JP2007521294A - 初期血管内凝血を選択的に分解する組成物及び方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、1998年5月21日に出願された米国仮出願番号第60/086,262号を優先権としてクレームし、1999年5月12日に出願されたPCT出願PCT/US99/10547号の一部継続出願である、米国特許第6,488,927号として現在発行された、1999年12月3日に出願された米国出願番号第09/454,666の分割出願であり、2002年9月23日に出願された米国出願番号第10/253,518号の一部継続出願である。
血管内凝血塊による血管の閉塞は、心筋梗塞、(脳)卒中、肺塞栓を含む種々の疾患状態の発病を引き起こし、および/または寄与し、従って重要な医学問題を意味する。プラスミノーゲン・アクチベータなどの繊維素溶解は、これらの疾患または状態の治療に最近使用されたが、それらの効果および安全性は、殊に深部静脈血栓症および肺塞栓などの特定の保護血栓状態下では、いまだ大きな懸念が存在する。
現在のアプローチは、保護の手法を提供するが、外科的環境において、すべて限定された利益/リスク比を有する。機械的なフィルターは、大きな凝血塊を捕らえるが、動脈再閉塞または脳微小塞栓の予防に使用することはできない。抗凝血剤(例えば、低分子量ヘパリン)は、血管床の血栓症の発生を減ずるが、投薬は、手術後の出血のリスクにより限定される。ヘパリンは、次々に外傷感染および裂開が生じる可能性を増しうる、外傷ヘマトマス(hematomas)の発生を増加することが報告されている。アスピリンおよび抗-GPIIb/IIIa剤は、血小板凝集を抑制するが、フィブリンモノマーの形成および凝血塊の増殖を防止できない。深刻な副作用に加えて(上記で部分的に議論)、個々の特別な抗凝血剤は、凝血塊の形成の特定の機構を抑制するが(例えば、血小板の活性化またはフィブリン形成)、抗血栓症保護の100%の忠誠を提供するものではない。すでに形成された初期の病的な血栓を溶解するモダリティは、抗凝血剤にもかかわらずまたはその非適用性のために、ひどく必要とされる。
ストレプトキナーゼ、スタフィロキナーゼ、組織型プラスミノーゲン・アクチベータまたはtPA、およびウロキナーゼは、プラスミノーゲン・アクチベータとして知られる薬剤のファミリーの一員である。これらの化合物は、プラスミン、フィブリンを消化するプロテアーゼを活性化することにより、血管内凝血塊を溶解する作用をする。プラスミンの不活性なプレカーサーである、プラスミノーゲンは、単独ペプチド結合の開裂により、プラスミンに変換される。プラスミン自身は、フィブリン塊、並びにいくつかの凝固因子を含む、他の血漿タンパクを消化する、非特異性プロテアーゼである。
従って、いくつかの異なるアプローチが、血液中のプラスミノーゲン・アクチベータの半減期の延長;抑制剤による不活性化からプラスミノーゲン・アクチベータを保護;ならびにフィブリンおよび血栓へのプラスミノーゲン・アクチベータの補足;を含む深部静脈血栓でのこれらの薬剤の効果を改良するために試みられた。例えば、化学修飾およびプラスミノーゲン・アクチベータのリポソームへの組み込みが、循環においてプラスミノーゲン・アクチベータの半減期を延長するために使用された(Kajihara, J. et. al. 1994. Biochim. Biophys. Acta 1199: 202-208; Heeremans, J. et. al. 1995. Thromb. Haemost. 73: 488-494)。しかし、これらの研究は、リポソーム封入プラスミノーゲン・アクチベータの活性が、立体的制限により強く損なわれることを示した。
赤血球(RBCs)は、通常120日の寿命を有し、従って薬剤および生体分子の天然キャリアを務めうる。自系のRBCsは、患者の血液から容易に得られ、薬物を載せて、再注入される。RBCsは、RBCsの内部体積中に載せた薬剤のキャリアとして使用された(Poznansky, M. and R. Juliano. 1984. Pharmacol. Rev. 36: 277-324; Kirch, M. et al. 1994. Biotechnol. App. Biochem. 19: 331-363; Kinoshita, K. and T. Tsong. 1978. Nature 272: 258-260)。加えて、架橋剤としてストレプトアビジン−ビオチンペアを使用する方法を含む、RBCsへのタンパク質の結合方法が開発された。
従って、本発明は、存在する凝血塊中への浸透を抑制する大きさ、たとえば赤血球などのキャリアに生体適合的に連結する、抗血栓剤などの治療薬を含む組成物、および先在する(止血)塊の溶解を避けながら、初期血管内凝血塊の選択的分解にこれらの組成物を使用する方法に関する。
本発明の目的は、治療薬、好ましくは抗血栓剤、より好ましくは繊維素溶解剤であって、大きさが赤血球と同程度のキャリアの表面に生体適合的に連結し、長期間循環し、初期血管内凝血塊を選択的に分解するものを含む、組成物を提供することである。好ましい態様として、キャリアは赤血球を含む。連結は、ストレプトアビジンによる赤血球などのビオチン化キャリアに、ビオチン化治療剤を架橋することにより、好ましく達成される。あるいは、治療剤は、モノクロナール抗体などの特異的な赤血球表面タンパク質に高い親和性を有する分子に結合し、その後投与により、赤血球に特異的に結合する。赤血球キャリアに特異的なモノクロナール抗体の例は、ヒトCR1に対するモノクロナール抗体である。
