JP2003137796A - 肝機能保護剤または改善剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 肝機能保護剤または改善剤、肝機能保護また
は改善用飲食品または飼料、肝機能保護作用または改善
作用を有する飲食品用添加剤または飼料用添加剤および
動物の肝機能保護方法または改善方法を提供する。 【解決手段】 ハマゼリ（Cnidium）属、ジャノヒゲ（O
phiopogon）属、コウホネ（Nupharis）属、パセリ（Pet
roselinum）属およびミズキ（Cornus）属に属する植物
からなる群より選ばれる１種または２種以上の植物の植
物体または該植物体抽出物を有効成分として含有するこ
とを特徴とする肝機能保護剤または改善剤およびハマゼ
リ（Cnidium）属、ジャノヒゲ（Ophiopogon）属、コウ
ホネ（Nupharis）属、パセリ（Petroselinum）属および
ミズキ（Cornus）属に属する植物からなる群より選ばれ
る１種または２種以上の植物の植物体または該植物体抽
出物を添加してなる肝機能保護または改善用飲食品また
は飼料。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、肝機能保護剤また
は改善剤、肝機能保護または改善用飲食品または飼料、
肝機能保護作用または改善作用を有する飲食品用添加剤
または飼料用添加剤および動物の肝機能保護方法または
改善方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】肝臓は、３大栄養素である糖質、タンパ
ク質、脂質の代謝調節・貯蔵を行なったり、生体にとっ
て不要な物質を分解・解毒したり等の種々の機能を担っ
ている重要な臓器である。これら機能は、アルコールの
過剰摂取、ウイルス感染、乱れた食習慣、ストレス、喫
煙等により急性的あるいは慢性的に障害を受けるが、該
障害が進行すると、例えば急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化
症、アルコール性脂肪肝、Ｂ型ウイルス肝炎、肝臓癌等
の疾患となる。

【０００３】肝細胞がウイルス、アルコール等で障害を
受けると、細胞中のアスパラギン酸アミノトランスフェ
ラーゼ（グルタミン酸−オキサロ酢酸トランスアミナー
ゼともいう。以下ＧＯＴと略記する。）やアラニンアミ
ノトランスフェラーゼ（グルタミン酸−ピルビン酸トラ
ンスアミナーゼともいう。以下、ＧＰＴと略記する。）
等の酵素が血液中に出てくるため、これらの酵素活性を
示す数値が上昇する。従って、血液中のこれらＧＯＴ、
ＧＰＴ活性は、肝臓の機能障害を示す指標として知られ
ている。

【０００４】肝機能障害の予防または治療に使用される
薬剤としては、例えばアシクロビル等の抗ウイルス剤、
免疫抑制剤（医学のあゆみ１７１巻１４号９５７〜１１
５８、１９９４年、医歯薬出版）、グルタチオン（蛋白
質核酸酵素３３巻９号１６２５〜１６３１、１９８８
年、共立出版株式会社）、等が知られている。また、肝
機能の保護・増強・改善に有効とされる飲食品として
は、例えばウコン、マリアアザミ、ゴマリグナン、牡蠣
エキス、レバーエキス等が知られている（ＦＯＯＤＳｔ
ｙｌｅ ２１， ２巻１２号， １９９８年、食品化学
新聞社）。

【０００５】しかし、ハマゼリ属、ジャノヒゲ属、コウ
ホネ属、パセリ属およびミズキ属に属する植物の植物体
またはそれらの抽出物が、肝機能保護作用または改善作
用を有することは知られていない。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】肝疾患を効果的に治療
できる薬剤や、日々摂取することで肝機能障害を予防ま
たは治療できる健康飲食品または動物用飼料の開発が切
望されている。本発明の目的は、肝機能保護剤または改
善剤、肝機能保護または改善用飲食品または飼料、肝機
能保護剤または改善剤、肝機能保護作用または改善作用
を有する飲食品用添加物または飼料量添加物、および動
物の肝機能保護方法または改善方法を提供することにあ
る。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明は、以下の（１）
〜（１２）に関する。 （１） ハマゼリ（Cnidium）属、ジャノヒゲ（Ophiopo
gon）属、コウホネ（Nupharis）属、パセリ（Petroseli
num）属およびミズキ（Cornus）属に属する植物からな
る群より選ばれる１種または２種以上の植物の植物体ま
たは該植物体抽出物を有効成分として含有することを特
徴とする肝機能保護剤または改善剤。

【０００８】（２） ジャショウシ（Cnidium monnieri
L. Cusson）、センキュウ（Cnidium officinale Makin
o）、バクモンドウ（Ophiopogon japonicus KER-GAWLE
R）、センコツ（Nupharis japonicum DC）、パセリ（Pe
troselinum hortense）、ヤマボウシ（Cornus kousa Bu
erg. ex Hance）からなる群より選ばれる１種または２
種以上の植物の植物体または該植物体抽出物を有効成分
として含有することを特徴とする肝機能保護剤または改
善剤。

【０００９】（３） 経口で投与される前記（１）また
は（２）に記載の肝機能保護剤または改善剤。

【００１０】（４） 肝機能がアルコールにより影響さ
れる機能である前記（１）〜（３）のいずれかに記載の
肝機能保護剤または改善剤。

【００１１】（５） ハマゼリ（Cnidium）属、ジャノ
ヒゲ（Ophiopogon）属、コウホネ（Nupharis）属、パセ
リ（Petroselinum）属およびミズキ（Cornus）属に属す
る植物からなる群より選ばれる１種または２種以上の植
物の植物体または該植物体抽出物を添加してなる肝機能
保護または改善用飲食品または飼料。

【００１２】（６） ジャショウシ（Cnidium monnieri
L. Cusson）、センキュウ（Cnidium officinale Makin
o）、バクモンドウ（Ophiopogon japonicus KER-GAWLE
R）、センコツ（Nupharis japonicum DC）、パセリ（Pe
troselinum hortense）、ヤマボウシ（Cornus kousa Bu
erg. ex Hance）からなる群より選ばれる１種または２
種以上の植物の植物体または該植物体抽出物を添加して
なる肝機能保護または改善用飲食品または飼料。

【００１３】（７） 肝機能がアルコールにより影響さ
れる機能である前記（５）または（６）に記載の飲食品
または飼料。

【００１４】（８） ハマゼリ（Cnidium）属、ジャノ
ヒゲ（Ophiopogon）属、コウホネ（Nupharis）属、パセ
リ（Petroselinum）属およびミズキ（Cornus）属に属す
る植物からなる群より選ばれる１種または２種以上の植
物の植物体または該植物体抽出物を含有することを特徴
とする肝機能保護作用または改善作用を有する飲食品用
添加剤または飼料用添加剤。

【００１５】（９） ジャショウシ（Cnidium monnieri
L. Cusson）、センキュウ（Cnidium officinale Makin
o）、バクモンドウ（Ophiopogon japonicus KER-GAWLE
R）、センコツ（Nupharis japonicum DC）、パセリ（Pe
troselinum hortense）、ヤマボウシ（Cornus kousa Bu
erg. ex Hance）からなる群より選ばれる１種または２
種以上の植物の植物体または該植物体抽出物を含有する
ことを特徴とする肝機能保護作用または改善作用を有す
る飲食品用添加剤または飼料用添加剤。

【００１６】（１０） 肝機能がアルコールにより影響
される機能である前記（８）または（９）に記載の飲食
品用添加剤または飼料用添加剤。

【００１７】（１１） 前記（１）〜（４）のいずれか
に記載の肝機能の保護剤もしくは改善剤または前記
（５）〜（７）のいずれかに記載の飼料を動物に給餌す
ることを特徴とする動物の肝機能保護方法または肝機能
改善方法。

【００１８】（１２） 動物が、家畜、家禽、養殖魚で
ある前記（１１）記載の方法。

【００１９】

【発明の実施の形態】本発明でいう肝機能とは、肝臓の
有する機能をすべて意味しており特に制限はない。具体
的な肝機能としては、例えば血液貯蔵（循環量の調
整）、血色素の処理（ヘモグロビンの処理排出）、胆汁
の生成、胆汁色素の腸肝循環、血漿タンパク質（急性期
タンパク質、アルブミン、血液凝固因子、ステロイド結
合タンパク質、他のホルモン結合タンパク質等）の合成
等の血液と循環における機能、栄養素とビタミン（グル
コースと他の糖類、アミノ酸、脂質−脂肪酸、コレステ
ロール、リポタンパク、脂溶性ビタミン、水溶性ビタミ
ン等）の代謝等の栄養素の代謝機能、種々の物質（毒
素、エストロゲンやアンドロステロン等のステロイド、
他のホルモン等）の不活性化等の解毒または分解機能、
および免疫機能等［「生理学展望」原書１９版（平成１
２年３月３１日）、「新しい臨床栄養学」改訂第３版
（２０００年５月２０日）］があげられる。これら機能
はいずれもアルコールの過剰摂取により障害を受けるも
のである。

