JP2002529380A - オキシドレダクターゼ及びｎ−ヒドロキシアニリド型の増強剤を含む抗微生物組成物 - Google Patents
オキシドレダクターゼ及びｎ−ヒドロキシアニリド型の増強剤を含む抗微生物組成物Info
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Abstract
(57)【要約】
本発明は、例えば、洗濯場において、硬質表面上で、水システムにおいて、皮膚上で、歯上で、又は粘膜上で微生物細胞又は微生物を殺し又は阻害することができる酵素組成物であって、フェノール酸化酵素及び式（Ｉ）の増強剤を含む組成物に関する。本発明は、食品、化粧品、ペイント、コーティング等を保護するための前記酵素組成物の使用にも関する。
Description
【０００１】 発明の分野 本発明は、例えば洗濯場において、硬質表面上に、水システム内に、皮膚上に
、歯上に、又は粘膜上に存在する微生物細胞又は微生物を殺し又は阻害すること
ができる酵素組成物に関する。本発明は、食品、化粧品、ペイント、コーティン
グ等を保護するための前記酵素組成物の使用にも関する。
、歯上に、又は粘膜上に存在する微生物細胞又は微生物を殺し又は阻害すること
ができる酵素組成物に関する。本発明は、食品、化粧品、ペイント、コーティン
グ等を保護するための前記酵素組成物の使用にも関する。
【０００２】 発明の背景 種々の酵素的抗微生物組成物が当業界で知られている。例えば、ＷＯ９４／０
４１２７は、抗微生物に有効な濃度のハイポチオシアナイトイオンを生産するこ
とができる安定化歯磨剤組成物を開示する。その組成物は、過酸化水素を生産す
ることができるオキシドレダクターゼ及び唾液中に通常、存在するチオシアネー
トを抗微生物ハイポチオシアナイトイオンに酸化することができるペルオキシダ
ーゼ酵素を含む。
４１２７は、抗微生物に有効な濃度のハイポチオシアナイトイオンを生産するこ
とができる安定化歯磨剤組成物を開示する。その組成物は、過酸化水素を生産す
ることができるオキシドレダクターゼ及び唾液中に通常、存在するチオシアネー
トを抗微生物ハイポチオシアナイトイオンに酸化することができるペルオキシダ
ーゼ酵素を含む。
【０００３】 ＥＰ−Ａ−０ ５００ ３８７には、ペルオキシド及びハライドの存在下で標
的微生物に選択的に結合しその増殖を阻害する、ハロペルオキシダーゼ、例えば
ミエローペルオキシダーゼ、好酸球オキシダーゼ、ラクトペルオキシダーゼ及び
クロロペルオキシダーゼを含む酵素的抗微生物組成物が開示される。 ＷＯ９５／２７０４６は、バナジウムクロロペルオキシダーゼ、ハロゲン化物
イオン、及び過酸化水素又は過酸化水素生成剤を含む抗微生物組成物を開示する
。
的微生物に選択的に結合しその増殖を阻害する、ハロペルオキシダーゼ、例えば
ミエローペルオキシダーゼ、好酸球オキシダーゼ、ラクトペルオキシダーゼ及び
クロロペルオキシダーゼを含む酵素的抗微生物組成物が開示される。 ＷＯ９５／２７０４６は、バナジウムクロロペルオキシダーゼ、ハロゲン化物
イオン、及び過酸化水素又は過酸化水素生成剤を含む抗微生物組成物を開示する
。
【０００４】 ＷＯ９６／３８５４８は、ハロペルオキシダーゼ、ハロゲン化物イオン、ペル
オキシド生成剤及びアミノ酸を含む抗微生物組成物を開示する。 ＷＯ９７／４２８２５は、ペルオキシダーゼ、過酸化水素源及びフェノチアジ
ン型又はアセトシリンゲート型の増強剤を含む抗微生物組成物を開示する。 本発明の目的は、微生物細胞を殺し又は阻害するための組成物を供することで
ある。
オキシド生成剤及びアミノ酸を含む抗微生物組成物を開示する。 ＷＯ９７／４２８２５は、ペルオキシダーゼ、過酸化水素源及びフェノチアジ
ン型又はアセトシリンゲート型の増強剤を含む抗微生物組成物を開示する。 本発明の目的は、微生物細胞を殺し又は阻害するための組成物を供することで
ある。
【０００５】 発明の概要 本発明によれば、フェノール酸化酵素系及び−ＣＯ−ＮＯＨ−基を含む増強剤
を含む抗微生物組成物が微生物細胞を殺し又は阻害するために極めて有効である
ことが見い出された。 これにより、これらの発見に基づいて、本発明は、第１の態様として、以下の
ものを供する。
を含む抗微生物組成物が微生物細胞を殺し又は阻害するために極めて有効である
ことが見い出された。 これにより、これらの発見に基づいて、本発明は、第１の態様として、以下の
ものを供する。
【０００６】 フェノール酸化酵素系及び次式：
【０００７】
【化７】
【０００８】 〔式中、Ａ及びＢは互いに独立して、
【０００９】
【化８】
【００１０】 であるか、又はＢはＨもしくはＣ1-16−アルキル（ここで該アルキルは、ヒドロ
キシ、エーテル又はエステル基を含んでよい）であり、ここでＲ２，Ｒ３，Ｒ４
，Ｒ５及びＲ６は、互いに独立して、Ｈ，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，
Ｃ1-12−アルキル、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，ＣＦ3 ，ＮＯＨ−ＣＯ−フェ
ニル、ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、Ｃ1-6 −ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ，ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ
，ＣＯＲ１２、フェニル−ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ，ＯＲ７，ＮＲ８Ｒ９，ＣＯＯＲ１
０、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１１であり、ここでＲ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１０，Ｒ１
１及びＲ１２はＣ1-12−アルキル又はアシルである〕 の増強剤を含む酵素的抗微生物組成物。
キシ、エーテル又はエステル基を含んでよい）であり、ここでＲ２，Ｒ３，Ｒ４
，Ｒ５及びＲ６は、互いに独立して、Ｈ，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，
Ｃ1-12−アルキル、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，ＣＦ3 ，ＮＯＨ−ＣＯ−フェ
ニル、ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、Ｃ1-6 −ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ，ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ
，ＣＯＲ１２、フェニル−ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ，ＯＲ７，ＮＲ８Ｒ９，ＣＯＯＲ１
０、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１１であり、ここでＲ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１０，Ｒ１
１及びＲ１２はＣ1-12−アルキル又はアシルである〕 の増強剤を含む酵素的抗微生物組成物。
【００１１】 更なる態様において、本発明は、例えば洗濯場において、化粧品において、又
は硬質表面上で微生物細胞を殺し又は阻害するための方法に関する。 なお更なる態様において、本発明は、コンタクトレンズを洗浄するため、水シ
ステムを洗浄するため、ペイントを保護するため、及びクリーニング・イン・プ
レイスシステムにおける酵素的抗微生物組成物の使用に関する。
は硬質表面上で微生物細胞を殺し又は阻害するための方法に関する。 なお更なる態様において、本発明は、コンタクトレンズを洗浄するため、水シ
ステムを洗浄するため、ペイントを保護するため、及びクリーニング・イン・プ
レイスシステムにおける酵素的抗微生物組成物の使用に関する。
【００１２】 発明の詳細な記載 本発明の文脈において、用語“抗微生物”は、その中に、殺細菌、静細菌、殺
真菌、静真菌、殺ウィルス及び／又は殺胞子効果が存在することを意味すること
を意図する。 用語“殺細菌”は、細菌細胞を殺すことができることとして理解されるべきで
ある。
真菌、静真菌、殺ウィルス及び／又は殺胞子効果が存在することを意味すること
を意図する。 用語“殺細菌”は、細菌細胞を殺すことができることとして理解されるべきで
ある。
【００１３】 殺細菌活性は、生きている細胞の数における対数削減（１０ｇ削減）又はmL当
りのコロニー形成単位（ CFU／mL）として測定される。例えば、１１０ｇ削減は
、Ｙ×１０xCFU／Ｍ（ CFU：コロニー形成単位；Ｍ：mL又はｇ）からＹ×１０x- 1 CFU／Ｍ（式中、ｘは１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０又は１１であ
り得、Ｙは０〜１０のいずれかの数であり得る）への大腸菌ＤＳＭ１５７６又は
エンテロコッカス・ファエカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉ ｓ ）ＤＳＭ２５７０の生きている細胞の数の減少に対応する。生きている細胞の
数は、３０℃でＴｒｙｐｔｏｎｅ Ｓｏｐａ Ａｇａｒ（＃ＣＭ）２９，Ｏｘｏ
ｉｄ，Ｅｎｇｌａｎｄ）プレート上で増殖することができる大腸菌又はＥ．ファ
エカリスの数として決定されるべきである。
りのコロニー形成単位（ CFU／mL）として測定される。例えば、１１０ｇ削減は
、Ｙ×１０xCFU／Ｍ（ CFU：コロニー形成単位；Ｍ：mL又はｇ）からＹ×１０x- 1 CFU／Ｍ（式中、ｘは１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０又は１１であ
り得、Ｙは０〜１０のいずれかの数であり得る）への大腸菌ＤＳＭ１５７６又は
エンテロコッカス・ファエカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉ ｓ ）ＤＳＭ２５７０の生きている細胞の数の減少に対応する。生きている細胞の
数は、３０℃でＴｒｙｐｔｏｎｅ Ｓｏｐａ Ａｇａｒ（＃ＣＭ）２９，Ｏｘｏ
ｉｄ，Ｅｎｇｌａｎｄ）プレート上で増殖することができる大腸菌又はＥ．ファ
エカリスの数として決定されるべきである。
【００１４】 用語“静細菌”は、細菌増殖を阻害する。即ち増殖細菌細胞を抑制することが
できるものとして理解されるべきである。 用語“殺真菌”は、真菌細胞を殺すことができるものとして理解されるべきで
ある。 用語“静真菌”は、真菌増殖を阻害する、即ち増殖真菌細胞を抑制することが
できるものとして理解されるべきである。
できるものとして理解されるべきである。 用語“殺真菌”は、真菌細胞を殺すことができるものとして理解されるべきで
ある。 用語“静真菌”は、真菌増殖を阻害する、即ち増殖真菌細胞を抑制することが
できるものとして理解されるべきである。
【００１５】 用語“殺ウィルス”は、ウィルスを不活性化することができるものとして理解
されるべきである。 用語“殺胞子”は、胞子を活性化することができるものとして理解されるべき
である。 用語“微生物細胞”とは、細菌又は真菌細胞をいい、用語“微生物”とは、（
イーストを含む）真菌又は細菌をいう。
されるべきである。 用語“殺胞子”は、胞子を活性化することができるものとして理解されるべき
である。 用語“微生物細胞”とは、細菌又は真菌細胞をいい、用語“微生物”とは、（
イーストを含む）真菌又は細菌をいう。
【００１６】 本発明の文脈において、用語“微生物細胞の増殖を阻害”は、細胞が非増殖状
態にあること、即ちそれらが繁殖することができないことを意味することを意図
する。 “フェノール酸化酵素系”は、過酸化水素源を伴うペルオキシダーゼ活性を有
する酵素、又は酸素を伴うラッカーゼもしくはラッカーゼ関連酵素を記述する。
態にあること、即ちそれらが繁殖することができないことを意味することを意図
する。 “フェノール酸化酵素系”は、過酸化水素源を伴うペルオキシダーゼ活性を有
する酵素、又は酸素を伴うラッカーゼもしくはラッカーゼ関連酵素を記述する。
【００１７】 本明細書に用いる用語“硬質表面”は、微生物について本質的に非透過性であ
るいずれの表面にも関する。硬質表面の例は、例えばペイント、エナメル等で任
意にコートされ得る、金属、例えばステンレススチール、プラスチック、ゴム、
ボード、ガラス、木、紙、織物、コンクリート、岩、大理石、ギプス及びセラミ
ック材料から作られた表面である。硬質表面は、プロセス装置、例えば冷却塔、
浸透膜、水処理プラント、乳製品工場、食品処理プラント、化学又は医薬プロセ
スプラントであってもよい。従って、本発明による組成物は、慣用的なクリーニ
ング・イン・プレイス（Ｃ−Ｉ−Ｐ）（現場洗浄）システムに役立つ。
るいずれの表面にも関する。硬質表面の例は、例えばペイント、エナメル等で任
意にコートされ得る、金属、例えばステンレススチール、プラスチック、ゴム、
ボード、ガラス、木、紙、織物、コンクリート、岩、大理石、ギプス及びセラミ
ック材料から作られた表面である。硬質表面は、プロセス装置、例えば冷却塔、
浸透膜、水処理プラント、乳製品工場、食品処理プラント、化学又は医薬プロセ
スプラントであってもよい。従って、本発明による組成物は、慣用的なクリーニ
ング・イン・プレイス（Ｃ−Ｉ−Ｐ）（現場洗浄）システムに役立つ。
【００１８】 増強剤 本発明は、次式：
【００１９】
【化９】
【００２０】 〔式中、Ａ及びＢは互いに独立して、
【００２１】
【化１０】
【００２２】 であるか、又はＢはＨもしくはＣ1-16−アルキルであり、ここで該アルキルは、
ヒドロキシ、エステル又はエーテル基を含んでもよく（例えば、そのエーテル酸
素はＡ−Ｎ（ＯＨ）Ｃ＝Ｏ−に直接、結合させて、これによりＮ−ヒドロキシカ
ルバミン酸エステル誘導体を含む）、Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は、互い
に独立して、Ｈ，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，Ｃ1-12−アルキル、アシ
ル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＦ3 ，ＮＯＨ−ＣＯ−フェニル、ＣＯ−
ＮＯＨ−フェニル、Ｃ1-6 −ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ，ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ，ＣＯＲ１２
、フェニル−ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ，ＯＲ７，ＮＲ８Ｒ９，ＣＯＯＲ１０、又はＮＯ
Ｈ−ＣＯ−Ｒ１１であり、ここでＲ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１０，Ｒ１１及びＲ１２
はＣ1-12−アルキル又はアシルである〕 の−ＣＯ−ＮＯＨ−基を含む増強剤に関する。
ヒドロキシ、エステル又はエーテル基を含んでもよく（例えば、そのエーテル酸
素はＡ−Ｎ（ＯＨ）Ｃ＝Ｏ−に直接、結合させて、これによりＮ−ヒドロキシカ
ルバミン酸エステル誘導体を含む）、Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は、互い
に独立して、Ｈ，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，Ｃ1-12−アルキル、アシ
ル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＦ3 ，ＮＯＨ−ＣＯ−フェニル、ＣＯ−
ＮＯＨ−フェニル、Ｃ1-6 −ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ，ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ，ＣＯＲ１２
