JP2003500041A - Ｍｅｔｈ１およびｍｅｔｈ２ポリヌクレオチドおよびポリペプチド - Google Patents
Ｍｅｔｈ１およびｍｅｔｈ２ポリヌクレオチドおよびポリペプチドInfo
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Abstract
(57)【要約】
本発明は、トロンボスポンジンに関する、新規な抗脈管形成タンパク質に関する。より詳細には、ヒトＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２をコードする単離された核酸が提供される。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２ポリぺプチドもまた提供され、ベクター、宿主細胞およびこれらを生成するための方法もまた提供される。癌の予後のための診断方法、ならびに増加した量のＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２を必要とする個体を処置するための治療方法もまた提供される。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２を使用する、脈管形成を阻害するための方法もまた提供される。
Description
【０００１】
（発明の背景）
（連邦政府が援助した研究開発の下でなされた発明に対する権利の言明）
本発明の開発中に実行された研究の一部は、米国政府基金を利用した。米国政
府は、本発明において特定の権利を有する。
府は、本発明において特定の権利を有する。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、トロンボスポンジン（ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ）に関する、
新規な抗新脈管形成タンパク質に関する。より具体的には、ヒトＭＥＴＨ１およ
びＭＥＴＨ２（ＭＥとはメタロプロテアーゼ、そしてＴＨとはトロンボスポンジ
ン）をコードする単離された核酸分子が提供される。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ
２ポリペプチドはまた、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２ポリペプチドを産生するた
めのベクター、宿主細胞および組換え方法として提供される。癌の予後について
の診断方法および漸増量のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を必要とする個体を処置
するための治療方法もまた、提供される。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を使用し
て新脈管形成を阻害するための方法もまた、提供される。
新規な抗新脈管形成タンパク質に関する。より具体的には、ヒトＭＥＴＨ１およ
びＭＥＴＨ２（ＭＥとはメタロプロテアーゼ、そしてＴＨとはトロンボスポンジ
ン）をコードする単離された核酸分子が提供される。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ
２ポリペプチドはまた、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２ポリペプチドを産生するた
めのベクター、宿主細胞および組換え方法として提供される。癌の予後について
の診断方法および漸増量のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を必要とする個体を処置
するための治療方法もまた、提供される。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を使用し
て新脈管形成を阻害するための方法もまた、提供される。
【０００３】
（関連分野）
新脈管形成（予め存在している血管系からの新しい血管の形成）は、正常な成
人では厳密に調節されたプロセスである。生理学的環境下では、新しい毛細血管
の増殖は、血管増殖を刺激するかまたは阻害するかのいずれかのために作用する
、増殖調節タンパク質の相互作用により厳密に制御される。通常、これらの力の
間のつりあいは、阻害のために傾けられ、そして結果的に、血管増殖が制限され
る。しかし、特定の病理学的環境下では、局所的な阻害制御は、新脈管形成誘導
剤の増加した活性を制限し得ない。新脈管形成は、癌の転移において鍵となる工
程であり（Ｆｏｌｋｍａｎ、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．１：２７〜３１（１９９５
））、そして異常な創傷治癒、炎症、慢性関節リウマチ、乾癬、および糖尿病性
網膜症では、病理学に必須であり（Ｆｏｌｋｍａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３５
：４４２〜４４７（１９８７））、これらの病理学的実体が血管増殖の薬理学的
抑制および／または遺伝的抑制により調節され得るという期待を生じる（Ｉｒｕ
ｅｌａ−Ａｒｉｓｐｅら、Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍ．７８：６７２〜６７７ １
９９７））。
人では厳密に調節されたプロセスである。生理学的環境下では、新しい毛細血管
の増殖は、血管増殖を刺激するかまたは阻害するかのいずれかのために作用する
、増殖調節タンパク質の相互作用により厳密に制御される。通常、これらの力の
間のつりあいは、阻害のために傾けられ、そして結果的に、血管増殖が制限され
る。しかし、特定の病理学的環境下では、局所的な阻害制御は、新脈管形成誘導
剤の増加した活性を制限し得ない。新脈管形成は、癌の転移において鍵となる工
程であり（Ｆｏｌｋｍａｎ、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．１：２７〜３１（１９９５
））、そして異常な創傷治癒、炎症、慢性関節リウマチ、乾癬、および糖尿病性
網膜症では、病理学に必須であり（Ｆｏｌｋｍａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３５
：４４２〜４４７（１９８７））、これらの病理学的実体が血管増殖の薬理学的
抑制および／または遺伝的抑制により調節され得るという期待を生じる（Ｉｒｕ
ｅｌａ−Ａｒｉｓｐｅら、Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍ．７８：６７２〜６７７ １
９９７））。
【０００４】
トロンボスポンジン（ＴＳＰ−１）は、活性化血小板から放出され、そして増
殖している細胞から分泌される、４５０ｋＤａの抗新脈管形成接着性糖タンパク
質である（Ａｄａｍｓ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２
９：８６１〜８６５（１９９７）中で概説される）。ＴＳＰ−１は、Ｎ連結グリ
コシル化およびアスパラギン残基のβ水酸化により翻訳後に修飾される、１１５
２アミノ酸残基ポリペプチドから構成される各サブユニットを有する、ホモ三量
体である。
殖している細胞から分泌される、４５０ｋＤａの抗新脈管形成接着性糖タンパク
質である（Ａｄａｍｓ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２
９：８６１〜８６５（１９９７）中で概説される）。ＴＳＰ−１は、Ｎ連結グリ
コシル化およびアスパラギン残基のβ水酸化により翻訳後に修飾される、１１５
２アミノ酸残基ポリペプチドから構成される各サブユニットを有する、ホモ三量
体である。
【０００５】
ＴＳＰ−１タンパク質およびｍＲＮＡレベルは、種々の因子により調節される
。ＴＳＰ−１タンパク質レベルは、ＩＬ−１αおよびＴＮＦαにより下方制御さ
れる。ＴＳＰ−１ ｍＲＮＡおよびタンパク質レベルは、ＰＤＧＦ、ＴＧＦβ、
およびｂＦＧＦを含むポリペプチドの増殖因子により上方制御され（Ｂｏｒｎｓ
ｔｅｉｎ、Ｆａｓｅｂ Ｊ．６：３２９０〜３２９９（１９９２））、そしてま
た、ｐ５３腫瘍サプレッサー遺伝子産物の発現レベルにより調節される（Ｄａｍ
ｅｒｏｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６５：１５８２〜１５８４（１９９４））。ト
ロンボスポンジンファミリーの少なくとも４つの他のメンバーが、同定されてい
る：ＴＳＰ−２、ＴＳＰ−３、ＴＳＰ−４、およびＴＳＰ−５（ＣＯＭＰとも呼
ばれる）。当該分野において、新脈管形成の調節に関与する他の分子を同定する
必要性がある。
。ＴＳＰ−１タンパク質レベルは、ＩＬ−１αおよびＴＮＦαにより下方制御さ
れる。ＴＳＰ−１ ｍＲＮＡおよびタンパク質レベルは、ＰＤＧＦ、ＴＧＦβ、
およびｂＦＧＦを含むポリペプチドの増殖因子により上方制御され（Ｂｏｒｎｓ
ｔｅｉｎ、Ｆａｓｅｂ Ｊ．６：３２９０〜３２９９（１９９２））、そしてま
た、ｐ５３腫瘍サプレッサー遺伝子産物の発現レベルにより調節される（Ｄａｍ
ｅｒｏｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６５：１５８２〜１５８４（１９９４））。ト
ロンボスポンジンファミリーの少なくとも４つの他のメンバーが、同定されてい
る：ＴＳＰ−２、ＴＳＰ−３、ＴＳＰ−４、およびＴＳＰ−５（ＣＯＭＰとも呼
ばれる）。当該分野において、新脈管形成の調節に関与する他の分子を同定する
必要性がある。
【０００６】
（発明の要旨）
本発明は、配列番号２に示されるアミノ酸配列、または１９９８年１月１５日
にＡＴＣＣ受託番号２０９５８１として細菌宿主中で寄託されたｃＤＮＡクロー
ンによりコードされたアミノ酸配列を有する、ＭＥＴＨ１ポリペプチドをコード
するポリヌクレオチドを含む単離された核酸分子を提供する。
にＡＴＣＣ受託番号２０９５８１として細菌宿主中で寄託されたｃＤＮＡクロー
ンによりコードされたアミノ酸配列を有する、ＭＥＴＨ１ポリペプチドをコード
するポリヌクレオチドを含む単離された核酸分子を提供する。
【０００７】
本発明はまた、配列番号４に示されるアミノ酸配列、または１９９８年１月１
５日にＡＴＣＣ受託番号２０９５８２として、もしくは２０００年３月１４日に
ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ １４７８として細菌宿主中で寄託されたｃＤＮＡクロ
ーンによりコードされたアミノ酸配列を有する、ＭＥＴＨ２ポリペプチドをコー
ドするポリヌクレオチドを含む単離された核酸分子を提供する。
５日にＡＴＣＣ受託番号２０９５８２として、もしくは２０００年３月１４日に
ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ １４７８として細菌宿主中で寄託されたｃＤＮＡクロ
ーンによりコードされたアミノ酸配列を有する、ＭＥＴＨ２ポリペプチドをコー
ドするポリヌクレオチドを含む単離された核酸分子を提供する。
【０００８】
本発明はまた、本発明の単離された核酸分子を含む組換えベクター、および組
換えベクターを含む宿主細胞ならびにこのようなベクターおよび宿主細胞を作製
する方法、ならびに組換え技術によりＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチ
ドまたはペプチドの産生のためにこれらを使用する方法に関する。
換えベクターを含む宿主細胞ならびにこのようなベクターおよび宿主細胞を作製
する方法、ならびに組換え技術によりＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチ
ドまたはペプチドの産生のためにこれらを使用する方法に関する。
【０００９】
本発明はさらに、本明細書中で記載されるポリヌクレオチドによりコードされ
るアミノ酸配列を有する単離されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチド
を提供する。
るアミノ酸配列を有する単離されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチド
を提供する。
【００１０】
本発明はさらに、癌の診断または予後の間に有用である診断方法を提供する。
【００１１】
本発明のさらなる局面は、身体中で増加したレベルのＭＥＴＨ１活性またはＭ
ＥＴＨ２活性を必要とする個体を処置するための方法に関し、これらは、治療的
に有効量の本発明の単離されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチドある
いはそれらのアゴニストを含む組成物をこのような個体に投与する工程を含む。
ＥＴＨ２活性を必要とする個体を処置するための方法に関し、これらは、治療的
に有効量の本発明の単離されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチドある
いはそれらのアゴニストを含む組成物をこのような個体に投与する工程を含む。
【００１２】
【表１】
【００１３】
【表２】
（好ましい実施形態の詳細な説明）
ＴＳＰ−１の抗新脈管形成性のドメインをコードするｃＤＮＡを用いてｃＤＮ
Ａライブラリーをスクリーニングすることによって、本発明者らは、ＴＳＰ−１
の抗新脈管形成性ドメイン、メタロプロテイナーゼドメイン、およびジスインテ
グリン様ドメインを含む、２つの新規なタンパク質ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２
（血管内皮成長アンタゴニストについては、それぞれ、ＶＥＧＡ−１およびＶＥ
ＧＡ−２とも呼ばれる）を同定した。本発明者らは、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ
２の両方が抗新脈管形成性活性を有することを実証した。
Ａライブラリーをスクリーニングすることによって、本発明者らは、ＴＳＰ−１
の抗新脈管形成性ドメイン、メタロプロテイナーゼドメイン、およびジスインテ
グリン様ドメインを含む、２つの新規なタンパク質ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２
（血管内皮成長アンタゴニストについては、それぞれ、ＶＥＧＡ−１およびＶＥ
ＧＡ−２とも呼ばれる）を同定した。本発明者らは、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ
２の両方が抗新脈管形成性活性を有することを実証した。
【００１４】
従って、本発明は、クローン化ｃＤＮＡを配列決定することによって決定され
た配列番号２に示されるアミノ酸配列を有するＭＥＴＨ１ポリペプチドをコード
するポリヌクレオチドを含む単離された核酸分子を提供する。本発明のＭＥＴＨ
１タンパク質は、トロンボスポンジン−１およびｐＮＰＩと配列相同性を共有す
る。配列番号１に示されるヌクレオチド配列は、１９９８年１月１５日にアメリ
カンタイプカルチャーコレクション、１０８０１、ユニバーシティー ブールバ
ード、マナサス、バージニア ２０１１０−２２０９に寄託され、そして受託番
号２０９５８１を与えられたｃＤＮＡクローンを配列決定することによって得ら
れた。ｃＤＮＡクローンは、ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１に含有され、そして
ＭＥＴＨ１配列を含み、配列番号２のアミノ酸１〜９５０をコードする。
た配列番号２に示されるアミノ酸配列を有するＭＥＴＨ１ポリペプチドをコード
するポリヌクレオチドを含む単離された核酸分子を提供する。本発明のＭＥＴＨ
１タンパク質は、トロンボスポンジン−１およびｐＮＰＩと配列相同性を共有す
る。配列番号１に示されるヌクレオチド配列は、１９９８年１月１５日にアメリ
カンタイプカルチャーコレクション、１０８０１、ユニバーシティー ブールバ
ード、マナサス、バージニア ２０１１０−２２０９に寄託され、そして受託番
号２０９５８１を与えられたｃＤＮＡクローンを配列決定することによって得ら
れた。ｃＤＮＡクローンは、ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１に含有され、そして
ＭＥＴＨ１配列を含み、配列番号２のアミノ酸１〜９５０をコードする。
【００１５】
本発明はまた、クローン化ｃＤＮＡを配列決定することによって部分的に決定
された配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＭＥＴＨ２ポリペプチドをコ
ードするポリヌクレオチドを含む単離された核酸分子を提供する。本発明のＭＥ
ＴＨ２タンパク質は、トロンボスポンジン−１およびｐＮＰＩと配列相同性を共
有する。配列番号３に示されるヌクレオチド配列を、ｃＤＮＡクローンを配列決
定することによって部分的に得、これを、アメリカンタイプカルチャーコレクシ
ョン、１０８０１、ユニバーシティー ブールバード、マナサス、バージニア、
２０１１０−２２０９に１９９８年１月１５日に寄託し、受託番号２０９５８２
を与えられた。ｃＤＮＡクローンは、ＡＴＣＣ受託番号２０９５８２に含有され
、部分ＭＥＴＨ２配列を含み、配列番号４のアミノ酸１１２−８９０をコードす
る。ＭＥＴＨ２配列全体を含むｃＤＮＡクローンを、アメリカンタイプカルチャ
ーコレクション、１０８０１、ユニバーシティー ブールバード、マナサス、バ
ージニア、２０１１０−２２０９に２０００年３月１４日に寄託し、受託番号Ｐ
ＴＡ １４７８を与えられた。
された配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＭＥＴＨ２ポリペプチドをコ
ードするポリヌクレオチドを含む単離された核酸分子を提供する。本発明のＭＥ
ＴＨ２タンパク質は、トロンボスポンジン−１およびｐＮＰＩと配列相同性を共
有する。配列番号３に示されるヌクレオチド配列を、ｃＤＮＡクローンを配列決
定することによって部分的に得、これを、アメリカンタイプカルチャーコレクシ
ョン、１０８０１、ユニバーシティー ブールバード、マナサス、バージニア、
２０１１０−２２０９に１９９８年１月１５日に寄託し、受託番号２０９５８２
を与えられた。ｃＤＮＡクローンは、ＡＴＣＣ受託番号２０９５８２に含有され
、部分ＭＥＴＨ２配列を含み、配列番号４のアミノ酸１１２−８９０をコードす
る。ＭＥＴＨ２配列全体を含むｃＤＮＡクローンを、アメリカンタイプカルチャ
ーコレクション、１０８０１、ユニバーシティー ブールバード、マナサス、バ
ージニア、２０１１０−２２０９に２０００年３月１４日に寄託し、受託番号Ｐ
ＴＡ １４７８を与えられた。
【００１６】
（核酸分子）
本明細書でＤＮＡ分子を配列決定することによって決定されたヌクレオチド配
列のいくつかを、自動化ＤＮＡシークエンサー（例えば、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉ
ｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．からのＭｏｄｅｌ ３７３）を使用して決定し、そ
して本明細書で決定されたＤＮＡ分子によってコードされるポリペプチドの全て
のアミノ酸配列は、上記のように決定されたＤＮＡ配列の翻訳によって予想され
た。従って、当該分野で公知のように、この自動化アプローチによって決定され
た任意のＤＮＡ配列について、本明細書で決定された任意のヌクレオチド配列は
、いくらかの誤差を含み得る。自動化によって決定されたヌクレオチド配列は、
代表的には、配列決定されたＤＮＡ分子の実際のヌクレオチド配列に対して、少
なくとも約９０％同一、より代表的には少なくとも約９５％から少なくとも約９
９．９％同一である。実際の配列は、当該分野で周知の手動ＤＮＡ配列決定法を
含む他のアプローチによって、より正確に決定され得る。同様に当該分野で公知
のように、実際の配列と比較しての、決定されたヌクレオチド配列における単一
の挿入または欠失は、決定されたヌクレオチド配列によってコードされる推定ア
ミノ酸配列が、そのような挿入または欠失の点で開始して配列決定されたＤＮＡ
分子によって実際にコードされるアミノ酸配列とは完全に異なるように、ヌクレ
オチド配列の翻訳におけるフレームシフトを引き起こす。
列のいくつかを、自動化ＤＮＡシークエンサー（例えば、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉ
ｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．からのＭｏｄｅｌ ３７３）を使用して決定し、そ
して本明細書で決定されたＤＮＡ分子によってコードされるポリペプチドの全て
のアミノ酸配列は、上記のように決定されたＤＮＡ配列の翻訳によって予想され
た。従って、当該分野で公知のように、この自動化アプローチによって決定され
た任意のＤＮＡ配列について、本明細書で決定された任意のヌクレオチド配列は
、いくらかの誤差を含み得る。自動化によって決定されたヌクレオチド配列は、
代表的には、配列決定されたＤＮＡ分子の実際のヌクレオチド配列に対して、少
なくとも約９０％同一、より代表的には少なくとも約９５％から少なくとも約９
９．９％同一である。実際の配列は、当該分野で周知の手動ＤＮＡ配列決定法を
含む他のアプローチによって、より正確に決定され得る。同様に当該分野で公知
のように、実際の配列と比較しての、決定されたヌクレオチド配列における単一
の挿入または欠失は、決定されたヌクレオチド配列によってコードされる推定ア
ミノ酸配列が、そのような挿入または欠失の点で開始して配列決定されたＤＮＡ
分子によって実際にコードされるアミノ酸配列とは完全に異なるように、ヌクレ
オチド配列の翻訳におけるフレームシフトを引き起こす。
【００１７】
本明細書で提供される情報（例えば、配列番号１または配列番号３のヌクレオ
チド配列）を使用することにより、ＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポ
リペプチドをコードする本発明の核酸分子は、標準的なクローニングおよびスク
リーニング手順（例えば、ｍＲＮＡを開始物質として使用してｃＤＮＡをクロー
ニングするための手順）を使用して得られ得る。本発明の例示として、配列番号
１に記載される核酸分子は、ヒト心臓に由来するｃＤＮＡライブラリーにおいて
見出され、そして配列番号３に記載される核酸分子は、ヒト肺に由来するｃＤＮ
Ａライブラリーにおいて見出された。配列番号１のＭＥＴＨ１ ｃＤＮＡの決定
されたヌクレオチド配列は、約２８のアミノ酸残基の推定リーダー配列を含む、
約９５０アミノ酸残基のタンパク質をコードするオープンリーディングフレーム
を含む。本発明者らは、配列番号３のＭＥＴＨ２ ｃＤＮＡのヌクレオチド配列
が、約２３アミノ酸残基の推定リーダー配列を含む、約８９０のアミノ酸残基の
タンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含有することを決定し
た。
チド配列）を使用することにより、ＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポ
リペプチドをコードする本発明の核酸分子は、標準的なクローニングおよびスク
リーニング手順（例えば、ｍＲＮＡを開始物質として使用してｃＤＮＡをクロー
ニングするための手順）を使用して得られ得る。本発明の例示として、配列番号
１に記載される核酸分子は、ヒト心臓に由来するｃＤＮＡライブラリーにおいて
見出され、そして配列番号３に記載される核酸分子は、ヒト肺に由来するｃＤＮ
Ａライブラリーにおいて見出された。配列番号１のＭＥＴＨ１ ｃＤＮＡの決定
されたヌクレオチド配列は、約２８のアミノ酸残基の推定リーダー配列を含む、
約９５０アミノ酸残基のタンパク質をコードするオープンリーディングフレーム
を含む。本発明者らは、配列番号３のＭＥＴＨ２ ｃＤＮＡのヌクレオチド配列
が、約２３アミノ酸残基の推定リーダー配列を含む、約８９０のアミノ酸残基の
タンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含有することを決定し
た。
【００１８】
本発明はまた、本発明のＭＥＴＨ１タンパク質およびＭＥＴＨ２タンパク質の
成熟形態を提供する。シグナル仮説に従うと、哺乳動物細胞によって分泌される
タンパク質は、一旦粗面小胞体を横切る成長中のタンパク質鎖の移出が開始され
ると成熟タンパク質から切断される、シグナルまたは分泌リーダー配列を有する
。ほとんどの哺乳動物細胞および昆虫細胞でさえ、分泌タンパク質を同じ特異性
で切断する。しかし、いくつかの場合には、分泌されたタンパク質の切断は完全
に均一ではなく、このことによりそのタンパク質に関して２つ以上の成熟種を生
じる。さらに、分泌されたタンパク質の切断特異性は、完全タンパク質の一次構
造によって最終的に決定されること、すなわち、そのポリペプチドのアミノ酸配
列に固有であることが長い間公知であった。それゆえ、本発明は、ＡＴＣＣ受託
番号２０９５８１として同定され、そして配列番号２に示される宿主に含まれる
ｃＤＮＡクローンによってコードされるアミノ酸配列を有する成熟ＭＥＴＨ１ポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列を提供する。本発明はまた、配列番号
４に示されるアミノ酸配列を有する成熟ＭＥＴＨ２ポリペプチドをコードするヌ
クレオチド配列を提供する。ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１として同定される宿
主に含まれるｃＤＮＡクローンによってコードされるアミノ酸配列を有する成熟
ＭＥＴＨ１タンパク質は、寄託された宿主中のベクターに含まれるクローンのヒ
トＤＮＡ配列によってコードされる完全オープンリーディングフレームの哺乳動
物細胞（例えば、以下に記載のＣＯＳ細胞）における発現によって産生されるＭ
ＥＴＨ１タンパク質の成熟形態を意味する。以下に示されるように、ＡＴＣＣ受
託番号２０９５８１に含まれるｃＤＮＡクローンによってコードされるアミノ酸
配列を有する成熟ＭＥＴＨ１は、配列番号２に示される推定「成熟」ＭＥＴＨ１
タンパク質（約２９から約９５０までのアミノ酸）とは、コンピューター分析に
基づいて推定される切断部位の精度に依存して、異なるかもしれないし、異なら
ないかもしれない。そして成熟ＭＥＴＨ２は、コンピューター分析に基づいて推
定された切断部位の精度に依存して、配列番号４に示される推定「成熟」ＭＥＴ
Ｈ２タンパク質（約２４から約８９０までのアミノ酸）とは、異なるかもしれな
いし、異ならないかもしれない。さらに、次いで、成熟形態のタンパク質は、切
断された後により一層のプロセシングを受け得る（例えば、メタロプロテアーゼ
ドメイン／システインリッチ領域に位置する、プロドメインに対して遠位の第２
の切断）。従って、タンパク質の「成熟」形態は、プロドメインの切断によって
生成される形態のみならず、タンパク質の他のプロセスされた形態をも含む。
成熟形態を提供する。シグナル仮説に従うと、哺乳動物細胞によって分泌される
タンパク質は、一旦粗面小胞体を横切る成長中のタンパク質鎖の移出が開始され
ると成熟タンパク質から切断される、シグナルまたは分泌リーダー配列を有する
。ほとんどの哺乳動物細胞および昆虫細胞でさえ、分泌タンパク質を同じ特異性
で切断する。しかし、いくつかの場合には、分泌されたタンパク質の切断は完全
に均一ではなく、このことによりそのタンパク質に関して２つ以上の成熟種を生
じる。さらに、分泌されたタンパク質の切断特異性は、完全タンパク質の一次構
造によって最終的に決定されること、すなわち、そのポリペプチドのアミノ酸配
列に固有であることが長い間公知であった。それゆえ、本発明は、ＡＴＣＣ受託
番号２０９５８１として同定され、そして配列番号２に示される宿主に含まれる
ｃＤＮＡクローンによってコードされるアミノ酸配列を有する成熟ＭＥＴＨ１ポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列を提供する。本発明はまた、配列番号
４に示されるアミノ酸配列を有する成熟ＭＥＴＨ２ポリペプチドをコードするヌ
クレオチド配列を提供する。ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１として同定される宿
主に含まれるｃＤＮＡクローンによってコードされるアミノ酸配列を有する成熟
ＭＥＴＨ１タンパク質は、寄託された宿主中のベクターに含まれるクローンのヒ
トＤＮＡ配列によってコードされる完全オープンリーディングフレームの哺乳動
物細胞（例えば、以下に記載のＣＯＳ細胞）における発現によって産生されるＭ
ＥＴＨ１タンパク質の成熟形態を意味する。以下に示されるように、ＡＴＣＣ受
託番号２０９５８１に含まれるｃＤＮＡクローンによってコードされるアミノ酸
配列を有する成熟ＭＥＴＨ１は、配列番号２に示される推定「成熟」ＭＥＴＨ１
タンパク質（約２９から約９５０までのアミノ酸）とは、コンピューター分析に
基づいて推定される切断部位の精度に依存して、異なるかもしれないし、異なら
ないかもしれない。そして成熟ＭＥＴＨ２は、コンピューター分析に基づいて推
定された切断部位の精度に依存して、配列番号４に示される推定「成熟」ＭＥＴ
Ｈ２タンパク質（約２４から約８９０までのアミノ酸）とは、異なるかもしれな
いし、異ならないかもしれない。さらに、次いで、成熟形態のタンパク質は、切
断された後により一層のプロセシングを受け得る（例えば、メタロプロテアーゼ
ドメイン／システインリッチ領域に位置する、プロドメインに対して遠位の第２
の切断）。従って、タンパク質の「成熟」形態は、プロドメインの切断によって
生成される形態のみならず、タンパク質の他のプロセスされた形態をも含む。
【００１９】
タンパク質が分泌リーダーならびにそのリーダー配列についての切断点を有す
るか否かを予測する方法が利用可能である。例えば、ＭｃＧｅｏｃｈの方法（Ｖ
ｉｒｕｓ Ｒｅｓ．３：２７１−２８６（１９８５））およびｖｏｎ Ｈｅｉｎ
ｊｅ（Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１４：４６８３−４６９０（１９
８６））が使用され得る。これらの方法の各々についての公知の哺乳動物分泌タ
ンパク質の切断点を予測することの精度は、７５〜８０％の範囲である。ｖｏｎ
Ｈｅｉｎｊｅ（前出）。しかし、２つの方法は、所定のタンパク質について同
一の予測される切断点をつねに産生するわけではない。
るか否かを予測する方法が利用可能である。例えば、ＭｃＧｅｏｃｈの方法（Ｖ
ｉｒｕｓ Ｒｅｓ．３：２７１−２８６（１９８５））およびｖｏｎ Ｈｅｉｎ
ｊｅ（Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１４：４６８３−４６９０（１９
８６））が使用され得る。これらの方法の各々についての公知の哺乳動物分泌タ
ンパク質の切断点を予測することの精度は、７５〜８０％の範囲である。ｖｏｎ
Ｈｅｉｎｊｅ（前出）。しかし、２つの方法は、所定のタンパク質について同
一の予測される切断点をつねに産生するわけではない。
【００２０】
本件では、本発明の完全ＭＥＴＨ１ポリペプチドおよびＭＥＴＨ２ポリペプチ
ドの予測されるアミノ酸配列は、コンピュータープログラム（「ＰＳＯＲＴ」）
（Ｋ．ＮａｋａｉおよびＭ．Ｋａｎｅｈｉｓａ，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ １４：８９
７−９１１（１９９２））によって分析され、これは、アミノ酸配列に基づいて
タンパク質の細胞位置を予測するための専門家システムである。このコンピュー
ターによる位置の予測の一部として、ＭｃＧｅｏｃｈおよびｖｏｎ Ｈｅｉｎｊ
ｅの方法が組み込まれている。ＰＲＯＲＴプログラムによる分析は、配列番号２
におけるアミノ酸２８と２９との間、および配列番号４におけるアミノ酸２３と
２４との間の切断部位を予測した。その後、完全アミノ酸配列は、ｖｏｎ Ｈｅ
ｉｎｊｅの（−１，−３）規則（ｖｏｎ Ｈｅｉｎｊｅ、前出）の単純形態を適
用することによって視覚的な検査によりさらに分析された。従って、ＭＥＴＨ１
タンパク質のリーダー配列は、配列番号２の約１〜約２８までのアミノ酸残基か
らなり、一方、成熟ＭＥＴＨ１タンパク質は、約２９〜約９５０までの残基から
なると予想され；そしてＭＥＴＨ２タンパク質のリーダー配列は、配列番号４の
約１〜約２３までのアミノ酸残基からなり、一方、成熟ＭＥＴＨ２タンパク質は
、約２４〜約８９０までの残基からなると予想される。代替の推定成熟ＭＥＴＨ
１タンパク質は、配列番号２の残基３０〜９５０からなる。別の代替的な推定成
熟ＭＥＴＨ１タンパク質は、配列番号２の残基約３５〜９５０からなる。代替的
な推定成熟ＭＥＴＨ２タンパク質は、配列番号４の残基３１〜８９０からなる。
ドの予測されるアミノ酸配列は、コンピュータープログラム（「ＰＳＯＲＴ」）
（Ｋ．ＮａｋａｉおよびＭ．Ｋａｎｅｈｉｓａ，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ １４：８９
７−９１１（１９９２））によって分析され、これは、アミノ酸配列に基づいて
タンパク質の細胞位置を予測するための専門家システムである。このコンピュー
ターによる位置の予測の一部として、ＭｃＧｅｏｃｈおよびｖｏｎ Ｈｅｉｎｊ
ｅの方法が組み込まれている。ＰＲＯＲＴプログラムによる分析は、配列番号２
におけるアミノ酸２８と２９との間、および配列番号４におけるアミノ酸２３と
２４との間の切断部位を予測した。その後、完全アミノ酸配列は、ｖｏｎ Ｈｅ
ｉｎｊｅの（−１，−３）規則（ｖｏｎ Ｈｅｉｎｊｅ、前出）の単純形態を適
用することによって視覚的な検査によりさらに分析された。従って、ＭＥＴＨ１
タンパク質のリーダー配列は、配列番号２の約１〜約２８までのアミノ酸残基か
らなり、一方、成熟ＭＥＴＨ１タンパク質は、約２９〜約９５０までの残基から
なると予想され；そしてＭＥＴＨ２タンパク質のリーダー配列は、配列番号４の
約１〜約２３までのアミノ酸残基からなり、一方、成熟ＭＥＴＨ２タンパク質は
、約２４〜約８９０までの残基からなると予想される。代替の推定成熟ＭＥＴＨ
１タンパク質は、配列番号２の残基３０〜９５０からなる。別の代替的な推定成
熟ＭＥＴＨ１タンパク質は、配列番号２の残基約３５〜９５０からなる。代替的
な推定成熟ＭＥＴＨ２タンパク質は、配列番号４の残基３１〜８９０からなる。
【００２１】
当業者が理解するように、配列決定誤差の可能性、および異なる公知のタンパ
ク質におけるリーダーについての切断部位の可変性のために、寄託されたｃＤＮ
Ａによってコードされる推定ＭＥＴＨ１ポリペプチドは、約９５０アミノ酸を含
むが、９１０〜９９０アミノ酸の範囲のどこかであり得；そしてこのタンパク質
の推定リーダー配列は、約２８アミノ酸であるが、約１８〜約３８アミノ酸の範
囲のどこかであり得る。代替的な推定ＭＥＴＨ１ポリペプチドは、配列番号１２
５に示されており、そしてＮ末端にさらなる１８アミノ酸残基を含む。また、予
想されるＭＥＴＨ２ポリペプチドは、約８９０アミノ酸を含むが、８５０〜約９
３０アミノ酸の範囲のどこかであり得る；そしてこのタンパク質の予想されるリ
ーダー配列は、約２３アミノ酸であるが、約１３〜約３３アミノ酸の範囲のどこ
かであり得る。
ク質におけるリーダーについての切断部位の可変性のために、寄託されたｃＤＮ
Ａによってコードされる推定ＭＥＴＨ１ポリペプチドは、約９５０アミノ酸を含
むが、９１０〜９９０アミノ酸の範囲のどこかであり得；そしてこのタンパク質
の推定リーダー配列は、約２８アミノ酸であるが、約１８〜約３８アミノ酸の範
囲のどこかであり得る。代替的な推定ＭＥＴＨ１ポリペプチドは、配列番号１２
５に示されており、そしてＮ末端にさらなる１８アミノ酸残基を含む。また、予
想されるＭＥＴＨ２ポリペプチドは、約８９０アミノ酸を含むが、８５０〜約９
３０アミノ酸の範囲のどこかであり得る；そしてこのタンパク質の予想されるリ
ーダー配列は、約２３アミノ酸であるが、約１３〜約３３アミノ酸の範囲のどこ
かであり得る。
【００２２】
示されるように、本発明の核酸分子は、ＲＮＡの形態（例えば、ｍＲＮＡ）、
またはＤＮＡの形態（例えば、クローニングにより、または合成的に産生して得
られるｃＤＮＡおよびゲノムｃＤＮＡを含む）であり得る。ＤＮＡは、二本鎖ま
たは一本鎖であり得る。一本鎖ＤＮＡまたはＲＮＡは、コード鎖（センス鎖とし
ても知られる）であり得るか、またはそれは非コード鎖（アンチセンス鎖ともい
われる）であり得る。
またはＤＮＡの形態（例えば、クローニングにより、または合成的に産生して得
られるｃＤＮＡおよびゲノムｃＤＮＡを含む）であり得る。ＤＮＡは、二本鎖ま
たは一本鎖であり得る。一本鎖ＤＮＡまたはＲＮＡは、コード鎖（センス鎖とし
ても知られる）であり得るか、またはそれは非コード鎖（アンチセンス鎖ともい
われる）であり得る。
【００２３】
「単離された」核酸分子は、天然の環境から取り出された核酸分子、ＤＮＡま
たはＲＮＡを意図する。例えば、ベクターに含まれる組換えＤＮＡ分子は、本発
明の目的のために単離されたと見なされる。単離されたＤＮＡ分子のさらなる例
には、異種宿主細胞において維持される組換えＤＮＡ分子あるいは溶液中の精製
された（部分的または実質的に）ＤＮＡ分子が含まれる。単離されたＲＮＡ分子
には、本発明のＤＮＡ分子のインビボまたはインビトロのＲＮＡ転写物が含まれ
る。本発明に従う単離された核酸分子は、合成的に産生されたこのような分子を
さらに含む。
たはＲＮＡを意図する。例えば、ベクターに含まれる組換えＤＮＡ分子は、本発
明の目的のために単離されたと見なされる。単離されたＤＮＡ分子のさらなる例
には、異種宿主細胞において維持される組換えＤＮＡ分子あるいは溶液中の精製
された（部分的または実質的に）ＤＮＡ分子が含まれる。単離されたＲＮＡ分子
には、本発明のＤＮＡ分子のインビボまたはインビトロのＲＮＡ転写物が含まれ
る。本発明に従う単離された核酸分子は、合成的に産生されたこのような分子を
さらに含む。
【００２４】
本発明の単離された核酸分子には、配列番号１に示されるオープンリーディン
グフレーム（ＯＲＦ）を含むＤＮＡ分子；成熟ＭＥＴＨ１タンパク質のコード配
列を含むＤＮＡ分子；および上記のものとは実質的に異なるが、遺伝コードの縮
重により、なおＭＥＴＨ１タンパク質をコードする配列を含むＤＮＡ分子が含ま
れる。配列番号３に示されるオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含むＤ
ＮＡ分子；成熟ＭＥＴＨ２タンパク質のコード配列を含むＤＮＡ分子；および上
記のものとは実質的に異なるが、遺伝子コードの縮重のため、なおＭＥＴＨ２タ
ンパク質をコードする配列を含むＤＮＡ分子もまた含まれる。当然、遺伝コード
は、当該分野で周知である。従って、このような縮重改変体を生成することは当
業者には慣用的である。
グフレーム（ＯＲＦ）を含むＤＮＡ分子；成熟ＭＥＴＨ１タンパク質のコード配
列を含むＤＮＡ分子；および上記のものとは実質的に異なるが、遺伝コードの縮
重により、なおＭＥＴＨ１タンパク質をコードする配列を含むＤＮＡ分子が含ま
れる。配列番号３に示されるオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含むＤ
ＮＡ分子；成熟ＭＥＴＨ２タンパク質のコード配列を含むＤＮＡ分子；および上
記のものとは実質的に異なるが、遺伝子コードの縮重のため、なおＭＥＴＨ２タ
ンパク質をコードする配列を含むＤＮＡ分子もまた含まれる。当然、遺伝コード
は、当該分野で周知である。従って、このような縮重改変体を生成することは当
業者には慣用的である。
【００２５】
本発明のポリヌクレオチドは、全長配列をコードするポリヌクレオチドのみな
らず、そのタンパク質の成熟形態、プロタンパク質形態、プロセスされた形態、
欠失変異体、置換改変体、対立遺伝子改変体、アナログ、誘導体などを含む。
らず、そのタンパク質の成熟形態、プロタンパク質形態、プロセスされた形態、
欠失変異体、置換改変体、対立遺伝子改変体、アナログ、誘導体などを含む。
【００２６】
別の局面において、本発明は、ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１として１９９８
年１月１５日に寄託されたプラスミドに含まれるｃＤＮＡクローン、またはＡＴ
ＣＣ受託番号２０９５８２として１９９８年１月１５日に寄託されたプラスミド
に含まれるｃＤＮＡクローンによってコードされるアミノ酸配列をそれぞれ有す
るＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチド；あるいはＡＴＣＣ受
託番号ＰＴＡ １４７８として２０００年３月１４日に寄託されたプラスミドに
含まれるｃＤＮＡクローンによってコードされるアミノ酸配列を有するＭＥＴＨ
２ポリペプチドをコードする単離された核酸分子を提供する。さらなる実施形態
において、成熟ＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチドあるいは
Ｎ末端メチオニンを欠失する全長ＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリ
ペプチドをコードする核酸分子が提供される。本発明はまた、配列番号１または
配列番号３に示されるヌクレオチド配列、あるいは上記の寄託されたクローンに
含まれるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のｃＤＮＡのヌクレオチド配列を有する単
離された核酸分子、あるいは上記の配列の１つに相補的な配列を有する核酸分子
を提供する。このような単離された分子、特にＤＮＡ分子は、染色体とのインサ
イチュハイブリダイゼーションによる遺伝子マッピングのための、およびヒト組
織におけるＭＥＴＨ１遺伝子またはＭＥＴＨ２遺伝子の発現を、例えば、ノーザ
ンブロット分析により検出するためのプローブとして有用である。
年１月１５日に寄託されたプラスミドに含まれるｃＤＮＡクローン、またはＡＴ
ＣＣ受託番号２０９５８２として１９９８年１月１５日に寄託されたプラスミド
に含まれるｃＤＮＡクローンによってコードされるアミノ酸配列をそれぞれ有す
るＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチド；あるいはＡＴＣＣ受
託番号ＰＴＡ １４７８として２０００年３月１４日に寄託されたプラスミドに
含まれるｃＤＮＡクローンによってコードされるアミノ酸配列を有するＭＥＴＨ
２ポリペプチドをコードする単離された核酸分子を提供する。さらなる実施形態
において、成熟ＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチドあるいは
Ｎ末端メチオニンを欠失する全長ＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリ
ペプチドをコードする核酸分子が提供される。本発明はまた、配列番号１または
配列番号３に示されるヌクレオチド配列、あるいは上記の寄託されたクローンに
含まれるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のｃＤＮＡのヌクレオチド配列を有する単
離された核酸分子、あるいは上記の配列の１つに相補的な配列を有する核酸分子
を提供する。このような単離された分子、特にＤＮＡ分子は、染色体とのインサ
イチュハイブリダイゼーションによる遺伝子マッピングのための、およびヒト組
織におけるＭＥＴＨ１遺伝子またはＭＥＴＨ２遺伝子の発現を、例えば、ノーザ
ンブロット分析により検出するためのプローブとして有用である。
【００２７】
本発明はさらに、本明細書中に記載される単離された核酸分子のフラグメント
に関する。寄託されたｃＤＮＡのヌクレオチド配列または配列番号１もしくは配
列番号３に示されるヌクレオチド配列を有する単離された核酸分子のフラグメン
トとは、本明細書で議論される診断用プローブおよびプライマーとして有用な、
少なくとも約１５ｎｔ、そしてより好ましくは、少なくとも約２０ｎｔ、なおよ
り好ましくは、少なくとも約３０ｎｔ、そしてさらにより好ましくは、少なくと
も約４０ｎｔ長のフラグメントを意図する。当然に、より大きいフラグメントで
ある５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０
、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００
、９５０、１０００、１０５０、１１００、１２００、１３００、１４００、１
５００、１６００、１７００、１８００、１９００、２０００、２１００、２２
００、２３００、２４００、２５００、２６００、２７００、２８００、２９０
０、または３０００ｎｔ長のフラグメントもまた、寄託されたｃＤＮＡのヌクレ
オチド配列、または配列番号１もしくは配列番号３に示されるヌクレオチド配列
のほとんど（全てでないとしても）に対応するフラグメントと同様に、本発明に
従って有用である。例えば、少なくとも２０ｎｔ長のフラグメントにより、寄託
されたｃＤＮＡのヌクレオチド配列、または配列番号１もしくは配列番号３に示
されるヌクレオチド配列からの２０以上の連続する塩基を含むフラグメントが意
図される。
に関する。寄託されたｃＤＮＡのヌクレオチド配列または配列番号１もしくは配
列番号３に示されるヌクレオチド配列を有する単離された核酸分子のフラグメン
トとは、本明細書で議論される診断用プローブおよびプライマーとして有用な、
少なくとも約１５ｎｔ、そしてより好ましくは、少なくとも約２０ｎｔ、なおよ
り好ましくは、少なくとも約３０ｎｔ、そしてさらにより好ましくは、少なくと
も約４０ｎｔ長のフラグメントを意図する。当然に、より大きいフラグメントで
ある５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０
、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００
、９５０、１０００、１０５０、１１００、１２００、１３００、１４００、１
５００、１６００、１７００、１８００、１９００、２０００、２１００、２２
００、２３００、２４００、２５００、２６００、２７００、２８００、２９０
０、または３０００ｎｔ長のフラグメントもまた、寄託されたｃＤＮＡのヌクレ
オチド配列、または配列番号１もしくは配列番号３に示されるヌクレオチド配列
のほとんど（全てでないとしても）に対応するフラグメントと同様に、本発明に
従って有用である。例えば、少なくとも２０ｎｔ長のフラグメントにより、寄託
されたｃＤＮＡのヌクレオチド配列、または配列番号１もしくは配列番号３に示
されるヌクレオチド配列からの２０以上の連続する塩基を含むフラグメントが意
図される。
【００２８】
本発明の好ましい核酸フラグメントは、ＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ
２タンパク質のエピトープ保有部分をコードする核酸分子を含む。ＭＥＴＨ１タ
ンパク質およびＭＥＴＨ２タンパク質のエピトープ保有部分を決定するための方
法は、以下に詳細に記載される。
２タンパク質のエピトープ保有部分をコードする核酸分子を含む。ＭＥＴＨ１タ
ンパク質およびＭＥＴＨ２タンパク質のエピトープ保有部分を決定するための方
法は、以下に詳細に記載される。
【００２９】
本発明の他の好ましい核酸フラグメントには、以下をコードする核酸分子が含
まれる：ＭＥＴＨ１のメタロプロテアーゼドメインである配列番号２のアミノ酸
２３５〜４５９；ＭＥＴＨ１のジスインテグリンドメインである配列番号２のア
ミノ酸４６０〜５４４；ＭＥＴＨ１の第１ＴＳＰ様ドメインである配列番号２の
アミノ酸５４５〜５９８；ＭＥＴＨ１の第２ＴＳＰ様ドメインである配列番号２
のアミノ酸８４１〜８９４；ＭＥＴＨ１の第３ＴＳＰ様ドメインである配列番号
２のアミノ酸８９５〜９３４；配列番号２のアミノ酸５３６〜６１３；配列番号
２のアミノ酸５４９〜５６３；ＭＥＴＨ２のメタロプロテアーゼドメインである
配列番号４のアミノ酸２１４〜４３９；ＭＥＴＨ２のジスインテグリンドメイン
である配列番号４のアミノ酸４４０〜５２９；ＭＥＴＨ２の第１ＴＳＰ様ドメイ
ンである配列番号４のアミノ酸５３０〜５８３；ＭＥＴＨ２の第２ＴＳＰ様ドメ
インである配列番号４のアミノ酸８３７〜８９０；配列番号４のアミノ酸２８０
〜６０６；および配列番号４のアミノ酸５２９〜５４８；ならびにこれらのドメ
インの組み合わせをコードする核酸分子。
まれる：ＭＥＴＨ１のメタロプロテアーゼドメインである配列番号２のアミノ酸
２３５〜４５９；ＭＥＴＨ１のジスインテグリンドメインである配列番号２のア
ミノ酸４６０〜５４４；ＭＥＴＨ１の第１ＴＳＰ様ドメインである配列番号２の
アミノ酸５４５〜５９８；ＭＥＴＨ１の第２ＴＳＰ様ドメインである配列番号２
のアミノ酸８４１〜８９４；ＭＥＴＨ１の第３ＴＳＰ様ドメインである配列番号
２のアミノ酸８９５〜９３４；配列番号２のアミノ酸５３６〜６１３；配列番号
２のアミノ酸５４９〜５６３；ＭＥＴＨ２のメタロプロテアーゼドメインである
配列番号４のアミノ酸２１４〜４３９；ＭＥＴＨ２のジスインテグリンドメイン
である配列番号４のアミノ酸４４０〜５２９；ＭＥＴＨ２の第１ＴＳＰ様ドメイ
ンである配列番号４のアミノ酸５３０〜５８３；ＭＥＴＨ２の第２ＴＳＰ様ドメ
インである配列番号４のアミノ酸８３７〜８９０；配列番号４のアミノ酸２８０
〜６０６；および配列番号４のアミノ酸５２９〜５４８；ならびにこれらのドメ
インの組み合わせをコードする核酸分子。
【００３０】
従って、好ましい実施形態は、以下のタンパク質をコードする核酸分子を含む
：シグナル配列を欠くＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質（切断
が、ＭＥＴＨ１については約１〜２４から約１〜３４のどこか、そしてＭＥＴＨ
２については約１〜２３から約１〜３０のどこかで起こる）；シグナル配列およ
びプロドメインを欠くＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質（プロ
ドメインについての切断が、ＭＥＴＨ１のアミノ酸約２３２〜２３６の間および
ＭＥＴＨ２の約２１１〜２１５間で起こり得る）；シグナル配列、プロドメイン
、およびメタロプロテアーゼドメインを欠くＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴ
Ｈ２タンパク質；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、
およびシステインリッチドメインを欠くＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２
タンパク質；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、シス
テインリッチドメイン、およびＴＳＰ１を欠くＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥ
ＴＨ２タンパク質；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン
、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、およびＴＳＰ２を欠くＭＥＴＨ１タン
パク質またはＭＥＴＨ２タンパク質。このような核酸によってコードされるポリ
ペプチドもまた好ましい。
：シグナル配列を欠くＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質（切断
が、ＭＥＴＨ１については約１〜２４から約１〜３４のどこか、そしてＭＥＴＨ
２については約１〜２３から約１〜３０のどこかで起こる）；シグナル配列およ
びプロドメインを欠くＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質（プロ
ドメインについての切断が、ＭＥＴＨ１のアミノ酸約２３２〜２３６の間および
ＭＥＴＨ２の約２１１〜２１５間で起こり得る）；シグナル配列、プロドメイン
、およびメタロプロテアーゼドメインを欠くＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴ
Ｈ２タンパク質；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、
およびシステインリッチドメインを欠くＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２
タンパク質；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、シス
テインリッチドメイン、およびＴＳＰ１を欠くＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥ
ＴＨ２タンパク質；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン
、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、およびＴＳＰ２を欠くＭＥＴＨ１タン
パク質またはＭＥＴＨ２タンパク質。このような核酸によってコードされるポリ
ペプチドもまた好ましい。
【００３１】
同様に、好ましい実施形態は、以下のタンパク質をコードする核酸を含む：Ｔ
ＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１タンパク質；ＴＳＰ２およびＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１
タンパク質；ＴＳＰ３、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ１を欠くＭＥＴＨ１タンパク質
；システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３を欠くＭＥ
ＴＨ１タンパク質；メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、
ＴＳＰ１、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１タンパク質；ならびに、
プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳ
Ｐ１、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１タンパク質；ＴＳＰ２を欠く
ＭＥＴＨ２タンパク質；ＴＳＰ１およびＴＳＰ２を欠くＭＥＴＨ２タンパク質；
システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２を欠くＭＥＴＨ２タンパク
質；メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１および
ＴＳＰ２を欠くＭＥＴＨ２タンパク質；ならびに、プロドメイン、メタロプロテ
アーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２を欠くＭ
ＥＴＨ２タンパク質。このような核酸によってコードされるポリペプチドもまた
、好ましい。
ＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１タンパク質；ＴＳＰ２およびＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１
タンパク質；ＴＳＰ３、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ１を欠くＭＥＴＨ１タンパク質
；システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３を欠くＭＥ
ＴＨ１タンパク質；メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、
ＴＳＰ１、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１タンパク質；ならびに、
プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳ
Ｐ１、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１タンパク質；ＴＳＰ２を欠く
ＭＥＴＨ２タンパク質；ＴＳＰ１およびＴＳＰ２を欠くＭＥＴＨ２タンパク質；
システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２を欠くＭＥＴＨ２タンパク
質；メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１および
ＴＳＰ２を欠くＭＥＴＨ２タンパク質；ならびに、プロドメイン、メタロプロテ
アーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２を欠くＭ
ＥＴＨ２タンパク質。このような核酸によってコードされるポリペプチドもまた
、好ましい。
【００３２】
ＭＥＴＨ１ドメインの任意の組み合わせをコードする核酸もまた、好ましい。
例えば、以下のＭＥＴＨ１のドメインを含むポリペプチドをコードする核酸分子
が好ましい：シグナル配列およびプロドメイン；シグナル配列、プロドメインお
よびメタロプロテアーゼドメイン；シグナル配列およびメタロプロテアーゼドメ
イン；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、およびシス
テインリッチドメイン；シグナル配列およびシステインリッチドメイン；シグナ
ル配列、メタロプロテアーゼドメインおよびシステインリッチドメイン；シグナ
ル配列、プロドメイン、およびシステインリッチドメイン；シグナル配列、プロ
ドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、およびＴ
ＳＰ１；シグナル配列およびＴＳＰ１；シグナル配列、プロドメインおよびＴＳ
Ｐ１；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメインおよびＴＳＰ
１；シグナル配列、メタロプロテアーゼドメイン、およびＴＳＰ１；シグナル配
列、プロドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配列、
システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配列、メタロプロテアーゼ
ドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配列、プロドメ
イン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およ
びＴＳＰ２；シグナル配列およびＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメインおよび
ＴＳＰ２；シグナル配列、メタロプロテアーゼドメインおよびＴＳＰ２；シグナ
ル配列、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配列、ＴＳＰ１お
よびＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメインおよ
びＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメイン、システインリッチドメインおよびＴ
ＳＰ２；シグナル配列、プロドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル配列
、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；シ
グナル配列、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル
配列、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およ
びＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ
１およびＴＳＰ２；シグナル配列およびＴＳＰ３；シグナル配列、プロドメイン
およびＴＳＰ３；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメインお
よびＴＳＰ３；シグナル配列、メタロプロテアーゼドメインおよびＴＳＰ３；シ
グナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチド
メインおよびＴＳＰ３；シグナル配列、システインリッチドメインおよびＴＳＰ
３；シグナル配列、プロドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ３；
シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチ
ドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；シグナル配列、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；
シグナル配列、プロドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；シグナル配列、プロド
メイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；シグナル配列
、プロドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；シグナ
ル配列、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグナル配列、プロドメイン、システインリ
ッチドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグナル配列、プロドメイ
ン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグナ
ル配列、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シ
グナル配列、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグナル配列、メタロプロテ
アーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ
３；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およ
びＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、シス
テインリッチドメイン、およびＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメイン、メタロ
プロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；
シグナル配列、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグナル配列、システイン
リッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル配列、システインリッチド
メイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；シグナル配列、システインリッチドメイン、
ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグナル配列、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１
、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３；シグナル配列、メタロプロテアーゼドメイン、シ
ステインリッチドメイン、およびＴＳＰ３；シグナル配列、メタロプロテアーゼ
ドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；シグナル配列
、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ２およびＴ
ＳＰ３；シグナル配列、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３
；シグナル配列、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグ
ナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ
３；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ２およ
びＴＳＰ３；プロドメインおよびメタロプロテアーゼドメイン；プロドメインお
よびシステインリッチドメイン；プロドメインおよびＴＳＰ１；プロドメインお
よびＴＳＰ２；プロドメインおよびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアー
ゼドメインおよびシステインリッチドメイン；プロドメイン、メタロプロテアー
ゼドメインおよびＴＳＰ１；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメインおよび
ＴＳＰ２；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメインおよびＴＳＰ３；プロド
メイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ
１；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメインお
よびＴＳＰ２；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチ
ドメインおよびＴＳＰ３；プロドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳ
Ｐ１；プロドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；プロドメイン
、システインリッチドメインおよびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアー
ゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイ
ン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳ
Ｐ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およ
びＴＳＰ２；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳ
Ｐ２；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン
、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ
１およびＴＳＰ３；プロドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ２および
ＴＳＰ３；プロドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、ＴＳＰ１お
よびＴＳＰ３；プロドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロ
プロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、メタロプロテ
アーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアーゼ
ドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイ
ン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、ＴＳ
Ｐ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；プロドメイン、
ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ
１およびＴＳＰ２；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およ
びＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳ
Ｐ３；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインドメイン、ＴＳ
Ｐ１およびＴＳＰ３；プロドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、Ｔ
ＳＰ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１
、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３；メタロプロテアーゼドメインおよびシステインリ
ッチドメイン；メタロプロテアーゼドメインおよびＴＳＰ１；メタロプロテアー
ゼドメインおよびＴＳＰ２；メタロプロテアーゼドメインおよびＴＳＰ３；メタ
ロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；メタロプ
ロテアーゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；メタロプロテ
アーゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ３；メタロプロテアー
ゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；メタロプロ
テアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳ
Ｐ３；メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およ
びＴＳＰ３；メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ
２およびＴＳＰ３；メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；メ
タロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；メタロプロテアーゼドメ
イン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳ
Ｐ２およびＴＳＰ３；システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；システインリ
ッチドメインおよびＴＳＰ２；システインリッチドメインおよびＴＳＰ３；シス
テインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；システインリッチドメイン、
ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；システインリッチドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３
；システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；ＴＳＰ１お
よびＴＳＰ２；ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；ならびに／
またはＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３。これらのドメインは、天然に存在す
る分子とは同じ順番または異なる順番でＭＥＴＨ１分子中に存在し得る。このよ
うな核酸によってコードされるポリペプチドもまた好ましい。
例えば、以下のＭＥＴＨ１のドメインを含むポリペプチドをコードする核酸分子
が好ましい：シグナル配列およびプロドメイン；シグナル配列、プロドメインお
よびメタロプロテアーゼドメイン；シグナル配列およびメタロプロテアーゼドメ
イン；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、およびシス
テインリッチドメイン；シグナル配列およびシステインリッチドメイン；シグナ
ル配列、メタロプロテアーゼドメインおよびシステインリッチドメイン；シグナ
ル配列、プロドメイン、およびシステインリッチドメイン；シグナル配列、プロ
ドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、およびＴ
ＳＰ１；シグナル配列およびＴＳＰ１；シグナル配列、プロドメインおよびＴＳ
Ｐ１；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメインおよびＴＳＰ
１；シグナル配列、メタロプロテアーゼドメイン、およびＴＳＰ１；シグナル配
列、プロドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配列、
システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配列、メタロプロテアーゼ
ドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配列、プロドメ
イン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およ
びＴＳＰ２；シグナル配列およびＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメインおよび
ＴＳＰ２；シグナル配列、メタロプロテアーゼドメインおよびＴＳＰ２；シグナ
ル配列、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配列、ＴＳＰ１お
よびＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメインおよ
びＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメイン、システインリッチドメインおよびＴ
ＳＰ２；シグナル配列、プロドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル配列
、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；シ
グナル配列、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル
配列、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およ
びＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ
１およびＴＳＰ２；シグナル配列およびＴＳＰ３；シグナル配列、プロドメイン
およびＴＳＰ３；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメインお
よびＴＳＰ３；シグナル配列、メタロプロテアーゼドメインおよびＴＳＰ３；シ
グナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチド
メインおよびＴＳＰ３；シグナル配列、システインリッチドメインおよびＴＳＰ
３；シグナル配列、プロドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ３；
シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチ
ドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；シグナル配列、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；
シグナル配列、プロドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；シグナル配列、プロド
メイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；シグナル配列
、プロドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；シグナ
ル配列、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグナル配列、プロドメイン、システインリ
ッチドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグナル配列、プロドメイ
ン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグナ
ル配列、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シ
グナル配列、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグナル配列、メタロプロテ
アーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ
３；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およ
びＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、シス
テインリッチドメイン、およびＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメイン、メタロ
プロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；
シグナル配列、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグナル配列、システイン
リッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル配列、システインリッチド
メイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；シグナル配列、システインリッチドメイン、
ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグナル配列、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１
、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３；シグナル配列、メタロプロテアーゼドメイン、シ
ステインリッチドメイン、およびＴＳＰ３；シグナル配列、メタロプロテアーゼ
ドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；シグナル配列
、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ２およびＴ
ＳＰ３；シグナル配列、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３
；シグナル配列、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；シグ
ナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ
３；シグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ２およ
びＴＳＰ３；プロドメインおよびメタロプロテアーゼドメイン；プロドメインお
よびシステインリッチドメイン；プロドメインおよびＴＳＰ１；プロドメインお
よびＴＳＰ２；プロドメインおよびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアー
ゼドメインおよびシステインリッチドメイン；プロドメイン、メタロプロテアー
ゼドメインおよびＴＳＰ１；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメインおよび
ＴＳＰ２；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメインおよびＴＳＰ３；プロド
メイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ
１；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメインお
よびＴＳＰ２；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチ
ドメインおよびＴＳＰ３；プロドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳ
Ｐ１；プロドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；プロドメイン
、システインリッチドメインおよびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアー
ゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイ
ン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳ
Ｐ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およ
びＴＳＰ２；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳ
Ｐ２；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン
、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ
１およびＴＳＰ３；プロドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ２および
ＴＳＰ３；プロドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、ＴＳＰ１お
よびＴＳＰ３；プロドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロ
プロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、メタロプロテ
アーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアーゼ
ドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイ
ン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、ＴＳ
Ｐ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；プロドメイン、
ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ
１およびＴＳＰ２；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およ
びＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳ
Ｐ３；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインドメイン、ＴＳ
Ｐ１およびＴＳＰ３；プロドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、Ｔ
ＳＰ２およびＴＳＰ３；プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１
、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３；メタロプロテアーゼドメインおよびシステインリ
ッチドメイン；メタロプロテアーゼドメインおよびＴＳＰ１；メタロプロテアー
ゼドメインおよびＴＳＰ２；メタロプロテアーゼドメインおよびＴＳＰ３；メタ
ロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；メタロプ
ロテアーゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；メタロプロテ
アーゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ３；メタロプロテアー
ゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；メタロプロ
テアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳ
Ｐ３；メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およ
びＴＳＰ３；メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ
２およびＴＳＰ３；メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；メ
タロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；メタロプロテアーゼドメ
イン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；メタロプロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳ
Ｐ２およびＴＳＰ３；システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；システインリ
ッチドメインおよびＴＳＰ２；システインリッチドメインおよびＴＳＰ３；シス
テインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；システインリッチドメイン、
ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；システインリッチドメイン、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３
；システインリッチドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；ＴＳＰ１お
よびＴＳＰ２；ＴＳＰ１およびＴＳＰ３；ＴＳＰ２およびＴＳＰ３；ならびに／
またはＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３。これらのドメインは、天然に存在す
る分子とは同じ順番または異なる順番でＭＥＴＨ１分子中に存在し得る。このよ
うな核酸によってコードされるポリペプチドもまた好ましい。
【００３３】
ＭＥＴＨ２ドメインの任意の組み合わせをコードする核酸もまた好ましい。例
えば、ＭＥＴＨ２の以下のドメインを含むポリペプチドをコードする核酸分子が
好ましい；シグナル配列およびプロドメイン；シグナル配列、プロドメインおよ
び金属プロテアーゼドメイン；シグナル配列および金属プロテアーゼドメイン；
シグナル配列、プロドメイン、金属プロテアーゼドメイン、およびシステインリ
ッチドメイン；シグナル配列およびシステインリッチドメイン；シグナル配列、
金属プロテアーゼドメインおよびシステインリッチドメイン；シグナル配列、プ
ロドメイン、およびシステインリッチドメイン；シグナル配列、プロドメイン、
金属プロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、およびＴＳＰ１；シグ
ナル配列およびＴＳＰ１；シグナル配列、プロドメインおよびＴＳＰ１；シグナ
ル配列、プロドメイン、金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配
列、金属プロテアーゼドメイン、およびＴＳＰ１；シグナル配列、プロドメイン
、システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配列、システインリッチ
ドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配列、金属プロテアーゼドメイン、システイ
ンリッチドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配列、プロドメイン、金属プロテア
ーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル
配列およびＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配
列、金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配列、システインリッ
チドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配列、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル
配列、プロドメイン、金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配列
、プロドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配列、プ
ロドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル配列、金属プロテアーゼドメイ
ン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配列、金属プロテアー
ゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル配列、金属プロテアーゼドメイ
ン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル配列、プロ
ドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル配列
、プロドメイン、金属プロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナ
ル配列、プロドメイン、金属プロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン
、およびＴＳＰ２；シグナル配列、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１および
ＴＳＰ２；プロドメインおよび金属プロテアーゼドメイン；プロドメインおよび
システインリッチドメイン；プロドメインおよびＴＳＰ１；プロドメインおよび
ＴＳＰ２；プロドメイン、金属プロテアーゼドメインおよびシステインリッチド
メイン；プロドメイン、金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ１；プロドメイ
ン、金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ２；プロドメイン、金属プロテアー
ゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；プロドメイン、金属プ
ロテアーゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；プロドメイン
、システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；プロドメイン、システインリッチ
ドメインおよびＴＳＰ２；プロドメイン、金属プロテアーゼドメイン、システイ
ンリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、システインリッチ
ドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、金属プロテアーゼドメイン
、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、金属プロテアーゼドメイン、ＴＳＰ
１およびＴＳＰ２；プロドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、金
属プロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；金属プロテアーゼドメイン
およびシステインリッチドメイン；金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ１；
金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ２；金属プロテアーゼドメイン、システ
インリッチドメインおよびＴＳＰ１；金属プロテアーゼドメイン、システインリ
ッチドメインおよびＴＳＰ２；金属プロテアーゼドメイン、システインリッチド
メイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；金属プロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１および
ＴＳＰ２；システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；システインリッチドメイ
ンおよびＴＳＰ２；システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２。これ
らのドメインは、天然に存在する分子おけるものと同じ順序か、または異なる順
序でＭＥＴＨ２分子内に存在し得る。
えば、ＭＥＴＨ２の以下のドメインを含むポリペプチドをコードする核酸分子が
好ましい；シグナル配列およびプロドメイン；シグナル配列、プロドメインおよ
び金属プロテアーゼドメイン；シグナル配列および金属プロテアーゼドメイン；
シグナル配列、プロドメイン、金属プロテアーゼドメイン、およびシステインリ
ッチドメイン；シグナル配列およびシステインリッチドメイン；シグナル配列、
金属プロテアーゼドメインおよびシステインリッチドメイン；シグナル配列、プ
ロドメイン、およびシステインリッチドメイン；シグナル配列、プロドメイン、
金属プロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン、およびＴＳＰ１；シグ
ナル配列およびＴＳＰ１；シグナル配列、プロドメインおよびＴＳＰ１；シグナ
ル配列、プロドメイン、金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配
列、金属プロテアーゼドメイン、およびＴＳＰ１；シグナル配列、プロドメイン
、システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配列、システインリッチ
ドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配列、金属プロテアーゼドメイン、システイ
ンリッチドメインおよびＴＳＰ１；シグナル配列、プロドメイン、金属プロテア
ーゼドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル
配列およびＴＳＰ２；シグナル配列、プロドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配
列、金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配列、システインリッ
チドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配列、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル
配列、プロドメイン、金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配列
、プロドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配列、プ
ロドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル配列、金属プロテアーゼドメイ
ン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；シグナル配列、金属プロテアー
ゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル配列、金属プロテアーゼドメイ
ン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル配列、プロ
ドメイン、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナル配列
、プロドメイン、金属プロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；シグナ
ル配列、プロドメイン、金属プロテアーゼドメイン、システインリッチドメイン
、およびＴＳＰ２；シグナル配列、システインリッチドメイン、ＴＳＰ１および
ＴＳＰ２；プロドメインおよび金属プロテアーゼドメイン；プロドメインおよび
システインリッチドメイン；プロドメインおよびＴＳＰ１；プロドメインおよび
ＴＳＰ２；プロドメイン、金属プロテアーゼドメインおよびシステインリッチド
メイン；プロドメイン、金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ１；プロドメイ
ン、金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ２；プロドメイン、金属プロテアー
ゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；プロドメイン、金属プ
ロテアーゼドメイン、システインリッチドメインおよびＴＳＰ２；プロドメイン
、システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；プロドメイン、システインリッチ
ドメインおよびＴＳＰ２；プロドメイン、金属プロテアーゼドメイン、システイ
ンリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、システインリッチ
ドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、金属プロテアーゼドメイン
、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、金属プロテアーゼドメイン、ＴＳＰ
１およびＴＳＰ２；プロドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；プロドメイン、金
属プロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；金属プロテアーゼドメイン
およびシステインリッチドメイン；金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ１；
金属プロテアーゼドメインおよびＴＳＰ２；金属プロテアーゼドメイン、システ
インリッチドメインおよびＴＳＰ１；金属プロテアーゼドメイン、システインリ
ッチドメインおよびＴＳＰ２；金属プロテアーゼドメイン、システインリッチド
メイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２；金属プロテアーゼドメイン、ＴＳＰ１および
ＴＳＰ２；システインリッチドメインおよびＴＳＰ１；システインリッチドメイ
ンおよびＴＳＰ２；システインリッチドメイン、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２。これ
らのドメインは、天然に存在する分子おけるものと同じ順序か、または異なる順
序でＭＥＴＨ２分子内に存在し得る。
【００３４】
さらに、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２ドメインは、ハイブリッド分子を形成す
るように結合され得る。ＭＥＴＨ１の任意のドメインは、ハイブリッド分子を形
成するようにＭＥＴＨ２の任意のドメインと結合され得る。例えば、ＭＥＴＨ１
のＴＳＰ１ドメインは、ハイブリッド分子を形成するようにＭＥＴＨ２のＴＳＰ
１ドメインで置換され得、ＭＥＴＨ１分子の残部はインタクトなままである。ま
た、ＭＥＴＨ１のＴＳＰ１ドメインは、ハイブリッド分子を形成するようにＭＥ
ＴＨ２のＴＳＰ２ドメインで置換され得、ＭＥＴＨ１分子の残部はインタクトな
ままである。さらに、ＭＥＴＨ１のＴＳＰ１ドメインは、任意のさらなるＭＥＴ
Ｈ１および／またはＭＥＴＨ２配列を伴わずに、ハイブリッド分子を形成するよ
うにＭＥＴＨ２のＴＳＰ２ドメインと結合され得る。これらのドメインは、天然
に存在する分子において生じるものと同じ順序または異なる順序で存在し得る。
そのような核酸によってコードされるポリペプチドもまた、好ましい。
るように結合され得る。ＭＥＴＨ１の任意のドメインは、ハイブリッド分子を形
成するようにＭＥＴＨ２の任意のドメインと結合され得る。例えば、ＭＥＴＨ１
のＴＳＰ１ドメインは、ハイブリッド分子を形成するようにＭＥＴＨ２のＴＳＰ
１ドメインで置換され得、ＭＥＴＨ１分子の残部はインタクトなままである。ま
た、ＭＥＴＨ１のＴＳＰ１ドメインは、ハイブリッド分子を形成するようにＭＥ
ＴＨ２のＴＳＰ２ドメインで置換され得、ＭＥＴＨ１分子の残部はインタクトな
ままである。さらに、ＭＥＴＨ１のＴＳＰ１ドメインは、任意のさらなるＭＥＴ
Ｈ１および／またはＭＥＴＨ２配列を伴わずに、ハイブリッド分子を形成するよ
うにＭＥＴＨ２のＴＳＰ２ドメインと結合され得る。これらのドメインは、天然
に存在する分子において生じるものと同じ順序または異なる順序で存在し得る。
そのような核酸によってコードされるポリペプチドもまた、好ましい。
【００３５】
さらなる実施形態は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドをコードする
核酸を含み、ここで：１つ以上のＴＳＰドメインが他の公知のＴＳＰドメインで
置換されており；金属プロテアーゼドメインが、別の公知の金属プロテアーゼド
メインで置換されており；ジスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｒｇｒｉｎ）ドメ
インが、別の公知のジスインテグリンドメインで置換される。１つ以上のドメイ
ンが、この様式において置換され得る。例えば、金属プロテアーゼドメインおよ
びジスインテグリンドメインの両方が置換され得る。あるいは、全ての３つのＴ
ＳＰドメインが置換され得る。そのような核酸によりコードされるポリペプチド
もまた好ましい。
核酸を含み、ここで：１つ以上のＴＳＰドメインが他の公知のＴＳＰドメインで
置換されており；金属プロテアーゼドメインが、別の公知の金属プロテアーゼド
メインで置換されており；ジスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｒｇｒｉｎ）ドメ
インが、別の公知のジスインテグリンドメインで置換される。１つ以上のドメイ
ンが、この様式において置換され得る。例えば、金属プロテアーゼドメインおよ
びジスインテグリンドメインの両方が置換され得る。あるいは、全ての３つのＴ
ＳＰドメインが置換され得る。そのような核酸によりコードされるポリペプチド
もまた好ましい。
【００３６】
好ましい実施形態は、いくつか（５〜１０、１〜５、１〜３、１〜２または１
）のアミノ酸残基が任意の組み合わせにおいて置換されるか、欠失されるかまた
は付加されていることを除いて、配列番号２または配列番号４のアミノ酸配列を
コードするポリヌクレオチドである。
）のアミノ酸残基が任意の組み合わせにおいて置換されるか、欠失されるかまた
は付加されていることを除いて、配列番号２または配列番号４のアミノ酸配列を
コードするポリヌクレオチドである。
【００３７】
さらに、本発明者らは、配列番号１に示される配列の部分に関連する以下のｃ
ＤＮＡクローンを同定した：配列番号：１：ＨＯＵＣＱ１７ＲＡ（配列番号：１
４）、ＨＰＬＢＭ１１Ｒ（配列番号：１５）、ＨＧＢＩ０７Ｒ（配列番号：１６
）、ＨＮＴＭＡ４９Ｒ（配列番号：１７）、ＨＮＡＬＥ２７Ｒ（配列番号：１８
）、およびＨＩＢＤＢ４５Ｒ（配列番号：１９）。
ＤＮＡクローンを同定した：配列番号：１：ＨＯＵＣＱ１７ＲＡ（配列番号：１
４）、ＨＰＬＢＭ１１Ｒ（配列番号：１５）、ＨＧＢＩ０７Ｒ（配列番号：１６
）、ＨＮＴＭＡ４９Ｒ（配列番号：１７）、ＨＮＡＬＥ２７Ｒ（配列番号：１８
）、およびＨＩＢＤＢ４５Ｒ（配列番号：１９）。
【００３８】
以下の公開されたＥＳＴ（これらは、配列番号１の部分に関連する）もまた同
定されている：Ｄ６７０７６（配列番号：２０）、ＡＢ００１７３５（配列番号
：２１）、Ｘ１４７８７（配列番号：２２）、Ｕ６４８５７（配列番号：２３）
、Ｘ０４６６５（配列番号：２４）、Ｍ６４８６６（配列番号：２５）、Ｌ０７
８０３（配列番号：２６）、Ｕ０８００６（配列番号：２７）、Ｍ１６９７４（
配列番号：２８）、Ｌ１３８５５（配列番号：２９）、ＡＬ０２１５２９（配列
番号：３０）、Ｄ８６０７４（配列番号：３１）、Ｌ０５３９０（配列番号：３
２）、Ｚ６９３６１（配列番号：３３）、Ｘ９９５９９（配列番号：３４）、Ａ
Ｆ０１８０７３（配列番号：３５）、Ｌ２３７６０（配列番号：３６）、Ｚ４６
９７０（配列番号：３７）、ＡＣ００４４４９（配列番号：３８）、Ｚ６９５８
９（配列番号：３９）、Ｚ２２２７９（配列番号：４０）、Ｘ１７５２４（配列
番号：４１）、ＡＩ１２６０１９（配列番号：１０３）、ＡＩ５７１０６９（配
列番号：１０４）、ＡＩ１４８７３９（配列番号：１０５）、ＡＩ３３５８４９
（配列番号：１０６）、ＡＡ６７７１１６（配列番号：１０７）、Ｈ２７１２８
（配列番号：１０８）、ＡＡ３６８４２９（配列番号：１０９）、ＡＡ３４５８
１２（配列番号：１１０）、ＡＡ３７３７１８（配列番号：１１１）、ＡＩ５３
７５１８（配列番号：１１２）、Ｎ８８３４１（配列番号：１１３）、Ｃ０３６
００（配列番号：１１４）、ＡＡ０６６１４２（配列番号：１１５）、ＡＩ４０
０９５（配列番号：９４）、ＡＡ２８８６８９（配列番号：１１６）、ＡＩ４６
４０７６（配列番号：９７）、Ｒ１３５４７（配列番号：１１７）、Ｒ１９９７
６（配列番号：１１８）、Ｚ４３９２５（配列番号：１１９）、ＡＡ６７０９８
７（配列番号：１２０）、ＡＡ６３５６５７（配列番号：９６）、Ｗ２４８７８
（配列番号：１２１）、Ｗ４７３１６（配列番号：１２２）、Ｗ３５３４５（配
列番号：１２３）、およびＮ２７２４３（配列番号：１２４）。
定されている：Ｄ６７０７６（配列番号：２０）、ＡＢ００１７３５（配列番号
：２１）、Ｘ１４７８７（配列番号：２２）、Ｕ６４８５７（配列番号：２３）
、Ｘ０４６６５（配列番号：２４）、Ｍ６４８６６（配列番号：２５）、Ｌ０７
８０３（配列番号：２６）、Ｕ０８００６（配列番号：２７）、Ｍ１６９７４（
配列番号：２８）、Ｌ１３８５５（配列番号：２９）、ＡＬ０２１５２９（配列
番号：３０）、Ｄ８６０７４（配列番号：３１）、Ｌ０５３９０（配列番号：３
２）、Ｚ６９３６１（配列番号：３３）、Ｘ９９５９９（配列番号：３４）、Ａ
Ｆ０１８０７３（配列番号：３５）、Ｌ２３７６０（配列番号：３６）、Ｚ４６
９７０（配列番号：３７）、ＡＣ００４４４９（配列番号：３８）、Ｚ６９５８
９（配列番号：３９）、Ｚ２２２７９（配列番号：４０）、Ｘ１７５２４（配列
番号：４１）、ＡＩ１２６０１９（配列番号：１０３）、ＡＩ５７１０６９（配
列番号：１０４）、ＡＩ１４８７３９（配列番号：１０５）、ＡＩ３３５８４９
（配列番号：１０６）、ＡＡ６７７１１６（配列番号：１０７）、Ｈ２７１２８
（配列番号：１０８）、ＡＡ３６８４２９（配列番号：１０９）、ＡＡ３４５８
１２（配列番号：１１０）、ＡＡ３７３７１８（配列番号：１１１）、ＡＩ５３
７５１８（配列番号：１１２）、Ｎ８８３４１（配列番号：１１３）、Ｃ０３６
００（配列番号：１１４）、ＡＡ０６６１４２（配列番号：１１５）、ＡＩ４０
０９５（配列番号：９４）、ＡＡ２８８６８９（配列番号：１１６）、ＡＩ４６
４０７６（配列番号：９７）、Ｒ１３５４７（配列番号：１１７）、Ｒ１９９７
６（配列番号：１１８）、Ｚ４３９２５（配列番号：１１９）、ＡＡ６７０９８
７（配列番号：１２０）、ＡＡ６３５６５７（配列番号：９６）、Ｗ２４８７８
（配列番号：１２１）、Ｗ４７３１６（配列番号：１２２）、Ｗ３５３４５（配
列番号：１２３）、およびＮ２７２４３（配列番号：１２４）。
【００３９】
本発明者らはまた、配列番号３の部分に関連する以下のｃＤＮＡクローンを同
定した：ＨＣＥ４Ｄ６９ＦＰ０２（配列番号：４２）、ＨＩＢＤＢ４５Ｆ（配列
番号：４３）、ＨＫＩＸＨ６４Ｒ（配列番号：４４）、ＨＩＢＤＢ４５Ｒ（配列
番号：１９）、ＨＣＥ３Ｚ９５Ｒ（配列番号：４５）、ＨＴＬＥＱ９０Ｒ（配列
番号：４６）、ＨＭＷＥＦ４５Ｒ（配列番号：４７）、ＨＴＯＦＣ３４ＲＡ（配
列番号：４８）、ＨＨＦＤＩ２０Ｒ（配列番号：４９）、ＨＭＳＨＹ４７Ｒ（配
列番号：５０）、ＨＣＥＳＦ９０Ｒ（配列番号：５１）、ＨＭＣＡＯ４６Ｒ（配
列番号：５２）、ＨＴＴＡＱ６７Ｒ（配列番号：５３）、ＨＦＫＣＦ１９Ｆ（配
列番号：５４）、ＨＭＣＡＳ３１Ｒ（配列番号：５５）、ＨＭＷＧＰ２６Ｒ（配
列番号：５６）、ＨＬＨＴＰ３６Ｒ（配列番号：５７）、ＨＥ８ＡＮ１１Ｒ（配
列番号：５８）、ＨＥＯＮＮ７３Ｒ（配列番号：５９）、ＨＢＮＢＧ５３Ｒ（配
列番号：６０）、およびＨＭＳＣＨ９４Ｒ（配列番号：６１）。
定した：ＨＣＥ４Ｄ６９ＦＰ０２（配列番号：４２）、ＨＩＢＤＢ４５Ｆ（配列
番号：４３）、ＨＫＩＸＨ６４Ｒ（配列番号：４４）、ＨＩＢＤＢ４５Ｒ（配列
番号：１９）、ＨＣＥ３Ｚ９５Ｒ（配列番号：４５）、ＨＴＬＥＱ９０Ｒ（配列
番号：４６）、ＨＭＷＥＦ４５Ｒ（配列番号：４７）、ＨＴＯＦＣ３４ＲＡ（配
列番号：４８）、ＨＨＦＤＩ２０Ｒ（配列番号：４９）、ＨＭＳＨＹ４７Ｒ（配
列番号：５０）、ＨＣＥＳＦ９０Ｒ（配列番号：５１）、ＨＭＣＡＯ４６Ｒ（配
列番号：５２）、ＨＴＴＡＱ６７Ｒ（配列番号：５３）、ＨＦＫＣＦ１９Ｆ（配
列番号：５４）、ＨＭＣＡＳ３１Ｒ（配列番号：５５）、ＨＭＷＧＰ２６Ｒ（配
列番号：５６）、ＨＬＨＴＰ３６Ｒ（配列番号：５７）、ＨＥ８ＡＮ１１Ｒ（配
列番号：５８）、ＨＥＯＮＮ７３Ｒ（配列番号：５９）、ＨＢＮＢＧ５３Ｒ（配
列番号：６０）、およびＨＭＳＣＨ９４Ｒ（配列番号：６１）。
【００４０】
以下の公開されたＥＳＴ（これらは配列番号３に示される配列の部分に関連す
る）もまた同定されている：Ｄ６７０７６（配列番号：２０）、ＡＢ００１７３
５（配列番号：２１）、ＡＢ００５２８７（配列番号：６２）、Ｘ８７６１９（
配列番号：６３）、Ｘ１４７８７（配列番号：２２）、Ｘ０４６６５（配列番号
：２４）、Ｍ８７２７６（配列番号：６４）、Ｍ６２４５８（配列番号：６５）
、ＡＢ００２３６４（配列番号：６６）、ＡＢ００５２９７（配列番号：６７）
、Ｘ６９１６１（配列番号：６８）、Ｘ１６６１９（配列番号：６９）、Ｉ３６
４４８（配列番号：７０）、Ｌ１２２６０（配列番号：７１）、Ｉ３６３５２（
配列番号：７２）、Ｘ１５８９８（配列番号：７３）、Ｉ０７７８９（配列番号
：７４）、Ｉ０８１４４（配列番号：７５）Ｕ３１８１４（配列番号：７６）、
ＡＦ００１４４４（配列番号：７７）、ＡＩ４００９０５（配列番号：９４）、
ＡＩ３７８８５７（配列番号：９５）、ＡＡ６３５６５７（配列番号：９６）、
ＡＩ４６４０７６（配列番号：９７）、ＣＯ６５７８（配列番号：９８）、ＡＡ
８５５５３２（配列番号：９９）、Ｈ１１８８１（配列番号：１００）、ＡＡ３
５０８０１（配列番号：１０１）、およびＡＡ３５０８０２（配列番号：１０２
）。
る）もまた同定されている：Ｄ６７０７６（配列番号：２０）、ＡＢ００１７３
５（配列番号：２１）、ＡＢ００５２８７（配列番号：６２）、Ｘ８７６１９（
配列番号：６３）、Ｘ１４７８７（配列番号：２２）、Ｘ０４６６５（配列番号
：２４）、Ｍ８７２７６（配列番号：６４）、Ｍ６２４５８（配列番号：６５）
、ＡＢ００２３６４（配列番号：６６）、ＡＢ００５２９７（配列番号：６７）
、Ｘ６９１６１（配列番号：６８）、Ｘ１６６１９（配列番号：６９）、Ｉ３６
４４８（配列番号：７０）、Ｌ１２２６０（配列番号：７１）、Ｉ３６３５２（
配列番号：７２）、Ｘ１５８９８（配列番号：７３）、Ｉ０７７８９（配列番号
：７４）、Ｉ０８１４４（配列番号：７５）Ｕ３１８１４（配列番号：７６）、
ＡＦ００１４４４（配列番号：７７）、ＡＩ４００９０５（配列番号：９４）、
ＡＩ３７８８５７（配列番号：９５）、ＡＡ６３５６５７（配列番号：９６）、
ＡＩ４６４０７６（配列番号：９７）、ＣＯ６５７８（配列番号：９８）、ＡＡ
８５５５３２（配列番号：９９）、Ｈ１１８８１（配列番号：１００）、ＡＡ３
５０８０１（配列番号：１０１）、およびＡＡ３５０８０２（配列番号：１０２
）。
【００４１】
特定の実施形態では、本発明のポリヌクレオチドは、３００ｋｂ、２００ｋｂ
、１００ｋｂ、５０ｋｂ、１５ｋｂ、１０ｋｂ、または７．５ｋｂ長未満である
。さらなる実施形態では、本発明のポリヌクレオチドは、ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２コード配列の少なくとも１５の連続するヌクレオチドを含むが、いずれの
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２イントロンの全部または部分も含まない。別の実施
形態では、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２コード配列を含む核酸は、ゲノムの隣接
遺伝子のコード配列を含まない（すなわち、ゲノム中のＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２遺伝子に対して５’または３’である）。
、１００ｋｂ、５０ｋｂ、１５ｋｂ、１０ｋｂ、または７．５ｋｂ長未満である
。さらなる実施形態では、本発明のポリヌクレオチドは、ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２コード配列の少なくとも１５の連続するヌクレオチドを含むが、いずれの
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２イントロンの全部または部分も含まない。別の実施
形態では、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２コード配列を含む核酸は、ゲノムの隣接
遺伝子のコード配列を含まない（すなわち、ゲノム中のＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２遺伝子に対して５’または３’である）。
【００４２】
別の局面において、本発明は、ストリンジェントなハイブリダイゼーション条
件下で、上記の本発明の核酸分子（例えば、ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１；Ａ
ＴＣＣ受託番号２０９５８２；またはＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ１４７８に含まれ
るｃＤＮＡクローン）中のポリヌクレオチドの一部にハイブリダイズするポリヌ
クレオチドを含む単離された核酸分子を提供する。「ストリンジェントなハイブ
リダイゼーション条件」により、以下を含む溶液：５０％ホルムアミド、５×Ｓ
ＳＣ（７５０ｍＭＮａＣｌ、７５ｍＭクエン酸三ナトリウム）、５０ｍＭリン酸
ナトリウム（ｐＨ７．６）、５×Ｄｅｎｈａｒｄｔ溶液、１０％デキストラン硫
酸、および２０μｇ／ｍｌ変性剪断サケ精子ＤＮＡ、における４２℃での一晩の
インキュベーション、続いて０．１×ＳＳＣ中で約６５℃でのそのフィルターの
洗浄を意図する。
件下で、上記の本発明の核酸分子（例えば、ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１；Ａ
ＴＣＣ受託番号２０９５８２；またはＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ１４７８に含まれ
るｃＤＮＡクローン）中のポリヌクレオチドの一部にハイブリダイズするポリヌ
クレオチドを含む単離された核酸分子を提供する。「ストリンジェントなハイブ
リダイゼーション条件」により、以下を含む溶液：５０％ホルムアミド、５×Ｓ
ＳＣ（７５０ｍＭＮａＣｌ、７５ｍＭクエン酸三ナトリウム）、５０ｍＭリン酸
ナトリウム（ｐＨ７．６）、５×Ｄｅｎｈａｒｄｔ溶液、１０％デキストラン硫
酸、および２０μｇ／ｍｌ変性剪断サケ精子ＤＮＡ、における４２℃での一晩の
インキュベーション、続いて０．１×ＳＳＣ中で約６５℃でのそのフィルターの
洗浄を意図する。
【００４３】
ポリヌクレオチドの「部分」にハイブリダイズするポリヌクレオチドにより、
参照ポリヌクレオチドの少なくとも約１５ヌクレオチド（ｎｔ）、そしてより好
ましくは、少なくとも約２０ｎｔ、なおより好ましくは、少なくとも約３０ｎｔ
、そしてさらにより好ましくは、約３０、４０、５０、６０、もしくは７０ｎｔ
にハイブリダイズするポリヌクレオチド（ＤＮＡまたはＲＮＡのいずれか）を意
図する。これらは、上記で議論し、そして以下により詳細に議論するように、診
断プローブおよびプライマーとして有用である。
参照ポリヌクレオチドの少なくとも約１５ヌクレオチド（ｎｔ）、そしてより好
ましくは、少なくとも約２０ｎｔ、なおより好ましくは、少なくとも約３０ｎｔ
、そしてさらにより好ましくは、約３０、４０、５０、６０、もしくは７０ｎｔ
にハイブリダイズするポリヌクレオチド（ＤＮＡまたはＲＮＡのいずれか）を意
図する。これらは、上記で議論し、そして以下により詳細に議論するように、診
断プローブおよびプライマーとして有用である。
【００４４】
例えば、「少なくとも２０ｎｔ長」のポリヌクレオチドの部分により、参照ポ
リヌクレオチド（例えば、寄託されたｃＤＮＡまたは、配列番号１もしくは配列
番号３に示されるヌクレオチド配列）のヌクレオチド配列からの２０以上の連続
するヌクレオチドを意図する。当然に、ポリＡ配列（例えば、配列番号１および
配列番号３にそれぞれ示されるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ｃＤＮＡの３’末端
ポリ（Ａ）トラクト）、またはＴ（もしくはＵ）残基の相補的ストレッチにのみ
ハイブリダイズするポリヌクレオチドは、本発明の核酸の一部にハイブリダイズ
するために使用される本発明のポリヌクレオチドに含まれる。なぜなら、このよ
うなポリヌクレオチドは、ポリ（Ａ）ストレッチまたはその相補鎖を含む任意の
核酸分子（例えば、実際的には、任意の二本鎖ｃＤＮＡクローン）にハイブリダ
イズするからである。
リヌクレオチド（例えば、寄託されたｃＤＮＡまたは、配列番号１もしくは配列
番号３に示されるヌクレオチド配列）のヌクレオチド配列からの２０以上の連続
するヌクレオチドを意図する。当然に、ポリＡ配列（例えば、配列番号１および
配列番号３にそれぞれ示されるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ｃＤＮＡの３’末端
ポリ（Ａ）トラクト）、またはＴ（もしくはＵ）残基の相補的ストレッチにのみ
ハイブリダイズするポリヌクレオチドは、本発明の核酸の一部にハイブリダイズ
するために使用される本発明のポリヌクレオチドに含まれる。なぜなら、このよ
うなポリヌクレオチドは、ポリ（Ａ）ストレッチまたはその相補鎖を含む任意の
核酸分子（例えば、実際的には、任意の二本鎖ｃＤＮＡクローン）にハイブリダ
イズするからである。
【００４５】
中程度に高ストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件でＭＥＴＨ１ま
たはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドにハイブリダイズする核酸分子がまた意図され
る。ハイブリダイゼーションのストリンジェンシーおよびシグナル検出の変化は
、主にホルムアミド濃度（ホルムアミドのより低いパーセンテージは、より低い
ストリンジェンシーをもたらす）；塩条件、または温度を操作することにより達
成される。例えば、中程度に高ストリンジェンシーの条件には、６×ＳＳＰＥ（
２０×ＳＳＰＥ＝３ＭＮａＣｌ；０．２ＭＮａＨ2ＰＯ4；０．０２ＭＥＤＴＡ、
ｐＨ７．４）、０．５％ＳＤＳ、３０％ホルムアミド、１００μｇ／ｍｌサケ精
子ブロッキングＤＮＡを含む溶液中での３℃での一晩のインキュベーション；続
いて１×ＳＳＰＥ、０．１％ＳＤＳでの５０℃での洗浄が含まれる。さらに、よ
り低いストリンジェンシーを達成するために、ストリンジェントなハイブリダイ
ゼーションに続いて行われる洗浄は、より高い塩濃度で行われ得る（例えば、５
×ＳＳＣ）。
たはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドにハイブリダイズする核酸分子がまた意図され
る。ハイブリダイゼーションのストリンジェンシーおよびシグナル検出の変化は
、主にホルムアミド濃度（ホルムアミドのより低いパーセンテージは、より低い
ストリンジェンシーをもたらす）；塩条件、または温度を操作することにより達
成される。例えば、中程度に高ストリンジェンシーの条件には、６×ＳＳＰＥ（
２０×ＳＳＰＥ＝３ＭＮａＣｌ；０．２ＭＮａＨ2ＰＯ4；０．０２ＭＥＤＴＡ、
ｐＨ７．４）、０．５％ＳＤＳ、３０％ホルムアミド、１００μｇ／ｍｌサケ精
子ブロッキングＤＮＡを含む溶液中での３℃での一晩のインキュベーション；続
いて１×ＳＳＰＥ、０．１％ＳＤＳでの５０℃での洗浄が含まれる。さらに、よ
り低いストリンジェンシーを達成するために、ストリンジェントなハイブリダイ
ゼーションに続いて行われる洗浄は、より高い塩濃度で行われ得る（例えば、５
×ＳＳＣ）。
【００４６】
上記の条件のバリエーションは、ハイブリダイゼーション実験におけるバック
グラウンドを抑制するために使用される代替のブロッキング剤を含ませることお
よび／または置換することによって達成され得ることに留意すること。代表的な
ブロッキング試薬には、Ｄｅｎｈａｒｄｔ試薬、ＢＬＯＴＴＯ、ヘパリン、変性
サケ精子ＤＮＡ、および市販の特許処方物が含まれる。特定のブロッキング試薬
を含ませることは、適合性の問題に起因して、上記のハイブリダイゼーション条
件の改変を必要とし得る。
グラウンドを抑制するために使用される代替のブロッキング剤を含ませることお
よび／または置換することによって達成され得ることに留意すること。代表的な
ブロッキング試薬には、Ｄｅｎｈａｒｄｔ試薬、ＢＬＯＴＴＯ、ヘパリン、変性
サケ精子ＤＮＡ、および市販の特許処方物が含まれる。特定のブロッキング試薬
を含ませることは、適合性の問題に起因して、上記のハイブリダイゼーション条
件の改変を必要とし得る。
【００４７】
当然に、ポリＡ+配列にのみハイブリダイズするポリヌクレオチド（例えば、
配列表に示されるｃＤＮＡの任意の３’末端ポリＡ+トラクト）、あるいはＴ（
またはＵ）残基の相補的ストレッチにのみハイブリダイズするポリヌクレオチド
は、「ポリヌクレオチド」の定義に含まれない。なぜなら、このようなポリヌク
レオチドは、ポリ（Ａ）ストレッチまたはその相補鎖を含む任意の核酸分子（例
えば、実際的には、任意の二本鎖ｃＤＮＡクローン）にハイブリダイズするから
である。
配列表に示されるｃＤＮＡの任意の３’末端ポリＡ+トラクト）、あるいはＴ（
またはＵ）残基の相補的ストレッチにのみハイブリダイズするポリヌクレオチド
は、「ポリヌクレオチド」の定義に含まれない。なぜなら、このようなポリヌク
レオチドは、ポリ（Ａ）ストレッチまたはその相補鎖を含む任意の核酸分子（例
えば、実際的には、任意の二本鎖ｃＤＮＡクローン）にハイブリダイズするから
である。
【００４８】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドは、任意のポリリボヌクレオ
チドまたはポリデオキシリボヌクレオチドから構成され得、これらは、非改変Ｒ
ＮＡもしくは非改変ＤＮＡまたは改変ＲＮＡもしくは改変ＤＮＡであり得る。例
えば、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドは、一本鎖および二本鎖
のＤＮＡ、一本鎖および二本鎖の領域の混合物であるＤＮＡ、一本鎖および二本
鎖のＲＮＡ、ならびに一本鎖および二本鎖の領域の混合物であるＲＮＡ、一本鎖
、またはより代表的には二本鎖もしくは一本鎖および二本鎖の領域の混合物であ
り得るＤＮＡおよびＲＮＡを含むハイブリッド分子から構成され得る。さらに、
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドは、ＲＮＡもしくはＤＮＡまた
はＲＮＡおよびＤＮＡの両方を含む三本鎖領域から構成され得る。ＭＥＴＨ１ま
たはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドはまた、安定性のために、または他の理由の
ために改変された１つ以上の改変された塩基またはＤＮＡもしくはＲＮＡの骨格
を含み得る。「改変された」塩基としては、例えば、トリチル化された塩基およ
びイノシンのような普通でない塩基が挙げられる。種々の改変が、ＤＮＡおよび
ＲＮＡに対して行われ得；従って、「ポリヌクレオチド」は、化学的、酵素学的
、または代謝的に改変された形態を含む。
チドまたはポリデオキシリボヌクレオチドから構成され得、これらは、非改変Ｒ
ＮＡもしくは非改変ＤＮＡまたは改変ＲＮＡもしくは改変ＤＮＡであり得る。例
えば、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドは、一本鎖および二本鎖
のＤＮＡ、一本鎖および二本鎖の領域の混合物であるＤＮＡ、一本鎖および二本
鎖のＲＮＡ、ならびに一本鎖および二本鎖の領域の混合物であるＲＮＡ、一本鎖
、またはより代表的には二本鎖もしくは一本鎖および二本鎖の領域の混合物であ
り得るＤＮＡおよびＲＮＡを含むハイブリッド分子から構成され得る。さらに、
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドは、ＲＮＡもしくはＤＮＡまた
はＲＮＡおよびＤＮＡの両方を含む三本鎖領域から構成され得る。ＭＥＴＨ１ま
たはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドはまた、安定性のために、または他の理由の
ために改変された１つ以上の改変された塩基またはＤＮＡもしくはＲＮＡの骨格
を含み得る。「改変された」塩基としては、例えば、トリチル化された塩基およ
びイノシンのような普通でない塩基が挙げられる。種々の改変が、ＤＮＡおよび
ＲＮＡに対して行われ得；従って、「ポリヌクレオチド」は、化学的、酵素学的
、または代謝的に改変された形態を含む。
【００４９】
「配列番号１」はＭＥＴＨ１ポリヌクレオチド配列をいい、一方、「配列番号
２」はＭＥＴＨ１ポリペプチド配列をいう。「配列番号３」はＭＥＴＨ２ポリヌ
クレオチド配列をいい、一方、「配列番号４」はＭＥＴＨ２ポリペプチド配列を
いう。
２」はＭＥＴＨ１ポリペプチド配列をいう。「配列番号３」はＭＥＴＨ２ポリヌ
クレオチド配列をいい、一方、「配列番号４」はＭＥＴＨ２ポリペプチド配列を
いう。
【００５０】
示されるように、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチドをコードする本
発明の核酸分子としては以下を挙げ得るが、これらに限定されない：成熟ポリペ
プチドのアミノ酸配列を単独でコードする配列；成熟ポリぺプチドについてのコ
ード配列およびさらなる配列（例えば、リーダー配列または分泌配列をコードす
る配列）（例えば、プレ−もしくはプロ−もしくはプレプロ−タンパク質配列）
；上述のさらなるコード配列を有するかもしくは有さない成熟ポリぺプチドのコ
ード配列と共に、さらなる非コード配列（例えば、イントロンおよび非コード５
’および３’配列（例えば、転写、スプライシングを含むｍＲＮＡプロセシング
、およびポリアデニル化シグナルに役割（例えば、リボソーム結合およびｍＲＮ
Ａの安定性）を果たす転写される非翻訳配列）を含むがこれらに限定されない配
列）；さらなるアミノ酸（例えば、さらなる機能性を提供する配列）をコードす
るさらなるコード配列。従って、ポリぺプチドをコードする配列は、マーカー配
列（例えば、融合されたポリぺプチドの精製を容易にするペプチドをコードする
配列）に融合され得る。本発明のこの局面の特定の好ましい実施形態において、
マーカーアミノ酸配列は、とりわけヘキサヒスチジンペプチド（例えば、ｐＱＥ
ベクター（Ｑｉａｇｅｎ，Ｉｎｃ．）において提供されるタグ）であり、これら
の多くのマーカーアミノ酸配列が市販されている。例えば、Ｇｅｎｔｚら、Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８６：８２１−８２４（１９８９）
に記載されるように、ヘキサヒスチジンは、融合タンパク質の都合の良い精製を
提供する。「ＨＡ」タグは、精製のために有用な別のペプチドタグであり、イン
フルエンザ赤血球凝集素タンパク質由来のエピトープに対応し、これは、Ｗｉｌ
ｓｏｎら、Ｃｅｌｌ３７：７６７−７７８（１９８４）に記載されている。以下
で議論されるように、他のこのような融合タンパク質としては、Ｎ末端またはＣ
末端でＦｃに融合されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２が挙げられる。他の融合タ
ンパク質としては、Ｎ末端またはＣ末端でＦｌａｇに融合されたＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２が挙げられる。他の融合タンパク質としては、Ｎ末端またはＣ末端
でＦｌａｇもしくはＦｃに融合されたＭＥＴＨ１フラグメントまたはＭＥＴＨ２
フラグメントが挙げられる。Ｎ末端またはＣ末端でＦｃもしくはＦｌａｇに融合
されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のフラグメント（例えば、配列番号２のＨ５
４１−Ｑ８９４、Ｍ１−Ｐ７９９、Ｆ２３６−Ｅ６１４、またはＫ８０１−Ｑ９
５０）が特に好ましい。
発明の核酸分子としては以下を挙げ得るが、これらに限定されない：成熟ポリペ
プチドのアミノ酸配列を単独でコードする配列；成熟ポリぺプチドについてのコ
ード配列およびさらなる配列（例えば、リーダー配列または分泌配列をコードす
る配列）（例えば、プレ−もしくはプロ−もしくはプレプロ−タンパク質配列）
；上述のさらなるコード配列を有するかもしくは有さない成熟ポリぺプチドのコ
ード配列と共に、さらなる非コード配列（例えば、イントロンおよび非コード５
’および３’配列（例えば、転写、スプライシングを含むｍＲＮＡプロセシング
、およびポリアデニル化シグナルに役割（例えば、リボソーム結合およびｍＲＮ
Ａの安定性）を果たす転写される非翻訳配列）を含むがこれらに限定されない配
列）；さらなるアミノ酸（例えば、さらなる機能性を提供する配列）をコードす
るさらなるコード配列。従って、ポリぺプチドをコードする配列は、マーカー配
列（例えば、融合されたポリぺプチドの精製を容易にするペプチドをコードする
配列）に融合され得る。本発明のこの局面の特定の好ましい実施形態において、
マーカーアミノ酸配列は、とりわけヘキサヒスチジンペプチド（例えば、ｐＱＥ
ベクター（Ｑｉａｇｅｎ，Ｉｎｃ．）において提供されるタグ）であり、これら
の多くのマーカーアミノ酸配列が市販されている。例えば、Ｇｅｎｔｚら、Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８６：８２１−８２４（１９８９）
に記載されるように、ヘキサヒスチジンは、融合タンパク質の都合の良い精製を
提供する。「ＨＡ」タグは、精製のために有用な別のペプチドタグであり、イン
フルエンザ赤血球凝集素タンパク質由来のエピトープに対応し、これは、Ｗｉｌ
ｓｏｎら、Ｃｅｌｌ３７：７６７−７７８（１９８４）に記載されている。以下
で議論されるように、他のこのような融合タンパク質としては、Ｎ末端またはＣ
末端でＦｃに融合されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２が挙げられる。他の融合タ
ンパク質としては、Ｎ末端またはＣ末端でＦｌａｇに融合されたＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２が挙げられる。他の融合タンパク質としては、Ｎ末端またはＣ末端
でＦｌａｇもしくはＦｃに融合されたＭＥＴＨ１フラグメントまたはＭＥＴＨ２
フラグメントが挙げられる。Ｎ末端またはＣ末端でＦｃもしくはＦｌａｇに融合
されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のフラグメント（例えば、配列番号２のＨ５
４１−Ｑ８９４、Ｍ１−Ｐ７９９、Ｆ２３６−Ｅ６１４、またはＫ８０１−Ｑ９
５０）が特に好ましい。
【００５１】
上記のように、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２は、ＦＬＡＧポリペプチド配列と
融合され得る（米国特許第４，８５１，３４１号を参照のこと；また、Ｈｏｐｐ
ら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ６：１２０４、１９８８を参照のこと）。こ
のＦＬＡＧポリペプチド配列は、非常に抗原性であり、そして特異的モノクロー
ナル抗体による結合のためのエピトープを提供し、発現された組換えタンパク質
の迅速な精製を可能にする。この配列はまた、Ａｓｐ−Ｌｙｓ対形成の直後の残
基においてウシ粘膜エンテロキナーゼにより特異的に切断される。
融合され得る（米国特許第４，８５１，３４１号を参照のこと；また、Ｈｏｐｐ
ら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ６：１２０４、１９８８を参照のこと）。こ
のＦＬＡＧポリペプチド配列は、非常に抗原性であり、そして特異的モノクロー
ナル抗体による結合のためのエピトープを提供し、発現された組換えタンパク質
の迅速な精製を可能にする。この配列はまた、Ａｓｐ−Ｌｙｓ対形成の直後の残
基においてウシ粘膜エンテロキナーゼにより特異的に切断される。
【００５２】
本発明は、さらに、本発明の核酸分子の改変体に関連し、これは、ＭＥＴＨ１
タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質の部分、アナログ、または誘導体をコー
ドする。改変体は天然に存在し得る（例えば、天然の対立遺伝子改変体）。「対
立遺伝子改変体」によって、生物の染色体上の所定の遺伝子座を占有する遺伝子
のいくつかの代替の形態のうちの１つが意図される。Ｌｅｗｉｎ，Ｂ．編，Ｇｅ
ｎｅｓＩＩ，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ（１９８５）。天
然に存在しない改変体は、当該分野に公知の変異誘発技術を使用して生成され得
る。
タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質の部分、アナログ、または誘導体をコー
ドする。改変体は天然に存在し得る（例えば、天然の対立遺伝子改変体）。「対
立遺伝子改変体」によって、生物の染色体上の所定の遺伝子座を占有する遺伝子
のいくつかの代替の形態のうちの１つが意図される。Ｌｅｗｉｎ，Ｂ．編，Ｇｅ
ｎｅｓＩＩ，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ（１９８５）。天
然に存在しない改変体は、当該分野に公知の変異誘発技術を使用して生成され得
る。
【００５３】
このような改変体としては、１つ以上のヌクレオチドを含み得る、ヌクレオチ
ドの置換、欠失、または付加によって生成される改変体が挙げられる。これらの
改変体は、コード領域、非コード領域、または両方において変更され得る。コー
ド領域における変更は、保存的なまたは非保存的なアミノ酸の置換、欠失、また
は付加を生成し得る。これらの間で特に好ましいものは、ＭＥＴＨ１もしくはＭ
ＥＴＨ２のタンパク質またはそれらの部分の特性および活性を変化させない、サ
イレントな置換、付加および欠失である。このことについて特に好ましいのはま
た、保存的置換である。
ドの置換、欠失、または付加によって生成される改変体が挙げられる。これらの
改変体は、コード領域、非コード領域、または両方において変更され得る。コー
ド領域における変更は、保存的なまたは非保存的なアミノ酸の置換、欠失、また
は付加を生成し得る。これらの間で特に好ましいものは、ＭＥＴＨ１もしくはＭ
ＥＴＨ２のタンパク質またはそれらの部分の特性および活性を変化させない、サ
イレントな置換、付加および欠失である。このことについて特に好ましいのはま
た、保存的置換である。
【００５４】
本発明のさらなる実施形態は、以下のヌクレオチド配列に、少なくとも８０％
同一なヌクレオチド配列、そしてより好ましくは、少なくとも８５％、９０％、
９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９
９％同一なヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドを含む単離された核酸分
子を含む：配列番号２のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌクレ
オチド配列；配列番号２のアミノ酸配列を有するがＮ末端のメチオニンを欠くポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列；配列番号２の約２９位〜約９５０位
のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列；配列番号
２の約３０位〜約９５０位のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌ
クレオチド配列；ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１に含まれるｃＤＮＡクローンに
よってコードされるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌクレオチ
ド配列；ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１に含まれるｃＤＮＡクローンによってコ
ードされるアミノ酸配列を有する成熟ＭＥＴＨ１ポリぺプチドをコードするヌク
レオチド配列；配列番号２のアミノ酸２３５〜４５９をコードするヌクレオチド
配列（ＭＥＴＨ１の金属プロテアーゼドメイン）；配列番号２のアミノ酸４６０
〜５４４をコードするヌクレオチド配列（ＭＥＴＨ１のジスインテグリン（ｄｉ
ｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ドメイン）；配列番号２のアミノ酸５４５〜５９８をコー
ドするヌクレオチド配列（ＭＥＴＨ１の第１のＴＳＰ様ドメイン）；配列番号２
のアミノ酸８４１〜８９４をコードするヌクレオチド配列（ＭＥＴＨ１の第２の
ＴＳＰ様ドメイン）；配列番号２のアミノ酸８９５〜９３４をコードするヌクレ
オチド配列（ＭＥＴＨ１の第３のＴＳＰ様ドメイン）；配列番号２のアミノ酸５
３６〜６１３をコードするヌクレオチド配列；配列番号２のアミノ酸５４９〜５
６３をコードするヌクレオチド配列；配列番号４のアミノ酸配列を有するポリペ
プチドをコードするヌクレオチド配列；配列番号４のアミノ酸配列を有するがＮ
末端のメチオニンを欠くポリペプチドをコードするヌクレオチド配列；配列番号
４の約２４位〜約８９０位のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌ
クレオチド配列；配列番号４の約１１２位〜約８９０位のアミノ酸配列を有する
ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列；ＡＴＣＣ受託番号２０９５８２ま
たはＰＴＡ１４７８に含まれるｃＤＮＡクローンによってコードされるアミノ酸
配列を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列；ＡＴＣＣ受託番号２
０９５８２またはＰＴＡ１４７８に含まれるｃＤＮＡクローンによってコードさ
れるアミノ酸配列を有する成熟ＭＥＴＨ２ポリぺプチドをコードするヌクレオチ
ド配列；配列番号４のアミノ酸２１４〜４３９をコードするヌクレオチド配列（
ＭＥＴＨ２の金属プロテアーゼドメイン）；配列番号４のアミノ酸４４０〜５２
９をコードするヌクレオチド配列（ＭＥＴＨ２のジスインテグリンドメイン）；
配列番号４のアミノ酸５３０〜５８３をコードするヌクレオチド配列（ＭＥＴＨ
２の第１のＴＳＰ様ドメイン）；配列番号４のアミノ酸８３７〜８９０をコード
するヌクレオチド配列（ＭＥＴＨ２の第２のＴＳＰ様ドメイン）；配列番号４の
アミノ酸２８０〜６０６をコードするヌクレオチド配列；配列番号４のアミノ酸
５２９〜５４８をコードするヌクレオチド配列；または上記のヌクレオチド配列
のいずれかと相補的なヌクレオチド配列。
同一なヌクレオチド配列、そしてより好ましくは、少なくとも８５％、９０％、
９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９
９％同一なヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドを含む単離された核酸分
子を含む：配列番号２のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌクレ
オチド配列；配列番号２のアミノ酸配列を有するがＮ末端のメチオニンを欠くポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列；配列番号２の約２９位〜約９５０位
のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列；配列番号
２の約３０位〜約９５０位のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌ
クレオチド配列；ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１に含まれるｃＤＮＡクローンに
よってコードされるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌクレオチ
ド配列；ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１に含まれるｃＤＮＡクローンによってコ
ードされるアミノ酸配列を有する成熟ＭＥＴＨ１ポリぺプチドをコードするヌク
レオチド配列；配列番号２のアミノ酸２３５〜４５９をコードするヌクレオチド
配列（ＭＥＴＨ１の金属プロテアーゼドメイン）；配列番号２のアミノ酸４６０
〜５４４をコードするヌクレオチド配列（ＭＥＴＨ１のジスインテグリン（ｄｉ
ｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ドメイン）；配列番号２のアミノ酸５４５〜５９８をコー
ドするヌクレオチド配列（ＭＥＴＨ１の第１のＴＳＰ様ドメイン）；配列番号２
のアミノ酸８４１〜８９４をコードするヌクレオチド配列（ＭＥＴＨ１の第２の
ＴＳＰ様ドメイン）；配列番号２のアミノ酸８９５〜９３４をコードするヌクレ
オチド配列（ＭＥＴＨ１の第３のＴＳＰ様ドメイン）；配列番号２のアミノ酸５
３６〜６１３をコードするヌクレオチド配列；配列番号２のアミノ酸５４９〜５
６３をコードするヌクレオチド配列；配列番号４のアミノ酸配列を有するポリペ
プチドをコードするヌクレオチド配列；配列番号４のアミノ酸配列を有するがＮ
末端のメチオニンを欠くポリペプチドをコードするヌクレオチド配列；配列番号
４の約２４位〜約８９０位のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌ
クレオチド配列；配列番号４の約１１２位〜約８９０位のアミノ酸配列を有する
ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列；ＡＴＣＣ受託番号２０９５８２ま
たはＰＴＡ１４７８に含まれるｃＤＮＡクローンによってコードされるアミノ酸
配列を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列；ＡＴＣＣ受託番号２
０９５８２またはＰＴＡ１４７８に含まれるｃＤＮＡクローンによってコードさ
れるアミノ酸配列を有する成熟ＭＥＴＨ２ポリぺプチドをコードするヌクレオチ
ド配列；配列番号４のアミノ酸２１４〜４３９をコードするヌクレオチド配列（
ＭＥＴＨ２の金属プロテアーゼドメイン）；配列番号４のアミノ酸４４０〜５２
９をコードするヌクレオチド配列（ＭＥＴＨ２のジスインテグリンドメイン）；
配列番号４のアミノ酸５３０〜５８３をコードするヌクレオチド配列（ＭＥＴＨ
２の第１のＴＳＰ様ドメイン）；配列番号４のアミノ酸８３７〜８９０をコード
するヌクレオチド配列（ＭＥＴＨ２の第２のＴＳＰ様ドメイン）；配列番号４の
アミノ酸２８０〜６０６をコードするヌクレオチド配列；配列番号４のアミノ酸
５２９〜５４８をコードするヌクレオチド配列；または上記のヌクレオチド配列
のいずれかと相補的なヌクレオチド配列。
【００５５】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチドをコードする参照ヌクレオチド配
列に、例えば、少なくとも９５％「同一」なヌクレオチド配列を有するポリヌク
レオチドとは、ポリヌクレオチドのヌクレオチド配列が、ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２のポリペプチドをコードする参照ヌクレオチド配列の各１００ヌクレオチ
ドあたり５つまでの点変異を含み得ることを除いて、このポリヌクレオチドの配
列が参照配列に対して同一であることを意図する。すなわち、参照ヌクレオチド
配列に少なくとも９５％同一なヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドを得
るために、参照配列のヌクレオチドの５％までが、欠失され得るかまたは別のヌ
クレオチドで置換され得るか、あるいは参照配列中の総ヌクレオチドの５％まで
の多数のヌクレオチドが参照配列中に挿入され得る。参照配列のこれらの変異は
、参照ヌクレオチド配列の５’末端位置もしくは３’末端位置で生じ得るか、ま
たは参照配列中のヌクレオチド間で個々に、もしくは参照配列内の１つ以上の連
続した群においてのいずれかで散在されてこれらの末端位置間のどこにでも生じ
得る。
列に、例えば、少なくとも９５％「同一」なヌクレオチド配列を有するポリヌク
レオチドとは、ポリヌクレオチドのヌクレオチド配列が、ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２のポリペプチドをコードする参照ヌクレオチド配列の各１００ヌクレオチ
ドあたり５つまでの点変異を含み得ることを除いて、このポリヌクレオチドの配
列が参照配列に対して同一であることを意図する。すなわち、参照ヌクレオチド
配列に少なくとも９５％同一なヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドを得
るために、参照配列のヌクレオチドの５％までが、欠失され得るかまたは別のヌ
クレオチドで置換され得るか、あるいは参照配列中の総ヌクレオチドの５％まで
の多数のヌクレオチドが参照配列中に挿入され得る。参照配列のこれらの変異は
、参照ヌクレオチド配列の５’末端位置もしくは３’末端位置で生じ得るか、ま
たは参照配列中のヌクレオチド間で個々に、もしくは参照配列内の１つ以上の連
続した群においてのいずれかで散在されてこれらの末端位置間のどこにでも生じ
得る。
【００５６】
実際問題として、任意の特定の核酸分子が、例えば、配列番号１もしくは配列
番号３に示されるヌクレオチド配列に対して、または受託されたｃＤＮＡクロー
ンのヌクレオチド配列に対して、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、
９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一
であるか否かは、従来通りに、公知のコンピュータープログラム（例えば、Ｂｅ
ｓｔｆｉｔプログラム（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ ＳｅｑｕｅｎｃｅＡｎａｌｙｓｉ
ｓ Ｐａｃｋａｇｅ，Ｕｎｉｘ（登録商標）対応バージョン８，Ｇｅｎｅｔｉｃ
ｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
Ｐａｒｋ，５７５Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｄｒｉｖｅ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ５３７
１１））を使用して決定され得る。Ｂｅｓｔｆｉｔは、ＳｍｉｔｈおよびＷａｔ
ｅｒｍａｎ，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍａｔｈｅｍａｔｉｃ
ｓ２：４８２−４８９（１９８１）の局所相同性アルゴリズムを使用し、２つの
配列間で相同性が最良のセグメントを見出す。特定の配列が、例えば、本発明に
従う参照配列に９５％同一であるかどうかを決定するために、Ｂｅｓｔｆｉｔも
しくは他の任意の配列整列プログラムを使用する場合、パラメーターは、当然、
同一性パーセントが参照ヌクレオチド配列の全長にわたって算出され、そして参
照配列のヌクレオチドの総数の５％までの相同性におけるギャップが許容される
ように設定される。
番号３に示されるヌクレオチド配列に対して、または受託されたｃＤＮＡクロー
ンのヌクレオチド配列に対して、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、
９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一
であるか否かは、従来通りに、公知のコンピュータープログラム（例えば、Ｂｅ
ｓｔｆｉｔプログラム（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ ＳｅｑｕｅｎｃｅＡｎａｌｙｓｉ
ｓ Ｐａｃｋａｇｅ，Ｕｎｉｘ（登録商標）対応バージョン８，Ｇｅｎｅｔｉｃ
ｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
Ｐａｒｋ，５７５Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｄｒｉｖｅ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ５３７
１１））を使用して決定され得る。Ｂｅｓｔｆｉｔは、ＳｍｉｔｈおよびＷａｔ
ｅｒｍａｎ，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍａｔｈｅｍａｔｉｃ
ｓ２：４８２−４８９（１９８１）の局所相同性アルゴリズムを使用し、２つの
配列間で相同性が最良のセグメントを見出す。特定の配列が、例えば、本発明に
従う参照配列に９５％同一であるかどうかを決定するために、Ｂｅｓｔｆｉｔも
しくは他の任意の配列整列プログラムを使用する場合、パラメーターは、当然、
同一性パーセントが参照ヌクレオチド配列の全長にわたって算出され、そして参
照配列のヌクレオチドの総数の５％までの相同性におけるギャップが許容される
ように設定される。
【００５７】
問い合わせ配列（本発明の配列）と対象配列との間での最良の全体的な一致（
全体的配列整列としても参照される）を決定するための好ましい方法は、Ｂｒｕ
ｔｌａｇら、Ｃｏｍｐ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．６：２３７−２４５（１９９
０）のアルゴリズムに基づいてＦＡＳＴＤＢコンピュータープログラムを使用し
て決定され得る。配列整列において、問い合わせ配列および対象配列は、両方と
もＤＮＡ配列である。ＲＮＡ配列は、ＵをＴに変換することによって比較され得
る。上記の全体的配列整列の結果は、同一性パーセントで示される。ＤＮＡ配列
のＦＡＳＴＤＢ整列に使用される、パーセント同一性を算出するための好ましい
パラメーターは以下の通りである：Ｍａｔｒｉｘ＝Ｕｎｉｔａｒｙ、ｋ−ｔｕｐ
ｌｅ＝４、Ｍｉｓｍａｔｃｈ Ｐｅｎａｌｔｙ＝１、Ｊｏｉｎｉｎｇ Ｐｅｎａ
ｌｔｙ＝３０、Ｒａｎｄｏｍｉｚａｔｉｏｎ Ｇｒｏｕｐ Ｌｅｎｇｔｈ＝０、
Ｃｕｔｏｆｆ Ｓｃｏｒｅ＝１、Ｇａｐ Ｐｅｎａｌｔｙ＝５、Ｇａｐ Ｓｉｚ
ｅ Ｐｅｎａｌｔｙ＝０．０５、Ｗｉｎｄｏｗ Ｓｉｚｅ＝５００または対象ヌ
クレオチド配列の長さ（どちらかより短い方）。
全体的配列整列としても参照される）を決定するための好ましい方法は、Ｂｒｕ
ｔｌａｇら、Ｃｏｍｐ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．６：２３７−２４５（１９９
０）のアルゴリズムに基づいてＦＡＳＴＤＢコンピュータープログラムを使用し
て決定され得る。配列整列において、問い合わせ配列および対象配列は、両方と
もＤＮＡ配列である。ＲＮＡ配列は、ＵをＴに変換することによって比較され得
る。上記の全体的配列整列の結果は、同一性パーセントで示される。ＤＮＡ配列
のＦＡＳＴＤＢ整列に使用される、パーセント同一性を算出するための好ましい
パラメーターは以下の通りである：Ｍａｔｒｉｘ＝Ｕｎｉｔａｒｙ、ｋ−ｔｕｐ
ｌｅ＝４、Ｍｉｓｍａｔｃｈ Ｐｅｎａｌｔｙ＝１、Ｊｏｉｎｉｎｇ Ｐｅｎａ
ｌｔｙ＝３０、Ｒａｎｄｏｍｉｚａｔｉｏｎ Ｇｒｏｕｐ Ｌｅｎｇｔｈ＝０、
Ｃｕｔｏｆｆ Ｓｃｏｒｅ＝１、Ｇａｐ Ｐｅｎａｌｔｙ＝５、Ｇａｐ Ｓｉｚ
ｅ Ｐｅｎａｌｔｙ＝０．０５、Ｗｉｎｄｏｗ Ｓｉｚｅ＝５００または対象ヌ
クレオチド配列の長さ（どちらかより短い方）。
【００５８】
対象配列が、５’末端欠失または３’末端欠失により（内部欠失のためではな
く）問い合わせ配列よりも短い場合、手動補正が結果に対してなされなければな
らない。これは、ＦＡＳＴＤＢプログラムが同一性パーセントを算定する場合に
、対象配列の５’末端切断および３’末端切断を考慮しないからである。問合せ
配列に対して５’末端または３’末端で切断される対象配列について、同一性パ
ーセントは、問い合わせ配列の総塩基のパーセントとして、対象配列の５’側お
よび３’側である一致／整列しない問い合わせ配列の塩基の数を計算することに
よって補正される。ヌクレオチドが一致／整列されているか否かは、ＦＡＳＴＤ
Ｂ配列整列の結果によって決定される。次いで、このパーセントは、同一性パー
セントから差し引かれ、上記のＦＡＳＴＤＢプログラムによって特定のパラメー
ターを使用して計算され、最終的な同一性パーセントのスコアに到達する。この
補正されたスコアは、本発明の目的で使用されるものである。ＦＡＳＴＤＢ整列
によって表示されるような、問い合わせ配列と一致／整列していない対象配列の
５’塩基および３’塩基の外側の塩基のみが、同一性パーセントのスコアを手動
で調整する目的で計算される。
く）問い合わせ配列よりも短い場合、手動補正が結果に対してなされなければな
らない。これは、ＦＡＳＴＤＢプログラムが同一性パーセントを算定する場合に
、対象配列の５’末端切断および３’末端切断を考慮しないからである。問合せ
配列に対して５’末端または３’末端で切断される対象配列について、同一性パ
ーセントは、問い合わせ配列の総塩基のパーセントとして、対象配列の５’側お
よび３’側である一致／整列しない問い合わせ配列の塩基の数を計算することに
よって補正される。ヌクレオチドが一致／整列されているか否かは、ＦＡＳＴＤ
Ｂ配列整列の結果によって決定される。次いで、このパーセントは、同一性パー
セントから差し引かれ、上記のＦＡＳＴＤＢプログラムによって特定のパラメー
ターを使用して計算され、最終的な同一性パーセントのスコアに到達する。この
補正されたスコアは、本発明の目的で使用されるものである。ＦＡＳＴＤＢ整列
によって表示されるような、問い合わせ配列と一致／整列していない対象配列の
５’塩基および３’塩基の外側の塩基のみが、同一性パーセントのスコアを手動
で調整する目的で計算される。
【００５９】
例えば、９０塩基の対象配列は、同一性パーセントを決定するために１００塩
基の問い合わせ配列と整列される。欠失が本配列の５’末端で生じ、そしてそれ
故に、ＦＡＳＴＤＢ整列は、５’末端での最初の１０塩基の一致／整列を示さな
い。１０個の不対合塩基は、配列の１０％（一致していない５’末端および３’
末端での塩基の数／問い合わせ配列中の塩基の総数）を表し、その結果ＦＡＳＴ
ＤＢプログラムによって計算される同一性パーセントのスコアから１０％が差し
引かれる。残りの９０塩基が完全に一致した場合、最終的な同一性パーセントは
９０％である。別の例において、９０塩基の対象配列が、１００塩基の問い合わ
せ配列と比較される。この場合、欠失は、内部欠失であり、そのため問い合わせ
配列と一致／整列しない対象配列の５’末端または３’末端の塩基は存在しない
。この場合、ＦＡＳＴＤＢによって算定される同一性パーセントは、手動で補正
されない。再び、問い合わせ配列と一致／整列しない対象配列の５’側および３
’側の塩基のみが手動で補正される。他の手動の補正は、本発明の目的のために
はなされない。
基の問い合わせ配列と整列される。欠失が本配列の５’末端で生じ、そしてそれ
故に、ＦＡＳＴＤＢ整列は、５’末端での最初の１０塩基の一致／整列を示さな
い。１０個の不対合塩基は、配列の１０％（一致していない５’末端および３’
末端での塩基の数／問い合わせ配列中の塩基の総数）を表し、その結果ＦＡＳＴ
ＤＢプログラムによって計算される同一性パーセントのスコアから１０％が差し
引かれる。残りの９０塩基が完全に一致した場合、最終的な同一性パーセントは
９０％である。別の例において、９０塩基の対象配列が、１００塩基の問い合わ
せ配列と比較される。この場合、欠失は、内部欠失であり、そのため問い合わせ
配列と一致／整列しない対象配列の５’末端または３’末端の塩基は存在しない
。この場合、ＦＡＳＴＤＢによって算定される同一性パーセントは、手動で補正
されない。再び、問い合わせ配列と一致／整列しない対象配列の５’側および３
’側の塩基のみが手動で補正される。他の手動の補正は、本発明の目的のために
はなされない。
【００６０】
本出願は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の活性を有するポリペプチドをコード
するか否かに拘らず、配列番号１もしくは配列番号３に示される核酸配列または
受託されたｃＤＮＡの核酸配列に少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、
９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一
な核酸分子に関する。これは、なぜなら、特定の核酸分子がＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２の活性を有するポリペプチドをコードしない場合でさえ、当業者はこの
核酸分子の、例えば、ハイブリダイゼーションプローブまたはポリメラーゼ連鎖
反応（ＰＣＲ）プライマーとしての使用方法を依然として理解するからである。
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の活性を有するポリペプチドをコードしない本発明
の核酸分子の使用としては、特に、（１）ｃＤＮＡライブラリーにおけるＭＥＴ
Ｈ１もしくはＭＥＴＨ２の遺伝子、またはそれらの対立遺伝子改変体の単離；（
２）Ｖｅｒｍａら、Ｈｕｍａｎ Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ：Ａ Ｍａｎｕａｌ
ｏｆ Ｂａｓｉｃ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎ
ｅｗ Ｙｏｒｋ（１９９８）に記載される通りの、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２
の遺伝子の正確な染色体位置を提供するための、分裂中期の染色体展開物に対す
るインサイチュハイブリダイゼーション（例えば、「ＦＩＳＨ」）；および（３
）特定の組織におけるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のｍＲＮＡ発現を検出するた
めのノーザンブロット分析が挙げられる。
するか否かに拘らず、配列番号１もしくは配列番号３に示される核酸配列または
受託されたｃＤＮＡの核酸配列に少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、
９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一
な核酸分子に関する。これは、なぜなら、特定の核酸分子がＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２の活性を有するポリペプチドをコードしない場合でさえ、当業者はこの
核酸分子の、例えば、ハイブリダイゼーションプローブまたはポリメラーゼ連鎖
反応（ＰＣＲ）プライマーとしての使用方法を依然として理解するからである。
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の活性を有するポリペプチドをコードしない本発明
の核酸分子の使用としては、特に、（１）ｃＤＮＡライブラリーにおけるＭＥＴ
Ｈ１もしくはＭＥＴＨ２の遺伝子、またはそれらの対立遺伝子改変体の単離；（
２）Ｖｅｒｍａら、Ｈｕｍａｎ Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ：Ａ Ｍａｎｕａｌ
ｏｆ Ｂａｓｉｃ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎ
ｅｗ Ｙｏｒｋ（１９９８）に記載される通りの、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２
の遺伝子の正確な染色体位置を提供するための、分裂中期の染色体展開物に対す
るインサイチュハイブリダイゼーション（例えば、「ＦＩＳＨ」）；および（３
）特定の組織におけるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のｍＲＮＡ発現を検出するた
めのノーザンブロット分析が挙げられる。
【００６１】
しかし、配列番号１または配列番号３に示される核酸配列に、あるいは受託さ
れたｃＤＮＡの核酸配列に、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２
％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な配
列を有し、実際に、ＭＥＴＨ１またはＭＲＴＨ２のタンパク質活性を有するポリ
ぺプチドをコードする核酸分子が好ましい。「ＭＥＴＨ１活性を有するポリぺプ
チド」によって、特定の生物学的アッセイにおいてＭＥＴＨ１の活性を示すポリ
ぺプチドが意図される。例えば、ＭＥＴＨ１タンパク質活性は、絨毛尿膜アッセ
イ（Ｉｒｕｅｌａ−Ａｒｉｓｐｅら、Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ａｎｄ Ｈａｅｍ
ｏｓｔａｓｉｓ ７８（１）：６７２−６７７（１９９７））、または角膜ポケ
ット（ｃｏｒｎｅａｐｏｃｋｅｔ）アッセイ（Ｔｏｌｓｍａら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．
Ｂｉｏｌ．１２２：４９７−５１１（１９９３））を使用して測定され得る。こ
の両アッセイは以下の実施例４に記載される。「ＭＥＴＨ２活性を有するポリぺ
プチド」によって、特定の生物学的アッセイにおいてＭＥＴＨ２の活性を示すポ
リぺプチドが意図される。例えば、ＭＥＴＨ２タンパク質活性はまた、絨毛尿膜
アッセイ（Ｉｒｕｅｌａ−Ａｒｉｓｐｅら、Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ａｎｄ Ｈ
ａｅｍｏｓｔａｓｉｓ ７８（１）：６７２−６７７（１９９７））、または角
膜ポケットアッセイ（Ｔｏｌｓｍａら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１２２：４９
７−５１１（１９９３））を使用して測定され得る。この両アッセイは以下の実
施例４に記載される。
れたｃＤＮＡの核酸配列に、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２
％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な配
列を有し、実際に、ＭＥＴＨ１またはＭＲＴＨ２のタンパク質活性を有するポリ
ぺプチドをコードする核酸分子が好ましい。「ＭＥＴＨ１活性を有するポリぺプ
チド」によって、特定の生物学的アッセイにおいてＭＥＴＨ１の活性を示すポリ
ぺプチドが意図される。例えば、ＭＥＴＨ１タンパク質活性は、絨毛尿膜アッセ
イ（Ｉｒｕｅｌａ−Ａｒｉｓｐｅら、Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ａｎｄ Ｈａｅｍ
ｏｓｔａｓｉｓ ７８（１）：６７２−６７７（１９９７））、または角膜ポケ
ット（ｃｏｒｎｅａｐｏｃｋｅｔ）アッセイ（Ｔｏｌｓｍａら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．
Ｂｉｏｌ．１２２：４９７−５１１（１９９３））を使用して測定され得る。こ
の両アッセイは以下の実施例４に記載される。「ＭＥＴＨ２活性を有するポリぺ
プチド」によって、特定の生物学的アッセイにおいてＭＥＴＨ２の活性を示すポ
リぺプチドが意図される。例えば、ＭＥＴＨ２タンパク質活性はまた、絨毛尿膜
アッセイ（Ｉｒｕｅｌａ−Ａｒｉｓｐｅら、Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ａｎｄ Ｈ
ａｅｍｏｓｔａｓｉｓ ７８（１）：６７２−６７７（１９９７））、または角
膜ポケットアッセイ（Ｔｏｌｓｍａら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１２２：４９
７−５１１（１９９３））を使用して測定され得る。この両アッセイは以下の実
施例４に記載される。
【００６２】
概略すると、絨毛尿膜アッセイにおいては、目的の潜在的に抗新脈管形成性の
化合物を、新脈管形成増殖因子（例えば、ｂＦＧＦ）と共に、Ｉ型コラーゲンペ
レット（Ｖｉｔｒｏｇｅｎ）に加える。このサンプルを混合し、そしてナイロン
メッシュ上に配置し、重合させる。重合化が完了した後、このメッシュを１２日
齢のニワトリ胚の絨毛尿膜上に配置し、そして３７℃で２４時間配置する。次い
で、この胚に蛍光薬剤（例えば、ＦＩＴＣ−デキストラン）を注射し、このメッ
シュを固定し、そして蛍光顕微鏡下での観察のために取り付ける。
化合物を、新脈管形成増殖因子（例えば、ｂＦＧＦ）と共に、Ｉ型コラーゲンペ
レット（Ｖｉｔｒｏｇｅｎ）に加える。このサンプルを混合し、そしてナイロン
メッシュ上に配置し、重合させる。重合化が完了した後、このメッシュを１２日
齢のニワトリ胚の絨毛尿膜上に配置し、そして３７℃で２４時間配置する。次い
で、この胚に蛍光薬剤（例えば、ＦＩＴＣ−デキストラン）を注射し、このメッ
シュを固定し、そして蛍光顕微鏡下での観察のために取り付ける。
【００６３】
角膜ポケットアッセイにおいては、目的の化合物および新脈管形成増殖因子（
例えば、ｂＦＧＦ）を含むハイドロン（ｈｙｄｒｏｎ）ペレットを、ラットもし
くはマウスの角膜の縁から１〜２ｍｍの所へ移植する。応答を、ある一定の期間
（例えば、５日間）の後に調べる。新脈管形成の程度を、角膜の縁（ｌｉｍｂ）
から移動した毛細血管を測定することによって評価する。
例えば、ｂＦＧＦ）を含むハイドロン（ｈｙｄｒｏｎ）ペレットを、ラットもし
くはマウスの角膜の縁から１〜２ｍｍの所へ移植する。応答を、ある一定の期間
（例えば、５日間）の後に調べる。新脈管形成の程度を、角膜の縁（ｌｉｍｂ）
から移動した毛細血管を測定することによって評価する。
【００６４】
当然、遺伝コードの縮重に起因して、当業者は、受託されたｃＤＮＡの核酸配
列または配列番号１もしくは配列番号３に示される核酸配列に、少なくとも８０
％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７
％、９８％、または９９％同一な配列を有する多数の核酸分子が、「ＭＥＴＨ１
またはＭＥＴＨ２のタンパク質活性を有する」ポリぺプチドをコードすることを
即座に認識する。実際、これらのヌクレオチド配列の縮重改変体は全て同じポリ
ぺプチドをコードするため、このことは、当業者にとって、上記に記載した比較
アッセイを行わなくても明らかである。縮重改変体でないこのような核酸分子に
ついて、妥当数がまた、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のタンパク質活性を有する
ポリぺプチドをコードすることが、当該分野においてさらに認識される。これは
、なぜなら、当業者は、タンパク質の機能に有意に影響を与える可能性が少なそ
うであるか、もしくは影響を与えないようであるかのいずれかのアミノ酸置換（
例えば、１つの脂肪族アミノ酸を第２の脂肪族アミノ酸で置換すること）を十分
に認識するからである。
列または配列番号１もしくは配列番号３に示される核酸配列に、少なくとも８０
％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７
％、９８％、または９９％同一な配列を有する多数の核酸分子が、「ＭＥＴＨ１
またはＭＥＴＨ２のタンパク質活性を有する」ポリぺプチドをコードすることを
即座に認識する。実際、これらのヌクレオチド配列の縮重改変体は全て同じポリ
ぺプチドをコードするため、このことは、当業者にとって、上記に記載した比較
アッセイを行わなくても明らかである。縮重改変体でないこのような核酸分子に
ついて、妥当数がまた、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のタンパク質活性を有する
ポリぺプチドをコードすることが、当該分野においてさらに認識される。これは
、なぜなら、当業者は、タンパク質の機能に有意に影響を与える可能性が少なそ
うであるか、もしくは影響を与えないようであるかのいずれかのアミノ酸置換（
例えば、１つの脂肪族アミノ酸を第２の脂肪族アミノ酸で置換すること）を十分
に認識するからである。
【００６５】
詳細には、１つ以上の以下の核酸置換および／または欠失を有するＭＥＴＨ２
核酸が提供される：３位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；３２位にて「Ｔ」を「Ｃ」
に置換；３７位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；６５位〜６７位にて「ＴＧＣ」欠失
；１９９位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；３０３位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；３
０６位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；３０９位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；９５０
位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；１２９２位にて「Ｇ」を「Ｃ」に置換；１５７７
位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；および／または２３７７位にて「Ａ」を「Ｇ」に
置換。同様に、１つ以上の以下のアミノ酸置換および／または欠失を有するＭＥ
ＴＨ２ポリペプチドが提供される：２位にて「Ｆ」を「Ｌ」に置換；１２位にて
「Ｌ」を「Ｐ」に置換；１４位にて「Ｆ」を「Ｌ」に置換；２３位にて「Ｌ」が
欠失；３１８位にて「Ｌ」を「Ｐ」に置換；４３２位にて「Ｇ」を「Ａ」に置換
；５２７位にて「Ｖ」を「Ａ」に置換；７９４位にて「Ｔ」を「Ａ」に置換。
核酸が提供される：３位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；３２位にて「Ｔ」を「Ｃ」
に置換；３７位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；６５位〜６７位にて「ＴＧＣ」欠失
；１９９位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；３０３位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；３
０６位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；３０９位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；９５０
位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；１２９２位にて「Ｇ」を「Ｃ」に置換；１５７７
位にて「Ｔ」を「Ｃ」に置換；および／または２３７７位にて「Ａ」を「Ｇ」に
置換。同様に、１つ以上の以下のアミノ酸置換および／または欠失を有するＭＥ
ＴＨ２ポリペプチドが提供される：２位にて「Ｆ」を「Ｌ」に置換；１２位にて
「Ｌ」を「Ｐ」に置換；１４位にて「Ｆ」を「Ｌ」に置換；２３位にて「Ｌ」が
欠失；３１８位にて「Ｌ」を「Ｐ」に置換；４３２位にて「Ｇ」を「Ａ」に置換
；５２７位にて「Ｖ」を「Ａ」に置換；７９４位にて「Ｔ」を「Ａ」に置換。
【００６６】
例えば、表現型的にサイレントなアミノ酸置換の作製方法に関する手引きは、
Ｂｏｗｉｅ，Ｊ．Ｕ．ら、「Ｄｅｃｉｐｈｅｒｉｎｇ ｔｈｅ Ｍｅｓｓａｇｅ
ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ：Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｔｏ Ａ
ｍｉｎｏ Ａｃｉｄ Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎｓ」，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４７
：１３０６−１３１０（１９９０）に提供され、ここにおいてこの著者らは、タ
ンパク質がアミノ酸置換に対して驚くほど寛容性であることを示す。
Ｂｏｗｉｅ，Ｊ．Ｕ．ら、「Ｄｅｃｉｐｈｅｒｉｎｇ ｔｈｅ Ｍｅｓｓａｇｅ
ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ：Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｔｏ Ａ
ｍｉｎｏ Ａｃｉｄ Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎｓ」，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４７
：１３０６−１３１０（１９９０）に提供され、ここにおいてこの著者らは、タ
ンパク質がアミノ酸置換に対して驚くほど寛容性であることを示す。
【００６７】
（ベクターおよび宿主細胞）
本発明はまた、本発明の単離されたＤＮＡ分子を含むベクター、組換えベクタ
ーで遺伝子操作された宿主細胞、および組換え技術によるＭＥＴＨ１ポリペプチ
ドもしくはＭＥＴＨ２ポリペプチドまたはそれらのフラグメントの産生に関する
。また、細胞無しの翻訳系を利用して、本発明のＤＮＡ構築物に由来するＲＮＡ
を使用してそのようなタンパク質を産生し得る。
ーで遺伝子操作された宿主細胞、および組換え技術によるＭＥＴＨ１ポリペプチ
ドもしくはＭＥＴＨ２ポリペプチドまたはそれらのフラグメントの産生に関する
。また、細胞無しの翻訳系を利用して、本発明のＤＮＡ構築物に由来するＲＮＡ
を使用してそのようなタンパク質を産生し得る。
【００６８】
ポリヌクレオチドは、宿主における増殖のために、選択マーカーを含むベクタ
ーに連結され得る。一般的に、プラスミドベクターは、リン酸カルシウム沈澱物
のような沈澱物中か、または荷電した脂質との複合体中で導入される。ベクター
がウイルスである場合、ベクターは、適切なパッケージング細胞株を用いてイン
ビトロでパッケージングされ得、次いで宿主細胞に形質導入され得る。
ーに連結され得る。一般的に、プラスミドベクターは、リン酸カルシウム沈澱物
のような沈澱物中か、または荷電した脂質との複合体中で導入される。ベクター
がウイルスである場合、ベクターは、適切なパッケージング細胞株を用いてイン
ビトロでパッケージングされ得、次いで宿主細胞に形質導入され得る。
【００６９】
ＤＮＡインサートは、適切なプロモーター（例えば、少し名を挙げると、ファ
ージλＰＬプロモーター、Ｅ．ｃｏｌｉのｌａｃプロモーター、ｔｒｐプロモー
ター、およびｔａｃプロモーター、ＳＶ４０初期プロモーターおよびＳＶ４０後
期プロモーター、ならびにレトロウイルスＬＴＲのプロモーター）に作動可能に
連結されるべきである。他の適切なプロモーターは、当業者に公知である。発現
構築物は、さらに、転写開始、転写終結のための部位、および、転写される領域
中に翻訳のためのリボソーム結合部位を含む。構築物によって発現される成熟転
写物のコード部分は、好ましくは、翻訳されるべきポリペプチドの始めに翻訳開
始コドンを含み、そして終わりに適切に位置される終止コドン（ＵＡＡ、ＵＧＡ
、またはＵＡＧ）を含む。
ージλＰＬプロモーター、Ｅ．ｃｏｌｉのｌａｃプロモーター、ｔｒｐプロモー
ター、およびｔａｃプロモーター、ＳＶ４０初期プロモーターおよびＳＶ４０後
期プロモーター、ならびにレトロウイルスＬＴＲのプロモーター）に作動可能に
連結されるべきである。他の適切なプロモーターは、当業者に公知である。発現
構築物は、さらに、転写開始、転写終結のための部位、および、転写される領域
中に翻訳のためのリボソーム結合部位を含む。構築物によって発現される成熟転
写物のコード部分は、好ましくは、翻訳されるべきポリペプチドの始めに翻訳開
始コドンを含み、そして終わりに適切に位置される終止コドン（ＵＡＡ、ＵＧＡ
、またはＵＡＧ）を含む。
【００７０】
示されるように、発現ベクターは、好ましくは、少なくとも１つの選択マーカ
ーを含む。このようなマーカーとしては、真核生物細胞培養についてはジヒドロ
葉酸レダクターゼ、Ｇ４１８またはネオマイシン耐性、ならびにＥ．ｃｏｌｉお
よび他の細菌における培養についてはテトラサイクリン耐性遺伝子、カナマイシ
ン耐性遺伝子またはアンピシリン耐性遺伝子が挙げられる。適切な宿主の代表的
な例としては、細菌細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ細胞、およびＳａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ細胞）；真菌細
胞（例えば、酵母細胞（例えば、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓ
ｉａｅまたはＰｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ （ＡＴＣＣ受託番号２０１１７
８）））；昆虫細胞（例えば、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ Ｓ２細胞およびＳｐｏｄ
ｏｐｔｅｒａ Ｓｆ９細胞）；動物細胞（例えば、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、２
９３細胞およびＢｏｗｅｓ黒色腫細胞）；ならびに植物細胞が挙げられるが、こ
れらに限定されない。上記の宿主細胞のための適切な培養培地および条件は当該
分野で公知である。
ーを含む。このようなマーカーとしては、真核生物細胞培養についてはジヒドロ
葉酸レダクターゼ、Ｇ４１８またはネオマイシン耐性、ならびにＥ．ｃｏｌｉお
よび他の細菌における培養についてはテトラサイクリン耐性遺伝子、カナマイシ
ン耐性遺伝子またはアンピシリン耐性遺伝子が挙げられる。適切な宿主の代表的
な例としては、細菌細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ細胞、およびＳａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ細胞）；真菌細
胞（例えば、酵母細胞（例えば、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓ
ｉａｅまたはＰｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ （ＡＴＣＣ受託番号２０１１７
８）））；昆虫細胞（例えば、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ Ｓ２細胞およびＳｐｏｄ
ｏｐｔｅｒａ Ｓｆ９細胞）；動物細胞（例えば、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、２
９３細胞およびＢｏｗｅｓ黒色腫細胞）；ならびに植物細胞が挙げられるが、こ
れらに限定されない。上記の宿主細胞のための適切な培養培地および条件は当該
分野で公知である。
【００７１】
細菌における使用に好ましいベクターの中には、ｐＱＥ７０、ｐＱＥ６０、お
よびｐＱＥ−９（Ｑｉａｇｅｎから入手可能）；ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔベクタ
ー、Ｐｈａｇｅｓｃｒｉｐｔベクター、ｐＮＨ８Ａ、ｐＮＨ１６ａ、ｐＮＨ１８
Ａ、ｐＮＨ４６Ａ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍｓ，
Ｉｎｃから入手可能）；ならびにｐｔｒｃ９９ａ、ｐＫＫ２２３−３、ｐＫＫ２
３３−３、ｐＤＲ５４０、ｐＲＩＴ５（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ，
Ｉｎｃから入手可能）が含まれる。好ましい真核生物ベクターの中には、ｐＷＬ
ＮＥＯ、ｐＳＶ２ＣＡＴ、ｐＯＧ４４、ｐＸＴ１、およびｐＳＧ（Ｓｔｒａｔａ
ｇｅｎｅから入手可能）；ならびにｐＳＶＫ３、ｐＢＰＶ、ｐＭＳＧ、およびｐ
ＳＶＬ（Ｐｈａｒｍａｃｉａから入手可能）がある。酵母系における使用のため
の好ましい発現ベクターとしては、ｐＹＥＳ２、ｐＹＤ１、ｐＴＥＦ１／Ｚｅｏ
、ｐＹＥＳ／ＧＳ、ｐＰＩＣＺ、ｐＧＡＰＺ、ｐＧＡＰＺα、ｐＰＩＣ９、ｐＰ
ＩＣ３．５、ｐＨＩＬ−Ｄ２、ｐＨＩＬ−Ｓ１、ｐＰＩＣ３．５Ｋ、ｐＰＩＣ９
ＫおよびＰＡＯ８１５（全て、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｂａｄ，ＣＡよ
り入手可能）。他の適切なベクターは、当業者に容易に明らかである。
よびｐＱＥ−９（Ｑｉａｇｅｎから入手可能）；ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔベクタ
ー、Ｐｈａｇｅｓｃｒｉｐｔベクター、ｐＮＨ８Ａ、ｐＮＨ１６ａ、ｐＮＨ１８
Ａ、ｐＮＨ４６Ａ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍｓ，
Ｉｎｃから入手可能）；ならびにｐｔｒｃ９９ａ、ｐＫＫ２２３−３、ｐＫＫ２
３３−３、ｐＤＲ５４０、ｐＲＩＴ５（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ，
Ｉｎｃから入手可能）が含まれる。好ましい真核生物ベクターの中には、ｐＷＬ
ＮＥＯ、ｐＳＶ２ＣＡＴ、ｐＯＧ４４、ｐＸＴ１、およびｐＳＧ（Ｓｔｒａｔａ
ｇｅｎｅから入手可能）；ならびにｐＳＶＫ３、ｐＢＰＶ、ｐＭＳＧ、およびｐ
ＳＶＬ（Ｐｈａｒｍａｃｉａから入手可能）がある。酵母系における使用のため
の好ましい発現ベクターとしては、ｐＹＥＳ２、ｐＹＤ１、ｐＴＥＦ１／Ｚｅｏ
、ｐＹＥＳ／ＧＳ、ｐＰＩＣＺ、ｐＧＡＰＺ、ｐＧＡＰＺα、ｐＰＩＣ９、ｐＰ
ＩＣ３．５、ｐＨＩＬ−Ｄ２、ｐＨＩＬ−Ｓ１、ｐＰＩＣ３．５Ｋ、ｐＰＩＣ９
ＫおよびＰＡＯ８１５（全て、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｂａｄ，ＣＡよ
り入手可能）。他の適切なベクターは、当業者に容易に明らかである。
【００７２】
本発明の実施における発現ベクターの使用に加えて、本発明はさらに、目的の
タンパク質をコードするヌクレオチド配列に作動可能に連結されたオペレーター
エレメントおよびプロモーターエレメントを含む新規な発現ベクターを含む。こ
のようなベクターの一例は、以下で詳細に記載されるｐＨＥ４−５である。
タンパク質をコードするヌクレオチド配列に作動可能に連結されたオペレーター
エレメントおよびプロモーターエレメントを含む新規な発現ベクターを含む。こ
のようなベクターの一例は、以下で詳細に記載されるｐＨＥ４−５である。
【００７３】
図８および９にまとめるように、ｐＨＥ４−５ベクター（配列番号１２）の構
成要素は、以下を含む：１）選択マーカーとしてのネオマイシンホスホトランス
フェラーゼ遺伝子、２）Ｅ．ｃｏｌｉ複製起点、３）Ｔ５ファージプロモーター
配列、４）２つのｌａｃオペレーター配列、５）シャイン−ダルガーノ配列、６
）ラクトースオペロンリプレッサー遺伝子（ｌａｑＩｑ）。複製起点（ｏｒｉＣ
）は、ｐＵＣ１９（ＬＴＩ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）に由来する。プ
ロモーター配列およびオペレーター配列を合成的に作製した。核酸配列の合成的
作製は、当該分野で周知である。ＣＬＯＮＴＥＣＨ ９５／９６ Ｃａｔａｌｏ
ｇ、２１５〜２１６頁、ＣＬＯＮＴＥＣＨ、１０２０ Ｅａｓｔ Ｍｅａｄｏｗ
Ｃｉｒｃｌｅ、Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ、ＣＡ、９４３０３。ＭＥＴＨ１をコード
するヌクレオチド配列（配列番号２）またはＭＥＴＨ２をコードするヌクレオチ
ド配列（配列番号４）は、ｐＨＥ４−５ベクターのＮｄｅＩ部位とＡｓｐ７１８
部位との間にこれらのヌクレオチド配列を挿入することにより、プロモーターお
よびオペレーターに作動可能に連結される。
成要素は、以下を含む：１）選択マーカーとしてのネオマイシンホスホトランス
フェラーゼ遺伝子、２）Ｅ．ｃｏｌｉ複製起点、３）Ｔ５ファージプロモーター
配列、４）２つのｌａｃオペレーター配列、５）シャイン−ダルガーノ配列、６
）ラクトースオペロンリプレッサー遺伝子（ｌａｑＩｑ）。複製起点（ｏｒｉＣ
）は、ｐＵＣ１９（ＬＴＩ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）に由来する。プ
ロモーター配列およびオペレーター配列を合成的に作製した。核酸配列の合成的
作製は、当該分野で周知である。ＣＬＯＮＴＥＣＨ ９５／９６ Ｃａｔａｌｏ
ｇ、２１５〜２１６頁、ＣＬＯＮＴＥＣＨ、１０２０ Ｅａｓｔ Ｍｅａｄｏｗ
Ｃｉｒｃｌｅ、Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ、ＣＡ、９４３０３。ＭＥＴＨ１をコード
するヌクレオチド配列（配列番号２）またはＭＥＴＨ２をコードするヌクレオチ
ド配列（配列番号４）は、ｐＨＥ４−５ベクターのＮｄｅＩ部位とＡｓｐ７１８
部位との間にこれらのヌクレオチド配列を挿入することにより、プロモーターお
よびオペレーターに作動可能に連結される。
【００７４】
上述のように、ｐＨＥ４−５ベクターは、ｌａｃＩｑ遺伝子を含む。ｌａｃＩ
ｑは、ｌａｃＩ遺伝子の対立遺伝子であり、ｌａｃＩ遺伝子は、ｌａｃオペレー
ターの強固な調節を付与する。Ａｍａｎｎ，Ｅ．ら、Ｇｅｎｅ ６９：３０１〜
３１５（１９８８）；Ｓｔａｒｋ，Ｍ．、Ｇｅｎｅ ５１：２５５〜２６７（１
９８７）。ｌａｃＩｑ遺伝子は、ｌａｃオペレーター配列に結合し、そして下流
（すなわち、３’側の）配列の転写を阻止する、リプレッサータンパク質をコー
ドする。しかし、ｌａｃＩｑ遺伝子産物は、ラクトースまたは特定のラクトース
アナログ（例えば、イソプロピルβ−Ｄ−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）
）のいずれかの存在下で、ｌａｃオペレーターから解離する。従って、ＭＥＴＨ
１またはＭＥＴＨ２は、ｐＨＥ４−５ベクターを含む非誘導宿主細胞において、
感知可能な量で産生されない。しかし、ＩＰＴＧのような薬剤の添加によるこれ
らの宿主細胞の誘導は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のコード配列の発現を生じ
る。
ｑは、ｌａｃＩ遺伝子の対立遺伝子であり、ｌａｃＩ遺伝子は、ｌａｃオペレー
ターの強固な調節を付与する。Ａｍａｎｎ，Ｅ．ら、Ｇｅｎｅ ６９：３０１〜
３１５（１９８８）；Ｓｔａｒｋ，Ｍ．、Ｇｅｎｅ ５１：２５５〜２６７（１
９８７）。ｌａｃＩｑ遺伝子は、ｌａｃオペレーター配列に結合し、そして下流
（すなわち、３’側の）配列の転写を阻止する、リプレッサータンパク質をコー
ドする。しかし、ｌａｃＩｑ遺伝子産物は、ラクトースまたは特定のラクトース
アナログ（例えば、イソプロピルβ−Ｄ−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）
）のいずれかの存在下で、ｌａｃオペレーターから解離する。従って、ＭＥＴＨ
１またはＭＥＴＨ２は、ｐＨＥ４−５ベクターを含む非誘導宿主細胞において、
感知可能な量で産生されない。しかし、ＩＰＴＧのような薬剤の添加によるこれ
らの宿主細胞の誘導は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のコード配列の発現を生じ
る。
【００７５】
ｐＨＥ４−５ベクターのプロモーター／オペレーター配列（配列番号１３）は
、Ｔ５ファージプロモーターおよび２つのｌａｃオペレーター配列を含む。１つ
のオペレーターは、転写開始部位の５’側に位置し、そしてもう他方は、同じ部
位の３’側に位置する。これらのオペレーターは、ｌａｃＩｑ遺伝子産物と組合
せて存在する場合、ｌａｃオペロンインデューサー（例えば、ＩＰＴＧ）の非存
在下での、下流配列の強固な抑制を与える。このｌａｃオペレーターの下流に位
置する作動可能に連結された配列の発現は、ｌａｃオペロンインデューサー（例
えば、ＩＰＴＧ）の添加により誘導され得る。ｌａｃＩｑタンパク質へのｌａｃ
インデューサーの結合は、ｌａｃオペレーター配列からのそれらの解放、および
作動可能に連結された配列の転写の開始を生じる。遺伝子発現のｌａｃオペロン
調節は、Ｄｅｖｌｉｎ，Ｔ．、ＴＥＸＴＢＯＯＫ ＯＦ ＢＩＯＣＨＥＭＩＳＴ
ＲＹ ＷＩＴＨ ＣＬＩＮＩＣＡＬ ＣＯＲＲＥＬＡＴＩＯＮＳ、第４版（１９
９７）、８０２〜８０７頁に概説される。
、Ｔ５ファージプロモーターおよび２つのｌａｃオペレーター配列を含む。１つ
のオペレーターは、転写開始部位の５’側に位置し、そしてもう他方は、同じ部
位の３’側に位置する。これらのオペレーターは、ｌａｃＩｑ遺伝子産物と組合
せて存在する場合、ｌａｃオペロンインデューサー（例えば、ＩＰＴＧ）の非存
在下での、下流配列の強固な抑制を与える。このｌａｃオペレーターの下流に位
置する作動可能に連結された配列の発現は、ｌａｃオペロンインデューサー（例
えば、ＩＰＴＧ）の添加により誘導され得る。ｌａｃＩｑタンパク質へのｌａｃ
インデューサーの結合は、ｌａｃオペレーター配列からのそれらの解放、および
作動可能に連結された配列の転写の開始を生じる。遺伝子発現のｌａｃオペロン
調節は、Ｄｅｖｌｉｎ，Ｔ．、ＴＥＸＴＢＯＯＫ ＯＦ ＢＩＯＣＨＥＭＩＳＴ
ＲＹ ＷＩＴＨ ＣＬＩＮＩＣＡＬ ＣＯＲＲＥＬＡＴＩＯＮＳ、第４版（１９
９７）、８０２〜８０７頁に概説される。
【００７６】
ｐＨＥ４シリーズのベクターは、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のコード配列を
除く、ｐＨＥ４−５ベクターの全ての構成要素を含む。ｐＨＥ４ベクターの特徴
は、最適化された合成Ｔ５ファージプロモーター、ｌａｃオペレーター、および
シャイン−ダルガーノ配列を含む。さらに、これらの配列はまた、最適に間隔を
空けられ、その結果、挿入された遺伝子の発現は強固に調節され得、そして高レ
ベルの発現が誘導に際して生じる。
除く、ｐＨＥ４−５ベクターの全ての構成要素を含む。ｐＨＥ４ベクターの特徴
は、最適化された合成Ｔ５ファージプロモーター、ｌａｃオペレーター、および
シャイン−ダルガーノ配列を含む。さらに、これらの配列はまた、最適に間隔を
空けられ、その結果、挿入された遺伝子の発現は強固に調節され得、そして高レ
ベルの発現が誘導に際して生じる。
【００７７】
本発明のタンパク質の産生における使用に適切な公知の細菌性プロモーターの
中には、Ｅ．ｃｏｌｉのｌａｃＩおよびｌａｃＺプロモーター、Ｔ３およびＴ７
プロモーター、ｇｐｔプロモーター、λＰＲおよびＰＬプロモーター、ならびに
ｔｒｐプロモーターが挙げられる。適切な真核生物プロモーターとしては、ＣＭ
Ｖ前初期プロモーター、ＨＳＶチミジンキナーゼプロモーター、初期および後期
ＳＶ４０プロモーター、レトロウイルスＬＴＲのプロモーター（例えば、ラウス
肉腫ウイルス（ＲＳＶ）のプロモーター）、ならびにメタロチオネインプロモー
ター（例えば、マウスメタロチオネイン−Ｉプロモーター）が挙げられる。
中には、Ｅ．ｃｏｌｉのｌａｃＩおよびｌａｃＺプロモーター、Ｔ３およびＴ７
プロモーター、ｇｐｔプロモーター、λＰＲおよびＰＬプロモーター、ならびに
ｔｒｐプロモーターが挙げられる。適切な真核生物プロモーターとしては、ＣＭ
Ｖ前初期プロモーター、ＨＳＶチミジンキナーゼプロモーター、初期および後期
ＳＶ４０プロモーター、レトロウイルスＬＴＲのプロモーター（例えば、ラウス
肉腫ウイルス（ＲＳＶ）のプロモーター）、ならびにメタロチオネインプロモー
ター（例えば、マウスメタロチオネイン−Ｉプロモーター）が挙げられる。
【００７８】
ｐＨＥ４−５ベクターはまた、ＡＵＧ開始コドンの５’側にシャイン−ダルガ
ーノ配列を含む。シャイン−ダルガーノ配列は、一般に、ＡＵＧ開始コドンの約
１０ヌクレオチド上流（すなわち、５’側）に位置する短い配列である。これら
の配列は、本質的には、原核生物リボソームを、ＡＵＧ開始コドンに指向させる
。
ーノ配列を含む。シャイン−ダルガーノ配列は、一般に、ＡＵＧ開始コドンの約
１０ヌクレオチド上流（すなわち、５’側）に位置する短い配列である。これら
の配列は、本質的には、原核生物リボソームを、ＡＵＧ開始コドンに指向させる
。
【００７９】
従って、本発明はまた、本発明のタンパク質の産生に有用な発現ベクターに関
する。本発明のこの局面は、ｐＨＥ４−５ベクター（配列番号１２）に例示され
る。
する。本発明のこの局面は、ｐＨＥ４−５ベクター（配列番号１２）に例示され
る。
【００８０】
宿主細胞への構築物の導入は、リン酸カルシウムトランスフェクション、ＤＥ
ＡＥ−デキストラン媒介トランスフェクション、カチオン性脂質媒介トランスフ
ェクション、エレクトロポレーション、形質導入、感染または他の方法によって
もたらされ得る。このような方法は、Ｄａｖｉｓら，Ｂａｓｉｃ Ｍｅｔｈｏｄ
ｓ Ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９８６）のような多くの標
準的実験室マニュアルに記載されている。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
ポリペプチドが、実際に、組換えベクターを欠く宿主細胞によって発現され得る
ことが、特に意図される。
ＡＥ−デキストラン媒介トランスフェクション、カチオン性脂質媒介トランスフ
ェクション、エレクトロポレーション、形質導入、感染または他の方法によって
もたらされ得る。このような方法は、Ｄａｖｉｓら，Ｂａｓｉｃ Ｍｅｔｈｏｄ
ｓ Ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９８６）のような多くの標
準的実験室マニュアルに記載されている。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
ポリペプチドが、実際に、組換えベクターを欠く宿主細胞によって発現され得る
ことが、特に意図される。
【００８１】
ポリペプチドは、融合タンパク質のような改変された形態で発現され得、そし
て分泌シグナルのみならず、さらなる異種の機能的領域も含み得る。例えば、さ
らなるアミノ酸、特に荷電したアミノ酸の領域が、宿主細胞における、精製の間
の、または続く取り扱いおよび保存の間の、安定性および持続性を改善するため
に、ポリペプチドのＮ末端に付加され得る。また、ペプチド部分が、精製を容易
にするためにポリペプチドへ付加され得る。そのような領域は、ポリペプチドの
最終調製の前に除去され得る。とりわけ、分泌または排出を生じるため、安定性
を改善するため、および精製を容易にするためのペプチド部分のポリペプチドへ
の付加は、当該分野でよく知られており、そして慣用的な技術である。好ましい
融合タンパク質は、タンパク質を可溶化するために有用である免疫グロブリン由
来の異種領域を含む。例えば、ＥＰ−Ａ−Ｏ ４６４ ５３３（カナダ対応出願
第２０４５８６９号）は、別のヒトタンパク質、またはその一部とともに免疫グ
ロブリン分子の定常領域の種々の部分を含む融合タンパク質を開示する。多くの
場合、融合タンパク質中のＦｃ部分は、治療および診断における使用に十分に有
利であり、従って、例えば、改善された薬物動態学的特性を生じる（ＥＰ−Ａ
０２３２ ２６２）。一方、いくつかの使用について、融合タンパク質が、記載
される有利な様式で、発現され、検出され、そして精製された後に、Ｆｃ部分が
欠失され得ることが望ましい。これは、Ｆｃ部分が、治療および診断における使
用に対して障害となると判明する場合（例えば、融合タンパク質が免疫のための
抗原として使用される場合）である。薬物探索において、例えば、ｈＩＬ５レセ
プターのようなヒトタンパク質は、ｈＩＬ−５のアンタゴニストを同定するため
の高処理能力スクリーニングアッセイの目的でＦｃ部分と融合されている。Ｄ．
Ｂｅｎｎｅｔｔら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ８：５２−５８（１
９９５）、およびＫ．Ｊｏｈａｎｓｏｎら，Ｊ．ｏｆ Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２
７０（１６）：９４５９−９４７１（１９９５）を参照のこと。
て分泌シグナルのみならず、さらなる異種の機能的領域も含み得る。例えば、さ
らなるアミノ酸、特に荷電したアミノ酸の領域が、宿主細胞における、精製の間
の、または続く取り扱いおよび保存の間の、安定性および持続性を改善するため
に、ポリペプチドのＮ末端に付加され得る。また、ペプチド部分が、精製を容易
にするためにポリペプチドへ付加され得る。そのような領域は、ポリペプチドの
最終調製の前に除去され得る。とりわけ、分泌または排出を生じるため、安定性
を改善するため、および精製を容易にするためのペプチド部分のポリペプチドへ
の付加は、当該分野でよく知られており、そして慣用的な技術である。好ましい
融合タンパク質は、タンパク質を可溶化するために有用である免疫グロブリン由
来の異種領域を含む。例えば、ＥＰ−Ａ−Ｏ ４６４ ５３３（カナダ対応出願
第２０４５８６９号）は、別のヒトタンパク質、またはその一部とともに免疫グ
ロブリン分子の定常領域の種々の部分を含む融合タンパク質を開示する。多くの
場合、融合タンパク質中のＦｃ部分は、治療および診断における使用に十分に有
利であり、従って、例えば、改善された薬物動態学的特性を生じる（ＥＰ−Ａ
０２３２ ２６２）。一方、いくつかの使用について、融合タンパク質が、記載
される有利な様式で、発現され、検出され、そして精製された後に、Ｆｃ部分が
欠失され得ることが望ましい。これは、Ｆｃ部分が、治療および診断における使
用に対して障害となると判明する場合（例えば、融合タンパク質が免疫のための
抗原として使用される場合）である。薬物探索において、例えば、ｈＩＬ５レセ
プターのようなヒトタンパク質は、ｈＩＬ−５のアンタゴニストを同定するため
の高処理能力スクリーニングアッセイの目的でＦｃ部分と融合されている。Ｄ．
Ｂｅｎｎｅｔｔら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ８：５２−５８（１
９９５）、およびＫ．Ｊｏｈａｎｓｏｎら，Ｊ．ｏｆ Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２
７０（１６）：９４５９−９４７１（１９９５）を参照のこと。
【００８２】
ＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質は、硫酸アンモニウム沈澱
またはエタノール沈澱、酸抽出、陰イオンまたは陽イオン交換クロマトグラフィ
ー、ホスホセルロースクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー
、アフィニティークロマトグラフィー、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィ
ー、およびレクチンクロマトグラフィーを含む周知の方法によって組換え細胞培
養物から回収され、そして精製され得る。最も好ましくは、高速液体クロマトグ
ラフィー（「ＨＰＬＣ」）が精製のために用いられる。
またはエタノール沈澱、酸抽出、陰イオンまたは陽イオン交換クロマトグラフィ
ー、ホスホセルロースクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー
、アフィニティークロマトグラフィー、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィ
ー、およびレクチンクロマトグラフィーを含む周知の方法によって組換え細胞培
養物から回収され、そして精製され得る。最も好ましくは、高速液体クロマトグ
ラフィー（「ＨＰＬＣ」）が精製のために用いられる。
【００８３】
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチド、そして好ましくは分泌形
態はまた、以下から収集され得る：天然の供給源から精製された産物（直接的に
単離されたか、または培養されたかのいずれかの体液、組織、および細胞を含む
）；化学合成手順の産物；および原核生物宿主または真核生物宿主（例えば、細
菌細胞、酵母細胞、高等植物細胞、昆虫細胞、および哺乳動物細胞を含む）から
組換え技術によって産生された産物。組換え産生手順において用いられる宿主に
依存して、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、グリコシル化
されていてもよく、またはグリコシル化されていなくてもよい。さらに、ＭＥＴ
Ｈ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドはまた、いくつかの場合、宿主媒介
プロセスの結果として、改変された開始メチオニン残基を含み得る。従って、翻
訳開始コドンによってコードされているＮ末端メチオニンは、一般的に、すべて
の真核生物細胞において翻訳後にいかなるタンパク質からも高い効率で除去され
ることが当該分野において周知である。大部分のタンパク質上のＮ末端メチオニ
ンはまた、大部分の原核生物において効率的に除去されるが、いくつかのタンパ
ク質では、この原核生物の除去プロセスは、Ｎ末端メチオニンが共有結合してい
るアミノ酸の性質に依存して、非効率的である。
態はまた、以下から収集され得る：天然の供給源から精製された産物（直接的に
単離されたか、または培養されたかのいずれかの体液、組織、および細胞を含む
）；化学合成手順の産物；および原核生物宿主または真核生物宿主（例えば、細
菌細胞、酵母細胞、高等植物細胞、昆虫細胞、および哺乳動物細胞を含む）から
組換え技術によって産生された産物。組換え産生手順において用いられる宿主に
依存して、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、グリコシル化
されていてもよく、またはグリコシル化されていなくてもよい。さらに、ＭＥＴ
Ｈ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドはまた、いくつかの場合、宿主媒介
プロセスの結果として、改変された開始メチオニン残基を含み得る。従って、翻
訳開始コドンによってコードされているＮ末端メチオニンは、一般的に、すべて
の真核生物細胞において翻訳後にいかなるタンパク質からも高い効率で除去され
ることが当該分野において周知である。大部分のタンパク質上のＮ末端メチオニ
ンはまた、大部分の原核生物において効率的に除去されるが、いくつかのタンパ
ク質では、この原核生物の除去プロセスは、Ｎ末端メチオニンが共有結合してい
るアミノ酸の性質に依存して、非効率的である。
【００８４】
１つの実施形態において、酵母Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓを使用して、
真核生物系において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質を発現す
る。Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓは、メチロトローフ酵母であり、その唯一
の炭素源としてメタノールを代謝し得る。メタノール代謝経路における主な工程
は、Ｏ2を使用するホルムアルデヒドへのメタノールの酸化である。この反応は
、酵素アルコールオキシダーゼにより触媒される。その唯一の炭素源としてメタ
ノールを代謝するために、Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓは、Ｏ2に対するア
ルコールオキシダーゼの比較的低い親和性に一部起因して、アルコールオキシダ
ーゼを高レベルで産生しなければならない。結果的に、主な炭素源としてメタノ
ールに依存する増殖培地において、２つのアルコールオキシダーゼ遺伝子のうち
の１つ（ＡＯＸ１）のプロモーター領域が非常に活性である。メタノールの存在
下で、ＡＯＸ１遺伝子から産生されるアルコールオキシダーゼは、Ｐｉｃｈｉａ
ｐａｓｔｏｒｉｓにおいて全可溶性タンパク質の約３０％までを構成する。Ｅ
ｌｌｉｓ，Ｓ．Ｂ．ら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．５：１１１１−２１（１
９８５）；Ｋｏｕｔｚ，Ｐ．Ｊら、Ｙｅａｓｔ ５：１６７−７７（１９８９）
；Ｔｓｃｈｏｐｐ，Ｊ．Ｆ．ら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１５：３８５
９−７６（１９８７）を参照のこと。従って、例えば、全てまたは一部のＡＯＸ
１調節配列の転写調節下で、本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリ
ヌクレオチドのような異種コード配列は、メタノール存在下で増殖されたＰｉｃ
ｈｉａ酵母中に例外的に高レベルで発現される。
真核生物系において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質を発現す
る。Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓは、メチロトローフ酵母であり、その唯一
の炭素源としてメタノールを代謝し得る。メタノール代謝経路における主な工程
は、Ｏ2を使用するホルムアルデヒドへのメタノールの酸化である。この反応は
、酵素アルコールオキシダーゼにより触媒される。その唯一の炭素源としてメタ
ノールを代謝するために、Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓは、Ｏ2に対するア
ルコールオキシダーゼの比較的低い親和性に一部起因して、アルコールオキシダ
ーゼを高レベルで産生しなければならない。結果的に、主な炭素源としてメタノ
ールに依存する増殖培地において、２つのアルコールオキシダーゼ遺伝子のうち
の１つ（ＡＯＸ１）のプロモーター領域が非常に活性である。メタノールの存在
下で、ＡＯＸ１遺伝子から産生されるアルコールオキシダーゼは、Ｐｉｃｈｉａ
ｐａｓｔｏｒｉｓにおいて全可溶性タンパク質の約３０％までを構成する。Ｅ
ｌｌｉｓ，Ｓ．Ｂ．ら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．５：１１１１−２１（１
９８５）；Ｋｏｕｔｚ，Ｐ．Ｊら、Ｙｅａｓｔ ５：１６７−７７（１９８９）
；Ｔｓｃｈｏｐｐ，Ｊ．Ｆ．ら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１５：３８５
９−７６（１９８７）を参照のこと。従って、例えば、全てまたは一部のＡＯＸ
１調節配列の転写調節下で、本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリ
ヌクレオチドのような異種コード配列は、メタノール存在下で増殖されたＰｉｃ
ｈｉａ酵母中に例外的に高レベルで発現される。
【００８５】
１つの例において、本明細書中に記載したように、プラスミドベクターｐＰＩ
Ｃ９Ｋを使用し、Ｐｉｃｈｉａ酵母系において、「Ｐｉｃｈｉａ Ｐｒｏｔｏｃ
ｏｌｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ」，Ｄ．
Ｒ．ＨｉｇｇｉｎｓおよびＪ．Ｃｒｅｇｇ編、Ｔｈｅ Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓ
ｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，１９９８に本質的に記載されたようにして、本発明の
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドをコードするＤＮＡを発現す
る。この発現ベクターは、マルチクローニング部位の上流に位置するＰｉｃｈｉ
ａ ｐａｓｔｏｒｉｓアルカリホスファターゼ（ＰＨＯ）分泌シグナルペプチド
（すなわち、リーダー）に連結された強力なＡＯＸ１プロモーターにより、本発
明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドの発現および分泌を可能
にする。
Ｃ９Ｋを使用し、Ｐｉｃｈｉａ酵母系において、「Ｐｉｃｈｉａ Ｐｒｏｔｏｃ
ｏｌｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ」，Ｄ．
Ｒ．ＨｉｇｇｉｎｓおよびＪ．Ｃｒｅｇｇ編、Ｔｈｅ Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓ
ｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，１９９８に本質的に記載されたようにして、本発明の
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドをコードするＤＮＡを発現す
る。この発現ベクターは、マルチクローニング部位の上流に位置するＰｉｃｈｉ
ａ ｐａｓｔｏｒｉｓアルカリホスファターゼ（ＰＨＯ）分泌シグナルペプチド
（すなわち、リーダー）に連結された強力なＡＯＸ１プロモーターにより、本発
明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドの発現および分泌を可能
にする。
【００８６】
多くの他の酵母ベクターが、当業者が容易に理解するように、提案された発現
構築物が転写、翻訳、分泌（所望の場合）などについての適切に配置されたシグ
ナル（必要な場合、インフレームでＡＵＧを含む）を提供する限り、ｐＰＩＣ９
Ｋの代わりに使用され得る（例えば、ｐＹＥＳ２、ｐＹＤ１、ｐＴＥＦ１／Ｚｅ
ｏ、ｐＹＥＳ２／ＧＳ、ｐＰＩＣＺ、ｐＧＡＰＺ、ｐＧＡＰＺα、ｐＰＩＣ９、
ｐＰＩＣ３．５、ｐＨＩＬ−Ｄ２、ｐＨＩＬ−Ｓ１、ｐＰＩＣ３．５Ｋ、および
ＰＡＯ８１５）。
構築物が転写、翻訳、分泌（所望の場合）などについての適切に配置されたシグ
ナル（必要な場合、インフレームでＡＵＧを含む）を提供する限り、ｐＰＩＣ９
Ｋの代わりに使用され得る（例えば、ｐＹＥＳ２、ｐＹＤ１、ｐＴＥＦ１／Ｚｅ
ｏ、ｐＹＥＳ２／ＧＳ、ｐＰＩＣＺ、ｐＧＡＰＺ、ｐＧＡＰＺα、ｐＰＩＣ９、
ｐＰＩＣ３．５、ｐＨＩＬ−Ｄ２、ｐＨＩＬ−Ｓ１、ｐＰＩＣ３．５Ｋ、および
ＰＡＯ８１５）。
【００８７】
別の実施形態において、例えば、本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ
２ポリヌクレオチドのような異種コード配列の高レベル発現は、発現ベクター（
例えば、ｐＧＡＰＺまたはｐＧＡＰＺαなど）に本発明の異種ポリヌクレオチド
をクローニングすること、ならびにメタノール非存在下で酵母培養物を増殖させ
ることにより達成され得る。
２ポリヌクレオチドのような異種コード配列の高レベル発現は、発現ベクター（
例えば、ｐＧＡＰＺまたはｐＧＡＰＺαなど）に本発明の異種ポリヌクレオチド
をクローニングすること、ならびにメタノール非存在下で酵母培養物を増殖させ
ることにより達成され得る。
【００８８】
本明細書中で議論されるベクター構築物を含有する宿主細胞を含むことに加え
て、本発明はまた、脊椎動物起源、特に哺乳動物起源の、一次、二次、および不
死化宿主細胞を含み、それは、内在性の遺伝物質（例えば、ＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２コード配列）を欠失または置換するように、そして／または遺
伝物質（例えば、異種ポリヌクレオチド配列）を含むように操作されており、こ
の遺伝物質は、本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド
と作動可能に結合されており、そして内在性のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴ
Ｈ２ポリヌクレオチドを活性化、変化、および／または増幅させる。例えば、当
該分野で公知の技術が使用されて、相同組換えを介して、異種制御領域（例えば
、プロモーターおよび／またはエンハンサー）と内在性ＭＥＴＨ１および／また
はＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド配列とを作動可能に結合し、新たな転写単位の形
成を生じさせ得る（例えば、１９９７年６月２４日に発行された米国特許第５，
６４１，６７０号；１９９８年３月３１日に発行された米国特許第５，７３３，
７６１号；１９９６年９月２６日に公開された国際公開番号ＷＯ９６／２９４１
１；１９９４年８月４日に公開された国際公開番号ＷＯ９４／１２６５０；Ｋｏ
ｌｌｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：８９３２
−８９３５（１９８９）；およびＺｉｊｌｓｔｒａら、Ｎａｔｕｒｅ ３４２：
４３５−４３８（１９８９）を参照のこと、これらの各々の開示はその全体が参
考として援用される）。
て、本発明はまた、脊椎動物起源、特に哺乳動物起源の、一次、二次、および不
死化宿主細胞を含み、それは、内在性の遺伝物質（例えば、ＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２コード配列）を欠失または置換するように、そして／または遺
伝物質（例えば、異種ポリヌクレオチド配列）を含むように操作されており、こ
の遺伝物質は、本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド
と作動可能に結合されており、そして内在性のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴ
Ｈ２ポリヌクレオチドを活性化、変化、および／または増幅させる。例えば、当
該分野で公知の技術が使用されて、相同組換えを介して、異種制御領域（例えば
、プロモーターおよび／またはエンハンサー）と内在性ＭＥＴＨ１および／また
はＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド配列とを作動可能に結合し、新たな転写単位の形
成を生じさせ得る（例えば、１９９７年６月２４日に発行された米国特許第５，
６４１，６７０号；１９９８年３月３１日に発行された米国特許第５，７３３，
７６１号；１９９６年９月２６日に公開された国際公開番号ＷＯ９６／２９４１
１；１９９４年８月４日に公開された国際公開番号ＷＯ９４／１２６５０；Ｋｏ
ｌｌｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：８９３２
−８９３５（１９８９）；およびＺｉｊｌｓｔｒａら、Ｎａｔｕｒｅ ３４２：
４３５−４３８（１９８９）を参照のこと、これらの各々の開示はその全体が参
考として援用される）。
【００８９】
本発明のポリペプチドは、天然に精製された産物、化学合成手順の産物、およ
び原核生物宿主または真核生物宿主（例えば、細菌細胞、酵母細胞、高等植物細
胞、昆虫細胞、および哺乳動物細胞を含む）から組換え技術によって産生された
産物を含む。組換え産生手順において用いられる宿主に依存して、本発明のポリ
ペプチドは、グリコシル化されていても、またはグリコシル化されていなくても
よい。さらに、本発明のポリペプチドはまた、いくつかの場合、宿主媒介プロセ
スの結果として、改変された開始メチオニン残基を含み得る。
び原核生物宿主または真核生物宿主（例えば、細菌細胞、酵母細胞、高等植物細
胞、昆虫細胞、および哺乳動物細胞を含む）から組換え技術によって産生された
産物を含む。組換え産生手順において用いられる宿主に依存して、本発明のポリ
ペプチドは、グリコシル化されていても、またはグリコシル化されていなくても
よい。さらに、本発明のポリペプチドはまた、いくつかの場合、宿主媒介プロセ
スの結果として、改変された開始メチオニン残基を含み得る。
【００９０】
さらに、本発明のポリペプチドは、当該分野で公知の技術を使用して化学的に
合成され得る（例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，１９８３，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓ
ｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ，Ｗ
．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，Ｎ．Ｙ．およびＨｕｎｋａｐｉｌｌｅｒ，Ｍ．
ら、１９８４、Ｎａｔｕｒｅ，３１０：１０５−１１１を参照のこと）。例えば
、本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドのフラグメントに
対応するペプチドは、ペプチド合成装置の使用によって合成され得る。さらに、
所望される場合、非古典的アミノ酸または化学的アミノ酸アナログが、ＭＥＴＨ
１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチド配列に置換または付加として導入され
得る。非古典的アミノ酸としては、一般的なアミノ酸のＤ−異性体、２，４−ジ
アミノ酪酸、ａ−アミノイソ酪酸、４−アミノ酪酸、Ａｂｕ、２−アミノ酪酸、
ｇ−Ａｂｕ、ｅ−Ａｈｘ、６−アミノヘキサン酸、Ａｉｂ、２−アミノイソ酪酸
、３−アミノプロピオン酸、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、ヒドロキ
シプロリン、サルコシン、シトルリン、ホモシトルリン、システイン酸、ｔ−ブ
チルグリシン、ｔ−ブチルアラニン、フェニルグリシン、シクロヘキシルアラニ
ン、ｂ−アラニン、フルオロアミノ酸、デザイナー（ｄｅｓｉｇｎｅｒ）アミノ
酸（例えば、ｂ−メチルアミノ酸）、Ｃａ−メチルアミノ酸、Ｎａ−メチルアミ
ノ酸、および一般的なアミノ酸アナログが挙げられるがこれらに限定されない。
さらに、アミノ酸は、Ｄ（右旋性）またはＬ（左旋性）であり得る。
合成され得る（例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，１９８３，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓ
ｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ，Ｗ
．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，Ｎ．Ｙ．およびＨｕｎｋａｐｉｌｌｅｒ，Ｍ．
ら、１９８４、Ｎａｔｕｒｅ，３１０：１０５−１１１を参照のこと）。例えば
、本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドのフラグメントに
対応するペプチドは、ペプチド合成装置の使用によって合成され得る。さらに、
所望される場合、非古典的アミノ酸または化学的アミノ酸アナログが、ＭＥＴＨ
１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチド配列に置換または付加として導入され
得る。非古典的アミノ酸としては、一般的なアミノ酸のＤ−異性体、２，４−ジ
アミノ酪酸、ａ−アミノイソ酪酸、４−アミノ酪酸、Ａｂｕ、２−アミノ酪酸、
ｇ−Ａｂｕ、ｅ−Ａｈｘ、６−アミノヘキサン酸、Ａｉｂ、２−アミノイソ酪酸
、３−アミノプロピオン酸、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、ヒドロキ
シプロリン、サルコシン、シトルリン、ホモシトルリン、システイン酸、ｔ−ブ
チルグリシン、ｔ−ブチルアラニン、フェニルグリシン、シクロヘキシルアラニ
ン、ｂ−アラニン、フルオロアミノ酸、デザイナー（ｄｅｓｉｇｎｅｒ）アミノ
酸（例えば、ｂ−メチルアミノ酸）、Ｃａ−メチルアミノ酸、Ｎａ−メチルアミ
ノ酸、および一般的なアミノ酸アナログが挙げられるがこれらに限定されない。
さらに、アミノ酸は、Ｄ（右旋性）またはＬ（左旋性）であり得る。
【００９１】
天然に存在しない改変体は、当該分野で公知の変異誘発技術を使用して産生さ
れ得、この技術としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：オリゴ
ヌクレオチド媒介変異誘発、アラニンスキャニング（ａｌａｎｉｎｅ ｓｃａｎ
ｎｉｎｇ）、ＰＣＲ変異誘発、部位特異的変異誘発（例えば、Ｃａｒｔｅｒら、
Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１３：４３３１（１９８６）；およびＺｏｌｌ
ｅｒら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１０：６４８７（１９８２）を参照の
こと）、カセット変異誘発（例えば、Ｗｅｌｌｓら、Ｇｅｎｅ ３４：３１５（
１９８５）を参照のこと）、制限選択変異誘発（例えば、Ｗｅｌｌｓら、Ｐｈｉ
ｌｏｓ．Ｔｒａｎｓ．Ｒ．Ｓｏｃ．Ｌｏｎｄｏｎ Ｓｅｒ．Ａ ３１７：４１５
（１９８６）を参照のこと）。
れ得、この技術としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：オリゴ
ヌクレオチド媒介変異誘発、アラニンスキャニング（ａｌａｎｉｎｅ ｓｃａｎ
ｎｉｎｇ）、ＰＣＲ変異誘発、部位特異的変異誘発（例えば、Ｃａｒｔｅｒら、
Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１３：４３３１（１９８６）；およびＺｏｌｌ
ｅｒら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１０：６４８７（１９８２）を参照の
こと）、カセット変異誘発（例えば、Ｗｅｌｌｓら、Ｇｅｎｅ ３４：３１５（
１９８５）を参照のこと）、制限選択変異誘発（例えば、Ｗｅｌｌｓら、Ｐｈｉ
ｌｏｓ．Ｔｒａｎｓ．Ｒ．Ｓｏｃ．Ｌｏｎｄｏｎ Ｓｅｒ．Ａ ３１７：４１５
（１９８６）を参照のこと）。
【００９２】
本発明は、例えば、グリコシル化、アセチル化、リン酸化、アミド化、公知の
保護基／ブロッキング基による誘導体化、タンパク質分解的切断、抗体分子また
は他の細胞リガンドとの結合などによって、翻訳の間または翻訳後に異なって修
飾されるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを含む。任意の多数
の化学修飾が公知の技術（臭化シアン、トリプシン、キモトリプシン、パパイン
、Ｖ８プロテアーゼ、ＮａＢＨ4による特異的化学的切断；アセチル化、ホルミ
ル化、酸化、還元；ツニカマイシンの存在下での代謝的合成などが含まれるがこ
れらに限定されない）によって実行され得る。
保護基／ブロッキング基による誘導体化、タンパク質分解的切断、抗体分子また
は他の細胞リガンドとの結合などによって、翻訳の間または翻訳後に異なって修
飾されるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを含む。任意の多数
の化学修飾が公知の技術（臭化シアン、トリプシン、キモトリプシン、パパイン
、Ｖ８プロテアーゼ、ＮａＢＨ4による特異的化学的切断；アセチル化、ホルミ
ル化、酸化、還元；ツニカマイシンの存在下での代謝的合成などが含まれるがこ
れらに限定されない）によって実行され得る。
【００９３】
本発明に含まれるさらなる翻訳後修飾としては、例えば、Ｎ結合型またはＯ結
合型の炭水化物鎖、Ｎ末端またはＣ末端のプロセシング、アミノ酸骨格への化学
部分の結合、Ｎ結合型またはＯ結合型の炭水化物鎖の化学修飾、および原核生物
宿主細胞発現の結果としてのＮ末端メチオニン残基の付加または欠失が挙げられ
る。このポリペプチドはまた、酵素標識、蛍光標識、同位体標識、またはアフィ
ニティー標識のような検出可能な標識で修飾され、タンパク質の検出および単離
を可能にし得る。
合型の炭水化物鎖、Ｎ末端またはＣ末端のプロセシング、アミノ酸骨格への化学
部分の結合、Ｎ結合型またはＯ結合型の炭水化物鎖の化学修飾、および原核生物
宿主細胞発現の結果としてのＮ末端メチオニン残基の付加または欠失が挙げられ
る。このポリペプチドはまた、酵素標識、蛍光標識、同位体標識、またはアフィ
ニティー標識のような検出可能な標識で修飾され、タンパク質の検出および単離
を可能にし得る。
【００９４】
本発明によってまた、さらなる利点（例えば、このポリペプチドの溶解度、安
定性および循環時間の増加、または免疫原性の減少）を提供し得る、ＭＥＴＨ１
および／またはＭＥＴＨ２の化学修飾誘導体が提供される（米国特許第４，１７
９，３３７号を参照のこと）。誘導体化のための化学部分は、水溶性ポリマー（
例えば、ポリエチレングリコール、エチレングリコール／プロピレングリコール
コポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコー
ルなど）から選択され得る。このポリペプチドは、この分子内のランダムな位置
でか、またはこの分子内の所定の位置で修飾され得、そして１、２、３以上の結
合した化学部分を含み得る。
定性および循環時間の増加、または免疫原性の減少）を提供し得る、ＭＥＴＨ１
および／またはＭＥＴＨ２の化学修飾誘導体が提供される（米国特許第４，１７
９，３３７号を参照のこと）。誘導体化のための化学部分は、水溶性ポリマー（
例えば、ポリエチレングリコール、エチレングリコール／プロピレングリコール
コポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコー
ルなど）から選択され得る。このポリペプチドは、この分子内のランダムな位置
でか、またはこの分子内の所定の位置で修飾され得、そして１、２、３以上の結
合した化学部分を含み得る。
【００９５】
このポリマーは、任意の分子量のポリマーであり得、そして分枝状であっても
非分枝状であってもよい。ポリエチレングリコールに関しては、好ましい分子量
は、取り扱いおよび製造の容易さのために、約１ｋＤａと約１００ｋＤａとの間
（用語「約」は、ポリエチレングリコールの調製において、いくつかの分子は示
した分子量よりも重く、いくつかは示した分子量よりも軽いことを示す）である
。所望の治療的プロフィール（例えば、所望される持続放出の持続時間、生物学
的活性に対する効果（ある場合）、取り扱いの容易さ、抗原性の程度または抗原
性がないこと、および治療タンパク質またはアナログに対するポリエチレングリ
コールの他の公知の効果）に依存して、他のサイズが用いられ得る。例えば、ポ
リエチレングリコールは、約２００；５００；１０００；１５００；２０００；
２５００；３０００；３５００；４０００；４５００；５０００；５５００；６
０００；６５００；７０００；７５００；８０００；８５００；９０００；９５
００；１０，０００；１０，５００；１１，０００；１１，５００；１２，００
０；１２，５００；１３，０００；１３，５００；１４，０００；１４，５００
；１５，０００；１５，５００；１６，０００；１６，５００；１７，０００；
１７，５００；１８，０００；１８，５００；１９，０００；１９，５００：２
０，０００ ；２５，０００；３０，０００；３５，０００；４０，０００；５
０，０００；５５，０００；６０，０００；６５，０００；７０，０００；７５
，０００；８０，０００；８５，０００；９０，０００；９５，０００；または
１００，０００ｋＤａの平均分子量を有し得る。
非分枝状であってもよい。ポリエチレングリコールに関しては、好ましい分子量
は、取り扱いおよび製造の容易さのために、約１ｋＤａと約１００ｋＤａとの間
（用語「約」は、ポリエチレングリコールの調製において、いくつかの分子は示
した分子量よりも重く、いくつかは示した分子量よりも軽いことを示す）である
。所望の治療的プロフィール（例えば、所望される持続放出の持続時間、生物学
的活性に対する効果（ある場合）、取り扱いの容易さ、抗原性の程度または抗原
性がないこと、および治療タンパク質またはアナログに対するポリエチレングリ
コールの他の公知の効果）に依存して、他のサイズが用いられ得る。例えば、ポ
リエチレングリコールは、約２００；５００；１０００；１５００；２０００；
２５００；３０００；３５００；４０００；４５００；５０００；５５００；６
０００；６５００；７０００；７５００；８０００；８５００；９０００；９５
００；１０，０００；１０，５００；１１，０００；１１，５００；１２，００
０；１２，５００；１３，０００；１３，５００；１４，０００；１４，５００
；１５，０００；１５，５００；１６，０００；１６，５００；１７，０００；
１７，５００；１８，０００；１８，５００；１９，０００；１９，５００：２
０，０００ ；２５，０００；３０，０００；３５，０００；４０，０００；５
０，０００；５５，０００；６０，０００；６５，０００；７０，０００；７５
，０００；８０，０００；８５，０００；９０，０００；９５，０００；または
１００，０００ｋＤａの平均分子量を有し得る。
【００９６】
上記のように、ポリエチレングリコールは、分枝鎖を有していてもよい。分枝
ポリエチレングリコールは、例えば、以下に記載される：米国特許第５，６４３
，５７５号；Ｍｏｒｐｕｒｇｏら、Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ
ｎｏｌ．５６：５９−７２（１９９６）；Ｖｏｒｏｂｊｅｖら、Ｎｕｃｌｅｏｓ
ｉｄｅｓ Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ １８：２７４５− ２７５０（１９９９）
；およびＣａｌｉｃｅｔｉら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．１０：６３８−
６４６（１９９９）（これらの各々の開示は、参考として援用される）。
ポリエチレングリコールは、例えば、以下に記載される：米国特許第５，６４３
，５７５号；Ｍｏｒｐｕｒｇｏら、Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ
ｎｏｌ．５６：５９−７２（１９９６）；Ｖｏｒｏｂｊｅｖら、Ｎｕｃｌｅｏｓ
ｉｄｅｓ Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ １８：２７４５− ２７５０（１９９９）
；およびＣａｌｉｃｅｔｉら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．１０：６３８−
６４６（１９９９）（これらの各々の開示は、参考として援用される）。
【００９７】
ポリエチレングリコール分子（または他の化学的部分）は、このタンパク質の
機能的ドメインまたは抗原性ドメインに対する効果を考慮して、タンパク質に結
合されるべきである。当業者に利用可能な多数の結合方法が存在する（例えば、
本明細書中に参考として援用される、ＥＰ ０ ４０１ ３８４（Ｇ−ＣＳＦに
ＰＥＧをカップリングする）、Ｍａｌｉｋら，Ｅｘｐ．Ｈｅｍａｔｏｌ．２０：
１０２８−１０３５（１９９２）（塩化トレシルを用いたＧＭ−ＣＳＦのペグ化
（ｐｅｇｙｌａｔｉｏｎ）を報告する）もまた参照のこと）。例えば、ポリエチ
レングリコールは、反応性基（例えば、遊離のアミノ基またはカルボキシル基）
によってアミノ酸残基を介して共有結合され得る。反応性基は、活性化ポリエチ
レングリコール分子が結合し得る基である。遊離のアミノ基を有するアミノ酸残
基としては、リジン残基およびＮ末端アミノ酸残基が挙げられ得る；遊離のカル
ボキシル基を有するアミノ酸残基としては、アスパラギン酸残基、グルタミン酸
残基およびＣ末端アミノ酸残基が挙げられ得る。スルフヒドリル残基もまた、ポ
リエチレングリコール分子を結合するための反応性基として用いられ得る。治療
目的のために好ましいのは、アミノ基での結合、例えば、Ｎ末端またはリジン基
での結合である。
機能的ドメインまたは抗原性ドメインに対する効果を考慮して、タンパク質に結
合されるべきである。当業者に利用可能な多数の結合方法が存在する（例えば、
本明細書中に参考として援用される、ＥＰ ０ ４０１ ３８４（Ｇ−ＣＳＦに
ＰＥＧをカップリングする）、Ｍａｌｉｋら，Ｅｘｐ．Ｈｅｍａｔｏｌ．２０：
１０２８−１０３５（１９９２）（塩化トレシルを用いたＧＭ−ＣＳＦのペグ化
（ｐｅｇｙｌａｔｉｏｎ）を報告する）もまた参照のこと）。例えば、ポリエチ
レングリコールは、反応性基（例えば、遊離のアミノ基またはカルボキシル基）
によってアミノ酸残基を介して共有結合され得る。反応性基は、活性化ポリエチ
レングリコール分子が結合し得る基である。遊離のアミノ基を有するアミノ酸残
基としては、リジン残基およびＮ末端アミノ酸残基が挙げられ得る；遊離のカル
ボキシル基を有するアミノ酸残基としては、アスパラギン酸残基、グルタミン酸
残基およびＣ末端アミノ酸残基が挙げられ得る。スルフヒドリル残基もまた、ポ
リエチレングリコール分子を結合するための反応性基として用いられ得る。治療
目的のために好ましいのは、アミノ基での結合、例えば、Ｎ末端またはリジン基
での結合である。
【００９８】
上記で示唆されるように、ポリエチレングリコールは、多くのアミノ酸残基の
いずれかへの結合を介してタンパク質に結合され得る。例えば、ポリエチレング
リコールは、リジン残基、ヒスチジン残基、アスパラギン酸残基、グルタミン酸
残基、またはシステイン残基への共有結合を介してタンパク質に連結され得る。
１つ以上の反応化学系を用いて、タンパク質の特定のアミノ酸残基（例えば、リ
ジン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸またはシステイン）またはタ
ンパク質の１つより多くの型のアミノ酸残基（例えば、リジン、ヒスチジン、ア
スパラギン酸、グルタミン酸またはシステインおよびそれらの組み合わせ）にポ
リエチレングリコールを結合し得る。
いずれかへの結合を介してタンパク質に結合され得る。例えば、ポリエチレング
リコールは、リジン残基、ヒスチジン残基、アスパラギン酸残基、グルタミン酸
残基、またはシステイン残基への共有結合を介してタンパク質に連結され得る。
１つ以上の反応化学系を用いて、タンパク質の特定のアミノ酸残基（例えば、リ
ジン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸またはシステイン）またはタ
ンパク質の１つより多くの型のアミノ酸残基（例えば、リジン、ヒスチジン、ア
スパラギン酸、グルタミン酸またはシステインおよびそれらの組み合わせ）にポ
リエチレングリコールを結合し得る。
【００９９】
Ｎ末端で化学修飾されたタンパク質が具体的に所望され得る。ポリエチレング
リコールを本発明の組成の例示として用いて、種々のポリエチレングリコール分
子から（分子量、分枝などによって）、反応混合物中でのポリエチレングリコー
ル分子のタンパク質（または、ポリペプチド）分子に対する比、行われるべきペ
グ化反応の型、および選択されたＮ末端ペグ化タンパク質の獲得方法を選択し得
る。Ｎ末端ペグ化調製物の獲得方法（すなわち、必要な場合、この部分を他のモ
ノペグ化部分から分離すること）は、ペグ化タンパク質分子の集団からの、Ｎ末
端ペグ化物質の精製により行われ得る。Ｎ末端修飾で化学修飾された選択的タン
パク質は、特定のタンパク質における誘導体化に利用可能な異なる型の第１級ア
ミノ基（リジン対Ｎ末端）の示差的な反応性を利用する還元的アルキル化によっ
て達成され得る。適切な反応条件下では、カルボニル基含有ポリマーを用いた、
Ｎ末端でのタンパク質の実質的に選択的な誘導体化が達成される。
リコールを本発明の組成の例示として用いて、種々のポリエチレングリコール分
子から（分子量、分枝などによって）、反応混合物中でのポリエチレングリコー
ル分子のタンパク質（または、ポリペプチド）分子に対する比、行われるべきペ
グ化反応の型、および選択されたＮ末端ペグ化タンパク質の獲得方法を選択し得
る。Ｎ末端ペグ化調製物の獲得方法（すなわち、必要な場合、この部分を他のモ
ノペグ化部分から分離すること）は、ペグ化タンパク質分子の集団からの、Ｎ末
端ペグ化物質の精製により行われ得る。Ｎ末端修飾で化学修飾された選択的タン
パク質は、特定のタンパク質における誘導体化に利用可能な異なる型の第１級ア
ミノ基（リジン対Ｎ末端）の示差的な反応性を利用する還元的アルキル化によっ
て達成され得る。適切な反応条件下では、カルボニル基含有ポリマーを用いた、
Ｎ末端でのタンパク質の実質的に選択的な誘導体化が達成される。
【０１００】
上記のように、本発明のタンパク質のペグ化（ｐｅｇｙｌａｔｉｏｎ）は、か
なり多数の手段によって、達成され得る。例えば、ポリエチレングリコールは、
直接的または介在性リンカーによってのいずれかによってタンパク質に付着され
得る。タンパク質にポリエチレングリコールを付着させるためのリンカーレス（
ｌｉｎｋｅｒｌｅｓｓ）システムは、Ｄｅｌｇａｄｏら、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔ
ｈｅｒａ．Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｒ Ｓｙｓ．９：２４９−３０４（１９９２）
；Ｆｒａｎｃｉｓら、Ｉｎｔｅｒｎ．Ｊ．ｏｆ Ｈｅｍａｔｏｌ．６８：１−１
８（１９９８）；米国特許第４，００２，５３１号；米国特許第５，３４９，０
５２号；ＷＯ９５／０６０５８；およびＷＯ９８／３２４６６に記載される。こ
れらの各々の開示は、本明細書中に参考として援用される。
なり多数の手段によって、達成され得る。例えば、ポリエチレングリコールは、
直接的または介在性リンカーによってのいずれかによってタンパク質に付着され
得る。タンパク質にポリエチレングリコールを付着させるためのリンカーレス（
ｌｉｎｋｅｒｌｅｓｓ）システムは、Ｄｅｌｇａｄｏら、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔ
ｈｅｒａ．Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｒ Ｓｙｓ．９：２４９−３０４（１９９２）
；Ｆｒａｎｃｉｓら、Ｉｎｔｅｒｎ．Ｊ．ｏｆ Ｈｅｍａｔｏｌ．６８：１−１
８（１９９８）；米国特許第４，００２，５３１号；米国特許第５，３４９，０
５２号；ＷＯ９５／０６０５８；およびＷＯ９８／３２４６６に記載される。こ
れらの各々の開示は、本明細書中に参考として援用される。
【０１０１】
介在性リンカーを伴わずに、ポリエチレングリコールを直接、タンパク質のア
ミノ酸残基に付着させるための一つの系は、トレシル化（ｔｒｅｓｙｌａｔｅｄ
）されたＭＰＥＧを利用する。トレシル化されたＭＰＥＧは、塩化トレシル（Ｃ
ｌＳＯ2ＣＨ2ＣＦ3）を使用するモノメトキシ（ｍｏｎｍｅｔｈｏｘｙ）ポリエ
チレングリコール（ＭＰＥＧ）の改変によって生成される。トレシル化されたＭ
ＰＥＧを用いるタンパク質の反応の際に、ポリエチレングリコールが、直接タン
パク質のアミン基と付着される。従って、本発明は、２，２，２−トリフルオロ
エタン（ｔｒｉｆｌｕｏｒｅｏｔｈａｎｅ）スルホニル基を有するポリエチレン
グリコール分子と本発明のタンパク質を反応させることによって産生されるタン
パク質ポリエチレングリコール結合体を含む。
ミノ酸残基に付着させるための一つの系は、トレシル化（ｔｒｅｓｙｌａｔｅｄ
）されたＭＰＥＧを利用する。トレシル化されたＭＰＥＧは、塩化トレシル（Ｃ
ｌＳＯ2ＣＨ2ＣＦ3）を使用するモノメトキシ（ｍｏｎｍｅｔｈｏｘｙ）ポリエ
チレングリコール（ＭＰＥＧ）の改変によって生成される。トレシル化されたＭ
ＰＥＧを用いるタンパク質の反応の際に、ポリエチレングリコールが、直接タン
パク質のアミン基と付着される。従って、本発明は、２，２，２−トリフルオロ
エタン（ｔｒｉｆｌｕｏｒｅｏｔｈａｎｅ）スルホニル基を有するポリエチレン
グリコール分子と本発明のタンパク質を反応させることによって産生されるタン
パク質ポリエチレングリコール結合体を含む。
【０１０２】
ポリエチレングリコールはまた、多数の異なる介在性リンカーを使用して、タ
ンパク質と付着され得る。例えば、米国特許第５，６１２，４６０号（この全体
の開示は、本明細書中で参考として援用される）は、タンパク質とポリエチレン
グリコールを連結するためのウレタンリンカーを開示する。タンパク質−ポリエ
チレングリコール結合体（ここで、ポリエチレングリコールは、リンカーによっ
てタンパク質と結合される）はまた、化合物（例えば、ＭＰＥＧ−スクシンイミ
ジルスクシネート、１，１’−カルボニルジイミダゾールで活性化されたＭＰＥ
Ｇ、ＭＰＥＧ−２，４，５−トリクロロペニルカーボネート、ＭＰＥＧ−ｐ−ニ
トロフェノールカーボネート、および種々のＭＰＥＧスクシネート誘導体）とタ
ンパク質との反応によって、産生され得る。多数のさらなるポリエチレングリコ
ール誘導体およびポリエチレングリコールをタンパク質に付着するための反応化
学は、ＷＯ９８／３２４６６に記載され、その全体の開示は、本明細書中に参考
として援用される。本明細書中で示される反応化学を使用して産生されるペグ化
タンパク質産物は、本発明の範囲内に含まれる。
ンパク質と付着され得る。例えば、米国特許第５，６１２，４６０号（この全体
の開示は、本明細書中で参考として援用される）は、タンパク質とポリエチレン
グリコールを連結するためのウレタンリンカーを開示する。タンパク質−ポリエ
チレングリコール結合体（ここで、ポリエチレングリコールは、リンカーによっ
てタンパク質と結合される）はまた、化合物（例えば、ＭＰＥＧ−スクシンイミ
ジルスクシネート、１，１’−カルボニルジイミダゾールで活性化されたＭＰＥ
Ｇ、ＭＰＥＧ−２，４，５−トリクロロペニルカーボネート、ＭＰＥＧ−ｐ−ニ
トロフェノールカーボネート、および種々のＭＰＥＧスクシネート誘導体）とタ
ンパク質との反応によって、産生され得る。多数のさらなるポリエチレングリコ
ール誘導体およびポリエチレングリコールをタンパク質に付着するための反応化
学は、ＷＯ９８／３２４６６に記載され、その全体の開示は、本明細書中に参考
として援用される。本明細書中で示される反応化学を使用して産生されるペグ化
タンパク質産物は、本発明の範囲内に含まれる。
【０１０３】
本発明の各タンパク質に付着されるポリエチレングリコール部分の数（すなわ
ち、置換の程度）はまた、変動し得る。例えば、本発明のペグ化タンパク質は、
平均して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１５、１７、２
０以上のポリエチレングリコール分子と連結され得る。同様に、タンパク質分子
当たりの置換の平均程度は、例えば、１−３、２−４、３−５、４−６、５−７
、６−８、７−９、８−１０、９−１１、１０−１２、１１−１３、１２−１４
、１３−１５、１４−１６、１５−１７、１６−１８、１７−１９、または１８
−２０のポリエチレングリコール部分の範囲内である。置換の程度を決定するた
めの方法は、例えば、Ｄｅｌｇａｄｏら、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒａ．Ｄｒ
ｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓ．９：２４９−３０４（１９９２）において議論
される。
ち、置換の程度）はまた、変動し得る。例えば、本発明のペグ化タンパク質は、
平均して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１５、１７、２
０以上のポリエチレングリコール分子と連結され得る。同様に、タンパク質分子
当たりの置換の平均程度は、例えば、１−３、２−４、３−５、４−６、５−７
、６−８、７−９、８−１０、９−１１、１０−１２、１１−１３、１２−１４
、１３−１５、１４−１６、１５−１７、１６−１８、１７−１９、または１８
−２０のポリエチレングリコール部分の範囲内である。置換の程度を決定するた
めの方法は、例えば、Ｄｅｌｇａｄｏら、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒａ．Ｄｒ
ｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓ．９：２４９−３０４（１９９２）において議論
される。
【０１０４】
本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、モノマーまた
はマルチマー（すなわち、ダイマー、トリマー、テトラマーおよびより高度のマ
ルチマー）であり得る。従って、本発明は、モノマーおよびマルチマーの本発明
のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチド、それらの調製ならびにそ
れらを含む組成物（好ましくは薬学的組成物）に関する。特定の実施形態では、
本発明のポリペプチドは、モノマー、ダイマー、トリマーまたはテトラマーであ
る。さらなる実施形態では、本発明のマルチマーは、少なくともダイマー、少な
くともトリマー、または少なくともテトラマーである。
はマルチマー（すなわち、ダイマー、トリマー、テトラマーおよびより高度のマ
ルチマー）であり得る。従って、本発明は、モノマーおよびマルチマーの本発明
のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチド、それらの調製ならびにそ
れらを含む組成物（好ましくは薬学的組成物）に関する。特定の実施形態では、
本発明のポリペプチドは、モノマー、ダイマー、トリマーまたはテトラマーであ
る。さらなる実施形態では、本発明のマルチマーは、少なくともダイマー、少な
くともトリマー、または少なくともテトラマーである。
【０１０５】
本発明によって含まれるマルチマーは、ホモマーまたはヘテロマーであり得る
。本明細書中で用いられる場合、用語ホモマーは、本発明のＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２ポリペプチドのみを含むマルチマー（本明細書中に記載される
ような、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のフラグメント、改変体、スプラ
イス改変体および融合タンパク質を含む）をいう。これらのホモマーは、同一ま
たは異なるアミノ酸配列を有するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプ
チドを含み得る。特定の実施形態では、本発明のホモマーは、同一のアミノ酸配
列を有するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドのみを含むマルチ
マーである。別の特定の実施形態では、本発明のホモマーは、異なるアミノ酸配
列を有するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを含むマルチマー
である。特定の実施形態では、本発明のマルチマーは、ホモダイマー（例えば、
同一または異なるアミノ酸配列を有するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポ
リペプチドを含む）あるいはホモトリマー（例えば、同一および／または異なる
アミノ酸配列を有するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを含む
）である。さらなる実施形態では、本発明のホモマー性マルチマーは、少なくと
もホモダイマー、少なくともホモトリマーまたは少なくともホモテトラマーであ
る。
。本明細書中で用いられる場合、用語ホモマーは、本発明のＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２ポリペプチドのみを含むマルチマー（本明細書中に記載される
ような、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のフラグメント、改変体、スプラ
イス改変体および融合タンパク質を含む）をいう。これらのホモマーは、同一ま
たは異なるアミノ酸配列を有するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプ
チドを含み得る。特定の実施形態では、本発明のホモマーは、同一のアミノ酸配
列を有するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドのみを含むマルチ
マーである。別の特定の実施形態では、本発明のホモマーは、異なるアミノ酸配
列を有するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを含むマルチマー
である。特定の実施形態では、本発明のマルチマーは、ホモダイマー（例えば、
同一または異なるアミノ酸配列を有するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポ
リペプチドを含む）あるいはホモトリマー（例えば、同一および／または異なる
アミノ酸配列を有するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを含む
）である。さらなる実施形態では、本発明のホモマー性マルチマーは、少なくと
もホモダイマー、少なくともホモトリマーまたは少なくともホモテトラマーであ
る。
【０１０６】
本明細書中で用いられる場合、用語ヘテロマーとは、本発明のＭＥＴＨ１およ
び／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドに加えて１以上の異種ポリペプチド（すなわ
ち、異なるタンパク質のポリペプチド）を含むマルチマーをいう。特定の実施形
態では、本発明のマルチマーは、ヘテロダイマー、ヘテロトリマーまたはヘテロ
テトラマーである。さらなる実施形態では、本発明のホモマー性マルチマーは、
少なくともホモダイマー、少なくともホモトリマーまたは少なくともホモテトラ
マーである。
び／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドに加えて１以上の異種ポリペプチド（すなわ
ち、異なるタンパク質のポリペプチド）を含むマルチマーをいう。特定の実施形
態では、本発明のマルチマーは、ヘテロダイマー、ヘテロトリマーまたはヘテロ
テトラマーである。さらなる実施形態では、本発明のホモマー性マルチマーは、
少なくともホモダイマー、少なくともホモトリマーまたは少なくともホモテトラ
マーである。
【０１０７】
本発明のマルチマーは、疎水性、親水性、イオン性および／もしくは共有結合
的な結合の結果であり得、そして／または、例えば、リポソーム形成によって間
接連結され得る。従って、１つの実施形態では、本発明のマルチマー（例えば、
ホモダイマーまたはホモトリマーなど）は、本発明のポリペプチドが溶液中で互
いに接触する場合に形成される。別の実施形態では、本発明のへテロマルチマー
（例えば、ヘテロトリマーまたはヘテロテトラマーなど）は、本発明のポリペプ
チドが、溶液中で本発明のポリペプチドに対する抗体（本発明の融合タンパク質
における異種ポリペプチド配列に対する抗体を含む）と接触した場合に形成され
る。他の実施形態では、本発明のマルチマーは、本発明のＭＥＴＨ１および／ま
たはＭＥＴＨ２ポリペプチドとの、および／または本発明のＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２ポリペプチド間での共有結合によって形成される。このような
共有結合は、ポリペプチド配列（例えば、配列番号２もしくは４に示されるか、
あるいはクローンＨＡＴＣＫ８９、またはＡＴＣＣ受託番号２０９５８１もしく
は２０９５８２もしくはＰＴＡ１４７８として寄託されたクローンのいずれかに
よってコードされるポリペプチドに含まれる）中に含まれる１以上のアミノ酸残
基を含み得る。１例では、この共有結合は、ネイティブ（すなわち、天然に存在
する）ポリペプチドにおいて相互作用するポリペプチド配列内に存在するシステ
イン残基間での架橋である。別の例では、この共有結合は、化学的操作または組
換え操作の結果である。あるいは、このような共有結合は、ＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２の融合タンパク質中の異種ポリペプチド配列に含まれる１以上
のアミノ酸残基を含み得る。１例では、共有結合は、本発明の融合タンパク質に
含まれる異種配列間にある（例えば、米国特許第５，４７８，９２５号を参照の
こと）。特定の例では、この共有結合は、（本明細書中に記載されるような）本
発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ Ｆｃ融合タンパク質に含まれる異
種配列間にある。別の特定の例では、本発明の融合タンパク質の共有結合は、共
有結合したマルチマーを形成し得る別の線維芽細胞増殖因子ファミリーのメンバ
ー（例えば、オステオプロテゲリン（ｏｓｅｔｅｏｐｒｏｔｅｇｅｒｉｎ）（例
えば、国際公開番号ＷＯ ９８／４９３０５号（この内容はその全体が本明細書
中で参考として援用される）を参照のこと）など）由来の異種ポリペプチド配列
間にある。別の実施形態では、２以上の本発明のポリペプチドは、ペプチドリン
カーを通して連結される。例としては、米国特許第５，０７３，６２７号（本明
細書中に参考として援用される）に記載されるペプチドリンカーが挙げられる。
ペプチドリンカーによって隔てられた本発明の複数のポリペプチドを含むタンパ
ク質は、従来の組換えＤＮＡ技術を用いて生成され得る。
的な結合の結果であり得、そして／または、例えば、リポソーム形成によって間
接連結され得る。従って、１つの実施形態では、本発明のマルチマー（例えば、
ホモダイマーまたはホモトリマーなど）は、本発明のポリペプチドが溶液中で互
いに接触する場合に形成される。別の実施形態では、本発明のへテロマルチマー
（例えば、ヘテロトリマーまたはヘテロテトラマーなど）は、本発明のポリペプ
チドが、溶液中で本発明のポリペプチドに対する抗体（本発明の融合タンパク質
における異種ポリペプチド配列に対する抗体を含む）と接触した場合に形成され
る。他の実施形態では、本発明のマルチマーは、本発明のＭＥＴＨ１および／ま
たはＭＥＴＨ２ポリペプチドとの、および／または本発明のＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２ポリペプチド間での共有結合によって形成される。このような
共有結合は、ポリペプチド配列（例えば、配列番号２もしくは４に示されるか、
あるいはクローンＨＡＴＣＫ８９、またはＡＴＣＣ受託番号２０９５８１もしく
は２０９５８２もしくはＰＴＡ１４７８として寄託されたクローンのいずれかに
よってコードされるポリペプチドに含まれる）中に含まれる１以上のアミノ酸残
基を含み得る。１例では、この共有結合は、ネイティブ（すなわち、天然に存在
する）ポリペプチドにおいて相互作用するポリペプチド配列内に存在するシステ
イン残基間での架橋である。別の例では、この共有結合は、化学的操作または組
換え操作の結果である。あるいは、このような共有結合は、ＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２の融合タンパク質中の異種ポリペプチド配列に含まれる１以上
のアミノ酸残基を含み得る。１例では、共有結合は、本発明の融合タンパク質に
含まれる異種配列間にある（例えば、米国特許第５，４７８，９２５号を参照の
こと）。特定の例では、この共有結合は、（本明細書中に記載されるような）本
発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ Ｆｃ融合タンパク質に含まれる異
種配列間にある。別の特定の例では、本発明の融合タンパク質の共有結合は、共
有結合したマルチマーを形成し得る別の線維芽細胞増殖因子ファミリーのメンバ
ー（例えば、オステオプロテゲリン（ｏｓｅｔｅｏｐｒｏｔｅｇｅｒｉｎ）（例
えば、国際公開番号ＷＯ ９８／４９３０５号（この内容はその全体が本明細書
中で参考として援用される）を参照のこと）など）由来の異種ポリペプチド配列
間にある。別の実施形態では、２以上の本発明のポリペプチドは、ペプチドリン
カーを通して連結される。例としては、米国特許第５，０７３，６２７号（本明
細書中に参考として援用される）に記載されるペプチドリンカーが挙げられる。
ペプチドリンカーによって隔てられた本発明の複数のポリペプチドを含むタンパ
ク質は、従来の組換えＤＮＡ技術を用いて生成され得る。
【０１０８】
本発明のマルチマーポリペプチドを調製するための別の方法は、ロイシンジッ
パーポリペプチド配列またはイソロイシンジッパーポリペプチド配列に融合され
た本発明のポリペプチドの使用を含む。ロイシンジッパードメインおよびイソロ
イシンジッパードメインは、そのドメインが見出されるタンパク質のマルチマー
形成を促進するポリペプチドである。ロイシンジッパーは元々、いくつかのＤＮ
Ａ結合タンパク質において同定され（Ｌａｎｄｓｃｈｕｌｚら，Ｓｃｉｅｎｃｅ
２４０：１７５９、（１９８８））、そしてそれ以来種々の異なるタンパク質
において見出されている。とりわけ公知のロイシンジッパーは、ダイマー形成ま
たはトリマー形成をする、天然に存在するペプチドおよびその誘導体である。本
発明の可溶性マルチマータンパク質を生成するために適切なロイシンジッパード
メインの例は、本明細書中に参考として援用されるＰＣＴ出願ＷＯ ９４／１０
３０８に記載されるロイシンジッパードメインである。溶液中でダイマー形成ま
たはトリマー形成をするポリペプチド配列に融合された本発明のポリペプチドを
含む組換え融合タンパク質は、適切な宿主細胞中で発現され、そして得られる可
溶性マルチマー融合タンパク質は、当該分野で公知の技術を用いて培養上清から
回収される。
パーポリペプチド配列またはイソロイシンジッパーポリペプチド配列に融合され
た本発明のポリペプチドの使用を含む。ロイシンジッパードメインおよびイソロ
イシンジッパードメインは、そのドメインが見出されるタンパク質のマルチマー
形成を促進するポリペプチドである。ロイシンジッパーは元々、いくつかのＤＮ
Ａ結合タンパク質において同定され（Ｌａｎｄｓｃｈｕｌｚら，Ｓｃｉｅｎｃｅ
２４０：１７５９、（１９８８））、そしてそれ以来種々の異なるタンパク質
において見出されている。とりわけ公知のロイシンジッパーは、ダイマー形成ま
たはトリマー形成をする、天然に存在するペプチドおよびその誘導体である。本
発明の可溶性マルチマータンパク質を生成するために適切なロイシンジッパード
メインの例は、本明細書中に参考として援用されるＰＣＴ出願ＷＯ ９４／１０
３０８に記載されるロイシンジッパードメインである。溶液中でダイマー形成ま
たはトリマー形成をするポリペプチド配列に融合された本発明のポリペプチドを
含む組換え融合タンパク質は、適切な宿主細胞中で発現され、そして得られる可
溶性マルチマー融合タンパク質は、当該分野で公知の技術を用いて培養上清から
回収される。
【０１０９】
本発明のトリマーポリペプチドは、生物学的活性の増強という利点を提供し得
る。好ましいロイシンジッパー部分およびイソロイシン部分は、トリマーを優先
的に形成する部分である。１例は、本明細書中に参考として援用されるＨｏｐｐ
ｅら（ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ３４４：１９１，（１９９４））および米国
特許出願第０８／４４６，９２２号に記載される通りの肺サーファクタントプロ
テインＤ（ＳＰＤ）に由来するロイシンジッパーである。天然に存在するトリマ
ータンパク質由来の他のペプチドは、本発明のトリマーポリペプチドの調製にお
いて用いられ得る。
る。好ましいロイシンジッパー部分およびイソロイシン部分は、トリマーを優先
的に形成する部分である。１例は、本明細書中に参考として援用されるＨｏｐｐ
ｅら（ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ３４４：１９１，（１９９４））および米国
特許出願第０８／４４６，９２２号に記載される通りの肺サーファクタントプロ
テインＤ（ＳＰＤ）に由来するロイシンジッパーである。天然に存在するトリマ
ータンパク質由来の他のペプチドは、本発明のトリマーポリペプチドの調製にお
いて用いられ得る。
【０１１０】
別の例では、本発明のタンパク質は、Ｆｌａｇ（登録商標）ポリペプチド配列
を含む本発明の融合タンパク質に含まれるＦｌａｇ（登録商標）ポリペプチド配
列間の相互作用によって会合する。さらなる実施形態では、本発明のタンパク質
の会合は、本発明のＦｌａｇ（登録商標）融合タンパク質に含まれる異種ポリペ
プチド配列と抗Ｆｌａｇ（登録商標）抗体との間の相互作用によって会合する。
を含む本発明の融合タンパク質に含まれるＦｌａｇ（登録商標）ポリペプチド配
列間の相互作用によって会合する。さらなる実施形態では、本発明のタンパク質
の会合は、本発明のＦｌａｇ（登録商標）融合タンパク質に含まれる異種ポリペ
プチド配列と抗Ｆｌａｇ（登録商標）抗体との間の相互作用によって会合する。
【０１１１】
本発明のマルチマーは、当該分野で公知の化学技術を用いて生成され得る。例
えば、本発明のマルチマーに含まれることが所望されるポリペプチドは、当該分
野で公知のリンカー分子およびリンカー分子長最適化技術を用いて化学的に架橋
され得る（例えば、本明細書中にその全体が参考として援用される、米国特許第
５，４７８，９２５号を参照のこと）。さらに、本発明のマルチマーは、当該分
野で公知の技術を用いて生成されて、マルチマーに含まれることが所望されるポ
リペプチドの配列内に存在するシステイン残基間の１以上の分子間架橋を形成し
得る（例えば、本明細書中にその全体が参考として援用される、米国特許第５，
４７８，９２５号を参照のこと）。さらに、本発明のポリペプチドは、ポリペプ
チドのＣ末端またはＮ末端へのシステインまたはビオチンの付加によって慣用的
に修飾され得、そして当該分野で公知の技術が、１以上のこれらの修飾されたポ
リペプチドを含むマルチマーを生成するために適用され得る（例えば、本明細書
中にその全体が参考として援用される、米国特許第５，４７８，９２５号を参照
のこと）。さらに、当該分野で公知の技術は、本発明のマルチマーに含まれるこ
とが所望されるポリペプチド成分を含むリポソームを生成するために適用され得
る（例えば、本明細書中にその全体が参考として援用される、米国特許第５，４
７８，９２５号を参照のこと）。
えば、本発明のマルチマーに含まれることが所望されるポリペプチドは、当該分
野で公知のリンカー分子およびリンカー分子長最適化技術を用いて化学的に架橋
され得る（例えば、本明細書中にその全体が参考として援用される、米国特許第
５，４７８，９２５号を参照のこと）。さらに、本発明のマルチマーは、当該分
野で公知の技術を用いて生成されて、マルチマーに含まれることが所望されるポ
リペプチドの配列内に存在するシステイン残基間の１以上の分子間架橋を形成し
得る（例えば、本明細書中にその全体が参考として援用される、米国特許第５，
４７８，９２５号を参照のこと）。さらに、本発明のポリペプチドは、ポリペプ
チドのＣ末端またはＮ末端へのシステインまたはビオチンの付加によって慣用的
に修飾され得、そして当該分野で公知の技術が、１以上のこれらの修飾されたポ
リペプチドを含むマルチマーを生成するために適用され得る（例えば、本明細書
中にその全体が参考として援用される、米国特許第５，４７８，９２５号を参照
のこと）。さらに、当該分野で公知の技術は、本発明のマルチマーに含まれるこ
とが所望されるポリペプチド成分を含むリポソームを生成するために適用され得
る（例えば、本明細書中にその全体が参考として援用される、米国特許第５，４
７８，９２５号を参照のこと）。
【０１１２】
あるいは、本発明のマルチマーは、当該分野で公知の遺伝子操作技術を用いて
生成され得る。１つの実施形態では、本発明のマルチマーに含まれるポリペプチ
ドは、本明細書中に記載されるかさもなくば当該分野で公知の融合タンパク質技
術を用いて組換え生成される（例えば、本明細書中にその全体が参考として援用
される、米国特許第５，４７８，９２５号を参照のこと）。特定の実施形態では
、本発明のホモダイマーをコードするポリヌクレオチドは、本発明のポリペプチ
ドをコードするポリヌクレオチド配列を、リンカーポリペプチドをコードする配
列に連結し、次いでさらに、元々のＣ末端からＮ末端の方向とは逆方向で、ポリ
ペプチドの翻訳産物をコードする合成ポリヌクレオチド（リーダー配列を欠く）
に連結することによって生成される（例えば、本明細書中にその全体が参考とし
て援用される、米国特許第５，４７８，９２５号を参照のこと）。別の実施形態
では、本明細書中に記載されるかさもなくば当該分野で公知の組換え技術を適用
して、膜貫通ドメイン（または疎水性ペプチドもしくはシグナルペプチド）を含
み、そして膜再構成技術によってリポソームに取り込まれ得る、本発明の組換え
ポリペプチドを生成する（例えば、本明細書中にその全体が参考として援用され
る、米国特許第５，４７８，９２５号を参照のこと）。
生成され得る。１つの実施形態では、本発明のマルチマーに含まれるポリペプチ
ドは、本明細書中に記載されるかさもなくば当該分野で公知の融合タンパク質技
術を用いて組換え生成される（例えば、本明細書中にその全体が参考として援用
される、米国特許第５，４７８，９２５号を参照のこと）。特定の実施形態では
、本発明のホモダイマーをコードするポリヌクレオチドは、本発明のポリペプチ
ドをコードするポリヌクレオチド配列を、リンカーポリペプチドをコードする配
列に連結し、次いでさらに、元々のＣ末端からＮ末端の方向とは逆方向で、ポリ
ペプチドの翻訳産物をコードする合成ポリヌクレオチド（リーダー配列を欠く）
に連結することによって生成される（例えば、本明細書中にその全体が参考とし
て援用される、米国特許第５，４７８，９２５号を参照のこと）。別の実施形態
では、本明細書中に記載されるかさもなくば当該分野で公知の組換え技術を適用
して、膜貫通ドメイン（または疎水性ペプチドもしくはシグナルペプチド）を含
み、そして膜再構成技術によってリポソームに取り込まれ得る、本発明の組換え
ポリペプチドを生成する（例えば、本明細書中にその全体が参考として援用され
る、米国特許第５，４７８，９２５号を参照のこと）。
【０１１３】
（ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２のポリペプチドおよびフラグメント）
本発明はさらに、寄託されたｃＤＮＡによってコードされるアミノ酸配列、も
しくは配列番号２のアミノ酸配列を有する、単離されたＭＥＴＨ１ポリペプチド
、または上記ポリペプチドの一部を含むペプチドもしくはポリペプチドを提供す
る。本発明はまた、寄託されたｃＤＮＡによってコードされるアミノ酸配列、も
しくは配列番号４のアミノ酸配列を有する、単離されたＭＥＴＨ２ポリペプチド
、または上記ポリペプチドの一部を含むペプチドもしくはポリペプチドを提供す
る。
しくは配列番号２のアミノ酸配列を有する、単離されたＭＥＴＨ１ポリペプチド
、または上記ポリペプチドの一部を含むペプチドもしくはポリペプチドを提供す
る。本発明はまた、寄託されたｃＤＮＡによってコードされるアミノ酸配列、も
しくは配列番号４のアミノ酸配列を有する、単離されたＭＥＴＨ２ポリペプチド
、または上記ポリペプチドの一部を含むペプチドもしくはポリペプチドを提供す
る。
【０１１４】
本発明のポリペプチドは、全長ポリペプチドのみならず、タンパク質の成熟形
態、プロタンパク質形態、プロセスされた形態、欠失変異体、置換改変体、対立
遺伝子改変体、アナログ、誘導体なども包含する。
態、プロタンパク質形態、プロセスされた形態、欠失変異体、置換改変体、対立
遺伝子改変体、アナログ、誘導体なども包含する。
【０１１５】
ＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、ペプチド結合また
は改変されたペプチド結合、すなわち、ペプチドアイソスター（ｉｓｏｓｔｅｒ
ｅ）によって互いに連結したアミノ酸から構成され得、そして遺伝子にコードさ
れる２０個のアミノ酸以外のアミノ酸を含み得る。ＭＥＴＨ１ポリペプチドまた
はＭＥＴＨ２ポリペプチドは、翻訳後プロセシングのような天然のプロセスによ
って、または当該技術分野で周知の化学修飾技術によってのいずれかで、修飾さ
れ得る。このような修飾は、基本テキスト、およびより詳細な研究論文、ならび
に多くの研究文献に十分記載される。修飾は、ペプチド骨格、アミノ酸側鎖、お
よびアミノ末端またはカルボキシル末端を含む、ＭＥＴＨ１ポリペプチドまたは
ＭＥＴＨ２ポリペプチドのどこでも生じ得る。同じ型の修飾が、所定のＭＥＴＨ
１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチド中のいくつかの部位で同じまたは
種々の程度で存在し得ることが理解される。また、所定のＭＥＴＨ１ポリペプチ
ドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチドは多くの型の修飾を含み得る。ＭＥＴＨ１ポリ
ペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、例えば、ユビキチン化の結果として
分枝状であり得、そしてこれらのポリペプチドは、分枝を含むかまたは含まない
、環状であり得る。環状、分枝状および分枝化環状ＭＥＴＨ１ポリペプチドまた
はＭＥＴＨ２ポリペプチドは、天然の翻訳後プロセスから生じ得るか、または合
成方法によって作製され得る。修飾としては、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ−
リボシル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチ
ドまたはヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質または脂質誘導体の共有結合、ホ
スファチジルイノシトール（ｐｈｏｓｐｈｏｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ）の共
有結合、架橋、環化、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、共有結合架橋の形成
、システインの形成、ピログルタミン酸の形成、ホルミル化、γ−カルボキシル
化、グリコシル化、ＧＰＩアンカー形成、水酸化、ヨウ素化、メチル化、ミリス
トイル化、酸化、ペグ化（ｐｅｇｙｌａｔｉｏｎ）、タンパク質分解プロセシン
グ、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、アルギニル化の
ようなタンパク質へのアミノ酸のトランスファーＲＮＡ媒介の付加、およびユビ
キチン化が挙げられる。（例えば、ＰＲＯＴＥＩＮＳ−ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ Ａ
ＮＤ ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳ，第２版，Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉ
ｇｈｔｏｎ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ Ｙｏ
ｒｋ（１９９３）；ＰＯＳＴＴＲＡＮＳＬＡＴＩＯＮＡＬ ＣＯＶＡＬＥＮＴ
ＭＯＤＩＦＩＣＡＴＩＯＮ ＯＦ ＰＲＯＴＥＩＮＳ，Ｂ．Ｃ． Ｊｏｈｎｓｏ
ｎ編，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１−１２頁（１９８
３）；Ｓｅｉｆｔｅｒら，Ｍｅｔｈ Ｅｎｚｙｍｏｌ １８２：６２６−６４６
（１９９０）；Ｒａｔｔａｎら，Ａｎｎ ＮＹ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ６６３：４
８−６２（１９９２）を参照のこと）。
は改変されたペプチド結合、すなわち、ペプチドアイソスター（ｉｓｏｓｔｅｒ
ｅ）によって互いに連結したアミノ酸から構成され得、そして遺伝子にコードさ
れる２０個のアミノ酸以外のアミノ酸を含み得る。ＭＥＴＨ１ポリペプチドまた
はＭＥＴＨ２ポリペプチドは、翻訳後プロセシングのような天然のプロセスによ
って、または当該技術分野で周知の化学修飾技術によってのいずれかで、修飾さ
れ得る。このような修飾は、基本テキスト、およびより詳細な研究論文、ならび
に多くの研究文献に十分記載される。修飾は、ペプチド骨格、アミノ酸側鎖、お
よびアミノ末端またはカルボキシル末端を含む、ＭＥＴＨ１ポリペプチドまたは
ＭＥＴＨ２ポリペプチドのどこでも生じ得る。同じ型の修飾が、所定のＭＥＴＨ
１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチド中のいくつかの部位で同じまたは
種々の程度で存在し得ることが理解される。また、所定のＭＥＴＨ１ポリペプチ
ドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチドは多くの型の修飾を含み得る。ＭＥＴＨ１ポリ
ペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、例えば、ユビキチン化の結果として
分枝状であり得、そしてこれらのポリペプチドは、分枝を含むかまたは含まない
、環状であり得る。環状、分枝状および分枝化環状ＭＥＴＨ１ポリペプチドまた
はＭＥＴＨ２ポリペプチドは、天然の翻訳後プロセスから生じ得るか、または合
成方法によって作製され得る。修飾としては、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ−
リボシル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチ
ドまたはヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質または脂質誘導体の共有結合、ホ
スファチジルイノシトール（ｐｈｏｓｐｈｏｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ）の共
有結合、架橋、環化、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、共有結合架橋の形成
、システインの形成、ピログルタミン酸の形成、ホルミル化、γ−カルボキシル
化、グリコシル化、ＧＰＩアンカー形成、水酸化、ヨウ素化、メチル化、ミリス
トイル化、酸化、ペグ化（ｐｅｇｙｌａｔｉｏｎ）、タンパク質分解プロセシン
グ、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、アルギニル化の
ようなタンパク質へのアミノ酸のトランスファーＲＮＡ媒介の付加、およびユビ
キチン化が挙げられる。（例えば、ＰＲＯＴＥＩＮＳ−ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ Ａ
ＮＤ ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳ，第２版，Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉ
ｇｈｔｏｎ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ Ｙｏ
ｒｋ（１９９３）；ＰＯＳＴＴＲＡＮＳＬＡＴＩＯＮＡＬ ＣＯＶＡＬＥＮＴ
ＭＯＤＩＦＩＣＡＴＩＯＮ ＯＦ ＰＲＯＴＥＩＮＳ，Ｂ．Ｃ． Ｊｏｈｎｓｏ
ｎ編，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１−１２頁（１９８
３）；Ｓｅｉｆｔｅｒら，Ｍｅｔｈ Ｅｎｚｙｍｏｌ １８２：６２６−６４６
（１９９０）；Ｒａｔｔａｎら，Ａｎｎ ＮＹ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ６６３：４
８−６２（１９９２）を参照のこと）。
【０１１６】
ＭＥＴＨ１ポリペプチドおよびＭＥＴＨ２ポリペプチドのいくつかのアミノ酸
配列が、これらのタンパク質の構造または機能に有意な影響を与えることなく、
変更され得ることが当該分野において認識される。配列におけるこのような差異
が意図される場合、タンパク質上に、活性を決定する重要な領域が存在すること
が思い出されるべきである。
配列が、これらのタンパク質の構造または機能に有意な影響を与えることなく、
変更され得ることが当該分野において認識される。配列におけるこのような差異
が意図される場合、タンパク質上に、活性を決定する重要な領域が存在すること
が思い出されるべきである。
【０１１７】
本発明者らは、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２が、インビトロおよびインビボで
新脈管形成を阻害することを示した。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２は各々、メタ
ロプロテアーゼドメイン、ジスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ドメイ
ン、およびＴＳＰ様ドメインを含む。メタロプロテアーゼドメインは、触媒的に
活性であり得る。ジスインテグリンドメインは、インテグリンと相互作用するこ
とにより新脈管形成を阻害する際に役割を果たし得る。なぜなら、インテグリン
は、増殖シグナルおよび移動シグナルの両方の媒介のために必須であるからであ
る。本発明者らは、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２のＴＳＰ様ドメインに由来する
ペプチドが、インビトロおよびインビボで新脈管形成を阻害することを示した。
新脈管形成を阻害することを示した。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２は各々、メタ
ロプロテアーゼドメイン、ジスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ドメイ
ン、およびＴＳＰ様ドメインを含む。メタロプロテアーゼドメインは、触媒的に
活性であり得る。ジスインテグリンドメインは、インテグリンと相互作用するこ
とにより新脈管形成を阻害する際に役割を果たし得る。なぜなら、インテグリン
は、増殖シグナルおよび移動シグナルの両方の媒介のために必須であるからであ
る。本発明者らは、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２のＴＳＰ様ドメインに由来する
ペプチドが、インビトロおよびインビボで新脈管形成を阻害することを示した。
【０１１８】
従って、本発明は、実質的なＭＥＴＨ１ポリペプチド活性を示すＭＥＴＨ１ポ
リペプチドの改変体、または以下で議論されるタンパク質部分のようなＭＥＴＨ
１タンパク質の領域を含むＭＥＴＨ１ポリペプチドの改変体；および実質的なＭ
ＥＴＨ２ポリペプチド活性を示すＭＥＴＨ２ポリペプチドの改変体、または以下
で議論されるタンパク質部分のようなＭＥＴＨ２タンパク質の領域を含むＭＥＴ
Ｈ１ポリペプチドの改変体をさらに含む。このような変異体は、欠失、挿入、逆
位、反復、および型置換を含む。上記のように、どのアミノ酸の変化が表現型的
にサイレントであるようであるかに関するガイダンスは、Ｂｏｗｉｅ，Ｊ．Ｕ．
ら、「Ｄｅｃｉｐｈｅｒｉｎｇ ｔｈｅ Ｍｅｓｓａｇｅ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉ
ｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ：Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｔｏ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ
Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎｓ」，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４７：１３０６−１３１０
（１９９０）において見出され得る。
リペプチドの改変体、または以下で議論されるタンパク質部分のようなＭＥＴＨ
１タンパク質の領域を含むＭＥＴＨ１ポリペプチドの改変体；および実質的なＭ
ＥＴＨ２ポリペプチド活性を示すＭＥＴＨ２ポリペプチドの改変体、または以下
で議論されるタンパク質部分のようなＭＥＴＨ２タンパク質の領域を含むＭＥＴ
Ｈ１ポリペプチドの改変体をさらに含む。このような変異体は、欠失、挿入、逆
位、反復、および型置換を含む。上記のように、どのアミノ酸の変化が表現型的
にサイレントであるようであるかに関するガイダンスは、Ｂｏｗｉｅ，Ｊ．Ｕ．
ら、「Ｄｅｃｉｐｈｅｒｉｎｇ ｔｈｅ Ｍｅｓｓａｇｅ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉ
ｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ：Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｔｏ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ
Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎｓ」，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４７：１３０６−１３１０
（１９９０）において見出され得る。
【０１１９】
従って、配列番号２または配列番号４のポリペプチドのフラグメント、誘導体
またはアナログ、あるいは寄託されたｃＤＮＡによりコードされるポリペプチド
のフラグメント、誘導体またはアナログは、（ｉ）１つ以上のアミノ酸残基が保
存的なアミノ酸残基または非保存的なアミノ酸残基（好ましくは保存的なアミノ
酸残基）で置換され、そしてこのような置換されたアミノ酸残基が遺伝コードに
よりコードされるものであってもよいしそうでなくともよいもの、あるいは（ｉ
ｉ）１つ以上のアミノ酸残基が置換基を含むもの、あるいは（ｉｉｉ）成熟ポリ
ペプチドが、ポリペプチドの半減期を増加させるための化合物（例えば、ポリエ
チレングリコール）のような別の化合物と融合したもの、あるいは（ｉｖ）さら
なるアミノ酸（例えば、ＩｇＧ Ｆｃ融合領域ペプチド配列、またはリーダー配
列もしくは分泌配列、または成熟ポリペプチドもしくはプロタンパク質配列の精
製について使用される配列）が成熟ポリペプチドと融合したものであり得る。こ
のようなフラグメント、誘導体およびアナログは、本明細書の教示より当業者の
範囲内であると考えられる。
またはアナログ、あるいは寄託されたｃＤＮＡによりコードされるポリペプチド
のフラグメント、誘導体またはアナログは、（ｉ）１つ以上のアミノ酸残基が保
存的なアミノ酸残基または非保存的なアミノ酸残基（好ましくは保存的なアミノ
酸残基）で置換され、そしてこのような置換されたアミノ酸残基が遺伝コードに
よりコードされるものであってもよいしそうでなくともよいもの、あるいは（ｉ
ｉ）１つ以上のアミノ酸残基が置換基を含むもの、あるいは（ｉｉｉ）成熟ポリ
ペプチドが、ポリペプチドの半減期を増加させるための化合物（例えば、ポリエ
チレングリコール）のような別の化合物と融合したもの、あるいは（ｉｖ）さら
なるアミノ酸（例えば、ＩｇＧ Ｆｃ融合領域ペプチド配列、またはリーダー配
列もしくは分泌配列、または成熟ポリペプチドもしくはプロタンパク質配列の精
製について使用される配列）が成熟ポリペプチドと融合したものであり得る。こ
のようなフラグメント、誘導体およびアナログは、本明細書の教示より当業者の
範囲内であると考えられる。
【０１２０】
特に興味深いのは、荷電したアミノ酸の、別の荷電したアミノ酸、および中性
のアミノ酸、または負に荷電したアミノ酸での置換である。後者は、結果として
、正の電荷が減少したタンパク質を生じてＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ
２タンパク質の特徴を改善する。凝集の防止は非常に望ましい。タンパク質の凝
集は活性を減少させるだけではなく、凝集体は免疫原性であり得ることから薬学
的処方物を調製する場合にも問題であり得る（Ｐｉｎｃｋａｒｄら、Ｃｌｉｎ．
Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２：３３１−３４０（１９６７）；Ｒｏｂｂｉｎｓら
、Ｄｉａｂｅｔｅｓ ３６：８３８−８４５（１９８７）；Ｃｌｅｌａｎｄら、
Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙ
ｓｔｅｍｓ １０：３０７−３７７（１９９３））。
のアミノ酸、または負に荷電したアミノ酸での置換である。後者は、結果として
、正の電荷が減少したタンパク質を生じてＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ
２タンパク質の特徴を改善する。凝集の防止は非常に望ましい。タンパク質の凝
集は活性を減少させるだけではなく、凝集体は免疫原性であり得ることから薬学
的処方物を調製する場合にも問題であり得る（Ｐｉｎｃｋａｒｄら、Ｃｌｉｎ．
Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２：３３１−３４０（１９６７）；Ｒｏｂｂｉｎｓら
、Ｄｉａｂｅｔｅｓ ３６：８３８−８４５（１９８７）；Ｃｌｅｌａｎｄら、
Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙ
ｓｔｅｍｓ １０：３０７−３７７（１９９３））。
【０１２１】
示されるように、タンパク質の折り畳みまたは活性に有意には影響を与えない
保存的アミノ酸置換のような、重要でない性質の変化が好ましい（表３を参照の
こと）。
保存的アミノ酸置換のような、重要でない性質の変化が好ましい（表３を参照の
こと）。
【０１２２】
【表３】
もちろん、当業者が行うアミノ酸置換の数は、多くの因子（上記の因子を含む
）に依存する。一般的に言うと、任意の所定のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリ
ペプチドについてのアミノ酸置換の数は、５０、４０、３０、２０、１０、９、
８、７、６、５、４、３、２、または１である。
）に依存する。一般的に言うと、任意の所定のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリ
ペプチドについてのアミノ酸置換の数は、５０、４０、３０、２０、１０、９、
８、７、６、５、４、３、２、または１である。
【０１２３】
詳細には、好ましいＭＥＴＨ１分子は以下の保存的置換の１つ以上を含む：Ｍ
１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｇ２（以下と置
換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ３（以下と置換された：Ｑ
）；Ａ４（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５（以
下と置換された：Ｄ）；Ｒ６（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ａ７（以下
と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ９（以下と置換された
：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ１０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ１１（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｓ
１２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ１３（以下
と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｇ１４（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ１６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ま
たはＭ）；Ｔ１８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；
Ｌ１９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２０（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２１（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２２（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ２３（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ２４（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ａ２５（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｌ２６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２７（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ２８（以下と置換
された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ２９（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ３０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ３１（以下と置換された：Ｅ）；Ａ３２（以下と置
換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３３（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３４（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３５（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｓ３
７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ３８（以下と
置換された：Ｄ）；Ｅ３９（以下と置換された：Ｄ）；Ｄ４０（以下と置換され
た：Ｅ）；Ｅ４１（以下と置換された：Ｄ）；Ｅ４２（以下と置換された：Ｄ）
；Ｌ４３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ４４（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ４５（以下と置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｅ４７（以下と置換された：Ｄ
）；Ｌ４８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ４９
（以下と置換された：Ｄ）；Ｒ５０（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ａ５
１（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５３（以下と
置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ５４（以下と置換された
：Ｋ、またはＲ）；Ｇ５５（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｔ５６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ
５７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ５８（以下
と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ５９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ６０（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ６１（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ６２（以下と置換さ
れた：Ｋ、またはＲ）；Ａ６３（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｆ６４（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｄ６５（以下と置換
された：Ｅ）；Ｑ６６（以下と置換された：Ｎ）；Ｑ６７（以下と置換された：
Ｎ）；Ｌ６８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６
９（以下と置換された：Ｅ）；Ｌ７０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｅ７１（以下と置換された：Ｄ）；Ｌ７２（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ７３（以下と置換された：Ｈ、ま
たはＫ）；Ｄ７５（以下と置換された：Ｅ）；Ｓ７６（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ７７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ７８（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｌ７９（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ８０（以下と置換
された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ８２（以下と置換された：Ａ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ８３（以下と置換された：Ｗ、またはＹ
）；Ｔ８４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ８５
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ８６（以下と置
換された：Ｎ）；Ｎ８７（以下と置換された：Ｑ）；Ｖ８８（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｇ８９（以下と置換された：Ａ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ９０（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｋ
９１（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｓ９２（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ９３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ９４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｅ９５（以下と置換された：Ｄ）；Ｔ９６（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ９８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１００（以下と置換された：Ｄ）；Ｔ１０１（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ１０２（以下と置換され
た：Ｅ）；Ｌ１０３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ａ１０４（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ１０
５（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｆ１０７（以下と置換された：Ｗ、ま
たはＹ）；Ｙ１０８（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｓ１０９（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１１０（以下と置換された
：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ１１１（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ１１２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｎ１１３（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ１１４（以下と
置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ１１５（以下と置換され
た：Ｅ）；Ｓ１１７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｓ１１８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１１
９（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１２０（以下
と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１２１（以下と置換さ
れた：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１２２（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ１２３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１２４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１２６（以下と置換された：Ｄ）；Ｇ１２７（以下と置換
された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ１２８（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｒ１２９（以下と置換された：Ｈ、また
はＫ）；Ｇ１３０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ａ１３１（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ１３２
（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｙ１３３（以下と置換された：Ｆ、また
はＷ）；Ｌ１３４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｌ１３５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１３６
（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１３７（以下と
置換された：Ｄ）；Ａ１３８（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｙ１３９（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｆ１４０（以下と置
換された：Ｗ、またはＹ）；Ｉ１４１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｑ１４２（以下と置換された：Ｎ）；Ｌ１４４（以下と置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１４６（以下と置換された：
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１４７（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ１４８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１４９（以下と置換された：Ｄ）；Ｒ１５０（以下と置
換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ１５１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ａ１５２（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｔ１５３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）
；Ａ１５４（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１５
５（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１５７（以下
と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１５８（以下と置換さ
れた：Ｄ）；Ｋ１５９（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ａ１６２（以下と
置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１６４（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ１６５（以下と置換された：Ｎ）
；Ｆ１６６（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｈ１６７（以下と置換された
：Ｋ、またはＲ）；Ｌ１６８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｌ１６９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｒ１７０（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｒ１７１（以下と置換された
：Ｈ、またはＫ）；Ｎ１７２（以下と置換された：Ｑ）；Ｒ１７３（以下と置換
された：Ｈ、またはＫ）；Ｑ１７４（以下と置換された：Ｎ）；Ｇ１７５（以下
と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ１７６（以下と置換さ
れた：Ｅ）；Ｖ１７７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ
）；Ｇ１７８（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１
７９（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ１８０（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１８２（以下と置換
された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ１８３（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ１８４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｄ１８５（以下と置換された：Ｅ）；Ｄ１８６（
以下と置換された：Ｅ）；Ｅ１８７（以下と置換された：Ｄ）；Ｒ１８９（以下
と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｔ１９１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１９２（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｋ１９３（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ａ１９４（以下
と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１９５（以下と置換さ
れた：Ｄ）；Ｔ１９６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ
）；Ｅ１９７（以下と置換された：Ｄ）；Ｄ１９８（以下と置換された：Ｅ）；
Ｅ１９９（以下と置換された：Ｄ）；Ｄ２００（以下と置換された：Ｅ）；Ｅ２
０１（以下と置換された：Ｄ）；Ｇ２０２（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ２０３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ
、またはＶ）；Ｅ２０４（以下と置換された：Ｄ）；Ｇ２０５（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ２０６（以下と置換された：Ｄ）
；Ｄ２０７（以下と置換された：Ｅ）；Ｅ２０８（以下と置換された：Ｄ）；Ｇ
２０９（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ２１１（
以下と置換された：Ｎ）；Ｗ２１２（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｓ２
１３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ２１５（以
下と置換された：Ｎ）；Ｄ２１６（以下と置換された：Ｅ）；Ａ２１８（以下と
置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２１９（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ２２０（以下と置換された：Ｎ）
；Ｇ２２１（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ２２
２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｇ２２３（以下
と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ２２４（以下と置換さ
れた：Ｎ）；Ｔ２２６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ
）；Ｇ２２７（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ２
２８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ２２９（以
下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ２３０（以下と置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ２３１（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ２３２（以下と置換された：Ｈ、また
はＫ）；Ｋ２３３（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ２３４（以下と置換
された：Ｈ、またはＲ）；Ｒ２３５（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｆ２
３６（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｖ２３７（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ２３８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ２３９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｈ２４０（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｒ２４１（以
下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｙ２４２（以下と置換された：Ｆ、またはＷ
）；Ｖ２４３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｅ２
４４（以下と置換された：Ｄ）；Ｔ２４５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ２４６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、またはＶ）；Ｌ２４７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｖ２４８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ａ
２４９（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ２５０（
以下と置換された：Ｅ）；Ｑ２５１（以下と置換された：Ｎ）；Ｓ２５２（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ２５３（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ａ２５４（以下と置換された：Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ２５５（以下と置換された：Ｄ）；Ｆ２
５６（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｈ２５７（以下と置換された：Ｋ、
またはＲ）；Ｇ２５８（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｓ２５９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ２
６０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２６１（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ２６２（以下と置換
された：Ｈ、またはＲ）；Ｈ２６３（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｙ２
６４（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｌ２６５（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２６６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ２６７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｍ、またはＶ）；Ｌ２６８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｆ２６９（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｓ２７０（以下と置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ２７１（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ａ２７２（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ２７３（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ２７４（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ２７５
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｙ２７６（以下と
置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｋ２７７（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；
Ｈ２７８（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｓ２８０（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ２８１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ２８２（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；
Ｎ２８３（以下と置換された：Ｑ）；Ｓ２８４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ２８５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、またはＭ）；Ｓ２８６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｌ２８７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｖ２８８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ２８
９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ２９０（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ２９１（以下と置換さ
れた：Ｈ、またはＲ）；Ｉ２９２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｌ２９３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｖ２９４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｉ
２９５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ２９６（
以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｄ２９７（以下と置換された：Ｅ）；Ｅ２
９８（以下と置換された：Ｄ）；Ｑ２９９（以下と置換された：Ｎ）；Ｋ３００
（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｇ３０１（以下と置換された：Ａ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ３０３（以下と置換された：Ｄ）；Ｖ３０４（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｔ３０５（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ３０６（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ３０７（以下と置換された：Ｑ）；
Ａ３０８（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ３０９
（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３１０（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ３１１（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３１２（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３１３（以下と置換された：Ｈ、またはＫ
）；Ｎ３１４（以下と置換された：Ｑ）；Ｆ３１５（以下と置換された：Ｗ、ま
たはＹ）；Ｎ３１７（以下と置換された：Ｑ）；Ｗ３１８（以下と置換された：
Ｆ、またはＹ）；Ｑ３１９（以下と置換された：Ｎ）；Ｋ３２０（以下と置換さ
れた：Ｈ、またはＲ）；Ｑ３２１（以下と置換された：Ｎ）；Ｈ３２２（以下と
置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｎ３２３（以下と置換された：Ｑ）；Ｓ３２６（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ３２７（以下と置
換された：Ｅ）；Ｒ３２８（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｄ３２９（以
下と置換された：Ｅ）；Ａ３３０（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｅ３３１（以下と置換された：Ｄ）；Ｈ３３２（以下と置換され
た：Ｋ、またはＲ）；Ｙ３３３（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｄ３３４
（以下と置換された：Ｅ）；Ｔ３３５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｍ、またはＶ）；Ａ３３６（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｉ３３７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｌ３３８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ３３
９（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｔ３４０（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３４１（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）
；Ｑ３４２（以下と置換された：Ｎ）；Ｄ３４３（以下と置換された：Ｅ）；Ｌ
３４４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３４６（
以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ３４７（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ３４８（以下と置換された
：Ｎ）；Ｔ３４９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；
Ｄ３５１（以下と置換された：Ｅ）；Ｔ３５２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３５３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３５４（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｍ３５５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）
；Ａ３５６（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ３５
７（以下と置換された：Ｅ）；Ｖ３５８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｇ３５９（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｔ３６０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ
）；Ｖ３６１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｄ３
６３（以下と置換された：Ｅ）；Ｓ３６５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３６６（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｓ３６
７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ３６９（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ３７０（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｉ３７１（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ３７２（以下と置換された：Ｄ）；Ｄ３
７３（以下と置換された：Ｅ）；Ｄ３７４（以下と置換された：Ｅ）；Ｇ３７５
（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３７６（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ３７７（以下と置換され
た：Ｎ）；Ａ３７８（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ａ３７９（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ３８
０（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｔ３８１（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ３８２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ａ３８３（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｈ３８４（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｅ３８５（以下
と置換された：Ｄ）；Ｌ３８６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｇ３８７（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｈ３８８（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｖ３８９（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｆ３９０（以下と置換された：Ｗ、
またはＹ）；Ｎ３９１（以下と置換された：Ｑ）；Ｍ３９２（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｈ３９４（以下と置換された：Ｋ、ま
たはＲ）；Ｄ３９５（以下と置換された：Ｅ）；Ｄ３９６（以下と置換された：
Ｅ）；Ａ３９７（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ
３９８（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｑ３９９（以下と置換された：Ｎ
）；Ａ４０１（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４
０２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４０３（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ４０４（以下と置換
された：Ｑ）；Ｇ４０５（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｖ４０６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｎ
４０７（以下と置換された：Ｑ）；Ｑ４０８（以下と置換された：Ｎ）；Ｄ４０
９（以下と置換された：Ｅ）；Ｓ４１０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ４１１（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｍ４１２
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｍ４１３（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ａ４１４（以下と置換され
た：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４１５（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ４１６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｌ４１７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｓ４１８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｎ４１９（以下と置換された：Ｑ）；Ｌ４２０（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４２１（以下と置換された：Ｅ）；Ｈ４
２２（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｓ４２３（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ４２４（以下と置換された：Ｎ）；Ｗ４２
６（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｓ４２７（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４３０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ４３１（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｙ４３２（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｍ４３３（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｉ４３４（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４３５（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４３６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ４３７（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｌ
４３８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４３９（
以下と置換された：Ｅ）；Ｎ４４０（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ４４１（以下
と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ４４２（以下と置換さ
れた：Ｋ、またはＲ）；Ｇ４４３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｅ４４４（以下と置換された：Ｄ）；Ｌ４４６（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ４４７（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｄ４４８（以下と置換された：Ｅ）；Ｋ４４
９（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｑ４５１（以下と置換された：Ｎ）；
Ｎ４５２（以下と置換された：Ｑ）；Ｉ４５４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ４５５（以下と置換された：Ｎ）；Ｌ４５６（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ４５８（以下と置換
された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４５９（以下と置換された：
Ｅ）；Ｌ４６０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ
４６２（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４６３（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４６４（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｙ４６５（以下と置換された
：Ｆ、またはＷ）；Ｄ４６６（以下と置換された：Ｅ）；Ａ４６７（以下と置換
された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ４６８（以下と置換された：
Ｑ）；Ｒ４６９（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｑ４７０（以下と置換さ
れた：Ｎ）；Ｑ４７２（以下と置換された：Ｎ）；Ｆ４７３（以下と置換された
：Ｗ、またはＹ）；Ｔ４７４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｆ４７５（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｇ４７６（以下と置
換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ４７７（以下と置換された
：Ｄ）；Ｄ４７８（以下と置換された：Ｅ）；Ｓ４７９（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ４８０（以下と置換された：Ｈ、または
Ｒ）；Ｈ４８１（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｄ４８４（以下と置換さ
れた：Ｅ）；Ａ４８５（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ａ４８６（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４
８７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４８８（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４９０（以下と置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４９１（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４９２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ４９３（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；
Ｔ４９５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ４９６
（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４９７（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４９８（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ４９９（以下と置換された：Ａ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５００（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ５０１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、またはＭ）；Ｌ５０２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｖ５０３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；
Ｑ５０５（以下と置換された：Ｎ）；Ｔ５０６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ５０７（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｈ
５０８（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｆ５０９（以下と置換された：Ｗ
、またはＹ）；Ｗ５１１（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ａ５１２（以下
と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ５１３（以下と置換さ
れた：Ｅ）；Ｇ５１４（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｔ５１５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ５
１６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５１８（以
下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５１９（以下と置換
された：Ｄ）；Ｇ５２０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｋ５２１（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｗ５２２（以下と置換さ
れた：Ｆ、またはＹ）；Ｉ５２４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｎ５２５（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ５２６（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ５２７（以下と置換された：Ｈ、
またはＲ）；Ｖ５２９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ
）；Ｎ５３０（以下と置換された：Ｑ）；Ｋ５３１（以下と置換された：Ｈ、ま
たはＲ）；Ｔ５３２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）
；Ｄ５３３（以下と置換された：Ｅ）；Ｒ５３４（以下と置換された：Ｈ、また
はＫ）；Ｋ５３５（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｈ５３６（以下と置換
された：Ｋ、またはＲ）；Ｆ５３７（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｄ５
３８（以下と置換された：Ｅ）；Ｔ５３９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ５４１（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｈ５４
２（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｇ５４３（以下と置換された：Ａ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ５４４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ５４５（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｇ５４
６（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ５４７（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｗ５４８（以下と置換さ
れた：Ｆ、またはＹ）；Ｇ５４９（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｗ５５１（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｇ５５２（以下
と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ５５３（以下と置換さ
れた：Ｅ）；Ｓ５５５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｒ５５６（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｔ５５７（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５５９（以下と置換された：Ａ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５６０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５６１（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｖ５６２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、また
はＭ）；Ｑ５６３（以下と置換された：Ｎ）；Ｙ５６４（以下と置換された：Ｆ
、またはＷ）；Ｔ５６５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｍ５６６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｒ
５６７（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｅ５６８（以下と置換された：Ｄ
）；Ｄ５７０（以下と置換された：Ｅ）；Ｎ５７１（以下と置換された：Ｑ）；
Ｖ５７３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ５７５
（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｎ５７６（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ
５７７（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５７８（
以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ５７９（以下と置
換された：Ｈ、またはＲ）；Ｙ５８０（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｅ
５８２（以下と置換された：Ｄ）；Ｇ５８３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ５８４（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｒ５
８５（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｖ５８６（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｒ５８７（以下と置換された：Ｈ、またはＫ
）；Ｙ５８８（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｒ５８９（以下と置換され
た：Ｈ、またはＫ）；Ｓ５９０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｎ５９２（以下と置換された：Ｑ）；Ｌ５９３（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５９４（以下と置換された：Ｄ）；
Ｄ５９５（以下と置換された：Ｅ）；Ｄ５９８（以下と置換された：Ｅ）；Ｎ５
９９（以下と置換された：Ｑ）；Ｎ６００（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ６０１
（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６０２（以下と
置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｔ６０３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ６０４（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｒ６０５
（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｅ６０６（以下と置換された：Ｄ）；Ｅ
６０７（以下と置換された：Ｄ）；Ｑ６０８（以下と置換された：Ｎ）；Ｅ６１
０（以下と置換された：Ｄ）；Ａ６１１（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ６１２（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｎ６１３
（以下と置換された：Ｑ）；Ｅ６１４（以下と置換された：Ｄ）；Ｆ６１５（以
下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｓ６１６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６１７（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ａ６
１８（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ６１９（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ６２０（以下と置換
された：Ｗ、またはＹ）；Ｇ６２１（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｓ６２２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｇ６２３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ａ６２５（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ６２６
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｅ６２７（以下と
置換された：Ｄ）；Ｗ６２８（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｉ６２９（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６３１（以下と置
換された：Ｈ、またはＲ）；Ｙ６３２（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ａ
６３３（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ６３４（
以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ６３５（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ６３６（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６３８（以下と置換された：Ｈ、ま
たはＲ）；Ｄ６３９（以下と置換された：Ｅ）；Ｒ６４０（以下と置換された：
Ｈ、またはＫ）；Ｋ６４２（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｌ６４３（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ６４４（以下と置換
された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ６４６（以下と置換された：
Ｎ）；Ａ６４７（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ
６４８（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｇ６４９（以下と置換された：Ａ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ６５０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ６５１（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｙ６５２（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｆ６５３（
以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｆ６５４（以下と置換された：Ｗ、または
Ｙ）；Ｖ６５５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ
６５６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ６５７（
以下と置換された：Ｎ）；Ｋ６５９（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｖ６
６０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ６６１（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｄ６６２（以下と置換
された：Ｅ）；Ｇ６６３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｔ６６４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ
６６７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６６９（
以下と置換された：Ｅ）；Ｓ６７０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｔ６７１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、また
はＶ）；Ｓ６７２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｖ６７３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ６７５
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｑ６７６（以下と
置換された：Ｎ）；Ｇ６７７（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｑ６７８（以下と置換された：Ｎ）；Ｖ６８０（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ６８１（以下と置換された：Ｈ、また
はＲ）；Ａ６８２（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｇ６８３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６８５
（以下と置換された：Ｅ）；Ｒ６８６（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｉ
６８７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ６８８（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６８９（以下と置
換された：Ｅ）；Ｓ６９０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｋ６９１（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ６９２（以下と置換
された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ６９３（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｆ６
９４（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｄ６９５（以下と置換された：Ｅ）
；Ｋ６９６（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｇ６９８（以下と置換された
：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ６９９（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｇ７０１（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ７０２（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｎ７０３（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ７０４（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ７０５（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ７０６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ７０８（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ７
０９（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｉ７１０（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ７１１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ７１２（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｓ７１３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｖ７１４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；
Ｔ７１５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ７１６
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ７１７（以下と
置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ７１８（以下と置換され
た：Ｈ、またはＲ）；Ｇ７２０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｙ７２１（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｈ７２２（以下と
置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｄ７２３（以下と置換された：Ｅ）；Ｉ７２４（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ７２５（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ７２６（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ７２７（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ７２９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ７３０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ａ７３１（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｔ７３２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ
７３３（以下と置換された：Ｑ）；Ｉ７３４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ７３５（以下と置換された：Ｄ）；Ｖ７３６（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ７３７（以下と置換さ
れた：Ｈ、またはＲ）；Ｑ７３８（以下と置換された：Ｎ）；Ｒ７３９（以下と
置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｎ７４０（以下と置換された：Ｑ）；Ｑ７４１（
以下と置換された：Ｎ）；Ｒ７４２（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ７
４３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ７４４（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ７４５（以下と置換
された：Ｈ、またはＫ）；Ｎ７４６（以下と置換された：Ｑ）；Ｎ７４７（以下
と置換された：Ｑ）；Ｇ７４８（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｓ７４９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｆ７５０（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｌ７５１（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ７５２（以下と置換された：Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ７５３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ７５４（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ａ７
５５（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ７５６（以
下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ７５７（以下と置換
された：Ｅ）；Ｇ７５８（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｔ７５９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｙ
７６０（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｉ７６１（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ７６２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ７６３（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ７６４（以
下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ７６５（以下と置換
された：Ｅ）；Ｙ７６６（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｔ７６７（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ７６８（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ７６９（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ７７０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ７７１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｅ７７２（以下と置換された：Ｄ）；Ｑ７７３（以下と置換
された：Ｎ）；Ｄ７７４（以下と置換された：Ｅ）；Ｉ７７５（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ７７６（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｙ７７７（以下と置換された：Ｆ、またはＷ
）；Ｋ７７８（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｇ７７９（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ７８０（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ７８１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ７８２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｒ７８３（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｙ７８４（以
下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｓ７８５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ７８６（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｓ７８７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｓ７８８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ａ７８９（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ７９０
（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ７９１（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ７９２（以下と置換され
た：Ｄ）；Ｒ７９３（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｉ７９４（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ７９５（以下と置換された
：Ｈ、またはＫ）；Ｓ７９６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｆ７９７（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｓ７９８（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ８００（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ８０１（以下と置換された：Ｈ、ま
たはＲ）；Ｅ８０２（以下と置換された：Ｄ）；Ｌ８０４（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ８０５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ８０６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ８０７（以下と置換された：Ｎ）；Ｖ８０８（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ８０９（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ８１０（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ８１１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｇ８１２（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｎ８１３（以下と置換された：Ｑ）；Ａ８１４（以下と置換され
た：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ８１５（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ８１６（以下と置換された：Ｈ、またはＫ
）；Ｋ８１８（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｉ８１９（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ８２０（以下と置換された：Ｈ、
またはＲ）；Ｙ８２１（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｔ８２２（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｙ８２３（以下と置換され
た：Ｆ、またはＷ）；Ｆ８２４（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｖ８２５
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ８２６（以下と
置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ８２７（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；
Ｋ８２８（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ８２９（以下と置換された：
Ｈ、またはＲ）；Ｅ８３０（以下と置換された：Ｄ）；Ｓ８３１（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ８３２（以下と置換された：Ｗ
、またはＹ）；Ｎ８３３（以下と置換された：Ｑ）；Ａ８３４（以下と置換され
た：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ８３５（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ８３７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ８３８（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｓ８
３９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ８４０（以
下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ８４１（以下と置換
された：Ｆ、またはＹ）；Ｖ８４２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、またはＭ）；Ｉ８４３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｅ８４４（以下と置換された：Ｄ）；Ｅ８４５（以下と置換された：Ｄ
）；Ｗ８４６（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｇ８４７（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ８４８（以下と置換された：Ｄ）
；Ｓ８５０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ８５
１（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｓ８５２（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ８５４（以下と置換された：Ｄ）；Ｌ８５５
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ８５６（以下と
置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ８５７（以下と置換され
た：Ｆ、またはＹ）；Ｑ８５８（以下と置換された：Ｎ）；Ｒ８５９（以下と置
換された：Ｈ、またはＫ）；Ｒ８６０（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ
８６１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ８６２（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｅ８６３（以下と置
換された：Ｄ）；Ｒ８６５（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｄ８６６（以
