JP2006520913A - 光学的にデコード可能なマイクロキャリア、アレイ及び方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、ビーズコード体系を提供し、これにより数百、そして所望であれば数千又は数万の異なるコード化ビーズを、簡便且つ容易に標識し、並びに迅速且つ正確にデコードすることができる。コード試薬は、ビーズ表面に固定されたシグナル発生ヘアピンを含む。シグナル発生ヘアピンは、それらが相互作用しているかどうかによって光学的シグナルの強度が変化する一対の標識部分(好ましくは一方の末端の少なくとも1種の蛍光団と、それとヘアピン構造を形成する他方の末端のクエンチャー)を用いて標識された広範な分子であり、ヘアピン構造においては蛍光が消光される。該分子は立体構造の再構成を行うことが可能であり、それにより蛍光団とクエンチャーが離れ、このとき蛍光団の蛍光は消光されない。好適な分子の1つのタイプは、分子ビーコンプローブに類似するものであり、分子ビーコンプローブは例えばTyagiら、米国特許第5,925,517号に記載されている(その全体を参照により本明細書中に組み入れる)。消光は蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)によるもの(前記特許中に開示されている)であってもよく、又は物理的相互作用によるもの(Tyagiら、米国特許第6,150,097号に記載されている(その全体を参照により本明細書中に組み入れる))であってもよい。Dabcylは物理的相互作用によって消光しうるクエンチャーの一例である。市販されている「Black Hole Quenchers」は別の例である。
図1は本発明の固定化シグナル発生ヘアピン101の実施形態を示している。ヘアピン分子101は、相補的オリゴヌクレオチド配列として示されている親和性ペア105、106により挟まれた中央連結部分104を含む。中央連結部分はオリゴヌクレオチドでもよく、上述のようにそうでなくてもよい。連結部分104がオリゴヌクレオチド配列である場合には、ヘアピン101は意図されるハイブリダイゼーションアッセイ中でハイブリダイゼーションプローブとして機能しないことが好ましい。オリゴヌクレオチドアーム105、106はDNA、RNA又はその組み合わせでありうる。アーム105、106は、非天然ヌクレオチド、修飾ヌクレオチド、及び修飾ヌクレオチド間結合を含むことができる。同じことは、中央連結部位104がオリゴヌクレオチド配列である場合に、中央連結部位104にも適用される。親和性ペアとしては相補的オリゴヌクレオチドアームが好ましいが、アッセイ条件下で可逆的に互いに結合することにより相互作用し、その相互作用が環境中の物理的変化若しくは化学的変化のいずれかにより崩壊しうる部分のいかなるペアも、本発明のシグナル発生ヘアピンに用いることができる。親和性ペアのメンバー105に連結されているのはクエンチャー部分107である。親和性ペアのメンバー106に連結されているのは蛍光団108である。ヘアピン101が示された状態にあるとき、蛍光団108からの蛍光が大部分消光され、親和性ペア105、106の破壊が、蛍光がわずかしか消光されないのに十分な程度に蛍光団108をクエンチャー107から引き離すように、部分107、108が配置され、連結される。複数のクエンチャー部分を含めることができ、同様に複数の蛍光団部分を含めることができ、これは例えばFRETにより相互作用する蛍光団のペアを含む。蛍光団108及びクエンチャー107は、親和性ペアが相互に結合しているかどうかに依存してそれらが発生する検出可能なシグナルの強度を変化させる化学基のいかなるペアでもよい。先述のように、いくつかの実施形態においては、部分107、108は親和性ペアの少なくとも一部を構成することができる。
Claims (16)
- その表面に複数の消光された標識シグナル発生ヘアピン分子が固定された、コード化マイクロキャリアであって、前記分子は連結部分で分離された相互作用する親和性ペアをそれぞれ含み、該親和性ペアの一方には少なくとも1つの蛍光団が結合し、且つ該親和性ペアの他方には少なくとも1つのクエンチャーが結合し、ここで個々のヘアピン分子の親和性ペアの相互作用は、その環境条件の物理的又は化学的変化によって崩壊可能であり、少なくとも1つの親和性ペアの相互作用の崩壊は前記条件の第1のレベルにおいて起こり、少なくとも別の親和性ペアの相互作用の崩壊は前記条件の第2のレベルにおいて起こり、該崩壊は光学的に識別可能である、前記マイクロキャリア。
- 前記親和性ペアが相補的ヌクレオチド配列を含む、請求項1に記載のマイクロキャリア。
- 前記連結部分がオリゴヌクレオチド配列である、請求項2に記載のマイクロキャリア。
- 分散型マイクロアレイでの使用に好適な、複数の請求項1に記載のコード化マイクロキャリアの混合物であって、個々のマイクロキャリアのそれぞれがその表面に捕捉プローブを固定しており、該混合物中の個々のマイクロキャリアを特定するためのコード体系は、3〜8種のスペクトル分解が可能な蛍光団と、前記条件の検出可能な異なるレベルにおいて崩壊しうる少なくとも3つの親和性ペアとの組み合わせを含む、前記混合物。
- 前記親和性ペアが相補的ヌクレオチド配列を含む、請求項4に記載の混合物。
- 個々のマイクロキャリアが光ファイバー束のファイバーの末端に固定されている、請求項4に記載の混合物。
- 表面上に同一の捕捉プローブを固定した、同一にコード化された複数のマイクロキャリアを含む、請求項4に記載の混合物。
- 捕捉プローブが分子ビーコンプローブである、請求項4に記載の混合物。
- 請求項4に記載の混合物を用いた、分析対象中の複数の核酸配列に対するハイブリダイゼーションアッセイであって、以下のステップ:
a) 該混合物と該分析対象とを接触させるステップ、
b) マイクロキャリアの分散型アレイを作製するステップ、
c) 該分析対象の核酸配列にハイブリダイズした捕捉プローブを有するマイクロキャリアを特定するステップ、
d) 該マイクロキャリアを光学的にデコードして、それらの捕捉プローブの配列を同定するステップ、
を含む、前記アッセイ。 - ステップa)がステップb)に先行する、請求項9に記載のアッセイ。
- デコードのステップが温度の上昇による前記親和性ペアの崩壊を含む、請求項9に記載のアッセイ。
- デコードのステップが変性剤の添加による前記親和性ペアの崩壊を含む、請求項9に記載のアッセイ。
- 前記分散型アレイが平面アレイである、請求項9に記載のアッセイ。
- 平面アレイが光ファイバー束のファイバーの末端に固定されたマイクロキャリアを含む、請求項13に記載のアッセイ。
- 前記分散型アレイが線形アレイである、請求項9に記載のアッセイ。
- ステップc)及びd)がフローサイトメトリーを含む、請求項15に記載のアッセイ。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2018538514A (ja) * | 2015-10-05 | 2018-12-27 | ザ ユニバーシティ オブ ノース カロライナ アット チャペル ヒルThe University Of North Carolina At Chapel Hill | アッセイを多重化する為のデコード方法並びに関連する流体デバイス、キット、及び固体支持体 |
