JP2005504784A - ＬＨ及びＦＳＨ合併アゴニスト作用を有するグリシン置換チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン - Google Patents

Abstract

本発明は、一般式Ｉ、（Ｉ）［式中、Ｘは、Ｏ又はＨ，Ｈであり、Ａは、Ｓ、ＮＨ、Ｎ（Ｒ^６）、Ｏ又は結合であり；Ｒ^１は、（１−４Ｃ）アルキル、（２−４Ｃ）アルケニル、フェニル又は（２−５Ｃ）ヘテロアリールであり、前記フェニル又はヘテロアリール環は、場合により置換基の群：ヒドロキシ、ハロゲン、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アミノ又は（１−４Ｃ）（ジ）アルキルアミノの１個又はそれ以上で置換されており；Ｒ^２は、Ｈ、（１−４Ｃ）アルキル、（１−４Ｃ）アルコキシ（２−４Ｃ）アルキル又はヒドロキシ（２−４Ｃ）アルキルであり；Ｒ^３及びＲ^４は、Ｈ、（１−４Ｃ）アルキル及びヒドロキシ（１−４Ｃ）アルキルから独立して選択することができ；Ｒ^５は、Ｈ又は（１−４Ｃ）アルキルである］で表わされる、グリシン置換チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン誘導体、又は医薬適合性のその塩を対象とする。前記式中、Ｒ^６は、Ｒ^１について述べたのと同じ群から選択することができる。本発明の化合物は、ＬＨならびにＦＳＨ受容体活性化作用を有し、受胎能調節療法において使用することができる。

Description

【技術分野】
【０００１】
本発明は、糖タンパク質ホルモンアゴニスト活性を有する化合物、特に黄体形成ホルモン（ＬＨ）と卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の両方のアゴニスト作用を有する化合物に関する。本発明はさらに、前記化合物を含む医薬組成物ならびに医学的治療、特に受胎能の調節として使用するための、これらの化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
性腺刺激ホルモンは、代謝、体温調節及び生殖過程を含む様々な身体機能において重要な役割を果たす。脳下垂体性腺ホルモンＦＳＨ及びＬＨは、例えば卵胞の発達と成熟の刺激において決定的に重要な役割を果たし、ＬＨは排卵過程の誘導に関与する（Ｓｈａｒｐ，Ｒ．Ｍ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ ３３：７８７−８０７；ＤｏｒｒｉｎｇｔｏｎとＡｒｍｓｔｒｏｎｇ，Ｒｅｃｅｎｔ Ｐｒｏｇ．Ｒｅｓ ３５：３０１−３４２、１９７９；Ｌｅｖｙら、Ｈｕｍａｎ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ １５：２２５８−２２６５、２０００）。
【０００３】
現在、ＬＨは、卵巣の刺激、すなわち体外受精（ＩＶＦ）のための卵巣の高度刺激及び不妊性無排卵女性における排卵の誘導のため（Ｉｎｓｌｅｒ，Ｖ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ ３３：８５−９７，１９８８；ＮａｖｏｔとＲｏｓｅｎｗａｋｓ，Ｊ．Ｖｉｔｒｏ Ｆｅｒｔ．Ｅｍｂｒｙｏ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ５：３−１３、１９８８）、ならびに男性性機能低下症及び男性不妊症のために、ＦＳＨと組み合わせて臨床的に適用されている。
【０００４】
性腺刺激ホルモンは、特定性腺細胞型に作用して、卵巣及び精巣の分化とステロイド生成を開始させる。これらの脳下垂体及び胎盤ホルモンの作用は、Ｇタンパク質共役受容体の大きなファミリーの成員である特異的細胞膜受容体によって仲介される。それらは、７つの膜貫通ドメインを有する１個のポリペプチドから成り、Ｇタンパク質と相互作用してアデニルシクラーゼの活性化を導くことができる。
【０００５】
治療目的のための性腺刺激ホルモンはヒト尿ソースから単離することができ、純度が低い（Ｍｏｒｓｅら、Ａｍｅｒ．Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．ａｎｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ １７：１４３，１９８８）。あるいは、それらは組換え性腺刺激ホルモンとして製造することができる。これらのタンパク質に加えて、性腺刺激ホルモン受容体は、合成低分子量化合物によって活性化又は不活性化することができる。ニ環式ヘテロ芳香族化合物がＷＯ００／６１５８６号に記述されている。インビトロ及びインビボ実験により、それらはＬＨアゴニストとして有用であることが示されている。
【０００６】
健常女性においては、脳下垂体ＬＨ及びＦＳＨの放出は、排卵に先立つ周期中頃の急増を特徴とする。排卵は、３つの異なる生理現象、すなわち卵母細胞の成熟、卵胞の破裂及び黄体形成によって特徴付けられる。これらの現象のインビボ誘導におけるＬＨ急増の役割については疑いの余地がないが、ＦＳＨ急増の役割はそれほど明らかではない。しかし、最近になって、ＦＳＨが、卵丘細胞を誘導してヒポキサンチン誘導の減数分裂停止を積極的に乗り越える因子を産生させることにより、インビトロでの卵母細胞成熟を誘導することが示された（Ｌｕら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１６４：１９１−１９６，２０００）。この因子は減数分裂活性化ステロール（ＭＡＳ）であると思われる。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、ＬＨ活性を示す低分子量化合物を提供する。ＬＨ活性に加えて、意外にもそれらは合わせてＦＳＨ活性も有する。全般にこれらの化合物は、ピリミジン環の４位でフェニル基によって置換されており、そのフェニル基がメタ位置で置換されている、チエノ［２，３−ｄ］ピリミジンである。この置換基は３原子スペーサー（ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_２）を含み、このスペーサーはさらに置換アミノ基で官能基化されている。全般にこれらの化合物は、様々な度合の、しかし典型的にはＬＨアゴニスト活性よりも低い、ＦＳＨアゴニスト活性を有する。
【０００８】
本発明は、一般式Ｉ：
【０００９】
【化１】

