JP2003509019A - 細孔を生物材料中に導入するための装置 - Google Patents

細孔を生物材料中に導入するための装置

Info

Publication number
JP2003509019A
JP2003509019A JP2001522380A JP2001522380A JP2003509019A JP 2003509019 A JP2003509019 A JP 2003509019A JP 2001522380 A JP2001522380 A JP 2001522380A JP 2001522380 A JP2001522380 A JP 2001522380A JP 2003509019 A JP2003509019 A JP 2003509019A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
magnetic field
sample
alternating
supplied
coils
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2001522380A
Other languages
English (en)
Other versions
JP4718074B2 (ja
Inventor
フレデリクソン、サラ
クリッツ、ダリオ
Original Assignee
ゲノビス・アーベー
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from SE9903185A external-priority patent/SE9903185D0/xx
Priority claimed from SE9903187A external-priority patent/SE9903187L/xx
Priority claimed from SE9903183A external-priority patent/SE9903183D0/xx
Application filed by ゲノビス・アーベー filed Critical ゲノビス・アーベー
Publication of JP2003509019A publication Critical patent/JP2003509019A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP4718074B2 publication Critical patent/JP4718074B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M1/00—Apparatus for enzymology or microbiology
    • C12M1/42—Apparatus for the treatment of microorganisms or enzymes with electrical or wave energy, e.g. magnetism, sonic waves
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
    • A61N2/00—Magnetotherapy
    • A61N2/02—Magnetotherapy using magnetic fields produced by coils, including single turn loops or electromagnets
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
    • C12M35/06—Magnetic means
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M47/00—Means for after-treatment of the produced biomass or of the fermentation or metabolic products, e.g. storage of biomass
    • C12M47/06—Hydrolysis; Cell lysis; Extraction of intracellular or cell wall material

