JP2002544483A

JP2002544483A - 植物葉部の農薬吸収率測定用組成物および測定方法

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Publication number: JP2002544483A
Application number: JP2000616419A
Authority: JP
Inventors: チョ、クヮン・ユン; ユ、ジュ・ヒュン; リム、ヘ・キョウン; チョイ、ギュン・ジャ; キム、ジョン・ハン
Original assignee: コリアリサーチインスティチュートオブケミカルテクノロジイ
Priority date: 1999-05-10
Filing date: 1999-06-29
Publication date: 2002-12-24
Anticipated expiration: 2019-06-29
Also published as: US6506601B2; AU743453B2; KR20000073389A; AU4531999A; KR100314600B1; US20010001713A1; WO2000068685A1; EP1097375A1; EP1097375B1; JP3348153B1

Abstract

(57)【要約】本発明は、農薬および追跡物質としてコンゴレッド（Congo red）を含む、植物葉部の農薬吸収率を測定するための組成物を提供し、さらに、（ａ）農薬およびコンゴレッドを含む組成物を植物および対照基板に散布する段階、（ｂ）農薬およびコンゴレッドを抽出するために前記植物および対照基板を溶媒で洗浄する段階、（ｃ）前記洗浄液中の農薬およびコンゴレッドの濃度を測定する段階、および（ｄ）植物葉部の農薬吸収率を算出する段階を含むことを特徴とする植物葉部の農薬吸収率を測定するための方法を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】

発明の分野本発明は、植物葉部の農薬吸収率測定用組成物および農薬吸収率を測定する方
法に関する。さらに詳しくは、本発明は、前記農薬および追跡物質としてコンゴ
レッド（Congo red）を含む植物葉部の農薬吸収率測定用組成物、およびそれを
用いて前記植物葉部の農薬吸収率を測定するための方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】

発明の背景雑草、病菌および昆虫から農作物を保護するために数百種の農薬が開発され、
市販されている。しかし、ある農薬の持続的な使用は、一時効果があったその農
薬に対する耐性が生じた種の出現を誘導し、また、このような耐性がある雑草、
病菌または昆虫を制御するために過量の農薬を用いることによって、コストの問
題だけでなく、深刻な環境問題を惹起した。したがって、環境親和的な新種農薬
を開発する必要とともに、効果的な補助剤を加えることなどによって伝達システ
ムを改善して農薬の既存の使用量を減らす必要がある。

【０００３】農薬活性増強用補助剤の例としては、農薬の防除対象作物への付着を容易にさ
せる散布剤または散布付着剤、防除対象作物に付着した農薬の雨水による流失を
防ぐための耐雨性増強剤、および対象作物による農薬の吸収を増大させる吸収促
進剤がある。

【０００４】多量の農薬が植物組織内に短時間内に吸収されれば、除草剤の場合もそうであ
るが、その薬効がより速く、かつ強くあらわれる。殺菌剤の場合においては、適
当な吸収促進剤を用いると、疾病に対する予防効果および治療効果まで増進させ
得る。また、殺虫剤の場合は、適当な吸収促進剤を加えると、殺虫剤が直接散布
されていない部位で棲息する害虫まで根絶できる優れた殺虫効果が得られる。

【０００５】たとえば、テレンス（B.Terence）らは、キュウリべと病、ジャガイモ枯れ病
およびトウガラシ枯れ病に感染された蔓類を治療するために用いられるジメトモ
ルフ（dimethomorph）を非イオン界面活性剤、たとえば、ラウリルアルコールエ
トキシレートと混合して用いると、治療効果が著しく増進されると報告した(Pes
ticide Science, 46, 199-213 & 355-359(1996))。

【０００６】さらに、メグシング（Megh Singh）らは、非選択性除草剤であるグリホセー
ト（Ｎ−（ホスホノメチル）グリシン）を有機シリコン系界面活性剤であるシル
ウェットＬ−７７（Hanjung Chemicals, Inc., Korea）と混合使用すると、
グリホセートの植物に対する吸収性を促進させ得ると報告した（Proceedings o
f Fourth International Symposium on Adjuvants for Agrochemicals,
385-390(1995)）。