下と置換された：Ｅ）；Ｉ８６７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｎ８６８（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ８６９（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ８７０（以下と置換された：Ｎ）
；Ａ８７２（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ８７
３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ８７４（以下
と置換された：Ｄ）；Ａ８７６（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｋ８７７（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｅ８７８（以下と
置換された：Ｄ）；Ｖ８７９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ま
たはＭ）；Ｋ８８０（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ａ８８２（以下と置
換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ８８３（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ８８４（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ８８５（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）
；Ａ８８８（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ８８
９（以下と置換された：Ｅ）；Ｈ８９０（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；
Ｑ８９４（以下と置換された：Ｎ）；Ｗ８９５（以下と置換された：Ｆ、または
Ｙ）；Ｑ８９６（以下と置換された：Ｎ）；Ｌ８９７（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ８９８（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ８９９（以下と置換された：Ｄ）；Ｗ９００（以下
と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｓ９０１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ９０２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｓ９０４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｋ９０５（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｔ９０６（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ９０８（以下と置換された：Ａ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ９０９（以下と置換された：Ｈ、または
Ｒ）；Ｇ９１０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｙ
９１１（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｋ９１２（以下と置換された：Ｈ
、またはＲ）；Ｋ９１３（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｒ９１４（以下
と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｓ９１５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ９１６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｋ９１７（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｌ９１９（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ９２０（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ９２１（以下と置換された：Ｋ
、またはＲ）；Ｄ９２２（以下と置換された：Ｅ）；Ｇ９２３（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ９２４（以下と置換された：Ａ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ９２５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ９２６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｓ９２７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｈ９２８（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｅ９２９（以下と置換
された：Ｄ）；Ｓ９３０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｄ９３２（以下と置換された：Ｅ）；Ｌ９３４（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ９３５（以下と置換された：Ｈ、またはＲ
）；Ｋ９３６（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ９３８（以下と置換され
た：Ｈ、またはＲ）；Ｈ９３９（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｆ９４０
（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｉ９４１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ９４２（以下と置換された：Ｅ）；Ｆ９４３（
以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｔ９４５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ９４６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、またはＶ）；Ａ９４７（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｅ９４８（以下と置換された：Ｄ）；Ｓ９５０（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）。
１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｇ２（以下と置
換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ３（以下と置換された：Ｑ
）；Ａ４（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５（以
下と置換された：Ｄ）；Ｒ６（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ａ７（以下
と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ９（以下と置換された
：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ１０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ１１（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｓ
１２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ１３（以下
と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｇ１４（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ１６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ま
たはＭ）；Ｔ１８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；
Ｌ１９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２０（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２１（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２２（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ２３（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ２４（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ａ２５（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｌ２６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２７（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ２８（以下と置換
された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ２９（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ３０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ３１（以下と置換された：Ｅ）；Ａ３２（以下と置
換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３３（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３４（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３５（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｓ３
７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ３８（以下と
置換された：Ｄ）；Ｅ３９（以下と置換された：Ｄ）；Ｄ４０（以下と置換され
た：Ｅ）；Ｅ４１（以下と置換された：Ｄ）；Ｅ４２（以下と置換された：Ｄ）
；Ｌ４３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ４４（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ４５（以下と置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｅ４７（以下と置換された：Ｄ
）；Ｌ４８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ４９
（以下と置換された：Ｄ）；Ｒ５０（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ａ５
１（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５３（以下と
置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ５４（以下と置換された
：Ｋ、またはＲ）；Ｇ５５（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｔ５６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ
５７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ５８（以下
と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ５９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ６０（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ６１（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ６２（以下と置換さ
れた：Ｋ、またはＲ）；Ａ６３（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｆ６４（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｄ６５（以下と置換
された：Ｅ）；Ｑ６６（以下と置換された：Ｎ）；Ｑ６７（以下と置換された：
Ｎ）；Ｌ６８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６
９（以下と置換された：Ｅ）；Ｌ７０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｅ７１（以下と置換された：Ｄ）；Ｌ７２（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ７３（以下と置換された：Ｈ、ま
たはＫ）；Ｄ７５（以下と置換された：Ｅ）；Ｓ７６（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ７７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ７８（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｌ７９（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ８０（以下と置換
された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ８２（以下と置換された：Ａ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ８３（以下と置換された：Ｗ、またはＹ
）；Ｔ８４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ８５
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ８６（以下と置
換された：Ｎ）；Ｎ８７（以下と置換された：Ｑ）；Ｖ８８（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｇ８９（以下と置換された：Ａ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ９０（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｋ
９１（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｓ９２（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ９３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ９４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｅ９５（以下と置換された：Ｄ）；Ｔ９６（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ９８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１００（以下と置換された：Ｄ）；Ｔ１０１（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ１０２（以下と置換され
た：Ｅ）；Ｌ１０３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ａ１０４（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ１０
５（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｆ１０７（以下と置換された：Ｗ、ま
たはＹ）；Ｙ１０８（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｓ１０９（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１１０（以下と置換された
：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ１１１（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ１１２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｎ１１３（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ１１４（以下と
置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ１１５（以下と置換され
た：Ｅ）；Ｓ１１７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｓ１１８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１１
９（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１２０（以下
と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１２１（以下と置換さ
れた：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１２２（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ１２３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１２４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１２６（以下と置換された：Ｄ）；Ｇ１２７（以下と置換
された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ１２８（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｒ１２９（以下と置換された：Ｈ、また
はＫ）；Ｇ１３０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ａ１３１（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ１３２
（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｙ１３３（以下と置換された：Ｆ、また
はＷ）；Ｌ１３４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｌ１３５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１３６
（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１３７（以下と
置換された：Ｄ）；Ａ１３８（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｙ１３９（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｆ１４０（以下と置
換された：Ｗ、またはＹ）；Ｉ１４１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｑ１４２（以下と置換された：Ｎ）；Ｌ１４４（以下と置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１４６（以下と置換された：
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１４７（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ１４８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１４９（以下と置換された：Ｄ）；Ｒ１５０（以下と置
換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ１５１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ａ１５２（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｔ１５３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）
；Ａ１５４（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１５
５（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１５７（以下
と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１５８（以下と置換さ
れた：Ｄ）；Ｋ１５９（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ａ１６２（以下と
置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１６４（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ１６５（以下と置換された：Ｎ）
；Ｆ１６６（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｈ１６７（以下と置換された
：Ｋ、またはＲ）；Ｌ１６８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｌ１６９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｒ１７０（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｒ１７１（以下と置換された
：Ｈ、またはＫ）；Ｎ１７２（以下と置換された：Ｑ）；Ｒ１７３（以下と置換
された：Ｈ、またはＫ）；Ｑ１７４（以下と置換された：Ｎ）；Ｇ１７５（以下
と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ１７６（以下と置換さ
れた：Ｅ）；Ｖ１７７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ
）；Ｇ１７８（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１
７９（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ１８０（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１８２（以下と置換
された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ１８３（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ１８４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｄ１８５（以下と置換された：Ｅ）；Ｄ１８６（
以下と置換された：Ｅ）；Ｅ１８７（以下と置換された：Ｄ）；Ｒ１８９（以下
と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｔ１９１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１９２（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｋ１９３（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ａ１９４（以下
と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１９５（以下と置換さ
れた：Ｄ）；Ｔ１９６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ
）；Ｅ１９７（以下と置換された：Ｄ）；Ｄ１９８（以下と置換された：Ｅ）；
Ｅ１９９（以下と置換された：Ｄ）；Ｄ２００（以下と置換された：Ｅ）；Ｅ２
０１（以下と置換された：Ｄ）；Ｇ２０２（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ２０３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ
、またはＶ）；Ｅ２０４（以下と置換された：Ｄ）；Ｇ２０５（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ２０６（以下と置換された：Ｄ）
；Ｄ２０７（以下と置換された：Ｅ）；Ｅ２０８（以下と置換された：Ｄ）；Ｇ
２０９（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ２１１（
以下と置換された：Ｎ）；Ｗ２１２（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｓ２
１３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ２１５（以
下と置換された：Ｎ）；Ｄ２１６（以下と置換された：Ｅ）；Ａ２１８（以下と
置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２１９（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ２２０（以下と置換された：Ｎ）
；Ｇ２２１（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ２２
２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｇ２２３（以下
と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ２２４（以下と置換さ
れた：Ｎ）；Ｔ２２６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ
）；Ｇ２２７（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ２
２８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ２２９（以
下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ２３０（以下と置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ２３１（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ２３２（以下と置換された：Ｈ、また
はＫ）；Ｋ２３３（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ２３４（以下と置換
された：Ｈ、またはＲ）；Ｒ２３５（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｆ２
３６（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｖ２３７（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ２３８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ２３９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｈ２４０（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｒ２４１（以
下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｙ２４２（以下と置換された：Ｆ、またはＷ
）；Ｖ２４３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｅ２
４４（以下と置換された：Ｄ）；Ｔ２４５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ２４６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、またはＶ）；Ｌ２４７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｖ２４８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ａ
２４９（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ２５０（
以下と置換された：Ｅ）；Ｑ２５１（以下と置換された：Ｎ）；Ｓ２５２（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ２５３（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ａ２５４（以下と置換された：Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ２５５（以下と置換された：Ｄ）；Ｆ２
５６（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｈ２５７（以下と置換された：Ｋ、
またはＲ）；Ｇ２５８（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｓ２５９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ２
６０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２６１（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ２６２（以下と置換
された：Ｈ、またはＲ）；Ｈ２６３（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｙ２
６４（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｌ２６５（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２６６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ２６７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｍ、またはＶ）；Ｌ２６８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｆ２６９（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｓ２７０（以下と置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ２７１（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ａ２７２（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ２７３（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ２７４（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ２７５
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｙ２７６（以下と
置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｋ２７７（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；
Ｈ２７８（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｓ２８０（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ２８１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ２８２（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；
Ｎ２８３（以下と置換された：Ｑ）；Ｓ２８４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ２８５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、またはＭ）；Ｓ２８６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｌ２８７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｖ２８８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ２８
９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ２９０（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ２９１（以下と置換さ
れた：Ｈ、またはＲ）；Ｉ２９２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｌ２９３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｖ２９４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｉ
２９５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ２９６（
以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｄ２９７（以下と置換された：Ｅ）；Ｅ２
９８（以下と置換された：Ｄ）；Ｑ２９９（以下と置換された：Ｎ）；Ｋ３００
（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｇ３０１（以下と置換された：Ａ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ３０３（以下と置換された：Ｄ）；Ｖ３０４（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｔ３０５（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ３０６（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ３０７（以下と置換された：Ｑ）；
Ａ３０８（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ３０９
（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３１０（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ３１１（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３１２（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３１３（以下と置換された：Ｈ、またはＫ
）；Ｎ３１４（以下と置換された：Ｑ）；Ｆ３１５（以下と置換された：Ｗ、ま
たはＹ）；Ｎ３１７（以下と置換された：Ｑ）；Ｗ３１８（以下と置換された：
Ｆ、またはＹ）；Ｑ３１９（以下と置換された：Ｎ）；Ｋ３２０（以下と置換さ
れた：Ｈ、またはＲ）；Ｑ３２１（以下と置換された：Ｎ）；Ｈ３２２（以下と
置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｎ３２３（以下と置換された：Ｑ）；Ｓ３２６（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ３２７（以下と置
換された：Ｅ）；Ｒ３２８（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｄ３２９（以
下と置換された：Ｅ）；Ａ３３０（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｅ３３１（以下と置換された：Ｄ）；Ｈ３３２（以下と置換され
た：Ｋ、またはＲ）；Ｙ３３３（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｄ３３４
（以下と置換された：Ｅ）；Ｔ３３５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｍ、またはＶ）；Ａ３３６（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｉ３３７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｌ３３８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ３３
９（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｔ３４０（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３４１（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）
；Ｑ３４２（以下と置換された：Ｎ）；Ｄ３４３（以下と置換された：Ｅ）；Ｌ
３４４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３４６（
以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ３４７（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ３４８（以下と置換された
：Ｎ）；Ｔ３４９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；
Ｄ３５１（以下と置換された：Ｅ）；Ｔ３５２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３５３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３５４（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｍ３５５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）
；Ａ３５６（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ３５
７（以下と置換された：Ｅ）；Ｖ３５８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｇ３５９（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｔ３６０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ
）；Ｖ３６１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｄ３
６３（以下と置換された：Ｅ）；Ｓ３６５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３６６（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｓ３６
７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ３６９（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ３７０（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｉ３７１（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ３７２（以下と置換された：Ｄ）；Ｄ３
７３（以下と置換された：Ｅ）；Ｄ３７４（以下と置換された：Ｅ）；Ｇ３７５
（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３７６（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ３７７（以下と置換され
た：Ｎ）；Ａ３７８（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ａ３７９（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ３８
０（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｔ３８１（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ３８２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ａ３８３（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｈ３８４（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｅ３８５（以下
と置換された：Ｄ）；Ｌ３８６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｇ３８７（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｈ３８８（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｖ３８９（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｆ３９０（以下と置換された：Ｗ、
またはＹ）；Ｎ３９１（以下と置換された：Ｑ）；Ｍ３９２（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｈ３９４（以下と置換された：Ｋ、ま
たはＲ）；Ｄ３９５（以下と置換された：Ｅ）；Ｄ３９６（以下と置換された：
Ｅ）；Ａ３９７（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ
３９８（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｑ３９９（以下と置換された：Ｎ
）；Ａ４０１（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４
０２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４０３（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ４０４（以下と置換
された：Ｑ）；Ｇ４０５（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｖ４０６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｎ
４０７（以下と置換された：Ｑ）；Ｑ４０８（以下と置換された：Ｎ）；Ｄ４０
９（以下と置換された：Ｅ）；Ｓ４１０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ４１１（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｍ４１２
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｍ４１３（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ａ４１４（以下と置換され
た：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４１５（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ４１６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｌ４１７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｓ４１８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｎ４１９（以下と置換された：Ｑ）；Ｌ４２０（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４２１（以下と置換された：Ｅ）；Ｈ４
２２（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｓ４２３（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ４２４（以下と置換された：Ｎ）；Ｗ４２
６（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｓ４２７（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４３０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ４３１（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｙ４３２（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｍ４３３（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｉ４３４（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４３５（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４３６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ４３７（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｌ
４３８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４３９（
以下と置換された：Ｅ）；Ｎ４４０（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ４４１（以下
と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ４４２（以下と置換さ
れた：Ｋ、またはＲ）；Ｇ４４３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｅ４４４（以下と置換された：Ｄ）；Ｌ４４６（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ４４７（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｄ４４８（以下と置換された：Ｅ）；Ｋ４４
９（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｑ４５１（以下と置換された：Ｎ）；
Ｎ４５２（以下と置換された：Ｑ）；Ｉ４５４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ４５５（以下と置換された：Ｎ）；Ｌ４５６（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ４５８（以下と置換
された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４５９（以下と置換された：
Ｅ）；Ｌ４６０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ
４６２（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４６３（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４６４（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｙ４６５（以下と置換された
：Ｆ、またはＷ）；Ｄ４６６（以下と置換された：Ｅ）；Ａ４６７（以下と置換
された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ４６８（以下と置換された：
Ｑ）；Ｒ４６９（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｑ４７０（以下と置換さ
れた：Ｎ）；Ｑ４７２（以下と置換された：Ｎ）；Ｆ４７３（以下と置換された
：Ｗ、またはＹ）；Ｔ４７４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｆ４７５（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｇ４７６（以下と置
換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ４７７（以下と置換された
：Ｄ）；Ｄ４７８（以下と置換された：Ｅ）；Ｓ４７９（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ４８０（以下と置換された：Ｈ、または
Ｒ）；Ｈ４８１（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｄ４８４（以下と置換さ
れた：Ｅ）；Ａ４８５（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ａ４８６（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４
８７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４８８（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４９０（以下と置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４９１（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４９２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ４９３（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；
Ｔ４９５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ４９６
（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４９７（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４９８（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ４９９（以下と置換された：Ａ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５００（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ５０１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、またはＭ）；Ｌ５０２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｖ５０３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；
Ｑ５０５（以下と置換された：Ｎ）；Ｔ５０６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ５０７（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｈ
５０８（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｆ５０９（以下と置換された：Ｗ
、またはＹ）；Ｗ５１１（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ａ５１２（以下
と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ５１３（以下と置換さ
れた：Ｅ）；Ｇ５１４（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｔ５１５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ５
１６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５１８（以
下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５１９（以下と置換
された：Ｄ）；Ｇ５２０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｋ５２１（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｗ５２２（以下と置換さ
れた：Ｆ、またはＹ）；Ｉ５２４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｎ５２５（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ５２６（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ５２７（以下と置換された：Ｈ、
またはＲ）；Ｖ５２９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ
）；Ｎ５３０（以下と置換された：Ｑ）；Ｋ５３１（以下と置換された：Ｈ、ま
たはＲ）；Ｔ５３２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）
；Ｄ５３３（以下と置換された：Ｅ）；Ｒ５３４（以下と置換された：Ｈ、また
はＫ）；Ｋ５３５（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｈ５３６（以下と置換
された：Ｋ、またはＲ）；Ｆ５３７（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｄ５
３８（以下と置換された：Ｅ）；Ｔ５３９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ５４１（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｈ５４
２（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｇ５４３（以下と置換された：Ａ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ５４４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ５４５（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｇ５４
６（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ５４７（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｗ５４８（以下と置換さ
れた：Ｆ、またはＹ）；Ｇ５４９（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｗ５５１（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｇ５５２（以下
と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ５５３（以下と置換さ
れた：Ｅ）；Ｓ５５５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｒ５５６（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｔ５５７（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５５９（以下と置換された：Ａ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５６０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５６１（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｖ５６２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、また
はＭ）；Ｑ５６３（以下と置換された：Ｎ）；Ｙ５６４（以下と置換された：Ｆ
、またはＷ）；Ｔ５６５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｍ５６６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｒ
５６７（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｅ５６８（以下と置換された：Ｄ
）；Ｄ５７０（以下と置換された：Ｅ）；Ｎ５７１（以下と置換された：Ｑ）；
Ｖ５７３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ５７５
（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｎ５７６（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ
５７７（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５７８（
以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ５７９（以下と置
換された：Ｈ、またはＲ）；Ｙ５８０（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｅ
５８２（以下と置換された：Ｄ）；Ｇ５８３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ５８４（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｒ５
８５（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｖ５８６（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｒ５８７（以下と置換された：Ｈ、またはＫ
）；Ｙ５８８（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｒ５８９（以下と置換され
た：Ｈ、またはＫ）；Ｓ５９０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｎ５９２（以下と置換された：Ｑ）；Ｌ５９３（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５９４（以下と置換された：Ｄ）；
Ｄ５９５（以下と置換された：Ｅ）；Ｄ５９８（以下と置換された：Ｅ）；Ｎ５
９９（以下と置換された：Ｑ）；Ｎ６００（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ６０１
（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６０２（以下と
置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｔ６０３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ６０４（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｒ６０５
（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｅ６０６（以下と置換された：Ｄ）；Ｅ
６０７（以下と置換された：Ｄ）；Ｑ６０８（以下と置換された：Ｎ）；Ｅ６１
０（以下と置換された：Ｄ）；Ａ６１１（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ６１２（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｎ６１３
（以下と置換された：Ｑ）；Ｅ６１４（以下と置換された：Ｄ）；Ｆ６１５（以
下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｓ６１６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６１７（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ａ６
１８（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ６１９（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ６２０（以下と置換
された：Ｗ、またはＹ）；Ｇ６２１（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｓ６２２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｇ６２３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ａ６２５（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ６２６
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｅ６２７（以下と
置換された：Ｄ）；Ｗ６２８（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｉ６２９（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６３１（以下と置
換された：Ｈ、またはＲ）；Ｙ６３２（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ａ
６３３（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ６３４（
以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ６３５（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ６３６（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６３８（以下と置換された：Ｈ、ま
たはＲ）；Ｄ６３９（以下と置換された：Ｅ）；Ｒ６４０（以下と置換された：
Ｈ、またはＫ）；Ｋ６４２（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｌ６４３（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ６４４（以下と置換
された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ６４６（以下と置換された：
Ｎ）；Ａ６４７（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ
６４８（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｇ６４９（以下と置換された：Ａ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ６５０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ６５１（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｙ６５２（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｆ６５３（
以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｆ６５４（以下と置換された：Ｗ、または
Ｙ）；Ｖ６５５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ
６５６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ６５７（
以下と置換された：Ｎ）；Ｋ６５９（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｖ６
６０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ６６１（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｄ６６２（以下と置換
された：Ｅ）；Ｇ６６３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｔ６６４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ
６６７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６６９（
以下と置換された：Ｅ）；Ｓ６７０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｔ６７１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、また
はＶ）；Ｓ６７２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｖ６７３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ６７５
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｑ６７６（以下と
置換された：Ｎ）；Ｇ６７７（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｑ６７８（以下と置換された：Ｎ）；Ｖ６８０（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ６８１（以下と置換された：Ｈ、また
はＲ）；Ａ６８２（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｇ６８３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６８５
（以下と置換された：Ｅ）；Ｒ６８６（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｉ
６８７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ６８８（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６８９（以下と置
換された：Ｅ）；Ｓ６９０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｋ６９１（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ６９２（以下と置換
された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ６９３（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｆ６
９４（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｄ６９５（以下と置換された：Ｅ）
；Ｋ６９６（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｇ６９８（以下と置換された
：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ６９９（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｇ７０１（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ７０２（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｎ７０３（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ７０４（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ７０５（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ７０６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ７０８（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ７
０９（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｉ７１０（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ７１１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ７１２（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｓ７１３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｖ７１４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；
Ｔ７１５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ７１６
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ７１７（以下と
置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ７１８（以下と置換され
た：Ｈ、またはＲ）；Ｇ７２０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｙ７２１（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｈ７２２（以下と
置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｄ７２３（以下と置換された：Ｅ）；Ｉ７２４（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ７２５（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ７２６（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ７２７（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ７２９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ７３０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ａ７３１（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｔ７３２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ
７３３（以下と置換された：Ｑ）；Ｉ７３４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ７３５（以下と置換された：Ｄ）；Ｖ７３６（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ７３７（以下と置換さ
れた：Ｈ、またはＲ）；Ｑ７３８（以下と置換された：Ｎ）；Ｒ７３９（以下と
置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｎ７４０（以下と置換された：Ｑ）；Ｑ７４１（
以下と置換された：Ｎ）；Ｒ７４２（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ７
４３（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ７４４（以
下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ７４５（以下と置換
された：Ｈ、またはＫ）；Ｎ７４６（以下と置換された：Ｑ）；Ｎ７４７（以下
と置換された：Ｑ）；Ｇ７４８（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｓ７４９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｆ７５０（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｌ７５１（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ７５２（以下と置換された：Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ７５３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ７５４（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ａ７
５５（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ７５６（以
下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ７５７（以下と置換
された：Ｅ）；Ｇ７５８（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｔ７５９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｙ
７６０（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｉ７６１（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ７６２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ７６３（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ７６４（以
下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ７６５（以下と置換
された：Ｅ）；Ｙ７６６（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｔ７６７（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ７６８（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ７６９（以下と置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ７７０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ７７１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｅ７７２（以下と置換された：Ｄ）；Ｑ７７３（以下と置換
された：Ｎ）；Ｄ７７４（以下と置換された：Ｅ）；Ｉ７７５（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ７７６（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｙ７７７（以下と置換された：Ｆ、またはＷ
）；Ｋ７７８（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｇ７７９（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ７８０（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ７８１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ７８２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｒ７８３（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｙ７８４（以
下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｓ７８５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ７８６（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｓ７８７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｓ７８８（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ａ７８９（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ７９０
（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ７９１（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ７９２（以下と置換され
た：Ｄ）；Ｒ７９３（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｉ７９４（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ７９５（以下と置換された
：Ｈ、またはＫ）；Ｓ７９６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｆ７９７（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｓ７９８（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ８００（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ８０１（以下と置換された：Ｈ、ま
たはＲ）；Ｅ８０２（以下と置換された：Ｄ）；Ｌ８０４（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ８０５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ８０６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ８０７（以下と置換された：Ｎ）；Ｖ８０８（以下と置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ８０９（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ８１０（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ８１１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｇ８１２（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｎ８１３（以下と置換された：Ｑ）；Ａ８１４（以下と置換され
た：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ８１５（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ８１６（以下と置換された：Ｈ、またはＫ
）；Ｋ８１８（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｉ８１９（以下と置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ８２０（以下と置換された：Ｈ、
またはＲ）；Ｙ８２１（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｔ８２２（以下と
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｙ８２３（以下と置換され
た：Ｆ、またはＷ）；Ｆ８２４（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｖ８２５
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ８２６（以下と
置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ８２７（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；
Ｋ８２８（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ８２９（以下と置換された：
Ｈ、またはＲ）；Ｅ８３０（以下と置換された：Ｄ）；Ｓ８３１（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ８３２（以下と置換された：Ｗ
、またはＹ）；Ｎ８３３（以下と置換された：Ｑ）；Ａ８３４（以下と置換され
た：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ８３５（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ８３７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ８３８（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｓ８
３９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ８４０（以
下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ８４１（以下と置換
された：Ｆ、またはＹ）；Ｖ８４２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、またはＭ）；Ｉ８４３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｅ８４４（以下と置換された：Ｄ）；Ｅ８４５（以下と置換された：Ｄ
）；Ｗ８４６（以下と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｇ８４７（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ８４８（以下と置換された：Ｄ）
；Ｓ８５０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ８５
１（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｓ８５２（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ８５４（以下と置換された：Ｄ）；Ｌ８５５
（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ８５６（以下と
置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ８５７（以下と置換され
た：Ｆ、またはＹ）；Ｑ８５８（以下と置換された：Ｎ）；Ｒ８５９（以下と置
換された：Ｈ、またはＫ）；Ｒ８６０（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ
８６１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ８６２（
以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｅ８６３（以下と置
換された：Ｄ）；Ｒ８６５（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｄ８６６（以
下と置換された：Ｅ）；Ｉ８６７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｎ８６８（以下と置換された：Ｑ）；Ｇ８６９（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ８７０（以下と置換された：Ｎ）
；Ａ８７２（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ８７
３（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ８７４（以下
と置換された：Ｄ）；Ａ８７６（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｋ８７７（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｅ８７８（以下と
置換された：Ｄ）；Ｖ８７９（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ま
たはＭ）；Ｋ８８０（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ａ８８２（以下と置
換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ８８３（以下と置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ８８４（以下と置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ８８５（以下と置換された：Ｈ、またはＫ）
；Ａ８８８（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ８８
９（以下と置換された：Ｅ）；Ｈ８９０（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；
Ｑ８９４（以下と置換された：Ｎ）；Ｗ８９５（以下と置換された：Ｆ、または
Ｙ）；Ｑ８９６（以下と置換された：Ｎ）；Ｌ８９７（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ８９８（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ８９９（以下と置換された：Ｄ）；Ｗ９００（以下
と置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｓ９０１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ９０２（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｓ９０４（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｋ９０５（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｔ９０６（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ９０８（以下と置換された：Ａ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ９０９（以下と置換された：Ｈ、または
Ｒ）；Ｇ９１０（以下と置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｙ
９１１（以下と置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｋ９１２（以下と置換された：Ｈ
、またはＲ）；Ｋ９１３（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｒ９１４（以下
と置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｓ９１５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ９１６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｋ９１７（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｌ９１９（以下
と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ９２０（以下と置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ９２１（以下と置換された：Ｋ
、またはＲ）；Ｄ９２２（以下と置換された：Ｅ）；Ｇ９２３（以下と置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ９２４（以下と置換された：Ａ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ９２５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ９２６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｓ９２７（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｈ９２８（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｅ９２９（以下と置換
された：Ｄ）；Ｓ９３０（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｄ９３２（以下と置換された：Ｅ）；Ｌ９３４（以下と置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ９３５（以下と置換された：Ｈ、またはＲ
）；Ｋ９３６（以下と置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｋ９３８（以下と置換され
た：Ｈ、またはＲ）；Ｈ９３９（以下と置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｆ９４０
（以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｉ９４１（以下と置換された：Ａ、Ｇ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ９４２（以下と置換された：Ｅ）；Ｆ９４３（
以下と置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｔ９４５（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ９４６（以下と置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、またはＶ）；Ａ９４７（以下と置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｅ９４８（以下と置換された：Ｄ）；Ｓ９５０（以下と置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）。
【０１２４】
以下の保存的置換の１つ以上を有するＭＥＴＨ１ポリペプチドもまた好ましい
：Ｍ１（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｇ２（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｎ３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ４（以下と置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ５（以下と置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｒ６（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７（以下と置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８（以下と置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＣ）；Ｇ９（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ１０（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ１１（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ１２
（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｆ１３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ１４（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ１５（以下と置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＣ）；Ｖ１６（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ１７（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｔ１８（以下と
置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１
９（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｌ２０（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣ）；Ｌ２１（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２２（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２４（以下と置換された：
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２５（以下と置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２６
（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｌ２７（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ａ２８（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２９（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ３０（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３１（以下と置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ａ３２（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣ）；Ｌ３３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ３４（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ３５（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ３６
（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｓ３７（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ３８（以下と置換された：Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｅ３９（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４０（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；
Ｅ４１（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ４２（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４
３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｖ４４（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣ）；Ｖ４５（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ４６（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｅ４７（
以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４８（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ４９（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ
５０（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ５１（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ５２（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ
）；Ｇ５３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｈ５４（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５５（以下と置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５６（以下と置換
された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５７（
以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｒ５８（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ５９（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ６０（以下と置換された：Ｄ、
Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；
Ｌ６１（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｈ６２（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ６３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ６４（以下と置換され
た：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、また
はＣ）；Ｄ６５（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ６６（以下と置換された：Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｑ６７（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ６８（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ６９（以下と置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｌ７０（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ７１（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ７２（以下と置換
された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ７３（
以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ７４（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｄ７５（以下
と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７６（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７７（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ７８（以下と置換された：Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；
Ｌ７９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ａ８０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｇ８２（以下で
置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ８
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ８４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ８５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ８６（以下で置換された：
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣ）；Ｎ８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ８８（以下で置換された：Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ８９（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ９０（以
下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９２（以下で置換され
た：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ９３（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ
９４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣ）；Ｅ９５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ９６（以下で置換された：Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ９７（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＣ）；Ｌ９８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ９９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｅ１０
０（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ１０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ１０２（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｌ１０３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ａ１０４：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ１０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ１０６（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｆ１０７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ１０８（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ１０９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇｌ１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔｌ１１（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ１１２（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ
１１３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ１１４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ１１５（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；ＰＩ１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｓ１１７（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ１１８（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ａ１１９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ａ１２０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ１２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ１２３（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１２４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｃ１２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｅ１２６（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｇ１２７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｖ１２８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ１２９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ１３０（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ａ１３１：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｆ１３２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ１３３（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｌ１３４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１３５：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ１３６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ１３７（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ａ１３８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｙ１３９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ１４０（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、ま
たはＣ）；１１４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ１４２：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ１４３（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｌ１４４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ１４５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、または
Ｃ）；Ａ１４６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ａ１４７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ１４８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ１４９（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｒ１５０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１５１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ１５２（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ１５３（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ａ１５４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ａ１５５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ１５６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｇ１５
７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｅ１５８（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ１５９（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｐ１６０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｐ１６１（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＣ）；Ａ１６２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ１６３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｌ１６４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｑ１６５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ１６６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ
１６７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１６９（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ１７０（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｒ１７１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ１７２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｒ１７３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ１７４（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｇ１７５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｄ１７６（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ１７７（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ１７
８：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｇ１７９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｔ１８０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ１８１：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｇ
１８２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｖ１８３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ１８４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ１８５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ
１８６（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ１８７（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ
１８８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｒ１８９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ
１９０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｔ１９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ１９２（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ１９３（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ１９４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ１９５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ
１９６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｅ１９７（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ１９８（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｅ１９９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ２００（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｅ２０１（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２０２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ２０３（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ
２０４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ２０６（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｄ２０７（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ２０８（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｇ２０９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ２１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｑ２１１（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｗ２１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ２１３（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ
２１４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｑ２１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｄ２１６（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ２１７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、または
Ｃ）；Ａ２１８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２１９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ２２０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２２
１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｖ２２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２２３：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ２２４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ２２
５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｔ２２６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２２７（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ２２８（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ
２２９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｓ２３０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ２３１：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ２３２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ２３
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ２３４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ２３５（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｆ２３６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２３７（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ２３８（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｓ２３９：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｈ２４０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ２４１（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｙ２４２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２４３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ２４４：以下で置換さ
れた：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｔ２４５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ２４６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２４７：以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２４８（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２４９（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｄ２５０（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ２５１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｓ２５２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｍ２５３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２５４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ２５５：以下で置換された：Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｆ２５６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ２５７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２５
８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｓ２５９：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２６０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２６１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ２６２：以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｈ２６３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ２６４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２６
５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｌ２６６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｔ２６７：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ２６９（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）
；Ｓ２７０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｖ２７１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２７２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２７３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ２７４（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｌ２７５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ２７６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ２７７（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｈ２７８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ２７９（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＣ）；Ｓ２８０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ２８１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ２８２：以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ
２８３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ２８４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２８５（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ２８６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ
２８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｖ２８８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２８９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２９０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ２９１（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｉ２９２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２９３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２９４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ２９５（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ２９６（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｄ２９７（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ２９８（以下で置換さ
れた：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｑ２９９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ３００（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｇ３０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ３０２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｅ３０３（
以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ３０４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ３０６（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ３０７（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３０８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３０９：以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ３１０（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３１１（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｌ３１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｒ３１３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ３１４（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｆ３１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ３１６（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＰ）；Ｎ３１７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｗ３１８（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｑ３１９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ，Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
，Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｗ，Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ３２０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ
３２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ３２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ３２
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ３２４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｐ
３２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｓ３２６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３２７（以下で置換さ
れた：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｒ３２８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３２９（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ａ３３０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ３３１（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ３３２（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｙ３３３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３３４（以下で置換さ
れた：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｔ３３５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３３６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ３３７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ３３８：以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ３３９（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３４０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ３４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ３４
２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３４３（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ３４
４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｃ３４５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｇ３４６（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ３４７（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ
３４８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３４９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ３５０（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＰ）；Ｄ３５１（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３５２（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ３５３（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｇ３５４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｍ３５５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３５６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３５７（以下で置換された：Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｖ３５８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｇ３５９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３６０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ３６１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ３６２：以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＰ）；Ｄ３６３（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ３６４（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｓ３６５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ３６６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ３６
７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｃ３６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｓ３６９（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ３７０（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ
３７１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｅ３７２（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３７３（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｄ３７４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ３７５（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ３７６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ
３７７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３７８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３７９：以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ３８０（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３８１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３８２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３８３（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ３８４（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｅ３８５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ３８６（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ３８７（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｈ３８８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ３８９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ３９０（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｎ３９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ３９２（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ３９３（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｈ３９４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３９５（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３９６（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３９７（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ３９
８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ３９９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ４００（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ａ４０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４０２（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４０３（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ４０
４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ４０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ４０６（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ４０７（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｑ４０８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４０９（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ４１１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ４１２（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｍ４１３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ａ４１４：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ４１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４１７：以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４１８（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｎ４１９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４２０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４２１：以下で置換さ
れた：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｈ４２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４２３（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ４２４（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ４２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｗ４２６（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４２７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ４２８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）
；Ｃ４２９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｓ４３０（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ４３１（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ４３
２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ４３３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ４３４：以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ４３５（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４３６（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｆ４３７：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４３８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４３９（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｎ４４０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ４４１（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ４４２（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ４４３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ４４４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ４４
５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｌ４４６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ４４７：以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４４８（以下
で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ４４９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ４５０（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｑ４５１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ４５２（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ４５３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｉ４５４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｑ４５５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４５６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ４５７：以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＣ）；Ｇ４５８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４５９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４６
０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｐ４６１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｇ４６２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ４６３（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ
４６４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｙ４６５：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４６６（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ａ４６７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｎ４６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ４６９（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｑ４７０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ４７１（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＰ）；Ｑ４７２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ４７３（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ
、またはＣ）；Ｔ４７４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ４７５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ４７６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ
４７７（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４７８（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ
４７９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｋ４８０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ４８１（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｃ４８２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｐ４８３（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＣ）；Ｄ４８４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ４８５（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ４８６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ
４８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｔ４８８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ４８９：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｓ４９０（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｔ４９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｌ４９２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｗ４９３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ４９４（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｔ４９５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ４９６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ４９７（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４９８（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｇ４９９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｇ５００：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ５０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ５０２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ５０３：以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５０４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｑ５０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５０
６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｋ５０７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ５０８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ
５０９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ５１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｗ
５１１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ａ５１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ５１３（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｇ５１４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ５１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５１７（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＰ）；Ｇ５１８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ５１９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５２０（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ
５２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｗ５２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５２３（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｉ５２４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ５２５（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｇ５２６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｋ５２７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５２８（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＰ）；Ｖ５２９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ５３０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ５３
１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５３２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ５３３（以下で置換された：Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｒ５３４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ５３５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ５３
６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ５３７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ５３８（以下
で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５３９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ５４０：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）
；Ｆ５４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ５４２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５４
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｓ５４４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｗ５４５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５４６（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ５４７（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｗ５４８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５４９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ５５０（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＣ）；Ｗ５５１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５５２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ５５３（以下
で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５５４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｓ５５５（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｒ５５６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５５７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５５８（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＰ）；Ｇ５５９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５６０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５６１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ５６２（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ５６３（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ５６４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５６５（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ
５６６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｒ５６７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ５６８（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｃ５６９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｄ５７０（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｎ５７１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ５７２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＣ）；Ｖ５７３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ５７４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｋ５７
５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ５７６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５７７（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｇ５７８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｋ５７９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ５８０（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｃ５８１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｅ５８２（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｇ５８３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ５８４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ５８５（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｖ５８６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ５８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ５８８（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｐ、またはＣ）；Ｒ５８９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ５９０（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５９１：
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｎ５９２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ５９
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｅ５９４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ５９５（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｃ５９６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｐ５９７（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＣ）；Ｄ５９８（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ５９９（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｎ６００（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６０１（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ６０２（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ６０３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ６０４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ６０
５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ６０６（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ６０７（
以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ６０８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ６０９（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｅ６１０（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ６１
１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｈ６１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ６１３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｅ６１４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ６１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ
６１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｋ６１７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ６１８（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ６１９（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ６２
０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ６２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６２３（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ６２４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ａ６２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ６２６：以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ６２７（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｗ６２８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ６２９（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ６３０：
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｋ６３１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ６３２（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ａ６３３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６３４：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ６３５（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ６３６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ
６３７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｋ６３８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｄ６３９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ６４０（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ，Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｃ６４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｋ６４２（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｌ６４３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ６４４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｒ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ６４５（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＰ）；Ｑ６４６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ６４７（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ６４８：以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６４９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ６５０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６５１（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ６５２：以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ
、またはＣ）；Ｆ６５３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ６５４（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｖ６５５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｌ６５６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ６５７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ６５
８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｋ６５９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ６６
０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｖ６６１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｄ６６２（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６６３（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ６６
４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｐ６６５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｃ６６６（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＰ）；Ｓ６６７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ６６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｄ６６
９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ６７０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ６７１（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ６７２（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ６７
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｃ６７４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｖ６７５（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ６７６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６７７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ６７８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ
６７９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｖ６８０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ６８１（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ａ６８２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６８３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ６８４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）
；Ｄ６８５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ６８６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ
６８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｉ６８８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ６８９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ６９０（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ
６９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ６９２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ６９３（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ６９４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ６９５（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｋ６９６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ６９７（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、；またはＰ）；Ｇ６９８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ６９９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ７００（以下で置換された：
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
またはＰ）；Ｇ７０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７０２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ７０３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；
Ｇ７０４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣ）；Ｓ７０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ７０６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ７０７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；または
Ｐ）；Ｋ７０８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ７０９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ
７１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｓ７１１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７１３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ７１４（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ７１５（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ
７１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ａ７１７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ７１８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ７１９（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｇ７２０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ７２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ７２
２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ７２３（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ７２４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｉ７２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｔ７２６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ７２７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ７２８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、または
Ｃ）；Ｔ７２９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７３０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７３１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ７３２（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ７３３（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｉ７３４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ７３５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ７３
６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｋ７３７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ７３８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｒ７３９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ７４０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ
７４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ７４２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７４
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｓ７４４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｒ７４５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ７４６（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｎ７４７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７４８（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７４９（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｆ７５０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ７５１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７５２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ７５３（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ
７５４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７５５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７５６（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ７５７（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７５８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ７５９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ７６０（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）
；Ｉ７６１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｌ７６２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ７６３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７６４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｄ７６５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ７６６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ
７６７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｌ７６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７６９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ７７０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ７７１（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ７７２（以下
で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ７７３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ７７４（以下
で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ７７５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ７７６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ７７７（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｋ７７８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７７９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ７８０（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ７８１（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｌ７８２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｒ７８３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ７８４（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｓ７８５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７８６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７８８（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７８９（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７９
０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｌ７９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｅ７９２（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ７９３（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｉ７９４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ７９５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７９６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ
７９７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７９８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ７９９（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＣ）；Ｌ８００（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ８０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ８０２（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８０３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｌ８０４（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ
８０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｉ８０６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ８０７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ８０８（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ
８０９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｔ８１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ８１１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ８１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ８１３（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ａ８１４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ８１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ８１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８１
７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｋ８１８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ８１
９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｋ８２０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ８２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ
８２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｙ８２３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ８２４（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）
；Ｖ８２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｋ８２６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ８２７（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｋ８２８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ８２９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ
８３０（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ８３１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ８３２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｎ８３３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ８３４（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ８３５（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８３
６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｔ８３７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ８３８（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｓ８３９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ａ８４０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｗ８４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ８４２（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｉ８４３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｅ８４４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ８４５（以下で置換さ
れた：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｗ８４６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ８４７（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ８４８（以下
で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ８４９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ｓ８５０
（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｋ８５１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ８５２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ８５３（以下で置換され
た：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、；またはＰ）；Ｅ８５４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ８５５（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ８５
６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｗ８５７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ８５８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｒ８５９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ８６０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ８６
１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｖ８６２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｅ８６３（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ８６４（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｒ８６５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ８６６（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｉ８６７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ８６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ８６
９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｑ８７０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８７１（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＣ）；Ａ８７２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ８７３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ８７４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ
８７５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ａ８７６（以下で置換された：Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ８７７（以下で置換
された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣ）；Ｅ８７８（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ８７９（以下で置換され
た：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ８８０（以
下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８８１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ａ８８２（以
下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；
Ｓ８８３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣ）；Ｔ８８４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ８８５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８８６（以下で
置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｃ８８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ａ８８
８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｄ８８９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ８９０（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｐ８９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｃ８９２（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；
またはＰ）；Ｐ８９３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｑ８９４（以下で置換
された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣ）；Ｗ８９５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ８９６（以下で置換され
た：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣ）；Ｌ８９７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ８９８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ８９９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；
Ｗ９００（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９０２（以下で置換された：
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ９０３（以下で
置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ｓ９０４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ
９０６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｃ９０７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ｇ９０８（以下で置換
された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９０９
（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ９１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ９１１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９
１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９１３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ９１４（以
下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ９１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９１７（以下で置換された：
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｃ９１８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ｌ９１９（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９２０（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）Ｈ９
２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ９２２（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ９２３
（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｇ９２４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣ）；Ｖ９２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ９２６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９２７（以下で置換された：Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ９２８（以下で置換
された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣ）；Ｅ９２９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９３０（以下で置換され
た：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ９３１（以
下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ｄ９３２（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ９３
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｌ９３４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９３５（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｋ９３６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ９３７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、または
Ｃ）；Ｋ９３８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ９３９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ
９４０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ９４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ９４２（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｆ９４３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ９４４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；また
はＰ）；Ｔ９４５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ９４６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ９４７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ９４８（以下で置換された：
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣ）；Ｃ９４９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ｓ９５０（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）。
：Ｍ１（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｇ２（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｎ３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ４（以下と置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ５（以下と置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｒ６（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７（以下と置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８（以下と置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＣ）；Ｇ９（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ１０（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ１１（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ１２
（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｆ１３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ１４（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ１５（以下と置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＣ）；Ｖ１６（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ１７（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｔ１８（以下と
置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１
９（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｌ２０（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣ）；Ｌ２１（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２２（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２４（以下と置換された：
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２５（以下と置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２６
（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｌ２７（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ａ２８（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２９（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ３０（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３１（以下と置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ａ３２（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣ）；Ｌ３３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ３４（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ３５（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ３６
（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｓ３７（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ３８（以下と置換された：Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｅ３９（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４０（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；
Ｅ４１（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ４２（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４
３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｖ４４（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣ）；Ｖ４５（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ４６（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｅ４７（
以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４８（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ４９（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ
５０（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ５１（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ５２（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ
）；Ｇ５３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｈ５４（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５５（以下と置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５６（以下と置換
された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５７（
以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｒ５８（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ５９（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ６０（以下と置換された：Ｄ、
Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；
Ｌ６１（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｈ６２（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ６３（以下と置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ６４（以下と置換され
た：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、また
はＣ）；Ｄ６５（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ６６（以下と置換された：Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｑ６７（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ６８（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ６９（以下と置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｌ７０（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ７１（以下と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ７２（以下と置換
された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ７３（
以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ７４（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｄ７５（以下
と置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７６（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７７（以下と置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ７８（以下と置換された：Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；
Ｌ７９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ａ８０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｇ８２（以下で
置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ８
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ８４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ８５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ８６（以下で置換された：
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣ）；Ｎ８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ８８（以下で置換された：Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ８９（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ９０（以
下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９２（以下で置換され
た：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ９３（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ
９４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣ）；Ｅ９５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ９６（以下で置換された：Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ９７（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＣ）；Ｌ９８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ９９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｅ１０
０（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ１０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ１０２（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｌ１０３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ａ１０４：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ１０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ１０６（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｆ１０７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ１０８（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ１０９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇｌ１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔｌ１１（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ１１２（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ
１１３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ１１４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ１１５（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；ＰＩ１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｓ１１７（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ１１８（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ａ１１９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ａ１２０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ１２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ１２３（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１２４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｃ１２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｅ１２６（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｇ１２７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｖ１２８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ１２９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ１３０（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ａ１３１：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｆ１３２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ１３３（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｌ１３４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１３５：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ１３６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ１３７（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ａ１３８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｙ１３９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ１４０（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、ま
たはＣ）；１１４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ１４２：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ１４３（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｌ１４４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ１４５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、または
Ｃ）；Ａ１４６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ａ１４７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ１４８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ１４９（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｒ１５０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１５１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ１５２（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ１５３（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ａ１５４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ａ１５５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ１５６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｇ１５
７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｅ１５８（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ１５９（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｐ１６０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｐ１６１（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＣ）；Ａ１６２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ１６３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｌ１６４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｑ１６５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ１６６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ
１６７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ１６９（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ１７０（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｒ１７１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ１７２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｒ１７３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ１７４（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｇ１７５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｄ１７６（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ１７７（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ１７
８：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｇ１７９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｔ１８０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ１８１：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｇ
１８２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｖ１８３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ１８４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ１８５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ
１８６（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ１８７（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ
１８８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｒ１８９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ
１９０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｔ１９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ１９２（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ１９３（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ１９４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ１９５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ
１９６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｅ１９７（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ１９８（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｅ１９９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ２００（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｅ２０１（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２０２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ２０３（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ
２０４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ２０６（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｄ２０７（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ２０８（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｇ２０９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ２１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｑ２１１（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｗ２１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ２１３（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ
２１４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｑ２１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｄ２１６（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ２１７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、または
Ｃ）；Ａ２１８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２１９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ２２０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２２
１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｖ２２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２２３：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ２２４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ２２
５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｔ２２６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２２７（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ２２８（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ
２２９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｓ２３０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ２３１：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ２３２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ２３
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ２３４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ２３５（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｆ２３６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２３７（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ２３８（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｓ２３９：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｈ２４０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ２４１（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｙ２４２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２４３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ２４４：以下で置換さ
れた：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｔ２４５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ２４６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２４７：以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２４８（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２４９（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｄ２５０（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ２５１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｓ２５２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｍ２５３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２５４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ２５５：以下で置換された：Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｆ２５６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ２５７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２５
８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｓ２５９：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ２６０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２６１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ２６２：以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｈ２６３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ２６４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２６
５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｌ２６６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｔ２６７：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ２６９（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）
；Ｓ２７０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｖ２７１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２７２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ２７３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ２７４（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｌ２７５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ２７６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ２７７（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｈ２７８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ２７９（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＣ）；Ｓ２８０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ２８１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ２８２：以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ
２８３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ２８４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２８５（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ２８６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ
２８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｖ２８８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２８９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２９０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ２９１（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｉ２９２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｌ２９３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ２９４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ２９５（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ２９６（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｄ２９７（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ２９８（以下で置換さ
れた：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｑ２９９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ３００（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｇ３０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ３０２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｅ３０３（
以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ３０４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ３０６（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ３０７（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３０８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３０９：以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ３１０（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３１１（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｌ３１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｒ３１３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ３１４（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｆ３１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ３１６（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＰ）；Ｎ３１７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｗ３１８（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｑ３１９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ，Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
，Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｗ，Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ３２０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ
３２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ３２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ３２
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ３２４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｐ
３２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｓ３２６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３２７（以下で置換さ
れた：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｒ３２８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３２９（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ａ３３０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ３３１（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ３３２（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｙ３３３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３３４（以下で置換さ
れた：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｔ３３５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３３６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ３３７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ３３８：以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ３３９（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３４０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ３４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ３４
２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３４３（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ３４
４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｃ３４５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｇ３４６（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ３４７（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ
３４８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３４９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ３５０（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＰ）；Ｄ３５１（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３５２（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ３５３（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｇ３５４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｍ３５５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３５６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３５７（以下で置換された：Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｖ３５８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｇ３５９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３６０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ３６１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ３６２：以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＰ）；Ｄ３６３（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ３６４（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｓ３６５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ３６６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ３６
７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｃ３６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｓ３６９（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ３７０（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ
３７１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｅ３７２（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３７３（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｄ３７４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ３７５（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ３７６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ
３７７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３７８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３７９：以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ３８０（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３８１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ３８２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３８３（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ３８４（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｅ３８５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ３８６（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ３８７（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｈ３８８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ３８９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ３９０（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｎ３９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ３９２（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ３９３（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｈ３９４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３９５（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｄ３９６（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ３９７（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ３９
８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ３９９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ４００（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ａ４０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４０２（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４０３（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ４０
４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ４０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ４０６（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ４０７（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｑ４０８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４０９（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ４１１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ４１２（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｍ４１３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ａ４１４：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ４１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４１７：以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４１８（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｎ４１９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４２０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４２１：以下で置換さ
れた：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｈ４２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４２３（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ４２４（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ４２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｗ４２６（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４２７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ４２８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）
；Ｃ４２９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｓ４３０（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ４３１（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ４３
２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ４３３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ４３４：以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ４３５（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４３６（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｆ４３７：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４３８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４３９（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｎ４４０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ４４１（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ４４２（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ４４３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ４４４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ４４
５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｌ４４６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ４４７：以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４４８（以下
で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ４４９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ４５０（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｑ４５１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ４５２（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ４５３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｉ４５４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｑ４５５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４５６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ４５７：以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＣ）；Ｇ４５８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４５９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ４６
０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｐ４６１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｇ４６２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ４６３（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ
４６４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｙ４６５：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４６６（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ａ４６７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｎ４６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ４６９（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｑ４７０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ４７１（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＰ）；Ｑ４７２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ４７３（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ
、またはＣ）；Ｔ４７４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ４７５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ４７６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ
４７７（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ４７８（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ
４７９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｋ４８０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ４８１（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｃ４８２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｐ４８３（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＣ）；Ｄ４８４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ４８５（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ４８６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ
４８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｔ４８８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ４８９：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｓ４９０（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｔ４９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｌ４９２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｗ４９３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ４９４（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｔ４９５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ４９６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ４９７（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ４９８（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｇ４９９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｇ５００：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ５０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ５０２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ５０３：以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５０４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｑ５０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５０
６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｋ５０７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ５０８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ
５０９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ５１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｗ
５１１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ａ５１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ５１３（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｇ５１４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ５１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５１７（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＰ）；Ｇ５１８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ５１９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５２０（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ
５２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｗ５２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５２３（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｉ５２４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ５２５（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｇ５２６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｋ５２７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５２８（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＰ）；Ｖ５２９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ５３０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ５３
１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５３２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ５３３（以下で置換された：Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｒ５３４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ５３５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ５３
６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ５３７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ５３８（以下
で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５３９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ５４０：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）
；Ｆ５４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ５４２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５４
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｓ５４４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｗ５４５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５４６（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ５４７（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｗ５４８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５４９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ５５０（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＣ）；Ｗ５５１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５５２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ５５３（以下
で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５５４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｓ５５５（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｒ５５６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５５７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５５８（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＰ）；Ｇ５５９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５６０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５６１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ５６２（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ５６３（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ５６４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ５６５（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ
５６６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｒ５６７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ５６８（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｃ５６９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｄ５７０（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｎ５７１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ５７２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＣ）；Ｖ５７３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ５７４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｋ５７
５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ５７６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ５７７（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｇ５７８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｋ５７９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ５８０（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｃ５８１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｅ５８２（以下で置換された
：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｇ５８３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ５８４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ５８５（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｖ５８６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ５８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ５８８（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｐ、またはＣ）；Ｒ５８９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ５９０（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ５９１：
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｎ５９２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ５９
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｅ５９４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ５９５（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｃ５９６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｐ５９７（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＣ）；Ｄ５９８（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ５９９（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｎ６００（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６０１（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ６０２（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ６０３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ６０４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ６０
５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ６０６（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ６０７（
以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ６０８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ６０９（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｅ６１０（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ６１
１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｈ６１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ６１３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｅ６１４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ６１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ
６１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｋ６１７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ６１８（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ６１９（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ６２
０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ６２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６２３（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ６２４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ａ６２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ６２６：以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ６２７（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｗ６２８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ６２９（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ６３０：
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｋ６３１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ６３２（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ａ６３３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６３４：以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ６３５（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ６３６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ
６３７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｋ６３８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｄ６３９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ６４０（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ，Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｃ６４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｋ６４２（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｌ６４３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ６４４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｒ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ６４５（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＰ）；Ｑ６４６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ６４７（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ６４８：以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６４９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ６５０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６５１（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ６５２：以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ
、またはＣ）；Ｆ６５３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ６５４（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｖ６５５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｌ６５６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ６５７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ６５
８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｋ６５９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ６６
０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｖ６６１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｄ６６２（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６６３（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ６６
４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｐ６６５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｃ６６６（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＰ）；Ｓ６６７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ６６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｄ６６
９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ６７０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ６７１（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ６７２（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ６７
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｃ６７４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｖ６７５（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ６７６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６７７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ６７８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ
６７９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｖ６８０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ６８１（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ａ６８２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ６８３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ６８４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰ）
；Ｄ６８５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ６８６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ
６８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｉ６８８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ６８９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ６９０（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ
６９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ６９２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ６９３（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ６９４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ６９５（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｋ６９６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ６９７（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、；またはＰ）；Ｇ６９８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ６９９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ７００（以下で置換された：
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
またはＰ）；Ｇ７０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７０２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ７０３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；
Ｇ７０４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣ）；Ｓ７０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ７０６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ７０７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；または
Ｐ）；Ｋ７０８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ７０９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ
７１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｓ７１１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７１３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ７１４（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ７１５（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ
７１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ａ７１７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ７１８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ７１９（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｇ７２０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ７２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ７２
２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ７２３（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ７２４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｉ７２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｔ７２６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ７２７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ７２８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、または
Ｃ）；Ｔ７２９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７３０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７３１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ７３２（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ７３３（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｉ７３４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ７３５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ７３
６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｋ７３７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ７３８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｒ７３９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ７４０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ
７４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ７４２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７４
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｓ７４４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｒ７４５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ７４６（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｎ７４７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７４８（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７４９（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｆ７５０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ７５１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７５２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ７５３（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ
７５４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７５５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７５６（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ７５７（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７５８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ７５９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ７６０（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）
；Ｉ７６１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｌ７６２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ７６３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７６４（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｄ７６５（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ７６６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ
７６７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｌ７６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７６９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ７７０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ７７１（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ７７２（以下
で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ７７３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ７７４（以下
で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ７７５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ７７６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ７７７（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｋ７７８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７７９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ７８０（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ７８１（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｌ７８２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｒ７８３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ７８４（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｓ７８５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｇ７８６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７８８（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７８９（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ７９
０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｌ７９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｅ７９２（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ７９３（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｉ７９４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ７９５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７９６（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ
７９７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ７９８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ７９９（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＣ）；Ｌ８００（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ８０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ８０２（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８０３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｌ８０４（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ
８０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｉ８０６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ８０７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ８０８（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ
８０９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｔ８１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ８１１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ８１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ８１３（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ａ８１４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ８１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ８１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８１
７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｋ８１８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ８１
９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｋ８２０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ８２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ
８２２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｙ８２３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ８２４（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）
；Ｖ８２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｋ８２６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ８２７（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｋ８２８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ８２９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ
８３０（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ８３１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ８３２（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｎ８３３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ８３４（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ８３５（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８３
６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｔ８３７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ８３８（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｓ８３９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ａ８４０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｗ８４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ８４２（
以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｉ８４３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｅ８４４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ８４５（以下で置換さ
れた：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣ）；Ｗ８４６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ８４７（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ８４８（以下
で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ８４９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ｓ８５０
（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｋ８５１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ８５２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ８５３（以下で置換され
た：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、；またはＰ）；Ｅ８５４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ８５５（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ８５
６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｗ８５７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ８５８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｒ８５９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ８６０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ８６
１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｖ８６２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｅ８６３（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ８６４（以下で置
換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＰ）；Ｒ８６５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ８６６（以下で置
換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣ）；Ｉ８６７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｎ８６８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ８６
９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｑ８７０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８７１（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ま
たはＣ）；Ａ８７２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ８７３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ８７４（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ
８７５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ａ８７６（以下で置換された：Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ８７７（以下で置換
された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣ）；Ｅ８７８（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｖ８７９（以下で置換され
た：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ８８０（以
下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８８１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ａ８８２（以
下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；
Ｓ８８３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣ）；Ｔ８８４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ８８５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ８８６（以下で
置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｃ８８７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ａ８８
８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｄ８８９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ８９０（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）
；Ｐ８９１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｃ８９２（以下で置換された：Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；
またはＰ）；Ｐ８９３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｑ８９４（以下で置換
された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣ）；Ｗ８９５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｑ８９６（以下で置換され
た：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣ）；Ｌ８９７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ８９８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ８９９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；
Ｗ９００（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９０１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９０２（以下で置換された：
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ９０３（以下で
置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ｓ９０４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９０５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｔ
９０６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣ）；Ｃ９０７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ｇ９０８（以下で置換
された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９０９
（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ９１０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｙ９１１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９
１２（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９１３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｒ９１４（以
下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９１５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ９１６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９１７（以下で置換された：
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｃ９１８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ｌ９１９（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９２０（以下
で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）Ｈ９
２１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ９２２（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｇ９２３
（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
）；Ｇ９２４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣ）；Ｖ９２５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｌ９２６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９２７（以下で置換された：Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ９２８（以下で置換
された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣ）；Ｅ９２９（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｓ９３０（以下で置換され
た：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ９３１（以
下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ｄ９３２（以下で置換された：Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ９３
３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣ）；Ｌ９３４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｋ９３５（以下で置換された
：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｋ９３６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｐ９３７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、または
Ｃ）；Ｋ９３８（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｈ９３９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｆ
９４０（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｉ９４１（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｄ９４２（以下で置換された：Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃ）；Ｆ９４３（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ）；Ｃ９４４（以下で置換された：Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；また
はＰ）；Ｔ９４５（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｍ９４６（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ａ９４７（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）；Ｅ９４８（以下で置換された：
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣ）；Ｃ９４９（以下で置換された：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、；またはＰ）；Ｓ９５０（以下で置換さ
れた：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ）。
【０１２５】
また、以下の１つ以上の保存的アミノ酸置換を有するＭＥＴＨ２ポリペプチド
も好ましい：Ｍ１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；
Ｆ２（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ａ４（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ６（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ａ７（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｒ９（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｗ１０（以下で置換された：Ｆ
、またはＹ）；Ｌ１１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｆ１３（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｌ１４（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｌ１７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｌ１８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；ＬＩ
９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２０（以下で
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２１（以下で置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ａ２５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｒ２６（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ２７（以下で置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ２８（以下で置換された：Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ３０（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３１（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ａ３３（以
下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ３４（以下で置換さ
れた：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３５（以下で置換された：Ａ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３６（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ３７（以下で置換された：Ｎ）；Ａ３８（以下で置換
された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ３９（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ４０（以下で置換された：Ｄ）；Ｌ４１
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ４２（以下で置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ４３（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｔ４５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ４６（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ４
７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ４９（以下で
置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ５０（以下で置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ５１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５３（以下で置換された：Ｄ）；Ｌ５４（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ５５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ５６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ５７（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｌ５８（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ５９（以下で置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ６０（以下で置換された：Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ６１（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）
；Ｇ６２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６３（
以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｇ６４（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ６５（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｖ６６
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ６７（以下で置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ６８（以下で置換された：
Ｈ、またはＫ）；Ｌ６９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ａ７０（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ７
２（以下で置換された：Ｅ）；Ｄ７３（以下で置換された：Ｅ）；Ｓ７４（以下
で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ７５（以下で置換され
た：Ｗ、またはＹ）；Ｌ７６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ａ７７（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｅ７９（以下で置換された：Ｄ）；Ｆ８０（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）
；Ｋ８１（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｉ８２（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ８３（以下で置換された：Ｄ）；Ｒ８４
（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ８５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ８６（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｇ８７（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｓ８８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ８
９（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ９０（以下で
置換された：Ｈ、またはＫ）；Ａ９１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｔ９２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、また
はＶ）；Ｇ９３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ
９４（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ９５（以下
で置換された：Ｄ）；Ｒ９６（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ９７（以
下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ９８（以下で置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ９９（以下で置換された：Ｈ、
またはＫ）；Ｇ１００（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｆ１０２（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｆ１０３（以下で置換され
た：Ｗ、またはＹ）；Ｓ１０４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｇ１０５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｔ１０６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ１
０７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｎ１０８（以
下で置換された：Ｑ）；Ｇ１０９（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｅ１１０（以下で置換された：Ｄ）；Ｅ１１２（以下で置換され
た：Ｄ）；Ｓ１１３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｌ１１４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１１
５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１１６（以下
で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ１１７（以下で置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ１１８（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；ＬＩ１９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ１２１（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ
１２２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１２３（
以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ１２４（以下で置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１２５（以下で置換された
：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ１２６（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ１２７（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）
；Ｌ１２８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１２
９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ１３０（以下
で置換された：Ｅ）；Ｇ１３１（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｅ１３２（以下で置換された：Ｄ）；Ｅ１３３（以下で置換された
：Ｄ）；Ｆ１３４（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｔ１３５（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ１３６（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ１３７（以下で置換された：Ｎ）；Ｑ
１３９（以下で置換された：Ｎ）；Ｇ１４０（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１４１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｇ１４２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｇ１４３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｓ１４４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１４５
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１４６（以下で
置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ１４７（以下で置換され
た：Ｎ）；Ｈ１４９（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｒ１５０（以下で置
換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ１５１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｑｌ５２（以下で置換された：Ｎ）；Ｒｌ５３（以下で置換
された：Ｈ、またはＫ）；Ｗ１５４（以下で置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｇ１
５５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１５７（以
下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１５８（以下で置換
された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１５９（以下で置換された：
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ１６０（以下で置換された：Ｈ、また
はＫ）；Ｌ１６２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｒ１６４（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ１６５（以下で置換された：
Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１６７（以下で置換された：Ｄ）；Ｗ
１６８（以下で置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｅ１６９（以下で置換された：Ｄ
）；Ｖ１７０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｅ１
７１（以下で置換された：Ｄ）；Ｔ１７２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１７３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｅ１７４（以下で置換された：Ｄ）；Ｇ１７５（以下で置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ１７６（以下で置換された：Ｎ）
；Ｒ１７７（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｑ１７８（以下で置換された
：Ｎ）；Ｅ１７９（以下で置換された：Ｄ）；Ｒ１８０（以下で置換された：Ｈ
、またはＫ）；Ｇ１８１（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｄ１８２（以下で置換された：Ｅ）；Ｈ１８３（以下で置換された：Ｋ、
またはＲ）；Ｑ１８４（以下で置換された：Ｎ）；Ｅ１８５（以下で置換された
：Ｄ）；Ｄ１８６（以下で置換された：Ｅ）；Ｓ１８７（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１８８（以下で置換された：Ｄ）；Ｅ１
８９（以下で置換された：Ｄ）；Ｅ１９０（以下で置換された：Ｄ）；Ｓ１９１
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ１９２（以下で
置換された：Ｎ）；Ｅ１９３（以下で置換された：Ｄ）；Ｅ１９４（以下で置換
された：Ｄ）；Ｅ１９５（以下で置換された：Ｄ）；Ａ１９６（以下で置換され
た：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１９７（以下で置換された：Ｄ）
；Ｇ１９８（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１９
９（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ２００（以下
で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ２０１（以下で置換さ
れた：Ｄ）；Ｌ２０６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｇ２０７（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ２
０８（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ２０９（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ２１０（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ２１１（以下で置換された：
Ｈ、またはＫ）；Ｔ２１２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、また
はＶ）；Ｋ２１３（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｒ２１４（以下で置換
された：Ｈ、またはＫ）；Ｆ２１５（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｖ２
１６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ２１７（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ２１８（以下で置換
された：Ｄ）；Ａ２１９（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｒ２２０（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｆ２２１（以下で置換さ
れた：Ｗ、またはＹ）；Ｖ２２２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、またはＭ）；Ｅ２２３（以下で置換された：Ｄ）；Ｔ２２４（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２２５（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２２６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ２２７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、またはＭ）；Ａ２２８（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｄ２２９（以下で置換された：Ｅ）；Ａ２３０（以下で置換された：Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ２３１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ２３２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、またはＶ）；Ａ２３３（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ａ２３４（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｆ２３５（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｙ２３６（以下で置換された
：Ｆ、またはＷ）；Ｇ２３７（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ａ２３８（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｄ２３９（以下で置換された：Ｅ）；Ｌ２４０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ２４１（以下で置換された：Ｎ）；Ｎ２４２（
以下で置換された：Ｑ）；Ｈ２４３（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｉ２
４４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２４５（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ２４６（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２４７（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ２４８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｓ２４９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ２５０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
またはＭ）；Ａ２５１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ａ２５２（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ２
５３（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｉ２５４（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｙ２５５（以下で置換された：Ｆ、またはＷ
）；Ｋ２５６（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｈ２５７（以下で置換され
た：Ｋ、またはＲ）；Ｓ２５９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｉ２６０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｋ２６１（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｎ２６２（以下で置換され
た：Ｑ）；Ｓ２６３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｉ２６４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ２６
５（以下で置換された：Ｑ）；Ｌ２６６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ２６７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
またはＶ）；Ｖ２６８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ
）；Ｖ２６９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ２
７０（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｖ２７１（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ２７２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ２７３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｖ２７４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、また
はＭ）；Ｅ２７５（以下で置換された：Ｄ）；Ｄ２７６（以下で置換された：Ｅ
）；Ｅ２７７（以下で置換された：Ｄ）；Ｋ２７８（以下で置換された：Ｈ、ま
たはＲ）；Ｗ２７９（以下で置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｇ２８０（以下で置
換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ２８２（以下で置換された
：Ｄ）；Ｖ２８３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；
Ｓ２８４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ２８５
（以下で置換された：Ｅ）；Ｎ２８６（以下で置換された：Ｑ）；Ｇ２８７（以
下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ２８８（以下で置換
された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２８９（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ２９０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２９１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ２９２（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｎ２９３
（以下で置換された：Ｑ）；Ｆ２９４（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｎ
２９６（以下で置換された：Ｑ）；Ｗ２９７（以下で置換された：Ｆ、またはＹ
）；Ｑ２９８（以下で置換された：Ｎ）；Ｒ２９９（以下で置換された：Ｈ、ま
たはＫ）；Ｒ３００（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｆ３０１（以下で置
換された：Ｗ、またはＹ）；Ｎ３０２（以下で置換された：Ｑ）；Ｑ３０３（以
下で置換された：Ｎ）；Ｓ３０５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｄ３０６（以下で置換された：Ｅ）；Ｒ３０７（以下で置換され
た：Ｈ、またはＫ）；Ｈ３０８（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｅ３１０
（以下で置換された：Ｄ）；Ｈ３１１（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｙ
３１２（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｄ３１３（以下で置換された：Ｅ
）；Ｔ３１４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ａ３
１５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ３１６（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３１７（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３１８（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ３１９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３２０（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；
Ｑ３２１（以下で置換された：Ｎ）；Ｎ３２２（以下で置換された：Ｑ）；Ｆ３
２３（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｇ３２５（以下で置換された：Ａ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ３２６（以下で置換された：Ｎ）；Ｅ３２
７（以下で置換された：Ｄ）；Ｇ３２８（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３２９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｄ３３１（以下で置換された：Ｅ）；Ｔ３３２（以下で置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３３３（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３３４（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ３３５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、またはＭ）；Ａ３３６（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｄ３３７（以下で置換された：Ｅ）；Ｉ３３８（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３３９（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ３４０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｍ、またはＶ）；Ｉ３４１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｄ３４３（以下で置換された：Ｅ）；Ｎ３４５（以下で置換された：Ｑ
）；Ｋ３４６（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｓ３４７（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ３４９（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ３５０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｉ３５１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｅ３５２（以下で置換された：Ｄ）；Ｄ３５３（以下で置換さ
れた：Ｅ）；Ｅ３５４（以下で置換された：Ｄ）；Ｇ３５５（以下で置換された