［式中、
Ｘは、Ｏ又はＨ，Ｈであり、
Ａは、Ｓ、ＮＨ、Ｎ（Ｒ^６）、Ｏ又は結合であり；
Ｒ^１は、（１−４Ｃ）アルキル、（２−４Ｃ）アルケニル、フェニル又は（２−５Ｃ）ヘテロアリールであり、前記フェニル又はヘテロアリール環は、場合により置換基の群：ヒドロキシ、ハロゲン、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アミノ又は（１−４Ｃ）（ジ）アルキルアミノの１個又はそれ以上で置換されており；
Ｒ^２は、Ｈ、（１−４Ｃ）アルキル、（１−４Ｃ）アルコキシ（２−４Ｃ）アルキル又はヒドロキシ（２−４Ｃ）アルキルであり；
Ｒ^３及びＲ^４は、Ｈ、（１−４Ｃ）アルキル及びヒドロキシ（１−４Ｃ）アルキルから独立して選択することができ；
Ｒ^５は、Ｈ又は（１−４Ｃ）アルキルである］
で表わされる、グリシン置換チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン誘導体、又は医薬適合性のその塩を対象とする。
【００１０】
前記式中、Ｒ^６は、Ｒ^１について述べたのと同じ群から選択することができる。
【００１１】
式Ｉの定義において使用される（１−４Ｃ）アルキルの語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル又はｔｅｒｔ−ブチルである、１個から４個の炭素原子を有する分枝又は非分枝アルキル基を意味する。
【００１２】
式Ｉの定義において使用される（２−４Ｃ）アルケニルの語は、ビニル、１−プロペニル、２−プロペニル、１−メチル−ビニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、２−メチル−１−プロペニル、２−メチル−２−プロペニル、１−メチル−１−プロペニル、１−エチル−ビニルである、２個から４個の炭素原子を有する分枝又は非分枝アルケニル基を意味する。
【００１３】
（１−４Ｃ）アルコキシ（１−４Ｃ）アルキルの語は、酸素原子によって１個から４個の炭素原子を有するもう１つ別のアルキル基に連結されている、１個から４個の炭素原子を有するアルキル基を意味し、そのアルキル部分は先に定義したのと同じ意味を持つ。
【００１４】
（１−４Ｃ）アルコキシ（２−４Ｃ）アルキルの語は、酸素原子によって２個から４個の炭素原子を有するもう１つ別のアルキル基に連結されている、１個から４個の炭素原子を有するアルキル基を意味し、そのアルキル部分は先に定義したのと同じ意味を持つ。
【００１５】
ヒドロキシ（１−４Ｃ）アルキルの語は、１個から４個の炭素原子を有するアルキル基に連結されたヒドロキシル基を意味し、そのアルキル部分は先に定義したのと同じ意味を持つ。
【００１６】
ヒドロキシ（２−４Ｃ）アルキルの語は、２個から４個の炭素原子を有するアルキル基に連結されたヒドロキシル基を意味し、そのアルキル部分は先に定義したのと同じ意味を持つ。
【００１７】
（１−４Ｃ）（ジ）アルキルアミノの語は、窒素原子に連結されている、先に定義した１個から４個の炭素原子を有する１又は２個のアルキル基を意味する。
【００１８】
（２−５Ｃ）ヘテロアリールの語は、イミダゾリル、チエニル、フリル又はピリジルのような、少なくともＮ、Ｏ及び／又はＳから選択される１個のヘテロ原子を含む、場合により置換された、２個から５個の炭素原子を有する芳香族基を意味する。
【００１９】
上記の式Ｉの化合物は、ＬＨ及びＦＳＨアゴニスト活性を示すことが明らかにされた。ヒトＬＨ又はＦＳＨ受容体でそれぞれ安定にトランスフェクトされたＣＨＯ細胞を使用したインビトロバイオアッセイにおいて、ＬＨ受容体に関するＥＣ_５０は５．１０^−８Ｍ未満であることが認められ、ＦＳＨ受容体に関しては、ＥＣ_５０は１０^−５Ｍ未満であった。典型的にはＦＳＨ活性は、ＬＨアゴニスト刺激の約１％の活性から、ＬＨアゴニスト刺激の約１０％までの範囲である。
【００２０】
本発明はさらに、一般式Ｉを有するチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン誘導体化合物又はその塩を含む医薬組成物を対象とする。
【００２１】
そこで、本発明に従った化合物は治療において使用することができる。本発明のさらなる局面は、受胎能の調節、より好ましくは排卵の誘発のための薬剤を製造するための、一般式Ｉを有するチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン化合物の使用を対象とする。本発明の化合物は、ＬＨ及びＦＳＨ受容体の両方を活性化するために使用される。本発明の化合物は、それ故、受胎能の問題を有する女性を治療するための方法において使用できる。
【００２２】
本発明のチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン化合物は、１個又はそれ以上のキラル炭素原子を有しうる。本発明の化合物は、それ故、キラリティーに関して純粋な化合物又はジアステレオマー及び／又は鏡像異性体の混合物として入手しうる。キラリティーに関して純粋な化合物を得るための方法は当技術分野において周知であり、例えば結晶化又はクロマトグラフィーが挙げられる。
【００２３】
治療用途のためには、式Ｉの化合物の塩は、その対イオンが医薬適合性のものである。しかし、式Ｉに従った塩基の酸付加塩も、例えば医薬適合性の化合物の製造又は生成において使用しうる。医薬適合性か否かに関わらず、すべての塩は本発明の範囲内に包含される。
【００２４】
酸付加塩の例は、塩酸、リン酸、硫酸などの鉱酸、好ましくは塩酸、及びクエン酸、酒石酸、酢酸、乳酸、マレイン酸、マロン酸、フマル酸、グリコール酸、コハク酸等のような有機酸から誘導されるものを含む。
【００２５】
ここでは有効成分とも称される、式Ｉの化合物又は医薬適合性のその塩についての適切な投与経路は、筋肉内注射、皮下注射、静脈内注射又は腹腔内注入、経口及び鼻内投与である。好ましくは、前記化合物は経口的に投与しうる。有効成分又はその医薬組成物の投与の正確な用量及びプログラムは、達成すべき治療効果（不妊症の治療；避妊）に必然的に依存し、個々の化合物、投与経路、及びその薬剤を投与する個々の被験者の年齢と状態によって変化しうる。
【００２６】
一般に、非経口投与は、吸着への依存性が高い他の投与方法よりも低い用量しか必要としない。しかし、ヒトに関しての投与量は、好ましくは０．０００１ｍｇ／ｋｇから２５ｍｇ／ｋｇ体重を含む。所望用量は、１回用量若しくは１日の間に適切な間隔で投与される多回分割用量として提供されうる。女性受容者の場合、用量は、卵胞の維持のために月経周期を通じて適切な日数間隔をおいて若しくは排卵誘発のために１回用量として、投与しうる。投与の用量ならびにプログラムは女性受容者と男性受容者の間で異なりうる。
【００２７】
ＩＶＦ適用のような、インビトロ又は半ビボ適用の場合は、本発明の化合物をインキュベーション培地中約０．０１μｇ／ｍｌから５μｇ／ｍｌの濃度で使用すべきである。
【００２８】
そこで本発明はまた、医薬適合性の補助剤及び任意に他の治療薬と混合して、一般式Ｉに従ったチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン化合物を含む医薬組成物に関する。前記補助剤は、前記組成物の他の成分と適合性であり、その受容者にとって有害ではないという意味で「許容され」なければならない。
【００２９】
医薬組成物は、経口、直腸、鼻、局所（経皮、口腔粘膜及び舌下を含む）、膣又は非経口（皮下、筋肉内、静脈内及び皮内を含む）投与に適するものを含む。前記組成物は、薬学技術分野において周知の何らかの方法によって、例えばＧｅｎｎａｒｏら、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（第１８版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０、特に第８部：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅ参照）に述べられているような方法を用いて製造しうる。
【００３０】
そのような方法は、有効成分と何らかの補助剤を組み合わせる段階を含む。副成分とも呼ばれる補助剤は、充填剤、結合剤、希釈剤、崩壊剤、潤滑剤、着色料、着香剤及び湿潤剤などの、当技術分野において慣例的なもの（Ｇｅｎｎａｒｏ、前出）を含む。
【００３１】
経口投与に適する医薬組成物は、丸剤、錠剤又はカプセルなどの別々の分離した投与単位として、若しくは粉末又は顆粒として、若しくは溶液又は懸濁液として提供されうる。有効成分はまた、ボーラス又はペーストとしても提供されうる。前記組成物はさらに、直腸投与用の坐薬又は浣腸に加工することができる。
【００３２】
非経口投与については、適切な組成物は、水性及び非水性無菌注射剤を含む。組成物は、単位投与又は多回投与容器、例えば密封バイアル及びアンプルに入れて提供することができ、使用前に無菌液状担体、例えば水を加えるだけでよいフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存しうる。
【００３３】
鼻吸入による投与に適する組成物又は製剤は、定量加圧エーロゾル、ネブライザ又は注入器によって生成されうる微細粉末又はミストを含む。
【００３４】
本発明のチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン化合物はまた、放出速度調節膜に包まれた有効成分のコアから成る、移植可能医薬装置の形態でも投与することができる。そのような移植片は皮下的又は局所的に適用されるべきであり、比較的長い期間にわたって、例えば数週間から数年間にわたってほぼ一定速度で有効成分を放出する。移植可能医薬装置自体の製造のための方法は、例えば欧州特許第０，３０３，３０６号（ＡＫＺＯ Ｎ．Ｖ．）に述べられているように、当技術分野において既知である。
【００３５】
そこで、本発明に従った化合物は天然ＬＨと同じ臨床目的のために使用することができ、さらにそれらは、ＦＳＨ活性を有し、変化した安定特性を示し、且つ異なる方法で投与できるという利点を備える。
【００３６】
式（Ｉ）によって表わされる本発明の化合物は、一般に、Ｑ＝Ｃｌ又はＢｒである一般式（ＩＩ）の化合物を、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンなどの第三級塩基の存在下に室温で、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド又はＴＨＦなどの適切な溶媒中、一般式（ＩＩＩ）のアミンで求核置換することによって製造できる。一般式（ＩＩＩ）の多くのアミンが市販されている。
【００３７】
【化２】

Ｑ＝Ｃｌ又はＢｒである式（ＩＩ）の誘導体は、式（Ｖ−ａ）のメタアニリン誘導体を、ジクロロメタン又はＴＨＦなどの適切な溶媒中、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンなどの第三級塩基の存在下に、Ｑ＝Ｃｌ又はＢｒである（ＩＶ）型塩化アシルで位置選択的にアシル化することによって製造できる。
【００３８】
【化３】

式（Ｖ）の化合物は、金属（Ｐｄ／Ｐｔ）触媒の存在下に水素などの適切な還元剤を使用して、式（ＶＩ）の誘導体中のニトロ官能基の当技術分野で既知の還元によって入手しうる。関連する還元は、Ｐ．Ｍ．Ｃａｒａｂａｔｅａｓ，Ｐ．Ｒ．Ｂｒｕｎｄａｇｅ，Ｋ．Ｏ．Ｇｅｌｏｔｔｅ，Ｍ．Ｄ．Ｇｒｕｅｔｔ，Ｒ．Ｒ．Ｌｏｒｅｎｚ，Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．２１，１８４９（１９８４）に述べられている。あるいは、前記の還元は、高温の塩酸の存在下に、エタノールなどのプロトン性溶媒中の塩化スズ（ＩＩ）によっても実施できる（Ｊ．Ｈｅｉｌｂｒｏｎ，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ，１２７９（１９４０））。
【００３９】
【化４】

一般式（ＶＩ）のチエノピリミジンは、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）又はブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢｒＯＰ）などのカップリング剤及び第三級塩基、例えばＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの影響下で、カルボン酸（ＶＩＩ）とｔｅｒｔ−ブチルアミンの縮合によって入手しうる。
【００４０】
【化５】

対応するエチルエステル（ＶＩＩＩ）からカルボン酸（ＶＩＩ）へのけん化は、高温（８０℃から還流まで）の水性ジオキサン中、水酸化リチウム、水酸化カリウム又は水酸化ナトリウムなどの塩基の存在下で起こる。
【００４１】
【化６】

一般式（ＶＩＩＩ）のニ環式系は、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの作用下に式（Ｘ）の塩化物をエチルメルカプトアセテートで置換し、次いでこの中間体チオエーテル（ＩＸ）を塩基触媒閉環することによって形成される。この種のチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン環の形成は、Ｓ．Ａ．Ａｂｄｅｌ−Ｈａｄｙ，Ｍ．Ａ．Ｂａｄａｗｙ，Ｙ．Ａ．Ｉｂｒａｈｉｍ，Ｓｕｌｆｕｒ Ｌｅｔｔ．９，１０１（１９８９）及びＳ．Ｔｕｍｋｅｖｉｃｉｕｓ，Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ．，１７０３（１９９５）に述べられている。
【００４２】
【化７】

環化反応のための適切な条件は、還流温度の、エタノール中のナトリウムエトキシド又はトルエン／エタノール（１／１、ｖ／ｖ）中のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンである。
【００４３】
【化８】

式（Ｘ）の化合物は、例えばＡ．Ａ．Ｓａｎｔｉｌｌｉ，Ｄ．Ｈ．Ｋｉｍ及びＳ．Ｖ．Ｗａｎｓｅｒ，Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．８、４４５、１９７１によって述べられているような文献の手順に従って合成できる。典型的な実験では、一般構造（ＸＩ）のアミドを高温（８０℃から還流まで）のＰＯＣｌ_３で処理する。この反応混合物への適切な溶媒、例えばジオキサンの添加、及び／又はＰＣｌ_５又はＮ，Ｎ−ジメチルアニリンのいずれかの添加は、反応時間の短縮と塩化物（Ｘ）のより高い収量をもたらしうる。
【００４４】
【化９】

