JP2003195180A - 位相差顕微鏡 - Google Patents
位相差顕微鏡Info
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- JP2003195180A JP2003195180A JP2001400873A JP2001400873A JP2003195180A JP 2003195180 A JP2003195180 A JP 2003195180A JP 2001400873 A JP2001400873 A JP 2001400873A JP 2001400873 A JP2001400873 A JP 2001400873A JP 2003195180 A JP2003195180 A JP 2003195180A
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- Japan
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- light
- ring
- lens
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- Pending
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- Instruments For Measurement Of Length By Optical Means (AREA)
- Length Measuring Devices By Optical Means (AREA)
- Microscoopes, Condenser (AREA)
Abstract
大幅な自由度を確保し、計測システムを組み込むことが
できる位相差顕微鏡を提供する。 【解決手段】 光源からの光を導入するレンズ11を新
たに設け、従来の位相差コンデンサ部に存在した位相板
7と共役な関係にあった位相リング4を取り除いて、コ
ンデンサレンズ3のみとし、その位置に仮想的な位相リ
ング12を形成し、更にこの仮想的な位相リング12と
共役な関係にある光源側の位置に、実物の位相リング4
を配置する。
Description
特に細胞などの生体試料を観察するときに、屈折率の差
のため光の位相が変化することを利用して光の強度を変
化させて観察する位相差顕微鏡に関するものである。
と共に、見るだけの顕微鏡から、操る、計測する顕微鏡
へと需要が拡大している。従来の明視野顕微鏡では、細
胞のような光の透過率が殆ど変化しないような試料は観
察しにくかった。これに対し、細胞などの生体試料を観
察するときに、光の透過率は変化しないが、屈折率の差
のため光の位相が変化することを利用し、光の強度を変
化させて観察する位相差顕微鏡が知られている。
て説明する。位相差顕微鏡は、一般に図3に示すよう
に、光源1と位相差コンデンサ部2と位相差対物レンズ
部5で構成される。位相差コンデンサ部2はコンデンサ
レンズ3及び位相リング(開口絞り板)4で構成され、
位相差対物レンズ部5は対物レンズ6と位相板7で構成
される。
8は試料テーブル9に支持されて、コンデンサレンズ3
と対物レンズ6との間に配設される。コンデンサレンズ
3と対物レンズ6で光学系を構成している。10は結像
面である。
えばリングスリット状等の所定のパターンの絞り光とす
ることができる構成となっており、また位相板5は透明
板に、位相リング4の開口と同形状となるように形成し
た位相膜を形成しているものであって、この位相膜は、
その透過光の位相に遅れ(または進み)を生じさせると
共に、透過光量を低下させるためのものである。そし
て、位相リング4は光学系の前側焦点位置に、位相板7
は後側焦点位置に配設され、両者は共役な関係にある。
グ4の光透過部を通過する際に、リング状の光とされ、
この光をコンデンサレンズ3により平行光とした後に、
生体試料8を透過させる。この透過光は、更に対物レン
ズ6及び位相板7を順次経て結像面10に結像する。
凹凸等がなければ、位相リング4でリング状に絞られた
照明光はこの生体試料8を透過して、位相板7における
位相膜を通って、直接光としてそのまま結像面10に投
影される。
いる等、この生体試料8に屈折率の差があったり、また
表面に凹凸があったりすると、この生体試料8の他の物
体が位置する部位を通過する光は回折して、この回折光
は位相板7における位相膜の形成領域以外の部位を透過
する。しかも、この回折光は直接光に対して位相がずれ
る。
存在する部位とそれ以外の部位との屈折率の差及びその
厚みにより変化するが、屈折率の差が小さく、また厚み
も薄いものであれば、回折光は直接光に対してほぼλ/
4となる。ここで、位相リング4は前側焦点位置に、ま
