JP2005517654A - 日周期リズム障害の治療方法 - Google Patents

Abstract

神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストは単独でまたは他の薬物と一緒に日周期リズム性を変化させ、日周期リズム障害を緩和し、睡眠の質を強化乃至改善するために使用される。更に、本発明は前記方法を実施するための薬剤の使用を提供する。

Description

ヒトを含めた全ての真核植物及び動物が日周期リズムを示す。生物学的リズムは日周期及び季節的変化を含めた経時的な生物学的プロセスの周期的変動である。日周期（すなわち、約２４時間）リズムはホルモンのような生物分子の産生、体温の調節並びに覚醒状態、機敏性、睡眠及び活動期間のような挙動を含む。日周期リズムは、原核生物からヒトまでの生物体で見られる２４時間にわたる内因性自立変動である（Ｊ．Ｓ．Ｔａｋａｈａｓｈｉら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２１７：１１０４−１１１１（１９８２））。

本来、日周期リズムは前記変動の多くに２４時間パターンを与える環境刺激に密接に結びついている。環境からのシグナルによる日周期リズムの調節には、日周期リズムの“同調”が含まれる。日周期リズムの同調に影響を及ぼす環境シグナルは“同調因子”と称され、その例は明暗周期である。

哺乳動物における多くの日周期リズムのコントロールは視交叉上核（ＳＣＮ）と呼ばれる脳の一部により媒介される。ヒトや他の哺乳動物では、すべての内因性日周期リズムをコントロールする日周期時計は視床下部のＳＣＮに位置している。活動、機敏性、コア体温及び多くのホルモンのすべてがＳＣＮによりコントロールされる内因性日周期リズムを有している。ＳＣＮは哺乳動物における日周期リズムの主要ペースメーカーである。日周期リズムは主に環境明暗周期により同調される。日周期時計の最も重要で再現性ある特徴の１つは外因性明暗シグナルに応答し得ることである。日周期時計は光入力経路、時計及びエフェクター（出力）経路の３部分から構成されている。光シグナルは網膜によりＳＣＮに運ばれ、松果腺はＳＣＮにより調節されるメラトニン（Ｎ−アセチル−５−メトキシトリプタミン）を生成する。光に関する情報は直接網膜視床下部路（ＲＨＴ）を介して及び間接的に外側膝状体核（ＬＧＮ）を介して網膜からＳＣＮに運ばれる（Ｄ．Ｃ．Ｋｌｅｉｎら，「視交叉上核：マインドクロック(Suprachiasmatic nucleus: the mind's clock(」，ニューヨークに所在のオックスフォード大学出版（１９９１年）発行）。

興奮性アミノ酸が明暗周期に関する情報のＳＣＮへの伝達に関与することが、この分野において示唆されてきた。アセチルコリン、神経ペプチドＹ、ＧＡＢＡ、５ＨＴ_１受容体機能、グルタメート及びサブスタンスＰ受容体は哺乳動物の日周期リズムの同調及び／または生成において役割を果たし得る。ＳＣＮ中の発振器は、網膜を起源とするグルタミン作動性導入(glutamatergic afferents)により媒介される光入力によりリセットされ得る。グルタメートはインビトロで哺乳動物日周期時計に対する光の影響を模倣することができる。ＮＭＤＡグルタメート受容体及び非ＮＭＤＡ受容体は日周期時計に対する光の影響を媒介し得る（Ｊ．Ｍ．Ｄｉｎｇら，Ｓｃｉｅｎｃｅｎ，２６６：１７１３−１７１７（１９９４）；Ｓ．Ｓｈｉｂａｔａら，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２６７：Ｒ３６０−Ｒ３６４（１９９４））。インビトロでＮＭＤＡを適用するとＳＣＮを含む視床下部脳スライスにおいて電気的活動リズムが相シフトされ得る。ＮＭＤＡ受容体の活性化は光情報をＳＣＮに伝達する際の重要なステップであると考えられる（Ｅ．Ｍ．Ｍｉｎｔｚら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，１９：５１２４−３０（１９９９））。

神経ペプチドＹ（ＮＰＹ）は、膵ポリペプチド（ＰＰ）やペプチドＹＹ（ＰＹＹ）をも含む膵ポリペプチドファミリーの１員である３６アミノ酸ペプチドである。ＮＰＹは中枢及び末梢神経系中に存在し、中枢エンドクリン分泌、脈管及び平滑筋活動、食欲、記憶、不安、血圧調節及び再生を含めた広範囲の生物学的機能に影響を及ぼす。例えば、Ｋａｒｌａら，Ｐｈｙｓ．＆ Ｂｅｈａｖｉｏｒ，５０：５（１９９１）を参照されたい。

ＮＰＹ受容体はＧタンパク質共役受容体スーパーファミリーの一員である。現在、ＮＰＹが少なくとも５個の受容体、すなわちＹ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４及びＹ５に結合することが公知である、Ｙ１及びＹ５ ＮＰＹ受容体はＳＣＮで発現する（Ｐ．Ｊ．Ｌａｒｓｅｎ及びＰ．Ｋｒｉｓｔｅｎｓｅｎ，Ｍｏｌ．Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．，６０：６９−７６（１９９８））。Ｙ５アンタゴニストはＳＣＮ日周期神経活動リズムのＮＭＤＡ誘導相シフトに対するＮＰＹの影響を防止し得ると考えられる。Ｙ５受容体はＮＭＤＡ誘導相シフトに対するＮＰＹの阻止効果を媒介する。

ＳＣＮ及び日周期時計はヒトにおいて多数のホルモンリズムの相及びリズムをコントロールする。最も十分に特徴づけられているＳＣＮ出力の１つは、視床下部から脊髄への回路ルートを介して松果体に対してであり、その後松果体に戻る。ヒト松果腺は夜間に観察される血漿濃度が日中に観察される濃度よりも１０〜４０倍高いようにメラトニンを日周期的に分泌する。この血漿メラトニンリズムは盲目の動物及びヒトで持続しているので真の日周期リズムであり、従って外因性明暗周期に依存しない。しかしながら、血漿メラトニン濃度が高い夜間に光を浴びせると、血漿メラトニンを用量依存的に日中レベル近くまで迅速に抑えることができる（Ｃ．Ａ．Ｃｚｅｉｓｌｅｒら，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３３２：６−１１（１９９５）；Ｉ．Ｍ．ＭｃＩｎｔｙｒｅら，Ｊ．Ｐｉｎｅａｌ Ｒｅｓ．，６：１４９−５６（１９８９）；Ｄ．Ｂ．Ｂｏｉｖｉｎら，Ｎａｔｕｒｅ，３７９：５４０−２（１９９６））。血漿メラトニン濃度に対する光の抑制効果は網膜−ＳＣＮ−松果体神経経路を介して媒介されると考えられる（Ｒ．Ｙ．Ｍｏｏｒｅら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２１０：１２６７−９（１９８０））。ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストはＳＣＮ日周期ニューロン活性のＮＭＤＡ誘導相シフト（後退）をブロックし得ると考えられる。ＮＰＹ Ｙ５受容体アンタゴニストは、メラトニンのように時計相応時間で睡眠を誘導することにより時計のリセットを促進する。ＮＰＹ Ｙ５受容体アンタゴニストはインビボで日周期時計の光同調を変更すると予想される。

日周期リズムは睡眠の重要なモジュレーターでもある。睡眠は生存のために必要であるが、その正確な恒常性寄与は不明である。睡眠は一様の状態ではなく、むしろ個人のＥＥＧの変化により特徴づけられる幾つかの段階を含んでいる。非急速眼球運動（ＮＲＥＭ）タイプ（全睡眠時間の７５〜８０％）はステージ１〜４（最深レベル）の深さの範囲である。ステージ１睡眠はうとうと状態で、このときＥＥＧは個人が覚醒しているときのＥＥＧよりも低い電圧、より混合した周波数及びαリズムの鈍化を示す。ステージ２では、ステージ１と類似の背景活動を経験するが、僅かに高い周波数“睡眠紡錘波”及び散発性の高振幅徐波が組み合わさっている。睡眠の第３及び第４ステージは徐々に高くなる高振幅徐波活動を呈する。個人が急速眼球運動（ＲＥＭ）を示している別の睡眠ステージは残りの睡眠時間を占め、正常な夜間睡眠中５〜６回起こる。ＲＥＭ睡眠は低い電圧、高い周波数ＥＥＧ及び個人が覚醒しているときに見られるのと同様の他の特徴により特徴づけられ、他の４睡眠ステージはＮＲＥＭ睡眠に分類される。

