JP3348153B1 - 植物葉部の農薬吸収率測定用組成物および測定方法 - Google Patents

Abstract

【要約】 本発明は、農薬および追跡物質としてコンゴレッド（Co
ngo red）を含む、植物葉部の農薬吸収率を測定するた
めの組成物を提供し、さらに、（ａ）農薬およびコンゴ
レッドを含む組成物を植物および対照基板に散布する段
階、（ｂ）農薬およびコンゴレッドを抽出するために前
記植物および対照基板を溶媒で洗浄する段階、（ｃ）前
記洗浄液中の農薬およびコンゴレッドの濃度を測定する
段階、および（ｄ）植物葉部の農薬吸収率を算出する段
階を含むことを特徴とする植物葉部の農薬吸収率を測定
するための方法を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】発明の分野 本発明は、植物葉部の農薬吸収率測定用組成物および農
薬吸収率を測定する方法に関する。さらに詳しくは、本
発明は、前記農薬および追跡物質としてコンゴレッド
（Congo red）を含む植物葉部の農薬吸収率測定用組成
物、およびそれを用いて前記植物葉部の農薬吸収率を測
定するための方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】発明の背景 雑草、病菌および昆虫から農作物を保護するために数百
種の農薬が開発され、市販されている。しかし、ある農
薬の持続的な使用は、一時効果があったその農薬に対す
る耐性が生じた種の出現を誘導し、また、このような耐
性がある雑草、病菌または昆虫を制御するために過量の
農薬を用いることによって、コストの問題だけでなく、
深刻な環境問題を惹起した。したがって、環境親和的な
新種農薬を開発する必要とともに、効果的な補助剤を加
えることなどによって伝達システムを改善して農薬の既
存の使用量を減らす必要がある。

【０００３】農薬活性増強用補助剤の例としては、農薬
の防除対象作物への付着を容易にさせる散布剤または散
布付着剤、防除対象作物に付着した農薬の雨水による流
失を防ぐための耐雨性増強剤、および対象作物による農
薬の吸収を増大させる吸収促進剤がある。

【０００４】多量の農薬が植物組織内に短時間内に吸収
されれば、除草剤の場合もそうであるが、その薬効がよ
り速く、かつ強くあらわれる。殺菌剤の場合において
は、適当な吸収促進剤を用いると、疾病に対する予防効
果および治療効果まで増進させ得る。また、殺虫剤の場
合は、適当な吸収促進剤を加えると、殺虫剤が直接散布
されていない部位で棲息する害虫まで根絶できる優れた
殺虫効果が得られる。

【０００５】たとえば、テレンス（B.Terence）らは、
キュウリべと病、ジャガイモ枯れ病およびトウガラシ枯
れ病に感染された蔓類を治療するために用いられるジメ
トモルフ（dimethomorph）を非イオン界面活性剤、たと
えば、ラウリルアルコールエトキシレートと混合して用
いると、治療効果が著しく増進されると報告した(Pesti
cide Science, 46, 199-213 & 355-359(1996))。

【０００６】さらに、メグシング（Megh Singh）ら
は、非選択性除草剤であるグリホセート（Ｎ−（ホスホ
ノメチル）グリシン）を有機シリコン系界面活性剤であ
るシルウェットＬ−７７（Hanjung Chemicals, Inc.,
Korea）と混合使用すると、グリホセートの植物に対
する吸収性を促進させ得ると報告した（Proceedings o
f Fourth International Symposium on Adjuvants
for Agrochemicals, 385-390(1995)）。

【０００７】上述のように、環境および経済的な観点か
らは、農薬使用率を最小限に維持し、かつ農作物を保護
する効果を最大化することが要求される。この効果は、
作物によって吸収される農薬の量に依存する。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】植物に吸収された農薬
の量を測定する一般的な方法は、放射性同位元素で標識
された農薬を対象植物に加え、一定時間後植物を適当な
溶媒で洗浄し、そしてこれらの放射能を測定する段階か
ら構成される。しかし、この方法は、高コストおよび、
特殊装備と専門家の介在を要するという複雑性の問題が
ある。