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

(57)【要約】 本発明は試料中の細胞または組織のような生物物質内に細孔を生成するための装置に関する。その装置は、試料中に存在する磁気粒子の熱または運動エネルギを増大させる交流磁界を使用する。その後、磁気粒子は、生物構造を包囲している膜に細孔を生成する。それに続いて、その細孔を使用して生物構造中に粒子を導入することができる。好ましい実施形態において、装置は温度制御装置を備えている。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、とくに分子生物学研究において使用される装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】
生物工学および生物医学の研究分野において、大きい分子またはバイオパーテ
ィクル(bioparticle) を細菌細胞のような生物構造中に導入することがしばしば
必要である。細胞およびウィルスは環境から保護するための外部バリアと栄養物
質のための選択的輸送系とを有している。自然保護機構を押し破ってターゲット
生物に望ましくない物質を導入するために、ターゲット細胞のある種の化学的ま
たは物理的処理が必要である。外部細胞膜（たとえば、細胞壁でもよい）を押し
破る技術の例は、遺伝子工学および分子生物学の研究分野に存在する。
【０００３】 新しい遺伝子コードがとくに選択された宿主細胞に導入されたとき、その技
術は形質転換またはトランスフェクションと呼ばれる。全てのタイプの細胞に使
用される一般的な方法は１つもないが、ある技術は各細胞タイプおよび目的に利
用可能である。さらに、現在利用可能な技術を使用して全ての細胞タイプを形質
転換することは不可能である。１９７０年に、MandelおよびHiga氏は文献 ( J.M
OL.Bio.53:159-162 ) において、ＣａＣｌ2 で予め処理された大腸菌細胞は温度
衝撃を受けたときに外来ＤＮＡを取入れることが可能なことが報告された。その
後、その方法は開発され続けている（たとえば、米国特許出願第97/01788号明細
書を参照）。何分の一秒かの期間中細胞を高電圧の電気パルスにさらすことによ
って細胞膜中の細孔が開き、これはエレクトロポレーションと呼ばれ [ Zimmerm
an 氏他による J.Membr Biol.67:165-82(1983)]、形質転換技術としてよく使用
されている。細菌、酵母菌および、ある場合には哺乳類の細胞および植物の細胞
は特定の条件でエレクトロポレーションによって形質転換されることができる。
また、この場合、その技術の継続的な開発が現在進行中である（米国特許出願第
97/16721号明細書、第98/16042号明細書を参照）。上述した２つの方法において
、細胞エンベロープは、ＤＮＡ分子がその細胞に入るように十分に長い時間開放
されている。第３の、最後に開発された形質転換方法は、外来ＤＮＡがターゲッ
ト細胞の外膜と融合する陽イオンリポソームに囲まれる／結合するいわゆるリポ
フェクションである[ Old および Primrose 氏による Principles of Gene Mani
pulation:An Introduction to Gene Manipulation,Blackwell Science(1995)]。
植物細胞を形質転換するための工業的技術がもう１つ存在し、この技術ではその
ために選択された植物の一部分が外来遺伝子により処理された小さい金粒子を衝
突させる( Boynton J.E.et.Science 240,1534-1538,1988)。このような遺伝子導
入は、細菌、菌類、昆虫および哺乳類細胞のような別の組織の形質転換のために
開発されてきた ものである(Johnston S.A.Nature 346,776-777,1990)。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、とくに上述の用途において使用されることが可能である。しかしな
がら、特定の細胞およびウィルスの応答特性を研究するために、たんぱく質，Ｒ
ＮＡ分子、脂肪酸、ペプチド、医学プレパラート等の直接トランスファのような
適用において別の外来(exogenic)材料を導入するために本発明の装置を使用する
ことが完全に可能である。さらに、本発明による装置はとくに、溶解を行なうた
めの細胞溶解、ならびに全く同じ方法での特定の細胞の成分の識別および分離に
適している。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
したがって、本発明は、交流磁界が発生されることができ、試料が挿入される
ことができる少なくとも１つのコイルを含んでおり、前記磁界は前記試料中の磁
気感応粒子の熱および、または運動エネルギを増加させ、前記粒子の熱および、
または運動エネルギの増加により前記試料中で見出されることとなる細孔が生物
の膜で包囲された構造内に形成され、前記細孔によりバイオパーティクルが前記
生物の膜で包囲された構造中に導入され、あるいはそこから抽出されることが可
能になることを特徴とする装置に関する。
【０００６】 その方法はまた、本発明による装置が特定の細胞溶解に対して使用される方
法に関する。さらに、本発明はとくに宿主細胞の遺伝子コードおよび、または物
質交代を変化させるために使用される方法に関する。
【０００７】 本発明の１つの特徴によると、装置は、磁界が１乃至５ＭＨｚの範囲の周波
数の交流磁界方向を有していることを特徴とする。
【０００８】 本発明の別の特徴によると、装置は、前記磁界が少なくとも１ｍＴの磁界強
度を有していることを特徴とする。
【０００９】 １以上の特徴によると、本発明は、前記磁界が非均一であり、交流勾配磁界
方向を有しており、前記交流勾配磁界の方向は２つのコイルによって発生され、
