JP2003210168A - 酵素固定化法および固定化酵素膜 - Google Patents
酵素固定化法および固定化酵素膜Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 従来型の固定化酵素膜は、目的酵素の固定化
および、通常三相となる膜の一枚化が煩雑かつ困難であ
り、技術的に難易度が高かった。 【解決手段】 試料側の相である高分子化合物膜にシラ
ンカップリング剤を導入し、その官能基に二価性試薬な
どを介して目的酵素を結合させるという酵素固定化法、
およびその酵素固定化相側に、溶剤に溶解させた別種ま
たは同種の高分子化合物の混合液を撒くことにより薄膜
を形成させ、かつ一枚化した固定化酵素膜を作製するこ
とにより、上記課題が解決された。
および、通常三相となる膜の一枚化が煩雑かつ困難であ
り、技術的に難易度が高かった。 【解決手段】 試料側の相である高分子化合物膜にシラ
ンカップリング剤を導入し、その官能基に二価性試薬な
どを介して目的酵素を結合させるという酵素固定化法、
およびその酵素固定化相側に、溶剤に溶解させた別種ま
たは同種の高分子化合物の混合液を撒くことにより薄膜
を形成させ、かつ一枚化した固定化酵素膜を作製するこ
とにより、上記課題が解決された。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、臨床、食品、生化
学的研究分野などにおいて広範囲に利用できる酵素固定
化法および固定化酵素膜に関するものである。
学的研究分野などにおいて広範囲に利用できる酵素固定
化法および固定化酵素膜に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】従来の固定化酵素膜は、以下の３種の相
を重ね合わせて構成されていた。
を重ね合わせて構成されていた。
【０００３】（ａ）試料側相 孔径０．０５〜５μｍ程
度の孔の空いたポリカーボネート膜相。この孔径は、目
的分子を通過させ、それ以上の分子量を持つ化合物類を
通過させないための大きさである。たとえば血液・血清
試料では、その成分であるタンパク質などを通過さな
い。
度の孔の空いたポリカーボネート膜相。この孔径は、目
的分子を通過させ、それ以上の分子量を持つ化合物類を
通過させないための大きさである。たとえば血液・血清
試料では、その成分であるタンパク質などを通過さな
い。
【０００４】（ｂ）酵素固定化相 目的分子と酵素反応
させる酵素を固定化した相。通常は、ある種の高分子化
合物に官能基を結合させ、その官能基に二価性試薬など
を用いて目的酵素を結合させて作製する。
させる酵素を固定化した相。通常は、ある種の高分子化
合物に官能基を結合させ、その官能基に二価性試薬など
を用いて目的酵素を結合させて作製する。
【０００５】（ｃ）プローブ（酸素電極、過酸化水素電
極、アンモニア電極など）側相 孔径０．５ｎｍ程度の
孔の空いた薄膜相。この孔径は、酵素反応後の分子、た
とえば酸素、過酸化水素、アンモニアなどを通過させ、
酵素反応前の分子を通過さないための大きさである。
極、アンモニア電極など）側相 孔径０．５ｎｍ程度の
孔の空いた薄膜相。この孔径は、酵素反応後の分子、た
とえば酸素、過酸化水素、アンモニアなどを通過させ、
酵素反応前の分子を通過さないための大きさである。
【０００６】上記３相において、特に（ｂ）酵素固定化
相 の作製は煩雑かつ困難であり、さらに上記３相（３
枚の膜）を貼り合わせて一枚化することも、技術的に難
易度が高かった。
相 の作製は煩雑かつ困難であり、さらに上記３相（３
枚の膜）を貼り合わせて一枚化することも、技術的に難
易度が高かった。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】上記したように従来型
の固定化酵素膜は、目的酵素の固定化および膜の一枚化
が煩雑かつ困難であり、技術的に難易度が高かった。
の固定化酵素膜は、目的酵素の固定化および膜の一枚化
が煩雑かつ困難であり、技術的に難易度が高かった。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明はこのような事情