【０００７】上述のように、環境および経済的な観点からは、農薬使用率を最小限に維持し
、かつ農作物を保護する効果を最大化することが要求される。この効果は、作物
によって吸収される農薬の量に依存する。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】

植物に吸収された農薬の量を測定する一般的な方法は、放射性同位元素で標識
された農薬を対象植物に加え、一定時間後植物を適当な溶媒で洗浄し、そしてこ
れらの放射能を測定する段階から構成される。しかし、この方法は、高コストお
よび、特殊装備と専門家の介在を要するという複雑性の問題がある。

【０００９】したがって、植物の農薬吸収率を定量的に測定するための経済的な方法はまだ
開発されていない。

【００１０】対象農作物による農薬吸収を増加させる吸収促進剤を選別するための方法とし
て下記の二つの方法が報告されている。

【００１１】第一の方法は、放射性同位元素で標識された農薬と吸収促進剤候補物質との混
合物で植物を処理し、この放射性標識を追跡することである。しかし、この方法
は、前述の高コストおよび複雑性の問題を伴う。

【００１２】第二の方法は、農薬と吸収促進剤候補物質との混合物で植物を処理し、雑草、
病菌または害虫の防除効果を直接に測定することである。しかし、この方法は、
長時間の実験を要し、また、半定量的なデータしか得られない。

【００１３】

【課題を解決するための手段】

そこで、本発明者らは、前記のような問題点を解決して、植物による農薬吸収
率を測定し、対象作物および使用農薬に対して最適な吸収促進剤を選別するため
の簡便でかつ正確な方法を開発するために鋭意研究した結果、前記目的を達成す
るために使用され得る新規な追跡物質を開発するに至った。

【００１４】発明の要約したがって、本発明の目的は、植物の農薬吸収率を測定するための組成物を提
供することである。

【００１５】本発明の他の目的は、前記組成物を用いて植物の農薬吸収率を測定するための
方法を提供することである。

【００１６】本発明のまた他の目的は、前記方法を用いて農薬の吸収促進剤を選別するため
の方法を提供することである。

【００１７】本発明の一実施態様によって、本発明では、農薬および追跡物質として植物に
全く吸収されないコンゴレッドを含む、植物葉部の農薬吸収率を測定するための
組成物が提供される。

【００１８】また、本発明の他の実施態様によって、本発明では、（ａ）農薬およびコンゴ
レッドを含む組成物を植物および対照基板（control plate）に散布する段階、
（ｂ）農薬およびコンゴレッド（Congo red）を抽出するために前記植物および
対照基板を溶媒で洗浄する段階、（ｃ）前記洗浄液中の農薬およびコンゴレッド
の濃度を測定する段階、並びに（ｄ）植物葉部の農薬吸収率を算出する段階を含
むことを特徴とする植物葉部の農薬吸収率を測定するための方法が提供される。

【００１９】

【発明の実施の形態】

発明の詳細な説明本発明の方法は、使用農薬の吸収率を高める吸収促進剤を選別するために用い
られる。

【００２０】以下、本発明を詳細に説明する。

【００２１】Ａ．植物葉部の農薬吸収率測定用組成物の製造農薬の原材または製剤を水または水溶性溶媒に溶解、乳化または懸濁し、これ
に追跡物質であるコンゴレッドを加え、よく混合して本発明の植物葉部の農薬吸
収率測定用組成物を得た。コンゴレッドは、高性能液体クロマトグラフィー(hig
h performance liquid chromatography, HPLC)や紫外可視分光光度計（spec
trophotometer）で定量できる範囲内で出きる限り低い濃度で農薬溶液に加える
ことが好ましい。たとえば、前記農薬溶液にコンゴレッドを１μｍ／ｍｌ〜１，
０００μｍ／ｍｌ範囲の濃度で加えることができる。農薬溶液中のコンゴレッド
の濃度が農薬の濃度より高いと、植物内への農薬の吸収を妨げ、植物の農薬吸収
率が実際より低い値として測定されるおそれがある。