本発明の他の目的は、患者に先在する(止血)塊の溶解を避けながら、初期血管内凝血塊の制御できない形成を予防および処置する方法を提供することであり、初期血管内凝血塊の制御できない形成に苦しむ患者に、大きさが赤血球と同程度またはより大きいキャリアに生体適合的に連結する抗血栓剤などの治療剤を含む組成物を、投与することを含む。
本発明は、深部静脈血栓、肺塞栓および血管内フィブリン塊の制御できない形成により特徴づけられる他の疾病または症候群を、予防および処置する組成物および方法を提供する。本発明は、治療剤、好ましくは抗血栓剤、より好ましくはプラスミノーゲン・アクチベータの、赤血球(RBC)と同程度の大きさのキャリアへの生体適合的な連結に基づく。好ましいキャリアは、RBCである。RBCキャリアまたはRBCsと大きさが同程度のキャリア(3〜5ミクロン)は、長期の循環、限定された組織吸収および薬剤の凝血塊中への最小の浸透を与える。プラスミノーゲン・アクチベータのストレプロアビジンによるビオチン化RBCsへの一価結合は(ここでSA/b−RBCとみなす)、本発明の生体適合的な連結方法の例として提供される。ビオチン化プラスミノーゲン・アクチベータは、ここでb−PAsとみなす。生体適合的な連結の他の例は、モノクロナール抗体などのビオチン化分子へのプラスミノーゲン・アクチベータの架橋であり、その後、全血中の赤血球などのキャリアと特異的に連結する。この連結方法で有益な抗体の例は、ヒトCR1に対するモノクロナール抗体である。
RBC−結合プラスミノーゲン・アクチベータの半減期(すなわち、血液からの劣化及び排出率)はまた、in vivoのラットで試験された。125I-scuPA、125I-ウロキナーゼ、125I-ストレプトキナーゼ、または125I-tPAの血中クリアランス動態は、5μg/kg用量でのscuPAまたはtPAの静脈内注入の後に決定された。注入後1時間以内に、scuPAの血液レベルは、注入用量の5%未満に低下した。対照的に、SA/b−RBCに結合したscuPAの血液レベルは、1時間の時点で10倍高く、24時間まで依然として高いレベル(注入用量の20%)であった。同様の結果が、tPA、ウロキナーゼおよびストレプトキナーゼでも見られた。静脈内注入後の24時間のRBCsへのこれらの生体適合的な連結に対し、プラスミノーゲン・アクチベータ血液レベルの曲線下面積の薬物動態解析は、RBC−結合PAsの半減期が、非結合PAsを桁違いに超えることが明らかになった。
b−suPAr/SA/b−RBC錯体(scuPA/b−suPAr/SA/b−RBC)に関連するscuPAの繊維素溶解活性は、その後試験した。125I−フィブリンおよびリン酸緩衝生理食塩水(凝結塊コントロール)、RBCキャリア単独、b−suPAr/SA/b−RBC錯体、scuPA/b−suPAr/SA/b−RBC錯体、またはscuPA単独のいずれかを含むフィブリン塊を製造した。凝結塊コントロールでは、37℃で120分の培養後、放射性標識の5%未満が上清に放出された。RBCキャリア単独でもb−scuPA/SA/b−RBC錯体(SA/b−RBCに直接結合するb−scuPA)でも、検出できる繊維素溶解は起こらなかった。しかし、同程度の用量のscuPA/b−suPAr/SA/b−RBC錯体は、95±4%の繊維素溶解を引き起こした。これらの結果は、SA/b−RBCに結合するb−suPArへのscuPAの結合は、scuPAの繊維素溶解活性を確かに促進し、b−suPAr/SA/b−RBC錯体は繊維素溶解剤として活性であることを示す。
生体分布研究は、suPAr結合が、溶血反応またはキャリアRBCの網膜内吸収を導かないことを示した。事実、b−suPAr/SA/51Cr−b−RBC結合分布は、51Cr−RBCコントロールのそれと類似する。ラットへのb−suPAr/SA/51Cr−b−RBC注入後1時間、125I−scuPAの血球への結合を決定するために、血液サンプルを採取した。b−suPAr/SA/b−RBC錯体を注入したラットから採取した血液は、コントロール動物から採取した血液よりも、3倍多くscuPAに結合した。これらのデータは、b−suPAr/SA/b−RBCが循環中に機能的に活性であり、scuPAに結合可能であることを示す。結合の定量により、血流中1時間循環後、各b−suPAr/SA/b−RBC錯体が、約104分子のscuPAに結合することが明らかになった。この値は、ラットに注入する前のscuPAのb−suPAr/SA/RBC結合の初期レベルに類似する。従って、血流中の循環は、この錯体の結合能力を変えなかった。
従って、本発明は、ヒトを含む動物の血流中で、血流中の治療剤の劣化および排出を低下するプラスミノーゲン・アクチベータおよび抗凝結剤などの抗血栓剤を含む治療剤の、半減期を延長するための新規な組成物を提供する。
本発明はまた、抗血栓剤などの治療剤により患者の血液中の凝血塊を選択的な分解を増加する方法を提供し、該方法は、患者に、治療剤、好ましくは抗血栓剤、より好ましくは赤血球キャリアまたは 大きさが赤血球と同程度のキャリアに、生体適合的に連結したプラスミノーゲン・アクチベータを含む組成物を投与することを含む。