：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３５６（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ３５７（以下で置換された：Ｎ）；Ａ３５８
（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ３５９（以下で
置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ３６０（以下で置換され
た：Ｋ、またはＲ）；Ｔ３６１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、
またはＶ）；Ｌ３６２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ａ３６３（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ３
６４（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｅ３６５（以下で置換された：Ｄ）
；Ｌ３６６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３６
７（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ３６８（以下
で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｖ３６９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ３７０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｓ３７１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｍ３７２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｈ
３７４（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｄ３７５（以下で置換された：Ｅ
）；Ｄ３７６（以下で置換された：Ｅ）；Ｓ３７７（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ３７８（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）
；Ｔ３８１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３８
２（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ３８３（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ３８４（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）
；Ｇ３８５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ３８
７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｇ３８８（以下
で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ３８９（以下で置換さ
れた：Ｈ、またはＲ）；Ｈ３９０（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｈ３９
１（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｖ３９２（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｍ３９３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ａ３９４（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｌ３９６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｆ３９７（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｖ３９８（以下で置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｈ３９９（以下で置換された：Ｋ
、またはＲ）；Ｌ４００（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｎ４０１（以下で置換された：Ｑ）；Ｑ４０２（以下で置換された：Ｎ）
；Ｔ４０３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４０
４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ４０６（以下
で置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｓ４０７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４１０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ａ４１１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｍ４１２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｙ
４１３（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｌ４１４（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４１５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ４１６（以下で置換された：Ｄ）；Ｌ４１７（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４１８（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４１９（以下で置換された：
Ｅ）；Ｇ４２０（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ
４２１（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ４２２（
以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｇ４２３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４２４（以下で置換された：Ｅ）；Ｌ４２６（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４２７（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４２８（以下で置換された：
Ｅ）；Ａ４２９（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ
４３１（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ４３２（
以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ４３３（以下で置
換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４３４（以下で置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４３６（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４３８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ４３９（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｌ４４０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｇ４４２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ
４４３（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｍ４４４（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ａ４４５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４４６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｙ４４７（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｑ４４８（
以下で置換された：Ｎ）；Ｌ４４９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｄ４５０（以下で置換された：Ｅ）；Ｑ４５１（以下で置換さ
れた：Ｎ）；Ｑ４５２（以下で置換された：Ｎ）；Ｒ４５４（以下で置換された
：Ｈ、またはＫ）；Ｑ４５５（以下で置換された：Ｎ）；Ｉ４５６（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ４５７（以下で置換された：
Ｗ、またはＹ）；Ｇ４５８（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｄ４６０（以下で置換された：Ｅ）；Ｆ４６１（以下で置換された：Ｗ
、またはＹ）；Ｒ４６２（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｈ４６３（以下
で置換された：Ｋ、またはＲ ；Ｎ４６６（以下で置換された：Ｑ）；Ｔ４６７
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４６８（以下で
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ４６９（以下で置換され
た：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ４７０（以下で置換された：Ｎ）
；Ｄ４７１（以下で置換された：Ｅ）；Ｖ４７２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ａ４７４（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ４７５（以下で置換された：Ｎ ；Ｌ４７６（以下で置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ４７７（以下で置換された
：Ｆ、またはＹ）；Ｈ４７９（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｔ４８０（
以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４８１（以下で置
換された：Ｅ）；Ｇ４８２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ａ４８３（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｅ４８４（以下で置換された：Ｄ）；Ｌ４８６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ４８８（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｔ
４８９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ４９０（
以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｎ４９１（以下で置換された：Ｑ）；Ｇ４
９２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４９３（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４９４（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ４９６（以下で置換された：
Ｆ、またはＹ）；Ａ４９７（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｄ４９８（以下で置換された：Ｅ）；Ｇ４９９（以下で置換された：Ａ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ５００（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５０３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５０５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｈ５０６（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｌ５０７（以下で置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ５０９（以下で置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５１０（以下で置換された：Ｄ）；
Ｇ５１１（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ５１２
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ５１４（以下で
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５１６（以下で置換され
た：Ｄ）；Ｅ５１７（以下で置換された：Ｄ）；Ｅ５１８（以下で置換された：
Ｄ）；Ｖ５１９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｅ
５２０（以下で置換された：Ｄ）；Ｒ５２１（以下で置換された：Ｈ、またはＫ
）；Ｋ５２３（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｖ５２５（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ５２６（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｄ５２７（以下で置換された：Ｅ）；Ｇ５２
８（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５２９（以下
で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ５３０（以下で置換さ
れた：Ｆ、またはＹ）；Ａ５３１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｗ５３３（以下で置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｇ５３４（以下
で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ５３６（以下で置換さ
れた：Ｆ、またはＹ）；Ｇ５３７（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｅ５３８（以下で置換された：Ｄ）；Ｓ５４０（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ５４１（以下で置換された：Ｈ、
またはＫ）；Ｔ５４２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ
）；Ｇ５４４（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５
４５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５４６（以
下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ５４７（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｑ５４８（以下で置換された：
Ｎ）；Ｆ５４９（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｓ５５０（以下で置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ５５１（以下で置換された：Ｋ
、またはＲ）；Ｒ５５２（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｅ５５３（以下
で置換された：Ｄ）；Ｋ５５５（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｄ５５６
（以下で置換された：Ｅ）；Ｅ５５８（以下で置換された：Ｄ）；Ｑ５６０（以
下で置換された：Ｎ）；Ｎ５６１（以下で置換された：Ｑ）；Ｇ５６２（以下で
置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５６３（以下で置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ５６４（以下で置換された：Ｈ、
またはＫ）；Ｙ５６５（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｌ５６７（以下で
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５６８（以下で置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ５６９（以下で置換された：Ｈ、
またはＫ）；Ｒ５７０（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ａ５７１（以下で
置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ５７２（以下で置換され
た：Ｈ、またはＲ）；Ｙ５７３（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｑ５７４
（以下で置換された：Ｎ）；Ｓ５７５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｈ５７７（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｔ５７８（
以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５７９（以下で置
換された：Ｄ）；Ｅ５８０（以下で置換された：Ｄ）；Ｄ５８４（以下で置換さ
れた：Ｅ）；Ｇ５８５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｋ５８６（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｓ５８７（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ５８８（以下で置換された：Ｗ、
またはＹ）；Ｒ５８９（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｅ５９０（以下で
置換された：Ｄ）；Ｑ５９１（以下で置換された：Ｎ）；Ｑ５９２（以下で置換
された：Ｎ）；Ｅ５９４（以下で置換された：Ｄ）；Ｋ５９５（以下で置換され
た：Ｈ、またはＲ）；Ｙ５９６（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｎ５９７
（以下で置換された：Ｑ）；Ａ５９８（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｙ５９９（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｎ６００（
以下で置換された：Ｑ）；Ｙ６０１（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｔ６
０２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６０３（以
下で置換された：Ｅ）；Ｍ６０４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、またはＶ）；Ｄ６０５（以下で置換された：Ｅ）；Ｇ６０６（以下で置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ６０７（以下で置換された：Ｑ）
；Ｌ６０８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ６０
９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ６１０（以下
で置換された：Ｎ）；Ｗ６１１（以下で置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｖ６１２
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ６１４（以下で
置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｙ６１５（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；
Ａ６１６（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ６１７
（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ６１８（以下で
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ６１９（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ６２１（以下で置換された：Ｈ、
またはＫ）；Ｄ６２２（以下で置換された：Ｅ）；Ｒ６２３（以下で置換された
：Ｈ、またはＫ）；Ｋ６２５（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｌ６２６（
以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ６２７（以下で置
換された：Ｗ、またはＹ）；Ｒ６２９（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ａ
６３０（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ６３１（
以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ６３２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ６３３（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｓ
６３４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ６３５（
以下で置換された：Ｄ）；Ｆ６３６（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｋ６
３７（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｖ６３８（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｆ６３９（以下で置換された：Ｗ、またはＹ
）；Ｅ６４０（以下で置換された：Ｄ）；Ａ６４１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６４２（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）
；Ｖ６４３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｉ６４
４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６４５（以下
で置換された：Ｅ）；Ｇ６４６（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｔ６４７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ
）；Ｌ６４８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ６
５０（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ６５２（以
下で置換された：Ｄ）；Ｔ６５３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ
、またはＶ）；Ｌ６５４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ａ６５５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ
６５６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ６５８（
以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｒ６５９（以下で置
換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ６６０（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｑ６６１（以下で置換された：Ｎ）；Ｖ６６３（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ６６４（以下で置換された：
Ｈ、またはＲ）；Ａ６６５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｇ６６６（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｄ６６８（以下で置換された：Ｅ）；Ｈ６６９（以下で置換された：Ｋ、または
Ｒ）；Ｖ６７０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ
６７１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｄ６７２（
以下で置換された：Ｅ）；Ｓ６７３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｒ６７５（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｋ６７６（以
下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｌ６７７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６７８（以下で置換された：Ｅ）；Ｋ６７９（以下
で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｇ６８１（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ６８２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
またはＭ）；Ｇ６８４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ
）；Ｇ６８５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６
８６（以下で置換された：ＨまたはＲ）；Ｇ６８７（以下で置換された：Ａ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ６８８（以下で置換された：Ｑ）；Ｓ６８９
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶ）；Ｒ６９１（以下で置
換された：ＨまたはＫ）；Ｋ６９２（以下で置換された：ＨまたはＲ）；Ｖ６９
３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ６９４（以下
で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ６９５（以下で置換さ
れた：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶ）；Ｓ６９６（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ６９７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｓ，Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ６９８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｔ７００（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、また
はＶ）；Ｎ７０１（以下で置換された：Ｑ）；Ｙ７０２（以下で置換された：Ｆ
またはＷ）；Ｇ７０３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｙ７０４（以下で置換された：ＦまたはＷ）；Ｎ７０５（以下で置換された
：Ｑ）；Ｄ７０６（以下で置換された：Ｅ）；Ｉ７０７（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ７０８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｔ７０９（以下で置換された：Ａ，Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｍ、またはＶ）；Ｉ１７１０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ａ７１２（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｇ７１３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ７
１４（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ７１５（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ７１６（以下で
置換された：Ｑ）；Ｉ７１７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｄ７１８（以下で置換された：Ｅ）；Ｖ７１９（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ７２０（以下で置換された：Ｈまたは
Ｒ）；Ｑ７２１（以下で置換された：Ｎ）；Ｒ７２２（以下で置換された：Ｈま
たはＫ）；Ｓ７２３（以下で置換された：Ａ、Ｇ，Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｈ７２４（以下で置換された：ＫまたはＲ）；Ｇ７２６（以下で置換された：
Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ７２７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＭ）；Ｑ７２８（以下で置換された：Ｎ）；Ｎ７２９（以
下で置換された：Ｑ）；Ｄ７３０（以下で置換された：Ｅ）；Ｇ７３１（以下で
置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ７３２（以下で置換され
た：Ｑ）；Ｙ７３３（以下で置換された：ＦまたはＷ）；Ｌ７３４（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ７３５（以下で置換された：
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶ）；Ｌ７３６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ７３７（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換されたＴ７３８；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
またはＶで置換されたＡ７３９；Ｅで置換されたＤ７４０；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、ＭまたはＶで置換されたＧ７４１；Ｎで置換されたＱ７４２；ＦまたはＷで置
換されたＹ７４３；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７４４；Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７４５；Ｑで置換されたＮ７４６
；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＧ７４７；Ｑで置換されたＮ７
４８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７４９；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＡ７５０；Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置
換されたＩ７５１；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ７５２；Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＡ７５３；Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
またはＶで置換されたＩ７５４；Ｄで置換されたＥ７５５；Ｎで置換されたＱ７
５６；Ｅで置換されたＤ７５７；Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換された
Ｉ７５８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７５９；Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＭで置換されたＶ７６０；ＨまたはＲで置換されたＫ７６１
；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＧ７６２；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、ＭまたはＶで置換されたＴ７６３；Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換さ
れたＩ７６４；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７６５；Ｈまた
はＲで置換されたＫ７６６；ＦまたはＷで置換されたＹ７６７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ７６８；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置
換されたＧ７６９；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ７７０；Ａ
、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＩ７７１；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
またはＶで置換されたＡ７７２；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換された
Ｔ７７３；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７７４；Ｄで置換さ
れたＥ７７５；ＨまたはＫで置換されたＲ７７６；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍまた
はＶで置換されたＬ７７７；Ｎで置換されたＱ７７８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ
またはＶで置換されたＳ７７９；ＷまたはＹで置換されたＦ７８０；ＨまたはＫ
で置換されたＲ７８１；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７８３
；Ｄで置換されたＥ７８５；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７
８７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換されたＴ７８８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、ＴまたはＭで置換されたＶ７８９；Ｎで置換されたＱ７９０；Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７９１；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶ
で置換されたＬ７９２；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換されたＴ７９３
；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＭで置換されたＶ７９４；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、ＭまたはＶで置換されたＧ７９６；Ｄで置換されたＥ７９７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、ＴまたはＭで置換されたＶ７９８；ＷまたはＹで置換されたＦ７９９；Ｈ
またはＲで置換されたＫ８０２；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＭで置換された
Ｖ８０３；ＨまたはＲで置換されたＫ８０４；ＦまたはＷで置換されたＹ８０５
；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換されたＴ８０６；ＷまたはＹで置換さ
れたＦ８０７；ＷまたはＹで置換されたＦ８０８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔまた
はＭで置換されたＶ８０９；Ｑで置換されたＮ８１１；Ｅで置換されたＤ８１２
；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＭで置換されたＶ８１３；Ｅで置換されたＤ８
１４；ＷまたはＹで置換されたＦ８１５；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置
換されたＳ８１６；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＶで置換されたＭ８１７；Ｎ
で置換されたＱ８１８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ８１９
；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ８２０；ＨまたはＲで置換さ
れたＫ８２１；Ｄで置換されたＥ８２２；ＨまたはＫで置換されたＲ８２３；Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＡ８２４；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ
またはＶで置換されたＴ８２５；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換された
Ｔ８２６；Ｑで置換されたＮ８２７；Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換さ
れたＩ８２８；Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＩ８２９；Ｎで置
換されたＱ８３０；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ８３２；Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ８３３；ＫまたはＲで置換された
Ｈ８３４；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＡ８３５；Ｎで置換さ
れたＱ８３６；ＦまたはＹで置換されたＷ８３７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔまた
はＭで置換されたＶ８３８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ８
３９；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＧ８４０；Ｅで置換された
Ｄ８４１；ＦまたはＹで置換されたＷ８４２；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶ
で置換されたＳ８４３；Ｄで置換されたＥ８４４；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍまた
はＶで置換されたＳ８４６；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ８
４７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換されたＴ８４８；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＧ８５０；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置
換されたＡ８５１；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＧ８５２；Ｆ
またはＹで置換されたＷ８５３；Ｎで置換されたＱ８５４；ＨまたはＫで置換さ
れたＲ８５５；ＨまたはＫで置換されたＲ８５６；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍまた
はＶで置換されたＴ８５７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＭで置換されたＶ８
５８；Ｄで置換されたＥ８５９；ＨまたはＫで置換されたＲ８６１；Ｅで置換さ
れたＤ８６２；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ８６４；Ａ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＧ８６５；Ｎで置換されたＱ８６６；Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＡ８６７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ
またはＶで置換されたＳ８６８；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換された
Ａ８６９；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換されたＴ８７０；Ｑで置換さ
れたＮ８７２；ＨまたはＲで置換されたＫ８７３；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍまた
はＶで置換されたＡ８７４；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ８
７５；ＨまたはＲで置換されたＫ８７６；Ｄで置換されたＥ８７８；Ｅで置換さ
れたＤ８７９；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＡ８８０；Ｈまた
はＲで置換されたＫ８８１；Ｄで置換されたＥ８８４；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ
またはＶで置換されたＳ８８５；Ｎで置換されたＱ８８６；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、ＭまたはＶで置換されたＬ８８７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換さ
れたＬ８９０。
も好ましい：Ｍ１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；
Ｆ２（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ａ４（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ６（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ａ７（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｒ９（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｗ１０（以下で置換された：Ｆ
、またはＹ）；Ｌ１１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｆ１３（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｌ１４（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｌ１７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｌ１８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；ＬＩ
９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２０（以下で
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２１（以下で置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ａ２５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｒ２６（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ２７（以下で置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ２８（以下で置換された：Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ３０（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３１（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ａ３３（以
下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ３４（以下で置換さ
れた：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３５（以下で置換された：Ａ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３６（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ３７（以下で置換された：Ｎ）；Ａ３８（以下で置換
された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ３９（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ４０（以下で置換された：Ｄ）；Ｌ４１
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ４２（以下で置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ４３（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｔ４５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ４６（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ４
７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ４９（以下で
置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ５０（以下で置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ５１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５３（以下で置換された：Ｄ）；Ｌ５４（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ５５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ５６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ５７（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｌ５８（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ５９（以下で置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ６０（以下で置換された：Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ６１（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）
；Ｇ６２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６３（
以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｇ６４（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ６５（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｖ６６
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ６７（以下で置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ６８（以下で置換された：
Ｈ、またはＫ）；Ｌ６９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ａ７０（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ７
２（以下で置換された：Ｅ）；Ｄ７３（以下で置換された：Ｅ）；Ｓ７４（以下
で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ７５（以下で置換され
た：Ｗ、またはＹ）；Ｌ７６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ａ７７（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｅ７９（以下で置換された：Ｄ）；Ｆ８０（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）
；Ｋ８１（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｉ８２（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ８３（以下で置換された：Ｄ）；Ｒ８４
（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ８５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ８６（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｇ８７（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｓ８８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ８
９（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ９０（以下で
置換された：Ｈ、またはＫ）；Ａ９１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｔ９２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、また
はＶ）；Ｇ９３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ
９４（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ９５（以下
で置換された：Ｄ）；Ｒ９６（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ９７（以
下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ９８（以下で置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ９９（以下で置換された：Ｈ、
またはＫ）；Ｇ１００（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｆ１０２（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｆ１０３（以下で置換され
た：Ｗ、またはＹ）；Ｓ１０４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｇ１０５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｔ１０６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ１
０７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｎ１０８（以
下で置換された：Ｑ）；Ｇ１０９（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｅ１１０（以下で置換された：Ｄ）；Ｅ１１２（以下で置換され
た：Ｄ）；Ｓ１１３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｌ１１４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１１
５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１１６（以下
で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ１１７（以下で置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ１１８（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；ＬＩ１９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ１２１（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ
１２２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１２３（
以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ１２４（以下で置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１２５（以下で置換された
：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ１２６（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ１２７（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）
；Ｌ１２８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１２
９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ１３０（以下
で置換された：Ｅ）；Ｇ１３１（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｅ１３２（以下で置換された：Ｄ）；Ｅ１３３（以下で置換された
：Ｄ）；Ｆ１３４（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｔ１３５（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ１３６（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ１３７（以下で置換された：Ｎ）；Ｑ
１３９（以下で置換された：Ｎ）；Ｇ１４０（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１４１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｇ１４２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｇ１４３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｓ１４４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ１４５
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１４６（以下で
置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ１４７（以下で置換され
た：Ｎ）；Ｈ１４９（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｒ１５０（以下で置
換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ１５１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｑｌ５２（以下で置換された：Ｎ）；Ｒｌ５３（以下で置換
された：Ｈ、またはＫ）；Ｗ１５４（以下で置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｇ１
５５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１５７（以
下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１５８（以下で置換
された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１５９（以下で置換された：
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ１６０（以下で置換された：Ｈ、また
はＫ）；Ｌ１６２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｒ１６４（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ１６５（以下で置換された：
Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１６７（以下で置換された：Ｄ）；Ｗ
１６８（以下で置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｅ１６９（以下で置換された：Ｄ
）；Ｖ１７０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｅ１
７１（以下で置換された：Ｄ）；Ｔ１７２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ１７３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｅ１７４（以下で置換された：Ｄ）；Ｇ１７５（以下で置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ１７６（以下で置換された：Ｎ）
；Ｒ１７７（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｑ１７８（以下で置換された
：Ｎ）；Ｅ１７９（以下で置換された：Ｄ）；Ｒ１８０（以下で置換された：Ｈ
、またはＫ）；Ｇ１８１（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｄ１８２（以下で置換された：Ｅ）；Ｈ１８３（以下で置換された：Ｋ、
またはＲ）；Ｑ１８４（以下で置換された：Ｎ）；Ｅ１８５（以下で置換された
：Ｄ）；Ｄ１８６（以下で置換された：Ｅ）；Ｓ１８７（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１８８（以下で置換された：Ｄ）；Ｅ１
８９（以下で置換された：Ｄ）；Ｅ１９０（以下で置換された：Ｄ）；Ｓ１９１
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ１９２（以下で
置換された：Ｎ）；Ｅ１９３（以下で置換された：Ｄ）；Ｅ１９４（以下で置換
された：Ｄ）；Ｅ１９５（以下で置換された：Ｄ）；Ａ１９６（以下で置換され
た：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ１９７（以下で置換された：Ｄ）
；Ｇ１９８（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ１９
９（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ２００（以下
で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ２０１（以下で置換さ
れた：Ｄ）；Ｌ２０６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｇ２０７（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ２
０８（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ２０９（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ２１０（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ２１１（以下で置換された：
Ｈ、またはＫ）；Ｔ２１２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、また
はＶ）；Ｋ２１３（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｒ２１４（以下で置換
された：Ｈ、またはＫ）；Ｆ２１５（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｖ２
１６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ２１７（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ２１８（以下で置換
された：Ｄ）；Ａ２１９（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｒ２２０（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｆ２２１（以下で置換さ
れた：Ｗ、またはＹ）；Ｖ２２２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、またはＭ）；Ｅ２２３（以下で置換された：Ｄ）；Ｔ２２４（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２２５（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２２６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ２２７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、またはＭ）；Ａ２２８（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｄ２２９（以下で置換された：Ｅ）；Ａ２３０（以下で置換された：Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ２３１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ２３２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、またはＶ）；Ａ２３３（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ａ２３４（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｆ２３５（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｙ２３６（以下で置換された
：Ｆ、またはＷ）；Ｇ２３７（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ａ２３８（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｄ２３９（以下で置換された：Ｅ）；Ｌ２４０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ２４１（以下で置換された：Ｎ）；Ｎ２４２（
以下で置換された：Ｑ）；Ｈ２４３（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｉ２
４４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２４５（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ２４６（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２４７（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ２４８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｓ２４９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ２５０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
またはＭ）；Ａ２５１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ａ２５２（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ２
５３（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｉ２５４（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｙ２５５（以下で置換された：Ｆ、またはＷ
）；Ｋ２５６（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｈ２５７（以下で置換され
た：Ｋ、またはＲ）；Ｓ２５９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｉ２６０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｋ２６１（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｎ２６２（以下で置換され
た：Ｑ）；Ｓ２６３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｉ２６４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ２６
５（以下で置換された：Ｑ）；Ｌ２６６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ２６７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
またはＶ）；Ｖ２６８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ
）；Ｖ２６９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ２
７０（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｖ２７１（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ２７２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ２７３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｖ２７４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、また
はＭ）；Ｅ２７５（以下で置換された：Ｄ）；Ｄ２７６（以下で置換された：Ｅ
）；Ｅ２７７（以下で置換された：Ｄ）；Ｋ２７８（以下で置換された：Ｈ、ま
たはＲ）；Ｗ２７９（以下で置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｇ２８０（以下で置
換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ２８２（以下で置換された
：Ｄ）；Ｖ２８３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；
Ｓ２８４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ２８５
（以下で置換された：Ｅ）；Ｎ２８６（以下で置換された：Ｑ）；Ｇ２８７（以
下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ２８８（以下で置換
された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２８９（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ２９０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ２９１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ２９２（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｎ２９３
（以下で置換された：Ｑ）；Ｆ２９４（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｎ
２９６（以下で置換された：Ｑ）；Ｗ２９７（以下で置換された：Ｆ、またはＹ
）；Ｑ２９８（以下で置換された：Ｎ）；Ｒ２９９（以下で置換された：Ｈ、ま
たはＫ）；Ｒ３００（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｆ３０１（以下で置
換された：Ｗ、またはＹ）；Ｎ３０２（以下で置換された：Ｑ）；Ｑ３０３（以
下で置換された：Ｎ）；Ｓ３０５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｄ３０６（以下で置換された：Ｅ）；Ｒ３０７（以下で置換され
た：Ｈ、またはＫ）；Ｈ３０８（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｅ３１０
（以下で置換された：Ｄ）；Ｈ３１１（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｙ
３１２（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｄ３１３（以下で置換された：Ｅ
）；Ｔ３１４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ａ３
１５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ３１６（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３１７（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３１８（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ３１９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３２０（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；
Ｑ３２１（以下で置換された：Ｎ）；Ｎ３２２（以下で置換された：Ｑ）；Ｆ３
２３（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｇ３２５（以下で置換された：Ａ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ３２６（以下で置換された：Ｎ）；Ｅ３２
７（以下で置換された：Ｄ）；Ｇ３２８（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３２９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｄ３３１（以下で置換された：Ｅ）；Ｔ３３２（以下で置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３３３（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３３４（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ３３５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、またはＭ）；Ａ３３６（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｄ３３７（以下で置換された：Ｅ）；Ｉ３３８（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３３９（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ３４０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｍ、またはＶ）；Ｉ３４１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｄ３４３（以下で置換された：Ｅ）；Ｎ３４５（以下で置換された：Ｑ
）；Ｋ３４６（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｓ３４７（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ３４９（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ３５０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｉ３５１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｅ３５２（以下で置換された：Ｄ）；Ｄ３５３（以下で置換さ
れた：Ｅ）；Ｅ３５４（以下で置換された：Ｄ）；Ｇ３５５（以下で置換された
：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ３５６（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ３５７（以下で置換された：Ｎ）；Ａ３５８
（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ３５９（以下で
置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ３６０（以下で置換され
た：Ｋ、またはＲ）；Ｔ３６１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、
またはＶ）；Ｌ３６２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ａ３６３（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ３
６４（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｅ３６５（以下で置換された：Ｄ）
；Ｌ３６６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ３６
７（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ３６８（以下
で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｖ３６９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｌ３７０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｓ３７１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｍ３７２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｈ
３７４（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｄ３７５（以下で置換された：Ｅ
）；Ｄ３７６（以下で置換された：Ｅ）；Ｓ３７７（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ３７８（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）
；Ｔ３８１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ３８
２（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｌ３８３（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ３８４（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）
；Ｇ３８５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｍ３８
７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｇ３８８（以下
で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ３８９（以下で置換さ
れた：Ｈ、またはＲ）；Ｈ３９０（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｈ３９
１（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｖ３９２（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｍ３９３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ａ３９４（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｌ３９６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｆ３９７（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｖ３９８（以下で置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｈ３９９（以下で置換された：Ｋ
、またはＲ）；Ｌ４００（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｎ４０１（以下で置換された：Ｑ）；Ｑ４０２（以下で置換された：Ｎ）
；Ｔ４０３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４０
４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ４０６（以下
で置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｓ４０７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４１０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ａ４１１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｍ４１２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ｙ
４１３（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｌ４１４（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４１５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ４１６（以下で置換された：Ｄ）；Ｌ４１７（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４１８（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４１９（以下で置換された：
Ｅ）；Ｇ４２０（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ
４２１（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ４２２（
以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｇ４２３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４２４（以下で置換された：Ｅ）；Ｌ４２６（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４２７（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４２８（以下で置換された：
Ｅ）；Ａ４２９（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ
４３１（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ４３２（
以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ４３３（以下で置
換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４３４（以下で置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４３６（以下で置換された：Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ４３８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ４３９（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｌ４４０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ｇ４４２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ
４４３（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｍ４４４（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＶ）；Ａ４４５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４４６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｙ４４７（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｑ４４８（
以下で置換された：Ｎ）；Ｌ４４９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｄ４５０（以下で置換された：Ｅ）；Ｑ４５１（以下で置換さ
れた：Ｎ）；Ｑ４５２（以下で置換された：Ｎ）；Ｒ４５４（以下で置換された
：Ｈ、またはＫ）；Ｑ４５５（以下で置換された：Ｎ）；Ｉ４５６（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ４５７（以下で置換された：
Ｗ、またはＹ）；Ｇ４５８（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｄ４６０（以下で置換された：Ｅ）；Ｆ４６１（以下で置換された：Ｗ
、またはＹ）；Ｒ４６２（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｈ４６３（以下
で置換された：Ｋ、またはＲ ；Ｎ４６６（以下で置換された：Ｑ）；Ｔ４６７
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４６８（以下で
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ４６９（以下で置換され
た：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ４７０（以下で置換された：Ｎ）
；Ｄ４７１（以下で置換された：Ｅ）；Ｖ４７２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ａ４７４（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ４７５（以下で置換された：Ｎ ；Ｌ４７６（以下で置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ４７７（以下で置換された
：Ｆ、またはＹ）；Ｈ４７９（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｔ４８０（
以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ４８１（以下で置
換された：Ｅ）；Ｇ４８２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ａ４８３（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｅ４８４（以下で置換された：Ｄ）；Ｌ４８６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ４８８（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｔ
４８９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ４９０（
以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｎ４９１（以下で置換された：Ｑ）；Ｇ４
９２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ４９３（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ４９４（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ４９６（以下で置換された：
Ｆ、またはＹ）；Ａ４９７（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｄ４９８（以下で置換された：Ｅ）；Ｇ４９９（以下で置換された：Ａ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ５００（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５０３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５０５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｈ５０６（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｌ５０７（以下で置
換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ５０９（以下で置換された
：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５１０（以下で置換された：Ｄ）；
Ｇ５１１（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｓ５１２
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ５１４（以下で
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５１６（以下で置換され
た：Ｄ）；Ｅ５１７（以下で置換された：Ｄ）；Ｅ５１８（以下で置換された：
Ｄ）；Ｖ５１９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｅ
５２０（以下で置換された：Ｄ）；Ｒ５２１（以下で置換された：Ｈ、またはＫ
）；Ｋ５２３（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｖ５２５（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ５２６（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｄ５２７（以下で置換された：Ｅ）；Ｇ５２
８（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５２９（以下
で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ５３０（以下で置換さ
れた：Ｆ、またはＹ）；Ａ５３１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｗ５３３（以下で置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｇ５３４（以下
で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｗ５３６（以下で置換さ
れた：Ｆ、またはＹ）；Ｇ５３７（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、またはＶ）；Ｅ５３８（以下で置換された：Ｄ）；Ｓ５４０（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ５４１（以下で置換された：Ｈ、
またはＫ）；Ｔ５４２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ
）；Ｇ５４４（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５
４５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５４６（以
下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ５４７（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｑ５４８（以下で置換された：
Ｎ）；Ｆ５４９（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｓ５５０（以下で置換さ
れた：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｈ５５１（以下で置換された：Ｋ
、またはＲ）；Ｒ５５２（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｅ５５３（以下
で置換された：Ｄ）；Ｋ５５５（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｄ５５６
（以下で置換された：Ｅ）；Ｅ５５８（以下で置換された：Ｄ）；Ｑ５６０（以
下で置換された：Ｎ）；Ｎ５６１（以下で置換された：Ｑ）；Ｇ５６２（以下で
置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５６３（以下で置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ５６４（以下で置換された：Ｈ、
またはＫ）；Ｙ５６５（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｌ５６７（以下で
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ５６８（以下で置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ５６９（以下で置換された：Ｈ、
またはＫ）；Ｒ５７０（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ａ５７１（以下で
置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ５７２（以下で置換され
た：Ｈ、またはＲ）；Ｙ５７３（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｑ５７４
（以下で置換された：Ｎ）；Ｓ５７５（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｈ５７７（以下で置換された：Ｋ、またはＲ）；Ｔ５７８（
以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ５７９（以下で置
換された：Ｄ）；Ｅ５８０（以下で置換された：Ｄ）；Ｄ５８４（以下で置換さ
れた：Ｅ）；Ｇ５８５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｋ５８６（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｓ５８７（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ５８８（以下で置換された：Ｗ、
またはＹ）；Ｒ５８９（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｅ５９０（以下で
置換された：Ｄ）；Ｑ５９１（以下で置換された：Ｎ）；Ｑ５９２（以下で置換
された：Ｎ）；Ｅ５９４（以下で置換された：Ｄ）；Ｋ５９５（以下で置換され
た：Ｈ、またはＲ）；Ｙ５９６（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｎ５９７
（以下で置換された：Ｑ）；Ａ５９８（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｙ５９９（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｎ６００（
以下で置換された：Ｑ）；Ｙ６０１（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；Ｔ６
０２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６０３（以
下で置換された：Ｅ）；Ｍ６０４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、またはＶ）；Ｄ６０５（以下で置換された：Ｅ）；Ｇ６０６（以下で置換され
た：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ６０７（以下で置換された：Ｑ）
；Ｌ６０８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ６０
９（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｑ６１０（以下
で置換された：Ｎ）；Ｗ６１１（以下で置換された：Ｆ、またはＹ）；Ｖ６１２
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ６１４（以下で
置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｙ６１５（以下で置換された：Ｆ、またはＷ）；
Ａ６１６（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ６１７
（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ６１８（以下で
置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ６１９（以下で置換され
た：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ６２１（以下で置換された：Ｈ、
またはＫ）；Ｄ６２２（以下で置換された：Ｅ）；Ｒ６２３（以下で置換された
：Ｈ、またはＫ）；Ｋ６２５（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｌ６２６（
以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｆ６２７（以下で置
換された：Ｗ、またはＹ）；Ｒ６２９（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ａ
６３０（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ６３１（
以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ６３２（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｒ６３３（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｓ
６３４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ６３５（
以下で置換された：Ｄ）；Ｆ６３６（以下で置換された：Ｗ、またはＹ）；Ｋ６
３７（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｖ６３８（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｆ６３９（以下で置換された：Ｗ、またはＹ
）；Ｅ６４０（以下で置換された：Ｄ）；Ａ６４１（以下で置換された：Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６４２（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）
；Ｖ６４３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｉ６４
４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６４５（以下
で置換された：Ｅ）；Ｇ６４６（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ｔ６４７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ
）；Ｌ６４８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ６
５０（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｅ６５２（以
下で置換された：Ｄ）；Ｔ６５３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ
、またはＶ）；Ｌ６５４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、または
Ｖ）；Ａ６５５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｉ
６５６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ６５８（
以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｒ６５９（以下で置
換された：Ｈ、またはＫ）；Ｇ６６０（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、またはＶ）；Ｑ６６１（以下で置換された：Ｎ）；Ｖ６６３（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ６６４（以下で置換された：
Ｈ、またはＲ）；Ａ６６５（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、また
はＶ）；Ｇ６６６（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；
Ｄ６６８（以下で置換された：Ｅ）；Ｈ６６９（以下で置換された：Ｋ、または
Ｒ）；Ｖ６７０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｖ
６７１（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｄ６７２（
以下で置換された：Ｅ）；Ｓ６７３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｒ６７５（以下で置換された：Ｈ、またはＫ）；Ｋ６７６（以
下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｌ６７７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｄ６７８（以下で置換された：Ｅ）；Ｋ６７９（以下
で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ｇ６８１（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ６８２（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
またはＭ）；Ｇ６８４（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、またはＶ
）；Ｇ６８５（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ６
８６（以下で置換された：ＨまたはＲ）；Ｇ６８７（以下で置換された：Ａ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ６８８（以下で置換された：Ｑ）；Ｓ６８９
（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶ）；Ｒ６９１（以下で置
換された：ＨまたはＫ）；Ｋ６９２（以下で置換された：ＨまたはＲ）；Ｖ６９
３（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｓ６９４（以下
で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｇ６９５（以下で置換さ
れた：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶ）；Ｓ６９６（以下で置換された：Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｌ６９７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｓ，Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ６９８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、またはＶ）；Ｔ７００（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ、また
はＶ）；Ｎ７０１（以下で置換された：Ｑ）；Ｙ７０２（以下で置換された：Ｆ
またはＷ）；Ｇ７０３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｙ７０４（以下で置換された：ＦまたはＷ）；Ｎ７０５（以下で置換された
：Ｑ）；Ｄ７０６（以下で置換された：Ｅ）；Ｉ７０７（以下で置換された：Ａ
、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ７０８（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｔ７０９（以下で置換された：Ａ，Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｍ、またはＶ）；Ｉ１７１０（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
またはＶ）；Ａ７１２（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ
）；Ｇ７１３（以下で置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ７
１４（以下で置換された：Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｔ７１５（以
下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ７１６（以下で
置換された：Ｑ）；Ｉ７１７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、ま
たはＶ）；Ｄ７１８（以下で置換された：Ｅ）；Ｖ７１９（以下で置換された：
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、またはＭ）；Ｋ７２０（以下で置換された：Ｈまたは
Ｒ）；Ｑ７２１（以下で置換された：Ｎ）；Ｒ７２２（以下で置換された：Ｈま
たはＫ）；Ｓ７２３（以下で置換された：Ａ、Ｇ，Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）
；Ｈ７２４（以下で置換された：ＫまたはＲ）；Ｇ７２６（以下で置換された：
Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｖ７２７（以下で置換された：Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＭ）；Ｑ７２８（以下で置換された：Ｎ）；Ｎ７２９（以
下で置換された：Ｑ）；Ｄ７３０（以下で置換された：Ｅ）；Ｇ７３１（以下で
置換された：Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｎ７３２（以下で置換され
た：Ｑ）；Ｙ７３３（以下で置換された：ＦまたはＷ）；Ｌ７３４（以下で置換
された：Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ａ７３５（以下で置換された：
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶ）；Ｌ７３６（以下で置換された：Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、またはＶ）；Ｋ７３７（以下で置換された：Ｈ、またはＲ）；Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換されたＴ７３８；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
またはＶで置換されたＡ７３９；Ｅで置換されたＤ７４０；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、ＭまたはＶで置換されたＧ７４１；Ｎで置換されたＱ７４２；ＦまたはＷで置
換されたＹ７４３；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７４４；Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７４５；Ｑで置換されたＮ７４６
；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＧ７４７；Ｑで置換されたＮ７
４８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７４９；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＡ７５０；Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置
換されたＩ７５１；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ７５２；Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＡ７５３；Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
またはＶで置換されたＩ７５４；Ｄで置換されたＥ７５５；Ｎで置換されたＱ７
５６；Ｅで置換されたＤ７５７；Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換された
Ｉ７５８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７５９；Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＭで置換されたＶ７６０；ＨまたはＲで置換されたＫ７６１
；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＧ７６２；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、ＭまたはＶで置換されたＴ７６３；Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換さ
れたＩ７６４；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７６５；Ｈまた
はＲで置換されたＫ７６６；ＦまたはＷで置換されたＹ７６７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ７６８；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置
換されたＧ７６９；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ７７０；Ａ
、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＩ７７１；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
またはＶで置換されたＡ７７２；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換された
Ｔ７７３；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７７４；Ｄで置換さ
れたＥ７７５；ＨまたはＫで置換されたＲ７７６；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｍまた
はＶで置換されたＬ７７７；Ｎで置換されたＱ７７８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ
またはＶで置換されたＳ７７９；ＷまたはＹで置換されたＦ７８０；ＨまたはＫ
で置換されたＲ７８１；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７８３
；Ｄで置換されたＥ７８５；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７
８７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換されたＴ７８８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、ＴまたはＭで置換されたＶ７８９；Ｎで置換されたＱ７９０；Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ７９１；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶ
で置換されたＬ７９２；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換されたＴ７９３
；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＭで置換されたＶ７９４；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、ＭまたはＶで置換されたＧ７９６；Ｄで置換されたＥ７９７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、ＴまたはＭで置換されたＶ７９８；ＷまたはＹで置換されたＦ７９９；Ｈ
またはＲで置換されたＫ８０２；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＭで置換された
Ｖ８０３；ＨまたはＲで置換されたＫ８０４；ＦまたはＷで置換されたＹ８０５
；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換されたＴ８０６；ＷまたはＹで置換さ
れたＦ８０７；ＷまたはＹで置換されたＦ８０８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔまた
はＭで置換されたＶ８０９；Ｑで置換されたＮ８１１；Ｅで置換されたＤ８１２
；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＭで置換されたＶ８１３；Ｅで置換されたＤ８
１４；ＷまたはＹで置換されたＦ８１５；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置
換されたＳ８１６；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＶで置換されたＭ８１７；Ｎ
で置換されたＱ８１８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ８１９
；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ８２０；ＨまたはＲで置換さ
れたＫ８２１；Ｄで置換されたＥ８２２；ＨまたはＫで置換されたＲ８２３；Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＡ８２４；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍ
またはＶで置換されたＴ８２５；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換された
Ｔ８２６；Ｑで置換されたＮ８２７；Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換さ
れたＩ８２８；Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＩ８２９；Ｎで置
換されたＱ８３０；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ８３２；Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ８３３；ＫまたはＲで置換された
Ｈ８３４；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＡ８３５；Ｎで置換さ
れたＱ８３６；ＦまたはＹで置換されたＷ８３７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔまた
はＭで置換されたＶ８３８；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ８
３９；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＧ８４０；Ｅで置換された
Ｄ８４１；ＦまたはＹで置換されたＷ８４２；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶ
で置換されたＳ８４３；Ｄで置換されたＥ８４４；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍまた
はＶで置換されたＳ８４６；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ８
４７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換されたＴ８４８；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＧ８５０；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置
換されたＡ８５１；Ａ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＧ８５２；Ｆ
またはＹで置換されたＷ８５３；Ｎで置換されたＱ８５４；ＨまたはＫで置換さ
れたＲ８５５；ＨまたはＫで置換されたＲ８５６；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｍまた
はＶで置換されたＴ８５７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＭで置換されたＶ８
５８；Ｄで置換されたＥ８５９；ＨまたはＫで置換されたＲ８６１；Ｅで置換さ
れたＤ８６２；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＳ８６４；Ａ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＧ８６５；Ｎで置換されたＱ８６６；Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＡ８６７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ
またはＶで置換されたＳ８６８；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換された
Ａ８６９；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、ＭまたはＶで置換されたＴ８７０；Ｑで置換さ
れたＮ８７２；ＨまたはＲで置換されたＫ８７３；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍまた
はＶで置換されたＡ８７４；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＬ８
７５；ＨまたはＲで置換されたＫ８７６；Ｄで置換されたＥ８７８；Ｅで置換さ
れたＤ８７９；Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換されたＡ８８０；Ｈまた
はＲで置換されたＫ８８１；Ｄで置換されたＥ８８４；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｍ
またはＶで置換されたＳ８８５；Ｎで置換されたＱ８８６；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ
、ＭまたはＶで置換されたＬ８８７；Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、ＭまたはＶで置換さ
れたＬ８９０。
【０１２６】
以下の保存的アミノ酸置換のうちの１以上を有するＭＥＴＨ２ポリペプチドも
また好ましい：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換さ
れたＭ１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ
またはＣで置換されたＦ２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ５；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ６；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ７；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置
換されたＰ８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、ＰまたはＣで置換されたＲ９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ１０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ１１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ１２；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで
置換されたＦ１３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置
換されたＬ１４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＬ１５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換さ
れたＬ１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＬ１７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換された
Ｌ１８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ
１９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２
０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２１
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２２；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙま
たはＣで置換されたＰ２３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＬ２４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＡ２５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ２６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ２７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ２８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ２９；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ３０；Ｄ、Ｅ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ
３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、ＹまたはＣで置換されたＰ３２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＡ３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＡ３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＧ３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＧ３６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ３７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ３９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ４０；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ４２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ４３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換さ
れたＰ４４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＴ４５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＲ４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＬ４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ５１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ５２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ５３；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ５４；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ５５；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ５６；Ｄ、Ｅ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ
５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ５
８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ５９
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ６０；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで
置換されたＦ６１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置
換されたＧ６２；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ６３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、ＰまたはＣで置換されたＧ６４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ６５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ６７；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ６８；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ７０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換
されたＰ７１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ７２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ７３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ７４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ７５
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ７６；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ７７；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙまた
はＣで置換されたＰ７８；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ８０；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＫ８１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換された
Ｉ８２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＥ８３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ８４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ８５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ８７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ８８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ８９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ９０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ９１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ９２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ９３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ９４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ９５；Ｄ
、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置
換されたＲ９６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＧ９７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換さ
れたＬ９８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＲ９９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＧ１００；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ１０１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ１
０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐまた
はＣで置換されたＦ１０３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＳ１０４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＧ１０５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＴ１０６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＶ１０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＮ１０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１０９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１１０
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
またはＣで置換されたＰ１１１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１１２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ１１３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ１１４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１１５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ１１７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ１１８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ１１９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換された
Ｃ１２０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＲ１２１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＧ１２２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＬ１２３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＳ１２４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＧ１２５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＳ１２６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ１２７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ１２８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ１２９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ１３０
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１３１
；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＥ１３２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ１３４；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ１３５；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＩ１３６；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣ
で置換されたＱ１３７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ１３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ１３９
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１４０
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１４１
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１４２
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１４３
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ１４４
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ１４５
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１４６
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＱ１４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ１４８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ１４９
；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣ
で置換されたＲ１５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣ
で置換されたＬ１５１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ１５２；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ１５３；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換さ
れたＷ１５４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換さ
れたＧ１５５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ１５６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１５８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１５９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ１６０；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置
換されたＰ１６１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置
換されたＬ１６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ１６３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ１６４；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１６５；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙまたは
Ｃで置換されたＰ１６６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１６７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ１６８；Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＥ１６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＶ１７０；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１７１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ１７２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１７３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１７４；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１７５；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＱ１７６；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ１７７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ１７８；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＥ１７９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ１８０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１８１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ１８２；Ｄ、Ｅ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ
１８３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＱ１８４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１８５；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ
１８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ
１８７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＥ１８８；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１８９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ
１９０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ
１９１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＱ１９２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１９３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ
１９４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＥ１９５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＡ１９６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１９７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１９８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１９９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ２００；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ
２０１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ２０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ２０３；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで
置換されたＰ２０４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ２０５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２０６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ２０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ２０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ２０９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ２１０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ２１１；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ２１２；Ｄ、
Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＫ２１３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ２１４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ２１５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ２１７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ
２１８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ
２１９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＲ２２０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ２２１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２２２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ２２３；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ２２４；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２２５；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２２６；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２２７；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ２２８；
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＤ２２９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＡ２３０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＳ２３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＭ２３２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＡ２３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＡ２３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ２３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＹ２３６；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ２３７；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ２３８；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＤ２３９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＬ２４０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ２４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＮ２４２；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＨ２４３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＩ２４４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＬ２４５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＴ２４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＬ２４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＭ２４８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＳ２４９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＶ２５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＡ２５１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＡ２５２；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＲ２５３；Ｄ、Ｅ、ＨｊＫ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＩ２５４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＹ２５５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ２５６；
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＨ２５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ２５８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ２５９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＩ２６０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ２６１；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＮ２６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＳ２６３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＩ２６４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＮ２６５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＭ２６７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２６８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２６９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ２７０；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２７１；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２７２；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＩ２７３；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２７４；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＥ２７５；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ２７６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ２７７；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＫ２７８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
ＰまたはＣで置換されたＷ２７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＧ２８０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ２８１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＥ２８２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＶ２８３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＳ２８４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ２８５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＮ２８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ２８７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ２８８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２８９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ２９０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２９１；Ｄ、Ｅ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ
２９２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＮ２９３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ２９４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ
２９５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＮ２９６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ２９７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ２９
８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＲ２９９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ３００；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ３０１；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＮ３０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ３０３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ３０４；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ３０５；Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＤ３０６；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ３０７；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換
されたＰ３０９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ３１０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３１１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＹ
３１２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＤ３１３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＴ３１４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＡ３１５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＩ３１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＬ３１７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＬ３１８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＴ３１９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ３２０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ３２
１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＮ３２２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ３２３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ３２
４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ３２
５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＱ３２６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ３２７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ３２８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ３２９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ
３３０；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＤ３３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＴ３３２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＬ３３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＧ３３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＶ３３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＡ３３６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ３３７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＩ３３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ３３９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ３４０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＩ３４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換され
たＣ３４２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ３４３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ３４４；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＮ３４５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ３４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ３４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ３４８；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ３４９；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ３５０；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＩ３５１；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＥ３５２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ３５３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ３５４；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ３５５；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ３５６；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＱ３５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＡ３５８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＡ３５９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３６０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ３６１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ３６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ３６３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３６４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ
３６５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ
３６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ
３６７；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＨ３６８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＶ３６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＬ３７０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＳ３７１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＭ３７２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ３７３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３７
４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＤ３７５；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ３７６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ３７７；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ３７８；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙま
たはＣで置換されたＰ３７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ３８０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ３８１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ３８
２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ３８
３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＦ３８４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＧ３８５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ３８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＭ３８７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ３８８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ３８９；
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＨ３９０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３９１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ３９２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＭ３９３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ３９４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ３９５；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ３９６；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換
されたＦ３９７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＶ３９８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３９９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４００；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＮ４０１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＱ４０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＴ４０３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＬ４０４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４０５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ４０６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ４０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換
されたＰ４０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ４０９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ４１０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ４１１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＭ４１２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＹ４１３；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４１４；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ４１５；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＥ４１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＬ４１７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＬ４１８；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ４１９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４２０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４２１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ４２２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４２３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＤ４２４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ４２５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４２６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４２７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ４２８；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ４２９；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで
置換されたＰ４３０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＧ４３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＡ４３２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＡ４３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＬ４３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４３６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４３
７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ４３
８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４３
９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４４
０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
ＹまたはＣで置換されたＰ４４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＧ４４２；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ４４３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＭ４４４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ４４５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＹ４４７；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＱ４４８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＬ４４９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ４５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ４５１；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＱ４５２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ４５３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ４５４；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＱ４５５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＩ４５６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ４５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４５８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４５９；
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＤ４６０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ４６１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ４６２；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＨ４６３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ４６４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４６５；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＮ４６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＴ４６７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＳ４６８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＡ４６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ４７０；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ４７１；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ４７２；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙまたは
Ｐで置換されたＣ４７３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＡ４７４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ４７５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４７６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ４７７；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙまたは
Ｐで置換されたＣ４７８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ４７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ４８０；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ４８１；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４８２；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ４８３；Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＥ４８４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４８５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ４８
７；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＨ４８８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＴ４８９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ４９０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＮ４９１；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４９２；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ４９３；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４９４；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙまたは
Ｃで置換されたＰ４９５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ４９６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ４９７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ４９８；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４９９；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ５００；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙまたは
Ｃで置換されたＰ５０１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ５０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ５０３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ
５０４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ
５０５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＨ５０６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＬ５０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ５０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ５０９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ
５１０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ
５１１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ
５１２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ５１３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ５１４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ５１５；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＥ５１６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ５１７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ５１８；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ５１９；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＥ５２０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ５２１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ５２２；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＫ５２３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ５２４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ５２５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ５２６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ５２７；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ５２８；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ５２９；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換され
たＷ５３０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＡ５３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ５３２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ５３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ５３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換
されたＰ５３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ５３６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ５３７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ５３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換
されたＣ５３９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置
換されたＳ５４０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ５４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ５４２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ５４３；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５４４
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５４
５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５
４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ
５４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣで置換されたＱ５４８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ５４９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ５５０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＨ
５５１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＲ５５２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ５５３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換さ
れたＣ５５４；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣで置換されたＫ５５５；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ５５６；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで
置換されたＰ５５７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ５５８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ５５
９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＱ５６０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ５６１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５６３；Ｄ、Ｅ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ｒ５６４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ
、またはＣで置換されたＹ５６５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ５６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ５６７；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５６８；Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＲ５６９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ５７０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ５７１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ５７２；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換された
Ｙ５７３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣで置換されたＱ５７４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ５７５；Ｄ、Ｅ，Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ５７６；Ｄ、
Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置
換されたＨ５７７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＴ５７８；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ５７９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ５８０；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
またはＰで置換されたＣ５８１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ５８２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置
換されたＰ５８３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ５８４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５８５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ５８６；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ５８７；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで
置換されたＦ５８８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ５８９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ５９０；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＱ５９１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ５９２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ５
９３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＥ５９４；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ５９５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＹ５９
６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＮ５９７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＡ５９８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＹ５９９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ
６００；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、
またはＣで置換されたＹ６０１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＴ６０２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ６０３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＭ６０４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＤ６０５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＧ６０６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ６０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ６０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ６０９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ６１０；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＷ６１１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＶ６１２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ６１３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ６１
４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、また
はＣで置換されたＹ６１５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＡ６１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＧ６１７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＶ６１８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣで置換されたＳ６１９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ６２０；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＲ６２１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ６２２；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ６２３；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで
置換されたＣ６２４；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ６２５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ６２６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ６２７；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、または
Ｐで置換されたＣ６２８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ６２９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ６３０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ６３１；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ６３２；
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＲ６３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＳ６３４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ６３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ６３６；
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＫ６３７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＶ６３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ６３９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ６４０；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ６４１
；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＫ６４２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＶ６４３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＩ６４４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ６４５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ６４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ６４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ６４８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置
換されたＣ６４９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＧ６５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ６５１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ６５
２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ６
５３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ
６５４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ａ６５５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換され
たＩ６５６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ６５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ６５８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ６５９；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ６６０；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＱ６６１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ６６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ６６３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ６６
４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ６
６５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ
６６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ６６７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ６６８；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＨ６６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＶ６７０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置
換されたＶ６７１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ６７２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ６７３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ６７
４；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＲ６７５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ６７６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ６７７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ６７
８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＫ６７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ６８０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ６８１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ６８２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置
換されたＣ６８３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＧ６８４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＧ６８５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ６８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ６８７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ６８８；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ６８９
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＰで置換されたＣ６９０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ６９１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ６９
２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ６
９３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ
６９４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ｇ６９５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換され
たＳ６９６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＬ６９７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＴ６９８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ６９９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ７００；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ７０１
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＹ７０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＧ７０３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＹ７０４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ７０５
；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＤ７０６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＩ７０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＶ７０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣで置換されたＴ７０９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣで置換されたＩ７１０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ７１１；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ７１２；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ７１３；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ７１４；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ７１５
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＮ７１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＩ７１７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ７１８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ７１９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ
７２０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣで置換されたＱ７２１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ７２２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ７２３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＨ
７２４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ７２５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ７２６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ７２７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ７２８；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＮ７２９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ７３０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ７３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ７３
２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、また
はＣで置換されたＹ７３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＬ７３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＡ７３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＬ７３６；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ７３７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ７３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ７３９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換され
たＤ７４０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＧ７４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ７４２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＹ７４３；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７４４；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７４５；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＮ７４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＧ７４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ７４８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７４９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ７５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＩ７５１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ７５２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ７５３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＩ７５４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＥ７５５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ７５６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ７５７；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＩ７５８；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７５９；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ７６０；
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＫ７６１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＧ７６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＴ７６３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＩ７６４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＬ７６５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ７６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＹ７６７
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ７６
８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ７
６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ
７７０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ｉ７７１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換され
たＡ７７２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＴ７７３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＬ７７４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ７７５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ７７６；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７７７；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＱ７７８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＳ７７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ７８０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ７８１；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、または
Ｃで置換されたＰ７８２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＬ７８３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ７８４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ｅ７８５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ７８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７８７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ７８８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ７８９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ７９０；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７９１
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７９
２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ７
９３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ
７９４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ７９５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ７９６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ７９７；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ７９８；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置
換されたＦ７９９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ８００；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ８
０１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＫ８０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＶ８０３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ８０４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＹ８０５
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ８０
６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、また
はＣで置換されたＦ８０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ８０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ８０９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ
８１０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣで置換されたＮ８１１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ８１２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ８１３；Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＤ８１４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ８１５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＭ８１７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ８１８；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８１９；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８２０；
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＫ８２１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ８２２；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ８２３；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ８２４；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ８２５
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ８２
６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＮ８２７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＩ８２８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣで置換されたＩ８２９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ８３０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置
換されたＰ８３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＬ８３２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＬ８３３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＨ８３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ８３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ８３６；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＷ８３７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＶ８３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＬ８３９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＧ８４０；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ８４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＷ８４
２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８
４３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＥ８４４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ８４５；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８４６；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８４７；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ８４８；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、また
はＰで置換されたＣ８４９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＧ８５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＡ８５１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＧ８５２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＷ８５３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ
８５４；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＲ８５５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ８５６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ８５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ８５８；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ｅ８５９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ８６０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ８６１；Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＤ８６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ８６３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８６４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ８６５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ８６
６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ８
６７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ
８６８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ａ８６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換され
たＴ８７０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ８７１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ８７２；Ｄ、
Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置
換されたＫ８７３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＡ８７４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＬ８７５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ８７６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ８７７
；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＥ８７８；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ８７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ８８０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ８
８１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＣで置換されたＰ８８２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ８８３；Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＥ８８４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＳ８８５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ８８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ８８７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ
８８８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ８８９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ８９０。
また好ましい：Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換さ
れたＭ１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ
またはＣで置換されたＦ２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ５；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ６；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ７；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置
換されたＰ８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、ＰまたはＣで置換されたＲ９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ１０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ１１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ１２；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで
置換されたＦ１３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置
換されたＬ１４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＬ１５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換さ
れたＬ１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＬ１７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換された
Ｌ１８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ
１９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２
０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２１
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２２；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙま
たはＣで置換されたＰ２３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＬ２４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＡ２５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ２６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ２７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ２８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ２９；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ３０；Ｄ、Ｅ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ
３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、ＹまたはＣで置換されたＰ３２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＡ３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＡ３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＧ３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＧ３６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ３７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ３９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ４０；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ４２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ４３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換さ
れたＰ４４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＴ４５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＲ４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＬ４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ５１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ５２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ５３；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ５４；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ５５；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ５６；Ｄ、Ｅ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ
５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ５
８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ５９
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ６０；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで
置換されたＦ６１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置
換されたＧ６２；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ６３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、ＰまたはＣで置換されたＧ６４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ６５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ６７；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ６８；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ７０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換
されたＰ７１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ７２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ７３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ７４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ７５
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ７６；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ７７；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙまた
はＣで置換されたＰ７８；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ８０；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＫ８１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換された
Ｉ８２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＥ８３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ８４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ８５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ８７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ８８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ８９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ９０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ９１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ９２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ９３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ９４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ９５；Ｄ
、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置
換されたＲ９６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＧ９７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換さ
れたＬ９８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＲ９９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＧ１００；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ１０１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ１
０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐまた
はＣで置換されたＦ１０３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＳ１０４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＧ１０５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＴ１０６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＶ１０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＮ１０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１０９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１１０
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
またはＣで置換されたＰ１１１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１１２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ１１３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ１１４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１１５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ１１７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ１１８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ１１９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換された
Ｃ１２０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＲ１２１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＧ１２２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＬ１２３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＳ１２４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＧ１２５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
またはＣで置換されたＳ１２６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ１２７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ１２８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ１２９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ１３０
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１３１
；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＥ１３２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ１３４；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ１３５；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＩ１３６；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣ
で置換されたＱ１３７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ１３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ１３９
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１４０
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１４１
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１４２
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１４３
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ１４４
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ１４５
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１４６
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまた
はＣで置換されたＱ１４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ１４８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ１４９
；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣ
で置換されたＲ１５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣ
で置換されたＬ１５１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ１５２；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ１５３；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換さ
れたＷ１５４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換さ
れたＧ１５５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ１５６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１５８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１５９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ１６０；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置
換されたＰ１６１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置
換されたＬ１６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ１６３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ１６４；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１６５；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙまたは
Ｃで置換されたＰ１６６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１６７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ１６８；Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＥ１６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＶ１７０；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１７１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ１７２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１７３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１７４；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１７５；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＱ１７６；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ１７７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ１７８；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＥ１７９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ１８０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１８１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ１８２；Ｄ、Ｅ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ
１８３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＱ１８４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１８５；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ
１８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ
１８７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＥ１８８；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１８９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ
１９０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ
１９１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＱ１９２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１９３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ
１９４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＥ１９５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＡ１９６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ１９７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ１９８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ１９９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ２００；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ
２０１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ２０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ２０３；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで
置換されたＰ２０４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ２０５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２０６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ２０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ２０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ２０９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ２１０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ２１１；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ２１２；Ｄ、
Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＫ２１３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ２１４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ２１５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ２１７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ
２１８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ
２１９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＲ２２０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ２２１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２２２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ２２３；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ２２４；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２２５；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２２６；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２２７；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ２２８；
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＤ２２９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＡ２３０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＳ２３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＭ２３２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＡ２３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＡ２３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ２３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＹ２３６；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ２３７；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ２３８；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＤ２３９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＬ２４０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ２４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＮ２４２；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＨ２４３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＩ２４４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＬ２４５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＴ２４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＬ２４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＭ２４８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＳ２４９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＶ２５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＡ２５１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＡ２５２；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＲ２５３；Ｄ、Ｅ、ＨｊＫ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＩ２５４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＹ２５５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ２５６；
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＨ２５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ２５８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ２５９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＩ２６０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ２６１；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＮ２６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＳ２６３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＩ２６４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＮ２６５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＭ２６７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２６８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２６９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ２７０；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２７１；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２７２；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＩ２７３；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ２７４；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＥ２７５；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ２７６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ２７７；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＫ２７８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
ＰまたはＣで置換されたＷ２７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＧ２８０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ２８１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＥ２８２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＶ２８３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＳ２８４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ２８５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＮ２８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ２８７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ２８８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２８９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ２９０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ２９１；Ｄ、Ｅ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ
２９２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＮ２９３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ２９４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ
２９５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＮ２９６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ２９７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ２９
８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＲ２９９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ３００；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ３０１；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＮ３０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ３０３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ３０４；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ３０５；Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＤ３０６；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ３０７；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換
されたＰ３０９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ３１０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３１１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＹ
３１２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＤ３１３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＴ３１４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＡ３１５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＩ３１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＬ３１７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＬ３１８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＴ３１９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ３２０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ３２
１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＮ３２２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ３２３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ３２
４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ３２
５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＱ３２６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ３２７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ３２８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ３２９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ
３３０；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＤ３３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＴ３３２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＬ３３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＧ３３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＶ３３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＡ３３６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ３３７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＩ３３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ３３９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ３４０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＩ３４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換され
たＣ３４２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ３４３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ３４４；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＮ３４５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ３４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ３４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ３４８；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ３４９；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ３５０；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＩ３５１；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＥ３５２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ３５３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ３５４；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ３５５；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ３５６；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＱ３５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＡ３５８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＡ３５９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３６０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ３６１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ３６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ３６３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３６４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ
３６５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ
３６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ
３６７；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＨ３６８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＶ３６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＬ３７０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＳ３７１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＭ３７２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ３７３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３７
４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＤ３７５；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ３７６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ３７７；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ３７８；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙま
たはＣで置換されたＰ３７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ３８０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ３８１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ３８
２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ３８
３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＦ３８４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＧ３８５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ３８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＭ３８７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ３８８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ３８９；
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＨ３９０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３９１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ３９２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＭ３９３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ３９４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ３９５；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ３９６；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換
されたＦ３９７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＶ３９８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ３９９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４００；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＮ４０１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＱ４０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＴ４０３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＬ４０４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４０５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ４０６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ４０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換
されたＰ４０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ４０９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ４１０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ４１１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＭ４１２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＹ４１３；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４１４；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ４１５；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＥ４１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＬ４１７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＬ４１８；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ４１９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４２０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４２１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ４２２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４２３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＤ４２４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ４２５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４２６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４２７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ４２８；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ４２９；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで
置換されたＰ４３０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＧ４３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＡ４３２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＡ４３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＬ４３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４３６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４３
７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ４３
８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４３
９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４４
０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
ＹまたはＣで置換されたＰ４４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
ＰまたはＣで置換されたＧ４４２；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ４４３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＭ４４４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ４４５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＹ４４７；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＱ４４８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＬ４４９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ４５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ４５１；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＱ４５２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ４５３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ４５４；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＱ４５５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＩ４５６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ４５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４５８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４５９；
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＤ４６０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＦ４６１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ４６２；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＨ４６３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ４６４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４６５；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＮ４６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＴ４６７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＳ４６８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＡ４６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ４７０；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ４７１；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ４７２；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙまたは
Ｐで置換されたＣ４７３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＡ４７４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＱ４７５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４７６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ４７７；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙまたは
Ｐで置換されたＣ４７８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＨ４７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ４８０；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ４８１；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４８２；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ４８３；Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで
置換されたＥ４８４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ４８５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ４８
７；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＨ４８８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐまたは
Ｃで置換されたＴ４８９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＫ４９０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＮ４９１；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４９２；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ４９３；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ４９４；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙまたは
Ｃで置換されたＰ４９５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ４９６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＡ４９７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ４９８；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ４９９；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＴ５００；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙまたは
Ｃで置換されたＰ５０１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ５０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ５０３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ
５０４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ
５０５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＨ５０６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐま
たはＣで置換されたＬ５０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ５０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ５０９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ
５１０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ
５１１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＳ
５１２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、ＹまたはＰで置換されたＣ５１３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＬ５１４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ５１５；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＥ５１６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ５１７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ５１８；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ５１９；Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換
されたＥ５２０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＲ５２１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ５２２；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＫ５２３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ５２４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ５２５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＶ５２６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＤ５２７；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ５２８；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ５２９；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換され
たＷ５３０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換され
たＡ５３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換されたＰ５３２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ５３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ５３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＣで置換
されたＰ５３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、ＰまたはＣで置換されたＷ５３６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＧ５３７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、ＰまたはＣで置換されたＥ５３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、ＹまたはＰで置換
されたＣ５３９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置
換されたＳ５４０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ５４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ５４２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ５４３；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５４４
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５４
５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５
４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ
５４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣで置換されたＱ５４８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ５４９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ５５０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＨ
５５１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＲ５５２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ５５３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換さ
れたＣ５５４；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣで置換されたＫ５５５；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ５５６；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで
置換されたＰ５５７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ５５８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ５５
９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＱ５６０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ５６１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５６３；Ｄ、Ｅ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ｒ５６４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ
、またはＣで置換されたＹ５６５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ５６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ５６７；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５６８；Ｄ、Ｅ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＲ５６９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ５７０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ５７１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ５７２；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、ＰまたはＣで置換された
Ｙ５７３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣで置換されたＱ５７４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、
Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ５７５；Ｄ、Ｅ，Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ５７６；Ｄ、
Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置
換されたＨ５７７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＴ５７８；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ５７９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ５８０；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
またはＰで置換されたＣ５８１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ５８２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置
換されたＰ５８３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ５８４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ５８５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ５８６；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ５８７；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで
置換されたＦ５８８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ５８９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ５９０；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＱ５９１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ５９２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ５
９３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＥ５９４；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ５９５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＹ５９
６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＮ５９７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＡ５９８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＹ５９９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ
６００；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、
またはＣで置換されたＹ６０１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＴ６０２；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ６０３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＭ６０４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＤ６０５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＧ６０６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ６０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ６０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ６０９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ６１０；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＷ６１１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＶ６１２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ６１３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ６１
４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、また
はＣで置換されたＹ６１５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＡ６１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＧ６１７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＶ６１８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣで置換されたＳ６１９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ６２０；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＲ６２１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ６２２；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ６２３；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで
置換されたＣ６２４；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ６２５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ６２６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ６２７；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、または
Ｐで置換されたＣ６２８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ６２９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ６３０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ６３１；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ６３２；
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＲ６３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＳ６３４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ６３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ６３６；
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＫ６３７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＶ６３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ６３９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ
、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ６４０；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ６４１
；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＫ６４２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＶ６４３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＩ６４４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ６４５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ６４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ６４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ６４８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置
換されたＣ６４９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＧ６５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ６５１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ６５
２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ６
５３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ
６５４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ａ６５５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換され
たＩ６５６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ６５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ６５８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ６５９；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ６６０；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＱ６６１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ６６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ６６３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ６６
４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ６
６５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ
６６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ６６７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ６６８；Ｄ、Ｅ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＨ６６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＶ６７０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置
換されたＶ６７１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ６７２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ６７３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ６７
４；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＲ６７５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ６７６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ６７７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ６７
８；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＫ６７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ６８０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ６８１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ６８２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置
換されたＣ６８３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＧ６８４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＧ６８５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ６８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ６８７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ６８８；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ６８９
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、またはＰで置換されたＣ６９０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ６９１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ６９
２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ６
９３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ
６９４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ｇ６９５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換され
たＳ６９６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＬ６９７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＴ６９８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ６９９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ７００；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ７０１
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＹ７０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＧ７０３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＹ７０４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ７０５
；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＤ７０６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＩ７０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＶ７０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣで置換されたＴ７０９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ
、Ｐ、またはＣで置換されたＩ７１０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ７１１；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ７１２；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ７１３；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ７１４；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ７１５
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＮ７１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＩ７１７；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ７１８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ７１９；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ
７２０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣで置換されたＱ７２１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ７２２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ７２３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＨ
７２４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ７２５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ７２６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ７２７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ７２８；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＮ７２９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ７３０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ７３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ７３
２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、また
はＣで置換されたＹ７３３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＬ７３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＡ７３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＬ７３６；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ７３７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ７３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ７３９；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換され
たＤ７４０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＧ７４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ７４２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＹ７４３；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７４４；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７４５；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＮ７４６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＧ７４７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ７４８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７４９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ７５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＩ７５１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ７５２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、
Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ７５３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＩ７５４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＥ７５５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ７５６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ７５７；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＩ７５８；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７５９；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ７６０；
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＫ７６１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＧ７６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＴ７６３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＩ７６４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＬ７６５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ７６６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＹ７６７
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ７６
８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ７
６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ
７７０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ｉ７７１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換され
たＡ７７２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換さ
れたＴ７７３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＬ７７４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ７７５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ７７６；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７７７；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＱ７７８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＳ７７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ
、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ７８０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ７８１；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、または
Ｃで置換されたＰ７８２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＬ７８３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ７８４；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ｅ７８５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ７８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７８７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ７８８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ７８９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ７９０；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７９１
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ７９
２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ７
９３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ
７９４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ７９５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ７９６；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ７９７；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ７９８；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置
換されたＦ７９９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ８００；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ８
０１；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＫ８０２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＶ８０３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ８０４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＹ８０５
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ８０
６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、また
はＣで置換されたＦ８０７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ８０８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ８０９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ
８１０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣで置換されたＮ８１１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ
、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ８１２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ８１３；Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＤ８１４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、
Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＦ８１５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８１６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＭ８１７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ８１８；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８１９；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８２０；
Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＫ８２１；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＥ８２２；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ８２３；Ｄ
、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ８２４；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ８２５
；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ８２
６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＮ８２７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＩ８２８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、
Ｐ、またはＣで置換されたＩ８２９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ
、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ８３０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、
Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置
換されたＰ８３１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＬ８３２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＬ８３３；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＨ８３４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ８３５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ
、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ８３６；
Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＷ８３７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、または
Ｃで置換されたＶ８３８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、また
はＣで置換されたＬ８３９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＧ８４０；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ８４１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＷ８４
２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８
４３；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＥ８４４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、
Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ８４５；Ｄ、Ｅ、Ｈ
、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８４６；Ｄ、Ｅ、
Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８４７；Ｄ、Ｅ
、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ８４８；Ｄ、
Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、また
はＰで置換されたＣ８４９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＧ８５０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＡ８５１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ
、またはＣで置換されたＧ８５２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｉ、
Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｐ、またはＣで置換されたＷ８５３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ
８５４；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、
またはＣで置換されたＲ８５５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ
、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ８５６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＴ８５７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＶ８５８；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、
Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ｅ８５９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ８６０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、
Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＲ８６１；Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換
されたＤ８６２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ８６３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ８６４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＧ８６５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ８６
６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ８
６７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＳ
８６８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換された
Ａ８６９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換され
たＴ８７０；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、
Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ８７１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ
、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＮ８７２；Ｄ、
Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置
換されたＫ８７３；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＡ８７４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＬ８７５；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ
、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ８７６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ８７７
；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、ま
たはＣで置換されたＥ８７８；Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、
Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＤ８７９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ
、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＡ８８０；Ｄ、Ｅ、Ａ、Ｇ、
Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＫ８
８１；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、またはＣで置換されたＰ８８２；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、
Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ８８３；Ｈ、Ｋ
、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで
置換されたＥ８８４；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣ
で置換されたＳ８８５；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ
、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＱ８８６；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、
Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ８８７；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ
、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、またはＰで置換されたＣ
８８８；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ａ、Ｇ、Ｉ、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｖ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、
Ｗ、Ｙ、またはＣで置換されたＰ８８９；Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｆ、Ｗ
、Ｙ、Ｐ、またはＣで置換されたＬ８９０。
【０１２７】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、５０、４０、３０、１０、２０
、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７
、６、５、４、３、２または１個の保存的もしくは非保存的なアミノ酸置換を含
み得る。さらに、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、保存的置換また
は非保存的置換の両方を任意に組み合わせて含み得る。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２ポリペプチドは、５０、４０、３０、１０、２０、１９、１８、１７、１６
、１５、１４、１３、１２、１１，１０、９、８、７、６、５、４、３、２また
は１個の保存的アミノ酸置換、および５０、４０、３０、１０、２０、１９、１
８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１，１０、９、８、７、６、５、
４、３、２または１個の非保存的アミノ酸置換を、同じポリペプチドに含み得る
。例えば、特定のポリペプチドが、１０個の保存的アミノ酸置換および１０個の
非保存的アミノ酸置換を含み得る。置換を有するこのようなＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドもまた、本発明において包
含され得る。
、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７
、６、５、４、３、２または１個の保存的もしくは非保存的なアミノ酸置換を含
み得る。さらに、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、保存的置換また
は非保存的置換の両方を任意に組み合わせて含み得る。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２ポリペプチドは、５０、４０、３０、１０、２０、１９、１８、１７、１６
、１５、１４、１３、１２、１１，１０、９、８、７、６、５、４、３、２また
は１個の保存的アミノ酸置換、および５０、４０、３０、１０、２０、１９、１
８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１，１０、９、８、７、６、５、
４、３、２または１個の非保存的アミノ酸置換を、同じポリペプチドに含み得る
。例えば、特定のポリペプチドが、１０個の保存的アミノ酸置換および１０個の
非保存的アミノ酸置換を含み得る。置換を有するこのようなＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドもまた、本発明において包
含され得る。
【０１２８】
これら置換は、全長ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２、成熟ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２、および本明細書中に開示される他の任意のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２
改変体（Ｎ末端および／もしくはＣ末端アミノ酸欠失を有する、ＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２ポリペプチド；１つ以上のドメインを欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２ポリペプチド；あるいはハイブリッドＭＥＴＨ１／ＭＥＴＨ２分子を含む）
にて行われ得る。
ＴＨ２、および本明細書中に開示される他の任意のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２
改変体（Ｎ末端および／もしくはＣ末端アミノ酸欠失を有する、ＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２ポリペプチド；１つ以上のドメインを欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２ポリペプチド；あるいはハイブリッドＭＥＴＨ１／ＭＥＴＨ２分子を含む）
にて行われ得る。
【０１２９】
機能に必須な本発明のＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２タンパク質中のアミノ酸は
、当該分野で公知の方法（例えば、部位特異的変異誘発またはアラニンスキャニ
ング変異誘発（ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍおよびＷｅｌｌｓ、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４
４：１０８１−１０８５（１９８９））により同定され得る．後者の手順は、そ
の分子中のどの残基にも単一アラニン変異を導入する。次いで、生じた変異体分
子が、生物学的活性（例えば、新脈管形成のインビトロまたはインビボでの阻害
）について試験される。新脈管形成の阻害に重要な部位はまた、構造分析（例え
ば、結晶化、核磁気共鳴または光親和性標識（Ｓｍｉｔｈら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉ
ｏｌ．２２４：８９９−９０４（１９９２）およびｄｅ Ｖｏｓら、Ｓｃｉｅｎ
ｃｅ ２５５：３０６−３１２ （１９９２））により決定され得る。
、当該分野で公知の方法（例えば、部位特異的変異誘発またはアラニンスキャニ
ング変異誘発（ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍおよびＷｅｌｌｓ、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４
４：１０８１−１０８５（１９８９））により同定され得る．後者の手順は、そ
の分子中のどの残基にも単一アラニン変異を導入する。次いで、生じた変異体分
子が、生物学的活性（例えば、新脈管形成のインビトロまたはインビボでの阻害
）について試験される。新脈管形成の阻害に重要な部位はまた、構造分析（例え
ば、結晶化、核磁気共鳴または光親和性標識（Ｓｍｉｔｈら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉ
ｏｌ．２２４：８９９−９０４（１９９２）およびｄｅ Ｖｏｓら、Ｓｃｉｅｎ
ｃｅ ２５５：３０６−３１２ （１９９２））により決定され得る。
【０１３０】
特に好ましいのは、各ドメインの境界（例えば、メタロプロテアーゼドメイン
の境界）にアミノ酸置換を有するポリペプチドである。これらの境界でのアミノ
酸置換は、そのタンパク質の活性を変化させるために、例えば、切断を妨げるた
めに、行われ得る。そのタンパク質の活性に影響しないアミノ酸置換もまた、行
われ得る。 例えば、以下のアミノ酸が、ＭＥＴＨ１において以下のアミノ酸で置換され得る
：Ｌ−１９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ
−２１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ
、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−２
３が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ
、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−２４が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、
Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−２５が
、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ
またはＹで置換され得る；Ｌ−２６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、
Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２７が、Ａ
、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗまた
はＹで置換され得る；Ａ−２８が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、
Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｖ−２９が、Ａ、Ｃ
、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹ
で置換され得る；Ｓ−３０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、
Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｄ−３１が、Ａ、Ｃ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置
換され得る；Ａ−３２が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−３３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｇ−３４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、
Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｒ−３５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｐ−３６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−３７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｅ−３８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｅ−３９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ
、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｐ−２２５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ−２２６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｇ−２２７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ−２２８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｇ−２２９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−２３０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｉ−２３１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｒ−２３２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｋ−２３３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｋ−２３４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｒ−２３５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｆ−２３６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｈ
、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｖ−２３７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−２３８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｓ−２３９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｈ−２４０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｒ−２４１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｙ−２４２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＷで置換され得る
；Ｖ−２４３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、
Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｅ−２４４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｔ−２４５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、
Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｋ−４４９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｐ−４５０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｑ−４５１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｎ−４５２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ−４５３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｉ−４５４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｑ−４５５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｌ−４５６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ−４５７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｇ−４５８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｄ−４５９が、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｌ−４６０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ−４６１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｇ−４６２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ−４６３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｓ−４６４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、
Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｙ−４６５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＷで置換され得
る；Ｄ−４６６が、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−４６７が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｎ−４６８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｒ−４６９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｒ−５３４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｋ−５３５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｈ−５３６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｆ−５３７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｄ−５３８が、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ−５３９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｐ−５４０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｆ−５４１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｈ−５４２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｇ−５４３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｓ−５４４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｗ−５４５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹで置換され
得る；Ｇ−５４６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、
Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｍ−５４７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、
Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され
得る；Ｗ−５４８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹで置換され得る；Ｇ−５４９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｐ−５５０が、Ａ、、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、
Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｗ−５５１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、
Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹで置換さ
れ得る；Ｇ−５５２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｄ−５５３が、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｇ−５５４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−８３１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｆ−８３２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｎ−８３３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ａ−８３４が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｉ−８３５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｐ−８３６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ−８３７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｆ−８３８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−８３９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ａ−８４０が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｗ−８４１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹで置換さ
れ得る；Ｖ−８４２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｉ−８４３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｅ−８４４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｅ−８４５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｗ−８４６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹで置換され得る；Ｇ−８４７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、
Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｅ−８４８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｃ−８４９が、Ａ、Ｄ、Ｅ、
Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｓ−８５０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｋ−８５１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、
Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｒ−８８５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ−８８６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、
Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｃ−８８７が、Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−８８８が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、
Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｄ−８８９が、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｈ−８９０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、
Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｐ−８９１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｃ−８９２が、Ａ、Ｄ、Ｅ、
Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｐ−８９３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｑ−８９４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、
Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｗ−８９５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹで置換され得る；Ｑ−８９６が、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置
換され得る；Ｌ−８９７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｇ−８９８が、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置
換され得る；Ｅ−８９９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｗ−９００が、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹで
置換され得る；Ｓ−９０１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、
Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−９０２が、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで
置換され得る；Ｃ−９０３が、Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−９０４が、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで
置換され得る；そして／あるいはＫ−９０５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る。
の境界）にアミノ酸置換を有するポリペプチドである。これらの境界でのアミノ
酸置換は、そのタンパク質の活性を変化させるために、例えば、切断を妨げるた
めに、行われ得る。そのタンパク質の活性に影響しないアミノ酸置換もまた、行
われ得る。 例えば、以下のアミノ酸が、ＭＥＴＨ１において以下のアミノ酸で置換され得る
：Ｌ−１９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ
−２１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ
、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−２
３が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ
、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−２４が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、
Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−２５が
、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ
またはＹで置換され得る；Ｌ−２６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、
Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２７が、Ａ
、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗまた
はＹで置換され得る；Ａ−２８が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、
Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｖ−２９が、Ａ、Ｃ
、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹ
で置換され得る；Ｓ−３０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、
Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｄ−３１が、Ａ、Ｃ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置
換され得る；Ａ−３２が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−３３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｇ−３４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、
Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｒ−３５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｐ−３６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−３７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｅ−３８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｅ−３９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ
、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｐ−２２５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ−２２６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｇ−２２７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ−２２８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｇ−２２９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−２３０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｉ−２３１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｒ−２３２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｋ−２３３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｋ−２３４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｒ−２３５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｆ−２３６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｈ
、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｖ−２３７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−２３８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｓ−２３９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｈ−２４０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；
Ｒ−２４１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｙ−２４２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＷで置換され得る
；Ｖ−２４３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、
Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｅ−２４４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｔ−２４５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、
Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｋ−４４９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｐ−４５０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｑ−４５１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｎ−４５２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ−４５３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｉ−４５４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｑ−４５５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｌ−４５６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ−４５７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｇ−４５８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｄ−４５９が、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｌ−４６０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ−４６１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｇ−４６２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ−４６３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｓ−４６４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、
Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｙ−４６５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＷで置換され得
る；Ｄ−４６６が、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−４６７が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｎ−４６８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｒ−４６９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｒ−５３４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｋ−５３５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｈ−５３６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｆ−５３７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｄ−５３８が、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ−５３９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｐ−５４０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｆ−５４１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｈ−５４２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｇ−５４３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得
る；Ｓ−５４４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｗ−５４５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹで置換され
得る；Ｇ−５４６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、
Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｍ−５４７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、
Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され
得る；Ｗ−５４８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹで置換され得る；Ｇ−５４９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｐ−５５０が、Ａ、、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、
Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｗ−５５１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、
Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹで置換さ
れ得る；Ｇ−５５２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｄ−５５３が、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｇ−５５４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−８３１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｆ−８３２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｎ−８３３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ａ−８３４が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｉ−８３５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｐ−８３６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ−８３７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｆ−８３８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−８３９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ａ−８４０が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｗ−８４１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹで置換さ
れ得る；Ｖ−８４２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｉ−８４３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｅ−８４４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｅ−８４５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換さ
れ得る；Ｗ−８４６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹで置換され得る；Ｇ−８４７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、
Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｅ−８４８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｃ−８４９が、Ａ、Ｄ、Ｅ、
Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｓ−８５０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｋ−８５１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、
Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｒ−８８５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ−８８６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、
Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｃ−８８７が、Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−８８８が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、
Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｄ−８８９が、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｈ−８９０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、
Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｐ−８９１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｃ−８９２が、Ａ、Ｄ、Ｅ、
Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｐ−８９３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｑ−８９４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、
Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｗ−８９５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹで置換され得る；Ｑ−８９６が、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置
換され得る；Ｌ−８９７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｇ−８９８が、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置
換され得る；Ｅ−８９９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｗ−９００が、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹで
置換され得る；Ｓ−９０１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、
Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−９０２が、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで
置換され得る；Ｃ−９０３が、Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−９０４が、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで
置換され得る；そして／あるいはＫ−９０５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る。
【０１３１】
さらに、以下のアミノ酸が、ＭＥＴＨ２において、以下のアミノ酸で置換され
得る：Ｌ−１４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−１５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｌ−１６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−１７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ
−１８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ
、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−１９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２
０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ
、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、
Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２２が
、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ
またはＹで置換され得る；Ｐ２３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ
、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２４が、Ａ、
Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗまたは
Ｙで置換され得る；Ａ−２５が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ
、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｒ−２６が、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで
置換され得る；Ｇ−２７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−２８が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、
Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｐ−２９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−３０が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され
得る；Ｒ−３１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ−３２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ａ−３３が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−３４が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ
−２０４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ−２０５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ
−２０６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｇ−２０７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ
−２０８が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ−２０９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ
−２１０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｒ−２１１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ
−２１２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｋ−２１３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｒ
−２１４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｆ−２１５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｖ
−２１６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−２１７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｅ
−２１８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−２１９は、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｒ
−２２０は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｆ−２２１は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｖ
−２２２は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｅ−２２３は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｔ
−２２４は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ−４３０は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｇ
−４３１は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ａ−４３２は、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ａ
−４３３は、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｌ−４３４は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ
−４３５は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｌ−４３６は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ
−４３７は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る； Ｔ−４３８は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｇ−４３９は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ
、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；
Ｌ−４４０は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ−４４１は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；
Ｇ−４４２は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｒ−４４３は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得
る；Ｍ−４４４は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ａ−４４５は、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得
る；Ｌ−４４６は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｙ−４４７は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｑ−４４８は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ
、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｌ−４４９は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｄ−４５０は、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｅ−５２０は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｒ−５２１は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ
、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ−５２２は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｋ−５２３は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ−５２４は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｖ−５２５は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ
、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｖ−５２６は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｄ−５２７は、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｇ−５２８は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｇ−５２９は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｗ−５３０は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹと
置換され得る；Ａ−５３１は、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ−５３２は、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと
置換され得る；Ｗ−５３３は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、
Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹと置換され得る；Ｇ−５３４は、Ａ、Ｃ
、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹ
と置換され得る；Ｐ−５３５は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ
、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｗ−５３６は、Ａ、Ｃ
、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹ
と置換され得る；Ｇ−５３７は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｅ−５３８は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｃ−５３９は、Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｓ−５４０は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｎ−８２７は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｉ−８２８は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｉ−８２９は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｑ−８３０は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｐ−８３１は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｌ−８３２は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｌ−８３３は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｈ−８３４は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ａ−８３５は、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｑ−８３６は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｗ−８３７は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ
、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹと置換され得る；Ｖ−８３８は、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹと
置換され得る；Ｌ−８３９は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｇ−８４０は、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと
置換され得る；Ｄ−８４１は、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｗ−８４２は、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹと
置換され得る；Ｓ−８４３は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、
Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｅ−８４４は、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと
置換され得る；Ｃ−８４５は、Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｓ−８４６は、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと
置換され得る；および／またはＳ−８４７は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ
、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る。
得る：Ｌ−１４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−１５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ｌ−１６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−１７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ
−１８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ
、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−１９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２
０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ
、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、
Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２２が
、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ
またはＹで置換され得る；Ｐ２３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ
、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ−２４が、Ａ、
Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗまたは
Ｙで置換され得る；Ａ−２５が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ
、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｒ−２６が、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで
置換され得る；Ｇ−２７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−２８が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、
Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換
され得る；Ｐ−２９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−３０が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され
得る；Ｒ−３１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ−３２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、
Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る
；Ａ−３３が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−３４が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ
−２０４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｐ−２０５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｌ
−２０６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｇ−２０７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ
−２０８が、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ−２０９が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ
−２１０が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｒ−２１１が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｔ
−２１２が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｋ−２１３が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｒ
−２１４が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｆ−２１５が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｖ
−２１６が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｓ−２１７が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ｅ
−２１８が、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹで置換され得る；Ａ−２１９は、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｒ
−２２０は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｆ−２２１は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｖ
−２２２は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｅ−２２３は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｔ
−２２４は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、
Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ−４３０は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｇ
−４３１は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ａ−４３２は、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、
Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ａ
−４３３は、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｌ−４３４は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ
−４３５は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｌ−４３６は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、
Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ
−４３７は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、
Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る； Ｔ−４３８は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｇ−４３９は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ
、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；
Ｌ−４４０は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ
、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ−４４１は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；
Ｇ−４４２は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｒ−４４３は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ
、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得
る；Ｍ−４４４は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ
、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ａ−４４５は、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ
、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得
る；Ｌ−４４６は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ
、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｙ−４４７は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｑ−４４８は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ
、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｌ−４４９は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｄ−４５０は、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｅ−５２０は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｒ−５２１は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ
、Ｐ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ−５２２は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｋ−５２３は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ−５２４は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｖ−５２５は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ
、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｖ−５２６は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｄ−５２７は、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｇ−５２８は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｇ−５２９は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｗ−５３０は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹと
置換され得る；Ａ−５３１は、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｐ−５３２は、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと
置換され得る；Ｗ−５３３は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、
Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹと置換され得る；Ｇ−５３４は、Ａ、Ｃ
、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹ
と置換され得る；Ｐ−５３５は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ
、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｗ−５３６は、Ａ、Ｃ
、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹ
と置換され得る；Ｇ−５３７は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｅ−５３８は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｃ−５３９は、Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｓ−５４０は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｎ−８２７は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｉ−８２８は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｉ−８２９は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｑ−８３０は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｐ−８３１は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｌ−８３２は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｌ−８３３は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｈ−８３４は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ａ−８３５は、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ
、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｑ−８３６は、Ａ、Ｃ、Ｄ
、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置
換され得る；Ｗ−８３７は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ
、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹと置換され得る；Ｖ−８３８は、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹと
置換され得る；Ｌ−８３９は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｇ−８４０は、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと
置換され得る；Ｄ−８４１は、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｗ−８４２は、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹと
置換され得る；Ｓ−８４３は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、
Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｅ−８４４は、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと
置換され得る；Ｃ−８４５は、Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、
Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る；Ｓ−８４６は、Ａ、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと
置換され得る；および／またはＳ−８４７は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ
、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹと置換され得る。
【０１３２】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチド変異体（置換変異体、欠失変異体お
よび／または追加変異体を含む）は、アミノ酸置換を含み、これは、本明細書中
で記載されるアッセイ（例えば、漿尿膜アッセイまたは角膜ポケットアッセイ）
のいずれかにおける活性について試験され得る。好ましくは、野生型タンパク質
の全ての活性および／または特性を維持し；またはその野生型タンパク質と比較
して１つ以上の向上した活性および／または特性を有する保存的置換を有するＭ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドである。また、非保存的置換を有するＭ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドが好ましく、これは、全ての他の活性お
よび／または特性を維持しながら、野生型タンパク質の活性および／または特性
に欠き、または野生型タンパク質の１以上の活性および／または特性に欠く。
よび／または追加変異体を含む）は、アミノ酸置換を含み、これは、本明細書中
で記載されるアッセイ（例えば、漿尿膜アッセイまたは角膜ポケットアッセイ）
のいずれかにおける活性について試験され得る。好ましくは、野生型タンパク質
の全ての活性および／または特性を維持し；またはその野生型タンパク質と比較
して１つ以上の向上した活性および／または特性を有する保存的置換を有するＭ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドである。また、非保存的置換を有するＭ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドが好ましく、これは、全ての他の活性お
よび／または特性を維持しながら、野生型タンパク質の活性および／または特性
に欠き、または野生型タンパク質の１以上の活性および／または特性に欠く。
【０１３３】
例えば、保存的置換または非保存的置換を有するＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２
ポリペプチドで変更され得るＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の活性または特性とし
て、以下に挙げられるが、これらに限定されない：血管形成の刺激；上皮細胞増
殖の刺激；抗体結合；リガンド結合；安定性；溶解性；および／または精製に影
響をおよぼす特性。
ポリペプチドで変更され得るＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の活性または特性とし
て、以下に挙げられるが、これらに限定されない：血管形成の刺激；上皮細胞増
殖の刺激；抗体結合；リガンド結合；安定性；溶解性；および／または精製に影
響をおよぼす特性。
【０１３４】
本発明のポリペプチドは、好ましくは、単離形態で提供される。「単離された
ポリペプチド」によって、そのネイティブな環境から取り出されたポリペプチド
が意図される。従って、組換え宿主細胞中で産生され、そして／またはその中に
含まれるポリペプチドは、本発明の目的のために単離されたとみなされる。組換
え宿主細胞からまたはネイティブ細胞から部分的または実質的に精製されたポリ
ペプチドもまた、「単離されたポリペプチド」として意図される。例えば、ＭＥ
ＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドの組換え産生されたバージョンが、Ｓｍｉ
ｔｈおよびＪｏｈｎｓｏｎ Ｇｅｎｅ ６７：３１〜４０（１９８８）に記載さ
れる１工程の方法によって実質的に精製され得る。
ポリペプチド」によって、そのネイティブな環境から取り出されたポリペプチド
が意図される。従って、組換え宿主細胞中で産生され、そして／またはその中に
含まれるポリペプチドは、本発明の目的のために単離されたとみなされる。組換
え宿主細胞からまたはネイティブ細胞から部分的または実質的に精製されたポリ
ペプチドもまた、「単離されたポリペプチド」として意図される。例えば、ＭＥ
ＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドの組換え産生されたバージョンが、Ｓｍｉ
ｔｈおよびＪｏｈｎｓｏｎ Ｇｅｎｅ ６７：３１〜４０（１９８８）に記載さ
れる１工程の方法によって実質的に精製され得る。
【０１３５】
本発明のポリペプチドは、以下を含む：リーダーを含む寄託されたｃＤＮＡに
よりコードされるＭＥＴＨ１ポリペプチド；リーダーを含まない寄託されたｃＤ
ＮＡによりコードされる成熟ＭＥＴＨ１ポリペプチド（すなわち、成熟タンパク
質）；配列番号２のアミノ酸およそ１〜およそ９５０を含むポリペプチド；配列
番号２のアミノ酸およそ２〜およそ９５０を含むポリペプチド；配列番号２のア
ミノ酸およそ２９〜およそ９５０を含むポリペプチド；配列番号２のアミノ酸お
よそ３０〜およそ９５０を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１のメタロプロテアーゼ
ドメイン、配列番号２のアミノ酸２３５〜４５９を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ
１のディスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ドメイン、配列番号２のア
ミノ酸４６０〜５４４を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１の第１のＴＳＰ様ドメイ
ン、配列番号２のアミノ酸５４５〜５９８を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１の第
２のＴＳＰ様ドメイン、配列番号２のアミノ酸８４１〜８９４を含むポリペプチ
ド；ＭＥＴＨ１の第３のＴＳＰ様ドメイン、配列番号２のアミノ酸８９５〜９３
４を含むポリペプチド；配列番号２のアミノ酸５３６〜６１３を含むポリペプチ
ド；配列番号２のアミノ酸５３６〜６１３を含むポリペプチド；配列番号２のア
ミノ酸５４９〜５６３を含むポリペプチド；リーダーを含む寄託されたｃＤＮＡ
によりコードされるＭＥＴＨ２ポリペプチド；リーダーを含まない寄託されたｃ
ＤＮＡによりコードされる成熟ＭＥＴＨ２ポプペプチド（すなわち、成熟タンパ
ク質）；配列番号４のアミノ酸およそ１〜およそ８９０を含むポリペプチド；配
列番号４のアミノ酸およそ２〜およそ８９０を含むポリペプチド；配列番号４の
アミノ酸およそ２〜およそ８９０を含むポリペプチド；配列番号４のアミノ酸お
よそ２４〜およそ８９０を含むポリペプチド；配列番号４のアミノ酸およそ１１
２〜およそ８９０を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２のメタロプロテアーゼドメイ
ン、配列番号４のアミノ酸２１４〜４３９を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２のデ
ィスインテグリンドメイン、配列番号４のアミノ酸４４０〜５２９を含むポリペ
プチド；ＭＥＴＨ２の第１のＴＳＰ様ドメイン、配列番号４のアミノ酸５３０〜
５８３を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２の第２のＴＳＰ様ドメイン、配列番号４
のアミノ酸８３７〜８９０を含むポリペプチド；配列番号４のアミノ酸２８０〜
６０６を含むポリペプチド；配列番号４のアミノ酸５２９〜５４８を含むポリペ
プチド；ならびに上記のポリペプチドに対して少なくとも８０％同一、より好ま
しくは、少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％
、９６％、９７％、９８％または９９％同一である、ポリペプチド、そして本発
明のポリペプチドはまた、少なくとも３０アミノ酸、そしてより好ましくは、少
なくとも５０アミノ酸を有するこのようなポリペプチドの一部を含む。
よりコードされるＭＥＴＨ１ポリペプチド；リーダーを含まない寄託されたｃＤ
ＮＡによりコードされる成熟ＭＥＴＨ１ポリペプチド（すなわち、成熟タンパク
質）；配列番号２のアミノ酸およそ１〜およそ９５０を含むポリペプチド；配列
番号２のアミノ酸およそ２〜およそ９５０を含むポリペプチド；配列番号２のア
ミノ酸およそ２９〜およそ９５０を含むポリペプチド；配列番号２のアミノ酸お
よそ３０〜およそ９５０を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１のメタロプロテアーゼ
ドメイン、配列番号２のアミノ酸２３５〜４５９を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ
１のディスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ドメイン、配列番号２のア
ミノ酸４６０〜５４４を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１の第１のＴＳＰ様ドメイ
ン、配列番号２のアミノ酸５４５〜５９８を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１の第
２のＴＳＰ様ドメイン、配列番号２のアミノ酸８４１〜８９４を含むポリペプチ
ド；ＭＥＴＨ１の第３のＴＳＰ様ドメイン、配列番号２のアミノ酸８９５〜９３
４を含むポリペプチド；配列番号２のアミノ酸５３６〜６１３を含むポリペプチ
ド；配列番号２のアミノ酸５３６〜６１３を含むポリペプチド；配列番号２のア
ミノ酸５４９〜５６３を含むポリペプチド；リーダーを含む寄託されたｃＤＮＡ
によりコードされるＭＥＴＨ２ポリペプチド；リーダーを含まない寄託されたｃ
ＤＮＡによりコードされる成熟ＭＥＴＨ２ポプペプチド（すなわち、成熟タンパ
ク質）；配列番号４のアミノ酸およそ１〜およそ８９０を含むポリペプチド；配
列番号４のアミノ酸およそ２〜およそ８９０を含むポリペプチド；配列番号４の
アミノ酸およそ２〜およそ８９０を含むポリペプチド；配列番号４のアミノ酸お
よそ２４〜およそ８９０を含むポリペプチド；配列番号４のアミノ酸およそ１１
２〜およそ８９０を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２のメタロプロテアーゼドメイ
ン、配列番号４のアミノ酸２１４〜４３９を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２のデ
ィスインテグリンドメイン、配列番号４のアミノ酸４４０〜５２９を含むポリペ
プチド；ＭＥＴＨ２の第１のＴＳＰ様ドメイン、配列番号４のアミノ酸５３０〜
５８３を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２の第２のＴＳＰ様ドメイン、配列番号４
のアミノ酸８３７〜８９０を含むポリペプチド；配列番号４のアミノ酸２８０〜
６０６を含むポリペプチド；配列番号４のアミノ酸５２９〜５４８を含むポリペ
プチド；ならびに上記のポリペプチドに対して少なくとも８０％同一、より好ま
しくは、少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％
、９６％、９７％、９８％または９９％同一である、ポリペプチド、そして本発
明のポリペプチドはまた、少なくとも３０アミノ酸、そしてより好ましくは、少
なくとも５０アミノ酸を有するこのようなポリペプチドの一部を含む。
【０１３６】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドの参照アミノ酸配列に、例えば、少
なくとも９５％「同一」なアミノ酸配列を有するポリペプチドにより、ポリペプ
チド配列が、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドの参照アミノ酸配列の各
１００アミノ酸ごとに５つまでのアミノ酸変化を含み得ることを除いて、そのポ
リペプチドのアミノ酸配列が、参照配列に同一であることが意図される。換言す
ると、参照アミノ酸配列に少なくとも９５％同一なアミノ酸配列を有するポリペ
プチドを得るために、参照配列のアミノ酸残基の５％までが、欠失または、別の
アミノ酸で置換され得るか、または参照配列の合計アミノ酸残基の５％までの幾
らかのアミノ酸が、その参照配列に挿入され得る。参照配列のこれらの変化は、
参照アミノ酸配列のアミノ末端位置かまたはカルボキシ末端位置でか、あるいは
これらの末端位置間のどこかで生じ得、参照配列の残基間で個々にか、または参
照配列内で１個以上連続する群としてかのいずれかで間に散在する。
なくとも９５％「同一」なアミノ酸配列を有するポリペプチドにより、ポリペプ
チド配列が、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドの参照アミノ酸配列の各
１００アミノ酸ごとに５つまでのアミノ酸変化を含み得ることを除いて、そのポ
リペプチドのアミノ酸配列が、参照配列に同一であることが意図される。換言す
ると、参照アミノ酸配列に少なくとも９５％同一なアミノ酸配列を有するポリペ
プチドを得るために、参照配列のアミノ酸残基の５％までが、欠失または、別の
アミノ酸で置換され得るか、または参照配列の合計アミノ酸残基の５％までの幾
らかのアミノ酸が、その参照配列に挿入され得る。参照配列のこれらの変化は、
参照アミノ酸配列のアミノ末端位置かまたはカルボキシ末端位置でか、あるいは
これらの末端位置間のどこかで生じ得、参照配列の残基間で個々にか、または参
照配列内で１個以上連続する群としてかのいずれかで間に散在する。
【０１３７】
実際的な問題として、任意の特定のポリペプチドが、例えば、配列番号２また
は配列番号４に示されるアミノ酸配列、または寄託されたｃＤＮＡクローンによ
りコードされるアミノ酸配列に、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、
９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一で
あるか否かは、Ｂｅｓｔｆｉｔプログラム（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｓｅｑｕｅｎ
ｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｐａｃｋａｇｅ，Ｖｅｒｓｉｏｎ ８ ｆｏｒ Ｕｎ
ｉｘ（登録商標），Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉ
ｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅｒｃｈ Ｐａｒｋ，５７５ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｄｒｉ
ｖｅ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ ５３７１１）のような公知のコンピュータープロ
グラムを使用して従来のように決定され得る。特定の配列が、本発明に従う参照
配列に、例えば９５％同一か否かを決定するために、Ｂｅｓｔｆｉｔまたは任意
の他の配列アライメントプログラムを使用する場合、もちろん、参照アミノ酸配
列の全長に渡って同一性の百分率が算出されるように、そして参照配列中のアミ
ノ酸残基の合計の数の５％までの相同性のギャップが許容されるように、パラメ
ーターは設定される。
は配列番号４に示されるアミノ酸配列、または寄託されたｃＤＮＡクローンによ
りコードされるアミノ酸配列に、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、
９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一で
あるか否かは、Ｂｅｓｔｆｉｔプログラム（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｓｅｑｕｅｎ
ｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｐａｃｋａｇｅ，Ｖｅｒｓｉｏｎ ８ ｆｏｒ Ｕｎ
ｉｘ（登録商標），Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉ
ｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅｒｃｈ Ｐａｒｋ，５７５ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｄｒｉ
ｖｅ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ ５３７１１）のような公知のコンピュータープロ
グラムを使用して従来のように決定され得る。特定の配列が、本発明に従う参照
配列に、例えば９５％同一か否かを決定するために、Ｂｅｓｔｆｉｔまたは任意
の他の配列アライメントプログラムを使用する場合、もちろん、参照アミノ酸配
列の全長に渡って同一性の百分率が算出されるように、そして参照配列中のアミ
ノ酸残基の合計の数の５％までの相同性のギャップが許容されるように、パラメ
ーターは設定される。
【０１３８】
参照（問い合わせ）配列（本発明の配列）と対象配列との間の最良な全体の適
合（全体的配列整列ともいわれる）を決定するための好ましい方法はまた、Ｂｒ
ｕｔｌａｇら（Ｃｏｍｐ．Ａｐｐ．Ｂｉｏｓｃｉ．６：２３７−２４５（１９９
０））のアルゴリズムに基づくＦＡＳＴＤＢコンピュータープログラムを使用し
て決定され得る。配列整列において、参照（問い合わせ）配列および対象配列は
、両方のヌクレオチド配列または両方のアミノ酸配列のいずれかである。この全
体的配列整列の結果は、％同一性で示される。ＦＡＳＴＤＢアミノ酸整列に用い
られる好ましいパラメーターは：Ｍａｔｒｉｘ＝ＰＡＭ ０、ｋ−ｔｕｐｌｅ＝
２、Ｍｉｓｍａｔｃｈ Ｐｅｎａｌｔｙ＝１、Ｊｏｉｎｉｎｇ Ｐｅｎａｌｔｙ
＝２０、Ｒａｎｄｏｍｉｚａｔｉｏｎ Ｇｒｏｕｐ Ｌｅｎｇｔｈ＝０、Ｃｕｔ
ｏｆｆ Ｓｃｏｒｅ＝１、Ｗｉｎｄｏｗ Ｓｉｚｅ＝配列の長さ、Ｇａｐ Ｐｅ
ｎａｌｔｙ＝５、Ｇａｐ Ｓｉｚｅ Ｐｅｎａｌｔｙ＝０．０５、Ｗｉｎｄｏｗ
Ｓｉｚｅ＝５００または対象アミノ酸配列の長さ（どちらかより短い方）であ
る。
合（全体的配列整列ともいわれる）を決定するための好ましい方法はまた、Ｂｒ
ｕｔｌａｇら（Ｃｏｍｐ．Ａｐｐ．Ｂｉｏｓｃｉ．６：２３７−２４５（１９９
０））のアルゴリズムに基づくＦＡＳＴＤＢコンピュータープログラムを使用し
て決定され得る。配列整列において、参照（問い合わせ）配列および対象配列は
、両方のヌクレオチド配列または両方のアミノ酸配列のいずれかである。この全
体的配列整列の結果は、％同一性で示される。ＦＡＳＴＤＢアミノ酸整列に用い
られる好ましいパラメーターは：Ｍａｔｒｉｘ＝ＰＡＭ ０、ｋ−ｔｕｐｌｅ＝
２、Ｍｉｓｍａｔｃｈ Ｐｅｎａｌｔｙ＝１、Ｊｏｉｎｉｎｇ Ｐｅｎａｌｔｙ
＝２０、Ｒａｎｄｏｍｉｚａｔｉｏｎ Ｇｒｏｕｐ Ｌｅｎｇｔｈ＝０、Ｃｕｔ
ｏｆｆ Ｓｃｏｒｅ＝１、Ｗｉｎｄｏｗ Ｓｉｚｅ＝配列の長さ、Ｇａｐ Ｐｅ
ｎａｌｔｙ＝５、Ｇａｐ Ｓｉｚｅ Ｐｅｎａｌｔｙ＝０．０５、Ｗｉｎｄｏｗ
Ｓｉｚｅ＝５００または対象アミノ酸配列の長さ（どちらかより短い方）であ
る。
【０１３９】
対象配列が、Ｎ末端またはＣ末端欠失により（内部の欠失のためではなく）問
い合わせ配列よりも短い場合、ＦＡＳＴＤＢプログラムが、全体的な同一性パー
セントを算定する場合に、対象配列のＮ末端短縮およびＣ末端短縮を考慮しない
という事実を考慮して、手動の補正が結果に対してなされる。問い合わせ配列に
対する、Ｎ末端およびＣ末端で短縮されている対象配列についての、同一性パー
セントは、問い合わせ配列の総塩基のパーセントとして、対応する対象残基と一
致／整列しない、対象配列のＮ末端およびＣ末端である問い合わせ配列の残基の
数を計算することによって補正される。残基が一致／整列されているか否かの決
定は、ＦＡＳＴＤＢ配列整列の結果によって決定される。次いで、このパーセン
トは、同一性パーセントから差し引かれ、上記のＦＡＳＴＤＢプログラムによっ
て特定のパラメーターを使用して計算され、最終的な同一性パーセントのスコア
に到達する。この最終的な同一性パーセントのスコアは、この実施形態の目的で
使用されるものである。問い合わせ配列と一致／整列していない対象配列のＮ末
端およびＣ末端側の残基のみが、同一性パーセントのスコアを手動で調整する目
的のために考慮される。すなわち、問い合わせ残基位置のみが、対象配列の最も
遠いＮ末端およびＣ末端残基の外側に位置する。
い合わせ配列よりも短い場合、ＦＡＳＴＤＢプログラムが、全体的な同一性パー
セントを算定する場合に、対象配列のＮ末端短縮およびＣ末端短縮を考慮しない
という事実を考慮して、手動の補正が結果に対してなされる。問い合わせ配列に
対する、Ｎ末端およびＣ末端で短縮されている対象配列についての、同一性パー
セントは、問い合わせ配列の総塩基のパーセントとして、対応する対象残基と一
致／整列しない、対象配列のＮ末端およびＣ末端である問い合わせ配列の残基の
数を計算することによって補正される。残基が一致／整列されているか否かの決
定は、ＦＡＳＴＤＢ配列整列の結果によって決定される。次いで、このパーセン
トは、同一性パーセントから差し引かれ、上記のＦＡＳＴＤＢプログラムによっ
て特定のパラメーターを使用して計算され、最終的な同一性パーセントのスコア
に到達する。この最終的な同一性パーセントのスコアは、この実施形態の目的で
使用されるものである。問い合わせ配列と一致／整列していない対象配列のＮ末
端およびＣ末端側の残基のみが、同一性パーセントのスコアを手動で調整する目
的のために考慮される。すなわち、問い合わせ残基位置のみが、対象配列の最も
遠いＮ末端およびＣ末端残基の外側に位置する。
【０１４０】
例えば、９０アミノ酸残基の対象配列は、同一性パーセントを決定するために
１００残基の問い合わせ配列と整列される。欠失が対象配列のＮ末端で生じ、そ
してそれゆえＦＡＳＴＤＢ整列は、Ｎ末端での最初の１０残基の一致／整列を示
さない。１０個の不対合残基は、配列の１０％（一致していないＮ末端およびＣ
末端での残基の数／問い合わせ配列中の残基の総数）を表し、その結果ＦＡＳＴ
ＤＢプログラムによって計算される同一性パーセントのスコアから１０％が差し
引かれる。残りの９０残基が完全に一致した場合、最終的な同一性パーセントは
９０％である。別の例において、９０残基の対象配列が、１００残基の問い合わ
せ配列と比較される。この場合、欠失は、内部欠失であり、そのため問い合わせ
配列と一致／整列しない対象配列のＮ末端またはＣ末端の残基は存在しない。こ
の場合、ＦＡＳＴＤＢによって算定される同一性パーセントは、手動で補正され
ない。再び、ＦＡＳＴＤＢ整列において示される、問い合わせ配列と一致／整列
しない対象配列のＮ末端およびＣ末端の外の残基位置のみが手動で補正される。
他の手動の補正は、この実施形態の目的のためにはなされない。
１００残基の問い合わせ配列と整列される。欠失が対象配列のＮ末端で生じ、そ
してそれゆえＦＡＳＴＤＢ整列は、Ｎ末端での最初の１０残基の一致／整列を示
さない。１０個の不対合残基は、配列の１０％（一致していないＮ末端およびＣ
末端での残基の数／問い合わせ配列中の残基の総数）を表し、その結果ＦＡＳＴ
ＤＢプログラムによって計算される同一性パーセントのスコアから１０％が差し
引かれる。残りの９０残基が完全に一致した場合、最終的な同一性パーセントは
９０％である。別の例において、９０残基の対象配列が、１００残基の問い合わ
せ配列と比較される。この場合、欠失は、内部欠失であり、そのため問い合わせ
配列と一致／整列しない対象配列のＮ末端またはＣ末端の残基は存在しない。こ
の場合、ＦＡＳＴＤＢによって算定される同一性パーセントは、手動で補正され
ない。再び、ＦＡＳＴＤＢ整列において示される、問い合わせ配列と一致／整列
しない対象配列のＮ末端およびＣ末端の外の残基位置のみが手動で補正される。
他の手動の補正は、この実施形態の目的のためにはなされない。
【０１４１】
本発明のポリペプチドは、当業者に周知の方法を使用する、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ
ゲルまたは分子ふるいゲル濾過カラムにおける分子量マーカーとして有用である
。
ゲルまたは分子ふるいゲル濾過カラムにおける分子量マーカーとして有用である
。
【０１４２】
別の局面において、本発明は、本発明のポリペプチドのエピトープを有する部
分を含むペプチドまたはポリヌクレオチドを提供する。このポリペプチド部分の
エピトープは、本明細書中に記載されるポリペプチドの免疫原性または抗原性の
エピトープである。本明細書で使用される場合、「免疫原性エピトープ」は、タ
ンパク質全体が免疫原である場合、抗体応答を誘発するタンパク質の一部分とし
て定義される。他方で、抗体が結合し得るタンパク質の領域は、「抗原性エピト
ープ」として定義される。タンパク質の免疫原性エピトープの数は、抗原性エピ
トープの数未満である。例えば、Ｇｅｙｓｅｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：３９９８−４００２（１９８３）を参照のこと。
分を含むペプチドまたはポリヌクレオチドを提供する。このポリペプチド部分の
エピトープは、本明細書中に記載されるポリペプチドの免疫原性または抗原性の
エピトープである。本明細書で使用される場合、「免疫原性エピトープ」は、タ
ンパク質全体が免疫原である場合、抗体応答を誘発するタンパク質の一部分とし
て定義される。他方で、抗体が結合し得るタンパク質の領域は、「抗原性エピト
ープ」として定義される。タンパク質の免疫原性エピトープの数は、抗原性エピ
トープの数未満である。例えば、Ｇｅｙｓｅｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：３９９８−４００２（１９８３）を参照のこと。
【０１４３】
抗原性エピトープ（すなわち、抗体が結合し得る、タンパク質分子の領域を含
む）を保有するペプチドもしくはポリペプチドの選択については、タンパク質配
列の部分を模倣する比較的短い合成ペプチドが、部分的に模倣したタンパク質と
反応する抗血清を慣用的に誘発し得るということが当該分野において周知である
。例えば、Ｊ．Ｇ．Ｓｕｔｃｌｉｆｆｅら、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｔｈａｔ
ｒｅａｃｔ ｗｉｔｈ ｐｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｓｉｔｅ ｏｎ ｐｒ
ｏｔｅｉｎｓ」、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２１９：６６０−６６６（１９８３）を参照
のこと。タンパク質反応性抗血清を誘発し得るペプチドは、しばしは、タンパク
質の一次配列において表わされ、１セットの単純な化学的ルールによって特徴付
けられ得、そしてインタクトなタンパク質の免疫優性領域（すなわち、免疫原性
エピトープ）またはアミノ末端もしくはカルボキル末端のいずれに対しても限定
されない。
む）を保有するペプチドもしくはポリペプチドの選択については、タンパク質配
列の部分を模倣する比較的短い合成ペプチドが、部分的に模倣したタンパク質と
反応する抗血清を慣用的に誘発し得るということが当該分野において周知である
。例えば、Ｊ．Ｇ．Ｓｕｔｃｌｉｆｆｅら、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｔｈａｔ
ｒｅａｃｔ ｗｉｔｈ ｐｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｓｉｔｅ ｏｎ ｐｒ
ｏｔｅｉｎｓ」、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２１９：６６０−６６６（１９８３）を参照
のこと。タンパク質反応性抗血清を誘発し得るペプチドは、しばしは、タンパク
質の一次配列において表わされ、１セットの単純な化学的ルールによって特徴付
けられ得、そしてインタクトなタンパク質の免疫優性領域（すなわち、免疫原性
エピトープ）またはアミノ末端もしくはカルボキル末端のいずれに対しても限定
されない。
【０１４４】
本発明の抗原性エピトープ保有ペプチドおよびポリペプチドは、それゆえ本発
明のポリペプチドと特異的に結合する抗体（モノクローナル抗体を含む）を惹起
するのに有用である。例えば、Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅｌｌ ３７：７６７−７７
８（１９８４）の７７７を参照のこと。
明のポリペプチドと特異的に結合する抗体（モノクローナル抗体を含む）を惹起
するのに有用である。例えば、Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅｌｌ ３７：７６７−７７
８（１９８４）の７７７を参照のこと。
【０１４５】
本発明の抗原性エピトープ保有ペプチドおよびポリペプチドは、好ましくは、
本発明のポリペプチドのアミノ酸配列内に含まれる、少なくとも７個、より好ま
しくは少なくとも９個および最も好ましくは少なくともおよそ１５〜３０個のア
ミノ酸の配列を含む。
本発明のポリペプチドのアミノ酸配列内に含まれる、少なくとも７個、より好ま
しくは少なくとも９個および最も好ましくは少なくともおよそ１５〜３０個のア
ミノ酸の配列を含む。
【０１４６】
本発明のエピトープ保有ペプチドおよびポリペプチドは、任意の従来の手段に
よって産生され得る。Ｒ．Ａ．Ｈｏｕｇｈｔｅｎ、「Ｇｅｎｅｒａｌ Ｍｅｔｈ
ｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒａｐｉｄ ｓｏｌｉｄ−ｐｈａｓｅ ｓｙｓｔｈｅｓ
ｉｓ ｏｆ ｌａｒｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｅｐｔｉｄｅｓ：ｓｐｅｃｉ
ｆｉｃｉｔｙ ｏｆ ａｎｔｉｇｅｎ−ａｎｔｉｂｏｄｙ ｉｎｔｅｒａｃｔｉ
ｏｎ ａｔ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ ａｍｉｎｏ
ａｃｉｄｓ」Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２：５１３１
−５１３５（１９８５）。この「Ｓｉｍｕｌｔａｎｉｏｕｓ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ
Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（ＳＭＰＳ）」プロセスは、Ｈｏｕｇｈ
ｔｅｎらに対する米国特許第４，６３１，２１１号（１９８６）にさらに記載さ
れる。
よって産生され得る。Ｒ．Ａ．Ｈｏｕｇｈｔｅｎ、「Ｇｅｎｅｒａｌ Ｍｅｔｈ
ｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒａｐｉｄ ｓｏｌｉｄ−ｐｈａｓｅ ｓｙｓｔｈｅｓ
ｉｓ ｏｆ ｌａｒｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｅｐｔｉｄｅｓ：ｓｐｅｃｉ
ｆｉｃｉｔｙ ｏｆ ａｎｔｉｇｅｎ−ａｎｔｉｂｏｄｙ ｉｎｔｅｒａｃｔｉ
ｏｎ ａｔ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ ａｍｉｎｏ
ａｃｉｄｓ」Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２：５１３１
−５１３５（１９８５）。この「Ｓｉｍｕｌｔａｎｉｏｕｓ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ
Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（ＳＭＰＳ）」プロセスは、Ｈｏｕｇｈ
ｔｅｎらに対する米国特許第４，６３１，２１１号（１９８６）にさらに記載さ
れる。
【０１４７】
当業者が理解するように、上記の本発明のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペ
プチドおよびそのエピトープ保有フラグメントは、免疫グロブリン（ＩｇＧ）の
定常領域の部分と結合され得、キメラポリペプチドを生じる。これらの融合タン
パク質は、精製を促進させて、そしてインビボで増大した半減期を示す。これは
、例えば、ヒトＣＤ４ポリペプチドの第１の２つのドメインおよび哺乳動物免疫
グロブリンの重鎖もしくは軽鎖の定常領域の種々のドメインからなるキメラタン
パク質について示される（ＥＰＡ ３９４，８２７；Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒら、
Ｎａｔｕｒｅ ３３１：８４−８６（１９８８））。ＩｇＧ部分に起因するジス
ルフィド結合二量体構造を有する融合タンパク質はまた、単量体ＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２タンパク質もしくはタンパク質フラグメント単独よりも、他の分子
と結合しそして中和する際に、より効率的であり得る（Ｆｏｕｔｏｕｌａｋｉｓ
ら、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：３９５８−３９６４（１９９５））。
プチドおよびそのエピトープ保有フラグメントは、免疫グロブリン（ＩｇＧ）の
定常領域の部分と結合され得、キメラポリペプチドを生じる。これらの融合タン
パク質は、精製を促進させて、そしてインビボで増大した半減期を示す。これは
、例えば、ヒトＣＤ４ポリペプチドの第１の２つのドメインおよび哺乳動物免疫
グロブリンの重鎖もしくは軽鎖の定常領域の種々のドメインからなるキメラタン
パク質について示される（ＥＰＡ ３９４，８２７；Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒら、
Ｎａｔｕｒｅ ３３１：８４−８６（１９８８））。ＩｇＧ部分に起因するジス
ルフィド結合二量体構造を有する融合タンパク質はまた、単量体ＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２タンパク質もしくはタンパク質フラグメント単独よりも、他の分子
と結合しそして中和する際に、より効率的であり得る（Ｆｏｕｔｏｕｌａｋｉｓ
ら、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：３９５８−３９６４（１９９５））。
【０１４８】
（ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２ポリペプチドおよびポリペプチドフラグメント
） 本発明において、「ポリペプチドフラグメント」は、寄託されたクローンに含
まれるか、または配列番号１または配列番号３に示される核酸配列を有する短鎖
ポリヌクレオチドをいう。この短鎖ヌクレオチドフラグメントは、好ましくは、
少なくとも約１５ｎｔ、そして好ましくは、少なくとも約２０ｎｔ、なおより好
ましくは少なくとも約３０ｎｔ、およびさらにより好ましくは、少なくとも約４
０ｎｔの長さである。例えば、フラグメント「少なくとも２０ｎｔ長」は、寄託
されたクローンに含まれるｃＤＮＡ配列、または配列番号１または配列番号３に
示されるヌクレオチド配列由来の２０以上の連続塩基を含むことが意図される。
これらのヌクレオチドフラグメントは、本明細書中で議論されるように、診断用
プローブおよびプライマーとして有用である。当然のことながら、より大きなフ
ラグメント（例えば、５０、１５０、５００、６００、２０００ヌクレオチド）
が好ましい。
） 本発明において、「ポリペプチドフラグメント」は、寄託されたクローンに含
まれるか、または配列番号１または配列番号３に示される核酸配列を有する短鎖
ポリヌクレオチドをいう。この短鎖ヌクレオチドフラグメントは、好ましくは、
少なくとも約１５ｎｔ、そして好ましくは、少なくとも約２０ｎｔ、なおより好
ましくは少なくとも約３０ｎｔ、およびさらにより好ましくは、少なくとも約４
０ｎｔの長さである。例えば、フラグメント「少なくとも２０ｎｔ長」は、寄託
されたクローンに含まれるｃＤＮＡ配列、または配列番号１または配列番号３に
示されるヌクレオチド配列由来の２０以上の連続塩基を含むことが意図される。
これらのヌクレオチドフラグメントは、本明細書中で議論されるように、診断用
プローブおよびプライマーとして有用である。当然のことながら、より大きなフ
ラグメント（例えば、５０、１５０、５００、６００、２０００ヌクレオチド）
が好ましい。
【０１４９】
さらに、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドフラグメントの代表例
としては、例えば、以下のおおよそのヌクレオチド数の配列を有するフラグメン
トまたは寄託されたクローンに含まれたｃＤＮＡが挙げられる：１〜５０、５１
〜１００、１０１〜１５０、１５１〜２００、２０１〜２５０、２５１〜３００
、３０１〜３５０、３５１〜４００、４０１〜４５０、４５１〜５００、５０１
〜５５０、５５１〜６００、６５１〜７００、７０１〜７５０、７５１〜８００
、８００〜８５０、８５１〜９００、９０１〜９５０、９５１〜１０００、１０
０１〜１０５０、１０５１〜１１００、１１０１〜１１５０、１１５１〜１２０
０、１２０１〜１２５０、１２５１〜１３００、１３０１〜１３５０、１３５１
〜１４００、１４０１〜１４５０、１４５１〜１５００、１５０１〜１５５０、
１５５１〜１６００、１６０１〜１６５０、１６５１〜１７００、１７０１〜１
７５０、１７５１〜１８００、１８０１〜１８５０、１８５１〜１９００、１９
０１〜１９５０、１９５１〜２０００、または２００１から配列番号１または配
列番号３の末端まで。この文脈において、「約（おおよそ）」は、特に記載され
た範囲、いずれかの末端もしくは両方の末端において、これより数個（５、４、
３、２、または１）のヌクレオチドだけ大きいかまたは小さな範囲を含む。好ま
しくは、これらのフラグメントは、生物学的活性を有するポリペプチドをコード
する。より好ましくは、これらのフラグメントは、本明細書中で議論されるよう
にプローブまたはプライマーとして使用され得る。
としては、例えば、以下のおおよそのヌクレオチド数の配列を有するフラグメン
トまたは寄託されたクローンに含まれたｃＤＮＡが挙げられる：１〜５０、５１
〜１００、１０１〜１５０、１５１〜２００、２０１〜２５０、２５１〜３００
、３０１〜３５０、３５１〜４００、４０１〜４５０、４５１〜５００、５０１
〜５５０、５５１〜６００、６５１〜７００、７０１〜７５０、７５１〜８００
、８００〜８５０、８５１〜９００、９０１〜９５０、９５１〜１０００、１０
０１〜１０５０、１０５１〜１１００、１１０１〜１１５０、１１５１〜１２０
０、１２０１〜１２５０、１２５１〜１３００、１３０１〜１３５０、１３５１
〜１４００、１４０１〜１４５０、１４５１〜１５００、１５０１〜１５５０、
１５５１〜１６００、１６０１〜１６５０、１６５１〜１７００、１７０１〜１
７５０、１７５１〜１８００、１８０１〜１８５０、１８５１〜１９００、１９
０１〜１９５０、１９５１〜２０００、または２００１から配列番号１または配
列番号３の末端まで。この文脈において、「約（おおよそ）」は、特に記載され
た範囲、いずれかの末端もしくは両方の末端において、これより数個（５、４、
３、２、または１）のヌクレオチドだけ大きいかまたは小さな範囲を含む。好ま
しくは、これらのフラグメントは、生物学的活性を有するポリペプチドをコード
する。より好ましくは、これらのフラグメントは、本明細書中で議論されるよう
にプローブまたはプライマーとして使用され得る。
【０１５０】
本発明において、「ポリペプチドフラグメント」とは、配列番号２または配列
番号４に含まれるか、または寄託されたクローンに含まれるｃＤＮＡによってコ
ードされる、短鎖アミノ酸配列をいう。タンパク質フラグメントは、「自立構造
（ｆｒｅｅ−ｓｔａｎｄｉｎｇ）」であり得るか、あるいはより大きなポリぺプ
チド内（そのフラグメントが、部分または領域を（最も好ましくは単一の連続し
た領域として）形成する）に含まれ得る。本発明のポリペプチドフラグメントの
代表的な例としては、例えば、以下のおおよそのアミノ酸数からなるフラグメン
トが挙げられる：１〜２０、２１〜４０、４１〜６０、６１〜８０、８１〜１０
０、１０２〜１２０、１２１〜１４０、１４１〜１６０、１６１〜１８０、１８
１〜２００、２０１〜２２０、２２１〜２４０、２４１〜２６０、２６１〜２８
０、または２８１から配列番号２または配列番号４のコード領域の末端まで。さ
らに、本発明のポリペプチドフラグメントは、少なくとも約２０、３０、４０、
５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、ま
たは１５０アミノ酸の長さであり得る。この文脈において、「約（おおよそ）」
とは、いずれかの末端もしくは両方の末端において、特に記載された範囲、また
はこれより数個（５、４、３、２、または１）のアミノ酸だけ大きいかまたは小
さな範囲を含む。
番号４に含まれるか、または寄託されたクローンに含まれるｃＤＮＡによってコ
ードされる、短鎖アミノ酸配列をいう。タンパク質フラグメントは、「自立構造
（ｆｒｅｅ−ｓｔａｎｄｉｎｇ）」であり得るか、あるいはより大きなポリぺプ
チド内（そのフラグメントが、部分または領域を（最も好ましくは単一の連続し
た領域として）形成する）に含まれ得る。本発明のポリペプチドフラグメントの
代表的な例としては、例えば、以下のおおよそのアミノ酸数からなるフラグメン
トが挙げられる：１〜２０、２１〜４０、４１〜６０、６１〜８０、８１〜１０
０、１０２〜１２０、１２１〜１４０、１４１〜１６０、１６１〜１８０、１８
１〜２００、２０１〜２２０、２２１〜２４０、２４１〜２６０、２６１〜２８
０、または２８１から配列番号２または配列番号４のコード領域の末端まで。さ
らに、本発明のポリペプチドフラグメントは、少なくとも約２０、３０、４０、
５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、ま
たは１５０アミノ酸の長さであり得る。この文脈において、「約（おおよそ）」
とは、いずれかの末端もしくは両方の末端において、特に記載された範囲、また
はこれより数個（５、４、３、２、または１）のアミノ酸だけ大きいかまたは小
さな範囲を含む。
【０１５１】
好ましいポリペプチドフラグメントとして、分泌されたＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２タンパク質およびその成熟形態が挙げられる。さらに好ましいポリペプチ
ドフラグメントとして、アミノ末端またはカルボキシ末端からの一連の欠失され
た残基を有する分泌されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質あるいはその
成熟形態、あるいはその両方が挙げられる。例えば、任意の数のアミノ酸（１〜
６０の範囲）は、分泌されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドあるいは
成熟形態のアミノ末端から切除され得る。同様に、任意の数のアミノ酸（１〜３
０の範囲）は、分泌されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質あるいは成熟
形態のカルボキシ末端から切除され得る。さらに、上記のアミノ末端およびカル
ボキシ末端欠失の任意の組み合わせが好ましい。同様に、これらのＭＥＴＨ１ま
たはＭＥＴＨ２ポリペプチドフラグメントをコードするポリヌクレオチドフラグ
メントがまた、好ましい。
ＴＨ２タンパク質およびその成熟形態が挙げられる。さらに好ましいポリペプチ
ドフラグメントとして、アミノ末端またはカルボキシ末端からの一連の欠失され
た残基を有する分泌されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質あるいはその
成熟形態、あるいはその両方が挙げられる。例えば、任意の数のアミノ酸（１〜
６０の範囲）は、分泌されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドあるいは
成熟形態のアミノ末端から切除され得る。同様に、任意の数のアミノ酸（１〜３
０の範囲）は、分泌されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質あるいは成熟
形態のカルボキシ末端から切除され得る。さらに、上記のアミノ末端およびカル
ボキシ末端欠失の任意の組み合わせが好ましい。同様に、これらのＭＥＴＨ１ま
たはＭＥＴＨ２ポリペプチドフラグメントをコードするポリヌクレオチドフラグ
メントがまた、好ましい。
【０１５２】
特に、ＭＥＴＨ１ポリペプチドのＮ末端欠失は、一般式ｍ−９５０によって記
載され、ここでｍは２〜９４９の整数であり、ここでｍは配列番号２で同定され
るアミノ酸残基の位置に対応する。好ましくは、配列番号２に示される本発明の
ＭＥＴＨ１ポリペプチドのＮ末端欠失として、配列番号２の以下の残基のアミノ
酸配列を含むポリペプチドが挙げられる：Ｇ−２〜Ｓ−９５０；Ｎ−３〜Ｓ−９
５０；Ａ−４〜Ｓ−９５０；Ｅ−５〜Ｓ−９５０；Ｒ−６〜Ｓ−９５０；Ａ−７
〜Ｓ−９５０；Ｐ−８〜Ｓ−９５０；Ｇ−９〜Ｓ−９５０；Ｓ−１０〜Ｓ−９５
０；Ｒ−１１〜Ｓ−９５０；Ｓ−１２〜Ｓ−９５０；Ｆ−１３〜Ｓ−９５０；Ｇ
−１４〜Ｓ−９５０；Ｐ−１５〜Ｓ−９５０；Ｖ−１６〜Ｓ−９５０；Ｐ−１７
〜Ｓ−９５０；Ｔ−１８〜Ｓ−９５０；Ｌ−１９〜Ｓ−９５０；Ｌ−２０〜Ｓ−
９５０；Ｌ−２１〜Ｓ−９５０；Ｌ−２２〜Ｓ−９５０；Ａ−２３〜Ｓ−９５０
；Ａ−２４〜Ｓ−９５０；Ａ−２５〜Ｓ−９５０；Ｌ−２６〜Ｓ−９５０；Ｌ−
２７〜Ｓ−９５０；Ａ−２８〜Ｓ−９５０；Ｖ−２９〜Ｓ−９５０；Ｓ−３０〜
Ｓ−９５０；Ｄ−３１〜Ｓ−９５０；Ａ−３２〜Ｓ−９５０；Ｌ−３３〜Ｓ−９
５０；Ｇ−３４〜Ｓ−９５０；Ｒ−３５〜Ｓ−９５０；Ｐ−３６〜Ｓ−９５０；
Ｓ−３７〜Ｓ−９５０；Ｅ−３８〜Ｓ−９５０；Ｅ−３９〜Ｓ−９５０；Ｄ−４
０〜Ｓ−９５０；Ｅ−４１〜Ｓ−９５０；Ｅ−４２〜Ｓ−９５０；Ｌ−４３〜Ｓ
−９５０；Ｖ−４４〜Ｓ−９５０；Ｖ−４５〜Ｓ−９５０；Ｐ−４６〜Ｓ−９５
０；Ｅ−４７〜Ｓ−９５０；Ｌ−４８〜Ｓ−９５０；Ｅ−４９〜Ｓ−９５０；Ｒ
−５０〜Ｓ−９５０；Ａ−５１〜Ｓ−９５０；Ｐ−５２〜Ｓ−９５０；Ｇ−５３
〜Ｓ−９５０；Ｈ−５４〜Ｓ−９５０；Ｇ−５５〜Ｓ−９５０；Ｔ−５６〜Ｓ−
９５０；Ｔ−５７〜Ｓ−９５０；Ｒ−５８〜Ｓ−９５０；Ｌ−５９〜Ｓ−９５０
；Ｒ−６０〜Ｓ−９５０；Ｌ−６１〜Ｓ−９５０；Ｈ−６２〜Ｓ−９５０；Ａ−
６３〜Ｓ−９５０；Ｆ−６４〜Ｓ−９５０；Ｄ−６５〜Ｓ−９５０；Ｑ−６６〜
Ｓ−９５０；Ｑ−６７〜Ｓ−９５０；Ｌ−６８〜Ｓ−９５０；Ｄ−６９〜Ｓ−９
５０；Ｌ−７０〜Ｓ−９５０；Ｅ−７１〜Ｓ−９５０；Ｌ−７２〜Ｓ−９５０；
Ｒ−７３〜Ｓ−９５０；Ｐ−７４〜Ｓ−９５０；Ｄ−７５〜Ｓ−９５０；Ｓ−７
６〜Ｓ−９５０；Ｓ−７７〜Ｓ−９５０；Ｆ−７８〜Ｓ−９５０；Ｌ−７９〜Ｓ
−９５０；Ａ−８０〜Ｓ−９５０；Ｐ−８１〜Ｓ−９５０；Ｇ−８２〜Ｓ−９５
０；Ｆ−８３〜Ｓ−９５０；Ｔ−８４〜Ｓ−９５０；Ｌ−８５〜Ｓ−９５０；Ｑ
−８６〜Ｓ−９５０；Ｎ−８７〜Ｓ−９５０；Ｖ−８８〜Ｓ−９５０；Ｇ−８９
〜Ｓ−９５０；Ｒ−９０〜Ｓ−９５０；Ｋ−９１〜Ｓ−９５０；Ｓ−９２〜Ｓ−
９５０；Ｇ−９３〜Ｓ−９５０；Ｓ−９４〜Ｓ−９５０；Ｅ−９５〜Ｓ−９５０
；Ｔ−９６〜Ｓ−９５０；Ｐ−９７〜Ｓ−９５０；Ｌ−９８〜Ｓ−９５０；Ｐ−
９９〜Ｓ−９５０；Ｅ−１００〜Ｓ−９５０；Ｔ−１０１〜Ｓ−９５０；Ｄ−１
０２〜Ｓ−９５０；Ｌ−１０３〜Ｓ−９５０；Ａ−１０４〜Ｓ−９５０；Ｈ−１
０５〜Ｓ−９５０；Ｃ−１０６〜Ｓ−９５０；Ｆ−１０７〜Ｓ−９５０；Ｙ−１
０８〜Ｓ−９５０；Ｓ−１０９〜Ｓ−９５０；Ｇ−１１０〜Ｓ−９５０；Ｔ−１
１１〜Ｓ−９５０；Ｖ−１１２〜Ｓ−９５０；Ｎ−１１３〜Ｓ−９５０；Ｇ−１
１４〜Ｓ−９５０；Ｄ−１１５〜Ｓ−９５０；Ｐ−１１６〜Ｓ−９５０；Ｓ−１
１７〜Ｓ−９５０；Ｓ−１１８〜Ｓ−９５０；Ａ−１１９〜Ｓ−９５０；Ａ−１
２０〜Ｓ−９５０；Ａ−１２１〜Ｓ−９５０；Ｌ−１２２〜Ｓ−９５０；Ｓ−１
２３〜Ｓ−９５０；Ｌ−１２４〜Ｓ−９５０；Ｃ−１２５〜Ｓ−９５０；Ｅ−１
２６〜Ｓ−９５０；Ｇ−１２７〜Ｓ−９５０；Ｖ−１２８〜Ｓ−９５０；Ｒ−１
２９〜Ｓ−９５０；Ｇ−１３０〜Ｓ−９５０；Ａ−１３１〜Ｓ−９５０；Ｆ−１
３２〜Ｓ−９５０；Ｙ−１３３〜Ｓ−９５０；Ｌ−１３４〜Ｓ−９５０；Ｌ−１
３５〜Ｓ−９５０；Ｇ−１３６〜Ｓ−９５０；Ｅ−１３７〜Ｓ−９５０；Ａ−１
３８〜Ｓ−９５０；Ｙ−１３９〜Ｓ−９５０；Ｆ−１４０〜Ｓ−９５０；Ｉ−１
４１〜Ｓ−９５０；Ｑ−１４２〜Ｓ−９５０；Ｐ−１４３〜Ｓ−９５０；Ｌ−１
４４〜Ｓ−９５０；Ｐ−１４５〜Ｓ−９５０；Ａ−１４６〜Ｓ−９５０；Ａ−１
４７〜Ｓ−９５０；Ｓ−１４８〜Ｓ−９５０；Ｅ−１４９〜Ｓ−９５０；Ｒ−１
５０〜Ｓ−９５０；Ｌ−１５１〜Ｓ−９５０；Ａ−１５２〜Ｓ−９５０；Ｔ−１
５３〜Ｓ−９５０；Ａ−１５４〜Ｓ−９５０；Ａ−１５５〜Ｓ−９５０；Ｐ−１
５６〜Ｓ−９５０；Ｇ−１５７〜Ｓ−９５０；Ｅ−１５８〜Ｓ−９５０；Ｋ−１
５９〜Ｓ−９５０；Ｐ−１６０〜Ｓ−９５０；Ｐ−１６１〜Ｓ−９５０；Ａ−１
６２〜Ｓ−９５０；Ｐ−１６３〜Ｓ−９５０；Ｌ−１６４〜Ｓ−９５０；Ｑ−１
６５〜Ｓ−９５０；Ｆ−１６６〜Ｓ−９５０；Ｈ−１６７〜Ｓ−９５０；Ｌ−１
６８〜Ｓ−９５０；Ｌ−１６９〜Ｓ−９５０；Ｒ−１７０〜Ｓ−９５０；Ｒ−１
７１〜Ｓ−９５０；Ｎ−１７２〜Ｓ−９５０；Ｒ−１７３〜Ｓ−９５０；Ｑ−１
７４〜Ｓ−９５０；Ｇ−１７５〜Ｓ−９５０；Ｄ−１７６〜Ｓ−９５０；Ｖ−１
７７〜Ｓ−９５０；Ｇ−１７８〜Ｓ−９５０；Ｇ−１７９〜Ｓ−９５０；Ｔ−１
８０〜Ｓ−９５０；Ｃ−１８１〜Ｓ−９５０；Ｇ−１８２〜Ｓ−９５０；Ｖ−１
８３〜Ｓ−９５０；Ｖ−１８４〜Ｓ−９５０；Ｄ−１８５〜Ｓ−９５０；Ｄ−１
８６〜Ｓ−９５０；Ｅ−１８７〜Ｓ−９５０；Ｐ−１８８〜Ｓ−９５０；Ｒ−１
８９〜Ｓ−９５０；Ｐ−１９０〜Ｓ−９５０；Ｔ−１９１〜Ｓ−９５０；Ｇ−１
９２〜Ｓ−９５０；Ｋ−１９３〜Ｓ−９５０；Ａ−１９４〜Ｓ−９５０；Ｅ−１
９５〜Ｓ−９５０；Ｔ−１９６〜Ｓ−９５０；Ｅ−１９７〜Ｓ−９５０；Ｄ−１
９８〜Ｓ−９５０；Ｅ−１９９〜Ｓ−９５０；Ｄ−２００〜Ｓ−９５０；Ｅ−２
０１〜Ｓ−９５０；Ｇ−２０２〜Ｓ−９５０；Ｔ−２０３〜Ｓ−９５０；Ｅ−２
０４〜Ｓ−９５０；Ｇ−２０５〜Ｓ−９５０；Ｅ−２０６〜Ｓ−９５０；Ｄ−２
０７〜Ｓ−９５０；Ｅ−２０８〜Ｓ−９５０；Ｇ−２０９〜Ｓ−９５０；Ｐ−２
１０〜Ｓ−９５０；Ｑ−２１１〜Ｓ−９５０；Ｗ−２１２〜Ｓ−９５０；Ｓ−２
１３〜Ｓ−９５０；Ｐ−２１４〜Ｓ−９５０；Ｑ−２１５〜Ｓ−９５０；Ｄ−２
１６〜Ｓ−９５０；Ｐ−２１７〜Ｓ−９５０；Ａ−２１８〜Ｓ−９５０；Ｌ−２
１９〜Ｓ−９５０；Ｑ−２２０〜Ｓ−９５０；Ｇ−２２１〜Ｓ−９５０；Ｖ−２
２２〜Ｓ−９５０；Ｇ−２２３〜Ｓ−９５０；Ｑ−２２４〜Ｓ−９５０；Ｐ−２
２５〜Ｓ−９５０；Ｔ−２２６〜Ｓ−９５０；Ｇ−２２７〜Ｓ−９５０；Ｔ−２
２８〜Ｓ−９５０；Ｇ−２２９〜Ｓ−９５０；Ｓ−２３０〜Ｓ−９５０；Ｉ−２
３１〜Ｓ−９５０；Ｒ−２３２〜Ｓ−２５９；Ｋ−２３３〜Ｓ−９５０；Ｋ−２
３４〜Ｓ−９５０；Ｒ−２３５〜Ｓ−９５０；Ｆ−２３６〜Ｓ−９５０；Ｖ−２
３７〜Ｓ−９５０；Ｓ−２３８〜Ｓ−９５０；Ｓ−２３９〜Ｓ−９５０；Ｈ−２
４０〜Ｓ−９５０；Ｒ−２４１〜Ｓ−９５０；Ｙ−２４２〜Ｓ−９５０；Ｖ−２
４３〜Ｓ−９５０；Ｅ−２４４〜Ｓ−９５０；Ｔ−２４５〜Ｓ−９５０；Ｍ−２
４６〜Ｓ−９５０；Ｌ−２４７〜Ｓ−９５０；Ｖ−２４８〜Ｓ−９５０；Ａ−２
４９〜Ｓ−９５０；Ｄ−２５０〜Ｓ−９５０；Ｑ−２５１〜Ｓ−９５０；Ｓ−２
５２〜Ｓ−９５０；Ｍ−２５３〜Ｓ−９５０；Ａ−２５４〜Ｓ−９５０；Ｅ−２
５５〜Ｓ−９５０；Ｆ−２５６〜Ｓ−９５０；Ｈ−２５７〜Ｓ−９５０；Ｇ−２
５８〜Ｓ−９５０；Ｓ−２５９〜Ｓ−９５０；Ｇ−２６０〜Ｓ−９５０；Ｌ−２
６１〜Ｓ−９５０；Ｋ−２６２〜Ｓ−９５０；Ｈ−２６３〜Ｓ−９５０；Ｙ−２
６４〜Ｓ−９５０；Ｌ−２６５〜Ｓ−９５０；Ｌ−２６６〜Ｓ−９５０；Ｔ−２
６７〜Ｓ−９５０；Ｌ−２６８〜Ｓ−９５０；Ｆ−２６９〜Ｓ−９５０；Ｓ−２
７０〜Ｓ−９５０；Ｖ−２７１〜Ｓ−９５０；Ａ−２７２〜Ｓ−９５０；Ａ−２
７３〜Ｓ−９５０；Ｒ−２７４〜Ｓ−９５０；Ｌ−２７５〜Ｓ−９５０；Ｙ−２
７６〜Ｓ−９５０；Ｋ−２７７〜Ｓ−９５０；Ｈ−２７８〜Ｓ−９５０；Ｐ−２
７９〜Ｓ−９５０；Ｓ−２８０〜Ｓ−９５０；Ｉ−２８１〜Ｓ−９５０；Ｒ−２
８２〜Ｓ−９５０；Ｎ−２８３〜Ｓ−９５０；Ｓ−２８４〜Ｓ−９５０；Ｖ−２
８５〜Ｓ−９５０；Ｓ−２８６〜Ｓ−９５０；Ｌ−２８７〜Ｓ−９５０；Ｖ−２
８８〜Ｓ−９５０；Ｖ−２８９〜Ｓ−９５０；Ｖ−２９０〜Ｓ−９５０；Ｋ−２
９１〜Ｓ−９５０；１−２９２〜Ｓ−９５０；Ｌ−２９３〜Ｓ−９５０；Ｖ−２
９４〜Ｓ−９５０；Ｉ−２９５〜Ｓ−９５０；Ｈ−２９６〜Ｓ−９５０；Ｄ−２
９７〜Ｓ−９５０；Ｅ−２９８〜Ｓ−９５０；Ｑ−２９９〜Ｓ−９５０；Ｋ−３
００〜Ｓ−９５０；Ｇ−３０１〜Ｓ−９５０；Ｐ−３０２〜Ｓ−９５０；Ｅ−３
０３〜Ｓ−９５０；Ｖ−３０４〜Ｓ−９５０；Ｔ−３０５〜Ｓ−９５０；Ｓ−３
０６〜Ｓ−９５０；Ｎ−３０７〜Ｓ−９５０；Ａ−３０８〜Ｓ−９５０；Ａ−３
０９〜Ｓ−９５０；Ｌ−３１０〜Ｓ−９５０；Ｔ−３１１〜Ｓ−９５０；Ｌ−３
１２〜Ｓ−９５０；Ｒ−３１３〜Ｓ−９５０；Ｎ−３１４〜Ｓ−９５０；Ｆ−３
１５〜Ｓ−９５０；Ｃ−３１６〜Ｓ−９５０；Ｎ−３１７〜Ｓ−９５０；Ｗ−３
１８〜Ｓ−９５０；Ｑ−３１９〜Ｓ−９５０；Ｋ−３２０〜Ｓ−９５０；Ｑ−３
２１〜Ｓ−９５０；Ｈ−３２２〜Ｓ−９５０；Ｎ−３２３〜Ｓ−９５０；Ｐ−３
２４〜Ｓ−９５０；Ｐ−３２５〜Ｓ−９５０；Ｓ−３２６〜Ｓ−９５０；Ｄ−３
２７〜Ｓ−９５０；Ｒ−３２８〜Ｓ−９５０；Ｄ−３２９〜Ｓ−９５０；Ａ−３
３０〜Ｓ−９５０；Ｅ−３３１〜Ｓ−９５０；Ｈ−３３２〜Ｓ−９５０；Ｙ−３
３３〜Ｓ−９５０；Ｄ−３３４〜Ｓ−９５０；Ｔ−３３５〜Ｓ−９５０；Ａ−３
３６〜Ｓ−９５０；Ｉ−３３７〜Ｓ−９５０；Ｌ−３３８〜Ｓ−９５０；Ｆ−３
３９〜Ｓ−９５０；Ｔ−３４０〜Ｓ−９５０；Ｒ−３４１〜Ｓ−９５０；Ｑ−３
４２〜Ｓ−９５０；Ｄ−３４３〜Ｓ−９５０；Ｌ−３４４〜Ｓ−９５０；Ｃ−３
４５〜Ｓ−９５０；Ｇ−３４６〜Ｓ−９５０；Ｓ−３４７〜Ｓ−９５０；Ｑ−３
４８〜Ｓ−９５０；Ｔ−３４９〜Ｓ−９５０；Ｃ−３５０〜Ｓ−９５０；Ｄ−３
５１〜Ｓ−９５０；Ｔ−３５２〜Ｓ−９５０；Ｌ−３５３〜Ｓ−９５０；Ｇ−３
５４〜Ｓ−９５０；Ｍ−３５５〜Ｓ−９５０；Ａ−３５６〜Ｓ−９５０；Ｄ−３
５７〜Ｓ−９５０；Ｖ−３５８〜Ｓ−９５０；Ｇ−３５９〜Ｓ−９５０；Ｔ−３
６０〜Ｓ−９５０；Ｖ−３６１〜Ｓ−９５０；Ｃ−３６２〜Ｓ−９５０；Ｄ−３
６３〜Ｓ−９５０；Ｐ−３６４〜Ｓ−９５０；Ｓ−３６５〜Ｓ−９５０；Ｒ−３
６６〜Ｓ−９５０；Ｓ−３６７〜Ｓ−９５０；Ｃ−３６８〜Ｓ−９５０；Ｓ−３
６９〜Ｓ−９５０；Ｖ−３７０〜Ｓ−９５０；Ｉ−３７１〜Ｓ−９５０；Ｅ−３
７２〜Ｓ−９５０；Ｄ−３７３〜Ｓ−９５０；Ｄ−３７４〜Ｓ−９５０；Ｇ−３
７５〜Ｓ−９５０；Ｌ−３７６〜Ｓ−９５０；Ｑ−３７７〜Ｓ−９５０；Ａ−３
７８〜Ｓ−９５０；Ａ−３７９〜Ｓ−９５０；Ｆ−３８０〜Ｓ−９５０；Ｔ−３
８１〜Ｓ−９５０；Ｔ−３８２〜Ｓ−９５０；Ａ−３８３〜Ｓ−９５０；Ｈ−３
８４〜Ｓ−９５０；Ｅ−３８５〜Ｓ−９５０；Ｌ−３８６〜Ｓ−９５０；Ｇ−３
８７〜Ｓ−９５０；Ｈ−３８８〜Ｓ−９５０；Ｖ−３８９〜Ｓ−９５０；Ｆ−３
９０〜Ｓ−９５０；Ｎ−３９１〜Ｓ−９５０；Ｍ−３９２〜Ｓ−９５０；Ｐ−３
９３〜Ｓ−９５０；Ｈ−３９４〜Ｓ−９５０；Ｄ−３９５〜Ｓ−９５０；Ｄ−３
９６〜Ｓ−９５０；Ａ−３９７〜Ｓ−９５０；Ｋ−３９８〜Ｓ−９５０；Ｑ−３
９９〜Ｓ−９５０；Ｃ−４００〜Ｓ−９５０；Ａ−４０１〜Ｓ−９５０；Ｓ−４
０２〜Ｓ−９５０；Ｌ−４０３〜Ｓ−９５０；Ｎ−４０４〜Ｓ−９５０；Ｇ−４
０５〜Ｓ−９５０；Ｖ−４０６〜Ｓ−９５０；Ｎ−４０７〜Ｓ−９５０；Ｑ−４
０８〜Ｓ−９５０；Ｄ−４０９〜Ｓ−９５０；Ｓ−４１０〜Ｓ−９５０；Ｈ−４
１１〜Ｓ−９５０；Ｍ−４１２〜Ｓ−９５０；Ｍ−４１３〜Ｓ−９５０；Ａ−４
１４〜Ｓ−９５０；Ｓ−４１５〜Ｓ−９５０；Ｍ−４１６〜Ｓ−９５０；Ｌ−４
１７〜Ｓ−９５０；Ｓ−４１８〜Ｓ−９５０；Ｎ−４１９〜Ｓ−９５０；Ｌ−４
２０〜Ｓ−９５０；Ｄ−４２１〜Ｓ−９５０；Ｈ−４２２〜Ｓ−９５０；Ｓ−４
２３〜Ｓ−９５０；Ｑ−４２４〜Ｓ−９５０；Ｐ−４２５〜Ｓ−９５０；Ｗ−４
２６〜Ｓ−９５０；Ｓ−４２７〜Ｓ−９５０；Ｐ−４２８〜Ｓ−９５０；Ｃ−４
２９〜Ｓ−９５０；Ｓ−４３０〜Ｓ−９５０；Ａ−４３１〜Ｓ−９５０；Ｙ−４
３２〜Ｓ−９５０；Ｍ−４３３〜Ｓ−９５０；Ｉ−４３４〜Ｓ−９５０；Ｔ−４
３５〜Ｓ−９５０；Ｓ−４３６〜Ｓ−９５０；Ｆ−４３７〜Ｓ−９５０；Ｌ−４
３８〜Ｓ−９５０；Ｄ−４３９〜Ｓ−９５０；Ｎ−４４０〜Ｓ−９５０；Ｇ−４
４１〜Ｓ−９５０；Ｈ−４４２〜Ｓ−９５０；Ｇ−４４３〜Ｓ−９５０；Ｅ−４
４４〜Ｓ−９５０；Ｃ−４４５〜Ｓ−９５０；Ｌ−４４６〜Ｓ−９５０；Ｍ−４
４７〜Ｓ−９５０；Ｄ−４４８〜Ｓ−９５０；Ｋ−４４９〜Ｓ−９５０；Ｐ−４
５０〜Ｓ−９５０；Ｑ−４５１〜Ｓ−９５０；Ｎ−４５２〜Ｓ−９５０；Ｐ−４
５３〜Ｓ−９５０；Ｉ−４５４〜Ｓ−９５０；Ｑ−４５５〜Ｓ−９５０；Ｌ−４
５６〜Ｓ−９５０；Ｐ−４５７〜Ｓ−９５０；Ｇ−４５８〜Ｓ−９５０；Ｄ−４
５９〜Ｓ−９５０；Ｌ−４６０〜Ｓ−９５０；Ｐ−４６１〜Ｓ−９５０；Ｇ−４
６２〜Ｓ−９５０；Ｔ−４６３〜Ｓ−９５０；Ｓ−４６４〜Ｓ−９５０；Ｙ−４
６５〜Ｓ−９５０；Ｄ−４６６〜Ｓ−９５０；Ａ−４６７〜Ｓ−９５０；Ｎ−４
６８〜Ｓ−９５０；Ｒ−４６９〜Ｓ−９５０；Ｑ−４７０〜Ｓ−９５０；Ｃ−４
７１〜Ｓ−９５０；Ｑ−４７２〜Ｓ−９５０；Ｆ−４７３〜Ｓ−９５０；Ｔ−４
７４〜Ｓ−９５０；Ｆ−４７５〜Ｓ−９５０；Ｇ−４７６〜Ｓ−９５０；Ｅ−４
７７〜Ｓ−９５０；Ｄ−４７８〜Ｓ−９５０；Ｓ−４７９〜Ｓ−９５０；Ｋ−４
８０〜Ｓ−９５０；Ｈ−４８１〜Ｓ−９５０；Ｃ−４８２〜Ｓ−９５０；Ｐ−４
８３〜Ｓ−９５０；Ｄ−４８４〜Ｓ−９５０；Ａ−４８５〜Ｓ−９５０；Ａ−４
８６〜Ｓ−９５０；Ｓ−４８７〜Ｓ−９５０；Ｔ−４８８〜Ｓ−９５０；Ｃ−４
８９〜Ｓ−９５０；Ｓ−４９０〜Ｓ−９５０；Ｔ−４９１〜Ｓ−９５０；Ｌ−４
９２〜Ｓ−９５０；Ｗ−４９３〜Ｓ−９５０；Ｃ−４９４〜Ｓ−９５０；Ｔ−４
９５〜Ｓ−９５０；Ｇ−４９６〜Ｓ−９５０；Ｔ−４９７〜Ｓ−９５０；Ｓ−４
９８〜Ｓ−９５０；Ｇ−４９９〜Ｓ−９５０；Ｇ−５００〜Ｓ−９５０；Ｖ−５
０１〜Ｓ−９５０；Ｌ−５０２〜Ｓ−９５０；Ｖ−５０３〜Ｓ−９５０；Ｃ−５
０４〜Ｓ−９５０；Ｑ−５０５〜Ｓ−９５０；Ｔ−５０６〜Ｓ−９５０；Ｋ−５
０７〜Ｓ−９５０；Ｈ−５０８〜Ｓ−９５０；Ｆ−５０９〜Ｓ−９５０；Ｐ−５
１０〜Ｓ−９５０；Ｗ−５１１〜Ｓ−９５０；Ａ−５１２〜Ｓ−９５０；Ｄ−５
１３〜Ｓ−９５０；Ｇ−５１４〜Ｓ−９５０；Ｔ−５１５〜Ｓ−９５０；Ｓ−５
１６〜Ｓ−９５０；Ｃ−５１７〜Ｓ−９５０；Ｇ−５１８〜Ｓ−９５０；Ｅ−５
１９〜Ｓ−９５０；Ｇ−５２０〜Ｓ−９５０；Ｋ−５２１〜Ｓ−９５０；Ｗ−５
２２〜Ｓ−９５０；Ｃ−５２３〜Ｓ−９５０；Ｉ−５２４〜Ｓ−９５０；Ｎ−５
２５〜Ｓ−９５０；Ｇ−５２６〜Ｓ−９５０；Ｋ−５２７〜Ｓ−９５０；Ｃ−５
２８〜Ｓ−９５０；Ｖ−５２９〜Ｓ−９５０；Ｎ−５３０〜Ｓ−９５０；Ｋ−５
３１〜Ｓ−９５０；Ｔ−５３２〜Ｓ−９５０；Ｄ−５３３〜Ｓ−９５０；Ｒ−５
３４〜Ｓ−９５０；Ｋ−５３５〜Ｓ−９５０；Ｈ−５３６〜Ｓ−９５０；Ｆ−５
３７〜Ｓ−９５０；Ｄ−５３８〜Ｓ−９５０；Ｔ−５３９〜Ｓ−９５０；Ｐ−５
４０〜Ｓ−９５０；Ｆ−５４１〜Ｓ−９５０；Ｈ−５４２〜Ｓ−９５０；Ｇ−５
４３〜Ｓ−９５０；Ｓ−５４４〜Ｓ−９５０；Ｗ−５４５〜Ｓ−９５０；Ｇ−５
４６〜Ｓ−９５０；Ｍ−５４７〜Ｓ−９５０；Ｗ−５４８〜Ｓ−９５０；Ｇ−５
４９〜Ｓ−９５０；Ｐ−５５０〜Ｓ−９５０；Ｗ−５５１〜Ｓ−９５０；Ｇ−５
５２〜Ｓ−９５０；Ｄ−５５３〜Ｓ−９５０；Ｃ−５５４〜Ｓ−９５０；Ｓ−５
５５〜Ｓ−９５０；Ｒ−５５６〜Ｓ−９５０；Ｔ−５５７〜Ｓ−９５０；Ｃ−５
５８〜Ｓ−９５０；Ｇ−５５９〜Ｓ−９５０；Ｇ−５６０〜Ｓ−９５０；Ｇ−５
６１〜Ｓ−９５０；Ｖ−５６２〜Ｓ−９５０；Ｑ−５６３〜Ｓ−９５０；Ｙ−５
６４〜Ｓ−９５０；Ｔ−５６５〜Ｓ−９５０；Ｍ−５６６〜Ｓ−９５０；Ｒ−５
６７〜Ｓ−９５０；Ｅ−５６８〜Ｓ−９５０；Ｃ−５６９〜Ｓ−９５０；Ｄ−５
７０〜Ｓ−９５０；Ｎ−５７１〜Ｓ−９５０；Ｐ−５７２〜Ｓ−９５０；Ｖ−５
７３〜Ｓ−９５０；Ｐ−５７４〜Ｓ−９５０；Ｋ−５７５〜Ｓ−９５０；Ｎ−５
７６〜Ｓ−９５０；Ｇ−５７７〜Ｓ−９５０；Ｇ−５７８〜Ｓ−９５０；Ｋ−５
７９〜Ｓ−９５０；Ｙ−５８０〜Ｓ−９５０；Ｃ−５８１〜Ｓ−９５０；Ｅ−５
８２〜Ｓ−９５０；Ｇ−５８３〜Ｓ−９５０；Ｋ−５８４〜Ｓ−９５０；Ｒ−５
８５〜Ｓ−９５０；Ｖ−５８６〜Ｓ−９５０；Ｒ−５８７〜Ｓ−９５０；Ｙ−５
８８〜Ｓ−９５０；Ｒ−５８９〜Ｓ−９５０；Ｓ−５９０〜Ｓ−９５０；Ｃ−５
９１〜Ｓ−９５０；Ｎ−５９２〜Ｓ−９５０；Ｌ−５９３〜Ｓ−９５０；Ｅ−５
９４〜Ｓ−９５０；Ｄ−５９５〜Ｓ−９５０；Ｃ−５９６〜Ｓ−９５０；Ｐ−５
９７〜Ｓ−９５０；Ｄ−５９８〜Ｓ−９５０；Ｎ−５９９〜Ｓ−９５０；Ｎ−６
００〜Ｓ−９５０；Ｇ−６０１〜Ｓ−９５０；Ｋ−６０２〜Ｓ−９５０；Ｔ−６
０３〜Ｓ−９５０；Ｆ−６０４〜Ｓ−９５０；Ｒ−６０５〜Ｓ−９５０；Ｅ−６
０６〜Ｓ−９５０；Ｅ−６０７〜Ｓ−９５０；Ｑ−６０８〜Ｓ−９５０；Ｃ−６
０９〜Ｓ−９５０；Ｅ−６１０〜Ｓ−９５０；Ａ−６１１〜Ｓ−９５０；Ｈ−６
１２〜Ｓ−９５０；Ｎ−６１３〜Ｓ−９５０；Ｅ−６１４〜Ｓ−９５０；Ｆ−６
１５〜Ｓ−９５０；Ｓ−６１６〜Ｓ−９５０；Ｋ−６１７〜Ｓ−９５０；Ａ−６
１８〜Ｓ−９５０；Ｓ−６１９〜Ｓ−９５０；Ｆ−６２０〜Ｓ−９５０；Ｇ−６
２１〜Ｓ−９５０；Ｓ−６２２〜Ｓ−９５０；Ｇ−６２３〜Ｓ−９５０；Ｐ−６
２４〜Ｓ−９５０；Ａ−６２５〜Ｓ−９５０；Ｖ−６２６〜Ｓ−９５０；Ｅ−６
２７〜Ｓ−９５０；Ｗ−６２８〜Ｓ−９５０；Ｉ−６２９〜Ｓ−９５０；Ｐ−６
３０〜Ｓ−９５０；Ｋ−６３１〜Ｓ−９５０；Ｙ−６３２〜Ｓ−９５０；Ａ−６
３３〜Ｓ−９５０；Ｇ−６３４〜Ｓ−９５０；Ｖ−６３５〜Ｓ−９５０；Ｓ−６
３６〜Ｓ−９５０；Ｐ−６３７〜Ｓ−９５０；Ｋ−６３８〜Ｓ−９５０；Ｄ−６
３９〜Ｓ−９５０；Ｒ−６４０〜Ｓ−９５０；Ｃ−６４１〜Ｓ−９５０；Ｋ−６
４２〜Ｓ−９５０；Ｌ−６４３〜Ｓ−９５０；Ｉ−６４４〜Ｓ−９５０；Ｃ−６
４５〜Ｓ−９５０；Ｑ−６４６〜Ｓ−９５０；Ａ−６４７〜Ｓ−９５０；Ｋ−６
４８〜Ｓ−９５０；Ｇ−６４９〜Ｓ−９５０；Ｉ−６５０〜Ｓ−９５０；Ｇ−６
５１〜Ｓ−９５０；Ｙ−６５２〜Ｓ−９５０；Ｆ−６５３〜Ｓ−９５０；Ｆ−６
５４〜Ｓ−９５０；Ｖ−６５５〜Ｓ−９５０；Ｌ−６５６〜Ｓ−９５０；Ｑ−６
５７〜Ｓ−９５０；Ｐ−６５８〜Ｓ−９５０；Ｋ−６５９〜Ｓ−９５０；Ｖ−６
６０〜Ｓ−９５０；Ｖ−６６１〜Ｓ−９５０；Ｄ−６６２〜Ｓ−９５０；Ｇ−６
６３〜Ｓ−９５０；Ｔ−６６４〜Ｓ−９５０；Ｐ−６６５〜Ｓ−９５０；Ｃ−６
６６〜Ｓ−９５０；Ｓ−６６７〜Ｓ−９５０；Ｐ−６６８〜Ｓ−９５０；Ｄ−６
６９〜Ｓ−９５０；Ｓ−６７０〜Ｓ−９５０；Ｔ−６７１〜Ｓ−９５０；Ｓ−６
７２〜Ｓ−９５０；Ｖ−６７３〜Ｓ−９５０；Ｃ−６７４〜Ｓ−９５０；Ｖ−６
７５〜Ｓ−９５０；Ｑ−６７６〜Ｓ−９５０；Ｇ−６７７〜Ｓ−９５０；Ｑ−６
７８〜Ｓ−９５０；Ｃ−６７９〜Ｓ−９５０；Ｖ−６８０〜Ｓ−９５０；Ｋ−６
８１〜Ｓ−９５０；Ａ−６８２〜Ｓ−９５０；Ｇ−６８３〜Ｓ−９５０；Ｃ−６
８４〜Ｓ−９５０；Ｄ−６８５〜Ｓ−９５０；Ｒ−６８６〜Ｓ−９５０；Ｉ−６
８７〜Ｓ−９５０；Ｉ−６８８〜Ｓ−９５０；Ｄ−６８９〜Ｓ−９５０；Ｓ−６
９０〜Ｓ−９５０；Ｋ−６９１〜Ｓ−９５０；Ｋ−６９２〜Ｓ−９５０；Ｋ−６
９３〜Ｓ−９５０；Ｆ−６９４〜Ｓ−９５０；Ｄ−６９５〜Ｓ−９５０；Ｋ−６
９６〜Ｓ−９５０；Ｃ−６９７〜Ｓ−９５０；Ｇ−６９８〜Ｓ−９５０；Ｖ−６
９９〜Ｓ−９５０；Ｃ−７００〜Ｓ−９５０；Ｇ−７０１〜Ｓ−９５０；Ｇ−７
０２〜Ｓ−９５０；Ｎ−７０３〜Ｓ−９５０；Ｇ−７０４〜Ｓ−９５０；Ｓ−７
０５〜Ｓ−９５０；Ｔ−７０６〜Ｓ−９５０；Ｃ−７０７〜Ｓ−９５０；Ｋ−７
０８〜Ｓ−９５０；Ｋ−７０９〜Ｓ−９５０；Ｉ−７１０〜Ｓ−９５０；Ｓ−７
１１〜Ｓ−９５０；Ｇ−７１２〜Ｓ−９５０；Ｓ−７１３〜Ｓ−９５０；Ｖ−７
１４〜Ｓ−９５０；Ｔ−７１５〜Ｓ−９５０；Ｓ−７１６〜Ｓ−９５０；Ａ−７
１７〜Ｓ−９５０；Ｋ−７１８〜Ｓ−９５０；Ｐ−７１９〜Ｓ−９５０；Ｇ−７
２０〜Ｓ−９５０；Ｙ−７２１〜Ｓ−９５０；Ｈ−７２２〜Ｓ−９５０；Ｄ−７
２３〜Ｓ−９５０；Ｉ−７２４〜Ｓ−９５０；Ｉ−７２５〜Ｓ−９５０；Ｔ−７
２６〜Ｓ−９５０；Ｉ−７２７〜Ｓ−９５０；Ｐ−７２８〜Ｓ−９５０；Ｔ−７
２９〜Ｓ−９５０；Ｇ−７３０〜Ｓ−９５０；Ａ−７３１〜Ｓ−９５０；Ｔ−７
３２〜Ｓ−９５０；Ｎ−７３３〜Ｓ−９５０；Ｉ−７３４〜Ｓ−９５０；Ｅ−７
３５〜Ｓ−９５０；Ｖ−７３６〜Ｓ−９５０；Ｋ−７３７〜Ｓ−９５０；Ｑ−７
３８〜Ｓ−９５０；Ｒ−７３９〜Ｓ−９５０；Ｎ−７４０〜Ｓ−９５０；Ｑ−７
４１〜Ｓ−９５０；Ｒ−７４２〜Ｓ−９５０；Ｇ−７４３〜Ｓ−９５０；Ｓ−７
４４〜Ｓ−９５０；Ｒ−７４５〜Ｓ−９５０；Ｎ−７４６〜Ｓ−９５０；Ｎ−７
４７〜Ｓ−９５０；Ｇ−７４８〜Ｓ−９５０；Ｓ−７４９〜Ｓ−９５０；Ｆ−７
５０〜Ｓ−９５０；Ｌ−７５１〜Ｓ−９５０；Ａ−７５２〜Ｓ−９５０；Ｉ−７
５３〜Ｓ−９５０；Ｋ−７５４〜Ｓ−９５０；Ａ−７５５〜Ｓ−９５０；Ａ−７
５６〜Ｓ−９５０；Ｄ−７５７〜Ｓ−９５０；Ｇ−７５８〜Ｓ−９５０；Ｔ−７
５９〜Ｓ−９５０；Ｙ−７６０〜Ｓ−９５０；Ｉ−７６１〜Ｓ−９５０；Ｌ−７
６２〜Ｓ−９５０；Ｎ−７６３〜Ｓ−９５０；Ｇ−７６４〜Ｓ−９５０；Ｄ−７
６５〜Ｓ−９５０；Ｙ−７６６〜Ｓ−９５０；Ｔ−７６７〜Ｓ−９５０；Ｌ−７
６８〜Ｓ−９５０；Ｓ−７６９〜Ｓ−９５０；Ｔ−７７０〜Ｓ−９５０；Ｌ−７
７１〜Ｓ−９５０；Ｅ−７７２〜Ｓ−９５０；Ｑ−７７３〜Ｓ−９５０；Ｄ−７
７４〜Ｓ−９５０；Ｉ−７７５〜Ｓ−９５０；Ｍ−７７６〜Ｓ−９５０；Ｙ−７
７７〜Ｓ−９５０；Ｋ−７７８〜Ｓ−９５０；Ｇ−７７９〜Ｓ−９５０；Ｖ−７
８０〜Ｓ−９５０；Ｖ−７８１〜Ｓ−９５０；Ｌ−７８２〜Ｓ−９５０；Ｒ−７
８３〜Ｓ−９５０；Ｙ−７８４〜Ｓ−９５０；Ｓ−７８５〜Ｓ−９５０；Ｇ−７
８６〜Ｓ−９５０；Ｓ−７８７〜Ｓ−９５０；Ｓ−７８８〜Ｓ−９５０；Ａ−７
８９〜Ｓ−９５０；Ａ−７９０〜Ｓ−９５０；Ｌ−７９１〜Ｓ−９５０；Ｅ−７
９２〜Ｓ−９５０；Ｒ−７９３〜Ｓ−９５０；Ｉ−７９４〜Ｓ−９５０；Ｒ−７
９５〜Ｓ−９５０；Ｓ−７９６〜Ｓ−９５０；Ｆ−７９７〜Ｓ−９５０；Ｓ−７
９８〜Ｓ−９５０；Ｐ−７９９〜Ｓ−９５０；Ｌ−８００〜Ｓ−９５０；Ｋ−８
０１〜Ｓ−９５０；Ｅ−８０２〜Ｓ−９５０；Ｐ−８０３〜Ｓ−９５０；Ｌ−８
０４〜Ｓ−９５０；Ｔ−８０５〜Ｓ−９５０；Ｉ−８０６〜Ｓ−９５０；Ｑ−８
０７〜Ｓ−９５０；Ｖ−８０８〜Ｓ−９５０；Ｌ−８０９〜Ｓ−９５０；Ｔ−８
１０〜Ｓ−９５０；Ｖ−８１１〜Ｓ−９５０；Ｇ−８１２〜Ｓ−９５０；Ｎ−８
１３〜Ｓ−９５０；Ａ−８１４〜Ｓ−９５０；Ｌ−８１５〜Ｓ−９５０；Ｒ−８
１６〜Ｓ−９５０；Ｐ−８１７〜Ｓ−９５０；Ｋ−８１８〜Ｓ−９５０；Ｉ−８
１９〜Ｓ−９５０；Ｋ−８２０〜Ｓ−９５０；Ｙ−８２１〜Ｓ−９５０；Ｔ−８
２２〜Ｓ−９５０；Ｙ−８２３〜Ｓ−９５０；Ｆ−８２４〜Ｓ−９５０；Ｖ−８
２５〜Ｓ−９５０；Ｋ−８２６〜Ｓ−９５０；Ｋ−８２７〜Ｓ−９５０；Ｋ−８
２８〜Ｓ−９５０；Ｋ−８２９〜Ｓ−９５０；Ｅ−８３０〜Ｓ−９５０；Ｓ−８
３１〜Ｓ−９５０；Ｆ−８３２〜Ｓ−９５０；Ｎ−８３３〜Ｓ−９５０；Ａ−８
３４〜Ｓ−９５０；Ｉ−８３５〜Ｓ−９５０；Ｐ−８３６〜Ｓ−９５０；Ｔ−８
３７〜Ｓ−９５０；Ｆ−８３８〜Ｓ−９５０；Ｓ−８３９〜Ｓ−９５０；Ａ−８
４０〜Ｓ−９５０；Ｗ−８４１〜Ｓ−９５０；Ｖ−８４２〜Ｓ−９５０；Ｉ−８
４３〜Ｓ−９５０；Ｅ−８４４〜Ｓ−９５０；Ｅ−８４５〜Ｓ−９５０；Ｗ−８
４６〜Ｓ−９５０；Ｇ−８４７〜Ｓ−９５０；Ｅ−８４８〜Ｓ−９５０；Ｃ−８
４９〜Ｓ−９５０；Ｓ−８５０〜Ｓ−９５０；Ｋ−８５１〜Ｓ−９５０；Ｓ−８
５２〜Ｓ−９５０；Ｃ−８５３〜Ｓ−９５０；Ｅ−８５４〜Ｓ−９５０；Ｌ−８
５５〜Ｓ−９５０；Ｇ−８５６〜Ｓ−９５０；Ｗ−８５７〜Ｓ−９５０；Ｑ−８
５８〜Ｓ−９５０；Ｒ−８５９〜Ｓ−９５０；Ｒ−８６０〜Ｓ−９５０；Ｌ−８
６１〜Ｓ−９５０；Ｖ−８６２〜Ｓ−９５０；Ｅ−８６３〜Ｓ−９５０；Ｃ−８
６４〜Ｓ−９５０；Ｒ−８６５〜Ｓ−９５０；Ｄ−８６６〜Ｓ−９５０；Ｉ−８
６７〜Ｓ−９５０；Ｎ−８６８〜Ｓ−９５０；Ｇ−８６９〜Ｓ−９５０；Ｑ−８
７０〜Ｓ−９５０；Ｐ−８７１〜Ｓ−９５０；Ａ−８７２〜Ｓ−９５０；Ｓ−８
７３〜Ｓ−９５０；Ｅ−８７４〜Ｓ−９５０；Ｃ−８７５〜Ｓ−９５０；Ａ−８
７６〜Ｓ−９５０；Ｋ−８７７〜Ｓ−９５０；Ｅ−８７８〜Ｓ−９５０；Ｖ−８
７９〜Ｓ−９５０；Ｋ−８８０〜Ｓ−９５０；Ｐ−８８１〜Ｓ−９５０；Ａ−８
８２〜Ｓ−９５０；Ｓ−８８３〜Ｓ−９５０；Ｔ−８８４〜Ｓ−９５０；Ｒ−８
８５〜Ｓ−９５０；Ｐ−８８６〜Ｓ−９５０；Ｃ−８８７〜Ｓ−９５０；Ａ−８
８８〜Ｓ−９５０；Ｄ−８８９〜Ｓ−９５０；Ｈ−８９０〜Ｓ−９５０；Ｐ−８
９１〜Ｓ−９５０；Ｃ−８９２〜Ｓ−９５０；Ｐ−８９３〜Ｓ−９５０；Ｑ−８
９４〜Ｓ−９５０；Ｗ−８９５〜Ｓ−９５０；Ｑ−８９６〜Ｓ−９５０；Ｌ−８
９７〜Ｓ−９５０；Ｇ−８９８〜Ｓ−９５０；Ｅ−８９９〜Ｓ−９５０；Ｗ−９
００〜Ｓ−９５０；Ｓ−９０１〜Ｓ−９５０；Ｓ−９０２〜Ｓ−９５０；Ｃ−９
０３〜Ｓ−９５０；Ｓ−９０４〜Ｓ−９５０；Ｋ−９０５〜Ｓ−９５０；Ｔ−９
０６〜Ｓ−９５０；Ｃ−９０７〜Ｓ−９５０；Ｇ−９０８〜Ｓ−９５０；Ｋ−９
０９〜Ｓ−９５０；Ｇ−９１０〜Ｓ−９５０；Ｙ−９１１〜Ｓ−９５０；Ｋ−９
１２〜Ｓ−９５０；Ｋ−９１３〜Ｓ−９５０；Ｒ−９１４〜Ｓ−９５０；Ｓ−９
１５〜Ｓ−９５０；Ｌ−９１６〜Ｓ−９５０；Ｋ−９１７〜Ｓ−９５０；Ｃ−９
１８〜Ｓ−９５０；Ｌ−９１９〜Ｓ−９５０；Ｓ−９２０〜Ｓ−９５０；Ｈ−９
２１〜Ｓ−９５０；Ｄ−９２２〜Ｓ−９５０；Ｇ−９２３〜Ｓ−９５０；Ｇ−９
２４〜Ｓ−９５０；Ｖ−９２５〜Ｓ−９５０；Ｌ−９２６〜Ｓ−９５０；Ｓ−９
２７〜Ｓ−９５０；Ｈ−９２８〜Ｓ−９５０；Ｅ−９２９〜Ｓ−９５０；Ｓ−９
３０〜Ｓ−９５０；Ｃ−９３１〜Ｓ−９５０；Ｄ−９３２〜Ｓ−９５０；Ｐ−９
３３〜Ｓ−９５０；Ｌ−９３４〜Ｓ−９５０；Ｋ−９３５〜Ｓ−９５０；Ｋ−９
３６〜Ｓ−９５０；Ｐ−９３７〜Ｓ−９５０；Ｋ−９３８〜Ｓ−９５０；Ｈ−９
３９〜Ｓ−９５０；Ｆ−９４０〜Ｓ−９５０；Ｉ−９４１〜Ｓ−９５０；Ｄ−９
４２〜Ｓ−９５０；Ｆ−９４３〜Ｓ−９５０；Ｃ−９４４〜Ｓ−９５０；Ｔ−９
４５〜Ｓ−９５０。
載され、ここでｍは２〜９４９の整数であり、ここでｍは配列番号２で同定され
るアミノ酸残基の位置に対応する。好ましくは、配列番号２に示される本発明の
ＭＥＴＨ１ポリペプチドのＮ末端欠失として、配列番号２の以下の残基のアミノ
酸配列を含むポリペプチドが挙げられる：Ｇ−２〜Ｓ−９５０；Ｎ−３〜Ｓ−９
５０；Ａ−４〜Ｓ−９５０；Ｅ−５〜Ｓ−９５０；Ｒ−６〜Ｓ−９５０；Ａ−７
〜Ｓ−９５０；Ｐ−８〜Ｓ−９５０；Ｇ−９〜Ｓ−９５０；Ｓ−１０〜Ｓ−９５
０；Ｒ−１１〜Ｓ−９５０；Ｓ−１２〜Ｓ−９５０；Ｆ−１３〜Ｓ−９５０；Ｇ
−１４〜Ｓ−９５０；Ｐ−１５〜Ｓ−９５０；Ｖ−１６〜Ｓ−９５０；Ｐ−１７
〜Ｓ−９５０；Ｔ−１８〜Ｓ−９５０；Ｌ−１９〜Ｓ−９５０；Ｌ−２０〜Ｓ−
９５０；Ｌ−２１〜Ｓ−９５０；Ｌ−２２〜Ｓ−９５０；Ａ−２３〜Ｓ−９５０
；Ａ−２４〜Ｓ−９５０；Ａ−２５〜Ｓ−９５０；Ｌ−２６〜Ｓ−９５０；Ｌ−
２７〜Ｓ−９５０；Ａ−２８〜Ｓ−９５０；Ｖ−２９〜Ｓ−９５０；Ｓ−３０〜
Ｓ−９５０；Ｄ−３１〜Ｓ−９５０；Ａ−３２〜Ｓ−９５０；Ｌ−３３〜Ｓ−９
５０；Ｇ−３４〜Ｓ−９５０；Ｒ−３５〜Ｓ−９５０；Ｐ−３６〜Ｓ−９５０；
Ｓ−３７〜Ｓ−９５０；Ｅ−３８〜Ｓ−９５０；Ｅ−３９〜Ｓ−９５０；Ｄ−４
０〜Ｓ−９５０；Ｅ−４１〜Ｓ−９５０；Ｅ−４２〜Ｓ−９５０；Ｌ−４３〜Ｓ
−９５０；Ｖ−４４〜Ｓ−９５０；Ｖ−４５〜Ｓ−９５０；Ｐ−４６〜Ｓ−９５
０；Ｅ−４７〜Ｓ−９５０；Ｌ−４８〜Ｓ−９５０；Ｅ−４９〜Ｓ−９５０；Ｒ
−５０〜Ｓ−９５０；Ａ−５１〜Ｓ−９５０；Ｐ−５２〜Ｓ−９５０；Ｇ−５３
〜Ｓ−９５０；Ｈ−５４〜Ｓ−９５０；Ｇ−５５〜Ｓ−９５０；Ｔ−５６〜Ｓ−
９５０；Ｔ−５７〜Ｓ−９５０；Ｒ−５８〜Ｓ−９５０；Ｌ−５９〜Ｓ−９５０
；Ｒ−６０〜Ｓ−９５０；Ｌ−６１〜Ｓ−９５０；Ｈ−６２〜Ｓ−９５０；Ａ−
６３〜Ｓ−９５０；Ｆ−６４〜Ｓ−９５０；Ｄ−６５〜Ｓ−９５０；Ｑ−６６〜
Ｓ−９５０；Ｑ−６７〜Ｓ−９５０；Ｌ−６８〜Ｓ−９５０；Ｄ−６９〜Ｓ−９
５０；Ｌ−７０〜Ｓ−９５０；Ｅ−７１〜Ｓ−９５０；Ｌ−７２〜Ｓ−９５０；
Ｒ−７３〜Ｓ−９５０；Ｐ−７４〜Ｓ−９５０；Ｄ−７５〜Ｓ−９５０；Ｓ−７
６〜Ｓ−９５０；Ｓ−７７〜Ｓ−９５０；Ｆ−７８〜Ｓ−９５０；Ｌ−７９〜Ｓ
−９５０；Ａ−８０〜Ｓ−９５０；Ｐ−８１〜Ｓ−９５０；Ｇ−８２〜Ｓ−９５
０；Ｆ−８３〜Ｓ−９５０；Ｔ−８４〜Ｓ−９５０；Ｌ−８５〜Ｓ−９５０；Ｑ
−８６〜Ｓ−９５０；Ｎ−８７〜Ｓ−９５０；Ｖ−８８〜Ｓ−９５０；Ｇ−８９
〜Ｓ−９５０；Ｒ−９０〜Ｓ−９５０；Ｋ−９１〜Ｓ−９５０；Ｓ−９２〜Ｓ−
９５０；Ｇ−９３〜Ｓ−９５０；Ｓ−９４〜Ｓ−９５０；Ｅ−９５〜Ｓ−９５０
；Ｔ−９６〜Ｓ−９５０；Ｐ−９７〜Ｓ−９５０；Ｌ−９８〜Ｓ−９５０；Ｐ−
９９〜Ｓ−９５０；Ｅ−１００〜Ｓ−９５０；Ｔ−１０１〜Ｓ−９５０；Ｄ−１
０２〜Ｓ−９５０；Ｌ−１０３〜Ｓ−９５０；Ａ−１０４〜Ｓ−９５０；Ｈ−１
０５〜Ｓ−９５０；Ｃ−１０６〜Ｓ−９５０；Ｆ−１０７〜Ｓ−９５０；Ｙ−１
０８〜Ｓ−９５０；Ｓ−１０９〜Ｓ−９５０；Ｇ−１１０〜Ｓ−９５０；Ｔ−１
１１〜Ｓ−９５０；Ｖ−１１２〜Ｓ−９５０；Ｎ−１１３〜Ｓ−９５０；Ｇ−１
１４〜Ｓ−９５０；Ｄ−１１５〜Ｓ−９５０；Ｐ−１１６〜Ｓ−９５０；Ｓ−１
１７〜Ｓ−９５０；Ｓ−１１８〜Ｓ−９５０；Ａ−１１９〜Ｓ−９５０；Ａ−１
２０〜Ｓ−９５０；Ａ−１２１〜Ｓ−９５０；Ｌ−１２２〜Ｓ−９５０；Ｓ−１
２３〜Ｓ−９５０；Ｌ−１２４〜Ｓ−９５０；Ｃ−１２５〜Ｓ−９５０；Ｅ−１
２６〜Ｓ−９５０；Ｇ−１２７〜Ｓ−９５０；Ｖ−１２８〜Ｓ−９５０；Ｒ−１
２９〜Ｓ−９５０；Ｇ−１３０〜Ｓ−９５０；Ａ−１３１〜Ｓ−９５０；Ｆ−１
３２〜Ｓ−９５０；Ｙ−１３３〜Ｓ−９５０；Ｌ−１３４〜Ｓ−９５０；Ｌ−１
３５〜Ｓ−９５０；Ｇ−１３６〜Ｓ−９５０；Ｅ−１３７〜Ｓ−９５０；Ａ−１
３８〜Ｓ−９５０；Ｙ−１３９〜Ｓ−９５０；Ｆ−１４０〜Ｓ−９５０；Ｉ−１
４１〜Ｓ−９５０；Ｑ−１４２〜Ｓ−９５０；Ｐ−１４３〜Ｓ−９５０；Ｌ−１
４４〜Ｓ−９５０；Ｐ−１４５〜Ｓ−９５０；Ａ−１４６〜Ｓ−９５０；Ａ−１
４７〜Ｓ−９５０；Ｓ−１４８〜Ｓ−９５０；Ｅ−１４９〜Ｓ−９５０；Ｒ−１
５０〜Ｓ−９５０；Ｌ−１５１〜Ｓ−９５０；Ａ−１５２〜Ｓ−９５０；Ｔ−１
５３〜Ｓ−９５０；Ａ−１５４〜Ｓ−９５０；Ａ−１５５〜Ｓ−９５０；Ｐ−１
５６〜Ｓ−９５０；Ｇ−１５７〜Ｓ−９５０；Ｅ−１５８〜Ｓ−９５０；Ｋ−１
５９〜Ｓ−９５０；Ｐ−１６０〜Ｓ−９５０；Ｐ−１６１〜Ｓ−９５０；Ａ−１
６２〜Ｓ−９５０；Ｐ−１６３〜Ｓ−９５０；Ｌ−１６４〜Ｓ−９５０；Ｑ−１
６５〜Ｓ−９５０；Ｆ−１６６〜Ｓ−９５０；Ｈ−１６７〜Ｓ−９５０；Ｌ−１
６８〜Ｓ−９５０；Ｌ−１６９〜Ｓ−９５０；Ｒ−１７０〜Ｓ−９５０；Ｒ−１
７１〜Ｓ−９５０；Ｎ−１７２〜Ｓ−９５０；Ｒ−１７３〜Ｓ−９５０；Ｑ−１
７４〜Ｓ−９５０；Ｇ−１７５〜Ｓ−９５０；Ｄ−１７６〜Ｓ−９５０；Ｖ−１
７７〜Ｓ−９５０；Ｇ−１７８〜Ｓ−９５０；Ｇ−１７９〜Ｓ−９５０；Ｔ−１
８０〜Ｓ−９５０；Ｃ−１８１〜Ｓ−９５０；Ｇ−１８２〜Ｓ−９５０；Ｖ−１
８３〜Ｓ−９５０；Ｖ−１８４〜Ｓ−９５０；Ｄ−１８５〜Ｓ−９５０；Ｄ−１
８６〜Ｓ−９５０；Ｅ−１８７〜Ｓ−９５０；Ｐ−１８８〜Ｓ−９５０；Ｒ−１
８９〜Ｓ−９５０；Ｐ−１９０〜Ｓ−９５０；Ｔ−１９１〜Ｓ−９５０；Ｇ−１
９２〜Ｓ−９５０；Ｋ−１９３〜Ｓ−９５０；Ａ−１９４〜Ｓ−９５０；Ｅ−１
９５〜Ｓ−９５０；Ｔ−１９６〜Ｓ−９５０；Ｅ−１９７〜Ｓ−９５０；Ｄ−１
９８〜Ｓ−９５０；Ｅ−１９９〜Ｓ−９５０；Ｄ−２００〜Ｓ−９５０；Ｅ−２
０１〜Ｓ−９５０；Ｇ−２０２〜Ｓ−９５０；Ｔ−２０３〜Ｓ−９５０；Ｅ−２
０４〜Ｓ−９５０；Ｇ−２０５〜Ｓ−９５０；Ｅ−２０６〜Ｓ−９５０；Ｄ−２
０７〜Ｓ−９５０；Ｅ−２０８〜Ｓ−９５０；Ｇ−２０９〜Ｓ−９５０；Ｐ−２
１０〜Ｓ−９５０；Ｑ−２１１〜Ｓ−９５０；Ｗ−２１２〜Ｓ−９５０；Ｓ−２
１３〜Ｓ−９５０；Ｐ−２１４〜Ｓ−９５０；Ｑ−２１５〜Ｓ−９５０；Ｄ−２
１６〜Ｓ−９５０；Ｐ−２１７〜Ｓ−９５０；Ａ−２１８〜Ｓ−９５０；Ｌ−２
１９〜Ｓ−９５０；Ｑ−２２０〜Ｓ−９５０；Ｇ−２２１〜Ｓ−９５０；Ｖ−２
２２〜Ｓ−９５０；Ｇ−２２３〜Ｓ−９５０；Ｑ−２２４〜Ｓ−９５０；Ｐ−２
２５〜Ｓ−９５０；Ｔ−２２６〜Ｓ−９５０；Ｇ−２２７〜Ｓ−９５０；Ｔ−２
２８〜Ｓ−９５０；Ｇ−２２９〜Ｓ−９５０；Ｓ−２３０〜Ｓ−９５０；Ｉ−２
３１〜Ｓ−９５０；Ｒ−２３２〜Ｓ−２５９；Ｋ−２３３〜Ｓ−９５０；Ｋ−２
３４〜Ｓ−９５０；Ｒ−２３５〜Ｓ−９５０；Ｆ−２３６〜Ｓ−９５０；Ｖ−２
３７〜Ｓ−９５０；Ｓ−２３８〜Ｓ−９５０；Ｓ−２３９〜Ｓ−９５０；Ｈ−２
４０〜Ｓ−９５０；Ｒ−２４１〜Ｓ−９５０；Ｙ−２４２〜Ｓ−９５０；Ｖ−２
４３〜Ｓ−９５０；Ｅ−２４４〜Ｓ−９５０；Ｔ−２４５〜Ｓ−９５０；Ｍ−２
４６〜Ｓ−９５０；Ｌ−２４７〜Ｓ−９５０；Ｖ−２４８〜Ｓ−９５０；Ａ−２
４９〜Ｓ−９５０；Ｄ−２５０〜Ｓ−９５０；Ｑ−２５１〜Ｓ−９５０；Ｓ−２
５２〜Ｓ−９５０；Ｍ−２５３〜Ｓ−９５０；Ａ−２５４〜Ｓ−９５０；Ｅ−２
５５〜Ｓ−９５０；Ｆ−２５６〜Ｓ−９５０；Ｈ−２５７〜Ｓ−９５０；Ｇ−２
５８〜Ｓ−９５０；Ｓ−２５９〜Ｓ−９５０；Ｇ−２６０〜Ｓ−９５０；Ｌ−２
６１〜Ｓ−９５０；Ｋ−２６２〜Ｓ−９５０；Ｈ−２６３〜Ｓ−９５０；Ｙ−２
６４〜Ｓ−９５０；Ｌ−２６５〜Ｓ−９５０；Ｌ−２６６〜Ｓ−９５０；Ｔ−２
６７〜Ｓ−９５０；Ｌ−２６８〜Ｓ−９５０；Ｆ−２６９〜Ｓ−９５０；Ｓ−２
７０〜Ｓ−９５０；Ｖ−２７１〜Ｓ−９５０；Ａ−２７２〜Ｓ−９５０；Ａ−２
７３〜Ｓ−９５０；Ｒ−２７４〜Ｓ−９５０；Ｌ−２７５〜Ｓ−９５０；Ｙ−２
７６〜Ｓ−９５０；Ｋ−２７７〜Ｓ−９５０；Ｈ−２７８〜Ｓ−９５０；Ｐ−２
７９〜Ｓ−９５０；Ｓ−２８０〜Ｓ−９５０；Ｉ−２８１〜Ｓ−９５０；Ｒ−２
８２〜Ｓ−９５０；Ｎ−２８３〜Ｓ−９５０；Ｓ−２８４〜Ｓ−９５０；Ｖ−２
８５〜Ｓ−９５０；Ｓ−２８６〜Ｓ−９５０；Ｌ−２８７〜Ｓ−９５０；Ｖ−２
８８〜Ｓ−９５０；Ｖ−２８９〜Ｓ−９５０；Ｖ−２９０〜Ｓ−９５０；Ｋ−２
９１〜Ｓ−９５０；１−２９２〜Ｓ−９５０；Ｌ−２９３〜Ｓ−９５０；Ｖ−２
９４〜Ｓ−９５０；Ｉ−２９５〜Ｓ−９５０；Ｈ−２９６〜Ｓ−９５０；Ｄ−２
９７〜Ｓ−９５０；Ｅ−２９８〜Ｓ−９５０；Ｑ−２９９〜Ｓ−９５０；Ｋ−３
００〜Ｓ−９５０；Ｇ−３０１〜Ｓ−９５０；Ｐ−３０２〜Ｓ−９５０；Ｅ−３
０３〜Ｓ−９５０；Ｖ−３０４〜Ｓ−９５０；Ｔ−３０５〜Ｓ−９５０；Ｓ−３
０６〜Ｓ−９５０；Ｎ−３０７〜Ｓ−９５０；Ａ−３０８〜Ｓ−９５０；Ａ−３
０９〜Ｓ−９５０；Ｌ−３１０〜Ｓ−９５０；Ｔ−３１１〜Ｓ−９５０；Ｌ−３
１２〜Ｓ−９５０；Ｒ−３１３〜Ｓ−９５０；Ｎ−３１４〜Ｓ−９５０；Ｆ−３
１５〜Ｓ−９５０；Ｃ−３１６〜Ｓ−９５０；Ｎ−３１７〜Ｓ−９５０；Ｗ−３
１８〜Ｓ−９５０；Ｑ−３１９〜Ｓ−９５０；Ｋ−３２０〜Ｓ−９５０；Ｑ−３
２１〜Ｓ−９５０；Ｈ−３２２〜Ｓ−９５０；Ｎ−３２３〜Ｓ−９５０；Ｐ−３
２４〜Ｓ−９５０；Ｐ−３２５〜Ｓ−９５０；Ｓ−３２６〜Ｓ−９５０；Ｄ−３
２７〜Ｓ−９５０；Ｒ−３２８〜Ｓ−９５０；Ｄ−３２９〜Ｓ−９５０；Ａ−３
３０〜Ｓ−９５０；Ｅ−３３１〜Ｓ−９５０；Ｈ−３３２〜Ｓ−９５０；Ｙ−３
３３〜Ｓ−９５０；Ｄ−３３４〜Ｓ−９５０；Ｔ−３３５〜Ｓ−９５０；Ａ−３
３６〜Ｓ−９５０；Ｉ−３３７〜Ｓ−９５０；Ｌ−３３８〜Ｓ−９５０；Ｆ−３
３９〜Ｓ−９５０；Ｔ−３４０〜Ｓ−９５０；Ｒ−３４１〜Ｓ−９５０；Ｑ−３
４２〜Ｓ−９５０；Ｄ−３４３〜Ｓ−９５０；Ｌ−３４４〜Ｓ−９５０；Ｃ−３
４５〜Ｓ−９５０；Ｇ−３４６〜Ｓ−９５０；Ｓ−３４７〜Ｓ−９５０；Ｑ−３
４８〜Ｓ−９５０；Ｔ−３４９〜Ｓ−９５０；Ｃ−３５０〜Ｓ−９５０；Ｄ−３
５１〜Ｓ−９５０；Ｔ−３５２〜Ｓ−９５０；Ｌ−３５３〜Ｓ−９５０；Ｇ−３
５４〜Ｓ−９５０；Ｍ−３５５〜Ｓ−９５０；Ａ−３５６〜Ｓ−９５０；Ｄ−３
５７〜Ｓ−９５０；Ｖ−３５８〜Ｓ−９５０；Ｇ−３５９〜Ｓ−９５０；Ｔ−３
６０〜Ｓ−９５０；Ｖ−３６１〜Ｓ−９５０；Ｃ−３６２〜Ｓ−９５０；Ｄ−３
６３〜Ｓ−９５０；Ｐ−３６４〜Ｓ−９５０；Ｓ−３６５〜Ｓ−９５０；Ｒ−３
６６〜Ｓ−９５０；Ｓ−３６７〜Ｓ−９５０；Ｃ−３６８〜Ｓ−９５０；Ｓ−３
６９〜Ｓ−９５０；Ｖ−３７０〜Ｓ−９５０；Ｉ−３７１〜Ｓ−９５０；Ｅ−３
７２〜Ｓ−９５０；Ｄ−３７３〜Ｓ−９５０；Ｄ−３７４〜Ｓ−９５０；Ｇ−３
７５〜Ｓ−９５０；Ｌ−３７６〜Ｓ−９５０；Ｑ−３７７〜Ｓ−９５０；Ａ−３
７８〜Ｓ−９５０；Ａ−３７９〜Ｓ−９５０；Ｆ−３８０〜Ｓ−９５０；Ｔ−３
８１〜Ｓ−９５０；Ｔ−３８２〜Ｓ−９５０；Ａ−３８３〜Ｓ−９５０；Ｈ−３
８４〜Ｓ−９５０；Ｅ−３８５〜Ｓ−９５０；Ｌ−３８６〜Ｓ−９５０；Ｇ−３
８７〜Ｓ−９５０；Ｈ−３８８〜Ｓ−９５０；Ｖ−３８９〜Ｓ−９５０；Ｆ−３
９０〜Ｓ−９５０；Ｎ−３９１〜Ｓ−９５０；Ｍ−３９２〜Ｓ−９５０；Ｐ−３
９３〜Ｓ−９５０；Ｈ−３９４〜Ｓ−９５０；Ｄ−３９５〜Ｓ−９５０；Ｄ−３
９６〜Ｓ−９５０；Ａ−３９７〜Ｓ−９５０；Ｋ−３９８〜Ｓ−９５０；Ｑ−３
９９〜Ｓ−９５０；Ｃ−４００〜Ｓ−９５０；Ａ−４０１〜Ｓ−９５０；Ｓ−４
０２〜Ｓ−９５０；Ｌ−４０３〜Ｓ−９５０；Ｎ−４０４〜Ｓ−９５０；Ｇ−４
０５〜Ｓ−９５０；Ｖ−４０６〜Ｓ−９５０；Ｎ−４０７〜Ｓ−９５０；Ｑ−４
０８〜Ｓ−９５０；Ｄ−４０９〜Ｓ−９５０；Ｓ−４１０〜Ｓ−９５０；Ｈ−４
１１〜Ｓ−９５０；Ｍ−４１２〜Ｓ−９５０；Ｍ−４１３〜Ｓ−９５０；Ａ−４
１４〜Ｓ−９５０；Ｓ−４１５〜Ｓ−９５０；Ｍ−４１６〜Ｓ−９５０；Ｌ−４
１７〜Ｓ−９５０；Ｓ−４１８〜Ｓ−９５０；Ｎ−４１９〜Ｓ−９５０；Ｌ−４
２０〜Ｓ−９５０；Ｄ−４２１〜Ｓ−９５０；Ｈ−４２２〜Ｓ−９５０；Ｓ−４
２３〜Ｓ−９５０；Ｑ−４２４〜Ｓ−９５０；Ｐ−４２５〜Ｓ−９５０；Ｗ−４
２６〜Ｓ−９５０；Ｓ−４２７〜Ｓ−９５０；Ｐ−４２８〜Ｓ−９５０；Ｃ−４
２９〜Ｓ−９５０；Ｓ−４３０〜Ｓ−９５０；Ａ−４３１〜Ｓ−９５０；Ｙ−４
３２〜Ｓ−９５０；Ｍ−４３３〜Ｓ−９５０；Ｉ−４３４〜Ｓ−９５０；Ｔ−４
３５〜Ｓ−９５０；Ｓ−４３６〜Ｓ−９５０；Ｆ−４３７〜Ｓ−９５０；Ｌ−４
３８〜Ｓ−９５０；Ｄ−４３９〜Ｓ−９５０；Ｎ−４４０〜Ｓ−９５０；Ｇ−４
４１〜Ｓ−９５０；Ｈ−４４２〜Ｓ−９５０；Ｇ−４４３〜Ｓ−９５０；Ｅ−４
４４〜Ｓ−９５０；Ｃ−４４５〜Ｓ−９５０；Ｌ−４４６〜Ｓ−９５０；Ｍ−４
４７〜Ｓ−９５０；Ｄ−４４８〜Ｓ−９５０；Ｋ−４４９〜Ｓ−９５０；Ｐ−４
５０〜Ｓ−９５０；Ｑ−４５１〜Ｓ−９５０；Ｎ−４５２〜Ｓ−９５０；Ｐ−４
５３〜Ｓ−９５０；Ｉ−４５４〜Ｓ−９５０；Ｑ−４５５〜Ｓ−９５０；Ｌ−４
５６〜Ｓ−９５０；Ｐ−４５７〜Ｓ−９５０；Ｇ−４５８〜Ｓ−９５０；Ｄ−４
５９〜Ｓ−９５０；Ｌ−４６０〜Ｓ−９５０；Ｐ−４６１〜Ｓ−９５０；Ｇ−４
６２〜Ｓ−９５０；Ｔ−４６３〜Ｓ−９５０；Ｓ−４６４〜Ｓ−９５０；Ｙ−４
６５〜Ｓ−９５０；Ｄ−４６６〜Ｓ−９５０；Ａ−４６７〜Ｓ−９５０；Ｎ−４
６８〜Ｓ−９５０；Ｒ−４６９〜Ｓ−９５０；Ｑ−４７０〜Ｓ−９５０；Ｃ−４
７１〜Ｓ−９５０；Ｑ−４７２〜Ｓ−９５０；Ｆ−４７３〜Ｓ−９５０；Ｔ−４
７４〜Ｓ−９５０；Ｆ−４７５〜Ｓ−９５０；Ｇ−４７６〜Ｓ−９５０；Ｅ−４
７７〜Ｓ−９５０；Ｄ−４７８〜Ｓ−９５０；Ｓ−４７９〜Ｓ−９５０；Ｋ−４
８０〜Ｓ−９５０；Ｈ−４８１〜Ｓ−９５０；Ｃ−４８２〜Ｓ−９５０；Ｐ−４
８３〜Ｓ−９５０；Ｄ−４８４〜Ｓ−９５０；Ａ−４８５〜Ｓ−９５０；Ａ−４
８６〜Ｓ−９５０；Ｓ−４８７〜Ｓ−９５０；Ｔ−４８８〜Ｓ−９５０；Ｃ−４
８９〜Ｓ−９５０；Ｓ−４９０〜Ｓ−９５０；Ｔ−４９１〜Ｓ−９５０；Ｌ−４
９２〜Ｓ−９５０；Ｗ−４９３〜Ｓ−９５０；Ｃ−４９４〜Ｓ−９５０；Ｔ−４
９５〜Ｓ−９５０；Ｇ−４９６〜Ｓ−９５０；Ｔ−４９７〜Ｓ−９５０；Ｓ−４
９８〜Ｓ−９５０；Ｇ−４９９〜Ｓ−９５０；Ｇ−５００〜Ｓ−９５０；Ｖ−５
０１〜Ｓ−９５０；Ｌ−５０２〜Ｓ−９５０；Ｖ−５０３〜Ｓ−９５０；Ｃ−５
０４〜Ｓ−９５０；Ｑ−５０５〜Ｓ−９５０；Ｔ−５０６〜Ｓ−９５０；Ｋ−５
０７〜Ｓ−９５０；Ｈ−５０８〜Ｓ−９５０；Ｆ−５０９〜Ｓ−９５０；Ｐ−５
１０〜Ｓ−９５０；Ｗ−５１１〜Ｓ−９５０；Ａ−５１２〜Ｓ−９５０；Ｄ−５
１３〜Ｓ−９５０；Ｇ−５１４〜Ｓ−９５０；Ｔ−５１５〜Ｓ−９５０；Ｓ−５
１６〜Ｓ−９５０；Ｃ−５１７〜Ｓ−９５０；Ｇ−５１８〜Ｓ−９５０；Ｅ−５
１９〜Ｓ−９５０；Ｇ−５２０〜Ｓ−９５０；Ｋ−５２１〜Ｓ−９５０；Ｗ−５
２２〜Ｓ−９５０；Ｃ−５２３〜Ｓ−９５０；Ｉ−５２４〜Ｓ−９５０；Ｎ−５
２５〜Ｓ−９５０；Ｇ−５２６〜Ｓ−９５０；Ｋ−５２７〜Ｓ−９５０；Ｃ−５
２８〜Ｓ−９５０；Ｖ−５２９〜Ｓ−９５０；Ｎ−５３０〜Ｓ−９５０；Ｋ−５
３１〜Ｓ−９５０；Ｔ−５３２〜Ｓ−９５０；Ｄ−５３３〜Ｓ−９５０；Ｒ−５
３４〜Ｓ−９５０；Ｋ−５３５〜Ｓ−９５０；Ｈ−５３６〜Ｓ−９５０；Ｆ−５
３７〜Ｓ−９５０；Ｄ−５３８〜Ｓ−９５０；Ｔ−５３９〜Ｓ−９５０；Ｐ−５
４０〜Ｓ−９５０；Ｆ−５４１〜Ｓ−９５０；Ｈ−５４２〜Ｓ−９５０；Ｇ−５
４３〜Ｓ−９５０；Ｓ−５４４〜Ｓ−９５０；Ｗ−５４５〜Ｓ−９５０；Ｇ−５
４６〜Ｓ−９５０；Ｍ−５４７〜Ｓ−９５０；Ｗ−５４８〜Ｓ−９５０；Ｇ−５
４９〜Ｓ−９５０；Ｐ−５５０〜Ｓ−９５０；Ｗ−５５１〜Ｓ−９５０；Ｇ−５
５２〜Ｓ−９５０；Ｄ−５５３〜Ｓ−９５０；Ｃ−５５４〜Ｓ−９５０；Ｓ−５
５５〜Ｓ−９５０；Ｒ−５５６〜Ｓ−９５０；Ｔ−５５７〜Ｓ−９５０；Ｃ−５
５８〜Ｓ−９５０；Ｇ−５５９〜Ｓ−９５０；Ｇ−５６０〜Ｓ−９５０；Ｇ−５
６１〜Ｓ−９５０；Ｖ−５６２〜Ｓ−９５０；Ｑ−５６３〜Ｓ−９５０；Ｙ−５
６４〜Ｓ−９５０；Ｔ−５６５〜Ｓ−９５０；Ｍ−５６６〜Ｓ−９５０；Ｒ−５
６７〜Ｓ−９５０；Ｅ−５６８〜Ｓ−９５０；Ｃ−５６９〜Ｓ−９５０；Ｄ−５
７０〜Ｓ−９５０；Ｎ−５７１〜Ｓ−９５０；Ｐ−５７２〜Ｓ−９５０；Ｖ−５
７３〜Ｓ−９５０；Ｐ−５７４〜Ｓ−９５０；Ｋ−５７５〜Ｓ−９５０；Ｎ−５
７６〜Ｓ−９５０；Ｇ−５７７〜Ｓ−９５０；Ｇ−５７８〜Ｓ−９５０；Ｋ−５
７９〜Ｓ−９５０；Ｙ−５８０〜Ｓ−９５０；Ｃ−５８１〜Ｓ−９５０；Ｅ−５
８２〜Ｓ−９５０；Ｇ−５８３〜Ｓ−９５０；Ｋ−５８４〜Ｓ−９５０；Ｒ−５
８５〜Ｓ−９５０；Ｖ−５８６〜Ｓ−９５０；Ｒ−５８７〜Ｓ−９５０；Ｙ−５
８８〜Ｓ−９５０；Ｒ−５８９〜Ｓ−９５０；Ｓ−５９０〜Ｓ−９５０；Ｃ−５
９１〜Ｓ−９５０；Ｎ−５９２〜Ｓ−９５０；Ｌ−５９３〜Ｓ−９５０；Ｅ−５
９４〜Ｓ−９５０；Ｄ−５９５〜Ｓ−９５０；Ｃ−５９６〜Ｓ−９５０；Ｐ−５
９７〜Ｓ−９５０；Ｄ−５９８〜Ｓ−９５０；Ｎ−５９９〜Ｓ−９５０；Ｎ−６
００〜Ｓ−９５０；Ｇ−６０１〜Ｓ−９５０；Ｋ−６０２〜Ｓ−９５０；Ｔ−６
０３〜Ｓ−９５０；Ｆ−６０４〜Ｓ−９５０；Ｒ−６０５〜Ｓ−９５０；Ｅ−６
０６〜Ｓ−９５０；Ｅ−６０７〜Ｓ−９５０；Ｑ−６０８〜Ｓ−９５０；Ｃ−６
０９〜Ｓ−９５０；Ｅ−６１０〜Ｓ−９５０；Ａ−６１１〜Ｓ−９５０；Ｈ−６
１２〜Ｓ−９５０；Ｎ−６１３〜Ｓ−９５０；Ｅ−６１４〜Ｓ−９５０；Ｆ−６
１５〜Ｓ−９５０；Ｓ−６１６〜Ｓ−９５０；Ｋ−６１７〜Ｓ−９５０；Ａ−６
１８〜Ｓ−９５０；Ｓ−６１９〜Ｓ−９５０；Ｆ−６２０〜Ｓ−９５０；Ｇ−６
２１〜Ｓ−９５０；Ｓ−６２２〜Ｓ−９５０；Ｇ−６２３〜Ｓ−９５０；Ｐ−６
２４〜Ｓ−９５０；Ａ−６２５〜Ｓ−９５０；Ｖ−６２６〜Ｓ−９５０；Ｅ−６
２７〜Ｓ−９５０；Ｗ−６２８〜Ｓ−９５０；Ｉ−６２９〜Ｓ−９５０；Ｐ−６
３０〜Ｓ−９５０；Ｋ−６３１〜Ｓ−９５０；Ｙ−６３２〜Ｓ−９５０；Ａ−６
３３〜Ｓ−９５０；Ｇ−６３４〜Ｓ−９５０；Ｖ−６３５〜Ｓ−９５０；Ｓ−６
３６〜Ｓ−９５０；Ｐ−６３７〜Ｓ−９５０；Ｋ−６３８〜Ｓ−９５０；Ｄ−６
３９〜Ｓ−９５０；Ｒ−６４０〜Ｓ−９５０；Ｃ−６４１〜Ｓ−９５０；Ｋ−６
４２〜Ｓ−９５０；Ｌ−６４３〜Ｓ−９５０；Ｉ−６４４〜Ｓ−９５０；Ｃ−６
４５〜Ｓ−９５０；Ｑ−６４６〜Ｓ−９５０；Ａ−６４７〜Ｓ−９５０；Ｋ−６
４８〜Ｓ−９５０；Ｇ−６４９〜Ｓ−９５０；Ｉ−６５０〜Ｓ−９５０；Ｇ−６
５１〜Ｓ−９５０；Ｙ−６５２〜Ｓ−９５０；Ｆ−６５３〜Ｓ−９５０；Ｆ−６
５４〜Ｓ−９５０；Ｖ−６５５〜Ｓ−９５０；Ｌ−６５６〜Ｓ−９５０；Ｑ−６
５７〜Ｓ−９５０；Ｐ−６５８〜Ｓ−９５０；Ｋ−６５９〜Ｓ−９５０；Ｖ−６
６０〜Ｓ−９５０；Ｖ−６６１〜Ｓ−９５０；Ｄ−６６２〜Ｓ−９５０；Ｇ−６
６３〜Ｓ−９５０；Ｔ−６６４〜Ｓ−９５０；Ｐ−６６５〜Ｓ−９５０；Ｃ−６
６６〜Ｓ−９５０；Ｓ−６６７〜Ｓ−９５０；Ｐ−６６８〜Ｓ−９５０；Ｄ−６
６９〜Ｓ−９５０；Ｓ−６７０〜Ｓ−９５０；Ｔ−６７１〜Ｓ−９５０；Ｓ−６
７２〜Ｓ−９５０；Ｖ−６７３〜Ｓ−９５０；Ｃ−６７４〜Ｓ−９５０；Ｖ−６
７５〜Ｓ−９５０；Ｑ−６７６〜Ｓ−９５０；Ｇ−６７７〜Ｓ−９５０；Ｑ−６
７８〜Ｓ−９５０；Ｃ−６７９〜Ｓ−９５０；Ｖ−６８０〜Ｓ−９５０；Ｋ−６
８１〜Ｓ−９５０；Ａ−６８２〜Ｓ−９５０；Ｇ−６８３〜Ｓ−９５０；Ｃ−６
８４〜Ｓ−９５０；Ｄ−６８５〜Ｓ−９５０；Ｒ−６８６〜Ｓ−９５０；Ｉ−６
８７〜Ｓ−９５０；Ｉ−６８８〜Ｓ−９５０；Ｄ−６８９〜Ｓ−９５０；Ｓ−６
９０〜Ｓ−９５０；Ｋ−６９１〜Ｓ−９５０；Ｋ−６９２〜Ｓ−９５０；Ｋ−６
９３〜Ｓ−９５０；Ｆ−６９４〜Ｓ−９５０；Ｄ−６９５〜Ｓ−９５０；Ｋ−６
９６〜Ｓ−９５０；Ｃ−６９７〜Ｓ−９５０；Ｇ−６９８〜Ｓ−９５０；Ｖ−６
９９〜Ｓ−９５０；Ｃ−７００〜Ｓ−９５０；Ｇ−７０１〜Ｓ−９５０；Ｇ−７
０２〜Ｓ−９５０；Ｎ−７０３〜Ｓ−９５０；Ｇ−７０４〜Ｓ−９５０；Ｓ−７
０５〜Ｓ−９５０；Ｔ−７０６〜Ｓ−９５０；Ｃ−７０７〜Ｓ−９５０；Ｋ−７
０８〜Ｓ−９５０；Ｋ−７０９〜Ｓ−９５０；Ｉ−７１０〜Ｓ−９５０；Ｓ−７
１１〜Ｓ−９５０；Ｇ−７１２〜Ｓ−９５０；Ｓ−７１３〜Ｓ−９５０；Ｖ−７
１４〜Ｓ−９５０；Ｔ−７１５〜Ｓ−９５０；Ｓ−７１６〜Ｓ−９５０；Ａ−７
１７〜Ｓ−９５０；Ｋ−７１８〜Ｓ−９５０；Ｐ−７１９〜Ｓ−９５０；Ｇ−７
２０〜Ｓ−９５０；Ｙ−７２１〜Ｓ−９５０；Ｈ−７２２〜Ｓ−９５０；Ｄ−７
２３〜Ｓ−９５０；Ｉ−７２４〜Ｓ−９５０；Ｉ−７２５〜Ｓ−９５０；Ｔ−７
２６〜Ｓ−９５０；Ｉ−７２７〜Ｓ−９５０；Ｐ−７２８〜Ｓ−９５０；Ｔ−７
２９〜Ｓ−９５０；Ｇ−７３０〜Ｓ−９５０；Ａ−７３１〜Ｓ−９５０；Ｔ−７
３２〜Ｓ−９５０；Ｎ−７３３〜Ｓ−９５０；Ｉ−７３４〜Ｓ−９５０；Ｅ−７
３５〜Ｓ−９５０；Ｖ−７３６〜Ｓ−９５０；Ｋ−７３７〜Ｓ−９５０；Ｑ−７
３８〜Ｓ−９５０；Ｒ−７３９〜Ｓ−９５０；Ｎ−７４０〜Ｓ−９５０；Ｑ−７
４１〜Ｓ−９５０；Ｒ−７４２〜Ｓ−９５０；Ｇ−７４３〜Ｓ−９５０；Ｓ−７
４４〜Ｓ−９５０；Ｒ−７４５〜Ｓ−９５０；Ｎ−７４６〜Ｓ−９５０；Ｎ−７
４７〜Ｓ−９５０；Ｇ−７４８〜Ｓ−９５０；Ｓ−７４９〜Ｓ−９５０；Ｆ−７
５０〜Ｓ−９５０；Ｌ−７５１〜Ｓ−９５０；Ａ−７５２〜Ｓ−９５０；Ｉ−７
５３〜Ｓ−９５０；Ｋ−７５４〜Ｓ−９５０；Ａ−７５５〜Ｓ−９５０；Ａ−７
５６〜Ｓ−９５０；Ｄ−７５７〜Ｓ−９５０；Ｇ−７５８〜Ｓ−９５０；Ｔ−７
５９〜Ｓ−９５０；Ｙ−７６０〜Ｓ−９５０；Ｉ−７６１〜Ｓ−９５０；Ｌ−７
６２〜Ｓ−９５０；Ｎ−７６３〜Ｓ−９５０；Ｇ−７６４〜Ｓ−９５０；Ｄ−７
６５〜Ｓ−９５０；Ｙ−７６６〜Ｓ−９５０；Ｔ−７６７〜Ｓ−９５０；Ｌ−７
６８〜Ｓ−９５０；Ｓ−７６９〜Ｓ−９５０；Ｔ−７７０〜Ｓ−９５０；Ｌ−７
７１〜Ｓ−９５０；Ｅ−７７２〜Ｓ−９５０；Ｑ−７７３〜Ｓ−９５０；Ｄ−７
７４〜Ｓ−９５０；Ｉ−７７５〜Ｓ−９５０；Ｍ−７７６〜Ｓ−９５０；Ｙ−７
７７〜Ｓ−９５０；Ｋ−７７８〜Ｓ−９５０；Ｇ−７７９〜Ｓ−９５０；Ｖ−７
８０〜Ｓ−９５０；Ｖ−７８１〜Ｓ−９５０；Ｌ−７８２〜Ｓ−９５０；Ｒ−７
８３〜Ｓ−９５０；Ｙ−７８４〜Ｓ−９５０；Ｓ−７８５〜Ｓ−９５０；Ｇ−７
８６〜Ｓ−９５０；Ｓ−７８７〜Ｓ−９５０；Ｓ−７８８〜Ｓ−９５０；Ａ−７
８９〜Ｓ−９５０；Ａ−７９０〜Ｓ−９５０；Ｌ−７９１〜Ｓ−９５０；Ｅ−７
９２〜Ｓ−９５０；Ｒ−７９３〜Ｓ−９５０；Ｉ−７９４〜Ｓ−９５０；Ｒ−７
９５〜Ｓ−９５０；Ｓ−７９６〜Ｓ−９５０；Ｆ−７９７〜Ｓ−９５０；Ｓ−７
９８〜Ｓ−９５０；Ｐ−７９９〜Ｓ−９５０；Ｌ−８００〜Ｓ−９５０；Ｋ−８
０１〜Ｓ−９５０；Ｅ−８０２〜Ｓ−９５０；Ｐ−８０３〜Ｓ−９５０；Ｌ−８
０４〜Ｓ−９５０；Ｔ−８０５〜Ｓ−９５０；Ｉ−８０６〜Ｓ−９５０；Ｑ−８
０７〜Ｓ−９５０；Ｖ−８０８〜Ｓ−９５０；Ｌ−８０９〜Ｓ−９５０；Ｔ−８
１０〜Ｓ−９５０；Ｖ−８１１〜Ｓ−９５０；Ｇ−８１２〜Ｓ−９５０；Ｎ−８
１３〜Ｓ−９５０；Ａ−８１４〜Ｓ−９５０；Ｌ−８１５〜Ｓ−９５０；Ｒ−８
１６〜Ｓ−９５０；Ｐ−８１７〜Ｓ−９５０；Ｋ−８１８〜Ｓ−９５０；Ｉ−８
１９〜Ｓ−９５０；Ｋ−８２０〜Ｓ−９５０；Ｙ−８２１〜Ｓ−９５０；Ｔ−８
２２〜Ｓ−９５０；Ｙ−８２３〜Ｓ−９５０；Ｆ−８２４〜Ｓ−９５０；Ｖ−８
２５〜Ｓ−９５０；Ｋ−８２６〜Ｓ−９５０；Ｋ−８２７〜Ｓ−９５０；Ｋ−８
２８〜Ｓ−９５０；Ｋ−８２９〜Ｓ−９５０；Ｅ−８３０〜Ｓ−９５０；Ｓ−８
３１〜Ｓ−９５０；Ｆ−８３２〜Ｓ−９５０；Ｎ−８３３〜Ｓ−９５０；Ａ−８
３４〜Ｓ−９５０；Ｉ−８３５〜Ｓ−９５０；Ｐ−８３６〜Ｓ−９５０；Ｔ−８
３７〜Ｓ−９５０；Ｆ−８３８〜Ｓ−９５０；Ｓ−８３９〜Ｓ−９５０；Ａ−８
４０〜Ｓ−９５０；Ｗ−８４１〜Ｓ−９５０；Ｖ−８４２〜Ｓ−９５０；Ｉ−８
４３〜Ｓ−９５０；Ｅ−８４４〜Ｓ−９５０；Ｅ−８４５〜Ｓ−９５０；Ｗ−８
４６〜Ｓ−９５０；Ｇ−８４７〜Ｓ−９５０；Ｅ−８４８〜Ｓ−９５０；Ｃ−８
４９〜Ｓ−９５０；Ｓ−８５０〜Ｓ−９５０；Ｋ−８５１〜Ｓ−９５０；Ｓ−８
５２〜Ｓ−９５０；Ｃ−８５３〜Ｓ−９５０；Ｅ−８５４〜Ｓ−９５０；Ｌ−８
５５〜Ｓ−９５０；Ｇ−８５６〜Ｓ−９５０；Ｗ−８５７〜Ｓ−９５０；Ｑ−８
５８〜Ｓ−９５０；Ｒ−８５９〜Ｓ−９５０；Ｒ−８６０〜Ｓ−９５０；Ｌ−８
６１〜Ｓ−９５０；Ｖ−８６２〜Ｓ−９５０；Ｅ−８６３〜Ｓ−９５０；Ｃ−８
６４〜Ｓ−９５０；Ｒ−８６５〜Ｓ−９５０；Ｄ−８６６〜Ｓ−９５０；Ｉ−８
６７〜Ｓ−９５０；Ｎ−８６８〜Ｓ−９５０；Ｇ−８６９〜Ｓ−９５０；Ｑ−８
７０〜Ｓ−９５０；Ｐ−８７１〜Ｓ−９５０；Ａ−８７２〜Ｓ−９５０；Ｓ−８
７３〜Ｓ−９５０；Ｅ−８７４〜Ｓ−９５０；Ｃ−８７５〜Ｓ−９５０；Ａ−８
７６〜Ｓ−９５０；Ｋ−８７７〜Ｓ−９５０；Ｅ−８７８〜Ｓ−９５０；Ｖ−８
７９〜Ｓ−９５０；Ｋ−８８０〜Ｓ−９５０；Ｐ−８８１〜Ｓ−９５０；Ａ−８
８２〜Ｓ−９５０；Ｓ−８８３〜Ｓ−９５０；Ｔ−８８４〜Ｓ−９５０；Ｒ−８
８５〜Ｓ−９５０；Ｐ−８８６〜Ｓ−９５０；Ｃ−８８７〜Ｓ−９５０；Ａ−８
８８〜Ｓ−９５０；Ｄ−８８９〜Ｓ−９５０；Ｈ−８９０〜Ｓ−９５０；Ｐ−８
９１〜Ｓ−９５０；Ｃ−８９２〜Ｓ−９５０；Ｐ−８９３〜Ｓ−９５０；Ｑ−８
９４〜Ｓ−９５０；Ｗ−８９５〜Ｓ−９５０；Ｑ−８９６〜Ｓ−９５０；Ｌ−８
９７〜Ｓ−９５０；Ｇ−８９８〜Ｓ−９５０；Ｅ−８９９〜Ｓ−９５０；Ｗ−９
００〜Ｓ−９５０；Ｓ−９０１〜Ｓ−９５０；Ｓ−９０２〜Ｓ−９５０；Ｃ−９
０３〜Ｓ−９５０；Ｓ−９０４〜Ｓ−９５０；Ｋ−９０５〜Ｓ−９５０；Ｔ−９
０６〜Ｓ−９５０；Ｃ−９０７〜Ｓ−９５０；Ｇ−９０８〜Ｓ−９５０；Ｋ−９
０９〜Ｓ−９５０；Ｇ−９１０〜Ｓ−９５０；Ｙ−９１１〜Ｓ−９５０；Ｋ−９
１２〜Ｓ−９５０；Ｋ−９１３〜Ｓ−９５０；Ｒ−９１４〜Ｓ−９５０；Ｓ−９
１５〜Ｓ−９５０；Ｌ−９１６〜Ｓ−９５０；Ｋ−９１７〜Ｓ−９５０；Ｃ−９
１８〜Ｓ−９５０；Ｌ−９１９〜Ｓ−９５０；Ｓ−９２０〜Ｓ−９５０；Ｈ−９
２１〜Ｓ−９５０；Ｄ−９２２〜Ｓ−９５０；Ｇ−９２３〜Ｓ−９５０；Ｇ−９
２４〜Ｓ−９５０；Ｖ−９２５〜Ｓ−９５０；Ｌ−９２６〜Ｓ−９５０；Ｓ−９
２７〜Ｓ−９５０；Ｈ−９２８〜Ｓ−９５０；Ｅ−９２９〜Ｓ−９５０；Ｓ−９
３０〜Ｓ−９５０；Ｃ−９３１〜Ｓ−９５０；Ｄ−９３２〜Ｓ−９５０；Ｐ−９
３３〜Ｓ−９５０；Ｌ−９３４〜Ｓ−９５０；Ｋ−９３５〜Ｓ−９５０；Ｋ−９
３６〜Ｓ−９５０；Ｐ−９３７〜Ｓ−９５０；Ｋ−９３８〜Ｓ−９５０；Ｈ−９
３９〜Ｓ−９５０；Ｆ−９４０〜Ｓ−９５０；Ｉ−９４１〜Ｓ−９５０；Ｄ−９
４２〜Ｓ−９５０；Ｆ−９４３〜Ｓ−９５０；Ｃ−９４４〜Ｓ−９５０；Ｔ−９
４５〜Ｓ−９５０。
【０１５３】
さらに、ＭＥＴＨ１ポリペプチドのＣ末端欠失もまた、一般式１〜ｎ1により
表され得、ここでｎ1は、２〜９５０の整数であり、ここでｎは、配列番号２に
おいて同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。好ましくは、配列番号２とし
て示される、本発明のＭＥＴＨ１ポリペプチドのＣ末端欠失は、配列番号２の以
下の残基のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む：Ｍ−１〜Ｃ−９４９；Ｍ−
１〜Ｅ−９４８；Ｍ−１〜Ａ−９４７；Ｍ−１〜Ｍ−９４６；Ｍ−１〜Ｔ−９４
５；Ｍ−１〜Ｃ−９４４；Ｍ−１〜Ｆ−９４３；Ｍ−１〜Ｄ−９４２；Ｍ−１〜
Ｉ−９４１；Ｍ−１〜Ｆ−９４０；Ｍ−１〜Ｈ−９３９；Ｍ−１〜Ｋ−９３８；
Ｍ−１〜Ｐ−９３７；Ｍ−１〜Ｋ−９３６；Ｍ−１〜Ｋ−９３５；Ｍ−１〜Ｌ−
９３４；Ｍ−１〜Ｐ−９３３；Ｍ−１〜Ｄ−９３２；Ｍ−１〜Ｃ−９３１；Ｍ−
１〜Ｓ−９３０；Ｍ−１〜Ｅ−９２９；Ｍ−１〜Ｈ−９２８；Ｍ−１〜Ｓ−９２
７；Ｍ−１〜Ｌ−９２６；Ｍ−１〜Ｖ−９２５；Ｍ−１〜Ｇ−９２４；Ｍ−１〜
Ｇ−９２３；Ｍ−１〜Ｄ−９２２；Ｍ−１〜Ｈ−９２１；Ｍ−１〜Ｓ−９２０；
Ｍ−１〜Ｌ−９１９；Ｍ−１〜Ｃ−９１８；Ｍ−１〜Ｋ−９１７；Ｍ−１〜Ｌ−
９１６；Ｍ−１〜Ｓ−９１５；Ｍ−１〜Ｒ−９１４；Ｍ−１〜Ｋ−９１３；Ｍ−
１〜Ｋ−９１２；Ｍ−１〜Ｙ−９１１；Ｍ−１〜Ｇ−９１０；Ｍ−１〜Ｋ−９０
９；Ｍ−１〜Ｇ−９０８；Ｍ−１〜Ｃ−９０７；Ｍ−１〜Ｔ−９０６；Ｍ−１〜
Ｋ−９０５；Ｍ−１〜Ｓ−９０４；Ｍ−１〜Ｃ−９０３；Ｍ−１〜Ｓ−９０２；
Ｍ−１〜Ｓ−９０１；Ｍ−１〜Ｗ−９００；Ｍ−１〜Ｅ−８９９；Ｍ−１〜Ｇ−
８９８；Ｍ−１〜Ｌ−８９７；Ｍ−１〜Ｑ−８９６；Ｍ−１〜Ｗ−８９５；Ｍ−
１〜Ｑ−８９４；Ｍ−１〜Ｐ−８９３；Ｍ−１〜Ｃ−８９２；Ｍ−１〜Ｐ−８９
１；Ｍ−１〜Ｈ−８９０；Ｍ−１〜Ｄ−８８９；Ｍ−１〜Ａ−８８８；Ｍ−１〜
Ｃ−８８７；Ｍ−１〜Ｐ−８８６；Ｍ−１〜Ｒ−８８５；Ｍ−１〜Ｔ−８８４；
Ｍ−１〜Ｓ−８８３；Ｍ−１〜Ａ−８８２；Ｍ−１〜Ｐ−８８１；Ｍ−１〜Ｋ−
８８０；Ｍ−１〜Ｖ−８７９；Ｍ−１〜Ｅ−８７８；Ｍ−１〜Ｋ−８７７；Ｍ−
１〜Ａ−８７６；Ｍ−１〜Ｃ−８７５；Ｍ−１〜Ｅ−８７４；Ｍ−１〜Ｓ−８７
３；Ｍ−１〜Ａ−８７２；Ｍ−１〜Ｐ−８７１；Ｍ−１〜Ｑ−８７０；Ｍ−１〜
Ｇ−８６９；Ｍ−１〜Ｎ−８６８；Ｍ−１〜Ｉ−８６７；Ｍ−１〜Ｄ−８６６；
Ｍ−１〜Ｒ−８６５；Ｍ−１〜Ｃ−８６４；Ｍ−１〜Ｅ−８６３；Ｍ−１〜Ｖ−
８６２；Ｍ−１〜Ｌ−８６１；Ｍ−１〜Ｒ−８６０；Ｍ−１〜Ｒ−８５９；Ｍ−
１〜Ｑ−８５８；Ｍ−１〜Ｗ−８５７；Ｍ−１〜Ｇ−８５６；Ｍ−１〜Ｌ−８５
５；Ｍ−１〜Ｅ−８５４；Ｍ−１〜Ｃ−８５３；Ｍ−１〜Ｓ−８５２；Ｍ−１〜
Ｋ−８５１；Ｍ−１〜Ｓ−８５０；Ｍ−１〜Ｃ−８４９；Ｍ−１〜Ｅ−８４８；
Ｍ−１〜Ｇ−８４７；Ｍ−１〜Ｗ−８４６；Ｍ−１〜Ｅ−８４５；Ｍ−１〜Ｅ−
８４４；Ｍ−１〜Ｉ−８４３；Ｍ−１〜Ｖ−８４２；Ｍ−１〜Ｗ−８４１；Ｍ−
１〜Ａ−８４０；Ｍ−１〜Ｓ−８３９；Ｍ−１〜Ｆ−８３８；Ｍ−１〜Ｔ−８３
７；Ｍ−１〜Ｐ−８３６；Ｍ−１〜Ｉ−８３５；Ｍ−１〜Ａ−８３４；Ｍ−１〜
Ｎ−８３３；Ｍ−１〜Ｆ−８３２；Ｍ−１〜Ｓ−８３１；Ｍ−１〜Ｅ−８３０；
Ｍ−１〜Ｋ−８２９；Ｍ−１〜Ｋ−８２８；Ｍ−１〜Ｋ−８２７；Ｍ−１〜Ｋ−
８２６；Ｍ−１〜Ｖ−８２５；Ｍ−１〜Ｆ−８２４；Ｍ−１〜Ｙ−８２３；Ｍ−
１〜Ｔ−８２２；Ｍ−１〜Ｙ−８２１；Ｍ−１〜Ｋ−８２０；Ｍ−１〜Ｉ−８１
９；Ｍ−１〜Ｋ−８１８；Ｍ−１〜Ｐ−８１７；Ｍ−１〜Ｒ−８１６；Ｍ−１〜
Ｌ−８１５；Ｍ−１〜Ａ−８１４；Ｍ−１〜Ｎ−８１３；Ｍ−１〜Ｇ−８１２；
Ｍ−１〜Ｖ−８１１；Ｍ−１〜Ｔ−８１０；Ｍ−１〜Ｌ−８０９；Ｍ−１〜Ｖ−
８０８；Ｍ−１〜Ｑ−８０７；Ｍ−１〜Ｉ−８０６；Ｍ−１〜Ｔ−８０５；Ｍ−
１〜Ｌ−８０４；Ｍ−１〜Ｐ−８０３；Ｍ−１〜Ｅ−８０２；Ｍ−１〜Ｋ−８０
１；Ｍ−１〜Ｌ−８００；Ｍ−１〜Ｐ−７９９；Ｍ−１〜Ｓ−７９８；Ｍ−１〜
Ｆ−７９７；Ｍ−１〜Ｓ−７９６；Ｍ−１〜Ｒ−７９５；Ｍ−１〜Ｉ−７９４；
Ｍ−１〜Ｒ−７９３；Ｍ−１〜Ｅ−７９２；Ｍ−１〜Ｌ−７９１；Ｍ−１〜Ａ−
７９０；Ｍ−１〜Ａ−７８９；Ｍ−１〜Ｓ−７８８；Ｍ−１〜Ｓ−７８７；Ｍ−
１〜Ｇ−７８６；Ｍ−１〜Ｓ−７８５；Ｍ−１〜Ｙ−７８４；Ｍ−１〜Ｒ−７８
３；Ｍ−１〜Ｌ−７８２；Ｍ−１〜Ｖ−７８１；Ｍ−１〜Ｖ−７８０；Ｍ−１〜
Ｇ−７７９；Ｍ−１〜Ｋ−７７８；Ｍ−１〜Ｙ−７７７；Ｍ−１〜Ｍ−７７６；
Ｍ−１〜Ｉ−７７５；Ｍ−１〜Ｄ−７７４；Ｍ−１〜Ｑ−７７３；Ｍ−１〜Ｅ−
７７２；Ｍ−１〜Ｌ−７７１；Ｍ−１〜Ｔ−７７０；Ｍ−１〜Ｓ−７６９；Ｍ−
１〜Ｌ−７６８；Ｍ−１〜Ｔ−７６７；Ｍ−１〜Ｙ−７６６；Ｍ−１〜Ｄ−７６
５；Ｍ−１〜Ｇ−７６４；Ｍ−１〜Ｎ−７６３；Ｍ−１〜Ｌ−７６２；Ｍ−１〜
Ｉ−７６１；Ｍ−１〜Ｙ−７６０；Ｍ−１〜Ｔ−７５９；Ｍ−１〜Ｇ−７５８；
Ｍ−１〜Ｄ−７５７；Ｍ−１〜Ａ−７５６；Ｍ−１〜Ａ−７５５；Ｍ−１〜Ｋ−
７５４；Ｍ−１〜Ｉ−７５３；Ｍ−１〜Ａ−７５２；Ｍ−１〜Ｌ−７５１；Ｍ−
１〜Ｆ−７５０；Ｍ−１〜Ｓ−７４９；Ｍ−１〜Ｇ−７４８；Ｍ−１〜Ｎ−７４
７；Ｍ−１〜Ｎ−７４６；Ｍ−１〜Ｒ−７４５；Ｍ−１〜Ｓ−７４４；Ｍ−１〜
Ｇ−７４３；Ｍ−１〜Ｒ−７４２；Ｍ−１〜Ｑ−７４１；Ｍ−１〜Ｎ−７４０；
Ｍ−１〜Ｒ−７３９；Ｍ−１〜Ｑ−７３８；Ｍ−１〜Ｋ−７３７；Ｍ−１〜Ｖ−
７３６；Ｍ−１〜Ｅ−７３５；Ｍ−１〜Ｉ−７３４；Ｍ−１〜Ｎ−７３３；Ｍ−
１〜Ｔ−７３２；Ｍ−１〜Ａ−７３１；Ｍ−１〜Ｇ−７３０；Ｍ−１〜Ｔ−７２
９；Ｍ−１〜Ｐ−７２８；Ｍ−１〜Ｉ−７２７；Ｍ−１〜Ｔ−７２６；Ｍ−１〜
Ｉ−７２５；Ｍ−１〜Ｉ−７２４；Ｍ−１〜Ｄ−７２３；Ｍ−１〜Ｈ−７２２；
Ｍ−１〜Ｙ−７２１；Ｍ−１〜Ｇ−７２０；Ｍ−１〜Ｐ−７１９；Ｍ−１〜Ｋ−
７１８；Ｍ−１〜Ａ−７１７；Ｍ−１〜Ｓ−７１６；Ｍ−１〜Ｔ−７１５；Ｍ−
１〜Ｖ−７１４；Ｍ−１〜Ｓ−７１３；Ｍ−１〜Ｇ−７１２；Ｍ−１〜Ｓ−７１
１；Ｍ−１〜Ｉ−７１０；Ｍ−１〜Ｋ−７０９；Ｍ−１〜Ｋ−７０８；Ｍ−１〜
Ｃ−７０７；Ｍ−１〜Ｔ−７０６；Ｍ−１〜Ｓ−７０５；Ｍ−１〜Ｇ−７０４；
Ｍ−１〜Ｎ−７０３；Ｍ−１〜Ｇ−７０２；Ｍ−１〜Ｇ−７０１；Ｍ−１〜Ｃ−
７００；Ｍ−１〜Ｖ−６９９；Ｍ−１〜Ｇ−６９８；Ｍ−１〜Ｃ−６９７；Ｍ−
１〜Ｋ−６９６；Ｍ−１〜Ｄ−６９５；Ｍ−１〜Ｆ−６９４；Ｍ−１〜Ｋ−６９
３；Ｍ−１〜Ｋ−６９２；Ｍ−１〜Ｋ−６９１；Ｍ−１〜Ｓ−６９０；Ｍ−１〜
Ｄ−６８９；Ｍ−１〜Ｉ−６８８；Ｍ−１〜Ｉ−６８７；Ｍ−１〜Ｒ−６８６；
Ｍ−１〜Ｄ−６８５；Ｍ−１〜Ｃ−６８４；Ｍ−１〜Ｇ−６８３；Ｍ−１〜Ａ−
６８２；Ｍ−１〜Ｋ−６８１；Ｍ−１〜Ｖ−６８０；Ｍ−１〜Ｃ−６７９；Ｍ−
１〜Ｑ−６７８；Ｍ−１〜Ｇ−６７７；Ｍ−１〜Ｑ−６７６；Ｍ−１〜Ｖ−６７
５；Ｍ−１〜Ｃ−６７４；Ｍ−１〜Ｖ−６７３；Ｍ−１〜Ｓ−６７２；Ｍ−１〜
Ｔ−６７１；Ｍ−１〜Ｓ−６７０；Ｍ−１〜Ｄ−６６９；Ｍ−１〜Ｐ−６６８；
Ｍ−１〜Ｓ−６６７；Ｍ−１〜Ｃ−６６６；Ｍ−１〜Ｐ−６６５；Ｍ−１〜Ｔ−
６６４；Ｍ−１〜Ｇ−６６３；Ｍ−１〜Ｄ−６６２；Ｍ−１〜Ｖ−６６１；Ｍ−
１〜Ｖ−６６０；Ｍ−１〜Ｋ−６５９；Ｍ−１〜Ｐ−６５８；Ｍ−１〜Ｑ−６５
７；Ｍ−１〜Ｌ−６５６；Ｍ−１〜Ｖ−６５５；Ｍ−１〜Ｆ−６５４；Ｍ−１〜
Ｆ−６５３；Ｍ−１〜Ｙ−６５２；Ｍ−１〜Ｇ−６５１；Ｍ−１〜Ｉ−６５０；
Ｍ−１〜Ｇ−６４９；Ｍ−１〜Ｋ−６４８；Ｍ−１〜Ａ−６４７；Ｍ−１〜Ｑ−
６４６；Ｍ−１〜Ｃ−６４５；Ｍ−１〜Ｉ−６４４；Ｍ−１〜Ｌ−６４３；Ｍ−
１〜Ｋ−６４２；Ｍ−１〜Ｃ−６４１；Ｍ−１〜Ｒ−６４０；Ｍ−１〜Ｄ−６３
９；Ｍ−１〜Ｋ−６３８；Ｍ−１〜Ｐ−６３７；Ｍ−１〜Ｓ−６３６；Ｍ−１〜
Ｖ−６３５；Ｍ−１〜Ｇ−６３４；Ｍ−１〜Ａ−６３３；Ｍ−１〜Ｙ−６３２；
Ｍ−１〜Ｋ−６３１；Ｍ−１〜Ｐ−６３０；Ｍ−１〜Ｉ−６２９；Ｍ−１〜Ｗ−
６２８；Ｍ−１〜Ｅ−６２７；Ｍ−１〜Ｖ−６２６；Ｍ−１〜Ａ−６２５；Ｍ−
１〜Ｐ−６２４；Ｍ−１〜Ｇ−６２３；Ｍ−１〜Ｓ−６２２；Ｍ−１〜Ｇ−６２
１；Ｍ−１〜Ｆ−６２０；Ｍ−１〜Ｓ−６１９；Ｍ−１〜Ａ−６１８；Ｍ−１〜
Ｋ−６１７；Ｍ−１〜Ｓ−６１６；Ｍ−１〜Ｆ−６１５；Ｍ−１〜Ｅ−６１４；
Ｍ−１〜Ｎ−６１３；Ｍ−１〜Ｈ−６１２；Ｍ−１〜Ａ−６１１；Ｍ−１〜Ｅ−
６１０；Ｍ−１〜Ｃ−６０９；Ｍ−１〜Ｑ−６０８；Ｍ−１〜Ｅ−６０７；Ｍ−
１〜Ｅ−６０６；Ｍ−１〜Ｒ−６０５；Ｍ−１〜Ｆ−６０４；Ｍ−１〜Ｔ−６０
３；Ｍ−１〜Ｋ−６０２；Ｍ−１〜Ｇ−６０１；Ｍ−１〜Ｎ−６００；Ｍ−１〜
Ｎ−５９９；Ｍ−１〜Ｄ−５９８；Ｍ−１〜Ｐ−５９７；Ｍ−１〜Ｃ−５９６；
Ｍ−１〜Ｄ−５９５；Ｍ−１〜Ｅ−５９４；Ｍ−１〜Ｌ−５９３；Ｍ−１〜Ｎ−
５９２；Ｍ−１〜Ｃ−５９１；Ｍ−１〜Ｓ−５９０；Ｍ−１〜Ｒ−５８９；Ｍ−
１〜Ｙ−５８８；Ｍ−１〜Ｒ−５８７；Ｍ−１〜Ｖ−５８６；Ｍ−１〜Ｒ−５８
５；Ｍ−１〜Ｋ−５８４；Ｍ−１〜Ｇ−５８３；Ｍ−１〜Ｅ−５８２；Ｍ−１〜
Ｃ−５８１；Ｍ−１〜Ｙ−５８０；Ｍ−１〜Ｋ−５７９；Ｍ−１〜Ｇ−５７８；
Ｍ−１〜Ｇ−５７７；Ｍ−１〜Ｎ−５７６；Ｍ−１〜Ｋ−５７５；Ｍ−１〜Ｐ−
５７４；Ｍ−１〜Ｖ−５７３；Ｍ−１〜Ｐ−５７２；Ｍ−１〜Ｎ−５７１；Ｍ−
１〜Ｄ−５７０；Ｍ−１〜Ｃ−５６９；Ｍ−１〜Ｅ−５６８；Ｍ−１〜Ｒ−５６
７；Ｍ−１〜Ｍ−５６６；Ｍ−１〜Ｔ−５６５；Ｍ−１〜Ｙ−５６４；Ｍ−１〜
Ｑ−５６３；Ｍ−１〜Ｖ−５６２；Ｍ−１〜Ｇ−５６１；Ｍ−１〜Ｇ−５６０；
Ｍ−１〜Ｇ−５５９；Ｍ−１〜Ｃ−５５８；Ｍ−１〜Ｔ−５５７；Ｍ−１〜Ｒ−
５５６；Ｍ−１〜Ｓ−５５５；Ｍ−１〜Ｃ−５５４；Ｍ−１〜Ｄ−５５３；Ｍ−
１〜Ｇ−５５２；Ｍ−１〜Ｗ−５５１；Ｍ−１〜Ｐ−５５０；Ｍ−１〜Ｇ−５４
９；Ｍ−１〜Ｗ−５４８；Ｍ−１〜Ｍ−５４７；Ｍ−１〜Ｇ５４６；Ｍ−１〜Ｗ
−５４５；Ｍ−１〜Ｓ−５４４；Ｍ−１〜Ｇ−５４３；Ｍ−１〜Ｈ−５４２；Ｍ
−１〜Ｆ−５４１；Ｍ−１〜Ｐ−５４０；Ｍ−１〜Ｔ−５３９；Ｍ−１〜Ｄ−５
３８；Ｍ−１〜Ｆ−５３７；Ｍ−１〜Ｈ−５３６；Ｍ−１〜Ｋ−５３５；Ｍ−１
〜Ｒ−５３４；Ｍ−１〜Ｄ−５３３；Ｍ−１〜Ｔ−５３２；Ｍ−１〜Ｋ−５３１
；Ｍ−１〜Ｎ−５３０；Ｍ−１〜Ｖ−５２９；Ｍ−１〜Ｃ−５２８；Ｍ−１〜Ｋ
−５２７；Ｍ−１〜Ｇ−５２６；Ｍ−１〜Ｎ−５２５；Ｍ−１〜Ｉ−５２４；Ｍ
−１〜Ｃ−５２３；Ｍ−１〜Ｗ−５２２；Ｍ−１〜Ｋ−５２１；Ｍ−１〜Ｇ−５
２０；Ｍ−１〜Ｅ−５１９；Ｍ−１〜Ｇ−５１８；Ｍ−１〜Ｃ−５１７；Ｍ−１
〜Ｓ−５１６；Ｍ−１〜Ｔ−５１５；Ｍ−１〜Ｇ−５１４；Ｍ−１〜Ｄ−５１３
；Ｍ−１〜Ａ−５１２；Ｍ−１〜Ｗ−５１１；Ｍ−１〜Ｐ−５１０；Ｍ−１〜Ｆ
−５０９；Ｍ−１〜Ｈ−５０８；Ｍ−１〜Ｋ−５０７；Ｍ−１〜Ｔ−５０６；Ｍ
−１〜Ｑ−５０５；Ｍ−１〜Ｃ−５０４；Ｍ−１〜Ｖ−５０３；Ｍ−１〜Ｌ−５
０２；Ｍ−１〜Ｖ−５０１；Ｍ−１〜Ｇ−５００；Ｍ−１〜Ｇ−４９９；Ｍ−１
〜Ｓ−４９８；Ｍ−１〜Ｔ−４９７；Ｍ−１〜Ｇ−４９６；Ｍ−１〜Ｔ−４９５
；Ｍ−１〜Ｃ−４９４；Ｍ−１〜Ｗ−４９３；Ｍ−１〜Ｌ−４９２；Ｍ−１〜Ｔ
−４９１；Ｍ−１〜Ｓ−４９０；Ｍ−１〜Ｃ−４８９；Ｍ−１〜Ｔ−４８８；Ｍ
−１〜Ｓ−４８７；Ｍ−１〜Ａ−４８６；Ｍ−１〜Ａ−４８５；Ｍ−１〜Ｄ−４
８４；Ｍ−１〜Ｐ−４８３；Ｍ−１〜Ｃ−４８２；Ｍ−１〜Ｈ−４８１；Ｍ−１
〜Ｋ−４８０；Ｍ−１〜Ｓ−４７９；Ｍ−１〜Ｄ−４７８；Ｍ−１〜Ｅ−４７７
；Ｍ−１〜Ｇ−４７６；Ｍ−１〜Ｆ−４７５；Ｍ−１〜Ｔ−４７４；Ｍ−１〜Ｆ
−４７３；Ｍ−１〜Ｑ−４７２；Ｍ−１〜Ｃ−４７１；Ｍ−１〜Ｑ−４７０；Ｍ
−１〜Ｒ−４６９；Ｍ−１〜Ｎ−４６８；Ｍ−１〜Ａ−４６７；Ｍ−１〜Ｄ−４
６６；Ｍ−１〜Ｙ−４６５；Ｍ−１〜Ｓ−４６４；Ｍ−１〜Ｔ−４６３；Ｍ−１
〜Ｇ−４６２；Ｍ−１〜Ｐ−４６１；Ｍ−１〜Ｌ−４６０；Ｍ−１〜Ｄ−４５９
；Ｍ−１〜Ｇ−４５８；Ｍ−１〜Ｐ−４５７；Ｍ−１〜Ｌ−４５６；Ｍ−１〜Ｑ
−４５５；Ｍ−１〜Ｉ−４５４；Ｍ−１〜Ｐ−４５３；Ｍ−１〜Ｎ−４５２；Ｍ
−１〜Ｑ−４５１；Ｍ−１〜Ｐ−４５０；Ｍ−１〜Ｋ−４４９；Ｍ−１〜Ｄ−４
４８；Ｍ−１〜Ｍ−４４７；Ｍ−１〜Ｌ−４４６；Ｍ−１〜Ｃ−４４５；Ｍ−１
〜Ｅ−４４４；Ｍ−１〜Ｇ−４４３；Ｍ−１〜Ｈ−４４２；Ｍ−１〜Ｇ−４４１
；Ｍ−１〜Ｎ−４４０；Ｍ−１〜Ｄ−４３９；Ｍ−１〜Ｌ−４３８；Ｍ−１〜Ｆ
−４３７；Ｍ−１〜Ｓ−４３６；Ｍ−１〜Ｔ−４３５；Ｍ−１〜Ｉ−４３４；Ｍ
−１〜Ｍ−４３３；Ｍ−１〜Ｙ−４３２；Ｍ−１〜Ａ−４３１；Ｍ−１〜Ｓ−４
３０；Ｍ−１〜Ｃ−４２９；Ｍ−１〜Ｐ−４２８；Ｍ−１〜Ｓ−４２７；Ｍ−１
〜Ｗ−４２６；Ｍ−１〜Ｐ−４２５；Ｍ−１〜Ｑ−４２４；Ｍ−１〜Ｓ−４２３
；Ｍ−１〜Ｈ−４２２；Ｍ−１〜Ｄ−４２１；Ｍ−１〜Ｌ−４２０；Ｍ−１〜Ｎ
−４１９；Ｍ−１〜Ｓ−４１８；Ｍ−１〜Ｌ−４１７；Ｍ−１〜Ｍ−４１６；Ｍ
−１〜Ｓ−４１５；Ｍ−１〜Ａ−４１４；Ｍ−１〜Ｍ−４１３；Ｍ−１〜Ｍ−４
１２；Ｍ−１〜Ｈ−４１１；Ｍ−１〜Ｓ−４１０；Ｍ−１〜Ｄ−４０９；Ｍ−１
〜Ｑ−４０８；Ｍ−１〜Ｎ−４０７；Ｍ−１〜Ｖ−４０６；Ｍ−１〜Ｇ４０５；
Ｍ−１〜Ｎ−４０４；Ｍ−１〜Ｌ−４０３；Ｍ−１〜Ｓ−４０２；Ｍ−１〜Ａ−
４０１；Ｍ−１〜Ｃ−４００；Ｍ−１〜Ｑ−３９９；Ｍ−１〜Ｋ−３９８；Ｍ−
１〜Ａ−３９７；Ｍ−１〜Ｄ−３９６；Ｍ−１〜Ｄ−３９５；Ｍ−１〜Ｈ−３９
４；Ｍ−１〜Ｐ−３９３；Ｍ−１〜Ｍ−３９２；Ｍ−１〜Ｎ−３９１；Ｍ−１〜
Ｆ−３９０；Ｍ−１〜Ｖ−３８９；Ｍ−１〜Ｈ−３８８；Ｍ−１〜Ｇ−３８７；
Ｍ−１〜Ｌ−３８６；Ｍ−１〜Ｅ−３８５；Ｍ−１〜Ｈ−３８４；Ｍ−１〜Ａ−
３８３；Ｍ−１〜Ｔ−３８２；Ｍ−１〜Ｔ−３８１；Ｍ−１〜Ｆ−３８０；Ｍ−
１〜Ａ−３７９；Ｍ−１〜Ａ−３７８；Ｍ−１〜Ｑ−３７７；Ｍ−１〜Ｌ−３７
６；Ｍ−１〜Ｇ−３７５；Ｍ−１〜Ｄ−３７４；Ｍ−１〜Ｄ−３７３；Ｍ−１〜
Ｅ−３７２；Ｍ−１〜Ｉ−３７１；Ｍ−１〜Ｖ−３７０；Ｍ−１〜Ｓ−３６９；
Ｍ−１〜Ｃ−３６８；Ｍ−１〜Ｓ−３６７；Ｍ−１〜Ｒ−３６６；Ｍ−１〜Ｓ−
３６５；Ｍ−１〜Ｐ−３６４；Ｍ−１〜Ｄ−３６３；Ｍ−１〜Ｃ−３６２；Ｍ−
１〜Ｖ−３６１；Ｍ−１〜Ｔ−３６０；Ｍ−１〜Ｇ−３５９；Ｍ−１〜Ｖ−３５
８；Ｍ−１〜Ｄ−３５７；Ｍ−１〜Ａ−３５６；Ｍ−１〜Ｍ−３５５；Ｍ−１〜
Ｇ−３５４；Ｍ−１〜Ｌ−３５３；Ｍ−１〜Ｔ−３５２；Ｍ−１〜Ｄ−３５１；
Ｍ−１〜Ｃ−３５０；Ｍ−１〜Ｔ−３４９；Ｍ−１〜Ｑ−３４８；Ｍ−１〜Ｓ−
３４７；Ｍ−１〜Ｇ−３４６；Ｍ−１〜Ｃ−３４５；Ｍ−１〜Ｌ−３４４；Ｍ−
１〜Ｄ−３４３；Ｍ−１〜Ｑ−３４２；Ｍ−１〜Ｒ−３４１；Ｍ−１〜Ｔ−３４
０；Ｍ−１〜Ｆ−３３９；Ｍ−１〜Ｌ−３３８；Ｍ−１〜Ｉ−３３７；Ｍ−１〜
Ａ−３３６；Ｍ−１〜Ｔ−３３５；Ｍ−１〜Ｄ−３３４；Ｍ−１〜Ｙ−３３３；
Ｍ−１〜Ｈ−３３２；Ｍ−１〜Ｅ−３３１；Ｍ−１〜Ａ−３３０；Ｍ−１〜Ｄ−
３２９；Ｍ−１〜Ｒ−３２８；Ｍ−１〜Ｄ−３２７；Ｍ−１〜Ｓ−３２６；Ｍ−
１〜Ｐ−３２５；Ｍ−１〜Ｐ−３２４；Ｍ−１〜Ｎ−３２３；Ｍ−１〜Ｈ−３２
２；Ｍ−１〜Ｑ−３２１；Ｍ−１〜Ｋ−３２０；Ｍ−１〜Ｑ−３１９；Ｍ−１〜
Ｗ−３１８；Ｍ−１〜Ｎ−３１７；Ｍ−１〜Ｃ−３１６；Ｍ−１〜Ｆ−３１５；
Ｍ−１〜Ｎ−３１４；Ｍ−１〜Ｒ−３１３；Ｍ−１〜Ｌ−３１２；Ｍ−１〜Ｔ−
３１１；Ｍ−１〜Ｌ−３１０；Ｍ−１〜Ａ−３０９；Ｍ−１〜Ａ−３０８；Ｍ−
１〜Ｎ−３０７；Ｍ−１〜Ｓ−３０６；Ｍ−１〜Ｔ−３０５；Ｍ−１〜Ｖ−３０
４；Ｍ−１〜Ｅ−３０３；Ｍ−１〜Ｐ−３０２；Ｍ−１〜Ｇ−３０１；Ｍ−１〜
Ｋ−３００；Ｍ−１〜Ｑ−２９９；Ｍ−１〜Ｅ−２９８；Ｍ−１〜Ｄ−２９７；
Ｍ−１〜Ｈ−２９６；Ｍ−１〜Ｉ−２９５；Ｍ−１〜Ｖ−２９４；Ｍ−１〜Ｌ−
２９３；Ｍ−１〜Ｉ−２９２；Ｍ−１〜Ｋ−２９１；Ｍ−１〜Ｖ−２９０；Ｍ−
１〜Ｖ−２８９；Ｍ−１〜Ｖ−２８８；Ｍ−１〜Ｌ−２８７；Ｍ−１〜Ｓ−２８
６；Ｍ−１〜Ｖ−２８５；Ｍ−１〜Ｓ−２８４；Ｍ−１〜Ｎ−２８３；Ｍ−１〜
Ｒ−２８２；Ｍ−１〜Ｉ−２８１；Ｍ−１〜Ｓ−２８０；Ｍ−１〜Ｐ−２７９；
Ｍ−１〜Ｈ−２７８；Ｍ−１〜Ｋ−２７７；Ｍ−１〜Ｙ−２７６；Ｍ−１〜Ｌ−
２７５；Ｍ−１〜Ｒ−２７４；Ｍ−１〜Ａ−２７３；Ｍ−１〜Ａ−２７２；Ｍ−
１〜Ｖ−２７１；Ｍ−１〜Ｓ−２７０；Ｍ−１〜Ｆ−２６９；Ｍ−１〜Ｌ−２６
８；Ｍ−１〜Ｔ−２６７；Ｍ−１〜Ｌ−２６６；Ｍ−１〜Ｌ−２６５；Ｍ−１〜
Ｙ−２６４；Ｍ−１〜Ｈ−２６３；Ｍ−１〜Ｋ−２６２；Ｍ−１〜Ｌ−２６１；
Ｍ−１〜Ｇ−２６０；Ｍ−１〜Ｓ−２５９；Ｍ−１〜Ｇ−２５８；Ｍ−１〜Ｈ−
２５７；Ｍ−１〜Ｆ−２５６；Ｍ−１〜Ｅ−２５５；Ｍ−１〜Ａ−２５４；Ｍ−
１〜Ｍ−２５３；Ｍ−１〜Ｓ−２５２；Ｍ−１〜Ｑ−２５１；Ｍ−１〜Ｄ−２５
０；Ｍ−１〜Ａ−２４９；Ｍ−１〜Ｖ−２４８；Ｍ−１〜Ｌ−２４７；Ｍ−１〜
Ｍ−２４６；Ｍ−１〜Ｔ−２４５；Ｍ−１〜Ｅ−２４４；Ｍ−１〜Ｖ−２４３；
Ｍ−１〜Ｙ−２４２；Ｍ−１〜Ｒ−２４１；Ｍ−１〜Ｈ−２４０；Ｍ−１〜Ｓ−
２３９；Ｍ−１〜Ｓ−２３８；Ｍ−１〜Ｖ−２３７；Ｍ−１〜Ｆ−２３６；Ｍ−
１〜Ｒ−２３５；Ｍ−１〜Ｋ−２３４；Ｍ−１〜Ｋ−２３３；Ｍ−１〜Ｒ−２３
２；Ｍ−１〜Ｉ−２３１；Ｍ−１〜Ｓ−２３０；Ｍ−１〜Ｇ−２２９；Ｍ−１〜
Ｔ−２２８；Ｍ−１〜Ｇ−２２７；Ｍ−１〜Ｔ−２２６；Ｍ−１〜Ｐ−２２５；
Ｍ−１〜Ｑ−２２４；Ｍ−１〜Ｇ−２２３；Ｍ−１〜Ｖ−２２２；Ｍ−１〜Ｇ−
２２１；Ｍ−１〜Ｑ−２２０；Ｍ−１〜Ｌ−２１９；Ｍ−１〜Ａ−２１８；Ｍ−
１〜Ｇ−２１７；Ｍ−１〜Ｄ−２１６；Ｍ−１〜Ｑ−２１５；Ｍ−１〜Ｐ−２１
４；Ｍ−１〜Ｓ−２１３；Ｍ−１〜Ｗ−２１２；Ｍ−１〜Ｑ−２１１；Ｍ−１〜
Ｐ−２１０；Ｍ−１〜Ｇ−２０９；Ｍ−１〜Ｅ−２０８；Ｍ−１〜Ｄ−２０７；
Ｍ−１〜Ｅ−２０６；Ｍ−１〜Ｇ−２５０；Ｍ−１〜Ｅ−２０４；Ｍ−１〜Ｔ−
２０３；Ｍ−１〜Ｇ−２０２；Ｍ−１〜Ｅ−２０１；Ｍ−１〜Ｄ−２００；Ｍ−
１〜Ｅ−１９９；Ｍ−１〜Ｄ−１９８；Ｍ−１〜Ｅ−１９７；Ｍ−１〜Ｔ−１９
６；Ｍ−１〜Ｅ−１９５；Ｍ−１〜Ａ−１９４；Ｍ−１〜Ｋ−１９３；Ｍ−１〜
Ｇ−１９２；Ｍ−１〜Ｔ−１９１；Ｍ−１〜Ｐ−１９０；Ｍ−１〜Ｒ−１８９；
Ｍ−１〜Ｐ−１８８；Ｍ−１〜Ｅ−１８７；Ｍ−１〜Ｄ−１８６；Ｍ−１〜Ｄ−
１８５；Ｍ−１〜Ｖ−１８４；Ｍ−１〜Ｖ−１８３；Ｍ−１〜Ｇ−１８２；Ｍ−
１〜Ｃ−１８１；Ｍ−１〜Ｔ−１８０；Ｍ−１〜Ｇ−１７９；Ｍ−１〜Ｇ−１７
８；Ｍ−１〜Ｖ−１７７；Ｍ−１〜Ｄ−１７６；Ｍ−１〜Ｇ−１７５；Ｍ−１〜
Ｑ−１７４；Ｍ−１〜Ｒ−１７３；Ｍ−１〜Ｎ−１７２；Ｍ−１〜Ｒ−１７１；
Ｍ−１〜Ｒ−１７０；Ｍ−１〜Ｌ−１６９；Ｍ−１〜Ｌ−１６８；Ｍ−１〜Ｈ−
１６７；Ｍ−１〜Ｆ−１６６；Ｍ−１〜Ｑ−１６５；Ｍ−１〜Ｌ−１６４；Ｍ−
１〜Ｐ−１６３；Ｍ−１〜Ａ−１６２；Ｍ−１〜Ｐ−１６１；Ｍ−１〜Ｐ−１６
０；Ｍ−１〜Ｋ−１５９；Ｍ−１〜Ｅ−１５８；Ｍ−１〜Ｇ−１５７；Ｍ−１〜
Ｐ−１５６；Ｍ−１〜Ａ−１５５；Ｍ−１〜Ａ−１５４；Ｍ−１〜Ｔ−１５３；
Ｍ−１〜Ａ−１５２；Ｍ−１〜Ｌ−１５１；Ｍ−１〜Ｒ−１５０；Ｍ−１〜Ｅ−
１４９；Ｍ−１〜Ｓ−１４８；Ｍ−１〜Ａ−１４７；Ｍ−１〜Ａ−１４６；Ｍ−
１〜Ｐ−１４５；Ｍ−１〜Ｌ−１４４；Ｍ−１〜Ｐ−１４３；Ｍ−１〜Ｑ−１４
２；Ｍ−１〜Ｉ−１４１；Ｍ−１〜Ｆ−１４０；Ｍ−１〜Ｙ−１３９；Ｍ−１〜
Ａ−１３８；Ｍ−１〜Ｅ−１３７；Ｍ−１〜Ｇ−１３６；Ｍ−１〜Ｌ−１３５；
Ｍ−１〜Ｌ−１３４；Ｍ−１〜Ｙ−１３３；Ｍ−１〜Ｆ−１３２；Ｍ−１〜Ａ−
１３１；Ｍ−１〜Ｇ−１３０；Ｍ−１〜Ｒ−１２９；Ｍ−１〜Ｖ−１２８；Ｍ−
１〜Ｇ−１２７；Ｍ−１〜Ｅ−１２６；Ｍ−１〜Ｃ−１２５；Ｍ−１〜Ｌ−１２
４；Ｍ−１〜Ｓ−１２３；Ｍ−１〜Ｌ−１２２；Ｍ−１〜Ａ−１２１；Ｍ−１〜
Ａ−１２０；Ｍ−１〜Ａ−１１９；Ｍ−１〜Ｓ−１１８；Ｍ−１〜Ｓ−１１７；
Ｍ−１〜Ｐ−１１６；Ｍ−１〜Ｄ−１１５；Ｍ−１〜Ｇ−１１４；Ｍ−１〜Ｎ−
１１３；Ｍ−１〜Ｖ−１１２；Ｍ−１〜Ｔ−１１１；Ｍ−１〜Ｇ−１１０；Ｍ−
１〜Ｓ−１０９；Ｍ−１〜Ｙ−１０８；Ｍ−１〜Ｆ−１０７；Ｍ−１〜Ｃ−１０
６；Ｍ−１〜Ｈ−１０５；Ｍ−１〜Ａ−１０４；Ｍ−１〜Ｌ−１０３；Ｍ−１〜
Ｄ−１０２；Ｍ−１〜Ｔ−１０１；Ｍ−１〜Ｅ−１００；Ｍ−１〜Ｐ−９９；Ｍ
−１〜Ｌ−９８；Ｍ−１〜Ｐ−９７；Ｍ−１〜Ｔ−９６；Ｍ−１〜Ｅ−９５；Ｍ
−１〜Ｓ−９４；Ｍ−１〜Ｇ−９３；Ｍ−１〜Ｓ−９２；Ｍ−１〜Ｋ−９１；Ｍ
−１〜Ｒ−９０；Ｍ−１〜Ｇ−８９；Ｍ−１〜Ｖ−８８；Ｍ−１〜Ｎ−８７；Ｍ
−１〜Ｑ−８６；Ｍ−１〜Ｌ−８５；Ｍ−１〜Ｔ−８４；Ｍ−１〜Ｆ−８３；Ｍ
−１〜Ｇ−８２；Ｍ−１〜Ｐ−８１；Ｍ−１〜Ａ−８０；Ｍ−１〜Ｌ−７９；Ｍ
−１〜Ｆ−７８；Ｍ−１〜Ｓ−７７；Ｍ−１〜Ｓ−７６；Ｍ−１〜Ｄ−７５；Ｍ
−１〜Ｐ−７４；Ｍ−１〜Ｒ−７３；Ｍ−１〜Ｌ−７２；Ｍ−１〜Ｅ−７１；Ｍ
−１〜Ｌ−７０；Ｍ−１〜Ｄ−６９；Ｍ−１〜Ｌ−６８；Ｍ−１〜Ｑ−６７；Ｍ
−１〜Ｑ−６６；Ｍ−１〜Ｄ−６５；Ｍ−１〜Ｆ−６４；Ｍ−１〜Ａ−６３；Ｍ
−１〜Ｈ−６２；Ｍ−１〜Ｌ−６１；Ｍ−１〜Ｒ−６０；Ｍ−１〜Ｌ−５９；Ｍ
−１〜Ｒ−５８；Ｍ−１〜Ｔ−５７；Ｍ−１〜Ｔ−５６；Ｍ−１〜Ｇ−５５；Ｍ
−１〜Ｈ−５４；Ｍ−１〜Ｇ−５３；Ｍ−１〜Ｐ−５２；Ｍ−１〜Ａ−５１；Ｍ
−１〜Ｒ−５０；Ｍ−１〜Ｅ−４９；Ｍ−１〜Ｌ−４８；Ｍ−１〜Ｅ−４７；Ｍ
−１〜Ｐ−４６；Ｍ−１〜Ｖ−４５；Ｍ−１〜Ｖ−４４；Ｍ−１〜Ｌ−４３；Ｍ
−１〜Ｅ−４２；Ｍ−１〜Ｅ−４１；Ｍ−１〜Ｄ−４０；Ｍ−１〜Ｅ−３９；Ｍ
−１〜Ｅ−３８；Ｍ−１〜Ｓ−３７；Ｍ−１〜Ｐ−３６；Ｍ−１〜Ｒ−３５；Ｍ
−１〜Ｇ−３４；Ｍ−１〜Ｌ−３３；Ｍ−１〜Ａ−３２；Ｍ−１〜Ｄ−３１；Ｍ
−１〜Ｓ−３０；Ｍ−１〜Ｖ−２９；Ｍ−１〜Ａ−２８；Ｍ−１〜Ｌ−２７；Ｍ
−１〜Ｌ−２６；Ｍ−１〜Ａ−２５；Ｍ−１〜Ａ−２４；Ｍ−１〜Ａ−２３；Ｍ
−１〜Ｌ−２２；Ｍ−１〜Ｌ−２１；Ｍ−１〜Ｌ−２０；Ｍ−１〜Ｌ−１９；Ｍ
−１〜Ｔ−１８；Ｍ−１〜Ｐ−１７；Ｍ−１〜Ｖ−１６；Ｍ−１〜Ｐ−１５；Ｍ
−１〜Ｇ−１４；Ｍ−１〜Ｆ−１３；Ｍ−１〜Ｓ−１２；Ｍ−１〜Ｒ−１１；Ｍ
−１〜Ｓ−１０；Ｍ−１〜Ｇ−９；Ｍ−１〜Ｐ−８；Ｍ−１〜Ａ−７。例えば、
上に列挙したＮ末端またはＣ末端の欠失のいずれかが組み合わせられて、Ｎ末端
またはＣ末端が欠失したＭＥＴＨ１ポリペプチドを生成し得る。配列番号２の特
に好ましいフラグメントは、Ｈ５４２〜Ｑ８９４およびＫ８０１〜Ｓ９５０であ
る。
表され得、ここでｎ1は、２〜９５０の整数であり、ここでｎは、配列番号２に
おいて同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。好ましくは、配列番号２とし
て示される、本発明のＭＥＴＨ１ポリペプチドのＣ末端欠失は、配列番号２の以
下の残基のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む：Ｍ−１〜Ｃ−９４９；Ｍ−
１〜Ｅ−９４８；Ｍ−１〜Ａ−９４７；Ｍ−１〜Ｍ−９４６；Ｍ−１〜Ｔ−９４
５；Ｍ−１〜Ｃ−９４４；Ｍ−１〜Ｆ−９４３；Ｍ−１〜Ｄ−９４２；Ｍ−１〜
Ｉ−９４１；Ｍ−１〜Ｆ−９４０；Ｍ−１〜Ｈ−９３９；Ｍ−１〜Ｋ−９３８；
Ｍ−１〜Ｐ−９３７；Ｍ−１〜Ｋ−９３６；Ｍ−１〜Ｋ−９３５；Ｍ−１〜Ｌ−
９３４；Ｍ−１〜Ｐ−９３３；Ｍ−１〜Ｄ−９３２；Ｍ−１〜Ｃ−９３１；Ｍ−
１〜Ｓ−９３０；Ｍ−１〜Ｅ−９２９；Ｍ−１〜Ｈ−９２８；Ｍ−１〜Ｓ−９２
７；Ｍ−１〜Ｌ−９２６；Ｍ−１〜Ｖ−９２５；Ｍ−１〜Ｇ−９２４；Ｍ−１〜
Ｇ−９２３；Ｍ−１〜Ｄ−９２２；Ｍ−１〜Ｈ−９２１；Ｍ−１〜Ｓ−９２０；
Ｍ−１〜Ｌ−９１９；Ｍ−１〜Ｃ−９１８；Ｍ−１〜Ｋ−９１７；Ｍ−１〜Ｌ−
９１６；Ｍ−１〜Ｓ−９１５；Ｍ−１〜Ｒ−９１４；Ｍ−１〜Ｋ−９１３；Ｍ−
１〜Ｋ−９１２；Ｍ−１〜Ｙ−９１１；Ｍ−１〜Ｇ−９１０；Ｍ−１〜Ｋ−９０
９；Ｍ−１〜Ｇ−９０８；Ｍ−１〜Ｃ−９０７；Ｍ−１〜Ｔ−９０６；Ｍ−１〜
Ｋ−９０５；Ｍ−１〜Ｓ−９０４；Ｍ−１〜Ｃ−９０３；Ｍ−１〜Ｓ−９０２；
Ｍ−１〜Ｓ−９０１；Ｍ−１〜Ｗ−９００；Ｍ−１〜Ｅ−８９９；Ｍ−１〜Ｇ−
８９８；Ｍ−１〜Ｌ−８９７；Ｍ−１〜Ｑ−８９６；Ｍ−１〜Ｗ−８９５；Ｍ−
１〜Ｑ−８９４；Ｍ−１〜Ｐ−８９３；Ｍ−１〜Ｃ−８９２；Ｍ−１〜Ｐ−８９
１；Ｍ−１〜Ｈ−８９０；Ｍ−１〜Ｄ−８８９；Ｍ−１〜Ａ−８８８；Ｍ−１〜
Ｃ−８８７；Ｍ−１〜Ｐ−８８６；Ｍ−１〜Ｒ−８８５；Ｍ−１〜Ｔ−８８４；
Ｍ−１〜Ｓ−８８３；Ｍ−１〜Ａ−８８２；Ｍ−１〜Ｐ−８８１；Ｍ−１〜Ｋ−
８８０；Ｍ−１〜Ｖ−８７９；Ｍ−１〜Ｅ−８７８；Ｍ−１〜Ｋ−８７７；Ｍ−
１〜Ａ−８７６；Ｍ−１〜Ｃ−８７５；Ｍ−１〜Ｅ−８７４；Ｍ−１〜Ｓ−８７
３；Ｍ−１〜Ａ−８７２；Ｍ−１〜Ｐ−８７１；Ｍ−１〜Ｑ−８７０；Ｍ−１〜
Ｇ−８６９；Ｍ−１〜Ｎ−８６８；Ｍ−１〜Ｉ−８６７；Ｍ−１〜Ｄ−８６６；
Ｍ−１〜Ｒ−８６５；Ｍ−１〜Ｃ−８６４；Ｍ−１〜Ｅ−８６３；Ｍ−１〜Ｖ−
８６２；Ｍ−１〜Ｌ−８６１；Ｍ−１〜Ｒ−８６０；Ｍ−１〜Ｒ−８５９；Ｍ−
１〜Ｑ−８５８；Ｍ−１〜Ｗ−８５７；Ｍ−１〜Ｇ−８５６；Ｍ−１〜Ｌ−８５
５；Ｍ−１〜Ｅ−８５４；Ｍ−１〜Ｃ−８５３；Ｍ−１〜Ｓ−８５２；Ｍ−１〜
Ｋ−８５１；Ｍ−１〜Ｓ−８５０；Ｍ−１〜Ｃ−８４９；Ｍ−１〜Ｅ−８４８；
Ｍ−１〜Ｇ−８４７；Ｍ−１〜Ｗ−８４６；Ｍ−１〜Ｅ−８４５；Ｍ−１〜Ｅ−
８４４；Ｍ−１〜Ｉ−８４３；Ｍ−１〜Ｖ−８４２；Ｍ−１〜Ｗ−８４１；Ｍ−
１〜Ａ−８４０；Ｍ−１〜Ｓ−８３９；Ｍ−１〜Ｆ−８３８；Ｍ−１〜Ｔ−８３
７；Ｍ−１〜Ｐ−８３６；Ｍ−１〜Ｉ−８３５；Ｍ−１〜Ａ−８３４；Ｍ−１〜
Ｎ−８３３；Ｍ−１〜Ｆ−８３２；Ｍ−１〜Ｓ−８３１；Ｍ−１〜Ｅ−８３０；
Ｍ−１〜Ｋ−８２９；Ｍ−１〜Ｋ−８２８；Ｍ−１〜Ｋ−８２７；Ｍ−１〜Ｋ−
８２６；Ｍ−１〜Ｖ−８２５；Ｍ−１〜Ｆ−８２４；Ｍ−１〜Ｙ−８２３；Ｍ−
１〜Ｔ−８２２；Ｍ−１〜Ｙ−８２１；Ｍ−１〜Ｋ−８２０；Ｍ−１〜Ｉ−８１
９；Ｍ−１〜Ｋ−８１８；Ｍ−１〜Ｐ−８１７；Ｍ−１〜Ｒ−８１６；Ｍ−１〜
Ｌ−８１５；Ｍ−１〜Ａ−８１４；Ｍ−１〜Ｎ−８１３；Ｍ−１〜Ｇ−８１２；
Ｍ−１〜Ｖ−８１１；Ｍ−１〜Ｔ−８１０；Ｍ−１〜Ｌ−８０９；Ｍ−１〜Ｖ−
８０８；Ｍ−１〜Ｑ−８０７；Ｍ−１〜Ｉ−８０６；Ｍ−１〜Ｔ−８０５；Ｍ−
１〜Ｌ−８０４；Ｍ−１〜Ｐ−８０３；Ｍ−１〜Ｅ−８０２；Ｍ−１〜Ｋ−８０
１；Ｍ−１〜Ｌ−８００；Ｍ−１〜Ｐ−７９９；Ｍ−１〜Ｓ−７９８；Ｍ−１〜
Ｆ−７９７；Ｍ−１〜Ｓ−７９６；Ｍ−１〜Ｒ−７９５；Ｍ−１〜Ｉ−７９４；
Ｍ−１〜Ｒ−７９３；Ｍ−１〜Ｅ−７９２；Ｍ−１〜Ｌ−７９１；Ｍ−１〜Ａ−
７９０；Ｍ−１〜Ａ−７８９；Ｍ−１〜Ｓ−７８８；Ｍ−１〜Ｓ−７８７；Ｍ−
１〜Ｇ−７８６；Ｍ−１〜Ｓ−７８５；Ｍ−１〜Ｙ−７８４；Ｍ−１〜Ｒ−７８
３；Ｍ−１〜Ｌ−７８２；Ｍ−１〜Ｖ−７８１；Ｍ−１〜Ｖ−７８０；Ｍ−１〜
Ｇ−７７９；Ｍ−１〜Ｋ−７７８；Ｍ−１〜Ｙ−７７７；Ｍ−１〜Ｍ−７７６；
Ｍ−１〜Ｉ−７７５；Ｍ−１〜Ｄ−７７４；Ｍ−１〜Ｑ−７７３；Ｍ−１〜Ｅ−
７７２；Ｍ−１〜Ｌ−７７１；Ｍ−１〜Ｔ−７７０；Ｍ−１〜Ｓ−７６９；Ｍ−
１〜Ｌ−７６８；Ｍ−１〜Ｔ−７６７；Ｍ−１〜Ｙ−７６６；Ｍ−１〜Ｄ−７６
５；Ｍ−１〜Ｇ−７６４；Ｍ−１〜Ｎ−７６３；Ｍ−１〜Ｌ−７６２；Ｍ−１〜
Ｉ−７６１；Ｍ−１〜Ｙ−７６０；Ｍ−１〜Ｔ−７５９；Ｍ−１〜Ｇ−７５８；
Ｍ−１〜Ｄ−７５７；Ｍ−１〜Ａ−７５６；Ｍ−１〜Ａ−７５５；Ｍ−１〜Ｋ−
７５４；Ｍ−１〜Ｉ−７５３；Ｍ−１〜Ａ−７５２；Ｍ−１〜Ｌ−７５１；Ｍ−
１〜Ｆ−７５０；Ｍ−１〜Ｓ−７４９；Ｍ−１〜Ｇ−７４８；Ｍ−１〜Ｎ−７４
７；Ｍ−１〜Ｎ−７４６；Ｍ−１〜Ｒ−７４５；Ｍ−１〜Ｓ−７４４；Ｍ−１〜
Ｇ−７４３；Ｍ−１〜Ｒ−７４２；Ｍ−１〜Ｑ−７４１；Ｍ−１〜Ｎ−７４０；
Ｍ−１〜Ｒ−７３９；Ｍ−１〜Ｑ−７３８；Ｍ−１〜Ｋ−７３７；Ｍ−１〜Ｖ−
７３６；Ｍ−１〜Ｅ−７３５；Ｍ−１〜Ｉ−７３４；Ｍ−１〜Ｎ−７３３；Ｍ−
１〜Ｔ−７３２；Ｍ−１〜Ａ−７３１；Ｍ−１〜Ｇ−７３０；Ｍ−１〜Ｔ−７２
９；Ｍ−１〜Ｐ−７２８；Ｍ−１〜Ｉ−７２７；Ｍ−１〜Ｔ−７２６；Ｍ−１〜
Ｉ−７２５；Ｍ−１〜Ｉ−７２４；Ｍ−１〜Ｄ−７２３；Ｍ−１〜Ｈ−７２２；
Ｍ−１〜Ｙ−７２１；Ｍ−１〜Ｇ−７２０；Ｍ−１〜Ｐ−７１９；Ｍ−１〜Ｋ−
７１８；Ｍ−１〜Ａ−７１７；Ｍ−１〜Ｓ−７１６；Ｍ−１〜Ｔ−７１５；Ｍ−
１〜Ｖ−７１４；Ｍ−１〜Ｓ−７１３；Ｍ−１〜Ｇ−７１２；Ｍ−１〜Ｓ−７１
１；Ｍ−１〜Ｉ−７１０；Ｍ−１〜Ｋ−７０９；Ｍ−１〜Ｋ−７０８；Ｍ−１〜
Ｃ−７０７；Ｍ−１〜Ｔ−７０６；Ｍ−１〜Ｓ−７０５；Ｍ−１〜Ｇ−７０４；
Ｍ−１〜Ｎ−７０３；Ｍ−１〜Ｇ−７０２；Ｍ−１〜Ｇ−７０１；Ｍ−１〜Ｃ−
７００；Ｍ−１〜Ｖ−６９９；Ｍ−１〜Ｇ−６９８；Ｍ−１〜Ｃ−６９７；Ｍ−
１〜Ｋ−６９６；Ｍ−１〜Ｄ−６９５；Ｍ−１〜Ｆ−６９４；Ｍ−１〜Ｋ−６９
３；Ｍ−１〜Ｋ−６９２；Ｍ−１〜Ｋ−６９１；Ｍ−１〜Ｓ−６９０；Ｍ−１〜
Ｄ−６８９；Ｍ−１〜Ｉ−６８８；Ｍ−１〜Ｉ−６８７；Ｍ−１〜Ｒ−６８６；
Ｍ−１〜Ｄ−６８５；Ｍ−１〜Ｃ−６８４；Ｍ−１〜Ｇ−６８３；Ｍ−１〜Ａ−
６８２；Ｍ−１〜Ｋ−６８１；Ｍ−１〜Ｖ−６８０；Ｍ−１〜Ｃ−６７９；Ｍ−
１〜Ｑ−６７８；Ｍ−１〜Ｇ−６７７；Ｍ−１〜Ｑ−６７６；Ｍ−１〜Ｖ−６７
５；Ｍ−１〜Ｃ−６７４；Ｍ−１〜Ｖ−６７３；Ｍ−１〜Ｓ−６７２；Ｍ−１〜
Ｔ−６７１；Ｍ−１〜Ｓ−６７０；Ｍ−１〜Ｄ−６６９；Ｍ−１〜Ｐ−６６８；
Ｍ−１〜Ｓ−６６７；Ｍ−１〜Ｃ−６６６；Ｍ−１〜Ｐ−６６５；Ｍ−１〜Ｔ−
６６４；Ｍ−１〜Ｇ−６６３；Ｍ−１〜Ｄ−６６２；Ｍ−１〜Ｖ−６６１；Ｍ−
１〜Ｖ−６６０；Ｍ−１〜Ｋ−６５９；Ｍ−１〜Ｐ−６５８；Ｍ−１〜Ｑ−６５
７；Ｍ−１〜Ｌ−６５６；Ｍ−１〜Ｖ−６５５；Ｍ−１〜Ｆ−６５４；Ｍ−１〜
Ｆ−６５３；Ｍ−１〜Ｙ−６５２；Ｍ−１〜Ｇ−６５１；Ｍ−１〜Ｉ−６５０；
Ｍ−１〜Ｇ−６４９；Ｍ−１〜Ｋ−６４８；Ｍ−１〜Ａ−６４７；Ｍ−１〜Ｑ−
６４６；Ｍ−１〜Ｃ−６４５；Ｍ−１〜Ｉ−６４４；Ｍ−１〜Ｌ−６４３；Ｍ−
１〜Ｋ−６４２；Ｍ−１〜Ｃ−６４１；Ｍ−１〜Ｒ−６４０；Ｍ−１〜Ｄ−６３
９；Ｍ−１〜Ｋ−６３８；Ｍ−１〜Ｐ−６３７；Ｍ−１〜Ｓ−６３６；Ｍ−１〜
Ｖ−６３５；Ｍ−１〜Ｇ−６３４；Ｍ−１〜Ａ−６３３；Ｍ−１〜Ｙ−６３２；
Ｍ−１〜Ｋ−６３１；Ｍ−１〜Ｐ−６３０；Ｍ−１〜Ｉ−６２９；Ｍ−１〜Ｗ−
６２８；Ｍ−１〜Ｅ−６２７；Ｍ−１〜Ｖ−６２６；Ｍ−１〜Ａ−６２５；Ｍ−
１〜Ｐ−６２４；Ｍ−１〜Ｇ−６２３；Ｍ−１〜Ｓ−６２２；Ｍ−１〜Ｇ−６２
１；Ｍ−１〜Ｆ−６２０；Ｍ−１〜Ｓ−６１９；Ｍ−１〜Ａ−６１８；Ｍ−１〜
Ｋ−６１７；Ｍ−１〜Ｓ−６１６；Ｍ−１〜Ｆ−６１５；Ｍ−１〜Ｅ−６１４；
Ｍ−１〜Ｎ−６１３；Ｍ−１〜Ｈ−６１２；Ｍ−１〜Ａ−６１１；Ｍ−１〜Ｅ−
６１０；Ｍ−１〜Ｃ−６０９；Ｍ−１〜Ｑ−６０８；Ｍ−１〜Ｅ−６０７；Ｍ−
１〜Ｅ−６０６；Ｍ−１〜Ｒ−６０５；Ｍ−１〜Ｆ−６０４；Ｍ−１〜Ｔ−６０
３；Ｍ−１〜Ｋ−６０２；Ｍ−１〜Ｇ−６０１；Ｍ−１〜Ｎ−６００；Ｍ−１〜
Ｎ−５９９；Ｍ−１〜Ｄ−５９８；Ｍ−１〜Ｐ−５９７；Ｍ−１〜Ｃ−５９６；
Ｍ−１〜Ｄ−５９５；Ｍ−１〜Ｅ−５９４；Ｍ−１〜Ｌ−５９３；Ｍ−１〜Ｎ−
５９２；Ｍ−１〜Ｃ−５９１；Ｍ−１〜Ｓ−５９０；Ｍ−１〜Ｒ−５８９；Ｍ−
１〜Ｙ−５８８；Ｍ−１〜Ｒ−５８７；Ｍ−１〜Ｖ−５８６；Ｍ−１〜Ｒ−５８
５；Ｍ−１〜Ｋ−５８４；Ｍ−１〜Ｇ−５８３；Ｍ−１〜Ｅ−５８２；Ｍ−１〜
Ｃ−５８１；Ｍ−１〜Ｙ−５８０；Ｍ−１〜Ｋ−５７９；Ｍ−１〜Ｇ−５７８；
Ｍ−１〜Ｇ−５７７；Ｍ−１〜Ｎ−５７６；Ｍ−１〜Ｋ−５７５；Ｍ−１〜Ｐ−
５７４；Ｍ−１〜Ｖ−５７３；Ｍ−１〜Ｐ−５７２；Ｍ−１〜Ｎ−５７１；Ｍ−
１〜Ｄ−５７０；Ｍ−１〜Ｃ−５６９；Ｍ−１〜Ｅ−５６８；Ｍ−１〜Ｒ−５６
７；Ｍ−１〜Ｍ−５６６；Ｍ−１〜Ｔ−５６５；Ｍ−１〜Ｙ−５６４；Ｍ−１〜
Ｑ−５６３；Ｍ−１〜Ｖ−５６２；Ｍ−１〜Ｇ−５６１；Ｍ−１〜Ｇ−５６０；
Ｍ−１〜Ｇ−５５９；Ｍ−１〜Ｃ−５５８；Ｍ−１〜Ｔ−５５７；Ｍ−１〜Ｒ−
５５６；Ｍ−１〜Ｓ−５５５；Ｍ−１〜Ｃ−５５４；Ｍ−１〜Ｄ−５５３；Ｍ−
１〜Ｇ−５５２；Ｍ−１〜Ｗ−５５１；Ｍ−１〜Ｐ−５５０；Ｍ−１〜Ｇ−５４
９；Ｍ−１〜Ｗ−５４８；Ｍ−１〜Ｍ−５４７；Ｍ−１〜Ｇ５４６；Ｍ−１〜Ｗ
−５４５；Ｍ−１〜Ｓ−５４４；Ｍ−１〜Ｇ−５４３；Ｍ−１〜Ｈ−５４２；Ｍ
−１〜Ｆ−５４１；Ｍ−１〜Ｐ−５４０；Ｍ−１〜Ｔ−５３９；Ｍ−１〜Ｄ−５
３８；Ｍ−１〜Ｆ−５３７；Ｍ−１〜Ｈ−５３６；Ｍ−１〜Ｋ−５３５；Ｍ−１
〜Ｒ−５３４；Ｍ−１〜Ｄ−５３３；Ｍ−１〜Ｔ−５３２；Ｍ−１〜Ｋ−５３１
；Ｍ−１〜Ｎ−５３０；Ｍ−１〜Ｖ−５２９；Ｍ−１〜Ｃ−５２８；Ｍ−１〜Ｋ
−５２７；Ｍ−１〜Ｇ−５２６；Ｍ−１〜Ｎ−５２５；Ｍ−１〜Ｉ−５２４；Ｍ
−１〜Ｃ−５２３；Ｍ−１〜Ｗ−５２２；Ｍ−１〜Ｋ−５２１；Ｍ−１〜Ｇ−５
２０；Ｍ−１〜Ｅ−５１９；Ｍ−１〜Ｇ−５１８；Ｍ−１〜Ｃ−５１７；Ｍ−１
〜Ｓ−５１６；Ｍ−１〜Ｔ−５１５；Ｍ−１〜Ｇ−５１４；Ｍ−１〜Ｄ−５１３
；Ｍ−１〜Ａ−５１２；Ｍ−１〜Ｗ−５１１；Ｍ−１〜Ｐ−５１０；Ｍ−１〜Ｆ
−５０９；Ｍ−１〜Ｈ−５０８；Ｍ−１〜Ｋ−５０７；Ｍ−１〜Ｔ−５０６；Ｍ
−１〜Ｑ−５０５；Ｍ−１〜Ｃ−５０４；Ｍ−１〜Ｖ−５０３；Ｍ−１〜Ｌ−５
０２；Ｍ−１〜Ｖ−５０１；Ｍ−１〜Ｇ−５００；Ｍ−１〜Ｇ−４９９；Ｍ−１
〜Ｓ−４９８；Ｍ−１〜Ｔ−４９７；Ｍ−１〜Ｇ−４９６；Ｍ−１〜Ｔ−４９５
；Ｍ−１〜Ｃ−４９４；Ｍ−１〜Ｗ−４９３；Ｍ−１〜Ｌ−４９２；Ｍ−１〜Ｔ
−４９１；Ｍ−１〜Ｓ−４９０；Ｍ−１〜Ｃ−４８９；Ｍ−１〜Ｔ−４８８；Ｍ
−１〜Ｓ−４８７；Ｍ−１〜Ａ−４８６；Ｍ−１〜Ａ−４８５；Ｍ−１〜Ｄ−４
８４；Ｍ−１〜Ｐ−４８３；Ｍ−１〜Ｃ−４８２；Ｍ−１〜Ｈ−４８１；Ｍ−１
〜Ｋ−４８０；Ｍ−１〜Ｓ−４７９；Ｍ−１〜Ｄ−４７８；Ｍ−１〜Ｅ−４７７
；Ｍ−１〜Ｇ−４７６；Ｍ−１〜Ｆ−４７５；Ｍ−１〜Ｔ−４７４；Ｍ−１〜Ｆ
−４７３；Ｍ−１〜Ｑ−４７２；Ｍ−１〜Ｃ−４７１；Ｍ−１〜Ｑ−４７０；Ｍ
−１〜Ｒ−４６９；Ｍ−１〜Ｎ−４６８；Ｍ−１〜Ａ−４６７；Ｍ−１〜Ｄ−４
６６；Ｍ−１〜Ｙ−４６５；Ｍ−１〜Ｓ−４６４；Ｍ−１〜Ｔ−４６３；Ｍ−１
〜Ｇ−４６２；Ｍ−１〜Ｐ−４６１；Ｍ−１〜Ｌ−４６０；Ｍ−１〜Ｄ−４５９
；Ｍ−１〜Ｇ−４５８；Ｍ−１〜Ｐ−４５７；Ｍ−１〜Ｌ−４５６；Ｍ−１〜Ｑ
−４５５；Ｍ−１〜Ｉ−４５４；Ｍ−１〜Ｐ−４５３；Ｍ−１〜Ｎ−４５２；Ｍ
−１〜Ｑ−４５１；Ｍ−１〜Ｐ−４５０；Ｍ−１〜Ｋ−４４９；Ｍ−１〜Ｄ−４
４８；Ｍ−１〜Ｍ−４４７；Ｍ−１〜Ｌ−４４６；Ｍ−１〜Ｃ−４４５；Ｍ−１
〜Ｅ−４４４；Ｍ−１〜Ｇ−４４３；Ｍ−１〜Ｈ−４４２；Ｍ−１〜Ｇ−４４１
；Ｍ−１〜Ｎ−４４０；Ｍ−１〜Ｄ−４３９；Ｍ−１〜Ｌ−４３８；Ｍ−１〜Ｆ
−４３７；Ｍ−１〜Ｓ−４３６；Ｍ−１〜Ｔ−４３５；Ｍ−１〜Ｉ−４３４；Ｍ
−１〜Ｍ−４３３；Ｍ−１〜Ｙ−４３２；Ｍ−１〜Ａ−４３１；Ｍ−１〜Ｓ−４
３０；Ｍ−１〜Ｃ−４２９；Ｍ−１〜Ｐ−４２８；Ｍ−１〜Ｓ−４２７；Ｍ−１
〜Ｗ−４２６；Ｍ−１〜Ｐ−４２５；Ｍ−１〜Ｑ−４２４；Ｍ−１〜Ｓ−４２３
；Ｍ−１〜Ｈ−４２２；Ｍ−１〜Ｄ−４２１；Ｍ−１〜Ｌ−４２０；Ｍ−１〜Ｎ
−４１９；Ｍ−１〜Ｓ−４１８；Ｍ−１〜Ｌ−４１７；Ｍ−１〜Ｍ−４１６；Ｍ
−１〜Ｓ−４１５；Ｍ−１〜Ａ−４１４；Ｍ−１〜Ｍ−４１３；Ｍ−１〜Ｍ−４
１２；Ｍ−１〜Ｈ−４１１；Ｍ−１〜Ｓ−４１０；Ｍ−１〜Ｄ−４０９；Ｍ−１
〜Ｑ−４０８；Ｍ−１〜Ｎ−４０７；Ｍ−１〜Ｖ−４０６；Ｍ−１〜Ｇ４０５；
Ｍ−１〜Ｎ−４０４；Ｍ−１〜Ｌ−４０３；Ｍ−１〜Ｓ−４０２；Ｍ−１〜Ａ−
４０１；Ｍ−１〜Ｃ−４００；Ｍ−１〜Ｑ−３９９；Ｍ−１〜Ｋ−３９８；Ｍ−
１〜Ａ−３９７；Ｍ−１〜Ｄ−３９６；Ｍ−１〜Ｄ−３９５；Ｍ−１〜Ｈ−３９
４；Ｍ−１〜Ｐ−３９３；Ｍ−１〜Ｍ−３９２；Ｍ−１〜Ｎ−３９１；Ｍ−１〜
Ｆ−３９０；Ｍ−１〜Ｖ−３８９；Ｍ−１〜Ｈ−３８８；Ｍ−１〜Ｇ−３８７；
Ｍ−１〜Ｌ−３８６；Ｍ−１〜Ｅ−３８５；Ｍ−１〜Ｈ−３８４；Ｍ−１〜Ａ−
３８３；Ｍ−１〜Ｔ−３８２；Ｍ−１〜Ｔ−３８１；Ｍ−１〜Ｆ−３８０；Ｍ−
１〜Ａ−３７９；Ｍ−１〜Ａ−３７８；Ｍ−１〜Ｑ−３７７；Ｍ−１〜Ｌ−３７
６；Ｍ−１〜Ｇ−３７５；Ｍ−１〜Ｄ−３７４；Ｍ−１〜Ｄ−３７３；Ｍ−１〜
Ｅ−３７２；Ｍ−１〜Ｉ−３７１；Ｍ−１〜Ｖ−３７０；Ｍ−１〜Ｓ−３６９；
Ｍ−１〜Ｃ−３６８；Ｍ−１〜Ｓ−３６７；Ｍ−１〜Ｒ−３６６；Ｍ−１〜Ｓ−
３６５；Ｍ−１〜Ｐ−３６４；Ｍ−１〜Ｄ−３６３；Ｍ−１〜Ｃ−３６２；Ｍ−
１〜Ｖ−３６１；Ｍ−１〜Ｔ−３６０；Ｍ−１〜Ｇ−３５９；Ｍ−１〜Ｖ−３５
８；Ｍ−１〜Ｄ−３５７；Ｍ−１〜Ａ−３５６；Ｍ−１〜Ｍ−３５５；Ｍ−１〜
Ｇ−３５４；Ｍ−１〜Ｌ−３５３；Ｍ−１〜Ｔ−３５２；Ｍ−１〜Ｄ−３５１；
Ｍ−１〜Ｃ−３５０；Ｍ−１〜Ｔ−３４９；Ｍ−１〜Ｑ−３４８；Ｍ−１〜Ｓ−
３４７；Ｍ−１〜Ｇ−３４６；Ｍ−１〜Ｃ−３４５；Ｍ−１〜Ｌ−３４４；Ｍ−
１〜Ｄ−３４３；Ｍ−１〜Ｑ−３４２；Ｍ−１〜Ｒ−３４１；Ｍ−１〜Ｔ−３４
０；Ｍ−１〜Ｆ−３３９；Ｍ−１〜Ｌ−３３８；Ｍ−１〜Ｉ−３３７；Ｍ−１〜
Ａ−３３６；Ｍ−１〜Ｔ−３３５；Ｍ−１〜Ｄ−３３４；Ｍ−１〜Ｙ−３３３；
Ｍ−１〜Ｈ−３３２；Ｍ−１〜Ｅ−３３１；Ｍ−１〜Ａ−３３０；Ｍ−１〜Ｄ−
３２９；Ｍ−１〜Ｒ−３２８；Ｍ−１〜Ｄ−３２７；Ｍ−１〜Ｓ−３２６；Ｍ−
１〜Ｐ−３２５；Ｍ−１〜Ｐ−３２４；Ｍ−１〜Ｎ−３２３；Ｍ−１〜Ｈ−３２
２；Ｍ−１〜Ｑ−３２１；Ｍ−１〜Ｋ−３２０；Ｍ−１〜Ｑ−３１９；Ｍ−１〜
Ｗ−３１８；Ｍ−１〜Ｎ−３１７；Ｍ−１〜Ｃ−３１６；Ｍ−１〜Ｆ−３１５；
Ｍ−１〜Ｎ−３１４；Ｍ−１〜Ｒ−３１３；Ｍ−１〜Ｌ−３１２；Ｍ−１〜Ｔ−
３１１；Ｍ−１〜Ｌ−３１０；Ｍ−１〜Ａ−３０９；Ｍ−１〜Ａ−３０８；Ｍ−
１〜Ｎ−３０７；Ｍ−１〜Ｓ−３０６；Ｍ−１〜Ｔ−３０５；Ｍ−１〜Ｖ−３０
４；Ｍ−１〜Ｅ−３０３；Ｍ−１〜Ｐ−３０２；Ｍ−１〜Ｇ−３０１；Ｍ−１〜
Ｋ−３００；Ｍ−１〜Ｑ−２９９；Ｍ−１〜Ｅ−２９８；Ｍ−１〜Ｄ−２９７；
Ｍ−１〜Ｈ−２９６；Ｍ−１〜Ｉ−２９５；Ｍ−１〜Ｖ−２９４；Ｍ−１〜Ｌ−
２９３；Ｍ−１〜Ｉ−２９２；Ｍ−１〜Ｋ−２９１；Ｍ−１〜Ｖ−２９０；Ｍ−
１〜Ｖ−２８９；Ｍ−１〜Ｖ−２８８；Ｍ−１〜Ｌ−２８７；Ｍ−１〜Ｓ−２８
６；Ｍ−１〜Ｖ−２８５；Ｍ−１〜Ｓ−２８４；Ｍ−１〜Ｎ−２８３；Ｍ−１〜
Ｒ−２８２；Ｍ−１〜Ｉ−２８１；Ｍ−１〜Ｓ−２８０；Ｍ−１〜Ｐ−２７９；
Ｍ−１〜Ｈ−２７８；Ｍ−１〜Ｋ−２７７；Ｍ−１〜Ｙ−２７６；Ｍ−１〜Ｌ−
２７５；Ｍ−１〜Ｒ−２７４；Ｍ−１〜Ａ−２７３；Ｍ−１〜Ａ−２７２；Ｍ−
１〜Ｖ−２７１；Ｍ−１〜Ｓ−２７０；Ｍ−１〜Ｆ−２６９；Ｍ−１〜Ｌ−２６
８；Ｍ−１〜Ｔ−２６７；Ｍ−１〜Ｌ−２６６；Ｍ−１〜Ｌ−２６５；Ｍ−１〜
Ｙ−２６４；Ｍ−１〜Ｈ−２６３；Ｍ−１〜Ｋ−２６２；Ｍ−１〜Ｌ−２６１；
Ｍ−１〜Ｇ−２６０；Ｍ−１〜Ｓ−２５９；Ｍ−１〜Ｇ−２５８；Ｍ−１〜Ｈ−
２５７；Ｍ−１〜Ｆ−２５６；Ｍ−１〜Ｅ−２５５；Ｍ−１〜Ａ−２５４；Ｍ−
１〜Ｍ−２５３；Ｍ−１〜Ｓ−２５２；Ｍ−１〜Ｑ−２５１；Ｍ−１〜Ｄ−２５
０；Ｍ−１〜Ａ−２４９；Ｍ−１〜Ｖ−２４８；Ｍ−１〜Ｌ−２４７；Ｍ−１〜
Ｍ−２４６；Ｍ−１〜Ｔ−２４５；Ｍ−１〜Ｅ−２４４；Ｍ−１〜Ｖ−２４３；
Ｍ−１〜Ｙ−２４２；Ｍ−１〜Ｒ−２４１；Ｍ−１〜Ｈ−２４０；Ｍ−１〜Ｓ−
２３９；Ｍ−１〜Ｓ−２３８；Ｍ−１〜Ｖ−２３７；Ｍ−１〜Ｆ−２３６；Ｍ−
１〜Ｒ−２３５；Ｍ−１〜Ｋ−２３４；Ｍ−１〜Ｋ−２３３；Ｍ−１〜Ｒ−２３
２；Ｍ−１〜Ｉ−２３１；Ｍ−１〜Ｓ−２３０；Ｍ−１〜Ｇ−２２９；Ｍ−１〜
Ｔ−２２８；Ｍ−１〜Ｇ−２２７；Ｍ−１〜Ｔ−２２６；Ｍ−１〜Ｐ−２２５；
Ｍ−１〜Ｑ−２２４；Ｍ−１〜Ｇ−２２３；Ｍ−１〜Ｖ−２２２；Ｍ−１〜Ｇ−
２２１；Ｍ−１〜Ｑ−２２０；Ｍ−１〜Ｌ−２１９；Ｍ−１〜Ａ−２１８；Ｍ−
１〜Ｇ−２１７；Ｍ−１〜Ｄ−２１６；Ｍ−１〜Ｑ−２１５；Ｍ−１〜Ｐ−２１
４；Ｍ−１〜Ｓ−２１３；Ｍ−１〜Ｗ−２１２；Ｍ−１〜Ｑ−２１１；Ｍ−１〜
Ｐ−２１０；Ｍ−１〜Ｇ−２０９；Ｍ−１〜Ｅ−２０８；Ｍ−１〜Ｄ−２０７；
Ｍ−１〜Ｅ−２０６；Ｍ−１〜Ｇ−２５０；Ｍ−１〜Ｅ−２０４；Ｍ−１〜Ｔ−
２０３；Ｍ−１〜Ｇ−２０２；Ｍ−１〜Ｅ−２０１；Ｍ−１〜Ｄ−２００；Ｍ−
１〜Ｅ−１９９；Ｍ−１〜Ｄ−１９８；Ｍ−１〜Ｅ−１９７；Ｍ−１〜Ｔ−１９
６；Ｍ−１〜Ｅ−１９５；Ｍ−１〜Ａ−１９４；Ｍ−１〜Ｋ−１９３；Ｍ−１〜
Ｇ−１９２；Ｍ−１〜Ｔ−１９１；Ｍ−１〜Ｐ−１９０；Ｍ−１〜Ｒ−１８９；
Ｍ−１〜Ｐ−１８８；Ｍ−１〜Ｅ−１８７；Ｍ−１〜Ｄ−１８６；Ｍ−１〜Ｄ−
１８５；Ｍ−１〜Ｖ−１８４；Ｍ−１〜Ｖ−１８３；Ｍ−１〜Ｇ−１８２；Ｍ−
１〜Ｃ−１８１；Ｍ−１〜Ｔ−１８０；Ｍ−１〜Ｇ−１７９；Ｍ−１〜Ｇ−１７
８；Ｍ−１〜Ｖ−１７７；Ｍ−１〜Ｄ−１７６；Ｍ−１〜Ｇ−１７５；Ｍ−１〜
Ｑ−１７４；Ｍ−１〜Ｒ−１７３；Ｍ−１〜Ｎ−１７２；Ｍ−１〜Ｒ−１７１；
Ｍ−１〜Ｒ−１７０；Ｍ−１〜Ｌ−１６９；Ｍ−１〜Ｌ−１６８；Ｍ−１〜Ｈ−
１６７；Ｍ−１〜Ｆ−１６６；Ｍ−１〜Ｑ−１６５；Ｍ−１〜Ｌ−１６４；Ｍ−
１〜Ｐ−１６３；Ｍ−１〜Ａ−１６２；Ｍ−１〜Ｐ−１６１；Ｍ−１〜Ｐ−１６
０；Ｍ−１〜Ｋ−１５９；Ｍ−１〜Ｅ−１５８；Ｍ−１〜Ｇ−１５７；Ｍ−１〜
Ｐ−１５６；Ｍ−１〜Ａ−１５５；Ｍ−１〜Ａ−１５４；Ｍ−１〜Ｔ−１５３；
Ｍ−１〜Ａ−１５２；Ｍ−１〜Ｌ−１５１；Ｍ−１〜Ｒ−１５０；Ｍ−１〜Ｅ−
１４９；Ｍ−１〜Ｓ−１４８；Ｍ−１〜Ａ−１４７；Ｍ−１〜Ａ−１４６；Ｍ−
１〜Ｐ−１４５；Ｍ−１〜Ｌ−１４４；Ｍ−１〜Ｐ−１４３；Ｍ−１〜Ｑ−１４
２；Ｍ−１〜Ｉ−１４１；Ｍ−１〜Ｆ−１４０；Ｍ−１〜Ｙ−１３９；Ｍ−１〜
Ａ−１３８；Ｍ−１〜Ｅ−１３７；Ｍ−１〜Ｇ−１３６；Ｍ−１〜Ｌ−１３５；
Ｍ−１〜Ｌ−１３４；Ｍ−１〜Ｙ−１３３；Ｍ−１〜Ｆ−１３２；Ｍ−１〜Ａ−
１３１；Ｍ−１〜Ｇ−１３０；Ｍ−１〜Ｒ−１２９；Ｍ−１〜Ｖ−１２８；Ｍ−
１〜Ｇ−１２７；Ｍ−１〜Ｅ−１２６；Ｍ−１〜Ｃ−１２５；Ｍ−１〜Ｌ−１２
４；Ｍ−１〜Ｓ−１２３；Ｍ−１〜Ｌ−１２２；Ｍ−１〜Ａ−１２１；Ｍ−１〜
Ａ−１２０；Ｍ−１〜Ａ−１１９；Ｍ−１〜Ｓ−１１８；Ｍ−１〜Ｓ−１１７；
Ｍ−１〜Ｐ−１１６；Ｍ−１〜Ｄ−１１５；Ｍ−１〜Ｇ−１１４；Ｍ−１〜Ｎ−
１１３；Ｍ−１〜Ｖ−１１２；Ｍ−１〜Ｔ−１１１；Ｍ−１〜Ｇ−１１０；Ｍ−
１〜Ｓ−１０９；Ｍ−１〜Ｙ−１０８；Ｍ−１〜Ｆ−１０７；Ｍ−１〜Ｃ−１０
６；Ｍ−１〜Ｈ−１０５；Ｍ−１〜Ａ−１０４；Ｍ−１〜Ｌ−１０３；Ｍ−１〜
Ｄ−１０２；Ｍ−１〜Ｔ−１０１；Ｍ−１〜Ｅ−１００；Ｍ−１〜Ｐ−９９；Ｍ
−１〜Ｌ−９８；Ｍ−１〜Ｐ−９７；Ｍ−１〜Ｔ−９６；Ｍ−１〜Ｅ−９５；Ｍ
−１〜Ｓ−９４；Ｍ−１〜Ｇ−９３；Ｍ−１〜Ｓ−９２；Ｍ−１〜Ｋ−９１；Ｍ
−１〜Ｒ−９０；Ｍ−１〜Ｇ−８９；Ｍ−１〜Ｖ−８８；Ｍ−１〜Ｎ−８７；Ｍ
−１〜Ｑ−８６；Ｍ−１〜Ｌ−８５；Ｍ−１〜Ｔ−８４；Ｍ−１〜Ｆ−８３；Ｍ
−１〜Ｇ−８２；Ｍ−１〜Ｐ−８１；Ｍ−１〜Ａ−８０；Ｍ−１〜Ｌ−７９；Ｍ
−１〜Ｆ−７８；Ｍ−１〜Ｓ−７７；Ｍ−１〜Ｓ−７６；Ｍ−１〜Ｄ−７５；Ｍ
−１〜Ｐ−７４；Ｍ−１〜Ｒ−７３；Ｍ−１〜Ｌ−７２；Ｍ−１〜Ｅ−７１；Ｍ
−１〜Ｌ−７０；Ｍ−１〜Ｄ−６９；Ｍ−１〜Ｌ−６８；Ｍ−１〜Ｑ−６７；Ｍ
−１〜Ｑ−６６；Ｍ−１〜Ｄ−６５；Ｍ−１〜Ｆ−６４；Ｍ−１〜Ａ−６３；Ｍ
−１〜Ｈ−６２；Ｍ−１〜Ｌ−６１；Ｍ−１〜Ｒ−６０；Ｍ−１〜Ｌ−５９；Ｍ
−１〜Ｒ−５８；Ｍ−１〜Ｔ−５７；Ｍ−１〜Ｔ−５６；Ｍ−１〜Ｇ−５５；Ｍ
−１〜Ｈ−５４；Ｍ−１〜Ｇ−５３；Ｍ−１〜Ｐ−５２；Ｍ−１〜Ａ−５１；Ｍ
−１〜Ｒ−５０；Ｍ−１〜Ｅ−４９；Ｍ−１〜Ｌ−４８；Ｍ−１〜Ｅ−４７；Ｍ
−１〜Ｐ−４６；Ｍ−１〜Ｖ−４５；Ｍ−１〜Ｖ−４４；Ｍ−１〜Ｌ−４３；Ｍ
−１〜Ｅ−４２；Ｍ−１〜Ｅ−４１；Ｍ−１〜Ｄ−４０；Ｍ−１〜Ｅ−３９；Ｍ
−１〜Ｅ−３８；Ｍ−１〜Ｓ−３７；Ｍ−１〜Ｐ−３６；Ｍ−１〜Ｒ−３５；Ｍ
−１〜Ｇ−３４；Ｍ−１〜Ｌ−３３；Ｍ−１〜Ａ−３２；Ｍ−１〜Ｄ−３１；Ｍ
−１〜Ｓ−３０；Ｍ−１〜Ｖ−２９；Ｍ−１〜Ａ−２８；Ｍ−１〜Ｌ−２７；Ｍ
−１〜Ｌ−２６；Ｍ−１〜Ａ−２５；Ｍ−１〜Ａ−２４；Ｍ−１〜Ａ−２３；Ｍ
−１〜Ｌ−２２；Ｍ−１〜Ｌ−２１；Ｍ−１〜Ｌ−２０；Ｍ−１〜Ｌ−１９；Ｍ
−１〜Ｔ−１８；Ｍ−１〜Ｐ−１７；Ｍ−１〜Ｖ−１６；Ｍ−１〜Ｐ−１５；Ｍ
−１〜Ｇ−１４；Ｍ−１〜Ｆ−１３；Ｍ−１〜Ｓ−１２；Ｍ−１〜Ｒ−１１；Ｍ
−１〜Ｓ−１０；Ｍ−１〜Ｇ−９；Ｍ−１〜Ｐ−８；Ｍ−１〜Ａ−７。例えば、
上に列挙したＮ末端またはＣ末端の欠失のいずれかが組み合わせられて、Ｎ末端
またはＣ末端が欠失したＭＥＴＨ１ポリペプチドを生成し得る。配列番号２の特
に好ましいフラグメントは、Ｈ５４２〜Ｑ８９４およびＫ８０１〜Ｓ９５０であ
る。
【０１５４】
同様に、配列番号２として示す、本発明のポリペプチドのＣ末端欠失は、配列
番号２の以下の残基のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む：Ｆ−２３６〜Ｓ
−９５０；Ｆ−２３６〜Ｃ−９４９；Ｆ−２３６〜Ｅ−９４８；Ｆ−２３６〜Ａ
−９４７；Ｆ−２３６〜Ｍ−９４６；Ｆ−２３６〜Ｔ−９４５；Ｆ−２３６〜Ｃ
−９４４；Ｆ−２３６〜Ｆ−９４３；Ｆ−２３６〜Ｄ−９４２；Ｆ−２３６〜Ｉ
−９４１；Ｆ−２３６〜Ｆ−９４０；Ｆ−２３６〜Ｈ−９３９；Ｆ−２３６〜Ｋ
−９３８；Ｆ−２３６〜Ｐ−９３７；Ｆ−２３６〜Ｋ−９３６；Ｆ−２３６〜Ｋ
−９３５；Ｆ−２３６〜Ｌ−９３４；Ｆ−２３６〜Ｐ−９３３；Ｆ−２３６〜Ｄ
−９３２；Ｆ−２３６〜Ｃ−９３１；Ｆ−２３６〜Ｓ−９３０；Ｆ−２３６〜Ｅ
９２９；Ｆ−２３６〜Ｈ−９２８；Ｆ−２３６〜Ｓ−９２７；Ｆ−２３６〜Ｌ−
９２６；Ｆ−２３６〜Ｖ−９２５；Ｆ−２３６〜Ｇ−９２４；Ｆ−２３６〜Ｇ−
９２３；Ｆ−２３６〜Ｄ−９２２；Ｆ−２３６〜Ｈ−９２１；Ｆ−２３６〜Ｓ−
９２０；Ｆ−２３６〜Ｌ−９１９；Ｆ−２３６〜Ｃ−９１８；Ｆ−２３６〜Ｋ−
９１７；Ｆ−２３６〜Ｌ−９１６；Ｆ−２３６〜Ｓ−９１５；Ｆ−２３６〜Ｒ−
９１４；Ｆ−２３６〜Ｋ９１３；Ｆ−２３６〜Ｋ−９１２；Ｆ−２３６〜Ｙ−９
１１；Ｆ−２３６〜Ｇ−９１０；Ｆ−２３６〜Ｋ−９０９；Ｆ−２３６〜Ｇ−９
０８；Ｆ−２３６〜Ｃ−９０７；Ｆ−２３６〜Ｔ−９０６；Ｆ−２３６〜Ｋ−９
０５；Ｆ−２３６〜Ｓ−９０４；Ｆ−２３６〜Ｃ−９０３；Ｆ−２３６〜Ｓ−９
０２；Ｆ−２３６〜Ｓ−９０１；Ｆ−２３６〜Ｗ−９００；Ｆ−２３６〜Ｅ−８
９９；Ｆ−２３６〜Ｇ−８９８；Ｆ−２３６〜Ｌ８９７；Ｆ−２３６〜Ｑ−８９
６；Ｆ−２３６〜Ｗ−８９５；Ｆ−２３６〜Ｑ−８９４；Ｆ−２３６〜Ｐ−８９
３；Ｆ−２３６〜Ｃ−８９２；Ｆ−２３６〜Ｐ−８９１；Ｆ−２３６〜Ｈ−８９
０；Ｆ−２３６〜Ｄ−８８９；Ｆ−２３６〜Ａ−８８８；Ｆ−２３６〜Ｃ−８８
７；Ｆ−２３６〜Ｐ−８８６；Ｆ−２３６〜Ｒ−８８５；Ｆ−２３６〜Ｔ−８８
４；Ｆ−２３６〜Ｓ−８８３；Ｆ−２３６〜Ａ−８８２；Ｆ−２３６〜Ｐ−８８
１；Ｆ−２３６〜Ｋ−８８０；Ｆ−２３６〜Ｖ−８７９；Ｆ−２３６〜Ｅ−８７
８；Ｆ−２３６〜Ｋ−８７７；Ｆ−２３６〜Ａ−８７６；Ｆ−２３６〜Ｃ−８７
５；Ｆ−２３６〜Ｅ−８７４；Ｆ−２３６〜Ｓ−８７３；Ｆ−２３６〜Ａ−８７
２；Ｆ−２３６〜Ｐ−８７１；Ｆ−２３６〜Ｑ−８７０；Ｆ−２３６〜Ｇ−８６
９；Ｆ−２３６〜Ｎ−８６８；Ｆ−２３６〜Ｉ−８６７；Ｆ−２３６〜Ｄ−８６
６；Ｆ−２３６〜Ｒ８６５；Ｆ−２３６〜Ｃ−８６４；Ｆ−２３６〜Ｅ−８６３
；Ｆ−２３６〜Ｖ−８６２；Ｆ−２３６〜Ｌ−８６１；Ｆ−２３６〜Ｒ−８６０
；Ｆ−２３６〜Ｒ−８５９；Ｆ−２３６〜Ｑ−８５８；Ｆ−２３６〜Ｗ−８５７
；Ｆ−２３６〜Ｇ−８５６；Ｆ−２３６〜Ｌ−８５５；Ｆ−２３６〜Ｅ−８５４
；Ｆ−２３６〜Ｃ−８５３；Ｆ−２３６〜Ｓ−８５２；Ｆ−２３６〜Ｋ−８５１
；Ｆ−２３６〜Ｓ−８５０；Ｆ−２３６〜Ｃ−８４９；Ｆ−２３６〜Ｅ−８４８
；Ｆ−２３６〜Ｇ−８４７；Ｆ−２３６〜Ｗ−８４６；Ｆ−２３６〜Ｅ−８４５
；Ｆ−２３６〜Ｅ−８４４；Ｆ−２３６〜Ｉ−８４３；Ｆ−２３６〜Ｖ−８４２
；Ｆ−２３６〜Ｗ−８４１；Ｆ−２３６〜Ａ−８４０；Ｆ−２３６〜Ｓ−８３９
；Ｆ−２３６〜Ｆ−８３８；Ｆ−２３６〜Ｔ−８３７；Ｆ−２３６〜Ｐ−８３６
；Ｆ−２３６〜Ｉ−８３５；Ｆ−２３６〜Ａ−８３４；Ｆ−２３６〜Ｎ−８３３
；Ｆ−２３６〜Ｆ−８３２；Ｆ−２３６〜Ｓ−８３１；Ｆ−２３６〜Ｅ−８３０
；Ｆ−２３６〜Ｋ−８２９；Ｆ−２３６〜Ｋ−８２８；Ｆ−２３６〜Ｋ−８２７
；Ｆ−２３６〜Ｋ−８２６；Ｆ−２３６〜Ｖ−８２５；Ｆ−２３６〜Ｆ−８２４
；Ｆ−２３６〜Ｙ−８２３；Ｆ−２３６〜Ｔ−８２２；Ｆ−２３６〜Ｙ−８２１
；Ｆ−２３６〜Ｋ−８２０；Ｆ−２３６〜Ｉ−８１９；Ｆ−２３６〜Ｋ−８１８
；Ｆ−２３６〜Ｐ−８１７；Ｆ−２３６〜Ｒ−８１６；Ｆ−２３６〜Ｌ−８１５
；Ｆ−２３６〜Ａ−８１４；Ｆ−２３６〜Ｎ−８１３；Ｆ−２３６〜Ｇ−８１２
；Ｆ−２３６〜Ｖ−８１１；Ｆ−２３６〜Ｔ−８１０；Ｆ−２３６〜Ｌ−８０９
；Ｆ−２３６〜Ｖ−８０８；Ｆ−２３６〜Ｑ−８０７；Ｆ−２３６〜Ｉ−８０６
；Ｆ−２３６〜Ｔ−８０５；Ｆ−２３６〜Ｌ−８０４；Ｆ−２３６〜Ｐ−８０３
；Ｆ−２３６〜Ｅ−８０２；Ｆ−２３６〜Ｋ−８０１；Ｆ−２３６〜Ｌ−８００
；Ｆ−２３６〜Ｐ−７９９；Ｆ−２３６〜Ｓ−７９８；Ｆ−２３６〜Ｆ−７９７
；Ｆ−２３６〜Ｓ−７９６；Ｆ−２３６〜Ｒ−７９５；Ｆ−２３６〜Ｉ−７９４
；Ｆ−２３６〜Ｒ−７９３；Ｆ−２３６〜Ｅ−７９２；Ｆ−２３６〜Ｌ−７９１
；Ｆ−２３６〜Ａ−７９０；Ｆ−２３６〜Ａ−７８９；Ｆ−２３６〜Ｓ−７８８
；Ｆ−２３６〜Ｓ−７８７；Ｆ−２３６〜Ｇ−７８６；Ｆ−２３６〜Ｓ−７８５
；Ｆ−２３６〜Ｙ−７８４；Ｆ−２３６〜Ｒ−７８３；Ｆ−２３６〜Ｌ−７８２
；Ｆ−２３６〜Ｖ−７８１；Ｆ−２３６〜Ｖ７８０；Ｆ−２３６〜Ｇ−７７９；
Ｆ−２３６〜Ｋ−７７８；Ｆ−２３６〜Ｙ−７７７；Ｆ−２３６〜Ｍ−７７６；
Ｆ−２３６〜Ｉ−７７５；Ｆ−２３６〜Ｄ−７７４；Ｆ−２３６〜Ｑ−７７３；
Ｆ−２３６〜Ｅ−７７２；Ｆ−２３６〜Ｌ−７７１；Ｆ−２３６〜Ｔ−７７０；
Ｆ−２３６〜Ｓ−７６９；Ｆ−２３６〜Ｌ−７６８；Ｆ−２３６〜Ｔ−７６７；
Ｆ−２３６〜Ｙ−７６６；Ｆ−２３６〜Ｄ−７６５；Ｆ−２３６〜Ｇ−７６４；
Ｆ−２３６〜Ｎ−７６３；Ｆ−２３６〜Ｌ−７６２；Ｆ−２３６〜Ｉ−７６１；
Ｆ−２３６〜Ｙ−７６０；Ｆ−２３６〜Ｔ−７５９；Ｆ−２３６〜Ｇ−７５８；
Ｆ−２３６〜Ｄ−７５７；Ｆ−２３６〜Ａ−７５６；Ｆ−２３６〜Ａ−７５５；
Ｆ−２３６〜Ｋ−７５４；Ｆ−２３６〜Ｉ−７５３；Ｆ−２３６〜Ａ−７５２；
Ｆ−２３６〜Ｌ−７５１；Ｆ−２３６〜Ｆ−７５０；Ｆ−２３６〜Ｓ−７４９；
Ｆ−２３６〜Ｇ−７４８；Ｆ−２３６〜Ｎ−７４７；Ｆ−２３６〜Ｎ−７４６；
Ｆ−２３６〜Ｒ−７４５；Ｆ−２３６〜Ｓ−７４４；Ｆ−２３６〜Ｇ−７４３；
Ｆ−２３６〜Ｒ−７４２；Ｆ−２３６〜Ｑ−７４１；Ｆ−２３６〜Ｎ−７４０；
Ｆ−２３６〜Ｒ−７３９；Ｆ−２３６〜Ｑ−７３８；Ｆ−２３６〜Ｋ−７３７；
Ｆ−２３６〜Ｖ−７３６；Ｆ−２３６〜Ｅ−７３５；Ｆ−２３６〜Ｉ−７３４；
Ｆ−２３６〜Ｎ−７３３；Ｆ−２３６〜Ｔ−７３２；Ｆ−２３６〜Ａ−７３１；
Ｆ−２３６〜Ｇ−７３０；Ｆ−２３６〜Ｔ−７２９；Ｆ−２３６〜Ｐ−７２８；
Ｆ−２３６〜Ｉ−７２７；Ｆ−２３６〜Ｔ−７２６；Ｆ−２３６〜Ｉ−７２５；
Ｆ−２３６〜Ｉ−７２４；Ｆ−２３６〜Ｄ−７２３；Ｆ−２３６〜Ｈ−７２２；
Ｆ−２３６〜Ｙ−７２１；Ｆ−２３６〜Ｇ−７２０；Ｆ−２３６〜Ｐ−７１９；
Ｆ−２３６〜Ｋ−７１８；Ｆ−２３６〜Ａ−７１７；Ｆ−２３６〜Ｓ−７１６；
Ｆ−２３６〜Ｔ−７１５；Ｆ−２３６〜Ｖ−７１４；Ｆ−２３６〜Ｓ−７１３；
Ｆ−２３６〜Ｇ−７１２；Ｆ−２３６〜Ｓ−７１１；Ｆ−２３６〜Ｉ−７１０；
Ｆ−２３６〜Ｋ−７０９；Ｆ−２３６〜Ｋ−７０８；Ｆ−２３６〜Ｃ−７０７；
Ｆ−２３６〜Ｔ−７０６；Ｆ−２３６〜Ｓ−７０５；Ｆ−２３６〜Ｇ−７０４；
Ｆ−２３６〜Ｎ−７０３；Ｆ−２３６〜Ｇ−７０２；Ｆ−２３６〜Ｇ−７０１；
Ｆ−２３６〜Ｃ−７００；Ｆ−２３６〜Ｖ−６９９；Ｆ−２３６〜Ｇ−６９８；
Ｆ−２３６〜Ｃ−６９７；Ｆ−２３６〜Ｋ−６９６；Ｆ−２３６〜Ｄ−６９５；
Ｆ−２３６〜Ｆ−６９４；Ｆ−２３６〜Ｋ−６９３；Ｆ−２３６〜Ｋ−６９２；
Ｆ−２３６〜Ｋ−６９１；Ｆ−２３６〜Ｓ−６９０；Ｆ−２３６〜Ｄ−６８９；
Ｆ−２３６〜Ｉ−６８８；Ｆ−２３６〜Ｉ−６８７；Ｆ−２３６〜Ｒ−６８６；
Ｆ−２３６〜Ｄ−６８５；Ｆ−２３６〜Ｃ−６８４；Ｆ−２３６〜Ｇ−６８３；
Ｆ−２３６〜Ａ−６８２；Ｆ−２３６〜Ｋ−６８１；Ｆ−２３６〜Ｖ−６８０；
Ｆ−２３６〜Ｃ−６７９；Ｆ−２３６〜Ｑ−６７８；Ｆ−２３６〜Ｇ−６７７；
Ｆ−２３６〜Ｑ−６７６；Ｆ−２３６〜Ｖ−６７５；Ｆ−２３６〜Ｃ−６７４；
Ｆ−２３６〜Ｖ−６７３；Ｆ−２３６〜Ｓ−６７２；Ｆ−２３６〜Ｔ−６７１；
Ｆ−２３６〜Ｓ−６７０；Ｆ−２３６〜Ｄ−６６９；Ｆ−２３６〜Ｐ−６６８；
Ｆ−２３６〜Ｓ−６６７；Ｆ−２３６〜Ｃ−６６６；Ｆ−２３６〜Ｐ−６６５；
Ｆ−２３６〜Ｔ−６６４；Ｆ−２３６〜Ｇ−６６３；Ｆ−２３６〜Ｄ−６６２；
Ｆ−２３６〜Ｖ−６６１；Ｆ−２３６〜Ｖ−６６０；Ｆ−２３６〜Ｋ−６５９；
Ｆ−２３６〜Ｐ−６５８；Ｆ−２３６〜Ｑ−６５７；Ｆ−２３６〜Ｌ−６５６；
Ｆ−２３６〜Ｖ−６５５；Ｆ−２３６〜Ｆ−６５４；Ｆ−２３６〜Ｆ−６５３；
Ｆ−２３６〜Ｙ−６５２；Ｆ−２３６〜Ｇ−６５１；Ｆ−２３６〜Ｉ−６５０；
Ｆ−２３６〜Ｇ−６４９；Ｆ−２３６〜Ｋ−６４８；Ｆ−２３６〜Ａ−６４７；
Ｆ−２３６〜Ｑ−６４６；Ｆ−２３６〜Ｃ−６４５；Ｆ−２３６〜Ｉ−６４４；
Ｆ−２３６〜Ｌ−６４３；Ｆ−２３６〜Ｋ−６４２；Ｆ−２３６〜Ｃ−６４１；
Ｆ−２３６〜Ｒ−６４０；Ｆ−２３６〜Ｄ−６３９；Ｆ−２３６〜Ｋ−６３８；
Ｆ−２３６〜Ｐ−６３７；Ｆ−２３６〜Ｓ−６３６；Ｆ−２３６〜Ｖ−６３５；
Ｆ−２３６〜Ｇ−６３４；Ｆ−２３６〜Ａ−６３３；Ｆ−２３６〜Ｙ−６３２；
Ｆ−２３６〜Ｋ−６３１；Ｆ−２３６〜Ｐ−６３０；Ｆ−２３６〜Ｉ−６２９；
Ｆ−２３６〜Ｗ−６２８；Ｆ−２３６〜Ｅ−６２７；Ｆ−２３６〜Ｖ−６２６；
Ｆ−２３６〜Ａ−６２５；Ｆ−２３６〜Ｐ−６２４；Ｆ−２３６〜Ｇ−６２３；
Ｆ−２３６〜Ｓ−６２２；Ｆ−２３６〜Ｇ−６２１；Ｆ−２３６〜Ｆ−６２０；
Ｆ−２３６〜Ｓ−６１９；Ｆ−２３６〜Ａ−６１８；Ｆ−２３６〜Ｋ−６１７；
Ｆ−２３６〜Ｓ−６１６；Ｆ−２３６〜Ｆ−６１５；Ｆ−２３６〜Ｅ−６１４；
Ｆ−２３６〜Ｎ−６１３；Ｆ−２３６〜Ｈ−６１２；Ｆ−２３６〜Ａ−６１１；
Ｆ−２３６〜Ｅ−６１０；Ｆ−２３６〜Ｃ−６０９；Ｆ−２３６〜Ｑ−６０８；
Ｆ−２３６〜Ｅ−６０７；Ｆ−２３６〜Ｅ−６０６；Ｆ−２３６〜Ｒ−６０５；
Ｆ−２３６〜Ｆ−６０４；Ｆ−２３６〜Ｔ−６０３；Ｆ−２３６〜Ｋ−６０２；
Ｆ−２３６〜Ｇ−６０１；Ｆ−２３６〜Ｎ−６００；Ｆ−２３６〜Ｎ−５９９；
Ｆ−２３６〜Ｄ−５９８；Ｆ−２３６〜Ｐ−５９７；Ｆ−２３６〜Ｃ−５９６；
Ｆ−２３６〜Ｄ−５９５；Ｆ−２３６〜Ｅ−５９４；Ｆ−２３６〜Ｌ−５９３；
Ｆ−２３６〜Ｎ−５９２；Ｆ−２３６〜Ｃ−５９１；Ｆ−２３６〜Ｓ−５９０；
Ｆ−２３６〜Ｒ−５８９；Ｆ−２３６〜Ｙ−５８８；Ｆ−２３６〜Ｒ−５８７；
Ｆ−２３６〜Ｖ−５８６；Ｆ−２３６〜Ｒ−５８５；Ｆ−２３６〜Ｋ−５８４；
Ｆ−２３６〜Ｇ−５８３；Ｆ−２３６〜Ｅ−５８２；Ｆ−２３６〜Ｃ−５８１；
Ｆ−２３６〜Ｙ−５８０；Ｆ−２３６〜Ｋ−５７９；Ｆ−２３６〜Ｇ−５７８；
Ｆ−２３６〜Ｇ−５７７；Ｆ−２３６〜Ｎ−５７６；Ｆ−２３６〜Ｋ−５７５；
Ｆ−２３６〜Ｐ−５７４；Ｆ−２３６〜Ｖ−５７３；Ｆ−２３６〜Ｐ−５７２；
Ｆ−２３６〜Ｎ−５７１；Ｆ−２３６〜Ｄ−５７０；Ｆ−２３６〜Ｃ−５６９；
Ｆ−２３６〜Ｅ−５６８；Ｆ−２３６〜Ｒ−５６７；Ｆ−２３６〜Ｍ−５６６；
Ｆ−２３６〜Ｔ−５６５；Ｆ−２３６〜Ｙ−５６４；Ｆ−２３６〜Ｑ−５６３；
Ｆ−２３６〜Ｖ−５６２；Ｆ−２３６〜Ｇ−５６１；Ｆ−２３６〜Ｇ−５６０；
Ｆ−２３６〜Ｇ−５５９；Ｆ−２３６〜Ｃ−５５８；Ｆ−２３６〜Ｔ−５５７；
Ｆ−２３６〜Ｒ−５５６；Ｆ−２３６〜Ｓ−５５５；Ｆ−２３６〜Ｃ−５５４；
Ｆ−２３６〜Ｄ−５５３；Ｆ−２３６〜Ｇ−５５２；Ｆ−２３６〜Ｗ−５５１；
Ｆ−２３６〜Ｐ−５５０；Ｆ−２３６〜Ｇ−５４９；Ｆ−２３６〜Ｗ−５４８；
Ｆ−２３６〜Ｍ−５４７；Ｆ−２３６〜Ｇ−５４６；Ｆ−２３６〜Ｗ−５４５；
Ｆ−２３６〜Ｓ−５４４；Ｆ−２３６〜Ｇ−５４３；Ｆ−２３６〜Ｈ−５４２；
Ｆ−２３６〜Ｆ−５４１；Ｆ−２３６〜Ｐ−５４０；Ｆ−２３６〜Ｔ−５３９；
Ｆ−２３６〜Ｄ−５３８；Ｆ−２３６〜Ｆ−５３７；Ｆ−２３６〜Ｈ−５３６；
Ｆ−２３６〜Ｋ−５３５；Ｆ−２３６〜Ｒ−５３４；Ｆ−２３６〜Ｄ−５３３；
Ｆ−２３６〜Ｔ−５３２；Ｆ−２３６〜Ｋ−５３１；Ｆ−２３６〜Ｎ−５３０；
Ｆ−２３６〜Ｖ−５２９；Ｆ−２３６〜Ｃ−５２８；Ｆ−２３６〜Ｋ−５２７；
Ｆ−２３６〜Ｇ−５２６；Ｆ−２３６〜Ｎ−５２５；Ｆ−２３６〜Ｉ−５２４；
Ｆ−２３６〜Ｃ−５２３；Ｆ−２３６〜Ｗ−５２２；Ｆ−２３６〜Ｋ−５２１；
Ｆ−２３６〜Ｇ−５２０；Ｆ−２３６〜Ｅ−５１９；Ｆ−２３６〜Ｇ−５１８；
Ｆ−２３６〜Ｃ−５１７；Ｆ−２３６〜Ｓ−５１６；Ｆ−２３６〜Ｔ−５１５；
Ｆ−２３６〜Ｇ−５１４；Ｆ−２３６〜Ｄ−５１３；Ｆ−２３６〜Ａ−５１２；
Ｆ−２３６〜Ｗ−５１１；Ｆ−２３６〜Ｐ−５１０；Ｆ−２３６〜Ｆ−５０９；
Ｆ−２３６〜Ｈ−５０８；Ｆ−２３６〜Ｋ−５０７；Ｆ−２３６〜Ｔ−５０６；
Ｆ−２３６〜Ｑ−５０５；Ｆ−２３６〜Ｃ−５０４；Ｆ−２３６〜Ｖ−５０３；
Ｆ−２３６〜Ｌ−５０２；Ｆ−２３６〜Ｖ−５０１；Ｆ−２３６〜Ｇ−５００；
Ｆ−２３６〜Ｇ−４９９；Ｆ−２３６〜Ｓ−４９８；Ｆ−２３６〜Ｔ−４９７；
Ｆ−２３６〜Ｇ−４９６；Ｆ−２３６〜Ｔ−４９５；Ｆ−２３６〜Ｃ−４９４；
Ｆ−２３６〜Ｗ−４９３；Ｆ−２３６〜Ｌ−４９２；Ｆ−２３６〜Ｔ−４９１；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４９０；Ｆ−２３６〜Ｃ−４８９；Ｆ−２３６〜Ｔ−４８８；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４８７；Ｆ−２３６〜Ａ−４８６；Ｆ−２３６〜Ａ−４８５；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４８４；Ｆ−２３６〜Ｐ−４８３；Ｆ−２３６〜Ｃ−４８２；
Ｆ−２３６〜Ｈ−４８１；Ｆ−２３６〜Ｋ−４８０；Ｆ−２３６〜Ｓ−４７９；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４７８；Ｆ−２３６〜Ｅ−４７７；Ｆ−２３６〜Ｇ−４７６；
Ｆ−２３６〜Ｆ−４７５；Ｆ−２３６〜Ｔ−４７４；Ｆ−２３６〜Ｆ−４７３；
Ｆ−２３６〜Ｑ−４７２；Ｆ−２３６〜Ｃ−４７１；Ｆ−２３６〜Ｑ−４７０；
Ｆ−２３６〜Ｒ−４６９；Ｆ−２３６〜Ｎ−４６８；Ｆ−２３６〜Ａ−４６７；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４６６；Ｆ−２３６〜Ｙ−４６５；Ｆ−２３６〜Ｓ−４６４；
Ｆ−２３６〜Ｔ−４６３；Ｆ−２３６〜Ｇ−４６２；Ｆ−２３６〜Ｐ−４６１；
Ｆ−２３６〜Ｌ−４６０；Ｆ−２３６〜Ｄ−４５９；Ｆ−２３６〜Ｇ−４５８；
Ｆ−２３６〜Ｐ−４５７；Ｆ−２３６〜Ｌ−４５６；Ｆ−２３６〜Ｑ−４５５；
Ｆ−２３６〜Ｉ−４５４；Ｆ−２３６〜Ｐ−４５３；Ｆ−２３６〜Ｎ−４５２；
Ｆ−２３６〜Ｑ−４５１；Ｆ−２３６〜Ｐ−４５０；Ｆ−２３６〜Ｋ−４４９；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４４８；Ｆ−２３６〜Ｍ−４４７；Ｆ−２３６〜Ｌ−４４６；
Ｆ−２３６〜Ｃ−４４５；Ｆ−２３６〜Ｅ−４４４；Ｆ−２３６〜Ｇ−４４３；
Ｆ−２３６〜Ｈ−４４２；Ｆ−２３６〜Ｇ−４４１；Ｆ−２３６〜Ｎ−４４０；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４３９；Ｆ−２３６〜Ｌ−４３８；Ｆ−２３６〜Ｆ−４３７；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４３６；Ｆ−２３６〜Ｔ−４３５；Ｆ−２３６〜Ｉ−４３４；
Ｆ−２３６〜Ｍ−４３３；Ｆ−２３６〜Ｙ−４３２；Ｆ−２３６〜Ａ−４３１；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４３０；Ｆ−２３６〜Ｃ−４２９；Ｆ−２３６〜Ｐ−４２８；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４２７；Ｆ−２３６〜Ｗ−４２６；Ｆ−２３６〜Ｐ−４２５；
Ｆ−２３６〜Ｑ−４２４；Ｆ−２３６〜Ｓ−４２３；Ｆ−２３６〜Ｈ−４２２；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４２１；Ｆ−２３６〜Ｌ−４２０；Ｆ−２３６〜Ｎ−４１９；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４１８；Ｆ−２３６〜Ｌ−４１７；Ｆ−２３６〜Ｍ−４１６；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４１５；Ｆ−２３６〜Ａ−４１４；Ｆ−２３６〜Ｍ−４１３；
Ｆ−２３６〜Ｍ−４１２；Ｆ−２３６〜Ｈ−４１１；Ｆ−２３６〜Ｓ−４１０；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４０９；Ｆ−２３６〜Ｑ−４０８；Ｆ−２３６〜Ｎ−４０７；
Ｆ−２３６〜Ｖ−４０６；Ｆ−２３６〜Ｇ−４０５；Ｆ−２３６〜Ｎ−４０４；
Ｆ−２３６〜Ｌ−４０３；Ｆ−２３６〜Ｓ−４０２；Ｆ−２３６〜Ａ−４０１；
Ｆ−２３６〜Ｃ−４００；Ｆ−２３６〜Ｑ−３９９；Ｆ−２３６〜Ｋ−３９８；
Ｆ−２３６〜Ａ−３９７；Ｆ−２３６〜Ｄ−３９６；Ｆ−２３６〜Ｄ−３９５；
Ｆ−２３６〜Ｈ−３９４；Ｆ−２３６〜Ｐ−３９３；Ｆ−２３６〜Ｍ−３９２；
Ｆ−２３６〜Ｎ−３９１；Ｆ−２３６〜Ｆ−３９０；Ｆ−２３６〜Ｖ−３８９；
Ｆ−２３６〜Ｈ−３８８；Ｆ−２３６〜Ｇ−３８７；Ｆ−２３６〜Ｌ−３８６；
Ｆ−２３６〜Ｅ−３８５；Ｆ−２３６〜Ｈ−３８４；Ｆ−２３６〜Ａ−３８３；
Ｆ−２３６〜Ｔ−３８２；Ｆ−２３６〜Ｔ−３８１；Ｆ−２３６〜Ｆ−３８０；
Ｆ−２３６〜Ａ−３７９；Ｆ−２３６〜Ａ−３７８；Ｆ−２３６〜Ｑ−３７７；
Ｆ−２３６〜Ｌ−３７６；Ｆ−２３６〜Ｇ−３７５；Ｆ−２３６〜Ｄ−３７４；
Ｆ−２３６〜Ｄ−３７３；Ｆ−２３６〜Ｅ−３７２；Ｆ−２３６〜Ｉ−３７１；
Ｆ−２３６〜Ｖ−３７０；Ｆ−２３６〜Ｓ−３６９；Ｆ−２３６〜Ｃ−３６８；
Ｆ−２３６〜Ｓ−３６７；Ｆ−２３６〜Ｒ−３６６；Ｆ−２３６〜Ｓ−３６５；
Ｆ−２３６〜Ｐ−３６４；Ｆ−２３６〜Ｄ−３６３；Ｆ−２３６〜Ｃ−３６２；
Ｆ−２３６〜Ｖ−３６１；Ｆ−２３６〜Ｔ−３６０；Ｆ−２３６〜Ｇ−３５９；
Ｆ−２３６〜Ｖ−３５８；Ｆ−２３６〜Ｄ−３５７；Ｆ−２３６〜Ａ−３５６；
Ｆ−２３６〜Ｍ−３５５；Ｆ−２３６〜Ｇ−３５４；Ｆ−２３６〜Ｌ−３５３；
Ｆ−２３６〜Ｔ−３５２；Ｆ−２３６〜Ｄ−３５１；Ｆ−２３６〜Ｃ−３５０；
Ｆ−２３６〜Ｔ−３４９；Ｆ−２３６〜Ｑ−３４８；Ｆ−２３６〜Ｓ−３４７；
Ｆ−２３６〜Ｇ−３４６；Ｆ−２３６〜Ｃ−３４５；Ｆ−２３６〜Ｌ−３４４；
Ｆ−２３６〜Ｄ−３４３；Ｆ−２３６〜Ｑ−３４２；Ｆ−２３６〜Ｒ−３４１；
Ｆ−２３６〜Ｔ−３４０；Ｆ−２３６〜Ｆ−３３９；Ｆ−２３６〜Ｌ−３３８；
Ｆ−２３６〜Ｉ−３３７；Ｆ−２３６〜Ａ−３３６；Ｆ−２３６〜Ｔ−３３５；
Ｆ−２３６〜Ｄ−３３４；Ｆ−２３６〜Ｙ−３３３；Ｆ−２３６〜Ｈ−３３２；
Ｆ−２３６〜Ｅ−３３１；Ｆ−２３６〜Ａ−３３０；Ｆ−２３６〜Ｄ−３２９；
Ｆ−２３６〜Ｒ−３２８；Ｆ−２３６〜Ｄ−３２７；Ｆ−２３６〜Ｓ−３２６；
Ｆ−２３６〜Ｐ−３２５；Ｆ−２３６〜Ｐ−３２４；Ｆ−２３６〜Ｎ−３２３；
Ｆ−２３６〜Ｈ−３２２；Ｆ−２３６〜Ｑ−３２１；Ｆ−２３６〜Ｋ−３２０；
Ｆ−２３６〜Ｑ−３１９；Ｆ−２３６〜Ｗ−３１８；Ｆ−２３６〜Ｎ−３１７；
Ｆ−２３６〜Ｃ−３１６；Ｆ−２３６〜Ｆ−３１５；Ｆ−２３６〜Ｎ−３１４；
Ｆ−２３６〜Ｒ−３１３；Ｆ−２３６〜Ｌ−３１２；Ｆ−２３６〜Ｔ−３１１；
Ｆ−２３６〜Ｌ−３１０；Ｆ−２３６〜Ａ−３０９；Ｆ−２３６〜Ａ−３０８；
Ｆ−２３６〜Ｎ−３０７；Ｆ−２３６〜Ｓ−３０６；Ｆ−２３６〜Ｔ−３０５；
Ｆ−２３６〜Ｖ−３０４；Ｆ−２３６〜Ｅ−３０３；Ｆ−２３６〜Ｐ−３０２；
Ｆ−２３６〜Ｇ−３０１；Ｆ−２３６〜Ｋ−３００；Ｆ−２３６〜Ｑ−２９９；
Ｆ−２３６〜Ｅ−２９８；Ｆ−２３６〜Ｄ−２９７；Ｆ−２３６〜Ｈ−２９６；
Ｆ−２３６〜Ｉ−２９５；Ｆ−２３６〜Ｖ−２９４；Ｆ−２３６〜Ｌ−２９３；
Ｆ−２３６〜Ｉ−２９２；Ｆ−２３６〜Ｋ−２９１；Ｆ−２３６〜Ｖ−２９０；
Ｆ−２３６〜Ｖ−２８９；Ｆ−２３６〜Ｖ−２８８；Ｆ−２３６〜Ｌ−２８７；
Ｆ−２３６〜Ｓ−２８６；Ｆ−２３６〜Ｖ−２８５；Ｆ−２３６〜Ｓ−２８４；
Ｆ−２３６〜Ｎ−２８３；Ｆ−２３６〜Ｒ−２８２；Ｆ−２３６〜Ｉ−２８１；
Ｆ−２３６〜Ｓ−２８０；Ｆ−２３６〜Ｐ−２７９；Ｆ−２３６〜Ｈ−２７８；
Ｆ−２３６〜Ｋ−２７７；Ｆ−２３６〜Ｙ−２７６；Ｆ−２３６〜Ｌ−２７５；
Ｆ−２３６〜Ｒ−２７４；Ｆ−２３６〜Ａ−２７３；Ｆ−２３６〜Ａ−２７２；
Ｆ−２３６〜Ｖ−２７１；Ｆ−２３６〜Ｓ−２７０；Ｆ−２３６〜Ｆ−２６９；
Ｆ−２３６〜Ｌ−２６８；Ｆ−２３６〜Ｔ−２６７；Ｆ−２３６〜Ｌ−２６６；
Ｆ−２３６〜Ｌ−２６５；Ｆ−２３６〜Ｙ−２６４；Ｆ−２３６〜Ｈ−２６３；
Ｆ−２３６〜Ｋ−２６２；Ｆ−２３６〜Ｌ−２６１；Ｆ−２３６〜Ｇ−２６０；
Ｆ−２３６〜Ｓ−２５９；Ｆ−２３６〜Ｇ−２５８；Ｆ−２３６〜Ｈ−２５７；
Ｆ−２３６〜Ｆ−２５６；Ｆ−２３６〜Ｅ−２５５；Ｆ−２３６〜Ａ−２５４；
Ｆ−２３６〜Ｍ−２５３；Ｆ−２３６〜Ｓ−２５２；Ｆ−２３６〜Ｑ−２５１；
Ｆ−２３６〜Ｄ−２５０；Ｆ−２３６〜Ａ−２４９；Ｆ−２３６〜Ｖ−２４８；
Ｆ−２３６〜Ｌ−２４７；Ｆ−２３６〜Ｍ−２４６；Ｆ−２３６〜Ｔ−２４５；
Ｆ−２３６〜Ｅ−２４４；Ｆ−２３６〜Ｖ２４３；および／またはＦ−２３６〜
Ｙ−２４２。
番号２の以下の残基のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む：Ｆ−２３６〜Ｓ
−９５０；Ｆ−２３６〜Ｃ−９４９；Ｆ−２３６〜Ｅ−９４８；Ｆ−２３６〜Ａ
−９４７；Ｆ−２３６〜Ｍ−９４６；Ｆ−２３６〜Ｔ−９４５；Ｆ−２３６〜Ｃ
−９４４；Ｆ−２３６〜Ｆ−９４３；Ｆ−２３６〜Ｄ−９４２；Ｆ−２３６〜Ｉ
−９４１；Ｆ−２３６〜Ｆ−９４０；Ｆ−２３６〜Ｈ−９３９；Ｆ−２３６〜Ｋ
−９３８；Ｆ−２３６〜Ｐ−９３７；Ｆ−２３６〜Ｋ−９３６；Ｆ−２３６〜Ｋ
−９３５；Ｆ−２３６〜Ｌ−９３４；Ｆ−２３６〜Ｐ−９３３；Ｆ−２３６〜Ｄ
−９３２；Ｆ−２３６〜Ｃ−９３１；Ｆ−２３６〜Ｓ−９３０；Ｆ−２３６〜Ｅ
９２９；Ｆ−２３６〜Ｈ−９２８；Ｆ−２３６〜Ｓ−９２７；Ｆ−２３６〜Ｌ−
９２６；Ｆ−２３６〜Ｖ−９２５；Ｆ−２３６〜Ｇ−９２４；Ｆ−２３６〜Ｇ−
９２３；Ｆ−２３６〜Ｄ−９２２；Ｆ−２３６〜Ｈ−９２１；Ｆ−２３６〜Ｓ−
９２０；Ｆ−２３６〜Ｌ−９１９；Ｆ−２３６〜Ｃ−９１８；Ｆ−２３６〜Ｋ−
９１７；Ｆ−２３６〜Ｌ−９１６；Ｆ−２３６〜Ｓ−９１５；Ｆ−２３６〜Ｒ−
９１４；Ｆ−２３６〜Ｋ９１３；Ｆ−２３６〜Ｋ−９１２；Ｆ−２３６〜Ｙ−９
１１；Ｆ−２３６〜Ｇ−９１０；Ｆ−２３６〜Ｋ−９０９；Ｆ−２３６〜Ｇ−９
０８；Ｆ−２３６〜Ｃ−９０７；Ｆ−２３６〜Ｔ−９０６；Ｆ−２３６〜Ｋ−９
０５；Ｆ−２３６〜Ｓ−９０４；Ｆ−２３６〜Ｃ−９０３；Ｆ−２３６〜Ｓ−９
０２；Ｆ−２３６〜Ｓ−９０１；Ｆ−２３６〜Ｗ−９００；Ｆ−２３６〜Ｅ−８
９９；Ｆ−２３６〜Ｇ−８９８；Ｆ−２３６〜Ｌ８９７；Ｆ−２３６〜Ｑ−８９
６；Ｆ−２３６〜Ｗ−８９５；Ｆ−２３６〜Ｑ−８９４；Ｆ−２３６〜Ｐ−８９
３；Ｆ−２３６〜Ｃ−８９２；Ｆ−２３６〜Ｐ−８９１；Ｆ−２３６〜Ｈ−８９
０；Ｆ−２３６〜Ｄ−８８９；Ｆ−２３６〜Ａ−８８８；Ｆ−２３６〜Ｃ−８８
７；Ｆ−２３６〜Ｐ−８８６；Ｆ−２３６〜Ｒ−８８５；Ｆ−２３６〜Ｔ−８８
４；Ｆ−２３６〜Ｓ−８８３；Ｆ−２３６〜Ａ−８８２；Ｆ−２３６〜Ｐ−８８
１；Ｆ−２３６〜Ｋ−８８０；Ｆ−２３６〜Ｖ−８７９；Ｆ−２３６〜Ｅ−８７
８；Ｆ−２３６〜Ｋ−８７７；Ｆ−２３６〜Ａ−８７６；Ｆ−２３６〜Ｃ−８７
５；Ｆ−２３６〜Ｅ−８７４；Ｆ−２３６〜Ｓ−８７３；Ｆ−２３６〜Ａ−８７
２；Ｆ−２３６〜Ｐ−８７１；Ｆ−２３６〜Ｑ−８７０；Ｆ−２３６〜Ｇ−８６
９；Ｆ−２３６〜Ｎ−８６８；Ｆ−２３６〜Ｉ−８６７；Ｆ−２３６〜Ｄ−８６
６；Ｆ−２３６〜Ｒ８６５；Ｆ−２３６〜Ｃ−８６４；Ｆ−２３６〜Ｅ−８６３
；Ｆ−２３６〜Ｖ−８６２；Ｆ−２３６〜Ｌ−８６１；Ｆ−２３６〜Ｒ−８６０
；Ｆ−２３６〜Ｒ−８５９；Ｆ−２３６〜Ｑ−８５８；Ｆ−２３６〜Ｗ−８５７
；Ｆ−２３６〜Ｇ−８５６；Ｆ−２３６〜Ｌ−８５５；Ｆ−２３６〜Ｅ−８５４
；Ｆ−２３６〜Ｃ−８５３；Ｆ−２３６〜Ｓ−８５２；Ｆ−２３６〜Ｋ−８５１
；Ｆ−２３６〜Ｓ−８５０；Ｆ−２３６〜Ｃ−８４９；Ｆ−２３６〜Ｅ−８４８
；Ｆ−２３６〜Ｇ−８４７；Ｆ−２３６〜Ｗ−８４６；Ｆ−２３６〜Ｅ−８４５
；Ｆ−２３６〜Ｅ−８４４；Ｆ−２３６〜Ｉ−８４３；Ｆ−２３６〜Ｖ−８４２
；Ｆ−２３６〜Ｗ−８４１；Ｆ−２３６〜Ａ−８４０；Ｆ−２３６〜Ｓ−８３９
；Ｆ−２３６〜Ｆ−８３８；Ｆ−２３６〜Ｔ−８３７；Ｆ−２３６〜Ｐ−８３６
；Ｆ−２３６〜Ｉ−８３５；Ｆ−２３６〜Ａ−８３４；Ｆ−２３６〜Ｎ−８３３
；Ｆ−２３６〜Ｆ−８３２；Ｆ−２３６〜Ｓ−８３１；Ｆ−２３６〜Ｅ−８３０
；Ｆ−２３６〜Ｋ−８２９；Ｆ−２３６〜Ｋ−８２８；Ｆ−２３６〜Ｋ−８２７
；Ｆ−２３６〜Ｋ−８２６；Ｆ−２３６〜Ｖ−８２５；Ｆ−２３６〜Ｆ−８２４
；Ｆ−２３６〜Ｙ−８２３；Ｆ−２３６〜Ｔ−８２２；Ｆ−２３６〜Ｙ−８２１
；Ｆ−２３６〜Ｋ−８２０；Ｆ−２３６〜Ｉ−８１９；Ｆ−２３６〜Ｋ−８１８
；Ｆ−２３６〜Ｐ−８１７；Ｆ−２３６〜Ｒ−８１６；Ｆ−２３６〜Ｌ−８１５
；Ｆ−２３６〜Ａ−８１４；Ｆ−２３６〜Ｎ−８１３；Ｆ−２３６〜Ｇ−８１２
；Ｆ−２３６〜Ｖ−８１１；Ｆ−２３６〜Ｔ−８１０；Ｆ−２３６〜Ｌ−８０９
；Ｆ−２３６〜Ｖ−８０８；Ｆ−２３６〜Ｑ−８０７；Ｆ−２３６〜Ｉ−８０６
；Ｆ−２３６〜Ｔ−８０５；Ｆ−２３６〜Ｌ−８０４；Ｆ−２３６〜Ｐ−８０３
；Ｆ−２３６〜Ｅ−８０２；Ｆ−２３６〜Ｋ−８０１；Ｆ−２３６〜Ｌ−８００
；Ｆ−２３６〜Ｐ−７９９；Ｆ−２３６〜Ｓ−７９８；Ｆ−２３６〜Ｆ−７９７
；Ｆ−２３６〜Ｓ−７９６；Ｆ−２３６〜Ｒ−７９５；Ｆ−２３６〜Ｉ−７９４
；Ｆ−２３６〜Ｒ−７９３；Ｆ−２３６〜Ｅ−７９２；Ｆ−２３６〜Ｌ−７９１
；Ｆ−２３６〜Ａ−７９０；Ｆ−２３６〜Ａ−７８９；Ｆ−２３６〜Ｓ−７８８
；Ｆ−２３６〜Ｓ−７８７；Ｆ−２３６〜Ｇ−７８６；Ｆ−２３６〜Ｓ−７８５
；Ｆ−２３６〜Ｙ−７８４；Ｆ−２３６〜Ｒ−７８３；Ｆ−２３６〜Ｌ−７８２
；Ｆ−２３６〜Ｖ−７８１；Ｆ−２３６〜Ｖ７８０；Ｆ−２３６〜Ｇ−７７９；
Ｆ−２３６〜Ｋ−７７８；Ｆ−２３６〜Ｙ−７７７；Ｆ−２３６〜Ｍ−７７６；
Ｆ−２３６〜Ｉ−７７５；Ｆ−２３６〜Ｄ−７７４；Ｆ−２３６〜Ｑ−７７３；
Ｆ−２３６〜Ｅ−７７２；Ｆ−２３６〜Ｌ−７７１；Ｆ−２３６〜Ｔ−７７０；
Ｆ−２３６〜Ｓ−７６９；Ｆ−２３６〜Ｌ−７６８；Ｆ−２３６〜Ｔ−７６７；
Ｆ−２３６〜Ｙ−７６６；Ｆ−２３６〜Ｄ−７６５；Ｆ−２３６〜Ｇ−７６４；
Ｆ−２３６〜Ｎ−７６３；Ｆ−２３６〜Ｌ−７６２；Ｆ−２３６〜Ｉ−７６１；
Ｆ−２３６〜Ｙ−７６０；Ｆ−２３６〜Ｔ−７５９；Ｆ−２３６〜Ｇ−７５８；
Ｆ−２３６〜Ｄ−７５７；Ｆ−２３６〜Ａ−７５６；Ｆ−２３６〜Ａ−７５５；
Ｆ−２３６〜Ｋ−７５４；Ｆ−２３６〜Ｉ−７５３；Ｆ−２３６〜Ａ−７５２；
Ｆ−２３６〜Ｌ−７５１；Ｆ−２３６〜Ｆ−７５０；Ｆ−２３６〜Ｓ−７４９；
Ｆ−２３６〜Ｇ−７４８；Ｆ−２３６〜Ｎ−７４７；Ｆ−２３６〜Ｎ−７４６；
Ｆ−２３６〜Ｒ−７４５；Ｆ−２３６〜Ｓ−７４４；Ｆ−２３６〜Ｇ−７４３；
Ｆ−２３６〜Ｒ−７４２；Ｆ−２３６〜Ｑ−７４１；Ｆ−２３６〜Ｎ−７４０；
Ｆ−２３６〜Ｒ−７３９；Ｆ−２３６〜Ｑ−７３８；Ｆ−２３６〜Ｋ−７３７；
Ｆ−２３６〜Ｖ−７３６；Ｆ−２３６〜Ｅ−７３５；Ｆ−２３６〜Ｉ−７３４；
Ｆ−２３６〜Ｎ−７３３；Ｆ−２３６〜Ｔ−７３２；Ｆ−２３６〜Ａ−７３１；
Ｆ−２３６〜Ｇ−７３０；Ｆ−２３６〜Ｔ−７２９；Ｆ−２３６〜Ｐ−７２８；
Ｆ−２３６〜Ｉ−７２７；Ｆ−２３６〜Ｔ−７２６；Ｆ−２３６〜Ｉ−７２５；
Ｆ−２３６〜Ｉ−７２４；Ｆ−２３６〜Ｄ−７２３；Ｆ−２３６〜Ｈ−７２２；
Ｆ−２３６〜Ｙ−７２１；Ｆ−２３６〜Ｇ−７２０；Ｆ−２３６〜Ｐ−７１９；
Ｆ−２３６〜Ｋ−７１８；Ｆ−２３６〜Ａ−７１７；Ｆ−２３６〜Ｓ−７１６；
Ｆ−２３６〜Ｔ−７１５；Ｆ−２３６〜Ｖ−７１４；Ｆ−２３６〜Ｓ−７１３；
Ｆ−２３６〜Ｇ−７１２；Ｆ−２３６〜Ｓ−７１１；Ｆ−２３６〜Ｉ−７１０；
Ｆ−２３６〜Ｋ−７０９；Ｆ−２３６〜Ｋ−７０８；Ｆ−２３６〜Ｃ−７０７；
Ｆ−２３６〜Ｔ−７０６；Ｆ−２３６〜Ｓ−７０５；Ｆ−２３６〜Ｇ−７０４；
Ｆ−２３６〜Ｎ−７０３；Ｆ−２３６〜Ｇ−７０２；Ｆ−２３６〜Ｇ−７０１；
Ｆ−２３６〜Ｃ−７００；Ｆ−２３６〜Ｖ−６９９；Ｆ−２３６〜Ｇ−６９８；
Ｆ−２３６〜Ｃ−６９７；Ｆ−２３６〜Ｋ−６９６；Ｆ−２３６〜Ｄ−６９５；
Ｆ−２３６〜Ｆ−６９４；Ｆ−２３６〜Ｋ−６９３；Ｆ−２３６〜Ｋ−６９２；
Ｆ−２３６〜Ｋ−６９１；Ｆ−２３６〜Ｓ−６９０；Ｆ−２３６〜Ｄ−６８９；
Ｆ−２３６〜Ｉ−６８８；Ｆ−２３６〜Ｉ−６８７；Ｆ−２３６〜Ｒ−６８６；
Ｆ−２３６〜Ｄ−６８５；Ｆ−２３６〜Ｃ−６８４；Ｆ−２３６〜Ｇ−６８３；
Ｆ−２３６〜Ａ−６８２；Ｆ−２３６〜Ｋ−６８１；Ｆ−２３６〜Ｖ−６８０；
Ｆ−２３６〜Ｃ−６７９；Ｆ−２３６〜Ｑ−６７８；Ｆ−２３６〜Ｇ−６７７；
Ｆ−２３６〜Ｑ−６７６；Ｆ−２３６〜Ｖ−６７５；Ｆ−２３６〜Ｃ−６７４；
Ｆ−２３６〜Ｖ−６７３；Ｆ−２３６〜Ｓ−６７２；Ｆ−２３６〜Ｔ−６７１；
Ｆ−２３６〜Ｓ−６７０；Ｆ−２３６〜Ｄ−６６９；Ｆ−２３６〜Ｐ−６６８；
Ｆ−２３６〜Ｓ−６６７；Ｆ−２３６〜Ｃ−６６６；Ｆ−２３６〜Ｐ−６６５；
Ｆ−２３６〜Ｔ−６６４；Ｆ−２３６〜Ｇ−６６３；Ｆ−２３６〜Ｄ−６６２；
Ｆ−２３６〜Ｖ−６６１；Ｆ−２３６〜Ｖ−６６０；Ｆ−２３６〜Ｋ−６５９；
Ｆ−２３６〜Ｐ−６５８；Ｆ−２３６〜Ｑ−６５７；Ｆ−２３６〜Ｌ−６５６；
Ｆ−２３６〜Ｖ−６５５；Ｆ−２３６〜Ｆ−６５４；Ｆ−２３６〜Ｆ−６５３；
Ｆ−２３６〜Ｙ−６５２；Ｆ−２３６〜Ｇ−６５１；Ｆ−２３６〜Ｉ−６５０；
Ｆ−２３６〜Ｇ−６４９；Ｆ−２３６〜Ｋ−６４８；Ｆ−２３６〜Ａ−６４７；
Ｆ−２３６〜Ｑ−６４６；Ｆ−２３６〜Ｃ−６４５；Ｆ−２３６〜Ｉ−６４４；
Ｆ−２３６〜Ｌ−６４３；Ｆ−２３６〜Ｋ−６４２；Ｆ−２３６〜Ｃ−６４１；
Ｆ−２３６〜Ｒ−６４０；Ｆ−２３６〜Ｄ−６３９；Ｆ−２３６〜Ｋ−６３８；
Ｆ−２３６〜Ｐ−６３７；Ｆ−２３６〜Ｓ−６３６；Ｆ−２３６〜Ｖ−６３５；
Ｆ−２３６〜Ｇ−６３４；Ｆ−２３６〜Ａ−６３３；Ｆ−２３６〜Ｙ−６３２；
Ｆ−２３６〜Ｋ−６３１；Ｆ−２３６〜Ｐ−６３０；Ｆ−２３６〜Ｉ−６２９；
Ｆ−２３６〜Ｗ−６２８；Ｆ−２３６〜Ｅ−６２７；Ｆ−２３６〜Ｖ−６２６；
Ｆ−２３６〜Ａ−６２５；Ｆ−２３６〜Ｐ−６２４；Ｆ−２３６〜Ｇ−６２３；
Ｆ−２３６〜Ｓ−６２２；Ｆ−２３６〜Ｇ−６２１；Ｆ−２３６〜Ｆ−６２０；
Ｆ−２３６〜Ｓ−６１９；Ｆ−２３６〜Ａ−６１８；Ｆ−２３６〜Ｋ−６１７；
Ｆ−２３６〜Ｓ−６１６；Ｆ−２３６〜Ｆ−６１５；Ｆ−２３６〜Ｅ−６１４；
Ｆ−２３６〜Ｎ−６１３；Ｆ−２３６〜Ｈ−６１２；Ｆ−２３６〜Ａ−６１１；
Ｆ−２３６〜Ｅ−６１０；Ｆ−２３６〜Ｃ−６０９；Ｆ−２３６〜Ｑ−６０８；
Ｆ−２３６〜Ｅ−６０７；Ｆ−２３６〜Ｅ−６０６；Ｆ−２３６〜Ｒ−６０５；
Ｆ−２３６〜Ｆ−６０４；Ｆ−２３６〜Ｔ−６０３；Ｆ−２３６〜Ｋ−６０２；
Ｆ−２３６〜Ｇ−６０１；Ｆ−２３６〜Ｎ−６００；Ｆ−２３６〜Ｎ−５９９；
Ｆ−２３６〜Ｄ−５９８；Ｆ−２３６〜Ｐ−５９７；Ｆ−２３６〜Ｃ−５９６；
Ｆ−２３６〜Ｄ−５９５；Ｆ−２３６〜Ｅ−５９４；Ｆ−２３６〜Ｌ−５９３；
Ｆ−２３６〜Ｎ−５９２；Ｆ−２３６〜Ｃ−５９１；Ｆ−２３６〜Ｓ−５９０；
Ｆ−２３６〜Ｒ−５８９；Ｆ−２３６〜Ｙ−５８８；Ｆ−２３６〜Ｒ−５８７；
Ｆ−２３６〜Ｖ−５８６；Ｆ−２３６〜Ｒ−５８５；Ｆ−２３６〜Ｋ−５８４；
Ｆ−２３６〜Ｇ−５８３；Ｆ−２３６〜Ｅ−５８２；Ｆ−２３６〜Ｃ−５８１；
Ｆ−２３６〜Ｙ−５８０；Ｆ−２３６〜Ｋ−５７９；Ｆ−２３６〜Ｇ−５７８；
Ｆ−２３６〜Ｇ−５７７；Ｆ−２３６〜Ｎ−５７６；Ｆ−２３６〜Ｋ−５７５；
Ｆ−２３６〜Ｐ−５７４；Ｆ−２３６〜Ｖ−５７３；Ｆ−２３６〜Ｐ−５７２；
Ｆ−２３６〜Ｎ−５７１；Ｆ−２３６〜Ｄ−５７０；Ｆ−２３６〜Ｃ−５６９；
Ｆ−２３６〜Ｅ−５６８；Ｆ−２３６〜Ｒ−５６７；Ｆ−２３６〜Ｍ−５６６；
Ｆ−２３６〜Ｔ−５６５；Ｆ−２３６〜Ｙ−５６４；Ｆ−２３６〜Ｑ−５６３；
Ｆ−２３６〜Ｖ−５６２；Ｆ−２３６〜Ｇ−５６１；Ｆ−２３６〜Ｇ−５６０；
Ｆ−２３６〜Ｇ−５５９；Ｆ−２３６〜Ｃ−５５８；Ｆ−２３６〜Ｔ−５５７；
Ｆ−２３６〜Ｒ−５５６；Ｆ−２３６〜Ｓ−５５５；Ｆ−２３６〜Ｃ−５５４；
Ｆ−２３６〜Ｄ−５５３；Ｆ−２３６〜Ｇ−５５２；Ｆ−２３６〜Ｗ−５５１；
Ｆ−２３６〜Ｐ−５５０；Ｆ−２３６〜Ｇ−５４９；Ｆ−２３６〜Ｗ−５４８；
Ｆ−２３６〜Ｍ−５４７；Ｆ−２３６〜Ｇ−５４６；Ｆ−２３６〜Ｗ−５４５；
Ｆ−２３６〜Ｓ−５４４；Ｆ−２３６〜Ｇ−５４３；Ｆ−２３６〜Ｈ−５４２；
Ｆ−２３６〜Ｆ−５４１；Ｆ−２３６〜Ｐ−５４０；Ｆ−２３６〜Ｔ−５３９；
Ｆ−２３６〜Ｄ−５３８；Ｆ−２３６〜Ｆ−５３７；Ｆ−２３６〜Ｈ−５３６；
Ｆ−２３６〜Ｋ−５３５；Ｆ−２３６〜Ｒ−５３４；Ｆ−２３６〜Ｄ−５３３；
Ｆ−２３６〜Ｔ−５３２；Ｆ−２３６〜Ｋ−５３１；Ｆ−２３６〜Ｎ−５３０；
Ｆ−２３６〜Ｖ−５２９；Ｆ−２３６〜Ｃ−５２８；Ｆ−２３６〜Ｋ−５２７；
Ｆ−２３６〜Ｇ−５２６；Ｆ−２３６〜Ｎ−５２５；Ｆ−２３６〜Ｉ−５２４；
Ｆ−２３６〜Ｃ−５２３；Ｆ−２３６〜Ｗ−５２２；Ｆ−２３６〜Ｋ−５２１；
Ｆ−２３６〜Ｇ−５２０；Ｆ−２３６〜Ｅ−５１９；Ｆ−２３６〜Ｇ−５１８；
Ｆ−２３６〜Ｃ−５１７；Ｆ−２３６〜Ｓ−５１６；Ｆ−２３６〜Ｔ−５１５；
Ｆ−２３６〜Ｇ−５１４；Ｆ−２３６〜Ｄ−５１３；Ｆ−２３６〜Ａ−５１２；
Ｆ−２３６〜Ｗ−５１１；Ｆ−２３６〜Ｐ−５１０；Ｆ−２３６〜Ｆ−５０９；
Ｆ−２３６〜Ｈ−５０８；Ｆ−２３６〜Ｋ−５０７；Ｆ−２３６〜Ｔ−５０６；
Ｆ−２３６〜Ｑ−５０５；Ｆ−２３６〜Ｃ−５０４；Ｆ−２３６〜Ｖ−５０３；
Ｆ−２３６〜Ｌ−５０２；Ｆ−２３６〜Ｖ−５０１；Ｆ−２３６〜Ｇ−５００；
Ｆ−２３６〜Ｇ−４９９；Ｆ−２３６〜Ｓ−４９８；Ｆ−２３６〜Ｔ−４９７；
Ｆ−２３６〜Ｇ−４９６；Ｆ−２３６〜Ｔ−４９５；Ｆ−２３６〜Ｃ−４９４；
Ｆ−２３６〜Ｗ−４９３；Ｆ−２３６〜Ｌ−４９２；Ｆ−２３６〜Ｔ−４９１；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４９０；Ｆ−２３６〜Ｃ−４８９；Ｆ−２３６〜Ｔ−４８８；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４８７；Ｆ−２３６〜Ａ−４８６；Ｆ−２３６〜Ａ−４８５；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４８４；Ｆ−２３６〜Ｐ−４８３；Ｆ−２３６〜Ｃ−４８２；
Ｆ−２３６〜Ｈ−４８１；Ｆ−２３６〜Ｋ−４８０；Ｆ−２３６〜Ｓ−４７９；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４７８；Ｆ−２３６〜Ｅ−４７７；Ｆ−２３６〜Ｇ−４７６；
Ｆ−２３６〜Ｆ−４７５；Ｆ−２３６〜Ｔ−４７４；Ｆ−２３６〜Ｆ−４７３；
Ｆ−２３６〜Ｑ−４７２；Ｆ−２３６〜Ｃ−４７１；Ｆ−２３６〜Ｑ−４７０；
Ｆ−２３６〜Ｒ−４６９；Ｆ−２３６〜Ｎ−４６８；Ｆ−２３６〜Ａ−４６７；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４６６；Ｆ−２３６〜Ｙ−４６５；Ｆ−２３６〜Ｓ−４６４；
Ｆ−２３６〜Ｔ−４６３；Ｆ−２３６〜Ｇ−４６２；Ｆ−２３６〜Ｐ−４６１；
Ｆ−２３６〜Ｌ−４６０；Ｆ−２３６〜Ｄ−４５９；Ｆ−２３６〜Ｇ−４５８；
Ｆ−２３６〜Ｐ−４５７；Ｆ−２３６〜Ｌ−４５６；Ｆ−２３６〜Ｑ−４５５；
Ｆ−２３６〜Ｉ−４５４；Ｆ−２３６〜Ｐ−４５３；Ｆ−２３６〜Ｎ−４５２；
Ｆ−２３６〜Ｑ−４５１；Ｆ−２３６〜Ｐ−４５０；Ｆ−２３６〜Ｋ−４４９；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４４８；Ｆ−２３６〜Ｍ−４４７；Ｆ−２３６〜Ｌ−４４６；
Ｆ−２３６〜Ｃ−４４５；Ｆ−２３６〜Ｅ−４４４；Ｆ−２３６〜Ｇ−４４３；
Ｆ−２３６〜Ｈ−４４２；Ｆ−２３６〜Ｇ−４４１；Ｆ−２３６〜Ｎ−４４０；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４３９；Ｆ−２３６〜Ｌ−４３８；Ｆ−２３６〜Ｆ−４３７；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４３６；Ｆ−２３６〜Ｔ−４３５；Ｆ−２３６〜Ｉ−４３４；
Ｆ−２３６〜Ｍ−４３３；Ｆ−２３６〜Ｙ−４３２；Ｆ−２３６〜Ａ−４３１；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４３０；Ｆ−２３６〜Ｃ−４２９；Ｆ−２３６〜Ｐ−４２８；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４２７；Ｆ−２３６〜Ｗ−４２６；Ｆ−２３６〜Ｐ−４２５；
Ｆ−２３６〜Ｑ−４２４；Ｆ−２３６〜Ｓ−４２３；Ｆ−２３６〜Ｈ−４２２；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４２１；Ｆ−２３６〜Ｌ−４２０；Ｆ−２３６〜Ｎ−４１９；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４１８；Ｆ−２３６〜Ｌ−４１７；Ｆ−２３６〜Ｍ−４１６；
Ｆ−２３６〜Ｓ−４１５；Ｆ−２３６〜Ａ−４１４；Ｆ−２３６〜Ｍ−４１３；
Ｆ−２３６〜Ｍ−４１２；Ｆ−２３６〜Ｈ−４１１；Ｆ−２３６〜Ｓ−４１０；
Ｆ−２３６〜Ｄ−４０９；Ｆ−２３６〜Ｑ−４０８；Ｆ−２３６〜Ｎ−４０７；
Ｆ−２３６〜Ｖ−４０６；Ｆ−２３６〜Ｇ−４０５；Ｆ−２３６〜Ｎ−４０４；
Ｆ−２３６〜Ｌ−４０３；Ｆ−２３６〜Ｓ−４０２；Ｆ−２３６〜Ａ−４０１；
Ｆ−２３６〜Ｃ−４００；Ｆ−２３６〜Ｑ−３９９；Ｆ−２３６〜Ｋ−３９８；
Ｆ−２３６〜Ａ−３９７；Ｆ−２３６〜Ｄ−３９６；Ｆ−２３６〜Ｄ−３９５；
Ｆ−２３６〜Ｈ−３９４；Ｆ−２３６〜Ｐ−３９３；Ｆ−２３６〜Ｍ−３９２；
Ｆ−２３６〜Ｎ−３９１；Ｆ−２３６〜Ｆ−３９０；Ｆ−２３６〜Ｖ−３８９；
Ｆ−２３６〜Ｈ−３８８；Ｆ−２３６〜Ｇ−３８７；Ｆ−２３６〜Ｌ−３８６；
Ｆ−２３６〜Ｅ−３８５；Ｆ−２３６〜Ｈ−３８４；Ｆ−２３６〜Ａ−３８３；
Ｆ−２３６〜Ｔ−３８２；Ｆ−２３６〜Ｔ−３８１；Ｆ−２３６〜Ｆ−３８０；
Ｆ−２３６〜Ａ−３７９；Ｆ−２３６〜Ａ−３７８；Ｆ−２３６〜Ｑ−３７７；
Ｆ−２３６〜Ｌ−３７６；Ｆ−２３６〜Ｇ−３７５；Ｆ−２３６〜Ｄ−３７４；
Ｆ−２３６〜Ｄ−３７３；Ｆ−２３６〜Ｅ−３７２；Ｆ−２３６〜Ｉ−３７１；
Ｆ−２３６〜Ｖ−３７０；Ｆ−２３６〜Ｓ−３６９；Ｆ−２３６〜Ｃ−３６８；
Ｆ−２３６〜Ｓ−３６７；Ｆ−２３６〜Ｒ−３６６；Ｆ−２３６〜Ｓ−３６５；
Ｆ−２３６〜Ｐ−３６４；Ｆ−２３６〜Ｄ−３６３；Ｆ−２３６〜Ｃ−３６２；
Ｆ−２３６〜Ｖ−３６１；Ｆ−２３６〜Ｔ−３６０；Ｆ−２３６〜Ｇ−３５９；
Ｆ−２３６〜Ｖ−３５８；Ｆ−２３６〜Ｄ−３５７；Ｆ−２３６〜Ａ−３５６；
Ｆ−２３６〜Ｍ−３５５；Ｆ−２３６〜Ｇ−３５４；Ｆ−２３６〜Ｌ−３５３；
Ｆ−２３６〜Ｔ−３５２；Ｆ−２３６〜Ｄ−３５１；Ｆ−２３６〜Ｃ−３５０；
Ｆ−２３６〜Ｔ−３４９；Ｆ−２３６〜Ｑ−３４８；Ｆ−２３６〜Ｓ−３４７；
Ｆ−２３６〜Ｇ−３４６；Ｆ−２３６〜Ｃ−３４５；Ｆ−２３６〜Ｌ−３４４；
Ｆ−２３６〜Ｄ−３４３；Ｆ−２３６〜Ｑ−３４２；Ｆ−２３６〜Ｒ−３４１；
Ｆ−２３６〜Ｔ−３４０；Ｆ−２３６〜Ｆ−３３９；Ｆ−２３６〜Ｌ−３３８；
Ｆ−２３６〜Ｉ−３３７；Ｆ−２３６〜Ａ−３３６；Ｆ−２３６〜Ｔ−３３５；
Ｆ−２３６〜Ｄ−３３４；Ｆ−２３６〜Ｙ−３３３；Ｆ−２３６〜Ｈ−３３２；
Ｆ−２３６〜Ｅ−３３１；Ｆ−２３６〜Ａ−３３０；Ｆ−２３６〜Ｄ−３２９；
Ｆ−２３６〜Ｒ−３２８；Ｆ−２３６〜Ｄ−３２７；Ｆ−２３６〜Ｓ−３２６；
Ｆ−２３６〜Ｐ−３２５；Ｆ−２３６〜Ｐ−３２４；Ｆ−２３６〜Ｎ−３２３；
Ｆ−２３６〜Ｈ−３２２；Ｆ−２３６〜Ｑ−３２１；Ｆ−２３６〜Ｋ−３２０；
Ｆ−２３６〜Ｑ−３１９；Ｆ−２３６〜Ｗ−３１８；Ｆ−２３６〜Ｎ−３１７；
Ｆ−２３６〜Ｃ−３１６；Ｆ−２３６〜Ｆ−３１５；Ｆ−２３６〜Ｎ−３１４；
Ｆ−２３６〜Ｒ−３１３；Ｆ−２３６〜Ｌ−３１２；Ｆ−２３６〜Ｔ−３１１；
Ｆ−２３６〜Ｌ−３１０；Ｆ−２３６〜Ａ−３０９；Ｆ−２３６〜Ａ−３０８；
Ｆ−２３６〜Ｎ−３０７；Ｆ−２３６〜Ｓ−３０６；Ｆ−２３６〜Ｔ−３０５；
Ｆ−２３６〜Ｖ−３０４；Ｆ−２３６〜Ｅ−３０３；Ｆ−２３６〜Ｐ−３０２；
Ｆ−２３６〜Ｇ−３０１；Ｆ−２３６〜Ｋ−３００；Ｆ−２３６〜Ｑ−２９９；
Ｆ−２３６〜Ｅ−２９８；Ｆ−２３６〜Ｄ−２９７；Ｆ−２３６〜Ｈ−２９６；
Ｆ−２３６〜Ｉ−２９５；Ｆ−２３６〜Ｖ−２９４；Ｆ−２３６〜Ｌ−２９３；
Ｆ−２３６〜Ｉ−２９２；Ｆ−２３６〜Ｋ−２９１；Ｆ−２３６〜Ｖ−２９０；
Ｆ−２３６〜Ｖ−２８９；Ｆ−２３６〜Ｖ−２８８；Ｆ−２３６〜Ｌ−２８７；
Ｆ−２３６〜Ｓ−２８６；Ｆ−２３６〜Ｖ−２８５；Ｆ−２３６〜Ｓ−２８４；
Ｆ−２３６〜Ｎ−２８３；Ｆ−２３６〜Ｒ−２８２；Ｆ−２３６〜Ｉ−２８１；
Ｆ−２３６〜Ｓ−２８０；Ｆ−２３６〜Ｐ−２７９；Ｆ−２３６〜Ｈ−２７８；
Ｆ−２３６〜Ｋ−２７７；Ｆ−２３６〜Ｙ−２７６；Ｆ−２３６〜Ｌ−２７５；
Ｆ−２３６〜Ｒ−２７４；Ｆ−２３６〜Ａ−２７３；Ｆ−２３６〜Ａ−２７２；
Ｆ−２３６〜Ｖ−２７１；Ｆ−２３６〜Ｓ−２７０；Ｆ−２３６〜Ｆ−２６９；
Ｆ−２３６〜Ｌ−２６８；Ｆ−２３６〜Ｔ−２６７；Ｆ−２３６〜Ｌ−２６６；
Ｆ−２３６〜Ｌ−２６５；Ｆ−２３６〜Ｙ−２６４；Ｆ−２３６〜Ｈ−２６３；
Ｆ−２３６〜Ｋ−２６２；Ｆ−２３６〜Ｌ−２６１；Ｆ−２３６〜Ｇ−２６０；
Ｆ−２３６〜Ｓ−２５９；Ｆ−２３６〜Ｇ−２５８；Ｆ−２３６〜Ｈ−２５７；
Ｆ−２３６〜Ｆ−２５６；Ｆ−２３６〜Ｅ−２５５；Ｆ−２３６〜Ａ−２５４；
Ｆ−２３６〜Ｍ−２５３；Ｆ−２３６〜Ｓ−２５２；Ｆ−２３６〜Ｑ−２５１；
Ｆ−２３６〜Ｄ−２５０；Ｆ−２３６〜Ａ−２４９；Ｆ−２３６〜Ｖ−２４８；
Ｆ−２３６〜Ｌ−２４７；Ｆ−２３６〜Ｍ−２４６；Ｆ−２３６〜Ｔ−２４５；
Ｆ−２３６〜Ｅ−２４４；Ｆ−２３６〜Ｖ２４３；および／またはＦ−２３６〜
Ｙ−２４２。
【０１５５】
同様に、配列番号２として示す、本発明のポリペプチドのＣ末端欠失は、配列
番号２の以下の残基のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む：Ｌ−３３〜Ｓ−
９５０；Ｌ−３３〜Ｃ−９４９；Ｌ−３３〜Ｅ−９４８；Ｌ−３３〜Ａ−９４７
；Ｌ−３３〜Ｍ−９４６；Ｌ−３３〜Ｔ−９４５；Ｌ−３３〜Ｃ−９４４；Ｌ−
３３〜Ｆ−９４３；Ｌ−３３〜Ｄ−９４２；Ｌ−３３〜Ｉ−９４１；Ｌ−３３〜
Ｆ−９４０；Ｌ−３３〜Ｈ−９３９；Ｌ−３３〜Ｋ−９３８；Ｌ−３３〜Ｐ−９
３７；Ｌ−３３〜Ｋ−９３６；Ｌ−３３〜Ｋ−９３５；Ｌ−３３〜Ｌ−９３４；
Ｌ−３３〜Ｐ−９３３；Ｌ−３３〜Ｄ−９３２；Ｌ−３３〜Ｃ−９３１；Ｌ−３
３〜Ｓ−９３０；Ｌ−３３〜Ｅ−９２９；Ｌ−３３〜Ｈ−９２８；Ｌ−３３〜Ｓ
−９２７；Ｌ−３３〜Ｌ−９２６；Ｌ−３３〜Ｖ−９２５；Ｌ−３３〜Ｇ−９２
４；Ｌ−３３〜Ｇ−９２３；Ｌ−３３〜Ｄ−９２２；Ｌ−３３〜Ｈ−９２１；Ｌ
−３３〜Ｓ−９２０；Ｌ−３３〜Ｌ−９１９；Ｌ−３３〜Ｃ−９１８；Ｌ−３３
〜Ｋ−９１７；Ｌ−３３〜Ｌ−９１６；Ｌ−３３〜Ｓ−９１５；Ｌ−３３〜Ｒ−
９１４；Ｌ−３３〜Ｋ−９１３；Ｌ−３３〜Ｋ−９１２；Ｌ−３３〜Ｙ−９１１
；Ｌ−３３〜Ｇ−９１０；Ｌ−３３〜Ｋ−９０９；Ｌ−３３〜Ｇ−９０８；Ｌ−
３３〜Ｃ−９０７；Ｌ−３３〜Ｔ−９０６；Ｌ−３３〜Ｋ−９０５；Ｌ−３３〜
Ｓ−９０４；Ｌ−３３〜Ｃ−９０３；Ｌ−３３〜Ｓ−９０２；Ｌ−３３〜Ｓ−９
０１；Ｌ−３３〜Ｗ−９００；Ｌ−３３〜Ｅ−８９９；Ｌ−３３〜Ｇ−８９８；
Ｌ−３３〜Ｌ−８９７；Ｌ−３３〜Ｑ−８９６；Ｌ−３３〜Ｗ−８９５；Ｌ−３
３〜Ｑ−８９４；Ｌ−３３〜Ｐ−８９３；Ｌ−３３〜Ｃ−８９２；Ｌ−３３〜Ｐ
−８９１；Ｌ−３３〜Ｈ−８９０；Ｌ−３３〜Ｄ−８８９；Ｌ−３３〜Ａ−８８
８；Ｌ−３３〜Ｃ−８８７；Ｌ−３３〜Ｐ−８８６；Ｌ−３３〜Ｒ−８８５；Ｌ
−３３〜Ｔ−８８４；Ｌ−３３〜Ｓ−８８３；Ｌ−３３〜Ａ−８８２；Ｌ−３３
〜Ｐ−８８１；Ｌ−３３〜Ｋ−８８０；Ｌ−３３〜Ｖ−８７９；Ｌ−３３〜Ｅ−
８７８；Ｌ−３３〜Ｋ−８７７；Ｌ−３３〜Ａ−８７６；Ｌ−３３〜Ｃ−８７５
；Ｌ−３３〜Ｅ−８７４；Ｌ−３３〜Ｓ−８７３；Ｌ−３３〜Ａ−８７２；Ｌ−
３３〜Ｐ−８７１；Ｌ−３３〜Ｑ−８７０；Ｌ−３３〜Ｇ−８６９；Ｌ−３３〜
Ｎ−８６８；Ｌ−３３〜Ｉ−８６７；Ｌ−３３〜Ｄ−８６６；Ｌ−３３〜Ｒ−８
６５；Ｌ−３３〜Ｃ−８６４；Ｌ−３３〜Ｅ−８６３；Ｌ−３３〜Ｖ−８６２；
Ｌ−３３〜Ｌ−８６１；Ｌ−３３〜Ｒ−８６０；Ｌ−３３〜Ｒ−８５９；Ｌ−３
３〜Ｑ−８５８；Ｌ−３３〜Ｗ−８５７；Ｌ−３３〜Ｇ−８５６；Ｌ−３３〜Ｌ
−８５５；Ｌ−３３〜Ｅ−８５４；Ｌ−３３〜Ｃ−８５３；Ｌ−３３〜Ｓ−８５
２；Ｌ−３３〜Ｋ−８５１；Ｌ−３３〜Ｓ−８５０；Ｌ−３３〜Ｃ−８４９；Ｌ
−３３〜Ｅ８４８；Ｌ−３３〜Ｇ−８４７；Ｌ−３３〜Ｗ−８４６；Ｌ−３３〜
Ｅ−８４５；Ｌ−３３〜Ｅ−８４４；Ｌ−３３〜Ｉ−８４３；Ｌ−３３〜Ｖ−８
４２；Ｌ−３３〜Ｗ−８４１；Ｌ−３３〜Ａ−８４０；Ｌ−３３〜Ｓ−８３９；
Ｌ−３３〜Ｆ−８３８；Ｌ−３３〜Ｔ−８３７；Ｌ−３３〜Ｐ−８３６；Ｌ−３
３〜Ｉ−８３５；Ｌ−３３〜Ａ−８３４；Ｌ−３３〜Ｎ−８３３；Ｌ−３３〜Ｆ
−８３２；Ｌ−３３〜Ｓ−８３１；Ｌ−３３〜Ｅ−８３０；Ｌ−３３〜Ｋ−８２
９；Ｌ−３３〜Ｋ−８２８；Ｌ−３３〜Ｋ−８２７；Ｌ−３３〜Ｋ−８２６；Ｌ
−３３〜Ｖ−８２５；Ｌ−３３〜Ｆ−８２４；Ｌ−３３〜Ｙ−８２３；Ｌ−３３
〜Ｔ−８２２；Ｌ−３３〜Ｙ−８２１；Ｌ−３３〜Ｋ−８２０；Ｌ−３３〜Ｉ−
８１９；Ｌ−３３〜Ｋ−８１８；Ｌ−３３〜Ｐ−８１７；Ｌ−３３〜Ｒ−８１６
；Ｌ−３３〜Ｌ−８１５；Ｌ−３３〜Ａ８１４；Ｌ−３３〜Ｎ−８１３；Ｌ−３
３〜Ｇ−８１２；Ｌ−３３〜Ｖ−８１１；Ｌ−３３〜Ｔ−８１０；Ｌ−３３〜Ｌ
−８０９；Ｌ−３３〜Ｖ−８０８；Ｌ−３３〜Ｑ−８０７；Ｌ−３３〜Ｉ−８０
６；Ｌ−３３〜Ｔ−８０５；Ｌ−３３〜Ｌ−８０４；Ｌ−３３〜Ｐ−８０３；Ｌ
−３３〜Ｅ−８０２；Ｌ−３３〜Ｋ−８０１；Ｌ−３３〜Ｌ−８００；Ｌ−３３
〜Ｐ−７９９；Ｌ−３３〜Ｓ−７９８；Ｌ−３３〜Ｆ−７９７；Ｌ−３３〜Ｓ−
７９６；Ｌ−３３〜Ｒ−７９５；Ｌ−３３〜Ｉ−７９４；Ｌ−３３〜Ｒ−７９３
；Ｌ−３３〜Ｅ−７９２；Ｌ−３３〜Ｌ−７９１；Ｌ−３３〜Ａ−７９０；Ｌ−
３３〜Ａ−７８９；Ｌ−３３〜Ｓ−７８８；Ｌ−３３〜Ｓ−７８７；Ｌ−３３〜
Ｇ−７８６；Ｌ−３３〜Ｓ−７８５；Ｌ−３３〜Ｙ−７８４；Ｌ−３３〜Ｒ−７
８３；Ｌ−３３〜Ｌ−７８２；Ｌ−３３〜Ｖ−７８１；Ｌ−３３〜Ｖ−７８０；
Ｌ−３３〜Ｇ−７７９；Ｌ−３３〜Ｋ−７７８；Ｌ−３３〜Ｙ−７７７；Ｌ−３
３〜Ｍ−７７６；Ｌ−３３〜Ｉ−７７５；Ｌ−３３〜Ｄ−７７４；Ｌ−３３〜Ｑ
−７７３；Ｌ−３３〜Ｅ−７７２；Ｌ−３３〜Ｌ−７７１；Ｌ−３３〜Ｔ−７７
０；Ｌ−３３〜Ｓ−７６９；Ｌ−３３〜Ｌ−７６８；Ｌ−３３〜Ｔ−７６７；Ｌ
−３３〜Ｙ−７６６；Ｌ−３３〜Ｄ−７６５；Ｌ−３３〜Ｇ−７６４；Ｌ−３３
〜Ｎ−７６３；Ｌ−３３〜Ｌ−７６２；Ｌ−３３〜Ｉ−７６１；Ｌ−３３〜Ｙ−
７６０；Ｌ−３３〜Ｔ−７５９；Ｌ−３３〜Ｇ−７５８；Ｌ−３３〜Ｄ−７５７
；Ｌ−３３〜Ａ−７５６；Ｌ−３３〜Ａ−７５５；Ｌ−３３〜Ｋ−７５４；Ｌ−
３３〜Ｉ−７５３；Ｌ−３３〜Ａ−７５２；Ｌ−３３〜Ｌ−７５１；Ｌ−３３〜
Ｆ−７５０；Ｌ−３３〜Ｓ−７４９；Ｌ−３３〜Ｇ−７４８；Ｌ−３３〜Ｎ−７
４７；Ｌ−３３〜Ｎ−７４６；Ｌ−３３〜Ｒ−７４５；Ｌ−３３〜Ｓ−７４４；
Ｌ−３３〜Ｇ−７４３；Ｌ−３３〜Ｒ−７４２；Ｌ−３３〜Ｑ−７４１；Ｌ−３
３〜Ｎ−７４０；Ｌ−３３〜Ｒ−７３９；Ｌ−３３〜Ｑ−７３８；Ｌ−３３〜Ｋ
−７３７；Ｌ−３３〜Ｖ−７３６；Ｌ−３３〜Ｅ−７３５；Ｌ−３３〜Ｉ−７３
４；Ｌ−３３〜Ｎ−７３３；Ｌ−３３〜Ｔ−７３２；Ｌ−３３〜Ａ−７３１；Ｌ
−３３〜Ｇ−７３０；Ｌ−３３〜Ｔ−７２９；Ｌ−３３〜Ｐ−７２８；Ｌ−３３
〜Ｉ−７２７；Ｌ−３３〜Ｔ−７２６；Ｌ−３３〜Ｉ−７２５；Ｌ−３３〜Ｉ−
７２４；Ｌ−３３〜Ｄ−７２３；Ｌ−３３〜Ｈ−７２２；Ｌ−３３〜Ｙ−７２１
；Ｌ−３３〜Ｇ−７２０；Ｌ−３３〜Ｐ−７１９；Ｌ−３３〜Ｋ−７１８；Ｌ−
３３〜Ａ−７１７；Ｌ−３３〜Ｓ−７１６；Ｌ−３３〜Ｔ−７１５；Ｌ−３３〜
Ｖ−７１４；Ｌ−３３〜Ｓ−７１３；Ｌ−３３〜Ｇ−７１２；Ｌ−３３〜Ｓ−７
１１；Ｌ−３３〜Ｉ−７１０；Ｌ−３３〜Ｋ−７０９；Ｌ−３３〜Ｋ−７０８；
Ｌ−３３〜Ｃ−７０７；Ｌ−３３〜Ｔ−７０６；Ｌ−３３〜Ｓ−７０５；Ｌ−３
３〜Ｇ−７０４；Ｌ−３３〜Ｎ−７０３；Ｌ−３３〜Ｇ−７０２；Ｌ−３３〜Ｇ
−７０１；Ｌ−３３〜Ｃ−７００；Ｌ−３３〜Ｖ−６９９；Ｌ−３３〜Ｇ−６９
８；Ｌ−３３〜Ｃ−６９７；Ｌ−３３〜Ｋ−６９６；Ｌ−３３〜Ｄ−６９５；Ｌ
−３３〜Ｆ−６９４；Ｌ−３３〜Ｋ−６９３；Ｌ−３３〜Ｋ−６９２；Ｌ−３３
〜Ｋ−６９１；Ｌ−３３〜Ｓ−６９０；Ｌ−３３〜Ｄ−６８９；Ｌ−３３〜Ｉ−
６８８；Ｌ−３３〜Ｉ−６８７；Ｌ−３３〜Ｒ−６８６；Ｌ−３３〜Ｄ−６８５
；Ｌ−３３〜Ｃ−６８４；Ｌ−３３〜Ｇ−６８３；Ｌ−３３〜Ａ−６８２；Ｌ−
３３〜Ｋ−６８１；Ｌ−３３〜Ｖ−６８０；Ｌ−３３〜Ｃ−６７９；Ｌ−３３〜
Ｑ−６７８；Ｌ−３３〜Ｇ−６７７；Ｌ−３３〜Ｑ−６７６；Ｌ−３３〜Ｖ−６
７５；Ｌ−３３〜Ｃ−６７４；Ｌ−３３〜Ｖ−６７３；Ｌ−３３〜Ｓ−６７２；
Ｌ−３３〜Ｔ−６７１；Ｌ−３３〜Ｓ−６７０；Ｌ−３３〜Ｄ−６６９；Ｌ−３
３〜Ｐ−６６８；Ｌ−３３〜Ｓ−６６７；Ｌ−３３〜Ｃ−６６６；Ｌ−３３〜Ｐ
−６６５；Ｌ−３３〜Ｔ−６６４；Ｌ−３３〜Ｇ−６６３；Ｌ−３３〜Ｄ−６６
２；Ｌ−３３〜Ｖ−６６１；Ｌ−３３〜Ｖ−６６０；Ｌ−３３〜Ｋ−６５９；Ｌ
−３３〜Ｐ−６５８；Ｌ−３３〜Ｑ−６５７；Ｌ−３３〜Ｌ−６５６；Ｌ−３３
〜Ｖ−６５５；Ｌ−３３〜Ｆ−６５４；Ｌ−３３〜Ｆ−６５３；Ｌ−３３〜Ｙ−
６５２；Ｌ−３３〜Ｇ−６５１；Ｌ−３３〜Ｉ−６５０；Ｌ−３３〜Ｇ−６４９
；Ｌ−３３〜Ｋ−６４８；Ｌ−３３〜Ａ−６４７；Ｌ−３３〜Ｑ−６４６；Ｌ−
３３〜Ｃ−６４５；Ｌ−３３〜Ｉ−６４４；Ｌ−３３〜Ｌ−６４３；Ｌ−３３〜
Ｋ−６４２；Ｌ−３３〜Ｃ−６４１；Ｌ−３３〜Ｒ−６４０；Ｌ−３３〜Ｄ−６
３９；Ｌ−３３〜Ｋ−６３８；Ｌ−３３〜Ｐ−６３７；Ｌ−３３〜Ｓ−６３６；
Ｌ−３３〜Ｖ−６３５；Ｌ−３３〜Ｇ−６３４；Ｌ−３３〜Ａ−６３３；Ｌ−３
３〜Ｙ−６３２；Ｌ−３３〜Ｋ−６３１；Ｌ−３３〜Ｐ−６３０；Ｌ−３３〜Ｉ
−６２９；Ｌ−３３〜Ｗ−６２８；Ｌ−３３〜Ｅ６２７；Ｌ−３３〜Ｖ−６２６
；Ｌ−３３〜Ａ−６２５；Ｌ−３３〜Ｐ−６２４；Ｌ−３３〜Ｇ−６２３；Ｌ−
３３〜Ｓ−６２２；Ｌ−３３〜Ｇ−６２１；Ｌ−３３〜Ｆ−６２０；Ｌ−３３〜
Ｓ−６１９；Ｌ−３３〜Ａ−６１８；Ｌ−３３〜Ｋ−６１７；Ｌ−３３〜Ｓ−６
１６；Ｌ−３３〜Ｆ−６１５；Ｌ−３３〜Ｅ−６１４；Ｌ−３３〜Ｎ−６１３；
Ｌ−３３〜Ｈ−６１２；Ｌ−３３〜Ａ−６１１；Ｌ−３３〜Ｅ−６１０；Ｌ−３
３〜Ｃ−６０９；Ｌ−３３〜Ｑ−６０８；Ｌ−３３〜Ｅ−６０７；Ｌ−３３〜Ｅ
−６０６；Ｌ−３３〜Ｒ−６０５；Ｌ−３３〜Ｆ−６０４；Ｌ−３３〜Ｔ−６０
３；Ｌ−３３〜Ｋ−６０２；Ｌ−３３〜Ｇ−６０１；Ｌ−３３〜Ｎ−６００；Ｌ
−３３〜Ｎ−５９９；Ｌ−３３〜Ｄ−５９８；Ｌ−３３〜Ｐ−５９７；Ｌ−３３
〜Ｃ−５９６；Ｌ−３３〜Ｄ−５９５；Ｌ−３３〜Ｅ−５９４；Ｌ−３３〜Ｌ−
５９３；Ｌ−３３〜Ｎ−５９２；Ｌ−３３〜Ｃ−５９１；Ｌ−３３〜Ｓ−５９０
；Ｌ−３３〜Ｒ−５８９；Ｌ−３３〜Ｙ−５８８；Ｌ−３３〜Ｒ−５８７；Ｌ−
３３〜Ｖ−５８６；Ｌ−３３〜Ｒ−５８５；Ｌ−３３〜Ｋ−５８４；Ｌ−３３〜
Ｇ−５８３；Ｌ−３３〜Ｅ−５８２；Ｌ−３３〜Ｃ−５８１；Ｌ−３３〜Ｙ−５
８０；Ｌ−３３〜Ｋ−５７９；Ｌ−３３〜Ｇ−５７８；Ｌ−３３〜Ｇ−５７７；
Ｌ−３３〜Ｎ−５７６；Ｌ−３３〜Ｋ−５７５；Ｌ−３３〜Ｐ−５７４；Ｌ−３
３〜Ｖ−５７３；Ｌ−３３〜Ｐ−５７２；Ｌ−３３〜Ｎ−５７１；Ｌ−３３〜Ｄ
−５７０；Ｌ−３３〜Ｃ−５６９；Ｌ−３３〜Ｅ−５６８；Ｌ−３３〜Ｒ−５６
７；Ｌ−３３〜Ｍ−５６６；Ｌ−３３〜Ｔ−５６５；Ｌ−３３〜Ｙ−５６４；Ｌ
−３３〜Ｑ−５６３；Ｌ−３３〜Ｖ−５６２；Ｌ−３３〜Ｇ−５６１；Ｌ−３３
〜Ｇ−５６０；Ｌ−３３〜Ｇ−５５９；Ｌ−３３〜Ｃ−５５８；Ｌ−３３〜Ｔ−
５５７；Ｌ−３３〜Ｒ−５５６；Ｌ−３３〜Ｓ−５５５；Ｌ−３３〜Ｃ−５５４
；Ｌ−３３〜Ｄ−５５３；Ｌ−３３〜Ｇ−５５２；Ｌ−３３〜Ｗ−５５１；Ｌ−
３３〜Ｐ−５５０；Ｌ−３３〜Ｇ−５４９；Ｌ−３３〜Ｗ−５４８；Ｌ−３３〜
Ｍ−５４７；Ｌ−３３〜Ｇ−５４６；Ｌ−３３〜Ｗ−５４５；Ｌ−３３〜Ｓ−５
４４；Ｌ−３３〜Ｇ−５４３；Ｌ−３３〜Ｈ−５４２；Ｌ−３３〜Ｆ−５４１；
Ｌ−３３〜Ｐ−５４０；Ｌ−３３〜Ｔ−５３９；Ｌ−３３〜Ｄ−５３８；Ｌ−３
３〜Ｆ−５３７；Ｌ−３３〜Ｈ−５３６；Ｌ−３３〜Ｋ−５３５；Ｌ−３３〜Ｒ
−５３４；Ｌ−３３〜Ｄ−５３３；Ｌ−３３〜Ｔ−５３２；Ｌ−３３〜Ｋ−５３
１；Ｌ−３３〜Ｎ−５３０；Ｌ−３３〜Ｖ−５２９；Ｌ−３３〜Ｃ−５２８；Ｌ
−３３〜Ｋ−５２７；Ｌ−３３〜Ｇ−５２６；Ｌ−３３〜Ｎ−５２５；Ｌ−３３
〜Ｉ−５２４；Ｌ−３３〜Ｃ−５２３；Ｌ−３３〜Ｗ−５２２；Ｌ−３３〜Ｋ−
５２１；Ｌ−３３〜Ｇ−５２０；Ｌ−３３〜Ｅ−５１９；Ｌ−３３〜Ｇ−５１８
；Ｌ−３３〜Ｃ−５１７；Ｌ−３３〜Ｓ−５１６；Ｌ−３３〜Ｔ−５１５；Ｌ−
３３〜Ｇ−５１４；Ｌ−３３〜Ｄ−５１３；Ｌ−３３〜Ａ−５１２；Ｌ−３３〜
Ｗ−５１１；Ｌ−３３〜Ｐ−５１０；Ｌ−３３〜Ｆ−５０９；Ｌ−３３〜Ｈ−５
０８；Ｌ−３３〜Ｋ−５０７；Ｌ−３３〜Ｔ−５０６；Ｌ−３３〜Ｑ−５０５；
Ｌ−３３〜Ｃ−５０４；Ｌ−３３〜Ｖ−５０３；Ｌ−３３〜Ｌ−５０２；Ｌ−３
３〜Ｖ−５０１；Ｌ−３３〜Ｇ−５００；Ｌ−３３〜Ｇ−４９９；Ｌ−３３〜Ｓ
−４９８；Ｌ−３３〜Ｔ−４９７；Ｌ−３３〜Ｇ−４９６；Ｌ−３３〜Ｔ−４９
５；Ｌ−３３〜Ｃ−４９４；Ｌ−３３〜Ｗ−４９３；Ｌ−３３〜Ｌ−４９２；Ｌ
−３３〜Ｔ−４９１；Ｌ−３３〜Ｓ−４９０；Ｌ−３３〜Ｃ−４８９；Ｌ−３３
〜Ｔ−４８８；Ｌ−３３〜Ｓ−４８７；Ｌ−３３〜Ａ−４８６；Ｌ−３３〜Ａ−
４８５；Ｌ−３３〜Ｄ−４８４；Ｌ−３３〜Ｐ−４８３；Ｌ−３３〜Ｃ−４８２
；Ｌ−３３〜Ｈ−４８１；Ｌ−３３〜Ｋ−４８０；Ｌ−３３〜Ｓ−４７９；Ｌ−
３３〜Ｄ−４７８；Ｌ−３３〜Ｅ−４７７；Ｌ−３３〜Ｇ−４７６；Ｌ−３３〜
Ｆ−４７５；Ｌ−３３〜Ｔ−４７４；Ｌ−３３〜Ｆ−４７３；Ｌ−３３〜Ｑ−４
７２；Ｌ−３３〜Ｃ−４７１；Ｌ−３３〜Ｑ−４７０；Ｌ−３３〜Ｒ−４６９；
Ｌ−３３〜Ｎ−４６８；Ｌ−３３〜Ａ−４６７；Ｌ−３３〜Ｄ−４６６；Ｌ−３
３〜Ｙ−４６５；Ｌ−３３〜Ｓ−４６４；Ｌ−３３〜Ｔ−４６３；Ｌ−３３〜Ｇ
−４６２；Ｌ−３３〜Ｐ−４６１；Ｌ−３３〜Ｌ−４６０；Ｌ−３３〜Ｄ−４５
９；Ｌ−３３〜Ｇ−４５８；Ｌ−３３〜Ｐ−４５７；Ｌ−３３〜Ｌ−４５６；Ｌ
−３３〜Ｑ−４５５；Ｌ−３３〜Ｉ−４５４；Ｌ−３３〜Ｐ−４５３；Ｌ−３３
〜Ｎ−４５２；Ｌ−３３〜Ｑ−４５１；Ｌ−３３〜Ｐ−４５０；Ｌ−３３〜Ｋ−
４４９；Ｌ−３３〜Ｄ−４４８；Ｌ−３３〜Ｍ−４４７；Ｌ−３３〜Ｌ−４４６
；Ｌ−３３〜Ｃ−４４５；Ｌ−３３〜Ｅ−４４４；Ｌ−３３〜Ｇ−４４３；Ｌ−
３３〜Ｈ−４４２；Ｌ−３３〜Ｇ−４４１；Ｌ−３３〜Ｎ−４４０；Ｌ−３３〜
Ｄ−４３９；Ｌ−３３〜Ｌ−４３８；Ｌ−３３〜Ｆ−４３７；Ｌ−３３〜Ｓ−４
３６；Ｌ−３３〜Ｔ−４３５；Ｌ−３３〜Ｉ−４３４；Ｌ−３３〜Ｍ−４３３；
Ｌ−３３〜Ｙ−４３２；Ｌ−３３〜Ａ−４３１；Ｌ−３３〜Ｓ−４３０；Ｌ−３
３〜Ｃ−４２９；Ｌ−３３〜Ｐ−４２８；Ｌ−３３〜Ｓ−４２７；Ｌ−３３〜Ｗ
−４２６；Ｌ−３３〜Ｐ−４２５；Ｌ−３３〜Ｑ−４２４；Ｌ−３３〜Ｓ−４２
３；Ｌ−３３〜Ｈ−４２２；Ｌ−３３〜Ｄ−４２１；Ｌ−３３〜Ｌ−４２０；Ｌ
−３３〜Ｎ−４１９；Ｌ−３３〜Ｓ−４１８；Ｌ−３３〜Ｌ−４１７；Ｌ−３３
〜Ｍ−４１６；Ｌ−３３〜Ｓ−４１５；Ｌ−３３〜Ａ−４１４；Ｌ−３３〜Ｍ−
４１３；Ｌ−３３〜Ｍ−４１２；Ｌ−３３〜Ｈ−４１１；Ｌ−３３〜Ｓ−４１０
；Ｌ−３３〜Ｄ−４０９；Ｌ−３３〜Ｑ−４０８；Ｌ−３３〜Ｎ−４０７；Ｌ−
３３〜Ｖ−４０６；Ｌ−３３〜Ｇ−４０５；Ｌ−３３〜Ｎ−４０４；Ｌ−３３〜
Ｌ−４０３；Ｌ−３３〜Ｓ−４０２；Ｌ−３３〜Ａ−４０１；Ｌ−３３〜Ｃ−４
００；Ｌ−３３〜Ｑ−３９９；Ｌ−３３〜Ｋ−３９８；Ｌ−３３〜Ａ−３９７；
Ｌ−３３〜Ｄ−３９６；Ｌ−３３〜Ｄ−３９５；Ｌ−３３〜Ｈ−３９４；Ｌ−３
３〜Ｐ−３９３；Ｌ−３３〜Ｍ−３９２；Ｌ−３３〜Ｎ−３９１；Ｌ−３３〜Ｆ
−３９０；Ｌ−３３〜Ｖ−３８９；Ｌ−３３〜Ｈ−３８８；Ｌ−３３〜Ｇ−３８
７；Ｌ−３３〜Ｌ−３８６；Ｌ−３３〜Ｅ−３８５；Ｌ−３３〜Ｈ−３８４；Ｌ
−３３〜Ａ−３８３；Ｌ−３３〜Ｔ−３８２；Ｌ−３３〜Ｔ−３８１；Ｌ−３３
〜Ｆ−３８０；Ｌ−３３〜Ａ−３７９；Ｌ−３３〜Ａ−３７８；Ｌ−３３〜Ｑ−
３７７；Ｌ−３３〜Ｌ−３７６；Ｌ−３３〜Ｇ−３７５；Ｌ−３３〜Ｄ−３７４
；Ｌ−３３〜Ｄ−３７３；Ｌ−３３〜Ｅ−３７２；Ｌ−３３〜Ｉ−３７１；Ｌ−
３３〜Ｖ−３７０；Ｌ−３３〜Ｓ−３６９；Ｌ−３３〜Ｃ−３６８；Ｌ−３３〜
Ｓ−３６７；Ｌ−３３〜Ｒ−３６６；Ｌ−３３〜Ｓ−３６５；Ｌ−３３〜Ｐ−３
６４；Ｌ−３３〜Ｄ−３６３；Ｌ−３３〜Ｃ−３６２；Ｌ−３３〜Ｖ−３６１；
Ｌ−３３〜Ｔ−３６０；Ｌ−３３〜Ｇ−３５９；Ｌ−３３〜Ｖ−３５８；Ｌ−３
３〜Ｄ−３５７；Ｌ−３３〜Ａ−３５６；Ｌ−３３〜Ｍ−３５５；Ｌ−３３〜Ｇ
−３５４；Ｌ−３３〜Ｌ−３５３；Ｌ−３３〜Ｔ−３５２；Ｌ−３３〜Ｄ−３５
１；Ｌ−３３〜Ｃ−３５０；Ｌ−３３〜Ｔ−３４９；Ｌ−３３〜Ｑ−３４８；Ｌ
−３３〜Ｓ−３４７；Ｌ−３３〜Ｇ−３４６；Ｌ−３３〜Ｃ−３４５；Ｌ−３３
〜Ｌ−３４４；Ｌ−３３〜Ｄ−３４３；Ｌ−３３〜Ｑ−３４２；Ｌ−３３〜Ｒ−
３４１；Ｌ−３３〜Ｔ−３４０；Ｌ−３３〜Ｆ−３３９；Ｌ−３３〜Ｌ−３３８
；Ｌ−３３〜Ｉ−３３７；Ｌ−３３〜Ａ−３３６；Ｌ−３３〜Ｔ−３３５；Ｌ−
３３〜Ｄ−３３４；Ｌ−３３〜Ｙ−３３３；Ｌ−３３〜Ｈ−３３２；Ｌ−３３〜
Ｅ−３３１；Ｌ−３３〜Ａ−３３０；Ｌ−３３〜Ｄ−３２９；Ｌ−３３〜Ｒ−３
２８；Ｌ−３３〜Ｄ−３２７；Ｌ−３３〜Ｓ−３２６；Ｌ−３３〜Ｐ−３２５；
Ｌ−３３〜Ｐ−３２４；Ｌ−３３〜Ｎ−３２３；Ｌ−３３〜Ｈ−３２２；Ｌ−３
３〜Ｑ−３２１；Ｌ−３３〜Ｋ−３２０；Ｌ−３３〜Ｑ−３１９；Ｌ−３３〜Ｗ
−３１８；Ｌ−３３〜Ｎ−３１７；Ｌ−３３〜Ｃ−３１６；Ｌ−３３〜Ｆ−３１
５；Ｌ−３３〜Ｎ−３１４；Ｌ−３３〜Ｒ−３１３；Ｌ−３３〜Ｌ−３１２；Ｌ
−３３〜Ｔ−３１１；Ｌ−３３〜Ｌ−３１０；Ｌ−３３〜Ａ−３０９；Ｌ−３３
〜Ａ−３０８；Ｌ−３３〜Ｎ−３０７；Ｌ−３３〜Ｓ−３０６；Ｌ−３３〜Ｔ−
３０５；Ｌ−３３〜Ｖ−３０４；Ｌ−３３〜Ｅ−３０３；Ｌ−３３〜Ｐ−３０２
；Ｌ−３３〜Ｇ−３０１；Ｌ−３３〜Ｋ−３００；Ｌ−３３〜Ｑ−２９９；Ｌ−
３３〜Ｅ−２９８；Ｌ−３３〜Ｄ−２９７；Ｌ−３３〜Ｈ−２９６；Ｌ−３３〜
Ｉ−２９５；Ｌ−３３〜Ｖ−２９４；Ｌ−３３〜Ｌ−２９３；Ｌ−３３〜Ｉ−２
９２；Ｌ−３３〜Ｋ−２９１；Ｌ−３３〜Ｖ−２９０；Ｌ−３３〜Ｖ−２８９；
Ｌ−３３〜Ｖ−２８８；Ｌ−３３〜Ｌ−２８７；Ｌ−３３〜Ｓ−２８６；Ｌ−３
３〜Ｖ−２８５；Ｌ−３３〜Ｓ−２８４；Ｌ−３３〜Ｎ−２８３；Ｌ−３３〜Ｒ
−２８２；Ｌ−３３〜Ｉ−２８１；Ｌ−３３〜Ｓ−２８０；Ｌ−３３〜Ｐ−２７
９；Ｌ−３３〜Ｈ−２７８；Ｌ−３３〜Ｋ−２７７；Ｌ−３３〜Ｙ−２７６；Ｌ
−３３〜Ｌ−２７５；Ｌ−３３〜Ｒ−２７４；Ｌ−３３〜Ａ−２７３；Ｌ−３３
〜Ａ−２７２；Ｌ−３３〜Ｖ−２７１；Ｌ−３３〜Ｓ−２７０；Ｌ−３３〜Ｆ−
２６９；Ｌ−３３〜Ｌ−２６８；Ｌ−３３〜Ｔ−２６７；Ｌ−３３〜Ｌ−２６６
；Ｌ−３３〜Ｌ−２６５；Ｌ−３３〜Ｙ−２６４；Ｌ−３３〜Ｈ−２６３；Ｌ−
３３〜Ｋ−２６２；Ｌ−３３〜Ｌ−２６１；Ｌ−３３〜Ｇ−２６０；Ｌ−３３〜
Ｓ−２５９；Ｌ−３３〜Ｇ−２５８；Ｌ−３３〜Ｈ−２５７；Ｌ−３３〜Ｆ−２
５６；Ｌ−３３〜Ｅ−２５５；Ｌ−３３〜Ａ−２５４；Ｌ−３３〜Ｍ−２５３；
Ｌ−３３〜Ｓ−２５２；Ｌ−３３〜Ｑ−２５１；Ｌ−３３〜Ｄ−２５０；Ｌ−３
３〜Ａ−２４９；Ｌ−３３〜Ｖ−２４８；Ｌ−３３〜Ｌ−２４７；Ｌ−３３〜Ｍ
−２４６；Ｌ−３３〜Ｔ−２４５；Ｌ−３３〜Ｅ−２４４；Ｌ−３３〜Ｖ−２４
３；Ｌ−３３〜Ｙ−２４２；Ｌ−３３〜Ｒ−２４１；Ｌ−３３〜Ｈ−２４０；Ｌ
−３３〜Ｓ−２３９；Ｌ−３３〜Ｓ−２３８；Ｌ−３３〜Ｖ−２３７；Ｌ−３３
〜Ｆ−２３６；Ｌ−３３〜Ｒ−２３５；Ｌ−３３〜Ｋ−２３４；Ｌ−３３〜Ｋ−
２３３；Ｌ−３３〜Ｒ−２３２；Ｌ−３３〜Ｉ−２３１；Ｌ−３３〜Ｓ−２３０
；Ｌ−３３〜Ｇ−２２９；Ｌ−３３〜Ｔ−２２８；Ｌ−３３〜Ｇ−２２７；Ｌ−
３３〜Ｔ−２２６；Ｌ−３３〜Ｐ−２２５；Ｌ−３３〜Ｑ−２２４；Ｌ−３３〜
Ｇ−２２３；Ｌ−３３〜Ｖ−２２２；Ｌ−３３〜Ｇ−２２１；Ｌ−３３〜Ｑ−２
２０；Ｌ−３３〜Ｌ−２１９；Ｌ−３３〜Ａ−２１８；Ｌ−３３〜Ｐ−２１７；
Ｌ−３３〜Ｄ−２１６；Ｌ−３３〜Ｑ−２１５；Ｌ−３３〜Ｐ−２１４；Ｌ−３
３〜Ｓ−２１３；Ｌ−３３〜Ｗ−２１２；Ｌ−３３〜Ｑ−２１１；Ｌ−３３〜Ｐ
−２１０；Ｌ−３３〜Ｇ−２０９；Ｌ−３３〜Ｅ−２０８；Ｌ−３３〜Ｄ−２０
７；Ｌ−３３〜Ｅ−２０６；Ｌ−３３〜Ｇ−２０５；Ｌ−３３〜Ｅ−２０４；Ｌ
−３３〜Ｔ−２０３；Ｌ−３３〜Ｇ−２０２；Ｌ−３３〜Ｅ−２０１；Ｌ−３３
〜Ｄ−２００；Ｌ−３３〜Ｅ−１９９；Ｌ−３３〜Ｄ−１９８；Ｌ−３３〜Ｅ−
１９７；Ｌ−３３〜Ｔ−１９６；Ｌ−３３〜Ｅ−１９５；Ｌ−３３〜Ａ−１９４
；Ｌ−３３〜Ｋ−１９３；Ｌ−３３〜Ｇ−１９２；Ｌ−３３〜Ｔ−１９１；Ｌ−
３３〜Ｐ−１９０；Ｌ−３３〜Ｒ−１８９；Ｌ−３３〜Ｐ−１８８；Ｌ−３３〜
Ｅ−１８７；Ｌ−３３〜Ｄ−１８６；Ｌ−３３〜Ｄ−１８５；Ｌ−３３〜Ｖ−１
８４；Ｌ−３３〜Ｖ−１８３；Ｌ−３３〜Ｇ−１８２；Ｌ−３３〜Ｃ−１８１；
Ｌ−３３〜Ｔ−１８０；Ｌ−３３〜Ｇ−１７９；Ｌ−３３〜Ｇ−１７８；Ｌ−３
３〜Ｖ−１７７；Ｌ−３３〜Ｄ−１７６；Ｌ−３３〜Ｇ−１７５；Ｌ−３３〜Ｑ
−１７４；Ｌ−３３〜Ｒ−１７３；Ｌ−３３〜Ｎ−１７２；Ｌ−３３〜Ｒ−１７
１；Ｌ−３３〜Ｒ−１７０；Ｌ−３３〜Ｌ−１６９；Ｌ−３３〜Ｌ−１６８；Ｌ
−３３〜Ｈ−１６７；Ｌ−３３〜Ｆ−１６６；Ｌ−３３〜Ｑ−１６５；Ｌ−３３
〜Ｌ−１６４；Ｌ−３３〜Ｐ−１６３；Ｌ−３３〜Ａ−１６２；Ｌ−３３〜Ｐ−
１６１；Ｌ−３３〜Ｐ−１６０；Ｌ−３３〜Ｋ−１５９；Ｌ−３３〜Ｅ−１５８
；Ｌ−３３〜Ｇ−１５７；Ｌ−３３〜Ｐ−１５６；Ｌ−３３〜Ａ−１５５；Ｌ−
３３〜Ａ−１５４；Ｌ−３３〜Ｔ−１５３；Ｌ−３３〜Ａ−１５２；Ｌ−３３〜
Ｌ−１５１；Ｌ−３３〜Ｒ−１５０；Ｌ−３３〜Ｅ−１４９；Ｌ−３３〜Ｓ−１
４８；Ｌ−３３〜Ａ−１４７；Ｌ−３３〜Ａ−１４６；Ｌ−３３〜Ｐ−１４５；
Ｌ−３３〜Ｌ−１４４；Ｌ−３３〜Ｐ−１４３；Ｌ−３３〜Ｑ−１４２；Ｌ−３
３〜Ｉ−１４１；Ｌ−３３〜Ｆ−１４０；Ｌ−３３〜Ｙ−１３９；Ｌ−３３〜Ａ
−１３８；Ｌ−３３〜Ｅ−１３７；Ｌ−３３〜Ｇ−１３６；Ｌ−３３〜Ｌ−１３
５；Ｌ−３３〜Ｌ−１３４；Ｌ−３３〜Ｙ−１３３；Ｌ−３３〜Ｆ−１３２；Ｌ
−３３〜Ａ−１３１；Ｌ−３３〜Ｇ−１３０；Ｌ−３３〜Ｒ−１２９；Ｌ−３３
〜Ｖ−１２８；Ｌ−３３〜Ｇ−１２７；Ｌ−３３〜Ｅ−１２６；Ｌ−３３〜Ｃ−
１２５；Ｌ−３３〜Ｌ−１２４；Ｌ−３３〜Ｓ−１２３；Ｌ−３３〜Ｌ−１２２
；Ｌ−３３〜Ａ−１２１；Ｌ−３３〜Ａ−１２０；Ｌ−３３〜Ａ−１１９；Ｌ−
３３〜Ｓ−１１８；Ｌ−３３〜Ｓ−１１７；Ｌ−３３〜Ｐ−１１６；Ｌ−３３〜
Ｄ−１１５；Ｌ−３３〜Ｇ−１１４；Ｌ−３３〜Ｎ−１１３；Ｌ−３３〜Ｖ−１
１２；Ｌ−３３〜Ｔ１１１；Ｌ−３３〜Ｇ−１１０；Ｌ−３３〜Ｓ−１０９；Ｌ
−３３〜Ｙ−１０８；Ｌ−３３〜Ｆ−１０７；Ｌ−３３〜Ｃ−１０６；Ｌ−３３
〜Ｈ−１０５；Ｌ−３３〜Ａ−１０４；Ｌ−３３〜Ｌ−１０３；Ｌ−３３〜Ｄ−
１０２；Ｌ−３３〜Ｔ−１０１；Ｌ−３３〜Ｅ−１００；Ｌ−３３〜Ｐ−９９；
Ｌ−３３〜Ｌ−９８；Ｌ−３３〜Ｐ−９７；Ｌ−３３〜Ｔ−９６；Ｌ−３３〜Ｅ
−９５；Ｌ−３３〜Ｓ−９４；Ｌ−３３〜Ｇ−９３；Ｌ−３３〜Ｓ−９２；Ｌ−
３３〜Ｋ−９１；Ｌ−３３〜Ｒ−９０；Ｌ−３３〜Ｇ−８９；Ｌ−３３〜Ｖ−８
８；Ｌ−３３〜Ｎ−８７；Ｌ−３３〜Ｑ−８６；Ｌ−３３〜Ｌ−８５；Ｌ−３３
〜Ｔ−８４；Ｌ−３３〜Ｆ−８３；Ｌ−３３〜Ｇ−８２；Ｌ−３３〜Ｐ８１；Ｌ
−３３〜Ａ−８０；Ｌ−３３〜Ｌ−７９；Ｌ−３３〜Ｆ−７８；Ｌ−３３〜Ｓ−
７７；Ｌ−３３〜Ｓ−７６；Ｌ−３３〜Ｄ−７５；Ｌ−３３〜Ｐ−７４；Ｌ−３
３〜Ｒ−７３；Ｌ−３３〜Ｌ−７２；Ｌ−３３〜Ｅ−７１；Ｌ−３３〜Ｌ−７０
；Ｌ−３３〜Ｄ−６９；Ｌ−３３〜Ｌ−６８；Ｌ−３３〜Ｑ−６７；Ｌ−３３〜
Ｑ−６６；Ｌ−３３〜Ｄ−６５；Ｌ−３３〜Ｆ−６４；Ｌ−３３〜Ａ−６３；Ｌ
−３３〜Ｈ−６２；Ｌ−３３〜Ｌ−６１；Ｌ−３３〜Ｒ−６０；Ｌ−３３〜Ｌ−
５９；Ｌ−３３〜Ｒ−５８；Ｌ−３３〜Ｔ−５７；Ｌ−３３〜Ｔ−５６；Ｌ−３
３〜Ｇ−５５；Ｌ−３３〜Ｈ−５４；Ｌ−３３〜Ｇ−５３；Ｌ−３３〜Ｐ−５２
；Ｌ−３３〜Ａ−５１；Ｌ−３３〜Ｒ−５０；Ｌ−３３〜Ｅ−４９；Ｌ−３３〜
Ｌ−４８；Ｌ−３３〜Ｅ−４７；Ｌ−３３〜Ｐ−４６；Ｌ−３３〜Ｖ−４５；Ｌ
−３３〜Ｖ−４４；Ｌ−３３〜Ｌ−４３；Ｌ−３３〜Ｅ−４２；Ｌ−３３〜Ｅ−
４１；Ｌ−３３〜Ｄ−４０；および／またはＬ−３３〜Ｅ−３９。
番号２の以下の残基のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む：Ｌ−３３〜Ｓ−
９５０；Ｌ−３３〜Ｃ−９４９；Ｌ−３３〜Ｅ−９４８；Ｌ−３３〜Ａ−９４７
；Ｌ−３３〜Ｍ−９４６；Ｌ−３３〜Ｔ−９４５；Ｌ−３３〜Ｃ−９４４；Ｌ−
３３〜Ｆ−９４３；Ｌ−３３〜Ｄ−９４２；Ｌ−３３〜Ｉ−９４１；Ｌ−３３〜
Ｆ−９４０；Ｌ−３３〜Ｈ−９３９；Ｌ−３３〜Ｋ−９３８；Ｌ−３３〜Ｐ−９
３７；Ｌ−３３〜Ｋ−９３６；Ｌ−３３〜Ｋ−９３５；Ｌ−３３〜Ｌ−９３４；
Ｌ−３３〜Ｐ−９３３；Ｌ−３３〜Ｄ−９３２；Ｌ−３３〜Ｃ−９３１；Ｌ−３
３〜Ｓ−９３０；Ｌ−３３〜Ｅ−９２９；Ｌ−３３〜Ｈ−９２８；Ｌ−３３〜Ｓ
−９２７；Ｌ−３３〜Ｌ−９２６；Ｌ−３３〜Ｖ−９２５；Ｌ−３３〜Ｇ−９２
４；Ｌ−３３〜Ｇ−９２３；Ｌ−３３〜Ｄ−９２２；Ｌ−３３〜Ｈ−９２１；Ｌ
−３３〜Ｓ−９２０；Ｌ−３３〜Ｌ−９１９；Ｌ−３３〜Ｃ−９１８；Ｌ−３３
〜Ｋ−９１７；Ｌ−３３〜Ｌ−９１６；Ｌ−３３〜Ｓ−９１５；Ｌ−３３〜Ｒ−
９１４；Ｌ−３３〜Ｋ−９１３；Ｌ−３３〜Ｋ−９１２；Ｌ−３３〜Ｙ−９１１
；Ｌ−３３〜Ｇ−９１０；Ｌ−３３〜Ｋ−９０９；Ｌ−３３〜Ｇ−９０８；Ｌ−
３３〜Ｃ−９０７；Ｌ−３３〜Ｔ−９０６；Ｌ−３３〜Ｋ−９０５；Ｌ−３３〜
Ｓ−９０４；Ｌ−３３〜Ｃ−９０３；Ｌ−３３〜Ｓ−９０２；Ｌ−３３〜Ｓ−９
０１；Ｌ−３３〜Ｗ−９００；Ｌ−３３〜Ｅ−８９９；Ｌ−３３〜Ｇ−８９８；
Ｌ−３３〜Ｌ−８９７；Ｌ−３３〜Ｑ−８９６；Ｌ−３３〜Ｗ−８９５；Ｌ−３
３〜Ｑ−８９４；Ｌ−３３〜Ｐ−８９３；Ｌ−３３〜Ｃ−８９２；Ｌ−３３〜Ｐ
−８９１；Ｌ−３３〜Ｈ−８９０；Ｌ−３３〜Ｄ−８８９；Ｌ−３３〜Ａ−８８
８；Ｌ−３３〜Ｃ−８８７；Ｌ−３３〜Ｐ−８８６；Ｌ−３３〜Ｒ−８８５；Ｌ
−３３〜Ｔ−８８４；Ｌ−３３〜Ｓ−８８３；Ｌ−３３〜Ａ−８８２；Ｌ−３３
〜Ｐ−８８１；Ｌ−３３〜Ｋ−８８０；Ｌ−３３〜Ｖ−８７９；Ｌ−３３〜Ｅ−
８７８；Ｌ−３３〜Ｋ−８７７；Ｌ−３３〜Ａ−８７６；Ｌ−３３〜Ｃ−８７５
；Ｌ−３３〜Ｅ−８７４；Ｌ−３３〜Ｓ−８７３；Ｌ−３３〜Ａ−８７２；Ｌ−
３３〜Ｐ−８７１；Ｌ−３３〜Ｑ−８７０；Ｌ−３３〜Ｇ−８６９；Ｌ−３３〜
Ｎ−８６８；Ｌ−３３〜Ｉ−８６７；Ｌ−３３〜Ｄ−８６６；Ｌ−３３〜Ｒ−８
６５；Ｌ−３３〜Ｃ−８６４；Ｌ−３３〜Ｅ−８６３；Ｌ−３３〜Ｖ−８６２；
Ｌ−３３〜Ｌ−８６１；Ｌ−３３〜Ｒ−８６０；Ｌ−３３〜Ｒ−８５９；Ｌ−３
３〜Ｑ−８５８；Ｌ−３３〜Ｗ−８５７；Ｌ−３３〜Ｇ−８５６；Ｌ−３３〜Ｌ
−８５５；Ｌ−３３〜Ｅ−８５４；Ｌ−３３〜Ｃ−８５３；Ｌ−３３〜Ｓ−８５
２；Ｌ−３３〜Ｋ−８５１；Ｌ−３３〜Ｓ−８５０；Ｌ−３３〜Ｃ−８４９；Ｌ
−３３〜Ｅ８４８；Ｌ−３３〜Ｇ−８４７；Ｌ−３３〜Ｗ−８４６；Ｌ−３３〜
Ｅ−８４５；Ｌ−３３〜Ｅ−８４４；Ｌ−３３〜Ｉ−８４３；Ｌ−３３〜Ｖ−８
４２；Ｌ−３３〜Ｗ−８４１；Ｌ−３３〜Ａ−８４０；Ｌ−３３〜Ｓ−８３９；
Ｌ−３３〜Ｆ−８３８；Ｌ−３３〜Ｔ−８３７；Ｌ−３３〜Ｐ−８３６；Ｌ−３
３〜Ｉ−８３５；Ｌ−３３〜Ａ−８３４；Ｌ−３３〜Ｎ−８３３；Ｌ−３３〜Ｆ
−８３２；Ｌ−３３〜Ｓ−８３１；Ｌ−３３〜Ｅ−８３０；Ｌ−３３〜Ｋ−８２
９；Ｌ−３３〜Ｋ−８２８；Ｌ−３３〜Ｋ−８２７；Ｌ−３３〜Ｋ−８２６；Ｌ
−３３〜Ｖ−８２５；Ｌ−３３〜Ｆ−８２４；Ｌ−３３〜Ｙ−８２３；Ｌ−３３
〜Ｔ−８２２；Ｌ−３３〜Ｙ−８２１；Ｌ−３３〜Ｋ−８２０；Ｌ−３３〜Ｉ−
８１９；Ｌ−３３〜Ｋ−８１８；Ｌ−３３〜Ｐ−８１７；Ｌ−３３〜Ｒ−８１６
；Ｌ−３３〜Ｌ−８１５；Ｌ−３３〜Ａ８１４；Ｌ−３３〜Ｎ−８１３；Ｌ−３
３〜Ｇ−８１２；Ｌ−３３〜Ｖ−８１１；Ｌ−３３〜Ｔ−８１０；Ｌ−３３〜Ｌ
−８０９；Ｌ−３３〜Ｖ−８０８；Ｌ−３３〜Ｑ−８０７；Ｌ−３３〜Ｉ−８０
６；Ｌ−３３〜Ｔ−８０５；Ｌ−３３〜Ｌ−８０４；Ｌ−３３〜Ｐ−８０３；Ｌ
−３３〜Ｅ−８０２；Ｌ−３３〜Ｋ−８０１；Ｌ−３３〜Ｌ−８００；Ｌ−３３
〜Ｐ−７９９；Ｌ−３３〜Ｓ−７９８；Ｌ−３３〜Ｆ−７９７；Ｌ−３３〜Ｓ−
７９６；Ｌ−３３〜Ｒ−７９５；Ｌ−３３〜Ｉ−７９４；Ｌ−３３〜Ｒ−７９３
；Ｌ−３３〜Ｅ−７９２；Ｌ−３３〜Ｌ−７９１；Ｌ−３３〜Ａ−７９０；Ｌ−
３３〜Ａ−７８９；Ｌ−３３〜Ｓ−７８８；Ｌ−３３〜Ｓ−７８７；Ｌ−３３〜
Ｇ−７８６；Ｌ−３３〜Ｓ−７８５；Ｌ−３３〜Ｙ−７８４；Ｌ−３３〜Ｒ−７
８３；Ｌ−３３〜Ｌ−７８２；Ｌ−３３〜Ｖ−７８１；Ｌ−３３〜Ｖ−７８０；
Ｌ−３３〜Ｇ−７７９；Ｌ−３３〜Ｋ−７７８；Ｌ−３３〜Ｙ−７７７；Ｌ−３
３〜Ｍ−７７６；Ｌ−３３〜Ｉ−７７５；Ｌ−３３〜Ｄ−７７４；Ｌ−３３〜Ｑ
−７７３；Ｌ−３３〜Ｅ−７７２；Ｌ−３３〜Ｌ−７７１；Ｌ−３３〜Ｔ−７７
０；Ｌ−３３〜Ｓ−７６９；Ｌ−３３〜Ｌ−７６８；Ｌ−３３〜Ｔ−７６７；Ｌ
−３３〜Ｙ−７６６；Ｌ−３３〜Ｄ−７６５；Ｌ−３３〜Ｇ−７６４；Ｌ−３３
〜Ｎ−７６３；Ｌ−３３〜Ｌ−７６２；Ｌ−３３〜Ｉ−７６１；Ｌ−３３〜Ｙ−
７６０；Ｌ−３３〜Ｔ−７５９；Ｌ−３３〜Ｇ−７５８；Ｌ−３３〜Ｄ−７５７
；Ｌ−３３〜Ａ−７５６；Ｌ−３３〜Ａ−７５５；Ｌ−３３〜Ｋ−７５４；Ｌ−
３３〜Ｉ−７５３；Ｌ−３３〜Ａ−７５２；Ｌ−３３〜Ｌ−７５１；Ｌ−３３〜
Ｆ−７５０；Ｌ−３３〜Ｓ−７４９；Ｌ−３３〜Ｇ−７４８；Ｌ−３３〜Ｎ−７
４７；Ｌ−３３〜Ｎ−７４６；Ｌ−３３〜Ｒ−７４５；Ｌ−３３〜Ｓ−７４４；
Ｌ−３３〜Ｇ−７４３；Ｌ−３３〜Ｒ−７４２；Ｌ−３３〜Ｑ−７４１；Ｌ−３
３〜Ｎ−７４０；Ｌ−３３〜Ｒ−７３９；Ｌ−３３〜Ｑ−７３８；Ｌ−３３〜Ｋ
−７３７；Ｌ−３３〜Ｖ−７３６；Ｌ−３３〜Ｅ−７３５；Ｌ−３３〜Ｉ−７３
４；Ｌ−３３〜Ｎ−７３３；Ｌ−３３〜Ｔ−７３２；Ｌ−３３〜Ａ−７３１；Ｌ
−３３〜Ｇ−７３０；Ｌ−３３〜Ｔ−７２９；Ｌ−３３〜Ｐ−７２８；Ｌ−３３
〜Ｉ−７２７；Ｌ−３３〜Ｔ−７２６；Ｌ−３３〜Ｉ−７２５；Ｌ−３３〜Ｉ−
７２４；Ｌ−３３〜Ｄ−７２３；Ｌ−３３〜Ｈ−７２２；Ｌ−３３〜Ｙ−７２１
；Ｌ−３３〜Ｇ−７２０；Ｌ−３３〜Ｐ−７１９；Ｌ−３３〜Ｋ−７１８；Ｌ−
３３〜Ａ−７１７；Ｌ−３３〜Ｓ−７１６；Ｌ−３３〜Ｔ−７１５；Ｌ−３３〜
Ｖ−７１４；Ｌ−３３〜Ｓ−７１３；Ｌ−３３〜Ｇ−７１２；Ｌ−３３〜Ｓ−７
１１；Ｌ−３３〜Ｉ−７１０；Ｌ−３３〜Ｋ−７０９；Ｌ−３３〜Ｋ−７０８；
Ｌ−３３〜Ｃ−７０７；Ｌ−３３〜Ｔ−７０６；Ｌ−３３〜Ｓ−７０５；Ｌ−３
３〜Ｇ−７０４；Ｌ−３３〜Ｎ−７０３；Ｌ−３３〜Ｇ−７０２；Ｌ−３３〜Ｇ
−７０１；Ｌ−３３〜Ｃ−７００；Ｌ−３３〜Ｖ−６９９；Ｌ−３３〜Ｇ−６９
８；Ｌ−３３〜Ｃ−６９７；Ｌ−３３〜Ｋ−６９６；Ｌ−３３〜Ｄ−６９５；Ｌ
−３３〜Ｆ−６９４；Ｌ−３３〜Ｋ−６９３；Ｌ−３３〜Ｋ−６９２；Ｌ−３３
〜Ｋ−６９１；Ｌ−３３〜Ｓ−６９０；Ｌ−３３〜Ｄ−６８９；Ｌ−３３〜Ｉ−
６８８；Ｌ−３３〜Ｉ−６８７；Ｌ−３３〜Ｒ−６８６；Ｌ−３３〜Ｄ−６８５
；Ｌ−３３〜Ｃ−６８４；Ｌ−３３〜Ｇ−６８３；Ｌ−３３〜Ａ−６８２；Ｌ−
３３〜Ｋ−６８１；Ｌ−３３〜Ｖ−６８０；Ｌ−３３〜Ｃ−６７９；Ｌ−３３〜
Ｑ−６７８；Ｌ−３３〜Ｇ−６７７；Ｌ−３３〜Ｑ−６７６；Ｌ−３３〜Ｖ−６
７５；Ｌ−３３〜Ｃ−６７４；Ｌ−３３〜Ｖ−６７３；Ｌ−３３〜Ｓ−６７２；
Ｌ−３３〜Ｔ−６７１；Ｌ−３３〜Ｓ−６７０；Ｌ−３３〜Ｄ−６６９；Ｌ−３
３〜Ｐ−６６８；Ｌ−３３〜Ｓ−６６７；Ｌ−３３〜Ｃ−６６６；Ｌ−３３〜Ｐ
−６６５；Ｌ−３３〜Ｔ−６６４；Ｌ−３３〜Ｇ−６６３；Ｌ−３３〜Ｄ−６６
２；Ｌ−３３〜Ｖ−６６１；Ｌ−３３〜Ｖ−６６０；Ｌ−３３〜Ｋ−６５９；Ｌ
−３３〜Ｐ−６５８；Ｌ−３３〜Ｑ−６５７；Ｌ−３３〜Ｌ−６５６；Ｌ−３３
〜Ｖ−６５５；Ｌ−３３〜Ｆ−６５４；Ｌ−３３〜Ｆ−６５３；Ｌ−３３〜Ｙ−
６５２；Ｌ−３３〜Ｇ−６５１；Ｌ−３３〜Ｉ−６５０；Ｌ−３３〜Ｇ−６４９
；Ｌ−３３〜Ｋ−６４８；Ｌ−３３〜Ａ−６４７；Ｌ−３３〜Ｑ−６４６；Ｌ−
３３〜Ｃ−６４５；Ｌ−３３〜Ｉ−６４４；Ｌ−３３〜Ｌ−６４３；Ｌ−３３〜
Ｋ−６４２；Ｌ−３３〜Ｃ−６４１；Ｌ−３３〜Ｒ−６４０；Ｌ−３３〜Ｄ−６
３９；Ｌ−３３〜Ｋ−６３８；Ｌ−３３〜Ｐ−６３７；Ｌ−３３〜Ｓ−６３６；
Ｌ−３３〜Ｖ−６３５；Ｌ−３３〜Ｇ−６３４；Ｌ−３３〜Ａ−６３３；Ｌ−３
３〜Ｙ−６３２；Ｌ−３３〜Ｋ−６３１；Ｌ−３３〜Ｐ−６３０；Ｌ−３３〜Ｉ
−６２９；Ｌ−３３〜Ｗ−６２８；Ｌ−３３〜Ｅ６２７；Ｌ−３３〜Ｖ−６２６
；Ｌ−３３〜Ａ−６２５；Ｌ−３３〜Ｐ−６２４；Ｌ−３３〜Ｇ−６２３；Ｌ−
３３〜Ｓ−６２２；Ｌ−３３〜Ｇ−６２１；Ｌ−３３〜Ｆ−６２０；Ｌ−３３〜
Ｓ−６１９；Ｌ−３３〜Ａ−６１８；Ｌ−３３〜Ｋ−６１７；Ｌ−３３〜Ｓ−６
１６；Ｌ−３３〜Ｆ−６１５；Ｌ−３３〜Ｅ−６１４；Ｌ−３３〜Ｎ−６１３；
Ｌ−３３〜Ｈ−６１２；Ｌ−３３〜Ａ−６１１；Ｌ−３３〜Ｅ−６１０；Ｌ−３
３〜Ｃ−６０９；Ｌ−３３〜Ｑ−６０８；Ｌ−３３〜Ｅ−６０７；Ｌ−３３〜Ｅ
−６０６；Ｌ−３３〜Ｒ−６０５；Ｌ−３３〜Ｆ−６０４；Ｌ−３３〜Ｔ−６０
３；Ｌ−３３〜Ｋ−６０２；Ｌ−３３〜Ｇ−６０１；Ｌ−３３〜Ｎ−６００；Ｌ
−３３〜Ｎ−５９９；Ｌ−３３〜Ｄ−５９８；Ｌ−３３〜Ｐ−５９７；Ｌ−３３
〜Ｃ−５９６；Ｌ−３３〜Ｄ−５９５；Ｌ−３３〜Ｅ−５９４；Ｌ−３３〜Ｌ−
５９３；Ｌ−３３〜Ｎ−５９２；Ｌ−３３〜Ｃ−５９１；Ｌ−３３〜Ｓ−５９０
；Ｌ−３３〜Ｒ−５８９；Ｌ−３３〜Ｙ−５８８；Ｌ−３３〜Ｒ−５８７；Ｌ−
３３〜Ｖ−５８６；Ｌ−３３〜Ｒ−５８５；Ｌ−３３〜Ｋ−５８４；Ｌ−３３〜
Ｇ−５８３；Ｌ−３３〜Ｅ−５８２；Ｌ−３３〜Ｃ−５８１；Ｌ−３３〜Ｙ−５
８０；Ｌ−３３〜Ｋ−５７９；Ｌ−３３〜Ｇ−５７８；Ｌ−３３〜Ｇ−５７７；
Ｌ−３３〜Ｎ−５７６；Ｌ−３３〜Ｋ−５７５；Ｌ−３３〜Ｐ−５７４；Ｌ−３
３〜Ｖ−５７３；Ｌ−３３〜Ｐ−５７２；Ｌ−３３〜Ｎ−５７１；Ｌ−３３〜Ｄ
−５７０；Ｌ−３３〜Ｃ−５６９；Ｌ−３３〜Ｅ−５６８；Ｌ−３３〜Ｒ−５６
７；Ｌ−３３〜Ｍ−５６６；Ｌ−３３〜Ｔ−５６５；Ｌ−３３〜Ｙ−５６４；Ｌ
−３３〜Ｑ−５６３；Ｌ−３３〜Ｖ−５６２；Ｌ−３３〜Ｇ−５６１；Ｌ−３３
〜Ｇ−５６０；Ｌ−３３〜Ｇ−５５９；Ｌ−３３〜Ｃ−５５８；Ｌ−３３〜Ｔ−
５５７；Ｌ−３３〜Ｒ−５５６；Ｌ−３３〜Ｓ−５５５；Ｌ−３３〜Ｃ−５５４
；Ｌ−３３〜Ｄ−５５３；Ｌ−３３〜Ｇ−５５２；Ｌ−３３〜Ｗ−５５１；Ｌ−
３３〜Ｐ−５５０；Ｌ−３３〜Ｇ−５４９；Ｌ−３３〜Ｗ−５４８；Ｌ−３３〜
Ｍ−５４７；Ｌ−３３〜Ｇ−５４６；Ｌ−３３〜Ｗ−５４５；Ｌ−３３〜Ｓ−５
４４；Ｌ−３３〜Ｇ−５４３；Ｌ−３３〜Ｈ−５４２；Ｌ−３３〜Ｆ−５４１；
Ｌ−３３〜Ｐ−５４０；Ｌ−３３〜Ｔ−５３９；Ｌ−３３〜Ｄ−５３８；Ｌ−３
３〜Ｆ−５３７；Ｌ−３３〜Ｈ−５３６；Ｌ−３３〜Ｋ−５３５；Ｌ−３３〜Ｒ
−５３４；Ｌ−３３〜Ｄ−５３３；Ｌ−３３〜Ｔ−５３２；Ｌ−３３〜Ｋ−５３
１；Ｌ−３３〜Ｎ−５３０；Ｌ−３３〜Ｖ−５２９；Ｌ−３３〜Ｃ−５２８；Ｌ
−３３〜Ｋ−５２７；Ｌ−３３〜Ｇ−５２６；Ｌ−３３〜Ｎ−５２５；Ｌ−３３
〜Ｉ−５２４；Ｌ−３３〜Ｃ−５２３；Ｌ−３３〜Ｗ−５２２；Ｌ−３３〜Ｋ−
５２１；Ｌ−３３〜Ｇ−５２０；Ｌ−３３〜Ｅ−５１９；Ｌ−３３〜Ｇ−５１８
；Ｌ−３３〜Ｃ−５１７；Ｌ−３３〜Ｓ−５１６；Ｌ−３３〜Ｔ−５１５；Ｌ−
３３〜Ｇ−５１４；Ｌ−３３〜Ｄ−５１３；Ｌ−３３〜Ａ−５１２；Ｌ−３３〜
Ｗ−５１１；Ｌ−３３〜Ｐ−５１０；Ｌ−３３〜Ｆ−５０９；Ｌ−３３〜Ｈ−５
０８；Ｌ−３３〜Ｋ−５０７；Ｌ−３３〜Ｔ−５０６；Ｌ−３３〜Ｑ−５０５；
Ｌ−３３〜Ｃ−５０４；Ｌ−３３〜Ｖ−５０３；Ｌ−３３〜Ｌ−５０２；Ｌ−３
３〜Ｖ−５０１；Ｌ−３３〜Ｇ−５００；Ｌ−３３〜Ｇ−４９９；Ｌ−３３〜Ｓ
−４９８；Ｌ−３３〜Ｔ−４９７；Ｌ−３３〜Ｇ−４９６；Ｌ−３３〜Ｔ−４９
５；Ｌ−３３〜Ｃ−４９４；Ｌ−３３〜Ｗ−４９３；Ｌ−３３〜Ｌ−４９２；Ｌ
−３３〜Ｔ−４９１；Ｌ−３３〜Ｓ−４９０；Ｌ−３３〜Ｃ−４８９；Ｌ−３３
〜Ｔ−４８８；Ｌ−３３〜Ｓ−４８７；Ｌ−３３〜Ａ−４８６；Ｌ−３３〜Ａ−
４８５；Ｌ−３３〜Ｄ−４８４；Ｌ−３３〜Ｐ−４８３；Ｌ−３３〜Ｃ−４８２
；Ｌ−３３〜Ｈ−４８１；Ｌ−３３〜Ｋ−４８０；Ｌ−３３〜Ｓ−４７９；Ｌ−
３３〜Ｄ−４７８；Ｌ−３３〜Ｅ−４７７；Ｌ−３３〜Ｇ−４７６；Ｌ−３３〜
Ｆ−４７５；Ｌ−３３〜Ｔ−４７４；Ｌ−３３〜Ｆ−４７３；Ｌ−３３〜Ｑ−４
７２；Ｌ−３３〜Ｃ−４７１；Ｌ−３３〜Ｑ−４７０；Ｌ−３３〜Ｒ−４６９；
Ｌ−３３〜Ｎ−４６８；Ｌ−３３〜Ａ−４６７；Ｌ−３３〜Ｄ−４６６；Ｌ−３
３〜Ｙ−４６５；Ｌ−３３〜Ｓ−４６４；Ｌ−３３〜Ｔ−４６３；Ｌ−３３〜Ｇ
−４６２；Ｌ−３３〜Ｐ−４６１；Ｌ−３３〜Ｌ−４６０；Ｌ−３３〜Ｄ−４５
９；Ｌ−３３〜Ｇ−４５８；Ｌ−３３〜Ｐ−４５７；Ｌ−３３〜Ｌ−４５６；Ｌ
−３３〜Ｑ−４５５；Ｌ−３３〜Ｉ−４５４；Ｌ−３３〜Ｐ−４５３；Ｌ−３３
〜Ｎ−４５２；Ｌ−３３〜Ｑ−４５１；Ｌ−３３〜Ｐ−４５０；Ｌ−３３〜Ｋ−
４４９；Ｌ−３３〜Ｄ−４４８；Ｌ−３３〜Ｍ−４４７；Ｌ−３３〜Ｌ−４４６
；Ｌ−３３〜Ｃ−４４５；Ｌ−３３〜Ｅ−４４４；Ｌ−３３〜Ｇ−４４３；Ｌ−
３３〜Ｈ−４４２；Ｌ−３３〜Ｇ−４４１；Ｌ−３３〜Ｎ−４４０；Ｌ−３３〜
Ｄ−４３９；Ｌ−３３〜Ｌ−４３８；Ｌ−３３〜Ｆ−４３７；Ｌ−３３〜Ｓ−４
３６；Ｌ−３３〜Ｔ−４３５；Ｌ−３３〜Ｉ−４３４；Ｌ−３３〜Ｍ−４３３；
Ｌ−３３〜Ｙ−４３２；Ｌ−３３〜Ａ−４３１；Ｌ−３３〜Ｓ−４３０；Ｌ−３
３〜Ｃ−４２９；Ｌ−３３〜Ｐ−４２８；Ｌ−３３〜Ｓ−４２７；Ｌ−３３〜Ｗ
−４２６；Ｌ−３３〜Ｐ−４２５；Ｌ−３３〜Ｑ−４２４；Ｌ−３３〜Ｓ−４２
３；Ｌ−３３〜Ｈ−４２２；Ｌ−３３〜Ｄ−４２１；Ｌ−３３〜Ｌ−４２０；Ｌ
−３３〜Ｎ−４１９；Ｌ−３３〜Ｓ−４１８；Ｌ−３３〜Ｌ−４１７；Ｌ−３３
〜Ｍ−４１６；Ｌ−３３〜Ｓ−４１５；Ｌ−３３〜Ａ−４１４；Ｌ−３３〜Ｍ−
４１３；Ｌ−３３〜Ｍ−４１２；Ｌ−３３〜Ｈ−４１１；Ｌ−３３〜Ｓ−４１０
；Ｌ−３３〜Ｄ−４０９；Ｌ−３３〜Ｑ−４０８；Ｌ−３３〜Ｎ−４０７；Ｌ−
３３〜Ｖ−４０６；Ｌ−３３〜Ｇ−４０５；Ｌ−３３〜Ｎ−４０４；Ｌ−３３〜
Ｌ−４０３；Ｌ−３３〜Ｓ−４０２；Ｌ−３３〜Ａ−４０１；Ｌ−３３〜Ｃ−４
００；Ｌ−３３〜Ｑ−３９９；Ｌ−３３〜Ｋ−３９８；Ｌ−３３〜Ａ−３９７；
Ｌ−３３〜Ｄ−３９６；Ｌ−３３〜Ｄ−３９５；Ｌ−３３〜Ｈ−３９４；Ｌ−３
３〜Ｐ−３９３；Ｌ−３３〜Ｍ−３９２；Ｌ−３３〜Ｎ−３９１；Ｌ−３３〜Ｆ
−３９０；Ｌ−３３〜Ｖ−３８９；Ｌ−３３〜Ｈ−３８８；Ｌ−３３〜Ｇ−３８
７；Ｌ−３３〜Ｌ−３８６；Ｌ−３３〜Ｅ−３８５；Ｌ−３３〜Ｈ−３８４；Ｌ
−３３〜Ａ−３８３；Ｌ−３３〜Ｔ−３８２；Ｌ−３３〜Ｔ−３８１；Ｌ−３３
〜Ｆ−３８０；Ｌ−３３〜Ａ−３７９；Ｌ−３３〜Ａ−３７８；Ｌ−３３〜Ｑ−
３７７；Ｌ−３３〜Ｌ−３７６；Ｌ−３３〜Ｇ−３７５；Ｌ−３３〜Ｄ−３７４
；Ｌ−３３〜Ｄ−３７３；Ｌ−３３〜Ｅ−３７２；Ｌ−３３〜Ｉ−３７１；Ｌ−
３３〜Ｖ−３７０；Ｌ−３３〜Ｓ−３６９；Ｌ−３３〜Ｃ−３６８；Ｌ−３３〜
Ｓ−３６７；Ｌ−３３〜Ｒ−３６６；Ｌ−３３〜Ｓ−３６５；Ｌ−３３〜Ｐ−３
６４；Ｌ−３３〜Ｄ−３６３；Ｌ−３３〜Ｃ−３６２；Ｌ−３３〜Ｖ−３６１；
Ｌ−３３〜Ｔ−３６０；Ｌ−３３〜Ｇ−３５９；Ｌ−３３〜Ｖ−３５８；Ｌ−３
３〜Ｄ−３５７；Ｌ−３３〜Ａ−３５６；Ｌ−３３〜Ｍ−３５５；Ｌ−３３〜Ｇ
−３５４；Ｌ−３３〜Ｌ−３５３；Ｌ−３３〜Ｔ−３５２；Ｌ−３３〜Ｄ−３５
１；Ｌ−３３〜Ｃ−３５０；Ｌ−３３〜Ｔ−３４９；Ｌ−３３〜Ｑ−３４８；Ｌ
−３３〜Ｓ−３４７；Ｌ−３３〜Ｇ−３４６；Ｌ−３３〜Ｃ−３４５；Ｌ−３３
〜Ｌ−３４４；Ｌ−３３〜Ｄ−３４３；Ｌ−３３〜Ｑ−３４２；Ｌ−３３〜Ｒ−
３４１；Ｌ−３３〜Ｔ−３４０；Ｌ−３３〜Ｆ−３３９；Ｌ−３３〜Ｌ−３３８
；Ｌ−３３〜Ｉ−３３７；Ｌ−３３〜Ａ−３３６；Ｌ−３３〜Ｔ−３３５；Ｌ−
３３〜Ｄ−３３４；Ｌ−３３〜Ｙ−３３３；Ｌ−３３〜Ｈ−３３２；Ｌ−３３〜
Ｅ−３３１；Ｌ−３３〜Ａ−３３０；Ｌ−３３〜Ｄ−３２９；Ｌ−３３〜Ｒ−３
２８；Ｌ−３３〜Ｄ−３２７；Ｌ−３３〜Ｓ−３２６；Ｌ−３３〜Ｐ−３２５；
Ｌ−３３〜Ｐ−３２４；Ｌ−３３〜Ｎ−３２３；Ｌ−３３〜Ｈ−３２２；Ｌ−３
３〜Ｑ−３２１；Ｌ−３３〜Ｋ−３２０；Ｌ−３３〜Ｑ−３１９；Ｌ−３３〜Ｗ
−３１８；Ｌ−３３〜Ｎ−３１７；Ｌ−３３〜Ｃ−３１６；Ｌ−３３〜Ｆ−３１
５；Ｌ−３３〜Ｎ−３１４；Ｌ−３３〜Ｒ−３１３；Ｌ−３３〜Ｌ−３１２；Ｌ
−３３〜Ｔ−３１１；Ｌ−３３〜Ｌ−３１０；Ｌ−３３〜Ａ−３０９；Ｌ−３３
〜Ａ−３０８；Ｌ−３３〜Ｎ−３０７；Ｌ−３３〜Ｓ−３０６；Ｌ−３３〜Ｔ−
３０５；Ｌ−３３〜Ｖ−３０４；Ｌ−３３〜Ｅ−３０３；Ｌ−３３〜Ｐ−３０２
；Ｌ−３３〜Ｇ−３０１；Ｌ−３３〜Ｋ−３００；Ｌ−３３〜Ｑ−２９９；Ｌ−
３３〜Ｅ−２９８；Ｌ−３３〜Ｄ−２９７；Ｌ−３３〜Ｈ−２９６；Ｌ−３３〜
Ｉ−２９５；Ｌ−３３〜Ｖ−２９４；Ｌ−３３〜Ｌ−２９３；Ｌ−３３〜Ｉ−２
９２；Ｌ−３３〜Ｋ−２９１；Ｌ−３３〜Ｖ−２９０；Ｌ−３３〜Ｖ−２８９；
Ｌ−３３〜Ｖ−２８８；Ｌ−３３〜Ｌ−２８７；Ｌ−３３〜Ｓ−２８６；Ｌ−３
３〜Ｖ−２８５；Ｌ−３３〜Ｓ−２８４；Ｌ−３３〜Ｎ−２８３；Ｌ−３３〜Ｒ
−２８２；Ｌ−３３〜Ｉ−２８１；Ｌ−３３〜Ｓ−２８０；Ｌ−３３〜Ｐ−２７
９；Ｌ−３３〜Ｈ−２７８；Ｌ−３３〜Ｋ−２７７；Ｌ−３３〜Ｙ−２７６；Ｌ
−３３〜Ｌ−２７５；Ｌ−３３〜Ｒ−２７４；Ｌ−３３〜Ａ−２７３；Ｌ−３３
〜Ａ−２７２；Ｌ−３３〜Ｖ−２７１；Ｌ−３３〜Ｓ−２７０；Ｌ−３３〜Ｆ−
２６９；Ｌ−３３〜Ｌ−２６８；Ｌ−３３〜Ｔ−２６７；Ｌ−３３〜Ｌ−２６６
；Ｌ−３３〜Ｌ−２６５；Ｌ−３３〜Ｙ−２６４；Ｌ−３３〜Ｈ−２６３；Ｌ−
３３〜Ｋ−２６２；Ｌ−３３〜Ｌ−２６１；Ｌ−３３〜Ｇ−２６０；Ｌ−３３〜
Ｓ−２５９；Ｌ−３３〜Ｇ−２５８；Ｌ−３３〜Ｈ−２５７；Ｌ−３３〜Ｆ−２
５６；Ｌ−３３〜Ｅ−２５５；Ｌ−３３〜Ａ−２５４；Ｌ−３３〜Ｍ−２５３；
Ｌ−３３〜Ｓ−２５２；Ｌ−３３〜Ｑ−２５１；Ｌ−３３〜Ｄ−２５０；Ｌ−３
３〜Ａ−２４９；Ｌ−３３〜Ｖ−２４８；Ｌ−３３〜Ｌ−２４７；Ｌ−３３〜Ｍ
−２４６；Ｌ−３３〜Ｔ−２４５；Ｌ−３３〜Ｅ−２４４；Ｌ−３３〜Ｖ−２４
３；Ｌ−３３〜Ｙ−２４２；Ｌ−３３〜Ｒ−２４１；Ｌ−３３〜Ｈ−２４０；Ｌ
−３３〜Ｓ−２３９；Ｌ−３３〜Ｓ−２３８；Ｌ−３３〜Ｖ−２３７；Ｌ−３３
〜Ｆ−２３６；Ｌ−３３〜Ｒ−２３５；Ｌ−３３〜Ｋ−２３４；Ｌ−３３〜Ｋ−
２３３；Ｌ−３３〜Ｒ−２３２；Ｌ−３３〜Ｉ−２３１；Ｌ−３３〜Ｓ−２３０
；Ｌ−３３〜Ｇ−２２９；Ｌ−３３〜Ｔ−２２８；Ｌ−３３〜Ｇ−２２７；Ｌ−
３３〜Ｔ−２２６；Ｌ−３３〜Ｐ−２２５；Ｌ−３３〜Ｑ−２２４；Ｌ−３３〜
Ｇ−２２３；Ｌ−３３〜Ｖ−２２２；Ｌ−３３〜Ｇ−２２１；Ｌ−３３〜Ｑ−２
２０；Ｌ−３３〜Ｌ−２１９；Ｌ−３３〜Ａ−２１８；Ｌ−３３〜Ｐ−２１７；
Ｌ−３３〜Ｄ−２１６；Ｌ−３３〜Ｑ−２１５；Ｌ−３３〜Ｐ−２１４；Ｌ−３
３〜Ｓ−２１３；Ｌ−３３〜Ｗ−２１２；Ｌ−３３〜Ｑ−２１１；Ｌ−３３〜Ｐ
−２１０；Ｌ−３３〜Ｇ−２０９；Ｌ−３３〜Ｅ−２０８；Ｌ−３３〜Ｄ−２０
７；Ｌ−３３〜Ｅ−２０６；Ｌ−３３〜Ｇ−２０５；Ｌ−３３〜Ｅ−２０４；Ｌ
−３３〜Ｔ−２０３；Ｌ−３３〜Ｇ−２０２；Ｌ−３３〜Ｅ−２０１；Ｌ−３３
〜Ｄ−２００；Ｌ−３３〜Ｅ−１９９；Ｌ−３３〜Ｄ−１９８；Ｌ−３３〜Ｅ−
１９７；Ｌ−３３〜Ｔ−１９６；Ｌ−３３〜Ｅ−１９５；Ｌ−３３〜Ａ−１９４
；Ｌ−３３〜Ｋ−１９３；Ｌ−３３〜Ｇ−１９２；Ｌ−３３〜Ｔ−１９１；Ｌ−
３３〜Ｐ−１９０；Ｌ−３３〜Ｒ−１８９；Ｌ−３３〜Ｐ−１８８；Ｌ−３３〜
Ｅ−１８７；Ｌ−３３〜Ｄ−１８６；Ｌ−３３〜Ｄ−１８５；Ｌ−３３〜Ｖ−１
８４；Ｌ−３３〜Ｖ−１８３；Ｌ−３３〜Ｇ−１８２；Ｌ−３３〜Ｃ−１８１；
Ｌ−３３〜Ｔ−１８０；Ｌ−３３〜Ｇ−１７９；Ｌ−３３〜Ｇ−１７８；Ｌ−３
３〜Ｖ−１７７；Ｌ−３３〜Ｄ−１７６；Ｌ−３３〜Ｇ−１７５；Ｌ−３３〜Ｑ
−１７４；Ｌ−３３〜Ｒ−１７３；Ｌ−３３〜Ｎ−１７２；Ｌ−３３〜Ｒ−１７
１；Ｌ−３３〜Ｒ−１７０；Ｌ−３３〜Ｌ−１６９；Ｌ−３３〜Ｌ−１６８；Ｌ
−３３〜Ｈ−１６７；Ｌ−３３〜Ｆ−１６６；Ｌ−３３〜Ｑ−１６５；Ｌ−３３
〜Ｌ−１６４；Ｌ−３３〜Ｐ−１６３；Ｌ−３３〜Ａ−１６２；Ｌ−３３〜Ｐ−
１６１；Ｌ−３３〜Ｐ−１６０；Ｌ−３３〜Ｋ−１５９；Ｌ−３３〜Ｅ−１５８
；Ｌ−３３〜Ｇ−１５７；Ｌ−３３〜Ｐ−１５６；Ｌ−３３〜Ａ−１５５；Ｌ−
３３〜Ａ−１５４；Ｌ−３３〜Ｔ−１５３；Ｌ−３３〜Ａ−１５２；Ｌ−３３〜
Ｌ−１５１；Ｌ−３３〜Ｒ−１５０；Ｌ−３３〜Ｅ−１４９；Ｌ−３３〜Ｓ−１
４８；Ｌ−３３〜Ａ−１４７；Ｌ−３３〜Ａ−１４６；Ｌ−３３〜Ｐ−１４５；
Ｌ−３３〜Ｌ−１４４；Ｌ−３３〜Ｐ−１４３；Ｌ−３３〜Ｑ−１４２；Ｌ−３
３〜Ｉ−１４１；Ｌ−３３〜Ｆ−１４０；Ｌ−３３〜Ｙ−１３９；Ｌ−３３〜Ａ
−１３８；Ｌ−３３〜Ｅ−１３７；Ｌ−３３〜Ｇ−１３６；Ｌ−３３〜Ｌ−１３
５；Ｌ−３３〜Ｌ−１３４；Ｌ−３３〜Ｙ−１３３；Ｌ−３３〜Ｆ−１３２；Ｌ
−３３〜Ａ−１３１；Ｌ−３３〜Ｇ−１３０；Ｌ−３３〜Ｒ−１２９；Ｌ−３３
〜Ｖ−１２８；Ｌ−３３〜Ｇ−１２７；Ｌ−３３〜Ｅ−１２６；Ｌ−３３〜Ｃ−
１２５；Ｌ−３３〜Ｌ−１２４；Ｌ−３３〜Ｓ−１２３；Ｌ−３３〜Ｌ−１２２
；Ｌ−３３〜Ａ−１２１；Ｌ−３３〜Ａ−１２０；Ｌ−３３〜Ａ−１１９；Ｌ−
３３〜Ｓ−１１８；Ｌ−３３〜Ｓ−１１７；Ｌ−３３〜Ｐ−１１６；Ｌ−３３〜
Ｄ−１１５；Ｌ−３３〜Ｇ−１１４；Ｌ−３３〜Ｎ−１１３；Ｌ−３３〜Ｖ−１
１２；Ｌ−３３〜Ｔ１１１；Ｌ−３３〜Ｇ−１１０；Ｌ−３３〜Ｓ−１０９；Ｌ
−３３〜Ｙ−１０８；Ｌ−３３〜Ｆ−１０７；Ｌ−３３〜Ｃ−１０６；Ｌ−３３
〜Ｈ−１０５；Ｌ−３３〜Ａ−１０４；Ｌ−３３〜Ｌ−１０３；Ｌ−３３〜Ｄ−
１０２；Ｌ−３３〜Ｔ−１０１；Ｌ−３３〜Ｅ−１００；Ｌ−３３〜Ｐ−９９；
Ｌ−３３〜Ｌ−９８；Ｌ−３３〜Ｐ−９７；Ｌ−３３〜Ｔ−９６；Ｌ−３３〜Ｅ
−９５；Ｌ−３３〜Ｓ−９４；Ｌ−３３〜Ｇ−９３；Ｌ−３３〜Ｓ−９２；Ｌ−
３３〜Ｋ−９１；Ｌ−３３〜Ｒ−９０；Ｌ−３３〜Ｇ−８９；Ｌ−３３〜Ｖ−８
８；Ｌ−３３〜Ｎ−８７；Ｌ−３３〜Ｑ−８６；Ｌ−３３〜Ｌ−８５；Ｌ−３３
〜Ｔ−８４；Ｌ−３３〜Ｆ−８３；Ｌ−３３〜Ｇ−８２；Ｌ−３３〜Ｐ８１；Ｌ
−３３〜Ａ−８０；Ｌ−３３〜Ｌ−７９；Ｌ−３３〜Ｆ−７８；Ｌ−３３〜Ｓ−
７７；Ｌ−３３〜Ｓ−７６；Ｌ−３３〜Ｄ−７５；Ｌ−３３〜Ｐ−７４；Ｌ−３
３〜Ｒ−７３；Ｌ−３３〜Ｌ−７２；Ｌ−３３〜Ｅ−７１；Ｌ−３３〜Ｌ−７０
；Ｌ−３３〜Ｄ−６９；Ｌ−３３〜Ｌ−６８；Ｌ−３３〜Ｑ−６７；Ｌ−３３〜
Ｑ−６６；Ｌ−３３〜Ｄ−６５；Ｌ−３３〜Ｆ−６４；Ｌ−３３〜Ａ−６３；Ｌ
−３３〜Ｈ−６２；Ｌ−３３〜Ｌ−６１；Ｌ−３３〜Ｒ−６０；Ｌ−３３〜Ｌ−
５９；Ｌ−３３〜Ｒ−５８；Ｌ−３３〜Ｔ−５７；Ｌ−３３〜Ｔ−５６；Ｌ−３
３〜Ｇ−５５；Ｌ−３３〜Ｈ−５４；Ｌ−３３〜Ｇ−５３；Ｌ−３３〜Ｐ−５２
；Ｌ−３３〜Ａ−５１；Ｌ−３３〜Ｒ−５０；Ｌ−３３〜Ｅ−４９；Ｌ−３３〜
Ｌ−４８；Ｌ−３３〜Ｅ−４７；Ｌ−３３〜Ｐ−４６；Ｌ−３３〜Ｖ−４５；Ｌ
−３３〜Ｖ−４４；Ｌ−３３〜Ｌ−４３；Ｌ−３３〜Ｅ−４２；Ｌ−３３〜Ｅ−
４１；Ｌ−３３〜Ｄ−４０；および／またはＬ−３３〜Ｅ−３９。
【０１５６】
ＭＥＴＨ１の欠失変異体はまた、配列番号１２５に記載されるさらなる配列の
すべてまたは一部を含むように作製され得る。例えば、例示的な欠失変異体には
、以下が挙げられる：Ｑ−２〜Ｓ−９６７；Ｒ−３〜Ｓ−９６７；Ａ−４〜Ｓ−
９６７；Ｖ−５〜Ｓ−９６７；Ｐ−６〜Ｓ−９６７；Ｅ−７〜Ｓ−９６７；Ｇ−
８〜Ｓ−９６７；Ｆ−９〜Ｓ−９６７；Ｇ−１０〜Ｓ−９６７；Ｒ−１１〜Ｓ−
９７６；Ｒ−１２〜Ｓ−９６７；Ｋ−１３〜Ｓ−９６７；Ｌ−１４〜Ｓ−９６７
；Ｇ−１５〜Ｓ−９６７；Ｓ−１６〜Ｓ−９６７；Ｄ−１７〜Ｓ−９６７；およ
びＭ−１８〜Ｓ−９６７。
すべてまたは一部を含むように作製され得る。例えば、例示的な欠失変異体には
、以下が挙げられる：Ｑ−２〜Ｓ−９６７；Ｒ−３〜Ｓ−９６７；Ａ−４〜Ｓ−
９６７；Ｖ−５〜Ｓ−９６７；Ｐ−６〜Ｓ−９６７；Ｅ−７〜Ｓ−９６７；Ｇ−
８〜Ｓ−９６７；Ｆ−９〜Ｓ−９６７；Ｇ−１０〜Ｓ−９６７；Ｒ−１１〜Ｓ−
９７６；Ｒ−１２〜Ｓ−９６７；Ｋ−１３〜Ｓ−９６７；Ｌ−１４〜Ｓ−９６７
；Ｇ−１５〜Ｓ−９６７；Ｓ−１６〜Ｓ−９６７；Ｄ−１７〜Ｓ−９６７；およ
びＭ−１８〜Ｓ−９６７。
【０１５７】
さらに、ＭＥＴＨ２ポリペプチドのＮ末端欠失は、一般式ｍ2−８９０によっ
て記載され得、ここで、ｍ2は、２〜８８９の整数であり、ここでｍは、配列番
号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。好ましくは、配列番号
４として示される本発明のＭＥＴＨ２ポリペプチドのＮ末端欠失は、以下の残基
のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む：配列番号４のＦ−２〜Ｌ−８９０；
Ｐ−３〜Ｌ−８９０；Ａ−４〜Ｌ−８９０；Ｐ−５〜Ｌ−８９０；Ａ−６〜Ｌ−
８９０；Ａ−７〜Ｌ−８９０；Ｐ−８〜Ｌ−８９０；Ｒ−９〜Ｌ−８９０；Ｗ−
１０〜Ｌ−８９０；Ｌ−１１〜Ｌ−８９０；Ｐ−１２〜Ｌ−８９０；Ｆ−１３〜
Ｌ−８９０；Ｌ−１４〜Ｌ−８９０；Ｌ−１５〜Ｌ−８９０；Ｌ−１６〜Ｌ−８
９０；Ｌ−１７〜Ｌ−８９０；Ｌ−１８〜Ｌ−８９０；Ｌ−１９〜Ｌ−８９０；
Ｌ−２０〜Ｌ−８９０；Ｌ−２１〜Ｌ−８９０；Ｌ−２２〜Ｌ−８９０；Ｐ−２
３〜Ｌ−８９０；Ｌ−２４〜Ｌ−８９０；Ａ−２５〜Ｌ−８９０；Ｒ−２６〜Ｌ
−８９０；Ｇ−２７〜Ｌ−８９０；Ａ−２８〜Ｌ−８９０；Ｐ−２９〜Ｌ−８９
０；Ａ−３０〜Ｌ−８９０；Ｒ−３１〜Ｌ−８９０；Ｐ−３２〜Ｌ−８９０；Ａ
−３３〜Ｌ−８９０；Ａ−３４〜Ｌ−８９０；Ｇ−３５〜Ｌ−８９０；Ｇ−３６
〜Ｌ−８９０；Ｑ−３７〜Ｌ−８９０；Ａ−３８〜Ｌ−８９０；Ｓ−３９〜Ｌ−
８９０；Ｅ−４０〜Ｌ−８９０；Ｌ−４１〜Ｌ−８９０；Ｖ−４２〜Ｌ−８９０
；Ｖ−４３〜Ｌ−８９０；Ｐ−４４〜Ｌ−８９０；Ｔ−４５〜Ｌ−８９０；Ｒ−
４６〜Ｌ−８９０；Ｌ−４７〜Ｌ−８９０；Ｐ−４８〜Ｌ−８９０；Ｇ−４９〜
Ｌ−８９０；Ｓ−５０〜Ｌ−８９０；Ａ−５１〜Ｌ−８９０；Ｇ−５２〜Ｌ−８
９０；Ｅ−５３〜Ｌ−８９０；Ｌ−５４〜Ｌ−８９０；Ａ−５５〜Ｌ−８９０；
Ｌ−５６〜Ｌ−８９０；Ｈ−５７〜Ｌ−８９０；Ｌ−５８〜Ｌ−８９０；Ｓ−５
９〜Ｌ−８９０；Ａ−６０〜Ｌ−８９０；Ｆ−６１〜Ｌ−８９０；Ｇ−６２〜Ｌ
−８９０；Ｋ−６３〜Ｌ−８９０；Ｇ−６４〜Ｌ−８９０；Ｆ−６５〜Ｌ−８９
０；Ｖ−６６〜Ｌ−８９０；Ｌ−６７〜Ｌ−８９０；Ｒ−６８〜Ｌ−８９０；Ｌ
−６９〜Ｌ−８９０；Ａ−７０〜Ｌ−８９０；Ｐ−７１〜Ｌ−８９０；Ｄ−７２
〜Ｌ−８９０；Ｄ−７３〜Ｌ−８９０；Ｓ−７４〜Ｌ−８９０；Ｆ−７５〜Ｌ−
８９０；Ｌ−７６〜Ｌ−８９０；Ａ−７７〜Ｌ−８９０；Ｐ−７８〜Ｌ−８９０
；Ｅ−７９〜Ｌ−８９０；Ｆ−８０〜Ｌ−８９０；Ｋ−８１〜Ｌ−８９０；Ｉ−
８２〜Ｌ−８９０；Ｅ−８３〜Ｌ−８９０；Ｒ−８４〜Ｌ−８９０；Ｌ−８５〜
Ｌ−８９０；Ｇ−８６〜Ｌ−８９０；Ｇ−８７〜Ｌ−８９０；Ｓ−８８〜Ｌ−８
９０；Ｇ−８９〜Ｌ−８９０；Ｒ−９０〜Ｌ−８９０；Ａ−９１〜Ｌ−８９０；
Ｔ−９２〜Ｌ−８９０；Ｇ−９３〜Ｌ−８９０；Ｇ−９４〜Ｌ−８９０；Ｅ−９
５〜Ｌ−８９０；Ｒ−９６〜Ｌ−８９０；Ｇ−９７〜Ｌ−８９０；Ｌ−９８〜Ｌ
−８９０；Ｒ−９９〜Ｌ−８９０；Ｇ−１００〜Ｌ−８９０；Ｃ−１０１〜Ｌ−
８９０；Ｆ−１０２〜Ｌ−８９０；Ｆ−１０３〜Ｌ−８９０；Ｓ−１０４〜Ｌ−
８９０；Ｇ−１０５〜Ｌ−８９０；Ｔ−１０６〜Ｌ−８９０；Ｖ−１０７〜Ｌ−
８９０；Ｎ−１０８〜Ｌ−８９０；Ｇ−１０９〜Ｌ−８９０；Ｅ−１１０〜Ｌ−
８９０；Ｐ−１１１〜Ｌ−８９０；Ｅ−１１２〜Ｌ−８９０；Ｓ−１１３〜Ｌ−
８９０；Ｌ−１１４〜Ｌ−８９０；Ａ−１１５〜Ｌ−８９０；Ａ−１１６〜Ｌ−
８９０；Ｖ−１１７〜Ｌ−８９０；Ｓ−１１８〜Ｌ−８９０；Ｌ−１１９〜Ｌ−
８９０；Ｃ−１２０〜Ｌ−８９０；Ｒ−１２１〜Ｌ−８９０；Ｇ−１２２〜Ｌ−
８９０；Ｌ−１２３〜Ｌ−８９０；Ｓ−１２４〜Ｌ−８９０；Ｇ−１２５〜Ｌ−
８９０；Ｓ−１２６〜Ｌ−８９０；Ｆ−１２７〜Ｌ−８９０；Ｌ−１２８〜Ｌ−
８９０；Ｌ−１２９〜Ｌ−８９０；Ｄ−１３０〜Ｌ−８９０；Ｇ−１３１〜Ｌ−
８９０；Ｅ−１３２〜Ｌ−８９０；Ｅ−１３３〜Ｌ−８９０；Ｆ−１３４〜Ｌ−
８９０；Ｔ−１３５〜Ｌ−８９０；Ｉ−１３６〜Ｌ−８９０；Ｑ−１３７〜Ｌ−
８９０；Ｐ−１３８〜Ｌ−８９０；Ｑ−１３９〜Ｌ−８９０；Ｇ−１４０〜Ｌ−
８９０；Ａ−１４１〜Ｌ−８９０；Ｇ−１４２〜Ｌ−８９０；Ｇ−１４３〜Ｌ−
８９０；Ｓ−１４４〜Ｌ−８９０；Ｌ−１４５〜Ｌ−８９０；Ａ−１４６〜Ｌ−
８９０；Ｑ−１４７〜Ｌ−８９０；Ｐ−１４８〜Ｌ−８９０；Ｈ−１４９〜Ｌ−
８９０；Ｒ−１５０〜Ｌ−８９０；Ｌ−１５１〜Ｌ−８９０；Ｑ−１５２〜Ｌ−
８９０；Ｒ−１５３〜Ｌ−８９０；Ｗ−１５４〜Ｌ−８９０；Ｇ−１５５〜Ｌ−
８９０；Ｐ−１５６〜Ｌ−８９０；Ａ−１５７〜Ｌ−８９０；Ｇ−１５８〜Ｌ−
８９０；Ａ−１５９〜Ｌ−８９０；Ｒ−１６０〜Ｌ−８９０；Ｐ−１６１〜Ｌ−
８９０；Ｌ−１６２〜Ｌ−８９０；Ｐ−１６３〜Ｌ−８９０；Ｒ−１６４〜Ｌ−
８９０；Ｇ−１６５〜Ｌ−８９０；Ｐ−１６６〜Ｌ−８９０；Ｅ−１６７〜Ｌ−
８９０；Ｗ−１６８〜Ｌ−８９０；Ｅ−１６９〜Ｌ−８９０；Ｖ−１７０〜Ｌ−
８９０；Ｅ−１７１〜Ｌ−８９０；Ｔ−１７２〜Ｌ−８９０；Ｇ−１７３〜Ｌ−
８９０；Ｅ−１７４〜Ｌ−８９０；Ｇ−１７５〜Ｌ−８９０；Ｑ−１７６〜Ｌ−
８９０；Ｒ−１７７〜Ｌ−８９０；Ｑ−１７８〜Ｌ−８９０；Ｅ−１７９〜Ｌ−
８９０；Ｒ−１８０〜Ｌ−８９０；Ｇ−１８１〜Ｌ−８９０；Ｄ−１８２〜Ｌ−
８９０；Ｈ−１８３〜Ｌ−８９０；Ｑ−１８４〜Ｌ−８９０；Ｅ−１８５〜Ｌ−
８９０；Ｄ−１８６〜Ｌ−８９０；Ｓ−１８７〜Ｌ−８９０；Ｅ−１８８〜Ｌ−
８９０；Ｅ−１８９〜Ｌ−８９０；Ｅ−１９０〜Ｌ−８９０；Ｓ−１９１〜Ｌ−
８９０；Ｑ−１９２〜Ｌ−８９０；Ｅ−１９３〜Ｌ−８９０；Ｅ−１９４〜Ｌ−
８９０；Ｅ−１９５〜Ｌ−８９０；Ａ−１９６〜Ｌ−８９０；Ｅ−１９７〜Ｌ−
８９０；Ｇ−１９８〜Ｌ−８９０；Ａ−１９９〜Ｌ−８９０；Ｓ−２００〜Ｌ−
８９０；Ｅ−２０１〜Ｌ−８９０；Ｐ−２０２〜Ｌ−８９０；Ｐ−２０３〜Ｌ−
８９０；Ｐ−２０４〜Ｌ−８９０；Ｐ−２０５〜Ｌ−８９０；Ｌ−２０６〜Ｌ−
８９０；Ｇ−２０７〜Ｌ−８９０；Ａ−２０８〜Ｌ−８９０；Ｔ−２０９〜Ｌ−
８９０；Ｓ−２１０〜Ｌ−８９０；Ｒ−２１１〜Ｌ−８９０；Ｔ−２１２〜Ｌ−
８９０；Ｋ−２１３〜Ｌ−８９０；Ｒ−２１４〜Ｌ−８９０；Ｆ−２１５〜Ｌ−
８９０；Ｖ−２１６〜Ｌ−８９０；Ｓ−２１７〜Ｌ−８９０；Ｅ−２１８〜Ｌ−
８９０；Ａ−２１９〜Ｌ−８９０；Ｒ−２２０〜Ｌ−８９０；Ｆ−２２１〜Ｌ−
８９０；Ｖ−２２２〜Ｌ−８９０；Ｅ−２２３〜Ｌ−８９０；Ｔ−２２４〜Ｌ−
８９０；Ｌ−２２５〜Ｌ−８９０；Ｌ−２２６〜Ｌ−８９０；Ｖ−２２７〜Ｌ−
８９０；Ａ−２２８〜Ｌ−８９０；Ｄ−２２９〜Ｌ−８９０；Ａ−２３０〜Ｌ−
８９０；Ｓ−２３１〜Ｌ−８９０；Ｍ−２３２〜Ｌ−８９０；Ａ−２３３〜Ｌ−
８９０；Ａ−２３４〜Ｌ−８９０；Ｆ−２３５〜Ｌ−８９０；Ｙ−２３６〜Ｌ−
８９０；Ｇ−２３７〜Ｌ−８９０；Ａ−２３８〜Ｌ−８９０；Ｄ−２３９〜Ｌ−
８９０；Ｌ−２４０〜Ｌ−８９０；Ｑ−２４１〜Ｌ−８９０；Ｎ−２４２〜Ｌ−
８９０；Ｈ−２４３〜Ｌ−８９０；Ｉ−２４４〜Ｌ−８９０；Ｌ−２４５〜Ｌ−
８９０；Ｔ−２４６〜Ｌ−８９０；Ｌ−２４７〜Ｌ−８９０；Ｍ−２４８〜Ｌ−
８９０；Ｓ−２４９〜Ｌ−８９０；Ｖ−２５０〜Ｌ−８９０；Ａ−２５１〜Ｌ−
８９０；Ａ−２５２〜Ｌ−８９０；Ｒ−２５３〜Ｌ−８９０；Ｉ−２５４〜Ｌ−
８９０；Ｙ−２５５〜Ｌ−８９０；Ｋ−２５６〜Ｌ−８９０；Ｈ−２５７〜Ｌ−
８９０；Ｐ−２５８〜Ｌ−８９０；Ｓ−２５９〜Ｌ−８９０；Ｉ−２６０〜Ｌ−
８９０；Ｋ−２６１〜Ｌ−８９０；Ｎ−２６２〜Ｌ−８９０；Ｓ−２６３〜Ｌ−
８９０；Ｉ−２６４〜Ｌ−８９０；Ｎ−２６５〜Ｌ−８９０；Ｌ−２６６〜Ｌ−
８９０；Ｍ−２６７〜Ｌ−８９０；Ｖ−２６８〜Ｌ−８９０；Ｖ−２６９〜Ｌ−
８９０；Ｋ−２７０〜Ｌ−８９０；Ｖ−２７１〜Ｌ−８９０；Ｌ−２７２〜Ｌ−
８９０；Ｉ−２７３〜Ｌ−８９０；Ｖ−２７４〜Ｌ−８９０；Ｅ−２７５〜Ｌ−
８９０；Ｄ−２７６〜Ｌ−８９０；Ｅ−２７７〜Ｌ−８９０；Ｋ−２７８〜Ｌ−
８９０；Ｗ−２７９〜Ｌ−８９０；Ｇ−２８０〜Ｌ−８９０；Ｐ−２８１〜Ｌ−
８９０；Ｅ−２８２〜Ｌ−８９０；Ｖ−２８３〜Ｌ−８９０；Ｓ−２８４〜Ｌ−
８９０；Ｄ−２８５〜Ｌ−８９０；Ｎ−２８６〜Ｌ−８９０；Ｇ−２８７〜Ｌ−
８９０；Ｇ−２８８〜Ｌ−８９０；Ｌ−２８９〜Ｌ−８９０；Ｔ−２９０〜Ｌ−
８９０；Ｌ−２９１〜Ｌ−８９０；Ｒ−２９２〜Ｌ−８９０；Ｎ−２９３〜Ｌ−
８９０；Ｆ−２９４〜Ｌ−８９０；Ｃ−２９５〜Ｌ−８９０；Ｎ−２９６〜Ｌ−
８９０；Ｗ−２９７〜Ｌ−８９０；Ｑ−２９８〜Ｌ−８９０；Ｒ−２９９〜Ｌ−
８９０；Ｒ−３００〜Ｌ−８９０；Ｆ−３０１〜Ｌ−８９０；Ｎ−３０２〜Ｌ−
８９０；Ｑ−３０３〜Ｌ−８９０；Ｐ−３０４〜Ｌ−８９０；Ｓ−３０５〜Ｌ−
８９０；Ｄ−３０６〜Ｌ−８９０；Ｒ−３０７〜Ｌ−８９０；Ｈ−３０８〜Ｌ−
８９０；Ｐ−３０９〜Ｌ−８９０；Ｅ−３１０〜Ｌ−８９０；Ｈ−３１１〜Ｌ−
８９０；Ｙ−３１２〜Ｌ−８９０；Ｄ−３１３〜Ｌ−８９０；Ｔ−３１４〜Ｌ−
８９０；Ａ−３１５〜Ｌ−８９０；Ｉ−３１６〜Ｌ−８９０；Ｌ−３１７〜Ｌ−
８９０；Ｌ−３１８〜Ｌ−８９０；Ｔ−３１９〜Ｌ−８９０；Ｒ−３２０〜Ｌ−
８９０；Ｑ−３２１〜Ｌ−８９０；Ｎ−３２２〜Ｌ−８９０；Ｆ−３２３〜Ｌ−
８９０；Ｃ−３２４〜Ｌ−８９０；Ｇ−３２５〜Ｌ−８９０；Ｑ−３２６〜Ｌ−
８９０；Ｅ−３２７〜Ｌ−８９０；Ｇ−３２８〜Ｌ−８９０；Ｌ−３２９〜Ｌ−
８９０；Ｃ−３３０〜Ｌ−８９０；Ｄ−３３１〜Ｌ−８９０；Ｔ−３３２〜Ｌ−
８９０；Ｌ−３３３〜Ｌ−８９０；Ｇ−３３４〜Ｌ−８９０；Ｖ−３３５〜Ｌ−
８９０；Ａ−３３６〜Ｌ−８９０；Ｄ−３３７〜Ｌ−８９０；Ｉ−３３８〜Ｌ−
８９０；Ｇ−３３９〜Ｌ−８９０；Ｔ−３４０〜Ｌ−８９０；Ｉ−３４１〜Ｌ−
８９０；Ｃ−３４２〜Ｌ−８９０；Ｄ−３４３〜Ｌ−８９０；Ｐ−３４４〜Ｌ−
８９０；Ｎ−３４５〜Ｌ−８９０；Ｋ−３４６〜Ｌ−８９０；Ｓ−３４７〜Ｌ−
８９０；Ｃ−３４８〜Ｌ−８９０；Ｓ−３４９〜Ｌ−８９０；Ｖ−３５０〜Ｌ−
８９０；Ｉ−３５１〜Ｌ−８９０；Ｅ−３５２〜Ｌ−８９０；Ｄ−３５３〜Ｌ−
８９０；Ｅ−３５４〜Ｌ−８９０；Ｇ−３５５〜Ｌ−８９０；Ｌ−３５６〜Ｌ−
８９０；Ｑ−３５７〜Ｌ−８９０；Ａ−３５８〜Ｌ−８９０；Ａ−３５９〜Ｌ−
８９０；Ｈ−３６０〜Ｌ−８９０；Ｔ−３６１〜Ｌ−８９０；Ｌ−３６２〜Ｌ−
８９０；Ａ−３６３〜Ｌ−８９０；Ｈ−３６４〜Ｌ−８９０；Ｅ−３６５〜Ｌ−
８９０；Ｌ−３６６〜Ｌ−８９０；Ｇ−３６７〜Ｌ−８９０；Ｈ−３６８〜Ｌ−
８９０；Ｖ−３６９〜Ｌ−８９０；Ｌ−３７０〜Ｌ−８９０；Ｓ−３７１〜Ｌ−
８９０；Ｍ−３７２〜Ｌ−８９０；Ｐ−３７３〜Ｌ−８９０；Ｈ−３７４〜Ｌ−
８９０；Ｄ−３７５〜Ｌ−８９０；Ｄ−３７６〜Ｌ−８９０；Ｓ−３７７〜Ｌ−
８９０；Ｋ−３７８〜Ｌ−８９０；Ｐ−３７９〜Ｌ−８９０；Ｃ−３８０〜Ｌ−
８９０；Ｔ−３８１〜Ｌ−８９０；Ｒ−３８２〜Ｌ−８９０；Ｌ−３８３〜Ｌ−
８９０；Ｆ−３８４〜Ｌ−８９０；Ｇ−３８５〜Ｌ−８９０；Ｐ−３８６〜Ｌ−
８９０；Ｍ−３８７〜Ｌ−８９０；Ｇ−３８８〜Ｌ−８９０；Ｋ−３８９〜Ｌ−
８９０；Ｈ−３９０〜Ｌ−８９０；Ｈ−３９１〜Ｌ−８９０；Ｖ−３９２〜Ｌ−
８９０；Ｍ−３９３〜Ｌ−８９０；Ａ−３９４〜Ｌ−８９０；Ｐ−３９５〜Ｌ−
８９０；Ｌ−３９６〜Ｌ−８９０；Ｆ−３９７〜Ｌ−８９０；Ｖ−３９８〜Ｌ−
８９０；Ｈ−３９９〜Ｌ−８９０；Ｌ−４００〜Ｌ−８９０；Ｎ−４０１〜Ｌ−
８９０；Ｑ−４０２〜Ｌ−８９０；Ｔ−４０３〜Ｌ−８９０；Ｌ−４０４〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４０５〜Ｌ−８９０；Ｗ−４０６〜Ｌ−８９０；Ｓ−４０７〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４０８〜Ｌ−８９０；Ｃ−４０９〜Ｌ−８９０；Ｓ−４１０〜Ｌ−
８９０；Ａ−４１１〜Ｌ−８９０；Ｍ−４１２〜Ｌ−８９０；Ｙ−４１３〜Ｌ−
８９０；Ｌ−４１４〜Ｌ−８９０；Ｔ−４１５〜Ｌ−８９０；Ｅ−４１６〜Ｌ−
８９０；Ｌ−４１７〜Ｌ−８９０；Ｌ−４１８〜Ｌ−８９０；Ｄ−４１９〜Ｌ−
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８９０；Ｌ−４２６〜Ｌ−８９０；Ｌ−４２７〜Ｌ−８９０；Ｄ−４２８〜Ｌ−
８９０；Ａ−４２９〜Ｌ−８９０；Ｐ−４３０〜Ｌ−８９０；Ｇ−４３１〜Ｌ−
８９０；Ａ−４３２〜Ｌ−８９０；Ａ−４３３〜Ｌ−８９０；Ｌ−４３４〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４３５〜Ｌ−８９０；Ｌ−４３６〜Ｌ−８９０；Ｐ−４３７〜Ｌ−
８９０；Ｔ−４３８〜Ｌ−８９０；Ｇ−４３９〜Ｌ−８９０；Ｌ−４４０〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４４１〜Ｌ−８９０；Ｇ−４４２〜Ｌ−８９０；Ｒ−４４３〜Ｌ−
８９０；Ｍ−４４４〜Ｌ−８９０；Ａ−４４５〜Ｌ−８９０；Ｌ−４４６〜Ｌ−
８９０；Ｙ−４４７〜Ｌ−８９０；Ｑ−４４８〜Ｌ−８９０；Ｌ−４４９〜Ｌ−
８９０；Ｄ−４５０〜Ｌ−８９０；Ｑ−４５１〜Ｌ−８９０；Ｑ−４５２〜Ｌ−
８９０；Ｃ−４５３〜Ｌ−８９０；Ｒ−４５４〜Ｌ−８９０；Ｑ−４５５〜Ｌ−
８９０；Ｉ−４５６〜Ｌ−８９０；Ｆ−４５７〜Ｌ−８９０；Ｇ−４５８〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４５９〜Ｌ−８９０；Ｄ−４６０〜Ｌ−８９０；Ｆ−４６１〜Ｌ−
８９０；Ｒ−４６２〜Ｌ−８９０；Ｈ−４６３〜Ｌ−８９０；Ｃ−４６４〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４６５〜Ｌ−８９０；Ｎ−４６６〜Ｌ−８９０；Ｔ−４６７〜Ｌ−
８９０；Ｓ−４６８〜Ｌ−８９０；Ａ−４６９〜Ｌ−８９０；Ｑ−４７０〜Ｌ−
８９０；Ｄ−４７１〜Ｌ−８９０；Ｖ−４７２〜Ｌ−８９０；Ｃ−４７３〜Ｌ−
８９０；Ａ−４７４〜Ｌ−８９０；Ｑ−４７５〜Ｌ−８９０；Ｌ−４７６〜Ｌ−
８９０；Ｗ−４７７〜Ｌ−８９０；Ｃ−４７８〜Ｌ−８９０；Ｈ−４７９〜Ｌ−
８９０；Ｔ−４８０〜Ｌ−８９０；Ｄ−４８１〜Ｌ−８９０；Ｇ−４８２〜Ｌ−
８９０；Ａ−４８３〜Ｌ−８９０；Ｅ−４８４〜Ｌ−８９０；Ｐ−４８５〜Ｌ−
８９０；Ｌ−４８６〜Ｌ−８９０；Ｃ−４８７〜Ｌ−８９０；Ｈ−４８８〜Ｌ−
８９０；Ｔ−４８９〜Ｌ−８９０；Ｋ−４９０〜Ｌ−８９０；Ｎ−４９１〜Ｌ−
８９０；Ｇ−４９２〜Ｌ−８９０；Ｓ−４９３〜Ｌ−８９０；Ｌ−４９４〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４９５〜Ｌ−８９０；Ｗ−４９６〜Ｌ−８９０；Ａ−４９７〜Ｌ−
８９０；Ｄ−４９８〜Ｌ−８９０；Ｇ−４９９〜Ｌ−８９０；Ｔ−５００〜Ｌ−
８９０；Ｐ−５０１〜Ｌ−８９０；Ｃ−５０２〜Ｌ−８９０；Ｇ−５０３〜Ｌ−
８９０；Ｐ−５０４〜Ｌ−８９０；Ｇ−５０５〜Ｌ−８９０；Ｈ−５０６〜Ｌ−
８９０；Ｌ−５０７〜Ｌ−８９０；Ｃ−５０８〜Ｌ−８９０；Ｓ−５０９〜Ｌ−
８９０；Ｅ−５１０〜Ｌ−８９０；Ｇ−５１１〜Ｌ−８９０；Ｓ−５１２〜Ｌ−
８９０；Ｃ−５１３〜Ｌ−８９０；Ｌ−５１４〜Ｌ−８９０；Ｐ−５１５〜Ｌ−
８９０；Ｅ−５１６〜Ｌ−８９０；Ｅ−５１７〜Ｌ−８９０；Ｅ−５１８〜Ｌ−
８９０；Ｖ−５１９〜Ｌ−８９０；Ｅ−５２０〜Ｌ−８９０；Ｒ−５２１〜Ｌ−
８９０；Ｐ−５２２〜Ｌ−８９０；Ｋ−５２３〜Ｌ−８９０；Ｐ−５２４〜Ｌ−
８９０；Ｖ−５２５〜Ｌ−８９０；Ｖ−５２６〜Ｌ−８９０；Ｄ−５２７〜Ｌ−
８９０；Ｇ−５２８〜Ｌ−８９０；Ｇ−５２９〜Ｌ−８９０；Ｗ−５３０〜Ｌ−
８９０；Ａ−５３１〜Ｌ−８９０；Ｐ−５３２〜Ｌ−８９０；Ｗ−５３３〜Ｌ−
８９０；Ｇ−５３４〜Ｌ−８９０；Ｐ−５３５〜Ｌ−８９０；Ｗ−５３６〜Ｌ−
８９０；Ｇ−５３７〜Ｌ−８９０；Ｅ−５３８〜Ｌ−８９０；Ｃ−５３９〜Ｌ−
８９０；Ｓ−５４０〜Ｌ−８９０；Ｒ−５４１〜Ｌ−８９０；Ｔ−５４２〜Ｌ−
８９０；Ｃ−５４３〜Ｌ−８９０；Ｇ−５４４〜Ｌ−８９０；Ｇ−５４５〜Ｌ−
８９０；Ｇ−５４６〜Ｌ−８９０；Ｖ−５４７〜Ｌ−８９０；Ｑ−５４８〜Ｌ−
８９０；Ｆ−５４９〜Ｌ−８９０；Ｓ−５５０〜Ｌ−８９０；Ｈ−５５１〜Ｌ−
８９０；Ｒ−５５２〜Ｌ−８９０；Ｅ−５５３〜Ｌ−８９０；Ｃ−５５４〜Ｌ−
８９０；Ｋ−５５５〜Ｌ−８９０；Ｄ−５５６〜Ｌ−８９０；Ｐ−５５７〜Ｌ−
８９０；Ｅ−５５８〜Ｌ−８９０；Ｐ−５５９〜Ｌ−８９０；Ｑ−５６０〜Ｌ−
８９０；Ｎ−５６１〜Ｌ−８９０；Ｇ−５６２〜Ｌ−８９０；Ｇ−５６３〜Ｌ−
８９０；Ｒ−５６４〜Ｌ−８９０；Ｙ−５６５〜Ｌ−８９０；Ｃ−５６６〜Ｌ−
８９０；Ｌ−５６７〜Ｌ−８９０；Ｇ−５６８〜Ｌ−８９０；Ｒ−５６９〜Ｌ−
８９０；Ｒ−５７０〜Ｌ−８９０；Ａ−５７１〜Ｌ−８９０；Ｋ−５７２〜Ｌ−
８９０；Ｙ−５７３〜Ｌ−８９０；Ｑ−５７４〜Ｌ−８９０；Ｓ−５７５〜Ｌ−
８９０；Ｃ−５７６〜Ｌ−８９０；Ｈ−５７７〜Ｌ−８９０；Ｔ−５７８〜Ｌ−
８９０；Ｅ−５７９〜Ｌ−８９０；Ｅ−５８０〜Ｌ−８９０；Ｃ−５８１〜Ｌ−
８９０；Ｐ−５８２〜Ｌ−８９０；Ｐ−５８３〜Ｌ−８９０；Ｄ−５８４〜Ｌ−
８９０；Ｇ−５８５〜Ｌ−８９０；Ｋ−５８６〜Ｌ−８９０；Ｓ−５８７〜Ｌ−
８９０；Ｆ−５８８〜Ｌ−８９０；Ｒ−５８９〜Ｌ−８９０；Ｅ−５９０〜Ｌ−
８９０；Ｑ−５９１〜Ｌ−８９０；Ｑ−５９２〜Ｌ−８９０；Ｃ−５９３〜Ｌ−
８９０；Ｅ−５９４〜Ｌ−８９０；Ｋ−５９５〜Ｌ−８９０；Ｙ−５９６〜Ｌ−
８９０；Ｎ−５９７〜Ｌ−８９０；Ａ−５９８〜Ｌ−８９０；Ｙ−５９９〜Ｌ−
８９０；Ｎ−６００〜Ｌ−８９０；Ｙ−６０１〜Ｌ−８９０；Ｔ−６０２〜Ｌ−
８９０；Ｄ−６０３〜Ｌ−８９０；Ｍ−６０４〜Ｌ−８９０；Ｄ−６０５〜Ｌ−
８９０；Ｇ−６０６〜Ｌ−８９０；Ｎ−６０７〜Ｌ−８９０；Ｌ−６０８〜Ｌ−
８９０；Ｌ−６０９〜Ｌ−８９０；Ｑ−６１０〜Ｌ−８９０；Ｗ−６１１〜Ｌ−
８９０；Ｖ−６１２〜Ｌ−８９０；Ｐ−６１３〜Ｌ−８９０；Ｋ−６１４〜Ｌ−
８９０；Ｙ−６１５〜Ｌ−８９０；Ａ−６１６〜Ｌ−８９０；Ｇ−６１７〜Ｌ−
８９０；Ｖ−６１８〜Ｌ−８９０；Ｓ−６１９〜Ｌ−８９０；Ｐ−６２０〜Ｌ−
８９０；Ｒ−６２１〜Ｌ−８９０；Ｄ−６２２〜Ｌ−８９０；Ｒ−６２３〜Ｌ−
８９０；Ｃ−６２４〜Ｌ−８９０；Ｋ−６２５〜Ｌ−８９０；Ｌ−６２６〜Ｌ−
８９０；Ｆ−６２７〜Ｌ−８９０；Ｃ−６２８〜Ｌ−８９０；Ｒ−６２９〜Ｌ−
８９０；Ａ−６３０〜Ｌ−８９０；Ｒ−６３１〜Ｌ−８９０；Ｇ−６３２〜Ｌ−
８９０；Ｒ−６３３〜Ｌ−８９０；Ｓ−６３４〜Ｌ−８９０；Ｅ−６３５〜Ｌ−
８９０；Ｆ−６３６〜Ｌ−８９０；Ｋ−６３７〜Ｌ−８９０；Ｖ−６３８〜Ｌ−
８９０；Ｆ−６３９〜Ｌ−８９０；Ｅ−６４０〜Ｌ−８９０；Ａ−６４１〜Ｌ−
８９０；Ｋ−６４２〜Ｌ−８９０；Ｖ−６４３〜Ｌ−８９０；Ｉ−６４４〜Ｌ−
８９０；Ｄ−６４５〜Ｌ−８９０；Ｇ−６４６〜Ｌ−８９０；Ｔ−６４７〜Ｌ−
８９０；Ｌ−６４８〜Ｌ−８９０；Ｃ−６４９〜Ｌ−８９０；Ｇ−６５０〜Ｌ−
８９０；Ｐ−６５１〜Ｌ−８９０；Ｅ−６５２〜Ｌ−８９０；Ｔ−６５３〜Ｌ−
８９０；Ｌ−６５４〜Ｌ−８９０；Ａ−６５５〜Ｌ−８９０；Ｉ−６５６〜Ｌ−
８９０；Ｃ−６５７〜Ｌ−８９０；Ｖ−６５８〜Ｌ−８９０；Ｒ−６５９〜Ｌ−
８９０；Ｇ−６６０〜Ｌ−８９０；Ｑ−６６１〜Ｌ−８９０；Ｃ−６６２〜Ｌ−
８９０；Ｖ−６６３〜Ｌ−８９０；Ｋ−６６４〜Ｌ−８９０；Ａ−６６５〜Ｌ−
８９０；Ｇ−６６６〜Ｌ−８９０；Ｃ−６６７〜Ｌ−８９０；Ｄ−６６８〜Ｌ−
８９０；Ｈ−６６９〜Ｌ−８９０；Ｖ−６７０〜Ｌ−８９０；Ｖ−６７１〜Ｌ−
８９０；Ｄ−６７２〜Ｌ−８９０；Ｓ−６７３〜Ｌ−８９０；Ｐ−６７４〜Ｌ−
８９０；Ｒ−６７５〜Ｌ−８９０；Ｋ−６７６〜Ｌ−８９０；Ｌ−６７７〜Ｌ−
８９０；Ｄ−６７８〜Ｌ−８９０；Ｋ−６７９〜Ｌ−８９０；Ｃ−６８０〜Ｌ−
８９０；Ｇ−６８１〜Ｌ−８９０；Ｖ−６８２〜Ｌ−８９０；Ｃ−６８３〜Ｌ−
８９０；Ｇ−６８４〜Ｌ−８９０；Ｇ−６８５〜Ｌ−８９０；Ｋ−６８６〜Ｌ−
８９０；Ｇ−６８７〜Ｌ−８９０；Ｎ−６８８〜Ｌ−８９０；Ｓ−６８９〜Ｌ−
８９０；Ｃ−６９０〜Ｌ−８９０；Ｒ−６９１〜Ｌ−８９０；Ｋ−６９２〜Ｌ−
８９０；Ｖ−６９３〜Ｌ−８９０；Ｓ−６９４〜Ｌ−８９０；Ｇ−６９５〜Ｌ−
８９０；Ｓ−６９６〜Ｌ−８９０；Ｌ−６９７〜Ｌ−８９０；Ｔ−６９８〜Ｌ−
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８９０；Ｌ−７７４〜Ｌ−８９０；Ｅ−７７５〜Ｌ−８９０；Ｒ−７７６〜Ｌ−
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８９０；Ｖ−７９８〜Ｌ−８９０；Ｆ−７９９〜Ｌ−８９０；Ｐ−８００〜Ｌ−
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８９０；Ｅ−８２２〜Ｌ−８９０；Ｒ−８２３〜Ｌ−８９０；Ａ−８２４〜Ｌ−
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８９０；Ｇ−８５２〜Ｌ−８９０；Ｗ−８５３〜Ｌ−８９０；Ｑ−８５４〜Ｌ−
８９０；Ｒ−８５５〜Ｌ−８９０；Ｒ−８５６〜Ｌ−８９０；Ｔ−８５７〜Ｌ−
８９０；Ｖ−８５８〜Ｌ−８９０；Ｅ−８５９〜Ｌ−８９０；Ｃ−８６０〜Ｌ−
８９０；Ｒ−８６１〜Ｌ−８９０；Ｄ−８６２〜Ｌ−８９０；Ｐ−８６３〜Ｌ−
８９０；Ｓ−８６４〜Ｌ−８９０；Ｇ−８６５〜Ｌ−８９０；Ｑ−８６６〜Ｌ−
８９０；Ａ−８６７〜Ｌ−８９０；Ｓ−８６８〜Ｌ−８９０；Ａ−８６９〜Ｌ−
８９０；Ｔ−８７０〜Ｌ−８９０；Ｃ−８７１〜Ｌ−８９０；Ｎ−８７２〜Ｌ−
８９０；Ｋ−８７３〜Ｌ−８９０；Ａ−８７４〜Ｌ−８９０；Ｌ−８７５〜Ｌ−
８９０；Ｋ−８７６〜Ｌ−８９０；Ｐ−８７７〜Ｌ−８９０；Ｅ−８７８〜Ｌ−
８９０；Ｄ−８７９〜Ｌ−８９０；Ａ−８８０〜Ｌ−８９０；Ｋ−８８１〜Ｌ−
８９０；Ｐ−８８２〜Ｌ−８９０；Ｃ−８８３〜Ｌ−８９０；Ｅ−８８４〜Ｌ−
８９０；Ｓ−８８５〜Ｌ−８９０。
て記載され得、ここで、ｍ2は、２〜８８９の整数であり、ここでｍは、配列番
号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。好ましくは、配列番号
４として示される本発明のＭＥＴＨ２ポリペプチドのＮ末端欠失は、以下の残基
のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む：配列番号４のＦ−２〜Ｌ−８９０；
Ｐ−３〜Ｌ−８９０；Ａ−４〜Ｌ−８９０；Ｐ−５〜Ｌ−８９０；Ａ−６〜Ｌ−
８９０；Ａ−７〜Ｌ−８９０；Ｐ−８〜Ｌ−８９０；Ｒ−９〜Ｌ−８９０；Ｗ−
１０〜Ｌ−８９０；Ｌ−１１〜Ｌ−８９０；Ｐ−１２〜Ｌ−８９０；Ｆ−１３〜
Ｌ−８９０；Ｌ−１４〜Ｌ−８９０；Ｌ−１５〜Ｌ−８９０；Ｌ−１６〜Ｌ−８
９０；Ｌ−１７〜Ｌ−８９０；Ｌ−１８〜Ｌ−８９０；Ｌ−１９〜Ｌ−８９０；
Ｌ−２０〜Ｌ−８９０；Ｌ−２１〜Ｌ−８９０；Ｌ−２２〜Ｌ−８９０；Ｐ−２
３〜Ｌ−８９０；Ｌ−２４〜Ｌ−８９０；Ａ−２５〜Ｌ−８９０；Ｒ−２６〜Ｌ
−８９０；Ｇ−２７〜Ｌ−８９０；Ａ−２８〜Ｌ−８９０；Ｐ−２９〜Ｌ−８９
０；Ａ−３０〜Ｌ−８９０；Ｒ−３１〜Ｌ−８９０；Ｐ−３２〜Ｌ−８９０；Ａ
−３３〜Ｌ−８９０；Ａ−３４〜Ｌ−８９０；Ｇ−３５〜Ｌ−８９０；Ｇ−３６
〜Ｌ−８９０；Ｑ−３７〜Ｌ−８９０；Ａ−３８〜Ｌ−８９０；Ｓ−３９〜Ｌ−
８９０；Ｅ−４０〜Ｌ−８９０；Ｌ−４１〜Ｌ−８９０；Ｖ−４２〜Ｌ−８９０
；Ｖ−４３〜Ｌ−８９０；Ｐ−４４〜Ｌ−８９０；Ｔ−４５〜Ｌ−８９０；Ｒ−
４６〜Ｌ−８９０；Ｌ−４７〜Ｌ−８９０；Ｐ−４８〜Ｌ−８９０；Ｇ−４９〜
Ｌ−８９０；Ｓ−５０〜Ｌ−８９０；Ａ−５１〜Ｌ−８９０；Ｇ−５２〜Ｌ−８
９０；Ｅ−５３〜Ｌ−８９０；Ｌ−５４〜Ｌ−８９０；Ａ−５５〜Ｌ−８９０；
Ｌ−５６〜Ｌ−８９０；Ｈ−５７〜Ｌ−８９０；Ｌ−５８〜Ｌ−８９０；Ｓ−５
９〜Ｌ−８９０；Ａ−６０〜Ｌ−８９０；Ｆ−６１〜Ｌ−８９０；Ｇ−６２〜Ｌ
−８９０；Ｋ−６３〜Ｌ−８９０；Ｇ−６４〜Ｌ−８９０；Ｆ−６５〜Ｌ−８９
０；Ｖ−６６〜Ｌ−８９０；Ｌ−６７〜Ｌ−８９０；Ｒ−６８〜Ｌ−８９０；Ｌ
−６９〜Ｌ−８９０；Ａ−７０〜Ｌ−８９０；Ｐ−７１〜Ｌ−８９０；Ｄ−７２
〜Ｌ−８９０；Ｄ−７３〜Ｌ−８９０；Ｓ−７４〜Ｌ−８９０；Ｆ−７５〜Ｌ−
８９０；Ｌ−７６〜Ｌ−８９０；Ａ−７７〜Ｌ−８９０；Ｐ−７８〜Ｌ−８９０
；Ｅ−７９〜Ｌ−８９０；Ｆ−８０〜Ｌ−８９０；Ｋ−８１〜Ｌ−８９０；Ｉ−
８２〜Ｌ−８９０；Ｅ−８３〜Ｌ−８９０；Ｒ−８４〜Ｌ−８９０；Ｌ−８５〜
Ｌ−８９０；Ｇ−８６〜Ｌ−８９０；Ｇ−８７〜Ｌ−８９０；Ｓ−８８〜Ｌ−８
９０；Ｇ−８９〜Ｌ−８９０；Ｒ−９０〜Ｌ−８９０；Ａ−９１〜Ｌ−８９０；
Ｔ−９２〜Ｌ−８９０；Ｇ−９３〜Ｌ−８９０；Ｇ−９４〜Ｌ−８９０；Ｅ−９
５〜Ｌ−８９０；Ｒ−９６〜Ｌ−８９０；Ｇ−９７〜Ｌ−８９０；Ｌ−９８〜Ｌ
−８９０；Ｒ−９９〜Ｌ−８９０；Ｇ−１００〜Ｌ−８９０；Ｃ−１０１〜Ｌ−
８９０；Ｆ−１０２〜Ｌ−８９０；Ｆ−１０３〜Ｌ−８９０；Ｓ−１０４〜Ｌ−
８９０；Ｇ−１０５〜Ｌ−８９０；Ｔ−１０６〜Ｌ−８９０；Ｖ−１０７〜Ｌ−
８９０；Ｎ−１０８〜Ｌ−８９０；Ｇ−１０９〜Ｌ−８９０；Ｅ−１１０〜Ｌ−
８９０；Ｐ−１１１〜Ｌ−８９０；Ｅ−１１２〜Ｌ−８９０；Ｓ−１１３〜Ｌ−
８９０；Ｌ−１１４〜Ｌ−８９０；Ａ−１１５〜Ｌ−８９０；Ａ−１１６〜Ｌ−
８９０；Ｖ−１１７〜Ｌ−８９０；Ｓ−１１８〜Ｌ−８９０；Ｌ−１１９〜Ｌ−
８９０；Ｃ−１２０〜Ｌ−８９０；Ｒ−１２１〜Ｌ−８９０；Ｇ−１２２〜Ｌ−
８９０；Ｌ−１２３〜Ｌ−８９０；Ｓ−１２４〜Ｌ−８９０；Ｇ−１２５〜Ｌ−
８９０；Ｓ−１２６〜Ｌ−８９０；Ｆ−１２７〜Ｌ−８９０；Ｌ−１２８〜Ｌ−
８９０；Ｌ−１２９〜Ｌ−８９０；Ｄ−１３０〜Ｌ−８９０；Ｇ−１３１〜Ｌ−
８９０；Ｅ−１３２〜Ｌ−８９０；Ｅ−１３３〜Ｌ−８９０；Ｆ−１３４〜Ｌ−
８９０；Ｔ−１３５〜Ｌ−８９０；Ｉ−１３６〜Ｌ−８９０；Ｑ−１３７〜Ｌ−
８９０；Ｐ−１３８〜Ｌ−８９０；Ｑ−１３９〜Ｌ−８９０；Ｇ−１４０〜Ｌ−
８９０；Ａ−１４１〜Ｌ−８９０；Ｇ−１４２〜Ｌ−８９０；Ｇ−１４３〜Ｌ−
８９０；Ｓ−１４４〜Ｌ−８９０；Ｌ−１４５〜Ｌ−８９０；Ａ−１４６〜Ｌ−
８９０；Ｑ−１４７〜Ｌ−８９０；Ｐ−１４８〜Ｌ−８９０；Ｈ−１４９〜Ｌ−
８９０；Ｒ−１５０〜Ｌ−８９０；Ｌ−１５１〜Ｌ−８９０；Ｑ−１５２〜Ｌ−
８９０；Ｒ−１５３〜Ｌ−８９０；Ｗ−１５４〜Ｌ−８９０；Ｇ−１５５〜Ｌ−
８９０；Ｐ−１５６〜Ｌ−８９０；Ａ−１５７〜Ｌ−８９０；Ｇ−１５８〜Ｌ−
８９０；Ａ−１５９〜Ｌ−８９０；Ｒ−１６０〜Ｌ−８９０；Ｐ−１６１〜Ｌ−
８９０；Ｌ−１６２〜Ｌ−８９０；Ｐ−１６３〜Ｌ−８９０；Ｒ−１６４〜Ｌ−
８９０；Ｇ−１６５〜Ｌ−８９０；Ｐ−１６６〜Ｌ−８９０；Ｅ−１６７〜Ｌ−
８９０；Ｗ−１６８〜Ｌ−８９０；Ｅ−１６９〜Ｌ−８９０；Ｖ−１７０〜Ｌ−
８９０；Ｅ−１７１〜Ｌ−８９０；Ｔ−１７２〜Ｌ−８９０；Ｇ−１７３〜Ｌ−
８９０；Ｅ−１７４〜Ｌ−８９０；Ｇ−１７５〜Ｌ−８９０；Ｑ−１７６〜Ｌ−
８９０；Ｒ−１７７〜Ｌ−８９０；Ｑ−１７８〜Ｌ−８９０；Ｅ−１７９〜Ｌ−
８９０；Ｒ−１８０〜Ｌ−８９０；Ｇ−１８１〜Ｌ−８９０；Ｄ−１８２〜Ｌ−
８９０；Ｈ−１８３〜Ｌ−８９０；Ｑ−１８４〜Ｌ−８９０；Ｅ−１８５〜Ｌ−
８９０；Ｄ−１８６〜Ｌ−８９０；Ｓ−１８７〜Ｌ−８９０；Ｅ−１８８〜Ｌ−
８９０；Ｅ−１８９〜Ｌ−８９０；Ｅ−１９０〜Ｌ−８９０；Ｓ−１９１〜Ｌ−
８９０；Ｑ−１９２〜Ｌ−８９０；Ｅ−１９３〜Ｌ−８９０；Ｅ−１９４〜Ｌ−
８９０；Ｅ−１９５〜Ｌ−８９０；Ａ−１９６〜Ｌ−８９０；Ｅ−１９７〜Ｌ−
８９０；Ｇ−１９８〜Ｌ−８９０；Ａ−１９９〜Ｌ−８９０；Ｓ−２００〜Ｌ−
８９０；Ｅ−２０１〜Ｌ−８９０；Ｐ−２０２〜Ｌ−８９０；Ｐ−２０３〜Ｌ−
８９０；Ｐ−２０４〜Ｌ−８９０；Ｐ−２０５〜Ｌ−８９０；Ｌ−２０６〜Ｌ−
８９０；Ｇ−２０７〜Ｌ−８９０；Ａ−２０８〜Ｌ−８９０；Ｔ−２０９〜Ｌ−
８９０；Ｓ−２１０〜Ｌ−８９０；Ｒ−２１１〜Ｌ−８９０；Ｔ−２１２〜Ｌ−
８９０；Ｋ−２１３〜Ｌ−８９０；Ｒ−２１４〜Ｌ−８９０；Ｆ−２１５〜Ｌ−
８９０；Ｖ−２１６〜Ｌ−８９０；Ｓ−２１７〜Ｌ−８９０；Ｅ−２１８〜Ｌ−
８９０；Ａ−２１９〜Ｌ−８９０；Ｒ−２２０〜Ｌ−８９０；Ｆ−２２１〜Ｌ−
８９０；Ｖ−２２２〜Ｌ−８９０；Ｅ−２２３〜Ｌ−８９０；Ｔ−２２４〜Ｌ−
８９０；Ｌ−２２５〜Ｌ−８９０；Ｌ−２２６〜Ｌ−８９０；Ｖ−２２７〜Ｌ−
８９０；Ａ−２２８〜Ｌ−８９０；Ｄ−２２９〜Ｌ−８９０；Ａ−２３０〜Ｌ−
８９０；Ｓ−２３１〜Ｌ−８９０；Ｍ−２３２〜Ｌ−８９０；Ａ−２３３〜Ｌ−
８９０；Ａ−２３４〜Ｌ−８９０；Ｆ−２３５〜Ｌ−８９０；Ｙ−２３６〜Ｌ−
８９０；Ｇ−２３７〜Ｌ−８９０；Ａ−２３８〜Ｌ−８９０；Ｄ−２３９〜Ｌ−
８９０；Ｌ−２４０〜Ｌ−８９０；Ｑ−２４１〜Ｌ−８９０；Ｎ−２４２〜Ｌ−
８９０；Ｈ−２４３〜Ｌ−８９０；Ｉ−２４４〜Ｌ−８９０；Ｌ−２４５〜Ｌ−
８９０；Ｔ−２４６〜Ｌ−８９０；Ｌ−２４７〜Ｌ−８９０；Ｍ−２４８〜Ｌ−
８９０；Ｓ−２４９〜Ｌ−８９０；Ｖ−２５０〜Ｌ−８９０；Ａ−２５１〜Ｌ−
８９０；Ａ−２５２〜Ｌ−８９０；Ｒ−２５３〜Ｌ−８９０；Ｉ−２５４〜Ｌ−
８９０；Ｙ−２５５〜Ｌ−８９０；Ｋ−２５６〜Ｌ−８９０；Ｈ−２５７〜Ｌ−
８９０；Ｐ−２５８〜Ｌ−８９０；Ｓ−２５９〜Ｌ−８９０；Ｉ−２６０〜Ｌ−
８９０；Ｋ−２６１〜Ｌ−８９０；Ｎ−２６２〜Ｌ−８９０；Ｓ−２６３〜Ｌ−
８９０；Ｉ−２６４〜Ｌ−８９０；Ｎ−２６５〜Ｌ−８９０；Ｌ−２６６〜Ｌ−
８９０；Ｍ−２６７〜Ｌ−８９０；Ｖ−２６８〜Ｌ−８９０；Ｖ−２６９〜Ｌ−
８９０；Ｋ−２７０〜Ｌ−８９０；Ｖ−２７１〜Ｌ−８９０；Ｌ−２７２〜Ｌ−
８９０；Ｉ−２７３〜Ｌ−８９０；Ｖ−２７４〜Ｌ−８９０；Ｅ−２７５〜Ｌ−
８９０；Ｄ−２７６〜Ｌ−８９０；Ｅ−２７７〜Ｌ−８９０；Ｋ−２７８〜Ｌ−
８９０；Ｗ−２７９〜Ｌ−８９０；Ｇ−２８０〜Ｌ−８９０；Ｐ−２８１〜Ｌ−
８９０；Ｅ−２８２〜Ｌ−８９０；Ｖ−２８３〜Ｌ−８９０；Ｓ−２８４〜Ｌ−
８９０；Ｄ−２８５〜Ｌ−８９０；Ｎ−２８６〜Ｌ−８９０；Ｇ−２８７〜Ｌ−
８９０；Ｇ−２８８〜Ｌ−８９０；Ｌ−２８９〜Ｌ−８９０；Ｔ−２９０〜Ｌ−
８９０；Ｌ−２９１〜Ｌ−８９０；Ｒ−２９２〜Ｌ−８９０；Ｎ−２９３〜Ｌ−
８９０；Ｆ−２９４〜Ｌ−８９０；Ｃ−２９５〜Ｌ−８９０；Ｎ−２９６〜Ｌ−
８９０；Ｗ−２９７〜Ｌ−８９０；Ｑ−２９８〜Ｌ−８９０；Ｒ−２９９〜Ｌ−
８９０；Ｒ−３００〜Ｌ−８９０；Ｆ−３０１〜Ｌ−８９０；Ｎ−３０２〜Ｌ−
８９０；Ｑ−３０３〜Ｌ−８９０；Ｐ−３０４〜Ｌ−８９０；Ｓ−３０５〜Ｌ−
８９０；Ｄ−３０６〜Ｌ−８９０；Ｒ−３０７〜Ｌ−８９０；Ｈ−３０８〜Ｌ−
８９０；Ｐ−３０９〜Ｌ−８９０；Ｅ−３１０〜Ｌ−８９０；Ｈ−３１１〜Ｌ−
８９０；Ｙ−３１２〜Ｌ−８９０；Ｄ−３１３〜Ｌ−８９０；Ｔ−３１４〜Ｌ−
８９０；Ａ−３１５〜Ｌ−８９０；Ｉ−３１６〜Ｌ−８９０；Ｌ−３１７〜Ｌ−
８９０；Ｌ−３１８〜Ｌ−８９０；Ｔ−３１９〜Ｌ−８９０；Ｒ−３２０〜Ｌ−
８９０；Ｑ−３２１〜Ｌ−８９０；Ｎ−３２２〜Ｌ−８９０；Ｆ−３２３〜Ｌ−
８９０；Ｃ−３２４〜Ｌ−８９０；Ｇ−３２５〜Ｌ−８９０；Ｑ−３２６〜Ｌ−
８９０；Ｅ−３２７〜Ｌ−８９０；Ｇ−３２８〜Ｌ−８９０；Ｌ−３２９〜Ｌ−
８９０；Ｃ−３３０〜Ｌ−８９０；Ｄ−３３１〜Ｌ−８９０；Ｔ−３３２〜Ｌ−
８９０；Ｌ−３３３〜Ｌ−８９０；Ｇ−３３４〜Ｌ−８９０；Ｖ−３３５〜Ｌ−
８９０；Ａ−３３６〜Ｌ−８９０；Ｄ−３３７〜Ｌ−８９０；Ｉ−３３８〜Ｌ−
８９０；Ｇ−３３９〜Ｌ−８９０；Ｔ−３４０〜Ｌ−８９０；Ｉ−３４１〜Ｌ−
８９０；Ｃ−３４２〜Ｌ−８９０；Ｄ−３４３〜Ｌ−８９０；Ｐ−３４４〜Ｌ−
８９０；Ｎ−３４５〜Ｌ−８９０；Ｋ−３４６〜Ｌ−８９０；Ｓ−３４７〜Ｌ−
８９０；Ｃ−３４８〜Ｌ−８９０；Ｓ−３４９〜Ｌ−８９０；Ｖ−３５０〜Ｌ−
８９０；Ｉ−３５１〜Ｌ−８９０；Ｅ−３５２〜Ｌ−８９０；Ｄ−３５３〜Ｌ−
８９０；Ｅ−３５４〜Ｌ−８９０；Ｇ−３５５〜Ｌ−８９０；Ｌ−３５６〜Ｌ−
８９０；Ｑ−３５７〜Ｌ−８９０；Ａ−３５８〜Ｌ−８９０；Ａ−３５９〜Ｌ−
８９０；Ｈ−３６０〜Ｌ−８９０；Ｔ−３６１〜Ｌ−８９０；Ｌ−３６２〜Ｌ−
８９０；Ａ−３６３〜Ｌ−８９０；Ｈ−３６４〜Ｌ−８９０；Ｅ−３６５〜Ｌ−
８９０；Ｌ−３６６〜Ｌ−８９０；Ｇ−３６７〜Ｌ−８９０；Ｈ−３６８〜Ｌ−
８９０；Ｖ−３６９〜Ｌ−８９０；Ｌ−３７０〜Ｌ−８９０；Ｓ−３７１〜Ｌ−
８９０；Ｍ−３７２〜Ｌ−８９０；Ｐ−３７３〜Ｌ−８９０；Ｈ−３７４〜Ｌ−
８９０；Ｄ−３７５〜Ｌ−８９０；Ｄ−３７６〜Ｌ−８９０；Ｓ−３７７〜Ｌ−
８９０；Ｋ−３７８〜Ｌ−８９０；Ｐ−３７９〜Ｌ−８９０；Ｃ−３８０〜Ｌ−
８９０；Ｔ−３８１〜Ｌ−８９０；Ｒ−３８２〜Ｌ−８９０；Ｌ−３８３〜Ｌ−
８９０；Ｆ−３８４〜Ｌ−８９０；Ｇ−３８５〜Ｌ−８９０；Ｐ−３８６〜Ｌ−
８９０；Ｍ−３８７〜Ｌ−８９０；Ｇ−３８８〜Ｌ−８９０；Ｋ−３８９〜Ｌ−
８９０；Ｈ−３９０〜Ｌ−８９０；Ｈ−３９１〜Ｌ−８９０；Ｖ−３９２〜Ｌ−
８９０；Ｍ−３９３〜Ｌ−８９０；Ａ−３９４〜Ｌ−８９０；Ｐ−３９５〜Ｌ−
８９０；Ｌ−３９６〜Ｌ−８９０；Ｆ−３９７〜Ｌ−８９０；Ｖ−３９８〜Ｌ−
８９０；Ｈ−３９９〜Ｌ−８９０；Ｌ−４００〜Ｌ−８９０；Ｎ−４０１〜Ｌ−
８９０；Ｑ−４０２〜Ｌ−８９０；Ｔ−４０３〜Ｌ−８９０；Ｌ−４０４〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４０５〜Ｌ−８９０；Ｗ−４０６〜Ｌ−８９０；Ｓ−４０７〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４０８〜Ｌ−８９０；Ｃ−４０９〜Ｌ−８９０；Ｓ−４１０〜Ｌ−
８９０；Ａ−４１１〜Ｌ−８９０；Ｍ−４１２〜Ｌ−８９０；Ｙ−４１３〜Ｌ−
８９０；Ｌ−４１４〜Ｌ−８９０；Ｔ−４１５〜Ｌ−８９０；Ｅ−４１６〜Ｌ−
８９０；Ｌ−４１７〜Ｌ−８９０；Ｌ−４１８〜Ｌ−８９０；Ｄ−４１９〜Ｌ−
８９０；Ｇ−４２０〜Ｌ−８９０；Ｇ−４２１〜Ｌ−８９０；Ｈ−４２２〜Ｌ−
８９０；Ｇ−４２３〜Ｌ−８９０；Ｄ−４２４〜Ｌ−８９０；Ｃ−４２５〜Ｌ−
８９０；Ｌ−４２６〜Ｌ−８９０；Ｌ−４２７〜Ｌ−８９０；Ｄ−４２８〜Ｌ−
８９０；Ａ−４２９〜Ｌ−８９０；Ｐ−４３０〜Ｌ−８９０；Ｇ−４３１〜Ｌ−
８９０；Ａ−４３２〜Ｌ−８９０；Ａ−４３３〜Ｌ−８９０；Ｌ−４３４〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４３５〜Ｌ−８９０；Ｌ−４３６〜Ｌ−８９０；Ｐ−４３７〜Ｌ−
８９０；Ｔ−４３８〜Ｌ−８９０；Ｇ−４３９〜Ｌ−８９０；Ｌ−４４０〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４４１〜Ｌ−８９０；Ｇ−４４２〜Ｌ−８９０；Ｒ−４４３〜Ｌ−
８９０；Ｍ−４４４〜Ｌ−８９０；Ａ−４４５〜Ｌ−８９０；Ｌ−４４６〜Ｌ−
８９０；Ｙ−４４７〜Ｌ−８９０；Ｑ−４４８〜Ｌ−８９０；Ｌ−４４９〜Ｌ−
８９０；Ｄ−４５０〜Ｌ−８９０；Ｑ−４５１〜Ｌ−８９０；Ｑ−４５２〜Ｌ−
８９０；Ｃ−４５３〜Ｌ−８９０；Ｒ−４５４〜Ｌ−８９０；Ｑ−４５５〜Ｌ−
８９０；Ｉ−４５６〜Ｌ−８９０；Ｆ−４５７〜Ｌ−８９０；Ｇ−４５８〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４５９〜Ｌ−８９０；Ｄ−４６０〜Ｌ−８９０；Ｆ−４６１〜Ｌ−
８９０；Ｒ−４６２〜Ｌ−８９０；Ｈ−４６３〜Ｌ−８９０；Ｃ−４６４〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４６５〜Ｌ−８９０；Ｎ−４６６〜Ｌ−８９０；Ｔ−４６７〜Ｌ−
８９０；Ｓ−４６８〜Ｌ−８９０；Ａ−４６９〜Ｌ−８９０；Ｑ−４７０〜Ｌ−
８９０；Ｄ−４７１〜Ｌ−８９０；Ｖ−４７２〜Ｌ−８９０；Ｃ−４７３〜Ｌ−
８９０；Ａ−４７４〜Ｌ−８９０；Ｑ−４７５〜Ｌ−８９０；Ｌ−４７６〜Ｌ−
８９０；Ｗ−４７７〜Ｌ−８９０；Ｃ−４７８〜Ｌ−８９０；Ｈ−４７９〜Ｌ−
８９０；Ｔ−４８０〜Ｌ−８９０；Ｄ−４８１〜Ｌ−８９０；Ｇ−４８２〜Ｌ−
８９０；Ａ−４８３〜Ｌ−８９０；Ｅ−４８４〜Ｌ−８９０；Ｐ−４８５〜Ｌ−
８９０；Ｌ−４８６〜Ｌ−８９０；Ｃ−４８７〜Ｌ−８９０；Ｈ−４８８〜Ｌ−
８９０；Ｔ−４８９〜Ｌ−８９０；Ｋ−４９０〜Ｌ−８９０；Ｎ−４９１〜Ｌ−
８９０；Ｇ−４９２〜Ｌ−８９０；Ｓ−４９３〜Ｌ−８９０；Ｌ−４９４〜Ｌ−
８９０；Ｐ−４９５〜Ｌ−８９０；Ｗ−４９６〜Ｌ−８９０；Ａ−４９７〜Ｌ−
８９０；Ｄ−４９８〜Ｌ−８９０；Ｇ−４９９〜Ｌ−８９０；Ｔ−５００〜Ｌ−
８９０；Ｐ−５０１〜Ｌ−８９０；Ｃ−５０２〜Ｌ−８９０；Ｇ−５０３〜Ｌ−
８９０；Ｐ−５０４〜Ｌ−８９０；Ｇ−５０５〜Ｌ−８９０；Ｈ−５０６〜Ｌ−
８９０；Ｌ−５０７〜Ｌ−８９０；Ｃ−５０８〜Ｌ−８９０；Ｓ−５０９〜Ｌ−
８９０；Ｅ−５１０〜Ｌ−８９０；Ｇ−５１１〜Ｌ−８９０；Ｓ−５１２〜Ｌ−
８９０；Ｃ−５１３〜Ｌ−８９０；Ｌ−５１４〜Ｌ−８９０；Ｐ−５１５〜Ｌ−
８９０；Ｅ−５１６〜Ｌ−８９０；Ｅ−５１７〜Ｌ−８９０；Ｅ−５１８〜Ｌ−
８９０；Ｖ−５１９〜Ｌ−８９０；Ｅ−５２０〜Ｌ−８９０；Ｒ−５２１〜Ｌ−
８９０；Ｐ−５２２〜Ｌ−８９０；Ｋ−５２３〜Ｌ−８９０；Ｐ−５２４〜Ｌ−
８９０；Ｖ−５２５〜Ｌ−８９０；Ｖ−５２６〜Ｌ−８９０；Ｄ−５２７〜Ｌ−
８９０；Ｇ−５２８〜Ｌ−８９０；Ｇ−５２９〜Ｌ−８９０；Ｗ−５３０〜Ｌ−
８９０；Ａ−５３１〜Ｌ−８９０；Ｐ−５３２〜Ｌ−８９０；Ｗ−５３３〜Ｌ−
８９０；Ｇ−５３４〜Ｌ−８９０；Ｐ−５３５〜Ｌ−８９０；Ｗ−５３６〜Ｌ−
８９０；Ｇ−５３７〜Ｌ−８９０；Ｅ−５３８〜Ｌ−８９０；Ｃ−５３９〜Ｌ−
８９０；Ｓ−５４０〜Ｌ−８９０；Ｒ−５４１〜Ｌ−８９０；Ｔ−５４２〜Ｌ−
８９０；Ｃ−５４３〜Ｌ−８９０；Ｇ−５４４〜Ｌ−８９０；Ｇ−５４５〜Ｌ−
８９０；Ｇ−５４６〜Ｌ−８９０；Ｖ−５４７〜Ｌ−８９０；Ｑ−５４８〜Ｌ−
８９０；Ｆ−５４９〜Ｌ−８９０；Ｓ−５５０〜Ｌ−８９０；Ｈ−５５１〜Ｌ−
８９０；Ｒ−５５２〜Ｌ−８９０；Ｅ−５５３〜Ｌ−８９０；Ｃ−５５４〜Ｌ−
８９０；Ｋ−５５５〜Ｌ−８９０；Ｄ−５５６〜Ｌ−８９０；Ｐ−５５７〜Ｌ−
８９０；Ｅ−５５８〜Ｌ−８９０；Ｐ−５５９〜Ｌ−８９０；Ｑ−５６０〜Ｌ−
８９０；Ｎ−５６１〜Ｌ−８９０；Ｇ−５６２〜Ｌ−８９０；Ｇ−５６３〜Ｌ−
８９０；Ｒ−５６４〜Ｌ−８９０；Ｙ−５６５〜Ｌ−８９０；Ｃ−５６６〜Ｌ−
８９０；Ｌ−５６７〜Ｌ−８９０；Ｇ−５６８〜Ｌ−８９０；Ｒ−５６９〜Ｌ−
８９０；Ｒ−５７０〜Ｌ−８９０；Ａ−５７１〜Ｌ−８９０；Ｋ−５７２〜Ｌ−
８９０；Ｙ−５７３〜Ｌ−８９０；Ｑ−５７４〜Ｌ−８９０；Ｓ−５７５〜Ｌ−
８９０；Ｃ−５７６〜Ｌ−８９０；Ｈ−５７７〜Ｌ−８９０；Ｔ−５７８〜Ｌ−
８９０；Ｅ−５７９〜Ｌ−８９０；Ｅ−５８０〜Ｌ−８９０；Ｃ−５８１〜Ｌ−
８９０；Ｐ−５８２〜Ｌ−８９０；Ｐ−５８３〜Ｌ−８９０；Ｄ−５８４〜Ｌ−
８９０；Ｇ−５８５〜Ｌ−８９０；Ｋ−５８６〜Ｌ−８９０；Ｓ−５８７〜Ｌ−
８９０；Ｆ−５８８〜Ｌ−８９０；Ｒ−５８９〜Ｌ−８９０；Ｅ−５９０〜Ｌ−
８９０；Ｑ−５９１〜Ｌ−８９０；Ｑ−５９２〜Ｌ−８９０；Ｃ−５９３〜Ｌ−
８９０；Ｅ−５９４〜Ｌ−８９０；Ｋ−５９５〜Ｌ−８９０；Ｙ−５９６〜Ｌ−
８９０；Ｎ−５９７〜Ｌ−８９０；Ａ−５９８〜Ｌ−８９０；Ｙ−５９９〜Ｌ−
８９０；Ｎ−６００〜Ｌ−８９０；Ｙ−６０１〜Ｌ−８９０；Ｔ−６０２〜Ｌ−
８９０；Ｄ−６０３〜Ｌ−８９０；Ｍ−６０４〜Ｌ−８９０；Ｄ−６０５〜Ｌ−
８９０；Ｇ−６０６〜Ｌ−８９０；Ｎ−６０７〜Ｌ−８９０；Ｌ−６０８〜Ｌ−
８９０；Ｌ−６０９〜Ｌ−８９０；Ｑ−６１０〜Ｌ−８９０；Ｗ−６１１〜Ｌ−
８９０；Ｖ−６１２〜Ｌ−８９０；Ｐ−６１３〜Ｌ−８９０；Ｋ−６１４〜Ｌ−
８９０；Ｙ−６１５〜Ｌ−８９０；Ａ−６１６〜Ｌ−８９０；Ｇ−６１７〜Ｌ−
８９０；Ｖ−６１８〜Ｌ−８９０；Ｓ−６１９〜Ｌ−８９０；Ｐ−６２０〜Ｌ−
８９０；Ｒ−６２１〜Ｌ−８９０；Ｄ−６２２〜Ｌ−８９０；Ｒ−６２３〜Ｌ−
８９０；Ｃ−６２４〜Ｌ−８９０；Ｋ−６２５〜Ｌ−８９０；Ｌ−６２６〜Ｌ−
８９０；Ｆ−６２７〜Ｌ−８９０；Ｃ−６２８〜Ｌ−８９０；Ｒ−６２９〜Ｌ−
８９０；Ａ−６３０〜Ｌ−８９０；Ｒ−６３１〜Ｌ−８９０；Ｇ−６３２〜Ｌ−
８９０；Ｒ−６３３〜Ｌ−８９０；Ｓ−６３４〜Ｌ−８９０；Ｅ−６３５〜Ｌ−
８９０；Ｆ−６３６〜Ｌ−８９０；Ｋ−６３７〜Ｌ−８９０；Ｖ−６３８〜Ｌ−
８９０；Ｆ−６３９〜Ｌ−８９０；Ｅ−６４０〜Ｌ−８９０；Ａ−６４１〜Ｌ−
８９０；Ｋ−６４２〜Ｌ−８９０；Ｖ−６４３〜Ｌ−８９０；Ｉ−６４４〜Ｌ−
８９０；Ｄ−６４５〜Ｌ−８９０；Ｇ−６４６〜Ｌ−８９０；Ｔ−６４７〜Ｌ−
８９０；Ｌ−６４８〜Ｌ−８９０；Ｃ−６４９〜Ｌ−８９０；Ｇ−６５０〜Ｌ−
８９０；Ｐ−６５１〜Ｌ−８９０；Ｅ−６５２〜Ｌ−８９０；Ｔ−６５３〜Ｌ−
８９０；Ｌ−６５４〜Ｌ−８９０；Ａ−６５５〜Ｌ−８９０；Ｉ−６５６〜Ｌ−
８９０；Ｃ−６５７〜Ｌ−８９０；Ｖ−６５８〜Ｌ−８９０；Ｒ−６５９〜Ｌ−
８９０；Ｇ−６６０〜Ｌ−８９０；Ｑ−６６１〜Ｌ−８９０；Ｃ−６６２〜Ｌ−
８９０；Ｖ−６６３〜Ｌ−８９０；Ｋ−６６４〜Ｌ−８９０；Ａ−６６５〜Ｌ−
８９０；Ｇ−６６６〜Ｌ−８９０；Ｃ−６６７〜Ｌ−８９０；Ｄ−６６８〜Ｌ−
８９０；Ｈ−６６９〜Ｌ−８９０；Ｖ−６７０〜Ｌ−８９０；Ｖ−６７１〜Ｌ−
８９０；Ｄ−６７２〜Ｌ−８９０；Ｓ−６７３〜Ｌ−８９０；Ｐ−６７４〜Ｌ−
８９０；Ｒ−６７５〜Ｌ−８９０；Ｋ−６７６〜Ｌ−８９０；Ｌ−６７７〜Ｌ−
８９０；Ｄ−６７８〜Ｌ−８９０；Ｋ−６７９〜Ｌ−８９０；Ｃ−６８０〜Ｌ−
８９０；Ｇ−６８１〜Ｌ−８９０；Ｖ−６８２〜Ｌ−８９０；Ｃ−６８３〜Ｌ−
８９０；Ｇ−６８４〜Ｌ−８９０；Ｇ−６８５〜Ｌ−８９０；Ｋ−６８６〜Ｌ−
８９０；Ｇ−６８７〜Ｌ−８９０；Ｎ−６８８〜Ｌ−８９０；Ｓ−６８９〜Ｌ−
８９０；Ｃ−６９０〜Ｌ−８９０；Ｒ−６９１〜Ｌ−８９０；Ｋ−６９２〜Ｌ−
８９０；Ｖ−６９３〜Ｌ−８９０；Ｓ−６９４〜Ｌ−８９０；Ｇ−６９５〜Ｌ−
８９０；Ｓ−６９６〜Ｌ−８９０；Ｌ−６９７〜Ｌ−８９０；Ｔ−６９８〜Ｌ−
８９０；Ｐ−６９９〜Ｌ−８９０；Ｔ−７００〜Ｌ−８９０；Ｎ−７０１〜Ｌ−
８９０；Ｙ−７０２〜Ｌ−８９０；Ｇ−７０３〜Ｌ−８９０；Ｙ−７０４〜Ｌ−
８９０；Ｎ−７０５〜Ｌ−８９０；Ｄ−７０６〜Ｌ−８９０；Ｉ−７０７〜Ｌ−
８９０；Ｖ−７０８〜Ｌ−８９０；Ｔ−７０９〜Ｌ−８９０；Ｉ−７１０〜Ｌ−
８９０；Ｐ−７１１〜Ｌ−８９０；Ａ−７１２〜Ｌ−８９０；Ｇ−７１３〜Ｌ−
８９０；Ａ−７１４〜Ｌ−８９０；Ｔ−７１５〜Ｌ−８９０；Ｎ−７１６〜Ｌ−
８９０；Ｉ−７１７〜Ｌ−８９０；Ｄ−７１８〜Ｌ−８９０；Ｖ−７１９〜Ｌ−
８９０；Ｋ−７２０〜Ｌ−８９０；Ｑ−７２１〜Ｌ−８９０；Ｒ−７２２〜Ｌ−
８９０；Ｓ−７２３〜Ｌ−８９０；Ｈ−７２４〜Ｌ−８９０；Ｐ−７２５〜Ｌ−
８９０；Ｇ−７２６〜Ｌ−８９０；Ｖ−７２７〜Ｌ−８９０；Ｑ−７２８〜Ｌ−
８９０；Ｎ−７２９〜Ｌ−８９０；Ｄ−７３０〜Ｌ−８９０；Ｇ−７３１〜Ｌ−
８９０；Ｎ−７３２〜Ｌ−８９０；Ｙ−７３３〜Ｌ−８９０；Ｌ−７３４〜Ｌ−
８９０；Ａ−７３５〜Ｌ−８９０；Ｌ−７３６〜Ｌ−８９０；Ｋ−７３７〜Ｌ−
８９０；Ｔ−７３８〜Ｌ−８９０；Ａ−７３９〜Ｌ−８９０；Ｄ−７４０〜Ｌ−
８９０；Ｇ−７４１〜Ｌ−８９０；Ｑ−７４２〜Ｌ−８９０；Ｙ−７４３〜Ｌ−
８９０；Ｌ−７４４〜Ｌ−８９０；Ｌ−７４５〜Ｌ−８９０；Ｎ−７４６〜Ｌ−
８９０；Ｇ−７４７〜Ｌ−８９０；Ｎ−７４８〜Ｌ−８９０；Ｌ−７４９〜Ｌ−
８９０；Ａ−７５０〜Ｌ−８９０；Ｉ−７５１〜Ｌ−８９０；Ｓ−７５２〜Ｌ−
８９０；Ａ−７５３〜Ｌ−８９０；Ｉ−７５４〜Ｌ−８９０；Ｅ−７５５〜Ｌ−
８９０；Ｑ−７５６〜Ｌ−８９０；Ｄ−７５７〜Ｌ−８９０；Ｉ−７５８〜Ｌ−
８９０；Ｌ−７５９〜Ｌ−８９０；Ｖ−７６０〜Ｌ−８９０；Ｋ−７６１〜Ｌ−
８９０；Ｇ−７６２〜Ｌ−８９０；Ｔ−７６３〜Ｌ−８９０；Ｉ−７６４〜Ｌ−
８９０；Ｌ−７６５〜Ｌ−８９０；Ｋ−７６６〜Ｌ−８９０；Ｙ−７６７〜Ｌ−
８９０；Ｓ−７６８〜Ｌ−８９０；Ｇ−７６９〜Ｌ−８９０；Ｓ−７７０〜Ｌ−
８９０；Ｉ−７７１〜Ｌ−８９０；Ａ−７７２〜Ｌ−８９０；Ｔ−７７３〜Ｌ−
８９０；Ｌ−７７４〜Ｌ−８９０；Ｅ−７７５〜Ｌ−８９０；Ｒ−７７６〜Ｌ−
８９０；Ｌ−７７７〜Ｌ−８９０；Ｑ−７７８〜Ｌ−８９０；Ｓ−７７９〜Ｌ−
８９０；Ｆ−７８０〜Ｌ−８９０；Ｒ−７８１〜Ｌ−８９０；Ｐ−７８２〜Ｌ−
８９０；Ｌ−７８３〜Ｌ−８９０；Ｐ−７８４〜Ｌ−８９０；Ｅ−７８５〜Ｌ−
８９０；Ｐ−７８６〜Ｌ−８９０；Ｌ−７８７〜Ｌ−８９０；Ｔ−７８８〜Ｌ−
８９０；Ｖ−７８９〜Ｌ−８９０；Ｑ−７９０〜Ｌ−８９０；Ｌ−７９１〜Ｌ−
８９０；Ｌ−７９２〜Ｌ−８９０；Ｔ−７９３〜Ｌ−８９０；Ｖ−７９４〜Ｌ−
８９０；Ｐ−７９５〜Ｌ−８９０；Ｇ−７９６〜Ｌ−８９０；Ｅ−７９７〜Ｌ−
８９０；Ｖ−７９８〜Ｌ−８９０；Ｆ−７９９〜Ｌ−８９０；Ｐ−８００〜Ｌ−
８９０；Ｐ−８０１〜Ｌ−８９０；Ｋ−８０２〜Ｌ−８９０；Ｖ−８０３〜Ｌ−
８９０；Ｋ−８０４〜Ｌ−８９０；Ｙ−８０５〜Ｌ−８９０；Ｔ−８０６〜Ｌ−
８９０；Ｆ−８０７〜Ｌ−８９０；Ｆ−８０８〜Ｌ−８９０；Ｖ−８０９〜Ｌ−
８９０；Ｐ−８１０〜Ｌ−８９０；Ｎ−８１１〜Ｌ−８９０；Ｄ−８１２〜Ｌ−
８９０；Ｖ−８１３〜Ｌ−８９０；Ｄ−８１４〜Ｌ−８９０；Ｆ−８１５〜Ｌ−
８９０；Ｓ−８１６〜Ｌ−８９０；Ｍ−８１７〜Ｌ−８９０；Ｑ−８１８〜Ｌ−
８９０；Ｓ−８１９〜Ｌ−８９０；Ｓ−８２０〜Ｌ−８９０；Ｋ−８２１〜Ｌ−
８９０；Ｅ−８２２〜Ｌ−８９０；Ｒ−８２３〜Ｌ−８９０；Ａ−８２４〜Ｌ−
８９０；Ｔ−８２５〜Ｌ−８９０；Ｔ−８２６〜Ｌ−８９０；Ｎ−８２７〜Ｌ−
８９０；Ｉ−８２８〜Ｌ−８９０；Ｉ−８２９〜Ｌ−８９０；Ｑ−８３０〜Ｌ−
８９０；Ｐ−８３１〜Ｌ−８９０；Ｌ−８３２〜Ｌ−８９０；Ｌ−８３３〜Ｌ−
８９０；Ｈ−８３４〜Ｌ−８９０；Ａ−８３５〜Ｌ−８９０；Ｑ−８３６〜Ｌ−
８９０；Ｗ−８３７〜Ｌ−８９０；Ｖ−８３８〜Ｌ−８９０；Ｌ−８３９〜Ｌ−
８９０；Ｇ−８４０〜Ｌ−８９０；Ｄ−８４１〜Ｌ−８９０；Ｗ−８４２〜Ｌ−
８９０；Ｓ−８４３〜Ｌ−８９０；Ｅ−８４４〜Ｌ−８９０；Ｃ−８４５〜Ｌ−
８９０；Ｓ−８４６〜Ｌ−８９０；Ｓ−８４７〜Ｌ−８９０；Ｔ−８４８〜Ｌ−
８９０；Ｃ−８４９〜Ｌ−８９０；Ｇ−８５０〜Ｌ−８９０；Ａ−８５１〜Ｌ−
８９０；Ｇ−８５２〜Ｌ−８９０；Ｗ−８５３〜Ｌ−８９０；Ｑ−８５４〜Ｌ−
８９０；Ｒ−８５５〜Ｌ−８９０；Ｒ−８５６〜Ｌ−８９０；Ｔ−８５７〜Ｌ−
８９０；Ｖ−８５８〜Ｌ−８９０；Ｅ−８５９〜Ｌ−８９０；Ｃ−８６０〜Ｌ−
８９０；Ｒ−８６１〜Ｌ−８９０；Ｄ−８６２〜Ｌ−８９０；Ｐ−８６３〜Ｌ−
８９０；Ｓ−８６４〜Ｌ−８９０；Ｇ−８６５〜Ｌ−８９０；Ｑ−８６６〜Ｌ−
８９０；Ａ−８６７〜Ｌ−８９０；Ｓ−８６８〜Ｌ−８９０；Ａ−８６９〜Ｌ−
８９０；Ｔ−８７０〜Ｌ−８９０；Ｃ−８７１〜Ｌ−８９０；Ｎ−８７２〜Ｌ−
８９０；Ｋ−８７３〜Ｌ−８９０；Ａ−８７４〜Ｌ−８９０；Ｌ−８７５〜Ｌ−
８９０；Ｋ−８７６〜Ｌ−８９０；Ｐ−８７７〜Ｌ−８９０；Ｅ−８７８〜Ｌ−
８９０；Ｄ−８７９〜Ｌ−８９０；Ａ−８８０〜Ｌ−８９０；Ｋ−８８１〜Ｌ−
８９０；Ｐ−８８２〜Ｌ−８９０；Ｃ−８８３〜Ｌ−８９０；Ｅ−８８４〜Ｌ−
８９０；Ｓ−８８５〜Ｌ−８９０。
【０１５８】
さらに、ＭＥＴＨ２ポリペプチドのＣ末端欠失はまた、一般式１−ｎ2によっ
て記載され得、ここで、ｎ2は、２〜８９０の整数であり、ここで、ｎは、配列
番号４において同定されたアミノ酸残基の位置に対応する。好ましくは、配列番
号４として示される本発明のＭＥＴＨ２ポリペプチドのＣ末端欠失は、以下の残
基のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む：配列番号４のＭ−１〜Ｐ−８８９
；Ｍ−１〜Ｃ−８８８；Ｍ−１〜Ｌ−８８７；Ｍ−１〜Ｑ−８８６；Ｍ−１〜Ｓ
−８８５；Ｍ−１〜Ｅ−８８４；Ｍ−１〜Ｃ−８８３；Ｍ−１〜Ｐ−８８２；Ｍ
−１〜Ｋ−８８１；Ｍ−１〜Ａ−８８０；Ｍ−１〜Ｄ−８７９；Ｍ−１〜Ｅ−８
７８；Ｍ−１〜Ｐ−８７７；Ｍ−１〜Ｋ−８７６；Ｍ−１〜Ｌ−８７５；Ｍ−１
〜Ａ−８７４；Ｍ−１〜Ｋ−８７３；Ｍ−１〜Ｎ−８７２；Ｍ−１〜Ｃ−８７１
；Ｍ−１〜Ｔ−８７０；Ｍ−１〜Ａ−８６９；Ｍ−１〜Ｓ−８６８；Ｍ−１〜Ａ
−８６７；Ｍ−１〜Ｑ−８６６；Ｍ−１〜Ｇ−８６５；Ｍ−１〜Ｓ−８６４；Ｍ
−１〜Ｐ−８６３；Ｍ−１〜Ｄ−８６２；Ｍ−１〜Ｒ−８６１；Ｍ−１〜Ｃ−８
６０；Ｍ−１〜Ｅ−８５９；Ｍ−１〜Ｖ−８５８；Ｍ−１〜Ｔ−８５７；Ｍ−１
〜Ｒ−８５６；Ｍ−１〜Ｒ−８５５；Ｍ−１〜Ｑ−８５４；Ｍ−１〜Ｗ−８５３
；Ｍ−１〜Ｇ−８５２；Ｍ−１〜Ａ−８５１；Ｍ−１〜Ｇ−８５０；Ｍ−１〜Ｃ
−８４９；Ｍ−１〜Ｔ−８４８；Ｍ−１〜Ｓ−８４７；Ｍ−１〜Ｓ−８４６；Ｍ
−１〜Ｃ−８４５；Ｍ−１〜Ｅ−８４４；Ｍ−１〜Ｓ−８４３；Ｍ−１〜Ｗ−８
４２；Ｍ−１〜Ｄ−８４１；Ｍ−１〜Ｇ−８４０；Ｍ−１〜Ｌ−８３９；Ｍ−１
〜Ｖ−８３８；Ｍ−１〜Ｗ−８３７；Ｍ−１〜Ｑ−８３６；Ｍ−１〜Ａ−８３５
；Ｍ−１〜Ｈ−８３４；Ｍ−１〜Ｌ−８３３；Ｍ−１〜Ｌ−８３２；Ｍ−１〜Ｐ
−８３１；Ｍ−１〜Ｑ−８３０；Ｍ−１〜Ｉ−８２９；Ｍ−１〜Ｉ−８２８；Ｍ
−１〜Ｎ−８２７；Ｍ−１〜Ｔ−８２６；Ｍ−１〜Ｔ−８２５；Ｍ−１〜Ａ−８
２４；Ｍ−１〜Ｒ−８２３；Ｍ−１〜Ｅ−８２２；Ｍ−１〜Ｋ−８２１；Ｍ−１
〜Ｓ−８２０；Ｍ−１〜Ｓ−８１９；Ｍ−１〜Ｑ−８１８；Ｍ−１〜Ｍ−８１７
；Ｍ−１〜Ｓ−８１６；Ｍ−１〜Ｆ−８１５；Ｍ−１〜Ｄ−８１４；Ｍ−１〜Ｖ
−８１３；Ｍ−１〜Ｄ−８１２；Ｍ−１〜Ｎ−８１１；Ｍ−１〜Ｐ−８１０；Ｍ
−１〜Ｖ−８０９；Ｍ−１〜Ｆ−８０８；Ｍ−１〜Ｆ−８０７；Ｍ−１〜Ｔ−８
０６；Ｍ−１〜Ｙ−８０５；Ｍ−１〜Ｋ−８０４；Ｍ−１〜Ｖ−８０３；Ｍ−１
〜Ｋ−８０２；Ｍ−１〜Ｐ−８０１；Ｍ−１〜Ｐ−８００；Ｍ−１〜Ｆ−７９９
；Ｍ−１〜Ｖ−７９８；Ｍ−１〜Ｅ−７９７；Ｍ−１〜Ｇ−７９６；Ｍ−１〜Ｐ
−７９５；Ｍ−１〜Ｖ−７９４；Ｍ−１〜Ｔ−７９３；Ｍ−１〜Ｌ−７９２；Ｍ
−１〜Ｌ−７９１；Ｍ−１〜Ｑ−７９０；Ｍ−１〜Ｖ−７８９；Ｍ−１〜Ｔ−７
８８；Ｍ−１〜Ｌ−７８７；Ｍ−１〜Ｐ−７８６；Ｍ−１〜Ｅ−７８５；Ｍ−１
〜Ｐ−７８４；Ｍ−１〜Ｌ−７８３；Ｍ−１〜Ｐ−７８２；Ｍ−１〜Ｒ−７８１
；Ｍ−１〜Ｆ−７８０；Ｍ−１〜Ｓ−７７９；Ｍ−１〜Ｑ−７７８；Ｍ−１〜Ｌ
−７７７；Ｍ−１〜Ｒ−７７６；Ｍ−１〜Ｅ−７７５；Ｍ−１〜Ｌ−７７４；Ｍ
−１〜Ｔ−７７３；Ｍ−１〜Ａ−７７２；Ｍ−１〜Ｉ−７７１；Ｍ−１〜Ｓ−７
７０；Ｍ−１〜Ｇ−７６９；Ｍ−１〜Ｓ−７６８；Ｍ−１〜Ｙ−７６７；Ｍ−１
〜Ｋ−７６６；Ｍ−１〜Ｌ−７６５；Ｍ−１〜Ｉ−７６４；Ｍ−１〜Ｔ−７６３
；Ｍ−１〜Ｇ−７６２；Ｍ−１〜Ｋ−７６１；Ｍ−１〜Ｖ−７６０；Ｍ−１〜Ｌ
−７５９；Ｍ−１〜Ｉ−７５８；Ｍ−１〜Ｄ−７５７；Ｍ−１〜Ｑ−７５６；Ｍ
−１〜Ｅ−７５５；Ｍ−１〜Ｉ−７５４；Ｍ−１〜Ａ−７５３；Ｍ−１〜Ｓ−７
５２；Ｍ−１〜Ｉ−７５１；Ｍ−１〜Ａ−７５０；Ｍ−１〜Ｌ−７４９；Ｍ−１
〜Ｎ−７４８；Ｍ−１〜Ｇ−７４７；Ｍ−１〜Ｎ−７４６；Ｍ−１〜Ｌ−７４５
；Ｍ−１〜Ｌ−７４４；Ｍ−１〜Ｙ−７４３；Ｍ−１〜Ｑ−７４２；Ｍ−１〜Ｇ
−７４１；Ｍ−１〜Ｄ−７４０；Ｍ−１〜Ａ−７３９；Ｍ−１〜Ｔ−７３８；Ｍ
−１〜Ｋ−７３７；Ｍ−１〜Ｌ−７３６；Ｍ−１〜Ａ−７３５；Ｍ−１〜Ｌ−７
３４；Ｍ−１〜Ｙ−７３３；Ｍ−１〜Ｎ−７３２；Ｍ−１〜Ｇ−７３１；Ｍ−１
〜Ｄ−７３０；Ｍ−１〜Ｎ−７２９；Ｍ−１〜Ｑ−７２８；Ｍ−１〜Ｖ−７２７
；Ｍ−１〜Ｇ−７２６；Ｍ−１〜Ｐ−７２５；Ｍ−１〜Ｈ−７２４；Ｍ−１〜Ｓ
−７２３；Ｍ−１〜Ｒ−７２２；Ｍ−１〜Ｑ−７２１；Ｍ−１〜Ｋ−７２０；Ｍ
−１〜Ｖ−７１９；Ｍ−１〜Ｄ−７１８；Ｍ−１〜Ｉ−７１７；Ｍ−１〜Ｎ−７
１６；Ｍ−１〜Ｔ−７１５；Ｍ−１〜Ａ−７１４；Ｍ−１〜Ｇ−７１３；Ｍ−１
〜Ａ−７１２；Ｍ−１〜Ｐ−７１１；Ｍ−１〜Ｉ−７１０；Ｍ−１〜Ｔ−７０９
；Ｍ−１〜Ｖ−７０８；Ｍ−１〜Ｉ−７０７；Ｍ−１〜Ｄ−７０６；Ｍ−１〜Ｎ
−７０５；Ｍ−１〜Ｙ−７０４；Ｍ−１〜Ｇ−７０３；Ｍ−１〜Ｙ−７０２；Ｍ
−１〜Ｎ−７０１；Ｍ−１〜Ｔ−７００；Ｍ−１〜Ｐ−６９９；Ｍ−１〜Ｔ−６
９８；Ｍ−１〜Ｌ−６９７；Ｍ−１〜Ｓ−６９６；Ｍ−１〜Ｇ−６９５；Ｍ−１
〜Ｓ−６９４；Ｍ−１〜Ｖ−６９３；Ｍ−１〜Ｋ−６９２；Ｍ−１〜Ｒ−６９１
；Ｍ−１〜Ｃ−６９０；Ｍ−１〜Ｓ−６８９；Ｍ−１〜Ｎ−６８８；Ｍ−１〜Ｇ
−６８７；Ｍ−１〜Ｋ−６８６；Ｍ−１〜Ｇ−６８５；Ｍ−１〜Ｇ−６８４；Ｍ
−１〜Ｃ−６８３；Ｍ−１〜Ｖ−６８２；Ｍ−１〜Ｇ−６８１；Ｍ−１〜Ｃ−６
８０；Ｍ−１〜Ｋ−６７９；Ｍ−１〜Ｄ−６７８；Ｍ−１〜Ｌ−６７７；Ｍ−１
〜Ｋ−６７６；Ｍ−１〜Ｒ−６７５；Ｍ−１〜Ｐ−６７４；Ｍ−１〜Ｓ−６７３
；Ｍ−１〜Ｄ−６７２；Ｍ−１〜Ｖ−６７１；Ｍ−１〜Ｖ−６７０；Ｍ−１〜Ｈ
−６６９；Ｍ−１〜Ｄ−６６８；Ｍ−１〜Ｃ−６６７；Ｍ−１〜Ｇ−６６６；Ｍ
−１〜Ａ−６６５；Ｍ−１〜Ｋ−６６４；Ｍ−１〜Ｖ−６６３；Ｍ−１〜Ｃ−６
６２；Ｍ−１〜Ｑ−６６１；Ｍ−１〜Ｇ−６６０；Ｍ−１〜Ｒ−６５９；Ｍ−１
〜Ｖ−６５８；Ｍ−１〜Ｃ−６５７；Ｍ−１〜Ｉ−６５６；Ｍ−１〜Ａ−６５５
；Ｍ−１〜Ｌ−６５４；Ｍ−１〜Ｔ−６５３；Ｍ−１〜Ｅ−６５２；Ｍ−１〜Ｐ
−６５１；Ｍ−１〜Ｇ−６５０；Ｍ−１〜Ｃ−６４９；Ｍ−１〜Ｌ−６４８；Ｍ
−１〜Ｔ−６４７；Ｍ−１〜Ｇ−６４６；Ｍ−１〜Ｄ−６４５；Ｍ−１〜Ｉ−６
４４；Ｍ−１〜Ｖ−６４３；Ｍ−１〜Ｋ−６４２；Ｍ−１〜Ａ−６４１；Ｍ−１
〜Ｅ−６４０；Ｍ−１〜Ｆ−６３９；Ｍ−１〜Ｖ−６３８；Ｍ−１〜Ｋ−６３７
；Ｍ−１〜Ｆ−６３６；Ｍ−１〜Ｅ−６３５；Ｍ−１〜Ｓ−６３４；Ｍ−１〜Ｒ
−６３３；Ｍ−１〜Ｇ−６３２；Ｍ−１〜Ｒ−６３１；Ｍ−１〜Ａ−６３０；Ｍ
−１〜Ｒ−６２９；Ｍ−１〜Ｃ−６２８；Ｍ−１〜Ｆ−６２７；Ｍ−１〜Ｌ−６
２６；Ｍ−１〜Ｋ−６２５；Ｍ−１〜Ｃ−６２４；Ｍ−１〜Ｒ−６２３；Ｍ−１
〜Ｄ−６２２；Ｍ−１〜Ｒ−６２１；Ｍ−１〜Ｐ−６２０；Ｍ−１〜Ｓ−６１９
；Ｍ−１〜Ｖ−６１８；Ｍ−１〜Ｇ−６１７；Ｍ−１〜Ａ−６１６；Ｍ−１〜Ｙ
−６１５；Ｍ−１〜Ｋ−６１４；Ｍ−１〜Ｐ−６１３；Ｍ−１〜Ｖ−６１２；Ｍ
−１〜Ｗ−６１１；Ｍ−１〜Ｑ−６１０；Ｍ−１〜Ｌ−６０９；Ｍ−１〜Ｌ−６
０８；Ｍ−１〜Ｎ−６０７；Ｍ−１〜Ｇ−６０６；Ｍ−１〜Ｄ−６０５；Ｍ−１
〜Ｍ−６０４；Ｍ−１〜Ｄ−６０３；Ｍ−１〜Ｔ−６０２；Ｍ−１〜Ｙ−６０１
；Ｍ−１〜Ｎ−６００；Ｍ−１〜Ｙ−５９９；Ｍ−１〜Ａ−５９８；Ｍ−１〜Ｎ
−５９７；Ｍ−１〜Ｙ−５９６；Ｍ−１〜Ｋ−５９５；Ｍ−１〜Ｅ−５９４；Ｍ
−１〜Ｃ−５９３；Ｍ−１〜Ｑ−５９２；Ｍ−１〜Ｑ−５９１；Ｍ−１〜Ｅ−５
９０；Ｍ−１〜Ｒ−５８９；Ｍ−１〜Ｆ−５８８；Ｍ−１〜Ｓ−５８７；Ｍ−１
〜Ｋ−５８６；Ｍ−１〜Ｇ−５８５；Ｍ−１〜Ｄ−５８４；Ｍ−１〜Ｐ−５８３
；Ｍ−１〜Ｐ−５８２；Ｍ−１〜Ｃ−５８１；Ｍ−１〜Ｅ−５８０；Ｍ−１〜Ｅ
−５７９；Ｍ−１〜Ｔ−５７８；Ｍ−１〜Ｈ−５７７；Ｍ−１〜Ｃ−５７６；Ｍ
−１〜Ｓ−５７５；Ｍ−１〜Ｑ−５７４；Ｍ−１〜Ｙ−５７３；Ｍ−１〜Ｋ−５
７２；Ｍ−１〜Ａ−５７１；Ｍ−１〜Ｒ−５７０；Ｍ−１〜Ｒ−５６９；Ｍ−１
〜Ｇ−５６８；Ｍ−１〜Ｌ−５６７；Ｍ−１〜Ｃ−５６６；Ｍ−１〜Ｙ−５６５
；Ｍ−１〜Ｒ−５６４；Ｍ−１〜Ｇ−５６３；Ｍ−１〜Ｇ−５６２；Ｍ−１〜Ｎ
−５６１；Ｍ−１〜Ｑ−５６０；Ｍ−１〜Ｐ−５５９；Ｍ−１〜Ｅ−５５８；Ｍ
−１〜Ｐ−５５７；Ｍ−１〜Ｄ−５５６；Ｍ−１〜Ｋ−５５５；Ｍ−１〜Ｃ−５
５４；Ｍ−１〜Ｅ−５５３；Ｍ−１〜Ｒ−５５２；Ｍ−１〜Ｈ−５５１；Ｍ−１
〜Ｓ−５５０；Ｍ−１〜Ｆ−５４９；Ｍ−１〜Ｑ−５４８；Ｍ−１〜Ｖ−５４７
；Ｍ−１〜Ｇ−５４６；Ｍ−１〜Ｇ−５４５；Ｍ−１〜Ｇ−５４４；Ｍ−１〜Ｃ
−５４３；Ｍ−１〜Ｔ−５４２；Ｍ−１〜Ｒ−５４１；Ｍ−１〜Ｓ−５４０；Ｍ
−１〜Ｃ−５３９；Ｍ−１〜Ｅ−５３８；Ｍ−１〜Ｇ−５３７；Ｍ−１〜Ｗ−５
３６；Ｍ−１〜Ｐ−５３５；Ｍ−１〜Ｇ−５３４；Ｍ−１〜Ｗ−５３３；Ｍ−１
〜Ｐ−５３２；Ｍ−１〜Ａ−５３１；Ｍ−１〜Ｗ−５３０；Ｍ−１〜Ｇ−５２９
；Ｍ−１〜Ｇ−５２８；Ｍ−１〜Ｄ−５２７；Ｍ−１〜Ｖ−５２６；Ｍ−１〜Ｖ
−５２５；Ｍ−１〜Ｐ−５２４；Ｍ−１〜Ｋ−５２３；Ｍ−１〜Ｐ−５２２；Ｍ
−１〜Ｒ−５２１；Ｍ−１〜Ｅ−５２０；Ｍ−１〜Ｖ−５１９；Ｍ−１〜Ｅ−５
１８；Ｍ−１〜Ｅ−５１７；Ｍ−１〜Ｅ−５１６；Ｍ−１〜Ｐ−５１５；Ｍ−１
〜Ｌ−５１４；Ｍ−１〜Ｃ−５１３；Ｍ−１〜Ｓ−５１２；Ｍ−１〜Ｇ−５１１
；Ｍ−１〜Ｅ−５１０；Ｍ−１〜Ｓ−５０９；Ｍ−１〜Ｃ−５０８；Ｍ−１〜Ｌ
−５０７；Ｍ−１〜Ｈ−５０６；Ｍ−１〜Ｇ−５０５；Ｍ−１〜Ｐ−５０４；Ｍ
−１〜Ｇ−５０３；Ｍ−１〜Ｃ−５０２；Ｍ−１〜Ｐ−５０１；Ｍ−１〜Ｔ−５
００；Ｍ−１〜Ｇ−４９９；Ｍ−１〜Ｄ−４９８；Ｍ−１〜Ａ−４９７；Ｍ−１
〜Ｗ−４９６；Ｍ−１〜Ｐ−４９５；Ｍ−１〜Ｌ−４９４；Ｍ−１〜Ｓ−４９３
；Ｍ−１〜Ｇ−４９２；Ｍ−１〜Ｎ−４９１；Ｍ−１〜Ｋ−４９０；Ｍ−１〜Ｔ
−４８９；Ｍ−１〜Ｈ−４８８；Ｍ−１〜Ｃ−４８７；Ｍ−１〜Ｌ−４８６；Ｍ
−１〜Ｐ−４８５；Ｍ−１〜Ｅ−４８４；Ｍ−１〜Ａ−４８３；Ｍ−１〜Ｇ−４
８２；Ｍ−１〜Ｄ−４８１；Ｍ−１〜Ｔ−４８０；Ｍ−１〜Ｈ−４７９；Ｍ−１
〜Ｃ−４７８；Ｍ−１〜Ｗ−４７７；Ｍ−１〜Ｌ−４７６；Ｍ−１〜Ｑ−４７５
；Ｍ−１〜Ａ−４７４；Ｍ−１〜Ｃ−４７３；Ｍ−１〜Ｖ−４７２；Ｍ−１〜Ｄ
−４７１；Ｍ−１〜Ｑ−４７０；Ｍ−１〜Ａ−４６９；Ｍ−１〜Ｓ−４６８；Ｍ
−１〜Ｔ−４６７；Ｍ−１〜Ｎ−４６６；Ｍ−１〜Ｐ−４６５；Ｍ−１〜Ｃ−４
６４；Ｍ−１〜Ｈ−４６３；Ｍ−１〜Ｒ−４６２；Ｍ−１〜Ｆ−４６１；Ｍ−１
〜Ｄ−４６０；Ｍ−１〜Ｐ−４５９；Ｍ−１〜Ｇ−４５８；Ｍ−１〜Ｆ−４５７
；Ｍ−１〜Ｉ−４５６；Ｍ−１〜Ｑ−４５５；Ｍ−１〜Ｒ−４５４；Ｍ−１〜Ｃ
−４５３；Ｍ−１〜Ｑ−４５２；Ｍ−１〜Ｑ−４５１；Ｍ−１〜Ｄ−４５０；Ｍ
−１〜Ｌ−４４９；Ｍ−１〜Ｑ−４４８；Ｍ−１〜Ｙ−４４７；Ｍ−１〜Ｌ−４
４６；Ｍ−１〜Ａ−４４５；Ｍ−１〜Ｍ−４４４；Ｍ−１〜Ｒ−４４３；Ｍ−１
〜Ｇ−４４２；Ｍ−１〜Ｐ−４４１；Ｍ−１〜Ｌ−４４０；Ｍ−１〜Ｇ−４３９
；Ｍ−１〜Ｔ−４３８；Ｍ−１〜Ｐ−４３７；Ｍ−１〜Ｌ−４３６；Ｍ−１〜Ｐ
−４３５；Ｍ−１〜Ｌ−４３４；Ｍ−１〜Ａ−４３３；Ｍ−１〜Ａ−４３２；Ｍ
−１〜Ｇ−４３１；Ｍ−１〜Ｐ−４３０；Ｍ−１〜Ａ−４２９；Ｍ−１〜Ｄ−４
２８；Ｍ−１〜Ｌ−４２７；Ｍ−１〜Ｌ−４２６；Ｍ−１〜Ｃ−４２５；Ｍ−１
〜Ｄ−４２４；Ｍ−１〜Ｇ−４２３；Ｍ−１〜Ｈ−４２２；Ｍ−１〜Ｇ−４２１
；Ｍ−１〜Ｇ−４２０；Ｍ−１〜Ｄ−４１９；Ｍ−１〜Ｌ−４１８；Ｍ−１〜Ｌ
−４１７；Ｍ−１〜Ｅ−４１６；Ｍ−１〜Ｔ−４１５；Ｍ−１〜Ｌ−４１４；Ｍ
−１〜Ｙ−４１３；Ｍ−１〜Ｍ−４１２；Ｍ−１〜Ａ−４１１；Ｍ−１〜Ｓ−４
１０；Ｍ−１〜Ｃ−４０９；Ｍ−１〜Ｐ−４０８；Ｍ−１〜Ｓ−４０７；Ｍ−１
〜Ｗ−４０６；Ｍ−１〜Ｐ−４０５；Ｍ−１〜Ｌ−４０４；Ｍ−１〜Ｔ−４０３
；Ｍ−１〜Ｑ−４０２；Ｍ−１〜Ｎ−４０１；Ｍ−１〜Ｌ−４００；Ｍ−１〜Ｈ
−３９９；Ｍ−１〜Ｖ−３９８；Ｍ−１〜Ｆ−３９７；Ｍ−１〜Ｌ−３９６；Ｍ
−１〜Ｐ−３９５；Ｍ−１〜Ａ−３９４；Ｍ−１〜Ｍ−３９３；Ｍ−１〜Ｖ−３
９２；Ｍ−１〜Ｈ−３９１；Ｍ−１〜Ｈ−３９０；Ｍ−１〜Ｋ−３８９；Ｍ−１
〜Ｇ−３８８；Ｍ−１〜Ｍ−３８７；Ｍ−１〜Ｐ−３８６；Ｍ−１〜Ｇ−３８５
；Ｍ−１〜Ｆ−３８４；Ｍ−１〜Ｌ−３８３；Ｍ−１〜Ｒ−３８２；Ｍ−１〜Ｔ
−３８１；Ｍ−１〜Ｃ−３８０；Ｍ−１〜Ｐ−３７９；Ｍ−１〜Ｋ−３７８；Ｍ
−１〜Ｓ−３７７；Ｍ−１〜Ｄ−３７６；Ｍ−１〜Ｄ−３７５；Ｍ−１〜Ｈ−３
７４；Ｍ−１〜Ｐ−３７３；Ｍ−１〜Ｍ−３７２；Ｍ−１〜Ｓ−３７１；Ｍ−１
〜Ｌ−３７０；Ｍ−１〜Ｖ−３６９；Ｍ−１〜Ｈ−３６８；Ｍ−１〜Ｇ−３６７
；Ｍ−１〜Ｌ−３６６；Ｍ−１〜Ｅ−３６５；Ｍ−１〜Ｈ−３６４；Ｍ−１〜Ａ
−３６３；Ｍ−１〜Ｌ−３６２；Ｍ−１〜Ｔ−３６１；Ｍ−１〜Ｈ−３６０；Ｍ
−１〜Ａ−３５９；Ｍ−１〜Ａ−３５８；Ｍ−１〜Ｑ−３５７；Ｍ−１〜Ｌ−３
５６；Ｍ−１〜Ｇ−３５５；Ｍ−１〜Ｅ−３５４；Ｍ−１〜Ｄ−３５３；Ｍ−１
〜Ｅ−３５２；Ｍ−１〜Ｉ−３５１；Ｍ−１〜Ｖ−３５０；Ｍ−１〜Ｓ−３４９
；Ｍ−１〜Ｃ−３４８；Ｍ−１〜Ｓ−３４７；Ｍ−１〜Ｋ−３４６；Ｍ−１〜Ｎ
−３４５；Ｍ−１〜Ｐ−３４４；Ｍ−１〜Ｄ−３４３；Ｍ−１〜Ｃ−３４２；Ｍ
−１〜Ｉ−３４１；Ｍ−１〜Ｔ−３４０；Ｍ−１〜Ｇ−３３９；Ｍ−１〜Ｉ−３
３８；Ｍ−１〜Ｄ−３３７；Ｍ−１〜Ａ−３３６；Ｍ−１〜Ｖ−３３５；Ｍ−１
〜Ｇ−３３４；Ｍ−１〜Ｌ−３３３；Ｍ−１〜Ｔ−３３２；Ｍ−１〜Ｄ−３３１
；Ｍ−１〜Ｃ−３３０；Ｍ−１〜Ｌ−３２９；Ｍ−１〜Ｇ−３２８；Ｍ−１〜Ｅ
−３２７；Ｍ−１〜Ｑ−３２６；Ｍ−１〜Ｇ−３２５；Ｍ−１〜Ｃ−３２４；Ｍ
−１〜Ｆ−３２３；Ｍ−１〜Ｎ−３２２；Ｍ−１〜Ｑ−３２１；Ｍ−１〜Ｒ−３
２０；Ｍ−１〜Ｔ−３１９；Ｍ−１〜Ｌ−３１８；Ｍ−１〜Ｌ−３１７；Ｍ−１
〜Ｉ−３１６；Ｍ−１〜Ａ−３１５；Ｍ−１〜Ｔ−３１４；Ｍ−１〜Ｄ−３１３
；Ｍ−１〜Ｙ−３１２；Ｍ−１〜Ｈ−３１１；Ｍ−１〜Ｅ−３１０；Ｍ−１〜Ｐ
−３０９；Ｍ−１〜Ｈ−３０８；Ｍ−１〜Ｒ−３０７；Ｍ−１〜Ｄ−３０６；Ｍ
−１〜Ｓ−３０５；Ｍ−１〜Ｐ−３０４；Ｍ−１〜Ｑ−３０３；Ｍ−１〜Ｎ−３
０２；Ｍ−１〜Ｆ−３０１；Ｍ−１〜Ｒ−３００；Ｍ−１〜Ｒ−２９９；Ｍ−１
〜Ｑ−２９８；Ｍ−１〜Ｗ−２９７；Ｍ−１〜Ｎ−２９６；Ｍ−１〜Ｃ−２９５
；Ｍ−１〜Ｆ−２９４；Ｍ−１〜Ｎ−２９３；Ｍ−１〜Ｒ−２９２；Ｍ−１〜Ｌ
−２９１；Ｍ−１〜Ｔ−２９０；Ｍ−１〜Ｌ−２８９；Ｍ−１〜Ｇ−２８８；Ｍ
−１〜Ｇ−２８７；Ｍ−１〜Ｎ−２８６；Ｍ−１〜Ｄ−２８５；Ｍ−１〜Ｓ−２
８４；Ｍ−１〜Ｖ−２８３；Ｍ−１〜Ｅ−２８２；Ｍ−１〜Ｐ−２８１；Ｍ−１
〜Ｇ−２８０；Ｍ−１〜Ｗ−２７９；Ｍ−１〜Ｋ−２７８；Ｍ−１〜Ｅ−２７７
；Ｍ−１〜Ｄ−２７６；Ｍ−１〜Ｅ−２７５；Ｍ−１〜Ｖ−２７４；Ｍ−１〜Ｉ
−２７３；Ｍ−１〜Ｌ−２７２；Ｍ−１〜Ｖ−２７１；Ｍ−１〜Ｋ−２７０；Ｍ
−１〜Ｖ−２６９；Ｍ−１〜Ｖ−２６８；Ｍ−１〜Ｍ−２６７；Ｍ−１〜Ｌ−２
６６；Ｍ−１〜Ｎ−２６５；Ｍ−１〜Ｉ−２６４；Ｍ−１〜Ｓ−２６３；Ｍ−１
〜Ｎ−２６２；Ｍ−１〜Ｋ−２６１；Ｍ−１〜Ｉ−２６０；Ｍ−１〜Ｓ−２５９
；Ｍ−１〜Ｐ−２５８；Ｍ−１〜Ｈ−２５７；Ｍ−１〜Ｋ−２５６；Ｍ−１〜Ｙ
−２５５；Ｍ−１〜Ｉ−２５４；Ｍ−１〜Ｒ−２５３；Ｍ−１〜Ａ−２５２；Ｍ
−１〜Ａ−２５１；Ｍ−１〜Ｖ−２５０；Ｍ−１〜Ｓ−２４９；Ｍ−１〜Ｍ−２
４８；Ｍ−１〜Ｌ−２４７；Ｍ−１〜Ｔ−２４６；Ｍ−１〜Ｌ−２４５；Ｍ−１
〜Ｉ−２４４；Ｍ−１〜Ｈ−２４３；Ｍ−１〜Ｎ−２４２；Ｍ−１〜Ｑ−２４１
；Ｍ−１〜Ｌ−２４０；Ｍ−１〜Ｄ−２３９；Ｍ−１〜Ａ−２３８；Ｍ−１〜Ｇ
−２３７；Ｍ−１〜Ｙ−２３６；Ｍ−１〜Ｆ−２３５；Ｍ−１〜Ａ−２３４；Ｍ
−１〜Ａ−２３３；Ｍ−１〜Ｍ−２３２；Ｍ−１〜Ｓ−２３１；Ｍ−１〜Ａ−２
３０；Ｍ−１〜Ｄ−２２９；Ｍ−１〜Ａ−２２８；Ｍ−１〜Ｖ−２２７；Ｍ−１
〜Ｌ−２２６；Ｍ−１〜Ｌ−２２５；Ｍ−１〜Ｔ−２２４；Ｍ−１〜Ｅ−２２３
；Ｍ−１〜Ｖ−２２２；Ｍ−１〜Ｆ−２２１；Ｍ−１〜Ｒ−２２０；Ｍ−１〜Ａ
−２１９；Ｍ−１〜Ｅ−２１８；Ｍ−１〜Ｓ−２１７；Ｍ−１〜Ｖ−２１６；Ｍ
−１〜Ｆ−２１５；Ｍ−１〜Ｒ−２１４；Ｍ−１〜Ｋ−２１３；Ｍ−１〜Ｔ−２
１２；Ｍ−１〜Ｒ−２１１；Ｍ−１〜Ｓ−２１０；Ｍ−１〜Ｔ−２０９；Ｍ−１
〜Ａ−２０８；Ｍ−１〜Ｇ−２０７；Ｍ−１〜Ｌ−２０６；Ｍ−１〜Ｐ−２０５
；Ｍ−１〜Ｐ−２０４；Ｍ−１〜Ｐ−２０３；Ｍ−１〜Ｐ−２０２；Ｍ−１〜Ｅ
−２０１；Ｍ−１〜Ｓ−２００；Ｍ−１〜Ａ−１９９；Ｍ−１〜Ｇ−１９８；Ｍ
−１〜Ｅ−１９７；Ｍ−１〜Ａ−１９６；Ｍ−１〜Ｅ−１９５；Ｍ−１〜Ｅ−１
９４；Ｍ−１〜Ｅ−１９３；Ｍ−１〜Ｑ−１９２；Ｍ−１〜Ｓ−１９１；Ｍ−１
〜Ｅ−１９０；Ｍ−１〜Ｅ−１８９；Ｍ−１〜Ｅ−１８８；Ｍ−１〜Ｓ−１８７
；Ｍ−１〜Ｄ−１８６；Ｍ−１〜Ｅ−１８５；Ｍ−１〜Ｑ−１８４；Ｍ−１〜Ｈ
−１８３；Ｍ−１〜Ｄ−１８２；Ｍ−１〜Ｇ−１８１；Ｍ−１〜Ｒ−１８０；Ｍ
−１〜Ｅ−１７９；Ｍ−１〜Ｑ−１７８；Ｍ−１〜Ｒ−１７７；Ｍ−１〜Ｑ−１
７６；Ｍ−１〜Ｇ−１７５；Ｍ−１〜Ｅ−１７４；Ｍ−１〜Ｇ−１７３；Ｍ−１
〜Ｔ−１７２；Ｍ−１〜Ｅ−１７１；Ｍ−１〜Ｖ−１７０；Ｍ−１〜Ｅ−１６９
；Ｍ−１〜Ｗ−１６８；Ｍ−１〜Ｅ−１６７；Ｍ−１〜Ｐ−１６６；Ｍ−１〜Ｇ
−１６５；Ｍ−１〜Ｒ−１６４；Ｍ−１〜Ｐ−１６３；Ｍ−１〜Ｌ−１６２；Ｍ
−１〜Ｐ−１６１；Ｍ−１〜Ｒ−１６０；Ｍ−１〜Ａ−１５９；Ｍ−１〜Ｇ−１
５８；Ｍ−１〜Ａ−１５７；Ｍ−１〜Ｐ−１５６；Ｍ−１〜Ｇ−１５５；Ｍ−１
〜Ｗ−１５４；Ｍ−１〜Ｒ−１５３；Ｍ−１〜Ｑ−１５２；Ｍ−１〜Ｌ−１５１
；Ｍ−１〜Ｒ−１５０；Ｍ−１〜Ｈ−１４９；Ｍ−１〜Ｐ−１４８；Ｍ−１〜Ｑ
−１４７；Ｍ−１〜Ａ−１４６；Ｍ−１〜Ｌ−１４５；Ｍ−１〜Ｓ−１４４；Ｍ
−１〜Ｇ−１４３；Ｍ−１〜Ｇ−１４２；Ｍ−１〜Ａ−１４１；Ｍ−１〜Ｇ−１
４０；Ｍ−１〜Ｑ−１３９；Ｍ−１〜Ｐ−１３８；Ｍ−１〜Ｑ−１３７；Ｍ−１
〜Ｉ−１３６；Ｍ−１〜Ｔ−１３５；Ｍ−１〜Ｆ−１３４；Ｍ−１〜Ｅ−１３３
；Ｍ−１〜Ｅ−１３２；Ｍ−１〜Ｇ−１３１；Ｍ−１〜Ｄ−１３０；Ｍ−１〜Ｌ
−１２９；Ｍ−１〜Ｌ−１２８；Ｍ−１〜Ｆ−１２７；Ｍ−１〜Ｓ−１２６；Ｍ
−１〜Ｇ−１２５；Ｍ−１〜Ｓ−１２４；Ｍ−１〜Ｌ−１２３；Ｍ−１〜Ｇ−１
２２；Ｍ−１〜Ｒ−１２１；Ｍ−１〜Ｃ−１２０；Ｍ−１〜Ｌ−１１９；Ｍ−１
〜Ｓ−１１８；Ｍ−１〜Ｖ−１１７；Ｍ−１〜Ａ−１１６；Ｍ−１〜Ａ−１１５
；Ｍ−１〜Ｌ−１１４；Ｍ−１〜Ｓ−１１３；Ｍ−１〜Ｅ−１１２；Ｍ−１〜Ｐ
−１１１；Ｍ−１〜Ｅ−１１０；Ｍ−１〜Ｇ−１０９；Ｍ−１〜Ｎ−１０８；Ｍ
−１〜Ｖ−１０７；Ｍ−１〜Ｔ−１０６；Ｍ−１〜Ｇ−１０５；Ｍ−１〜Ｓ−１
０４；Ｍ−１〜Ｆ−１０３；Ｍ−１〜Ｆ−１０２；Ｍ−１〜Ｃ−１０１；Ｍ−１
〜Ｇ−１００；Ｍ−１〜Ｒ−９９；Ｍ−１〜Ｌ−９８；Ｍ−１〜Ｇ−９７；Ｍ−
１〜Ｒ−９６；Ｍ−１〜Ｅ−９５；Ｍ−１〜Ｇ−９４；Ｍ−１〜Ｇ−９３；Ｍ−
１〜Ｔ−９２；Ｍ−１〜Ａ− ９１；Ｍ−１〜Ｒ−９０；Ｍ−１〜Ｇ−８９；Ｍ
−１〜Ｓ−８８；Ｍ−１〜Ｇ−８７；Ｍ−１〜Ｇ−８６；Ｍ−１〜Ｌ−８５；Ｍ
−１〜Ｒ−８４；Ｍ−１〜Ｅ−８３；Ｍ−１〜Ｉ−８２；Ｍ−１〜Ｋ−８１；Ｍ
−１〜Ｆ−８０；Ｍ−１〜Ｅ−７９；Ｍ−１〜Ｐ−７８；Ｍ−１〜Ａ−７７；Ｍ
−１〜Ｌ−７６；Ｍ−１〜Ｆ−７５；Ｍ−１〜Ｓ−７４；Ｍ−１〜Ｄ−７３；Ｍ
−１〜Ｄ−７２；Ｍ−１〜Ｐ−７１；Ｍ−１〜Ａ−７０；Ｍ−１〜Ｌ−６９；Ｍ
−１〜Ｒ−６８；Ｍ−１〜Ｌ−６７；Ｍ−１〜Ｖ−６６；Ｍ−１〜Ｆ−６５；Ｍ
−１〜Ｇ−６４；Ｍ−１〜Ｋ−６３；Ｍ−１〜Ｇ−６２；Ｍ−１〜Ｆ−６１；Ｍ
−１〜Ａ−６０；Ｍ−１〜Ｓ−５９；Ｍ−１〜Ｌ−５８；Ｍ−１〜Ｈ−５７；Ｍ
−１〜Ｌ−５６；Ｍ−１〜Ａ−５５；Ｍ−１〜Ｌ−５４；Ｍ−１〜Ｅ−５３；Ｍ
−１〜Ｇ−５２；Ｍ−１〜Ａ−５１；Ｍ−１〜Ｓ−５０；Ｍ−１〜Ｇ−４９；Ｍ
−１〜Ｐ−４８；Ｍ−１〜Ｌ−４７；Ｍ−１〜Ｒ−４６；Ｍ−１〜Ｔ−４５；Ｍ
−１〜Ｐ−４４；Ｍ−１〜Ｖ−４３；Ｍ−１〜Ｖ−４２；Ｍ−１〜Ｌ−４１；Ｍ
−１〜Ｅ−４０；Ｍ−１〜Ｓ−３９；Ｍ−１〜Ａ−３８；Ｍ−１〜Ｑ−３７；Ｍ
−１〜Ｇ−３６；Ｍ−１〜Ｇ−３５；Ｍ−１〜Ａ−３４；Ｍ−１〜Ａ−３３；Ｍ
−１〜Ｐ−３２；Ｍ−１〜Ｒ−３１；Ｍ−１〜Ａ−３０；Ｍ−１〜Ｐ−２９；Ｍ
−１〜Ａ−２８；Ｍ−１〜Ｇ−２７；Ｍ−１〜Ｒ−２６；Ｍ−１〜Ａ−２５；Ｍ
−１〜Ｌ−２４；Ｍ−１〜Ｐ−２３；Ｍ−１〜Ｌ−２２；Ｍ−１〜Ｌ−２１；Ｍ
−１〜Ｌ−２０；Ｍ−１〜Ｌ−１９；Ｍ−１〜Ｌ−１８；Ｍ−１〜Ｌ−１７；Ｍ
−１〜Ｌ−１６；Ｍ−１〜Ｌ−１５；Ｍ−１〜Ｌ−１４；Ｍ−１〜Ｆ−１３；Ｍ
−１〜Ｐ−１２；Ｍ−１〜Ｌ−１１；Ｍ−１〜Ｗ−１０；Ｍ−１〜Ｒ−９；Ｍ−
１〜Ｐ−８；Ｍ−１〜Ａ−７。好ましくは、上に列挙されたＮ末端欠失またはＣ
末端欠失のうちの任意は、Ｎ末端欠失およびＣ末端欠失ＭＥＴＨ２ポリペプチド
を産生するために組み合わせられ得る。
て記載され得、ここで、ｎ2は、２〜８９０の整数であり、ここで、ｎは、配列
番号４において同定されたアミノ酸残基の位置に対応する。好ましくは、配列番
号４として示される本発明のＭＥＴＨ２ポリペプチドのＣ末端欠失は、以下の残
基のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む：配列番号４のＭ−１〜Ｐ−８８９
；Ｍ−１〜Ｃ−８８８；Ｍ−１〜Ｌ−８８７；Ｍ−１〜Ｑ−８８６；Ｍ−１〜Ｓ
−８８５；Ｍ−１〜Ｅ−８８４；Ｍ−１〜Ｃ−８８３；Ｍ−１〜Ｐ−８８２；Ｍ
−１〜Ｋ−８８１；Ｍ−１〜Ａ−８８０；Ｍ−１〜Ｄ−８７９；Ｍ−１〜Ｅ−８
７８；Ｍ−１〜Ｐ−８７７；Ｍ−１〜Ｋ−８７６；Ｍ−１〜Ｌ−８７５；Ｍ−１
〜Ａ−８７４；Ｍ−１〜Ｋ−８７３；Ｍ−１〜Ｎ−８７２；Ｍ−１〜Ｃ−８７１
；Ｍ−１〜Ｔ−８７０；Ｍ−１〜Ａ−８６９；Ｍ−１〜Ｓ−８６８；Ｍ−１〜Ａ
−８６７；Ｍ−１〜Ｑ−８６６；Ｍ−１〜Ｇ−８６５；Ｍ−１〜Ｓ−８６４；Ｍ
−１〜Ｐ−８６３；Ｍ−１〜Ｄ−８６２；Ｍ−１〜Ｒ−８６１；Ｍ−１〜Ｃ−８
６０；Ｍ−１〜Ｅ−８５９；Ｍ−１〜Ｖ−８５８；Ｍ−１〜Ｔ−８５７；Ｍ−１
〜Ｒ−８５６；Ｍ−１〜Ｒ−８５５；Ｍ−１〜Ｑ−８５４；Ｍ−１〜Ｗ−８５３
；Ｍ−１〜Ｇ−８５２；Ｍ−１〜Ａ−８５１；Ｍ−１〜Ｇ−８５０；Ｍ−１〜Ｃ
−８４９；Ｍ−１〜Ｔ−８４８；Ｍ−１〜Ｓ−８４７；Ｍ−１〜Ｓ−８４６；Ｍ
−１〜Ｃ−８４５；Ｍ−１〜Ｅ−８４４；Ｍ−１〜Ｓ−８４３；Ｍ−１〜Ｗ−８
４２；Ｍ−１〜Ｄ−８４１；Ｍ−１〜Ｇ−８４０；Ｍ−１〜Ｌ−８３９；Ｍ−１
〜Ｖ−８３８；Ｍ−１〜Ｗ−８３７；Ｍ−１〜Ｑ−８３６；Ｍ−１〜Ａ−８３５
；Ｍ−１〜Ｈ−８３４；Ｍ−１〜Ｌ−８３３；Ｍ−１〜Ｌ−８３２；Ｍ−１〜Ｐ
−８３１；Ｍ−１〜Ｑ−８３０；Ｍ−１〜Ｉ−８２９；Ｍ−１〜Ｉ−８２８；Ｍ
−１〜Ｎ−８２７；Ｍ−１〜Ｔ−８２６；Ｍ−１〜Ｔ−８２５；Ｍ−１〜Ａ−８
２４；Ｍ−１〜Ｒ−８２３；Ｍ−１〜Ｅ−８２２；Ｍ−１〜Ｋ−８２１；Ｍ−１
〜Ｓ−８２０；Ｍ−１〜Ｓ−８１９；Ｍ−１〜Ｑ−８１８；Ｍ−１〜Ｍ−８１７
；Ｍ−１〜Ｓ−８１６；Ｍ−１〜Ｆ−８１５；Ｍ−１〜Ｄ−８１４；Ｍ−１〜Ｖ
−８１３；Ｍ−１〜Ｄ−８１２；Ｍ−１〜Ｎ−８１１；Ｍ−１〜Ｐ−８１０；Ｍ
−１〜Ｖ−８０９；Ｍ−１〜Ｆ−８０８；Ｍ−１〜Ｆ−８０７；Ｍ−１〜Ｔ−８
０６；Ｍ−１〜Ｙ−８０５；Ｍ−１〜Ｋ−８０４；Ｍ−１〜Ｖ−８０３；Ｍ−１
〜Ｋ−８０２；Ｍ−１〜Ｐ−８０１；Ｍ−１〜Ｐ−８００；Ｍ−１〜Ｆ−７９９
；Ｍ−１〜Ｖ−７９８；Ｍ−１〜Ｅ−７９７；Ｍ−１〜Ｇ−７９６；Ｍ−１〜Ｐ
−７９５；Ｍ−１〜Ｖ−７９４；Ｍ−１〜Ｔ−７９３；Ｍ−１〜Ｌ−７９２；Ｍ
−１〜Ｌ−７９１；Ｍ−１〜Ｑ−７９０；Ｍ−１〜Ｖ−７８９；Ｍ−１〜Ｔ−７
８８；Ｍ−１〜Ｌ−７８７；Ｍ−１〜Ｐ−７８６；Ｍ−１〜Ｅ−７８５；Ｍ−１
〜Ｐ−７８４；Ｍ−１〜Ｌ−７８３；Ｍ−１〜Ｐ−７８２；Ｍ−１〜Ｒ−７８１
；Ｍ−１〜Ｆ−７８０；Ｍ−１〜Ｓ−７７９；Ｍ−１〜Ｑ−７７８；Ｍ−１〜Ｌ
−７７７；Ｍ−１〜Ｒ−７７６；Ｍ−１〜Ｅ−７７５；Ｍ−１〜Ｌ−７７４；Ｍ
−１〜Ｔ−７７３；Ｍ−１〜Ａ−７７２；Ｍ−１〜Ｉ−７７１；Ｍ−１〜Ｓ−７
７０；Ｍ−１〜Ｇ−７６９；Ｍ−１〜Ｓ−７６８；Ｍ−１〜Ｙ−７６７；Ｍ−１
〜Ｋ−７６６；Ｍ−１〜Ｌ−７６５；Ｍ−１〜Ｉ−７６４；Ｍ−１〜Ｔ−７６３
；Ｍ−１〜Ｇ−７６２；Ｍ−１〜Ｋ−７６１；Ｍ−１〜Ｖ−７６０；Ｍ−１〜Ｌ
−７５９；Ｍ−１〜Ｉ−７５８；Ｍ−１〜Ｄ−７５７；Ｍ−１〜Ｑ−７５６；Ｍ
−１〜Ｅ−７５５；Ｍ−１〜Ｉ−７５４；Ｍ−１〜Ａ−７５３；Ｍ−１〜Ｓ−７
５２；Ｍ−１〜Ｉ−７５１；Ｍ−１〜Ａ−７５０；Ｍ−１〜Ｌ−７４９；Ｍ−１
〜Ｎ−７４８；Ｍ−１〜Ｇ−７４７；Ｍ−１〜Ｎ−７４６；Ｍ−１〜Ｌ−７４５
；Ｍ−１〜Ｌ−７４４；Ｍ−１〜Ｙ−７４３；Ｍ−１〜Ｑ−７４２；Ｍ−１〜Ｇ
−７４１；Ｍ−１〜Ｄ−７４０；Ｍ−１〜Ａ−７３９；Ｍ−１〜Ｔ−７３８；Ｍ
−１〜Ｋ−７３７；Ｍ−１〜Ｌ−７３６；Ｍ−１〜Ａ−７３５；Ｍ−１〜Ｌ−７
３４；Ｍ−１〜Ｙ−７３３；Ｍ−１〜Ｎ−７３２；Ｍ−１〜Ｇ−７３１；Ｍ−１
〜Ｄ−７３０；Ｍ−１〜Ｎ−７２９；Ｍ−１〜Ｑ−７２８；Ｍ−１〜Ｖ−７２７
；Ｍ−１〜Ｇ−７２６；Ｍ−１〜Ｐ−７２５；Ｍ−１〜Ｈ−７２４；Ｍ−１〜Ｓ
−７２３；Ｍ−１〜Ｒ−７２２；Ｍ−１〜Ｑ−７２１；Ｍ−１〜Ｋ−７２０；Ｍ
−１〜Ｖ−７１９；Ｍ−１〜Ｄ−７１８；Ｍ−１〜Ｉ−７１７；Ｍ−１〜Ｎ−７
１６；Ｍ−１〜Ｔ−７１５；Ｍ−１〜Ａ−７１４；Ｍ−１〜Ｇ−７１３；Ｍ−１
〜Ａ−７１２；Ｍ−１〜Ｐ−７１１；Ｍ−１〜Ｉ−７１０；Ｍ−１〜Ｔ−７０９
；Ｍ−１〜Ｖ−７０８；Ｍ−１〜Ｉ−７０７；Ｍ−１〜Ｄ−７０６；Ｍ−１〜Ｎ
−７０５；Ｍ−１〜Ｙ−７０４；Ｍ−１〜Ｇ−７０３；Ｍ−１〜Ｙ−７０２；Ｍ
−１〜Ｎ−７０１；Ｍ−１〜Ｔ−７００；Ｍ−１〜Ｐ−６９９；Ｍ−１〜Ｔ−６
９８；Ｍ−１〜Ｌ−６９７；Ｍ−１〜Ｓ−６９６；Ｍ−１〜Ｇ−６９５；Ｍ−１
〜Ｓ−６９４；Ｍ−１〜Ｖ−６９３；Ｍ−１〜Ｋ−６９２；Ｍ−１〜Ｒ−６９１
；Ｍ−１〜Ｃ−６９０；Ｍ−１〜Ｓ−６８９；Ｍ−１〜Ｎ−６８８；Ｍ−１〜Ｇ
−６８７；Ｍ−１〜Ｋ−６８６；Ｍ−１〜Ｇ−６８５；Ｍ−１〜Ｇ−６８４；Ｍ
−１〜Ｃ−６８３；Ｍ−１〜Ｖ−６８２；Ｍ−１〜Ｇ−６８１；Ｍ−１〜Ｃ−６
８０；Ｍ−１〜Ｋ−６７９；Ｍ−１〜Ｄ−６７８；Ｍ−１〜Ｌ−６７７；Ｍ−１
〜Ｋ−６７６；Ｍ−１〜Ｒ−６７５；Ｍ−１〜Ｐ−６７４；Ｍ−１〜Ｓ−６７３
；Ｍ−１〜Ｄ−６７２；Ｍ−１〜Ｖ−６７１；Ｍ−１〜Ｖ−６７０；Ｍ−１〜Ｈ
−６６９；Ｍ−１〜Ｄ−６６８；Ｍ−１〜Ｃ−６６７；Ｍ−１〜Ｇ−６６６；Ｍ
−１〜Ａ−６６５；Ｍ−１〜Ｋ−６６４；Ｍ−１〜Ｖ−６６３；Ｍ−１〜Ｃ−６
６２；Ｍ−１〜Ｑ−６６１；Ｍ−１〜Ｇ−６６０；Ｍ−１〜Ｒ−６５９；Ｍ−１
〜Ｖ−６５８；Ｍ−１〜Ｃ−６５７；Ｍ−１〜Ｉ−６５６；Ｍ−１〜Ａ−６５５
；Ｍ−１〜Ｌ−６５４；Ｍ−１〜Ｔ−６５３；Ｍ−１〜Ｅ−６５２；Ｍ−１〜Ｐ
−６５１；Ｍ−１〜Ｇ−６５０；Ｍ−１〜Ｃ−６４９；Ｍ−１〜Ｌ−６４８；Ｍ
−１〜Ｔ−６４７；Ｍ−１〜Ｇ−６４６；Ｍ−１〜Ｄ−６４５；Ｍ−１〜Ｉ−６
４４；Ｍ−１〜Ｖ−６４３；Ｍ−１〜Ｋ−６４２；Ｍ−１〜Ａ−６４１；Ｍ−１
〜Ｅ−６４０；Ｍ−１〜Ｆ−６３９；Ｍ−１〜Ｖ−６３８；Ｍ−１〜Ｋ−６３７
；Ｍ−１〜Ｆ−６３６；Ｍ−１〜Ｅ−６３５；Ｍ−１〜Ｓ−６３４；Ｍ−１〜Ｒ
−６３３；Ｍ−１〜Ｇ−６３２；Ｍ−１〜Ｒ−６３１；Ｍ−１〜Ａ−６３０；Ｍ
−１〜Ｒ−６２９；Ｍ−１〜Ｃ−６２８；Ｍ−１〜Ｆ−６２７；Ｍ−１〜Ｌ−６
２６；Ｍ−１〜Ｋ−６２５；Ｍ−１〜Ｃ−６２４；Ｍ−１〜Ｒ−６２３；Ｍ−１
〜Ｄ−６２２；Ｍ−１〜Ｒ−６２１；Ｍ−１〜Ｐ−６２０；Ｍ−１〜Ｓ−６１９
；Ｍ−１〜Ｖ−６１８；Ｍ−１〜Ｇ−６１７；Ｍ−１〜Ａ−６１６；Ｍ−１〜Ｙ
−６１５；Ｍ−１〜Ｋ−６１４；Ｍ−１〜Ｐ−６１３；Ｍ−１〜Ｖ−６１２；Ｍ
−１〜Ｗ−６１１；Ｍ−１〜Ｑ−６１０；Ｍ−１〜Ｌ−６０９；Ｍ−１〜Ｌ−６
０８；Ｍ−１〜Ｎ−６０７；Ｍ−１〜Ｇ−６０６；Ｍ−１〜Ｄ−６０５；Ｍ−１
〜Ｍ−６０４；Ｍ−１〜Ｄ−６０３；Ｍ−１〜Ｔ−６０２；Ｍ−１〜Ｙ−６０１
；Ｍ−１〜Ｎ−６００；Ｍ−１〜Ｙ−５９９；Ｍ−１〜Ａ−５９８；Ｍ−１〜Ｎ
−５９７；Ｍ−１〜Ｙ−５９６；Ｍ−１〜Ｋ−５９５；Ｍ−１〜Ｅ−５９４；Ｍ
−１〜Ｃ−５９３；Ｍ−１〜Ｑ−５９２；Ｍ−１〜Ｑ−５９１；Ｍ−１〜Ｅ−５
９０；Ｍ−１〜Ｒ−５８９；Ｍ−１〜Ｆ−５８８；Ｍ−１〜Ｓ−５８７；Ｍ−１
〜Ｋ−５８６；Ｍ−１〜Ｇ−５８５；Ｍ−１〜Ｄ−５８４；Ｍ−１〜Ｐ−５８３
；Ｍ−１〜Ｐ−５８２；Ｍ−１〜Ｃ−５８１；Ｍ−１〜Ｅ−５８０；Ｍ−１〜Ｅ
−５７９；Ｍ−１〜Ｔ−５７８；Ｍ−１〜Ｈ−５７７；Ｍ−１〜Ｃ−５７６；Ｍ
−１〜Ｓ−５７５；Ｍ−１〜Ｑ−５７４；Ｍ−１〜Ｙ−５７３；Ｍ−１〜Ｋ−５
７２；Ｍ−１〜Ａ−５７１；Ｍ−１〜Ｒ−５７０；Ｍ−１〜Ｒ−５６９；Ｍ−１
〜Ｇ−５６８；Ｍ−１〜Ｌ−５６７；Ｍ−１〜Ｃ−５６６；Ｍ−１〜Ｙ−５６５
；Ｍ−１〜Ｒ−５６４；Ｍ−１〜Ｇ−５６３；Ｍ−１〜Ｇ−５６２；Ｍ−１〜Ｎ
−５６１；Ｍ−１〜Ｑ−５６０；Ｍ−１〜Ｐ−５５９；Ｍ−１〜Ｅ−５５８；Ｍ
−１〜Ｐ−５５７；Ｍ−１〜Ｄ−５５６；Ｍ−１〜Ｋ−５５５；Ｍ−１〜Ｃ−５
５４；Ｍ−１〜Ｅ−５５３；Ｍ−１〜Ｒ−５５２；Ｍ−１〜Ｈ−５５１；Ｍ−１
〜Ｓ−５５０；Ｍ−１〜Ｆ−５４９；Ｍ−１〜Ｑ−５４８；Ｍ−１〜Ｖ−５４７
；Ｍ−１〜Ｇ−５４６；Ｍ−１〜Ｇ−５４５；Ｍ−１〜Ｇ−５４４；Ｍ−１〜Ｃ
−５４３；Ｍ−１〜Ｔ−５４２；Ｍ−１〜Ｒ−５４１；Ｍ−１〜Ｓ−５４０；Ｍ
−１〜Ｃ−５３９；Ｍ−１〜Ｅ−５３８；Ｍ−１〜Ｇ−５３７；Ｍ−１〜Ｗ−５
３６；Ｍ−１〜Ｐ−５３５；Ｍ−１〜Ｇ−５３４；Ｍ−１〜Ｗ−５３３；Ｍ−１
〜Ｐ−５３２；Ｍ−１〜Ａ−５３１；Ｍ−１〜Ｗ−５３０；Ｍ−１〜Ｇ−５２９
；Ｍ−１〜Ｇ−５２８；Ｍ−１〜Ｄ−５２７；Ｍ−１〜Ｖ−５２６；Ｍ−１〜Ｖ
−５２５；Ｍ−１〜Ｐ−５２４；Ｍ−１〜Ｋ−５２３；Ｍ−１〜Ｐ−５２２；Ｍ
−１〜Ｒ−５２１；Ｍ−１〜Ｅ−５２０；Ｍ−１〜Ｖ−５１９；Ｍ−１〜Ｅ−５
１８；Ｍ−１〜Ｅ−５１７；Ｍ−１〜Ｅ−５１６；Ｍ−１〜Ｐ−５１５；Ｍ−１
〜Ｌ−５１４；Ｍ−１〜Ｃ−５１３；Ｍ−１〜Ｓ−５１２；Ｍ−１〜Ｇ−５１１
；Ｍ−１〜Ｅ−５１０；Ｍ−１〜Ｓ−５０９；Ｍ−１〜Ｃ−５０８；Ｍ−１〜Ｌ
−５０７；Ｍ−１〜Ｈ−５０６；Ｍ−１〜Ｇ−５０５；Ｍ−１〜Ｐ−５０４；Ｍ
−１〜Ｇ−５０３；Ｍ−１〜Ｃ−５０２；Ｍ−１〜Ｐ−５０１；Ｍ−１〜Ｔ−５
００；Ｍ−１〜Ｇ−４９９；Ｍ−１〜Ｄ−４９８；Ｍ−１〜Ａ−４９７；Ｍ−１
〜Ｗ−４９６；Ｍ−１〜Ｐ−４９５；Ｍ−１〜Ｌ−４９４；Ｍ−１〜Ｓ−４９３
；Ｍ−１〜Ｇ−４９２；Ｍ−１〜Ｎ−４９１；Ｍ−１〜Ｋ−４９０；Ｍ−１〜Ｔ
−４８９；Ｍ−１〜Ｈ−４８８；Ｍ−１〜Ｃ−４８７；Ｍ−１〜Ｌ−４８６；Ｍ
−１〜Ｐ−４８５；Ｍ−１〜Ｅ−４８４；Ｍ−１〜Ａ−４８３；Ｍ−１〜Ｇ−４
８２；Ｍ−１〜Ｄ−４８１；Ｍ−１〜Ｔ−４８０；Ｍ−１〜Ｈ−４７９；Ｍ−１
〜Ｃ−４７８；Ｍ−１〜Ｗ−４７７；Ｍ−１〜Ｌ−４７６；Ｍ−１〜Ｑ−４７５
；Ｍ−１〜Ａ−４７４；Ｍ−１〜Ｃ−４７３；Ｍ−１〜Ｖ−４７２；Ｍ−１〜Ｄ
−４７１；Ｍ−１〜Ｑ−４７０；Ｍ−１〜Ａ−４６９；Ｍ−１〜Ｓ−４６８；Ｍ
−１〜Ｔ−４６７；Ｍ−１〜Ｎ−４６６；Ｍ−１〜Ｐ−４６５；Ｍ−１〜Ｃ−４
６４；Ｍ−１〜Ｈ−４６３；Ｍ−１〜Ｒ−４６２；Ｍ−１〜Ｆ−４６１；Ｍ−１
〜Ｄ−４６０；Ｍ−１〜Ｐ−４５９；Ｍ−１〜Ｇ−４５８；Ｍ−１〜Ｆ−４５７
；Ｍ−１〜Ｉ−４５６；Ｍ−１〜Ｑ−４５５；Ｍ−１〜Ｒ−４５４；Ｍ−１〜Ｃ
−４５３；Ｍ−１〜Ｑ−４５２；Ｍ−１〜Ｑ−４５１；Ｍ−１〜Ｄ−４５０；Ｍ
−１〜Ｌ−４４９；Ｍ−１〜Ｑ−４４８；Ｍ−１〜Ｙ−４４７；Ｍ−１〜Ｌ−４
４６；Ｍ−１〜Ａ−４４５；Ｍ−１〜Ｍ−４４４；Ｍ−１〜Ｒ−４４３；Ｍ−１
〜Ｇ−４４２；Ｍ−１〜Ｐ−４４１；Ｍ−１〜Ｌ−４４０；Ｍ−１〜Ｇ−４３９
；Ｍ−１〜Ｔ−４３８；Ｍ−１〜Ｐ−４３７；Ｍ−１〜Ｌ−４３６；Ｍ−１〜Ｐ
−４３５；Ｍ−１〜Ｌ−４３４；Ｍ−１〜Ａ−４３３；Ｍ−１〜Ａ−４３２；Ｍ
−１〜Ｇ−４３１；Ｍ−１〜Ｐ−４３０；Ｍ−１〜Ａ−４２９；Ｍ−１〜Ｄ−４
２８；Ｍ−１〜Ｌ−４２７；Ｍ−１〜Ｌ−４２６；Ｍ−１〜Ｃ−４２５；Ｍ−１