【００２２】本発明の農薬吸収率測定方法に使用され得る農薬の具体例としては、当分野で
公知の除草剤、殺虫剤、殺菌剤、植物成長調節剤などがある。

【００２３】農薬溶液を製造するにおいて使用可能な市販の農薬製品は、通常の方法によっ
て所定の濃度に希釈される。液状またはゼリー状農薬の場合は、少量のアセトン
のような有機溶媒に溶解するか、または必要な場合、少量の界面活性剤を加えて
水に溶解または乳化し得る。固体状の場合は、微粉砕して分散剤である界面活性
剤と混合する。

【００２４】特定農薬に対する吸収促進剤を選別するために、本発明の組成物はさらに農薬
吸収促進剤候補物質を含むことができる。吸収促進剤候補物質は、水または有機
溶媒に溶解した状態で本発明の組成物に加えることができる。

【００２５】Ｂ．植物および対照基板に本発明の組成物の塗布前記Ａで製造された本発明の組成物を対象植物、および農薬と追跡物質のいず
れもを吸収しない対照基板に塗布する。

【００２６】本発明に使用され得る対象植物の種類は特に限定されないが、十分成熟したも
ので、老化現象があらわれていないのが好ましい。

【００２７】対照基板は、植物への吸収以外の要因による農薬の損失量を測定するために用
いられる。本発明に用いられる対照基板の物質は、本発明の組成物を吸収、分解
および非活性化させない限り制限されなく、ガラス基板が好ましい。

【００２８】コンゴレッドは、光分解されやすい物質であるため、農薬溶液の噴霧、植物と
対照基板の保管および洗浄などのすべての作業は、強い直射光線を避け、弱い光
の下で行われなければならない。

【００２９】植物および対照基板に本発明の組成物を散布するときは、対象表面へ組成物を
均一に散布するのために噴霧室(spray booth)を用いることが好ましい。また、
組成物の噴霧量は溶液が溢れない範囲内で最大量にすることが好ましい。たとえ
ば、キュウリやトウガラシのように葉が水平で、葉の面積が比較的広い広葉植物
の場合は、組成物の噴霧量が１〜１００ｌ／ｈａであり、イネやヒエのように葉
が直立し、葉の面積が狭い単子葉植物の場合は、５０〜３００ｌ／ｈａであるこ
とが好ましい。しかし、植物の種類および種々の条件によって噴霧量を調節する
ことができる。

【００３０】Ｃ．組成物の洗浄前記Ｂで本発明の組成物を塗布して得た植物および対照基板の特定数は、噴霧
直後適当な溶媒で洗浄して連続測定のための基準設定に用いられる標準洗浄液を
得る。残りの噴霧された植物および基板は、一定期間暗所で保管した後、同様に
洗浄して、吸収されないで残っている農薬およびコンゴレッドを含む洗浄液を得
る。このような洗浄過程に適合な溶媒としては、水、またはメタノール、エタノ
ール、アセトンおよびアセトニトリルのような水溶性有機溶媒、またはこれらの
混合物があり、特にアセトニトリル水溶液が好ましい。水溶性有機溶媒を用いる
場合、水に対する水溶性有機溶媒の比率は、使用される農薬の水溶解度によって
０：１０（ｖ／ｖ）〜５：５（ｖ／ｖ）に調整することができる。すなわち、農
薬の水溶解度が高いときは、水溶性有機溶媒の含量が低いことが好ましく、農薬
の水溶解度が低いときは、水の含量が低いことが好ましい。

【００３１】噴霧された植物を洗浄する場合は、適切な溶媒を含む試験管に、植物の地上部
を切り取って入れ、栓で塞いだ後、分当り５０〜８０ｒｐｍで１分〜５分間攪拌
する。噴霧された対照基板は、適当なサイズのペトリ皿（petri dish）に入れ
、前記と同様な溶媒で洗浄する。

【００３２】Ｄ．農薬およびコンゴレッドの濃度測定ならびに農薬吸収率の算出前記Ｃで得られた洗浄液中の農薬およびコンゴレッドの濃度は、通常の方法、
たとえば、ＨＰＬＣ、ガスクロマトグラフィー（gas chromatography）、吸光
度測定法によって定量することができる。

