JP2003505502A - カルシリティック化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 骨疾患または障害の新規治療法が提供される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 （技術分野） 本発明は、副甲状腺機能低下症、骨肉腫、歯周疾患、骨折治癒機転、変形性関
節症、慢性関節リウマチ、パジェット病および骨粗鬆症を包含するがこれらに限
定されない異常な骨または無機質ホメオスタシスに伴う種々の疾患の治療に関す
る。本発明の方法は、カルシウム受容体の経口活性アンタゴニストと吸収抑制剤
との共投与を含む。

【０００２】 哺乳動物において、細胞外Ｃａ^２＋は、厳重なホメオスタシス制御下にあり、
血液凝固、神経および筋肉興奮性、ならびに細胞性機能などの種々のプロセスを
調節する。細胞外Ｃａ^２＋は副甲状腺細胞からの副甲状腺ホルモン（「ＰＴＨ」
）の分泌を阻害し、破骨細胞による骨吸収を阻害し、甲状腺Ｃ−細胞からのカル
シトニンの分泌を刺激する。カルシウム受容体タンパク質はある種の分化細胞を
細胞外Ｃａ^２＋濃度の変化に素早く応答させることができる。

【０００３】 ＰＴＨは血液および細胞外液中のＣａ^２＋ホメオスタシスを調節する主要な内
分泌因子である。ＰＴＨは骨および腎細胞に作用することにより血中のＣａ^２＋ 濃度を増加させる。この細胞外Ｃａ^２＋の増加は、ＰＴＨ分泌を抑制する負のフ
ィードバックシグナルとしての役割を果たす。細胞外Ｃａ^２＋とＰＴＨ分泌との
間の相互の関連性はＣａ^２＋ホメオスタシスを具体的に維持する重要なメカニズ
ムを形成する。

【０００４】 細胞外Ｃａ^２＋は副甲状腺細胞に直接作用してＰＴＨ分泌を調節する。細胞外
Ｃａ^２＋の変化を検出する副甲状腺細胞の表面タンパク質の存在が確認されてい
る。Brown et al., Nature 366:574, 1993 を参照のこと。副甲状腺細胞にて、
カルシウム受容体であるこのタンパク質は、細胞外Ｃａ^２＋の受容体としての役
割を果たし、細胞外Ｃａ^２＋のイオン濃度の変化を検出し、機能的な細胞応答で
あるＰＴＨ分泌を開始させる。

【０００５】 細胞外Ｃａ^２＋は、Nemeth et al., Cell Calcium 11:319, 1990 に報告され
ているように、種々の細胞機能に影響を及ぼす。例えば、細胞外Ｃａ^２＋は傍濾
胞細胞（Ｃ−細胞）および副甲状腺細胞にて役割を果たしている。Nemeth, Cell
Calcium 11:323, 1990 を参照のこと。破骨細胞における細胞外Ｃａ^２＋の役割
も研究されている。Zaidi, Bioscience Reports 10:493, 1990 を参照のこと。

【０００６】 カルシウム受容体に対する細胞外Ｃａ^２＋の作用を模倣する種々の化合物が知
られている。カルシリティック化合物（calcilytics）はカルシウム受容体活性
をアンタゴナイズし、それにより細胞外Ｃａ^２＋によって喚起される１またはそ
れ以上のカルシウム受容体活性を減少させることのできる化合物である。カルシ
リティック化合物は、Ｃａ^２＋受容体で活性である有用なカルシウム調節因子を
発見、開発、設計、修飾および／または構築する場合のリード分子として有用で
ある。このようなカルシリティック化合物は、発現および／または分泌が１また
はそれ以上のＣａ^２＋受容体での活性により調節されるかまたは影響を受ける１
またはそれ以上の要素、例えば、ホルモン、酵素または成長因子などのポリペプ
チドの異常な濃度により特徴付けられる種々の病状の治療において有用である。
カルシリティック化合物の標的となる疾患または障害としては、異常な骨および
無機質代謝に関連する疾患が挙げられる。

【０００７】 異常なカルシウムホメオスタシスは、１またはそれ以上の以下の活性：血清カ
ルシウムの異常な増加または減少；カルシウムの尿排泄の異常な増加または減少
；骨カルシウム濃度（例えば、骨無機質密度測定により評価される）の異常な増
加または減少；食物カルシウムの異常な吸収；ＰＴＨおよびカルシトニンなどの
血清カルシウム濃度に影響を及ぼすメッセンジャーの産生および／または放出の
異常な増加または減少；および血清カルシウム濃度に影響を及ぼすメッセンジャ
ーにより惹起される応答の異常な変化により特徴付けられる。

【０００８】 すなわち、カルシウム受容体アンタゴニストは、副甲状腺機能低下症、骨肉腫
、歯周疾患、骨折治癒機転、変形性関節症、慢性関節リウマチ、パジェット病お
よび骨粗鬆症などの異常な骨または無機質ホメオスタシスに伴う疾患の薬物療法
に対する独特の方法を提供するものである。

【０００９】 副甲状腺機能亢進症において見られるようなＰＴＨの慢性的上昇が破骨細胞媒
介骨損失および異常な骨組織学を引き起こすことはよく知られている。Dobnig a
nd Turner, Endocrinol., Vol. 138, pp. 4607-4612 (1997) は、２時間または
それ以上の間にわたる高投与量のＰＴＨ（４０および８０ｕｇ／ｋｇ／日）の皮
下注入が、副甲状腺機能亢進症において見られる変化と一致する、体重の急速な
減少、高カルシウム血症、および骨格の組織学的異常性を引き起こすことを証明
している。該文献は、骨形成をもたらすにはＰＴＨの断続的な投与が望ましいが
、ＰＴＨ上昇を延長し過ぎると、骨吸収が上昇することを示している。このＰＴ
Ｈ上昇期間の制限は、カルシウム受容体をアンタゴナイズするのに用いることが
できる化合物の選択を制限する。

【００１０】 したがって、産業上、文献において立証された付随する吸収問題を伴わずに一
過性のＰＴＨ上昇を誘起できるカルシウム受容体アンタゴニストを用いることが
できる治療が必要とされている。 さらに、比較的低いＰＴＨ上昇を引き起こすが、現在利用可能な治療と同様に
有益な効果を有する治療が必要とされている。

【００１１】 （発明の概要） 本発明は、副甲状腺機能低下症、骨肉種、歯周疾患、骨折治癒機転、変形性関
節症、慢性関節リウマチ、パジェット病および骨粗鬆症を包含するがこれらに限
定されるものではない異常な骨または無機質ホメオスタシスに伴う種々の疾患の
新規治療法を提供する。

【００１２】 本発明の方法は、治療を必要とする対象体に、カルシリティック剤と吸収抑制
剤とを共投与することを含む。本発明のカルシリティック剤としては、延長され
たＰＴＨ上昇を引き起こす薬剤が挙げられる。好ましくは、本薬剤は、ＰＴＨの
一過性の上昇を引き起こす。

