JP2004002215A - スフィンゴ脂質誘導体の製造方法 - Google Patents
スフィンゴ脂質誘導体の製造方法 Download PDFInfo
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Abstract
【課題】高収率かつ高純度でスフィンゴ脂質誘導体を人工的に合成し得る工業的に有利なスフィンゴ脂質誘導体の製造方法を提供する。
【解決手段】一般式（ＩＩ）で示される化合物にトリイソプロビルシリル基を有する化合物を導入してその第２級水酸基が保護された一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を得、ついでこの化合物にリン含有化合物又は糖含有化合物を反応させて、一般式（ＩＶ）で示される化合物を得、ついでこの化合物の第２級水酸基を脱保護して一般式（Ｉ）で示されるスフィンゴ脂質誘導体を得る。
【選択図】なし
【解決手段】一般式（ＩＩ）で示される化合物にトリイソプロビルシリル基を有する化合物を導入してその第２級水酸基が保護された一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を得、ついでこの化合物にリン含有化合物又は糖含有化合物を反応させて、一般式（ＩＶ）で示される化合物を得、ついでこの化合物の第２級水酸基を脱保護して一般式（Ｉ）で示されるスフィンゴ脂質誘導体を得る。
【選択図】なし
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は医薬、化粧品等として有用なスフィンゴ脂質誘導体の新規な製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
スフィンゴ脂質誘導体は、抗腫瘍剤、抗インフルエンザ剤等の医薬、保湿剤、育毛剤等の化粧品、農薬、工業薬品などに幅広く用いられている重要な化合物である。
このようなスフィンゴ脂質誘導体は一般に牛脳から抽出することにより得られていたが、最近の狂牛病（ＢＳＥ）の発症が社会的に問題となってからは、このような牛脳からの抽出法は好ましいものではなく、人工的な製造方法が強く要請されているのが現状である。
【０００３】
従来、スフィンゴ脂質誘導体の人工的合成法としては、セリンもしくはセリン誘導体を出発原料とするスフィンゴミエリンの合成法の開発が主として行われ、特に、スフィンゴミエリンの中間体であるガーナーアルデヒド、スフィンゴシン、セラミドなどの合成に関してはほぼ合成経路が確立される至っている（Ｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓ．Ｌｉｐｉｄｓ，１９９９，３）。
【０００４】
しかし、中間体であるスフィンゴシン、セラミドからのスフィンゴミエリンへの合成経路における高収率の製造方法がまだ確立されていない。
【０００５】
たとえば、Ｓｌｏｔｔｅらの報告した「Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９１，１０７４６．」には、下記反応工程式によりスフィンゴミエリンが得られるとされているが、その全収率は極めて低く工業的に満足すべき収率ではなく、また純度も不十分なものであった。
【化７】
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明はこのような従来技術の実状に鑑みなされたものであって、その目的は、高収率かつ高純度でスフィンゴ脂質誘導体を人工的に合成し得る工業的に有利なスフィンゴ脂質誘導体の製造方法を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、前記課題について鋭意研究を重ねた結果、特定な保護基を用いることにより高収率・高純度でスフィンゴ脂質誘導体が得られることを見出し本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明によれば以下の発明が提供される。
（１）下記一般式（ＩＩ）で示される化合物にトリイソプロピルシリル基を有する化合物を反応させてその第２級水酸基が保護された下記一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を得、ついでこの化合物にリン含有化合物又は糖含有化合物を反応させて、下記一般式（ＩＶ）で示される化合物を得、ついでこの化合物の第２級水酸基を脱保護して下記一般式（Ｉ）で示されるスフィンゴ脂質誘導体を得ることを特徴とするスフィンゴ脂質誘導体の製造方法。
【化８】
（Ｉ）
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。Ｒ３は、リン含有化合物の残基又は糖含有化合物の残基を表す。）
【化９】
（ＩＩ）
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。）
【化１０】
（ＩＩＩ）
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。ＴＩＰＳはトリイソプロピルシリル基を表す。）
【化１１】
（ＩＶ）
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。Ｒ３は、リン含有化合物の残基又は糖含有化合物の残基を、ＴＩＰＳはトリイソプロピルシリル基を表す。）
（２） 上記一般式（ＩＩ）で示される化合物の第１級水酸基をあらかじめ保護して下記一般式（ＩＩａ）で示される化合物を得、次いでこの化合物の第２級水酸基をトリイソプロピルシリル基で保護して下記一般式（ＩＩｂ）で示される化合物を得た後、この化合物の第１級水酸基を脱保護して上記一般式（ＩＩ）で示される化合物を得る工程を含むことを特徴とする上記（１）に記載のスフィンゴ脂質誘導体の製造方法。
【化１２】
（ＩＩａ）
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。Ｚは第１級水酸基の保護基を表す。）
【化１３】
（ＩＩｂ）
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。Ｚは第１級水酸基の保護基を、ＴＩＰＳはトリイソプロピルシリル基を表す。）
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明の目的生成物であるスフィンゴ脂質誘導体は、下記一般式（Ｉ）で表すことができる。
【化１４】
（式中の各記号は前記と同じ。）
【０００９】
上記一般式におけるＲ１とＲ２は、具体的には、炭素数５０以下好ましくは炭素数２０以下の直鎖状または分岐状の未置換のアルキル基または未置換のアルケニル基を表し、またこれらのアルキル基及びアルケニル基は、ハロゲン、酸素、窒素、珪素、硫黄、燐、金属から選ばれる原子で置換されていてもよい。
【００１０】
未置換の直鎖状アルキルとしては、たとえばメチル基、エチル基、ｎープロピル基、ｎーブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニル基、デシル基、ウンデシル基、ドデシル基、テトラデシル基、ヘキサデシル基、オクタデシル基、エイコシル基等が挙げられ、未置換の直鎖状アルケニル基としては、たとえばエチレン基、ｎープロペン基、ｎーブテン基、ｎ−ペンテン基、ｎ−ヘキセン基、ヘプテン基、オクテン基、ノネン基、デセン基、ウンデセン基、ドデセン基、テトラデセン基、ヘキサデセン基、オクタデセン基、エイコセン基等を挙げることができる。
【００１１】