【００３３】すなわち、植物葉部の農薬吸収率は、下記方法によって算出される：噴霧直後得られた植物および対照基板の初期洗浄液中の農薬とコンゴレッドの濃
度比（農薬濃度／コンゴレッド濃度）を各々算出し、噴霧してから一定時間経過後得られた植物および対照基板の洗浄液中の農薬とコ
ンゴレッドの濃度比（農薬濃度／コンゴレッド濃度）を各々算出し、前記（２）で算出された農薬とコンゴレッドの濃度比を前記（１）で算出された
植物および対照基板の洗浄液中の濃度比で各々分け、噴霧してから一定時間経過
後、植物および対照基板の表面に残留する農薬の比率を算出し、そして、前記対照基板の表面における農薬残留率から植物の表面における農薬残留率を引
くことによって、植物に吸収される農薬の比率を算出する。

【００３４】本発明による農薬吸収率の測定方法をより容易に説明するための一つの例を挙
げると次の通りである。

【００３５】農薬１００ｐｐｍおよびコンゴレッド１００ｐｐｍを含む農薬溶液を製造し、
これを２枚のキュウリ葉と二つのガラス基板に各々噴霧する。噴霧直後キュウリ
葉１枚およびガラス基板１個を各々溶媒１０ｍｌで洗浄し、ＨＰＬＣ分析方法を
用いて洗浄液中の農薬およびコンゴレッドの濃度を測定する。一方、他のキュウ
リ葉およびガラス基板を２４時間暗室で保管した後、同一溶媒１０ｍｌで洗浄す
る。洗浄液中の農薬およびコンゴレッドの濃度をＨＰＬＣによって測定する。上
述の手順に従ってキュウリ葉への農薬の吸収率を算出し、その結果を下記表１に
示す。

【００３６】

【表１】

【００３７】前記のように、コンゴレッドは、植物内に吸収または揮発されない。したがっ
て、植物内への吸収および蒸発と分解のような他の要因によって損失した農薬の
総量は、本発明の組成物の噴霧直後および一定時間経過後に植物から観察される
農薬とコンゴレッドの量を比べることによって算出し得る。また、ガラス基板は
これら物質を全く吸収しないため、ガラス基板に残留する農薬の比は、植物内へ
の吸収以外の理由で損失された農薬の比率を示す。したがって、植物葉部の農薬
吸収率に対する正確な値は、植物およびガラス基板に残っている農薬の比を比べ
ることによって容易に算出することができる。

【００３８】前述のように、農薬の追跡物質としてコンゴレッドを用いる本発明の方法は、
植物に吸収された農薬の量を正確に判断するのに有用である。また、本発明の方
法は、特定農薬および植物に適合な吸収促進剤を選別するのに有用である。本発
明は、種々の農薬の効果的な最少適用率を決定するのに用いられるため、費用お
よび環境保護の両面で有益である。

【００３９】下記実施例は本発明をさらに詳細に説明するためのものであり、本発明の範囲
を制限しない。

【００４０】また、下記固体混合物中の固体、液体中の液体、および液体中の固体に対して
下記に与えられた百分率は、別に言及しない限り各々重量／重量、体積／体積お
よび重量／体積に基づいたものである。

【００４１】実施例１：キュウリに対する種々の農薬の吸収率の測定（段階１）農薬およびコンゴレッドを含む溶液の調製プロシミドン（procymidone）水和剤（５０％ ai, Dongbang Agro Corpor
ation, Korea）、フェナリモール（fenarimol）乳剤（１２．５％ ai, Orien
tal Chemical Industries, Korea）およびジメトモルフ水和剤（２５％ ai,
Dongbang Agro Corporation, Korea）を各々秤量してエルレンマイヤー（E
rlenmeyer）フラスコに入れ、これに水とコンゴレッド水溶液を加えて最終濃度
が各々５００ｐｐｍ、３１．２５ｐｐｍおよび２５０ｐｐｍになるようにし、こ
の際、コンゴレッドの濃度は４００ｐｐｍに調整した。ジメトモルフは植物に全
く吸収されないので、補助剤としてステアリルアミンエトキシレート（ＳＮ、エ
チレンオキシドの付加モル数１０モル）０．１％を加えてキュウリ葉に対する吸
収性を高めた。