、フェニル−ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ，ＯＲ７，ＮＲ８Ｒ９，ＣＯＯＲ１０、又はＮＯ
Ｈ−ＣＯ−Ｒ１１であり、ここでＲ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ１０，Ｒ１１及びＲ１２
はＣ1-12−アルキル又はアシルである〕 の−ＣＯ−ＮＯＨ−基を含む増強剤に関する。
【００２３】 ＡのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は、好ましくは、Ｈ，ＯＨ，ＮＨ2 ，Ｃ
ＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，Ｃ1-3 −アルキル、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ
，ＣＦ3 ，ＮＯＨ−ＣＯ−フェニル、ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＣＯＲ１２，Ｏ
Ｒ７，ＮＲ８Ｒ９，ＣＯＯＲ１０、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１１であり、ここでＲ
７，Ｒ８及びＲ９はＣ1-3 −アルキル又はアシルであり、Ｒ１０，Ｒ１１及びＲ
１２はＣ1-3 −アルキルであり；より好ましくはＡのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及
びＲ６はＨ，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、ＮＯ2 ，Ｃ
Ｎ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＦ3 ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＣＯＣＨ3 ，ＯＲ７，
ＮＲ８Ｒ９、又はＣＯＯＣＨ3 であり、ここでＲ７，Ｒ８及びＲ９はＣＨ3 又は
ＣＯＣＨ3 であり；更により好ましくはＡのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は
Ｈ，ＯＨ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，
Ｆ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＯＣＨ3 ，ＣＯＣＨ3 、又はＣＯＯＣＨ3 であり
；そして特にＡのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６はＨ，ＯＨ，ＣＯＯＨ，ＳＯ 3 Ｈ，ＣＨ3 ，ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、又はＯＣ
Ｈ3 である。
ＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，Ｃ1-3 −アルキル、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ
，ＣＦ3 ，ＮＯＨ−ＣＯ−フェニル、ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＣＯＲ１２，Ｏ
Ｒ７，ＮＲ８Ｒ９，ＣＯＯＲ１０、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１１であり、ここでＲ
７，Ｒ８及びＲ９はＣ1-3 −アルキル又はアシルであり、Ｒ１０，Ｒ１１及びＲ
１２はＣ1-3 −アルキルであり；より好ましくはＡのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及
びＲ６はＨ，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、ＮＯ2 ，Ｃ
Ｎ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＦ3 ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＣＯＣＨ3 ，ＯＲ７，
ＮＲ８Ｒ９、又はＣＯＯＣＨ3 であり、ここでＲ７，Ｒ８及びＲ９はＣＨ3 又は
ＣＯＣＨ3 であり；更により好ましくはＡのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は
Ｈ，ＯＨ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，
Ｆ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＯＣＨ3 ，ＣＯＣＨ3 、又はＣＯＯＣＨ3 であり
；そして特にＡのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６はＨ，ＯＨ，ＣＯＯＨ，ＳＯ 3 Ｈ，ＣＨ3 ，ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、又はＯＣ
Ｈ3 である。
【００２４】 ＢのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は、好ましくは、Ｈ，ＯＨ，ＮＨ2 ，Ｃ
ＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，Ｃ1-3 −アルキル、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ
，ＣＦ3 ，ＮＯＨ−ＣＯ−フェニル、ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＣＯＲ１２，Ｏ
Ｒ７，ＮＲ８Ｒ９，ＣＯＯＲ１０、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１１であり、ここで、
Ｒ７，Ｒ８及びＲ９はＣ1-3 −アルキル又はアシルであり、Ｒ１０，Ｒ１１及び
Ｒ１２はＣ1-3 −アルキルであり；より好ましくは、ＢのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ
５及びＲ６はＨ，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、ＮＯ2
，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＦ3 ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＣＯＣＨ3 ，ＯＲ
７，ＮＲ８Ｒ９、又はＣＯＯＣＨ3 であり、ここでＲ７，Ｒ８及びＲ９はＣＨ3
又はＣＯＣＨ3 であり；更により好ましくはＢのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ
６はＨ，ＯＨ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂ
ｒ，Ｆ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＯＣＨ3 ，ＣＯＣＨ3 、又はＣＯＯＣＨ3 で
あり；そして特にＢのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６はＨ，ＯＨ，ＣＯＯＨ，
ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 ，ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、又は
ＯＣＨ3 である。
ＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，Ｃ1-3 −アルキル、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ
，ＣＦ3 ，ＮＯＨ−ＣＯ−フェニル、ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＣＯＲ１２，Ｏ
Ｒ７，ＮＲ８Ｒ９，ＣＯＯＲ１０、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１１であり、ここで、
Ｒ７，Ｒ８及びＲ９はＣ1-3 −アルキル又はアシルであり、Ｒ１０，Ｒ１１及び
Ｒ１２はＣ1-3 −アルキルであり；より好ましくは、ＢのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ
５及びＲ６はＨ，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、ＮＯ2
，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＦ3 ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＣＯＣＨ3 ，ＯＲ
７，ＮＲ８Ｒ９、又はＣＯＯＣＨ3 であり、ここでＲ７，Ｒ８及びＲ９はＣＨ3
又はＣＯＣＨ3 であり；更により好ましくはＢのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ
６はＨ，ＯＨ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂ
ｒ，Ｆ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＯＣＨ3 ，ＣＯＣＨ3 、又はＣＯＯＣＨ3 で
あり；そして特にＢのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６はＨ，ＯＨ，ＣＯＯＨ，
ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 ，ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、又は
ＯＣＨ3 である。
【００２５】 Ｂは、好ましくは、Ｈ又はＣ1-3 −アルキルであり、ここで該アルキルはヒド
ロキシ、エステル又はエーテル基を含み得；好ましくはアルキルはエステル又は
エーテル基を含み得；より好ましくはアルキルはエーテル基を含み得る。 一実施形態において、Ａ及びＢは、互いに独立して、
ロキシ、エステル又はエーテル基を含み得；好ましくはアルキルはエステル又は
エーテル基を含み得；より好ましくはアルキルはエーテル基を含み得る。 一実施形態において、Ａ及びＢは、互いに独立して、
【００２６】
【化１１】
【００２７】 であるか、又はＢはＨ又はＣ1-3 −アルキルであり、ここで該アルキルは、ヒド
ロキシ、エステル又はエーテル基を含み得（例えばそのエーテル酸素はＡ−Ｎ（
ＯＨ）Ｃ＝Ｏ−に直接、結合させて、これによりＮ−ヒドロキシカルバミン酸エ
ステル誘導体を含む）、Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は互いに独立して、Ｈ
，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，Ｃ1-3 −アルキル、アシル、ＮＯ2 ，Ｃ
Ｎ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＦ3 ，ＮＯＨ−ＣＯ−フェニル、ＣＯ−ＮＯＨ−フェニ
ル、ＣＯＲ１２，ＯＲ７，ＮＲ８Ｒ９，ＣＯＯＲ１０、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１
１であり、ここでＲ７，Ｒ８及びＲ９はＣ1-3 −アルキル又はアシルであり、そ
してＲ１０，Ｒ１１及びＲ１２はＣ1-3 −アルキルである。
ロキシ、エステル又はエーテル基を含み得（例えばそのエーテル酸素はＡ−Ｎ（
ＯＨ）Ｃ＝Ｏ−に直接、結合させて、これによりＮ−ヒドロキシカルバミン酸エ
ステル誘導体を含む）、Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は互いに独立して、Ｈ
，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，Ｃ1-3 −アルキル、アシル、ＮＯ2 ，Ｃ
Ｎ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＦ3 ，ＮＯＨ−ＣＯ−フェニル、ＣＯ−ＮＯＨ−フェニ
ル、ＣＯＲ１２，ＯＲ７，ＮＲ８Ｒ９，ＣＯＯＲ１０、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１
１であり、ここでＲ７，Ｒ８及びＲ９はＣ1-3 −アルキル又はアシルであり、そ
してＲ１０，Ｒ１１及びＲ１２はＣ1-3 −アルキルである。
【００２８】 別の実施形態において、Ａ及びＢは、互いに独立して、
【００２９】
【化１２】
【００３０】 であるか、又はＢはＨ又はＣ1-3 −アルキルであり、ここで該アルキルは、ヒド
ロキシ又はエーテル基を含み得（例えばそのエーテル酸素はＡ−Ｎ（ＯＨ）Ｃ＝
Ｏ−に直接、結合させて、これによりＮ−ヒドロキシカルバミン酸エステル誘導
体を含む）、Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は互いに独立して、Ｈ，ＯＨ，Ｎ
Ｈ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，
ＣＦ3 ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＣＯＣＨ3 ，ＯＲ７，ＮＲ８Ｒ９、又はＣＯ
ＯＣＨ3 であり、ここでＲ７，Ｒ８及びＲ９はＣＨ3 又はＣＯＣＨ3 である。
ロキシ又はエーテル基を含み得（例えばそのエーテル酸素はＡ−Ｎ（ＯＨ）Ｃ＝
Ｏ−に直接、結合させて、これによりＮ−ヒドロキシカルバミン酸エステル誘導
体を含む）、Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は互いに独立して、Ｈ，ＯＨ，Ｎ
Ｈ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，
ＣＦ3 ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＣＯＣＨ3 ，ＯＲ７，ＮＲ８Ｒ９、又はＣＯ
ＯＣＨ3 であり、ここでＲ７，Ｒ８及びＲ９はＣＨ3 又はＣＯＣＨ3 である。
【００３１】 別の実施形態において、Ａ及びＢは、互いに独立して、
【００３２】
【化１３】
【００３３】 であるか、又はＢはＨ又はＣ1-3 −アルキルであり、ここで該アルキルは、ヒド
ロキシ又はエーテル基を含み得（例えばそのエーテル酸素はＡ−Ｎ（ＯＨ）Ｃ＝
Ｏ−に直接、結合させて、これによりＮ−ヒドロキシカルバミン酸エステル誘導
体を含む）、Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は互いに独立して、Ｈ，ＯＨ，Ｃ
ＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＯ−Ｎ
ＯＨ−フェニル、ＯＣＨ3 ，ＣＯＣＨ3 、又はＣＯＯＣＨ3 である。
ロキシ又はエーテル基を含み得（例えばそのエーテル酸素はＡ−Ｎ（ＯＨ）Ｃ＝
Ｏ−に直接、結合させて、これによりＮ−ヒドロキシカルバミン酸エステル誘導
体を含む）、Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は互いに独立して、Ｈ，ＯＨ，Ｃ
ＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＯ−Ｎ
ＯＨ−フェニル、ＯＣＨ3 ，ＣＯＣＨ3 、又はＣＯＯＣＨ3 である。
【００３４】 別の実施形態において、Ａ及びＢは、互いに独立して、
【００３５】
【化１４】
【００３６】 であるか、又はＢはＣ1-3 −アルキルであり、ここで該アルキルは、エーテル基
を含み得（例えばそのエーテル酸素はＡ−Ｎ（ＯＨ）Ｃ＝Ｏ−に直接、結合させ
て、これによりＮ−ヒドロキシカルバミン酸エステル誘導体を含む）、Ｒ２，Ｒ
３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は互いに独立してＨ，ＯＨ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ 3 ，ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、又はＯＣＨ3 である