【０００９】したがって、植物の農薬吸収率を定量的に
測定するための経済的な方法はまだ開発されていない。

【００１０】対象農作物による農薬吸収を増加させる吸
収促進剤を選別するための方法として下記の二つの方法
が報告されている。

【００１１】第一の方法は、放射性同位元素で標識され
た農薬と吸収促進剤候補物質との混合物で植物を処理
し、この放射性標識を追跡することである。しかし、こ
の方法は、前述の高コストおよび複雑性の問題を伴う。

【００１２】第二の方法は、農薬と吸収促進剤候補物質
との混合物で植物を処理し、雑草、病菌または害虫の防
除効果を直接に測定することである。しかし、この方法
は、長時間の実験を要し、また、半定量的なデータしか
得られない。

【００１３】

【課題を解決するための手段】そこで、本発明者らは、
前記のような問題点を解決して、植物による農薬吸収率
を測定し、対象作物および使用農薬に対して最適な吸収
促進剤を選別するための簡便でかつ正確な方法を開発す
るために鋭意研究した結果、前記目的を達成するために
使用され得る新規な追跡物質を開発するに至った。

【００１４】発明の要約 したがって、本発明の目的は、植物の農薬吸収率を測定
するための組成物を提供することである。

【００１５】本発明の他の目的は、前記組成物を用いて
植物の農薬吸収率を測定するための方法を提供すること
である。

【００１６】本発明のまた他の目的は、前記方法を用い
て農薬の吸収促進剤を選別するための方法を提供するこ
とである。

【００１７】本発明の一実施態様によって、本発明で
は、農薬および追跡物質として植物に全く吸収されない
コンゴレッドを含む、植物葉部の農薬吸収率を測定する
ための組成物が提供される。

【００１８】また、本発明の他の実施態様によって、本
発明では、（ａ）農薬およびコンゴレッドを含む組成物
を植物および対照基板（control plate）に散布する段
階、（ｂ）農薬およびコンゴレッド（Congo red）を抽
出するために前記植物および対照基板を溶媒で洗浄する
段階、（ｃ）前記洗浄液中の農薬およびコンゴレッドの
濃度を測定する段階、並びに（ｄ）植物葉部の農薬吸収
率を算出する段階を含むことを特徴とする植物葉部の農
薬吸収率を測定するための方法が提供される。

【００１９】

【発明の実施の形態】発明の詳細な説明 本発明の方法は、使用農薬の吸収率を高める吸収促進剤
を選別するために用いられる。

【００２０】以下、本発明を詳細に説明する。

【００２１】Ａ．植物葉部の農薬吸収率測定用組成物の
製造 農薬の原材または製剤を水または水溶性溶媒に溶解、乳
化または懸濁し、これに追跡物質であるコンゴレッドを
加え、よく混合して本発明の植物葉部の農薬吸収率測定
用組成物を得た。コンゴレッドは、高性能液体クロマト
グラフィー(high performance liquid chromatograp
hy, HPLC)や紫外可視分光光度計（spectrophotomete
r）で定量できる範囲内で出きる限り低い濃度で農薬溶
液に加えることが好ましい。たとえば、前記農薬溶液に
コンゴレッドを１μｍ／ｍｌ〜１，０００μｍ／ｍｌ範
囲の濃度で加えることができる。農薬溶液中のコンゴレ
ッドの濃度が農薬の濃度より高いと、植物内への農薬の
吸収を妨げ、植物の農薬吸収率が実際より低い値として
測定されるおそれがある。

【００２２】本発明の農薬吸収率測定方法に使用され得
る農薬の具体例としては、当分野で公知の除草剤、殺虫
剤、殺菌剤、植物成長調節剤などがある。

【００２３】農薬溶液を製造するにおいて使用可能な市
販の農薬製品は、通常の方法によって所定の濃度に希釈
される。液状またはゼリー状農薬の場合は、少量のアセ
トンのような有機溶媒に溶解するか、または必要な場
合、少量の界面活性剤を加えて水に溶解または乳化し得
る。固体状の場合は、微粉砕して分散剤である界面活性
剤と混合する。

【００２４】特定農薬に対する吸収促進剤を選別するた
めに、本発明の組成物はさらに農薬吸収促進剤候補物質
を含むことができる。吸収促進剤候補物質は、水または
有機溶媒に溶解した状態で本発明の組成物に加えること
ができる。