式（ＸＩ）のラクタムへの一般的な経路は、３−ニトロ−ベンズアルデヒド及びイソチオ尿素（ＸＩＩ−ａ）、イソ尿素（ＸＩＩ−ｂ）、一置換グアニジン（ＸＩＩ−ｃ）、ニ置換グアニジン（ＸＩＩ−ｄ）又はアミジン（ＸＩＩ−ｅ）でありうる化合物（ＸＩＩ）と、エチルシアノアセテートの縮合を含む。
【００４５】
【化１０】

典型的な実験では、エチルシアノアセテート、３−ニトロベンズアルデヒド及び誘導体（ＸＩＩ）を適切な溶媒、例えばエタノール、メタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリジノン、テトラヒドロフラン又はピリジンに懸濁し、炭酸カリウム、酢酸ナトリウム、ナトリウムメトキシド又はナトリウムエトキシドなどの塩基を加える。高温（７０℃から還流まで）で反応が起こる。濾過後、残留物を水に取り、酸性化（ｐＨ２）した後、生成物（ＸＩ）が沈殿する（Ｓ．Ｋａｍｂｅ，Ｋ．Ｓａｉｔｏ及びＨ．Ｋｉｓｈｉ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，２８７（１９７９）；Ａ．Ｍ．Ａｂｄ−Ｅｌｆａｔｔａｈ，Ｓ．Ｍ．Ｈｕｓｓａｉｎ及びＡ．Ｍ．Ｅｌ−Ｒｅｅｄｙ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ３９，３１９７（１９８３）；Ｓ．Ｍ．Ｈｕｓｓａｉｎ，Ａ．Ａ．Ｅｌ−Ｂａｒｂａｒｙ及びＳ．Ａ．Ｍａｎｓｏｕｒ，Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．２２，１６９（１９８５））。
【００４６】
【化１１】

あるいは、式（Ｉ−ａ）によって表わされる、Ａ＝Ｎである本発明の化合物は、一般式（ＸＩＩＩ）のスルホキシド誘導体から、一般構造（ＸＩＶ）のアミン求核試薬による求核置換によって製造することができる。その反応は、典型的には１，４−ジオキサンなどの適切な溶媒中、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンなどの第三級塩基の存在下に高温で実施される。
【００４７】
【化１２】

同様に、式（Ｉ−ｂ）によって表わされる、Ａ＝Ｏである本発明の化合物は、一般式（ＸＩＩＩ）のスルホキシド誘導体から、一般構造（ＸＶ）のアルコキシド求核試薬による求核置換によって製造することができる。その反応は、過剰のアルコールＲ^１−ＯＨと共にカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドの存在下で実施される。
【００４８】
【化１３】

一般式（ＸＩＩＩ）のスルホキシド誘導体は、式（Ｉ−ｃ）によって表わされる、Ｒ^１＝Ｍｅ及びＡ＝Ｓである一般式（Ｉ）の化合物の酸化によって入手しうる。その酸化は、トリフルオロ酢酸中の３−クロロ過安息香酸によって実施される。この溶媒が酸性であることは、５−アミノ基が対応する５−ニトロソ誘導体へと酸化するのを防ぐ。
【００４９】
【化１４】

