JP2007006838A - 微生物培養基材 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】酵母菌体、特にキャンディダ属酵母菌体、から熱水抽出等によりエキス分を抽出した残渣である酵母菌体残渣に、細胞壁溶解酵素及び/又はプロテアーゼを作用させ、次いで、該反応液を乾燥する。
【選択図】なし
Description
しかしながらこれら方法は、処理が煩雑であったり、特殊な菌を作用させなければならいという欠点があり、更に有利な方法が求められていた。
すなわち本発明は、
(1)酵母菌体残渣の細胞壁溶解酵素及び/又はプロテアーゼ処理物からなる微生物培養基材、
(2)酵母がキャンディダ属酵母である、上記(1)記載の微生物培養基材、
(3)プロテアーゼがアルカリ性のエンドプロテアーゼである、上記(1)乃至(2)記載の微生物培養基材、
を提供するものである。
本発明のいう酵母菌体残渣とは、酵母菌体から抽出処理、例えば、熱水抽出、アルカリ抽出等の簡単な処理により、酵母菌体中の有用物、例えば酵母エキス等を抽出した残渣であり、タンパク質とグルカン等の細胞壁成分を主とするものである。
用いられる酵母は、酵母エキス等を生産するための酵母であればいずれでもよく、例えば、サッカロミセス属酵母、キャンディダ属酵母等を例示することができるが、中でもキャンディダ属酵母が好ましい。
用いられる細胞壁溶解酵素は、酵母細胞を分解するものであれば特に種類を問わないが、グルカナーゼが特に好ましい。また、プロテアーゼは、エンド型、エキソ型共に用いることができ、酸性、中性、アルカリ性も問わず、これらを併用することもできるが、特にアルカリ性のエンドプロテアーゼが好ましい。
酵素の使用量は、使用する酵素によっても異なるが、酵母菌体残渣(乾燥重量)に対して0.1〜5%、好ましくは0.5〜1.0%添加される。
本発明の微生物培養基材は、水に不溶性成分を30〜75重量%と多量に含むため、特に、糸状菌、放線菌等の核となる物質が存在するとよい微生物の培養に好適であり、目的とする有用物質の生産性を高めることもできる。
製造例
キャンディダ・ユティリスAHU3053株を常法により培養し集菌することにより酵母菌体を得た。該菌体からエキス分を熱水抽出し、該熱水可溶性成分(エキス分)を分離・除去することにより、酵母菌体残渣を得た。
製造例で得た酵母菌体残渣22.5kg(乾燥重量)を水127.5Lに懸濁しpHを8.5に調製した。本懸濁液に、プロチンAC10F(大和化成製)225gを水に溶解した溶液を0.22μmのフィルターを通して添加した。添加終了後、60〜70℃で攪拌下4時間酵素反応を行った。
反応終了後、反応液をドラムドライヤーを用いて150℃で乾燥を行い、次いで粉砕器で粉砕し、本発明の微生物培養基材18kgを得た。
得られた微生物培養基材の組成を表1に示す。
製造例で得た酵母菌体残渣22.5kg(乾燥重量)を水127.5Lに懸濁しpHを6.5に調製した。本懸濁液に、ツニカーゼ(大和化成製)225gを水に溶解した溶液を0.22μmのフィルターを通して添加した。添加終了後、35〜40℃で攪拌下4時間酵素反応を行った。
反応終了後、反応液をドラムドライヤーを用いて150℃で乾燥を行い、次いで粉砕器で粉砕し、本発明の微生物培養基材18kgを得た。
得られた微生物培養基材の組成を表1に示す。
微生物としてAspergillus oryzae NBRC4181株を用い、ポテトデキストロース寒天培地で胞子を形成させた後、スキムミルク10%、グルタミン酸ナトリウム1%からなる保存液に胞子を懸濁させ、−80℃で保存した胞子懸濁液を用いた。
グルコース1%、酵母エキス0.05%、リン酸一カリ0.1%、硫酸マグネシウム0.01、pH6.0の培地に、市販のポリペプトン(日本製薬製)、実施例1あるいは実施例2で得られた微生物培養基材をそれぞれ0.75%添加し、それぞれ坂口フラスコに100ml分注し、121℃、20分間オートクレーブ殺菌した。次いで、各々のフラスコに上述した胞子懸濁液をそれぞれ0.4mlずつ接種した後、25℃で振とう培養を3日間行った。
各培養液について、生育菌体量、プロテアーゼ活性の測定を行った。
結果を表2に示す。
なお、測定方法は以下の通りである。
(a)生育菌体量
麹菌量測定キット(キッコーマン製)により測定した。
(b)プロテアーゼ活性
培養液1.5mlをエッペンドルフチューブに分注し、12000rpm、10分間遠心分離して上澄み液を得た。得られた上澄み液を0.02Mの食塩水を用いて10倍に希釈し、ミルクカゼイン消化法を用いて遊離するチロシン量を測定することによりプロテアーゼ活性を求めた。
Claims (3)
- 酵母菌体残渣の細胞壁溶解酵素及び/又はプロテアーゼ処理物からなる微生物培養基材。
- 酵母がキャンディダ属酵母である、請求項1記載の微生物培養基材。
- プロテアーゼがアルカリ性のエンドプロテアーゼである、請求項1乃至2記載の微生物培養基材。
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