また、未置換の分岐状のアルキル基または置換アルケニル基を例示すれば、イソプロピル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔ−ブチル基、イソペンチル基、２−メチルブチル基、１−メチルブチル基、イソヘキシル基、３−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、１−メチルペンチル基、イソオクチル基、２−エチルヘキシル基、イソプロピレン基、イソブテン基、ｓｅｃ−ブテン基、ｔ−ブテン基、イソペンテン基、２−メチルブテン基、１−メチルブテン基、イソヘキセン基、３−メチルペンテン基、２−メチルペンテン基、１−メチルペンテン基、イソオクテン基、２−エチルヘキセン基のような基を挙げることができる。本発明で好ましく使用されるのは、炭素数１〜３６、更に好ましくは炭素数３〜２４、更に好ましく炭素数６〜１８の直鎖状又は分岐状のアルキル基又はアルケニル基である。
【００１２】
更に、本発明のアルキル基及びアルケニル基は、前記したように、ハロゲン、酸素、窒素、珪素、硫黄、燐、金属から選ばれる原子で置換されていてもよい。
【００１３】
ハロゲン原子としては、塩素、フッ素、ヨウ素、臭素から選ばれる原子が挙げられ、金属原子としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、ルビジウム、セシウムなどのアルカリ金属、ベリリウム、マグネシウム、カルシウム、ストロンチウム、バリウムなどのアルカリ土類金属、ホウ素、アルミニウム、チタン、錫、鉄などが挙げられる。
【００１４】
Ｒ３ はリン含有化合物の残基又は糖含有化合物の残基の少なくとも一種の基を示すが、これらの基は単独でも他の化合物の組み合わせからなる複合基であってもよい。
【００１５】
リン含有化合物としては、リン酸、ホスホコリン、ホスホエタノールアミン、の他ホスホセリンなどのアミノ酸類や核酸を含む化合物が例示される。
アミノ酸類として具体的には、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン、リジン、オルニチン、アルギニン、ヒスチジン、ヒドロキシリジン、システイン、シスチン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、プロリン、４−ヒドロキシプロリン、トリコロミン酸、イボテン酸、キスカリン酸、カナバニン、カイニン酸、ドモイ酸、１−アミノシクロプロパンカルボン酸、２−（メチレンシクロプロピル）グリシン、ヒポグリシンＡ、３−シアノアラニン、アベナ酸、ムギネ酸、ミモシン、レボドパ、β−ヒドロキシ−γ−メチルフルタミン酸、５−ヒドロキシトリプトファン、パントテン酸、ラミニン、ベタシアニンなどが例示される。また、タウリンなどスルホン酸基を有するアミン類なども挙げられる。通常、これらのアミノ酸の水酸基もしくはアミノ基を介してリン酸に結合している。
【００１６】
糖含有化合物としては特に制限はないが、通常は単糖類、二糖、三糖およびオリゴ糖類である。単糖類としてペントース、ヘキソース、デオキシヘキソース、ヘプトース、アミノ糖が挙げられ、具体的にはアラビノース、リボース、キシロース、グルコース、ガラクトース、マンノース、フルクトース、ラムノース、フコース、ジギトキソース、チマロース、オレアンドロース、ジギタロース、アピオース、ハマメロース、ストレプトース、セドヘプチュロース、コリオース、グルコサミン、ガラクトサミン、２−デオキシ−２−メチルアミノグルコースなどが例示される。オリゴ糖類として非還元性オリゴ糖、還元性オリゴ糖が挙げられ、具体的にはショ糖、トレハロース、ゲンチアノース、ラフィノース、乳糖、セルビオース、麦芽糖、ゲンチオビオースなどが例示される。これらの糖は、通常、還元末端のアノマー位を介して結合することができる。
【００１７】
以上のような本発明のスフィンゴ脂質誘導体（Ｉ）は、上記一般式（ＩＩ）で示される化合物にトリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）を導入してその第２級水酸基が保護された上記一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を得、ついでこの化合物にリン含有化合物、糖含有化合物、アミノ酸及び核酸から選ばれた少なくとも一種の化合物を反応させて、上記上記一般式（ＩＶ）で示される化合物を得、ついでこの化合物の第２級水酸基を脱保護することにより合成される。
ここで、上記一般式（ＩＩ）で示される化合物から上記一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を得る場合に、上記一般式（ＩＩ）で示される化合物の第１級水酸基をあらかじめ保護して上記一般式（ＩＩａ）で示される化合物を得、次いでこの化合物の第２級水酸基をトリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）で保護して上記一般式（ＩＩｂ）で示される化合物を合成し、しかる後この化合物の第１級水酸基を脱保護して上記一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を得る工程を経ることが好ましい。
【００１８】
本発明のスフィンゴ脂質誘導体の好ましい合成態様を反応工程式で示すと以下のようになる
【化１５】
（式中の各記号は前記と同じ）
【００１９】
以下、この反応工程を詳細に説明する。
まず、一般式（ＩＩ）で示される化合物の第１級水酸基をその保護基（Ｚ）で保護して一般式（ＩＩａ）で示される化合物を合成する。第１級水酸基の保護基を与える化合物としては、ベンゾイルクロリドもしくはベンゾイルブロマイド、パラメトキシベンゾイルクロリド、無水酢酸、アセチルクロライド、クロロアセチルクロライド、トリクロロアセチルクロライド、メトキシアセチルクロライド、フェノキシアセチルクロライド、パラフェニルベンゾイルクロライド等が使用されるが、酸および塩基への耐性および立体的障害による導入方法の観点からみてベンゾイルクロリドもしくはベンゾイルブロマイドを用いることが好ましい。
また、この合成反応の溶媒としては、ピリジン、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素などの溶媒を用いられ、必要じ応じ、さらにトリエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、４−ピロリジノピリジンなどの塩基を添加しておくことが望ましい。反応温度は、通常、−７８℃〜１５０℃、好ましくは、−４０℃〜１００℃の範囲である。
【００２０】
つぎに、一般式（ＩＩａ）で示される化合物の第２級水酸基をトリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）で保護した後、第１級水酸基を脱保護して一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を合成する。
上記トリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）を導入するには、例えば、塩化トリイソプロピルシリル、トリイソプロピルシリルトリフラートなどが用いられる。また、溶媒としては、ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリジノン、１，３−ジメチルイミダゾリジノン、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、ピリジン、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテルなどが用いられる。また必要に応じ、イミダゾール、２，６−ルチジン、トリエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、４−ピロリジノピリジンなどの塩基を添加することが好ましい。反応温度は、通常、−７８℃〜１５０℃、好ましくは−４５℃〜１００℃の範囲である。