に鑑みなされたものであり、酵素の固定化および各相の
一枚化の調製が容易であるにもかかわらず、直線性、選
択性、かつ機械的強度に優れた固定化酵素膜、およびそ
れを作製するための酵素固定化法を提供することを目的
とする。
に鑑みなされたものであり、酵素の固定化および各相の
一枚化の調製が容易であるにもかかわらず、直線性、選
択性、かつ機械的強度に優れた固定化酵素膜、およびそ
れを作製するための酵素固定化法を提供することを目的
とする。
【０００９】
【発明の構成】このような本発明の目的は、試料側の相
である高分子化合物膜にシランカップリング剤を導入
し、導入したシランカップリング剤の官能基に、二価性
試薬などを介して酵素を結合させるという酵素固定化
法、およびその酵素固定化相側に、溶剤に溶解させた別
種または同種の高分子化合物を撒くことにより薄膜を形
成させ、かつ一枚化した固定化酵素膜によって達成され
た。
である高分子化合物膜にシランカップリング剤を導入
し、導入したシランカップリング剤の官能基に、二価性
試薬などを介して酵素を結合させるという酵素固定化
法、およびその酵素固定化相側に、溶剤に溶解させた別
種または同種の高分子化合物を撒くことにより薄膜を形
成させ、かつ一枚化した固定化酵素膜によって達成され
た。
【００１０】註 試料側の高分子化合物がポリカーボネ
ートである場合
ートである場合
【００１１】通常、ポリカーボネートにアミノ基を含ん
だ化合物を導入するとエポキシ化合物類似の硬化反応が
生じ、当該化合物はその結果生じるアミノ基を介した架
橋のためにボロボロに崩れてしまう。しかし本発明で
は、当該膜の表面相にアミノ基を導入するため、そのよ
うな機械的劣化は生じない。またアミノ化シラン以外の
シランカップリン剤、たとえばチオール化シランを用い
た場合は、当然そのような反応は生じない。
だ化合物を導入するとエポキシ化合物類似の硬化反応が
生じ、当該化合物はその結果生じるアミノ基を介した架
橋のためにボロボロに崩れてしまう。しかし本発明で
は、当該膜の表面相にアミノ基を導入するため、そのよ
うな機械的劣化は生じない。またアミノ化シラン以外の
シランカップリン剤、たとえばチオール化シランを用い
た場合は、当然そのような反応は生じない。
【００１２】すなわち本発明は、酵素固定化相と試料側
の相が調製の初期段階で一体化しているため、その先の
処理が容易であり、また酵素反応前の目的分子およびプ
ローブに影響を与える分子類（たとえば過酸化水素な
ど）がプローブ上に到達しえないように行うプローブ側
薄膜処理も、溶剤に溶解させた高分子化合物を用いるこ
とにより容易に実行できる。またそれぞれの段階の処理
自体が簡便であるため、特別な機材を有しない一般者で
も、材料さえ揃えば、作業の翌日には安定した固定化酵
素膜を得ることができる。加えて、使用する材料も一般
入手可能なものであるため、汎用性かつ応用性が非常に
広い。
の相が調製の初期段階で一体化しているため、その先の
処理が容易であり、また酵素反応前の目的分子およびプ
ローブに影響を与える分子類（たとえば過酸化水素な
ど）がプローブ上に到達しえないように行うプローブ側
薄膜処理も、溶剤に溶解させた高分子化合物を用いるこ
とにより容易に実行できる。またそれぞれの段階の処理
自体が簡便であるため、特別な機材を有しない一般者で
も、材料さえ揃えば、作業の翌日には安定した固定化酵
素膜を得ることができる。加えて、使用する材料も一般
入手可能なものであるため、汎用性かつ応用性が非常に
広い。
【００１３】
【発明の構成の詳細な説明】試料側膜に用いる高分子化
合物には、ポリカーボネートなどの機械的強度の高い膜
を用いる。なおポリカーボネートを用いる場合、当該化
合物を自製してもよいが、孔径０．０５〜５．０μｍの
市販品を用いるのが最も簡便である。
合物には、ポリカーボネートなどの機械的強度の高い膜
を用いる。なおポリカーボネートを用いる場合、当該化
合物を自製してもよいが、孔径０．０５〜５．０μｍの
市販品を用いるのが最も簡便である。
【００１４】固定化に必要なシランカップリング剤に