【００２０】本発明で用いられる植物は、ハマゼリ（Cn
idium）属、ジャノヒゲ（Ophiopogon）属、コウホネ（N
upharis）属、パセリ（Petroselinum）属およびミズキ
（Cornus）属に属する植物からなる群より選ばれる１種
または２種以上の植物である。

【００２１】ハマゼリ（Cnidium）属に属する植物とし
ては、例えばハマゼリ（Cnidium japonicum Miq.）、セ
ンキュウ（Cnidium officinale Makin）、ジャショウシ
（Cnidium monnieri L. Cusson）およびこれら植物から
育種された植物等があげられる。

【００２２】ジャノヒゲ（Ophiopogon）属に属する植物
としては、例えばオオバジャノヒゲ（Ophiopogon plami
scapus Nakai）、ジャノヒゲ（Ophiopogon japonicu
s）、ジャノヒゲ玉竜（Ophiopogon japonicus cv. Gyok
uryuu）、バクモンドウ（Ophiopogon japonicus KER-GA
WLER）およびこれら植物から育種された植物等があげら
れる。

【００２３】コウホネ（Nupharis）属に属する植物とし
ては、例えばコウホネ（Nuphar japonicum DC.）、オグ
ラコウホネ（Nuphar oguraense Miki）、オゼコウホネ
（Nuphar pumilum (Timm) DC. var. ozeense (Miki) H.
Hara）およびこれら植物から育種された植物等があげ
られる。

【００２４】パセリ（Petroselinum）属に属する植物と
しては、例えばイタリアンパセリ（Petroselinum sativ
um Hoffm）、パセリ（Petroselinum hortense）および
これら植物から育種された植物等があげられる。

【００２５】ミズキ（Cornus）属に属する植物として
は、例えばミズキ（Cornus controversa Hemsl.）、ハ
ナミズキ（Cornus florida L．）、サンシュユ（Cornus
officinalis Siebold et Zucc.）、ヤマボウシ（Cornu
s kousa Buerg. ex Hance）およびこれら植物から育種
された植物等があげられる。

【００２６】植物体としては、例えば野生の植物、栽培
により得られる植物または組織培養等の培養により得ら
れる植物の、例えば、葉、花、枝、茎、果実、根、種
子、培養された細胞もしくは器官、カルス等があげら
れ、これらをそのままあるいは物理・化学的または生物
的に処理して得られる各種処理物等があげられる。

【００２７】物理・化学的処理方法としては、例えば天
日乾燥、風乾等の乾燥処理、凍結乾燥処理、粉砕処理等
があげられ、物理・化学処理物としては、乾燥処理物、
凍結乾燥処理物、粉砕処理物等があげられる。生物的処
理方法としては、発酵方法等があげられ、生物的処理物
としては発酵処理物等があげられる。植物体抽出物とし
ては、前述の植物体より種々の抽出方法により得られる
抽出物があげられる。抽出方法としては、例えば各種溶
媒抽出、超臨界流体抽出等があげられる。抽出物は沈降
分離、ケーキ濾過、清澄濾過、遠心濾過、遠心沈降、圧
搾分離、フィルタープレス等の各種固液分離方法、各種
濃縮方法、各種乾燥方法、造粒もしくは粉末化等の製剤
化方法、各種精製方法等で処理してもよい。

【００２８】精製方法としては、例えば溶媒分画法、カ
ラムクロマトグラフィー法、再結晶法等があげられる。
特に、ダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化学社製）、セフ
ァデクスＬＨ−２０（ファルマシア社製）等の各種担体
を用いたカラムクロマトグラフィー法が好適に用いられ
る。濃縮および乾燥方法としては、例えば凍結乾燥、自
然乾燥、熱風乾燥、通風乾燥、送風乾燥、噴霧乾燥、減
圧乾燥、天日乾燥、真空乾燥、流動層乾燥、泡沫層乾
燥、ドラムドライヤー等による皮膜乾燥、超音波乾燥、
電磁波乾燥等の乾燥方法があげられ、噴霧乾燥方法、凍
結乾燥方法が好適に用いられる。

【００２９】抽出および抽出物の処理に際しては、例え
ば抗酸化剤や保存剤等を添加することもできる。溶媒抽
出に用いる溶媒としては、本発明の肝機能保護または改
善作用を示す物質を抽出できる溶媒なら何を用いてもよ
く、例えば水道水、蒸留水、脱イオン水等の水、無機塩
水溶液、緩衝液等の水性媒体、メタノール、エタノー
ル、プロパノール、ブタノール等の一価アルコール、プ
ロピレングリコール、グリセロール等の多価アルコー
ル、ヘキサン、トルエン、石油エーテル、ベンゼン、酢
酸エチル、クロロホルム、ジクロロメタン、１，１，２
−トリクロロエテン、ジメチルスルフォキシド、アセト
ン等の有機溶媒等があげられ、水性媒体、アルコールが
好適に用いられる。

【００３０】緩衝液としては、例えばリン酸緩衝液、ク
エン酸緩衝液等があげられる。無機塩水溶液の無機塩と
しては、例えば塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カ
ルシウム等があげられる。アルコールとしては、一価ア
ルコールが好ましく、一価アルコールとしてはエタノー
ルが好ましい。

【００３１】これら溶媒は単独または複数混合して用い
ることができる。混合した溶媒としては、含水アルコー
ルが好ましく、含水一価アルコールがより好ましく、含
水エタノールが特に好ましい。含水率としては、７０容
量％以下が好ましく、４０容量％以下がより好ましい。
溶媒としては、超臨界流体化した二酸化炭素を用いるこ
ともできる。

【００３２】抽出は、例えば植物体１重量部に対し溶媒
０．１重量部〜１００００重量部、好ましくは１重量部
〜１００重量部用いて行う。抽出温度は特に制限が無い
が、例えば０℃〜１００℃が好ましく、２０℃〜９０℃
がより好ましい。抽出時間は、特に制限が無いが、例え
ば１分間〜１週間が好ましく、３０分間〜１日間がより
好ましい。

【００３３】好ましい抽出方法としては、前述の植物
体、植物体の物理・化学処理物または生物的処理物を水
で抽出した残さをアルコールもしくは含水アルコールで
抽出する方法があげられる。水およびアルコールもしく
は含水アルコールで抽出するときの抽出温度としては、
例えば０℃〜１００℃が好ましく、２０℃〜９０℃がよ
り好ましい。抽出時間は、特に制限が無いが、例えば１
分間〜１週間が好ましく、３０分間〜１日間がより好ま
しい。

【００３４】抽出に使用する機器としては特に制限が無
いが、効率よく抽出するために工夫された容器、攪拌
機、還流冷却器、ソックスレー抽出機、ホモジナイザ
ー、振とう機、超音波発生装置等等があげられる。本発
明の肝機能保護剤または改善剤は、前述の方法で調製し
た植物体または該植物体抽出物を含有し、必要に応じて
薬理学的に許容される一種もしくはそれ以上の担体、更
に必要に応じて肝機能保護、増強、改善または肝機能障
害予防もしくは治療のための他の有効成分を含有してい
てもよい。

【００３５】本発明の肝機能保護または改善剤は、植物
体または該植物体抽出物を必要に応じ担体と一緒に混合
し、製剤学の技術分野においてよく知られている任意の
方法により製造される。製剤の投与形態は、肝機能を保
護または改善させるために効果的なものを使用するのが
望ましく、経口投与または、例えば静脈内、腹膜内もし
くは皮下投与等の非経口投与をあげることができる。こ
れらのうち、経口投与が好ましい。

【００３６】投与する剤形としては、錠剤、散剤、顆粒
剤、丸剤、懸濁剤、乳剤、浸剤、カプセル剤、シロップ
剤、注射剤、液剤、エリキシル剤、エキス剤、チンキ
剤、流エキス剤等があげられる。経口投与に適当な、例
えばエキス剤、チンキ剤、流エキス剤等は、ハマゼリ
属、ジャノヒゲ属、コウホネ属、パセリ属およびミズキ
属に属する植物からなる群より選ばれる１種または２種
以上の植物の植物体から、例えば水、エタノール、水と
エタノールの混合液等の溶媒で抽出して得られる植物体
抽出物をそのまま、または濃縮して調製することができ
る。