た位相板7の位相膜は後側焦点位置に配置されているか
ら、直接光は必ず位相膜を通過する。
回折光に対して、λ/4だけ遅れる方向または進む方向
にずらせるようにし、かつその透過光量を回折光の光量
とほぼ同じ程度に設定しておけば、直接光と回折光とが
干渉して、結像面10に結ばれる像には明暗の差が生じ
る。位相板7によって位相を進む方向にずらせれば、結
像面10にはポジティブコントラストが、また位相を遅
らせれば、ネガティブコントラストが表示されることに
なる。例えば、細胞などの生体試料を被観察物とした場
合、細胞の輪郭、内部構造の様子、細胞の様子を観察で
きる。
相差顕微鏡システムでは、位相差コンデンサ部に位相リ
ングが存在するため、計測システムを組み込むことは非
常に困難であった。そこで本発明は、位相差コンデンサ
部の位相リングを除去し、大幅な自由度を確保すること
ができる位相差顕微鏡、及び位相差顕微鏡に計測システ
ムを組み込むことを可能とし、位相差像を見ながら計測
できる位相差顕微鏡を提供することを目的とする。
に、この発明の請求項1に係る位相差顕微鏡は、光源か
ら照射される照明光を、コンデンサレンズの前側焦点位
置から移動された位相リングと、レンズを介して、該位
相リングの共役点で且つコンデンサレンズの前側焦点位
置の仮想位相リングに得られる照明光を、コンデンサ物
レンズ、被観察物、対物レンズとその後側焦点位置の位
相板からなる位相差対物レンズ部に、順次透過させて、
結像面に結像させる構成とした。
差コンデンサ部に必要であった位相リングを、本発明の
位相差顕微鏡では、この位相差コンデンサ部の位相リン
グをはずし、従来の位相リングの場所と共役な位置に設
置することにより、位相差コンデンサ部をコンデンサレ
ンズのみに置き換えて、位相差顕微鏡の位相差コンデン
サ部から位相リングをなくすことにより、既存の位相差
コンデンサ部を設けずに位相像を観測可能にした位相差
顕微鏡を得ることができる。ことができる。
微鏡は、光源から照射される照明光を、コンデンサレン
ズの前側焦点位置から移動された位相リングと、レンズ
を介して、該位相リングの共役点で且つコンデンサレン
ズの前側焦点位置の仮想位相リングに得られる照明光
を、コンデンサレンズ、被観察物、対物レンズとその後
側焦点位置の位相板からなる位相差対物レンズ部に、順
次透過させて、結像面に結像させる位相差顕微鏡と、計
測システムを同一システム内に併設させる構成とした。
微鏡は、光源から照射される照明光を、コンデンサレン
ズの前側焦点位置から移動された位相リングと、レンズ
を介して、該位相リングの共役点で且つコンデンサレン
ズの前側焦点位置の仮想位相リングに得られる照明光
を、コンデンサレンズ、被観察物、対物レンズとその後
側焦点位置の位相板からなる位相差対物レンズ部に、順
次透過させて、結像面に結像させる位相差顕微鏡と、前
記位相差対物レンズ部と前記結像面の間にレーザ光を入
射するダイクロイックミラーを設け、前記レンズと前記
コンデンサレンズの間に計測器に光を照射するダイクロ
イックミラーを設けてなる計測システムを同一システム
内に併設させる構成とした。
用対物レンズが必要となるが、位相差コンデンサ部を計
測用対物レンズに置き換えることが可能なため、位相差
顕微鏡に計測システムを組み込むことが可能となる。そ
して、例えば、細胞などの生体試料を被観察物とした場
合、細胞の輪郭、内部構造の様子、細胞の様子を観察で
きると同時に、位相差像を見ながらナノメータ単位の距
離を計測することができる。
て以下に詳述する。図において、位相差顕微鏡の基本原
理は図3のものと同じであり、同一物には同じ符号を付
している。図3のものと異なる点は、光源からの光を導
入し、共役点を作るためのレンズ11を新たに設け、従
来の位相差コンデンサ部2に存在した位相板7と共役な
関係にあった位相リング4を取り除き、コンデンサレン
ズ3のみとし、その位置に仮想的な位相リング12を形
成し、更にこの仮想的な位相リング12と共役な関係に
ある位置に、実物の位相リング4を配置することであ
る。
する。光源(図示せず)からの照明光は、位置を移動し
て設けられた位相リング4で、例えばリングスリット状
等の所定のパターンの絞り光として、レンズ11を通っ
て共役な関係にある仮想的な位相リング12の位置に像
を結ぶ。
3のものと同様であり、照明光はリングスリット状等の
光とされ、この光をコンデンサレンズ3により平行光と
した後に、生体試料8を透過させる。この透過光は、さ
らに対物レンズ6及び位相板7を順次経て結像面10に
結像する。
凹凸等がなければ、位相リング4でリング状に絞られた
照明光はこの生体試料8を透過して、位相板7における
位相膜を通って、直接光としてそのまま結像面10に投
影される。
いる等、この生体試料8に屈折率の差があったり、また