受容体結合を測定する方法ならびに性腺刺激ホルモンの生物活性を測定するためのインビトロ及びインビボアッセイは周知である。一般には、発現された受容体を被験化合物と接触させ、結合若しくは機能的応答の刺激又は阻害を測定する。
【００５０】
機能的応答を測定するには、ＬＨ又はＦＳＨ受容体遺伝子、好ましくはヒト受容体をコードする単離ＤＮＡを適切な宿主細胞において発現させる。そのような細胞はチャイニーズハムスター卵巣細胞でありうるが、他の細胞も適する。好ましくは、前記細胞は哺乳類由来である（Ｊｉａら、Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．５：７５９−７７６，１９９１）。
【００５１】
組換えＬＨ又はＦＳＨ発現細胞系統を構築する方法は当技術分野において周知である（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，最新版）。受容体の発現は、所望タンパク質をコードするＤＮＡの発現によって達成される。位置指定突然変異誘発、付加配列の連結、ＰＣＲ、及び適切な発現系の構築のための手法は、現在では、すべて当技術分野において周知である。好ましくは連結を容易にするための制限部位を含む、所望タンパク質をコードするＤＮＡの一部又は全部は、標準固相手法を用いて合成的構築することができる。含まれるコード配列の転写と翻訳についての適切な制御エレメントをＤＮＡコード配列に与えることができる。周知のように、細菌などの原核生物宿主及び酵母、植物細胞、昆虫細胞、哺乳類細胞、鳥類細胞等のような真核生物宿主を含む様々な宿主と適合性である発現系が現在入手可能である。
【００５２】
次に、受容体を発現する細胞を被験化合物に接触させて、結合、若しくは機能的応答の刺激又は阻害を観察する。
【００５３】
あるいは、化合物の結合を測定するために、発現された受容体を含む単離細胞膜が使用できる。
【００５４】
結合の測定には、放射能標識又は蛍光標識化合物が使用しうる。標準化合物として、ヒト組換えＬＨ又はＦＳＨが使用できる。あるいは、競合結合アッセイも実施できる。
【００５５】
もう１つのアッセイは、受容体が仲介するｃＡＭＰ蓄積の刺激を測定することによってＬＨ又はＦＳＨ受容体アゴニスト化合物をスクリーニングすることを含む。すなわち、そのような方法は、宿主細胞の細胞表面上に受容体を発現すること及びその細胞を被験細胞に接触させることを含む。その後、ｃＡＭＰの量を測定する。受容体に結合したときの被験化合物の阻害又は刺激作用に依存して、ｃＡＭＰのレベルは低下又は上昇する。
【００５６】
例えば接触した細胞におけるｃＡＭＰレベルの直接測定のほかに、ＤＮＡをコードする受容体によるトランスフェクションに加えて、その発現がｃＡＭＰのレベルに応答するレポーター遺伝子をコードする第二ＤＮＡでトランスフェクトされた細胞を使用することができる。そのようなレポーター遺伝子は、ｃＡＭＰ誘導性であるか又は新規ｃＡＭＰ応答性エレメントに接続されるように構築しうる。一般に、レポーター遺伝子の発現はｃＡＭＰのレベルを変化させるように反応する何らかの応答性エレメントによって制御されうる。適切なレポーター遺伝子は、例えばＬａｃＺ、アルカリホスファターゼ、ホタルルシフェラーゼ及びグリーン蛍光タンパク質である。そのようなトランス活性化アッセイの原理は当技術分野において周知であり、例えばＳｔｒａｔｏｗａ，Ｃｈ，Ｈｉｍｍｌｅｒ，ＡとＣｚｅｒｎｉｌｏｆｓｋｙ，Ａ．Ｐ．（１９９５）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６：５７４に述べられている。
【００５７】
ＬＨ又はＦＳＨ受容体に対して活性な化合物を選択するには、ＬＨ又はＦＳＨを標準物質として使用したとき、１０^−５Ｍでの試験が最大活性の２０％以上の活性を生じなければならない。もう１つの判定基準はＥＣ_５０値であり、＜１０^−５Ｍ、好ましくは＜１０^−７Ｍでなければならない。
【００５８】
当業者は、望ましいＥＣ_５０値は試験する化合物に依存することを認識するであろう。例えば、１０^−５Ｍ以下のＥＣ_５０値を有する化合物は、一般に薬剤選択の候補物質とみなされる。好ましくはこの値は１０^−７Ｍ以下である。しかし、より高いＥＣ_５０を有するが、特定受容体に選択的である化合物はよりよい候補物質でありうる。
【００５９】
ＬＨ受容体アゴニスト化合物のスクリーニングはまた、マウスライディッヒ細胞バイオアッセイを使用することによって実施できる（Ｖａｎ Ｄａｍｍｅ，Ｍ．，Ｒｏｂｅｒｓｅｎ，Ｄ．及びＤｉｃｚｆａｌｕｓｙ，Ｅ．（１９７４）．Ａｃｔａ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．７７：６５５−６７１ Ｍａｎｎａｅｒｔｓ，Ｂ．，Ｋｌｏｏｓｔｅｒｂｏｅｒ，Ｈ．及びＳｃｈｕｕｒｓ，Ａ．（１９８７）。Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ｒ．Ｒｏｌｌａｎｄら編集、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ Ｂ．Ｖ．，４９−５８）。このアッセイでは、雄性マウスから単離したライディッヒ細胞において、ＬＨ受容体を介したテストステロン産生の刺激を測定することができる。
【００６０】
化合物のＦＳＨアゴニスト活性はまた、Ｎａｙｕｄｕ，Ｐ．とＯｓｂｏｒｎ，Ｓ．（１９９２、Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ ９５：３４９−３６２）に従って培養マウス卵胞を用いた半ビボモデルにおいても測定できる。そこで、マウス卵巣の卵胞を単離し、ＦＳＨアゴニスト化合物の存在下で培養して、卵胞の成長を誘導する。培地中の卵胞径とエストラジオールの測定が卵胞の成長を示す。
【００６１】
化合物のＬＨインビボ活性を測定するために、未熟マウスにおける排卵誘発を検討することができる。このアッセイでは、未熟雌性マウスを尿ＦＳＨでプライミングし、約４８時間後にＬＨアゴニスト化合物で処置する。ＬＨアゴニスト処置後に動物を死亡させ、卵管内の卵の数を顕微鏡で評価する。
【００６２】
化合物のＦＳＨインビボ活性を測定するために、未熟雌性ラットを０、８、２４及び３２時間眼にＦＳＨアゴニスト化合物で処置して、卵胞の成長を誘発する。実験開始から５２時間後に、動物にｈＣＧを注入して排卵を誘発する。動物を実験開始から７２時間後に死亡させ、卵管内の卵の数を顕微鏡で評価する。さらに、卵巣の重量を測定する。
【００６３】
本発明の化合物は、現在ＬＨ又はｈＣＧが使用されているプログラムにおいて臨床的に適用することができる。これらは、男性又は女性の低ゴナドトロピン性性機能低下症を有する被験者におけるＬＨ補充療法、排卵を誘発するための周期中間投与（排卵誘発（ＯＩ）又は高度刺激調節（ＣＯＨ）又は黄体の刺激）を含む。
【００６４】
下記の実施例は本発明についての例示であり、いかなる意味においても本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。
【実施例１】
【００６５】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
（ａ）５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−メチルチオ−６−ヒドロキシ−ピリミジン
無水ＥｔＯＨ（１５００ｍｌ）中のＳ−メチルイソチオ尿素硫酸塩（６９．０ｇ）、３−ニトロベンズアルデヒド（７５．０ｇ）、エチルシアノアセテート（５６．０ｍｌ）及び炭酸カリウム（７２．５ｇ）の混合物を６０℃で１６時間攪拌した。この反応混合物を氷浴中で０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、無水ＥｔＯＨで洗って、熱水（１００℃）に溶解した。この溶液を室温に冷却し、２Ｎ ＨＣｌでｐＨ２に酸性化し、氷浴中で０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、氷水で洗った。沈殿物中の残留水を１，４−ジオキサンとの同時蒸発によって除去した。
収量：５４．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝２８９．０。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．３、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９／１（ｖ／ｖ）。
【００６６】
（ｂ）６−クロロ−５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−メチルチオ−ピリミジン
ＰＯＣｌ_３（１００ｍｌ）を、無水１，４−ジオキサン（３００ｍｌ）中の５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−メチルチオ−６−ヒドロキシ−ピリミジン（実施例１（ａ）、２５．０ｇ）の攪拌溶液に加えた。９０℃で３時間後、この混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。その残留物を１，４−ジオキサン（１００ｍｌ）に溶解し、生じた溶液を０℃に冷却した。氷水を慎重に加えた。生じた沈殿物をろ取し、水で洗った。沈殿物中の残留水を１，４−ジオキサンとの同時蒸発によって除去した。
収量：２６．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３０７．０。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．５、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００６７】
（ｃ）エチル５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−メチルチオ−６−（エトキシカルボニルメチルチオ）−ピリミジン
ＤＩＰＥＡ（１５．７ｍｌ）を、ＥｔＯＨ（２５０ｍｌ）とＤＣＭ（２５０ｍｌ）の混合物中のエチル２−メルカプトアセテート（９．３ｍｌ）及び６−クロロ−５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−メチルチオ−ピリミジン（実施例１（ｂ）、２６．０ｇ）の攪拌溶液に加えた。室温で１時間後、０．１Ｎ ＨＣｌ水溶液（５００ｍｌ）を前記混合物に加え、次にそれをＤＣＭ（３×５００ｍｌ）で抽出して、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。
収量：２８．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３９１．４。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．５、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００６８】
（ｄ）エチル５−アミノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート
トルエン（１５０ｍｌ）とＥｔＯＨ（１５０ｍｌ）の混合物中のエチル５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−メチルチオ−６−（エトキシカルボニルメチルチオ）−ピリミジン（実施例１（ｃ）、２８．０ｇ）及びＤＩＰＥＡ（３０ｍｌ）の混合物を還流温度（１００℃）で１６時間攪拌した。次にこの混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。残留ＤＩＰＥＡをトルエンとの同時蒸発によって除去した。
収量：２８．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３９１．４。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．６、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００６９】
（ｅ）エチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート
ＥｔＯＨ（４００ｍｌ）を、１，４−ジオキサン（４００ｍｌ）中のエチル５−アミノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（実施例１（ｄ）、２８．０ｇ）、濃塩酸水溶液（１５ｍｌ）及び塩化スズ（ＩＩ）（４１．０ｇ）の混合物に加えた。この混合物を９０℃で１６時間攪拌した。次にその混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。その残留物をＥｔＯＡｃ（１０００ｍｌ）に懸濁した。４Ｎ ＮａＯＨ水溶液を加えて、１０〜１１のｐＨを得た。この混合物を強く攪拌し、有機層を分離して、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。
収量：２１．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３６１．０。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．６、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００７０】
（ｆ）５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
水酸化カリウム（３２．４ｇ）を、１，４−ジオキサン（３００ｍｌ）と水（１００ｍｌ）の混合物中のエチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（実施例１（ｅ）、２１．０ｇ）の溶液に加えた。９０℃で１６時間後、この混合物を１０℃に冷却し、強く攪拌しながら２Ｎクエン酸水溶液（３００ｍｌ）を加えた。生じた沈殿物をろ取し、水（１８０ｍｌ）で洗って、真空中で乾燥した。
収量：１４．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３３３．０。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．５、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９／１（ｖ／ｖ）。
【００７１】
（ｇ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＴＢＴＵ（１６．１ｇ）を、ＤＣＭ／ＤＭＦ（１／１、ｖ／ｖ、２５０ｍｌ）中の５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（実施例１（ｆ）、１４．０ｇ）、ＤＩＰＥＡ（１７．４ｍｌ）及びｔｅｒｔ−ブチルアミン（７．３ｇ）の溶液に加えた。室温で３時間後、この混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３（３×１００ｍｌ）水溶液、０．１Ｎ ＨＣｌ水溶液（１００ｍｌ）及び水（１００ｍｌ）で洗った。その有機層を減圧下で濃縮した。粗生成物を、温かい無水ＥｔＯＨ（３００ｍｌ）からの結晶化によって精製した。
収量：１０．５ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３８８．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝３０．７２分、Ｌｕｎａ Ｃ−１８（２）、５μｍ、２５０×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液の水／ＡＣＮ／ＭｅＯＨ＝９０／９．５／０．５から０／９５／０、実施時間＝５０分間。
【００７２】
（ｈ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
塩化ブロモアセチル（６１５ｍｇ）を、無水ＤＣＭ（２０ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−アミノフェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１（ｇ）、１．０８ｇ）及びＤＩＰＥＡ（２．４３ｍｌ）の溶液に加えた。室温で３時間後、この混合物をＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）を溶離液として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製した。
収量：９１０ｍｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５１０．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．３、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００７３】
（ｉ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
Ｎ−メチル−２−アミノ−エタノール（２５０ｍｇ）を、ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１（ｈ）、２５０ｍｇ）の溶液に加えた。室温で１６時間後、この混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：１１２ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５０３．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１１．４５分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例２】
【００７４】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（（Ｎ−（１−ヒドロキシ−２−メチル−プロプ−２−イル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
２−アミノ−２−メチル−プロパノール（２５０ｍｇ）を、ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１（ｈ）、２５０ｍｇ）の溶液に加えた。室温で１６時間後、この混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：６７ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５１７．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１２．６７分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例３】
【００７５】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
塩酸グリシンメチルエステル（２００ｍｇ）を、ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１（ｈ）、２５０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２０ｍｌ）の溶液に加えた。室温で１６時間後、この混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：１３３ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５１７．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１１．８７分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例４】
【００７６】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
Ｎ−（２−メトキシエチル）−エチルアミン（２６６ｍｇ）を、ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１（ｈ）、２００ｍｇ）の溶液に加えた。室温で１６時間後、この混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：８４ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５３１．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１２．６２分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例５】
【００７７】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（（Ｎ−（Ｒ−１−メトキシカルボニル−２−メチル−プロプ−１−イル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
塩酸Ｄ−バリンメチルエステル（２５０ｍｇ）を、ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１（ｈ）、２５０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２０ｍｌ）の溶液に加えた。室温で１６時間後、この混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：７７ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５５９．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１３．２２分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例６】
【００７８】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（（Ｎ，Ｎ−ビス−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
Ｎ，Ｎ−ビス−（２−メトキシエチル）−アミン（４００ｍｇ）を、ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１（ｈ）、２５０ｍｇ）の溶液に加えた。室温で１６時間後、この混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：１６６ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５６１．３。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１３．６２分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例７】
【００７９】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（（２，３−ジヒドロキシ−プロプ−１−イル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
３−アミノ−２−ヒドロキシ−プロパノール（２５０ｍｇ）を、ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１（ｈ）、２５０ｍｇ）の溶液に加えた。室温で１６時間後、この混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：１６４ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５１９．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１２．６２分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例８】
【００８０】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（（１，３−ジヒドロキシプロプ−２−イル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
２−アミノ−３−ヒドロキシプロパノール（２５０ｍｇ）を、ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−メチルチオ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１（ｈ）、２５０ｍｇ）の溶液に加えた。室温で１６時間後、この混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：１１７ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５１９．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１２．６２分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例９】
【００８１】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−フェニル−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
（ａ）５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−フェニル−６−ヒドロキシ−ピリミジン