睡眠の要件は個人毎に広く異なり、現在の情動的状態を含めた諸因子により影響される。自然の老化過程は各種の日周期リズム及び日内リズムの変化を伴っている。驚くことに、睡眠のタイミング及び構造の加齢変化は高齢者に共通の問題であり、しばしば高い疾病率に関連している。年齢が進むと、睡眠の総量は短かくなる傾向にある。ステージ４は減るかまたはなくなり、睡眠はより断片化され、中断されるようになり得る。高齢者における睡眠パターンを評価すると、睡眠のタイミングが相前進する。特に女性の場合にそうであることが判明している。より早く寝て、より早く起きるようになるこの傾向は、世間の他の人たちと歩調があっていないと感じている老人にとって非常に欲求不満である。加えて、高齢者における睡眠の質は、徐波睡眠の著しい減少、深い睡眠ステージ（特にステージ４）の短縮、ＲＥＭ睡眠の断片化及びより頻繁な覚醒を伴って低下する。また、高齢者でなくて通常の睡眠プロセスの障害を呈する場合がある。睡眠の構造のこれらの変化はより頻繁な居眠り、少ない昼間機敏性、及び低下した知的機能及び認識能力に相関している。ＲＥＭ睡眠の不足は反復活動による学習スキルに関わる記憶硬化を妨害すると示唆されており、徐波睡眠は事象を長い記憶に硬化するのに重要であると認められている。また、睡眠のＲＥＭステージが短くなると認識機能及び学習の低下、特に記憶の低下を招く恐れがある。うつ病及び不眠症は正常な日周期リズム性の破壊を含み得る。

睡眠障害は通常、個人が寝つく及び／または寝入る能力に影響を及ぼす日周期リズムの障害を含めた睡眠の妨害を含み、睡眠障害により睡眠が少なくなったり多くなったり、または睡眠に関連する異常な行動が起こる。

この分野では正常な睡眠を促進し、睡眠異常及び睡眠障害を治療するために多くの化合物が使用されている。その例として、鎮静薬、睡眠薬、不安緩解薬、抗精神薬、抗不安薬、マイナートランキライザー、メラトニン受容体アゴニスト及びアンタゴニスト、メラトン作動薬、ベンゾジアゼピン、バルビツレート、５ＨＴ−２アンタゴニスト等が挙げられる。睡眠異常を患っている患者を治療するために物理的方法も使用されている。その例として、光線療法の使用、特定神経または神経束への変調電気シグナルの適用が挙げられる。

しかしながら、公知の治療レジメは、昼間機能における残留影響、記憶欠陥、中毒となる恐れ、リバウンド不眠症、高い夢強度及び悪夢の発生に関連し得る“ＲＥＭリバウンド”等を含めた複数の問題を有する。従って、睡眠を強化し、時間生物学的（日周期リズム相のシフト）効果を達成し、または日周期リズム睡眠障害を緩和するためのより生理学的方法が非常に望ましい。

本発明は、哺乳動物において時間生物学的（日周期リズム相のシフト）効果を達成し、日周期リズム睡眠障害を緩和するためのＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの使用に関する。本発明は更に、哺乳動物において光の相シフト影響を阻止するためのＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの使用に関する。従って、本発明は、ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの投与を含む哺乳動物において日周期リズム相シフト効果を達成する方法を提供する。更に、本発明は、日周期リズム相シフト効果を達成するための医薬組成物を提供する。更に、本発明は、日周期リズム相シフト効果を達成するため、日周期リズム障害を治療または予防するため、及び光の相シフト影響を阻止するために使用される薬剤の製造方法を提供する。

更に、本発明は、哺乳動物において睡眠の質を強化乃至改善し（特に睡眠効率を高めることにより）、睡眠の維持を増強させるための、及び睡眠異常及び睡眠障害を予防及び治療するためのＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの使用に関する。従って、本発明は、ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの投与を含む哺乳動物において睡眠の質を強化乃至改善し、睡眠の効率及び睡眠の維持を高めるための方法を提供する。更に、本発明は睡眠の質を強化乃至改善し、睡眠の効率及び睡眠の維持を高めるための医薬組成物を提供する。更に、本発明は睡眠の質を強化乃至改善し、睡眠異常及び睡眠障害を治療するための薬剤の製造方法を提供する。

本発明は、哺乳動物において時間生物学的（日周期リズム相のシフト）効果を達成し、日周期リズム睡眠障害を緩和するためのＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの使用に関する。本発明は更に、哺乳動物において光の相シフト影響を調節するためのＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの使用に関する。

１実施態様において、本発明は、被験者に対して適当量のＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む被験者の日周期リズムを相前進または相後退させる方法を提供する。

被験者に対して適当量のＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することは、例えば時間生物学的（日周期リズム相シフト）効果を達成するため及び／または日周期リズム相異常または障害を緩和するために以下の状態を予防または治療する際に有用である：睡眠−覚醒スケジュールの障害；時差ぼけ；交代勤務；勤務及び勤務外スケジュールに適応不良の人；住み込みの医者、看護士、消防士、警官、または夕方または夜間に機敏性及び覚醒状態が要求される人、または任務及び責任のためにいろいろな期間睡眠が奪われる人；動物飼育員；体内時計をより有効な時間にリセットしたい運動選手；極度のレベルの機敏性及び覚醒状態が要求される任務についている軍隊の歩兵または他の兵隊、及び前記任務の遂行において睡眠が奪われることがある者；潜水夫、または研究、探査または工業的目的で海の中に閉じこめられている人；鉱夫、洞窟探検者、研究者、または地球の下に閉じこめられている人；地球の周りの軌道上、月や衛星への宇宙空間で任務中または太陽系外で任務中の宇宙飛行士、またはそのような任務のトレーニングを受けている者；盲人または弱視の人、または永久か一時的に明暗を区別できない人；精神病患者；夜食症候群、不眠症を患っている人；昏睡状態の人、または医学的、精神医学的または他の理由で意識朦朧状態を維持する必要がある人；北極圏または南極大陸の居住者、または異常量の光または闇がある気候のところに住んでいる人；季節性感情障害（ＳＡＤ）、冬季うつ病または他の形態のうつを患っている者；老人；アルツハイマー病患者または他の形態の痴呆を患っている者；日周期の適当な時期に投薬が必要な患者；睡眠相後退症候群、睡眠相前進症候群または非２４時間睡眠相症候群を患っている患者；及び一次または二次不眠症、または日周期リズム関連不眠症を患っている患者。

日周期リズムは、安静−活動、睡眠−覚醒サイクル、体温、ホルモンレベルのリズム、全身生理学の変動等のような各種生理学的パラメーターに影響を与える。これらのパラメーターが日周期時計と同調しないと、日周期リズムのバランスが崩れ、生理、各種仕事に対するパフォーマンス及び情緒的幸福が低下する恐れがある。本発明は、例えば日周期リズム性に関連する症状及び時間帯をまたがる旅行や交代勤務スケジュールに関連する精神的／肉体的障害を予防または治療する際に有用である。

別の実施態様で、本発明は、哺乳動物に対して有効量のＮＰＹ Ｙ５受容体アンタゴニストを投与することを含む時間帯変化（時差ぼけ）症候群、交代勤務睡眠障害、睡眠相後退症候群、睡眠相前進症候群及び非２４時間睡眠−覚醒障害の予防または治療方法を提供する。

別の実施態様で、本発明は、被験者に対して適量のＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む前記被験者における再同調（日周期リズム性の正常同調への復元；環境の明暗周期に同調）時間の短縮方法を提供する。

別の実施態様で、本発明は、旅行者、特に哺乳動物に対して機敏性増加量のＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む前記旅行者の時差ぼけの影響を緩和する方法を提供する。この態様の目的は、複数の時間帯をまたがったときに睡眠及び給食パターンの変化に身体を生理学的に合わせるのを助けることである。