【００４２】（段階２）農薬溶液の噴霧キュウリ種子（Baktadagi, Hung Nong Seed Co., Ltd.）を樹脂コップポ
ット（内径４７ｍｍｘ高さ５０ｍｍ）にポット当り３粒ずつ播種し、温室で栽培
した。子葉が完全に展開される時期に使い捨て樹脂コップポット（内径６６ｍｍ
ｘ高さ６６ｍｍ）に移植し、４葉または５葉が展開されるまで温室で栽培した。

【００４３】このように製造されたキュウリ１８ポットを噴霧室に入れ、前記段階１で製造
した農薬溶液８０ｌ／ｈａを噴霧した。また、ガラス板（１０ｃｍｘ１０ｃｍ）
１５枚に前記段階１で製造した農薬溶液８０ｌ／ｈａを噴霧した。

【００４４】（段階３）キュウリ葉およびガラス板の洗浄洗浄液として、プロシミドンに対して４０％アセトニトリル水溶液２０ｍｌを
、フェナリモールおよびジメトモルフに対して３０％アセトニトリル水溶液２０
ｍｌずつを各々試験管（内径３２ｍｍｘ高さ２００ｍｍ）に入れて栓で塞いだ。

【００４５】前記段階２の噴霧直後、三つのキュウリの各々から一葉を葉柄が付いているま
ま切り取り、適当な洗浄溶液を含む試験管に各々入れ、分当り６０〜７０ｒｐｍ
で２分間攪拌して三つの洗浄液を得た。また、三つのガラス板をペトリ皿（内径
１５．２ｃｍ）で前記と同様な手順に従って洗浄して三つの対照洗浄液を得た。

【００４６】残りのキュウリ１５ポットおよびガラス板１２枚を暗状態の室温で保管し、各
々噴霧してから１時間、３時間、６時間、１２時間および２４時間後前記と同様
な方法で洗浄した。

【００４７】（段階４）農薬およびコンゴレッドの定量および農薬吸収率の算出洗浄液中の農薬の濃度は、ＨＰＬＣ（スペックトラ２００ Programmable wa
velength Detector, acetonitrile-water solvent programming,４２％−８
０％）で測定した。噴霧直後得られた洗浄液を標準溶液として用い、コンゴレッ
ドを内部標準物質として用いた。植物葉部の農薬吸収率は、ガラス基板およびキ
ュウリ葉の表面から観察された農薬の量を基準として算出した。

【００４８】その結果を下記表２に示す。

【００４９】

【表２】

【００５０】前記表２から分かるように、園芸用殺菌剤であるプロシミドンは噴霧２４時間
後キュウリ葉に５．７％のみが吸収された。

【００５１】ノブヨシ・ミカミ（Nobuyoshi Mikami）らは、温室で成長したキュウリ葉に
散布したプロシミドンの７３．２％を８日後葉から回収したと報告した[J. Pes
ticide Sci., 9. 131-136(1984)]。しかし、この結果は、葉の表面において
起り得るすべての消失要因を含むことを示す。プロシミドンを加えてから２４時
間後のキュウリ葉への吸収率は、本発明の結果より大きくないと推定される。し
たがって、この結果は、本発明の結果と大体一致する。

【００５２】一方、フェナリモールの場合、吸収量が０％（噴霧直後）から１５．１％（噴
霧２４時間後）と持続的に増加することが観察された。この結果もまた、４種の
植物を用いた実験において、補助剤を添加しなかったとき、フェナリモールの吸
収率が１．４％〜１１．４％と多様であると報告したピター（Peter）らの文献[
Pestic. Sci., 24. 31-53(1988)]の結果と大差がなかった。

【００５３】ジメトモルフの場合は、吸収促進剤として０．１％ＳＮを含む溶液を噴霧して
から２４時間後２０％以上が吸収されたことが分かる。

【００５４】これらの結果は、本発明の方法が植物葉部の農薬吸収率の測定において非常に
有用であることを示す。

【００５５】実施例２：イネに対する種々の農薬の吸収率測定 (段階１)農薬およびコンゴレッドを含む溶液の製造エジフェンホス（edifenphos、乳剤３０％、Misung Co., Ltd., Korea）、
イソプロチオラン（isoprothiolane、乳剤４０％、Hankook Samgong Co., Lt
d., Korea）、トリサイクラゾール（tricyclazole、水和剤７５％、Chunjin C
o., Ltd., Korea）を各々秤量してエルレンマイヤー（Erlenmeyer）フラスコ
に入れ、これに水およびコンゴレッド水溶液を加えて最終濃度が各々６００ｐｐ
ｍ、８００ｐｐｍおよび３００ｐｐｍになるように混合し、この際、コンゴレッ
ドの濃度は４００ｐｐｍに調整した。