試料がコイル間に挿入される。
【００１０】 １以上の特徴によると、本発明の装置は、前記コイルが異なった周波数の交
流電流を供給されることを特徴とする。
【００１１】 さらに別の特徴によると、装置は、前記コイルが供給された交流電流の正ま
たは負の部分のいずれかを供給されることを特徴とする。
【００１２】 別の特徴によると、装置は、それが前記コイルおよび、または前記試料を正
確に温度制御するためのサーモスタットを備えていることを特徴とする。
【００１３】 さらに別の特徴によると、装置は、それが前記交流電流がオン状態であって
試料が供給された磁界にさらされている時間を正確に制御するための可変タイミ
ング装置を備えていることを特徴とする。
【００１４】 別の特徴によると、装置は、それが前記交流電流の強度および周波数を正確
に設定する制御システムを備えていることを特徴とする。
【００１５】 生物の膜で包囲された構造は、身体組織、細胞、細菌、ウィルス粒子、細胞
より小さいレベルの小器官、リポソームまたはたんぱく質から構成されている。
【００１６】 膜で包囲された構造中への導入／そこからの抽出に適しているバイオパーテ
ィクルはとくに、ＤＮＡ分子、ＲＮＡ分子、たんぱく質、別の生物ポリマー、ペ
プチド、化学プレパラート、有機化合物、無機化合物または合成ポリマー、ある
いはそれらの組合せである。
【００１７】
【発明の実施の形態】
本発明が部分的に基づいている技術は、磁気ナノ技術(nanotechnology)および
ペプチド化学の組合せである。この技術では、数十マイクロメータ乃至１ナノメ
ータのサイズを有する磁気感応粒子が試薬として使用される。このような粒子は
ある磁界にさらされたときに振動させられ、熱を発生する。図１は、本発明によ
る装置の原理概略図である。生物試料は、その用途に応じた試薬と混合され、そ
の後試料ホルダ(a) 内に配置される。磁界発生装置(b) の所望の強度および周波
数が調節され、それによって冷却装置(c) の所望の温度が調節される。磁界発生
装置は１つのコイルまたは２つのコイルのいずれかであり、図５にしたがって試
料がそれらの間に配置される。磁界発生装置および試料ホルダは、冷却装置によ
ってその温度が決定される隔離された装置内に封入されている。試料ホルダ内の
正確な温度を保証するために、そのシステムに対して温度センサ(d) を接続する
ことができる。可変の温度、磁界の強度および周波数ならびに処理間隔が制御さ
れ、デジタル表示装置(e) 上で表示されることができる。
【００１８】 図２は、回路ＸＲ２２０６に基づいた発振器1 を含む電子電流源回路の一例
を示しており、この発振器1 の出力信号2 は回路ＰＢＤ３５４８／１に基づいた
電力増幅段3 により増幅され、この電力増幅段3 の出力信号4 は１以上のコイル
によって交流（１ＭＨｚ，２Ａ）で動作することができる。このコイルの一接続
例は図３に示されており、振動回路は２Ωの抵抗6 と、０．５０ｎＦのキャパシ
タ7 と、および５０μＨのコイル8 とから構成され、この回路は交流5 を供給さ
れる。当業者は、図２および３に示されている上述の例が容易に修正可能であり
、別の接続およびコイルを使って同様の結果を得ることができることは明白であ
る。
【００１９】 本発明による方法において使用される磁気材料の例は、たとえば米国特許第
4,323,056号明細書（Borelli et al ）等に記載されている。磁気感応粒子およ
び可能な形状もまた図４に示されている。粒子の磁気感応性のコア9 は本質的に
磁鉄鉱（酸化鉄）からなる。さらに、粒子は、誘導ポリマー（デキストラン）か
らなる外層10で、あるいは単一層または代わりに２層の誘導脂肪酸で被覆されて
いる。誘導体として使用される配位子11のタイプ（アミノ酸または炭水化物ユニ
ットおよびシーケンスの数）の選択は、磁気感応粒子の各用途に対して個々に適
応され、その効果は、１以上のエフェクタ分子12によってさらに変化させられた
その表面によってさらに一層拡大されることができる。
【００２０】 細胞懸濁液に前記粒子を加え、その後交流磁界方向を有する磁界にその細胞
をさらすことにより、磁気感応性の各粒子を包囲した媒体の瞬時的な加熱が行わ
れる。熱は細胞および細胞膜中に温度衝撃を誘起し、それによって細胞膜におい
て一時的な開口が生じる。熱は試料全体において迅速に、かつ均一に誘起され、
それによって試料および細胞は短時間処理にさらされることが可能となり、これ
は、そのさらされた細胞のサバイバル周波数を増加させる。例１は、大腸菌の形
質転換を示している。
【００２１】 温度衝撃を含む通常の形質転換方法において、細胞懸濁液を含む試験管は高
い周辺温度（４２℃）にさらされ、それによって温度勾配が試験管壁から試料中
に発生し、その構成には本発明による方法より長い時間を要し、それはさらに、
細胞壁の最も近くに位置された細胞が管の中心のものよりも長い時間のあいだ高
い温度にさらされることを意味する。したがって、細胞のあるものは温度の上昇
により死滅し、一方その細胞の一部分は処理されないまま残っている。本発明に
よる方法は、試料ホルダ中での各粒子周囲の瞬時加熱によってこの問題を回避す
る。その効果は、粒子がその表面上の配位子分子によって細胞エンベロープに直
接導かれる場合以外は増大される。これには、最終結果にとって熱衝撃と細胞死
滅との間のバランスが重要である通常の形質転換方法と比較して大きな利点があ
る。
【００２２】 さらに磁界の強度は空間的に変化する可能性が高く、いわゆる勾配磁界は、
交流磁界方向と組合せられて粒子内において機械的振動を生じさせ（運動エネル
ギが増加し）、熱放射（熱エネルギ）と組合せられて全ての細胞（および適切な
場合には細胞壁）を取囲む細胞膜に対する粒子の影響を増大させる。本発明は、
熱の誘導または剪断力のパワフルな導入あるいはその組合せを含む完全に新しい
方法に関する。剪断力は機械的疲労による細胞膜において転移（ｄｉｓｌｏｃａ