〜Ｄ−４２４；Ｍ−１〜Ｇ−４２３；Ｍ−１〜Ｈ−４２２；Ｍ−１〜Ｇ−４２１
；Ｍ−１〜Ｇ−４２０；Ｍ−１〜Ｄ−４１９；Ｍ−１〜Ｌ−４１８；Ｍ−１〜Ｌ
−４１７；Ｍ−１〜Ｅ−４１６；Ｍ−１〜Ｔ−４１５；Ｍ−１〜Ｌ−４１４；Ｍ
−１〜Ｙ−４１３；Ｍ−１〜Ｍ−４１２；Ｍ−１〜Ａ−４１１；Ｍ−１〜Ｓ−４
１０；Ｍ−１〜Ｃ−４０９；Ｍ−１〜Ｐ−４０８；Ｍ−１〜Ｓ−４０７；Ｍ−１
〜Ｗ−４０６；Ｍ−１〜Ｐ−４０５；Ｍ−１〜Ｌ−４０４；Ｍ−１〜Ｔ−４０３
；Ｍ−１〜Ｑ−４０２；Ｍ−１〜Ｎ−４０１；Ｍ−１〜Ｌ−４００；Ｍ−１〜Ｈ
−３９９；Ｍ−１〜Ｖ−３９８；Ｍ−１〜Ｆ−３９７；Ｍ−１〜Ｌ−３９６；Ｍ
−１〜Ｐ−３９５；Ｍ−１〜Ａ−３９４；Ｍ−１〜Ｍ−３９３；Ｍ−１〜Ｖ−３
９２；Ｍ−１〜Ｈ−３９１；Ｍ−１〜Ｈ−３９０；Ｍ−１〜Ｋ−３８９；Ｍ−１
〜Ｇ−３８８；Ｍ−１〜Ｍ−３８７；Ｍ−１〜Ｐ−３８６；Ｍ−１〜Ｇ−３８５
；Ｍ−１〜Ｆ−３８４；Ｍ−１〜Ｌ−３８３；Ｍ−１〜Ｒ−３８２；Ｍ−１〜Ｔ
−３８１；Ｍ−１〜Ｃ−３８０；Ｍ−１〜Ｐ−３７９；Ｍ−１〜Ｋ−３７８；Ｍ
−１〜Ｓ−３７７；Ｍ−１〜Ｄ−３７６；Ｍ−１〜Ｄ−３７５；Ｍ−１〜Ｈ−３
７４；Ｍ−１〜Ｐ−３７３；Ｍ−１〜Ｍ−３７２；Ｍ−１〜Ｓ−３７１；Ｍ−１
〜Ｌ−３７０；Ｍ−１〜Ｖ−３６９；Ｍ−１〜Ｈ−３６８；Ｍ−１〜Ｇ−３６７
；Ｍ−１〜Ｌ−３６６；Ｍ−１〜Ｅ−３６５；Ｍ−１〜Ｈ−３６４；Ｍ−１〜Ａ
−３６３；Ｍ−１〜Ｌ−３６２；Ｍ−１〜Ｔ−３６１；Ｍ−１〜Ｈ−３６０；Ｍ
−１〜Ａ−３５９；Ｍ−１〜Ａ−３５８；Ｍ−１〜Ｑ−３５７；Ｍ−１〜Ｌ−３
５６；Ｍ−１〜Ｇ−３５５；Ｍ−１〜Ｅ−３５４；Ｍ−１〜Ｄ−３５３；Ｍ−１
〜Ｅ−３５２；Ｍ−１〜Ｉ−３５１；Ｍ−１〜Ｖ−３５０；Ｍ−１〜Ｓ−３４９
；Ｍ−１〜Ｃ−３４８；Ｍ−１〜Ｓ−３４７；Ｍ−１〜Ｋ−３４６；Ｍ−１〜Ｎ
−３４５；Ｍ−１〜Ｐ−３４４；Ｍ−１〜Ｄ−３４３；Ｍ−１〜Ｃ−３４２；Ｍ
−１〜Ｉ−３４１；Ｍ−１〜Ｔ−３４０；Ｍ−１〜Ｇ−３３９；Ｍ−１〜Ｉ−３
３８；Ｍ−１〜Ｄ−３３７；Ｍ−１〜Ａ−３３６；Ｍ−１〜Ｖ−３３５；Ｍ−１
〜Ｇ−３３４；Ｍ−１〜Ｌ−３３３；Ｍ−１〜Ｔ−３３２；Ｍ−１〜Ｄ−３３１
；Ｍ−１〜Ｃ−３３０；Ｍ−１〜Ｌ−３２９；Ｍ−１〜Ｇ−３２８；Ｍ−１〜Ｅ
−３２７；Ｍ−１〜Ｑ−３２６；Ｍ−１〜Ｇ−３２５；Ｍ−１〜Ｃ−３２４；Ｍ
−１〜Ｆ−３２３；Ｍ−１〜Ｎ−３２２；Ｍ−１〜Ｑ−３２１；Ｍ−１〜Ｒ−３
２０；Ｍ−１〜Ｔ−３１９；Ｍ−１〜Ｌ−３１８；Ｍ−１〜Ｌ−３１７；Ｍ−１
〜Ｉ−３１６；Ｍ−１〜Ａ−３１５；Ｍ−１〜Ｔ−３１４；Ｍ−１〜Ｄ−３１３
；Ｍ−１〜Ｙ−３１２；Ｍ−１〜Ｈ−３１１；Ｍ−１〜Ｅ−３１０；Ｍ−１〜Ｐ
−３０９；Ｍ−１〜Ｈ−３０８；Ｍ−１〜Ｒ−３０７；Ｍ−１〜Ｄ−３０６；Ｍ
−１〜Ｓ−３０５；Ｍ−１〜Ｐ−３０４；Ｍ−１〜Ｑ−３０３；Ｍ−１〜Ｎ−３
０２；Ｍ−１〜Ｆ−３０１；Ｍ−１〜Ｒ−３００；Ｍ−１〜Ｒ−２９９；Ｍ−１
〜Ｑ−２９８；Ｍ−１〜Ｗ−２９７；Ｍ−１〜Ｎ−２９６；Ｍ−１〜Ｃ−２９５
；Ｍ−１〜Ｆ−２９４；Ｍ−１〜Ｎ−２９３；Ｍ−１〜Ｒ−２９２；Ｍ−１〜Ｌ
−２９１；Ｍ−１〜Ｔ−２９０；Ｍ−１〜Ｌ−２８９；Ｍ−１〜Ｇ−２８８；Ｍ
−１〜Ｇ−２８７；Ｍ−１〜Ｎ−２８６；Ｍ−１〜Ｄ−２８５；Ｍ−１〜Ｓ−２
８４；Ｍ−１〜Ｖ−２８３；Ｍ−１〜Ｅ−２８２；Ｍ−１〜Ｐ−２８１；Ｍ−１
〜Ｇ−２８０；Ｍ−１〜Ｗ−２７９；Ｍ−１〜Ｋ−２７８；Ｍ−１〜Ｅ−２７７
；Ｍ−１〜Ｄ−２７６；Ｍ−１〜Ｅ−２７５；Ｍ−１〜Ｖ−２７４；Ｍ−１〜Ｉ
−２７３；Ｍ−１〜Ｌ−２７２；Ｍ−１〜Ｖ−２７１；Ｍ−１〜Ｋ−２７０；Ｍ
−１〜Ｖ−２６９；Ｍ−１〜Ｖ−２６８；Ｍ−１〜Ｍ−２６７；Ｍ−１〜Ｌ−２
６６；Ｍ−１〜Ｎ−２６５；Ｍ−１〜Ｉ−２６４；Ｍ−１〜Ｓ−２６３；Ｍ−１
〜Ｎ−２６２；Ｍ−１〜Ｋ−２６１；Ｍ−１〜Ｉ−２６０；Ｍ−１〜Ｓ−２５９
；Ｍ−１〜Ｐ−２５８；Ｍ−１〜Ｈ−２５７；Ｍ−１〜Ｋ−２５６；Ｍ−１〜Ｙ
−２５５；Ｍ−１〜Ｉ−２５４；Ｍ−１〜Ｒ−２５３；Ｍ−１〜Ａ−２５２；Ｍ
−１〜Ａ−２５１；Ｍ−１〜Ｖ−２５０；Ｍ−１〜Ｓ−２４９；Ｍ−１〜Ｍ−２
４８；Ｍ−１〜Ｌ−２４７；Ｍ−１〜Ｔ−２４６；Ｍ−１〜Ｌ−２４５；Ｍ−１
〜Ｉ−２４４；Ｍ−１〜Ｈ−２４３；Ｍ−１〜Ｎ−２４２；Ｍ−１〜Ｑ−２４１
；Ｍ−１〜Ｌ−２４０；Ｍ−１〜Ｄ−２３９；Ｍ−１〜Ａ−２３８；Ｍ−１〜Ｇ
−２３７；Ｍ−１〜Ｙ−２３６；Ｍ−１〜Ｆ−２３５；Ｍ−１〜Ａ−２３４；Ｍ
−１〜Ａ−２３３；Ｍ−１〜Ｍ−２３２；Ｍ−１〜Ｓ−２３１；Ｍ−１〜Ａ−２
３０；Ｍ−１〜Ｄ−２２９；Ｍ−１〜Ａ−２２８；Ｍ−１〜Ｖ−２２７；Ｍ−１
〜Ｌ−２２６；Ｍ−１〜Ｌ−２２５；Ｍ−１〜Ｔ−２２４；Ｍ−１〜Ｅ−２２３
；Ｍ−１〜Ｖ−２２２；Ｍ−１〜Ｆ−２２１；Ｍ−１〜Ｒ−２２０；Ｍ−１〜Ａ
−２１９；Ｍ−１〜Ｅ−２１８；Ｍ−１〜Ｓ−２１７；Ｍ−１〜Ｖ−２１６；Ｍ
−１〜Ｆ−２１５；Ｍ−１〜Ｒ−２１４；Ｍ−１〜Ｋ−２１３；Ｍ−１〜Ｔ−２
１２；Ｍ−１〜Ｒ−２１１；Ｍ−１〜Ｓ−２１０；Ｍ−１〜Ｔ−２０９；Ｍ−１
〜Ａ−２０８；Ｍ−１〜Ｇ−２０７；Ｍ−１〜Ｌ−２０６；Ｍ−１〜Ｐ−２０５
；Ｍ−１〜Ｐ−２０４；Ｍ−１〜Ｐ−２０３；Ｍ−１〜Ｐ−２０２；Ｍ−１〜Ｅ
−２０１；Ｍ−１〜Ｓ−２００；Ｍ−１〜Ａ−１９９；Ｍ−１〜Ｇ−１９８；Ｍ
−１〜Ｅ−１９７；Ｍ−１〜Ａ−１９６；Ｍ−１〜Ｅ−１９５；Ｍ−１〜Ｅ−１
９４；Ｍ−１〜Ｅ−１９３；Ｍ−１〜Ｑ−１９２；Ｍ−１〜Ｓ−１９１；Ｍ−１
〜Ｅ−１９０；Ｍ−１〜Ｅ−１８９；Ｍ−１〜Ｅ−１８８；Ｍ−１〜Ｓ−１８７
；Ｍ−１〜Ｄ−１８６；Ｍ−１〜Ｅ−１８５；Ｍ−１〜Ｑ−１８４；Ｍ−１〜Ｈ
−１８３；Ｍ−１〜Ｄ−１８２；Ｍ−１〜Ｇ−１８１；Ｍ−１〜Ｒ−１８０；Ｍ
−１〜Ｅ−１７９；Ｍ−１〜Ｑ−１７８；Ｍ−１〜Ｒ−１７７；Ｍ−１〜Ｑ−１
７６；Ｍ−１〜Ｇ−１７５；Ｍ−１〜Ｅ−１７４；Ｍ−１〜Ｇ−１７３；Ｍ−１
〜Ｔ−１７２；Ｍ−１〜Ｅ−１７１；Ｍ−１〜Ｖ−１７０；Ｍ−１〜Ｅ−１６９
；Ｍ−１〜Ｗ−１６８；Ｍ−１〜Ｅ−１６７；Ｍ−１〜Ｐ−１６６；Ｍ−１〜Ｇ
−１６５；Ｍ−１〜Ｒ−１６４；Ｍ−１〜Ｐ−１６３；Ｍ−１〜Ｌ−１６２；Ｍ
−１〜Ｐ−１６１；Ｍ−１〜Ｒ−１６０；Ｍ−１〜Ａ−１５９；Ｍ−１〜Ｇ−１
５８；Ｍ−１〜Ａ−１５７；Ｍ−１〜Ｐ−１５６；Ｍ−１〜Ｇ−１５５；Ｍ−１
〜Ｗ−１５４；Ｍ−１〜Ｒ−１５３；Ｍ−１〜Ｑ−１５２；Ｍ−１〜Ｌ−１５１
；Ｍ−１〜Ｒ−１５０；Ｍ−１〜Ｈ−１４９；Ｍ−１〜Ｐ−１４８；Ｍ−１〜Ｑ
−１４７；Ｍ−１〜Ａ−１４６；Ｍ−１〜Ｌ−１４５；Ｍ−１〜Ｓ−１４４；Ｍ
−１〜Ｇ−１４３；Ｍ−１〜Ｇ−１４２；Ｍ−１〜Ａ−１４１；Ｍ−１〜Ｇ−１
４０；Ｍ−１〜Ｑ−１３９；Ｍ−１〜Ｐ−１３８；Ｍ−１〜Ｑ−１３７；Ｍ−１
〜Ｉ−１３６；Ｍ−１〜Ｔ−１３５；Ｍ−１〜Ｆ−１３４；Ｍ−１〜Ｅ−１３３
；Ｍ−１〜Ｅ−１３２；Ｍ−１〜Ｇ−１３１；Ｍ−１〜Ｄ−１３０；Ｍ−１〜Ｌ
−１２９；Ｍ−１〜Ｌ−１２８；Ｍ−１〜Ｆ−１２７；Ｍ−１〜Ｓ−１２６；Ｍ
−１〜Ｇ−１２５；Ｍ−１〜Ｓ−１２４；Ｍ−１〜Ｌ−１２３；Ｍ−１〜Ｇ−１
２２；Ｍ−１〜Ｒ−１２１；Ｍ−１〜Ｃ−１２０；Ｍ−１〜Ｌ−１１９；Ｍ−１
〜Ｓ−１１８；Ｍ−１〜Ｖ−１１７；Ｍ−１〜Ａ−１１６；Ｍ−１〜Ａ−１１５
；Ｍ−１〜Ｌ−１１４；Ｍ−１〜Ｓ−１１３；Ｍ−１〜Ｅ−１１２；Ｍ−１〜Ｐ
−１１１；Ｍ−１〜Ｅ−１１０；Ｍ−１〜Ｇ−１０９；Ｍ−１〜Ｎ−１０８；Ｍ
−１〜Ｖ−１０７；Ｍ−１〜Ｔ−１０６；Ｍ−１〜Ｇ−１０５；Ｍ−１〜Ｓ−１
０４；Ｍ−１〜Ｆ−１０３；Ｍ−１〜Ｆ−１０２；Ｍ−１〜Ｃ−１０１；Ｍ−１
〜Ｇ−１００；Ｍ−１〜Ｒ−９９；Ｍ−１〜Ｌ−９８；Ｍ−１〜Ｇ−９７；Ｍ−
１〜Ｒ−９６；Ｍ−１〜Ｅ−９５；Ｍ−１〜Ｇ−９４；Ｍ−１〜Ｇ−９３；Ｍ−
１〜Ｔ−９２；Ｍ−１〜Ａ− ９１；Ｍ−１〜Ｒ−９０；Ｍ−１〜Ｇ−８９；Ｍ
−１〜Ｓ−８８；Ｍ−１〜Ｇ−８７；Ｍ−１〜Ｇ−８６；Ｍ−１〜Ｌ−８５；Ｍ
−１〜Ｒ−８４；Ｍ−１〜Ｅ−８３；Ｍ−１〜Ｉ−８２；Ｍ−１〜Ｋ−８１；Ｍ
−１〜Ｆ−８０；Ｍ−１〜Ｅ−７９；Ｍ−１〜Ｐ−７８；Ｍ−１〜Ａ−７７；Ｍ
−１〜Ｌ−７６；Ｍ−１〜Ｆ−７５；Ｍ−１〜Ｓ−７４；Ｍ−１〜Ｄ−７３；Ｍ
−１〜Ｄ−７２；Ｍ−１〜Ｐ−７１；Ｍ−１〜Ａ−７０；Ｍ−１〜Ｌ−６９；Ｍ
−１〜Ｒ−６８；Ｍ−１〜Ｌ−６７；Ｍ−１〜Ｖ−６６；Ｍ−１〜Ｆ−６５；Ｍ
−１〜Ｇ−６４；Ｍ−１〜Ｋ−６３；Ｍ−１〜Ｇ−６２；Ｍ−１〜Ｆ−６１；Ｍ
−１〜Ａ−６０；Ｍ−１〜Ｓ−５９；Ｍ−１〜Ｌ−５８；Ｍ−１〜Ｈ−５７；Ｍ
−１〜Ｌ−５６；Ｍ−１〜Ａ−５５；Ｍ−１〜Ｌ−５４；Ｍ−１〜Ｅ−５３；Ｍ
−１〜Ｇ−５２；Ｍ−１〜Ａ−５１；Ｍ−１〜Ｓ−５０；Ｍ−１〜Ｇ−４９；Ｍ
−１〜Ｐ−４８；Ｍ−１〜Ｌ−４７；Ｍ−１〜Ｒ−４６；Ｍ−１〜Ｔ−４５；Ｍ
−１〜Ｐ−４４；Ｍ−１〜Ｖ−４３；Ｍ−１〜Ｖ−４２；Ｍ−１〜Ｌ−４１；Ｍ
−１〜Ｅ−４０；Ｍ−１〜Ｓ−３９；Ｍ−１〜Ａ−３８；Ｍ−１〜Ｑ−３７；Ｍ
−１〜Ｇ−３６；Ｍ−１〜Ｇ−３５；Ｍ−１〜Ａ−３４；Ｍ−１〜Ａ−３３；Ｍ
−１〜Ｐ−３２；Ｍ−１〜Ｒ−３１；Ｍ−１〜Ａ−３０；Ｍ−１〜Ｐ−２９；Ｍ
−１〜Ａ−２８；Ｍ−１〜Ｇ−２７；Ｍ−１〜Ｒ−２６；Ｍ−１〜Ａ−２５；Ｍ
−１〜Ｌ−２４；Ｍ−１〜Ｐ−２３；Ｍ−１〜Ｌ−２２；Ｍ−１〜Ｌ−２１；Ｍ
−１〜Ｌ−２０；Ｍ−１〜Ｌ−１９；Ｍ−１〜Ｌ−１８；Ｍ−１〜Ｌ−１７；Ｍ
−１〜Ｌ−１６；Ｍ−１〜Ｌ−１５；Ｍ−１〜Ｌ−１４；Ｍ−１〜Ｆ−１３；Ｍ
−１〜Ｐ−１２；Ｍ−１〜Ｌ−１１；Ｍ−１〜Ｗ−１０；Ｍ−１〜Ｒ−９；Ｍ−
１〜Ｐ−８；Ｍ−１〜Ａ−７。好ましくは、上に列挙されたＮ末端欠失またはＣ
末端欠失のうちの任意は、Ｎ末端欠失およびＣ末端欠失ＭＥＴＨ２ポリペプチド
を産生するために組み合わせられ得る。
【０１５９】
本発明はまた、１つ以上のアミノ酸がアミノ末端とカルボキシル末端の両方か
ら欠失されたポリペプチドを提供し、これは、配列番号２の残基ｍ1−ｎ1、また
は配列番号４の残基ｍ2−ｎ2を有するとして一般的に記載され得、ここで、ｎお
よびｍは、上記のような整数である。
ら欠失されたポリペプチドを提供し、これは、配列番号２の残基ｍ1−ｎ1、また
は配列番号４の残基ｍ2−ｎ2を有するとして一般的に記載され得、ここで、ｎお
よびｍは、上記のような整数である。
【０１６０】
本発明はまた、ＭＥＴＨ１のメタロプロテアーゼの変異体を提供し、これは、
一般式ｍ3−ｎ3によって記載され、ここで、ｍ3は、２０５〜２６５の整数であ
り、そしてｎ3は、２８５〜９５０の整数であり、ここで、ｍ3およびｎ3は、配
列番号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。本発明はさらに、
ＭＥＴＨ１のメタロプロテアーゼの変異体を提供し、これは、一般式ｍ4−ｎ4に
よって記載され、ここで、ｍ4は、１〜４０９の整数であり、そしてｎ4は、４２
９〜４８９の整数であり、ここで、ｍ4およびｎ4は、配列番号２において同定さ
れるアミノ酸残基の位置に対応する。
一般式ｍ3−ｎ3によって記載され、ここで、ｍ3は、２０５〜２６５の整数であ
り、そしてｎ3は、２８５〜９５０の整数であり、ここで、ｍ3およびｎ3は、配
列番号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。本発明はさらに、
ＭＥＴＨ１のメタロプロテアーゼの変異体を提供し、これは、一般式ｍ4−ｎ4に
よって記載され、ここで、ｍ4は、１〜４０９の整数であり、そしてｎ4は、４２
９〜４８９の整数であり、ここで、ｍ4およびｎ4は、配列番号２において同定さ
れるアミノ酸残基の位置に対応する。
【０１６１】
本発明は、また、ＭＥＴＨ１のディスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ
）ドメインの変異体を提供し、これは、一般式ｍ5−ｎ5によって記載され、ここ
で、ｍ5は、４３０〜４９０の整数であり、そしてｎ5は、５１０〜９５０の整数
であり、ここで、ｍ5およびｎ5は、配列番号２において同定されるアミノ酸残基
の位置に対応する。
）ドメインの変異体を提供し、これは、一般式ｍ5−ｎ5によって記載され、ここ
で、ｍ5は、４３０〜４９０の整数であり、そしてｎ5は、５１０〜９５０の整数
であり、ここで、ｍ5およびｎ5は、配列番号２において同定されるアミノ酸残基
の位置に対応する。
【０１６２】
本発明は、さらに、ＭＥＴＨ１のディスインテグリンドメインの変異体を提供
し、これは、一般式ｍ6−ｎ6によって記載され、ここで、ｍ6は、１〜４９４の
整数であり、そしてｎ6は、５１４〜５７４の整数であり、ここで、ｍ6およびｎ 6 は、配列番号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
し、これは、一般式ｍ6−ｎ6によって記載され、ここで、ｍ6は、１〜４９４の
整数であり、そしてｎ6は、５１４〜５７４の整数であり、ここで、ｍ6およびｎ 6 は、配列番号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
【０１６３】
本発明は、さらに、ＭＥＴＨ１のＴＳＰ１ドメインの変異体を提供し、これは
、一般式ｍ7−ｎ7によって記載され、ここで、ｍ7は、５１５〜５７５の整数で
あり、そしてｎ7は、５９５〜９５０の整数であり、ここで、ｍ7およびｎ7は、
配列番号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
、一般式ｍ7−ｎ7によって記載され、ここで、ｍ7は、５１５〜５７５の整数で
あり、そしてｎ7は、５９５〜９５０の整数であり、ここで、ｍ7およびｎ7は、
配列番号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
【０１６４】
本発明は、また、ＭＥＴＨ１のＴＳＰ１ドメインの変異体を提供し、これは、
一般式ｍ8−ｎ8によって記載され、ここで、ｍ8は、１〜５４８の整数であり、
そしてｎ8は、５６８〜６２８の整数であり、ここで、ｍ8およびｎ8は、配列番
号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
一般式ｍ8−ｎ8によって記載され、ここで、ｍ8は、１〜５４８の整数であり、
そしてｎ8は、５６８〜６２８の整数であり、ここで、ｍ8およびｎ8は、配列番
号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
【０１６５】
本発明は、また、ＭＥＴＨ１のＴＳＰ２ドメインの変異体を提供し、これは、
一般式ｍ9−ｎ9によって記載され、ここで、ｍ9は、８０１〜８７１の整数であ
り、そしてｎ9は、８９１〜９５０の整数であり、ここで、ｍ9およびｎ9は、配
列番号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
一般式ｍ9−ｎ9によって記載され、ここで、ｍ9は、８０１〜８７１の整数であ
り、そしてｎ9は、８９１〜９５０の整数であり、ここで、ｍ9およびｎ9は、配
列番号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
【０１６６】
本発明は、また、ＭＥＴＨ１のＴＳＰ２ドメインの変異体を提供し、これは、
一般式ｍ10−ｎ10によって記載され、ここで、ｍ10は、１〜８３４の整数であり
、そしてｎ10は、８６４〜９２４の整数であり、ここで、ｍ10およびｎ10は、配
列番号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
一般式ｍ10−ｎ10によって記載され、ここで、ｍ10は、１〜８３４の整数であり
、そしてｎ10は、８６４〜９２４の整数であり、ここで、ｍ10およびｎ10は、配
列番号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
【０１６７】
本発明は、さらに、ＭＥＴＨ１のＴＳＰ３ドメインの変異体を提供し、これは
、一般式ｍ11−ｎ11によって記載され、ここで、ｍ11は、８６５〜９２５の整数
であり、そしてｎ11は、９４５〜９５０の整数であり、ここで、ｍ11およびｎ11 は、配列番号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。本発明はま
た、ＭＥＴＨ１のＴＳＰ３ドメインの変異体を提供し、これは、一般式ｍ12−ｎ 12 によって記載され、ここで、ｍ12は、１〜８８４の整数であり、そしてｎ12は
、９０４〜９５０の整数であり、ここで、ｍ12およびｎ12は、配列番号２におい
て同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
、一般式ｍ11−ｎ11によって記載され、ここで、ｍ11は、８６５〜９２５の整数
であり、そしてｎ11は、９４５〜９５０の整数であり、ここで、ｍ11およびｎ11 は、配列番号２において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。本発明はま
た、ＭＥＴＨ１のＴＳＰ３ドメインの変異体を提供し、これは、一般式ｍ12−ｎ 12 によって記載され、ここで、ｍ12は、１〜８８４の整数であり、そしてｎ12は
、９０４〜９５０の整数であり、ここで、ｍ12およびｎ12は、配列番号２におい
て同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
【０１６８】
本発明は、さらに、ＭＥＴＨ２のメタロプロテアーゼドメインの変異体を提供
し、これは、一般式ｍ13−ｎ13によって記載され、ここで、ｍ13は、１８４〜２
４４の整数であり、そしてｎ13は、２６４〜８９０の整数であり、ここで、ｍ13 およびｎ13は、配列番号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
本発明はまた、ＭＥＴＨ２のメタロプロテアーゼドメインの変異体を提供し、こ
れは、一般式ｍ14−ｎ14によって記載され、ここで、ｍ14は、１〜３８９の整数
であり、そしてｎ14は、４０９〜４６９の整数であり、ここで、ｍ14およびｎ14 は、配列番号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
し、これは、一般式ｍ13−ｎ13によって記載され、ここで、ｍ13は、１８４〜２
４４の整数であり、そしてｎ13は、２６４〜８９０の整数であり、ここで、ｍ13 およびｎ13は、配列番号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
本発明はまた、ＭＥＴＨ２のメタロプロテアーゼドメインの変異体を提供し、こ
れは、一般式ｍ14−ｎ14によって記載され、ここで、ｍ14は、１〜３８９の整数
であり、そしてｎ14は、４０９〜４６９の整数であり、ここで、ｍ14およびｎ14 は、配列番号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
【０１６９】
本発明は、さらに、ＭＥＴＨ２のディスインテグリンドメインの変異体を提供
し、これは、一般式ｍ15−ｎ15によって記載され、ここで、ｍ15は、４００〜４
７０の整数であり、そしてｎ15は、４９０〜８９０の整数であり、ここで、ｍ15 およびｎ15は、配列番号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
本発明はまた、ＭＥＴＨ２のディスインテグリンドメインの変異体を提供し、こ
れは、一般式ｍ16−ｎ16によって記載され、ここで、ｍ16は、１〜４７９の整数
であり、そしてｎ16は、４９９〜５５９の整数であり、ここで、ｍ16およびｎ16 は、配列番号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
し、これは、一般式ｍ15−ｎ15によって記載され、ここで、ｍ15は、４００〜４
７０の整数であり、そしてｎ15は、４９０〜８９０の整数であり、ここで、ｍ15 およびｎ15は、配列番号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
本発明はまた、ＭＥＴＨ２のディスインテグリンドメインの変異体を提供し、こ
れは、一般式ｍ16−ｎ16によって記載され、ここで、ｍ16は、１〜４７９の整数
であり、そしてｎ16は、４９９〜５５９の整数であり、ここで、ｍ16およびｎ16 は、配列番号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
【０１７０】
本発明は、さらに、ＭＥＴＨ２のＴＳＰ１ドメインの変異体を提供し、これは
、一般式ｍ17−ｎ17によって記載され、ここで、ｍ17は、５００〜５６０の整数
であり、そしてｎ17は、５８０〜８９０の整数であり、ここで、ｍ17およびｎ17 は、配列番号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。本発明はま
た、ＭＥＴＨ２のＴＳＰ１ドメインの変異体を提供し、これは、一般式ｍ18−ｎ 18 によって記載され、ここで、ｍ18は、１〜５３３の整数であり、そしてｎ18は
、５５３〜６１３の整数であり、ここで、ｍ18およびｎ18は、配列番号４におい
て同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
、一般式ｍ17−ｎ17によって記載され、ここで、ｍ17は、５００〜５６０の整数
であり、そしてｎ17は、５８０〜８９０の整数であり、ここで、ｍ17およびｎ17 は、配列番号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。本発明はま
た、ＭＥＴＨ２のＴＳＰ１ドメインの変異体を提供し、これは、一般式ｍ18−ｎ 18 によって記載され、ここで、ｍ18は、１〜５３３の整数であり、そしてｎ18は
、５５３〜６１３の整数であり、ここで、ｍ18およびｎ18は、配列番号４におい
て同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
【０１７１】
本発明は、さらに、ＭＥＴＨ２のＴＳＰ２ドメインの変異体を提供し、これは
、一般式ｍ19−ｎ19によって記載され、ここで、ｍ19は、８０７〜８６７の整数
であり、そしてｎ19は、８８７〜８９０の整数であり、ここで、ｍ19およびｎ19 は、配列番号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。本発明はま
た、ＭＥＴＨ２のＴＳＰ２ドメインの変異体を提供し、これは、一般式ｍ20−ｎ 20 によって記載され、ここで、ｍ20は、１〜８４０の整数であり、そしてｎ20は
、８６０〜８９０の整数であり、ここで、ｍ20およびｎ20は、配列番号４におい
て同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
、一般式ｍ19−ｎ19によって記載され、ここで、ｍ19は、８０７〜８６７の整数
であり、そしてｎ19は、８８７〜８９０の整数であり、ここで、ｍ19およびｎ19 は、配列番号４において同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。本発明はま
た、ＭＥＴＨ２のＴＳＰ２ドメインの変異体を提供し、これは、一般式ｍ20−ｎ 20 によって記載され、ここで、ｍ20は、１〜８４０の整数であり、そしてｎ20は
、８６０〜８９０の整数であり、ここで、ｍ20およびｎ20は、配列番号４におい
て同定されるアミノ酸残基の位置に対応する。
【０１７２】
構造または機能ドメインによって特徴づけられるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２
のポリペプチドフラグメントおよびポリヌクレオチドフラグメントもまた好まし
い。本発明の好ましい実施形態は、α−ヘリックスおよびα−ヘリックス形成領
域（「α−領域」）、β−シートおよびβ−シート形成領域（「β−領域」）、
ターンおよびターン形成領域（「ターン−領域」）、コイルおよびコイル形成領
域（「コイル−領域」）、親水性領域、疎水性領域、α両親媒性領域、β両親媒
性領域、可撓性領域、表面形成領域、基質結合領域、および高抗原性指標領域を
含むフラグメントを含む。図に示されるように、このような好ましい領域として
は、Ｇａｒｎｉｅｒ−Ｒｏｂｓｏｎのα−領域、β−領域、ターン−領域、およ
びコイル−領域、Ｃｈｏｕ−Ｆａｓｍａｎのα−領域、β−領域、およびターン
−領域、Ｋｙｔｅ−Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの親水性領域および疎水性領域、Ｅｉｓ
ｅｎｂｅｒｇのα−およびβ−両親媒性領域、Ｋａｒｐｌｕｓ−Ｓｃｈｕｌｚの
可撓性領域、Ｅｍｉｎｉの表面形成領域、およびＪａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆの高
抗原性指数領域が挙げられる。保存性ドメインに入る配列番号２のポリペプチド
フラグメントが特に本発明に意図される。（図１０および１１ならびに表１およ
び２を参照のこと）。さらに、これらのドメインをコードするポリヌクレオチド
フラグメントがまた、意図される。
のポリペプチドフラグメントおよびポリヌクレオチドフラグメントもまた好まし
い。本発明の好ましい実施形態は、α−ヘリックスおよびα−ヘリックス形成領
域（「α−領域」）、β−シートおよびβ−シート形成領域（「β−領域」）、
ターンおよびターン形成領域（「ターン−領域」）、コイルおよびコイル形成領
域（「コイル−領域」）、親水性領域、疎水性領域、α両親媒性領域、β両親媒
性領域、可撓性領域、表面形成領域、基質結合領域、および高抗原性指標領域を
含むフラグメントを含む。図に示されるように、このような好ましい領域として
は、Ｇａｒｎｉｅｒ−Ｒｏｂｓｏｎのα−領域、β−領域、ターン−領域、およ
びコイル−領域、Ｃｈｏｕ−Ｆａｓｍａｎのα−領域、β−領域、およびターン
−領域、Ｋｙｔｅ−Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの親水性領域および疎水性領域、Ｅｉｓ
ｅｎｂｅｒｇのα−およびβ−両親媒性領域、Ｋａｒｐｌｕｓ−Ｓｃｈｕｌｚの
可撓性領域、Ｅｍｉｎｉの表面形成領域、およびＪａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆの高
抗原性指数領域が挙げられる。保存性ドメインに入る配列番号２のポリペプチド
フラグメントが特に本発明に意図される。（図１０および１１ならびに表１およ
び２を参照のこと）。さらに、これらのドメインをコードするポリヌクレオチド
フラグメントがまた、意図される。
【０１７３】
他の好ましいフラグメントは、生物学的に活性なＭＥＴＨ１フラグメントまた
はＭＥＴＨ２フラグメントである。生物学的に活性なフラグメントは、ＭＥＴＨ
１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチドの活性に類似するが、必ずしも同
一ではない、活性を示すフラグメントである。フラグメントの生物学的な活性に
は、改善された望ましい活性、または減少された望ましくない活性が挙げられる
。しかし、ＥＳＴ配列のような多くのポリヌクレオチド配列は、配列データベー
スを介して公に利用可能でありアクセス可能である。これらの配列のいくつかは
、配列番号１または配列番号３に関連し、そして本発明の概念の前に公に利用可
能であったかもしれない。好ましくは、このような関連するポリヌクレオチドは
、本発明の範囲から特に除外される。全ての関連配列を列挙することは煩わしい
。従って、好ましくは、本発明からは、一般式ａ−ｂにより記載されるヌクレオ
チド配列（ここで、ａは配列番号１の１〜９３６の任意の整数であり、ｂは１５
〜９５０の整数であり、ここでａおよびｂの両方は配列番号１に示されるヌクレ
オチド残基の位置に対応し、そしてここでｂはａ＋１４以上である）を含む１つ
以上のポリヌクレオチドが除外される。さらに、好ましくは、本発明からは、一
般式ａ−ｂにより記載されるヌクレオチド配列（ここで、ａは配列番号３の１〜
８７６の任意の整数であり、ｂは１５〜８９０の整数であり、ここでａおよびｂ
の両方は配列番号３に示されるヌクレオチド残基の位置に対応し、そしてここで
ｂはａ＋１４以上である）を含む１つ以上のポリヌクレオチドが除外される。
はＭＥＴＨ２フラグメントである。生物学的に活性なフラグメントは、ＭＥＴＨ
１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチドの活性に類似するが、必ずしも同
一ではない、活性を示すフラグメントである。フラグメントの生物学的な活性に
は、改善された望ましい活性、または減少された望ましくない活性が挙げられる
。しかし、ＥＳＴ配列のような多くのポリヌクレオチド配列は、配列データベー
スを介して公に利用可能でありアクセス可能である。これらの配列のいくつかは
、配列番号１または配列番号３に関連し、そして本発明の概念の前に公に利用可
能であったかもしれない。好ましくは、このような関連するポリヌクレオチドは
、本発明の範囲から特に除外される。全ての関連配列を列挙することは煩わしい
。従って、好ましくは、本発明からは、一般式ａ−ｂにより記載されるヌクレオ
チド配列（ここで、ａは配列番号１の１〜９３６の任意の整数であり、ｂは１５
〜９５０の整数であり、ここでａおよびｂの両方は配列番号１に示されるヌクレ
オチド残基の位置に対応し、そしてここでｂはａ＋１４以上である）を含む１つ
以上のポリヌクレオチドが除外される。さらに、好ましくは、本発明からは、一
般式ａ−ｂにより記載されるヌクレオチド配列（ここで、ａは配列番号３の１〜
８７６の任意の整数であり、ｂは１５〜８９０の整数であり、ここでａおよびｂ
の両方は配列番号３に示されるヌクレオチド残基の位置に対応し、そしてここで
ｂはａ＋１４以上である）を含む１つ以上のポリヌクレオチドが除外される。
【０１７４】
上記フラグメントは、以下のように、融合タンパク質、例えば、ＦｃまたはＦ
ｌａｇ融合タンパク質を作製するために使用され得る。
ｌａｇ融合タンパク質を作製するために使用され得る。
【０１７５】
（エピトープおよび抗体）
別の局面において、本発明は、本発明のポリペプチドのエピトープ保有部分を
含むペプチドおよびポリペプチドを提供する。これらのエピトープは、本発明の
ポリペプチドの免疫原性エピトープまたは抗原性エピトープである。「免疫原性
エピトープ」は、本発明のポリペプチド全体またはそれらのフラグメントが免疫
原である場合、インビボにおいて抗体応答を誘発するタンパク質の一部と定義さ
れる。一方で、抗体が結合し得るポリペプチドの領域は、「抗原決定基」または
「抗原性エピトープ」として規定される。タンパク質のインビボでの免疫原性エ
ピトープの数は、一般に抗原性エピトープの数より少ない。例えば、Ｇｅｙｓｅ
ｎら（１９８３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：３９
９８〜４００２を参照のこと。しかし、抗体が免疫原性エピトープであるか否か
にかかわらず、ファージディスプレイのような方法を用いることにより、任意の
抗原性エピトープに対して、抗体は作製され得る。例えば、Ｐｅｔｅｒｓｅｎ
Ｇ．ら（１９９５）Ｍｏｌ．Ｇｅｎ．Ｇｅｎｅｔ．２４９：４２５〜４３１を参
照のこと。従って、免疫原性エピトープおよび抗原性エピトープの両方が本発明
に含まれる。
含むペプチドおよびポリペプチドを提供する。これらのエピトープは、本発明の
ポリペプチドの免疫原性エピトープまたは抗原性エピトープである。「免疫原性
エピトープ」は、本発明のポリペプチド全体またはそれらのフラグメントが免疫
原である場合、インビボにおいて抗体応答を誘発するタンパク質の一部と定義さ
れる。一方で、抗体が結合し得るポリペプチドの領域は、「抗原決定基」または
「抗原性エピトープ」として規定される。タンパク質のインビボでの免疫原性エ
ピトープの数は、一般に抗原性エピトープの数より少ない。例えば、Ｇｅｙｓｅ
ｎら（１９８３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：３９
９８〜４００２を参照のこと。しかし、抗体が免疫原性エピトープであるか否か
にかかわらず、ファージディスプレイのような方法を用いることにより、任意の
抗原性エピトープに対して、抗体は作製され得る。例えば、Ｐｅｔｅｒｓｅｎ
Ｇ．ら（１９９５）Ｍｏｌ．Ｇｅｎ．Ｇｅｎｅｔ．２４９：４２５〜４３１を参
照のこと。従って、免疫原性エピトープおよび抗原性エピトープの両方が本発明
に含まれる。
【０１７６】
免疫原性エピトープを含むアミノ酸配列の例の列挙を表１および２に示す。こ
れは、表１および２がＪａｍｅｓｏｎおよびＷｏｌｆ，（１９８８）Ｃｏｍｐ．
Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．，４：１８１〜１８６（この引用文献はその全体が参
考として援用されている）のアルゴリズムを用いて最高の抗原性を有することが
予想されたエピトープを含むアミノ酸残基のみを列挙することが指摘されている
。Ｊａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆ抗原性分析を、デフォルトパラメーターを用いるコ
ンピュータープログラムＰＲＯＴＥＡＮ（Ｐｏｗｅｒ ＭａｃＩｎｔｏｓｈ用，
Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．１１ ＤＮＡＳＴＡＲ，Ｉｎｃ．，１２２８ Ｓｏｕｔｈ
Ｐａｒｋ Ｓｔｒｅｅｔ Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を用いて実行した。表１お
よび２ならびに表１および２に列挙されないポリペプチドの一部は、非免疫性と
は考えられない。表１および２の免疫原性エピトープは、例示的な列挙であって
、排他的な列挙ではない。なぜなら、他の免疫原性エピトープが、使用される特
定のアルゴリズムによって認識されないだけであるからである。他の免疫原性エ
ピトープを含むアミノ酸残基は、Ｊａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆ分析に類似のアルゴ
リズムを用いて、または当該分野で公知の方法を用いる抗原性反応についてのイ
ンビボ試験により慣用的に決定され得る。例えば、Ｇｅｙｓｅｎら、前出；米国
特許第４，７０８，７８１号；同第５，１９４，３９２号；同第４，４３３，０
９２号；および同第５，４８０，９７１号（これらの参考文献はその全体が参考
として援用される）を参照のこと。
れは、表１および２がＪａｍｅｓｏｎおよびＷｏｌｆ，（１９８８）Ｃｏｍｐ．
Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．，４：１８１〜１８６（この引用文献はその全体が参
考として援用されている）のアルゴリズムを用いて最高の抗原性を有することが
予想されたエピトープを含むアミノ酸残基のみを列挙することが指摘されている
。Ｊａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆ抗原性分析を、デフォルトパラメーターを用いるコ
ンピュータープログラムＰＲＯＴＥＡＮ（Ｐｏｗｅｒ ＭａｃＩｎｔｏｓｈ用，
Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．１１ ＤＮＡＳＴＡＲ，Ｉｎｃ．，１２２８ Ｓｏｕｔｈ
Ｐａｒｋ Ｓｔｒｅｅｔ Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を用いて実行した。表１お
よび２ならびに表１および２に列挙されないポリペプチドの一部は、非免疫性と
は考えられない。表１および２の免疫原性エピトープは、例示的な列挙であって
、排他的な列挙ではない。なぜなら、他の免疫原性エピトープが、使用される特
定のアルゴリズムによって認識されないだけであるからである。他の免疫原性エ
ピトープを含むアミノ酸残基は、Ｊａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆ分析に類似のアルゴ
リズムを用いて、または当該分野で公知の方法を用いる抗原性反応についてのイ
ンビボ試験により慣用的に決定され得る。例えば、Ｇｅｙｓｅｎら、前出；米国
特許第４，７０８，７８１号；同第５，１９４，３９２号；同第４，４３３，０
９２号；および同第５，４８０，９７１号（これらの参考文献はその全体が参考
として援用される）を参照のこと。
【０１７７】
本発明の抗原性エピトープ保有ペプチドおよびポリペプチドは、本発明のポリ
ペプチドのアミノ酸配列に含まれる、好ましくは少なくとも７アミノ酸、より好
ましくは少なくとも９アミノ酸、そして最も好ましくは約１５〜約３０アミノ酸
の配列を含む。
ペプチドのアミノ酸配列に含まれる、好ましくは少なくとも７アミノ酸、より好
ましくは少なくとも９アミノ酸、そして最も好ましくは約１５〜約３０アミノ酸
の配列を含む。
【０１７８】
ＤＮＡｓｔａｒ分析を用いて、配列番号２は、以下のアミノ酸で抗原性が見出
された：２〜１４、３２〜４４、４７〜６０、６６〜７８、８７〜１０３、１０
９〜１１８、１４６〜１６２、１６８〜１８０、１８３〜２１９、２２３〜２４
３、２７５〜２８４、２９６〜３０６、３１４〜３３４、３４１〜３５４、３５
７〜３７６、３９２〜３９９、４０１〜４１０、４１８〜４２９、４３８〜４５
４、４５６〜４７１、４７４〜４８８、５１０〜５２２、５２４〜５３８、５５
０〜５６１、５６５〜６２６、６３０〜６４３、６５９〜６７１、６７９〜７２
１、７３４〜７４９、７８４〜８０４、８１３〜８２０、８２５〜８３２、８４
５〜８５４、８６０〜８９４、８９９〜９１７、９１９〜９２４および９２８〜
９３９。
された：２〜１４、３２〜４４、４７〜６０、６６〜７８、８７〜１０３、１０
９〜１１８、１４６〜１６２、１６８〜１８０、１８３〜２１９、２２３〜２４
３、２７５〜２８４、２９６〜３０６、３１４〜３３４、３４１〜３５４、３５
７〜３７６、３９２〜３９９、４０１〜４１０、４１８〜４２９、４３８〜４５
４、４５６〜４７１、４７４〜４８８、５１０〜５２２、５２４〜５３８、５５
０〜５６１、５６５〜６２６、６３０〜６４３、６５９〜６７１、６７９〜７２
１、７３４〜７４９、７８４〜８０４、８１３〜８２０、８２５〜８３２、８４
５〜８５４、８６０〜８９４、８９９〜９１７、９１９〜９２４および９２８〜
９３９。
【０１７９】
ＤＮＡｓｔａｒ分析を用いて、配列番号４は、以下のアミノ酸で抗原性が見出
された：２６〜３８、４５〜５２、６９〜７６、８０〜９９、１０５〜１１３、
１２９〜１３６、１３８〜２１７、２５４〜２６３、２７３〜２８９、２９４〜
３１３、３２１〜３３１、３３９〜３５６、３７１〜３８３、４１７〜４２７、
４３８〜４４３、４５９〜４７１、４７９〜５０５、５０７〜５２６、５３５〜
５４６、５５０〜６０７、６１５〜６４０、６４８〜６５３、６６０〜６６７、
６６９〜６８１、６８３〜７０４、７１７〜７３２、７３７〜７４３、７７５〜
７８７、７９７〜８０４、８１１〜８２５、８４０〜８６７および８７０〜８８
４。
された：２６〜３８、４５〜５２、６９〜７６、８０〜９９、１０５〜１１３、
１２９〜１３６、１３８〜２１７、２５４〜２６３、２７３〜２８９、２９４〜
３１３、３２１〜３３１、３３９〜３５６、３７１〜３８３、４１７〜４２７、
４３８〜４４３、４５９〜４７１、４７９〜５０５、５０７〜５２６、５３５〜
５４６、５５０〜６０７、６１５〜６４０、６４８〜６５３、６６０〜６６７、
６６９〜６８１、６８３〜７０４、７１７〜７３２、７３７〜７４３、７７５〜
７８７、７９７〜８０４、８１１〜８２５、８４０〜８６７および８７０〜８８
４。
【０１８０】
従って、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のこれらの領域は、ＭＥＴＨ１
および／またはＭＥＴＨ２特異的抗体を産生させるために使用され得る抗原性ポ
リペプチドまたはペプチドの非限定的な例である。
および／またはＭＥＴＨ２特異的抗体を産生させるために使用され得る抗原性ポ
リペプチドまたはペプチドの非限定的な例である。
【０１８１】
表１および２のアミノ酸配列が免疫原性エピトープを含むことが特に示されて
いる。表１および２は、Ｊａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆ分析により決定される免疫原
性エピトープの重要な残基のみを列挙している。このように、Ｎ末端、Ｃ末端、
またはＮ末端およびＣ末端の両方のいずれかの末端におけるさらなる隣接する残
基を表１および２の配列に付加し、本発明のエピトープ保有ポリペプチドを生成
し得る。従って、表１および２の免疫原性エピトープは、さらなるＮ末端アミノ
酸残基またはＣ末端アミノ酸残基を含み得る。さらなる隣接するアミノ酸残基は
、本発明のポリペプチドからの連続した隣接するＮ末端配列および／またはＣ末
端配列、異種ポリペプチド配列であってもよいし、あるいは本発明のポリペプチ
ドおよび異種ポリペプチド配列からの連続した隣接する配列の両方を含み得る。
いる。表１および２は、Ｊａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆ分析により決定される免疫原
性エピトープの重要な残基のみを列挙している。このように、Ｎ末端、Ｃ末端、
またはＮ末端およびＣ末端の両方のいずれかの末端におけるさらなる隣接する残
基を表１および２の配列に付加し、本発明のエピトープ保有ポリペプチドを生成
し得る。従って、表１および２の免疫原性エピトープは、さらなるＮ末端アミノ
酸残基またはＣ末端アミノ酸残基を含み得る。さらなる隣接するアミノ酸残基は
、本発明のポリペプチドからの連続した隣接するＮ末端配列および／またはＣ末
端配列、異種ポリペプチド配列であってもよいし、あるいは本発明のポリペプチ
ドおよび異種ポリペプチド配列からの連続した隣接する配列の両方を含み得る。
【０１８２】
免疫原性エピトープまたは抗原性エピトープを含む本発明のポリペプチドは、
少なくとも７アミノ酸残基長である。「少なくとも」は、免疫原性エピトープま
たは抗原性エピトープを含む本発明のポリペプチドは、７アミノ酸残基長または
７アミノ酸と本発明の完全長ポリペプチドのアミノ酸残基数との間の任意の整数
であり得ることを意味する。免疫原性エピトープまたは抗原性エピトープを含む
好ましいポリペプチドは、少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４
０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、ま
たは１００アミノ酸残基長である。しかし、７と完全長ポリペプチドのアミノ酸
残基数との間のそれぞれの整数およびあらゆる整数が、本発明に含まれることが
示される。
少なくとも７アミノ酸残基長である。「少なくとも」は、免疫原性エピトープま
たは抗原性エピトープを含む本発明のポリペプチドは、７アミノ酸残基長または
７アミノ酸と本発明の完全長ポリペプチドのアミノ酸残基数との間の任意の整数
であり得ることを意味する。免疫原性エピトープまたは抗原性エピトープを含む
好ましいポリペプチドは、少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４
０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、ま
たは１００アミノ酸残基長である。しかし、７と完全長ポリペプチドのアミノ酸
残基数との間のそれぞれの整数およびあらゆる整数が、本発明に含まれることが
示される。
【０１８３】
免疫原性エピトープ保有フラグメントおよび抗原性エピトープ保有フラグメン
トは、上記のような連続したアミノ酸残基の数、または配列番号２もしくは４の
アミノ酸配列のこれらのフラグメントのＮ末端位置およびＣ末端位置によりさら
に特定され得る。例えば、少なくとも７または少なくとも１５の連続したアミノ
酸残基長のフラグメントが配列番号２もしくは４のアミノ酸配列上で占有し得る
、Ｎ末端位置およびＣ末端位置のあらゆる組み合わせは、本発明に含まれる。再
度、「少なくとも７の連続したアミノ酸残基長」は、７アミノ酸残基長、または
７アミノ酸と本発明の全長ポリペプチドのアミノ酸残基数との間の任意の整数を
意味する。詳細には、７と完全長ポリペプチドのアミノ酸残基数との間のそれぞ
れの整数およびあらゆる整数が、本発明に含まれる。
トは、上記のような連続したアミノ酸残基の数、または配列番号２もしくは４の
アミノ酸配列のこれらのフラグメントのＮ末端位置およびＣ末端位置によりさら
に特定され得る。例えば、少なくとも７または少なくとも１５の連続したアミノ
酸残基長のフラグメントが配列番号２もしくは４のアミノ酸配列上で占有し得る
、Ｎ末端位置およびＣ末端位置のあらゆる組み合わせは、本発明に含まれる。再
度、「少なくとも７の連続したアミノ酸残基長」は、７アミノ酸残基長、または
７アミノ酸と本発明の全長ポリペプチドのアミノ酸残基数との間の任意の整数を
意味する。詳細には、７と完全長ポリペプチドのアミノ酸残基数との間のそれぞ
れの整数およびあらゆる整数が、本発明に含まれる。
【０１８４】
本発明の免疫原性エピトープ保有ポリペプチドおよび抗原性エピトープ保有ポ
リペプチドは、例えば、本発明のポリペプチドに特異的に結合する抗体を作製す
るため、および本発明のポリペプチドを検出するためのイムノアッセイにおいて
有用である。この抗体は、例えば、本発明のポリペプチドのアフニティー精製に
有用である。この抗体はまた、種々の定性的イムノアッセイまたは定量的イムノ
アッセイにおいて、特に当該分野で公知の方法を用いる本発明のポリペプチドの
ために、慣用的に用いられ得る。例えば、Ｈａｒｌｏｗら、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅ
ｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈ
ａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ；第２版、１９８８）を参照の
こと。
リペプチドは、例えば、本発明のポリペプチドに特異的に結合する抗体を作製す
るため、および本発明のポリペプチドを検出するためのイムノアッセイにおいて
有用である。この抗体は、例えば、本発明のポリペプチドのアフニティー精製に
有用である。この抗体はまた、種々の定性的イムノアッセイまたは定量的イムノ
アッセイにおいて、特に当該分野で公知の方法を用いる本発明のポリペプチドの
ために、慣用的に用いられ得る。例えば、Ｈａｒｌｏｗら、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅ
ｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈ
ａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ；第２版、１９８８）を参照の
こと。
【０１８５】
本発明のエピトープ保有ポリペプチドは、当該分野で公知の合成方法および組
換え方法を含むポリペプチドの作製のための任意の従来の手段により産生され得
る。例えば、エピトープ保有ペプチドは、化学合成の公知の方法を用いて合成さ
れ得る。例えば、Ｈｏｕｇｈｔｅｎは、多数のペプチド、例えば、１０〜２０ｍ
ｇの２４８の個々のペプチドおよびＨＡ１ポリペプチドのセグメントの単一のア
ミノ酸改変体を示す別の１３残基ペプチド（これら全ては、４週未満で調製され
そして特徴付けされた（ＥＬＩＳＡ型結合研究により））の合成のための簡易な
方法を記載している（Ｈｏｕｇｈｔｅｎ，Ｒ．Ａ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２：５１３１〜５１３５（１９８５））。この「同時複
数ペプチド合成（Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｐｅｐｔｉｄ
ｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）（ＳＭＰＳ）」プロセスは、Ｈｏｕｇｈｔｅｎおよび
共働研究者（１９８６）の米国特許第４，６３１，２１１号にさらに記載されて
いる。この手順において、種々のペプチドの固相合成のための個別の樹脂が、別
の溶媒透過性パケットに含まれる。これは固相方法に関与する多数の同一の反復
性工程の最適の使用を可能にする。完全なマニュアル手順は、同時に実行される
５００〜１０００以上の合成を可能にする（Ｈｏｕｇｈｔｅｎら、（１９８５）
Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，Ｕ．Ｓ．Ａ．８２：５１３１〜５１
３５、５１３４）。
換え方法を含むポリペプチドの作製のための任意の従来の手段により産生され得
る。例えば、エピトープ保有ペプチドは、化学合成の公知の方法を用いて合成さ
れ得る。例えば、Ｈｏｕｇｈｔｅｎは、多数のペプチド、例えば、１０〜２０ｍ
ｇの２４８の個々のペプチドおよびＨＡ１ポリペプチドのセグメントの単一のア
ミノ酸改変体を示す別の１３残基ペプチド（これら全ては、４週未満で調製され
そして特徴付けされた（ＥＬＩＳＡ型結合研究により））の合成のための簡易な
方法を記載している（Ｈｏｕｇｈｔｅｎ，Ｒ．Ａ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２：５１３１〜５１３５（１９８５））。この「同時複
数ペプチド合成（Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｐｅｐｔｉｄ
ｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）（ＳＭＰＳ）」プロセスは、Ｈｏｕｇｈｔｅｎおよび
共働研究者（１９８６）の米国特許第４，６３１，２１１号にさらに記載されて
いる。この手順において、種々のペプチドの固相合成のための個別の樹脂が、別
の溶媒透過性パケットに含まれる。これは固相方法に関与する多数の同一の反復
性工程の最適の使用を可能にする。完全なマニュアル手順は、同時に実行される
５００〜１０００以上の合成を可能にする（Ｈｏｕｇｈｔｅｎら、（１９８５）
Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，Ｕ．Ｓ．Ａ．８２：５１３１〜５１
３５、５１３４）。
【０１８６】
本発明は、配列番号２および／または配列番号４のアミノ酸配列を有するポリ
ペプチドのエピトープ、またはＡＴＣＣ受託番号２０９５８１または２０９５８
２またはＰＴＡ１４７８に含まれるポリヌクレオチド配列によって、もしくは配
列番号１および／または配列番号３の配列の相補物にハイブリダイズするポリヌ
クレオチドによってコードされるポリペプチド配列のエピトープ、または上記で
規定されたようなストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下もしくはよ
り低いストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件下でＡＴＣＣ寄託番号
２０９５８１または２０９５８２またはＰＴＡ１４７８に含まれるポリヌクレオ
チド配列によってコードされるポリペプチド配列のエピトープを含むか、あるい
はそれらからなるポリペプチドを含む。本発明はさらに、本発明のポリペプチド
配列（例えば、配列番号１または配列番号３で開示された配列）のエピトープを
コードするポリヌクレオチド配列、本発明のエピトープをコードするポリヌクレ
オチド配列の相補鎖のポリヌクレオチド配列、および上記で定義されたストリン
ジェントなハイブリダイゼーション条件下またはより低いストリンジェンシーの
ハイブリダイゼーション条件下で相補鎖にハイブリダイズするポリヌクレオチド
配列を含む。
ペプチドのエピトープ、またはＡＴＣＣ受託番号２０９５８１または２０９５８
２またはＰＴＡ１４７８に含まれるポリヌクレオチド配列によって、もしくは配
列番号１および／または配列番号３の配列の相補物にハイブリダイズするポリヌ
クレオチドによってコードされるポリペプチド配列のエピトープ、または上記で
規定されたようなストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下もしくはよ
り低いストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件下でＡＴＣＣ寄託番号
２０９５８１または２０９５８２またはＰＴＡ１４７８に含まれるポリヌクレオ
チド配列によってコードされるポリペプチド配列のエピトープを含むか、あるい
はそれらからなるポリペプチドを含む。本発明はさらに、本発明のポリペプチド
配列（例えば、配列番号１または配列番号３で開示された配列）のエピトープを
コードするポリヌクレオチド配列、本発明のエピトープをコードするポリヌクレ
オチド配列の相補鎖のポリヌクレオチド配列、および上記で定義されたストリン
ジェントなハイブリダイゼーション条件下またはより低いストリンジェンシーの
ハイブリダイゼーション条件下で相補鎖にハイブリダイズするポリヌクレオチド
配列を含む。
【０１８７】
用語「エピトープ」とは、本明細書中で使用される場合、動物において、好ま
しくは哺乳動物において、そして最も好ましくはヒトにおいて抗原性活性または
免疫原性活性を有するポリペプチドの部分をいう。好ましい実施形態において、
本発明は、エピトープを含むポリペプチド、およびこのポリペプチドをコードす
るポリヌクレオチドを含む。「免疫原性エピトープ」とは、本明細書中で使用さ
れる場合、当該分野で公知の任意の方法によって決定されるような（例えば、下
記に記載される抗体を産生するための方法による）、動物における抗体応答を誘
発するタンパク質の一部として定義される（例えば、Ｇｅｙｓｅｎら、Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：３９９８−４００２（１９８３
）を参照のこと）。用語「抗原性エピトープ」とは、本明細書中で使用される場
合、当該分野で周知の任意の方法（例えば、本明細書中に記載される免疫アッセ
イによる）によって決定されるような、抗体がその抗原に免疫特異的に結合し得
るタンパク質の一部として定義される。免疫特異的結合は、非特異的結合は除外
するが、他の抗原との交差反応を除外する必要はない。抗原性エピトープは、免
疫原性である必要はない。
しくは哺乳動物において、そして最も好ましくはヒトにおいて抗原性活性または
免疫原性活性を有するポリペプチドの部分をいう。好ましい実施形態において、
本発明は、エピトープを含むポリペプチド、およびこのポリペプチドをコードす
るポリヌクレオチドを含む。「免疫原性エピトープ」とは、本明細書中で使用さ
れる場合、当該分野で公知の任意の方法によって決定されるような（例えば、下
記に記載される抗体を産生するための方法による）、動物における抗体応答を誘
発するタンパク質の一部として定義される（例えば、Ｇｅｙｓｅｎら、Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：３９９８−４００２（１９８３
）を参照のこと）。用語「抗原性エピトープ」とは、本明細書中で使用される場
合、当該分野で周知の任意の方法（例えば、本明細書中に記載される免疫アッセ
イによる）によって決定されるような、抗体がその抗原に免疫特異的に結合し得
るタンパク質の一部として定義される。免疫特異的結合は、非特異的結合は除外
するが、他の抗原との交差反応を除外する必要はない。抗原性エピトープは、免
疫原性である必要はない。
【０１８８】
エピトープとして機能するフラグメントは、任意の従来の方法によって産生さ
れ得る。（例えば、Ｈｏｕｇｈｔｅｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ
．ＵＳＡ ８２：５１３１−５１３５（１９８５）を参照のこと。これはさらに
、米国特許第４，６３１，２１１号に記載される）。
れ得る。（例えば、Ｈｏｕｇｈｔｅｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ
．ＵＳＡ ８２：５１３１−５１３５（１９８５）を参照のこと。これはさらに
、米国特許第４，６３１，２１１号に記載される）。
【０１８９】
本発明においては、抗原性エピトープは、好ましくは、少なくとも４、少なく
とも５、少なくとも６、少なくとも７アミノ酸配列を含み、より好ましくは、少
なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２
、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも２０、少なく
とも２５、少なくとも３０、少なくとも４０、少なくとも５０，そして最も好ま
しくは約１５アミノ酸と約３０アミノ酸との間の配列を含む。免疫原性エピトー
プまたは抗原性エピトープを含有する好ましいポリペプチドは、少なくとも１０
、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０
、７５、８０、８５、９０、９５または１００アミノ酸残基の長さである。さら
に好ましいＭＥＴＨ１の抗原性エピトープは、以下の残基のアミノ酸配列を含む
か、あるいは以下の残基のアミノ酸配列からなる：配列番号２のＭ−１〜Ｐ−１
５；Ｇ−２〜Ｖ−１６；Ｎ−３〜Ｐ−１７；Ａ−４〜Ｔ−１８；Ｅ−５〜Ｌ−１
９；Ｒ−６〜Ｌ−２０；Ａ−７〜Ｌ−２１；Ｐ−８〜Ｌ−２２；Ｇ−９〜Ａ−２
３；Ｓ−１０〜Ａ−２４；Ｒ−１１〜Ａ−２５；Ｓ−１２〜Ｌ−２６；Ｆ−１３
〜Ｌ−２７；Ｇ−１４〜Ａ−２８；Ｐ−１５〜Ｖ−２９；Ｖ−１６〜Ｓ−３０；
Ｐ−１７〜Ｄ−３１；Ｔ−１８〜Ａ−３２；Ｌ−１９〜Ｌ−３３；Ｌ−２０〜Ｇ
−３４；Ｌ−２１〜Ｒ−３５；Ｌ−２２〜Ｐ−３６；Ａ−２３〜Ｓ−３７；Ａ−
２４〜Ｅ−３８；Ａ−２５〜Ｅ−３９；Ｌ−２６〜Ｄ−４０；Ｌ−２７〜Ｅ−４
１；Ａ−２８〜Ｅ−４２；Ｖ−２９〜Ｌ−４３；Ｓ−３０〜Ｖ−４４；Ｄ−３１
〜Ｖ−４５；Ａ−３２〜Ｐ−４６；Ｌ−３３〜Ｅ−４７；Ｇ−３４〜Ｌ−４８；
Ｒ−３５〜Ｅ−４９；Ｐ−３６〜Ｒ−５０；Ｓ−３７〜Ａ−５１；Ｅ−３８〜Ｐ
−５２；Ｅ−３９〜Ｇ−５３；Ｄ−４０〜Ｈ−５４；Ｅ−４１〜Ｇ−５５；Ｅ−
４２〜Ｔ−５６；Ｌ−４３〜Ｔ−５７；Ｖ−４４〜Ｒ−５８；Ｖ−４５〜Ｌ−５
９；Ｐ−４６〜Ｒ−６０；Ｅ−４７〜Ｌ−６１；Ｌ−４８〜Ｈ−６２；Ｅ−４９
〜Ａ−６３；Ｒ−５０〜Ｆ−６４；Ａ−５１〜Ｄ−６５；Ｐ−５２〜Ｑ−６６；
Ｇ−５３〜Ｑ−６７；Ｈ−５４〜Ｌ−６８；Ｇ−５５〜Ｄ−６９；Ｔ−５６〜Ｌ
−７０；Ｔ−５７〜Ｅ−７１；Ｒ−５８〜Ｌ−７２；Ｌ−５９〜Ｒ−７３；Ｒ−
６０〜Ｐ−７４；Ｌ−６１〜Ｄ−７５；Ｈ−６２〜Ｓ−７６；Ａ−６３〜Ｓ−７
７；Ｆ−６４〜Ｆ−７８；Ｄ−６５〜Ｌ−７９；Ｑ−６６〜Ａ−８０；Ｑ−６７
〜Ｐ−８１；Ｌ−６８〜Ｇ−８２；Ｄ−６９〜Ｆ−８３；Ｌ−７０〜Ｔ−８４；
Ｅ−７１〜Ｌ−８５；Ｌ−７２〜Ｑ−８６；Ｒ−７３〜Ｎ−８７；Ｐ−７４〜Ｖ
−８８；Ｄ−７５〜Ｇ−８９；Ｓ−７６〜Ｒ−９０；Ｓ−７７〜Ｋ−９１；Ｆ−
７８〜Ｓ−９２；Ｌ−７９〜Ｇ−９３；Ａ−８０〜Ｓ−９４；Ｐ−８１〜Ｅ−９
５；Ｇ−８２〜Ｔ−９６；Ｆ−８３〜Ｐ−９７；Ｔ−８４〜Ｌ−９８；Ｌ−８５
〜Ｐ−９９；Ｑ−８６〜Ｅ−１００；Ｎ−８７〜Ｔ−１０１；Ｖ−８８〜Ｄ−１
０２；Ｇ−８９〜Ｌ−１０３；Ｒ−９０〜Ａ−１０４；Ｋ−９１〜Ｈ−１０５；
Ｓ−９２〜Ｃ−１０６；Ｇ−９３〜Ｆ−１０７；Ｓ−９４〜Ｙ−１０８；Ｅ−９
５〜Ｓ−１０９；Ｔ−９６〜Ｇ−１１０；Ｐ−９７〜Ｔ−１１１；Ｌ−９８〜Ｖ
−１１２；Ｐ−９９〜Ｎ−１１３；Ｅ−１００〜Ｇ−１１４；Ｔ−１０１〜Ｄ−
１１５；Ｄ−１０２〜Ｐ−１１６；Ｌ−１０３〜Ｓ−１１７；Ａ−１０４〜Ｓ−
１１８；Ｈ−１０５〜Ａ−１１９；Ｃ−１０６〜Ａ−１２０；Ｆ−１０７〜Ａ−
１２１；Ｙ−１０８〜Ｌ−１２２；Ｓ−１０９〜Ｓ−１２３；Ｇ−１１０〜Ｌ−
１２４；Ｔ−１１１〜Ｃ−１２５；Ｖ−１１２〜Ｅ−１２６；Ｎ−１１３〜Ｇ−
１２７；Ｇ−１１４〜Ｖ−１２８；Ｄ−１１５〜Ｒ−１２９；Ｐ−１１６〜Ｇ−
１３０；Ｓ−１１７〜Ａ−１３１；Ｓ−１１８〜Ｆ−１３２；Ａ−１１９〜Ｙ−
１３３；Ａ−１２０〜Ｌ−１３４；Ａ−１２１〜Ｌ−１３５；Ｌ−１２２〜Ｇ−
１３６；Ｓ−１２３〜Ｅ−１３７；Ｌ−１２４〜Ａ−１３８；Ｃ−１２５〜Ｙ−
１３９；Ｅ−１２６〜Ｆ−１４０；Ｇ−１２７〜Ｉ−１４１；Ｖ−１２８〜Ｑ−
１４２；Ｒ−１２９〜Ｐ−１４３；Ｇ−１３０〜Ｌ−１４４；Ａ−１３１〜Ｐ−
１４５；Ｆ−１３２〜Ａ−１４６；Ｙ−１３３〜Ａ−１４７；Ｌ−１３４〜Ｓ−
１４８；Ｌ−１３５〜Ｅ−１４９；Ｇ−１３６〜Ｒ−１５０；Ｅ−１３７〜Ｌ−
１５１；Ａ−１３８〜Ａ−１５２；Ｙ−１３９〜Ｔ−１５３；Ｆ−１４０〜Ａ−
１５４；Ｉ−１４１〜Ａ−１５５；Ｑ−１４２〜Ｐ−１５６；Ｐ−１４３〜Ｇ−
１５７；Ｌ−１４４〜Ｅ−１５８；Ｐ−１４５〜Ｋ−１５９；Ａ−１４６〜Ｐ−
１６０；Ａ−１４７〜Ｐ−１６１；Ｓ−１４８〜Ａ−１６２；Ｅ−１４９〜Ｐ−
１６３；Ｒ−１５０〜Ｌ−１６４；Ｌ−１５１〜Ｑ−１６５；Ａ−１５２〜Ｆ−
１６６；Ｔ−１５３〜Ｈ−１６７；Ａ−１５４〜Ｌ−１６８；Ａ−１５５〜Ｌ−
１６９；Ｐ−１５６〜Ｒ−１７０；Ｇ−１５７〜Ｒ−１７１；Ｅ−１５８〜Ｎ−
１７２；Ｋ−１５９〜Ｒ−１７３；Ｐ−１６０〜Ｑ−１７４；Ｐ−１６１〜Ｇ−
１７５；Ａ−１６２〜Ｄ−１７６；Ｐ−１６３〜Ｖ−１７７；Ｌ−１６４〜Ｇ−
１７８；Ｑ−１６５〜Ｇ−１７９；Ｆ−１６６〜Ｔ−１８０；Ｈ−１６７〜Ｃ−
１８１；Ｌ−１６８〜Ｇ−１８２；Ｌ−１６９〜Ｖ−１８３；Ｒ−１７０〜Ｖ−
１８４；Ｒ−１７１〜Ｄ−１８５；Ｎ−１７２〜Ｄ−１８６；Ｒ−１７３〜Ｅ−
１８７；Ｑ−１７４〜Ｐ−１８８；Ｇ−１７５〜Ｒ−１８９；Ｄ−１７６〜Ｐ−
１９０；Ｖ−１７７〜Ｔ−１９１；Ｇ−１７８〜Ｇ−１９２；Ｇ−１７９〜Ｋ−
１９３；Ｔ−１８０〜Ａ−１９４；Ｃ−１８１〜Ｅ−１９５；Ｇ−１８２〜Ｔ−
１９６；Ｖ−１８３〜Ｅ−１９７；Ｖ−１８４〜Ｄ−１９８；Ｄ−１８５〜Ｅ−
１９９；Ｄ−１８６〜Ｄ−２００；Ｅ−１８７〜Ｅ−２０１；Ｐ−１８８〜Ｇ−
２０２；Ｒ−１８９〜Ｔ−２０３；Ｐ−１９０〜Ｅ−２０４；Ｔ−１９１〜Ｇ−
２０５；Ｇ−１９２〜Ｅ−２０６；Ｋ−１９３〜Ｄ−２０７；Ａ−１９４〜Ｅ−
２０８；Ｅ−１９５〜Ｇ−２０９；Ｔ−１９６〜Ｐ−２１０；Ｅ−１９７〜Ｑ−
２１１；Ｄ−１９８〜Ｗ−２１２；Ｅ−１９９〜Ｓ−２１３；Ｄ−２００〜Ｐ−
２１４；Ｅ−２０１〜Ｑ−２１５；Ｇ−２０２〜Ｄ−２１６；Ｔ−２０３〜Ｐ−
２１７；Ｅ−２０４〜Ａ−２１８；Ｇ−２０５〜Ｌ−２１９；Ｅ−２０６〜Ｑ−
２２０；Ｄ−２０７〜Ｇ−２２１；Ｅ−２０８〜Ｖ−２２２；Ｇ−２０９〜Ｇ−
２２３；Ｐ−２１０〜Ｑ−２２４；Ｑ−２１１〜Ｐ−２２５；Ｗ−２１２〜Ｔ−
２２６；Ｓ−２１３〜Ｇ−２２７；Ｐ−２１４〜Ｔ−２２８；Ｑ−２１５〜Ｇ−
２２９；Ｄ−２１６〜Ｓ−２３０；Ｐ−２１７〜Ｉ−２３１；Ａ−２１８〜Ｒ−
２３２；Ｌ−２１９〜Ｋ−２３３；Ｑ−２２０〜Ｋ−２３４；Ｇ−２２１〜Ｒ−
２３５；Ｖ−２２２〜Ｆ−２３６；Ｇ−２２３〜Ｖ−２３７；Ｑ−２２４〜Ｓ−
２３８；Ｐ−２２５〜Ｓ−２３９；Ｔ−２２６〜Ｈ−２４０；Ｇ−２２７〜Ｒ−
２４１；Ｔ−２２８〜Ｙ−２４２；Ｇ−２２９〜Ｖ−２４３；Ｓ−２３０〜Ｅ−
２４４；Ｉ−２３１〜Ｔ−２４５；Ｒ−２３２〜Ｍ−２４６；Ｋ−２３３〜Ｌ−
２４７；Ｋ−２３４〜Ｖ−２４８；Ｒ−２３５〜Ａ−２４９；Ｆ−２３６〜Ｄ−
２５０；Ｖ−２３７〜Ｑ−２５１；Ｓ−２３８〜Ｓ−２５２；Ｓ−２３９〜Ｍ−
２５３；Ｈ−２４０〜Ａ−２５４；Ｒ−２４１〜Ｅ−２５５；Ｙ−２４２〜Ｆ−
２５６；Ｖ−２４３〜Ｈ−２５７；Ｅ−２４４〜Ｇ−２５８；Ｔ−２４５〜Ｓ−
２５９；Ｍ−２４６〜Ｇ−２６０；Ｌ−２４７〜Ｌ−２６１；Ｖ−２４８〜Ｋ−
２６２；Ａ−２４９〜Ｈ−２６３；Ｄ−２５０〜Ｙ−２６４；Ｑ−２５１〜Ｌ−
２６５；Ｓ−２５２〜Ｌ−２６６；Ｍ−２５３〜Ｔ−２６７；Ａ−２５４〜Ｌ−
２６８；Ｅ−２５５〜Ｆ−２６９；Ｆ−２５６〜Ｓ−２７０；Ｈ−２５７〜Ｖ−
２７１；Ｇ−２５８〜Ａ−２７２；Ｓ−２５９〜Ａ−２７３；Ｇ−２６０〜Ｒ−
２７４；Ｌ−２６１〜Ｌ−２７５；Ｋ−２６２〜Ｙ−２７６；Ｈ−２６３〜Ｋ−
２７７；Ｙ−２６４〜Ｈ−２７８；Ｌ−２６５〜Ｐ−２７９；Ｌ−２６６〜Ｓ−
２８０；Ｔ−２６７〜Ｉ−２８１；Ｌ−２６８〜Ｒ−２８２；Ｆ−２６９〜Ｎ−
２８３；Ｓ−２７０〜Ｓ−２８４；Ｖ−２７１〜Ｖ−２８５；Ａ−２７２〜Ｓ−
２８６；Ａ−２７３〜Ｌ−２８７；Ｒ−２７４〜Ｖ−２８８；Ｌ−２７５〜Ｖ−
２８９；Ｙ−２７６〜Ｖ−２９０；Ｋ−２７７〜Ｋ−２９１；Ｈ−２７８〜Ｉ−
２９２；Ｐ−２７９〜Ｌ−２９３；Ｓ−２８０〜Ｖ−２９４；Ｉ−２８１〜Ｉ−
２９５；Ｒ−２８２〜Ｈ−２９６；Ｎ−２８３〜Ｄ−２９７；Ｓ−２８４〜Ｅ−
２９８；Ｖ−２８５〜Ｑ−２９９；Ｓ−２８６〜Ｋ−３００；Ｌ−２８７〜Ｇ−
３０１；Ｖ−２８８〜Ｐ−３０２；Ｖ−２８９〜Ｅ−３０３；Ｖ−２９０〜Ｖ−
３０４；Ｋ−２９１〜Ｔ−３０５；Ｉ−２９２〜Ｓ−３０６；Ｌ−２９３〜Ｎ−
３０７；Ｖ−２９４〜Ａ−３０８；Ｉ−２９５〜Ａ−３０９；Ｈ−２９６〜Ｌ−
３１０；Ｄ−２９７〜Ｔ−３１１；Ｅ−２９８〜Ｌ−３１２；Ｑ−２９９〜Ｒ−
３１３；Ｋ−３００〜Ｎ−３１４；Ｇ−３０１〜Ｆ−３１５；Ｐ−３０２〜Ｃ−
３１６；Ｅ−３０３〜Ｎ−３１７；Ｖ−３０４〜Ｗ−３１８；Ｔ−３０５〜Ｑ−
３１９；Ｓ−３０６〜Ｋ−３２０；Ｎ−３０７〜Ｑ−３２１；Ａ−３０８〜Ｈ−
３２２；Ａ−３０９〜Ｎ−３２３；Ｌ−３１０〜Ｐ−３２４；Ｔ−３１１〜Ｐ−
３２５；Ｌ−３１２〜Ｓ−３２６；Ｒ−３１３〜Ｄ−３２７；Ｎ−３１４〜Ｒ−
３２８；Ｆ−３１５〜Ｄ−３２９；Ｃ−３１６〜Ａ−３３０；Ｎ−３１７〜Ｅ−
３３１；Ｗ−３１８〜Ｈ−３３２；Ｑ−３１９〜Ｙ−３３３；Ｋ−３２０〜Ｄ−
３３４；Ｑ−３２１〜Ｔ−３３５；Ｈ−３２２〜Ａ−３３６；Ｎ−３２３〜Ｉ−
３３７；Ｐ−３２４〜Ｌ−３３８；Ｐ−３２５〜Ｆ−３３９；Ｓ−３２６〜Ｔ−
３４０；Ｄ−３２７〜Ｒ−３４１；Ｒ−３２８〜Ｑ−３４２；Ｄ−３２９〜Ｄ−
３４３；Ａ−３３０〜Ｌ−３４４；Ｅ−３３１〜Ｃ−３４５；Ｈ−３３２〜Ｇ−
３４６；Ｙ−３３３〜Ｓ−３４７；Ｄ−３３４〜Ｑ−３４８；Ｔ−３３５〜Ｔ−
３４９；Ａ−３３６〜Ｃ−３５０；Ｉ−３３７〜Ｄ−３５１；Ｌ−３３８〜Ｔ−
３５２；Ｆ−３３９〜Ｌ−３５３；Ｔ−３４０〜Ｇ−３５４；Ｒ−３４１〜Ｍ−
３５５；Ｑ−３４２〜Ａ−３５６；Ｄ−３４３〜Ｄ−３５７；Ｌ−３４４〜Ｖ−
３５８；Ｃ−３４５〜Ｇ−３５９；Ｇ−３４６〜Ｔ−３６０；Ｓ−３４７〜Ｖ−
３６１；Ｑ−３４８〜Ｃ−３６２；Ｔ−３４９〜Ｄ−３６３；Ｃ−３５０〜Ｐ−
３６４；Ｄ−３５１〜Ｓ−３６５；Ｔ−３５２〜Ｒ−３６６；Ｌ−３５３〜Ｓ−
３６７；Ｇ−３５４〜Ｃ−３６８；Ｍ−３５５〜Ｓ−３６９；Ａ−３５６〜Ｖ−
３７０；Ｄ−３５７〜Ｉ−３７１；Ｖ−３５８〜Ｅ−３７２；Ｇ−３５９〜Ｄ−
３７３；Ｔ−３６０〜Ｄ−３７４；Ｖ−３６１〜Ｇ−３７５；Ｃ−３６２〜Ｌ−
３７６；Ｄ−３６３〜Ｑ−３７７；Ｐ−３６４〜Ａ−３７８；Ｓ−３６５〜Ａ−
３７９；Ｒ−３６６〜Ｆ−３８０；Ｓ−３６７〜Ｔ−３８１；Ｃ−３６８〜Ｔ−
３８２；Ｓ−３６９〜Ａ−３８３；Ｖ−３７０〜Ｈ−３８４；Ｉ−３７１〜Ｅ−
３８５；Ｅ−３７２〜Ｌ−３８６；Ｄ−３７３〜Ｇ−３８７；Ｄ−３７４〜Ｈ−
３８８；Ｇ−３７５〜Ｖ−３８９；Ｌ−３７６〜Ｆ−３９０；Ｑ−３７７〜Ｎ−
３９１；Ａ−３７８〜Ｍ−３９２；Ａ−３７９〜Ｐ−３９３；Ｆ−３８０〜Ｈ−
３９４；Ｔ−３８１〜Ｄ−３９５；Ｔ−３８２〜Ｄ−３９６；Ａ−３８３〜Ａ−
３９７；Ｈ−３８４〜Ｋ−３９８；Ｅ−３８５〜Ｑ−３９９；Ｌ−３８６〜Ｃ−
４００；Ｇ−３８７〜Ａ−４０１；Ｈ−３８８〜Ｓ−４０２；Ｖ−３８９〜Ｌ−
４０３；Ｆ−３９０〜Ｎ−４０４；Ｎ−３９１〜Ｇ−４０５；Ｍ−３９２〜Ｖ−
４０６；Ｐ−３９３〜Ｎ−４０７；Ｈ−３９４〜Ｑ−４０８；Ｄ−３９５〜Ｄ−
４０９；Ｄ−３９６〜Ｓ−４１０；Ａ−３９７〜Ｈ−４１１；Ｋ−３９８〜Ｍ−
４１２；Ｑ−３９９〜Ｍ−４１３；Ｃ−４００〜Ａ−４１４；Ａ−４０１〜Ｓ−
４１５；Ｓ−４０２〜Ｍ−４１６；Ｌ−４０３〜Ｌ−４１７；Ｎ−４０４〜Ｓ−
４１８；Ｇ−４０５〜Ｎ−４１９；Ｖ−４０６〜Ｌ−４２０；Ｎ−４０７〜Ｄ−
４２１；Ｑ−４０８〜Ｈ−４２２；Ｄ−４０９〜Ｓ−４２３；Ｓ−４１０〜Ｑ−
４２４；Ｈ−４１１〜Ｐ−４２５；Ｍ−４１２〜Ｗ−４２６；Ｍ−４１３〜Ｓ−
４２７；Ａ−４１４〜Ｐ−４２８；Ｓ−４１５〜Ｃ−４２９；Ｍ−４１６〜Ｓ−
４３０；Ｌ−４１７〜Ａ−４３１；Ｓ−４１８〜Ｙ−４３２；Ｎ−４１９〜Ｍ−
４３３；Ｌ−４２０〜Ｉ−４３４；Ｄ−４２１〜Ｔ−４３５；Ｈ−４２２〜Ｓ−
４３６；Ｓ−４２３〜Ｆ−４３７；Ｑ−４２４〜Ｌ−４３８；Ｐ−４２５〜Ｄ−
４３９；Ｗ−４２６〜Ｎ−４４０；Ｓ−４２７〜Ｇ−４４１；Ｐ−４２８〜Ｈ−
４４２；Ｃ−４２９〜Ｇ−４４３；Ｓ−４３０〜Ｅ−４４４；Ａ−４３１〜Ｃ−
４４５；Ｙ−４３２〜Ｌ−４４６；Ｍ−４３３〜Ｍ−４４７；Ｉ−４３４〜Ｄ−
４４８；Ｔ−４３５〜Ｋ−４４９；Ｓ−４３６〜Ｐ−４５０；Ｆ−４３７〜Ｑ−
４５１；Ｌ−４３８〜Ｎ−４５２；Ｄ−４３９〜Ｐ−４５３；Ｎ−４４０〜Ｉ−
４５４；Ｇ−４４１〜Ｑ−４５５；Ｈ−４４２〜Ｌ−４５６；Ｇ−４４３〜Ｐ−
４５７；Ｅ−４４４〜Ｇ−４５８；Ｃ−４４５〜Ｄ−４５９；Ｌ−４４６〜Ｌ−
４６０；Ｍ−４４７〜Ｐ−４６１；Ｄ−４４８〜Ｇ−４６２；Ｋ−４４９〜Ｔ−
４６３；Ｐ−４５０〜Ｓ−４６４；Ｑ−４５１〜Ｙ−４６５；Ｎ−４５２〜Ｄ−
４６６；Ｐ−４５３〜Ａ−４６７；Ｉ−４５４〜Ｎ−４６８；Ｑ−４５５〜Ｒ−
４６９；Ｌ−４５６〜Ｑ−４７０；Ｐ−４５７〜Ｃ−４７１；Ｇ−４５８〜Ｑ−
４７２；Ｄ−４５９〜Ｆ−４７３；Ｌ−４６０〜Ｔ−４７４；Ｐ−４６１〜Ｆ−
４７５；Ｇ−４６２〜Ｇ−４７６；Ｔ−４６３〜Ｅ−４７７；Ｓ−４６４〜Ｄ−
４７８；Ｙ−４６５〜Ｓ−４７９；Ｄ−４６６〜Ｋ−４８０；Ａ−４６７〜Ｈ−
４８１；Ｎ−４６８〜Ｃ−４８２；Ｒ−４６９〜Ｐ−４８３；Ｑ−４７０〜Ｄ−
４８４；Ｃ−４７１〜Ａ−４８５；Ｑ−４７２〜Ａ−４８６；Ｆ−４７３〜Ｓ−
４８７；Ｔ−４７４〜Ｔ−４８８；Ｆ−４７５〜Ｃ−４８９；Ｇ−４７６〜Ｓ−
４９０；Ｅ−４７７〜Ｔ−４９１；Ｄ−４７８〜Ｌ−４９２；Ｓ−４７９〜Ｗ−
４９３；Ｋ−４８０〜Ｃ−４９４；Ｈ−４８１〜Ｔ−４９５；Ｃ−４８２〜Ｇ−
４９６；Ｐ−４８３〜Ｔ−４９７；Ｄ−４８４〜Ｓ−４９８；Ａ−４８５〜Ｇ−
４９９；Ａ−４８６〜Ｇ−５００；Ｓ−４８７〜Ｖ−５０１；Ｔ−４８８〜Ｌ−
５０２；Ｃ−４８９〜Ｖ−５０３；Ｓ−４９０〜Ｃ−５０４；Ｔ−４９１〜Ｑ−
５０５；Ｌ−４９２〜Ｔ−５０６；Ｗ−４９３〜Ｋ−５０７；Ｃ−４９４〜Ｈ−
５０８；Ｔ−４９５〜Ｆ−５０９；Ｇ−４９６〜Ｐ−５１０；Ｔ−４９７〜Ｗ−
５１１；Ｓ−４９８〜Ａ−５１２；Ｇ−４９９〜Ｄ−５１３；Ｇ−５００〜Ｇ−
５１４；Ｖ−５０１〜Ｔ−５１５；Ｌ−５０２〜Ｓ−５１６；Ｖ−５０３〜Ｃ−
５１７；Ｃ−５０４〜Ｇ−５１８；Ｑ−５０５〜Ｅ−５１９；Ｔ−５０６〜Ｇ−
５２０；Ｋ−５０７〜Ｋ−５２１；Ｈ−５０８〜Ｗ−５２２；Ｆ−５０９〜Ｃ−
５２３；Ｐ−５１０〜Ｉ−５２４；Ｗ−５１１〜Ｎ−５２５；Ａ−５１２〜Ｇ−
５２６；Ｄ−５１３〜Ｋ−５２７；Ｇ−５１４〜Ｃ−５２８；Ｔ−５１５〜Ｖ−
５２９；Ｓ−５１６〜Ｎ−５３０；Ｃ−５１７〜Ｋ−５３１；Ｇ−５１８〜Ｔ−
５３２；Ｅ−５１９〜Ｄ−５３３；Ｇ−５２０〜Ｒ−５３４；Ｋ−５２１〜Ｋ−
５３５；Ｗ−５２２〜Ｈ−５３６；Ｃ−５２３〜Ｆ−５３７；Ｉ−５２４〜Ｄ−
５３８；Ｎ−５２５〜Ｔ−５３９；Ｇ−５２６〜Ｐ−５４０；Ｋ−５２７〜Ｆ−
５４１；Ｃ−５２８〜Ｈ−５４２；Ｖ−５２９〜Ｇ−５４３；Ｎ−５３０〜Ｓ−
５４４；Ｋ−５３１〜Ｗ−５４５；Ｔ−５３２〜Ｇ−５４６；Ｄ−５３３〜Ｍ−
５４７；Ｒ−５３４〜Ｗ−５４８；Ｋ−５３５〜Ｇ−５４９；Ｈ−５３６〜Ｐ−
５５０；Ｆ−５３７〜Ｗ−５５１；Ｄ−５３８〜Ｇ−５５２；Ｔ−５３９〜Ｄ−
５５３；Ｐ−５４０〜Ｃ−５５４；Ｆ−５４１〜Ｓ−５５５；Ｈ−５４２〜Ｒ−
５５６；Ｇ−５４３〜Ｔ−５５７；Ｓ−５４４〜Ｃ−５５８；Ｗ−５４５〜Ｇ−
５５９；Ｇ−５４６〜Ｇ−５６０；Ｍ−５４７〜Ｇ−５６１；Ｗ−５４８〜Ｖ−
５６２；Ｇ−５４９〜Ｑ−５６３；Ｐ−５５０〜Ｙ−５６４；Ｗ−５５１〜Ｔ−
５６５；Ｇ−５５２〜Ｍ−５６６；Ｄ−５５３〜Ｒ−５６７；Ｃ−５５４〜Ｅ−
５６８；Ｓ−５５５〜Ｃ−５６９；Ｒ−５５６〜Ｄ−５７０；Ｔ−５５７〜Ｎ−
５７１；Ｃ−５５８〜Ｐ−５７２；Ｇ−５５９〜Ｖ−５７３；Ｇ−５６０〜Ｐ−
５７４；Ｇ−５６１〜Ｋ−５７５；Ｖ−５６２〜Ｎ−５７６；Ｑ−５６３〜Ｇ−
５７７；Ｙ−５６４〜Ｇ−５７８；Ｔ−５６５〜Ｋ−５７９；Ｍ−５６６〜Ｙ−
５８０；Ｒ−５６７〜Ｃ−５８１；Ｅ−５６８〜Ｅ−５８２；Ｃ−５６９〜Ｇ−
５８３；Ｄ−５７０〜Ｋ−５８４；Ｎ−５７１〜Ｒ−５８５；Ｐ−５７２〜Ｖ−
５８６；Ｖ−５７３〜Ｒ−５８７；Ｐ−５７４〜Ｙ−５８８；Ｋ−５７５〜Ｒ−
５８９；Ｎ−５７６〜Ｓ−５９０；Ｇ−５７７〜Ｃ−５９１；Ｇ−５７８〜Ｎ−
５９２；Ｋ−５７９〜Ｌ−５９３；Ｙ−５８０〜Ｅ−５９４；Ｃ−５８１〜Ｄ−
５９５；Ｅ−５８２〜Ｃ−５９６；Ｇ−５８３〜Ｐ−５９７；Ｋ−５８４〜Ｄ−
５９８；Ｒ−５８５〜Ｎ−５９９；Ｖ−５８６〜Ｎ−６００；Ｒ−５８７〜Ｇ−
６０１；Ｙ−５８８〜Ｋ−６０２；Ｒ−５８９〜Ｔ−６０３；Ｓ−５９０〜Ｆ−
６０４；Ｃ−５９１〜Ｒ−６０５；Ｎ−５９２〜Ｅ−６０６；Ｌ−５９３〜Ｅ−
６０７；Ｅ−５９４〜Ｑ−６０８；Ｄ−５９５〜Ｃ−６０９；Ｃ−５９６〜Ｅ−
６１０；Ｐ−５９７〜Ａ−６１１；Ｄ−５９８〜Ｈ−６１２；Ｎ−５９９〜Ｎ−
６１３；Ｎ−６００〜Ｅ−６１４；Ｇ−６０１〜Ｆ−６１５；Ｋ−６０２〜Ｓ−
６１６；Ｔ−６０３〜Ｋ−６１７；Ｆ−６０４〜Ａ−６１８；Ｒ−６０５〜Ｓ−
６１９；Ｅ−６０６〜Ｆ−６２０；Ｅ−６０７〜Ｇ−６２１；Ｑ−６０８〜Ｓ−
６２２；Ｃ−６０９〜Ｇ−６２３；Ｅ−６１０〜Ｐ−６２４；Ａ−６１１〜Ａ−
６２５；Ｈ−６１２〜Ｖ−６２６；Ｎ−６１３〜Ｅ−６２７；Ｅ−６１４〜Ｗ−
６２８；Ｆ−６１５〜Ｉ−６２９；Ｓ−６１６〜Ｐ−６３０；Ｋ−６１７〜Ｋ−
６３１；Ａ−６１８〜Ｙ−６３２；Ｓ−６１９〜Ａ−６３３；Ｆ−６２０〜Ｇ−
６３４；Ｇ−６２１〜Ｖ−６３５；Ｓ−６２２〜Ｓ−６３６；Ｇ−６２３〜Ｐ−
６３７；Ｐ−６２４〜Ｋ−６３８；Ａ−６２５〜Ｄ−６３９；Ｖ−６２６〜Ｒ−
６４０；Ｅ−６２７〜Ｃ−６４１；Ｗ−６２８〜Ｋ−６４２；Ｉ−６２９〜Ｌ−
６４３；Ｐ−６３０〜Ｉ−６４４；Ｋ−６３１〜Ｃ−６４５；Ｙ−６３２〜Ｑ−
６４６；Ａ−６３３〜Ａ−６４７；Ｇ−６３４〜Ｋ−６４８；Ｖ−６３５〜Ｇ−
６４９；Ｓ−６３６〜Ｉ−６５０；Ｐ−６３７〜Ｇ−６５１；Ｋ−６３８〜Ｙ−
６５２；Ｄ−６３９〜Ｆ−６５３；Ｒ−６４０〜Ｆ−６５４；Ｃ−６４１〜Ｖ−
６５５；Ｋ−６４２〜Ｌ−６５６；Ｌ−６４３〜Ｑ−６５７；Ｉ−６４４〜Ｐ−
６５８；Ｃ−６４５〜Ｋ−６５９；Ｑ−６４６〜Ｖ−６６０；Ａ−６４７〜Ｖ−
６６１；Ｋ−６４８〜Ｄ−６６２；Ｇ−６４９〜Ｇ−６６３；Ｉ−６５０〜Ｔ−
６６４；Ｇ−６５１〜Ｐ−６６５；Ｙ−６５２〜Ｃ−６６６；Ｆ−６５３〜Ｓ−
６６７；Ｆ−６５４〜Ｐ−６６８；Ｖ−６５５〜Ｄ−６６９；Ｌ−６５６〜Ｓ−
６７０；Ｑ−６５７〜Ｔ−６７１；Ｐ−６５８〜Ｓ−６７２；Ｋ−６５９〜Ｖ−
６７３；Ｖ−６６０〜Ｃ−６７４；Ｖ−６６１〜Ｖ−６７５；Ｄ−６６２〜Ｑ−
６７６；Ｇ−６６３〜Ｇ−６７７；Ｔ−６６４〜Ｑ−６７８；Ｐ−６６５〜Ｃ−
６７９；Ｃ−６６６〜Ｖ−６８０；Ｓ−６６７〜Ｋ−６８１；Ｐ−６６８〜Ａ−
６８２；Ｄ−６６９〜Ｇ−６８３；Ｓ−６７０〜Ｃ−６８４；Ｔ−６７１〜Ｄ−
６８５；Ｓ−６７２〜Ｒ−６８６；Ｖ−６７３〜Ｉ−６８７；Ｃ−６７４〜Ｉ−
６８８；Ｖ−６７５〜Ｄ−６８９；Ｑ−６７６〜Ｓ−６９０；Ｇ−６７７〜Ｋ−
６９１；Ｑ−６７８〜Ｋ−６９２；Ｃ−６７９〜Ｋ−６９３；Ｖ−６８０〜Ｆ−
６９４；Ｋ−６８１〜Ｄ−６９５；Ａ−６８２〜Ｋ−６９６；Ｇ−６８３〜Ｃ−
６９７；Ｃ−６８４〜Ｇ−６９８；Ｄ−６８５〜Ｖ−６９９；Ｒ−６８６〜Ｃ−
７００；Ｉ−６８７〜Ｇ−７０１；Ｉ−６８８〜Ｇ−７０２；Ｄ−６８９〜Ｎ−
７０３；Ｓ−６９０〜Ｇ−７０４；Ｋ−６９１〜Ｓ−７０５；Ｋ−６９２〜Ｔ−
７０６；Ｋ−６９３〜Ｃ−７０７；Ｆ−６９４〜Ｋ−７０８；Ｄ−６９５〜Ｋ−
７０９；Ｋ−６９６〜Ｉ−７１０；Ｃ−６９７〜Ｓ−７１１；Ｇ−６９８〜Ｇ−
７１２；Ｖ−６９９〜Ｓ−７１３；Ｃ−７００〜Ｖ−７１４；Ｇ−７０１〜Ｔ−
７１５；Ｇ−７０２〜Ｓ−７１６；Ｎ−７０３〜Ａ−７１７；Ｇ−７０４〜Ｋ−
７１８；Ｓ−７０５〜Ｐ−７１９；Ｔ−７０６〜Ｇ−７２０；Ｃ−７０７〜Ｙ−
７２１；Ｋ−７０８〜Ｈ−７２２；Ｋ−７０９〜Ｄ−７２３；Ｉ−７１０〜Ｉ−
７２４；Ｓ−７１１〜Ｉ−７２５；Ｇ−７１２〜Ｔ−７２６；Ｓ−７１３〜Ｉ−
７２７；Ｖ−７１４〜Ｐ−７２８；Ｔ−７１５〜Ｔ−７２９；Ｓ−７１６〜Ｇ−
７３０；Ａ−７１７〜Ａ−７３１；Ｋ−７１８〜Ｔ−７３２：Ｐ−７１９〜Ｎ−
７３３；Ｇ−７２０〜Ｉ−７３４；Ｙ−７２１〜Ｅ−７３５；Ｈ−７２２〜Ｖ−
７４６；Ｄ−７２３〜Ｋ−７３７；Ｉ−７２４〜Ｑ−７３８；Ｉ−７２５〜Ｒ−
７３９；Ｔ−７２６〜Ｎ−７４０；Ｉ−７２７〜Ｑ−７４１；Ｐ−７２８〜Ｒ−
７４２；Ｔ−７２９〜Ｇ−７４３；Ｇ−７３０〜Ｓ−７４４；Ａ−７３１〜Ｒ−
７４５；Ｔ−７３２〜Ｎ−７４６；Ｎ−７３３〜Ｎ−７４７；Ｉ−７３４〜Ｇ−
７４８；Ｅ−７３５〜Ｓ−７４９；Ｖ−７３６〜Ｆ−７５０；Ｋ−７３７〜Ｌ−
７５１；Ｑ−７３８〜Ａ−７５２；Ｒ−７３９〜Ｉ−７５３：Ｎ−７４０〜Ｋ−
７５４；Ｑ−７４１〜Ａ−７５５；Ｒ−７４２〜Ａ−７５６；Ｇ−７４３〜Ｄ−
７５７；Ｓ−７４４〜Ｇ−７５８；Ｒ−７４５〜Ｔ−７５９；Ｎ−７４６〜Ｙ−
７６０；Ｎ−７４７〜Ｉ−７６１；Ｇ−７４８〜Ｌ−７６２；Ｓ−７４９〜Ｎ−
７６３；Ｆ−７５０〜Ｇ−７６４；Ｌ−７５１〜Ｄ−７６５；Ａ−７５２〜Ｙ−
７６６；Ｉ−７５３〜Ｔ−７６７；Ｋ−７５４〜Ｌ−７６８；Ａ−７５５〜Ｓ−
７６９；Ａ−７５６〜Ｔ−７７０；Ｄ−７５７〜Ｌ−７７１；Ｇ−７５８〜Ｅ−
７７２；Ｔ−７５９〜Ｑ−７７３；Ｙ−７６０〜Ｄ−７７４；Ｉ−７６１〜Ｉ−
７７５；Ｌ−７６２〜Ｍ−７７６；Ｎ−７６３〜Ｙ−７７７；Ｇ−７６４〜Ｋ−
７７８；Ｄ−７６５〜Ｇ−７７９；Ｙ−７６６〜Ｖ−７８０；Ｔ−７６７〜Ｖ−
７８１；Ｌ−７６８〜Ｌ−７８２；Ｓ−７６９〜Ｒ−７８３；Ｔ−７７０〜Ｙ−
７８４；Ｌ−７７１〜Ｓ−７８５；Ｅ−７７２〜Ｇ−７８６；Ｑ−７７３〜Ｓ−
７８７；Ｄ−７７４〜Ｓ−７８８；Ｉ−７７５〜Ａ−７８９；Ｍ−７７６〜Ａ−
７９０；Ｙ−７７７〜Ｌ−７９１；Ｋ−７７８〜Ｅ−７９２；Ｇ−７７９〜Ｒ−
７９３；Ｖ−７８０〜Ｉ−７９４；Ｖ−７８１〜Ｒ−７９５；Ｌ−７８２〜Ｓ−
７９６；Ｒ−７８３〜Ｆ−７９７；Ｙ−７８４〜Ｓ−７９８；Ｓ−７８５〜Ｐ−
７９９；Ｇ−７８６〜Ｌ−８００；Ｓ−７８７〜Ｋ−８０１；Ｓ−７８８〜Ｅ−
８０２；Ａ−７８９〜Ｐ−８０３：Ａ−７９０〜Ｌ−８０４；Ｌ−７９１〜Ｔ−
８０５；Ｅ−７９２〜Ｉ−８０６；Ｒ−７９３〜Ｑ−８０７；Ｉ−７９４〜Ｖ−
８０８；Ｒ−７９５〜Ｌ−８０９；Ｓ−７９６〜Ｔ−８１０；Ｆ−７９７〜Ｖ−
８１１；Ｓ−７９８〜Ｇ−８１２；Ｐ−７９９〜Ｎ−８１３；Ｌ−８００〜Ａ−
８１４；Ｋ−８０１〜Ｌ−８１５；Ｅ−８０２〜Ｒ−８１６；Ｐ−８０３〜Ｐ−
８１７；Ｌ−８０４〜Ｋ−８１８；Ｔ−８０５〜Ｉ−８１９；Ｉ−８０６〜Ｋ−
８２０；Ｑ−８０７〜Ｙ−８２１；Ｖ−８０８〜Ｔ−８２２；Ｌ−８０９〜Ｙ−
８２３；Ｔ−８１０〜Ｆ−８２４；Ｖ−８１１〜Ｖ−８２５；Ｇ−８１２〜Ｋ−
８２６；Ｎ−８１３〜Ｋ−８２７；Ａ−８１４〜Ｋ−８２８；Ｌ−８１５〜Ｋ−
８２９；Ｒ−８１６〜Ｅ−８３０；Ｐ−８１７〜Ｓ−８３１；Ｋ−８１８〜Ｆ−
８３２；Ｉ−８１９〜Ｎ−８３３；Ｋ−８２０〜Ａ−８３４；Ｙ−８２１〜Ｉ−
８３５；Ｔ−８２２〜Ｐ−８３６；Ｙ−８２３〜Ｔ−８３７；Ｆ−８２４〜Ｆ−
８３８；Ｖ−８２５〜Ｓ−８３９；Ｋ−８２６〜Ａ−８４０；Ｋ−８２７〜Ｗ−
８４１；Ｋ−８２８〜Ｖ−８４２；Ｋ−８２９〜Ｉ−８４３；Ｅ−８３０〜Ｅ−
８４４；Ｓ−８３１〜Ｅ−８４５；Ｆ−８３２〜Ｗ−８４６；Ｎ−８３３〜Ｇ−
８４７；Ａ−８３４〜Ｅ−８４８；Ｉ−８３５〜Ｃ−８４９；Ｐ−８３６〜Ｓ−
８５０；Ｔ−８３７〜Ｋ−８５１；Ｆ−８３８〜Ｓ−８５２；Ｓ−８３９〜Ｃ−
８５３；Ａ−８４０〜Ｅ−８５４；Ｗ−８４１〜Ｌ−８５５；Ｖ−８４２〜Ｇ−
８５６；Ｉ−８４３〜Ｗ−８５７；Ｅ−８４４〜Ｑ−８５８；Ｅ−８４５〜Ｒ−
８５９；Ｗ−８４６〜Ｒ−８６０；Ｇ−８４７〜Ｌ−８６１；Ｅ−８４８〜Ｖ−
８６２；Ｃ−８４９〜Ｅ−８６３；Ｓ−８５０〜Ｃ−８６４；Ｋ−８５１〜Ｒ−
８６５；Ｓ−８５２〜Ｄ−８６６；Ｃ−８５３〜Ｉ−８６７；Ｅ−８５４〜Ｎ−
８６８；Ｌ−８５５〜Ｇ−８６９；Ｇ−８５６〜Ｑ−８７０；Ｗ−８５７〜Ｐ−
８７１；Ｑ−８５８〜Ａ−８７２；Ｒ−８５９〜Ｓ−８７３；Ｒ−８６０〜Ｅ−
８７４；Ｌ−８６１〜Ｃ−８７５；Ｖ−８６２〜Ａ−８７６；Ｅ−８６３〜Ｋ−
８７７；Ｃ−８６４〜Ｅ−８７８；Ｒ−８６５〜Ｖ−８７９；Ｄ−８６６〜Ｋ−
８８０；Ｉ−８６７〜Ｐ−８８１；Ｎ−８６８〜Ａ−８８２；Ｇ−８６９〜Ｓ−
８８３；Ｑ−８７０〜Ｔ−８８４；Ｐ−８７１〜Ｒ−８８５；Ａ−８７２〜Ｐ−
８８６；Ｓ−８７３〜Ｃ−８８７；Ｅ−８７４〜Ａ−８８８；Ｃ−８７５〜Ｄ−
８８９；Ａ−８７６〜Ｈ−８９０；Ｋ−８７７〜Ｐ−８９１；Ｅ−８７８〜Ｃ−
８９２；Ｖ−８７９〜Ｐ−８９３；Ｋ−８８０〜Ｑ−８９４；Ｐ−８８１〜Ｗ−
８９５；Ａ−８８２〜Ｑ−８９６；Ｓ−８８３〜Ｌ−８９７；Ｔ−８８４〜Ｇ−
８９８；Ｒ−８８５〜Ｅ−８９９；Ｐ−８８６〜Ｗ−９００；Ｃ−８８７〜Ｓ−
９０１；Ａ−８８８〜Ｓ−９０２；Ｄ−８８９〜Ｃ−９０３；Ｈ−８９０〜Ｓ−
９０４；Ｐ−８９１〜Ｋ−９０５；Ｃ−８９２〜Ｔ−９０６；Ｐ−８９３〜Ｃ−
９０７；Ｑ−８９４〜Ｇ−９０８；Ｗ−８９５〜Ｋ−９０９；Ｑ−８９６〜Ｇ−
９１０；Ｌ−８９７〜Ｙ−９１１；Ｇ−８９８〜Ｋ−９１２；Ｅ−８９９〜Ｋ−
９１３；Ｗ−９００〜Ｒ−９１４；Ｓ−９０１〜Ｓ−９１５；Ｓ−９０２〜Ｌ−
９１６；Ｃ−９０３〜Ｋ−９１７；Ｓ−９０４〜Ｃ−９１８；Ｋ−９０５〜Ｌ−
９１９；Ｔ−９０６〜Ｓ−９２０；Ｃ−９０７〜Ｈ−９２１；Ｇ−９０８〜Ｄ−
９２２；Ｋ−９０９〜Ｇ−９２３；Ｇ−９１０〜Ｇ−９２４；Ｙ−９１１〜Ｖ−
９２５；Ｋ−９１２〜Ｌ−９２６；Ｋ−９１３〜Ｓ−９２７；Ｒ−９１４〜Ｈ−
９２８；Ｓ−９１５〜Ｅ−９２９；Ｌ−９１６〜Ｓ−９３０；Ｋ−９１７〜Ｃ−
９３１；Ｃ−９１８〜Ｄ−９３２；Ｌ−９１９〜Ｐ−９３３；Ｓ−９２０〜Ｌ−
９３４；Ｈ−９２１〜Ｋ−９３５；Ｄ−９２２〜Ｋ−９３６；Ｇ−９２３〜Ｐ−
９３７；Ｇ−９２４〜Ｋ−９３８；Ｖ−９２５〜Ｈ−９３９；Ｌ−９２６〜Ｆ−
９４０；Ｓ−９２７〜Ｉ−９４１；Ｈ−９２８〜Ｄ−９４２；Ｅ−９２９〜Ｆ−
９４３；Ｓ−９３０〜Ｃ−９４４；Ｃ−９３１〜Ｔ−９４５；Ｄ−９３２〜Ｍ−
９４６；Ｐ−９３３〜Ａ−９４７；Ｌ−９３４〜Ｅ−９４８；Ｋ−９３５〜Ｃ−
９４９；および／またはＫ−９３６〜Ｓ−９５０。
とも５、少なくとも６、少なくとも７アミノ酸配列を含み、より好ましくは、少
なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２
、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも２０、少なく
とも２５、少なくとも３０、少なくとも４０、少なくとも５０，そして最も好ま
しくは約１５アミノ酸と約３０アミノ酸との間の配列を含む。免疫原性エピトー
プまたは抗原性エピトープを含有する好ましいポリペプチドは、少なくとも１０
、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０
、７５、８０、８５、９０、９５または１００アミノ酸残基の長さである。さら
に好ましいＭＥＴＨ１の抗原性エピトープは、以下の残基のアミノ酸配列を含む
か、あるいは以下の残基のアミノ酸配列からなる：配列番号２のＭ−１〜Ｐ−１
５；Ｇ−２〜Ｖ−１６；Ｎ−３〜Ｐ−１７；Ａ−４〜Ｔ−１８；Ｅ−５〜Ｌ−１
９；Ｒ−６〜Ｌ−２０；Ａ−７〜Ｌ−２１；Ｐ−８〜Ｌ−２２；Ｇ−９〜Ａ−２
３；Ｓ−１０〜Ａ−２４；Ｒ−１１〜Ａ−２５；Ｓ−１２〜Ｌ−２６；Ｆ−１３
〜Ｌ−２７；Ｇ−１４〜Ａ−２８；Ｐ−１５〜Ｖ−２９；Ｖ−１６〜Ｓ−３０；
Ｐ−１７〜Ｄ−３１；Ｔ−１８〜Ａ−３２；Ｌ−１９〜Ｌ−３３；Ｌ−２０〜Ｇ
−３４；Ｌ−２１〜Ｒ−３５；Ｌ−２２〜Ｐ−３６；Ａ−２３〜Ｓ−３７；Ａ−
２４〜Ｅ−３８；Ａ−２５〜Ｅ−３９；Ｌ−２６〜Ｄ−４０；Ｌ−２７〜Ｅ−４
１；Ａ−２８〜Ｅ−４２；Ｖ−２９〜Ｌ−４３；Ｓ−３０〜Ｖ−４４；Ｄ−３１
〜Ｖ−４５；Ａ−３２〜Ｐ−４６；Ｌ−３３〜Ｅ−４７；Ｇ−３４〜Ｌ−４８；
Ｒ−３５〜Ｅ−４９；Ｐ−３６〜Ｒ−５０；Ｓ−３７〜Ａ−５１；Ｅ−３８〜Ｐ
−５２；Ｅ−３９〜Ｇ−５３；Ｄ−４０〜Ｈ−５４；Ｅ−４１〜Ｇ−５５；Ｅ−
４２〜Ｔ−５６；Ｌ−４３〜Ｔ−５７；Ｖ−４４〜Ｒ−５８；Ｖ−４５〜Ｌ−５
９；Ｐ−４６〜Ｒ−６０；Ｅ−４７〜Ｌ−６１；Ｌ−４８〜Ｈ−６２；Ｅ−４９
〜Ａ−６３；Ｒ−５０〜Ｆ−６４；Ａ−５１〜Ｄ−６５；Ｐ−５２〜Ｑ−６６；
Ｇ−５３〜Ｑ−６７；Ｈ−５４〜Ｌ−６８；Ｇ−５５〜Ｄ−６９；Ｔ−５６〜Ｌ
−７０；Ｔ−５７〜Ｅ−７１；Ｒ−５８〜Ｌ−７２；Ｌ−５９〜Ｒ−７３；Ｒ−
６０〜Ｐ−７４；Ｌ−６１〜Ｄ−７５；Ｈ−６２〜Ｓ−７６；Ａ−６３〜Ｓ−７
７；Ｆ−６４〜Ｆ−７８；Ｄ−６５〜Ｌ−７９；Ｑ−６６〜Ａ−８０；Ｑ−６７
〜Ｐ−８１；Ｌ−６８〜Ｇ−８２；Ｄ−６９〜Ｆ−８３；Ｌ−７０〜Ｔ−８４；
Ｅ−７１〜Ｌ−８５；Ｌ−７２〜Ｑ−８６；Ｒ−７３〜Ｎ−８７；Ｐ−７４〜Ｖ
−８８；Ｄ−７５〜Ｇ−８９；Ｓ−７６〜Ｒ−９０；Ｓ−７７〜Ｋ−９１；Ｆ−
７８〜Ｓ−９２；Ｌ−７９〜Ｇ−９３；Ａ−８０〜Ｓ−９４；Ｐ−８１〜Ｅ−９
５；Ｇ−８２〜Ｔ−９６；Ｆ−８３〜Ｐ−９７；Ｔ−８４〜Ｌ−９８；Ｌ−８５
〜Ｐ−９９；Ｑ−８６〜Ｅ−１００；Ｎ−８７〜Ｔ−１０１；Ｖ−８８〜Ｄ−１
０２；Ｇ−８９〜Ｌ−１０３；Ｒ−９０〜Ａ−１０４；Ｋ−９１〜Ｈ−１０５；
Ｓ−９２〜Ｃ−１０６；Ｇ−９３〜Ｆ−１０７；Ｓ−９４〜Ｙ−１０８；Ｅ−９
５〜Ｓ−１０９；Ｔ−９６〜Ｇ−１１０；Ｐ−９７〜Ｔ−１１１；Ｌ−９８〜Ｖ
−１１２；Ｐ−９９〜Ｎ−１１３；Ｅ−１００〜Ｇ−１１４；Ｔ−１０１〜Ｄ−
１１５；Ｄ−１０２〜Ｐ−１１６；Ｌ−１０３〜Ｓ−１１７；Ａ−１０４〜Ｓ−
１１８；Ｈ−１０５〜Ａ−１１９；Ｃ−１０６〜Ａ−１２０；Ｆ−１０７〜Ａ−
１２１；Ｙ−１０８〜Ｌ−１２２；Ｓ−１０９〜Ｓ−１２３；Ｇ−１１０〜Ｌ−
１２４；Ｔ−１１１〜Ｃ−１２５；Ｖ−１１２〜Ｅ−１２６；Ｎ−１１３〜Ｇ−
１２７；Ｇ−１１４〜Ｖ−１２８；Ｄ−１１５〜Ｒ−１２９；Ｐ−１１６〜Ｇ−
１３０；Ｓ−１１７〜Ａ−１３１；Ｓ−１１８〜Ｆ−１３２；Ａ−１１９〜Ｙ−
１３３；Ａ−１２０〜Ｌ−１３４；Ａ−１２１〜Ｌ−１３５；Ｌ−１２２〜Ｇ−
１３６；Ｓ−１２３〜Ｅ−１３７；Ｌ−１２４〜Ａ−１３８；Ｃ−１２５〜Ｙ−
１３９；Ｅ−１２６〜Ｆ−１４０；Ｇ−１２７〜Ｉ−１４１；Ｖ−１２８〜Ｑ−
１４２；Ｒ−１２９〜Ｐ−１４３；Ｇ−１３０〜Ｌ−１４４；Ａ−１３１〜Ｐ−
１４５；Ｆ−１３２〜Ａ−１４６；Ｙ−１３３〜Ａ−１４７；Ｌ−１３４〜Ｓ−
１４８；Ｌ−１３５〜Ｅ−１４９；Ｇ−１３６〜Ｒ−１５０；Ｅ−１３７〜Ｌ−
１５１；Ａ−１３８〜Ａ−１５２；Ｙ−１３９〜Ｔ−１５３；Ｆ−１４０〜Ａ−
１５４；Ｉ−１４１〜Ａ−１５５；Ｑ−１４２〜Ｐ−１５６；Ｐ−１４３〜Ｇ−
１５７；Ｌ−１４４〜Ｅ−１５８；Ｐ−１４５〜Ｋ−１５９；Ａ−１４６〜Ｐ−
１６０；Ａ−１４７〜Ｐ−１６１；Ｓ−１４８〜Ａ−１６２；Ｅ−１４９〜Ｐ−
１６３；Ｒ−１５０〜Ｌ−１６４；Ｌ−１５１〜Ｑ−１６５；Ａ−１５２〜Ｆ−
１６６；Ｔ−１５３〜Ｈ−１６７；Ａ−１５４〜Ｌ−１６８；Ａ−１５５〜Ｌ−
１６９；Ｐ−１５６〜Ｒ−１７０；Ｇ−１５７〜Ｒ−１７１；Ｅ−１５８〜Ｎ−
１７２；Ｋ−１５９〜Ｒ−１７３；Ｐ−１６０〜Ｑ−１７４；Ｐ−１６１〜Ｇ−
１７５；Ａ−１６２〜Ｄ−１７６；Ｐ−１６３〜Ｖ−１７７；Ｌ−１６４〜Ｇ−
１７８；Ｑ−１６５〜Ｇ−１７９；Ｆ−１６６〜Ｔ−１８０；Ｈ−１６７〜Ｃ−
１８１；Ｌ−１６８〜Ｇ−１８２；Ｌ−１６９〜Ｖ−１８３；Ｒ−１７０〜Ｖ−
１８４；Ｒ−１７１〜Ｄ−１８５；Ｎ−１７２〜Ｄ−１８６；Ｒ−１７３〜Ｅ−
１８７；Ｑ−１７４〜Ｐ−１８８；Ｇ−１７５〜Ｒ−１８９；Ｄ−１７６〜Ｐ−
１９０；Ｖ−１７７〜Ｔ−１９１；Ｇ−１７８〜Ｇ−１９２；Ｇ−１７９〜Ｋ−
１９３；Ｔ−１８０〜Ａ−１９４；Ｃ−１８１〜Ｅ−１９５；Ｇ−１８２〜Ｔ−
１９６；Ｖ−１８３〜Ｅ−１９７；Ｖ−１８４〜Ｄ−１９８；Ｄ−１８５〜Ｅ−
１９９；Ｄ−１８６〜Ｄ−２００；Ｅ−１８７〜Ｅ−２０１；Ｐ−１８８〜Ｇ−
２０２；Ｒ−１８９〜Ｔ−２０３；Ｐ−１９０〜Ｅ−２０４；Ｔ−１９１〜Ｇ−
２０５；Ｇ−１９２〜Ｅ−２０６；Ｋ−１９３〜Ｄ−２０７；Ａ−１９４〜Ｅ−
２０８；Ｅ−１９５〜Ｇ−２０９；Ｔ−１９６〜Ｐ−２１０；Ｅ−１９７〜Ｑ−
２１１；Ｄ−１９８〜Ｗ−２１２；Ｅ−１９９〜Ｓ−２１３；Ｄ−２００〜Ｐ−
２１４；Ｅ−２０１〜Ｑ−２１５；Ｇ−２０２〜Ｄ−２１６；Ｔ−２０３〜Ｐ−
２１７；Ｅ−２０４〜Ａ−２１８；Ｇ−２０５〜Ｌ−２１９；Ｅ−２０６〜Ｑ−
２２０；Ｄ−２０７〜Ｇ−２２１；Ｅ−２０８〜Ｖ−２２２；Ｇ−２０９〜Ｇ−
２２３；Ｐ−２１０〜Ｑ−２２４；Ｑ−２１１〜Ｐ−２２５；Ｗ−２１２〜Ｔ−
２２６；Ｓ−２１３〜Ｇ−２２７；Ｐ−２１４〜Ｔ−２２８；Ｑ−２１５〜Ｇ−
２２９；Ｄ−２１６〜Ｓ−２３０；Ｐ−２１７〜Ｉ−２３１；Ａ−２１８〜Ｒ−
２３２；Ｌ−２１９〜Ｋ−２３３；Ｑ−２２０〜Ｋ−２３４；Ｇ−２２１〜Ｒ−
２３５；Ｖ−２２２〜Ｆ−２３６；Ｇ−２２３〜Ｖ−２３７；Ｑ−２２４〜Ｓ−
２３８；Ｐ−２２５〜Ｓ−２３９；Ｔ−２２６〜Ｈ−２４０；Ｇ−２２７〜Ｒ−
２４１；Ｔ−２２８〜Ｙ−２４２；Ｇ−２２９〜Ｖ−２４３；Ｓ−２３０〜Ｅ−
２４４；Ｉ−２３１〜Ｔ−２４５；Ｒ−２３２〜Ｍ−２４６；Ｋ−２３３〜Ｌ−
２４７；Ｋ−２３４〜Ｖ−２４８；Ｒ−２３５〜Ａ−２４９；Ｆ−２３６〜Ｄ−
２５０；Ｖ−２３７〜Ｑ−２５１；Ｓ−２３８〜Ｓ−２５２；Ｓ−２３９〜Ｍ−
２５３；Ｈ−２４０〜Ａ−２５４；Ｒ−２４１〜Ｅ−２５５；Ｙ−２４２〜Ｆ−
２５６；Ｖ−２４３〜Ｈ−２５７；Ｅ−２４４〜Ｇ−２５８；Ｔ−２４５〜Ｓ−
２５９；Ｍ−２４６〜Ｇ−２６０；Ｌ−２４７〜Ｌ−２６１；Ｖ−２４８〜Ｋ−
２６２；Ａ−２４９〜Ｈ−２６３；Ｄ−２５０〜Ｙ−２６４；Ｑ−２５１〜Ｌ−
２６５；Ｓ−２５２〜Ｌ−２６６；Ｍ−２５３〜Ｔ−２６７；Ａ−２５４〜Ｌ−
２６８；Ｅ−２５５〜Ｆ−２６９；Ｆ−２５６〜Ｓ−２７０；Ｈ−２５７〜Ｖ−
２７１；Ｇ−２５８〜Ａ−２７２；Ｓ−２５９〜Ａ−２７３；Ｇ−２６０〜Ｒ−
２７４；Ｌ−２６１〜Ｌ−２７５；Ｋ−２６２〜Ｙ−２７６；Ｈ−２６３〜Ｋ−
２７７；Ｙ−２６４〜Ｈ−２７８；Ｌ−２６５〜Ｐ−２７９；Ｌ−２６６〜Ｓ−
２８０；Ｔ−２６７〜Ｉ−２８１；Ｌ−２６８〜Ｒ−２８２；Ｆ−２６９〜Ｎ−
２８３；Ｓ−２７０〜Ｓ−２８４；Ｖ−２７１〜Ｖ−２８５；Ａ−２７２〜Ｓ−
２８６；Ａ−２７３〜Ｌ−２８７；Ｒ−２７４〜Ｖ−２８８；Ｌ−２７５〜Ｖ−
２８９；Ｙ−２７６〜Ｖ−２９０；Ｋ−２７７〜Ｋ−２９１；Ｈ−２７８〜Ｉ−
２９２；Ｐ−２７９〜Ｌ−２９３；Ｓ−２８０〜Ｖ−２９４；Ｉ−２８１〜Ｉ−
２９５；Ｒ−２８２〜Ｈ−２９６；Ｎ−２８３〜Ｄ−２９７；Ｓ−２８４〜Ｅ−
２９８；Ｖ−２８５〜Ｑ−２９９；Ｓ−２８６〜Ｋ−３００；Ｌ−２８７〜Ｇ−
３０１；Ｖ−２８８〜Ｐ−３０２；Ｖ−２８９〜Ｅ−３０３；Ｖ−２９０〜Ｖ−
３０４；Ｋ−２９１〜Ｔ−３０５；Ｉ−２９２〜Ｓ−３０６；Ｌ−２９３〜Ｎ−
３０７；Ｖ−２９４〜Ａ−３０８；Ｉ−２９５〜Ａ−３０９；Ｈ−２９６〜Ｌ−
３１０；Ｄ−２９７〜Ｔ−３１１；Ｅ−２９８〜Ｌ−３１２；Ｑ−２９９〜Ｒ−
３１３；Ｋ−３００〜Ｎ−３１４；Ｇ−３０１〜Ｆ−３１５；Ｐ−３０２〜Ｃ−
３１６；Ｅ−３０３〜Ｎ−３１７；Ｖ−３０４〜Ｗ−３１８；Ｔ−３０５〜Ｑ−
３１９；Ｓ−３０６〜Ｋ−３２０；Ｎ−３０７〜Ｑ−３２１；Ａ−３０８〜Ｈ−
３２２；Ａ−３０９〜Ｎ−３２３；Ｌ−３１０〜Ｐ−３２４；Ｔ−３１１〜Ｐ−
３２５；Ｌ−３１２〜Ｓ−３２６；Ｒ−３１３〜Ｄ−３２７；Ｎ−３１４〜Ｒ−
３２８；Ｆ−３１５〜Ｄ−３２９；Ｃ−３１６〜Ａ−３３０；Ｎ−３１７〜Ｅ−
３３１；Ｗ−３１８〜Ｈ−３３２；Ｑ−３１９〜Ｙ−３３３；Ｋ−３２０〜Ｄ−
３３４；Ｑ−３２１〜Ｔ−３３５；Ｈ−３２２〜Ａ−３３６；Ｎ−３２３〜Ｉ−
３３７；Ｐ−３２４〜Ｌ−３３８；Ｐ−３２５〜Ｆ−３３９；Ｓ−３２６〜Ｔ−
３４０；Ｄ−３２７〜Ｒ−３４１；Ｒ−３２８〜Ｑ−３４２；Ｄ−３２９〜Ｄ−
３４３；Ａ−３３０〜Ｌ−３４４；Ｅ−３３１〜Ｃ−３４５；Ｈ−３３２〜Ｇ−
３４６；Ｙ−３３３〜Ｓ−３４７；Ｄ−３３４〜Ｑ−３４８；Ｔ−３３５〜Ｔ−
３４９；Ａ−３３６〜Ｃ−３５０；Ｉ−３３７〜Ｄ−３５１；Ｌ−３３８〜Ｔ−
３５２；Ｆ−３３９〜Ｌ−３５３；Ｔ−３４０〜Ｇ−３５４；Ｒ−３４１〜Ｍ−
３５５；Ｑ−３４２〜Ａ−３５６；Ｄ−３４３〜Ｄ−３５７；Ｌ−３４４〜Ｖ−
３５８；Ｃ−３４５〜Ｇ−３５９；Ｇ−３４６〜Ｔ−３６０；Ｓ−３４７〜Ｖ−
３６１；Ｑ−３４８〜Ｃ−３６２；Ｔ−３４９〜Ｄ−３６３；Ｃ−３５０〜Ｐ−
３６４；Ｄ−３５１〜Ｓ−３６５；Ｔ−３５２〜Ｒ−３６６；Ｌ−３５３〜Ｓ−
３６７；Ｇ−３５４〜Ｃ−３６８；Ｍ−３５５〜Ｓ−３６９；Ａ−３５６〜Ｖ−
３７０；Ｄ−３５７〜Ｉ−３７１；Ｖ−３５８〜Ｅ−３７２；Ｇ−３５９〜Ｄ−
３７３；Ｔ−３６０〜Ｄ−３７４；Ｖ−３６１〜Ｇ−３７５；Ｃ−３６２〜Ｌ−
３７６；Ｄ−３６３〜Ｑ−３７７；Ｐ−３６４〜Ａ−３７８；Ｓ−３６５〜Ａ−
３７９；Ｒ−３６６〜Ｆ−３８０；Ｓ−３６７〜Ｔ−３８１；Ｃ−３６８〜Ｔ−
３８２；Ｓ−３６９〜Ａ−３８３；Ｖ−３７０〜Ｈ−３８４；Ｉ−３７１〜Ｅ−
３８５；Ｅ−３７２〜Ｌ−３８６；Ｄ−３７３〜Ｇ−３８７；Ｄ−３７４〜Ｈ−
３８８；Ｇ−３７５〜Ｖ−３８９；Ｌ−３７６〜Ｆ−３９０；Ｑ−３７７〜Ｎ−
３９１；Ａ−３７８〜Ｍ−３９２；Ａ−３７９〜Ｐ−３９３；Ｆ−３８０〜Ｈ−
３９４；Ｔ−３８１〜Ｄ−３９５；Ｔ−３８２〜Ｄ−３９６；Ａ−３８３〜Ａ−
３９７；Ｈ−３８４〜Ｋ−３９８；Ｅ−３８５〜Ｑ−３９９；Ｌ−３８６〜Ｃ−
４００；Ｇ−３８７〜Ａ−４０１；Ｈ−３８８〜Ｓ−４０２；Ｖ−３８９〜Ｌ−
４０３；Ｆ−３９０〜Ｎ−４０４；Ｎ−３９１〜Ｇ−４０５；Ｍ−３９２〜Ｖ−
４０６；Ｐ−３９３〜Ｎ−４０７；Ｈ−３９４〜Ｑ−４０８；Ｄ−３９５〜Ｄ−
４０９；Ｄ−３９６〜Ｓ−４１０；Ａ−３９７〜Ｈ−４１１；Ｋ−３９８〜Ｍ−
４１２；Ｑ−３９９〜Ｍ−４１３；Ｃ−４００〜Ａ−４１４；Ａ−４０１〜Ｓ−
４１５；Ｓ−４０２〜Ｍ−４１６；Ｌ−４０３〜Ｌ−４１７；Ｎ−４０４〜Ｓ−
４１８；Ｇ−４０５〜Ｎ−４１９；Ｖ−４０６〜Ｌ−４２０；Ｎ−４０７〜Ｄ−
４２１；Ｑ−４０８〜Ｈ−４２２；Ｄ−４０９〜Ｓ−４２３；Ｓ−４１０〜Ｑ−
４２４；Ｈ−４１１〜Ｐ−４２５；Ｍ−４１２〜Ｗ−４２６；Ｍ−４１３〜Ｓ−
４２７；Ａ−４１４〜Ｐ−４２８；Ｓ−４１５〜Ｃ−４２９；Ｍ−４１６〜Ｓ−
４３０；Ｌ−４１７〜Ａ−４３１；Ｓ−４１８〜Ｙ−４３２；Ｎ−４１９〜Ｍ−
４３３；Ｌ−４２０〜Ｉ−４３４；Ｄ−４２１〜Ｔ−４３５；Ｈ−４２２〜Ｓ−
４３６；Ｓ−４２３〜Ｆ−４３７；Ｑ−４２４〜Ｌ−４３８；Ｐ−４２５〜Ｄ−
４３９；Ｗ−４２６〜Ｎ−４４０；Ｓ−４２７〜Ｇ−４４１；Ｐ−４２８〜Ｈ−
４４２；Ｃ−４２９〜Ｇ−４４３；Ｓ−４３０〜Ｅ−４４４；Ａ−４３１〜Ｃ−
４４５；Ｙ−４３２〜Ｌ−４４６；Ｍ−４３３〜Ｍ−４４７；Ｉ−４３４〜Ｄ−
４４８；Ｔ−４３５〜Ｋ−４４９；Ｓ−４３６〜Ｐ−４５０；Ｆ−４３７〜Ｑ−
４５１；Ｌ−４３８〜Ｎ−４５２；Ｄ−４３９〜Ｐ−４５３；Ｎ−４４０〜Ｉ−
４５４；Ｇ−４４１〜Ｑ−４５５；Ｈ−４４２〜Ｌ−４５６；Ｇ−４４３〜Ｐ−
４５７；Ｅ−４４４〜Ｇ−４５８；Ｃ−４４５〜Ｄ−４５９；Ｌ−４４６〜Ｌ−
４６０；Ｍ−４４７〜Ｐ−４６１；Ｄ−４４８〜Ｇ−４６２；Ｋ−４４９〜Ｔ−
４６３；Ｐ−４５０〜Ｓ−４６４；Ｑ−４５１〜Ｙ−４６５；Ｎ−４５２〜Ｄ−
４６６；Ｐ−４５３〜Ａ−４６７；Ｉ−４５４〜Ｎ−４６８；Ｑ−４５５〜Ｒ−
４６９；Ｌ−４５６〜Ｑ−４７０；Ｐ−４５７〜Ｃ−４７１；Ｇ−４５８〜Ｑ−
４７２；Ｄ−４５９〜Ｆ−４７３；Ｌ−４６０〜Ｔ−４７４；Ｐ−４６１〜Ｆ−
４７５；Ｇ−４６２〜Ｇ−４７６；Ｔ−４６３〜Ｅ−４７７；Ｓ−４６４〜Ｄ−
４７８；Ｙ−４６５〜Ｓ−４７９；Ｄ−４６６〜Ｋ−４８０；Ａ−４６７〜Ｈ−
４８１；Ｎ−４６８〜Ｃ−４８２；Ｒ−４６９〜Ｐ−４８３；Ｑ−４７０〜Ｄ−
４８４；Ｃ−４７１〜Ａ−４８５；Ｑ−４７２〜Ａ−４８６；Ｆ−４７３〜Ｓ−
４８７；Ｔ−４７４〜Ｔ−４８８；Ｆ−４７５〜Ｃ−４８９；Ｇ−４７６〜Ｓ−
４９０；Ｅ−４７７〜Ｔ−４９１；Ｄ−４７８〜Ｌ−４９２；Ｓ−４７９〜Ｗ−
４９３；Ｋ−４８０〜Ｃ−４９４；Ｈ−４８１〜Ｔ−４９５；Ｃ−４８２〜Ｇ−
４９６；Ｐ−４８３〜Ｔ−４９７；Ｄ−４８４〜Ｓ−４９８；Ａ−４８５〜Ｇ−
４９９；Ａ−４８６〜Ｇ−５００；Ｓ−４８７〜Ｖ−５０１；Ｔ−４８８〜Ｌ−
５０２；Ｃ−４８９〜Ｖ−５０３；Ｓ−４９０〜Ｃ−５０４；Ｔ−４９１〜Ｑ−
５０５；Ｌ−４９２〜Ｔ−５０６；Ｗ−４９３〜Ｋ−５０７；Ｃ−４９４〜Ｈ−
５０８；Ｔ−４９５〜Ｆ−５０９；Ｇ−４９６〜Ｐ−５１０；Ｔ−４９７〜Ｗ−
５１１；Ｓ−４９８〜Ａ−５１２；Ｇ−４９９〜Ｄ−５１３；Ｇ−５００〜Ｇ−
５１４；Ｖ−５０１〜Ｔ−５１５；Ｌ−５０２〜Ｓ−５１６；Ｖ−５０３〜Ｃ−
５１７；Ｃ−５０４〜Ｇ−５１８；Ｑ−５０５〜Ｅ−５１９；Ｔ−５０６〜Ｇ−
５２０；Ｋ−５０７〜Ｋ−５２１；Ｈ−５０８〜Ｗ−５２２；Ｆ−５０９〜Ｃ−
５２３；Ｐ−５１０〜Ｉ−５２４；Ｗ−５１１〜Ｎ−５２５；Ａ−５１２〜Ｇ−
５２６；Ｄ−５１３〜Ｋ−５２７；Ｇ−５１４〜Ｃ−５２８；Ｔ−５１５〜Ｖ−
５２９；Ｓ−５１６〜Ｎ−５３０；Ｃ−５１７〜Ｋ−５３１；Ｇ−５１８〜Ｔ−
５３２；Ｅ−５１９〜Ｄ−５３３；Ｇ−５２０〜Ｒ−５３４；Ｋ−５２１〜Ｋ−
５３５；Ｗ−５２２〜Ｈ−５３６；Ｃ−５２３〜Ｆ−５３７；Ｉ−５２４〜Ｄ−
５３８；Ｎ−５２５〜Ｔ−５３９；Ｇ−５２６〜Ｐ−５４０；Ｋ−５２７〜Ｆ−
５４１；Ｃ−５２８〜Ｈ−５４２；Ｖ−５２９〜Ｇ−５４３；Ｎ−５３０〜Ｓ−
５４４；Ｋ−５３１〜Ｗ−５４５；Ｔ−５３２〜Ｇ−５４６；Ｄ−５３３〜Ｍ−
５４７；Ｒ−５３４〜Ｗ−５４８；Ｋ−５３５〜Ｇ−５４９；Ｈ−５３６〜Ｐ−
５５０；Ｆ−５３７〜Ｗ−５５１；Ｄ−５３８〜Ｇ−５５２；Ｔ−５３９〜Ｄ−
５５３；Ｐ−５４０〜Ｃ−５５４；Ｆ−５４１〜Ｓ−５５５；Ｈ−５４２〜Ｒ−
５５６；Ｇ−５４３〜Ｔ−５５７；Ｓ−５４４〜Ｃ−５５８；Ｗ−５４５〜Ｇ−
５５９；Ｇ−５４６〜Ｇ−５６０；Ｍ−５４７〜Ｇ−５６１；Ｗ−５４８〜Ｖ−
５６２；Ｇ−５４９〜Ｑ−５６３；Ｐ−５５０〜Ｙ−５６４；Ｗ−５５１〜Ｔ−
５６５；Ｇ−５５２〜Ｍ−５６６；Ｄ−５５３〜Ｒ−５６７；Ｃ−５５４〜Ｅ−
５６８；Ｓ−５５５〜Ｃ−５６９；Ｒ−５５６〜Ｄ−５７０；Ｔ−５５７〜Ｎ−
５７１；Ｃ−５５８〜Ｐ−５７２；Ｇ−５５９〜Ｖ−５７３；Ｇ−５６０〜Ｐ−
５７４；Ｇ−５６１〜Ｋ−５７５；Ｖ−５６２〜Ｎ−５７６；Ｑ−５６３〜Ｇ−
５７７；Ｙ−５６４〜Ｇ−５７８；Ｔ−５６５〜Ｋ−５７９；Ｍ−５６６〜Ｙ−
５８０；Ｒ−５６７〜Ｃ−５８１；Ｅ−５６８〜Ｅ−５８２；Ｃ−５６９〜Ｇ−
５８３；Ｄ−５７０〜Ｋ−５８４；Ｎ−５７１〜Ｒ−５８５；Ｐ−５７２〜Ｖ−
５８６；Ｖ−５７３〜Ｒ−５８７；Ｐ−５７４〜Ｙ−５８８；Ｋ−５７５〜Ｒ−
５８９；Ｎ−５７６〜Ｓ−５９０；Ｇ−５７７〜Ｃ−５９１；Ｇ−５７８〜Ｎ−
５９２；Ｋ−５７９〜Ｌ−５９３；Ｙ−５８０〜Ｅ−５９４；Ｃ−５８１〜Ｄ−
５９５；Ｅ−５８２〜Ｃ−５９６；Ｇ−５８３〜Ｐ−５９７；Ｋ−５８４〜Ｄ−
５９８；Ｒ−５８５〜Ｎ−５９９；Ｖ−５８６〜Ｎ−６００；Ｒ−５８７〜Ｇ−
６０１；Ｙ−５８８〜Ｋ−６０２；Ｒ−５８９〜Ｔ−６０３；Ｓ−５９０〜Ｆ−
６０４；Ｃ−５９１〜Ｒ−６０５；Ｎ−５９２〜Ｅ−６０６；Ｌ−５９３〜Ｅ−
６０７；Ｅ−５９４〜Ｑ−６０８；Ｄ−５９５〜Ｃ−６０９；Ｃ−５９６〜Ｅ−
６１０；Ｐ−５９７〜Ａ−６１１；Ｄ−５９８〜Ｈ−６１２；Ｎ−５９９〜Ｎ−
６１３；Ｎ−６００〜Ｅ−６１４；Ｇ−６０１〜Ｆ−６１５；Ｋ−６０２〜Ｓ−
６１６；Ｔ−６０３〜Ｋ−６１７；Ｆ−６０４〜Ａ−６１８；Ｒ−６０５〜Ｓ−
６１９；Ｅ−６０６〜Ｆ−６２０；Ｅ−６０７〜Ｇ−６２１；Ｑ−６０８〜Ｓ−
６２２；Ｃ−６０９〜Ｇ−６２３；Ｅ−６１０〜Ｐ−６２４；Ａ−６１１〜Ａ−
６２５；Ｈ−６１２〜Ｖ−６２６；Ｎ−６１３〜Ｅ−６２７；Ｅ−６１４〜Ｗ−
６２８；Ｆ−６１５〜Ｉ−６２９；Ｓ−６１６〜Ｐ−６３０；Ｋ−６１７〜Ｋ−
６３１；Ａ−６１８〜Ｙ−６３２；Ｓ−６１９〜Ａ−６３３；Ｆ−６２０〜Ｇ−
６３４；Ｇ−６２１〜Ｖ−６３５；Ｓ−６２２〜Ｓ−６３６；Ｇ−６２３〜Ｐ−
６３７；Ｐ−６２４〜Ｋ−６３８；Ａ−６２５〜Ｄ−６３９；Ｖ−６２６〜Ｒ−
６４０；Ｅ−６２７〜Ｃ−６４１；Ｗ−６２８〜Ｋ−６４２；Ｉ−６２９〜Ｌ−
６４３；Ｐ−６３０〜Ｉ−６４４；Ｋ−６３１〜Ｃ−６４５；Ｙ−６３２〜Ｑ−
６４６；Ａ−６３３〜Ａ−６４７；Ｇ−６３４〜Ｋ−６４８；Ｖ−６３５〜Ｇ−
６４９；Ｓ−６３６〜Ｉ−６５０；Ｐ−６３７〜Ｇ−６５１；Ｋ−６３８〜Ｙ−
６５２；Ｄ−６３９〜Ｆ−６５３；Ｒ−６４０〜Ｆ−６５４；Ｃ−６４１〜Ｖ−
６５５；Ｋ−６４２〜Ｌ−６５６；Ｌ−６４３〜Ｑ−６５７；Ｉ−６４４〜Ｐ−
６５８；Ｃ−６４５〜Ｋ−６５９；Ｑ−６４６〜Ｖ−６６０；Ａ−６４７〜Ｖ−
６６１；Ｋ−６４８〜Ｄ−６６２；Ｇ−６４９〜Ｇ−６６３；Ｉ−６５０〜Ｔ−
６６４；Ｇ−６５１〜Ｐ−６６５；Ｙ−６５２〜Ｃ−６６６；Ｆ−６５３〜Ｓ−
６６７；Ｆ−６５４〜Ｐ−６６８；Ｖ−６５５〜Ｄ−６６９；Ｌ−６５６〜Ｓ−
６７０；Ｑ−６５７〜Ｔ−６７１；Ｐ−６５８〜Ｓ−６７２；Ｋ−６５９〜Ｖ−
６７３；Ｖ−６６０〜Ｃ−６７４；Ｖ−６６１〜Ｖ−６７５；Ｄ−６６２〜Ｑ−
６７６；Ｇ−６６３〜Ｇ−６７７；Ｔ−６６４〜Ｑ−６７８；Ｐ−６６５〜Ｃ−
６７９；Ｃ−６６６〜Ｖ−６８０；Ｓ−６６７〜Ｋ−６８１；Ｐ−６６８〜Ａ−
６８２；Ｄ−６６９〜Ｇ−６８３；Ｓ−６７０〜Ｃ−６８４；Ｔ−６７１〜Ｄ−
６８５；Ｓ−６７２〜Ｒ−６８６；Ｖ−６７３〜Ｉ−６８７；Ｃ−６７４〜Ｉ−
６８８；Ｖ−６７５〜Ｄ−６８９；Ｑ−６７６〜Ｓ−６９０；Ｇ−６７７〜Ｋ−
６９１；Ｑ−６７８〜Ｋ−６９２；Ｃ−６７９〜Ｋ−６９３；Ｖ−６８０〜Ｆ−
６９４；Ｋ−６８１〜Ｄ−６９５；Ａ−６８２〜Ｋ−６９６；Ｇ−６８３〜Ｃ−
６９７；Ｃ−６８４〜Ｇ−６９８；Ｄ−６８５〜Ｖ−６９９；Ｒ−６８６〜Ｃ−
７００；Ｉ−６８７〜Ｇ−７０１；Ｉ−６８８〜Ｇ−７０２；Ｄ−６８９〜Ｎ−
７０３；Ｓ−６９０〜Ｇ−７０４；Ｋ−６９１〜Ｓ−７０５；Ｋ−６９２〜Ｔ−
７０６；Ｋ−６９３〜Ｃ−７０７；Ｆ−６９４〜Ｋ−７０８；Ｄ−６９５〜Ｋ−
７０９；Ｋ−６９６〜Ｉ−７１０；Ｃ−６９７〜Ｓ−７１１；Ｇ−６９８〜Ｇ−
７１２；Ｖ−６９９〜Ｓ−７１３；Ｃ−７００〜Ｖ−７１４；Ｇ−７０１〜Ｔ−
７１５；Ｇ−７０２〜Ｓ−７１６；Ｎ−７０３〜Ａ−７１７；Ｇ−７０４〜Ｋ−
７１８；Ｓ−７０５〜Ｐ−７１９；Ｔ−７０６〜Ｇ−７２０；Ｃ−７０７〜Ｙ−
７２１；Ｋ−７０８〜Ｈ−７２２；Ｋ−７０９〜Ｄ−７２３；Ｉ−７１０〜Ｉ−
７２４；Ｓ−７１１〜Ｉ−７２５；Ｇ−７１２〜Ｔ−７２６；Ｓ−７１３〜Ｉ−
７２７；Ｖ−７１４〜Ｐ−７２８；Ｔ−７１５〜Ｔ−７２９；Ｓ−７１６〜Ｇ−
７３０；Ａ−７１７〜Ａ−７３１；Ｋ−７１８〜Ｔ−７３２：Ｐ−７１９〜Ｎ−
７３３；Ｇ−７２０〜Ｉ−７３４；Ｙ−７２１〜Ｅ−７３５；Ｈ−７２２〜Ｖ−
７４６；Ｄ−７２３〜Ｋ−７３７；Ｉ−７２４〜Ｑ−７３８；Ｉ−７２５〜Ｒ−
７３９；Ｔ−７２６〜Ｎ−７４０；Ｉ−７２７〜Ｑ−７４１；Ｐ−７２８〜Ｒ−
７４２；Ｔ−７２９〜Ｇ−７４３；Ｇ−７３０〜Ｓ−７４４；Ａ−７３１〜Ｒ−
７４５；Ｔ−７３２〜Ｎ−７４６；Ｎ−７３３〜Ｎ−７４７；Ｉ−７３４〜Ｇ−
７４８；Ｅ−７３５〜Ｓ−７４９；Ｖ−７３６〜Ｆ−７５０；Ｋ−７３７〜Ｌ−
７５１；Ｑ−７３８〜Ａ−７５２；Ｒ−７３９〜Ｉ−７５３：Ｎ−７４０〜Ｋ−
７５４；Ｑ−７４１〜Ａ−７５５；Ｒ−７４２〜Ａ−７５６；Ｇ−７４３〜Ｄ−
７５７；Ｓ−７４４〜Ｇ−７５８；Ｒ−７４５〜Ｔ−７５９；Ｎ−７４６〜Ｙ−
７６０；Ｎ−７４７〜Ｉ−７６１；Ｇ−７４８〜Ｌ−７６２；Ｓ−７４９〜Ｎ−
７６３；Ｆ−７５０〜Ｇ−７６４；Ｌ−７５１〜Ｄ−７６５；Ａ−７５２〜Ｙ−
７６６；Ｉ−７５３〜Ｔ−７６７；Ｋ−７５４〜Ｌ−７６８；Ａ−７５５〜Ｓ−
７６９；Ａ−７５６〜Ｔ−７７０；Ｄ−７５７〜Ｌ−７７１；Ｇ−７５８〜Ｅ−
７７２；Ｔ−７５９〜Ｑ−７７３；Ｙ−７６０〜Ｄ−７７４；Ｉ−７６１〜Ｉ−
７７５；Ｌ−７６２〜Ｍ−７７６；Ｎ−７６３〜Ｙ−７７７；Ｇ−７６４〜Ｋ−
７７８；Ｄ−７６５〜Ｇ−７７９；Ｙ−７６６〜Ｖ−７８０；Ｔ−７６７〜Ｖ−
７８１；Ｌ−７６８〜Ｌ−７８２；Ｓ−７６９〜Ｒ−７８３；Ｔ−７７０〜Ｙ−
７８４；Ｌ−７７１〜Ｓ−７８５；Ｅ−７７２〜Ｇ−７８６；Ｑ−７７３〜Ｓ−
７８７；Ｄ−７７４〜Ｓ−７８８；Ｉ−７７５〜Ａ−７８９；Ｍ−７７６〜Ａ−
７９０；Ｙ−７７７〜Ｌ−７９１；Ｋ−７７８〜Ｅ−７９２；Ｇ−７７９〜Ｒ−
７９３；Ｖ−７８０〜Ｉ−７９４；Ｖ−７８１〜Ｒ−７９５；Ｌ−７８２〜Ｓ−
７９６；Ｒ−７８３〜Ｆ−７９７；Ｙ−７８４〜Ｓ−７９８；Ｓ−７８５〜Ｐ−
７９９；Ｇ−７８６〜Ｌ−８００；Ｓ−７８７〜Ｋ−８０１；Ｓ−７８８〜Ｅ−
８０２；Ａ−７８９〜Ｐ−８０３：Ａ−７９０〜Ｌ−８０４；Ｌ−７９１〜Ｔ−
８０５；Ｅ−７９２〜Ｉ−８０６；Ｒ−７９３〜Ｑ−８０７；Ｉ−７９４〜Ｖ−
８０８；Ｒ−７９５〜Ｌ−８０９；Ｓ−７９６〜Ｔ−８１０；Ｆ−７９７〜Ｖ−
８１１；Ｓ−７９８〜Ｇ−８１２；Ｐ−７９９〜Ｎ−８１３；Ｌ−８００〜Ａ−
８１４；Ｋ−８０１〜Ｌ−８１５；Ｅ−８０２〜Ｒ−８１６；Ｐ−８０３〜Ｐ−
８１７；Ｌ−８０４〜Ｋ−８１８；Ｔ−８０５〜Ｉ−８１９；Ｉ−８０６〜Ｋ−
８２０；Ｑ−８０７〜Ｙ−８２１；Ｖ−８０８〜Ｔ−８２２；Ｌ−８０９〜Ｙ−
８２３；Ｔ−８１０〜Ｆ−８２４；Ｖ−８１１〜Ｖ−８２５；Ｇ−８１２〜Ｋ−
８２６；Ｎ−８１３〜Ｋ−８２７；Ａ−８１４〜Ｋ−８２８；Ｌ−８１５〜Ｋ−
８２９；Ｒ−８１６〜Ｅ−８３０；Ｐ−８１７〜Ｓ−８３１；Ｋ−８１８〜Ｆ−
８３２；Ｉ−８１９〜Ｎ−８３３；Ｋ−８２０〜Ａ−８３４；Ｙ−８２１〜Ｉ−
８３５；Ｔ−８２２〜Ｐ−８３６；Ｙ−８２３〜Ｔ−８３７；Ｆ−８２４〜Ｆ−
８３８；Ｖ−８２５〜Ｓ−８３９；Ｋ−８２６〜Ａ−８４０；Ｋ−８２７〜Ｗ−
８４１；Ｋ−８２８〜Ｖ−８４２；Ｋ−８２９〜Ｉ−８４３；Ｅ−８３０〜Ｅ−
８４４；Ｓ−８３１〜Ｅ−８４５；Ｆ−８３２〜Ｗ−８４６；Ｎ−８３３〜Ｇ−
８４７；Ａ−８３４〜Ｅ−８４８；Ｉ−８３５〜Ｃ−８４９；Ｐ−８３６〜Ｓ−
８５０；Ｔ−８３７〜Ｋ−８５１；Ｆ−８３８〜Ｓ−８５２；Ｓ−８３９〜Ｃ−
８５３；Ａ−８４０〜Ｅ−８５４；Ｗ−８４１〜Ｌ−８５５；Ｖ−８４２〜Ｇ−
８５６；Ｉ−８４３〜Ｗ−８５７；Ｅ−８４４〜Ｑ−８５８；Ｅ−８４５〜Ｒ−
８５９；Ｗ−８４６〜Ｒ−８６０；Ｇ−８４７〜Ｌ−８６１；Ｅ−８４８〜Ｖ−
８６２；Ｃ−８４９〜Ｅ−８６３；Ｓ−８５０〜Ｃ−８６４；Ｋ−８５１〜Ｒ−
８６５；Ｓ−８５２〜Ｄ−８６６；Ｃ−８５３〜Ｉ−８６７；Ｅ−８５４〜Ｎ−
８６８；Ｌ−８５５〜Ｇ−８６９；Ｇ−８５６〜Ｑ−８７０；Ｗ−８５７〜Ｐ−
８７１；Ｑ−８５８〜Ａ−８７２；Ｒ−８５９〜Ｓ−８７３；Ｒ−８６０〜Ｅ−
８７４；Ｌ−８６１〜Ｃ−８７５；Ｖ−８６２〜Ａ−８７６；Ｅ−８６３〜Ｋ−
８７７；Ｃ−８６４〜Ｅ−８７８；Ｒ−８６５〜Ｖ−８７９；Ｄ−８６６〜Ｋ−
８８０；Ｉ−８６７〜Ｐ−８８１；Ｎ−８６８〜Ａ−８８２；Ｇ−８６９〜Ｓ−
８８３；Ｑ−８７０〜Ｔ−８８４；Ｐ−８７１〜Ｒ−８８５；Ａ−８７２〜Ｐ−
８８６；Ｓ−８７３〜Ｃ−８８７；Ｅ−８７４〜Ａ−８８８；Ｃ−８７５〜Ｄ−
８８９；Ａ−８７６〜Ｈ−８９０；Ｋ−８７７〜Ｐ−８９１；Ｅ−８７８〜Ｃ−
８９２；Ｖ−８７９〜Ｐ−８９３；Ｋ−８８０〜Ｑ−８９４；Ｐ−８８１〜Ｗ−
８９５；Ａ−８８２〜Ｑ−８９６；Ｓ−８８３〜Ｌ−８９７；Ｔ−８８４〜Ｇ−
８９８；Ｒ−８８５〜Ｅ−８９９；Ｐ−８８６〜Ｗ−９００；Ｃ−８８７〜Ｓ−
９０１；Ａ−８８８〜Ｓ−９０２；Ｄ−８８９〜Ｃ−９０３；Ｈ−８９０〜Ｓ−
９０４；Ｐ−８９１〜Ｋ−９０５；Ｃ−８９２〜Ｔ−９０６；Ｐ−８９３〜Ｃ−
９０７；Ｑ−８９４〜Ｇ−９０８；Ｗ−８９５〜Ｋ−９０９；Ｑ−８９６〜Ｇ−
９１０；Ｌ−８９７〜Ｙ−９１１；Ｇ−８９８〜Ｋ−９１２；Ｅ−８９９〜Ｋ−
９１３；Ｗ−９００〜Ｒ−９１４；Ｓ−９０１〜Ｓ−９１５；Ｓ−９０２〜Ｌ−
９１６；Ｃ−９０３〜Ｋ−９１７；Ｓ−９０４〜Ｃ−９１８；Ｋ−９０５〜Ｌ−
９１９；Ｔ−９０６〜Ｓ−９２０；Ｃ−９０７〜Ｈ−９２１；Ｇ−９０８〜Ｄ−
９２２；Ｋ−９０９〜Ｇ−９２３；Ｇ−９１０〜Ｇ−９２４；Ｙ−９１１〜Ｖ−
９２５；Ｋ−９１２〜Ｌ−９２６；Ｋ−９１３〜Ｓ−９２７；Ｒ−９１４〜Ｈ−
９２８；Ｓ−９１５〜Ｅ−９２９；Ｌ−９１６〜Ｓ−９３０；Ｋ−９１７〜Ｃ−
９３１；Ｃ−９１８〜Ｄ−９３２；Ｌ−９１９〜Ｐ−９３３；Ｓ−９２０〜Ｌ−
９３４；Ｈ−９２１〜Ｋ−９３５；Ｄ−９２２〜Ｋ−９３６；Ｇ−９２３〜Ｐ−
９３７；Ｇ−９２４〜Ｋ−９３８；Ｖ−９２５〜Ｈ−９３９；Ｌ−９２６〜Ｆ−
９４０；Ｓ−９２７〜Ｉ−９４１；Ｈ−９２８〜Ｄ−９４２；Ｅ−９２９〜Ｆ−
９４３；Ｓ−９３０〜Ｃ−９４４；Ｃ−９３１〜Ｔ−９４５；Ｄ−９３２〜Ｍ−
９４６；Ｐ−９３３〜Ａ−９４７；Ｌ−９３４〜Ｅ−９４８；Ｋ−９３５〜Ｃ−
９４９；および／またはＫ−９３６〜Ｓ−９５０。
【０１９０】
同様に、好ましいＭＥＴＨ２の抗原性エピトープは、以下の残基のアミノ酸配
列を含むか、あるいは以下の残基のアミノ酸配列からなる：配列番号４のＭ−１
〜Ｌ−１５；Ｆ−２〜Ｌ−１６；Ｐ−３〜Ｌ−１７；Ａ−４〜Ｌ−１８；Ｐ−５
〜Ｌ−１９；Ａ−６〜Ｌ−２０；Ａ−７〜Ｌ−２１；Ｐ−８〜Ｌ−２２；Ｒ−９
〜Ｐ−２３；Ｗ−１０〜Ｌ−２４；Ｌ−１１〜Ａ−２５；Ｐ−１２〜Ｒ−２６；
Ｆ−１３〜Ｇ−２７；Ｌ−１４〜Ａ−２８；Ｌ−１５〜Ｐ−２９；Ｌ−１６〜Ａ
−３０；Ｌ−１７〜Ｒ−３１；Ｌ−１８〜Ｐ−３２；Ｌ−１９〜Ａ−３３；Ｌ−
２０〜Ａ−３４；Ｌ−２１〜Ｇ−３５；Ｌ−２２〜Ｇ−３６；Ｐ−２３〜Ｑ−３
７；Ｌ−２４〜Ａ−３８；Ａ−２５〜Ｓ−３９；Ｒ−２６〜Ｅ−４０；Ｇ−２７
〜Ｌ−４１；Ａ−２８〜Ｖ−４２；Ｐ−２９〜Ｖ−４３；Ａ−３０〜Ｐ−４４；
Ｒ−３１〜Ｔ−４５；Ｐ−３２〜Ｒ−４６；Ａ−３３〜Ｌ−４７；Ａ−３４〜Ｐ
−４８；Ｇ−３５〜Ｇ−４９；Ｇ−３６〜Ｓ−５０；Ｑ−３７〜Ａ−５１；Ａ−
３８〜Ｇ−５２；Ｓ−３９〜Ｅ−５３；Ｅ−４０〜Ｌ−５４；Ｌ−４１〜Ａ−５
５；Ｖ−４２〜Ｌ−５６；Ｖ−４３〜Ｈ−５７；Ｐ−４４〜Ｌ−５８；Ｔ−４５
〜Ｓ−５９；Ｒ−４６〜Ａ−６０；Ｌ−４７〜Ｆ−６１；Ｐ−４８〜Ｇ−６２；
Ｇ−４９〜Ｋ−６３；Ｓ−５０〜Ｇ−６４；Ａ−５１〜Ｆ−６５；Ｇ−５２〜Ｖ
−６６；Ｅ−５３〜Ｌ−６７；Ｌ−５４〜Ｒ−６８；Ａ−５５〜Ｌ−６９；Ｌ−
５６〜Ａ−７０；Ｈ−５７〜Ｐ−７１；Ｌ−５８〜Ｄ−７２；Ｓ−５９〜Ｄ−７
３；Ａ−６０〜Ｓ−７４；Ｆ−６１〜Ｆ−７５；Ｇ−６２〜Ｌ−７６；Ｋ−６３
〜Ａ−７７；Ｇ−６４〜Ｐ−７８；Ｆ−６５〜Ｅ−７９；Ｖ−６６〜Ｆ−８０；
Ｌ−６７〜Ｋ−８１；Ｒ−６８〜Ｉ−８２；Ｌ−６９〜Ｅ−８３；Ａ−７０〜Ｒ
−８４；Ｐ−７１〜Ｌ−８５；Ｄ−７２〜Ｇ−８６；Ｄ−７３〜Ｇ−８７；Ｓ−
７４〜Ｓ−８８；Ｆ−７５〜Ｇ−８９；Ｌ−７６〜Ｒ−９０；Ａ−７７〜Ａ−９
１；Ｐ−７８〜Ｔ−９２；Ｅ−７９〜Ｇ−９３；Ｆ−８０〜Ｇ−９４；Ｋ−８１
〜Ｅ−９５；Ｉ−８２〜Ｒ−９６；Ｅ−８３〜Ｇ−９７；Ｒ−８４〜Ｌ−９８；
Ｌ−８５〜Ｒ−９９；Ｇ−８６〜Ｇ−１００；Ｇ−８７〜Ｃ−１０１；Ｓ−８８
〜Ｆ−１０２；Ｇ−８９〜Ｆ−１０３；Ｒ−９０〜Ｓ−１０４；Ａ−９１〜Ｇ−
１０５；Ｔ−９２〜Ｔ−１０６；Ｇ−９３〜Ｖ−１０７；Ｇ−９４〜Ｎ−１０８
；Ｅ−９５〜Ｇ−１０９；Ｒ−９６〜Ｅ−１１０；Ｇ−９７〜Ｐ−１１１；Ｌ−
９８〜Ｅ−１１２；Ｒ−９９〜Ｓ−１１３；Ｇ−１００〜Ｌ−１１４；Ｃ−１０
１〜Ａ−１１５；Ｆ−１０２〜Ａ−１１６；Ｆ−１０３〜Ｖ−１１７；Ｓ−１０
４〜Ｓ−１１８；Ｇ−１０５〜Ｌ−１１９；Ｔ−１０６〜Ｃ−１２０；Ｖ−１０
７〜Ｒ−１２１；Ｎ−１０８〜Ｇ−１２２；Ｇ−１０９〜Ｌ−１２３；Ｅ−１１
０〜Ｓ−１２４；Ｐ−１１１〜Ｇ−１２５；Ｅ−１１２〜Ｓ−１２６；Ｓ−１１
３〜Ｆ−１２７；Ｌ−１１４〜Ｌ−１２８；Ａ−１１５〜Ｌ−１２９；Ａ−１１
６〜Ｄ−１３０；Ｖ−１１７〜Ｇ−１３１；Ｓ−１１８〜Ｅ−１３２；Ｌ−１１
９〜Ｅ−１３３；Ｃ−１２０〜Ｆ−１３４；Ｒ−１２１〜Ｔ−１３５；Ｇ−１２
２〜Ｉ−１３６；Ｌ−１２３〜Ｑ−１３７；Ｓ−１２４〜Ｐ−１３８；Ｇ−１２
５〜Ｑ−１３９；Ｓ−１２６〜Ｇ−１４０；Ｆ−１２７〜Ａ−１４１；Ｌ−１２
８〜Ｇ−１４２；Ｌ−１２９〜Ｇ−１４３；Ｄ−１３０〜Ｓ−１４４；Ｇ−１３
１〜Ｌ−１４５；Ｅ−１３２〜Ａ−１４６；Ｅ−１３３〜Ｑ−１４７；Ｆ−１３
４〜Ｐ−１４８；Ｔ−１３５〜Ｈ−１４９；Ｉ−１３６〜Ｒ−１５０；Ｑ−１３
７〜Ｌ−１５１；Ｐ−１３８〜Ｑ−１５２；Ｑ−１３９〜Ｒ−１５３；Ｇ−１４
０〜Ｗ−１５４；Ａ−１４１〜Ｇ−１５５；Ｇ−１４２〜Ｐ−１５６；Ｇ−１４
３〜Ａ−１５７；Ｓ−１４４〜Ｇ−１５８；Ｌ−１４５〜Ａ−１５９；Ａ−１４
６〜Ｒ−１６０；Ｑ−１４７〜Ｐ−１６１；Ｐ−１４８〜Ｌ−１６２；Ｈ−１４
９〜Ｐ−１６３；Ｒ−１５０〜Ｒ−１６４；Ｌ−１５１〜Ｇ−１６５；Ｑ−１５
２〜Ｐ−１６６；Ｒ−１５３〜Ｅ−１６７；Ｗ−１５４〜Ｗ−１６８；Ｇ−１５
５〜Ｅ−１６９；Ｐ−１５６〜Ｖ−１７０；Ａ−１５７〜Ｅ−１７１；Ｇ−１５
８〜Ｔ−１７２；Ａ−１５９〜Ｇ−１７３；Ｒ−１６０〜Ｅ−１７４；Ｐ−１６
１〜Ｇ−１７５；Ｌ−１６２〜Ｑ−１７６；Ｐ−１６３〜Ｒ−１７７；Ｒ−１６
４〜Ｑ−１７８；Ｇ−１６５〜Ｅ−１７９；Ｐ−１６６〜Ｒ−１８０；Ｅ−１６
７〜Ｇ−１８１；Ｗ−１６８〜Ｄ−１８２；Ｅ−１６９〜Ｈ−１８３；Ｖ−１７
０〜Ｑ−１８４；Ｅ−１７１〜Ｅ−１８５；Ｔ−１７２〜Ｄ−１８６；Ｇ−１７
３〜Ｓ−１８７；Ｅ−１７４〜Ｅ−１８８；Ｇ−１７５〜Ｅ−１８９；Ｑ−１７
６〜Ｅ−１９０；Ｒ−１７７〜Ｓ−１９１；Ｑ−１７８〜Ｑ−１９２；Ｅ−１７
９〜Ｅ−１９３；Ｒ−１８０〜Ｅ−１９４；Ｇ−１８１〜Ｅ−１９５；Ｄ−１８
２〜Ａ−１９６；Ｈ−１８３〜Ｅ−１９７；Ｑ−１８４〜Ｇ−１９８；Ｅ−１８
５〜Ａ−１９９；Ｄ−１８６〜Ｓ−２００；Ｓ−１８７〜Ｅ−２０１；Ｅ−１８
８〜Ｐ−２０２；Ｅ−１８９〜Ｐ−２０３；Ｅ−１９０〜Ｐ−２０４；Ｓ−１９
１〜Ｐ−２０５；Ｑ−１９２〜Ｌ−２０６；Ｅ−１９３〜Ｇ−２０７；Ｅ−１９
４〜Ａ−２０８；Ｅ−１９５〜Ｔ−２０９；Ａ−１９６〜Ｓ−２１０；Ｅ−１９
７〜Ｒ−２１１；Ｇ−１９８〜Ｔ−２１２；Ａ−１９９〜Ｋ−２１３；Ｓ−２０
０〜Ｒ−２１４；Ｅ−２０１〜Ｆ−２１５；Ｐ−２０２〜Ｖ−２１６；Ｐ−２０
３〜Ｓ−２１７；Ｐ−２０４〜Ｅ−２１８；Ｐ−２０５〜Ａ−２１９；Ｌ−２０
６〜Ｒ−２２０；Ｇ−２０７〜Ｆ−２２１；Ａ−２０８〜Ｖ−２２２；Ｔ−２０
９〜Ｅ−２２３；Ｓ−２１０〜Ｔ−２２４；Ｒ−２１１〜Ｌ−２２５；Ｔ−２１
２〜Ｌ−２２６；Ｋ−２１３〜Ｖ−２２７；Ｒ−２１４〜Ａ−２２８；Ｆ−２１
５〜Ｄ−２２９；Ｖ−２１６〜Ａ−２３０；Ｓ−２１７〜Ｓ−２３１；Ｅ−２１
８〜Ｍ−２３２；Ａ−２１９〜Ａ−２３３；Ｒ−２２０〜Ａ−２３４；Ｆ−２２
１〜Ｆ−２３５；Ｖ−２２２〜Ｙ−２３６；Ｅ−２２３〜Ｇ−２３７；Ｔ−２２
４〜Ａ−２３８；Ｌ−２２５〜Ｄ−２３９；Ｌ−２２６〜Ｌ−２４０；Ｖ−２２
７〜Ｑ−２４１；Ａ−２２８〜Ｎ−２４２；Ｄ−２２９〜Ｈ−２４３；Ａ−２３
０〜Ｉ−２４４；Ｓ−２３１〜Ｌ−２４５；Ｍ−２３２〜Ｔ−２４６；Ａ−２３
３〜Ｌ−２４７；Ａ−２３４〜Ｍ−２４８；Ｆ−２３５〜Ｓ−２４９；Ｙ−２３
６〜Ｖ−２５０；Ｇ−２３７〜Ａ−２５１；Ａ−２３８〜Ａ−２５２；Ｄ−２３
９〜Ｒ−２５３；Ｌ−２４０〜Ｉ−２５４；Ｑ−２４１〜Ｙ−２５５；Ｎ−２４
２〜Ｋ−２５６；Ｈ−２４３〜Ｈ−２５７；Ｉ−２４４〜Ｐ−２５８；Ｌ−２４
５〜Ｓ−２５９；Ｔ−２４６〜Ｉ−２６０；Ｌ−２４７〜Ｋ−２６１；Ｍ−２４
８〜Ｎ−２６２；Ｓ−２４９〜Ｓ−２６３；Ｖ−２５０〜Ｉ−２６４；Ａ−２５
１〜Ｎ−２６５；Ａ−２５２〜Ｌ−２６６；Ｒ−２５３〜Ｍ−２６７；Ｉ−２５
４〜Ｖ−２６８；Ｙ−２５５〜Ｖ−２６９；Ｋ−２５６〜Ｋ−２７０；Ｈ−２５
７〜Ｖ−２７１；Ｐ−２５８〜Ｌ−２７２；Ｓ−２５９〜Ｉ−２７３；Ｉ−２６
０〜Ｖ−２７４；Ｋ−２６１〜Ｅ−２７５；Ｎ−２６２〜Ｄ−２７６；Ｓ−２６
３〜Ｅ−２７７；Ｉ−２６４〜Ｋ−２７８；Ｎ−２６５〜Ｗ−２７９；Ｌ−２６
６〜Ｇ−２８０；Ｍ−２６７〜Ｐ−２８１；Ｖ−２６８〜Ｅ−２８２；Ｖ−２６
９〜Ｖ−２８３；Ｋ−２７０〜Ｓ−２８４；Ｖ−２７１〜Ｄ−２８５；Ｌ−２７
２〜Ｎ−２８６；Ｉ−２７３〜Ｇ−２８７；Ｖ−２７４〜Ｇ−２８８；Ｅ−２７
５〜Ｌ−２８９；Ｄ−２７６〜Ｔ−２９０；Ｅ−２７７〜Ｌ−２９１；Ｋ−２７
８〜Ｒ−２９２；Ｗ−２７９〜Ｎ−２９３；Ｇ−２８０〜Ｆ−２９４；Ｐ−２８
１〜Ｃ−２９５；Ｅ−２８２〜Ｎ−２９６；Ｖ−２８３〜Ｗ−２９７；Ｓ−２８
４〜Ｑ−２９８；Ｄ−２８５〜Ｒ−２９９；Ｎ−２８６〜Ｒ−３００；Ｇ−２８
７〜Ｆ−３０１；Ｇ−２８８〜Ｎ−３０２；Ｌ−２８９〜Ｑ−３０３；Ｔ−２９
０〜Ｐ−３０４；Ｌ−２９１〜Ｓ−３０５；Ｒ−２９２〜Ｄ−３０６；Ｎ−２９
３〜Ｒ−３０７；Ｆ−２９４〜Ｈ−３０８；Ｃ−２９５〜Ｐ−３０９；Ｎ−２９
６〜Ｅ−３１０；Ｗ−２９７〜Ｈ−３１１；Ｑ−２９８〜Ｙ−３１２；Ｒ−２９
９〜Ｄ−３１３；Ｒ−３００〜Ｔ−３１４；Ｆ−３０１〜Ａ−３１５；Ｎ−３０
２〜Ｉ−３１６；Ｑ−３０３〜Ｌ−３１７；Ｐ−３０４〜Ｌ−３１８；Ｓ−３０
５〜Ｔ−３１９；Ｄ−３０６〜Ｒ−３２０；Ｒ−３０７〜Ｑ−３２１；Ｈ−３０
８〜Ｎ−３２２；Ｐ−３０９〜Ｆ−３２３；Ｅ−３１０〜Ｃ−３２４；Ｈ−３１
１〜Ｇ−３２５；Ｙ−３１２〜Ｑ−３２６；Ｄ−３１３〜Ｅ−３２７；Ｔ−３１
４〜Ｇ−３２８；Ａ−３１５〜Ｌ−３２９；Ｉ−３１６〜Ｃ−３３０；Ｌ−３１
７〜Ｄ−３３１；Ｌ−３１８〜Ｔ−３３２；Ｔ−３１９〜Ｌ−３３３；Ｒ−３２
０〜Ｇ−３３４；Ｑ−３２１〜Ｖ−３３５；Ｎ−３２２〜Ａ−３３６；Ｆ−３２
３〜Ｄ−３３７；Ｃ−３２４〜Ｉ−３３８；Ｇ−３２５〜Ｇ−３３９；Ｑ−３２
６〜Ｔ−３４０；Ｅ−３２７〜Ｉ−３４１；Ｇ−３２８〜Ｃ−３４２；Ｌ−３２
９〜Ｄ−３４３；Ｃ−３３０〜Ｐ−３４４；Ｄ−３３１〜Ｎ−３４５；Ｔ−３３
２〜Ｋ−３４６；Ｌ−３３３〜Ｓ−３４７；Ｇ−３３４〜Ｃ−３４８；Ｖ−３３
５〜Ｓ−３４９；Ａ−３３６〜Ｖ−３５０；Ｄ−３３７〜Ｉ−３５１；Ｉ−３３
８〜Ｅ−３５２；Ｇ−３３９〜Ｄ−３５３；Ｔ−３４０〜Ｅ−３５４；Ｉ−３４
１〜Ｇ−３５５；Ｃ−３４２〜Ｌ−３５６；Ｄ−３４３〜Ｑ−３５７；Ｐ−３４
４〜Ａ−３５８；Ｎ−３４５〜Ａ−３５９；Ｋ−３４６〜Ｈ−３６０；Ｓ−３４
７〜Ｔ−３６１；Ｃ−３４８〜Ｌ−３６２；Ｓ−３４９〜Ａ−３６３；Ｖ−３５
０〜Ｈ−３６４；Ｉ−３５１〜Ｅ−３６５；Ｅ−３５２〜Ｌ−３６６；Ｄ−３５
３〜Ｇ−３６７；Ｅ−３５４〜Ｈ−３６８；Ｇ−３５５〜Ｖ−３６９；Ｌ−３５
６〜Ｌ−３７０；Ｑ−３５７〜Ｓ−３７１；Ａ−３５８〜Ｍ−３７２；Ａ−３５
９〜Ｐ−３７３；Ｈ−３６０〜Ｈ−３７４；Ｔ−３６１〜Ｄ−３７５；Ｌ−３６
２〜Ｄ−３７６；Ａ−３６３〜Ｓ−３７７；Ｈ−３６４〜Ｋ−３７８；Ｅ−３６
５〜Ｐ−３７９；Ｌ−３６６〜Ｃ−３８０；Ｇ−３６７〜Ｔ−３８１；Ｈ−３６
８〜Ｒ−３８２；Ｖ−３６９〜Ｌ−３８３；Ｌ−３７０〜Ｆ−３８４；Ｓ−３７
１〜Ｇ−３８５；Ｍ−３７２〜Ｐ−３８６；Ｐ−３７３〜Ｍ−３８７；Ｈ−３７
４〜Ｇ−３８８；Ｄ−３７５〜Ｋ−３８９；Ｄ−３７６〜Ｈ−３９０；Ｓ−３７
７〜Ｈ−３９１；Ｋ−３７８〜Ｖ−３９２；Ｐ−３７９〜Ｍ−３９３；Ｃ−３８
０〜Ａ−３９４；Ｔ−３８１〜Ｐ−３９５；Ｒ−３８２〜Ｌ−３９６；Ｌ−３８
３〜Ｆ−３９７；Ｆ−３８４〜Ｖ−３９８；Ｇ−３８５〜Ｈ−３９９；Ｐ−３８
６〜Ｌ−４００；Ｍ−３８７〜Ｎ−４０１；Ｇ−３８８〜Ｑ−４０２；Ｋ−３８
９〜Ｔ−４０３；Ｈ−３９０〜Ｌ−４０４；Ｈ−３９１〜Ｐ−４０５；Ｖ−３９
２〜Ｗ−４０６；Ｍ−３９３〜Ｓ−４０７；Ａ−３９４〜Ｐ−４０８；Ｐ−３９
５〜Ｃ−４０９；Ｌ−３９６〜Ｓ−４１０；Ｆ−３９７〜Ａ−４１１；Ｖ−３９
８〜Ｍ−４１２；Ｈ−３９９〜Ｙ−４１３；Ｌ−４００〜Ｌ−４１４；Ｎ−４０
１〜Ｔ−４１５；Ｑ−４０２〜Ｅ−４１６；Ｔ−４０３〜Ｌ−４１７；Ｌ−４０
４〜Ｌ−４１８；Ｐ−４０５〜Ｄ−４１９；Ｗ−４０６〜Ｇ−４２０；Ｓ−４０
７〜Ｇ−４２１；Ｐ−４０８〜Ｈ−４２２；Ｃ−４０９〜Ｇ−４２３；Ｓ−４１
０〜Ｄ−４２４；Ａ−４１１〜Ｃ−４２５；Ｍ−４１２〜Ｌ−４２６；Ｙ−４１
３〜Ｌ−４２７；Ｌ−４１４〜Ｄ−４２８；Ｔ−４１５〜Ａ−４２９；Ｅ−４１
６〜Ｐ−４３０；Ｌ−４１７〜Ｇ−４３１；Ｌ−４１８〜Ａ−４３２；Ｄ−４１
９〜Ａ−４３３；Ｇ−４２０〜Ｌ−４３４；Ｇ−４２１〜Ｐ−４３５；Ｈ−４２
２〜Ｌ−４３６；Ｇ−４２３〜Ｐ−４３７；Ｄ−４２４〜Ｔ−４３８；Ｃ−４２
５〜Ｇ−４３９；Ｌ−４２６〜Ｌ−４４０；Ｌ−４２７〜Ｐ−４４１；Ｄ−４２
８〜Ｇ−４４２；Ａ−４２９〜Ｒ−４４３；Ｐ−４３０〜Ｍ−４４４；Ｇ−４３
１〜Ａ−４４５；Ａ−４３２〜Ｌ−４４６；Ａ−４３３〜Ｙ−４４７；Ｌ−４３
４〜Ｑ−４４８；Ｐ−４３５〜Ｌ−４４９；Ｌ−４３６〜Ｄ−４５０；Ｐ−４３
７〜Ｑ−４５１；Ｔ−４３８〜Ｑ−４５２；Ｇ−４３９〜Ｃ−４５３；Ｌ−４４
０〜Ｒ−４５４；Ｐ−４４１〜Ｑ−４５５；Ｇ−４４２〜Ｉ−４５６；Ｒ−４４
３〜Ｆ−４５７；Ｍ−４４４〜Ｇ−４５８；Ａ−４４５〜Ｐ−４５９；Ｌ−４４
６〜Ｄ−４６０；Ｙ−４４７〜Ｆ−４６１；Ｑ−４４８〜Ｒ−４６２；Ｌ−４４
９〜Ｈ−４６３；Ｄ−４５０〜Ｃ−４６４；Ｑ−４５１〜Ｐ−４６５；Ｑ−４５
２〜Ｎ−４６６；Ｃ−４５３〜Ｔ−４６７；Ｒ−４５４〜Ｓ−４６８；Ｑ−４５
５〜Ａ−４６９；Ｉ−４５６〜Ｑ−４７０；Ｆ−４５７〜Ｄ−４７１；Ｇ−４５
８〜Ｖ−４７２；Ｐ−４５９〜Ｃ−４７３；Ｄ−４６０〜Ａ−４７４；Ｆ−４６
１〜Ｑ−４７５；Ｒ−４６２〜Ｌ−４７６；Ｈ−４６３〜Ｗ−４７７；Ｃ−４６
４〜Ｃ−４７８；Ｐ−４６５〜Ｈ−４７９；Ｎ−４６６〜Ｔ−４８０；Ｔ−４６
７〜Ｄ−４８１；Ｓ−４６８〜Ｇ−４８２；Ａ−４６９〜Ａ−４８３；Ｑ−４７
０〜Ｅ−４８４；Ｄ−４７１〜Ｐ−４８５；Ｖ−４７２〜Ｌ−４８６；Ｃ−４７
３〜Ｃ−４８７；Ａ−４７４〜Ｈ−４８８；Ｑ−４７５〜Ｔ−４８９；Ｌ−４７
６〜Ｋ−４９０；Ｗ−４７７〜Ｎ−４９１；Ｃ−４７８〜Ｇ−４９２；Ｈ−４７
９〜Ｓ−４９３；Ｔ−４８０〜Ｌ−４９４；Ｄ−４８１〜Ｐ−４９５；Ｇ−４８
２〜Ｗ−４９６；Ａ−４８３〜Ａ−４９７；Ｅ−４８４〜Ｄ−４９８；Ｐ−４８
５〜Ｇ−４９９；Ｌ−４８６〜Ｔ−５００；Ｃ−４８７〜Ｐ−５０１；Ｈ−４８
８〜Ｃ−５０２；Ｔ−４８９〜Ｇ−５０３；Ｋ−４９０〜Ｐ−５０４；Ｎ−４９
１〜Ｇ−５０５；Ｇ−４９２〜Ｈ−５０６；Ｓ−４９３〜Ｌ−５０７；Ｌ−４９
４〜Ｃ−５０８；Ｐ−４９５〜Ｓ−５０９；Ｗ−４９６〜Ｅ−５１０；Ａ−４９
７〜Ｇ−５１１；Ｄ−４９８〜Ｓ−５１２；Ｇ−４９９〜Ｃ−５１３；Ｔ−５０
０〜Ｌ−５１４；Ｐ−５０１〜Ｐ−５１５；Ｃ−５０２〜Ｅ−５１６；Ｇ−５０
３〜Ｅ−５１７；Ｐ−５０４〜Ｅ−５１８；Ｇ−５０５〜Ｖ−５１９；Ｈ−５０
６〜Ｅ−５２０；Ｌ−５０７〜Ｒ−５２１；Ｃ−５０８〜Ｐ−５２２；Ｓ−５０
９〜Ｋ−５２３；Ｅ−５１０〜Ｐ−５２４；Ｇ−５１１〜Ｖ−５２５；Ｓ−５１
２〜Ｖ−５２６；Ｃ−５１３〜Ｄ−５２７；Ｌ−５１４〜Ｇ−５２８；Ｐ−５１
５〜Ｇ−５２９；Ｅ−５１６〜Ｗ−５３０；Ｅ−５１７〜Ａ−５３１；Ｅ−５１
８〜Ｐ−５３２；Ｖ−５１９〜Ｗ−５３３；Ｅ−５２０〜Ｇ−５３４；Ｒ−５２
１〜Ｐ−５３５；Ｐ−５２２〜Ｗ−５３６；Ｋ−５２３〜Ｇ−５３７；Ｐ−５２
４〜Ｅ−５３８；Ｖ−５２５〜Ｃ−５３９；Ｖ−５２６〜Ｓ−５４０；Ｄ−５２
７〜Ｒ−５４１；Ｇ−５２８〜Ｔ−５４２；Ｇ−５２９〜Ｃ−５４３；Ｗ−５３
０〜Ｇ−５４４；Ａ−５３１〜Ｇ−５４５；Ｐ−５３２〜Ｇ−５４６；Ｗ−５３
３〜Ｖ−５４７；Ｇ−５３４〜Ｑ−５４８；Ｐ−５３５〜Ｆ−５４９；Ｗ−５３
６〜Ｓ−５５０；Ｇ−５３７〜Ｈ−５５１；Ｅ−５３８〜Ｒ−５５２；Ｃ−５３
９〜Ｅ−５５３；Ｓ−５４０〜Ｃ−５５４；Ｒ−５４１〜Ｋ−５５５；Ｔ−５４
２〜Ｄ−５５６；Ｃ−５４３〜Ｐ−５５７；Ｇ−５４４〜Ｅ−５５８；Ｇ−５４
５〜Ｐ−５５９；Ｇ−５４６〜Ｑ−５６０；Ｖ−５４７〜Ｎ−５６１；Ｑ−５４
８〜Ｇ−５６２；Ｆ−５４９〜Ｇ−５６３；Ｓ−５５０〜Ｒ−５６４；Ｈ−５５
１〜Ｙ−５６５；Ｒ−５５２〜Ｃ−５６６；Ｅ−５５３〜Ｌ−５６７；Ｃ−５５
４〜Ｇ−５６８；Ｋ−５５５〜Ｒ−５６９；Ｄ−５５６〜Ｒ−５７０；Ｐ−５５
７〜Ａ−５７１；Ｅ−５５８〜Ｋ−５７２；Ｐ−５５９〜Ｙ−５７３；Ｑ−５６
０〜Ｑ−５７４；Ｎ−５６１〜Ｓ−５７５；Ｇ−５６２〜Ｃ−５７６；Ｇ−５６
３〜Ｈ−５７７；Ｒ−５６４〜Ｔ−５７８；Ｙ−５６５〜Ｅ−５７９；Ｃ−５６
６〜Ｅ−５８０；Ｌ−５６７〜Ｃ−５８１；Ｇ−５６８〜Ｐ−５８２；Ｒ−５６
９〜Ｐ−５８３；Ｒ−５７０〜Ｄ−５８４；Ａ−５７１〜Ｇ−５８５；Ｋ−５７
２〜Ｋ−５８６；Ｙ−５７３〜Ｓ−５８７；Ｑ−５７４〜Ｆ−５８８；Ｓ−５７
５〜Ｒ−５８９；Ｃ−５７６〜Ｅ−５９０；Ｈ−５７７〜Ｑ−５９１；Ｔ−５７
８〜Ｑ−５９２；Ｅ−５７９〜Ｃ−５９３；Ｅ−５８０〜Ｅ−５９４；Ｃ−５８
１〜Ｋ−５９５；Ｐ−５８２〜Ｙ−５９６；Ｐ−５８３〜Ｎ−５９７；Ｄ−５８
４〜Ａ−５９８；Ｇ−５８５〜Ｙ−５９９；Ｋ−５８６〜Ｎ−６００；Ｓ−５８
７〜Ｙ−６０１；Ｆ−５８８〜Ｔ−６０２；Ｒ−５８９〜Ｄ−６０３；Ｅ−５９
０〜Ｍ−６０４；Ｑ−５９１〜Ｄ−６０５；Ｑ−５９２〜Ｇ−６０６；Ｃ−５９
３〜Ｎ−６０７；Ｅ−５９４〜Ｌ−６０８；Ｋ−５９５〜Ｌ−６０９；Ｙ−５９
６〜Ｑ−６１０；Ｎ−５９７〜Ｗ−６１１；Ａ−５９８〜Ｖ−６１２；Ｙ−５９
９〜Ｐ−６１３；Ｎ−６００〜Ｋ−６１４；Ｙ−６０１〜Ｙ−６１５；Ｔ−６０
２〜Ａ−６１６；Ｄ−６０３〜Ｇ−６１７；Ｍ−６０４〜Ｖ−６１８；Ｄ−６０
５〜Ｓ−６１９；Ｇ−６０６〜Ｐ−６２０；Ｎ−６０７〜Ｒ−６２１；Ｌ−６０
８〜Ｄ−６２２；Ｌ−６０９〜Ｒ−６２３；Ｑ−６１０〜Ｃ−６２４；Ｗ−６１
１〜Ｋ−６２５；Ｖ−６１２〜Ｌ−６２６；Ｐ−６１３〜Ｆ−６２７；Ｋ−６１
４〜Ｃ−６２８；Ｙ−６１５〜Ｒ−６２９；Ａ−６１６〜Ａ−６３０；Ｇ−６１
７〜Ｒ−６３１；Ｖ−６１８〜Ｇ−６３２；Ｓ−６１９〜Ｒ−６３３；Ｐ−６２
０〜Ｓ−６３４；Ｒ−６２１〜Ｅ−６３５；Ｄ−６２２〜Ｆ−６３６；Ｒ−６２
３〜Ｋ−６３７；Ｃ−６２４〜Ｖ−６３８；Ｋ−６２５〜Ｆ−６３９；Ｌ−６２
６〜Ｅ−６４０；Ｆ−６２７〜Ａ−６４１；Ｃ−６２８〜Ｋ−６４２；Ｒ−６２
９〜Ｖ−６４３；Ａ−６３０〜Ｉ−６４４；Ｒ−６３１〜Ｄ−６４５；Ｇ−６３
２〜Ｇ−６４６；Ｒ−６３３〜Ｔ−６４７；Ｓ−６３４〜Ｌ−６４８；Ｅ−６３
５〜Ｃ−６４９；Ｆ−６３６〜Ｇ−６５０；Ｋ−６３７〜Ｐ−６５１；Ｖ−６３
８〜Ｅ−６５２；Ｆ−６３９〜Ｔ−６５３；Ｅ−６４０〜Ｌ−６５４；Ａ−６４
１〜Ａ−６５５；Ｋ−６４２〜Ｉ−６５６；Ｖ−６４３〜Ｃ−６５７；Ｉ−６４
４〜Ｖ−６５８；Ｄ−６４５〜Ｒ−６５９；Ｇ−６４６〜Ｇ−６６０；Ｔ−６４
７〜Ｑ−６６１；Ｌ−６４８〜Ｃ−６６２；Ｃ−６４９〜Ｖ−６６３；Ｇ−６５
０〜Ｋ−６６４；Ｐ−６５１〜Ａ−６６５；Ｅ−６５２〜Ｇ−６６６；Ｔ−６５
３〜Ｃ−６６７；Ｌ−６５４〜Ｄ−６６８；Ａ−６５５〜Ｈ−６６９；Ｉ−６５
６〜Ｖ−６７０；Ｃ−６５７〜Ｖ−６７１；Ｖ−６５８〜Ｄ−６７２；Ｒ−６５
９〜Ｓ−６７３；Ｇ−６６０〜Ｐ−６７４；Ｑ−６６１〜Ｒ−６７５；Ｃ−６６
２〜Ｋ−６７６；Ｖ−６６３〜Ｌ−６７７；Ｋ−６６４〜Ｄ−６７８；Ａ−６６
５〜Ｋ−６７９；Ｇ−６６６〜Ｃ−６８０；Ｃ−６６７〜Ｇ−６８１；Ｄ−６６
８〜Ｖ−６８２；Ｈ−６６９〜Ｃ−６８３；Ｖ−６７０〜Ｇ−６８４；Ｖ−６７
１〜Ｇ−６８５；Ｄ−６７２〜Ｋ−６８６；Ｓ−６７３〜Ｇ−６８７；Ｐ−６７
４〜Ｎ−６８８；Ｒ−６７５〜Ｓ−６８９；Ｋ−６７６〜Ｃ−６９０；Ｌ−６７
７〜Ｒ−６９１；Ｄ−６７８〜Ｋ−６９２；Ｋ−６７９〜Ｖ−６９３；Ｃ−６８
０〜Ｓ−６９４；Ｇ−６８１〜Ｇ−６９５；Ｖ−６８２〜Ｓ−６９６；Ｃ−６８
３〜Ｌ−６９７；Ｇ−６８４〜Ｔ−６９８；Ｇ−６８５〜Ｐ−６９９；Ｋ−６８
６〜Ｔ−７００；Ｇ−６８７〜Ｎ−７０１；Ｎ−６８８〜Ｙ−７０２；Ｓ−６８
９〜Ｇ−７０３；Ｃ−６９０〜Ｙ−７０４；Ｒ−６９１〜Ｎ−７０５；Ｋ−６９
２〜Ｄ−７０６；Ｖ−６９３〜Ｉ−７０７；Ｓ−６９４〜Ｖ−７０８；Ｇ−６９
５〜Ｔ−７０９；Ｓ−６９６〜Ｉ−７１０；Ｌ−６９７〜Ｐ−７１１；Ｔ−６９
８〜Ａ−７１２；Ｐ−６９９〜Ｇ−７１３；Ｔ−７００〜Ａ−７１４；Ｎ−７０
１〜Ｔ−７１５；Ｙ−７０２〜Ｎ−７１６；Ｇ−７０３〜Ｉ−７１７；Ｙ−７０
４〜Ｄ−７１８；Ｎ−７０５〜Ｖ−７１９；Ｄ−７０６〜Ｋ−７２０；１−７０
７〜Ｑ−７２１；Ｖ−７０８〜Ｒ−７２２；Ｔ−７０９〜Ｓ−７２３；Ｉ−７１
０〜Ｈ−７２４；Ｐ−７１１〜Ｐ−７２５；Ａ−７１２〜Ｇ−７２６；Ｇ−７１
３〜Ｖ−７２７；Ａ−７１４〜Ｑ−７２８；Ｔ−７１５〜Ｎ−７２９；Ｎ−７１
６〜Ｄ−７３０；Ｉ−７１７〜Ｇ−７３１；Ｄ−７１８〜Ｎ−７３２；Ｖ−７１
９〜Ｙ−７３３；Ｋ−７２０〜Ｌ−７３４；Ｑ−７２１〜Ａ−７３５；Ｒ−７２
２〜Ｌ−７３６；Ｓ−７２３〜Ｋ−７３７；Ｈ−７２４〜Ｔ−７３８；Ｐ−７２
５〜Ａ−７３９；Ｇ−７２６〜Ｄ−７４０；Ｖ−７２７〜Ｇ−７４１；Ｑ−７２
８〜Ｑ−７４２；Ｎ−７２９〜Ｙ−７４３；Ｄ−７３０〜Ｌ−７４４；Ｇ−７３
１〜Ｌ−７４５；Ｎ−７３２〜Ｎ−７４６；Ｙ−７３３〜Ｇ−７４７；Ｌ−７３
４〜Ｎ−７４８；Ａ−７３５〜Ｌ−７４９；Ｌ−７３６〜Ａ−７５０；Ｋ−７３
７〜Ｉ−７５１；Ｔ−７３８〜Ｓ−７５２；Ａ−７３９〜Ａ−７５３；Ｄ−７４
０〜Ｉ−７５４；Ｇ−７４１〜Ｅ−７５５；Ｑ−７４２〜Ｑ−７５６；Ｙ−７４
３〜Ｄ−７５７；Ｌ−７４４〜Ｉ−７５８；Ｌ−７４５〜Ｌ−７５９；Ｎ−７４
６〜Ｖ−７６０；Ｇ−７４７〜Ｋ−７６１；Ｎ−７４８〜Ｇ−７６２；Ｌ−７４
９〜Ｔ−７６３；Ａ−７５０〜１−７６４；Ｉ−７５１〜Ｌ−７６５；Ｓ−７５
２〜Ｋ−７６６；Ａ−７５３〜Ｙ−７６７；Ｉ−７５４〜Ｓ−７６８；Ｅ−７５
５〜Ｇ−７６９；Ｑ−７５６〜Ｓ−７７０；Ｄ−７５７〜Ｉ−７７１；Ｉ−７５
８〜Ａ−７７２；Ｌ−７５９〜Ｔ−７７３；Ｖ−７６０〜Ｌ−７７４；Ｋ−７６
１〜Ｅ−７７５；Ｇ−７６２〜Ｒ−７７６；Ｔ−７６３〜Ｌ−７７７；Ｉ−７６
４〜Ｑ−７７８；Ｌ−７６５〜Ｓ−７７９；Ｋ−７６６〜Ｆ−７８０；Ｙ−７６
７〜Ｒ−７８１；Ｓ−７６８〜Ｐ−７８２；Ｇ−７６９〜Ｌ−７８３；Ｓ−７７
０〜Ｐ−７８４；Ｉ−７７１〜Ｅ−７８５；Ａ−７７２〜Ｐ−７８６；Ｔ−７７
３〜Ｌ−７８７；Ｌ−７７４〜Ｔ−７８８；Ｅ−７７５〜Ｖ−７８９；Ｒ−７７
６〜Ｑ−７９０；Ｌ−７７７〜Ｌ−７９１；Ｑ−７７８〜Ｌ−７９２；Ｓ−７７
９〜Ｔ−７９３；Ｆ−７８０〜Ｖ−７９４；Ｒ−７８１〜Ｐ−７９５；Ｐ−７８
２〜Ｇ−７９６；Ｌ−７８３〜Ｅ−７９７；Ｐ−７８４〜Ｖ−７９８；Ｅ−７８
５〜Ｆ−７９９；Ｐ−７８６〜Ｐ−８００；Ｌ−７８７〜Ｐ−８０１；Ｔ−７８
８〜Ｋ−８０２；Ｖ−７８９〜Ｖ−８０３；Ｑ−７９０〜Ｋ−８０４；Ｌ−７９
１〜Ｙ−８０５；Ｌ−７９２〜Ｔ−８０６；Ｔ−７９３〜Ｆ−８０７；Ｖ−７９
４〜Ｆ−８０８；Ｐ−７９５〜Ｖ−８０９；Ｇ−７９６〜Ｐ−８１０；Ｅ−７９
７〜Ｎ−８１１；Ｖ−７９８〜Ｄ−８１２；Ｆ−７９９〜Ｖ−８１３；Ｐ−８０
０〜Ｄ−８１４；Ｐ−８０１〜Ｆ−８１５；Ｋ−８０２〜Ｓ−８１６；Ｖ−８０
３〜Ｍ−８１７；Ｋ−８０４〜Ｑ−８１８；Ｙ−８０５〜Ｓ−８１９；Ｔ８−０
６〜Ｓ−８２０；Ｆ−８０７〜Ｋ−８２１；Ｆ−８０８〜Ｅ−８２２；Ｖ−８０
９〜Ｒ−８２３；Ｐ−８１０〜Ａ−８２４；Ｎ−８１１〜Ｔ−８２５；Ｄ−８１
２〜Ｔ−８２６；Ｖ−８１３〜Ｎ−８２７；Ｄ−８１４〜Ｉ−８２８；Ｆ−８１
５〜Ｉ−８２９；Ｓ−８１６〜Ｑ ８３０；Ｍ−８１７〜Ｐ−８３１；Ｑ−８１
８〜Ｌ−８３２；Ｓ−８１９〜Ｌ−８３３；Ｓ−８２０〜Ｈ−８３４；Ｋ−８２
１〜Ａ−８３５；Ｅ−８２２〜Ｑ−８３６；Ｒ−８２３〜Ｗ−８３７；Ａ−８２
４〜Ｖ−８３８；Ｔ−８２５〜Ｌ−８３９；Ｔ−８２６〜Ｇ−８４０；Ｎ−８２
７〜Ｄ−８４１；Ｉ−８２８〜Ｗ−８４２；Ｉ−８２９〜Ｓ−８４３；Ｑ−８３
０〜Ｅ−８４４；Ｐ−８３１〜Ｃ−８４５；Ｌ−８３２〜Ｓ−８４６；Ｌ−８３
３〜Ｓ−８４７；Ｈ−８３４〜Ｔ−８４８；Ａ−８３５〜Ｃ−８４９；Ｑ−８３
６〜Ｇ−８５０；Ｗ−８３７〜Ａ−８５１；Ｖ−８３８〜Ｇ−８５２；Ｌ−８３
９〜Ｗ−８５３；Ｇ−８４０〜Ｑ−８５４；Ｄ−８４１〜Ｒ−８５５；Ｗ−８４
２〜Ｒ−８５６；Ｓ−８４３〜Ｔ−８５７；Ｅ−８４４〜Ｖ−８５８；Ｃ−８４
５〜Ｅ−８５９；Ｓ−８４６〜Ｃ−８６０；Ｓ−８４７〜Ｒ−８６１；Ｔ−８４
８〜Ｄ−８６２；Ｃ−８４９〜Ｐ−８６３；Ｇ−８５０〜Ｓ−８６４；Ａ−８５
１〜Ｇ−８６５；Ｇ−８５２〜Ｑ−８６６；Ｗ−８５３〜Ａ−８６７；Ｑ−８５
４〜Ｓ−８６８；Ｒ−８５５〜Ａ−８６９；Ｒ−８５６〜Ｔ−８７０；Ｔ−８５
７〜Ｃ−８７１；Ｖ−８５８〜Ｎ−８７２；Ｅ−８５９〜Ｋ−８７３；Ｃ−８６
０〜Ａ−８７４；Ｒ−８６１〜Ｌ−８７５；Ｄ−８６２〜Ｋ−８７６；Ｐ−８６
３〜Ｐ−８７７；Ｓ−８６４〜Ｅ−８７８；Ｇ−８６５〜Ｄ−８７９；Ｑ−８６
６〜Ａ−８８０；Ａ−８６７〜Ｋ−８８１；Ｓ−８６８〜Ｐ−８８２；Ａ−８６
９〜Ｃ−８８３；Ｔ−８７０〜Ｅ−８８４；Ｃ−８７１〜Ｓ−８８５；Ｎ−８７
２〜Ｑ−８８６；Ｋ−８７３〜Ｌ−８８７；Ａ−８７４〜Ｃ−８８８；Ｌ−８７
５〜Ｐ−８８９；および／または；Ｋ−８７６〜Ｌ−８９０。
列を含むか、あるいは以下の残基のアミノ酸配列からなる：配列番号４のＭ−１
〜Ｌ−１５；Ｆ−２〜Ｌ−１６；Ｐ−３〜Ｌ−１７；Ａ−４〜Ｌ−１８；Ｐ−５
〜Ｌ−１９；Ａ−６〜Ｌ−２０；Ａ−７〜Ｌ−２１；Ｐ−８〜Ｌ−２２；Ｒ−９
〜Ｐ−２３；Ｗ−１０〜Ｌ−２４；Ｌ−１１〜Ａ−２５；Ｐ−１２〜Ｒ−２６；
Ｆ−１３〜Ｇ−２７；Ｌ−１４〜Ａ−２８；Ｌ−１５〜Ｐ−２９；Ｌ−１６〜Ａ
−３０；Ｌ−１７〜Ｒ−３１；Ｌ−１８〜Ｐ−３２；Ｌ−１９〜Ａ−３３；Ｌ−
２０〜Ａ−３４；Ｌ−２１〜Ｇ−３５；Ｌ−２２〜Ｇ−３６；Ｐ−２３〜Ｑ−３
７；Ｌ−２４〜Ａ−３８；Ａ−２５〜Ｓ−３９；Ｒ−２６〜Ｅ−４０；Ｇ−２７
〜Ｌ−４１；Ａ−２８〜Ｖ−４２；Ｐ−２９〜Ｖ−４３；Ａ−３０〜Ｐ−４４；
Ｒ−３１〜Ｔ−４５；Ｐ−３２〜Ｒ−４６；Ａ−３３〜Ｌ−４７；Ａ−３４〜Ｐ
−４８；Ｇ−３５〜Ｇ−４９；Ｇ−３６〜Ｓ−５０；Ｑ−３７〜Ａ−５１；Ａ−
３８〜Ｇ−５２；Ｓ−３９〜Ｅ−５３；Ｅ−４０〜Ｌ−５４；Ｌ−４１〜Ａ−５
５；Ｖ−４２〜Ｌ−５６；Ｖ−４３〜Ｈ−５７；Ｐ−４４〜Ｌ−５８；Ｔ−４５
〜Ｓ−５９；Ｒ−４６〜Ａ−６０；Ｌ−４７〜Ｆ−６１；Ｐ−４８〜Ｇ−６２；
Ｇ−４９〜Ｋ−６３；Ｓ−５０〜Ｇ−６４；Ａ−５１〜Ｆ−６５；Ｇ−５２〜Ｖ
−６６；Ｅ−５３〜Ｌ−６７；Ｌ−５４〜Ｒ−６８；Ａ−５５〜Ｌ−６９；Ｌ−
５６〜Ａ−７０；Ｈ−５７〜Ｐ−７１；Ｌ−５８〜Ｄ−７２；Ｓ−５９〜Ｄ−７
３；Ａ−６０〜Ｓ−７４；Ｆ−６１〜Ｆ−７５；Ｇ−６２〜Ｌ−７６；Ｋ−６３
〜Ａ−７７；Ｇ−６４〜Ｐ−７８；Ｆ−６５〜Ｅ−７９；Ｖ−６６〜Ｆ−８０；
Ｌ−６７〜Ｋ−８１；Ｒ−６８〜Ｉ−８２；Ｌ−６９〜Ｅ−８３；Ａ−７０〜Ｒ
−８４；Ｐ−７１〜Ｌ−８５；Ｄ−７２〜Ｇ−８６；Ｄ−７３〜Ｇ−８７；Ｓ−
７４〜Ｓ−８８；Ｆ−７５〜Ｇ−８９；Ｌ−７６〜Ｒ−９０；Ａ−７７〜Ａ−９
１；Ｐ−７８〜Ｔ−９２；Ｅ−７９〜Ｇ−９３；Ｆ−８０〜Ｇ−９４；Ｋ−８１
〜Ｅ−９５；Ｉ−８２〜Ｒ−９６；Ｅ−８３〜Ｇ−９７；Ｒ−８４〜Ｌ−９８；
Ｌ−８５〜Ｒ−９９；Ｇ−８６〜Ｇ−１００；Ｇ−８７〜Ｃ−１０１；Ｓ−８８
〜Ｆ−１０２；Ｇ−８９〜Ｆ−１０３；Ｒ−９０〜Ｓ−１０４；Ａ−９１〜Ｇ−
１０５；Ｔ−９２〜Ｔ−１０６；Ｇ−９３〜Ｖ−１０７；Ｇ−９４〜Ｎ−１０８
；Ｅ−９５〜Ｇ−１０９；Ｒ−９６〜Ｅ−１１０；Ｇ−９７〜Ｐ−１１１；Ｌ−
９８〜Ｅ−１１２；Ｒ−９９〜Ｓ−１１３；Ｇ−１００〜Ｌ−１１４；Ｃ−１０
１〜Ａ−１１５；Ｆ−１０２〜Ａ−１１６；Ｆ−１０３〜Ｖ−１１７；Ｓ−１０
４〜Ｓ−１１８；Ｇ−１０５〜Ｌ−１１９；Ｔ−１０６〜Ｃ−１２０；Ｖ−１０
７〜Ｒ−１２１；Ｎ−１０８〜Ｇ−１２２；Ｇ−１０９〜Ｌ−１２３；Ｅ−１１
０〜Ｓ−１２４；Ｐ−１１１〜Ｇ−１２５；Ｅ−１１２〜Ｓ−１２６；Ｓ−１１
３〜Ｆ−１２７；Ｌ−１１４〜Ｌ−１２８；Ａ−１１５〜Ｌ−１２９；Ａ−１１
６〜Ｄ−１３０；Ｖ−１１７〜Ｇ−１３１；Ｓ−１１８〜Ｅ−１３２；Ｌ−１１
９〜Ｅ−１３３；Ｃ−１２０〜Ｆ−１３４；Ｒ−１２１〜Ｔ−１３５；Ｇ−１２
２〜Ｉ−１３６；Ｌ−１２３〜Ｑ−１３７；Ｓ−１２４〜Ｐ−１３８；Ｇ−１２
５〜Ｑ−１３９；Ｓ−１２６〜Ｇ−１４０；Ｆ−１２７〜Ａ−１４１；Ｌ−１２
８〜Ｇ−１４２；Ｌ−１２９〜Ｇ−１４３；Ｄ−１３０〜Ｓ−１４４；Ｇ−１３
１〜Ｌ−１４５；Ｅ−１３２〜Ａ−１４６；Ｅ−１３３〜Ｑ−１４７；Ｆ−１３
４〜Ｐ−１４８；Ｔ−１３５〜Ｈ−１４９；Ｉ−１３６〜Ｒ−１５０；Ｑ−１３
７〜Ｌ−１５１；Ｐ−１３８〜Ｑ−１５２；Ｑ−１３９〜Ｒ−１５３；Ｇ−１４
０〜Ｗ−１５４；Ａ−１４１〜Ｇ−１５５；Ｇ−１４２〜Ｐ−１５６；Ｇ−１４
３〜Ａ−１５７；Ｓ−１４４〜Ｇ−１５８；Ｌ−１４５〜Ａ−１５９；Ａ−１４
６〜Ｒ−１６０；Ｑ−１４７〜Ｐ−１６１；Ｐ−１４８〜Ｌ−１６２；Ｈ−１４
９〜Ｐ−１６３；Ｒ−１５０〜Ｒ−１６４；Ｌ−１５１〜Ｇ−１６５；Ｑ−１５
２〜Ｐ−１６６；Ｒ−１５３〜Ｅ−１６７；Ｗ−１５４〜Ｗ−１６８；Ｇ−１５
５〜Ｅ−１６９；Ｐ−１５６〜Ｖ−１７０；Ａ−１５７〜Ｅ−１７１；Ｇ−１５
８〜Ｔ−１７２；Ａ−１５９〜Ｇ−１７３；Ｒ−１６０〜Ｅ−１７４；Ｐ−１６
１〜Ｇ−１７５；Ｌ−１６２〜Ｑ−１７６；Ｐ−１６３〜Ｒ−１７７；Ｒ−１６
４〜Ｑ−１７８；Ｇ−１６５〜Ｅ−１７９；Ｐ−１６６〜Ｒ−１８０；Ｅ−１６
７〜Ｇ−１８１；Ｗ−１６８〜Ｄ−１８２；Ｅ−１６９〜Ｈ−１８３；Ｖ−１７
０〜Ｑ−１８４；Ｅ−１７１〜Ｅ−１８５；Ｔ−１７２〜Ｄ−１８６；Ｇ−１７
３〜Ｓ−１８７；Ｅ−１７４〜Ｅ−１８８；Ｇ−１７５〜Ｅ−１８９；Ｑ−１７
６〜Ｅ−１９０；Ｒ−１７７〜Ｓ−１９１；Ｑ−１７８〜Ｑ−１９２；Ｅ−１７
９〜Ｅ−１９３；Ｒ−１８０〜Ｅ−１９４；Ｇ−１８１〜Ｅ−１９５；Ｄ−１８
２〜Ａ−１９６；Ｈ−１８３〜Ｅ−１９７；Ｑ−１８４〜Ｇ−１９８；Ｅ−１８
５〜Ａ−１９９；Ｄ−１８６〜Ｓ−２００；Ｓ−１８７〜Ｅ−２０１；Ｅ−１８
８〜Ｐ−２０２；Ｅ−１８９〜Ｐ−２０３；Ｅ−１９０〜Ｐ−２０４；Ｓ−１９
１〜Ｐ−２０５；Ｑ−１９２〜Ｌ−２０６；Ｅ−１９３〜Ｇ−２０７；Ｅ−１９
４〜Ａ−２０８；Ｅ−１９５〜Ｔ−２０９；Ａ−１９６〜Ｓ−２１０；Ｅ−１９
７〜Ｒ−２１１；Ｇ−１９８〜Ｔ−２１２；Ａ−１９９〜Ｋ−２１３；Ｓ−２０
０〜Ｒ−２１４；Ｅ−２０１〜Ｆ−２１５；Ｐ−２０２〜Ｖ−２１６；Ｐ−２０
３〜Ｓ−２１７；Ｐ−２０４〜Ｅ−２１８；Ｐ−２０５〜Ａ−２１９；Ｌ−２０
６〜Ｒ−２２０；Ｇ−２０７〜Ｆ−２２１；Ａ−２０８〜Ｖ−２２２；Ｔ−２０
９〜Ｅ−２２３；Ｓ−２１０〜Ｔ−２２４；Ｒ−２１１〜Ｌ−２２５；Ｔ−２１
２〜Ｌ−２２６；Ｋ−２１３〜Ｖ−２２７；Ｒ−２１４〜Ａ−２２８；Ｆ−２１
５〜Ｄ−２２９；Ｖ−２１６〜Ａ−２３０；Ｓ−２１７〜Ｓ−２３１；Ｅ−２１
８〜Ｍ−２３２；Ａ−２１９〜Ａ−２３３；Ｒ−２２０〜Ａ−２３４；Ｆ−２２
１〜Ｆ−２３５；Ｖ−２２２〜Ｙ−２３６；Ｅ−２２３〜Ｇ−２３７；Ｔ−２２
４〜Ａ−２３８；Ｌ−２２５〜Ｄ−２３９；Ｌ−２２６〜Ｌ−２４０；Ｖ−２２
７〜Ｑ−２４１；Ａ−２２８〜Ｎ−２４２；Ｄ−２２９〜Ｈ−２４３；Ａ−２３
０〜Ｉ−２４４；Ｓ−２３１〜Ｌ−２４５；Ｍ−２３２〜Ｔ−２４６；Ａ−２３
３〜Ｌ−２４７；Ａ−２３４〜Ｍ−２４８；Ｆ−２３５〜Ｓ−２４９；Ｙ−２３
６〜Ｖ−２５０；Ｇ−２３７〜Ａ−２５１；Ａ−２３８〜Ａ−２５２；Ｄ−２３
９〜Ｒ−２５３；Ｌ−２４０〜Ｉ−２５４；Ｑ−２４１〜Ｙ−２５５；Ｎ−２４
２〜Ｋ−２５６；Ｈ−２４３〜Ｈ−２５７；Ｉ−２４４〜Ｐ−２５８；Ｌ−２４
５〜Ｓ−２５９；Ｔ−２４６〜Ｉ−２６０；Ｌ−２４７〜Ｋ−２６１；Ｍ−２４
８〜Ｎ−２６２；Ｓ−２４９〜Ｓ−２６３；Ｖ−２５０〜Ｉ−２６４；Ａ−２５
１〜Ｎ−２６５；Ａ−２５２〜Ｌ−２６６；Ｒ−２５３〜Ｍ−２６７；Ｉ−２５
４〜Ｖ−２６８；Ｙ−２５５〜Ｖ−２６９；Ｋ−２５６〜Ｋ−２７０；Ｈ−２５
７〜Ｖ−２７１；Ｐ−２５８〜Ｌ−２７２；Ｓ−２５９〜Ｉ−２７３；Ｉ−２６
０〜Ｖ−２７４；Ｋ−２６１〜Ｅ−２７５；Ｎ−２６２〜Ｄ−２７６；Ｓ−２６
３〜Ｅ−２７７；Ｉ−２６４〜Ｋ−２７８；Ｎ−２６５〜Ｗ−２７９；Ｌ−２６
６〜Ｇ−２８０；Ｍ−２６７〜Ｐ−２８１；Ｖ−２６８〜Ｅ−２８２；Ｖ−２６
９〜Ｖ−２８３；Ｋ−２７０〜Ｓ−２８４；Ｖ−２７１〜Ｄ−２８５；Ｌ−２７
２〜Ｎ−２８６；Ｉ−２７３〜Ｇ−２８７；Ｖ−２７４〜Ｇ−２８８；Ｅ−２７
５〜Ｌ−２８９；Ｄ−２７６〜Ｔ−２９０；Ｅ−２７７〜Ｌ−２９１；Ｋ−２７
８〜Ｒ−２９２；Ｗ−２７９〜Ｎ−２９３；Ｇ−２８０〜Ｆ−２９４；Ｐ−２８
１〜Ｃ−２９５；Ｅ−２８２〜Ｎ−２９６；Ｖ−２８３〜Ｗ−２９７；Ｓ−２８
４〜Ｑ−２９８；Ｄ−２８５〜Ｒ−２９９；Ｎ−２８６〜Ｒ−３００；Ｇ−２８
７〜Ｆ−３０１；Ｇ−２８８〜Ｎ−３０２；Ｌ−２８９〜Ｑ−３０３；Ｔ−２９
０〜Ｐ−３０４；Ｌ−２９１〜Ｓ−３０５；Ｒ−２９２〜Ｄ−３０６；Ｎ−２９
３〜Ｒ−３０７；Ｆ−２９４〜Ｈ−３０８；Ｃ−２９５〜Ｐ−３０９；Ｎ−２９
６〜Ｅ−３１０；Ｗ−２９７〜Ｈ−３１１；Ｑ−２９８〜Ｙ−３１２；Ｒ−２９
９〜Ｄ−３１３；Ｒ−３００〜Ｔ−３１４；Ｆ−３０１〜Ａ−３１５；Ｎ−３０
２〜Ｉ−３１６；Ｑ−３０３〜Ｌ−３１７；Ｐ−３０４〜Ｌ−３１８；Ｓ−３０
５〜Ｔ−３１９；Ｄ−３０６〜Ｒ−３２０；Ｒ−３０７〜Ｑ−３２１；Ｈ−３０
８〜Ｎ−３２２；Ｐ−３０９〜Ｆ−３２３；Ｅ−３１０〜Ｃ−３２４；Ｈ−３１
１〜Ｇ−３２５；Ｙ−３１２〜Ｑ−３２６；Ｄ−３１３〜Ｅ−３２７；Ｔ−３１
４〜Ｇ−３２８；Ａ−３１５〜Ｌ−３２９；Ｉ−３１６〜Ｃ−３３０；Ｌ−３１
７〜Ｄ−３３１；Ｌ−３１８〜Ｔ−３３２；Ｔ−３１９〜Ｌ−３３３；Ｒ−３２
０〜Ｇ−３３４；Ｑ−３２１〜Ｖ−３３５；Ｎ−３２２〜Ａ−３３６；Ｆ−３２
３〜Ｄ−３３７；Ｃ−３２４〜Ｉ−３３８；Ｇ−３２５〜Ｇ−３３９；Ｑ−３２
６〜Ｔ−３４０；Ｅ−３２７〜Ｉ−３４１；Ｇ−３２８〜Ｃ−３４２；Ｌ−３２
９〜Ｄ−３４３；Ｃ−３３０〜Ｐ−３４４；Ｄ−３３１〜Ｎ−３４５；Ｔ−３３
２〜Ｋ−３４６；Ｌ−３３３〜Ｓ−３４７；Ｇ−３３４〜Ｃ−３４８；Ｖ−３３
５〜Ｓ−３４９；Ａ−３３６〜Ｖ−３５０；Ｄ−３３７〜Ｉ−３５１；Ｉ−３３
８〜Ｅ−３５２；Ｇ−３３９〜Ｄ−３５３；Ｔ−３４０〜Ｅ−３５４；Ｉ−３４
１〜Ｇ−３５５；Ｃ−３４２〜Ｌ−３５６；Ｄ−３４３〜Ｑ−３５７；Ｐ−３４
４〜Ａ−３５８；Ｎ−３４５〜Ａ−３５９；Ｋ−３４６〜Ｈ−３６０；Ｓ−３４
７〜Ｔ−３６１；Ｃ−３４８〜Ｌ−３６２；Ｓ−３４９〜Ａ−３６３；Ｖ−３５
０〜Ｈ−３６４；Ｉ−３５１〜Ｅ−３６５；Ｅ−３５２〜Ｌ−３６６；Ｄ−３５
３〜Ｇ−３６７；Ｅ−３５４〜Ｈ−３６８；Ｇ−３５５〜Ｖ−３６９；Ｌ−３５
６〜Ｌ−３７０；Ｑ−３５７〜Ｓ−３７１；Ａ−３５８〜Ｍ−３７２；Ａ−３５
９〜Ｐ−３７３；Ｈ−３６０〜Ｈ−３７４；Ｔ−３６１〜Ｄ−３７５；Ｌ−３６
２〜Ｄ−３７６；Ａ−３６３〜Ｓ−３７７；Ｈ−３６４〜Ｋ−３７８；Ｅ−３６
５〜Ｐ−３７９；Ｌ−３６６〜Ｃ−３８０；Ｇ−３６７〜Ｔ−３８１；Ｈ−３６
８〜Ｒ−３８２；Ｖ−３６９〜Ｌ−３８３；Ｌ−３７０〜Ｆ−３８４；Ｓ−３７
１〜Ｇ−３８５；Ｍ−３７２〜Ｐ−３８６；Ｐ−３７３〜Ｍ−３８７；Ｈ−３７
４〜Ｇ−３８８；Ｄ−３７５〜Ｋ−３８９；Ｄ−３７６〜Ｈ−３９０；Ｓ−３７
７〜Ｈ−３９１；Ｋ−３７８〜Ｖ−３９２；Ｐ−３７９〜Ｍ−３９３；Ｃ−３８
０〜Ａ−３９４；Ｔ−３８１〜Ｐ−３９５；Ｒ−３８２〜Ｌ−３９６；Ｌ−３８
３〜Ｆ−３９７；Ｆ−３８４〜Ｖ−３９８；Ｇ−３８５〜Ｈ−３９９；Ｐ−３８
６〜Ｌ−４００；Ｍ−３８７〜Ｎ−４０１；Ｇ−３８８〜Ｑ−４０２；Ｋ−３８
９〜Ｔ−４０３；Ｈ−３９０〜Ｌ−４０４；Ｈ−３９１〜Ｐ−４０５；Ｖ−３９
２〜Ｗ−４０６；Ｍ−３９３〜Ｓ−４０７；Ａ−３９４〜Ｐ−４０８；Ｐ−３９
５〜Ｃ−４０９；Ｌ−３９６〜Ｓ−４１０；Ｆ−３９７〜Ａ−４１１；Ｖ−３９
８〜Ｍ−４１２；Ｈ−３９９〜Ｙ−４１３；Ｌ−４００〜Ｌ−４１４；Ｎ−４０
１〜Ｔ−４１５；Ｑ−４０２〜Ｅ−４１６；Ｔ−４０３〜Ｌ−４１７；Ｌ−４０
４〜Ｌ−４１８；Ｐ−４０５〜Ｄ−４１９；Ｗ−４０６〜Ｇ−４２０；Ｓ−４０
７〜Ｇ−４２１；Ｐ−４０８〜Ｈ−４２２；Ｃ−４０９〜Ｇ−４２３；Ｓ−４１
０〜Ｄ−４２４；Ａ−４１１〜Ｃ−４２５；Ｍ−４１２〜Ｌ−４２６；Ｙ−４１
３〜Ｌ−４２７；Ｌ−４１４〜Ｄ−４２８；Ｔ−４１５〜Ａ−４２９；Ｅ−４１
６〜Ｐ−４３０；Ｌ−４１７〜Ｇ−４３１；Ｌ−４１８〜Ａ−４３２；Ｄ−４１
９〜Ａ−４３３；Ｇ−４２０〜Ｌ−４３４；Ｇ−４２１〜Ｐ−４３５；Ｈ−４２
２〜Ｌ−４３６；Ｇ−４２３〜Ｐ−４３７；Ｄ−４２４〜Ｔ−４３８；Ｃ−４２
５〜Ｇ−４３９；Ｌ−４２６〜Ｌ−４４０；Ｌ−４２７〜Ｐ−４４１；Ｄ−４２
８〜Ｇ−４４２；Ａ−４２９〜Ｒ−４４３；Ｐ−４３０〜Ｍ−４４４；Ｇ−４３
１〜Ａ−４４５；Ａ−４３２〜Ｌ−４４６；Ａ−４３３〜Ｙ−４４７；Ｌ−４３
４〜Ｑ−４４８；Ｐ−４３５〜Ｌ−４４９；Ｌ−４３６〜Ｄ−４５０；Ｐ−４３
７〜Ｑ−４５１；Ｔ−４３８〜Ｑ−４５２；Ｇ−４３９〜Ｃ−４５３；Ｌ−４４
０〜Ｒ−４５４；Ｐ−４４１〜Ｑ−４５５；Ｇ−４４２〜Ｉ−４５６；Ｒ−４４
３〜Ｆ−４５７；Ｍ−４４４〜Ｇ−４５８；Ａ−４４５〜Ｐ−４５９；Ｌ−４４
６〜Ｄ−４６０；Ｙ−４４７〜Ｆ−４６１；Ｑ−４４８〜Ｒ−４６２；Ｌ−４４
９〜Ｈ−４６３；Ｄ−４５０〜Ｃ−４６４；Ｑ−４５１〜Ｐ−４６５；Ｑ−４５
２〜Ｎ−４６６；Ｃ−４５３〜Ｔ−４６７；Ｒ−４５４〜Ｓ−４６８；Ｑ−４５
５〜Ａ−４６９；Ｉ−４５６〜Ｑ−４７０；Ｆ−４５７〜Ｄ−４７１；Ｇ−４５
８〜Ｖ−４７２；Ｐ−４５９〜Ｃ−４７３；Ｄ−４６０〜Ａ−４７４；Ｆ−４６
１〜Ｑ−４７５；Ｒ−４６２〜Ｌ−４７６；Ｈ−４６３〜Ｗ−４７７；Ｃ−４６
４〜Ｃ−４７８；Ｐ−４６５〜Ｈ−４７９；Ｎ−４６６〜Ｔ−４８０；Ｔ−４６
７〜Ｄ−４８１；Ｓ−４６８〜Ｇ−４８２；Ａ−４６９〜Ａ−４８３；Ｑ−４７
０〜Ｅ−４８４；Ｄ−４７１〜Ｐ−４８５；Ｖ−４７２〜Ｌ−４８６；Ｃ−４７
３〜Ｃ−４８７；Ａ−４７４〜Ｈ−４８８；Ｑ−４７５〜Ｔ−４８９；Ｌ−４７
６〜Ｋ−４９０；Ｗ−４７７〜Ｎ−４９１；Ｃ−４７８〜Ｇ−４９２；Ｈ−４７
９〜Ｓ−４９３；Ｔ−４８０〜Ｌ−４９４；Ｄ−４８１〜Ｐ−４９５；Ｇ−４８
２〜Ｗ−４９６；Ａ−４８３〜Ａ−４９７；Ｅ−４８４〜Ｄ−４９８；Ｐ−４８
５〜Ｇ−４９９；Ｌ−４８６〜Ｔ−５００；Ｃ−４８７〜Ｐ−５０１；Ｈ−４８
８〜Ｃ−５０２；Ｔ−４８９〜Ｇ−５０３；Ｋ−４９０〜Ｐ−５０４；Ｎ−４９
１〜Ｇ−５０５；Ｇ−４９２〜Ｈ−５０６；Ｓ−４９３〜Ｌ−５０７；Ｌ−４９
４〜Ｃ−５０８；Ｐ−４９５〜Ｓ−５０９；Ｗ−４９６〜Ｅ−５１０；Ａ−４９
７〜Ｇ−５１１；Ｄ−４９８〜Ｓ−５１２；Ｇ−４９９〜Ｃ−５１３；Ｔ−５０
０〜Ｌ−５１４；Ｐ−５０１〜Ｐ−５１５；Ｃ−５０２〜Ｅ−５１６；Ｇ−５０
３〜Ｅ−５１７；Ｐ−５０４〜Ｅ−５１８；Ｇ−５０５〜Ｖ−５１９；Ｈ−５０
６〜Ｅ−５２０；Ｌ−５０７〜Ｒ−５２１；Ｃ−５０８〜Ｐ−５２２；Ｓ−５０
９〜Ｋ−５２３；Ｅ−５１０〜Ｐ−５２４；Ｇ−５１１〜Ｖ−５２５；Ｓ−５１
２〜Ｖ−５２６；Ｃ−５１３〜Ｄ−５２７；Ｌ−５１４〜Ｇ−５２８；Ｐ−５１
５〜Ｇ−５２９；Ｅ−５１６〜Ｗ−５３０；Ｅ−５１７〜Ａ−５３１；Ｅ−５１
８〜Ｐ−５３２；Ｖ−５１９〜Ｗ−５３３；Ｅ−５２０〜Ｇ−５３４；Ｒ−５２
１〜Ｐ−５３５；Ｐ−５２２〜Ｗ−５３６；Ｋ−５２３〜Ｇ−５３７；Ｐ−５２
４〜Ｅ−５３８；Ｖ−５２５〜Ｃ−５３９；Ｖ−５２６〜Ｓ−５４０；Ｄ−５２
７〜Ｒ−５４１；Ｇ−５２８〜Ｔ−５４２；Ｇ−５２９〜Ｃ−５４３；Ｗ−５３
０〜Ｇ−５４４；Ａ−５３１〜Ｇ−５４５；Ｐ−５３２〜Ｇ−５４６；Ｗ−５３
３〜Ｖ−５４７；Ｇ−５３４〜Ｑ−５４８；Ｐ−５３５〜Ｆ−５４９；Ｗ−５３
６〜Ｓ−５５０；Ｇ−５３７〜Ｈ−５５１；Ｅ−５３８〜Ｒ−５５２；Ｃ−５３
９〜Ｅ−５５３；Ｓ−５４０〜Ｃ−５５４；Ｒ−５４１〜Ｋ−５５５；Ｔ−５４
２〜Ｄ−５５６；Ｃ−５４３〜Ｐ−５５７；Ｇ−５４４〜Ｅ−５５８；Ｇ−５４
５〜Ｐ−５５９；Ｇ−５４６〜Ｑ−５６０；Ｖ−５４７〜Ｎ−５６１；Ｑ−５４
８〜Ｇ−５６２；Ｆ−５４９〜Ｇ−５６３；Ｓ−５５０〜Ｒ−５６４；Ｈ−５５
１〜Ｙ−５６５；Ｒ−５５２〜Ｃ−５６６；Ｅ−５５３〜Ｌ−５６７；Ｃ−５５
４〜Ｇ−５６８；Ｋ−５５５〜Ｒ−５６９；Ｄ−５５６〜Ｒ−５７０；Ｐ−５５
７〜Ａ−５７１；Ｅ−５５８〜Ｋ−５７２；Ｐ−５５９〜Ｙ−５７３；Ｑ−５６
０〜Ｑ−５７４；Ｎ−５６１〜Ｓ−５７５；Ｇ−５６２〜Ｃ−５７６；Ｇ−５６
３〜Ｈ−５７７；Ｒ−５６４〜Ｔ−５７８；Ｙ−５６５〜Ｅ−５７９；Ｃ−５６
６〜Ｅ−５８０；Ｌ−５６７〜Ｃ−５８１；Ｇ−５６８〜Ｐ−５８２；Ｒ−５６
９〜Ｐ−５８３；Ｒ−５７０〜Ｄ−５８４；Ａ−５７１〜Ｇ−５８５；Ｋ−５７
２〜Ｋ−５８６；Ｙ−５７３〜Ｓ−５８７；Ｑ−５７４〜Ｆ−５８８；Ｓ−５７
５〜Ｒ−５８９；Ｃ−５７６〜Ｅ−５９０；Ｈ−５７７〜Ｑ−５９１；Ｔ−５７
８〜Ｑ−５９２；Ｅ−５７９〜Ｃ−５９３；Ｅ−５８０〜Ｅ−５９４；Ｃ−５８
１〜Ｋ−５９５；Ｐ−５８２〜Ｙ−５９６；Ｐ−５８３〜Ｎ−５９７；Ｄ−５８
４〜Ａ−５９８；Ｇ−５８５〜Ｙ−５９９；Ｋ−５８６〜Ｎ−６００；Ｓ−５８
７〜Ｙ−６０１；Ｆ−５８８〜Ｔ−６０２；Ｒ−５８９〜Ｄ−６０３；Ｅ−５９
０〜Ｍ−６０４；Ｑ−５９１〜Ｄ−６０５；Ｑ−５９２〜Ｇ−６０６；Ｃ−５９
３〜Ｎ−６０７；Ｅ−５９４〜Ｌ−６０８；Ｋ−５９５〜Ｌ−６０９；Ｙ−５９
６〜Ｑ−６１０；Ｎ−５９７〜Ｗ−６１１；Ａ−５９８〜Ｖ−６１２；Ｙ−５９
９〜Ｐ−６１３；Ｎ−６００〜Ｋ−６１４；Ｙ−６０１〜Ｙ−６１５；Ｔ−６０
２〜Ａ−６１６；Ｄ−６０３〜Ｇ−６１７；Ｍ−６０４〜Ｖ−６１８；Ｄ−６０
５〜Ｓ−６１９；Ｇ−６０６〜Ｐ−６２０；Ｎ−６０７〜Ｒ−６２１；Ｌ−６０
８〜Ｄ−６２２；Ｌ−６０９〜Ｒ−６２３；Ｑ−６１０〜Ｃ−６２４；Ｗ−６１
１〜Ｋ−６２５；Ｖ−６１２〜Ｌ−６２６；Ｐ−６１３〜Ｆ−６２７；Ｋ−６１
４〜Ｃ−６２８；Ｙ−６１５〜Ｒ−６２９；Ａ−６１６〜Ａ−６３０；Ｇ−６１
７〜Ｒ−６３１；Ｖ−６１８〜Ｇ−６３２；Ｓ−６１９〜Ｒ−６３３；Ｐ−６２
０〜Ｓ−６３４；Ｒ−６２１〜Ｅ−６３５；Ｄ−６２２〜Ｆ−６３６；Ｒ−６２
３〜Ｋ−６３７；Ｃ−６２４〜Ｖ−６３８；Ｋ−６２５〜Ｆ−６３９；Ｌ−６２
６〜Ｅ−６４０；Ｆ−６２７〜Ａ−６４１；Ｃ−６２８〜Ｋ−６４２；Ｒ−６２
９〜Ｖ−６４３；Ａ−６３０〜Ｉ−６４４；Ｒ−６３１〜Ｄ−６４５；Ｇ−６３
２〜Ｇ−６４６；Ｒ−６３３〜Ｔ−６４７；Ｓ−６３４〜Ｌ−６４８；Ｅ−６３
５〜Ｃ−６４９；Ｆ−６３６〜Ｇ−６５０；Ｋ−６３７〜Ｐ−６５１；Ｖ−６３
８〜Ｅ−６５２；Ｆ−６３９〜Ｔ−６５３；Ｅ−６４０〜Ｌ−６５４；Ａ−６４
１〜Ａ−６５５；Ｋ−６４２〜Ｉ−６５６；Ｖ−６４３〜Ｃ−６５７；Ｉ−６４
４〜Ｖ−６５８；Ｄ−６４５〜Ｒ−６５９；Ｇ−６４６〜Ｇ−６６０；Ｔ−６４
７〜Ｑ−６６１；Ｌ−６４８〜Ｃ−６６２；Ｃ−６４９〜Ｖ−６６３；Ｇ−６５
０〜Ｋ−６６４；Ｐ−６５１〜Ａ−６６５；Ｅ−６５２〜Ｇ−６６６；Ｔ−６５
３〜Ｃ−６６７；Ｌ−６５４〜Ｄ−６６８；Ａ−６５５〜Ｈ−６６９；Ｉ−６５
６〜Ｖ−６７０；Ｃ−６５７〜Ｖ−６７１；Ｖ−６５８〜Ｄ−６７２；Ｒ−６５
９〜Ｓ−６７３；Ｇ−６６０〜Ｐ−６７４；Ｑ−６６１〜Ｒ−６７５；Ｃ−６６
２〜Ｋ−６７６；Ｖ−６６３〜Ｌ−６７７；Ｋ−６６４〜Ｄ−６７８；Ａ−６６
５〜Ｋ−６７９；Ｇ−６６６〜Ｃ−６８０；Ｃ−６６７〜Ｇ−６８１；Ｄ−６６
８〜Ｖ−６８２；Ｈ−６６９〜Ｃ−６８３；Ｖ−６７０〜Ｇ−６８４；Ｖ−６７
１〜Ｇ−６８５；Ｄ−６７２〜Ｋ−６８６；Ｓ−６７３〜Ｇ−６８７；Ｐ−６７
４〜Ｎ−６８８；Ｒ−６７５〜Ｓ−６８９；Ｋ−６７６〜Ｃ−６９０；Ｌ−６７
７〜Ｒ−６９１；Ｄ−６７８〜Ｋ−６９２；Ｋ−６７９〜Ｖ−６９３；Ｃ−６８
０〜Ｓ−６９４；Ｇ−６８１〜Ｇ−６９５；Ｖ−６８２〜Ｓ−６９６；Ｃ−６８
３〜Ｌ−６９７；Ｇ−６８４〜Ｔ−６９８；Ｇ−６８５〜Ｐ−６９９；Ｋ−６８
６〜Ｔ−７００；Ｇ−６８７〜Ｎ−７０１；Ｎ−６８８〜Ｙ−７０２；Ｓ−６８
９〜Ｇ−７０３；Ｃ−６９０〜Ｙ−７０４；Ｒ−６９１〜Ｎ−７０５；Ｋ−６９
２〜Ｄ−７０６；Ｖ−６９３〜Ｉ−７０７；Ｓ−６９４〜Ｖ−７０８；Ｇ−６９
５〜Ｔ−７０９；Ｓ−６９６〜Ｉ−７１０；Ｌ−６９７〜Ｐ−７１１；Ｔ−６９
８〜Ａ−７１２；Ｐ−６９９〜Ｇ−７１３；Ｔ−７００〜Ａ−７１４；Ｎ−７０
１〜Ｔ−７１５；Ｙ−７０２〜Ｎ−７１６；Ｇ−７０３〜Ｉ−７１７；Ｙ−７０
４〜Ｄ−７１８；Ｎ−７０５〜Ｖ−７１９；Ｄ−７０６〜Ｋ−７２０；１−７０
７〜Ｑ−７２１；Ｖ−７０８〜Ｒ−７２２；Ｔ−７０９〜Ｓ−７２３；Ｉ−７１
０〜Ｈ−７２４；Ｐ−７１１〜Ｐ−７２５；Ａ−７１２〜Ｇ−７２６；Ｇ−７１
３〜Ｖ−７２７；Ａ−７１４〜Ｑ−７２８；Ｔ−７１５〜Ｎ−７２９；Ｎ−７１
６〜Ｄ−７３０；Ｉ−７１７〜Ｇ−７３１；Ｄ−７１８〜Ｎ−７３２；Ｖ−７１
９〜Ｙ−７３３；Ｋ−７２０〜Ｌ−７３４；Ｑ−７２１〜Ａ−７３５；Ｒ−７２
２〜Ｌ−７３６；Ｓ−７２３〜Ｋ−７３７；Ｈ−７２４〜Ｔ−７３８；Ｐ−７２
５〜Ａ−７３９；Ｇ−７２６〜Ｄ−７４０；Ｖ−７２７〜Ｇ−７４１；Ｑ−７２
８〜Ｑ−７４２；Ｎ−７２９〜Ｙ−７４３；Ｄ−７３０〜Ｌ−７４４；Ｇ−７３
１〜Ｌ−７４５；Ｎ−７３２〜Ｎ−７４６；Ｙ−７３３〜Ｇ−７４７；Ｌ−７３
４〜Ｎ−７４８；Ａ−７３５〜Ｌ−７４９；Ｌ−７３６〜Ａ−７５０；Ｋ−７３
７〜Ｉ−７５１；Ｔ−７３８〜Ｓ−７５２；Ａ−７３９〜Ａ−７５３；Ｄ−７４
０〜Ｉ−７５４；Ｇ−７４１〜Ｅ−７５５；Ｑ−７４２〜Ｑ−７５６；Ｙ−７４
３〜Ｄ−７５７；Ｌ−７４４〜Ｉ−７５８；Ｌ−７４５〜Ｌ−７５９；Ｎ−７４
６〜Ｖ−７６０；Ｇ−７４７〜Ｋ−７６１；Ｎ−７４８〜Ｇ−７６２；Ｌ−７４
９〜Ｔ−７６３；Ａ−７５０〜１−７６４；Ｉ−７５１〜Ｌ−７６５；Ｓ−７５
２〜Ｋ−７６６；Ａ−７５３〜Ｙ−７６７；Ｉ−７５４〜Ｓ−７６８；Ｅ−７５
５〜Ｇ−７６９；Ｑ−７５６〜Ｓ−７７０；Ｄ−７５７〜Ｉ−７７１；Ｉ−７５
８〜Ａ−７７２；Ｌ−７５９〜Ｔ−７７３；Ｖ−７６０〜Ｌ−７７４；Ｋ−７６
１〜Ｅ−７７５；Ｇ−７６２〜Ｒ−７７６；Ｔ−７６３〜Ｌ−７７７；Ｉ−７６
４〜Ｑ−７７８；Ｌ−７６５〜Ｓ−７７９；Ｋ−７６６〜Ｆ−７８０；Ｙ−７６
７〜Ｒ−７８１；Ｓ−７６８〜Ｐ−７８２；Ｇ−７６９〜Ｌ−７８３；Ｓ−７７
０〜Ｐ−７８４；Ｉ−７７１〜Ｅ−７８５；Ａ−７７２〜Ｐ−７８６；Ｔ−７７
３〜Ｌ−７８７；Ｌ−７７４〜Ｔ−７８８；Ｅ−７７５〜Ｖ−７８９；Ｒ−７７
６〜Ｑ−７９０；Ｌ−７７７〜Ｌ−７９１；Ｑ−７７８〜Ｌ−７９２；Ｓ−７７
９〜Ｔ−７９３；Ｆ−７８０〜Ｖ−７９４；Ｒ−７８１〜Ｐ−７９５；Ｐ−７８
２〜Ｇ−７９６；Ｌ−７８３〜Ｅ−７９７；Ｐ−７８４〜Ｖ−７９８；Ｅ−７８
５〜Ｆ−７９９；Ｐ−７８６〜Ｐ−８００；Ｌ−７８７〜Ｐ−８０１；Ｔ−７８
８〜Ｋ−８０２；Ｖ−７８９〜Ｖ−８０３；Ｑ−７９０〜Ｋ−８０４；Ｌ−７９
１〜Ｙ−８０５；Ｌ−７９２〜Ｔ−８０６；Ｔ−７９３〜Ｆ−８０７；Ｖ−７９
４〜Ｆ−８０８；Ｐ−７９５〜Ｖ−８０９；Ｇ−７９６〜Ｐ−８１０；Ｅ−７９
７〜Ｎ−８１１；Ｖ−７９８〜Ｄ−８１２；Ｆ−７９９〜Ｖ−８１３；Ｐ−８０
０〜Ｄ−８１４；Ｐ−８０１〜Ｆ−８１５；Ｋ−８０２〜Ｓ−８１６；Ｖ−８０
３〜Ｍ−８１７；Ｋ−８０４〜Ｑ−８１８；Ｙ−８０５〜Ｓ−８１９；Ｔ８−０
６〜Ｓ−８２０；Ｆ−８０７〜Ｋ−８２１；Ｆ−８０８〜Ｅ−８２２；Ｖ−８０
９〜Ｒ−８２３；Ｐ−８１０〜Ａ−８２４；Ｎ−８１１〜Ｔ−８２５；Ｄ−８１
２〜Ｔ−８２６；Ｖ−８１３〜Ｎ−８２７；Ｄ−８１４〜Ｉ−８２８；Ｆ−８１
５〜Ｉ−８２９；Ｓ−８１６〜Ｑ ８３０；Ｍ−８１７〜Ｐ−８３１；Ｑ−８１
８〜Ｌ−８３２；Ｓ−８１９〜Ｌ−８３３；Ｓ−８２０〜Ｈ−８３４；Ｋ−８２
１〜Ａ−８３５；Ｅ−８２２〜Ｑ−８３６；Ｒ−８２３〜Ｗ−８３７；Ａ−８２
４〜Ｖ−８３８；Ｔ−８２５〜Ｌ−８３９；Ｔ−８２６〜Ｇ−８４０；Ｎ−８２
７〜Ｄ−８４１；Ｉ−８２８〜Ｗ−８４２；Ｉ−８２９〜Ｓ−８４３；Ｑ−８３
０〜Ｅ−８４４；Ｐ−８３１〜Ｃ−８４５；Ｌ−８３２〜Ｓ−８４６；Ｌ−８３
３〜Ｓ−８４７；Ｈ−８３４〜Ｔ−８４８；Ａ−８３５〜Ｃ−８４９；Ｑ−８３
６〜Ｇ−８５０；Ｗ−８３７〜Ａ−８５１；Ｖ−８３８〜Ｇ−８５２；Ｌ−８３
９〜Ｗ−８５３；Ｇ−８４０〜Ｑ−８５４；Ｄ−８４１〜Ｒ−８５５；Ｗ−８４
２〜Ｒ−８５６；Ｓ−８４３〜Ｔ−８５７；Ｅ−８４４〜Ｖ−８５８；Ｃ−８４
５〜Ｅ−８５９；Ｓ−８４６〜Ｃ−８６０；Ｓ−８４７〜Ｒ−８６１；Ｔ−８４
８〜Ｄ−８６２；Ｃ−８４９〜Ｐ−８６３；Ｇ−８５０〜Ｓ−８６４；Ａ−８５
１〜Ｇ−８６５；Ｇ−８５２〜Ｑ−８６６；Ｗ−８５３〜Ａ−８６７；Ｑ−８５
４〜Ｓ−８６８；Ｒ−８５５〜Ａ−８６９；Ｒ−８５６〜Ｔ−８７０；Ｔ−８５
７〜Ｃ−８７１；Ｖ−８５８〜Ｎ−８７２；Ｅ−８５９〜Ｋ−８７３；Ｃ−８６
０〜Ａ−８７４；Ｒ−８６１〜Ｌ−８７５；Ｄ−８６２〜Ｋ−８７６；Ｐ−８６
３〜Ｐ−８７７；Ｓ−８６４〜Ｅ−８７８；Ｇ−８６５〜Ｄ−８７９；Ｑ−８６
６〜Ａ−８８０；Ａ−８６７〜Ｋ−８８１；Ｓ−８６８〜Ｐ−８８２；Ａ−８６
９〜Ｃ−８８３；Ｔ−８７０〜Ｅ−８８４；Ｃ−８７１〜Ｓ−８８５；Ｎ−８７
２〜Ｑ−８８６；Ｋ−８７３〜Ｌ−８８７；Ａ−８７４〜Ｃ−８８８；Ｌ−８７
５〜Ｐ−８８９；および／または；Ｋ−８７６〜Ｌ−８９０。
【０１９１】
これらのポリペプチドフラグメントをコードするポリヌクレオチドもまた、本
発明により包含される。
発明により包含される。
【０１９２】
さらなる非排他的な好ましい抗原性エピトープは、本明細書で開示された抗原
性エピトープ、ならびにそれらの一部を含む。抗原性エピトープは、例えば、こ
のエピトープに特異的に結合する抗体（モノクローナル抗体を含む）を惹起する
ために有用である。好ましい抗原性エピトープは、本明細書に開示された抗原性
エピトープ、ならびにこれらの抗原性エピトープの２つ、３つ、４つ、５つ以上
の任意の組み合わせを含む。抗原性エピトープは、イムノアッセイの標的分子と
して使用され得る。（例えば、Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅｌｌ ３７：７６７−７７
８（１９８４）；Ｓｕｔｃｌｉｆｆｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２１９：６６０−６
６６（１９８３）を参照のこと）。
性エピトープ、ならびにそれらの一部を含む。抗原性エピトープは、例えば、こ
のエピトープに特異的に結合する抗体（モノクローナル抗体を含む）を惹起する
ために有用である。好ましい抗原性エピトープは、本明細書に開示された抗原性
エピトープ、ならびにこれらの抗原性エピトープの２つ、３つ、４つ、５つ以上
の任意の組み合わせを含む。抗原性エピトープは、イムノアッセイの標的分子と
して使用され得る。（例えば、Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅｌｌ ３７：７６７−７７
８（１９８４）；Ｓｕｔｃｌｉｆｆｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２１９：６６０−６
６６（１９８３）を参照のこと）。
【０１９３】
同様に、免疫原性のエピトープを使用して、例えば、当該分野で周知の方法に
従って抗体を誘導し得る。（例えば、Ｓｕｔｃｌｉｆｆｅら（前出）；Ｗｉｌｓ
ｏｎら（前出）；Ｃｈｏｗら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ
８２：９１０−９１４；およびＢｉｔｔｌｅら、Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．６
６：２３４７−２３５４（１９８５）を参照のこと）。好ましい免疫原性エピト
ープは、本明細書で開示された免疫原性エピトープ、ならびにこれらの免疫原性
エピトープの２つ、３つ、４つ、５つ以上の任意の組み合わせを含む。１つ以上
の免疫原性エピトープを含むポリペプチドは、キャリアタンパク質（例えば、ア
ルブミン）とともに動物系（例えば、ウサギまたはマウス）に対する抗体応答を
惹起するために提示され得るか、または、そのポリペプチドが十分に長い場合で
は（少なくとも約２５アミノ酸）、このポリペプチドはキャリアなしで提示され
得る。しかし、８〜１０程度のわずかなアミノ酸を含む免疫原性エピトープが、
変性されたポリペプチドの直鎖エピトープに（少なくとも）結合し得る抗体を惹
起するのに十分であることが示された（例えば、ウエスタンブロッティングにお
いて）。
従って抗体を誘導し得る。（例えば、Ｓｕｔｃｌｉｆｆｅら（前出）；Ｗｉｌｓ
ｏｎら（前出）；Ｃｈｏｗら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ
８２：９１０−９１４；およびＢｉｔｔｌｅら、Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．６
６：２３４７−２３５４（１９８５）を参照のこと）。好ましい免疫原性エピト
ープは、本明細書で開示された免疫原性エピトープ、ならびにこれらの免疫原性
エピトープの２つ、３つ、４つ、５つ以上の任意の組み合わせを含む。１つ以上
の免疫原性エピトープを含むポリペプチドは、キャリアタンパク質（例えば、ア
ルブミン）とともに動物系（例えば、ウサギまたはマウス）に対する抗体応答を
惹起するために提示され得るか、または、そのポリペプチドが十分に長い場合で
は（少なくとも約２５アミノ酸）、このポリペプチドはキャリアなしで提示され
得る。しかし、８〜１０程度のわずかなアミノ酸を含む免疫原性エピトープが、
変性されたポリペプチドの直鎖エピトープに（少なくとも）結合し得る抗体を惹
起するのに十分であることが示された（例えば、ウエスタンブロッティングにお
いて）。
【０１９４】
本発明のエピトープ保有ポリペプチドは、当該分野で周知の方法に従って抗体
を誘導するために使用され得る。この方法としては、インビボ免疫、インビトロ
免疫、およびファージディスプレイ法が挙げられるが、それらに限定されない。
例えば、Ｓｕｔｃｌｉｆｆｅら，前出；Ｗｉｌｓｏｎら，前出；およびＢｉｔｔ
ｌｅら，Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．，６６：２３４７−２３５４（１９８５）を
参照のこと。インビボ免疫を使用する場合、動物を遊離ペプチドを用いて免疫し
得る；しかし、抗ペプチド抗体力価は、高分子キャリア（例えば、キーホールリ
ンペットヘモシアニン（ｈｅｍａｃｙａｎｉｎ）（ＫＬＨ）または破傷風トキソ
イド）にペプチドを結合させることによりブーストされ得る。例えば、システイ
ン残基を含むペプチドは、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシン
イミドエステル（ＭＢＳ）のようなリンカーを用いてキャリアに結合され得る。
その一方、他のペプチドは、より一般的な結合剤（例えば、グルタルアルデヒド
）を用いてキャリアに結合され得る。ウサギ、ラット、およびマウスのような動
物は、遊離のペプチドまたはキャリア結合ペプチドのいずれかを用いて、例えば
、エマルジョン（約１００μｇのペプチドまたはキャリアタンパク質およびフロ
イントアジュバントまたは免疫応答を刺激すると知られる任意の他のアジュバン
トを含む）の腹膜内注射および／または皮内注射により免疫される。いくつかの
ブースター注射が、抗ペプチド抗体の有用な力価を提供するために、例えば、約
２週間の間隔で、必要とされ得る。この力価は、例えば、固体表面に吸着した遊
離のペプチドを用いるＥＬＩＳＡアッセイにより検出され得る。免疫した動物由
来の血清中の抗ペプチド抗体の力価は、抗ペプチド抗体の選択（例えば、当該分
野で周知の方法に従う固体支持体上のペプチドの吸着および選択された抗体の溶
出による）により上昇し得る。
を誘導するために使用され得る。この方法としては、インビボ免疫、インビトロ
免疫、およびファージディスプレイ法が挙げられるが、それらに限定されない。
例えば、Ｓｕｔｃｌｉｆｆｅら，前出；Ｗｉｌｓｏｎら，前出；およびＢｉｔｔ
ｌｅら，Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．，６６：２３４７−２３５４（１９８５）を
参照のこと。インビボ免疫を使用する場合、動物を遊離ペプチドを用いて免疫し
得る；しかし、抗ペプチド抗体力価は、高分子キャリア（例えば、キーホールリ
ンペットヘモシアニン（ｈｅｍａｃｙａｎｉｎ）（ＫＬＨ）または破傷風トキソ
イド）にペプチドを結合させることによりブーストされ得る。例えば、システイ
ン残基を含むペプチドは、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシン
イミドエステル（ＭＢＳ）のようなリンカーを用いてキャリアに結合され得る。
その一方、他のペプチドは、より一般的な結合剤（例えば、グルタルアルデヒド
）を用いてキャリアに結合され得る。ウサギ、ラット、およびマウスのような動
物は、遊離のペプチドまたはキャリア結合ペプチドのいずれかを用いて、例えば
、エマルジョン（約１００μｇのペプチドまたはキャリアタンパク質およびフロ
イントアジュバントまたは免疫応答を刺激すると知られる任意の他のアジュバン
トを含む）の腹膜内注射および／または皮内注射により免疫される。いくつかの
ブースター注射が、抗ペプチド抗体の有用な力価を提供するために、例えば、約
２週間の間隔で、必要とされ得る。この力価は、例えば、固体表面に吸着した遊
離のペプチドを用いるＥＬＩＳＡアッセイにより検出され得る。免疫した動物由
来の血清中の抗ペプチド抗体の力価は、抗ペプチド抗体の選択（例えば、当該分
野で周知の方法に従う固体支持体上のペプチドの吸着および選択された抗体の溶
出による）により上昇し得る。
【０１９５】
当業者に理解されるように、そして上記で考察されるように、免疫原性エピト
ープまたは抗原性エピトープを含む本発明のポリペプチドは、他のポリペプチド
配列に融合され得る。例えば、本発明のポリペプチドは、免疫グロブリン（Ｉｇ
Ａ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ）の定常ドメインまたはそれらの部分（ＣＨ１、Ｃ
Ｈ２、ＣＨ３、またはそれらの任意の組み合わせおよびそれらの部分）と融合さ
れ得、キメラポリペプチドを生じる。このような融合タンパク質は、精製を容易
にし得、そしてインビボでの半減期を増大させ得る。これは、ヒトＣＤ４−ポリ
ペプチドの最初の２つのドメインおよび哺乳動物の免疫グロブリンの重鎖または
軽鎖の定常領域の種々のドメインからなるキメラタンパク質について示されてい
る。例えば、ＥＰ ３９４，８２７；Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ，
３３１：８４〜８６（１９８８）を参照のこと。免疫系に対して上皮障害（ｅｐ
ｉｔｈｅｒｉａｌ ｂａｒｒｉｅｒ）を横切る抗原の増強された送達は、ＩｇＧ
またはＦｃフラグメントのようなＦｃＲｎ結合パートナーへ結合された抗原（例
えば、インシュリン）について実証された（例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９６／２２
０２４および同ＷＯ９９／０４８１３を参照のこと）。ＩｇＧ部分のジスルフィ
ド結合に起因するジスルフィド結合二量体構造を有するＩｇＧ融合タンパク質は
また、単量体ポリペプチドまたはそれらのフラグメント単独よりも、他の分子の
結合および中和においてより効果的であることが見出された。例えば、Ｆｏｕｎ
ｔｏｕｌａｋｉｓら，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２７０：３９５８−３９６４（１
９９５）を参照のこと。上記のエピトープをコードする核酸はまた、エピトープ
タグ（例えば、赤血球凝集素（「ＨＡ」）タグまたはフラッグ（ｆｌａｇ）タグ
）として目的の遺伝子と組換えられ、発現されたポリペプチドの検出および精製
を補助し得る。例えば、Ｊａｎｋｎｅｃｈｔらによって記載される系は、ヒト細
胞株中で発現される非変性融合タンパク質の容易な精製を可能にする（Ｊａｎｋ
ｎｅｃｈｔら、１９９１、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８
８：８９７２−８９７）。この系において、目的の遺伝子はワクシニア組換えプ
ラスミドへサブクローン化され、その結果、この遺伝子のオープンリーディング
フレームが、６つのヒスチジン残基からなるアミノ末端タグへ翻訳時に融合され
る。このタグは、融合タンパク質についてのマトリックス結合ドメインとしての
機能を果たす。組換えワクシニアウイルスを用いて感染された細胞からの抽出物
は、Ｎｉ２＋ニトリロ酢酸−アガロースカラム上へロードされ、そしてヒスチジ
ンタグ化タンパク質は、イミダゾール含有緩衝液を用いて選択的に溶出され得る
。
ープまたは抗原性エピトープを含む本発明のポリペプチドは、他のポリペプチド
配列に融合され得る。例えば、本発明のポリペプチドは、免疫グロブリン（Ｉｇ
Ａ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ）の定常ドメインまたはそれらの部分（ＣＨ１、Ｃ
Ｈ２、ＣＨ３、またはそれらの任意の組み合わせおよびそれらの部分）と融合さ
れ得、キメラポリペプチドを生じる。このような融合タンパク質は、精製を容易
にし得、そしてインビボでの半減期を増大させ得る。これは、ヒトＣＤ４−ポリ
ペプチドの最初の２つのドメインおよび哺乳動物の免疫グロブリンの重鎖または
軽鎖の定常領域の種々のドメインからなるキメラタンパク質について示されてい
る。例えば、ＥＰ ３９４，８２７；Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ，
３３１：８４〜８６（１９８８）を参照のこと。免疫系に対して上皮障害（ｅｐ
ｉｔｈｅｒｉａｌ ｂａｒｒｉｅｒ）を横切る抗原の増強された送達は、ＩｇＧ
またはＦｃフラグメントのようなＦｃＲｎ結合パートナーへ結合された抗原（例
えば、インシュリン）について実証された（例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９６／２２
０２４および同ＷＯ９９／０４８１３を参照のこと）。ＩｇＧ部分のジスルフィ
ド結合に起因するジスルフィド結合二量体構造を有するＩｇＧ融合タンパク質は
また、単量体ポリペプチドまたはそれらのフラグメント単独よりも、他の分子の
結合および中和においてより効果的であることが見出された。例えば、Ｆｏｕｎ
ｔｏｕｌａｋｉｓら，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２７０：３９５８−３９６４（１
９９５）を参照のこと。上記のエピトープをコードする核酸はまた、エピトープ
タグ（例えば、赤血球凝集素（「ＨＡ」）タグまたはフラッグ（ｆｌａｇ）タグ
）として目的の遺伝子と組換えられ、発現されたポリペプチドの検出および精製
を補助し得る。例えば、Ｊａｎｋｎｅｃｈｔらによって記載される系は、ヒト細
胞株中で発現される非変性融合タンパク質の容易な精製を可能にする（Ｊａｎｋ
ｎｅｃｈｔら、１９９１、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８
８：８９７２−８９７）。この系において、目的の遺伝子はワクシニア組換えプ
ラスミドへサブクローン化され、その結果、この遺伝子のオープンリーディング
フレームが、６つのヒスチジン残基からなるアミノ末端タグへ翻訳時に融合され
る。このタグは、融合タンパク質についてのマトリックス結合ドメインとしての
機能を果たす。組換えワクシニアウイルスを用いて感染された細胞からの抽出物
は、Ｎｉ２＋ニトリロ酢酸−アガロースカラム上へロードされ、そしてヒスチジ
ンタグ化タンパク質は、イミダゾール含有緩衝液を用いて選択的に溶出され得る
。
【０１９６】
本発明のさらなる融合タンパク質は、遺伝子シャッフリング、モチーフシャッ
フリング、エキソンシャッフリング、および／またはコドンシャッフリング（総
称して「ＤＮＡシャッフリング」といわれる）の技術を通じて生成され得る。Ｄ
ＮＡシャッフリングを利用して、本発明のポリペプチドの活性を調節し得、この
方法を使用することにより、改変された活性を有するポリペプチド、ならびにこ
のポリペプチドのアゴニストおよびアンタゴニストを生成し得る。一般には、米
国特許第５，６０５，７９３号；同第５，８１１，２３８号；同第５，８３０，
７２１号；同第５，８３４，２５２号；および同第５，８３７，４５８号、なら
びにＰａｔｔｅｎら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８：
７２４−３３（１９９７）；Ｈａｒａｙａｍａ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ
ｎｏｌ．１６（２）：７６−８２（１９９８）；Ｈａｎｓｓｏｎら、Ｊ．Ｍｏｌ
．Ｂｉｏｌ．２８７：２６５−７６（１９９９）；ならびにＬｏｒｅｎｚｏおよ
びＢｌａｓｃｏ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ２４（２）：３０８−１３（１
９９８）（これらの特許および刊行物の各々が本明細書によってその全体におい
て参考として援用される）を参照のこと。１つの実施形態において、配列番号１
または３に対応するポリヌクレオチドおよびこれらのポリヌクレオチドによって
コードされるポリペプチドの改変は、ＤＮＡシャッフリングにより達成され得る
。ＤＮＡシャッフリングは、相同組換えまたは部位特異的組換えにより、ポリヌ
クレオチド配列において変化を生じるように２つ以上のＤＮＡセグメントをアセ
ンブルすることを含む。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドまた
はそのコードされるポリペプチドは、組換え前に、誤りがちの（ｅｒｒｏｒ−ｐ
ｒｏｎｅ）ＰＣＲ、ランダムヌクレオチド挿入または他の方法による、ランダム
変異誘発に供されることによって改変され得る。別の実施形態において、本発明
のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの１つ以上の成分、モチーフ、セ
クション、部分、ドメイン、フラグメントなどは、１つ以上の異種分子の、１つ
以上の成分、モチーフ、セクション、部分、ドメイン、フラグメントなどと組み
換えられ得る。
フリング、エキソンシャッフリング、および／またはコドンシャッフリング（総
称して「ＤＮＡシャッフリング」といわれる）の技術を通じて生成され得る。Ｄ
ＮＡシャッフリングを利用して、本発明のポリペプチドの活性を調節し得、この
方法を使用することにより、改変された活性を有するポリペプチド、ならびにこ
のポリペプチドのアゴニストおよびアンタゴニストを生成し得る。一般には、米
国特許第５，６０５，７９３号；同第５，８１１，２３８号；同第５，８３０，
７２１号；同第５，８３４，２５２号；および同第５，８３７，４５８号、なら
びにＰａｔｔｅｎら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８：
７２４−３３（１９９７）；Ｈａｒａｙａｍａ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ
ｎｏｌ．１６（２）：７６−８２（１９９８）；Ｈａｎｓｓｏｎら、Ｊ．Ｍｏｌ
．Ｂｉｏｌ．２８７：２６５−７６（１９９９）；ならびにＬｏｒｅｎｚｏおよ
びＢｌａｓｃｏ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ２４（２）：３０８−１３（１
９９８）（これらの特許および刊行物の各々が本明細書によってその全体におい
て参考として援用される）を参照のこと。１つの実施形態において、配列番号１
または３に対応するポリヌクレオチドおよびこれらのポリヌクレオチドによって
コードされるポリペプチドの改変は、ＤＮＡシャッフリングにより達成され得る
。ＤＮＡシャッフリングは、相同組換えまたは部位特異的組換えにより、ポリヌ
クレオチド配列において変化を生じるように２つ以上のＤＮＡセグメントをアセ
ンブルすることを含む。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドまた
はそのコードされるポリペプチドは、組換え前に、誤りがちの（ｅｒｒｏｒ−ｐ
ｒｏｎｅ）ＰＣＲ、ランダムヌクレオチド挿入または他の方法による、ランダム
変異誘発に供されることによって改変され得る。別の実施形態において、本発明
のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの１つ以上の成分、モチーフ、セ
クション、部分、ドメイン、フラグメントなどは、１つ以上の異種分子の、１つ
以上の成分、モチーフ、セクション、部分、ドメイン、フラグメントなどと組み
換えられ得る。
【０１９７】
ジスルフィド結合二量体構造（ＩｇＧ部分に起因する）を有する融合タンパク
質はまた、単量体ポリペプチドまたはそのフラグメント単独よりも、他の分子に
結合しそして中和するのにさらに効率的であり得る。例えば、Ｆｏｕｎｔｏｕｌ
ａｋｉｓら、（１９９５）、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：３９５８−３９６４
を参照のこと。
質はまた、単量体ポリペプチドまたはそのフラグメント単独よりも、他の分子に
結合しそして中和するのにさらに効率的であり得る。例えば、Ｆｏｕｎｔｏｕｌ
ａｋｉｓら、（１９９５）、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：３９５８−３９６４
を参照のこと。
【０１９８】
本発明は、抗体および本発明のポリペプチドを特異的に結合する抗体およびＴ
細胞抗原レセプター（ＴＣＲ）に関する。本発明の抗体としては、ＩｇＧ（Ｉｇ
Ｇ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４）、ＩｇＡ（ＩｇＡ１およびいＩｇ
Ａ２を含む）、ＩｇＤ、ＩｇＥ、またはＩｇＭ、およびＩｇＹが挙げられる。本
明細書中で使用される場合、用語「抗体」（Ａｂ）は、単鎖全抗体およびその抗
原結合フラグメントを含む全抗体を含むことが意味される。最も好ましくは、こ
の抗体は、本発明のヒト抗原結合抗体フラグメントであり、これには、Ｆａｂ、
Ｆａｂ’およびＦ（ａｂ’）２、Ｆｄ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、単鎖抗体、ジス
ルフィド結合Ｆｖｓ（ｓｄＦｖ）およびＶLまたはＶHドメインのいずれかを含む
フラグメントが挙げられるがこれらに限定されない。この抗体は、鳥類および哺
乳動物を含む任意の動物起源であり得る。好ましくは、この抗体は、ヒト、マウ
ス、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ、ウマ、またはニワトリである。
細胞抗原レセプター（ＴＣＲ）に関する。本発明の抗体としては、ＩｇＧ（Ｉｇ
Ｇ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４）、ＩｇＡ（ＩｇＡ１およびいＩｇ
Ａ２を含む）、ＩｇＤ、ＩｇＥ、またはＩｇＭ、およびＩｇＹが挙げられる。本
明細書中で使用される場合、用語「抗体」（Ａｂ）は、単鎖全抗体およびその抗
原結合フラグメントを含む全抗体を含むことが意味される。最も好ましくは、こ
の抗体は、本発明のヒト抗原結合抗体フラグメントであり、これには、Ｆａｂ、
Ｆａｂ’およびＦ（ａｂ’）２、Ｆｄ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、単鎖抗体、ジス
ルフィド結合Ｆｖｓ（ｓｄＦｖ）およびＶLまたはＶHドメインのいずれかを含む
フラグメントが挙げられるがこれらに限定されない。この抗体は、鳥類および哺
乳動物を含む任意の動物起源であり得る。好ましくは、この抗体は、ヒト、マウ
ス、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ、ウマ、またはニワトリである。
【０１９９】
単鎖抗体を含む抗原結合抗体フラグメントは、可変領域を単独で、または以下
の全体もしくは部分と組み合わせて含み得る：ヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２およ
びＣＨ３ドメイン。また、可変領域ならびにヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２および
ＣＨ３ドメインの任意の組み合わせがまた本発明に含まれる。本発明はさらに、
本発明のポリペプチドを特異的に結合するモノクローナル抗体、ポリクローナル
抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ならびにヒトモノクローナル抗体およびヒトポ
リクローナル抗体を含む。本発明はさらに、本発明の抗体に対して抗イディオタ
イプである抗体を含む。
の全体もしくは部分と組み合わせて含み得る：ヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２およ
びＣＨ３ドメイン。また、可変領域ならびにヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２および
ＣＨ３ドメインの任意の組み合わせがまた本発明に含まれる。本発明はさらに、
本発明のポリペプチドを特異的に結合するモノクローナル抗体、ポリクローナル
抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ならびにヒトモノクローナル抗体およびヒトポ
リクローナル抗体を含む。本発明はさらに、本発明の抗体に対して抗イディオタ
イプである抗体を含む。
【０２００】
本発明の抗体は、一重特異的、二重特異的、三重特異的またはより多くの多重
特異性の抗体であり得る。多重特異的な抗体は、本発明のポリペプチドの異なる
エピトープに対して特異的であり得るか、または本発明のポリペプチドおよび異
種の組成物（例えば、異種ポリペプチドもしくは固体支持体物質）、の両方に特
異的であり得る。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ ９３／１７７１５；同ＷＯ ９２／
０８８０２；同ＷＯ ９１／００３６０；同ＷＯ ９２／０５７９３；Ｔｕｔｔ
，Ａ．ら、（１９９１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０−６９；米国特許第
５，５７３，９２０号、同第４，４７４，８９３号、同第５，６０１，８１９号
、同第４，７１４，６８１号、同第４，９２５，６４８号；Ｋｏｓｔｅｌｎｙ，
Ｓ．Ａ．ら、（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７〜１５５３を
参照のこと。
特異性の抗体であり得る。多重特異的な抗体は、本発明のポリペプチドの異なる
エピトープに対して特異的であり得るか、または本発明のポリペプチドおよび異
種の組成物（例えば、異種ポリペプチドもしくは固体支持体物質）、の両方に特
異的であり得る。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ ９３／１７７１５；同ＷＯ ９２／
０８８０２；同ＷＯ ９１／００３６０；同ＷＯ ９２／０５７９３；Ｔｕｔｔ
，Ａ．ら、（１９９１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０−６９；米国特許第
５，５７３，９２０号、同第４，４７４，８９３号、同第５，６０１，８１９号
、同第４，７１４，６８１号、同第４，９２５，６４８号；Ｋｏｓｔｅｌｎｙ，
Ｓ．Ａ．ら、（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７〜１５５３を
参照のこと。
【０２０１】
本発明の抗体は、抗体により認識されるかまたは特異的に結合される本発明の
ポリペプチドのエピトープまたは部分の点で記載されるかまたは特定化され得る
。この免疫反応性および抗原性のエピトープまたはポリペプチドの部分は、本明
細書において、例えば、Ｎ末端およびＣ末端位置により、近接するアミノ酸残基
におけるサイズにより、記載される様に、または表および図に列挙されるように
、特定化され得る。本発明の任意のエピトープまたはポリペプチドに特異的に結
合する抗体はまた排除され得る。従って、本発明は、本発明のポリペプチドの免
疫原性および抗原性エピトープに特異的に結合し、これの排除を可能にする抗体
を含む。
ポリペプチドのエピトープまたは部分の点で記載されるかまたは特定化され得る
。この免疫反応性および抗原性のエピトープまたはポリペプチドの部分は、本明
細書において、例えば、Ｎ末端およびＣ末端位置により、近接するアミノ酸残基
におけるサイズにより、記載される様に、または表および図に列挙されるように
、特定化され得る。本発明の任意のエピトープまたはポリペプチドに特異的に結
合する抗体はまた排除され得る。従って、本発明は、本発明のポリペプチドの免
疫原性および抗原性エピトープに特異的に結合し、これの排除を可能にする抗体
を含む。
【０２０２】
本発明の抗体はまた、その交差反応性について記載されるか、または特定化さ
れ得る。本発明のポリペプチドの任意の他のアナログ、オルソログまたはホモロ
グを結合しない抗体が、含まれる。本発明のポリペプチドに対して９５％未満、
９０％未満、８５％未満、８０％未満、７５％未満、７０％未満、６５％未満、
６０％未満、５５％未満および５０％未満の同一性（当該分野で公知の方法およ
び本明細書において記載された方法を用いて計算されるように）を有するポリペ
プチドを結合しない抗体もまた、本発明に含まれる。さらに本発明には、ストリ
ンジェントなハイブリダイゼーション条件下（本明細書において記載のような）
で本発明のポリヌクレオチドにハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコー
ドされるポリペプチドのみ結合する抗体が含まれる。本発明の抗体はまた、その
結合親和性について記載または特定化され得る。好ましい結合親和性としては、
５×１０-6Ｍ、１０-6Ｍ、５×１０-7Ｍ、１０-7Ｍ、５×１０-8Ｍ、１０-8Ｍ、
５×１０-9Ｍ、１０-9Ｍ、５×１０-10Ｍ、１０-10Ｍ、５×１０-11Ｍ、１０-11 Ｍ、５×１０-12Ｍ、１０-12Ｍ、５×１０-13Ｍ、１０-13Ｍ、５×１０-14Ｍ、
１０-14Ｍ、５×１０-15Ｍ、および１０-15Ｍ未満の解離定数すなわちＫdの親和
性が挙げられる。
れ得る。本発明のポリペプチドの任意の他のアナログ、オルソログまたはホモロ
グを結合しない抗体が、含まれる。本発明のポリペプチドに対して９５％未満、
９０％未満、８５％未満、８０％未満、７５％未満、７０％未満、６５％未満、
６０％未満、５５％未満および５０％未満の同一性（当該分野で公知の方法およ
び本明細書において記載された方法を用いて計算されるように）を有するポリペ
プチドを結合しない抗体もまた、本発明に含まれる。さらに本発明には、ストリ
ンジェントなハイブリダイゼーション条件下（本明細書において記載のような）
で本発明のポリヌクレオチドにハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコー
ドされるポリペプチドのみ結合する抗体が含まれる。本発明の抗体はまた、その
結合親和性について記載または特定化され得る。好ましい結合親和性としては、
５×１０-6Ｍ、１０-6Ｍ、５×１０-7Ｍ、１０-7Ｍ、５×１０-8Ｍ、１０-8Ｍ、
５×１０-9Ｍ、１０-9Ｍ、５×１０-10Ｍ、１０-10Ｍ、５×１０-11Ｍ、１０-11 Ｍ、５×１０-12Ｍ、１０-12Ｍ、５×１０-13Ｍ、１０-13Ｍ、５×１０-14Ｍ、
１０-14Ｍ、５×１０-15Ｍ、および１０-15Ｍ未満の解離定数すなわちＫdの親和
性が挙げられる。
【０２０３】
本発明の抗体は、インビトロおよびインビボの両方における診断方法ならびに
治療方法を含む、本発明のポリペプチドを精製、検出および標的化するのための
当該分野で公知の方法を含むがこれに限定されない用途を有する。例えば、この
抗体は、生物学的サンプルにおいて本発明のポリペプチドのレベルを質的および
量的に測定するためのイムノアッセイにおいて用途を有する。例えば、Ｈａｒｌ
ｏｗら，ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ：Ａ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＭＡＮＵＡＬ，（
Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，
第２版，１９８８）（全体が参考として援用されている）を参照のこと。
治療方法を含む、本発明のポリペプチドを精製、検出および標的化するのための
当該分野で公知の方法を含むがこれに限定されない用途を有する。例えば、この
抗体は、生物学的サンプルにおいて本発明のポリペプチドのレベルを質的および
量的に測定するためのイムノアッセイにおいて用途を有する。例えば、Ｈａｒｌ
ｏｗら，ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ：Ａ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＭＡＮＵＡＬ，（
Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，
第２版，１９８８）（全体が参考として援用されている）を参照のこと。
【０２０４】
本発明の抗体は、単独、または他の組成物との組み合わせのいずれかで用いら
れ得る。この抗体は、さらに、Ｎ末端またはＣ末端で異種のポリペプチドに組換
え的に融合され得るか、またはポリペプチドもしくは他の組成物に化学的に結合
体化（共有結合的結合体化および非共有結合的結合体化を含む）され得る。例え
ば、本発明の抗体は、検出アッセイにおける標識として有用な分子およびエフェ
クター分子（例えば、異種のポリペプチド、薬物または毒素）に組換え的に融合
または結合体化され得る。例えば、ＷＯ９２／０８４９５；ＷＯ９１／１４４３
８；ＷＯ８９／１２６２４；米国特許第５，３１４，９９５号；および欧州特許
第０３９６３８７号を参照のこと。
れ得る。この抗体は、さらに、Ｎ末端またはＣ末端で異種のポリペプチドに組換
え的に融合され得るか、またはポリペプチドもしくは他の組成物に化学的に結合
体化（共有結合的結合体化および非共有結合的結合体化を含む）され得る。例え
ば、本発明の抗体は、検出アッセイにおける標識として有用な分子およびエフェ
クター分子（例えば、異種のポリペプチド、薬物または毒素）に組換え的に融合
または結合体化され得る。例えば、ＷＯ９２／０８４９５；ＷＯ９１／１４４３
８；ＷＯ８９／１２６２４；米国特許第５，３１４，９９５号；および欧州特許
第０３９６３８７号を参照のこと。
【０２０５】
本発明の抗体は、当該分野で公知の任意の適切な方法によって調製され得る。
例えば、本発明のポリペプチドまたはその抗原性フラグメントは、ポリクローナ
ル抗体を含有する血清を産生することを誘導するために動物に投与され得る。モ
ノクローナル抗体は、ハイブリドーマの使用および組換え技術を含む当該分野で
公知の広範な技術を使用して調製され得る。用語「モノクローナル抗体」とは、
ハイブリドーマ技術を通して生成された抗体に限定されない。用語「モノクロー
ナル抗体」とは、真核生物、原核生物、またはファージクローンを含む単一のク
ローンに由来する抗体をいい、そしてモノクローナル抗体が生成される方法では
ない。モノクローナル抗体は、当該分野で公知の広範な種々の技術（ハイブリド
ーマ、組換えおよびファージディスプレイ技術の使用を含む）を使用して調整さ
れ得る。
例えば、本発明のポリペプチドまたはその抗原性フラグメントは、ポリクローナ
ル抗体を含有する血清を産生することを誘導するために動物に投与され得る。モ
ノクローナル抗体は、ハイブリドーマの使用および組換え技術を含む当該分野で
公知の広範な技術を使用して調製され得る。用語「モノクローナル抗体」とは、
ハイブリドーマ技術を通して生成された抗体に限定されない。用語「モノクロー
ナル抗体」とは、真核生物、原核生物、またはファージクローンを含む単一のク
ローンに由来する抗体をいい、そしてモノクローナル抗体が生成される方法では
ない。モノクローナル抗体は、当該分野で公知の広範な種々の技術（ハイブリド
ーマ、組換えおよびファージディスプレイ技術の使用を含む）を使用して調整さ
れ得る。
【０２０６】
Ｈａｒｌｏｗら、ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ：Ａ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＭＡＮ
ＵＡＬ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒ
ｅｓｓ，第二版、１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇら、ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ
ＡＮＴＯＢＯＤＩＥＳ ＡＮＤ Ｔ−ＣＥＬＬ ＨＹＢＲＩＤＯＭＡＳ ５６
３−６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．１９８１）（該参考文献は、その全体
が参考として援用される）。ＦａｂおよびＦ（ａｂ）’２フラグメントは、パパ
イン（Ｆａｂフラグメントを産生するため）またはペプシン（Ｆ（ａｂ’）２フ
ラグメントを産生するため）のような酵素を使用して、タンパク質分解切断によ
って産生され得る。
ＵＡＬ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒ
ｅｓｓ，第二版、１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇら、ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ
ＡＮＴＯＢＯＤＩＥＳ ＡＮＤ Ｔ−ＣＥＬＬ ＨＹＢＲＩＤＯＭＡＳ ５６
３−６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．１９８１）（該参考文献は、その全体
が参考として援用される）。ＦａｂおよびＦ（ａｂ）’２フラグメントは、パパ
イン（Ｆａｂフラグメントを産生するため）またはペプシン（Ｆ（ａｂ’）２フ
ラグメントを産生するため）のような酵素を使用して、タンパク質分解切断によ
って産生され得る。
【０２０７】
あるいは、本発明の抗体は、当該分野で公知の方法を使用して、組換えＤＮＡ
およびファージディスプレイ技術を適用して、または合成化学を通して産生され
得る。例えば、本発明の抗体は、当該分野で公知の種々のファージディスプレイ
方法を用いて調製され得る。ファージディスプレイ方法において、機能的抗体ド
メインは、それらをコードするポリヌクレオチド配列を保有するファージ粒子の
表面に提示される。所望の結合特性を有するファージは、抗原（代表的には、固
体表面またはビーズに結合または捕捉された抗原）を用いて直接的に選択するこ
とにより、レパートリー抗体ライブラリーまたはコンビナトリアル抗体ライブラ
リー（例えば、ヒトまたはマウス）から選択される。これらの方法において使用
されるファージは、代表的に、ファージ遺伝子ＩＩＩタンパク質またはファージ
遺伝子ＶＩＩＩタンパク質のいずれかに組換え的に融合されたＦａｂ、Ｆｖまた
はジスルフィド安定化されたＦｖの抗体ドメインを有するｆｄおよびＭ１３を含
む糸状（ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ）ファージである。本発明の抗体を作製するた
めに用いられ得るファージディスプレイ方法の例としては、以下に開示される方
法が挙げられる：Ｂｒｉｎｋｍａｎ Ｕ．ら、（１９９５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
．Ｍｅｔｈｏｄｓ １８２：４１〜５０；Ａｍｅｓ，Ｒ．Ｓ．ら、（１９９５）
Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １８４：１７７〜１８６；Ｋｅｔｔｌｅ
ｂｏｒｏｕｇｈ，Ｃ．Ａ．ら、（１９９４）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４
：９５２〜９５８；Ｐｅｒｓｉｃ，Ｌ．ら、（１９９７）Ｇｅｎｅ １８７ ９
〜１８；Ｂｕｒｔｏｎ，Ｄ．Ｒ．ら、（１９９４）Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｉ
ｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ５７：１９１〜２８０；ＰＣＴ／ＧＢ９１／０１１３４；
ＷＯ９０／０２８０９；ＷＯ９１／１０７３７；ＷＯ９２／０１０４７；ＷＯ９
２／１８６１９；ＷＯ９３／１１２３６；ＷＯ９５／１５９８２；ＷＯ９５／２
０４０１；ならびに米国特許第５，６９８，４２６号；同第５，２２３，４０９
号；同第５，４０３，４８４号；同第５，５８０，７１７号；同第５，４２７，
９０８号；同第５，７５０，７５３号；同第５，８２１，０４７号；同第５，５
７１，６９８号；同第５，４２７，９０８号；同第５，５１６，６３７号；同第
５，７８０，２２５号；同第５，６５８，７２７号および同第５，７３３，７４
３号（これらのそれぞれは、その全体が参考として援用される）。
およびファージディスプレイ技術を適用して、または合成化学を通して産生され
得る。例えば、本発明の抗体は、当該分野で公知の種々のファージディスプレイ
方法を用いて調製され得る。ファージディスプレイ方法において、機能的抗体ド
メインは、それらをコードするポリヌクレオチド配列を保有するファージ粒子の
表面に提示される。所望の結合特性を有するファージは、抗原（代表的には、固
体表面またはビーズに結合または捕捉された抗原）を用いて直接的に選択するこ
とにより、レパートリー抗体ライブラリーまたはコンビナトリアル抗体ライブラ
リー（例えば、ヒトまたはマウス）から選択される。これらの方法において使用
されるファージは、代表的に、ファージ遺伝子ＩＩＩタンパク質またはファージ
遺伝子ＶＩＩＩタンパク質のいずれかに組換え的に融合されたＦａｂ、Ｆｖまた
はジスルフィド安定化されたＦｖの抗体ドメインを有するｆｄおよびＭ１３を含
む糸状（ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ）ファージである。本発明の抗体を作製するた
めに用いられ得るファージディスプレイ方法の例としては、以下に開示される方
法が挙げられる：Ｂｒｉｎｋｍａｎ Ｕ．ら、（１９９５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
．Ｍｅｔｈｏｄｓ １８２：４１〜５０；Ａｍｅｓ，Ｒ．Ｓ．ら、（１９９５）
Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １８４：１７７〜１８６；Ｋｅｔｔｌｅ
ｂｏｒｏｕｇｈ，Ｃ．Ａ．ら、（１９９４）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４
：９５２〜９５８；Ｐｅｒｓｉｃ，Ｌ．ら、（１９９７）Ｇｅｎｅ １８７ ９
〜１８；Ｂｕｒｔｏｎ，Ｄ．Ｒ．ら、（１９９４）Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｉ
ｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ５７：１９１〜２８０；ＰＣＴ／ＧＢ９１／０１１３４；
ＷＯ９０／０２８０９；ＷＯ９１／１０７３７；ＷＯ９２／０１０４７；ＷＯ９
２／１８６１９；ＷＯ９３／１１２３６；ＷＯ９５／１５９８２；ＷＯ９５／２
０４０１；ならびに米国特許第５，６９８，４２６号；同第５，２２３，４０９
号；同第５，４０３，４８４号；同第５，５８０，７１７号；同第５，４２７，
９０８号；同第５，７５０，７５３号；同第５，８２１，０４７号；同第５，５
７１，６９８号；同第５，４２７，９０８号；同第５，５１６，６３７号；同第
５，７８０，２２５号；同第５，６５８，７２７号および同第５，７３３，７４
３号（これらのそれぞれは、その全体が参考として援用される）。
【０２０８】
上記参考文献に記載されているように、ファージ選択後、ファージ由来の抗体
をコードする領域は、ヒト抗体を含む抗体の全体、または任意の他の所望の抗原
結合フラグメントを作製するために単離および使用され得、そして哺乳動物細胞
、昆虫細胞、植物細胞、酵母および細菌を含む任意の所望の宿主において発現さ
れ得る。例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’およびＦ（ａｂ’）２フラグメントを組換え
的に産生するための技術はまた、当該分野で公知の方法を用いて使用され得る。
この方法は、例えば、以下に開示される方法である：ＷＯ９２／２２３２４；Ｍ
ｕｌｌｉｎａｘ，Ｒ．Ｌ．ら、（１９９２）ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １２
（６）：８６４−８６９；およびＳａｗａｉ，Ｈ．ら、（１９９５）ＡＪＲＩ
３４：２６−３４；およびＢｅｔｔｅｒ，Ｍ．ら、（１９９８）Ｓｃｉｅｎｃｅ
２４０：１０４１−１０４３（上記の参考文献は、その全体が参考として援用
される）。
をコードする領域は、ヒト抗体を含む抗体の全体、または任意の他の所望の抗原
結合フラグメントを作製するために単離および使用され得、そして哺乳動物細胞
、昆虫細胞、植物細胞、酵母および細菌を含む任意の所望の宿主において発現さ
れ得る。例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’およびＦ（ａｂ’）２フラグメントを組換え
的に産生するための技術はまた、当該分野で公知の方法を用いて使用され得る。
この方法は、例えば、以下に開示される方法である：ＷＯ９２／２２３２４；Ｍ
ｕｌｌｉｎａｘ，Ｒ．Ｌ．ら、（１９９２）ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １２
（６）：８６４−８６９；およびＳａｗａｉ，Ｈ．ら、（１９９５）ＡＪＲＩ
３４：２６−３４；およびＢｅｔｔｅｒ，Ｍ．ら、（１９９８）Ｓｃｉｅｎｃｅ
２４０：１０４１−１０４３（上記の参考文献は、その全体が参考として援用
される）。
【０２０９】
さらに、本発明のポリペプチドは、（特異的な抗体抗原結合をアッセイするた
めの当該分野で周知のイムノアッセイによって決定されるような）本発明の配列
番号２および／または４の、ポリペプチド、ポリペプチドフラグメント、または
改変体、および／またはエピトープを免疫特異的に結合する抗体およびＴ細胞抗
原レセプター（ＴＣＲ）に関する。本発明の抗体は、ポリクローナル抗体、モノ
クローナル抗体、多重特異的抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体、単
鎖抗体、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）フラグメント、Ｆａｂ発現ライブラ
リーによって産生されるフラグメント、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例え
ば、本発明の抗体に対する抗Ｉｄ抗体を含む）、および上記のいずれかのエピト
ープ結合フラグメントを含むが、限定されない。本明細書中で使用される場合、
用語「抗体」とは、免疫グロブリン分子および免疫グロリン分子の免疫学的に活
性な部分、すなわち、免疫特異的に抗原を結合する抗原結合部位を含む分子をい
う。本発明の免疫グロブリン分子は、免疫グロブリン分子の任意の型（例えば、
ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩｇＹ）、任意のクラス（例
えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）ま
たは任意のサブクラスであり得る。
めの当該分野で周知のイムノアッセイによって決定されるような）本発明の配列
番号２および／または４の、ポリペプチド、ポリペプチドフラグメント、または
改変体、および／またはエピトープを免疫特異的に結合する抗体およびＴ細胞抗
原レセプター（ＴＣＲ）に関する。本発明の抗体は、ポリクローナル抗体、モノ
クローナル抗体、多重特異的抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体、単
鎖抗体、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）フラグメント、Ｆａｂ発現ライブラ
リーによって産生されるフラグメント、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例え
ば、本発明の抗体に対する抗Ｉｄ抗体を含む）、および上記のいずれかのエピト
ープ結合フラグメントを含むが、限定されない。本明細書中で使用される場合、
用語「抗体」とは、免疫グロブリン分子および免疫グロリン分子の免疫学的に活
性な部分、すなわち、免疫特異的に抗原を結合する抗原結合部位を含む分子をい
う。本発明の免疫グロブリン分子は、免疫グロブリン分子の任意の型（例えば、
ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩｇＹ）、任意のクラス（例
えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）ま
たは任意のサブクラスであり得る。
【０２１０】
最も好ましくは、この抗体は、本発明のヒト抗原結合抗体フラグメントであり
、これには、Ｆａｂ、Ｆａｂ’およびＦ（ａｂ’）２、Ｆｄ、単鎖Ｆｖｓ（ｓｃ
Ｆｖ）、単鎖抗体、ジスルフィド結合Ｆｖｓ（ｓｄＦｖ）ならびにＶＬまたはＶ
Ｈドメインのいずれかを含むフラグメントが挙げられるがこれらに限定されない
。単鎖抗体を含む抗原結合抗体フラグメントは、可変領域を単独で、または以下
の全体もしくは部分と組み合わせて含み得る：ヒンジ領域、ＣＨ１ドメイン、Ｃ
Ｈ２ドメインおよびＣＨ３ドメイン。また、可変領域とヒンジ領域、ＣＨ１ドメ
イン、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインとの任意の組み合わせもまた含む抗
原結合フラグメントがまた本発明に含まれる。本発明の抗体は、鳥類および哺乳
動物を含む任意の動物起源由来であり得る。好ましくは、この抗体は、ヒト、ネ
ズミ（ｍｕｒｉｎｅ）（例えば、マウスおよびラット）、ロバ、シップウサギ（
ｓｈｉｐ ｒａｂｂｉｔ）、ヤギ、モルモット、ラクダ、ウマ、またはニワトリ
である。本明細書中で使用される場合、「ヒト」抗体は、ヒト免疫グロブリンの
アミノ酸配列を有する抗体を含み、そしてヒト免疫グロブリンライブラリーまた
は１つ以上のヒト免疫グロブリンについてトランスジェニックであり、そして内
因性免疫グロブリンを発現しない動物から単離さた抗体（下に記載のように、そ
して例えば、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉらによる米国特許第５，９３９，５９８
号において記載のような）を含む。
、これには、Ｆａｂ、Ｆａｂ’およびＦ（ａｂ’）２、Ｆｄ、単鎖Ｆｖｓ（ｓｃ
Ｆｖ）、単鎖抗体、ジスルフィド結合Ｆｖｓ（ｓｄＦｖ）ならびにＶＬまたはＶ
Ｈドメインのいずれかを含むフラグメントが挙げられるがこれらに限定されない
。単鎖抗体を含む抗原結合抗体フラグメントは、可変領域を単独で、または以下
の全体もしくは部分と組み合わせて含み得る：ヒンジ領域、ＣＨ１ドメイン、Ｃ
Ｈ２ドメインおよびＣＨ３ドメイン。また、可変領域とヒンジ領域、ＣＨ１ドメ
イン、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインとの任意の組み合わせもまた含む抗
原結合フラグメントがまた本発明に含まれる。本発明の抗体は、鳥類および哺乳
動物を含む任意の動物起源由来であり得る。好ましくは、この抗体は、ヒト、ネ
ズミ（ｍｕｒｉｎｅ）（例えば、マウスおよびラット）、ロバ、シップウサギ（
ｓｈｉｐ ｒａｂｂｉｔ）、ヤギ、モルモット、ラクダ、ウマ、またはニワトリ
である。本明細書中で使用される場合、「ヒト」抗体は、ヒト免疫グロブリンの
アミノ酸配列を有する抗体を含み、そしてヒト免疫グロブリンライブラリーまた
は１つ以上のヒト免疫グロブリンについてトランスジェニックであり、そして内
因性免疫グロブリンを発現しない動物から単離さた抗体（下に記載のように、そ
して例えば、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉらによる米国特許第５，９３９，５９８
号において記載のような）を含む。
【０２１１】
本発明の抗体は、一重特異的、二重特異的、三重特異的またはより多くの多重
特異性の抗体であり得る。多重特異的な抗体は、本発明のポリペプチドの異なる
エピトープに対して特異的であり得るか、または本発明のポリペプチドおよび異
種のエピトープ（例えば、異種ポリペプチドもしくは固体支持体物質）、の両方
に特異的であり得る。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ ９３／１７７１５；同ＷＯ ９
２／０８８０２；同ＷＯ ９１／００３６０；同ＷＯ ９２／０５７９３；Ｔｕ
ｔｔら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０−６９（１９９１）；米国特許第４
，４７４，８９３号、同第４，７１４，６８１号、同第４，９２５，６４８号、
同第５，５７３，９２０号、同第５，６０１，８１９号；Ｋｏｓｔｅｌｎｙら、
Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７−１５５３（１９９２）を参照のこと。
特異性の抗体であり得る。多重特異的な抗体は、本発明のポリペプチドの異なる
エピトープに対して特異的であり得るか、または本発明のポリペプチドおよび異
種のエピトープ（例えば、異種ポリペプチドもしくは固体支持体物質）、の両方
に特異的であり得る。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ ９３／１７７１５；同ＷＯ ９
２／０８８０２；同ＷＯ ９１／００３６０；同ＷＯ ９２／０５７９３；Ｔｕ
ｔｔら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０−６９（１９９１）；米国特許第４
，４７４，８９３号、同第４，７１４，６８１号、同第４，９２５，６４８号、
同第５，５７３，９２０号、同第５，６０１，８１９号；Ｋｏｓｔｅｌｎｙら、
Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７−１５５３（１９９２）を参照のこと。
【０２１２】
本発明の抗体は、これらが認識または特異的に結合する、本発明のポリペプチ
ドのエピトープまたは部分に関して記載または特定化され得る。このエピトープ
またはポリペプチドの部分は、例えば、Ｎ末端およびＣ末端位置によって、連続
するアミノ酸残基におけるサイズによって本明細書中に記載されるか、または表
および図において列挙されるように、特定化され得る。本発明の好ましいエピト
ープとしては、以下が挙げられる：配列番号２のアミノ酸２〜１４、３２〜４４
、４７〜６０、６６〜７８、８７〜１０３、１０９〜１１８、１４６〜１６２、
１６８〜１８０、１８３〜２１９、２２３〜２４３、２７５〜２８４、２９６〜
３０６、３１４〜３３４、３４１〜３５４、３５７〜３７６、３９２〜３９９、
４０１〜４１０、４１８〜４２９、４３８〜４５４、４５６〜４７１、４７４〜
４８８、５１０〜５２２、５２４〜５３８、５５０〜５６１、５６５〜６２６、
６３０〜６４３、６５９〜６７１、６７９〜７２１、７３４〜７４９、７８４〜
８０４、８１３〜８２０、８２５〜８３２、８４５〜８５４、８６０〜８９４、
８９９〜９１７、９１９〜９２４および９２８〜９３９、ならびに配列番号４の
アミノ酸２６〜３８、４５〜５２、６９〜７６、８０〜９９、１０５〜１１３、
１２９〜１３６、１３８〜２１７、２５４〜２６３、２７３〜２８９、２９４〜
３１３、３２１〜３３１、３３９〜３５６、３７１３８３、４１７〜４２７、４
３８〜４４３、４５９〜４７１、４７９〜５０５、５０７〜５２６、５３５〜５
４６、５５０〜６０７、６１５〜６４０、６４８６５３、６６０〜６６７、６６
９〜６８１、６８３〜７０４、７１７〜７３２、７３７〜７４３、７７５〜７８
７、７９７〜８０４、８１１〜８２５、８４０〜８６７および８７０〜８８４、
ならびにこれらのエピトープをコードするポリヌクレオチド。本発明の任意のエ
ピトープまたはポリペプチドに特異的に結合する抗体はまた、排除され得る。従
って、本発明は、本発明のポリペプチドを特異的に結合し、そして本発明のポリ
ペプチドの排除を可能にする抗体を含む。
ドのエピトープまたは部分に関して記載または特定化され得る。このエピトープ
またはポリペプチドの部分は、例えば、Ｎ末端およびＣ末端位置によって、連続
するアミノ酸残基におけるサイズによって本明細書中に記載されるか、または表
および図において列挙されるように、特定化され得る。本発明の好ましいエピト
ープとしては、以下が挙げられる：配列番号２のアミノ酸２〜１４、３２〜４４
、４７〜６０、６６〜７８、８７〜１０３、１０９〜１１８、１４６〜１６２、
１６８〜１８０、１８３〜２１９、２２３〜２４３、２７５〜２８４、２９６〜
３０６、３１４〜３３４、３４１〜３５４、３５７〜３７６、３９２〜３９９、
４０１〜４１０、４１８〜４２９、４３８〜４５４、４５６〜４７１、４７４〜
４８８、５１０〜５２２、５２４〜５３８、５５０〜５６１、５６５〜６２６、
６３０〜６４３、６５９〜６７１、６７９〜７２１、７３４〜７４９、７８４〜
８０４、８１３〜８２０、８２５〜８３２、８４５〜８５４、８６０〜８９４、
８９９〜９１７、９１９〜９２４および９２８〜９３９、ならびに配列番号４の
アミノ酸２６〜３８、４５〜５２、６９〜７６、８０〜９９、１０５〜１１３、
１２９〜１３６、１３８〜２１７、２５４〜２６３、２７３〜２８９、２９４〜
３１３、３２１〜３３１、３３９〜３５６、３７１３８３、４１７〜４２７、４
３８〜４４３、４５９〜４７１、４７９〜５０５、５０７〜５２６、５３５〜５
４６、５５０〜６０７、６１５〜６４０、６４８６５３、６６０〜６６７、６６
９〜６８１、６８３〜７０４、７１７〜７３２、７３７〜７４３、７７５〜７８
７、７９７〜８０４、８１１〜８２５、８４０〜８６７および８７０〜８８４、
ならびにこれらのエピトープをコードするポリヌクレオチド。本発明の任意のエ
ピトープまたはポリペプチドに特異的に結合する抗体はまた、排除され得る。従
って、本発明は、本発明のポリペプチドを特異的に結合し、そして本発明のポリ
ペプチドの排除を可能にする抗体を含む。
【０２１３】
本発明の抗体はまた、その交差反応性について記載または特定化され得る。本
発明のポリペプチドの任意の他のアナログ、オルソログまたはホモログを結合し
ない抗体が、含まれる。本発明のポリペプチドに対して少なくとも９５％、少な
くとも９０％、少なくとも８５％、少なくとも８０％、少なくとも７５％、少な
くとも７０％、少なくとも６５％、少なくとも６０％、少なくとも５５％および
少なくとも５０％の同一性（当該分野で公知の方法および本明細書中に記載され
る方法を用いて計算される場合）を有するポリペプチドを結合する抗体もまた、
本発明に含まれる。特定の実施形態において、本発明の抗体は、ヒトタンパク質
の、マウスホモログ、ラットホモログおよび／またはウサギホモログならびに対
応するそれらのエピトープと交差反応する。本発明のポリペプチドに対して９５
％未満、９０％未満、８５％未満、８０％未満、７５％未満、７０％未満、６５
％未満、６０％未満、５５％未満および５０％未満の同一性（当該分野で公知の
方法および本明細書中に記載される方法を用いて計算される場合）を有するポリ
ペプチドを結合しない抗体もまた、本発明に含まれる。特定の実施形態において
、上記の交差反応性は、本明細書中に開示された、任意の単一特異的な抗原性ま
たは免疫原性ポリペプチド、あるいは２、３、４、５以上の特異的抗原性および
／または免疫原生ポリペプチドの組み合わせに関する。さらに、ストリンジェン
トなハイブリダイゼーション条件下（本明細書中で記載されるような）で本発明
のポリヌクレオチドにハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされる
ポリペプチドを結合する抗体が、本発明に含まれる。本発明の抗体はまた、本発
明のポリペプチドに対するそれらの結合親和性について記載または特定化され得
る。好ましい結合親和性としては、５×１０-2Ｍ未満、１０-2Ｍ未満、５×１０ -3 Ｍ未満、１０-3Ｍ未満、５×１０-4Ｍ未満、１０-4Ｍ未満、５×１０-5Ｍ未満
、１０-5Ｍ未満、５×１０-6Ｍ未満、１０-6Ｍ未満、５×１０-7Ｍ未満、１０-7 Ｍ未満、５×１０-8Ｍ未満、１０-8Ｍ未満、５×１０-9Ｍ未満、１０-9Ｍ未満、
５×１０-10Ｍ未満、１０-10Ｍ未満、５×１０-11Ｍ未満、１０-11Ｍ未満、５×
１０-12Ｍ未満、１０-12Ｍ未満、５×１０-13Ｍ未満、１０-13Ｍ未満、５×１０ -14 Ｍ未満、１０-14Ｍ未満、５×１０-15Ｍ未満または１０-15Ｍ未満の解離定数
すなわちＫｄを有する親和性が挙げられる。
発明のポリペプチドの任意の他のアナログ、オルソログまたはホモログを結合し
ない抗体が、含まれる。本発明のポリペプチドに対して少なくとも９５％、少な
くとも９０％、少なくとも８５％、少なくとも８０％、少なくとも７５％、少な
くとも７０％、少なくとも６５％、少なくとも６０％、少なくとも５５％および
少なくとも５０％の同一性（当該分野で公知の方法および本明細書中に記載され
る方法を用いて計算される場合）を有するポリペプチドを結合する抗体もまた、
本発明に含まれる。特定の実施形態において、本発明の抗体は、ヒトタンパク質
の、マウスホモログ、ラットホモログおよび／またはウサギホモログならびに対
応するそれらのエピトープと交差反応する。本発明のポリペプチドに対して９５
％未満、９０％未満、８５％未満、８０％未満、７５％未満、７０％未満、６５
％未満、６０％未満、５５％未満および５０％未満の同一性（当該分野で公知の
方法および本明細書中に記載される方法を用いて計算される場合）を有するポリ
ペプチドを結合しない抗体もまた、本発明に含まれる。特定の実施形態において
、上記の交差反応性は、本明細書中に開示された、任意の単一特異的な抗原性ま
たは免疫原性ポリペプチド、あるいは２、３、４、５以上の特異的抗原性および
／または免疫原生ポリペプチドの組み合わせに関する。さらに、ストリンジェン
トなハイブリダイゼーション条件下（本明細書中で記載されるような）で本発明
のポリヌクレオチドにハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされる
ポリペプチドを結合する抗体が、本発明に含まれる。本発明の抗体はまた、本発
明のポリペプチドに対するそれらの結合親和性について記載または特定化され得
る。好ましい結合親和性としては、５×１０-2Ｍ未満、１０-2Ｍ未満、５×１０ -3 Ｍ未満、１０-3Ｍ未満、５×１０-4Ｍ未満、１０-4Ｍ未満、５×１０-5Ｍ未満
、１０-5Ｍ未満、５×１０-6Ｍ未満、１０-6Ｍ未満、５×１０-7Ｍ未満、１０-7 Ｍ未満、５×１０-8Ｍ未満、１０-8Ｍ未満、５×１０-9Ｍ未満、１０-9Ｍ未満、
５×１０-10Ｍ未満、１０-10Ｍ未満、５×１０-11Ｍ未満、１０-11Ｍ未満、５×
１０-12Ｍ未満、１０-12Ｍ未満、５×１０-13Ｍ未満、１０-13Ｍ未満、５×１０ -14 Ｍ未満、１０-14Ｍ未満、５×１０-15Ｍ未満または１０-15Ｍ未満の解離定数
すなわちＫｄを有する親和性が挙げられる。
【０２１４】
本発明はまた、競合性結合を決定するための当該分野で公知の任意の方法（例
えば、本明細書中で記載されるイムノアッセイ）によって決定されるような、本
発明のエピトープに対する抗体の結合を競合的に阻害する抗体を提供する。好ま
しい実施形態において、この抗体は、少なくとも９５％、少なくとも９０％、少
なくとも８５％、少なくとも８０％、少なくとも７５％、少なくとも７０％、少
なくとも６０％、または少なくとも５０％だけ、エピトープへの結合を競合的に
阻害する。
えば、本明細書中で記載されるイムノアッセイ）によって決定されるような、本
発明のエピトープに対する抗体の結合を競合的に阻害する抗体を提供する。好ま
しい実施形態において、この抗体は、少なくとも９５％、少なくとも９０％、少
なくとも８５％、少なくとも８０％、少なくとも７５％、少なくとも７０％、少
なくとも６０％、または少なくとも５０％だけ、エピトープへの結合を競合的に
阻害する。
【０２１５】
本発明の抗体は、本発明のポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストと
して作用し得る。例えば、本発明は、本発明のポリペプチドとのレセプター／リ
ガンド相互作用を部分的または完全にのいずれかで破壊する抗体を含む。好まし
くは、本発明の抗体は、本明細書中で開示された抗原性エピトープ、またはその
部分を結合する。本発明は、レセプター特異的抗体およびリガンド特異的抗体の
両方の特徴を有する。本発明はまた、リガンド結合を妨害しないがレセプター活
性化を妨害するレセプター特異的抗体の特徴を有する。レセプター活性化（すな
わち、シグナル伝達）は、本明細書中に記載の技術、そうでなければ、当該分野
で公知の技術により決定され得る。例えば、レセプター活性化は、レセプターの
リン酸化（例えば、チロシンまたはセリン／トレオニン）、または免疫沈降それ
に続くウェスタンブロット分析（例えば、上記のような）によってその基質を検
出することにより、決定され得る。特定の実施形態において、この抗体の非存在
下で、リガンド活性またはレセプター活性を、その活性の少なくとも９５％、少
なくとも９０％、少なくとも８５％、少なくとも８０％、少なくとも７５％、少
なくとも７０％、少なくとも６０％、または少なくとも５０％阻害する抗体が提
供される。
して作用し得る。例えば、本発明は、本発明のポリペプチドとのレセプター／リ
ガンド相互作用を部分的または完全にのいずれかで破壊する抗体を含む。好まし
くは、本発明の抗体は、本明細書中で開示された抗原性エピトープ、またはその
部分を結合する。本発明は、レセプター特異的抗体およびリガンド特異的抗体の
両方の特徴を有する。本発明はまた、リガンド結合を妨害しないがレセプター活
性化を妨害するレセプター特異的抗体の特徴を有する。レセプター活性化（すな
わち、シグナル伝達）は、本明細書中に記載の技術、そうでなければ、当該分野
で公知の技術により決定され得る。例えば、レセプター活性化は、レセプターの
リン酸化（例えば、チロシンまたはセリン／トレオニン）、または免疫沈降それ
に続くウェスタンブロット分析（例えば、上記のような）によってその基質を検
出することにより、決定され得る。特定の実施形態において、この抗体の非存在
下で、リガンド活性またはレセプター活性を、その活性の少なくとも９５％、少
なくとも９０％、少なくとも８５％、少なくとも８０％、少なくとも７５％、少
なくとも７０％、少なくとも６０％、または少なくとも５０％阻害する抗体が提
供される。
【０２１６】
本発明はまた、リガンド結合およびレセプター活性化の両方を妨げるレセプタ
ー特異的抗体、ならびにレセプターリガンド複合体を認識し、そして好ましくは
、結合していないレセプターまたは結合していないリガンドを特異的に認識しな
い抗体の特徴を有する。同様に、本発明は、リガンドを結合し、そしてレセプタ
ーへのリガンドの結合を妨げる中和抗体、およびリガントを結合し、それにより
レセプター活性化を妨げるが、リガンドがレセプターを結合することを妨げない
抗体を含む。さらに、本発明は、レセプターを活性化する抗体を含む。これらの
抗体は、レセプターアゴニストとして作用し得、すなわち、例えば、レセプター
の二量化を誘発することによってリガンド媒介レセプター活性化の生物学的活性
化の全てまたはサブセットのいずれかを増強するかまたは活性化し得る。この抗
体は、本明細書中に開示される本発明のペプチドの特異的生物学的活性を含む生
物学的活性についてのアゴニスト、アンタゴニストまたは逆アゴニストとして特
定化され得る。上記抗体アゴニストは、当該分野で公知の方法を用いて作製され
得る。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９６／４０２８１；米国特許第５，８１１，０９
７号；Ｄｅｎｇら、Ｂｌｏｏｄ ９２（６）：１９８１−１９８８（１９９８）
；Ｃｈｅｎら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５８（１６）：３６６８−３６７８（１
９９８）；Ｈａｒｒｏｐら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１（４）：１７８６−１
７９４（１９９８）；Ｚｈｕら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ：５８（１５）：３２０
９−３２１４（１９９８）；Ｙｏｏｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０（７）：
３１７０−３１７９（１９９８）；Ｐｒａｔら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．１１１
（Ｐｔ２）：２３７−２４７（１９９８）；Ｐｉｔａｒｄら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏ
ｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２０５（２）：１７７−１９０（１９９７）；Ｌｉａｕｔ
ａｒｄら、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ９（４）：２３３−２４１（１９９７）；Ｃａｒ
ｌｓｏｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２（１７）：１１２９５−１１３０
１（１９９７）；Ｔａｒｙｍａｎら、Ｎｅｕｒｏｎ １４（４）：７５５−７６
２（１９９５）；Ｍｕｌｌｅｒら、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ６（９）：１１５３−
１１６７（１９９８）；Ｂａｒｔｕｎｅｋら、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８（１）：１
４−２０（１９９６）（これらは全て、その全体が参考として本明細書中に援用
される）を参照のこと。
ー特異的抗体、ならびにレセプターリガンド複合体を認識し、そして好ましくは
、結合していないレセプターまたは結合していないリガンドを特異的に認識しな
い抗体の特徴を有する。同様に、本発明は、リガンドを結合し、そしてレセプタ
ーへのリガンドの結合を妨げる中和抗体、およびリガントを結合し、それにより
レセプター活性化を妨げるが、リガンドがレセプターを結合することを妨げない
抗体を含む。さらに、本発明は、レセプターを活性化する抗体を含む。これらの
抗体は、レセプターアゴニストとして作用し得、すなわち、例えば、レセプター
の二量化を誘発することによってリガンド媒介レセプター活性化の生物学的活性
化の全てまたはサブセットのいずれかを増強するかまたは活性化し得る。この抗
体は、本明細書中に開示される本発明のペプチドの特異的生物学的活性を含む生
物学的活性についてのアゴニスト、アンタゴニストまたは逆アゴニストとして特
定化され得る。上記抗体アゴニストは、当該分野で公知の方法を用いて作製され
得る。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９６／４０２８１；米国特許第５，８１１，０９
７号；Ｄｅｎｇら、Ｂｌｏｏｄ ９２（６）：１９８１−１９８８（１９９８）
；Ｃｈｅｎら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５８（１６）：３６６８−３６７８（１
９９８）；Ｈａｒｒｏｐら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１（４）：１７８６−１
７９４（１９９８）；Ｚｈｕら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ：５８（１５）：３２０
９−３２１４（１９９８）；Ｙｏｏｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０（７）：
３１７０−３１７９（１９９８）；Ｐｒａｔら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．１１１
（Ｐｔ２）：２３７−２４７（１９９８）；Ｐｉｔａｒｄら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏ
ｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２０５（２）：１７７−１９０（１９９７）；Ｌｉａｕｔ
ａｒｄら、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ９（４）：２３３−２４１（１９９７）；Ｃａｒ
ｌｓｏｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２（１７）：１１２９５−１１３０
１（１９９７）；Ｔａｒｙｍａｎら、Ｎｅｕｒｏｎ １４（４）：７５５−７６
２（１９９５）；Ｍｕｌｌｅｒら、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ６（９）：１１５３−
１１６７（１９９８）；Ｂａｒｔｕｎｅｋら、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８（１）：１
４−２０（１９９６）（これらは全て、その全体が参考として本明細書中に援用
される）を参照のこと。
【０２１７】
本発明の抗体は、例えば、これらに限定されないが、本発明のポリペプチドを
精製し、検出し、そして標的化するために使用され得る。これらは、インビトロ
およびインビボの両方での診断方法および治療方法を含む。例えば、この抗体は
、生物学的サンプルにおける本発明のポリペプチドのレベルを定性的におよび定
量的に測定するためのイムノアッセイにおける用途を有する。例えば、Ｈａｒｌ
ｏｗら，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（
Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，
第２版，１９８８）（本明細書中でその全体が参照として援用される）を参照の
こと。
精製し、検出し、そして標的化するために使用され得る。これらは、インビトロ
およびインビボの両方での診断方法および治療方法を含む。例えば、この抗体は
、生物学的サンプルにおける本発明のポリペプチドのレベルを定性的におよび定
量的に測定するためのイムノアッセイにおける用途を有する。例えば、Ｈａｒｌ
ｏｗら，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（
Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，
第２版，１９８８）（本明細書中でその全体が参照として援用される）を参照の
こと。
【０２１８】
以下にさらに詳細に議論されるように、本発明の抗体は、単独または他の組成
物との組み合わせのいずれかで使用され得る。この抗体はさらに、ポリペプチド
または他の化合物へＮ末端でもしくはＣ末端で異種ポリペプチドに組換え的に融
合され得るか、または化学的に結合体化（共有結合および非共有結合体化を含む
）され得る。例えば、本発明の抗体は、検出アッセイにおける標識として有用な
分子および異種ポリペプチド、薬剤、放射性核種、または毒素のようなエフェク
ター分子へ組換え的に融合または結合体化され得る。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９
２／０８４９５；ＷＯ９１／１４４３８；ＷＯ８９／１２６２４；米国特許第５
，３１４，９９５号；および欧州特許第３９６，３８７号を参照のこと。
物との組み合わせのいずれかで使用され得る。この抗体はさらに、ポリペプチド
または他の化合物へＮ末端でもしくはＣ末端で異種ポリペプチドに組換え的に融
合され得るか、または化学的に結合体化（共有結合および非共有結合体化を含む
）され得る。例えば、本発明の抗体は、検出アッセイにおける標識として有用な
分子および異種ポリペプチド、薬剤、放射性核種、または毒素のようなエフェク
ター分子へ組換え的に融合または結合体化され得る。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９
２／０８４９５；ＷＯ９１／１４４３８；ＷＯ８９／１２６２４；米国特許第５
，３１４，９９５号；および欧州特許第３９６，３８７号を参照のこと。
【０２１９】
本発明の抗体は、改変される（すなわち、共有結合性付着（ｃｏｖａｌｅｎｔ
ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ）が、抗体が抗イディオタイプ応答を産生するのを妨げ
ないような、抗体に対する任意の型の分子の共有結合性付着による）誘導体を含
む。例えば、制限されないが、抗体誘導体には、例えば、グリコシル化、アセチ
ル化、ぺグ化（ｐｅｇｙｌａｔｉｏｎ）、リン酸化（ｐｈｏｓｐｈｙｌａｔｉｏ
ｎ）、アミド化、既知の保護基／ブロック基（ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）
による誘導体化、タンパク質分解性切断、細胞性リガンドまたは他のタンパク質
への連結などによって改変された抗体が挙げられる。多数の任意の化学的改変が
、特異的化学切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝的合成など
を含むが、これらに制限されない公知の技術によって実行され得る。さらに、誘
導体は、１つ以上の非古典的アミノ酸を含み得る。
ないような、抗体に対する任意の型の分子の共有結合性付着による）誘導体を含
む。例えば、制限されないが、抗体誘導体には、例えば、グリコシル化、アセチ
ル化、ぺグ化（ｐｅｇｙｌａｔｉｏｎ）、リン酸化（ｐｈｏｓｐｈｙｌａｔｉｏ
ｎ）、アミド化、既知の保護基／ブロック基（ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）
による誘導体化、タンパク質分解性切断、細胞性リガンドまたは他のタンパク質
への連結などによって改変された抗体が挙げられる。多数の任意の化学的改変が
、特異的化学切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝的合成など
を含むが、これらに制限されない公知の技術によって実行され得る。さらに、誘
導体は、１つ以上の非古典的アミノ酸を含み得る。
【０２２０】
本発明の抗体は、当該分野で公知の任意の適切な方法によって産生され得る。
目的の抗原に対するポリクローナル抗体は、当該分野で周知の種々の手順によっ
て産生され得る。例えば、本発明のポリペプチドが種々の宿主動物（ウサギ、マ
ウス、ラットなどを含むがこれらに限定されない）に投与され得、抗原に対して
特異的なポリクローナル抗体を含む血清の産生を誘導する。種々のアジュバント
が、免疫学的応答を増加させるために使用され得、宿主種に依存し、そしてフロ
イント（完全および不完全）、水酸化アルミニウムのようなミネラルゲル（ｍｉ
ｎｅｒａｌ ｇｅｌ）、リゾレシチンのような表面活性物質、プルロニック（ｐ
ｌｕｒｏｎｉｃ）ポリオール、ポリアニオン、ペプチド、油乳濁液、キーホール
リンペットヘモシアニン、ジニトロフェノール、ならびにＢＣＧ（カルメット−
ゲラン杆菌）およびＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐａｒｖｕｍのような強
力に有用なヒトアジュバントを含むが、これらに限定されない。このようなアジ
ュバントはまた、当該分野で周知である。
目的の抗原に対するポリクローナル抗体は、当該分野で周知の種々の手順によっ
て産生され得る。例えば、本発明のポリペプチドが種々の宿主動物（ウサギ、マ
ウス、ラットなどを含むがこれらに限定されない）に投与され得、抗原に対して
特異的なポリクローナル抗体を含む血清の産生を誘導する。種々のアジュバント
が、免疫学的応答を増加させるために使用され得、宿主種に依存し、そしてフロ
イント（完全および不完全）、水酸化アルミニウムのようなミネラルゲル（ｍｉ
ｎｅｒａｌ ｇｅｌ）、リゾレシチンのような表面活性物質、プルロニック（ｐ
ｌｕｒｏｎｉｃ）ポリオール、ポリアニオン、ペプチド、油乳濁液、キーホール
リンペットヘモシアニン、ジニトロフェノール、ならびにＢＣＧ（カルメット−
ゲラン杆菌）およびＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐａｒｖｕｍのような強
力に有用なヒトアジュバントを含むが、これらに限定されない。このようなアジ
ュバントはまた、当該分野で周知である。
【０２２１】
モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ、組換え、およびファージディスプレ
イ技術、またはそれらの組み合わせの使用を含む、当該分野で公知の広範な種々
の技術を用いて調製され得る。例えば、モノクローナル抗体は、当該分野で公知
の、以下に教示される技術を含むハイブリドーマ技術を使用して産生され得る：
例えば、Ｈａｒｌｏｗら、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒ
ｙ Ｐｒｅｓｓ，第２版、１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇら、Ｍｏｎｏｃｌ
ｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ
ｓ ５６３−６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１）（上記の参考文
献は、その全体が参考として援用される）。本明細書中で使用される場合、用語
「モノクローナル抗体」とは、ハイブリドーマ技術を通して生成された抗体に限
定されない。用語「モノクローナル抗体」とは、任意の真核生物、原核生物、ま
たはファージクローンを含む単一のクローンに由来する抗体をいい、そしてモノ
クローナル抗体が生成される方法ではない。
イ技術、またはそれらの組み合わせの使用を含む、当該分野で公知の広範な種々
の技術を用いて調製され得る。例えば、モノクローナル抗体は、当該分野で公知
の、以下に教示される技術を含むハイブリドーマ技術を使用して産生され得る：
例えば、Ｈａｒｌｏｗら、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒ
ｙ Ｐｒｅｓｓ，第２版、１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇら、Ｍｏｎｏｃｌ
ｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ
ｓ ５６３−６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１）（上記の参考文
献は、その全体が参考として援用される）。本明細書中で使用される場合、用語
「モノクローナル抗体」とは、ハイブリドーマ技術を通して生成された抗体に限
定されない。用語「モノクローナル抗体」とは、任意の真核生物、原核生物、ま
たはファージクローンを含む単一のクローンに由来する抗体をいい、そしてモノ
クローナル抗体が生成される方法ではない。
【０２２２】
ハイブリドーマ技術を用いて特定の抗体に対して産生およびスクリーニングす
る方法は、慣用的であり、そして当該分野において周知であり、実施例において
詳細に議論される。非限定な例において、マウスを、本発明のポリペプチドまた
はこのようなペプチドを発現する細胞を用いて免疫化し得る。一旦、免疫応答が
検出される（例えば、抗原に対して特異的な抗体がマウス血清中に検出される）
と、マウスの脾臓を回収し、そして脾細胞を単離する。次いで、脾細胞は、周知
の技術によって、任意の適切なミエローマ細胞（例えば、ＡＴＣＣから入手可能
な細胞株ＳＰ２０由来の細胞）へ融合される。ハイブリドーマを、限定希釈によ
り選択およびクローン化する。次いで、ハイブリドーマクローンを本発明のポリ
ペプチドを結合し得る抗体を分泌する細胞について、当該分野に公知の方法によ
ってアッセイする。一般的に高レベルの抗体を含む腹水を、ポジティブなハイブ
リドーマクローンを用いてマウスを免疫化することにより、産生し得る。
る方法は、慣用的であり、そして当該分野において周知であり、実施例において
詳細に議論される。非限定な例において、マウスを、本発明のポリペプチドまた
はこのようなペプチドを発現する細胞を用いて免疫化し得る。一旦、免疫応答が
検出される（例えば、抗原に対して特異的な抗体がマウス血清中に検出される）
と、マウスの脾臓を回収し、そして脾細胞を単離する。次いで、脾細胞は、周知
の技術によって、任意の適切なミエローマ細胞（例えば、ＡＴＣＣから入手可能
な細胞株ＳＰ２０由来の細胞）へ融合される。ハイブリドーマを、限定希釈によ
り選択およびクローン化する。次いで、ハイブリドーマクローンを本発明のポリ
ペプチドを結合し得る抗体を分泌する細胞について、当該分野に公知の方法によ
ってアッセイする。一般的に高レベルの抗体を含む腹水を、ポジティブなハイブ
リドーマクローンを用いてマウスを免疫化することにより、産生し得る。
【０２２３】
従って、本発明は、モノクローナル抗体、および本発明の抗体を分泌するハイ
ブリドーマ細胞を培養する工程を含む方法によって産生される抗体を、産生する
方法を提供し、ここで、好ましくは、このハイブリドーマは、ミエローマ細胞を
有する本発明の抗原を用いて免疫化されたマウスから単離された脾細胞を融合す
ることにより、次いで、本発明のペプチドを結合し得る抗体を分泌するハイブリ
ドーマクローンについて、その融合から生じるハイブリドーマをスクリーニング
することにより、産生される。
ブリドーマ細胞を培養する工程を含む方法によって産生される抗体を、産生する
方法を提供し、ここで、好ましくは、このハイブリドーマは、ミエローマ細胞を
有する本発明の抗原を用いて免疫化されたマウスから単離された脾細胞を融合す
ることにより、次いで、本発明のペプチドを結合し得る抗体を分泌するハイブリ
ドーマクローンについて、その融合から生じるハイブリドーマをスクリーニング
することにより、産生される。
【０２２４】
特定のエピトープを認識する抗体フラグメントは、公知の技術により産生し得
る。例えば、本発明のＦａｂフラグメントおよびＦ（ａｂ’）２フラグメントは
、パパイン（Ｆａｂフラグメントを産生するため）またはペプシン（Ｆ（ａｂ’
）２フラグメントを産生するため）のような酵素を使用して、免疫グロブリン分
子のタンパク質分解性切断によって産生され得る。Ｆ（ａｂ’）２フラグメント
は、可変領域、軽鎖定常領域および重鎖のＣＨ１ドメインを含む。
る。例えば、本発明のＦａｂフラグメントおよびＦ（ａｂ’）２フラグメントは
、パパイン（Ｆａｂフラグメントを産生するため）またはペプシン（Ｆ（ａｂ’
）２フラグメントを産生するため）のような酵素を使用して、免疫グロブリン分
子のタンパク質分解性切断によって産生され得る。Ｆ（ａｂ’）２フラグメント
は、可変領域、軽鎖定常領域および重鎖のＣＨ１ドメインを含む。
【０２２５】
例えば、本発明の抗体はまた、当該分野に公知の種々のファージディスプレイ
方法を用いて産生され得る。ファージディスプレイ方法において、機能的な抗体
ドメインは、それらをコードするポリヌクレオチド配列を保有するファージ粒子
の表面上に提示される。特定の実施形態において、このようなファージを、レパ
ートリー抗体ライブラリーまたはコンビナトリアル抗体ライブラリー（例えば、
ヒトまたはマウス）から発現される抗原結合ドメインを提示するために利用し得
る。目的の抗原と結合する抗原結合ドメインを発現するファージを、抗原を用い
て、（例えば、標識化抗原、あるいは固体表面または固体ビーズへ結合または捕
捉された抗原を使用して）選択または同定し得る。これらの方法において使用さ
れるファージは、代表的に、ファージ遺伝子ＩＩＩタンパク質またはファージ遺
伝子ＶＩＩＩタンパク質のいずれかに組換え的に融合されたＦａｂ、Ｆｖまたは
ジスルフィド安定化されたＦｖの抗体ドメインを有するファージから発現された
ｆｄおよびＭ１３結合ドメインを含む糸状（ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ）ファージ
である。本発明の抗体を作製するために用いられ得るファージディスプレイ方法
の例としては、以下に開示される方法が挙げられる：Ｂｒｉｎｋｍａｎら、Ｊ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １８２：４１〜５０（１９９５）；Ａｍｅｓ
ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １８４：１７７〜１８６（１９９５
）；Ｋｅｔｔｌｅｂｏｒｏｕｇｈら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：９５
２〜９５８（１９９４）；Ｐｅｒｓｉｃら、Ｇｅｎｅ １８７ ９〜１８（１９
９７）；Ｂｕｒｔｏｎら、Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ５
７：１９１〜２８０（１９９４）；ＰＣＴ公開 ＰＣＴ／ＧＢ９１／０１１３４
；ＰＣＴ公開 ＷＯ９０／０２８０９；ＷＯ９１／１０７３７；ＷＯ９２／０１
０４７；ＷＯ９２／１８６１９；ＷＯ９３／１１２３６；ＷＯ９５／１５９８２
；ＷＯ９５／２０４０１；ならびに米国特許第５，６９８，４２６号；同第５，
２２３，４０９号；同第５，４０３，４８４号；同第５，５８０，７１７号；同
第５，４２７，９０８号；同第５，７５０，７５３号；同第５，８２１，０４７
号；同第５，５７１，６９８号；同第５，４２７，９０８号；同第５，５１６，
６３７号；同第５，７８０，２２５号；同第５，６５８，７２７号；同第５，７
３３，７４３号および同第５，９６９，１０８号（これらのそれぞれは、その全
体が参考として援用される）。
方法を用いて産生され得る。ファージディスプレイ方法において、機能的な抗体
ドメインは、それらをコードするポリヌクレオチド配列を保有するファージ粒子
の表面上に提示される。特定の実施形態において、このようなファージを、レパ
ートリー抗体ライブラリーまたはコンビナトリアル抗体ライブラリー（例えば、
ヒトまたはマウス）から発現される抗原結合ドメインを提示するために利用し得
る。目的の抗原と結合する抗原結合ドメインを発現するファージを、抗原を用い
て、（例えば、標識化抗原、あるいは固体表面または固体ビーズへ結合または捕
捉された抗原を使用して）選択または同定し得る。これらの方法において使用さ
れるファージは、代表的に、ファージ遺伝子ＩＩＩタンパク質またはファージ遺
伝子ＶＩＩＩタンパク質のいずれかに組換え的に融合されたＦａｂ、Ｆｖまたは
ジスルフィド安定化されたＦｖの抗体ドメインを有するファージから発現された
ｆｄおよびＭ１３結合ドメインを含む糸状（ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ）ファージ
である。本発明の抗体を作製するために用いられ得るファージディスプレイ方法
の例としては、以下に開示される方法が挙げられる：Ｂｒｉｎｋｍａｎら、Ｊ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １８２：４１〜５０（１９９５）；Ａｍｅｓ
ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １８４：１７７〜１８６（１９９５
）；Ｋｅｔｔｌｅｂｏｒｏｕｇｈら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：９５
２〜９５８（１９９４）；Ｐｅｒｓｉｃら、Ｇｅｎｅ １８７ ９〜１８（１９
９７）；Ｂｕｒｔｏｎら、Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ５
７：１９１〜２８０（１９９４）；ＰＣＴ公開 ＰＣＴ／ＧＢ９１／０１１３４
；ＰＣＴ公開 ＷＯ９０／０２８０９；ＷＯ９１／１０７３７；ＷＯ９２／０１
０４７；ＷＯ９２／１８６１９；ＷＯ９３／１１２３６；ＷＯ９５／１５９８２
；ＷＯ９５／２０４０１；ならびに米国特許第５，６９８，４２６号；同第５，
２２３，４０９号；同第５，４０３，４８４号；同第５，５８０，７１７号；同
第５，４２７，９０８号；同第５，７５０，７５３号；同第５，８２１，０４７
号；同第５，５７１，６９８号；同第５，４２７，９０８号；同第５，５１６，
６３７号；同第５，７８０，２２５号；同第５，６５８，７２７号；同第５，７
３３，７４３号および同第５，９６９，１０８号（これらのそれぞれは、その全
体が参考として援用される）。
【０２２６】
上記参考文献に記載されているように、ファージ選択後、ファージ由来の抗体
をコードする領域は、ヒト抗体を含む抗体の全体、または任意の他の所望の抗原
結合フラグメントを作製するために単離および使用され得、そして例えば、以下
に詳細に記載されるように、哺乳動物細胞、昆虫細胞、植物細胞、酵母および細
菌を含む任意の所望の宿主において発現され得る。例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’お
よびＦ（ａｂ’）２フラグメントを組換え的に産生するための技術はまた、当該
分野で公知の方法を用いて使用され得る。この方法は、例えば、以下に開示され
る方法である：ＰＣＴ公開ＷＯ９２／２２３２４；Ｍｕｌｌｉｎａｘら、Ｂｉｏ
Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １２（６）：８６４−８６９（１９９２）；およびＳａ
ｗａｉら、ＡＪＲＩ ３４：２６−３４（１９９５）；およびＢｅｔｔｅｒら、
Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０４１−１０４３（１９８８）（上記の参考文献は
、その全体が参考として援用される）。
をコードする領域は、ヒト抗体を含む抗体の全体、または任意の他の所望の抗原
結合フラグメントを作製するために単離および使用され得、そして例えば、以下
に詳細に記載されるように、哺乳動物細胞、昆虫細胞、植物細胞、酵母および細
菌を含む任意の所望の宿主において発現され得る。例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’お
よびＦ（ａｂ’）２フラグメントを組換え的に産生するための技術はまた、当該
分野で公知の方法を用いて使用され得る。この方法は、例えば、以下に開示され
る方法である：ＰＣＴ公開ＷＯ９２／２２３２４；Ｍｕｌｌｉｎａｘら、Ｂｉｏ
Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １２（６）：８６４−８６９（１９９２）；およびＳａ
ｗａｉら、ＡＪＲＩ ３４：２６−３４（１９９５）；およびＢｅｔｔｅｒら、
Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０４１−１０４３（１９８８）（上記の参考文献は
、その全体が参考として援用される）。
【０２２７】
単鎖のＦｖｓおよび抗体を産生するために用いられ得る技術の例としては、米
国特許第４，９４６，７７８号および同第５，２５８，４９８号；Ｈｕｓｔｏｎ
ら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ２０３：４６−８８（１９
９１）；Ｓｈｕら、ＰＮＡＳ ９０：７９９５−７９９９（１９９３）；および
Ｓｋｅｒｒａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０３８−１０４０（１９８８）に
記載される技術が挙げられる。ヒトにおける抗体のインビボ使用およびインビト
ロ検出アッセイを含むいくつかの用途のために、キメラ抗体、ヒト化抗体または
ヒト抗体の使用が好ましくあり得る。キメラ抗体は、この抗体の異なる部分が異
なる動物種に由来する分子（例えば、マウスモノクローナル抗体由来の可変領域
およびヒト免疫グロブリン定常領域を有する抗体）である。キメラ抗体を産生す
るための方法は、当該分野において公知である。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２（１９８５）；Ｏｉら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑ
ｕｅｓ ４：２１４（１９８６）；Ｇｉｌｌｉｅｓら、（１９８９）Ｊ．Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １２５：１９１−２０２；米国特許第５，８０７，
７１５号；同第４，８１６，５６７号；および同第４，８１６，３９７号を参照
のこと（これらは、本明細書中でその全体が参照として援用される）。ヒト化抗
体は、非ヒト種由来の１以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）およびヒト免疫グロブ
リン分子由来のフレームワーク領域を有する所望の抗原に結合する、非ヒト種抗
体由来の抗体分子である。しばしば、ヒトフレームワーク領域におけるフレーム
ワーク残基は、ＣＤＲドナー抗体由来の対応する残基と置換され、抗原結合を改
変（好ましくは、改善）する。これらのフレームワーク置換は、当該分野で周知
の方法により同定され、例えば、抗原結合に重要なフレームワーク残基を同定す
るためのＣＤＲとフレームワーク残基との相互作用のモデリング、ならびに特定
の位置における異常なフレームワーク残基を同定するための配列比較による。（
例えば、Ｑｕｅｅｎら、米国特許第５，５８５，０８９号；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ
ら、Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３（１９８８）（これらは本明細書中でその全
体が参考として援用される）を参照のこと）。抗体は、例えば、以下を含む当該
分野で公知の種々の技術を用いてヒト化され得る：ＣＤＲ−移植術（欧州特許第
２３９，４００号；ＰＣＴ公開 ＷＯ９１／０９９６７；米国特許第５，２２５
，５３９号；同第５，５３０，１０１号および同第５，５８５，０８９号）、ベ
ニヤリング（ｖｅｎｅｅｒｉｎｇ）またはリサーフェイシング（ｒｅｓｕｒｆａ
ｃｉｎｇ）（欧州特許第５９２，１０６号；欧州特許第５１９，５９６号；Ｐａ
ｄｌａｎ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２８（４／５）：４８
９−４９８（１９９１）； Ｓｔｕｄｎｉｃｋａら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉ
ｎｅｅｒｉｎｇ ７（６）：８０５−８１４（１９９４）；Ｒｏｇｕｓｋａら、
ＰＮＡＳ ９１：９６９−９７３（１９９４））、およびチェーンシャッフリン
グ（ｃｈａｉｎ ｓｈｕｆｆｌｉｎｇ）（米国特許第５，５６５，３３２号）。
国特許第４，９４６，７７８号および同第５，２５８，４９８号；Ｈｕｓｔｏｎ
ら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ２０３：４６−８８（１９
９１）；Ｓｈｕら、ＰＮＡＳ ９０：７９９５−７９９９（１９９３）；および
Ｓｋｅｒｒａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０３８−１０４０（１９８８）に
記載される技術が挙げられる。ヒトにおける抗体のインビボ使用およびインビト
ロ検出アッセイを含むいくつかの用途のために、キメラ抗体、ヒト化抗体または
ヒト抗体の使用が好ましくあり得る。キメラ抗体は、この抗体の異なる部分が異
なる動物種に由来する分子（例えば、マウスモノクローナル抗体由来の可変領域
およびヒト免疫グロブリン定常領域を有する抗体）である。キメラ抗体を産生す
るための方法は、当該分野において公知である。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２（１９８５）；Ｏｉら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑ
ｕｅｓ ４：２１４（１９８６）；Ｇｉｌｌｉｅｓら、（１９８９）Ｊ．Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １２５：１９１−２０２；米国特許第５，８０７，
７１５号；同第４，８１６，５６７号；および同第４，８１６，３９７号を参照
のこと（これらは、本明細書中でその全体が参照として援用される）。ヒト化抗
体は、非ヒト種由来の１以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）およびヒト免疫グロブ
リン分子由来のフレームワーク領域を有する所望の抗原に結合する、非ヒト種抗
体由来の抗体分子である。しばしば、ヒトフレームワーク領域におけるフレーム
ワーク残基は、ＣＤＲドナー抗体由来の対応する残基と置換され、抗原結合を改
変（好ましくは、改善）する。これらのフレームワーク置換は、当該分野で周知
の方法により同定され、例えば、抗原結合に重要なフレームワーク残基を同定す
るためのＣＤＲとフレームワーク残基との相互作用のモデリング、ならびに特定
の位置における異常なフレームワーク残基を同定するための配列比較による。（
例えば、Ｑｕｅｅｎら、米国特許第５，５８５，０８９号；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ
ら、Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３（１９８８）（これらは本明細書中でその全
体が参考として援用される）を参照のこと）。抗体は、例えば、以下を含む当該
分野で公知の種々の技術を用いてヒト化され得る：ＣＤＲ−移植術（欧州特許第
２３９，４００号；ＰＣＴ公開 ＷＯ９１／０９９６７；米国特許第５，２２５
，５３９号；同第５，５３０，１０１号および同第５，５８５，０８９号）、ベ
ニヤリング（ｖｅｎｅｅｒｉｎｇ）またはリサーフェイシング（ｒｅｓｕｒｆａ
ｃｉｎｇ）（欧州特許第５９２，１０６号；欧州特許第５１９，５９６号；Ｐａ
ｄｌａｎ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２８（４／５）：４８
９−４９８（１９９１）； Ｓｔｕｄｎｉｃｋａら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉ
ｎｅｅｒｉｎｇ ７（６）：８０５−８１４（１９９４）；Ｒｏｇｕｓｋａら、
ＰＮＡＳ ９１：９６９−９７３（１９９４））、およびチェーンシャッフリン
グ（ｃｈａｉｎ ｓｈｕｆｆｌｉｎｇ）（米国特許第５，５６５，３３２号）。
【０２２８】
完全なヒト抗体が、ヒト患者の治療的処置に対して特に望ましい。ヒト抗体は
、当該分野で公知の種々の方法によって作製され得、これらの方法としては、ヒ
ト免疫グロブリン配列由来の抗体ライブラリーを用いる上記のファージディスプ
レイ方法が挙げられる。米国特許第４，４４４，８８７号および同第４，７１６
，１１１号；ならびにＰＣＴ公開ＷＯ９８／４６６４５、ＷＯ９８／５０４３３
、ＷＯ９８／２４８９３、ＷＯ９８／１６６５４、ＷＯ９６／３４０９６、ＷＯ
９６／３３７３５、およびＷＯ９１／１０７４１（これらの各々は、その全体が
参考として本明細書中に援用される）もまた参照のこと。
、当該分野で公知の種々の方法によって作製され得、これらの方法としては、ヒ
ト免疫グロブリン配列由来の抗体ライブラリーを用いる上記のファージディスプ
レイ方法が挙げられる。米国特許第４，４４４，８８７号および同第４，７１６
，１１１号；ならびにＰＣＴ公開ＷＯ９８／４６６４５、ＷＯ９８／５０４３３
、ＷＯ９８／２４８９３、ＷＯ９８／１６６５４、ＷＯ９６／３４０９６、ＷＯ
９６／３３７３５、およびＷＯ９１／１０７４１（これらの各々は、その全体が
参考として本明細書中に援用される）もまた参照のこと。
【０２２９】
ヒト抗体はまた、機能的内因性免疫グロブリンを発現し得ないが、ヒト免疫グ
ロブリン遺伝子を発現し得るトランスジェニックマウスを用いて産生され得る。
例えば、ヒト重鎖免疫グロブリン遺伝子およびヒト軽鎖免疫グロブリン遺伝子の
複合体は、無作為にまたは相同組換えによってマウス胚性幹細胞に導入され得る
。あるいは、ヒト可変領域、定常領域および多様性領域（ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｒｅｇｉｏｎ）は、ヒト重鎖遺伝子およびヒト軽鎖遺伝子に加えて、マウスの胚
性幹細胞に導入され得る。マウス重鎖免疫グロブリン遺伝子およびマウス軽鎖免
疫グロブリン遺伝子は、相同組換えによるヒト免疫グロブリン座の導入と別々に
または同時に非機能的にされ得る。特に、ＪＨ領域のホモ接合性の欠失は、内因
性抗体の産生を妨げる。この改変された胚性幹細胞を増殖させ、そして胚盤胞に
微量注入して、キメラマウスを産生する。次に、このキメラマウスを、ヒト抗体
を発現するホモ接合性の子孫を産生するために繁殖させる。トランスジェニック
マウスを、選択された抗原（例えば、本発明のポリペプチドの全体または一部）
を用いて通常の様式で免疫する。その抗原に対するモノクローナル抗体は、従来
のハイブリドーマ技術を用いた免疫したトランスジェニックマウスから得られ得
る。ヒト免疫グロブリン導入遺伝子は、Ｂ細胞分化の間のトランスジェニックマ
ウスの再編成によってかくまわれ（ｈａｒｂｏｒｅｄ）、そしてその後、クラス
スイッチングおよび体細胞変異を受ける。従って、そのような技術の使用によっ
て、治療的に有用なＩｇＧ抗体、ＩｇＡ抗体、ＩｇＭ抗体およびＩｇＥ抗体の産
生が可能である。ヒト抗体を産生するためのこの技術の概要については、Ｌｏｎ
ｂｅｒｇおよびＨｕｓｚａｒ、Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５−
９３（１９９５）を参照のこと。ヒト抗体およびヒトモノクローナル抗体を産生
するためのこの技術の、ならびにそのような抗体を産生するためのプロトコール
の詳細な議論については、例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９８／２４８９３；ＷＯ９２
／０１０４７；ＷＯ９６／３４０９６；ＷＯ９６／３３７３５；欧州特許第０
５９８ ８７７号；米国特許第５，４１３，９２３号；同第５，６２５，１２６
号；同第５，６３３，４２５号；同第５，５６９，８２５号；同第５，６６１，
０１６号；同第５，５４５，８０６号；同第５，８１４，３１８号；同第５，８
８５，７９３号；同第５，９１６，７７１号；および同第５，９３９，５９８号
を参照のこと（これらは、その全体が本明細書中に参考として援用される）。さ
らに、Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｉｎｃ．（Ｆｒｅｅｍｏｎｔ，ＣＡ）およびＧｅｎｐｈ
ａｒｍ（Ｓａｎ Ｊｏｓｅ，ＣＡ）のような企業は、上記の技術に類似した技術
を用いて選択された抗原に対するヒト抗体を提供することに従事し得る。
ロブリン遺伝子を発現し得るトランスジェニックマウスを用いて産生され得る。
例えば、ヒト重鎖免疫グロブリン遺伝子およびヒト軽鎖免疫グロブリン遺伝子の
複合体は、無作為にまたは相同組換えによってマウス胚性幹細胞に導入され得る
。あるいは、ヒト可変領域、定常領域および多様性領域（ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｒｅｇｉｏｎ）は、ヒト重鎖遺伝子およびヒト軽鎖遺伝子に加えて、マウスの胚
性幹細胞に導入され得る。マウス重鎖免疫グロブリン遺伝子およびマウス軽鎖免
疫グロブリン遺伝子は、相同組換えによるヒト免疫グロブリン座の導入と別々に
または同時に非機能的にされ得る。特に、ＪＨ領域のホモ接合性の欠失は、内因
性抗体の産生を妨げる。この改変された胚性幹細胞を増殖させ、そして胚盤胞に
微量注入して、キメラマウスを産生する。次に、このキメラマウスを、ヒト抗体
を発現するホモ接合性の子孫を産生するために繁殖させる。トランスジェニック
マウスを、選択された抗原（例えば、本発明のポリペプチドの全体または一部）
を用いて通常の様式で免疫する。その抗原に対するモノクローナル抗体は、従来
のハイブリドーマ技術を用いた免疫したトランスジェニックマウスから得られ得
る。ヒト免疫グロブリン導入遺伝子は、Ｂ細胞分化の間のトランスジェニックマ
ウスの再編成によってかくまわれ（ｈａｒｂｏｒｅｄ）、そしてその後、クラス
スイッチングおよび体細胞変異を受ける。従って、そのような技術の使用によっ
て、治療的に有用なＩｇＧ抗体、ＩｇＡ抗体、ＩｇＭ抗体およびＩｇＥ抗体の産
生が可能である。ヒト抗体を産生するためのこの技術の概要については、Ｌｏｎ
ｂｅｒｇおよびＨｕｓｚａｒ、Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５−
９３（１９９５）を参照のこと。ヒト抗体およびヒトモノクローナル抗体を産生
するためのこの技術の、ならびにそのような抗体を産生するためのプロトコール
の詳細な議論については、例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９８／２４８９３；ＷＯ９２
／０１０４７；ＷＯ９６／３４０９６；ＷＯ９６／３３７３５；欧州特許第０
５９８ ８７７号；米国特許第５，４１３，９２３号；同第５，６２５，１２６
号；同第５，６３３，４２５号；同第５，５６９，８２５号；同第５，６６１，
０１６号；同第５，５４５，８０６号；同第５，８１４，３１８号；同第５，８
８５，７９３号；同第５，９１６，７７１号；および同第５，９３９，５９８号
を参照のこと（これらは、その全体が本明細書中に参考として援用される）。さ
らに、Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｉｎｃ．（Ｆｒｅｅｍｏｎｔ，ＣＡ）およびＧｅｎｐｈ
ａｒｍ（Ｓａｎ Ｊｏｓｅ，ＣＡ）のような企業は、上記の技術に類似した技術
を用いて選択された抗原に対するヒト抗体を提供することに従事し得る。
【０２３０】
選択されたエピトープを認識する完全なヒト抗体は、「ガイド（ｇｕｉｄｅｄ
）選択」といわれる技術を用いて産生され得る。このアプローチにおいて、選択
された非ヒトモノクローナル抗体（例えば、マウス抗体）は、同じエピトープを
認識する完全なヒト抗体の選択をガイドするために使用される（Ｊｅｓｐｅｒｓ
ら、Ｂｉｏ／ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １２：８９９−９０３（１９８８））。
）選択」といわれる技術を用いて産生され得る。このアプローチにおいて、選択
された非ヒトモノクローナル抗体（例えば、マウス抗体）は、同じエピトープを
認識する完全なヒト抗体の選択をガイドするために使用される（Ｊｅｓｐｅｒｓ
ら、Ｂｉｏ／ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １２：８９９−９０３（１９８８））。
【０２３１】
さらに、本発明のポリペプチドに対する抗体は、当業者に周知の技術を用いて
本発明のポリペプチドを「模倣する」抗イディオタイプ抗体を生成するために順
々に利用され得る。（例えば、ＧｒｅｅｎｓｐａｎおよびＢｏｎａ、ＦＡＳＥＢ
Ｊ．７（５）：４３７−４４４（１９８９）；ならびにＮｉｓｓｉｎｏｆｆ、
Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７（８）：２４２９−２４３８（１９９１）を参照の
こと）。例えば、結合し、そしてポリペプチドの多量体化および／または本発明
のポリペプチドのリガンドに対する結合を競合的に阻害する抗体を用いて、この
ポリペプチドの多量体化および／または結合ドメインを「模倣し」、そして結果
として、ポリペプチドおよび／またはそのリガンドに結合し、そして中和する抗
イディオタイプを生成し得る。このような中和抗イディオタイプまたはこのよう
な抗イディオタイプのＦａｂフラグメントは、治療レジメンにおいて使用されて
、ポリペプチドリガンドを中和し得る。例えば、このような抗イディオタイプ抗
体を使用して、本発明のポリペプチドを結合し得るか、そして／またはそのリガ
ンド／レセプターを結合し得、そしてそれによって、その生物学的活性をブロッ
クし得る。
本発明のポリペプチドを「模倣する」抗イディオタイプ抗体を生成するために順
々に利用され得る。（例えば、ＧｒｅｅｎｓｐａｎおよびＢｏｎａ、ＦＡＳＥＢ
Ｊ．７（５）：４３７−４４４（１９８９）；ならびにＮｉｓｓｉｎｏｆｆ、
Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７（８）：２４２９−２４３８（１９９１）を参照の
こと）。例えば、結合し、そしてポリペプチドの多量体化および／または本発明
のポリペプチドのリガンドに対する結合を競合的に阻害する抗体を用いて、この
ポリペプチドの多量体化および／または結合ドメインを「模倣し」、そして結果
として、ポリペプチドおよび／またはそのリガンドに結合し、そして中和する抗
イディオタイプを生成し得る。このような中和抗イディオタイプまたはこのよう
な抗イディオタイプのＦａｂフラグメントは、治療レジメンにおいて使用されて
、ポリペプチドリガンドを中和し得る。例えば、このような抗イディオタイプ抗
体を使用して、本発明のポリペプチドを結合し得るか、そして／またはそのリガ
ンド／レセプターを結合し得、そしてそれによって、その生物学的活性をブロッ
クし得る。
【０２３２】
単鎖のＦｖおよび抗体を作製するために用いられ得る技術の例としては、米国
特許第４，９４６，７７８号および同第５，２５８，４９８号；Ｈｕｓｔｏｎら
Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ２０３：４６〜８８（１９９１
）；Ｓｈｕ，Ｌ．ら、ＰＮＡＳ ９０：７９９５〜７９９９（１９９３）；およ
びＳｋｅｒｒａ，Ａ．らＳｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０３８〜１０４０（１９８
８）に記載される技術が挙げられる。ヒトにおける抗体のインビボ使用およびイ
ンビトロ検出アッセイを含むいくつかの用途のために、キメラ抗体、ヒト化抗体
またはヒト抗体の使用が好ましくあり得る。キメラ抗体を作製するための方法は
、当該分野において公知である。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ
２２９：１２０２（１９８５）；Ｏｉら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２
１４（１９８６）；Ｇｉｌｌｉｅｓ，Ｓ．Ｄ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔ
ｈｏｄｓ １２５：１９１〜２０２（１９８９）；および米国特許第５，８０７
，７１５号を参照のこと。抗体は、以下を含む種々の技術を用いてヒト化され得
る：ＣＤＲ−移植術（欧州特許第０ ２３９ ４００号；ＷＯ ９１／０９９６
７；米国特許第５，５３０，１０１号および同第５，５８５，０８９号）、ベニ
ヤリングまたはリサーフェイシング（欧州特許第０ ５９２ １０６号；欧州特
許第０ ５１９ ５９６号；Ｐａｄｌａｎ Ｅ．Ａ．、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉ
ｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２８（４／５）：４８９〜４９８（１９９１）； Ｓｔｕ
ｄｎｉｃｋａ Ｇ．Ｍ．ら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ７（６
）：８０５〜８１４（１９９４）；Ｒｏｇｕｓｋａ Ｍ．Ａ．ら、ＰＮＡＳ ９
１：９６９〜９７３（１９９４））、およびチェーンシャッフリング（米国特許
第５，５６５，３３２号）。ヒト抗体は、上記のファージディスプレイ方法を含
む当該分野で公知の種々の方法により作製され得る。米国特許第４，４４４，８
８７号、同第４，７１６，１１１号、同第５，５４５，８０６号および同第５，
８１４，３１８号；ならびにＷＯ ９８／４６６４５（これらの参考文献はその
全体が参考として援用される）をまた参照のこと。
特許第４，９４６，７７８号および同第５，２５８，４９８号；Ｈｕｓｔｏｎら
Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ２０３：４６〜８８（１９９１
）；Ｓｈｕ，Ｌ．ら、ＰＮＡＳ ９０：７９９５〜７９９９（１９９３）；およ
びＳｋｅｒｒａ，Ａ．らＳｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０３８〜１０４０（１９８
８）に記載される技術が挙げられる。ヒトにおける抗体のインビボ使用およびイ
ンビトロ検出アッセイを含むいくつかの用途のために、キメラ抗体、ヒト化抗体
またはヒト抗体の使用が好ましくあり得る。キメラ抗体を作製するための方法は
、当該分野において公知である。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ
２２９：１２０２（１９８５）；Ｏｉら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２
１４（１９８６）；Ｇｉｌｌｉｅｓ，Ｓ．Ｄ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔ
ｈｏｄｓ １２５：１９１〜２０２（１９８９）；および米国特許第５，８０７
，７１５号を参照のこと。抗体は、以下を含む種々の技術を用いてヒト化され得
る：ＣＤＲ−移植術（欧州特許第０ ２３９ ４００号；ＷＯ ９１／０９９６
７；米国特許第５，５３０，１０１号および同第５，５８５，０８９号）、ベニ
ヤリングまたはリサーフェイシング（欧州特許第０ ５９２ １０６号；欧州特
許第０ ５１９ ５９６号；Ｐａｄｌａｎ Ｅ．Ａ．、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉ
ｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２８（４／５）：４８９〜４９８（１９９１）； Ｓｔｕ
ｄｎｉｃｋａ Ｇ．Ｍ．ら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ７（６
）：８０５〜８１４（１９９４）；Ｒｏｇｕｓｋａ Ｍ．Ａ．ら、ＰＮＡＳ ９
１：９６９〜９７３（１９９４））、およびチェーンシャッフリング（米国特許
第５，５６５，３３２号）。ヒト抗体は、上記のファージディスプレイ方法を含
む当該分野で公知の種々の方法により作製され得る。米国特許第４，４４４，８
８７号、同第４，７１６，１１１号、同第５，５４５，８０６号および同第５，
８１４，３１８号；ならびにＷＯ ９８／４６６４５（これらの参考文献はその
全体が参考として援用される）をまた参照のこと。
【０２３３】
さらに、本発明には、本発明のポリペプチドに組換え的に融合または化学的に
結合（共有結合的結合および非共有結合的結合の両方を含む）した抗体が含まれ
る。この抗体は、本発明のポリペプチド以外の抗原に特異的であり得る。例えば
、抗体は、本発明のポリペプチドを特定の細胞表面レセプターに特異的な抗体に
融合または結合することにより、インビトロまたはインビボのいずれかで本発明
のポリペプチドを特定の細胞型へ標的化するために用いられ得る。本発明のポリ
ペプチドに対して融合または結合された抗体はまた、当該分野で公知の方法を用
いてインビトロイムノアッセイおよび精製方法において用いられ得る。例えば、
Ｈａｒｂｏｒら、前出、およびＷＯ ９３／２１２３２；欧州特許第０ ４３９
０９５号；Ｎａｒａｍｕｒａ，Ｍ．ら、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔ．３９：９
１〜９９（１９９４）；米国特許第５，４７４，９８１号；Ｇｉｌｌｉｅｓ，Ｓ
．Ｏ．らＰＮＡＳ ８９：１４２８〜１４３２（１９９２）；Ｆｅｌｌ，Ｈ．Ｐ
．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４６：２４４６〜２４５２（１９９１）（これら
の参考文献は、その全体が参考として援用される）を参照のこと。
結合（共有結合的結合および非共有結合的結合の両方を含む）した抗体が含まれ
る。この抗体は、本発明のポリペプチド以外の抗原に特異的であり得る。例えば
、抗体は、本発明のポリペプチドを特定の細胞表面レセプターに特異的な抗体に
融合または結合することにより、インビトロまたはインビボのいずれかで本発明
のポリペプチドを特定の細胞型へ標的化するために用いられ得る。本発明のポリ
ペプチドに対して融合または結合された抗体はまた、当該分野で公知の方法を用
いてインビトロイムノアッセイおよび精製方法において用いられ得る。例えば、
Ｈａｒｂｏｒら、前出、およびＷＯ ９３／２１２３２；欧州特許第０ ４３９
０９５号；Ｎａｒａｍｕｒａ，Ｍ．ら、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔ．３９：９
１〜９９（１９９４）；米国特許第５，４７４，９８１号；Ｇｉｌｌｉｅｓ，Ｓ
．Ｏ．らＰＮＡＳ ８９：１４２８〜１４３２（１９９２）；Ｆｅｌｌ，Ｈ．Ｐ
．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４６：２４４６〜２４５２（１９９１）（これら
の参考文献は、その全体が参考として援用される）を参照のこと。
【０２３４】
本発明は、可変領域以外の抗体ドメインと融合されたか、または結合体化され
た本発明のポリペプチドを含む組成物をさらに含む。例えば、本発明のポリペプ
チドは、抗体のＦｃ領域またはその一部分と融合され得るか、またはそれに結合
体化され得る。本発明のポリペプチドに融合した抗体部分は、ヒンジ領域、ＣＨ
１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメインまたはドメイン全体かまた
はその一部の任意の組み合わせを含み得る。本発明のポリペプチドは、当該分野
で公知の方法を用いて、ポリペプチドのインビボでの半減期を増大するか、また
はイムノアッセイにおける使用のために上記の抗体部分に融合され得るか、また
はそれに結合体化され得る。このポリペプチドはまた、上記の抗体部分に融合さ
れるか、またはそこに結合体化されて、多量体を形成し得る。例えば、本発明の
ポリペプチドに融合されたＦｃ部分は、Ｆｃ部分間のジスルフィド結合によって
ダイマーを形成し得る。より高度な多量体形態は、ＩｇＡおよびＩｇＭの部分に
ポリペプチドを融合することにより作製され得る。本発明のポリペプチドを抗体
部分に融合または結合体化するための方法は、当該分野で公知である。例えば、
米国特許第５，３３６，６０３号、同第５，６２２，９２９号、同第５，３５９
，０４６号、同第５，３４９，０５３号、同第５，４４７，８５１号、同第５，
１１２，９４６号；ＥＰ ０ ３０７ ４３４号、ＥＰ ０ ３６７ １６６号
；ＷＯ９６／０４３８８号、ＷＯ９１／０６５７０号；Ａｓｈｋｅｎａｚｉ，Ａ
．ら、ＰＮＡＳ ８８：１０５３５−１０５３９（１９９１）；Ｚｈｅｎｇ，Ｘ
．Ｘ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４：５５９０−５６００（１９９５）；な
らびにＶｉｌ，Ｈ．ら、ＰＮＡＳ ８９：１１３３７−１１３４１（１９９２）
（上記の参考文献は、その全体が参考として援用される）を参照のこと。
た本発明のポリペプチドを含む組成物をさらに含む。例えば、本発明のポリペプ
チドは、抗体のＦｃ領域またはその一部分と融合され得るか、またはそれに結合
体化され得る。本発明のポリペプチドに融合した抗体部分は、ヒンジ領域、ＣＨ
１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメインまたはドメイン全体かまた
はその一部の任意の組み合わせを含み得る。本発明のポリペプチドは、当該分野
で公知の方法を用いて、ポリペプチドのインビボでの半減期を増大するか、また
はイムノアッセイにおける使用のために上記の抗体部分に融合され得るか、また
はそれに結合体化され得る。このポリペプチドはまた、上記の抗体部分に融合さ
れるか、またはそこに結合体化されて、多量体を形成し得る。例えば、本発明の
ポリペプチドに融合されたＦｃ部分は、Ｆｃ部分間のジスルフィド結合によって
ダイマーを形成し得る。より高度な多量体形態は、ＩｇＡおよびＩｇＭの部分に
ポリペプチドを融合することにより作製され得る。本発明のポリペプチドを抗体
部分に融合または結合体化するための方法は、当該分野で公知である。例えば、
米国特許第５，３３６，６０３号、同第５，６２２，９２９号、同第５，３５９
，０４６号、同第５，３４９，０５３号、同第５，４４７，８５１号、同第５，
１１２，９４６号；ＥＰ ０ ３０７ ４３４号、ＥＰ ０ ３６７ １６６号
；ＷＯ９６／０４３８８号、ＷＯ９１／０６５７０号；Ａｓｈｋｅｎａｚｉ，Ａ
．ら、ＰＮＡＳ ８８：１０５３５−１０５３９（１９９１）；Ｚｈｅｎｇ，Ｘ
．Ｘ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４：５５９０−５６００（１９９５）；な
らびにＶｉｌ，Ｈ．ら、ＰＮＡＳ ８９：１１３３７−１１３４１（１９９２）
（上記の参考文献は、その全体が参考として援用される）を参照のこと。
【０２３５】
本発明はさらに、本発明のポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストと
して作用する抗体に関する。本発明のポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴ
ニストとして作用する抗体は、例えば、部分的にか、または完全にかのいずれか
で本発明のポリペプチドとのレセプター／リガンド相互作用を破壊する抗体を含
む。例えば、本発明は、本発明のタンパク質の多量体化する能力を破壊する抗体
を含む。別の例では、本発明は、本発明のタンパク質が多量体化することを可能
にするが、本発明のタンパク質が１つ以上のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ
２レセプター／リガンドに結合する能力を破壊する抗体を含む。なお別の例では
、本発明は、本発明のタンパク質が多量体化し、そしてＭＥＴＨ１および／また
はＭＥＴＨ２に結合することを可能にするが、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴ
Ｈ２レセプター／リガンド複合体に付随する生物学的活性をブロックする抗体を
含む。
して作用する抗体に関する。本発明のポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴ
ニストとして作用する抗体は、例えば、部分的にか、または完全にかのいずれか
で本発明のポリペプチドとのレセプター／リガンド相互作用を破壊する抗体を含
む。例えば、本発明は、本発明のタンパク質の多量体化する能力を破壊する抗体
を含む。別の例では、本発明は、本発明のタンパク質が多量体化することを可能
にするが、本発明のタンパク質が１つ以上のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ
２レセプター／リガンドに結合する能力を破壊する抗体を含む。なお別の例では
、本発明は、本発明のタンパク質が多量体化し、そしてＭＥＴＨ１および／また
はＭＥＴＨ２に結合することを可能にするが、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴ
Ｈ２レセプター／リガンド複合体に付随する生物学的活性をブロックする抗体を
含む。
【０２３６】
本発明のポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストとして作用する抗体
はまた、レセプター特異的抗体およびリガンド特異的抗体の両方を含む。リガン
ド結合を妨害しないが、レセプター活性化を妨害するレセプター特異的抗体が含
まれる。レセプター活性化（すなわち、シグナル伝達）は、本明細書中に記載の
技術、または別に、当該分野で公知の技術により決定され得る。リガンド結合お
よびレセプター活性化を両方とも妨害するレセプター特異的抗体もまた含まれる
。同様に、リガンドを結合し、そしてリガンドのレセプターへの結合を妨害する
中和抗体、ならびにリガンドに結合し、それによってレセプター活性化を妨害す
るが、リガンドがレセプターに結合することを妨害しない抗体が含まれる。レセ
プターを活性化する抗体がさらに含まれる。これらの抗体は、リガンド媒介レセ
プター活性化により影響を及ぼされる生物学的活性の全てまたは全てではないい
ずれかについてのアゴニストとして作用し得る。この抗体は、本明細書中に開示
された比活性を含む生物学的活性についてのアゴニストまたはアンタゴニストと
して特定され得る。上記の抗体アゴニストは、当該分野で公知の方法を使用して
作製され得る。例えば、ＷＯ９６／４０２８１；米国特許第５，８１１，０９７
号；Ｄｅｎｇ，Ｂ．ら、Ｂｌｏｏｄ ９２（６）：１９８１−１９８８（１９９
８）；Ｃｈｅｎ，Ｚ．ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５８（１６）：３６６８−３
６７８（１９９８）；Ｈａｒｒｏｐ，Ｊ．Ａ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１
（４）：１７８６−１７９４（１９９８）；Ｚｈｕ，Ｚ．ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒ
ｅｓ：５８（１５）：３２０９−３２１４（１９９８）；Ｙｏｏｎ，Ｄ．Ｙ．ら
、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０（７）：３１７０−３１７９（１９９８）；Ｐｒ
ａｔ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．１１１（Ｐｔ２）：２３７−２４７（１
９９８）；Ｐｉｔａｒｄ，Ｖ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２０
５（２）：１７７−１９０（１９９７）；Ｌｉａｕｔａｒｄ，Ｊ．ら、Ｃｙｔｏ
ｋｉｎｄｅ ９（４）：２３３−２４１（１９９７）；Ｃａｒｌｓｏｎ，Ｎ．Ｇ
．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２（１７）：１１２９５−１１３０１（１
９９７）；Ｔａｒｙｍａｎ，Ｒ．Ｅ．ら、Ｎｅｕｒｏｎ １４（４）：７５５−
７６２（１９９５）；Ｍｕｌｌｅｒ，Ｙ．Ａ．ら、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ６（９
）：１１５３−１１６７（１９９８）；Ｂａｒｔｕｎｅｋ，Ｐ．ら、Ｃｙｔｏｋ
ｉｎｅ ８（１）：１４−２０（１９９６）（上記の参考文献は、その全体が参
考として援用される）を参照のこと。
はまた、レセプター特異的抗体およびリガンド特異的抗体の両方を含む。リガン
ド結合を妨害しないが、レセプター活性化を妨害するレセプター特異的抗体が含
まれる。レセプター活性化（すなわち、シグナル伝達）は、本明細書中に記載の
技術、または別に、当該分野で公知の技術により決定され得る。リガンド結合お
よびレセプター活性化を両方とも妨害するレセプター特異的抗体もまた含まれる
。同様に、リガンドを結合し、そしてリガンドのレセプターへの結合を妨害する
中和抗体、ならびにリガンドに結合し、それによってレセプター活性化を妨害す
るが、リガンドがレセプターに結合することを妨害しない抗体が含まれる。レセ
プターを活性化する抗体がさらに含まれる。これらの抗体は、リガンド媒介レセ
プター活性化により影響を及ぼされる生物学的活性の全てまたは全てではないい
ずれかについてのアゴニストとして作用し得る。この抗体は、本明細書中に開示
された比活性を含む生物学的活性についてのアゴニストまたはアンタゴニストと
して特定され得る。上記の抗体アゴニストは、当該分野で公知の方法を使用して
作製され得る。例えば、ＷＯ９６／４０２８１；米国特許第５，８１１，０９７
号；Ｄｅｎｇ，Ｂ．ら、Ｂｌｏｏｄ ９２（６）：１９８１−１９８８（１９９
８）；Ｃｈｅｎ，Ｚ．ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５８（１６）：３６６８−３
６７８（１９９８）；Ｈａｒｒｏｐ，Ｊ．Ａ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１
（４）：１７８６−１７９４（１９９８）；Ｚｈｕ，Ｚ．ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒ
ｅｓ：５８（１５）：３２０９−３２１４（１９９８）；Ｙｏｏｎ，Ｄ．Ｙ．ら
、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０（７）：３１７０−３１７９（１９９８）；Ｐｒ
ａｔ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．１１１（Ｐｔ２）：２３７−２４７（１
９９８）；Ｐｉｔａｒｄ，Ｖ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２０
５（２）：１７７−１９０（１９９７）；Ｌｉａｕｔａｒｄ，Ｊ．ら、Ｃｙｔｏ
ｋｉｎｄｅ ９（４）：２３３−２４１（１９９７）；Ｃａｒｌｓｏｎ，Ｎ．Ｇ
．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２（１７）：１１２９５−１１３０１（１
９９７）；Ｔａｒｙｍａｎ，Ｒ．Ｅ．ら、Ｎｅｕｒｏｎ １４（４）：７５５−
７６２（１９９５）；Ｍｕｌｌｅｒ，Ｙ．Ａ．ら、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ６（９
）：１１５３−１１６７（１９９８）；Ｂａｒｔｕｎｅｋ，Ｐ．ら、Ｃｙｔｏｋ
ｉｎｅ ８（１）：１４−２０（１９９６）（上記の参考文献は、その全体が参
考として援用される）を参照のこと。
【０２３７】
上記で議論されるように、本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タン
パク質に対する抗体は、当業者に周知の技術を用いてＭＥＴＨ１および／または
ＭＥＴＨ２を「模倣する」抗イディオタイプ抗体を産生するために順々に利用さ
れ得る（例えば、ＧｒｅｅｎｓｐａｎおよびＢｏｎａ、ＦＡＳＥＢ Ｊ．７（５
）：４３７−４４４；（１９８９）およびＮｉｓｓｉｎｏｆｆ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ．１４７（８）：２４２９−２４３８（１９９１）を参照のこと）。例えば
、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２に結合し、そしてＭＥＴＨ１および／ま
たはＭＥＴＨ２の多量体化および／またはリガンドに対するＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２の結合を競合的に阻害する抗体が、ＭＥＴＨ１および／または
ＭＥＴＨ２の多量体化ドメインおよび／または結合ドメインを「模倣する」抗イ
ディオタイプを産生するために使用され得、そして結果としてＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２および／またはそのリガンドに結合し、そして中和する。こ
のような抗イディオタイプまたはそのような抗イディオタイプのＦａｂフラグメ
ントの中和は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２リガンドを中和するための
治療的レジメンに使用され得る。例えば、そのような抗イディオタイプ抗体は、
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２に結合するため、またはＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２リガンド／レセプターに結合するために使用され得、そして
それによってＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の生物学的活性がブロックさ
れる。
パク質に対する抗体は、当業者に周知の技術を用いてＭＥＴＨ１および／または
ＭＥＴＨ２を「模倣する」抗イディオタイプ抗体を産生するために順々に利用さ
れ得る（例えば、ＧｒｅｅｎｓｐａｎおよびＢｏｎａ、ＦＡＳＥＢ Ｊ．７（５
）：４３７−４４４；（１９８９）およびＮｉｓｓｉｎｏｆｆ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ．１４７（８）：２４２９−２４３８（１９９１）を参照のこと）。例えば
、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２に結合し、そしてＭＥＴＨ１および／ま
たはＭＥＴＨ２の多量体化および／またはリガンドに対するＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２の結合を競合的に阻害する抗体が、ＭＥＴＨ１および／または
ＭＥＴＨ２の多量体化ドメインおよび／または結合ドメインを「模倣する」抗イ
ディオタイプを産生するために使用され得、そして結果としてＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２および／またはそのリガンドに結合し、そして中和する。こ
のような抗イディオタイプまたはそのような抗イディオタイプのＦａｂフラグメ
ントの中和は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２リガンドを中和するための
治療的レジメンに使用され得る。例えば、そのような抗イディオタイプ抗体は、
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２に結合するため、またはＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２リガンド／レセプターに結合するために使用され得、そして
それによってＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の生物学的活性がブロックさ
れる。
【０２３８】
（抗体をコードするポリヌクレオチド）
本発明はさらに、本発明の抗体およびそのフラグメントをコードするヌクレオ
チド配列を含むポリヌクレオチドを提供する。本発明はまた、ストリンジェント
な、あるいはより低いストリジェンシーなハイブリダイゼーション条件下で（例
えば、上記に定義されるような）抗体（好ましくは、本発明のポリペプチドと特
異的に結合する、好ましくは、配列番号２および／または配列番号４のアミノ酸
配列を有するポリペプチドに結合する抗体）をコードするポリヌクレオチドにハ
イブリダイズするポリヌクレオチドを含む。
チド配列を含むポリヌクレオチドを提供する。本発明はまた、ストリンジェント
な、あるいはより低いストリジェンシーなハイブリダイゼーション条件下で（例
えば、上記に定義されるような）抗体（好ましくは、本発明のポリペプチドと特
異的に結合する、好ましくは、配列番号２および／または配列番号４のアミノ酸
配列を有するポリペプチドに結合する抗体）をコードするポリヌクレオチドにハ
イブリダイズするポリヌクレオチドを含む。
【０２３９】
ポリヌクレオチドが、当該分野で公知の任意の方法によって得られ得、そして
そのポリヌクレオチドのヌクレオチド配列が決定される。例えば、抗体のヌクレ
オチド配列が知られている場合、この抗体をコードするポリヌクレオチドは、化
学的に合成されたオリゴヌクレオチドから構築され得（例えば、Ｋｕｔｍｅｉｅ
ｒら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １７：２４２（１９９４）に記載されるよ
うな）、これは、簡単にいうと、以下の工程を包含する：この抗体をコードする
配列の部分を含むオーバーラップするオリゴヌクレオチドの合成、これらのオリ
ゴヌクレオチドのアニーリングおよび連結、次いでＰＣＲによる連結されたオリ
ゴヌクレオチドの増幅。
そのポリヌクレオチドのヌクレオチド配列が決定される。例えば、抗体のヌクレ
オチド配列が知られている場合、この抗体をコードするポリヌクレオチドは、化
学的に合成されたオリゴヌクレオチドから構築され得（例えば、Ｋｕｔｍｅｉｅ
ｒら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １７：２４２（１９９４）に記載されるよ
うな）、これは、簡単にいうと、以下の工程を包含する：この抗体をコードする
配列の部分を含むオーバーラップするオリゴヌクレオチドの合成、これらのオリ
ゴヌクレオチドのアニーリングおよび連結、次いでＰＣＲによる連結されたオリ
ゴヌクレオチドの増幅。
【０２４０】
あるいは、抗体をコードするポリヌクレオチドは、適切な供給源からの核酸か
ら生成され得る。特定の抗体をコードする核酸を含むクローンは入手不可能だが
、その抗体分子の配列が既知である場合、その免疫グロブリンをコードする核酸
は、化学的に合成され得るか、あるいは適切な供給源（例えば、抗体ｃＤＮＡラ
イブラリー、または抗体を発現する任意の組織もしくは細胞（例えば、本発明の
抗体の発現のために選択されたハイブリドーマ細胞）から生成されたｃＤＮＡラ
イブラリー、またはそれから単離された核酸（好ましくはポリＡ＋ＲＮＡ））か
ら、例えば、その抗体をコードするｃＤＮＡライブラリーからのｃＤＮＡクロー
ンを同定するために、配列の３’末端および５’末端にハイブリダイズ可能な合
成プライマーを使用するＰＣＲ増幅によって、または特定の遺伝子配列に特異的
なオリゴヌクレオチドプローブを使用するクローニングによって得られ得る。Ｐ
ＣＲによって生成された増幅された核酸は、次いで、当該分野で周知の任意の方
法を用いて、複製可能なクローニングベクターにクローニングされ得る。
ら生成され得る。特定の抗体をコードする核酸を含むクローンは入手不可能だが
、その抗体分子の配列が既知である場合、その免疫グロブリンをコードする核酸
は、化学的に合成され得るか、あるいは適切な供給源（例えば、抗体ｃＤＮＡラ
イブラリー、または抗体を発現する任意の組織もしくは細胞（例えば、本発明の
抗体の発現のために選択されたハイブリドーマ細胞）から生成されたｃＤＮＡラ
イブラリー、またはそれから単離された核酸（好ましくはポリＡ＋ＲＮＡ））か
ら、例えば、その抗体をコードするｃＤＮＡライブラリーからのｃＤＮＡクロー
ンを同定するために、配列の３’末端および５’末端にハイブリダイズ可能な合
成プライマーを使用するＰＣＲ増幅によって、または特定の遺伝子配列に特異的
なオリゴヌクレオチドプローブを使用するクローニングによって得られ得る。Ｐ
ＣＲによって生成された増幅された核酸は、次いで、当該分野で周知の任意の方
法を用いて、複製可能なクローニングベクターにクローニングされ得る。
【０２４１】
一旦、抗体のヌクレオチド配列および対応するアミノ酸配列が決定されると、
抗体のヌクレオチド配列は、ヌクレオチド配列の操作について当該分野で周知の
方法（例えば、組換えＤＮＡ技術、部位特異的変異誘発、ＰＣＲなど（例えば、
Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９９０，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌ
ａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，第２版、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒ
ｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ
およびＡｕｓｕｂｅｌら編、１９９８，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ
ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ
，ＮＹに記載の技術を参照のこと。これらは両方がその全体において本明細書に
参考として援用される。））を用いて操作され、例えば、アミノ酸の置換、欠失
、および／または挿入を作製するように異なるアミノ酸配列を有する抗体を生成
し得る。
抗体のヌクレオチド配列は、ヌクレオチド配列の操作について当該分野で周知の
方法（例えば、組換えＤＮＡ技術、部位特異的変異誘発、ＰＣＲなど（例えば、
Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９９０，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌ
ａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，第２版、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒ
ｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ
およびＡｕｓｕｂｅｌら編、１９９８，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ
ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ
，ＮＹに記載の技術を参照のこと。これらは両方がその全体において本明細書に
参考として援用される。））を用いて操作され、例えば、アミノ酸の置換、欠失
、および／または挿入を作製するように異なるアミノ酸配列を有する抗体を生成
し得る。
【０２４２】
特定の実施形態において、重鎖および／または軽鎖の可変ドメインのアミノ酸
配列は、相補性決定領域（ＣＤＲ）の配列の同定のために、当該分野において周
知の方法によって（例えば、配列超可変性の領域を決定するために、他の重鎖、
および軽鎖の可変領域を既知のアミノ酸配列と比較することによって）調べられ
得る。慣用的な組換えＤＮＡ技術を用いて、１つ以上のＣＤＲが、前述のように
フレームワーク領域内に（例えば、非ヒト抗体をヒト化するために、ヒトフレー
ムワーク領域中に）挿入され得る。このフレームワーク領域は天然に存在し得る
か、またはコンセンサスフレームワーク領域であり得、そして好ましくはヒトフ
レームワーク領域であり得る（例えば、列挙したヒトフレームワーク領域につい
ては、Ｃｈｏｔｈｉａら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２７８：４５７−４７９（１
９９８）を参照のこと）。好ましくは、フレームワーク領域およびＣＤＲの組み
合わせによって生成されたポリヌクレオチドは、本発明のポリペプチドに特異的
に結合する抗体をコードする。好ましくは、上記に議論されるように、１つ以上
のアミノ酸置換は、フレームワーク領域内で作製され得、そして好ましくは、そ
のアミノ酸置換は、抗体のその抗原への結合を改善する。さらに、このような方
法は、１つ以上の鎖内ジスルフィド結合が欠如した抗体分子を生成するように、
鎖内ジスルフィド結合に関与する１つ以上の可変領域のシステイン残基のアミノ
酸置換または欠失を作製するために使用され得る。ポリヌクレオチドへの他の変
更は、本発明によって、および当該分野の技術において包含される。
配列は、相補性決定領域（ＣＤＲ）の配列の同定のために、当該分野において周
知の方法によって（例えば、配列超可変性の領域を決定するために、他の重鎖、
および軽鎖の可変領域を既知のアミノ酸配列と比較することによって）調べられ
得る。慣用的な組換えＤＮＡ技術を用いて、１つ以上のＣＤＲが、前述のように
フレームワーク領域内に（例えば、非ヒト抗体をヒト化するために、ヒトフレー
ムワーク領域中に）挿入され得る。このフレームワーク領域は天然に存在し得る
か、またはコンセンサスフレームワーク領域であり得、そして好ましくはヒトフ
レームワーク領域であり得る（例えば、列挙したヒトフレームワーク領域につい
ては、Ｃｈｏｔｈｉａら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２７８：４５７−４７９（１
９９８）を参照のこと）。好ましくは、フレームワーク領域およびＣＤＲの組み
合わせによって生成されたポリヌクレオチドは、本発明のポリペプチドに特異的
に結合する抗体をコードする。好ましくは、上記に議論されるように、１つ以上
のアミノ酸置換は、フレームワーク領域内で作製され得、そして好ましくは、そ
のアミノ酸置換は、抗体のその抗原への結合を改善する。さらに、このような方
法は、１つ以上の鎖内ジスルフィド結合が欠如した抗体分子を生成するように、
鎖内ジスルフィド結合に関与する１つ以上の可変領域のシステイン残基のアミノ
酸置換または欠失を作製するために使用され得る。ポリヌクレオチドへの他の変
更は、本発明によって、および当該分野の技術において包含される。
【０２４３】
さらに、適切な抗原特異性のマウス抗体分子由来の遺伝子を、適切な生物学的
活性のヒト抗体分子由来の遺伝子と共にスプライシングさせることによって、「
キメラ抗体」を産生するために開発された技術（Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８１：８５１−８５５（１９８４）；Ｎｅｕｂ
ｅｒｇｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３１２：６０４−６０８（１９８４）；Ｔａｋｅ
ｄａら、Ｎａｔｕｒｅ ３１４：４５２−４５４（１９８５））が使用され得る
。上記のように、キメラ抗体は、異なる部分が異なる動物種に由来する分子であ
り、このような分子は、マウスｍＡｂおよびヒト免疫グロブリンの定常領域由来
の可変領域を有する（例えば、ヒト化抗体）。
活性のヒト抗体分子由来の遺伝子と共にスプライシングさせることによって、「
キメラ抗体」を産生するために開発された技術（Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８１：８５１−８５５（１９８４）；Ｎｅｕｂ
ｅｒｇｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３１２：６０４−６０８（１９８４）；Ｔａｋｅ
ｄａら、Ｎａｔｕｒｅ ３１４：４５２−４５４（１９８５））が使用され得る
。上記のように、キメラ抗体は、異なる部分が異なる動物種に由来する分子であ
り、このような分子は、マウスｍＡｂおよびヒト免疫グロブリンの定常領域由来
の可変領域を有する（例えば、ヒト化抗体）。
【０２４４】
あるいは、単鎖抗体の産生について記載された技術（米国特許第４，９４６，
７７８号；Ｂｉｒｄ、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３−４２（１９８８）；Ｈ
ｕｓｔｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７
９−５８８３（１９８８）；およびＷａｒｄら、Ｎａｔｕｒｅ ３３４：５４４
−５４（１９８９））が、単鎖抗体の産生に適応され得る。単鎖抗体は、Ｆｖ領
域の重鎖フラグメントおよび軽鎖フラグメントがアミノ酸架橋を介して連結され
れることによって形成され、単鎖ポリペプチドを生じる。Ｅ．ｃｏｌｉにおける
機能性Ｆｖフラグメントのアセンブリのための技術もまた、使用され得る（Ｓｋ
ｅｒｒａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：１０３８−１０４１（１９８８））。
７７８号；Ｂｉｒｄ、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３−４２（１９８８）；Ｈ
ｕｓｔｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７
９−５８８３（１９８８）；およびＷａｒｄら、Ｎａｔｕｒｅ ３３４：５４４
−５４（１９８９））が、単鎖抗体の産生に適応され得る。単鎖抗体は、Ｆｖ領
域の重鎖フラグメントおよび軽鎖フラグメントがアミノ酸架橋を介して連結され
れることによって形成され、単鎖ポリペプチドを生じる。Ｅ．ｃｏｌｉにおける
機能性Ｆｖフラグメントのアセンブリのための技術もまた、使用され得る（Ｓｋ
ｅｒｒａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：１０３８−１０４１（１９８８））。
【０２４５】
（抗体を産生する方法）
本発明の抗体は、抗体を合成するための当該分野で公知の任意の方法によって
、特に、化学合成によって、または、好ましくは、組換え発現技術によって産生
され得る。
、特に、化学合成によって、または、好ましくは、組換え発現技術によって産生
され得る。
【０２４６】
本発明の抗体、またはそのフラグメント、誘導体もしくはアナログ（例えば、
本発明の抗体の重鎖もしくは軽鎖または本発明の単鎖抗体）の組換え発現は、そ
の抗体をコードするポリヌクレオチドを含有する発現ベクターの構築を必要とす
る。一旦、本発明の抗体分子または抗体の重鎖もしくは軽鎖、あるいはそれらの
部分（好ましくは、重鎖または軽鎖の可変ドメインを含有する）をコードするポ
リヌクレオチドが得られると、抗体分子の産生のためのベクターは、当該分野で
周知の技術を用いる組換えＤＮＡ技術によって生成され得る。従って、抗体をコ
ードするヌクレオチド配列を含有するポリヌクレオチドの発現によってタンパク
質を調製するための方法は、本明細書に記載される。当業者に周知の方法は、抗
体をコードする配列ならびに適切な転写制御シグナルおよび翻訳制御シグナルを
含有する発現ベクターの構築のために使用され得る。これらの方法には、例えば
、インビトロの組換えＤＮＡ技術、合成技術、およびインビボの遺伝子組換えが
挙げられる。従って、本発明は、プロモーターに作動可能に連結された、本発明
の抗体分子、あるいはその重鎖もしくは軽鎖、または重鎖もしくは軽鎖の可変ド
メインをコードするヌクレオチド配列を含む、複製可能なベクターを提供する。
このようなベクターは、抗体分子の定常領域（例えば、ＰＣＴ公開 ＷＯ８６／
０５８０７；ＰＣＴ公開 ＷＯ８９／０１０３６；および米国特許第５，１２２
，４６４号を参照のこと）をコードするヌクレオチド配列を含み得、そしてこの
抗体の可変ドメインは、重鎖または軽鎖の全体の発現のためにこのようなベクタ
ーにクローニングされ得る。
本発明の抗体の重鎖もしくは軽鎖または本発明の単鎖抗体）の組換え発現は、そ
の抗体をコードするポリヌクレオチドを含有する発現ベクターの構築を必要とす
る。一旦、本発明の抗体分子または抗体の重鎖もしくは軽鎖、あるいはそれらの
部分（好ましくは、重鎖または軽鎖の可変ドメインを含有する）をコードするポ
リヌクレオチドが得られると、抗体分子の産生のためのベクターは、当該分野で
周知の技術を用いる組換えＤＮＡ技術によって生成され得る。従って、抗体をコ
ードするヌクレオチド配列を含有するポリヌクレオチドの発現によってタンパク
質を調製するための方法は、本明細書に記載される。当業者に周知の方法は、抗
体をコードする配列ならびに適切な転写制御シグナルおよび翻訳制御シグナルを
含有する発現ベクターの構築のために使用され得る。これらの方法には、例えば
、インビトロの組換えＤＮＡ技術、合成技術、およびインビボの遺伝子組換えが
挙げられる。従って、本発明は、プロモーターに作動可能に連結された、本発明
の抗体分子、あるいはその重鎖もしくは軽鎖、または重鎖もしくは軽鎖の可変ド
メインをコードするヌクレオチド配列を含む、複製可能なベクターを提供する。
このようなベクターは、抗体分子の定常領域（例えば、ＰＣＴ公開 ＷＯ８６／
０５８０７；ＰＣＴ公開 ＷＯ８９／０１０３６；および米国特許第５，１２２
，４６４号を参照のこと）をコードするヌクレオチド配列を含み得、そしてこの
抗体の可変ドメインは、重鎖または軽鎖の全体の発現のためにこのようなベクタ
ーにクローニングされ得る。
【０２４７】
この発現ベクターは、従来技術によって宿主細胞へと移入され、そしてこのト
ランスフェクトされた細胞は、次いで、本発明の抗体を産生するために、従来技
術によって培養される。従って、本発明は、異種プロモーターに作動可能に連結
された、本発明の抗体、あるいはその重鎖もしくは軽鎖、または本発明の単鎖抗
体をコードするポリヌクレオチドを含む宿主細胞を含む。二重鎖抗体の発現につ
いての好ましい実施形態において、重鎖および軽鎖の両方をコードするベクター
は、以下に詳述されるように、免疫グロブリン分子全体の発現のために宿主細胞
中に同時発現され得る。
ランスフェクトされた細胞は、次いで、本発明の抗体を産生するために、従来技
術によって培養される。従って、本発明は、異種プロモーターに作動可能に連結
された、本発明の抗体、あるいはその重鎖もしくは軽鎖、または本発明の単鎖抗
体をコードするポリヌクレオチドを含む宿主細胞を含む。二重鎖抗体の発現につ
いての好ましい実施形態において、重鎖および軽鎖の両方をコードするベクター
は、以下に詳述されるように、免疫グロブリン分子全体の発現のために宿主細胞
中に同時発現され得る。
【０２４８】
種々の宿主発現ベクター系は、本発明の抗体分子を発現させるために利用され
得る。このような宿主発現系は、目的のコード配列が産生され、かつ続いて精製
され得るビヒクルを表わすが、また、適切なヌクレオチドをコードする配列で形
質転換またはトランスフェクトされる場合に、インサイチュで本発明の抗体分子
を発現し得る細胞を表わす。これらには、以下が挙げられるが、これらに限定さ
れない：抗体をコードする配列を含む組換えバクテリオファージＤＮＡ、プラス
ミドＤＮＡまたはコスミドＤＮＡ発現ベクターを用いて形質転換された細菌（例
えば、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のような微生物；抗体をコードす
る配列を含む組換え酵母発現ベクターで形質転換された酵母（例えば、Ｓａｃｃ
ｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｐｉｃｈｉａ）；抗体をコードする配列を含む組換えウイ
ルス発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）に感染した昆虫細胞系；組換え
ウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイクウイルス、ＣａＭＶ；タ
バコモザイクウイルス、ＴＭＶ）に感染した植物細胞系または抗体をコードする
配列を含む組換えプラスミド発現ベクター（例えば、Ｔｉプラスミド）で形質転
換された植物細胞系；あるいは哺乳動物細胞のゲノムに由来するプロモーター（
例えば、メタロチオネインプロモーター）または哺乳動物のウイルスに由来する
プロモーター（例えば、アデノウイルス後期プロモーター；ワクシニアウイルス
７．５Ｋプロモーター）を含む組換え発現構築物を保有する哺乳動物細胞系（例
えば、ＣＯＳ、ＣＨＯ、ＢＨＫ、２９３、３Ｔ３細胞）。好ましくは、Ｅｓｃｈ
ｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉのような細菌細胞、そしてより好ましくは、特に、組
換え抗体分子全体の発現のために真核生物細胞が、組換え抗体分子の発現のため
に使用される。例えば、ヒトサイトメガロウイルス由来の主要最初期遺伝子プロ
モーターエレメントのようなベクターと組み合わされた、チャイニーズハムスタ
ーの卵巣細胞（ＣＨＯ）のような哺乳動物細胞が、抗体のための効果的な発現系
である（Ｆｏｅｃｋｉｎｇら、Ｇｅｎｅ ４５：１０１（１９８６）；Ｃｏｃｋ
ｅｔｔら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ８：２（１９９０））。
得る。このような宿主発現系は、目的のコード配列が産生され、かつ続いて精製
され得るビヒクルを表わすが、また、適切なヌクレオチドをコードする配列で形
質転換またはトランスフェクトされる場合に、インサイチュで本発明の抗体分子
を発現し得る細胞を表わす。これらには、以下が挙げられるが、これらに限定さ
れない：抗体をコードする配列を含む組換えバクテリオファージＤＮＡ、プラス
ミドＤＮＡまたはコスミドＤＮＡ発現ベクターを用いて形質転換された細菌（例
えば、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のような微生物；抗体をコードす
る配列を含む組換え酵母発現ベクターで形質転換された酵母（例えば、Ｓａｃｃ
ｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｐｉｃｈｉａ）；抗体をコードする配列を含む組換えウイ
ルス発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）に感染した昆虫細胞系；組換え
ウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイクウイルス、ＣａＭＶ；タ
バコモザイクウイルス、ＴＭＶ）に感染した植物細胞系または抗体をコードする
配列を含む組換えプラスミド発現ベクター（例えば、Ｔｉプラスミド）で形質転
換された植物細胞系；あるいは哺乳動物細胞のゲノムに由来するプロモーター（
例えば、メタロチオネインプロモーター）または哺乳動物のウイルスに由来する
プロモーター（例えば、アデノウイルス後期プロモーター；ワクシニアウイルス
７．５Ｋプロモーター）を含む組換え発現構築物を保有する哺乳動物細胞系（例
えば、ＣＯＳ、ＣＨＯ、ＢＨＫ、２９３、３Ｔ３細胞）。好ましくは、Ｅｓｃｈ
ｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉのような細菌細胞、そしてより好ましくは、特に、組
換え抗体分子全体の発現のために真核生物細胞が、組換え抗体分子の発現のため
に使用される。例えば、ヒトサイトメガロウイルス由来の主要最初期遺伝子プロ
モーターエレメントのようなベクターと組み合わされた、チャイニーズハムスタ
ーの卵巣細胞（ＣＨＯ）のような哺乳動物細胞が、抗体のための効果的な発現系
である（Ｆｏｅｃｋｉｎｇら、Ｇｅｎｅ ４５：１０１（１９８６）；Ｃｏｃｋ
ｅｔｔら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ８：２（１９９０））。
【０２４９】
細菌系において、多くの発現ベクターが、抗体分子の発現を意図する使用に依
存して有利に選択され得る。例えば、多量のこのようなタンパク質が産生される
べき場合、抗体分子の薬学的組成物の生成のために、容易に精製される融合タン
パク質産物の高レベルの発現を指向するベクターが所望され得る。このようなベ
クターには、以下が挙げられるが、これらに限定されない：抗体をコードする配
列がｌａｃＺをコードする領域と共にベクターにインフレーム（ｉｎ ｆｒａｍ
ｅ）で個別に連結され得、その結果、融合タンパク質が産生されるＥ．ｃｏｌｉ
発現ベクターｐＵＲ２７８（Ｒｕｔｈｅｒら、ＥＭＢＯ Ｊ．２：１７９１（１
９８３））；ｐＩＮベクター（ＩｎｏｕｙｅおよびＩｎｏｕｙｅ、Ｎｕｃｌｅｉ
ｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１３：３１０１−３１０９（１９８５）；Ｖａｎ Ｈ
ｅｅｋｅおよびＳｃｈｕｓｔｅｒ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２４：５５０３−
５５０９（１９８９））など。ｐＧＥＸベクターもまた、グルタチオンＳ−トラ
ンスフェラーゼ（ＧＳＴ）との融合タンパク質として、外来性ポリペプチドを発
現させるために使用され得る。一般に、このような融合タンパク質は可溶性であ
り、そして溶解した細胞から、マトリックスグルタチオン−アガロースビーズへ
の吸着および結合、それに続く遊離グルタチオン存在化での溶出によって容易に
精製され得る。このｐＧＥＸベクターは、トロンビンまたはＸａ因子プロテアー
ゼ切断部位を含むように設計され、その結果、このクローニングされた標的遺伝
子産物は、ＧＳＴ部分から放出され得る。
存して有利に選択され得る。例えば、多量のこのようなタンパク質が産生される
べき場合、抗体分子の薬学的組成物の生成のために、容易に精製される融合タン
パク質産物の高レベルの発現を指向するベクターが所望され得る。このようなベ
クターには、以下が挙げられるが、これらに限定されない：抗体をコードする配
列がｌａｃＺをコードする領域と共にベクターにインフレーム（ｉｎ ｆｒａｍ
ｅ）で個別に連結され得、その結果、融合タンパク質が産生されるＥ．ｃｏｌｉ
発現ベクターｐＵＲ２７８（Ｒｕｔｈｅｒら、ＥＭＢＯ Ｊ．２：１７９１（１
９８３））；ｐＩＮベクター（ＩｎｏｕｙｅおよびＩｎｏｕｙｅ、Ｎｕｃｌｅｉ
ｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１３：３１０１−３１０９（１９８５）；Ｖａｎ Ｈ
ｅｅｋｅおよびＳｃｈｕｓｔｅｒ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２４：５５０３−
５５０９（１９８９））など。ｐＧＥＸベクターもまた、グルタチオンＳ−トラ
ンスフェラーゼ（ＧＳＴ）との融合タンパク質として、外来性ポリペプチドを発
現させるために使用され得る。一般に、このような融合タンパク質は可溶性であ
り、そして溶解した細胞から、マトリックスグルタチオン−アガロースビーズへ
の吸着および結合、それに続く遊離グルタチオン存在化での溶出によって容易に
精製され得る。このｐＧＥＸベクターは、トロンビンまたはＸａ因子プロテアー
ゼ切断部位を含むように設計され、その結果、このクローニングされた標的遺伝
子産物は、ＧＳＴ部分から放出され得る。
【０２５０】
昆虫系においては、Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ核多角体
病ウイルス（ＡｃＮＰＶ）は、異種遺伝子を発現するためのベクターとして使用
される。このウイルスは、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞に
おいて増殖する。抗体をコードする配列は、このウイルスの非必須の領域（例え
ばポリヘドリン遺伝子）に個々にクローニングされ得、そしてＡｃＮＰＶプロモ
ーター（例えばポリヘドリンプロモーター）の制御下に配置され得る。
病ウイルス（ＡｃＮＰＶ）は、異種遺伝子を発現するためのベクターとして使用
される。このウイルスは、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞に
おいて増殖する。抗体をコードする配列は、このウイルスの非必須の領域（例え
ばポリヘドリン遺伝子）に個々にクローニングされ得、そしてＡｃＮＰＶプロモ
ーター（例えばポリヘドリンプロモーター）の制御下に配置され得る。
【０２５１】
哺乳動物宿主細胞においては、多数のウイルスに基づく発現系が利用され得る
。アデノウイルスが発現ベクターとして使用される場合においては、目的の抗体
をコードする配列は、アデノウイルスの転写／翻訳制御複合体、例えば後期プロ
モーターおよび３つの部分に分かれるリーダー配列、に連結され得る。次いで、
このキメラ遺伝子は、インビトロまたはインビボでの組換えによって、アデノウ
イルスゲノムに挿入され得る。ウイルスのゲノムの非必須領域（例えば、Ｅ１ま
たはＥ３領域）における挿入は、生存可能で、感染した宿主において抗体分子を
発現する能力のある組換えウイルスを生じる（例えば、ＬｏｇａｎおよびＳｈｅ
ｎｋ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：３５５−３５９
（１９８４）を参照のこと）。特異的開始シグナルはまた、挿入された抗体をコ
ードする配列の効率的な翻訳のために必要とされ得る。これらのシグナルは、Ａ
ＴＧ開始コドンおよび隣接する配列を含む。さらに、この開始コドンは、挿入部
分全体の翻訳を確実にするために、所望されるコード配列のリーディングフレー
ム（ｒｅａｄｉｎｇ ｆｒａｍｅ）と相が同じでなければならない。これらの外
因性翻訳制御シグナルおよび開始コドンは、種々の起源、天然および合成の両方
であり得る。発現の効率は、適切な転写エンハンサー要素、転写ターミネーター
、などの含有によって高められ得る（Ｂｉｔｔｎｅｒら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ
Ｅｎｚｙｍｏｌ．１５３：５１−５４４（１９８７）を参照のこと）。
。アデノウイルスが発現ベクターとして使用される場合においては、目的の抗体
をコードする配列は、アデノウイルスの転写／翻訳制御複合体、例えば後期プロ
モーターおよび３つの部分に分かれるリーダー配列、に連結され得る。次いで、
このキメラ遺伝子は、インビトロまたはインビボでの組換えによって、アデノウ
イルスゲノムに挿入され得る。ウイルスのゲノムの非必須領域（例えば、Ｅ１ま
たはＥ３領域）における挿入は、生存可能で、感染した宿主において抗体分子を
発現する能力のある組換えウイルスを生じる（例えば、ＬｏｇａｎおよびＳｈｅ
ｎｋ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：３５５−３５９
（１９８４）を参照のこと）。特異的開始シグナルはまた、挿入された抗体をコ
ードする配列の効率的な翻訳のために必要とされ得る。これらのシグナルは、Ａ
ＴＧ開始コドンおよび隣接する配列を含む。さらに、この開始コドンは、挿入部
分全体の翻訳を確実にするために、所望されるコード配列のリーディングフレー
ム（ｒｅａｄｉｎｇ ｆｒａｍｅ）と相が同じでなければならない。これらの外
因性翻訳制御シグナルおよび開始コドンは、種々の起源、天然および合成の両方
であり得る。発現の効率は、適切な転写エンハンサー要素、転写ターミネーター
、などの含有によって高められ得る（Ｂｉｔｔｎｅｒら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ
Ｅｎｚｙｍｏｌ．１５３：５１−５４４（１９８７）を参照のこと）。
【０２５２】
さらに、宿主細胞系統は、選択され得、これは挿入配列の発現を調節し、また
は、所望される特異的な様式で遺伝子産物を改変し、そしてプロセシングする。
タンパク質産物のこのような改変（例えばグリコシル化）およびプロセシング（
例えば切断）は、タンパク質の機能のために重要であり得る。異なる宿主細胞は
、タンパク質および遺伝子産物の、翻訳後プロセシングおよび改変のための、特
徴的で特異的な機構を有する。適切な細胞株または宿主系は、発現された外来タ
ンパク質の正確な改変およびプロセシングを確実にするように選択され得る。こ
の目的のために、遺伝子産物の、第一の転写、グリコシル化、およびリン酸化の
正確なプロセシングのための細胞機構を有する、真核生物宿主細胞が、使用され
得る。このような哺乳動物宿主細胞は、ＣＨＯ、ＶＥＲＡ、ＢＨＫ、Ｈｅｌａ、
ＣＯＳ、ＭＤＣＫ、２９３、３Ｔ３、ＷＩ３８、そして特に、例えば、ＢＴ４８
３、Ｈｓ５７８Ｔ、ＨＴＢ２、ＢＴ２０およびＴ４７Ｄのような乳癌細胞株、な
らびに、例えば、ＣＲＬ７０３０およびＨｓ５７８Ｂｓｔのような正常な乳腺細
胞株を含むが、これらに限定されない。
は、所望される特異的な様式で遺伝子産物を改変し、そしてプロセシングする。
タンパク質産物のこのような改変（例えばグリコシル化）およびプロセシング（
例えば切断）は、タンパク質の機能のために重要であり得る。異なる宿主細胞は
、タンパク質および遺伝子産物の、翻訳後プロセシングおよび改変のための、特
徴的で特異的な機構を有する。適切な細胞株または宿主系は、発現された外来タ
ンパク質の正確な改変およびプロセシングを確実にするように選択され得る。こ
の目的のために、遺伝子産物の、第一の転写、グリコシル化、およびリン酸化の
正確なプロセシングのための細胞機構を有する、真核生物宿主細胞が、使用され
得る。このような哺乳動物宿主細胞は、ＣＨＯ、ＶＥＲＡ、ＢＨＫ、Ｈｅｌａ、
ＣＯＳ、ＭＤＣＫ、２９３、３Ｔ３、ＷＩ３８、そして特に、例えば、ＢＴ４８
３、Ｈｓ５７８Ｔ、ＨＴＢ２、ＢＴ２０およびＴ４７Ｄのような乳癌細胞株、な
らびに、例えば、ＣＲＬ７０３０およびＨｓ５７８Ｂｓｔのような正常な乳腺細
胞株を含むが、これらに限定されない。
【０２５３】
組換えタンパク質の長期間の高収率産生、安定発現が好ましい。例えば、安定
に抗体分子を発現する細胞株が操作され得る。ウイルスの複製起点を含む発現ベ
クターを使用するよりも、宿主細胞は、適切な発現制御要素（例えば、プロモー
ター、エンハンサー、配列、転写ターミネーター、ポリアデニル化部位、など）
、および選択可能なマーカーによって制御されるＤＮＡで形質転換され得る。外
来ＤＮＡの導入に続いて、操作された細胞は、１〜２日間富化培地で増殖させら
れ得、次いで、選択培地に切り替えられる。組換えプラスミドにおける選択可能
マーカーは、選択のために耐性を与え、そして細胞が、プラスミドをその染色体
内に安定に組み込み、そして増殖して、細胞増殖巣を形成し、これを今度はクロ
ーニングし得、細胞株に拡張され得ることを可能にする。この方法は、抗体分子
を発現する細胞株を操作するために、有利に使用され得る。このような操作され
た細胞株は、直接的または間接的に抗体分子と相互作用する化合物のスクリーニ
ングおよび評価において、特に有用であり得る。
に抗体分子を発現する細胞株が操作され得る。ウイルスの複製起点を含む発現ベ
クターを使用するよりも、宿主細胞は、適切な発現制御要素（例えば、プロモー
ター、エンハンサー、配列、転写ターミネーター、ポリアデニル化部位、など）
、および選択可能なマーカーによって制御されるＤＮＡで形質転換され得る。外
来ＤＮＡの導入に続いて、操作された細胞は、１〜２日間富化培地で増殖させら
れ得、次いで、選択培地に切り替えられる。組換えプラスミドにおける選択可能
マーカーは、選択のために耐性を与え、そして細胞が、プラスミドをその染色体
内に安定に組み込み、そして増殖して、細胞増殖巣を形成し、これを今度はクロ
ーニングし得、細胞株に拡張され得ることを可能にする。この方法は、抗体分子
を発現する細胞株を操作するために、有利に使用され得る。このような操作され
た細胞株は、直接的または間接的に抗体分子と相互作用する化合物のスクリーニ
ングおよび評価において、特に有用であり得る。
【０２５４】
多数の選択系が使用され得、この選択系は、単純ヘルペスウイルスチミジンキ
ナーゼ（Ｗｉｇｌｅｒら、Ｃｅｌｌ １１：２２３（１９７７））、ヒポキサン
チン−グアニン ホスホリボシルトランスフェラーゼ（Ｓｚｙｂａｌｓｋａおよ
びＳｚｙｂａｌｓｋｉ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ４８
：２０２（１９９２））、およびアデニン ホスホリボシルトランスフェラーゼ
（Ｌｏｗｙら、Ｃｅｌｌ ２２：８１７（１９８０））の遺伝子を含むが限定さ
れず、これらの遺伝子は、ｔｋ−、ｈｇｐｒｔ−またはａｐｒｔ−細胞において
それぞれ使用され得る。また、代謝拮抗物質耐性は、以下の遺伝子の選択の根拠
として使用され得る：ｄｈｆｒ、これはメトトレキサートに対する耐性を与える
（Ｗｉｇｌｅｒら、Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：３５７（１９
８０）；Ｏ’Ｈａｒｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７
８：１５２７（１９８１））；ｇｐｔ、これはミコフェノール酸にに対する耐性
を与える（ＭｕｌｌｉｇａｎおよびＢｅｒｇ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．
Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７８：２０７２（１９８１））；ｎｅｏ、これはアミノグリコ
シドＧ−４１８に対する耐性を与える（Ｇｏｌｄｓｐｉｅｌら、Ｃｌｉｎｉｃａ
ｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ １２：４８８−５０５；ＷｕおよびＷｕ、Ｂｉｏｔｈｅ
ｒａｐｙ ３：８７−９５（１９９１）；Ｔｏｌｓｔｏｓｈｅｖ、Ａｎｎ．Ｒｅ
ｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ． ３２：５７３−５９６（１９９３
）；Ｍｕｌｌｉｇａｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６０：９２６−９３２（１９９３）
；およびＭｏｒｇａｎおよびＡｎｄｅｒｓｏｎ、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．６２：１９１−２１７（１９９３）；１９９３年５月、ＴＩＢ ＴＥＣＨ
１１（５）：１５５−２１５）；ならびにｈｙｇｒｏ、これはハイグロマイシン
にに対する耐性を与える（Ｓａｎｔｅｒｒｅら、Ｇｅｎｅ ３０：１４７（１９
８４））。組換えＤＮＡ技術の分野で周知の方法は、所望の組換えクローンを選
択するために、慣用的に適用され得、そしてこのような方法は、以下に記載され
ている：例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら（編）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌ
ｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏ
ｎｓ、ＮＹ（１９９３）；Ｋｒｉｅｇｌｅｒ、Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ａ
ｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ、Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｓｔ
ｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ、ＮＹ（１９９０）；ならびに１２章および１３章、
Ｄｒａｃｏｐｏｌｉら（編）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｈ
ｕｍａｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ、ＮＹ（１
９９４）；Ｃｏｌｂｅｒｒｅ−Ｇａｒａｐｉｎら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ． １
５０：１（１９８１）（これらはその全体が本明細書中に参考として援用される
）。
ナーゼ（Ｗｉｇｌｅｒら、Ｃｅｌｌ １１：２２３（１９７７））、ヒポキサン
チン−グアニン ホスホリボシルトランスフェラーゼ（Ｓｚｙｂａｌｓｋａおよ
びＳｚｙｂａｌｓｋｉ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ４８
：２０２（１９９２））、およびアデニン ホスホリボシルトランスフェラーゼ
（Ｌｏｗｙら、Ｃｅｌｌ ２２：８１７（１９８０））の遺伝子を含むが限定さ
れず、これらの遺伝子は、ｔｋ−、ｈｇｐｒｔ−またはａｐｒｔ−細胞において
それぞれ使用され得る。また、代謝拮抗物質耐性は、以下の遺伝子の選択の根拠
として使用され得る：ｄｈｆｒ、これはメトトレキサートに対する耐性を与える
（Ｗｉｇｌｅｒら、Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：３５７（１９
８０）；Ｏ’Ｈａｒｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７
８：１５２７（１９８１））；ｇｐｔ、これはミコフェノール酸にに対する耐性
を与える（ＭｕｌｌｉｇａｎおよびＢｅｒｇ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．
Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７８：２０７２（１９８１））；ｎｅｏ、これはアミノグリコ
シドＧ−４１８に対する耐性を与える（Ｇｏｌｄｓｐｉｅｌら、Ｃｌｉｎｉｃａ
ｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ １２：４８８−５０５；ＷｕおよびＷｕ、Ｂｉｏｔｈｅ
ｒａｐｙ ３：８７−９５（１９９１）；Ｔｏｌｓｔｏｓｈｅｖ、Ａｎｎ．Ｒｅ
ｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ． ３２：５７３−５９６（１９９３
）；Ｍｕｌｌｉｇａｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６０：９２６−９３２（１９９３）
；およびＭｏｒｇａｎおよびＡｎｄｅｒｓｏｎ、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．６２：１９１−２１７（１９９３）；１９９３年５月、ＴＩＢ ＴＥＣＨ
１１（５）：１５５−２１５）；ならびにｈｙｇｒｏ、これはハイグロマイシン
にに対する耐性を与える（Ｓａｎｔｅｒｒｅら、Ｇｅｎｅ ３０：１４７（１９
８４））。組換えＤＮＡ技術の分野で周知の方法は、所望の組換えクローンを選
択するために、慣用的に適用され得、そしてこのような方法は、以下に記載され
ている：例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら（編）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌ
ｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏ
ｎｓ、ＮＹ（１９９３）；Ｋｒｉｅｇｌｅｒ、Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ａ
ｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ、Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｓｔ
ｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ、ＮＹ（１９９０）；ならびに１２章および１３章、
Ｄｒａｃｏｐｏｌｉら（編）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｈ
ｕｍａｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ、ＮＹ（１
９９４）；Ｃｏｌｂｅｒｒｅ−Ｇａｒａｐｉｎら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ． １
５０：１（１９８１）（これらはその全体が本明細書中に参考として援用される
）。
【０２５５】
抗体分子の発現レベルは、ベクター増幅によって増大され得る（総説として、
ＢｅｂｂｉｎｇｔｏｎおよびＨｅｎｔｓｃｈｅｌ、Ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｖｅ
ｃｔｏｒｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｇｅｎｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｆｏ
ｒ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｌｏｎｅｄ ｇｅｎｅｓ ｉｎ
ｍａｍｍａｌｉａｎ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ＤＮＡ ｃｌｏｎｉｎｇ、第３巻（Ａ
ｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８７）を参照のこと）。
抗体を発現するベクター系におけるマーカーが、増幅可能であると、宿主細胞の
培養物に存在するインヒビターのレベルにおける増加は、マーカー遺伝子のコピ
ーの数を増加する。増副領域は抗体遺伝子と結合しているので、抗体の産生もま
た増加する（Ｃｒｏｕｓｅら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．３：２５７（１９
８３））。
ＢｅｂｂｉｎｇｔｏｎおよびＨｅｎｔｓｃｈｅｌ、Ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｖｅ
ｃｔｏｒｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｇｅｎｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｆｏ
ｒ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｌｏｎｅｄ ｇｅｎｅｓ ｉｎ
ｍａｍｍａｌｉａｎ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ＤＮＡ ｃｌｏｎｉｎｇ、第３巻（Ａ
ｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８７）を参照のこと）。
抗体を発現するベクター系におけるマーカーが、増幅可能であると、宿主細胞の
培養物に存在するインヒビターのレベルにおける増加は、マーカー遺伝子のコピ
ーの数を増加する。増副領域は抗体遺伝子と結合しているので、抗体の産生もま
た増加する（Ｃｒｏｕｓｅら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．３：２５７（１９
８３））。
【０２５６】
宿主細胞は、本発明の二つの発現ベクター（重鎖由来のポリペプチドをコード
する第一のベクターおよび軽鎖由来のポリペプチドをコードする第二のベクター
）で、同時トランスフェクトされ得る。この二つのベクターは、重鎖および軽鎖
のポリペプチドの等しい発現を可能にする、同一の選択可能なマーカーを含み得
る。あるいは、単一のベクターが使用され得、これは重鎖および軽鎖両方のポリ
ペプチドをコードし、そして発現することができる。このような状況において、
過剰の毒性の遊離重鎖を避けるために、重鎖の前に軽鎖が配置されるべきである
（Ｐｒｏｕｄｆｏｏｔ、Ｎａｔｕｒｅ ３２２：５２（１９８６）；Ｋｏｈｌｅ
ｒ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：２１９７（１９８
０））。重鎖および軽鎖のためのコード配列はｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡを含
み得る。
する第一のベクターおよび軽鎖由来のポリペプチドをコードする第二のベクター
）で、同時トランスフェクトされ得る。この二つのベクターは、重鎖および軽鎖
のポリペプチドの等しい発現を可能にする、同一の選択可能なマーカーを含み得
る。あるいは、単一のベクターが使用され得、これは重鎖および軽鎖両方のポリ
ペプチドをコードし、そして発現することができる。このような状況において、
過剰の毒性の遊離重鎖を避けるために、重鎖の前に軽鎖が配置されるべきである
（Ｐｒｏｕｄｆｏｏｔ、Ｎａｔｕｒｅ ３２２：５２（１９８６）；Ｋｏｈｌｅ
ｒ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：２１９７（１９８
０））。重鎖および軽鎖のためのコード配列はｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡを含
み得る。
【０２５７】
一旦本発明の抗体分子が、動物によって産生されるか、化学的に合成されるか
、または組換えにより発現されると、当該分野で公知の、免疫グロブリン分子の
精製のための任意の方法、例えば、クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、
アフィニティー（特に、プロテインＡの後に特異的抗原に対するアフィニティー
による）、およびサイズカラムクロマトグラフィー）、遠心分離、溶解度差、ま
たはタンパク質精製のための任意の他の標準的な技術によって、精製され得る。
さらに、本発明の抗体またはそのフラグメントは、本明細書中に記載されるかま
たはそうでなければ当該分野において公知の、異種ポリペプチド配列に融合され
得、精製を容易にする。
、または組換えにより発現されると、当該分野で公知の、免疫グロブリン分子の
精製のための任意の方法、例えば、クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、
アフィニティー（特に、プロテインＡの後に特異的抗原に対するアフィニティー
による）、およびサイズカラムクロマトグラフィー）、遠心分離、溶解度差、ま
たはタンパク質精製のための任意の他の標準的な技術によって、精製され得る。
さらに、本発明の抗体またはそのフラグメントは、本明細書中に記載されるかま
たはそうでなければ当該分野において公知の、異種ポリペプチド配列に融合され
得、精製を容易にする。
【０２５８】
本発明は、本発明のポリペプチド（もしくはその部分、好ましくはこのポリペ
プチドの少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、
もしくは１００個のアミノ酸）に、組換えにより融合されるかまたは化学的に結
合されて（共有結合および非共有結合の両方を含む）、融合タンパク質を生成す
る抗体、を含む。この融合は、直接的である必要はないが、リンカー配列を介し
て起こり得る。この抗体は、本発明のポリペプチド（またはその部分、好ましく
はこのポリペプチドの少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、
８０、９０、もしくは１００個のアミノ酸）以外の抗原に特異的であり得る。例
えば、インビトロまたはインビボのいずれにおいても、本発明のポリペプチドを
特定の細胞表面のレセプターに特異的な抗体に融合または結合させることによっ
て、特定の細胞のタイプに対して、本発明のポリペプチドを標的にするために、
抗体が使用され得る。本発明のポリぺプチドに融合または結合される抗体はまた
、インビトロ免疫アッセイおよび当該分野で公知の方法を使用する精製方法にお
いて使用され得る。例えば、Ｈａｒｂｏｒら、上記、およびＰＣＴ公開ＷＯ９３
／２１２３２；ＥＰ４３９，０９５；Ｎａｒａｍｕｒａら、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌ
ｅｔｔ．３９：９１−９９（１９９４）；米国特許第５，４７４，９８１号；Ｇ
ｉｌｌｉｅｓら、ＰＮＡＳ ８９：１４２８−１４３２（１９９２）；Ｆｅｌｌ
ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４６：２４４６−２４５２（１９９１）を参照のこ
と。これらは、その全体が参考として援用される。
プチドの少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、
もしくは１００個のアミノ酸）に、組換えにより融合されるかまたは化学的に結
合されて（共有結合および非共有結合の両方を含む）、融合タンパク質を生成す
る抗体、を含む。この融合は、直接的である必要はないが、リンカー配列を介し
て起こり得る。この抗体は、本発明のポリペプチド（またはその部分、好ましく
はこのポリペプチドの少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、
８０、９０、もしくは１００個のアミノ酸）以外の抗原に特異的であり得る。例
えば、インビトロまたはインビボのいずれにおいても、本発明のポリペプチドを
特定の細胞表面のレセプターに特異的な抗体に融合または結合させることによっ
て、特定の細胞のタイプに対して、本発明のポリペプチドを標的にするために、
抗体が使用され得る。本発明のポリぺプチドに融合または結合される抗体はまた
、インビトロ免疫アッセイおよび当該分野で公知の方法を使用する精製方法にお
いて使用され得る。例えば、Ｈａｒｂｏｒら、上記、およびＰＣＴ公開ＷＯ９３
／２１２３２；ＥＰ４３９，０９５；Ｎａｒａｍｕｒａら、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌ
ｅｔｔ．３９：９１−９９（１９９４）；米国特許第５，４７４，９８１号；Ｇ
ｉｌｌｉｅｓら、ＰＮＡＳ ８９：１４２８−１４３２（１９９２）；Ｆｅｌｌ
ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４６：２４４６−２４５２（１９９１）を参照のこ
と。これらは、その全体が参考として援用される。
【０２５９】
本発明はさらに、抗体の可変領域以外のドメインに融合または結合された、本
発明のポリぺプチドを含む組成物を含む。例えば、本発明のポリぺプチドは、抗
体のＦｃ領域、またはその部分に融合または結合され得る。本発明のポリぺプチ
ドに融合されたこの抗体の部分は、定常領域、ヒンジ領域、ＣＨ１ドメイン、Ｃ
Ｈ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、またはそのドメイン全体もしくは部分の
任意の組合せを含み得る。これらのポリぺプチドはまた、上記の抗体の部分に融
合または結合され得、多量体を形成する。例えば、本発明のポリぺプチドに融合
されたＦｃ部分は、このＦｃ部分の間のジスルフィド結合を通して二量体を形成
し得る。より高度の多量体形態は、ポリぺプチドをＩｇＡおよびＩｇＭの部分に
融合させることによって作製され得る。本発明のポリぺプチドを抗体部分に融合
または結合させるための方法は、当該分野において公知である。例えば、米国特
許第５，３３６，６０３号；同第５，６２２，９２９号；同第５，３５９，０４
６号；同第５，３４９，０５３号；同第５，４４７，８５１号；同第５，１１２
，９４６号；ＥＰ ３０７，４３４；ＥＰ ３６７，１６６；ＰＣＴ公開ＷＯ９
６／０４３８８；ＷＯ９１／０６５７０；Ａｓｈｋｅｎａｚｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８８：１０５３５−１０５３９（１９９１
）；Ｚｈｅｎｇら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４：５５９０−５６００（１９９
５）；およびＶｉｌら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９
：１１３３７−１１３４１（１９９２）（前記の参考文献はその全体が参考とし
て援用される）を参照のこと。
発明のポリぺプチドを含む組成物を含む。例えば、本発明のポリぺプチドは、抗
体のＦｃ領域、またはその部分に融合または結合され得る。本発明のポリぺプチ
ドに融合されたこの抗体の部分は、定常領域、ヒンジ領域、ＣＨ１ドメイン、Ｃ
Ｈ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、またはそのドメイン全体もしくは部分の
任意の組合せを含み得る。これらのポリぺプチドはまた、上記の抗体の部分に融
合または結合され得、多量体を形成する。例えば、本発明のポリぺプチドに融合
されたＦｃ部分は、このＦｃ部分の間のジスルフィド結合を通して二量体を形成
し得る。より高度の多量体形態は、ポリぺプチドをＩｇＡおよびＩｇＭの部分に
融合させることによって作製され得る。本発明のポリぺプチドを抗体部分に融合
または結合させるための方法は、当該分野において公知である。例えば、米国特
許第５，３３６，６０３号；同第５，６２２，９２９号；同第５，３５９，０４
６号；同第５，３４９，０５３号；同第５，４４７，８５１号；同第５，１１２
，９４６号；ＥＰ ３０７，４３４；ＥＰ ３６７，１６６；ＰＣＴ公開ＷＯ９
６／０４３８８；ＷＯ９１／０６５７０；Ａｓｈｋｅｎａｚｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８８：１０５３５−１０５３９（１９９１
）；Ｚｈｅｎｇら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４：５５９０−５６００（１９９
５）；およびＶｉｌら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９
：１１３３７−１１３４１（１９９２）（前記の参考文献はその全体が参考とし
て援用される）を参照のこと。
【０２６０】
上記で議論されるように、ポリぺプチド、ポリぺプチドフラグメント、または
、配列番号２および／または４の改変体に対応するポリぺプチドは、このポリぺ
プチドのインビボ半減期を増大させるため、または当該分野で公知の方法を使用
する免疫学的アッセイにおいて使用するために、上記の抗体部分に融合または結
合体化され得る。さらに、配列番号２および／または４に対応するポリぺプチド
を、上記の抗体部分に融合または結合体化させて、精製を容易にし得る。１つの
報告された例は、ヒトＣＤ４ポリペプチドの最初の２つのドメイン、および哺乳
動物の免疫グロブリンの重鎖または軽鎖の定常領域の種々のドメインからなるキ
メラタンパク質を記載している（ＥＰ ３９４，８２７；Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ
ら、Ｎａｔｕｒｅ ３３１：８４−８６（１９８８））。ジスルフィド連結二量
体構造（ＩｇＧに起因する）を有する抗体に融合または結合体化される本発明の
ポリぺプチドもまた、単量体分泌タンパク質またはタンパク質フラグメント単独
よりも、他の分子に結合しそして中和するのにさらに効率的であり得る（Ｆｏｕ
ｎｔｏｕｌａｋｉｓら、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：３９５８−３９６４（１
９９５））。多くの場合、融合タンパク質のＦｃ部分は、治療および診断におい
て有益であり、従って、例えば、改良された薬物動態学的な特性を生じ得る（Ｅ
Ｐ Ａ ２３２，２６２）。あるいは、融合タンパク質が発現され、検出され、
そして精製された後に、Ｆｃ部分を欠失させることが望ましい。例えば、融合タ
ンパク質が免疫化のための抗原として使用される場合、Ｆｃ部分は、治療および
診断を妨害し得る。例えば、薬物の発見において、ｈＩＬ−５レセプターのよう
なヒトタンパク質は、ｈＩＬ−５のアンタゴニストを同定するための高処理能力
スクリーニングアッセイの目的のためにＦｃ部分と融合されてきた（Ｂｅｎｎｅ
ｔｔら、Ｊ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ８：５２−５８（
１９９５）；Ｊｏｈａｎｓｏｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：９４５９
−９４７１（１９９５）を参照のこと）。
、配列番号２および／または４の改変体に対応するポリぺプチドは、このポリぺ
プチドのインビボ半減期を増大させるため、または当該分野で公知の方法を使用
する免疫学的アッセイにおいて使用するために、上記の抗体部分に融合または結
合体化され得る。さらに、配列番号２および／または４に対応するポリぺプチド
を、上記の抗体部分に融合または結合体化させて、精製を容易にし得る。１つの
報告された例は、ヒトＣＤ４ポリペプチドの最初の２つのドメイン、および哺乳
動物の免疫グロブリンの重鎖または軽鎖の定常領域の種々のドメインからなるキ
メラタンパク質を記載している（ＥＰ ３９４，８２７；Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ
ら、Ｎａｔｕｒｅ ３３１：８４−８６（１９８８））。ジスルフィド連結二量
体構造（ＩｇＧに起因する）を有する抗体に融合または結合体化される本発明の
ポリぺプチドもまた、単量体分泌タンパク質またはタンパク質フラグメント単独
よりも、他の分子に結合しそして中和するのにさらに効率的であり得る（Ｆｏｕ
ｎｔｏｕｌａｋｉｓら、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：３９５８−３９６４（１
９９５））。多くの場合、融合タンパク質のＦｃ部分は、治療および診断におい
て有益であり、従って、例えば、改良された薬物動態学的な特性を生じ得る（Ｅ
Ｐ Ａ ２３２，２６２）。あるいは、融合タンパク質が発現され、検出され、
そして精製された後に、Ｆｃ部分を欠失させることが望ましい。例えば、融合タ
ンパク質が免疫化のための抗原として使用される場合、Ｆｃ部分は、治療および
診断を妨害し得る。例えば、薬物の発見において、ｈＩＬ−５レセプターのよう
なヒトタンパク質は、ｈＩＬ−５のアンタゴニストを同定するための高処理能力
スクリーニングアッセイの目的のためにＦｃ部分と融合されてきた（Ｂｅｎｎｅ
ｔｔら、Ｊ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ８：５２−５８（
１９９５）；Ｊｏｈａｎｓｏｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：９４５９
−９４７１（１９９５）を参照のこと）。
【０２６１】
さらに、本発明の抗体またはそのフラグメントは、精製を容易にするペプチド
のような、マーカー配列に融合され得る。好ましい実施形態において、マーカー
アミノ酸配列は、とりわけヘキサ−ヒスチジンペプチド（例えば、ｐＱＥベクタ
ー（ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．，９２５９ Ｅｔｏｎ Ａｖｅｎｕｅ，Ｃｈａｔｓ
ｗｏｒｔｈ，ＣＡ，９１３１１）において提供されるタグ）であり、これらの多
くのマーカーアミノ酸配列が市販されている。例えば、Ｇｅｎｔｚら、Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：８２１−８２４（１９８９）に
記載されるように、ヘキサ−ヒスチジンは、融合タンパク質の都合の良い精製を
提供する。精製のために有用な他のペプチドタグは、インフルエンザ赤血球凝集
素タンパク質由来のエピトープに対応する「ＨＡ」タグ（Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅ
ｌｌ ３７：７６７（１９８４））、および「ｆｌａｇ」タグを含むが、これに
限定されない。
のような、マーカー配列に融合され得る。好ましい実施形態において、マーカー
アミノ酸配列は、とりわけヘキサ−ヒスチジンペプチド（例えば、ｐＱＥベクタ
ー（ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．，９２５９ Ｅｔｏｎ Ａｖｅｎｕｅ，Ｃｈａｔｓ
ｗｏｒｔｈ，ＣＡ，９１３１１）において提供されるタグ）であり、これらの多
くのマーカーアミノ酸配列が市販されている。例えば、Ｇｅｎｔｚら、Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：８２１−８２４（１９８９）に
記載されるように、ヘキサ−ヒスチジンは、融合タンパク質の都合の良い精製を
提供する。精製のために有用な他のペプチドタグは、インフルエンザ赤血球凝集
素タンパク質由来のエピトープに対応する「ＨＡ」タグ（Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅ
ｌｌ ３７：７６７（１９８４））、および「ｆｌａｇ」タグを含むが、これに
限定されない。
【０２６２】
本発明は、診断剤または治療剤に結合体化される、抗体またはそのフラグメン
トをさらに含む。抗体は、例えば、臨床上の試験手順（例えば、所定の処置レジ
メン（ｒｅｇｉｍｅｎ）の効力を決定するため）の一部として、腫瘍の発生また
は進行をモニターするために、診断的に使用され得る。検出は、抗体を検出可能
な物質とカップリングさせることによって容易にされ得る。検出可能な物質の例
としては、種々の酵素、補欠分子団、蛍光物質、発光物質、生物発光物質、放射
性物質、種々の陽電子放射断層撮影を使用する陽電子放射金属、および非放射性
常磁性金属イオン、が挙げられる。この検出可能な物質は、抗体（またはそのフ
ラグメント）に対して、直接的または間接的のいずれかで、当該分野で公知の技
術を使用して媒介物（例えば、当該分野で公知のリンカーなど）を介して、連結
または結合体化され得る。例えば、本発明に従う診断薬としての使用のための抗
体に結合体化され得る金属イオンに関しては、米国特許第４，７４１，９００号
を参照のこと。適切な酵素の例としては、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカ
リホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、またはアセチルコリンエステラーゼ
が挙げられ；適切な補欠分子団複合体の例としては、ストレプトアビジン／ビオ
チンおよびアビジン／ビオチンが挙げられ；適切な蛍光物質の例としては、ウン
ベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミ
ン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、ダンシルクロリドまたはフィ
コエリトリンが挙げられ；発光物質の例としては、ルミノールが挙げられ；生物
発光物質の例としては、ルシフェラーゼ、ルシフェリンおよびエクオリンが挙げ
られ；ならびに、適切な放射性物質の例としては、125Ｉ、131Ｉ、111Ｉｎまた
は99Ｔｃが挙げられる。
トをさらに含む。抗体は、例えば、臨床上の試験手順（例えば、所定の処置レジ
メン（ｒｅｇｉｍｅｎ）の効力を決定するため）の一部として、腫瘍の発生また
は進行をモニターするために、診断的に使用され得る。検出は、抗体を検出可能
な物質とカップリングさせることによって容易にされ得る。検出可能な物質の例
としては、種々の酵素、補欠分子団、蛍光物質、発光物質、生物発光物質、放射
性物質、種々の陽電子放射断層撮影を使用する陽電子放射金属、および非放射性
常磁性金属イオン、が挙げられる。この検出可能な物質は、抗体（またはそのフ
ラグメント）に対して、直接的または間接的のいずれかで、当該分野で公知の技
術を使用して媒介物（例えば、当該分野で公知のリンカーなど）を介して、連結
または結合体化され得る。例えば、本発明に従う診断薬としての使用のための抗
体に結合体化され得る金属イオンに関しては、米国特許第４，７４１，９００号
を参照のこと。適切な酵素の例としては、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカ
リホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、またはアセチルコリンエステラーゼ
が挙げられ；適切な補欠分子団複合体の例としては、ストレプトアビジン／ビオ
チンおよびアビジン／ビオチンが挙げられ；適切な蛍光物質の例としては、ウン
ベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミ
ン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、ダンシルクロリドまたはフィ
コエリトリンが挙げられ；発光物質の例としては、ルミノールが挙げられ；生物
発光物質の例としては、ルシフェラーゼ、ルシフェリンおよびエクオリンが挙げ
られ；ならびに、適切な放射性物質の例としては、125Ｉ、131Ｉ、111Ｉｎまた
は99Ｔｃが挙げられる。
【０２６３】
さらに、抗体またはそのフラグメントは、治療用部分（例えば細胞毒（例えば
細胞増殖抑制性もしくは細胞殺傷性の薬剤））、治療剤または放射性金属イオン
（例えば、α−エミッタ−（例えば２１３Ｂｉ）など）に結合体化され得る。細
胞毒または細胞傷害性薬剤は、細胞に対して有害な任意の薬剤を含む。例として
は、パクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｏｌ）、サイトカラシンＢ、グラミシジ
ンＤ、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テニポシド（
ｔｅｎｏｐｏｓｉｄｅ）、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン（ｃｏ
ｌｃｈｉｃｉｎ）、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシ
ンジオン（ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ ａｎｔｈｒａｃｉｎ ｄｉｏｎｅ）、ミトキサ
ントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１−デヒドロテストステロン
、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロ
ール、およびピューロマイシン、ならびにそれらのアナログまたはホモログが挙
げられる。治療剤は、代謝拮抗物質（例えば、メトトレキサート、６−メルカプ
トプリン、６−チオグアニン、シタラビン、５−フルオロウラシルデカルバジン
（５−ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ）、アルキル化剤（
例えば、メクロレタミン、チオエパ（ｔｈｉｏｅｐａ）クロラムブシル、メルフ
ァラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）およびロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホス
ファミド（ｃｙｃｌｏｔｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、ブスルファン、ジブロモマン
ニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ、ならびにｃｉｓ−ジクロロ
ジアミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）シスプラチン）、アントラサイクリン（例えば
、ダウノルビシン（以前はダウノマイシン）およびドキソルビシン）、抗生物質
（例えば、ダクチノマイシン（以前はアクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミ
トラマイシン、およびアントラマイシン（ａｎｔｈｒａｍｙｃｉｎ）（ＡＭＣ）
）、ならびに抗有糸分裂剤（例えばビンクリスチンおよびビンブラスチン）、を
含むが、それらに限定されない。
細胞増殖抑制性もしくは細胞殺傷性の薬剤））、治療剤または放射性金属イオン
（例えば、α−エミッタ−（例えば２１３Ｂｉ）など）に結合体化され得る。細
胞毒または細胞傷害性薬剤は、細胞に対して有害な任意の薬剤を含む。例として
は、パクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｏｌ）、サイトカラシンＢ、グラミシジ
ンＤ、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テニポシド（
ｔｅｎｏｐｏｓｉｄｅ）、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン（ｃｏ
ｌｃｈｉｃｉｎ）、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシ
ンジオン（ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ ａｎｔｈｒａｃｉｎ ｄｉｏｎｅ）、ミトキサ
ントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１−デヒドロテストステロン
、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロ
ール、およびピューロマイシン、ならびにそれらのアナログまたはホモログが挙
げられる。治療剤は、代謝拮抗物質（例えば、メトトレキサート、６−メルカプ
トプリン、６−チオグアニン、シタラビン、５−フルオロウラシルデカルバジン
（５−ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ）、アルキル化剤（
例えば、メクロレタミン、チオエパ（ｔｈｉｏｅｐａ）クロラムブシル、メルフ
ァラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）およびロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホス
ファミド（ｃｙｃｌｏｔｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、ブスルファン、ジブロモマン
ニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ、ならびにｃｉｓ−ジクロロ
ジアミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）シスプラチン）、アントラサイクリン（例えば
、ダウノルビシン（以前はダウノマイシン）およびドキソルビシン）、抗生物質
（例えば、ダクチノマイシン（以前はアクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミ
トラマイシン、およびアントラマイシン（ａｎｔｈｒａｍｙｃｉｎ）（ＡＭＣ）
）、ならびに抗有糸分裂剤（例えばビンクリスチンおよびビンブラスチン）、を
含むが、それらに限定されない。
【０２６４】
本発明の結合体は、所定の生物学的応答を改変するために使用され得、治療剤
または薬物部分は、古典的な化学的治療剤に限定されると解釈されない。例えば
、薬物部分は、所望の生物学的活性を有するタンパク質またはポリぺプチドであ
り得る。このようなタンパク質としては、例えば、毒素（例えばアブリン、リシ
ンＡ、シュードモナス外毒素、またはジフテリア毒素）；タンパク質（例えば、
腫瘍壊死因子、ａ−インターフェロン、β−インターフェロン、神経増殖因子、
血小板由来増殖因子、組織プラスミノゲンアクチベーター、アポトーシス性因子
（例えば、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β、ＡＩＭ Ｉ（国際公開第ＷＯ９７／３３８
９９号を参照のこと）、ＡＩＭ ＩＩ（国際公開第ＷＯ９７／３４９１１号を参
照のこと）、Ｆａｓリガンド（Ｔａｋａｈａｓｈｉら、Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