【００５６】 (段階２)農薬溶液の噴霧イネ種（イネ品種：Dongjin byeo）を苗板に播種し、温室で栽培した。イネ
が３葉期であるとき、使い捨て樹脂コップポット（内径６６ｍｍｘ高さ６６ｍｍ
）にポット当り３粒ずつ移植し、蘗が４葉期になるまで温室で栽培した後、老化
した葉のみを除去した。

【００５７】このように製造された１２個のイネポットを噴霧室に入れ、前記段階１で製造
した農薬溶液２５０ｌ／ｈａを噴霧した。また、ガラス板（１０ｃｍｘ１０ｃｍ
）１２枚に前記と同様な農薬溶液１２５ｌ／ｈａを噴霧した。

【００５８】 (段階３)イネおよびガラス板の洗浄洗浄液として製造した３０％のアセトニトリル水溶液２０ｍｌを試験管（内径
３２ｍｍｘ高さ２００ｍｍ）に入れて栓で塞いだ。

【００５９】前記段階２の噴霧直後、二つのイネポットにおけるイネの地上部を切り取り、
洗浄液を含む試験管２個に入れ、分当り６０〜７０ｒｐｍで２分間攪拌しながら
洗浄して標準洗浄液を得た。ガラス板２枚を各々ペトリ皿（内径１５．２ｃｍ）
に入れ、前記と同様な洗浄溶媒２０ｍｌで洗浄して標準対照浄液を得た。

【００６０】残りのイネ１０ポットおよびガラス板１０枚を暗状態の室温で保管し、各々処
理１時間、３時間、６時間、１２時間および２４時間後前記と同様な方法で洗浄
して各時間別洗浄液およびコントロールを得た。

【００６１】（段階４）農薬およびコンゴレッドの定量および農薬吸収率の算出洗浄液中のエジフェンホスおよびイソプロチオランの濃度をＨＰＬＣ（スペッ
クトラ２００ Programmable wavelength Detector, acetonitrile-water s
olvent programming,３０％−８０％）で測定した。噴霧直後得られた洗浄液は
標準溶液として用い、コンゴレッドは内部標準物質として用いた。トリサイクラ
ゾールの濃度をＨＰＬＣで測定し、コンゴレッドは紫外可視分光光度計(SHIMADZ
U, Model UV-2401PC UV-VIS Recording spectrophotometer,497nm)で測定
した。

【００６２】植物葉部の農薬吸収率は、ガラス基板およびイネ葉から観察された農薬の量を
基準として算出した。

【００６３】その結果を下記表３に示す。

【００６４】

【表３】

【００６５】前記表３から分かるように、稲熱病防除用農薬であるエジフェンホス、イソプ
ロチオランおよびトリサイクラゾールは、時間が経過するにつれてイネに対する
吸収率が持続的に増加した。この結果は、これらの農薬が優れた吸収移行性を有
する事実を立証する。

【００６６】実施例３：イネ葉に対するジメトモルフの吸収を促進するための吸収促進剤の
選別フォルム水和剤（２５％ジメトモルフ製剤、Dongbang Agro Co., Ltd., K
orea）を水に分散し、これに下記表４に示す吸収促進剤候補物質の一つとコンゴ
レッドを加えてジメトモルフ、吸収促進剤候補物質およびコンゴレッドを各々２
５０ｐｐｍ、１，０００ｐｐｍおよび２００ｐｐｍの濃度で含む農薬溶液を得た
。また、吸収促進剤を含有しない対照溶液も製造した。

【００６７】４〜５葉期のキュウリ６株の各々の葉と６枚のガラス板（１０ｃｍｘ１０ｃｍ
）に前記で製造した農薬溶液および対照溶液を噴霧した。噴霧直後キュウリ３株
から取った葉とガラス板３枚を３０％アセトニトリル水溶液１２ｍｌで３分間洗
浄して標準洗浄液およびコントロールを得た。