。
を含み得（例えばそのエーテル酸素はＡ−Ｎ（ＯＨ）Ｃ＝Ｏ−に直接、結合させ
て、これによりＮ−ヒドロキシカルバミン酸エステル誘導体を含む）、Ｒ２，Ｒ
３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は互いに独立してＨ，ＯＨ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ 3 ，ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、又はＯＣＨ3 である
。
【００３７】 本明細書に用いるｎが２〜１６であり得る用語“Ｃ1-n −アルキル”は、１〜
特定数の炭素原子を有する分枝又は直鎖アルキル基を示す。典型的なＣ1-6 −ア
ルキル基は、これらに限らないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピ
ル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソ
ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル等を含む。
特定数の炭素原子を有する分枝又は直鎖アルキル基を示す。典型的なＣ1-6 −ア
ルキル基は、これらに限らないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピ
ル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソ
ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル等を含む。
【００３８】 本明細書に用いる用語“アシル”は、カルボニル基を介して結合したＣ1-6 −
アルキル基を含む一価置換基をいい；例えばアセチル、プロピオニル、ブチリル
、イソブチリル、ピバロイル、バレリル等をいう。 一実施形態において、Ａの置換基Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６のうちの少
くとも１つはＨであり、好ましくはＡの置換基Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６
のうちの少くとも２つはＨであり、より好ましくはＡの置換基Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４
，Ｒ５及びＲ６のうちの少くとも３つはＨであり、最も好ましくはＡの置換基Ｒ
２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６はＨであり、特にＡのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及
びＲ６は全てＨである。
アルキル基を含む一価置換基をいい；例えばアセチル、プロピオニル、ブチリル
、イソブチリル、ピバロイル、バレリル等をいう。 一実施形態において、Ａの置換基Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６のうちの少
くとも１つはＨであり、好ましくはＡの置換基Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６
のうちの少くとも２つはＨであり、より好ましくはＡの置換基Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４
，Ｒ５及びＲ６のうちの少くとも３つはＨであり、最も好ましくはＡの置換基Ｒ
２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６はＨであり、特にＡのＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及
びＲ６は全てＨである。
【００３９】 別の実施形態において、Ｂの置換基Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６のうちの
少くとも１つはＨであり、好ましくはＢの置換基Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ
６のうちの少くとも２つはＨであり、より好ましくはＢの置換基Ｒ２，Ｒ３，Ｒ
４，Ｒ５及びＲ６のうちの少くとも３つはＨであり、最も好ましくはＢの置換基
Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６のうちの少くとも４つはＨであり、特にＢのＲ
２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は全てＨである。
少くとも１つはＨであり、好ましくはＢの置換基Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ
６のうちの少くとも２つはＨであり、より好ましくはＢの置換基Ｒ２，Ｒ３，Ｒ
４，Ｒ５及びＲ６のうちの少くとも３つはＨであり、最も好ましくはＢの置換基
Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６のうちの少くとも４つはＨであり、特にＢのＲ
２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は全てＨである。
【００４０】 本発明による特定の実施形態において、増強剤は、 ４−ニトロ安息香酸−Ｎ−ヒドロキシアニリド； ４−メトキシ安息香酸−Ｎ−ヒドロキシアニリド； Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジフェニルテレフタルアミド； デカン酸−Ｎ−ヒドロキシアニリド； Ｎ−ヒドロキシ−４−シアノアセトアニリド； Ｎ−ヒドロキシ−４−アセチルアセトアニリド； Ｎ−ヒドロキシ−４−ヒドロキシアセトアニリド； Ｎ−ヒドロキシ−３−（Ｎ′−ヒドロキシアセトアミド）アセトアニリド； ４−シアノ安息香酸−Ｎ−ヒドロキシアニリド； Ｎ−ヒドロキシ−４−ニトロアセトアニリド； Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド； Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−フェニル−カルバミン酸イソプロピルエステル； Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−フェニル−カルバミン酸メチルエステル； Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−フェニル−カルバミン酸フェニルエステル； Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−フェニル−カルバミン酸エチルエステル；及び Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−（４−シアノフェニル）−カルバミン酸メチルエステル
からなる群から選択される。
からなる群から選択される。
【００４１】 本発明の増強剤は、１〜１０００μＭ、好ましくは５〜５００μＭ、より好ま
しくは１０〜２００μＭの濃度で存在し得る。 増強剤の調製 本願に記載される増強剤は、当業者に公知の方法を用いて調製することができ
；それら増強剤のいくつかは市販もされている。
しくは１０〜２００μＭの濃度で存在し得る。 増強剤の調製 本願に記載される増強剤は、当業者に公知の方法を用いて調製することができ
；それら増強剤のいくつかは市販もされている。
【００４２】 用いる化合物は、Ｎ−ヒドロキシアセトアニリドについて記載される一般的手
順（Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ ６７，１９８９，ｐ．１８７〜１９
２）次に標準的精製手順に従って調製した。 過酸化水素／酸素 フェノール酸化酵素が過酸化水素のソースを要求する場合、そのソースは、過
酸化水素又は過酸化水素のイン・シトウ生産のための過酸化水素前駆体、例えば
ペルカーボネートもしくはペルボレート、又は過酸化水素生成酵素系（例えばオ
キシダーゼのための基質を伴うオキシダーゼ、例えば好適なアミノ酸を伴うアミ
ン酸オキシダーゼ）、又はペルオキシカルボン酸又はその塩であり得る。過酸化
水素は、その過程の始めに又はその間に加えることができ、典型的には、０．０
０１〜２５mMのレベル、好ましくは０．００５〜５mMのレベル、特に０．０１〜
１mMのレベルに相当する量で加えることができる。
順（Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ ６７，１９８９，ｐ．１８７〜１９
２）次に標準的精製手順に従って調製した。 過酸化水素／酸素 フェノール酸化酵素が過酸化水素のソースを要求する場合、そのソースは、過
酸化水素又は過酸化水素のイン・シトウ生産のための過酸化水素前駆体、例えば
ペルカーボネートもしくはペルボレート、又は過酸化水素生成酵素系（例えばオ
キシダーゼのための基質を伴うオキシダーゼ、例えば好適なアミノ酸を伴うアミ
ン酸オキシダーゼ）、又はペルオキシカルボン酸又はその塩であり得る。過酸化
水素は、その過程の始めに又はその間に加えることができ、典型的には、０．０
０１〜２５mMのレベル、好ましくは０．００５〜５mMのレベル、特に０．０１〜
１mMのレベルに相当する量で加えることができる。
【００４３】 フェノール酸化酵素が酸素分子を要求する場合、その雰囲気からの酸素分子は
、通常、十分な量で存在するであろう。より多くのＯ2 が必要とされるなら、更
なる酸素を加えることができる。 フェノール酸化酵素 本発明の文脈において、フェノール酸化酵素の酵素は、ペルオキシダーゼ活性
を有する酵素又はラッカーゼもしくはラッカーゼ関連酵素であり得る。
、通常、十分な量で存在するであろう。より多くのＯ2 が必要とされるなら、更
なる酸素を加えることができる。 フェノール酸化酵素 本発明の文脈において、フェノール酸化酵素の酵素は、ペルオキシダーゼ活性
を有する酵素又はラッカーゼもしくはラッカーゼ関連酵素であり得る。
【００４４】 本発明の酵素は、典型的には、水溶液１リッター当り１〜１００００μｇの酵
素タンパク質、好ましくは水溶液１リッター当り５〜２０００μｇの酵素タンパ
ク質、より好ましくは水溶液１リッター当り５〜１０００μｇの酵素タンパク質
、そして最も好ましくは水溶液１リッター当り１〜５００μｇの酵素タンパク質
の濃度で存在し得る。
素タンパク質、好ましくは水溶液１リッター当り５〜２０００μｇの酵素タンパ
ク質、より好ましくは水溶液１リッター当り５〜１０００μｇの酵素タンパク質
、そして最も好ましくは水溶液１リッター当り１〜５００μｇの酵素タンパク質
の濃度で存在し得る。
【００４５】 ペルオキシダーゼ及びペルオキシダーゼ活性を有する化合物 ペルオキシダーゼ活性を有する化合物は、酵素分類（ＥＣ １．１１．１．７
）に含まれるいずれのペルオキシダーゼ酵素であっても、又はペルオキシダーゼ
活性を示すいずれのそれから得られるフラグメントであってもよい。 好ましくは、本発明によるペルオキシダーゼは、植物（例えばセイヨウワサビ
又はダイズペルオキシダーゼ）又は微生物、例えば真菌もしくは細菌により生産
され得る。
）に含まれるいずれのペルオキシダーゼ酵素であっても、又はペルオキシダーゼ
活性を示すいずれのそれから得られるフラグメントであってもよい。 好ましくは、本発明によるペルオキシダーゼは、植物（例えばセイヨウワサビ
又はダイズペルオキシダーゼ）又は微生物、例えば真菌もしくは細菌により生産
され得る。
【００４６】 いくつかの好ましい真菌には、亜門Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｏｔｉｎａ、綱Ｈｙ
ｐｈｏｍｙｃｅｔｅｓに属する株、例えば、Ｆｕｓａｒｉｕｍ，Ｈｕｍｉｃｏｌ
ａ，Ｔｒｉｃｏｄｅｒｍａ，Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍ，Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｍ
，Ａｒｔｈｒｏｍｙｃｅｓ，Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃｅｓ，Ｕｌｏｃｌａｄｉｕ
ｍ，Ｅｍｂｅｌｌｉｓｉａ，Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ又はＤｒｅｓｃｈｌｅｒ
ａ、特にＦｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ（ＤＳＭ ２６７２），Ｈｕｍ
ｉｃｏｌａ ｉｎｓｏｌｅｎｓ，Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｓｉｉ，Ｍｙｒ
ｏｔｈｅｃｉｕｍ ｖｅｒｒｕｃａｒｉａ（ＩＦＯ ６１１３），Ｖｅｒｔｉｃ
ｉｌｌｕｍ ａｌｂｏａｔｒｕｍ，Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｍ ｄａｈｌｉｅ，Ａ
ｒｔｈｒｏｍｙｃｅｓ ｒａｍｏｓｕｓ（ＦＥＲＭ Ｐ−７７５４），Ｃａｌｄ
ａｒｉｏｍｙｃｅｓ ｆｕｍａｇｏ，Ｕｌｏｃｌａｄｉｕｍ ｃｈａｒｔａｒｕ
ｍ，Ｅｍｂｅｌｌｉｓｉａ ａｌｌｉ又はＤｒｅｓｃｈｌｅｒａ ｈａｌｏｄｅ
ｓがある。
ｐｈｏｍｙｃｅｔｅｓに属する株、例えば、Ｆｕｓａｒｉｕｍ，Ｈｕｍｉｃｏｌ
ａ，Ｔｒｉｃｏｄｅｒｍａ，Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍ，Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｍ
，Ａｒｔｈｒｏｍｙｃｅｓ，Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃｅｓ，Ｕｌｏｃｌａｄｉｕ
ｍ，Ｅｍｂｅｌｌｉｓｉａ，Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ又はＤｒｅｓｃｈｌｅｒ
ａ、特にＦｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ（ＤＳＭ ２６７２），Ｈｕｍ
ｉｃｏｌａ ｉｎｓｏｌｅｎｓ，Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｓｉｉ，Ｍｙｒ
ｏｔｈｅｃｉｕｍ ｖｅｒｒｕｃａｒｉａ（ＩＦＯ ６１１３），Ｖｅｒｔｉｃ
ｉｌｌｕｍ ａｌｂｏａｔｒｕｍ，Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｍ ｄａｈｌｉｅ，Ａ
ｒｔｈｒｏｍｙｃｅｓ ｒａｍｏｓｕｓ（ＦＥＲＭ Ｐ−７７５４），Ｃａｌｄ
ａｒｉｏｍｙｃｅｓ ｆｕｍａｇｏ，Ｕｌｏｃｌａｄｉｕｍ ｃｈａｒｔａｒｕ
ｍ，Ｅｍｂｅｌｌｉｓｉａ ａｌｌｉ又はＤｒｅｓｃｈｌｅｒａ ｈａｌｏｄｅ
ｓがある。
【００４７】 他の好ましい真菌には、亜門Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔｉｎａ、綱Ｂａｓｉｄ
ｉｏｍｙｃｅｔｅｓに属する株、例えば、Ｃｏｐｒｉｎｕｓ，Ｐｈａｎｅｒｏｃ
ｈａｅｔｅ，Ｃｏｒｉｏｌｕｓ又はＴｒａｍｅｔｅｓ、特にＣｏｐｒｉｎｕｓ
ｃｉｎｅｒｅｕｓ ｆ．ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｓ（ＩＦＯ ８３７１），Ｃｏｐ
ｒｉｎｕｓ ｍａｃｒｏｒｈｉｚｕｓ，Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ ｃｈｒｙ
ｓｏｓｐｏｒｉｕｍ（例えば、ＮＡ−１２）又はＴｒａｍｅｔｅｓ（ｐｒｅｖｉ
ｏｕｓｌｙ ｃａｌｌｅｄ Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ）、例えばＴ．ｖｅｒｓｉｃｏ
ｌｏｒ（例えば、ＰＲ４ ２８−Ａ）がある。
ｉｏｍｙｃｅｔｅｓに属する株、例えば、Ｃｏｐｒｉｎｕｓ，Ｐｈａｎｅｒｏｃ