別のより好ましい実施態様で、本発明は、被験者の現在の活動／睡眠サイクルに整合させるべく被験者の体内日周期時計をリセットさせる方法を提供する。例えば、昼から夜、または夜から昼へと勤務を交代する労働者に対して適当量のＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストを投与する。

本発明は更に、哺乳動物において睡眠の質を強化乃至改善するため及び睡眠異常や睡眠障害を予防及び治療するためのＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの使用に関する。特に、本発明は、睡眠効率を高め、睡眠維持を高めることにより睡眠の質を強化乃至改善する方法を提供する。加えて、本発明はＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む哺乳動物における睡眠異常及び睡眠障害の予防及び治療方法を提供する。本発明は更に、睡眠の質を強化乃至改善し、睡眠効率及び睡眠維持を高めるための医薬組成物を提供する。本発明は、精神病（特に不安症に関連する）の結果としての心身的要因、薬物及びアルコールの使用及び乱用（特に退薬段階中）、幼児期発症の睡眠の開始及び維持の障害（不眠症）（ＤＩＭＳ）、夜間ミオクローヌス及び下肢不穏状態、及び老年期に見られるような非特異的ＲＥＭ障害を原因とし得るＤＩＭＳを含めた睡眠障害の治療において有用である。

本発明により与えられる被験者における以下の結果は睡眠の質の強化に相関し得る：被験者の睡眠時間を被験者が眠ろうと試みた時間で割った値の上昇；睡眠潜伏期（眠つく時間）の短縮；睡眠中に目が覚めた回数の減少；最初に眠った後目が覚めている時間の短縮；総睡眠量の増加；ＲＥＭ睡眠の量及びパーセンテージの増加；ＲＥＭ睡眠の期間及び発生の増加；ＲＥＭ睡眠の断片化の減少；徐波（すなわち、ステージ３または４）睡眠の量及びパーセンテージの増加；ステージ２睡眠の量及びパーセンテージの増加；覚醒、特に早朝覚醒の回数の数の低下；昼間機敏性の増加；及び睡眠維持の向上。本発明により提供され得る二次的結果には、強化された認識機能及び高い記憶維持が含まれる。「睡眠の質の強化方法」は、被験者において睡眠の質の強化に相関し得る結果をもたらす方法を指す。前記結果には、上記した睡眠の質の強化に相関する結果が含まれるが、これらに限定されない。

本発明は更に、不眠症、過眠症、睡眠時無呼吸、ナルコレプシー、夜間ミオクローヌス、ＲＥＭ睡眠中断、時差ぼけ、交代勤務者の睡眠障害、記憶障害(dysomnias)、夜驚症、夜食症候群、うつまたは情緒／気分障害に関連する不眠症、睡眠（錯眠）に関連する機能不全、夢遊病及び遺尿症を含めた睡眠異常及び睡眠障害、並びに老化に伴う睡眠障害を予防及び治療するために有用である。睡眠異常及び睡眠障害は通常睡眠の開始または維持することが困難であること、または安らかなまたは十分な睡眠を得ることが困難であることにより特徴づけられる。

加えて、ある薬物は副作用としてＲＥＭ睡眠を短縮させることがあり、本発明はこのタイプの睡眠障害を是正するために使用され得る。本発明は、非回復睡眠及び筋肉痛、または睡眠時の呼吸障害に関連する睡眠時無呼吸により生ずる繊維筋痛症のような症状を治療するのにも有用である。本発明は睡眠異常及び睡眠障害に限定されず、睡眠の質の低下により生ずる各種症状に適用され得ることは当業者には明らかである。

本発明は、上記症状の治療及び予防、並びに前記症状を治療または予防するために有用な薬剤を製造するためのＮＰＹ Ｙ５アンタゴニスト、その組合せまたは組成物の使用に関する。

本発明において、被験者哺乳動物はヒトである。本発明は年齢に関係なく適用され得る得るが、高齢者に対して多く適用され得る。更に、本発明は健康人の睡眠を強化させるためにも使用され得るが、睡眠異常または睡眠障害を患っているヒトの睡眠の質を強化するために特に有効であり得る。

本発明で使用されるＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは当業界で公知のＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストであり得る。

ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストはペプチドまたは非ペプチドであり得る。しかしながら、非ペプチドＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの使用が好ましい。更に、経口的に活性なＮＰＹ ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの使用が便宜上好ましい。

本発明において、全身投与後中枢神経系（ＣＮＳ）、例えば脳に対して活性であるＮＰＹ Ｙ５アンタゴニスト、すなわちＣＮＳに容易に貫通するＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストが好ましい。従って、本発明で使用するのに好ましいＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストはＣＮＳ透過性ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストである。

Ｙ５受容体アンタゴニストの非限定例には、式：

［式中、
Ａはアリール及びヘテロアリールからなる群から選択され、前記アリール及びヘテロアリール基は場合により炭素またはヘテロ原子のいずれかでハロゲン、ニトロ、低級アルキル、ハロ（低級）アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキル、低級アルケニル、低級アルコキシ、ハロ（低級）アルコキシ、低級アルキルチオ、カルボキシ、低級アルカノイル、低級アルコキシカルボニル、場合によりオキソで置換されている低級アルキレン及び式−Ｑ−Ｄで表される基からなる群から選択される置換基で置換されていてもよく；
Ｄはアリール及びヘテロアリールからなる群から選択され、前記アリール及びヘテロアリール基は場合によりハロゲン、シアノ、低級アルキル、ハロ（低級）アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ（低級）アルコキシ、低級アルキルアミノ、ジ−低級アルキルアミノ、低級アルカノイル及びアリールからなる群から選択される置換基で置換されていてもよく；
ｎは０〜１の整数であり；
Ｑは一重結合及びカルボニルからなる群から選択され；
Ｔ、Ｕ、Ｖ及びＷはそれぞれ独立して窒素及びメチレン基からなる群から選択され、前記窒素及びメチレン基は場合によりハロゲン、低級アルキル、ヒドロキシ及び低級アルコキシからなる群から選択される置換基で置換されていてもよく；
Ｘはメチレン及び窒素からなる群から選択され；
Ｙは窒素及び酸素からなる群から選択され、前記窒素は場合により低級アルキルまたは酸素で置換されている］
を有する化合物、及びその医薬的に許容され得る塩及びエステルが含まれる。これらの化合物は詳しく記載されており、その製造方法は援用により本明細書に含まれるとする国際特許出願公開第００／１４３７６号パンフレット、米国特許第６，２３６，３７５号明細書及び同第６，３３５，３４５号明細書に記載されている。

ＮＰＹ Ｙ５受容体アンタゴニストの非限定例には、式：

［式中、
Ｖ、Ｗ、Ｘ及びＺは独立してＣＨ及びＮから選択され；
Ｒ^１はＨ、Ｃ_１−３アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ＦまたはＣｌであり；
Ｒ^２はＳ（Ｏ）_ｎＲ^６、ＣＯＲ^６またはＣＨＯ（ここで、ｎは０、１または２であり、Ｒ^６はＮ（Ｒ^３）_２またはＣ_１−３アルキルである）であり；
Ｒ^３は独立してＨまたはＣ_１−３アルキルであり；
Ａｒはアリールまたはヘテロアリールであり；
Ｒ^４及びＲ^５は独立して（１）水素、（２）未置換であるかまたは(a)ハロ、(b)Ｃ_１−３アルコキシ、(c)−Ｎ（Ｃ_１−３アルキル）_２、(d)Ｃ_２−４アルカノイルまたは(e)アリールで置換されたアリール、（３）ニトロ、（４）Ｃ_１−５アルキル、（５）Ｃ_１−５アルコキシ、（６）ヒドロキシ−Ｃ_１−３アルキル、（７）カルボキシ、（８）ハロ、（９）Ｃ_１−５アルキルチオ、（１０）Ｃ_１−５エトキシカルボニル、（１１）ピリジルカルボニル、（１２）ベンゾイル、（１３）フェニル−Ｃ_１−３アルコキシ、（１４）未置換であるかまたはＣ_１−３アルキルまたはＣ_１−３アルコキシで置換されたピリジル、（１５）Ｃ_３−６シクロアルキル、（１６）オキサゾリル、（１７）チアゾリル、（１８）トリアゾリル、（１９）フェノキシ及び（２０）Ｃ_２−６アルカノイルから選択される］
を有する化合物またはその医薬的に許容され得る塩が含まれる。