表面に凹凸があったりすると、この生体試料8の他の物
体が位置する部位を通過する光は回折して、この回折光
は位相板7における位相膜の形成領域以外の部位を透過
する。しかも、この回折光は直接光に対して位相がずれ
る。
存在する部位とそれ以外の部位との屈折率の差及びその
厚みにより変化するが、屈折率の差が小さく、また厚み
も薄いものであれば、回折光は直接光に対してほぼλ/
4となる。ここで、位相リング4は前側焦点位置に、ま
た位相板7の位相膜は後側焦点位置に配置されているか
ら、直接光は必ず位相膜を通過する。
回折光に対して、λ/4だけ遅れる方向または進む方向
にずらせるようにし、かつその透過光量を回折光の光量
とほぼ同じ程度に設定しておけば、直接光と回折光とが
干渉して、結像面10に結ばれる像には明暗の差が生じ
る。位相板7によって位相を進む方向にずらせれば、結
像面10にはポジティブコントラストが、また位相を遅
らせれば、ネガティブコントラストが表示されることに
なる。
差コンデンサ部に必要であった位相リングを、図1の本
発明の位相差顕微鏡では、この位相差コンデンサ部の位
相リングをはずし、従来の位相リングの場所と共役な位
置に設置することにより、位相差コンデンサ部をコンデ
ンサレンズのみに置き換えて、位相差顕微鏡の位相差コ
ンデンサ部から位相リングをなくすことにより、既存の
位相差コンデンサ部を設けずに位相像を観測可能にした
位相差顕微鏡を得ることができる。
対物レンズを使用することも可能となり、開口数や倍率
などの性能の上で選択肢が多くなり、融通のきくシステ
ムとなる。
鏡をナノメータ計測系と組み合わせた計測用位相差顕微
鏡の実施形態を説明する。図2においては、図1の位相
差顕微鏡の各部の部材と同一物には同じ符号を付してい
る。本実施形態では、位相差対物レンズ部5と結像面1
0の間にダイクロイックミラー13を設け、レンズ11
とコンデンサレンズ3の間にダイクロイックミラー14
を設け、また、ダイクロイックミラー13にはレーザー
光源からレーザー光15を入射し、ダイクロイックミラ
ー14からの光は4分割フォトダイオード等で成るナノ
メータ計測器16に光が入射される。
めには、位相差像を観察しながらレーザ光を効率的に試
料に照射し、その変化を効率的にフォトダイオードに照
射する必要があるが、従来の位相差顕微鏡では、位相リ
ングがレーザーの殆どの光を妨げてしまうため、位相差
像、ナノメートル計測とが同時に行なえなかったが、本
発明の計測用位相差顕微鏡の構成によれば、レーザーの
光は位相リングに妨げられず、同時計測が可能となる。
射し、その光強度の変化を4分割フォトダイオード等で
成るナノメータ計測器16で捉えることにより、ナノメ
ータレベルでの分解能での計測を可能とする。
では、コンデンサレンズ以外に計測用対物レンズが必要
となるが、位相差コンデンサ部の位置に計測用対物レン
ズに置換することが可能なため、位相差顕微鏡に計測シ
ステムを組み込むことが可能となる。そして、例えば、
細胞などの生体試料を被観察物とした場合、細胞の輪
郭、内部構造の様子、細胞の様子を観察できると同時
に、位相差像を見ながらナノメータ単位の距離を計測す
ることができる。
と解像が位相膜径と位相リングの比によって決まり、被
観察物によって最適なコントラストと解像が異なるため
に、コントラストと解像のバランスをとった位相膜径や
位相リングとする必要がある。
位相板上の位相膜の透過率を変化させることによりコン
トラストを変化させて被観察物に最も適したコントラス
トが得られるように、位相板上の吸収膜の代わりに印加
電圧を変化させることによって透過率が変化するエレク
トロミック材料を用いることができる。
倍率等の観察条件を変更する際に変更しなければならな
い部材のうち、位相リング(開口絞り部)の開口の形状
を変化させるために、印加電圧を変化させることにより
透過率が変化する液晶パネルを用いる構成とすることも
できる。
従来の位相差顕微鏡では位相差コンデンサ部に必要であ
った位相リングを、本発明の位相差顕微鏡では、この位
相差コンデンサ部の位相リングをはずし、従来の位相リ
ングの場所と共役な位置に設置することにより、位相差
コンデンサ部をコンデンサレンズのみに置き換えて、位
相差顕微鏡の位相差コンデンサ部から位相リングをなく
すことにより、従来の位相差コンデンサ部を設けずに位
相像を観測可能にした位相差顕微鏡を得ることができ
る。
レンズが必要となるが、位相差コンデンサ部を計測用対
物レンズに置き換えることが可能なため、位相差顕微鏡
に計測システムを組み込むことが可能となる。そして、
例えば、細胞などの生体試料を被観察物とした場合、細
胞の輪郭、内部構造の様子、細胞の様子を観察できると
同時に、位相差像を見ながらナノメータ単位の距離を計
測することができる。
成図。