【００２５】Ｂ．植物および対照基板に本発明の組成物
の塗布 前記Ａで製造された本発明の組成物を対象植物、および
農薬と追跡物質のいずれもを吸収しない対照基板に塗布
する。

【００２６】本発明に使用され得る対象植物の種類は特
に限定されないが、十分成熟したもので、老化現象があ
らわれていないのが好ましい。

【００２７】対照基板は、植物への吸収以外の要因によ
る農薬の損失量を測定するために用いられる。本発明に
用いられる対照基板の物質は、本発明の組成物を吸収、
分解および非活性化させない限り制限されなく、ガラス
基板が好ましい。

【００２８】コンゴレッドは、光分解されやすい物質で
あるため、農薬溶液の噴霧、植物と対照基板の保管およ
び洗浄などのすべての作業は、強い直射光線を避け、弱
い光の下で行われなければならない。

【００２９】植物および対照基板に本発明の組成物を散
布するときは、対象表面へ組成物を均一に散布するのた
めに噴霧室(spray booth)を用いることが好ましい。ま
た、組成物の噴霧量は溶液が溢れない範囲内で最大量に
することが好ましい。たとえば、キュウリやトウガラシ
のように葉が水平で、葉の面積が比較的広い広葉植物の
場合は、組成物の噴霧量が１〜１００ｌ／ｈａであり、
イネやヒエのように葉が直立し、葉の面積が狭い単子葉
植物の場合は、５０〜３００ｌ／ｈａであることが好ま
しい。しかし、植物の種類および種々の条件によって噴
霧量を調節することができる。

【００３０】Ｃ．組成物の洗浄 前記Ｂで本発明の組成物を塗布して得た植物および対照
基板の特定数は、噴霧直後適当な溶媒で洗浄して連続測
定のための基準設定に用いられる標準洗浄液を得る。残
りの噴霧された植物および基板は、一定期間暗所で保管
した後、同様に洗浄して、吸収されないで残っている農
薬およびコンゴレッドを含む洗浄液を得る。このような
洗浄過程に適合な溶媒としては、水、またはメタノー
ル、エタノール、アセトンおよびアセトニトリルのよう
な水溶性有機溶媒、またはこれらの混合物があり、特に
アセトニトリル水溶液が好ましい。水溶性有機溶媒を用
いる場合、水に対する水溶性有機溶媒の比率は、使用さ
れる農薬の水溶解度によって０：１０（ｖ／ｖ）〜５：
５（ｖ／ｖ）に調整することができる。すなわち、農薬
の水溶解度が高いときは、水溶性有機溶媒の含量が低い
ことが好ましく、農薬の水溶解度が低いときは、水の含
量が低いことが好ましい。

【００３１】噴霧された植物を洗浄する場合は、適切な
溶媒を含む試験管に、植物の地上部を切り取って入れ、
栓で塞いだ後、分当り５０〜８０ｒｐｍで１分〜５分間
攪拌する。噴霧された対照基板は、適当なサイズのペト
リ皿（petri dish）に入れ、前記と同様な溶媒で洗浄
する。

【００３２】Ｄ．農薬およびコンゴレッドの濃度測定な
らびに農薬吸収率の算出 前記Ｃで得られた洗浄液中の農薬およびコンゴレッドの
濃度は、通常の方法、たとえば、ＨＰＬＣ、ガスクロマ
トグラフィー（gas chromatography）、吸光度測定法
によって定量することができる。

【００３３】すなわち、植物葉部の農薬吸収率は、下記
方法によって算出される：噴霧直後得られた植物および
対照基板の初期洗浄液中の農薬とコンゴレッドの濃度比
（農薬濃度／コンゴレッド濃度）を各々算出し、噴霧し
てから一定時間経過後得られた植物および対照基板の洗
浄液中の農薬とコンゴレッドの濃度比（農薬濃度／コン
ゴレッド濃度）を各々算出し、前記（２）で算出された
農薬とコンゴレッドの濃度比を前記（１）で算出された
植物および対照基板の洗浄液中の濃度比で各々分け、噴
霧してから一定時間経過後、植物および対照基板の表面
に残留する農薬の比率を算出し、そして、前記対照基板
の表面における農薬残留率から植物の表面における農薬
残留率を引くことによって、植物に吸収される農薬の比
率を算出する。

