JP2006520184A5 - - Google Patents
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Claims (65)
- 天然に存在するアレルゲンに対して防御免疫応答を誘導することのできる組換えタンパク質変種であって、
i)天然に存在するアレルゲンに構造的に類似した三次元折りたたみ様式を有する足場タンパク質の変種であり、
ii)前記足場タンパク質に比較して、少なくとも一つの非変異アミノ酸残基によって隔てられた2以上の一次変異を含むタンパク質変種であって、前記各一次変異が、天然に存在するアレルゲン中の対応する位置のアミノ酸残基と同一又は相同な少なくとも1つのアミノ酸残基を前記足場タンパク質に導入する変異であり、
iii)前記足場タンパク質に比較して、天然に存在するアレルゲンに特異的なIgE抗体へのアフィニティーおよび/または結合能が増加した、前記タンパク質変種。 - 天然に存在するアレルゲンに比べて低下したヒスタミン遊離誘導能を有する、請求項1記載のタンパク質変種。
- ヒスタミン遊離誘導能が2〜10,000分の1に低下している、請求項2に記載のタンパク質変種。
- 更に、天然に存在するアレルゲンの対応する位置には存在しないアミノ酸残基を足場タンパク質に導入する1以上の二次変異を含む、請求項1〜3のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- 2〜50、好ましくは2〜40、より好ましくは3〜25、更に好ましくは4〜15、最も好ましくは5〜12の一次変異を含む、請求項1〜4のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- 足場タンパク質が天然に存在するアレルゲンと20〜60%、好ましくは30〜50%のアミノ酸同一性を有する、請求項1〜5のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンに比較して、前記天然に存在するアレルゲンに対して特異的な抗体に対する結合能が低下している、請求項1〜6のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- 結合能が、天然のアレルゲンの抗体結合能に対して少なくとも10%、好ましくは50%、および100%まで増加している、請求項1〜7のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- 一次変異の少なくとも一つが置換である、請求項1〜8のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- 少なくとも一つの一次変異の導入が欠失および/または付加である、請求項1〜8のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- デコンボリューションしたCD-スペクトルが、天然に存在するアレルゲンのデコンボリューションしたCD-スペクトルに比較して、30%未満、好ましくは20%未満、更に好ましくは10%未満しか偏差のない、請求項1〜10のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- 全ての一次変異が約600-900Å2の面積を有する表面領域内に位置する、請求項1〜11のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- 一次変異が表面露出アミノ酸の変異を含む、請求項1〜12のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- 変異されるアミノ酸残基が20%、好ましくは30%、より好ましくは40%、最も好ましくは50%を超える溶媒接近性を有する、請求項13記載のタンパク質変種。
- 以下の工程を含む、天然に存在するアレルゲンに対する防御免疫応答を誘導することのできる組換えタンパク質変種を作成する方法:
i)天然に存在するアレルゲンと構造的に類似した三次元折りたたみ様式を有する足場タンパク質を選択する工程、
ii)少なくとも一つの実変異アミノ酸残基によって隔てられた2以上の一次変異を前記足場タンパク質に導入する工程であって、前記各一次変異が、天然に存在するアレルゲン中の対応する位置のアミノ酸残基と同一又は相同な少なくとも1つのアミノ酸残基を前記足場タンパク質に導入する変異である、前記工程、
iii)前記足場タンパク質に比較して、天然に存在するアレルゲンに特異的なIgE抗体へのアフィニティーおよび/または結合能が増加した、タンパク質変種。 - 請求項15記載の方法によって得ることのできる産物。
- 天然に存在するアレルゲンが吸入アレルゲンである、請求項1〜16のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンが花粉アレルゲンである、請求項17記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンが、ブナ目、モクセイ目、マツ目の花粉アレルゲンである、請求項18記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンがBet v 1である、請求項19記載のタンパク質変種。
- 足場タンパク質がMal d 1である、請求項20記載のタンパク質変種。
- 少なくとも2つの一次変異が、(E12V, E12I, E12M, E12L), P16A, (H40S, H40T), I43N, L44I, D47N, G65K, K70R, (E76H, E76R, E76K, Q76H), S107T, G108P, +109D, S110G, E129A, K152L, (P154S, P154T), P155S からなる群より選ばれ、場合により1以上の二次変異がN28X, 好ましくはN28T, K32X, 好ましくは K32Q, E45S, E96X, +159Xからなる群より選ばれる、請求項21記載のタンパク質変種。