【００１３】 （図面の詳細な記載） 図１は、試験１に従ってカルシリティック化合物またはＰＴＨで治療した後の
骨減少症ラットにおける近位脛骨ＢＭＤを表す。 ７ヶ月齢のラットは、ｏｖｘであり、２ヶ月間、骨減少症を発病させた。偽手
術ラットをビヒクル（◇）で処置し、ｏｖｘラットを、ビヒクル（○）、１００
ｕｍｏｌ／ｋｇ（経口投与）のＮＰＳ ２１４３（□）、または５ｕｇ／ｋｇ（
皮下投与）のラットＰＴＨ １−３４（△）で処置した。所定の時点でＢＭＤを
測定した。統計学的な有意さが示される：^＊Ｐ＜０.０５；^＊＊Ｐ＜０.０１。

【００１４】 図２は、試験１に従ってカルシリティック化合物またはラットＰＴＨで処置し
た骨減少症ラットにおける血漿ＰＴＨ濃度を表す。 投与されたカルシリティック化合物（黒丸）またはＰＴＨ（白丸）で処置した
後、所定の薬剤の投与に関して血漿サンプルを定期的に回収した。

【００１５】 図３は、試験１に従ってカルシリティック化合物を投与した後のカルシリティ
ック化合物の循環濃度を表す。 所定の化合物の投与に関して血漿サンプルを定期的に回収した。

【００１６】 図４ａ〜ｄは、試験１に従ってカルシリティック化合物またはＰＴＨで処置し
た後の骨減少症ラットからの近位脛骨についての動的組織形態計測を表す。 図４ａは、標識された周囲長％（％Ｌ.Ｐｍ）を表す。 図４ｂは、侵食された表面％（％Ｅｒ.Ｐ）を表す。 図４ｃは、類骨周囲長％（％Ｏｓ.Ｐｍ）を表す。 図４ｄは、骨形成速度：組織面積リファレント（ＢＦＲ／Ｂ.Ａｒ）％／年を
表す。統計学的有意さが示される：^＊Ｐ＜０.０５；^＊＊Ｐ＜０.０１。

【００１７】 図５は、試験２に従ってエストロゲン＋／−カルシリティック化合物で処置さ
れた骨減少症ｏｖｘラットからのＶｏｎ Ｋｏｓｓａで染色された脛骨の切片を
表す。 所定の物質で翌５週間処置した動物からの代表的な切片を示す。 図５（ａ）は、ビヒクルで処置した場合を表す。 図５（ｂ）は、１７βエストラジオール（ペレット０.０１ｍｇ／９０日の皮
下投与）で処置した場合を表す。 図５（ｃ）は、ＮＰＳ ２１４３（１日に１００ｕｍｏｌ／ｋｇの経口投与）
で処置した場合を表す。

【００１８】 図６ａ〜ｂは、試験２に従ってカルシリティック化合物＋／−１７βエストラ
ジオールで処置した後の骨減少症ラットからの近位脛骨についての組織形態計測
を表す。 図６ａは、小柱骨面積％（％Ｔｂ.Ａｒ）を表す。 図６ｂは、骨形成速度：組織面積リファレント（ＢＦＲ／Ｔ.Ａｒ）％／年を
表す。統計学的有意さが示される：^＊Ｐ＜０.０５；^＊＊Ｐ＜０.０１。

【００１９】 （発明の詳細な記載） 本発明のカルシリティック化合物は、全てのカルシリティック化合物を包含す
る。「カルシリティック化合物」とは、化合物がカルシウム受容体活性を阻害す
ることができ、これにより、細胞外Ｃａ^２＋によって誘起される１つまたはそれ
以上のカルシウム受容体活性の低下を引き起こすことを意味する。かかる化合物
としては、以下の化合物からなる群から選択される化合物が挙げられるが、これ
らに限定されるものではない： Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロ
ピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミン・塩酸塩； Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロ
ピル]−１,１−ジメチル−２−(４−メトキシフェニル)エチルアミン・塩酸塩； Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(２,３−ジクロロ)フェノキシ−プロピル]−
１,１−ジメチル−２−(４−メトキシフェニル)エチルアミン・塩酸塩； Ｎ−[(Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−
カルボキシフェニル)スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチ
ル−２−(６−(１,２,３,４−テトラヒドロナフチル)エチルアミン； Ｎ−[(Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−
カルボキシフェニル)スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチ
ル−２−(ベンゾチエン−３−イル)−エチルアミン； Ｎ−[(Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−
カルボキシフェニル)スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチ
ル−２−(ベンゾチエン−２−イル)−エチルアミン； Ｎ−[(Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−
カルボキシフェニル)スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチ
ル−２−(デカヒドロナフタレン−２−イル)エチルアミン； Ｎ−[(Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−
カルボキシフェニル)スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチ
ル−４−フェニルブチルアミン； Ｎ−[(Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−
カルボキシフェニル)スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチ
ル−４−(２−メトキシフェニル)ブチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[４−エ
チルカルボキシフェニル]スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジ
メチル−２−(２−ナフチル)エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−メ
チルカルボキシメトキシフェニル]スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−
１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
ロピル]−１,１−ジメチル−２−[２−ナフチル]エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
ロピル]−１,１−ジメチル−２−(１,２,３,４−テトラヒドロナフタ−６−イル
)エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
ロピル]−１,１−ジメチル−２−(ベンゾチエン−３−イル)−エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
ロピル]−１,１−ジメチル−２−(ベンゾチエン−２−イル)−エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
ロピル]−１,１−ジメチル−２−(デカヒドロナフタレン−２−イル)−エチルア
ミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
ロピル]−１,１−ジメチル−４−(２−メトキシフェニル)ブチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
ロピル]−１,１−ジメチル−４−フェニルブチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[Ｎ−ベンジル−Ｎ−[４−
メチルフェニル]スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチル−
２−[４−メトキシフェニル]エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[Ｎ−[４−ベンジル]スルホ
ニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチル−２−[２−ナフチル]エ
チルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−５−[[４−カルボキシ]フェニル
]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチル−２−[ナフチル]エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−カ
ルボキシル]フェニル]スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメ
チル−２−[２−ナフチル]エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−メ
チルカルボキシル]フェニル]スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１
−ジメチル−２−[２−ナフチル]エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−(２−フェニル−２−Ｒ,Ｓ
−カルボキシル)フェノキシ]−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチ
ル)エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−(３−カルボキシプロピル)
フェノキシ]−プロピル]−１,１−ジメチル−２−ナフチルエチルアミン； (Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−５−(３−カルボキシプロピル)
フェノキシ]−プロピル]−１,１−ジメチル−２−ナフチルエチルアミン；およ
び (Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[２−[２−[６−アミノメチル]ピリジル]エチ
ルオキシ]−１,１−ジメチル−２−ナフチルエチルアミン。

【００２０】 骨は、ヒドロキシアパタイトの紡錘状結晶または板状結晶を取込んでいるタン
パク質マトリックスから成っている。Ｉ型コラーゲンは、構造タンパク質の約９
０％を構成する骨の主要な構造タンパク質である。マトリックスの残り１０％は
、オステオカルシン、プロテオグリカン、オステオポンチン、オステオネクチン
、トロンボスポンジン、フィブロネクチン、および骨シアロタンパク質を包含す
る多くの非コラーゲンタンパク質から成っている。骨格骨は、生涯を通じて別個
の病巣部でリモデリングを受ける。これらの病巣部またはリモデリングユニット
は、骨吸収相に次ぐ骨置換相からなるサイクルを受ける。