これらの実験において、抗血栓剤組織プラスミノーゲン・アクチベータ(tPA)は、架橋剤としてストレプトアビジン(SA)ビオチンを用いて、RBCsに連結した。ビオチン化ラット、マウス、ヒトRBCs(bRBC)に連結しうるビオチン化tPAの量(btPA)は、105分子/RBCから、非ビオチン化tPAの200分子未満の範囲である。多価ストレプトアビジンを用いたbRBCへの付着は、タンパク質DAFおよびCD59を制御する補体を不活性化し、自系血清中で、bRBC/SAの溶血反応を導く。しかし、100μm以下レベルのビオチンエステル中でビオチン化されたRBC(xが100以下である、bxRBC活性)は、補体を活性化せず、新鮮な同一源血清中で安定である。
125I−ME後10分での、フリーtPA注入は、ほとんど完全に凝血塊を分解する。対照的に、塞栓より5分前にtPAを注入したときでさえ、繊維素溶解の20%未満は、血流からの迅速なクリアランスへの一致が見られた。対照的に125I−ME20分前に注入されたRBC/tPAが80%の繊維素溶解を引き起こすものの、125I−ME後、注入されたRBC/tPAは、肺塞栓の繊維素溶解を控えめに(40%未満)引き起こした。従って、初期凝血塊対先在する凝結塊の繊維素溶解率は、フリーtPAおよびRBC/tPAに対し、それぞれ0.2および2.2であった。
自系注入は、待機手術では標準的な実務である。他の薬剤のRBC輸送を探索するヒトにおける研究からの結果は、自己提供(auto-donated)RBCへの抗血栓剤(例えば、tPAなどの繊維素溶解剤)などの治療剤の結合および手術後の錯体再注入は、技術的に可能であることを示す。活性化ポリエチレングリコール(PEG)を介するRBCへの連結などの代替的な生体結合技術は、生体適合性を誘発し、非自系RBCへの免疫反応を最小化しうる。PEGを介するRBCsへの治療剤の連結は、穏当な品質保持期限を有する普遍的ドナーRBC/tPAを生成することにより、提案する戦略の適用可能性を広げうる。さらに、血流で、RBCsに治療剤を直接連結することができる。ヒトRBCは、免疫錯体に結合し、RBC自身のオプソニン作用なしに、それらをマクロファージに移動する、補体受容体I(CRI)を所有する。動物に注入されたCRIモノクロナール抗体および抗CRI免疫抱合体は、RBCに結合し、細胞損傷を引き起こすことなしに、長期間循環する。従って、抗CRI/抗血栓剤結合はまた、RBC抽出、修飾または注入の必要性なしに、予防に使用される。
好ましい態様において、本発明の組成物は、深部静脈血栓症を含む制御できない血管内フィブリン塊形成により特徴づけられる、疾患または状態の患者に、静脈内投与のための薬学的に許容できる賦形剤をさらに含む。そのような薬学的に許容できる賦形剤は、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、臨床実務で静脈内注入に容認される他の液状無菌賦形剤を含む。
以下の制限されない例は、本発明のさらなる説明のために提供される。
例1:ビオチン化、タンパク質の放射性標識、プラスミノーゲン・アクチベータ結合の製造、RBCへのタンパク質の結合および繊維素溶解活性の評価
ビオチンエステル、6−ビオチニルアミノカプロン酸 N−ヒドロキシスクシンイミドエステル(BxNHS)を、10mMまたは1mMの最終濃度になるよう100%ジメチルホルムアミドに溶解した。組織型プラスミノーゲン・アクチベータ(tPA)、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼおよび可溶なウロキナーゼ・プラスミノーゲン・アクチベータ受容体(suPAr)を、BxNHSの10倍モル過剰量でビオチン化した。新鮮な1mMのBxNHSの8μlを、100μlのタンパク質溶液に添加する(1mg/mlホウ酸緩衝生理食塩水、BBS、pH8.1)。氷上で1時間培養後、過剰な非反応BxNHSを、一晩透析により排除した。ビオチン化タンパク質を、製造者(Pierce)の忠告に従い、ヨードゲン(iodogen)−被覆管を用いて、125ヨウ素で放射性標識した。100μgのビオチン化タンパク質および100μCiの125ヨウ化ナトリウムを、20分間100μgのヨードゲンで被覆した管中、氷上で培養し、ngあたり約500cpmの特異的放射活性を有するストレプトアビジンを得た。過剰のヨウ素を透析により排除した。放射性標識タンパク質の95%より多くは、TCAにより沈澱可能であった。
SA/b−RBCへのビオチン化プラスミノーゲン・アクチベータまたはsuPArの付着のために、5μlのb−PAまたはb−suPArS原液(PBS中1mg/ml)を、100μlのSA/b−RBC10%懸濁液に添加し、十分に混合した。これは、2×107SA/b−RBCあたり1μgのb−PAまたはb−suPArの添加を与える(SA/b−RBCあたり約3.5×105分子)。b−PAまたはb−suPArを、その後、SA/b−RBC10%懸濁液で、1時間培養した(定期的に穏やかな振動、20℃)。BSA−PBS中の非結合タンパク質を、標準的な遠心分離により除去した。SA/b−RBCへのb−PAまたはb−suPAr結合を定量するために、放射性標識b−PAまたはb−suPArを、トレーサーとして使用した。