【００３７】経口投与に適当な、例えばシロップ剤のよ
うな液体調製物は、水、蔗糖、ソルビトール、果糖等の
糖類、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール
等のグリコール類、ごま油、オリーブ油、大豆油等の油
類、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル類等の防腐剤、パ
ラオキシ安息香酸メチル等のパラオキシ安息香酸誘導
体、安息香酸ナトリウム等の保存剤、ストロベリーフレ
ーバー、ペパーミント等のフレーバー類等の担体を使用
して製造できる。

【００３８】また、経口投与に適当な、例えば錠剤、散
剤および顆粒剤等は、乳糖、白糖、ブドウ糖、蔗糖、マ
ンニトール、ソルビトール等の糖類、バレイショ、コム
ギ、トウモロコシ等の澱粉、炭酸カルシウム、硫酸カル
シウム、炭酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム等の無機
物、結晶セルロース、カンゾウ末、ゲンチアナ末等の植
物末等の賦形剤、澱粉、寒天、ゼラチン末、結晶セルロ
ース、カルメロースナトリウム、カルメロースカルシウ
ム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、アルギン酸
ナトリウム等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、タ
ルク、水素添加植物油、マクロゴール、シリコーン油等
の滑沢剤、ポリビニールアルコール、ヒドロキシプロピ
ルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、
カルメロース、ゼラチン、澱粉のり液等の結合剤、脂肪
酸エステル等の界面活性剤、グリセリン等の可塑剤等を
用いて製造できる。

【００３９】非経口投与に適当な注射剤は、好ましくは
受容者の血液と等張である活性化合物を含む滅菌水性剤
からなる。例えば、注射剤の場合は、塩溶液、ブドウ糖
溶液または塩水とブドウ糖溶液の混合物からなる担体等
を用いて注射用の溶液を調製する。また、これら非経口
剤においても、前述の防腐剤、保存剤、界面活性剤等が
使用できる。

【００４０】本発明の、肝機能保護または改善剤の投与
量および投与回数は、投与形態、患者の年齢、体重、治
療すべき症状の性質もしくは重篤度等により異なり特に
制限はないが、経口の場合、植物体乾燥重量または該植
物体抽出物の乾燥重量として、成人一人当り０．０１ｍ
ｇ〜５０ｇ、好ましくは０．０５ｍｇ〜１０ｇを一日一
回ないし数回投与する。静脈内投与等の非経口投与の場
合、植物体乾燥重量または該植物体抽出物の乾燥重量と
して、成人一人当り０．００１ｍｇ〜５０ｇ、好ましく
は０．０１ｍｇ〜１０ｇを一日一回ないし数回投与す
る。

【００４１】また、動物に投与する場合、投与形態、動
物の年齢、種類、治療すべき症状の性質もしくは重篤度
等により異なり特に制限はないが、経口の場合、植物体
乾燥重量または該植物体抽出物の乾燥重量として、体重
１Ｋｇ当たり、０．１ｍｇ〜１０ｇ、好ましくは１ｍｇ
〜１ｇを一日一回ないし数回投与する。また、静脈内投
与等の非経口投与の場合、植物体乾燥重量または該植物
体抽出物の乾燥重量として、体重１Ｋｇ当たり０．０１
ｍｇ〜１０ｇ、好ましくは１ｍｇ〜１ｇを一日一回ない
し数回投与する。

【００４２】これら投与量および投与回数に関しては、
前述の種々の条件により変動する。本発明の植物体また
は該植物体抽出物を添加してなる肝機能保護または改善
用飲食品または飼料としては、一般の飲食品もしくは飼
料またはそれらの原料に本発明の植物体または該植物体
抽出物を添加する以外は、一般の飲食品または飼料の製
造方法で製造されるものがあげられる。

【００４３】植物体または該植物体抽出物を添加する一
般の飲食品もしくは飼料またはそれらの原料としては、
特に制限が無く、植物体または該植物体抽出物を含有し
ているものでも、植物体または該植物体抽出物を実質的
に含有していないものでもよい。植物体または該植物体
抽出物を含有している飲食品または飼料に、植物体また
は該植物抽出物を添加することにより、該飲食品または
飼料の肝機能保護作用または改善作用を増大させること
ができる。

【００４４】該飲食品または飼料は、例えば成形・造粒
方法等一般の飲食品または飼料に用いる加工法で加工し
てもよい。成形・造粒方法としては流動層造粒、攪拌造
粒、押し出し造粒、転動造粒、気流造粒、圧縮成形造
粒、解砕造粒、噴霧造粒、噴射造粒等の造粒方法、パン
コーティング、流動層コーティング、ドライコーティン
グ等のコーティング方法、パフドライ、過剰水蒸気法、
フォームマット方法、マイクロ波加熱方法等の膨化方
法、押出造粒機やエキストルーダー等の押出方法等があ
げられる。

【００４５】飲食品または飼料に添加する本発明の植物
体または該植物体抽出物の添加量としては、飲食品また
は飼料が肝機能保護作用または改善作用を示すことがで
きる量であれば特に制限はないが、植物体乾燥重量また
は該植物体抽出物乾燥重量として例えば０．００１〜１
００重量％、好ましくは０．０１〜１００重量％、より
好ましくは０．１〜１００重量％含有するように添加さ
れる。

【００４６】植物体または該植物体抽出物を添加する具
体的な飲食品としては、例えば植物体または該植物体抽
出物を添加されたジュース類、清涼飲料水、スープ類、
茶類、乳酸菌飲料、発酵乳、冷菓、バター、チーズ、ヨ
ーグルト、加工乳、脱脂粉乳等の乳製品、ハム、ソーセ
ージ、ハンバーグ等の畜肉製品、魚肉錬り製品、だし巻
き、卵豆腐等の卵製品、クッキー、ゼリー、スナック菓
子、チューイングガム等の菓子類、パン類、麺類、漬け
物類、燻製品、干物、佃煮、調味料等があげられる。

【００４７】飲食品の形態としては、例えば粉末食品、
シート状食品、瓶詰め食品、缶詰食品、レトルト食品、
カプセル食品、タブレット状食品、流動食品、ドリンク
剤等があげられる。本発明の飲食品は、健康飲食品、機
能性飲食品として、肝機能保護または改善のために使用
することができる。本発明の植物体または該植物体抽出
物を有効成分として含有する肝機能保護作用または改善
作用を有する飲食品を摂取する場合、その摂取量は特に
制限がないが、成人一人あたり、植物体乾燥重量または
該植物体抽出物乾燥重量として、一日あたり０．０１ｍ
ｇ〜５０ｇ、好ましくは０．０５ｍｇ〜１０ｇである。
この摂取量を１日間〜１年間、好ましくは２週間〜３ヶ
月間、摂取し続ける。ただし、この摂取量はあくまでも
目安であり、摂取者の症状の程度や年齢、体重等に応じ
て適宜好適な範囲となるように調整することができる。

【００４８】植物体または該植物体抽出物を添加する具
体的な飼料としては、ほ乳類、鳥類、は虫類、両生類、
魚類等の動物に対する飼料で有ればいずれでもよく、例
えば、イヌ、ネコ、ネズミ等のペット用飼料、ウシ、ブ
タ等の家畜用飼料、ニワトリ、七面鳥等の家禽用飼料、
タイ、ハマチ等の養殖魚用飼料等があげられる。本発明
の飼料は、飼料原料に植物体または該植物体抽出物を適
宜配合して作ることができる。飼料原料としては、穀物
類、糟糠類、植物性油かす類、動物性飼料原料、その他
の飼料原料、精製品等があげられる。

【００４９】穀物としては、例えばマイロ、小麦、大
麦、えん麦、らい麦、玄米、そば、あわ、きび、ひえ、
とうもろこし、大豆等があげられる。糟糠類としては、
例えば米ぬか、脱脂米ぬか、ふすま、末粉、小麦、胚
芽、麦ぬか、トウモロコシぬか、トウモロコシ胚芽等が
あげられる。植物性油かす類としては、例えば大豆油か
す、きな粉、あまに油かす、綿実油かす、落花生油か
す、サフラワー油かす、やし油かす、パーム油かす、ご
ま油かす、ひまわり油かす、なたね油かす、カポック油
かす、からし油かす等があげられる。