【００２１】 骨吸収は、造血系の多核細胞である破骨細胞によって行なわれる。破骨細胞は
、骨表面に付着し、封鎖帯を形成し、次いで、それらの頂端（すなわち、吸収）
表面上に波状に広がる膜を形成する。これにより、波状膜におけるプロトンポン
プによって酸性化される骨表面上で包囲された細胞外コンパートメントが創り出
され、この中に破骨細胞がタンパク質分解酵素を分泌する。この低いｐＨのコン
パートメントは、骨表面でヒドロキシアパタイト結晶を溶解し、タンパク質分解
酵素は、タンパク質マトリックスを消化する。このようにして、吸収窩またはピ
ットが形成される。該サイクルのこの相の最後に、骨芽細胞は、その後に石灰化
される新しいタンパク質マトリックスを蓄える。骨粗鬆症およびパジェット病の
ようないくつかの病態においては、骨吸収と骨形成との間の正常なバランスが崩
れ、サイクルごとに骨の正味の損失がある。最後には、これにより骨の衰弱が生
じ、最小の外傷で骨折する危険性が増加することがある。

【００２２】 本明細書で用いる場合、「吸収抑制剤」なる用語は、骨吸収を予防、遅延また
は妨害する能力を有する薬剤を表す。本発明において有用な吸収抑制剤としては
、エストロゲン、１,２５(ＯＨ)_２ビタミンＤ３、カルシトニン、ビスホスホネ
ートおよびカテプシンＫ阻害物質が挙げられるが、これらに限定されるものでは
ない。

【００２３】 本発明の化合物は、また、医薬上許容される塩およびその複合体として処方す
ることができる。医薬上許容される塩は、それらが投与される量および濃度にお
いて無毒性塩である。

【００２４】 医薬上許容される塩としては、硫酸塩、塩酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、
リン酸塩、スルファミン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、メタン
スルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスル
ホン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩およびキナ酸塩などの酸付加塩が挙
げられる。医薬上許容される塩は、塩酸、マレイン酸、硫酸、リン酸、スルファ
ミン酸、酢酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、マロン酸、メタンスルホン酸、エタン
スルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクロヘキシルス
ルファミン酸、フマル酸およびキナ酸などの酸から得ることができる。

【００２５】 医薬上許容される塩としては、また、カルボン酸またはフェノールのような酸
性官能基が存在する場合、ベンザチン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノー
ルアミン、エチレンジアミン、メグルミン、プロカイン、アルミニウム、カルシ
ウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、アンモニウム、アルキ
ルアミンおよび亜鉛などの塩基付加塩が挙げられる。

【００２６】 ヒトおよび他の哺乳動物の治療に本発明の化合物またはその医薬上許容される
塩を使用するために、それは、通常、医薬組成物として標準的な製薬業務に従っ
て処方される。

【００２７】 カルシリティック化合物は、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内、経口、局所（経
皮）または経粘膜投与を包含する種々の経路によって投与することができる。全
身投与については、経口投与が好ましい。経口投与については、例えば、当該化
合物を、カプセル剤、錠剤、液体製剤（例えば、シロップ剤およびエリキシル剤
）および濃縮ドロップ剤などの慣用的な経口投与剤形に製剤化することができる
。

【００２８】 別法として、注射（非経口投与）、例えば、筋肉注射、静脈注射、腹腔内注射
および皮下注射を用いることができる。注射については、本発明の化合物は、溶
液、好ましくは、生理学上適合可能な緩衝液または溶液、例えば、生理食塩水、
ハンクス溶液、またはリンゲル溶液中で製剤化される。その上、当該化合物は、
固体剤形に製剤化され、使用直前に再溶解または懸濁させることができる。凍結
乾燥剤形を調製することもできる。

【００２９】 全身投与は、また、経粘膜または経皮手段によることもできる。経粘膜または
経皮投与については、該処方物において浸透させるべき障壁に適した浸透剤を用
いる。かかる浸透剤は、一般に、当該技術分野において知られており、例えば、
経粘膜投与については、胆汁酸塩およびフシジン酸誘導体が挙げられる。さらに
、界面活性剤を用いて浸透を促進することができる。例えば、経粘膜投与は、鼻
スプレー、直腸坐剤または膣坐剤によることができる。

【００３０】 局所投与については、本発明の化合物は、一般に、当該技術分野で知られてい
るような軟膏剤（ointment）、軟膏剤（salve）、ゲル剤またはクリーム剤に処
方することができる。

【００３１】 種々のカルシリティック化合物の投与量は、化合物のＩＣ_５０、ＥＣ_５０、化
合物の生物学的半減期、患者の年齢、大きさおよび体重、ならびに患者に付随す
る疾患または障害などの因子を考慮して標準的な方法によって判定することがで
きる。これらの因子および考えられる他の因子の重要性は、当業者に知られてい
る。

【００３２】 投与量は、投与経路および経口生物学的利用能の程度にも依存する。例えば、
低い経口生物学的利用能を有する化合物については、比較的高い投与量を投与し
なければならない。

【００３３】 好ましくは、当該組成物は、単位投与剤形である。経口用途については、例え
ば、錠剤またはカプセル剤を投与することができ、経鼻用途については、定量型
エアゾール剤を投与することができ、経皮投与については、局所製剤またはパッ
チ剤を投与することができ、経粘膜送達については、バッカルパッチ剤を投与す
ることができる。各々の場合、投与量は、患者が単一用量を投与することができ
るような量である。

【００３４】 経口投与のための各投与単位は、適当には、遊離塩基として換算して式（Ｉ）
で示される化合物またはその医薬上許容される塩０.０１〜５００ｍｇ／ｋｇ、
好ましくは、０.１〜５０ｍｇ／ｋｇを含有する。非経口、経鼻、経口吸入、経
粘膜または経皮経路のための日用量は、適当には、式（Ｉ）で示される化合物０
.０１ｍｇ〜１００ｍｇ／ｋｇを含有する。局所処方物は、適当には、式（Ｉ）
で示される化合物０.０１〜５.０％を含有する。活性成分は、当業者に容易に明
らかであるように、所望の活性を示すのに十分な、１日あたり１〜６回、好まし
くは、１回投与することができる。

【００３５】 本明細書で用いる場合、疾患の「治療」は、疾患の防止、遅延および予防を包
含するが、これらに限定されるものではない。

【００３６】 患部細胞をベースとした治療または予防される疾患および障害としては、骨お
よび無機質関連疾患または障害；副甲状腺機能低下症；発作、卒中、頭部外傷、
脊椎損傷、心停止または新生児ジストレスにおいて生じるような低酸素症誘発性
神経細胞損傷、癲癇、アルツハイマー病、ハンチントン病およびパーキンソン病
のような神経変性性疾患、痴呆症、筋肉緊張、鬱病、不安、パニック障害、強迫
障害、心的外傷後ストレス障害、精神分裂病、神経遮断性悪性症候群およびツレ
ット症候群などの中枢神経の疾患および障害；ＡＤＨ分泌異常症候群（ＳＩＡＤ
Ｈ）、肝硬変、うっ血性心不全、およびネフローゼなどの腎臓による過剰な水分
再吸収に関連する疾患；高血圧症；カチオン性抗生物質（例えば、アミノグリコ
シド系抗生物質）からの腎毒性を防止および／または軽減すること；下痢および
痙性結腸などの腸運動障害；ＧＩ潰瘍性疾患；サルコイドーシスのような過剰な
カルシウム吸収を伴うＧＩ疾患；自己免疫疾患および臓器移植拒絶反応；扁平上
皮癌；および膵炎が挙げられる。