タンパク質を、ヨードゲン(Pierce, Rockford, IL)を用いて125I−Na(Perkin Elmer, Boston, MA)で放射性標識し、RBCをMuzykantovらが記載するように(Anal. Biochem. 1996 241: 109-119)、51Crで放射性標識した。
リン酸緩衝生理食塩水(PBS)/3%ウシ血清アルブミン中、51Cr/125I−tPA懸濁液は、4℃で少なくとも4日間安定だった。補体による溶血反応を試験するために、コントロールRBC、bRBC/SAまたはbRBC/SA/btPAを、新鮮な血清中、37℃で1時間培養し、遠心分離し(5分、1200g)、および放出されたヘモグロビンを、分光光度法により405nmで決定した。
ラットにおいて放射性標識された調整物の生体内分布を研究するために、放射性標識PAもしくはsuPAr、またはキャリアRBCに連結したこれらのタンパク質を1μg含有する0.5ml生理食塩水の注入を、麻酔下で尾静脈に行った。in vivo投与後のRBC−連結プラスミノーゲン・アクチベータをトレースするために、20〜50μlの125I−b−PA/SA/b−RBC10%懸濁液を、麻酔下ラットの尾静脈を介して注入した。注入後の表示時間において(5分〜24時間)、麻酔下ラットを、瀉血により犠牲にした。血液と内部器官を採取した。器官は、血液がなくなるまで緩衝液で洗浄し、重さを量った。血液および内部器官アリコート(aliquot)での125Iの放射活性を、その後、ガンマカウンターを使用して決定した。血しょうを、その後、血液の遠心分離により血液から分離し、血しょうの放射活性を測定した。結果を、組織、血液または血しょうのグラムあたりのcpmとして、平均±標準誤差(M±SE)として計算した。統計上の比較は、一元配置等分散分析(one-way analysis of eqaul variance)(ANOVA)を用いて、p<0.05の統計上の優位性のレベルで、Student-Newman-Keuls法に従って行った。
フィブリン塊を、CaCl2および125I−フィブリノゲンでトレース標識したトロンビン(20mMおよび0.2ユニット/ml最終濃度)を−フィブリノゲン(3mg/mL)に添加することにより形成した。先在する凝血塊の溶解を模擬するために、凝血塊を、個々の繊維素溶解剤、または生理食塩水(コントロール)で、20分間20℃でオーバーレイした。初期凝血塊を溶解するために、繊維素溶解剤を、CaCl2およびトロンビンを加える前に、125I−フィブリノゲンに直接加えた。繊維素溶解を始めるために、凝血塊を37℃で放置し、上清の放射活性をガンマカウンターで測定した(Perkin Elmer, Boston, MA)。
例4:in vivoでのRBC、tPAおよびRBC/tPA循環
51Cr−RBC、125I−tPAまたは51Cr−RBC/125I−tPAを、麻酔下ラットまたはマウスの尾静脈に注入した。選択された時間に、100〜200μlの血液をヘパリン中へ動物から採取し、1200gで遠心分離し、血しょう上清およびRBC沈殿物中の放射活性を測定した。動物を、注入後1〜3時間で犠牲にし、器官中の放射活性をガンマカウンターで分析した。
コントロールRBC、フリーtPA、RBC/tPAまたは生理食塩水(コントロール)を、ラットまたはマウスの静脈内に注入した。表示した時間に、100〜200μlの血液アルコートを、抗凝血剤の不存在下で抜き出し、125I−フィブリノゲンのトレース量と迅速に混合し、ホウケイ酸塩管中で、20℃で凝血塊に配分した。20分成熟後、凝血塊を、生理食塩水でオーバーレイし、37℃で培養し、125ヨウ素の放出を測定した。
例6:tPAまたはRBC/tPAによる肺塞栓の分解
125I−フィブリン微小塞栓(125I−ME)懸濁液を、記載されるように製造し(Murciano, J. C. et al. 2002. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 282: L529-539およびBdeir, K. et al. 2000. Blood 96: 1820-1826)、麻酔下マウスに注入した。125I−ME注入後、RBC50%懸濁液、RBCを含有する350μlサンプルを、生理食塩水またはtPA(0.5mg/Kg)またはRBC/tPAと混合した。動物を、125I−ME注入後1時間で犠牲とし、肺を分離し、生理食塩水で洗浄し、残余の放射活性をガンマカウンターで測定した。
我々は、記載された急性頸動脈血栓のマウスモデルを使用した(Ferrehi, P. M. et al., 1998. Circulation 97: 1002-1008)。血管の閉塞を、記録系に連結した0.5VBの流量プローブを用いて、Doppler超音波により決定した(Transonic, Ithaca, NY)。完全な閉塞は、FeCl3による血管損傷8〜10分以内で発生し、コントロール動物の血管は、実験が60分で終結するまで閉塞し続けた。FeCl3適用前または完全な閉塞後10分のいずれかにおいて、PBS、RBC、tPA0.7mg/Kg単独もしくはRBCとの混合、またはRBC/tPA(0.5mg/KgtPA含有)溶液の350μlを、反対側の頸静脈を通して注入した。
Claims (6)
- 大きさが赤血球に類似のキャリアに生体適合的に結合する治療薬を含む、組成物。
- キャリアが赤血球である、請求項1に記載の組成物。
- 治療薬が抗血栓剤である、請求項1に記載の組成物。