- 配列番号2に記載の配列を含み、以下の一次変異を含む、請求項21記載のタンパク質変種(rMal d 1 (2781)):I43N、L44I、G65K、K70R、Q76H。
- 配列番号3に記載の配列を含み、以下の一次変異を含む、請求項21記載のタンパク質変種(rMal d 1 (2762)):E12V、P16A、K152L、P155S、S107T、G108P、+109D、S110G。
- (E12V, E12I, E12M, E12L), (H40S, H40T), (E76H, E76R, E76K), E129A, (P154S, P154T)からなる群より選ばれる少なくとも2つの一次変異を含み、場合により、E8X, N28X, K32X, E96X, +159Xからなる群より選ばれる1以上の二次変異を含む、請求項21記載のタンパク質変種。
- Bet v 1の足場タンパク質がDau c 1である、請求項20記載のタンパク質変種。
- 少なくとも2つの一次変異が、(S12V, S12L, S12I, S12M), S14P, E16A, P105A, A107P, (A148S, A148T), (I151L, I151V, I151M), (N153H, N153K, N153R), (+154S, +154T), (+155D, +155E), +156A, (+157Y, +157F), (+158N, +158Q), (K39S, K39T), (K44E, K44D), (V52I, V52M, V52L), (I54K, I54R, I54H), (T64K, T64R, T64H), (T65Y, T65F, T65W), (T67K, T67R, T67H), D86E, L91G, (G92D, G92E)からなる群より選ばれ、場合により1以上の二次変異がK32X, E42X, E59X, R69X, E95X, K122X, E8X, T10X, D25X, K32X, D46X, E59X, E95X, D108X, K122Xからなる群より選ばれる、請求項26記載のタンパク質変種。
- (S12V, S12L, S12I, S12M), S14P, E16A, P105A, A107P, (A148S, A148T), (I151L, I151V, I151M), (N153H, N153K, N153R), (+154S, +154T), (+155D, +155E), +156A, (+157Y, +157F), (+158N, +158Q)からなる群より選ばれる少なくとも2つの一次変異を含み、場合によりK32X, E42X, E59X, R69X, E95X, K122Xからなる群より選ばれる1以上の二次変異を含む、請求項26記載のタンパク質変種。
- (K39S, K39T), (K44E, K44D), (V52I, V52M, V52L), (I54K, I54R, I54H), (T64K, T64R, T64H), (T65Y, T65F, T65W), (T67K, T67R, T67H), D86E, L91G, (G92D, G92E)からなる群より選ばれる少なくとも2つの一次変異を含み、場合によりE8X, T10X, D25X, K32X, D46X, E59X, E95X, D108X, K122Xからなる群より選ばれる1以上の二次変異を含む、請求項26記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンがイネ目に由来する、請求項17記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンがキク目またはイラクサ目に由来する、請求項17記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンがハウスダストダニアレルゲンである、請求項17記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンがヒョウヒダニアレルゲンである、請求項32記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンがDer p 2である、請求項33記載のタンパク質変種。
- 足場タンパク質がEur m 1である、請求項34記載のタンパク質変種。
- 足場タンパク質がLep d 2である、請求項34記載のタンパク質変種。
- D17L, D17I, D17V, D17M, S19P, Q32K, Q32R, Q32H, K33P, T35Q, T35N, N88K, N88R, N88H, T92N, T92Q, A95K, A95R, A95Hからなる群より選ばれる少なくとも2つの一次変異を含み、場合により、K6X, S22X, R30X, K76S, K81X, V114Xからなる群より選ばれる1以上の二次変異を含む、請求項36記載のタンパク質変種。
- D45N, D45Q, N47K, N47R, N47H, K48T, K48S, T50K, T50R, T50H, K52E, K52D, L54K, L54R, L54H, E107K, E107R, E107M, H112D, H112E, T119I, T119L, T119V, T199Mからなる群より選ばれる少なくとも2つの一次変異を含み、場合により、K6X, S22X, K29X, R30X, K76X, K81Xからなる群より選ばれる1以上の二次変異を含む、請求項36記載のタンパク質変種。