無水ＥｔＯＨ（２５０ｍｌ）中の塩酸ベンズアミジン（１６．４ｇ）、３−ニトロベンズアルデヒド（１５．１ｇ）、エチルシアノアセテート（１１．２ｍｌ）及び炭酸カリウム（１６．６ｇ）の混合物を６０℃で８時間攪拌した。この反応混合物を氷浴中で０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、無水ＥｔＯＨで洗って、透明な溶液が得られるまで水中で加熱した（１００℃）。この溶液を５０℃に冷却し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液を加えてｐＨ２に酸性化し、氷浴中で０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、氷水で洗った。残留水を１，４−ジオキサンとの同時蒸発によって除去した。
収量：１５．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３１９．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．３、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９／１（ｖ／ｖ）。
【００８２】
（ｂ）６−クロロ−５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−フェニル−ピリミジン
ＰＯＣｌ_３（５０ｍｌ）を、無水１，４−ジオキサンｐ．ａ．（２００ｍｌ）中の５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−フェニル−６−ヒドロキシ−ピリミジン（実施例９（ａ）、１５．０ｇ）及びジメチルアニリン（０．５ｍｌ）の攪拌溶液に加えた。９０℃で３時間後、この温かい混合物をろ取し、そのろ液を減圧下で濃縮した。その残留物を１，４−ジオキサンに溶解し、氷水を加えた。生じた沈殿物をろ取し、水で洗った。残留水を１，４−ジオキサンとの同時蒸発によって除去した。
収量：１５．８ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３３７．４。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．８、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００８３】
（ｃ）エチル５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−フェニル−６−（エトキシカルボニルメチルチオ）−ピリミジン
ＤＩＰＥＡ（８．７１ｍｌ）を、窒素ガス体下にＥｔＯＨ（１２５ｍｌ）とＤＣＭ（１２５ｍｌ）の混合物中のエチル２−メルカプトアセテート（５．１５ｍｌ）及び６−クロロ−５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−フェニル−ピリミジン（実施例９（ｂ）、１５．８ｇ）の攪拌溶液に加えた。室温で２時間後、この混合物を、完全に溶解するまでＤＣＭで希釈し、０．５Ｎ ＨＣｌ水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。
収量：１９．７ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４２１．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．７、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００８４】
（ｄ）エチル５−アミノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート
ＤＩＰＥＡ（２０．０ｍｌ）を、無水ＥｔＯＨ（１００ｍｌ）とトルエンｐ．ａ．（１００ｍｌ）の混合物中のエチル５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−フェニル−６−（エトキシカルボニルメチルチオ）−ピリミジン（実施例９（ｃ）、１９．７ｇ）の攪拌溶液に加えた。１００℃で４８時間後、この混合物を０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、低温ＥｔＯＨで洗って、真空中４０℃で乾燥した。
収量：１７．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４２１．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．５、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００８５】
（ｅ）エチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート
無水ＥｔＯＨ（２５０ｍｌ）中の塩化スズ（ＩＩ）（２３．０ｇ）の溶液を、１，４−ジオキサンｐ．ａ．（２５０ｍｌ）中のエチル５−アミノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（実施例９（ｄ）、１６．６ｇ）の溶液に加えた。３７％ＨＣｌ水溶液（６．９ｍｌ）を加え、この混合物を還流下（９０℃）で１６時間加熱した。その混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。その残留物をＥｔＯＡｃ（５００ｍｌ）に懸濁した。４Ｎ ＮａＯＨ水溶液を加えて、１０〜１１のｐＨを得た。飽和ＮａＣｌ水溶液を加えてその混合物を希釈した。有機層を分離して、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。
収量：１７．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４２１．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．５、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００８６】
（ｆ）５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
水酸化カリウム（２０．０ｇ）を、１，４−ジオキサン（２１０ｍｌ）と水（８０ｍｌ）の混合物中のエチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（実施例９（ｅ）、１７．０ｇ）の溶液に加えた。９０℃で１６時間後、この混合物を０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、水（３００ｍｌ）に懸濁して、０℃に冷却した。この混合物を、２Ｎクエン酸水溶液を加えてｐＨ３に酸性化し、０℃から室温までで２時間攪拌した。生じた沈殿物をろ取し、水で洗って、真空中４０℃で乾燥した。
収量：１３．３ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３６３．０。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．２、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９５／５（ｖ／ｖ）。
【００８７】
（ｇ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＩＰＥＡ（１５．３ｍｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルアミン（９．３ｍｌ）及びＴＢＴＵ（１４．１ｇ）を、窒素ガス体下でＤＣＭ（２５０ｍｌ）とＤＭＦ（５０ｍｌ）の混合物中の５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（実施例９（ｆ）、１３．３ｇ）の混合物に加えた。室温で３時間後、この混合物をＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液、０．１Ｎ ＨＣｌ水溶液及び飽和ＮａＣｌ水溶液で洗った。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／７から１／１（ｖ／ｖ）を溶離液として使用して、シリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製した。
収量：１４．７ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４１８．４。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．４、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００８８】
（ｈ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
塩化ブロモアセチル（２．８０ｍｌ）を、ＤＣＭ（５０ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例９（ｇ）、５．８ｇ）及びＤＩＰＥＡ（１２．２ｍｌ）の溶液に滴下した。室温で３時間後、この混合物をＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）を溶離液として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製した。ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミドとｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−クロロアセトアミド）−フェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミドの１：１（ｍｏｌ／ｍｏｌ）混合物を得た。
収量：２．６ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４０．２、［Ｍ’＋Ｈ’］^＋＝４９４．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．３、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００８９】
（ｉ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−フェニル−４−（３−（（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例９（ｈ）、５００ｍｇ）の攪拌溶液に、Ｎ−エチル−２−アミノ−エタノール（５００ｍｇ）を加えた。室温で１７時間攪拌した後、この反応混合物をＤＣＭ（１００ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ_３水溶液（１Ｍ、２×１０ｍｌ）で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：２７１ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４７．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１１．８８分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例１０】
【００９０】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−フェニル−４−（３−（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−フェニル−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例９（ｈ）、５００ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤｉＰＥＡ、１ｍｌ）の攪拌溶液に、塩酸グリシンメチルエステル（７００ｍｇ）を加えた。室温で１７時間攪拌した後、この反応混合物をＤＣＭ（１００ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ_３水溶液（１Ｍ、２×５０ｍｌ）で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：３２１ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４７．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１２．５４分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例１１】
【００９１】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（２−フリル）−４−（３−（（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
（ａ）２−アミジノフラン
冷却した（０℃）エタノール中の飽和ＨＣｌ（４０ｍｌ）を、２−フロニトリル（１３ｍｌ）を含む冷却した（氷浴、０℃）反応容器に加えた。生じた溶液を放置して周辺温度にし、窒素ガス体下に４８時間攪拌した。この反応混合物を真空中で濃縮した後、対応する２−フリルエチルイミデートを含むその残留物をエタノール（２０ｍｌ）に再溶解し、窒素ガス体下に０℃で攪拌した。その後、エタノール中の飽和アンモニア（４０ｍｌ）を加え、この反応混合物を密封反応容器内で４８時間攪拌した。その反応混合物を濾過した後、ろ液を減圧下で濃縮した。その粗生成物を、さらなる精製を行わずに次の段階で使用した。
収量：１５．０ｇ
【００９２】
（ｂ）５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−フリル）−６−ヒドロキシ−ピリミジン
無水ＥｔＯＨ（３００ｍｌ）中の２−アミジノフラン（実施例１１（ａ）、１５ｇ）、３−ニトロベンズアルデヒド（２４ｇ）、エチルシアノアセテート（１７ｍｌ）及び炭酸カリウム（２５ｇ）の混合物を６０℃で１６時間攪拌した。この反応混合物を氷浴中で０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、無水ＥｔＯＨで洗って、乳状懸濁液が得られるまで、攪拌しながら水中で加熱した（１００℃）。この懸濁液を５０℃に冷却し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液を加えてｐＨ２に酸性化し、氷浴中で０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、氷水で洗った。残留水を１，４−ジオキサンとの同時蒸発によって除去した。
収量：１６．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３０９．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．３、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９／１（ｖ／ｖ）。
【００９３】
（ｃ）６−クロロ−５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−フリル）−ピリミジン
ＰＯＣｌ_３（５０ｍｌ）を、無水１，４−ジオキサンｐ．ａ．（２５０ｍｌ）中の５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−フリル）−６−ヒドロキシ−ピリミジン（実施例１１（ｂ）、１６．０ｇ）及びジメチルアニリン（０．５ｍｌ）の攪拌溶液に加えた。９０℃で２時間後、この温かい混合物をろ取し、そのろ液を減圧下で濃縮した。その残留物を１，４−ジオキサンに溶解し、氷水を加えた。生じた沈殿物をろ取し、水で洗った。残留水を１，４−ジオキサンとの同時蒸発によって除去した。
収量：１６．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３２７．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．７５、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００９４】
（ｄ）エチル５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−フリル）−６−（エトキシカルボニルメチルチオ）−ピリミジン
ＤＩＰＥＡ（９．１ｍｌ）を、窒素ガス体下にＥｔＯＨ（１２５ｍｌ）とＤＣＭ（１２５ｍｌ）の混合物中のエチル２−メルカプトアセテート（５．４ｍｌ）及び６−クロロ−５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−フリル）−ピリミジン（実施例１１（ｃ）、１６．０ｇ）の攪拌溶液に加えた。室温で２時間後、この混合物を、完全に溶解するまでＤＣＭで希釈し、０．５Ｎ ＨＣｌ水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。
収量：２０．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４１１．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．７、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００９５】
（ｅ）エチル５−アミノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−フリル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート
ＤＩＰＥＡ（２０．０ｍｌ）を、無水ＥｔＯＨ（１００ｍｌ）とトルエンｐ．ａ．（１００ｍｌ）の混合物中のエチル５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−フリル）−６−（エトキシカルボニルメチルチオ）−ピリミジン（実施例１１（ｄ）、２０ｇ）の攪拌溶液に加えた。１００℃で４８時間後、この混合物を０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、低温ＥｔＯＨで洗って、真空中４０℃で乾燥した。
収量：２０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４１１．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．６、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００９６】
（ｆ）エチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（２−フリル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート
無水ＥｔＯＨ（２５０ｍｌ）中の塩化スズ（ＩＩ）（２８．０ｇ）の溶液を、１，４−ジオキサンｐ．ａ．（２５０ｍｌ）中のエチル５−アミノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−フリル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（実施例１１（ｅ）、２０ｇ）の溶液に加えた。３７％ＨＣｌ水溶液（８．５ｍｌ）を加え、この混合物を還流下（９０℃）で１６時間加熱した。その混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。その残留物をＥｔＯＡｃ（５００ｍｌ）に懸濁した。４Ｎ ＮａＯＨ水溶液を加えて、１０〜１１のｐＨを得た。飽和ＮａＣｌ水溶液を加えてその混合物を希釈した。有機層を分離して、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。
収量：１７．５ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３８１．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．４、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００９７】
（ｇ）５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（２−フリル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
水酸化カリウム（２３．０ｇ）を、１，４−ジオキサン（２１０ｍｌ）と水（８０ｍｌ）の混合物中のエチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（２−フリル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（実施例１１（ｆ）、１７．５ｇ）の溶液に加えた。９０℃で８時間後、この混合物を０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、水（３００ｍｌ）に懸濁して、０℃に冷却した。この混合物を、２Ｎクエン酸水溶液を加えてｐＨ３に酸性化し、０℃から室温までで２時間攪拌した。生じた沈殿物をろ取し、水で洗って、真空中４０℃で乾燥した。
収量：１６．９ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３５３．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．２、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９５／５（ｖ／ｖ）。
【００９８】
（ｈ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（２−フリル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＩＰＥＡ（１９．２ｍｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルアミン（１１．６ｍｌ）及びＴＢＴＵ（１７．７ｇ）を、窒素ガス体下でＤＣＭ（２５０ｍｌ）とＤＭＦ（５０ｍｌ）の混合物中の５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（２−フリル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（実施例１１（ｇ）、１６．９ｇ）の溶液に加えた。室温で３時間後、実質的な量の黄色沈殿物が形成されており、それをろ取した。この残留物をジエチルエーテルで洗い、真空中４０℃で乾燥した。
収量：１８．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４０８．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．４、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【００９９】
（ｉ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（２−フリル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
塩化ブロモアセチル（１００ｍｌ）を、ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（２−フリル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１１（ｈ）、２５０ｍｇ）及びＤＩＰＥＡ（０．５ｍｌ）の溶液に滴下した。室温で３時間後、この混合物をＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）を溶離液として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製した。ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミドとｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−クロロアセトアミド）−フェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミドの１：１（ｍｏｌ／ｍｏｌ）混合物を得た。
収量：１２４ｍｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４０．２、［Ｍ’＋Ｈ’］^＋＝４９４．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．３、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【０１００】
（ｊ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（２−フリル）−４−（３−（（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（２−フリル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１１（ｉ）、１３０ｍｇ）の攪拌溶液に、Ｎ−メチル−２−アミノ−エタノール（２００ｍｇ）を加えた。室温で１７時間攪拌した後、この反応混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ_３水溶液（１Ｍ、２×１０ｍｌ）で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：８１ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５２３．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１１．０１分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例１２】