【００３４】本発明による農薬吸収率の測定方法をより
容易に説明するための一つの例を挙げると次の通りであ
る。

【００３５】農薬１００ｐｐｍおよびコンゴレッド１０
０ｐｐｍを含む農薬溶液を製造し、これを２枚のキュウ
リ葉と二つのガラス基板に各々噴霧する。噴霧直後キュ
ウリ葉１枚およびガラス基板１個を各々溶媒１０ｍｌで
洗浄し、ＨＰＬＣ分析方法を用いて洗浄液中の農薬およ
びコンゴレッドの濃度を測定する。一方、他のキュウリ
葉およびガラス基板を２４時間暗室で保管した後、同一
溶媒１０ｍｌで洗浄する。洗浄液中の農薬およびコンゴ
レッドの濃度をＨＰＬＣによって測定する。上述の手順
に従ってキュウリ葉への農薬の吸収率を算出し、その結
果を下記表１に示す。

【００３６】

【表１】

【００３７】前記のように、コンゴレッドは、植物内に
吸収または揮発されない。したがって、植物内への吸収
および蒸発と分解のような他の要因によって損失した農
薬の総量は、本発明の組成物の噴霧直後および一定時間
経過後に植物から観察される農薬とコンゴレッドの量を
比べることによって算出し得る。また、ガラス基板はこ
れら物質を全く吸収しないため、ガラス基板に残留する
農薬の比は、植物内への吸収以外の理由で損失された農
薬の比率を示す。したがって、植物葉部の農薬吸収率に
対する正確な値は、植物およびガラス基板に残っている
農薬の比を比べることによって容易に算出することがで
きる。

【００３８】前述のように、農薬の追跡物質としてコン
ゴレッドを用いる本発明の方法は、植物に吸収された農
薬の量を正確に判断するのに有用である。また、本発明
の方法は、特定農薬および植物に適合な吸収促進剤を選
別するのに有用である。本発明は、種々の農薬の効果的
な最少適用率を決定するのに用いられるため、費用およ
び環境保護の両面で有益である。

【００３９】下記実施例は本発明をさらに詳細に説明す
るためのものであり、本発明の範囲を制限しない。

【００４０】また、下記固体混合物中の固体、液体中の
液体、および液体中の固体に対して下記に与えられた百
分率は、別に言及しない限り各々重量／重量、体積／体
積および重量／体積に基づいたものである。

【００４１】実施例１：キュウリに対する種々の農薬の
吸収率の測定 （段階１）農薬およびコンゴレッドを含む溶液の調製 プロシミドン（procymidone）水和剤（５０％ ai, Do
ngbang Agro Corporation, Korea）、フェナリモー
ル（fenarimol）乳剤（１２．５％ ai, Oriental Ch
emical Industries, Korea）およびジメトモルフ水和
剤（２５％ ai, Dongbang Agro Corporation, Kor
ea）を各々秤量してエルレンマイヤー（Erlenmeyer）フ
ラスコに入れ、これに水とコンゴレッド水溶液を加えて
最終濃度が各々５００ｐｐｍ、３１．２５ｐｐｍおよび
２５０ｐｐｍになるようにし、この際、コンゴレッドの
濃度は４００ｐｐｍに調整した。ジメトモルフは植物に
全く吸収されないので、補助剤としてステアリルアミン
エトキシレート（ＳＮ、エチレンオキシドの付加モル数
１０モル）０．１％を加えてキュウリ葉に対する吸収性
を高めた。

【００４２】（段階２）農薬溶液の噴霧 キュウリ種子（Baktadagi, Hung Nong Seed Co.,
Ltd.）を樹脂コップポット（内径４７ｍｍｘ高さ５０ｍ
ｍ）にポット当り３粒ずつ播種し、温室で栽培した。子
葉が完全に展開される時期に使い捨て樹脂コップポット
（内径６６ｍｍｘ高さ６６ｍｍ）に移植し、４葉または
５葉が展開されるまで温室で栽培した。