- 足場タンパク質がGly d 2である、請求項34記載のタンパク質変種。
- K2Q, K2N, K4D, K4E, K10N, K10Q, T14K, T14R, S22H, S22R, S22K, K39V, K39L, K39I, K39M, D45N, D45Q, T60L, T60V, T60I, T60M, Q63D, Q63E, K80V, K80L, K80I, K80M, T91S, H112D, H112E, R122I, R122V, R122L, R122Mからなる群より選ばれる少なくとも2つの一次変異を含み、場合により、K6X、好ましくはK6RまたはK6H、R30X、好ましくはR30K、 R30H, F74X, 好ましくは F74Y, F74W, K81X,好ましくは K81Rまたは K81H, K88X, 好ましくは K88R または K88H, T90X, および V114X, 好ましくは V114L, V114I または V114Mからなる群より選ばれる1以上の二次変異を含む、請求項39記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンがゴキブリアレルゲンである、請求項17記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンが動物アレルゲン、好ましくは哺乳動物アレルゲンである、請求項16記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンがネコ、イヌ、またはウマ由来である、請求項42記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンが毒物アレルゲンである、請求項1〜16のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンが膜翅目由来である、請求項44記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンがスズメバチ科、ミツバチ科、またはアリ科に由来する、請求項45記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンがVes v 5である、請求項46記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンが食物アレルゲンである、請求項1〜16のいずれか1項記載のタンパク質変種。
- 天然に存在するアレルゲンに対して免疫応答を調節する能力を有する組換えタンパク質変種であって、
i)植物、草、食物、及びダニアレルゲンからなる群より選択され、
ii)足場タンパク質の変種であり、前記足場タンパク質は天然に存在するアレルゲンの三次元折りたたみ様式と類似の三次元折りたたみ様式を有し、前記タンパク質変種は、前記足場タンパク質と比較して、前記天然に存在するアレルゲン中の対応する位置に存在する少なくとも1個のアミノ酸残基に同一である又は相同な少なくとも1個のアミノ酸残基を前記足場タンパク質中に導入する少なくとも1つの一次変異を含み、かつ
iii)前記足場タンパク質と比較して、前記天然に存在するアレルゲンに特異的なIgE抗体に対するアフィニティー及び/又は結合能が増加している、前記タンパク質変種。 - 医薬品として使用するための請求項1〜49のいずれか1項に記載のタンパク質変種。
- アレルギーの治療又は予防用薬物製造のための請求項1〜49のいずれか1項に記載の組換えタンパク質変種の使用。
- 請求項1〜49のいずれか1項に記載の2種以上の組換えタンパク質変種を含んでなる組成物であって、各変種が、他の変種の少なくとも1つに存在しない少なくとも1つの一次変異を有することによって定義される、組成物。
- 2〜12種、好ましくは3〜10種、さらに好ましくは4〜8種、最も好ましくは5〜7種の請求項1〜18に記載の異なるタンパク質変種を含む、請求項52に記載の組成物。
- 医薬品として使用するための請求項52又は53に記載の組成物。
- アレルギーを予防及び/又は治療するための医薬品製造のための請求項52〜54のいずれか1項に記載の組成物の使用。
- 請求項1〜49のいずれか1項に記載の組換えタンパク質変種又は請求項52又は53に記載の組成物を含むことを特徴とする医薬組成物。
- さらに薬学的に許容しうる担体及び/又は賦形剤及び/又はアジュバントを含む、請求項52又は53に記載の医薬組成物。
- アレルギーに苦しむ患者内で天然に存在するアレルゲンによって誘導されるアレルギー反応に対するワクチンの形態である、請求項52又は53に記載の医薬組成物。
- 組換えタンパク質変種が足場タンパク質をコードするDNAおよび天然に存在するアレルゲンをコードするDNAのDNAシャッフリング(分子育種)によって得られるDNA配列から生成される、請求項1〜49のいずれか1項記載の組換えタンパク質変種を調製する方法。
- 請求項1〜49のいずれか1項記載の組換えタンパク質変種をコードするDNA配列。
- 配列番号2または3から選ばれる配列の誘導体である、請求項60記載のDNA配列。
- 請求項60または61記載のDNAを含む発現ベクター。
- 請求項62記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
- 請求項63記載の宿主T細胞を培養する工程を含む、組換えタンパク質変種を製造する方法。
- 天然に存在するアレルゲンに対して特異的なT細胞クローンまたはT細胞株を刺激することのできる少なくとも一つのT細胞エピトープを含む、請求項1〜49のいずれか1項記載の組換えタンパク質変種。
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