【００５０】動物性飼料原料としては、例えば魚粉（北
洋ミール、輸入ミール、ホールミール、沿岸ミール
等）、フィッシュソルブル、肉粉、肉骨粉、血粉、分解
毛、骨粉、家畜用処理副産物、フェザーミール、蚕よ
う、脱脂粉乳、カゼイン、乾燥ホエー等があげられる。
その他飼料原料としては、植物茎葉類（アルファルフ
ァ、ヘイキューブ、アルファルファリーフミール、ニセ
アカシア粉末等）、トウモロコシ加工工業副産物（コー
ングルテン、ミール、コーングルテンフィード、コーン
ステープリカー等）、でんぷん加工品（でんぷん等）、
砂糖、発酵工業産物（酵母、ビールかす、麦芽根、アル
コールかす、しょう油かす等）、農産製造副産物（柑橘
加工かす、豆腐かす、コーヒーかす、ココアかす等）、
その他（キャッサバ、そら豆、グアミール、海藻、オキ
アミ、スピルリナ、クロレラ、鉱物等）等があげられ
る。精製品としては、タンパク質（カゼイン、アルブミ
ン等）、アミノ酸、糖質（スターチ、セルロース、しょ
糖、グルコース等）、ミネラル、ビタミン等があげられ
る。

【００５１】本発明による植物体または該植物体抽出物
を有効成分として含有する肝機能保護作用または改善作
用を有する飼料を動物に摂取させる場合、その摂取量は
特に制限がないが、動物の体重１ｋｇあたり、植物体乾
燥重量または該植物体抽出物乾燥重量として、一日あた
り０．１ｍｇ〜１０ｇ、好ましくは１ｍｇ〜１ｇであ
る。この摂取量を１日間〜１年間、好ましくは２週間〜
３ヶ月間、摂取し続ける。ただし、この摂取量はあくま
でも目安であり、摂取動物の種類、年齢、体重等に応じ
て適宜好適な範囲に調製することができる。

【００５２】植物体または該植物体抽出物を有効成分と
して含有することを特徴とする肝機能保護作用または改
善作用を有する飲食品用添加剤または飼料用添加剤は、
前述の方法で調製した植物体または該植物体抽出物を有
効成分として含有し、必要に応じて一般に飲食品または
飼料に用いられる添加剤、例えば食品添加物表示ハンド
ブック（日本食品添加物協会、平成９年１月６日発行）
に記載されている甘味料、着色料、保存料、増粘安定
剤、酸化防止剤、発色剤、漂白剤、防かび剤、ガムベー
ス、苦味料、酵素または酵素源、光沢剤、酸味料、調味
料、乳化剤、強化剤、製造用剤、香料、香辛料抽出物等
の添加剤を添加してもよい。また、前述の肝機能保護ま
たは改善剤に例示した担体を添加してもよい。

【００５３】飲食品用添加剤または飼料用添加剤におけ
る植物体または植物体抽出物の濃度としては、特に制限
がないが、１〜１００重量％が好ましく、１０〜１００
重量％がより好ましく、２０〜１００重量％が特に好ま
しい。添加物としては、例えば以下の添加物があげられ
る。甘味料としては、例えばアスパルテーム、カンゾ
ウ、ステビア、キシロース、ラカンカ等があげられる。

【００５４】着色料としては、例えばカロチノイド、ウ
コン色素、フラボノイド、カラメル色素、シコン色素、
スピルリナ色素、葉緑素、ムラサキイモ色素、ムラサキ
ヤマイモ色素、シソ色素、ブルーベリー色素等があげら
れる。保存料としては、例えば亜硫酸ナトリウム、安息
香酸類、ウド抽出物、エゴノキ抽出物、カワラヨモギ抽
出物、ソルビン酸類、プロピオン酸類等があげられる。

【００５５】増粘安定剤としては、アラビアガムやキサ
ンタンガム等のガム類、アルギン酸類、キチン、キトサ
ン、キダチアロエ抽出物、グァーガム、ヒドロキシプロ
ピルセルロース、カゼインナトリウム、コーンスター
チ、カルボキシメチルセルロース類、ゼラチン、寒天、
デキストリン、メチルセルロース、ポリビニルアルコー
ル、微小繊維状セルロース、微結晶セルロース、海藻セ
ルロース、ポリアクリル酸ソーダ、ポリリン酸ナトリウ
ム、カラギーナン、酵母細胞壁、コンニャクイモ抽出
物、ナタデココ、マンナン等があげられる。

【００５６】酸化防止剤としては、例えばビタミンＣ
類、エチレンジアミン四酢酸ナトリウム、エチレンジア
ミン四酢酸カルシウム、エリソルビン酸、オリザノー
ル、カテキン、ケルセチン、クローブ抽出物、酵素処理
ルチン、リンゴ抽出物、ゴマ油抽出物、ジブチルヒドロ
キシトルエン、ウイキョウ抽出物、セイヨウワサビ抽出
物、セリ抽出物、チャ抽出物、テンペ抽出物、ドクダミ
抽出物、トコトリエノール、トコフェロール類、ナタネ
油抽出物、生コーヒー豆抽出物、ヒマワリ種子、フェル
ラ酸、ブチルヒドロキシアニソール、ブルーベリー葉抽
出物、プロポリス抽出物、ヘゴ・イチョウ抽出物、ヘス
ペレチン、コショウ抽出物、ホウセンカ抽出物、没食子
酸、ヤマモモ抽出物、ユーカリ抽出物、ローズマリー抽
出物等があげられる。

【００５７】発色剤としては、例えば亜硝酸ナトリウム
等があげられる。漂白剤としては、例えば亜硫酸ナトリ
ウム等があげられる。防カビ剤としては、例えばオルト
フェニルフェノール等があげられる。ガムベースとして
は、例えばアセチルリシノール酸メチル、ウルシロウ、
エステルガム、エレミ樹脂、オウリキュウリロウ、オゾ
ケライト、オポパナックス樹脂、カウリガム、カルナウ
バロウ、グアヤク樹脂、グッタカチュウ、グッタハンカ
ン、グッタペルカ、グリセリン脂肪酸エスエル、ゲイロ
ウ、コパオババルサム、コーパル樹脂、ゴム、コメヌカ
ロウ、サトウキビロウ、シェラック、ジェルトン、しょ
糖脂肪酸エステル、ソルバ、ソルビタン脂肪酸エステ
ル、タルク、炭酸カルシウム、ダンマル樹脂、チクル、
チルテ、ツヌー、低分子ゴム、パラフィンワックス、フ
ァーバルサム、プロピレングリコール脂肪酸エステル、
粉末パルプ、粉末モミガラ、ホホバロウ、ポリイソブチ
レン、ポリブテン、マイクロクリスタルワックス、マス
チック、マッサランドチョコレート、ミツロウ、りん酸
カルシウム等があげられる。

【００５８】苦味剤としては、例えばイソアルファー苦
味酸、カフェイン、カワラタケ抽出物、キナ抽出物、キ
ハダ抽出物、ゲンチアナ抽出物、酵素処理ナリンジン、
ジャマイカカッシア抽出物、デオブロミン、ナリンジ
ン、ビガキ抽出物、ニガヨモギ抽出物、ヒキオコシ抽出
物、ヒメマツタケ抽出物、ボラペット、メチルチオアデ
ノシン、レイシ抽出物、オリーブ茶、ダイダイ抽出物、
ホップ抽出物、ヨモギ抽出物等があげられる。

【００５９】酵素または酵素源としては、例えばアミラ
ーゼ、トリプシン、レンネット、乳酸菌等があげられ
る。光沢剤としては、例えばウルシロウ、モクロウ等が
あげられる。酸味料としては、例えばアジピン酸、イタ
コン酸、クエン酸類、コハク酸類、酢酸ナトリウム、酒
石酸類、二酸化炭素、乳酸、フィチン酸、フマル酸、リ
ンゴ酸、リン酸等があげられる。

【００６０】調味料としては、例えばアスパラギン、ア
スパラギン酸類、グルタミン酸、グルタミン、アラニ
ン、イソロイシン、グリシン、セリン、シスチン、チロ
シン、ロイシン、プロリン等のアミノ酸、イノシン酸ナ
トリウム、ウリジル酸ナトリウム、グアニル酸ナトリウ
ム、シチジル酸ナトリウム、リボヌクレオチドカルシウ
ム、リボヌクレオチドナトリウム等の核酸、クエン酸、
コハク酸等の有機酸、塩化カリウム、塩水湖水低塩ナト
リウム液、粗製海水塩化カリウム、ホエイソルト、りん
酸三カリウム、りん酸水素ニカリウム、りん酸ニ水素カ
リウム、りん酸水素ニナトリウム、りん酸ニ水素ナトリ
ウム、りん酸三ナトリウム、クロレラ抽出物等があげら
れる。

