JP2003521900A5 - - Google Patents
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Description
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の（a）〜（d）：
（a） SEQ ID NO: 2のアミノ酸配列、SEQ ID NO: 6のアミノ酸配列、およびSEQ ID NO: 8のアミノ酸配列からなる群から選択されるタンパク質；
（b） SEQ ID NO: 2により示されるアミノ酸配列、SEQ ID NO: 6により示されるアミノ酸配列、またはSEQ ID NO: 8により示されるアミノ酸配列と少なくとも45％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質；
（c） SEQ ID NO: 2により示されるアミノ酸配列、6により示されるアミノ酸配列、またはSEQ ID NO: 8により示されるアミノ酸配列中に、1またはそれ以上のアミノ酸置換、付加、および／または欠失を有するタンパク質；
（d） SEQ ID NO: 2により示されるアミノ酸配列、SEQ ID NO: 6により示されるアミノ酸配列、またはSEQ ID NO: 8により示されるアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列に相補的なヌクレオチド配列と、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズ可能なヌクレオチド配列によりコードされるタンパク質；
のいずれか一つであって、FLT-3受容体に対してアゴニスト活性を有する、タンパク質。
【請求項２】
マメ科植物（legume）由来である、請求項1に記載のタンパク質。
【請求項３】
マメ科植物がインゲンマメ（Phaseolus vulgaris）である、請求項2に記載のタンパク質。
【請求項４】
マメ科植物がフジマメ（Dolichos lab lab）である、請求項2に記載のタンパク質。
【請求項５】
マメ科植物がクズイモ（Sphenostylis stenocarpa）である、請求項2に記載のタンパク質。
【請求項６】
タンパク質が、FLT-3受容体に対するアゴニスト活性の結果として、前駆細胞保存活性を示す、請求項1〜5のいずれか1項に記載のタンパク質。
【請求項７】
タンパク質が、FRILファミリーのメンバーの一つに由来する第一の部分と、第一の部分の起源以外のFRILファミリーのメンバーに由来する第二の部分との融合タンパク質である、請求項1に記載のタンパク質。
【請求項８】
以下の（a）〜（d）：
（a） SEQ ID NO: 1により示されるヌクレオチド配列、SEQ ID NO: 3により示されるヌクレオチド配列、SEQ ID NO: 5により示されるヌクレオチド配列、またはSEQ ID NO: 7により示されるヌクレオチド配列からなる核酸；
（b） SEQ ID NO: 1により示されるヌクレオチド配列、SEQ ID NO: 3により示されるヌクレオチド配列、SEQ ID NO: 5により示されるヌクレオチド配列、またはSEQ ID NO: 7により示されるヌクレオチド配列と、少なくとも50％のヌクレオチド配列同一性を有し、FLT-3受容体に対するアゴニスト活性を有するタンパク質をコードする、核酸；
（c） SEQ ID NO: 2により示されるアミノ酸配列、SEQ ID NO: 6により示されるアミノ酸配列、またはSEQ ID NO: 8により示されるアミノ酸配列中のアミノ酸の1またはそれ以上の置換、付加、および／または欠失を有するタンパク質であってFLT-3受容体に対するアゴニスト活性を有するものをコードする、核酸；
（d） FLT-3受容体に対するアゴニスト活性を有するタンパク質をコードするSEQ ID NO: 1のヌクレオチド配列、SEQ ID NO: 3のヌクレオチド配列、SEQ ID NO: 5のヌクレオチド配列、またはSEQ ID NO: 7のヌクレオチド配列と相補的なヌクレオチド配列と、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズ可能な核酸
のいずれか一つである、核酸。
【請求項９】
マメ科植物（legume）由来である、請求項8に記載の核酸。
【請求項１０】
マメ科植物がインゲンマメ（Phaseolus vulgaris）である、請求項9に記載の核酸。
【請求項１１】
マメ科植物がフジマメ（Dolichos lab lab）である、請求項9に記載の核酸。
【請求項１２】
マメ科植物がクズイモ（Sphenostylis stenocarpa）である、請求項9に記載の核酸。
【請求項１３】
タンパク質が、FLT-3受容体に対するアゴニスト活性の結果として、前駆細胞保存活性を示す、請求項8〜12のいずれか1項に記載の核酸。
【請求項１４】
請求項1〜7のいずれか1項に記載のタンパク質を含む組成物。
【請求項１５】