【０１０１】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（２−フリル）−４−（３−（Ｎ−（１−ヒドロキシ−２−メチル−プロプ−２−イル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（２−フリル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１１（ｉ）、１３０ｍｇ）の攪拌溶液に、２−アミノ−２−メチル−プロパノール（２６０ｍｇ）を加えた。室温で１７時間攪拌した後、この反応混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ_３水溶液（１Ｍ、２×１０ｍｌ）で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：５４ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５３７．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１１．１５分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例１３】
【０１０２】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（２−フリル）−４−（３−（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（２−フリル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１１（ｉ）、１３０ｍｇ）及びＤｉＰＥＡ（０．５ｍｌ）の攪拌溶液に、塩酸グリシンメチルエステル（３２４ｍｇ）を加えた。室温で１７時間攪拌した後、この反応混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ_３水溶液（１Ｍ、２×１０ｍｌ）で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：７４ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５３７．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１２．０９分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例１４】
【０１０３】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（２−チエニル）−４−（３−（（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
（ａ）５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−チエニル）−６−ヒドロキシ−ピリミジン
無水ＥｔＯＨ（２００ｍｌ）中の２−アミジノチオフェンヒドロクロリド（１０．０ｇ）、３−ニトロベンズアルデヒド（９．７ｇ）、エチルシアノアセテート（６．８１ｍｌ）及び炭酸カリウム（１０．１ｇ）の混合物を６０℃で８時間攪拌した。この反応混合物を氷浴中で０℃に冷却し、濾過して、無水ＥｔＯＨで洗い、その残留物を水（１００℃）に溶解した。この溶液を５０℃に冷却し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液でｐＨ２に酸性化して、氷浴中で０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、氷水で洗った。残留水を１，４−ジオキサンとの同時蒸発によって除去した。
収量：１０．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３２５．０。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．３、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９／１（ｖ／ｖ）。
【０１０４】
（ｂ）６−クロロ−５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−チエニル）−ピリミジン
ＰＯＣｌ_３（３０ｍｌ）を、無水１，４−ジオキサン（１５０ｍｌ）中の５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−チエニル）−６−ヒドロキシ−ピリミジン（実施例１４（ａ）、１０．０ｇ）及びジメチルアニリン（２滴から３滴）の攪拌溶液に加えた。９０℃で３時間後、この混合物を室温に冷却し減圧下で濃縮した。その残留物を１，４−ジオキサンに溶解し、氷水を慎重に加えた。生じた沈殿物をろ取し、水で洗った。残留水を、１，４−ジオキサンとの同時蒸発及び真空中４０℃での乾燥によって除去した。
収量：９．８ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３４３．４。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．８、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【０１０５】
（ｃ）エチル５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−チエニル）−６−（エトキシカルボニルメチルチオ）−ピリミジン
ＤＩＰＥＡ（５．５７ｍｌ）を、窒素ガス体下にＥｔＯＨ（８０ｍｌ）とＤＣＭ（８０ｍｌ）の混合物中のエチル２−メルカプトアセテート（３．２８ｍｌ）及び６−クロロ−５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−チエニル）−ピリミジン（実施例１４（ｂ）、９．８ｇ）の攪拌溶液に加えた。室温で２時間後、この混合物を、完全に溶解するまでＤＣＭで希釈し、０．５Ｎ ＨＣｌ水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。
収量：１２．９ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４２７．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．７、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【０１０６】
（ｄ）エチル５−アミノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート
ＤＩＰＥＡ（１３．０ｍｌ）を、無水ＥｔＯＨ（７５ｍｌ）とトルエンｐ．ａ．（７５ｍｌ）の混合物中のエチル５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−チエニル）−６−（エトキシカルボニルメチルチオ）−ピリミジン（実施例１４（ｃ）、１２．９ｇ）の攪拌溶液に加えた。１００℃で４８時間後、この混合物を０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、低温ＥｔＯＨで洗って、真空中４０℃で乾燥した。
収量：１１．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４２７．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．６、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【０１０７】
（ｅ）エチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート
無水ＥｔＯＨ（１５０ｍｌ）中の塩化スズ（ＩＩ）（１５ｇ）の溶液を、１，４−ジオキサン（１５０ｍｌ）中のエチル５−アミノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（実施例１４（ｄ）、１０．８６ｇ）の溶液に加えた。３７％ＨＣｌ水溶液（４．５ｍｌ）を加え、この混合物を還流下（９０℃）で１６時間加熱した。その混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。その残留物をＥｔＯＡｃ（４００ｍｌ）に懸濁し、完全に溶解するまでＴＨＦを加えた。４Ｎ ＮａＯＨ水溶液を加えて、１０〜１１のｐＨを得た。飽和ＮａＣｌ水溶液を加えてその混合物を希釈した。有機層を分離して、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。
収量：１２．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３９７．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．４、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【０１０８】
（ｆ）５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
水酸化カリウム（１３ｇ）を、１，４−ジオキサン（１５０ｍｌ）と水（５０ｍｌ）の混合物中のエチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（実施例１４（ｅ）、１０．１ｇ）の溶液に加えた。９０℃で１６時間後、この混合物を０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、水（１８０ｍｌ）に懸濁して、０℃に冷却した。この混合物を、２Ｎクエン酸水溶液を加えてｐＨ３に酸性化し、０℃で２時間攪拌した。生じた沈殿物をろ取し、水で洗って、真空中４０℃で乾燥した。
収量：６．３ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３６９．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．２、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９５／５（ｖ／ｖ）。
【０１０９】
（ｇ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＩＰＥＡ（７．１ｍｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルアミン（４．３ｍｌ）及びＴＢＴＵ（６．６ｇ）を、窒素ガス体下でＤＣＭ（１２５ｍｌ）とＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）（２５ｍｌ）の混合物中の５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（実施例１４（ｆ）、６．３ｇ）の混合物に加えた。室温で３時間後、この混合物をＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液、０．１Ｎ ＨＣｌ水溶液及び飽和ＮａＣｌ水溶液で洗った。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／７から１／１（ｖ／ｖ）を溶離液として使用して、シリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製した。
収量：６．４５ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４２４．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．３、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【０１１０】
（ｈ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
塩化ブロモアセチル（２．４０ｍｌ）を、ＤＣＭ（５０ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１４（ｇ）、５．０ｇ）及びＤＩＰＥＡ（１０．５ｍｌ）の溶液に加えた。室温で３時間後、この混合物をＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）を溶離液として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製した。ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミドとｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−クロロアセトアミド）−フェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミドの混合物を得た。
収量：３．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４６．２、［Ｍ’＋Ｈ］^＋＝５００．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．２、シリカゲル、トルエン／ＥｔＯＡｃ＝７／１（ｖ／ｖ）。
【０１１１】
（ｉ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（２−チエニル）−４−（３−（（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１４（ｈ）、１００ｍｇ）の攪拌溶液に、Ｎ−メチル−２−アミノ−エタノール（１４０ｍｇ）を加えた。室温で１７時間攪拌した後、この反応混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ_３水溶液（１Ｍ、２×１０ｍｌ）で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：５９ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５３９．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１１．０１分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例１５】
【０１１２】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（２−チエニル）−４−（３−（（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１４（ｈ）、１００ｍｇ）及びＤｉＰＥＡ（０．５ｍｌ）の攪拌溶液に、塩酸グリシンメチルエステル（２５０ｍｇ）を加えた。室温で１７時間攪拌した後、この反応混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ_３水溶液（１Ｍ、２×１０ｍｌ）で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：７４ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５５３．０。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１２．５７分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例１６】
【０１１３】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（２−チエニル）−４−（３−（（Ｎ，Ｎ−ジ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（２−チエニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１４（ｈ）、１００ｍｇ）の攪拌溶液に、Ｎ，Ｎ−ジ−（２−メトキシエチル）−アミン（２００ｍｇ）を加えた。室温で１７時間攪拌した後、この反応混合物をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ_３水溶液（１Ｍ、２×１０ｍｌ）で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：５９ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５９７．４。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１３．８４分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例１７】
【０１１４】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−エチルアミノ−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
（ａ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メタンスルフィニル−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、２５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例４、１．０ｇ）の攪拌溶液に、３−クロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ、１．０ｇ）を加えた。１７時間後、この反応混合物を周辺温度（２０℃）で減圧下に濃縮し、ＤＣＭ（１００ｍｌ）に再溶解して、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（２×５０ｍｌ）及び水（５０ｍｌ）で注意深く洗い、乾燥して（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その粗残留物を、さらなる精製を行わずに次の段階で使用した。
収量：８２０ｍｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４７．３。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．２、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９／１（ｖ／ｖ）。
【０１１５】
（ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−エチルアミノ−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
塩酸エチルアミン（１５０ｍｇ）を、１，４−ジオキサン（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メタンスルフィニル−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１７（ａ）、１００ｍｇ）及びＤｉＰＥＡ（０．５ｍｌ）の攪拌溶液に加え、この反応混合物を６０℃に３時間加熱した。前記反応混合物を減圧下で濃縮した後、その残留物をＤＣＭ（５０ｍｌ）中に取り、ブライン（１Ｍ、２５ｍｌ）及び水（２５ｍｌ）で洗った。その後、有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。このようにして得た残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：３６ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５２８．４。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１０．２１分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例１８】
【０１１６】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
（ａ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メタンスルフィニル−４−（３−（（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、２５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１（ｉ）、１．０ｇ）の攪拌溶液に、３−クロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ、１．０ｇ）を加えた。１７時間後、この反応混合物を周辺温度（２０℃）で減圧下に濃縮し、ＤＣＭ（１００ｍｌ）に再溶解して、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（２×５０ｍｌ）及び水（５０ｍｌ）で注意深く洗い、乾燥して（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その粗残留物を、さらなる精製を行わずに次の段階で使用した。
収量：９１０ｍｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５１９．６。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．１５、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９／１（ｖ／ｖ）。
【０１１７】
（ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−４−（３−（（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
塩酸ジメチルアミン（１５０ｍｇ）を、１，４−ジオキサン（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メタンスルフィニル−４−（３−（（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１８（ａ）、１００ｍｇ）及びＤｉＰＥＡ（０．５ｍｌ）の攪拌溶液に加え、この反応混合物を６０℃に３時間加熱した。前記反応混合物を減圧下で濃縮した後、その残留物をＤＣＭ（５０ｍｌ）中に取り、ブライン（１Ｍ、２５ｍｌ）及び水（２５ｍｌ）で洗った。その後、有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。このようにして得た残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：３６ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５００．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１０．０３分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例１９】
【０１１８】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−エチルアミノ−４−（３−（（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
（ａ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メタンスルフィニル−４−（３−（（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、２５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メチルチオ−４−（３−（（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例３、１．０ｇ）の攪拌溶液に、３−クロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ、１．０ｇ）を加えた。１７時間後、この反応混合物を周辺温度（２０℃）で減圧下に濃縮し、ＤＣＭ（１００ｍｌ）に再溶解して、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（２×５０ｍｌ）及び水（５０ｍｌ）で注意深く洗い、乾燥して（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その粗残留物を、さらなる精製を行わずに次の段階で使用した。
収量：６８０ｍｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５３３．６。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．１７、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９／１（ｖ／ｖ）。
【０１１９】
（ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−エチルアミノ−４−（３−（（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