【００６８】残りの３つのキュウリポットおよび３枚のガラス板を暗状態の室温で保管し、
噴霧してから２４時間後前記と同様な方法で洗浄した。前記一連の実験は、下記表４の吸収促進剤候補物質の各々に対して繰返した。洗
浄液中のジメトモルフおよびコンゴレッドの濃度はＨＰＬＣ（スペックトラ200
Programmable wavelength Detector, acetonitrile-water solvent prog
ramming,４２％−８０％）で測定した。噴霧直後得られた洗浄液は標準溶液とし
て用い、コンゴレッドは内部標準物質として用いた。植物葉部へのジメトモルフ
の吸収率は、噴霧直後および噴霧してから２４時間後得られた洗浄液中のジメト
モルフおよびコンゴレッドの濃度を比べて算出した。その結果を下記表４に示す。

【００６９】

【表４】

【００７０】前記表４から分かるように、ジメトモルフはコントロールとガラス板において
、噴霧してから２４時間後初期量のほとんど１００％が回収されたが、これは、
ジメトモルフがキュウリ葉に全く吸収されなく、その他の消失要因も全くないこ
とを示す。しかし、種々の吸収促進物質を加えた実験群においては多様な吸収率
を示したが、これからキュウリに対するジメトモルフの吸収を促進するための適
合な吸収促進剤はステアリルアミンエトキシレート、ジオクチルスルホコハク酸
ナトリウムおよびヒマシ油エトキシレートであることが分かる。

【００７１】実施例４：イネに対するトリサイクラゾールの吸収を促進するための吸収促進
剤の選別ビーム水和剤（７５％トリサイクラゾール製剤、Oriental Chemical Indust
ries, Korea）を水に懸濁し、表５に示す吸収促進剤候補物質の一つとコンゴレ
ッドを加えてトリサイクラゾール、吸収促進剤候補物質およびコンゴレッドを各
々４００ｐｐｍ、１，０００ｐｐｍおよび４００ｐｐｍの濃度で含む農薬溶液を
得た。また、吸収促進剤を含まないコントロールを製造した。

【００７２】このように製造したコントロールと農薬溶液を、４葉期のイネ蘗６ポットと６
枚のガラス板（１０ｃｍｘ１０ｃｍ）に噴霧した。噴霧直後三つのイネポットの
イネとガラス板３枚を３０％アセトニトリル水溶液２０ｍｌで３分間洗浄して標
準洗浄液を得た。

【００７３】残りの三つのイネポットのイネと３枚のガラス板を暗状態の室温で保管した後
、噴霧してから２４時間後同様な方法で洗浄した。

【００７４】前記一連の実験は、下記表５の吸収促進剤候補物質の各々に対して繰返した。

【００７５】洗浄液中のコンゴレッドの濃度は、紫外可視分光光度計(SHIMADZU, Model U
V-2401PC UV-VIS Recording spectrophotometer,497nm)で測定し、洗浄液中
のトリサイクラゾールの濃度はＨＰＬＣ（スペックトラ２００ Programmable
wavelength Detector, acetonitrile-water solvent programming,３０％−
８０％）で測定した。噴霧直後得られた洗浄液は標準溶液として用い、コンゴレ
ッドは内部標準物質として用いた。植物葉部に対するトリサイクラゾールの吸収
率は、噴霧直後および噴霧してから２４時間後得られた洗浄液中のトリサイクラ
ゾールおよびコンゴレッドの濃度を比べることによって算出した。結果を下記表
５に示す。

【００７６】

【表５】

【００７７】前記表５から分かるように、トリサイクラゾールはガラス板において、噴霧し
てから２４時間後初期量のほとんど１００％が回収されたが、これは、トリサイ
クラゾールが安定であり、２４時間の間１７．６％が吸収された前記コントロー
ルのようにイネへの吸収以外は消失要因がないことを示す。種々の吸収促進物質
を加えた実験群においてはさらに高い吸収率を示したが、これからイネに対する
トリサイクラゾールの吸収を促進させるに適合な吸収促進物質は、ラウリルアミ
ンエトキシレート、ステアリルアミンエトキシレートおよびラウリルアルコール
エトキシレートであることが分かる。