第１級水酸基の脱保護は、通常、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドなどの塩基を用いることが好ましく、また溶媒としては、メタノール、エタノール、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテルなどが用いられる。反応温度は、通常、−７８℃〜１５０℃、好ましくは−３０℃〜８０℃の範囲である。
【００２１】
ついで、得られた一般式（ＩＩＩ）で示される化合物に、リン含有化合物又は糖含有化合物を反応させて第１級水酸基にＲ３基が導入された一般式（ＩＶ）で示される化合物を合成する。
この反応は、通常、トリフルオロメタンスルホン酸、シルバートリフラート、トリメチルシリルトリフラートなどのルイス酸もしくは、ピリジン、トリエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、４−ピロリジノピリジンなどの塩基を用いることが好ましく、また溶媒としては、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、アセトニトリル、イソプロパノール、１，４−ジオキサン、トルエン、ベンゼン、エーテル、テトラヒドロフランなどが用いられる。反応温度は、通常、−７８℃〜１００℃、好ましくは−７８℃〜３０℃の範囲である。
【００２２】
つぎに、一般式（ＩＶ）で示される化合物の第２級水酸基を脱保護することにより一般式（Ｉ）で示されるスフィンゴ脂質誘導体を高収率で得ることができる。
この反応は、テトラブチルオンモニウムフルオライド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、酢酸、トリフルオロ酢酸、パラトルエンスルホン酸、塩酸、フッ化水素のピリジン塩などを用いることが望ましく、溶媒として、水、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテルなどが用いられる。反応温度は、通常、―７８℃〜１００℃、好ましくは、−６０℃〜６０℃の範囲である。
【００２３】
前記合成工程で、最も重要なことは、出発原料である前記一般式（ＩＩ）で示される第２級水酸基の保護基としてトリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）を用いる必要がある点である。一般に、水酸基の保護基としては、テトラヒドロピラニル基（ＴＨＰ）、各種のシリル基などが広く知られており、前記した「Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９１，１０７４６．」においても、前記反応におけ原料の第２級水酸基の保護基として前者のテトラヒドロピラニル基（ＴＨＰ）を用いる実験例が記載されているが、その全収率は２７％程度である。これに対して、保護基としてトリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）を用いた、本発明方法においては全収率で４１．５％という、前記文献値の１．５倍強の値で所望のスフィンゴ脂質誘導体を純度良いキラルなものとして得ることができる。一般に、水酸基の保護基としてこれらの基が同様な作用効果を呈するものとされている点を斟酌すると、両者の収率の格段の相違は当業者の常識を越えた驚くべき知見といえよう。
本発明方法が、上記のような顕著な作用効果を奏する理由は現時点では定かではないが、トリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）がテロラヒドロピラニル基（ＴＨＰ）に比べ、基質の分解および副反応の抑制効果能に優れると共に立体を制御し、化合物の安定化を発現するためと考えられる。
【００２４】
【実施例】
以下、本発明につき実施例を挙げて説明するが、その要旨を越えない限り以下に限定されるものではない。
【００２５】
実施例［パルミトイルスフィンゴミエリンへの合成］
以下の反応工程式にしたがってパルミトイルスフィンゴミエリン（化合物５）を合成した。
【化１６】
（式中、Ｂｚはベンジル基を、ＴＩＰＳはトリイソプロピルシリル基を表す。）
【００２６】
［化合物１の合成］
化合物１は下記文献を参考に合成した。
Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，１９８８，３５４、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９９，２６８７、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１９９８，１７９
【００２７】
［化合物２の合成］
窒素気流下、前記で得た化合物１のピリジン：クロロホルム混合溶液（１：１）に、氷冷下、１．３当量の塩化ベンゾイルを滴下した後、０．５当量のジメチルアミノピリジンを加えた。同温にて３０分間撹拌後、室温にて一晩撹拌した。氷冷下、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、飽和塩化アンモニウム水溶液、水、飽和食塩水の順で洗浄した。分離した有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過した後、溶媒を減圧下にて留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、化合物２を収率７０％で得た。
【００２８】
［化合物３の合成］
窒素気流下、前記で得た化合物２の無水テトラヒドロフラン溶液に、氷冷下、２，６−ルチジンを加えた後、トリイソプロピルシリルトリフラートを滴下した。同温で３０分間撹拌した後、室温で２時間撹拌した。氷冷下、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えた後、酢酸エチルで抽出し、飽和塩化アンモニウム水溶液、水、飽和食塩水の順で洗浄した。分離した有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過した後、溶媒を減圧下にて留去し、化合物３を定量的に得た。
【００２９】
生成物は、１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより同定した。
【００３０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＴＭＳ、ＣＤＣｌ３）：８．００（２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．２、１．２Ｈｚ）、７．５４（１Ｈ、ｔｔ、Ｊ＝７．６、１．２Ｈｚ）、７．４１（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．８１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ）、５．７２（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．５、６．７Ｈｚ）、５．５１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．５、７．３Ｈｚ）、Ｈｚ）、４．５５（１Ｈ、ｍ）、４．４６（１Ｈ、ｍ）、４．４１−４．３７（２Ｈ、ｍ）、２．２１（２Ｈ、ｔｄ、Ｊ＝７．３、３．０Ｈｚ）、２．０５−２．０１（２Ｈ、ｍ）、１．５６−１．５２（２Ｈ、ｍ）、１．３８−１．１３（４６Ｈ、ｍ）、１．０９−１．００（１８Ｈ、ｍ）、０．８７（６Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）。