造血前駆細胞枯渇活性を有する療法処置で患者を処置する前に、患者における療法処置の造血前駆細胞枯渇活性を軽減するかまたは低減するための、請求項1〜7に記載されるタンパク質を含む医薬組成物。
【請求項１６】
患者がヒトである、請求項15に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
患者が癌を有する、請求項16に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
療法処置が、放射線療法、化学療法、または放射線療法および化学療法の組み合わせからなる群より選択される、請求項17に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
化学療法が、シタラビン、ドキソルビシン、および5-フルオロウラシルからなる群より選択される、請求項18に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前駆細胞集団をin vitroで単離する方法であって、請求項1〜7に記載の複数のタンパク質と細胞集団とをin vitroで接触させ、そして非結合細胞を取り除くことを含み、ここで請求項1〜7に記載されたタンパク質に結合している細胞が、前駆細胞の単離集団である、前記方法。
【請求項２１】
前駆細胞の単離集団がヒト由来である、請求項20に記載の方法。
【請求項２２】
請求項1〜7に記載されたタンパク質が検出可能に標識されている、請求項20に記載の方法。
【請求項２３】
請求項1〜7に記載されたタンパク質が固体支持体上に固定されている、請求項20に記載の方法。
【請求項２４】
固体支持体がビーズである、請求項23に記載の方法。
【請求項２５】
ビーズが磁気ビーズである、請求項24に記載の方法。
【請求項２６】
磁気ビーズ上に固定された請求項1〜7に記載されたタンパク質と接触させた細胞集団に、磁石を適用することによって、非結合細胞が取り除かれる、請求項25に記載の方法。
【請求項２７】
磁石を適用している間、磁気ビーズ上に固定された請求項1〜7に記載されたタンパク質に結合している細胞集団を、生理学的に許容しうる溶液でリンスする、請求項26に記載の方法。
【請求項２８】
固体支持体が組織培養プレートの底である、請求項23に記載の方法。
【請求項２９】
単離前駆細胞集団が、造血前駆細胞集団である、請求項20に記載の方法。
【請求項３０】
細胞集団が、全血、臍帯血、骨髄細胞、および胎児肝細胞からなる群より選択される、請求項29に記載の方法。
【請求項３１】
細胞集団が、CD11b、CD11c、およびCD38からなる群より選択される細胞表面分子を発現しない選別細胞集団であり、請求項20に記載の方法。
【請求項３２】
選別細胞集団が、フローサイトメトリーによって、または磁気ビーズ選択によって、選別される、請求項31に記載の方法。
【請求項３３】
請求項20に記載の方法により単離された前駆細胞の単離集団。
【請求項３４】
単離前駆細胞集団がヒト由来である、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項３５】
単離前駆細胞集団がCD34を発現しない、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項３６】
単離前駆細胞集団の細胞が、FLK1、FLT1、FLT3、FLT4、およびKitからなる群より選択される受容体チロシンキナーゼを発現する、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項３７】
単離前駆細胞集団の細胞が、CD11bおよびCD11cからなる群より選択される細胞表面分子を発現する、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項３８】
単離前駆細胞集団の細胞がFLT3を発現する、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項３９】
単離前駆細胞集団の細胞が、血管芽細胞、間充織幹細胞、骨前駆細胞、肝前駆細胞、内皮前駆細胞、造血前駆細胞、胚性幹細胞、脳前駆細胞、および樹状前駆細胞からなる群より選択される、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項４０】
単離前駆細胞集団の細胞が造血前駆細胞である、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項４１】
動物の生存を可能にするのに十分な造血前駆細胞集団を欠く動物への単離前駆細胞集団の移植が、該動物を再構成し、移植された動物が生き延びる、請求項40に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項４２】
少なくとも1つの前駆細胞を含む細胞集団を、有効量の請求項1〜7に記載されたタンパク質と、有効な期間接触させることを含み、集団中の前駆細胞を静止状態にする、ex vivoで前駆細胞を保存する方法。
【請求項４３】
前駆細胞がヒト由来である、請求項42に記載の方法。
【請求項４４】