【００３７】 本発明の好ましい実施態様において、本発明の化合物を用いて、非拍動性手法
（non-pulsatile manner）で血清副甲状腺ホルモン（「ＰＴＨ」）濃度を増加さ
せる。血清ＰＴＨ濃度の増加は、副甲状腺機能低下症、骨肉種、歯周疾患、骨折
、変形性関節症、慢性関節リウマチ、パジェット病および骨粗鬆症などの疾患の
治療に有用である。

【００３８】 ヒトにおける無傷ＰＴＨについての正常な範囲は、約１０〜約６５ｐｇ／ｍｌ
である。血清ＰＴＨの増加は、また、疾患の発病を予防的に遅延させるかまたは
防止するのにも有用である。例えば、血清ＰＴＨが低い人に対して、または血清
ＰＴＨが低くない人であってもＰＴＨの増加が有益な代償効果をもたらす場合に
はその人に対して予防的処置を行なうことができる。好ましくは、該患者は、血
清ＰＴＨが異常に低い。本明細書で用いる場合、「血清ＰＴＨが異常に低い」と
は、血清ＰＴＨ濃度が一般的な個体群において生じるよりも低いことを意味し、
好ましくは、疾患または疾患の発病に関連する量である。

【００３９】 血清ＰＴＨ濃度の増加を用いて、骨および無機質関連疾患を包含する種々の疾
患の治療をすることができる。

【００４０】 好ましくは、ＰＴＨ濃度増加の期間は、１２時間またはそれ以上、より好まし
くは、１８時間またはそれ以上、最も好ましくは、２４時間またはそれ以上であ
る。

【００４１】 好ましくは、ＰＴＨの増加は、ヒトにおける無傷ＰＴＨについての正常な範囲
よりも３倍またはそれ以下である。より好ましくは、ＰＴＨ濃度の増加は、正常
な範囲の２倍またはそれ以下である。

【００４２】 本発明は、また、経口投与した場合に活性な本発明の化合物およびそれらの医
薬上許容される塩を含む組成物を提供し、シロップ剤、錠剤、カプセル剤および
ロゼンジ剤として処方することができる。シロップ処方物は、一般に、当該化合
物または塩の、フレーバーまたは着色剤を含む、エタノール、落花生油、オリー
ブ油、グリセリンまたは水などの液体担体中懸濁液または溶液からなる。当該組
成物が錠剤の剤形である場合、固体処方物の調製に慣用的に用いられる医薬担体
を用いることができる。かかる担体の例としては、ステアリン酸マグネシウム、
白土、タルク、ゼラチン、アラビアガム、ステアリン酸、デンプン、ラクトース
およびスクロースが挙げられる。当該組成物がカプセル剤の剤形である場合、例
えば、ハードゼラチンカプセルシェル中で上記担体を用いるような慣用のカプセ
ル化が適当である。当該組成物がソフトゼラチンシェルカプセル剤の剤形である
場合、水性ガム、セルロース、シリケートまたは油のような分散体または懸濁液
の調製に慣用的に用いられる医薬担体が考えられ、ソフトゼラチンカプセルシェ
ルに一体化される。

【００４３】 典型的な非経口組成物は、化合物または塩の、ポリエチレングリコール、ポリ
ビニルピロリドン、レシチン、落花生油またはゴマ油のような非経口上許容され
る油を含有していてもよい無菌水性または非水性担体中溶液または懸濁液からな
る。

【００４４】 典型的な吸入用組成物は、乾燥粉末として投与できる液剤、懸濁剤もしくは乳
剤の剤形、またはジクロロジフルオロメタンまたはトリクロロフルオロメタンの
ような慣用的な噴射剤を用いるエアゾール剤の剤形である。

【００４５】 典型的な坐剤処方物は、このような方法で投与した場合に活性な本発明の化合
物またはその医薬上許容される塩を、高分子グリコール、ゼラチン、カカオ脂ま
たは他の低融点植物ワックスもしくは脂肪またはそれらの合成アナログなどの結
合剤および／または滑沢剤と一緒に含む。

【００４６】 典型的な皮膚用または経皮処方物は、例えば、慣用的な水性または非水性ビヒ
クルを含むクリーム剤、軟膏剤、ローション剤またはペースト剤であるか、また
は薬用プラスター剤、パッチ剤または膜剤の剤形である。

【００４７】 好ましくは、当該組成物は、例えば、錠剤、カプセル剤または定量型エアゾー
ル剤などの単位投与剤形であり、患者は、単一用量を投与できる。

【００４８】 本発明の化合物を本発明に従って投与した場合、許容されない毒物学的作用は
まったく予想されない。

【００４９】 生物学的検定： 以下の検定を行なった。

【００５０】 卵巣摘出ラット試験 試験１ ７ヶ月齢の未交尾雌性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ ラットに両側の卵巣摘出
手術または偽手術を施し、次いで、該動物を３か月間保持して骨減少症を発病さ
せた。その時、１つの偽（ｓｈａｍ）群（ｎ＝１０）および３つの卵巣摘出（ｏ
ｖｘ）動物群（ｎ＝１０〜１４）が割り当てられた。ｏｖｘ群は、群の間で、腰
椎、近位脛骨または遠位大腿骨の骨塩量（「ＢＭＤ」）には有意な差異がないよ
うに選択された。群は、ビヒクル（２０％水性エンカプシン）で処置したｓｈａ
ｍおよびｏｖｘ対照、ならびにＮ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２
−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチ
ルアミン・塩酸塩（「投与されたカルシリティック化合物」）（１日につき体重
１ｋｇ当たり１００ｕｍｏｌの経口投与）またはラットＰＴＨ １−３４（１日
につき体重１ｋｇ当たり５ｕｇの皮下投与）のいずれかで処置したｏｖｘ群から
なっていた。

【００５１】 当該試験の間、循環ＰＴＨおよびオステオカルシンの測定のために血液試料を
採取した。処置前ならびに４週目および８週目にＤＸＡ（ＱＤＲ−４５００、マ
サチューセッツ州ウォルサムのホロジック（Hologic））によりＢＭＤを測定し
た。その期間が終わって、組織学的分析のために脛骨を取り出した。全ての動物
に、投与開始の１０日前および３日前にテトラサイクリンを投与し、屠殺の１０
日前および３日前にカルセイン（１０ｍｇ／ｋｇ）を投与した。