【００３１】
［化合物４の合成］
前記で得た化合物３のメタノール：クロロホルム混合溶液（１：１）に、氷冷下、２当量の無水炭酸カリウムを加え、室温にて一晩撹拌した。氷冷下、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、飽和塩化アンモニウム水溶液、水、飽和食塩水の順で洗浄した。分離した有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過した後、溶媒を減圧下にて留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、化合物４を収率９１％で得た。
【００３２】
生成物は、１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより同定した。
【００３３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＴＭＳ、ＣＤＣｌ３）：６．２７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）、５．７１（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．５、７．０Ｈｚ）、５．４７（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．５、７．３Ｈｚ）、４．５１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝７．３、３．０Ｈｚ）、３．９９−３．９１（１Ｈ、ｍ）、３．８５−３．７８（１Ｈ、ｍ）、３．６０−３．５２（２Ｈ、ｍ）、２．１９（２Ｈ、ｍ）、２．０４−２．０２（２Ｈ、ｍ）、１．６１（２Ｈ、ｍ）、１．３９−１．２０（４６Ｈ、ｍ）、１．０８−１．０２（１８Ｈ、ｍ）、０．８６（６Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．７Ｈｚ）。
【００３４】
［化合物５の合成］
窒素気流下、１．５当量の２−ブロモエチルジクロロホスフェートの無水ジエチルエーテル溶液に、氷冷下、当量のトリエチルアミン、前記で得た化合物４の無水ジエチルエーテル溶液を滴下した。同温にて３．５時間撹拌した後、０．５Ｎ塩化カリウム水溶液を加え、ジエチルエーテルで希釈し１時間撹拌した。ジエチルエーテルで抽出した後、水、飽和食塩水の順で洗浄した。分離した有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過した後、溶媒を減圧下にて留去した。得られた残渣をクロロホルム：イソプロピルアルコール：アセトニトリル（３：３：５）に溶解させ、３０％トリメチルアミン水溶液を加えて、５０℃にて４時間撹拌した。冷後、減圧下にて濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１）で精製し、化合物５を収率７４％で得た。
【００３５】
生成物は１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより同定した。
【００３６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）： ６．２７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）、５．７１（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．５、６．７Ｈｚ）、５．４７（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．５、７．３Ｈｚ）、４．５１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝７．３、３．０Ｈｚ）、３．９８−３．９３（１Ｈ、ｍ）、３．８５−３．７９（１Ｈ、ｍ）、３．６０−３．５２（２Ｈ、ｍ）、２．１９（２Ｈ、ｍ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）、２．０２（２Ｈ、ｍ）、１．６１（２Ｈ、ｍ）、１．３９−１．１８（４６Ｈ、ｍ）、１．０８−０．９９（１８Ｈ、ｍ）、０．８６（６Ｈ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）。
【００３７】
［化合物６の合成］
前記で得た化合物５の無水テトラヒドロフラン溶液に氷冷下、２当量のテトラｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（１．０Ｍテトラヒドロフラン溶液）を加え、室温にて４時間撹拌した。反応溶液を減圧下にて濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５：１）で精製し、化合物６を収率８８％で得た。全収率４１．５％。
【００３８】
生成物は１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより同定した。
【００３９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３−ＣＤ３ＯＤ、ＴＭＳ）：７．１９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）、５．６４（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．２、６．７Ｈｚ）、５．４０（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．２、７．６Ｈｚ）、４．３０−４．１６（２Ｈ、ｂｓ）４．１０（１Ｈ、ｍ）、４．００（１Ｈ、ｍ）、３．９２−３．８１（２Ｈ、ｍ）、３．２０（９Ｈ、ｓ）、１．９５（２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１４．６、７．０Ｈｚ）、１．５６−１．４８（２Ｈ、ｍ）、１．３２−１．１７（４６Ｈ、ｍ）、０．８４（６Ｈ、ｔ、６．７Ｈｚ）。
【００４０】
比較例
実施例において、第２級水酸基の保護基としてトリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）の代わりにテトラヒドロピラニル基（ＴＨＰ）を用いた以外は実施例と同様にしてパルミトイルスフィンゴミエリンを合成した。その全収率は２５〜２７％であった。
【発明の効果】
本発明によれば、高収率かつ高純度でスフィンゴ脂質誘導体を人工的に合成し得る工業的に有利なスフィンゴ脂質誘導体の製造方法が提供される。
本発明方法で得られるスフィンゴ脂質誘導体は、抗腫瘍剤、抗インフルエンザ剤等の医薬、保湿剤、育毛剤等の化粧品、農薬、工業薬品などに幅広く用いられる。
【発明の属する技術分野】
本発明は医薬、化粧品等として有用なスフィンゴ脂質誘導体の新規な製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