ｈａｅｔｅ，Ｃｏｒｉｏｌｕｓ又はＴｒａｍｅｔｅｓ、特にＣｏｐｒｉｎｕｓ
ｃｉｎｅｒｅｕｓ ｆ．ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｓ（ＩＦＯ ８３７１），Ｃｏｐ
ｒｉｎｕｓ ｍａｃｒｏｒｈｉｚｕｓ，Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ ｃｈｒｙ
ｓｏｓｐｏｒｉｕｍ（例えば、ＮＡ−１２）又はＴｒａｍｅｔｅｓ（ｐｒｅｖｉ
ｏｕｓｌｙ ｃａｌｌｅｄ Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ）、例えばＴ．ｖｅｒｓｉｃｏ
ｌｏｒ（例えば、ＰＲ４ ２８−Ａ）がある。
【００４８】 更に好ましい真菌には、亜門Ｚｙｇｏｍｙｃｏｔｉｎａ、綱Ｍｙｃｏｒａｃｅ
ａｅに属する株、例えば、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ又はＭｕｃｏｒ、特にＭｕｃｏｒ
ｈｉｅｍａｌｉｓがある。 いくつかの好ましい細菌には、目Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓの株、例え
ばＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐｈｅｒｏｉｄｅｓ（ＡＴＴＣ ２３９６５）
，Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｔｈｅｒｍｏｖｉｏｌａｃｅｕｓ（ＩＦＯ １２
３８２）又はＳｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｍ ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕ
ｍ ｓｓｐ．ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍがある。
ａｅに属する株、例えば、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ又はＭｕｃｏｒ、特にＭｕｃｏｒ
ｈｉｅｍａｌｉｓがある。 いくつかの好ましい細菌には、目Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓの株、例え
ばＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐｈｅｒｏｉｄｅｓ（ＡＴＴＣ ２３９６５）
，Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｔｈｅｒｍｏｖｉｏｌａｃｅｕｓ（ＩＦＯ １２
３８２）又はＳｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｍ ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕ
ｍ ｓｓｐ．ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍがある。
【００４９】 他の好ましい細菌には、Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ，
Ｒｈｏｄｏｍｏｎａｓ ｐａｌｕｓｔｒｉ，Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａ
ｃｔｉｓ，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｒｒｏｃｉｎｉａ（ＡＴＣＣ １５９
５８），Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ（ＮＲＲＬ Ｂ−１
１）及びＢａｃｉｌｌｕｓ株、例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ（Ａ
ＴＣＣ １２９０５）及びＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉ
ｌｕｓがある。
Ｒｈｏｄｏｍｏｎａｓ ｐａｌｕｓｔｒｉ，Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａ
ｃｔｉｓ，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｒｒｏｃｉｎｉａ（ＡＴＣＣ １５９
５８），Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ（ＮＲＲＬ Ｂ−１
１）及びＢａｃｉｌｌｕｓ株、例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ（Ａ
ＴＣＣ １２９０５）及びＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉ
ｌｕｓがある。
【００５０】 更に好ましい細菌には、Ｍｙｘｏｃｏｃｃｕｓに属する株、例えば、Ｍ．ｖｉ
ｒｅｓｃｅｎｓがある。 ペルオキシダーゼは、更に、ペルオキシダーゼの発現を許容する条件下で培養
培地中で、前記ペルオキシダーゼをコードするＤＮＡ配列、並びにペルオキシダ
ーゼをコードするＤＮＡ配列の発現を許容する機能をコードするＤＮＡ配列を有
する組換えＤＮＡベクターで形質転換された宿主細胞を培養し、そしてその培養
物からペルオキシダーゼを回収することを含む方法により生産することができる
ものであり得る。
ｒｅｓｃｅｎｓがある。 ペルオキシダーゼは、更に、ペルオキシダーゼの発現を許容する条件下で培養
培地中で、前記ペルオキシダーゼをコードするＤＮＡ配列、並びにペルオキシダ
ーゼをコードするＤＮＡ配列の発現を許容する機能をコードするＤＮＡ配列を有
する組換えＤＮＡベクターで形質転換された宿主細胞を培養し、そしてその培養
物からペルオキシダーゼを回収することを含む方法により生産することができる
ものであり得る。
【００５１】 特に、組換え生産されたペルオキシダーゼは、コプリヌス種（Ｃｏｐｒｉｎｕ
ｓ ｓｐ）、特にＷＯ９２／１６６３４に従うＣ．マクロリズス（Ｃ．ｍａｃｒ ｏｒｈｉｚｕｓ ）又はＣ．シネレウス（Ｃ．ｃｉｎｅｒｅｕｓ）から得られるペ
ルオキシダーゼである。 本発明の文脈において、ペルオキシダーゼ活性を有する化合物は、ペルオキシ
ダーゼ酵素、及びシトクロム、ヘモグロビン又はペルオキシダーゼ酵素から得ら
れるペルオキシダーゼ活性フラグメントを含む。
ｓ ｓｐ）、特にＷＯ９２／１６６３４に従うＣ．マクロリズス（Ｃ．ｍａｃｒ ｏｒｈｉｚｕｓ ）又はＣ．シネレウス（Ｃ．ｃｉｎｅｒｅｕｓ）から得られるペ
ルオキシダーゼである。 本発明の文脈において、ペルオキシダーゼ活性を有する化合物は、ペルオキシ
ダーゼ酵素、及びシトクロム、ヘモグロビン又はペルオキシダーゼ酵素から得ら
れるペルオキシダーゼ活性フラグメントを含む。
【００５２】 ペルオキシダーゼ活性（ＰＯＸＵ）の測定 １ペルオキシダーゼ単位（ＰＯＸＵ）は、以下の条件下で分当りに１μモルの
過酸化水素の変換を触媒する酵素の量である： ０．１Ｍ リン酸緩衝液pH７．０ ０．８８mM 過酸化水素 １．６７mM ２，２′−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−ス
ルホネート）（ＡＢＴＳ） ３０℃ その反応は、４１８nmの吸光度の変化により６０秒（混合後１５秒）、追跡し
、それは０．１５〜０．３０の範囲になるべきである。
過酸化水素の変換を触媒する酵素の量である： ０．１Ｍ リン酸緩衝液pH７．０ ０．８８mM 過酸化水素 １．６７mM ２，２′−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−ス
ルホネート）（ＡＢＴＳ） ３０℃ その反応は、４１８nmの吸光度の変化により６０秒（混合後１５秒）、追跡し
、それは０．１５〜０．３０の範囲になるべきである。
【００５３】 活性の計算のため、３６mM-1cm-1の酸化ＡＢＴＳの吸光係数及び酸化した２μ
モルのＡＢＴＳ当りに変換される１μモルのＨ2 Ｏ2 の化学量論を用いる。 ラッカーゼ及びラッカーゼ関連酵素 本発明の文脈において、ラッカーゼ及びラッカーゼ関連酵素は、酵素分類（Ｅ
Ｃ １．１０．３．２）に含まれるいずれかのラッカーゼ酵素、酵素分類（ＥＣ
１．１０．３．１）に含まれるいずれかのカテコールオキシダーゼ酵素、酵素
分類（ＥＣ １．３．３．５）に含まれるいずれかのビリルビンオキシダーゼ酵
素又は酵素分類（ＥＣ １．１４．１８．１）に含まれるいずれかのモノフェノ
ールモノオキシゲナーゼ酵素を含む。
モルのＡＢＴＳ当りに変換される１μモルのＨ2 Ｏ2 の化学量論を用いる。 ラッカーゼ及びラッカーゼ関連酵素 本発明の文脈において、ラッカーゼ及びラッカーゼ関連酵素は、酵素分類（Ｅ
Ｃ １．１０．３．２）に含まれるいずれかのラッカーゼ酵素、酵素分類（ＥＣ
１．１０．３．１）に含まれるいずれかのカテコールオキシダーゼ酵素、酵素
分類（ＥＣ １．３．３．５）に含まれるいずれかのビリルビンオキシダーゼ酵
素又は酵素分類（ＥＣ １．１４．１８．１）に含まれるいずれかのモノフェノ
ールモノオキシゲナーゼ酵素を含む。
【００５４】 上述の酵素は、微生物のものであっても、即ち細菌又は（糸状菌及びイースト
を含む）真菌から得られてもよく、又はそれらは植物から得られてもよい。 真菌からの好適な例には、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ，Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ、
例えば、Ｎ．ｃｒａｓｓａ，Ｐｏｄｏｓｐｏｒａ，Ｂｏｔｒｙｔｉｓ，Ｃｏｌｌ
ｙｂｉａ，Ｆｏｍｅｓ，Ｌｅｎｔｉｎｕｓ，Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ，Ｔｒａｍｅｔ
ｅｓ、例えばＴ．ｖｉｌｌｏｓａ及びＴ．ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ，Ｒｈｉｚｏｃ
ｔｏｎｉａ、例えば、Ｒ．ｓｏｌａｎｉ，Ｃｏｐｒｉｎｕｓ、例えば、Ｃ．ｃｉ
ｎｅｒｅｕｓ，Ｃ．ｃｏｍａｔｕｓ，Ｃ．ｆｒｉｅｓｉｉ、及びＣ．ｐｌｉｃａ
ｔｉｌｉｓ，Ｐｓａｔｈｙｒｅｌｌａ、例えば、Ｐ．ｃｏｎｄｅｌｌｅａｎａ，
Ｐａｎａｅｏｌｕｓ、例えば、Ｐ．ｐａｐｉｌｉｏｎａｃｅｕｓ，Ｍｙｃｅｌｉ
ｏｐｈｔｈｏｒａ、例えば、Ｍ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ，Ｓｃｈｙｔａｌｉｄ
ｉｕｍ、例えば、Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ，Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ、例えば
、Ｐ．ｐｉｎｓｉｔｕｓ，Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓ、例えば、Ｐ．ｃｉｎｎａｂａ
ｒｉｎｕｓ，Ｐｈｌｅｂｉａ、例えば、Ｐ．ｒａｄｉｔａ（ＷＯ９２／０１０４
６）、又はＣｏｒｉｏｌｕｓ、例えば、Ｃ．ｈｉｒｓｕｔｕｓ（ＪＰ ２−２３
８８８５）の株から得ることができるラッカーゼがある。
を含む）真菌から得られてもよく、又はそれらは植物から得られてもよい。 真菌からの好適な例には、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ，Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ、
例えば、Ｎ．ｃｒａｓｓａ，Ｐｏｄｏｓｐｏｒａ，Ｂｏｔｒｙｔｉｓ，Ｃｏｌｌ
ｙｂｉａ，Ｆｏｍｅｓ，Ｌｅｎｔｉｎｕｓ，Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ，Ｔｒａｍｅｔ
ｅｓ、例えばＴ．ｖｉｌｌｏｓａ及びＴ．ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ，Ｒｈｉｚｏｃ
ｔｏｎｉａ、例えば、Ｒ．ｓｏｌａｎｉ，Ｃｏｐｒｉｎｕｓ、例えば、Ｃ．ｃｉ
ｎｅｒｅｕｓ，Ｃ．ｃｏｍａｔｕｓ，Ｃ．ｆｒｉｅｓｉｉ、及びＣ．ｐｌｉｃａ
ｔｉｌｉｓ，Ｐｓａｔｈｙｒｅｌｌａ、例えば、Ｐ．ｃｏｎｄｅｌｌｅａｎａ，
Ｐａｎａｅｏｌｕｓ、例えば、Ｐ．ｐａｐｉｌｉｏｎａｃｅｕｓ，Ｍｙｃｅｌｉ
ｏｐｈｔｈｏｒａ、例えば、Ｍ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ，Ｓｃｈｙｔａｌｉｄ
ｉｕｍ、例えば、Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ，Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ、例えば
、Ｐ．ｐｉｎｓｉｔｕｓ，Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓ、例えば、Ｐ．ｃｉｎｎａｂａ
ｒｉｎｕｓ，Ｐｈｌｅｂｉａ、例えば、Ｐ．ｒａｄｉｔａ（ＷＯ９２／０１０４
６）、又はＣｏｒｉｏｌｕｓ、例えば、Ｃ．ｈｉｒｓｕｔｕｓ（ＪＰ ２−２３
８８８５）の株から得ることができるラッカーゼがある。
【００５５】 細菌からの好適な例には、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）の株から得ることが
できるラッカーゼがある。 Ｃｏｐｒｉｎｕｓ，Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ，Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ，Ｐ
ｙｃｎｏｐｏｒｕｓ，Ｓｃｙｔａｌｉｄｉｕｍ又はＲｈｉｚｏｃｔｏｎｉａから
得られるラッカーゼが好ましく；特にＣｏｐｒｉｎｕｓ ｃｉｎｅｒｅｕｓ，Ｍ
ｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ，Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ
ｐｉｎｓｉｔｕｓ，Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓ ｃｉｎｎａｂａｒｉｎｕｓ，Ｓｃｙ
ｔａｌｉｄｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ又はＲｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓ
ｏｌａｎｉから得られるラッカーゼが好ましい。
できるラッカーゼがある。 Ｃｏｐｒｉｎｕｓ，Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ，Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ，Ｐ
ｙｃｎｏｐｏｒｕｓ，Ｓｃｙｔａｌｉｄｉｕｍ又はＲｈｉｚｏｃｔｏｎｉａから
得られるラッカーゼが好ましく；特にＣｏｐｒｉｎｕｓ ｃｉｎｅｒｅｕｓ，Ｍ
ｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ，Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ
ｐｉｎｓｉｔｕｓ，Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓ ｃｉｎｎａｂａｒｉｎｕｓ，Ｓｃｙ
ｔａｌｉｄｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ又はＲｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓ
ｏｌａｎｉから得られるラッカーゼが好ましい。
【００５６】 ラッカーゼ又はラッカーゼ関連酵素は、更に、ラッカーゼをコードするＤＮＡ
配列及び該ラッカーゼをコードするＤＮＡ配列の発現を許容する機能をコードす
るＤＮＡ配列を有する組換えＤＮＡベクターで形質転換された宿主細胞を、ラッ
カーゼ酵素の発現を許容する条件下で培養し、そしてその培養物からラッカーゼ
を回収することを含む方法によって生産することができるものであり得る。