【００５２】 試験２ 上記に従って動物を調製し、モニターした。群は、ビヒクル（２０％水性エン
カプシン）を経口投与して処置したｓｈａｍおよびｏｖｘ対照、ならびにＮ−[(
２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１
,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミン・塩酸塩（１００ｕｍｏｌ／
ｋｇ／ｄ、経口投与）、１７β−エストラジオール（皮下ペレット０.０１ｍｇ
／９０日）、またはＮ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)
フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミン・
塩酸塩＋エストラジオール（各々、上記のとおり）のいずれかを投与した４つの
さらなるｏｖｘ群からなっていた。投与を５週間続け、その時点で動物を屠殺し
、組織学的分析のために脛骨を回収した。

【００５３】 循環化合物およびＰＴＨ濃度の測定 化合物またはＰＴＨの投与に関して定期的に血漿試料を回収した。ＲＩＡ（カ
リフォルニア州サン・フアン・キャピストラーノのニコルズ・インスティチュー
ト・ディアグノスティクス（Nichols Institute Diagnostics））によりＰＴＨ
１−３４を測定した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ（検出限界＝１０ｎｇ／ｍｌ）により化
合物の血漿中濃度を定量化した。

【００５４】 組織形態計測的評価 エタノールの濃度を増加させながら骨試料を脱水し、アセトン中で脱脂し、メ
チルメタクリレート（ペンシルベニア州ウォリントンのポリサイエンシズ・イン
コーポレイテッド（Polysciences, Inc.））中に包埋した。近位脛骨の長軸方向
未脱灰化切片（５μｍ）をＬｅｉｃａミクロトーム（ＳＭ２５００Ｓ）で切出し
た；組織ブロックをＶｉｌｌａｎｕｅｖａ染色で予備染色した。Ｏｓｔｅｏｍｅ
ａｓｕｒｅシステム（オステオメトリクス・インコーポレイテッド（OsteoMetri
cs Incorporated））を用いて、群割り当ての知識をもたずに組織形態計測的分
析を行なった。脛骨骨幹端内での測定は、成長板の１ｍｍ下で始まり平均組織面
積約８ｍｍ^２に制限された。主な測定は、骨および髄の面積（ｍｍ^２）、骨面積
（ｍｍ^２）、骨の周囲長（ｍｍ）、単一および二重標識した周囲長（ｓＬ.Ｐｍ
、ｄＬ.Ｐｍ、ｍｍ）、類骨周囲長（Ｏ.Ｐｍ、ｍｍ）および侵食された周囲長（
Ｅｒ.Ｐ、ｍｍ）を包含した。誘導される指標は、小柱骨体積（％Ｔｂ.Ａｒ）、
小柱数（Ｔｂ.Ｎ、ｍｍ^−１）、小柱厚（Ｔｂ.Ｔｈ、μｍ）、小柱分離（Ｔｂ.
Ｓｐ、μｍ）、骨形成速度：表面リファレント（ＢＦＲ／Ｔｂ.Ｐｍ、μｍ^３／
μｍ^２／年）、ＢＦＲ／Ｔｂ.Ａｒ（骨面積リファレント、％／年）、ＢＦＲ／
Ｂ.Ａｒ（組織リファレント、％／年）および無機質付着速度（ＭＡＲ、μｍ／
日）、ならびに標識された周囲長のパーセント（％Ｌｐ）を包含した。統計学的
分析は、両側ｔ−検定により評価した。

【００５５】 ヒト破骨細胞媒介性骨吸収検定 James, J. Bone Min. Res., Vol. 11, pp.1453-1460 に従って、新鮮な骨巨細
胞腫組織からの脱凝集ヒト破骨細胞の単離およびインビトロ・ヒト破骨細胞吸収
検定を行なった。すなわち、３７℃で２４時間、ヒト破骨細胞を化合物またはビ
ヒクルと一緒にウシ皮質骨粒子に播種した。次いで、培養培地を除去し、競合結
合酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）（１９）（デンマーク国ロドヴレのオ
ステオメター・アクティー・ゼルスカブ（Osteometer A/S））を用いて、吸収の
生化学的読出しとしてヒトＩ型コラーゲンのα１鎖のカルボキシ末端ペプチドの
濃度を定量化した。結果を、阻害物質を用いずにビヒクル中で培養した破骨細胞
から誘導された上清に対する吸収の阻害パーセントとして表す。ＩＣ_５０値は、
得られた用量応答曲線から判定する。

【００５６】 胎児ラット長骨吸収検定 この検定は、実質的に、Votta, Bone, Vol. 15, pp. 533-538, (1994) におけ
ると同様に行なった。妊娠しているＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ ラット（ニ
ューヨーク州ジャーマンタウンのタコニック・ファームズ（Taconic Farms））
に妊娠期間の１８日目に２００μＣの^４５ＣａＣｌを皮下注射し、一夜収容し、
次いで、Ｉｎｎｏｖａｒ−Ｖｅｔ（イリノイ州マンデレンのピットマン−ムーア
（Pittman-Moore））で麻酔し、頚部脱臼により屠殺した。胎児を無菌的に取り
出し、橈骨および尺骨を解剖して周囲軟組織および軟骨端を取り除いた。次いで
、１ｍｇ／ｍｌのＢＳＡを含有するＢＧＪ_ｂ培地（ミズーリ州セントルイスのシ
グマ（Sigma））中で骨原基痕跡（ｎ＝４）を１８〜２４時間培養し、次いで、
新しい培地に移し、ＰＴＨ（ヒト副甲状腺ホルモン［１−３４］、カリフォルニ
ア州トレンスのバッケム（Bachem））および所望の阻害物質の不在下または存在
下でさらに４８時間培養した。液体シンチレーション分光測定法により、培地中
に放出された^４５Ｃａおよび骨中の残留^４５Ｃａ（室温で１時間、５％ＴＣＡ中
で可溶化した後）を定量化した。データを、処置した骨から放出された^４５Ｃａ
の対応する対照骨に対するパーセントで表す。一元分散分析（ＡＮＯＶＡ）によ
り統計学的差異を評価した。ＩＣ−５０値は、２つの独立した試験からのデータ
に基づいた。

【００５７】 骨芽細胞ｃＡＭＰ産生およびアルカリホスファターゼ活性 ヒトＴＦ２７４骨芽細胞（ヒト骨髄ストローマ細胞の不死化により誘導された
）（上掲のJamesを参照のこと）および Beresford, Biochim. Biophys. Acta, V
ol. 801, pp. 58-65 (19884) に開示されている小柱骨の外植片から誘導された
初代ヒト骨芽細胞の両方においてｃＡＭＰ蓄積を測定した。非放射性プロトコー
ル（Ａｍｅｒｓｈａｍキット）を用いて細胞試料中のｃＡＭＰ濃度を測定した。
Gowen, Arth. Rheum., Vol. 31, pp. 1500-1507 (1988) に従前に開示されてい
る標準的な比色法を用いてアルカリホスファターゼ活性を判定した。Ｎ−[(２Ｒ
−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１
−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミン・塩酸塩を０.１、１および１０
ｕＭで試験した。正の対照としてＰＴＨ ４０ｎｇ／ｍｌを用いた。

【００５８】 試験１に記載した検定から得られた結果は、僅かであるが持続されたＰＴＨ濃
度の上昇が正味の骨獲得または損失を伴わずに骨代謝回転を増加させることを証
明している。