は、アミノ化シランまたはチオール化シランなど、二価
性試薬類と結合可能なものを用いる。
は、アミノ化シランまたはチオール化シランなど、二価
性試薬類と結合可能なものを用いる。
【００１５】二価性試薬には、その用途に合わせて、グ
ルタルアルデヒド（アミノ基対象）やＮ’−［２−（Ｎ
−マレイミド）エチル］−Ｎ−ピペラジルＤ−ビオチナ
ミド塩酸塩（チオール基対象）などを用いる。
ルタルアルデヒド（アミノ基対象）やＮ’−［２−（Ｎ
−マレイミド）エチル］−Ｎ−ピペラジルＤ−ビオチナ
ミド塩酸塩（チオール基対象）などを用いる。
【００１６】固定化する酵素には、その目的に合った酵
素を用いる。たとえばグルコース応答膜を作製したい場
合はグルコースオキシダーゼを、複数の反応の後生じる
基質を測定したい場合は、その系に見合った複数の酵素
類を用いる。
素を用いる。たとえばグルコース応答膜を作製したい場
合はグルコースオキシダーゼを、複数の反応の後生じる
基質を測定したい場合は、その系に見合った複数の酵素
類を用いる。
【００１７】
【００１８】
【実施例１】おけるはじめに使用した原料および器材を
記す（代表例）。
記す（代表例）。
【００１９】ポリカーボネート膜 ミリポア製 ０．２
０μｍフィルター 型番ＧＴTＰ０４７００
０μｍフィルター 型番ＧＴTＰ０４７００
【００２０】シランカップリング剤 信越シリコーン製
Ｎ−β（アミノエチル）γ−アミノプロピルメチルジ
メトキシシラン 型番ＫＢＭ−６０２
Ｎ−β（アミノエチル）γ−アミノプロピルメチルジ
メトキシシラン 型番ＫＢＭ−６０２
【００２１】グルコースオキシダーゼ 東洋紡製 型番
ＧＬＯ−２０１
ＧＬＯ−２０１
【００２２】グルタルアルデヒド 和光純薬工業製 ２
５％グルタルアルデヒド溶液 型番０７９−００５３３
５％グルタルアルデヒド溶液 型番０７９−００５３３
【００２３】Ｌ−（＋）−リシン 東京化成工業製 型
番Ｌ０１９
番Ｌ０１９
【００２４】アセチルセルロース コダック製 モノア
セチルセルロース 型番１１７−３２５１
セチルセルロース 型番１１７−３２５１
【００２５】ポリ酢酸ビニル 和光純薬工業製 ポリ酢
酸ビニル（メタノール溶液） 型番２２２‐００４６５
酸ビニル（メタノール溶液） 型番２２２‐００４６５
【００２６】モレキュラシーブス 和光純薬工業製 モ
レキュラシーブス３Ａ １／１６ 型番１３４−０６０
９５
レキュラシーブス３Ａ １／１６ 型番１３４−０６０
９５
【００２７】その他の試薬 エチルアルコール、酢酸メ
チル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）は特級品を用い
た。水は、ミリポア社製超純水装置から供給される超純
水を用いた。
チル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）は特級品を用い
た。水は、ミリポア社製超純水装置から供給される超純
水を用いた。
【００２８】その他に器材として、ガラス板、弗素樹脂
シール、平型ピンセット、ビーカー、シャーレ、可変ピ
ペット、ハトメ抜き（９ｍｍ）などを、装置として真空
乾燥器などを用いた。
シール、平型ピンセット、ビーカー、シャーレ、可変ピ
ペット、ハトメ抜き（９ｍｍ）などを、装置として真空
乾燥器などを用いた。
【００２９】作製法
【００３０】１.ポリ酢酸ビニルのアルコール溶液約５
ｇをシャーレに取り、真空乾燥器を用いて、約１００℃
で６時間乾燥させ、アルコールを除いた。
ｇをシャーレに取り、真空乾燥器を用いて、約１００℃
で６時間乾燥させ、アルコールを除いた。
【００３１】２.乾燥させたポリ酢酸ビニル２００ｍｇ
を、まず２０ｍＬのＴＨＦに溶解し、ついで攪拌しなが
ら酢酸メチル６０ｍＬを加え、その後、モレキュラシー
ブスを加えて水分を除いた。
を、まず２０ｍＬのＴＨＦに溶解し、ついで攪拌しなが
ら酢酸メチル６０ｍＬを加え、その後、モレキュラシー
ブスを加えて水分を除いた。
【００３２】３.モノアセチルセルロース１２００ｍｇ
を８０ｍＬの酢酸メチルに溶解し、ついで２．４ｍＬの
エチルアルコールを加えてよく攪拌した後、モレキュラ