ｔｉｏｎ）を開始させ、その結果、細胞膜（およびターゲット細胞がたとえば細
菌である場合には細胞壁）が破れる。この方法は、外部から供給された交流勾配
磁界の使用に基づいている。勾配磁界は少なくとも２つのコイルで供給され、供
給された交流電流の正または負の部分のいずれかを供給され、あるいはその代り
に、コイルは異なった周波数の交流電流を供給される。勾配磁界を発生すること
のできる装置は、図５に示されている。機能原理は、図５による対向して配置さ
れた２つのコイルA およびB （フェライト磁心を有するか、有しない）に基づい
ている。制御装置C は、一時に１つのコイルだけが電流をその巻線を通過させる
ようにコイルを通った電流を制御する。この電流変化はその周波数が発振器OSC
によって制御され、その結果コイルは異なった勾配方向を有する勾配磁界D およ
びE を交互に発生する。コイル間に配置された磁気感応粒子P は、機械的振動を
誘導する周期的に交番する方向を有する勾配磁界を受けるであろう。その代り、
勾配磁界は、２つのコイルが２つの異なった周波数の電流を供給されたときに発
生されることができる。２つのコイル内の電流間＊の周波数の差は、勾配の交番
する周波数を制御する。
【００２３】 磁気処理を短時間行なうことによって、処理後に非常に多数の細胞が残存す
る条件が生成される。細胞エンベロープが開いている限り、形質転換される分子
は細胞中に導入されなければならない。この工程を最適化するために、分子はま
た細胞エンベロープに導かれることができる。両プロセスは、一方において細胞
表面に結合し、他方全く同じ強磁性粒子の前記分子に結合するために認識分子を
結付けることによって行われる。生物化学ベースで、異なった種類の生物構造を
認識して結合することのできる分子は、たとえば短い合成ペプチド、抗体の部分
または酵素であることができる。
【００２４】 組換えたんぱく質のようなターゲットたんぱく質の認識分子を磁気感応粒子
に結付けることによって、本発明による装置は、前記ターゲットたんぱく質の全
く同じ方法での溶解および特定の精製に使用されることができる。別の溶解技術
（主として酵素および機械的溶解）と比較すると、１以上の精製ステップと組合
せて本発明による装置を使用することによって上記の全ての時間だけでなく材料
もまた節約される。
【００２５】 本発明の利点は、一方では形質転換方法に対して使用され、他方において装
置を独特なものにする特定の細胞成分の精製のために使用されることが可能なこ
とである。この方法は、用途に関係なく、コイルが一定温度に維持されているあ
いだに行われなければならず、それは冷却装置および温度制御装置が制御可能な
磁気装置内に組込まれていなければならないことを意味する。さらに、磁界の強
度および周波数、ならびに試料が処理にさらされる時間が可変的であることは、
装置の種々の可能性のある適用分野にとって利点である。
【００２６】 ［例 １］ 以下の例では、ｐＵＣ１８プラスミドによる大腸菌（Ｅコリ）の形質転換方法
を説明する： １００μｌの反応性をもつ大腸菌は、３０μｌの０．０５ＭのＣａＣｌ2 中に
溶解された５００μｇのｐＵＣ１８と０℃で混合される。本発明による装置内の
試料コンテナ中に試料が導入され、コイル内において３０分間０℃で培養される
。その後、その試料は３０秒間１ＭＨｚ、２Ａで処理される。その後、１ｍｌの
滅菌したＬＢ肉汁が試料に加えられ、それ後これは１時間３７℃で水浴中で培養
される。続いて、形質転換された細菌だけを得るために、淘汰圧、５０μｇ／μ
ｌのアンピシリンを含む寒天のプレート上に細胞が塗布される。この実験は、サ
バイバルおよび形質転換周波数を判定するためにｐＵＣ１８を含まない基準試料
を含んでいなければならない。
【図面の簡単な説明】
【図１】 本発明による装置の原理的概略図。
【図２】 例示的な電流源の回路図。
【図３】 例示的なコイルの接続図。
【図４】 磁気感応粒子の例示的な概略図。
【図５】 勾配磁界を発生させることのできる装置の概略図。
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書
【提出日】平成１３年１０月１２日（２００１．１０．１２）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (31)優先権主張番号 ９９０３１８７−４ (32)優先日 平成11年９月８日(1999．9．8) (33)優先権主張国 スウェーデン（ＳＥ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ， ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ， ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，Ｃ Ａ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ， ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，Ｋ Ｅ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ， ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，Ｒ Ｕ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ， ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ Ｆターム(参考） 4B024 AA19 CA01 CA11 GA11 4B029 AA23 BB01 BB20 CC01 4B065 AA01X AA57X AA83X AA86X AA87X BA01 BA30 BD01 BD50