．６：１５６７−１５７４（１９９４））、ＶＥＧＩ（国際公開第ＷＯ９９／２
３１０５号を参照のこと））、血栓症薬もしくは抗脈管形成薬（例えば、アンジ
オスタチンもしくはエンドスタチン）；または生物学的応答改変剤（例えばリン
ホカイン、インターロイキン−１（「ＩＬ−１」）、インターロイキン−２（「
ＩＬ−２」）、インターロイキン−６（「ＩＬ−６」）、顆粒球マクロファージ
コロニー刺激因子（「ＧＭ−ＣＳＦ」）、顆粒球コロニー刺激因子（「Ｇ−ＣＳ
Ｆ」）、または他の増殖因子など）、が挙げられ得る。
または薬物部分は、古典的な化学的治療剤に限定されると解釈されない。例えば
、薬物部分は、所望の生物学的活性を有するタンパク質またはポリぺプチドであ
り得る。このようなタンパク質としては、例えば、毒素（例えばアブリン、リシ
ンＡ、シュードモナス外毒素、またはジフテリア毒素）；タンパク質（例えば、
腫瘍壊死因子、ａ−インターフェロン、β−インターフェロン、神経増殖因子、
血小板由来増殖因子、組織プラスミノゲンアクチベーター、アポトーシス性因子
（例えば、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β、ＡＩＭ Ｉ（国際公開第ＷＯ９７／３３８
９９号を参照のこと）、ＡＩＭ ＩＩ（国際公開第ＷＯ９７／３４９１１号を参
照のこと）、Ｆａｓリガンド（Ｔａｋａｈａｓｈｉら、Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
．６：１５６７−１５７４（１９９４））、ＶＥＧＩ（国際公開第ＷＯ９９／２
３１０５号を参照のこと））、血栓症薬もしくは抗脈管形成薬（例えば、アンジ
オスタチンもしくはエンドスタチン）；または生物学的応答改変剤（例えばリン
ホカイン、インターロイキン−１（「ＩＬ−１」）、インターロイキン−２（「
ＩＬ−２」）、インターロイキン−６（「ＩＬ−６」）、顆粒球マクロファージ
コロニー刺激因子（「ＧＭ−ＣＳＦ」）、顆粒球コロニー刺激因子（「Ｇ−ＣＳ
Ｆ」）、または他の増殖因子など）、が挙げられ得る。
【０２６５】
抗体はまた、固体支持体に付着させられ得、この固体支持体は、標的抗原の免
疫アッセイまたは精製に特に有用である。このような固体支持体としては、ガラ
ス、セルロース、ポリアクリルアミド、ナイロン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニ
ルまたはポリプロピレン、が挙げられるがそれらに限定されない。
疫アッセイまたは精製に特に有用である。このような固体支持体としては、ガラ
ス、セルロース、ポリアクリルアミド、ナイロン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニ
ルまたはポリプロピレン、が挙げられるがそれらに限定されない。
【０２６６】
このような治療部分を抗体に結合体化する技術は周知であり、例えば、Ａｒｎ
ｏｎら、「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｉｍｍｕｎ
ｏｔａｒｇｅｔｉｎｇ Ｏｆ Ｄｒｕｇｓ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐ
ｙ」Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔ
ｈｅｒａｐｙ、Ｒｅｉｓｆｅｌｄら（編）、２４３−５６頁（Ａｌａｎ Ｒ．Ｌ
ｉｓｓ，Ｉｎｃ．１９８５）；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍら、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ
Ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄ
ｅｌｉｖｅｒｙ（第２版）、Ｒｏｂｉｎｓｏｎら（編）、６２３−５３頁（Ｍａ
ｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．１９８７）；Ｔｈｏｒｐｅ、「Ａｎｔｉｂｏ
ｄｙ Ｃａｒｒｉｅｒｓ Ｏｆ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ａｇｅｎｔｓ Ｉｎ Ｃ
ａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ：Ａ Ｒｅｖｉｅｗ」Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎ
ｔｉｂｏｄｉｅｓ’８４：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ
Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｐｉｎｃｈｅｒａら（編）、４７５−５０６頁（１
９８５）；「Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｒｅｓｕｌｔｓ，Ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ｐｒ
ｏｓｐｅｃｔｉｖｅ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｕｓｅ Ｏｆ
Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ
ａｐｙ」Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ
Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｂａｌｄｗｉｎら（編）、３
０３−１６頁（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ １９８５）、およびＴｈｏｒｐ
ｅら、「Ｔｈｅ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｐｒ
ｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｔｏｘｉｎ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ
ｓ」、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．６２：１１９−５８（１９８２）を参照のこと
。
ｏｎら、「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｉｍｍｕｎ
ｏｔａｒｇｅｔｉｎｇ Ｏｆ Ｄｒｕｇｓ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐ
ｙ」Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔ
ｈｅｒａｐｙ、Ｒｅｉｓｆｅｌｄら（編）、２４３−５６頁（Ａｌａｎ Ｒ．Ｌ
ｉｓｓ，Ｉｎｃ．１９８５）；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍら、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ
Ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄ
ｅｌｉｖｅｒｙ（第２版）、Ｒｏｂｉｎｓｏｎら（編）、６２３−５３頁（Ｍａ
ｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．１９８７）；Ｔｈｏｒｐｅ、「Ａｎｔｉｂｏ
ｄｙ Ｃａｒｒｉｅｒｓ Ｏｆ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ａｇｅｎｔｓ Ｉｎ Ｃ
ａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ：Ａ Ｒｅｖｉｅｗ」Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎ
ｔｉｂｏｄｉｅｓ’８４：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ
Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｐｉｎｃｈｅｒａら（編）、４７５−５０６頁（１
９８５）；「Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｒｅｓｕｌｔｓ，Ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ｐｒ
ｏｓｐｅｃｔｉｖｅ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｕｓｅ Ｏｆ
Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ
ａｐｙ」Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ
Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｂａｌｄｗｉｎら（編）、３
０３−１６頁（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ １９８５）、およびＴｈｏｒｐ
ｅら、「Ｔｈｅ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｐｒ
ｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｔｏｘｉｎ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ
ｓ」、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．６２：１１９−５８（１９８２）を参照のこと
。
【０２６７】
あるいは、抗体は第二の抗体に結合され、米国特許第４，６７６，９８０号（
これは、その全体が本明細書に参考として援用される）においてＳｅｇａｌによ
る記載のような抗体異種結合体（ｈｅｔｅｒｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）を形成し得
る。
これは、その全体が本明細書に参考として援用される）においてＳｅｇａｌによ
る記載のような抗体異種結合体（ｈｅｔｅｒｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）を形成し得
る。
【０２６８】
単独、あるいは細胞傷害性因子および／またはサイトカインと組み合わせて投
与される、抗体に結合する治療部分を有するかまたは有さない抗体が、治療薬と
して使用され得る。
与される、抗体に結合する治療部分を有するかまたは有さない抗体が、治療薬と
して使用され得る。
【０２６９】
（免疫表現型分類（ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｉｎｇ））
本発明の抗体は、細胞株および生物学的サンプルの免疫表現型分類のために利
用され得る。本発明の遺伝子の翻訳生成物は、細胞特異的マーカーとして、ある
いはより詳細には、特定の細胞型の分化および／または成熟の種々の段階で差示
的に発現される細胞マーカーとして有用であり得る。特異的エピトープ、または
エピトープの組み合わせに対して指向されるモノクロナール抗体は、マーカーを
発現する細胞集団のスクリーニングを可能にする。種々の技術が、マーカーを発
現する細胞集団をスクリーニングするために、モノクロナール抗体を用いて利用
され得、そしてその技術には、抗体でコーティングされた磁気ビーズを用いる磁
気分離、固体マトリクス（すなわち、プレート）に付着した抗体を用いる「パン
ニング」、ならびにフローサイトメトリー（例えば、米国特許第５，９８５，６
６０号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎら、Ｃｅｌｌ，９６：７３７−４９（１９９９
）を参照のこと）が挙げられる。
用され得る。本発明の遺伝子の翻訳生成物は、細胞特異的マーカーとして、ある
いはより詳細には、特定の細胞型の分化および／または成熟の種々の段階で差示
的に発現される細胞マーカーとして有用であり得る。特異的エピトープ、または
エピトープの組み合わせに対して指向されるモノクロナール抗体は、マーカーを
発現する細胞集団のスクリーニングを可能にする。種々の技術が、マーカーを発
現する細胞集団をスクリーニングするために、モノクロナール抗体を用いて利用
され得、そしてその技術には、抗体でコーティングされた磁気ビーズを用いる磁
気分離、固体マトリクス（すなわち、プレート）に付着した抗体を用いる「パン
ニング」、ならびにフローサイトメトリー（例えば、米国特許第５，９８５，６
６０号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎら、Ｃｅｌｌ，９６：７３７−４９（１９９９
）を参照のこと）が挙げられる。
【０２７０】
これらの技術は、血液学的悪性腫瘍（すなわち、急性白血病患者における最少
残留疾患（ｍｉｎｉｍａｌ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｄｉｓｅａｓｅ）（ＭＲＤ））
および対宿主性移植片病（ＧＶＨＤ）を予防するための移植術における「非自己
」細胞と共に見出され得るような、細胞の特定集団のスクリーニングを可能にす
る。あるいは、これらの技術は、ヒト臍帯血において見出され得るような増殖お
よび／または分化を受け得る、造血幹細胞および先祖細胞のスクリーニングを可
能にする。
残留疾患（ｍｉｎｉｍａｌ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｄｉｓｅａｓｅ）（ＭＲＤ））
および対宿主性移植片病（ＧＶＨＤ）を予防するための移植術における「非自己
」細胞と共に見出され得るような、細胞の特定集団のスクリーニングを可能にす
る。あるいは、これらの技術は、ヒト臍帯血において見出され得るような増殖お
よび／または分化を受け得る、造血幹細胞および先祖細胞のスクリーニングを可
能にする。
【０２７１】
（抗体結合についてのアッセイ）
本発明の抗体は、当該分野において公知の任意の方法により、免疫特異的結合
についてアッセイされ得る。用いられ得る免疫アッセイとしては、いくつかのも
のについてだけ名称を挙げると、ウエスタンブロット、ラジオイムノアッセイ、
ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）、「サンドイッチ」免疫アッセイ、免
疫沈降アッセイ、沈降反応、ゲル拡散沈降反応、免疫拡散アッセイ、凝集アッセ
イ、補体結合アッセイ、免疫放射定量アッセイ、蛍光免疫アッセイ、プロテイン
Ａ免疫アッセイのような技術を用いる競合アッセイ系および非競合アッセイ系が
挙げられるが、これらに限定されない。このようなアッセイは慣用的であり、そ
して当該分野において周知である（例えば、その全体が本明細書中に参考として
援用される、Ａｕｓｕｂｅｌら編，１９９４，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏ
ｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌ
ｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照のこと）。例示的な免疫ア
ッセイが、以下に簡潔に記載される（しかし、これらは限定を目的とすることが
意図されない）。
についてアッセイされ得る。用いられ得る免疫アッセイとしては、いくつかのも
のについてだけ名称を挙げると、ウエスタンブロット、ラジオイムノアッセイ、
ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）、「サンドイッチ」免疫アッセイ、免
疫沈降アッセイ、沈降反応、ゲル拡散沈降反応、免疫拡散アッセイ、凝集アッセ
イ、補体結合アッセイ、免疫放射定量アッセイ、蛍光免疫アッセイ、プロテイン
Ａ免疫アッセイのような技術を用いる競合アッセイ系および非競合アッセイ系が
挙げられるが、これらに限定されない。このようなアッセイは慣用的であり、そ
して当該分野において周知である（例えば、その全体が本明細書中に参考として
援用される、Ａｕｓｕｂｅｌら編，１９９４，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏ
ｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌ
ｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照のこと）。例示的な免疫ア
ッセイが、以下に簡潔に記載される（しかし、これらは限定を目的とすることが
意図されない）。
【０２７２】
免疫沈降プロトコルは、一般に、タンパク質ホスファターゼインヒビターおよ
び／またはプロテアーゼインヒビター（例えば、ＥＤＴＡ、ＰＭＳＦ、アプロチ
ニン、バナジン酸ナトリウム）を補充したＲＩＰＡ緩衝液（１％ ＮＰ−４０ま
たはＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、１％ デオキシコール酸ナトリウム、０．１％
ＳＤＳ、０．１５Ｍ ＮａＣｌ、０．０１Ｍ リン酸ナトリウム（ｐＨ７．２
）、１％ Ｔｒａｓｙｌｏｌ）のような溶解緩衝液中で、細胞の集団を溶解する
工程、目的の抗体を細胞溶解物に添加する工程、一定時間（例えば、１〜４時間
）４℃でインキュベートする工程、プロテインＡセファロースビーズおよび／ま
たはプロテインＧセファロースビーズを細胞溶解物に添加する工程、約１時間以
上４℃でインキュベートする工程、溶解緩衝液中でビーズを洗浄する工程、およ
びＳＤＳ／サンプル緩衝液中にビーズを再懸濁する工程を包含する。目的の抗体
の、特定の抗原を免疫沈降する能力は、例えば、ウエスタンブロット分析により
、アッセイされ得る。当業者は、抗体の抗原への結合を増加するように、そして
バックグラウンドを減少させるように改変され得るパラメータ（例えば、セファ
ロースビーズを用いて細胞溶解物を事前にきれいにする工程）に関して、認め得
る。免疫沈降プロトコルに関するさらなる考察については、例えば、Ａｕｓｕｂ
ｅｌら編，１９９４、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｉｎｃ
．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１０．１６．１を参照のこと。
び／またはプロテアーゼインヒビター（例えば、ＥＤＴＡ、ＰＭＳＦ、アプロチ
ニン、バナジン酸ナトリウム）を補充したＲＩＰＡ緩衝液（１％ ＮＰ−４０ま
たはＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、１％ デオキシコール酸ナトリウム、０．１％
ＳＤＳ、０．１５Ｍ ＮａＣｌ、０．０１Ｍ リン酸ナトリウム（ｐＨ７．２
）、１％ Ｔｒａｓｙｌｏｌ）のような溶解緩衝液中で、細胞の集団を溶解する
工程、目的の抗体を細胞溶解物に添加する工程、一定時間（例えば、１〜４時間
）４℃でインキュベートする工程、プロテインＡセファロースビーズおよび／ま
たはプロテインＧセファロースビーズを細胞溶解物に添加する工程、約１時間以
上４℃でインキュベートする工程、溶解緩衝液中でビーズを洗浄する工程、およ
びＳＤＳ／サンプル緩衝液中にビーズを再懸濁する工程を包含する。目的の抗体
の、特定の抗原を免疫沈降する能力は、例えば、ウエスタンブロット分析により
、アッセイされ得る。当業者は、抗体の抗原への結合を増加するように、そして
バックグラウンドを減少させるように改変され得るパラメータ（例えば、セファ
ロースビーズを用いて細胞溶解物を事前にきれいにする工程）に関して、認め得
る。免疫沈降プロトコルに関するさらなる考察については、例えば、Ａｕｓｕｂ
ｅｌら編，１９９４、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｉｎｃ
．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１０．１６．１を参照のこと。
【０２７３】
ウエスタンブロット分析は、一般に、タンパク質サンプルを調製する工程、ポ
リアクリルアミドゲル（例えば、抗原の分子量に依存した８％〜２０％ ＳＤＳ
−ＰＡＧＥ）中でのそのタンパク質サンプルの電気泳動、そのタンパク質サンプ
ルをそのポリアクリルアミドゲルからニトロセルロース、ＰＶＤＦまたはナイロ
ンのような膜に移す工程、ブロッキング溶液（例えば、３％ ＢＳＡまたは脱脂
粉乳を有するＰＢＳ）中でその膜をブロックする工程、洗浄緩衝液（例えば、Ｐ
ＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ２０）中でその膜を洗浄する工程、ブロッキング緩衝液中で
希釈された一次抗体（目的の抗体）を用いてその膜をブロックする工程、洗浄緩
衝液中でその膜を洗浄する工程、ブロッキング緩衝液中で希釈された酵素基質（
例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼまたはアルカリホスファターゼ）あるいは
放射性分子（例えば、32Ｐまたは125Ｉ）に結合した二次抗体（一次抗体を認識
する、例えば、抗ヒト抗体）を用いて、その膜をブロックする工程、洗浄緩衝液
中でその膜を洗浄する工程、ならびにその抗原の存在を検出する工程を包含する
。当業者は、検出されるシグナルを増加させるように、そしてバックグラウンド
ノイズを減少させるように改変され得るパラメータに関して、認め得る。ウエス
タンブロットプロトコルに関するさらなる考察については、例えば、Ａｕｓｕｂ
ｅｌら編，１９９４，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ
．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１０．８．１を参照のこと。
リアクリルアミドゲル（例えば、抗原の分子量に依存した８％〜２０％ ＳＤＳ
−ＰＡＧＥ）中でのそのタンパク質サンプルの電気泳動、そのタンパク質サンプ
ルをそのポリアクリルアミドゲルからニトロセルロース、ＰＶＤＦまたはナイロ
ンのような膜に移す工程、ブロッキング溶液（例えば、３％ ＢＳＡまたは脱脂
粉乳を有するＰＢＳ）中でその膜をブロックする工程、洗浄緩衝液（例えば、Ｐ
ＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ２０）中でその膜を洗浄する工程、ブロッキング緩衝液中で
希釈された一次抗体（目的の抗体）を用いてその膜をブロックする工程、洗浄緩
衝液中でその膜を洗浄する工程、ブロッキング緩衝液中で希釈された酵素基質（
例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼまたはアルカリホスファターゼ）あるいは
放射性分子（例えば、32Ｐまたは125Ｉ）に結合した二次抗体（一次抗体を認識
する、例えば、抗ヒト抗体）を用いて、その膜をブロックする工程、洗浄緩衝液
中でその膜を洗浄する工程、ならびにその抗原の存在を検出する工程を包含する
。当業者は、検出されるシグナルを増加させるように、そしてバックグラウンド
ノイズを減少させるように改変され得るパラメータに関して、認め得る。ウエス
タンブロットプロトコルに関するさらなる考察については、例えば、Ａｕｓｕｂ
ｅｌら編，１９９４，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ
．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１０．８．１を参照のこと。
【０２７４】
ＥＬＩＳＡは、抗原を調製する工程、９６ウェルマイクロタイタープレートの
ウェルをその抗原でコーティングする工程、酵素基質（例えば、西洋ワサビペル
オキシダーゼまたはアルカリホスファターゼ）のような検出可能な化合物に結合
体化した目的の抗体をそのウェルに添加し、そして一定時間インキュベートする
工程、およびその抗原の存在を検出する工程を包含する。ＥＬＩＳＡにおいて、
目的の抗体は、検出可能な化合物に結合している必要はない；その代わり、検出
可能な化合物に結合体化した第二の抗体（これは、目的の抗体を認識する）が、
ウェルに添加され得る。さらに、ウェルを抗原でコーティングする代わりに、抗
体がウェルにコーティングされ得る。この場合、検出可能な化合物に結合体化し
た二次抗体が、コーティングされたウェルへの目的の抗原の添加に続いて、添加
され得る。当業者は、検出されるシグナルを増加させるように改変され得るパラ
メータ、および当該分野において公知のＥＬＩＳＡの他のバリエーションに関し
て、認め得る。ＥＬＩＳＡに関するさらなる考察については、例えば、Ａｕｓｕ
ｂｅｌら編，１９９４，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅ
ｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎ
ｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１１．２．１を参照のこと。
ウェルをその抗原でコーティングする工程、酵素基質（例えば、西洋ワサビペル
オキシダーゼまたはアルカリホスファターゼ）のような検出可能な化合物に結合
体化した目的の抗体をそのウェルに添加し、そして一定時間インキュベートする
工程、およびその抗原の存在を検出する工程を包含する。ＥＬＩＳＡにおいて、
目的の抗体は、検出可能な化合物に結合している必要はない；その代わり、検出
可能な化合物に結合体化した第二の抗体（これは、目的の抗体を認識する）が、
ウェルに添加され得る。さらに、ウェルを抗原でコーティングする代わりに、抗
体がウェルにコーティングされ得る。この場合、検出可能な化合物に結合体化し
た二次抗体が、コーティングされたウェルへの目的の抗原の添加に続いて、添加
され得る。当業者は、検出されるシグナルを増加させるように改変され得るパラ
メータ、および当該分野において公知のＥＬＩＳＡの他のバリエーションに関し
て、認め得る。ＥＬＩＳＡに関するさらなる考察については、例えば、Ａｕｓｕ
ｂｅｌら編，１９９４，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅ
ｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎ
ｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１１．２．１を参照のこと。
【０２７５】
抗原に対する抗体の結合親和性および抗体−抗原相互作用のオフレート（ｏｆ
ｆ−ｒａｔｅ）が、競合結合アッセイにより決定され得る。競合結合アッセイの
一つの例は、ラジオイムノアッセイであり、ラジオイムノアッセイは、漸増量の
非標識抗原の存在下での、標識抗原（例えば、3Ｈまたは125Ｉ）の目的の抗体と
のインキュベーション、および標識抗原に結合した抗体の検出を含む。特定の抗
原に対する目的の抗体の親和性、および結合オフレートは、スキャッチャードプ
ロット分析によるデータから決定され得る。二次抗体との競合はまた、ラジオイ
ムノアッセイを用いて決定され得る。この場合、抗原は、漸増量の非標識の二次
抗体の存在下で、標識化合物（例えば、3Ｈまたは125Ｉ）に結合体化した目的の
抗体とともにインキュベートされる。
ｆ−ｒａｔｅ）が、競合結合アッセイにより決定され得る。競合結合アッセイの
一つの例は、ラジオイムノアッセイであり、ラジオイムノアッセイは、漸増量の
非標識抗原の存在下での、標識抗原（例えば、3Ｈまたは125Ｉ）の目的の抗体と
のインキュベーション、および標識抗原に結合した抗体の検出を含む。特定の抗
原に対する目的の抗体の親和性、および結合オフレートは、スキャッチャードプ
ロット分析によるデータから決定され得る。二次抗体との競合はまた、ラジオイ
ムノアッセイを用いて決定され得る。この場合、抗原は、漸増量の非標識の二次
抗体の存在下で、標識化合物（例えば、3Ｈまたは125Ｉ）に結合体化した目的の
抗体とともにインキュベートされる。
【０２７６】
（本発明の抗体の治療用途）
本発明はさらに、抗体ベースの治療に関し、この治療は、１つ以上の開示され
た疾患、障害、または状態を処置するために、動物、好ましくは哺乳動物、そし
て最も好ましくはヒトの患者に、本発明の抗体を投与する工程を包含する。本発
明の治療化合物としては、本発明の抗体（本明細書中に記載されるような、それ
らのフラグメント、アナログおよび誘導体を含む）ならびに本発明の抗体をコー
ドする核酸（本明細書中に記載されるような、それらのフラグメント、アナログ
および誘導体ならびに抗イディオタイプ抗体を含む）が挙げられるが、これらに
限定されない。本発明の抗体は、本発明のポリペプチドの異常な発現および／ま
たは活性に関連した疾患、障害または状態（本明細書中に記載される任意の１つ
以上の疾患、障害、または状態を含むがこれらに限定されない）を処置、阻害ま
たは予防するために使用され得る。本発明のポリペプチドの異常な発現および／
または活性に関連した疾患、障害または状態の処置および／または予防は、それ
らの疾患、障害または状態に関連した症状を緩和する工程を含むが、これに限定
されない。本発明の抗体は、当該分野で公知であるか、または本明細書中に記載
されるように、薬学的に受容可能な組成物中に提供され得る。
た疾患、障害、または状態を処置するために、動物、好ましくは哺乳動物、そし
て最も好ましくはヒトの患者に、本発明の抗体を投与する工程を包含する。本発
明の治療化合物としては、本発明の抗体（本明細書中に記載されるような、それ
らのフラグメント、アナログおよび誘導体を含む）ならびに本発明の抗体をコー
ドする核酸（本明細書中に記載されるような、それらのフラグメント、アナログ
および誘導体ならびに抗イディオタイプ抗体を含む）が挙げられるが、これらに
限定されない。本発明の抗体は、本発明のポリペプチドの異常な発現および／ま
たは活性に関連した疾患、障害または状態（本明細書中に記載される任意の１つ
以上の疾患、障害、または状態を含むがこれらに限定されない）を処置、阻害ま
たは予防するために使用され得る。本発明のポリペプチドの異常な発現および／
または活性に関連した疾患、障害または状態の処置および／または予防は、それ
らの疾患、障害または状態に関連した症状を緩和する工程を含むが、これに限定
されない。本発明の抗体は、当該分野で公知であるか、または本明細書中に記載
されるように、薬学的に受容可能な組成物中に提供され得る。
【０２７７】
本発明の抗体が治療的に使用され得る方法の要約は、身体内で局所的にまたは
全身的に、あるいは（例えば、補体（ＣＤＣ）により、またはエフェクター細胞
（ＡＤＣＣ）により媒介されるような）抗体の直接的細胞傷害性により、本発明
のポリヌクレオチドまたはポリペプチドを結合させることを含む。これらのアプ
ローチのいくつかは、より詳細に以下に記載される。本明細書中で提供される教
示を与えられれば、当業者は、過度の実験なしに、診断上の目的、モニタリング
の目的あるいは治療上の目的のために、本発明の抗体を使用する方法を理解する
。
全身的に、あるいは（例えば、補体（ＣＤＣ）により、またはエフェクター細胞
（ＡＤＣＣ）により媒介されるような）抗体の直接的細胞傷害性により、本発明
のポリヌクレオチドまたはポリペプチドを結合させることを含む。これらのアプ
ローチのいくつかは、より詳細に以下に記載される。本明細書中で提供される教
示を与えられれば、当業者は、過度の実験なしに、診断上の目的、モニタリング
の目的あるいは治療上の目的のために、本発明の抗体を使用する方法を理解する
。
【０２７８】
本発明の抗体は、例えば、抗体と相互作用するエフェクター細胞の数または活
性を増加させるように作用する他のモノクローナル抗体またはキメラ抗体、ある
いはリンホカインまたは造血増殖因子（例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−３およびＩＬ
−７のような）と組み合わせて有利に利用され得る。
性を増加させるように作用する他のモノクローナル抗体またはキメラ抗体、ある
いはリンホカインまたは造血増殖因子（例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−３およびＩＬ
−７のような）と組み合わせて有利に利用され得る。
【０２７９】
本発明の抗体は、単独で、または他の型の処置（例えば、放射線療法、化学療
法、ホルモン治療、免疫治療および抗腫瘍剤）との組み合わせで投与され得る。
一般的に、（抗体の場合には）患者の種と同じ種である種起源または種反応性の
生成物の投与が好ましい。従って、好ましい実施形態においては、ヒトの抗体、
フラグメント誘導体、アナログ、または核酸が、治療または予防のために、ヒト
の患者に投与される。
法、ホルモン治療、免疫治療および抗腫瘍剤）との組み合わせで投与され得る。
一般的に、（抗体の場合には）患者の種と同じ種である種起源または種反応性の
生成物の投与が好ましい。従って、好ましい実施形態においては、ヒトの抗体、
フラグメント誘導体、アナログ、または核酸が、治療または予防のために、ヒト
の患者に投与される。
【０２８０】
本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド（そのフラグメントを含む）に
関する免疫アッセイ、およびそれらに関連した障害の治療の両方のために、本発
明のポリペプチドまたはポリヌクレオチドに対する、高親和性および／または強
力な、インビボでの阻害抗体および／または中和抗体、それらのフラグメント、
またはそれらの領域を使用することが好ましい。このような抗体、フラグメント
、または領域は、好ましくは、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド（
そのフラグメントを含む）に対して親和性を有する。好ましい結合親和性として
は、５×１０-2Ｍ、１０-2Ｍ、５×１０-3Ｍ、１０-3Ｍ、５×１０-4Ｍ、１０-4 Ｍ、５×１０-5Ｍ、１０-5Ｍ、５×１０-6Ｍ、１０-6Ｍ、５×１０-7Ｍ、１０-7 Ｍ、５×１０-8Ｍ、１０-8Ｍ、５×１０-9Ｍ、１０-9Ｍ、５×１０-10Ｍ、１０- 10 Ｍ、５×１０-11Ｍ、１０-11Ｍ、５×１０-12Ｍ、１０-12Ｍ、５×１０-13Ｍ
、１０-13Ｍ、５×１０-14Ｍ、１０-14Ｍ、５×１０-15Ｍ、および１０-15Ｍよ
り小さい解離定数すなわちＫｄを有する結合親和性が挙げられる。
関する免疫アッセイ、およびそれらに関連した障害の治療の両方のために、本発
明のポリペプチドまたはポリヌクレオチドに対する、高親和性および／または強
力な、インビボでの阻害抗体および／または中和抗体、それらのフラグメント、
またはそれらの領域を使用することが好ましい。このような抗体、フラグメント
、または領域は、好ましくは、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド（
そのフラグメントを含む）に対して親和性を有する。好ましい結合親和性として
は、５×１０-2Ｍ、１０-2Ｍ、５×１０-3Ｍ、１０-3Ｍ、５×１０-4Ｍ、１０-4 Ｍ、５×１０-5Ｍ、１０-5Ｍ、５×１０-6Ｍ、１０-6Ｍ、５×１０-7Ｍ、１０-7 Ｍ、５×１０-8Ｍ、１０-8Ｍ、５×１０-9Ｍ、１０-9Ｍ、５×１０-10Ｍ、１０- 10 Ｍ、５×１０-11Ｍ、１０-11Ｍ、５×１０-12Ｍ、１０-12Ｍ、５×１０-13Ｍ
、１０-13Ｍ、５×１０-14Ｍ、１０-14Ｍ、５×１０-15Ｍ、および１０-15Ｍよ
り小さい解離定数すなわちＫｄを有する結合親和性が挙げられる。
【０２８１】
（診断および画像化）
目的のポリペプチドに特異的に結合する標識化抗体、ならびにその誘導体およ
びそのアナログが、診断目的のために使用されて、本発明のポリペプチドの異常
な発現および／または活性に関連する疾患、障害および／または状態を検出、診
断またはモニターし得る。本発明は、目的のポリペプチドの異常な発現の検出を
提供し、これは、（ａ）目的のポリペプチドに特異的な１つ以上の抗体を使用し
て、個体の細胞または体液中の目的のポリペプチドの発現をアッセイする工程、
および（ｂ）この遺伝子発現レベルと標準的な遺伝子発現のレベルを比較する工
程、を包含し、これによって、その標準的な発現レベルと比較されるアッセイさ
れたポリペプチド遺伝子発現レベルの増加または減少が、異常な発現を示す。
びそのアナログが、診断目的のために使用されて、本発明のポリペプチドの異常
な発現および／または活性に関連する疾患、障害および／または状態を検出、診
断またはモニターし得る。本発明は、目的のポリペプチドの異常な発現の検出を
提供し、これは、（ａ）目的のポリペプチドに特異的な１つ以上の抗体を使用し
て、個体の細胞または体液中の目的のポリペプチドの発現をアッセイする工程、
および（ｂ）この遺伝子発現レベルと標準的な遺伝子発現のレベルを比較する工
程、を包含し、これによって、その標準的な発現レベルと比較されるアッセイさ
れたポリペプチド遺伝子発現レベルの増加または減少が、異常な発現を示す。
【０２８２】
本発明は、障害を診断するための診断アッセイを提供し、このアッセイは、（
ａ）目的のポリペプチドに特異的な１つ以上の抗体を使用して、個体の細胞また
は体液中の目的のポリペプチドの発現をアッセイする工程、および（ｂ）この遺
伝子発現レベルと標準的な遺伝子発現のレベルを比較する工程、を包含し、これ
によって、その標準的な発現レベルと比較されるアッセイされたポリペプチド遺
伝子発現レベルの増加または減少が、特定の障害を示す。癌に関して、個体由来
の生検組織における比較的高い量の転写物の存在は、疾患の発生のための素因を
示し得るか、または実際の臨床症状の出現前に疾患を検出するための手段を提供
し得る。この型のより決定的な診断は、保健専門家に予防手段を使用させること
、または早期の積極的な処置を可能にし得、これにより、癌の発生またはさらな
る進行を予防する。
ａ）目的のポリペプチドに特異的な１つ以上の抗体を使用して、個体の細胞また
は体液中の目的のポリペプチドの発現をアッセイする工程、および（ｂ）この遺
伝子発現レベルと標準的な遺伝子発現のレベルを比較する工程、を包含し、これ
によって、その標準的な発現レベルと比較されるアッセイされたポリペプチド遺
伝子発現レベルの増加または減少が、特定の障害を示す。癌に関して、個体由来
の生検組織における比較的高い量の転写物の存在は、疾患の発生のための素因を
示し得るか、または実際の臨床症状の出現前に疾患を検出するための手段を提供
し得る。この型のより決定的な診断は、保健専門家に予防手段を使用させること
、または早期の積極的な処置を可能にし得、これにより、癌の発生またはさらな
る進行を予防する。
【０２８３】
本発明の抗体を使用して、当業者に公知の古典的な免疫組織学的方法を使用し
て生物学的サンプル中のタンパク質レベルをアッセイし得る（例えば、Ｊａｌｋ
ａｎｅｎら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０１：９７６−９８５（１９８５）；
Ｊａｌｋａｎｅｎら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０５：３０８７−３０９６（
１９８７）を参照のこと）。タンパク質遺伝子発現を検出するために有用な、抗
体ベースの他の方法としては、イムノアッセイ（例えば、酵素結合免疫吸着アッ
セイ（ＥＬＩＳＡ）および放射性免疫測定法（ＲＩＡ））が挙げられる。適切な
抗体アッセイ標識は、当該分野において公知であり、そして酵素標識（例えば、
グルコースオキシダーゼ）；放射性同位体（例えば、ヨウ素（125Ｉ、121Ｉ）、
炭素（14Ｃ）、硫黄（35Ｓ）、トリチウム（3Ｈ）、インジウム（112Ｉｎ）、お
よびテクネチウム（99Ｔｃ））；発光標識（例えば、ルミノール）；ならびに蛍
光標識（例えば、フルオレセインおよびローダミン）、ならびにビオチンが挙げ
られる。
て生物学的サンプル中のタンパク質レベルをアッセイし得る（例えば、Ｊａｌｋ
ａｎｅｎら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０１：９７６−９８５（１９８５）；
Ｊａｌｋａｎｅｎら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０５：３０８７−３０９６（
１９８７）を参照のこと）。タンパク質遺伝子発現を検出するために有用な、抗
体ベースの他の方法としては、イムノアッセイ（例えば、酵素結合免疫吸着アッ
セイ（ＥＬＩＳＡ）および放射性免疫測定法（ＲＩＡ））が挙げられる。適切な
抗体アッセイ標識は、当該分野において公知であり、そして酵素標識（例えば、
グルコースオキシダーゼ）；放射性同位体（例えば、ヨウ素（125Ｉ、121Ｉ）、
炭素（14Ｃ）、硫黄（35Ｓ）、トリチウム（3Ｈ）、インジウム（112Ｉｎ）、お
よびテクネチウム（99Ｔｃ））；発光標識（例えば、ルミノール）；ならびに蛍
光標識（例えば、フルオレセインおよびローダミン）、ならびにビオチンが挙げ
られる。
【０２８４】
本発明の１つの局面は、動物、好ましくは哺乳動物、そして最も好ましくはヒ
トにおける、目的のポリペプチドの異常な発現と関連する疾患または障害の検出
および診断である。１つの実施形態において、診断は、ａ）目的のポリペプチド
に特異的に結合する有効量の標識化分子を被験体に（例えば、非経口的に、皮下
に、または腹腔内に）投与する工程；ｂ）このポリペプチドが発現する被験体内
の部位でこの標識化分子が優先的に濃縮することを可能にするために（および結
合していない標識化分子がバックグラウンドレベルまで除去されるために）投与
後、時間間隔を待つ工程；ｃ）バックグラウンドレベルを決定する工程；および
ｄ）この被験体中の標識化分子を検出する工程、を包含し、その結果、このバッ
クグラウンドレベルを越える標識化分子の検出は、この被験体が目的のポリペプ
チドの異常な発現と関連する特定の疾患または障害を有することを示す。バック
グラウンドレベルは、特定の系について以前に決定された標準的な値と、検出さ
れた標識化分子の量を比較する工程を包含する種々の方法により決定され得る。
トにおける、目的のポリペプチドの異常な発現と関連する疾患または障害の検出
および診断である。１つの実施形態において、診断は、ａ）目的のポリペプチド
に特異的に結合する有効量の標識化分子を被験体に（例えば、非経口的に、皮下
に、または腹腔内に）投与する工程；ｂ）このポリペプチドが発現する被験体内
の部位でこの標識化分子が優先的に濃縮することを可能にするために（および結
合していない標識化分子がバックグラウンドレベルまで除去されるために）投与
後、時間間隔を待つ工程；ｃ）バックグラウンドレベルを決定する工程；および
ｄ）この被験体中の標識化分子を検出する工程、を包含し、その結果、このバッ
クグラウンドレベルを越える標識化分子の検出は、この被験体が目的のポリペプ
チドの異常な発現と関連する特定の疾患または障害を有することを示す。バック
グラウンドレベルは、特定の系について以前に決定された標準的な値と、検出さ
れた標識化分子の量を比較する工程を包含する種々の方法により決定され得る。
【０２８５】
被験体のサイズおよび使用される画像化システムが、診断の画像を生じるため
に必要である画像化部分の量を決定するということは、当該分野において理解さ
れる。放射性同位体部分の場合、ヒト被験体について、注入される放射能の量は
、通常、約５〜２０ミリキュリーの範囲の99ｍＴｃである。次いで、標識化抗体
または標識化抗体フラグメントは、特定のタンパク質を含む細胞の位置で優先的
に蓄積する。インビボでの腫瘍の画像化は、Ｓ．Ｗ．Ｂｕｒｃｈｉｅｌら、「Ｉ
ｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅ
ｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ」（Ｔｕ
ｍｏｒ Ｉｍａｇｉｎｇ、第１３章：Ｔｈｅ Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｄ
ｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ，Ｓ．Ｗ．ＢｕｒｃｈｉｅｌおよびＢ．
Ａ．Ｒｈｏｄｅｓ編、Ｍａｓｓｏｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｉｎｃ．（１９８
２）において、記載される。
に必要である画像化部分の量を決定するということは、当該分野において理解さ
れる。放射性同位体部分の場合、ヒト被験体について、注入される放射能の量は
、通常、約５〜２０ミリキュリーの範囲の99ｍＴｃである。次いで、標識化抗体
または標識化抗体フラグメントは、特定のタンパク質を含む細胞の位置で優先的
に蓄積する。インビボでの腫瘍の画像化は、Ｓ．Ｗ．Ｂｕｒｃｈｉｅｌら、「Ｉ
ｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅ
ｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ」（Ｔｕ
ｍｏｒ Ｉｍａｇｉｎｇ、第１３章：Ｔｈｅ Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｄ
ｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ，Ｓ．Ｗ．ＢｕｒｃｈｉｅｌおよびＢ．
Ａ．Ｒｈｏｄｅｓ編、Ｍａｓｓｏｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｉｎｃ．（１９８
２）において、記載される。
【０２８６】
使用する標識の型および投与の様式を含む、いくつかの変動に依存して、標識
化分子が被験体中の部位に優先的に濃縮することを可能にするため、および結合
していない標識化分子がバックグラウンドレベルまで除去されるための投与後の
時間間隔は、６〜４８時間もしくは６〜２４時間または６〜１２時間である。別
の実施形態において、投与後の時間間隔は、５〜２０日間または５〜１０日間で
ある。
化分子が被験体中の部位に優先的に濃縮することを可能にするため、および結合
していない標識化分子がバックグラウンドレベルまで除去されるための投与後の
時間間隔は、６〜４８時間もしくは６〜２４時間または６〜１２時間である。別
の実施形態において、投与後の時間間隔は、５〜２０日間または５〜１０日間で
ある。
【０２８７】
１つの実施形態において、疾患および障害をモニターすることは、疾患または
障害（ｄｉｓｅａｓｅ）を診断するための方法を繰り返すことによって実施され
る（例えば、最初の診断から１ヶ月後、最初の診断から６ヶ月後、最初の診断か
ら１年後、など）。
障害（ｄｉｓｅａｓｅ）を診断するための方法を繰り返すことによって実施され
る（例えば、最初の診断から１ヶ月後、最初の診断から６ヶ月後、最初の診断か
ら１年後、など）。
【０２８８】
標識化分子の存在は、インビボスキャニングについての当該分野で公知の方法
を使用して患者中で検出され得る。これらの方法は、使用される標識の型に依存
する。当業者は、特定の標識を検出するための適切な方法を決定することができ
る。本発明の診断方法において使用され得る方法およびデバイスは、コンピュー
タ連動断層撮影法（ＣＴ）、体全体のスキャン（例えば、陽子（ｐｏｓｉｔｉｏ
ｎ）放射断層撮影法（ＰＥＴ））、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、および超音波診
断法を含むが、これらに限定されない。
を使用して患者中で検出され得る。これらの方法は、使用される標識の型に依存
する。当業者は、特定の標識を検出するための適切な方法を決定することができ
る。本発明の診断方法において使用され得る方法およびデバイスは、コンピュー
タ連動断層撮影法（ＣＴ）、体全体のスキャン（例えば、陽子（ｐｏｓｉｔｉｏ
ｎ）放射断層撮影法（ＰＥＴ））、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、および超音波診
断法を含むが、これらに限定されない。
【０２８９】
特定の実施形態において、分子を放射性同位体で標識し、そして放射応答外科
的機器（ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｉｎ
ｓｔｒｕｍｅｎｔ）（Ｔｈｕｒｓｔｏｎら、米国特許第５，４４１，０５０号）
を使用して患者中で検出する。別の実施形態において、分子を蛍光化合物で標識
し、そして蛍光応答スキャニング機器を使用して患者中で検出する。別の実施形
態において、分子を陽電子射出金属で標識し、そして陽電子射出断層撮影法を使
用して患者中で検出する。さらに別の実施形態において、分子を常磁性標識で標
識し、そして磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）を使用して患者中で検出する。
的機器（ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｉｎ
ｓｔｒｕｍｅｎｔ）（Ｔｈｕｒｓｔｏｎら、米国特許第５，４４１，０５０号）
を使用して患者中で検出する。別の実施形態において、分子を蛍光化合物で標識
し、そして蛍光応答スキャニング機器を使用して患者中で検出する。別の実施形
態において、分子を陽電子射出金属で標識し、そして陽電子射出断層撮影法を使
用して患者中で検出する。さらに別の実施形態において、分子を常磁性標識で標
識し、そして磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）を使用して患者中で検出する。
【０２９０】
（融合タンパク質）
任意のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを使用して、融合タンパク質
を生成し得る。例えば、第２のタンパク質と融合される場合、ＭＥＴＨ１または
ＭＥＴＨ２ポリペプチドは、抗原タグとして使用され得る。ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２ポリペプチドに対して誘起された抗体を使用して、ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２と結合することにより第２のタンパク質を直接検出し得る。さらに、細
胞内輸送シグナルに基づく、分泌タンパク質標的細胞の位置に起因して、ＭＥＴ
Ｈ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、他のタンパク質と一旦融合すると、標的
タンパク質として使用され得る。
を生成し得る。例えば、第２のタンパク質と融合される場合、ＭＥＴＨ１または
ＭＥＴＨ２ポリペプチドは、抗原タグとして使用され得る。ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２ポリペプチドに対して誘起された抗体を使用して、ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２と結合することにより第２のタンパク質を直接検出し得る。さらに、細
胞内輸送シグナルに基づく、分泌タンパク質標的細胞の位置に起因して、ＭＥＴ
Ｈ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、他のタンパク質と一旦融合すると、標的
タンパク質として使用され得る。
【０２９１】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドと融合し得るドメインの例としては
、異種シグナル配列だけでなく、他の異種機能領域も挙げられる。この融合物は
、直接的である必要はないが、リンカーを介して起こり得る。
、異種シグナル配列だけでなく、他の異種機能領域も挙げられる。この融合物は
、直接的である必要はないが、リンカーを介して起こり得る。
【０２９２】
特定の実施形態において、本発明のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質は
、融合タンパク質を含み、ここでは、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチド
は、各々ｍ1−ｎ1、ｍ2−ｎ2として上記される融合タンパク質である。好ましい
実施形態では、適用は、本明細書中に列挙される特異的欠失またはＣ末端欠失の
アミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列に少なくとも８０％、
８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、
９８％または９９％同一である核酸分子に関する。これらのポリペプチドをコー
ドするポリヌクレオチドもまた、本発明により包含される。
、融合タンパク質を含み、ここでは、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチド
は、各々ｍ1−ｎ1、ｍ2−ｎ2として上記される融合タンパク質である。好ましい
実施形態では、適用は、本明細書中に列挙される特異的欠失またはＣ末端欠失の
アミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配列に少なくとも８０％、
８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、
９８％または９９％同一である核酸分子に関する。これらのポリペプチドをコー
ドするポリヌクレオチドもまた、本発明により包含される。
【０２９３】
さらに、融合タンパク質はまた、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドの
特徴を改良するために操作され得る。例えば、さらなるアミノ酸の領域（特に、
荷電アミノ酸）が、宿主細胞からの精製の間、または引き続く操作および貯蔵の
間の安定性および持続性を改良するためにＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプ
チドのＮ末端に付加され得る。また、ペプチド部分が精製を容易にするためにＭ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドに付加され得る。このような領域は、Ｍ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドの最終精製の前に除去され得る。ポリペ
プチドの操作を容易にするためのペプチド部分の付加は、当該分野でよく用いら
れておりそして慣用技術である。
特徴を改良するために操作され得る。例えば、さらなるアミノ酸の領域（特に、
荷電アミノ酸）が、宿主細胞からの精製の間、または引き続く操作および貯蔵の
間の安定性および持続性を改良するためにＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプ
チドのＮ末端に付加され得る。また、ペプチド部分が精製を容易にするためにＭ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドに付加され得る。このような領域は、Ｍ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドの最終精製の前に除去され得る。ポリペ
プチドの操作を容易にするためのペプチド部分の付加は、当該分野でよく用いら
れておりそして慣用技術である。
【０２９４】
さらに、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチド（フラグメントが挙げられ
、そして具体的にはエピトープ）は、免疫グロブリン（ＩｇＧ）の定常ドメイン
の部分と組み合わされ、キメラポリペプチドを生じ得る。このような融合タンパ
ク質は、精製を容易にし得、そして増加したインビボにおける半減期を示し得る
。１つの報告された例は、ヒトＣＤ４ポリペプチドの最初の２つのドメインおよ
び哺乳動物の免疫グロブリンの重鎖または軽鎖の定常領域の種々のドメインから
なるキメラタンパク質について開示する（ＥＰ Ａ ３９４，８２７；Ｔｒａｕ
ｎｅｃｋｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ，３３１：８４−８６（１９８８））。ジスルフ
ィド架橋二量体構造を有する融合タンパク質（ＩｇＧに起因する）はまた、単量
体ポリペプチドまたはそれらのフラグメント単独よりも、他の分子の結合および
中和において効果的であることが見出された（Ｆｏｕｎｔｏｕｌａｋｉｓら、Ｊ
．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、２７０：３９５８−３９６４（１９９５））。
、そして具体的にはエピトープ）は、免疫グロブリン（ＩｇＧ）の定常ドメイン
の部分と組み合わされ、キメラポリペプチドを生じ得る。このような融合タンパ
ク質は、精製を容易にし得、そして増加したインビボにおける半減期を示し得る
。１つの報告された例は、ヒトＣＤ４ポリペプチドの最初の２つのドメインおよ
び哺乳動物の免疫グロブリンの重鎖または軽鎖の定常領域の種々のドメインから
なるキメラタンパク質について開示する（ＥＰ Ａ ３９４，８２７；Ｔｒａｕ
ｎｅｃｋｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ，３３１：８４−８６（１９８８））。ジスルフ
ィド架橋二量体構造を有する融合タンパク質（ＩｇＧに起因する）はまた、単量
体ポリペプチドまたはそれらのフラグメント単独よりも、他の分子の結合および
中和において効果的であることが見出された（Ｆｏｕｎｔｏｕｌａｋｉｓら、Ｊ
．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、２７０：３９５８−３９６４（１９９５））。
【０２９５】
同様に、ＥＰ−Ａ−Ｏ ４６４ ５３３（カナダ国対応出願２０４５８６９）
は、別のヒトタンパク質またはその一部とともに免疫グロブリン分子の定常領域
の種々の部分を含む、融合タンパク質を開示する。多くの場合、融合タンパク質
中のＦｃ部分は、治療および診断において有利であり、従って、例えば改良され
た薬物動態学的特性を生じ得る（ＥＰ−Ａ ０ ２３２ ２６２）。あるいは、
融合タンパク質が発現、検出、および精製された後に、Ｆｃ部分が欠失され得る
ことが望ましい。例えば、融合タンパク質が、免疫の抗原として使用される場合
、そのＦｃ部分は、治療および診断を妨げ得る。薬物探索において、例えばｈＩ
Ｌ−５レセプターのようなヒトタンパク質が、ｈＩＬ−５のアンタゴニストを同
定するための高処理能力スクリーニングアッセイの目的のためにＦｃ部分と融合
されている。（Ｄ．Ｂｅｎｎｅｔｔら、Ｊ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｒｅｃｏｇｎ
ｉｔｉｏｎ ８：５２−５８（１９９５）；Ｋ．Ｊｏｈａｎｓｏｎら、Ｊ．Ｂｉ
ｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：９４５９−９４７１（１９９５）を参照のこと。） さらに、本発明のポリペプチドは、融合されたポリペプチドの精製を容易にす
るペプチドのような、マーカー配列と融合され得る。好ましい実施形態において
、このマーカーアミノ酸配列は、とりわけ、ｐＱＥベクター（ＱＩＡＧＥＮ，Ｉ
ｎｃ．，９２５９ Ｅｔｏｎ Ａｖｅｎｕｅ，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，ＣＡ，９
１３１１）において提供されるタグのようなヘキサ−ヒスチジンペプチドであり
、それらの多くは市販されている。例えば、Ｇｅｎｔｚら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ
．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：８２１−８２４（１９８９）に記載される
ように、ヘキサ−ヒスチジンは、融合タンパク質の簡便な精製を提供する。精製
に有用な他のペプチドタグである「ＨＡ」タグは、インフルエンザ赤血球凝集素
タンパク質由来のエピトープに対応する（Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅｌｌ ３７：７
６７（１９８４））。
は、別のヒトタンパク質またはその一部とともに免疫グロブリン分子の定常領域
の種々の部分を含む、融合タンパク質を開示する。多くの場合、融合タンパク質
中のＦｃ部分は、治療および診断において有利であり、従って、例えば改良され
た薬物動態学的特性を生じ得る（ＥＰ−Ａ ０ ２３２ ２６２）。あるいは、
融合タンパク質が発現、検出、および精製された後に、Ｆｃ部分が欠失され得る
ことが望ましい。例えば、融合タンパク質が、免疫の抗原として使用される場合
、そのＦｃ部分は、治療および診断を妨げ得る。薬物探索において、例えばｈＩ
Ｌ−５レセプターのようなヒトタンパク質が、ｈＩＬ−５のアンタゴニストを同
定するための高処理能力スクリーニングアッセイの目的のためにＦｃ部分と融合
されている。（Ｄ．Ｂｅｎｎｅｔｔら、Ｊ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｒｅｃｏｇｎ
ｉｔｉｏｎ ８：５２−５８（１９９５）；Ｋ．Ｊｏｈａｎｓｏｎら、Ｊ．Ｂｉ
ｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：９４５９−９４７１（１９９５）を参照のこと。） さらに、本発明のポリペプチドは、融合されたポリペプチドの精製を容易にす
るペプチドのような、マーカー配列と融合され得る。好ましい実施形態において
、このマーカーアミノ酸配列は、とりわけ、ｐＱＥベクター（ＱＩＡＧＥＮ，Ｉ
ｎｃ．，９２５９ Ｅｔｏｎ Ａｖｅｎｕｅ，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，ＣＡ，９
１３１１）において提供されるタグのようなヘキサ−ヒスチジンペプチドであり
、それらの多くは市販されている。例えば、Ｇｅｎｔｚら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ
．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：８２１−８２４（１９８９）に記載される
ように、ヘキサ−ヒスチジンは、融合タンパク質の簡便な精製を提供する。精製
に有用な他のペプチドタグである「ＨＡ」タグは、インフルエンザ赤血球凝集素
タンパク質由来のエピトープに対応する（Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅｌｌ ３７：７
６７（１９８４））。
【０２９６】
従って、これら上記の融合物のいずれかが、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリ
ヌクレオチドまたはポリペプチドを用いて操作され得る。
ヌクレオチドまたはポリペプチドを用いて操作され得る。
【０２９７】
（ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の生物学的活性）
ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるい
はＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストをアッセイに
使用し、１つ以上の生物学的活性について試験し得る。ＭＥＴＨ１もしくはＭＥ
ＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もしくはＭＥ
ＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストが特定のアッセイにおいて活性を示す場
合、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２はその生物学的活性に関連した疾患に関与し得
るようである。従って、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を使用し、関連した疾患を
処置し得る。
はＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストをアッセイに
使用し、１つ以上の生物学的活性について試験し得る。ＭＥＴＨ１もしくはＭＥ
ＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もしくはＭＥ
ＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストが特定のアッセイにおいて活性を示す場
合、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２はその生物学的活性に関連した疾患に関与し得
るようである。従って、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を使用し、関連した疾患を
処置し得る。
【０２９８】
（免疫活性）
ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるい
はＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストは、免疫細胞
の増殖、分化、もしくは動員（走化性）を活性化または阻害することにより、免
疫系の欠損または障害の処置において有用であり得る。免疫細胞は、造血と呼ば
れるプロセスを介して発達し、多能性幹細胞から骨髄性細胞（血小板、赤血球、
好中球およびマクロファージ）およびリンパ系細胞（Ｂリンパ球およびＴリンパ
球）を生成する。これら免疫の欠損または障害の病因は、遺伝的、身体的（ｓｏ
ｍａｔｉｃ）（例えば、癌またはいくつかの自己免疫性障害）、後天的（例えば
、化学療法もしくは毒素による）または感染的であり得る。さらに、ＭＥＴＨ１
もしくはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１
もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストは、特定の免疫系の疾患ま
たは障害のマーカーまたは検出物質（ｄｅｔｅｃｔｏｒ）として使用され得る。
はＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストは、免疫細胞
の増殖、分化、もしくは動員（走化性）を活性化または阻害することにより、免
疫系の欠損または障害の処置において有用であり得る。免疫細胞は、造血と呼ば
れるプロセスを介して発達し、多能性幹細胞から骨髄性細胞（血小板、赤血球、
好中球およびマクロファージ）およびリンパ系細胞（Ｂリンパ球およびＴリンパ
球）を生成する。これら免疫の欠損または障害の病因は、遺伝的、身体的（ｓｏ
ｍａｔｉｃ）（例えば、癌またはいくつかの自己免疫性障害）、後天的（例えば
、化学療法もしくは毒素による）または感染的であり得る。さらに、ＭＥＴＨ１
もしくはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１
もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストは、特定の免疫系の疾患ま
たは障害のマーカーまたは検出物質（ｄｅｔｅｃｔｏｒ）として使用され得る。
【０２９９】
ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるい
はＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストは、造血細胞
の欠損または障害の処置または検出において有用であり得る。ＭＥＴＨ１もしく
はＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もしく
はＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストは、特定の（または多くの）型の
造血細胞の減少に関連する障害を処置する試みにおいて、多能性幹細胞を含む造
血細胞の分化および増殖を増加させるために用いられ得る。免疫不全症候群の例
としては、血液タンパク質の障害（例えば、無ガンマグロブリン血症、低ガンマ
グロブリン血症）、毛細血管拡張性運動失調、分類不能型免疫不全、ディ・ジョ
ージ症候群、ＨＩＶ感染、ＨＴＬＶ−ＢＬＶ感染、白血球接着不全症候群、リン
パ球減少、食細胞殺細菌機能不全、重症複合型免疫不全（ＳＣＩＤ）、ヴィスコ
ット−オールドリッチ障害、貧血、血小板減少、またはヘモグロビン尿症が挙げ
られるが、それらに限定されない。
はＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストは、造血細胞
の欠損または障害の処置または検出において有用であり得る。ＭＥＴＨ１もしく
はＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もしく
はＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストは、特定の（または多くの）型の
造血細胞の減少に関連する障害を処置する試みにおいて、多能性幹細胞を含む造
血細胞の分化および増殖を増加させるために用いられ得る。免疫不全症候群の例
としては、血液タンパク質の障害（例えば、無ガンマグロブリン血症、低ガンマ
グロブリン血症）、毛細血管拡張性運動失調、分類不能型免疫不全、ディ・ジョ
ージ症候群、ＨＩＶ感染、ＨＴＬＶ−ＢＬＶ感染、白血球接着不全症候群、リン
パ球減少、食細胞殺細菌機能不全、重症複合型免疫不全（ＳＣＩＤ）、ヴィスコ
ット−オールドリッチ障害、貧血、血小板減少、またはヘモグロビン尿症が挙げ
られるが、それらに限定されない。
【０３００】
さらに、ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド
、あるいはＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストをま
た使用して、止血性活性（出血を止めること）または血栓崩壊活性（血餅形成）
を調節し得る。例えば、止血活性または血栓崩壊活性を増大させることにより、
ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいは
ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストを使用し、血液
凝固の障害（例えば、無線維素原血症、因子欠損症）、血液血小板の障害（例え
ば、血小板減少症）、あるいは外傷、手術または他の原因から生じる創傷を処置
し得る。あるいは、止血活性または血栓崩壊活性を減少させ得るＭＥＴＨ１もし
くはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もし
くはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストを使用し、凝血を阻害または溶
解し得る。心臓発作（梗塞）、発作（ｓｔｒｏｋｅ）または瘢痕の処置において
、これらの分子は重要であり得る。
、あるいはＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストをま
た使用して、止血性活性（出血を止めること）または血栓崩壊活性（血餅形成）
を調節し得る。例えば、止血活性または血栓崩壊活性を増大させることにより、
ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいは
ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストを使用し、血液
凝固の障害（例えば、無線維素原血症、因子欠損症）、血液血小板の障害（例え
ば、血小板減少症）、あるいは外傷、手術または他の原因から生じる創傷を処置
し得る。あるいは、止血活性または血栓崩壊活性を減少させ得るＭＥＴＨ１もし
くはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もし
くはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストを使用し、凝血を阻害または溶
解し得る。心臓発作（梗塞）、発作（ｓｔｒｏｋｅ）または瘢痕の処置において
、これらの分子は重要であり得る。
【０３０１】
自己免疫障害の処置または検出において、ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポリ
ヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴ
ニストまたはアンタゴニストはまた、有用であり得る。多くの自己免疫障害は、
免疫細胞によって外来性物質として不適切に自己認識することから生じる。この
不適切な認識は、宿主組織の破壊をもたらす免疫応答を引き起こす。従って、免
疫応答、特にＴ細胞の増殖、分化または走化性を阻害し得るＭＥＴＨ１もしくは
ＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もしくは
ＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストの投与は、自己免疫障害の防止にお
いて効果的な治療であり得る。
ヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴ
ニストまたはアンタゴニストはまた、有用であり得る。多くの自己免疫障害は、
免疫細胞によって外来性物質として不適切に自己認識することから生じる。この
不適切な認識は、宿主組織の破壊をもたらす免疫応答を引き起こす。従って、免
疫応答、特にＴ細胞の増殖、分化または走化性を阻害し得るＭＥＴＨ１もしくは
ＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もしくは
ＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストの投与は、自己免疫障害の防止にお
いて効果的な治療であり得る。
【０３０２】
処置または検出され得る自己免疫障害の例としては、アディソン病、溶血性貧
血、抗リン脂質症候群、慢性関節リウマチ、皮膚炎、アレルギー性脳脊髄炎、糸
球体腎炎、グッドパスチャー症候群、グレーヴズ病、多発性硬化症、重症筋無力
症、神経炎、眼炎、水疱性類天疱瘡、類天疱瘡、多発性内分泌腺症、紫斑病、ラ
イター病、スティッフマン症候群、自己免疫性甲状腺炎、全身性エリテマトーデ
ス、自己免疫性の肺の炎症、ギヤン−バレー症候群、インスリン依存性糖尿病、
および自己免疫炎症性眼疾患が挙げられるが、それらに限定されない。
血、抗リン脂質症候群、慢性関節リウマチ、皮膚炎、アレルギー性脳脊髄炎、糸
球体腎炎、グッドパスチャー症候群、グレーヴズ病、多発性硬化症、重症筋無力
症、神経炎、眼炎、水疱性類天疱瘡、類天疱瘡、多発性内分泌腺症、紫斑病、ラ
イター病、スティッフマン症候群、自己免疫性甲状腺炎、全身性エリテマトーデ
ス、自己免疫性の肺の炎症、ギヤン−バレー症候群、インスリン依存性糖尿病、
および自己免疫炎症性眼疾患が挙げられるが、それらに限定されない。
【０３０３】
同様に、ぜん息（特にアレルギー性ぜん息）または他の呼吸の問題のような、
アレルギー反応およびアレルギー状態もまた、ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポ
リヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ア
ゴニストまたはアンタゴニストにより処置され得る。さらに、これらの分子を使
用し、抗原性分子に対するアナフィラキシー、過敏症または血液型不適合性を処
置し得る。
アレルギー反応およびアレルギー状態もまた、ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポ
リヌクレオチドまたはポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ア
ゴニストまたはアンタゴニストにより処置され得る。さらに、これらの分子を使
用し、抗原性分子に対するアナフィラキシー、過敏症または血液型不適合性を処
置し得る。
【０３０４】
ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、あるい
はＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストをまた使用し
、器官拒絶または対宿主性移植片病（ＧＶＨＤ）を処置および／または予防し得
る。器官拒絶は、免疫応答を介して宿主免疫細胞による移植組織の破壊によって
起こる。同様に、免疫応答はＧＶＨＤにもまた関与するが、この場合、外来性の
移植免疫細胞が宿主組織を破壊する。免疫応答、特にＴ細胞の増殖、分化または
走化性を阻害する、ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリ
ペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニ
ストの投与は、器官拒絶またはＧＶＨＤの防止において効果的な治療であり得る
。
はＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストをまた使用し
、器官拒絶または対宿主性移植片病（ＧＶＨＤ）を処置および／または予防し得
る。器官拒絶は、免疫応答を介して宿主免疫細胞による移植組織の破壊によって
起こる。同様に、免疫応答はＧＶＨＤにもまた関与するが、この場合、外来性の
移植免疫細胞が宿主組織を破壊する。免疫応答、特にＴ細胞の増殖、分化または
走化性を阻害する、ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリ
ペプチド、あるいはＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニ
ストの投与は、器官拒絶またはＧＶＨＤの防止において効果的な治療であり得る
。
【０３０５】
同様に、ＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド
、あるいはＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストをも
また使用し、炎症を調節し得る。例えば、このポリヌクレオチドもしくはポリペ
プチド、またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、炎症応答に関与する細胞
の増殖および分化を阻害し得る。これらの分子を使用して、感染に関連する炎症
（例えば、敗血症性ショック、敗血症、または全身炎症応答症候群（ＳＩＲＳ）
）、虚血再灌流傷害に関連する炎症、内毒素致死に関連する炎症、関節炎に関連
する炎症、補体媒介性超急性拒絶に関連する炎症、腎炎に関連する炎症、サイト
カインまたはケモカインが誘導する肺傷害に関連する炎症、炎症性腸疾患に関連
する炎症、クローン病に関連する炎症またはサイトカイン（例えば、ＴＮＦまた
はＩＬ−１）の過剰生成から生じる炎症を含む、慢性および急性の両方の状態の
炎症状態を処置し得る。
、あるいはＭＥＴＨ１もしくはＭＥＴＨ２アゴニストまたはアンタゴニストをも
また使用し、炎症を調節し得る。例えば、このポリヌクレオチドもしくはポリペ
プチド、またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、炎症応答に関与する細胞
の増殖および分化を阻害し得る。これらの分子を使用して、感染に関連する炎症
（例えば、敗血症性ショック、敗血症、または全身炎症応答症候群（ＳＩＲＳ）
）、虚血再灌流傷害に関連する炎症、内毒素致死に関連する炎症、関節炎に関連
する炎症、補体媒介性超急性拒絶に関連する炎症、腎炎に関連する炎症、サイト
カインまたはケモカインが誘導する肺傷害に関連する炎症、炎症性腸疾患に関連
する炎症、クローン病に関連する炎症またはサイトカイン（例えば、ＴＮＦまた
はＩＬ−１）の過剰生成から生じる炎症を含む、慢性および急性の両方の状態の
炎症状態を処置し得る。
【０３０６】
（過増殖障害）
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストを使用し、新生物を含む過増殖性障害を処置または検出し得る。ＭＥＴＨ１
および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥ
ＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、直接
的または間接的な相互作用を介してこの障害の増殖を阻害し得る。あるいは、Ｍ
ＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ま
たはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニスト
は、過増殖障害を阻害し得る他の細胞を増殖させ得る。
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストを使用し、新生物を含む過増殖性障害を処置または検出し得る。ＭＥＴＨ１
および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥ
ＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、直接
的または間接的な相互作用を介してこの障害の増殖を阻害し得る。あるいは、Ｍ
ＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ま
たはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニスト
は、過増殖障害を阻害し得る他の細胞を増殖させ得る。
【０３０７】
例えば、免疫応答を増大させること、特に過増殖障害の抗原性の質を増大させ
ることによって、またはＴ細胞を増殖、分化、もしくは動員することによって、
過増殖性障害を処置し得る。既存の免疫応答を増強するか、または新たな免疫応
答を開始するかのいずれかによって、この免疫応答を増大させ得る。あるいは、
免疫応答を減少させることもまた、化学療法剤のような、過増殖性障害を処置す
る方法であり得る。
ることによって、またはＴ細胞を増殖、分化、もしくは動員することによって、
過増殖性障害を処置し得る。既存の免疫応答を増強するか、または新たな免疫応
答を開始するかのいずれかによって、この免疫応答を増大させ得る。あるいは、
免疫応答を減少させることもまた、化学療法剤のような、過増殖性障害を処置す
る方法であり得る。
【０３０８】
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストによって処置または検出され得る過増殖性障害の例としては、結腸、腹部、
骨、胸、消化系、肝臓、膵臓、腹膜、内分泌腺（副腎、上皮小体、下垂体、精巣
、卵巣、胸腺、甲状腺）、眼、頭および首、神経（中枢および末梢）、リンパ系
、骨盤、皮膚、軟組織、脾臓、胸郭、ならびに尿生殖器に位置する新生物が挙げ
られるが、これらに限定されない。
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストによって処置または検出され得る過増殖性障害の例としては、結腸、腹部、
骨、胸、消化系、肝臓、膵臓、腹膜、内分泌腺（副腎、上皮小体、下垂体、精巣
、卵巣、胸腺、甲状腺）、眼、頭および首、神経（中枢および末梢）、リンパ系
、骨盤、皮膚、軟組織、脾臓、胸郭、ならびに尿生殖器に位置する新生物が挙げ
られるが、これらに限定されない。
【０３０９】
同様に、他の過増殖性障害もまた、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリ
ヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ
２のアゴニストもしくはアンタゴニストにより処置または検出され得る。そのよ
うな過増殖性障害の例としては、高ガンマグロブリン血症、リンパ増殖障害、パ
ラプロテイン血症、紫斑病、類肉腫症、セザリー症候群、ヴァルデンストレーム
マクログロブリン血症、ゴシェ病、組織球増殖症、および任意の他の過増殖疾患
、さらに上記に収載されている器官系に位置している新生物が挙げられるが、そ
れらに限定されない。
ヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ
２のアゴニストもしくはアンタゴニストにより処置または検出され得る。そのよ
うな過増殖性障害の例としては、高ガンマグロブリン血症、リンパ増殖障害、パ
ラプロテイン血症、紫斑病、類肉腫症、セザリー症候群、ヴァルデンストレーム
マクログロブリン血症、ゴシェ病、組織球増殖症、および任意の他の過増殖疾患
、さらに上記に収載されている器官系に位置している新生物が挙げられるが、そ
れらに限定されない。
【０３１０】
（心臓血管障害）
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストを使用して、四肢虚血のような末梢動脈疾患を含む、心臓血管障害を処置し
得る。
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストを使用して、四肢虚血のような末梢動脈疾患を含む、心臓血管障害を処置し
得る。
【０３１１】
心臓血管障害としては、動動脈瘻（ａｒｔｅｒｉｏ−ａｒｔｅｒｉａｌ ｆｉ
ｓｔｕｌａ）、動静脈瘻、大脳動静脈先天異常、先天性心欠陥（ｃｏｎｇｅｎｉ
ｔａｌ ｈｅａｒｔ ｄｅｆｅｃｔｓ）、肺動脈弁閉鎖症、およびシミター症候
群のような心臓血管異常が挙げられる。先天性心欠陥としては、大動脈縮窄、三
房心、冠状脈管奇形（ｃｏｒｏｎａｒｙ ｖｅｓｓｅｌ ａｎｏｍａｌｉｅｓ）
、交差心、右胸心、開存性動脈管（ｐａｔｅｎｔ ｄｕｃｔｕｓ ａｒｔｅｒｉ
ｏｓｕｓ）、エブスタイン奇形、アイゼンメンガー複合体、左心室発育不全症候
群、左胸心、ファロー四徴症、大血管転位症、両大血管右室起始症、三尖弁閉鎖
症、動脈管遺残、および心中隔欠損症（ｈｅａｒｔ ｓｅｐｔａｌ ｄｅｆｅｃ
ｔｓ）（例えば、大動脈肺動脈中隔欠損症（ａｏｒｔｏｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｓ
ｅｐｔａｌ ｄｅｆｅｃｔ）、心内膜床欠損症、リュタンバッシェ症候群、ファ
ロー三徴症、心室心中隔欠損症（ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ ｈｅａｒｔ ｓｅｐ
ｔａｌ ｄｅｆｅｃｔｓ））が挙げられる。
ｓｔｕｌａ）、動静脈瘻、大脳動静脈先天異常、先天性心欠陥（ｃｏｎｇｅｎｉ
ｔａｌ ｈｅａｒｔ ｄｅｆｅｃｔｓ）、肺動脈弁閉鎖症、およびシミター症候
群のような心臓血管異常が挙げられる。先天性心欠陥としては、大動脈縮窄、三
房心、冠状脈管奇形（ｃｏｒｏｎａｒｙ ｖｅｓｓｅｌ ａｎｏｍａｌｉｅｓ）
、交差心、右胸心、開存性動脈管（ｐａｔｅｎｔ ｄｕｃｔｕｓ ａｒｔｅｒｉ
ｏｓｕｓ）、エブスタイン奇形、アイゼンメンガー複合体、左心室発育不全症候
群、左胸心、ファロー四徴症、大血管転位症、両大血管右室起始症、三尖弁閉鎖
症、動脈管遺残、および心中隔欠損症（ｈｅａｒｔ ｓｅｐｔａｌ ｄｅｆｅｃ
ｔｓ）（例えば、大動脈肺動脈中隔欠損症（ａｏｒｔｏｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｓ
ｅｐｔａｌ ｄｅｆｅｃｔ）、心内膜床欠損症、リュタンバッシェ症候群、ファ
ロー三徴症、心室心中隔欠損症（ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ ｈｅａｒｔ ｓｅｐ
ｔａｌ ｄｅｆｅｃｔｓ））が挙げられる。
【０３１２】
心臓血管障害としてはまた、不整脈、カルチノイド心臓病、高心拍出量（ｈｉ
ｇｈ ｃａｒｄｉａｃ ｏｕｔｐｕｔ）、低心拍出量（ｌｏｗ ｃａｒｄｉａｃ
ｏｕｔｐｕｔ）、心タンポナーデ、心内膜炎（細菌性を含む）、心臓動脈瘤、
心停止、うっ血性心不全、うっ血性心筋症、発作性呼吸困難、心臓水腫、心肥大
、うっ血性心筋症、左心室肥大、右心室肥大、梗塞後心破裂（ｐｏｓｔ−ｉｎｆ
ａｒｃｔｉｏｎ ｈｅａｒｔ ｒｕｐｔｕｒｅ）、心室中隔破裂、心臓弁疾患、
心筋疾患、心筋虚血、心内膜液浸出、心外膜炎（梗塞性および結核性を含む）、
気心膜症、心膜切開後症候群、右心疾患、リウマチ性心疾患、心室機能不全、充
血、心臓血管妊娠合併症（ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｐｒｅｇｎａｎｃｙ
ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ）、シミター症候群、心血管梅毒、および心血管
結核（ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）のような心
臓病が挙げられる。
ｇｈ ｃａｒｄｉａｃ ｏｕｔｐｕｔ）、低心拍出量（ｌｏｗ ｃａｒｄｉａｃ
ｏｕｔｐｕｔ）、心タンポナーデ、心内膜炎（細菌性を含む）、心臓動脈瘤、
心停止、うっ血性心不全、うっ血性心筋症、発作性呼吸困難、心臓水腫、心肥大
、うっ血性心筋症、左心室肥大、右心室肥大、梗塞後心破裂（ｐｏｓｔ−ｉｎｆ
ａｒｃｔｉｏｎ ｈｅａｒｔ ｒｕｐｔｕｒｅ）、心室中隔破裂、心臓弁疾患、
心筋疾患、心筋虚血、心内膜液浸出、心外膜炎（梗塞性および結核性を含む）、
気心膜症、心膜切開後症候群、右心疾患、リウマチ性心疾患、心室機能不全、充
血、心臓血管妊娠合併症（ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｐｒｅｇｎａｎｃｙ
ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ）、シミター症候群、心血管梅毒、および心血管
結核（ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）のような心
臓病が挙げられる。
【０３１３】
不整脈としては、洞性不整脈、心房性細動、心房粗動、徐脈、期外収縮、アダ
ムズ−ストークス症候群、脚ブロック、洞房ブロック、長ＱＴ症候群（ｌｏｎｇ
ＱＴ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、副収縮、ローン−ギャノング−レヴァイン症候群
、マヘーム型早期興奮症候群（Ｍａｈａｉｍ−ｔｙｐｅ ｐｒｅ−ｅｘｃｉｔａ
ｔｉｏｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ウルフ−パーキンソン−ホワイト症候群、洞不
全症候群、頻拍、および心室性細動が挙げられる。頻拍としては、発作性頻拍、
上室性頻拍、心室固有調律促進、房室結節性再入頻拍（ａｔｒｉｏｖｅｎｔｒｉ
ｃｕｌａｒ ｎｏｄａｌ ｒｅｅｎｔｒｙ ｔａｃｈｙｃａｒｄｉａ）、異所心
房性頻拍、異所接合部頻拍、洞房結節性再入頻拍（ｓｉｎｏａｔｒｉａｌ ｎｏ
ｄａｌ ｒｅｅｎｔｒｙ ｔａｃｈｙｃａｒｄｉａ）、洞性頻拍、トルサード・
ド・ポワント、および心室性頻拍が挙げられる。
ムズ−ストークス症候群、脚ブロック、洞房ブロック、長ＱＴ症候群（ｌｏｎｇ
ＱＴ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、副収縮、ローン−ギャノング−レヴァイン症候群
、マヘーム型早期興奮症候群（Ｍａｈａｉｍ−ｔｙｐｅ ｐｒｅ−ｅｘｃｉｔａ
ｔｉｏｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ウルフ−パーキンソン−ホワイト症候群、洞不
全症候群、頻拍、および心室性細動が挙げられる。頻拍としては、発作性頻拍、
上室性頻拍、心室固有調律促進、房室結節性再入頻拍（ａｔｒｉｏｖｅｎｔｒｉ
ｃｕｌａｒ ｎｏｄａｌ ｒｅｅｎｔｒｙ ｔａｃｈｙｃａｒｄｉａ）、異所心
房性頻拍、異所接合部頻拍、洞房結節性再入頻拍（ｓｉｎｏａｔｒｉａｌ ｎｏ
ｄａｌ ｒｅｅｎｔｒｙ ｔａｃｈｙｃａｒｄｉａ）、洞性頻拍、トルサード・
ド・ポワント、および心室性頻拍が挙げられる。
【０３１４】
心臓弁疾患としては、大動脈弁機能不全症、大動脈弁狭窄症、心雑音（ｈｅａ
ｒ ｍｕｒｍｕｒｓ）、大動脈弁逸脱症、僧帽弁逸脱症、三尖弁逸脱症、僧帽弁
機能不全、僧帽弁狭窄症、肺動脈弁閉鎖症、肺動脈弁機能不全、肺動脈弁狭窄症
、三尖閉鎖症、三尖弁機能不全、および三尖弁狭窄症が挙げられる。
ｒ ｍｕｒｍｕｒｓ）、大動脈弁逸脱症、僧帽弁逸脱症、三尖弁逸脱症、僧帽弁
機能不全、僧帽弁狭窄症、肺動脈弁閉鎖症、肺動脈弁機能不全、肺動脈弁狭窄症
、三尖閉鎖症、三尖弁機能不全、および三尖弁狭窄症が挙げられる。
【０３１５】
心筋疾患としては、アルコール性心筋症、うっ血性心筋症、肥大型心筋症、弁
下部性大動脈狭搾症（、弁下部性肺動脈狭搾症、拘束型心筋症、シャーガス心筋
症、心内膜線維弾性症、心内膜心筋線維症、キーンズ症候群、心筋再灌流障害、
および心筋炎が挙げられる。
下部性大動脈狭搾症（、弁下部性肺動脈狭搾症、拘束型心筋症、シャーガス心筋
症、心内膜線維弾性症、心内膜心筋線維症、キーンズ症候群、心筋再灌流障害、
および心筋炎が挙げられる。
【０３１６】
心筋性虚血としては、狭心症、冠動脈瘤、冠動脈硬化、冠動脈血栓症、冠動脈
血管痙攣、心筋梗塞、および心筋気絶（ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｓｔｕｎｎｉｎ
ｇ）のような冠動脈疾患が挙げられる。
血管痙攣、心筋梗塞、および心筋気絶（ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｓｔｕｎｎｉｎ
ｇ）のような冠動脈疾患が挙げられる。
【０３１７】
心臓血管疾患としてはまた、動脈瘤、血管形成異常、血管腫症、細菌性血管腫
症状、ヒッペル−リンダラ疾患（Ｈｉｐｐｅｌ−Ｌｉｎｄａｕ Ｄｉｓｅａｓｅ
）、クリペル−トルノネー−ウェーバー症候群、スタージ−ウェーバー症候群、
血管運動神経性水腫、大動脈疾患、高安動脈炎、大動脈炎、ルリーシュ症候群、
動脈閉塞疾患、動脈炎、動脈内膜炎（ｅｎａｒｔｅｒｉｔｉｓ）、結節性多発性
動脈炎、脳血管障害、糖尿病性血管障害、糖尿病性網膜症、塞栓症、血栓症、先
端紅痛症、痔、肝静脈閉塞障害、高血圧、低血圧、虚血、末梢血管障害、静脈炎
、肺静脈閉塞疾患、高血圧、低血圧、虚血、末梢血管疾患、静脈炎、肺静脈閉塞
疾患、レーノー病、ＣＲＥＳＴ症候群、網膜静脈閉塞、シミター症候群、上大静
脈症候群、毛細血管拡張症、毛細血管拡張性運動失調（ａｔａｃｉａ ｔｅｌａ
ｎｇｉｅｃｔａｓｉａ）、遺伝性出血性毛細管拡張症、精索静脈瘤、拡張蛇行静
脈、静脈瘤性潰瘍、脈管炎、および静脈機能不全のような血管疾患が挙げられる
。
症状、ヒッペル−リンダラ疾患（Ｈｉｐｐｅｌ−Ｌｉｎｄａｕ Ｄｉｓｅａｓｅ
）、クリペル−トルノネー−ウェーバー症候群、スタージ−ウェーバー症候群、
血管運動神経性水腫、大動脈疾患、高安動脈炎、大動脈炎、ルリーシュ症候群、
動脈閉塞疾患、動脈炎、動脈内膜炎（ｅｎａｒｔｅｒｉｔｉｓ）、結節性多発性
動脈炎、脳血管障害、糖尿病性血管障害、糖尿病性網膜症、塞栓症、血栓症、先
端紅痛症、痔、肝静脈閉塞障害、高血圧、低血圧、虚血、末梢血管障害、静脈炎
、肺静脈閉塞疾患、高血圧、低血圧、虚血、末梢血管疾患、静脈炎、肺静脈閉塞
疾患、レーノー病、ＣＲＥＳＴ症候群、網膜静脈閉塞、シミター症候群、上大静
脈症候群、毛細血管拡張症、毛細血管拡張性運動失調（ａｔａｃｉａ ｔｅｌａ
ｎｇｉｅｃｔａｓｉａ）、遺伝性出血性毛細管拡張症、精索静脈瘤、拡張蛇行静
脈、静脈瘤性潰瘍、脈管炎、および静脈機能不全のような血管疾患が挙げられる
。
【０３１８】
動脈瘤としては、解離性動脈瘤、偽動脈瘤、感染した動脈瘤、破裂した動脈瘤
、大動脈性動脈瘤、大脳性動脈瘤、冠動脈瘤、心動脈瘤、および腸骨性動脈瘤が
挙げられる。
、大動脈性動脈瘤、大脳性動脈瘤、冠動脈瘤、心動脈瘤、および腸骨性動脈瘤が
挙げられる。
【０３１９】
動脈閉塞疾患としては、動脈硬化症、間欠性跛行、頸動脈狭窄症、線維筋性形
成異常、腸間膜性血管閉塞、モヤモヤ病、腎動脈閉塞、網膜動脈閉塞、および閉
塞性血栓性血管炎が挙げられる。
成異常、腸間膜性血管閉塞、モヤモヤ病、腎動脈閉塞、網膜動脈閉塞、および閉
塞性血栓性血管炎が挙げられる。
【０３２０】
脳血管障害としては、頸動脈疾患、脳のアミロイドアンギオパチー、大脳動脈
瘤、大脳無酸素症、大脳動脈硬化、大脳動静脈先天異常、大脳動脈疾患、大脳の
塞栓症および血栓症、頸動脈血栓症、洞血栓症、ヴァレンベルク症候群、大脳出
血、硬膜上血腫、硬膜下血腫、クモ膜下出血（ｓｕｂａｒａｘｈｎｏｉｄ ｈｅ
ｍｏｒｒｈａｇｅ）、大脳梗塞、大脳虚血（一過性を含む）、鎖骨下動脈盗血症
候群、室周白軟化症（ｐｅｒｉｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ ｌｅｕｋｏｍａｌａｃ
ｉａ）、血管性頭痛、群発性頭痛、片頭痛、および椎骨基部（ｖｅｒｔｅｂｒｏ
ｂａｓｉｌａｒ）機能不全が挙げられる。
瘤、大脳無酸素症、大脳動脈硬化、大脳動静脈先天異常、大脳動脈疾患、大脳の
塞栓症および血栓症、頸動脈血栓症、洞血栓症、ヴァレンベルク症候群、大脳出
血、硬膜上血腫、硬膜下血腫、クモ膜下出血（ｓｕｂａｒａｘｈｎｏｉｄ ｈｅ
ｍｏｒｒｈａｇｅ）、大脳梗塞、大脳虚血（一過性を含む）、鎖骨下動脈盗血症
候群、室周白軟化症（ｐｅｒｉｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ ｌｅｕｋｏｍａｌａｃ
ｉａ）、血管性頭痛、群発性頭痛、片頭痛、および椎骨基部（ｖｅｒｔｅｂｒｏ
ｂａｓｉｌａｒ）機能不全が挙げられる。
【０３２１】
塞栓症としては、空気塞栓症、羊水塞栓症、コレステロール塞栓症、爪先チア
ノーゼ症候群、脂肪塞栓症、肺動脈塞栓症、および血栓塞栓症が挙げられる。血
栓症としては、冠状動脈血栓症、肝静脈血栓症、網膜静脈閉塞、頸動脈血栓症、
洞血栓症、ヴァレンベルク症候群、および血栓性静脈炎が挙げられる。
ノーゼ症候群、脂肪塞栓症、肺動脈塞栓症、および血栓塞栓症が挙げられる。血
栓症としては、冠状動脈血栓症、肝静脈血栓症、網膜静脈閉塞、頸動脈血栓症、
洞血栓症、ヴァレンベルク症候群、および血栓性静脈炎が挙げられる。
【０３２２】
虚血としては、大脳虚血、虚血性大腸炎、仕切り症候群（ｃｏｍｐａｒｔｍｅ
ｎｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、前仕切り症候群（ａｎｔｅｒｉｏｒ ｃｏｍｐａｒ
ｔｍｅｎｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、心筋虚血、再灌流傷害、および末梢四肢虚血
が挙げられる。脈管炎としては、大動脈炎、動脈炎、ベーチェット（Ｂｅｈｃｅ
ｔ）症候群、チャーグ−ストラウス症候群、粘膜皮膚リンパ節症候群、閉塞性血
栓性血管炎、過敏性血管炎、シェーンライン−ヘーノホ紫斑病（Ｓｃｈｏｅｎｌ
ｅｉｎ−Ｈｅｎｏｃｈ ｐｕｒｐｕｒａ）、アレルギー性皮膚血管炎およびヴェ
ーゲナー肉芽腫症が挙げられる。
ｎｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、前仕切り症候群（ａｎｔｅｒｉｏｒ ｃｏｍｐａｒ
ｔｍｅｎｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、心筋虚血、再灌流傷害、および末梢四肢虚血
が挙げられる。脈管炎としては、大動脈炎、動脈炎、ベーチェット（Ｂｅｈｃｅ
ｔ）症候群、チャーグ−ストラウス症候群、粘膜皮膚リンパ節症候群、閉塞性血
栓性血管炎、過敏性血管炎、シェーンライン−ヘーノホ紫斑病（Ｓｃｈｏｅｎｌ
ｅｉｎ−Ｈｅｎｏｃｈ ｐｕｒｐｕｒａ）、アレルギー性皮膚血管炎およびヴェ
ーゲナー肉芽腫症が挙げられる。
【０３２３】
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストは、危険な四肢虚血および冠状動脈疾患の処置に対して特に有効である。
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストは、危険な四肢虚血および冠状動脈疾患の処置に対して特に有効である。
【０３２４】
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、当該分野で公知である
任意の方法を使用して投与され得、これらの方法としては、送達部位における直
接的針注射、静脈内注射、局所投与、カテーテル注入、微粒子銃（ｂｉｏｌｉｓ
ｔｉｃ）注射、粒子加速器、ゲルフォームスポンジデポー、他の市販デポー物質
、浸透圧ポンプ、経口または坐剤の固形薬学的処方物、手術中のデカンティング
または局所適用、エアロゾル送達が挙げられるが、これらに限定されない。その
ような方法は当該分野で公知である。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリ
ペプチドは、下記でより詳細に記載される、治療剤（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ）
の一部として投与され得る。ポリヌクレオチドを送達する方法は本明細書中でよ
り詳細に記載される。
任意の方法を使用して投与され得、これらの方法としては、送達部位における直
接的針注射、静脈内注射、局所投与、カテーテル注入、微粒子銃（ｂｉｏｌｉｓ
ｔｉｃ）注射、粒子加速器、ゲルフォームスポンジデポー、他の市販デポー物質
、浸透圧ポンプ、経口または坐剤の固形薬学的処方物、手術中のデカンティング
または局所適用、エアロゾル送達が挙げられるが、これらに限定されない。その
ような方法は当該分野で公知である。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリ
ペプチドは、下記でより詳細に記載される、治療剤（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ）
の一部として投与され得る。ポリヌクレオチドを送達する方法は本明細書中でよ
り詳細に記載される。
【０３２５】
（細胞レベルでの疾患）
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアンタゴニストもしくはアゴ
ニストによって処置または検出され得る細胞生存の増大あるいはアポトーシスの
阻害に関連する疾患には、癌（例えば、濾胞性リンパ腫、ｐ５３変異を有する癌
腫、およびホルモン依存性腫瘍、これらは以下：結腸癌、心臓腫瘍、膵臓癌、黒
色腫、網膜芽細胞腫、神経膠芽細胞腫、肺癌、腸の癌、精巣癌、胃癌、神経芽細
胞腫、粘液腫、筋腫、リンパ腫、内皮腫、骨芽細胞腫、骨巨細胞腫、骨肉腫、軟
骨肉腫、腺腫、乳癌、前立腺癌、カポージ肉腫および卵巣癌を含むが、これらに
限定されない）；自己免疫障害（例えば、多発性硬化症、シェーグレン症候群、
橋本甲状腺炎、胆汁性肝硬変、ベーチェット病（Ｂｅｈｃｅｔ’ｓ ｄｉｓｅａ
ｓｅ）、クローン病、多発性筋炎、全身性エリテマトーデスおよび免疫関連糸球
体腎炎ならびに慢性関節リウマチ）およびウイルス感染（例えば、ヘルペスウイ
ルス、ポックスウイルスおよびアデノウイルス）、炎症、対宿主性移植片病、急
性移植片拒絶、ならびに慢性移植片拒絶、が挙げられる。好ましい実施形態にお
いて、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプ
チド、および／またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアンタゴニストは
、特に上記に列挙される、癌の増殖、進行、および／または転移（ｍｅｔａｓｉ
ｓ）を阻害するために使用される。
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアンタゴニストもしくはアゴ
ニストによって処置または検出され得る細胞生存の増大あるいはアポトーシスの
阻害に関連する疾患には、癌（例えば、濾胞性リンパ腫、ｐ５３変異を有する癌
腫、およびホルモン依存性腫瘍、これらは以下：結腸癌、心臓腫瘍、膵臓癌、黒
色腫、網膜芽細胞腫、神経膠芽細胞腫、肺癌、腸の癌、精巣癌、胃癌、神経芽細
胞腫、粘液腫、筋腫、リンパ腫、内皮腫、骨芽細胞腫、骨巨細胞腫、骨肉腫、軟
骨肉腫、腺腫、乳癌、前立腺癌、カポージ肉腫および卵巣癌を含むが、これらに
限定されない）；自己免疫障害（例えば、多発性硬化症、シェーグレン症候群、
橋本甲状腺炎、胆汁性肝硬変、ベーチェット病（Ｂｅｈｃｅｔ’ｓ ｄｉｓｅａ
ｓｅ）、クローン病、多発性筋炎、全身性エリテマトーデスおよび免疫関連糸球
体腎炎ならびに慢性関節リウマチ）およびウイルス感染（例えば、ヘルペスウイ
ルス、ポックスウイルスおよびアデノウイルス）、炎症、対宿主性移植片病、急
性移植片拒絶、ならびに慢性移植片拒絶、が挙げられる。好ましい実施形態にお
いて、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプ
チド、および／またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアンタゴニストは
、特に上記に列挙される、癌の増殖、進行、および／または転移（ｍｅｔａｓｉ
ｓ）を阻害するために使用される。
【０３２６】
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストによって処置あるいは検出され得る細胞生存の増大に関連するさらなる疾患
または状態には、悪性疾患の進行および／または転移ならびに以下のような関連
する障害が挙げられるが、これらに限定されない：白血病（急性白血病（例えば
、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（骨髄芽球性、前骨髄球性、骨髄単球
性、単球性および赤白血病を含む）を含む）ならびに慢性白血病（例えば、慢性
骨髄性（顆粒球性）白血病および慢性リンパ球性白血病））、真性赤血球増加症
、リンパ腫（例えば、ホジキン病および非ホジキン病）、多発性骨髄腫、ヴァル
デンストレームマクログロブリン血症、Ｈ鎖病、ならびに固形腫瘍（肉腫および
癌腫（例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫
、血管肉腫、内皮肉腫（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ）、リンパ管肉腫
、リンパ管内皮腫、骨膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫
、結腸癌腫、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌
、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原生癌
、腎細胞癌、肝細胞癌腫、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胎生期癌、ウィルムス
腫瘍、頸部癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、神経
膠星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、脳室上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細
胞腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫（ｍｅｎａｎｇｉｏｍａ）、黒色腫、
神経芽細胞腫、および網膜芽細胞腫）を含むが、これらに限定されない）。
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストによって処置あるいは検出され得る細胞生存の増大に関連するさらなる疾患
または状態には、悪性疾患の進行および／または転移ならびに以下のような関連
する障害が挙げられるが、これらに限定されない：白血病（急性白血病（例えば
、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（骨髄芽球性、前骨髄球性、骨髄単球
性、単球性および赤白血病を含む）を含む）ならびに慢性白血病（例えば、慢性
骨髄性（顆粒球性）白血病および慢性リンパ球性白血病））、真性赤血球増加症
、リンパ腫（例えば、ホジキン病および非ホジキン病）、多発性骨髄腫、ヴァル
デンストレームマクログロブリン血症、Ｈ鎖病、ならびに固形腫瘍（肉腫および
癌腫（例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫
、血管肉腫、内皮肉腫（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ）、リンパ管肉腫
、リンパ管内皮腫、骨膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫
、結腸癌腫、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌
、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原生癌
、腎細胞癌、肝細胞癌腫、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胎生期癌、ウィルムス
腫瘍、頸部癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、神経
膠星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、脳室上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細
胞腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫（ｍｅｎａｎｇｉｏｍａ）、黒色腫、
神経芽細胞腫、および網膜芽細胞腫）を含むが、これらに限定されない）。
【０３２７】
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストによって処置あるいは検出され得るアポトーシスの増大に関連する疾患には
、以下が挙げられる：ＡＩＤＳ；神経変性障害（例えば、アルツハイマー病、パ
ーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、色素性網膜炎、小脳変性および脳腫瘍また
は以前に関連した疾患）；自己免疫障害（例えば、多発性硬化症、シェーグレン
症候群、橋本甲状腺炎、胆汁性肝硬変、ベーチェット病（Ｂｅｈｃｅｔ’ｓ ｄ
ｉｓｅａｓｅ）、クローン病、多発性筋炎、全身性エリテマトーデスおよび免疫
関連糸球体腎炎ならびに慢性関節リウマチ）、脊髄形成異常症候群（例えば、再
生不良性貧血）、対宿主性移植片病、虚血性傷害（心筋梗塞、発作および再灌流
傷害によって生じるようなもの）、肝臓傷害（例えば、肝炎関連肝臓傷害、虚血
／再灌流傷害、胆汁うっ滞（ｃｈｏｌｅｓｔｏｓｉｓ）（胆管傷害）および肝臓
癌）；毒物誘導性肝臓疾患（アルコールによって引き起こされるようなもの）、
敗血症性ショック、悪液質ならびに食欲不振。
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストによって処置あるいは検出され得るアポトーシスの増大に関連する疾患には
、以下が挙げられる：ＡＩＤＳ；神経変性障害（例えば、アルツハイマー病、パ
ーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、色素性網膜炎、小脳変性および脳腫瘍また
は以前に関連した疾患）；自己免疫障害（例えば、多発性硬化症、シェーグレン
症候群、橋本甲状腺炎、胆汁性肝硬変、ベーチェット病（Ｂｅｈｃｅｔ’ｓ ｄ
ｉｓｅａｓｅ）、クローン病、多発性筋炎、全身性エリテマトーデスおよび免疫
関連糸球体腎炎ならびに慢性関節リウマチ）、脊髄形成異常症候群（例えば、再
生不良性貧血）、対宿主性移植片病、虚血性傷害（心筋梗塞、発作および再灌流
傷害によって生じるようなもの）、肝臓傷害（例えば、肝炎関連肝臓傷害、虚血
／再灌流傷害、胆汁うっ滞（ｃｈｏｌｅｓｔｏｓｉｓ）（胆管傷害）および肝臓
癌）；毒物誘導性肝臓疾患（アルコールによって引き起こされるようなもの）、
敗血症性ショック、悪液質ならびに食欲不振。
【０３２８】
（創傷治癒および上皮細胞増殖）
本発明のなおさらなる局面に従って、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポ
リヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥ
ＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストを、治療目的のため、例えば、創傷
治癒の目的のために上皮細胞増殖および基底ケラチノサイトを刺激するため、な
らびに毛包産生および皮膚創傷の治癒を刺激するために、利用するためのプロセ
スが提供される。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしく
はポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストも
しくはアンタゴニストは、以下を含む創傷治癒を刺激することにおいて臨床的に
有用であり得る：外科的創傷、切除の創傷、深い創傷（真皮および表皮の損傷を
含む）、眼組織の創傷、歯の組織の創傷、口腔の創傷、糖尿病性潰瘍、皮膚の潰
瘍、肘の潰瘍、動脈性の潰瘍、静脈うっ滞潰瘍、熱への曝露または化学物質によ
る熱傷、および他の異常な創傷治癒状態（例えば、尿毒症、栄養失調、ビタミン
欠乏、ならびにステロイド、放射能療法および抗腫瘍性薬物および代謝拮抗物質
を用いる全身性処置に関連する合併症）。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２
ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭ
ＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、皮膚の欠失後の皮膚の回復を
促進するために使用され得る。
リヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥ
ＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストを、治療目的のため、例えば、創傷
治癒の目的のために上皮細胞増殖および基底ケラチノサイトを刺激するため、な
らびに毛包産生および皮膚創傷の治癒を刺激するために、利用するためのプロセ
スが提供される。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしく
はポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストも
しくはアンタゴニストは、以下を含む創傷治癒を刺激することにおいて臨床的に
有用であり得る：外科的創傷、切除の創傷、深い創傷（真皮および表皮の損傷を
含む）、眼組織の創傷、歯の組織の創傷、口腔の創傷、糖尿病性潰瘍、皮膚の潰
瘍、肘の潰瘍、動脈性の潰瘍、静脈うっ滞潰瘍、熱への曝露または化学物質によ
る熱傷、および他の異常な創傷治癒状態（例えば、尿毒症、栄養失調、ビタミン
欠乏、ならびにステロイド、放射能療法および抗腫瘍性薬物および代謝拮抗物質
を用いる全身性処置に関連する合併症）。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２
ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭ
ＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、皮膚の欠失後の皮膚の回復を
促進するために使用され得る。
【０３２９】
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストは、創傷床（ｗｏｕｎｄ ｂｅｄ）への皮膚移植片の付着を増大するため
、および創傷床からの再上皮形成を刺激するために使用され得る。以下は、ＭＥ
ＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ＭＥＴ
Ｈ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストまたはアンタゴニストが創傷床への
付着を増大するために使用され得る、移植片の型である：自家移植片、人工皮膚
、同種移植片（ａｌｌｏｇｒａｆｔ）、自己植皮片、自己表皮移植片（ａｕｔｏ
ｅｐｄｅｒｍｉｃ ｇｒａｆｔ）、無血管性（ａｖａｃｕｌａｒ）移植片、ブレ
ア−ブラウン移植片、骨移植片、胚胎組織移植片、真皮移植片、遅延移植片、皮
膚移植片、表皮移植片、筋膜移植片、全層皮膚移植片、異種移植片（ｈｅｔｅｒ
ｏｌｏｇｏｕｓ ｇｒａｆｔ）、異種移植片（ｘｅｎｏｇｒａｆｔ）、同種移植
片（ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ ｇｒａｆｔ）、増殖性移植片、層板状の移植片、網
状移植片、粘膜移植片、オリエ−ティールシュ移植片、大網移植片（ｏｍｅｎｐ
ａｌ ｇｒａｆｔ）、パッチの移植片、茎状移植片、全層移植片（ｐｅｎｅｔｒ
ａｔｉｎｇ ｇｒａｆｔ）、分層植皮片、分層皮膚移植片。ＭＥＴＨ１および/
またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１
および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、皮膚の強度
を助長するため、および高齢の皮膚の外見を改善するために使用され得る。
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストは、創傷床（ｗｏｕｎｄ ｂｅｄ）への皮膚移植片の付着を増大するため
、および創傷床からの再上皮形成を刺激するために使用され得る。以下は、ＭＥ
ＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ＭＥＴ
Ｈ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストまたはアンタゴニストが創傷床への
付着を増大するために使用され得る、移植片の型である：自家移植片、人工皮膚
、同種移植片（ａｌｌｏｇｒａｆｔ）、自己植皮片、自己表皮移植片（ａｕｔｏ
ｅｐｄｅｒｍｉｃ ｇｒａｆｔ）、無血管性（ａｖａｃｕｌａｒ）移植片、ブレ
ア−ブラウン移植片、骨移植片、胚胎組織移植片、真皮移植片、遅延移植片、皮
膚移植片、表皮移植片、筋膜移植片、全層皮膚移植片、異種移植片（ｈｅｔｅｒ
ｏｌｏｇｏｕｓ ｇｒａｆｔ）、異種移植片（ｘｅｎｏｇｒａｆｔ）、同種移植
片（ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ ｇｒａｆｔ）、増殖性移植片、層板状の移植片、網
状移植片、粘膜移植片、オリエ−ティールシュ移植片、大網移植片（ｏｍｅｎｐ
ａｌ ｇｒａｆｔ）、パッチの移植片、茎状移植片、全層移植片（ｐｅｎｅｔｒ
ａｔｉｎｇ ｇｒａｆｔ）、分層植皮片、分層皮膚移植片。ＭＥＴＨ１および/
またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１
および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、皮膚の強度
を助長するため、および高齢の皮膚の外見を改善するために使用され得る。
【０３３０】
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストはまた、肝細胞増殖、および肺、乳房、膵臓、胃、小腸（ｓｍａｌｌ ｉ
ｎｔｅｓｔｉｎｇ）、および大腸における上皮細胞増殖における変化を生じると
考えられる。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポ
リペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしく
はアンタゴニストは、上皮細胞（例えば、皮脂細胞（ｓｅｂｏｃｙｔｅ）、毛包
、肝実質細胞、肺胞上皮細胞ＩＩ型（ｔｙｐｅ ＩＩ ｐｎｅｕｍｏｃｙｔｅ）
、ムチン産生杯細胞、および他の上皮細胞、ならびに皮膚、肺、肝臓、および胃
腸管内に含まれるそれらの先祖）の増殖を促進し得る。ＭＥＴＨ１および/また
はＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ＭＥＴＨ１および/また
はＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、内皮細胞、ケラチノサイ
ト、および基底ケラチノサイトの増殖を促進し得る。
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストはまた、肝細胞増殖、および肺、乳房、膵臓、胃、小腸（ｓｍａｌｌ ｉ
ｎｔｅｓｔｉｎｇ）、および大腸における上皮細胞増殖における変化を生じると
考えられる。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポ
リペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしく
はアンタゴニストは、上皮細胞（例えば、皮脂細胞（ｓｅｂｏｃｙｔｅ）、毛包
、肝実質細胞、肺胞上皮細胞ＩＩ型（ｔｙｐｅ ＩＩ ｐｎｅｕｍｏｃｙｔｅ）
、ムチン産生杯細胞、および他の上皮細胞、ならびに皮膚、肺、肝臓、および胃
腸管内に含まれるそれらの先祖）の増殖を促進し得る。ＭＥＴＨ１および/また
はＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ＭＥＴＨ１および/また
はＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、内皮細胞、ケラチノサイ
ト、および基底ケラチノサイトの増殖を促進し得る。
【０３３１】
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストはまた、照射、化学療法処置またはウイルス感染から生じる腸の毒性の副
作用を低減するために使用され得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリ
ヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴ
Ｈ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、小腸粘膜上で細胞保護的な効果を
有し得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリ
ペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくは
アンタゴニストはまた、化学療法およびウイルス感染から生じる粘膜炎（ｍｕｃ
ｏｓｉｔｉｓ）（口粘膜）の治癒を刺激し得る。
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストはまた、照射、化学療法処置またはウイルス感染から生じる腸の毒性の副
作用を低減するために使用され得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリ
ヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴ
Ｈ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、小腸粘膜上で細胞保護的な効果を
有し得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリ
ペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくは
アンタゴニストはまた、化学療法およびウイルス感染から生じる粘膜炎（ｍｕｃ
ｏｓｉｔｉｓ）（口粘膜）の治癒を刺激し得る。
【０３３２】
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストは、熱傷を含む、完全なおよび部分的な厚さの皮膚欠損における皮膚の十
分な再生（すなわち、毛包、汗腺、および皮脂腺の再増殖）、乾癬のような他の
皮膚欠損の処置においてさらに使用され得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴ
Ｈ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/また
はＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、表皮水疱症、これらの損
傷の再上皮形成を促進することによる頻繁な開放性かつ疼痛性の水疱を生じる内
在的な真皮への表皮の接着における欠損を処置するために使用され得る。ＭＥＴ
Ｈ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならび
にＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは
また、胃潰瘍および十二指腸潰瘍を処置し、そして粘膜の内層の瘢痕形成ならび
により迅速な腺の粘膜および十二指腸の粘膜の内層の再生による治癒を助けるた
めに使用され得る。炎症性腸疾患（例えば、クーロン病および潰瘍性大腸結腸炎
）は、それぞれ、小腸または大腸の粘膜表面の崩壊を生じる疾患である。従って
、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストは、粘膜表面の再表面化（ｒｅｓｕｌｆａｃｉｎｇ）を促進して、より迅
速な治癒を助けるため、および炎症性腸疾患の進行を予防するために、使用され
得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプ
チド、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニス
トを用いる処置は、胃腸管全体の粘膜の産生に対して有意な効果を有することが
予測され、そして腸粘膜を、摂取されたかまたは外科手術後の有害な物質から保
護するために使用され得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオ
チドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のア
ゴニストもしくはアンタゴニストは、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリ
ヌクレオチドの発現下に関連する疾患を処置するために使用され得る。
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストは、熱傷を含む、完全なおよび部分的な厚さの皮膚欠損における皮膚の十
分な再生（すなわち、毛包、汗腺、および皮脂腺の再増殖）、乾癬のような他の
皮膚欠損の処置においてさらに使用され得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴ
Ｈ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/また
はＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、表皮水疱症、これらの損
傷の再上皮形成を促進することによる頻繁な開放性かつ疼痛性の水疱を生じる内
在的な真皮への表皮の接着における欠損を処置するために使用され得る。ＭＥＴ
Ｈ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならび
にＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは
また、胃潰瘍および十二指腸潰瘍を処置し、そして粘膜の内層の瘢痕形成ならび
により迅速な腺の粘膜および十二指腸の粘膜の内層の再生による治癒を助けるた
めに使用され得る。炎症性腸疾患（例えば、クーロン病および潰瘍性大腸結腸炎
）は、それぞれ、小腸または大腸の粘膜表面の崩壊を生じる疾患である。従って
、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストは、粘膜表面の再表面化（ｒｅｓｕｌｆａｃｉｎｇ）を促進して、より迅
速な治癒を助けるため、および炎症性腸疾患の進行を予防するために、使用され
得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプ
チド、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニス
トを用いる処置は、胃腸管全体の粘膜の産生に対して有意な効果を有することが
予測され、そして腸粘膜を、摂取されたかまたは外科手術後の有害な物質から保
護するために使用され得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオ
チドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のア
ゴニストもしくはアンタゴニストは、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリ
ヌクレオチドの発現下に関連する疾患を処置するために使用され得る。
【０３３３】
さらに、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリ
ペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくは
アンタゴニストは、種々の病的状態に起因する肺への損傷を予防および治癒する
ために使用され得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドも
しくはポリペプチド、および／またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のア
ゴニストもしくはアンタゴニストは、急性または慢性の肺損傷を予防または処置
するために、増殖および分化を刺激し得、そして肺胞および気管支（ｂｒｏｃｈ
ｉｏｌａｒ）上皮の修復を促進し得る。例えば、気管支上皮および肺胞（ａｖｅ
ｏｌｉ）の壊死を生じる、気腫（これは、肺胞の進行性の損失を生じる）および
吸入損傷（すなわち、煙の吸入および熱傷から生じる）は、ＭＥＴＨ１および/
またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ＭＥＴＨ１および/
またはＭＥＴＨ２のアゴニストまたはアンタゴニストを使用して効果的に処置さ
れ得る。また、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくは
ポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもし
くはアンタゴニストは、肺胞上皮細胞ＩＩ型の増殖および分化を刺激するために
使用され得、これは、未熟な乳児における硝子膜疾患（例えば、乳児呼吸窮迫症
候群および気管支肺異形成症）のような疾患を処置または予防することを助け得
る。
ペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくは
アンタゴニストは、種々の病的状態に起因する肺への損傷を予防および治癒する
ために使用され得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドも
しくはポリペプチド、および／またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のア
ゴニストもしくはアンタゴニストは、急性または慢性の肺損傷を予防または処置
するために、増殖および分化を刺激し得、そして肺胞および気管支（ｂｒｏｃｈ
ｉｏｌａｒ）上皮の修復を促進し得る。例えば、気管支上皮および肺胞（ａｖｅ
ｏｌｉ）の壊死を生じる、気腫（これは、肺胞の進行性の損失を生じる）および
吸入損傷（すなわち、煙の吸入および熱傷から生じる）は、ＭＥＴＨ１および/
またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ＭＥＴＨ１および/
またはＭＥＴＨ２のアゴニストまたはアンタゴニストを使用して効果的に処置さ
れ得る。また、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくは
ポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもし
くはアンタゴニストは、肺胞上皮細胞ＩＩ型の増殖および分化を刺激するために
使用され得、これは、未熟な乳児における硝子膜疾患（例えば、乳児呼吸窮迫症
候群および気管支肺異形成症）のような疾患を処置または予防することを助け得
る。
【０３３４】
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストは、肝実質細胞の増殖および分化を刺激し得、そして従って、肝臓疾患お
よび病状（例えば、肝硬変により生じる劇症肝不全、肝炎ウイルスおよび毒性物
質（すなわち、アセトアミノフェン、四塩化炭素（ｃａｒｂｏｎ ｔｅｔｒａｈ
ｏｌｏｒｉｄｅ）、および他の当該分野で公知の肝臓毒素）により生じる肝臓損
傷）を緩和または処置するために使用され得る。
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストは、肝実質細胞の増殖および分化を刺激し得、そして従って、肝臓疾患お
よび病状（例えば、肝硬変により生じる劇症肝不全、肝炎ウイルスおよび毒性物
質（すなわち、アセトアミノフェン、四塩化炭素（ｃａｒｂｏｎ ｔｅｔｒａｈ
ｏｌｏｒｉｄｅ）、および他の当該分野で公知の肝臓毒素）により生じる肝臓損
傷）を緩和または処置するために使用され得る。
【０３３５】
さらに、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリ
ペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくは
アンタゴニストは、真性糖尿病の発症を処置または予防するために使用され得る
。新たにＩ型糖尿病およびＩＩ型糖尿病と診断された患者において、いくつかの
島細胞機能が残っている場合、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレ
オチドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２の
アゴニストもしくはアンタゴニストは、その疾患の持続性の発現を緩和、遅延ま
たは予防するように、その島機能を維持するために使用され得る。また、ＭＥＴ
Ｈ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくポリペプチド、ならびに
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストまたはアンタゴニストは、島
細胞機能を改善または促進するための島細胞移植における補助として使用され得
る。
ペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくは
アンタゴニストは、真性糖尿病の発症を処置または予防するために使用され得る
。新たにＩ型糖尿病およびＩＩ型糖尿病と診断された患者において、いくつかの
島細胞機能が残っている場合、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレ
オチドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２の
アゴニストもしくはアンタゴニストは、その疾患の持続性の発現を緩和、遅延ま
たは予防するように、その島機能を維持するために使用され得る。また、ＭＥＴ
Ｈ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくポリペプチド、ならびに
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストまたはアンタゴニストは、島
細胞機能を改善または促進するための島細胞移植における補助として使用され得
る。
【０３３６】
（感染性疾患）
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストは、感染因子を処置または検出するために用いられ得る。例えば、免疫応
答を上昇させることによって、特にＢ細胞および／またはＴ細胞の増殖および分
化を増加させることによって、感染性疾患が処置され得る。免疫応答は、既存の
免疫応答を上昇させるか、または新たな免疫応答を開始させるかのいずれかによ
り上昇され得る。あるいは、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオ
チドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のア
ゴニストもしくはアンタゴニストはまた、必ずしも免疫応答を誘発することなく
、感染因子を直接阻害し得る。
、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴ
ニストは、感染因子を処置または検出するために用いられ得る。例えば、免疫応
答を上昇させることによって、特にＢ細胞および／またはＴ細胞の増殖および分
化を増加させることによって、感染性疾患が処置され得る。免疫応答は、既存の
免疫応答を上昇させるか、または新たな免疫応答を開始させるかのいずれかによ
り上昇され得る。あるいは、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオ
チドもしくはポリペプチド、ならびにＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のア
ゴニストもしくはアンタゴニストはまた、必ずしも免疫応答を誘発することなく
、感染因子を直接阻害し得る。
【０３３７】
ウイルスは、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくは
ポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしく
はアンタゴニストにより処置または検出され得る疾患または症状を引き起こし得
る感染因子の一例である。ウイルスの例としては、以下のＤＮＡおよびＲＮＡの
ウイルスおよびウイルス科が挙げられるがこれらに限定されない：アルボウイル
ス、アデノウイルス科、アレナウイルス科、アルテリウイルス、ビルナウイルス
科、ブンヤウイルス科、カルシウイルス科、サルコウイルス科（Ｃｉｒｃｏｖｉ
ｒｉｄａｅ）、コロナウイルス科、デング熱、ＥＢＶ、ＨＩＶ、フラビウイルス
科、ヘパドナウイルス科（肝炎）、ヘルペスウイルス科（例えば、サイトメガロ
ウイルス、単純ヘルペス、ヘルペス帯状疱疹）、モノネガウイルス（Ｍｏｎｏｎ
ｅｇａｖｉｒｕｓ）（例えば、パラミクソウイルス科、麻疹ウイルス、ラブドウ
イルス科）、オルソミクソウイルス科（例えば、インフルエンザＡ、インフルエ
ンザＢ、およびパラインフルエンザ）、パピローマウイルス、パポバウイルス科
、パルボウイルス科、ピコルナウイルス科、ポックスウイルス科（例えば、痘瘡
またはワクシニア）、レオウイルス科（例えば、ロタウイルス）、レトロウイル
ス科（ＨＴＬＶ−Ｉ、ＨＴＬＶ−ＩＩ、レンチウイルス）、およびトガウイルス
科（例えば、ルビウイルス属）。これらの科内に入るウイルスは、以下を含むが
これらに限定されない種々の疾患または症状を引き起こし得る：関節炎、細気管
支炎（ｂｒｏｎｃｈｉｏｌｌｉｔｉｓ）、呼吸性シンシチウムウイルス、脳炎、
眼性感染症（例えば、結膜炎、角膜炎）、慢性疲労症候群、肝炎（Ａ型、Ｂ型、
Ｃ型、Ｅ型、慢性活動性、デルタ）、日本脳炎Ｂ型、アルゼンチン出血熱、チン
グニア、リフトバレー熱、黄熱病、髄膜炎、日和見感染症（例えば、ＡＩＤＳ）
、肺炎、バーキットリンパ腫、水痘、出血熱、麻疹、流行性耳下腺炎、パライン
フルエンザ、狂犬病、感冒、ポリオ、白血病、風疹、性感染症、皮膚病（例えば
、カポージ、いぼ）、およびウイルス血症。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ
２ポリペプチドもしくはポリヌクレオチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭ
ＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストを用いて、任意のこれらの症状ま
たは疾患が処置または検出され得る。特定の実施形態において、ＭＥＴＨ１およ
び/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド、ポリペプチド、またはＭＥＴＨ１およ
び/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、以下の処置に使
用される：髄膜炎、デング熱、ＥＢＶ、および／または肝炎（例えば、Ｂ型肝炎
）。さらなる具体的な実施形態において、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２
ポリヌクレオチド、ポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２
のアゴニストもしくはアンタゴニストは、１以上の他の市販の肝炎ワクチンに非
応答性の患者を処置するために使用される。さらに具体的な実施形態において、
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド、ポリペプチド、または
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、
ＡＩＤＳを処置するために使用される。
ポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしく
はアンタゴニストにより処置または検出され得る疾患または症状を引き起こし得
る感染因子の一例である。ウイルスの例としては、以下のＤＮＡおよびＲＮＡの
ウイルスおよびウイルス科が挙げられるがこれらに限定されない：アルボウイル
ス、アデノウイルス科、アレナウイルス科、アルテリウイルス、ビルナウイルス
科、ブンヤウイルス科、カルシウイルス科、サルコウイルス科（Ｃｉｒｃｏｖｉ
ｒｉｄａｅ）、コロナウイルス科、デング熱、ＥＢＶ、ＨＩＶ、フラビウイルス
科、ヘパドナウイルス科（肝炎）、ヘルペスウイルス科（例えば、サイトメガロ
ウイルス、単純ヘルペス、ヘルペス帯状疱疹）、モノネガウイルス（Ｍｏｎｏｎ
ｅｇａｖｉｒｕｓ）（例えば、パラミクソウイルス科、麻疹ウイルス、ラブドウ
イルス科）、オルソミクソウイルス科（例えば、インフルエンザＡ、インフルエ
ンザＢ、およびパラインフルエンザ）、パピローマウイルス、パポバウイルス科
、パルボウイルス科、ピコルナウイルス科、ポックスウイルス科（例えば、痘瘡
またはワクシニア）、レオウイルス科（例えば、ロタウイルス）、レトロウイル
ス科（ＨＴＬＶ−Ｉ、ＨＴＬＶ−ＩＩ、レンチウイルス）、およびトガウイルス
科（例えば、ルビウイルス属）。これらの科内に入るウイルスは、以下を含むが
これらに限定されない種々の疾患または症状を引き起こし得る：関節炎、細気管
支炎（ｂｒｏｎｃｈｉｏｌｌｉｔｉｓ）、呼吸性シンシチウムウイルス、脳炎、
眼性感染症（例えば、結膜炎、角膜炎）、慢性疲労症候群、肝炎（Ａ型、Ｂ型、
Ｃ型、Ｅ型、慢性活動性、デルタ）、日本脳炎Ｂ型、アルゼンチン出血熱、チン
グニア、リフトバレー熱、黄熱病、髄膜炎、日和見感染症（例えば、ＡＩＤＳ）
、肺炎、バーキットリンパ腫、水痘、出血熱、麻疹、流行性耳下腺炎、パライン
フルエンザ、狂犬病、感冒、ポリオ、白血病、風疹、性感染症、皮膚病（例えば
、カポージ、いぼ）、およびウイルス血症。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ
２ポリペプチドもしくはポリヌクレオチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭ
ＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストを用いて、任意のこれらの症状ま
たは疾患が処置または検出され得る。特定の実施形態において、ＭＥＴＨ１およ
び/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド、ポリペプチド、またはＭＥＴＨ１およ
び/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、以下の処置に使
用される：髄膜炎、デング熱、ＥＢＶ、および／または肝炎（例えば、Ｂ型肝炎
）。さらなる具体的な実施形態において、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２
ポリヌクレオチド、ポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２
のアゴニストもしくはアンタゴニストは、１以上の他の市販の肝炎ワクチンに非
応答性の患者を処置するために使用される。さらに具体的な実施形態において、
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド、ポリペプチド、または
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、
ＡＩＤＳを処置するために使用される。
【０３３８】
同様に、疾患または症状を引き起こし得、かつＭＥＴＨ１および/またはＭＥ
ＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/また
はＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストによって処置または検出され
得る細菌性因子あるいは真菌性因子は、以下のグラム陰性およびグラム陽性細菌
および細菌科ならびに真菌を含むがこれらに限定されない：Ａｃｔｉｎｏｍｙｃ
ｅｔａｌｅｓ（例えば、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅ
ｒｉｕｍ、Ｎｏｒｃａｒｄｉａ）、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍ
ａｎｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｏｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ（例えば、Ａｎ
ｔｈｒａｘ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄａｃｅａｅ、Ｂｌ
ａｓｔｏｍｙｃｏｓｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ（例えば、
Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）、Ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ、Ｃａ
ｎｄｉｄｉａｓｉｓ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｏｍ
ｙｃｏｓｉｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｏｓｉｓ、Ｄｅｒｍａｔｏｃｙｃｏｓｅｓ
、Ｅ．ｃｏｌｉ（例えば、Ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃ Ｅ．ｃｏｌｉおよ
びＥｎｔｅｒｏｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃ
ｔｅｒｉａｃｅａｅ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ（例えば、
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉ、およびＳａｌｍｏｎｅｌｌａ ｐａｒａｔ
ｙｐｈｉ）、Ｓｅｒｒａｔｉａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ）、Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈ
ｒｉｘ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌｏｓｉｓ、Ｌｅｐｔｏ
ｓｐｉｒｏｓｉｓ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｔａｌｅｓ、Ｍｙ
ｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ、Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｎ
ｅｉｓｓｅｒｉａｃｅａｅ（例えば、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ、Ｇｏｎｏｒ
ｒｈｅａ、Ｍｅｎｉｇｏｃｏｃｃａｌ）、Ｍｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉ
ｔｉｄｉｓ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａｃｅａの感染症（例えば、Ａｃｔｉｎｏｂ
ａｃｉｌｌｕｓ、Ｈｅａｍｏｐｈｉｌｕｓ（例えば、Ｈｅａｍｏｐｈｉｌｕｓイ
ンフルエンザＢ型）、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｒ
ｉｃｋｅｔｔｓｉａｃｅａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｃｅａｅ、Ｓｙｐｈｉｌｉｓ
、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｓｐｐ．、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌ、Ｍｅｎｉｎｇ
ｉｏｃｏｃｃａｌ、ＰｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌならびにＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃ
ａｌ（例えば、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅおよびＢ群
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）。これらの細菌または真菌の科は、以下を含むが
これらに限定されない疾患または症状を引き起こし得る：菌血症、心内膜炎、眼
感染症（結膜炎、結核、ブドウ膜炎）、歯肉炎、日和見感染症（例えば、ＡＩＤ
Ｓに関連した感染症）、爪周囲炎、プロテーゼ関連感染症、ライター病、気道感
染症（例えば、百日咳または蓄膿症）、敗血症、ライム病、ネコ引っ掻き病、赤
痢、パラチフス熱、食中毒、腸チフス、肺炎、淋病、髄膜炎（例えば、髄膜炎Ａ
型およびＢ型）、クラミジア、梅毒、ジフテリア、ライ病、パラ結核、結核、狼
瘡、ボツリヌス中毒、壊疽、破傷風、膿痂疹、リウマチ熱、猩紅熱、性感染病、
皮膚病（例えば、蜂巣炎、皮膚真菌症（ｄｅｒｍａｔｏｃｙｃｏｓｅｓ））、毒
血症、尿路感染症、創傷感染症。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリペプ
チドもしくはポリヌクレオチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２の
アゴニストもしくはアンタゴニストを用いて、任意のこれらの症状もしくは疾患
を処置または検出し得る。
ＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/また
はＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストによって処置または検出され
得る細菌性因子あるいは真菌性因子は、以下のグラム陰性およびグラム陽性細菌
および細菌科ならびに真菌を含むがこれらに限定されない：Ａｃｔｉｎｏｍｙｃ
ｅｔａｌｅｓ（例えば、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅ
ｒｉｕｍ、Ｎｏｒｃａｒｄｉａ）、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍ
ａｎｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｏｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ（例えば、Ａｎ
ｔｈｒａｘ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄａｃｅａｅ、Ｂｌ
ａｓｔｏｍｙｃｏｓｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ（例えば、
Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）、Ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ、Ｃａ
ｎｄｉｄｉａｓｉｓ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｏｍ
ｙｃｏｓｉｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｏｓｉｓ、Ｄｅｒｍａｔｏｃｙｃｏｓｅｓ
、Ｅ．ｃｏｌｉ（例えば、Ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃ Ｅ．ｃｏｌｉおよ
びＥｎｔｅｒｏｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃ
ｔｅｒｉａｃｅａｅ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ（例えば、
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉ、およびＳａｌｍｏｎｅｌｌａ ｐａｒａｔ
ｙｐｈｉ）、Ｓｅｒｒａｔｉａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ）、Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈ
ｒｉｘ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌｏｓｉｓ、Ｌｅｐｔｏ
ｓｐｉｒｏｓｉｓ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｔａｌｅｓ、Ｍｙ
ｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ、Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｎ
ｅｉｓｓｅｒｉａｃｅａｅ（例えば、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ、Ｇｏｎｏｒ
ｒｈｅａ、Ｍｅｎｉｇｏｃｏｃｃａｌ）、Ｍｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉ
ｔｉｄｉｓ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａｃｅａの感染症（例えば、Ａｃｔｉｎｏｂ
ａｃｉｌｌｕｓ、Ｈｅａｍｏｐｈｉｌｕｓ（例えば、Ｈｅａｍｏｐｈｉｌｕｓイ
ンフルエンザＢ型）、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｒ
ｉｃｋｅｔｔｓｉａｃｅａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｃｅａｅ、Ｓｙｐｈｉｌｉｓ
、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｓｐｐ．、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌ、Ｍｅｎｉｎｇ
ｉｏｃｏｃｃａｌ、ＰｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌならびにＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃ
ａｌ（例えば、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅおよびＢ群
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）。これらの細菌または真菌の科は、以下を含むが
これらに限定されない疾患または症状を引き起こし得る：菌血症、心内膜炎、眼
感染症（結膜炎、結核、ブドウ膜炎）、歯肉炎、日和見感染症（例えば、ＡＩＤ
Ｓに関連した感染症）、爪周囲炎、プロテーゼ関連感染症、ライター病、気道感
染症（例えば、百日咳または蓄膿症）、敗血症、ライム病、ネコ引っ掻き病、赤
痢、パラチフス熱、食中毒、腸チフス、肺炎、淋病、髄膜炎（例えば、髄膜炎Ａ
型およびＢ型）、クラミジア、梅毒、ジフテリア、ライ病、パラ結核、結核、狼
瘡、ボツリヌス中毒、壊疽、破傷風、膿痂疹、リウマチ熱、猩紅熱、性感染病、
皮膚病（例えば、蜂巣炎、皮膚真菌症（ｄｅｒｍａｔｏｃｙｃｏｓｅｓ））、毒
血症、尿路感染症、創傷感染症。ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリペプ
チドもしくはポリヌクレオチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２の
アゴニストもしくはアンタゴニストを用いて、任意のこれらの症状もしくは疾患
を処置または検出し得る。
【０３３９】
さらに、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリ
ペプチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはア
ンタゴニストにより処置または検出され得る、寄生生物性因子が引き起こす疾患
または症状としては以下のファミリーまたはクラスが挙げられるがこれらに限定
されない：アメーバ症、バベシア症、コクシジウム症、クリプトスポリジウム症
、二核アメーバ症（Ｄｉｅｎｔａｍｏｅｂｉａｓｉｓ）、交疫、外部寄生生物性
、ジアルジア鞭毛虫症、蠕虫症、リーシュマニア症、タイレリア症、トキソプラ
スマ症、トリパノソーマ症、およびトリコモナス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ）症
、ならびに胞子虫症（Ｓｐｏｒｏｚｏａｎ）（例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ
ｖｉｒａｘ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｉｕｍ、Ｐｌａｓｍｏｄ
ｉｕｍ ｍａｌａｒｉａｅおよびＰｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｏｖａｌｅ）。これら
の寄生生物は、以下を含むがこれらに限定されない種々の疾患または症状を引き
起こし得る：疥癬、ツツガムシ病、眼性感染症、腸疾患（例えば、赤痢、ジアル
ジア鞭毛虫症）、肝臓疾患、肺疾患、日和見感染症（例えば、ＡＩＤＳ関連）、
マラリア、妊娠合併症、およびトキソプラスマ症。ＭＥＴＨ１および/またはＭ
ＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/ま
たはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストを用いて、任意のこれらの
症状または疾患を処置または検出し得る。
ペプチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはア
ンタゴニストにより処置または検出され得る、寄生生物性因子が引き起こす疾患
または症状としては以下のファミリーまたはクラスが挙げられるがこれらに限定
されない：アメーバ症、バベシア症、コクシジウム症、クリプトスポリジウム症
、二核アメーバ症（Ｄｉｅｎｔａｍｏｅｂｉａｓｉｓ）、交疫、外部寄生生物性
、ジアルジア鞭毛虫症、蠕虫症、リーシュマニア症、タイレリア症、トキソプラ
スマ症、トリパノソーマ症、およびトリコモナス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ）症
、ならびに胞子虫症（Ｓｐｏｒｏｚｏａｎ）（例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ
ｖｉｒａｘ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｉｕｍ、Ｐｌａｓｍｏｄ
ｉｕｍ ｍａｌａｒｉａｅおよびＰｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｏｖａｌｅ）。これら
の寄生生物は、以下を含むがこれらに限定されない種々の疾患または症状を引き
起こし得る：疥癬、ツツガムシ病、眼性感染症、腸疾患（例えば、赤痢、ジアル
ジア鞭毛虫症）、肝臓疾患、肺疾患、日和見感染症（例えば、ＡＩＤＳ関連）、
マラリア、妊娠合併症、およびトキソプラスマ症。ＭＥＴＨ１および/またはＭ
ＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/ま
たはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストを用いて、任意のこれらの
症状または疾患を処置または検出し得る。
【０３４０】
好ましくは、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドもしく
はポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもし
くはアンタゴニストは、患者に有効量のポリペプチドを投与するか、または患者
から細胞を取り出して、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド
をこの細胞に供給し、そして操作した細胞を患者に戻す（エキソビボ治療）かの
いずれかによるものであり得る。さらに、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２
ポリペプチドまたはポリヌクレオチドはワクチン中の抗原として用いられて、感
染性疾患に対する免疫応答を惹起し得る。
はポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもし
くはアンタゴニストは、患者に有効量のポリペプチドを投与するか、または患者
から細胞を取り出して、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド
をこの細胞に供給し、そして操作した細胞を患者に戻す（エキソビボ治療）かの
いずれかによるものであり得る。さらに、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２
ポリペプチドまたはポリヌクレオチドはワクチン中の抗原として用いられて、感
染性疾患に対する免疫応答を惹起し得る。
【０３４１】
（再生）
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストを用いて、細胞を分化させ、増殖させ、そして誘引して、組織の再生を導き
得る（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７６：５９−８７（１９９７）を参照のこと）。組織
の再生を用いて、先天性欠損、外傷（創傷、熱傷、切開、または潰瘍）、加齢、
疾患（例えば、骨粗鬆症、変形性関節炎（ｏｓｔｅｏｃａｒｔｈｒｉｔｉｓ）、
歯周病、肝不全）、美容形成手術を含む手術、線維症、再灌流傷害、もしくは全
身性サイトカイン損傷により損傷を受けた組織を修復、置換、または保護し得る
。
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストを用いて、細胞を分化させ、増殖させ、そして誘引して、組織の再生を導き
得る（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７６：５９−８７（１９９７）を参照のこと）。組織
の再生を用いて、先天性欠損、外傷（創傷、熱傷、切開、または潰瘍）、加齢、
疾患（例えば、骨粗鬆症、変形性関節炎（ｏｓｔｅｏｃａｒｔｈｒｉｔｉｓ）、
歯周病、肝不全）、美容形成手術を含む手術、線維症、再灌流傷害、もしくは全
身性サイトカイン損傷により損傷を受けた組織を修復、置換、または保護し得る
。
【０３４２】
本発明を用いて再生し得る組織としては、以下が挙げられる：器官（例えば、
膵臓、肝臓、腸、腎臓、皮膚、内皮）、筋肉（平滑筋、骨格筋、または心筋）、
血管系（血管およびリンパ管を含む）、神経、造血、および骨格（骨、軟骨、腱
、および靭帯）の組織。好ましくは、再生は、瘢痕なく、または瘢痕が低減され
て生じる。再生はまた、新脈管形成を含み得る。
膵臓、肝臓、腸、腎臓、皮膚、内皮）、筋肉（平滑筋、骨格筋、または心筋）、
血管系（血管およびリンパ管を含む）、神経、造血、および骨格（骨、軟骨、腱
、および靭帯）の組織。好ましくは、再生は、瘢痕なく、または瘢痕が低減され
て生じる。再生はまた、新脈管形成を含み得る。
【０３４３】
さらに、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリ
ペプチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはア
ンタゴニストは、治癒するのが困難な組織の再生を増加させ得る。例えば、腱／
靭帯の再生を増大させることによって、損傷後の回復時間が早まる。ＭＥＴＨ１
および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥ
ＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストはまた、
損傷を回避する試みにおいて予防的に使用され得る。処置され得る特定の疾患は
、腱炎、手根管症候群、および他の腱欠損または靭帯欠損を含む。非治癒創傷の
組織再生のさらなる例としては、褥瘡性潰瘍、脈管不全、外科的創傷、および外
傷性創傷に関連する潰瘍が挙げられる。
ペプチド、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはア
ンタゴニストは、治癒するのが困難な組織の再生を増加させ得る。例えば、腱／
靭帯の再生を増大させることによって、損傷後の回復時間が早まる。ＭＥＴＨ１
および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥ
ＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストはまた、
損傷を回避する試みにおいて予防的に使用され得る。処置され得る特定の疾患は
、腱炎、手根管症候群、および他の腱欠損または靭帯欠損を含む。非治癒創傷の
組織再生のさらなる例としては、褥瘡性潰瘍、脈管不全、外科的創傷、および外
傷性創傷に関連する潰瘍が挙げられる。
【０３４４】
同様に、神経および脳組織はまた、神経細胞を増殖および分化させるためにＭ
ＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ま
たはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニスト
を使用することによって再生され得る。本方法を用いて処置され得る疾患として
は、中枢神経系疾患および末梢神経系疾患、神経障害、または機械的および外傷
性障害（例えば、脊髄障害、頭部外傷、脳血管疾患、および発作（ｓｔｏｋｅ）
）が挙げられる。詳細には、末梢神経傷害と関連する疾患、末梢神経障害（例え
ば、化学療法または他の医学的療法から生じる）、局在神経障害、および中枢神
経系疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎
縮性側索硬化症、およびシャイ−ドレーガー症候群）はすべて、ＭＥＴＨ１およ
び/またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥＴ
Ｈ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストを用いて処
置され得る。
ＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ま
たはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニスト
を使用することによって再生され得る。本方法を用いて処置され得る疾患として
は、中枢神経系疾患および末梢神経系疾患、神経障害、または機械的および外傷
性障害（例えば、脊髄障害、頭部外傷、脳血管疾患、および発作（ｓｔｏｋｅ）
）が挙げられる。詳細には、末梢神経傷害と関連する疾患、末梢神経障害（例え
ば、化学療法または他の医学的療法から生じる）、局在神経障害、および中枢神
経系疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎
縮性側索硬化症、およびシャイ−ドレーガー症候群）はすべて、ＭＥＴＨ１およ
び/またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥＴ
Ｈ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストを用いて処
置され得る。
【０３４５】
（走化性）
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストは、走化性活性を有し得る。走化性分子は、細胞（例えば、単球、線維芽細
胞、好中球、Ｔ細胞、肥満細胞、好酸球、上皮細胞および／または内皮細胞）を
、身体中の特定の部位（例えば、炎症、感染、または過剰増殖の部位）に誘引ま
たは動員する。次いで、動員された細胞は、特定の外傷または異常性を撃退およ
び／または治癒し得る。
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストは、走化性活性を有し得る。走化性分子は、細胞（例えば、単球、線維芽細
胞、好中球、Ｔ細胞、肥満細胞、好酸球、上皮細胞および／または内皮細胞）を
、身体中の特定の部位（例えば、炎症、感染、または過剰増殖の部位）に誘引ま
たは動員する。次いで、動員された細胞は、特定の外傷または異常性を撃退およ
び／または治癒し得る。
【０３４６】
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストは、特定の細胞の走化性活性を増大し得る。次いで、これらの走化性分子を
使用して、身体中の特定の位置に標的化した細胞の数を増加させることによって
、炎症、感染、過剰増殖性障害、または任意の免疫系障害を処置し得る。例えば
、走化性分子を使用して、傷害を受けた位置に免疫細胞を誘引することによって
、組織に対する創傷および他の外傷を処置し得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭ
ＥＴＨ２走化性分子はまた、線維芽細胞を誘引し得、これは創傷を処置するため
に使用され得る。
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストは、特定の細胞の走化性活性を増大し得る。次いで、これらの走化性分子を
使用して、身体中の特定の位置に標的化した細胞の数を増加させることによって
、炎症、感染、過剰増殖性障害、または任意の免疫系障害を処置し得る。例えば
、走化性分子を使用して、傷害を受けた位置に免疫細胞を誘引することによって
、組織に対する創傷および他の外傷を処置し得る。ＭＥＴＨ１および/またはＭ
ＥＴＨ２走化性分子はまた、線維芽細胞を誘引し得、これは創傷を処置するため
に使用され得る。
【０３４７】
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストが走化性活性を阻害し得ることもまた意図される。これらの分子はまた、障
害を処置するために使用され得る。従って、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ
２のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/または
ＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、走化性のインヒビターとし
て使用され得る。
、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニ
ストが走化性活性を阻害し得ることもまた意図される。これらの分子はまた、障
害を処置するために使用され得る。従って、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ
２のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはＭＥＴＨ１および/または
ＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、走化性のインヒビターとし
て使用され得る。
【０３４８】
（結合活性）
ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、ＭＥＴＨ１および/また
はＭＥＴＨ２に結合する分子、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２が結
合する分子についてスクリーニングするために使用され得る。ＭＥＴＨ１および
/またはＭＥＴＨ２とこの分子との結合は、結合したＭＥＴＨ１および/またはＭ
ＥＴＨ２または分子の活性を活性化（アゴニスト）、増大、阻害（アンタゴニス
ト）、または減少させ得る。そのような分子の例としては、抗体、オリゴヌクレ
オチド、タンパク質（例えば、レセプター）、または低分子が挙げられる。
はＭＥＴＨ２に結合する分子、またはＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２が結
合する分子についてスクリーニングするために使用され得る。ＭＥＴＨ１および
/またはＭＥＴＨ２とこの分子との結合は、結合したＭＥＴＨ１および/またはＭ
ＥＴＨ２または分子の活性を活性化（アゴニスト）、増大、阻害（アンタゴニス
ト）、または減少させ得る。そのような分子の例としては、抗体、オリゴヌクレ
オチド、タンパク質（例えば、レセプター）、または低分子が挙げられる。
【０３４９】
好ましくは、この分子は、このＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２の天然の
リガンド（例えば、リガンドのフラグメント）、または天然の基質、リガンド、
構造的模倣物、もしくは機能的模倣物に密接に関連する（Ｃｏｌｉｇａｎら、Ｃ
ｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １（２）：
第５章（１９９１）を参照のこと）。同様に、この分子は、ＭＥＴＨ１および/
またはＭＥＴＨ２が結合する天然のレセプター、または少なくとも、ＭＥＴＨ１
および/またはＭＥＴＨ２によって結合され得るレセプターのフラグメント（例
えば、活性部位）に密接に関連し得る。いずれの場合においても、この分子は、
公知の技術を用いて合理的に設計され得る。
リガンド（例えば、リガンドのフラグメント）、または天然の基質、リガンド、
構造的模倣物、もしくは機能的模倣物に密接に関連する（Ｃｏｌｉｇａｎら、Ｃ
ｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １（２）：
第５章（１９９１）を参照のこと）。同様に、この分子は、ＭＥＴＨ１および/
またはＭＥＴＨ２が結合する天然のレセプター、または少なくとも、ＭＥＴＨ１
および/またはＭＥＴＨ２によって結合され得るレセプターのフラグメント（例
えば、活性部位）に密接に関連し得る。いずれの場合においても、この分子は、
公知の技術を用いて合理的に設計され得る。
【０３５０】
好ましくは、これらの分子についてのスクリーニングは、ＭＥＴＨ１および/
またはＭＥＴＨ２を発現する適切な細胞を産生する工程を包含する。好ましい細
胞としては、哺乳動物、酵母、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ、またはＥ．ｃｏｌｉ由来
の細胞が挙げられる。次いで、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２を発現する
細胞（または、発現されたポリペプチドを含む細胞膜）を、好ましくは、ＭＥＴ
Ｈ１および/またはＭＥＴＨ２またはこの分子のいずれかの結合、活性の刺激、
または活性の阻害を観察するための分子を潜在的に含む試験化合物と接触させる
。
またはＭＥＴＨ２を発現する適切な細胞を産生する工程を包含する。好ましい細
胞としては、哺乳動物、酵母、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ、またはＥ．ｃｏｌｉ由来
の細胞が挙げられる。次いで、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２を発現する
細胞（または、発現されたポリペプチドを含む細胞膜）を、好ましくは、ＭＥＴ
Ｈ１および/またはＭＥＴＨ２またはこの分子のいずれかの結合、活性の刺激、
または活性の阻害を観察するための分子を潜在的に含む試験化合物と接触させる
。
【０３５１】
アッセイは、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２への候補化合物の結合を単
純に試験し得、ここで結合は、標識によって、または標識された競合物との競合
に関するアッセイにおいて検出される。さらに、アッセイは、候補化合物がＭＥ
ＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２への結合によって生成されるシグナルを生じる
か否かを試験し得る。
純に試験し得、ここで結合は、標識によって、または標識された競合物との競合
に関するアッセイにおいて検出される。さらに、アッセイは、候補化合物がＭＥ
ＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２への結合によって生成されるシグナルを生じる
か否かを試験し得る。
【０３５２】
あるいは、アッセイは、無細胞調製物、固体支持体に接着されたポリペプチド
／分子、化学ライブラリー、または天然産物の混合物を用いて実施され得る。ア
ッセイはまた、候補化合物を、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２を含む溶液
と混合する工程、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２／分子の活性または結合
を測定する工程、およびＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２／分子の活性また
は結合を、標準と比較する工程を単純に包含し得る。
／分子、化学ライブラリー、または天然産物の混合物を用いて実施され得る。ア
ッセイはまた、候補化合物を、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２を含む溶液
と混合する工程、ＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２／分子の活性または結合
を測定する工程、およびＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２／分子の活性また
は結合を、標準と比較する工程を単純に包含し得る。
【０３５３】
好ましくは、ＥＬＩＳＡアッセイは、モノクローナル抗体またはポリクローナ
ル抗体を用いて、サンプル（例えば、生物学的サンプル）におけるＭＥＴＨ１お
よび/またはＭＥＴＨ２のレベルまたは活性を測定し得る。抗体は、ＭＥＴＨ１
および/またはＭＥＴＨ２への直接的もしくは間接的のいずれかの結合、または
基質についてのＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２との競合によって、ＭＥＴ
Ｈ１および/またはＭＥＴＨ２のレベルまたは活性を測定し得る。
ル抗体を用いて、サンプル（例えば、生物学的サンプル）におけるＭＥＴＨ１お
よび/またはＭＥＴＨ２のレベルまたは活性を測定し得る。抗体は、ＭＥＴＨ１
および/またはＭＥＴＨ２への直接的もしくは間接的のいずれかの結合、または
基質についてのＭＥＴＨ１および/またはＭＥＴＨ２との競合によって、ＭＥＴ
Ｈ１および/またはＭＥＴＨ２のレベルまたは活性を測定し得る。
【０３５４】
さらに、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２が結合するレセプターは、当業
者に公知の多くの方法（例えば、リガンドパニングおよびＦＡＣＳソーティング
（Ｃｏｌｉｇａｎら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎ
．，１（２）、第５章（１９９１））によって同定され得る。例えば、発現クロ
ーニングは、ポリアデニル化ＲＮＡがこのポリペプチドに応答する細胞から調製
される場合に用いられ、例えば、ＮＩＨ３Ｔ３細胞（これは、ＦＧＦファミリー
タンパク質に対する複数のレセプターを含むことが公知である）、およびＳＣ−
３細胞、およびこのＲＮＡから作製されたｃＤＮＡライブラリーは、プールに分
けられ、そしてこのポリペプチドに応答性でないＣＯＳ細胞または他の細胞をト
ランスフェクトするために使用される。ガラススライド上で増殖しているトラン
スフェクトされた細胞は、本発明のポリペプチドを標識化した後に、これらに曝
露される。このポリペプチドは、種々の手段（部位特異的プロテインキナーゼに
対する認識部位のヨウ素化または封入を含む）によって標識化され得る。
者に公知の多くの方法（例えば、リガンドパニングおよびＦＡＣＳソーティング
（Ｃｏｌｉｇａｎら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎ
．，１（２）、第５章（１９９１））によって同定され得る。例えば、発現クロ
ーニングは、ポリアデニル化ＲＮＡがこのポリペプチドに応答する細胞から調製
される場合に用いられ、例えば、ＮＩＨ３Ｔ３細胞（これは、ＦＧＦファミリー
タンパク質に対する複数のレセプターを含むことが公知である）、およびＳＣ−
３細胞、およびこのＲＮＡから作製されたｃＤＮＡライブラリーは、プールに分
けられ、そしてこのポリペプチドに応答性でないＣＯＳ細胞または他の細胞をト
ランスフェクトするために使用される。ガラススライド上で増殖しているトラン
スフェクトされた細胞は、本発明のポリペプチドを標識化した後に、これらに曝
露される。このポリペプチドは、種々の手段（部位特異的プロテインキナーゼに
対する認識部位のヨウ素化または封入を含む）によって標識化され得る。
【０３５５】
固定化およびインキュベーション後、スライドは、オートラジオグラフィー分
析に供される。陽性プールを同定し、そしてサブプールを、双方向性のサププー
ル化および再スクリーニングプロセスを使用して調製および再びトランスフェク
トして、最終的に推定レセプターをコードする単一のクローンを生じる。
析に供される。陽性プールを同定し、そしてサブプールを、双方向性のサププー
ル化および再スクリーニングプロセスを使用して調製および再びトランスフェク
トして、最終的に推定レセプターをコードする単一のクローンを生じる。
【０３５６】
レセプター同定のための代替のアプローチとして、標識ポリペプチドは、レセ
プター分子を発現する細胞膜または抽出調製物と光親和性に連結され得る。架橋
された材料は、ＰＡＧＥ分析によって分離され、そしてＸ線フィルムに曝露され
る。ポリペプチドのレセプターを含む標識複合体が切り出され得、ペプチドフラ
グメントへと分離され得、そしてタンパク質微小配列決定に供され得る。微小配
列決定から得られるアミノ酸配列を使用して、１組の縮重オリゴヌクレオチドプ
ローブを設計してｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングし、推定レセプターを
コードする遺伝子を同定する。
プター分子を発現する細胞膜または抽出調製物と光親和性に連結され得る。架橋
された材料は、ＰＡＧＥ分析によって分離され、そしてＸ線フィルムに曝露され
る。ポリペプチドのレセプターを含む標識複合体が切り出され得、ペプチドフラ
グメントへと分離され得、そしてタンパク質微小配列決定に供され得る。微小配
列決定から得られるアミノ酸配列を使用して、１組の縮重オリゴヌクレオチドプ
ローブを設計してｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングし、推定レセプターを
コードする遺伝子を同定する。
【０３５７】
さらに、遺伝子シャッフリング、モチーフシャッフリング、エキソンシャッフ
リング、および／またはコドンシャッフリングの技術（集合的に「ＤＮＡシャッ
フリング」という）を利用して、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の活性を調節し得
、それによってＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよびアンタゴニスト
を効果的に生成する。一般に、米国特許第５，６０５，７９３号、同第５，８１
１，２３８号、同第５，８３０，７２１号、同第５，８３４，２５２号、および
同第５，８３７，４５８号、ならびにＰａｔｔｅｎ，Ｐ．Ａ．ら、Ｃｕｒｒ．Ｏ
ｐｉｎｉｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８：７２４〜７３３（１９９７）；Ｈａ
ｒａｙａｍａ，Ｓ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６（２）：７６〜
８２（１９９８）；Ｈａｎｓｓｏｎ，Ｌ．Ｏ．ら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２８
７：２６５〜２７６（１９９９）；ならびにＬｏｒｅｎｚｏ，Ｍ．Ｍ．およびＢ
ｌａｓｃｏ，Ｒ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ２４（２）：３０８〜３１３（
１９９８）（これらの特許および刊行物の各々は、本明細書において参考として
援用される）を参照のこと。１つの実施形態において、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２のポリヌクレオチドおよび対応するポリペプチドの変更は、ＤＮＡシャッフ
リングによって達成され得る。ＤＮＡシャッフリングは、相同組換えまたは部位
特異的な組換えによる、２つ以上のＤＮＡセグメントの、所望のＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２分子へのアセンブリを含む。
リング、および／またはコドンシャッフリングの技術（集合的に「ＤＮＡシャッ
フリング」という）を利用して、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の活性を調節し得
、それによってＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよびアンタゴニスト
を効果的に生成する。一般に、米国特許第５，６０５，７９３号、同第５，８１
１，２３８号、同第５，８３０，７２１号、同第５，８３４，２５２号、および
同第５，８３７，４５８号、ならびにＰａｔｔｅｎ，Ｐ．Ａ．ら、Ｃｕｒｒ．Ｏ
ｐｉｎｉｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８：７２４〜７３３（１９９７）；Ｈａ
ｒａｙａｍａ，Ｓ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６（２）：７６〜
８２（１９９８）；Ｈａｎｓｓｏｎ，Ｌ．Ｏ．ら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２８
７：２６５〜２７６（１９９９）；ならびにＬｏｒｅｎｚｏ，Ｍ．Ｍ．およびＢ
ｌａｓｃｏ，Ｒ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ２４（２）：３０８〜３１３（
１９９８）（これらの特許および刊行物の各々は、本明細書において参考として
援用される）を参照のこと。１つの実施形態において、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２のポリヌクレオチドおよび対応するポリペプチドの変更は、ＤＮＡシャッフ
リングによって達成され得る。ＤＮＡシャッフリングは、相同組換えまたは部位
特異的な組換えによる、２つ以上のＤＮＡセグメントの、所望のＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２分子へのアセンブリを含む。
【０３５８】
別の実施形態において、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドおよ
び対応するポリペプチドは、組換えの前に、誤りがちな（ｅｒｒｏｒ−ｐｒｏｎ
ｅ）ＰＣＲ、ランダムヌクレオチド挿入または他の方法によるランダム変異誘発
に供することによって、変更され得る。別の実施形態において、ＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２の１つ以上の成分、モチーフ、切片、部分、ドメイン、フラグメン
トなどは、１つ以上の異種分子の１つ以上の成分、モチーフ、切片、部分、ドメ
イン、フラグメントなどと組換えられ得る。好ましい実施形態において、この異
種分子は、例えば、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、インスリン様増殖因子（
ＩＧＦ−Ｉ）、トランスホーミング増殖因子（ＴＧＦ）−α、表皮増殖因子（Ｅ
ＧＦ）、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、ＴＧＦ−β、骨形成タンパク質（ＢＭ
Ｐ）−２、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、ア
クチビンＡおよびアクチビンＢ、デカペンタプレジック（ｄｅｃａｐｅｎｔａｐ
ｌｅｇｉｃ）（ｄｐｐ）、６０Ａ、ＯＰ−２、ドーサリン（ｄｏｒｓａｌｉｎ）
、増殖分化因子（ＧＤＦ）、結節（ｎｏｄａｌ）、ＭＩＳ、インヒビン−α、Ｔ
ＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、ＴＧＦ−β３、ＴＧＦ−β５、および神経膠由来神
経栄養因子（ＧＤＮＦ）のような増殖因子である。
び対応するポリペプチドは、組換えの前に、誤りがちな（ｅｒｒｏｒ−ｐｒｏｎ
ｅ）ＰＣＲ、ランダムヌクレオチド挿入または他の方法によるランダム変異誘発
に供することによって、変更され得る。別の実施形態において、ＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２の１つ以上の成分、モチーフ、切片、部分、ドメイン、フラグメン
トなどは、１つ以上の異種分子の１つ以上の成分、モチーフ、切片、部分、ドメ
イン、フラグメントなどと組換えられ得る。好ましい実施形態において、この異
種分子は、例えば、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、インスリン様増殖因子（
ＩＧＦ−Ｉ）、トランスホーミング増殖因子（ＴＧＦ）−α、表皮増殖因子（Ｅ
ＧＦ）、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、ＴＧＦ−β、骨形成タンパク質（ＢＭ
Ｐ）−２、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、ア
クチビンＡおよびアクチビンＢ、デカペンタプレジック（ｄｅｃａｐｅｎｔａｐ
ｌｅｇｉｃ）（ｄｐｐ）、６０Ａ、ＯＰ−２、ドーサリン（ｄｏｒｓａｌｉｎ）
、増殖分化因子（ＧＤＦ）、結節（ｎｏｄａｌ）、ＭＩＳ、インヒビン−α、Ｔ
ＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、ＴＧＦ−β３、ＴＧＦ−β５、および神経膠由来神
経栄養因子（ＧＤＮＦ）のような増殖因子である。
【０３５９】
他の好ましいフラグメントは、生物学的に活性なＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２
のフラグメントである。生物学的に活性なフラグメントは、ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２のポリぺプチドの活性に類似の活性を示すが、必ずしも同一ではないフ
ラグメントである。このフラグメントの生物学的活性は、改善された所望の活性
、または減少した所望されない活性を含み得る。
のフラグメントである。生物学的に活性なフラグメントは、ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２のポリぺプチドの活性に類似の活性を示すが、必ずしも同一ではないフ
ラグメントである。このフラグメントの生物学的活性は、改善された所望の活性
、または減少した所望されない活性を含み得る。
【０３６０】
さらに、本発明は、本発明のポリペプチドの作用を調節する化合物を同定する
ために化合物をスクリーニングする方法を提供する。このようなアッセイの例は
、哺乳動物線維芽細胞、本発明のポリペプチド、スクリーニングされる化合物お
よび３［Ｈ］チミジンを、線維芽細胞が通常増殖する細胞培養条件下で組み合わ
せる工程を包含する。コントロールアッセイは、スクリーニングされる化合物の
非存在下で実施され得、そしてこの化合物の存在下での線維芽細胞の増殖の量と
比較して、各々の場合における３［Ｈ］チミジンの取り込みの決定によって、こ
の化合物が増殖を刺激するか否かを決定し得る。線維芽細胞の増殖の量は、３［
Ｈ］チミジンの取り込みを測定する液体シンチレーションクロマトグラフィーに
よって測定される。アゴニスト化合物およびアンタゴニスト化合物の両方が、こ
の手順により同定され得る。
ために化合物をスクリーニングする方法を提供する。このようなアッセイの例は
、哺乳動物線維芽細胞、本発明のポリペプチド、スクリーニングされる化合物お
よび３［Ｈ］チミジンを、線維芽細胞が通常増殖する細胞培養条件下で組み合わ
せる工程を包含する。コントロールアッセイは、スクリーニングされる化合物の
非存在下で実施され得、そしてこの化合物の存在下での線維芽細胞の増殖の量と
比較して、各々の場合における３［Ｈ］チミジンの取り込みの決定によって、こ
の化合物が増殖を刺激するか否かを決定し得る。線維芽細胞の増殖の量は、３［
Ｈ］チミジンの取り込みを測定する液体シンチレーションクロマトグラフィーに
よって測定される。アゴニスト化合物およびアンタゴニスト化合物の両方が、こ
の手順により同定され得る。
【０３６１】
別の方法において、本発明のポリペプチドに対するレセプターを発現する哺乳
動物細胞または膜調製物は、この化合物の存在下において標識化した本発明のポ
リペプチドとともにインキュベートされる。次いで、この化合物がこの相互作用
を増強またはブロックする能力が、測定され得る。あるいは、スクリーニングさ
れる化合物とＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のレセプターとの相互作用に
従う既知のセカンドメッセンジャー系の応答が測定され、そしてこの化合物がこ
のレセプターに結合してセカンドメッセンジャー応答を誘発する能力を測定して
、この化合物が潜在的なアゴニストまたはアンタゴニストであるか否かを決定す
る。このようなセカンドメッセンジャー系には、ｃＡＭＰグアニル酸シクラーゼ
、イオンチャネルまたはホスホイノシチド加水分解が挙げられるが、これらに限
定されない。
動物細胞または膜調製物は、この化合物の存在下において標識化した本発明のポ
リペプチドとともにインキュベートされる。次いで、この化合物がこの相互作用
を増強またはブロックする能力が、測定され得る。あるいは、スクリーニングさ
れる化合物とＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のレセプターとの相互作用に
従う既知のセカンドメッセンジャー系の応答が測定され、そしてこの化合物がこ
のレセプターに結合してセカンドメッセンジャー応答を誘発する能力を測定して
、この化合物が潜在的なアゴニストまたはアンタゴニストであるか否かを決定す
る。このようなセカンドメッセンジャー系には、ｃＡＭＰグアニル酸シクラーゼ
、イオンチャネルまたはホスホイノシチド加水分解が挙げられるが、これらに限
定されない。
【０３６２】
これらの上記のアッセイの全ては、診断マーカーまたは予後マーカーとして使
用され得る。これらのアッセイを用いて発見される分子は、ＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２／分子を活性化または阻害することによって、疾患を処置する
か、または患者に特定の結果（例えば、血管増殖）をもたらすために使用され得
る。さらに、アッセイは、適切に操作された細胞または組織からのＭＥＴＨ１お
よび／またはＭＥＴＨ２の産生を阻害または増強し得る因子を発見し得る。従っ
て、本発明は、以下の工程を包含する、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２に
結合する化合物を同定する方法を含む：（ａ）候補結合化合物をＭＥＴＨ１およ
び／またはＭＥＴＨ２とともにインキュベートする工程；および（ｂ）結合が生
じたか否かを決定する工程。さらに、本発明は、以下の工程を包含するアゴニス
ト／アンタゴニストを同定する方法を含む：（ａ）候補化合物をＭＥＴＨ１およ
び／またはＭＥＴＨ２とともにインキュベートする工程、（ｂ）生物学的活性を
アッセイする工程、および（ｂ）ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の生物学
的活性が改変されているか否かを決定する工程。
用され得る。これらのアッセイを用いて発見される分子は、ＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２／分子を活性化または阻害することによって、疾患を処置する
か、または患者に特定の結果（例えば、血管増殖）をもたらすために使用され得
る。さらに、アッセイは、適切に操作された細胞または組織からのＭＥＴＨ１お
よび／またはＭＥＴＨ２の産生を阻害または増強し得る因子を発見し得る。従っ
て、本発明は、以下の工程を包含する、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２に
結合する化合物を同定する方法を含む：（ａ）候補結合化合物をＭＥＴＨ１およ
び／またはＭＥＴＨ２とともにインキュベートする工程；および（ｂ）結合が生
じたか否かを決定する工程。さらに、本発明は、以下の工程を包含するアゴニス
ト／アンタゴニストを同定する方法を含む：（ａ）候補化合物をＭＥＴＨ１およ
び／またはＭＥＴＨ２とともにインキュベートする工程、（ｂ）生物学的活性を
アッセイする工程、および（ｂ）ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の生物学
的活性が改変されているか否かを決定する工程。
【０３６３】
また、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２に結合する分子を、図１０および
１１ならびに表１および２に開示されるβプリーツシート領域を用いることによ
って実験的に同定し得る。従って、本明細書中の特定の実施形態は、図１０／表
１および図１１／表２に開示される各々のβプリーツシート領域のアミノ酸配列
を含むか、あるいはこれらからなるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド
に向く。本発明のさらなる実施形態は、図１０／表１および図１１／表２に開示
されるβプリーツシート領域の任意の組合せまたは全てを含むか、あるいはこれ
らからなるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリペプチドをコードするポ
リヌクレオチドに向く。本発明のさらに好ましい実施形態は、図１０／表１およ
び図１１／表２に開示される各々のβプリーツシート領域のＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２のアミノ酸配列を含むか、あるいはこれらからなるポリペプチ
ドに向く。本発明のさらなる実施形態は、図１０／表１および図１１／表２に開
示されるβプリーツシート領域の任意の組合せまたは全てを含むか、あるいはこ
れらからなるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリペプチドに向く。
１１ならびに表１および２に開示されるβプリーツシート領域を用いることによ
って実験的に同定し得る。従って、本明細書中の特定の実施形態は、図１０／表
１および図１１／表２に開示される各々のβプリーツシート領域のアミノ酸配列
を含むか、あるいはこれらからなるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド
に向く。本発明のさらなる実施形態は、図１０／表１および図１１／表２に開示
されるβプリーツシート領域の任意の組合せまたは全てを含むか、あるいはこれ
らからなるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリペプチドをコードするポ
リヌクレオチドに向く。本発明のさらに好ましい実施形態は、図１０／表１およ
び図１１／表２に開示される各々のβプリーツシート領域のＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２のアミノ酸配列を含むか、あるいはこれらからなるポリペプチ
ドに向く。本発明のさらなる実施形態は、図１０／表１および図１１／表２に開
示されるβプリーツシート領域の任意の組合せまたは全てを含むか、あるいはこ
れらからなるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリペプチドに向く。
【０３６４】
（アンチセンスおよびリボザイム（アンタゴニスト））
特定の実施形態において、本発明に従うアンタゴニストは、配列番号１または
３に含まれる配列またはその相補鎖に対応する核酸、および／または寄託された
クローンに含まれるヌクレオチド配列に対応する核酸である。１つの実施形態に
おいて、アンチセンス配列は、生物体により内部で生成され、別の実施形態にお
いて、アンチセンス配列は別々に投与される（例えば、Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ，Ｊ．
，Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．５６：５６０（１９９１）を参照のこと）。Ｏｌｉｇｏ
ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ａｓ Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｉｎｈｉｂｉ
ｔｏｒｓ ｏｆ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏ
ｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬ（１９８８）。アンチセンス技術を使用して、アンチセ
ンスＤＮＡもしくはＲＮＡを通してか、または３重らせんの形成を通して遺伝子
発現を制御し得る。アンチセンス技術は、例えば、Ｏｋａｎｏ，Ｊ．，Ｎｅｕｒ
ｏｃｈｅｍ．５６：５６０（１９９１）；Ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔ
ｉｄｅｓ ａｓ Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ Ｇｅｎｅ
Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬ（
１９８８）で議論される。３重らせん形成は、例えば、Ｌｅｅら、Ｎｕｃｌｅｉ
ｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６：３０７３（１９７９）；Ｃｏｏｎｅｙ
ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４１：４５６（１９８８）；およびＤｅｒｖａｎら、Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ、２５１：１３００（１９９１）において議論される。これらの方
法は、相補的なＤＮＡまたはＲＮＡへのポリヌクレオチドの結合に基づく。
３に含まれる配列またはその相補鎖に対応する核酸、および／または寄託された
クローンに含まれるヌクレオチド配列に対応する核酸である。１つの実施形態に
おいて、アンチセンス配列は、生物体により内部で生成され、別の実施形態にお
いて、アンチセンス配列は別々に投与される（例えば、Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ，Ｊ．
，Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．５６：５６０（１９９１）を参照のこと）。Ｏｌｉｇｏ
ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ａｓ Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｉｎｈｉｂｉ
ｔｏｒｓ ｏｆ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏ
ｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬ（１９８８）。アンチセンス技術を使用して、アンチセ
ンスＤＮＡもしくはＲＮＡを通してか、または３重らせんの形成を通して遺伝子
発現を制御し得る。アンチセンス技術は、例えば、Ｏｋａｎｏ，Ｊ．，Ｎｅｕｒ
ｏｃｈｅｍ．５６：５６０（１９９１）；Ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔ
ｉｄｅｓ ａｓ Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ Ｇｅｎｅ
Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬ（
１９８８）で議論される。３重らせん形成は、例えば、Ｌｅｅら、Ｎｕｃｌｅｉ
ｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６：３０７３（１９７９）；Ｃｏｏｎｅｙ
ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４１：４５６（１９８８）；およびＤｅｒｖａｎら、Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ、２５１：１３００（１９９１）において議論される。これらの方
法は、相補的なＤＮＡまたはＲＮＡへのポリヌクレオチドの結合に基づく。
【０３６５】
例えば、本発明の成熟ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの５’コー
ド部分を使用して、約１０〜４０塩基対長のアンチセンスＲＮＡオリゴヌクレオ
チドを設計し得る。ＤＮＡオリゴヌクレオチドは、転写に関与する遺伝子の領域
に相補的であるように設計され、それにより転写およびレセプターの産生を阻害
する。アンチセンスＲＮＡオリゴヌクレオチドは、インビボでｍＲＮＡにハイブ
リダイズし、そしてｍＲＮＡ分子のレセプターポリペプチドへの翻訳をブロック
する。
ド部分を使用して、約１０〜４０塩基対長のアンチセンスＲＮＡオリゴヌクレオ
チドを設計し得る。ＤＮＡオリゴヌクレオチドは、転写に関与する遺伝子の領域
に相補的であるように設計され、それにより転写およびレセプターの産生を阻害
する。アンチセンスＲＮＡオリゴヌクレオチドは、インビボでｍＲＮＡにハイブ
リダイズし、そしてｍＲＮＡ分子のレセプターポリペプチドへの翻訳をブロック
する。
【０３６６】
１つの実施形態において、本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のア
ンチセンス核酸は、外来の配列からの転写により細胞内で産生される。例えば、
ベクターまたはその一部が転写され、本発明のアンチセンス核酸（ＲＮＡ）を産
生する。このようなベクターは、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアンチ
センス核酸をコードする配列を含む。このようなベクターは、それが転写されて
所望のアンチセンスＲＮＡを産生し得る限り、エピソームのベクターのままであ
るか、または染色体に組込まれ得る。このようなベクターは、当該分野において
標準的な組換えＤＮＡ技術方法により構築され得る。ベクターは、脊椎動物細胞
において複製および発現のために使用される、当該分野で公知のプラスミド、ウ
イルスなどであり得る。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２をコードする配列
またはそのフラグメントの発現は、脊椎動物、好ましくはヒト細胞において作用
する、当該分野で公知の任意のプロモーターにより得る。そのようなプロモータ
ーは、誘導性または構成的であり得る。このようなプロモーターは、ＳＶ４０初
期プロモーター領域（ＢｅｒｎｏｉｓｔおよびＣｈａｍｂｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ、
２９：３０４−３１０（１９８１））、ラウス肉腫ウイルスの３’長末端反復に
含まれるプロモーター（Ｙａｍａｍｏｔｏら、Ｃｅｌｌ、２２：７８７−７９７
（１９８０））、ヘルペスチミジンプロモーター（Ｗａｇｎｅｒら、Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．７８：１４４１−１４４５（１９８
１））、メタロチオネイン遺伝子の調節配列（Ｂｒｉｎｓｔｅｒら、Ｎａｔｕｒ
ｅ、２９６：３９−４２（１９８２））などが挙げられるが、これらに限定され
ない。
ンチセンス核酸は、外来の配列からの転写により細胞内で産生される。例えば、
ベクターまたはその一部が転写され、本発明のアンチセンス核酸（ＲＮＡ）を産
生する。このようなベクターは、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアンチ
センス核酸をコードする配列を含む。このようなベクターは、それが転写されて
所望のアンチセンスＲＮＡを産生し得る限り、エピソームのベクターのままであ
るか、または染色体に組込まれ得る。このようなベクターは、当該分野において
標準的な組換えＤＮＡ技術方法により構築され得る。ベクターは、脊椎動物細胞
において複製および発現のために使用される、当該分野で公知のプラスミド、ウ
イルスなどであり得る。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２をコードする配列
またはそのフラグメントの発現は、脊椎動物、好ましくはヒト細胞において作用
する、当該分野で公知の任意のプロモーターにより得る。そのようなプロモータ
ーは、誘導性または構成的であり得る。このようなプロモーターは、ＳＶ４０初
期プロモーター領域（ＢｅｒｎｏｉｓｔおよびＣｈａｍｂｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ、
２９：３０４−３１０（１９８１））、ラウス肉腫ウイルスの３’長末端反復に
含まれるプロモーター（Ｙａｍａｍｏｔｏら、Ｃｅｌｌ、２２：７８７−７９７
（１９８０））、ヘルペスチミジンプロモーター（Ｗａｇｎｅｒら、Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．７８：１４４１−１４４５（１９８
１））、メタロチオネイン遺伝子の調節配列（Ｂｒｉｎｓｔｅｒら、Ｎａｔｕｒ
ｅ、２９６：３９−４２（１９８２））などが挙げられるが、これらに限定され
ない。
【０３６７】
本発明のアンチセンス核酸は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の遺伝子
のＲＮＡ転写物の少なくとも一部に相補的な配列を含む。しかし、完全に相補的
であることは好ましいが、必ずしも必要ではない。本明細書中で言及される「少
なくともＲＮＡの一部に相補的な」配列は、ＲＮＡとハイブリダイズし得るに十
分な相補性を有し、安定な二重鎖を形成する配列を意味し；従って、二本鎖のＭ
ＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアンチセンス核酸の場合、二重鎖ＤＮＡの
一本鎖が試験され得るか、または三重鎖形成がアッセイされ得る。ハイブリダイ
ズする能力は、相補性の程度およびアンチセンス核酸の長さの両方に依存する。
一般的に、ハイブリダイズする核酸が長いほど、その核酸は、ＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２のＲＮＡとのより多くの塩基ミスマッチを含み得、そしてさ
らに安定な二重鎖（または三重鎖の場合もあり得る）を形成し得る。当業者は、
標準的な手順の使用によってミスマッチの許容の程度を確認し得、ハイブリダイ
ズされた複合体の融点を決定する。
のＲＮＡ転写物の少なくとも一部に相補的な配列を含む。しかし、完全に相補的
であることは好ましいが、必ずしも必要ではない。本明細書中で言及される「少
なくともＲＮＡの一部に相補的な」配列は、ＲＮＡとハイブリダイズし得るに十
分な相補性を有し、安定な二重鎖を形成する配列を意味し；従って、二本鎖のＭ
ＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアンチセンス核酸の場合、二重鎖ＤＮＡの
一本鎖が試験され得るか、または三重鎖形成がアッセイされ得る。ハイブリダイ
ズする能力は、相補性の程度およびアンチセンス核酸の長さの両方に依存する。
一般的に、ハイブリダイズする核酸が長いほど、その核酸は、ＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２のＲＮＡとのより多くの塩基ミスマッチを含み得、そしてさ
らに安定な二重鎖（または三重鎖の場合もあり得る）を形成し得る。当業者は、
標準的な手順の使用によってミスマッチの許容の程度を確認し得、ハイブリダイ
ズされた複合体の融点を決定する。
【０３６８】
メッセージの５’末端に相補的であるオリゴヌクレオチド（例えば、ＡＵＧ開
始コドンまででかつＡＵＧ開始コドンを含む５’非翻訳配列）は、翻訳の阻害の
際に最も効率的に働くべきである。しかし、ｍＲＮＡの３’非翻訳配列に相補的
な配列は、同様にｍＲＮＡの翻訳を阻害する際に有効であることが示された。一
般的に、Ｗａｇｎｅｒ，Ｒ．、１９９４、Ｎａｔｕｒｅ ３７２：３３３−３３
５を参照のこと。従って、図１に示されるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
の、５’−または３’−の非翻訳、非コード領域のいずれかに相補的なオリゴヌ
クレオチドは、内因性ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のｍＲＮＡの翻訳を
阻害するアンチセンスアプローチに使用され得る。ｍＲＮＡの５’非翻訳領域に
相補的なオリゴヌクレオチドは、ＡＵＧ開始コドンの相補物を含むべきである。
ｍＲＮＡコード領域に相補的なアンチセンスオリゴヌクレオチドは、翻訳のあま
り効率的でないインヒビターであるが、本発明に従って使用され得る。ＭＥＴＨ
１および／またはＭＥＴＨ２のｍＲＮＡの５’領域、３’領域またはコード領域
にハイブリダイズするように設計されるか否かにかかわらず、アンチセンス核酸
は、少なくとも６ヌクレオチド長であるべきであり、そして好ましくは６〜約５
０ヌクレオチド長にわたるオリゴヌクレオチドである。特定の局面において、こ
のオリゴヌクレオチドは、少なくとも１０ヌクレオチド、少なくとも１７ヌクレ
オチド、少なくとも２５ヌクレオチドまたは少なくとも５０ヌクレオチドである
。
始コドンまででかつＡＵＧ開始コドンを含む５’非翻訳配列）は、翻訳の阻害の
際に最も効率的に働くべきである。しかし、ｍＲＮＡの３’非翻訳配列に相補的
な配列は、同様にｍＲＮＡの翻訳を阻害する際に有効であることが示された。一
般的に、Ｗａｇｎｅｒ，Ｒ．、１９９４、Ｎａｔｕｒｅ ３７２：３３３−３３
５を参照のこと。従って、図１に示されるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
の、５’−または３’−の非翻訳、非コード領域のいずれかに相補的なオリゴヌ
クレオチドは、内因性ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のｍＲＮＡの翻訳を
阻害するアンチセンスアプローチに使用され得る。ｍＲＮＡの５’非翻訳領域に
相補的なオリゴヌクレオチドは、ＡＵＧ開始コドンの相補物を含むべきである。
ｍＲＮＡコード領域に相補的なアンチセンスオリゴヌクレオチドは、翻訳のあま
り効率的でないインヒビターであるが、本発明に従って使用され得る。ＭＥＴＨ
１および／またはＭＥＴＨ２のｍＲＮＡの５’領域、３’領域またはコード領域
にハイブリダイズするように設計されるか否かにかかわらず、アンチセンス核酸
は、少なくとも６ヌクレオチド長であるべきであり、そして好ましくは６〜約５
０ヌクレオチド長にわたるオリゴヌクレオチドである。特定の局面において、こ
のオリゴヌクレオチドは、少なくとも１０ヌクレオチド、少なくとも１７ヌクレ
オチド、少なくとも２５ヌクレオチドまたは少なくとも５０ヌクレオチドである
。
【０３６９】
本発明のポリヌクレオチドは、ＤＮＡ、もしくはＲＮＡ、またはキメラ混合物
、あるいはそれらの誘導体もしくは改変バージョン、一本鎖、または二本鎖であ
り得る。このオリゴヌクレオチドは、塩基部分、糖部分、またはリン酸骨格にお
いて改変され、例えば、分子の安定性、ハイブリダーゼーションなどを改善し得
る。このオリゴヌクレオチドは、ペプチドのような他の付加基（例えば、インビ
ボで宿主細胞レセプターを標的化するために）、または細胞膜を通した輸送を促
進する因子（例えば、Ｌｅｔｓｉｎｇｅｒら、１９８９、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．
Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８６：６５５３−６５５６；Ｌｅｍａｉｔｒｅ
ら、１９８７、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８４：６４８−６５２
；ＰＣＴ公開番号ＷＯ８８／０９８１０（１９８８年１２月１５日公開）を参照
のこと）、または血液脳関門（例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ８９／１０１３４（
１９８８年４月２５日公開）を参照のこと）、ハイブリダイゼーション誘引切断
剤（ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ−ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ ｃｌｅａｖａｇｅ ａ
ｇｅｎｔ）（例えば、Ｋｒｏｌら、１９８８，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、６
：９５８−９７６を参照のこと）、またはインターカレート剤（例えば、Ｚｏｎ
，１９８８，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．５：５３９−５４９を参照のこと）を含み得
る。この目的のために、オリゴヌクレオチドは、別の分子（例えば、ペプチド、
ハイブリダーゼーション誘引架橋剤、輸送剤、ハイブリダイゼーション誘引切断
剤など）に結合体化され得る。
、あるいはそれらの誘導体もしくは改変バージョン、一本鎖、または二本鎖であ
り得る。このオリゴヌクレオチドは、塩基部分、糖部分、またはリン酸骨格にお
いて改変され、例えば、分子の安定性、ハイブリダーゼーションなどを改善し得
る。このオリゴヌクレオチドは、ペプチドのような他の付加基（例えば、インビ
ボで宿主細胞レセプターを標的化するために）、または細胞膜を通した輸送を促
進する因子（例えば、Ｌｅｔｓｉｎｇｅｒら、１９８９、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．
Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８６：６５５３−６５５６；Ｌｅｍａｉｔｒｅ
ら、１９８７、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８４：６４８−６５２
；ＰＣＴ公開番号ＷＯ８８／０９８１０（１９８８年１２月１５日公開）を参照
のこと）、または血液脳関門（例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ８９／１０１３４（
１９８８年４月２５日公開）を参照のこと）、ハイブリダイゼーション誘引切断
剤（ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ−ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ ｃｌｅａｖａｇｅ ａ
ｇｅｎｔ）（例えば、Ｋｒｏｌら、１９８８，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、６
：９５８−９７６を参照のこと）、またはインターカレート剤（例えば、Ｚｏｎ
，１９８８，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．５：５３９−５４９を参照のこと）を含み得
る。この目的のために、オリゴヌクレオチドは、別の分子（例えば、ペプチド、
ハイブリダーゼーション誘引架橋剤、輸送剤、ハイブリダイゼーション誘引切断
剤など）に結合体化され得る。
【０３７０】
アンチセンスオリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの改変された塩基部分を
含み得、この塩基部分は、以下を含むがそれらに限定されない群から選択される
：５−フルオロウラシル、５−ブロモウラシル、５−クロロウラシル、５−ヨー
ドウラシル、ヒポキサンチン、キサンチン、４−アセチルシトシン、５−（カル
ボキシヒドロキシルメチル）ウラシル、５−カルボキシメチルアミノメチル−２
−チオウリジン、５−カルボキシメチルアミノメチルウラシル、ジヒドロウラシ
ル、β−Ｄ−ガラクトシルキューオシン、イノシン、Ｎ６−イソペンテニルアデ
ニン、１−メチルグアニン、１−メチルイノシン、２，２−ジメチルグアニン、
２−メチルアデニン、２−メチルグアニン、３−メチルシトシン、５−メチルシ
トシン、Ｎ６−アデニン、７−メチルグアニン、５−メチルアミノメチルウラシ
ル、５−メトキシアミノメチル−２−チオウラシル、β−Ｄ−マンノシルキュー
オシン、５’−メトキシカルボキシメチルウラシル、５−メトキシウラシル、２
−メチルチオ−Ｎ６−イソペンテニルアデニン、ウラシル−５−オキシ酢酸（ｖ
）、ワイブトキソシン（ｗｙｂｕｔｏｘｏｓｉｎｅ）、プソイドウラシル、キュ
ーオシン、２−チオシトシン、５−メチル−２−チオウラシル、２−チオウラシ
ル、４−チオウラシル、５−メチルウラシル、ウラシル−５−オキシ酢酸メチル
エステル、ウラシル−５−オキシ酢酸（ｖ）、５−メチル−２−チオウラシル、
３−（３−アミノ−３−Ｎ−２−カルボキシプロピル）ウラシル、（ａｃｐ３）
ｗ、および２，６−ジアミノプリン。
含み得、この塩基部分は、以下を含むがそれらに限定されない群から選択される
：５−フルオロウラシル、５−ブロモウラシル、５−クロロウラシル、５−ヨー
ドウラシル、ヒポキサンチン、キサンチン、４−アセチルシトシン、５−（カル
ボキシヒドロキシルメチル）ウラシル、５−カルボキシメチルアミノメチル−２
−チオウリジン、５−カルボキシメチルアミノメチルウラシル、ジヒドロウラシ
ル、β−Ｄ−ガラクトシルキューオシン、イノシン、Ｎ６−イソペンテニルアデ
ニン、１−メチルグアニン、１−メチルイノシン、２，２−ジメチルグアニン、
２−メチルアデニン、２−メチルグアニン、３−メチルシトシン、５−メチルシ
トシン、Ｎ６−アデニン、７−メチルグアニン、５−メチルアミノメチルウラシ
ル、５−メトキシアミノメチル−２−チオウラシル、β−Ｄ−マンノシルキュー
オシン、５’−メトキシカルボキシメチルウラシル、５−メトキシウラシル、２
−メチルチオ−Ｎ６−イソペンテニルアデニン、ウラシル−５−オキシ酢酸（ｖ
）、ワイブトキソシン（ｗｙｂｕｔｏｘｏｓｉｎｅ）、プソイドウラシル、キュ
ーオシン、２−チオシトシン、５−メチル−２−チオウラシル、２−チオウラシ
ル、４−チオウラシル、５−メチルウラシル、ウラシル−５−オキシ酢酸メチル
エステル、ウラシル−５−オキシ酢酸（ｖ）、５−メチル−２−チオウラシル、
３−（３−アミノ−３−Ｎ−２−カルボキシプロピル）ウラシル、（ａｃｐ３）
ｗ、および２，６−ジアミノプリン。
【０３７１】
アンチセンスオリゴヌクレオチドはまた、以下を含むがそれらに限定されない
群から選択される少なくとも１つの改変された糖部分を含み得る：アラビノース
、２−フルオロアラビノース、キシルロース、およびヘキソース。
群から選択される少なくとも１つの改変された糖部分を含み得る：アラビノース
、２−フルオロアラビノース、キシルロース、およびヘキソース。
【０３７２】
さらなる別の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、以下を
含むがそれらに限定されない群から選択される少なくとも１つの改変されたリン
酸骨格を含む：ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホロアミドチ
オエート、ホスホロアミデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄａｔｅ）、ホスホロ
ジアミデート、メチルホスホネート、アルキルホスホトリエステル、およびホル
ムアセタール（ｆｏｒｍａｃｅｔａｌ）またはそれらのアナログ。
含むがそれらに限定されない群から選択される少なくとも１つの改変されたリン
酸骨格を含む：ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホロアミドチ
オエート、ホスホロアミデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄａｔｅ）、ホスホロ
ジアミデート、メチルホスホネート、アルキルホスホトリエステル、およびホル
ムアセタール（ｆｏｒｍａｃｅｔａｌ）またはそれらのアナログ。
【０３７３】
さらなる別の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ａ−ア
ノマーオリゴヌクレオチドである。ａ−アノマーオリゴヌクレオチドは、相補的
なＲＮＡと特異的な二本鎖ハイブリッドを形成し、通常のｂ−ユニットとは反対
に、その鎖は互いに平行にする（Ｇａｕｔｉｅｒら、１９８７、Ｎｕｃｌ．Ａｃ
ｉｄｓ Ｒｅｓ．１５：６６２５−６６４１）。このオリゴヌクレオチドは、２
’−Ｏ−メチルリボヌクレオチドであるか（Ｉｎｏｕｅら、１９８７、Ｎｕｃｌ
．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１５：６１３１−６１４８）、またはキメラＲＮＡ−Ｄ
ＮＡアナログである（Ｉｎｏｕｅら、１９８７、ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．２１５：
３２７−３３０）。
ノマーオリゴヌクレオチドである。ａ−アノマーオリゴヌクレオチドは、相補的
なＲＮＡと特異的な二本鎖ハイブリッドを形成し、通常のｂ−ユニットとは反対
に、その鎖は互いに平行にする（Ｇａｕｔｉｅｒら、１９８７、Ｎｕｃｌ．Ａｃ
ｉｄｓ Ｒｅｓ．１５：６６２５−６６４１）。このオリゴヌクレオチドは、２
’−Ｏ−メチルリボヌクレオチドであるか（Ｉｎｏｕｅら、１９８７、Ｎｕｃｌ
．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１５：６１３１−６１４８）、またはキメラＲＮＡ−Ｄ
ＮＡアナログである（Ｉｎｏｕｅら、１９８７、ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．２１５：
３２７−３３０）。
【０３７４】
本発明のポリヌクレオチドは当該分野で公知の標準的な方法（例えば、自動Ｄ
ＮＡ合成機の使用により（このような装置はＢｉｏｓｅａｒｃｈ，Ａｐｐｌｉｅ
ｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓなどから市販されている）の使用により）合成され得
る。例えば、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、Ｓｔｅｉｎらの方法（
１９８８、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１６：３２０９）により合成され得
、メチルホスホネートオリゴヌクレオチドは、制御された細孔ガラス（ｃｏｎｔ
ｒｏｌｌｅｄ ｐｏｒｅ ｇｌａｓｓ）ポリマー支持体（Ｓａｒｉｎら、１９８
８、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：７４４８−７
４５１）の使用などにより調製され得る。
ＮＡ合成機の使用により（このような装置はＢｉｏｓｅａｒｃｈ，Ａｐｐｌｉｅ
ｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓなどから市販されている）の使用により）合成され得
る。例えば、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、Ｓｔｅｉｎらの方法（
１９８８、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１６：３２０９）により合成され得
、メチルホスホネートオリゴヌクレオチドは、制御された細孔ガラス（ｃｏｎｔ
ｒｏｌｌｅｄ ｐｏｒｅ ｇｌａｓｓ）ポリマー支持体（Ｓａｒｉｎら、１９８
８、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：７４４８−７
４５１）の使用などにより調製され得る。
【０３７５】
一方、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のコード領域配列に相補的なアン
チセンスヌクレオチドが、使用され得、転写された非翻訳領域に相補的なアンチ
センスヌクレオチドが最も好ましい。
チセンスヌクレオチドが、使用され得、転写された非翻訳領域に相補的なアンチ
センスヌクレオチドが最も好ましい。
【０３７６】
本発明による潜在的なアンタゴニストはまた、触媒ＲＮＡ、すなわちリボザイ
ムを含む（例えば、ＰＣＴ国際公開ＷＯ９０／１１３６４、１９９０年１０月４
日公開；Ｓａｒｖｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４７：１２２２−１２２５（１９
９０）を参照のこと）。一方、部位特異的認識配列でｍＲＮＡを切断するリボザ
イムを使用して、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のｍＲＮＡを破壊し得る
が、ハンマーヘッド型リボザイムの使用が好ましい。ハンマーヘッド型リボザイ
ムは、標的ｍＲＮＡと相補的な塩基対を形成する隣接領域により決定される位置
で、ｍＲＮＡを切断する。たった１つの必要条件は、標的ｍＲＮＡが以下の２つ
の塩基の配列を有することである：５’−ＵＧ−３’。ハンマーヘッド型リボザ
イムの構築および生成は当該分野で周知であり、そしてＨａｓｅｌｏｆｆおよび
Ｇｅｒｌａｃｈ、Ｎａｔｕｒｅ、３３４：５８５−５９１（１９８８）に、より
十分に記載される。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のヌクレオチド配列（
図１および２）内に多くの潜在的なハンマーヘッド型リボザイム切断部位が存在
する。好ましくは、このリボザイムは、切断認識部位がＭＥＴＨ１および／また
はＭＥＴＨ２のｍＲＮＡの５’末端付近に位置するように；すなわち、効率を増
大し、そして非機能的ｍＲＮＡ転写物の細胞内蓄積を最小化するように、操作さ
れる。
ムを含む（例えば、ＰＣＴ国際公開ＷＯ９０／１１３６４、１９９０年１０月４
日公開；Ｓａｒｖｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４７：１２２２−１２２５（１９
９０）を参照のこと）。一方、部位特異的認識配列でｍＲＮＡを切断するリボザ
イムを使用して、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のｍＲＮＡを破壊し得る
が、ハンマーヘッド型リボザイムの使用が好ましい。ハンマーヘッド型リボザイ
ムは、標的ｍＲＮＡと相補的な塩基対を形成する隣接領域により決定される位置
で、ｍＲＮＡを切断する。たった１つの必要条件は、標的ｍＲＮＡが以下の２つ
の塩基の配列を有することである：５’−ＵＧ−３’。ハンマーヘッド型リボザ
イムの構築および生成は当該分野で周知であり、そしてＨａｓｅｌｏｆｆおよび
Ｇｅｒｌａｃｈ、Ｎａｔｕｒｅ、３３４：５８５−５９１（１９８８）に、より
十分に記載される。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のヌクレオチド配列（
図１および２）内に多くの潜在的なハンマーヘッド型リボザイム切断部位が存在
する。好ましくは、このリボザイムは、切断認識部位がＭＥＴＨ１および／また
はＭＥＴＨ２のｍＲＮＡの５’末端付近に位置するように；すなわち、効率を増
大し、そして非機能的ｍＲＮＡ転写物の細胞内蓄積を最小化するように、操作さ
れる。
【０３７７】
アンチセンスアプローチの場合、本発明のリボザイムは、改変されたオリゴヌ
クレオチド（例えば、安定性、標的化などについて改良された）から構成され得
、そしてインビボにおいてＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を発現する細胞
に送達されるべきである。リボザイムをコードするＤＮＡ構築物は、ＤＮＡをコ
ードするアンチセンスの導入のための上記と同じ様式で細胞中に導入され得る。
送達の好ましい方法は、強力な構成的プロモーター（例えば、ｐｏｌ ＩＩＩま
たはｐｏｌ ＩＩプロモーターのような）の制御下でリボザイムを「コードする
」ＤＮＡ構築物を使用することを含み、その結果、トランスフェクトした細胞は
、内因性のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のメッセージを破壊しそして翻
訳を阻害するに十分な量のリボザイムを生成する。リボザイムはアンチセンス分
子と異なり触媒性であるので、より低い細胞内濃度が効率のために必要とされる
。
クレオチド（例えば、安定性、標的化などについて改良された）から構成され得
、そしてインビボにおいてＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を発現する細胞
に送達されるべきである。リボザイムをコードするＤＮＡ構築物は、ＤＮＡをコ
ードするアンチセンスの導入のための上記と同じ様式で細胞中に導入され得る。
送達の好ましい方法は、強力な構成的プロモーター（例えば、ｐｏｌ ＩＩＩま
たはｐｏｌ ＩＩプロモーターのような）の制御下でリボザイムを「コードする
」ＤＮＡ構築物を使用することを含み、その結果、トランスフェクトした細胞は
、内因性のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のメッセージを破壊しそして翻
訳を阻害するに十分な量のリボザイムを生成する。リボザイムはアンチセンス分
子と異なり触媒性であるので、より低い細胞内濃度が効率のために必要とされる
。
【０３７８】
アンタゴニスト／アゴニスト化合物を利用して、腫瘍性の細胞および組織上で
の本発明のポリペプチドの細胞増殖（ｇｒｏｗｔｈ）および増殖（ｐｒｏｌｉｆ
ｅｒａｔｉｏｎ）効果を阻害し得る。すなわち、腫瘍の新脈管形成を刺激し、そ
れにより異常な細胞成長および増殖を（例えば、腫瘍形成または増殖において）
遅延または防止する。
の本発明のポリペプチドの細胞増殖（ｇｒｏｗｔｈ）および増殖（ｐｒｏｌｉｆ
ｅｒａｔｉｏｎ）効果を阻害し得る。すなわち、腫瘍の新脈管形成を刺激し、そ
れにより異常な細胞成長および増殖を（例えば、腫瘍形成または増殖において）
遅延または防止する。
【０３７９】
アンタゴニスト／アゴニストをまた利用して、血管過多の疾患をも阻害し得、
そして水晶体嚢外白内障（ｅｘｔｒａｃａｐｓｕｌａｒ ｃａｔａｒａｃｔ）手
術後の上皮レンズ細胞の増殖をも防止する。本発明のポリペプチドのマイトジェ
ン活性の防止はまた、例えば、バルーン血管障害後の再狭窄のような場合に要求
され得る。
そして水晶体嚢外白内障（ｅｘｔｒａｃａｐｓｕｌａｒ ｃａｔａｒａｃｔ）手
術後の上皮レンズ細胞の増殖をも防止する。本発明のポリペプチドのマイトジェ
ン活性の防止はまた、例えば、バルーン血管障害後の再狭窄のような場合に要求
され得る。
【０３８０】
アンタゴニスト／アゴニストをまた利用して、創傷治癒の間の瘢痕組織の増殖
をも防止し得る。
をも防止し得る。
【０３８１】
アンタゴニスト／アゴニストをまた利用して、本明細書中に記載される疾患を
も処置し得る。
も処置し得る。
【０３８２】
（他の活性）
以下に示されるように、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２は、ＡＤＡＭファミリー
のメンバーと構造相同性および配列相同性を共有する。ＡＤＡＭタンパク質は、
タンパク質分解性に膜固着タンパク質（ｍｅｍｂｒａｎｅ−ａｎｃｈｏｒｅｄ
ｐｒｏｔｅｉｎ）（ＴＮＦを含む）をプロセスすることが示された（Ｂｌａｃｋ
ら、Ｎａｔｕｒｅ ３８５：７２９（１９９７）；Ｍｏｓｓら、Ｎａｔｕｒｅ
３８５：７３３（１９９７））。従って、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
は、膜固着タンパク質のタンパク質分解性プロセシングに有用であり得る。ＭＥ
ＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２によってタンパク質分解性にプロセスされ得る
膜固着タンパク質は、サイトカイン、増殖因子、サイトカインレセプターおよび
増殖因子レセプターを含む。
のメンバーと構造相同性および配列相同性を共有する。ＡＤＡＭタンパク質は、
タンパク質分解性に膜固着タンパク質（ｍｅｍｂｒａｎｅ−ａｎｃｈｏｒｅｄ
ｐｒｏｔｅｉｎ）（ＴＮＦを含む）をプロセスすることが示された（Ｂｌａｃｋ
ら、Ｎａｔｕｒｅ ３８５：７２９（１９９７）；Ｍｏｓｓら、Ｎａｔｕｒｅ
３８５：７３３（１９９７））。従って、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
は、膜固着タンパク質のタンパク質分解性プロセシングに有用であり得る。ＭＥ
ＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２によってタンパク質分解性にプロセスされ得る
膜固着タンパク質は、サイトカイン、増殖因子、サイトカインレセプターおよび
増殖因子レセプターを含む。
【０３８３】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチドもしくはポリヌクレオチド、また
はＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは
また、先に議論されるように、造血系統に加えて胚性幹細胞の分化または増殖を
増加または減少し得る。
はＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは
また、先に議論されるように、造血系統に加えて胚性幹細胞の分化または増殖を
増加または減少し得る。
【０３８４】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチドもしくはポリヌクレオチド、また
はＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは
また、哺乳動物の特徴（例えば、身長、体重、毛の色、眼の色、皮膚、脂肪組織
の割合、色素沈着、大きさ、および形（例えば、美容外科））を調節するために
使用され得る。同様に、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチドもしくはポ
リヌクレオチド、またはＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストもし
くはアンタゴニストは、異化作用、同化作用、プロセシング、利用、およびエネ
ルギーの貯蔵に影響を及ぼす哺乳動物の代謝を調節するために使用され得る。
はＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは
また、哺乳動物の特徴（例えば、身長、体重、毛の色、眼の色、皮膚、脂肪組織
の割合、色素沈着、大きさ、および形（例えば、美容外科））を調節するために
使用され得る。同様に、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチドもしくはポ
リヌクレオチド、またはＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストもし
くはアンタゴニストは、異化作用、同化作用、プロセシング、利用、およびエネ
ルギーの貯蔵に影響を及ぼす哺乳動物の代謝を調節するために使用され得る。
【０３８５】
新脈管形成が脂肪細胞の支持に重要な因子である場合、ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２のポリペプチドもしくはポリヌクレオチド、またはＭＥＴＨ１および／ま
たはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、個体において体重を制
御するため、体重を減少するため、肥満症を処置するため、および／または脂肪
組織を制御するために使用され得る。
ＴＨ２のポリペプチドもしくはポリヌクレオチド、またはＭＥＴＨ１および／ま
たはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは、個体において体重を制
御するため、体重を減少するため、肥満症を処置するため、および／または脂肪
組織を制御するために使用され得る。
【０３８６】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチドもしくはポリヌクレオチド、また
はＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは
、バイオリズム、日周期、うつ病（抑うつ性障害を含む）、暴力の傾向、痛みへ
の耐性、生殖能力（好ましくは、アクチビンまたはインヒビン様活性によって）
、ホルモンレベルもしくは内分泌レベル、食欲、性欲、記憶、ストレス、または
他の認知の質に影響を及ぼすことによって、哺乳動物の精神状態または身体状態
を変更するために使用され得る。
はＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは
、バイオリズム、日周期、うつ病（抑うつ性障害を含む）、暴力の傾向、痛みへ
の耐性、生殖能力（好ましくは、アクチビンまたはインヒビン様活性によって）
、ホルモンレベルもしくは内分泌レベル、食欲、性欲、記憶、ストレス、または
他の認知の質に影響を及ぼすことによって、哺乳動物の精神状態または身体状態
を変更するために使用され得る。
【０３８７】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のポリペプチドもしくはポリヌクレオチド、また
はＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは
また、例えば、貯蔵能力、脂肪含有量、脂質、タンパク質、炭水化物、ビタミン
、ミネラル、補因子、または他の栄養成分を増加または減少させるような食品添
加物または保存剤として使用され得る。
はＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストは
また、例えば、貯蔵能力、脂肪含有量、脂質、タンパク質、炭水化物、ビタミン
、ミネラル、補因子、または他の栄養成分を増加または減少させるような食品添
加物または保存剤として使用され得る。
【０３８８】
上記に列挙される用途は、広範な種々の宿主における使用を有する。このよう
な宿主としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：ヒト、ネズミ、ウ
サギ、ヤギ、モルモット、ラクダ、ウマ、マウス、ラット、ハムスター、ブタ、
ミニブタ（ｍｉｃｒｏ ｐｉｇ）、ニワトリ、ヤギ、ウシ、ヒツジ、イヌ、ネコ
、非ヒト霊長類、およびヒト。特定の実施形態において、宿主は、マウス、ウサ
ギ、ヤギ、モルモット、ニワトリ、ラット、ハムスター、ブタ、ヒツジ、イヌま
たはネコである。好ましい実施形態において、宿主は哺乳動物である。最も好ま
しい実施形態において、宿主は、ヒトである。
な宿主としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：ヒト、ネズミ、ウ
サギ、ヤギ、モルモット、ラクダ、ウマ、マウス、ラット、ハムスター、ブタ、
ミニブタ（ｍｉｃｒｏ ｐｉｇ）、ニワトリ、ヤギ、ウシ、ヒツジ、イヌ、ネコ
、非ヒト霊長類、およびヒト。特定の実施形態において、宿主は、マウス、ウサ
ギ、ヤギ、モルモット、ニワトリ、ラット、ハムスター、ブタ、ヒツジ、イヌま
たはネコである。好ましい実施形態において、宿主は哺乳動物である。最も好ま
しい実施形態において、宿主は、ヒトである。
【０３８９】
（抗新脈管形成）
実施例４および５に示すように、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２は、新脈管形成
を阻害する。従って、本発明は、新脈管形成関連疾患および／または障害を処置
する方法を提供し、この方法は、治療有効量の、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストを、その
処置が必要な個体に投与する工程を包含する。
を阻害する。従って、本発明は、新脈管形成関連疾患および／または障害を処置
する方法を提供し、この方法は、治療有効量の、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストを、その
処置が必要な個体に投与する工程を包含する。
【０３９０】
例えば、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプ
チド、および／またはアゴニストは、癌または腫瘍を治療的に処置するために、
種々のさらなる方法で利用され得る。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポ
リヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストで処置され得る癌と
しては、前立腺癌、肺癌、乳癌、卵巣癌、胃癌、膵臓癌、喉頭癌、食道癌、精巣
癌、肝臓癌、耳下腺癌、胆管癌、結腸癌、直腸癌、頸部癌、子宮癌、子宮内膜癌
、腎臓癌、膀胱癌、甲状腺癌を含む固形腫瘍；原発性腫瘍および転移；黒色腫；
神経膠芽腫；カポージ肉腫；平滑筋肉腫；非小細胞肺癌；結腸直腸癌；進行性（
ａｄｖａｎｃｅｄ）悪性疾患；および血液から生じる腫瘍（例えば、白血病）が
挙げられるが、これらに限定されない。例えば、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストは、皮膚
癌、頭頸部腫瘍、乳房腫瘍およびカポージ肉腫のような癌を処置するために、局
所送達され得る。なお他の局面において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストは、例えば膀胱
内投与によって膀胱癌の表面形態を処置するために利用され得る。ＭＥＴＨ１お
よび／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはア
ゴニストは、腫瘍に直接的に、または注射もしくはカテーテルを介して腫瘍部位
付近に送達され得る。当然のことながら、当業者が理解するように、適切な投与
様式は、処置される癌によって変化する。他の送達様式は本明細書中において議
論される。
チド、および／またはアゴニストは、癌または腫瘍を治療的に処置するために、
種々のさらなる方法で利用され得る。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポ
リヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストで処置され得る癌と
しては、前立腺癌、肺癌、乳癌、卵巣癌、胃癌、膵臓癌、喉頭癌、食道癌、精巣
癌、肝臓癌、耳下腺癌、胆管癌、結腸癌、直腸癌、頸部癌、子宮癌、子宮内膜癌
、腎臓癌、膀胱癌、甲状腺癌を含む固形腫瘍；原発性腫瘍および転移；黒色腫；
神経膠芽腫；カポージ肉腫；平滑筋肉腫；非小細胞肺癌；結腸直腸癌；進行性（
ａｄｖａｎｃｅｄ）悪性疾患；および血液から生じる腫瘍（例えば、白血病）が
挙げられるが、これらに限定されない。例えば、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストは、皮膚
癌、頭頸部腫瘍、乳房腫瘍およびカポージ肉腫のような癌を処置するために、局
所送達され得る。なお他の局面において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストは、例えば膀胱
内投与によって膀胱癌の表面形態を処置するために利用され得る。ＭＥＴＨ１お
よび／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはア
ゴニストは、腫瘍に直接的に、または注射もしくはカテーテルを介して腫瘍部位
付近に送達され得る。当然のことながら、当業者が理解するように、適切な投与
様式は、処置される癌によって変化する。他の送達様式は本明細書中において議
論される。
【０３９１】
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、お
よび／またはアゴニストは、癌に加えて、他の障害（新脈管形成を含む）を処置
する際に有用であり得る。これらの障害としては、以下が挙げられるが、これら
に限定されない：良性腫瘍（例えば、血管腫、聴神経腫、神経線維腫、トラコー
マ、および化膿性肉芽腫）；動脈硬化プラーク；眼の脈管形成疾患（例えば、糖
尿病性網膜症、未熟網膜症、黄斑変性、角膜移植拒絶、血管新生緑内障、水晶体
後線維増殖、ルベオーシス、網膜芽細胞腫、ブドウ膜炎（ｕｖｉｅｔｉｓ）およ
び眼の翼状片（Ｐｔｅｒｙｇｉａ）（異常な血管増殖））；慢性関節リウマチ；
乾癬；遅延型創傷治癒；子宮内膜症；脈管形成；顆粒化；過形成性瘢痕（ケロイ
ド）；偽関節骨折；強皮症；トラコーマ；血管接着；心筋の新脈管形成；冠状側
副枝（ｃｏｒｏｎａｒｙ ｃｏｌｌａｔｅｒａｌｓ）；大脳側副枝；動静脈奇形
；虚血性四肢新脈管形成；オースラー−ウェーバー（Ｏｓｌｅｒ−Ｗｅｂｂｅｒ
）症候群；プラーク新生血管形成；毛細血管拡張症；血友病性関節；血管線維腫
；線維筋性形成異常；創傷顆粒化；クローン病；およびアテローム性動脈硬化症
。
よび／またはアゴニストは、癌に加えて、他の障害（新脈管形成を含む）を処置
する際に有用であり得る。これらの障害としては、以下が挙げられるが、これら
に限定されない：良性腫瘍（例えば、血管腫、聴神経腫、神経線維腫、トラコー
マ、および化膿性肉芽腫）；動脈硬化プラーク；眼の脈管形成疾患（例えば、糖
尿病性網膜症、未熟網膜症、黄斑変性、角膜移植拒絶、血管新生緑内障、水晶体
後線維増殖、ルベオーシス、網膜芽細胞腫、ブドウ膜炎（ｕｖｉｅｔｉｓ）およ
び眼の翼状片（Ｐｔｅｒｙｇｉａ）（異常な血管増殖））；慢性関節リウマチ；
乾癬；遅延型創傷治癒；子宮内膜症；脈管形成；顆粒化；過形成性瘢痕（ケロイ
ド）；偽関節骨折；強皮症；トラコーマ；血管接着；心筋の新脈管形成；冠状側
副枝（ｃｏｒｏｎａｒｙ ｃｏｌｌａｔｅｒａｌｓ）；大脳側副枝；動静脈奇形
；虚血性四肢新脈管形成；オースラー−ウェーバー（Ｏｓｌｅｒ−Ｗｅｂｂｅｒ
）症候群；プラーク新生血管形成；毛細血管拡張症；血友病性関節；血管線維腫
；線維筋性形成異常；創傷顆粒化；クローン病；およびアテローム性動脈硬化症
。
【０３９２】
例えば、本発明の１つの局面において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストを過形成性瘢痕
またはケロイドに投与する工程を包含する、過形成性瘢痕およびケロイドを処置
するための方法が提供される。本発明の１つの実施形態において、ＭＥＴＨ１お
よび／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはア
ゴニストは、過形成性瘢痕またはケロイドに、これらの病変の進行を妨げるため
に直接注射される。この治療は、過形成性瘢痕およびケロイド（例えば、やけど
）の発生を生じることが知られている状態の予防処置において特に価値がある治
療であり、そして好ましくは、増殖期が進行する時間（最初の傷害の後約１４日
）を有した後であるが、過形成性瘢痕またはケロイドの発生の前に開始される。
のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストを過形成性瘢痕
またはケロイドに投与する工程を包含する、過形成性瘢痕およびケロイドを処置
するための方法が提供される。本発明の１つの実施形態において、ＭＥＴＨ１お
よび／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはア
ゴニストは、過形成性瘢痕またはケロイドに、これらの病変の進行を妨げるため
に直接注射される。この治療は、過形成性瘢痕およびケロイド（例えば、やけど
）の発生を生じることが知られている状態の予防処置において特に価値がある治
療であり、そして好ましくは、増殖期が進行する時間（最初の傷害の後約１４日
）を有した後であるが、過形成性瘢痕またはケロイドの発生の前に開始される。
【０３９３】
上述のように、本発明はまた、眼の新生血管形成疾患（例えば、角膜新生血管
形成、血管新生緑内障、増殖性糖尿病網膜症、水晶体後線維増殖および黄斑変性
を含む）ならびに他の眼の炎症性疾患、眼の腫瘍、および脈絡膜または虹彩の新
生血管形成に関連する疾患を処置するための方法を提供する。例えば、Ｗａｌｔ
ｍａｎら、Ａｍ．Ｊ．Ｏｐｈｔｈａｌ．８５：７０４〜７１０（１９７８）およ
びＧａｒｔｎｅｒら、Ｓｕｒｖ．Ｏｐｈｔｈａｌ．２２：２９１〜３１２（１９
７８）による総説を参照のこと。
形成、血管新生緑内障、増殖性糖尿病網膜症、水晶体後線維増殖および黄斑変性
を含む）ならびに他の眼の炎症性疾患、眼の腫瘍、および脈絡膜または虹彩の新
生血管形成に関連する疾患を処置するための方法を提供する。例えば、Ｗａｌｔ
ｍａｎら、Ａｍ．Ｊ．Ｏｐｈｔｈａｌ．８５：７０４〜７１０（１９７８）およ
びＧａｒｔｎｅｒら、Ｓｕｒｖ．Ｏｐｈｔｈａｌ．２２：２９１〜３１２（１９
７８）による総説を参照のこと。
【０３９４】
従って、本発明の１つの局面において、治療有効量のＭＥＴＨ１および／また
はＭＥＴＨ２の化合物（上記）を患者に対して、血管の形成が阻害されるように
角膜に投与する工程を包含する、角膜新生血管形成（角膜移植新生血管形成を含
む）のような眼の新生血管形成疾患を処置するための方法が、提供される。簡潔
には、角膜は、通常には血管を欠く組織である。しかし、特定の病的状態におい
て、毛細血管は、縁の角膜周囲脈管叢から角膜に伸長し得る。角膜が血管化され
るようになる場合、角膜はまた混濁されるようになり、患者の視力の衰えを生じ
る。角膜が完全に不透明になる（ｏｐａｃｉｔａｔｅ）場合に、視力喪失が完全
になり得る。
はＭＥＴＨ２の化合物（上記）を患者に対して、血管の形成が阻害されるように
角膜に投与する工程を包含する、角膜新生血管形成（角膜移植新生血管形成を含
む）のような眼の新生血管形成疾患を処置するための方法が、提供される。簡潔
には、角膜は、通常には血管を欠く組織である。しかし、特定の病的状態におい
て、毛細血管は、縁の角膜周囲脈管叢から角膜に伸長し得る。角膜が血管化され
るようになる場合、角膜はまた混濁されるようになり、患者の視力の衰えを生じ
る。角膜が完全に不透明になる（ｏｐａｃｉｔａｔｅ）場合に、視力喪失が完全
になり得る。
【０３９５】
広範な種々の障害は、例えば、以下を含む角膜新生血管形成を生じ得る：角膜
感染（例えば、トラコーマ、単純ヘルペス角膜炎、リーシュマニア症およびオン
コセルカ症）、免疫学的プロセス（例えば、移植片拒絶およびスティーヴンズ−
ジョンソン症候群）、アルカリやけど、外傷、炎症（任意の原因による）、毒性
および栄養欠乏状態、ならびにコンタクトレンズを装着することの合併症として
。
感染（例えば、トラコーマ、単純ヘルペス角膜炎、リーシュマニア症およびオン
コセルカ症）、免疫学的プロセス（例えば、移植片拒絶およびスティーヴンズ−
ジョンソン症候群）、アルカリやけど、外傷、炎症（任意の原因による）、毒性
および栄養欠乏状態、ならびにコンタクトレンズを装着することの合併症として
。
【０３９６】
本発明の特に好ましい実施形態において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ
２は、生理食塩水（眼の調製物に一般に使用される任意の保存剤および抗菌剤と
組合せて）中で局所投与のために調製され得、そして点眼剤形態で投与され得る
。溶液または懸濁液は、その純粋な形態で調製され得、そして１日に数回投与さ
れ得る。あるいは、上記のように調製される抗脈管形成組成物はまた、角膜に直
接投与され得る。好ましい実施形態において、抗脈管形成組成物は、角膜に結合
する粘膜接着性ポリマーとともに調製される。さらなる実施形態において、抗脈
管形成因子または抗脈管形成組成物は、従来のステロイド治療に対する補助剤と
して利用され得る。
２は、生理食塩水（眼の調製物に一般に使用される任意の保存剤および抗菌剤と
組合せて）中で局所投与のために調製され得、そして点眼剤形態で投与され得る
。溶液または懸濁液は、その純粋な形態で調製され得、そして１日に数回投与さ
れ得る。あるいは、上記のように調製される抗脈管形成組成物はまた、角膜に直
接投与され得る。好ましい実施形態において、抗脈管形成組成物は、角膜に結合
する粘膜接着性ポリマーとともに調製される。さらなる実施形態において、抗脈
管形成因子または抗脈管形成組成物は、従来のステロイド治療に対する補助剤と
して利用され得る。
【０３９７】
局所治療はまた、脈管形成応答を誘導する高い可能性を有することが公知であ
る角膜病変（例えば、化学的やけど）において予防的に有用であり得る。これら
の場合において、処置（おそらくステロイドと組み合わせられる）は、その後の
合併症を予防するのを補助するために直ちに開始され得る。
る角膜病変（例えば、化学的やけど）において予防的に有用であり得る。これら
の場合において、処置（おそらくステロイドと組み合わせられる）は、その後の
合併症を予防するのを補助するために直ちに開始され得る。
【０３９８】
他の実施形態において、上記の化合物は、角膜支質に直接、顕微鏡の案内の下
で眼科医によって注入され得る。好ましい注射部位は、個々の病巣の形態で変化
し得るが、投与の目標は、脈管構造の前進している面に組成物を置くこと（すな
わち、血管と正常な角膜との間に分散される）である。ほとんどの場合において
、これは、前進している血管から角膜を「防御」するための縁周囲（ｐｅｒｉｌ
ｉｍｂｉｃ）角膜注射を含む。この方法はまた、角膜新生血管形成を予防的に防
ぐために、角膜傷害の直後に利用され得る。この状況において、この物質は、角
膜病巣とその所望されない潜在的な血液供給の縁との間に分散して縁周囲角膜に
注射され得る。このような方法はまた、類似の様式で、移植された角膜の毛細血
管浸潤を予防するために利用され得る。徐放形態において、注入は、１年に２〜
３回のみ必要とされ得る。ステロイドもまた、注入溶液に添加され、その注射自
体から生じる炎症を低減し得る。
で眼科医によって注入され得る。好ましい注射部位は、個々の病巣の形態で変化
し得るが、投与の目標は、脈管構造の前進している面に組成物を置くこと（すな
わち、血管と正常な角膜との間に分散される）である。ほとんどの場合において
、これは、前進している血管から角膜を「防御」するための縁周囲（ｐｅｒｉｌ
ｉｍｂｉｃ）角膜注射を含む。この方法はまた、角膜新生血管形成を予防的に防
ぐために、角膜傷害の直後に利用され得る。この状況において、この物質は、角
膜病巣とその所望されない潜在的な血液供給の縁との間に分散して縁周囲角膜に
注射され得る。このような方法はまた、類似の様式で、移植された角膜の毛細血
管浸潤を予防するために利用され得る。徐放形態において、注入は、１年に２〜
３回のみ必要とされ得る。ステロイドもまた、注入溶液に添加され、その注射自
体から生じる炎症を低減し得る。
【０３９９】
本発明の別の局面において、患者に、血管の形成を阻害するように、治療有効
量のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリペプチド、ポリヌクレオチド、
および／またはアゴニストを眼に投与する工程を包含する、血管新生緑内障を処
置するための方法が提供される。１つの実施形態において、化合物は、血管新生
緑内障の早期形態を処置するために、眼に局所投与され得る。他の実施形態にお
いて、化合物は、前方角（ａｎｔｅｒｉｏｒ ｃｈａｍｂｅｒ ａｎｇｌｅ）の
領域への注入によって移植され得る。他の実施形態において、化合物はまた、化
合物が眼房水に連続的に放出されるように、任意の位置に置かれ得る。
量のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリペプチド、ポリヌクレオチド、
および／またはアゴニストを眼に投与する工程を包含する、血管新生緑内障を処
置するための方法が提供される。１つの実施形態において、化合物は、血管新生
緑内障の早期形態を処置するために、眼に局所投与され得る。他の実施形態にお
いて、化合物は、前方角（ａｎｔｅｒｉｏｒ ｃｈａｍｂｅｒ ａｎｇｌｅ）の
領域への注入によって移植され得る。他の実施形態において、化合物はまた、化
合物が眼房水に連続的に放出されるように、任意の位置に置かれ得る。
【０４００】
本発明の別の局面において、患者に、血管の形成が阻害されるように、治療有
効量のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド
、および／またはアゴニストを眼に投与する工程を包含する、増殖性糖尿病性網
膜症を処置するための方法が提供される。本発明の特に好ましい実施形態におい
て、増殖性糖尿病性網膜症は、網膜におけるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ
２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストの局所濃度を
増加させるために、眼房水または硝子体へ注入することによって処置され得る。
好ましくは、この処置は、光凝固を必要とする重篤な疾患の獲得の前に開始され
るべきである。
効量のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド
、および／またはアゴニストを眼に投与する工程を包含する、増殖性糖尿病性網
膜症を処置するための方法が提供される。本発明の特に好ましい実施形態におい
て、増殖性糖尿病性網膜症は、網膜におけるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ
２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストの局所濃度を
増加させるために、眼房水または硝子体へ注入することによって処置され得る。
好ましくは、この処置は、光凝固を必要とする重篤な疾患の獲得の前に開始され
るべきである。
【０４０１】
本発明の別の局面において、血管の形成が阻害されるように、患者に、治療有
効量のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド
、アンタゴニストおよび／またはアゴニストを眼に投与する工程を包含する、水
晶体後線維増殖症を処置するための方法が、提供される。化合物は、硝子体内注
射を介して、および／または眼内レンズを介して局所投与され得る。
効量のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド
、アンタゴニストおよび／またはアゴニストを眼に投与する工程を包含する、水
晶体後線維増殖症を処置するための方法が、提供される。化合物は、硝子体内注
射を介して、および／または眼内レンズを介して局所投与され得る。
【０４０２】
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチドおよ
び／またはアゴニストは、病原性の結果としての新脈管形成を有する疾患（例え
ば、ネコ引っかき病（Ｒｏｃｈｅｌｅ ｍｉｎａｌｉａ ｑｕｉｎｔｏｓａ）、
潰瘍（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）、バルトネラ症および細菌性
血管腫症状）を処置するために使用され得る。
び／またはアゴニストは、病原性の結果としての新脈管形成を有する疾患（例え
ば、ネコ引っかき病（Ｒｏｃｈｅｌｅ ｍｉｎａｌｉａ ｑｕｉｎｔｏｓａ）、
潰瘍（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）、バルトネラ症および細菌性
血管腫症状）を処置するために使用され得る。
【０４０３】
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチドおよ
び／またはアゴニストは、胎芽着床に必要な血管新生を阻止することによって産
児制限薬剤として使用され得る。産児制限方法の１つの局面において、胎芽着床
をブロックするに十分な化合物の量は、性交および受精が起こる前またはその後
に投与され、従って産児制限の有効な方法、おそらく「事後用（ｍｏｒｎｉｎｇ ａｆｔｅｒ）」方法を提供する。
び／またはアゴニストは、胎芽着床に必要な血管新生を阻止することによって産
児制限薬剤として使用され得る。産児制限方法の１つの局面において、胎芽着床
をブロックするに十分な化合物の量は、性交および受精が起こる前またはその後
に投与され、従って産児制限の有効な方法、おそらく「事後用（ｍｏｒｎｉｎｇ ａｆｔｅｒ）」方法を提供する。
【０４０４】
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、お
よび／またはアゴニストはまた、月経を制御することにおいて使用され得るか、
または子宮内膜症の処置における腹膜洗浄液として、もしくは腹膜移植のための
いずれかで投与され得る。
よび／またはアゴニストはまた、月経を制御することにおいて使用され得るか、
または子宮内膜症の処置における腹膜洗浄液として、もしくは腹膜移植のための
いずれかで投与され得る。
【０４０５】
本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプ
チド、および／またはアゴニストは、縫合（ｓｔｉｔｃｈ）肉芽腫を予防するた
めに、外科用縫合に組み込まれ得る。
チド、および／またはアゴニストは、縫合（ｓｔｉｔｃｈ）肉芽腫を予防するた
めに、外科用縫合に組み込まれ得る。
【０４０６】
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド、ポリペプチド、お
よび／またはアゴニストは、広範な種々の外科手順において利用され得る。例え
ば、本発明の１つの局面において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の組成
物（例えば、スプレーまたはフィルムの形態において）は、悪性組織から正常な
周囲の組織を分離するため、そして／または周囲の組織への疾患の広がりを予防
するために、腫瘍の除去の前に、領域をコートまたはスプレーするために利用さ
れ得る。本発明の他の局面において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の組
成物（例えば、スプレーの形態において）は、腫瘍をコートするため、または所
望の場所において新脈管形成を阻害するために、内視鏡手順を介して送達され得
る。本発明のなお他の局面において、本発明の抗脈管形成組成物でコートされて
いる外科用メッシュが、外科用メッシュが利用され得る任意の手順において利用
され得る。例えば、本発明の１つの実施形態において、抗脈管形成組成物を有し
た外科用メッシュのレーデン（ｌａｄｅｎ）は、構造に対する支持を提供するた
め、そして一定の量の抗脈管形成因子を放出するために、腹部癌切除手術の間（
例えば、結腸切除の後）に利用され得る。
よび／またはアゴニストは、広範な種々の外科手順において利用され得る。例え
ば、本発明の１つの局面において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の組成
物（例えば、スプレーまたはフィルムの形態において）は、悪性組織から正常な
周囲の組織を分離するため、そして／または周囲の組織への疾患の広がりを予防
するために、腫瘍の除去の前に、領域をコートまたはスプレーするために利用さ
れ得る。本発明の他の局面において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の組
成物（例えば、スプレーの形態において）は、腫瘍をコートするため、または所
望の場所において新脈管形成を阻害するために、内視鏡手順を介して送達され得
る。本発明のなお他の局面において、本発明の抗脈管形成組成物でコートされて
いる外科用メッシュが、外科用メッシュが利用され得る任意の手順において利用
され得る。例えば、本発明の１つの実施形態において、抗脈管形成組成物を有し
た外科用メッシュのレーデン（ｌａｄｅｎ）は、構造に対する支持を提供するた
め、そして一定の量の抗脈管形成因子を放出するために、腹部癌切除手術の間（
例えば、結腸切除の後）に利用され得る。
【０４０７】
本発明のさらなる局面において、癌の局所的再発およびその部位での新しい血
管の形成が阻害されるように、切除後にＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の
ポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストを腫瘍の切除縁に
投与する工程を包含する、腫瘍切除部位を処置するための方法が提供される。本
発明の１つの実施形態において、抗脈管形成化合物は、腫瘍切除部位に直接投与
される（例えば、塗布、ブラッシング（ｂｒｕｓｈｉｎｇ）、または他の方法で
抗脈管形成化合物で腫瘍の切除縁をコートすることによって適用される）。ある
いは、抗脈管形成化合物は、投与前に公知の外科ペーストに組み込まれ得る。本
発明の特に好ましい実施形態において、抗脈管形成化合物は、悪性疾患について
の肝切除後、および神経外科手術後に適用される。
管の形成が阻害されるように、切除後にＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の
ポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストを腫瘍の切除縁に
投与する工程を包含する、腫瘍切除部位を処置するための方法が提供される。本
発明の１つの実施形態において、抗脈管形成化合物は、腫瘍切除部位に直接投与
される（例えば、塗布、ブラッシング（ｂｒｕｓｈｉｎｇ）、または他の方法で
抗脈管形成化合物で腫瘍の切除縁をコートすることによって適用される）。ある
いは、抗脈管形成化合物は、投与前に公知の外科ペーストに組み込まれ得る。本
発明の特に好ましい実施形態において、抗脈管形成化合物は、悪性疾患について
の肝切除後、および神経外科手術後に適用される。
【０４０８】
本発明の１つの局面において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌク
レオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストは、広範な種々の腫瘍（例
えば、乳房腫瘍、結腸腫瘍、脳腫瘍および肝腫瘍を含む）の切除縁に投与され得
る。例えば、本発明の１つの実施形態において、抗脈管形成化合物は、切除後に
、神経学的腫瘍の部位に、その部位での新しい血管の形成が阻害されるように投
与され得る。
レオチド、ポリペプチド、および／またはアゴニストは、広範な種々の腫瘍（例
えば、乳房腫瘍、結腸腫瘍、脳腫瘍および肝腫瘍を含む）の切除縁に投与され得
る。例えば、本発明の１つの実施形態において、抗脈管形成化合物は、切除後に
、神経学的腫瘍の部位に、その部位での新しい血管の形成が阻害されるように投
与され得る。
【０４０９】
本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド、ポリペプチ
ド、および／またはアゴニストはまた、他の抗脈管形成因子とともに投与され得
る。他の抗脈管形成因子の代表的な例としては以下が挙げられる：抗侵襲性因子
、レチノイン酸およびその誘導体、パクリタキセル、スラミン、メタロプロテイ
ナーゼ−１の組織インヒビター、メタロプロテイナーゼ−２の組織インヒビター
、プラスミノーゲン活性化インヒビター−１、プラスミノーゲン活性化インヒビ
ター−２および種々の形態のより軽い「ｄ群」遷移金属。
ド、および／またはアゴニストはまた、他の抗脈管形成因子とともに投与され得
る。他の抗脈管形成因子の代表的な例としては以下が挙げられる：抗侵襲性因子
、レチノイン酸およびその誘導体、パクリタキセル、スラミン、メタロプロテイ
ナーゼ−１の組織インヒビター、メタロプロテイナーゼ−２の組織インヒビター
、プラスミノーゲン活性化インヒビター−１、プラスミノーゲン活性化インヒビ
ター−２および種々の形態のより軽い「ｄ群」遷移金属。
【０４１０】
より軽い「ｄ群」遷移金属には、例えばバナジウム、モリブデン、タングステ
ン、チタン、ニオブおよびタンタル種が挙げられる。このような遷移金属種は、
遷移金属錯体を形成し得る。上記の遷移金属種の適切な錯体としては、オキソ遷
移金属錯体が挙げられる。
ン、チタン、ニオブおよびタンタル種が挙げられる。このような遷移金属種は、
遷移金属錯体を形成し得る。上記の遷移金属種の適切な錯体としては、オキソ遷
移金属錯体が挙げられる。
【０４１１】
バナジウム錯体の代表的な例としては、バナデート錯体およびバナジル錯体の
ようなオキソバナジウム錯体が挙げられる。適切なバナデート錯体としては、例
えばメタバナジン酸アンモニウム、メタバナジン酸ナトリウムおよびオルトバナ
ジン酸ナトリウムのようなメタバナデート錯体およびオルトバナデート錯体が挙
げられる。適切なバナジル錯体としては、例えばバナジルアセチルアセトネート
および硫酸バナジル（硫酸バナジル一水和物および硫酸バナジル三水和物のよう
な硫酸バナジル水和物を含む）が挙げられる。
ようなオキソバナジウム錯体が挙げられる。適切なバナデート錯体としては、例
えばメタバナジン酸アンモニウム、メタバナジン酸ナトリウムおよびオルトバナ
ジン酸ナトリウムのようなメタバナデート錯体およびオルトバナデート錯体が挙
げられる。適切なバナジル錯体としては、例えばバナジルアセチルアセトネート
および硫酸バナジル（硫酸バナジル一水和物および硫酸バナジル三水和物のよう
な硫酸バナジル水和物を含む）が挙げられる。
【０４１２】
タングステン錯体およびモリブデン錯体の代表的な例としてはまた、オキソ錯
体が挙げられる。適切なオキソタングステン錯体としては、タングステート錯体
およびタングステンオキシド錯体が挙げられる。適切なタングステート錯体とし
ては、タングステン酸アンモニウム、タングステン酸カルシウム、タングステン
酸ナトリウム二水和物およびタングステン酸が挙げられる。適切なタングステン
オキシドとしては、タングステン（ＩＶ）オキシドおよびタングステン（ＶＩ）
オキシドが挙げられる。適切なオキソモリブデン錯体としては、モリブデート、
モリブデンオキシドおよびモリブデニル錯体が挙げられる。適切なモリブデート
錯体としては、モリブデン酸アンモニウムおよびその水和物、モリブデン酸ナト
リウムおよびその水和物、ならびにモリブデン酸カリウムおよびその水和物が挙
げられる。適切なモリブデンオキシドとしては、モリブデン（ＶＩ）オキシド、
モリブデン（ＶＩ）オキシドおよびモリブデン酸が挙げられる。適切なモリブデ
ニル錯体としては、例えばモリブデニルアセチルアセトネートが挙げられる。他
の適切なタングステン錯体およびモリブデン錯体としては、例えばグリセロール
、酒石酸および糖から誘導されるヒドロキソ誘導体が挙げられる。
体が挙げられる。適切なオキソタングステン錯体としては、タングステート錯体
およびタングステンオキシド錯体が挙げられる。適切なタングステート錯体とし
ては、タングステン酸アンモニウム、タングステン酸カルシウム、タングステン
酸ナトリウム二水和物およびタングステン酸が挙げられる。適切なタングステン
オキシドとしては、タングステン（ＩＶ）オキシドおよびタングステン（ＶＩ）
オキシドが挙げられる。適切なオキソモリブデン錯体としては、モリブデート、
モリブデンオキシドおよびモリブデニル錯体が挙げられる。適切なモリブデート
錯体としては、モリブデン酸アンモニウムおよびその水和物、モリブデン酸ナト
リウムおよびその水和物、ならびにモリブデン酸カリウムおよびその水和物が挙
げられる。適切なモリブデンオキシドとしては、モリブデン（ＶＩ）オキシド、
モリブデン（ＶＩ）オキシドおよびモリブデン酸が挙げられる。適切なモリブデ
ニル錯体としては、例えばモリブデニルアセチルアセトネートが挙げられる。他
の適切なタングステン錯体およびモリブデン錯体としては、例えばグリセロール
、酒石酸および糖から誘導されるヒドロキソ誘導体が挙げられる。
【０４１３】
広範な種々の他の抗脈管形成因子もまた、本発明の状況において利用され得る
。代表的な例としては、以下が挙げられる：血小板因子４；硫酸プロタミン；硫
酸化キチン誘導体（クイーンクラブ（ｑｕｅｅｎ ｃｒａｂ）の殻から調製され
る）（Ｍｕｒａｔａら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５１：２２−２６、１９９１）
；硫酸化多糖ペプチドグリカン複合体（ＳＰ−ＰＧ）（この化合物の機能は、ス
テロイド（例えば、エストロゲン）およびクエン酸タモキシフェンの存在によっ
て増強され得る）；スタウロスポリン；基質代謝の調節因子（例えば、プロリン
アナログ、シスヒドロキシプロリン、ｄ，Ｌ−３，４−デヒドロプロリン、チア
プロリン、α，α−ジピリジル，アミノプロピオニトリルフマレートを含む）；
４−プロピル−５−（４−ピリジニル）−２（３Ｈ）−オキサゾロン；メトトレ
キサート；ミトザントロン；ヘパリン；インターフェロン；２マクログロブリン
−血清；ＣｈＩＭＰ−３（Ｐａｖｌｏｆｆら、Ｊ．Ｂｉｏ．Ｃｈｅｍ．２６７：
１７３２１〜１７３２６、１９９２）；キモスタチン（Ｔｏｍｋｉｎｓｏｎら、
Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ．２８６：４７５〜４８０、１９９２）；シクロデキストリ
ンテトラデカサルフェート；エポネマイシン；カンプトテシン；フマギリン（Ｉ
ｎｇｂｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５５〜５５７、１９９０）；チオリン
ゴ酸金ナトリウム（「ＧＳＴ」；ＭａｔｓｕｂａｒａおよびＺｉｆｆ、Ｊ．Ｃｌ
ｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．７９：１４４０〜１４４６、１９８７）；アンチコラゲナ
ーゼ−血清；α２−抗プラスミン（Ｈｏｌｍｅｓら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．
２６２（４）：１６５９〜１６６４、１９８７）；ビサントレン（Ｎａｔｉｏｎ
ａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）；ロベンザリット二ナトリウム（Ｎ
−（２）−カルボキシフェニル−４−クロロアントロニル酸（ｃｈｌｏｒｏａｎ
ｔｈｒｏｎｉｌｉｃ ａｃｉｄ）二ナトリウム、すなわち「ＣＣＡ」；Ｔａｋｅ
ｕｃｈｉら、Ａｇｅｎｔｓ Ａｃｔｉｏｎｓ ３６：３１２〜３１６、１９９２
）；サリドマイド；Ａｎｇｏｓｔａｔｉｃステロイド；ＡＧＭ−１４７０；カル
ボキシアミノイミダゾール（ｃａｒｂｏｘｙｎａｍｉｎｏｌｍｉｄａｚｏｌｅ）
；およびメタロプロテイナーゼインヒビター（例えば、ＢＢ９４）。
。代表的な例としては、以下が挙げられる：血小板因子４；硫酸プロタミン；硫
酸化キチン誘導体（クイーンクラブ（ｑｕｅｅｎ ｃｒａｂ）の殻から調製され
る）（Ｍｕｒａｔａら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５１：２２−２６、１９９１）
；硫酸化多糖ペプチドグリカン複合体（ＳＰ−ＰＧ）（この化合物の機能は、ス
テロイド（例えば、エストロゲン）およびクエン酸タモキシフェンの存在によっ
て増強され得る）；スタウロスポリン；基質代謝の調節因子（例えば、プロリン
アナログ、シスヒドロキシプロリン、ｄ，Ｌ−３，４−デヒドロプロリン、チア
プロリン、α，α−ジピリジル，アミノプロピオニトリルフマレートを含む）；
４−プロピル−５−（４−ピリジニル）−２（３Ｈ）−オキサゾロン；メトトレ
キサート；ミトザントロン；ヘパリン；インターフェロン；２マクログロブリン
−血清；ＣｈＩＭＰ−３（Ｐａｖｌｏｆｆら、Ｊ．Ｂｉｏ．Ｃｈｅｍ．２６７：
１７３２１〜１７３２６、１９９２）；キモスタチン（Ｔｏｍｋｉｎｓｏｎら、
Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ．２８６：４７５〜４８０、１９９２）；シクロデキストリ
ンテトラデカサルフェート；エポネマイシン；カンプトテシン；フマギリン（Ｉ
ｎｇｂｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５５〜５５７、１９９０）；チオリン
ゴ酸金ナトリウム（「ＧＳＴ」；ＭａｔｓｕｂａｒａおよびＺｉｆｆ、Ｊ．Ｃｌ
ｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．７９：１４４０〜１４４６、１９８７）；アンチコラゲナ
ーゼ−血清；α２−抗プラスミン（Ｈｏｌｍｅｓら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．
２６２（４）：１６５９〜１６６４、１９８７）；ビサントレン（Ｎａｔｉｏｎ
ａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）；ロベンザリット二ナトリウム（Ｎ
−（２）−カルボキシフェニル−４−クロロアントロニル酸（ｃｈｌｏｒｏａｎ
ｔｈｒｏｎｉｌｉｃ ａｃｉｄ）二ナトリウム、すなわち「ＣＣＡ」；Ｔａｋｅ
ｕｃｈｉら、Ａｇｅｎｔｓ Ａｃｔｉｏｎｓ ３６：３１２〜３１６、１９９２
）；サリドマイド；Ａｎｇｏｓｔａｔｉｃステロイド；ＡＧＭ−１４７０；カル
ボキシアミノイミダゾール（ｃａｒｂｏｘｙｎａｍｉｎｏｌｍｉｄａｚｏｌｅ）
；およびメタロプロテイナーゼインヒビター（例えば、ＢＢ９４）。
【０４１４】
（診断方法）
本発明はまた、診断試薬としての使用のためのＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポ
リヌクレオチドの使用に関する。機能障害に関連するＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ
２遺伝子の変異形態の検出は、疾患または疾患に対する罹患率（これは、ＭＥＴ
Ｈ１またはＭＥＴＨ２の不足発現、過剰発現または変化した発現に起因する）の
診断に加え得るか、または規定し得る診断ツールを提供する。ＭＥＴＨ１または
ＭＥＴＨ２遺伝子における変異を有する個体は、種々の技術によってＤＮＡレベ
ルで検出され得る。
リヌクレオチドの使用に関する。機能障害に関連するＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ
２遺伝子の変異形態の検出は、疾患または疾患に対する罹患率（これは、ＭＥＴ
Ｈ１またはＭＥＴＨ２の不足発現、過剰発現または変化した発現に起因する）の
診断に加え得るか、または規定し得る診断ツールを提供する。ＭＥＴＨ１または
ＭＥＴＨ２遺伝子における変異を有する個体は、種々の技術によってＤＮＡレベ
ルで検出され得る。
【０４１５】
診断のための核酸は、被検体の細胞（例えば、血液、尿、唾液、組織生体材料
または検死材料から）から得られ得る。ゲノムＤＮＡは、検出のために直接的に
使用され得るか、あるいは分析の前にＰＣＲまたは他の増幅技術を使用すること
によって酵素学的に増幅され得る。ＲＮＡまたはＤＮＡはまた、同様の様式で使
用され得る。欠失および挿入は、正常な遺伝子型と比較した増幅産物の大きさの
変化によって検出され得る。点変異は、増幅させたＤＮＡを、標識したＭＥＴＨ
１またはＭＥＴＨ２のヌクレオチド配列とハイブリダイズさせることによって同
定され得る。完全に一致した配列は、ＲＮａｓｅ消化によってかまたは融解温度
の違いによって、一致しない二重鎖と区別され得る。ＤＮＡ配列の違いはまた、
変性剤が有りまたは無しのゲル中でのＤＮＡフラグメントの電気泳動移動度の変
化によって、あるいは直接のＤＮＡ配列決定によって検出され得る（例えば、Ｍ
ｙｅｒｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３０：１２４２（１９８５）を参照のこと）。
特定の位置における配列の変化はまた、例えば、ＲＮａｓｅおよびＳ１プロテク
ション（ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）または化学切断方法のような、ヌクレアーゼプ
ロテクションアッセイによって明らかにされ得る。Ｃｏｔｔｏｎら、Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：４３９７−４４０１（１９８５）
を参照のこと。別の実施形態において、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ヌクレオチ
ド配列またはそのフラグメントを含むオリゴヌクレオチドプローブのアレイは、
（例えば遺伝子変異の）効率的なスクリーニングを行うために構築され得る。ア
レイ技術方法は、周知かつ一般適用性を有し、そして遺伝子発現、遺伝連鎖およ
び遺伝的変動性を含む分子遺伝学における種々の問題に取り組むために使用され
得る（例えば、Ｃｈｅｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７４：６１０−６１３（１９９
６）を参照のこと）。
または検死材料から）から得られ得る。ゲノムＤＮＡは、検出のために直接的に
使用され得るか、あるいは分析の前にＰＣＲまたは他の増幅技術を使用すること
によって酵素学的に増幅され得る。ＲＮＡまたはＤＮＡはまた、同様の様式で使
用され得る。欠失および挿入は、正常な遺伝子型と比較した増幅産物の大きさの
変化によって検出され得る。点変異は、増幅させたＤＮＡを、標識したＭＥＴＨ
１またはＭＥＴＨ２のヌクレオチド配列とハイブリダイズさせることによって同
定され得る。完全に一致した配列は、ＲＮａｓｅ消化によってかまたは融解温度
の違いによって、一致しない二重鎖と区別され得る。ＤＮＡ配列の違いはまた、
変性剤が有りまたは無しのゲル中でのＤＮＡフラグメントの電気泳動移動度の変
化によって、あるいは直接のＤＮＡ配列決定によって検出され得る（例えば、Ｍ
ｙｅｒｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３０：１２４２（１９８５）を参照のこと）。
特定の位置における配列の変化はまた、例えば、ＲＮａｓｅおよびＳ１プロテク
ション（ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）または化学切断方法のような、ヌクレアーゼプ
ロテクションアッセイによって明らかにされ得る。Ｃｏｔｔｏｎら、Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：４３９７−４４０１（１９８５）
を参照のこと。別の実施形態において、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ヌクレオチ
ド配列またはそのフラグメントを含むオリゴヌクレオチドプローブのアレイは、
（例えば遺伝子変異の）効率的なスクリーニングを行うために構築され得る。ア
レイ技術方法は、周知かつ一般適用性を有し、そして遺伝子発現、遺伝連鎖およ
び遺伝的変動性を含む分子遺伝学における種々の問題に取り組むために使用され
得る（例えば、Ｃｈｅｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７４：６１０−６１３（１９９
６）を参照のこと）。
【０４１６】
診断アッセイは、記載される方法によって、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２遺伝
子における変異の検出を通して、に対する感受性を診断または決定するためのプ
ロセスを提供する。
子における変異の検出を通して、に対する感受性を診断または決定するためのプ
ロセスを提供する。
【０４１７】
さらに、管脈形成疾患（癌、癌転移、慢性炎症性障害、慢性間接リウマチ、動
脈硬化（ａｌｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、黄斑変性、糖尿病性網膜症）、
再狭窄、アルツハイマー病、および組織リモデリングは、被験体に由来するサン
プルから、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２ｍＲＮＡの異常に減少したかまたは上昇したレベルを決定する工程
を含む方法によって診断され得る。減少または上昇した発現は、ＲＮＡレベルに
おいて、例えば、ＰＣＲ、ＲＴ−ＰＣＲ、ＲＮａｓｅプロテクション、ノーザン
ブロットおよび他のハイブリダイゼーション法のようなポリヌクレオチドの定量
化について当該分野で周知の任意の方法を用いて測定され得る。宿主由来のサン
プルにおいて、タンパク質（例えば、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチド
）のレベルを決定するために使用され得るアッセイ技術は、当業者に周知である
。このようなアッセイ方法としては、ラジオイムノアッセイ、競合結合アッセイ
、ウエスタンブロット分析およびＥＬＩＳＡアッセイが挙げられる。
脈硬化（ａｌｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、黄斑変性、糖尿病性網膜症）、
再狭窄、アルツハイマー病、および組織リモデリングは、被験体に由来するサン
プルから、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチド、あるいはＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２ｍＲＮＡの異常に減少したかまたは上昇したレベルを決定する工程
を含む方法によって診断され得る。減少または上昇した発現は、ＲＮＡレベルに
おいて、例えば、ＰＣＲ、ＲＴ−ＰＣＲ、ＲＮａｓｅプロテクション、ノーザン
ブロットおよび他のハイブリダイゼーション法のようなポリヌクレオチドの定量
化について当該分野で周知の任意の方法を用いて測定され得る。宿主由来のサン
プルにおいて、タンパク質（例えば、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチド
）のレベルを決定するために使用され得るアッセイ技術は、当業者に周知である
。このようなアッセイ方法としては、ラジオイムノアッセイ、競合結合アッセイ
、ウエスタンブロット分析およびＥＬＩＳＡアッセイが挙げられる。
【０４１８】
（癌の診断および予後）
癌を有する哺乳動物における特定の組織は、対応する「標準的な」哺乳動物（
すなわち、癌を有さない同種の哺乳動物）と比較した場合、有意に減少したレベ
ルのＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質およびＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２
をコードするｍＲＮＡを発現すると考えられる。さらに、減少したレベルのＭＥ
ＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質は、癌を有さない同種の哺乳動物由来の血清
と比較した場合、癌を有する哺乳動物由来の特定の体液（例えば、血清、血漿、
尿、および髄液）において検出され得ると考えられる。従って、本発明は、腫瘍
の診断の間に有用な診断方法を提供し、この方法は、哺乳動物の細胞または体液
中のＭＥＴＨ１タンパク質をコードする遺伝子の発現レベルをアッセイする工程
、および遺伝子発現レベルを標準のＭＥＴＨ１遺伝子発現レベルと比較する工程
を包含し、これによって、標準以下の遺伝子発現レベルの減少が、特定の腫瘍を
示す。本発明はまた、腫瘍の診断の間に有用な診断方法を提供し、この方法は、
哺乳動物の細胞または体液中のＭＥＴＨ２タンパク質をコードする遺伝子の発現
レベルをアッセイする工程、および遺伝子発現レベルを標準のＭＥＴＨ２遺伝子
発現レベルと比較する工程を包含し、これによって、標準以下の遺伝子発現レベ
ルの減少が、特定の腫瘍を示す。
すなわち、癌を有さない同種の哺乳動物）と比較した場合、有意に減少したレベ
ルのＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質およびＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２
をコードするｍＲＮＡを発現すると考えられる。さらに、減少したレベルのＭＥ
ＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質は、癌を有さない同種の哺乳動物由来の血清
と比較した場合、癌を有する哺乳動物由来の特定の体液（例えば、血清、血漿、
尿、および髄液）において検出され得ると考えられる。従って、本発明は、腫瘍
の診断の間に有用な診断方法を提供し、この方法は、哺乳動物の細胞または体液
中のＭＥＴＨ１タンパク質をコードする遺伝子の発現レベルをアッセイする工程
、および遺伝子発現レベルを標準のＭＥＴＨ１遺伝子発現レベルと比較する工程
を包含し、これによって、標準以下の遺伝子発現レベルの減少が、特定の腫瘍を
示す。本発明はまた、腫瘍の診断の間に有用な診断方法を提供し、この方法は、
哺乳動物の細胞または体液中のＭＥＴＨ２タンパク質をコードする遺伝子の発現
レベルをアッセイする工程、および遺伝子発現レベルを標準のＭＥＴＨ２遺伝子
発現レベルと比較する工程を包含し、これによって、標準以下の遺伝子発現レベ
ルの減少が、特定の腫瘍を示す。
【０４１９】
従来の方法に従って腫瘍の診断が既に達成された場合、本発明は、予後の指示
薬として有用であり、これによって、減少したＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２遺伝
子発現を示す患者は、低いレベルで遺伝子を発現する患者と比較して、より悪い
臨床結果を経験する。
薬として有用であり、これによって、減少したＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２遺伝
子発現を示す患者は、低いレベルで遺伝子を発現する患者と比較して、より悪い
臨床結果を経験する。
【０４２０】
「ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質をコードする遺伝子の発現のレベル
をアッセイする」ことによって、第１の生物学的サンプルにおけるＭＥＴＨ１ま
たはＭＥＴＨ２タンパク質のレベルあるいはＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパ
ク質をコードするｍＲＮＡのレベルを、直接的（例えば、完全なタンパク質レベ
ルまたはｍＲＮＡレベルを決定または推定することによる）または相対的（例え
ば、第２の生物学的サンプルにおけるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質レ
ベルまたはｍＲＮＡレベルと比較することによる）のいずれかで、定性的または
定量的に、測定または推定することが意図される。
をアッセイする」ことによって、第１の生物学的サンプルにおけるＭＥＴＨ１ま
たはＭＥＴＨ２タンパク質のレベルあるいはＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパ
ク質をコードするｍＲＮＡのレベルを、直接的（例えば、完全なタンパク質レベ
ルまたはｍＲＮＡレベルを決定または推定することによる）または相対的（例え
ば、第２の生物学的サンプルにおけるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質レ
ベルまたはｍＲＮＡレベルと比較することによる）のいずれかで、定性的または
定量的に、測定または推定することが意図される。
【０４２１】
好ましくは、第１の生物学的サンプルにおけるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の
タンパク質レベルまたはｍＲＮＡレベルは、測定されるかまたは推定され、そし
て標準のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質レベルまたはｍＲＮＡレベルと
比較される。標準は、癌を有さない個体から得られた第２の生物学的サンプルか
ら得られた。当該分野で認識されるように、一旦標準のＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２タンパク質レベルまたはｍＲＮＡレベルが知られると、これは、比較のため
の標準として繰り返し使用され得る。
タンパク質レベルまたはｍＲＮＡレベルは、測定されるかまたは推定され、そし
て標準のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質レベルまたはｍＲＮＡレベルと
比較される。標準は、癌を有さない個体から得られた第２の生物学的サンプルか
ら得られた。当該分野で認識されるように、一旦標準のＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２タンパク質レベルまたはｍＲＮＡレベルが知られると、これは、比較のため
の標準として繰り返し使用され得る。
【０４２２】
「生物学的サンプル」によって、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質また
はｍＲＮＡを含有する個体、細胞株、組織培養物または他の供給源から得られた
任意の生物学的サンプルが意図される。生物学的サンプルとしては、分泌された
成熟ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質を含む哺乳動物の体液（例えば、血
清、血漿、尿、滑液および髄液）、ならびに副腎、甲状腺、胃、脳、心臓、胎盤
、肺、肝臓、筋肉、腎臓、膵臓、精巣および卵巣の組織（ＭＥＴＨ１について）
；ならびに前立腺、小腸、結腸、脳および肺の組織（ＭＥＴＨ２について）が挙
げられる。
はｍＲＮＡを含有する個体、細胞株、組織培養物または他の供給源から得られた
任意の生物学的サンプルが意図される。生物学的サンプルとしては、分泌された
成熟ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質を含む哺乳動物の体液（例えば、血
清、血漿、尿、滑液および髄液）、ならびに副腎、甲状腺、胃、脳、心臓、胎盤
、肺、肝臓、筋肉、腎臓、膵臓、精巣および卵巣の組織（ＭＥＴＨ１について）
；ならびに前立腺、小腸、結腸、脳および肺の組織（ＭＥＴＨ２について）が挙
げられる。
【０４２３】
本発明は、哺乳動物における癌の検出に有用である。特に、本発明は、哺乳動
物における以下の型の癌の診断の間に有用である：乳癌、卵巣癌、前立腺癌、、
肝癌、肺癌、膵臓癌、結腸癌、精巣癌）。好ましい哺乳動物としては、サル、尾
なしザル（ａｐｅ）、ネコ、イヌ、ウシ、ブタ、ウマ、ウサギ、およびヒトが挙
げられる。特に好ましいのはヒトである。
物における以下の型の癌の診断の間に有用である：乳癌、卵巣癌、前立腺癌、、
肝癌、肺癌、膵臓癌、結腸癌、精巣癌）。好ましい哺乳動物としては、サル、尾
なしザル（ａｐｅ）、ネコ、イヌ、ウシ、ブタ、ウマ、ウサギ、およびヒトが挙
げられる。特に好ましいのはヒトである。
【０４２４】
細胞総ＲＮＡは、ＣｈｏｍｃｚｙｎｓｋｉおよびＳａｃｃｈｉ、Ａｎａｌ．Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ．１６２：１５６−１５９（１９８７）に記載される一工程グアニ
ジン−チオシアネート−フェノール−クロロホルム法を使用して生物学的サンプ
ルから単離され得る。次いで、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質をコード
するｍＲＮＡのレベルは、任意の適切な方法を使用してアッセイされる。これら
には、ノーザンブロット分析（Ｈａｒａｄａら、Ｃｓｌｌ ６３：３０３−３１
２（１９９０））、Ｓ１ヌクレアーゼマッピング（Ｆｕｊｉｔａら、Ｃｅｌｌ
４９：３５７−３６７（１９８７））、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、ポリ
メラーゼ連鎖反応と組み合わせた逆転写（ＲＴ−ＰＣＲ）（Ｍａｋｉｎｏら、Ｔ
ｅｃｈｎｉｑｕｅ ２：２９５−３０１（１９９０））、およびリガーゼ連鎖反
応と組み合わせた逆転写（ＲＴ−ＬＣＲ）が挙げられる。
ｉｏｃｈｅｍ．１６２：１５６−１５９（１９８７）に記載される一工程グアニ
ジン−チオシアネート−フェノール−クロロホルム法を使用して生物学的サンプ
ルから単離され得る。次いで、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質をコード
するｍＲＮＡのレベルは、任意の適切な方法を使用してアッセイされる。これら
には、ノーザンブロット分析（Ｈａｒａｄａら、Ｃｓｌｌ ６３：３０３−３１
２（１９９０））、Ｓ１ヌクレアーゼマッピング（Ｆｕｊｉｔａら、Ｃｅｌｌ
４９：３５７−３６７（１９８７））、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、ポリ
メラーゼ連鎖反応と組み合わせた逆転写（ＲＴ−ＰＣＲ）（Ｍａｋｉｎｏら、Ｔ
ｅｃｈｎｉｑｕｅ ２：２９５−３０１（１９９０））、およびリガーゼ連鎖反
応と組み合わせた逆転写（ＲＴ−ＬＣＲ）が挙げられる。
【０４２５】
生物学的サンプルにおけるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質レベルのア
ッセイは、抗体に基づく技術を用いて行い得る。例えば、組織におけるＭＥＴＨ
１またはＭＥＴＨ２タンパク質発現は、古典的な免疫組織学的方法を用いて研究
され得る（Ｊａｌｋａｎｅｎ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０１：９７
６−９８５（１９８５）；Ｊａｌｋａｎｅｎ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ
．１０５：３０８７−３０９６（１９８７））。
ッセイは、抗体に基づく技術を用いて行い得る。例えば、組織におけるＭＥＴＨ
１またはＭＥＴＨ２タンパク質発現は、古典的な免疫組織学的方法を用いて研究
され得る（Ｊａｌｋａｎｅｎ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０１：９７
６−９８５（１９８５）；Ｊａｌｋａｎｅｎ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ
．１０５：３０８７−３０９６（１９８７））。
【０４２６】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質遺伝子発現を検出するために有用な他
の抗体に基づく方法は、イムノアッセイ（例えば、酵素結合免疫吸着アッセイ（
ＥＬＩＳＡ）およびラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ））を含む。
の抗体に基づく方法は、イムノアッセイ（例えば、酵素結合免疫吸着アッセイ（
ＥＬＩＳＡ）およびラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ））を含む。
【０４２７】
適切な標識は当該分野で公知であり、そしてグルコースオキシダーゼのような
酵素標識、ヨウ素（125Ｉ、121Ｉ）、炭素（14Ｃ）、イオウ（35Ｓ）、トリチウ
ム（3Ｈ）、インジウム（112Ｉｎ）、およびテクネチウム（99mＴｃ）のような
放射性同位体、ならびにフルオレセインおよびローダミンのような蛍光標識、な
らびにビオチンを含む。
酵素標識、ヨウ素（125Ｉ、121Ｉ）、炭素（14Ｃ）、イオウ（35Ｓ）、トリチウ
ム（3Ｈ）、インジウム（112Ｉｎ）、およびテクネチウム（99mＴｃ）のような
放射性同位体、ならびにフルオレセインおよびローダミンのような蛍光標識、な
らびにビオチンを含む。
【０４２８】
（ワクチン）
本発明の別の局面は、哺乳動物に免疫学的応答を誘導する方法に関し、これは
、とりわけ管脈形成疾患（癌、癌転移、慢性炎症性障害、慢性間接リウマチ、動
脈硬化（ａｌｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、黄斑変性、糖尿病性網膜症）、
再狭窄、アルツハイマー病、および組織リモデリングから哺乳動物を保護するた
めの抗体および／またはＴ細胞免疫応答を生成するのに適切なＭＥＴＨ１または
ＭＥＴＨ２ポリペプチド、またはそのフラグメントをこの哺乳動物に接種する工
程を包含する。
、とりわけ管脈形成疾患（癌、癌転移、慢性炎症性障害、慢性間接リウマチ、動
脈硬化（ａｌｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、黄斑変性、糖尿病性網膜症）、
再狭窄、アルツハイマー病、および組織リモデリングから哺乳動物を保護するた
めの抗体および／またはＴ細胞免疫応答を生成するのに適切なＭＥＴＨ１または
ＭＥＴＨ２ポリペプチド、またはそのフラグメントをこの哺乳動物に接種する工
程を包含する。
【０４２９】
本発明のさらに別の局面は、哺乳動物において免疫学的応答を誘導する方法に
関し、この方法は、このような動物を疾患から保護するための抗体を作製するた
めのこのような免疫学的応答を誘導するために、ＥＭＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポ
リヌクレオチドのインビボ発現を指向するベクターを介して、ＭＥＴＨ１または
ＭＥＴＨ２を送達する工程を包含する。本発明のさらなる局面は、免疫学的／ワ
クチン処方物（組成物）に関し、これは、哺乳動物宿主に導入される場合、この
哺乳動物においてＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドに対する免疫学的応
答を誘導し、ここでこの組成物は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドあ
るいはＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２遺伝子を含む。このワクチン処方物は、適切
なキャリアをさらに含み得る。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは胃に
おいて崩壊され得るために、これは好ましくは非経口的に（皮下、筋肉内、静脈
内、皮内などの注射を含む）投与される。経口投与に適切な処方物としては、水
性および非水性滅菌注射溶液（これは抗酸化剤、緩衝液、静菌剤、および受容者
の血液と等張性の処方物を与える溶液を含み得る）、ならびに水性および非水性
の滅菌懸濁液（これは、懸濁剤または濃化剤を含み得る）が挙げられる。この処
方物は、単一用量または複数の用量の容器（例えば、密封されたアンプルおよび
バイアル）中に存在し得、そして使用の直前に滅菌液体キャリアの添加のみを必
要とする凍結乾燥状態で保存され得る。このワクチン処方物はまた、処方物の免
疫原性を増大するために、水中の油系および当該分野で公知のほかの系のような
アジュバント系を含み得る。この投薬量は、ワクチンの特定の活性に依存し、そ
して慣用的な実験法によって容易に決定され得る。
関し、この方法は、このような動物を疾患から保護するための抗体を作製するた
めのこのような免疫学的応答を誘導するために、ＥＭＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポ
リヌクレオチドのインビボ発現を指向するベクターを介して、ＭＥＴＨ１または
ＭＥＴＨ２を送達する工程を包含する。本発明のさらなる局面は、免疫学的／ワ
クチン処方物（組成物）に関し、これは、哺乳動物宿主に導入される場合、この
哺乳動物においてＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドに対する免疫学的応
答を誘導し、ここでこの組成物は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドあ
るいはＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２遺伝子を含む。このワクチン処方物は、適切
なキャリアをさらに含み得る。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは胃に
おいて崩壊され得るために、これは好ましくは非経口的に（皮下、筋肉内、静脈
内、皮内などの注射を含む）投与される。経口投与に適切な処方物としては、水
性および非水性滅菌注射溶液（これは抗酸化剤、緩衝液、静菌剤、および受容者
の血液と等張性の処方物を与える溶液を含み得る）、ならびに水性および非水性
の滅菌懸濁液（これは、懸濁剤または濃化剤を含み得る）が挙げられる。この処
方物は、単一用量または複数の用量の容器（例えば、密封されたアンプルおよび
バイアル）中に存在し得、そして使用の直前に滅菌液体キャリアの添加のみを必
要とする凍結乾燥状態で保存され得る。このワクチン処方物はまた、処方物の免
疫原性を増大するために、水中の油系および当該分野で公知のほかの系のような
アジュバント系を含み得る。この投薬量は、ワクチンの特定の活性に依存し、そ
して慣用的な実験法によって容易に決定され得る。
【０４３０】
（投与の様式）
血管供給における増加が、腫瘍の進行および転移における中心的役割を果たす
ことが認識されており；従って、血管形成のインヒビターは、癌患者のためのア
ジュバント治療として効率的であることを立証し得る。現在認識される血管形成
サプレッサーのいくつかは、危険な付随的効果のために、全身性処置についての
乏しい候補である。本発明は、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２がインビトロおよび
インビボの両方で血管形成の強力なインヒビターであることを見出した。ＭＥＴ
Ｈ１およびＭＥＴＨ１の利点は、これらのインヒビターは、通常生理学的な血管
形成の抑制に関連し；従ってこれらは、他の血管形成インヒビターよりも、毒性
の欠如および内皮特異性を提供することである。さらに、ＭＥＴＨ１およびＭＥ
ＴＨ２は制限された発現パターンを示し、これは器官特異性に可能な利点をを提
供する。
ことが認識されており；従って、血管形成のインヒビターは、癌患者のためのア
ジュバント治療として効率的であることを立証し得る。現在認識される血管形成
サプレッサーのいくつかは、危険な付随的効果のために、全身性処置についての
乏しい候補である。本発明は、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２がインビトロおよび
インビボの両方で血管形成の強力なインヒビターであることを見出した。ＭＥＴ
Ｈ１およびＭＥＴＨ１の利点は、これらのインヒビターは、通常生理学的な血管
形成の抑制に関連し；従ってこれらは、他の血管形成インヒビターよりも、毒性
の欠如および内皮特異性を提供することである。さらに、ＭＥＴＨ１およびＭＥ
ＴＨ２は制限された発現パターンを示し、これは器官特異性に可能な利点をを提
供する。
【０４３１】
従って、本発明のポリペプチドは、癌を処置するために使用され得る。本発明
のMETH1およびMETH2ポリペプチドはまた、血管形成（異常な創傷治癒、炎症、慢
性間接リウマチ、乾癬、子宮内膜出血障害、糖尿病性網膜症、黄斑変性のいくつ
かの形態、血管腫、および動脈−静脈形成異常を含む）に関連する他の障害を有
する個体を処置するために使用され得る。
のMETH1およびMETH2ポリペプチドはまた、血管形成（異常な創傷治癒、炎症、慢
性間接リウマチ、乾癬、子宮内膜出血障害、糖尿病性網膜症、黄斑変性のいくつ
かの形態、血管腫、および動脈−静脈形成異常を含む）に関連する他の障害を有
する個体を処置するために使用され得る。
【０４３２】
従って、本発明は、個体の血管形成を阻害する方法を提供し、この方法は、こ
のような個体に、このような個体におけるＭＥＴＨ１の活性レベルを増大するた
めに有効な、本発明の単離されたＭＥＴＨ１ポリペプチドの有効量を含む薬学的
組成物を投与する工程を包含する。本発明はまた、個体の血管形成を阻害する方
法を提供し、この方法は、このような個体に、このような個体におけるＭＥＴＨ
２の活性レベルを増大するために有効な、本発明の単離されたＭＥＴＨ２ポリペ
プチドの有効量を含む薬学的組成物を投与する工程を包含する。
のような個体に、このような個体におけるＭＥＴＨ１の活性レベルを増大するた
めに有効な、本発明の単離されたＭＥＴＨ１ポリペプチドの有効量を含む薬学的
組成物を投与する工程を包含する。本発明はまた、個体の血管形成を阻害する方
法を提供し、この方法は、このような個体に、このような個体におけるＭＥＴＨ
２の活性レベルを増大するために有効な、本発明の単離されたＭＥＴＨ２ポリペ
プチドの有効量を含む薬学的組成物を投与する工程を包含する。
【０４３３】
ＭＥＴＨ１ポリペプチド（これは、この様式において血管形成を阻害するため
に使用され得る）としては、以下が挙げられる：リーダーを含む寄託されたｃＤ
ＮＡによってコードされるＭＥＴＨ１ポリペプチド；リーダーを含まない寄託さ
れたｃＤＮＡによってコードされる成熟ＭＥＴＨ１ポリペプチド（すなわち、成
熟タンパク質）；配列番号２の約１〜約９５０のアミノ酸を含むポリペプチド；
配列番号２の約２〜約９５０のアミノ酸を含むポリペプチド；配列番号２の約２
９〜約９５０のアミノ酸を含むポリペプチド；配列番号２の約３０〜約９５０の
アミノ酸を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１のメタロプロテアーゼドメイン、配列
番号２のアミノ酸２３５〜４５９を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１のジシンテグ
リン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ドメイン、配列番号２のアミノ酸４６０〜５４
４を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１の第１のＴＳＰ様ドメイン、配列番号２のア
ミノ酸５４５〜５９８を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１の第２のＴＳＰ様ドメイ
ン、配列番号２のアミノ酸８４１〜８９４を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１の第
３のＴＳＰ様ドメイン、配列番号２のアミノ酸８９５〜９３４を含むポリペプチ
ド；配列番号２のアミノ酸５３６〜６１３を含むポリペプチド；配列番号２のア
ミノ酸５４９〜５６３を含むポリペプチド；配列番号２のアミノ酸５４２〜８９
４を含むポリペプチド；および配列番号２のアミノ酸８０１〜９５０を含むポリ
ペプチド。
に使用され得る）としては、以下が挙げられる：リーダーを含む寄託されたｃＤ
ＮＡによってコードされるＭＥＴＨ１ポリペプチド；リーダーを含まない寄託さ
れたｃＤＮＡによってコードされる成熟ＭＥＴＨ１ポリペプチド（すなわち、成
熟タンパク質）；配列番号２の約１〜約９５０のアミノ酸を含むポリペプチド；
配列番号２の約２〜約９５０のアミノ酸を含むポリペプチド；配列番号２の約２
９〜約９５０のアミノ酸を含むポリペプチド；配列番号２の約３０〜約９５０の
アミノ酸を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１のメタロプロテアーゼドメイン、配列
番号２のアミノ酸２３５〜４５９を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１のジシンテグ
リン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ドメイン、配列番号２のアミノ酸４６０〜５４
４を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１の第１のＴＳＰ様ドメイン、配列番号２のア
ミノ酸５４５〜５９８を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１の第２のＴＳＰ様ドメイ
ン、配列番号２のアミノ酸８４１〜８９４を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ１の第
３のＴＳＰ様ドメイン、配列番号２のアミノ酸８９５〜９３４を含むポリペプチ
ド；配列番号２のアミノ酸５３６〜６１３を含むポリペプチド；配列番号２のア
ミノ酸５４９〜５６３を含むポリペプチド；配列番号２のアミノ酸５４２〜８９
４を含むポリペプチド；および配列番号２のアミノ酸８０１〜９５０を含むポリ
ペプチド。
【０４３４】
ＭＥＴＨ２ポリペプチド（これは、この様式において血管形成を阻害するため
に使用され得る）としては、以下が挙げられる：リーダーを含む寄託されたｃＤ
ＮＡによってコードされるＭＥＴＨ２ポリペプチド；リーダーを含まない寄託さ
れたｃＤＮＡによってコードされる成熟ＭＥＴＨ２ポリペプチド（すなわち、成
熟タンパク質）；配列番号４の約１〜約８９０のアミノ酸を含むポリペプチド；
配列番号４の約２〜約８９０のアミノ酸を含むポリペプチド；配列番号４の約２
２４〜約８９０のアミノ酸を含むポリペプチド；配列番号４の約１１２〜約８９
０のアミノ酸を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２のメタロプロテアーゼドメイン、
配列番号４のアミノ酸２１４〜４３９を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２のジシン
テグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ドメイン、配列番号４のアミノ酸４４０〜
５２９を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２の第１のＴＳＰ様ドメイン、配列番号４
のアミノ酸５３０〜５８３を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２の第２のＴＳＰ様ド
メイン、配列番号４のアミノ酸８３７〜８９０を含むポリペプチド；配列番号４
のアミノ酸２８０〜６０６を含むポリペプチド；および配列番号４のアミノ酸５
２９〜５４８を含むポリペプチド。
に使用され得る）としては、以下が挙げられる：リーダーを含む寄託されたｃＤ
ＮＡによってコードされるＭＥＴＨ２ポリペプチド；リーダーを含まない寄託さ
れたｃＤＮＡによってコードされる成熟ＭＥＴＨ２ポリペプチド（すなわち、成
熟タンパク質）；配列番号４の約１〜約８９０のアミノ酸を含むポリペプチド；
配列番号４の約２〜約８９０のアミノ酸を含むポリペプチド；配列番号４の約２
２４〜約８９０のアミノ酸を含むポリペプチド；配列番号４の約１１２〜約８９
０のアミノ酸を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２のメタロプロテアーゼドメイン、
配列番号４のアミノ酸２１４〜４３９を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２のジシン
テグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ドメイン、配列番号４のアミノ酸４４０〜
５２９を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２の第１のＴＳＰ様ドメイン、配列番号４
のアミノ酸５３０〜５８３を含むポリペプチド；ＭＥＴＨ２の第２のＴＳＰ様ド
メイン、配列番号４のアミノ酸８３７〜８９０を含むポリペプチド；配列番号４
のアミノ酸２８０〜６０６を含むポリペプチド；および配列番号４のアミノ酸５
２９〜５４８を含むポリペプチド。
【０４３５】
ＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質；ＴＳＰ２およびＴＳ
Ｐ３を欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質；ＴＳＰ３、ＴＳＰ２、およ
びＴＳＰ１を欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質；システインリッチな
ドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２タンパク質；メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチなドメイン、
ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク
質；ならびにプロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチな
ドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２タンパク質もまた含まれる。最後に、これらのドメインの任意の組合わせも
また好ましい。例えば、ＭＥＴＨ１のシステインリッチなドメインは、ＭＥＴＨ
１の １、２、または３のＴＳＰドメインと組合わされ得る。ＭＥＴＨ２のシス
テインリッチなドメインは、ＭＥＴＨ２の１、２、または３のＴＳＰドメインと
組合わされ得る。ＭＥＴＨ１のメタロプロテアーゼドメインおよびシステインリ
ッチなドメインは、ＭＥＴＨ１の１、２または３のＴＳＰドメインと組合わされ
得る。ＭＥＴＨ２のメタロプロテアーゼドメインおよびシステインリッチなドメ
インは、ＭＥＴＨ２の１、２または３のＴＳＰドメインと組合わされ得る。ＭＥ
ＴＨ１のプロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、およびシステインリッチ
なドメインは、ＭＥＴＨ１の１、２または３のＴＳＰドメインと組合わされ得る
。ＭＥＴＨ２のプロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、およびシステイン
リッチなドメインは、ＭＥＴＨ２の１、２または３のＴＳＰドメインと組合わさ
れ得る。ＭＥＴＨ１のシグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイ
ン、およびシステインリッチなドメインは、ＭＥＴＨ１の１、２または３のＴＳ
Ｐドメインと組合わされ得る。ＭＥＴＨ２のシグナル配列、プロドメイン、メタ
ロプロテアーゼドメイン、およびシステインリッチなドメインは、ＭＥＴＨ２の
１、２または３のＴＳＰドメインと組合わされ得る。
Ｐ３を欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質；ＴＳＰ３、ＴＳＰ２、およ
びＴＳＰ１を欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質；システインリッチな
ドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２タンパク質；メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチなドメイン、
ＴＳＰ１、ＴＳＰ２およびＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク
質；ならびにプロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、システインリッチな
ドメイン、ＴＳＰ１、ＴＳＰ２、およびＴＳＰ３を欠くＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２タンパク質もまた含まれる。最後に、これらのドメインの任意の組合わせも
また好ましい。例えば、ＭＥＴＨ１のシステインリッチなドメインは、ＭＥＴＨ
１の １、２、または３のＴＳＰドメインと組合わされ得る。ＭＥＴＨ２のシス
テインリッチなドメインは、ＭＥＴＨ２の１、２、または３のＴＳＰドメインと
組合わされ得る。ＭＥＴＨ１のメタロプロテアーゼドメインおよびシステインリ
ッチなドメインは、ＭＥＴＨ１の１、２または３のＴＳＰドメインと組合わされ
得る。ＭＥＴＨ２のメタロプロテアーゼドメインおよびシステインリッチなドメ
インは、ＭＥＴＨ２の１、２または３のＴＳＰドメインと組合わされ得る。ＭＥ
ＴＨ１のプロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、およびシステインリッチ
なドメインは、ＭＥＴＨ１の１、２または３のＴＳＰドメインと組合わされ得る
。ＭＥＴＨ２のプロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、およびシステイン
リッチなドメインは、ＭＥＴＨ２の１、２または３のＴＳＰドメインと組合わさ
れ得る。ＭＥＴＨ１のシグナル配列、プロドメイン、メタロプロテアーゼドメイ
ン、およびシステインリッチなドメインは、ＭＥＴＨ１の１、２または３のＴＳ
Ｐドメインと組合わされ得る。ＭＥＴＨ２のシグナル配列、プロドメイン、メタ
ロプロテアーゼドメイン、およびシステインリッチなドメインは、ＭＥＴＨ２の
１、２または３のＴＳＰドメインと組合わされ得る。
【０４３６】
一般的提案として、用量当り、非経口的に投与されるＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２ポリペプチドの合計薬学的有効量は、患者体重の、約１μｇ／ｋｇ／日〜１
０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲にあるが、上記のようにこれは治療的裁量に委ねられる
。より好ましくは、このポリペプチドについて、この用量は、少なくとも０．０
１ｍｇ／ｋｇ／日、そして最も好ましくはヒトに対して約０．０１ｍｇ／ｋｇ／
日と約１ｍｇ／ｋｇ／日との間である。連続投与する場合、代表的には、ＭＥＴ
Ｈ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを約１μｇ／ｋｇ／時間〜約５０μｇ／ｋｇ
／時間の投薬速度で１日に１〜４回の注射かまたは連続皮下注入（例えばミニポ
ンプを用いる）のいずれかにより投与する。静脈内用バッグ溶液もまた使用し得
る。
Ｈ２ポリペプチドの合計薬学的有効量は、患者体重の、約１μｇ／ｋｇ／日〜１
０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲にあるが、上記のようにこれは治療的裁量に委ねられる
。より好ましくは、このポリペプチドについて、この用量は、少なくとも０．０
１ｍｇ／ｋｇ／日、そして最も好ましくはヒトに対して約０．０１ｍｇ／ｋｇ／
日と約１ｍｇ／ｋｇ／日との間である。連続投与する場合、代表的には、ＭＥＴ
Ｈ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを約１μｇ／ｋｇ／時間〜約５０μｇ／ｋｇ
／時間の投薬速度で１日に１〜４回の注射かまたは連続皮下注入（例えばミニポ
ンプを用いる）のいずれかにより投与する。静脈内用バッグ溶液もまた使用し得
る。
【０４３７】
本発明のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を含有する薬学的組成物を、経口的、直
腸内、非経口的、槽内（ｉｎｔｒａｃｉｓｔｅｍａｌｌｙ）、膣内、腹腔内、局
所的（粉剤、軟膏、点滴剤、または経皮パッチによるなど）、口内あるいは経口
または鼻腔スプレーとして投与する。「薬学的に受容可能なキャリア」とは、非
毒性の固体、半固体または液体の充填剤、希釈剤、被包材または任意の型の処方
補助剤を意味する。本明細書中で用いる場合、用語「非経口的」とは、静脈内、
筋肉内、腹腔内、胸骨内、皮下および関節内の注射および注入を含む投与の様式
をいう。
腸内、非経口的、槽内（ｉｎｔｒａｃｉｓｔｅｍａｌｌｙ）、膣内、腹腔内、局
所的（粉剤、軟膏、点滴剤、または経皮パッチによるなど）、口内あるいは経口
または鼻腔スプレーとして投与する。「薬学的に受容可能なキャリア」とは、非
毒性の固体、半固体または液体の充填剤、希釈剤、被包材または任意の型の処方
補助剤を意味する。本明細書中で用いる場合、用語「非経口的」とは、静脈内、
筋肉内、腹腔内、胸骨内、皮下および関節内の注射および注入を含む投与の様式
をいう。
【０４３８】
（遺伝子治療方法）
本発明の別の局面は、障害、疾患および状態を処置するための遺伝子治療方法
である。この遺伝子治療方法は、本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
ポリペプチドの発現を達成するための、核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡおよびアンチセン
スＤＮＡまたはＲＮＡ）配列の動物への導入に関する。この方法は、標的組織に
よるこのポリペプチドの発現のために必要なプロモータおよび他の任意の遺伝因
子と、作動可能に連結したＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを
コードするポリヌクレオチドを必要とする。このような遺伝子治療および送達技
術は当該分野において公知である（例えば、本明細書中に参考として援用される
、ＷＯ９０／１１０９２を参照のこと）。
である。この遺伝子治療方法は、本発明のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
ポリペプチドの発現を達成するための、核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡおよびアンチセン
スＤＮＡまたはＲＮＡ）配列の動物への導入に関する。この方法は、標的組織に
よるこのポリペプチドの発現のために必要なプロモータおよび他の任意の遺伝因
子と、作動可能に連結したＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを
コードするポリヌクレオチドを必要とする。このような遺伝子治療および送達技
術は当該分野において公知である（例えば、本明細書中に参考として援用される
、ＷＯ９０／１１０９２を参照のこと）。
【０４３９】
従って、例えば、患者由来の細胞は、エキソビボでＭＥＴＨ１および／または
ＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドと作動可能に連結したプロモーターを含むポリヌク
レオチド（ＤＮＡまたはＲＮＡ）を用いて操作され得、次いで、操作された細胞
は、このポリペプチドを用いて処置される患者に提供される。このような方法は
、当該分野において周知である。例えば、Ｂｅｌｌｄｅｇｒｕｎ，Ａ．ら、Ｊ．
Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．８５：１０７−２１６（１９９３）；Ｆｅ
ｒｒａｎｔｉｎｉ，Ｍ．ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５３：１１０７
−１１１２（１９９３）；Ｆｅｒｒａｎｔｉｎｉ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
ｏｇｙ １５３：４６０４−４６１５（１９９４）；Ｋａｉｄｏ，Ｔ．ら、Ｉｎ
ｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ６０：２２１−２２９（１９９５）；Ｏｇｕｒａ，Ｈ．
ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５０：５１０２−５１０６（１９９０）
；Ｓａｎｔｏｄｏｎａｔｏ，Ｌ．ら、Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ
７：１−１０（１９９６）；Ｓａｎｔｏｄｏｎａｔｏ，Ｌ．ら、Ｇｅｎｅ Ｔｈ
ｅｒａｐｙ ４：１２４６−１２５５（１９９７）；およびＺｈａｎｇ，Ｊ．−
Ｆ．ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ３：３１−３８（１９９６
）を参照のこと。これらは、本明細書中に参考として援用される。１つの実施形
態においては、操作される細胞は、動脈細胞である。この動脈細胞は、動脈、動
脈の周囲の組織への直接的な注射を介して、またはカテーテル注入を介して患者
に再導入され得る。
ＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドと作動可能に連結したプロモーターを含むポリヌク
レオチド（ＤＮＡまたはＲＮＡ）を用いて操作され得、次いで、操作された細胞
は、このポリペプチドを用いて処置される患者に提供される。このような方法は
、当該分野において周知である。例えば、Ｂｅｌｌｄｅｇｒｕｎ，Ａ．ら、Ｊ．
Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．８５：１０７−２１６（１９９３）；Ｆｅ
ｒｒａｎｔｉｎｉ，Ｍ．ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５３：１１０７
−１１１２（１９９３）；Ｆｅｒｒａｎｔｉｎｉ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
ｏｇｙ １５３：４６０４−４６１５（１９９４）；Ｋａｉｄｏ，Ｔ．ら、Ｉｎ
ｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ６０：２２１−２２９（１９９５）；Ｏｇｕｒａ，Ｈ．
ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５０：５１０２−５１０６（１９９０）
；Ｓａｎｔｏｄｏｎａｔｏ，Ｌ．ら、Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ
７：１−１０（１９９６）；Ｓａｎｔｏｄｏｎａｔｏ，Ｌ．ら、Ｇｅｎｅ Ｔｈ
ｅｒａｐｙ ４：１２４６−１２５５（１９９７）；およびＺｈａｎｇ，Ｊ．−
Ｆ．ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ３：３１−３８（１９９６
）を参照のこと。これらは、本明細書中に参考として援用される。１つの実施形
態においては、操作される細胞は、動脈細胞である。この動脈細胞は、動脈、動
脈の周囲の組織への直接的な注射を介して、またはカテーテル注入を介して患者
に再導入され得る。
【０４４０】
以下により詳細に考察されるように、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポ
リヌクレオチド構築物は、注射可能な物質を動物の細胞に送達する任意の方法（
例えば、組織（心臓、筋肉、皮膚、肺、肝臓など）の間質空間への注射）により
送達され得る。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物は
、薬学的に受容可能な液体または水性のキャリア中で送達され得る。
リヌクレオチド構築物は、注射可能な物質を動物の細胞に送達する任意の方法（
例えば、組織（心臓、筋肉、皮膚、肺、肝臓など）の間質空間への注射）により
送達され得る。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物は
、薬学的に受容可能な液体または水性のキャリア中で送達され得る。
【０４４１】
１つの実施形態において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオ
チドは、裸のポリヌクレオチドとして送達される。用語「裸の」ポリヌクレオチ
ド、ＤＮＡまたはＲＮＡとは、細胞への侵入を補助し、促進し、または容易にす
るように作用するいかなる送達ビヒクル（ウイルス配列、ウイルス粒子、リポソ
ーム処方物、リポフェクチンまたは沈殿剤などを含む）も含まない配列をいう。
しかし、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドはまた、当業者
に周知の方法により調製され得るリポソーム処方物中およびリポフェクチン処方
物などにおいて送達され得る。このような方法は、例えば、米国特許第５，５９
３，９７２号、同第５，５８９，４６６号および同第５，５８０，８５９号（こ
れらは、本明細書中に参考として援用される）に記載される。
チドは、裸のポリヌクレオチドとして送達される。用語「裸の」ポリヌクレオチ
ド、ＤＮＡまたはＲＮＡとは、細胞への侵入を補助し、促進し、または容易にす
るように作用するいかなる送達ビヒクル（ウイルス配列、ウイルス粒子、リポソ
ーム処方物、リポフェクチンまたは沈殿剤などを含む）も含まない配列をいう。
しかし、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドはまた、当業者
に周知の方法により調製され得るリポソーム処方物中およびリポフェクチン処方
物などにおいて送達され得る。このような方法は、例えば、米国特許第５，５９
３，９７２号、同第５，５８９，４６６号および同第５，５８０，８５９号（こ
れらは、本明細書中に参考として援用される）に記載される。
【０４４２】
遺伝子治療方法において使用されるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリ
ヌクレオチドベクター構築物は、好ましくは、宿主ゲノム中に組み込まれないか
または複製を可能にする配列を含まない構築物である。適切なベクターとしては
、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅから入手可能なｐＷＬＮＥＯ、ｐＳＶ２ＣＡＴ、ｐＯＧ
４４、ｐＸＴ１およびｐＳＧ；Ｐｈａｒｍａｃｉａから入手可能なｐＳＶＫ３、
ｐＢＰＶ、ｐＭＳＧおよびｐＳＶＬ；ならびにＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎから入手可
能なｐＥＦ１／Ｖ５、ｐｃＤＮＡ３．１、およびｐＲｃ／ＣＭＶ２が挙げられる
。他の適切なベクターは、当業者に容易に明らかである。
ヌクレオチドベクター構築物は、好ましくは、宿主ゲノム中に組み込まれないか
または複製を可能にする配列を含まない構築物である。適切なベクターとしては
、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅから入手可能なｐＷＬＮＥＯ、ｐＳＶ２ＣＡＴ、ｐＯＧ
４４、ｐＸＴ１およびｐＳＧ；Ｐｈａｒｍａｃｉａから入手可能なｐＳＶＫ３、
ｐＢＰＶ、ｐＭＳＧおよびｐＳＶＬ；ならびにＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎから入手可
能なｐＥＦ１／Ｖ５、ｐｃＤＮＡ３．１、およびｐＲｃ／ＣＭＶ２が挙げられる
。他の適切なベクターは、当業者に容易に明らかである。
【０４４３】
当業者に公知の任意の強力なプロモーターは、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２ＤＮＡの発現を駆動するために用いられ得る。適切なプロモーターとして
は、アデノウイルスプロモーター（例えば、アデノウイルス主要後期プロモータ
ー）；または異種プロモーター（例えば、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロ
モーター）；ＲＳウイルス（ＲＳＶ）プロモーター；誘導性プロモーター（例え
ば、ＭＭＴプロモーター、メタロチオネインプロモーター）；熱ショックプロモ
ーター；アルブミンプロモーター；ＡｐｏＡＩプロモーター；ヒトグロビンプロ
モーター；ウイルスチミジンキナーゼプロモーター（例えば、単純ヘルペスチミ
ジンキナーゼプロモーター）；レトロウイルスＬＴＲ；ｂ−アクチンプロモータ
ー；およびヒト成長ホルモンプロモーターが挙げられる。このプロモーターはま
た、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２についてネイティブなプロモーターで
あり得る。
ＴＨ２ＤＮＡの発現を駆動するために用いられ得る。適切なプロモーターとして
は、アデノウイルスプロモーター（例えば、アデノウイルス主要後期プロモータ
ー）；または異種プロモーター（例えば、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロ
モーター）；ＲＳウイルス（ＲＳＶ）プロモーター；誘導性プロモーター（例え
ば、ＭＭＴプロモーター、メタロチオネインプロモーター）；熱ショックプロモ
ーター；アルブミンプロモーター；ＡｐｏＡＩプロモーター；ヒトグロビンプロ
モーター；ウイルスチミジンキナーゼプロモーター（例えば、単純ヘルペスチミ
ジンキナーゼプロモーター）；レトロウイルスＬＴＲ；ｂ−アクチンプロモータ
ー；およびヒト成長ホルモンプロモーターが挙げられる。このプロモーターはま
た、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２についてネイティブなプロモーターで
あり得る。
【０４４４】
他の遺伝子治療技術とは異なり、裸の核酸配列を標的細胞に導入する１つの主
要な利点は、その細胞におけるポリヌクレオチド合成の一過性の性質である。研
究によって、非複製ＤＮＡ配列が細胞に導入されて、６ヶ月までの期間の間、所
望のポリペプチドの産生を提供し得ることが示された。
要な利点は、その細胞におけるポリヌクレオチド合成の一過性の性質である。研
究によって、非複製ＤＮＡ配列が細胞に導入されて、６ヶ月までの期間の間、所
望のポリペプチドの産生を提供し得ることが示された。
【０４４５】
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物は、動物内の組
織（筋肉、皮膚、脳、肺、肝臓、脾臓、骨髄、胸腺、心臓、リンパ、血液、骨、
軟骨、膵臓、腎臓、胆嚢、胃、腸、精巣、卵巣、子宮、直腸、神経系、眼、腺、
および結合組織を含む）の間隙空間に送達され得る。この組織の間隙空間は、器
官組織の細網線維間の細胞間の液体、ムコ多糖類基質、血管または室の壁におけ
る弾性線維、線維性組織のコラーゲン線維、あるいは結合組織鞘性筋肉細胞（ｃ
ｏｎｎｅｃｔｉｖｅ ｔｉｓｓｕｅ ｅｎｓｈｅａｔｈｉｎｇ ｍｕｓｃｌｅ
ｃｅｌｌ）内または骨の裂孔中の同じ基質を包含する。これは、同様に、循環の
血漿およびリンパチャネルのリンパ液により占められた空間である。筋肉組織の
間隙空間への送達は、以下で議論される理由のために好ましい。ＭＥＴＨ１およ
び／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物は、これらの細胞を含む組織への
注射によって、好都合に送達され得る。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポ
リヌクレオチド構築物は、好ましくは、分化した持続性の非分裂細胞に送達され
、そしてその細胞において発現されるが、送達および発現は、非分化細胞または
完全には分化していない細胞（例えば、血液の幹細胞または皮膚線維芽細胞）に
おいて達成され得る。インビボでの筋肉細胞は、ポリヌクレオチドを取り込み、
そして発現するその能力において、特に適格である。
織（筋肉、皮膚、脳、肺、肝臓、脾臓、骨髄、胸腺、心臓、リンパ、血液、骨、
軟骨、膵臓、腎臓、胆嚢、胃、腸、精巣、卵巣、子宮、直腸、神経系、眼、腺、
および結合組織を含む）の間隙空間に送達され得る。この組織の間隙空間は、器
官組織の細網線維間の細胞間の液体、ムコ多糖類基質、血管または室の壁におけ
る弾性線維、線維性組織のコラーゲン線維、あるいは結合組織鞘性筋肉細胞（ｃ
ｏｎｎｅｃｔｉｖｅ ｔｉｓｓｕｅ ｅｎｓｈｅａｔｈｉｎｇ ｍｕｓｃｌｅ
ｃｅｌｌ）内または骨の裂孔中の同じ基質を包含する。これは、同様に、循環の
血漿およびリンパチャネルのリンパ液により占められた空間である。筋肉組織の
間隙空間への送達は、以下で議論される理由のために好ましい。ＭＥＴＨ１およ
び／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物は、これらの細胞を含む組織への
注射によって、好都合に送達され得る。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポ
リヌクレオチド構築物は、好ましくは、分化した持続性の非分裂細胞に送達され
、そしてその細胞において発現されるが、送達および発現は、非分化細胞または
完全には分化していない細胞（例えば、血液の幹細胞または皮膚線維芽細胞）に
おいて達成され得る。インビボでの筋肉細胞は、ポリヌクレオチドを取り込み、
そして発現するその能力において、特に適格である。
【０４４６】
裸の核酸配列注射のために、ＤＮＡまたはＲＮＡの有効投薬量は、約０．０５
ｍｇ／ｋｇ体重〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲にある。好ましくは、この投薬量
は、約０．００５ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇであり、そしてより好ましくは
約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇである。もちろん、当業者が認識するよ
うに、この投薬量は、注射の組織部位に応じて変化する。核酸配列の適切かつ有
効な投薬量は、当業者によって容易に決定され得、そして処置される状態および
投与経路に依存し得る。
ｍｇ／ｋｇ体重〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲にある。好ましくは、この投薬量
は、約０．００５ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇであり、そしてより好ましくは
約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇである。もちろん、当業者が認識するよ
うに、この投薬量は、注射の組織部位に応じて変化する。核酸配列の適切かつ有
効な投薬量は、当業者によって容易に決定され得、そして処置される状態および
投与経路に依存し得る。
【０４４７】
好ましい投与経路は、組織の間隙空間への非経口注射経路による。しかし、他
の非経口経路もまた用いられ得、これには、例えば、特に、肺または気管支の組
織、咽喉または鼻の粘膜への送達のためのエアロゾル処方物の吸入が挙げられる
。さらに、裸のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ＤＮＡ構築物が、血管形成
術の間にこの手順において用いられるカテーテルによって動脈に送達され得る。
の非経口経路もまた用いられ得、これには、例えば、特に、肺または気管支の組
織、咽喉または鼻の粘膜への送達のためのエアロゾル処方物の吸入が挙げられる
。さらに、裸のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ＤＮＡ構築物が、血管形成
術の間にこの手順において用いられるカテーテルによって動脈に送達され得る。
【０４４８】
裸のポリヌクレオチドは、送達部位での直接の針注射、静脈内注射、局所投与
、カテーテル注入、およびいわゆる「遺伝子銃」を含むがこれらに限定されない
、当該分野で公知の任意の方法によって送達される。これらの送達方法は、当該
分野で公知である。
、カテーテル注入、およびいわゆる「遺伝子銃」を含むがこれらに限定されない
、当該分野で公知の任意の方法によって送達される。これらの送達方法は、当該
分野で公知である。
【０４４９】
この構築物はまた、ウイルス配列、ウイルス粒子、リポソーム処方物、リポフ
ェクチン、沈殿剤などのような送達ビヒクルを用いて送達され得る。このような
送達方法は、当該分野で公知である。
ェクチン、沈殿剤などのような送達ビヒクルを用いて送達され得る。このような
送達方法は、当該分野で公知である。
【０４５０】
特定の実施形態において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオ
チド構築物は、リポソーム調製物中で複合体化している。本発明にて使用するた
めのリポソーム調製物は、カチオン性（正に荷電した）、アニオン性（負に荷電
した）および中性の調製物を包含する。しかしながら、カチオン性リポソームと
ポリアニオン性核酸との間で強固な荷電複合体を形成し得るので、カチオン性リ
ポソームが特に好ましい。カチオン性リポソームは、機能的形態において、プラ
スミドＤＮＡ（本明細書中で参考として援用される、Ｆｅｌｇｎｅｒら、Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９８７）８４：７４１３〜７４１
６）；ｍＲＮＡ（本明細書中で参考として援用される、Ｍａｌｏｎｅら、Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９８９）８６：６０７７〜６０８
１）；および精製された転写因子（本明細書中で参考として援用される、Ｄｅｂ
ｓら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９０）２６５：１０１８９〜１０１９２
）の細胞内送達を媒介することが示されている。
チド構築物は、リポソーム調製物中で複合体化している。本発明にて使用するた
めのリポソーム調製物は、カチオン性（正に荷電した）、アニオン性（負に荷電
した）および中性の調製物を包含する。しかしながら、カチオン性リポソームと
ポリアニオン性核酸との間で強固な荷電複合体を形成し得るので、カチオン性リ
ポソームが特に好ましい。カチオン性リポソームは、機能的形態において、プラ
スミドＤＮＡ（本明細書中で参考として援用される、Ｆｅｌｇｎｅｒら、Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９８７）８４：７４１３〜７４１
６）；ｍＲＮＡ（本明細書中で参考として援用される、Ｍａｌｏｎｅら、Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９８９）８６：６０７７〜６０８
１）；および精製された転写因子（本明細書中で参考として援用される、Ｄｅｂ
ｓら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９０）２６５：１０１８９〜１０１９２
）の細胞内送達を媒介することが示されている。
【０４５１】
カチオン性リポソームは容易に入手可能である。例えば、Ｎ［１−２，３−ジ
オレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリエチルアンモニウム（ＤＯＴＭ
Ａ）リポソームは特に有用であり、そして商標ＬｉｐｏｆｅｃｔｉｎのもとにＧ
ＩＢＣＯ ＢＲＬ，Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ，Ｎ．Ｙ．より入手可能である（
本明細書中で参考として援用される、Ｆｅｌｇｎｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．
Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９８７）８４：７４１３〜７４１６をもまた参照
のこと）。他の市販のリポソームとしては、トランスフェクテース（ｔｒａｎｓ
ｆｅｃｔａｃｅ）（ＤＤＡＢ／ＤＯＰＥ）およびＤＯＴＡＰ／ＤＯＰＥ（Ｂｏｅ
ｈｒｉｎｇｅｒ）が挙げられる。
オレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリエチルアンモニウム（ＤＯＴＭ
Ａ）リポソームは特に有用であり、そして商標ＬｉｐｏｆｅｃｔｉｎのもとにＧ
ＩＢＣＯ ＢＲＬ，Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ，Ｎ．Ｙ．より入手可能である（
本明細書中で参考として援用される、Ｆｅｌｇｎｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．
Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９８７）８４：７４１３〜７４１６をもまた参照
のこと）。他の市販のリポソームとしては、トランスフェクテース（ｔｒａｎｓ
ｆｅｃｔａｃｅ）（ＤＤＡＢ／ＤＯＰＥ）およびＤＯＴＡＰ／ＤＯＰＥ（Ｂｏｅ
ｈｒｉｎｇｅｒ）が挙げられる。
【０４５２】
当該分野で周知の技術を使用して、他のカチオン性リポソームを、容易に入手
可能な物質より調製し得る。ＤＯＴＡＰ（１，２−ビス（オレオイルオキシ）−
３−（トリメチルアンモニオ）プロパン）リポソームの合成の記述に関して、例
えばＰＣＴ公開第ＷＯ ９０／１１０９２号（本明細書中で参考として援用され
る）を参照のこと。ＤＯＴＭＡリポソームの調製は文献にて説明されており、例
えば、本明細書中で参考として援用される、Ｐ．Ｆｅｌｇｎｅｒら、Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８４：７４１３〜７４１７を参照のこと
。類似した方法を使用して、他のカチオン性脂質物質よりリポソームを調製し得
る。
可能な物質より調製し得る。ＤＯＴＡＰ（１，２−ビス（オレオイルオキシ）−
３−（トリメチルアンモニオ）プロパン）リポソームの合成の記述に関して、例
えばＰＣＴ公開第ＷＯ ９０／１１０９２号（本明細書中で参考として援用され
る）を参照のこと。ＤＯＴＭＡリポソームの調製は文献にて説明されており、例
えば、本明細書中で参考として援用される、Ｐ．Ｆｅｌｇｎｅｒら、Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８４：７４１３〜７４１７を参照のこと
。類似した方法を使用して、他のカチオン性脂質物質よりリポソームを調製し得
る。
【０４５３】
同様に、アニオン性リポソームおよび中性リポソームは、例えば、Ａｖａｎｔ
ｉ Ｐｏｌａｒ Ｌｉｐｉｄｓ（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，Ａｌａ．）から容易に
入手可能であり、または容易に入手可能な物質を使用して簡単に調製され得る。
そのような物質としてはとりわけ、ホスファチジルコリン、コレステロール、ホ
スファチジルエタノールアミン、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ
）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジオレオイルホス
ファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）が挙げられる。これらの物質はまた、
ＤＯＴＭＡ出発物資およびＤＯＴＡＰ出発物質と適切な割合において混合され得
る。これらの物質を使用してリポソームを生成する方法は、当該分野で周知であ
る。
ｉ Ｐｏｌａｒ Ｌｉｐｉｄｓ（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，Ａｌａ．）から容易に
入手可能であり、または容易に入手可能な物質を使用して簡単に調製され得る。
そのような物質としてはとりわけ、ホスファチジルコリン、コレステロール、ホ
スファチジルエタノールアミン、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ
）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジオレオイルホス
ファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）が挙げられる。これらの物質はまた、
ＤＯＴＭＡ出発物資およびＤＯＴＡＰ出発物質と適切な割合において混合され得
る。これらの物質を使用してリポソームを生成する方法は、当該分野で周知であ
る。
【０４５４】
例えば、商業的に、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジオレ
オイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、およびジオレオイルホスファ
チジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）を種々の組み合わせにおいて使用し、コレ
ステロールを添加してもしなくても、従来のリポソームを生成し得る。従って、
例えば、超音波処理バイアル中への窒素ガス流下で、各５０ｍｇのＤＯＰＧおよ
びＤＯＰＣを乾燥することにより、ＤＯＰＧ／ＤＯＰＣ小胞を調製し得る。この
サンプルを一晩真空ポンプ下に置き、そして次の日、脱イオン水で水和する。次
いで、浴を、１５ＥＣで循環させながら、最大設定にて、逆位カップ（浴タイプ
）プローブを装備したＨｅａｔ Ｓｙｓｔｅｍｓ モデル３５０超音波処理器を
使用して、このサンプルを栓をしたバイアル中にて２時間超音波処理する。ある
いは、負に荷電した小胞を、超音波処理なしで調製して多重膜小胞を生成し得る
か、または核孔膜（ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｅ ｍｅｍｂｒａｎｅ）を通して押し出
すことにより別々の大きさの単膜小胞を生成し得る。他の方法は、当業者に公知
でありそして利用可能である。
オイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、およびジオレオイルホスファ
チジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）を種々の組み合わせにおいて使用し、コレ
ステロールを添加してもしなくても、従来のリポソームを生成し得る。従って、
例えば、超音波処理バイアル中への窒素ガス流下で、各５０ｍｇのＤＯＰＧおよ
びＤＯＰＣを乾燥することにより、ＤＯＰＧ／ＤＯＰＣ小胞を調製し得る。この
サンプルを一晩真空ポンプ下に置き、そして次の日、脱イオン水で水和する。次
いで、浴を、１５ＥＣで循環させながら、最大設定にて、逆位カップ（浴タイプ
）プローブを装備したＨｅａｔ Ｓｙｓｔｅｍｓ モデル３５０超音波処理器を
使用して、このサンプルを栓をしたバイアル中にて２時間超音波処理する。ある
いは、負に荷電した小胞を、超音波処理なしで調製して多重膜小胞を生成し得る
か、または核孔膜（ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｅ ｍｅｍｂｒａｎｅ）を通して押し出
すことにより別々の大きさの単膜小胞を生成し得る。他の方法は、当業者に公知
でありそして利用可能である。
【０４５５】
このリポソームとしては、多重膜小胞（ＭＬＶ）、小さな単膜小胞（ＳＵＶ）
または大きな単膜小胞（ＬＵＶ）が挙げられ得、ＳＵＶが好ましい。当該分野で
周知の方法を使用して、種々のリポソーム−核酸複合体が調製される。例えば、
本明細書中で参考として援用される、Ｓｔｒａｕｂｉｎｇｅｒら、Ｍｅｔｈｏｄ
ｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（１９８３）、１０１：５１２〜５２７を参照
のこと。例えば、核酸を含有するＭＬＶは、ガラスチューブの壁面にリン脂質の
薄膜を堆積させ、そしてその後、カプセル化されるべき物質の溶液で水和するこ
とによって調製され得る。ＳＵＶはＭＬＶの長期超音波処理により調製され、単
膜リポソームの均質集団を生成する。封入されるべき物質を、予め形成されたＭ
ＬＶの懸濁液に添加し、次いで、超音波処理する。カチオン性脂質を含むリポソ
ームを使用する場合、乾燥した脂質膜を、滅菌水または１０ｍＭ Ｔｒｉｓ／Ｎ
ａＣｌのような等張性緩衝溶液のような適切な溶液中に再懸濁し、超音波処理し
、次いで、予め形成されたリポソームをＤＮＡと直接混合する。正に荷電したリ
ポソームのカチオン性ＤＮＡへの結合に起因して、リポソームおよびＤＮＡは非
常に安定な複合体を形成する。ＳＵＶは、小核酸フラグメントを用いての用途を
見出す。ＬＵＶは、当該分野で周知の多くの方法により調製される。一般に使用
される方法としては、Ｃａ2+−ＥＤＴＡキレート化（Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕ
ｌｏｓら、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ（１９７５）３９４：４
８３；Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅｌｌ（１９７９）１７：７７）；エーテル注入（Ｄ
ｅａｍｅｒ，Ｄ．およびＢａｎｇｈａｍ，Ａ．、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙ
ｓ．Ａｃｔａ（１９７６）４４３：６２９；Ｏｓｔｒｏら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｍ．（１９７７）７６：８３６；Ｆｒａｌｅ
ｙら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９７９）７６：３３
４８）；界面活性剤透析（Ｅｎｏｃｈ，Ｈ．およびＳｔｒｉｔｔｍａｔｔｅｒ，
Ｐ．、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９７９）７６：１４
５）；および逆相エバポレーション（ＲＥＶ）（Ｆｒａｌｅｙら、Ｊ．Ｂｉｏｌ
．Ｃｈｅｍ．（１９８０）２５５：１０４３１；Ｓｚｏｋａ、Ｆ．およびＰａｐ
ａｈａｄｊｏｐｕｏｌｏｓ，Ｄ．、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ
ＳＡ（１９７８）７５：１４５；Ｓｃｈａｅｆｅｒ−Ｒｉｄｄｅｒら、Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ（１９８２）２１５：１６６）が挙げられ、これらの文献は本明細書中で
参考として援用される。
または大きな単膜小胞（ＬＵＶ）が挙げられ得、ＳＵＶが好ましい。当該分野で
周知の方法を使用して、種々のリポソーム−核酸複合体が調製される。例えば、
本明細書中で参考として援用される、Ｓｔｒａｕｂｉｎｇｅｒら、Ｍｅｔｈｏｄ
ｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（１９８３）、１０１：５１２〜５２７を参照
のこと。例えば、核酸を含有するＭＬＶは、ガラスチューブの壁面にリン脂質の
薄膜を堆積させ、そしてその後、カプセル化されるべき物質の溶液で水和するこ
とによって調製され得る。ＳＵＶはＭＬＶの長期超音波処理により調製され、単
膜リポソームの均質集団を生成する。封入されるべき物質を、予め形成されたＭ
ＬＶの懸濁液に添加し、次いで、超音波処理する。カチオン性脂質を含むリポソ
ームを使用する場合、乾燥した脂質膜を、滅菌水または１０ｍＭ Ｔｒｉｓ／Ｎ
ａＣｌのような等張性緩衝溶液のような適切な溶液中に再懸濁し、超音波処理し
、次いで、予め形成されたリポソームをＤＮＡと直接混合する。正に荷電したリ
ポソームのカチオン性ＤＮＡへの結合に起因して、リポソームおよびＤＮＡは非
常に安定な複合体を形成する。ＳＵＶは、小核酸フラグメントを用いての用途を
見出す。ＬＵＶは、当該分野で周知の多くの方法により調製される。一般に使用
される方法としては、Ｃａ2+−ＥＤＴＡキレート化（Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕ
ｌｏｓら、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ（１９７５）３９４：４
８３；Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅｌｌ（１９７９）１７：７７）；エーテル注入（Ｄ
ｅａｍｅｒ，Ｄ．およびＢａｎｇｈａｍ，Ａ．、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙ
ｓ．Ａｃｔａ（１９７６）４４３：６２９；Ｏｓｔｒｏら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｍ．（１９７７）７６：８３６；Ｆｒａｌｅ
ｙら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９７９）７６：３３
４８）；界面活性剤透析（Ｅｎｏｃｈ，Ｈ．およびＳｔｒｉｔｔｍａｔｔｅｒ，
Ｐ．、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９７９）７６：１４
５）；および逆相エバポレーション（ＲＥＶ）（Ｆｒａｌｅｙら、Ｊ．Ｂｉｏｌ
．Ｃｈｅｍ．（１９８０）２５５：１０４３１；Ｓｚｏｋａ、Ｆ．およびＰａｐ
ａｈａｄｊｏｐｕｏｌｏｓ，Ｄ．、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ
ＳＡ（１９７８）７５：１４５；Ｓｃｈａｅｆｅｒ−Ｒｉｄｄｅｒら、Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ（１９８２）２１５：１６６）が挙げられ、これらの文献は本明細書中で
参考として援用される。
【０４５６】
一般に、ＤＮＡのリポソームに対する割合は約１０：１から約１：１０までで
ある。好ましくは、その割合（ｒａｔｉｏｎ）は約５：１から約１：５までであ
る。より好ましくは、その割合は約３：１から約１：３までである。さらにより
好ましくは、その割合は約１：１である。
ある。好ましくは、その割合（ｒａｔｉｏｎ）は約５：１から約１：５までであ
る。より好ましくは、その割合は約３：１から約１：３までである。さらにより
好ましくは、その割合は約１：１である。
【０４５７】
米国特許第５，６７６，９５４号（本明細書中で参考として援用される）はカ
チオン性リポソームキャリアと複合体化された遺伝物質のマウスへの注入につい
て報告する。米国特許第４，８９７，３５５号、同第４，９４６，７８７号、同
第５，０４９，３８６号、同第５，４５９，１２７号、同第５，５８９，４６６
号、同第５，６９３，６２２号、同第５，５８０，８５９号、同第５，７０３，
０５５号および国際公開第ＷＯ９４／９４６９号（これらは本明細書中で参考と
して援用される）は、ＤＮＡを細胞および哺乳動物にトランスフェクトする際に
使用するためのカチオン性脂質を提供する。米国特許第５，５８９，４６６号、
同第５，６９３，６２２号、同第５，５８０，８５９号、同第５，７０３，０５