【００５９】 処置直前および投与の８週間後に腰椎、遠位大腿骨および近位脛骨において骨
塩量（ＢＭＤ）をインビボで測定した。３ヵ月前に子宮摘出した動物は、３つの
骨格部位の全てで有意な骨量を損失した：腰椎および近位脛骨で１５％ならびに
遠位大腿骨で２４％。処置単位の間、骨量は、Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(
３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−
ナフチル)エチルアミンでの処置による影響を受けなかったが、近位脛骨におい
て１日につき５ｕｇ／ｋｇのＰＴＨでの処置の８週間後には前ｏｖｘレベルに戻
っていた（図１）。この試験の最後での血漿ＰＴＨ濃度の測定は、Ｎ−[(２Ｒ−
ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−
ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミンを投与した動物が、高いＰＴＨ濃度
（＞１００ｐｇ／ｍｌ）を有し、薬物投与の４時間後でも高いままであることを
証明した（図２）。この上昇がどのくらい長く持続されたか知られていないが、
２４時間後（次回投与の直前）に、ＰＴＨ濃度はベースラインに戻った。５ｕｇ
／ｋｇのＰＴＨを投与した動物におけるＰＴＨ濃度は、Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ
−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−
２−(２−ナフチル)エチルアミンを投与した動物と同範囲であったが、投与の２
〜４時間後までにベースラインに戻った（図２）。ＰＴＨ応答の期間の差異は、
Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピ
ル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミンへの持続した曝露によ
って説明することができ、８時間までの間上昇することが判明した（図３）。

【００６０】 これら２つの投与条件下で得られたＰＴＨプロフィルにおける差異により、骨
代謝回転に対するＰＴＨへの曝露時間の作用を直接判定することができた。近位
脛骨の動的組織形態計測は、骨形成（％Ｌ.Ｐｍ、％Ｏｓ.Ｐｍ）が、ＰＴＨおよ
びＮ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロ
ピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミンの両方により、ｏｖ
ｘ対照レベルよりも上昇した（図４ａ、図４ｂ）。無機質付着率は、いずれの処
置によつても変わらなかった。しかしながら、侵食された周囲長％によって測定
した骨吸収は、ＰＴＨまたはｏｖｘ対照群におけるよりもＮ−[(２Ｒ−ヒドロキ
シ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル
−２−(２−ナフチル)エチルアミン群における方が有意に高かった（図４ｃ）こ
れは、他の２つの群と比較してＮ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２
−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチ
ルアミン処置におけるＢＦＲ／Ｂ.Ａｒ.によって示される骨代謝回転の劇的な増
大によりさらに例示される（図４ｄ）。かくして、投与されたカルシリティック
化合物の投与によって達成されたあまり高くないが延長されたＰＴＨの上昇は、
正味の骨獲得または損失を伴わずに、骨形成および骨吸収の両方を劇的に増加さ
せた。外因的に投与されたＰＴＨもまた、吸収および形成の両方を増加させたが
、形成が吸収よりも高いと、骨量が増加する。

【００６１】 試験２から得た結果は、吸収抑制剤の存在下でのＰＴＨ濃度の僅かであるが持
続した上昇が正味の骨獲得を伴って骨代謝回転を増大させることを証明している
。

【００６２】 ３ヶ月前からｏｖｘであった７ヶ月齢のラットに、エストロゲンの存在下また
は不在下で、Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノ
キシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミン・塩酸塩
を４週間の間毎日投与する第２の試験を行った。図５は、ｏｖｘ後に無処置の動
物（５ａ）、エストロゲン単独で処置した動物（５ｂ）またはエストロゲン＋Ｎ
−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]
−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミンで処置した動物（５ｃ）
からのＶｏｎ Ｋｏｓｓａで染色した脛骨の代表的な切片を示している。Ｎ−[(
２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１
,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミンおよびエストロゲンの共投与
（５ｃ）の方がエストロゲン単独よりも多く骨量を増加させることが明らかであ
る。近位脛骨の静的組織形態計測（表１）は、小柱面積％（％Ｔｂ.Ａｒ.）がｓ
ｈａｍよりもｏｖｘ動物における方が７２％低いことを示した（ｐ＜０.０００
１）。この骨損失は、エストラジオールによって有意に回復しなかった。Ｎ−[(
２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１
,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミン単独は、ｏｖｘ誘発性骨減少
症に対して影響を及ぼさなかった。しかしながら、Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３
−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(
２−ナフチル)エチルアミン＋エストロゲンは、ｏｖｘ群と比較して％Ｔｂ.Ａｒ
.を２倍増させた（図６ａ）。このことは、Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３
−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナ
フチル)エチルアミン＋エストロゲンによって誘発された小柱厚の増大によるも
のと考えられる（表１）。骨形成速度／組織面積は、Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−
３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２
−(２−ナフチル)エチルアミン＋エストロゲン群において有意に上昇した（図６
ｂ）。骨形成速度／組織面積の上昇は、骨量が測定された面積を増加させること
を示しており、ＰＴＨ作用の古典的な特徴であるリモデルされていない骨表面上
での新しい骨形成（モデリング）を反映している。このことは、骨形成の維持さ
れた上昇にもかかわらず、Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シ
アノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルア
ミン処置動物と比較して吸収を低下させると考えられる（おそらく、同時発生の
エストロゲン処置のためと考えられる）。

【００６３】 インビトロでのＮ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フ
ェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミンの骨
芽細胞および破骨細胞に対する直接的作用 Ｃａ^２＋感受性受容体は、骨芽細胞および破骨細胞の両方において明らかにさ
れているので、本発明者らは、インビトロでのＮ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(
３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−
ナフチル)エチルアミンの骨芽細胞および破骨細胞の両方に対する直接的な作用
を試験した。

【００６４】 骨芽細胞活性 ＰＴＨは、使用した両方の細胞型においてｃＡＭＰ濃度を２倍増させるが、Ｎ
−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]
−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミンは、基礎またはＰＴＨ誘
発ｃＡＭＰ濃度に対して影響を及ぼさなかった。ＴＦ２７４細胞のＮ−[(２Ｒ−
ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−
ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミンでの処置は、アルカリホスファター
ゼ活性の変化を生じず、ＰＴＨ誘発アルカリホスファターゼもまた、Ｎ−[(２Ｒ
−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１
−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミンによる影響を受けなかった。Ｎ−
[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−
１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミンは、１０ｕＭ濃度で、イン
ビトロで、多少の毒性を示した。

【００６５】 破骨細胞活性 Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロ
ピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミンは、３ｕＭまでの濃
度で、ヒト破骨細胞媒介性骨吸収に影響を及ぼさなかったが、カテプシンＫの阻
害物質である３,１１−ビス(２−メチルプロピル)−４,７,１０−トリオキソ−
２,５,６,８,９,１２−ヘキサアザトリデカンジオエートは、０.９ｕＭのＩＣ_{５ ０} でもって阻害した。この検定は、ＤＭＳＯに対するその感受性によって制限さ
れるので、３ｕＭ以上のＮ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シア
ノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミ
ンの濃度は試験できなかった。胎児ラットの長骨検定において、Ｎ−[(２Ｒ−ヒ
ドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジ
メチル−２−(２−ナフチル)エチルアミンは、１１.３＋／−３ｕＭのＩＣ_５０
でもって吸収を阻害した。この阻害のメカニズムは、知られておらず、その作用
は、Ｃａ^２＋受容体媒介性Ｃａ^２＋動員についてのＩＣ_５０よりも約３００倍高
い濃度で生じるので、Ｃａ^２＋受容体に対する作用に十分に無関係である。毒性
に関与する可能性は、除外できない。