配列及び該ラッカーゼをコードするＤＮＡ配列の発現を許容する機能をコードす
るＤＮＡ配列を有する組換えＤＮＡベクターで形質転換された宿主細胞を、ラッ
カーゼ酵素の発現を許容する条件下で培養し、そしてその培養物からラッカーゼ
を回収することを含む方法によって生産することができるものであり得る。
【００５７】 ラッカーゼ活性（ＬＡＣＵ）の測定 ラッカーゼ活性は、好気性条件下でのシリングアルダジンの酸化から測定され
る。形成された紫色は５３０nmで光度測定される。分析条件は１９mMシリングア
ルダジン、２３mMアセテート緩衝液、pH５．５、３０℃、１分の反応時間である
。
る。形成された紫色は５３０nmで光度測定される。分析条件は１９mMシリングア
ルダジン、２３mMアセテート緩衝液、pH５．５、３０℃、１分の反応時間である
。
【００５８】 １ラッカーゼ単位（ＬＡＣＵ）は、これらの条件で分当りに１．０μモルのシ
リングアルダジンの変換を触媒する酵素の量である。 ラッカーゼ活性（ＬＡＭＵ）の測定 ラッカーゼ活性は、好気性条件下でのシリングアルダジンの酸化から測定され
る。形成された紫色は５３０nmで光度測定される。分析条件は１９mMシリングア
ルダジン、２３mM Ｔｒｉｓ／マレエート緩衝液、pH７．５、３０℃、１分の反
応時間である。
リングアルダジンの変換を触媒する酵素の量である。 ラッカーゼ活性（ＬＡＭＵ）の測定 ラッカーゼ活性は、好気性条件下でのシリングアルダジンの酸化から測定され
る。形成された紫色は５３０nmで光度測定される。分析条件は１９mMシリングア
ルダジン、２３mM Ｔｒｉｓ／マレエート緩衝液、pH７．５、３０℃、１分の反
応時間である。
【００５９】 １ラッカーゼ単位（ＬＡＭＵ）は、これらの条件で分当りに１．０μモルのシ
リングアルダジンの変換を触媒する酵素の量である。 組成物 本発明による抗微生物組成物は固体又は液体として調剤することができる。 液体として調剤する場合、組成物は、典型的には、水性組成物である。
リングアルダジンの変換を触媒する酵素の量である。 組成物 本発明による抗微生物組成物は固体又は液体として調剤することができる。 液体として調剤する場合、組成物は、典型的には、水性組成物である。
【００６０】 固体として調剤する場合、組成物は、典型的には、粉末、顆粒、ペースト又は
ゲル化製品である。 過酸化水素が必要である場合、２部の調剤システムを用い、それにより過酸化
水素を他の成分と別個にしておくのが好ましい。 本発明の組成物は、補助剤、例えば湿潤剤、濃化剤、緩衝液、安定剤、香料、
着色料、充填剤等を更に含み得る。
ゲル化製品である。 過酸化水素が必要である場合、２部の調剤システムを用い、それにより過酸化
水素を他の成分と別個にしておくのが好ましい。 本発明の組成物は、補助剤、例えば湿潤剤、濃化剤、緩衝液、安定剤、香料、
着色料、充填剤等を更に含み得る。
【００６１】 有用な湿潤剤は、界面活性剤、即ち非イオン性、アニオン性、両性又は双性イ
オン性界面活性剤である。 本発明の組成物は、濃縮製品又は直ちに用いることができる製品であってもよ
い。使用において、濃縮製品は、典型的には、水で希釈されて、消毒又は保護さ
れるべき対象に適用され、存在する微生物との反応を許容する有効な抗微生物活
性を有する媒体を供する。
オン性界面活性剤である。 本発明の組成物は、濃縮製品又は直ちに用いることができる製品であってもよ
い。使用において、濃縮製品は、典型的には、水で希釈されて、消毒又は保護さ
れるべき対象に適用され、存在する微生物との反応を許容する有効な抗微生物活
性を有する媒体を供する。
【００６２】 このような水性組成物の至適pHは、通常、問題の酵素の至適安定性及び至適活
性の間の妥協点である。本発明の一態様において、pHはpH３〜１０．５の範囲に
あり、本発明の別の態様において、pHはpH５〜９の範囲である。 方法 本発明は、微生物細胞を本発明の組成物で処理することを含む微生物を殺し又
は阻害するための方法も供する。その処理は、有効量の前記組成物で行うことが
できる。
性の間の妥協点である。本発明の一態様において、pHはpH３〜１０．５の範囲に
あり、本発明の別の態様において、pHはpH５〜９の範囲である。 方法 本発明は、微生物細胞を本発明の組成物で処理することを含む微生物を殺し又
は阻害するための方法も供する。その処理は、有効量の前記組成物で行うことが
できる。
【００６３】 “有効量”は、選択された適用において要求される抗微生物効果を得るために
適した量を意味し；例えば生きている細胞の数を１０％、１％又は１％未満に減
らし；又は１２時間、１日、５日、３０日又は３０日超の間、生きている細胞の
数が倍加するのを防ぐ量である。 使用 本発明の組成物は、更に他の酵素型を典型的に含む洗剤又は洗浄組成物に組み
込むことができる（以下を参照のこと）。
適した量を意味し；例えば生きている細胞の数を１０％、１％又は１％未満に減
らし；又は１２時間、１日、５日、３０日又は３０日超の間、生きている細胞の
数が倍加するのを防ぐ量である。 使用 本発明の組成物は、更に他の酵素型を典型的に含む洗剤又は洗浄組成物に組み
込むことができる（以下を参照のこと）。
【００６４】 本発明の組成物は、有効量の組成物を含む浸漬、洗浄又はゆすぎ液で洗濯場を
処理することにより、洗濯場に存在する微生物を阻害するためにも用いることが
できる。 ペイント、食品、飲料、化粧品、例えばローション（例えば点眼剤）、液体、
クリーム、ゲル、ペースト、軟膏（例えば眼軟膏）、セッケン、シャンプー、コ
ンディショナー、制汗剤、脱臭剤、口内洗浄剤、鼻スプレー、コンタクトレンズ
製品、酵素製剤、又は食品含有物の保護のために用いる場合、本発明の方法に用
いる組成物は、例えば水ベースのペイント、非保護食品、飲料、化粧品、コンタ
クトレンズ製品、食品含有物又は抗炎症製品に、微生物細胞を殺し又はその増殖
を阻害するために有効な量で組み込むことができる。
処理することにより、洗濯場に存在する微生物を阻害するためにも用いることが
できる。 ペイント、食品、飲料、化粧品、例えばローション（例えば点眼剤）、液体、
クリーム、ゲル、ペースト、軟膏（例えば眼軟膏）、セッケン、シャンプー、コ
ンディショナー、制汗剤、脱臭剤、口内洗浄剤、鼻スプレー、コンタクトレンズ
製品、酵素製剤、又は食品含有物の保護のために用いる場合、本発明の方法に用
いる組成物は、例えば水ベースのペイント、非保護食品、飲料、化粧品、コンタ
クトレンズ製品、食品含有物又は抗炎症製品に、微生物細胞を殺し又はその増殖
を阻害するために有効な量で組み込むことができる。
【００６５】 特に、本発明の組成物は、水ベースのペイントにおいて保護剤又は消毒剤とし
て用いることができる。 更に、本発明による組成物は、例えばアクネ、眼又は口への感染、皮膚感染の
治療において；制汗剤又は脱臭剤において；足浴塩において；コンタクトレンズ
、硬質表面、歯（オーラルケア）、創傷、挫傷の洗浄及び消毒において、消毒剤
として役立ち得る。
て用いることができる。 更に、本発明による組成物は、例えばアクネ、眼又は口への感染、皮膚感染の
治療において；制汗剤又は脱臭剤において；足浴塩において；コンタクトレンズ
、硬質表面、歯（オーラルケア）、創傷、挫傷の洗浄及び消毒において、消毒剤
として役立ち得る。
【００６６】 一般に、本発明の組成物は、いずれかの硬質表面上の微生物増殖を洗浄、消毒
又は阻害するために役立つ。本発明の組成物に有利に接触させることができる表
面の例は、例えば乳製品工場、化学又は医薬プロセスプラント、水衛生システム
、製紙用パルプ処理プラント、水処理プラント、及び冷却塔に用いられるプロセ
ス装置の表面である。本発明の組成物は、問題の表面上の微生物増殖を洗浄、消
毒又は阻害するために有効である量で用いることができる。
又は阻害するために役立つ。本発明の組成物に有利に接触させることができる表
面の例は、例えば乳製品工場、化学又は医薬プロセスプラント、水衛生システム
、製紙用パルプ処理プラント、水処理プラント、及び冷却塔に用いられるプロセ
ス装置の表面である。本発明の組成物は、問題の表面上の微生物増殖を洗浄、消
毒又は阻害するために有効である量で用いることができる。
【００６７】 特に、本発明の組成物は、紙及びパルプ処理プラントにおいて微生物増殖を消
毒し阻害するために用いることができる。 更に、本発明の組成物は、いずれかの種類のプロセス装置の洗浄のための現場
洗浄（ｃｌｅａｎｉｎｇ−ｉｎ−ｐｌａｃｅ）（Ｃ．Ｉ．Ｐ．）システムに有利
に用いることができる。
毒し阻害するために用いることができる。 更に、本発明の組成物は、いずれかの種類のプロセス装置の洗浄のための現場
洗浄（ｃｌｅａｎｉｎｇ−ｉｎ−ｐｌａｃｅ）（Ｃ．Ｉ．Ｐ．）システムに有利
に用いることができる。
【００６８】 本発明の方法は、更に、食品処理プラントにおいて、並びに病院、ナーシング
ホーム、レストラン、特にファーストフードレストラン、調製食品店等のような
食品を調製し又は供給するいずれかの場所において、表面及び料理用品を洗浄す
るために用いることができる。それは、食品中の抗微生物剤としても用いること
ができ、チーズ、フルーツ及び野菜のため並びにサラダバーにおける食品のため
の表面抗微生物剤として特に有用であろう。
ホーム、レストラン、特にファーストフードレストラン、調製食品店等のような
食品を調製し又は供給するいずれかの場所において、表面及び料理用品を洗浄す
るために用いることができる。それは、食品中の抗微生物剤としても用いること
ができ、チーズ、フルーツ及び野菜のため並びにサラダバーにおける食品のため
の表面抗微生物剤として特に有用であろう。
【００６９】 本発明の組成物は、水ラインの微生物抑制のため、及び水の消毒のため、特に
工業用水の消毒のためにも役立つ。 ペイントの保存／保護 カン内のペイント製品の保存は、当業界において、非酵素的有機殺生物剤をペ
イントに添加することにより行われている。本発明の文脈において、ペイントは
、表面上に広げた時に、乾燥して薄い、着色した、装飾的及び／又は保護的コー
ティングを残す、液体ビヒクル、例えば水、有機溶媒及び／又は油に溶解分散さ
れた固体有色物を含む物質として解釈される。典型的には、イソチアゾリオン類
、例えば５−クロロ−２−メチル−４−チアゾリ−３−オンがペイントにおいて
微生物増殖を阻害／防止するために殺生物剤としてペイントに添加されている。
しかしながら、本発明の方法は、この分野に好適に適用することができ、それに
よりこれらの毒性殺生物剤を環境的に適合性のある酵素に置換することにより、
毒性有機殺生物剤の今まである環境的バイオハザードの問題を解決することがで
きる。これにより、本発明は、ペイントに、フェノール酸化酵素及び本発明によ
る増強剤を接触させることを含むペイントの保存のための方法を供する。更に、
本発明は、フェノール酸化酵素及び本発明に記載の増強剤を含むペイント組成物
を供する。
工業用水の消毒のためにも役立つ。 ペイントの保存／保護 カン内のペイント製品の保存は、当業界において、非酵素的有機殺生物剤をペ
イントに添加することにより行われている。本発明の文脈において、ペイントは
、表面上に広げた時に、乾燥して薄い、着色した、装飾的及び／又は保護的コー
ティングを残す、液体ビヒクル、例えば水、有機溶媒及び／又は油に溶解分散さ
れた固体有色物を含む物質として解釈される。典型的には、イソチアゾリオン類
、例えば５−クロロ−２−メチル−４−チアゾリ−３−オンがペイントにおいて
微生物増殖を阻害／防止するために殺生物剤としてペイントに添加されている。
しかしながら、本発明の方法は、この分野に好適に適用することができ、それに
よりこれらの毒性殺生物剤を環境的に適合性のある酵素に置換することにより、
毒性有機殺生物剤の今まである環境的バイオハザードの問題を解決することがで
きる。これにより、本発明は、ペイントに、フェノール酸化酵素及び本発明によ
る増強剤を接触させることを含むペイントの保存のための方法を供する。更に、
本発明は、フェノール酸化酵素及び本発明に記載の増強剤を含むペイント組成物
を供する。
【００７０】 ペイントは、好ましくは、水ベースのペイントであり、即ち、ペイントの固体
が水溶液に分散されていて、ペイントは、０〜２０％、好ましくは０〜１０％、
例えば０〜５％の有機溶媒を含み得る。 酵素は、ペイント１リッター当り０．０００１〜１００mg、好ましくは０．０
０１〜１０mg／Ｌ、例えば０．０１〜５mg／Ｌの活性酵素タンパク質の量でペイ
ントに加えることができ、増強剤は、ペイント組成物の１０〜５００μＭ、好ま
しくは２５〜２５０μＭ、例えば１００μＭの量で加えることができる。
が水溶液に分散されていて、ペイントは、０〜２０％、好ましくは０〜１０％、
例えば０〜５％の有機溶媒を含み得る。 酵素は、ペイント１リッター当り０．０００１〜１００mg、好ましくは０．０
０１〜１０mg／Ｌ、例えば０．０１〜５mg／Ｌの活性酵素タンパク質の量でペイ
ントに加えることができ、増強剤は、ペイント組成物の１０〜５００μＭ、好ま
しくは２５〜２５０μＭ、例えば１００μＭの量で加えることができる。
【００７１】 洗剤組成物 本発明の抗微生物組成物は、洗剤組成物に加え、これによりその成分となって
もよい。 本発明の洗剤組成物は、例えば、染色布帛のプレ処理のために適したランドリ
ー添加組成物及びリンス添加布帛軟化組成物を含む手又は機械洗濯洗剤として調
剤することができ、又は一般的な家事用硬質表面洗浄作業に用いるための洗剤組
成物として調剤することができ、又は手又は機械式皿洗い作業のために調剤する
ことができる。
もよい。 本発明の洗剤組成物は、例えば、染色布帛のプレ処理のために適したランドリ
ー添加組成物及びリンス添加布帛軟化組成物を含む手又は機械洗濯洗剤として調
剤することができ、又は一般的な家事用硬質表面洗浄作業に用いるための洗剤組
成物として調剤することができ、又は手又は機械式皿洗い作業のために調剤する
ことができる。
【００７２】 特定の態様において、本発明は、本発明の抗微生物組成物を含む洗剤添加物を
供する。その洗剤添加物及び洗剤組成物は、１又は複数の他の酵素、例えばプロ
テアーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、アミラーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ
、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ
、オキシダーゼ、例えばラッカーゼ及び／又はペルオキシダーゼを含み得る。
供する。その洗剤添加物及び洗剤組成物は、１又は複数の他の酵素、例えばプロ
テアーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、アミラーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ
、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ
、オキシダーゼ、例えばラッカーゼ及び／又はペルオキシダーゼを含み得る。
【００７３】 一般に、選択された酵素の特性は、選択された洗剤と適合すべきであり（即ち
pH至適性、他の酵素及び非酵素成分との適合性等）、その酵素は有効量で存在す
るべきである。 プロテアーゼ 好適なプロテアーゼには、動物、植物又は微生物源のものがある。微生物源が
好ましい。化学的に改変され又はタンパク質操作された変異体が含まれる。プロ
テアーゼは、セリンプロテアーゼ又はメタロプロテアーゼ、好ましくはアルカリ
微生物プロテアーゼ又はトリプシン様プロテアーゼであり得る。アルカリプロテ
アーゼの例は、ズブチリシン類、特にバチルス由来のもの、例えばズブチリシン
Ｎｏｖｏ、ズブチリシンＣａｒｌｓｂｅｒｇ、ズブチリシン３０９、ズブチリシ
ン１４７及びズブチリシン１６８（ＷＯ８９／０６２７９に記載）であり得る。
トリプシン様プロテアーゼの例は、（例えばブタ又はブタ起源の）トリプシン並
びにＷＯ８９／０６２７０及びＷＯ９４／２５５８３に記載のフサリウム（Ｆｕ ｓａｒｉｕｍ ）プロテアーゼである。
pH至適性、他の酵素及び非酵素成分との適合性等）、その酵素は有効量で存在す
るべきである。 プロテアーゼ 好適なプロテアーゼには、動物、植物又は微生物源のものがある。微生物源が
好ましい。化学的に改変され又はタンパク質操作された変異体が含まれる。プロ