塩酸エチルアミン（１５０ｍｇ）を、１，４−ジオキサン（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メタンスルフィニル−４−（３−（（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１９（ａ）、１００ｍｇ）及びＤｉＰＥＡ（０．５ｍｌ）の攪拌溶液に加え、この反応混合物を６０℃に３時間加熱した。前記反応混合物を減圧下で濃縮した後、その残留物をＤＣＭ（５０ｍｌ）中に取り、ブライン（１Ｍ、２５ｍｌ）及び水（２５ｍｌ）で洗った。その後、有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。このようにして得た残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：５７ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５１４．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１２．５６分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例２０】
【０１２０】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−イソプロピルアミノ−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
イソプロピルアミン（１５０ｍｇ）を、１，４−ジオキサン（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メタンスルフィニル−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１７（ａ）、１００ｍｇ）及びＤｉＰＥＡ（０．５ｍｌ）の攪拌溶液に加え、この反応混合物を６０℃に３時間加熱した。前記反応混合物を減圧下で濃縮した後、その残留物をＤＣＭ（５０ｍｌ）中に取り、ブライン（１Ｍ、２５ｍｌ）及び水（２５ｍｌ）で洗った。その後、有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。このようにして得た残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：５７ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４２．４。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１１．０１分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例２１】
【０１２１】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−アリルアミノ−４−（３−（（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
アリルアミン（２００ｍｇ）を、１，４−ジオキサン（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メタンスルフィニル−４−（３−（（Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１９（ａ）、１００ｍｇ）及びＤｉＰＥＡ（０．５ｍｌ）の攪拌溶液に加え、この反応混合物を６０℃に３時間加熱した。前記反応混合物を減圧下で濃縮した後、その残留物をＤＣＭ（５０ｍｌ）中に取り、ブライン（１Ｍ、２５ｍｌ）及び水（２５ｍｌ）で洗った。その後、有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。このようにして得た残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：６５ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５２６．４。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１３．１８分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例２２】
【０１２２】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メトキシ−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１００ｍｇ）を、メタノール（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メタンスルフィニル−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１７（ａ）、２００ｍｇ）の攪拌溶液に加え、この反応混合物を５０℃に３時間加熱した。前記反応混合物を減圧下で濃縮した後、その残留物をＤＣＭ（５０ｍｌ）中に取り、塩化アンモニウム水溶液（１Ｍ、２５ｍｌ）、ブライン（１Ｍ、２５ｍｌ）及び水（２５ｍｌ）で洗った。その後、有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。このようにして得た残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：９２ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５１５．４。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１２．２１分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例２３】
【０１２３】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−アリルオキシ−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１００ｍｇ）を、アリルアルコール（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メタンスルフィニル−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１７（ａ）、２００ｍｇ）の攪拌溶液に加え、この反応混合物を５０℃に３時間加熱した。前記反応混合物を減圧下で濃縮した後、その残留物をＤＣＭ（５０ｍｌ）中に取り、塩化アンモニウム水溶液（１Ｍ、２５ｍｌ）、ブライン（１Ｍ、２５ｍｌ）及び水（２５ｍｌ）で洗った。その後、有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。このようにして得た残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：６３ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４１．４。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１２．７１分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例２４】
【０１２４】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−イソプロポキシ−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１００ｍｇ）を、イソプロパノール（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−メタンスルフィニル−４−（３−（（Ｎ−エチル−Ｎ−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例１７（ａ）、２００ｍｇ）の攪拌溶液に加え、この反応混合物を５０℃に３時間加熱した。前記反応混合物を減圧下で濃縮した後、その残留物をＤＣＭ（５０ｍｌ）中に取り、塩化アンモニウム水溶液（１Ｍ、２５ｍｌ）、ブライン（１Ｍ、２５ｍｌ）及び水（２５ｍｌ）で洗った。その後、有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。このようにして得た残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：３２ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４３．４。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１２．９３分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例２５】
【０１２５】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（４−ピリジル）−４−（３−（（Ｎ−（１−ヒドロキシ−２−メチル−プロプ−２−イル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
（ａ）５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（４−ピリジル）−６−ヒドロキシ−ピリミジン
無水ＥｔＯＨ（２５０ｍｌ）中の４−アミジノ−ピリジンヒドロクロリド（１６．５ｇ）、３−ニトロベンズアルデヒド（１５．１ｇ）、エチルシアノアセテート（１１．２ｍｌ）及び炭酸カリウム（１６．６ｇ）の混合物を６０℃で１６時間攪拌した。この反応混合物を氷浴中で０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、無水ＥｔＯＨで洗って、透明な溶液が得られるまで水中で加熱した（１００℃）。この溶液を５０℃に冷却し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液を加えてｐＨ２に酸性化して、氷浴中で０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、氷水で洗った。残留水を１，４−ジオキサンとの同時蒸発によって除去した。
収量：１８．３ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３２０．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．２、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９／１（ｖ／ｖ）。
【０１２６】
（ｂ）６−クロロ−５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（４−ピリジル）−ピリミジン
ＰＯＣｌ_３（５０ｍｌ）を、無水１，４−ジオキサンｐ．ａ．（２００ｍｌ）中の５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（４−ピリジル）−６−ヒドロキシ−ピリミジン（実施例２５（ａ）、１８．３ｇ）及びジメチルアニリン（０．５ｍｌ）の攪拌溶液に加えた。９０℃で３時間後、この温かい混合物をろ取し、そのろ液を減圧下で濃縮した。その残留物を１，４−ジオキサンに溶解し、氷水を加えた。生じた沈殿物をろ取し、水で洗った。残留水を１，４−ジオキサンとの同時蒸発によって除去した。
収量：１７．２ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３３８．４。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．７、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【０１２７】
（ｃ）エチル５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（４−ピリジル）−６−（エトキシカルボニルメチルチオ）−ピリミジン
ＤＩＰＥＡ（９．８ｍｌ）を、窒素ガス体下にＥｔＯＨ（１２５ｍｌ）とＤＣＭ（１２５ｍｌ）の混合物中のエチル２−メルカプトアセテート（５．７ｍｌ）及び６−クロロ−５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（４−ピリジル）−ピリミジン（実施例２５（ｂ）、１７．２ｇ）の攪拌溶液に加えた。室温で２時間後、この混合物を、完全に溶解するまでＤＣＭで希釈し、０．５Ｎ ＨＣｌ水溶液で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。
収量：２０．５ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４２２．０。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．６、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【０１２８】
（ｄ）エチル５−アミノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（４−ピリジル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート
ＤＩＰＥＡ（２０．０ｍｌ）を、無水ＥｔＯＨ（１００ｍｌ）とトルエンｐ．ａ．（１００ｍｌ）の混合物中のエチル５−シアノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（４−ピリジル）−６−（エトキシカルボニルメチルチオ）−ピリミジン（実施例２５（ｃ）、２０．５ｇ）の攪拌溶液に加えた。１００℃で４８時間後、この混合物を０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、低温ＥｔＯＨで洗って、真空中４０℃で乾燥した。
収量：１５．７ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４２２．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．５、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【０１２９】
（ｅ）エチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（４−ピリジル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート
無水ＥｔＯＨ（２５０ｍｌ）中の塩化スズ（ＩＩ）（２１．０ｇ）の溶液を、１，４−ジオキサンｐ．ａ．（２５０ｍｌ）中のエチル５−アミノ−４−（３−ニトロフェニル）−２−（４−ピリジル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（実施例２５（ｄ）、１５．７ｇ）の溶液に加えた。３７％ＨＣｌ水溶液（６．９ｍｌ）を加え、この混合物を還流下（９０℃）で１６時間加熱した。その混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。その残留物をＥｔＯＡｃ（５００ｍｌ）に懸濁した。４Ｎ ＮａＯＨ水溶液を加えて、１０〜１１のｐＨを得た。飽和ＮａＣｌ水溶液を加えてその混合物を希釈した。有機層を分離して、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。
収量：１２．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３９２．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．３、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【０１３０】
（ｆ）５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（４−ピリジル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
水酸化カリウム（１５．７ｇ）を、１，４−ジオキサン（２１０ｍｌ）と水（８０ｍｌ）の混合物中のエチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（４−ピリジル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキシレート（実施例２５（ｅ）、１２．０ｇ）の溶液に加えた。９０℃で１６時間後、この混合物を０℃に冷却した。生じた沈殿物をろ取し、水（３００ｍｌ）に懸濁して、０℃に冷却した。この混合物を、２Ｎクエン酸水溶液を加えてｐＨ３に酸性化し、０℃から室温までで２時間攪拌した。生じた沈殿物をろ取し、水で洗って、真空中４０℃で乾燥した。
収量：１２．０ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３６４．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．１、シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９５／５（ｖ／ｖ）。
【０１３１】
（ｇ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（４−ピリジル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＩＰＥＡ（１２．９ｍｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルアミン（７．８ｍｌ）及びＴＢＴＵ（１１．９ｇ）を、窒素ガス体下でＤＣＭ（２５０ｍｌ）とＤＭＦ（５０ｍｌ）の混合物中の５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（４−ピリジル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（実施例２５（ｆ）、１２．０ｇ）の混合物に加えた。室温で２時間後、この混合物をＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液、０．１Ｎ ＨＣｌ水溶液及び飽和ＮａＣｌ水溶液で洗った。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、ジクロロメタン／メタノール＝１／０から９５／５（ｖ／ｖ）を溶離液として使用して、シリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製した。
収量：１２．２ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４１９．４。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．３、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【０１３２】
（ｈ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（４−ピリジル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＴＨＦ（２５ｍｌ）中の臭化ブロモアセチル（０．５９ｍｌ）の溶液を、ＴＨＦ（５０ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−２−（４−ピリジル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例２５（ｇ）、２．０ｇ）及びＮ，Ｎ−ジメチルアニリン（３．０ｍｌ）の溶液に滴下した。室温で３０分後、この混合物を減圧下で濃縮し、その後ＤＣＭ（１００ｍｌ）に溶解して、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗い、乾燥して（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その残留物を、さらなる精製を行わずに次の段階で使用した。
収量：２．３ｇ。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５３９．２。
ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．３、シリカゲル、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ＝３／２（ｖ／ｖ）。
【０１３３】
（ｉ）ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（４−ピリジル）−４−（３−（（Ｎ−（１−ヒドロキシ−２−メチル−プロプ−２−イル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（４−ピリジル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例２５（ｈ）、２００ｍｇ）の攪拌溶液に、２−アミノ−２−メチル−プロパノール（３００ｍｇ）を加えた。室温で１７時間攪拌した後、この反応混合物をＤＣＭ（１００ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ_３水溶液（１Ｍ、２×５０ｍｌ）で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：７３ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４８．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝９．６５分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例２６】
【０１３４】
ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−２−（４−ピリジル）−４−（３−（（Ｎ，Ｎ−ビス−（２−メトキシエチル）−グリシニル）−アミノ）−フェニル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド
ＤＣＭ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（３−（２−ブロモアセトアミド）−フェニル）−２−（４−ピリジル）−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（実施例２５（ｈ）、２００ｍｇ）の攪拌溶液に、ビス−（２−メトキシエチル）−アミン（３００ｍｇ）を加えた。室温で１７時間攪拌した後、この反応混合物をＤＣＭ（１００ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ_３水溶液（１Ｍ、２×５０ｍｌ）で洗って、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。その残留物を、次の勾配：３０分間で０．１％ＴＦＡ水溶液＋１０％ＡＣＮ水溶液／ＡＣＮ＝９０／１０から１０／９０（ｖ／ｖ）、を有するＬｕｎａ Ｃ−１８カラムを用いたＨＰＬＣによって精製した。その後１，４−ジオキサン、０．１％ＴＦＡ水溶液及び水の混合物から表題化合物を凍結乾燥した。
収量：１７０ｍｇ（ＴＦＡ塩）。
ＭＳ−ＥＳＩ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５９２．２。
ＨＰＬＣ：Ｒ_ｔ＝１２．０２分、カラムＬｕｎａ Ｃ−１８（２）、３μｍ、１００×２．０ｍｍ、検出ＵＶ＝２１０ｎｍ、炉の温度＝４０℃、流速＝０．２５ｍｌ／分、溶離液のリン酸緩衝液５０ｍＭ ｐＨ２．１／水／ＡＣＮ＝１０／８０／１０から１０／１０／８０（ｖ／ｖ／ｖ）、実施時間＝２０分間。
【実施例２７】
【０１３５】
ＣＨＯ−ＬＨ及びＣＨＯ−ＦＳＨのインビトロ生物活性
化合物のＬＨアゴニスト活性を、ヒトＬＨ受容体で安定にトランスフェクトし、ホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子の発現を指令するｃＡＭＰ応答性エレメント（ＣＲＥ）／プロモーターでコトランスフェクトしたチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞において試験した。Ｇｓ共役ＬＨ受容体へのリガンドの結合はｃＡＭＰの上昇をもたらし、それが次に、ルシフェラーゼレポーター構築物のトランス活性化上昇を誘導する。発光計数器を用いてルシフェラーゼシグナルを定量した。被験化合物について、ＥＣ_５０値（最大刺激の半分（５０％）の刺激を生じさせる化合物の濃度）を算定した。そのために、ＧｒａｐｈＰａｄ ＰＲＩＳＭ、バージョン３．０（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ）のソフトウエアプログラムを使用した。
【０１３６】
同様に、化合物のＦＳＨアゴニスト活性を、ルシフェラーゼレポーター遺伝子及びヒトＦＳＨ受容体でトランスフェクトしたＣＨＯ細胞において試験した。結果を表１に示す。
【０１３７】
インビボ生物活性
ＬＨ／ＦＳＨ受容体アゴニスト化合物のインビボでの活性を測定するために、未熟マウスにおける排卵誘発を検討した。このアッセイでは、未熟雌性マウスを尿ＦＳＨ（Ｈｕｍｅｇｏｎ １２．５ＩＵ／動物）でプライムした。約４８時間後、その製造が実施例１、４、９及び１７に述べられている、５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルのＬＨ／ＦＳＨアゴニスト化合物で動物を処置した。ＬＨ／ＦＳＨ処置の２４時間後に動物を死亡させ、卵管内の卵の数を顕微鏡で評価した。平均１０匹から１５匹の動物を試験した。卵の平均数は、実施例１７の化合物（これについては０．４個）を除いて、８個であった。
【０１３８】
【表１】