これらの化合物は詳しく記載されており、その製造方法は援用により本明細書に含まれるとする国際特許出願公開第００／２７８４５号パンフレット、米国特許第６，１９１，１６０号明細書及び同第６，３１３，２９８号明細書に記載されている。

ＮＰＹ Ｙ５受容体アンタゴニストの非限定例には、式：

を有する化合物Ｌ−１５２，８０４、及びその医薬的に許容され得る塩、エステル及び互変異性体が含まれる。化合物Ｌ−１５２，８０４及びその製造は、参照により本明細書に含まれるとするＪ．Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３１（５）：１６３９（１９６６）及び米国特許第６，２５８，８３７号明細書に記載されている。

上記化合物は現在研究中のＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの１例にすぎない。これらの化合物のリストは網羅的ではなく、本発明の方法は任意のＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストを使用し得、化合物の特定の構造クラスに限定されない。

本発明で使用されるＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの好適な医薬的に許容され得る塩には、例えば前記化合物の溶液と医薬的に許容され得る非毒性酸（例えば、塩酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、クエン酸、酒石酸、炭酸、リン酸または硫酸）の溶液を混合することにより形成され得る酸付加塩が含まれる。アミン基の塩は、アミノ窒素原子がアルキル、アルケニル、アルキニルまたはアルアルキル基を有する第４級アンモニウム塩からなり得る。化合物が酸性基、例えばカルボン酸基を有している場合には、本発明はその塩、好ましくはその非毒性の医薬的に許容され得る塩（例えば、そのナトリウム、カリウム及びカルシウム塩）も意図される。

上に定義した用語が上記式において複数回現れていることがあり、そのような場合各用語は相互に独立して定義される。また、構造式中の特定変数の使用は異なる構造式中の同一変数の使用と独立して解される。

本発明で使用されるＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの製造については本明細書中に援用した文献に詳細に記載されている。

ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストとして、特にＣＮＳ透過性ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストとして、よって本発明において使用され得る化合物は当業界で公知の方法、例えば本明細書に記載されているアッセイにより過度の実験をすることなく容易に同定され得る。

ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは単独で、または日周期リズムを変更したり睡眠効率を高めるのに有効であることが公知の他の薬物と一緒に使用され得る。ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニスト及び他の薬物は同時療法または固定併用で共に投与してもよく、または別々のときに投与してもよい。例えば、ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストはメラトニン生成を抑制または刺激するために使用されることが当業界で公知の他の化合物、例えばメラトニン作動薬、ノルアドレナリン作動性／セロトニン作動性再吸収ブロッカー、α−１−ノルアドレナリンアゴニスト、モノアミンオキシダーゼ阻害剤、他のＮＰＹアゴニストまたはアンタゴニスト、ニューロキニン−１アゴニスト、サブスタンスＰ、β−アドレナリンブロッカー及びベンゾジアゼピン（例えば、アテノロール）；メラトニン生成を刺激するために使用されることが当業界で公知の他の化合物、例えば三環式抗うつ剤及びα−２−アドレナリンアンタゴニスト；またはメラトニン前駆体、例えばトリプトファン、５−ヒドロキシトリプトファン、セロトニン及びＮ−アセチルセロトニン；メラトニンアナログ、メラトニンアゴニスト及びメラトニンアンタゴニスト；またはメラトニンそのものと一緒に投与され得る。

加えて、ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは睡眠の質を強化し、睡眠異常及び睡眠障害を予防及び治療するために有用であることが当業界で公知の他の化合物、例えば鎮静薬、睡眠薬、抗不安薬、抗精神薬、抗不安薬、マイナートランキライザー、メラトニンアゴニスト及びアンタゴニスト、メラトニン作動薬、ベンゾジアゼピン、バルビツレート、５ＨＴ−２アンタゴニスト等と一緒に投与され得る。例えば、アジナゾラム、アロバルビタール、アロニミド、アルプラゾラム、アミトリプチリン、アモバルビタール、アモキサピン、ベンタゼパム、ベンズオクタミン、ブロチゾラム、ブプロピオン、ブスピロン、ブタバルビタール、ブタルビタール、カプリド、カルボクロラール、ベタインクロラール、抱水クロラール、クロルジアゼポキシド、クロミプラミン、クロペリドン、クロラゼパート、クロレタート、クロザピン、シプラゼパム、デシプラミン、デクスクラモール、ジアゼパム、ジクロラールフェナゾン、ジバルプロエックス、ジフェンヒドラミン、ドキセピン、エスタゾラム、エトクロルビノール、エトミデート、フェノバム、フルニトラゼパム、フルラゼパム、フルボキサミン、フルオキセチン、ホスアゼパム、グルテチミド、ハラゼパム、ヒドロキシジン、イミプラミン、リチウム、ロラゼパム、ロルメタゼパム、マプロチリン、メクロカロン、メラトニン、メフォバルビタール、メプロバメート、メタクアロン、ミダフルル、ミダゾラム、ネファゾドン、ニソバメート、ニトラゼパム、ノルトリプチリン、オキサゼパム、パラアルデヒド、パロキセチン、ペントバルビタール、ペルラピン、ペルフェナジン、フェネルジン、フェノバルビタール、プラゼパム、プロメタジン、プロポホール、プロトリプチリン、クアゼパム、レクラゼパム、ロレタミド、セコバルビタール、セルトラリン、スプロクロン、テマゼパム、チオリダジン、トラカゾレート、トラニルシプロミン、トラゾドン、トリアゾラム、トレピパム、トリセタミド、トリクロホス、トリフルオペラジン、トリメトジン、トリミプラミン、ウルダゼパム、バルプロエート、ベンラファキシン、ゼレプロン、ゾラゼパム、ゾルピデムのような化合物、その塩、その組合せ等が含まれる。

ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは、光線療法または電気刺激のような物理的方法と共に投与され得る。特に、ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは明るい光投与、通常強度の光線暴露または薄暗い光または暗所への暴露（眠っていても）をスケジュールに加えて投与され得る。本発明の１実施態様は、ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは治療プラス暗所の相加効果を与えるような投与時に暗いまたは赤いゴーグルを着用しながら投与される。本発明の別の実施態様では、ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストにより生ずる相シフトとの外部同調因子の発生を避けるためにＮＰＹ Ｙ５アンタゴニスト投与時とずらしてヒトは暗いゴーグルを着用する。また、明るい光暴露はＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの投与と共に使用され得る。本明細書中、用語「光線療法」には上に定義した光線療法が含まれるが、これに限定されない。

従って、本発明の範囲には、哺乳動物において日周期リズム性を変更するため、または睡眠異常及び睡眠障害を予防または治療するためのＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの単独使用または他の薬物との併用が包含される。本発明において好ましい哺乳動物はヒトである。

本明細書中の治療に関する記載は予防（防止）にも、記載した疾患／障害及び症状の治療にも敷衍されることは当業者に自明である。

本発明の範囲には、日周期リズムを変更するため、または睡眠の質を強化乃至改善するためのＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの使用方法も包含される。ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは、哺乳動物において睡眠の質を強化乃至改善する際及び睡眠異常及び睡眠障害を予防及び治療する際に有用である。加えて、ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストを使用すると睡眠効率が高まり、睡眠維持が向上する。ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは更に、哺乳動物において睡眠異常及び睡眠障害を予防及び治療する方法において使用され得る。本発明は更に、日周期リズムを変更するため、睡眠の質を強化乃至改善するため、睡眠効率及び睡眠の維持を高めるための医薬組成物も提供する。