Claims (13)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 交流磁界が発生されることができ、試料が挿入されることが
    できる少なくとも１つのコイルを含んでおり、前記磁界は前記試料中の磁気感応
    性粒子の熱および、または運動エネルギを増加させ、前記粒子の熱および、また
    は運動エネルギの増加により前記試料中で見出されることとなる細孔が生物の膜
    で包囲された構造に形成され、前記細孔によりバイオパーティクルが前記生物の
    膜で包囲された構造中に導入され、あるいはそこから抽出されることが可能にさ
    れることを特徴とする装置。
  2. 【請求項２】 前記磁界は１乃至５ＭＨｚの範囲の周波数の交流磁界方向を
    有していることを特徴とする請求項１記載の装置。
  3. 【請求項３】 前記磁界は少なくとも１ｍＴの磁界強度を有していることを
    特徴とする請求項１または２記載の装置。
  4. 【請求項４】 前記磁界は非均一であり、交流勾配磁界方向を有しており、
    前記交流勾配磁界の方向は２つのコイルによって発生され、前記試料がコイル間
    に挿入されることを特徴とする請求項１乃至３のいずれか１項記載の装置。
  5. 【請求項５】 前記コイルは異なった周波数の交流電流を供給されることを
    特徴とする請求項４記載の装置。
  6. 【請求項６】 前記コイルは供給された交流電流の正または負の部分のいず
    れかを供給されることを特徴とする請求項４記載の装置。
  7. 【請求項７】 前記コイルおよび、または前記試料を正確に温度制御するサ
    ーモスタットを備えていることを特徴とする請求項１乃至６のいずれか１項記載
    の装置。
  8. 【請求項８】 前記交流電流がオン状態であり、前記試料が前記供給された
    磁界にさらされている時間を正確に制御する可変タイミング装置を備えているこ
    とを特徴とする請求項１乃至７のいずれか１項記載の装置。
  9. 【請求項９】 前記交流電流の強度および周波数を正確に設定する制御シス
    テムを備えていることを特徴とする請求項１乃至８のいずれか１項記載の装置。
  10. 【請求項１０】 前記生物の膜で包囲された構造は、身体の組織、細胞、細
    菌、ウィルス粒子、細胞より小さいレベルでの小器官、リポソームまたはたんぱ
    く質から構成されていることを特徴とする請求項１乃至９のいずれか１項記載の
    装置。
  11. 【請求項１１】 前記バイオパーティクルはＤＮＡ分子、ＲＮＡ分子、たん
    ぱく質、別の生物ポリマー、ペプチド、化学プレパラート、有機化合物、無機化
    合物または合成ポリマー、あるいはそれらの組合せであることを特徴とする請求
    項１乃至１０のいずれか１項記載の装置。
  12. 【請求項１２】 請求項１乃至１０のいずれか１項記載の装置が特定の細胞
    溶解のために使用される方法。
  13. 【請求項１３】 請求項１乃至１０のいずれか１項記載の装置がとくに宿主
    細胞の遺伝子コードおよび、または物質代謝を変化させるために使用される方法
    。
JP2001522380A 1999-09-08 2000-09-07 細孔を生物材料中に導入するための装置 Expired - Fee Related JP4718074B2 (ja)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE9903187-4 1999-09-08
SE9903183-3 1999-09-08
SE9903185A SE9903185D0 (sv) 1999-09-08 1999-09-08 Terapeutisk metod och anordning baserad på magnetism
SE9903187A SE9903187L (sv) 1999-09-08 1999-09-08 Molekylärbiologisk anordning för introduktion av porer i biologiska material
SE9903183A SE9903183D0 (sv) 1999-09-08 1999-09-08 Selektivt bindande och magnetiskt påverkbara nanopartiklar för medicinskt bruk
SE9903185-8 1999-09-08
PCT/SE2000/001743 WO2001018168A1 (en) 1999-09-08 2000-09-07 Device for introducing pores into biological materials