Families Citing this family (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20050048498A1 (en) * | 2003-08-29 | 2005-03-03 | Applera Corporation | Compositions, methods, and kits for assembling probes |
US20050069895A1 (en) * | 2003-08-29 | 2005-03-31 | Applera Corporation | Compositions, methods, and kits for fabricating coded molecular tags |
US7198900B2 (en) * | 2003-08-29 | 2007-04-03 | Applera Corporation | Multiplex detection compositions, methods, and kits |
DE602005020943D1 (de) | 2004-07-01 | 2010-06-10 | Gen Probe Inc | Verfahren und zusammensetzungen zum nachweis von nukleinsäuren in einer biologischen probe |
US9297036B2 (en) | 2005-07-01 | 2016-03-29 | Agilent Technologies, Inc | Nucleic acid probes for analysis of small RNAs and other polynucleotides |
US20070072304A1 (en) * | 2005-09-26 | 2007-03-29 | International Business Machines Corporation | System and method for identifying biological growth media |
US7754475B2 (en) | 2006-01-25 | 2010-07-13 | Agilent Technologies, Inc. | Nucleic acid probes and microarrays for analysis of polynucleotides |
ES2553284T5 (es) | 2006-02-15 | 2021-08-31 | Rechtsanwalt Thomas Beck | Composiciones y procedimientos para formulaciones de oligonucleótidos |
WO2007114986A2 (en) * | 2006-04-04 | 2007-10-11 | Arcxis Biotechnologies, Inc. | Cooperative probes and methods of using them |
EP2069788B1 (en) | 2006-10-05 | 2017-03-01 | Massachusetts Institute of Technology | Multifunctional encoded particles for high-throughput analysis |
AU2007306616B2 (en) * | 2006-10-10 | 2012-05-17 | Metasystems Indigo Gmbh | Nucleic acid beacons for fluorescent in-situ hybridisation and chip technology |
US9938641B2 (en) | 2006-12-18 | 2018-04-10 | Fluidigm Corporation | Selection of aptamers based on geometry |
US8360321B2 (en) * | 2007-04-02 | 2013-01-29 | Fio Corporation | System and method of deconvolving multiplexed fluorescence spectral signals generated by quantum dot optical coding technology |
EP2288726B1 (en) | 2008-05-13 | 2012-06-13 | Gen-Probe Incorporated | Inactivatable target capture oligomers for use in the selective hybridization and capture of target nucleic acid sequences |
WO2010068473A1 (en) | 2008-11-25 | 2010-06-17 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting small rnas, and uses thereof |
GB2480792B (en) * | 2009-03-02 | 2018-11-14 | Co Diagnostics Inc | Energy transfer hairpin oligonucleotide probes |
EP2577300B1 (en) | 2010-06-07 | 2016-09-28 | Firefly Bioworks, Inc. | Scanning multifunctional particles |
WO2013116774A1 (en) * | 2012-02-01 | 2013-08-08 | Gen-Probe Incorporated | Asymmetric hairpin target capture oligomers |
GB2502306A (en) * | 2012-05-22 | 2013-11-27 | Univ Singapore | Microparticle sensor |
CN103983625B (zh) * | 2014-05-15 | 2016-03-09 | 清华大学深圳研究生院 | 荧光编码微球的解码方法及系统 |
CN111394432B (zh) * | 2020-03-27 | 2023-03-24 | 深圳闪量科技有限公司 | 基于通用探针芯片的多重定量pcr检测系统 |