更に、ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストを使用する本発明の方法は、被験者の睡眠時間を患者が眠ろうと試みた時間で割った値の上昇；睡眠潜伏期（眠つく時間）の短縮；睡眠中に目が覚めた回数の減少；最初に眠った後目が覚めている時間の短縮；総睡眠量の増加；ＲＥＭ睡眠の量及びパーセンテージの増加；ＲＥＭ睡眠の期間及び発生の増加；ＲＥＭ睡眠の断片化の減少；徐波（すなわち、ステージ３または４）睡眠の量及びパーセンテージの増加；ステージ２睡眠の量及びパーセンテージの増加；覚醒、特に早朝覚醒の回数の低下；昼間機敏性の増加；睡眠維持の向上；認識機能の強化；及び記憶保持の向上という効果を与える。

本発明は更に、不眠症に関連する睡眠の問題、過眠症、睡眠時無呼吸、ナルコレプシー、夜間ミオクローヌス、ＲＥＭ睡眠中断、時差ぼけ、交代勤務者の睡眠障害、記憶障害(dysomnias)、夜驚症、うつまたは情緒／気分障害に関連する不眠症、夢遊病及び遺尿症を含めた睡眠異常及び睡眠障害、並びに老化に伴う睡眠障害、日周期リズム性に関連する症状、時間帯をまたがる旅行や交代勤務スケジュールに関連する精神的／肉体的障害、非回復睡眠や筋肉痛を示したり睡眠時の呼吸障害に関連する睡眠時無呼吸により生ずる繊維筋痛症のような症状を含めた睡眠異常及び睡眠障害を予防及び治療するために有用である。

加えて、本発明の範囲には、活性成分として少なくとも１つのＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストを医薬用担体または希釈剤と一緒に含む睡眠の質を強化乃至改善するための医薬組成物も包含される。本発明には更に、日周期リズム相シフト効果を得るため、日周期リズム障害を緩和するため、光の相シフト影響を阻止するため、睡眠の質を強化乃至改善するため、または睡眠疾患または睡眠障害を治療するための薬剤の製造におけるＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの使用が包含される。

日周期リズムに影響を与えたり睡眠の質を強化乃至改善するために使用される化合物が多数あることは当業者に公知である。前記した治療薬の組合せにより、各種治療薬の所望特性を向上させるために相補的であり、しばしば相乗的な特性が得られる。前記した組合せの幾つかは本明細書中にＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストと一緒に記載されている。上記した組合せでは、ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニスト及び治療薬は独立して、該化合物を単独で使用したときに有効な用量レベルの１／１００〜１倍の用量範囲で存在させ得る。

ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは鎮静薬、睡眠薬、不安緩解薬、抗精神薬、抗不安薬、マイナートランキライザー、メラトニンアゴニスト及びアンタゴニスト、メラトニン作動薬、ベンゾジアゼピン、バルビツレート、５ＨＴ−２アンタゴニスト等と一緒に投与され得、或いはＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは光線療法または電気刺激のような物理的方法の使用と共に投与され得る。例えば、日周期リズム性を変更したり睡眠の質を強化乃至改善するために、ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは、アジナゾラム、アロバルビタール、アロニミド、アルプラゾラム、アミトリプチリン、アモバルビタール、アモキサピン、ベンタゼパム、ベンズオクタミン、ブロチゾラム、ブプロピオン、ブスピロン、ブタバルビタール、ブタルビタール、カプリド、カルボクロラール、ベタインクロラール、抱水クロラール、クロルジアゼポキシド、クロミプラミン、クロペリドン、クロラゼパート、クロレタート、クロザピン、シプラゼパム、デシプラミン、デクスクラモール、ジアゼパム、ジクロラールフェナゾン、ジバルプロエックス、ジフェンヒドラミン、ドキセピン、エスタゾラム、エトクロルビノール、エトミデート、フェノバム、フルニトラゼパム、フルラゼパム、フルボキサミン、フルオキセチン、ホスアゼパム、グルテチミド、ハラゼパム、ヒドロキシジン、イミプラミン、リチウム、ロラゼパム、ロルメタゼパム、マプロチリン、メクロカロン、メラトニン、メフォバルビタール、メプロバメート、メタクアロン、ミダフルル、ミダゾラム、ネファゾドン、ニソバメート、ニトラゼパム、ノルトリプチリン、オキサゼパム、パラアルデヒド、パロキセチン、ペントバルビタール、ペルラピン、ペルフェナジン、フェネルジン、フェノバルビタール、プラゼパム、プロメタジン、プロポホール、プロトリプチリン、クアゼパム、レクラゼパム、ロレタミド、セコバルビタール、セルトラリン、スプロクロン、テマゼパム、チオリダジン、トラカゾレート、トラニルシプロミン、トラゾドン、トリアゾラム、トレピパム、トリセタミド、トリクロホス、トリフルオペラジン、トリメトジン、トリミプラミン、ウルダゼパム、バルプロエート、ベンラファキシン、ゼレプロン、ゾラゼパム、ゾルピデムのような化合物、その塩、その組合せ等、及びその混合物または組合せと一緒に投与され得る。

典型的には、上記組合せの各成分の１日用量は、該成分を単独で使用したときの最小推奨用量の約１／５０〜最大推奨レベルの範囲であり得る。

上記組合せを例示するために、所与の１日用量範囲で臨床的に有効なＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは１日用量範囲と同等またはそれ以下のレベルで、指定される１日用量範囲のアジナゾラム、アロバルビタール、アロニミド、アルプラゾラム、アミトリプチリン、アモバルビタール、アモキサピン、ベンタゼパム、ベンズオクタミン、ブロチゾラム、ブプロピオン、ブスピロン、ブタバルビタール、ブタルビタール、カプリド、カルボクロラール、ベタインクロラール、抱水クロラール、クロルジアゼポキシド、クロミプラミン、クロペリドン、クロラゼパート、クロレタート、クロザピン、シプラゼパム、デシプラミン、デクスクラモール、ジアゼパム、ジクロラールフェナゾン、ジバルプロエックス、ジフェンヒドラミン、ドキセピン、エスタゾラム、エトクロルビノール、エトミデート、フェノバム、フルニトラゼパム、フルラゼパム、フルボキサミン、フルオキセチン、ホスアゼパム、グルテチミド、ハラゼパム、ヒドロキシジン、イミプラミン、リチウム、ロラゼパム、ロルメタゼパム、マプロチリン、メクロカロン、メラトニン、メフォバルビタール、メプロバメート、メタクアロン、ミダフルル、ミダゾラム、ネファゾドン、ニソバメート、ニトラゼパム、ノルトリプチリン、オキサゼパム、パラアルデヒド、パロキセチン、ペントバルビタール、ペルラピン、ペルフェナジン、フェネルジン、フェノバルビタール、プラゼパム、プロメタジン、プロポホール、プロトリプチリン、クアゼパム、レクラゼパム、ロレタミド、セコバルビタール、セルトラリン、スプロクロン、テマゼパム、チオリダジン、トラカゾレート、トラニルシプロミン、トラゾドン、トリアゾラム、トレピパム、トリセタミド、トリクロホス、トリフルオペラジン、トリメトジン、トリミプラミン、ウルダゼパム、ベンラファキシン、ゼレプロン、ゾラゼパム、ゾルピデムのような化合物、その塩、その組合せ等と一緒に及び前記した混合物または組合せで効果的に組合わされ得る。ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストはうつ病患者において日周期リズムを変更したり睡眠異常及び睡眠障害をコントロールするため及び／または睡眠異常及び睡眠障害を予防及び治療するために他の薬物と一緒に使用され得ることは当業者に自明である。

通常、前記用量範囲は、所要により分割１日用量を与えるように単位基準で調節され得、上記したようにその用量は疾患の種類及び重篤度、患者の体重、特別食及び他の要因に依存する。

上記組合せは当業界で公知であり、以下に検討するような医薬組成物中に処方され得る。ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストは単独でまたは組み合わせて、経口、非経口（例えば、筋肉内、腹腔内、静脈内または皮下注射、或いはインプラント）、鼻、膣、直腸、舌下、または局所ルートで投与され得、各投与ルートに適した剤形で調製され得る。