スフィンゴ脂質誘導体は、抗腫瘍剤、抗インフルエンザ剤等の医薬、保湿剤、育毛剤等の化粧品、農薬、工業薬品などに幅広く用いられている重要な化合物である。
このようなスフィンゴ脂質誘導体は一般に牛脳から抽出することにより得られていたが、最近の狂牛病（ＢＳＥ）の発症が社会的に問題となってからは、このような牛脳からの抽出法は好ましいものではなく、人工的な製造方法が強く要請されているのが現状である。
【０００３】
従来、スフィンゴ脂質誘導体の人工的合成法としては、セリンもしくはセリン誘導体を出発原料とするスフィンゴミエリンの合成法の開発が主として行われ、特に、スフィンゴミエリンの中間体であるガーナーアルデヒド、スフィンゴシン、セラミドなどの合成に関してはほぼ合成経路が確立される至っている（Ｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓ．Ｌｉｐｉｄｓ，１９９９，３）。
【０００４】
しかし、中間体であるスフィンゴシン、セラミドからのスフィンゴミエリンへの合成経路における高収率の製造方法がまだ確立されていない。
【０００５】
たとえば、Ｓｌｏｔｔｅらの報告した「Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９１，１０７４６．」には、下記反応工程式によりスフィンゴミエリンが得られるとされているが、その全収率は極めて低く工業的に満足すべき収率ではなく、また純度も不十分なものであった。
【化７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明はこのような従来技術の実状に鑑みなされたものであって、その目的は、高収率かつ高純度でスフィンゴ脂質誘導体を人工的に合成し得る工業的に有利なスフィンゴ脂質誘導体の製造方法を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、前記課題について鋭意研究を重ねた結果、特定な保護基を用いることにより高収率・高純度でスフィンゴ脂質誘導体が得られることを見出し本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明によれば以下の発明が提供される。
（１）下記一般式（ＩＩ）で示される化合物にトリイソプロピルシリル基を有する化合物を反応させてその第２級水酸基が保護された下記一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を得、ついでこの化合物にリン含有化合物又は糖含有化合物を反応させて、下記一般式（ＩＶ）で示される化合物を得、ついでこの化合物の第２級水酸基を脱保護して下記一般式（Ｉ）で示されるスフィンゴ脂質誘導体を得ることを特徴とするスフィンゴ脂質誘導体の製造方法。
【化８】
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。Ｒ３は、リン含有化合物の残基又は糖含有化合物の残基を表す。）
【化９】
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。）
【化１０】
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。ＴＩＰＳはトリイソプロピルシリル基を表す。）
【化１１】
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。Ｒ３は、リン含有化合物の残基又は糖含有化合物の残基を、ＴＩＰＳはトリイソプロピルシリル基を表す。）
（２） 上記一般式（ＩＩ）で示される化合物の第１級水酸基をあらかじめ保護して下記一般式（ＩＩａ）で示される化合物を得、次いでこの化合物の第２級水酸基をトリイソプロピルシリル基で保護して下記一般式（ＩＩｂ）で示される化合物を得た後、この化合物の第１級水酸基を脱保護して上記一般式（ＩＩ）で示される化合物を得る工程を含むことを特徴とする上記（１）に記載のスフィンゴ脂質誘導体の製造方法。
【化１２】
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。Ｚは第１級水酸基の保護基を表す。）
【化１３】
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。Ｚは第１級水酸基の保護基を、ＴＩＰＳはトリイソプロピルシリル基を表す。）
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明の目的生成物であるスフィンゴ脂質誘導体は、下記一般式（Ｉ）で表すことができる。
【化１４】
【０００９】
上記一般式におけるＲ１とＲ２は、具体的には、炭素数５０以下好ましくは炭素数２０以下の直鎖状または分岐状の未置換のアルキル基または未置換のアルケニル基を表し、またこれらのアルキル基及びアルケニル基は、ハロゲン、酸素、窒素、珪素、硫黄、燐、金属から選ばれる原子で置換されていてもよい。
【００１０】
未置換の直鎖状アルキルとしては、たとえばメチル基、エチル基、ｎープロピル基、ｎーブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニル基、デシル基、ウンデシル基、ドデシル基、テトラデシル基、ヘキサデシル基、オクタデシル基、エイコシル基等が挙げられ、未置換の直鎖状アルケニル基としては、たとえばエチレン基、ｎープロペン基、ｎーブテン基、ｎ−ペンテン基、ｎ−ヘキセン基、ヘプテン基、オクテン基、ノネン基、デセン基、ウンデセン基、ドデセン基、テトラデセン基、ヘキサデセン基、オクタデセン基、エイコセン基等を挙げることができる。
【００１１】
また、未置換の分岐状のアルキル基または置換アルケニル基を例示すれば、イソプロピル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔ−ブチル基、イソペンチル基、２−メチルブチル基、１−メチルブチル基、イソヘキシル基、３−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、１−メチルペンチル基、イソオクチル基、２−エチルヘキシル基、イソプロピレン基、イソブテン基、ｓｅｃ−ブテン基、ｔ−ブテン基、イソペンテン基、２−メチルブテン基、１−メチルブテン基、イソヘキセン基、３−メチルペンテン基、２−メチルペンテン基、１−メチルペンテン基、イソオクテン基、２−エチルヘキセン基のような基を挙げることができる。本発明で好ましく使用されるのは、炭素数１〜３６、更に好ましくは炭素数３〜２４、更に好ましく炭素数６〜１８の直鎖状又は分岐状のアルキル基又はアルケニル基である。
【００１２】
更に、本発明のアルキル基及びアルケニル基は、前記したように、ハロゲン、酸素、窒素、珪素、硫黄、燐、金属から選ばれる原子で置換されていてもよい。
【００１３】
ハロゲン原子としては、塩素、フッ素、ヨウ素、臭素から選ばれる原子が挙げられ、金属原子としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、ルビジウム、セシウムなどのアルカリ金属、ベリリウム、マグネシウム、カルシウム、ストロンチウム、バリウムなどのアルカリ土類金属、ホウ素、アルミニウム、チタン、錫、鉄などが挙げられる。
【００１４】
Ｒ３ はリン含有化合物の残基又は糖含有化合物の残基の少なくとも一種の基を示すが、これらの基は単独でも他の化合物の組み合わせからなる複合基であってもよい。
【００１５】
リン含有化合物としては、リン酸、ホスホコリン、ホスホエタノールアミン、の他ホスホセリンなどのアミノ酸類や核酸を含む化合物が例示される。