- 被験者に先在する止血塊を容認しながら、請求項3の組成物を被験者に投与することを含む、被験者の初期血管内凝血を選択的に溶解する方法。
- 請求項3の組成物および薬学的に許容できる賦形剤を含む、血栓予防薬。
- 請求項5の血栓予防薬を被験者に投与することを含む、初期血管内凝血形成の予防方法。
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AU4155602A (en) * | 2000-11-01 | 2002-06-18 | Elusys Therapeutics Inc | Method of producing biospecific molecules by protein trans-splicing |
EP1380290A1 (en) * | 2002-07-09 | 2004-01-14 | Universitair Medisch Centrum Utrecht | Cross-beta structure pathway and its therapeutic relevance |
US20070003552A1 (en) * | 2002-07-09 | 2007-01-04 | Gebbink Martijn F B | Cross-beta structure comprising amyloid binding proteins and methods for detection of the cross-beta structure, for modulating cross-beta structures fibril formation and for modulating cross-beta structure-mediated toxicity and method for interfering with blood coagulation |
US20080317761A1 (en) * | 2004-04-28 | 2008-12-25 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Peptide-Mediated Protein Transduction Into Cells of the Hematopoietic Lineage |
US8119128B2 (en) * | 2004-10-29 | 2012-02-21 | The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate | Antibodies that bind urokinase-type plasminogen activator and epitopes therefor |
US20090202980A1 (en) * | 2005-03-21 | 2009-08-13 | Crossbeta Biosciences B.V. | Cross-Beta Structure Comprising Amyloid Binding Proteins and Methods for Detection of the Cross-Beta Structure, for Modulating Cross-Beta Structures Fibril Formation and for Modulating Cross-Beta Structure-Mediated Toxicity and Method for Interfering With Blood Coagulation |
EP1907864A2 (en) * | 2005-07-13 | 2008-04-09 | Crossbeta Biosciences B.V. | METHODS FOR DETERMINING THE EFFECT OF A TREATMENT ON THE CROSS-ß STRUCTURE CONTENT OF A PROTEIN; SELECTION OF TREATMENTS AND USES THEREOF |
US8114832B2 (en) * | 2005-07-13 | 2012-02-14 | Crossbeta Biosciences B.V. | Method for detecting and/or removing a protein comprising a cross-beta structure from a pharmaceutical composition |
CA2615028A1 (en) * | 2005-07-13 | 2007-01-18 | Crossbeta Biosciences B.V. | Cross-.beta. structure binding compounds |
US20090130104A1 (en) * | 2005-10-05 | 2009-05-21 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Fusion proteins for inhibition and dissolution of coagulation |
WO2007108675A1 (en) * | 2006-03-17 | 2007-09-27 | Crossbeta Biosciences B.V. | Methods of binding of cross-beta structures by chaperones |