経口投与用固体剤形にはカプセル剤、錠剤、ピル剤、散剤及び顆粒剤が含まれる。この固体剤形では、活性化合物は少なくとも１つの医薬的に許容され得る不活性担体、例えばスクロース、ラクトースまたはスターチと混合されている。前記剤形はまた、通常のプラクティスのように不活性希釈剤以外の追加物質、例えばステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤をも含み得る。錠剤、カプセル剤等に配合され得る助剤としては、結合剤（例えば、トラガカントガム、アカシア、コーンスターチまたはゼラチン）；賦形剤（例えば、微晶質セルロース）；崩壊剤（例えば、コーンスターチ、予ゼラチン化スターチ、アルギン酸等）；滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）；甘味剤（例えば、スクロース、ラクトースまたはサッカリン）；矯臭剤（例えば、ペパーミント、ウィンターグリーン油、またはチェリー）が例示される。カプセル剤、錠剤やピル剤の場合剤形が緩衝剤を含んでいてもよい。

１回量服用剤形がカプセル剤の場合、そのカプセル剤は上記したタイプの物質に加えて液体担体、例えば脂肪油を含み得る。コーティングとして或いは剤形の物理的形態を変更するために各種の他の材料を存在させてもよい。錠剤及びピル剤は腸溶性コーティングを設けて調製してもよく、錠剤にシェラック及び／または糖をコーティングしてもよい。

経口投与用の液体剤形には医薬的に許容され得るエマルション、溶液、懸濁液、シロップ、エリキシルが含まれ、これらは水のような当業界で慣用されている不活性希釈剤を含む。前記不活性希釈剤の他に、組成物は湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、甘味料、フレーバー、パフュームのような助剤をも含み得る。シロップまたはエリキシルは活性化合物、甘味料としてスクロース、保存剤としてメチル及びプロピルパラベン、色素及びフレーバー（例えば、チェリーまたはオレンジフレーバー）を含み得る。

非経口投与用の本発明の調製剤には滅菌の水性または非水性溶液、懸濁液またはエマルションが含まれる。注射用滅菌組成物は慣用の製薬プラクティスに従って活性物質をビヒクル、例えば注射用蒸留水、天然植物油（例えば、ゴマ油、ココナツ油、落花生油、綿実油等）、合成脂肪ビヒクル（例えば、オレイン酸エチル等）に溶解または懸濁させることにより調製され得る。所要により、緩衝剤、保存剤、酸化防止剤等を配合してもよい。非水性溶媒またはビヒクルとしては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油（例えば、オリーブ油、コーン油）、ゼラチン及び注射用有機エステル（例えば、オレイン酸エチル）が例示される。前記剤形が助剤、例えば保存剤、湿潤剤、乳化剤及び分散剤を含んでいてもよい。前記剤形は、例えば細菌保持フィルターを介する濾過、組成物への安定剤の配合、組成物への照射、または組成物の加熱により滅菌され得る。前記剤形は使用直前に滅菌水または他の滅菌注射用媒体に溶解され得る滅菌固体組成物の形態でも製造され得る。直腸または膣投与用組成物としては、活性化合物に加えてカカオ脂や座薬ワックスのような賦形剤を含み得る座薬が好ましい。鼻内または舌下投与用組成物は当業界で公知の一般的賦形剤を用いても製造される。

本発明の組成物中の活性成分の投与量は変更可能であるが、活性成分の量は適切な剤形が得られるような量でなければならない。活性成分は治療を要する患者（動物及びヒト）に対して最適の薬理効果が得られるような用量で投与され得る。選択した用量は所望する治療効果、投与ルート及び治療期間に依存する。当業者は容易に分かるように、中心日周期ペースメーカーで相シフトを誘導するＮＰＹ Ｙ５アンタゴニストの効果は投与の周囲及び日周期時間の両方に依存し得る。同一化合物でも、投与の日周期時間に依存して相を前進または後退させたり、または特定の日周期リズムにマイナーな影響を与え得る。用量は疾患の種類及び重篤度；患者の体重；患者がその後取る特別食；同時投薬；化合物の固有ＮＰＹ Ｙ５アンタゴニスト活性；化合物の経口投与時のバイオアベイラビリティー；及び当業者が認識している他の要因に応じて患者毎に異なる。

本発明に従って症状を治療する場合、適切な用量レベルは通常約０．０１μｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ体重／日であり、この用量が１回または複数回に分けて投与され得る。好ましい用量レベルは約０．１μｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇ体重／日、より好ましくは約０．５μｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重／日である。例えば、日周期リズム相シフト効果を達成するため、体内日周期時計をリセットするため、日周期リズムの再同調時間を短縮するため、日周期リズム障害を緩和するため、機敏性を高めるため、または睡眠の質に強化するために適した用量レベルは約０．１μｇ〜２５ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは約０．５μｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ日、特に約０．１μｇ〜５ｍｇ／ｋｇ／日である。大型哺乳動物、例えばヒトに対して経口投与のための典型的な適応用量は約３００μｇ〜４００ｍｇである。化合物は１日に数回、例えば１日１〜４回、好ましくは１日１〜２回の投与レジメで投与され得る。注射剤を使用する場合の適当な用量レベルは約０．１μｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは約０．５μｇ〜５ｍｇ／ｋｇ／日、特に約１μｇ〜１ｍｇ／ｋｇ／日である。大型哺乳動物、例えばヒトに対して静注する場合の典型的な用量は約１００μｇ〜１００ｍｇである。化合物は１日に数回、例えば１日１〜４回、好ましくは１日１〜２回の投与レジメで投与され得る。

本発明の医薬組成物は固体剤形処方物で提供され、前記処方物は好ましくは約１００μｇ〜５００ｍｇの活性成分、より好ましくは約１００μｇ〜２５０ｍｇの活性成分を含む。医薬組成物を約１００μｇ、１ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇまたは２５０ｍｇの活性化合物を含む固体剤形で提供することが好ましい。

下記実施例を本発明を単に例示する目的で例示する。これらの実施例は本発明を限定するものではない。

Ｙ５受容体アンタゴニストアッセイ
ヒトの日周期リズム障害を治療するための有力なＹ５アンタゴニストを同定するために、クローン化ヒトＹ５受容体を一次アッセイで使用する。４５５アミノ酸形態（例えば、米国特許第５，６０２，０２４号明細書参照）または１０アミノ酸Ｎ−末端短縮形態（例えば、米国特許第５，９１９，９０１号明細書参照）を発現するベクターを細胞株に導入して、ヒトＹ５受容体を発現する細胞を得ることができる。クローン化ヒトＹ５受容体を発現する細胞からの膜調製物に対する［^１２５Ｉ］ＰＹＹ（ＮＥＮ）の結合は、１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１ｍＭ ＰＭＳＦ、０．１％ バシトラシン及び０．５％ ウシ血清アルブミンを含有する２５ｍＭ トリス緩衝液（ｐＨ７．４）（０．２ｍｌ）中で実施する。Ｙ５受容体を発現するＬＭｔｋ−、ＣＯＳ−７、ＨＥＫまたはＣＨＯ細胞から作成した膜（１０〜３００μｇ／ｍｌ）を２５℃において数種類の濃度の被験化合物の存在下で［^１２５Ｉ］ＰＹＹ（２５ｐＭ）と一緒に１２０分間インキュベートする。結合ペプチド及び遊離ペプチドを予め０．３％ ポリエチレンイミンに浸したＧＦ／Ｃガラスフィルターを用いる濾過により分離する。フィルター上に残留する放射能をＴｏｐＣｏｕｎｔ（商品名）（Ｐａｃｋａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏ．Ｉｎｃ．）を用いて定量する。［^１２５Ｉ］ＰＹＹの特異的結合は総結合と１μＭ ＰＹＹの存在下での非特異的結合の差として定義される。結合ＩＣ_５０はＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（バージョン３．０）を用いて計算する。