シーブスを加えて水分を除いた。
を８０ｍＬの酢酸メチルに溶解し、ついで２．４ｍＬの
エチルアルコールを加えてよく攪拌した後、モレキュラ
シーブスを加えて水分を除いた。
【００３３】４.シランカップリング剤１．６ｍＬを８
０ｍＬのエチルアルコールに溶解し、モレキュラシーブ
スを加えて水分を除いた。
０ｍＬのエチルアルコールに溶解し、モレキュラシーブ
スを加えて水分を除いた。
【００３４】５. ガラス板に弗素樹脂シールを貼り、そ
の上にシランのエタノール溶液１００μＬを滴下し、ポ
リカーボネート膜の光沢のない面を下にして溶液の上に
ゆっくりとのせ、下面一面に溶液を延ばした。
の上にシランのエタノール溶液１００μＬを滴下し、ポ
リカーボネート膜の光沢のない面を下にして溶液の上に
ゆっくりとのせ、下面一面に溶液を延ばした。
【００３５】註 その際、溶液が表面側（上面）にまわ
り込まないように注意する。
り込まないように注意する。
【００３６】６.数分後、溶液が乾いたのを確認し、同
様操作をもう一度繰り返す。
様操作をもう一度繰り返す。
【００３７】７.膜の端を平型ピンセットでつまみ、予
め用意しておいたビーカー内の純水で、斑模様が見えな
くなるまで数回洗った。
め用意しておいたビーカー内の純水で、斑模様が見えな
くなるまで数回洗った。
【００３８】８.溶液にさらした面を上にして、シャー
レ内に膜をおいた。
レ内に膜をおいた。
【００３９】９.グルコースオキシダーゼ２５ｍｇを５
ｍＬの純水に溶解し、溶解後、２５％グルタルアルデヒ
ド溶液２５０μＬを加えた。
ｍＬの純水に溶解し、溶解後、２５％グルタルアルデヒ
ド溶液２５０μＬを加えた。
【００４０】１０.上記で調製したグルコースオキシダ
ーゼ溶液を、ポリカーボネート膜を入れたシャーレに注
ぎ、室温で一晩（１２時間）放置した。
ーゼ溶液を、ポリカーボネート膜を入れたシャーレに注
ぎ、室温で一晩（１２時間）放置した。
【００４１】１１.放置後、膜を水洗し、別のシャーレ
に入れた。
に入れた。
【００４２】１２.Ｌ−（＋）−リシン５０ｍｇを５ｍ
Ｌの純水に溶解し、上記シャーレに注ぎ入れた。
Ｌの純水に溶解し、上記シャーレに注ぎ入れた。
【００４３】１３.１時間後、膜を水洗し、純水を満た
した別のシャーレに入れ、２時間放置した。
した別のシャーレに入れ、２時間放置した。
【００４４】１４.放置後、膜を室温乾燥した。
【００４５】１５.先ほど用意した酢酸ビニル溶液とモ
ノアセチルセルロース溶液を１:２の割合で混合した。
ノアセチルセルロース溶液を１:２の割合で混合した。
【００４６】１６．乾燥した酵素膜を、酵素固定化面
（光沢のない面）を上にして弗素樹脂シールを貼ったガ
ラス板の上にのせ、まず３００〜４００μＬの酢酸メチ
ルを膜の中央から滴下して膜を延ばした。
（光沢のない面）を上にして弗素樹脂シールを貼ったガ
ラス板の上にのせ、まず３００〜４００μＬの酢酸メチ
ルを膜の中央から滴下して膜を延ばした。
【００４７】１７．ついでその液が乾かないうちに、１
２００μＬの酢酸ビニル−モノアセチルセルロース混合
溶液を、２回に分けて膜に滴下し、室温で自然乾燥させ
た。
２００μＬの酢酸ビニル−モノアセチルセルロース混合
溶液を、２回に分けて膜に滴下し、室温で自然乾燥させ
た。
【００４８】１８．乾燥後、９ｍｍのハトメ抜きで固定
化酵素膜をくり貫いた。
化酵素膜をくり貫いた。
【００４９】註 ９ｍｍのハトメ抜きは、この先の実験
に用いる過酸化水素電極プローブに合わせたもの。使用
する機材によって、くり貫く大きさを替える必要があ
る。
に用いる過酸化水素電極プローブに合わせたもの。使用
する機材によって、くり貫く大きさを替える必要があ
る。
【００５０】
【実施例２】
【００５１】１．実施例１で使用したポリカーボネート
膜を０．０５μｍフィルター（ミリポア製、型番ＶＭＴ
Ｐ０４７００）に、モノアセチルセルロール溶液の濃度
を４００ｍｇ／８０ｍＬ（エチルアルコール ０．８ｍ
Ｌ）に替え、後は同様手順で作製した。
膜を０．０５μｍフィルター（ミリポア製、型番ＶＭＴ
Ｐ０４７００）に、モノアセチルセルロール溶液の濃度