アミノ酸類として具体的には、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン、リジン、オルニチン、アルギニン、ヒスチジン、ヒドロキシリジン、システイン、シスチン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、プロリン、４−ヒドロキシプロリン、トリコロミン酸、イボテン酸、キスカリン酸、カナバニン、カイニン酸、ドモイ酸、１−アミノシクロプロパンカルボン酸、２−（メチレンシクロプロピル）グリシン、ヒポグリシンＡ、３−シアノアラニン、アベナ酸、ムギネ酸、ミモシン、レボドパ、β−ヒドロキシ−γ−メチルフルタミン酸、５−ヒドロキシトリプトファン、パントテン酸、ラミニン、ベタシアニンなどが例示される。また、タウリンなどスルホン酸基を有するアミン類なども挙げられる。通常、これらのアミノ酸の水酸基もしくはアミノ基を介してリン酸に結合している。
【００１６】
糖含有化合物としては特に制限はないが、通常は単糖類、二糖、三糖およびオリゴ糖類である。単糖類としてペントース、ヘキソース、デオキシヘキソース、ヘプトース、アミノ糖が挙げられ、具体的にはアラビノース、リボース、キシロース、グルコース、ガラクトース、マンノース、フルクトース、ラムノース、フコース、ジギトキソース、チマロース、オレアンドロース、ジギタロース、アピオース、ハマメロース、ストレプトース、セドヘプチュロース、コリオース、グルコサミン、ガラクトサミン、２−デオキシ−２−メチルアミノグルコースなどが例示される。オリゴ糖類として非還元性オリゴ糖、還元性オリゴ糖が挙げられ、具体的にはショ糖、トレハロース、ゲンチアノース、ラフィノース、乳糖、セルビオース、麦芽糖、ゲンチオビオースなどが例示される。これらの糖は、通常、還元末端のアノマー位を介して結合することができる。
【００１７】
以上のような本発明のスフィンゴ脂質誘導体（Ｉ）は、上記一般式（ＩＩ）で示される化合物にトリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）を導入してその第２級水酸基が保護された上記一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を得、ついでこの化合物にリン含有化合物、糖含有化合物、アミノ酸及び核酸から選ばれた少なくとも一種の化合物を反応させて、上記上記一般式（ＩＶ）で示される化合物を得、ついでこの化合物の第２級水酸基を脱保護することにより合成される。
ここで、上記一般式（ＩＩ）で示される化合物から上記一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を得る場合に、上記一般式（ＩＩ）で示される化合物の第１級水酸基をあらかじめ保護して上記一般式（ＩＩａ）で示される化合物を得、次いでこの化合物の第２級水酸基をトリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）で保護して上記一般式（ＩＩｂ）で示される化合物を合成し、しかる後この化合物の第１級水酸基を脱保護して上記一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を得る工程を経ることが好ましい。
【００１８】
本発明のスフィンゴ脂質誘導体の好ましい合成態様を反応工程式で示すと以下のようになる
【化１５】
【００１９】
以下、この反応工程を詳細に説明する。
まず、一般式（ＩＩ）で示される化合物の第１級水酸基をその保護基（Ｚ）で保護して一般式（ＩＩａ）で示される化合物を合成する。第１級水酸基の保護基を与える化合物としては、ベンゾイルクロリドもしくはベンゾイルブロマイド、パラメトキシベンゾイルクロリド、無水酢酸、アセチルクロライド、クロロアセチルクロライド、トリクロロアセチルクロライド、メトキシアセチルクロライド、フェノキシアセチルクロライド、パラフェニルベンゾイルクロライド等が使用されるが、酸および塩基への耐性および立体的障害による導入方法の観点からみてベンゾイルクロリドもしくはベンゾイルブロマイドを用いることが好ましい。
また、この合成反応の溶媒としては、ピリジン、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素などの溶媒を用いられ、必要じ応じ、さらにトリエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、４−ピロリジノピリジンなどの塩基を添加しておくことが望ましい。反応温度は、通常、−７８℃〜１５０℃、好ましくは、−４０℃〜１００℃の範囲である。
【００２０】
つぎに、一般式（ＩＩａ）で示される化合物の第２級水酸基をトリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）で保護した後、第１級水酸基を脱保護して一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を合成する。
上記トリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）を導入するには、例えば、塩化トリイソプロピルシリル、トリイソプロピルシリルトリフラートなどが用いられる。また、溶媒としては、ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリジノン、１，３−ジメチルイミダゾリジノン、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、ピリジン、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテルなどが用いられる。また必要に応じ、イミダゾール、２，６−ルチジン、トリエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、４−ピロリジノピリジンなどの塩基を添加することが好ましい。反応温度は、通常、−７８℃〜１５０℃、好ましくは−４５℃〜１００℃の範囲である。
第１級水酸基の脱保護は、通常、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドなどの塩基を用いることが好ましく、また溶媒としては、メタノール、エタノール、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテルなどが用いられる。反応温度は、通常、−７８℃〜１５０℃、好ましくは−３０℃〜８０℃の範囲である。
【００２１】
ついで、得られた一般式（ＩＩＩ）で示される化合物に、リン含有化合物又は糖含有化合物を反応させて第１級水酸基にＲ３基が導入された一般式（ＩＶ）で示される化合物を合成する。
この反応は、通常、トリフルオロメタンスルホン酸、シルバートリフラート、トリメチルシリルトリフラートなどのルイス酸もしくは、ピリジン、トリエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、４−ピロリジノピリジンなどの塩基を用いることが好ましく、また溶媒としては、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、アセトニトリル、イソプロパノール、１，４−ジオキサン、トルエン、ベンゼン、エーテル、テトラヒドロフランなどが用いられる。反応温度は、通常、−７８℃〜１００℃、好ましくは−７８℃〜３０℃の範囲である。
【００２２】
つぎに、一般式（ＩＶ）で示される化合物の第２級水酸基を脱保護することにより一般式（Ｉ）で示されるスフィンゴ脂質誘導体を高収率で得ることができる。