AU2008257419B2 (en) * | 2007-05-23 | 2013-10-24 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Targeted carriers for intracellular drug delivery |
EP2058000A1 (en) * | 2007-11-08 | 2009-05-13 | Crossbeta Biosciences B.V. | Immunogenic compositions capable of activating T cells |
EP2058001A1 (en) * | 2007-11-08 | 2009-05-13 | Crossbeta Biosciences B.V. | Enhancement of immunogenicity of antigens |
US8333973B2 (en) * | 2008-01-02 | 2012-12-18 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Targeting recombinant therapeutics to circulating red blood cells |
US9518087B2 (en) | 2010-08-10 | 2016-12-13 | Ecole Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) | Erythrocyte-binding therapeutics |
US9517257B2 (en) | 2010-08-10 | 2016-12-13 | Ecole Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) | Erythrocyte-binding therapeutics |
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US10046056B2 (en) | 2014-02-21 | 2018-08-14 | École Polytechnique Fédérale De Lausanne (Epfl) | Glycotargeting therapeutics |
ES2874884T3 (es) | 2014-02-21 | 2021-11-05 | Ecole Polytechnique Fed De Lausanne Epfl Epfl Tto | Compuestos terapéuticos dirigidos a la glucosa |
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WO2018232176A1 (en) | 2017-06-16 | 2018-12-20 | The University Of Chicago | Compositions and methods for inducing immune tolerance |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002515447A (ja) * | 1998-05-21 | 2002-05-28 | ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティー オブ ペンシルヴァニア | 抑制されない血管内フィブリンクロット形成の予防および治療のための組成物および方法 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS60200169A (ja) * | 1984-03-23 | 1985-10-09 | Green Cross Corp:The | 線維素溶解酵素前駆体測定用試薬 |
-
2003
- 2003-07-01 US US10/611,723 patent/US7041287B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2004
- 2004-06-28 WO PCT/US2004/020660 patent/WO2005004804A2/en active Search and Examination
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-
2006
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Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002515447A (ja) * | 1998-05-21 | 2002-05-28 | ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティー オブ ペンシルヴァニア | 抑制されない血管内フィブリンクロット形成の予防および治療のための組成物および方法 |
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