を４００ｍｇ／８０ｍＬ（エチルアルコール ０．８ｍ
Ｌ）に替え、後は同様手順で作製した。
【実施例３】
【００５２】１．実施例１で使用したポリカーボネート
膜を０．１０μｍフィルター（ミリポア製、型番ＶＣＴ
Ｐ０４７００）に、モノアセチルセルロール溶液の濃度
を８００ｍｇ／８０ｍＬ（エチルアルコール １．６ｍ
Ｌ）に替え、後は同様手順で作製した。
膜を０．１０μｍフィルター（ミリポア製、型番ＶＣＴ
Ｐ０４７００）に、モノアセチルセルロール溶液の濃度
を８００ｍｇ／８０ｍＬ（エチルアルコール １．６ｍ
Ｌ）に替え、後は同様手順で作製した。
【００５３】
【実験例】図１に示した構成の測定装置に実施例の固定
化酵素膜を装着し、直線性、選択性の実験を行った。
化酵素膜を装着し、直線性、選択性の実験を行った。
【００５４】使用試薬
【００５５】測定用緩衝液（リン酸緩衝液） ＥＤＴＡ
−２Ｋ ０.６０ｇ、安息香酸ナトリウム １.００ｇ、
塩化ナトリウム ３.００ｇ、リン酸水素二ナトリウム
一水和物 ７．４９ｇ、リン酸二水素ナトリウム １．
９１ｇを、純水１Ｌに溶解した。ｐＨ７．３。
−２Ｋ ０.６０ｇ、安息香酸ナトリウム １.００ｇ、
塩化ナトリウム ３.００ｇ、リン酸水素二ナトリウム
一水和物 ７．４９ｇ、リン酸二水素ナトリウム １．
９１ｇを、純水１Ｌに溶解した。ｐＨ７．３。
【００５６】測定用校正液（グルコース濃度１８０ｍｇ
／ｄＬ） α−ｄ−グルコース １．８０ｇ、安息香酸
ナトリウム ２．００ｇ、ＥＤＴＡ−２Ｋ １．００ｇ
を、純水１Ｌに溶解した。
／ｄＬ） α−ｄ−グルコース １．８０ｇ、安息香酸
ナトリウム ２．００ｇ、ＥＤＴＡ−２Ｋ １．００ｇ
を、純水１Ｌに溶解した。
【００５７】試料用緩衝液（リン酸緩衝液） Ａ液
（０．２Ｍリン酸水素ナトリウム３６０ｍＬ、０．２Ｍ
リン酸二水素ナトリウム１４０ｍＬを混和したもの）、
Ｂ液（３．０Ｍ塩化ナトリウム）のそれぞれ５０ｍＬ、
およびアジ化ナトリウム１０ｇを加え、純水で１Ｌに希
釈した。
（０．２Ｍリン酸水素ナトリウム３６０ｍＬ、０．２Ｍ
リン酸二水素ナトリウム１４０ｍＬを混和したもの）、
Ｂ液（３．０Ｍ塩化ナトリウム）のそれぞれ５０ｍＬ、
およびアジ化ナトリウム１０ｇを加え、純水で１Ｌに希
釈した。
【００５８】実験法
【００５９】直線性
【００６０】実施例の固定化酵素膜を用い、前記試料用
緩衝液でα―ｄ−グルコース濃度が０、５０、１００、
２００、３００、４００、５００、７００ｍＭになるよ
うに調製した試料を測定用緩衝液で２４倍希釈し、その
電流値を測定した（ｎ＝２）。
緩衝液でα―ｄ−グルコース濃度が０、５０、１００、
２００、３００、４００、５００、７００ｍＭになるよ
うに調製した試料を測定用緩衝液で２４倍希釈し、その
電流値を測定した（ｎ＝２）。
【００６１】選択性
【００６２】試料用緩衝液に、Ｌ−アスコルビン酸を濃
度が１０ｍＭ（１７６．１３ｍｇ／ｄＬ）、１００ｍＭ
（１７６１．３ｍｇ／ｄＬ）になるように溶解し、その
２溶液を測定用緩衝液で２４倍希釈し、試料として測定
した。
度が１０ｍＭ（１７６．１３ｍｇ／ｄＬ）、１００ｍＭ
（１７６１．３ｍｇ／ｄＬ）になるように溶解し、その
２溶液を測定用緩衝液で２４倍希釈し、試料として測定
した。
【００６３】結果
【００６４】直線性および選択性実験の結果を、表１、
表２に示した。
表２に示した。
【００６５】
【表１】
【００６６】
【表２】
【００６７】
【発明の効果】以上のように本発明は、試料側の相であ
る高分子膜にシランカップリング剤を導入し、その官能
基に二価性試薬などを介して酵素を結合させるという酵
素固定化法、およびその酵素固定化相側に、溶剤に溶解
させた別種または同種の高分子化合物を撒くことにより
薄膜を形成させ、かつ一枚化した固定化酵素膜を採用す
ることにより、酵素の固定化および各相の一枚化の調製
が容易であるにもかかわらず、直線性、選択性、かつ機
械的強度に優れた固定化酵素膜を、臨床、食品、生化学
など、各研究分野に提供することができる。またそれぞ
れの段階の処理自体が簡便であるため、特別な機材を有
しない一般者でも、材料さえ揃えば、作業の翌日には安