【００４３】このように製造されたキュウリ１８ポット
を噴霧室に入れ、前記段階１で製造した農薬溶液８０ｌ
／ｈａを噴霧した。また、ガラス板（１０ｃｍｘ１０ｃ
ｍ）１５枚に前記段階１で製造した農薬溶液８０ｌ／ｈ
ａを噴霧した。

【００４４】（段階３）キュウリ葉およびガラス板の洗
浄 洗浄液として、プロシミドンに対して４０％アセトニト
リル水溶液２０ｍｌを、フェナリモールおよびジメトモ
ルフに対して３０％アセトニトリル水溶液２０ｍｌずつ
を各々試験管（内径３２ｍｍｘ高さ２００ｍｍ）に入れ
て栓で塞いだ。

【００４５】前記段階２の噴霧直後、三つのキュウリの
各々から一葉を葉柄が付いているまま切り取り、適当な
洗浄溶液を含む試験管に各々入れ、分当り６０〜７０ｒ
ｐｍで２分間攪拌して三つの洗浄液を得た。また、三つ
のガラス板をペトリ皿（内径１５．２ｃｍ）で前記と同
様な手順に従って洗浄して三つの対照洗浄液を得た。

【００４６】残りのキュウリ１５ポットおよびガラス板
１２枚を暗状態の室温で保管し、各々噴霧してから１時
間、３時間、６時間、１２時間および２４時間後前記と
同様な方法で洗浄した。

【００４７】（段階４）農薬およびコンゴレッドの定量
および農薬吸収率の算出 洗浄液中の農薬の濃度は、ＨＰＬＣ（スペックトラ２０
０ Programmable wavelength Detector, acetonitr
ile-water solvent programming,４２％−８０％）で
測定した。噴霧直後得られた洗浄液を標準溶液として用
い、コンゴレッドを内部標準物質として用いた。植物葉
部の農薬吸収率は、ガラス基板およびキュウリ葉の表面
から観察された農薬の量を基準として算出した。

【００４８】その結果を下記表２に示す。

【００４９】

【表２】

【００５０】前記表２から分かるように、園芸用殺菌剤
であるプロシミドンは噴霧２４時間後キュウリ葉に５．
７％のみが吸収された。

【００５１】ノブヨシ・ミカミ（Nobuyoshi Mikami）
らは、温室で成長したキュウリ葉に散布したプロシミド
ンの７３．２％を８日後葉から回収したと報告した[J.
Pesticide Sci., 9. 131-136(1984)]。しかし、こ
の結果は、葉の表面において起り得るすべての消失要因
を含むことを示す。プロシミドンを加えてから２４時間
後のキュウリ葉への吸収率は、本発明の結果より大きく
ないと推定される。したがって、この結果は、本発明の
結果と大体一致する。

【００５２】一方、フェナリモールの場合、吸収量が０
％（噴霧直後）から１５．１％（噴霧２４時間後）と持
続的に増加することが観察された。この結果もまた、４
種の植物を用いた実験において、補助剤を添加しなかっ
たとき、フェナリモールの吸収率が１．４％〜１１．４
％と多様であると報告したピター（Peter）らの文献[Pe
stic. Sci., 24. 31-53(1988)]の結果と大差がなか
った。

【００５３】ジメトモルフの場合は、吸収促進剤として
０．１％ＳＮを含む溶液を噴霧してから２４時間後２０
％以上が吸収されたことが分かる。

【００５４】これらの結果は、本発明の方法が植物葉部
の農薬吸収率の測定において非常に有用であることを示
す。

【００５５】実施例２：イネに対する種々の農薬の吸収
率測定 （段階１）農薬およびコンゴレッドを含む溶液の製造 エジフェンホス（edifenphos、乳剤３０％、Misung C
o., Ltd., Korea）、イソプロチオラン（isoprothiol
ane、乳剤４０％、Hankook Samgong Co., Ltd., Ko
rea）、トリサイクラゾール（tricyclazole、水和剤７
５％、Chunjin Co., Ltd., Korea）を各々秤量して
エルレンマイヤー（Erlenmeyer）フラスコに入れ、これ
に水およびコンゴレッド水溶液を加えて最終濃度が各々
６００ｐｐｍ、８００ｐｐｍおよび３００ｐｐｍになる
ように混合し、この際、コンゴレッドの濃度は４００ｐ
ｐｍに調整した。