Claims (10)

1. 一般式Ｉ：
   

   

   ［式中、
   Ｘは、Ｏ又はＨ，Ｈであり、
   Ａは、Ｓ、ＮＨ、Ｎ（Ｒ^６）、Ｏ又は結合であり；
   Ｒ^１は、（１−４Ｃ）アルキル、（２−４Ｃ）アルケニル、フェニル又は（２−５Ｃ）ヘテロアリールであり、前記フェニル又はヘテロアリール環は、場合により置換基の群：ヒドロキシ、ハロゲン、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アミノ又は（１−４Ｃ）（ジ）アルキルアミノの１個又はそれ以上で置換されており；
   Ｒ^２は、Ｈ、（１−４Ｃ）アルキル、（１−４Ｃ）アルコキシ（２−４Ｃ）アルキル又はヒドロキシ（２−４Ｃ）アルキルであり；
   Ｒ^３及びＲ^４は、Ｈ、（１−４Ｃ）アルキル及びヒドロキシ（１−４Ｃ）アルキルから独立して選択することができ；
   Ｒ^５は、Ｈ又は（１−４Ｃ）アルキルであり、及び
   Ｒ^６は、Ｒ^１について述べたのと同じ群から選択することができる］
   で表わされるチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン誘導体、又は医薬適合性のその塩。
2. ＸがＨ，Ｈである、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ^５が（１−４Ｃ）アルキルである、請求項１又は２に記載の化合物。
4. Ｒ^３＝Ｒ^４である、請求項１から３のいずれかに記載の化合物。
5. Ｒ^３＝Ｒ^４＝Ｈである、請求項１から４のいずれかに記載の化合物。
6. Ｒ^２が（１−４Ｃ）アルキルである、請求項１から５のいずれかに記載の化合物。
7. 治療における使用のための、請求項１から６のいずれかに記載の化合物。
8. 医薬適合性の補助剤と混合して、請求項１から６のいずれかに記載のチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン化合物又は医薬適合性のその塩又は溶媒和物を含む医薬組成物。
9. 受胎能の調節のための薬剤を製造するための、請求項１から６のいずれかに記載のチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン化合物又は医薬適合性のその塩又は溶媒和物の使用。
10. 請求項１から６のいずれかに記載の化合物の有効量を投与することによる、その必要のある患者において受胎能障害を治療するための方法。