【００６１】乳化剤としては、例えばショ糖脂肪酸エス
テル等があげられる。強化剤としては亜鉛塩類、ビタミ
ンＣ類、各種アミノ酸、５−アデニル酸、塩化鉄、ヘス
ペリジン、各種焼成カルシウム、各種未焼成カルシウ
ム、ジベンゾイルチアミン、水酸化カルシウム、炭酸カ
ルシウム、チアミン塩酸塩、デュナリエラカロチン、ト
コフェロール、ニコチン酸、ニンジンカロチン、パーム
油カロチン、パントテン酸カルシウム、ビタミンＡ、ヒ
ドロキシプロリン、ピロリン酸ニ水素カルシウム、ピロ
リン酸第一鉄、ピロリン酸第二鉄、フェリチン、ヘム
鉄、メナキノン、葉酸、リボフラビン等があげられる。

【００６２】製造用剤としてはアセトンやイオン交換樹
脂等の加工助剤、イチジク葉抽出物、イナワラ灰抽出
物、カオリン、グリセリン脂肪酸エステル、クワ抽出
物、骨灰、シソ抽出物、ショウガ抽出物、各種タンニ
ン、パフィア抽出物、ブドウ種子抽出物、エタノール等
があげられる。香料としては、例えばバニラエッセンス
等があげられる。

【００６３】香辛料抽出物としては、例えばトウガラシ
エキス等があげられる。なお、これら各種添加剤は、前
述の肝機能保護剤または改善剤、並びに肝機能保護作用
または改善作用を有する飲食品または飼料に添加して用
いることもできる。以下実施例に基づいて本発明を詳述
する。ただし、下記実施例は本発明を制限するものでは
ない。

【００６４】

【実施例】実施例１ ジャショウシのアセトンエキスの
凍結乾燥粉末の製造 乾燥したジャショウシ（Cnidium monnieri L. Cusson）
の粉末（志平商店社製）１ｋｇをアセトン１０リットル
で２回抽出し（室温、１時間攪拌）、得られた抽出液を
濃縮後、凍結乾燥することにより、ジャショウシのアセ
トンエキスの凍結乾燥粉末８３．３ｇを得た。

【００６５】実施例２ センキュウ末のアセトンエキス
の凍結乾燥粉末の製造 乾燥したセンキュウ（Cnidium officinale Makino）の
粉末（伸和製薬社製）１ｋｇをアセトン１０リットルで
２回抽出し（室温、１時間攪拌）、得られた抽出液を濃
縮後、凍結乾燥することにより、センキュウ末のアセト
ンエキスの凍結乾燥粉末を得た。

【００６６】実施例３ バクモンドウのアセトンエキス
の凍結乾燥粉末の製造 乾燥したバクモンドウ（Ophiopogon japonicus KER-GAW
LER）の粉末（志平商店社製）１ｋｇをアセトン１０リ
ットルで２回抽出し（室温、１時間攪拌）、得られた抽
出液を濃縮後、凍結乾燥することにより、バクモンドウ
のアセトンエキスの凍結乾燥粉末４５．２ｇを得た。

【００６７】実施例４ センコツのアセトンエキスの凍
結乾燥粉末の製造 乾燥したセンコツ（Nupharis japonicum DC）の粉末
（紀伊国屋漢薬社製）１ｋｇをアセトン１０リットルで
２回抽出し（室温、１時間攪拌）、得られた抽出液を濃
縮後、凍結乾燥することにより、センコツのアセトンエ
キスの凍結乾燥粉末を得た。

【００６８】実施例５ パセリのアセトンエキスの凍結
乾燥粉末の製造 市販のパセリ（Petroselinum hortense）を乾燥、粉砕
して得られた粉末１ｋｇをアセトン１０リットルで２回
抽出し（室温、１時間攪拌）、得られた抽出液を濃縮
後、凍結乾燥することにより、パセリのアセトンエキス
の凍結乾燥粉末２４０．８ｇを得た。

【００６９】実施例６ ヤマボウシのアセトンエキスの
凍結乾燥粉末の製造 ヤマボウシ（Cornus kousa Buerg. ex Hance）の葉を乾
燥、粉砕して得られた粉末１ｋｇをアセトン１０リット
ルで２回抽出し（室温、１時間攪拌）、得られた抽出液
を濃縮後、凍結乾燥することにより、ヤマボウシのアセ
トンエキスの凍結乾燥粉１３０．５ｇを得た。

【００７０】実施例７ ジャショウシのアセトンエキス
の分画物の製造 実施例１で製造して得た凍結乾燥粉末５ｇを水５００ｍ
ｌで懸濁した。該懸濁液を疎水性吸着レジン（三菱化学
社製、ダイヤイオンＨＰ−２０、ボイドボリューム１０
０ｍｌ）を充填したカラムに通塔した。ついで２５０ｍ
ｌの３３容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌ
の３３容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの
６６容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの６
６容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの１０
０％メタノールを通塔し溶出される液を濃縮・乾燥する
ことにより濃縮乾固物（１）を０．２９ｇ得た。さら
に、２５０ｍｌの１００％メタノールを通塔し、さらに
２５０ｍｌの１００％アセトンを通塔し、ついで２５０
ｍｌの１００％アセトンを通塔し溶出される液を濃縮・
乾燥することにより濃縮乾固物（２）を０．００２５ｇ
得た。

【００７１】実施例８ センキュウ末のアセトンエキス
の分画物の製造 実施例２で製造して得た凍結乾燥粉末５ｇを水５００ｍ
ｌで懸濁した。該懸濁液を疎水性吸着レジン（三菱化学
社製、ダイヤイオンＨＰ−２０、ボイドボリューム１０
０ｍｌ）を充填したカラムに通塔した。ついで２５０ｍ
ｌの３３容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌ
の３３容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの
６６容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの６
６容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの１０
０％メタノールを通塔し、さらに、２５０ｍｌの１００
％メタノールを通塔し溶出される液を濃縮・乾燥するこ
とにより濃縮乾固物（１）を０．０７２３ｇ得た。さら
に２５０ｍｌの１００％アセトンを通塔し溶出される液
を濃縮・乾燥することにより濃縮乾固物（２）を０．０
８６８ｇ得た。

【００７２】実施例９ バクモンドウのアセトンエキス
の分画物の製造 実施例３で製造して得た凍結乾燥粉末５ｇを水５００ｍ
ｌで懸濁した。該懸濁液を疎水性吸着レジン（三菱化学
社製、ダイヤイオンＨＰ−２０、ボイドボリューム１０
０ｍｌ）を充填したカラムに通塔した。ついで２５０ｍ
ｌの３３容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌ
の３３容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの
６６容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの６
６容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの１０
０％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの１００％
メタノールを通塔し、ついで２５０ｍｌの１００％アセ
トンを通塔し溶出される液を濃縮・乾燥することにより
濃縮乾固物（１）を０．００１５ｇ得た。

【００７３】実施例１０ センコツのアセトンエキスの
分画物の製造 実施例４で製造して得た凍結乾燥粉末５ｇを水５００ｍ
ｌで懸濁した。該懸濁液を疎水性吸着レジン（三菱化学
社製、ダイヤイオンＨＰ−２０、ボイドボリューム１０
０ｍｌ）を充填したカラムに通塔した。ついで２５０ｍ
ｌの３３容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌ
の３３容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの
６６容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの６
６容量％メタノールを通塔し溶出される液を濃縮・乾燥
することにより濃縮乾固物（１）を０．６７ｇ得た。

【００７４】実施例１１ パセリのアセトンエキスの分
画物の製造 実施例５で製造して得た凍結乾燥粉末５ｇを水５００ｍ
ｌで懸濁した。該懸濁液を疎水性吸着レジン（三菱化学
社製、ダイヤイオンＨＰ−２０、ボイドボリューム１０
０ｍｌ）を充填したカラムに通塔した。ついで２５０ｍ
ｌの３３容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌ
の３３容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの
６６容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの６
６容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌの１０
０％メタノールを通塔し、さらに、２５０ｍｌの１００
％メタノールを通塔し溶出される液を濃縮・乾燥するこ
とにより濃縮乾固物（１）を０．６３ｇ得た。ついで２
５０ｍｌの１００％アセトンを通塔し溶出される液を濃
縮・乾燥することにより濃縮乾固物（２）を２．０ｇ得
た。ついで、２５０ｍｌの１００％アセトンを通塔し溶
出される液を濃縮・乾燥することにより濃縮乾固物
（３）を０．１０ｇ得た。

【００７５】実施例１２ ヤマボウシのアセトンエキス
の分画物の製造 実施例６で製造して得た凍結乾燥粉末５ｇを水５００ｍ
ｌで懸濁した。該懸濁液を疎水性吸着レジン（三菱化学
社製、ダイヤイオンＨＰ−２０、ボイドボリューム１０
０ｍｌ）を充填したカラムに通塔した。ついで２５０ｍ
ｌの３３容量％メタノールを通塔し、さらに２５０ｍｌ
の３３容量％メタノールを通塔し溶出される液を濃縮・
乾燥することにより濃縮乾固物（１）を０．２６ｇ得
た。さらに２５０ｍｌの６６容量％メタノールを通塔し
溶出される液を濃縮・乾燥することにより濃縮乾固物
（２）を０．１５ｇ得た。さらに２５０ｍｌの６６容量
％メタノールを通塔し溶出される液を濃縮・乾燥するこ
とにより濃縮乾固物（３）を１．４ｇ得た。