細胞集団が骨髄細胞である、請求項42に記載の方法。
【請求項４５】
細胞集団中の非前駆細胞が分化するかまたは死ぬ、請求項42に記載の方法。
【請求項４６】
造血前駆細胞枯渇活性を有する療法処置で癌患者を処置する前に、細胞集団が癌患者から除去される、請求項42に記載の方法。
【請求項４７】
療法処置が、放射線療法、化学療法、または放射線療法および化学療法の組み合わせからなる群より選択される、請求項46に記載の方法。
【請求項４８】
化学療法が、シタラビン、ドキソルビシン、および5-フルオロウラシルからなる群より選択される、請求項47に記載の方法。
【請求項４９】
患者中の前駆細胞を静止状態にし、in vivoで前駆細胞を保存するための、請求項1〜7に記載されたタンパク質を含む医薬組成物。
【請求項５０】
患者がヒトである、請求項49に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
患者が癌患者である、請求項50に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
造血前駆細胞枯渇活性を有する療法処置で患者を処置する前に、請求項1〜7に記載されたタンパク質が投与される、請求項50に記載の医薬組成物。
【請求項５３】
前駆細胞をin vitroで同定する方法であって、請求項1〜7に記載されたタンパク質と候補細胞とをin vitroで接触させることを含み、請求項1〜7に記載されたタンパク質へ候補細胞が結合する場合に候補細胞を前駆細胞と同定する、前記方法。
【請求項５４】
候補細胞が細胞集団中にある、請求項53に記載の方法。
【請求項５５】
候補細胞がヒト由来である、請求項53に記載の方法。
【請求項５６】
請求項53に記載の方法により同定された前駆細胞。
【請求項５７】
前駆細胞保存因子の請求項1〜7に記載されたタンパク質の組成物を同定する方法であって、候補化合物を、FLT3受容体のグリコシル化細胞外ドメインと接触させることを含み、FLT3受容体の細胞外ドメインのグリコシル化パターンが、正常にグリコシル化されているFLT3受容体の細胞外ドメインのグリコシル化パターンと同一であり、FLT3受容体のグリコシル化細胞外ドメインに結合する候補化合物が、請求項1〜7に記載されたタンパク質と同定される、前記方法。
【請求項５８】
候補化合物がレクチンである、請求項57に記載の方法。
【請求項５９】
レクチンが合成レクチンである、請求項58に記載の方法。
【請求項６０】
レクチンがマメ科植物由来である、請求項58に記載の方法。
【請求項６１】
請求項57の方法によって同定される、請求項1〜7に記載された本質的に純粋なタンパク質。
【請求項１】
以下の（a）〜（d）：
（a） SEQ ID NO: 2のアミノ酸配列、SEQ ID NO: 6のアミノ酸配列、およびSEQ ID NO: 8のアミノ酸配列からなる群から選択されるタンパク質；
（b） SEQ ID NO: 2により示されるアミノ酸配列、SEQ ID NO: 6により示されるアミノ酸配列、またはSEQ ID NO: 8により示されるアミノ酸配列と少なくとも45％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質；
（c） SEQ ID NO: 2により示されるアミノ酸配列、6により示されるアミノ酸配列、またはSEQ ID NO: 8により示されるアミノ酸配列中に、1またはそれ以上のアミノ酸置換、付加、および／または欠失を有するタンパク質；
（d） SEQ ID NO: 2により示されるアミノ酸配列、SEQ ID NO: 6により示されるアミノ酸配列、またはSEQ ID NO: 8により示されるアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列に相補的なヌクレオチド配列と、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズ可能なヌクレオチド配列によりコードされるタンパク質；
のいずれか一つであって、FLT-3受容体に対してアゴニスト活性を有する、タンパク質。
【請求項２】
マメ科植物（legume）由来である、請求項1に記載のタンパク質。
【請求項３】
マメ科植物がインゲンマメ（Phaseolus vulgaris）である、請求項2に記載のタンパク質。
【請求項４】
マメ科植物がフジマメ（Dolichos lab lab）である、請求項2に記載のタンパク質。
【請求項５】
マメ科植物がクズイモ（Sphenostylis stenocarpa）である、請求項2に記載のタンパク質。
【請求項６】
タンパク質が、FLT-3受容体に対するアゴニスト活性の結果として、前駆細胞保存活性を示す、請求項1〜5のいずれか1項に記載のタンパク質。
【請求項７】
タンパク質が、FRILファミリーのメンバーの一つに由来する第一の部分と、第一の部分の起源以外のFRILファミリーのメンバーに由来する第二の部分との融合タンパク質である、請求項1に記載のタンパク質。
【請求項８】
以下の（a）〜（d）：