【００６６】 上記試験は、骨代謝回転を刺激するのに十分に内因性ＰＴＨ分泌を誘発する小
さな経口活性化合物を設計することができることを証明した。この分子の薬物動
態学的特徴は、ＰＴＨの延長された上昇（＞４時間）が得られることである。こ
れにより、低濃度の循環ＰＴＨでＰＴＨ上昇の期間の役割を試験することができ
た。ＰＴＨが４時間を超えて上昇した場合、骨代謝回転はさらに上昇するが、正
味の損失または獲得を引き起こさずに平衡のままである。共治療試験は、組織形
態計測的に測定した骨形成の増加を引き起こすエストロゲンとアンタゴニストと
の共処置で行なった。

【００６７】 副甲状腺機能亢進症において見られるような慢性のＰＴＨ上昇が骨損失および
異常な骨組織学を引き起こすことはよく知られている。Dobnig et al.（上掲）
は、２時間またはそれ以上の期間にわたる高用量（４０および８０ｕｇ／ｋｇ／
日）のＰＴＨの皮下注入が、副甲状腺機能亢進症において見られる変化と一致す
る体重の急速な減少、高カルシウム血症および組織学的異常を引き起こすことを
示した。本発明者らの研究では、ＰＴＨの持続しているが非常に僅かな増加はこ
れらの副作用を引き起こさなかった。しかしながら、ＰＴＨの同化作用は、曝露
の持続により失われた。このことは、穏やかな副甲状腺機能亢進症状が、天然で
あっても薬理学的に誘発されていても、無症候性であることを示している。

【００６８】 このデータは、また、Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シア
ノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミ
ンに応答して分泌されたＰＴＨの量に関して、ＰＴＨ濃度の低い期間および低い
倍数の増加が骨代謝回転に対して深い影響を及ぼすことを示している。ラットに
おけるＰＴＨの作用についての公表されたほとんどの研究は、８０ｕｇ／ｋｇの
用量を用いていた。この用量は、本発明者らの研究における循環濃度が１５０〜
２００ｐｇ／ｍｌであるのに対して、約５,０００〜１４,０００ｐｇ／ｍｌの循
環濃度を引き起こす。このことは、非常に低い用量のＰＴＨが骨代謝回転を有効
に調節することを示している。これは、また、体重１ｋｇ当たり約０.４〜０.８
ｕｇの用量が骨量を増加させるという最近行なわれた臨床研究（８、２４）にお
いて用いられた非常に低い用量によって説明される。０.４ｕｇ／ｋｇにより、
投与の３０分後にＰＴＨ １−３４の循環濃度が約９０ｐｍｏｌ／ｌになった（
２５）。これは、循環ＰＴＨ濃度が約３倍増している。かくして、副甲状腺に貯
蔵されているＰＴＨは、Ｃａ^２＋受容体アンタゴニストに応答して放出された場
合に同化作用を引き起こすのに十分であると考えられる。

【００６９】 上記データは、副甲状腺細胞Ｃａ^２＋受容体のアンタゴニストを用いる内因性
副甲状腺ホルモン分泌の刺激が骨形成および骨吸収を増大させることを初めて示
した。吸収抑制剤の存在下、Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−
シアノ)フェノキシ−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチル
アミンは、骨量の増加を引き起こした。このことは、骨粗鬆症の処置用の新規同
化剤の開発の基礎を提供する。

【００７０】 本明細書にて引用した特許および特許出願を包含するがこれらに限定されない
全ての刊行物は、個々の刊行物が十分に開示されているかの如く具体的かつ個別
的に出典明示により本明細書の一部とすることが明示されているかのように出典
明示により本明細書の一部とする。

【図面の簡単な説明】

【図１】 試験１に従ってカルシリティック化合物またはＰＴＨで治療した
後の骨減少性ラットにおける近位脛骨ＢＭＤを表すグラフである。

【図２】 試験１に従ってカルシリティック化合物またはラットＰＴＨで処
置した骨減少症ラットにおける血漿ＰＴＨ濃度を表すグラフである。

【図３】 試験１に従ってカルシリティック化合物を投与した後のカルシリ
ティック化合物の循環濃度を表すグラフである。

【図４ａ】 試験１に従ってカルシリティック化合物またはＰＴＨで処置し
た後の骨減少症ラットからの近位脛骨についての動的組織形態計測を表すグラフ
であり、標識された周囲長％（％Ｌ.Ｐｍ）を表すグラフである。

【図４ｂ】 試験１に従ってカルシリティック化合物またはＰＴＨで処置し
た後の骨減少症ラットからの近位脛骨についての動的組織形態計測を表すグラフ
であり、侵食された表面％（％Ｅｒ.Ｐ）を表すグラフである。

【図４ｃ】 試験１に従ってカルシリティック化合物またはＰＴＨで処置し
た後の骨減少症ラットからの近位脛骨についての動的組織形態計測を表すグラフ
であり、類骨周囲長％（％Ｏｓ.Ｐｍ）を表すグラフである。

【図４ｄ】 試験１に従ってカルシリティック化合物またはＰＴＨで処置し
た後の骨減少症ラットからの近位脛骨についての動的組織形態計測を表すグラフ
であり、骨形成速度：組織面積リファレント（ＢＦＲ／Ｂ.Ａｒ）％／年を表す
グラフである。

【図５】 試験２に従ってエストロゲン＋／−カルシリティック化合物で処
置された骨減少症ｏｖｘラットからのＶｏｎ Ｋｏｓｓａで染色された脛骨の切
片の図であり、（ａ）は、ビヒクルで、（ｂ）は、１７βエストラジオールで、
（ｃ）は、ＮＰＳ ２１４３で処置した場合である。

【図６ａ】 試験２に従ってカルシリティック化合物＋／−１７βエストラ
ジオールで処置した後の骨減少症ラットからの近位脛骨についての組織形態計測
を表すグラフであり、小柱骨面積％（％Ｔｂ.Ａｒ）を表すグラフである。