Ｙ５アンタゴニストの機能性力価は第２メッセンジャー経路の阻害を測定する各種アッセイを用いて測定され得る。ＮＰＹはＧαｑｉ５へのカップリングを介するＹ５受容体の活性化により細胞内Ｃａ^２＋濃度を上昇させる。ＮＰＹ媒介のＣａ^２＋上昇の阻止におけるＹ５アンタゴニストの力価は機能的アンタゴニスト活性の尺度として使用され得る。例えば、アッセイの２４時間前に９６ウェルプレートにＮＰＰ Ｙ５受容体及びＧαｑｉ５の両方を発現するＣＨＯ細胞（４０，０００細胞／ウェル）を接種する。細胞にアッセイ緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、０．５％ ＢＳＡ及び２．５ｍＭ プロベネシドを含有するハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ），ｐＨ７．４）中でＣａ^２＋感受性蛍光染料Ｆｌｕｏ−４−ＡＭを１時間負荷し、アッセイ緩衝液で３回洗浄し、インキュベータに戻して１時間放置した後、蛍光イメージングプレートリーダーＦＬＩＰＲ（商標）（カリフォルニアに所在のＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を用いてアッセイする。蛍光のベースラインに対するＮＰＹ誘導最大変化を調べ、蛍光を５０％増加させる用量をＮＰＹに対するＥＣ_５０用量として定義する。Ｙ５アンタゴニストを評価するために、アッセイを各種濃度のＹ５アンタゴニストの存在下でＥＣ_５０用量のＮＰＹを用いて実施して機能性ＩＣ_５０を求める。濃度−用量曲線をＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（バージョン３．０）を用いて適合させる。上記アッセイを用いて、１μＭ未満の結合ＩＣ_５０及び／または機能性ＩＣ_５０を有する有力なＹ５アンタゴニストが同定され得る。有用なアンタゴニストは他のＮＰＹ受容体に比した選択性、良好な全身暴露、十分な半減期及び脳透過のような他の特徴をも有するであろう。

行動リズムの評価
げっ歯類の歩行活動リズムを記録するために、各実験を始める前数週間動物を標準の明暗周期（げっ歯類の種類及び系統に応じて１２：１２または１４：１０）で維持する。動物は個々にケージ内にランニングホイールに近づけるように収容し、ホイールランニング活動を連続的に（例えば、ＡｃｔｉｖｉｅｗソフトウェアのＣｈｒｏｎｏｂｉｏｌｏｇｙキットまたは別の生物学的リズム分析ソフトウェアパッケージを用いて）記録する。食餌（ラット固形飼料）及び水は自由に取ることができる。

（１） ＮＰＹ５受容体アンタゴニスト治療が歩行活動の日周期リズムを相シフトするかを調べるために、動物に対してＮＰＹ５受容体アンタゴニストまたはビヒクルを異なる日周期時間で投与し、この間動物は“恒暗”条件で薄暗赤色光線（＜１５ルクスの光）の下に維持する。ホイールランニング活動における相後退（例えば、早い自覚的夜、日周期時間（ＣＴ）１４）及び相前進（例えば、遅い自覚的夜、ＣＴ１９）を観察して相−応答曲線を作成したいときに動物に対してＮＰＹ５受容体アンダニストを投与する。

（２） げっ歯類日周期歩行活動リズムの光誘導相シフトに対するＮＰＹ５アンタゴニストの効果を評価するために、動物を恒暗で収容した後、行動関連時間（すなわち、上に概説したように光により行動の相前進または相後退が大きく生じたとき；ＣＴ１４及び／またはＣＴ１９）に光パルスに曝す３０分前にＮＰＹ５アンタゴニストまたはビヒクルを注射する。光刺激のために、動物を〜１００〜３００ルックスの蛍光白色光に１０〜１５分間曝す。動物の歩行活動を光パルス後数日間モニターする。

（３） ＮＰＹ５アンタゴニストの注射が一定光の下で収容した動物における暗パルスの影響に似ているかを調べるために、動物を一定の光（〜１００〜３００ルクス）に維持する。暗パルスは、中間自覚的昼(mid-subjective day)及び遅い自覚的夜の間に適用したときにそれぞれ歩行活動リズムに相前進及び相後退を誘導する。動物の群を中間自覚的昼（例えば、ＣＴ６またはＣＴ８）の間にＮＰＹ５アンタゴニストまたはビヒクルで処置し、別の群の動物を遅い自覚的夜（例えば、ＣＴ１９）の間にＮＰＹ５アンタゴニストまたはビヒクルで処置する。

（４） ＮＰＹ５受容体アンタゴニストの毎日処置が恒暗（薄暗赤色安全灯下；１５Ｗ，コダック１Ａフィルター）に維持したげっ歯類において自由ランニング歩行活動リズムを変えるかを調べるために、動物を恒暗に数日間または数週間維持して自由ランニング歩行活動リズムを安定化させる。動物に連続数日間（例えば、３〜２１日間）同一クロックタイム（例えば、ＣＴ１０またはＣＴ２４）にＮＰＹ５受容体アンタゴニストまたはビヒクルを投与する。この枠組みで、ホイールランニング活動の開始はＮＰＹ５受容体アンタゴニストを投与する時間に連結する。同調は歩行活動の開始が毎日注射時と一致したときとして定義される。

上記研究に関してホイールランニングリズムにおける相シフトを調べるために、アクトグラム（活動データのプロット）を試験し、薬物治療の前７〜１０日間回帰曲線を目で（または、ソフトウェアを用いて）歩行活動の開始に当てはめ、治療日に投影する。この方法は相シフトの程度（すなわち、ライン間の差）を外挿するために使用される。

Ｙ５アンタゴニストＬ１５２８０４の歩行リズムの相シフトに対する効果の測定
Ａ． Ｌ−１５２８０４の日周期リズムに対する効果
雄ゴールデンハムスターを個別に供給業者から到着してから２週間１４：１０の明暗（ＬＤ）周期の下に収容する。全ての動物のハウスには活動を測定するためにランニングホイールが入れてある。次いで、動物を恒暗（ＤＤ）周期に２週間移し、ランニングホイールからの活動の記録を用いて日周期時間（ＣＴ）１４を調べる。

２群のハムスターに５０ｍｇ／ｋｇの量のビヒクル（０．５％ メトセル）またはＬ−１５２８０４を経口投与した後、動物をそのホームゲージに戻し、動物がランニングホイール上で過ごした時間をモニターすることにより活動を１０日間記録する。活動のピーク時間がシフトしたことから、Ｙ５アンタゴニストが日周期リズムをシフトさせ得ることが分かる。

Ｂ． Ｌ−１５２８０４の日周期リズムの光線誘導相シフトに対する効果
雄ゴールデンハムスターを個別に供給業者から到着してから２週間１４：１０の明暗（ＬＤ）周期の下に収容する。全ての動物のハウスには活動を測定するためにランニングホイールが入れてある。次いで、動物を恒暗（ＤＤ）周期に２週間移し、ランニングホイールからの活動の記録を用いて日周期時間（ＣＴ）１４を調べる。

２群のハムスターに５０ｍｇ／ｋｇの量のビヒクル（０．５％ メトーセル）またはＬ−１５２８０４を経口投与した後、２つの異なる行動関連時間ＣＴ１４及びＣＴ２０に光パルスを加える。ハムスターの活動レベルを最大シフトの約１／３に相シフトさせることが公知の光パルス（５０３ｎｍ，８．６×１０^１２光子／ｃｍ^２／秒，５分）を両群に与える。動物をそのホームケージに戻し、活動を１０日間記録する。Ｙ５アンタゴニスト処置は、相シフトがビヒクル処置の効果に比して大きいならば光パルスの効果を高める。或いは、相シフトがビヒクル処置動物で見られるよりも小さいならば、Ｙ５アンタゴニストは光誘導相シフトを抑制する。

Ｃ． 日周期リズムにおけるＬ−１５２８０４活動誘導相シフトの影響
雄ゴールデンハムスターを個別に供給業者から到着してから２週間１４：１０の明暗（ＬＤ）周期の下に収容する。全ての動物のハウスには活動を測定するためにランニングホイールが入れてある。次いで、動物を恒暗（ＤＤ）周期に２週間移し、ランニングホイールからの活動の記録を用いて日周期時間（ＣＴ）８を調べる。