（a） SEQ ID NO: 1により示されるヌクレオチド配列、SEQ ID NO: 3により示されるヌクレオチド配列、SEQ ID NO: 5により示されるヌクレオチド配列、またはSEQ ID NO: 7により示されるヌクレオチド配列からなる核酸；
（b） SEQ ID NO: 1により示されるヌクレオチド配列、SEQ ID NO: 3により示されるヌクレオチド配列、SEQ ID NO: 5により示されるヌクレオチド配列、またはSEQ ID NO: 7により示されるヌクレオチド配列と、少なくとも50％のヌクレオチド配列同一性を有し、FLT-3受容体に対するアゴニスト活性を有するタンパク質をコードする、核酸；
（c） SEQ ID NO: 2により示されるアミノ酸配列、SEQ ID NO: 6により示されるアミノ酸配列、またはSEQ ID NO: 8により示されるアミノ酸配列中のアミノ酸の1またはそれ以上の置換、付加、および／または欠失を有するタンパク質であってFLT-3受容体に対するアゴニスト活性を有するものをコードする、核酸；
（d） FLT-3受容体に対するアゴニスト活性を有するタンパク質をコードするSEQ ID NO: 1のヌクレオチド配列、SEQ ID NO: 3のヌクレオチド配列、SEQ ID NO: 5のヌクレオチド配列、またはSEQ ID NO: 7のヌクレオチド配列と相補的なヌクレオチド配列と、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズ可能な核酸
のいずれか一つである、核酸。
【請求項９】
マメ科植物（legume）由来である、請求項8に記載の核酸。
【請求項１０】
マメ科植物がインゲンマメ（Phaseolus vulgaris）である、請求項9に記載の核酸。
【請求項１１】
マメ科植物がフジマメ（Dolichos lab lab）である、請求項9に記載の核酸。
【請求項１２】
マメ科植物がクズイモ（Sphenostylis stenocarpa）である、請求項9に記載の核酸。
【請求項１３】
タンパク質が、FLT-3受容体に対するアゴニスト活性の結果として、前駆細胞保存活性を示す、請求項8〜12のいずれか1項に記載の核酸。
【請求項１４】
請求項1〜7のいずれか1項に記載のタンパク質を含む組成物。
【請求項１５】
造血前駆細胞枯渇活性を有する療法処置で患者を処置する前に、患者における療法処置の造血前駆細胞枯渇活性を軽減するかまたは低減するための、請求項1〜7に記載されるタンパク質を含む医薬組成物。
【請求項１６】
患者がヒトである、請求項15に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
患者が癌を有する、請求項16に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
療法処置が、放射線療法、化学療法、または放射線療法および化学療法の組み合わせからなる群より選択される、請求項17に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
化学療法が、シタラビン、ドキソルビシン、および5-フルオロウラシルからなる群より選択される、請求項18に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前駆細胞集団をin vitroで単離する方法であって、請求項1〜7に記載の複数のタンパク質と細胞集団とをin vitroで接触させ、そして非結合細胞を取り除くことを含み、ここで請求項1〜7に記載されたタンパク質に結合している細胞が、前駆細胞の単離集団である、前記方法。
【請求項２１】
前駆細胞の単離集団がヒト由来である、請求項20に記載の方法。
【請求項２２】
請求項1〜7に記載されたタンパク質が検出可能に標識されている、請求項20に記載の方法。
【請求項２３】
請求項1〜7に記載されたタンパク質が固体支持体上に固定されている、請求項20に記載の方法。
【請求項２４】
固体支持体がビーズである、請求項23に記載の方法。
【請求項２５】
ビーズが磁気ビーズである、請求項24に記載の方法。
【請求項２６】
磁気ビーズ上に固定された請求項1〜7に記載されたタンパク質と接触させた細胞集団に、磁石を適用することによって、非結合細胞が取り除かれる、請求項25に記載の方法。
【請求項２７】
磁石を適用している間、磁気ビーズ上に固定された請求項1〜7に記載されたタンパク質に結合している細胞集団を、生理学的に許容しうる溶液でリンスする、請求項26に記載の方法。
【請求項２８】
固体支持体が組織培養プレートの底である、請求項23に記載の方法。
【請求項２９】
単離前駆細胞集団が、造血前駆細胞集団である、請求項20に記載の方法。
【請求項３０】
細胞集団が、全血、臍帯血、骨髄細胞、および胎児肝細胞からなる群より選択される、請求項29に記載の方法。
【請求項３１】
細胞集団が、CD11b、CD11c、およびCD38からなる群より選択される細胞表面分子を発現しない選別細胞集団であり、請求項20に記載の方法。
【請求項３２】