定した固定化酵素膜を得ることができる。加えて、使用
する材料も一般入手可能なものであるため、汎用性かつ
応用性が非常に広い。
る高分子膜にシランカップリング剤を導入し、その官能
基に二価性試薬などを介して酵素を結合させるという酵
素固定化法、およびその酵素固定化相側に、溶剤に溶解
させた別種または同種の高分子化合物を撒くことにより
薄膜を形成させ、かつ一枚化した固定化酵素膜を採用す
ることにより、酵素の固定化および各相の一枚化の調製
が容易であるにもかかわらず、直線性、選択性、かつ機
械的強度に優れた固定化酵素膜を、臨床、食品、生化学
など、各研究分野に提供することができる。またそれぞ
れの段階の処理自体が簡便であるため、特別な機材を有
しない一般者でも、材料さえ揃えば、作業の翌日には安
定した固定化酵素膜を得ることができる。加えて、使用
する材料も一般入手可能なものであるため、汎用性かつ
応用性が非常に広い。
【図１】 本発明の酵素固定化法を用いた固定化酵素膜
を使用する際に用いた測定装置の構成を示す図である。
を使用する際に用いた測定装置の構成を示す図である。
１・・・固定化酵素膜
２・・・プローブ（過酸化水素電極など）
３・・・測定セル
４・・・緩衝液、または試料溶液
５・・・外部電源
６・・・電流計または抵抗
７・・・記録計
Claims (7)
- 【請求項１】 高分子化合物よりなる膜にシランカップ
リング剤を導入し、そのシランカップリング剤の官能基
に目的酵素を結合させたことを特徴とする酵素固定化法
および固定化酵素膜 - 【請求項２】 前記高分子化合物がポリカーボネートで
あることを特徴とする酵素固定化法および固定化酵素膜 - 【請求項３】 前記シランカップリング剤がアミノ化シ
ランであることを特長とする請求項１、２記載の酵素固
定化法および固定化酵素膜 - 【請求項４】 前記高分子化合物膜の酵素固定化相側
に、溶剤に溶解した高分子化合物を撒いて薄膜を形成さ
せ、かつ一体化させたことを特長とする請求項１、２、
３記載の酵素固定化法および固定化酵素膜 - 【請求項５】 前記薄膜の少なくともひとつがアセチル
セルロースであることを特徴とする請求項１、２、３、
４記載の固定化酵素膜 - 【請求項６】 前記薄膜の少なくともひとつがポリ酢酸
ビニルであることを特徴とする請求項１、２、３、４記
載の固定化酵素膜 - 【請求項７】 前記薄膜にアセチルセルロースおよびポ
リ酢酸ビニルが同時に含まれることを特徴とする請求項
１、２、３、４、５、６記載の固定化酵素膜
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002013278A JP2003210168A (ja) | 2002-01-22 | 2002-01-22 | 酵素固定化法および固定化酵素膜 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002013278A JP2003210168A (ja) | 2002-01-22 | 2002-01-22 | 酵素固定化法および固定化酵素膜 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003210168A true JP2003210168A (ja) | 2003-07-29 |
Family
ID=27650272
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2002013278A Pending JP2003210168A (ja) | 2002-01-22 | 2002-01-22 | 酵素固定化法および固定化酵素膜 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2003210168A (ja) |
-
2002
- 2002-01-22 JP JP2002013278A patent/JP2003210168A/ja active Pending
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