２群のハムスターに５０ｍｇ／ｋｇの量のビヒクル（０．５％ メトセル）またはＬ−１５２８０４を経口投与した後、ＣＴ８でベンゾジアゼペンアゴニストトリアゾラム（３ｍｇ／ｋｇ）を１回注射する。動物をそのホームケージに戻し、Ｌ−１５２８０４が活動刺激剤のトリアゾラムにより誘導される日周期シフトを抑制するかを調べるために活動を１０日間記録する。

健康な青年男子における光誘導メラトニン抑制に対する神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストの効果を調べるためのプラセボをコントロールする二重盲検試験
本発明の目的は、プラセボまたは神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストで処置した被験者における光誘導メラトニン抑制の量を調べることによりヒトにおける日周期リズムに対する神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストの効果を評価することである。神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストが光誘導メラトニン抑制の量を変化させ、よって日周期リズムに影響を与えることができるならば、前記アンタゴニストは例えば時差ぼけ、交代勤務、季節性感情障害及び高齢者の睡眠障害を治療するための有用な薬物であり得る。

本研究は、１機関で健康な青年男子を対象とし、プラセボをコントロールとした二重盲検無作為交差試験である。スクリーニング訪問が完了した後、被験者はコンプライアンスを確認するためにアクチグラフィーモニターを着用しながら家で規則正しい睡眠／覚醒スケジュールを２週間こなす。２週間後、被験者は研究の第１回実験室内試験に参加し、その間被験者はベースライン日を実験室で夜の間眠る一定のルーチン（ＣＲ）条件で過ごし、その後別のＣＲ日／夜条件で過ごし、この間被験者は眠らずにメラトニン抑制試験を受け、その後回復日を設け、被験者は眠り、夜の前に自由とされる。２日目の典型的な就寝時間の２時間前に、被験者は神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストＬ−１５２８０４またはプラセボのいずれかを経口服用する。４時間後の典型的な就寝時から２時間後に、被験者に中程度の明るさの光（３００〜９００ルクス）を５時間浴びせる。光を暴露した後、被験者はＣＲ条件に更に５時間置き、睡眠をとり、その後実験室を離れる。メラトニンアッセイのためのサンプルを採取するために採血を実験室にいる間実施する。第２回試験のために戻る前に、被験者は家で３〜８週間のリフレッシュ期間を過ごす。被験者が実験室に戻る前の少なくとも２週間、被験者はコンプライアンスを確認するためにアクチグラフィーモニターを着用しながら家で規則正しい睡眠／覚醒スケジュールを２週間こなす。その後、被験者は実験室に戻って同一の３日プロトコルに従ったが、逆の薬物処置（すなわち、神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストまたはプラセボ）を受ける。メラトニンの抑制という一次応答を、５時間の光パルス間のメラトニン血漿のベースラインからの変化率（％）を計算することにより評価する。ベースライン値は２４時間前に起こった対応５時間のメラトニン血漿ＡＵＣとして定義される。

有効な神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストの投与により、自由ランニング日周期時計の相が変化し、哺乳動物の日周期時計に対する光の相シフト影響が阻止される。

本発明をその特定の実施態様を参照して説明してきたが、本発明の趣旨及び範囲を逸脱することなく手順及びプロトコルに対して各種の改変、変化、修飾、置換、欠失または付加を加えることができることは当業者に自明である。例えば、本明細書に上記した特定用量以外の有効量が記した本発明化合物を用いて適応症に対して治療される哺乳動物の応答の変化の結果として適用され得る。また、観察された特定の薬理学的応答は選択した特定の活性化合物または医薬用担体が存在するかどうかに従って、使用する処方物のタイプ及び投与モードに従って、或いはそれらに応じて変わり得、結果の違いまたは差は本発明の目的及び実施に従って解釈される。従って、本発明は上記請求の範囲に定義されており、この請求の範囲は合理的である程度に広く解釈されると意図される。

Claims (36)

1. 哺乳動物に対して有効量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む哺乳動物における日周期リズム相シフト効果の達成方法。
2. 哺乳動物に対して適量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む哺乳動物における体内日周期時計のリセット方法。
3. 哺乳動物に対して適量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む睡眠−覚醒周期をシフトした後の哺乳動物における日周期リズムの再同調時間の短縮方法。
4. 哺乳動物に対して有効量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む哺乳動物における日周期リズム障害の緩和方法。
5. 哺乳動物に対して有効量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む哺乳動物における時間帯変化（時差ぼけ）症候群、交代勤務睡眠障害、睡眠相後退症候群、睡眠相前進症候群及び非２４時間睡眠−覚醒障害からなる群から選択される日周期リズム障害の治療方法。
6. 哺乳動物に対して機敏性増加量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む哺乳動物における時差ぼけの影響の緩和方法。
7. 哺乳動物に対して有効量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む哺乳動物における睡眠の質の強化方法。
8. 哺乳動物がヒトである請求項１に記載の方法。
9. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストが経口的に活性な神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストである請求項１に記載の方法。
10. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストが非ペプチド神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストである請求項１に記載の方法。
11. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストがＣＮＳ透過性神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストである請求項１に記載の方法。
12. 哺乳動物がヒトである請求項５に記載の方法。
13. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストがＣＮＳ透過性神経ペプチドＹ Ｙ５受容体アンタゴニストである請求項１２に記載の方法。
14. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストをメラトニンまたはメラトニン生成を抑制または刺激する化合物と共に投与する請求項１に記載の方法。
15. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを睡眠の質を強化する化合物と共に投与する請求項１に記載の方法。
16. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを光線療法と共に投与する請求項１に記載の方法。
17. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストをメラトニンまたはメラトニン生成を抑制または刺激する化合物と共に投与する請求項５に記載の方法。
18. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを睡眠の質を強化する化合物と共に投与する請求項５に記載の方法。
19. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを光線療法と共に投与する請求項５に記載の方法。
20. 哺乳動物に対して有効量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む哺乳動物における時間帯変化（時差ぼけ）症候群、交代勤務睡眠障害、睡眠相後退症候群、睡眠相前進症候群及び非２４時間睡眠−覚醒障害からなる群から選択される日周期リズム障害の予防方法。
21. 治療を要するヒトに対して有効量のＣＮＳ透過性神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含むヒトにおける交代勤務睡眠障害の影響の緩和方法。
22. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストをメラトニンまたはメラトニン生成を抑制または刺激する化合物と共に投与する請求項２１に記載の方法。
23. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを光線療法と共に投与する請求項２１に記載の方法。
24. 治療を要するヒトに対して有効量のＣＮＳ透過性神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含むヒトにおける睡眠障害の治療方法。
25. 治療を要するヒトに対して有効量のＣＮＳ透過性神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含むヒトにおける睡眠障害の予防方法。
26. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストをメラトニンまたはメラトニン生成を抑制または刺激する化合物と共に投与する請求項２４に記載の方法。
27. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを光線療法と共に投与する請求項２４に記載の方法。
28. 治療を要する高齢者に対して有効量のＣＮＳ透過性神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む高齢者における睡眠障害の治療方法。
29. 治療を要する高齢者に対して有効量のＣＮＳ透過性神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを投与することを含む高齢者における睡眠障害の予防方法。
30. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストをメラトニンまたはメラトニン生成を抑制または刺激する化合物と共に投与する請求項２８に記載の方法。
31. 神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニストを光線療法と共に投与する請求項２８に記載の方法。
32. 哺乳動物において日周期リズム相シフト効果を達成するために使用される薬剤の製造における有効量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニスト、またはその医薬的に許容され得る塩またはエステルの使用。
33. 哺乳動物において日周期リズム障害を緩解させるために使用される薬剤の製造における有効量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニスト、またはその医薬的に許容され得る塩またはエステルの使用。
34. 哺乳動物において光線の相シフトの影響をブロックするために使用される薬剤の製造における有効量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニスト、またはその医薬的に許容され得る塩またはエステルの使用。
35. 哺乳動物において睡眠の質を強化乃至改善するために使用される薬剤の製造における有効量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニスト、またはその医薬的に許容され得る塩またはエステルの使用。
36. 哺乳動物において睡眠障害を治療するために使用される薬剤の製造における有効量の神経ペプチドＹ Ｙ５アンタゴニスト、またはその医薬的に許容され得る塩またはエステルの使用。