【００５６】（段階２）農薬溶液の噴霧 イネ種（イネ品種：Dongjin byeo）を苗板に播種し、
温室で栽培した。イネが３葉期であるとき、使い捨て樹
脂コップポット（内径６６ｍｍｘ高さ６６ｍｍ）にポッ
ト当り３粒ずつ移植し、蘗が４葉期になるまで温室で栽
培した後、老化した葉のみを除去した。

【００５７】このように製造された１２個のイネポット
を噴霧室に入れ、前記段階１で製造した農薬溶液２５０
ｌ／ｈａを噴霧した。また、ガラス板（１０ｃｍｘ１０
ｃｍ）１２枚に前記と同様な農薬溶液１２５ｌ／ｈａを
噴霧した。

【００５８】（段階３）イネおよびガラス板の洗浄 洗浄液として製造した３０％のアセトニトリル水溶液２
０ｍｌを試験管（内径３２ｍｍｘ高さ２００ｍｍ）に入
れて栓で塞いだ。

【００５９】前記段階２の噴霧直後、二つのイネポット
におけるイネの地上部を切り取り、洗浄液を含む試験管
２個に入れ、分当り６０〜７０ｒｐｍで２分間攪拌しな
がら洗浄して標準洗浄液を得た。ガラス板２枚を各々ペ
トリ皿（内径１５．２ｃｍ）に入れ、前記と同様な洗浄
溶媒２０ｍｌで洗浄して標準対照浄液を得た。

【００６０】残りのイネ１０ポットおよびガラス板１０
枚を暗状態の室温で保管し、各々処理１時間、３時間、
６時間、１２時間および２４時間後前記と同様な方法で
洗浄して各時間別洗浄液およびコントロールを得た。

【００６１】（段階４）農薬およびコンゴレッドの定量
および農薬吸収率の算出 洗浄液中のエジフェンホスおよびイソプロチオランの濃
度をＨＰＬＣ（スペックトラ２００ Programmable wa
velength Detector, acetonitrile-water solvent
programming,３０％−８０％）で測定した。噴霧直後得
られた洗浄液は標準溶液として用い、コンゴレッドは内
部標準物質として用いた。トリサイクラゾールの濃度を
ＨＰＬＣで測定し、コンゴレッドは紫外可視分光光度計
(SHIMADZU, Model UV-2401PC UV-VIS Recording s
pectrophotometer,497nm)で測定した。

【００６２】植物葉部の農薬吸収率は、ガラス基板およ
びイネ葉から観察された農薬の量を基準として算出し
た。

【００６３】その結果を下記表３に示す。

【００６４】

【表３】

【００６５】前記表３から分かるように、稲熱病防除用
農薬であるエジフェンホス、イソプロチオランおよびト
リサイクラゾールは、時間が経過するにつれてイネに対
する吸収率が持続的に増加した。この結果は、これらの
農薬が優れた吸収移行性を有する事実を立証する。

【００６６】実施例３：イネ葉に対するジメトモルフの
吸収を促進するための吸収促進剤の選別 フォルム水和剤（２５％ジメトモルフ製剤、Dongbang
Agro Co., Ltd., Korea）を水に分散し、これに下記
表４に示す吸収促進剤候補物質の一つとコンゴレッドを
加えてジメトモルフ、吸収促進剤候補物質およびコンゴ
レッドを各々２５０ｐｐｍ、１，０００ｐｐｍおよび２
００ｐｐｍの濃度で含む農薬溶液を得た。また、吸収促
進剤を含有しない対照溶液も製造した。

【００６７】４〜５葉期のキュウリ６株の各々の葉と６
枚のガラス板（１０ｃｍｘ１０ｃｍ）に前記で製造した
農薬溶液および対照溶液を噴霧した。噴霧直後キュウリ
３株から取った葉とガラス板３枚を３０％アセトニトリ
ル水溶液１２ｍｌで３分間洗浄して標準洗浄液およびコ
ントロールを得た。