この反応は、テトラブチルオンモニウムフルオライド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、酢酸、トリフルオロ酢酸、パラトルエンスルホン酸、塩酸、フッ化水素のピリジン塩などを用いることが望ましく、溶媒として、水、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテルなどが用いられる。反応温度は、通常、―７８℃〜１００℃、好ましくは、−６０℃〜６０℃の範囲である。
【００２３】
前記合成工程で、最も重要なことは、出発原料である前記一般式（ＩＩ）で示される第２級水酸基の保護基としてトリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）を用いる必要がある点である。一般に、水酸基の保護基としては、テトラヒドロピラニル基（ＴＨＰ）、各種のシリル基などが広く知られており、前記した「Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９１，１０７４６．」においても、前記反応におけ原料の第２級水酸基の保護基として前者のテトラヒドロピラニル基（ＴＨＰ）を用いる実験例が記載されているが、その全収率は２７％程度である。これに対して、保護基としてトリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）を用いた、本発明方法においては全収率で４１．５％という、前記文献値の１．５倍強の値で所望のスフィンゴ脂質誘導体を純度良いキラルなものとして得ることができる。一般に、水酸基の保護基としてこれらの基が同様な作用効果を呈するものとされている点を斟酌すると、両者の収率の格段の相違は当業者の常識を越えた驚くべき知見といえよう。
本発明方法が、上記のような顕著な作用効果を奏する理由は現時点では定かではないが、トリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）がテロラヒドロピラニル基（ＴＨＰ）に比べ、基質の分解および副反応の抑制効果能に優れると共に立体を制御し、化合物の安定化を発現するためと考えられる。
【００２４】
【実施例】
以下、本発明につき実施例を挙げて説明するが、その要旨を越えない限り以下に限定されるものではない。
【００２５】
実施例［パルミトイルスフィンゴミエリンへの合成］
以下の反応工程式にしたがってパルミトイルスフィンゴミエリン（化合物５）を合成した。
【化１６】
【００２６】
［化合物１の合成］
化合物１は下記文献を参考に合成した。
Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，１９８８，３５４、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９９，２６８７、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１９９８，１７９
【００２７】
［化合物２の合成］
窒素気流下、前記で得た化合物１のピリジン：クロロホルム混合溶液（１：１）に、氷冷下、１．３当量の塩化ベンゾイルを滴下した後、０．５当量のジメチルアミノピリジンを加えた。同温にて３０分間撹拌後、室温にて一晩撹拌した。氷冷下、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、飽和塩化アンモニウム水溶液、水、飽和食塩水の順で洗浄した。分離した有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過した後、溶媒を減圧下にて留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、化合物２を収率７０％で得た。
【００２８】
［化合物３の合成］
窒素気流下、前記で得た化合物２の無水テトラヒドロフラン溶液に、氷冷下、２，６−ルチジンを加えた後、トリイソプロピルシリルトリフラートを滴下した。同温で３０分間撹拌した後、室温で２時間撹拌した。氷冷下、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えた後、酢酸エチルで抽出し、飽和塩化アンモニウム水溶液、水、飽和食塩水の順で洗浄した。分離した有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過した後、溶媒を減圧下にて留去し、化合物３を定量的に得た。
【００２９】
生成物は、１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより同定した。
【００３０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＴＭＳ、ＣＤＣｌ３）：８．００（２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．２、１．２Ｈｚ）、７．５４（１Ｈ、ｔｔ、Ｊ＝７．６、１．２Ｈｚ）、７．４１（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．８１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ）、５．７２（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．５、６．７Ｈｚ）、５．５１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．５、７．３Ｈｚ）、Ｈｚ）、４．５５（１Ｈ、ｍ）、４．４６（１Ｈ、ｍ）、４．４１−４．３７（２Ｈ、ｍ）、２．２１（２Ｈ、ｔｄ、Ｊ＝７．３、３．０Ｈｚ）、２．０５−２．０１（２Ｈ、ｍ）、１．５６−１．５２（２Ｈ、ｍ）、１．３８−１．１３（４６Ｈ、ｍ）、１．０９−１．００（１８Ｈ、ｍ）、０．８７（６Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）。
【００３１】
［化合物４の合成］
前記で得た化合物３のメタノール：クロロホルム混合溶液（１：１）に、氷冷下、２当量の無水炭酸カリウムを加え、室温にて一晩撹拌した。氷冷下、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、飽和塩化アンモニウム水溶液、水、飽和食塩水の順で洗浄した。分離した有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過した後、溶媒を減圧下にて留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、化合物４を収率９１％で得た。
【００３２】
生成物は、１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより同定した。
【００３３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＴＭＳ、ＣＤＣｌ３）：６．２７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）、５．７１（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．５、７．０Ｈｚ）、５．４７（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．５、７．３Ｈｚ）、４．５１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝７．３、３．０Ｈｚ）、３．９９−３．９１（１Ｈ、ｍ）、３．８５−３．７８（１Ｈ、ｍ）、３．６０−３．５２（２Ｈ、ｍ）、２．１９（２Ｈ、ｍ）、２．０４−２．０２（２Ｈ、ｍ）、１．６１（２Ｈ、ｍ）、１．３９−１．２０（４６Ｈ、ｍ）、１．０８−１．０２（１８Ｈ、ｍ）、０．８６（６Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．７Ｈｚ）。