【００７６】実施例１３ 下記の各成分を混合することにより飼料を製造した。。

【００７７】 ＣＥ−２（日本クレア社製） ９９．８重量％ 実施例１で製造した粉体 ０．２重量％

【００７８】実施例１４ 下記の各成分を混合することにより飼料を製造した。。 ＣＥ−２（日本クレア社製） ９９．８重量％ 実施例２で製造した粉体 ０．２重量％

【００７９】実施例１５ 下記の各成分を混合することにより飼料を製造した。。

【００８０】 ＣＥ−２（日本クレア社製） ９９重量％ 実施例３で製造した粉末 １重量％

【００８１】実施例１６ 下記の各成分を混合することにより飼料を製造した。。 ＣＥ−２（日本クレア社製） ９９．９４重量％ 実施例４で製造した粉末 ０．０６重量％

【００８２】実施例１７ 下記の各成分を混合することにより飼料を製造した。。

【００８３】 ＣＥ−２（日本クレア社製） ９９重量％ 実施例５で製造した粉末 １重量％

【００８４】実施例１８ 下記の各成分を混合することにより飼料を製造した。。 ＣＥ−２（日本クレア社製） ９９重量％ 実施例６で製造した粉末 １重量％

【００８５】比較例１ 下記の各成分を混合することにより飼料を製造した。。

【００８６】 ＣＥ−２（日本クレア社製） ９９重量％ パインデックス（松谷化学社製） １重量％

【００８７】実施例１９ ジャショウシ、センキュウ、
バクモンドウ、センコツ、パセリ及びヤマボウシのアセ
トンエキスの分画物によるアセトアミノフェン（ＡＡ
Ｐ）誘導初代培養肝細胞障害の抑制 コラゲナーゼ灌流法［セグレン（Seglen,P.O.）、メソ
ド・イン・セル・バイオロジー（Methods in Cell Biol
ogy），１３，２９（１９７６）］に基づいてラットの
肝細胞を分離した。即ち、体重約１３０ｇのオスのＳＤ
ラットを麻酔下で開腹し、３７℃に保温した前灌流液
［ハンクの等張液（Hanks' Balanced SaltSolution、ギ
ブコ社製）：９．５ｇ、ＨＥＰＥＳ（ナカライテスク社
製）：２．３８ｇ、ＥＧＴＡ（シグマ社製）：０．１９
ｇ、ＮａＨＣＯ₃（キシダ化学社製）：０．３５ｇを１
Ｌの水に溶解し、ｐＨ７．２に調整したもの］を門脈よ
り肝臓を３０ｍｌ／分の流速で４００ｍｌ灌流した。次
に３７℃に保温したコラゲナーゼ溶液［ハンクス液ニッ
スイ（日水製薬社製）：９．８ｇ、ＨＥＰＥＳ（ナカ
ライテスク社製）：２．３８ｇ、ＮａＨＣＯ₃（キシダ
化学社製）：０．３５ｇ、ＣａＣｌ₂（キシダ化学社
製）：０．５６ｇ、トリプシンインヒビター（シグマ社
製）：０．０２ｇ、コラゲナーゼ（シグマ社製）：０．
５ｇを１Ｌの水に溶解し、ｐＨ７．５に調整したもの］
を２００ｍｌ灌流した。

【００８８】肝臓が消化された後、肝臓をシャーレ内に
回収し、２０ｍｌのＳ−ＭＥＭ培地（ギブコ社製）を加
えメスで細切した。次いで１０ｍｌの先太駒込ピペット
でピペッティングし、肝細胞を分散させた後、ガーゼ及
び細胞濾過器（池本理化工業社製）で肝細胞を濾過し、
肝細胞分散液を得た。ここで得られた肝細胞は肝実質細
胞以外の非実質細胞、例えば内皮細胞、クッパー細胞、
伊東細胞、星細胞等を含んでいるため、遠心分離によっ
て肝実質細胞のみを精製した。具体的には、得られた肝
細胞分散液を５０×Ｇで１分間冷却下で遠心分離し、底
に沈殿した肝実質細胞を回収した。この操作を３回繰り
返し、純度の高い肝実質細胞を分離回収した。

【００８９】分離回収した肝細胞を１．２×１０⁶細胞
／ｍｌの濃度になるように、下記基本培地に懸濁し、マ
トリゲルをコートした６穴プレート上に１．４ｍｌ播種
し、以下の培養条件で初代培養した。培地は、ウエイマ
ウスのＭＢ７５２／１（Waymouth'sMB752/1）培地（ギ
ブコ社製）に１０容量％のウシ血清（ＦＢＳ）、５０Ｕ
／ｍｌのペニシリン、５０μｇ／ｍｌのストレプトマイ
シン、１０^-8ｍｏｌ／ｌのインシュリン及び１０^-6ｍｏ
ｌ／ｌのデキサメタゾン（dexamethasone）を含有させ
た培地（以下、基本培地というときもある。）を用い
た。

【００９０】培養は３７℃、５容量％ＣＯ₂、９５容量
％大気のＣＯ₂インキュベーターでおこなった。播種終
了４時間後に基本培地を除去し、ＰＢＳで洗浄後、新た
な基本培地７００μｌを分注して、さらに培養した。実
施例７で得た濃縮乾固物（１）及び（２）、実施例８で
得た濃縮乾固物（１）及び（２）、実施例９で得た濃縮
乾固物（１）、実施例１０で得た濃縮乾固物（１）、実
施例１１で得た濃縮乾固物（１）、（２）及び（３）、
及び実施例１２で得た濃縮乾固物（１）及び（２）をそ
れぞれジメチルスルフォキシド（以下、ＤＭＳＯと略記
する。）で１０ｍｇ／ｍｌの濃度となるように溶解し、
これを上記基本培地で５０倍に希釈し、分画物濃度２０
０μｇ／ｍｌの試験液を調製した。

【００９１】細胞播種２４時間後、各穴に試験液を１４
０μｌずつ添加し（分画物の最終濃度は、２０μｇ／ｍ
ｌとなる。）、その１時間後に５０ｍｍｏｌ／ｌアセト
アミノフェン水溶液（肝障害誘導剤）を５６０μｌずつ
添加し（アセトアミノフェンの最終濃度は、２０ｍｍｏ
ｌ／ｌとなる。）、これを試験区とした。また、細胞播
種２４時間後、各穴に２重量％ＤＭＳＯ含有培地１４０
μｌずつ添加し、その１時間後に５０ｍｍｏｌ／ｌアセ
トアミノフェン水溶液（肝障害誘導剤）を５６０μｌず
つ添加し（アセトアミノフェンの最終濃度は、２０ｍｍ
ｏｌ／ｌとなる。）、これを第１コントロール区とし
た。

【００９２】また、細胞播種２４時間後、各穴に２重量
％ＤＭＳＯ含有培地を１４０μｌずつ添加し、その１時
間後に蒸留水を５６０μｌずつ添加し、これを第２コン
トロール区とした。アセトアミノフェン水溶液または蒸
留水添加４８時間後にＭＴＴ［3-(4,5-Dimethyl-2-thia
zolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide]アッセ
イによって、各区の細胞数を吸光度により計測した。具
体的には、各穴中の基本培地を除き、ＭＴＴ（１０ｍｇ
／ｍｌ）を溶解したＰＢＳ（リン酸緩衝液含有生理食塩
水）を１０容量％含んだＷａｙｍｏｕｔｈ’ｓＭＢ７５
２／１培地を１．４ｍｌ分注した。３７℃のＣＯ₂イン
キュベータ内で１時間インキュベートした後、４．２ｍ
ｌのＤＭＳＯを添加し、烈しく攪拌した後、マイクロプ
レートリーダー（バイオラド社製、モデル３５５０）に
おいて、５７０ｎｍの吸光度をそれぞれ測定した。評価
は２連でおこなった。肝細胞障害抑制率は次の式（Ｉ）
によって計算した。

【００９３】

【式１】

【００９４】

【表１】

【００９５】第１表に示したように、実施例７で得た濃
縮乾固物（１）及び（２）、実施例８の濃縮乾固物
（１）及び（２）、実施例９で得た濃縮乾固物（１）、
実施例１０で得た濃縮乾固物（１）、実施例１１で得た
濃縮乾固物（１）、（２）及び（３）、及び実施例１２
で得た濃縮乾固物（１）及び（２）は、アセトアミノフ
ェンによる肝細胞障害を２８．１〜１０８．３％抑制し
た。