５号および国際公開第ＷＯ９４／９４６９号（これらは本明細書中で参考として
援用される）は、ＤＮＡ−カチオン性脂質複合体を哺乳動物に送達する方法を提
供する。
チオン性リポソームキャリアと複合体化された遺伝物質のマウスへの注入につい
て報告する。米国特許第４，８９７，３５５号、同第４，９４６，７８７号、同
第５，０４９，３８６号、同第５，４５９，１２７号、同第５，５８９，４６６
号、同第５，６９３，６２２号、同第５，５８０，８５９号、同第５，７０３，
０５５号および国際公開第ＷＯ９４／９４６９号（これらは本明細書中で参考と
して援用される）は、ＤＮＡを細胞および哺乳動物にトランスフェクトする際に
使用するためのカチオン性脂質を提供する。米国特許第５，５８９，４６６号、
同第５，６９３，６２２号、同第５，５８０，８５９号、同第５，７０３，０５
５号および国際公開第ＷＯ９４／９４６９号（これらは本明細書中で参考として
援用される）は、ＤＮＡ−カチオン性脂質複合体を哺乳動物に送達する方法を提
供する。
【０４５８】
特定の実施形態において、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２をコードする
配列を含むＲＮＡを含むレトロウイルス粒子を使用して、エキソビボまたはイン
ビボで細胞を操作する。レトロウイルスプラスミドベクターを誘導し得るレトロ
ウイルスとしては、モロニーマウス白血病ウイルス、脾臓壊死ウイルス、ラウス
肉腫ウイルス、ハーベイ肉腫ウイルス、ニワトリ白血病ウイルス、テナガザル白
血病ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、骨髄増殖性肉腫ウイルス、および乳癌ウ
イルスが挙げられるが、これらに限定されない。
配列を含むＲＮＡを含むレトロウイルス粒子を使用して、エキソビボまたはイン
ビボで細胞を操作する。レトロウイルスプラスミドベクターを誘導し得るレトロ
ウイルスとしては、モロニーマウス白血病ウイルス、脾臓壊死ウイルス、ラウス
肉腫ウイルス、ハーベイ肉腫ウイルス、ニワトリ白血病ウイルス、テナガザル白
血病ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、骨髄増殖性肉腫ウイルス、および乳癌ウ
イルスが挙げられるが、これらに限定されない。
【０４５９】
このレトロウイルスプラスミドベクターを使用して、パッケージング細胞株を
形質導入し、プロデューサー細胞株を形成する。トランスフェクトされ得るパッ
ケージング細胞株の例としては、その全体が本明細書中で参考として援用される
、Ｍｉｌｌｅｒ、Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅａｐｙ、１：５〜１４（１９９
０）にて記載されるようなＰＥ５０１、ＰＡ３１７、Ｒ−２、Ｒ−ＡＭ、ＰＡ１
２、Ｔ１９−１４Ｘ、ＶＴ−１９−１７−Ｈ２、ＲＣＲＥ、ＲＣＲＩＰ、ＧＰ＋
Ｅ−８６、ＧＰ＋ｅｎｖＡｍ１２およびＤＡＮ細胞株が挙げられるが、これらに
限定されない。このベクターは、当該分野で公知の任意の手段により、パッケー
ジング細胞を形質導入し得る。そのような手段としては、エレクトロポレーショ
ン、リポソームの使用、およびＣａＰＯ4沈殿が挙げられるが、それらに限定さ
れない。１つの代替法において、このレトロウイルスプラスミドベクターをリポ
ソームにカプセル化するか、または脂質に結合して、次いで宿主に投与し得る。
形質導入し、プロデューサー細胞株を形成する。トランスフェクトされ得るパッ
ケージング細胞株の例としては、その全体が本明細書中で参考として援用される
、Ｍｉｌｌｅｒ、Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅａｐｙ、１：５〜１４（１９９
０）にて記載されるようなＰＥ５０１、ＰＡ３１７、Ｒ−２、Ｒ−ＡＭ、ＰＡ１
２、Ｔ１９−１４Ｘ、ＶＴ−１９−１７−Ｈ２、ＲＣＲＥ、ＲＣＲＩＰ、ＧＰ＋
Ｅ−８６、ＧＰ＋ｅｎｖＡｍ１２およびＤＡＮ細胞株が挙げられるが、これらに
限定されない。このベクターは、当該分野で公知の任意の手段により、パッケー
ジング細胞を形質導入し得る。そのような手段としては、エレクトロポレーショ
ン、リポソームの使用、およびＣａＰＯ4沈殿が挙げられるが、それらに限定さ
れない。１つの代替法において、このレトロウイルスプラスミドベクターをリポ
ソームにカプセル化するか、または脂質に結合して、次いで宿主に投与し得る。
【０４６０】
このプロデューサー細胞株は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２をコード
するポリヌクレオチドを含む感染性レトロウイルスベクター粒子を産生する。次
いで、そのようなレトロウイルスベクター粒子を使用して、インビトロまたはイ
ンビボのどちらかにおいて、真核生物細胞を形質導入し得る。この形質導入され
た真核生物細胞は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を発現する。
するポリヌクレオチドを含む感染性レトロウイルスベクター粒子を産生する。次
いで、そのようなレトロウイルスベクター粒子を使用して、インビトロまたはイ
ンビボのどちらかにおいて、真核生物細胞を形質導入し得る。この形質導入され
た真核生物細胞は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を発現する。
【０４６１】
特定の他の実施形態において、アデノウイルスベクター中に含まれるＭＥＴＨ
１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドを用いて、エキソビボまたはイン
ビボで細胞を操作する。アデノウイルスは、それがＭＥＴＨ１および／またはＭ
ＥＴＨ２をコードし、そして発現し、それと同時に通常の溶解性ウイルス生活環
にて複製するその能力に関して不活性化されるように操作され得る。アデノウイ
ルス発現は、そのウイルスＤＮＡの宿主細胞染色体への組み込み無しに達成され
、その結果、挿入性変異誘発についての心配が軽減される。さらに、アデノウイ
ルスは、何年もの間、腸の生ワクチンとして優れた安全側面を伴って使用されて
いる（Ｓｃｈｗａｒｔｚｅｔ Ａ．Ｒ．ら、（１９７４）Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓ
ｐｉｒ．Ｄｉｓ．、１０９：２３３−２３８）。最終的に、アデノウイルス媒介
性遺伝子移入が、コトン（ｃｏｔｔｏｎ）ラットの肺へのα−１−アンチトリプ
シンおよびＣＦＴＲの移入を含む多くの例において実証されている（Ｒｏｓｅｎ
ｆｅｌｄら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２５２：４３１〜４３４（１９９１）；Ｒｏｓｅ
ｎｆｅｌｄら、Ｃｅｌｌ、６８：１４３〜１５５（１９９２））。さらに、ヒト
癌における原因物質としてアデノウイルスを確立しようとする広範な研究は、一
様に否定的であった（Ｇｒｅｅｎら Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．
ＵＳＡ，７６：６６０６（１９７９））。
１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドを用いて、エキソビボまたはイン
ビボで細胞を操作する。アデノウイルスは、それがＭＥＴＨ１および／またはＭ
ＥＴＨ２をコードし、そして発現し、それと同時に通常の溶解性ウイルス生活環
にて複製するその能力に関して不活性化されるように操作され得る。アデノウイ
ルス発現は、そのウイルスＤＮＡの宿主細胞染色体への組み込み無しに達成され
、その結果、挿入性変異誘発についての心配が軽減される。さらに、アデノウイ
ルスは、何年もの間、腸の生ワクチンとして優れた安全側面を伴って使用されて
いる（Ｓｃｈｗａｒｔｚｅｔ Ａ．Ｒ．ら、（１９７４）Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓ
ｐｉｒ．Ｄｉｓ．、１０９：２３３−２３８）。最終的に、アデノウイルス媒介
性遺伝子移入が、コトン（ｃｏｔｔｏｎ）ラットの肺へのα−１−アンチトリプ
シンおよびＣＦＴＲの移入を含む多くの例において実証されている（Ｒｏｓｅｎ
ｆｅｌｄら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２５２：４３１〜４３４（１９９１）；Ｒｏｓｅ
ｎｆｅｌｄら、Ｃｅｌｌ、６８：１４３〜１５５（１９９２））。さらに、ヒト
癌における原因物質としてアデノウイルスを確立しようとする広範な研究は、一
様に否定的であった（Ｇｒｅｅｎら Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．
ＵＳＡ，７６：６６０６（１９７９））。
【０４６２】
本発明において有用である適切なアデノウイルスベクターが、例えば、Ｋｏｚ
ａｒｓｋｙおよびＷｉｌｓｏｎ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｇｅｎｅｔ．Ｄｅｖｅｌ
．、３：４９９〜５０３（１９９３）；Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄら、Ｃｅｌｌ、６８
：１４３〜１５５（１９９２）；Ｅｎｇｅｌｈａｒｄｔら、Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎ
ｅｔ．Ｔｈｅｒ．、４：７５９〜７６９（１９９３）；Ｙａｎｇら、Ｎａｔｕｒ
ｅ Ｇｅｎｅｔ、７：３６２〜３６９（１９９４）；Ｗｉｌｓｏｎら、Ｎａｔｕ
ｒｅ、３６５:６９１〜６９２（１９９３）；および米国特許第５，６５２，２
２４号に記載されており、これらは本明細書中で参考として援用される。例えば
、アデノウイルスベクターＡｄ２が有用であり、そしてヒト２９３細胞にて増殖
され得る。これらの細胞は、アデノウイルスのＥ１領域を含み、そして構成的に
ＥｌａおよびＥｌｂを発現し、このことは、このベクターから欠失している遺伝
子の産物を提供することによって欠損アデノウイルスを補完する。Ａｄ２に加え
て、他の多様なアデノウイルス（例えば、Ａｄ３、Ａｄ５、およびＡｄ７）もま
た、本発明において有用である。
ａｒｓｋｙおよびＷｉｌｓｏｎ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｇｅｎｅｔ．Ｄｅｖｅｌ
．、３：４９９〜５０３（１９９３）；Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄら、Ｃｅｌｌ、６８
：１４３〜１５５（１９９２）；Ｅｎｇｅｌｈａｒｄｔら、Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎ
ｅｔ．Ｔｈｅｒ．、４：７５９〜７６９（１９９３）；Ｙａｎｇら、Ｎａｔｕｒ
ｅ Ｇｅｎｅｔ、７：３６２〜３６９（１９９４）；Ｗｉｌｓｏｎら、Ｎａｔｕ
ｒｅ、３６５:６９１〜６９２（１９９３）；および米国特許第５，６５２，２
２４号に記載されており、これらは本明細書中で参考として援用される。例えば
、アデノウイルスベクターＡｄ２が有用であり、そしてヒト２９３細胞にて増殖
され得る。これらの細胞は、アデノウイルスのＥ１領域を含み、そして構成的に
ＥｌａおよびＥｌｂを発現し、このことは、このベクターから欠失している遺伝
子の産物を提供することによって欠損アデノウイルスを補完する。Ａｄ２に加え
て、他の多様なアデノウイルス（例えば、Ａｄ３、Ａｄ５、およびＡｄ７）もま
た、本発明において有用である。
【０４６３】
好ましくは、本発明において使用されるアデノウイルスは、複製欠損性である
。複製欠損アデノウイルスは、感染性粒子を形成するために、ヘルパーウイルス
および／またはパッケージング細胞株の助けを必要とする。得られたウイルスは
、細胞に感染する能力があり、そしてプロモーターに作動可能に連結された目的
のポリヌクレオチドを発現し得るが、ほとんどの細胞にて複製し得ない。複製欠
損アデノウイルスは、次の遺伝子：Ｅ１ａ、Ｅ１ｂ、Ｅ３、Ｅ４、Ｅ２ａまたは
Ｌ１からＬ５までのすべてまたは一部のうちの１つ以上にて欠失され得る。
。複製欠損アデノウイルスは、感染性粒子を形成するために、ヘルパーウイルス
および／またはパッケージング細胞株の助けを必要とする。得られたウイルスは
、細胞に感染する能力があり、そしてプロモーターに作動可能に連結された目的
のポリヌクレオチドを発現し得るが、ほとんどの細胞にて複製し得ない。複製欠
損アデノウイルスは、次の遺伝子：Ｅ１ａ、Ｅ１ｂ、Ｅ３、Ｅ４、Ｅ２ａまたは
Ｌ１からＬ５までのすべてまたは一部のうちの１つ以上にて欠失され得る。
【０４６４】
特定の他の実施形態において、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を使用して、エ
キソビボまたはインビボでこの細胞を操作する。ＡＡＶは、感染性粒子を生成す
るためにヘルパーウイルスを必要とする、天然に存在する欠損ウイルスである（
Ｍｕｚｙｃｚｋａ，Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ．，１５８：９７（１９９２））。ＡＡＶはまた、分裂中ではない細
胞の中にそのＤＮＡを組み込み得る数少ないウイルスの中の１つである。３００
塩基対程度の小さいＡＡＶを含むベクターがパッケージされ得、そして組み込み
得るが、外来性ＤＮＡのためのスペースは約４．５ｋｂに限られる。そのような
ＡＡＶの生成および使用の方法は当該分野で公知である。例えば、米国特許第５
，１３９，９４１号、同第５，１７３，４１４号、同第５，３５４，６７８号、
同第５，４３６，１４６号、同第５，４７４，９３５号、同第５，４７８，７４
５号および同第５，５８９，３７７号を参照のこと。
キソビボまたはインビボでこの細胞を操作する。ＡＡＶは、感染性粒子を生成す
るためにヘルパーウイルスを必要とする、天然に存在する欠損ウイルスである（
Ｍｕｚｙｃｚｋａ，Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ．，１５８：９７（１９９２））。ＡＡＶはまた、分裂中ではない細
胞の中にそのＤＮＡを組み込み得る数少ないウイルスの中の１つである。３００
塩基対程度の小さいＡＡＶを含むベクターがパッケージされ得、そして組み込み
得るが、外来性ＤＮＡのためのスペースは約４．５ｋｂに限られる。そのような
ＡＡＶの生成および使用の方法は当該分野で公知である。例えば、米国特許第５
，１３９，９４１号、同第５，１７３，４１４号、同第５，３５４，６７８号、
同第５，４３６，１４６号、同第５，４７４，９３５号、同第５，４７８，７４
５号および同第５，５８９，３７７号を参照のこと。
【０４６５】
例えば、本発明において使用するために適切なＡＡＶベクターは、ＤＮＡ複製
、キャプシド形成、および宿主細胞組み込みに必要な配列すべてを含む。Ｓａｍ
ｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒ
ｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ（１９
８９）において見い出される方法のような、標準的クローニング方法を使用して
、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物を、このＡＡＶ
ベクターに挿入する。次いで、リポフェクション、エレクトロポレーション、リ
ン酸カルシウム沈殿などを含む、任意の標準的技術を使用して、この組み換えＡ
ＡＶベクターを、ヘルパーウイルスに感染しているパッケージング細胞にトラン
スフェクトする。適切なヘルパーウイルスとしては、アデノウイルス、サイトメ
ガロウイルス、ワクシニアウイルス、またはヘルペスウイルスが挙げられる。一
旦パッケージング細胞がトランスフェクトおよび感染されると、それらはＭＥＴ
Ｈ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物を含む感染性ＡＡＶウイ
ルス粒子を生成する。次いで、エキソビボまたはインビボのいずれかで、これら
のウイルス粒子を使用して真核生物細胞を形質導入する。この形質導入細胞は、
そのゲノムに組み込まれたＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチ
ド構築物を含み、そしてＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を発現する。
、キャプシド形成、および宿主細胞組み込みに必要な配列すべてを含む。Ｓａｍ
ｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒ
ｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ（１９
８９）において見い出される方法のような、標準的クローニング方法を使用して
、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物を、このＡＡＶ
ベクターに挿入する。次いで、リポフェクション、エレクトロポレーション、リ
ン酸カルシウム沈殿などを含む、任意の標準的技術を使用して、この組み換えＡ
ＡＶベクターを、ヘルパーウイルスに感染しているパッケージング細胞にトラン
スフェクトする。適切なヘルパーウイルスとしては、アデノウイルス、サイトメ
ガロウイルス、ワクシニアウイルス、またはヘルペスウイルスが挙げられる。一
旦パッケージング細胞がトランスフェクトおよび感染されると、それらはＭＥＴ
Ｈ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物を含む感染性ＡＡＶウイ
ルス粒子を生成する。次いで、エキソビボまたはインビボのいずれかで、これら
のウイルス粒子を使用して真核生物細胞を形質導入する。この形質導入細胞は、
そのゲノムに組み込まれたＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチ
ド構築物を含み、そしてＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を発現する。
【０４６６】
遺伝子治療の別の方法は、相同組み換え（例えば、米国特許第５，６４１，６
７０号、１９９７年６月２４日発行；国際公開第ＷＯ９６／２９４１１号、１９
９６年９月２６日公開；国際公開第ＷＯ９４／１２６５０号、１９９４年８月４
日公開；Ｋｏｌｌｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８
６：８９３２〜８９３５（１９８９）；およびＺｉｊｌｓｔｒａら、Ｎａｔｕｒ
ｅ、３４２：４３５〜４３８（１９８９）を参照のこと）を介して、異種制御領
域および内在性ポリヌクレオチド配列（例えば、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２配列をコードしている配列）を作動可能に連結する工程を含む。この方法
は、標的細胞中に存在しているが、通常はその細胞中で発現しないかまたは所望
するよりも低いレベルで発現する、遺伝子の活性化を含む。
７０号、１９９７年６月２４日発行；国際公開第ＷＯ９６／２９４１１号、１９
９６年９月２６日公開；国際公開第ＷＯ９４／１２６５０号、１９９４年８月４
日公開；Ｋｏｌｌｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８
６：８９３２〜８９３５（１９８９）；およびＺｉｊｌｓｔｒａら、Ｎａｔｕｒ
ｅ、３４２：４３５〜４３８（１９８９）を参照のこと）を介して、異種制御領
域および内在性ポリヌクレオチド配列（例えば、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２配列をコードしている配列）を作動可能に連結する工程を含む。この方法
は、標的細胞中に存在しているが、通常はその細胞中で発現しないかまたは所望
するよりも低いレベルで発現する、遺伝子の活性化を含む。
【０４６７】
当該分野で既知の標準的技術を使用して、ポリヌクレオチド構築物を作製する
。この構築物は、プロモーターを、そのプロモーターに隣接した標的化配列とと
もに含む。適切なプロモーターが、本明細書中に記載されている。標的化配列は
、内在性配列に対して十分に相補的であり、プロモーター−標的化配列と内在性
配列との相同組換えを可能にする。標的化配列は、所望される内在性ポリヌクレ
オチド配列のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の５’末端の十分近くに存在
し、それゆえ、相同組換えに際して、プロモーターは、内在性配列に作動可能に
連結される。
。この構築物は、プロモーターを、そのプロモーターに隣接した標的化配列とと
もに含む。適切なプロモーターが、本明細書中に記載されている。標的化配列は
、内在性配列に対して十分に相補的であり、プロモーター−標的化配列と内在性
配列との相同組換えを可能にする。標的化配列は、所望される内在性ポリヌクレ
オチド配列のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の５’末端の十分近くに存在
し、それゆえ、相同組換えに際して、プロモーターは、内在性配列に作動可能に
連結される。
【０４６８】
このプロモーターおよび標的化配列は、ＰＣＲを使用して増幅され得る。好ま
しくは、この増幅されたプロモーターは、５’末端および３’末端に別の制限酵
素部位を含む。好ましくは、第１の標的化配列の３’末端は、増幅されたプロモ
ーターの５’末端と同じ制限酵素部位を含み、そして第２の標的化配列の５’末
端は、増幅されたプロモーターの３’末端と同じ制限部位を含む。増幅されたプ
ロモーターおよび標的化配列を消化し、そしてともに連結する。
しくは、この増幅されたプロモーターは、５’末端および３’末端に別の制限酵
素部位を含む。好ましくは、第１の標的化配列の３’末端は、増幅されたプロモ
ーターの５’末端と同じ制限酵素部位を含み、そして第２の標的化配列の５’末
端は、増幅されたプロモーターの３’末端と同じ制限部位を含む。増幅されたプ
ロモーターおよび標的化配列を消化し、そしてともに連結する。
【０４６９】
裸のポリヌクレオチドとしてか、もしくは上記により詳細に記載されるような
リポソーム、ウイルス配列、ウイルス粒子、ウイルス全体、リポフェクション、
沈殿剤などのようなトランスフェクション促進剤と一緒にかのいずれかで、この
プロモーター−標的化配列構築物を細胞に送達する。直接針注射、静脈内注射、
局所投与、カテーテル注入、粒子加速器などを含む任意の方法により、Ｐプロモ
ーター−標的化配列を送達し得る。この方法を、下記により詳細に記載する。
リポソーム、ウイルス配列、ウイルス粒子、ウイルス全体、リポフェクション、
沈殿剤などのようなトランスフェクション促進剤と一緒にかのいずれかで、この
プロモーター−標的化配列構築物を細胞に送達する。直接針注射、静脈内注射、
局所投与、カテーテル注入、粒子加速器などを含む任意の方法により、Ｐプロモ
ーター−標的化配列を送達し得る。この方法を、下記により詳細に記載する。
【０４７０】
プロモーター−標的化配列構築物は、細胞により取り込まれる。この構築物と
内在性配列との間に相同組換えが起こり、その結果、内在性ＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２配列は、このプロモーターの制御下に配置される。次いで、こ
のプロモーターは、内在性ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２配列の発現を駆
動する。
内在性配列との間に相同組換えが起こり、その結果、内在性ＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２配列は、このプロモーターの制御下に配置される。次いで、こ
のプロモーターは、内在性ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２配列の発現を駆
動する。
【０４７１】
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２をコードするポリヌクレオチドは、他の
タンパク質をコードする他のポリヌクレオチドと共に投与され得る。このような
タンパク質としては、酸性および塩基性増殖因子、ＶＥＧＦ−１、ＶＥＧＦ−２
、ＶＥＧＦ−３、ＶＥＧＦ−Ｅ、ＰＩＧＦ１および２、上皮成長因子αおよびβ
、血小板由来内皮細胞成長因子、血小板由来成長因子αおよびβ、腫瘍壊死因子
α、肝細胞増殖因子、インスリン様増殖因子、コロニー刺激因子、マクロファー
ジコロニー刺激因子、顆粒球／マクロファージコロニー刺激因子、および一酸化
窒素シンセターゼが挙げられるが、これらに限定されない。
タンパク質をコードする他のポリヌクレオチドと共に投与され得る。このような
タンパク質としては、酸性および塩基性増殖因子、ＶＥＧＦ−１、ＶＥＧＦ−２
、ＶＥＧＦ−３、ＶＥＧＦ−Ｅ、ＰＩＧＦ１および２、上皮成長因子αおよびβ
、血小板由来内皮細胞成長因子、血小板由来成長因子αおよびβ、腫瘍壊死因子
α、肝細胞増殖因子、インスリン様増殖因子、コロニー刺激因子、マクロファー
ジコロニー刺激因子、顆粒球／マクロファージコロニー刺激因子、および一酸化
窒素シンセターゼが挙げられるが、これらに限定されない。
【０４７２】
好ましくは、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、そのタ
ンパク質の分泌を促進する分泌シグナル配列を含む。代表的に、このシグナル配
列は、ポリヌクレオチドのコード領域の５’末端に向かってかまたは５’末端で
発現される、そのポリヌクレオチドのコード領域に位置する。このシグナル配列
は、目的のポリヌクレオチドに対して同種または異種であり得、そしてトランス
フェクトされる細胞に対して同種または異種であり得る。さらに、当該分野で公
知の方法を使用して、このシグナル配列は化学合成され得る。
ンパク質の分泌を促進する分泌シグナル配列を含む。代表的に、このシグナル配
列は、ポリヌクレオチドのコード領域の５’末端に向かってかまたは５’末端で
発現される、そのポリヌクレオチドのコード領域に位置する。このシグナル配列
は、目的のポリヌクレオチドに対して同種または異種であり得、そしてトランス
フェクトされる細胞に対して同種または異種であり得る。さらに、当該分野で公
知の方法を使用して、このシグナル配列は化学合成され得る。
【０４７３】
その投与様式によって、治療効果を提供するのに十分な量にて１つ以上の分子
が発現される限り、上記の任意のポリヌクレオチド構築物の任意の投与様式が使
用され得る。これは、直接針注入、全身注射、カテーテル注入、バイオリスティ
ック（ｂｉｏｌｙｓｔｉｃ）注射器、粒子加速器（すなわち、「遺伝子銃」）、
ゲルフォームスポンジデポー（ｄｅｐｏｔ）、他の市販デポー（ｄｅｐｏｔ）物
質、浸透圧ポンプ（例えば、Ａｌｚａミニポンプ）、経口用または坐剤用の固形
（錠剤または丸剤）薬学的処方物、および手術中のデカンティングまたは局所適
用を含む。例えば、ラット肝臓およびラット脾臓へのリン酸カルシウム沈殿した
裸のプラスミドの直接注入、または門脈へのタンパク質被覆プラスミド直接注入
は、ラット肝臓における外来遺伝子の遺伝子発現をもたらした（Ｋａｎｅｄａら
、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４３：３７５（１９８９））。
が発現される限り、上記の任意のポリヌクレオチド構築物の任意の投与様式が使
用され得る。これは、直接針注入、全身注射、カテーテル注入、バイオリスティ
ック（ｂｉｏｌｙｓｔｉｃ）注射器、粒子加速器（すなわち、「遺伝子銃」）、
ゲルフォームスポンジデポー（ｄｅｐｏｔ）、他の市販デポー（ｄｅｐｏｔ）物
質、浸透圧ポンプ（例えば、Ａｌｚａミニポンプ）、経口用または坐剤用の固形
（錠剤または丸剤）薬学的処方物、および手術中のデカンティングまたは局所適
用を含む。例えば、ラット肝臓およびラット脾臓へのリン酸カルシウム沈殿した
裸のプラスミドの直接注入、または門脈へのタンパク質被覆プラスミド直接注入
は、ラット肝臓における外来遺伝子の遺伝子発現をもたらした（Ｋａｎｅｄａら
、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４３：３７５（１９８９））。
【０４７４】
局所投与の好ましい方法は、直接注射によるものである。好ましくは、送達ビ
ヒクルと複合体を形成した本発明の組換え分子は、動脈領域中に直接注入により
投与されるか、または動脈領域内部に局所投与される。動脈領域内部での組成物
の局所投与とは、その組成物を動脈内に数センチメートル、好ましくは数ミリメ
ートルで注射することをいう。
ヒクルと複合体を形成した本発明の組換え分子は、動脈領域中に直接注入により
投与されるか、または動脈領域内部に局所投与される。動脈領域内部での組成物
の局所投与とは、その組成物を動脈内に数センチメートル、好ましくは数ミリメ
ートルで注射することをいう。
【０４７５】
局所投与の別の方法は、外科的創傷内またはその周辺に本発明のポリヌクレオ
チド構築物を接触させることである。例えば、患者は手術を経験し得、そしてこ
のポリヌクレオチド構築物を創傷内部の組織表面上に被覆され得るか、またはそ
の構築物を創傷内部の組織領域に注射され得る。
チド構築物を接触させることである。例えば、患者は手術を経験し得、そしてこ
のポリヌクレオチド構築物を創傷内部の組織表面上に被覆され得るか、またはそ
の構築物を創傷内部の組織領域に注射され得る。
【０４７６】
全身投与に有用な治療組成物は、本発明の標的化された送達ビヒクルと複合体
を形成した本発明の組換え分子を含む。全身投与で使用するために適切な送達ビ
ヒクルは、特定部位に対してそのビヒクルを標的化するリガンドを含むリポソー
ムを含む。
を形成した本発明の組換え分子を含む。全身投与で使用するために適切な送達ビ
ヒクルは、特定部位に対してそのビヒクルを標的化するリガンドを含むリポソー
ムを含む。
【０４７７】
全身投与の好ましい方法としては、静脈内注射、エアロゾル、経口および経皮
（局所的）送達が挙げられる。当該分野で標準的な方法を使用して、静脈内注射
が実行され得る。当該分野で標準的な方法を使用して、エアロゾル送達もまた実
行され得る（例えば、本明細書中で参考として援用される、Ｓｔｒｉｂｌｉｎｇ
ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１８９：１１２７７〜１
１２８１（１９９２）を参照のこと）。動物の腸内の消化酵素による分解に耐え
る能力をもつキャリアに対して本発明のポリヌクレオチド構築物が複合体を形成
することにより、経口送達は実行され得る。そのようなキャリアの例としては、
当該分野で公知であるもののような、プラスチックカプセルまたは錠剤が挙げら
れる。皮膚内へ通過可能な親油性試薬（例えば、ＤＭＳＯ）と本発明のポリヌク
レオチド構築物を混合することによって、局所的送達は実行され得る。
（局所的）送達が挙げられる。当該分野で標準的な方法を使用して、静脈内注射
が実行され得る。当該分野で標準的な方法を使用して、エアロゾル送達もまた実
行され得る（例えば、本明細書中で参考として援用される、Ｓｔｒｉｂｌｉｎｇ
ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１８９：１１２７７〜１
１２８１（１９９２）を参照のこと）。動物の腸内の消化酵素による分解に耐え
る能力をもつキャリアに対して本発明のポリヌクレオチド構築物が複合体を形成
することにより、経口送達は実行され得る。そのようなキャリアの例としては、
当該分野で公知であるもののような、プラスチックカプセルまたは錠剤が挙げら
れる。皮膚内へ通過可能な親油性試薬（例えば、ＤＭＳＯ）と本発明のポリヌク
レオチド構築物を混合することによって、局所的送達は実行され得る。
【０４７８】
送達される物質の有効量を決定することは、例えば、その物質の化学構造およ
び生物学的活性、動物の年齢および体重、処置を必要とする正確な状態およびそ
の重症度、ならびに投与経路を含む、多数の因子に依存し得る。処置の頻度は、
１用量あたりの投与されるポリヌクレオチド構築物の量ならびに被験体の健康お
よび病歴のような多くの因子に依存する。正確な量、投薬回数および投薬のタイ
ミングは、主治医または主治獣医により決定される。
び生物学的活性、動物の年齢および体重、処置を必要とする正確な状態およびそ
の重症度、ならびに投与経路を含む、多数の因子に依存し得る。処置の頻度は、
１用量あたりの投与されるポリヌクレオチド構築物の量ならびに被験体の健康お
よび病歴のような多くの因子に依存する。正確な量、投薬回数および投薬のタイ
ミングは、主治医または主治獣医により決定される。
【０４７９】
本発明の治療的組成物は、任意の動物に、好ましくは哺乳動物および鳥類に投
与され得る。好ましい哺乳動物としては、ヒト、イヌ、ネコ、マウス、ラット、
ウサギ、ヒツジ、ウシ、ウマおよびブタが挙げられ、ヒトが特に好ましい。
与され得る。好ましい哺乳動物としては、ヒト、イヌ、ネコ、マウス、ラット、
ウサギ、ヒツジ、ウシ、ウマおよびブタが挙げられ、ヒトが特に好ましい。
【０４８０】
特定の実施形態において、抗体またはその機能的誘導体をコードする配列を含
む核酸は、本発明のポリペプチドの異常な発現および／または活性に関連した疾
患または障害を処置、阻害または予防するために、遺伝子治療の目的で投与され
る。遺伝子治療とは、発現したか、または発現可能な核酸の、被験体への投与に
より行われる治療をいう。本発明のこの実施形態において、核酸は、それらのコ
ードされたタンパク質を産生し、そのタンパク質は治療効果を媒介する。
む核酸は、本発明のポリペプチドの異常な発現および／または活性に関連した疾
患または障害を処置、阻害または予防するために、遺伝子治療の目的で投与され
る。遺伝子治療とは、発現したか、または発現可能な核酸の、被験体への投与に
より行われる治療をいう。本発明のこの実施形態において、核酸は、それらのコ
ードされたタンパク質を産生し、そのタンパク質は治療効果を媒介する。
【０４８１】
当該分野で利用可能な遺伝子治療のための任意の方法は、本発明に従って使用
され得る。例示的な方法が以下に記載される。
され得る。例示的な方法が以下に記載される。
【０４８２】
遺伝子治療の方法の一般的な概説については、Ｇｏｌｄｓｐｉｅｌら，Ｃｌｉ
ｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ １２：４８８−５０５（１９９３）；Ｗｕおよ
びＷｕ，Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ ３：８７−９５（１９９１）；Ｔｏｌｓｔｏｓ
ｈｅｖ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．３２：５７３
−５９６（１９９３）；Ｍｕｌｌｉｇａｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６０：９２６−
９３２（１９９３）；ならびにＭｏｒｇａｎおよびＡｎｄｅｒｓｏｎ，Ａｎｎ．
Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６２：１９１−２１７（１９９３）；Ｍａｙ，ＴＩＢ
ＴＥＣＨ １１（５）：１５５−２１５（１９９３）を参照のこと。使用され得
る、組換えＤＮＡ技術分野において一般的に公知である方法は、Ａｕｓｕｂｅｌ
ら（編），Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ（１９９３）；および
Ｋｒｉｅｇｌｅｒ，Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏ
ｎ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ
，ＮＹ（１９９０）に記載される。
ｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ １２：４８８−５０５（１９９３）；Ｗｕおよ
びＷｕ，Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ ３：８７−９５（１９９１）；Ｔｏｌｓｔｏｓ
ｈｅｖ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．３２：５７３
−５９６（１９９３）；Ｍｕｌｌｉｇａｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６０：９２６−
９３２（１９９３）；ならびにＭｏｒｇａｎおよびＡｎｄｅｒｓｏｎ，Ａｎｎ．
Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６２：１９１−２１７（１９９３）；Ｍａｙ，ＴＩＢ
ＴＥＣＨ １１（５）：１５５−２１５（１９９３）を参照のこと。使用され得
る、組換えＤＮＡ技術分野において一般的に公知である方法は、Ａｕｓｕｂｅｌ
ら（編），Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ（１９９３）；および
Ｋｒｉｅｇｌｅｒ，Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏ
ｎ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ
，ＮＹ（１９９０）に記載される。
【０４８３】
好ましい局面において、化合物は抗体をコードする核酸配列を含有し、上記核
酸配列は、適切な宿主において、抗体、またはそのフラグメントもしくはキメラ
タンパク質、あるいはその重鎖もしくは軽鎖を発現する発現ベクターの一部であ
る。特に、このような核酸配列は、抗体コード領域に作動可能に連結したプロモ
ーターを有し、上記プロモーターは誘導性であるかまたは構成性であり、そして
必要に応じて組織特異的である。別の特定の実施形態においては、抗体をコード
する配列および任意の他の所望の配列がゲノム中の所望の部位での相同組換えを
促進する領域に隣接した核酸分子が使用され、従って抗体をコードする核酸の染
色体内の発現を提供する（ＫｏｌｌｅｒおよびＳｍｉｔｈｉｅｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：８９３２−８９３５（１９８９）；
Ｚｉｊｌｓｔｒａら，Ｎａｔｕｒｅ ３４２：４３５−４３８（１９８９））。
特定の実施形態において、発現した抗体分子は単鎖抗体であるか；あるいはこの
核酸配列は、この抗体の重鎖および軽鎖の両方をコードする配列またはそのフラ
グメントを含む。
酸配列は、適切な宿主において、抗体、またはそのフラグメントもしくはキメラ
タンパク質、あるいはその重鎖もしくは軽鎖を発現する発現ベクターの一部であ
る。特に、このような核酸配列は、抗体コード領域に作動可能に連結したプロモ
ーターを有し、上記プロモーターは誘導性であるかまたは構成性であり、そして
必要に応じて組織特異的である。別の特定の実施形態においては、抗体をコード
する配列および任意の他の所望の配列がゲノム中の所望の部位での相同組換えを
促進する領域に隣接した核酸分子が使用され、従って抗体をコードする核酸の染
色体内の発現を提供する（ＫｏｌｌｅｒおよびＳｍｉｔｈｉｅｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：８９３２−８９３５（１９８９）；
Ｚｉｊｌｓｔｒａら，Ｎａｔｕｒｅ ３４２：４３５−４３８（１９８９））。
特定の実施形態において、発現した抗体分子は単鎖抗体であるか；あるいはこの
核酸配列は、この抗体の重鎖および軽鎖の両方をコードする配列またはそのフラ
グメントを含む。
【０４８４】
核酸の患者への送達は、直接的（この場合、患者は核酸または核酸保有ベクタ
ーに直接的に曝される）か、または間接的（この場合、細胞は最初にインビトロ
で核酸で形質転換され、次いで患者に移植される）のいずれかであり得る。これ
らの２つのアプローチは、インビボ遺伝子治療として、またはエキソビボ遺伝子
治療としてそれぞれ公知である。
ーに直接的に曝される）か、または間接的（この場合、細胞は最初にインビトロ
で核酸で形質転換され、次いで患者に移植される）のいずれかであり得る。これ
らの２つのアプローチは、インビボ遺伝子治療として、またはエキソビボ遺伝子
治療としてそれぞれ公知である。
【０４８５】
特定の実施形態において、核酸配列はインビボで直接的に投与され、そこで核
酸配列は発現されて、コードされた生成物を産生する。これは、当該分野で公知
の多数の方法（例えば、それらを適切な核酸発現ベクターの一部分として構築し
、そしてそれを（例えば、欠損性または弱毒化したレトロウイルスまたは他のウ
イルスベクター（米国特許第４，９８０，２８６号を参照のこと）を用いる感染
により）細胞内になるように投与することにより、あるいは、裸のＤＮＡの直接
注射により、あるいは、微粒子ボンバードメント（例えば、遺伝子銃；Ｂｉｏｌ
ｉｓｔｉｃ、Ｄｕｐｏｎｔ）の使用により、あるいは脂質または細胞表面のレセ
プターでコーティングするか、もしくは薬剤をトランスフェクトすることにより
、あるいは、リポソーム、微粒子、またはマイクロカプセル中へのカプセル化に
より、あるいは、それらを核に入ることが公知であるペプチドと結合させて投与
することにより、レセプター媒介のエンドサイトーシスを受けるリガンドと結合
させて投与することにより（例えば、ＷｕおよびＷｕ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ
．２６２：４４２９−４４３２（１９８７）を参照のこと）（レセプターを特異
的に発現する細胞の型を標的にするために用いられ得る）などのいずれかにより
達成され得る。別の実施形態において、核酸−リガンド複合体が形成され得、こ
こで、このリガンドはエンドソームを破壊するフソジェニック（ｆｕｓｏｇｅｎ
ｉｃ）ウイルス性ペプチドを含み、この核酸がリソゾーム分解を回避することを
可能にする。さらに別の実施形態において、核酸は、特定のレセプターを標的化
することにより、細胞特異的な取り込みおよび発現についてインビボで標的化さ
れ得る（例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ９２／０６１８０号；同第ＷＯ９２／２２６
３５号；同第ＷＯ９２／２０３１６号；同第ＷＯ９３／１４１８８号、同第ＷＯ
９３／２０２２１号を参照のこと）。あるいは、核酸は、細胞内部に導入され得
、そして相同組換えにより、発現のために宿主細胞ＤＮＡ中に組み込まれ得る（
ＫｏｌｌｅｒおよびＳｍｉｔｈｉｅｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ
．ＵＳＡ ８６：８９３２−８９３５（１９８９）；Ｚｉｊｌｓｔｒａら，Ｎａ
ｔｕｒｅ ３４２：４３５−４３８（１９８９））。
酸配列は発現されて、コードされた生成物を産生する。これは、当該分野で公知
の多数の方法（例えば、それらを適切な核酸発現ベクターの一部分として構築し
、そしてそれを（例えば、欠損性または弱毒化したレトロウイルスまたは他のウ
イルスベクター（米国特許第４，９８０，２８６号を参照のこと）を用いる感染
により）細胞内になるように投与することにより、あるいは、裸のＤＮＡの直接
注射により、あるいは、微粒子ボンバードメント（例えば、遺伝子銃；Ｂｉｏｌ
ｉｓｔｉｃ、Ｄｕｐｏｎｔ）の使用により、あるいは脂質または細胞表面のレセ
プターでコーティングするか、もしくは薬剤をトランスフェクトすることにより
、あるいは、リポソーム、微粒子、またはマイクロカプセル中へのカプセル化に
より、あるいは、それらを核に入ることが公知であるペプチドと結合させて投与
することにより、レセプター媒介のエンドサイトーシスを受けるリガンドと結合
させて投与することにより（例えば、ＷｕおよびＷｕ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ
．２６２：４４２９−４４３２（１９８７）を参照のこと）（レセプターを特異
的に発現する細胞の型を標的にするために用いられ得る）などのいずれかにより
達成され得る。別の実施形態において、核酸−リガンド複合体が形成され得、こ
こで、このリガンドはエンドソームを破壊するフソジェニック（ｆｕｓｏｇｅｎ
ｉｃ）ウイルス性ペプチドを含み、この核酸がリソゾーム分解を回避することを
可能にする。さらに別の実施形態において、核酸は、特定のレセプターを標的化
することにより、細胞特異的な取り込みおよび発現についてインビボで標的化さ
れ得る（例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ９２／０６１８０号；同第ＷＯ９２／２２６
３５号；同第ＷＯ９２／２０３１６号；同第ＷＯ９３／１４１８８号、同第ＷＯ
９３／２０２２１号を参照のこと）。あるいは、核酸は、細胞内部に導入され得
、そして相同組換えにより、発現のために宿主細胞ＤＮＡ中に組み込まれ得る（
ＫｏｌｌｅｒおよびＳｍｉｔｈｉｅｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ
．ＵＳＡ ８６：８９３２−８９３５（１９８９）；Ｚｉｊｌｓｔｒａら，Ｎａ
ｔｕｒｅ ３４２：４３５−４３８（１９８９））。
【０４８６】
特定の実施形態において、本発明の抗体をコードする核酸配列を含むウイルス
ベクターが使用される。例えば、レトロウイルスベクターが用いられ得る（Ｍｉ
ｌｌｅｒら，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２１７：５８１−５９９（１９９３）
を参照のこと）。これらのレトロウイルスベクターは、ウイルス性ゲノムの正確
なパッケージングおよび宿主細胞ＤＮＡへの正確な組込みのために必要な構成要
素を含む。遺伝子治療において使用される抗体をコードする核酸配列は、一つ以
上のベクター中にクローニングされ、これは、患者内への遺伝子の送達を容易に
する。レトロウイルスベクターに関するさらなる詳細は、Ｂｏｅｓｅｎら，Ｂｉ
ｏｔｈｅｒａｐｙ ６：２９１−３０２（１９９４）（これは、幹細胞を化学療
法に対してより耐性にするために、ｍｄｒ１遺伝子を造血性幹細胞に送達するた
めの、レトロウイルスベクターの使用を記載する）に見出され得る。遺伝子治療
におけるレトロウイルスベクターの使用を説明する他の参考文献は、以下である
：Ｃｌｏｗｅｓら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９３：６４４−６５１（１９
９４）；Ｋｉｅｍら，Ｂｌｏｏｄ ８３：１４６７−１４７３（１９９４）；Ｓ
ａｌｍｏｎｓおよびＧｕｎｚｂｅｒｇ，Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ
４：１２９−１４１（１９９３）；ならびにＧｒｏｓｓｍａｎおよびＷｉｌｓ
ｏｎ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．ｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌ．３
：１１０−１１４（１９９３）。
ベクターが使用される。例えば、レトロウイルスベクターが用いられ得る（Ｍｉ
ｌｌｅｒら，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２１７：５８１−５９９（１９９３）
を参照のこと）。これらのレトロウイルスベクターは、ウイルス性ゲノムの正確
なパッケージングおよび宿主細胞ＤＮＡへの正確な組込みのために必要な構成要
素を含む。遺伝子治療において使用される抗体をコードする核酸配列は、一つ以
上のベクター中にクローニングされ、これは、患者内への遺伝子の送達を容易に
する。レトロウイルスベクターに関するさらなる詳細は、Ｂｏｅｓｅｎら，Ｂｉ
ｏｔｈｅｒａｐｙ ６：２９１−３０２（１９９４）（これは、幹細胞を化学療
法に対してより耐性にするために、ｍｄｒ１遺伝子を造血性幹細胞に送達するた
めの、レトロウイルスベクターの使用を記載する）に見出され得る。遺伝子治療
におけるレトロウイルスベクターの使用を説明する他の参考文献は、以下である
：Ｃｌｏｗｅｓら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９３：６４４−６５１（１９
９４）；Ｋｉｅｍら，Ｂｌｏｏｄ ８３：１４６７−１４７３（１９９４）；Ｓ
ａｌｍｏｎｓおよびＧｕｎｚｂｅｒｇ，Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ
４：１２９−１４１（１９９３）；ならびにＧｒｏｓｓｍａｎおよびＷｉｌｓ
ｏｎ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．ｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌ．３
：１１０−１１４（１９９３）。
【０４８７】
アデノウイルスは、遺伝子治療において使用され得る他のウイルスベクターで
ある。アデノウイルスは、特に、気道上皮へ遺伝子を送達するための魅力的なビ
ヒクルである。アデノウイルスは、自然に気道上皮に感染し、そこで軽い疾患を
起こす。アデノウイルスベースの送達システムの他の標的は、肝臓、中枢神経系
、内皮細胞、および筋肉である。アデノウイルスは、非分裂細胞を感染すること
ができるという利点を有する。ＫｏｚａｒｓｋｙおよびＷｉｌｓｏｎ，Ｃｕｒｒ
ｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍ
ｅｎｔ ３：４９９−５０３（１９９３）は、アデノウイルスベースの遺伝子治
療の概説を示す。Ｂｏｕｔら，Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ５：３
−１０（１９９４）は、アカゲザルの気道上皮に遺伝子を移すためのアデノウイ
ルスベクターの使用を示した。遺伝子治療におけるアデノウイルスの使用の他の
例は、Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄら，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５２：４３１−４３４（１９
９１）；Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄら，Ｃｅｌｌ ６８：１４３−１５５（１９９２）
；Ｍａｓｔｒａｎｇｅｌｉら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９１：２２５−２
３４（１９９３）；ＰＣＴ公開第ＷＯ９４／１２６４９号；およびＷａｎｇら，
Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ２：７７５−７８３（１９９５）に見出され得る。
好ましい実施形態において、アデノウイルスベクターが使用される。
ある。アデノウイルスは、特に、気道上皮へ遺伝子を送達するための魅力的なビ
ヒクルである。アデノウイルスは、自然に気道上皮に感染し、そこで軽い疾患を
起こす。アデノウイルスベースの送達システムの他の標的は、肝臓、中枢神経系
、内皮細胞、および筋肉である。アデノウイルスは、非分裂細胞を感染すること
ができるという利点を有する。ＫｏｚａｒｓｋｙおよびＷｉｌｓｏｎ，Ｃｕｒｒ
ｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍ
ｅｎｔ ３：４９９−５０３（１９９３）は、アデノウイルスベースの遺伝子治
療の概説を示す。Ｂｏｕｔら，Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ５：３
−１０（１９９４）は、アカゲザルの気道上皮に遺伝子を移すためのアデノウイ
ルスベクターの使用を示した。遺伝子治療におけるアデノウイルスの使用の他の
例は、Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄら，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５２：４３１−４３４（１９
９１）；Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄら，Ｃｅｌｌ ６８：１４３−１５５（１９９２）
；Ｍａｓｔｒａｎｇｅｌｉら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９１：２２５−２
３４（１９９３）；ＰＣＴ公開第ＷＯ９４／１２６４９号；およびＷａｎｇら，
Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ２：７７５−７８３（１９９５）に見出され得る。
好ましい実施形態において、アデノウイルスベクターが使用される。
【０４８８】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）はまた、遺伝子治療における使用が提案されて
きた（Ｗａｌｓｈら，Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．２０４：
２８９−３００（１９９３）；米国特許第５，４３６，１４６号）。
きた（Ｗａｌｓｈら，Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．２０４：
２８９−３００（１９９３）；米国特許第５，４３６，１４６号）。
【０４８９】
遺伝子治療への別のアプローチは、エレクトロポレーション、リポフェクショ
ン、リン酸カルシウム媒介トランスフェクション、またはウイルス感染のような
方法により、組織培養中の細胞へ遺伝子を移入する工程を包含する。通常、移入
の方法は、選択可能なマーカーの細胞への移入を含む。次いで、細胞は、移入さ
れた遺伝子を取り込みそして発現する細胞を単離するために選沢下に置かれる。
次いで、それらの細胞は患者に送達される。
ン、リン酸カルシウム媒介トランスフェクション、またはウイルス感染のような
方法により、組織培養中の細胞へ遺伝子を移入する工程を包含する。通常、移入
の方法は、選択可能なマーカーの細胞への移入を含む。次いで、細胞は、移入さ
れた遺伝子を取り込みそして発現する細胞を単離するために選沢下に置かれる。
次いで、それらの細胞は患者に送達される。
【０４９０】
この実施形態においては、得られた組換え細胞のインビボ投与の前に、核酸が
細胞に導入される。このような導入は、当該分野において公知の任意の方法によ
り実施され得、それらの方法としては以下が挙げられるが、これらに限定されな
い：トランスフェクション、エレクトロポレーション、マイクロインジェクショ
ン、核酸配列を含むウイルスベクターまたはバクテリオファージベクターでの感
染、細胞融合、染色体媒介の遺伝子移入、マイクロセル媒介の遺伝子移入、スフ
ェロプラスト融合など。外来遺伝子の細胞への導入については、当該分野におい
て多数の技術が公知であり（例えば、ＬｏｅｆｆｌｅｒおよびＢｅｈｒ，Ｍｅｔ
ｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２１７：５９９−６１８（１９９３）；Ｃｏｈｅｎら，Ｍ
ｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２１７：６１８−６４４（１９９３）；Ｃｌｉｎｅ，
Ｐｈａｒｍａｃ．Ｔｈｅｒ．２９：６９−９２ｍ（１９８５）を参照のこと）、
そしてレシピエント細胞の必要な発生的および生理学的機能が破壊されないなら
ば、本発明に従って使用され得る。この技術は、細胞への核酸の安定した移入を
提供するべきであり、その結果、この核酸は、細胞により発現可能であり、好ま
しくは、その細胞の子孫により遺伝性でかつ発現可能である。
細胞に導入される。このような導入は、当該分野において公知の任意の方法によ
り実施され得、それらの方法としては以下が挙げられるが、これらに限定されな
い：トランスフェクション、エレクトロポレーション、マイクロインジェクショ
ン、核酸配列を含むウイルスベクターまたはバクテリオファージベクターでの感
染、細胞融合、染色体媒介の遺伝子移入、マイクロセル媒介の遺伝子移入、スフ
ェロプラスト融合など。外来遺伝子の細胞への導入については、当該分野におい
て多数の技術が公知であり（例えば、ＬｏｅｆｆｌｅｒおよびＢｅｈｒ，Ｍｅｔ
ｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２１７：５９９−６１８（１９９３）；Ｃｏｈｅｎら，Ｍ
ｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２１７：６１８−６４４（１９９３）；Ｃｌｉｎｅ，
Ｐｈａｒｍａｃ．Ｔｈｅｒ．２９：６９−９２ｍ（１９８５）を参照のこと）、
そしてレシピエント細胞の必要な発生的および生理学的機能が破壊されないなら
ば、本発明に従って使用され得る。この技術は、細胞への核酸の安定した移入を
提供するべきであり、その結果、この核酸は、細胞により発現可能であり、好ま
しくは、その細胞の子孫により遺伝性でかつ発現可能である。
【０４９１】
得られた組換え細胞は、当該分野において公知の様々な方法により、患者へ送
達され得る。組換え血球（例えば、造血幹細胞または造血前駆細胞）は、好まし
くは、静脈内に投与される。使用が考えられる細胞の量は、所望の効果、患者の
状態などに依存し、当業者により決定され得る。
達され得る。組換え血球（例えば、造血幹細胞または造血前駆細胞）は、好まし
くは、静脈内に投与される。使用が考えられる細胞の量は、所望の効果、患者の
状態などに依存し、当業者により決定され得る。
【０４９２】
遺伝子治療の目的のために核酸が導入され得る細胞は、任意の所望の入手可能
な細胞型を包含し、以下を含むがそれらに限定されない：上皮細胞、内皮細胞、
ケラチノサイト、線維芽細胞、筋肉細胞、肝細胞；Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、単
球、マクロファージ、好中球、好酸球、巨核球、顆粒球のような血球；様々な幹
細胞または前駆細胞、特に、造血幹細胞または造血前駆細胞（例えば、骨髄、臍
帯血、末梢血、胎児の肝臓などから得られるような細胞）。
な細胞型を包含し、以下を含むがそれらに限定されない：上皮細胞、内皮細胞、
ケラチノサイト、線維芽細胞、筋肉細胞、肝細胞；Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、単
球、マクロファージ、好中球、好酸球、巨核球、顆粒球のような血球；様々な幹
細胞または前駆細胞、特に、造血幹細胞または造血前駆細胞（例えば、骨髄、臍
帯血、末梢血、胎児の肝臓などから得られるような細胞）。
【０４９３】
好ましい実施形態において、遺伝子治療に使用される細胞は、患者に対して自
己である。
己である。
【０４９４】
遺伝子治療において組換え細胞が使用される実施形態において、抗体をコード
する核酸配列は、細胞またはそれらの子孫により核酸配列が発現可能であるよう
に細胞に導入され、そして次いで組み換え細胞は、治療的効果のためにインビボ
で投与される。具体的な実施形態において、幹細胞または前駆細胞が用いられる
。インビトロで単離され得、そしてインビトロで維持され得る任意の幹細胞およ
び／または前駆細胞は、本発明のこの実施形態に従って潜在的に使用され得る（
例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ９４／０８５９８号：ＳｔｅｍｐｌｅおよびＡｎｄｅ
ｒｓｏｎ，Ｃｅｌｌ ７１：９７３−９８５（１９９２）；Ｒｈｅｉｎｗａｌｄ
，Ｍｅｔｈ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏ．２１Ａ：２２９（１９８０）；ならびにＰｉｔ
ｔｅｌｋｏｗおよびＳｃｏｔｔ，Ｍａｙｏ Ｃｌｉｎｉｃ Ｐｒｏｃ．６１：７
７１（１９８６）を参照のこと）。
する核酸配列は、細胞またはそれらの子孫により核酸配列が発現可能であるよう
に細胞に導入され、そして次いで組み換え細胞は、治療的効果のためにインビボ
で投与される。具体的な実施形態において、幹細胞または前駆細胞が用いられる
。インビトロで単離され得、そしてインビトロで維持され得る任意の幹細胞およ
び／または前駆細胞は、本発明のこの実施形態に従って潜在的に使用され得る（
例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ９４／０８５９８号：ＳｔｅｍｐｌｅおよびＡｎｄｅ
ｒｓｏｎ，Ｃｅｌｌ ７１：９７３−９８５（１９９２）；Ｒｈｅｉｎｗａｌｄ
，Ｍｅｔｈ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏ．２１Ａ：２２９（１９８０）；ならびにＰｉｔ
ｔｅｌｋｏｗおよびＳｃｏｔｔ，Ｍａｙｏ Ｃｌｉｎｉｃ Ｐｒｏｃ．６１：７
７１（１９８６）を参照のこと）。
【０４９５】
具体的な実施形態において、遺伝子治療の目的で導入されるべき核酸は、コー
ド領域に作動可能に連結された誘導性プロモーターを含有し、その結果、核酸の
発現は、適切な転写誘導因子の存在または不在を制御することにより制御可能で
ある。
ド領域に作動可能に連結された誘導性プロモーターを含有し、その結果、核酸の
発現は、適切な転写誘導因子の存在または不在を制御することにより制御可能で
ある。
【０４９６】
本発明の化合物または薬学的組成物は、ヒトにおいて使用する前に、好ましく
は、所望の治療活性または予防的活性について、インビトロで試験され、次いで
、インビボで試験される。例えば、化合物または薬学的組成物の治療的または予
防的利用を実証するためのインビトロアッセイは、細胞株または患者の組織サン
プルにおける化合物の効果を含む。細胞株および／または組織サンプルに関する
化合物または組成物の効果は、当業者に公知の技術を利用して決定され、この技
術としては、ロゼット形成アッセイおよび細胞溶解アッセイが挙げられるが、こ
れらに限定されない。本発明に従って、特定の化合物の投与が示されるか否かを
決定するために使用され得るインビトロアッセイとしては、患者組織サンプルが
、培養中で増殖し、そして化合物に曝されるかまたはそうでなければ化合物を投
与されるインビトロ細胞培養アッセイが挙げられ、そして組織におけるこのよう
な化合物の効果が、観測される。
は、所望の治療活性または予防的活性について、インビトロで試験され、次いで
、インビボで試験される。例えば、化合物または薬学的組成物の治療的または予
防的利用を実証するためのインビトロアッセイは、細胞株または患者の組織サン
プルにおける化合物の効果を含む。細胞株および／または組織サンプルに関する
化合物または組成物の効果は、当業者に公知の技術を利用して決定され、この技
術としては、ロゼット形成アッセイおよび細胞溶解アッセイが挙げられるが、こ
れらに限定されない。本発明に従って、特定の化合物の投与が示されるか否かを
決定するために使用され得るインビトロアッセイとしては、患者組織サンプルが
、培養中で増殖し、そして化合物に曝されるかまたはそうでなければ化合物を投
与されるインビトロ細胞培養アッセイが挙げられ、そして組織におけるこのよう
な化合物の効果が、観測される。
【０４９７】
（治療的／予防的な投与および組成物）
本発明は、被験体への有効量の本発明の化合物または薬学的組成物、好ましく
は本発明の抗体の投与による処置、阻害および予防の方法を提供する。好ましい
局面において、化合物は実質的に精製される（例えば、その効果を制限するかま
たは望ましくない副作用を生じる物質は実質的にない）。被験体は好ましくは、
ウシ、ブタ、ウマ、ニワトリ、ネコ、イヌなどの動物が挙げられるがそれらに限
定されない動物であり、そして好ましくは哺乳動物であり、そして最も好ましく
はヒトである。
は本発明の抗体の投与による処置、阻害および予防の方法を提供する。好ましい
局面において、化合物は実質的に精製される（例えば、その効果を制限するかま
たは望ましくない副作用を生じる物質は実質的にない）。被験体は好ましくは、
ウシ、ブタ、ウマ、ニワトリ、ネコ、イヌなどの動物が挙げられるがそれらに限
定されない動物であり、そして好ましくは哺乳動物であり、そして最も好ましく
はヒトである。
【０４９８】
化合物が核酸または免疫グロブリンを含む場合に使用され得る処方および投与
方法は、上記に記載され；さらなる適切な処方および投与経路は、本明細書中で
以下に記載されたものの中から選択され得る。
方法は、上記に記載され；さらなる適切な処方および投与経路は、本明細書中で
以下に記載されたものの中から選択され得る。
【０４９９】
様々な送達システムが公知であり、そして本発明の化合物を投与するために用
いられ得る（例えば、リポソーム、微粒子、マイクロカプセル、この化合物の発
現が可能な組換え細胞中でのカプセル化、レセプター媒介エンドサイトーシス（
例えば、ＷｕおよびＷｕ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２：４４２９−４４３
２（１９８７）を参照のこと）、レトロウイルスまたは他のベクターの一部とし
ての核酸の構築など）。導入方法としては、皮内、筋内、腹腔内、静脈内、皮下
、鼻腔内、硬膜外、および経口経路が挙げられるがそれらに限定されない。化合
物または組成物は、任意の好都合な経路により（例えば、注入またはボーラス注
射により、上皮または粘膜内層（例えば、口腔粘膜、直腸粘膜および腸粘膜など
）を通しての吸収により）投与され得、そして他の生物学的に活性な薬剤と一緒
に投与され得る。投与は、全身的または局所的であり得る。さらに、本発明の薬
学的化合物または組成物を、任意の適切な経路（脳室内注射および髄腔内注射を
包含し；脳室内注射は、例えば、Ｏｍｍａｙａリザーバのようなリザーバに取り
付けられた脳室内カテーテルにより容易にされ得る）により中枢神経系に導入す
ることが望まれ得る。例えば、吸入器または噴霧器の使用、およびエアゾール化
剤を用いた処方により、肺投与もまた使用され得る。
いられ得る（例えば、リポソーム、微粒子、マイクロカプセル、この化合物の発
現が可能な組換え細胞中でのカプセル化、レセプター媒介エンドサイトーシス（
例えば、ＷｕおよびＷｕ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２：４４２９−４４３
２（１９８７）を参照のこと）、レトロウイルスまたは他のベクターの一部とし
ての核酸の構築など）。導入方法としては、皮内、筋内、腹腔内、静脈内、皮下
、鼻腔内、硬膜外、および経口経路が挙げられるがそれらに限定されない。化合
物または組成物は、任意の好都合な経路により（例えば、注入またはボーラス注
射により、上皮または粘膜内層（例えば、口腔粘膜、直腸粘膜および腸粘膜など
）を通しての吸収により）投与され得、そして他の生物学的に活性な薬剤と一緒
に投与され得る。投与は、全身的または局所的であり得る。さらに、本発明の薬
学的化合物または組成物を、任意の適切な経路（脳室内注射および髄腔内注射を
包含し；脳室内注射は、例えば、Ｏｍｍａｙａリザーバのようなリザーバに取り
付けられた脳室内カテーテルにより容易にされ得る）により中枢神経系に導入す
ることが望まれ得る。例えば、吸入器または噴霧器の使用、およびエアゾール化
剤を用いた処方により、肺投与もまた使用され得る。
【０５００】
具体的な実施形態において、本発明の薬学的化合物または組成物を、処置の必
要な領域に局所的に投与することが望まれ得る；これは、制限する目的ではない
が、例えば、手術中の局部注入、局所適用（例えば、手術後の創傷包帯との組み
合わせて）により、注射により、カテーテルにより、坐剤により、またはインプ
ラント（このインプラントは、シアラスティック（ｓｉａｌａｓｔｉｃ）膜のよ
うな膜または繊維を含む、多孔性、非多孔性、または膠様材料である）により達
成され得る。好ましくは、抗体を含む本発明のタンパク質を投与する際、タンパ
ク質が吸収されない材料を使用するために注意が払われなければならない。
要な領域に局所的に投与することが望まれ得る；これは、制限する目的ではない
が、例えば、手術中の局部注入、局所適用（例えば、手術後の創傷包帯との組み
合わせて）により、注射により、カテーテルにより、坐剤により、またはインプ
ラント（このインプラントは、シアラスティック（ｓｉａｌａｓｔｉｃ）膜のよ
うな膜または繊維を含む、多孔性、非多孔性、または膠様材料である）により達
成され得る。好ましくは、抗体を含む本発明のタンパク質を投与する際、タンパ
ク質が吸収されない材料を使用するために注意が払われなければならない。
【０５０１】
別の実施形態において、化合物または組成物は、小胞、特に、リポソーム中へ
送達され得る（Ｌａｎｇｅｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３（
１９９０）；Ｔｒｅａｔら，Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｔｈｅｒａｐ
ｙ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ，Ｌ
ｏｐｅｚ−ＢｅｒｅｓｔｅｉｎおよびＦｉｄｌｅｒ（編），Ｌｉｓｓ，Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ，３５３〜３６５頁（１９８９）；Ｌｏｐｅｚ−Ｂｅｒｅｓｔｅｉｎ，
同書３１７〜３２７頁を参照のこと；広く同書を参照のこと）。
送達され得る（Ｌａｎｇｅｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３（
１９９０）；Ｔｒｅａｔら，Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｔｈｅｒａｐ
ｙ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ，Ｌ
ｏｐｅｚ−ＢｅｒｅｓｔｅｉｎおよびＦｉｄｌｅｒ（編），Ｌｉｓｓ，Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ，３５３〜３６５頁（１９８９）；Ｌｏｐｅｚ−Ｂｅｒｅｓｔｅｉｎ，
同書３１７〜３２７頁を参照のこと；広く同書を参照のこと）。
【０５０２】
さらに別の実施形態において、化合物または組成物は制御された放出システム
中で送達され得る。１つの実施形態において、ポンプが用いられ得る（Ｌａｎｇ
ｅｒ，（前出）；Ｓｅｆｔｏｎ，ＣＲＣ Ｃｒｉｔ．Ｒｅｆ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅ
ｎｇ．１４：２０１（１９８７）；Ｂｕｃｈｗａｌｄら，Ｓｕｒｇｅｒｙ ８８
：５０７（１９８０）；Ｓａｕｄｅｋら，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：
５７４（１９８９）を参照のこと）。別の実施形態において、高分子材料が用い
られ得る（Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌ
ｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ，ＬａｎｇｅｒおよびＷｉｓｅ（編），ＣＲＣ Ｐｒｅ
ｓ．，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，Ｆｌｏｒｉｄａ（１９７４）；Ｃｏｎｔｒｏｌｌ
ｅｄ Ｄｒｕｇ Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ，Ｄｒｕｇ Ｐｒｏｄｕｃｔ
Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，ＳｍｏｌｅｎおよびＢａｌ
ｌ（編），Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９８４）；ＲａｎｇｅｒおよびＰ
ｅｐｐａｓ，Ｊ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｓｃｉ．Ｒｅｖ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃｈ
ｅｍ．２３：６１（１９８３）を参照のこと；Ｌｅｖｙら，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２
２８：１９０（１９８５）；Ｄｕｒｉｎｇら，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．２５：３
５１（１９８９）；Ｈｏｗａｒｄら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．７１：１０５（
１９８９）もまた参照のこと）。さらに別の実施形態において、制御された放出
システムは、治療標的、即ち、脳の近くに置かれ得、従って、全身用量の一部の
みを必要とする（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ，Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔ
ｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ，（前出），第２巻，
１１５〜１３８頁（１９８４）を参照のこと）。
中で送達され得る。１つの実施形態において、ポンプが用いられ得る（Ｌａｎｇ
ｅｒ，（前出）；Ｓｅｆｔｏｎ，ＣＲＣ Ｃｒｉｔ．Ｒｅｆ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅ
ｎｇ．１４：２０１（１９８７）；Ｂｕｃｈｗａｌｄら，Ｓｕｒｇｅｒｙ ８８
：５０７（１９８０）；Ｓａｕｄｅｋら，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：
５７４（１９８９）を参照のこと）。別の実施形態において、高分子材料が用い
られ得る（Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌ
ｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ，ＬａｎｇｅｒおよびＷｉｓｅ（編），ＣＲＣ Ｐｒｅ
ｓ．，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，Ｆｌｏｒｉｄａ（１９７４）；Ｃｏｎｔｒｏｌｌ
ｅｄ Ｄｒｕｇ Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ，Ｄｒｕｇ Ｐｒｏｄｕｃｔ
Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，ＳｍｏｌｅｎおよびＢａｌ
ｌ（編），Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９８４）；ＲａｎｇｅｒおよびＰ
ｅｐｐａｓ，Ｊ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｓｃｉ．Ｒｅｖ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃｈ
ｅｍ．２３：６１（１９８３）を参照のこと；Ｌｅｖｙら，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２
２８：１９０（１９８５）；Ｄｕｒｉｎｇら，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．２５：３
５１（１９８９）；Ｈｏｗａｒｄら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．７１：１０５（
１９８９）もまた参照のこと）。さらに別の実施形態において、制御された放出
システムは、治療標的、即ち、脳の近くに置かれ得、従って、全身用量の一部の
みを必要とする（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ，Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔ
ｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ，（前出），第２巻，
１１５〜１３８頁（１９８４）を参照のこと）。
【０５０３】
他の制御された放出システムは、Ｌａｎｇｅｒにより総説において議論される
（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３（１９９０））。
（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３（１９９０））。
【０５０４】
本発明の化合物がタンパク質をコードする核酸である、具体的な実施形態にお
いて、その核酸は、それを適切な核酸発現ベクターの一部として構成し、そして
それが細胞内になるように投与することにより（例えば、レトロウイルスベクタ
ーの使用により（米国特許第４，９８０，２８６号を参照のこと）、または直接
注射により、または微粒子ボンバードメント（例えば、遺伝子銃；Ｂｉｏｌｉｓ
ｔｉｃ，Ｄｕｐｏｎｔ）の使用により、または脂質もしくは細胞表面レセプター
もしくはトランスフェクト剤でコーティングすることにより、または核に入るこ
とが公知であるホメオボックス様ペプチドと結合させて投与すること（例えば、
Ｊｏｌｉｏｔら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８８：１８
６４−１８６８（１９９１）を参照のこと）などにより、そのコードされたタン
パク質の発現を促進するようにインビボで投与され得る。あるいは、核酸は、細
胞内に導入され得、そして、発現のために相同組換えにより宿主細胞ＤＮＡ内に
組み込まれ得る。
いて、その核酸は、それを適切な核酸発現ベクターの一部として構成し、そして
それが細胞内になるように投与することにより（例えば、レトロウイルスベクタ
ーの使用により（米国特許第４，９８０，２８６号を参照のこと）、または直接
注射により、または微粒子ボンバードメント（例えば、遺伝子銃；Ｂｉｏｌｉｓ
ｔｉｃ，Ｄｕｐｏｎｔ）の使用により、または脂質もしくは細胞表面レセプター
もしくはトランスフェクト剤でコーティングすることにより、または核に入るこ
とが公知であるホメオボックス様ペプチドと結合させて投与すること（例えば、
Ｊｏｌｉｏｔら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８８：１８
６４−１８６８（１９９１）を参照のこと）などにより、そのコードされたタン
パク質の発現を促進するようにインビボで投与され得る。あるいは、核酸は、細
胞内に導入され得、そして、発現のために相同組換えにより宿主細胞ＤＮＡ内に
組み込まれ得る。
【０５０５】
本発明はまた、薬学的組成物を提供する。このような組成物は、治療有効量の
化合物、および薬学的に受容可能なキャリアを含む。具体的な実施形態において
、用語「薬学的に受容可能な」とは、動物における、そしてさらに特にヒトにお
ける使用のために、連邦規制当局もしくは米国政府により認められたか、または
米国薬局方もしくは他の一般に認められた薬局方に列挙されたことを意味する。
用語「キャリア」とは、治療剤とともに投与される、希釈剤、アジュバンド、賦
形剤、またはビヒクルをいう。このような薬学的なキャリアは、水および油（石
油起源、動物起源、植物起源、または合成起源の油（例えば、ピーナッツ油、大
豆油、鉱油、ゴマ油など）を含む）のような滅菌した液体であり得る。水は、薬
学的組成物が静脈内に投与される場合に、好ましいキャリアである。生理食塩水
溶液、ならびにデキストロースおよびグリセロールの水溶液はまた、特に注射可
能な溶液のために、液体キャリアとして使用され得る。適切な薬学的賦形剤とし
ては、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、イネ
、フラワー、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン
酸グリセロール、滑石、塩化ナトリウム、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン
、グリコール、水、エタノールなどが挙げられる。組成物はまた、所望されるな
らば、少量の湿潤剤もしくは乳化剤、またはｐＨ緩衝剤を含み得る。これらの組
成物は、液剤、懸濁剤、乳剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、持続放出処方物
などの形態を取り得る。この組成物は、従来の結合剤およびトリグリセリドのよ
うなキャリアとともに、坐剤として処方され得る。経口処方物は、薬学的等級の
マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリン
ナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどのような標準キャリアを含み得
る。適切な薬学的キャリアの例は、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる「Ｒｅｍｉｎｇ
ｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」に記載される
。このような組成物は、治療有効量の化合物を、好ましくは精製された形態で、
適切な量のキャリアとともに含んで、患者への適切な投与のための形態を提供す
る。処方物は、投与形態に適するべきである。
化合物、および薬学的に受容可能なキャリアを含む。具体的な実施形態において
、用語「薬学的に受容可能な」とは、動物における、そしてさらに特にヒトにお
ける使用のために、連邦規制当局もしくは米国政府により認められたか、または
米国薬局方もしくは他の一般に認められた薬局方に列挙されたことを意味する。
用語「キャリア」とは、治療剤とともに投与される、希釈剤、アジュバンド、賦
形剤、またはビヒクルをいう。このような薬学的なキャリアは、水および油（石
油起源、動物起源、植物起源、または合成起源の油（例えば、ピーナッツ油、大
豆油、鉱油、ゴマ油など）を含む）のような滅菌した液体であり得る。水は、薬
学的組成物が静脈内に投与される場合に、好ましいキャリアである。生理食塩水
溶液、ならびにデキストロースおよびグリセロールの水溶液はまた、特に注射可
能な溶液のために、液体キャリアとして使用され得る。適切な薬学的賦形剤とし
ては、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、イネ
、フラワー、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン
酸グリセロール、滑石、塩化ナトリウム、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン
、グリコール、水、エタノールなどが挙げられる。組成物はまた、所望されるな
らば、少量の湿潤剤もしくは乳化剤、またはｐＨ緩衝剤を含み得る。これらの組
成物は、液剤、懸濁剤、乳剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、持続放出処方物
などの形態を取り得る。この組成物は、従来の結合剤およびトリグリセリドのよ
うなキャリアとともに、坐剤として処方され得る。経口処方物は、薬学的等級の
マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリン
ナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどのような標準キャリアを含み得
る。適切な薬学的キャリアの例は、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる「Ｒｅｍｉｎｇ
ｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」に記載される
。このような組成物は、治療有効量の化合物を、好ましくは精製された形態で、
適切な量のキャリアとともに含んで、患者への適切な投与のための形態を提供す
る。処方物は、投与形態に適するべきである。
【０５０６】
好ましい実施形態において、組成物は、慣用手順に従って、ヒトへの静脈内投
与のために採用された薬学的組成物として、処方される。代表的には、静脈内投
与のための組成物は、滅菌等張水性緩衝液の溶液である。必要な場合、組成物は
また、可溶化剤および注射の部位での痛みを緩和するリグノカインのような局部
麻酔を含み得る。一般的には、成分は、別々にかまたは単一投薬形態で一緒に混
合してのどちらかで、例えば、一定量の活性薬剤を示すアンプルまたは小袋（ｓ
ａｃｈｅｔｔｅ）のような密封された容器中の凍結乾燥粉末または水を含まない
濃縮物として供給される。組成物が注入により投与されるべき場合には、組成物
は、滅菌した薬学的等級の水または生理食塩水を含む注入ボトルに分配され得る
。組成物が注射により投与される場合、成分が投与の前に混合され得るように、
注射用滅菌水または生理食塩水のアンプルが提供され得る。
与のために採用された薬学的組成物として、処方される。代表的には、静脈内投
与のための組成物は、滅菌等張水性緩衝液の溶液である。必要な場合、組成物は
また、可溶化剤および注射の部位での痛みを緩和するリグノカインのような局部
麻酔を含み得る。一般的には、成分は、別々にかまたは単一投薬形態で一緒に混
合してのどちらかで、例えば、一定量の活性薬剤を示すアンプルまたは小袋（ｓ
ａｃｈｅｔｔｅ）のような密封された容器中の凍結乾燥粉末または水を含まない
濃縮物として供給される。組成物が注入により投与されるべき場合には、組成物
は、滅菌した薬学的等級の水または生理食塩水を含む注入ボトルに分配され得る
。組成物が注射により投与される場合、成分が投与の前に混合され得るように、
注射用滅菌水または生理食塩水のアンプルが提供され得る。
【０５０７】
本発明の化合物は、中性のまたは塩の形態として処方され得る。薬学的に受容
可能な塩としては、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などに由来するもの
のようなアニオンとともに形成される塩、およびナトリウム、カリウム、アンモ
ニウム、カルシウム、水酸化第２鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、
２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどに由来するもののよ
うなカチオンとともに形成される塩が挙げられる。
可能な塩としては、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などに由来するもの
のようなアニオンとともに形成される塩、およびナトリウム、カリウム、アンモ
ニウム、カルシウム、水酸化第２鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、
２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどに由来するもののよ
うなカチオンとともに形成される塩が挙げられる。
【０５０８】
この処置（本発明のポリペプチドの異常な発現および／または活性と関連する
疾患または障害の抑制および予防）において効果的である本発明の化合物の量は
、標準的な臨床技術により決定され得る。さらに、インビトロアッセイは、必要
に応じて、使用して最適な投薬量の範囲を同定するのを助け得る。処方において
使用されるべき正確な用量はまた、投与の経路、および疾患または障害の重篤さ
に依存し、そして開業医の判断および各患者の状況に従って決定されるべきであ
る。有効用量は、インビトロまたは動物モデル試験系から得られた用量反応曲線
から外插され得る。
疾患または障害の抑制および予防）において効果的である本発明の化合物の量は
、標準的な臨床技術により決定され得る。さらに、インビトロアッセイは、必要
に応じて、使用して最適な投薬量の範囲を同定するのを助け得る。処方において
使用されるべき正確な用量はまた、投与の経路、および疾患または障害の重篤さ
に依存し、そして開業医の判断および各患者の状況に従って決定されるべきであ
る。有効用量は、インビトロまたは動物モデル試験系から得られた用量反応曲線
から外插され得る。
【０５０９】
抗体に関して、患者に投与される投薬量は、代表的に、患者の体重１ｋｇあた
り０．１ｍｇ〜１００ｍｇである。好ましくは、患者に投与される投薬量は、患
者の体重１ｋｇあたり０．１ｍｇと２０ｍｇとの間であり、より好ましくは、患
者の体重１ｋｇあたり１ｍｇ〜１０ｍｇである。一般に、ヒト抗体は、外来ポリ
ペプチドへの免疫応答に起因して、他種由来の抗体よりもヒト体内で長い半減期
を有する。従って、ヒト抗体の低い投薬量および頻度の低い投与は、しばしば可
能である。さらに、本発明の抗体の投与の投薬量および頻度は、改変（例えば、
脂溶化（ｌｉｐｉｄａｔｉｏｎ）のような）による抗体の取り込みおよび組織浸
透（例えば、脳への）を増強することにより減少され得る。
り０．１ｍｇ〜１００ｍｇである。好ましくは、患者に投与される投薬量は、患
者の体重１ｋｇあたり０．１ｍｇと２０ｍｇとの間であり、より好ましくは、患
者の体重１ｋｇあたり１ｍｇ〜１０ｍｇである。一般に、ヒト抗体は、外来ポリ
ペプチドへの免疫応答に起因して、他種由来の抗体よりもヒト体内で長い半減期
を有する。従って、ヒト抗体の低い投薬量および頻度の低い投与は、しばしば可
能である。さらに、本発明の抗体の投与の投薬量および頻度は、改変（例えば、
脂溶化（ｌｉｐｉｄａｔｉｏｎ）のような）による抗体の取り込みおよび組織浸
透（例えば、脳への）を増強することにより減少され得る。
【０５１０】
本発明はまた、本発明の薬学的組成物の一つ以上の成分で満たされている一つ
以上の容器を備える薬学的パックまたはキットを提供する。薬学的製品または生
物学的製品の製造、使用または販売を規制している政府機関により規定される形
式における通告は、このような容器に、必要に応じて伴ない得る。この通告は、
ヒトの投与のための製造、使用または販売のこの機関による認可を反映する。
以上の容器を備える薬学的パックまたはキットを提供する。薬学的製品または生
物学的製品の製造、使用または販売を規制している政府機関により規定される形
式における通告は、このような容器に、必要に応じて伴ない得る。この通告は、
ヒトの投与のための製造、使用または販売のこの機関による認可を反映する。
【０５１１】
（染色体アッセイ）
本発明の核酸分子はまた、染色体同定に有用である。この配列は、個々のヒト
染色体における特定の位置に特異的に標的化され、そしてハイブリダイズし得る
。本発明による染色体へのＤＮＡのマッピングは、それらの配列を、疾患に関連
した遺伝子と相関づけることにおいて重要な第一歩である。
染色体における特定の位置に特異的に標的化され、そしてハイブリダイズし得る
。本発明による染色体へのＤＮＡのマッピングは、それらの配列を、疾患に関連
した遺伝子と相関づけることにおいて重要な第一歩である。
【０５１２】
この点における特定の好ましい実施形態において、本明細書中で開示されるｃ
ＤＮＡは、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質遺伝子のゲノムＤＮＡをクロ
ーニングするために用いられる。これは、一般的に市販されている、種々の周知
の技術およびライブラリーを用いて達成され得る。次いで、この目的のために周
知の技術を用いて、インサイチュ染色体マッピングのためにゲノムＤＮＡが用い
られる。
ＤＮＡは、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質遺伝子のゲノムＤＮＡをクロ
ーニングするために用いられる。これは、一般的に市販されている、種々の周知
の技術およびライブラリーを用いて達成され得る。次いで、この目的のために周
知の技術を用いて、インサイチュ染色体マッピングのためにゲノムＤＮＡが用い
られる。
【０５１３】
さらに、いくつかの場合において、配列は、ｃＤＮＡからＰＣＲプライマー（
好ましくは、１５〜２５ｂｐ）を調製することにより、染色体にマッピングされ
得る。遺伝子の３’非翻訳領域のコンピューター分析を用いて、ゲノムＤＮＡに
おいて１つを超えるエキソンにまたがらないプライマーを迅速に選択し、従って
、増幅プロセスを複雑化する。次いで、これらのプライマーは、個々のヒト染色
体を含有する体細胞ハイブリッドのＰＣＲスクリーニングのために用いられる。
好ましくは、１５〜２５ｂｐ）を調製することにより、染色体にマッピングされ
得る。遺伝子の３’非翻訳領域のコンピューター分析を用いて、ゲノムＤＮＡに
おいて１つを超えるエキソンにまたがらないプライマーを迅速に選択し、従って
、増幅プロセスを複雑化する。次いで、これらのプライマーは、個々のヒト染色
体を含有する体細胞ハイブリッドのＰＣＲスクリーニングのために用いられる。
【０５１４】
中期染色体スプレッド（ｓｐｒｅａｄ）へのｃＤＮＡクローンの蛍光インサイ
チュハイブリダイゼーション（「ＦＩＳＨ」）は、一工程で、正確な染色体位置
を提供するために用いられ得る。この技術は、５０または６０ｂｐ程度の短さの
ｃＤＮＡ由来のプローブと共に用いられ得る。この技術の概説については、Ｖｅ
ｒｍａら、Ｈｕｍａｎ Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ：Ａ Ｍａｎｕａｌ Ｏｆ Ｂ
ａｓｉｃ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙ
ｏｒｋ（１９８８）を参照のこと。
チュハイブリダイゼーション（「ＦＩＳＨ」）は、一工程で、正確な染色体位置
を提供するために用いられ得る。この技術は、５０または６０ｂｐ程度の短さの
ｃＤＮＡ由来のプローブと共に用いられ得る。この技術の概説については、Ｖｅ
ｒｍａら、Ｈｕｍａｎ Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ：Ａ Ｍａｎｕａｌ Ｏｆ Ｂ
ａｓｉｃ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙ
ｏｒｋ（１９８８）を参照のこと。
【０５１５】
染色体に対してマッピングするために同様に使用され得る他のマッピングスト
ラテジーとしては、放射ハイブリッドマッピング、標識されたフロー選別（ｆｌ
ｏｗ−ｓｏｒｔｅｄ）染色体を用いるプレスクリーニングおよび染色体特異的ｃ
ＤＮＡライブラリーを構築するためのハイブリダイゼーションによる事前選択が
挙げられる。放射ハイブリッド（ＲＨ）マッピングは、ヒト染色体のＸ線を用い
た断片化、およびハムスターＡ２３宿主細胞におけるこれらのランダムフラグメ
ントの保有（ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ）に依存する。ＲＨマッピングのためのＤＮＡ
は、Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ（ＵＳＡ）により供給される。８０ｂ
ｐと３００ｂｐとの間の産物を増幅するＥＳＴ配列から、オリゴ対が設計される
。ＰＣＲは、９３のヒト／ハムスターハイブリッドＤＮＡに対して行われ、そし
て結果をフレームワークマップ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ−ｇｅｎｏｍｅ．ｗｉ．
ｍｉｔ．ｅｄｕ／ｃｇｉ−ｂｉｎ／ｃｏｎｔｉｇ／ｒｈｍａｐｐｅｒ．ｐｌ；Ｇ
ｙａｐａｙら、Ｈｕｍａｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ５：３９
−３４６（１９９６））と比較する。ＲＨマッピングは、ＦＩＳＨより高い精度
を提供し、そして遺伝子のクラスターおよび疾患遺伝子座／遺伝子相関を示す。
ラテジーとしては、放射ハイブリッドマッピング、標識されたフロー選別（ｆｌ
ｏｗ−ｓｏｒｔｅｄ）染色体を用いるプレスクリーニングおよび染色体特異的ｃ
ＤＮＡライブラリーを構築するためのハイブリダイゼーションによる事前選択が
挙げられる。放射ハイブリッド（ＲＨ）マッピングは、ヒト染色体のＸ線を用い
た断片化、およびハムスターＡ２３宿主細胞におけるこれらのランダムフラグメ
ントの保有（ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ）に依存する。ＲＨマッピングのためのＤＮＡ
は、Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ（ＵＳＡ）により供給される。８０ｂ
ｐと３００ｂｐとの間の産物を増幅するＥＳＴ配列から、オリゴ対が設計される
。ＰＣＲは、９３のヒト／ハムスターハイブリッドＤＮＡに対して行われ、そし
て結果をフレームワークマップ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ−ｇｅｎｏｍｅ．ｗｉ．
ｍｉｔ．ｅｄｕ／ｃｇｉ−ｂｉｎ／ｃｏｎｔｉｇ／ｒｈｍａｐｐｅｒ．ｐｌ；Ｇ
ｙａｐａｙら、Ｈｕｍａｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ５：３９
−３４６（１９９６））と比較する。ＲＨマッピングは、ＦＩＳＨより高い精度
を提供し、そして遺伝子のクラスターおよび疾患遺伝子座／遺伝子相関を示す。
【０５１６】
一旦、配列が正確な染色体位置にマッピングされると、染色体上の配列の物理
学的な位置は、遺伝子マップデータと相関づけられ得る。このようなデータは、
例えば、Ｖ．ＭｃＫｕｓｉｃｋ，Ｍｅｎｄｅｌｉａｎ Ｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ
Ｉｎ Ｍａｎ（Ｊｏｈｎｓ Ｈｏｐｋｉｎｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｅｌ
ｃｈ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｌｉｂｒａｒｙからオンラインで入手可能である）に見
出される。次いで、同じ染色体領域にマッピングされた遺伝子と疾患との間の関
連が、連鎖分析（物理学的に隣接した遺伝子の共同遺伝）によって同定される。
学的な位置は、遺伝子マップデータと相関づけられ得る。このようなデータは、
例えば、Ｖ．ＭｃＫｕｓｉｃｋ，Ｍｅｎｄｅｌｉａｎ Ｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ
Ｉｎ Ｍａｎ（Ｊｏｈｎｓ Ｈｏｐｋｉｎｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｅｌ
ｃｈ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｌｉｂｒａｒｙからオンラインで入手可能である）に見
出される。次いで、同じ染色体領域にマッピングされた遺伝子と疾患との間の関
連が、連鎖分析（物理学的に隣接した遺伝子の共同遺伝）によって同定される。
【０５１７】
次に、罹患個体と非罹患個体との間でのｃＤＮＡまたはゲノム配列における差
異を決定することが必要である。罹患個体のいくらかまたは全てにおいて変異が
認められるが、いずれの正常個体でも認められない場合、変異は、疾患の原因因
子のようである。
異を決定することが必要である。罹患個体のいくらかまたは全てにおいて変異が
認められるが、いずれの正常個体でも認められない場合、変異は、疾患の原因因
子のようである。
【０５１８】
ＭＥＴＨ１遺伝子マップＳＴＳマーカーＤ２１Ｓ１４３５とＤ２１Ｓ１４４２
との間に位置し、これは２１ｑ２１と訳される。これは、アミロイド前駆体タン
パク質（ＡＰＰ）と類似の染色体位置である。ＡＰＰおよびＭＥＴＨ１は、およ
そ３００万の塩基だけ離れており、これはヒトゲノムにおいては大きな距離では
ない。この染色体位置は、エンテロキナーゼ（トリプシノーゲンをトリプシンに
この変換することによりトリプシノーゲンを活性化する酵素）およびアルツハイ
マー病に応答性の遺伝子のような重要な遺伝子を含む。
との間に位置し、これは２１ｑ２１と訳される。これは、アミロイド前駆体タン
パク質（ＡＰＰ）と類似の染色体位置である。ＡＰＰおよびＭＥＴＨ１は、およ
そ３００万の塩基だけ離れており、これはヒトゲノムにおいては大きな距離では
ない。この染色体位置は、エンテロキナーゼ（トリプシノーゲンをトリプシンに
この変換することによりトリプシノーゲンを活性化する酵素）およびアルツハイ
マー病に応答性の遺伝子のような重要な遺伝子を含む。
【０５１９】
ＭＥＴＨ１遺伝子は、以下の放射ハイブリッドマッピングのためのオリゴを使
用して、２１ｑ２１にマッピングされ得る： ５’プライマー：ＡＣＴＧＴＧＴＧＴＧＡＴＣＣＧＡＧ（配列番号１２６） ３’プライマー：ＧＴＴＧＧＡＡＡＧＣＡＴＴＧＡＣＧ（配列番号１２７） （キット） 本発明は、上記の方法において使用され得るキットを提供する。１つの実施形
態において、キットは、１つ以上の容器において、本発明の抗体、好ましくは精
製した抗体を備える。特定の実施形態において、本発明のキットは、エピトープ
を含む実質的に単離されたポリペプチドを備える。このエピトープは、キット中
に含まれる抗体と特異的に免疫反応する。好ましくは、本発明のキットは、目的
のポリペプチドと反応しないコントロール抗体をさらに備える。別の特定の実施
形態において、本発明のキットは、目的のポリペプチドへの抗体の結合を検出す
るための手段を備える（例えば、この抗体は、検出可能な基質（例えば、蛍光化
合物、酵素基質、放射性化合物もしくは発光化合物）に結合体化され得るか、ま
たは一次抗体を認識する二次抗体が、検出可能な基質と結合体化され得る）。
用して、２１ｑ２１にマッピングされ得る： ５’プライマー：ＡＣＴＧＴＧＴＧＴＧＡＴＣＣＧＡＧ（配列番号１２６） ３’プライマー：ＧＴＴＧＧＡＡＡＧＣＡＴＴＧＡＣＧ（配列番号１２７） （キット） 本発明は、上記の方法において使用され得るキットを提供する。１つの実施形
態において、キットは、１つ以上の容器において、本発明の抗体、好ましくは精
製した抗体を備える。特定の実施形態において、本発明のキットは、エピトープ
を含む実質的に単離されたポリペプチドを備える。このエピトープは、キット中
に含まれる抗体と特異的に免疫反応する。好ましくは、本発明のキットは、目的
のポリペプチドと反応しないコントロール抗体をさらに備える。別の特定の実施
形態において、本発明のキットは、目的のポリペプチドへの抗体の結合を検出す
るための手段を備える（例えば、この抗体は、検出可能な基質（例えば、蛍光化
合物、酵素基質、放射性化合物もしくは発光化合物）に結合体化され得るか、ま
たは一次抗体を認識する二次抗体が、検出可能な基質と結合体化され得る）。
【０５２０】
本発明の別の特定の実施形態において、キットは、増殖性および／または癌性
のポリヌクレオチドおよびポリペプチドに対して特異的な抗体を含む血清のスク
リーニングに使用するための診断キットである。このようなキットは、目的のポ
リペプチドと反応しないコントロール抗体を備え得る。このようなキットは、エ
ピトープを含む実質的に単離されたポリペプチド抗原を備え得る。このエピトー
プは、少なくとも１つの抗ポリペプチド抗原抗体と特異的に免疫反応する。さら
に、このようなキットは、抗原に対する上記の抗体の結合を検出するための手段
を備える（例えば、抗体は、蛍光化合物（例えば、フローサイトメトリーにより
検出され得るフルオレセインまはたローダミン）と結合体化され得る）。特定の
実施形態において、キットは、組換え的に産生されたポリペプチド抗原または化
学的に合成されたポリペプチド抗原を備え得る。キットのポリペプチド抗原はま
た、固体支持体に付着され得る。
のポリヌクレオチドおよびポリペプチドに対して特異的な抗体を含む血清のスク
リーニングに使用するための診断キットである。このようなキットは、目的のポ
リペプチドと反応しないコントロール抗体を備え得る。このようなキットは、エ
ピトープを含む実質的に単離されたポリペプチド抗原を備え得る。このエピトー
プは、少なくとも１つの抗ポリペプチド抗原抗体と特異的に免疫反応する。さら
に、このようなキットは、抗原に対する上記の抗体の結合を検出するための手段
を備える（例えば、抗体は、蛍光化合物（例えば、フローサイトメトリーにより
検出され得るフルオレセインまはたローダミン）と結合体化され得る）。特定の
実施形態において、キットは、組換え的に産生されたポリペプチド抗原または化
学的に合成されたポリペプチド抗原を備え得る。キットのポリペプチド抗原はま
た、固体支持体に付着され得る。
【０５２１】
より特定の実施形態において、上記のキットの検出手段は、上記のポリペプチ
ド抗原が付着する固体支持体を備える。このようなキットはまた、非付着レポー
ター標識化抗ヒト抗体を備え得る。この実施形態において、ポリペプチド抗原へ
の抗体の結合は、上記のレポーター標識化抗体の結合によって検出され得る。
ド抗原が付着する固体支持体を備える。このようなキットはまた、非付着レポー
ター標識化抗ヒト抗体を備え得る。この実施形態において、ポリペプチド抗原へ
の抗体の結合は、上記のレポーター標識化抗体の結合によって検出され得る。
【０５２２】
さらなる実施形態において、本発明は、本発明のポリペプチドの抗原を含む血
清のスクリーニングにおいて使用するための、診断キットを含む。この診断キッ
トは、ポリペプチド抗原またはポリヌクレオチド抗原と特異的に免疫反応する実
質的に単離された抗体、およびこの抗体へのこのポリヌクレオチド抗原またはポ
リペプチド抗原の結合を検出するための手段を備える。１つの実施形態において
、抗体は、固体支持体に付着される。特定の実施形態において、抗体は、モノク
ロナール抗体であり得る。キットのこの検出手段は、第２の標識化モノクロナー
ル抗体を含み得る。あるいは、またはさらに、この検出手段は、標識化競合抗原
を含み得る。
清のスクリーニングにおいて使用するための、診断キットを含む。この診断キッ
トは、ポリペプチド抗原またはポリヌクレオチド抗原と特異的に免疫反応する実
質的に単離された抗体、およびこの抗体へのこのポリヌクレオチド抗原またはポ
リペプチド抗原の結合を検出するための手段を備える。１つの実施形態において
、抗体は、固体支持体に付着される。特定の実施形態において、抗体は、モノク
ロナール抗体であり得る。キットのこの検出手段は、第２の標識化モノクロナー
ル抗体を含み得る。あるいは、またはさらに、この検出手段は、標識化競合抗原
を含み得る。
【０５２３】
１つの診断構成において、試験血清を、本発明の方法により得られる表面結合
抗原を有する固相試薬と反応させる。特定の抗原抗体とこの試薬との結合、およ
び洗浄することによる結合していない血清成分の除去の後、この試薬をレポータ
ー標識化抗ヒト抗体と反応させて、固体支持体上に、結合した抗抗原抗体の量に
比例して、この試薬にレポーターを結合させる。この試薬を再び洗浄して、結合
していない標識化抗体を除去し、そしてこの試薬と会合するレポーターの量を決
定する。代表的に、レポーターは、酵素であり、この酵素は、適切な蛍光性基質
、発光性基質または比色用基質（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）の存在
下で固相をインキュベートすることにより検出される。
抗原を有する固相試薬と反応させる。特定の抗原抗体とこの試薬との結合、およ
び洗浄することによる結合していない血清成分の除去の後、この試薬をレポータ
ー標識化抗ヒト抗体と反応させて、固体支持体上に、結合した抗抗原抗体の量に
比例して、この試薬にレポーターを結合させる。この試薬を再び洗浄して、結合
していない標識化抗体を除去し、そしてこの試薬と会合するレポーターの量を決
定する。代表的に、レポーターは、酵素であり、この酵素は、適切な蛍光性基質
、発光性基質または比色用基質（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）の存在
下で固相をインキュベートすることにより検出される。
【０５２４】
上記アッセイにおいて、固体表面試薬は、固体支持体物質（例えば、ポリマー
ビーズ、ディップスティック、９６ウェルプレートまたは濾過材料）へタンパク
質物質を付着することについての公知の技術によって調製される。これらの付着
法は、一般に、支持体へのタンパク質の非特異的吸着またはタンパク質の共有結
合性の結合（代表的に、固体支持体上の化学的反応性基（例えば、活性化カルボ
キシル基、ヒドロキシル基、もしくはアルデヒド基）に対する遊離のアミン基の
結合を介する）を包含する。あるいは、ストレプトアビジンコートプレートが、
ビオチン化抗原と結合体化して使用され得る。
ビーズ、ディップスティック、９６ウェルプレートまたは濾過材料）へタンパク
質物質を付着することについての公知の技術によって調製される。これらの付着
法は、一般に、支持体へのタンパク質の非特異的吸着またはタンパク質の共有結
合性の結合（代表的に、固体支持体上の化学的反応性基（例えば、活性化カルボ
キシル基、ヒドロキシル基、もしくはアルデヒド基）に対する遊離のアミン基の
結合を介する）を包含する。あるいは、ストレプトアビジンコートプレートが、
ビオチン化抗原と結合体化して使用され得る。
【０５２５】
従って、本発明は、この診断方法を実施するためのアッセイ系またはキットを
提供する。このキットは、一般に、表面に結合した組換え抗原を有する支持体、
および表面に結合した抗抗原抗体を検出するためのレポーター標識化抗ヒト抗体
を含む。
提供する。このキットは、一般に、表面に結合した組換え抗原を有する支持体、
および表面に結合した抗抗原抗体を検出するためのレポーター標識化抗ヒト抗体
を含む。
【０５２６】
本発明を一般的に記載してきたが、以下の実施例を参照して等価物がより容易
に理解される。これらの実施例は、例示として提供され、限定を意図されない。
に理解される。これらの実施例は、例示として提供され、限定を意図されない。
【０５２７】
（実施例）
（実施例１：ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２の同定およびクローニング）
ＴＳＰ様ドメインを有する新規な遺伝子を検索するために、およそ９００，０
００の発現配列タグ（ＥＳＴ）からなる大きなヒトｃＤＮＡデータベースを、Ｔ
ＳＰ１の第２のＩ型反復に相同な配列についてスクリーニングした。いくつかの
ＥＳＴを、ＴＳＰ様ドメインを有するタンパク質をコードすると推定した。ヒト
心臓および肺のライブラリーを起源とする２つのｃＤＮＡクローンを、さらに配
列決定し、そして機能分析のために選択した。
００の発現配列タグ（ＥＳＴ）からなる大きなヒトｃＤＮＡデータベースを、Ｔ
ＳＰ１の第２のＩ型反復に相同な配列についてスクリーニングした。いくつかの
ＥＳＴを、ＴＳＰ様ドメインを有するタンパク質をコードすると推定した。ヒト
心臓および肺のライブラリーを起源とする２つのｃＤＮＡクローンを、さらに配
列決定し、そして機能分析のために選択した。
【０５２８】
ＭＥＴＨ１のアミノ末端を、製造業者の指示に従いｃＤＮＡ末端の５’高速増
幅（ＲＡＣＥ）ＰＣＲ技術（Ｍａｒａｔｈｏｎ ｃＤＮＡ ａｍｐｌｉｆｉｃａ
ｔｉｏｎ ｋｉｔ，Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）を使用して得た。ＭＥＴＨ２のアミノ末
端を、５’ＲＡＣＥ ＰＣＲにより部分的に得、そしてその後、ゲノムスクリー
ニングによって確認および完全にした。ゲノムスクリーニングに関して、ＢＡＣ
クローン（Ｇｅｎｏｍｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を、ＰＣＲによって最初に同定した
。１５０〜２００ｂｐの配列を含むポジティブ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）ＢＡＣクロ
ーンを、続いて小フラグメントとしてｐＧＥＭベクターにサブクローン化し、そ
して配列決定した。
幅（ＲＡＣＥ）ＰＣＲ技術（Ｍａｒａｔｈｏｎ ｃＤＮＡ ａｍｐｌｉｆｉｃａ
ｔｉｏｎ ｋｉｔ，Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）を使用して得た。ＭＥＴＨ２のアミノ末
端を、５’ＲＡＣＥ ＰＣＲにより部分的に得、そしてその後、ゲノムスクリー
ニングによって確認および完全にした。ゲノムスクリーニングに関して、ＢＡＣ
クローン（Ｇｅｎｏｍｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を、ＰＣＲによって最初に同定した
。１５０〜２００ｂｐの配列を含むポジティブ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）ＢＡＣクロ
ーンを、続いて小フラグメントとしてｐＧＥＭベクターにサブクローン化し、そ
して配列決定した。
【０５２９】
ＧｅｎＢａｎｋ、ＥＭＢＬおよびＳｗｉｓｓＰｒｏｔデータベースでの推定ア
ミノ酸配列の分析および比較は、これらの遺伝子が、それらのＮＨ２末端におい
てリルロリシンファミリーに対する相同性を有し、かつＣＯＯＨ末端においてい
くつかのＴＳＰ様モチーフを有するメタロプロテアーゼの新しいファミリーに属
することを示唆した。これらのｃＤＮＡを、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２と命名
した；ＭＥ（メタロプロテアーゼ）およびＴＨ（トロンボスポンジン）。ＭＥＴ
Ｈ１のマウスホモログが同定され、そしてＡＤＡＭＴＳ１と命名された（Ｋｕｎ
ｏ，Ｋら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：５５６−５６２（１９９７））。
ヒト配列とマウス配列の直接の比較は、高レベルの保存を示した（８３．４％の
アミノ酸同一）。これまでは、ＭＥＴＨ２についてのホモログは、同定されてい
ない。
ミノ酸配列の分析および比較は、これらの遺伝子が、それらのＮＨ２末端におい
てリルロリシンファミリーに対する相同性を有し、かつＣＯＯＨ末端においてい
くつかのＴＳＰ様モチーフを有するメタロプロテアーゼの新しいファミリーに属
することを示唆した。これらのｃＤＮＡを、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２と命名
した；ＭＥ（メタロプロテアーゼ）およびＴＨ（トロンボスポンジン）。ＭＥＴ
Ｈ１のマウスホモログが同定され、そしてＡＤＡＭＴＳ１と命名された（Ｋｕｎ
ｏ，Ｋら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：５５６−５６２（１９９７））。
ヒト配列とマウス配列の直接の比較は、高レベルの保存を示した（８３．４％の
アミノ酸同一）。これまでは、ＭＥＴＨ２についてのホモログは、同定されてい
ない。
【０５３０】
興味深いことに、最近同定されたｐＮＰＩ（プロコラーゲンＩ Ｎ−プロテイ
ナーゼ；Ｃｏｌｉｄｇｅ，Ａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ ９４：２３７４−２３７９（１９９７））と命名されたタンパク質は、ＭＥ
ＴＨ１およびＭＥＴＨ２と顕著な配列および構造的な類似性を示した（図３）。
本明細書中に記載された新規なタンパク質のように、ｐＮＰＩはまた、カルボキ
シ末端にメタロプロテイナーゼ（リプロリシンサブファミリー）ドメインおよび
ＴＳＰドメインを含む。ｐＮＰＩの配列は、ウシ起源であるが、配列アラインメ
ントは、同一の構造的な特徴を示した。ＭＥＴＨ１とＭＥＴＨ２との間のアミノ
酸類似性は、５１．７％であり、そしてＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２とｐＮＰＩ
との間の相同性は、それぞれより少ない３３．９％および３６．３％である。
ナーゼ；Ｃｏｌｉｄｇｅ，Ａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ ９４：２３７４−２３７９（１９９７））と命名されたタンパク質は、ＭＥ
ＴＨ１およびＭＥＴＨ２と顕著な配列および構造的な類似性を示した（図３）。
本明細書中に記載された新規なタンパク質のように、ｐＮＰＩはまた、カルボキ
シ末端にメタロプロテイナーゼ（リプロリシンサブファミリー）ドメインおよび
ＴＳＰドメインを含む。ｐＮＰＩの配列は、ウシ起源であるが、配列アラインメ
ントは、同一の構造的な特徴を示した。ＭＥＴＨ１とＭＥＴＨ２との間のアミノ
酸類似性は、５１．７％であり、そしてＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２とｐＮＰＩ
との間の相同性は、それぞれより少ない３３．９％および３６．３％である。
【０５３１】
配列分析は、それぞれ、９５０アミノ酸および８９０アミノ酸のタンパク質を
コードするＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２のＯＲＦを示した。３つ全てのタンパク
質において、ＮＨ2末端は、親水性プロットから推定される約３００アミノ酸の
別の膜貫通ドメインに続く、推定シグナルペプチドを含む。これらのタンパク質
が、膜に結合するか否かは、明らかではない。しかし、予備データを考慮して、
この２つの膜貫通ドメインが、疎水性ポケットからなり、かつＭＥＴＨ１、ＭＥ
ＴＨ２およびｐＮＰＩが、実際に分泌タンパク質である可能性がある。シグナル
ペプチドを過ぎてＮＨ2末端は、ジンクメタロプロテアーゼのスーパーファミリ
ーと相同性を有し、そしてプロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、および
システインリッチ領域に細分され得る。
コードするＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２のＯＲＦを示した。３つ全てのタンパク
質において、ＮＨ2末端は、親水性プロットから推定される約３００アミノ酸の
別の膜貫通ドメインに続く、推定シグナルペプチドを含む。これらのタンパク質
が、膜に結合するか否かは、明らかではない。しかし、予備データを考慮して、
この２つの膜貫通ドメインが、疎水性ポケットからなり、かつＭＥＴＨ１、ＭＥ
ＴＨ２およびｐＮＰＩが、実際に分泌タンパク質である可能性がある。シグナル
ペプチドを過ぎてＮＨ2末端は、ジンクメタロプロテアーゼのスーパーファミリ
ーと相同性を有し、そしてプロドメイン、メタロプロテアーゼドメイン、および
システインリッチ領域に細分され得る。
【０５３２】
プロドメインとメタロプロテアーゼドメインとの間の境界に位置する、図３に
おいてＭＥＴＨ１（アミノ酸２３２〜２３５）およびＭＥＴＨ２（アミノ酸２１
１〜２１４）において２重下線を付した配列は、哺乳動物サブチリシン（例えば
、フリンス（Ｂａｒｒ，１９９１））の潜在的な切断部位である。タンパク質分
解性プロセシングは、ＳＶＭＰにおいて起こり、可溶性のメタロプロテアーゼお
よびディスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）を得（Ｂｊａｒｎａｓｏｎ
，Ｊ．Ｂ．およびＦｏｘ，Ｊ．Ｗ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．２４８
：３４５−３６８（１９９５））、そしてまた、いくつかのＡＤＡＭにおいて検
出されている（Ｗｏｌｓｂｅｒｇ，Ｔ．Ｇ．およびＷｈｉｔｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｄｅ
ｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １８０：３８９−４０１（１９９６
）によって概説される）。タンパク質分解性プロセシングは、ＭＥＴＨ１および
２の両方において起る（以下を参照のこと）。さらに、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴ
Ｈ２の両方は、特定の機能的に重要なアミノ酸の保存に起因する触媒活性がある
と推定されるＺｎ2+結合部位を有し（Ｒａｗｌｉｎｇｓ，Ｎ．Ｄ．およびＢａｒ
ｒｅｔｔ，Ａ．Ｊ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．２４８：１８３−２２
８（１９９５））（図３における点線）、これは、これらのタンパク質が活性な
プロテアーゼであり得ることを示唆する。
おいてＭＥＴＨ１（アミノ酸２３２〜２３５）およびＭＥＴＨ２（アミノ酸２１
１〜２１４）において２重下線を付した配列は、哺乳動物サブチリシン（例えば
、フリンス（Ｂａｒｒ，１９９１））の潜在的な切断部位である。タンパク質分
解性プロセシングは、ＳＶＭＰにおいて起こり、可溶性のメタロプロテアーゼお
よびディスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）を得（Ｂｊａｒｎａｓｏｎ
，Ｊ．Ｂ．およびＦｏｘ，Ｊ．Ｗ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．２４８
：３４５−３６８（１９９５））、そしてまた、いくつかのＡＤＡＭにおいて検
出されている（Ｗｏｌｓｂｅｒｇ，Ｔ．Ｇ．およびＷｈｉｔｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｄｅ
ｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １８０：３８９−４０１（１９９６
）によって概説される）。タンパク質分解性プロセシングは、ＭＥＴＨ１および
２の両方において起る（以下を参照のこと）。さらに、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴ
Ｈ２の両方は、特定の機能的に重要なアミノ酸の保存に起因する触媒活性がある
と推定されるＺｎ2+結合部位を有し（Ｒａｗｌｉｎｇｓ，Ｎ．Ｄ．およびＢａｒ
ｒｅｔｔ，Ａ．Ｊ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．２４８：１８３−２２
８（１９９５））（図３における点線）、これは、これらのタンパク質が活性な
プロテアーゼであり得ることを示唆する。
【０５３３】
メタロプロテアーゼドメインの後に、２つの推定ディスインテグリンループを
含む、システインリッチ領域がある（Ｗｏｌｓｂｅｒｇ，Ｔ．Ｇ．およびＷｈｉ
ｔｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １８０：３８
９−４０１（１９９６））（図３において矢印で示される）。ディスインテグリ
ンドメインを、ヘビ毒液メタロプロテアーゼ（ＳＶＭＰ）およびＡＤＡＭ（１つ
のディスインテグリンおよび１つのメタロプロテアーゼドメインを含む哺乳動物
タンパク質）におけるメタロプロテアーゼのスーパーファミリーにおいて見出し
、そしてＳＶＭＰにおけるそれらのリガンドに対するインテグリンの結合を阻害
する潜在的な機能を有する。逆に、膜アンカータンパク質の一部としてのＡＤＡ
Ｍディスインテグリン様ドメインは、細胞−細胞相互作用を崩壊ではなく、促進
し得る（Ｗｏｌｓｂｅｒｇ，Ｔ．Ｇ．およびＷｈｉｔｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｄｅｖｅｌ
ｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １８０：３８９−４０１（１９９６））。
ＴＳＰ様ドメインは、ＭＥＴＨ１タンパク質およびＭＥＴＨ２タンパク質のＣＯ
ＯＨ半分において位置される。ＭＥＴＨ１は、第２の抗脈管形成領域に続いて、
未知の機能を有するスペーサー領域によって分離される２つの保存されたＴＳＰ
ドメイン、およびより低い相同性および５つだけシステインを有するサブドメイ
ン、を含む。ＭＥＴＨ２は、このスペーサー領域によって分離される２つのＴＳ
Ｐドメインを含む。ＴＳＰ１およびＴＳＰ２のドメインを含むＭＥＴＨ１および
ＭＥＴＨ２のＴＳＰ様ドメインのアラインメントを、図５に示す。この相同性は
、全てのＴＳＰ反復の中のアミノ酸類似性が１９．２％から５２％の間で変化す
る。１〜６に番号を付したシステイン、およびアスタリスクで標識したトリプト
ファンは、高く保存されている。
含む、システインリッチ領域がある（Ｗｏｌｓｂｅｒｇ，Ｔ．Ｇ．およびＷｈｉ
ｔｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １８０：３８
９−４０１（１９９６））（図３において矢印で示される）。ディスインテグリ
ンドメインを、ヘビ毒液メタロプロテアーゼ（ＳＶＭＰ）およびＡＤＡＭ（１つ
のディスインテグリンおよび１つのメタロプロテアーゼドメインを含む哺乳動物
タンパク質）におけるメタロプロテアーゼのスーパーファミリーにおいて見出し
、そしてＳＶＭＰにおけるそれらのリガンドに対するインテグリンの結合を阻害
する潜在的な機能を有する。逆に、膜アンカータンパク質の一部としてのＡＤＡ
Ｍディスインテグリン様ドメインは、細胞−細胞相互作用を崩壊ではなく、促進
し得る（Ｗｏｌｓｂｅｒｇ，Ｔ．Ｇ．およびＷｈｉｔｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｄｅｖｅｌ
ｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １８０：３８９−４０１（１９９６））。
ＴＳＰ様ドメインは、ＭＥＴＨ１タンパク質およびＭＥＴＨ２タンパク質のＣＯ
ＯＨ半分において位置される。ＭＥＴＨ１は、第２の抗脈管形成領域に続いて、
未知の機能を有するスペーサー領域によって分離される２つの保存されたＴＳＰ
ドメイン、およびより低い相同性および５つだけシステインを有するサブドメイ
ン、を含む。ＭＥＴＨ２は、このスペーサー領域によって分離される２つのＴＳ
Ｐドメインを含む。ＴＳＰ１およびＴＳＰ２のドメインを含むＭＥＴＨ１および
ＭＥＴＨ２のＴＳＰ様ドメインのアラインメントを、図５に示す。この相同性は
、全てのＴＳＰ反復の中のアミノ酸類似性が１９．２％から５２％の間で変化す
る。１〜６に番号を付したシステイン、およびアスタリスクで標識したトリプト
ファンは、高く保存されている。
【０５３４】
ヒトゲノムＤＮＡのサザンブロットは、このゲノム中にＭＥＴＨ１およびＭＥ
ＴＨ２の存在を示した。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２のプローブは、異なるサイ
ズのバンドを示し、これは、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２が、異なる遺伝子から
転写されることを示唆する。
ＴＨ２の存在を示した。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２のプローブは、異なるサイ
ズのバンドを示し、これは、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２が、異なる遺伝子から
転写されることを示唆する。
【０５３５】
Ｉ型反復のコンセンサス配列は、６個の完全な保存システインを有する１６残
基を含む。代表的には、これは、配列モチーフＷＳＸＷＳ（配列番号８２）で始
まる。このモチーフはまた、ヘパリンに結合することが示されている（Ｇｕｏ，
Ｎ．，ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６７：１９３４９−１９３５５（１９９
２））。この領域のヘパリンに対する親和性は、ＴＳＰ−１の抗脈管形成活性の
一部と提案されている（Ｇｕｏ，Ｎ．，ら、Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｒｅｓ．４９
（１９９７））。ＴＳＰファミリーのタンパク質の５つのメンバー間で、ＴＳＰ
１およびＴＳＰ２のみが、脈管形成を阻害し、かつＩ型反復を含む（Ｔｏｌｓｍ
ａ，Ｓ．Ｓ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１２２：４９７−５１１（１９９３
）；Ｋｙｒｉａｋｉｄｅｓ，Ｔ．Ｒ．，ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１４０：
４１９−４３０（１９９８））。Ｉ型反復またはプロパージン反復は、おそらく
５億年前と９億年前との間にエキソンシャッフリングによってＴＳＰ１および２
の前駆体に付加された（Ａｄａｍｓ，Ｊ．，ら、Ｔｈｅ Ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏ
ｎｄｉｎ Ｇｅｎｅ Ｆａｍｉｌｙ，第１版、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏ
ｇｙ Ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｃｅ Ｕｎｉｔ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ編）、Ｒ．Ｇ．
Ｌａｎｄｅｓ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｇｅｒｍａｎｙ（１９９５））。このドメイン
の獲得は、新しい血管の形成の調節のような機能を有するＴＳＰ１およびＴＳＰ
２の前駆体を提供するようである。最近、ｐ５３によって調節されるその能力に
ついて、脳ライブラリーから単離されたタンパク質である、ＢＡＩ−１（脳新脈
管形成インヒビター−１）が、ＴＳＰ−１のＩ型反復を含むこと、およびこの分
子に対する抗脈管形成潜在力を提供することが示された（Ｎｉｓｈｉｍｏｒｉ，
Ｈ．，ら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １５：２１４５−２１５０（１９９７））。それ
にもかかわらず、さらなる配列または前後関係がまた、重要であるようである。
なぜなら、Ｉ型反復を含むタンパク質が、補足的なファミリーのプロパージン、
Ｆ−スポンジン、および他のメンバーのような明らかなまたはより確立された抗
脈管形成特性を有しないようだからである。
基を含む。代表的には、これは、配列モチーフＷＳＸＷＳ（配列番号８２）で始
まる。このモチーフはまた、ヘパリンに結合することが示されている（Ｇｕｏ，
Ｎ．，ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６７：１９３４９−１９３５５（１９９
２））。この領域のヘパリンに対する親和性は、ＴＳＰ−１の抗脈管形成活性の
一部と提案されている（Ｇｕｏ，Ｎ．，ら、Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｒｅｓ．４９
（１９９７））。ＴＳＰファミリーのタンパク質の５つのメンバー間で、ＴＳＰ
１およびＴＳＰ２のみが、脈管形成を阻害し、かつＩ型反復を含む（Ｔｏｌｓｍ
ａ，Ｓ．Ｓ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１２２：４９７−５１１（１９９３
）；Ｋｙｒｉａｋｉｄｅｓ，Ｔ．Ｒ．，ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１４０：
４１９−４３０（１９９８））。Ｉ型反復またはプロパージン反復は、おそらく
５億年前と９億年前との間にエキソンシャッフリングによってＴＳＰ１および２
の前駆体に付加された（Ａｄａｍｓ，Ｊ．，ら、Ｔｈｅ Ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏ
ｎｄｉｎ Ｇｅｎｅ Ｆａｍｉｌｙ，第１版、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏ
ｇｙ Ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｃｅ Ｕｎｉｔ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ編）、Ｒ．Ｇ．
Ｌａｎｄｅｓ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｇｅｒｍａｎｙ（１９９５））。このドメイン
の獲得は、新しい血管の形成の調節のような機能を有するＴＳＰ１およびＴＳＰ
２の前駆体を提供するようである。最近、ｐ５３によって調節されるその能力に
ついて、脳ライブラリーから単離されたタンパク質である、ＢＡＩ−１（脳新脈
管形成インヒビター−１）が、ＴＳＰ−１のＩ型反復を含むこと、およびこの分
子に対する抗脈管形成潜在力を提供することが示された（Ｎｉｓｈｉｍｏｒｉ，
Ｈ．，ら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １５：２１４５−２１５０（１９９７））。それ
にもかかわらず、さらなる配列または前後関係がまた、重要であるようである。
なぜなら、Ｉ型反復を含むタンパク質が、補足的なファミリーのプロパージン、
Ｆ−スポンジン、および他のメンバーのような明らかなまたはより確立された抗
脈管形成特性を有しないようだからである。
【０５３６】
ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２の抗脈管形成特性とともにＭＥＴＨ１およびＭＥ
ＴＨ２におけるＴＳＰ反復の存在のために、これらのタンパク質は、ＴＳＰスー
パーファミリーのメンバーを本来保存していた。それにもかかわらず、ＭＥＴＨ
１およびＭＥＴＨ２は、他のＴＳＰに対するさらなる相同性を有さず、そして事
実、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２に対する類似性は、Ｉ型反復に対して制限される。
さらに、このタンパク質はまた、ＡＤＡＭのメンバーに対して強力な配列および
構造的な相同性を有する。これらの特徴は、Ｋｕｎｏおよび同僚がＭＥＴＨ１の
マウスホモログに対してＡＤＡＭＴＳと命名することを導いた（Ｋｕｎｏ，Ｋ．
，ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：５５６−５６２（１９９７））。ｐＮ
ＰＩの最近の同定および本明細書に記載されたこのタンパク質に対するその顕著
な配列相同性は、メタロスポンジンと命名されたサブファミリーにグループ分け
するようこれら３つ全てのタンパク質を促す。この時、ｐＮＩＰが、抗脈管特性
を有するか否か、またはＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２が、α１（１）プ
ロコラーゲンのアミノ末端プロペプチドの切断に関与するか否かは明らかではな
い。
ＴＨ２におけるＴＳＰ反復の存在のために、これらのタンパク質は、ＴＳＰスー
パーファミリーのメンバーを本来保存していた。それにもかかわらず、ＭＥＴＨ
１およびＭＥＴＨ２は、他のＴＳＰに対するさらなる相同性を有さず、そして事
実、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２に対する類似性は、Ｉ型反復に対して制限される。
さらに、このタンパク質はまた、ＡＤＡＭのメンバーに対して強力な配列および
構造的な相同性を有する。これらの特徴は、Ｋｕｎｏおよび同僚がＭＥＴＨ１の
マウスホモログに対してＡＤＡＭＴＳと命名することを導いた（Ｋｕｎｏ，Ｋ．
，ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：５５６−５６２（１９９７））。ｐＮ
ＰＩの最近の同定および本明細書に記載されたこのタンパク質に対するその顕著
な配列相同性は、メタロスポンジンと命名されたサブファミリーにグループ分け
するようこれら３つ全てのタンパク質を促す。この時、ｐＮＩＰが、抗脈管特性
を有するか否か、またはＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２が、α１（１）プ
ロコラーゲンのアミノ末端プロペプチドの切断に関与するか否かは明らかではな
い。
【０５３７】
（実施例２：ノーザンブロット分析およびサザンブロット分析）
全ＲＮＡを、グアニジウム―イソチオシアネート抽出により、以前に記載され
るように（Ｃｈｏｍｃｚｙｎｓｋｉ，Ｐ．およびＳａｃｃｈｉ，Ｎ．，Ａｎａｌ
Ｂｉｏｃｈｅｍ．１６２：１５６−１５９（１９８７））、細胞から精製した。
ポリ（Ａ）＋ＲＮＡを、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ（ＢＭＢ，Ｉ
ｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）キットを使用して、製造者の条件に従って抽出
した。他のポリ（Ａ）＋ＲＮＡブロットをＣｌｏｎｔｅｃｈ（Ｐａｌｏ Ａｌｔ
ｏ，ＣＡ）から購入した。プレハイブリダイゼーションを以下を含有する溶液中
で１２〜１８時間４２℃で実行した：５０％ホルムアミド、６×ＳＳＰＥ、１×
デンハルト溶液、０．１％ＳＤＳおよび１００μｇ／ｍｌの熱変性サケ精子ＤＮ
Ａ。標識されたｃＤＮＡプローブを用いたハイブリダイゼーションを１２〜１８
時間、４２℃で進めた。ＴＳＰ１およびＭＥＴＨ１プローブは、ヒトｃＤＮＡ全
体に対応する。ＭＥＴＨ２プローブは、ヒトｃＤＮＡ由来のＫｐｎＩ−ＥｃｏＲ
Ｉフラグメントに対応した。グリセルアルデヒド−３−ホスフェート−デヒドロ
ゲナーゼ（ＧＰＤＨ）の１．３ＫｂのＰｓｔＩフラグメントを使用して、ロード
効率および移入効率を標準化した。膜をＫｏｄａｋ Ｂｉｏｍａｘ ＭＳフィル
ム（Ｋｏｄａｋ，Ｎｅｗ Ｈａｖｅｎ，ＣＴ）に曝露した。
るように（Ｃｈｏｍｃｚｙｎｓｋｉ，Ｐ．およびＳａｃｃｈｉ，Ｎ．，Ａｎａｌ
Ｂｉｏｃｈｅｍ．１６２：１５６−１５９（１９８７））、細胞から精製した。
ポリ（Ａ）＋ＲＮＡを、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ（ＢＭＢ，Ｉ
ｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）キットを使用して、製造者の条件に従って抽出
した。他のポリ（Ａ）＋ＲＮＡブロットをＣｌｏｎｔｅｃｈ（Ｐａｌｏ Ａｌｔ
ｏ，ＣＡ）から購入した。プレハイブリダイゼーションを以下を含有する溶液中
で１２〜１８時間４２℃で実行した：５０％ホルムアミド、６×ＳＳＰＥ、１×
デンハルト溶液、０．１％ＳＤＳおよび１００μｇ／ｍｌの熱変性サケ精子ＤＮ
Ａ。標識されたｃＤＮＡプローブを用いたハイブリダイゼーションを１２〜１８
時間、４２℃で進めた。ＴＳＰ１およびＭＥＴＨ１プローブは、ヒトｃＤＮＡ全
体に対応する。ＭＥＴＨ２プローブは、ヒトｃＤＮＡ由来のＫｐｎＩ−ＥｃｏＲ
Ｉフラグメントに対応した。グリセルアルデヒド−３−ホスフェート−デヒドロ
ゲナーゼ（ＧＰＤＨ）の１．３ＫｂのＰｓｔＩフラグメントを使用して、ロード
効率および移入効率を標準化した。膜をＫｏｄａｋ Ｂｉｏｍａｘ ＭＳフィル
ム（Ｋｏｄａｋ，Ｎｅｗ Ｈａｖｅｎ，ＣＴ）に曝露した。
【０５３８】
サザンブロットについては、ヒトゲノムＤＮＡ（Ｐｒｏｍｅｇａ（Ｍａｄｉｓ
ｏｎ，ＷＩ）から購入）を６５℃で１０分間加熱し、そしてＥｃｏＲＩおよびＰ
ｓｔＩを用いて一晩３７℃で消化した。５μｇの消化されたＤＮＡを１％アガロ
ースゲルで分離し、ｎｙｔｒａｎ膜に移して、そして紫外線で架橋させた。ｃＤ
ＮＡプローブ、ならびにプレハイブリダイゼーションおよびハイブリダイゼーシ
ョン条件は、ノーザンブロットについて記載された条件と同一であった。ブロッ
トをハイストリンジェンシー（５０℃にて、０．２×ＳＳＣ、０．２％ＳＤＳ）
で洗浄した。
ｏｎ，ＷＩ）から購入）を６５℃で１０分間加熱し、そしてＥｃｏＲＩおよびＰ
ｓｔＩを用いて一晩３７℃で消化した。５μｇの消化されたＤＮＡを１％アガロ
ースゲルで分離し、ｎｙｔｒａｎ膜に移して、そして紫外線で架橋させた。ｃＤ
ＮＡプローブ、ならびにプレハイブリダイゼーションおよびハイブリダイゼーシ
ョン条件は、ノーザンブロットについて記載された条件と同一であった。ブロッ
トをハイストリンジェンシー（５０℃にて、０．２×ＳＳＣ、０．２％ＳＤＳ）
で洗浄した。
【０５３９】
ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２の発現パターンを成体および胚組織において試験
した。ノーザンブロット分析を、ハイストリンジェンシー条件下で、ヒト組織由
来のポリ（Ａ）＋ＲＮＡを含むブロットを用いて実行した。ＭＥＴＨ１およびＭ
ＥＴＨ２の転写物は、それぞれ単一のバンド４．６Ｋｂおよび３．７Ｋｂである
ことを明らかにした。充分なＭＥＴＨ１ ｍＲＮＡ発現を、副腎、心臓、胎盤、
次いで骨格筋、甲状腺および胃において観察した。分析された胚組織から、腎臓
は、ＭＥＴＨ１ｍＲＮＡの最も高い発現を示した。それにも関わらず、ＭＥＴＨ
１ｍＲＮＡののより弱い発現が、分析された全ての組織で見られた。ＭＥＴＨ２
ｍＲＮＡの分布は、より限られており、そしてＭＥＴＨ１の分布より弱かった。
胚および成体の両方において、最も高い発現が肺において見られた。興味深いこ
とに、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２の発現は、重複していないようである。組み
合わせて、構造類似性およびそれらの発現パターンは、機能的重複性を示唆する
が、異なる転写調節も示唆する。同一ブッロトにおけるＴＳＰ１転写物の発現レ
ベルもまた、比較の目的のために分析した。ＴＳＰ１ｍＲＮＡの最も高い発現は
、成体胎盤および分析された全ての胚組織において見られた。ＭＥＴＨ１および
ＭＥＴＨ２と対照的に、本発明者らは、試験された全ての他の組織において一定
レベルのＴＳＰ１転写を観察した。
した。ノーザンブロット分析を、ハイストリンジェンシー条件下で、ヒト組織由
来のポリ（Ａ）＋ＲＮＡを含むブロットを用いて実行した。ＭＥＴＨ１およびＭ
ＥＴＨ２の転写物は、それぞれ単一のバンド４．６Ｋｂおよび３．７Ｋｂである
ことを明らかにした。充分なＭＥＴＨ１ ｍＲＮＡ発現を、副腎、心臓、胎盤、
次いで骨格筋、甲状腺および胃において観察した。分析された胚組織から、腎臓
は、ＭＥＴＨ１ｍＲＮＡの最も高い発現を示した。それにも関わらず、ＭＥＴＨ
１ｍＲＮＡののより弱い発現が、分析された全ての組織で見られた。ＭＥＴＨ２
ｍＲＮＡの分布は、より限られており、そしてＭＥＴＨ１の分布より弱かった。
胚および成体の両方において、最も高い発現が肺において見られた。興味深いこ
とに、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２の発現は、重複していないようである。組み
合わせて、構造類似性およびそれらの発現パターンは、機能的重複性を示唆する
が、異なる転写調節も示唆する。同一ブッロトにおけるＴＳＰ１転写物の発現レ
ベルもまた、比較の目的のために分析した。ＴＳＰ１ｍＲＮＡの最も高い発現は
、成体胎盤および分析された全ての胚組織において見られた。ＭＥＴＨ１および
ＭＥＴＨ２と対照的に、本発明者らは、試験された全ての他の組織において一定
レベルのＴＳＰ１転写を観察した。
【０５４０】
細胞型分布もまた、ポリ（Ａ）＋ＲＮＡのノーザンブロット分析により研究し
た。ＭＥＴＨ１ ｍＲＮＡは、皮膚繊維芽細胞、脈管平滑筋、子宮内膜間質部細
胞、および２つの癌細胞株（ＨｅＬａおよびＧ６３１）、腺癌および黒色腫のそ
れぞれにおいて、低レベルで検出可能であった。ＭＥＴＨ２ ｍＲＮＡを、ＳＷ
４８０（結腸癌細胞株）でのみ検出したが、分析されたどのほかの細胞株でも一
次系統でも、発現は見られなかった。
た。ＭＥＴＨ１ ｍＲＮＡは、皮膚繊維芽細胞、脈管平滑筋、子宮内膜間質部細
胞、および２つの癌細胞株（ＨｅＬａおよびＧ６３１）、腺癌および黒色腫のそ
れぞれにおいて、低レベルで検出可能であった。ＭＥＴＨ２ ｍＲＮＡを、ＳＷ
４８０（結腸癌細胞株）でのみ検出したが、分析されたどのほかの細胞株でも一
次系統でも、発現は見られなかった。
【０５４１】
脈管形成因子および抗脈管形成因子の群が、特定の器官において脈管ネットワ
ーク形成を調節するという可能性は、しばしば真実でありそうな仮説として議論
されてきたが、未だ証明されていない。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２の発現パタ
ーン（これらは明確に異なり、そしてほとんど非重複である）は、少なくとも全
体のレベルを考慮して、難解である。ＴＳＰ１およびＴＳＰ２もまた、同一の構
造、高レベルのアミノ酸類似性を共有するが、これらの発現パターンは有意に異
なる（Ｉｒｕｅｌａ−Ａｒｉｓｐｅ，Ｍ．Ｌ．，Ｄｅｖ．Ｄｙｎ．１９７：４０
−５６（１９９３））。以前に示唆されたように、この差異は、ＴＳＰ１および
ＴＳＰ２のプロモーターにおける異なるｃｉｓ作用要素および異なる調節機構に
基づくようである。ＭＥＴＨ１および２についてのプロモーターは特徴付けられ
ていないが、これらは各遺伝子の調節に関して独特の特徴を提供するようである
。それにもかかわらず、実証された抗脈管形成特性を有する１つのモチーフ（抗
脈管形成／Ｉ型反復）が、異なる組織特異性を有するいくつかのタンパク質にお
いて存在するという可能性は、興味深い。あるいは、同一ファミリーの密接に関
連したメンバー間の配列の小さな差異は、機能的冗長性を超える重要性を有し得
る。ＴＳＰ１およびＴＳＰ２の場合、顕著な構造類似性およびおそらく機能的に
共通する抗脈管形成特性を有することを除いて、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２はまた
、それら自身の機能であって、かつそれらの類似性の関係によりおそらく共有さ
れない機能を示すようである。このことは、これらの遺伝子についての２つのノ
ックアウトの結果で明らかになった。ＴＳＰ１ヌル動物は、主として肺障害（Ｌ
ａｗｌｅｒ，Ｊ．ら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０１：９８２−９９２（
１９９８））、および２番目に脈管異常を示したが、特定の病理学的設定下、ま
たは制限された組の器官においてのみであった。対照的に、ＴＳＲ２ノックアウ
トマウスは、予測不能なコラーゲン凝集異常を示し、皮膚、腱、および骨に対し
、それに続く結果を示した（Ｋｙｒｉａｋｉｄｅｓ，Ｔ．Ｒ．ら，Ｊ Ｃｅｌｌ
Ｂｉｏｌ．１４０：４１９−４３０（１９９８））。さらに、これらの動物は
また、真皮における毛細管密度の全体的な増加を有するようである。メタロスポ
ンジン（ｍｅｔａｌｌｏｓｐｏｎｄｉｎ）ファミリーの新しく記載されるメンバ
ー間の類似点がどのように機能的に翻訳されるのかは分かっていない。明らかに
は、ｐＮＩＰが、Ｉ型プロコラーゲンのＮ末端を切断することにより、活性なタ
ンパク質分解活性を示すことが示されている（Ｃｏｌｉｄｇｅ，Ａ．ら、Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９４：２３７４−２３７９（１９９７
））。
ーク形成を調節するという可能性は、しばしば真実でありそうな仮説として議論
されてきたが、未だ証明されていない。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２の発現パタ
ーン（これらは明確に異なり、そしてほとんど非重複である）は、少なくとも全
体のレベルを考慮して、難解である。ＴＳＰ１およびＴＳＰ２もまた、同一の構
造、高レベルのアミノ酸類似性を共有するが、これらの発現パターンは有意に異
なる（Ｉｒｕｅｌａ−Ａｒｉｓｐｅ，Ｍ．Ｌ．，Ｄｅｖ．Ｄｙｎ．１９７：４０
−５６（１９９３））。以前に示唆されたように、この差異は、ＴＳＰ１および
ＴＳＰ２のプロモーターにおける異なるｃｉｓ作用要素および異なる調節機構に
基づくようである。ＭＥＴＨ１および２についてのプロモーターは特徴付けられ
ていないが、これらは各遺伝子の調節に関して独特の特徴を提供するようである
。それにもかかわらず、実証された抗脈管形成特性を有する１つのモチーフ（抗
脈管形成／Ｉ型反復）が、異なる組織特異性を有するいくつかのタンパク質にお
いて存在するという可能性は、興味深い。あるいは、同一ファミリーの密接に関
連したメンバー間の配列の小さな差異は、機能的冗長性を超える重要性を有し得
る。ＴＳＰ１およびＴＳＰ２の場合、顕著な構造類似性およびおそらく機能的に
共通する抗脈管形成特性を有することを除いて、ＴＳＰ１およびＴＳＰ２はまた
、それら自身の機能であって、かつそれらの類似性の関係によりおそらく共有さ
れない機能を示すようである。このことは、これらの遺伝子についての２つのノ
ックアウトの結果で明らかになった。ＴＳＰ１ヌル動物は、主として肺障害（Ｌ
ａｗｌｅｒ，Ｊ．ら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０１：９８２−９９２（
１９９８））、および２番目に脈管異常を示したが、特定の病理学的設定下、ま
たは制限された組の器官においてのみであった。対照的に、ＴＳＲ２ノックアウ
トマウスは、予測不能なコラーゲン凝集異常を示し、皮膚、腱、および骨に対し
、それに続く結果を示した（Ｋｙｒｉａｋｉｄｅｓ，Ｔ．Ｒ．ら，Ｊ Ｃｅｌｌ
Ｂｉｏｌ．１４０：４１９−４３０（１９９８））。さらに、これらの動物は
また、真皮における毛細管密度の全体的な増加を有するようである。メタロスポ
ンジン（ｍｅｔａｌｌｏｓｐｏｎｄｉｎ）ファミリーの新しく記載されるメンバ
ー間の類似点がどのように機能的に翻訳されるのかは分かっていない。明らかに
は、ｐＮＩＰが、Ｉ型プロコラーゲンのＮ末端を切断することにより、活性なタ
ンパク質分解活性を示すことが示されている（Ｃｏｌｉｄｇｅ，Ａ．ら、Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９４：２３７４−２３７９（１９９７
））。
【０５４２】
機能的に興味深い第２の領域は、ディスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉ
ｎ）ドメインに対応する。このドメインは、αＩＩｂβ３に結合して凝固をブロ
ックする血小板相互作用を阻害することが示されてきたヘビ毒メタロプロテアー
ゼの関連メンバーにおいてより完全に特徴付けられた（Ｐｆａｆｆ，Ｍ．ら，Ｃ
ｅｌｌ Ａｄｈｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ．２：４９１−５０１（１９９４）；Ｕｓａ
ｍｉ，Ｙ．ら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２０
１：３３１−３３９（１９９４））。ディスインテグリンモチーフは、１３から
１５のドメインから構成され、これらのドメインは、しばしばＲＧＤまたはアス
パラギン酸の位置で負に荷電した残基を含む。ＲＧＤまたは等価物は、インテグ
リンに結合し、そしてアンタゴニストまたはシグナル伝達リガンドとして作用す
る（Ｗｏｌｓｂｅｒｇ，Ｔ．Ｇ．およびＷｈｉｔｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｄｅｖｅｌｏｐ
ｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １８０：３８９−４０１（１９９６））。ＭＥ
ＴＨ２は、ディスインテグリンドメインに対してアミノ末端に位置するＲＧＤ配
列を有するが、ＭＥＴＨ１は有さない。さらに、両方の分子は、ディスインテグ
リンモチーフ内で、完全ではないが比較的高度なシステインの保存性を示す。こ
のことは、この領域の３次元構造における重要な役割およびインテグリンと相互
作用する能力を示す。さらに、これらのドメインのいくつかは、機能的接着分子
（特に膜管通領域を有する機能的接着分子）として作用することが示されてきた
（Ｗｏｌｓｂｅｒｇ，Ｔ．Ｇ．およびＷｈｉｔｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｄｅｖｅｌｏｐｍ
ｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １８０：３８９−４０１（１９９６））。このこ
とはＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２には当てはまらないようである。なぜならば、
これらのタンパク質の両方は分泌されるようだからである。
ｎ）ドメインに対応する。このドメインは、αＩＩｂβ３に結合して凝固をブロ
ックする血小板相互作用を阻害することが示されてきたヘビ毒メタロプロテアー
ゼの関連メンバーにおいてより完全に特徴付けられた（Ｐｆａｆｆ，Ｍ．ら，Ｃ
ｅｌｌ Ａｄｈｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ．２：４９１−５０１（１９９４）；Ｕｓａ
ｍｉ，Ｙ．ら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２０
１：３３１−３３９（１９９４））。ディスインテグリンモチーフは、１３から
１５のドメインから構成され、これらのドメインは、しばしばＲＧＤまたはアス
パラギン酸の位置で負に荷電した残基を含む。ＲＧＤまたは等価物は、インテグ
リンに結合し、そしてアンタゴニストまたはシグナル伝達リガンドとして作用す
る（Ｗｏｌｓｂｅｒｇ，Ｔ．Ｇ．およびＷｈｉｔｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｄｅｖｅｌｏｐ
ｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １８０：３８９−４０１（１９９６））。ＭＥ
ＴＨ２は、ディスインテグリンドメインに対してアミノ末端に位置するＲＧＤ配
列を有するが、ＭＥＴＨ１は有さない。さらに、両方の分子は、ディスインテグ
リンモチーフ内で、完全ではないが比較的高度なシステインの保存性を示す。こ
のことは、この領域の３次元構造における重要な役割およびインテグリンと相互
作用する能力を示す。さらに、これらのドメインのいくつかは、機能的接着分子
（特に膜管通領域を有する機能的接着分子）として作用することが示されてきた
（Ｗｏｌｓｂｅｒｇ，Ｔ．Ｇ．およびＷｈｉｔｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｄｅｖｅｌｏｐｍ
ｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １８０：３８９−４０１（１９９６））。このこ
とはＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２には当てはまらないようである。なぜならば、
これらのタンパク質の両方は分泌されるようだからである。
【０５４３】
（実施例３：組換えタンパク質の発現および精製）
Ｈｉｓタグ化融合タンパク質の発現のための組換え構築物を、細菌での発現の
ために作製した。ＭＥＴＨ１ ｎｔ６０５〜１８３９（ＡＴＧから）を、Ｂａｍ
ＨＩおよびＰｓｔＩ部位を含有するプライマーを用いてポリメラーゼ連鎖反応に
より増幅し、そしてｐＲＳＥＴベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ， Ｃａｒｌｓ
ｂａｄ， ＣＡ）にサブクローニングした。この構築物をフレームおよび配列忠
実度を評価するために配列決定し、次いでＢＬ２１；ＤＥ３ Ｅ．Ｃｏｌｉ株（
Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，
ＣＡ）に形質転換した。Ｎｉ−ＮＴＡカラムのアフィニティークロマトグラフィ
ーにより精製を行った。組換えタンパク質をＰＢＳ中の５００ｍＭイミダゾール
で溶出した。組換えタンパク質を含む画分を、無フェノール−レッドＤＭＥＭに
対して透析し、そして抗血清を作製するために使用した。
ために作製した。ＭＥＴＨ１ ｎｔ６０５〜１８３９（ＡＴＧから）を、Ｂａｍ
ＨＩおよびＰｓｔＩ部位を含有するプライマーを用いてポリメラーゼ連鎖反応に
より増幅し、そしてｐＲＳＥＴベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ， Ｃａｒｌｓ
ｂａｄ， ＣＡ）にサブクローニングした。この構築物をフレームおよび配列忠
実度を評価するために配列決定し、次いでＢＬ２１；ＤＥ３ Ｅ．Ｃｏｌｉ株（
Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，
ＣＡ）に形質転換した。Ｎｉ−ＮＴＡカラムのアフィニティークロマトグラフィ
ーにより精製を行った。組換えタンパク質をＰＢＳ中の５００ｍＭイミダゾール
で溶出した。組換えタンパク質を含む画分を、無フェノール−レッドＤＭＥＭに
対して透析し、そして抗血清を作製するために使用した。
【０５４４】
抗血清を組換えタンパク質（５００μｇ／ｍｇ）とフロイントアジュバントと
の１：１混合物の筋内注射により生成した。８個体の動物（５個体のモルモット
および３個体のウサギを含む）を、１５日ごとに３回のサイクルで注射した。３
回目の注射の後、血清を抗ＭＥＴＨ１抗体の存在について評価し、モルモットの
うち２個体のみが有意な力価を示した。ウエスタンブロットで組換えタンパク質
が認識する抗体が、ＭＥＴＨ１タンパク質を細胞抽出物から免疫沈降し得、そし
て免疫淡当細胞化学によりこのタンパク質を認識し得た。免疫前血清を、常にコ
ントロールとして含めた。モルモット抗体のうちの１つはまた、ＭＥＴＨ２を認
識し得た。
の１：１混合物の筋内注射により生成した。８個体の動物（５個体のモルモット
および３個体のウサギを含む）を、１５日ごとに３回のサイクルで注射した。３
回目の注射の後、血清を抗ＭＥＴＨ１抗体の存在について評価し、モルモットの
うち２個体のみが有意な力価を示した。ウエスタンブロットで組換えタンパク質
が認識する抗体が、ＭＥＴＨ１タンパク質を細胞抽出物から免疫沈降し得、そし
て免疫淡当細胞化学によりこのタンパク質を認識し得た。免疫前血清を、常にコ
ントロールとして含めた。モルモット抗体のうちの１つはまた、ＭＥＴＨ２を認
識し得た。
【０５４５】
哺乳動物発現については、全長ＭＥＴＨ１ ＤＮＡおよびＭＥＴＨ２ ｃＤＮ
ＡをｐｃＤＮＡ３．１発現ベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にクローン化した
。このベクターは、ＣＭＶプロモーターの調節制御下にある。クローニングを実
施し、その結果構築物がそれ自身の終止コドンを含んだ。
ＡをｐｃＤＮＡ３．１発現ベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にクローン化した
。このベクターは、ＣＭＶプロモーターの調節制御下にある。クローニングを実
施し、その結果構築物がそれ自身の終止コドンを含んだ。
【０５４６】
組換えタンパク質を、標準的なリン酸カルシウム沈澱を使用して、２９３Ｔ細
胞における発現ベクターの一次的トランスフェクションにより得た。トランスフ
ェクションの際に、細胞を６〜１６時間血清含有培地中でインキュベートし、次
いで無血清培地に換えて３６時間組換えタンパク質の蓄積のためにインキュベー
トした。コントロールとして、ｐｃＤＮＡ３．１ベクター単独を、並行プレート
中で一時的にトランスフェクトした。タンパク質の精製は３０％硫酸アンモニウ
ム沈澱、次いでＨＳ緩衝液（ＤＢ＝１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣ
ｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ2および１ｍＭ ＭｇＳＯ４）での透析を含んだ。次いで
サンプルをヘパリン親和性クロマトグラフィーに供した。ヘパリンカラムからの
溶出を、５５０ｍＭ ＮａＣｌを含有するＨＳ緩衝液を用いて達成した。次いで
画分を５〜３０％スクロース勾配にロードし、そして４８Ｋで回転させた。スク
ロース勾配での分離を、ウエスタンブロット法により評価し、そして純度をクマ
シーブルーおよび硝酸銀染色により決定した。
胞における発現ベクターの一次的トランスフェクションにより得た。トランスフ
ェクションの際に、細胞を６〜１６時間血清含有培地中でインキュベートし、次
いで無血清培地に換えて３６時間組換えタンパク質の蓄積のためにインキュベー
トした。コントロールとして、ｐｃＤＮＡ３．１ベクター単独を、並行プレート
中で一時的にトランスフェクトした。タンパク質の精製は３０％硫酸アンモニウ
ム沈澱、次いでＨＳ緩衝液（ＤＢ＝１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣ
ｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ2および１ｍＭ ＭｇＳＯ４）での透析を含んだ。次いで
サンプルをヘパリン親和性クロマトグラフィーに供した。ヘパリンカラムからの
溶出を、５５０ｍＭ ＮａＣｌを含有するＨＳ緩衝液を用いて達成した。次いで
画分を５〜３０％スクロース勾配にロードし、そして４８Ｋで回転させた。スク
ロース勾配での分離を、ウエスタンブロット法により評価し、そして純度をクマ
シーブルーおよび硝酸銀染色により決定した。
【０５４７】
組換えタンパク質の生成を最初に細菌で行った。精製の際に補助するためのア
ミノ末端Ｈｉｓタグを含有するＭＥＴＨ１発現ベクターを、作製した。全てのＭ
ＥＴＨ１についてコードされる生じたタンパク質は、プロドメインを除く配列を
翻訳した。Ｎｉ++ビーズでのアフィニティークロマトグラフィーは、６８ｋＤの
独特のバンドを示した。単離および精製を常に変性条件化で行い、そしてタンパ
ク質を再度折りたたむ試みは、ほとんど成功しなかった。このことは、多数のシ
ステインに付随する有意な数の分子内ジスルフィド結合におそらく起因する。そ
れにも関わらずこのタンパク質を使用して抗体を作製し得る。注射された８個体
の動物から、２個体だけが免疫応答を有し得、そして特異的抗体を生成し得た。
これは、種にわたる高い保存性におそらく起因する。両方の抗体が、Ｎｉ++カラ
ムでの精製の前後の組換えＭＥＴＨ１タンパク質を認識した。この抗体もまた使
用して、細胞溶解産物のウエスタンブロットにおいてタンパク質の発現を評価し
得た。約１０５〜１１０ｋＤの単一のバンドを、間質繊維芽細胞および平滑筋細
胞において検出した。
ミノ末端Ｈｉｓタグを含有するＭＥＴＨ１発現ベクターを、作製した。全てのＭ
ＥＴＨ１についてコードされる生じたタンパク質は、プロドメインを除く配列を
翻訳した。Ｎｉ++ビーズでのアフィニティークロマトグラフィーは、６８ｋＤの
独特のバンドを示した。単離および精製を常に変性条件化で行い、そしてタンパ
ク質を再度折りたたむ試みは、ほとんど成功しなかった。このことは、多数のシ
ステインに付随する有意な数の分子内ジスルフィド結合におそらく起因する。そ
れにも関わらずこのタンパク質を使用して抗体を作製し得る。注射された８個体
の動物から、２個体だけが免疫応答を有し得、そして特異的抗体を生成し得た。
これは、種にわたる高い保存性におそらく起因する。両方の抗体が、Ｎｉ++カラ
ムでの精製の前後の組換えＭＥＴＨ１タンパク質を認識した。この抗体もまた使
用して、細胞溶解産物のウエスタンブロットにおいてタンパク質の発現を評価し
得た。約１０５〜１１０ｋＤの単一のバンドを、間質繊維芽細胞および平滑筋細
胞において検出した。
【０５４８】
ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２が、新脈管形成のレギュレーターとして機能し得
るという仮説を検定するために、組換え全長タンパク質を、哺乳動物細胞におい
て生成した。まず、正確な読み枠および分子量の評価をインビトロ翻訳によって
試験した。ＭＥＴＨ−１オープンリーディングフレームの翻訳は、１１０ｋＤの
タンパク質を示した。これは、ｃＤＮＡ配列の翻訳により推定されたサイズより
わずかに高い。以前に示したように、２つの推定グリコシル化部位があり、タン
パク質の高い方のサイズは、糖残基の付加に起因すると思われる。同様に、ＭＥ
ＴＨ２もまた、その推定サイズよりもわずかに高く、９８ｋＤタンパク質を示し
た。
るという仮説を検定するために、組換え全長タンパク質を、哺乳動物細胞におい
て生成した。まず、正確な読み枠および分子量の評価をインビトロ翻訳によって
試験した。ＭＥＴＨ−１オープンリーディングフレームの翻訳は、１１０ｋＤの
タンパク質を示した。これは、ｃＤＮＡ配列の翻訳により推定されたサイズより
わずかに高い。以前に示したように、２つの推定グリコシル化部位があり、タン
パク質の高い方のサイズは、糖残基の付加に起因すると思われる。同様に、ＭＥ
ＴＨ２もまた、その推定サイズよりもわずかに高く、９８ｋＤタンパク質を示し
た。
【０５４９】
組換えタンパク質を、二次構造を保持するようにネイティブ条件下で２９３Ｔ
上清から単離した。推定アミノ酸配列の分析およびマウスホモログに関する公開
された情報（ＡＤＡＭＴＳ）から、両タンパク質とも、ヘパリンに結合すること
が推定され、そして精製のためにアフィニティークロマトグラフィーを使用した
。ＭＥＴＨ１、ＭＥＴＨ２およびベクターコントロールでトランスフェクトされ
た２９３Ｔ細胞の細胞層および馴化培地の両方を精製のために使用した。ＭＥＴ
Ｈ１および２の分子量は、網状赤血球溶解物由来と同様であった。推定されるよ
うに、両タンパク質とも、分泌される。興味深いことに、培地は、ＭＥＴＨ１に
関して全長（１１０ｋＤ）ならびに２つのプロセシングされた形態である８５ｋ
Ｄおよび６７ｋＤ、ならびにＭＥＴＨ２に関して７９ｋＤおよび６４ｋＤの両方
を含む。８５ｋＤ分子量および７９ｋＤ分子量は、コンセンサスなズブチリシン
（ｓｕｂｌｉｓｉｎ）部位での開裂後の両タンパク質についての推定サイズと一
致する。しかし、第２のプロセシング事象は、それぞれ６７ｋＤおよび６４ｋＤ
で観察される最も豊富なフラグメントを生成するように生じている。これらの形
態は、プロテアーゼインヒビターの不在下でさえ、精製後に安定である。精製の
ために、まず、タンパク質を硫酸アンモニウム沈殿によって濃縮し、続いて透析
した。次いで、得られたタンパク質懸濁液を、ヘパリン−セファロースカラムに
供した。組換えＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２を、５５０ｍＭ ＮａＣｌを含む洗
浄緩衝液で溶出した。画分は、プロＭＥＴＨ１ならびにプロセシングされた形態
の両方を含んだ。プロセシングが、タンパク質の機能に関連したか否か明らかで
なかったので、両方の形態をスクロース濃度勾配で分離した。全長形態およびプ
ロセシングされた形態の両方を、新脈管形成アッセイにおいて使用した。
上清から単離した。推定アミノ酸配列の分析およびマウスホモログに関する公開
された情報（ＡＤＡＭＴＳ）から、両タンパク質とも、ヘパリンに結合すること
が推定され、そして精製のためにアフィニティークロマトグラフィーを使用した
。ＭＥＴＨ１、ＭＥＴＨ２およびベクターコントロールでトランスフェクトされ
た２９３Ｔ細胞の細胞層および馴化培地の両方を精製のために使用した。ＭＥＴ
Ｈ１および２の分子量は、網状赤血球溶解物由来と同様であった。推定されるよ
うに、両タンパク質とも、分泌される。興味深いことに、培地は、ＭＥＴＨ１に
関して全長（１１０ｋＤ）ならびに２つのプロセシングされた形態である８５ｋ
Ｄおよび６７ｋＤ、ならびにＭＥＴＨ２に関して７９ｋＤおよび６４ｋＤの両方
を含む。８５ｋＤ分子量および７９ｋＤ分子量は、コンセンサスなズブチリシン
（ｓｕｂｌｉｓｉｎ）部位での開裂後の両タンパク質についての推定サイズと一
致する。しかし、第２のプロセシング事象は、それぞれ６７ｋＤおよび６４ｋＤ
で観察される最も豊富なフラグメントを生成するように生じている。これらの形
態は、プロテアーゼインヒビターの不在下でさえ、精製後に安定である。精製の
ために、まず、タンパク質を硫酸アンモニウム沈殿によって濃縮し、続いて透析
した。次いで、得られたタンパク質懸濁液を、ヘパリン−セファロースカラムに
供した。組換えＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２を、５５０ｍＭ ＮａＣｌを含む洗
浄緩衝液で溶出した。画分は、プロＭＥＴＨ１ならびにプロセシングされた形態
の両方を含んだ。プロセシングが、タンパク質の機能に関連したか否か明らかで
なかったので、両方の形態をスクロース濃度勾配で分離した。全長形態およびプ
ロセシングされた形態の両方を、新脈管形成アッセイにおいて使用した。
【０５５０】
短縮型融合タンパク質の発現のための組換え構築物は、以下の通りであった：
（１）ｐＲＳＥＴ−ＭＥＴＨ１−Ｉ型： ＭＥＴＨ１ ｎｔ １６０５−１８３
９（開始コドンから）を、以下のプライマーを用いてポリメラーゼ連鎖反応によ
って増幅した：５’−ＧＣＡ ＴＴＴ ＴＧＧ ＡＴＣ ＣＧＣ ＣＴＴ ＴＴ
Ｃ ＡＴＧ−３’（配列番号７８）および５’−ＧＴＴ ＧＴＧ ＴＧＣ ＴＧ
Ｃ ＡＧＡ ＴＴＧ ＴＴＣ Ｃ−３’（配列番号７９）。次いで、増幅された
フラグメントを、ｐＲＳＥＴベクターのＢａｍＨＩ部位およびＰｓｔＩ部位にサ
ブクローニングした；（２）ｐＧＥＸ−ＭＥＴＨ１−ＴＳＰを、ｐＲＳＥＴ−Ｍ
ＥＴＨ１−ＴＳＰ由来のＢａｍＨＩ−ＥｃｏＲＩフラグメントを、ｐＧＥＸ−５
Ｘベクター（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｐｉｓｃａｔａ
ｗａｙ，ＮＪ）のＳｍａＩ部位に、平滑末端連結により連結することにより生成
した；（３）ｐＧＥＸ−１．０−ＭＥＴＨ２：ＭＥＴＨ２ ｃＤＮＡのｎｔ ８
３８−１８１８（開始コドンから）のフラグメントを、ｐＧＥＭ−２ＴＫのＢａ
ｍＨＩ−ＥｃｏＲＩ部位に連結した。ＭＥＴＨ２フラグメントを、以下のプライ
マー：５’−ＧＡＡＡＡＡＴＧＧＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧ−３’（配列番号８
０）および５’−ＧＣＡＧＧＡＧＡＡＴＴＣＣＧＴＣＣＡＴＧ−３’（配列番号
８１）を用いてＰＣＲによって増幅し、ＢａｍＨＩおよびＥｃｏＲＩ制限部位を
生じさせた；（４）ｐＧＥＸ−ＭＥＴＨ２−ＴＳＰ：ｐＧＥＸ−１．０−ＭＥＴ
Ｈ２から単離された０．５Ｋｂ ＸｍａＩ−ＥｃｏＲＩフラグメントをｐＧＥＸ
−２ＴＫベクターのＸｍａＩおよびＥｃｏＲＩ部位にサブクローニングした。全
ての構築物を配列決定し、配列忠実度および正確なオープンリーディングフレー
ムを確証した。
（１）ｐＲＳＥＴ−ＭＥＴＨ１−Ｉ型： ＭＥＴＨ１ ｎｔ １６０５−１８３
９（開始コドンから）を、以下のプライマーを用いてポリメラーゼ連鎖反応によ
って増幅した：５’−ＧＣＡ ＴＴＴ ＴＧＧ ＡＴＣ ＣＧＣ ＣＴＴ ＴＴ
Ｃ ＡＴＧ−３’（配列番号７８）および５’−ＧＴＴ ＧＴＧ ＴＧＣ ＴＧ
Ｃ ＡＧＡ ＴＴＧ ＴＴＣ Ｃ−３’（配列番号７９）。次いで、増幅された
フラグメントを、ｐＲＳＥＴベクターのＢａｍＨＩ部位およびＰｓｔＩ部位にサ
ブクローニングした；（２）ｐＧＥＸ−ＭＥＴＨ１−ＴＳＰを、ｐＲＳＥＴ−Ｍ
ＥＴＨ１−ＴＳＰ由来のＢａｍＨＩ−ＥｃｏＲＩフラグメントを、ｐＧＥＸ−５
Ｘベクター（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｐｉｓｃａｔａ
ｗａｙ，ＮＪ）のＳｍａＩ部位に、平滑末端連結により連結することにより生成
した；（３）ｐＧＥＸ−１．０−ＭＥＴＨ２：ＭＥＴＨ２ ｃＤＮＡのｎｔ ８
３８−１８１８（開始コドンから）のフラグメントを、ｐＧＥＭ−２ＴＫのＢａ
ｍＨＩ−ＥｃｏＲＩ部位に連結した。ＭＥＴＨ２フラグメントを、以下のプライ
マー：５’−ＧＡＡＡＡＡＴＧＧＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧ−３’（配列番号８
０）および５’−ＧＣＡＧＧＡＧＡＡＴＴＣＣＧＴＣＣＡＴＧ−３’（配列番号
８１）を用いてＰＣＲによって増幅し、ＢａｍＨＩおよびＥｃｏＲＩ制限部位を
生じさせた；（４）ｐＧＥＸ−ＭＥＴＨ２−ＴＳＰ：ｐＧＥＸ−１．０−ＭＥＴ
Ｈ２から単離された０．５Ｋｂ ＸｍａＩ−ＥｃｏＲＩフラグメントをｐＧＥＸ
−２ＴＫベクターのＸｍａＩおよびＥｃｏＲＩ部位にサブクローニングした。全
ての構築物を配列決定し、配列忠実度および正確なオープンリーディングフレー
ムを確証した。
【０５５１】
組換えタンパク質を、６Ｈ−ＭＥＴＨ１（プラスミドｐＲＳＥＴ−ＭＥＴＨ１
−ＴＳＰで発現された組換えタンパク質）、ＧＳＴ−ＭＥＴＨ１（プラスミドｐ
ＧＥＸ−ＭＥＴＨＩ−ＴＳＰで発現されたタンパク質）、およびＧＳＴ−ＭＥＴ
Ｈ２（プラスミドｐＧＥＸ−ＭＥＴＨ２−ＴＳＰで発現されたタンパク質）と名
づけた。
−ＴＳＰで発現された組換えタンパク質）、ＧＳＴ−ＭＥＴＨ１（プラスミドｐ
ＧＥＸ−ＭＥＴＨＩ−ＴＳＰで発現されたタンパク質）、およびＧＳＴ−ＭＥＴ
Ｈ２（プラスミドｐＧＥＸ−ＭＥＴＨ２−ＴＳＰで発現されたタンパク質）と名
づけた。
【０５５２】
発現プラスミドを、ＢＬ２１：ＤＥ３ Ｅ．ｃｏｌｉ株（Ｓｔｒａｔａｇｅｎ
ｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）に形質転換し
、そして融合タンパク質を、製造者の推奨に従って誘導した。簡潔には、誘導細
菌ペレットをＰＢＳ中に再懸濁し、１分間氷上で超音波処理した。続いて、懸濁
液を、１％トリトンＸ−１００の存在下でＲＴで２０分間インキュベートし、そ
して４℃で遠心分離した。次いで、ヒスチジンタグ化融合タンパク質を、２０ｍ
ｌの上清を１ｍｌのビーズ（５０％スラリー）と４℃で２時間インキュベートす
ることにより、Ｎｉ−ＮＴＡビーズ（Ｑｉａｇｅｎ，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，Ｃ
Ａ）上で精製した。懸濁液をカラムに移し、そして１０ｍＭイミダゾールを含む
１０カラム容量のＰＢＳ、続いて５０ｍＭのイミダゾールを含む１０カラム容量
のＰＢＳ、そして最後に１００ｍＭのイミダゾールを含む１０カラム容量のＰＢ
Ｓで洗浄した。タンパク質を、ＰＢＳ中５００ｍＭイミダゾールで溶出した。組
換えタンパク質を含む画分を、フェノールレッド非含有ＤＭＥＭに対して透析し
た。サンプルを４℃で３０分間遠心分離したところ、タンパク質の一部は可溶性
でなく、遠心分離の間に損失した。この上清を、−７０℃で貯蔵し、そして増殖
アッセイ、角膜嚢（ｃｏｒｎｅａ ｐｏｃｋｅｔ）アッセイおよび漿尿膜（ＣＡ
Ｍ）アッセイのために使用した。
ｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）に形質転換し
、そして融合タンパク質を、製造者の推奨に従って誘導した。簡潔には、誘導細
菌ペレットをＰＢＳ中に再懸濁し、１分間氷上で超音波処理した。続いて、懸濁
液を、１％トリトンＸ−１００の存在下でＲＴで２０分間インキュベートし、そ
して４℃で遠心分離した。次いで、ヒスチジンタグ化融合タンパク質を、２０ｍ
ｌの上清を１ｍｌのビーズ（５０％スラリー）と４℃で２時間インキュベートす
ることにより、Ｎｉ−ＮＴＡビーズ（Ｑｉａｇｅｎ，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，Ｃ
Ａ）上で精製した。懸濁液をカラムに移し、そして１０ｍＭイミダゾールを含む
１０カラム容量のＰＢＳ、続いて５０ｍＭのイミダゾールを含む１０カラム容量
のＰＢＳ、そして最後に１００ｍＭのイミダゾールを含む１０カラム容量のＰＢ
Ｓで洗浄した。タンパク質を、ＰＢＳ中５００ｍＭイミダゾールで溶出した。組
換えタンパク質を含む画分を、フェノールレッド非含有ＤＭＥＭに対して透析し
た。サンプルを４℃で３０分間遠心分離したところ、タンパク質の一部は可溶性
でなく、遠心分離の間に損失した。この上清を、−７０℃で貯蔵し、そして増殖
アッセイ、角膜嚢（ｃｏｒｎｅａ ｐｏｃｋｅｔ）アッセイおよび漿尿膜（ＣＡ
Ｍ）アッセイのために使用した。
【０５５３】
ＧＳＴ融合タンパク質の精製のために、抽出物を、遠心分離によって清澄化し
、そしてＧＳＴアフィニティーカラム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）に適用した。カラ
ムを、０．１ｍＭ還元グルタチオンの存在下のＰＢＳ−１％トリトンＸ−１００
で、そして続いて０．５ｍＭ還元グルタチオンの存在下の同じ緩衝液で洗浄した
。融合タンパク質を、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５中の１０ｍＭ汗
顔グルタチオンで溶出した。タンパク質を含む画分を、ＤＭＥＭに対して透析し
、−７０℃で貯蔵し、そして増殖アッセイ、角膜嚢（ｃｏｒｎｅａ ｐｏｃｋｅ
ｔ）アッセイおよび漿尿膜（ＣＡＭ）アッセイのために使用した。
、そしてＧＳＴアフィニティーカラム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）に適用した。カラ
ムを、０．１ｍＭ還元グルタチオンの存在下のＰＢＳ−１％トリトンＸ−１００
で、そして続いて０．５ｍＭ還元グルタチオンの存在下の同じ緩衝液で洗浄した
。融合タンパク質を、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５中の１０ｍＭ汗
顔グルタチオンで溶出した。タンパク質を含む画分を、ＤＭＥＭに対して透析し
、−７０℃で貯蔵し、そして増殖アッセイ、角膜嚢（ｃｏｒｎｅａ ｐｏｃｋｅ
ｔ）アッセイおよび漿尿膜（ＣＡＭ）アッセイのために使用した。
【０５５４】
組換えタンパク質の完全性（ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ）および純度を、クーマシー
ブルーで染色した１２．５％または１５％アクリルアミドゲル中で分析した。
ブルーで染色した１２．５％または１５％アクリルアミドゲル中で分析した。
【０５５５】
ＴＳＰの第一の２つのＩ型反復を含む組換えＧＳＴ融合タンパク質をまた、機
能的アッセイにおいて使用する前に、ＤＭＥＭに対して透析した。インタクトな
ＴＳＰ１を、以前に記載のように、血小板から精製した（Ｒｏｂｅｒｔｓ、Ｄ．
Ｄ．ら、Ｊ．Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １６：２１７−２２２
（１９９４））。
能的アッセイにおいて使用する前に、ＤＭＥＭに対して透析した。インタクトな
ＴＳＰ１を、以前に記載のように、血小板から精製した（Ｒｏｂｅｒｔｓ、Ｄ．
Ｄ．ら、Ｊ．Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １６：２１７−２２２
（１９９４））。
【０５５６】
ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２ ＴＳＰドメインが新脈管形成のレギュレーター
として機能し得るという仮説を検定するために、組換え融合タンパク質を細菌に
おいて生成した。この構築物は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の第一のＴＳＰド
メインを含んだ。このドメインは、最も保存されたものであり、ＴＳＰ１の第二
のＩ型反復と５２％のアミノ酸類似性を有する（このドメインは、ＣＤ３６につ
いての推定結合部位を含む）。全ての組換えタンパク質を、できるだけ多くそれ
らの二次構造を保持するようにネイティブな条件下で単離した。６Ｈ−ＭＥＴＨ
１およびＧＳＴ−ＭＥＴＨ１はそれぞれ、ヒスチジンタグまたはＧＳＴに融合さ
れたＭＥＴＨ１の第一のＴＳＰ様ドメインを含んだ。ＭＥＴＨ１組換えタンパク
質を、精製および構造的利点のために、２つの異なるタグを用いて作製した。サ
イズにおける差異は、タグのサイズに起因する。６ｋＤａはヒスチジンであり、
そして２７ｋＤａはＧＳＴである。ＧＳＴ−ＭＥＴＨ２は、これもまたＧＳＴに
融合されたＭＥＴＨ２の第一のＴＳＰドメインを含有した。ＴＳＰ１の最後の２
つのＩ型反復に対応するフラグメント（これもまたＧＳＴに融合された）、およ
び血小板から精製されたインタクトなＴＳＰ１を陽性コントロールとして使用し
た。さらに、ＧＳＴ単独を、陰性コントロールとして全ての実験に含ませた。
として機能し得るという仮説を検定するために、組換え融合タンパク質を細菌に
おいて生成した。この構築物は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の第一のＴＳＰド
メインを含んだ。このドメインは、最も保存されたものであり、ＴＳＰ１の第二
のＩ型反復と５２％のアミノ酸類似性を有する（このドメインは、ＣＤ３６につ
いての推定結合部位を含む）。全ての組換えタンパク質を、できるだけ多くそれ
らの二次構造を保持するようにネイティブな条件下で単離した。６Ｈ−ＭＥＴＨ
１およびＧＳＴ−ＭＥＴＨ１はそれぞれ、ヒスチジンタグまたはＧＳＴに融合さ
れたＭＥＴＨ１の第一のＴＳＰ様ドメインを含んだ。ＭＥＴＨ１組換えタンパク
質を、精製および構造的利点のために、２つの異なるタグを用いて作製した。サ
イズにおける差異は、タグのサイズに起因する。６ｋＤａはヒスチジンであり、
そして２７ｋＤａはＧＳＴである。ＧＳＴ−ＭＥＴＨ２は、これもまたＧＳＴに
融合されたＭＥＴＨ２の第一のＴＳＰドメインを含有した。ＴＳＰ１の最後の２
つのＩ型反復に対応するフラグメント（これもまたＧＳＴに融合された）、およ
び血小板から精製されたインタクトなＴＳＰ１を陽性コントロールとして使用し
た。さらに、ＧＳＴ単独を、陰性コントロールとして全ての実験に含ませた。
【０５５７】
（実施例４：ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２中のＴＳＰドメインは、インビボの
新脈管形成を破壊する） （角膜ポケットアッセイ） Ｓｗｉｓｓ Ｗｅｂｓｔｅｒの雌および雄を、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ（
Ｂｏｓｔｏｎ、ＭＡ）から購入し、そしてペレットの移植用に８〜１０週齢を用
いた。角膜ポケットは、Ｋｅｎｙｏｎおよび同僚（Ｋｅｎｙｏｎ、Ｂ．Ｍ．，ら
、Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．３７：１６２５−１
６３２（１９９６））に記載のようにほとんど改変せずに実施した。要約すれば
、１０μｇの組換えｂＦＧＦプラス５ｍｇのスクラルフェートの溶液を、１０μ
ｌのＨｙｄｒｏｎ（エタノール中２００ｍｇ／ｍｌ；Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃ
ｋ、ＮＪ）および目的の組換えタンパク質（２μｇ）と混合した。次いでこの懸
濁液を、滅菌ナイロンメッシュ膜（ｓｑｕａｒｅ）（ポアサイズ５００μｍ；Ｔ
ｅｔｋｏ Ｉｎｃ．，Ｂｒｉａｒｃｌｉｆｆ Ｍａｏｒ，ＮＹ）上に塗沫し、そ
して３０分間乾燥させた。このメッシュのファイバーを引っ張り、−２０゜Ｃで
貯蔵された５００μｍ3のペレットを生成した。均一サイズのペレットを顕微鏡
下で選択し、そしてアッセイに用いた。
新脈管形成を破壊する） （角膜ポケットアッセイ） Ｓｗｉｓｓ Ｗｅｂｓｔｅｒの雌および雄を、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ（
Ｂｏｓｔｏｎ、ＭＡ）から購入し、そしてペレットの移植用に８〜１０週齢を用
いた。角膜ポケットは、Ｋｅｎｙｏｎおよび同僚（Ｋｅｎｙｏｎ、Ｂ．Ｍ．，ら
、Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．３７：１６２５−１
６３２（１９９６））に記載のようにほとんど改変せずに実施した。要約すれば
、１０μｇの組換えｂＦＧＦプラス５ｍｇのスクラルフェートの溶液を、１０μ
ｌのＨｙｄｒｏｎ（エタノール中２００ｍｇ／ｍｌ；Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃ
ｋ、ＮＪ）および目的の組換えタンパク質（２μｇ）と混合した。次いでこの懸
濁液を、滅菌ナイロンメッシュ膜（ｓｑｕａｒｅ）（ポアサイズ５００μｍ；Ｔ
ｅｔｋｏ Ｉｎｃ．，Ｂｒｉａｒｃｌｉｆｆ Ｍａｏｒ，ＮＹ）上に塗沫し、そ
して３０分間乾燥させた。このメッシュのファイバーを引っ張り、−２０゜Ｃで
貯蔵された５００μｍ3のペレットを生成した。均一サイズのペレットを顕微鏡
下で選択し、そしてアッセイに用いた。
【０５５８】
マウスはＡｖｅｒｔｉｎで麻酔した。Ｎｉｋｏｎ ＳＭＺ−Ｕ解剖顕微鏡を用
い、外科用ブレードの補助により角膜中に切開を作成した。ポケット中に単一の
ペレットを移植した。ペレット移植の５日後、角膜新脈管形成を評価し、そして
写真撮影した。
い、外科用ブレードの補助により角膜中に切開を作成した。ポケット中に単一の
ペレットを移植した。ペレット移植の５日後、角膜新脈管形成を評価し、そして
写真撮影した。
【０５５９】
（ＣＡＭアッセイ）
絨毛尿膜アッセイは、胚発達１２〜１４日のＬｅｇｈｏｒｎニワトリ胚（ＳＰ
ＡＦＡＳ、ＭＡ）に対して実施した。マトリゲル（７５０μｇ／ｍｌ）、ＶＥＧ
Ｆ（２５０ｎｇ／メッシュ）および試験されるべきタンパク質またはペプチドを
混合し、ナイロンメッシュ（ポアサイズ２５０μｍ；Ｔｅｔｋｏ Ｉｎｃ．）上
に置き、次いで３７゜Ｃで３０分間および４゜Ｃで２時間インキュベートし、重合
を誘導した。ポジティブ（マトリゲルおよびＶＥＧＦ）およびネガティブ（ＶＥ
ＧＦ単独）コントロールもまた、各ＣＡＭについて調製した。重合メッシュを、
ＣＡＭの第３の外部領域上に置き、そして２４時間インキュベートした。血管を
見えるようにするため、４００μｌのフルオレセインイソチオシアネートデキス
トラン（１０ｍｇ／ｍｌ、ＳＩＧＭＡ）をニワトリ血流中に注入した。５〜１０
分のインキュベーション後、ニワトリを３．７％ホルムアミドで５分間局所的に
固定した。次いでこのメッシュを解剖し、そしてスライド上にマウントした。フ
ルオレセイン強度を、コンピューター支援イメージプログラム（ＮＩＨ Ｉｍａ
ｇｅ １．５９）を用いて分析した。
ＡＦＡＳ、ＭＡ）に対して実施した。マトリゲル（７５０μｇ／ｍｌ）、ＶＥＧ
Ｆ（２５０ｎｇ／メッシュ）および試験されるべきタンパク質またはペプチドを
混合し、ナイロンメッシュ（ポアサイズ２５０μｍ；Ｔｅｔｋｏ Ｉｎｃ．）上
に置き、次いで３７゜Ｃで３０分間および４゜Ｃで２時間インキュベートし、重合
を誘導した。ポジティブ（マトリゲルおよびＶＥＧＦ）およびネガティブ（ＶＥ
ＧＦ単独）コントロールもまた、各ＣＡＭについて調製した。重合メッシュを、
ＣＡＭの第３の外部領域上に置き、そして２４時間インキュベートした。血管を
見えるようにするため、４００μｌのフルオレセインイソチオシアネートデキス
トラン（１０ｍｇ／ｍｌ、ＳＩＧＭＡ）をニワトリ血流中に注入した。５〜１０
分のインキュベーション後、ニワトリを３．７％ホルムアミドで５分間局所的に
固定した。次いでこのメッシュを解剖し、そしてスライド上にマウントした。フ
ルオレセイン強度を、コンピューター支援イメージプログラム（ＮＩＨ Ｉｍａ
ｇｅ １．５９）を用いて分析した。
【０５６０】
これらのアッセイで用いたペプチドは、Ｃｈｉｒｏｎ（Ｒａｌｅｉｇｈ、ＮＣ
）により合成された。配列は、アミノ酸：Ｐ−ＴＳＰ１、４３０−４４７；Ｐ−
ＭＥＴＨ１、５４９−５６３；Ｐ−ＭＥＴＨ２、５２９−５４８に対応した。
）により合成された。配列は、アミノ酸：Ｐ−ＴＳＰ１、４３０−４４７；Ｐ−
ＭＥＴＨ１、５４９−５６３；Ｐ−ＭＥＴＨ２、５２９−５４８に対応した。
【０５６１】
新脈管形成または抗新脈管形成応答の評価は、この応答を評価するために用い
られるアッセイの感度および特異性に濃密に依存する。これらフラグメントのイ
ンビボの抗新脈管形成活性を評価するために、２つの一般的かつ良く承認された
新脈管形成アッセイ：角膜ポケットおよび絨毛尿膜を用いた。角膜の視感度、接
触性、および無血管状態は、高度に有利であり、そして新生血管応答の可視化お
よび試験物質の局所適用を容易にする。既知量の血管新生因子（単数または複数
）を、角膜眼中に作成されたポケット中にペレットとして移植する。新脈管形成
インヒビターを試験するため、この分子を、同一ペレット中に刺激剤とともに移
植し、そして応答を刺激剤単独と比較する。
られるアッセイの感度および特異性に濃密に依存する。これらフラグメントのイ
ンビボの抗新脈管形成活性を評価するために、２つの一般的かつ良く承認された
新脈管形成アッセイ：角膜ポケットおよび絨毛尿膜を用いた。角膜の視感度、接
触性、および無血管状態は、高度に有利であり、そして新生血管応答の可視化お
よび試験物質の局所適用を容易にする。既知量の血管新生因子（単数または複数
）を、角膜眼中に作成されたポケット中にペレットとして移植する。新脈管形成
インヒビターを試験するため、この分子を、同一ペレット中に刺激剤とともに移
植し、そして応答を刺激剤単独と比較する。
【０５６２】
これらの実験では、ｂＦＧＦを血管形成刺激剤として用いた。組換えタンパク
質を含むペレットを、マウス角膜中に移植し、そしてそれらのｂＦＧＦで誘導さ
れる新脈管形成応答を阻害する能力を、コントロールのそれと比較した。ＧＳＴ
を含むｂＦＧＦペレットを移植したとき、新たな毛細管血管が、５日以内に、角
膜縁から角膜を横切ってかつペレット中に生育した。対照的に、ｂＦＧＦペレッ
トへのＧＳＴ−ＭＥＴＨ１またはＧＳＴ−ＭＥＴＨ２の添加は、血管成長を完全
になくした。表４は、実施した４１アッセイから得られた結果の要約を含む。血
小板から精製したインタクトなＴＳＰ１およびＧＳＴ−ＴＳＰ１をポジティブコ
ントロールとして用いた。すべてのアッセイを、同一濃度で実施し、これは、新
脈管形成の阻害において、ＭＥＨＴ１およびＭＥＨＴ２が、ＴＳＰ１のそれと類
似の効力を有することを示唆した。さらに、標準濃度の半分で用いたとき、弱い
が、認知し得る応答が観察され、用量依存的効果を示した。
質を含むペレットを、マウス角膜中に移植し、そしてそれらのｂＦＧＦで誘導さ
れる新脈管形成応答を阻害する能力を、コントロールのそれと比較した。ＧＳＴ
を含むｂＦＧＦペレットを移植したとき、新たな毛細管血管が、５日以内に、角
膜縁から角膜を横切ってかつペレット中に生育した。対照的に、ｂＦＧＦペレッ
トへのＧＳＴ−ＭＥＴＨ１またはＧＳＴ−ＭＥＴＨ２の添加は、血管成長を完全
になくした。表４は、実施した４１アッセイから得られた結果の要約を含む。血
小板から精製したインタクトなＴＳＰ１およびＧＳＴ−ＴＳＰ１をポジティブコ
ントロールとして用いた。すべてのアッセイを、同一濃度で実施し、これは、新
脈管形成の阻害において、ＭＥＨＴ１およびＭＥＨＴ２が、ＴＳＰ１のそれと類
似の効力を有することを示唆した。さらに、標準濃度の半分で用いたとき、弱い
が、認知し得る応答が観察され、用量依存的効果を示した。
【０５６３】
【表４】
ＣＡＭアッセイでは、新脈管形成応答を、新脈管形成増殖因子を含むマトリッ
クスポリマー内で生育する血管の数を測定することにより分析する。組換えＭＥ
ＴＨ１およびＭＥＴＨ２タンパク質が、ＶＥＧＦにより誘導されたＣＡＭアッセ
イにおける新生血管形成を阻害したか否かを測定するために、ＶＥＧＦおよび組
換えタンパク質を含むマトリゲルポリマーをＣＡＭ中に移植した。処理あたり３
つの異なるポリマーを含んだ実験の定量分析を図６Ａに示す。ＶＥＧＦプラス５
μｇのＧＳＴ−ＭＥＴＨ１またはＧＳＴ−ＭＥＴＨ２を含むマトリゲルポリマー
は、血管成長において８０％を超える阻害を引き起こした。同様の効力が、ＴＳ
Ｐ１のＩ型反復由来のＧＳＴ組換えタンパク質を用いて見出された。さらに、Ｍ
ＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２中のＴＳＰドメインの抗新脈管形成効果は、１５μｇ
／ｍｌのタンパク質を用いたときの血管成長の完全阻害とともに用量依存的であ
った（図６ＣおよびＤ）。同じ濃度のＧＳＴ単独は、ＶＥＧＦで刺激される新脈
管形成に対して有意な効果は有さなかった。ＭＥＴＨ−１およびＭＥＴＨ−２の
未処理形態を用いて実施されたＣＭＡアッセイは、処理形態に対する同様の結果
を提供した。処理が、機能のために必要ではないか否か、またはＣＡＭ組織が、
本発明者らのタンパク質の処理に導くか否かは、明らかではなかった。従って、
インタクトなタンパク質は、ＣＡＭ組織とともに２４時間インキュベートされ、
ウェスタンブロットで、このタンパク質を評価した。これらの結果は、ＣＡＭ組
織が、６８ｋＤ ＭＥＴＨ−１処理タンパク質を生成し得たことを示す。
クスポリマー内で生育する血管の数を測定することにより分析する。組換えＭＥ
ＴＨ１およびＭＥＴＨ２タンパク質が、ＶＥＧＦにより誘導されたＣＡＭアッセ
イにおける新生血管形成を阻害したか否かを測定するために、ＶＥＧＦおよび組
換えタンパク質を含むマトリゲルポリマーをＣＡＭ中に移植した。処理あたり３
つの異なるポリマーを含んだ実験の定量分析を図６Ａに示す。ＶＥＧＦプラス５
μｇのＧＳＴ−ＭＥＴＨ１またはＧＳＴ−ＭＥＴＨ２を含むマトリゲルポリマー
は、血管成長において８０％を超える阻害を引き起こした。同様の効力が、ＴＳ
Ｐ１のＩ型反復由来のＧＳＴ組換えタンパク質を用いて見出された。さらに、Ｍ
ＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２中のＴＳＰドメインの抗新脈管形成効果は、１５μｇ
／ｍｌのタンパク質を用いたときの血管成長の完全阻害とともに用量依存的であ
った（図６ＣおよびＤ）。同じ濃度のＧＳＴ単独は、ＶＥＧＦで刺激される新脈
管形成に対して有意な効果は有さなかった。ＭＥＴＨ−１およびＭＥＴＨ−２の
未処理形態を用いて実施されたＣＭＡアッセイは、処理形態に対する同様の結果
を提供した。処理が、機能のために必要ではないか否か、またはＣＡＭ組織が、
本発明者らのタンパク質の処理に導くか否かは、明らかではなかった。従って、
インタクトなタンパク質は、ＣＡＭ組織とともに２４時間インキュベートされ、
ウェスタンブロットで、このタンパク質を評価した。これらの結果は、ＣＡＭ組
織が、６８ｋＤ ＭＥＴＨ−１処理タンパク質を生成し得たことを示す。
【０５６４】
ヒトＴＳＰ１の第２または第３のＩ型反復からの合成ペプチドは、インタクト
なＴＳＰ１のその抗新脈管形成効果を模倣し得る（Ｔｏｌｓｍａ、Ｓ．Ｓ．，ら
、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１２２：４９７−５１１（１９９３））。実際、１
９残基のポリペプチドは、ラット角膜におけるインビボ新生血管形成をブロック
し、かつ培養内皮細胞のｂＦＧＦで誘導される移動を阻害するに十分であること
が示された（Ｖｏｇｅｌ，Ｔら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５３：７４−
８４（１９９３））；Ｔｏｌｓｍａ，Ｓ．Ｓ．，ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．
１２２：４９７−５１１（１９９３））。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２ ＴＳＰ
ドメインについて同じことが真実であったか否かを試験するために、同じ領域由
来のペプチドを合成し、そしてそれらの抗新脈管形成活性をＣＡＭアッセイで評
価した。結果を図６Ｂに示す。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２両者のＴＳＰドメイ
ン由来のペプチドは、ＴＳＰ１のそれと同様に、ＶＥＧＦで誘導される新脈管形
成をブロックした。対照的に、スクランブルペプチドは、有意な効果は有さなか
った。
なＴＳＰ１のその抗新脈管形成効果を模倣し得る（Ｔｏｌｓｍａ、Ｓ．Ｓ．，ら
、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１２２：４９７−５１１（１９９３））。実際、１
９残基のポリペプチドは、ラット角膜におけるインビボ新生血管形成をブロック
し、かつ培養内皮細胞のｂＦＧＦで誘導される移動を阻害するに十分であること
が示された（Ｖｏｇｅｌ，Ｔら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５３：７４−
８４（１９９３））；Ｔｏｌｓｍａ，Ｓ．Ｓ．，ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．
１２２：４９７−５１１（１９９３））。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２ ＴＳＰ
ドメインについて同じことが真実であったか否かを試験するために、同じ領域由
来のペプチドを合成し、そしてそれらの抗新脈管形成活性をＣＡＭアッセイで評
価した。結果を図６Ｂに示す。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２両者のＴＳＰドメイ
ン由来のペプチドは、ＴＳＰ１のそれと同様に、ＶＥＧＦで誘導される新脈管形
成をブロックした。対照的に、スクランブルペプチドは、有意な効果は有さなか
った。
【０５６５】
（実施例５：増殖アッセイ）
ヒト真皮内皮細胞（ＨＤＥＣ）を単離し、そして１５％ウシ胎児血清、２５μ
ｇ／ｍｌ ｃＡＭＰ、および１μ／ｍｌのハイドロコルチゾン−２１−アセテー
トを補充したＥＢＭ（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）中、Ｖ
ｉｔｒｏｇｅｎTM被覆ペトリ皿上で増殖させ、そして３〜６の継代から用いた。
細胞を、０．２％ＢＳＡを含むフェノールレッドフリーのＥＢＭを用い、４８時
間、集密単層のインキュベーションにより静止状態にした。ヒト真皮線維芽細胞
は、新生児包皮からそして酵素的解離により単離した。線維芽細胞および平滑筋
細胞の両者を、１０％ウシ胎児血清を補充したＤＭＥＭ中に維持した。ヒト乳房
上皮細胞（ＨＭＥＣ）は、Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓから購入し、そして推奨される培
地（乳房上皮増殖培地、ＭＥＧＭ）中で維持した。
ｇ／ｍｌ ｃＡＭＰ、および１μ／ｍｌのハイドロコルチゾン−２１−アセテー
トを補充したＥＢＭ（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）中、Ｖ
ｉｔｒｏｇｅｎTM被覆ペトリ皿上で増殖させ、そして３〜６の継代から用いた。
細胞を、０．２％ＢＳＡを含むフェノールレッドフリーのＥＢＭを用い、４８時
間、集密単層のインキュベーションにより静止状態にした。ヒト真皮線維芽細胞
は、新生児包皮からそして酵素的解離により単離した。線維芽細胞および平滑筋
細胞の両者を、１０％ウシ胎児血清を補充したＤＭＥＭ中に維持した。ヒト乳房
上皮細胞（ＨＭＥＣ）は、Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓから購入し、そして推奨される培
地（乳房上皮増殖培地、ＭＥＧＭ）中で維持した。
【０５６６】
継代３〜６の間の静止状態ヒト真皮内皮細胞を、組換えタンパク質の存在下ま
たは非存在下で、０．２％ＢＳＡ、０．１％ウシ胎児血清および１ｎｇ／ｍｌの
ｂＦＧＦで補充したＥＢＭ中、ＶｉｔｒｏｇｅｎTM被覆２４ウェルプレート上に
プレートし、そして５％ＣＯ2で、３７゜Ｃ、４８時間インキュベートした。血管
平滑筋（ＶＳＭ）および線維芽細胞増殖アッセイには、細胞を、同じ条件下で、
しかし、ＥＢＭの代わりにＤＭＥＭを用いてインキュベートした。ヒト乳房上皮
細胞をそれらの増殖培地上でインキュベートした。［3Ｈ］−チミジン（１μＣ
ｉ／μｌ）のパルスを、回収前の最後の４時間の間に付加した。細胞を洗浄し、
そして１０％ＴＣＡ中で固定した。［3Ｈ］−チミジンの取り込みは、従前に記
載のように（Ｉｒｕｅｌａ−Ａｒｉｓｐｅ、Ｍ．Ｌ．＆ Ｓａｇｅ、Ｅ．Ｈ．，
Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５２：４１４（１９９３））、シンチレーショ
ン計数により測定した。
たは非存在下で、０．２％ＢＳＡ、０．１％ウシ胎児血清および１ｎｇ／ｍｌの
ｂＦＧＦで補充したＥＢＭ中、ＶｉｔｒｏｇｅｎTM被覆２４ウェルプレート上に
プレートし、そして５％ＣＯ2で、３７゜Ｃ、４８時間インキュベートした。血管
平滑筋（ＶＳＭ）および線維芽細胞増殖アッセイには、細胞を、同じ条件下で、
しかし、ＥＢＭの代わりにＤＭＥＭを用いてインキュベートした。ヒト乳房上皮
細胞をそれらの増殖培地上でインキュベートした。［3Ｈ］−チミジン（１μＣ
ｉ／μｌ）のパルスを、回収前の最後の４時間の間に付加した。細胞を洗浄し、
そして１０％ＴＣＡ中で固定した。［3Ｈ］−チミジンの取り込みは、従前に記
載のように（Ｉｒｕｅｌａ−Ａｒｉｓｐｅ、Ｍ．Ｌ．＆ Ｓａｇｅ、Ｅ．Ｈ．，
Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５２：４１４（１９９３））、シンチレーショ
ン計数により測定した。
【０５６７】
統計学的分析は、Ｍａｃｉｎｔｏｓｈ用のＩｎ−Ｓｔａｔ ｓｏｆｔｗａｒｅ
（Ｇｒａｐｈ Ｐａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を用いて行った。正規分布と仮定し
て、データを一元ＡＮＯＶＡにより、次いで群間の比較のためのＴ検定Ｄｕｎｎ
ｅｔｔ検定または群間の多重比較のためのスチューデント−Ｎｅｗｍａｎ−Ｋｌ
ｅｕｓ検定のいずれかで分析した。
（Ｇｒａｐｈ Ｐａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を用いて行った。正規分布と仮定し
て、データを一元ＡＮＯＶＡにより、次いで群間の比較のためのＴ検定Ｄｕｎｎ
ｅｔｔ検定または群間の多重比較のためのスチューデント−Ｎｅｗｍａｎ−Ｋｌ
ｅｕｓ検定のいずれかで分析した。
【０５６８】
ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２が新生血管形成を阻害する機構に踏み入った洞察
を得るために、内皮細胞増殖に対する精製組換え融合タンパク質の直接効果を試
験した。血清飢餓内皮細胞を、ｂＦＧＦおよびＦＣＳを含む増殖培地中にプレー
トした。組換えタンパク質（３μｇ／ｍｌ）は、プレーティングと同時に添加し
た。４０％（ＧＳＴ−ＭＥＴＨ１）、４５％（６Ｈ−ＧＳＴ）または３６％（Ｇ
ＳＴ−ＭＥＴＨ２）阻害が、ＧＳＴ単独を添加したときの有意でない効果とは対
照的に観察された。ＴＳＰ１のＩ型反復からの組換えタンパク質は、類似の阻害
効果を有していた（図７Ａ）。さらに、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２により媒介
される増殖の抑制は、図７Ｅに示されるように、用量依存的であった。この阻害
は、処置の１日後程度で観察され、そしてこの阻害効果は、中毒性ではなく、か
つ可逆的であった。なぜなら、組換えタンパク質の除去および引き続く増殖因子
単独の添加は、内皮細胞増殖の回復をもたらしたからである。
を得るために、内皮細胞増殖に対する精製組換え融合タンパク質の直接効果を試
験した。血清飢餓内皮細胞を、ｂＦＧＦおよびＦＣＳを含む増殖培地中にプレー
トした。組換えタンパク質（３μｇ／ｍｌ）は、プレーティングと同時に添加し
た。４０％（ＧＳＴ−ＭＥＴＨ１）、４５％（６Ｈ−ＧＳＴ）または３６％（Ｇ
ＳＴ−ＭＥＴＨ２）阻害が、ＧＳＴ単独を添加したときの有意でない効果とは対
照的に観察された。ＴＳＰ１のＩ型反復からの組換えタンパク質は、類似の阻害
効果を有していた（図７Ａ）。さらに、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２により媒介
される増殖の抑制は、図７Ｅに示されるように、用量依存的であった。この阻害
は、処置の１日後程度で観察され、そしてこの阻害効果は、中毒性ではなく、か
つ可逆的であった。なぜなら、組換えタンパク質の除去および引き続く増殖因子
単独の添加は、内皮細胞増殖の回復をもたらしたからである。
【０５６９】
内皮上のＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２に対する抗増殖効果の細胞特異性は、種
々の非内皮細胞に対するさらなる増殖アッセイにより評価した。増殖の有意な阻
害は、線維芽細胞または平滑筋細胞培養に対しては観察されなかった。対照的に
、これら２つの細胞型に対する有意ではないが、再現性のある増殖の刺激が観察
され得た。この結果は、組換えタンパク質調製物中の、細胞増殖の任意の可能な
非特異的インヒビターの存在を排除する。しかし、乳房上皮細胞に対して、ＭＥ
ＴＨ１およびＭＥＴＨ２は、内皮細胞に対するのと同じ程度まで細胞増殖を阻害
した。興味深いことに、ＴＳＰ１はまた、インビトロおよびトランスジェニック
モデルの両方で乳房上皮細胞増殖を抑制する。
々の非内皮細胞に対するさらなる増殖アッセイにより評価した。増殖の有意な阻
害は、線維芽細胞または平滑筋細胞培養に対しては観察されなかった。対照的に
、これら２つの細胞型に対する有意ではないが、再現性のある増殖の刺激が観察
され得た。この結果は、組換えタンパク質調製物中の、細胞増殖の任意の可能な
非特異的インヒビターの存在を排除する。しかし、乳房上皮細胞に対して、ＭＥ
ＴＨ１およびＭＥＴＨ２は、内皮細胞に対するのと同じ程度まで細胞増殖を阻害
した。興味深いことに、ＴＳＰ１はまた、インビトロおよびトランスジェニック
モデルの両方で乳房上皮細胞増殖を抑制する。
【０５７０】
ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２が、ディスインテグリンとして作用し得る可能性
は、それらの抗新脈管形成性質と一致する。明らかに、抗体を用いるαｖβ３お
よびβ１インテグリンの遮断は、発生の間および腫瘍中の両方の新生血管形成を
阻害することが示されている（Ｂｒｏｏｋｓ、Ｐ．Ｃ．，ら、Ｃｅｌｌ ８５：
６８３−６９３（１９９６）；Ｂｏｏｋｓ、Ｐ．Ｃ．，ら、Ｃｅｌｌ ９２：３
９１−４００（１９９８）；Ｓｅｎｇｅｒ、Ｄ．Ｒ．，ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ
．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９４：１３６１２−１３６１７（１９９７））。
インテグリンは、増殖および移動シグナルの両方の媒介に必須であり（Ｓｃｈｗ
ａｒｔｚ、Ｍ．Ａ．＆ Ｉｎｇｂｅｒ、Ｄ．Ｅ．，Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ
５：３８９−３９３（１９９４））、したがってこれらのシグナルの妨害は、
新脈管形成プロセスに高度に有害であり得る。新脈管形成の機能的アッセイは、
ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２中のＩ型反復のみを含む組換えタンパク質で実施し
た。
は、それらの抗新脈管形成性質と一致する。明らかに、抗体を用いるαｖβ３お
よびβ１インテグリンの遮断は、発生の間および腫瘍中の両方の新生血管形成を
阻害することが示されている（Ｂｒｏｏｋｓ、Ｐ．Ｃ．，ら、Ｃｅｌｌ ８５：
６８３−６９３（１９９６）；Ｂｏｏｋｓ、Ｐ．Ｃ．，ら、Ｃｅｌｌ ９２：３
９１−４００（１９９８）；Ｓｅｎｇｅｒ、Ｄ．Ｒ．，ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ
．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９４：１３６１２−１３６１７（１９９７））。
インテグリンは、増殖および移動シグナルの両方の媒介に必須であり（Ｓｃｈｗ
ａｒｔｚ、Ｍ．Ａ．＆ Ｉｎｇｂｅｒ、Ｄ．Ｅ．，Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ
５：３８９−３９３（１９９４））、したがってこれらのシグナルの妨害は、
新脈管形成プロセスに高度に有害であり得る。新脈管形成の機能的アッセイは、
ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２中のＩ型反復のみを含む組換えタンパク質で実施し
た。
【０５７１】
ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２の血管阻害活性に関するそれらの作用の機構は、
未知である。現在まで、本発明者らは、これらのタンパク質が、分泌されかつ内
皮細胞に結合するという証拠を有する。さらなる調査は、レセプターおよびシグ
ナル伝達機構の同定に向けて案内される。ＴＳＰ１から学んだレッスンから得ら
れるありそうな仮説は、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２の両方が、ＣＤ３６に結合
することである。最近、このスカベンジャーレセプターは、ＴＳＰ−１がその抗
新脈管形成効果を奏するシグナルの媒介に関与した（Ｄａｗｓｏｎ、Ｄ．Ｗ．，
ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１３８：７０７−７１７（１９９７））。ＣＳＶ
ＴＣＧ（配列番号８３）（Ａｓｃｈ、Ａ．Ｓ．，ら、Ｎａｔｕｒｅ ２６２：１
４３６−１４３９（１９９３）；Ｃａｔｉｍｅｌ、Ｂ．，ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．
Ｊ．２８４：２３１−２３６（１９９２））およびＧＣＱＸＲ（配列番号８４）
配列の両方が、ＣＤ３６に対する主要な結合成分として提案されている（Ｄａｗ
ｓｏｎ、Ｄ．Ｗ．，ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１３８：７０７−７１７（１
９９７））。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２は、これらの領域の両方においてほぼ
完全な保存を有する。補完的そしてまた同様の出来事は、ＭＥＴＨ１およびＭＥ
ＴＨ２のｂＦＧＦへの結合である。ヘパリンおよびｂＦＧＦへの結合が、ＴＳＰ
１の抗新脈管形成活性の一部分として提案されている（Ｇｕｏ、Ｎら、Ｊ．Ｐｅ
ｐｔｉｄｅ Ｒｅｓ．４９（１９９７））。この性質は、これもまたＭＥＴＨ１
およびＭＥＴＨ２中で保存されているＷＳＸＷＳ（配列番号８２）モチーフによ
り媒介されるようである。さらなる努力は、これらの新規タンパク質により媒介
される抗新脈管形成性質に関与するシグナルに対して、および細胞外環境のプロ
テアーゼとしてそれらの可能性に対して焦点を当てる。
未知である。現在まで、本発明者らは、これらのタンパク質が、分泌されかつ内
皮細胞に結合するという証拠を有する。さらなる調査は、レセプターおよびシグ
ナル伝達機構の同定に向けて案内される。ＴＳＰ１から学んだレッスンから得ら
れるありそうな仮説は、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２の両方が、ＣＤ３６に結合
することである。最近、このスカベンジャーレセプターは、ＴＳＰ−１がその抗
新脈管形成効果を奏するシグナルの媒介に関与した（Ｄａｗｓｏｎ、Ｄ．Ｗ．，
ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１３８：７０７−７１７（１９９７））。ＣＳＶ
ＴＣＧ（配列番号８３）（Ａｓｃｈ、Ａ．Ｓ．，ら、Ｎａｔｕｒｅ ２６２：１
４３６−１４３９（１９９３）；Ｃａｔｉｍｅｌ、Ｂ．，ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．
Ｊ．２８４：２３１−２３６（１９９２））およびＧＣＱＸＲ（配列番号８４）
配列の両方が、ＣＤ３６に対する主要な結合成分として提案されている（Ｄａｗ
ｓｏｎ、Ｄ．Ｗ．，ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１３８：７０７−７１７（１
９９７））。ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２は、これらの領域の両方においてほぼ
完全な保存を有する。補完的そしてまた同様の出来事は、ＭＥＴＨ１およびＭＥ
ＴＨ２のｂＦＧＦへの結合である。ヘパリンおよびｂＦＧＦへの結合が、ＴＳＰ
１の抗新脈管形成活性の一部分として提案されている（Ｇｕｏ、Ｎら、Ｊ．Ｐｅ
ｐｔｉｄｅ Ｒｅｓ．４９（１９９７））。この性質は、これもまたＭＥＴＨ１
およびＭＥＴＨ２中で保存されているＷＳＸＷＳ（配列番号８２）モチーフによ
り媒介されるようである。さらなる努力は、これらの新規タンパク質により媒介
される抗新脈管形成性質に関与するシグナルに対して、および細胞外環境のプロ
テアーゼとしてそれらの可能性に対して焦点を当てる。
【０５７２】
（実施例６：ＭＥＴＨ１またはＭＲＴＨ２ ｃＤＮＡクローンの寄託されたサ
ンプルからの単離） ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を寄託サンプルから単離するために２つのアプロ
ーチが使用され得る。第一に、寄託されたクローンを当業者に公知の技術（例え
ば、ベクター供給者によって提供される技術または関連の刊行物もしくは特許に
おいて提供される技術）を用いて、適切な宿主（例えば、ＸＬ−１ Ｂｌｕｅ（
Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ））に形質転換する。形質転換体を１．５％寒天プレート
（適切な選択薬剤、例えば、アンピシリンを含む）に、１プレートあたり約１５
０の形質転換体（コロニー）の密度で播種する。次いで、単一コロニーを使用し
て、当業者に周知の核酸単離技術を使用してＤＮＡを生成する。（例えば、Ｓａ
ｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏ
ｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第２版、（１９８９）、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒ
ｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ）。
ンプルからの単離） ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を寄託サンプルから単離するために２つのアプロ
ーチが使用され得る。第一に、寄託されたクローンを当業者に公知の技術（例え
ば、ベクター供給者によって提供される技術または関連の刊行物もしくは特許に
おいて提供される技術）を用いて、適切な宿主（例えば、ＸＬ−１ Ｂｌｕｅ（
Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ））に形質転換する。形質転換体を１．５％寒天プレート
（適切な選択薬剤、例えば、アンピシリンを含む）に、１プレートあたり約１５
０の形質転換体（コロニー）の密度で播種する。次いで、単一コロニーを使用し
て、当業者に周知の核酸単離技術を使用してＤＮＡを生成する。（例えば、Ｓａ
ｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏ
ｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第２版、（１９８９）、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒ
ｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ）。
【０５７３】
あるいは、配列番号１または配列番号３の両端（すなわち、クローンの５’Ｎ
Ｔおよび３’ＮＴによって囲まれる配列番号１または配列番号３の領域内）に由
来する、１７〜２０ヌクレオチドの２つのプライマーを合成し、そしてこれらを
使用して、寄託されたｃＤＮＡプラスミドをテンプレートとして使用して、ＭＥ
ＴＨ１またはＭＥＴＨ２のｃＤＮＡを増幅する。ポリメラーゼ連鎖反応を、慣用
の条件下で、例えば、０．５μｇの上記ｃＤＮＡテンプレートとの反応混合物の
２５μｌ中で実施する。好都合な反応混合物は、１．５〜５ｍＭ ＭｇＣｌ2、
０．０１％（ｗ／ｖ）ゼラチン、それぞれ２０μＭのｄＡＴＰ、ｄＣＴＰ、ｄＧ
ＴＰ、ｄＴＴＰ、２５ｐｍｏｌの各プライマーおよび０．２５ユニットのＴａｑ
ポリメラーゼである。３５サイクルのＰＣＲ（９４℃での変性を１分間；５５℃
でのアニールを１分間；７２℃での伸長を１分間）を、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅ
ｒ Ｃｅｔｕｓ自動化サーマルサイクラーを用いて実施する。増幅産物をアガロ
ースゲル電気泳動により分析し、そして予想される分子量のＤＮＡバンドを切り
出し、そして精製する。ＰＣＲ産物を、ＤＮＡ産物をサブクローニングおよび配
列決定することによって選択された配列であることを確認する。
Ｔおよび３’ＮＴによって囲まれる配列番号１または配列番号３の領域内）に由
来する、１７〜２０ヌクレオチドの２つのプライマーを合成し、そしてこれらを
使用して、寄託されたｃＤＮＡプラスミドをテンプレートとして使用して、ＭＥ
ＴＨ１またはＭＥＴＨ２のｃＤＮＡを増幅する。ポリメラーゼ連鎖反応を、慣用
の条件下で、例えば、０．５μｇの上記ｃＤＮＡテンプレートとの反応混合物の
２５μｌ中で実施する。好都合な反応混合物は、１．５〜５ｍＭ ＭｇＣｌ2、
０．０１％（ｗ／ｖ）ゼラチン、それぞれ２０μＭのｄＡＴＰ、ｄＣＴＰ、ｄＧ
ＴＰ、ｄＴＴＰ、２５ｐｍｏｌの各プライマーおよび０．２５ユニットのＴａｑ
ポリメラーゼである。３５サイクルのＰＣＲ（９４℃での変性を１分間；５５℃
でのアニールを１分間；７２℃での伸長を１分間）を、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅ
ｒ Ｃｅｔｕｓ自動化サーマルサイクラーを用いて実施する。増幅産物をアガロ
ースゲル電気泳動により分析し、そして予想される分子量のＤＮＡバンドを切り
出し、そして精製する。ＰＣＲ産物を、ＤＮＡ産物をサブクローニングおよび配
列決定することによって選択された配列であることを確認する。
【０５７４】
寄託されたクローンに存在しないかもしれないＭＥＴＨ１の遺伝子またはＭＥ
ＴＨ２遺伝子の５’非コード部分または３’非コード部分の同定のために、いく
つかの方法が利用可能である。これらの方法は、以下を含むがこれらに限定され
ない：フィルタープローブ探索、特異的プローブを使用するクローン富化、およ
び当該分野で周知である５’および３’「ＲＡＣＥ」プロトコルと類似するかま
たは同一のプロトコル。例えば、５’ＲＡＣＥに類似する方法は、所望の全長転
写物の５’末端の欠失を生成するために利用可能である（Ｆｒｏｍｏｎｔ−Ｒａ
ｃｉｎｅら、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． ２１（７）：１６８３−
１６８４（１９９３））。
ＴＨ２遺伝子の５’非コード部分または３’非コード部分の同定のために、いく
つかの方法が利用可能である。これらの方法は、以下を含むがこれらに限定され
ない：フィルタープローブ探索、特異的プローブを使用するクローン富化、およ
び当該分野で周知である５’および３’「ＲＡＣＥ」プロトコルと類似するかま
たは同一のプロトコル。例えば、５’ＲＡＣＥに類似する方法は、所望の全長転
写物の５’末端の欠失を生成するために利用可能である（Ｆｒｏｍｏｎｔ−Ｒａ
ｃｉｎｅら、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． ２１（７）：１６８３−
１６８４（１９９３））。
【０５７５】
簡潔には、特定のＲＮＡオリゴヌクレオチドを、全長遺伝子ＲＮＡ転写物をお
そらく含むＲＮＡの集団の５’末端に連結する。連結されたＲＮＡオリゴヌクレ
オチドに特異的なプライマーおよび目的のＭＥＴＨ１遺伝子またはＭＥＴＨ２遺
伝子の公知の配列に特異的なプライマーを含むプライマーセットを使用して、Ｍ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の全長遺伝子の５’部分をＰＣＲ増幅する。次いで、
この増幅した産物を配列決定し得、そしてこれを使用して全長遺伝子を生成し得
る。
そらく含むＲＮＡの集団の５’末端に連結する。連結されたＲＮＡオリゴヌクレ
オチドに特異的なプライマーおよび目的のＭＥＴＨ１遺伝子またはＭＥＴＨ２遺
伝子の公知の配列に特異的なプライマーを含むプライマーセットを使用して、Ｍ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の全長遺伝子の５’部分をＰＣＲ増幅する。次いで、
この増幅した産物を配列決定し得、そしてこれを使用して全長遺伝子を生成し得
る。
【０５７６】
ポリＡ＋ＲＮＡが、使用され得るが、この上記の方法は、所望の供給源から単
離された全ＲＮＡを用いて開始する。次いで、ＲＮＡ調製物を、後のＲＮＡリガ
ーゼ工程を妨害し得る分解または損傷ＲＮＡの５’リン酸基を排除するために、
必要ならばホスファターゼで処理し得る。次いで、ホスファターゼを不活化する
べきであり、そしてＲＮＡをメッセンジャーＲＮＡの５’末端に存在するキャッ
プ構造を除去するために、タバコ酸ピロホスファターゼを用いて処理するべきで
ある。この反応は、次いでＴ４ ＲＮＡリガーゼを用いてＲＮＡオリゴヌクレオ
チドに連結され得る、キャップ切断ＲＮＡの５’末端に５’リン酸基を残す。
離された全ＲＮＡを用いて開始する。次いで、ＲＮＡ調製物を、後のＲＮＡリガ
ーゼ工程を妨害し得る分解または損傷ＲＮＡの５’リン酸基を排除するために、
必要ならばホスファターゼで処理し得る。次いで、ホスファターゼを不活化する
べきであり、そしてＲＮＡをメッセンジャーＲＮＡの５’末端に存在するキャッ
プ構造を除去するために、タバコ酸ピロホスファターゼを用いて処理するべきで
ある。この反応は、次いでＴ４ ＲＮＡリガーゼを用いてＲＮＡオリゴヌクレオ
チドに連結され得る、キャップ切断ＲＮＡの５’末端に５’リン酸基を残す。
【０５７７】
この改変型ＲＮＡ調製物を、遺伝子特異的なオリゴヌクレオチドを用いる、第
一鎖ｃＤＮＡ合成のためのテンプレートとして使用する。第一鎖合成反応物を連
結されたＲＮＡオリゴヌクレオチドに特異的なプライマーおよび目的の遺伝子の
公知の配列に特異的なプライマーを用いる、所望の５’末端のＰＣＲ増幅のため
のテンプレートとして使用する。次いで、得られた生成物を配列決定し、そして
分析して５’末端配列がＭＥＴＨ１遺伝子またはＭＥＴＨ２遺伝子に属すること
を確認する。
一鎖ｃＤＮＡ合成のためのテンプレートとして使用する。第一鎖合成反応物を連
結されたＲＮＡオリゴヌクレオチドに特異的なプライマーおよび目的の遺伝子の
公知の配列に特異的なプライマーを用いる、所望の５’末端のＰＣＲ増幅のため
のテンプレートとして使用する。次いで、得られた生成物を配列決定し、そして
分析して５’末端配列がＭＥＴＨ１遺伝子またはＭＥＴＨ２遺伝子に属すること
を確認する。
【０５７８】
（実施例７：ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の細菌性発現）
本発明のＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチドをコードする
ＭＥＴＨ１ヌクレオチドまたはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドを、実施例５に概説
するように、そのＤＮＡ配列の５’および３’末端に対応するＰＣＲオリゴヌク
レオチドプライマーを使用して増幅し、挿入フラグメントを合成する。ｃＤＮＡ
挿入物を増幅するために使用されるプライマーは、発現ベクター内に増幅産物を
クローニングするために、好ましくはプライマーの５’末端にＢａｍＨＩおよび
ＸｂａＩのような制限部位を含むべきである。例えば、ＢａｍＨＩおよびＸｂａ
Ｉは、細菌性発現ベクターｐＱＥ−９（Ｑｉａｇｅｎ，Ｉｎｃ．，Ｃｈａｔｓｗ
ｏｒｔｈ，ＣＡ）の制限酵素部位に対応する。このプラスミドベクターは、抗生
物質耐性（Ａｍｐr）、細菌の複製起点（ｏｒｉ）、ＩＰＴＧで調節可能なプロ
モーター／オペレーター（Ｐ／Ｏ）、リボソーム結合部位（ＲＢＳ）、６−ヒス
チジンタグ（６−Ｈｉｓ）、および制限酵素クローニング部位をコードする。ｐ
ＱＥ−９ベクターをＢａｍＨＩおよびＸｂａＩで消化し、そして、増幅されたフ
ラグメントを細菌性ＲＢＳにおいて開始されるリーディングフレームを維持しな
がらｐＱＥ−９ベクターに連結する。次いで連結混合物を、ｌａｃＩリプレッサ
ーを発現し、またカナマイシン耐性（Ｋａｎr）を与えるプラスミドｐＲＥＰ４
の多重コピーを含む、Ｅ．ｃｏｌｉ株Ｍ１５／ｒｅｐ４（Ｑｉａｇｅｎ，Ｉｎｃ
．）を形質転換するために使用する。形質転換体を、ＬＢプレート上で生育でき
るそれらの能力によって同定し、そしてアンピシリン／カナマイシン耐性コロニ
ーを選択する。プラスミドＤＮＡを単離し、そして制限分析によって確認する。
ＭＥＴＨ１ヌクレオチドまたはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドを、実施例５に概説
するように、そのＤＮＡ配列の５’および３’末端に対応するＰＣＲオリゴヌク
レオチドプライマーを使用して増幅し、挿入フラグメントを合成する。ｃＤＮＡ
挿入物を増幅するために使用されるプライマーは、発現ベクター内に増幅産物を
クローニングするために、好ましくはプライマーの５’末端にＢａｍＨＩおよび
ＸｂａＩのような制限部位を含むべきである。例えば、ＢａｍＨＩおよびＸｂａ
Ｉは、細菌性発現ベクターｐＱＥ−９（Ｑｉａｇｅｎ，Ｉｎｃ．，Ｃｈａｔｓｗ
ｏｒｔｈ，ＣＡ）の制限酵素部位に対応する。このプラスミドベクターは、抗生
物質耐性（Ａｍｐr）、細菌の複製起点（ｏｒｉ）、ＩＰＴＧで調節可能なプロ
モーター／オペレーター（Ｐ／Ｏ）、リボソーム結合部位（ＲＢＳ）、６−ヒス
チジンタグ（６−Ｈｉｓ）、および制限酵素クローニング部位をコードする。ｐ
ＱＥ−９ベクターをＢａｍＨＩおよびＸｂａＩで消化し、そして、増幅されたフ
ラグメントを細菌性ＲＢＳにおいて開始されるリーディングフレームを維持しな
がらｐＱＥ−９ベクターに連結する。次いで連結混合物を、ｌａｃＩリプレッサ
ーを発現し、またカナマイシン耐性（Ｋａｎr）を与えるプラスミドｐＲＥＰ４
の多重コピーを含む、Ｅ．ｃｏｌｉ株Ｍ１５／ｒｅｐ４（Ｑｉａｇｅｎ，Ｉｎｃ
．）を形質転換するために使用する。形質転換体を、ＬＢプレート上で生育でき
るそれらの能力によって同定し、そしてアンピシリン／カナマイシン耐性コロニ
ーを選択する。プラスミドＤＮＡを単離し、そして制限分析によって確認する。
【０５７９】
所望の構築物を含むクローンを、Ａｍｐ（１００μｇ／ｍｌ）およびＫａｎ（
２５μｇ／ｍｌ）の両方を補充したＬＢ培地における液体培養で一晩（Ｏ／Ｎ）
増殖させる。Ｏ／Ｎ培養物を、１：１００〜１：２５０の比で大量培養に接種す
るために使用する。細胞を、０．４〜０．６の間の光学密度６００（Ｏ．Ｄ．60 0 ）まで増殖させる。次いで、ＩＰＴＧ（イソプロピル−Ｂ−Ｄ−チオガラクト
ピラノシド）を最終濃度１ｍＭになるように加える。ＩＰＴＧは、ｌａｃＩリプ
レッサーの不活化によりＰ／Ｏのクリアリングを誘導し、遺伝子発現の増加を導
く。
２５μｇ／ｍｌ）の両方を補充したＬＢ培地における液体培養で一晩（Ｏ／Ｎ）
増殖させる。Ｏ／Ｎ培養物を、１：１００〜１：２５０の比で大量培養に接種す
るために使用する。細胞を、０．４〜０．６の間の光学密度６００（Ｏ．Ｄ．60 0 ）まで増殖させる。次いで、ＩＰＴＧ（イソプロピル−Ｂ−Ｄ−チオガラクト
ピラノシド）を最終濃度１ｍＭになるように加える。ＩＰＴＧは、ｌａｃＩリプ
レッサーの不活化によりＰ／Ｏのクリアリングを誘導し、遺伝子発現の増加を導
く。
【０５８０】
細胞を、さらに３〜４時間増殖させる。次いで、細胞を遠心分離（６０００×
ｇで２０分間）によって収集する。細胞ペレットを、カオトロピック剤である６
ＭグアニジンＨＣｌ中に、４℃で３〜４時間攪拌することによって可溶化させる
。細胞細片を遠心分離によって取り除き、そしてポリペプチドを含む上清を、ニ
ッケル−ニトリロ−三酢酸（「Ｎｉ−ＮＴＡ」）アフィニティー樹脂カラム（Ｑ
ＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．前出より入手可能）にロードする。６×Ｈｉｓタグを有す
るタンパク質は、Ｎｉ−ＮＴＡ樹脂に高い親和性で結合し、そして単純な１工程
手順で精製され得る（詳細には、ＱＩＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｓｔ（１９９５
） ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．，前出を参照のこと）。手短に言えば、上清を、６
Ｍグアニジン−ＨＣｌ、ｐＨ８のカラムにロードし、カラムを、最初に１０容量
の６Ｍグアニジン−ＨＣｌ、ｐＨ８で洗浄し、次いで１０容量の６Ｍグアニジン
−ＨＣｌ、ｐＨ ６で洗浄し、最後にポリペプチドを、６Ｍグアニジン−ＨＣｌ
、ｐＨ ５で溶出する。
ｇで２０分間）によって収集する。細胞ペレットを、カオトロピック剤である６
ＭグアニジンＨＣｌ中に、４℃で３〜４時間攪拌することによって可溶化させる
。細胞細片を遠心分離によって取り除き、そしてポリペプチドを含む上清を、ニ
ッケル−ニトリロ−三酢酸（「Ｎｉ−ＮＴＡ」）アフィニティー樹脂カラム（Ｑ
ＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．前出より入手可能）にロードする。６×Ｈｉｓタグを有す
るタンパク質は、Ｎｉ−ＮＴＡ樹脂に高い親和性で結合し、そして単純な１工程
手順で精製され得る（詳細には、ＱＩＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｓｔ（１９９５
） ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．，前出を参照のこと）。手短に言えば、上清を、６
Ｍグアニジン−ＨＣｌ、ｐＨ８のカラムにロードし、カラムを、最初に１０容量
の６Ｍグアニジン−ＨＣｌ、ｐＨ８で洗浄し、次いで１０容量の６Ｍグアニジン
−ＨＣｌ、ｐＨ ６で洗浄し、最後にポリペプチドを、６Ｍグアニジン−ＨＣｌ
、ｐＨ ５で溶出する。
【０５８１】
次いで、精製したＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質を、リン
酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）または５０ｍＭ 酢酸ナトリウム、ｐＨ６の緩衝
液および２００ｍＭ ＮａＣｌに対して透析することにより再生させる。あるい
は、ＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質はＮｉ−ＮＴＡカラムに
固定化している間に、首尾よく再折り畳みされ得る。推奨条件は以下の通りであ
る：プロテアーゼインヒビターを含む、５００ｍＭ ＮａＣｌ、２０％グリセロ
ール、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ ｐＨ７．４中の６Ｍ〜１Ｍ尿素の直線勾配
を使用する再生。再生は１．５時間以上の時間をかけて行うべきである。再生後
、タンパク質を２５０ｍＭイミダゾールの添加によって溶出させる。イミダゾー
ルを、ＰＢＳまたは５０ｍＭ酢酸ナトリウム ｐＨ６の緩衝液および２００ｍＭ
ＮａＣｌに対する最終の透析工程によって除去する。精製したＭＥＴＨ１タン
パク質またはＭＥＴＨ２ポリペプチドタンパク質を、４℃で保存するか、または
−８０℃で冷凍する。
酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）または５０ｍＭ 酢酸ナトリウム、ｐＨ６の緩衝
液および２００ｍＭ ＮａＣｌに対して透析することにより再生させる。あるい
は、ＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質はＮｉ−ＮＴＡカラムに
固定化している間に、首尾よく再折り畳みされ得る。推奨条件は以下の通りであ
る：プロテアーゼインヒビターを含む、５００ｍＭ ＮａＣｌ、２０％グリセロ
ール、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ ｐＨ７．４中の６Ｍ〜１Ｍ尿素の直線勾配
を使用する再生。再生は１．５時間以上の時間をかけて行うべきである。再生後
、タンパク質を２５０ｍＭイミダゾールの添加によって溶出させる。イミダゾー
ルを、ＰＢＳまたは５０ｍＭ酢酸ナトリウム ｐＨ６の緩衝液および２００ｍＭ
ＮａＣｌに対する最終の透析工程によって除去する。精製したＭＥＴＨ１タン
パク質またはＭＥＴＨ２ポリペプチドタンパク質を、４℃で保存するか、または
−８０℃で冷凍する。
【０５８２】
上記の発現ベクターに加えて、本発明はさらに、ｐＨＥ４ａと呼ばれる、ＭＥ
ＴＨ１ポリヌクレオチドまたはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドに作動可能に連結さ
れたファージオペレーターおよびプロモーターエレメントを含む発現ベクターを
含む（ＡＴＣＣ受託番号２０９６４５、１９９８年２月２５日に寄託。）。この
ベクターは以下を含む：１）選択マーカーとしてのネオマイシンホスホトランス
フェラーゼ遺伝子、２）Ｅ．ｃｏｌｉ複製起点、３）Ｔ５ファージプロモーター
配列、４）２つのｌａｃオペレーター配列、５）シャイン−ダルガーノ配列、お
よび６）ラクトースオペロンリプレッサー遺伝子（ｌａｑＩｑ）。複製起点（ｏ
ｒｉＣ）は、ｐＵＣ１９（ＬＴＩ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）に由来す
る。プロモーター配列およびオペレーター配列を合成的に作製する。ＮｄｅＩお
よびＸｂａＩ、ＢａｍＨＩ、ＸｈｏＩ、またはＡｓｐ７１８によってベクターを
制限処理し、制限生成物をゲルで泳動し、そしてより大きなフラグメント（スタ
ッファー（ｓｔｕｆｆｅｒ）フラグメントは約３１０塩基対であるべきである）
を単離することによって、ＤＮＡをｐＨＥａに挿入し得る。ＤＮＡ挿入物を、Ｎ
ｄｅＩ（５’プライマー）およびＸｂａＩ、ＢａｍＨＩ、ＸｈｏＩ、またはＡｓ
ｐ７１８（３’プライマー）に対する制限部位を有するＰＣＲプライマーを使用
して、実施例５に記載のＰＣＲプロトコールに従って生成する。ＰＣＲ挿入物を
、ゲル精製し、そして適合する酵素で制限処理する。挿入物およびベクターを標
準的なプロトコールに従って連結する。
ＴＨ１ポリヌクレオチドまたはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドに作動可能に連結さ
れたファージオペレーターおよびプロモーターエレメントを含む発現ベクターを
含む（ＡＴＣＣ受託番号２０９６４５、１９９８年２月２５日に寄託。）。この
ベクターは以下を含む：１）選択マーカーとしてのネオマイシンホスホトランス
フェラーゼ遺伝子、２）Ｅ．ｃｏｌｉ複製起点、３）Ｔ５ファージプロモーター
配列、４）２つのｌａｃオペレーター配列、５）シャイン−ダルガーノ配列、お
よび６）ラクトースオペロンリプレッサー遺伝子（ｌａｑＩｑ）。複製起点（ｏ
ｒｉＣ）は、ｐＵＣ１９（ＬＴＩ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）に由来す
る。プロモーター配列およびオペレーター配列を合成的に作製する。ＮｄｅＩお
よびＸｂａＩ、ＢａｍＨＩ、ＸｈｏＩ、またはＡｓｐ７１８によってベクターを
制限処理し、制限生成物をゲルで泳動し、そしてより大きなフラグメント（スタ
ッファー（ｓｔｕｆｆｅｒ）フラグメントは約３１０塩基対であるべきである）
を単離することによって、ＤＮＡをｐＨＥａに挿入し得る。ＤＮＡ挿入物を、Ｎ
ｄｅＩ（５’プライマー）およびＸｂａＩ、ＢａｍＨＩ、ＸｈｏＩ、またはＡｓ
ｐ７１８（３’プライマー）に対する制限部位を有するＰＣＲプライマーを使用
して、実施例５に記載のＰＣＲプロトコールに従って生成する。ＰＣＲ挿入物を
、ゲル精製し、そして適合する酵素で制限処理する。挿入物およびベクターを標
準的なプロトコールに従って連結する。
【０５８３】
操作されたベクターは、上記のプロトコールにおいて、細菌系でタンパク質を
発現させるために容易に置換され得る。
発現させるために容易に置換され得る。
【０５８４】
（実施例８：封入体からのＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプ
チドの精製） 以下の代替の方法は、Ｅ．ｃｏｌｉ中で発現されたＭＥＴＨ１ポリペプチドま
たはＭＥＴＨ２ポリペプチドが封入体の形態で存在する場合に、そのポリペプチ
ドを精製するために使用され得る。他に指定されない場合には、以下のすべての
工程は４〜１０℃で行われる。
チドの精製） 以下の代替の方法は、Ｅ．ｃｏｌｉ中で発現されたＭＥＴＨ１ポリペプチドま
たはＭＥＴＨ２ポリペプチドが封入体の形態で存在する場合に、そのポリペプチ
ドを精製するために使用され得る。他に指定されない場合には、以下のすべての
工程は４〜１０℃で行われる。
【０５８５】
Ｅ．ｃｏｌｉ発酵の生産期の完了後、細胞培養物を４〜１０℃に冷却し、そし
て１５，０００ｒｐｍの連続遠心分離（Ｈｅｒａｅｕｓ Ｓｅｐａｔｅｃｈ）に
よって細胞を採集する。細胞ペーストの単位重量あたりのタンパク質の予想され
る収量および必要とされる精製タンパク質の量に基づいて、細胞ペーストの適切
な量（重量による）を、１００ｍＭ Ｔｒｉｓ、５０ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ７．
４を含む緩衝溶液に懸濁させる。細胞を、高剪断ミキサーを使用して均質な懸濁
液に分散させる。
て１５，０００ｒｐｍの連続遠心分離（Ｈｅｒａｅｕｓ Ｓｅｐａｔｅｃｈ）に
よって細胞を採集する。細胞ペーストの単位重量あたりのタンパク質の予想され
る収量および必要とされる精製タンパク質の量に基づいて、細胞ペーストの適切
な量（重量による）を、１００ｍＭ Ｔｒｉｓ、５０ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ７．
４を含む緩衝溶液に懸濁させる。細胞を、高剪断ミキサーを使用して均質な懸濁
液に分散させる。
【０５８６】
次いで、細胞をマイクロフルイダイザー（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ）（
Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ，Ｃｏｒｐ．またはＡＰＶ Ｇａｕｌｉｎ，Ｉｎｃ
．）に２回、４０００〜６０００ ｐｓｉで溶液を通すことによって溶解させる
。次いでホモジネートを、最終濃度０．５Ｍ ＮａＣｌまでＮａＣｌ溶液と混合
し、続いて７０００×ｇで１５分間遠心分離を行う。得られたペレットを、０．
５Ｍ ＮａＣｌ、１００ｍＭ Ｔｒｉｓ、５０ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４を使
用して再度洗浄する。
Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ，Ｃｏｒｐ．またはＡＰＶ Ｇａｕｌｉｎ，Ｉｎｃ
．）に２回、４０００〜６０００ ｐｓｉで溶液を通すことによって溶解させる
。次いでホモジネートを、最終濃度０．５Ｍ ＮａＣｌまでＮａＣｌ溶液と混合
し、続いて７０００×ｇで１５分間遠心分離を行う。得られたペレットを、０．
５Ｍ ＮａＣｌ、１００ｍＭ Ｔｒｉｓ、５０ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４を使
用して再度洗浄する。
【０５８７】
得られた洗浄した封入体を、１．５Ｍ塩酸グアニジン（ＧｕＨＣｌ）で２〜４
時間可溶化する。７０００×ｇで１５分間の遠心分離の後、ペレットを廃棄し、
そしてポリペプチドを含む上清を４℃で一晩インキュベートしてさらなるＧｕＨ
Ｃｌ抽出を可能にする。
時間可溶化する。７０００×ｇで１５分間の遠心分離の後、ペレットを廃棄し、
そしてポリペプチドを含む上清を４℃で一晩インキュベートしてさらなるＧｕＨ
Ｃｌ抽出を可能にする。
【０５８８】
不溶性粒子を除去するための高速遠心分離（３０，０００×ｇ）に続き、Ｇｕ
ＨＣｌ可溶化タンパク質を、ＧｕＨＣｌ抽出物と、５０ｍＭ ナトリウム、ｐＨ
４．５、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、２ｍＭ ＥＤＴＡを含む２０容量の緩衝液とを
、激しい攪拌で迅速に混合することによって、再折畳みさせる。再折り畳みした
希釈タンパク質溶液を、さらなる精製工程の前の１２時間、混合しないで４℃で
保つ。
ＨＣｌ可溶化タンパク質を、ＧｕＨＣｌ抽出物と、５０ｍＭ ナトリウム、ｐＨ
４．５、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、２ｍＭ ＥＤＴＡを含む２０容量の緩衝液とを
、激しい攪拌で迅速に混合することによって、再折畳みさせる。再折り畳みした
希釈タンパク質溶液を、さらなる精製工程の前の１２時間、混合しないで４℃で
保つ。
【０５８９】
再折り畳みされたポリペプチド溶液を清澄にするために、あらかじめ準備した
４０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０で平衡化した、適切な表面積を有する０．
１６μｍメンブレンフィルターを備える接触濾過ユニット（例えば、Ｆｉｌｔｒ
ｏｎ）を使用する。濾過したサンプルを、陽イオン交換樹脂（例えば、Ｐｏｒｏ
ｓ ＨＳ−５０，Ｐｅｒｓｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）上にロードす
る。カラムを４０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０で洗浄し、そして同じ緩衝液
中の２５０ｍＭ、５００ｍＭ、１０００ｍＭ、および１５００ｍＭ ＮａＣｌで
、段階的な様式で溶出する。溶出液の２８０ｎｍにおける吸光度を継続的にモニ
ターする。画分を収集し、そしてＳＤＳ−ＰＡＧＥによってさらに分析する。
４０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０で平衡化した、適切な表面積を有する０．
１６μｍメンブレンフィルターを備える接触濾過ユニット（例えば、Ｆｉｌｔｒ
ｏｎ）を使用する。濾過したサンプルを、陽イオン交換樹脂（例えば、Ｐｏｒｏ
ｓ ＨＳ−５０，Ｐｅｒｓｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）上にロードす
る。カラムを４０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０で洗浄し、そして同じ緩衝液
中の２５０ｍＭ、５００ｍＭ、１０００ｍＭ、および１５００ｍＭ ＮａＣｌで
、段階的な様式で溶出する。溶出液の２８０ｎｍにおける吸光度を継続的にモニ
ターする。画分を収集し、そしてＳＤＳ−ＰＡＧＥによってさらに分析する。
【０５９０】
次いでＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチドを含む画分をプ
ールし、そして４容量の水と混合する。次いで希釈されたサンプルを、あらかじ
め準備した強陰イオン（Ｐｏｒｏｓ ＨＱ−５０，Ｐｅｒｓｅｐｔｉｖｅ Ｂｉ
ｏｓｙｓｔｅｍｓ）および弱陰イオン（Ｐｏｒｏｓ ＣＭ−２０，Ｐｅｒｓｅｐ
ｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）交換樹脂の直列カラムのセットにロードする
。カラムを４０ｍＭ 酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０で平衡化する。両方のカラム
を、４０ｍＭ 酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０、２００ｍＭ ＮａＣｌで洗浄する
。次いでＣＭ−２０カラムを１０カラム容量の直線勾配（０．２Ｍ ＮａＣｌ、
５０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０から１．０Ｍ ＮａＣｌ、５０ｍＭ酢酸ナ
トリウム、ｐＨ６．５の範囲）を用いて溶出させる。画分を、溶出液の定常Ａ28 0 モニタリング下で収集する。次いで、（例えば、１６％ＳＤＳ−ＰＡＧＥによ
って判明した）ポリペプチドを含む画分をプールする。
ールし、そして４容量の水と混合する。次いで希釈されたサンプルを、あらかじ
め準備した強陰イオン（Ｐｏｒｏｓ ＨＱ−５０，Ｐｅｒｓｅｐｔｉｖｅ Ｂｉ
ｏｓｙｓｔｅｍｓ）および弱陰イオン（Ｐｏｒｏｓ ＣＭ−２０，Ｐｅｒｓｅｐ
ｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）交換樹脂の直列カラムのセットにロードする
。カラムを４０ｍＭ 酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０で平衡化する。両方のカラム
を、４０ｍＭ 酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０、２００ｍＭ ＮａＣｌで洗浄する
。次いでＣＭ−２０カラムを１０カラム容量の直線勾配（０．２Ｍ ＮａＣｌ、
５０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０から１．０Ｍ ＮａＣｌ、５０ｍＭ酢酸ナ
トリウム、ｐＨ６．５の範囲）を用いて溶出させる。画分を、溶出液の定常Ａ28 0 モニタリング下で収集する。次いで、（例えば、１６％ＳＤＳ−ＰＡＧＥによ
って判明した）ポリペプチドを含む画分をプールする。
【０５９１】
得られたＭＥＴＨ１ポリペプチドまたはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、上記の再
折り畳みおよび精製工程の後で９５％より高い純度を示すべきである。５μｇの
精製タンパク質がロードされる場合、主要な混入物のバンドは、クマシーブルー
染色した１６％ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルから全く観察されないはずである。精製Ｍ
ＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質はまた、エンドトキシン／ＬＰ
Ｓ混入について試験され得、そして代表的には、ＬＰＳ含量はＬＡＬアッセイに
従って、０．１ｎｇ／ｍｌ未満である。
折り畳みおよび精製工程の後で９５％より高い純度を示すべきである。５μｇの
精製タンパク質がロードされる場合、主要な混入物のバンドは、クマシーブルー
染色した１６％ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルから全く観察されないはずである。精製Ｍ
ＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質はまた、エンドトキシン／ＬＰ
Ｓ混入について試験され得、そして代表的には、ＬＰＳ含量はＬＡＬアッセイに
従って、０．１ｎｇ／ｍｌ未満である。
【０５９２】
（実施例９：バキュロウイルス発現系におけるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の
クローニングおよび発現） 本実施例では、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を発現するために、プラスミドシ
ャトルベクターｐＡ２を使用してＭＥＴＨ１ポリヌクレオチドまたはＭＥＴＨ２
ポリヌクレオチドをバキュロウイルスに挿入する。この発現ベクターは、Ａｕｔ
ｏｇｒａｐｈａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ核多核体ウイルス（ＡｃＭＮＰＶ）の
強力なポリヘドリンプロモーター、続いてＢａｍＨＩ、ＸｂａＩ、およびＡｓｐ
７１８のような便利な制限部位を含む。シミアンウイルス４０（「ＳＶ４０」）
のポリアデニル化部位を、効率的なポリアデニル化のために使用する。組換えウ
イルスの容易な選択のために、プラスミドは、同方向にある弱いＤｒｏｓｏｐｈ
ｉｌａプロモーターの制御下のＥ．ｃｏｌｉ由来のβ−ガラクトシダーゼ遺伝子
、続いてポリヘドリン遺伝子のポリアデニル化シグナルを含む。挿入された遺伝
子は両方の側で、クローン化されたＭＥＴＨ１ポリヌクレオチドまたはＭＥＴＨ
２ポリヌクレオチドを発現する生存可能なウイルスを生成するために、野生型ウ
イルスＤＮＡとの細胞媒介性相同組換えのためのウイルス配列と隣接する。
クローニングおよび発現） 本実施例では、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を発現するために、プラスミドシ
ャトルベクターｐＡ２を使用してＭＥＴＨ１ポリヌクレオチドまたはＭＥＴＨ２
ポリヌクレオチドをバキュロウイルスに挿入する。この発現ベクターは、Ａｕｔ
ｏｇｒａｐｈａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ核多核体ウイルス（ＡｃＭＮＰＶ）の
強力なポリヘドリンプロモーター、続いてＢａｍＨＩ、ＸｂａＩ、およびＡｓｐ
７１８のような便利な制限部位を含む。シミアンウイルス４０（「ＳＶ４０」）
のポリアデニル化部位を、効率的なポリアデニル化のために使用する。組換えウ
イルスの容易な選択のために、プラスミドは、同方向にある弱いＤｒｏｓｏｐｈ
ｉｌａプロモーターの制御下のＥ．ｃｏｌｉ由来のβ−ガラクトシダーゼ遺伝子
、続いてポリヘドリン遺伝子のポリアデニル化シグナルを含む。挿入された遺伝
子は両方の側で、クローン化されたＭＥＴＨ１ポリヌクレオチドまたはＭＥＴＨ
２ポリヌクレオチドを発現する生存可能なウイルスを生成するために、野生型ウ
イルスＤＮＡとの細胞媒介性相同組換えのためのウイルス配列と隣接する。
【０５９３】
他の多くのバキュロウイルスベクター（例えば、ｐＡｃ３７３、ｐＶＬ９４１
、およびｐＡｃＩＭ１）は、当業者が容易に理解するように、構築物が転写、翻
訳、分泌など（必要とされる場合、シグナルペプチドおよびインフレームなＡＵ
Ｇを含む）のために適切に配置されたシグナルを提供する限りにおいて、上記の
ベクターの代わりに使用され得る。このようなベクターは、例えば、Ｌｕｃｋｏ
ｗら、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ １７０：３１−３９（１９８９）に記載される。
、およびｐＡｃＩＭ１）は、当業者が容易に理解するように、構築物が転写、翻
訳、分泌など（必要とされる場合、シグナルペプチドおよびインフレームなＡＵ
Ｇを含む）のために適切に配置されたシグナルを提供する限りにおいて、上記の
ベクターの代わりに使用され得る。このようなベクターは、例えば、Ｌｕｃｋｏ
ｗら、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ １７０：３１−３９（１９８９）に記載される。
【０５９４】
詳細には、寄託されたクローンに含まれるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のｃＤ
ＮＡ配列（ＡＵＧ開始コドンおよび任意の天然に付随するリーダー配列を含む）
を、実施例５に記載されるＰＣＲプロトコルを使用して増幅させる。天然に存在
するシグナル配列を使用して分泌タンパク質を産生する場合、ｐＡ２ベクターは
第２のシグナルペプチドを必要としない。あるいは、ベクターは、Ｓｕｍｍｅｒ
ｓら（「Ａ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｂａｃｕｌｏｖｉ
ｒｕｓ Ｖｅｃｔｏｒｓ ａｎｄ Ｉｎｓｅｃｔ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ
Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ」、Ｔｅｘａｓ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｅｘｐｅｒ
ｉｍｅｎｔａｌ Ｓｔａｔｉｏｎ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ Ｎｏ．１５５５（１９８
７））に記載される標準的な方法を用いて改変して、バキュロウイルスリーダー
配列を含ませ得る（ｐＡ２ ＧＰ）。
ＮＡ配列（ＡＵＧ開始コドンおよび任意の天然に付随するリーダー配列を含む）
を、実施例５に記載されるＰＣＲプロトコルを使用して増幅させる。天然に存在
するシグナル配列を使用して分泌タンパク質を産生する場合、ｐＡ２ベクターは
第２のシグナルペプチドを必要としない。あるいは、ベクターは、Ｓｕｍｍｅｒ
ｓら（「Ａ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｂａｃｕｌｏｖｉ
ｒｕｓ Ｖｅｃｔｏｒｓ ａｎｄ Ｉｎｓｅｃｔ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ
Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ」、Ｔｅｘａｓ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｅｘｐｅｒ
ｉｍｅｎｔａｌ Ｓｔａｔｉｏｎ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ Ｎｏ．１５５５（１９８
７））に記載される標準的な方法を用いて改変して、バキュロウイルスリーダー
配列を含ませ得る（ｐＡ２ ＧＰ）。
【０５９５】
増幅されたフラグメントを、市販のキット（「Ｇｅｎｅｃｌｅａｎ」ＢＩＯ
１０１ Ｉｎｃ．，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃａ）を使用して、１％アガロースゲル
から単離する。次いでフラグメントを適切な制限酵素で消化し、そして再び１％
アガロースゲルで精製する。
１０１ Ｉｎｃ．，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃａ）を使用して、１％アガロースゲル
から単離する。次いでフラグメントを適切な制限酵素で消化し、そして再び１％
アガロースゲルで精製する。
【０５９６】
プラスミドを対応する制限酵素で消化し、そして必要に応じて、当該分野で公
知の慣用の手順を用いて、仔ウシ腸ホスファターゼを用いて脱リン酸し得る。次
いでＤＮＡを、市販のキット（「Ｇｅｎｅｃｌｅａｎ」ＢＩＯ １０１ Ｉｎｃ
．，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃａ）を使用して、１％アガロースゲルから単離する。
知の慣用の手順を用いて、仔ウシ腸ホスファターゼを用いて脱リン酸し得る。次
いでＤＮＡを、市販のキット（「Ｇｅｎｅｃｌｅａｎ」ＢＩＯ １０１ Ｉｎｃ
．，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃａ）を使用して、１％アガロースゲルから単離する。
【０５９７】
フラグメントおよび脱リン酸したプラスミドを、Ｔ４ ＤＮＡリガーゼを用い
て互いに連結する。Ｅ．ｃｏｌｉ ＨＢ１０１またはＸＬ−１ Ｂｌｕｅ（Ｓｔ
ｒａｔａｇｅｎｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃａ
）細胞のような他の適切なＥ．ｃｏｌｉ宿主を、連結混合液で形質転換し、そし
て培養プレート上に拡げる。プラスミドを含む細菌を、個々のコロニー由来のＤ
ＮＡを消化し、そして消化産物をゲル電気泳動によって分析することにより同定
する。クローニングしたフラグメントの配列をＤＮＡ配列決定によって確認する
。
て互いに連結する。Ｅ．ｃｏｌｉ ＨＢ１０１またはＸＬ−１ Ｂｌｕｅ（Ｓｔ
ｒａｔａｇｅｎｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃａ
）細胞のような他の適切なＥ．ｃｏｌｉ宿主を、連結混合液で形質転換し、そし
て培養プレート上に拡げる。プラスミドを含む細菌を、個々のコロニー由来のＤ
ＮＡを消化し、そして消化産物をゲル電気泳動によって分析することにより同定
する。クローニングしたフラグメントの配列をＤＮＡ配列決定によって確認する
。
【０５９８】
このポリヌクレオチドを含む５μｇのプラスミドを、Ｆｅｌｇｎｅｒら、Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：７４１３−７４１７（１９
８７）によって記載されたリポフェクション法を使用して、１．０μｇの市販の
線状化バキュロウイルスＤＮＡ（「ＢａｃｕｌｏＧｏｌｄa ｂａｃｕｌｏｖｉ
ｒｕｓ ＤＮＡ」， Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ， Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ， ＣＡ）
とともに同時トランスフェクトする。１μｇのＢａｃｕｌｏＧｏｌｄaウイルス
ＤＮＡおよび５μｇのプラスミドを、５０μｌの無血清グレース培地（Ｌｉｆｅ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）を
含む、マイクロタイタープレートの滅菌したウェル中で混合する。その後、１０
μｌのリポフェクチンおよび９０μｌグレース培地を加え、混合し、そして室温
で１５分間インキュベートする。次いで、トランスフェクション混合液を、無血
清グレース培地１ｍｌを含む３５ｍｍ組織培養プレートに播種されたＳｆ９昆虫
細胞（ＡＴＣＣ ＣＲＬ １７１１）に滴下して加える。次いで、プレートを２
７℃で５時間インキュベートする。次いで、トランスフェクション溶液をプレー
トから除去し、そして１０％ウシ胎仔血清を補充した１ｍｌのグレース昆虫培地
を添加する。次いで、培養を２７℃で４日間継続する。
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：７４１３−７４１７（１９
８７）によって記載されたリポフェクション法を使用して、１．０μｇの市販の
線状化バキュロウイルスＤＮＡ（「ＢａｃｕｌｏＧｏｌｄa ｂａｃｕｌｏｖｉ
ｒｕｓ ＤＮＡ」， Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ， Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ， ＣＡ）
とともに同時トランスフェクトする。１μｇのＢａｃｕｌｏＧｏｌｄaウイルス
ＤＮＡおよび５μｇのプラスミドを、５０μｌの無血清グレース培地（Ｌｉｆｅ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）を
含む、マイクロタイタープレートの滅菌したウェル中で混合する。その後、１０
μｌのリポフェクチンおよび９０μｌグレース培地を加え、混合し、そして室温
で１５分間インキュベートする。次いで、トランスフェクション混合液を、無血
清グレース培地１ｍｌを含む３５ｍｍ組織培養プレートに播種されたＳｆ９昆虫
細胞（ＡＴＣＣ ＣＲＬ １７１１）に滴下して加える。次いで、プレートを２
７℃で５時間インキュベートする。次いで、トランスフェクション溶液をプレー
トから除去し、そして１０％ウシ胎仔血清を補充した１ｍｌのグレース昆虫培地
を添加する。次いで、培養を２７℃で４日間継続する。
【０５９９】
４日後上清を収集し、ＳｕｍｍｅｒｓおよびＳｍｉｔｈ、前出によって記載さ
れたようにプラークアッセイを行う。「Ｂｌｕｅ Ｇａｌ」（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃ
ｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ）を含むアガロース
ゲルを、ｇａｌが発現しているクローン（青色に着色したプラークを生ずる）の
容易な同定および単離を可能にするために使用する。（この型の「プラークアッ
セイ」の詳細な説明はまた、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．，
Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，９−１０頁によって頒布される、昆虫細胞培養およ
びバキュロウイルス学のための使用者ガイドの中に見出され得る）。適切なイン
キュベーションの後、青色に着色したプラークをマイクロピペッター（例えば、
Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）のチップで拾う。次いで、組換えウイルスを含む寒天を、
２００μｌのグレース培地を含む微小遠心分離チューブ中で再懸濁させ、そして
組換えバキュロウイルスを含む懸濁液を、３５ｍｍ皿に播種したＳｆ９細胞に感
染させるために使用する。４日後、これらの培養皿の上清を採集し、次いで４℃
に貯蔵する。
れたようにプラークアッセイを行う。「Ｂｌｕｅ Ｇａｌ」（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃ
ｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ）を含むアガロース
ゲルを、ｇａｌが発現しているクローン（青色に着色したプラークを生ずる）の
容易な同定および単離を可能にするために使用する。（この型の「プラークアッ
セイ」の詳細な説明はまた、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．，
Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，９−１０頁によって頒布される、昆虫細胞培養およ
びバキュロウイルス学のための使用者ガイドの中に見出され得る）。適切なイン
キュベーションの後、青色に着色したプラークをマイクロピペッター（例えば、
Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）のチップで拾う。次いで、組換えウイルスを含む寒天を、
２００μｌのグレース培地を含む微小遠心分離チューブ中で再懸濁させ、そして
組換えバキュロウイルスを含む懸濁液を、３５ｍｍ皿に播種したＳｆ９細胞に感
染させるために使用する。４日後、これらの培養皿の上清を採集し、次いで４℃
に貯蔵する。
【０６００】
ポリペプチドの発現を確認するために、１０％熱不活性化ＦＢＳを補充したグ
レース培地中でＳｆ９細胞を増殖させる。細胞を、約２の感染多重度（「ＭＯＩ
」）でポリヌクレオチドを含む組換えバキュロウイルスで感染させる。放射性標
識したタンパク質を所望する場合には、６時間後に培地を除去し、そしてメチオ
ニンおよびシステインを含まないＳＦ９００ ＩＩ培地（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎ
ｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤから入手可能）に置き換
える。４２時間後、５μＣｉの35Ｓ−メチオニンおよび５μＣｉの35Ｓ−システ
イン（Ａｍｅｒｓｈａｍから入手可能）を添加する。細胞をさらに１６時間イン
キュベートし、次いで遠心分離によって採集する。上清中のタンパク質および細
胞内タンパク質を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、次いで（放射性標識した場合）オートラ
ジオグラフィーによって分析する。
レース培地中でＳｆ９細胞を増殖させる。細胞を、約２の感染多重度（「ＭＯＩ
」）でポリヌクレオチドを含む組換えバキュロウイルスで感染させる。放射性標
識したタンパク質を所望する場合には、６時間後に培地を除去し、そしてメチオ
ニンおよびシステインを含まないＳＦ９００ ＩＩ培地（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎ
ｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤから入手可能）に置き換
える。４２時間後、５μＣｉの35Ｓ−メチオニンおよび５μＣｉの35Ｓ−システ
イン（Ａｍｅｒｓｈａｍから入手可能）を添加する。細胞をさらに１６時間イン
キュベートし、次いで遠心分離によって採集する。上清中のタンパク質および細
胞内タンパク質を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、次いで（放射性標識した場合）オートラ
ジオグラフィーによって分析する。
【０６０１】
精製タンパク質のアミノ末端のアミノ酸配列の微量配列決定法を使用して、産
生されたＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質のアミノ末端配列を
決定し得る。
生されたＭＥＴＨ１タンパク質またはＭＥＴＨ２タンパク質のアミノ末端配列を
決定し得る。
【０６０２】
（実施例１０：哺乳動物細胞におけるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の発現）
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを、哺乳動物細胞中で発現させ得る
。代表的な哺乳動物発現ベクターは、ｍＲＮＡの転写の開始を仲介するプロモー
ターエレメント、タンパク質コード配列、および転写の終結および転写物のポリ
アデニル化に必要なシグナルを含む。さらなるエレメントは、エンハンサー、コ
ザック配列、および、ＲＮＡスプライシングのドナーおよびアクセプター部位に
隣接する介在配列を含む。非常に効率的な転写は、ＳＶ４０由来の初期および後
期プロモーター、レトロウイルス（例えばＲＳＶ、ＨＴＬＶＩ、ＨＩＶＩ）由来
の長末端反復（ＬＴＲ）、およびサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の初期プロモ
ーターを用いて達成される。しかし、細胞内エレメント（例えば、ヒトアクチン
プロモーター）もまた、使用され得る。
。代表的な哺乳動物発現ベクターは、ｍＲＮＡの転写の開始を仲介するプロモー
ターエレメント、タンパク質コード配列、および転写の終結および転写物のポリ
アデニル化に必要なシグナルを含む。さらなるエレメントは、エンハンサー、コ
ザック配列、および、ＲＮＡスプライシングのドナーおよびアクセプター部位に
隣接する介在配列を含む。非常に効率的な転写は、ＳＶ４０由来の初期および後
期プロモーター、レトロウイルス（例えばＲＳＶ、ＨＴＬＶＩ、ＨＩＶＩ）由来
の長末端反復（ＬＴＲ）、およびサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の初期プロモ
ーターを用いて達成される。しかし、細胞内エレメント（例えば、ヒトアクチン
プロモーター）もまた、使用され得る。
【０６０３】
本発明を実施する際の使用に適切な発現ベクターは、例えば、ｐＳＶＬおよび
ｐＭＳＧ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）、ｐＲＳＶｃ
ａｔ（ＡＴＣＣ ３７１５２）、ｐＳＶ２ ＤＨＦＲ（ＡＴＣＣ ３７１４６）
、ｐＢＣ１２ＭＩ（ＡＴＣＣ ６７１０９）、ｐＣＭＶＳｐｏｒｔ２．０、なら
びにｐＣＭＶＳｐｏｒｔ３．０のようなベクターを含む。使用され得る哺乳動物
宿主細胞は、ヒトＨｅｌａ細胞、２９３細胞、Ｈ９細胞およびＪｕｒｋａｔ細胞
、マウスＮＩＨ３Ｔ３細胞およびＣ１２７細胞、Ｃｏｓ １細胞、Ｃｏｓ ７細
胞およびＣＶ１細胞、ウズラＱＣ１−３細胞、マウスＬ細胞、ならびにチャイニ
ーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を含む。
ｐＭＳＧ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）、ｐＲＳＶｃ
ａｔ（ＡＴＣＣ ３７１５２）、ｐＳＶ２ ＤＨＦＲ（ＡＴＣＣ ３７１４６）
、ｐＢＣ１２ＭＩ（ＡＴＣＣ ６７１０９）、ｐＣＭＶＳｐｏｒｔ２．０、なら
びにｐＣＭＶＳｐｏｒｔ３．０のようなベクターを含む。使用され得る哺乳動物
宿主細胞は、ヒトＨｅｌａ細胞、２９３細胞、Ｈ９細胞およびＪｕｒｋａｔ細胞
、マウスＮＩＨ３Ｔ３細胞およびＣ１２７細胞、Ｃｏｓ １細胞、Ｃｏｓ ７細
胞およびＣＶ１細胞、ウズラＱＣ１−３細胞、マウスＬ細胞、ならびにチャイニ
ーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を含む。
【０６０４】
あるいは、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、染色体に組み込まれ
たＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドを含む、安定な細胞株中で発現
され得る。ＤＨＦＲ、ｇｐｔ、ネオマイシン、ハイグロマイシンのような選択マ
ーカーを用いる同時トランスフェクションは、トランスフェクトされた細胞の同
定および単離を可能にする。
たＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドを含む、安定な細胞株中で発現
され得る。ＤＨＦＲ、ｇｐｔ、ネオマイシン、ハイグロマイシンのような選択マ
ーカーを用いる同時トランスフェクションは、トランスフェクトされた細胞の同
定および単離を可能にする。
【０６０５】
トランスフェクトされたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２遺伝子はまた、大量のコ
ードされたタンパク質を発現するために増幅され得る。ＤＨＦＲ（ジヒドロ葉酸
還元酵素）マーカーは、目的の遺伝子の数百または数千さえものコピーを有する
細胞株の開発に有用である。（例えば、Ａｌｔ，Ｆ．Ｗ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃ
ｈｅｍ．２５３：１３５７−１３７０（１９７８）；Ｈａｍｌｉｎ， Ｊ．Ｌ．
およびＭａ，Ｃ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ、１０９
７：１０７−１４３（１９９０）：Ｐａｇｅ， Ｍ．Ｊ．およびＳｙｎｄｅｎｈ
ａｍ，Ｍ．Ａ．、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：６４−６８（１９９１）を
参照のこと）。別の有用な選択マーカーは、酵素グルタミンシンターゼ（ＧＳ）
である（Ｍｕｒｐｈｙら、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ． ２２７：２７７−２７９ （
１９９１）；Ｂｅｂｂｉｎｇｔｏｎら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：
１６９−１７５ （１９９２））。これらのマーカーを使用して、哺乳動物細胞
を選択培地中で増殖させ、そしてもっとも高い耐性を有する細胞を選択する。こ
れらの細胞株は、染色体に組み込まれた、増幅された遺伝子を含む。チャイニー
ズハムスター卵巣（ＣＨＯ）およびＮＳＯ細胞は、タンパク質の産生のためにし
ばしば使用される。
ードされたタンパク質を発現するために増幅され得る。ＤＨＦＲ（ジヒドロ葉酸
還元酵素）マーカーは、目的の遺伝子の数百または数千さえものコピーを有する
細胞株の開発に有用である。（例えば、Ａｌｔ，Ｆ．Ｗ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃ
ｈｅｍ．２５３：１３５７−１３７０（１９７８）；Ｈａｍｌｉｎ， Ｊ．Ｌ．
およびＭａ，Ｃ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ、１０９
７：１０７−１４３（１９９０）：Ｐａｇｅ， Ｍ．Ｊ．およびＳｙｎｄｅｎｈ
ａｍ，Ｍ．Ａ．、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：６４−６８（１９９１）を
参照のこと）。別の有用な選択マーカーは、酵素グルタミンシンターゼ（ＧＳ）
である（Ｍｕｒｐｈｙら、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ． ２２７：２７７−２７９ （
１９９１）；Ｂｅｂｂｉｎｇｔｏｎら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：
１６９−１７５ （１９９２））。これらのマーカーを使用して、哺乳動物細胞
を選択培地中で増殖させ、そしてもっとも高い耐性を有する細胞を選択する。こ
れらの細胞株は、染色体に組み込まれた、増幅された遺伝子を含む。チャイニー
ズハムスター卵巣（ＣＨＯ）およびＮＳＯ細胞は、タンパク質の産生のためにし
ばしば使用される。
【０６０６】
プラスミドｐＳＶ２−ＤＨＦＲ（ＡＴＣＣ受託番号３７１４６）の誘導体であ
る、発現ベクターｐＣ４（ＡＴＣＣ受託番号２０９６４６）およびｐＣ６（ＡＴ
ＣＣ受託番号２０９６４７）は、ラウス肉腫ウイルス（Ｃｕｌｌｅｎら、Ｍｏｌ
ｅｃｕｌａｒ ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４３８−４４７
（１９８５年３月））の強力なプロモーター（ＬＴＲ）、およびＣＭＶエンハン
サー（Ｂｏｓｈａｒｔら、Ｃｅｌｌ ４１：５２１−５３０ （１９８５））の
フラグメントを含む。例えば、ＢａｍＨＩ、ＸｂａＩ、およびＡｓｐ７１８の制
限酵素切断部位を有するマルチプルクローニングサイトは、ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２のクローニングを容易にする。このベクターはまた、３’イントロン、
ラットプレプロインシュリン遺伝子のポリアデニル化および終結シグナル、なら
びに、ＳＶ４０初期プロモーターの制御下にあるマウスＤＨＦＲ遺伝子を含む。
る、発現ベクターｐＣ４（ＡＴＣＣ受託番号２０９６４６）およびｐＣ６（ＡＴ
ＣＣ受託番号２０９６４７）は、ラウス肉腫ウイルス（Ｃｕｌｌｅｎら、Ｍｏｌ
ｅｃｕｌａｒ ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４３８−４４７
（１９８５年３月））の強力なプロモーター（ＬＴＲ）、およびＣＭＶエンハン
サー（Ｂｏｓｈａｒｔら、Ｃｅｌｌ ４１：５２１−５３０ （１９８５））の
フラグメントを含む。例えば、ＢａｍＨＩ、ＸｂａＩ、およびＡｓｐ７１８の制
限酵素切断部位を有するマルチプルクローニングサイトは、ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２のクローニングを容易にする。このベクターはまた、３’イントロン、
ラットプレプロインシュリン遺伝子のポリアデニル化および終結シグナル、なら
びに、ＳＶ４０初期プロモーターの制御下にあるマウスＤＨＦＲ遺伝子を含む。
【０６０７】
天然に存在するシグナル配列が、分泌タンパク質を産生するために使用される
場合、このベクターは、第二のシグナルペプチドを必要としない。あるいは、天
然に存在するシグナル配列が使用されない場合には、このベクターは、細胞から
タンパク質を分泌する試みにおいて異種シグナル配列を含むように改変され得る
（例えば、ＷＯ９６／３４８９１を参照のこと）。
場合、このベクターは、第二のシグナルペプチドを必要としない。あるいは、天
然に存在するシグナル配列が使用されない場合には、このベクターは、細胞から
タンパク質を分泌する試みにおいて異種シグナル配列を含むように改変され得る
（例えば、ＷＯ９６／３４８９１を参照のこと）。
【０６０８】
次いで、増幅フラグメントを、適切な制限酵素で消化し、そして市販のキット
（「Ｇｅｎｅｃｌｅａｎ」、ＢＩＯ １０１ Ｉｎｃ．，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃ
ａ．）を使用して１％アガロースゲル上で精製する。次いで、単離されたフラグ
メントおよび脱リン酸化したベクターを、Ｔ４ ＤＮＡリガーゼで連結する。次
いで、Ｅ．ｃｏｌｉ ＨＢ１０１またはＸＬ−１ Ｂｌｕｅ細胞を形質転換し、
そしてプラスミドｐＣ６またはｐＣ４に挿入されたフラグメントを含む細菌を、
例えば、制限酵素分析を用いて同定する。
（「Ｇｅｎｅｃｌｅａｎ」、ＢＩＯ １０１ Ｉｎｃ．，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃ
ａ．）を使用して１％アガロースゲル上で精製する。次いで、単離されたフラグ
メントおよび脱リン酸化したベクターを、Ｔ４ ＤＮＡリガーゼで連結する。次
いで、Ｅ．ｃｏｌｉ ＨＢ１０１またはＸＬ−１ Ｂｌｕｅ細胞を形質転換し、
そしてプラスミドｐＣ６またはｐＣ４に挿入されたフラグメントを含む細菌を、
例えば、制限酵素分析を用いて同定する。
【０６０９】
活性なＤＨＦＲ遺伝子を欠損するチャイニーズハムスター卵巣細胞を、トラン
スフェクションに使用する。５μｇの発現プラスミドｐＣ６またはｐＣ４を、リ
ポフェクチンを用いて、０．５μｇのプラスミドｐＳＶｎｅｏとともに同時トラ
ンスフェクトする（Ｆｅｌｇｎｅｒら、前出）。プラスミドｐＳＶ２−ｎｅｏは
、優性選択マーカーであるところの、Ｇ４１８を含む抗生物質の群に対する耐性
を付与する酵素をコードするＴｎ５由来のｎｅｏ遺伝子を含む。細胞を、１ｍｇ
／ｍｌのＧ４１８を補充したαマイナスＭＥＭに播種する。２日後、細胞をトリ
プシン処理し、そして１０、２５、または５０ｎｇ／ｍｌのメトトレキサートお
よび１ｍｇ／ｍｌのＧ４１８を補充したαマイナスＭＥＭ中のハイブリドーマク
ローニングプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ，Ｇｅｒｍａｎｙ）中に播種する。約１０
〜１４日後、単一のクローンをトリプシン処理し、次いでメトトレキサートの異
なる濃度（５０ｎＭ、１００ｎＭ、２００ｎＭ、４００ｎＭ、８００ｎＭ）を使
用して、６ウェルのペトリ皿または１０ｍｌのフラスコに播種する。次いで、メ
トトレキサートの最高濃度で増殖するクローンを、さらに高い濃度（１μＭ、２
μＭ、５μＭ、１０μＭ、２０μＭ）のメトトレキサートを含む新たな６ウェル
プレートに移す。同じ手順を、１００〜２００μＭの濃度で増殖するクローンが
得られるまで繰り返す。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の遺伝子産物の発現を、例
えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウエスタンブロットによって、または逆相ＨＰＬ
Ｃ分析によって分析する。
スフェクションに使用する。５μｇの発現プラスミドｐＣ６またはｐＣ４を、リ
ポフェクチンを用いて、０．５μｇのプラスミドｐＳＶｎｅｏとともに同時トラ
ンスフェクトする（Ｆｅｌｇｎｅｒら、前出）。プラスミドｐＳＶ２−ｎｅｏは
、優性選択マーカーであるところの、Ｇ４１８を含む抗生物質の群に対する耐性
を付与する酵素をコードするＴｎ５由来のｎｅｏ遺伝子を含む。細胞を、１ｍｇ
／ｍｌのＧ４１８を補充したαマイナスＭＥＭに播種する。２日後、細胞をトリ
プシン処理し、そして１０、２５、または５０ｎｇ／ｍｌのメトトレキサートお
よび１ｍｇ／ｍｌのＧ４１８を補充したαマイナスＭＥＭ中のハイブリドーマク
ローニングプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ，Ｇｅｒｍａｎｙ）中に播種する。約１０
〜１４日後、単一のクローンをトリプシン処理し、次いでメトトレキサートの異
なる濃度（５０ｎＭ、１００ｎＭ、２００ｎＭ、４００ｎＭ、８００ｎＭ）を使
用して、６ウェルのペトリ皿または１０ｍｌのフラスコに播種する。次いで、メ
トトレキサートの最高濃度で増殖するクローンを、さらに高い濃度（１μＭ、２
μＭ、５μＭ、１０μＭ、２０μＭ）のメトトレキサートを含む新たな６ウェル
プレートに移す。同じ手順を、１００〜２００μＭの濃度で増殖するクローンが
得られるまで繰り返す。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の遺伝子産物の発現を、例
えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウエスタンブロットによって、または逆相ＨＰＬ
Ｃ分析によって分析する。
【０６１０】
（実施例１１：Ｎ−末端および／またはＣ−末端欠失変異体の構築）
以下の一般的なアプローチを使用して、Ｎ−末端またはＣ−末端欠失ＭＥＴＨ
１およびＭＥＴＨ２欠失変異体をクローニングし得る。一般的に、約１５〜２５
ヌクレオチドの２つのオリゴヌクレオチドプライマーは、配列番号１または配列
番号３のポリヌクレオチドの所望の５’および３’位置に由来する。プライマー
の５’および３’位置は、所望のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド
フラグメントに基づいて決定される。開始コドンおよび終止コドンは、必要な場
合、ポリヌクレオチドフラグメントによってコードされるＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２ポリペプチドフラグメントを発現するために、５’および３’プライマー
にそれぞれ付加される。好ましいＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド
フラグメントは、本明細書の「ポリヌクレオチドおよびポリペプチドフラグメン
ト」の節で上記に開示されるＮ−末端およびＣ−末端欠失変異体をコードするポ
リヌクレオチドフラグメントである。
１およびＭＥＴＨ２欠失変異体をクローニングし得る。一般的に、約１５〜２５
ヌクレオチドの２つのオリゴヌクレオチドプライマーは、配列番号１または配列
番号３のポリヌクレオチドの所望の５’および３’位置に由来する。プライマー
の５’および３’位置は、所望のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド
フラグメントに基づいて決定される。開始コドンおよび終止コドンは、必要な場
合、ポリヌクレオチドフラグメントによってコードされるＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２ポリペプチドフラグメントを発現するために、５’および３’プライマー
にそれぞれ付加される。好ましいＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド
フラグメントは、本明細書の「ポリヌクレオチドおよびポリペプチドフラグメン
ト」の節で上記に開示されるＮ−末端およびＣ−末端欠失変異体をコードするポ
リヌクレオチドフラグメントである。
【０６１１】
所望のベクター中のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドフラグメン
トのクローニングを容易にするための制限部位を含むさらなるヌクレオチドもま
た、５’および３’プライマー配列に添加され得る。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ
２ポリヌクレオチドフラグメントを、ゲノムＤＮＡまたは寄託されたｃＤＮＡク
ローンから、適切なＰＣＲオリゴヌクレオチドプライマーおよび本明細書中で考
察した条件もしくは当該分野で公知の条件を使用して増幅する。本発明のＭＥＴ
Ｈ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドフラグメントによってコードされるＭＥ
ＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドフラグメントを、全長のポリペプチドとし
て同じ一般的な様式で、発現および精製し得るが、特定のフラグメントと全長ポ
リペプチドとの間の化学的および物理的特性における違いのために、慣用的な改
変が必要であり得る。
トのクローニングを容易にするための制限部位を含むさらなるヌクレオチドもま
た、５’および３’プライマー配列に添加され得る。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ
２ポリヌクレオチドフラグメントを、ゲノムＤＮＡまたは寄託されたｃＤＮＡク
ローンから、適切なＰＣＲオリゴヌクレオチドプライマーおよび本明細書中で考
察した条件もしくは当該分野で公知の条件を使用して増幅する。本発明のＭＥＴ
Ｈ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドフラグメントによってコードされるＭＥ
ＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドフラグメントを、全長のポリペプチドとし
て同じ一般的な様式で、発現および精製し得るが、特定のフラグメントと全長ポ
リペプチドとの間の化学的および物理的特性における違いのために、慣用的な改
変が必要であり得る。
【０６１２】
例示の手段として、そして本発明を限定するためにではなく、ＭＥＴＨ１ポリ
ペプチドフラグメントＲ−２３５〜Ｌ−９３４またはＭＥＴＨ２ポリペプチドフ
ラグメントＲ−２１４〜Ｑ−８３６をコードするポリヌクレオチドを、以下のよ
うに増幅およびクローニングする：制限酵素部位、続いてＲ−２３５またはＲ−
２１４でそれぞれ開始するポリペプチドフラグメントのＮ−末端部分をコードす
るポリヌクレオチド配列とインフレームに開始コドンを含む５’プライマーを生
成する。制限酵素部位、続いてＬ−９３４またはＱ−８３６でそれぞれ終止する
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドフラグメントのＣ−末端部分をコード
するポリヌクレオチド配列とインフレームに終止コドンを含む相補的な３’プラ
イマーを生成する。
ペプチドフラグメントＲ−２３５〜Ｌ−９３４またはＭＥＴＨ２ポリペプチドフ
ラグメントＲ−２１４〜Ｑ−８３６をコードするポリヌクレオチドを、以下のよ
うに増幅およびクローニングする：制限酵素部位、続いてＲ−２３５またはＲ−
２１４でそれぞれ開始するポリペプチドフラグメントのＮ−末端部分をコードす
るポリヌクレオチド配列とインフレームに開始コドンを含む５’プライマーを生
成する。制限酵素部位、続いてＬ−９３４またはＱ−８３６でそれぞれ終止する
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドフラグメントのＣ−末端部分をコード
するポリヌクレオチド配列とインフレームに終止コドンを含む相補的な３’プラ
イマーを生成する。
【０６１３】
増幅したポリヌクレオチドフラグメントおよび発現ベクターを、プライマー中
の部位を認識する制限酵素を用いて消化する。次いで、消化したポリヌクレオチ
ドを互いに連結する。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドフラグメン
トを、好ましくは、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドフラグメントコー
ド領域を、プロモーターから下流に配置する様式で、制限酵素処理されたベクタ
ー中に挿入する。連結混合物を、標準的な手順を使用して、そして本明細書中の
実施例に記載されるように、コンピテントなＥ．ｃｏｌｉに形質転換する。耐性
コロニーからプラスミドＤＮＡを単離し、そしてクローニングしたＤＮＡの同一
性を、制限分析、ＰＣＲ、およびＤＮＡ配列決定によって確認した。
の部位を認識する制限酵素を用いて消化する。次いで、消化したポリヌクレオチ
ドを互いに連結する。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチドフラグメン
トを、好ましくは、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドフラグメントコー
ド領域を、プロモーターから下流に配置する様式で、制限酵素処理されたベクタ
ー中に挿入する。連結混合物を、標準的な手順を使用して、そして本明細書中の
実施例に記載されるように、コンピテントなＥ．ｃｏｌｉに形質転換する。耐性
コロニーからプラスミドＤＮＡを単離し、そしてクローニングしたＤＮＡの同一
性を、制限分析、ＰＣＲ、およびＤＮＡ配列決定によって確認した。
【０６１４】
（実施例１２：ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のタンパク質融合物）
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、好ましくは、他のタンパク質に
融合される。これらの融合タンパク質は、種々の適用について使用され得る。例
えば、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドの、Ｈｉｓタグ、ＨＡタグ、プ
ロテインＡ、ＩｇＧドメイン、およびマルトース結合タンパク質への融合は、精
製を容易にする（実施例７を参照のこと；ＥＰ Ａ ３９４，８２７もまた参照
のこと；Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３３１：８４−８６（１９８
８））。同様に、ＩｇＧ−１、ＩｇＧ−３、およびアルブミンへの融合は、イン
ビボでの半減期を増大させる。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドに融合
した核局在化シグナルは、タンパク質を特定の細胞下の局在に標的化し得る。一
方、共有結合ヘテロダイマーまたはホモダイマーは、融合タンパク質の活性を増
大または減少させ得る。融合タンパク質はまた、１つより多い機能を有するキメ
ラ分子を作製し得る。最後に、融合タンパク質は、非融合タンパク質と比較して
、融合タンパク質の可溶性および／または安定性を増大させ得る。上記の融合タ
ンパク質の全ての型は、ポリペプチドのＩｇＧ分子への融合を概説する以下のプ
ロトコル、または実施例７に記載されるプロトコルを改変することによって作製
され得る。
融合される。これらの融合タンパク質は、種々の適用について使用され得る。例
えば、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドの、Ｈｉｓタグ、ＨＡタグ、プ
ロテインＡ、ＩｇＧドメイン、およびマルトース結合タンパク質への融合は、精
製を容易にする（実施例７を参照のこと；ＥＰ Ａ ３９４，８２７もまた参照
のこと；Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３３１：８４−８６（１９８
８））。同様に、ＩｇＧ−１、ＩｇＧ−３、およびアルブミンへの融合は、イン
ビボでの半減期を増大させる。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドに融合
した核局在化シグナルは、タンパク質を特定の細胞下の局在に標的化し得る。一
方、共有結合ヘテロダイマーまたはホモダイマーは、融合タンパク質の活性を増
大または減少させ得る。融合タンパク質はまた、１つより多い機能を有するキメ
ラ分子を作製し得る。最後に、融合タンパク質は、非融合タンパク質と比較して
、融合タンパク質の可溶性および／または安定性を増大させ得る。上記の融合タ
ンパク質の全ての型は、ポリペプチドのＩｇＧ分子への融合を概説する以下のプ
ロトコル、または実施例７に記載されるプロトコルを改変することによって作製
され得る。
【０６１５】
簡単には、ＩｇＧ分子のヒトＦｃ部分は、以下に記載の配列の５’および３’
末端にわたるプライマーを使用してＰＣＲ増幅され得る。これらのプライマーは
また、発現ベクター（好ましくは、哺乳動物発現ベクター）へのクローニングを
容易にする都合の良い制限酵素部位を有するべきである。
末端にわたるプライマーを使用してＰＣＲ増幅され得る。これらのプライマーは
また、発現ベクター（好ましくは、哺乳動物発現ベクター）へのクローニングを
容易にする都合の良い制限酵素部位を有するべきである。
【０６１６】
例えば、ｐＣ４（受託番号第２０９６４６号）が使用される場合、ヒトＦｃ部
分は、ＢａｍＨＩクローニング部位に連結され得る。３’ＢａｍＨＩ部位が破壊
されるべきであることに注意のこと。次に、ヒトＦｃ部分を含有するベクターが
、ＢａｍＨＩによって再び制限され、ベクターを線状化し、そして実施例５に記
載するＰＣＲプロトコルによって単離されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌ
クレオチドが、このＢａｍＨＩ部位に連結される。このポリヌクレオチドは、終
止コドンなしにクローン化され、そうでなければ、融合タンパク質は産生されな
いことに注意すること。
分は、ＢａｍＨＩクローニング部位に連結され得る。３’ＢａｍＨＩ部位が破壊
されるべきであることに注意のこと。次に、ヒトＦｃ部分を含有するベクターが
、ＢａｍＨＩによって再び制限され、ベクターを線状化し、そして実施例５に記
載するＰＣＲプロトコルによって単離されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌ
クレオチドが、このＢａｍＨＩ部位に連結される。このポリヌクレオチドは、終
止コドンなしにクローン化され、そうでなければ、融合タンパク質は産生されな
いことに注意すること。
【０６１７】
天然に存在するシグナル配列が分泌タンパク質を産生するために使用される場
合、ｐＣ４は、第二のシグナルペプチドを必要としない。あるいは、天然に存在
するシグナル配列が使用されない場合、ベクターは、異種シグナル配列を含むよ
うに改変され得る（例えば、ＷＯ ９６／３４８９１を参照のこと）。 ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域
合、ｐＣ４は、第二のシグナルペプチドを必要としない。あるいは、天然に存在
するシグナル配列が使用されない場合、ベクターは、異種シグナル配列を含むよ
うに改変され得る（例えば、ＷＯ ９６／３４８９１を参照のこと）。 ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域
【０６１８】
【化１】
（実施例１３：抗体の産生）
ａ）本発明の抗体は、種々の方法によって調製され得る。（Ｃｕｒｒｅｎｔ
Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，第２章を参照のこと。）例えば、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２を発現する細胞は、ポリクローナル抗体を含む血清の産生を誘導するために
動物に投与される。好ましい方法において、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパ
ク質の調製物が調製され、そして精製されて、天然の夾雑物を実質的に含まない
ようにする。次いで、このような調製物は、より大きな比活性のポリクローナル
抗血清を生成するために、動物に導入される。
Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，第２章を参照のこと。）例えば、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２を発現する細胞は、ポリクローナル抗体を含む血清の産生を誘導するために
動物に投与される。好ましい方法において、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパ
ク質の調製物が調製され、そして精製されて、天然の夾雑物を実質的に含まない
ようにする。次いで、このような調製物は、より大きな比活性のポリクローナル
抗血清を生成するために、動物に導入される。
【０６１９】
最も好ましい方法において、本発明の抗体は、モノクローナル抗体（または、
そのタンパク質結合フラグメント）である。このようなモノクローナル抗体は、
ハイブリドーマ技術を使用して調製され得る（Ｋｏｈｌｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ
２５６：４９５（１９７５）；Ｋｏｈｌｅｒら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．
６：５１１（１９７６）；Ｋｏｈｌｅｒら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：
２９２（１９７６）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇら：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔ
ｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ，Ｅｌｓｅｖｉ
ｅｒ，Ｎ．Ｙ．、５６３−６８１頁（１９８１））。一般に、このような手順は
、動物（好ましくは、マウス）をＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリぺプチドで免
疫化すること、またはより好ましくは、分泌されるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２
ポリぺプチド発現細胞での免疫化を含む。このような細胞は、任意の適切な組織
培養培地において培養され得る；しかし、１０％ウシ胎仔血清（約５６℃で非働
化した）を補充し、そして約１０ｇ／ｌの非必須アミノ酸、約１，０００Ｕ／ｍ
ｌのペニシリン、および約１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンを補充したＥ
ａｒｌｅ改変Ｅａｇｌｅ培地において細胞を培養することが好ましい。
そのタンパク質結合フラグメント）である。このようなモノクローナル抗体は、
ハイブリドーマ技術を使用して調製され得る（Ｋｏｈｌｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ
２５６：４９５（１９７５）；Ｋｏｈｌｅｒら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．
６：５１１（１９７６）；Ｋｏｈｌｅｒら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：
２９２（１９７６）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇら：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔ
ｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ，Ｅｌｓｅｖｉ
ｅｒ，Ｎ．Ｙ．、５６３−６８１頁（１９８１））。一般に、このような手順は
、動物（好ましくは、マウス）をＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリぺプチドで免
疫化すること、またはより好ましくは、分泌されるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２
ポリぺプチド発現細胞での免疫化を含む。このような細胞は、任意の適切な組織
培養培地において培養され得る；しかし、１０％ウシ胎仔血清（約５６℃で非働
化した）を補充し、そして約１０ｇ／ｌの非必須アミノ酸、約１，０００Ｕ／ｍ
ｌのペニシリン、および約１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンを補充したＥ
ａｒｌｅ改変Ｅａｇｌｅ培地において細胞を培養することが好ましい。
【０６２０】
このようなマウスの脾細胞は抽出され、そして適切なミエローマ細胞株と融合
される。任意の適切なミエローマ細胞株は、本発明に従って用いられ得る；しか
し、ＡＴＣＣから入手可能な親ミエローマ細胞株（ＳＰ２Ｏ）を用いることが好
ましい。融合後、得られるハイブリドーマ細胞を、ＨＡＴ培地において選択的に
維持し、次いでＷａｎｄｓら（Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ８０：２２
５−２３２（１９８１））に記載されるように限界希釈によってクローニングす
る。このような選択を通して得られるハイブリドーマ細胞は、次いでＭＥＴＨ１
またはＭＥＴＨ２ポリぺプチドに結合し得る抗体を分泌するクローンを同定する
ためにアッセイされる。
される。任意の適切なミエローマ細胞株は、本発明に従って用いられ得る；しか
し、ＡＴＣＣから入手可能な親ミエローマ細胞株（ＳＰ２Ｏ）を用いることが好
ましい。融合後、得られるハイブリドーマ細胞を、ＨＡＴ培地において選択的に
維持し、次いでＷａｎｄｓら（Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ８０：２２
５−２３２（１９８１））に記載されるように限界希釈によってクローニングす
る。このような選択を通して得られるハイブリドーマ細胞は、次いでＭＥＴＨ１
またはＭＥＴＨ２ポリぺプチドに結合し得る抗体を分泌するクローンを同定する
ためにアッセイされる。
【０６２１】
あるいは、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリぺプチドに結合し得るさらなる抗
体を、抗イディオタイプ抗体を使用して２段階工程の手順において生成し得る。
このような方法は、抗体それ自体が抗原であり、それゆえ第二の抗体に結合する
抗体を得ることが可能であるという事実を利用する。この方法に従って、タンパ
ク質特異的抗体が使用されて、動物（好ましくは、マウス）を免疫する。次いで
、このような動物の脾細胞を使用して、ハイブリドーマ細胞を産生する。そして
、ハイブリドーマ細胞は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質特異的抗体に
結合する能力がＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によってブロックされ得る抗体を産
生するクローンを同定するためにスクリーニングされる。このような抗体は、Ｍ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質特異的抗体に対する抗イディオタイプ抗体
を含み、そして動物を免疫してさらなるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質
特異的抗体の形成を誘導するために使用され得る。
体を、抗イディオタイプ抗体を使用して２段階工程の手順において生成し得る。
このような方法は、抗体それ自体が抗原であり、それゆえ第二の抗体に結合する
抗体を得ることが可能であるという事実を利用する。この方法に従って、タンパ
ク質特異的抗体が使用されて、動物（好ましくは、マウス）を免疫する。次いで
、このような動物の脾細胞を使用して、ハイブリドーマ細胞を産生する。そして
、ハイブリドーマ細胞は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質特異的抗体に
結合する能力がＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によってブロックされ得る抗体を産
生するクローンを同定するためにスクリーニングされる。このような抗体は、Ｍ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質特異的抗体に対する抗イディオタイプ抗体
を含み、そして動物を免疫してさらなるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質
特異的抗体の形成を誘導するために使用され得る。
【０６２２】
ＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２ならびに本発明の抗体の他のフラグメントは、本
明細書中で開示される方法に従って使用され得ることが理解される。このような
フラグメントは、代表的には、パパイン（Ｆａｂフラグメントを産生するため）
またはペプシン（Ｆ（ａｂ’）２フラグメントを産生するため）のような酵素を
使用して、タンパク質分解性切断によって産生される。あるいは、分泌されるＭ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質結合フラグメントは、組換えＤＮＡ技術の
適用を通して、または合成化学を通して産生され得る。
明細書中で開示される方法に従って使用され得ることが理解される。このような
フラグメントは、代表的には、パパイン（Ｆａｂフラグメントを産生するため）
またはペプシン（Ｆ（ａｂ’）２フラグメントを産生するため）のような酵素を
使用して、タンパク質分解性切断によって産生される。あるいは、分泌されるＭ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質結合フラグメントは、組換えＤＮＡ技術の
適用を通して、または合成化学を通して産生され得る。
【０６２３】
ヒトにおける抗体のインビボ使用のために、「ヒト化」キメラモノクローナル
抗体を使用することが好ましくあり得る。このような抗体は、上記のモノクロー
ナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞に由来する遺伝的構築物を使用すること
によって産生され得る。キメラ抗体を産生するための方法は当該分野で公知であ
る。（総説については、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９： １２０
２（１９８５）； Ｏｉら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４ （１９
８６）； Ｃａｂｉｌｌｙら、米国特許第４，８１６，５６７号；Ｔａｎｉｇｕ
ｃｈｉら、ＥＰ １７１４９６；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、ＥＰ １７３４９４；Ｎ
ｅｕｂｅｒｇｅｒら、ＷＯ ８６０１５３３；Ｒｏｂｉｎｓｏｎら、ＷＯ ８７
０２６７１；Ｂｏｕｌｉａｎｎｅら、Ｎａｔｕｒｅ ３１２：６４３ （１９８
４）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３１４：２６８（１９８５）を参
照のこと。） （ｂ）ｓｃＦｖｓのライブラリーからの本発明のポリペプチドに対して指向さ
れる抗体フラグメントの単離） ヒトＰＢＬから単離した天然に存在するＶ遺伝子を、ドナーが曝され得たかま
たは曝され得なかった本発明のポリペプチドに対する反応性を含む抗体フラグメ
ントのライブラリーに構築する（例えば、米国特許第５，８８５，７９３号（そ
の全体が参考として本明細書に援用される）を参照のこと）。
抗体を使用することが好ましくあり得る。このような抗体は、上記のモノクロー
ナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞に由来する遺伝的構築物を使用すること
によって産生され得る。キメラ抗体を産生するための方法は当該分野で公知であ
る。（総説については、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９： １２０
２（１９８５）； Ｏｉら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４ （１９
８６）； Ｃａｂｉｌｌｙら、米国特許第４，８１６，５６７号；Ｔａｎｉｇｕ
ｃｈｉら、ＥＰ １７１４９６；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、ＥＰ １７３４９４；Ｎ
ｅｕｂｅｒｇｅｒら、ＷＯ ８６０１５３３；Ｒｏｂｉｎｓｏｎら、ＷＯ ８７
０２６７１；Ｂｏｕｌｉａｎｎｅら、Ｎａｔｕｒｅ ３１２：６４３ （１９８
４）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３１４：２６８（１９８５）を参
照のこと。） （ｂ）ｓｃＦｖｓのライブラリーからの本発明のポリペプチドに対して指向さ
れる抗体フラグメントの単離） ヒトＰＢＬから単離した天然に存在するＶ遺伝子を、ドナーが曝され得たかま
たは曝され得なかった本発明のポリペプチドに対する反応性を含む抗体フラグメ
ントのライブラリーに構築する（例えば、米国特許第５，８８５，７９３号（そ
の全体が参考として本明細書に援用される）を参照のこと）。
【０６２４】
ライブラリーのレスキュー。 ＰＣＴ公開ＷＯ ９２／０１０４７に記載のよ
うに、ヒトＰＢＬのＲＮＡからｓｃＦｖｓのライブラリーを構築する。抗体フラ
グメントを提示するファージをレスキューするため、ファージミドを保有する約
１０9個のＥ．ｃｏｌｉを用いて、５０ｍｌの２×ＴＹ（１％グルコースおよび
１００μｇ／ｍｌのアンピシリンを含有する）（２×ＴＹ−ＡＭＰ−ＧＬＵ）を
接種し、そして振盪しながら０．８のＯ．Ｄ．まで増殖させる。この培養物の５
ｍｌを用いて５０ｍｌの２×ＴＹ−ＡＭＰ−ＧＬＵに接種し、２×１０８ＴＵの
Δ遺伝子３ヘルパー（Ｍ１３Δ遺伝子ＩＩＩ、ＰＣＴ公開ＷＯ９２／０１０４７
を参照のこと）を添加し、そして培養物を振盪なしで３７℃で４５分間インキュ
ベートし、次いで振盪しながら３７℃で４５分間インキュベートする。この培養
物を１０分間４０００ｒ．ｐ．ｍ．で遠心分離し、そしてペレットを２リットル
の２×ＴＹ（１００μｇ／ｍｌアンピシリンおよび５０μｇ／ｍｌカナマイシン
を含有する）中に再懸濁し、そして一晩増殖させる。ファージをＰＣＴ公開ＷＯ
９２／０１０４７に記載のように調製する。
うに、ヒトＰＢＬのＲＮＡからｓｃＦｖｓのライブラリーを構築する。抗体フラ
グメントを提示するファージをレスキューするため、ファージミドを保有する約
１０9個のＥ．ｃｏｌｉを用いて、５０ｍｌの２×ＴＹ（１％グルコースおよび
１００μｇ／ｍｌのアンピシリンを含有する）（２×ＴＹ−ＡＭＰ−ＧＬＵ）を
接種し、そして振盪しながら０．８のＯ．Ｄ．まで増殖させる。この培養物の５
ｍｌを用いて５０ｍｌの２×ＴＹ−ＡＭＰ−ＧＬＵに接種し、２×１０８ＴＵの
Δ遺伝子３ヘルパー（Ｍ１３Δ遺伝子ＩＩＩ、ＰＣＴ公開ＷＯ９２／０１０４７
を参照のこと）を添加し、そして培養物を振盪なしで３７℃で４５分間インキュ
ベートし、次いで振盪しながら３７℃で４５分間インキュベートする。この培養
物を１０分間４０００ｒ．ｐ．ｍ．で遠心分離し、そしてペレットを２リットル
の２×ＴＹ（１００μｇ／ｍｌアンピシリンおよび５０μｇ／ｍｌカナマイシン
を含有する）中に再懸濁し、そして一晩増殖させる。ファージをＰＣＴ公開ＷＯ
９２／０１０４７に記載のように調製する。
【０６２５】
Ｍ１３Δ遺伝子ＩＩＩを以下のように調製する：Ｍ１３Δ遺伝子ＩＩＩヘルパ
ーファージは、遺伝子ＩＩＩタンパク質をコードしない。それゆえ、抗体フラグ
メントを提示するファージ（ファージミド）は、抗原に対するより大きい結合ア
ビディティーを有する。ファージ形態形成の間、野生型遺伝子ＩＩＩタンパク質
を供給するｐＵＣ１９誘導体を保有する細胞においてヘルパーファージを増殖さ
せることにより、感染性Ｍ１３Δ遺伝子ＩＩＩ粒子を作製する。培養物を振盪な
しで３７℃で１時間インキュベートし、次いで振盪しながら３７℃でさらに１時
間インキュベートする。細胞を遠心沈殿（ＩＥＣ−Ｃｅｎｔｒａ ８，４００ｒ
．ｐ．ｍ．で１０分間）し、１００μｇ／ｍｌのアンピシリンおよび２５μｇ／
ｍｌのカナマイシンを含有する２×ＴＹブロス（２×ＴＹ−ＡＭＰ−ＫＡＮ）３
００ｍｌ中で再懸濁し、そして３７℃で振盪しながら一晩増殖させた。ファージ
粒子を、２回のＰＥＧ沈殿（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９９０）により培養培地か
ら精製および濃縮し、２ｍｌ ＰＢＳに再懸濁し、そして０．４５μｍのフィル
ター（Ｍｉｎｉｓａｒｔ ＮＭＬ；Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）を通過させ、約１０13 形質導入単位／ｍｌ（アンピシリン耐性クローン）の最終濃度を得る。
ーファージは、遺伝子ＩＩＩタンパク質をコードしない。それゆえ、抗体フラグ
メントを提示するファージ（ファージミド）は、抗原に対するより大きい結合ア
ビディティーを有する。ファージ形態形成の間、野生型遺伝子ＩＩＩタンパク質
を供給するｐＵＣ１９誘導体を保有する細胞においてヘルパーファージを増殖さ
せることにより、感染性Ｍ１３Δ遺伝子ＩＩＩ粒子を作製する。培養物を振盪な
しで３７℃で１時間インキュベートし、次いで振盪しながら３７℃でさらに１時
間インキュベートする。細胞を遠心沈殿（ＩＥＣ−Ｃｅｎｔｒａ ８，４００ｒ
．ｐ．ｍ．で１０分間）し、１００μｇ／ｍｌのアンピシリンおよび２５μｇ／
ｍｌのカナマイシンを含有する２×ＴＹブロス（２×ＴＹ−ＡＭＰ−ＫＡＮ）３
００ｍｌ中で再懸濁し、そして３７℃で振盪しながら一晩増殖させた。ファージ
粒子を、２回のＰＥＧ沈殿（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９９０）により培養培地か
ら精製および濃縮し、２ｍｌ ＰＢＳに再懸濁し、そして０．４５μｍのフィル
ター（Ｍｉｎｉｓａｒｔ ＮＭＬ；Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）を通過させ、約１０13 形質導入単位／ｍｌ（アンピシリン耐性クローン）の最終濃度を得る。
【０６２６】
ライブラリーのパニング。Ｉｍｍｕｎｏｔｕｂｅｓ（Ｎｕｎｃ）を、本発明の
ポリペプチドの１００μｇ／ｍｌまたは１０μｇ／ｍｌのいずれかの４ｍｌを用
いてＰＢＳ中で一晩被膜する。チューブを２％Ｍａｒｖｅｌ−ＰＢＳを用いて３
７℃で２時間ブロックし、次いでＰＢＳ中で３回洗浄する。約１０13ＴＵのファ
ージをチューブに適用し、そして、回転盤上で上下にタンブリングしながら室温
で３０分間インキュベートし、次いでさらに１．５時間静置しておく。チューブ
をＰＢＳ０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０で１０回、そしてＰＢＳで１０回洗浄する。
１ｍｌの１００ｍＭトリエチルアミンを添加し、そして回転盤上で１５分間上下
に回転させることによりファージを溶出し、その後この溶液を０．５ｍｌの１．
０Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．４で直ちに中和する。次いで、溶出したファ
ージを細菌とともに３７℃で３０分間インキュベートすることにより、ファージ
を用いて、１０ｍｌの対数増殖中期のＥ．ｃｏｌｉ ＴＧ１に感染させる。次い
で、Ｅ．ｃｏｌｉを１％グルコースおよび１００μｇ／ｍｌアンピシリンを含有
するＴＹＥプレート上にプレートする。次いで、得られる細菌ライブラリーを、
上記のようにΔ遺伝子３ヘルパーファージでレスキューし、次の回の選択のため
のファージを調製する。次いで、このプロセスを、アフィニティー精製の全４回
について反復し、３回目および４回目にはチューブ洗浄をＰＢＳ、０．１％Ｔｗ
ｅｅｎ−２０で２０倍、そしてＰＢＳで２０倍に増加する。
ポリペプチドの１００μｇ／ｍｌまたは１０μｇ／ｍｌのいずれかの４ｍｌを用
いてＰＢＳ中で一晩被膜する。チューブを２％Ｍａｒｖｅｌ−ＰＢＳを用いて３
７℃で２時間ブロックし、次いでＰＢＳ中で３回洗浄する。約１０13ＴＵのファ
ージをチューブに適用し、そして、回転盤上で上下にタンブリングしながら室温
で３０分間インキュベートし、次いでさらに１．５時間静置しておく。チューブ
をＰＢＳ０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０で１０回、そしてＰＢＳで１０回洗浄する。
１ｍｌの１００ｍＭトリエチルアミンを添加し、そして回転盤上で１５分間上下
に回転させることによりファージを溶出し、その後この溶液を０．５ｍｌの１．
０Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．４で直ちに中和する。次いで、溶出したファ
ージを細菌とともに３７℃で３０分間インキュベートすることにより、ファージ
を用いて、１０ｍｌの対数増殖中期のＥ．ｃｏｌｉ ＴＧ１に感染させる。次い
で、Ｅ．ｃｏｌｉを１％グルコースおよび１００μｇ／ｍｌアンピシリンを含有
するＴＹＥプレート上にプレートする。次いで、得られる細菌ライブラリーを、
上記のようにΔ遺伝子３ヘルパーファージでレスキューし、次の回の選択のため
のファージを調製する。次いで、このプロセスを、アフィニティー精製の全４回
について反復し、３回目および４回目にはチューブ洗浄をＰＢＳ、０．１％Ｔｗ
ｅｅｎ−２０で２０倍、そしてＰＢＳで２０倍に増加する。
【０６２７】
結合剤の特徴付け。第３回目および４回目の選択から溶出したファージを用い
て、Ｅ．ｃｏｌｉ ＨＢ ２１５１を感染させ、そして可溶性ｓｃＦｖをアッセ
イのために単一コロニーから生成する（Ｍａｒｋｓら、１９９１）。５０ｍＭ炭
酸水素塩、ｐＨ９．６中の本発明のポリペプチドの１０ｐｇ／ｍｌのいずれかで
被膜したマイクロタイタープレートを用いてＥＬＩＳＡを実行する。ＥＬＩＳＡ
中の陽性クローンをＰＣＲフィンガープリンティング（例えば、ＰＣＴ公報ＷＯ
９２／０１０４７を参照のこと）、次に配列決定することによりさらに特徴付け
る。
て、Ｅ．ｃｏｌｉ ＨＢ ２１５１を感染させ、そして可溶性ｓｃＦｖをアッセ
イのために単一コロニーから生成する（Ｍａｒｋｓら、１９９１）。５０ｍＭ炭
酸水素塩、ｐＨ９．６中の本発明のポリペプチドの１０ｐｇ／ｍｌのいずれかで
被膜したマイクロタイタープレートを用いてＥＬＩＳＡを実行する。ＥＬＩＳＡ
中の陽性クローンをＰＣＲフィンガープリンティング（例えば、ＰＣＴ公報ＷＯ
９２／０１０４７を参照のこと）、次に配列決定することによりさらに特徴付け
る。
【０６２８】
（実施例１４：高処理能力スクリーニングアッセイのためのＭＥＴＨ１または
ＭＥＴＨ２タンパク質の産生） 以下のプロトコルは、試験されるべきＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリぺプチ
ドを含有する上清を産生する。次いで、この上清は、実施例１６〜２３に記載さ
れるスクリーニングアッセイにおいて使用され得る。
ＭＥＴＨ２タンパク質の産生） 以下のプロトコルは、試験されるべきＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリぺプチ
ドを含有する上清を産生する。次いで、この上清は、実施例１６〜２３に記載さ
れるスクリーニングアッセイにおいて使用され得る。
【０６２９】
第一に、ポリ−Ｄ−リジン（６４４ ５８７ Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎ
ｎｈｅｉｍ）ストック溶液（ＰＢＳ中に１ｍｇ／ｍｌ）を、ＰＢＳ（カルシウム
もマグネシウムも含まない１７−５１６Ｆ Ｂｉｏｗｈｉｔｔａｋｅｒ）中で１
：２０に希釈して、作業溶液５０μｇ／ｍｌにする。２００μｌのこの溶液を、
各ウェル（２４ウェルプレート）に添加し、室温で２０分間インキュベートする
。溶液を各ウェルにわたって分配させることを確実にする（注：１２チャンネル
ピペッターは、１つおきのチャンネルにチップをつけて使用され得る）。ポリ−
Ｄ−リジン溶液を吸引除去し、そして１ｍｌ ＰＢＳ（リン酸緩衝化生理食塩水
）でリンスする。ＰＢＳは、細胞をプレートする直前までウェル中に残すべきで
あり、そしてプレートは２週間前までに予めポリリジンでコーティングし得る。
ｎｈｅｉｍ）ストック溶液（ＰＢＳ中に１ｍｇ／ｍｌ）を、ＰＢＳ（カルシウム
もマグネシウムも含まない１７−５１６Ｆ Ｂｉｏｗｈｉｔｔａｋｅｒ）中で１
：２０に希釈して、作業溶液５０μｇ／ｍｌにする。２００μｌのこの溶液を、
各ウェル（２４ウェルプレート）に添加し、室温で２０分間インキュベートする
。溶液を各ウェルにわたって分配させることを確実にする（注：１２チャンネル
ピペッターは、１つおきのチャンネルにチップをつけて使用され得る）。ポリ−
Ｄ−リジン溶液を吸引除去し、そして１ｍｌ ＰＢＳ（リン酸緩衝化生理食塩水
）でリンスする。ＰＢＳは、細胞をプレートする直前までウェル中に残すべきで
あり、そしてプレートは２週間前までに予めポリリジンでコーティングし得る。
【０６３０】
２９３Ｔ細胞（Ｐ＋２０を過ぎて細胞を保有しない）を、２×１０5細胞／ウ
ェルで、０．５ｍｌのＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ改変Ｅａｇｌｅ培地）（４．
５Ｇ／ＬのグルコースおよびＬ−グルタミン（１２−６０４Ｆ Ｂｉｏｗｈｉｔ
ｔａｋｅｒ）を含む）／１０％熱非働化ＦＢＳ（１４−５０３Ｆ Ｂｉｏｗｈｉ
ｔｔａｋｅｒ）／１×Ｐｅｎｓｔｒｅｐ（１７−６０２Ｅ Ｂｉｏｗｈｉｔｔａ
ｋｅｒ）中にプレートする。細胞を一晩増殖させる。
ェルで、０．５ｍｌのＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ改変Ｅａｇｌｅ培地）（４．
５Ｇ／ＬのグルコースおよびＬ−グルタミン（１２−６０４Ｆ Ｂｉｏｗｈｉｔ
ｔａｋｅｒ）を含む）／１０％熱非働化ＦＢＳ（１４−５０３Ｆ Ｂｉｏｗｈｉ
ｔｔａｋｅｒ）／１×Ｐｅｎｓｔｒｅｐ（１７−６０２Ｅ Ｂｉｏｗｈｉｔｔａ
ｋｅｒ）中にプレートする。細胞を一晩増殖させる。
【０６３１】
翌日、滅菌溶液容器（ｂａｓｉｎ）中で、３００μｌリポフェクトアミン（１
８３２４−０１２ Ｇｉｂｃｏ／ＢＲＬ）および５ｍｌ Ｏｐｔｉｍｅｍ Ｉ（
３１９８５０７０ Ｇｉｂｃｏ／ＢＲＬ）／９６ウェルプレートを、一緒に混合
する。小容量のマルチチャンネルピペッターを用いて、実施例１０〜１２に記載
する方法によって産生されたポリヌクレオチド挿入物を含有する約２μｇの発現
ベクターを、適切に標識された９６ウェルの丸底プレート中にアリコートする。
マルチチャンネルピペッターを用いて、５０μｌのリポフェクトアミン／Ｏｐｔ
ｉｍｅｍ Ｉ混合物を各ウェルに添加する。ピペットで緩やかに吸い上げたり下
げたりして混合する。室温で１５〜４５分間インキュベートする。約２０分後、
マルチチャンネルピペッターを使用して１５０μｌのＯｐｔｉｍｅｍ Ｉを各ウ
ェルに添加する。コントロールとして、挿入物を欠失するベクターＤＮＡの１つ
のプレートは、トランスフェクションの各セットでトランスフェクトされるべき
である。
８３２４−０１２ Ｇｉｂｃｏ／ＢＲＬ）および５ｍｌ Ｏｐｔｉｍｅｍ Ｉ（
３１９８５０７０ Ｇｉｂｃｏ／ＢＲＬ）／９６ウェルプレートを、一緒に混合
する。小容量のマルチチャンネルピペッターを用いて、実施例１０〜１２に記載
する方法によって産生されたポリヌクレオチド挿入物を含有する約２μｇの発現
ベクターを、適切に標識された９６ウェルの丸底プレート中にアリコートする。
マルチチャンネルピペッターを用いて、５０μｌのリポフェクトアミン／Ｏｐｔ
ｉｍｅｍ Ｉ混合物を各ウェルに添加する。ピペットで緩やかに吸い上げたり下
げたりして混合する。室温で１５〜４５分間インキュベートする。約２０分後、
マルチチャンネルピペッターを使用して１５０μｌのＯｐｔｉｍｅｍ Ｉを各ウ
ェルに添加する。コントロールとして、挿入物を欠失するベクターＤＮＡの１つ
のプレートは、トランスフェクションの各セットでトランスフェクトされるべき
である。
【０６３２】
好ましくは、トランスフェクションは、以下の作業をタッグチームを組んで（
ｔａｇ−ｔｅａｍｉｎｇ）行うべきである。タッグチームを組むことによって、
時間に関する労力は半減され、そして細胞にはＰＢＳ上であまり多くの時間を過
ごさせない。まず、Ａさんは、培地を細胞の４つの２４ウェルプレートから吸引
除去し、次いでＢさんが０．５〜１ｍｌのＰＢＳで各ウェルをリンスする。次い
で、Ａさんは、ＰＢＳリンスを吸引除去し、そしてＢさんは、チャンネル１つお
きにチップのついた１２チャンネルピペッターを使用して、２００μｌのＤＮＡ
／リポフェクトアミン／Ｏｐｔｉｍｅｍ Ｉ複合体を、まず奇数のウェルに、次
いで偶数のウェルにと、２４ウェルプレート上の各列に添加する。３７℃で６時
間インキュベートする。
ｔａｇ−ｔｅａｍｉｎｇ）行うべきである。タッグチームを組むことによって、
時間に関する労力は半減され、そして細胞にはＰＢＳ上であまり多くの時間を過
ごさせない。まず、Ａさんは、培地を細胞の４つの２４ウェルプレートから吸引
除去し、次いでＢさんが０．５〜１ｍｌのＰＢＳで各ウェルをリンスする。次い
で、Ａさんは、ＰＢＳリンスを吸引除去し、そしてＢさんは、チャンネル１つお
きにチップのついた１２チャンネルピペッターを使用して、２００μｌのＤＮＡ
／リポフェクトアミン／Ｏｐｔｉｍｅｍ Ｉ複合体を、まず奇数のウェルに、次
いで偶数のウェルにと、２４ウェルプレート上の各列に添加する。３７℃で６時
間インキュベートする。
【０６３３】
細胞をインキュベートする間に、１×ペンストレップ（ｐｅｎｓｔｒｅｐ）を
有するＤＭＥＭ中の１％ＢＳＡか、またはＨＧＳ−ＣＨＯ−５培地（１１６．６
ｍｇ／ＬのＣａＣｌ2（無水物）；０．００１３０ｍｇ／Ｌ ＣｕＳＯ4−５Ｈ2
Ｏ；０．０５０ｍｇ／ＬのＦｅ（ＮＯ3）3−９Ｈ2Ｏ；０．４１７ｍｇ／ＬのＦ
ｅＳＯ4−７Ｈ2Ｏ；３１１．８０ｍｇ／ＬのＫＣｌ；２８．６４ｍｇ／ＬのＭｇ
Ｃｌ2；４８．８４ｍｇ／ＬのＭｇＳＯ4；６９９５．５０ｍｇ／ＬのＮａＣｌ；
２４００．０ｍｇ／ＬのＮａＨＣＯ3；６２．５０ｍｇ／ＬのＮａＨ2ＰＯ4−Ｈ2 Ｏ；７１．０２ｍｇ／ＬのＮａ2ＨＰＯ4；０．４３２０ｍｇ／ＬのＺｎＳＯ4−
７Ｈ2Ｏ；０．００２ｍｇ／Ｌのアラキドン酸；１．０２２ｍｇ／Ｌのコレステ
ロール；０．０７０ｍｇ／ＬのＤＬ−α−酢酸トコフェロール；０．０５２０ｍ
ｇ／Ｌのリノール酸；０．０１０ｍｇ／Ｌのリノレン酸；０．０１０ｍｇ／Ｌの
ミリスチン酸；０．０１０ｍｇ／Ｌのオレイン酸；０．０１０ｍｇ／Ｌのパルミ
トオレイン酸（ｐａｌｍｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ）；０．０１０ｍｇ／Ｌのパルミ
チン酸；１００ｍｇ／ＬのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８；０．０１０ｍｇ／Ｌの
ステアリン酸；２．２０ｍｇ／ＬのＴｗｅｅｎ８０；４５５１ｍｇ／ＬのＤ−グ
ルコース；１３０．８５ｍｇ／ｍｌのＬ−アラニン；１４７．５０ｍｇ／ｍｌの
Ｌ−アルギニン−ＨＣｌ；７．５０ｍｇ／ｍｌのＬ−アスパラギン−Ｈ2Ｏ；６
．６５ｍｇ／ｍｌのＬ−アスパラギン酸；２９．５６ｍｇ／ｍｌのＬ−シスチン
２ＨＣｌ−Ｈ2Ｏ；３１．２９ｍｇ／ｍｌのＬ−シスチン−２ＨＣｌ；７．３５
ｍｇ／ｍｌのＬ−グルタミン酸；３６５．０ｍｇ／ｍｌのＬ−グルタミン；１８
．７５ｍｇ／ｍｌのグリシン；５２．４８ｍｇ／ｍｌのＬ−ヒスチジン−ＨＣｌ
−Ｈ2Ｏ；１０６．９７ｍｇ／ｍｌのＬ−イソロイシン；１１１．４５ｍｇ／ｍ
ｌのＬ−ロイシン；１６３．７５ｍｇ／ｍｌのＬ−リジンＨＣｌ；３２．３４ｍ
ｇ／ｍｌのＬ−メチオニン；６８．４８ｍｇ／ｍｌのＬ−フェニルアラニン；４
０．０ｍｇ／ｍｌのＬ−プロリン；２６．２５ｍｇ／ｍｌのＬ−セリン；１０１
．０５ｍｇ／ｍｌのＬ−スレオニン；１９．２２ｍｇ／ｍｌのＬ−トリプトファ
ン；９１．７９ｍｇ／ｍｌのＬ−チロシン（Ｔｒｙｒｏｓｉｎｅ）−２Ｎａ−２
Ｈ2Ｏ；および９９．６５ｍｇ／ＬのＬ−バリン；０．００３５ｍｇ／Ｌのビオ
チン；３．２４ｍｇ／ＬのＤ−Ｃａパントテン酸；１１．７８ｍｇ／Ｌの塩化コ
リン；４．６５ｍｇ／Ｌの葉酸；１５．６０ｍｇ／Ｌのｉ−イノシトール；３．
０２ｍｇ／Ｌのナイアシンアミド；３．００ｍｇ／ＬのピリドキサールＨＣｌ；
０．０３１ｍｇ／ＬのピリドキシンＨＣｌ；０．３１９ｍｇ／Ｌのリボフラビン
；３．１７ｍｇ／ＬのチアミンＨＣｌ；０．３６５ｍｇ／Ｌのチミジン；および
０．６８０ｍｇ／ＬのビタミンＢ12；２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝剤；２．３９ｍ
ｇ／ＬのＮａヒポキサンチン；０．１０５ｍｇ／Ｌのリポ酸；０．０８１ｍｇ／
Ｌのプトレシンナトリウム−２ＨＣｌ；５５．０ｍｇ／Ｌのピルビン酸ナトリウ
ム；０．００６７ｍｇ／Ｌの亜セレン酸ナトリウム；２０μＭのエタノールアミ
ン；０．１２２ｍｇ／Ｌのクエン酸第二鉄；リノール酸と複合体化した４１．７
０ｍｇ／Ｌのメチル−Ｂ−シクロデキストリン；オレイン酸と複合体化した３３
．３３ｍｇ／Ｌのメチル−Ｂ−シクロデキストリン；レチナール酢酸と複合体化
した１０ｍｇ／Ｌのメチル−Ｂ−シクロデキストリン）のいずれかの適切な培地
を調製する。２ｍＭグルタミンおよび１×ペンストレップを用いて、浸透圧を３
２７ｍＯｓｍ）に調整する。（１０％ＢＳＡストック溶液のために、１Ｌ ＤＭ
ＥＭ中にＢＳＡ（８１−０６８−３ Ｂａｙｅｒ） １００ｇを溶解する）。培
地を濾過し、そして５０μｌを内毒素アッセイのために１５ｍｌポリスチレンコ
ニカル中に収集する。
有するＤＭＥＭ中の１％ＢＳＡか、またはＨＧＳ−ＣＨＯ−５培地（１１６．６
ｍｇ／ＬのＣａＣｌ2（無水物）；０．００１３０ｍｇ／Ｌ ＣｕＳＯ4−５Ｈ2
Ｏ；０．０５０ｍｇ／ＬのＦｅ（ＮＯ3）3−９Ｈ2Ｏ；０．４１７ｍｇ／ＬのＦ
ｅＳＯ4−７Ｈ2Ｏ；３１１．８０ｍｇ／ＬのＫＣｌ；２８．６４ｍｇ／ＬのＭｇ
Ｃｌ2；４８．８４ｍｇ／ＬのＭｇＳＯ4；６９９５．５０ｍｇ／ＬのＮａＣｌ；
２４００．０ｍｇ／ＬのＮａＨＣＯ3；６２．５０ｍｇ／ＬのＮａＨ2ＰＯ4−Ｈ2 Ｏ；７１．０２ｍｇ／ＬのＮａ2ＨＰＯ4；０．４３２０ｍｇ／ＬのＺｎＳＯ4−
７Ｈ2Ｏ；０．００２ｍｇ／Ｌのアラキドン酸；１．０２２ｍｇ／Ｌのコレステ
ロール；０．０７０ｍｇ／ＬのＤＬ−α−酢酸トコフェロール；０．０５２０ｍ
ｇ／Ｌのリノール酸；０．０１０ｍｇ／Ｌのリノレン酸；０．０１０ｍｇ／Ｌの
ミリスチン酸；０．０１０ｍｇ／Ｌのオレイン酸；０．０１０ｍｇ／Ｌのパルミ
トオレイン酸（ｐａｌｍｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ）；０．０１０ｍｇ／Ｌのパルミ
チン酸；１００ｍｇ／ＬのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８；０．０１０ｍｇ／Ｌの
ステアリン酸；２．２０ｍｇ／ＬのＴｗｅｅｎ８０；４５５１ｍｇ／ＬのＤ−グ
ルコース；１３０．８５ｍｇ／ｍｌのＬ−アラニン；１４７．５０ｍｇ／ｍｌの
Ｌ−アルギニン−ＨＣｌ；７．５０ｍｇ／ｍｌのＬ−アスパラギン−Ｈ2Ｏ；６
．６５ｍｇ／ｍｌのＬ−アスパラギン酸；２９．５６ｍｇ／ｍｌのＬ−シスチン
２ＨＣｌ−Ｈ2Ｏ；３１．２９ｍｇ／ｍｌのＬ−シスチン−２ＨＣｌ；７．３５
ｍｇ／ｍｌのＬ−グルタミン酸；３６５．０ｍｇ／ｍｌのＬ−グルタミン；１８
．７５ｍｇ／ｍｌのグリシン；５２．４８ｍｇ／ｍｌのＬ−ヒスチジン−ＨＣｌ
−Ｈ2Ｏ；１０６．９７ｍｇ／ｍｌのＬ−イソロイシン；１１１．４５ｍｇ／ｍ
ｌのＬ−ロイシン；１６３．７５ｍｇ／ｍｌのＬ−リジンＨＣｌ；３２．３４ｍ
ｇ／ｍｌのＬ−メチオニン；６８．４８ｍｇ／ｍｌのＬ−フェニルアラニン；４
０．０ｍｇ／ｍｌのＬ−プロリン；２６．２５ｍｇ／ｍｌのＬ−セリン；１０１
．０５ｍｇ／ｍｌのＬ−スレオニン；１９．２２ｍｇ／ｍｌのＬ−トリプトファ
ン；９１．７９ｍｇ／ｍｌのＬ−チロシン（Ｔｒｙｒｏｓｉｎｅ）−２Ｎａ−２
Ｈ2Ｏ；および９９．６５ｍｇ／ＬのＬ−バリン；０．００３５ｍｇ／Ｌのビオ
チン；３．２４ｍｇ／ＬのＤ−Ｃａパントテン酸；１１．７８ｍｇ／Ｌの塩化コ
リン；４．６５ｍｇ／Ｌの葉酸；１５．６０ｍｇ／Ｌのｉ−イノシトール；３．
０２ｍｇ／Ｌのナイアシンアミド；３．００ｍｇ／ＬのピリドキサールＨＣｌ；
０．０３１ｍｇ／ＬのピリドキシンＨＣｌ；０．３１９ｍｇ／Ｌのリボフラビン
；３．１７ｍｇ／ＬのチアミンＨＣｌ；０．３６５ｍｇ／Ｌのチミジン；および
０．６８０ｍｇ／ＬのビタミンＢ12；２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝剤；２．３９ｍ
ｇ／ＬのＮａヒポキサンチン；０．１０５ｍｇ／Ｌのリポ酸；０．０８１ｍｇ／
Ｌのプトレシンナトリウム−２ＨＣｌ；５５．０ｍｇ／Ｌのピルビン酸ナトリウ
ム；０．００６７ｍｇ／Ｌの亜セレン酸ナトリウム；２０μＭのエタノールアミ
ン；０．１２２ｍｇ／Ｌのクエン酸第二鉄；リノール酸と複合体化した４１．７
０ｍｇ／Ｌのメチル−Ｂ−シクロデキストリン；オレイン酸と複合体化した３３
．３３ｍｇ／Ｌのメチル−Ｂ−シクロデキストリン；レチナール酢酸と複合体化
した１０ｍｇ／Ｌのメチル−Ｂ−シクロデキストリン）のいずれかの適切な培地
を調製する。２ｍＭグルタミンおよび１×ペンストレップを用いて、浸透圧を３
２７ｍＯｓｍ）に調整する。（１０％ＢＳＡストック溶液のために、１Ｌ ＤＭ
ＥＭ中にＢＳＡ（８１−０６８−３ Ｂａｙｅｒ） １００ｇを溶解する）。培
地を濾過し、そして５０μｌを内毒素アッセイのために１５ｍｌポリスチレンコ
ニカル中に収集する。
【０６３４】
トランスフェクション反応を、好ましくはタッグチームを組んでインキュベー
ション時間の終わりに終結させる。Ａさんは、トランスフェクション培地を吸引
除去し、その間Ｂさんは、１．５ｍｌの適切な培地を各ウェルに添加する。使用
された培地に依存して４５または７２時間、３７℃でインキュベートする：１％
ＢＳＡは４５時間、またはＣＨＯ−５は７２時間。
ション時間の終わりに終結させる。Ａさんは、トランスフェクション培地を吸引
除去し、その間Ｂさんは、１．５ｍｌの適切な培地を各ウェルに添加する。使用
された培地に依存して４５または７２時間、３７℃でインキュベートする：１％
ＢＳＡは４５時間、またはＣＨＯ−５は７２時間。
【０６３５】
４日目に、３００μｌのマルチチャンネルピペッターを使用して、６００μｌ
を１ｍｌの深底ウェルプレート１枚にアリコートし、そして残りの上清を２ｍｌ
の深底ウェルにアリコートする。次いで、各ウェルからの上清を実施例１６〜２
３に記載するアッセイにおいて使用し得る。
を１ｍｌの深底ウェルプレート１枚にアリコートし、そして残りの上清を２ｍｌ
の深底ウェルにアリコートする。次いで、各ウェルからの上清を実施例１６〜２
３に記載するアッセイにおいて使用し得る。
【０６３６】
活性が、上清を使用して以下に記載する任意のアッセイにおいて得られる場合
、この活性は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリぺプチドから直接に（例えば、
分泌タンパク質として）か、またはＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によって誘導さ
れる他のタンパク質の発現（これは、次いで上清中に分泌される）のいずれかに
由来することが特に理解される。従って、本発明はさらに、特定のアッセイにお
ける活性によって特徴づけられる上清中のタンパク質を同定する方法を提供する
。
、この活性は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリぺプチドから直接に（例えば、
分泌タンパク質として）か、またはＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によって誘導さ
れる他のタンパク質の発現（これは、次いで上清中に分泌される）のいずれかに
由来することが特に理解される。従って、本発明はさらに、特定のアッセイにお
ける活性によって特徴づけられる上清中のタンパク質を同定する方法を提供する
。
【０６３７】
（実施例１５：ＧＡＳレポーター構築物の構築）
細胞の分化および増殖に関与する１つのシグナル伝達経路は、Ｊａｋ−ＳＴＡ
Ｔ経路と呼ばれる。Ｊａｋ−ＳＴＡＴ経路の活性化タンパク質は、多くの遺伝子
のプロモーターに位置する、γ活性化部位「ＧＡＳ」エレメントまたはインター
フェロン感受性応答エレメント（「ＩＳＲＥ」）に結合する。これらのエレメン
トに対するタンパク質の結合は、関連する遺伝子の発現を変化させる。
Ｔ経路と呼ばれる。Ｊａｋ−ＳＴＡＴ経路の活性化タンパク質は、多くの遺伝子
のプロモーターに位置する、γ活性化部位「ＧＡＳ」エレメントまたはインター
フェロン感受性応答エレメント（「ＩＳＲＥ」）に結合する。これらのエレメン
トに対するタンパク質の結合は、関連する遺伝子の発現を変化させる。
【０６３８】
ＧＡＳおよびＩＳＲＥエレメントは、転写のシグナルトランスデューサーおよ
びアクチベーター、すなわち「ＳＴＡＴ」と呼ばれる転写因子のクラスによって
認識される。ＳＴＡＴファミリーには６つのメンバーが存在する。Ｓｔａｔ１お
よびＳｔａｔ３は、Ｓｔａｔ２と同様に（ＩＦＮαに対する応答が広範であるよ
うに）、多くの細胞型において存在する。Ｓｔａｔ４は、より限定されており、
そして多くの細胞型には存在しないが、ＩＬ−１２での処理後のＴヘルパークラ
スＩ細胞に見出されている。Ｓｔａｔ５は、元々は乳房成長因子と呼ばれたが、
骨髄細胞を含む他の細胞においてより高い濃度で見出されている。それは、多く
のサイトカインによって組織培養細胞において活性化され得る。
びアクチベーター、すなわち「ＳＴＡＴ」と呼ばれる転写因子のクラスによって
認識される。ＳＴＡＴファミリーには６つのメンバーが存在する。Ｓｔａｔ１お
よびＳｔａｔ３は、Ｓｔａｔ２と同様に（ＩＦＮαに対する応答が広範であるよ
うに）、多くの細胞型において存在する。Ｓｔａｔ４は、より限定されており、
そして多くの細胞型には存在しないが、ＩＬ−１２での処理後のＴヘルパークラ
スＩ細胞に見出されている。Ｓｔａｔ５は、元々は乳房成長因子と呼ばれたが、
骨髄細胞を含む他の細胞においてより高い濃度で見出されている。それは、多く
のサイトカインによって組織培養細胞において活性化され得る。
【０６３９】
ＳＴＡＴは活性化されて、Ｊａｎｕｓ Ｋｉｎａｓｅ（「Ｊａｋｓ」）ファミ
リーとして知られる１セットのキナーゼによるチロシンリン酸化に際して細胞質
から核へ移動する。Ｊａｋｓは、可溶性のチロシンキナーゼの独特のファミリー
を表わし、そしてＴｙｋ２、Ｊａｋ１、Ｊａｋ２、およびＪａｋ３を含む。これ
らのキナーゼは、有意な配列類似性を示し、そして一般には休止細胞において触
媒的に不活性である。
リーとして知られる１セットのキナーゼによるチロシンリン酸化に際して細胞質
から核へ移動する。Ｊａｋｓは、可溶性のチロシンキナーゼの独特のファミリー
を表わし、そしてＴｙｋ２、Ｊａｋ１、Ｊａｋ２、およびＪａｋ３を含む。これ
らのキナーゼは、有意な配列類似性を示し、そして一般には休止細胞において触
媒的に不活性である。
【０６４０】
Ｊａｋｓは、以下の表によって要約されるように広範なレセプターによって活
性化される。（ＳｃｈｉｄｌｅｒおよびＤａｒｎｅｌｌ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉ
ｏｃｈｅｍ．６４：６２１−５１（１９９５）による総説から改変。）Ｊａｋｓ
を活性化し得るサイトカインレセプターファミリーは、２つの群に分けられる：
（ａ）クラス１は、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ
−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、Ｅｐｏ、ＰＲＬ、ＧＨ、Ｇ−ＣＳ
Ｆ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＬＩＦ、ＣＮＴＦ、およびトロンボポエチンについてのレセ
プターを含み；そして（ｂ）クラス２は、ＩＦＮ−ａ、ＩＦＮ−ｇ、およびＩＬ
−１０を含む。クラス１レセプターは、保存されたシステインモチーフ（４つの
保存されたシステインおよび１つのトリプトファンのセット）、およびＷＳＸＷ
Ｓモチーフ（Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｘｘｘ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ（配列番号８２）をコー
ドする膜近接領域）を共有する。
性化される。（ＳｃｈｉｄｌｅｒおよびＤａｒｎｅｌｌ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉ
ｏｃｈｅｍ．６４：６２１−５１（１９９５）による総説から改変。）Ｊａｋｓ
を活性化し得るサイトカインレセプターファミリーは、２つの群に分けられる：
（ａ）クラス１は、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ
−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、Ｅｐｏ、ＰＲＬ、ＧＨ、Ｇ−ＣＳ
Ｆ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＬＩＦ、ＣＮＴＦ、およびトロンボポエチンについてのレセ
プターを含み；そして（ｂ）クラス２は、ＩＦＮ−ａ、ＩＦＮ−ｇ、およびＩＬ
−１０を含む。クラス１レセプターは、保存されたシステインモチーフ（４つの
保存されたシステインおよび１つのトリプトファンのセット）、およびＷＳＸＷ
Ｓモチーフ（Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｘｘｘ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ（配列番号８２）をコー
ドする膜近接領域）を共有する。
【０６４１】
従って、リガンドのレセプターへの結合の際に、Ｊａｋｓは活性化され、これ
は次いでＳＴＡＴを活性化し、これは、次いで移動し、そしてＧＡＳエレメント
に結合する。この全プロセスは、Ｊａｋｓ−ＳＴＡＴシグナル伝達経路に包含さ
れる。
は次いでＳＴＡＴを活性化し、これは、次いで移動し、そしてＧＡＳエレメント
に結合する。この全プロセスは、Ｊａｋｓ−ＳＴＡＴシグナル伝達経路に包含さ
れる。
【０６４２】
それゆえ、ＧＡＳまたはＩＳＲＥエレメントの結合によって反映されるＪａｋ
ｓ−ＳＴＡＴ経路の活性化は、細胞の増殖および分化に関与するタンパク質を示
すために使用され得る。例えば、成長因子およびサイトカインは、Ｊａｋｓ−Ｓ
ＴＡＴ経路を活性化することが知られている。（以下の表を参照のこと）。従っ
て、レポーター分子に連結したＧＡＳエレメントを使用することにより、Ｊａｋ
ｓ−ＳＴＡＴ経路のアクチベーターが同定され得る。
ｓ−ＳＴＡＴ経路の活性化は、細胞の増殖および分化に関与するタンパク質を示
すために使用され得る。例えば、成長因子およびサイトカインは、Ｊａｋｓ−Ｓ
ＴＡＴ経路を活性化することが知られている。（以下の表を参照のこと）。従っ
て、レポーター分子に連結したＧＡＳエレメントを使用することにより、Ｊａｋ
ｓ−ＳＴＡＴ経路のアクチベーターが同定され得る。
【０６４３】
【表５】
実施例１６〜１７に記載される生物学的アッセイにおいて使用されるプロモー
ターエレメントを含む合成ＧＡＳを構築するために、ＰＣＲに基づいたストラテ
ジーを用いてＧＡＳ−ＳＶ４０プロモーター配列を産生する。５’プライマーは
、ＩＲＦ１プロモーターにおいて見出され、そして一定の範囲のサイトカインで
の誘導の際にＳＴＡＴに結合することが以前に証明されたＧＡＳ結合部位の４つ
の直列のコピーを含むが（Ｒｏｔｈｍａｎら、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １：４５７−
４６８（１９９４））、他のＧＡＳまたはＩＳＲＥエレメントを代わりに使用し
得る。５’プライマーはまた、ＳＶ４０初期プロモーター配列に対して相補的な
１８ｂｐの配列も含み、そしてＸｈｏＩ部位に隣接する。５’プライマーの配列
は以下である：
ターエレメントを含む合成ＧＡＳを構築するために、ＰＣＲに基づいたストラテ
ジーを用いてＧＡＳ−ＳＶ４０プロモーター配列を産生する。５’プライマーは
、ＩＲＦ１プロモーターにおいて見出され、そして一定の範囲のサイトカインで
の誘導の際にＳＴＡＴに結合することが以前に証明されたＧＡＳ結合部位の４つ
の直列のコピーを含むが（Ｒｏｔｈｍａｎら、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １：４５７−
４６８（１９９４））、他のＧＡＳまたはＩＳＲＥエレメントを代わりに使用し
得る。５’プライマーはまた、ＳＶ４０初期プロモーター配列に対して相補的な
１８ｂｐの配列も含み、そしてＸｈｏＩ部位に隣接する。５’プライマーの配列
は以下である：
【０６４４】
【化２】
下流プライマーはＳＶ４０プロモーターに対して相補的であり、Ｈｉｎｄ Ｉ
ＩＩ部位に隣接する：５’：ＧＣＧＧＣＡＡＧＣＴＴＴＴＴＧＣＡＡＡＧＣＣＴ
ＡＧＧＣ：３’（配列番号８７）。
ＩＩ部位に隣接する：５’：ＧＣＧＧＣＡＡＧＣＴＴＴＴＴＧＣＡＡＡＧＣＣＴ
ＡＧＧＣ：３’（配列番号８７）。
【０６４５】
ＰＣＲ増幅を、Ｃｌｏｎｔｅｃｈから入手したＢ−ｇａｌ：プロモータープラ
スミド中に存在するＳＶ４０プロモーターのテンプレートを用いて実施する。得
られたＰＣＲフラグメントをＸｈｏＩ／Ｈｉｎｄ ＩＩＩを用いて消化し、そし
てＢＬＳＫ２−（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）にサブクローニングする。正方向およ
び逆方向のプライマーを用いる配列決定により、挿入物が以下の配列を含むこと
を確認する：
スミド中に存在するＳＶ４０プロモーターのテンプレートを用いて実施する。得
られたＰＣＲフラグメントをＸｈｏＩ／Ｈｉｎｄ ＩＩＩを用いて消化し、そし
てＢＬＳＫ２−（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）にサブクローニングする。正方向およ
び逆方向のプライマーを用いる配列決定により、挿入物が以下の配列を含むこと
を確認する：
【０６４６】
【化３】
次に、ＳＶ４０プロモーターに結合したこのＧＡＳプロモーターエレメントを
用いて、ＧＡＳ：ＳＥＡＰ２レポーター構築物を操作する。ここで、レポーター
分子は、分泌アルカリホスファターゼ、すなわち「ＳＥＡＰ」である。しかし、
明らかに、この実施例または他の実施例のいずれにおいても、任意のレポーター
分子が、ＳＥＡＰの代わりとなり得る。ＳＥＡＰの代わりに使用され得る周知の
レポーター分子としては、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（
ＣＡＴ）、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、
グリーン蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、または抗体により検出可能な任意のタンパ
ク質が挙げられる。
用いて、ＧＡＳ：ＳＥＡＰ２レポーター構築物を操作する。ここで、レポーター
分子は、分泌アルカリホスファターゼ、すなわち「ＳＥＡＰ」である。しかし、
明らかに、この実施例または他の実施例のいずれにおいても、任意のレポーター
分子が、ＳＥＡＰの代わりとなり得る。ＳＥＡＰの代わりに使用され得る周知の
レポーター分子としては、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（
ＣＡＴ）、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、
グリーン蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、または抗体により検出可能な任意のタンパ
ク質が挙げられる。
【０６４７】
合成ＧＡＳ−ＳＶ４０プロモーターエレメントと確認された上記の配列を、Ｇ
ＡＳ−ＳＥＡＰベクターを作製するために、ＨｉｎｄＩＩＩおよびＸｈｏＩを用
いて、ＳＶ４０プロモーターを、増幅したＧＡＳ：ＳＶ４０プロモーターエレメ
ントで効率的に置換し、Ｃｌｏｎｔｅｃｈから入手したｐＳＥＡＰ−プロモータ
ーベクターにサブクローニングする。しかし、このベクターはネオマイシン耐性
遺伝子を含まず、それゆえ、哺乳動物の発現系には好ましくない。
ＡＳ−ＳＥＡＰベクターを作製するために、ＨｉｎｄＩＩＩおよびＸｈｏＩを用
いて、ＳＶ４０プロモーターを、増幅したＧＡＳ：ＳＶ４０プロモーターエレメ
ントで効率的に置換し、Ｃｌｏｎｔｅｃｈから入手したｐＳＥＡＰ−プロモータ
ーベクターにサブクローニングする。しかし、このベクターはネオマイシン耐性
遺伝子を含まず、それゆえ、哺乳動物の発現系には好ましくない。
【０６４８】
従って、ＧＡＳ−ＳＥＡＰレポーターを発現する哺乳動物の安定な細胞株を作
製するために、ＧＡＳ−ＳＥＡＰカセットを、ＳａｌＩおよびＮｏｔＩを用いて
ＧＡＳ−ＳＥＡＰベクターから取り出し、そしてＧＡＳ−ＳＥＡＰ／Ｎｅｏベク
ターを作製するために、マルチクローニング部位におけるこれらの制限部位を用
いて、ネオマイシン耐性遺伝子を含むバックボーンベクター（例えば、ｐＧＦＰ
−１（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ））に挿入する。一旦、このベクターを哺乳動物細胞に
トランスフェクトすれば、このベクターは、実施例１６〜１７に記載されるよう
にＧＡＳ結合についてのレポーター分子として使用され得る。
製するために、ＧＡＳ−ＳＥＡＰカセットを、ＳａｌＩおよびＮｏｔＩを用いて
ＧＡＳ−ＳＥＡＰベクターから取り出し、そしてＧＡＳ−ＳＥＡＰ／Ｎｅｏベク
ターを作製するために、マルチクローニング部位におけるこれらの制限部位を用
いて、ネオマイシン耐性遺伝子を含むバックボーンベクター（例えば、ｐＧＦＰ
−１（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ））に挿入する。一旦、このベクターを哺乳動物細胞に
トランスフェクトすれば、このベクターは、実施例１６〜１７に記載されるよう
にＧＡＳ結合についてのレポーター分子として使用され得る。
【０６４９】
他の構築物を、上記の記載を使用し、そしてＧＡＳを異なるプロモーター配列
で置換して、作製し得る。例えば、ＮＦＫ−ＢおよびＥＧＲプロモーター配列を
含むレポーター分子の構築を、実施例１８および１９に記載する。しかし、多く
の他のプロモーターをこれらの実施例に記載のプロトコルを使用して置換し得る
。例えば、ＳＲＥ、ＩＬ−２、ＮＦＡＴ、またはオステオカルシンのプロモータ
ーを単独で、または組み合わせて（例えば、ＧＡＳ／ＮＦ−ＫＢ／ＥＧＲ、ＧＡ
Ｓ／ＮＦ−ＫＢ、Ｉｌ−２／ＮＦＡＴ、またはＮＦ−ＫＢ／ＧＡＳ）置換し得る
。同様に、他の細胞株（例えば、ＨＥＬＡ（上皮細胞）、ＨＵＶＥＣ（内皮細胞
）、Ｒｅｈ（Ｂ細胞）、Ｓａｏｓ−２（骨芽細胞）、ＨＵＶＡＣ（大動脈細胞）
、または心筋細胞）を、レポーター構築物の活性を試験するために使用し得る。
で置換して、作製し得る。例えば、ＮＦＫ−ＢおよびＥＧＲプロモーター配列を
含むレポーター分子の構築を、実施例１８および１９に記載する。しかし、多く
の他のプロモーターをこれらの実施例に記載のプロトコルを使用して置換し得る
。例えば、ＳＲＥ、ＩＬ−２、ＮＦＡＴ、またはオステオカルシンのプロモータ
ーを単独で、または組み合わせて（例えば、ＧＡＳ／ＮＦ−ＫＢ／ＥＧＲ、ＧＡ
Ｓ／ＮＦ−ＫＢ、Ｉｌ−２／ＮＦＡＴ、またはＮＦ−ＫＢ／ＧＡＳ）置換し得る
。同様に、他の細胞株（例えば、ＨＥＬＡ（上皮細胞）、ＨＵＶＥＣ（内皮細胞
）、Ｒｅｈ（Ｂ細胞）、Ｓａｏｓ−２（骨芽細胞）、ＨＵＶＡＣ（大動脈細胞）
、または心筋細胞）を、レポーター構築物の活性を試験するために使用し得る。
【０６５０】
（実施例１６：Ｔ細胞の活性についての高処理能力スクリーニングアッセイ）
以下のプロトコルを使用し、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の上清がＴ細胞を増
殖および／または分化させるか否かを決定することにより、ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２のＴ細胞活性を評価する。Ｔ細胞の活性を実施例１５で作製したＧＡＳ
／ＳＥＡＰ／Ｎｅｏ構築物を用いて評価する。従って、ＳＥＡＰ活性を増加させ
る因子は、Ｊａｋｓ−ＳＴＡＴＳシグナル伝達経路を活性化する能力を示す。こ
のアッセイに使用したＴ細胞は、Ｊｕｒｋａｔ Ｔ細胞（ＡＴＣＣ受託番号ＴＩ
Ｂ−１５２）であるが、Ｍｏｌｔ−３細胞（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−１５５２
）およびＭｏｌｔ−４細胞（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−１５８２）細胞もまた使
用し得る。
殖および／または分化させるか否かを決定することにより、ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２のＴ細胞活性を評価する。Ｔ細胞の活性を実施例１５で作製したＧＡＳ
／ＳＥＡＰ／Ｎｅｏ構築物を用いて評価する。従って、ＳＥＡＰ活性を増加させ
る因子は、Ｊａｋｓ−ＳＴＡＴＳシグナル伝達経路を活性化する能力を示す。こ
のアッセイに使用したＴ細胞は、Ｊｕｒｋａｔ Ｔ細胞（ＡＴＣＣ受託番号ＴＩ
Ｂ−１５２）であるが、Ｍｏｌｔ−３細胞（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−１５５２
）およびＭｏｌｔ−４細胞（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−１５８２）細胞もまた使
用し得る。
【０６５１】
Ｊｕｒｋａｔ Ｔ細胞は、リンパ芽球性ＣＤ４＋ Ｔｈ１ヘルパー細胞である
。安定な細胞株を作製するために、およそ２００万のＪｕｒｋａｔ細胞をＤＭＲ
ＩＥ−Ｃ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて、ＧＡＳ−ＳＥＡＰ
／ｎｅｏベクターでトランスフェクト（以下に記載のトランスフェクション手順
）する。トランスフェクトした細胞を、およそ２０，０００細胞／ウェルの密度
で播種し、そして１ｍｇ／ｍｌのジェネティシン（ｇｅｎｔｉｃｉｎ）に対して
耐性であるトランスフェクト体を選択する。耐性コロニーを増殖させ、次いで、
漸増する濃度のインターフェロンγに対するそれらの応答について試験する。選
択したクローンの用量応答を示す。
。安定な細胞株を作製するために、およそ２００万のＪｕｒｋａｔ細胞をＤＭＲ
ＩＥ−Ｃ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて、ＧＡＳ−ＳＥＡＰ
／ｎｅｏベクターでトランスフェクト（以下に記載のトランスフェクション手順
）する。トランスフェクトした細胞を、およそ２０，０００細胞／ウェルの密度
で播種し、そして１ｍｇ／ｍｌのジェネティシン（ｇｅｎｔｉｃｉｎ）に対して
耐性であるトランスフェクト体を選択する。耐性コロニーを増殖させ、次いで、
漸増する濃度のインターフェロンγに対するそれらの応答について試験する。選
択したクローンの用量応答を示す。
【０６５２】
詳細には、以下のプロトコルにより、２００μｌの細胞を含む７５のウェルに
ついて十分な細胞を得る。従って、複数の９６ウェルプレートについて十分な細
胞を産生するために、これをスケールアップするか、または複数で実施するかの
いずれかを行う。Ｊｕｒｋａｔ細胞をＲＰＭＩ＋１０％血清および１％のＰｅｎ
−Ｓｔｒｅｐ中で維持する。Ｔ２５フラスコ中で２．５ｍｌのＯＰＴＩ−ＭＥＭ
（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）と１０μｇのプラスミドＤＮＡとを組
み合わせる。５０μｌのＤＭＲＩＥ−Ｃを含む２．５ｍｌのＯＰＴＩ−ＭＥＭを
添加し、そして、室温で１５〜４５分間インキュベートする。
ついて十分な細胞を得る。従って、複数の９６ウェルプレートについて十分な細
胞を産生するために、これをスケールアップするか、または複数で実施するかの
いずれかを行う。Ｊｕｒｋａｔ細胞をＲＰＭＩ＋１０％血清および１％のＰｅｎ
−Ｓｔｒｅｐ中で維持する。Ｔ２５フラスコ中で２．５ｍｌのＯＰＴＩ−ＭＥＭ
（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）と１０μｇのプラスミドＤＮＡとを組
み合わせる。５０μｌのＤＭＲＩＥ−Ｃを含む２．５ｍｌのＯＰＴＩ−ＭＥＭを
添加し、そして、室温で１５〜４５分間インキュベートする。
【０６５３】
インキュベート時間の間、細胞濃度をカウントし、必要な細胞数（トランスフ
ェクションあたり１０7個）をスピンダウンし、そして最終濃度が１０7細胞／ｍ
ｌとなるようにＯＰＴＩ−ＭＥＭ中で再懸濁する。次いで、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ中
の１×１０7個の細胞の１ｍｌをＴ２５フラスコに加え、そして３７℃で６時間
インキュベートする。インキュベーションの後、１０ｍｌのＲＰＭＩ＋１５％の
血清を添加する。
ェクションあたり１０7個）をスピンダウンし、そして最終濃度が１０7細胞／ｍ
ｌとなるようにＯＰＴＩ−ＭＥＭ中で再懸濁する。次いで、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ中
の１×１０7個の細胞の１ｍｌをＴ２５フラスコに加え、そして３７℃で６時間
インキュベートする。インキュベーションの後、１０ｍｌのＲＰＭＩ＋１５％の
血清を添加する。
【０６５４】
Ｊｕｒｋａｔ：ＧＡＳ−ＳＥＡＰ安定レポーター株をＲＰＭＩ＋１０％血清、
１ｍｇ／ｍｌジェネティシン、および１％のＰｅｎ−Ｓｔｒｅｐ中で維持する。
これらの細胞は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を含む上清で処理されるか、また
は実施例１４に記載のプロトコールにより産生されるようなＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２誘導ポリペプチドで処理される。
１ｍｇ／ｍｌジェネティシン、および１％のＰｅｎ−Ｓｔｒｅｐ中で維持する。
これらの細胞は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を含む上清で処理されるか、また
は実施例１４に記載のプロトコールにより産生されるようなＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２誘導ポリペプチドで処理される。
【０６５５】
上清での処理日に細胞を洗浄すべきであり、そして１ｍｌあたり５００，００
０個の細胞の密度となるように新鮮なＲＰＭＩ＋１０％血清中に再懸濁するべき
である。必要な細胞の正確な数は、スクリーニングされる上清の数に依存する。
１枚の９６ウェルプレートについて、およそ１０００万個の細胞（１０枚のプレ
ートについて１億個の細胞）を必要とする。
０個の細胞の密度となるように新鮮なＲＰＭＩ＋１０％血清中に再懸濁するべき
である。必要な細胞の正確な数は、スクリーニングされる上清の数に依存する。
１枚の９６ウェルプレートについて、およそ１０００万個の細胞（１０枚のプレ
ートについて１億個の細胞）を必要とする。
【０６５６】
１２チャンネルのピペットを用いて９６ウェルのディッシュに細胞を分与する
ために、三角のリザーバーボートに細胞を移す。２００μｌの細胞を、１２チャ
ンネルのピペットを用いて、それぞれのウェルに移す（従って、ウェル当たり１
００，０００個の細胞を添加する）。
ために、三角のリザーバーボートに細胞を移す。２００μｌの細胞を、１２チャ
ンネルのピペットを用いて、それぞれのウェルに移す（従って、ウェル当たり１
００，０００個の細胞を添加する）。
【０６５７】
全てのプレートに播種した後、５０μｌの上清を、１２チャンネルピペットを
用いて、上清を含む９６ウェルプレートから各ウェルに直接的に移す。さらに、
外来性のインターフェロンγの用量（０．１、１．０、１０ｎｇ）を、ウェルＨ
９、ウェルＨ１０、およびウェルＨ１１に添加し、アッセイについてのさらなる
陽性コントロールとして使用する。
用いて、上清を含む９６ウェルプレートから各ウェルに直接的に移す。さらに、
外来性のインターフェロンγの用量（０．１、１．０、１０ｎｇ）を、ウェルＨ
９、ウェルＨ１０、およびウェルＨ１１に添加し、アッセイについてのさらなる
陽性コントロールとして使用する。
【０６５８】
上清で処理したＪｕｒｋａｔ細胞を含む９６ウェルディッシュをインキュベー
ターに４８時間置く（注記：この時間は４８〜７２時間の間で変更可能である）
。次いで、各ウェルから３５μｌのサンプルを１２チャンネルのピペットを用い
て、不透明な９６ウェルプレートに移す。不透明なプレートを（セロファンのカ
バーを用いて）覆うべきであり、そして実施例２０に記載のＳＥＡＰアッセイを
実施するまで、−２０℃で保存するべきである。残存する処理した細胞を含むプ
レートを４℃に置き、そして、所望するならば、特定のウェル上でのアッセイを
繰り返すための物質の供給源として供する。
ターに４８時間置く（注記：この時間は４８〜７２時間の間で変更可能である）
。次いで、各ウェルから３５μｌのサンプルを１２チャンネルのピペットを用い
て、不透明な９６ウェルプレートに移す。不透明なプレートを（セロファンのカ
バーを用いて）覆うべきであり、そして実施例２０に記載のＳＥＡＰアッセイを
実施するまで、−２０℃で保存するべきである。残存する処理した細胞を含むプ
レートを４℃に置き、そして、所望するならば、特定のウェル上でのアッセイを
繰り返すための物質の供給源として供する。
【０６５９】
陽性コントロールとして、１００ユニット／ｍｌのインターフェロンγを使用
し得、これは、Ｊｕｒｋａｔ Ｔ細胞を活性化することが公知である。代表的に
は、３０倍を超える誘導が、陽性コントロールのウェルにおいて観察される。
し得、これは、Ｊｕｒｋａｔ Ｔ細胞を活性化することが公知である。代表的に
は、３０倍を超える誘導が、陽性コントロールのウェルにおいて観察される。
【０６６０】
（実施例１７：骨髄性の活性を同定する高処理能力スクリーニングアッセイ）
以下のプロトコルを使用して、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２が骨髄性細胞を増
殖および／または分化させるか否かを決定することにより、ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２の骨髄性の活性を評価する。骨髄性細胞の活性を実施例１５において産
生されたＧＡＳ／ＳＥＡＰ／Ｎｅｏ構築物を用いて評価する。従って、ＳＥＡＰ
活性を増加させる因子は、Ｊａｋｓ−ＳＴＡＴＳシグナル伝達経路を活性化させ
る能力を示す。このアッセイに使用した骨髄性細胞は、Ｕ９３７（前単球（ｐｒ
ｅ−ｍｏｎｏｃｙｔｅ）細胞株）であるが、ＴＦ−１、ＨＬ６０、またはＫＧ１
も使用し得る。
殖および／または分化させるか否かを決定することにより、ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２の骨髄性の活性を評価する。骨髄性細胞の活性を実施例１５において産
生されたＧＡＳ／ＳＥＡＰ／Ｎｅｏ構築物を用いて評価する。従って、ＳＥＡＰ
活性を増加させる因子は、Ｊａｋｓ−ＳＴＡＴＳシグナル伝達経路を活性化させ
る能力を示す。このアッセイに使用した骨髄性細胞は、Ｕ９３７（前単球（ｐｒ
ｅ−ｍｏｎｏｃｙｔｅ）細胞株）であるが、ＴＦ−１、ＨＬ６０、またはＫＧ１
も使用し得る。
【０６６１】
Ｕ９３７細胞を、実施例１５において産生されたＧＡＳ／ＳＥＡＰ／Ｎｅｏ構
築物で、一過性にトランスフェクトするために、ＤＥＡＥ−Ｄｅｘｔｒａｎ法（
Ｋｈａｒｂａｎｄａら、１９９４，Ｃｅｌｌ Ｇｒｏｗｔｈ ＆ Ｄｉｆｆｅｒ
ｅｎｔｉａｔｉｏｎ，５：２５９−２６５）を用いる。最初に、２×１０ｅ7個
のＵ９３７細胞を回収し、そしてＰＢＳで洗浄する。Ｕ９３７細胞を、通常、１
００単位／ｍｌのペニシリンおよび１００ｍｇ／ｍｌのストレプトマイシンを補
充した１０％熱非働化ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含むＲＰＭＩ １６４０培地中
で増殖させる。
築物で、一過性にトランスフェクトするために、ＤＥＡＥ−Ｄｅｘｔｒａｎ法（
Ｋｈａｒｂａｎｄａら、１９９４，Ｃｅｌｌ Ｇｒｏｗｔｈ ＆ Ｄｉｆｆｅｒ
ｅｎｔｉａｔｉｏｎ，５：２５９−２６５）を用いる。最初に、２×１０ｅ7個
のＵ９３７細胞を回収し、そしてＰＢＳで洗浄する。Ｕ９３７細胞を、通常、１
００単位／ｍｌのペニシリンおよび１００ｍｇ／ｍｌのストレプトマイシンを補
充した１０％熱非働化ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含むＲＰＭＩ １６４０培地中
で増殖させる。
【０６６２】
次に、０．５ｍｇ／ｍｌ ＤＥＡＥ−Ｄｅｘｔｒａｎ、８μｇのＧＡＳ−ＳＥ
ＡＰ２プラスミドＤＮＡ、１４０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＫＣｌ、３７５μＭ
Ｎａ2ＨＰＯ4・７Ｈ2Ｏ、１ｍＭ ＭｇＣｌ2、および６７５μＭ ＣａＣｌ2
を含む１ｍｌの２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ ７．４）緩衝液に細胞を懸
濁する。３７℃で４５分間インキュベートする。
ＡＰ２プラスミドＤＮＡ、１４０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＫＣｌ、３７５μＭ
Ｎａ2ＨＰＯ4・７Ｈ2Ｏ、１ｍＭ ＭｇＣｌ2、および６７５μＭ ＣａＣｌ2
を含む１ｍｌの２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ ７．４）緩衝液に細胞を懸
濁する。３７℃で４５分間インキュベートする。
【０６６３】
１０％ ＦＢＳを含むＲＰＭＩ １６４０培地で細胞を洗浄し、次いで、１０
ｍｌの完全培地に再懸濁し、そして３７℃で３６時間インキュベートする。
ｍｌの完全培地に再懸濁し、そして３７℃で３６時間インキュベートする。
【０６６４】
ＧＡＳ−ＳＥＡＰ／Ｕ９３７安定細胞を、４００μｇ／ｍｌのＧ４１８中で細
胞を増殖させることにより得る。Ｇ４１８を含まない培地を使用して、慣用的に
増殖させるが、１〜２ヶ月毎に細胞を二継代の間、４００μｇ／ｍｌ Ｇ４１８
中で再増殖させるべきである。
胞を増殖させることにより得る。Ｇ４１８を含まない培地を使用して、慣用的に
増殖させるが、１〜２ヶ月毎に細胞を二継代の間、４００μｇ／ｍｌ Ｇ４１８
中で再増殖させるべきである。
【０６６５】
これらの細胞を１×１０8個の細胞（これは１０枚の９６ウェルプレートアッ
セイのために十分である）を回収することにより試験し、そしてＰＢＳで洗浄す
る。上記の２００ｍｌの増殖培地中に、５×１０5細胞／ｍｌの最終密度で細胞
を懸濁する。９６ウェルプレートにおいてウェルあたり２００μｌの細胞（すな
わち、１×１０5細胞／ウェル）をプレートする。
セイのために十分である）を回収することにより試験し、そしてＰＢＳで洗浄す
る。上記の２００ｍｌの増殖培地中に、５×１０5細胞／ｍｌの最終密度で細胞
を懸濁する。９６ウェルプレートにおいてウェルあたり２００μｌの細胞（すな
わち、１×１０5細胞／ウェル）をプレートする。
【０６６６】
実施例１４に記載されるプロトコルにより調製された上清の５０μｌを添加す
る。３７℃で４８〜７２時間インキュベートする。陽性コントロールとして、１
００単位／ｍｌのインターフェロンγを使用し得、これはＵ９３７細胞を活性化
させることが公知である。代表的には、３０倍を超える誘導が、陽性コントロー
ルウェルにおいて観察される。実施例２０に記載のプロトコルに従って上清をＳ
ＥＡＰアッセイする。
る。３７℃で４８〜７２時間インキュベートする。陽性コントロールとして、１
００単位／ｍｌのインターフェロンγを使用し得、これはＵ９３７細胞を活性化
させることが公知である。代表的には、３０倍を超える誘導が、陽性コントロー
ルウェルにおいて観察される。実施例２０に記載のプロトコルに従って上清をＳ
ＥＡＰアッセイする。
【０６６７】
（実施例１８：ニューロン活性を同定する高処理能力スクリーニングアッセイ
） 細胞が分化および増殖を経る場合、一群の遺伝子が多くの異なるシグナル伝達
経路を介して活性化される。これらの遺伝子の１つであるＥＧＲ１（初期増殖応
答遺伝子１）は、活性化時に種々の組織および細胞型において誘導される。ＥＧ
Ｒ１のプロモーターはこのような誘導を担う。レポーター分子に結合したＥＧＲ
１プロモーターを使用して、細胞の活性化をＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によっ
て評価し得る。
） 細胞が分化および増殖を経る場合、一群の遺伝子が多くの異なるシグナル伝達
経路を介して活性化される。これらの遺伝子の１つであるＥＧＲ１（初期増殖応
答遺伝子１）は、活性化時に種々の組織および細胞型において誘導される。ＥＧ
Ｒ１のプロモーターはこのような誘導を担う。レポーター分子に結合したＥＧＲ
１プロモーターを使用して、細胞の活性化をＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によっ
て評価し得る。
【０６６８】
詳細には、以下のプロトコルをＰＣ１２細胞株におけるニューロン活性を評価
するために使用する。ＰＣ１２細胞（ラット褐色細胞腫（ｐｈｅｎｏｃｈｒｏｍ
ｏｃｙｔｏｍａ）細胞）は、多くのマイトジェン（例えば、ＴＰＡ（テトラデカ
ノイルホルボールアセテート）、ＮＧＦ（神経成長因子）、およびＥＧＦ（上皮
増殖因子））での活性化により、増殖および／または分化することが公知である
。この処理の間にＥＧＲ１遺伝子発現を活性化する。従って、ＳＥＡＰレポータ
ーに結合したＥＧＲプロモーターを含む構築物でＰＣ１２細胞を安定にトランス
フェクトすることにより、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によるＰＣ１２細胞の活
性化を評価し得る。
するために使用する。ＰＣ１２細胞（ラット褐色細胞腫（ｐｈｅｎｏｃｈｒｏｍ
ｏｃｙｔｏｍａ）細胞）は、多くのマイトジェン（例えば、ＴＰＡ（テトラデカ
ノイルホルボールアセテート）、ＮＧＦ（神経成長因子）、およびＥＧＦ（上皮
増殖因子））での活性化により、増殖および／または分化することが公知である
。この処理の間にＥＧＲ１遺伝子発現を活性化する。従って、ＳＥＡＰレポータ
ーに結合したＥＧＲプロモーターを含む構築物でＰＣ１２細胞を安定にトランス
フェクトすることにより、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によるＰＣ１２細胞の活
性化を評価し得る。
【０６６９】
ＥＧＲ／ＳＥＡＰレポーター構築物を以下のプロトコルにより組み立て得る。
ＥＧＲ−１プロモーター配列（−６３３〜＋１）（Ｓａｋａｍｏｔｏ Ｋら、Ｏ
ｎｃｏｇｅｎｅ ６：８６７−８７１（１９９１））を以下のプライマーを用い
て、ヒトゲノムＤＮＡからＰＣＲ増幅し得る： ５’ＧＣＧＣＴＣＧＡＧＧＧＡＴＧＡＣＡＧＣＧＡＴＡＧＡＡＣＣＣＣＧＧ−
３’（配列番号８９） ５’ＧＣＧＡＡＧＣＴＴＣＧＣＧＡＣＴＣＣＣＣＧＧＡＴＣＣＧＣＣＴＣ−３
’（配列番号９０）。
ＥＧＲ−１プロモーター配列（−６３３〜＋１）（Ｓａｋａｍｏｔｏ Ｋら、Ｏ
ｎｃｏｇｅｎｅ ６：８６７−８７１（１９９１））を以下のプライマーを用い
て、ヒトゲノムＤＮＡからＰＣＲ増幅し得る： ５’ＧＣＧＣＴＣＧＡＧＧＧＡＴＧＡＣＡＧＣＧＡＴＡＧＡＡＣＣＣＣＧＧ−
３’（配列番号８９） ５’ＧＣＧＡＡＧＣＴＴＣＧＣＧＡＣＴＣＣＣＣＧＧＡＴＣＣＧＣＣＴＣ−３
’（配列番号９０）。
【０６７０】
次いで、実施例１５において作製したＧＡＳ：ＳＥＡＰ／Ｎｅｏベクターを使
用して、ＥＧＲ１増幅産物をこのベクターに挿入し得る。制限酵素ＸｈｏＩ／Ｈ
ｉｎｄＩＩＩを使用してＧＡＳ：ＳＥＡＰ／Ｎｅｏベクターを直鎖状化し、ＧＡ
Ｓ／ＳＶ４０スタッファー（ｓｔｕｆｆｅｒ）を取り除く。これらと同じ酵素を
用いて、ＥＧＲ１増幅産物を制限処理する。ベクターとＥＧＲ１プロモーターと
を連結する。
用して、ＥＧＲ１増幅産物をこのベクターに挿入し得る。制限酵素ＸｈｏＩ／Ｈ
ｉｎｄＩＩＩを使用してＧＡＳ：ＳＥＡＰ／Ｎｅｏベクターを直鎖状化し、ＧＡ
Ｓ／ＳＶ４０スタッファー（ｓｔｕｆｆｅｒ）を取り除く。これらと同じ酵素を
用いて、ＥＧＲ１増幅産物を制限処理する。ベクターとＥＧＲ１プロモーターと