Claims (3)
- 【請求項1】 光源から照射される照明光をコンデンサ
レンズの前側焦点位置から移動された位相リングと、レ
ンズを介して、該位相リングの共役点で且つコンデンサ
レンズの前側焦点位置の仮想位相リングに得られる照明
光を、コンデンサレンズ、被観察物、対物レンズとその
後側焦点位置の位相板からなる位相差対物レンズ部に、
順次透過させて、結像面に結像させることを特徴とする
位相差顕微鏡。 - 【請求項2】 光源から照射される照明光を、コンデン
サレンズの前側焦点位置から移動された位相リングと、
レンズを介して、該位相リングの共役点で且つコンデン
サレンズの前側焦点位置の仮想位相リングに得られる照
明光を、コンデンサレンズ、被観察物、対物レンズとそ
の後側焦点位置の位相板からなる位相差対物レンズ部
に、順次透過させて、結像面に結像させる位相差顕微鏡
と、計測システムを同一システム内に併設させることを
特徴とする計測用位相差顕微鏡。 - 【請求項3】 前記計測システムは、前記位相差対物レ
ンズ部と前記結像面の間にレーザ光を入射するダイクロ
イックミラーを設け、前記レンズと前記コンデンサレン
ズの間に計測器に光を照射するダイクロイックミラーを
設けてなることを特徴とする請求項2記載の計測用位相
差顕微鏡。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2001400873A JP2003195180A (ja) | 2001-12-28 | 2001-12-28 | 位相差顕微鏡 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2001400873A JP2003195180A (ja) | 2001-12-28 | 2001-12-28 | 位相差顕微鏡 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2003195180A true JP2003195180A (ja) | 2003-07-09 |
Family
ID=27605210
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2001400873A Pending JP2003195180A (ja) | 2001-12-28 | 2001-12-28 | 位相差顕微鏡 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2003195180A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014124849A1 (de) * | 2013-02-15 | 2014-08-21 | Carl Zeiss Microscopy Gmbh | Verfahren zum betreiben eines lichtmikroskops und optikanordnung |
-
2001
- 2001-12-28 JP JP2001400873A patent/JP2003195180A/ja active Pending
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014124849A1 (de) * | 2013-02-15 | 2014-08-21 | Carl Zeiss Microscopy Gmbh | Verfahren zum betreiben eines lichtmikroskops und optikanordnung |
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Legal Events
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A621 | Written request for application examination |
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A977 | Report on retrieval |
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A131 | Notification of reasons for refusal |
Effective date: 20060725 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 |
|
A521 | Written amendment |
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