【００９６】実施例２０ ジャショウシ、バクモンド
ウ、パセリ及びヤマボウシのアセトンエキスの分画物に
よるガラクトサミン誘導初代培養肝細胞障害の抑制 実施例７で得た濃縮乾固物（１）、実施例９で得た濃縮
乾固物（１）、実施例１１で得た濃縮乾固物（１）及び
（２）、及び実施例１２で得た濃縮乾固物（１）をそれ
ぞれＤＭＳＯで溶解して１０ｍｇ／ｍｌとし、これを基
本培地で５０倍に希釈して分画物濃度２００μｇ／ｍｌ
の分画物希釈液を作成した。

【００９７】実施例１９と同様の方法で細胞を播種し初
代培養した。播種２時間後に培地を除去し、ＰＢＳで洗
浄後、新たな基本培地７００μｌを分注した後、分画物
希釈液を１４０μｌ添加した（分画物の最終濃度は２０
μｇ／ｍｌとなる。）。その２時間後に培地に溶解した
５０ｍｍｏｌ／ｌガラクトサミン（肝障害誘導剤）を５
６０μｌ添加し（ガラクトサミンの最終濃度は、２０ｍ
ｍｏｌ／ｌとなる。）、これを試験区とした。

【００９８】また、細胞播種２４時間後、各穴に２重量
％ＤＭＳＯ含有培地１４０μｌを添加し、その１時間後
に５０ｍｍｏｌ／ｌガラクトサミン（肝障害誘導剤）を
５６０μｌ添加し（ガラクトサミンの最終濃度は、２０
ｍｍｏｌ／ｌとなる。）、これを第１コントロール区と
した。また、細胞播種２４時間後、各穴に２重量％ＤＭ
ＳＯ含有培地１４０μｌを添加し、その１時間後に蒸留
水を５６０μｌ添加し、これを第２コントロール区とし
た。

【００９９】ガラクトサミンまたは蒸留水添加４８時間
後にＭＴＴアッセイによって、各区の細胞数を吸光度に
より計測した。具体的には、各穴中の基本培地を除き、
１０ｍｇ／ｍｌのＭＴＴを溶解したＰＢＳを１０容量％
含有させたＷａｙｍｏｕｔｈ’ｓＭＢ７５２／１培地を
１．４ｍｌ分注した。３７℃のＣＯ₂インキュベータ内
で１時間インキュベートした後、４．２ｍｌのＤＭＳＯ
を添加し、烈しく攪拌した後、マイクロプレートリーダ
ー（バイオラド社製、モデル３５５０）において、５７
０ｎｍの吸光度をそれぞれ測定した。評価は２連でおこ
なった。肝細胞障害抑制率は前述の式（Ｉ）によって計
算した。

【０１００】結果を第２表に示す。

【０１０１】

【表２】

【０１０２】第２表に示したように、実施例７で得た濃
縮乾固物（１）、実施例９で得た濃縮乾固物（１）、実
施例１１で得た濃縮乾固物（１）及び（２）、及び実施
例１２で得た濃縮乾固物（１）は、ガラクトサミンによ
る肝細胞障害を３１．４〜８２．５％抑制した。

【０１０３】実施例２１ ジャショウシ、バクモンド
ウ、センコツ及びパセリによるガラクトサミン誘導ラッ
ト肝障害の抑制 日本ＳＬＣ社から購入したウイスター（Ｗｉｓｔａｒ）
系白色ラット（雄、１５０±２０ｇ）を一定条件下（温
度：２４±２℃、湿度：６０±５％、明暗周期：１２時
間）で３日間以上順応させた後、実施例１３及び１５〜
１７で製造した飼料および比較例１で製造した飼料をそ
れぞれ計４日間にわたって摂食させた。３日目に、４０
ｍｇ／ｍｌの濃度で生理食塩水に溶解したガラクトサミ
ン水溶液を、体重１ｋｇ当たり４００ｍｇの割合で腹腔
内に投与した。ガラクトサミンを投与してから２２時間
後に、ネンブタールによる麻酔下で開腹し採血した。

【０１０４】この様にして得られた血液を用い、肝機能
の指標として、血液中のＧＰＴの活性を、以下の方法で
測定した。採取した血液を凝固させた後、遠心分離し、
血清を得た。得られた血清中のＧＰＴをトランスアミナ
ーゼＣII−テストワコー（和光純薬工業社製）を用いて
測定した。ＧＰＴ活性は、比較例１の飼料を摂取させて
得られる値を１００として、各実施例で製造した飼料を
摂取させて得られる値の相対値（％）を計算して求め
た。値は平均値±標準誤差で示し、統計学的な有意差検
定はＴ−テストによって行った。

【０１０５】結果を第３表に示す。

【０１０６】

【表３】

【０１０７】第３表に示したように、実施例１３及び１
５〜１７で製造した飼料をそれぞれ摂取させた場合、比
較例１の飼料を摂取させた場合に比べ、肝機能障害の指
標である血清中のＧＰＴ活性は、６７．８％〜８５．９
％と低く押さえられ、肝機能障害が抑制されたことが判
る。なお、４日間の摂食期間中、いずれの飼料を与えた
場合でも体重増加に違いは認められず、外見上、および
行動上の異常も認められなかった。

【０１０８】実施例２２ ジャショウシアセトンエキス
配合剤の製造 下記組成を有する肝機能保護剤または肝機能改善剤を、
各成分を混合することにより製造した。

【０１０９】 実施例１で製造したジャショウシアセトンエキス ４９ｇ パインデックス＃３ ４９ｇ ピロリン酸第２鉄（鉄源） ０．１ｇ ホスカルＥＦＣ（カルシウム源；日興ファインプロダクツ社製） １ｇ ビタミンミックス（メルク社製） １ｇ

【０１１０】実施例２３ センキュウ末アセトンエキス
配合剤の製造 下記組成を有する肝機能保護剤または肝機能改善剤を、
各成分を混合することにより製造した。

【０１１１】 実施例２で製造したセンキュウ末アセトンエキス ４９ｇ パインデックス＃３ ４９ｇ ピロリン酸第２鉄（鉄源） ０．１ｇ ホスカルＥＦＣ（カルシウム源；日興ファインプロダクツ社製） １ｇ ビタミンミックス（メルク社製） １ｇ

【０１１２】実施例２４ バクモンドウアセトンエキス
配合剤の製造 下記組成を有する肝機能保護剤または肝機能改善剤を、
各成分を混合することにより製造した。

【０１１３】 実施例３で製造したバクモンドウアセトンエキス ４９ｇ パインデックス＃３ ４９ｇ ピロリン酸第２鉄（鉄源） ０．１ｇ ホスカルＥＦＣ（カルシウム源；日興ファインプロダクツ社製） １ｇ ビタミンミックス（メルク社製） １ｇ

【０１１４】実施例２５ センコツアセトンエキス配合
剤の製造 下記組成を有する肝機能保護剤または肝機能改善剤を、
各成分を混合することにより製造した。

【０１１５】 実施例４で製造したセンコツアセトンエキス ４９ｇ パインデックス＃３ ４９ｇ ピロリン酸第２鉄（鉄源） ０．１ｇ ホスカルＥＦＣ（カルシウム源；日興ファインプロダクツ社製） １ｇ ビタミンミックス（メルク社製） １ｇ

【０１１６】実施例２６ パセリアセトンエキス配合剤
の製造 下記組成を有する肝機能保護剤または肝機能改善剤を、
各成分を混合することにより製造した。

【０１１７】 実施例５で製造したパセリアセトンエキス ４９ｇ パインデックス＃３ ４９ｇ ピロリン酸第２鉄（鉄源） ０．１ｇ ホスカルＥＦＣ（カルシウム源；日興ファインプロダクツ社製） １ｇ ビタミンミックス（メルク社製） １ｇ

【０１１８】実施例２７ ヤマボウシアセトンエキス配
合剤の製造 下記組成を有する肝機能保護剤または肝機能改善剤を、
各成分を混合することにより製造した。

【０１１９】 実施例６で製造したヤマボウシアセトンエキス ４９ｇ パインデックス＃３ ４９ｇ ピロリン酸第２鉄（鉄源） ０．１ｇ ホスカルＥＦＣ（カルシウム源；日興ファインプロダクツ社製） １ｇ ビタミンミックス（メルク社製） １ｇ