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2003509019A true JP2003509019A (ja) 2003-03-11
JP4718074B2 JP4718074B2 (ja) 2011-07-06

Family

ID=27355991

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2001522380A Expired - Fee Related JP4718074B2 (ja) 1999-09-08 2000-09-07 細孔を生物材料中に導入するための装置

Country Status (14)

Country Link
EP (1) EP1234018B1 (ja)
JP (1) JP4718074B2 (ja)
KR (1) KR100683978B1 (ja)
AT (1) ATE263233T1 (ja)
AU (1) AU762598B2 (ja)
BR (1) BR0013882A (ja)
CA (1) CA2382434A1 (ja)
DE (1) DE60009547T2 (ja)
DK (1) DK1234018T3 (ja)
ES (1) ES2218221T3 (ja)
NO (1) NO20020923L (ja)
PL (1) PL353798A1 (ja)
PT (1) PT1234018E (ja)
WO (1) WO2001018168A1 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006523491A (ja) * 2003-04-15 2006-10-19 コーニンクレッカ　フィリップス　エレクトロニクス　エヌ　ヴィ 磁性粒子に影響を与える方法及び装置

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10224150B4 (de) 2002-05-27 2004-04-01 Siemens Ag Reaktor zur Behandlung eines Probenmediums
ES2208082B1 (es) * 2002-05-29 2005-09-16 Jose Luis Bardasano Rubio Dispositivo para la medida del potencial de la accion transmembrana en preparaciones celulares bajo la accion de campos electromagneticos de frecuencia e intensidad variables.
SE522099C2 (sv) * 2002-06-07 2004-01-13 Genovis Ab Anordning för multipel simultan genöverföring
DE10238853A1 (de) * 2002-08-24 2004-03-04 Philips Intellectual Property & Standards Gmbh Verfahren zur lokalen Erwärmung mit magnetischen Partikeln
SE0202725D0 (sv) * 2002-09-12 2002-09-12 Genovis Ab Anordning för magnetiskt inducerbar membrantransport
ES2265209B1 (es) * 2004-01-12 2008-03-01 Jose Luis Bardasano Rubio Dispositivo aplicador de campos electromagneticos a cultivos celulares.
KR101331891B1 (ko) 2005-08-19 2013-11-21 게노비스 에이비 막으로 둘러싸인 세포 또는 세포 소기관의 내부 또는외부로의 생분자 전달에 적합한 나노입자
KR100792594B1 (ko) 2006-11-30 2008-01-09 씨지케이 주식회사 자기장 인가장치
CN114433971B (zh) * 2021-12-20 2023-07-25 中国电子科技集团公司第二十九研究所 一种使用磁振颗粒辅助进行堆叠焊接的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH06133784A (ja) * 1992-10-23 1994-05-17 Res Dev Corp Of Japan 磁性微粒子による細胞への生体物質導入方法及び磁気による細胞の選択的濃縮・分離法
JP2001527534A (ja) * 1997-03-07 2001-12-25 マックス−デルブルック−セントラム フュア モレクラーレ メディシン 特異的磁気体、その製造方法及び使用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH06133784A (ja) * 1992-10-23 1994-05-17 Res Dev Corp Of Japan 磁性微粒子による細胞への生体物質導入方法及び磁気による細胞の選択的濃縮・分離法
JP2001527534A (ja) * 1997-03-07 2001-12-25 マックス−デルブルック−セントラム フュア モレクラーレ メディシン 特異的磁気体、その製造方法及び使用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JPN6010028347, Ｂｉｏｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｅｎｅｒｇｅｔｉｃｓ, 1998, Ｖｏｌ．４６, ｐ．１２１−１２８ *
JPN6010028349, Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ, 1996, Ｖｏｌ．７１, ｐ．６１６−６２２ *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006523491A (ja) * 2003-04-15 2006-10-19 コーニンクレッカ　フィリップス　エレクトロニクス　エヌ　ヴィ 磁性粒子に影響を与える方法及び装置