を連結する。
【０６７１】
細胞培養のための９６ウェルプレートを調製するために、コーティング溶液（
コラーゲンＩ型（Ｕｐｓｔａｔｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｉｎｃ．カタログ番号０８
−１１５）の３０％エタノール（滅菌濾過）での１：３０希釈）を１つの１０ｃ
ｍプレートあたり２ｍｌ、または９６ウェルプレートのウェルあたり５０ｍｌ添
加し、そして２時間風乾させる。
コラーゲンＩ型（Ｕｐｓｔａｔｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｉｎｃ．カタログ番号０８
−１１５）の３０％エタノール（滅菌濾過）での１：３０希釈）を１つの１０ｃ
ｍプレートあたり２ｍｌ、または９６ウェルプレートのウェルあたり５０ｍｌ添
加し、そして２時間風乾させる。
【０６７２】
ＰＣ１２細胞を、予めコートした１０ｃｍ組織培養ディッシュ上で、ペニシリ
ン（１００単位／ｍｌ）およびストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）を補充
した、１０％ウマ血清（ＪＲＨ ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳ、カタログ番号１２４
４９−７８Ｐ）、５％熱非働化ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含むＲＰＭＩ−１６４
０培地（Ｂｉｏ Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ）中で慣用的に増殖させる。１つから４つ
への分割を３〜４日毎に行う。細胞を掻き取ることによりプレートから取り出し
、そして１５回より多く上下にピペッティングして再懸濁する。
ン（１００単位／ｍｌ）およびストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）を補充
した、１０％ウマ血清（ＪＲＨ ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳ、カタログ番号１２４
４９−７８Ｐ）、５％熱非働化ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含むＲＰＭＩ−１６４
０培地（Ｂｉｏ Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ）中で慣用的に増殖させる。１つから４つ
への分割を３〜４日毎に行う。細胞を掻き取ることによりプレートから取り出し
、そして１５回より多く上下にピペッティングして再懸濁する。
【０６７３】
ＥＧＲ／ＳＥＡＰ／Ｎｅｏ構築物を、実施例１４に記載のＬｉｐｏｆｅｃｔａ
ｍｉｎｅプロトコルを使用して、ＰＣ１２にトランスフェクトする。ＥＧＲ−Ｓ
ＥＡＰ／ＰＣ１２安定細胞を、３００μｇ／ｍｌのＧ４１８中で細胞を増殖させ
ることにより得る。Ｇ４１８を含まない培地を慣用的な増殖のために使用するが
、１〜２ヶ月毎に、細胞を２継代の間、３００μｇ／ｍｌのＧ４１８中で再増殖
させるべきである。
ｍｉｎｅプロトコルを使用して、ＰＣ１２にトランスフェクトする。ＥＧＲ−Ｓ
ＥＡＰ／ＰＣ１２安定細胞を、３００μｇ／ｍｌのＧ４１８中で細胞を増殖させ
ることにより得る。Ｇ４１８を含まない培地を慣用的な増殖のために使用するが
、１〜２ヶ月毎に、細胞を２継代の間、３００μｇ／ｍｌのＧ４１８中で再増殖
させるべきである。
【０６７４】
ニューロン活性をアッセイするために、およそ７０〜８０％コンフルエントで
細胞を有する１０ｃｍプレートを、古い培地を除去することによりスクリーニン
グする。細胞をＰＢＳ（リン酸緩衝化生理食塩水）を用いて１回洗浄する。次い
で、細胞を低血清培地（抗生物質とともに１％ウマ血清および０．５％ ＦＢＳ
を含むＲＰＭＩ−１６４０）中で一晩、飢餓（ｓｔａｒｖｅ）させる。
細胞を有する１０ｃｍプレートを、古い培地を除去することによりスクリーニン
グする。細胞をＰＢＳ（リン酸緩衝化生理食塩水）を用いて１回洗浄する。次い
で、細胞を低血清培地（抗生物質とともに１％ウマ血清および０．５％ ＦＢＳ
を含むＲＰＭＩ−１６４０）中で一晩、飢餓（ｓｔａｒｖｅ）させる。
【０６７５】
翌朝、培地を除去し、そしてＰＢＳで細胞を洗浄する。プレートから細胞を掻
き取り、細胞を２ｍｌの低血清培地中で懸濁する。細胞数をカウントし、そして
より低血清の培地を添加し、５×１０5細胞／ｍｌの最終細胞密度に到達させる
。
き取り、細胞を２ｍｌの低血清培地中で懸濁する。細胞数をカウントし、そして
より低血清の培地を添加し、５×１０5細胞／ｍｌの最終細胞密度に到達させる
。
【０６７６】
２００μｌの細胞懸濁液を９６ウェルプレートの各ウェルに添加する（１×１
０5細胞／ウェルに等しい）。実施例１４により産生された５０μｌの上清を、
３７℃で４８〜７２時間添加する。陽性コントロールとして、ＥＧＲを介してＰ
Ｃ１２細胞を活性化することが公知の成長因子（例えば、５０ｎｇ／μｌの神経
成長因子（ＮＧＦ））を使用し得る。代表的には、５０倍を超えるＳＥＡＰ誘導
が陽性コントロールウェルにおいて見られる。実施例２０に従って、上清をＳＥ
ＡＰアッセイする。
０5細胞／ウェルに等しい）。実施例１４により産生された５０μｌの上清を、
３７℃で４８〜７２時間添加する。陽性コントロールとして、ＥＧＲを介してＰ
Ｃ１２細胞を活性化することが公知の成長因子（例えば、５０ｎｇ／μｌの神経
成長因子（ＮＧＦ））を使用し得る。代表的には、５０倍を超えるＳＥＡＰ誘導
が陽性コントロールウェルにおいて見られる。実施例２０に従って、上清をＳＥ
ＡＰアッセイする。
【０６７７】
（実施例１９：Ｔ細胞の活性についての高処理能力スクリーニングアッセイ）
ＮＦ−ＫＢ（核因子ＫＢ）は、広範な種々の薬剤（炎症性サイトカインである
ＩＬ−１およびＴＮＦ、ＣＤ３０およびＣＤ４０、リンホトキシン−αおよびリ
ンホトキシン−βを含む）により、ＬＰＳまたはトロンビンへの曝露により、な
らびに特定のウイルス遺伝子産物の発現により活性化される転写因子である。転
写因子として、ＮＦ−ＫＢは免疫細胞の活性化に関与する遺伝子の発現、アポト
ーシスの制御（ＮＦ−ＫＢは、アポトーシスから細胞を保護するようである）、
Ｂ細胞およびＴ細胞の発生、抗ウイルス応答および抗菌応答、ならびに複数のス
トレス応答を調節する。刺激されない条件において、ＮＦ−ＫＢは、Ｉ−ＫＢ（
インヒビターＫＢ）を有する細胞質に保持される。しかし、刺激の際に、Ｉ−Ｋ
Ｂはリン酸化され、そして分解され、ＮＦ−ＫＢの核への往復（ｓｈｕｔｔｌｅ
）を引き起こし、これにより標的遺伝子の転写を活性化する。ＮＦ−ＫＢにより
活性化される標的遺伝子としては、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＣＡ
Ｍ−１およびクラス１ＭＨＣが挙げられる。
ＩＬ−１およびＴＮＦ、ＣＤ３０およびＣＤ４０、リンホトキシン−αおよびリ
ンホトキシン−βを含む）により、ＬＰＳまたはトロンビンへの曝露により、な
らびに特定のウイルス遺伝子産物の発現により活性化される転写因子である。転
写因子として、ＮＦ−ＫＢは免疫細胞の活性化に関与する遺伝子の発現、アポト
ーシスの制御（ＮＦ−ＫＢは、アポトーシスから細胞を保護するようである）、
Ｂ細胞およびＴ細胞の発生、抗ウイルス応答および抗菌応答、ならびに複数のス
トレス応答を調節する。刺激されない条件において、ＮＦ−ＫＢは、Ｉ−ＫＢ（
インヒビターＫＢ）を有する細胞質に保持される。しかし、刺激の際に、Ｉ−Ｋ
Ｂはリン酸化され、そして分解され、ＮＦ−ＫＢの核への往復（ｓｈｕｔｔｌｅ
）を引き起こし、これにより標的遺伝子の転写を活性化する。ＮＦ−ＫＢにより
活性化される標的遺伝子としては、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＣＡ
Ｍ−１およびクラス１ＭＨＣが挙げられる。
【０６７８】
その中心的な役割および一定の範囲の刺激に応答する能力に起因して、ＮＦ−
ＫＢプロモーターエレメントを利用するレポーター構築物を、実施例１４におい
て産生された上清をスクリーニングするために使用する。ＮＦ−ＫＢのアクチベ
ーターまたはインヒビターは、疾患の処置、予防および／または診断に有用であ
る。例えば、ＮＦ−ＫＢのインヒビターを、急性または慢性的なＮＦ−ＫＢの活
性化に関連する疾患（例えば、慢性関節リウマチ）を処置するために使用し得る
。
ＫＢプロモーターエレメントを利用するレポーター構築物を、実施例１４におい
て産生された上清をスクリーニングするために使用する。ＮＦ−ＫＢのアクチベ
ーターまたはインヒビターは、疾患の処置、予防および／または診断に有用であ
る。例えば、ＮＦ−ＫＢのインヒビターを、急性または慢性的なＮＦ−ＫＢの活
性化に関連する疾患（例えば、慢性関節リウマチ）を処置するために使用し得る
。
【０６７９】
ＮＦ−ＫＢプロモーターエレメントを含むベクターを構築するために、ＰＣＲ
に基づいたストラテジーを用いる。上流のプライマーは、ＮＦ−ＫＢ結合部位（
ＧＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＣ）（配列番号９１）の４つの直列のコピー、ＳＶ４０
初期プロモーター配列の５’末端に対して相補的な１８ｂｐの配列を含み、そし
てＸｈｏＩ部位に隣接する： ５’：ＧＣＧＧＣＣＴＣＧＡＧＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＣＧＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣ
ＧＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＡＴＣＣＴＧＣＣＡＴＣＴＣＡＡ
ＴＴＡＧ：３’（配列番号９２）。
に基づいたストラテジーを用いる。上流のプライマーは、ＮＦ−ＫＢ結合部位（
ＧＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＣ）（配列番号９１）の４つの直列のコピー、ＳＶ４０
初期プロモーター配列の５’末端に対して相補的な１８ｂｐの配列を含み、そし
てＸｈｏＩ部位に隣接する： ５’：ＧＣＧＧＣＣＴＣＧＡＧＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＣＧＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣ
ＧＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＡＴＣＣＴＧＣＣＡＴＣＴＣＡＡ
ＴＴＡＧ：３’（配列番号９２）。
【０６８０】
下流プライマーは、ＳＶ４０プロモーターの３’末端に対して相補的であり、
そしてＨｉｎｄＩＩＩ部位に隣接する： ５’：ＧＣＧＧＣＡＡＧＣＴＴＴＴＴＧＣＡＡＡＧＣＣＴＡＧＧＣ：３’（配列
番号９３）。
そしてＨｉｎｄＩＩＩ部位に隣接する： ５’：ＧＣＧＧＣＡＡＧＣＴＴＴＴＴＧＣＡＡＡＧＣＣＴＡＧＧＣ：３’（配列
番号９３）。
【０６８１】
ＰＣＲ増幅を、Ｃｌｏｎｔｅｃｈから入手したｐＢ−ｇａｌ：プロモータープ
ラスミドに存在するＳＶ４０プロモーターのテンプレートを使用して実施する。
得られたＰＣＲフラグメントをＸｈｏＩおよびＨｉｎｄＩＩＩで消化し、そして
ＢＬＳＫ２−（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）にサブクローニングする。Ｔ７およびＴ
３プライマーを用いる配列決定により、挿入物が以下の配列を含むことを確認す
る：
ラスミドに存在するＳＶ４０プロモーターのテンプレートを使用して実施する。
得られたＰＣＲフラグメントをＸｈｏＩおよびＨｉｎｄＩＩＩで消化し、そして
ＢＬＳＫ２−（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）にサブクローニングする。Ｔ７およびＴ
３プライマーを用いる配列決定により、挿入物が以下の配列を含むことを確認す
る：
【０６８２】
【化４】
次に、ＸｈｏＩおよびＨｉｎｄＩＩＩを使用して、ｐＳＥＡＰ２−プロモータ
ープラスミド（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）に存在するＳＶ４０最小プロモーターエレメ
ントをこのＮＦ−ＫＢ／ＳＶ４０フラグメントで置換する。しかし、このベクタ
ーはネオマイシン耐性遺伝子を含まず、そしてそれゆえ哺乳動物の発現系には好
ましくない。
ープラスミド（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）に存在するＳＶ４０最小プロモーターエレメ
ントをこのＮＦ−ＫＢ／ＳＶ４０フラグメントで置換する。しかし、このベクタ
ーはネオマイシン耐性遺伝子を含まず、そしてそれゆえ哺乳動物の発現系には好
ましくない。
【０６８３】
安定な哺乳動物細胞株を作製するために、ＮＦ−ＫＢ／ＳＶ４０／ＳＥＡＰカ
セットを制限酵素ＳａｌＩおよびＮｏｔＩを使用して上記のＮＦ−ＫＢ／ＳＥＡ
Ｐベクターから取り出し、そしてネオマイシン耐性を含むベクターに挿入する。
詳細には、ＳａｌＩおよびＮｏｔＩでｐＧＦＰ−１を制限処理した後に、ＮＦ−
ＫＢ／ＳＶ４０／ＳＥＡＰカセットをｐＧＦＰ−１（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）に挿入
し、ＧＦＰ遺伝子を置換した。
セットを制限酵素ＳａｌＩおよびＮｏｔＩを使用して上記のＮＦ−ＫＢ／ＳＥＡ
Ｐベクターから取り出し、そしてネオマイシン耐性を含むベクターに挿入する。
詳細には、ＳａｌＩおよびＮｏｔＩでｐＧＦＰ−１を制限処理した後に、ＮＦ−
ＫＢ／ＳＶ４０／ＳＥＡＰカセットをｐＧＦＰ−１（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）に挿入
し、ＧＦＰ遺伝子を置換した。
【０６８４】
一旦、ＮＦ−ＫＢ／ＳＶ４０／ＳＥＡＰ／Ｎｅｏベクターを作製した後は、実
施例１６に記載のプロトコルに従って、安定なＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞を作製し、
そして維持する。同様に、これらの安定なＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞を含む上清をア
ッセイするための方法がまた、実施例１６に記載される。陽性コントロールとし
て、外因性のＴＮＦα（０．１、１、１０ｎｇ）をウェルＨ９、Ｈ１０、および
Ｈ１１に添加し、代表的には、５〜１０倍の活性化が観察される。
施例１６に記載のプロトコルに従って、安定なＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞を作製し、
そして維持する。同様に、これらの安定なＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞を含む上清をア
ッセイするための方法がまた、実施例１６に記載される。陽性コントロールとし
て、外因性のＴＮＦα（０．１、１、１０ｎｇ）をウェルＨ９、Ｈ１０、および
Ｈ１１に添加し、代表的には、５〜１０倍の活性化が観察される。
【０６８５】
（実施例２０：ＳＥＡＰ活性についてのアッセイ）
実施例１６〜１９に記載されるアッセイのためのレポーター分子として、ＳＥ
ＡＰ活性を、以下の一般的な手順に従ってＴｒｏｐｉｘ Ｐｈｏｓｐｈｏ−ｌｉ
ｇｈｔ Ｋｉｔ（カタログ番号ＢＰ−４００）を用いてアッセイする。Ｔｒｏｐ
ｉｘ Ｐｈｏｓｐｈｏ−ｌｉｇｈｔ Ｋｉｔは、以下で使用される希釈緩衝液、
アッセイ緩衝液、および反応緩衝液を供給する。
ＡＰ活性を、以下の一般的な手順に従ってＴｒｏｐｉｘ Ｐｈｏｓｐｈｏ−ｌｉ
ｇｈｔ Ｋｉｔ（カタログ番号ＢＰ−４００）を用いてアッセイする。Ｔｒｏｐ
ｉｘ Ｐｈｏｓｐｈｏ−ｌｉｇｈｔ Ｋｉｔは、以下で使用される希釈緩衝液、
アッセイ緩衝液、および反応緩衝液を供給する。
【０６８６】
ディスペンサーに２．５×希釈緩衝液を満たし、そして１５μｌの２．５×希
釈緩衝液を３５μｌの上清を含むオプティプレート（Ｏｐｔｉｐｌａｔｅ）に分
与する。プラスチックシーラーでプレートをシールし、そして６５℃で３０分間
インキュベートする。一様でない加温を避けるためにオプティプレートを離して
おく。
釈緩衝液を３５μｌの上清を含むオプティプレート（Ｏｐｔｉｐｌａｔｅ）に分
与する。プラスチックシーラーでプレートをシールし、そして６５℃で３０分間
インキュベートする。一様でない加温を避けるためにオプティプレートを離して
おく。
【０６８７】
サンプルを室温まで１５分間冷却する。ディスペンサーを空にし、そしてアッ
セイ緩衝液を満たす。５０ｍｌのアッセイ緩衝液を添加し、そして室温で５分間
インキュベートする。ディスペンサーを空にし、そして反応緩衝液を満たす（以
下の表を参照のこと）。５０μｌの反応緩衝液を添加し、そして室温で２０分間
インキュベートする。化学発光シグナルの強度は時間依存的であり、そしてルミ
ノメーターで５つのプレートを読み取るために約１０分間を費やすので、１回に
５つのプレートを処理し、１０分後に２つ目のセットを開始するべきである。
セイ緩衝液を満たす。５０ｍｌのアッセイ緩衝液を添加し、そして室温で５分間
インキュベートする。ディスペンサーを空にし、そして反応緩衝液を満たす（以
下の表を参照のこと）。５０μｌの反応緩衝液を添加し、そして室温で２０分間
インキュベートする。化学発光シグナルの強度は時間依存的であり、そしてルミ
ノメーターで５つのプレートを読み取るために約１０分間を費やすので、１回に
５つのプレートを処理し、１０分後に２つ目のセットを開始するべきである。
【０６８８】
ルミノメーターにおける相対的な光の単位（ｌｉｇｈｔ ｕｎｉｔ）を読み取
る。ブランクとしてＨ１２をセットし、そして結果を印字する。化学発光の増加
は、レポーター活性を示す。
る。ブランクとしてＨ１２をセットし、そして結果を印字する。化学発光の増加
は、レポーター活性を示す。
【０６８９】
【表６】
（実施例２１：低分子の濃度および膜透過性における変化を同定するハイスル
ープットスクリーニングアッセイ） レセプターへのリガンドの結合は、カルシウム、カリウム、ナトリウムのよう
な低分子およびｐＨの細胞内レベルを変化させ、ならびに膜電位を変化させるこ
とは公知である。これらの変化を特定細胞のレセプターに結合する上清の同定を
行うアッセイで測定し得る。以下のプロトコルは、カルシウムについてのアッセ
イを記載するが、このプロトコルは、カリウム、ナトリウム、ｐＨ、膜電位、ま
たは蛍光プローブにより検出可能な任意の他の低分子における変化を検出するよ
うに容易に改変し得る。
ープットスクリーニングアッセイ） レセプターへのリガンドの結合は、カルシウム、カリウム、ナトリウムのよう
な低分子およびｐＨの細胞内レベルを変化させ、ならびに膜電位を変化させるこ
とは公知である。これらの変化を特定細胞のレセプターに結合する上清の同定を
行うアッセイで測定し得る。以下のプロトコルは、カルシウムについてのアッセ
イを記載するが、このプロトコルは、カリウム、ナトリウム、ｐＨ、膜電位、ま
たは蛍光プローブにより検出可能な任意の他の低分子における変化を検出するよ
うに容易に改変し得る。
【０６９０】
以下のアッセイは、蛍光測定画像化プレートリーダー（「ＦＬＩＰＲ」）を使
用して低分子と結合する蛍光分子（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）におけ
る変化を測定する。明らかに、低分子を検出する任意の蛍光分子を本明細書で用
いるカルシウム蛍光分子、ｆｌｕｏ−３の代わりに使用し得る。
用して低分子と結合する蛍光分子（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）におけ
る変化を測定する。明らかに、低分子を検出する任意の蛍光分子を本明細書で用
いるカルシウム蛍光分子、ｆｌｕｏ−３の代わりに使用し得る。
【０６９１】
接着細胞については、細胞を１０，０００〜２０，０００細胞／ウェルで、底
が透明なＣｏ−ｓｔａｒ黒色９６ウェルプレートに播種する。プレートをＣＯ2
インキュベーター内で２０時間インキュベートする。接着細胞をＢｉｏｔｅｋ洗
浄器内で２００μｌのＨＢＳＳ（Ｈａｎｋ’ｓ Ｂａｌａｎｃｅｄ Ｓａｌｔ
Ｓｏｌｕｔｉｏｎ）で二回洗浄し、最後の洗浄後、緩衝液１００μｌを残す。
が透明なＣｏ−ｓｔａｒ黒色９６ウェルプレートに播種する。プレートをＣＯ2
インキュベーター内で２０時間インキュベートする。接着細胞をＢｉｏｔｅｋ洗
浄器内で２００μｌのＨＢＳＳ（Ｈａｎｋ’ｓ Ｂａｌａｎｃｅｄ Ｓａｌｔ
Ｓｏｌｕｔｉｏｎ）で二回洗浄し、最後の洗浄後、緩衝液１００μｌを残す。
【０６９２】
１ｍｇ／ｍｌ ｆｌｕｏ−３のストック溶液を１０％プルロン酸（ｐｌｕｒｏ
ｎｉｃ ａｃｉｄ）ＤＭＳＯで作製する。細胞にｆｌｕｏ−３を負荷するため、
１２μｇ／ｍｌ ｆｌｕｏ−３（５０μｌ）を各ウェルに添加する。このプレー
トをＣＯ2インキュベーター中、３７℃で６０分間インキュベートする。プレー
トをＢｉｏｔｅｋ洗浄器で、ＨＢＳＳにより４回洗浄し、緩衝液１００μｌを残
す。
ｎｉｃ ａｃｉｄ）ＤＭＳＯで作製する。細胞にｆｌｕｏ−３を負荷するため、
１２μｇ／ｍｌ ｆｌｕｏ−３（５０μｌ）を各ウェルに添加する。このプレー
トをＣＯ2インキュベーター中、３７℃で６０分間インキュベートする。プレー
トをＢｉｏｔｅｋ洗浄器で、ＨＢＳＳにより４回洗浄し、緩衝液１００μｌを残
す。
【０６９３】
非接着細胞については、細胞を培養培地からスピンダウンする。細胞を、５０
ｍｌのコニカルチューブ内でＨＢＳＳを用いて２〜５×１０6細胞／ｍｌに再懸
濁する。細胞懸濁液１ｍｌあたり、１ｍｇ／ｍｌ ｆｌｕｏ−３の１０％プルロ
ン酸ＤＭＳＯ溶液４μｌを加える。次に、チューブを３７℃の水浴中に３０〜６
０分間置く。細胞をＨＢＳＳで二回洗浄し、１×１０6細胞／ｍｌに再懸濁し、
そしてマイクロプレートに１００μｌ／ウェルずつ分配する。プレートを１００
０ｒｐｍで５分間遠心分離する。次に、プレートをＤｅｎｌｅｙ Ｃｅｌｌ Ｗ
ａｓｈ中で２００μｌで一回洗浄した後、吸引工程により最終容量を１００μｌ
にする。
ｍｌのコニカルチューブ内でＨＢＳＳを用いて２〜５×１０6細胞／ｍｌに再懸
濁する。細胞懸濁液１ｍｌあたり、１ｍｇ／ｍｌ ｆｌｕｏ−３の１０％プルロ
ン酸ＤＭＳＯ溶液４μｌを加える。次に、チューブを３７℃の水浴中に３０〜６
０分間置く。細胞をＨＢＳＳで二回洗浄し、１×１０6細胞／ｍｌに再懸濁し、
そしてマイクロプレートに１００μｌ／ウェルずつ分配する。プレートを１００
０ｒｐｍで５分間遠心分離する。次に、プレートをＤｅｎｌｅｙ Ｃｅｌｌ Ｗ
ａｓｈ中で２００μｌで一回洗浄した後、吸引工程により最終容量を１００μｌ
にする。
【０６９４】
非細胞ベースのアッセイについては、各ウェルは、ｆｌｕｏ−３のような蛍光
分子を含有する。上清をウェルに添加し、そして蛍光変化を検出する。
分子を含有する。上清をウェルに添加し、そして蛍光変化を検出する。
【０６９５】
細胞内カルシウムの蛍光を測定するため、ＦＬＩＰＲを以下のパラメーターに
ついて設定する：（１）システムゲインは、３００〜８００ｍＷであり；（２）
曝露時間は、０．４秒間であり；（３）カメラＦ／ストップは、Ｆ／２であり；
（４）励起は４８８ｎｍであり；（５）発光は５３０ｎｍであり；そして（６）
サンプル添加は５０μｌである。５３０ｎｍにおける発光の増加は、ＭＥＴＨ１
またはＭＥＴＨ２あるいはＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によって誘導される分子
のいずれかである分子によって引き起こされる、細胞内Ｃａ++濃度の増加を生じ
た、細胞外シグナル伝達事象を示す。
ついて設定する：（１）システムゲインは、３００〜８００ｍＷであり；（２）
曝露時間は、０．４秒間であり；（３）カメラＦ／ストップは、Ｆ／２であり；
（４）励起は４８８ｎｍであり；（５）発光は５３０ｎｍであり；そして（６）
サンプル添加は５０μｌである。５３０ｎｍにおける発光の増加は、ＭＥＴＨ１
またはＭＥＴＨ２あるいはＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によって誘導される分子
のいずれかである分子によって引き起こされる、細胞内Ｃａ++濃度の増加を生じ
た、細胞外シグナル伝達事象を示す。
【０６９６】
（実施例２２：チロシンキナーゼ活性を同定するハイスループットスクリーニ
ングアッセイ） プロテインチロシンキナーゼ（ＰＴＫ）は、多様な群の膜貫通キナーゼおよび
細胞質キナーゼを表す。レセプタープロテインチロシンキナーゼ（ＲＰＴＫ）群
内に、ＰＤＧＦ、ＦＧＦ、ＥＧＦ、ＮＧＦ、ＨＧＦおよびインスリンレセプター
サブファミリーを含む、一定の範囲の有糸分裂促進性（ｍｉｔｏｇｅｎｉｃ）お
よび代謝性成長因子のレセプターがある。さらに、対応するリガンドが未知であ
る大きなＲＰＴＫファミリーがある。ＲＰＴＫのリガンドは、主として分泌され
る低分子量タンパク質を含むが、膜結合型および細胞外マトリックスタンパク質
も含む。
ングアッセイ） プロテインチロシンキナーゼ（ＰＴＫ）は、多様な群の膜貫通キナーゼおよび
細胞質キナーゼを表す。レセプタープロテインチロシンキナーゼ（ＲＰＴＫ）群
内に、ＰＤＧＦ、ＦＧＦ、ＥＧＦ、ＮＧＦ、ＨＧＦおよびインスリンレセプター
サブファミリーを含む、一定の範囲の有糸分裂促進性（ｍｉｔｏｇｅｎｉｃ）お
よび代謝性成長因子のレセプターがある。さらに、対応するリガンドが未知であ
る大きなＲＰＴＫファミリーがある。ＲＰＴＫのリガンドは、主として分泌され
る低分子量タンパク質を含むが、膜結合型および細胞外マトリックスタンパク質
も含む。
【０６９７】
リガンドによるＲＰＴＫの活性化は、リガンド媒介レセプター二量体化を含み
、これはレセプターサブユニットのトランスリン酸化および細胞質チロシンキナ
ーゼの活性化を生じる。細胞質チロシンキナーゼとしては、ｓｒｃファミリー（
例えば、ｓｒｃ、ｙｅｓ、ｌｃｋ、ｌｙｎ、ｆｙｎ）のレセプター関連チロシン
キナーゼ、ならびにＪａｋファミリーのような非レセプター結合型および細胞質
ゾルプロテインチロシンキナーゼが挙げられる。これらのメンバーは、サイトカ
インスーパーファミリー（例えば、インターロイキン、インターフェロン、ＧＭ
−ＣＳＦおよびレプチン）のレセプターによって誘発されるシグナル伝達を媒介
する。
、これはレセプターサブユニットのトランスリン酸化および細胞質チロシンキナ
ーゼの活性化を生じる。細胞質チロシンキナーゼとしては、ｓｒｃファミリー（
例えば、ｓｒｃ、ｙｅｓ、ｌｃｋ、ｌｙｎ、ｆｙｎ）のレセプター関連チロシン
キナーゼ、ならびにＪａｋファミリーのような非レセプター結合型および細胞質
ゾルプロテインチロシンキナーゼが挙げられる。これらのメンバーは、サイトカ
インスーパーファミリー（例えば、インターロイキン、インターフェロン、ＧＭ
−ＣＳＦおよびレプチン）のレセプターによって誘発されるシグナル伝達を媒介
する。
【０６９８】
チロシンキナーゼ活性を刺激し得る公知の因子は広範であるため、ＭＥＴＨ１
またはＭＥＴＨ２あるいはＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によって誘導される分子
がチロシンキナーゼシグナル伝達経路を活性化し得るか否かの同定は興味深い。
従って、以下のプロトコルを設計して、チロシンキナーゼシグナル伝達経路を活
性化し得るこのような分子を同定する。
またはＭＥＴＨ２あるいはＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によって誘導される分子
がチロシンキナーゼシグナル伝達経路を活性化し得るか否かの同定は興味深い。
従って、以下のプロトコルを設計して、チロシンキナーゼシグナル伝達経路を活
性化し得るこのような分子を同定する。
【０６９９】
標的細胞（例えば、初代ケラチノサイト）を約２５，０００細胞／ウェルの密
度で、Ｎａｌｇｅ Ｎｕｎｃ（Ｎａｐｅｒｖｉｌｌｅ，ＩＬ）から購入した９６
ウェルＬｏｐｒｏｄｙｎｅ Ｓｉｌｅｎｔ Ｓｃｒｅｅｎ Ｐｌａｔｅに播種す
る。プレートを１００％エタノールで３０分間、二回リンスして滅菌し、水でリ
ンスした後、一晩乾燥させる。幾つかのプレートを、１００ｍｌの細胞培養グレ
ードＩ型コラーゲン（５０ｍｇ／ｍｌ）、ゼラチン（２％）またはポリリジン（
５０ｍｇ／ｍｌ）（これらは全て、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｓｔ．Ｌ
ｏｕｉｓ，ＭＯ）から購入し得る）で、またはＢｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏ
ｎ（Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）から購入した１０％Ｍａｔｒｉｇｅｌ、あるいは仔
ウシ血清で２時間コートし、ＰＢＳでリンスした後、４℃で保存する。増殖培地
に５，０００細胞／ウェルを播種し、製造業者のＡｌａｍａｒ Ｂｉｏｓｃｉｅ
ｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｓａｃｒａｍｅｎｔｏ，ＣＡ）が記載するように、ａｌａ
ｍａｒＢｌｕｅを使用して４８時間後に細胞数を間接定量することにより、これ
らのプレート上の細胞増殖をアッセイする。Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ
（Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）のＦａｌｃｏｎプレートカバー＃３０７１を使用し、
Ｌｏｐｒｏｄｙｎｅ Ｓｉｌｅｎｔ Ｓｃｒｅｅｎ Ｐｌａｔｅを覆う。Ｆａｌ
ｃｏｎ Ｍｉｃｒｏｔｅｓｔ ＩＩＩ細胞培養プレートもまた、いくつかの増殖
実験において使用し得る。
度で、Ｎａｌｇｅ Ｎｕｎｃ（Ｎａｐｅｒｖｉｌｌｅ，ＩＬ）から購入した９６
ウェルＬｏｐｒｏｄｙｎｅ Ｓｉｌｅｎｔ Ｓｃｒｅｅｎ Ｐｌａｔｅに播種す
る。プレートを１００％エタノールで３０分間、二回リンスして滅菌し、水でリ
ンスした後、一晩乾燥させる。幾つかのプレートを、１００ｍｌの細胞培養グレ
ードＩ型コラーゲン（５０ｍｇ／ｍｌ）、ゼラチン（２％）またはポリリジン（
５０ｍｇ／ｍｌ）（これらは全て、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｓｔ．Ｌ
ｏｕｉｓ，ＭＯ）から購入し得る）で、またはＢｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏ
ｎ（Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）から購入した１０％Ｍａｔｒｉｇｅｌ、あるいは仔
ウシ血清で２時間コートし、ＰＢＳでリンスした後、４℃で保存する。増殖培地
に５，０００細胞／ウェルを播種し、製造業者のＡｌａｍａｒ Ｂｉｏｓｃｉｅ
ｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｓａｃｒａｍｅｎｔｏ，ＣＡ）が記載するように、ａｌａ
ｍａｒＢｌｕｅを使用して４８時間後に細胞数を間接定量することにより、これ
らのプレート上の細胞増殖をアッセイする。Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ
（Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）のＦａｌｃｏｎプレートカバー＃３０７１を使用し、
Ｌｏｐｒｏｄｙｎｅ Ｓｉｌｅｎｔ Ｓｃｒｅｅｎ Ｐｌａｔｅを覆う。Ｆａｌ
ｃｏｎ Ｍｉｃｒｏｔｅｓｔ ＩＩＩ細胞培養プレートもまた、いくつかの増殖
実験において使用し得る。
【０７００】
抽出物を調製するため、Ａ４３１細胞をＬｏｐｒｏｄｙｎｅプレートのナイロ
ン膜上に播種し（２０，０００／２００ｍｌ／ウェル）、そして完全培地中で一
晩培養する。細胞を無血清基本培地中で２４時間インキュベートして静止させる
。ＥＧＦ（６０ｎｇ／ｍｌ）または実施例１４で生成した上清５０μｌで５〜２
０分間処理した後、培地を除去し、１００ｍｌの抽出緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰ
ＥＳ ｐＨ７．５、０．１５Ｍ ＮａＣｌ、１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００，０．
１％ＳＤＳ、２ｍＭ Ｎａ3ＶＯ4、２ｍＭ Ｎａ4Ｐ2Ｏ7およびＢｏｅｈｅｒｉ
ｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ（Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）から入手した
プロテアーゼインヒビターの混合物（＃１８３６１７０））を各ウェルに添加し
、そしてプレートを回転振盪器上、４℃で５分間振盪する。次に、プレートを真
空トランスファーマニホルド（ｖａｃｕｕｍ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｍａｎｉｆｏ
ｌｄ）に設置し、そしてハウスバキュームを使用して抽出物を各ウェルの底の０
．４５ｍｍ膜で濾過する。抽出物をバキュームマニホールドの底の９６ウェル捕
獲／アッセイプレートに集め、そして直ちに氷上に置く。遠心分離により明澄化
した抽出物を得るため、界面活性剤で５分間可溶化した後、各ウェルの含有物を
取り出し、４℃、１６，０００×ｇで１５分間遠心分離する。
ン膜上に播種し（２０，０００／２００ｍｌ／ウェル）、そして完全培地中で一
晩培養する。細胞を無血清基本培地中で２４時間インキュベートして静止させる
。ＥＧＦ（６０ｎｇ／ｍｌ）または実施例１４で生成した上清５０μｌで５〜２
０分間処理した後、培地を除去し、１００ｍｌの抽出緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰ
ＥＳ ｐＨ７．５、０．１５Ｍ ＮａＣｌ、１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００，０．
１％ＳＤＳ、２ｍＭ Ｎａ3ＶＯ4、２ｍＭ Ｎａ4Ｐ2Ｏ7およびＢｏｅｈｅｒｉ
ｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ（Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）から入手した
プロテアーゼインヒビターの混合物（＃１８３６１７０））を各ウェルに添加し
、そしてプレートを回転振盪器上、４℃で５分間振盪する。次に、プレートを真
空トランスファーマニホルド（ｖａｃｕｕｍ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｍａｎｉｆｏ
ｌｄ）に設置し、そしてハウスバキュームを使用して抽出物を各ウェルの底の０
．４５ｍｍ膜で濾過する。抽出物をバキュームマニホールドの底の９６ウェル捕
獲／アッセイプレートに集め、そして直ちに氷上に置く。遠心分離により明澄化
した抽出物を得るため、界面活性剤で５分間可溶化した後、各ウェルの含有物を
取り出し、４℃、１６，０００×ｇで１５分間遠心分離する。
【０７０１】
濾過抽出物をチロシンキナーゼ活性のレベルについて試験する。チロシンキナ
ーゼ活性を検出する多数の方法が公知であるが、本明細書においては方法の一つ
を記載する。
ーゼ活性を検出する多数の方法が公知であるが、本明細書においては方法の一つ
を記載する。
【０７０２】
一般的に、特定の基質（ビオチン化ペプチド）上のチロシン残基をリン酸化す
る能力を決定することにより、上清のチロシンキナーゼ活性を評価する。この目
的に使用し得るビオチン化ペプチドとしては、ＰＳＫ１（細胞分裂キナーゼｃｄ
ｃ２−ｐ３４のアミノ酸６〜２０に相当）およびＰＳＫ２（ガストリンのアミノ
酸１〜１７に相当）が挙げられる。両ペプチドは、一連のチロシンキナーゼの基
質であり、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍから入手可能である。
る能力を決定することにより、上清のチロシンキナーゼ活性を評価する。この目
的に使用し得るビオチン化ペプチドとしては、ＰＳＫ１（細胞分裂キナーゼｃｄ
ｃ２−ｐ３４のアミノ酸６〜２０に相当）およびＰＳＫ２（ガストリンのアミノ
酸１〜１７に相当）が挙げられる。両ペプチドは、一連のチロシンキナーゼの基
質であり、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍから入手可能である。
【０７０３】
以下の成分を順に添加することにより、チロシンキナーゼ反応を設定する。ま
ず、５μＭビオチン化ペプチド１０μｌを添加した後、順に、ＡＴＰ／Ｍｇ2+（
５ｍＭ ＡＴＰ／５０ｍＭ ＭｇＣｌ2）１０μｌ、５×アッセイ緩衝液（４０
ｍＭ塩酸イミダゾール、ｐＨ７．３、４０ｍＭ β−グリセロリン酸塩、１ｍＭ
ＥＧＴＡ、１００ｍＭ ＭｇＣｌ2、５ｍＭ ＭｎＣｌ2、０．５ｍｇ／ｍｌ
ＢＳＡ）１０μｌ、バナジン酸ナトリウム（１ｍＭ）５μｌ、最後に水５μｌを
加える。成分を穏やかに混合し、反応混合物を３０℃で２分間プレインキュベー
トする。コントロール酵素または濾過上清１０μｌを加えて反応を開始させる。
ず、５μＭビオチン化ペプチド１０μｌを添加した後、順に、ＡＴＰ／Ｍｇ2+（
５ｍＭ ＡＴＰ／５０ｍＭ ＭｇＣｌ2）１０μｌ、５×アッセイ緩衝液（４０
ｍＭ塩酸イミダゾール、ｐＨ７．３、４０ｍＭ β−グリセロリン酸塩、１ｍＭ
ＥＧＴＡ、１００ｍＭ ＭｇＣｌ2、５ｍＭ ＭｎＣｌ2、０．５ｍｇ／ｍｌ
ＢＳＡ）１０μｌ、バナジン酸ナトリウム（１ｍＭ）５μｌ、最後に水５μｌを
加える。成分を穏やかに混合し、反応混合物を３０℃で２分間プレインキュベー
トする。コントロール酵素または濾過上清１０μｌを加えて反応を開始させる。
【０７０４】
次に、１２０ｍＭ ＥＤＴＡ １０μｌを添加することによりチロシンキナー
ゼアッセイ反応を停止し、その反応物を氷上に置く。
ゼアッセイ反応を停止し、その反応物を氷上に置く。
【０７０５】
反応混合物の５０μｌのアリコートをマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）モ
ジュールに移し、３７℃で２０分間インキュベートすることにより、チロシンキ
ナーゼ活性を測定する。これにより、ストレプトアビジン（ｓｔｒｅｐｔａｖａ
ｄｉｎ）コーティング９６ウェルプレートをビオチン化ペプチドと会合させる。
ＭＴＰモジュールを３００μｌ／ウェルのＰＢＳで４回洗浄する。次に、西洋ワ
サビペルオキシダーゼに結合体化した抗ホスホチロシン（ｐｈｏｓｐｏｔｙｒｏ
ｓｉｎｅ）抗体（抗Ｐ−Ｔｙｒ−ＰＯＤ（０．５ｕ／ｍｌ））７５μｌを、各ウ
ェルに添加した後、３７℃で１時間インキュベートする。ウェルを上記のように
洗浄する。
ジュールに移し、３７℃で２０分間インキュベートすることにより、チロシンキ
ナーゼ活性を測定する。これにより、ストレプトアビジン（ｓｔｒｅｐｔａｖａ
ｄｉｎ）コーティング９６ウェルプレートをビオチン化ペプチドと会合させる。
ＭＴＰモジュールを３００μｌ／ウェルのＰＢＳで４回洗浄する。次に、西洋ワ
サビペルオキシダーゼに結合体化した抗ホスホチロシン（ｐｈｏｓｐｏｔｙｒｏ
ｓｉｎｅ）抗体（抗Ｐ−Ｔｙｒ−ＰＯＤ（０．５ｕ／ｍｌ））７５μｌを、各ウ
ェルに添加した後、３７℃で１時間インキュベートする。ウェルを上記のように
洗浄する。
【０７０６】
次に、ペルオキシダーゼ基質溶液（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ
）１００μｌを加え、室温で少なくとも５分間（最長３０分間）インキュベート
する。ＥＬＩＳＡリーダーを使用して、４０５ｎｍにおけるサンプルの吸光度を
測定する。結合したペルオキシダーゼ活性のレベルをＥＬＩＳＡリーダーを使用
して定量し、これは、チロシンキナーゼ活性のレベルを反映する。
）１００μｌを加え、室温で少なくとも５分間（最長３０分間）インキュベート
する。ＥＬＩＳＡリーダーを使用して、４０５ｎｍにおけるサンプルの吸光度を
測定する。結合したペルオキシダーゼ活性のレベルをＥＬＩＳＡリーダーを使用
して定量し、これは、チロシンキナーゼ活性のレベルを反映する。
【０７０７】
（実施例２３：リン酸化活性を同定するハイスループットスクリーニングアッ
セイ） 実施例２２に記載のプロテインチロシンキナーゼ活性アッセイの可能性のある
代替物および／または補完物（ｃｏｍｐｌｉｍｅｎｔ）として、主要な細胞内シ
グナル伝達中間体の活性化（リン酸化）を検出するアッセイもまた使用し得る。
例えば、下記のように、一つの特定のアッセイは、Ｅｒｋ−１およびＥｒｋ−２
キナーゼのチロシンリン酸化を検出し得る。しかし、Ｒａｆ、ＪＮＫ、ｐ３８Ｍ
ＡＰ、Ｍａｐキナーゼキナーゼ（ＭＥＫ）、ＭＥＫキナーゼ、Ｓｒｃ、筋肉特異
的キナーゼ（ＭｕＳＫ）、ＩＲＡＫ、ＴｅｃおよびＪａｎｕｓのような他の分子
、ならびに他の任意のホスホセリン、ホスホチロシンまたはホスホスレオニン分
子のリン酸化を、以下のアッセイにおいてこれらの分子でＥｒｋ−１またはＥｒ
ｋ−２を置き換えることにより検出し得る。
セイ） 実施例２２に記載のプロテインチロシンキナーゼ活性アッセイの可能性のある
代替物および／または補完物（ｃｏｍｐｌｉｍｅｎｔ）として、主要な細胞内シ
グナル伝達中間体の活性化（リン酸化）を検出するアッセイもまた使用し得る。
例えば、下記のように、一つの特定のアッセイは、Ｅｒｋ−１およびＥｒｋ−２
キナーゼのチロシンリン酸化を検出し得る。しかし、Ｒａｆ、ＪＮＫ、ｐ３８Ｍ
ＡＰ、Ｍａｐキナーゼキナーゼ（ＭＥＫ）、ＭＥＫキナーゼ、Ｓｒｃ、筋肉特異
的キナーゼ（ＭｕＳＫ）、ＩＲＡＫ、ＴｅｃおよびＪａｎｕｓのような他の分子
、ならびに他の任意のホスホセリン、ホスホチロシンまたはホスホスレオニン分
子のリン酸化を、以下のアッセイにおいてこれらの分子でＥｒｋ−１またはＥｒ
ｋ−２を置き換えることにより検出し得る。
【０７０８】
詳細には、９６ウェルＥＬＩＳＡプレートのウェルをプロテインＧ（１μｇ／
ｍｌ）０．１ｍｌにより室温（ＲＴ）で２時間コーティングしてアッセイプレー
トを作製する。次に、プレートをＰＢＳでリンスし、３％ＢＳＡ／ＰＢＳにより
ＲＴで１時間ブロックする。次に、プロテインＧプレートをＥｒｋ−１およびＥ
ｒｋ−２に対する二つの市販のモノクローナル抗体（１００ｎｇ／ウェル）（Ｓ
ａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）で処理（ＲＴで１時間）す
る。（他の分子を検出するために、上記の任意の分子を検出するモノクローナル
抗体を交換することにより、この工程を容易に改変し得る）。ＰＢＳで３〜５回
リンスした後、使用時まで、プレートを４℃で貯蔵する。
ｍｌ）０．１ｍｌにより室温（ＲＴ）で２時間コーティングしてアッセイプレー
トを作製する。次に、プレートをＰＢＳでリンスし、３％ＢＳＡ／ＰＢＳにより
ＲＴで１時間ブロックする。次に、プロテインＧプレートをＥｒｋ−１およびＥ
ｒｋ−２に対する二つの市販のモノクローナル抗体（１００ｎｇ／ウェル）（Ｓ
ａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）で処理（ＲＴで１時間）す
る。（他の分子を検出するために、上記の任意の分子を検出するモノクローナル
抗体を交換することにより、この工程を容易に改変し得る）。ＰＢＳで３〜５回
リンスした後、使用時まで、プレートを４℃で貯蔵する。
【０７０９】
Ａ４３１細胞を２０，０００／ウェルで９６ウェルＬｏｐｒｏｄｙｎｅフィル
タープレートに播種し、増殖培地中で一晩培養する。次に、細胞を基本培地（Ｄ
ＭＥＭ）中で４８時間飢餓させた後、ＥＧＦ（６ｎｇ／ウェル）または実施例３
１で得た上清５０μｌで５〜２０分間処理する。次に、細胞を可溶化し、抽出物
を濾過して直接アッセイプレート中に入れる。
タープレートに播種し、増殖培地中で一晩培養する。次に、細胞を基本培地（Ｄ
ＭＥＭ）中で４８時間飢餓させた後、ＥＧＦ（６ｎｇ／ウェル）または実施例３
１で得た上清５０μｌで５〜２０分間処理する。次に、細胞を可溶化し、抽出物
を濾過して直接アッセイプレート中に入れる。
【０７１０】
抽出物を用いてＲＴで１時間インキュベートした後、ウェルを再度リンスする
。陽性コントロールとして、市販のＭＡＰキナーゼ調製物（１０ｎｇ／ウェル）
をＡ４３１抽出物の代わりに使用する。次に、プレートを、Ｅｒｋ−１およびＥ
ｒｋ−２キナーゼのリン酸化エピトープを特異的に認識する市販のポリクローナ
ル（ウサギ）抗体（１μｇ／ｍｌ）で処理する（ＲＴで１時間）。この抗体を標
準的な手順によりビオチン化する。次に、結合ポリクローナル抗体をユーロピウ
ムストレプトアビジンおよびユーロピウム蛍光増強剤とＷａｌｌａｃ ＤＥＬＦ
ＩＡ装置内で連続的にインキュベートする（時間分解性蛍光）ことによって定量
する。バックグラウンドを超える蛍光シグナルの増加は、ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２またはＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によって誘導される分子によるリン酸
化を示す。
。陽性コントロールとして、市販のＭＡＰキナーゼ調製物（１０ｎｇ／ウェル）
をＡ４３１抽出物の代わりに使用する。次に、プレートを、Ｅｒｋ−１およびＥ
ｒｋ−２キナーゼのリン酸化エピトープを特異的に認識する市販のポリクローナ
ル（ウサギ）抗体（１μｇ／ｍｌ）で処理する（ＲＴで１時間）。この抗体を標
準的な手順によりビオチン化する。次に、結合ポリクローナル抗体をユーロピウ
ムストレプトアビジンおよびユーロピウム蛍光増強剤とＷａｌｌａｃ ＤＥＬＦ
ＩＡ装置内で連続的にインキュベートする（時間分解性蛍光）ことによって定量
する。バックグラウンドを超える蛍光シグナルの増加は、ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２またはＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２によって誘導される分子によるリン酸
化を示す。
【０７１１】
（実施例２４：ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２遺伝子における変化の決定方法）
目的の表現型（例えば、疾患）を提示する家族全員または個々の患者から単離
されたＲＮＡを単離する。次に、ｃＤＮＡをこれらのＲＮＡサンプルから当該分
野で公知のプロトコルを使用して生成する（Ｓａｍｂｒｏｏｋを参照のこと）。
次に、このｃＤＮＡを、配列番号１および／または寄託したライブラリーに含ま
れるｃＤＮＡクローンにおける関連するｃＤＮＡのヌクレオチド配列における目
的の領域を取り囲むプライマーを用いるＰＣＲのテンプレートとして使用する。
示唆されるＰＣＲ条件は、Ｓｉｄｒａｎｓｋｙ，Ｄ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５
２：７０６（１９９１）に記載の緩衝溶液を使用し、９５℃で３０秒間；５２〜
５８℃で６０〜１２０秒間；および７０℃で６０〜１２０秒間の３５サイクルか
らなる。
されたＲＮＡを単離する。次に、ｃＤＮＡをこれらのＲＮＡサンプルから当該分
野で公知のプロトコルを使用して生成する（Ｓａｍｂｒｏｏｋを参照のこと）。
次に、このｃＤＮＡを、配列番号１および／または寄託したライブラリーに含ま
れるｃＤＮＡクローンにおける関連するｃＤＮＡのヌクレオチド配列における目
的の領域を取り囲むプライマーを用いるＰＣＲのテンプレートとして使用する。
示唆されるＰＣＲ条件は、Ｓｉｄｒａｎｓｋｙ，Ｄ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５
２：７０６（１９９１）に記載の緩衝溶液を使用し、９５℃で３０秒間；５２〜
５８℃で６０〜１２０秒間；および７０℃で６０〜１２０秒間の３５サイクルか
らなる。
【０７１２】
次に、ＰＣＲ産物を、ＳｅｑｕｉＴｈｅｒｍ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（Ｅｐｉ
ｃｅｎｔｒｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用い、５’末端にＴ４ポリヌクレ
オチドキナーゼで標識したプライマーを使用して配列決定する。選択したＭＥＴ
Ｈ１またはＭＥＴＨ２のエキソンのイントロン−エキソン境界もまた決定し、ゲ
ノムＰＣＲ産物を分析してその結果を確認する。次に、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２において疑わしい変異を有するＰＣＲ産物のクローン化および配列決定を行
い、直接配列決定の結果を確認する。
ｃｅｎｔｒｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用い、５’末端にＴ４ポリヌクレ
オチドキナーゼで標識したプライマーを使用して配列決定する。選択したＭＥＴ
Ｈ１またはＭＥＴＨ２のエキソンのイントロン−エキソン境界もまた決定し、ゲ
ノムＰＣＲ産物を分析してその結果を確認する。次に、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２において疑わしい変異を有するＰＣＲ産物のクローン化および配列決定を行
い、直接配列決定の結果を確認する。
【０７１３】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のＰＣＲ産物を、Ｈｏｌｔｏｎ，Ｔ．Ａ．および
Ｇｒａｈａｍ，Ｍ．Ｗ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１
９：１１５６（１９９１）に記載のようにＴテールベクターにクローン化し、Ｔ
７ポリメラーゼ（Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ）で配
列決定する。罹患個体を、非罹患個体には存在しないＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ
２における変異により同定する。
Ｇｒａｈａｍ，Ｍ．Ｗ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１
９：１１５６（１９９１）に記載のようにＴテールベクターにクローン化し、Ｔ
７ポリメラーゼ（Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ）で配
列決定する。罹患個体を、非罹患個体には存在しないＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ
２における変異により同定する。
【０７１４】
ゲノム再配置もまた、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２遺伝子における改変を決定
する方法として観察する。単離したゲノムクローンを、ジゴキシゲニンデオキシ
−ウリジン５’−三リン酸（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｈｅｉｍ）を用いて
ニックトランスレーションし、そしてＪｏｈｎｓｏｎ，Ｃｇ．ら、Ｍｅｔｈｏｄ
ｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ． ３５： ７３−９９（１９９１）に記載のようにＦ
ＩＳＨを行う。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のゲノムの遺伝子座への特異的ハイ
ブリダイゼーションのために、大過剰のヒトｃｏｔ−１ ＤＮＡを用いて標識プ
ローブとのハイブリダイゼーションを行う。
する方法として観察する。単離したゲノムクローンを、ジゴキシゲニンデオキシ
−ウリジン５’−三リン酸（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｈｅｉｍ）を用いて
ニックトランスレーションし、そしてＪｏｈｎｓｏｎ，Ｃｇ．ら、Ｍｅｔｈｏｄ
ｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ． ３５： ７３−９９（１９９１）に記載のようにＦ
ＩＳＨを行う。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のゲノムの遺伝子座への特異的ハイ
ブリダイゼーションのために、大過剰のヒトｃｏｔ−１ ＤＮＡを用いて標識プ
ローブとのハイブリダイゼーションを行う。
【０７１５】
染色体を、４，６−ジアミノ−２−フェニリドールおよびヨウ化プロピジウム
で対比染色し、ＣバンドおよびＲバンドの組み合わせを生成する。正確なマッピ
ングのための整列イメージを、三重バンドフィルターセット（Ｃｈｒｏｍａ Ｔ
ｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｒａｔｔｌｅｂｏｒｏ，ＶＴ）と冷却電荷結合素子カメ
ラ（Ｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｓ，Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）および可変励起波長フィ
ルター（Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｃｖ．ら、Ｇｅｎｅｔ．Ａｎａｌ．Ｔｅｃｈ．Ａｐｐ
ｌ．，８：７５（１９９１））とを組み合わせて用いて得る。ＩＳｅｅ Ｇｒａ
ｐｈｉｃａｌ Ｐｒｏｇｒａｍ Ｓｙｓｔｅｍ （Ｉｎｏｖｉｓｉｏｎ Ｃｏｒ
ｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｄｕｒｈａｍ，ＮＣ）を使用して、イメージ収集、分析およ
び染色体部分長測定を行う。（プローブがハイブリダイズした）ＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２のゲノム領域の染色体変化を、挿入、欠失および転座として同定す
る。これらのＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の変化を関連疾患の診断マーカーとし
て使用する。
で対比染色し、ＣバンドおよびＲバンドの組み合わせを生成する。正確なマッピ
ングのための整列イメージを、三重バンドフィルターセット（Ｃｈｒｏｍａ Ｔ
ｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｒａｔｔｌｅｂｏｒｏ，ＶＴ）と冷却電荷結合素子カメ
ラ（Ｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｓ，Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）および可変励起波長フィ
ルター（Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｃｖ．ら、Ｇｅｎｅｔ．Ａｎａｌ．Ｔｅｃｈ．Ａｐｐ
ｌ．，８：７５（１９９１））とを組み合わせて用いて得る。ＩＳｅｅ Ｇｒａ
ｐｈｉｃａｌ Ｐｒｏｇｒａｍ Ｓｙｓｔｅｍ （Ｉｎｏｖｉｓｉｏｎ Ｃｏｒ
ｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｄｕｒｈａｍ，ＮＣ）を使用して、イメージ収集、分析およ
び染色体部分長測定を行う。（プローブがハイブリダイズした）ＭＥＴＨ１また
はＭＥＴＨ２のゲノム領域の染色体変化を、挿入、欠失および転座として同定す
る。これらのＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の変化を関連疾患の診断マーカーとし
て使用する。
【０７１６】
（実施例２５：生物学的サンプル中のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の異常レベ
ルを検出する方法） ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは生物学的サンプル中で検出され得
、そしてＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の上昇または低下が検出されるなら、この
ポリペプチドは、特定表現型のマーカーである。検出方法は数多くあり、そして
それ故、当業者は以下のアッセイをそれらの特定の必要性に適合するように改変
し得ることが理解される。
ルを検出する方法） ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは生物学的サンプル中で検出され得
、そしてＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の上昇または低下が検出されるなら、この
ポリペプチドは、特定表現型のマーカーである。検出方法は数多くあり、そして
それ故、当業者は以下のアッセイをそれらの特定の必要性に適合するように改変
し得ることが理解される。
【０７１７】
例えば、抗体サンドイッチＥＬＩＳＡを使用し、サンプル中、好ましくは、生
物学的サンプル中のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を検出する。マイクロタイター
プレートのウェルを、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２に対する特異的抗体を最終濃
度０．２〜１０μｇ／ｍｌで用いてコーティングする。この抗体は、モノクロー
ナルまたはポリクローナルのいずれかであって、実施例１３に記載の方法により
産生される。ウェルに対するＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の非特異的結合が減少
するように、このウェルをブロックする。
物学的サンプル中のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を検出する。マイクロタイター
プレートのウェルを、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２に対する特異的抗体を最終濃
度０．２〜１０μｇ／ｍｌで用いてコーティングする。この抗体は、モノクロー
ナルまたはポリクローナルのいずれかであって、実施例１３に記載の方法により
産生される。ウェルに対するＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の非特異的結合が減少
するように、このウェルをブロックする。
【０７１８】
次に、コーティングしたウェルを、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２含有サンプル
を用いてＲＴで２時間を超えてインキュベートする。好ましくは、サンプルの系
列希釈を使用して結果を確認すべきである。次に、プレートを脱イオン水または
蒸留水で三回洗浄し、非結合ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を除去する。
を用いてＲＴで２時間を超えてインキュベートする。好ましくは、サンプルの系
列希釈を使用して結果を確認すべきである。次に、プレートを脱イオン水または
蒸留水で三回洗浄し、非結合ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を除去する。
【０７１９】
次に、特異的抗体−アルカリホスファターゼ結合体５０μｌを２５〜４００ｎ
ｇの濃度で加え、室温で２時間インキュベートする。プレートを再び脱イオン水
または蒸留水で三回洗浄し、未結合の結合体を除去する。
ｇの濃度で加え、室温で２時間インキュベートする。プレートを再び脱イオン水
または蒸留水で三回洗浄し、未結合の結合体を除去する。
【０７２０】
４−メチルウンベリフェリルリン酸（ＭＵＰ）またはｐ−ニトロフェニルリン
酸（ＮＰＰ）基質溶液７５μｌを各ウェルに添加し、そして室温で１時間インキ
ュベートする。反応物をマイクロタイタープレートリーダーにより測定する。コ
ントロールサンプルの系列希釈を使用して標準曲線を作成し、そしてＸ軸（対数
スケール）にＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチド濃度を、そしてＹ軸（直
線スケール）に蛍光または吸光度をプロットする。標準曲線を用いてサンプル中
のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２濃度を補間する。
酸（ＮＰＰ）基質溶液７５μｌを各ウェルに添加し、そして室温で１時間インキ
ュベートする。反応物をマイクロタイタープレートリーダーにより測定する。コ
ントロールサンプルの系列希釈を使用して標準曲線を作成し、そしてＸ軸（対数
スケール）にＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチド濃度を、そしてＹ軸（直
線スケール）に蛍光または吸光度をプロットする。標準曲線を用いてサンプル中
のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２濃度を補間する。
【０７２１】
（実施例２６：ポリペプヂドの処方）
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２組成物は、個々の患者の臨床状態（特に、ＭＥＴ
Ｈ１またはＭＥＴＨ２ペプチドのみの処理での副作用）、送達部位、投与方法、
投与スケジュール、および開業医にとって既知の他の因子を考慮して、良好な医
療行為からなる様式で、処方および投与される。従って、本明細書における目的
のための「有効量」は、このような考慮によって決定される。
Ｈ１またはＭＥＴＨ２ペプチドのみの処理での副作用）、送達部位、投与方法、
投与スケジュール、および開業医にとって既知の他の因子を考慮して、良好な医
療行為からなる様式で、処方および投与される。従って、本明細書における目的
のための「有効量」は、このような考慮によって決定される。
【０７２２】
一般的提案として、用量当り、非経口的に投与されるＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２の合計薬学的有効量は、患者体重の、約１μｇ／ｋｇ／日〜１０ｍｇ／ｋｇ
／日の範囲にあるが、上記のようにこれは治療的裁量に委ねられる。さらに好ま
しくは、このホルモンについて、この用量は、少なくとも０．０１ｍｇ／ｋｇ／
日、そして最も好ましくはヒトに対して約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日と約１ｍｇ／
ｋｇ／日との間である。連続投与する場合、代表的には、ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２を約１μｇ／ｋｇ／時間〜約５０μｇ／ｋｇ／時間の投薬速度で１日に１
〜４回の注射かまたは連続皮下注入（例えばミニポンプを用いる）のいずれかに
より投与する。静脈内用バッグ溶液もまた使用し得る。変化を観察するために必
要な処置期間および応答が生じる処置後の間隔は、所望の効果に応じて変化する
ようである。
Ｈ２の合計薬学的有効量は、患者体重の、約１μｇ／ｋｇ／日〜１０ｍｇ／ｋｇ
／日の範囲にあるが、上記のようにこれは治療的裁量に委ねられる。さらに好ま
しくは、このホルモンについて、この用量は、少なくとも０．０１ｍｇ／ｋｇ／
日、そして最も好ましくはヒトに対して約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日と約１ｍｇ／
ｋｇ／日との間である。連続投与する場合、代表的には、ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２を約１μｇ／ｋｇ／時間〜約５０μｇ／ｋｇ／時間の投薬速度で１日に１
〜４回の注射かまたは連続皮下注入（例えばミニポンプを用いる）のいずれかに
より投与する。静脈内用バッグ溶液もまた使用し得る。変化を観察するために必
要な処置期間および応答が生じる処置後の間隔は、所望の効果に応じて変化する
ようである。
【０７２３】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を含む薬学的組成物を、経口的、直腸内、非経口
的、槽内（ｉｎｔｒａｃｉｓｔｅｍａｌｌｙ）、膣内、腹腔内、局所的（粉末、
軟膏、ゲル、点滴剤、または経皮パッチによるなど）、口内あるいは経口または
鼻腔スプレーとして投与する。「薬学的に受容可能なキャリア」とは、非毒性の
固体、半固体または液体の充填剤、希釈剤、被包材または任意の型の製剤補助剤
をいう。本明細書で用いる用語「非経口的」とは、静脈内、筋肉内、腹腔内、胸
骨内、皮下および関節内の注射および注入を含む投与の様式をいう。
的、槽内（ｉｎｔｒａｃｉｓｔｅｍａｌｌｙ）、膣内、腹腔内、局所的（粉末、
軟膏、ゲル、点滴剤、または経皮パッチによるなど）、口内あるいは経口または
鼻腔スプレーとして投与する。「薬学的に受容可能なキャリア」とは、非毒性の
固体、半固体または液体の充填剤、希釈剤、被包材または任意の型の製剤補助剤
をいう。本明細書で用いる用語「非経口的」とは、静脈内、筋肉内、腹腔内、胸
骨内、皮下および関節内の注射および注入を含む投与の様式をいう。
【０７２４】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２はまた、徐放性システムにより適切に投与される
。徐放性組成物の適切な例は、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの成形
品の形態の半透過性ポリマーマトリックスを包含する。徐放性マトリックスとし
ては、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号、ＥＰ５８，４８１）、
Ｌ−グルタミン酸およびγ−エチル−Ｌ−グルタメートのコポリマー（Ｓｉｄｍ
ａｎ，Ｕ．ら；Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ ２２：５４７−５５６（１９８３））
、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）（Ｒ．Ｌａｎｇｅｒら、Ｊ．Ｂ
ｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．１５：１６７−２７７（１９８１）、および
Ｒ．Ｌａｎｇｅｒ，Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．１２：９８−１０５（１９８２））、
エチレンビニルアセテート（Ｒ．Ｌａｎｇｅｒら）またはポリ−Ｄ−（−）−３
−ヒドロキシ酪酸（ＥＰ１３３，９８８）が挙げられる。徐放性組成物はまた、
リポソームに封入されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを包含する。
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を含有するリポソームは、それ自体が公知である方
法により調製される：ＤＥ３，２１８，１２１；Ｅｐｓｔｅｉｎら、Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２：３６８８−３６９２（１９８５）
；Ｈｗａｎｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：４０
３０−４０３４（１９８０）；ＥＰ５２，３２２；ＥＰ３６，６７６；ＥＰ８８
，０４６；ＥＰ１４３，９４９；ＥＰ１４２，６４１；日本国特許出願第８３−
１１８００８号；米国特許第４，４８５，０４５号および同第４，５４４，５４
５号；ならびにＥＰ第１０２，３２４号。通常、リポソームは、小さな（約２０
０〜８００オングストローム）単層状型であり、脂質含有量は、約３０モル％コ
レステロールよりも多く、選択された割合が、最適分泌ポリペプチド治療のため
に調整される。
。徐放性組成物の適切な例は、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの成形
品の形態の半透過性ポリマーマトリックスを包含する。徐放性マトリックスとし
ては、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号、ＥＰ５８，４８１）、
Ｌ−グルタミン酸およびγ−エチル−Ｌ−グルタメートのコポリマー（Ｓｉｄｍ
ａｎ，Ｕ．ら；Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ ２２：５４７−５５６（１９８３））
、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）（Ｒ．Ｌａｎｇｅｒら、Ｊ．Ｂ
ｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．１５：１６７−２７７（１９８１）、および
Ｒ．Ｌａｎｇｅｒ，Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．１２：９８−１０５（１９８２））、
エチレンビニルアセテート（Ｒ．Ｌａｎｇｅｒら）またはポリ−Ｄ−（−）−３
−ヒドロキシ酪酸（ＥＰ１３３，９８８）が挙げられる。徐放性組成物はまた、
リポソームに封入されたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを包含する。
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を含有するリポソームは、それ自体が公知である方
法により調製される：ＤＥ３，２１８，１２１；Ｅｐｓｔｅｉｎら、Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２：３６８８−３６９２（１９８５）
；Ｈｗａｎｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：４０
３０−４０３４（１９８０）；ＥＰ５２，３２２；ＥＰ３６，６７６；ＥＰ８８
，０４６；ＥＰ１４３，９４９；ＥＰ１４２，６４１；日本国特許出願第８３−
１１８００８号；米国特許第４，４８５，０４５号および同第４，５４４，５４
５号；ならびにＥＰ第１０２，３２４号。通常、リポソームは、小さな（約２０
０〜８００オングストローム）単層状型であり、脂質含有量は、約３０モル％コ
レステロールよりも多く、選択された割合が、最適分泌ポリペプチド治療のため
に調整される。
【０７２５】
非経口投与のために、１つの実施態様において、一般に、ＭＥＴＨ１またはＭ
ＥＴＨ２は、それを所望の程度の純度で、薬学的に受容可能なキャリア、すなわ
ち、用いる投薬量および濃度でレシピエントに対して毒性がなく、かつ処方物の
他の成分と適合するものと、単位投薬量の注射可能な形態（溶液、懸濁液または
乳濁液）で混合することにより処方される。例えば、この処方物は、好ましくは
、酸化剤、およびポリペプチドに対して有害であることが知られている他の化合
物を含まない。
ＥＴＨ２は、それを所望の程度の純度で、薬学的に受容可能なキャリア、すなわ
ち、用いる投薬量および濃度でレシピエントに対して毒性がなく、かつ処方物の
他の成分と適合するものと、単位投薬量の注射可能な形態（溶液、懸濁液または
乳濁液）で混合することにより処方される。例えば、この処方物は、好ましくは
、酸化剤、およびポリペプチドに対して有害であることが知られている他の化合
物を含まない。
【０７２６】
一般に、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を液体キャリアまたは微細分割固体キャ
リアあるいはその両方と均一および緊密に接触させて処方物を調製する。次に、
必要であれば、生成物を所望の処方物に成形する。好ましくは、キャリアは、非
経口的キャリアであり、より好ましくはレシピエントの血液と等張である溶液で
ある。このようなキャリアビヒクルの例としては、水、生理食塩水、リンゲル溶
液およびデキストロース溶液が挙げられる。不揮発性油およびオレイン酸エチル
のような非水性ビヒクルもまた、リポソームと同様に本明細書において有用であ
る。
リアあるいはその両方と均一および緊密に接触させて処方物を調製する。次に、
必要であれば、生成物を所望の処方物に成形する。好ましくは、キャリアは、非
経口的キャリアであり、より好ましくはレシピエントの血液と等張である溶液で
ある。このようなキャリアビヒクルの例としては、水、生理食塩水、リンゲル溶
液およびデキストロース溶液が挙げられる。不揮発性油およびオレイン酸エチル
のような非水性ビヒクルもまた、リポソームと同様に本明細書において有用であ
る。
【０７２７】
キャリアは、等張性および化学的安定性を増強する物質のような微量の添加剤
を適切に含有する。このような物質は、用いる投薬量および濃度でレシピエント
に対して毒性がなく、そしてこのような物質としては、リン酸塩、クエン酸塩、
コハク酸塩、酢酸および他の有機酸またはその塩類のような緩衝剤；アスコルビ
ン酸のような抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド（例えば、ポ
リアルギニンまたはトリペプチド）；血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロ
ブリンのようなタンパク質；ポリビニルピロリドンのような親水性ポリマー；グ
リシン、グルタミン酸、アスパラギン酸またはアルギニンのようなアミノ酸；セ
ルロースまたはその誘導体、ブドウ糖、マンノースまたはデキストリンを含む、
単糖類、二糖類、および他の炭水化物；ＥＤＴＡのようなキレート剤；マンニト
ールまたはソルビトールのような糖アルコール；ナトリウムのような対イオン；
および／またはポリソルベート、ポロキサマーもしくはＰＥＧのような非イオン
性界面活性剤が挙げられる。
を適切に含有する。このような物質は、用いる投薬量および濃度でレシピエント
に対して毒性がなく、そしてこのような物質としては、リン酸塩、クエン酸塩、
コハク酸塩、酢酸および他の有機酸またはその塩類のような緩衝剤；アスコルビ
ン酸のような抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド（例えば、ポ
リアルギニンまたはトリペプチド）；血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロ
ブリンのようなタンパク質；ポリビニルピロリドンのような親水性ポリマー；グ
リシン、グルタミン酸、アスパラギン酸またはアルギニンのようなアミノ酸；セ
ルロースまたはその誘導体、ブドウ糖、マンノースまたはデキストリンを含む、
単糖類、二糖類、および他の炭水化物；ＥＤＴＡのようなキレート剤；マンニト
ールまたはソルビトールのような糖アルコール；ナトリウムのような対イオン；
および／またはポリソルベート、ポロキサマーもしくはＰＥＧのような非イオン
性界面活性剤が挙げられる。
【０７２８】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２は、代表的には約０．１ｍｇ／ｍｌ〜１００ｍｇ
／ｍｌ、好ましくは１〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度で、約３〜８のｐＨで、このよう
なビヒクル中に処方される。前記の特定の賦形剤、キャリアまたは安定化剤を使
用することにより、ポリペプチド塩が形成されることが理解される。
／ｍｌ、好ましくは１〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度で、約３〜８のｐＨで、このよう
なビヒクル中に処方される。前記の特定の賦形剤、キャリアまたは安定化剤を使
用することにより、ポリペプチド塩が形成されることが理解される。
【０７２９】
治療的投与に用いられるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２は無菌状態であり得る。
滅菌濾過膜（例えば０．２ミクロンメンブレン）で濾過することにより無菌状態
は容易に達成される。一般に、治療用ポリペプチド組成物は、滅菌アクセスポー
トを有する容器、例えば、皮下用注射針で穿刺可能なストッパー付の静脈内用溶
液バッグまたはバイアルに配置される。
滅菌濾過膜（例えば０．２ミクロンメンブレン）で濾過することにより無菌状態
は容易に達成される。一般に、治療用ポリペプチド組成物は、滅菌アクセスポー
トを有する容器、例えば、皮下用注射針で穿刺可能なストッパー付の静脈内用溶
液バッグまたはバイアルに配置される。
【０７３０】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドは、通常、単位用量または複数用量
容器、例えば、密封アンプルまたはバイアルに、水溶液または再構成するための
凍結乾燥処方物として貯蔵される。凍結乾燥処方物の例として、１０ｍｌのバイ
アルに、滅菌濾過した１％（ｗ／ｖ）ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチド
水溶液５ｍｌを充填し、そして得られる混合物を凍結乾燥する。凍結乾燥したＭ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを注射用静菌水を用いて再構成して注入
溶液を調製する。
容器、例えば、密封アンプルまたはバイアルに、水溶液または再構成するための
凍結乾燥処方物として貯蔵される。凍結乾燥処方物の例として、１０ｍｌのバイ
アルに、滅菌濾過した１％（ｗ／ｖ）ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチド
水溶液５ｍｌを充填し、そして得られる混合物を凍結乾燥する。凍結乾燥したＭ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを注射用静菌水を用いて再構成して注入
溶液を調製する。
【０７３１】
本発明はまた、本発明の薬学的組成物の１つ以上の成分を満たした一つ以上の
容器を備える薬学的パックまたはキットを提供する。医薬品または生物学的製品
の製造、使用または販売を規制する政府機関が定めた形式の通知が、このような
容器に付属し得、この通知は、ヒトへの投与に対する製造、使用または販売に関
する政府機関による承認を表す。さらに、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を他の治
療用化合物と組み合わせて使用し得る。
容器を備える薬学的パックまたはキットを提供する。医薬品または生物学的製品
の製造、使用または販売を規制する政府機関が定めた形式の通知が、このような
容器に付属し得、この通知は、ヒトへの投与に対する製造、使用または販売に関
する政府機関による承認を表す。さらに、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を他の治
療用化合物と組み合わせて使用し得る。
【０７３２】
本発明の組成物は、単独で、または他の治療的薬剤と組み合わせて投与され得
る。本発明の治療剤とともに投与され得る治療的薬剤としては、以下が挙げられ
るが、それらに限定されない：ＴＮＦファミリーの他のメンバー、化学療法剤、
抗生物質、ステロイド性および非ステロイド性の抗炎症剤、従来の免疫療法剤、
サイトカインならびに／または増殖因子。組み合わせは、例えば、混合物として
同時に；別々であるが同時にもしくは並行して；または逐次的にかのいずれかで
投与され得る。これは、組み合わされた薬剤が、治療混合物としてともに投与さ
れる提示を含み、そして組み合わせた薬剤が、別々であるが同時に（例えば、同
じ個体へ別々の静脈ラインを通じての場合）投与される手順もまた含む。「組み
合わせ」投与は、第１に与えられ、続いて第２に与えられる化合物または薬剤の
うちの１つを別々に投与することをさらに含む。
る。本発明の治療剤とともに投与され得る治療的薬剤としては、以下が挙げられ
るが、それらに限定されない：ＴＮＦファミリーの他のメンバー、化学療法剤、
抗生物質、ステロイド性および非ステロイド性の抗炎症剤、従来の免疫療法剤、
サイトカインならびに／または増殖因子。組み合わせは、例えば、混合物として
同時に；別々であるが同時にもしくは並行して；または逐次的にかのいずれかで
投与され得る。これは、組み合わされた薬剤が、治療混合物としてともに投与さ
れる提示を含み、そして組み合わせた薬剤が、別々であるが同時に（例えば、同
じ個体へ別々の静脈ラインを通じての場合）投与される手順もまた含む。「組み
合わせ」投与は、第１に与えられ、続いて第２に与えられる化合物または薬剤の
うちの１つを別々に投与することをさらに含む。
【０７３３】
１つの実施形態において、本発明の組成物は、ＴＮＦファミリーの他のメンバ
ーと組み合わせて投与される。本発明の組成物とともに投与され得るＴＮＦ分子
、ＴＮＦ関連分子、またはＴＮＦ様分子としては、以下が挙げられるが、これら
に限定されない：可溶性形態のＴＮＦ−α、リンホトキシン−α、（ＬＴ−α、
ＴＮＦ−βとしても公知）、ＬＴ−β（複合ヘテロトリマーＬＴ−α２−βの状
態で見出された）、ＯＰＧＬ、ＦａｓＬ、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０Ｌ
、４−１ＢＢＬ、ＤｃＲ３、ＯＸ４０Ｌ、ＴＮＦ−γ（国際公開番号ＷＯ９６／
１４３２８）、ＡＩＭ−Ｉ（国際公開番号ＷＯ９７／３３８９９）、エンドカイ
ン（ｅｎｄｏｋｉｎｅ）−α（国際公開番号ＷＯ９８／０７８８０）、ＴＲ６（
国際公開番号ＷＯ９８／３０６９４）、ＯＰＧ、およびニュートロカイン（ｎｅ
ｕｔｒｏｋｉｎｅ）−α（国際公開番号ＷＯ９８／１８９２１）、ＯＸ４０、お
よび神経成長因子（ＮＧＦ）、ならびに可溶性形態のＦａｓ、可溶性形態のＣＤ
３０、可溶性形態のＣＤ２７、可溶性形態のＣＤ４０および可溶性形態の４−Ｉ
ＢＢ、ＴＲ２（国際公開番号ＷＯ９６／３４０９５）、ＤＲ３（国際公開番号Ｗ
Ｏ９７／３３９０４）、ＤＲ４（国際公開番号ＷＯ９８／３２８５６）、ＴＲ５
（国際公開番号ＷＯ９８／３０６９３）、ＴＲ６（国際公開番号ＷＯ９８／３０
６９４）、ＴＲ７（国際公開番号ＷＯ９８／４１６２９）、ＴＲＡＮＫ、ＴＲ９
（国際公開番号ＷＯ９８／５６８９２）、ＴＲ１０（国際公開番号ＷＯ９８／５
４２０２）、３１２Ｃ２（国際公開番号ＷＯ９８／０６８４２）、およびＴＲ１
２、ならびに可溶性形態のＣＤ１５４、可溶性形態のＣＤ７０、および可溶性形
態のＣＤ１５３。
ーと組み合わせて投与される。本発明の組成物とともに投与され得るＴＮＦ分子
、ＴＮＦ関連分子、またはＴＮＦ様分子としては、以下が挙げられるが、これら
に限定されない：可溶性形態のＴＮＦ−α、リンホトキシン−α、（ＬＴ−α、
ＴＮＦ−βとしても公知）、ＬＴ−β（複合ヘテロトリマーＬＴ−α２−βの状
態で見出された）、ＯＰＧＬ、ＦａｓＬ、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０Ｌ
、４−１ＢＢＬ、ＤｃＲ３、ＯＸ４０Ｌ、ＴＮＦ−γ（国際公開番号ＷＯ９６／
１４３２８）、ＡＩＭ−Ｉ（国際公開番号ＷＯ９７／３３８９９）、エンドカイ
ン（ｅｎｄｏｋｉｎｅ）−α（国際公開番号ＷＯ９８／０７８８０）、ＴＲ６（
国際公開番号ＷＯ９８／３０６９４）、ＯＰＧ、およびニュートロカイン（ｎｅ
ｕｔｒｏｋｉｎｅ）−α（国際公開番号ＷＯ９８／１８９２１）、ＯＸ４０、お
よび神経成長因子（ＮＧＦ）、ならびに可溶性形態のＦａｓ、可溶性形態のＣＤ
３０、可溶性形態のＣＤ２７、可溶性形態のＣＤ４０および可溶性形態の４−Ｉ
ＢＢ、ＴＲ２（国際公開番号ＷＯ９６／３４０９５）、ＤＲ３（国際公開番号Ｗ
Ｏ９７／３３９０４）、ＤＲ４（国際公開番号ＷＯ９８／３２８５６）、ＴＲ５
（国際公開番号ＷＯ９８／３０６９３）、ＴＲ６（国際公開番号ＷＯ９８／３０
６９４）、ＴＲ７（国際公開番号ＷＯ９８／４１６２９）、ＴＲＡＮＫ、ＴＲ９
（国際公開番号ＷＯ９８／５６８９２）、ＴＲ１０（国際公開番号ＷＯ９８／５
４２０２）、３１２Ｃ２（国際公開番号ＷＯ９８／０６８４２）、およびＴＲ１
２、ならびに可溶性形態のＣＤ１５４、可溶性形態のＣＤ７０、および可溶性形
態のＣＤ１５３。
【０７３４】
本発明の組成物とともに投与され得る従来の非特異的免疫抑制剤としては、ス
テロイド類、シクロスポリン、シクロスポリンアナログ、シクロホスファミドメ
チルプレドニゾン、プレドニゾン、アザチオプリン、ＦＫ−５０６、１５−デオ
キシスペルグアリン（１５−ｄｅｏｘｙｓｐｅｒｇｕｌａｉｎ）、および応答Ｔ
細胞の機能を抑制することによって作用する他の免疫抑制剤が挙げられるが、こ
れらに限定されない。
テロイド類、シクロスポリン、シクロスポリンアナログ、シクロホスファミドメ
チルプレドニゾン、プレドニゾン、アザチオプリン、ＦＫ−５０６、１５−デオ
キシスペルグアリン（１５−ｄｅｏｘｙｓｐｅｒｇｕｌａｉｎ）、および応答Ｔ
細胞の機能を抑制することによって作用する他の免疫抑制剤が挙げられるが、こ
れらに限定されない。
【０７３５】
さらなる実施形態において、本発明の組成物は、抗生物質とともに投与される
。本発明の組成物とともに投与され得る抗生物質としては、テトラサイクリン、
メトロニダゾル、アモキシシリン、β−ラクタマーゼ、アミノ配糖体、マクロラ
イド、キノロン類、フルオロキノロン類、セファロスポリン、エリスロマイシン
、シプロフロキサシンおよびストレプトマイシンが挙げられるが、これらに限定
されない。
。本発明の組成物とともに投与され得る抗生物質としては、テトラサイクリン、
メトロニダゾル、アモキシシリン、β−ラクタマーゼ、アミノ配糖体、マクロラ
イド、キノロン類、フルオロキノロン類、セファロスポリン、エリスロマイシン
、シプロフロキサシンおよびストレプトマイシンが挙げられるが、これらに限定
されない。
【０７３６】
さらなる実施形態において、本発明の組成物は、単独でかまたは抗炎症剤と組
み合わせて投与される。本発明の組成物とともに投与され得る抗炎症剤としては
、グルココルチコイドおよび非ステロイド抗炎症剤、アミノアリールカルボン酸
誘導体、アリール酢酸誘導体、アリール酪酸誘導体、アリールカルボン酸、アリ
ールプロピオン酸誘導体、ピラゾール類、ピラゾロン類、サリチル酸誘導体、チ
アジンカルボキサミド類、ｅ−アセトアミドカプロン酸、Ｓ−アデノシルメチオ
ニン、３−アミノ−４−ヒドロキシ酪酸、アミキセトリン（ａｍｉｘｅｔｒｉｎ
ｅ）、ベンダザック、ベンジダミン、ブコローム、ジフェンピラミド、ジタゾー
ル、エモルファゾン、グアイアズレン、ナブメトン、ニメスリド、オルゴテイン
、オキサセプロール、パラニリン（ｐａｒａｎｙｌｉｎｅ）、ペリソキサール、
ピフオキシム、プロカゾン、プロキサゾール、およびテニダプが挙げられるが、
これらに限定されない。
み合わせて投与される。本発明の組成物とともに投与され得る抗炎症剤としては
、グルココルチコイドおよび非ステロイド抗炎症剤、アミノアリールカルボン酸
誘導体、アリール酢酸誘導体、アリール酪酸誘導体、アリールカルボン酸、アリ
ールプロピオン酸誘導体、ピラゾール類、ピラゾロン類、サリチル酸誘導体、チ
アジンカルボキサミド類、ｅ−アセトアミドカプロン酸、Ｓ−アデノシルメチオ
ニン、３−アミノ−４−ヒドロキシ酪酸、アミキセトリン（ａｍｉｘｅｔｒｉｎ
ｅ）、ベンダザック、ベンジダミン、ブコローム、ジフェンピラミド、ジタゾー
ル、エモルファゾン、グアイアズレン、ナブメトン、ニメスリド、オルゴテイン
、オキサセプロール、パラニリン（ｐａｒａｎｙｌｉｎｅ）、ペリソキサール、
ピフオキシム、プロカゾン、プロキサゾール、およびテニダプが挙げられるが、
これらに限定されない。
【０７３７】
別の実施形態において、本発明の組成物は、化学療法剤と組み合わせて投与さ
れる。本発明の組成物とともに投与され得る化学療法剤としては、抗生物質誘導
体（例えば、ドキソルビシン、ブレオマイシン、ダウノルビシン、およびダクチ
ノマイシン）；抗エストロゲン（例えば、タモキシフェン）；抗代謝物（例えば
、フルオロウラシル、５−ＦＵ、メトトレキサート、フロクスウリジン、インタ
ーフェロンα−２ｂ、グルタミン酸、プリカマイシン（ｐｌｉｃａｍｙｃｉｎ）
、メルカプトプリン、および６−チオグアニン）；細胞傷害剤（例えば、カルム
スチン、ＢＣＮＵ、ロムスチン、ＣＣＮＵ、シトシンアラビノシド、シクロホス
ファミド、エストラムスチン、ヒドロキシウレア、プロカルバジン、マイトマイ
シン、ブスルファン、シス−プラチン、および硫酸ビンクリスチン）；ホルモン
（例えば、メドロキシプロゲステロン、エストラムスチンリン酸ナトリウム、エ
チニルエストラジオール、エストラジオール、酢酸メゲストロール、メチルテス
トステロン、ジエチルスチルベストロールジホスフェート、クロロトリアニセン
、およびテストラクトン）；ナイトロジェンマスタード誘導体（例えば、メファ
レン（ｍｅｐｈａｌｅｎ）、クロランブシル（ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、メ
クロレタミン（ナイトロジェンマスタード）およびチオテパ）；ステロイド類お
よび組み合わせ（例えば、ベタメタゾンリン酸ナトリウム）；ならびにその他（
例えば、ジカルバジン（ｄｉｃａｒｂａｚｉｎｅ）、アスパラギナーゼ、ミトー
テン、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンブラスチン、およびエトポシド）が挙げら
れるが、これらに限定されない。
れる。本発明の組成物とともに投与され得る化学療法剤としては、抗生物質誘導
体（例えば、ドキソルビシン、ブレオマイシン、ダウノルビシン、およびダクチ
ノマイシン）；抗エストロゲン（例えば、タモキシフェン）；抗代謝物（例えば
、フルオロウラシル、５−ＦＵ、メトトレキサート、フロクスウリジン、インタ
ーフェロンα−２ｂ、グルタミン酸、プリカマイシン（ｐｌｉｃａｍｙｃｉｎ）
、メルカプトプリン、および６−チオグアニン）；細胞傷害剤（例えば、カルム
スチン、ＢＣＮＵ、ロムスチン、ＣＣＮＵ、シトシンアラビノシド、シクロホス
ファミド、エストラムスチン、ヒドロキシウレア、プロカルバジン、マイトマイ
シン、ブスルファン、シス−プラチン、および硫酸ビンクリスチン）；ホルモン
（例えば、メドロキシプロゲステロン、エストラムスチンリン酸ナトリウム、エ
チニルエストラジオール、エストラジオール、酢酸メゲストロール、メチルテス
トステロン、ジエチルスチルベストロールジホスフェート、クロロトリアニセン
、およびテストラクトン）；ナイトロジェンマスタード誘導体（例えば、メファ
レン（ｍｅｐｈａｌｅｎ）、クロランブシル（ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、メ
クロレタミン（ナイトロジェンマスタード）およびチオテパ）；ステロイド類お
よび組み合わせ（例えば、ベタメタゾンリン酸ナトリウム）；ならびにその他（
例えば、ジカルバジン（ｄｉｃａｒｂａｚｉｎｅ）、アスパラギナーゼ、ミトー
テン、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンブラスチン、およびエトポシド）が挙げら
れるが、これらに限定されない。
【０７３８】
さらなる実施形態において、本発明の組成物は、サイトカインと組み合わせて
投与される。本発明の組成物とともに投与され得るサイトカインとしては、ＩＬ
２、ＩＬ３、ＩＬ４、ＩＬ５、ＩＬ６、ＩＬ７、ＩＬ１０、ＩＬ１２、ＩＬ１３
、ＩＬ１５、抗ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＩＦＮ−γおよびＴＮＦ−αが挙げられ
るが、これらに限定されない。
投与される。本発明の組成物とともに投与され得るサイトカインとしては、ＩＬ
２、ＩＬ３、ＩＬ４、ＩＬ５、ＩＬ６、ＩＬ７、ＩＬ１０、ＩＬ１２、ＩＬ１３
、ＩＬ１５、抗ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＩＦＮ−γおよびＴＮＦ−αが挙げられ
るが、これらに限定されない。
【０７３９】
さらなる実施形態において、本発明の組成物は、脈管形成タンパク質と組み合
わせて投与される。本発明の組成物とともに投与され得る脈管形成タンパク質と
しては、欧州特許番号ＥＰ−３９９８１６に開示されるようなグリオーム由来増
殖因子（ＧＤＧＦ）；欧州特許番号ＥＰ−６８２１１０に開示されるような血小
板由来増殖因子Ａ（ＰＤＧＦ−Ａ）；欧州特許番号ＥＰ−２８２３１７に開示さ
れるような血小板由来増殖因子Ｂ（ＰＤＧＦ−Ｂ）；国際公開番号ＷＯ９２／０
６１９４号に開示されるような胎盤増殖因子（ＰＩＧＦ）；Ｈａｕｓｅｒら、Ｇ
ｏｒｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｓ、４：２５９−２６８（１９９３）に開示されるよ
うな胎盤増殖因子２（ＰＩＧＦ−２）；国際公開番号ＷＯ９０／１３６４９号に
開示されるような血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）；欧州特許番号ＥＰ−５０６４
７７に開示されるような血管内皮増殖因子Ａ（ＶＥＧＦ−Ａ）；国際公開番号Ｗ
Ｏ９６／３９５１５号に開示されるような血管内皮増殖因子２（ＶＥＧＦ−２）
）；国際公開番号ＷＯ９６／２６７３６号に開示されるような血管内皮増殖因子
Ｂ−１８６（ＶＥＧＦ−Ｂ１８６）；国際公開番号ＷＯ９８／０２５４３号に開
示されるような血管内皮増殖因子Ｄ（ＶＥＧＦ−Ｄ）；国際公開番号ＷＯ９８／
０７８３２号に開示されるような血管内皮増殖因子Ｄ（ＶＥＧＦ−Ｄ）；および
ドイツ国特許番号ＤＥ１９６３９６０１に開示されるような血管内皮増殖因子Ｅ
（ＶＥＧＦ−Ｅ）が挙げられるが、これらに限定されない。上記の参考文献は、
本明細書で参考として援用される。
わせて投与される。本発明の組成物とともに投与され得る脈管形成タンパク質と
しては、欧州特許番号ＥＰ−３９９８１６に開示されるようなグリオーム由来増
殖因子（ＧＤＧＦ）；欧州特許番号ＥＰ−６８２１１０に開示されるような血小
板由来増殖因子Ａ（ＰＤＧＦ−Ａ）；欧州特許番号ＥＰ−２８２３１７に開示さ
れるような血小板由来増殖因子Ｂ（ＰＤＧＦ−Ｂ）；国際公開番号ＷＯ９２／０
６１９４号に開示されるような胎盤増殖因子（ＰＩＧＦ）；Ｈａｕｓｅｒら、Ｇ
ｏｒｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｓ、４：２５９−２６８（１９９３）に開示されるよ
うな胎盤増殖因子２（ＰＩＧＦ−２）；国際公開番号ＷＯ９０／１３６４９号に
開示されるような血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）；欧州特許番号ＥＰ−５０６４
７７に開示されるような血管内皮増殖因子Ａ（ＶＥＧＦ−Ａ）；国際公開番号Ｗ
Ｏ９６／３９５１５号に開示されるような血管内皮増殖因子２（ＶＥＧＦ−２）
）；国際公開番号ＷＯ９６／２６７３６号に開示されるような血管内皮増殖因子
Ｂ−１８６（ＶＥＧＦ−Ｂ１８６）；国際公開番号ＷＯ９８／０２５４３号に開
示されるような血管内皮増殖因子Ｄ（ＶＥＧＦ−Ｄ）；国際公開番号ＷＯ９８／
０７８３２号に開示されるような血管内皮増殖因子Ｄ（ＶＥＧＦ−Ｄ）；および
ドイツ国特許番号ＤＥ１９６３９６０１に開示されるような血管内皮増殖因子Ｅ
（ＶＥＧＦ−Ｅ）が挙げられるが、これらに限定されない。上記の参考文献は、
本明細書で参考として援用される。
【０７４０】
さらなる実施形態において、本発明の組成物は、線維芽細胞増殖因子と組み合
わせて投与される。本発明の組成物とともに投与され得る線維芽細胞増殖因子と
しては、ＦＧＦ−１、ＦＧＦ−２、ＦＧＦ−３、ＦＧＦ−４、ＦＧＦ−５、ＦＧ
Ｆ−６、ＦＧＦ−７、ＦＧＦ−８、ＦＧＦ−９、ＦＧＦ−１０、ＦＧＦ−１１、
ＦＧＦ−１２、ＦＧＦ−１３、ＦＧＦ−１４、およびＦＧＦ−１５が挙げられる
が、これらに限定されない。
わせて投与される。本発明の組成物とともに投与され得る線維芽細胞増殖因子と
しては、ＦＧＦ−１、ＦＧＦ−２、ＦＧＦ−３、ＦＧＦ−４、ＦＧＦ−５、ＦＧ
Ｆ−６、ＦＧＦ−７、ＦＧＦ−８、ＦＧＦ−９、ＦＧＦ−１０、ＦＧＦ−１１、
ＦＧＦ−１２、ＦＧＦ−１３、ＦＧＦ−１４、およびＦＧＦ−１５が挙げられる
が、これらに限定されない。
【０７４１】
さらなる実施形態において、本発明の組成物は、他の治療レジメンまたは予防
レジメン（例えば、放射線治療）と組み合わせて投与される。
レジメン（例えば、放射線治療）と組み合わせて投与される。
【０７４２】
（実施例２７：ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のレベル低下を処置する方法）
本発明は、体におけるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２活性の減少したレベルを必
要とする個体を処置するための方法に関し、この方法は、このような個体に、治
療的有効量のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２アンタゴニストを含む組成物を投与す
る工程を包含する。本発明における用途に好ましいアンタゴニストは、ＭＥＴＨ
１またはＭＥＴＨ２特異的抗体である。
要とする個体を処置するための方法に関し、この方法は、このような個体に、治
療的有効量のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２アンタゴニストを含む組成物を投与す
る工程を包含する。本発明における用途に好ましいアンタゴニストは、ＭＥＴＨ
１またはＭＥＴＨ２特異的抗体である。
【０７４３】
さらに、個体におけるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の標準の発現レベルまたは
正常発現レベルの低下により引き起こされる状態は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ
２を、好ましくは分泌形態において投与することにより処置し得ることが理解さ
れる。従って、本発明はまた、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドのレベ
ルの増加が必要な個体の処置方法を提供する。この方法は、このような個体に、
このような個体でＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の活性レベルを増加させる量のＭ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を含む薬学的組成物を投与する工程を包含する。
正常発現レベルの低下により引き起こされる状態は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ
２を、好ましくは分泌形態において投与することにより処置し得ることが理解さ
れる。従って、本発明はまた、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドのレベ
ルの増加が必要な個体の処置方法を提供する。この方法は、このような個体に、
このような個体でＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の活性レベルを増加させる量のＭ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を含む薬学的組成物を投与する工程を包含する。
【０７４４】
例えば、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドのレベルが低下した患者は
、そのポリペプチドを、１日用量０．１〜１００μｇ／ｋｇで６日続けて服用す
る。好ましくは、そのポリペプチドは分泌形態である。投与および処方物に基づ
く投薬計画の正確な詳細は、実施例２６に提供されている。
、そのポリペプチドを、１日用量０．１〜１００μｇ／ｋｇで６日続けて服用す
る。好ましくは、そのポリペプチドは分泌形態である。投与および処方物に基づ
く投薬計画の正確な詳細は、実施例２６に提供されている。
【０７４５】
（実施例２８：ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のレベル上昇を処置する方法）
本発明はまた、体におけるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２活性の増加したレベル
を必要とする個体を処置するための方法に関し、この方法は、このような個体に
、治療的有効量のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２、あるいはそれらのアゴニストを
含む組成物を投与する工程を包含する。
を必要とする個体を処置するための方法に関し、この方法は、このような個体に
、治療的有効量のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２、あるいはそれらのアゴニストを
含む組成物を投与する工程を包含する。
【０７４６】
アンチセンス技術を使用してＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２の産生を阻害する。
この技術は、癌のような様々な病因に起因するＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリ
ペプチド（好ましくは、分泌形態）のレベルを低下させる方法の１つの例である
。
この技術は、癌のような様々な病因に起因するＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリ
ペプチド（好ましくは、分泌形態）のレベルを低下させる方法の１つの例である
。
【０７４７】
例えば、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２のレベルが異常に上昇したと診断された
患者に、アンチセンスポリヌクレオチドを、０．５、１．０、１．５、２．０お
よび３．０ｍｇ／ｋｇ／日で２１日間、静脈内投与する。この処置に対して十分
に寛容化された場合は、７日間の休薬期間後に、この処置を繰り返す。このアン
チセンスポリヌクレオチドの処方は、実施例２６に提供されている。
患者に、アンチセンスポリヌクレオチドを、０．５、１．０、１．５、２．０お
よび３．０ｍｇ／ｋｇ／日で２１日間、静脈内投与する。この処置に対して十分
に寛容化された場合は、７日間の休薬期間後に、この処置を繰り返す。このアン
チセンスポリヌクレオチドの処方は、実施例２６に提供されている。
【０７４８】
（実施例２９：遺伝子治療を使用する処置方法−エキソビボ）
遺伝子治療の１つの方法は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプチドを発現
し得る線維芽細胞を患者に移植する。一般に、線維芽細胞は、皮膚生検により被
験者から得られる。得られた組織を組織培養培地中に配置し、小片に分割する。
組織の小塊を組織培養フラスコの湿潤表面に置き、約１０片を各フラスコに置く
。このフラスコを倒置し、しっかりと閉めた後、室温で一晩放置する。室温で２
４時間後、フラスコを反転させ、組織塊をフラスコの底に固定させたままにし、
そして新鮮な培地（例えば、１０％ＦＢＳ、ペニシリンおよびストレプトマイシ
ンを含有するＨａｍのＦ１２培地）を添加する。次に、フラスコを３７℃で約１
週間インキュベートする。
し得る線維芽細胞を患者に移植する。一般に、線維芽細胞は、皮膚生検により被
験者から得られる。得られた組織を組織培養培地中に配置し、小片に分割する。
組織の小塊を組織培養フラスコの湿潤表面に置き、約１０片を各フラスコに置く
。このフラスコを倒置し、しっかりと閉めた後、室温で一晩放置する。室温で２
４時間後、フラスコを反転させ、組織塊をフラスコの底に固定させたままにし、
そして新鮮な培地（例えば、１０％ＦＢＳ、ペニシリンおよびストレプトマイシ
ンを含有するＨａｍのＦ１２培地）を添加する。次に、フラスコを３７℃で約１
週間インキュベートする。
【０７４９】
この時点で、新鮮な培地を添加し、次いで数日ごとに取り換える。さらに二週
間培養した後に、単層の線維芽細胞が出現する。この単層をトリプシン処理し、
さらに大きなフラスコにスケールアップする。
間培養した後に、単層の線維芽細胞が出現する。この単層をトリプシン処理し、
さらに大きなフラスコにスケールアップする。
【０７５０】
モロニーマウス肉腫ウイルスの長末端反復が隣接するｐＭＶ−７（Ｋｉｒｓｃ
ｈｍｅｉｅｒ，Ｐ．Ｔ．ら、ＤＮＡ，７：２１９−２５（１９８８））をＥｃｏ
ＲＩおよびＨｉｎｄＩＩＩで消化した後、仔ウシ腸ホスファターゼで処理する。
線状ベクターをアガロースゲル上で分画し、そしてガラスビーズを使用して精製
する。
ｈｍｅｉｅｒ，Ｐ．Ｔ．ら、ＤＮＡ，７：２１９−２５（１９８８））をＥｃｏ
ＲＩおよびＨｉｎｄＩＩＩで消化した後、仔ウシ腸ホスファターゼで処理する。
線状ベクターをアガロースゲル上で分画し、そしてガラスビーズを使用して精製
する。
【０７５１】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２をコードするｃＤＮＡを、実施例５に記載のそれ
ぞれ５’ 末端配列および３’末端配列に対応するＰＣＲプライマーを使用して
増幅し得る。好ましくは、この５’プライマーはＥｃｏＲＩ部位を含み、そして
この３’プライマーはＨｉｎｄＩＩＩ部位を含む。等量の、モロニーマウス肉腫
ウイルスの線状骨格および増幅したＥｃｏＲＩおよびＨｉｎｄＩＩＩフラグメン
トを、Ｔ４ ＤＮＡリガーゼの存在下で一緒に加える。得られた混合物を、この
２つのフラグメントを連結するのに適した条件下で維持する。次に、連結混合物
を使用し、細菌ＨＢ１０１を形質転換する。次に、ベクターが正確に挿入された
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を含むことを確認する目的のために、それを、カナ
マイシンを含む寒天上にプレーティングする。
ぞれ５’ 末端配列および３’末端配列に対応するＰＣＲプライマーを使用して
増幅し得る。好ましくは、この５’プライマーはＥｃｏＲＩ部位を含み、そして
この３’プライマーはＨｉｎｄＩＩＩ部位を含む。等量の、モロニーマウス肉腫
ウイルスの線状骨格および増幅したＥｃｏＲＩおよびＨｉｎｄＩＩＩフラグメン
トを、Ｔ４ ＤＮＡリガーゼの存在下で一緒に加える。得られた混合物を、この
２つのフラグメントを連結するのに適した条件下で維持する。次に、連結混合物
を使用し、細菌ＨＢ１０１を形質転換する。次に、ベクターが正確に挿入された
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を含むことを確認する目的のために、それを、カナ
マイシンを含む寒天上にプレーティングする。
【０７５２】
アンホトロピックｐＡ３１７またはＧＰ＋ａｍ１２パッケージング細胞を、１
０％仔ウシ血清（ＣＳ）、ペニシリンおよびストレプトマイシンを含むダルベッ
コ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中、組織培養でコンフルエントな密度まで増殖
させる。次に、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２遺伝子を含むＭＳＶベクターを培地
に加え、そしてパッケージング細胞をこのベクターで形質導入する。このとき、
このパッケージング細胞は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２遺伝子を含む感染性ウ
イルス粒子を産生する（ここで、このパッケージング細胞をプロデューサー細胞
という）。
０％仔ウシ血清（ＣＳ）、ペニシリンおよびストレプトマイシンを含むダルベッ
コ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中、組織培養でコンフルエントな密度まで増殖
させる。次に、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２遺伝子を含むＭＳＶベクターを培地
に加え、そしてパッケージング細胞をこのベクターで形質導入する。このとき、
このパッケージング細胞は、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２遺伝子を含む感染性ウ
イルス粒子を産生する（ここで、このパッケージング細胞をプロデューサー細胞
という）。
【０７５３】
形質導入されたプロデューサー細胞に新鮮な培地を添加し、次いでこの培地を
１０ｃｍプレートのコンフルエントなプロデューサー細胞から採取する。感染性
ウイルス粒子を含む使用済み培地を、ミリポアーフィルターを通して濾過し、は
がれたプロデューサー細胞を除去した後、この培地を使用して、線維芽細胞を感
染させる。線維芽細胞のサブコンフルエントなプレートから培地を除去し、そし
てプロデューサー細胞からの培地で速やかに置き換える。この培地を除去し、そ
して新鮮な培地と置き換える。ウイルスの力価が高ければ、実質的にすべての線
維芽細胞が感染され、選択は必要ではない。力価が非常に低ければ、ｎｅｏまた
はｈｉｓのような選択マーカーを有するレトロウイルスベクターを使用すること
が必要である。一旦、線維芽細胞が効率的に感染したなら、その線維芽細胞を分
析し、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質が産生されているか否かを決定す
る。
１０ｃｍプレートのコンフルエントなプロデューサー細胞から採取する。感染性
ウイルス粒子を含む使用済み培地を、ミリポアーフィルターを通して濾過し、は
がれたプロデューサー細胞を除去した後、この培地を使用して、線維芽細胞を感
染させる。線維芽細胞のサブコンフルエントなプレートから培地を除去し、そし
てプロデューサー細胞からの培地で速やかに置き換える。この培地を除去し、そ
して新鮮な培地と置き換える。ウイルスの力価が高ければ、実質的にすべての線
維芽細胞が感染され、選択は必要ではない。力価が非常に低ければ、ｎｅｏまた
はｈｉｓのような選択マーカーを有するレトロウイルスベクターを使用すること
が必要である。一旦、線維芽細胞が効率的に感染したなら、その線維芽細胞を分
析し、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質が産生されているか否かを決定す
る。
【０７５４】
次に、操作された線維芽細胞を、単独で、またはサイトデックス３マイクロキ
ャリアビーズ上でコンフルエントに増殖させた後のいずれかで、宿主に移植する
。
ャリアビーズ上でコンフルエントに増殖させた後のいずれかで、宿主に移植する
。
【０７５５】
（実施例３０：遺伝子治療を使用する処置方法−インビボ）
本発明の別の局面は、障害、疾患、および状態を処置するためにインビボ遺伝
子治療方法を使用することである。この遺伝子治療法は、ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２ポリペプチドの発現を増大または減少させるための、動物への裸の核酸（
ＤＮＡ、ＲＮＡ、およびアンチセンスＤＮＡまたはＲＮＡ）のＭＥＴＨ１または
ＭＥＴＨ２配列の導入に関する。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド
は、プロモーター、または標的組織によるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプ
チドの発現に必要な任意の他の遺伝子エレメントに、作動可能に連結され得る。
このような遺伝子治療および送達の技術および方法は、当該分野で公知であり、
例えば、ＷＯ９０／１１０９２、ＷＯ９８／１１７７９；米国特許第５，６９３
，６２２号、同第５，７０５，１５１号、同第５，５８０，８５９号；Ｔａｂａ
ｔａ，Ｈら（１９９７）Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｒｅｓ．３５（３）：４７０−
４７９；Ｃｈａｏ，Ｊら（１９９７）Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｓ．３５（６）
：５１７−５２２；Ｗｏｌｆｆ，Ｊ．Ａ．（１９９７）、Ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕ
ｌ．Ｄｉｓｏｒｄ．７（５）：３１４−３１８、Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｂ．ら、（
１９９６）Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．３（５）：４０５−４１１；Ｔｓｕｒｕｍｉ，
Ｙ．ら（１９９６）Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ９４（１２）：３２８１−３２９
０（本明細書中に参考として援用される）を参照のこと。
子治療方法を使用することである。この遺伝子治療法は、ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２ポリペプチドの発現を増大または減少させるための、動物への裸の核酸（
ＤＮＡ、ＲＮＡ、およびアンチセンスＤＮＡまたはＲＮＡ）のＭＥＴＨ１または
ＭＥＴＨ２配列の導入に関する。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド
は、プロモーター、または標的組織によるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリペプ
チドの発現に必要な任意の他の遺伝子エレメントに、作動可能に連結され得る。
このような遺伝子治療および送達の技術および方法は、当該分野で公知であり、
例えば、ＷＯ９０／１１０９２、ＷＯ９８／１１７７９；米国特許第５，６９３
，６２２号、同第５，７０５，１５１号、同第５，５８０，８５９号；Ｔａｂａ
ｔａ，Ｈら（１９９７）Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｒｅｓ．３５（３）：４７０−
４７９；Ｃｈａｏ，Ｊら（１９９７）Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｓ．３５（６）
：５１７−５２２；Ｗｏｌｆｆ，Ｊ．Ａ．（１９９７）、Ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕ
ｌ．Ｄｉｓｏｒｄ．７（５）：３１４−３１８、Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｂ．ら、（
１９９６）Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．３（５）：４０５−４１１；Ｔｓｕｒｕｍｉ，
Ｙ．ら（１９９６）Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ９４（１２）：３２８１−３２９
０（本明細書中に参考として援用される）を参照のこと。
【０７５６】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物は、注入可能な物質を動
物の細胞に送達する任意の方法（例えば、組織（心臓、筋肉、皮膚、肺、肝臓、
腸など）の間隙空間への注入）によって送達され得る。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２ポリヌクレオチド構築物は、薬学的に受容可能な液体または水性キャリア中
で送達され得る。
物の細胞に送達する任意の方法（例えば、組織（心臓、筋肉、皮膚、肺、肝臓、
腸など）の間隙空間への注入）によって送達され得る。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２ポリヌクレオチド構築物は、薬学的に受容可能な液体または水性キャリア中
で送達され得る。
【０７５７】
用語「裸の」ポリヌクレオチド、ＤＮＡまたはＲＮＡは、細胞への侵入を補助
、促進、または容易にするように作用するいかなる送達ビヒクル（ウイルス配列
、ウイルス粒子、リポソーム処方物、リポフェクチン、または沈澱剤などを含む
）も含まない配列をいう。しかし、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチ
ドはまた、当業者に周知の方法によって調製され得るリポソーム処方物（例えば
、Ｆｅｌｇｎｅｒ，Ｐ．Ｌ．ら（１９９５）Ａｎｎ．ＮＹ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．
７７２：１２６−１３９およびＡｂｄａｌｌａｈ，Ｂ．ら、（１９９５）Ｂｉｏ
ｌ．Ｃｅｌｌ ８５（１）：１−７で教示されたもの）中で送達され得る。
、促進、または容易にするように作用するいかなる送達ビヒクル（ウイルス配列
、ウイルス粒子、リポソーム処方物、リポフェクチン、または沈澱剤などを含む
）も含まない配列をいう。しかし、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチ
ドはまた、当業者に周知の方法によって調製され得るリポソーム処方物（例えば
、Ｆｅｌｇｎｅｒ，Ｐ．Ｌ．ら（１９９５）Ａｎｎ．ＮＹ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．
７７２：１２６−１３９およびＡｂｄａｌｌａｈ，Ｂ．ら、（１９９５）Ｂｉｏ
ｌ．Ｃｅｌｌ ８５（１）：１−７で教示されたもの）中で送達され得る。
【０７５８】
この遺伝子治療方法において使用されるＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌク
レオチドベクター構築物は、好ましくは、宿主ゲノムに組み込まれず、複製を可
能にする配列も含まない構築物である。当業者に公知の任意の強力なプロモータ
ーが、ＤＮＡの発現を駆動するために用いられ得る。他の遺伝子治療技術とは異
なり、裸の核酸配列を標的細胞に導入する１つの主要な利点は、その細胞におけ
るポリヌクレオチド合成の一過性の性質である。研究によって、非複製ＤＮＡ配
列が細胞に導入されて、６ヶ月までの間の期間、所望のポリペプチドの産生を提
供し得ることが示された。
レオチドベクター構築物は、好ましくは、宿主ゲノムに組み込まれず、複製を可
能にする配列も含まない構築物である。当業者に公知の任意の強力なプロモータ
ーが、ＤＮＡの発現を駆動するために用いられ得る。他の遺伝子治療技術とは異
なり、裸の核酸配列を標的細胞に導入する１つの主要な利点は、その細胞におけ
るポリヌクレオチド合成の一過性の性質である。研究によって、非複製ＤＮＡ配
列が細胞に導入されて、６ヶ月までの間の期間、所望のポリペプチドの産生を提
供し得ることが示された。
【０７５９】
ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物は、動物内の組織（筋肉
、皮膚、脳、肺、肝臓、脾臓、骨髄、胸腺、心臓、リンパ、血液、骨、軟骨、膵
臓、腎臓、胆嚢、胃、腸、精巣、卵巣、子宮、直腸、神経系、眼、腺、および結
合組織を包含する）の間隙空間に送達され得る。この組織の間隙空間は、細胞間
液、ムコ多糖基質（器官組織の細網線維、血管または腔（ｃｈａｍｂｅｒ）の壁
における弾性線維、線維性組織のコラーゲン線維に間にある）、あるいは結合組
織鞘性筋肉細胞内または骨の裂孔中の同じ基質を包含する。これは、同様に、循
環の血漿およびリンパチャネルのリンパ液により占められた空間である。筋肉組
織の間隙空間への送達は、以下に考察する理由のために好ましい。それらは、こ
れらの細胞を含む組織への注入によって、好都合に送達され得る。それらは、好
ましくは、分化した持続性の非分裂細胞に送達され、そしてその細胞において発
現されるが、送達および発現は、非分化細胞または完全には分化していない細胞
（例えば、血液の幹細胞または皮膚線維芽細胞）において達成され得る。インビ
ボで、筋肉細胞は、ポリヌクレオチドを取り込み、そして発現するそれらの能力
において、特に適格である。
、皮膚、脳、肺、肝臓、脾臓、骨髄、胸腺、心臓、リンパ、血液、骨、軟骨、膵
臓、腎臓、胆嚢、胃、腸、精巣、卵巣、子宮、直腸、神経系、眼、腺、および結
合組織を包含する）の間隙空間に送達され得る。この組織の間隙空間は、細胞間
液、ムコ多糖基質（器官組織の細網線維、血管または腔（ｃｈａｍｂｅｒ）の壁
における弾性線維、線維性組織のコラーゲン線維に間にある）、あるいは結合組
織鞘性筋肉細胞内または骨の裂孔中の同じ基質を包含する。これは、同様に、循
環の血漿およびリンパチャネルのリンパ液により占められた空間である。筋肉組
織の間隙空間への送達は、以下に考察する理由のために好ましい。それらは、こ
れらの細胞を含む組織への注入によって、好都合に送達され得る。それらは、好
ましくは、分化した持続性の非分裂細胞に送達され、そしてその細胞において発
現されるが、送達および発現は、非分化細胞または完全には分化していない細胞
（例えば、血液の幹細胞または皮膚線維芽細胞）において達成され得る。インビ
ボで、筋肉細胞は、ポリヌクレオチドを取り込み、そして発現するそれらの能力
において、特に適格である。
【０７６０】
裸のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド注入のために、ＤＮＡまた
はＲＮＡの有効投薬量は、約０．０００５ｇ／ｋｇ体重から約５０ｍｇ／ｋｇ体
重の範囲にある。好ましくは、この投薬量は、約０．００５ｍｇ／ｋｇから約２
０ｍｇ／ｋｇであり、そしてより好ましくは、約０．０５ｍｇ／ｋｇから約５ｍ
ｇ／ｋｇである。もちろん、当業者が認識するように、この投薬量は、注入の組
織部位に従って変化する。核酸配列の適切かつ有効な投薬量は、当業者によって
容易に決定され得、そして処置される状態および投与経路に依存し得る。好まし
い投与経路は、組織の間隙空間への非経口注入経路によってである。しかし、他
の非経口経路もまた用いられ得、これには、例えば、特に肺または気管支組織、
咽喉、または鼻の粘膜への送達のためのエアロゾル処方物の吸入が挙げられる。
さらに、裸のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物が、血管形成
術の間に、この手順において用いられるカテーテルによって動脈に送達され得る
。
はＲＮＡの有効投薬量は、約０．０００５ｇ／ｋｇ体重から約５０ｍｇ／ｋｇ体
重の範囲にある。好ましくは、この投薬量は、約０．００５ｍｇ／ｋｇから約２
０ｍｇ／ｋｇであり、そしてより好ましくは、約０．０５ｍｇ／ｋｇから約５ｍ
ｇ／ｋｇである。もちろん、当業者が認識するように、この投薬量は、注入の組
織部位に従って変化する。核酸配列の適切かつ有効な投薬量は、当業者によって
容易に決定され得、そして処置される状態および投与経路に依存し得る。好まし
い投与経路は、組織の間隙空間への非経口注入経路によってである。しかし、他
の非経口経路もまた用いられ得、これには、例えば、特に肺または気管支組織、
咽喉、または鼻の粘膜への送達のためのエアロゾル処方物の吸入が挙げられる。
さらに、裸のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド構築物が、血管形成
術の間に、この手順において用いられるカテーテルによって動脈に送達され得る
。
【０７６１】
インビボでの筋肉における注入ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド
の用量応答効果を、以下のようにして決定する。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポ
リペプチドをコードするｍＲＮＡの生成のための適切なＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２鋳型ＤＮＡを、標準的な組換えＤＮＡ方法論に従って調製する。この鋳型Ｄ
ＮＡ（これは環状または線状のいずれかであり得る）を裸のＤＮＡとして使用す
るか、またはリポソームと複合体化するかのいずれかである。次いで、マウスの
四頭筋に、種々の量の鋳型ＤＮＡを注入する。
の用量応答効果を、以下のようにして決定する。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ポ
リペプチドをコードするｍＲＮＡの生成のための適切なＭＥＴＨ１またはＭＥＴ
Ｈ２鋳型ＤＮＡを、標準的な組換えＤＮＡ方法論に従って調製する。この鋳型Ｄ
ＮＡ（これは環状または線状のいずれかであり得る）を裸のＤＮＡとして使用す
るか、またはリポソームと複合体化するかのいずれかである。次いで、マウスの
四頭筋に、種々の量の鋳型ＤＮＡを注入する。
【０７６２】
５〜６週齢の雌性および雄性のＢａｌｂ／Ｃマウスに、０．３ｍｌの２．５％
Ａｖｅｒｔｉｎを腹腔内注射することにより麻酔する。１．５ｃｍの切開を大腿
前部で行い、そして四頭筋を直接可視化する。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２鋳型
ＤＮＡを、０．１ｍｌのキャリアに入れて、１ｃｃ注射器で２７ゲージ針を通し
て１分間にわたって、筋肉の遠位挿入部位から約０．５ｃｍのところで膝に、約
０．２ｃｍの深さで注入する。縫合を、将来の位置決定のために注入部位の上で
行い、そしてその皮膚をステンレス鋼クリップで閉じる。
Ａｖｅｒｔｉｎを腹腔内注射することにより麻酔する。１．５ｃｍの切開を大腿
前部で行い、そして四頭筋を直接可視化する。ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２鋳型
ＤＮＡを、０．１ｍｌのキャリアに入れて、１ｃｃ注射器で２７ゲージ針を通し
て１分間にわたって、筋肉の遠位挿入部位から約０．５ｃｍのところで膝に、約
０．２ｃｍの深さで注入する。縫合を、将来の位置決定のために注入部位の上で
行い、そしてその皮膚をステンレス鋼クリップで閉じる。
【０７６３】
適切なインキュベーション時間（例えば、７日）後、筋肉抽出物を、四頭全体
を切り出すことによって調製する。個々の四頭筋の５枚毎の１５μｍ切片を、Ｍ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質発現について組織化学的に染色する。ＭＥ
ＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質発現についてのタイムコースを、異なるマウ
スからの四頭を異なる時間で採取すること以外は、同様な様式で行い得る。注入
後の筋肉中のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ＤＮＡの持続性を、注入したマウスお
よびコントロールマウスからの全細胞性ＤＮＡおよびＨＩＲＴ上清を調製した後
、サザンブロット分析によって決定し得る。マウスにおける上記実験の結果を、
裸のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ＤＮＡを用いて、ヒトおよび他の動物において
適切な投薬量および他の処置パラメーターを外挿するために使用し得る。
を切り出すことによって調製する。個々の四頭筋の５枚毎の１５μｍ切片を、Ｍ
ＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質発現について組織化学的に染色する。ＭＥ
ＴＨ１またはＭＥＴＨ２タンパク質発現についてのタイムコースを、異なるマウ
スからの四頭を異なる時間で採取すること以外は、同様な様式で行い得る。注入
後の筋肉中のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ＤＮＡの持続性を、注入したマウスお
よびコントロールマウスからの全細胞性ＤＮＡおよびＨＩＲＴ上清を調製した後
、サザンブロット分析によって決定し得る。マウスにおける上記実験の結果を、
裸のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ＤＮＡを用いて、ヒトおよび他の動物において
適切な投薬量および他の処置パラメーターを外挿するために使用し得る。
【０７６４】
（実施例３１：内因性ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２遺伝子を使用する
遺伝子治療） 本発明に従う遺伝子治療の別の方法は、内因性ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２配列を、例えば、米国特許第５，６４１，６７０号（１９９７年６月２４
日発行）；国際公開番号ＷＯ ９６／２９４１１（１９９６年９月２６日公開）
；国際公開番号ＷＯ ９４／１２６５０（１９９４年８月４日公開）；Ｋｏｌｌ
ｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８６：８９３２〜８
９３５（１９８９）；およびＺｉｊｌｓｔｒａら、Ｎａｔｕｒｅ，３４２：４３
５〜４３８（１９８９）に記載されるように、相同組換えを介してプロモーター
に作動可能に結合する工程を包含する。この方法は、その標的細胞中に存在する
が、その細胞中では発現されないかまたは所望されるよりも低いレベルで発現さ
れる、遺伝子の活性化を包含する。
遺伝子治療） 本発明に従う遺伝子治療の別の方法は、内因性ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２配列を、例えば、米国特許第５，６４１，６７０号（１９９７年６月２４
日発行）；国際公開番号ＷＯ ９６／２９４１１（１９９６年９月２６日公開）
；国際公開番号ＷＯ ９４／１２６５０（１９９４年８月４日公開）；Ｋｏｌｌ
ｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８６：８９３２〜８
９３５（１９８９）；およびＺｉｊｌｓｔｒａら、Ｎａｔｕｒｅ，３４２：４３
５〜４３８（１９８９）に記載されるように、相同組換えを介してプロモーター
に作動可能に結合する工程を包含する。この方法は、その標的細胞中に存在する
が、その細胞中では発現されないかまたは所望されるよりも低いレベルで発現さ
れる、遺伝子の活性化を包含する。
【０７６５】
プロモーターおよび標的化配列を含むポリヌクレオチド構築物を作製する。こ
の標的配列は、プロモーターに隣接する、内因性ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２の５’非コード配列に相同である。この標的化配列は、ＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２の５’末端に十分に近く、その結果、このプロモーターは、
相同組換えの際にこの内因性配列に作動可能に連結される。このプロモーターお
よび標的化配列を、ＰＣＲを使用して増幅し得る。好ましくは、この増幅したプ
ロモーターは、５’末端および３’末端上に異なる制限酵素部位を含む。好まし
くは、第１の標的化配列の３’末端は、増幅したプロモーターの５’末端と同じ
制限酵素部位を含み、そして第２の標的化配列の５’末端は、増幅したプロモー
ターの３’末端と同じ制限部位を含む。
の標的配列は、プロモーターに隣接する、内因性ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２の５’非コード配列に相同である。この標的化配列は、ＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２の５’末端に十分に近く、その結果、このプロモーターは、
相同組換えの際にこの内因性配列に作動可能に連結される。このプロモーターお
よび標的化配列を、ＰＣＲを使用して増幅し得る。好ましくは、この増幅したプ
ロモーターは、５’末端および３’末端上に異なる制限酵素部位を含む。好まし
くは、第１の標的化配列の３’末端は、増幅したプロモーターの５’末端と同じ
制限酵素部位を含み、そして第２の標的化配列の５’末端は、増幅したプロモー
ターの３’末端と同じ制限部位を含む。
【０７６６】
この増幅したプロモーターおよび増幅した標的化配列を、適切な制限酵素で消
化し、続いてウシ腸ホスファターゼで処理する。消化したプロモーターおよび消
化した標的化配列を、Ｔ４ ＤＮＡリガーゼの存在下でともに加える。生じた混
合物を、これら２つのフラグメントの連結に適切な条件下で維持する。この構築
物をアガロースゲル上でサイズ分画し、次いでフェノール抽出およびエタノール
沈殿により精製する。
化し、続いてウシ腸ホスファターゼで処理する。消化したプロモーターおよび消
化した標的化配列を、Ｔ４ ＤＮＡリガーゼの存在下でともに加える。生じた混
合物を、これら２つのフラグメントの連結に適切な条件下で維持する。この構築
物をアガロースゲル上でサイズ分画し、次いでフェノール抽出およびエタノール
沈殿により精製する。
【０７６７】
この実施例において、このポリヌクレオチド構築物を、エレクトロポレーショ
ンを介して裸のポリヌクレオチドとして投与する。しかし、このポリヌクレオチ
ド構築物はまた、トランスフェクション促進剤（例えば、リポソーム、ウイルス
配列、ウイルス粒子、沈殿剤など）とともに投与され得る。送達のこのような方
法は、当該分野で公知である。
ンを介して裸のポリヌクレオチドとして投与する。しかし、このポリヌクレオチ
ド構築物はまた、トランスフェクション促進剤（例えば、リポソーム、ウイルス
配列、ウイルス粒子、沈殿剤など）とともに投与され得る。送達のこのような方
法は、当該分野で公知である。
【０７６８】
一旦、細胞をトランスフェクトすると、相同組換えが生じて、このプロモータ
ーがこの内因性ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２配列に作動可能に連結され
る。これは、この細胞中におけるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の発現を
生じる。発現は、免疫学的染色または当該分野で公知の他の任意の方法により、
検出され得る。線維芽細胞を、皮膚生検により被験者から得る。得られた組織を
、ＤＭＥＭ＋１０％ウシ胎仔血清中に配置する。対数増殖期または定常期初期の
線維芽細胞を、トリプシン処理し、そしてプラスチックの表面から栄養培地でリ
ンスする。細胞懸濁液のアリコートを、計数のために取り出し、そして残りの細
胞を遠心分離に供する。上清を吸引し、そしてペレットを５ｍｌのエレクトロポ
レーション緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．３、１３７ｍＭ ＮａＣｌ
、５ｍＭ ＫＣｌ、０．７ｍＭ Ｎａ2ＨＰＯ4、６ｍＭデキストロース）に再懸
濁する。この細胞を再遠心分離し、上清を吸引し、そして細胞をアセチル化ウシ
血清アルブミン１ｍｇ／ｍｌを含むエレクトロポレーション緩衝液に再懸濁する
。この最終細胞懸濁物は、約３×１０6細胞／ｍｌを含む。エレクトロポレーシ
ョンを、再懸濁直後に実施すべきである。
ーがこの内因性ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２配列に作動可能に連結され
る。これは、この細胞中におけるＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の発現を
生じる。発現は、免疫学的染色または当該分野で公知の他の任意の方法により、
検出され得る。線維芽細胞を、皮膚生検により被験者から得る。得られた組織を
、ＤＭＥＭ＋１０％ウシ胎仔血清中に配置する。対数増殖期または定常期初期の
線維芽細胞を、トリプシン処理し、そしてプラスチックの表面から栄養培地でリ
ンスする。細胞懸濁液のアリコートを、計数のために取り出し、そして残りの細
胞を遠心分離に供する。上清を吸引し、そしてペレットを５ｍｌのエレクトロポ
レーション緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．３、１３７ｍＭ ＮａＣｌ
、５ｍＭ ＫＣｌ、０．７ｍＭ Ｎａ2ＨＰＯ4、６ｍＭデキストロース）に再懸
濁する。この細胞を再遠心分離し、上清を吸引し、そして細胞をアセチル化ウシ
血清アルブミン１ｍｇ／ｍｌを含むエレクトロポレーション緩衝液に再懸濁する
。この最終細胞懸濁物は、約３×１０6細胞／ｍｌを含む。エレクトロポレーシ
ョンを、再懸濁直後に実施すべきである。
【０７６９】
プラスミドＤＮＡを、標準的技術に従って調製する。例えば、ＭＥＴＨ１およ
び／またはＭＥＴＨ２遺伝子座に標的化するためのプラスミドを構築するために
、プラスミドｐＵＣ１８（ＭＢＩ Ｆｅｒｍｅｎｔａｓ、Ａｍｈｅｒｓｔ、ＮＹ
）をＨｉｎｄＩＩＩで消化する。ＣＭＶプロモーターを、５’末端にＸｂａＩ部
位および３’末端にＢａｍＨＩ部位を備えてＰＣＲにより増幅する。２つのＭＥ
ＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２非コード配列をＰＣＲを介して増幅する：一方
のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２非コード配列（ＭＥＴＨ１および／また
はＭＥＴＨ２フラグメント１）を、５’末端にＨｉｎｄＩＩＩ部位および３’末
端にＸｂａ部位を備えて増幅する；他方のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
非コード配列（ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２フラグメント２）を、５’
末端にＢａｍＨＩ部位および３’末端にＨｉｎｄＩＩＩ部位を備えて増幅する。
このＣＭＶプロモーターならびにＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２フラグメ
ントを、適切な酵素（ＣＭＶプロモーター−ＸｂａＩおよびＢａｍＨＩ；ＭＥＴ
Ｈ１および／またはＭＥＴＨ２フラグメント１−ＸｂａＩ；ＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２フラグメント２−ＢａｍＨＩ）で消化し、そしてともに連結す
る。生じた連結生成物をＨｉｎｄＩＩＩで消化し、そしてＨｉｎｄＩＩＩで消化
したｐＵＣ１８プラスミドと連結する。
び／またはＭＥＴＨ２遺伝子座に標的化するためのプラスミドを構築するために
、プラスミドｐＵＣ１８（ＭＢＩ Ｆｅｒｍｅｎｔａｓ、Ａｍｈｅｒｓｔ、ＮＹ
）をＨｉｎｄＩＩＩで消化する。ＣＭＶプロモーターを、５’末端にＸｂａＩ部
位および３’末端にＢａｍＨＩ部位を備えてＰＣＲにより増幅する。２つのＭＥ
ＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２非コード配列をＰＣＲを介して増幅する：一方
のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２非コード配列（ＭＥＴＨ１および／また
はＭＥＴＨ２フラグメント１）を、５’末端にＨｉｎｄＩＩＩ部位および３’末
端にＸｂａ部位を備えて増幅する；他方のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
非コード配列（ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２フラグメント２）を、５’
末端にＢａｍＨＩ部位および３’末端にＨｉｎｄＩＩＩ部位を備えて増幅する。
このＣＭＶプロモーターならびにＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２フラグメ
ントを、適切な酵素（ＣＭＶプロモーター−ＸｂａＩおよびＢａｍＨＩ；ＭＥＴ
Ｈ１および／またはＭＥＴＨ２フラグメント１−ＸｂａＩ；ＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２フラグメント２−ＢａｍＨＩ）で消化し、そしてともに連結す
る。生じた連結生成物をＨｉｎｄＩＩＩで消化し、そしてＨｉｎｄＩＩＩで消化
したｐＵＣ１８プラスミドと連結する。
【０７７０】
プラスミドＤＮＡを、０．４ｃｍの電極ギャップを備える滅菌キュベット（Ｂ
ｉｏ−Ｒａｄ）に添加する。最終ＤＮＡ濃度は、一般的に、少なくとも１２０μ
ｇ／ｍｌである。次いで、この細胞懸濁液の０．５ｍｌ（約１．５×１０6細胞
を含む）をこのキュベットに添加し、そしてこの細胞懸濁液およびＤＮＡ溶液を
、穏やかに混合する。エレクトロポレーションを、Ｇｅｎｅ−Ｐｕｌｓｅｒ装置
（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）を用いて実施する。キャパシタンスおよび電圧を、それぞれ
、９６０μＦおよび２５０〜３００Ｖに設定する。電圧が増加すると、細胞の生
存が減少するが、導入されたＤＮＡをそのゲノム中に安定に組込む生存細胞の割
合が劇的に増加する。これらのパラメーターを与えると、パルス時間約１４〜２
０ｍＳｅｃが観察されるはずである。
ｉｏ−Ｒａｄ）に添加する。最終ＤＮＡ濃度は、一般的に、少なくとも１２０μ
ｇ／ｍｌである。次いで、この細胞懸濁液の０．５ｍｌ（約１．５×１０6細胞
を含む）をこのキュベットに添加し、そしてこの細胞懸濁液およびＤＮＡ溶液を
、穏やかに混合する。エレクトロポレーションを、Ｇｅｎｅ−Ｐｕｌｓｅｒ装置
（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）を用いて実施する。キャパシタンスおよび電圧を、それぞれ
、９６０μＦおよび２５０〜３００Ｖに設定する。電圧が増加すると、細胞の生
存が減少するが、導入されたＤＮＡをそのゲノム中に安定に組込む生存細胞の割
合が劇的に増加する。これらのパラメーターを与えると、パルス時間約１４〜２
０ｍＳｅｃが観察されるはずである。
【０７７１】
エレクトロポレーションした細胞を、室温で約５分間維持し、次いで、このキ
ュベットの中身を、滅菌した移動ピペットを用いて穏やかに取り出す。この細胞
を、１０ｃｍのディッシュ中の、予め温めた栄養培地（１５％ウシ血清を含むＤ
ＭＥＭ）１０ｍｌに直接加え、そして３７℃でインキュベートする。翌日、この
培地を吸引し、そして１０ｍｌの新鮮な培地で置換し、そしてさらに１６〜２４
時間インキュベートする。
ュベットの中身を、滅菌した移動ピペットを用いて穏やかに取り出す。この細胞
を、１０ｃｍのディッシュ中の、予め温めた栄養培地（１５％ウシ血清を含むＤ
ＭＥＭ）１０ｍｌに直接加え、そして３７℃でインキュベートする。翌日、この
培地を吸引し、そして１０ｍｌの新鮮な培地で置換し、そしてさらに１６〜２４
時間インキュベートする。
【０７７２】
次に、操作された線維芽細胞を、単独で、またはサイトデックス３マイクロキ
ャリアビーズ上でコンフルエントに増殖させた後のいずれかで、宿主に注射する
。ここで、この繊維芽細胞は、タンパク質産物を産生する。次いで、この繊維芽
細胞は、上記のように患者に導入され得る。
ャリアビーズ上でコンフルエントに増殖させた後のいずれかで、宿主に注射する
。ここで、この繊維芽細胞は、タンパク質産物を産生する。次いで、この繊維芽
細胞は、上記のように患者に導入され得る。
【０７７３】
（実施例３２：トランスジェニック動物）
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプチドはまた、トランスジェニッ
ク動物において発現され得る。マウス、ラット、ウサギ、ハムスター、モルモッ
ト、ブタ、ミニブタ、ヤギ、ヒツジ、ウシおよびヒト以外の霊長類（例えば、ヒ
ヒ、サルおよびチンパンジー）を含むがこれらに限定されない任意の種の動物は
、トランスジェニック動物を作製するために用いられ得る。特定の実施形態にお
いて、本明細書に記載されるかまたはさもなければ当該分野で公知の技術が、遺
伝子治療プロトコルの一部として、ヒトにおける本発明のポリペプチドの発現の
ために用いられる。
ク動物において発現され得る。マウス、ラット、ウサギ、ハムスター、モルモッ
ト、ブタ、ミニブタ、ヤギ、ヒツジ、ウシおよびヒト以外の霊長類（例えば、ヒ
ヒ、サルおよびチンパンジー）を含むがこれらに限定されない任意の種の動物は
、トランスジェニック動物を作製するために用いられ得る。特定の実施形態にお
いて、本明細書に記載されるかまたはさもなければ当該分野で公知の技術が、遺
伝子治療プロトコルの一部として、ヒトにおける本発明のポリペプチドの発現の
ために用いられる。
【０７７４】
当該分野で公知の任意の技術を、導入遺伝子（すなわち、本発明のポリヌクレ
オチド）の動物への導入に用いて、トランスジェニック動物の創始系統（ｆｏｕ
ｎｄｅｒ ｌｉｎｅ）を生成し得る。このような技術は、前核マイクロインジェ
クション（Ｐａｔｅｒｓｏｎら、Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃ
ｈｎｏｌ．４０：６９１−６９８（１９９４）；Ｃａｒｖｅｒら、Ｂｉｏｔｅｃ
ｈｎｏｌｏｇｙ（ＮＹ）１１：１２６３−１２７０（１９９３）；Ｗｒｉｇｈｔ
ら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＮＹ）９：８３０−８３４（１９９１）；お
よびＨｏｐｐｅら、米国特許第４，８７３，１９１号（１９８９））；生殖細胞
系へのレトロウイルス媒介遺伝子移入（Ｖａｎ ｄｅｒ Ｐｕｔｔｅｎら、Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２：６１４８−６１５２（１９
８５））、胚盤胞または胚；胚性幹細胞における遺伝子標的化（Ｔｈｏｍｐｓｏ
ｎら、Ｃｅｌｌ ５６：３１３−３２１（１９８９））；細胞または胚のエレク
トロポレーション（Ｌｏ、１９８３、Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．３：１８０
３−１８１４（１９８３））；遺伝子銃を用いた本発明のポリヌクレオチドの導
入（例えば、Ｕｌｍｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５９：１７４５（１９９３）を
参照のこと）；胚性多能性（ｐｌｅｕｒｉｐｏｔｅｎｔ）幹細胞への核酸構築物
の導入および胚盤胞へのこの幹細胞の移入；ならびに精子媒介遺伝子移入（Ｌａ
ｖｉｔｒａｎｏら、Ｃｅｌｌ ５７：７１７−７２３（１９８９））；などを含
むがこれらに限定されない。このような技術の総説については、本明細書中にそ
の全体が参考として援用される、Ｇｏｒｄｏｎ、「Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ Ａｎ
ｉｍａｌｓ」、Ｉｎｔｌ．Ｒｅｖ．Ｃｙｔｏｌ．１１５：１７１−２２９（１９
８９）を参照のこと。
オチド）の動物への導入に用いて、トランスジェニック動物の創始系統（ｆｏｕ
ｎｄｅｒ ｌｉｎｅ）を生成し得る。このような技術は、前核マイクロインジェ
クション（Ｐａｔｅｒｓｏｎら、Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃ
ｈｎｏｌ．４０：６９１−６９８（１９９４）；Ｃａｒｖｅｒら、Ｂｉｏｔｅｃ
ｈｎｏｌｏｇｙ（ＮＹ）１１：１２６３−１２７０（１９９３）；Ｗｒｉｇｈｔ
ら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＮＹ）９：８３０−８３４（１９９１）；お
よびＨｏｐｐｅら、米国特許第４，８７３，１９１号（１９８９））；生殖細胞
系へのレトロウイルス媒介遺伝子移入（Ｖａｎ ｄｅｒ Ｐｕｔｔｅｎら、Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２：６１４８−６１５２（１９
８５））、胚盤胞または胚；胚性幹細胞における遺伝子標的化（Ｔｈｏｍｐｓｏ
ｎら、Ｃｅｌｌ ５６：３１３−３２１（１９８９））；細胞または胚のエレク
トロポレーション（Ｌｏ、１９８３、Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．３：１８０
３−１８１４（１９８３））；遺伝子銃を用いた本発明のポリヌクレオチドの導
入（例えば、Ｕｌｍｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５９：１７４５（１９９３）を
参照のこと）；胚性多能性（ｐｌｅｕｒｉｐｏｔｅｎｔ）幹細胞への核酸構築物
の導入および胚盤胞へのこの幹細胞の移入；ならびに精子媒介遺伝子移入（Ｌａ
ｖｉｔｒａｎｏら、Ｃｅｌｌ ５７：７１７−７２３（１９８９））；などを含
むがこれらに限定されない。このような技術の総説については、本明細書中にそ
の全体が参考として援用される、Ｇｏｒｄｏｎ、「Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ Ａｎ
ｉｍａｌｓ」、Ｉｎｔｌ．Ｒｅｖ．Ｃｙｔｏｌ．１１５：１７１−２２９（１９
８９）を参照のこと。
【０７７５】
当該分野で公知の任意の技術を用いて、本発明のポリヌクレオチドを含むトラ
ンスジェニッククローンを生成し得る（例えば、培養された、静止状態に誘導さ
れた胚細胞、胎児細胞または成体の細胞由来の除核した卵母細胞の核への核移入
（Ｃａｍｐｅｌｌら、Ｎａｔｕｒｅ ３８０：６４−６６（１９９６）；Ｗｉｌ
ｍｕｔら、Ｎａｔｕｒｅ ３８５：８１０−８１３（１９９７））。
ンスジェニッククローンを生成し得る（例えば、培養された、静止状態に誘導さ
れた胚細胞、胎児細胞または成体の細胞由来の除核した卵母細胞の核への核移入
（Ｃａｍｐｅｌｌら、Ｎａｔｕｒｅ ３８０：６４−６６（１９９６）；Ｗｉｌ
ｍｕｔら、Ｎａｔｕｒｅ ３８５：８１０−８１３（１９９７））。
【０７７６】
本発明は、その全ての細胞に導入遺伝子を保有するトランスジェニック動物、
ならびにいくつかの細胞（しかしその全ての細胞ではない）に導入遺伝子を保有
する動物（すなわち、モザイク動物またはキメラ）を提供する。導入遺伝子は、
１つの導入遺伝子としてまたはコンカテマー（例えば、頭−頭タンデム型または
頭−尾タンデム型）のような複数のコピーとして組み込まれ得る。この導入遺伝
子はまた、例えば、Ｌａｓｋｏらの教示（Ｌａｓｋｏら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．
Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：６２３２−６２３６（１９９２））に従って
特定の細胞型に選択的に導入され得、そして活性化され得る。このような細胞型
特異的活性化に必要とされる調節配列は、目的の特定の細胞型に依存し、そして
それらは当業者に明らかである。ポリヌクレオチド導入遺伝子が、内在性遺伝子
の染色体部位に組み込まれることが所望される場合、遺伝子の標的化が好ましい
。
ならびにいくつかの細胞（しかしその全ての細胞ではない）に導入遺伝子を保有
する動物（すなわち、モザイク動物またはキメラ）を提供する。導入遺伝子は、
１つの導入遺伝子としてまたはコンカテマー（例えば、頭−頭タンデム型または
頭−尾タンデム型）のような複数のコピーとして組み込まれ得る。この導入遺伝
子はまた、例えば、Ｌａｓｋｏらの教示（Ｌａｓｋｏら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．
Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：６２３２−６２３６（１９９２））に従って
特定の細胞型に選択的に導入され得、そして活性化され得る。このような細胞型
特異的活性化に必要とされる調節配列は、目的の特定の細胞型に依存し、そして
それらは当業者に明らかである。ポリヌクレオチド導入遺伝子が、内在性遺伝子
の染色体部位に組み込まれることが所望される場合、遺伝子の標的化が好ましい
。
【０７７７】
手短に言えば、このような技術が利用される場合、内在性遺伝子に対して相同
ないくつかのヌクレオチド配列を含むベクターが、染色体配列との相同な組換え
を介して内在性遺伝子のヌクレオチド配列に組み込まれ、そのヌクレオチド配列
の機能を破壊することを目的として設計される。導入遺伝子はまた、特定の細胞
型に選択的に導入され得、従って、例えば、Ｇｕら（Ｇｕら、Ｓｃｉｅｎｃｅ
２６５：１０３−１０６（１９９４））の教示に従って、導入された細胞型にお
いてのみ内在性遺伝子が不活化される。そのような細胞型特異的不活化に必要と
される調節配列は、目的の特定の細胞型に依存し、そしてそれらは当業者に明ら
かである。この段落において列挙される文書の各々の内容は、本明細書中でその
全体において参考として援用される。
ないくつかのヌクレオチド配列を含むベクターが、染色体配列との相同な組換え
を介して内在性遺伝子のヌクレオチド配列に組み込まれ、そのヌクレオチド配列
の機能を破壊することを目的として設計される。導入遺伝子はまた、特定の細胞
型に選択的に導入され得、従って、例えば、Ｇｕら（Ｇｕら、Ｓｃｉｅｎｃｅ
２６５：１０３−１０６（１９９４））の教示に従って、導入された細胞型にお
いてのみ内在性遺伝子が不活化される。そのような細胞型特異的不活化に必要と
される調節配列は、目的の特定の細胞型に依存し、そしてそれらは当業者に明ら
かである。この段落において列挙される文書の各々の内容は、本明細書中でその
全体において参考として援用される。
【０７７８】
一旦トランスジェニック動物が作製されると、その組換え遺伝子の発現は、標
準的な技術を利用してアッセイされ得る。最初のスクリーニングは、サザンブロ
ット分析またはＰＣＲ技術によって達成されて、導入遺伝子の組み込みが起きた
ことを動物組織の分析により確認し得る。トランスジェニック動物の組織におけ
る導入遺伝子のｍＲＮＡ発現レベルはまた、動物から得た組織サンプルのノーザ
ンブロット分析、インサイチュハイブリダイゼーション分析および逆転写酵素Ｐ
ＣＲ（ｒｔ−ＰＣＲ）を含むがこれらに限定されない技術を用いて評価され得る
。トランスジェニック遺伝子発現組織のサンプルはまた、導入遺伝子産物に特異
的な抗体を用いて免疫細胞化学的または免疫組織化学的に評価され得る。
準的な技術を利用してアッセイされ得る。最初のスクリーニングは、サザンブロ
ット分析またはＰＣＲ技術によって達成されて、導入遺伝子の組み込みが起きた
ことを動物組織の分析により確認し得る。トランスジェニック動物の組織におけ
る導入遺伝子のｍＲＮＡ発現レベルはまた、動物から得た組織サンプルのノーザ
ンブロット分析、インサイチュハイブリダイゼーション分析および逆転写酵素Ｐ
ＣＲ（ｒｔ−ＰＣＲ）を含むがこれらに限定されない技術を用いて評価され得る
。トランスジェニック遺伝子発現組織のサンプルはまた、導入遺伝子産物に特異
的な抗体を用いて免疫細胞化学的または免疫組織化学的に評価され得る。
【０７７９】
一旦、創始動物が生成されると、それらは、交配され、同系交配され、異系交
配されるかまたは交雑されて、特定の動物のコロニーを生成し得る。そのような
交配戦略の例は、以下を含むがそれらに限定されない：別の系統を樹立するため
の１つより多くの組み込み部位を有する創始動物の異系交配；各導入遺伝子の相
加的発現効果によって、より高いレベルで導入遺伝子を発現する複合トランスジ
ェニックを生成するための別々の系統の同系交配；発現の増強およびＤＮＡ分析
による動物のスクリーニングの必要性の排除の両方のための、所定の組み込み部
位に対してホモ接合性の動物を生成するヘテロ接合性トランスジェニック動物の
交雑；複合ヘテロ接合性またはホモ接合性系統を生成するための別々のホモ接合
系統の交雑；ならびに目的の実験モデルに適切な異なるバックグラウンド上に導
入遺伝子を配置するための交配。
配されるかまたは交雑されて、特定の動物のコロニーを生成し得る。そのような
交配戦略の例は、以下を含むがそれらに限定されない：別の系統を樹立するため
の１つより多くの組み込み部位を有する創始動物の異系交配；各導入遺伝子の相
加的発現効果によって、より高いレベルで導入遺伝子を発現する複合トランスジ
ェニックを生成するための別々の系統の同系交配；発現の増強およびＤＮＡ分析
による動物のスクリーニングの必要性の排除の両方のための、所定の組み込み部
位に対してホモ接合性の動物を生成するヘテロ接合性トランスジェニック動物の
交雑；複合ヘテロ接合性またはホモ接合性系統を生成するための別々のホモ接合
系統の交雑；ならびに目的の実験モデルに適切な異なるバックグラウンド上に導
入遺伝子を配置するための交配。
【０７８０】
本発明のトランスジェニック動物は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポ
リペプチドの生物学的機能の詳述、異常なＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
発現に関連する状態および／または障害の研究、ならびにこのような状態および
／または障害の改善に有効な化合物についてのスクリーニングに有用な動物モデ
ル系を含むがこれらに限定されない用途を有する。
リペプチドの生物学的機能の詳述、異常なＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
発現に関連する状態および／または障害の研究、ならびにこのような状態および
／または障害の改善に有効な化合物についてのスクリーニングに有用な動物モデ
ル系を含むがこれらに限定されない用途を有する。
【０７８１】
（実施例３３：ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ノックアウト動物）
内因性ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２遺伝子発現もまた、標的化された
相同組換えを使用してＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２遺伝子ならびに／あ
るいはそのプロモーターを不活性化または「ノックアウトする」ことによって減
少し得る（例えば、Ｓｍｉｔｈｉｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ ３１７：２３０−２３
４（１９８５）；ＴｈｏｍａｓおよびＣａｐｅｃｃｈｉ、Ｃｅｌｌ ５１：５０
３−５１２（１９８７）；Ｔｈｏｍｐｓｏｎら、Ｃｅｌｌ ５：３１３−３２１
（１９８９）を参照のこと；これらの各々は、本明細書中でその全体が参考とし
て援用される）。例えば、内因性ポリヌクレオチド配列（この遺伝子のコード領
域または調節領域のいずれか）と相同性のＤＮＡに隣接される、本発明の変異体
、非機能的なポリヌクレオチド（または完全に関連のないＤＮＡ配列）を、選択
マーカーおよび／またはネガティブ選択マーカーを用いてまたは用いずに使用し
、インビボで本発明のポリペプチドを発現する細胞をトランスフェクトし得る。
別の実施形態において、当該分野で公知の技術を、目的の遺伝子を含むが、発現
しない細胞中でノックアウトを作製するために使用する。標的化された相同組換
えを介した、このＤＮＡ構築物の挿入は、標的化された遺伝子の不活性化を生じ
る。このようなアプローチは、胚性幹細胞に対する改変が不活性な標的化された
遺伝子を有する動物の子孫を作製するために使用され得る研究および農業分野に
特に適する（例えば、ＴｈｏｍａｓおよびＣａｐｅｃｃｈｉ １９８７ならびに
Ｔｈｏｍｐｓｏｎ １９８９、前出を参照のこと）。しかし、このアプローチは
、当業者に明白な適切なウイルスベクターを使用して、組換えＤＮＡ構築物がイ
ンビボで要求された部位に直接投与されるか、または標的化される場合、ヒトに
おける使用に慣用的に適合され得る。
相同組換えを使用してＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２遺伝子ならびに／あ
るいはそのプロモーターを不活性化または「ノックアウトする」ことによって減
少し得る（例えば、Ｓｍｉｔｈｉｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ ３１７：２３０−２３
４（１９８５）；ＴｈｏｍａｓおよびＣａｐｅｃｃｈｉ、Ｃｅｌｌ ５１：５０
３−５１２（１９８７）；Ｔｈｏｍｐｓｏｎら、Ｃｅｌｌ ５：３１３−３２１
（１９８９）を参照のこと；これらの各々は、本明細書中でその全体が参考とし
て援用される）。例えば、内因性ポリヌクレオチド配列（この遺伝子のコード領
域または調節領域のいずれか）と相同性のＤＮＡに隣接される、本発明の変異体
、非機能的なポリヌクレオチド（または完全に関連のないＤＮＡ配列）を、選択
マーカーおよび／またはネガティブ選択マーカーを用いてまたは用いずに使用し
、インビボで本発明のポリペプチドを発現する細胞をトランスフェクトし得る。
別の実施形態において、当該分野で公知の技術を、目的の遺伝子を含むが、発現
しない細胞中でノックアウトを作製するために使用する。標的化された相同組換
えを介した、このＤＮＡ構築物の挿入は、標的化された遺伝子の不活性化を生じ
る。このようなアプローチは、胚性幹細胞に対する改変が不活性な標的化された
遺伝子を有する動物の子孫を作製するために使用され得る研究および農業分野に
特に適する（例えば、ＴｈｏｍａｓおよびＣａｐｅｃｃｈｉ １９８７ならびに
Ｔｈｏｍｐｓｏｎ １９８９、前出を参照のこと）。しかし、このアプローチは
、当業者に明白な適切なウイルスベクターを使用して、組換えＤＮＡ構築物がイ
ンビボで要求された部位に直接投与されるか、または標的化される場合、ヒトに
おける使用に慣用的に適合され得る。
【０７８２】
本発明のさらなる実施形態において、本発明のポリペプチドを発現するために
遺伝子操作される細胞、あるいは本発明のポリペプチドを発現しないように遺伝
子操作された細胞（例えば、ノックアウト）を、インビボで患者に投与する。こ
のような細胞は、患者（すなわち、ヒトを含む動物）またはＭＨＣ適合性ドナー
から入手され得、そして線維芽細胞、骨髄細胞、血球（例えば、リンパ球）、脂
肪細胞、筋細胞、内皮細胞などを含み得るが、それらに限定されない。この細胞
を、例えば、形質導入（ウイルスベクターおよび好ましくは細胞ゲノム中に導入
遺伝子を組み込むベクターを使用する）、またはトランスフェクション手順（プ
ラスミド、コスミド、ＹＡＣ、裸のＤＮＡ、エレクトロポレーション、リポソー
ムなどの使用を含むが、これらに限定されない）によって、細胞中に本発明のポ
リペプチドのコード配列を導入するために、あるいはこのコード配列および／ま
たは本発明のポリペプチドに結合している内因性の調節配列を破壊するために、
組換えＤＮＡ技術を使用してインビトロで遺伝子操作する。本発明のポリペプチ
ドのコード配列を強力な構成的プロモーターもしくは誘導性プロモーターまたは
プロモーター／エンハンサーの制御下に配置し、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２ポリペプチドの発現および好ましくは分泌を達成し得る。本発明のポリペ
プチドを発現および好ましくは分泌する操作した細胞を、例えば、循環中におい
て、または腹腔内で患者中へ全身的に導入し得る。
遺伝子操作される細胞、あるいは本発明のポリペプチドを発現しないように遺伝
子操作された細胞（例えば、ノックアウト）を、インビボで患者に投与する。こ
のような細胞は、患者（すなわち、ヒトを含む動物）またはＭＨＣ適合性ドナー
から入手され得、そして線維芽細胞、骨髄細胞、血球（例えば、リンパ球）、脂
肪細胞、筋細胞、内皮細胞などを含み得るが、それらに限定されない。この細胞
を、例えば、形質導入（ウイルスベクターおよび好ましくは細胞ゲノム中に導入
遺伝子を組み込むベクターを使用する）、またはトランスフェクション手順（プ
ラスミド、コスミド、ＹＡＣ、裸のＤＮＡ、エレクトロポレーション、リポソー
ムなどの使用を含むが、これらに限定されない）によって、細胞中に本発明のポ
リペプチドのコード配列を導入するために、あるいはこのコード配列および／ま
たは本発明のポリペプチドに結合している内因性の調節配列を破壊するために、
組換えＤＮＡ技術を使用してインビトロで遺伝子操作する。本発明のポリペプチ
ドのコード配列を強力な構成的プロモーターもしくは誘導性プロモーターまたは
プロモーター／エンハンサーの制御下に配置し、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２ポリペプチドの発現および好ましくは分泌を達成し得る。本発明のポリペ
プチドを発現および好ましくは分泌する操作した細胞を、例えば、循環中におい
て、または腹腔内で患者中へ全身的に導入し得る。
【０７８３】
あるいは、この細胞をマトリックスに組み込み得、そして身体に移植し得る（
例えば、遺伝子操作した線維芽細胞を皮膚移植片の一部として移植し得る）；遺
伝子操作した内皮細胞をリンパ移植片または脈管移植片の一部として移植し得る
（例えば、Ａｎｄｅｒｓｏｎら、米国特許第５，３９９，３４９号；ならびにＭ
ｕｌｌｉｇａｎおよびＷｉｌｓｏｎ、米国特許第５，４６０，９５９号を参照の
こと。これらの各々は、本明細書中でその全体が参考として援用される）。
例えば、遺伝子操作した線維芽細胞を皮膚移植片の一部として移植し得る）；遺
伝子操作した内皮細胞をリンパ移植片または脈管移植片の一部として移植し得る
（例えば、Ａｎｄｅｒｓｏｎら、米国特許第５，３９９，３４９号；ならびにＭ
ｕｌｌｉｇａｎおよびＷｉｌｓｏｎ、米国特許第５，４６０，９５９号を参照の
こと。これらの各々は、本明細書中でその全体が参考として援用される）。
【０７８４】
投与される細胞が非自己または非ＭＨＣ適合性細胞である場合、それらを、こ
の導入細胞に対する宿主免疫応答の発生を妨害する周知の技術を使用して投与し
得る。例えば、この細胞をカプセル性の形態で導入し得、この形態は、構成成分
と即時の細胞外環境との交換を可能にするが、導入細胞が宿主免疫系によって認
識されることを可能にしない。
の導入細胞に対する宿主免疫応答の発生を妨害する周知の技術を使用して投与し
得る。例えば、この細胞をカプセル性の形態で導入し得、この形態は、構成成分
と即時の細胞外環境との交換を可能にするが、導入細胞が宿主免疫系によって認
識されることを可能にしない。
【０７８５】
本発明のノックアウト動物は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２ポリペプ
チドの生物学的機能の詳述、異常なＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２発現に
関連する状態および／または障害の研究、ならびにこのような状態および／また
は障害を寛解させるに有効な化合物のスクリーニングにおいて有用な動物モデル
系を含むが、それらに限定されない用途を有する。
チドの生物学的機能の詳述、異常なＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２発現に
関連する状態および／または障害の研究、ならびにこのような状態および／また
は障害を寛解させるに有効な化合物のスクリーニングにおいて有用な動物モデル
系を含むが、それらに限定されない用途を有する。
【０７８６】
（実施例３４：Ｂ細胞増殖および分化の刺激または阻害を検出するアッセイ）
機能的体液性免疫応答の生成は、Ｂ系列の細胞とそれらの微小環境との間に、
可溶性のシグナル伝達および同族のシグナル伝達の両方を必要とする。シグナル
は、陽性の刺激（Ｂ系列の細胞がプログラムされた発生を持続するようにさせる
）、または陰性の刺激（細胞が電流発生経路を阻止するように指示する）を伝え
得る。現在までに、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ
−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４およびＩＬ−１５を含む、多数の刺激シグナル
および阻害シグナルがＢ細胞応答性に影響することが見出されている。興味深い
ことに、これらのシグナルはそれ自体は弱いエフェクターであるが、種々の同時
刺激タンパク質と組み合わせて、Ｂ細胞集団中の活性化、増殖、分化、ホーミン
グ、耐性、および死を誘導し得る。
可溶性のシグナル伝達および同族のシグナル伝達の両方を必要とする。シグナル
は、陽性の刺激（Ｂ系列の細胞がプログラムされた発生を持続するようにさせる
）、または陰性の刺激（細胞が電流発生経路を阻止するように指示する）を伝え
得る。現在までに、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ
−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４およびＩＬ−１５を含む、多数の刺激シグナル
および阻害シグナルがＢ細胞応答性に影響することが見出されている。興味深い
ことに、これらのシグナルはそれ自体は弱いエフェクターであるが、種々の同時
刺激タンパク質と組み合わせて、Ｂ細胞集団中の活性化、増殖、分化、ホーミン
グ、耐性、および死を誘導し得る。
【０７８７】
Ｂ細胞同時刺激タンパク質の最も研究されたクラスの１つがＴＮＦスーパーフ
ァミリーである。このファミリー内で、ＣＤ４０、ＣＤ２７およびＣＤ３０は、
そのそれぞれのリガンドである、ＣＤ１５４、ＣＤ７０およびＣＤ１５３と共に
種々の免疫応答を調節することが見出されている。これらのＢ細胞集団およびそ
れらの前駆細胞の増殖および分化の検出および／または観察を可能にするアッセ
イは、種々のタンパク質がこれらのＢ細胞集団上に、増殖および分化の点で有し
得る効果を決定する際に価値のあるツールである。以下に列挙するのは、Ｂ細胞
集団およびそれらの前駆体の分化、増殖、または阻害の検出を可能にするように
設計された２つのアッセイである。
ァミリーである。このファミリー内で、ＣＤ４０、ＣＤ２７およびＣＤ３０は、
そのそれぞれのリガンドである、ＣＤ１５４、ＣＤ７０およびＣＤ１５３と共に
種々の免疫応答を調節することが見出されている。これらのＢ細胞集団およびそ
れらの前駆細胞の増殖および分化の検出および／または観察を可能にするアッセ
イは、種々のタンパク質がこれらのＢ細胞集団上に、増殖および分化の点で有し
得る効果を決定する際に価値のあるツールである。以下に列挙するのは、Ｂ細胞
集団およびそれらの前駆体の分化、増殖、または阻害の検出を可能にするように
設計された２つのアッセイである。
【０７８８】
（インビトロアッセイ）−精製ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク
質、あるいはその短縮形態を、Ｂ細胞集団およびそれらの前駆体において活性化
、増殖、分化もしくは阻害および／または死を誘導する能力について評価する。
精製したヒト扁桃腺Ｂ細胞へのＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質
の活性（定性的に０．１〜１０，０００ｎｇ／ｍＬの用量範囲にわたって測定し
た）を、標準的なＢリンパ球同時刺激アッセイにおいて評価する。このアッセイ
では、精製した扁桃腺Ｂ細胞を、プライミング因子として、ホルマリン固定Ｓｔ
ａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ Ｃｏｗａｎ Ｉ（ＳＡＣ）、または
固定した抗ヒトＩｇＭ抗体のいずれかの存在下で培養する。ＩＬ−２およびＩＬ
−１５のような第２のシグナルは、トリチウム化チミジン取り込みにより測定し
た場合、ＳＡＣおよびＩｇＭ架橋と協同してＢ細胞増殖を誘発する。新規な協同
因子を、このアッセイを用いて容易に同定し得る。このアッセイは、ＣＤ３陽性
細胞の磁気ビーズ（ＭＡＣＳ）枯渇によりヒト扁桃腺Ｂ細胞を単離する工程を包
含する。得られる細胞集団は、ＣＤ４５Ｒ（Ｂ２２０）の発現により評価する場
合、９５％のＢ細胞より大きい。
質、あるいはその短縮形態を、Ｂ細胞集団およびそれらの前駆体において活性化
、増殖、分化もしくは阻害および／または死を誘導する能力について評価する。
精製したヒト扁桃腺Ｂ細胞へのＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質
の活性（定性的に０．１〜１０，０００ｎｇ／ｍＬの用量範囲にわたって測定し
た）を、標準的なＢリンパ球同時刺激アッセイにおいて評価する。このアッセイ
では、精製した扁桃腺Ｂ細胞を、プライミング因子として、ホルマリン固定Ｓｔ
ａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ Ｃｏｗａｎ Ｉ（ＳＡＣ）、または
固定した抗ヒトＩｇＭ抗体のいずれかの存在下で培養する。ＩＬ−２およびＩＬ
−１５のような第２のシグナルは、トリチウム化チミジン取り込みにより測定し
た場合、ＳＡＣおよびＩｇＭ架橋と協同してＢ細胞増殖を誘発する。新規な協同
因子を、このアッセイを用いて容易に同定し得る。このアッセイは、ＣＤ３陽性
細胞の磁気ビーズ（ＭＡＣＳ）枯渇によりヒト扁桃腺Ｂ細胞を単離する工程を包
含する。得られる細胞集団は、ＣＤ４５Ｒ（Ｂ２２０）の発現により評価する場
合、９５％のＢ細胞より大きい。
【０７８９】
種々の希釈のそれぞれのサンプルを９６ウェルプレートの個々のウェルに配置
し、ここへ、培養培地（１０％ＦＢＳ、５×１０-5Ｍ ２ＭＥ、１００Ｕ／ｍｌ
ペニシリン、１０μｇ／ｍｌストレプトマイシン、および１０-5希釈のＳＡＣを
含有するＲＰＭＩ １６４０）中で懸濁した、総量１５０μｌ中の、１０5Ｂ細
胞を添加する。増殖または阻害を、因子の添加後７２時間から開始して、3Ｈ−
チミジン（６．７Ｃｉ／ｍＭ）で２０ｈパルス（１μＣｉ／ウェル）により定量
する。陽性コントロールおよび陰性コントロールは、それぞれＩＬ２および培地
である。
し、ここへ、培養培地（１０％ＦＢＳ、５×１０-5Ｍ ２ＭＥ、１００Ｕ／ｍｌ
ペニシリン、１０μｇ／ｍｌストレプトマイシン、および１０-5希釈のＳＡＣを
含有するＲＰＭＩ １６４０）中で懸濁した、総量１５０μｌ中の、１０5Ｂ細
胞を添加する。増殖または阻害を、因子の添加後７２時間から開始して、3Ｈ−
チミジン（６．７Ｃｉ／ｍＭ）で２０ｈパルス（１μＣｉ／ウェル）により定量
する。陽性コントロールおよび陰性コントロールは、それぞれＩＬ２および培地
である。
【０７９０】
（インビボアッセイ）−ＢＡＬＢ／ｃマウスに、緩衝液のみ、またはＭＥＴＨ
１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質、もしくはそれらの短縮形態の２ｍｇ／
ｋｇを、１日２回注射（腹腔内）する。マウスにこの処置を４日間連続して与え
、この時点でこのマウスを屠殺し、そして分析のために種々の組織および血清を
収集した。正常な脾臓ならびにＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質
で処理した脾臓由来のＨ＆Ｅ切片の比較により、脾臓細胞でのＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２タンパク質の活性の結果、例えば、動脈周囲リンパ性鞘の拡
散および／または赤色脾髄領域の有核の細胞充実性の有意な増加（これは、Ｂ細
胞集団の分化および増殖の活性化を示し得る）が確認される。Ｂ細胞マーカーで
ある、抗ＣＤ４５Ｒ（Ｂ２２０）を用いる免疫組織化学的研究を用いて、脾臓細
胞への任意の生理的な変化（例えば、脾臓組織崩壊）が、樹立されたＴ細胞領域
に浸潤する漠然と規定されたＢ細胞区画内のＢ細胞提示の増加に起因するか否か
を決定する。
１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質、もしくはそれらの短縮形態の２ｍｇ／
ｋｇを、１日２回注射（腹腔内）する。マウスにこの処置を４日間連続して与え
、この時点でこのマウスを屠殺し、そして分析のために種々の組織および血清を
収集した。正常な脾臓ならびにＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質
で処理した脾臓由来のＨ＆Ｅ切片の比較により、脾臓細胞でのＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２タンパク質の活性の結果、例えば、動脈周囲リンパ性鞘の拡
散および／または赤色脾髄領域の有核の細胞充実性の有意な増加（これは、Ｂ細
胞集団の分化および増殖の活性化を示し得る）が確認される。Ｂ細胞マーカーで
ある、抗ＣＤ４５Ｒ（Ｂ２２０）を用いる免疫組織化学的研究を用いて、脾臓細
胞への任意の生理的な変化（例えば、脾臓組織崩壊）が、樹立されたＴ細胞領域
に浸潤する漠然と規定されたＢ細胞区画内のＢ細胞提示の増加に起因するか否か
を決定する。
【０７９１】
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質で処置したマウス由来の脾臓
のフローサイトメトリー分析を用いて、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タ
ンパク質が、ＴｈＢ＋であるＣＤ４５Ｒ（Ｂ２２０）ｄｕｌｌ Ｂ細胞の比を、
コントロールマウスで観察される比よりも特異的に増加するか否かを示す。
のフローサイトメトリー分析を用いて、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タ
ンパク質が、ＴｈＢ＋であるＣＤ４５Ｒ（Ｂ２２０）ｄｕｌｌ Ｂ細胞の比を、
コントロールマウスで観察される比よりも特異的に増加するか否かを示す。
【０７９２】
同様に、増加した成熟Ｂ細胞のインビボでの提示の推定される結果は、血清Ｉ
ｇ力価の相対的な増加である。従って、血清ＩｇＭおよびＩｇＡレベルを緩衝液
処置マウスとＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質処置マウスとの間
で比較する。
ｇ力価の相対的な増加である。従って、血清ＩｇＭおよびＩｇＡレベルを緩衝液
処置マウスとＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質処置マウスとの間
で比較する。
【０７９３】
本実施例において記載する試験は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タン
パク質の活性を試験する。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴ
Ｈ２ポリヌクレオチド、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストなら
びに／あるいはＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアンタゴニストの活性（
例えば、遺伝子治療）を試験するために、例示する研究を容易に改変し得る。
パク質の活性を試験する。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴ
Ｈ２ポリヌクレオチド、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストなら
びに／あるいはＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアンタゴニストの活性（
例えば、遺伝子治療）を試験するために、例示する研究を容易に改変し得る。
【０７９４】
（実施例３５：Ｔ細胞増殖アッセイ）
ＣＤ３誘導性の増殖アッセイをＰＢＭＣで実行し、そして3Ｈ−チミジンの取
り込みにより測定する。このアッセイを以下のように実行する。９６ウェルプレ
ートを、ＣＤ３に対するｍＡｂ（ＨＩＴ３ａ，Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）の１００
μｌ／ウェル、またはアイソタイプ適合のコントロールｍＡｂ（Ｂ３３．１）（
０．０５Ｍ 炭酸水素塩緩衝液、ｐＨ９．５中、１ｍｇ／ｍｌ）で４℃で１晩、
コートし、次いでＰＢＳで３回洗浄する。ＰＢＭＣをヒト末梢血から、Ｆ／Ｈ勾
配遠心分離により単離し、そしてＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク
質の種々の濃度での存在下で、１０％ＦＣＳおよびＰ／Ｓを含有するＲＰＭＩ中
、ｍＡｂでコートしたプレートの４通りのウェル（５×１０4／ウェル）に添加
する（総量２００μｌ）。関連するタンパク質緩衝液および培地単独がコントロ
ールである。３７℃での培養の４８時間後、プレートを１０００ｒｐｍで２分間
回転させ、そして１００μｌの上清を除去し、そして、増殖への効果が観察され
る場合、ＩＬ−２（または他のサイトカイン）の測定のために−２０℃で貯蔵し
た。ウェルに０．５μＣｉの3Ｈ−チミジンを含有する１００μｌの培地を補充
し、そして３７℃で１８〜２４時間培養する。ウェルを収集し、そして3Ｈ−チ
ミジンの取り込みを増殖の指標として用いた。抗ＣＤ３単独が増殖の陽性コント
ロールである。ＩＬ−２（１００Ｕ／ｍｌ）をまた、増殖を増強するコントロー
ルとして用いる。Ｔ細胞の増殖を誘導しないコントロール抗体をＭＥＴＨ１およ
び／またはＭＥＴＨ２タンパク質の効果についての陰性コントロールとして用い
る。
り込みにより測定する。このアッセイを以下のように実行する。９６ウェルプレ
ートを、ＣＤ３に対するｍＡｂ（ＨＩＴ３ａ，Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）の１００
μｌ／ウェル、またはアイソタイプ適合のコントロールｍＡｂ（Ｂ３３．１）（
０．０５Ｍ 炭酸水素塩緩衝液、ｐＨ９．５中、１ｍｇ／ｍｌ）で４℃で１晩、
コートし、次いでＰＢＳで３回洗浄する。ＰＢＭＣをヒト末梢血から、Ｆ／Ｈ勾
配遠心分離により単離し、そしてＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク
質の種々の濃度での存在下で、１０％ＦＣＳおよびＰ／Ｓを含有するＲＰＭＩ中
、ｍＡｂでコートしたプレートの４通りのウェル（５×１０4／ウェル）に添加
する（総量２００μｌ）。関連するタンパク質緩衝液および培地単独がコントロ
ールである。３７℃での培養の４８時間後、プレートを１０００ｒｐｍで２分間
回転させ、そして１００μｌの上清を除去し、そして、増殖への効果が観察され
る場合、ＩＬ−２（または他のサイトカイン）の測定のために−２０℃で貯蔵し
た。ウェルに０．５μＣｉの3Ｈ−チミジンを含有する１００μｌの培地を補充
し、そして３７℃で１８〜２４時間培養する。ウェルを収集し、そして3Ｈ−チ
ミジンの取り込みを増殖の指標として用いた。抗ＣＤ３単独が増殖の陽性コント
ロールである。ＩＬ−２（１００Ｕ／ｍｌ）をまた、増殖を増強するコントロー
ルとして用いる。Ｔ細胞の増殖を誘導しないコントロール抗体をＭＥＴＨ１およ
び／またはＭＥＴＨ２タンパク質の効果についての陰性コントロールとして用い
る。
【０７９５】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タ
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２ポリヌクレオチド、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストな
らびに／あるいはＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアンタゴニストの活性
（例えば、遺伝子治療）を試験するために、例示する研究を容易に改変し得る。
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２ポリヌクレオチド、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストな
らびに／あるいはＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアンタゴニストの活性
（例えば、遺伝子治療）を試験するために、例示する研究を容易に改変し得る。
【０７９６】
（実施例３６：ＭＨＣクラスＩＩ、同時刺激分子および接着分子の発現、なら
びに単球および単球由来ヒト樹状細胞の細胞分化に対するＭＥＴＨ１および／ま
たはＭＥＴＨ２の効果） 樹状細胞を末梢血において見出される増殖前駆体の増殖により生成する：接着
性ＰＢＭＣまたは清浄化単球画分を、ＧＭ−ＣＳＦ（５０ｎｇ／ｍｌ）およびＩ
Ｌ−４（２０ｎｇ／ｍｌ）とともに７〜１０日間培養する。これらの樹状細胞は
、未成熟細胞の特徴的表現型（ＣＤ１、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ４０およびＭ
ＨＣクラスＩＩ抗原の発現）を有する。ＴＮＦ−αのような活性化因子での処理
は、表面表現型に迅速な変化（ＭＨＣクラスＩおよびＩＩ、同時刺激分子および
接着分子の発現の増加、ＦＣγＲＩＩの下方制御、ＣＤ８３の上方制御）を生じ
る。これらの変化は抗原提示能力の増加、および樹状細胞の機能的成熟と関連す
る。
びに単球および単球由来ヒト樹状細胞の細胞分化に対するＭＥＴＨ１および／ま
たはＭＥＴＨ２の効果） 樹状細胞を末梢血において見出される増殖前駆体の増殖により生成する：接着
性ＰＢＭＣまたは清浄化単球画分を、ＧＭ−ＣＳＦ（５０ｎｇ／ｍｌ）およびＩ
Ｌ−４（２０ｎｇ／ｍｌ）とともに７〜１０日間培養する。これらの樹状細胞は
、未成熟細胞の特徴的表現型（ＣＤ１、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ４０およびＭ
ＨＣクラスＩＩ抗原の発現）を有する。ＴＮＦ−αのような活性化因子での処理
は、表面表現型に迅速な変化（ＭＨＣクラスＩおよびＩＩ、同時刺激分子および
接着分子の発現の増加、ＦＣγＲＩＩの下方制御、ＣＤ８３の上方制御）を生じ
る。これらの変化は抗原提示能力の増加、および樹状細胞の機能的成熟と関連す
る。
【０７９７】
表面抗原のＦＡＣＳ分析を以下の様に実施する。細胞を、ＭＥＴＨ１および／
もしくはＭＥＴＨ２またはＬＰＳ（陽性コントロール）の漸増する濃度で１〜３
日処理し、１％ＢＳＡおよび０．０２ｍＭアジ化ナトリウムを含有するＰＢＳで
洗浄し、次いで１：２０希釈の適切なＦＩＴＣ標識モノクローナル抗体またはＰ
Ｅ標識モノクローナル抗体とともに、４℃で３０分間インキュベートする。さら
なる洗浄後、標識した細胞をＦＡＣＳｃａｎ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏ
ｎ）でのフローサイトメトリーにより分析する。
もしくはＭＥＴＨ２またはＬＰＳ（陽性コントロール）の漸増する濃度で１〜３
日処理し、１％ＢＳＡおよび０．０２ｍＭアジ化ナトリウムを含有するＰＢＳで
洗浄し、次いで１：２０希釈の適切なＦＩＴＣ標識モノクローナル抗体またはＰ
Ｅ標識モノクローナル抗体とともに、４℃で３０分間インキュベートする。さら
なる洗浄後、標識した細胞をＦＡＣＳｃａｎ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏ
ｎ）でのフローサイトメトリーにより分析する。
【０７９８】
（サイトカインの産生に対する効果） 樹状細胞により生成されるサイトカイ
ン、特にＩＬ−１２は、Ｔ細胞依存性免疫応答の開始において重要である。ＩＬ
−１２は、Ｔｈ１ヘルパーＴ細胞免疫応答の発生に強力に影響し、そして細胞傷
害性Ｔ細胞機能およびＮＫ細胞機能を誘導する。ＥＬＩＳＡを用いて以下のよう
にＩＬ−１２放出を測定する。樹状細胞（１０6／ｍｌ）を、ＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２の漸増する濃度で２４時間処理する。ＬＰＳ（１００ｎｇ／
ｍｌ）を、陽性コントロールとして細胞培養に添加する。次いで、細胞培養から
の上清を収集し、そして市販のＥＬＩＳＡキット（例えば、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅ
ｍｓ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ））を用いてＩＬ−１２含量について分析
する。キットに提供される標準的プロトコルを用いる。
ン、特にＩＬ−１２は、Ｔ細胞依存性免疫応答の開始において重要である。ＩＬ
−１２は、Ｔｈ１ヘルパーＴ細胞免疫応答の発生に強力に影響し、そして細胞傷
害性Ｔ細胞機能およびＮＫ細胞機能を誘導する。ＥＬＩＳＡを用いて以下のよう
にＩＬ−１２放出を測定する。樹状細胞（１０6／ｍｌ）を、ＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２の漸増する濃度で２４時間処理する。ＬＰＳ（１００ｎｇ／
ｍｌ）を、陽性コントロールとして細胞培養に添加する。次いで、細胞培養から
の上清を収集し、そして市販のＥＬＩＳＡキット（例えば、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅ
ｍｓ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ））を用いてＩＬ−１２含量について分析
する。キットに提供される標準的プロトコルを用いる。
【０７９９】
（ＭＨＣクラスＩＩ、同時刺激分子および接着分子の発現に対する効果） 細
胞表面抗原の３つの主なファミリー：接着分子、抗原提示に関与する分子、およ
びＦｃレセプターが、単球上で同定され得る。ＭＨＣクラスＩＩ抗原および他の
同時刺激分子（例えば、Ｂ７およびＩＣＡＭ−１）の発現の調節は、単球の抗原
提示能力、およびＴ細胞活性化を誘導する能力に変化を生じ得る。Ｆｃレセプタ
ーの発現増加は、単球細胞傷害性活性、サイトカイン放出および食菌作用の改善
と相関し得る。
胞表面抗原の３つの主なファミリー：接着分子、抗原提示に関与する分子、およ
びＦｃレセプターが、単球上で同定され得る。ＭＨＣクラスＩＩ抗原および他の
同時刺激分子（例えば、Ｂ７およびＩＣＡＭ−１）の発現の調節は、単球の抗原
提示能力、およびＴ細胞活性化を誘導する能力に変化を生じ得る。Ｆｃレセプタ
ーの発現増加は、単球細胞傷害性活性、サイトカイン放出および食菌作用の改善
と相関し得る。
【０８００】
ＦＡＣＳ分析は、以下のように表面抗原を試験するために用いられる。単球を
、ＭＥＴＨ１および／もしくはＭＥＴＨ２またはＬＰＳ（陽性コントロール）の
漸増する濃度で１〜５日処理し、１％ＢＳＡおよび０．０２ｍＭアジ化ナトリウ
ムを含有するＰＢＳで洗浄し、次いで１：２０希釈の適切なＦＩＴＣ標識モノク
ローナル抗体またはＰＥ標識モノクローナル抗体とともに、４℃で３０分間イン
キュベートする。さらなる洗浄後、標識した細胞をＦＡＣＳｃａｎ（Ｂｅｃｔｏ
ｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）でのフローサイトメトリーにより分析する。
、ＭＥＴＨ１および／もしくはＭＥＴＨ２またはＬＰＳ（陽性コントロール）の
漸増する濃度で１〜５日処理し、１％ＢＳＡおよび０．０２ｍＭアジ化ナトリウ
ムを含有するＰＢＳで洗浄し、次いで１：２０希釈の適切なＦＩＴＣ標識モノク
ローナル抗体またはＰＥ標識モノクローナル抗体とともに、４℃で３０分間イン
キュベートする。さらなる洗浄後、標識した細胞をＦＡＣＳｃａｎ（Ｂｅｃｔｏ
ｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）でのフローサイトメトリーにより分析する。
【０８０１】
（単球活性化および／または生存の増加） 単球を活性化する（あるいは、不
活化する）および／または単球の生存を増加する（あるいは、単球生存を低下さ
せる）分子についてのアッセイは、当該分野で公知であり、そして本発明の分子
が単球のインヒビターまたはアクチベーターとして機能するか否かを決定するた
めに慣用的に適用され得る。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２、ＭＥＴＨ１
および／またはＭＥＴＨ２のアゴニスト、もしくはアンタゴニストは、以下に記
載の３つのアッセイを用いてスクリーニングされ得る。これらのアッセイのそれ
ぞれについて、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ勾配（Ｓ
ｉｇｍａ）を通じた遠心分離により、単一のドナーｌｅｕｋｏｐａｃｋ（Ａｍｅ
ｒｉｃａｎ Ｒｅｄ Ｃｒｏｓｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ）から精製する。
単球を向流遠心性エルトリエーション（ｃｏｕｎｔｅｒｆｌｏｗ ｃｅｎｔｒｉ
ｆｕｇａｌ ｅｌｕｔｒｉａｔｉｏｎ）によりＰＢＭＣから単離する。
活化する）および／または単球の生存を増加する（あるいは、単球生存を低下さ
せる）分子についてのアッセイは、当該分野で公知であり、そして本発明の分子
が単球のインヒビターまたはアクチベーターとして機能するか否かを決定するた
めに慣用的に適用され得る。ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２、ＭＥＴＨ１
および／またはＭＥＴＨ２のアゴニスト、もしくはアンタゴニストは、以下に記
載の３つのアッセイを用いてスクリーニングされ得る。これらのアッセイのそれ
ぞれについて、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ勾配（Ｓ
ｉｇｍａ）を通じた遠心分離により、単一のドナーｌｅｕｋｏｐａｃｋ（Ａｍｅ
ｒｉｃａｎ Ｒｅｄ Ｃｒｏｓｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ）から精製する。
単球を向流遠心性エルトリエーション（ｃｏｕｎｔｅｒｆｌｏｗ ｃｅｎｔｒｉ
ｆｕｇａｌ ｅｌｕｔｒｉａｔｉｏｎ）によりＰＢＭＣから単離する。
【０８０２】
（１．単球生存アッセイ） ヒト末梢血単球は、血清または他の刺激の非存在
下で培養した場合、次第に生存度を失う。それらの死は、内部調節されたプロセ
ス（アポトーシス）から生じる。活性化因子、例えばＴＮＦ−αの培養への添加
は、劇的に、細胞生存を改善し、そしてＤＮＡの断片化を妨げる。
下で培養した場合、次第に生存度を失う。それらの死は、内部調節されたプロセ
ス（アポトーシス）から生じる。活性化因子、例えばＴＮＦ−αの培養への添加
は、劇的に、細胞生存を改善し、そしてＤＮＡの断片化を妨げる。
【０８０３】
プロピジウムヨージド（ＰＩ）染色を用いて、以下のようにアポトーシスを測
定する。単球を、１００ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−α（陰性コントロール）の存在下
、および試験される種々の濃度の化合物の存在下で、ポリプロピレンチューブ中
の無血清培地（陽性コントロール）中で、４８時間培養する。細胞を、最終濃度
５μｇ／ｍｌでＰＩを含有するＰＢＳ中で２×１０6／ｍｌの濃度に懸濁し、次
いでＦＡＣＳｃａｎ分析の前に５分間室温でインキュベートする。ＰＩ取り込み
は、この試験パラダイムにおけるＤＮＡの断片化と相関することを示している。
定する。単球を、１００ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−α（陰性コントロール）の存在下
、および試験される種々の濃度の化合物の存在下で、ポリプロピレンチューブ中
の無血清培地（陽性コントロール）中で、４８時間培養する。細胞を、最終濃度
５μｇ／ｍｌでＰＩを含有するＰＢＳ中で２×１０6／ｍｌの濃度に懸濁し、次
いでＦＡＣＳｃａｎ分析の前に５分間室温でインキュベートする。ＰＩ取り込み
は、この試験パラダイムにおけるＤＮＡの断片化と相関することを示している。
【０８０４】
（２．サイトカイン放出に対する影響） 単球／マクロファージの重要な機能
は、刺激後のサイトカインの放出を通じた免疫系の他の細胞集団へのそれらの調
節活性である。サイトカイン放出を測定するためのＥＬＩＳＡは、以下のように
実施する。ヒト単球を、５×１０5細胞／ｍｌの密度で、ＭＥＴＨ１および／ま
たはＭＥＴＨ２の漸増する濃度とともに、および同じ条件下であるが、ＭＥＴＨ
１および／またはＭＥＴＨ２の非存在下で、インキュベートする。ＩＬ−１２の
産生については、この細胞を、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の存在下で
ＩＦＮ（１００Ｕ／ｍｌ）で１晩プライムする。次いで、ＬＰＳ（１０ｎｇ／ｍ
ｌ）を添加する。馴化培地を２４時間後に収集し、そして使用するまで凍結保存
する。次いで、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１０、ＭＣＰ−１およびＩＬ−８の測定を市
販のＥＬＩＳＡキット（例えば、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｍｉｎｎｅａｐｏｌ
ｉｓ，ＭＮ）を用い、そしてキットに提供される標準的プロトコルを適用して実
施する。
は、刺激後のサイトカインの放出を通じた免疫系の他の細胞集団へのそれらの調
節活性である。サイトカイン放出を測定するためのＥＬＩＳＡは、以下のように
実施する。ヒト単球を、５×１０5細胞／ｍｌの密度で、ＭＥＴＨ１および／ま
たはＭＥＴＨ２の漸増する濃度とともに、および同じ条件下であるが、ＭＥＴＨ
１および／またはＭＥＴＨ２の非存在下で、インキュベートする。ＩＬ−１２の
産生については、この細胞を、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の存在下で
ＩＦＮ（１００Ｕ／ｍｌ）で１晩プライムする。次いで、ＬＰＳ（１０ｎｇ／ｍ
ｌ）を添加する。馴化培地を２４時間後に収集し、そして使用するまで凍結保存
する。次いで、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１０、ＭＣＰ−１およびＩＬ−８の測定を市
販のＥＬＩＳＡキット（例えば、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｍｉｎｎｅａｐｏｌ
ｉｓ，ＭＮ）を用い、そしてキットに提供される標準的プロトコルを適用して実
施する。
【０８０５】
（３．酸化的バースト（Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｂｕｒｓｔ）） 精製した単球
を９６ウェルプレートに２〜１×１０5細胞／ウェルでプレートする。ＭＥＴＨ
１および／またはＭＥＴＨ２の漸増濃度をウェルの総量０．２ｍｌの培養培地（
ＲＰＭＩ １６４０＋１０％ＦＣＳ、グルタミンおよび抗生物質）に添加する。
３日間のインキュベーション後、このプレートを遠心分離し、そして培地をウェ
ルから除く。マクロファージの単層に、１ウェルあたり０．２ｍｌのフェノール
レッド溶液（１４０ｍＭ ＮａＣｌ、１０ｍＭ リン酸カリウム緩衝液ｐＨ７．
０、５．５ｍＭデキストロース、０．５６ｍＭフェノールレッドおよび１９Ｕ／
ｍｌのＨＲＰＯ）を、刺激物質（２００ｎＭ ＰＭＡ）とともに添加する。この
プレートを３７℃で２時間インキュベートし、そして１ウェルあたり２０μｌの
１Ｎ ＮａＯＨを添加して反応を停止する。吸収を６１０ｎｍで読む。マクロフ
ァージにより産生されるＨ2Ｏ2の量を算出するため、既知のモル濃度のＨ2Ｏ2溶
液の標準曲線をそれぞれの実験について実施する。
を９６ウェルプレートに２〜１×１０5細胞／ウェルでプレートする。ＭＥＴＨ
１および／またはＭＥＴＨ２の漸増濃度をウェルの総量０．２ｍｌの培養培地（
ＲＰＭＩ １６４０＋１０％ＦＣＳ、グルタミンおよび抗生物質）に添加する。
３日間のインキュベーション後、このプレートを遠心分離し、そして培地をウェ
ルから除く。マクロファージの単層に、１ウェルあたり０．２ｍｌのフェノール
レッド溶液（１４０ｍＭ ＮａＣｌ、１０ｍＭ リン酸カリウム緩衝液ｐＨ７．
０、５．５ｍＭデキストロース、０．５６ｍＭフェノールレッドおよび１９Ｕ／
ｍｌのＨＲＰＯ）を、刺激物質（２００ｎＭ ＰＭＡ）とともに添加する。この
プレートを３７℃で２時間インキュベートし、そして１ウェルあたり２０μｌの
１Ｎ ＮａＯＨを添加して反応を停止する。吸収を６１０ｎｍで読む。マクロフ
ァージにより産生されるＨ2Ｏ2の量を算出するため、既知のモル濃度のＨ2Ｏ2溶
液の標準曲線をそれぞれの実験について実施する。
【０８０６】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タ
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２ポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしくは
ＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／またはアンタゴニストの活性の活性を試験する
ために、例示する研究を容易に改変し得る。
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２ポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしくは
ＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／またはアンタゴニストの活性の活性を試験する
ために、例示する研究を容易に改変し得る。
【０８０７】
（実施例３７：ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の生物学的効果）
（星状細胞および神経アッセイ）
上記のように、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉで発現され、そして精製さ
れた組換えＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を、皮質ニューロン細胞の生存
、神経突起成長または表現形分化を促進する活性について、およびグリア線維性
酸性タンパク質免疫陽性細胞、星状細胞の増殖の誘導について試験し得る。バイ
オアッセイのための皮質細胞の選択は、皮質構造中のＦＧＦ−１およびＦＧＦ−
２の広く行き渡っている発現、ならびにＦＧＦ−２処理から生じる皮質ニューロ
ン生存の以前に報告された増強に基づく。チミジン取り込みアッセイを用いて、
例えば、これらの細胞へのＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の活性を解明し
得る。
れた組換えＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を、皮質ニューロン細胞の生存
、神経突起成長または表現形分化を促進する活性について、およびグリア線維性
酸性タンパク質免疫陽性細胞、星状細胞の増殖の誘導について試験し得る。バイ
オアッセイのための皮質細胞の選択は、皮質構造中のＦＧＦ−１およびＦＧＦ−
２の広く行き渡っている発現、ならびにＦＧＦ−２処理から生じる皮質ニューロ
ン生存の以前に報告された増強に基づく。チミジン取り込みアッセイを用いて、
例えば、これらの細胞へのＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の活性を解明し
得る。
【０８０８】
さらに、インビトロにおける皮質ニューロンまたは海馬ニューロンへのＦＧＦ
−２（塩基性ＦＧＦ）の生物学的効果を記載する以前のレポートは、ニューロン
生存および神経突起成長の両方における増大を実証している（Ｗａｌｉｃｋｅら
、「Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｐｒｏｍｏｔｅｓ
ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ ｄｉｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ
ｎｅｕｒｏｎｓ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｎｅｕｒｉｔｅ ｅｘｔｅｎｓｉ
ｏｎ」Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８３：３０１２〜３０
１６（１９８６）、アッセイは、本明細書でその全体が参考として援用される）
。しかし、ＰＣ−１２細胞で実行される実験からの報告は、これらの２つの応答
が必ずしも同義でないこと、そしてどのＦＧＦを試験しいるかだけでなく、どの
レセプターが標的細胞で発現されているかにも依存し得ることを示唆する。神経
突起成長を誘導するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の能力を、一次の皮質
ニューロン培養パラダイムを用いて、例えば、チミジン取り込みアッセイを用い
てＦＧＦ−２で得られた応答と比較し得る。
−２（塩基性ＦＧＦ）の生物学的効果を記載する以前のレポートは、ニューロン
生存および神経突起成長の両方における増大を実証している（Ｗａｌｉｃｋｅら
、「Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｐｒｏｍｏｔｅｓ
ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ ｄｉｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ
ｎｅｕｒｏｎｓ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｎｅｕｒｉｔｅ ｅｘｔｅｎｓｉ
ｏｎ」Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８３：３０１２〜３０
１６（１９８６）、アッセイは、本明細書でその全体が参考として援用される）
。しかし、ＰＣ−１２細胞で実行される実験からの報告は、これらの２つの応答
が必ずしも同義でないこと、そしてどのＦＧＦを試験しいるかだけでなく、どの
レセプターが標的細胞で発現されているかにも依存し得ることを示唆する。神経
突起成長を誘導するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の能力を、一次の皮質
ニューロン培養パラダイムを用いて、例えば、チミジン取り込みアッセイを用い
てＦＧＦ−２で得られた応答と比較し得る。
【０８０９】
（線維芽細胞および内皮細胞アッセイ）
ヒト肺線維芽細胞をＣｌｏｎｅｔｉｃｓ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）から入
手し、そしてＣｌｏｎｅｔｉｃｓからの増殖培地で維持する。真皮性微小血管内
皮細胞をＣｅｌｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）か
ら得る。増殖アッセイについては、ヒト肺線維芽細胞および真皮性微小血管内皮
細胞を、９６ウェルプレートの増殖培地中で１日間、５，０００細胞／ウェルで
培養し得る。次いでこの細胞を０．１％ＢＳＡ基礎培地中で１日間インキュベー
トする。新鮮な０．１％ＢＳＡ培地で培地を置換した後、細胞を試験タンパク質
と３日間インキュベートする。Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ（Ａｌｍａｒ Ｂｉｏｓ
ｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｃｒａｍｅｎｔｏ，ＣＡ）を１０％の最終濃度になるよう
に各ウェルに添加する。この細胞を４時間インキュベートする。細胞生存度をＣ
ｙｔｏＦｌｕｏｒ蛍光リーダーでの読取りにより測定する。ＰＧＥ2アッセイに
ついては、ヒト肺線維芽細胞を、９６ウェルプレート中で１日間、５，０００細
胞／ウェルで培養する。０．１％ＢＳＡ基礎培地に培地を変換した後、細胞をＩ
Ｌ−１αとともに、またはそれをともなわずに、ＦＧＦ−２またはＭＥＴＨ１お
よび／またはＭＥＴＨ２と２４時間インキュベートする。上清を収集し、そして
ＥＩＡキット（Ｃａｙｍａｎ，Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ，ＭＩ）によりＰＧＥ2につ
いてアッセイする。ＩＬ−６アッセイについては、ヒト肺線維芽細胞を、９６ウ
ェルプレート中で１日間、５，０００細胞／ウェルで培養する。０．１％ＢＳＡ
基礎培地に培地を変換した後、細胞をＩＬ−１αとともに、またはそれをともな
わずに、ＦＧＦ−２またはＭＥＴＨ１および／もしくはＭＥＴＨ２と２４時間イ
ンキュベートする。上清を収集し、そしてＥＬＩＳＡキット（Ｅｎｄｏｇｅｎ，
Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）によりＩＬ−６についてアッセイする。
手し、そしてＣｌｏｎｅｔｉｃｓからの増殖培地で維持する。真皮性微小血管内
皮細胞をＣｅｌｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）か
ら得る。増殖アッセイについては、ヒト肺線維芽細胞および真皮性微小血管内皮
細胞を、９６ウェルプレートの増殖培地中で１日間、５，０００細胞／ウェルで
培養し得る。次いでこの細胞を０．１％ＢＳＡ基礎培地中で１日間インキュベー
トする。新鮮な０．１％ＢＳＡ培地で培地を置換した後、細胞を試験タンパク質
と３日間インキュベートする。Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ（Ａｌｍａｒ Ｂｉｏｓ
ｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｃｒａｍｅｎｔｏ，ＣＡ）を１０％の最終濃度になるよう
に各ウェルに添加する。この細胞を４時間インキュベートする。細胞生存度をＣ
ｙｔｏＦｌｕｏｒ蛍光リーダーでの読取りにより測定する。ＰＧＥ2アッセイに
ついては、ヒト肺線維芽細胞を、９６ウェルプレート中で１日間、５，０００細
胞／ウェルで培養する。０．１％ＢＳＡ基礎培地に培地を変換した後、細胞をＩ
Ｌ−１αとともに、またはそれをともなわずに、ＦＧＦ−２またはＭＥＴＨ１お
よび／またはＭＥＴＨ２と２４時間インキュベートする。上清を収集し、そして
ＥＩＡキット（Ｃａｙｍａｎ，Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ，ＭＩ）によりＰＧＥ2につ
いてアッセイする。ＩＬ−６アッセイについては、ヒト肺線維芽細胞を、９６ウ
ェルプレート中で１日間、５，０００細胞／ウェルで培養する。０．１％ＢＳＡ
基礎培地に培地を変換した後、細胞をＩＬ−１αとともに、またはそれをともな
わずに、ＦＧＦ−２またはＭＥＴＨ１および／もしくはＭＥＴＨ２と２４時間イ
ンキュベートする。上清を収集し、そしてＥＬＩＳＡキット（Ｅｎｄｏｇｅｎ，
Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）によりＩＬ−６についてアッセイする。
【０８１０】
ヒト肺線維芽細胞をＦＧＦ−２またはＭＥＴＨ１および／もしくはＭＥＴＨ２
とともに基礎培地中で３日間培養し、その後、線維芽細胞の増殖への効果を評価
するためＡｌａｍａｒ Ｂｌｕｅを添加する。ＦＧＦ−２は、ＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２での刺激に匹敵して用いられ得る１０〜２５００ｎｇ／ｍｌ
の刺激を示すはずである。
とともに基礎培地中で３日間培養し、その後、線維芽細胞の増殖への効果を評価
するためＡｌａｍａｒ Ｂｌｕｅを添加する。ＦＧＦ−２は、ＭＥＴＨ１および
／またはＭＥＴＨ２での刺激に匹敵して用いられ得る１０〜２５００ｎｇ／ｍｌ
の刺激を示すはずである。
【０８１１】
（パーキンソンモデル）
パーキンソン病における運動機能の喪失は、黒質線条体のドーパミン作動性投
射ニューロンの変性から生じる線条体ドーパミンの欠乏に起因する。広範に特徴
付けされたパーキンソン病の動物モデルは、１−メチル−４フェニル１，２，３
，６−テトラヒドロピリジン（ＭＰＴＰ）の全身投与を含む。ＣＮＳにおいて、
ＭＰＴＰは、星状細胞に取り込まれ、そしてモノアミンオキシダーゼＢにより１
−メチル−４−フェニルピリジン（ＭＰＰ+）に異化され、そして放出される。
引き続き、ＭＰＰ+は、ドーパミンの高親和性再取り込みトランスポーターによ
りドーパミン作動性ニューロンに能動的に蓄積する。次いで、ＭＰＰ+は、電気
化学勾配によりミトコンドリア中で濃縮され、そしてニコチン酸アミド二リン酸
：ユビキノン酸化還元酵素（複合体Ｉ）を選択的に阻害し、これにより電子伝達
を妨害し、そして最終的に活性酸素を生成する。
射ニューロンの変性から生じる線条体ドーパミンの欠乏に起因する。広範に特徴
付けされたパーキンソン病の動物モデルは、１−メチル−４フェニル１，２，３
，６−テトラヒドロピリジン（ＭＰＴＰ）の全身投与を含む。ＣＮＳにおいて、
ＭＰＴＰは、星状細胞に取り込まれ、そしてモノアミンオキシダーゼＢにより１
−メチル−４−フェニルピリジン（ＭＰＰ+）に異化され、そして放出される。
引き続き、ＭＰＰ+は、ドーパミンの高親和性再取り込みトランスポーターによ
りドーパミン作動性ニューロンに能動的に蓄積する。次いで、ＭＰＰ+は、電気
化学勾配によりミトコンドリア中で濃縮され、そしてニコチン酸アミド二リン酸
：ユビキノン酸化還元酵素（複合体Ｉ）を選択的に阻害し、これにより電子伝達
を妨害し、そして最終的に活性酸素を生成する。
【０８１２】
ＦＧＦ−２（塩基性ＦＧＦ）が黒質のドーパミン作動性ニューロンへの栄養活
性を有することが組織培養パラダイムにおいて実証されている（Ｆｅｒｒａｒｉ
ら、Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．１９８９）。近年、Ｕｎｓｉｃｋｅｒ博士のグループは
、線条体のゲル型インプラントでのＦＧＦ−２投与がＭＰＴＰ曝露と関連する毒
性から黒質のドーパミン作動性ニューロンのほぼ完全な防御を生じることを実証
している（ＯｔｔｏおよびＵｎｓｉｃｋｅｒ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，
１９９０）。
性を有することが組織培養パラダイムにおいて実証されている（Ｆｅｒｒａｒｉ
ら、Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．１９８９）。近年、Ｕｎｓｉｃｋｅｒ博士のグループは
、線条体のゲル型インプラントでのＦＧＦ−２投与がＭＰＴＰ曝露と関連する毒
性から黒質のドーパミン作動性ニューロンのほぼ完全な防御を生じることを実証
している（ＯｔｔｏおよびＵｎｓｉｃｋｅｒ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，
１９９０）。
【０８１３】
ＦＧＦ−２を用いたデータに基づいて、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２
は、インビトロにおけるドーパミン作動性ニューロン生存を増強する際において
、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２がＦＧＦ−２の作用と類似の作用を有す
るか否かを決定するために評価され得、そして、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２はまた、線条体におけるドーパミン作動性ニューロンを、ＭＰＴＰ処理と
関連する損傷からの防御についてインビボで試験され得る。ＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２の潜在的効果を、まずドーパミン性ニューロン細胞培養パラダ
イムにおいてインビトロで試験する。妊娠１４日のＷｉｓｔａｒラット胚由来の
中脳底板を解剖することにより、培養物を調製する。組織をトリプシンで分離し
、そしてポリオルチニン−ラミニンでコートしたカバーガラスに２００，０００
細胞／ｃｍ2の密度で播いた。この細胞をダルベッコ改変イーグル培地およびホ
ルモン補充物（ＮＩ）を含有するＦ１２培地中で維持する。インビトロで８日後
培養物をパラホルムアミドで固定し、そしてチロシンヒドロキシラーゼ（ドーパ
ミン作動性ニューロンについての特異的マーカー）での免疫組織化学染色のため
に処理する。分離した細胞培養物を胚性ラットから調製する。培養培地を３日ご
とに変化させ、そしてこの因子をまたその時点ごとに添加する。ドーパミン作動
性ニューロンを妊娠１４日（この発生時間は、ドーパミン作動性前駆細胞が増殖
する段階を過ぎる）で動物から単離するので、チロシンヒドロキシラーゼ免疫陽
性ニューロンの数の増加は、インビトロで生存しているドーパミン作動性ニュー
ロンの数の増加を示す。従って、もしＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２がド
ーパミン作動性の生存を延長するように作用するならば、ＭＥＴＨ１および／ま
たはＭＥＴＨ２がパーキンソン病に関与し得ることを示唆する。
は、インビトロにおけるドーパミン作動性ニューロン生存を増強する際において
、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２がＦＧＦ−２の作用と類似の作用を有す
るか否かを決定するために評価され得、そして、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２はまた、線条体におけるドーパミン作動性ニューロンを、ＭＰＴＰ処理と
関連する損傷からの防御についてインビボで試験され得る。ＭＥＴＨ１および／
またはＭＥＴＨ２の潜在的効果を、まずドーパミン性ニューロン細胞培養パラダ
イムにおいてインビトロで試験する。妊娠１４日のＷｉｓｔａｒラット胚由来の
中脳底板を解剖することにより、培養物を調製する。組織をトリプシンで分離し
、そしてポリオルチニン−ラミニンでコートしたカバーガラスに２００，０００
細胞／ｃｍ2の密度で播いた。この細胞をダルベッコ改変イーグル培地およびホ
ルモン補充物（ＮＩ）を含有するＦ１２培地中で維持する。インビトロで８日後
培養物をパラホルムアミドで固定し、そしてチロシンヒドロキシラーゼ（ドーパ
ミン作動性ニューロンについての特異的マーカー）での免疫組織化学染色のため
に処理する。分離した細胞培養物を胚性ラットから調製する。培養培地を３日ご
とに変化させ、そしてこの因子をまたその時点ごとに添加する。ドーパミン作動
性ニューロンを妊娠１４日（この発生時間は、ドーパミン作動性前駆細胞が増殖
する段階を過ぎる）で動物から単離するので、チロシンヒドロキシラーゼ免疫陽
性ニューロンの数の増加は、インビトロで生存しているドーパミン作動性ニュー
ロンの数の増加を示す。従って、もしＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２がド
ーパミン作動性の生存を延長するように作用するならば、ＭＥＴＨ１および／ま
たはＭＥＴＨ２がパーキンソン病に関与し得ることを示唆する。
【０８１４】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タ
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２ポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭ
ＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストの活性を試験するために、例示す
る研究を容易に改変し得る。
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２ポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭ
ＥＴＨ２のアゴニストもしくはアンタゴニストの活性を試験するために、例示す
る研究を容易に改変し得る。
【０８１５】
（実施例３８：血管内皮細胞の増殖に対するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴ
Ｈ２の効果） １日目に、ヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）を、４％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ
）、１６ユニット／ｍｌ ヘパリン、および５０ユニット／ｍｌ 内皮細胞増殖
補充物（ＥＣＧＳ、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，Ｉｎｃ．）を含有するＭ１９９
培地中で、３５ｍｍシャーレあたり２〜５×１０4細胞の密度で播種する。２日
目、この培地を、１０％ＦＢＳ、８ユニット／ｍｌヘパリンを含有するＭ１９９
で置換する。配列番号２のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質およ
び陽性コントロール（例えば、ＶＥＧＦおよび塩基性ＦＧＦ（ｂＦＧＦ））を種
々の濃度で添加する。４日目および６日目に、培地を交換する。８日目、Ｃｏｕ
ｌｔｅｒ Ｃｏｕｎｔｅｒを用いて細胞数を決定する。
Ｈ２の効果） １日目に、ヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）を、４％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ
）、１６ユニット／ｍｌ ヘパリン、および５０ユニット／ｍｌ 内皮細胞増殖
補充物（ＥＣＧＳ、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，Ｉｎｃ．）を含有するＭ１９９
培地中で、３５ｍｍシャーレあたり２〜５×１０4細胞の密度で播種する。２日
目、この培地を、１０％ＦＢＳ、８ユニット／ｍｌヘパリンを含有するＭ１９９
で置換する。配列番号２のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タンパク質およ
び陽性コントロール（例えば、ＶＥＧＦおよび塩基性ＦＧＦ（ｂＦＧＦ））を種
々の濃度で添加する。４日目および６日目に、培地を交換する。８日目、Ｃｏｕ
ｌｔｅｒ Ｃｏｕｎｔｅｒを用いて細胞数を決定する。
【０８１６】
ＨＵＶＥＣ細胞数の増加は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２が血管内皮
細胞を増殖し得ることを示す。
細胞を増殖し得ることを示す。
【０８１７】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タ
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしく
はＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／またはアンタゴニストの活性を試験するため
に、例示する研究を容易に改変し得る。
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしく
はＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／またはアンタゴニストの活性を試験するため
に、例示する研究を容易に改変し得る。
【０８１８】
（実施例３９：血管内皮細胞の増殖に対するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴ
Ｈ２の刺激効果） 増殖因子の分裂促進活性の評価のために、電子共役試薬ＰＭＳ（フェナジンメ
トサルフェート）を用いる、比色分析ＭＴＳ（３−（４，５−ジメチルチアゾー
ル−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルフ
ォフェニル）２Ｈ−テトラゾリウム）アッセイを実行した（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ
９６ ＡＱ，Ｐｒｏｍｅｇａ）。細胞を０．１ｍＬの血清補充培地中で９６ウ
ェルプレートに播種し（５，０００細胞／ウェル）、そして一晩付着させる。０
．５％ＦＢＳ中、１２時間の血清飢餓後、Ｈｅｐａｒｉｎ（８Ｕ／ｍｌ）を伴う
かまたは伴わない、条件（ｂＦＧＦ、ＶＥＧＦ165または０．５％ＦＢＳ中のＭ
ＥＴＨ１および／もしくはＭＥＴＨ２）をウェルに４８時間添加する。２０ｍｇ
のＭＴＳ／ＰＭＳ混合物（１：０．０５）を１ウェルあたりに添加し、そして３
７℃で１時間インキュベートさせ、その後ＥＬＩＳＡプレートリーダーで４９０
ｎｍの吸光度を測定する。コントロールウェル（培地あり、細胞なし）のバック
グラウンドの吸光度を差し引きし、そしてそれぞれの条件について７つのウェル
を並行して実施する。Ｌｅａｋら、Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｃｅｌｌ．Ｄｅｖ．Ｂｉ
ｏｌ．３０Ａ：５１２〜５１８（１９９４）を参照のこと。
Ｈ２の刺激効果） 増殖因子の分裂促進活性の評価のために、電子共役試薬ＰＭＳ（フェナジンメ
トサルフェート）を用いる、比色分析ＭＴＳ（３−（４，５−ジメチルチアゾー
ル−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルフ
ォフェニル）２Ｈ−テトラゾリウム）アッセイを実行した（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ
９６ ＡＱ，Ｐｒｏｍｅｇａ）。細胞を０．１ｍＬの血清補充培地中で９６ウ
ェルプレートに播種し（５，０００細胞／ウェル）、そして一晩付着させる。０
．５％ＦＢＳ中、１２時間の血清飢餓後、Ｈｅｐａｒｉｎ（８Ｕ／ｍｌ）を伴う
かまたは伴わない、条件（ｂＦＧＦ、ＶＥＧＦ165または０．５％ＦＢＳ中のＭ
ＥＴＨ１および／もしくはＭＥＴＨ２）をウェルに４８時間添加する。２０ｍｇ
のＭＴＳ／ＰＭＳ混合物（１：０．０５）を１ウェルあたりに添加し、そして３
７℃で１時間インキュベートさせ、その後ＥＬＩＳＡプレートリーダーで４９０
ｎｍの吸光度を測定する。コントロールウェル（培地あり、細胞なし）のバック
グラウンドの吸光度を差し引きし、そしてそれぞれの条件について７つのウェル
を並行して実施する。Ｌｅａｋら、Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｃｅｌｌ．Ｄｅｖ．Ｂｉ
ｏｌ．３０Ａ：５１２〜５１８（１９９４）を参照のこと。
【０８１９】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タ
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしく
はＭＥＴＨ２のアゴニスト、および／またはアンタゴニストの活性を試験するた
めに、例示する研究を容易に改変し得る。
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしく
はＭＥＴＨ２のアゴニスト、および／またはアンタゴニストの活性を試験するた
めに、例示する研究を容易に改変し得る。
【０８２０】
（実施例４０：ＰＤＧＦ誘導性血管平滑筋細胞増殖刺激効果の阻害）
ＨＡｏＳＭＣ増殖を、例えば、ＢｒｄＵｒｄ組み込みにより測定し得る。手短
には、４チャンバスライド上で増殖するコンフルエント未満の静止期細胞を、Ｃ
ＲＰまたはＦＩＴＣ標識化ＡＴ２−３ＬＰでトランスフェクトする。次いで、こ
の細胞に１０％ウシ血清および６ｍｇ／ｍｌのＢｒｄＵｒｄをパルスする。２４
時間後、ＢｒｄＵｒｄ染色キット（Ｚｙｍｅｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を
用いることにより免疫細胞化学を実施する。簡略には、この細胞を、変性溶液へ
の曝露後、ビオチン化マウス抗−ＢｒｄＵｒｄ抗体と４℃で２時間インキュベー
トし、次いでストレプトアビジン−ペルオキシダーゼおよびジアミノベンジジン
とともにインキュベートする。ヘマトキシリンでの対比染色後、この細胞を顕微
鏡試験のために標本にし、そしてＢｒｄ Ｕｒｄ−陽性細胞を計数する。Ｂｒｄ
Ｕｒｄ係数は、総細胞数に対するＢｒｄＵｒｄ−陽性細胞の割合として計算され
る。さらに、個々の細胞について、明野照明および暗野ＵＶ蛍光照明の同時使用
により、ＢｒｄＵｒｄ染色（核）およびＦＩＴＣ取り込み（細胞質）の同時検出
を実行する。Ｈａｙａｓｈｉｄａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．６：２７１（３
６）：２１９８５〜２１９９２（１９９６）を参照のこと。
には、４チャンバスライド上で増殖するコンフルエント未満の静止期細胞を、Ｃ
ＲＰまたはＦＩＴＣ標識化ＡＴ２−３ＬＰでトランスフェクトする。次いで、こ
の細胞に１０％ウシ血清および６ｍｇ／ｍｌのＢｒｄＵｒｄをパルスする。２４
時間後、ＢｒｄＵｒｄ染色キット（Ｚｙｍｅｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を
用いることにより免疫細胞化学を実施する。簡略には、この細胞を、変性溶液へ
の曝露後、ビオチン化マウス抗−ＢｒｄＵｒｄ抗体と４℃で２時間インキュベー
トし、次いでストレプトアビジン−ペルオキシダーゼおよびジアミノベンジジン
とともにインキュベートする。ヘマトキシリンでの対比染色後、この細胞を顕微
鏡試験のために標本にし、そしてＢｒｄ Ｕｒｄ−陽性細胞を計数する。Ｂｒｄ
Ｕｒｄ係数は、総細胞数に対するＢｒｄＵｒｄ−陽性細胞の割合として計算され
る。さらに、個々の細胞について、明野照明および暗野ＵＶ蛍光照明の同時使用
により、ＢｒｄＵｒｄ染色（核）およびＦＩＴＣ取り込み（細胞質）の同時検出
を実行する。Ｈａｙａｓｈｉｄａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．６：２７１（３
６）：２１９８５〜２１９９２（１９９６）を参照のこと。
【０８２１】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タ
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしく
はＭＥＴＨ２のアゴニスト、および／またはアンタゴニストの活性を試験するた
めに、例示する研究を容易に改変し得る。
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしく
はＭＥＴＨ２のアゴニスト、および／またはアンタゴニストの活性を試験するた
めに、例示する研究を容易に改変し得る。
【０８２２】
（実施例４１：内皮遊走の刺激）
本実施例は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２がリンパ性の内皮細胞遊走
を刺激し得る可能性を探索するために用いられる。
を刺激し得る可能性を探索するために用いられる。
【０８２３】
内皮細胞遊走アッセイは、４８ウェルの微小走化性チャンバを用いて実行され
る（Ｎｅｕｒｏｐｒｏｂｅ Ｉｎｃ．，Ｃａｂｉｎ Ｊｏｈｎ，ＭＤ；Ｆａｌｋ
，Ｗら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ １９８０；３３：
２３９〜２４７）。ポリビニルピロリドンを含まないポリカーボネートフィルタ
ー（これは８μｍの孔径を備える）（Ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｅ Ｃｏｒｐ．Ｃａｍ
ｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）を室温で少なくとも６時間０．１％ゼラチンでコートし、
そして滅菌空気のもとで乾燥する。０．２５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を
補充したＭ１９９中で試験物質を適切な濃度に希釈し、そして２５μｌの最終希
釈を改変Ｂｏｙｄｅｎ装置の底部チャンバに置く。コンフルエント未満の、早期
継代（２〜６）のＨＵＶＥＣまたはＢＭＥＣ培養物を洗浄し、そして細胞の脱離
に必要な最小の時間トリプシン処理する。底部チャンバと上部チャンバとの間の
フィルターを配置した後、１％ＦＢＳを含有する５０μｌ Ｍ１９９中に懸濁し
た２．５×１０5細胞を上部コンパートメントに播種する。次いでこの装置を、
５％ＣＯ２を用いて湿潤にしたチャンバ中で３７℃で５時間インキュベートして
細胞を遊走させた。インキュベーション期間後、このフィルターを取り出し、そ
して非遊走細胞を有するフィルターの上部側をゴム性のポリスマン（ｐｏｌｉｃ
ｅｍａｎ）でかきとる。このフィルターをメタノールで固定し、そしてＧｉｅｍ
ｓａ溶液で染色する（Ｄｉｆｆ−Ｑｕｉｃｋ，Ｂａｘｔｅｒ，ＭｃＧｒａｗ Ｐ
ａｒｋ，ＩＬ）。遊走は、それぞれのウェルにおいて、３つの無作為の高出力視
野（４０×）の細胞を計数することにより定量する。そしてすべての群を４連で
実行する。
る（Ｎｅｕｒｏｐｒｏｂｅ Ｉｎｃ．，Ｃａｂｉｎ Ｊｏｈｎ，ＭＤ；Ｆａｌｋ
，Ｗら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ １９８０；３３：
２３９〜２４７）。ポリビニルピロリドンを含まないポリカーボネートフィルタ
ー（これは８μｍの孔径を備える）（Ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｅ Ｃｏｒｐ．Ｃａｍ
ｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）を室温で少なくとも６時間０．１％ゼラチンでコートし、
そして滅菌空気のもとで乾燥する。０．２５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を
補充したＭ１９９中で試験物質を適切な濃度に希釈し、そして２５μｌの最終希
釈を改変Ｂｏｙｄｅｎ装置の底部チャンバに置く。コンフルエント未満の、早期
継代（２〜６）のＨＵＶＥＣまたはＢＭＥＣ培養物を洗浄し、そして細胞の脱離
に必要な最小の時間トリプシン処理する。底部チャンバと上部チャンバとの間の
フィルターを配置した後、１％ＦＢＳを含有する５０μｌ Ｍ１９９中に懸濁し
た２．５×１０5細胞を上部コンパートメントに播種する。次いでこの装置を、
５％ＣＯ２を用いて湿潤にしたチャンバ中で３７℃で５時間インキュベートして
細胞を遊走させた。インキュベーション期間後、このフィルターを取り出し、そ
して非遊走細胞を有するフィルターの上部側をゴム性のポリスマン（ｐｏｌｉｃ
ｅｍａｎ）でかきとる。このフィルターをメタノールで固定し、そしてＧｉｅｍ
ｓａ溶液で染色する（Ｄｉｆｆ−Ｑｕｉｃｋ，Ｂａｘｔｅｒ，ＭｃＧｒａｗ Ｐ
ａｒｋ，ＩＬ）。遊走は、それぞれのウェルにおいて、３つの無作為の高出力視
野（４０×）の細胞を計数することにより定量する。そしてすべての群を４連で
実行する。
【０８２４】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タ
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしく
はＭＥＴＨ２のアゴニスト、および／またはアンタゴニストの活性を試験するた
めに、例示する研究を容易に改変し得る。
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしく
はＭＥＴＨ２のアゴニスト、および／またはアンタゴニストの活性を試験するた
めに、例示する研究を容易に改変し得る。
【０８２５】
（実施例４２：内皮細胞による一酸化窒素産生の刺激）
血管内皮による一酸化窒素の放出は、血管内皮弛緩の介在物質であると考えら
れる。従って、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の活性は、ＭＥＴＨ１およ
び／またはＭＥＴＨ２に応答する内皮細胞による一酸化窒素産生を測定すること
によってアッセイされ得る。
れる。従って、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の活性は、ＭＥＴＨ１およ
び／またはＭＥＴＨ２に応答する内皮細胞による一酸化窒素産生を測定すること
によってアッセイされ得る。
【０８２６】
一酸化窒素を、２４時間の飢餓、次いで、様々なレベルの陽性コントロール（
例えば、ＶＥＧＦ−１）およびＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２への４時間
の曝露の後のコンフルエントな微小血管内皮細胞の９６ウェルプレート中で測定
する。培地中の一酸化窒素を、Ｇｒｉｅｓｓ試薬の使用により決定して、硝酸還
元酵素による一酸化硝酸由来の硝酸の還元後の亜硝酸の総量を測定する。一酸化
窒素放出の際のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の効果を、ＨＵＶＥＣにお
いて試験する。
例えば、ＶＥＧＦ−１）およびＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２への４時間
の曝露の後のコンフルエントな微小血管内皮細胞の９６ウェルプレート中で測定
する。培地中の一酸化窒素を、Ｇｒｉｅｓｓ試薬の使用により決定して、硝酸還
元酵素による一酸化硝酸由来の硝酸の還元後の亜硝酸の総量を測定する。一酸化
窒素放出の際のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の効果を、ＨＵＶＥＣにお
いて試験する。
【０８２７】
簡単には、培養したＨＵＶＥＣ単層からのＮＯ放出は、ＮＯメーター（Ｉｓｏ
−ＮＯ，Ｗｏｒｌｄ Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．
）（１０４９）に接続したＮＯ特異的なポーラログラフ電極を用いて測定する。
ＮＯエレメントの較正を、以下の式に従って行う： ２ＫＮＯ2＋２ＫＩ＋２Ｈ2ＳＯ4６２ＮＯ＋Ｉ2＋２Ｈ2Ｏ＋Ｋ2ＳＯ4 検量線を、ＫＩおよびＨ2ＳＯ4を含む較正溶液中に段階的な濃度のＫＮＯ2（
０、５、１０、２５、５０、１００、２５０、および５００ｎｍｏｌ／Ｌ）を添
加することによって得る。ＮＯに対するＩｓｏ−ＮＯ電極の特異性を、オーセン
ティックなＮＯ気体からのＮＯを測定することにより、事前に決定する（１０５
０）。この培養培地を取り除き、そしてＨＵＶＥＣを、Ｄｕｌｂｅｃｃｏリン酸
緩衝化生理食塩水で２回洗浄する。次いで、細胞を、６ウェルプレート中で５ｍ
ｌのろ過したＫｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ溶液に浸し、そしてこの細胞プレ
ートを、３７℃に温度を維持するために、スライドウォーマー（Ｌａｂ Ｌｉｎ
ｅ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．）で保持する。ＮＯセンサープローブを
ウェルに垂直に挿入して、異なる条件の追加の前に、電極の先端を溶液の表面の
２ｍｍ下で保持する。Ｓ−ニトロソアセチルペニシラミン（ＳＮＡＰ）を、陽性
コントロールとして用いる。放出したＮＯの量を、１×１０6内皮細胞あたりの
ピコモル濃度として表す。全ての報告した値は、各群（細胞培養ウェルの数）に
おける４〜６の測定値の平均である。Ｌｅａｋら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．ａｎｄ Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２１７：９６−１０５（１９９５）を参照の
こと。
−ＮＯ，Ｗｏｒｌｄ Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．
）（１０４９）に接続したＮＯ特異的なポーラログラフ電極を用いて測定する。
ＮＯエレメントの較正を、以下の式に従って行う： ２ＫＮＯ2＋２ＫＩ＋２Ｈ2ＳＯ4６２ＮＯ＋Ｉ2＋２Ｈ2Ｏ＋Ｋ2ＳＯ4 検量線を、ＫＩおよびＨ2ＳＯ4を含む較正溶液中に段階的な濃度のＫＮＯ2（
０、５、１０、２５、５０、１００、２５０、および５００ｎｍｏｌ／Ｌ）を添
加することによって得る。ＮＯに対するＩｓｏ−ＮＯ電極の特異性を、オーセン
ティックなＮＯ気体からのＮＯを測定することにより、事前に決定する（１０５
０）。この培養培地を取り除き、そしてＨＵＶＥＣを、Ｄｕｌｂｅｃｃｏリン酸
緩衝化生理食塩水で２回洗浄する。次いで、細胞を、６ウェルプレート中で５ｍ
ｌのろ過したＫｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ溶液に浸し、そしてこの細胞プレ
ートを、３７℃に温度を維持するために、スライドウォーマー（Ｌａｂ Ｌｉｎ
ｅ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．）で保持する。ＮＯセンサープローブを
ウェルに垂直に挿入して、異なる条件の追加の前に、電極の先端を溶液の表面の
２ｍｍ下で保持する。Ｓ−ニトロソアセチルペニシラミン（ＳＮＡＰ）を、陽性
コントロールとして用いる。放出したＮＯの量を、１×１０6内皮細胞あたりの
ピコモル濃度として表す。全ての報告した値は、各群（細胞培養ウェルの数）に
おける４〜６の測定値の平均である。Ｌｅａｋら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．ａｎｄ Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２１７：９６−１０５（１９９５）を参照の
こと。
【０８２８】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タ
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしく
はＭＥＴＨ２のアゴニスト、および／またはアンタゴニストの活性を試験するた
めに、例示する研究を容易に改変し得る。
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしく
はＭＥＴＨ２のアゴニスト、および／またはアンタゴニストの活性を試験するた
めに、例示する研究を容易に改変し得る。
【０８２９】
（実施例４３：新脈管形成における索形成に対するＭＥＴＨ１および／または
ＭＥＴＨ２の効果） 新脈管形成における別の工程は、内皮細胞の分化により特徴付けられる索（ｃ
ｏｒｄ）形成である。このバイオアッセイは、インビトロで培養した場合の微小
血管内皮細胞の毛細管様構造（中空構造）を形成する能力を測定する。
ＭＥＴＨ２の効果） 新脈管形成における別の工程は、内皮細胞の分化により特徴付けられる索（ｃ
ｏｒｄ）形成である。このバイオアッセイは、インビトロで培養した場合の微小
血管内皮細胞の毛細管様構造（中空構造）を形成する能力を測定する。
【０８３０】
ＣＡＤＭＥＣ（微小血管内皮細胞）を、増殖細胞（２継代）としてＣｅｌｌ
Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ Ｉｎｃ．から購入し、Ｃｅｌｌ Ａｐｐｌｉｃａｔ
ｉｏｎｓ’ＣＡＤＭＥＣ Ｇｒｏｗｔｈ Ｍｅｄｉｕｍ中で培養し、そして５継
代で使用する。インビトロ新脈管形成アッセイのために、４８ウェル細胞培養プ
レートのウェルをＣｅｌｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ’Ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ
Ｆａｃｔｏｒ Ｍｅｄｉｕｍ（２００ｍｌ／ウェル）を用いて、３７℃にて３
０分間コートする。ＣＡＤＭＥＣを、７，５００細胞／ウェルでコートしたウェ
ルに播種し、Ｇｒｏｗｔｈ Ｍｅｄｉｕｍ中で一晩培養する。次いで、このＧｒ
ｏｗｔｈ Ｍｅｄｉｕｍを、コントロール緩衝液またはＭＥＴＨ１および／また
はＭＥＴＨ２（０．１〜１００ｎｇ／ｍｌ）を含む３００ｍｇのＣｅｌｌ Ａｐ
ｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ’Ｃｈｏｒｄ Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉｕｍと交換
し、そしてこの細胞をさらに４８時間培養する。毛細管様索の数および長さを、
Ｂｏｅｃｋｅｌｅｒ ＶＩＡ−１７０ビデオ画像分析装置の使用を通じて定量す
る。全てのアッセイを三連で行った。
Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ Ｉｎｃ．から購入し、Ｃｅｌｌ Ａｐｐｌｉｃａｔ
ｉｏｎｓ’ＣＡＤＭＥＣ Ｇｒｏｗｔｈ Ｍｅｄｉｕｍ中で培養し、そして５継
代で使用する。インビトロ新脈管形成アッセイのために、４８ウェル細胞培養プ
レートのウェルをＣｅｌｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ’Ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ
Ｆａｃｔｏｒ Ｍｅｄｉｕｍ（２００ｍｌ／ウェル）を用いて、３７℃にて３
０分間コートする。ＣＡＤＭＥＣを、７，５００細胞／ウェルでコートしたウェ
ルに播種し、Ｇｒｏｗｔｈ Ｍｅｄｉｕｍ中で一晩培養する。次いで、このＧｒ
ｏｗｔｈ Ｍｅｄｉｕｍを、コントロール緩衝液またはＭＥＴＨ１および／また
はＭＥＴＨ２（０．１〜１００ｎｇ／ｍｌ）を含む３００ｍｇのＣｅｌｌ Ａｐ
ｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ’Ｃｈｏｒｄ Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉｕｍと交換
し、そしてこの細胞をさらに４８時間培養する。毛細管様索の数および長さを、
Ｂｏｅｃｋｅｌｅｒ ＶＩＡ−１７０ビデオ画像分析装置の使用を通じて定量す
る。全てのアッセイを三連で行った。
【０８３１】
市販の（Ｒ＆Ｄ）ＶＥＧＦ（５０ｎｇ／ｍｌ）を、陽性コントロールとして用
いる。ｂ−エストラジオール（１ｎｇ／ｍｌ）を、陰性コントロールとして用い
る。適切な緩衝液（タンパク質なし）もまた、コントロールとして利用する。
いる。ｂ−エストラジオール（１ｎｇ／ｍｌ）を、陰性コントロールとして用い
る。適切な緩衝液（タンパク質なし）もまた、コントロールとして利用する。
【０８３２】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２タ
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしく
はＭＥＴＨ２のアゴニスト、および／またはアンタゴニストの活性を試験するた
めに、例示する研究を容易に改変し得る。
ンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／もしく
はＭＥＴＨ２のアゴニスト、および／またはアンタゴニストの活性を試験するた
めに、例示する研究を容易に改変し得る。
【０８３３】
（実施例４４：ウサギ下肢モデルにおける虚血のレスキュー）
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の虚血に対するインビボでの効果を研究
するため、ウサギ後肢虚血モデルを、以前に記載される（Ｔａｋｅｓｈｉｔａ，
Ｓ．ら、Ａｍ Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ １４７：１６４９−１６６０（１９９５））
ように１つの大腿動脈の外科的除去により作製する。大腿動脈の切除は、血栓の
逆行性伝播および外腸骨動脈の閉塞を生じる。結果として、虚血肢への血流は、
内腸骨動脈から生じる側副血管に依存する（Ｔａｋｅｓｈｉｔａ，Ｓ．ら、Ａｍ
Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ １４７：１６４９−１６６０（１９９５））。１０日の間
隔で、ウサギの手術後の回復および内因性の側副血管の発達を可能にする。手術
（０日）後１０日目に、ベースライン血管造影を行った後、虚血肢の内腸骨動脈
を、５００ｍｇの裸のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の発現プラスミドを
用いて、（Ｒｉｅｓｓｅｎ，Ｒ．ら、Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．４：７４９
−７５８（１９９３）；Ｌｅｃｌｅｒｃ，Ｇ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ
．９０：９３６−９４４（１９９２））に記載されるように、ヒドロゲル被覆バ
ルーンカテーテルを用いる動脈遺伝子移入技術により、トランスフェクトする。
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を処置に用いる場合、５００ｍｇのＭＥＴ
Ｈ１および／またはＭＥＴＨ２あるいはコントロールの単回ボーラスを、注入カ
テーテルを通じて１分間にわたり、虚血肢の内腸骨動脈中に送達する。３０日目
に、種々のパラメーターを、これらのウサギで測定する：（ａ）ＢＰ比−虚血肢
の収縮期血圧 対 正常肢の収縮期血圧の比；（ｂ）血流および逆流−停止ＦＬ
：非拡張性状態の間の血流、および最大ＦＬ：完全な拡張性状態の間の血流（こ
れはまた、血管量の間接的測定）、そして逆流は、最大ＦＬ：停止ＦＬの比に反
映される；（ｃ）血管造影値（ａｎｇｉｏｇｒａｐｈｉｃ Ｓｃｏｒｅ）−これ
を側副血管の血管造影により測定する。スコアを、オーバーレイグリッド（ｏｖ
ｅｒｌａｙｉｎｇ ｇｒｉｄ）内の円の百分率（ウサギ大腿の総数ｍで割った横
断不透明化動脈を用いる）により決定する；（ｄ）毛細管（ｃａｐｉｌｌａｒｙ
）密度−側副毛細血管の数は、後肢から得た光学顕微鏡用切片において決定した
。
するため、ウサギ後肢虚血モデルを、以前に記載される（Ｔａｋｅｓｈｉｔａ，
Ｓ．ら、Ａｍ Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ １４７：１６４９−１６６０（１９９５））
ように１つの大腿動脈の外科的除去により作製する。大腿動脈の切除は、血栓の
逆行性伝播および外腸骨動脈の閉塞を生じる。結果として、虚血肢への血流は、
内腸骨動脈から生じる側副血管に依存する（Ｔａｋｅｓｈｉｔａ，Ｓ．ら、Ａｍ
Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ １４７：１６４９−１６６０（１９９５））。１０日の間
隔で、ウサギの手術後の回復および内因性の側副血管の発達を可能にする。手術
（０日）後１０日目に、ベースライン血管造影を行った後、虚血肢の内腸骨動脈
を、５００ｍｇの裸のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の発現プラスミドを
用いて、（Ｒｉｅｓｓｅｎ，Ｒ．ら、Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．４：７４９
−７５８（１９９３）；Ｌｅｃｌｅｒｃ，Ｇ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ
．９０：９３６−９４４（１９９２））に記載されるように、ヒドロゲル被覆バ
ルーンカテーテルを用いる動脈遺伝子移入技術により、トランスフェクトする。
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を処置に用いる場合、５００ｍｇのＭＥＴ
Ｈ１および／またはＭＥＴＨ２あるいはコントロールの単回ボーラスを、注入カ
テーテルを通じて１分間にわたり、虚血肢の内腸骨動脈中に送達する。３０日目
に、種々のパラメーターを、これらのウサギで測定する：（ａ）ＢＰ比−虚血肢
の収縮期血圧 対 正常肢の収縮期血圧の比；（ｂ）血流および逆流−停止ＦＬ
：非拡張性状態の間の血流、および最大ＦＬ：完全な拡張性状態の間の血流（こ
れはまた、血管量の間接的測定）、そして逆流は、最大ＦＬ：停止ＦＬの比に反
映される；（ｃ）血管造影値（ａｎｇｉｏｇｒａｐｈｉｃ Ｓｃｏｒｅ）−これ
を側副血管の血管造影により測定する。スコアを、オーバーレイグリッド（ｏｖ
ｅｒｌａｙｉｎｇ ｇｒｉｄ）内の円の百分率（ウサギ大腿の総数ｍで割った横
断不透明化動脈を用いる）により決定する；（ｄ）毛細管（ｃａｐｉｌｌａｒｙ
）密度−側副毛細血管の数は、後肢から得た光学顕微鏡用切片において決定した
。
【０８３４】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の
活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変して、ＭＥＴＨ
１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴ
Ｈ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／またはアンタゴニストの活
性を試験し得る。
活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変して、ＭＥＴＨ
１および／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥＴ
Ｈ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／またはアンタゴニストの活
性を試験し得る。
【０８３５】
（実施例４５：ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の血管拡張に対する効果
） 血管内皮の拡張は、血圧の低下に重要であるので、自然発症高血圧ラット（Ｓ
ＨＲ）における、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の血圧に影響する能力を
、試験する。漸増用量（０、１０、３０、１００、３００、および９００ｍｇ／
ｋｇ）のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を、１３〜１４週齢の自然発症高
血圧ラット（ＳＨＲ）に投与する。データを、平均＋／−ＳＥＭで表す。統計学
的分析を、両側ｔ検定を用いて行い、そして統計的な有意性を、ｐ＜０．０５
対 緩衝液単独への応答として定義する。
） 血管内皮の拡張は、血圧の低下に重要であるので、自然発症高血圧ラット（Ｓ
ＨＲ）における、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の血圧に影響する能力を
、試験する。漸増用量（０、１０、３０、１００、３００、および９００ｍｇ／
ｋｇ）のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を、１３〜１４週齢の自然発症高
血圧ラット（ＳＨＲ）に投与する。データを、平均＋／−ＳＥＭで表す。統計学
的分析を、両側ｔ検定を用いて行い、そして統計的な有意性を、ｐ＜０．０５
対 緩衝液単独への応答として定義する。
【０８３６】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドの活性（例えば、
遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／また
はアンタゴニストの活性を試験し得る。
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドの活性（例えば、
遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／また
はアンタゴニストの活性を試験し得る。
【０８３７】
（実施例４６：ラット虚血皮膚弁モデル）
評価パラメーターとして、皮膚の血流、皮膚温度、および第ＶＩＩＩ因子の免
疫組織化学または内皮アルカリホスファターゼ反応が挙げられる。皮膚虚血の間
のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の発現を、インサイチュハイブリダーゼ
ーションを用いて研究する。
疫組織化学または内皮アルカリホスファターゼ反応が挙げられる。皮膚虚血の間
のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の発現を、インサイチュハイブリダーゼ
ーションを用いて研究する。
【０８３８】
このモデルにおける研究を、以下の３つの部分に分ける：
ａ）虚血皮膚
ｂ）虚血皮膚創傷
ｃ）通常の創傷。
【０８３９】
実験プロトコルは以下を含む：
ａ）３×４ｃｍの単一茎全層無作為皮膚弁（ｓｉｎｇｌｅ ｐｅｄｉｃｌｅ
ｆｕｌｌ−ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ ｒａｎｄｏｍ ｓｋｉｎ ｆｌａｐ）（動物の
下背部にわたる筋皮弁）を生じさせる。
ｆｕｌｌ−ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ ｒａｎｄｏｍ ｓｋｉｎ ｆｌａｐ）（動物の
下背部にわたる筋皮弁）を生じさせる。
【０８４０】
ｂ）虚血皮膚（皮膚弁）に切除創傷をつくる（直径４〜６ｍｍ）
ｃ）次の種々の投薬範囲のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２による、切除
創傷（創傷後の０、１、２、３、４日目）の局所的な処置：１ｍｇ〜１００ｍｇ
ｄ）組織学的研究、免疫組織化学的研究、およびインサイチュ研究のために、
創傷後の３、５、７、１０、１４、および２１日目に創傷組織を収集する。
創傷（創傷後の０、１、２、３、４日目）の局所的な処置：１ｍｇ〜１００ｍｇ
ｄ）組織学的研究、免疫組織化学的研究、およびインサイチュ研究のために、
創傷後の３、５、７、１０、１４、および２１日目に創傷組織を収集する。
【０８４１】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドの活性（例えば、
遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／また
はアンタゴニストの活性を試験し得る。
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドの活性（例えば、
遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／また
はアンタゴニストの活性を試験し得る。
【０８４２】
（実施例４７：末梢動脈疾患モデル）
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を用いる脈管形成治療は、末梢動脈疾患
の場合の虚血の周囲の血流の回復を得る新規の治療的ストラテジーである。実験
プロトコルは以下を含む： ａ）一方の片側の大腿動脈を、後肢の虚血筋肉を作製するために結紮し、他方
の片側の後肢は、コントロールの役割をする。
の場合の虚血の周囲の血流の回復を得る新規の治療的ストラテジーである。実験
プロトコルは以下を含む： ａ）一方の片側の大腿動脈を、後肢の虚血筋肉を作製するために結紮し、他方
の片側の後肢は、コントロールの役割をする。
【０８４３】
ｂ）ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のタンパク質を、２０ｍｇ〜５００
ｍｇの投薬範囲で、一週間あたり静脈内および／または筋肉内に３回（おそらく
それより多く）で２〜３週間、送達する。
ｍｇの投薬範囲で、一週間あたり静脈内および／または筋肉内に３回（おそらく
それより多く）で２〜３週間、送達する。
【０８４４】
ｃ）この虚血筋肉組織を、大腿動脈の結紮後、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２の発現の分析ならびに組織学のために、１、２、および３週間目に収集す
る。生検もまた、他方の片側の対側後肢の正常な筋肉において行う。
ＴＨ２の発現の分析ならびに組織学のために、１、２、および３週間目に収集す
る。生検もまた、他方の片側の対側後肢の正常な筋肉において行う。
【０８４５】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドの活性（例えば、
遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／また
はアンタゴニストの活性を試験し得る。
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドの活性（例えば、
遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／また
はアンタゴニストの活性を試験し得る。
【０８４６】
（実施例４８：虚血性心筋疾患モデル）
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を、側副血管の発達を刺激し得、かつ冠
状動脈閉塞後の新しい血管を再構成し得る強力なマイトジェンとして評価する。
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の発現の変化を、インサイチュで調査する
。実験プロトコルは、以下を含む： ａ）心臓を、ラットの左側開胸術を介して露出する。直ちに、左冠状動脈を、
細い縫合糸（６−０）を用いて縫合し、そして胸郭を閉じる。
状動脈閉塞後の新しい血管を再構成し得る強力なマイトジェンとして評価する。
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の発現の変化を、インサイチュで調査する
。実験プロトコルは、以下を含む： ａ）心臓を、ラットの左側開胸術を介して露出する。直ちに、左冠状動脈を、
細い縫合糸（６−０）を用いて縫合し、そして胸郭を閉じる。
【０８４７】
ｂ）ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のタンパク質を、２０ｍｇ〜５００
ｍｇの投薬範囲で、一週間あたり静脈内および／または筋肉内に３回（おそらく
それより多く）で２〜４週間、送達する。
ｍｇの投薬範囲で、一週間あたり静脈内および／または筋肉内に３回（おそらく
それより多く）で２〜４週間、送達する。
【０８４８】
ｃ）手術の３０日後、この心臓を、形態測定のために取り出しそして断面切片
化し、そしてインサイチュで分析する。
化し、そしてインサイチュで分析する。
【０８４９】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドの活性（例えば、
遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／また
はアンタゴニストの活性を試験し得る。
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドの活性（例えば、
遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／また
はアンタゴニストの活性を試験し得る。
【０８５０】
（実施例４９：ラット角膜創傷治癒モデル）
この動物モデルは、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の、新生血管形成に
対する効果を示す。実験プロトコルは、以下を含む： ａ）角膜の中心から間質層へと１〜１．５ｍｍの長い切開を作る ｂ）目の外端に面する切開の唇縁の下にスパーテルを挿入する ｃ）ポケットを作る（その基底は、目の縁から（ｆｏｒｍ）１〜１．５ｍｍで
ある） ｄ）５０ｎｇ〜５μｇ（ｕｇ）のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を含む
ペレットを、ポケット内に配置する ｅ）ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２での処置をまた、２０ｍｇ〜５００
ｍｇの投薬範囲内で（毎日の処置を５日間）角膜創傷に局所的に適用し得る。
対する効果を示す。実験プロトコルは、以下を含む： ａ）角膜の中心から間質層へと１〜１．５ｍｍの長い切開を作る ｂ）目の外端に面する切開の唇縁の下にスパーテルを挿入する ｃ）ポケットを作る（その基底は、目の縁から（ｆｏｒｍ）１〜１．５ｍｍで
ある） ｄ）５０ｎｇ〜５μｇ（ｕｇ）のＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を含む
ペレットを、ポケット内に配置する ｅ）ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２での処置をまた、２０ｍｇ〜５００
ｍｇの投薬範囲内で（毎日の処置を５日間）角膜創傷に局所的に適用し得る。
【０８５１】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドの活性（例えば、
遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／また
はアンタゴニストの活性を試験し得る。
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチドの活性（例えば、
遺伝子治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／また
はアンタゴニストの活性を試験し得る。
【０８５２】
（実施例５０：糖尿病マウスおよび糖質コルチコイド障害性創傷治癒モデル）
（Ａ．糖尿病ｄｂ＋／ｄｂ＋マウスモデル）
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２が治癒プロセスに効果を有することを実
証するために、創傷治癒の遺伝的糖尿病マウスモデルを、使用する。ｄｂ＋／ｄ
ｂ＋マウスにおける全層（ｆｕｌｌ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ）創傷治癒モデルは、
障害性の創傷治癒の十分に特徴付けられた、臨床的に関連性のある、そして再現
可能なモデルである。糖尿病性創傷の治癒は、収縮よりむしろ肉芽組織の形成お
よび再上皮形成に依存する（Ｇａｒｔｎｅｒ，Ｍ．Ｈ．ら、Ｊ．Ｓｕｒｇ．Ｒｅ
ｓ．５２：３８９（１９９２）；Ｇｒｅｅｎｈａｌｇｈ，Ｄ．Ｇ．ら、Ａｍ．Ｊ
．Ｐａｔｈｏｌ．１３６：１２３５（１９９０））。
証するために、創傷治癒の遺伝的糖尿病マウスモデルを、使用する。ｄｂ＋／ｄ
ｂ＋マウスにおける全層（ｆｕｌｌ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ）創傷治癒モデルは、
障害性の創傷治癒の十分に特徴付けられた、臨床的に関連性のある、そして再現
可能なモデルである。糖尿病性創傷の治癒は、収縮よりむしろ肉芽組織の形成お
よび再上皮形成に依存する（Ｇａｒｔｎｅｒ，Ｍ．Ｈ．ら、Ｊ．Ｓｕｒｇ．Ｒｅ
ｓ．５２：３８９（１９９２）；Ｇｒｅｅｎｈａｌｇｈ，Ｄ．Ｇ．ら、Ａｍ．Ｊ
．Ｐａｔｈｏｌ．１３６：１２３５（１９９０））。
【０８５３】
この糖尿病動物は、ＩＩ型真性糖尿病において観察される特徴的な特性の多く
を有する。ホモ接合（ｄｂ＋／ｄｂ＋）マウスは、それらの正常なヘテロ接合（
ｄｂ＋／＋ｍ）同腹仔と比較して肥満である。変異体糖尿病（ｄｂ＋／ｄｂ＋）
マウスは、第４染色体（ｄｂ＋）上の単一の常染色体性の劣性変異を有する（Ｃ
ｏｌｅｍａｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：２８
３−２９３（１９８２））。動物は、多食症、多渇症、および多尿症を示す。変
異体糖尿病マウス（ｄｂ＋／ｄｂ＋）は、上昇した血中グルコース、増加したま
たは正常なインスリンレベル、および抑制された細胞媒介性免疫を有する（Ｍａ
ｎｄｅｌら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２０：１３７５（１９７８）；Ｄｅｂｒａ
ｙ−Ｓａｃｈｓ，Ｍ．ら、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．５１（１）：１
−７（１９８３）；Ｌｅｉｔｅｒら、Ａｍ．Ｊ．ｏｆ Ｐａｔｈｏｌ．１１４：
４６−５５（１９８５））。末梢神経障害、心筋合併症、および微小血管損傷、
基底膜肥厚および糸球体濾過異常は、これらの動物において記載されている（Ｎ
ｏｒｉｄｏ，Ｆ．ら、Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．８３（２）：２２１−２３２（１
９８４）；Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ ２９（１）：６０−６７
（１９８０）；Ｇｉａｃｏｍｅｌｌｉら、Ｌａｂ Ｉｎｖｅｓｔ．４０（４）：
４６０−４７３（１９７９）；Ｃｏｌｅｍａｎ，Ｄ．Ｌ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ ３
１（補遺）：１−６（１９８２））。これらのホモ接合糖尿病マウスは、高血糖
症を発症し、そしてこれは、ヒトＩＩ型糖尿病に類似してインスリンに対して耐
性である（Ｍａｎｄｅｌら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２０：１３７５−１３７７
（１９７８））。これらの動物において観察した特徴は、このモデルにおける治
癒が、ヒト糖尿病において観察される治癒に類似し得ることを示す（Ｇｒｅｅｎ
ｈａｌｇｈら、Ａｍ．Ｊ．ｏｆ Ｐａｔｈｏｌ．１３６：１２３５−１２４６（
１９９０））。
を有する。ホモ接合（ｄｂ＋／ｄｂ＋）マウスは、それらの正常なヘテロ接合（
ｄｂ＋／＋ｍ）同腹仔と比較して肥満である。変異体糖尿病（ｄｂ＋／ｄｂ＋）
マウスは、第４染色体（ｄｂ＋）上の単一の常染色体性の劣性変異を有する（Ｃ
ｏｌｅｍａｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：２８
３−２９３（１９８２））。動物は、多食症、多渇症、および多尿症を示す。変
異体糖尿病マウス（ｄｂ＋／ｄｂ＋）は、上昇した血中グルコース、増加したま
たは正常なインスリンレベル、および抑制された細胞媒介性免疫を有する（Ｍａ
ｎｄｅｌら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２０：１３７５（１９７８）；Ｄｅｂｒａ
ｙ−Ｓａｃｈｓ，Ｍ．ら、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．５１（１）：１
−７（１９８３）；Ｌｅｉｔｅｒら、Ａｍ．Ｊ．ｏｆ Ｐａｔｈｏｌ．１１４：
４６−５５（１９８５））。末梢神経障害、心筋合併症、および微小血管損傷、
基底膜肥厚および糸球体濾過異常は、これらの動物において記載されている（Ｎ
ｏｒｉｄｏ，Ｆ．ら、Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．８３（２）：２２１−２３２（１
９８４）；Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ ２９（１）：６０−６７
（１９８０）；Ｇｉａｃｏｍｅｌｌｉら、Ｌａｂ Ｉｎｖｅｓｔ．４０（４）：
４６０−４７３（１９７９）；Ｃｏｌｅｍａｎ，Ｄ．Ｌ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ ３
１（補遺）：１−６（１９８２））。これらのホモ接合糖尿病マウスは、高血糖
症を発症し、そしてこれは、ヒトＩＩ型糖尿病に類似してインスリンに対して耐
性である（Ｍａｎｄｅｌら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２０：１３７５−１３７７
（１９７８））。これらの動物において観察した特徴は、このモデルにおける治
癒が、ヒト糖尿病において観察される治癒に類似し得ることを示す（Ｇｒｅｅｎ
ｈａｌｇｈら、Ａｍ．Ｊ．ｏｆ Ｐａｔｈｏｌ．１３６：１２３５−１２４６（
１９９０））。
【０８５４】
遺伝的糖尿病の雌性Ｃ５７ＢＬ／ＫｓＪ（ｄｂ＋／ｄｂ＋）マウス、およびそ
れらの非糖尿病（ｄｂ＋／＋ｍ）へテロ接合性同腹仔を、この研究に用いた（Ｊ
ａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）。これらの動物を６週齢で購入する
。研究の開始時は８週齢である。動物を個別に飼育し、そして自由に食物と水を
与える。全ての操作を、無菌操作を用いて行う。この実験を、Ｈｕｍａｎ Ｇｅ
ｎｏｍｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．のＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉ
ｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ａｎｄ ｔｈｅ Ｇ
ｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａ
ｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓの規則およびガイドラインに従って行う。
れらの非糖尿病（ｄｂ＋／＋ｍ）へテロ接合性同腹仔を、この研究に用いた（Ｊ
ａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）。これらの動物を６週齢で購入する
。研究の開始時は８週齢である。動物を個別に飼育し、そして自由に食物と水を
与える。全ての操作を、無菌操作を用いて行う。この実験を、Ｈｕｍａｎ Ｇｅ
ｎｏｍｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．のＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉ
ｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ａｎｄ ｔｈｅ Ｇ
ｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａ
ｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓの規則およびガイドラインに従って行う。
【０８５５】
創傷プロトコルを、以前に報告された方法（Ｔｓｕｂｏｉ，Ｒ．およびＲｉｆ
ｋｉｎ，Ｄ．Ｂ．、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７２：２４５−２５１（１９９０）
）に従って行う。簡単には、創傷させる日に、動物を、脱イオン水に溶解したＡ
ｖｅｒｔｉｎ（０．０１ｍｇ／ｍＬ）、２，２，２−トリブロモエタノールおよ
び２−メチル−２−ブタノールの腹腔内注射で麻酔する。この動物の背面領域を
剃毛し、そして皮膚を７０％エタノール溶液およびヨウ素で洗浄する。手術範囲
を、創傷させる前に滅菌ガーゼで乾燥させる。次いで、８ｍｍの全層の創傷を、
Ｋｅｙｅｓ組織パンチを用いて作製する。創傷させた直後に、周囲の皮膚を、創
傷の拡大を取り除くために穏やかに伸ばす。実験の間、この創傷を開放しておく
。処置の適用は、創傷させた日から５日間連続で、局所的に受ける。処置の前に
、創傷を、滅菌生理食塩水およびガーゼスポンジを用いて穏やかに洗浄する。
ｋｉｎ，Ｄ．Ｂ．、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７２：２４５−２５１（１９９０）
）に従って行う。簡単には、創傷させる日に、動物を、脱イオン水に溶解したＡ
ｖｅｒｔｉｎ（０．０１ｍｇ／ｍＬ）、２，２，２−トリブロモエタノールおよ
び２−メチル−２−ブタノールの腹腔内注射で麻酔する。この動物の背面領域を
剃毛し、そして皮膚を７０％エタノール溶液およびヨウ素で洗浄する。手術範囲
を、創傷させる前に滅菌ガーゼで乾燥させる。次いで、８ｍｍの全層の創傷を、
Ｋｅｙｅｓ組織パンチを用いて作製する。創傷させた直後に、周囲の皮膚を、創
傷の拡大を取り除くために穏やかに伸ばす。実験の間、この創傷を開放しておく
。処置の適用は、創傷させた日から５日間連続で、局所的に受ける。処置の前に
、創傷を、滅菌生理食塩水およびガーゼスポンジを用いて穏やかに洗浄する。
【０８５６】
創傷を視覚的に検査し、そして手術の日およびその後２日間隔で、固定した距
離で写真撮影する。創傷閉鎖を、１〜５日目および８日目の日々の測定により決
定する。創傷を目盛り付き（ｃａｌｉｂｒａｔｅｄ）Ｊａｍｅｓｏｎ測径器（ｃ
ａｌｉｐｅｒ）を用いて水平および垂直に測定する。肉芽組織がもはや目に見え
ず、そして創傷を連続した上皮が覆う場合に、創傷を治癒したとみなす。
離で写真撮影する。創傷閉鎖を、１〜５日目および８日目の日々の測定により決
定する。創傷を目盛り付き（ｃａｌｉｂｒａｔｅｄ）Ｊａｍｅｓｏｎ測径器（ｃ
ａｌｉｐｅｒ）を用いて水平および垂直に測定する。肉芽組織がもはや目に見え
ず、そして創傷を連続した上皮が覆う場合に、創傷を治癒したとみなす。
【０８５７】
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を、ビヒクル中で８日間、異なる投薬範
囲（１日あたり創傷あたり４ｍｇ〜５００ｍｇのＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２）を用いて投与する。ビヒクルコントロール群に、５０ｍＬのビヒクル溶
液を与えた。
囲（１日あたり創傷あたり４ｍｇ〜５００ｍｇのＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２）を用いて投与する。ビヒクルコントロール群に、５０ｍＬのビヒクル溶
液を与えた。
【０８５８】
動物を、８日目にペントバルビタールナトリウム（３００ｍｇ／ｋｇ）の腹腔
内注射で安楽死させる。次いで、創傷および周囲の皮膚を、組織学および免疫組
織化学のために収集する。組織標本を、さらなる処理のために、生検スポンジの
間の組織カセット内で、１０％中性緩衝化ホルマリン中に置く。
内注射で安楽死させる。次いで、創傷および周囲の皮膚を、組織学および免疫組
織化学のために収集する。組織標本を、さらなる処理のために、生検スポンジの
間の組織カセット内で、１０％中性緩衝化ホルマリン中に置く。
【０８５９】
各々１０匹の動物（５匹の糖尿病および５匹の非糖尿病コントロール）の３つ
の群：１）ビヒクルプラシーボコントロール、２）ＭＥＴＨ１、および／または
３）ＭＥＴＨ２を評価する。
の群：１）ビヒクルプラシーボコントロール、２）ＭＥＴＨ１、および／または
３）ＭＥＴＨ２を評価する。
【０８６０】
創傷閉鎖を、水平軸および垂直軸で面積を測定すること、および創傷の面積の
合計を得ることにより分析する。次いで、収縮を、最初の創傷の面積（０日）と
処置後（８日）の面積との間の差異を確立することにより評価する。１日目のこ
の創傷面積は、６４ｍｍ2（皮膚パンチに対応するサイズ）である。計算を以下
の式を用いて行う： ［８日目の開放面積］−［１日目の開放面積］／［１日目の開放面積］ 標本を１０％緩衝化ホルマリン中で固定し、そしてパラフィン包埋塊を、創傷
表面に対して垂直に切り出し（５ｍｍ）、そしてＲｅｉｃｈｅｒｔ−Ｊｕｎｇミ
クロトームを用いて切断する。慣用的なヘマトキシリン−エオシン（Ｈ＆Ｅ）染
色を、二等分した創傷の横断切片で行う。創傷の組織学的試験を用いて、修復し
た皮膚の治癒プロセスおよび形態的な外見を、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴ
Ｈ２を用いる処置によって改変したかどうかを評価する。この評価として、細胞
蓄積、炎症細胞、毛細管、線維芽細胞、再上皮形成、および表皮成熟の存在の検
証が挙げられる（Ｇｒｅｅｎｈａｌｇｈ，Ｄ．Ｇ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ
．１３６：１２３５（１９９０））。目盛り付きレンズマイクロメーターを盲検
観察者（ｂｌｉｎｄｅｄ ｏｂｓｅｒｖｅｒ）が用いる。
合計を得ることにより分析する。次いで、収縮を、最初の創傷の面積（０日）と
処置後（８日）の面積との間の差異を確立することにより評価する。１日目のこ
の創傷面積は、６４ｍｍ2（皮膚パンチに対応するサイズ）である。計算を以下
の式を用いて行う： ［８日目の開放面積］−［１日目の開放面積］／［１日目の開放面積］ 標本を１０％緩衝化ホルマリン中で固定し、そしてパラフィン包埋塊を、創傷
表面に対して垂直に切り出し（５ｍｍ）、そしてＲｅｉｃｈｅｒｔ−Ｊｕｎｇミ
クロトームを用いて切断する。慣用的なヘマトキシリン−エオシン（Ｈ＆Ｅ）染
色を、二等分した創傷の横断切片で行う。創傷の組織学的試験を用いて、修復し
た皮膚の治癒プロセスおよび形態的な外見を、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴ
Ｈ２を用いる処置によって改変したかどうかを評価する。この評価として、細胞
蓄積、炎症細胞、毛細管、線維芽細胞、再上皮形成、および表皮成熟の存在の検
証が挙げられる（Ｇｒｅｅｎｈａｌｇｈ，Ｄ．Ｇ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ
．１３６：１２３５（１９９０））。目盛り付きレンズマイクロメーターを盲検
観察者（ｂｌｉｎｄｅｄ ｏｂｓｅｒｖｅｒ）が用いる。
【０８６１】
組織切片をまた、ＡＢＣ Ｅｌｉｔｅ検出システムを用いてポリクローナルウ
サギ抗ヒトケラチン抗体で免疫組織化学的に染色する。ヒト皮膚を陽性組織コン
トロールとして用いる一方、非免疫ＩｇＧを陰性コントロールとして用いる。ケ
ラチノサイト増殖を、目盛り付きレンズマイクロメーターを用いて創傷の再上皮
形成の程度を評価することによって決定する。
サギ抗ヒトケラチン抗体で免疫組織化学的に染色する。ヒト皮膚を陽性組織コン
トロールとして用いる一方、非免疫ＩｇＧを陰性コントロールとして用いる。ケ
ラチノサイト増殖を、目盛り付きレンズマイクロメーターを用いて創傷の再上皮
形成の程度を評価することによって決定する。
【０８６２】
皮膚標本における増殖細胞核抗原／サイクリン（ＰＣＮＡ）を、ＡＢＣ Ｅｌ
ｉｔｅ検出システムで抗ＰＣＮＡ抗体（１：５０）を用いることにより実証する
。ヒト結腸癌は、陽性組織コントロールとして働き得、そしてヒト脳組織を、陰
性組織コントロールとして用いる。各標本は、一次抗体の脱落および非免疫マウ
スＩｇＧとの置換を有する切片を含んだ。これらの切片の順位は、０〜８のスケ
ール（わずかな増殖を反映するより低い側のスケール〜激しい増殖を反映するよ
り高い側）の増殖の程度に基づく。
ｉｔｅ検出システムで抗ＰＣＮＡ抗体（１：５０）を用いることにより実証する
。ヒト結腸癌は、陽性組織コントロールとして働き得、そしてヒト脳組織を、陰
性組織コントロールとして用いる。各標本は、一次抗体の脱落および非免疫マウ
スＩｇＧとの置換を有する切片を含んだ。これらの切片の順位は、０〜８のスケ
ール（わずかな増殖を反映するより低い側のスケール〜激しい増殖を反映するよ
り高い側）の増殖の程度に基づく。
【０８６３】
実験データを、片側ｔ検定を用いて分析する。＜０．０５のｐ値を有意とみな
す。
す。
【０８６４】
（Ｂ．ステロイド障害性ラットモデル）
ステロイドによる創傷治癒の阻害は、種々のインビトロ系およびインビボ系に
おいて十分に実証されている（Ｗａｈｌ，Ｓ．Ｍ．、Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏ
ｉｄｓ ａｎｄ Ｗｏｕｎｄ ｈｅａｌｉｎｇ：Ａｎｔｉ−Ｉｎｆｌａｍｍａｔ
ｏｒｙ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ａｃｔｉｏｎ：Ｂａｓｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａ
ｌ Ａｓｐｅｃｔｓ．２８０−３０２（１９８９）；Ｗａｈｌ，Ｓ．Ｍ．ら、Ｊ
．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１５：４７６−４８１（１９７５）；Ｗｅｒｂ，Ｚ．ら、
Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１４７：１６８４−１６９４（１９７８））。糖質コルチ
コイドは、新脈管形成を阻害すること、血管透過性（Ｅｂｅｒｔら、Ａｎ．Ｉｎ
ｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．３７：７０１−７０５（１９５２））、線維芽細胞増殖、お
よびコラーゲン合成（Ｂｅｃｋ，Ｌ．Ｓ．ら、Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｓ．
５：２９５−３０４（１９９１）；Ｈａｙｎｅｓ，Ｂ．Ｆ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．
Ｉｎｖｅｓｔ．６１：７０３−７９７（１９７８））を低下させること、ならび
に循環する単球の一過性の減少を生じること（Ｈａｙｎｅｓら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．
Ｉｎｖｅｓｔ．６１：７０３−７９７（１９７８）；Ｗａｈｌ，Ｓ．Ｍ．、「Ｇ
ｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｓ ａｎｄ ｗｏｕｎｄ ｈｅａｌｉｎｇ」：Ａｎ
ｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ａｃｔｉｏｎ：Ｂａｓｉｃ
ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｓｐｅｃｔｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，
Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，２８０−３０２頁（１９８９））によって創傷治癒を遅延さ
せる。障害性創傷治癒に対するステロイドの全身性投与は、ラットにおいて十分
に確立された現象である（Ｂｅｃｋ，Ｌ．Ｓ．ら、Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ
ｓ．５：２９５−３０４（１９９１）； Ｈａｙｎｅｓ，Ｂ．Ｆ．ら、Ｊ．Ｃｌ
ｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．６１：７０３−７９７（１９７８）；Ｗａｈｌ，Ｓ．Ｍ．
、「Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｓ ａｎｄ ｗｏｕｎｄ ｈｅａｌｉｎｇ」
：Ａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ａｃｔｉｏｎ：Ｂａｓ
ｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｓｐｅｃｔｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅ
ｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，２８０−３０２頁（１９８９）；Ｐｉｅｒｃｅ，Ｇ．
Ｆ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：２２２９−２
２３３（１９８９））。
おいて十分に実証されている（Ｗａｈｌ，Ｓ．Ｍ．、Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏ
ｉｄｓ ａｎｄ Ｗｏｕｎｄ ｈｅａｌｉｎｇ：Ａｎｔｉ−Ｉｎｆｌａｍｍａｔ
ｏｒｙ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ａｃｔｉｏｎ：Ｂａｓｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａ
ｌ Ａｓｐｅｃｔｓ．２８０−３０２（１９８９）；Ｗａｈｌ，Ｓ．Ｍ．ら、Ｊ
．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１５：４７６−４８１（１９７５）；Ｗｅｒｂ，Ｚ．ら、
Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１４７：１６８４−１６９４（１９７８））。糖質コルチ
コイドは、新脈管形成を阻害すること、血管透過性（Ｅｂｅｒｔら、Ａｎ．Ｉｎ
ｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．３７：７０１−７０５（１９５２））、線維芽細胞増殖、お
よびコラーゲン合成（Ｂｅｃｋ，Ｌ．Ｓ．ら、Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｓ．
５：２９５−３０４（１９９１）；Ｈａｙｎｅｓ，Ｂ．Ｆ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．
Ｉｎｖｅｓｔ．６１：７０３−７９７（１９７８））を低下させること、ならび
に循環する単球の一過性の減少を生じること（Ｈａｙｎｅｓら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．
Ｉｎｖｅｓｔ．６１：７０３−７９７（１９７８）；Ｗａｈｌ，Ｓ．Ｍ．、「Ｇ
ｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｓ ａｎｄ ｗｏｕｎｄ ｈｅａｌｉｎｇ」：Ａｎ
ｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ａｃｔｉｏｎ：Ｂａｓｉｃ
ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｓｐｅｃｔｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，
Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，２８０−３０２頁（１９８９））によって創傷治癒を遅延さ
せる。障害性創傷治癒に対するステロイドの全身性投与は、ラットにおいて十分
に確立された現象である（Ｂｅｃｋ，Ｌ．Ｓ．ら、Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ
ｓ．５：２９５−３０４（１９９１）； Ｈａｙｎｅｓ，Ｂ．Ｆ．ら、Ｊ．Ｃｌ
ｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．６１：７０３−７９７（１９７８）；Ｗａｈｌ，Ｓ．Ｍ．
、「Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｓ ａｎｄ ｗｏｕｎｄ ｈｅａｌｉｎｇ」
：Ａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ａｃｔｉｏｎ：Ｂａｓ
ｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｓｐｅｃｔｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅ
ｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，２８０−３０２頁（１９８９）；Ｐｉｅｒｃｅ，Ｇ．
Ｆ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：２２２９−２
２３３（１９８９））。
【０８６５】
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２が治癒プロセスに効果を有することを実
証するために、治癒が、メチルプレドニゾロンの全身性投与により損なわれた、
ラットの全層切除皮膚創傷に対するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の複数
の局所適用の効果を、評価する。
証するために、治癒が、メチルプレドニゾロンの全身性投与により損なわれた、
ラットの全層切除皮膚創傷に対するＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の複数
の局所適用の効果を、評価する。
【０８６６】
若年成体の雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラット（体重２５０〜３００ｇ
）（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を、この実施例
に用いる。この動物を、８週齢で購入し、研究の開始時は９週齢である。ラット
の治癒応答は、創傷の時点で、メチルプレドニゾロンの全身性投与（１７ｍｇ／
ｋｇ／ラット、筋肉内）により損なわれる。動物を個別に飼育し、そして自由に
食物と水を与える。全ての操作を、無菌技術を用いて行う。この研究を、Ｈｕｍ
ａｎ Ｇｅｎｏｍｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．のＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａ
ｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ａｎｄ
ｔｈｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ
ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓの規則およびガイドラインに従っ
て行う。
）（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を、この実施例
に用いる。この動物を、８週齢で購入し、研究の開始時は９週齢である。ラット
の治癒応答は、創傷の時点で、メチルプレドニゾロンの全身性投与（１７ｍｇ／
ｋｇ／ラット、筋肉内）により損なわれる。動物を個別に飼育し、そして自由に
食物と水を与える。全ての操作を、無菌技術を用いて行う。この研究を、Ｈｕｍ
ａｎ Ｇｅｎｏｍｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．のＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａ
ｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ａｎｄ
ｔｈｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ
ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓの規則およびガイドラインに従っ
て行う。
【０８６７】
創傷プロトコルは、上記Ａ節に従う。創傷させる日に、動物をケタミン（５０
ｍｇ／ｋｇ）およびキシラジン（５ｍｇ／ｋｇ）の筋肉内注射で麻酔する。この
動物の背面領域を剃毛し、そして皮膚を７０％エタノールおよびヨウ素溶液で洗
浄する。手術範囲を、創傷させる前に滅菌ガーゼで乾燥させる。８ｍｍの全層の
創傷をＫｅｙｅｓ組織パンチを用いて作製する。実験の間、この創傷を開放して
おく。試験物質の適用を、創傷させ、次いでメチルメチルプレドニゾロン投与し
た日から開始して、７日間連続で、１日１回、局所的に与える。処置の前に、創
傷を滅菌生理食塩水およびガーゼスポンジを用いて穏やかに洗浄する。
ｍｇ／ｋｇ）およびキシラジン（５ｍｇ／ｋｇ）の筋肉内注射で麻酔する。この
動物の背面領域を剃毛し、そして皮膚を７０％エタノールおよびヨウ素溶液で洗
浄する。手術範囲を、創傷させる前に滅菌ガーゼで乾燥させる。８ｍｍの全層の
創傷をＫｅｙｅｓ組織パンチを用いて作製する。実験の間、この創傷を開放して
おく。試験物質の適用を、創傷させ、次いでメチルメチルプレドニゾロン投与し
た日から開始して、７日間連続で、１日１回、局所的に与える。処置の前に、創
傷を滅菌生理食塩水およびガーゼスポンジを用いて穏やかに洗浄する。
【０８６８】
創傷を視覚的に検査し、そして創傷させた日および処置の終りに、固定した距
離で写真撮影する。創傷閉鎖を、１〜５日目および８日目の日々の測定により決
定する。創傷を目盛り付き（ｃａｌｉｂｒａｔｅｄ）Ｊａｍｅｓｏｎ測径器を用
いて水平および垂直に測定する。肉芽組織がもはや目に見えずかつ創傷を連続し
た上皮が覆う場合に、創傷を治癒したとみなす。
離で写真撮影する。創傷閉鎖を、１〜５日目および８日目の日々の測定により決
定する。創傷を目盛り付き（ｃａｌｉｂｒａｔｅｄ）Ｊａｍｅｓｏｎ測径器を用
いて水平および垂直に測定する。肉芽組織がもはや目に見えずかつ創傷を連続し
た上皮が覆う場合に、創傷を治癒したとみなす。
【０８６９】
ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を、ビヒクル中で８日間、異なる投薬範
囲（１日あたり創傷あたり４ｍｇ〜５００ｍｇのＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２）を用いて投与する。ビヒクルコントロール群には、５０ｍＬのビヒクル
溶液を与えた。
囲（１日あたり創傷あたり４ｍｇ〜５００ｍｇのＭＥＴＨ１および／またはＭＥ
ＴＨ２）を用いて投与する。ビヒクルコントロール群には、５０ｍＬのビヒクル
溶液を与えた。
【０８７０】
動物を、８日目にペントバルビタールナトリウム（３００ｍｇ／ｋｇ）の腹腔
内注射で安楽死させる。次いで、創傷および周囲の皮膚を、組織学のために収集
する。組織標本を、さらなる処理のために、生検スポンジの間の組織カセット内
で１０％中性緩衝化ホルマリン中に置く。
内注射で安楽死させる。次いで、創傷および周囲の皮膚を、組織学のために収集
する。組織標本を、さらなる処理のために、生検スポンジの間の組織カセット内
で１０％中性緩衝化ホルマリン中に置く。
【０８７１】
各々１０匹の動物（メチルプレドニゾロンを用いる５匹および糖質コルチコイ
ドを用いない５匹）の４つの群を評価する：１）非処置群、２）ビヒクルプラシ
ーボコントロール、３）ＭＥＴＨ１処置群、および４）ＭＥＴＨ２処置群。
ドを用いない５匹）の４つの群を評価する：１）非処置群、２）ビヒクルプラシ
ーボコントロール、３）ＭＥＴＨ１処置群、および４）ＭＥＴＨ２処置群。
【０８７２】
創傷閉鎖を、垂直軸および水平軸で面積を測定すること、および創傷の総面積
を得ることにより分析する。次いで、閉鎖を、最初の創傷の面積（０日）と処置
後（８日）の面積との間の差異を確立することにより評価する。１日目のこの創
傷面積は、６４ｍｍ2（皮膚パンチに対応するサイズ）である。計算を以下の式
を用いて行う： ［８日目の開放面積］−［１日目の開放面積］／［１日目の開放面積］ 標本を１０％緩衝化ホルマリン中で固定し、そしてパラフィン包埋塊を、創傷
表面に対して垂直に切り出し（５ｍｍ）、そしてＯｌｙｍｐｕｓミクロトームを
用いて切断する。慣用的なヘマトキシリン−エオシン（Ｈ＆Ｅ）染色を、二等分
した創傷の横断切片で行う。創傷の組織学的試験は、修復した皮膚の治癒プロセ
スおよび形態的な外見が、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を用いる処置に
よって改善されるかどうかを評価することを可能にする。目盛り付きレンズマイ
クロメーターを盲検観察者が用いて、創傷の隙間の距離を決定する。
を得ることにより分析する。次いで、閉鎖を、最初の創傷の面積（０日）と処置
後（８日）の面積との間の差異を確立することにより評価する。１日目のこの創
傷面積は、６４ｍｍ2（皮膚パンチに対応するサイズ）である。計算を以下の式
を用いて行う： ［８日目の開放面積］−［１日目の開放面積］／［１日目の開放面積］ 標本を１０％緩衝化ホルマリン中で固定し、そしてパラフィン包埋塊を、創傷
表面に対して垂直に切り出し（５ｍｍ）、そしてＯｌｙｍｐｕｓミクロトームを
用いて切断する。慣用的なヘマトキシリン−エオシン（Ｈ＆Ｅ）染色を、二等分
した創傷の横断切片で行う。創傷の組織学的試験は、修復した皮膚の治癒プロセ
スおよび形態的な外見が、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２を用いる処置に
よって改善されるかどうかを評価することを可能にする。目盛り付きレンズマイ
クロメーターを盲検観察者が用いて、創傷の隙間の距離を決定する。
【０８７３】
実験データを、片側ｔ検定を用いて分析する。＜０．０５のｐ値を有意とみな
す。
す。
【０８７４】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子
治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／またはアン
タゴニストの活性を試験し得る。
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子
治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／またはアン
タゴニストの活性を試験し得る。
【０８７５】
（実施例５１：リンパ水腫（ｌｙｍｐｈａｄｅｍａ）動物モデル）
この実験アプローチの目的は、ラット後肢におけるリンパ管形成（ｌｙｍｐｈ
ａｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ）およびリンパの循環系の再確立におけるＭＥＴＨ１お
よび／またはＭＥＴＨ２の治療的効果を試験するための、適切かつ一貫したリン
パ水腫モデルを作製することである。有効性は、罹患した肢の腫脹体積、リンパ
の脈管系の量の定量、総血漿タンパク質、および組織病理学により測定される。
急性リンパ水腫は、７〜１０日間観察される。おそらく、より重要なことは、水
腫の慢性進行は、３〜４週間まで続く。
ａｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ）およびリンパの循環系の再確立におけるＭＥＴＨ１お
よび／またはＭＥＴＨ２の治療的効果を試験するための、適切かつ一貫したリン
パ水腫モデルを作製することである。有効性は、罹患した肢の腫脹体積、リンパ
の脈管系の量の定量、総血漿タンパク質、および組織病理学により測定される。
急性リンパ水腫は、７〜１０日間観察される。おそらく、より重要なことは、水
腫の慢性進行は、３〜４週間まで続く。
【０８７６】
手術を始める前に、血液サンプルを、タンパク質濃度分析のために採血する。
雄性ラット（体重約３５０ｇ）に、ペントバルビタールを投薬する。次いで、右
肢を膝から股関節部まで剃毛する。この剃毛した範囲を、７０％ＥｔＯＨに浸し
たガーゼで拭く。血液を、血清総タンパク質試験のために採血する。周径測定お
よび体積測定を行った後に、２つの測定レベル（踵の０．５ｃｍ上、足背の中間
点）に印をつけた後、足へと色素を注射する。右足背および左足背の両方の内皮
に、０．０５ｍｌの１％ Ｅｖａｎ’ｓ Ｂｌｕｅを注射する。次いで、足への
色素の注射の後、周径測定および体積測定を行う。
雄性ラット（体重約３５０ｇ）に、ペントバルビタールを投薬する。次いで、右
肢を膝から股関節部まで剃毛する。この剃毛した範囲を、７０％ＥｔＯＨに浸し
たガーゼで拭く。血液を、血清総タンパク質試験のために採血する。周径測定お
よび体積測定を行った後に、２つの測定レベル（踵の０．５ｃｍ上、足背の中間
点）に印をつけた後、足へと色素を注射する。右足背および左足背の両方の内皮
に、０．０５ｍｌの１％ Ｅｖａｎ’ｓ Ｂｌｕｅを注射する。次いで、足への
色素の注射の後、周径測定および体積測定を行う。
【０８７７】
目印として膝関節を用いて、中肢鼡径部切開を、大腿血管の位置を確認できる
ように環状に行う。鉗子および止血鉗子を用いて、皮膚弁を切開かつ分離する。
大腿血管の位置確認後、血管の横に沿ってかつ血管の下に走るリンパ管を位置確
認する。次いで、この範囲の主要なリンパ管を、電気凝固または縫合結紮（ｅｌ
ｅｃｔｒｉｃａｌｌｙ ｃｏａｇｕｌａｔｅｄ ｏｒ ｓｕｔｕｒｅ ｌｉｇａ
ｔｅ）する。
ように環状に行う。鉗子および止血鉗子を用いて、皮膚弁を切開かつ分離する。
大腿血管の位置確認後、血管の横に沿ってかつ血管の下に走るリンパ管を位置確
認する。次いで、この範囲の主要なリンパ管を、電気凝固または縫合結紮（ｅｌ
ｅｃｔｒｉｃａｌｌｙ ｃｏａｇｕｌａｔｅｄ ｏｒ ｓｕｔｕｒｅ ｌｉｇａ
ｔｅ）する。
【０８７８】
顕微鏡を用いて、肢の背部の筋肉（半腱様筋（ｓｅｍｉｔｅｎｄｉｎｏｓｉｓ
）および内転筋の付近）を平滑に切開する。次いで、膝窩リンパ節の位置を確認
する。次いで、２つの近位リンパ管および２つの遠位リンパ管、ならびに膝窩節
の遠位血液供給部を縫合糸により結紮する。次いで、膝窩リンパ節および任意の
付随する脂肪組織を、結合組織を切断することによって取り除く。
）および内転筋の付近）を平滑に切開する。次いで、膝窩リンパ節の位置を確認
する。次いで、２つの近位リンパ管および２つの遠位リンパ管、ならびに膝窩節
の遠位血液供給部を縫合糸により結紮する。次いで、膝窩リンパ節および任意の
付随する脂肪組織を、結合組織を切断することによって取り除く。
【０８７９】
この手順より生じるいかなる軽度の出血をも管理するように注意すること。リ
ンパ管を咬合した後、皮膚弁を、液体皮膚（Ｖｅｔｂｏｎｄ）（ＡＪ Ｂｕｃｋ
）を用いることによって密封する。別々の皮膚縁を、それらの下の筋肉組織に、
脚の周囲に約０．５ｃｍのギャップを残しながら密封する。皮膚はまた、必要な
場合、その下の筋肉に縫合することによって係留し得る。
ンパ管を咬合した後、皮膚弁を、液体皮膚（Ｖｅｔｂｏｎｄ）（ＡＪ Ｂｕｃｋ
）を用いることによって密封する。別々の皮膚縁を、それらの下の筋肉組織に、
脚の周囲に約０．５ｃｍのギャップを残しながら密封する。皮膚はまた、必要な
場合、その下の筋肉に縫合することによって係留し得る。
【０８８０】
感染を回避するために、動物を、メッシュを用いて個別に収容する（床敷きな
し）。回復した動物を、最適な水腫ピークを通して毎日チェックする。このピー
クは、代表的には５〜７日までに生じた。次いで、プラトーの水腫ピークを観察
する。リンパ水腫の強度を評価するために、各肢上の２つの指定した場所の周径
および体積を、操作の前および７日間毎日測定する。リンパ水腫に対する血漿タ
ンパク質の効果を決定し、そしてタンパク質分析が有用な試験周界であるか否か
もまた調査する。コントロール肢および水腫肢の両方の重量を、２箇所で評価す
る。分析を盲目様式（ｂｌｉｎｄ ｍａｎｎｅｒ）で行う。
し）。回復した動物を、最適な水腫ピークを通して毎日チェックする。このピー
クは、代表的には５〜７日までに生じた。次いで、プラトーの水腫ピークを観察
する。リンパ水腫の強度を評価するために、各肢上の２つの指定した場所の周径
および体積を、操作の前および７日間毎日測定する。リンパ水腫に対する血漿タ
ンパク質の効果を決定し、そしてタンパク質分析が有用な試験周界であるか否か
もまた調査する。コントロール肢および水腫肢の両方の重量を、２箇所で評価す
る。分析を盲目様式（ｂｌｉｎｄ ｍａｎｎｅｒ）で行う。
【０８８１】
周径測定：肢の動きを防止するための短期気体麻酔のもとで、布巻尺を使用し
て、肢の周径を測定する。測定を、距骨および背面の足にて、２人の異なる人物
によって行い、次いで、これらの２つの読み取りを平均する。読み取りを、コン
トロールおよび水腫肢の両方から得る。
て、肢の周径を測定する。測定を、距骨および背面の足にて、２人の異なる人物
によって行い、次いで、これらの２つの読み取りを平均する。読み取りを、コン
トロールおよび水腫肢の両方から得る。
【０８８２】
体積測定：手術の日に、動物をペントバルビタールで麻酔し、そして手術の前
に試験する。毎日の体積測定のために、動物を短期ハロタン麻酔（迅速な固定化
およびすばやい回復）のもとにおき、両方の脚を剃毛し、そして耐水性マーカー
を用いて脚に等しくしるしをつける。脚を、最初に水に漬け、次いでしるしをつ
けたレベルまで装置に漬け、次いでＢｕｘｃｏ水腫ソフトウェア（Ｃｈｅｎ／Ｖ
ｉｃｔｏｒ）によって測定する。データを１人の人物によって記録し、一方他者
は、脚をしるしを付けた領域まで漬ける。
に試験する。毎日の体積測定のために、動物を短期ハロタン麻酔（迅速な固定化
およびすばやい回復）のもとにおき、両方の脚を剃毛し、そして耐水性マーカー
を用いて脚に等しくしるしをつける。脚を、最初に水に漬け、次いでしるしをつ
けたレベルまで装置に漬け、次いでＢｕｘｃｏ水腫ソフトウェア（Ｃｈｅｎ／Ｖ
ｉｃｔｏｒ）によって測定する。データを１人の人物によって記録し、一方他者
は、脚をしるしを付けた領域まで漬ける。
【０８８３】
血液−血漿タンパク質測定：手術の前に血液を取り出し、遠心分離し、そして
血清を分離し、次いで、全タンパク質およびＣａ２＋比較について結論付ける。
血清を分離し、次いで、全タンパク質およびＣａ２＋比較について結論付ける。
【０８８４】
肢重量比較：血液を取り出した後、この動物を、組織収集のために調製する。
この肢を、キリチン（ｑｕｉｌｌｉｔｉｎｅ）を用いて切断し、次いで、実験用
脚とコントロール脚の両方を、結紮して切断し、そして秤量する。２回目の秤量
を、脛踵（ｔｉｂｉｏ−ｃａｃａｎｅａｌ）関節を外し、そして足を秤量して行
う。
この肢を、キリチン（ｑｕｉｌｌｉｔｉｎｅ）を用いて切断し、次いで、実験用
脚とコントロール脚の両方を、結紮して切断し、そして秤量する。２回目の秤量
を、脛踵（ｔｉｂｉｏ−ｃａｃａｎｅａｌ）関節を外し、そして足を秤量して行
う。
【０８８５】
組織学的調製：膝（膝窩）領域の後ろに位置する横筋を切り出し、そして金型
に配置し、ｆｒｅｅｚｅＧｅｌで満たし、冷メチルブタンに漬け、切断するまで
−８０ＥＣに、標識したサンプルバッグ中に置く。切断の際に、筋肉を、蛍光顕
微鏡のもとで、リンパ管について観察する。
に配置し、ｆｒｅｅｚｅＧｅｌで満たし、冷メチルブタンに漬け、切断するまで
−８０ＥＣに、標識したサンプルバッグ中に置く。切断の際に、筋肉を、蛍光顕
微鏡のもとで、リンパ管について観察する。
【０８８６】
本実施例において記載される研究は、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２の
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子
治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／またはアン
タゴニストの活性を試験し得る。
タンパク質の活性を試験した。しかし、当業者は、例証した研究を容易に改変し
て、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のポリヌクレオチド（例えば、遺伝子
治療）、ＭＥＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／またはアン
タゴニストの活性を試験し得る。
【０８８７】
（実施例５２：ＭＥＴＨ１の構築物の生成および発現）
そのＣ末端で全長ＭＥＴＨ１遺伝子に融合させたＦｌａｇポリペプチド配列ま
たはヒトＩｇＧ１ Ｆｃドメインのいずれかを有する２つの構築物を、当該分野
で周知の方法を使用して生成した。これらの構築物の名称としては、ｐＦｌａｇ
−ＣＭＶ−５ａ：ＭＥＴＨ１（ＩＤ ８２２）およびｐＣ４Ｆｃ：ＭＥＴＨ１（
ＩＤ ８２１）が与えられた。
たはヒトＩｇＧ１ Ｆｃドメインのいずれかを有する２つの構築物を、当該分野
で周知の方法を使用して生成した。これらの構築物の名称としては、ｐＦｌａｇ
−ＣＭＶ−５ａ：ＭＥＴＨ１（ＩＤ ８２２）およびｐＣ４Ｆｃ：ＭＥＴＨ１（
ＩＤ ８２１）が与えられた。
【０８８８】
ｐＦｌａｇ−ＣＭＶ−５ａ：ＭＥＴＨ１については以下のプライマーを使用し
た： ５’：ＡＡＧＡＡＴＧＣＧＧＣＣＧＣＡＧＣＣＡＣＣＡＴＧＧＧＧＡＡＣＧＣＧ
ＧＡＧＣＧＧＧＣＴＣＣ（配列番号１２８） ３’：ＧＡＴＣＧＣＧＧＴＡＣＣＡＣＴＧＣＡＴＴＣＴＧＣＣＡＴＴＧＴＧＣＡ
ＡＡＡＧＴＣＴＡＴＧ （配列番号１２９）。
た： ５’：ＡＡＧＡＡＴＧＣＧＧＣＣＧＣＡＧＣＣＡＣＣＡＴＧＧＧＧＡＡＣＧＣＧ
ＧＡＧＣＧＧＧＣＴＣＣ（配列番号１２８） ３’：ＧＡＴＣＧＣＧＧＴＡＣＣＡＣＴＧＣＡＴＴＣＴＧＣＣＡＴＴＧＴＧＣＡ
ＡＡＡＧＴＣＴＡＴＧ （配列番号１２９）。
【０８８９】
ＭＥＴＨ１を、示されたプライマーを使用して増幅し、そしてＡｓｐ７１８で
消化した。ベクターｐＦＬＡＧＣＭＶ−５ａもまた、Ａｓｐ７１８で消化した。
得られた制限産物を互いに連結した。
消化した。ベクターｐＦＬＡＧＣＭＶ−５ａもまた、Ａｓｐ７１８で消化した。
得られた制限産物を互いに連結した。
【０８９０】
ｐＣ４Ｆｃ：ＭＥＴＨ１については以下のプライマーを使用した：
５’：ＧＡＴＣＴＡＴＧＡＴＣＡＧＣＣＡＣＣＡＴＧＧＧＧＡＡＣＧＣＧＧＡＧ
ＣＧＧＧＣＴＣＣ（配列番号１３０） ３’：ＧＡＣＴＧＣＴＣＴＡＧＡＡＣＴＧＣＡＴＴＣＴＧＣＣＡＴＴＧＴＧＣＡ
ＡＡＡＧＴＣＴＡＴＧ（配列番号１３１）。
ＣＧＧＧＣＴＣＣ（配列番号１３０） ３’：ＧＡＣＴＧＣＴＣＴＡＧＡＡＣＴＧＣＡＴＴＣＴＧＣＣＡＴＴＧＴＧＣＡ
ＡＡＡＧＴＣＴＡＴＧ（配列番号１３１）。
【０８９１】
ＭＥＴＨ１を、示されたプライマーを使用して増幅し、そしてＢｃＩＩおよび
Ｘｂａで消化した。ベクターｐＣ４Ｆｃもまた、ＢｃＩＩおよびＸｂａで消化し
た。得られた制限産物を互いに連結した。
Ｘｂａで消化した。ベクターｐＣ４Ｆｃもまた、ＢｃＩＩおよびＸｂａで消化し
た。得られた制限産物を互いに連結した。
【０８９２】
構築物ｐＡ２ｇｐ：ＭＥＴＨ１（Ｈ５４２−Ｑ８９４）．ＦｃおよびｐＡ２ｇ
ｐ：ＭＥＴＨ１（Ｈ５４２−Ｑ８９４）もまた作製し得る。
ｐ：ＭＥＴＨ１（Ｈ５４２−Ｑ８９４）もまた作製し得る。
【０８９３】
また、ｐＣ４Ｆｃ：Ｍｅｔｈｌ．Ｍ１−Ｐ７９９を、以下のプライマーを使用
して作製し得る： ５’プライマー：ＧＡＴＣＴＡ ＴＧＡＴＣＡ ＧＣＣＡＣＣＡＴＧＧＧＧＡＡ
ＣＧＣＧＧＡＧＣＧＧＧＣＴＣＣ（配列番号１３２） ３’プライマー：ＧＣＧＴＧＣ ＴＣＴＡＧＡ ＡＧＧＧＣＴＡＡＡＧＣＴＧＣ
ＧＡＡＴＴＣ（配列番号１３３）。
して作製し得る： ５’プライマー：ＧＡＴＣＴＡ ＴＧＡＴＣＡ ＧＣＣＡＣＣＡＴＧＧＧＧＡＡ
ＣＧＣＧＧＡＧＣＧＧＧＣＴＣＣ（配列番号１３２） ３’プライマー：ＧＣＧＴＧＣ ＴＣＴＡＧＡ ＡＧＧＧＣＴＡＡＡＧＣＴＧＣ
ＧＡＡＴＴＣ（配列番号１３３）。
【０８９４】
ＭＥＴＨ１を、示されたプライマーを使用して増幅し、そしてＢｃＩＩおよび
Ｘｂａで消化した。ベクターｐＣ４Ｆｃもまた、ＢｃＩＩおよびＸｂａで消化し
、そして消化したＭＥＴＨ１フラグメントに連結した。
Ｘｂａで消化した。ベクターｐＣ４Ｆｃもまた、ＢｃＩＩおよびＸｂａで消化し
、そして消化したＭＥＴＨ１フラグメントに連結した。
【０８９５】
ｐＦＬＡＧ−ＣＭＶ−ｌ：Ｍｅｔｈｌ．Ｆ２３６−Ｅ６１４を、以下のプライ
マーを使用して作製し得る： ５’プライマー：ＧＴＡＣＣＣ ＡＡＧＣＴＴ ＴＴＴＧＴＧＴＣＣＡＧＴＣＡ
ＣＣＧＣ（配列番号１３４） ３’ｐｒｉｍｅｒ：ＧＣＧＴＧＣ ＴＣＴＡＧＡ ＴＴＡＣＴＣＧＴＴＧＴＧＴ
ＧＣＴＴＣＡＣ（配列番号１３５）。
マーを使用して作製し得る： ５’プライマー：ＧＴＡＣＣＣ ＡＡＧＣＴＴ ＴＴＴＧＴＧＴＣＣＡＧＴＣＡ
ＣＣＧＣ（配列番号１３４） ３’ｐｒｉｍｅｒ：ＧＣＧＴＧＣ ＴＣＴＡＧＡ ＴＴＡＣＴＣＧＴＴＧＴＧＴ
ＧＣＴＴＣＡＣ（配列番号１３５）。
【０８９６】
ＭＥＴＨ１を、示されたプライマーを使用して増幅し、そしてＨｉｎｄＩＩＩ
およびＸｂａで消化した。ベクターｐＦＬＡＧ−ＣＭＶ−ｌもまた、ＨｉｎｄＩ
ＩＩおよびＸｂａで消化し、そして消化したＭＥＴＨ１フラグメントに連結した
。
およびＸｂａで消化した。ベクターｐＦＬＡＧ−ＣＭＶ−ｌもまた、ＨｉｎｄＩ
ＩＩおよびＸｂａで消化し、そして消化したＭＥＴＨ１フラグメントに連結した
。
【０８９７】
この構築物を、ＭＥＴＨ１の抗血管形成活性を確証するために作製した。全長
ＭＥＴＨ１遺伝子を、ｐＣ４ＦｃおよびｐＦｌａｇＣＭＶ５ａベクターにＰＣＲ
クローニングした。ｐＣ４Ｆｃ：ＭＥＴＨ１およびｐＦＬＡＧＣＭＶ５ａ：ＭＥ
ＴＨ１の両方を得、そして配列を確認した。
ＭＥＴＨ１遺伝子を、ｐＣ４ＦｃおよびｐＦｌａｇＣＭＶ５ａベクターにＰＣＲ
クローニングした。ｐＣ４Ｆｃ：ＭＥＴＨ１およびｐＦＬＡＧＣＭＶ５ａ：ＭＥ
ＴＨ１の両方を得、そして配列を確認した。
【０８９８】
２９３Ｔ細胞への一過性のトランスフェクションを、リポフェクタミンプラス
（ＬＴＩ）試薬を使用して行い、そして生成のために血清を含まない条件に下に
保った。ウェスタン分析を、抗ｈｕＦｃ Ａｂまたは抗Ｆｌａｇ Ｍ２ Ａｂの
いずれかを用いて行った。ＭＥＴＨ１−Ｆｃ馴化培地は、強度の程度の異なる少
なくとも５つのバンドを示した。これらの見積もられた分子量は、１３０〜１４
０ｋＤ（弱いバンド）、１１０〜１２０ｋＤ（弱いバンド）、５２ｋＤ（強いバ
ンド）、４５〜４８ｋＤ（強いバンド）および３２−３５ｋＤ（最も強いバンド
）である。約６０および９０ｋＤの２つのより弱いバンドもまた、検出可能であ
った。ＭＥＴＨ１−Ｆｌａｇ馴化培地は、等しい強度の３つの主要なバンドを示
した。それらは、約１００−１１０ｋＤ、７０−８０ｋＤ、および２２ｋＤであ
る。２９３Ｔ細胞におけるＭＥＴＨ１−Ｆｃの一過性のトランスフェクション。
ＭＥＴＨ１−Ｆｃタンパク質の第２のバッチを、上記のように、１％血清を有す
る培地中で生成した。
（ＬＴＩ）試薬を使用して行い、そして生成のために血清を含まない条件に下に
保った。ウェスタン分析を、抗ｈｕＦｃ Ａｂまたは抗Ｆｌａｇ Ｍ２ Ａｂの
いずれかを用いて行った。ＭＥＴＨ１−Ｆｃ馴化培地は、強度の程度の異なる少
なくとも５つのバンドを示した。これらの見積もられた分子量は、１３０〜１４
０ｋＤ（弱いバンド）、１１０〜１２０ｋＤ（弱いバンド）、５２ｋＤ（強いバ
ンド）、４５〜４８ｋＤ（強いバンド）および３２−３５ｋＤ（最も強いバンド
）である。約６０および９０ｋＤの２つのより弱いバンドもまた、検出可能であ
った。ＭＥＴＨ１−Ｆｌａｇ馴化培地は、等しい強度の３つの主要なバンドを示
した。それらは、約１００−１１０ｋＤ、７０−８０ｋＤ、および２２ｋＤであ
る。２９３Ｔ細胞におけるＭＥＴＨ１−Ｆｃの一過性のトランスフェクション。
ＭＥＴＨ１−Ｆｃタンパク質の第２のバッチを、上記のように、１％血清を有す
る培地中で生成した。
【０８９９】
一過性にトランスフェクトした細胞からの５．５日目の馴化培地を、プロテイ
ンＡカラムに流し、そして溶出させた。タンパク質を含む画分を、還元条件下お
よび非還元条件下のＳＤＳ−ＰＡＧＥによって調べ、そしてＣｏｏｍａｓｓｉｅ
Ｂｌｕｅで染色した。第２のゲルもまた、Ｎ末端配列分析のために調製した。
ンＡカラムに流し、そして溶出させた。タンパク質を含む画分を、還元条件下お
よび非還元条件下のＳＤＳ−ＰＡＧＥによって調べ、そしてＣｏｏｍａｓｓｉｅ
Ｂｌｕｅで染色した。第２のゲルもまた、Ｎ末端配列分析のために調製した。
【０９００】
還元条件下で４つのバンドを示す１９７μｇのタンパク質を回収した。これら
のバンドのうちの３つは強く、１つは弱かった。これらのバンドのＮ末端配列決
定は、これらのバンドのうちの２つはＮ末端がブロックされたタンパク質を含む
ことを示唆した。配列がわかった２つのタンパク質のうち、１つはＦｃ由来のフ
ラグメントであり、他方はＬ８００から開始するＭＥＴＨｌ．Ｆｃ融合物の切断
生成物（２つのトロンボスポンジン様ドメインを含む）である。このことは、Ｍ
ＥＴＨ１が少なくとも２つ（おそらくそれ以上）の切断部位でプロセシングされ
ること示唆する。なぜなら、なおＦｃフラグメントに連結されているＣ末端フラ
グメントのみが、プロテインＡカラム上で精製されるからである。
のバンドのうちの３つは強く、１つは弱かった。これらのバンドのＮ末端配列決
定は、これらのバンドのうちの２つはＮ末端がブロックされたタンパク質を含む
ことを示唆した。配列がわかった２つのタンパク質のうち、１つはＦｃ由来のフ
ラグメントであり、他方はＬ８００から開始するＭＥＴＨｌ．Ｆｃ融合物の切断
生成物（２つのトロンボスポンジン様ドメインを含む）である。このことは、Ｍ
ＥＴＨ１が少なくとも２つ（おそらくそれ以上）の切断部位でプロセシングされ
ること示唆する。なぜなら、なおＦｃフラグメントに連結されているＣ末端フラ
グメントのみが、プロテインＡカラム上で精製されるからである。
【０９０１】
トランスフェクトされた２９３Ｔ細胞を、１％の透析した低ＩｇＧ、ウシ胎仔
血清を含む培地中で馴化して、組換え分泌タンパク質のタンパク質分解を減少さ
せることを試みた。精製および分析を上記のように行った。タンパク質の収率は
、最初のバッチよりも有意に高かった。このことは、おそらく、培地中の血清の
効果を反映している。いくらかのプロセシングが血清によって遅延化されたかも
しれないが、タンパク質の大部分は、還元ゲル上で約３１ｋＤに残存した。
血清を含む培地中で馴化して、組換え分泌タンパク質のタンパク質分解を減少さ
せることを試みた。精製および分析を上記のように行った。タンパク質の収率は
、最初のバッチよりも有意に高かった。このことは、おそらく、培地中の血清の
効果を反映している。いくらかのプロセシングが血清によって遅延化されたかも
しれないが、タンパク質の大部分は、還元ゲル上で約３１ｋＤに残存した。
【０９０２】
還元条件下で分離されたタンパク質のＮ末端配列決定は、そのタンパク質が、
この部位に対してＮ末端で起こる他の可能な切断とともに、９５０残基のＭＥＴ
Ｈ１ ｏｒｆのＬ８００においてプロセスされることを示す。観察された切断部
位は、異常であるとみなされた。なぜなら、この部位がＰｒｏの後であったから
である。総量１９７．４μｇのタンパク質を単離した（ＨＧ１２１００−Ｄ２９
３Ｔ１）。ウェスタンブロットにおいて少なくとも３つのバンドからなるタンパ
ク質（ｐＦｌａｇ−ＣＭＶ−５ａ：ＭＥＴＨｌ）の分析は、ただ１つのバンド（
２１ｋｄ）のみがＭＥＴＨ１と確認され得、そして他のバンドはＭＥＴＨ１以外
の起源のバンドであることを示した。
この部位に対してＮ末端で起こる他の可能な切断とともに、９５０残基のＭＥＴ
Ｈ１ ｏｒｆのＬ８００においてプロセスされることを示す。観察された切断部
位は、異常であるとみなされた。なぜなら、この部位がＰｒｏの後であったから
である。総量１９７．４μｇのタンパク質を単離した（ＨＧ１２１００−Ｄ２９
３Ｔ１）。ウェスタンブロットにおいて少なくとも３つのバンドからなるタンパ
ク質（ｐＦｌａｇ−ＣＭＶ−５ａ：ＭＥＴＨｌ）の分析は、ただ１つのバンド（
２１ｋｄ）のみがＭＥＴＨ１と確認され得、そして他のバンドはＭＥＴＨ１以外
の起源のバンドであることを示した。
【０９０３】
精製したＭＥＴＨ１ Ｆｃタンパク質の配列決定が異常な切断部位を示唆した
ので、ＭＥＴＨ１ Ｆｃの第２のバッチを、おそらく所望されないプロセシング
を阻害するために、１％ＦＢＳ中で増殖させた細胞を用いて調製した。その生成
物の予備的な評価は、培地の変化から生じるプロセシングの違いはないが、タン
パク質の収率が増加したことを示唆する。
ので、ＭＥＴＨ１ Ｆｃの第２のバッチを、おそらく所望されないプロセシング
を阻害するために、１％ＦＢＳ中で増殖させた細胞を用いて調製した。その生成
物の予備的な評価は、培地の変化から生じるプロセシングの違いはないが、タン
パク質の収率が増加したことを示唆する。
【０９０４】
実行された最初のＦｃおよびＦｌａｇタンパク質の上清の機能的アッセイには
、ヒト微小血管内皮細胞（ＨＭＶＥＣ）の増殖およびウシ大動脈内皮細胞（ＢＡ
ＥＣ）を使用するインビトロ索形成が含まれる。この増殖アッセイは、両方の培
養上清に応答してＨＭＶＥＣ増殖の速度を増加させることを示した。これは、馴
化培地からの高いバックグラウンド刺激に起因し得る。ＦｃおよびＦｌａｇ上清
の両方の索形成アッセイは、２つの独立した実験において、培地／コラーゲンコ
ントロールに対して、索形成の阻害を示した。
、ヒト微小血管内皮細胞（ＨＭＶＥＣ）の増殖およびウシ大動脈内皮細胞（ＢＡ
ＥＣ）を使用するインビトロ索形成が含まれる。この増殖アッセイは、両方の培
養上清に応答してＨＭＶＥＣ増殖の速度を増加させることを示した。これは、馴
化培地からの高いバックグラウンド刺激に起因し得る。ＦｃおよびＦｌａｇ上清
の両方の索形成アッセイは、２つの独立した実験において、培地／コラーゲンコ
ントロールに対して、索形成の阻害を示した。
【０９０５】
（実施例５３：ＭＥＴＥ１のインビトロ活性）
（増殖）
ＨＭＶＥＣを、ａｌａｍａｒ ｂｌｕｅアッセイにおいて使用して、ＭＥＴＨ
１上清が、ＥＣ増殖の阻害によって検出可能な、機能的な抗血管形成活性を有す
るか否かを決定した。ＦＧＦ−２を増殖のための一次刺激物として使用し、そし
て培養上清を１：４の最終希釈で使用した。示された増殖アッセイは、両方の培
養上清に応答するＨＭＶＥＣ増殖の速度を有意に増加した。これは、馴化培地か
らの高いバックグラウンド刺激に起因し得る。この問題は、精製したタンパク質
の使用によって、減少または除去されるべきである。
１上清が、ＥＣ増殖の阻害によって検出可能な、機能的な抗血管形成活性を有す
るか否かを決定した。ＦＧＦ−２を増殖のための一次刺激物として使用し、そし
て培養上清を１：４の最終希釈で使用した。示された増殖アッセイは、両方の培
養上清に応答するＨＭＶＥＣ増殖の速度を有意に増加した。これは、馴化培地か
らの高いバックグラウンド刺激に起因し得る。この問題は、精製したタンパク質
の使用によって、減少または除去されるべきである。
【０９０６】
（索形成）
内皮細胞への可溶性Ｉ型コラーゲンおよび適切な増殖因子の添加は、培養中の
内皮細胞の管状構造または索の生成を誘導する。これは、内皮細胞の移動および
これらの構造に関与していない細胞の選択的欠失（アポトーシス）の両方を含む
。１：４希釈の培養上清を含むＭＥＴＨ１−ＦｃおよびＭＥＴＨ１−Ｆｌａｇと
ともに培養した場合に、ウシ大動脈内皮細胞（ＢＡＥＣ）を使用して、安定な索
形成の阻害を検出した。索形成の定性的評価は、コラーゲン処理されたコントロ
ールと比較して、試験した両方の上清を用いての阻害を示した。しかし、一致し
ていない馴化培地コントロールはまた、索形成の阻害を生成し、このことは、非
特異的細胞毒性がまた、観察された阻害に寄与し得ることを示唆する。
内皮細胞の管状構造または索の生成を誘導する。これは、内皮細胞の移動および
これらの構造に関与していない細胞の選択的欠失（アポトーシス）の両方を含む
。１：４希釈の培養上清を含むＭＥＴＨ１−ＦｃおよびＭＥＴＨ１−Ｆｌａｇと
ともに培養した場合に、ウシ大動脈内皮細胞（ＢＡＥＣ）を使用して、安定な索
形成の阻害を検出した。索形成の定性的評価は、コラーゲン処理されたコントロ
ールと比較して、試験した両方の上清を用いての阻害を示した。しかし、一致し
ていない馴化培地コントロールはまた、索形成の阻害を生成し、このことは、非
特異的細胞毒性がまた、観察された阻害に寄与し得ることを示唆する。
【０９０７】
本実施例において記載された研究は、ＭＥＴＨ１タンパク質における活性を試
験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ２ポリペプチド、ＭＥＴＨ１ポリヌクレオ
チドおよび／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥ
ＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／またはアンタゴニストの
活性を試験するために、典型的な研究を容易に改変し得る。
験した。しかし、当業者は、ＭＥＴＨ２ポリペプチド、ＭＥＴＨ１ポリヌクレオ
チドおよび／またはＭＥＴＨ２ポリヌクレオチド（例えば、遺伝子治療）、ＭＥ
ＴＨ１および／またはＭＥＴＨ２のアゴニストおよび／またはアンタゴニストの
活性を試験するために、典型的な研究を容易に改変し得る。
【０９０８】
本発明を、前述の説明および実施例に詳細に記載された以外の方法で実施し得
ることは、明らかである。
ることは、明らかである。
【０９０９】
本発明の多数の改変およびバリエーションが、上記の教示を考慮して可能であ
り、従って、それは、添付の特許請求の範囲の範囲内にある。
り、従って、それは、添付の特許請求の範囲の範囲内にある。
【０９１０】
本明細書中で引用されたすべての刊行物の全開示（特許、特許出願、学術文献
、実験マニュアル、書籍または他の文書を含む）は、それによって参考として援
用される。
、実験マニュアル、書籍または他の文書を含む）は、それによって参考として援
用される。
【０９１１】
以下の特許出願の全開示は、本明細書中で参考として援用される：１９９７年
４月２４日に出願された米国特許出願番号０８／８４５，４９６；１９９８年１
月２３日に出願された米国特許出願番号６０／０７２，２９８；１９９８年８月
２８日に出願された米国特許出願番号６０／０９８，５３９；１９９９年１月２
２日に出願された米国特許出願番号０９／２３５，８１０；１９９９年５月２５
日に出願された米国特許出願番号０９／３１８，２０８；１９９９年７月２０日
に出願された米国仮出願番号６０／１４４，８８２；１９９９年８月１０日に出
願された米国仮出願番号６０／１４７，８２３；および１９９９年８月１３日に
出願された米国特許出願番号０９／３７３，６５８。
４月２４日に出願された米国特許出願番号０８／８４５，４９６；１９９８年１
月２３日に出願された米国特許出願番号６０／０７２，２９８；１９９８年８月
２８日に出願された米国特許出願番号６０／０９８，５３９；１９９９年１月２
２日に出願された米国特許出願番号０９／２３５，８１０；１９９９年５月２５
日に出願された米国特許出願番号０９／３１８，２０８；１９９９年７月２０日
に出願された米国仮出願番号６０／１４４，８８２；１９９９年８月１０日に出
願された米国仮出願番号６０／１４７，８２３；および１９９９年８月１３日に
出願された米国特許出願番号０９／３７３，６５８。
【０９１２】
【表７】
【０９１３】
【表８】
【０９１４】
【表９】
【配列表】
【図１】
図１Ａ〜Ｃは、ＭＥＴＨ１のヌクレオチド配列（配列番号１）および推定アミ
ノ酸配列（配列番号２）を示す。このタンパク質は、約２８のアミノ酸残基の推
定リーダー配列（下線）を有する。
ノ酸配列（配列番号２）を示す。このタンパク質は、約２８のアミノ酸残基の推
定リーダー配列（下線）を有する。
【図２】
図２Ａ〜Ｂは、ＭＥＴＨ２のヌクレオチド配列（配列番号３）および推定アミ
ノ酸配列（配列番号４）を示す。このタンパク質は、約２３のアミノ酸残基の推
定リーダー配列（下線）を有する。
ノ酸配列（配列番号４）を示す。このタンパク質は、約２３のアミノ酸残基の推
定リーダー配列（下線）を有する。
【図３Ａ】
図３は、ＭＥＴＨ１（配列番号２）およびＭＥＴＨ２（配列番号４）のアミノ
酸配列の、これらに最も近いホモログであるウシメタロプロテアーゼ（ｐＮＰ１
）（配列番号５）のアミノ酸配列との比較を示す。同一アミノ酸を囲む。配列お
よび構造的な相同性により推定される機能ドメインを標識し、これらは、メタロ
プロテアーゼドメインにおけるシグナルペプチド（一重線）、哺乳動物のサブチ
リシンに対して可能性のある切断部位（二重下線）、亜鉛結合部位（点線；ＭＥ
ＴＨ１のアミノ酸３８３〜３９５およびＭＥＴＨ２のアミノ酸３６３〜３７５）
、および推定ディスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ループ（矢印）を
含む。
酸配列の、これらに最も近いホモログであるウシメタロプロテアーゼ（ｐＮＰ１
）（配列番号５）のアミノ酸配列との比較を示す。同一アミノ酸を囲む。配列お
よび構造的な相同性により推定される機能ドメインを標識し、これらは、メタロ
プロテアーゼドメインにおけるシグナルペプチド（一重線）、哺乳動物のサブチ
リシンに対して可能性のある切断部位（二重下線）、亜鉛結合部位（点線；ＭＥ
ＴＨ１のアミノ酸３８３〜３９５およびＭＥＴＨ２のアミノ酸３６３〜３７５）
、および推定ディスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ループ（矢印）を
含む。
【図３Ｂ】
図３は、ＭＥＴＨ１（配列番号２）およびＭＥＴＨ２（配列番号４）のアミノ
酸配列の、これらに最も近いホモログであるウシメタロプロテアーゼ（ｐＮＰ１
）（配列番号５）のアミノ酸配列との比較を示す。同一アミノ酸を囲む。配列お
よび構造的な相同性により推定される機能ドメインを標識し、これらは、メタロ
プロテアーゼドメインにおけるシグナルペプチド（一重線）、哺乳動物のサブチ
リシンに対して可能性のある切断部位（二重下線）、亜鉛結合部位（点線；ＭＥ
ＴＨ１のアミノ酸３８３〜３９５およびＭＥＴＨ２のアミノ酸３６３〜３７５）
、および推定ディスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ループ（矢印）を
含む。
酸配列の、これらに最も近いホモログであるウシメタロプロテアーゼ（ｐＮＰ１
）（配列番号５）のアミノ酸配列との比較を示す。同一アミノ酸を囲む。配列お
よび構造的な相同性により推定される機能ドメインを標識し、これらは、メタロ
プロテアーゼドメインにおけるシグナルペプチド（一重線）、哺乳動物のサブチ
リシンに対して可能性のある切断部位（二重下線）、亜鉛結合部位（点線；ＭＥ
ＴＨ１のアミノ酸３８３〜３９５およびＭＥＴＨ２のアミノ酸３６３〜３７５）
、および推定ディスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ループ（矢印）を
含む。
【図３Ｃ】
図３は、ＭＥＴＨ１（配列番号２）およびＭＥＴＨ２（配列番号４）のアミノ
酸配列の、これらに最も近いホモログであるウシメタロプロテアーゼ（ｐＮＰ１
）（配列番号５）のアミノ酸配列との比較を示す。同一アミノ酸を囲む。配列お
よび構造的な相同性により推定される機能ドメインを標識し、これらは、メタロ
プロテアーゼドメインにおけるシグナルペプチド（一重線）、哺乳動物のサブチ
リシンに対して可能性のある切断部位（二重下線）、亜鉛結合部位（点線；ＭＥ
ＴＨ１のアミノ酸３８３〜３９５およびＭＥＴＨ２のアミノ酸３６３〜３７５）
、および推定ディスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ループ（矢印）を
含む。
酸配列の、これらに最も近いホモログであるウシメタロプロテアーゼ（ｐＮＰ１
）（配列番号５）のアミノ酸配列との比較を示す。同一アミノ酸を囲む。配列お
よび構造的な相同性により推定される機能ドメインを標識し、これらは、メタロ
プロテアーゼドメインにおけるシグナルペプチド（一重線）、哺乳動物のサブチ
リシンに対して可能性のある切断部位（二重下線）、亜鉛結合部位（点線；ＭＥ
ＴＨ１のアミノ酸３８３〜３９５およびＭＥＴＨ２のアミノ酸３６３〜３７５）
、および推定ディスインテグリン（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ）ループ（矢印）を
含む。
【図４】
図４は、ＭＥＴＨ１、ＭＥＴＨ２、およびｐＮＰ１の一次構造を示し、これら
は、プロドメイン、触媒メタロプロテアーゼドメイン、システインに富んだディ
スインテグリンドメイン、ＴＳＰ様ドメイン、スペーサー領域および異なる数の
ＴＳＰ様ドメイン（ＭＥＴＨ１については３つ、ＭＥＴＨ２については２つ、お
よびｐＮＰ１については４つ）を含む。
は、プロドメイン、触媒メタロプロテアーゼドメイン、システインに富んだディ
スインテグリンドメイン、ＴＳＰ様ドメイン、スペーサー領域および異なる数の
ＴＳＰ様ドメイン（ＭＥＴＨ１については３つ、ＭＥＴＨ２については２つ、お
よびｐＮＰ１については４つ）を含む。
【図５】
図５は、ＭＥＴＨ１（配列番号２）およびＭＥＴＨ２（配列番号４）のＴＳＰ
様ドメインの、ＴＳＰ１（配列番号６、７、および８）ならびにＴＳＰ２（配列
番号９，１０、および１１）のＴＳＰ様ドメインとの比較を示す。システインを
１〜６と番号付けし、トリプトファンを星印により印を付ける。
様ドメインの、ＴＳＰ１（配列番号６、７、および８）ならびにＴＳＰ２（配列
番号９，１０、および１１）のＴＳＰ様ドメインとの比較を示す。システインを
１〜６と番号付けし、トリプトファンを星印により印を付ける。
【図６Ａ】
図６は、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２のＴＳＰ様ドメイン由来のペプチドおよ
び組換えタンパク質が、ＶＥＧＦ誘導性新脈管形成をブロックすることを示す。
新脈管形成を、マトリゲル上で硬化したＶＥＧＦを含むナイロンメッシュを使用
して１２〜１４日齢胚由来のＣＡＭについて、ならびにこのペプチドまたは組換
えタンパク質の存在下または非存在下において誘導した。毛細血管の密度を、実
施例４に記載されるように評価した。陽性コントロールおよび陰性コントロール
は、それぞれ、ＶＥＧＦ単独およびビヒクル単独を含んだ。（Ａ）組換えタンパ
ク質の存在下でＶＥＧＦにより誘導される新脈管形成応答の定量。ＴＳＰ１、精
製された血小板ＴＳＰ１、ＧＳＴ、精製されたＧＳＴ、ＧＳＴ−ＴＳＰ１、ＧＳ
Ｔ−ＭＥＴＨ１、およびＧＳＴ−ＭＥＴＨ２は、実施例４に記載される。新脈管
形成指数は、ＶＥＧＦマトリゲルからの脈管応答を１００％とみなし、そしてバ
ックグランドレベル（マトリゲル単独）を差し引きして表される。アッセイを少
なくとも２回繰り返した。各々の処置を３連で行った。値は平均を示し、バーは
標準偏差を示す。*ｐ＜０．００１。
び組換えタンパク質が、ＶＥＧＦ誘導性新脈管形成をブロックすることを示す。
新脈管形成を、マトリゲル上で硬化したＶＥＧＦを含むナイロンメッシュを使用
して１２〜１４日齢胚由来のＣＡＭについて、ならびにこのペプチドまたは組換
えタンパク質の存在下または非存在下において誘導した。毛細血管の密度を、実
施例４に記載されるように評価した。陽性コントロールおよび陰性コントロール
は、それぞれ、ＶＥＧＦ単独およびビヒクル単独を含んだ。（Ａ）組換えタンパ
ク質の存在下でＶＥＧＦにより誘導される新脈管形成応答の定量。ＴＳＰ１、精
製された血小板ＴＳＰ１、ＧＳＴ、精製されたＧＳＴ、ＧＳＴ−ＴＳＰ１、ＧＳ
Ｔ−ＭＥＴＨ１、およびＧＳＴ−ＭＥＴＨ２は、実施例４に記載される。新脈管
形成指数は、ＶＥＧＦマトリゲルからの脈管応答を１００％とみなし、そしてバ
ックグランドレベル（マトリゲル単独）を差し引きして表される。アッセイを少
なくとも２回繰り返した。各々の処置を３連で行った。値は平均を示し、バーは
標準偏差を示す。*ｐ＜０．００１。
【図６Ｂ】
図６は、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２のＴＳＰ様ドメイン由来のペプチドおよ
び組換えタンパク質が、ＶＥＧＦ誘導性新脈管形成をブロックすることを示す。
新脈管形成を、マトリゲル上で硬化したＶＥＧＦを含むナイロンメッシュを使用
して１２〜１４日齢胚由来のＣＡＭについて、ならびにこのペプチドまたは組換
えタンパク質の存在下または非存在下において誘導した。毛細血管の密度を、実
施例４に記載されるように評価した。陽性コントロールおよび陰性コントロール
は、それぞれ、ＶＥＧＦ単独およびビヒクル単独を含んだ。（Ｂ）以下のペプチ
ドの存在下または非存在下でＶＥＧＦにより誘導された新脈管形成応答の定量；
Ｐ−ＴＳＰ１、Ｐ−ＭＥＴＨ１、およびＰ−ＭＥＴＨ２（ペプチドは、それぞれ
、ＴＳＰ、ＭＥＴＨ１、およびＭＥＴＨ２のＩ型反復に由来した）；ＳＣ１およ
びＳＣ２は、コントロールとして使用されるスクランブルペプチドである。新脈
管形成指数は、ＶＥＧＦマトリゲルからの脈管応答を１００％とみなし、そして
バックグランドレベル（マトリゲル単独）を差し引きして表される。アッセイを
少なくとも２回繰り返した。各々の処置を３連で行った。値は平均を示し、バー
は標準偏差を示す。*ｐ＜０．００１。
び組換えタンパク質が、ＶＥＧＦ誘導性新脈管形成をブロックすることを示す。
新脈管形成を、マトリゲル上で硬化したＶＥＧＦを含むナイロンメッシュを使用
して１２〜１４日齢胚由来のＣＡＭについて、ならびにこのペプチドまたは組換
えタンパク質の存在下または非存在下において誘導した。毛細血管の密度を、実
施例４に記載されるように評価した。陽性コントロールおよび陰性コントロール
は、それぞれ、ＶＥＧＦ単独およびビヒクル単独を含んだ。（Ｂ）以下のペプチ
ドの存在下または非存在下でＶＥＧＦにより誘導された新脈管形成応答の定量；
Ｐ−ＴＳＰ１、Ｐ−ＭＥＴＨ１、およびＰ−ＭＥＴＨ２（ペプチドは、それぞれ
、ＴＳＰ、ＭＥＴＨ１、およびＭＥＴＨ２のＩ型反復に由来した）；ＳＣ１およ
びＳＣ２は、コントロールとして使用されるスクランブルペプチドである。新脈
管形成指数は、ＶＥＧＦマトリゲルからの脈管応答を１００％とみなし、そして
バックグランドレベル（マトリゲル単独）を差し引きして表される。アッセイを
少なくとも２回繰り返した。各々の処置を３連で行った。値は平均を示し、バー
は標準偏差を示す。*ｐ＜０．００１。
【図６Ｃ】
図６は、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２のＴＳＰ様ドメイン由来のペプチドおよ
び組換えタンパク質が、ＶＥＧＦ誘導性新脈管形成をブロックすることを示す。
新脈管形成を、マトリゲル上で硬化したＶＥＧＦを含むナイロンメッシュを使用
して１２〜１４日齢胚由来のＣＡＭについて、ならびにこのペプチドまたは組換
えタンパク質の存在下または非存在下において誘導した。毛細血管の密度を、実
施例４に記載されるように評価した。陽性コントロールおよび陰性コントロール
は、それぞれ、ＶＥＧＦ単独およびビヒクル単独を含んだ。（Ｃ）ＧＳＴ−ＭＥ
ＴＨ１の存在下でのＶＥＧＦ誘導性新脈管形成の用量応答。新脈管形成指数は、
ＶＥＧＦマトリゲルからの脈管応答を１００％とみなし、そしてバックグランド
レベル（マトリゲル単独）を差し引きして表される。アッセイを少なくとも２回
繰り返した。各々の処置を３連で行った。値は平均を示し、バーは標準偏差を示
す。*ｐ＜０．００１。
び組換えタンパク質が、ＶＥＧＦ誘導性新脈管形成をブロックすることを示す。
新脈管形成を、マトリゲル上で硬化したＶＥＧＦを含むナイロンメッシュを使用
して１２〜１４日齢胚由来のＣＡＭについて、ならびにこのペプチドまたは組換
えタンパク質の存在下または非存在下において誘導した。毛細血管の密度を、実
施例４に記載されるように評価した。陽性コントロールおよび陰性コントロール
は、それぞれ、ＶＥＧＦ単独およびビヒクル単独を含んだ。（Ｃ）ＧＳＴ−ＭＥ
ＴＨ１の存在下でのＶＥＧＦ誘導性新脈管形成の用量応答。新脈管形成指数は、
ＶＥＧＦマトリゲルからの脈管応答を１００％とみなし、そしてバックグランド
レベル（マトリゲル単独）を差し引きして表される。アッセイを少なくとも２回
繰り返した。各々の処置を３連で行った。値は平均を示し、バーは標準偏差を示
す。*ｐ＜０．００１。
【図６Ｄ】
図６は、ＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２のＴＳＰ様ドメイン由来のペプチドおよ
び組換えタンパク質が、ＶＥＧＦ誘導性新脈管形成をブロックすることを示す。
新脈管形成を、マトリゲル上で硬化したＶＥＧＦを含むナイロンメッシュを使用
して１２〜１４日齢胚由来のＣＡＭについて、ならびにこのペプチドまたは組換
えタンパク質の存在下または非存在下において誘導した。毛細血管の密度を、実
施例４に記載されるように評価した。陽性コントロールおよび陰性コントロール
は、それぞれ、ＶＥＧＦ単独およびビヒクル単独を含んだ。（Ｄ）ＧＳＴ−ＭＥ
ＴＨ２の存在下でのＶＥＧＦ誘導性新脈管形成の用量応答。新脈管形成指数は、
ＶＥＧＦマトリゲルからの脈管応答を１００％とみなし、そしてバックグランド
レベル（マトリゲル単独）を差し引きして表される。アッセイを少なくとも２回
繰り返した。各々の処置を３連で行った。値は平均を示し、バーは標準偏差を示
す。*ｐ＜０．００１。
び組換えタンパク質が、ＶＥＧＦ誘導性新脈管形成をブロックすることを示す。
新脈管形成を、マトリゲル上で硬化したＶＥＧＦを含むナイロンメッシュを使用
して１２〜１４日齢胚由来のＣＡＭについて、ならびにこのペプチドまたは組換
えタンパク質の存在下または非存在下において誘導した。毛細血管の密度を、実
施例４に記載されるように評価した。陽性コントロールおよび陰性コントロール
は、それぞれ、ＶＥＧＦ単独およびビヒクル単独を含んだ。（Ｄ）ＧＳＴ−ＭＥ
ＴＨ２の存在下でのＶＥＧＦ誘導性新脈管形成の用量応答。新脈管形成指数は、
ＶＥＧＦマトリゲルからの脈管応答を１００％とみなし、そしてバックグランド
レベル（マトリゲル単独）を差し引きして表される。アッセイを少なくとも２回
繰り返した。各々の処置を３連で行った。値は平均を示し、バーは標準偏差を示
す。*ｐ＜０．００１。
【図７Ａ】
図７は、ｂＦＧＦで刺激された細胞増殖に対するＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２
組換えタンパク質の効果を示す。細胞を、ｂＦＧＦおよび試験される組換えタン
パク質（図で示されない場合、３μｇ／ｍｌ）を含む培地中で２４ウェルプレー
ト上で培養した。コントロールは、ビヒクルまたはＧＳＴ組換えタンパク質単独
を含んだ。（Ａ）、ＨＤＥＣは、ヒト皮膚内皮細胞；実験を少なくとも２回繰り
返した。各々の処置を３連で行った。値は平均を表し、バーは標準偏差を示す。 * ｐ＜０．０１。
組換えタンパク質の効果を示す。細胞を、ｂＦＧＦおよび試験される組換えタン
パク質（図で示されない場合、３μｇ／ｍｌ）を含む培地中で２４ウェルプレー
ト上で培養した。コントロールは、ビヒクルまたはＧＳＴ組換えタンパク質単独
を含んだ。（Ａ）、ＨＤＥＣは、ヒト皮膚内皮細胞；実験を少なくとも２回繰り
返した。各々の処置を３連で行った。値は平均を表し、バーは標準偏差を示す。 * ｐ＜０．０１。
【図７Ｂ】
図７は、ｂＦＧＦで刺激された細胞増殖に対するＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２
組換えタンパク質の効果を示す。細胞を、ｂＦＧＦおよび試験される組換えタン
パク質（図で示されない場合、３μｇ／ｍｌ）を含む培地中で２４ウェルプレー
ト上で培養した。コントロールは、ビヒクルまたはＧＳＴ組換えタンパク質単独
を含んだ。（Ｂ）、ＨＭＥＣは、ヒト乳房上皮細胞、実験を少なくとも２回繰り
返した。各々の処置を３連で行った。値は平均を表し、バーは標準偏差を示す。 * ｐ＜０．０１。
組換えタンパク質の効果を示す。細胞を、ｂＦＧＦおよび試験される組換えタン
パク質（図で示されない場合、３μｇ／ｍｌ）を含む培地中で２４ウェルプレー
ト上で培養した。コントロールは、ビヒクルまたはＧＳＴ組換えタンパク質単独
を含んだ。（Ｂ）、ＨＭＥＣは、ヒト乳房上皮細胞、実験を少なくとも２回繰り
返した。各々の処置を３連で行った。値は平均を表し、バーは標準偏差を示す。 * ｐ＜０．０１。
【図７Ｃ】
図７は、ｂＦＧＦで刺激された細胞増殖に対するＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２
組換えタンパク質の効果を示す。細胞を、ｂＦＧＦおよび試験される組換えタン
パク質（図で示されない場合、３μｇ／ｍｌ）を含む培地中で２４ウェルプレー
ト上で培養した。コントロールは、ビヒクルまたはＧＳＴ組換えタンパク質単独
を含んだ。（Ｃ）ＨＤＦは、ヒト皮膚線維芽細胞；実験を少なくとも２回繰り返
した。各々の処置を３連で行った。値は平均を表し、バーは標準偏差を示す。*
ｐ＜０．０１。
組換えタンパク質の効果を示す。細胞を、ｂＦＧＦおよび試験される組換えタン
パク質（図で示されない場合、３μｇ／ｍｌ）を含む培地中で２４ウェルプレー
ト上で培養した。コントロールは、ビヒクルまたはＧＳＴ組換えタンパク質単独
を含んだ。（Ｃ）ＨＤＦは、ヒト皮膚線維芽細胞；実験を少なくとも２回繰り返
した。各々の処置を３連で行った。値は平均を表し、バーは標準偏差を示す。*
ｐ＜０．０１。
【図７Ｄ】
図７は、ｂＦＧＦで刺激された細胞増殖に対するＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２
組換えタンパク質の効果を示す。細胞を、ｂＦＧＦおよび試験される組換えタン
パク質（図で示されない場合、３μｇ／ｍｌ）を含む培地中で２４ウェルプレー
ト上で培養した。コントロールは、ビヒクルまたはＧＳＴ組換えタンパク質単独
を含んだ。（Ｄ）、ＳＭＣは、平滑筋細胞；実験を少なくとも２回繰り返した。
各々の処置を３連で行った。値は平均を表し、バーは標準偏差を示す。*ｐ＜０
．０１。
組換えタンパク質の効果を示す。細胞を、ｂＦＧＦおよび試験される組換えタン
パク質（図で示されない場合、３μｇ／ｍｌ）を含む培地中で２４ウェルプレー
ト上で培養した。コントロールは、ビヒクルまたはＧＳＴ組換えタンパク質単独
を含んだ。（Ｄ）、ＳＭＣは、平滑筋細胞；実験を少なくとも２回繰り返した。
各々の処置を３連で行った。値は平均を表し、バーは標準偏差を示す。*ｐ＜０
．０１。
【図７Ｅ】
図７は、ｂＦＧＦで刺激された細胞増殖に対するＭＥＴＨ１およびＭＥＴＨ２
組換えタンパク質の効果を示す。細胞を、ｂＦＧＦおよび試験される組換えタン
パク質（図で示されない場合、３μｇ／ｍｌ）を含む培地中で２４ウェルプレー
ト上で培養した。コントロールは、ビヒクルまたはＧＳＴ組換えタンパク質単独
を含んだ。（Ｅ）ＨＤＥＣ増殖に対するＧＳＴ−ＭＥＴＨ１およびＧＳＴ−ＭＥ
ＴＨ２の用量応答。実験を少なくとも２回繰り返した。各々の処置を３連で行っ
た。値は平均を表し、バーは標準偏差を示す。*ｐ＜０．０１。
組換えタンパク質の効果を示す。細胞を、ｂＦＧＦおよび試験される組換えタン
パク質（図で示されない場合、３μｇ／ｍｌ）を含む培地中で２４ウェルプレー
ト上で培養した。コントロールは、ビヒクルまたはＧＳＴ組換えタンパク質単独
を含んだ。（Ｅ）ＨＤＥＣ増殖に対するＧＳＴ−ＭＥＴＨ１およびＧＳＴ−ＭＥ
ＴＨ２の用量応答。実験を少なくとも２回繰り返した。各々の処置を３連で行っ
た。値は平均を表し、バーは標準偏差を示す。*ｐ＜０．０１。
【図８】
図８は、ｐＨＥ４−５発現ベクター（配列番号１２）およびサブクローン化さ
れたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ ｃＤＮＡコード配列の模式図を示す。カナマ
イシン耐性マーカー遺伝子、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２コード配列、ｏｒｉＣ
配列、およびｌａｃＩｑコード配列の位置を示す。
れたＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２ ｃＤＮＡコード配列の模式図を示す。カナマ
イシン耐性マーカー遺伝子、ＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２コード配列、ｏｒｉＣ
配列、およびｌａｃＩｑコード配列の位置を示す。
【図９】
図９は、ｐＨＥプロモーター（配列番号１３）の調節エレメントのヌクレオチ
ド配列を示す。２つのｌａｃオペレーター配列、シャイン−ダルガルノ配列（Ｓ
／Ｄ）、ならびに末端ＨｉｎｄＩＩＩおよびＮｄｅＩ制限部位（イタリック体）
を示す。
ド配列を示す。２つのｌａｃオペレーター配列、シャイン−ダルガルノ配列（Ｓ
／Ｄ）、ならびに末端ＨｉｎｄＩＩＩおよびＮｄｅＩ制限部位（イタリック体）
を示す。
【図１０】
図１０は、ＭＥＴＨ１アミノ酸配列の分析を示す。α、β、ターンおよびコイ
ル領域；親水性および疎水性；両親媒性領域；可撓性領域；抗原性指数および表
面確率を示し、そして全てがデフォルト設定を使用して作製された。「抗原性指
数またはＪａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆ」の図において、ポジティブピークは、ＭＥ
ＴＨ１またはＭＥＴＨ２のタンパク質の高抗原性領域（すなわち、本発明のエピ
トープ保有ペプチドが入手され得る領域）の位置を示す。これらの図により規定
されるドメインは、本発明によって意図される。図１０で図示して要約されるデ
ータの表の表現は、表１に見出され得る。
ル領域；親水性および疎水性；両親媒性領域；可撓性領域；抗原性指数および表
面確率を示し、そして全てがデフォルト設定を使用して作製された。「抗原性指
数またはＪａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆ」の図において、ポジティブピークは、ＭＥ
ＴＨ１またはＭＥＴＨ２のタンパク質の高抗原性領域（すなわち、本発明のエピ
トープ保有ペプチドが入手され得る領域）の位置を示す。これらの図により規定
されるドメインは、本発明によって意図される。図１０で図示して要約されるデ
ータの表の表現は、表１に見出され得る。
【図１１】
図１１は、ＭＥＴＨ２アミノ酸配列の分析を示す。α、β、ターンおよびコイ
ル領域；親水性および疎水性；両親媒性領域；可撓性領域；抗原性指数および表
面確率を示し、そして全てがデフォルト設定を使用して作製された。「抗原性指
数またはＪａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆ」の図において、陽性ピークは、ＭＥＴＨ１
またはＭＥＴＨ２タンパク質の高抗原性領域（すなわち、本発明のエピトープ保
有ペプチドが入手され得る領域）の位置を示す。これらの図により規定されるド
メインは、本発明によって意図される。図１１で図示して要約されるデータの表
の表現は、表２に見出され得る。
ル領域；親水性および疎水性；両親媒性領域；可撓性領域；抗原性指数および表
面確率を示し、そして全てがデフォルト設定を使用して作製された。「抗原性指
数またはＪａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆ」の図において、陽性ピークは、ＭＥＴＨ１
またはＭＥＴＨ２タンパク質の高抗原性領域（すなわち、本発明のエピトープ保
有ペプチドが入手され得る領域）の位置を示す。これらの図により規定されるド
メインは、本発明によって意図される。図１１で図示して要約されるデータの表
の表現は、表２に見出され得る。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考）
Ａ６１Ｐ 9/10 １０１ Ａ６１Ｐ 17/00
15/00 17/02
17/00 17/06
17/02 29/00 １０１
17/06 35/00
29/00 １０１ Ｃ０７Ｋ 14/47
35/00 19/00
Ｃ０７Ｋ 14/47 Ｃ１２Ｎ 1/15
19/00 1/19
Ｃ１２Ｎ 1/15 1/21
1/19 Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ
1/21 Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ
5/10 5/00 Ａ
Ｃ１２Ｐ 21/02 Ａ６１Ｋ 37/54
(31)優先権主張番号 ６０／１４７，８２３
(32)優先日 平成11年８月10日(1999．8．10)
(33)優先権主張国 米国（ＵＳ）
(31)優先権主張番号 ０９／３７３，６５８
(32)優先日 平成11年８月13日(1999．8．13)
(33)優先権主張国 米国（ＵＳ）
(31)優先権主張番号 ６０／１７１，５０３
(32)優先日 平成11年12月22日(1999．12．22)
(33)優先権主張国 米国（ＵＳ）
(31)優先権主張番号 ６０／１８３，７９２
(32)優先日 平成12年２月22日(2000．2．22)
(33)優先権主張国 米国（ＵＳ）
(81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，
ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ
Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ
，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，
ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ
Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ
，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，
ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，
ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，Ｃ
Ｈ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ
，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，
ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，Ｋ
Ｇ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ
，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，
ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，Ｓ
Ｄ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ
，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，
ＺＡ，ＺＷ
(71)出願人 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイ
ション
ＳＭＩＴＨＫＬＩＮＥ ＢＥＥＣＨＡＭ
ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
アメリカ合衆国ペンシルベニア州19406−
0939、キング・オブ・プルシア、スウェー
ドランド・ロード709番
(71)出願人 ベス イスラエル デアコネス メディカ
ル センター
アメリカ合衆国 マサチューセッツ
02215， ボストン， アールエヌ， ブ
ルックリン アベニュー 330
(71)出願人 イルエラ−アリスペ， ルイサ
アメリカ合衆国 カリフォルニア 90024，
ロス アンジェルス， ホルムバイ ア
ベニュー 1342
(71)出願人 ヘイスティングス， グレッグ エイ．
アメリカ合衆国 カリフォルニア 91321，
ウエストレイク ビレッジ， リカグロ
ーブ コート 31919
(71)出願人 ルーベン， スティーブン エム．
アメリカ合衆国 メリーランド 20832，
オルネイ， ヘリテイジ ヒルズ ドラ
イブ 18528
(71)出願人 ジョナク， ツデンカ エル．
アメリカ合衆国 ペンシルベニア 19333，
デボン， ラダーバック レーン 28
(71)出願人 トルリー， スティーブン エイチ．
アメリカ合衆国 ペンシルベニア 19083，
ハバータウン， ベルベデア アベニュ
ー 2015
(71)出願人 フォーンワルド， ジェイムス エイ．
アメリカ合衆国 ペンシルベニア 19403，
ノーリスタウン， リングネック ロー
ド 2849
(71)出願人 テレット， ジョナサン エイ．
イギリス国 オーエックス14 ２ピーエッ
クス オクソン， アビンドン， サンド
フォード クローズ 20
(72)発明者 イルエラ−アリスペ， ルイサ
アメリカ合衆国 カリフォルニア 90024，
ロス アンジェルス， ホルムバイ ア
ベニュー 1342
(72)発明者 ヘイスティングス， グレッグ エイ．
アメリカ合衆国 カリフォルニア 91321，
ウエストレイク ビレッジ， リカグロ
ーブ コート 31919
(72)発明者 ルーベン， スティーブン エム．
アメリカ合衆国 メリーランド 20832，
オルネイ， ヘリテイジ ヒルズ ドラ
イブ 18528
(72)発明者 ジョナク， ツデンカ エル．
アメリカ合衆国 ペンシルベニア 19333，
デボン， ラダーバック レーン 28
(72)発明者 トルリー， スティーブン エイチ．
アメリカ合衆国 ペンシルベニア 19083，
ハバータウン， ベルベデア アベニュ
ー 2015
(72)発明者 フォーンワルド， ジェイムス エイ．
アメリカ合衆国 ペンシルベニア 19403，
ノーリスタウン， リングネック ロー
ド 2849
(72)発明者 テレット， ジョナサン エイ．
イギリス国 オーエックス14 ２ピーエッ
クス オクソン， アビンドン， サンド
フォード クローズ 20
Ｆターム(参考） 4B024 AA01 AA11 BA14 CA04 CA07
DA02 DA05 DA11 EA02 EA03
EA04 FA02 GA11 HA01 HA03
4B064 AG01 CA01 CA19 CC24 DA01
DA13
4B065 AA01X AA57X AA90X AA93Y
AB01 BA01 CA24 CA44 CA46
4C084 AA01 AA02 AA06 AA07 AA14
BA08 BA20 BA21 BA22 DC22
NA14 ZA36 ZA45 ZA68 ZA89
ZB15 ZB26
4H045 AA10 AA20 AA30 BA10 BA41
CA40 DA00 DA89 EA20 EA50
FA72 FA74
Claims (23)
- 【請求項１】 単離された核酸分子であって、以下： （ａ）配列番号２のアミノ酸１〜９５０をコードするポリヌクレオチド； （ｂ）配列番号２のアミノ酸２〜９５０をコードするポリヌクレオチド； （ｃ）配列番号２のアミノ酸２９〜９５０をコードするポリヌクレオチド； （ｄ）配列番号２のアミノ酸３０〜９５０をコードするポリヌクレオチド； （ｅ）ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１に含まれるｃＤＮＡクローンによりコー
ドされる完全アミノ酸配列をコードするポリヌクレオチド； （ｆ）ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１に含まれるｃＤＮＡクローンによりコー
ドされる成熟アミノ酸配列をコードするポリヌクレオチド； （ｇ）配列番号１２５のアミノ酸１〜９６８をコードするポリヌクレオチド； （ｈ）配列番号２のアミノ酸２３５〜４５９をコードするポリヌクレオチド； （ｉ）配列番号２のアミノ酸４６０〜５４４をコードするポリヌクレオチド； （ｊ）配列番号２のアミノ酸５４５〜５９８をコードするポリヌクレオチド； （ｋ）配列番号２のアミノ酸８４１〜８９４をコードするポリヌクレオチド； （ｌ）配列番号２のアミノ酸８９５〜９３４をコードするポリヌクレオチド； （ｍ）配列番号２のアミノ酸５３６〜６１３をコードするポリヌクレオチド；
および （ｎ）配列番号２のアミノ酸５４９〜５６３をコードするポリヌクレオチド、
からなる群より選択されるポリヌクレオチドを含む、単離された核酸分子。 - 【請求項２】 組換えベクターを作製するための方法であって、請求項１に
記載の単離された核酸分子をプロモーターに作動可能に連結された状態でベクタ
ーに挿入する工程を包含する、方法。 - 【請求項３】 請求項２に記載の方法によって産生される、組換えベクター
。 - 【請求項４】 組換え宿主細胞を作製する方法であって、請求項３に記載の
組換えベクターを宿主細胞に導入する工程を包含する、方法。 - 【請求項５】 請求項４に記載の方法により作製された、組換え宿主細胞。
- 【請求項６】 ポリペプチドを作製するための組換え方法であって、該ポリ
ペプチドが発現されるような条件下で、請求項５に記載の組換え宿主細胞を培養
する工程、および該ポリペプチドを回収する工程、を包含する、方法。 - 【請求項７】 単離された核酸分子であって、配列番号１のコード領域の５
０個連続するヌクレオチド、またはその相補鎖を含み、該核酸分子は、配列番号
１４〜４１のいずれの１つも含まない、核酸分子。 - 【請求項８】 単離された核酸分子であって、以下： （ａ）配列番号４のアミノ酸１〜８９０をコードするポリヌクレオチド； （ｂ）配列番号４のアミノ酸２〜８９０をコードするポリヌクレオチド； （ｃ）配列番号４のアミノ酸２４〜８９０をコードするポリヌクレオチド； （ｄ）配列番号４のアミノ酸１１２〜８９０をコードするポリヌクレオチド； （ｅ）ＡＴＣＣ受託番号２０９５８２に含まれるｃＤＮＡクローンによりコー
ドされる完全アミノ酸配列をコードするポリヌクレオチド； （ｆ）ＡＴＣＣ受託番号２０９５８２に含まれるｃＤＮＡクローンによりコー
ドされる成熟アミノ酸配列をコードするポリヌクレオチド； （ｇ）配列番号４のアミノ酸２１４〜４３９をコードするポリヌクレオチド； （ｈ）配列番号４のアミノ酸４４０〜５２９をコードするポリヌクレオチド； （ｉ）配列番号４のアミノ酸５３０〜５８３をコードするポリヌクレオチド； （ｊ）配列番号４のアミノ酸８３７〜８９０をコードするポリヌクレオチド； （ｋ）配列番号４のアミノ酸２８０〜６０６をコードするポリヌクレオチド；
および （ｌ）配列番号４のアミノ酸５２９〜５４８をコードするポリヌクレオチド、
からなる群より選択されるポリヌクレオチドを含む、単離された核酸分子。 - 【請求項９】 組換えベクターを作製するための方法であって、請求項８
に記載の単離された核酸分子をプロモーターに作動可能に連結された状態でベク
ターに挿入する工程を包含する、方法。 - 【請求項１０】 請求項９に記載の方法によって産生される、組換えベクタ
ー。 - 【請求項１１】 組換え宿主細胞を作製する方法であって、請求項１０に記
載の組換えベクターを宿主細胞に導入する工程を包含する、方法。 - 【請求項１２】 請求項１１に記載の方法により作製された、組換え宿主細
胞。 - 【請求項１３】 ポリペプチドを作製するための組換え方法であって、該ポ
リペプチドが発現されるような条件下で、請求項１２に記載の組換え宿主細胞を
培養する工程、および該ポリペプチドを回収する工程、を包含する、方法。 - 【請求項１４】 単離された核酸分子であって、配列番号３のコード領域の
５０個連続するヌクレオチド、またはその相補鎖を含み、該核酸分子は、配列番
号１９〜２２、２４または４２〜７７のいずれの１つも含まない、核酸分子。 - 【請求項１５】 単離されたポリペプチドであって、以下： （ａ）配列番号２のアミノ酸１〜９５０； （ｂ）配列番号２のアミノ酸２〜９５０； （ｃ）配列番号２のアミノ酸２９〜９５０； （ｄ）配列番号２のアミノ酸３０〜９５０； （ｅ）ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１に含まれるｃＤＮＡクローンによりコー
ドされる完全アミノ酸配列； （ｆ）ＡＴＣＣ受託番号２０９５８１に含まれるｃＤＮＡクローンによりコー
ドされる成熟アミノ酸配列； （ｇ）配列番号１２５のアミノ酸１〜９６８； （ｈ）配列番号２のアミノ酸２３５〜４５９； （ｉ）配列番号２のアミノ酸４６０〜５４４； （ｊ）配列番号２のアミノ酸５４５〜５９８； （ｋ）配列番号２のアミノ酸８４１〜８９４； （ｌ）配列番号２のアミノ酸８９５〜９３４； （ｍ）配列番号２のアミノ酸５３６〜６１３；および （ｎ）配列番号２のアミノ酸５４９〜５６３、 からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチド。 - 【請求項１６】 単離されたポリペプチドであって、以下： （ａ）配列番号４のアミノ酸１〜８９０； （ｂ）配列番号４のアミノ酸２〜８９０； （ｃ）配列番号４のアミノ酸２４〜８９０； （ｄ）配列番号４のアミノ酸１１２〜８９０； （ｅ）ＡＴＣＣ受託番号２０９５８２に含まれるｃＤＮＡクローンによりコー
ドされる完全アミノ酸配列； （ｆ）ＡＴＣＣ受託番号２０９５８２に含まれるｃＤＮＡクローンによりコー
ドされる成熟アミノ酸配列； （ｇ）配列番号４のアミノ酸２１４〜４３９； （ｈ）配列番号４のアミノ酸４４０〜５２９； （ｉ）配列番号４のアミノ酸５３０〜５８３； （ｊ）配列番号４のアミノ酸８３７〜８９０； （ｋ）配列番号４のアミノ酸２８０〜６０６；および （ｌ）配列番号４のアミノ酸５２９〜５４８、 からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチド。 - 【請求項１７】 配列番号２のアミノ酸配列ｍ〜ｎを含むポリペプチドであ
って、ここでｍは１〜９５０の整数であり、そしてｎは１０〜９５０の整数であ
る、ポリペプチド。 - 【請求項１８】 配列番号４のアミノ酸配列ｍ〜ｎを含むポリペプチドであ
って、ここでｍは１〜８９０の整数であり、そしてｎは１０〜８９０の整数であ
る、ポリペプチド。 - 【請求項１９】 個体における新脈管形成を阻害するための方法であって、
該方法は、有効量のＭＥＴＨ１またはＭＥＴＨ２を投与する工程を包含する、方
法。 - 【請求項２０】 請求項１９に記載の方法であって、該方法は、癌、良性腫
瘍、眼の新脈管形成疾患、慢性関節リウマチ、乾癬、遅延した創傷治癒、子宮内
膜症、脈管形成、顆粒形成、過形成性瘢痕、偽関節骨折、強皮症、トラコーマ、
血管癒着、心筋新脈管形成、冠状側副枝、大脳側副枝、動静脈先天異常、虚血性
四肢新脈管形成、オスラー−ウェーバー症候群、プラーク新生血管形成、毛細管
拡張症、血友病者の関節、血管線維症、線維筋性形成異常、創傷肉芽化、クーロ
ン病またはアテローム性動脈硬化症を処置するために用いられる、方法。 - 【請求項２１】 前記方法が産児制限において用いられる、請求項１９に記
載の方法。 - 【請求項２２】 別の脈管形成化合物を投与する工程をさらに包含する、請
求項１９に記載の方法。 - 【請求項２３】 請求項１９に記載の方法であって、ＭＥＴＨ１またはＭＥ
ＴＨ２が細胞または遺伝子治療手段により投与され、該細胞がＭＥＴＨ１または
ＭＥＴＨ２を生成しかつ分泌するように改変される、方法。
Applications Claiming Priority (13)
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|---|---|---|---|
| US31820899A | 1999-05-25 | 1999-05-25 | |
| US09/318,208 | 1999-05-25 | ||
| US14488299P | 1999-07-20 | 1999-07-20 | |
| US60/144,882 | 1999-07-20 | ||
| US14782399P | 1999-08-10 | 1999-08-10 | |
| US60/147,823 | 1999-08-10 | ||
| US09/373,658 US7220557B2 (en) | 1997-04-24 | 1999-08-13 | METH1 polynucleotides |
| US09/373,658 | 1999-08-13 | ||
| US17150399P | 1999-12-22 | 1999-12-22 | |
| US60/171,503 | 1999-12-22 | ||
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| US60/183,792 | 2000-02-22 | ||
| PCT/US2000/014462 WO2000071577A1 (en) | 1999-05-25 | 2000-05-25 | Meth1 and meth2 polynucleotides and polypeptides |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003500041A true JP2003500041A (ja) | 2003-01-07 |
Family
ID=27558302
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000619832A Withdrawn JP2003500041A (ja) | 1999-05-25 | 2000-05-25 | Ｍｅｔｈ１およびｍｅｔｈ２ポリヌクレオチドおよびポリペプチド |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20040002449A1 (ja) |
| EP (1) | EP1187849A1 (ja) |
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