【００６８】残りの３つのキュウリポットおよび３枚の
ガラス板を暗状態の室温で保管し、噴霧してから２４時
間後前記と同様な方法で洗浄した。前記一連の実験は、
下記表４の吸収促進剤候補物質の各々に対して繰返し
た。洗浄液中のジメトモルフおよびコンゴレッドの濃度
はＨＰＬＣ（スペックトラ200 Programmable wavele
ngth Detector, acetonitrile-water solvent prog
ramming,４２％−８０％）で測定した。噴霧直後得られ
た洗浄液は標準溶液として用い、コンゴレッドは内部標
準物質として用いた。植物葉部へのジメトモルフの吸収
率は、噴霧直後および噴霧してから２４時間後得られた
洗浄液中のジメトモルフおよびコンゴレッドの濃度を比
べて算出した。その結果を下記表４に示す。

【００６９】

【表４】

【００７０】前記表４から分かるように、ジメトモルフ
はコントロールとガラス板において、噴霧してから２４
時間後初期量のほとんど１００％が回収されたが、これ
は、ジメトモルフがキュウリ葉に全く吸収されなく、そ
の他の消失要因も全くないことを示す。しかし、種々の
吸収促進物質を加えた実験群においては多様な吸収率を
示したが、これからキュウリに対するジメトモルフの吸
収を促進するための適合な吸収促進剤はステアリルアミ
ンエトキシレート、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウ
ムおよびヒマシ油エトキシレートであることが分かる。

【００７１】実施例４：イネに対するトリサイクラゾー
ルの吸収を促進するための吸収促進剤の選別 ビーム水和剤（７５％トリサイクラゾール製剤、Orient
al Chemical Industries, Korea）を水に懸濁し、表
５に示す吸収促進剤候補物質の一つとコンゴレッドを加
えてトリサイクラゾール、吸収促進剤候補物質およびコ
ンゴレッドを各々４００ｐｐｍ、１，０００ｐｐｍおよ
び４００ｐｐｍの濃度で含む農薬溶液を得た。また、吸
収促進剤を含まないコントロールを製造した。

【００７２】このように製造したコントロールと農薬溶
液を、４葉期のイネ蘗６ポットと６枚のガラス板（１０
ｃｍｘ１０ｃｍ）に噴霧した。噴霧直後三つのイネポッ
トのイネとガラス板３枚を３０％アセトニトリル水溶液
２０ｍｌで３分間洗浄して標準洗浄液を得た。

【００７３】残りの三つのイネポットのイネと３枚のガ
ラス板を暗状態の室温で保管した後、噴霧してから２４
時間後同様な方法で洗浄した。

【００７４】前記一連の実験は、下記表５の吸収促進剤
候補物質の各々に対して繰返した。

【００７５】洗浄液中のコンゴレッドの濃度は、紫外可
視分光光度計(SHIMADZU, Model UV-2401PC UV-VIS
Recording spectrophotometer,497nm)で測定し、洗浄
液中のトリサイクラゾールの濃度はＨＰＬＣ（スペック
トラ２００ Programmable wavelength Detector, a
cetonitrile-water solvent programming,３０％−８
０％）で測定した。噴霧直後得られた洗浄液は標準溶液
として用い、コンゴレッドは内部標準物質として用い
た。植物葉部に対するトリサイクラゾールの吸収率は、
噴霧直後および噴霧してから２４時間後得られた洗浄液
中のトリサイクラゾールおよびコンゴレッドの濃度を比
べることによって算出した。結果を下記表５に示す。

【００７６】

【表５】

【００７７】前記表５から分かるように、トリサイクラ
ゾールはガラス板において、噴霧してから２４時間後初
期量のほとんど１００％が回収されたが、これは、トリ
サイクラゾールが安定であり、２４時間の間１７．６％
が吸収された前記コントロールのようにイネへの吸収以
外は消失要因がないことを示す。種々の吸収促進物質を
加えた実験群においてはさらに高い吸収率を示したが、
これからイネに対するトリサイクラゾールの吸収を促進
させるに適合な吸収促進物質は、ラウリルアミンエトキ
シレート、ステアリルアミンエトキシレートおよびラウ
リルアルコールエトキシレートであることが分かる。