【００７８】試験例１：フォルム水和剤を用いたキュウリべと病（Pseudopernospora cube
nsis）の防除効果測定温室においてキュウリべと病（Pseudopernospora cubensis）に感染されたキ
ュウリ葉を採取し、１日間湿室で保管して胞子を形成させた後、滅菌蒸留水で胞
子を収穫した。このように得られた胞子懸濁液を光学顕微鏡の下で血球計（hema
tocytometer）を用いて胞子濃度を５ｘ１０^３遊走子嚢（sporangia）/mlに調整
した。ガラスハウスで栽培した３葉期のキュウリにこの胞子懸濁液を噴霧した。
前記キュウリを２５℃で相対湿度９５％以上の条件で１７〜２０時間湿室に保管
した後、室温で２〜３時間乾燥した。

【００７９】フォルム水和剤を水に懸濁し、これにステアリルアミンエトキシレート（ＳＮ
、エチレンオキシド付加モル数：１０モル）を加えてフォルム水和剤およびステ
アリルアミンエトキシレートを各々１２５μｇ／ｍｌおよび１，０００μｇ／ｍ
ｌの濃度で含有する農薬溶液を製造した。この農薬溶液をさらに水で２倍および
４倍希釈された噴霧溶液を得た。また、フォルム水和剤のみを含有するコントロ
ールを製造した。

【００８０】前記で製造したキュウリに農薬溶液を噴霧した。処理されたキュウリを２６℃
、相対湿度８０％に保たれた恒温恒湿室に入れてキュウリべと病を発病させた。
次いで、葉の病斑面積率を肉眼で調査した。すべての実験は５回繰返して行い、
薬剤の防除値は下記数学式１のような方法で計算した：

【数１】

【００８１】その結果を下記表６に示す。

【００８２】

【表６】

【００８３】前記表６から分かるように、フォルム水和剤とステアリルアミンエトキシレー
トとからなる農薬溶液のキュウリべと病に対する活性はフォルム水和剤のみのよ
り著しく高い。

【００８４】本発明を前記特定実施態様と関連して記述したが、添付した特許請求範囲によ
って定義される本発明の範囲内で、当該分野の熟練者が本発明を多様に変形およ
び変化させ得ることは自明である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者ユ、ジュ・ヒュン大韓民国、305−390 ダエジョン、ユソン −グ、ジョンミン−ドン、ナンバー 462 −４、チョンクナラエ・アパートメント 106−504 (72)発明者リム、ヘ・キョウン大韓民国、305−333 ダエジョン、ユソン −グ、オエウン−ドン、ナンバー 99、ハンビト・アパートメント 130−202 (72)発明者チョイ、ギュン・ジャ大韓民国、305−390 ダエジョン、ユソン −グ、ジョンミン−ドン、ナンバー 462 −４、チョンクナラエ・アパートメント 104−1005 (72)発明者キム、ジョン・ハン大韓民国、137−070 ソウル、セオチョ− グ、セオチョ−ドン、ナンバー 1315、ジンヘウン・アパートメント３−407 Ｆターム(参考） 2G045 AA31 BB24 CB20 DA80 FA11

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】農薬および追跡物質としてコンゴレッドを含む、植物葉部の
農薬吸収率測定用組成物。
【請求項２】以下の工程を含むことを特徴とする植物葉部の農薬吸収率測
定方法；（ａ）農薬およびコンゴレッドを含む組成物を植物および対照基板に散布する
工程、（ｂ）農薬およびコンゴレッドを抽出するために前記植物および対照基板を溶
媒で洗浄する工程、（ｃ）前記洗浄液中の農薬およびコンゴレッドの濃度を測定する工程、並びに（ｄ）植物葉部の農薬吸収率を算出する工程。
【請求項３】前記溶媒が、水、メタノール、エタノール、アセトン、アセ
トニトリルおよびこれらの混合物からなる群より選ばれることを特徴とする請求
項２記載の方法。
【請求項４】前記段階（ａ）における農薬およびコンゴレッドを含む前記
組成物が、前記農薬に適合な吸収促進剤を選別するための吸収促進剤候補物質を
さらに含むことを特徴とする請求項２記載の方法。