選別細胞集団が、フローサイトメトリーによって、または磁気ビーズ選択によって、選別される、請求項31に記載の方法。
【請求項３３】
請求項20に記載の方法により単離された前駆細胞の単離集団。
【請求項３４】
単離前駆細胞集団がヒト由来である、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項３５】
単離前駆細胞集団がCD34を発現しない、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項３６】
単離前駆細胞集団の細胞が、FLK1、FLT1、FLT3、FLT4、およびKitからなる群より選択される受容体チロシンキナーゼを発現する、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項３７】
単離前駆細胞集団の細胞が、CD11bおよびCD11cからなる群より選択される細胞表面分子を発現する、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項３８】
単離前駆細胞集団の細胞がFLT3を発現する、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項３９】
単離前駆細胞集団の細胞が、血管芽細胞、間充織幹細胞、骨前駆細胞、肝前駆細胞、内皮前駆細胞、造血前駆細胞、胚性幹細胞、脳前駆細胞、および樹状前駆細胞からなる群より選択される、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項４０】
単離前駆細胞集団の細胞が造血前駆細胞である、請求項33に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項４１】
動物の生存を可能にするのに十分な造血前駆細胞集団を欠く動物への単離前駆細胞集団の移植が、該動物を再構成し、移植された動物が生き延びる、請求項40に記載の単離前駆細胞集団。
【請求項４２】
少なくとも1つの前駆細胞を含む細胞集団を、有効量の請求項1〜7に記載されたタンパク質と、有効な期間接触させることを含み、集団中の前駆細胞を静止状態にする、ex vivoで前駆細胞を保存する方法。
【請求項４３】
前駆細胞がヒト由来である、請求項42に記載の方法。
【請求項４４】
細胞集団が骨髄細胞である、請求項42に記載の方法。
【請求項４５】
細胞集団中の非前駆細胞が分化するかまたは死ぬ、請求項42に記載の方法。
【請求項４６】
造血前駆細胞枯渇活性を有する療法処置で癌患者を処置する前に、細胞集団が癌患者から除去される、請求項42に記載の方法。
【請求項４７】
療法処置が、放射線療法、化学療法、または放射線療法および化学療法の組み合わせからなる群より選択される、請求項46に記載の方法。
【請求項４８】
化学療法が、シタラビン、ドキソルビシン、および5-フルオロウラシルからなる群より選択される、請求項47に記載の方法。
【請求項４９】
患者中の前駆細胞を静止状態にし、in vivoで前駆細胞を保存するための、請求項1〜7に記載されたタンパク質を含む医薬組成物。
【請求項５０】
患者がヒトである、請求項49に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
患者が癌患者である、請求項50に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
造血前駆細胞枯渇活性を有する療法処置で患者を処置する前に、請求項1〜7に記載されたタンパク質が投与される、請求項50に記載の医薬組成物。
【請求項５３】
前駆細胞をin vitroで同定する方法であって、請求項1〜7に記載されたタンパク質と候補細胞とをin vitroで接触させることを含み、請求項1〜7に記載されたタンパク質へ候補細胞が結合する場合に候補細胞を前駆細胞と同定する、前記方法。
【請求項５４】
候補細胞が細胞集団中にある、請求項53に記載の方法。
【請求項５５】
候補細胞がヒト由来である、請求項53に記載の方法。
【請求項５６】
請求項53に記載の方法により同定された前駆細胞。
【請求項５７】
前駆細胞保存因子の請求項1〜7に記載されたタンパク質の組成物を同定する方法であって、候補化合物を、FLT3受容体のグリコシル化細胞外ドメインと接触させることを含み、FLT3受容体の細胞外ドメインのグリコシル化パターンが、正常にグリコシル化されているFLT3受容体の細胞外ドメインのグリコシル化パターンと同一であり、FLT3受容体のグリコシル化細胞外ドメインに結合する候補化合物が、請求項1〜7に記載されたタンパク質と同定される、前記方法。
【請求項５８】
候補化合物がレクチンである、請求項57に記載の方法。
【請求項５９】
レクチンが合成レクチンである、請求項58に記載の方法。
【請求項６０】
レクチンがマメ科植物由来である、請求項58に記載の方法。
【請求項６１】
請求項57の方法によって同定される、請求項1〜7に記載された本質的に純粋なタンパク質。
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