【００７８】試験例１：フォルム水和剤を用いたキュウ
リべと病（Pseudopernospora cubensis）の防除効果測
定 温室においてキュウリべと病（Pseudopernospora cube
nsis）に感染されたキュウリ葉を採取し、１日間湿室で
保管して胞子を形成させた後、滅菌蒸留水で胞子を収穫
した。このように得られた胞子懸濁液を光学顕微鏡の下
で血球計（hematocytometer）を用いて胞子濃度を５ｘ
１０^３遊走子嚢（sporangia）/mlに調整した。ガラスハ
ウスで栽培した３葉期のキュウリにこの胞子懸濁液を噴
霧した。前記キュウリを２５℃で相対湿度９５％以上の
条件で１７〜２０時間湿室に保管した後、室温で２〜３
時間乾燥した。

【００７９】フォルム水和剤を水に懸濁し、これにステ
アリルアミンエトキシレート（ＳＮ、エチレンオキシド
付加モル数：１０モル）を加えてフォルム水和剤および
ステアリルアミンエトキシレートを各々１２５μｇ／ｍ
ｌおよび１，０００μｇ／ｍｌの濃度で含有する農薬溶
液を製造した。この農薬溶液をさらに水で２倍および４
倍希釈された噴霧溶液を得た。また、フォルム水和剤の
みを含有するコントロールを製造した。

【００８０】前記で製造したキュウリに農薬溶液を噴霧
した。処理されたキュウリを２６℃、相対湿度８０％に
保たれた恒温恒湿室に入れてキュウリべと病を発病させ
た。次いで、葉の病斑面積率を肉眼で調査した。すべて
の実験は５回繰返して行い、薬剤の防除値は下記数学式
１のような方法で計算した：

【数１】

【００８１】その結果を下記表６に示す。

【００８２】

【表６】

【００８３】前記表６から分かるように、フォルム水和
剤とステアリルアミンエトキシレートとからなる農薬溶
液のキュウリべと病に対する活性はフォルム水和剤のみ
のより著しく高い。

【００８４】本発明を前記特定実施態様と関連して記述
したが、添付した特許請求範囲によって定義される本発
明の範囲内で、当該分野の熟練者が本発明を多様に変形
および変化させ得ることは自明である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ユ、ジュ・ヒュン 大韓民国、305−390 ダエジョン、ユソ ン−グ、ジョンミン−ドン、ナンバー 462−４、チョンクナラエ・アパートメ ント 106−504 (72)発明者 リム、ヘ・キョウン 大韓民国、305−333 ダエジョン、ユソ ン−グ、オエウン−ドン、ナンバー 99、ハンビト・アパートメント 130− 202 (72)発明者 チョイ、ギュン・ジャ 大韓民国、305−390 ダエジョン、ユソ ン−グ、ジョンミン−ドン、ナンバー 462−４、チョンクナラエ・アパートメ ント 104−1005 (72)発明者 キム、ジョン・ハン 大韓民国、137−070 ソウル、セオチョ −グ、セオチョ−ドン、ナンバー 1315、ジンヘウン・アパートメント ３ −407 (56)参考文献 特開2000−2659（ＪＰ，Ａ) 実開 平６−72635（ＪＰ，Ｕ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) G01N 33/48 G01N 33/15

Claims (4)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 農薬および追跡物質としてコンゴレッド
   を含む、植物葉部の農薬吸収率測定用組成物。
2. 【請求項２】 以下の工程を含むことを特徴とする植物
   葉部の農薬吸収率測定方法； （ａ）農薬およびコンゴレッドを含む組成物を植物およ
   び対照基板に散布する工程、 （ｂ）農薬およびコンゴレッドを抽出するために前記植
   物および対照基板を溶媒で洗浄する工程、 （ｃ）前記洗浄液中の農薬およびコンゴレッドの濃度を
   測定する工程、並びに （ｄ）植物葉部の農薬吸収率を算出する工程。
3. 【請求項３】 前記溶媒が、水、メタノール、エタノー
   ル、アセトン、アセトニトリルおよびこれらの混合物か
   らなる群より選ばれることを特徴とする請求項２記載の
   方法。
4. 【請求項４】 前記段階（ａ）における農薬およびコン
   ゴレッドを含む前記組成物が、前記農薬に適合な吸収促
   進剤を選別するための吸収促進剤候補物質をさらに含む
   ことを特徴とする請求項２記載の方法。