Also Published As

Publication number Publication date
AU7466700A (en) 2001-04-10
JP4718074B2 (ja) 2011-07-06
ES2218221T3 (es) 2004-11-16
EP1234018B1 (en) 2004-03-31
BR0013882A (pt) 2002-07-02
PT1234018E (pt) 2004-08-31
WO2001018168A1 (en) 2001-03-15
AU762598B2 (en) 2003-06-26
DK1234018T3 (da) 2004-07-19
ATE263233T1 (de) 2004-04-15
CA2382434A1 (en) 2001-03-15
KR100683978B1 (ko) 2007-02-22
DE60009547D1 (de) 2004-05-06
DE60009547T2 (de) 2004-09-23
NO20020923L (no) 2002-05-02
NO20020923D0 (no) 2002-02-26
KR20020029126A (ko) 2002-04-17
PL353798A1 (en) 2003-12-01
EP1234018A1 (en) 2002-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0941318B1 (de) Hantelförmige expressionskonstrukte für die gentherapie
Saiyed et al. Application of magnetic techniques in the field of drug discovery and biomedicine
RU2411291C2 (ru) Способ и устройство для очистки, разделения, модификации и/или иммобилизации химических или биологических объектов, находящихся в текучей среде, и опора из микропроволоки
JP4324101B2 (ja) 標的物質の結合
JP4718074B2 (ja) 細孔を生物材料中に導入するための装置
JPH03502043A (ja) 高周波電気パルスによる細胞ポレーションと細胞融合用の方法及び装置
CN1995361A (zh) 利用介电电泳辅助细胞定位借以提高电穿孔效率的方法
JP2010538607A (ja) 磁性送達デバイス
IL189559A (en) Nanoparticle suitable for delivery of a biomolecule into or out of a membrane enclosed cell or cell organelle
JP2009502464A (ja) 標的物質の精製、分離、検出、修飾及び／又は固定化のための静的支持床及びその使用方法
CN115916951A (zh) 化合物的磁裂解
Rito‐Palomares et al. Aqueous two‐phase systems for the recovery of a recombinant viral coat protein from Escherichia coli
US20050181508A1 (en) Device for multiple simulataneous gene transfer
Morgan et al. The introduction of proteins into mammalian cells by electroporation
Raghavarao et al. Multistage magnetic and electrophoretic extraction of cells, particles and macromolecules
Hui et al. In vitro and ex vivo gene delivery to cells by electroporation
AU2003261697B2 (en) Particle for magnetically induced membrane transport
Saiyed et al. Advancement in the field of magnetic fluids for drug discovery, medicine and biotechnology
Rose et al. Application of Higher Density Iron Oxide Nanoparticle Pellicles to Enrich the Plasma Membrane and Its Proteome from Cells in Suspension
JPH02138976A (ja) タンパク質の細胞への転移方法
KELLENBERGER¹ MA BJORNSTI¹, JA HOBOT¹, AS KELUS², W. VILLIGER¹, and
Bagga et al. Northwestern screening of expression libraries
Yasuda et al. Application of DNA micromanipulation to gene mapping and localized restriction enzyme digestion

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20070815

A977 Report on retrieval

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007

Effective date: 20100517

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20100525

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20100825

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20100901

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20101125

A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20110301

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20110331

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140408

Year of fee payment: 3

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

LAPS Cancellation because of no payment of annual fees