US20210324458A1 (en) * | 2020-04-15 | 2021-10-21 | Nanopec, Inc. | Enhanced signal to noise ratios for pcr testing within a fret doped nano-structured ceramic film |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002535998A (ja) * | 1999-02-01 | 2002-10-29 | ザ・ユニヴァーシティ・オヴ・ウェスタン・オーストラリア | メチル化核酸の検出における蛍光分子ビーコンの使用 |
JP2003500001A (ja) * | 1997-11-29 | 2003-01-07 | イギリス国 | 核酸の蛍光定量的検出システム |
JP2004500109A (ja) * | 2000-03-22 | 2004-01-08 | クァンタム・ドット・コーポレイション | ビーズベースの核酸アッセイにおける半導体ナノクリスタルの使用方法 |
JP2005514038A (ja) * | 2002-01-07 | 2005-05-19 | ノーチップ エー/エス | ヒトパピローマウイルスmRNAを検出するための方法 |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5118801A (en) * | 1988-09-30 | 1992-06-02 | The Public Health Research Institute | Nucleic acid process containing improved molecular switch |
EP0601889A2 (en) * | 1992-12-10 | 1994-06-15 | Maine Medical Center Research Institute | Nucleic acid probes |
US5925517A (en) * | 1993-11-12 | 1999-07-20 | The Public Health Research Institute Of The City Of New York, Inc. | Detectably labeled dual conformation oligonucleotide probes, assays and kits |
CA2252048C (en) * | 1996-04-12 | 2008-03-11 | The Public Health Research Institute Of The City Of New York, Inc. | Detection probes, kits and assays |
GB9819417D0 (en) | 1998-09-07 | 1998-10-28 | Secr Defence | Reaction method |
US6680377B1 (en) * | 1999-05-14 | 2004-01-20 | Brandeis University | Nucleic acid-based detection |
US6331438B1 (en) * | 1999-11-24 | 2001-12-18 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Optical sensors and multisensor arrays containing thin film electroluminescent devices |
WO2001046675A2 (en) * | 1999-12-23 | 2001-06-28 | Illumina, Inc. | Decoding of array sensors with microspheres |
ATE492652T1 (de) * | 2000-02-07 | 2011-01-15 | Illumina Inc | Nukleinsäuredetektionsverfahren mit universellem priming |
US6579680B2 (en) * | 2000-02-28 | 2003-06-17 | Corning Incorporated | Method for label-free detection of hybridized DNA targets |
US6844154B2 (en) * | 2000-04-04 | 2005-01-18 | Polygenyx, Inc. | High throughput methods for haplotyping |
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2004
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Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003500001A (ja) * | 1997-11-29 | 2003-01-07 | イギリス国 | 核酸の蛍光定量的検出システム |
JP2002535998A (ja) * | 1999-02-01 | 2002-10-29 | ザ・ユニヴァーシティ・オヴ・ウェスタン・オーストラリア | メチル化核酸の検出における蛍光分子ビーコンの使用 |
JP2004500109A (ja) * | 2000-03-22 | 2004-01-08 | クァンタム・ドット・コーポレイション | ビーズベースの核酸アッセイにおける半導体ナノクリスタルの使用方法 |
JP2005514038A (ja) * | 2002-01-07 | 2005-05-19 | ノーチップ エー/エス | ヒトパピローマウイルスmRNAを検出するための方法 |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2018538514A (ja) * | 2015-10-05 | 2018-12-27 | ザ ユニバーシティ オブ ノース カロライナ アット チャペル ヒルThe University Of North Carolina At Chapel Hill | アッセイを多重化する為のデコード方法並びに関連する流体デバイス、キット、及び固体支持体 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
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US20120141986A1 (en) | Multivalent substrate elements for detection of nucleic acid sequences | |
Marras | Kramer et al.(43) Pub. Date: Dec. 9, 2004 | |
US20080187910A1 (en) | Nucleic acid assay and method of detecting the presence of a nucleic acid sequence | |
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