【０１２０】実施例２８ 実施例２２で製造した肝機能保護剤または改善剤２０ｇ
を水１８０ｍｌに分散させ、肝機能保護または改善用飲
料を製造した。

【０１２１】実施例２９ 実施例２３で製造した肝機能保護剤または改善剤２０ｇ
を水１８０ｍｌに分散させ、肝機能保護または改善用飲
料を製造した。

【０１２２】実施例３０ 実施例２４で製造した肝機能保護剤または改善剤２０ｇ
を水１８０ｍｌに分散させ、肝機能保護または改善用飲
料を製造した。

【０１２３】実施例３１ 実施例２５で製造した肝機能保護剤または改善剤２０ｇ
を水１８０ｍｌに分散させ、肝機能保護または改善用飲
料を製造した。

【０１２４】実施例３２ 実施例２６で製造した肝機能保護剤または改善剤２０ｇ
を水１８０ｍｌに分散させ、肝機能保護または改善用飲
料を製造した。

【０１２５】実施例３３ 実施例２７で製造した肝機能保護剤または改善剤２０ｇ
を水１８０ｍｌに分散させ、肝機能保護または改善用飲
料を製造した。

【０１２６】実施例３４ ジャショウシアセトンエキス
配合ケーキの製造 次の配合によりクッキー（３０個分）を製造した。

【０１２７】 薄力粉 １００ｇ でん粉 ７４ｇ 水 １４ｇ 製造例２２で製造したジャショウシアセトンエキス配合剤 ３０ｇ ベーキングパウダー 小さじ２ 塩 小さじ２ 卵 １個 バター ８０ｇ 牛乳 大さじ２

【０１２８】実施例３５ センキュウ末アセトンエキス
配合ケーキの製造 次の配合によりクッキー（３０個分）を製造した。

【０１２９】 薄力粉 １００ｇ でん粉 ７４ｇ 水 １４ｇ 製造例２３で製造したセンキュウ末アセトンエキス配合剤 ３０ｇ ベーキングパウダー 小さじ２ 塩 小さじ２ 卵 １個 バター ８０ｇ 牛乳 大さじ２

【０１３０】実施例３６ バクモンドウアセトンエキス
配合ケーキの製造 次の配合によりクッキー（３０個分）を製造した。

【０１３１】 薄力粉 １００ｇ でん粉 ７４ｇ 水 １４ｇ 製造例２４で製造したバクモンドウアセトンエキス配合剤 ３０ｇ ベーキングパウダー 小さじ２ 塩 小さじ２ 卵 １個 バター ８０ｇ 牛乳 大さじ２

【０１３２】実施例３７ センコツアセトンエキス配合
ケーキの製造 次の配合によりクッキー（３０個分）を製造した。

【０１３３】 薄力粉 １００ｇ でん粉 ７４ｇ 水 １４ｇ 製造例２５で製造したセンコツアセトンエキス配合剤 ３０ｇ ベーキングパウダー 小さじ２ 塩 小さじ２ 卵 １個 バター ８０ｇ 牛乳 大さじ２

【０１３４】実施例３８ パセリアセトンエキス配合ケ
ーキの製造 次の配合によりクッキー（３０個分）を製造した。

【０１３５】 薄力粉 １００ｇ でん粉 ７４ｇ 水 １４ｇ 製造例２６で製造したパセリアセトンエキス ３０ｇ ベーキングパウダー 小さじ２ 塩 小さじ２ 卵 １個 バター ８０ｇ 牛乳 大さじ２

【０１３６】実施例３９ ヤマボウシアセトンエキス配
合ケーキの製造 次の配合によりクッキー（３０個分）を製造した。

【０１３７】 薄力粉 １００ｇ でん粉 ７４ｇ 水 １４ｇ 製造例２７で製造したヤマボウシアセトンエキス ３０ｇ ベーキングパウダー 小さじ２ 塩 小さじ２ 卵 １個 バター ８０ｇ 牛乳 大さじ２

【０１３８】

【発明の効果】本発明により、肝機能保護剤または改善
剤、肝機能保護または改善用飲食品または飼料、肝機能
保護作用または改善作用を有する飲食品用添加物または
飼料用添加物、および動物の肝機能保護方法または改善
方法を提供することができる。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ２３Ｋ 1/18 １０２ Ａ２３Ｋ 1/18 １０２Ａ Ａ２３Ｌ 1/30 Ａ２３Ｌ 1/30 Ｂ Ａ６１Ｐ 1/16 Ａ６１Ｐ 1/16 (72)発明者 神谷 陽子 茨城県つくば市御幸が丘２番地 協和醗酵 工業株式会社筑波研究所内 Ｆターム(参考） 2B005 DA01 DA05 GA01 MB09 2B150 AA01 AA02 AA03 AA05 AA06 AA08 AA20 AB20 DD31 DD57 4B018 LB01 LB08 LE05 MD61 ME14 MF01 4C088 AB12 AB39 AB40 AB85 AC03 AC04 AC05 AC11 CA01 CA03 CA10 CA11 MA52 NA14 ZA75

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ハマゼリ（Cnidium）属、ジャノヒゲ（O
   phiopogon）属、コウホネ（Nupharis）属、パセリ（Pet
   roselinum）属およびミズキ（Cornus）属に属する植物
   からなる群より選ばれる１種または２種以上の植物の植
   物体または該植物体抽出物を有効成分として含有するこ
   とを特徴とする肝機能保護剤または改善剤。
2. 【請求項２】 ジャショウシ（Cnidium monnieri L. Cu
   sson）、センキュウ（Cnidium officinale Makino）、
   バクモンドウ（Ophiopogon japonicus KER-GAWLER）、
   センコツ（Nupharis japonicum DC）、パセリ（Petrose
   linum hortense）、ヤマボウシ（Cornus kousa Buerg.
   ex Hance）からなる群より選ばれる１種または２種以上
   の植物の植物体または該植物体抽出物を有効成分として
   含有することを特徴とする肝機能保護剤または改善剤。
3. 【請求項３】 経口で投与される請求項１または２に記
   載の肝機能保護剤または改善剤。
4. 【請求項４】 肝機能がアルコールにより影響される機
   能である請求項１〜３のいずれかに記載の肝機能保護剤
   または改善剤。
5. 【請求項５】 ハマゼリ（Cnidium）属、ジャノヒゲ（O
   phiopogon）属、コウホネ（Nupharis）属、パセリ（Pet
   roselinum）属およびミズキ（Cornus）属に属する植物
   からなる群より選ばれる１種または２種以上の植物の植
   物体または該植物体抽出物を添加してなる肝機能保護ま
   たは改善用飲食品または飼料。
6. 【請求項６】 ジャショウシ（Cnidium monnieri L. Cu
   sson）、センキュウ（Cnidium officinale Makino）、
   バクモンドウ（Ophiopogon japonicus KER-GAWLER）、
   センコツ（Nupharis japonicum DC）、パセリ（Petrose
   linum hortense）、ヤマボウシ（Cornus kousa Buerg.
   ex Hance）からなる群より選ばれる１種または２種以上
   の植物の植物体または該植物体抽出物を添加してなる肝
   機能保護または改善用飲食品または飼料。
7. 【請求項７】 肝機能がアルコールにより影響される機
   能である請求項５または６に記載の飲食品または飼料。
8. 【請求項８】 ハマゼリ（Cnidium）属、ジャノヒゲ（O
   phiopogon）属、コウホネ（Nupharis）属、パセリ（Pet
   roselinum）属およびミズキ（Cornus）属に属する植物
   からなる群より選ばれる１種または２種以上の植物の植
   物体または該植物体抽出物を含有することを特徴とする
   肝機能保護作用または改善作用を有する飲食品用添加剤
   または飼料用添加剤。
9. 【請求項９】 ジャショウシ（Cnidium monnieri L. Cu
   sson）、センキュウ（Cnidium officinale Makino）、
   バクモンドウ（Ophiopogon japonicus KER-GAWLER）、
   センコツ（Nupharis japonicum DC）、パセリ（Petrose
   linum hortense）、ヤマボウシ（Cornus kousa Buerg.
   ex Hance）からなる群より選ばれる１種または２種以上
   の植物の植物体または該植物体抽出物を含有することを
   特徴とする肝機能保護作用または改善作用を有する飲食
   品用添加剤または飼料用添加剤。
10. 【請求項１０】 肝機能がアルコールにより影響される
    機能である請求項８または９に記載の飲食品用添加剤ま
    たは飼料用添加剤。
11. 【請求項１１】 請求項１〜４のいずれかに記載の肝機
    能の保護剤もしくは改善剤または請求項５〜７のいずれ
    かに記載の飼料を動物に給餌することを特徴とする動物
    の肝機能保護方法または肝機能改善方法。
12. 【請求項１２】 動物が、家畜、家禽、養殖魚である請
    求項１１記載の方法。