【００３４】
［化合物５の合成］
窒素気流下、１．５当量の２−ブロモエチルジクロロホスフェートの無水ジエチルエーテル溶液に、氷冷下、当量のトリエチルアミン、前記で得た化合物４の無水ジエチルエーテル溶液を滴下した。同温にて３．５時間撹拌した後、０．５Ｎ塩化カリウム水溶液を加え、ジエチルエーテルで希釈し１時間撹拌した。ジエチルエーテルで抽出した後、水、飽和食塩水の順で洗浄した。分離した有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過した後、溶媒を減圧下にて留去した。得られた残渣をクロロホルム：イソプロピルアルコール：アセトニトリル（３：３：５）に溶解させ、３０％トリメチルアミン水溶液を加えて、５０℃にて４時間撹拌した。冷後、減圧下にて濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１）で精製し、化合物５を収率７４％で得た。
【００３５】
生成物は１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより同定した。
【００３６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）： ６．２７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）、５．７１（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．５、６．７Ｈｚ）、５．４７（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．５、７．３Ｈｚ）、４．５１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝７．３、３．０Ｈｚ）、３．９８−３．９３（１Ｈ、ｍ）、３．８５−３．７９（１Ｈ、ｍ）、３．６０−３．５２（２Ｈ、ｍ）、２．１９（２Ｈ、ｍ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）、２．０２（２Ｈ、ｍ）、１．６１（２Ｈ、ｍ）、１．３９−１．１８（４６Ｈ、ｍ）、１．０８−０．９９（１８Ｈ、ｍ）、０．８６（６Ｈ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）。
【００３７】
［化合物６の合成］
前記で得た化合物５の無水テトラヒドロフラン溶液に氷冷下、２当量のテトラｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（１．０Ｍテトラヒドロフラン溶液）を加え、室温にて４時間撹拌した。反応溶液を減圧下にて濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５：１）で精製し、化合物６を収率８８％で得た。全収率４１．５％。
【００３８】
生成物は１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより同定した。
【００３９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３−ＣＤ３ＯＤ、ＴＭＳ）：７．１９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）、５．６４（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．２、６．７Ｈｚ）、５．４０（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．２、７．６Ｈｚ）、４．３０−４．１６（２Ｈ、ｂｓ）４．１０（１Ｈ、ｍ）、４．００（１Ｈ、ｍ）、３．９２−３．８１（２Ｈ、ｍ）、３．２０（９Ｈ、ｓ）、１．９５（２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１４．６、７．０Ｈｚ）、１．５６−１．４８（２Ｈ、ｍ）、１．３２−１．１７（４６Ｈ、ｍ）、０．８４（６Ｈ、ｔ、６．７Ｈｚ）。
【００４０】
比較例
実施例において、第２級水酸基の保護基としてトリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）の代わりにテトラヒドロピラニル基（ＴＨＰ）を用いた以外は実施例と同様にしてパルミトイルスフィンゴミエリンを合成した。その全収率は２５〜２７％であった。
【発明の効果】
本発明によれば、高収率かつ高純度でスフィンゴ脂質誘導体を人工的に合成し得る工業的に有利なスフィンゴ脂質誘導体の製造方法が提供される。
本発明方法で得られるスフィンゴ脂質誘導体は、抗腫瘍剤、抗インフルエンザ剤等の医薬、保湿剤、育毛剤等の化粧品、農薬、工業薬品などに幅広く用いられる。
Claims (2)
- 下記一般式（ＩＩ）で示される化合物とトリイソプロピルシリル基を有する化合物を反応させてその第２級水酸基が保護された下記一般式（ＩＩＩ）で示される化合物を得、ついでこの化合物にリン含有化合物又は糖含有化合物を反応させて、下記一般式（ＩＶ）で示される化合物を得、ついでこの化合物の第２級水酸基を脱保護して下記一般式（Ｉ）で示されるスフィンゴ脂質誘導体を得ることを特徴とするスフィンゴ脂質誘導体の製造方法。
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一でも、異なっていてもよい。Ｒ３は、リン含有化合物の残基又は糖含有化合物の残基を表す。）
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。）
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。ＴＩＰＳはトリイソプロピルシリル基を表す。）
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。Ｒ３は、リン含有化合物の残基又は糖含有化合物の残基を、ＴＩＰＳはトリイソプロピルシリル基を表す。） - 上記一般式（ＩＩ）で示される化合物の第１級水酸基をあらかじめ保護して下記一般式（ＩＩａ）で示される化合物を得、次いでこの化合物の第２級水酸基をトリイソプロピルシリル基で保護して下記一般式（ＩＩｂ）で示される化合物を得た後、この化合物の第１級水酸基を脱保護して上記一般式（ＩＩＩ）で示される化合物得る工程を含むことを特徴とする請求項１に記載のスフィンゴ脂質誘導体の製造方法。
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。Ｚは第１級水酸基の保護基を表す。）
（式中、Ｒ１とＲ２は、置換されていてもよい、アルキル基又はアルケニル基であり、Ｒ１とＲ２は、同一であっても、異なっていてもよい。Ｚは第１級水酸基の保護基を、ＴＩＰＳはトリイソプロピルシリル基を表す。）
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2002
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