【図６ｂ】 試験２に従ってカルシリティック化合物＋／−１７βエストラ
ジオールで処置した後の骨減少症ラットからの近位脛骨についての組織形態計測
を表すグラフであり、骨形成速度：組織面積リファレント（ＢＦＲ／Ｔ.Ａｒ）
％／年を表すグラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 1/02 Ａ６１Ｐ 1/02 3/12 3/12 3/14 3/14 5/18 5/18 19/02 19/02 19/08 19/08 19/10 19/10 29/00 １０１ 29/00 １０１ // Ｃ０７Ｄ 213/38 Ｃ０７Ｄ 213/38 213/74 213/74 333/58 333/58 409/12 409/12 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ， ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＵ，ＢＡ，ＢＢ， ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＺ，ＥＥ，ＧＥ，Ｇ Ｈ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＡ， ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，Ｓ Ｇ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＳ ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ (72)発明者 マキシン・ゴーウェン アメリカ合衆国19010ペンシルベニア州ブ リン・マー、サウス・ロバーツ・ロード 280番 (72)発明者 ラリー・ジェイ・スバ アメリカ合衆国19087ペンシルベニア州ウ ェイン、イートン・ドライブ161番 (72)発明者 ジョン・フォックス アメリカ合衆国84117ユタ州ソールト・レ イク・シティ、ストックブリッジ・レイン 4594番 (72)発明者 ジョージ・ビー・ストループ アメリカ合衆国19333ペンシルベニア州デ ボン、ブライトン・サークル303番 (72)発明者 エドワード・エフ・ネメス アメリカ合衆国84124ユタ州ソールト・レ イク・シティ、ザラヘムラ・ドライブ4414 番 Ｆターム(参考） 4C055 AA01 BA03 BA06 BA15 BA27 BA50 CA01 DA01 4C063 AA01 BB09 CC94 DD12 EE01 4C084 AA27 MA01 NA11 ZA67 ZA96 ZA97 ZB15 ZC06 4C086 AA01 AA02 BB03 BC17 MA01 MA52 NA11 NA14 ZA67 ZA96 ZA97 ZB15 4C206 AA01 AA02 FA18 HA14 MA02 MA72 NA11 NA14 ZA67 ZA96 ZA97 ZB15 ZC06

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 異常な骨または無機質ホメオスタシスによって特徴付けられ
   る疾患または障害の治療法であって、かかる治療を必要とする対象体に有効量の
   カルシリティック化合物を有効量の吸収抑制剤と組み合わせて投与することを含
   む方法。
2. 【請求項２】 カルシリティック化合物が以下の化合物からなる群から選択
   される請求項１記載の方法： Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロ
   ピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミン・塩酸塩； Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(３−クロロ−２−シアノ)フェノキシ−プロ
   ピル]−１,１−ジメチル−２−(４−メトキシフェニル)エチルアミン・塩酸塩； Ｎ−[(２Ｒ−ヒドロキシ−３−[(２,３−ジクロロ)フェノキシ−プロピル]−
   １,１−ジメチル−２−(４−メトキシフェニル)エチルアミン・塩酸塩； Ｎ−[(Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−
   カルボキシフェニル)スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル−１,１−ジメチ
   ル−２−(６−(１,２,３,４−テトラヒドロナフチル)エチルアミン； Ｎ−[(Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−
   カルボキシフェニル)スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチ
   ル−２−(ベンゾチエン−３−イル)−エチルアミン； Ｎ−[(Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−
   カルボキシフェニル)スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチ
   ル−２−(ベンゾチエン−２−イル)−エチルアミン； Ｎ−[(Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−
   カルボキシフェニル)スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチ
   ル−２−(デカヒドロナフタレン−２−イル)エチルアミン； Ｎ−[(Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−
   カルボキシフェニル)スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチ
   ル−４−フェニルブチルアミン； Ｎ−[(Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−
   カルボキシフェニル)スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチ
   ル−４−(２−メトキシフェニル)ブチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[４−エ
   チルカルボキシフェニル]スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジ
   メチル−２−(２−ナフチル)エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−メ
   チルカルボキシメトキシフェニル]スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−
   １,１−ジメチル−２−(２−ナフチル)エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
   Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
   ロピル]−１,１−ジメチル−２−[２−ナフチル]エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
   Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
   ルピル]−１,１−ジメチル−２−(１,２,３,４−テトラヒドロナフタ−６−イル
   )エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
   Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
   ロピル]−１,１−ジメチル−２−(ベンゾチエン−３−イル)−エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
   Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
   ロピル]−１,１−ジメチル−２−(ベンゾチエン−２−イル)−エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
   Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
   ロピル]−１,１−ジメチル−２−(デカヒドロナフタレン−２−イル)エチルアミ
   ン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
   Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
   ロピル]−１,１−ジメチル−４−(２−メトキシフェニル)ブチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチルスルホニル]−
   Ｎ−[[[１−[２−[６−メチル]アミノ]ピリジル]エチル]アミノ]フェノキシ]プ
   ロピル]−１,１−ジメチル−４−フェニルブチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[Ｎ−ベンジル−Ｎ−[４−
   メチルフェニル]スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチル−
   ２−[４−メトキシフェニル]エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[Ｎ−[４−ベンジル]スルホ
   ニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチル−２−[２−ナフチル]エ
   チルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−５−[[４−カルボキシ]フェニル
   ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメチル−２−[ナフチル]エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−カ
   ルボキシル]フェニル]スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１−ジメ
   チル−２−[２−ナフチル]エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−[[Ｎ−メチル−Ｎ−[３−メ
   チルカルボキシル]フェニル]スルホニル]アミノ]フェノキシ]プロピル]−１,１
   −ジメチル−２−[２−ナフチル]エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−(２−フェニル−２−Ｒ,Ｓ
   −カルボキシル)フェノキシ]−プロピル]−１,１−ジメチル−２−(２−ナフチ
   ル)エチルアミン； Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−４−(３−カルボキシプロピル)
   フェノキシ]−プロピル]−１,１−ジメチル−２−ナフチルエチルアミン； (Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[[２−シアノ−５−(３−カルボキシプロピル)
   フェノキシ]−プロピル]−１,１−ジメチル−２−ナフチルエチルアミン；およ
   び (Ｎ−[２Ｒ−ヒドロキシ−３−[２−[２−[６−アミノメチル]ピリジル]エチ
   ルオキシ]−１,１−ジメチル−２−ナフチルエチルアミン。
3. 【請求項３】 吸収抑制剤がエストロゲン、１,２５(ＯＨ)_２ビタミンＤ３
   、カルシトニン、選択的エストロゲン受容体調節因子、ビトロネクチン受容体ア
   ンタゴニスト、Ｖ−Ｈ＋−ＡＴＰａｓｅ阻害物質、ｓｒｃ ＳＨ２アンタゴニス
   ト、ビスホスホネートおよびカテプシンＫ阻害物質からなる群から選択される請
   求項２記載の方法。
4. 【請求項４】 骨または無機質疾患または障害が歯周疾患、骨折治癒機転、
   変形性関節症、慢性関節リウマチ、パジェット病、悪性疾患に伴う体液性高カル
   シウム血症、転移性骨疾患、関節置換および骨粗鬆症からなる群から選択される
   請求項１記載の方法。
5. 【請求項５】 骨または無機質疾患または障害が骨粗鬆症である請求項３記
   載の方法。
6. 【請求項６】 カルシリティック化合物が３倍またはそれ以上の血清ＰＴＨ
   濃度の増加を引き起こす請求項１記載の方法。
7. 【請求項７】 カルシリティック化合物が２倍またはそれ以上の血清ＰＴＨ
   濃度の増加を引き起こす請求項１記載の方法。
8. 【請求項８】 異常な骨または無機質ホメオスタシスによって特徴付けられ
   る疾患または障害の治療法であって、かかる治療を必要とする対象体に有効量の
   アナボリック化合物を有効量の吸収抑制剤と組み合わせて投与することを含む方
   法。