テアーゼは、セリンプロテアーゼ又はメタロプロテアーゼ、好ましくはアルカリ
微生物プロテアーゼ又はトリプシン様プロテアーゼであり得る。アルカリプロテ
アーゼの例は、ズブチリシン類、特にバチルス由来のもの、例えばズブチリシン
Ｎｏｖｏ、ズブチリシンＣａｒｌｓｂｅｒｇ、ズブチリシン３０９、ズブチリシ
ン１４７及びズブチリシン１６８（ＷＯ８９／０６２７９に記載）であり得る。
トリプシン様プロテアーゼの例は、（例えばブタ又はブタ起源の）トリプシン並
びにＷＯ８９／０６２７０及びＷＯ９４／２５５８３に記載のフサリウム（Ｆｕ ｓａｒｉｕｍ ）プロテアーゼである。
【００７４】 有用なプロテアーゼの例は、ＷＯ９２／１９７２９，ＷＯ９８／２０１１５，
ＷＯ９８／２０１１６、及びＷＯ９８／３４９４６に記載される変異体、特に次
の位置：２７，３６，５７，７６，８７，９７，１０１，１０４，１２０，１２
３，１６７，１７０，１９４，２０６，２１８，２２２，２２４，２３５及び２
７４のうちの１つ又は複数に置換がある変異体である。
ＷＯ９８／２０１１６、及びＷＯ９８／３４９４６に記載される変異体、特に次
の位置：２７，３６，５７，７６，８７，９７，１０１，１０４，１２０，１２
３，１６７，１７０，１９４，２０６，２１８，２２２，２２４，２３５及び２
７４のうちの１つ又は複数に置換がある変異体である。
【００７５】 好ましい市販のプロテアーゼ酵素には、ＡｌｃａｌａｓｅTM，Ｓａｖｉｎａｓ
ｅTM，ＰｒｉｍａｓｅTM，ＤｕｒａｌａｓｅTM，ＥｓｐｅｒａｓｅTM、及びＫａ
ｎｎａｓｅTM（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／Ｓ），ＭａｘａｔａｓｅTM，Ｍ
ａｘａｃａｌTM，ＭａｘａｐｅｍTM，ＰｒｏｐｅｒａｓｅTM，Ｐｕｒａｆｅｃｔ TM ，Ｐｕｒａｆｅｃｔ ＯｘＰTM，ＦＮ２TM、及びＦＮ３TM（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ
Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃ．）がある。
ｅTM，ＰｒｉｍａｓｅTM，ＤｕｒａｌａｓｅTM，ＥｓｐｅｒａｓｅTM、及びＫａ
ｎｎａｓｅTM（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／Ｓ），ＭａｘａｔａｓｅTM，Ｍ
ａｘａｃａｌTM，ＭａｘａｐｅｍTM，ＰｒｏｐｅｒａｓｅTM，Ｐｕｒａｆｅｃｔ TM ，Ｐｕｒａｆｅｃｔ ＯｘＰTM，ＦＮ２TM、及びＦＮ３TM（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ
Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃ．）がある。
【００７６】 リパーゼ 好適なリパーゼには、細菌又は真菌源のものがある。化学的に改変され又はタ
ンパク質操作された変異体が含まれる。有用なリパーゼの例には、Ｈｕｍｉｃｏ
ｌａ（異名Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ）、例えばＨ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓｅ（Ｔ．
ｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｓ）（ＥＰ ２５８ ０６８及びＥＰ ３０５ ２１６
）又はＨ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ（ＷＯ９６／１３５８０）からのリパーゼ、ａ Ｐ
ｓｅｕｄｏｍｏｎａｓリパーゼ、例えばＰ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ又はＰ．ｐ
ｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ（ＥＰ ２１８ ２７２）、Ｐ．ｃｅｐａｃ
ｉａ（ＥＰ ３３１ ３７６）、Ｐ．ｓｔｕｔｚｅｒｉ（ＧＢ １，３７２，０
３４），Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ．株ＳＤ
７０５（ＷＯ９５／０６７２０及びＷＯ９６／２７００２），Ｐ．ｗｉｓｃｏ
ｎｓｉｎｅｎｓｉｓ（ＷＯ９６／１２０１２）からのリパーゼ、ａ Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓリパーゼ、例えばＢ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ（Ｄａｒｔｏｉｓ ｅｔ ａｌ．
（１９９３），Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ
，１１３１，２５３−３６０），Ｂ．ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ（
ＪＰ ６４／７４４９９２）又はＢ．ｐｕｍｉｌｕｓ（ＷＯ９１／１６４２２）
からのリパーゼがある。
ンパク質操作された変異体が含まれる。有用なリパーゼの例には、Ｈｕｍｉｃｏ
ｌａ（異名Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ）、例えばＨ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓｅ（Ｔ．
ｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｓ）（ＥＰ ２５８ ０６８及びＥＰ ３０５ ２１６
）又はＨ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ（ＷＯ９６／１３５８０）からのリパーゼ、ａ Ｐ
ｓｅｕｄｏｍｏｎａｓリパーゼ、例えばＰ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ又はＰ．ｐ
ｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ（ＥＰ ２１８ ２７２）、Ｐ．ｃｅｐａｃ
ｉａ（ＥＰ ３３１ ３７６）、Ｐ．ｓｔｕｔｚｅｒｉ（ＧＢ １，３７２，０
３４），Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ．株ＳＤ
７０５（ＷＯ９５／０６７２０及びＷＯ９６／２７００２），Ｐ．ｗｉｓｃｏ
ｎｓｉｎｅｎｓｉｓ（ＷＯ９６／１２０１２）からのリパーゼ、ａ Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓリパーゼ、例えばＢ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ（Ｄａｒｔｏｉｓ ｅｔ ａｌ．
（１９９３），Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ
，１１３１，２５３−３６０），Ｂ．ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ（
ＪＰ ６４／７４４９９２）又はＢ．ｐｕｍｉｌｕｓ（ＷＯ９１／１６４２２）
からのリパーゼがある。
【００７７】 他の例は、リパーゼ変異体、例えばＷＯ９２／０５２４９，ＷＯ９４／０１５
４１，ＥＰ ４０７ ２２５，ＥＰ ２６０ １０５，ＷＯ９５／３５３８１，
ＷＯ９６／００２９２，ＷＯ９５／３０７４４，ＷＯ９４／２５５７８，ＷＯ９
５／１４７８３，ＷＯ９５／２２６１５，ＷＯ９７／０４０７９及びＷＯ９７／
０７２０２に記載されるものである。
４１，ＥＰ ４０７ ２２５，ＥＰ ２６０ １０５，ＷＯ９５／３５３８１，
ＷＯ９６／００２９２，ＷＯ９５／３０７４４，ＷＯ９４／２５５７８，ＷＯ９
５／１４７８３，ＷＯ９５／２２６１５，ＷＯ９７／０４０７９及びＷＯ９７／
０７２０２に記載されるものである。
【００７８】 好ましい市販のリパーゼには、ＬｉｐｏｌａｓｅTM ａｎｄ Ｌｉｐｏｌａｓ
ｅ ＵｌｔｒａTM（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／Ｓ）がある。 アミラーゼ： 好適なアミラーゼ（α及び／又はβ）には、細菌又は真菌源のものがある。化
学的に改変され又はタンパク質操作された変異体が含まれる。アミラーゼには、
例えばＧＢ１，２９６，８３９により詳細に記載される、バチルス、例えばＢ．
ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓの特定の株から得られるα−アミラーゼがある。
ｅ ＵｌｔｒａTM（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／Ｓ）がある。 アミラーゼ： 好適なアミラーゼ（α及び／又はβ）には、細菌又は真菌源のものがある。化
学的に改変され又はタンパク質操作された変異体が含まれる。アミラーゼには、
例えばＧＢ１，２９６，８３９により詳細に記載される、バチルス、例えばＢ．
ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓの特定の株から得られるα−アミラーゼがある。
【００７９】 有用なアミラーゼの例は、ＷＯ９４／０２５９７，ＷＯ９４／１８３１４，Ｗ
Ｏ９６／２３８７３、及びＷＯ９７／４３４２４に記載される変異体、特に次の
位置：１５，２３，１０５，１０６，１２４，１２８，１３３，１５４，１５６
，１８１，１８８，１９０，１９７，２０２，２０８，２０９，２４３，２６４
，３０４，３０５，３９１，４０８、及び４４４のうちの１又は複数が、置換の
ある変異体である。
Ｏ９６／２３８７３、及びＷＯ９７／４３４２４に記載される変異体、特に次の
位置：１５，２３，１０５，１０６，１２４，１２８，１３３，１５４，１５６
，１８１，１８８，１９０，１９７，２０２，２０８，２０９，２４３，２６４
，３０４，３０５，３９１，４０８、及び４４４のうちの１又は複数が、置換の
ある変異体である。
【００８０】 市販のアミラーゼには、ＤｕｒａｍｙｌTM，ＴｅｒｍａｍｙｌTM，Ｆｕｎｇａ
ｍｙｌTM及びＢＡＮTM（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／Ｓ），Ｒａｐｉｄａｓ
ｅTM及びＰｕｒａｓｔａｒTM（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ
Ｉｎｃ．）がある。 セルラーゼ 好適なセルラーゼには、細菌又は真菌源のものがある。化学的に改変され又は
タンパク質操作された変異体が含まれる。好適なセルラーゼには、Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓ，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ，Ｈｕｍｉｃｏｌａ，Ｆｕｓａｒｉｕｍ，Ｔｈｉ
ｅｌａｖｉａ，Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍからのセルラーゼ、例えばＨｕｍｉｃｏｌ
ａ ｉｎｓｏｌｅｎｓ，Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌ
ａ ａｎｄ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍから生産される真菌セルラ
ーゼ（ＵＳ ４，４３５，３０７，ＵＳ ５，６４８，２６３，ＵＳ ５，６９
１，１７８，ＵＳ ５，７７６，７５７及びＷＯ８９／０９２５９に開示）があ
る。
ｍｙｌTM及びＢＡＮTM（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／Ｓ），Ｒａｐｉｄａｓ
ｅTM及びＰｕｒａｓｔａｒTM（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ
Ｉｎｃ．）がある。 セルラーゼ 好適なセルラーゼには、細菌又は真菌源のものがある。化学的に改変され又は
タンパク質操作された変異体が含まれる。好適なセルラーゼには、Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓ，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ，Ｈｕｍｉｃｏｌａ，Ｆｕｓａｒｉｕｍ，Ｔｈｉ
ｅｌａｖｉａ，Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍからのセルラーゼ、例えばＨｕｍｉｃｏｌ
ａ ｉｎｓｏｌｅｎｓ，Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌ
ａ ａｎｄ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍから生産される真菌セルラ
ーゼ（ＵＳ ４，４３５，３０７，ＵＳ ５，６４８，２６３，ＵＳ ５，６９
１，１７８，ＵＳ ５，７７６，７５７及びＷＯ８９／０９２５９に開示）があ
る。
【００８１】 特に好適なセルラーゼは、カラー・ケア利益を有するアルカリ又は中性セルラ
ーゼである。このようなセルラーゼの例は、ＥＰ ０ ４９５ ２５７，ＥＰ
０ ５３１ ３７２，ＷＯ９６／１１２６２，ＷＯ９６／２９３９７，ＷＯ９８
／０８９４０に記載されるセルラーゼである。他の例は、ＷＯ９４／０７９９８
，ＥＰ ０ ５３１ ３１５，ＵＳ ５，４５７，０４６，ＵＳ ５，６８６，
５９３，ＵＳ ５，７６３，２５４，ＷＯ９５／２４４７１，ＷＯ９８／１２３
０７及びＰＣＴ／ＤＫ９８／００２９９に記載されるもののようなセルラーゼ変
異体である。
ーゼである。このようなセルラーゼの例は、ＥＰ ０ ４９５ ２５７，ＥＰ
０ ５３１ ３７２，ＷＯ９６／１１２６２，ＷＯ９６／２９３９７，ＷＯ９８
／０８９４０に記載されるセルラーゼである。他の例は、ＷＯ９４／０７９９８
，ＥＰ ０ ５３１ ３１５，ＵＳ ５，４５７，０４６，ＵＳ ５，６８６，
５９３，ＵＳ ５，７６３，２５４，ＷＯ９５／２４４７１，ＷＯ９８／１２３
０７及びＰＣＴ／ＤＫ９８／００２９９に記載されるもののようなセルラーゼ変
異体である。
【００８２】 市販のセルラーゼには、ＣｅｌｌｕｚｙｍｅTM、及びＣａｒｅｚｙｍｅTM（Ｎ
ｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／Ｓ），ＣｌａｚｉｎａｓｅTM、及びＰｕｒａｄａ
ｘ ＨＡTM（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃ．）、及
びＫＡＣ−５００（Ｂ）TM（Ｋａｏ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）がある。 ペルオキシダーゼ／オキシダーゼ 好適なペルオキシダーゼ／オキシダーゼには、植物、細菌又は真菌源のものが
ある。化学的に改変され又はタンパク質操作された変異体が含まれる。有用なペ
ルオキシダーゼの例には、ＷＯ９３／２４６１８，ＷＯ９５／１０６０２、及び
ＷＯ９８／１５２５７に記載されるもののような、Ｃｏｐｒｉｎｕｓ、例えばＣ
．ｃｉｎｅｒｅｕｓからのペルオキシダーゼ及びその変異体がある。
ｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／Ｓ），ＣｌａｚｉｎａｓｅTM、及びＰｕｒａｄａ
ｘ ＨＡTM（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃ．）、及
びＫＡＣ−５００（Ｂ）TM（Ｋａｏ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）がある。 ペルオキシダーゼ／オキシダーゼ 好適なペルオキシダーゼ／オキシダーゼには、植物、細菌又は真菌源のものが
ある。化学的に改変され又はタンパク質操作された変異体が含まれる。有用なペ
ルオキシダーゼの例には、ＷＯ９３／２４６１８，ＷＯ９５／１０６０２、及び
ＷＯ９８／１５２５７に記載されるもののような、Ｃｏｐｒｉｎｕｓ、例えばＣ
．ｃｉｎｅｒｅｕｓからのペルオキシダーゼ及びその変異体がある。
【００８３】 市販のペルオキシダーゼには、ＧｕａｒｄｚｙｍｅTM（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉ
ｓｋ Ａ／Ｓ）がある。 洗剤酵素は、１又は複数の酵素を含む別個の添加物を加えることにより、又は
これらの酵素全てを含む、組み合わせた添加物を加えることにより洗剤組成物に
含めることができる。本発明の洗剤添加物、即ち別個の添加物又は組み合わせ添
加物は、例えば、顆粒、液体、スラリー等として調剤することができる。好まし
い洗剤添加物製剤は、顆粒、特に非ダスティング粒子、液体、特に安定化液、又
はスラリーである。
ｓｋ Ａ／Ｓ）がある。 洗剤酵素は、１又は複数の酵素を含む別個の添加物を加えることにより、又は
これらの酵素全てを含む、組み合わせた添加物を加えることにより洗剤組成物に
含めることができる。本発明の洗剤添加物、即ち別個の添加物又は組み合わせ添
加物は、例えば、顆粒、液体、スラリー等として調剤することができる。好まし
い洗剤添加物製剤は、顆粒、特に非ダスティング粒子、液体、特に安定化液、又
はスラリーである。
【００８４】 非ダスティング粒子は、例えばＵＳ ４，１０６，９９１及び４，６６１，４
５２に開示されるように生産することができ、任意に、当業界で知られた方法に
よってコーティングすることができる。ワキシーコーティング材料の例は、１０
００〜２００００の平均分子量を有するポリ（エチレンオキシド）製品（ポリエ
チレングリコール、ＰＥＧ）；１６〜５０のエチレンオキシド単位を有するエト
キシル化ノニルフェノール；アルコールが１２〜２０の炭素原子を含み、１５〜
８０のエチレンオキシド単位があるエトキシル化脂肪アルコール；脂肪アルコー
ル；脂肪酸；並びに脂肪酸のモノ−、ジ−及びトリグリセリドである。流動床技
術による適用のために適したフィルム形成性コーティング材料の例は、ＧＢ１４
８３５９１に供される。液体酵素調製物は、例えば、ポリオール、例えばプロピ
レングリコール、糖又は糖アルコール、乳酸又はホウ酸を、確立された方法に従
って加えることにより安定化することができる。保護された酵素は、ＥＰ ２３
８，２１６に開示される方法に従って調製することができる。
５２に開示されるように生産することができ、任意に、当業界で知られた方法に
よってコーティングすることができる。ワキシーコーティング材料の例は、１０
００〜２００００の平均分子量を有するポリ（エチレンオキシド）製品（ポリエ
チレングリコール、ＰＥＧ）；１６〜５０のエチレンオキシド単位を有するエト
キシル化ノニルフェノール；アルコールが１２〜２０の炭素原子を含み、１５〜
８０のエチレンオキシド単位があるエトキシル化脂肪アルコール；脂肪アルコー
ル；脂肪酸；並びに脂肪酸のモノ−、ジ−及びトリグリセリドである。流動床技
術による適用のために適したフィルム形成性コーティング材料の例は、ＧＢ１４
８３５９１に供される。液体酵素調製物は、例えば、ポリオール、例えばプロピ
レングリコール、糖又は糖アルコール、乳酸又はホウ酸を、確立された方法に従
って加えることにより安定化することができる。保護された酵素は、ＥＰ ２３
８，２１６に開示される方法に従って調製することができる。
【００８５】 本発明の洗剤組成物は、いずれの慣用的な形態、例えば棒状、錠剤、粉末、粒
子、ペースト又は液体であってよい。液体洗剤は、水性で、典型的には７０％ま
での水及び０〜３０％の有機溶媒を含むか、又は非水性であり得る。 洗剤組成物は、半極性を含む非イオン性、アニオン性、カチオン性、及び／又
は双性イオン性であり得る１又は複数の界面活性剤を含む。界面活性剤は、典型
的には、０．１重量％〜６０重量％のレベルで存在する。
子、ペースト又は液体であってよい。液体洗剤は、水性で、典型的には７０％ま
での水及び０〜３０％の有機溶媒を含むか、又は非水性であり得る。 洗剤組成物は、半極性を含む非イオン性、アニオン性、カチオン性、及び／又
は双性イオン性であり得る１又は複数の界面活性剤を含む。界面活性剤は、典型
的には、０．１重量％〜６０重量％のレベルで存在する。
【００８６】 その中に含まれる場合、洗剤は、通常、約１％〜約４０％のアニオン界面活性
剤、例えば直鎖アルキルベンゼンスルホネート、α−オレフィンスルホネート、
アルキルスルフェート（脂肪アルコールスルフェート）、アルコールエトキシス
ルフェート、２級アルカンスルホネート、α−スルホ脂肪酸メチルエステル、ア
ルキル−もしくはアルケニルコハク酸又はセッケンを含むであろう。
剤、例えば直鎖アルキルベンゼンスルホネート、α−オレフィンスルホネート、
アルキルスルフェート（脂肪アルコールスルフェート）、アルコールエトキシス
ルフェート、２級アルカンスルホネート、α−スルホ脂肪酸メチルエステル、ア
ルキル−もしくはアルケニルコハク酸又はセッケンを含むであろう。
【００８７】 その中に含まれる場合、洗剤は、通常、約０．２％〜約４０％の非イオン性界
面活性剤、例えばアルコールエトキシレート、ノニルフェノールエトキシレート
、アルキルポリグリコシド、アルキルジメチルアミンオキシド、エトキシ化脂肪
酸モノエタノールアミド、脂肪酸モノエタノールアミド、ポリヒドロキシアルキ
ル脂肪酸アミド、又はグルコサミンのＮ−アシルＮ−アルキル誘導体（“グルカ
ミド”）を含むであろう。
面活性剤、例えばアルコールエトキシレート、ノニルフェノールエトキシレート
、アルキルポリグリコシド、アルキルジメチルアミンオキシド、エトキシ化脂肪
酸モノエタノールアミド、脂肪酸モノエタノールアミド、ポリヒドロキシアルキ
ル脂肪酸アミド、又はグルコサミンのＮ−アシルＮ−アルキル誘導体（“グルカ
ミド”）を含むであろう。
【００８８】 洗剤は、０〜６５％の界面活性剤ビルダー又は錯化剤、例えばゼオライト、ジ
ホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、カーボネート、シトレート、
ニトリロトリ酢酸、エチレンジアミンテトラ酢酸、ジエチレントリアミンペンタ
酢酸、アルキル−もしくはアルケニルコハク酸、可溶性シリケート又は層状シリ
ケート（例えばＨｏｅｃｈｓｔからのＳＫＳ−６）を含み得る。
ホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、カーボネート、シトレート、
ニトリロトリ酢酸、エチレンジアミンテトラ酢酸、ジエチレントリアミンペンタ
酢酸、アルキル−もしくはアルケニルコハク酸、可溶性シリケート又は層状シリ
ケート（例えばＨｏｅｃｈｓｔからのＳＫＳ−６）を含み得る。
【００８９】 洗剤は、１又は複数のポリマーを含んでもよい。例は、カルボキシメチルセル
ロース、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（ビニ
ルアルコール）、ポリ（ビニルビリジン−Ｎ−オキシド）、ポリ（ビニルイミダ
ゾール）、ポリカルボキシレート、例えばポリアクリレート、マレイン酸／アク
リル酸コポリマー及びラウリルメタクリレート／アクリル酸コポリマーである。
ロース、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（ビニ
ルアルコール）、ポリ（ビニルビリジン−Ｎ−オキシド）、ポリ（ビニルイミダ
ゾール）、ポリカルボキシレート、例えばポリアクリレート、マレイン酸／アク
リル酸コポリマー及びラウリルメタクリレート／アクリル酸コポリマーである。
【００９０】 洗剤は、Ｈ2 Ｏ2 源、例えばテトラアセチルエチレンジアミン又はノナノイル
オキシベンゼンスルホネートのような過酸形成漂白アクティベーターと組み合わ
せることができるペルボレート又はペルカーボネートを含み得る漂白システムを
含み得る、あるいは、漂白システムは、例えばアミド、イミド又はスルホン型の
ペルオキシ酸を含んでもよい。
オキシベンゼンスルホネートのような過酸形成漂白アクティベーターと組み合わ
せることができるペルボレート又はペルカーボネートを含み得る漂白システムを
含み得る、あるいは、漂白システムは、例えばアミド、イミド又はスルホン型の
ペルオキシ酸を含んでもよい。
【００９１】 本発明の洗剤組成物の酵素は、慣用的な安定化剤、例えばポリオール、例えば
プロピレングリコール又はグリセロール、糖又は糖アルコール、乳酸、ホウ酸、
又はホウ酸誘導体、例えば芳香族ホウ酸エステル、又はフェニルホウ素酸誘導体
、例えば４−ホルミルフェニルホウ素酸を用いて安定化することができ、その組
成物は、例えば、ＷＯ９２／１９７０９及びＷＯ９２／１９７０８に記載される
ように調剤することができる。
プロピレングリコール又はグリセロール、糖又は糖アルコール、乳酸、ホウ酸、
又はホウ酸誘導体、例えば芳香族ホウ酸エステル、又はフェニルホウ素酸誘導体
、例えば４−ホルミルフェニルホウ素酸を用いて安定化することができ、その組
成物は、例えば、ＷＯ９２／１９７０９及びＷＯ９２／１９７０８に記載される
ように調剤することができる。
【００９２】 洗剤は、他の慣用的な洗剤成分、例えばファブリックコンディショナー、例え
ばクレイ、フォームブースター、泡サプレッサー、抗腐食剤、土懸濁剤、抗土再
折剤、染料、殺細菌剤、光沢剤、ヒドロトロープ、曇り阻害剤、又は香料も含み
得る。 本発明は、以下の例に更に説明されるが、それらは、クレームされる本発明の
範囲を限定することを意図しない。
ばクレイ、フォームブースター、泡サプレッサー、抗腐食剤、土懸濁剤、抗土再
折剤、染料、殺細菌剤、光沢剤、ヒドロトロープ、曇り阻害剤、又は香料も含み
得る。 本発明は、以下の例に更に説明されるが、それらは、クレームされる本発明の
範囲を限定することを意図しない。
【００９３】 実施例１ 電子供与体としてＮ−ヒドロキシアセトアニリドを伴うコプリヌス・ペルオキ シダーゼの抗細菌活性 電子供与体としてＮ−ヒドロキシアセトアニリドを用いることによりpH６及び
pH８で、ＷＯ９２／１６６３４に記載される通りに得た組換えコプリヌス・シネ
レウスペルオキシダーゼ（ｒＣｉＰ）の抗微生物活性をテストした。
pH８で、ＷＯ９２／１６６３４に記載される通りに得た組換えコプリヌス・シネ
レウスペルオキシダーゼ（ｒＣｉＰ）の抗微生物活性をテストした。
【００９４】 抗微生物活性は、０．０５Ｍ ＭＥＳ緩衝液（Ｓｉｇｍａ Ｍ８２５０）（pH
６）又は０．０５ ＨＥＰＥＳ緩衝液（Ｓｉｇｍａ Ｈ３３７５）（pH８）中で
評価し；緩衝液はろ過滅菌により滅菌した。 抗微生物活性は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ（Ｇｒａ
ｍ ｅｔ ａｌ．１９９０，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏ
ｆ Ｆｏｏｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ １０：３０３−３１６）及びＳｔａ
ｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ（ＤＳＭ ２００４２）に対
して測定した。細胞は、Ｔｒｙｐｔｏｎｅ Ｓｏｙａ Ｂｒｏｔｈ（Ｏｘｏｉｄ
ＣＭ１２９）中で、３０℃（Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）又は２５℃（Ｐ．
ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）で、２４時間、増殖させ、ＭＥＳ緩衝液中で約１０6c
fu／mLの最終細胞濃度に希釈した。その細胞懸濁液をｒＣｉＰ（３POXU／mL）、
増強剤（０．２mM）及び過酸化水素（０．５mM）と、２０分、４０℃で混合した
。その殺細菌活性は、Ｍａｌｔｈｕｓ中でのインキュベーションにより測定した
。Ｍａｌｔｈｕｓ装置により測定した検出時間を較正曲線により cfu／mLに変換
した。全生存細胞を計数する時に、直接又は間接Ｍａｌｔｈｕｓ測定を用いた（
Ｍａｌｔｈｕｓ Ｆｌｅｘｉ Ｍ２０６０，Ｍａｌｔｈｕｓ Ｉｎｓｔｒｕｍｅ
ｎｔ Ｌｉｍｉｔｅｄ）。直接測定により、細胞代謝を増殖基質におけるコンダ
クタンス測定により測定した。間接測定により、３mLの増殖培地を間接Ｍａｌｔ
ｈｕｓセルの外部チャンバーに移し、０．５mLの滅菌ＫＯＨ（０．１Ｍ）を内部
チャンバーに移した。その細胞懸濁液を酵素処理後にＭａｌｔｈｕｓセルの外部
チャンバーに移した。細胞が外部チャンバー内で増殖するにつれ、それらはＣＯ 2 を作り出し、それは内部チャンバー内のＫＯＨ中に溶けて、ＫＯＨのコンダク
タンスを変化させる。酵素処理で生きている呼吸する細胞により形成されるＣＯ 2 の量を、生存可能細胞の数を評価するために用いた。コンダクタンス変化がＭ
ａｌｔｈｕｓにより測定することができる場合、検出時間を記録した。そのｄｔ
’を、 cfu／mLをｄｔに関連づける較正曲線を用いることによりコロニー数に変
換した（Ｊｏｈａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．１９９５．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａ
ｐｐｌｉｅｄ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ７８：２９７−３０３，Ｊｏｈａｎ
ｓｅｎ ｅｔ ａｌ．１９９７，Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅ
ｎｔａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ６３：３７２４−３７２８）。
６）又は０．０５ ＨＥＰＥＳ緩衝液（Ｓｉｇｍａ Ｈ３３７５）（pH８）中で
評価し；緩衝液はろ過滅菌により滅菌した。 抗微生物活性は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ（Ｇｒａ
ｍ ｅｔ ａｌ．１９９０，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏ
ｆ Ｆｏｏｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ １０：３０３−３１６）及びＳｔａ
ｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ（ＤＳＭ ２００４２）に対
して測定した。細胞は、Ｔｒｙｐｔｏｎｅ Ｓｏｙａ Ｂｒｏｔｈ（Ｏｘｏｉｄ
ＣＭ１２９）中で、３０℃（Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）又は２５℃（Ｐ．
ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）で、２４時間、増殖させ、ＭＥＳ緩衝液中で約１０6c
fu／mLの最終細胞濃度に希釈した。その細胞懸濁液をｒＣｉＰ（３POXU／mL）、
増強剤（０．２mM）及び過酸化水素（０．５mM）と、２０分、４０℃で混合した
。その殺細菌活性は、Ｍａｌｔｈｕｓ中でのインキュベーションにより測定した
。Ｍａｌｔｈｕｓ装置により測定した検出時間を較正曲線により cfu／mLに変換
した。全生存細胞を計数する時に、直接又は間接Ｍａｌｔｈｕｓ測定を用いた（
Ｍａｌｔｈｕｓ Ｆｌｅｘｉ Ｍ２０６０，Ｍａｌｔｈｕｓ Ｉｎｓｔｒｕｍｅ
ｎｔ Ｌｉｍｉｔｅｄ）。直接測定により、細胞代謝を増殖基質におけるコンダ
クタンス測定により測定した。間接測定により、３mLの増殖培地を間接Ｍａｌｔ
ｈｕｓセルの外部チャンバーに移し、０．５mLの滅菌ＫＯＨ（０．１Ｍ）を内部
チャンバーに移した。その細胞懸濁液を酵素処理後にＭａｌｔｈｕｓセルの外部
チャンバーに移した。細胞が外部チャンバー内で増殖するにつれ、それらはＣＯ 2 を作り出し、それは内部チャンバー内のＫＯＨ中に溶けて、ＫＯＨのコンダク
タンスを変化させる。酵素処理で生きている呼吸する細胞により形成されるＣＯ 2 の量を、生存可能細胞の数を評価するために用いた。コンダクタンス変化がＭ
ａｌｔｈｕｓにより測定することができる場合、検出時間を記録した。そのｄｔ
’を、 cfu／mLをｄｔに関連づける較正曲線を用いることによりコロニー数に変
換した（Ｊｏｈａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．１９９５．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａ
ｐｐｌｉｅｄ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ７８：２９７−３０３，Ｊｏｈａｎ
ｓｅｎ ｅｔ ａｌ．１９９７，Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅ
ｎｔａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ６３：３７２４−３７２８）。
【００９５】 観察された過酸化水素と組み合わせたＮ−ヒドロキシアセトアニリド又はＮ−
ヒドロキシアセトアニリドの殺細菌活性はなかった。他方、組合わせたシステム
：Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド、過酸化水素及びｒＣｉＰにより全体の死殺が
得られた（図１を参照のこと）。グラム陰性細菌は、全般的に、オキシドレダク
ターゼ及び増強剤の組合せシステムに対して最も耐性である。しかしながら、グ
ラム陰性細菌Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓに対して、pH６及び８の両方で、約１
０6CFU／mL（コロニー形成単位）の細胞減少に相当する全体の死殺が得られた。
ヒドロキシアセトアニリドの殺細菌活性はなかった。他方、組合わせたシステム
：Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド、過酸化水素及びｒＣｉＰにより全体の死殺が
得られた（図１を参照のこと）。グラム陰性細菌は、全般的に、オキシドレダク
ターゼ及び増強剤の組合せシステムに対して最も耐性である。しかしながら、グ
ラム陰性細菌Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓに対して、pH６及び８の両方で、約１
０6CFU／mL（コロニー形成単位）の細胞減少に相当する全体の死殺が得られた。
【００９６】 実施例２ ラッカーゼ及びＮ−ヒドロキシアセトアニリドの殺細菌活性 ＷＯ９６／００２９０に記載の通り得られたポリポルス・ピンシトウス（Ｐｏ ｌｙｐｏｒｕｓ ｐｉｎｓｉｔｕｓ ）ラッカーゼ（ｒＰｐＬ）、及びＷＯ９７／
０８３２５に記載の通り得られたコプリヌス・シネレウスラッカーゼ（ｒＣｃＬ
）を、増強剤としてＮ−ヒドロキシアセトアニリドを用いて、Ｐｓｅｕｄｏｍｏ
ｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（ＡＴＣＣ １０１４５），Ｅｎｔｅｒｏｂａｃ
ｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ（ＡＴＣＣ １３０４８）及びＥｎｔｅｒｏｃｏｃ
ｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ（ＤＳＭ ２５７０）に対して測定した。その殺細菌
活性は、実施例１に記載される通り測定し、ｒＰｐＬ（１mg／Ｌ）の抗細菌活性
はpH６で評価し、ｒＣｃＬ（１mg／Ｌ）はpH８で評価した。
０８３２５に記載の通り得られたコプリヌス・シネレウスラッカーゼ（ｒＣｃＬ
）を、増強剤としてＮ−ヒドロキシアセトアニリドを用いて、Ｐｓｅｕｄｏｍｏ
ｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（ＡＴＣＣ １０１４５），Ｅｎｔｅｒｏｂａｃ
ｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ（ＡＴＣＣ １３０４８）及びＥｎｔｅｒｏｃｏｃ
ｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ（ＤＳＭ ２５７０）に対して測定した。その殺細菌
活性は、実施例１に記載される通り測定し、ｒＰｐＬ（１mg／Ｌ）の抗細菌活性
はpH６で評価し、ｒＣｃＬ（１mg／Ｌ）はpH８で評価した。
【００９７】 Ｎ−ヒドロキシアセトアニリドについての投与量応答曲線を、ｒＰｐＬ（図２
）又はｒＣｃＬ（図３）と組み合わせた場合について示す。全てのテスト生物に
対して有意な殺細菌活性が得られ、グラム陰性株が最も耐性であった。Ｐ．アエ
ルギノサＡＴＣＣ １０１４５に対する殺細菌活性は、２００μＭ超のＮ−ヒド
ロキシアセトアニリド濃度で得た。pH６でｒＰｐＬを用いる場合、２つのグラム
陰性細菌の全死殺が、高濃度のＮ−ヒドロキシアセトアニリドで得られた。
）又はｒＣｃＬ（図３）と組み合わせた場合について示す。全てのテスト生物に
対して有意な殺細菌活性が得られ、グラム陰性株が最も耐性であった。Ｐ．アエ
ルギノサＡＴＣＣ １０１４５に対する殺細菌活性は、２００μＭ超のＮ−ヒド
ロキシアセトアニリド濃度で得た。pH６でｒＰｐＬを用いる場合、２つのグラム
陰性細菌の全死殺が、高濃度のＮ−ヒドロキシアセトアニリドで得られた。
【００９８】 実施例３ 種々のフェノール酸化酵素及び増強剤の殺細菌活性 （ＷＯ９５／０７９８８に記載されるような）Ｃｏｐｒｉｎｕｓ ｃｉｎｅｒ
ｅｕｓペルオキシダーゼ（ｒＣｉＰ）、ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ ｐｉｎｓｉｔｕｓ
ラッカーゼ（ｒＰｐＬ）、Ｃｏｐｒｉｎｕｓ ｃｉｎｅｒｅｕｓラッカーゼ（ｒ
ＣｃＬ）及びＲｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉラッカーゼ（ｒＲｓＬ）の
抗細菌活性を、異なる増強剤で、pH６及び８で測定した（緩衝液；実施例１を参
照のこと）。ｒＣｉＰを０．５mMの過酸化水素と組み合わせた。
ｅｕｓペルオキシダーゼ（ｒＣｉＰ）、ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ ｐｉｎｓｉｔｕｓ
ラッカーゼ（ｒＰｐＬ）、Ｃｏｐｒｉｎｕｓ ｃｉｎｅｒｅｕｓラッカーゼ（ｒ
ＣｃＬ）及びＲｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉラッカーゼ（ｒＲｓＬ）の
抗細菌活性を、異なる増強剤で、pH６及び８で測定した（緩衝液；実施例１を参
照のこと）。ｒＣｉＰを０．５mMの過酸化水素と組み合わせた。
【００９９】 ｒＣｉＰ及びｒＰｐＬの抗微生物活性を、シュードモナス・フルオレセンス（
Ｇｒａｍ ｅｔ ａｌ．１９９０，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａ
ｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ １０：３０３〜３１６）に対
して測定し、ｒＣｃＬ及びｒＲｓＬの抗微生物活性を、シュードモナス・アエル
ギノサ（ＡＴＣＣ １０１４５）に対して測定した。
Ｇｒａｍ ｅｔ ａｌ．１９９０，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａ
ｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ １０：３０３〜３１６）に対
して測定し、ｒＣｃＬ及びｒＲｓＬの抗微生物活性を、シュードモナス・アエル
ギノサ（ＡＴＣＣ １０１４５）に対して測定した。
【０１００】 殺細菌活性は、実施例１に記載される通り測定した。異なる組合せ及び結果を
表１に示す。結果は、生きている細胞の数の減少として示す。これにより、４の
減少は生きている細胞の４log 削減に相当し、例えば１０6CFU／mLから１０2CFU
／mLである。
表１に示す。結果は、生きている細胞の数の減少として示す。これにより、４の
減少は生きている細胞の４log 削減に相当し、例えば１０6CFU／mLから１０2CFU
／mLである。
【０１０１】
【表１】
【０１０２】
【表２】
【０１０３】
【表３】
【０１０４】
【表４】
【０１０５】 実施例４ 増強剤の例 Ａ）Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ１−フェニル−４−ニトロベンズアミド、４−ニトロ 安息香酸−Ｎ−ヒドロキシアニリド（ＣＡＳ ２０２９−６１−０）；
【０１０６】
【化１５】
【０１０７】 Ｂ）Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ１−フェニル−４−メトキシベンズアミド、４−メト キシ安息香酸−Ｎ−ヒドロキシアニリド（ＣＡＳ １３６６４−４９−８） ；
【０１０８】
【化１６】
【０１０９】 Ｃ）Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジフェニルテレフタルアミド（ＣＡＳ ６１４９４−２６−６）；
【０１１０】
【化１７】
【０１１１】 Ｄ）Ｎ１−（４−シアノフェニル）−Ｎ１−ヒドロキシアセトアミド、Ｎ−ヒド ロキシ−４−シアノアセトアニリド（ＣＡＳ ８０５８４−６５−２）；
【０１１２】
【化１８】
【０１１３】 Ｅ）Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ１−フェニルデカンアミド、デカン酸−Ｎ−ヒドロキ シアニリド（ＣＡＳ ２５３１０−１６−１）；
【０１１４】
【化１９】
【０１１５】 Ｆ）Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ１−フェニル−４−シアノベンズアミド、４−シアノ 安息香酸−Ｎ−ヒドロキシアニリド；
【０１１６】
【化２０】
【０１１７】 Ｇ）Ｎ１−（４−アセチルフェニル）−Ｎ１−ヒドロキシアセトアミド、Ｎ−ヒ ドロキシ−４−アセチルアセトアニリド（ＣＡＳ ６７２７４−５１−５） ；
【０１１８】
【化２１】
【０１１９】 Ｈ）Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ１−（３−ニトロフェニル）アセトアミド；
【０１２０】
【化２２】
【０１２１】 Ｉ）Ｎ１−（４−ヒドロキシフェニル）−Ｎ１−ヒドロキシアセトアミド、Ｎ− ヒドロキシ−４−ヒドロキシアセトアニリド（ＣＡＳ ６３９７５−２１− ３）；
【０１２２】
【化２３】
【０１２３】 Ｋ）Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ１−（４−ニトロフェニル）アセトアミド、Ｎ−ヒド ロキシ−４−ニトロアセトアニリド（ＣＡＳ ６７２７４−５２−６）；
【０１２４】
【化２４】
【０１２５】 Ｌ）Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド（ＣＡＳ １７９５−８３−１）；
【０１２６】
【化２５】
【０１２７】 Ｍ）Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−フェニル−カルバミン酸イソプロピルエステル（ＣＡ Ｓ ４２７９−１６−７）；
【０１２８】
【化２６】
【０１２９】 Ｎ）Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−フェニル−カルバミン酸メチルエステル（ＣＡＳ ２ ８０９１−６２−５）；
【０１３０】
【化２７】
【０１３１】 Ｏ）Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−フェニル−カルバミン酸フェニルエステル（ＣＡＳ ４６４５−７２−１）；
【０１３２】
【化２８】
【０１３３】 Ｐ）Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−フェニル−カルバミン酸エチルエステル（ＣＡＳ １ ８６３１−９９−７）；
【０１３４】
【化２９】
【０１３５】 Ｑ）Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−（４−シアノフェニル）−カルバミン酸メチルエステ ル
【０１３６】
【化３０】
【０１３７】 全ての化合物は、化合物Ｌ）の合成についてＯｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓ
ｅｓ １９８９，６７，１８７〜１９２に概説される通り一般的な手順に従って
合成した。その手順は、反応混合物の精密検査及び生成物の精製に関して改変し
た。全ての構造は利用できるなら、文献からのそれらの融点により、及びＶＡＲ
ＩＡＮ Ｍｅｒｃｕｒｙ ４００での 1Ｈ−ＮＭＲにより確認した。
ｅｓ １９８９，６７，１８７〜１９２に概説される通り一般的な手順に従って
合成した。その手順は、反応混合物の精密検査及び生成物の精製に関して改変し
た。全ての構造は利用できるなら、文献からのそれらの融点により、及びＶＡＲ
ＩＡＮ Ｍｅｒｃｕｒｙ ４００での 1Ｈ−ＮＭＲにより確認した。
【０１３８】 先の化合物は以下に記載される
【０１３９】
【表５】
【０１４０】 化合物Ｆ），Ｈ）、及びＱ）の合成を以下に記載する： Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ１−フェニル−４−シアノベンズアミド（Ｆ）の合成 ＴＨＦ（３０mL）中のＮ−フェニルヒドロキシルアミン（１．７７ｇ、１６．
２mmol）の溶液を、Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．１９８９，６７，１８７〜１９２に概
説されるように合成した。重炭酸ナトリウムのスラリー（２mLの水中の２ｇ）を
その溶液に加えた。その混合物を−２℃に冷やし、４−シアノベンゾイルクロラ
イド（３．２３ｇ、１９．５１mmol）を滴下して加えた。撹拌を一晩、続けた後
、水（２００mL）を加えた。その反応混合物をメチレンクロライドで３回、抽出
した。その組み合わせた有機相の溶媒を真空下で除去した。その残留物を、溶離
剤としてＡｃＯＥｔ／ヘプタン（３：５，ｖ：ｖ）を用いて、４．０×１５．０
cmカートリッジを備えたＳＩＭと共にＢｉｏｔａｇｅ Ｆｌａｓｈ ４０ｉを用
いてクロマトグラフィーで精製し、純粋なｆ）を０．５５ｇ、供した（１４％）
：ｍｐ：１４６−１４７℃． 1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）ｄ １０
．９３（ｓ，１Ｈ），７．９３（ｄ，２Ｈ），７．８０（ｄ，２Ｈ），７．６２
（ｄ，２Ｈ），７．４２（ｄｄ，２Ｈ），７．２４（ｔ，１Ｈ）．13Ｃ ＮＭＲ
（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）ｄ １６５．９１，１４０．８２，１３９．５９，
１３１．４５，１２８．３８，１２８．１１，１２５．４３，１２１．３０，１
１７．８５，１１１．９９．分析、計算値（Ｃ14Ｈ10Ｎ2 Ｏ2 ）：Ｃ，７０．５
８；Ｈ，４．２３；Ｎ，１１．７６測定値：Ｃ，７０．６２；Ｈ，４．３２；Ｎ
，１１．６４。
２mmol）の溶液を、Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．１９８９，６７，１８７〜１９２に概
説されるように合成した。重炭酸ナトリウムのスラリー（２mLの水中の２ｇ）を
その溶液に加えた。その混合物を−２℃に冷やし、４−シアノベンゾイルクロラ
イド（３．２３ｇ、１９．５１mmol）を滴下して加えた。撹拌を一晩、続けた後
、水（２００mL）を加えた。その反応混合物をメチレンクロライドで３回、抽出
した。その組み合わせた有機相の溶媒を真空下で除去した。その残留物を、溶離
剤としてＡｃＯＥｔ／ヘプタン（３：５，ｖ：ｖ）を用いて、４．０×１５．０
cmカートリッジを備えたＳＩＭと共にＢｉｏｔａｇｅ Ｆｌａｓｈ ４０ｉを用
いてクロマトグラフィーで精製し、純粋なｆ）を０．５５ｇ、供した（１４％）
：ｍｐ：１４６−１４７℃． 1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）ｄ １０
．９３（ｓ，１Ｈ），７．９３（ｄ，２Ｈ），７．８０（ｄ，２Ｈ），７．６２
（ｄ，２Ｈ），７．４２（ｄｄ，２Ｈ），７．２４（ｔ，１Ｈ）．13Ｃ ＮＭＲ
（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）ｄ １６５．９１，１４０．８２，１３９．５９，
１３１．４５，１２８．３８，１２８．１１，１２５．４３，１２１．３０，１
１７．８５，１１１．９９．分析、計算値（Ｃ14Ｈ10Ｎ2 Ｏ2 ）：Ｃ，７０．５
８；Ｈ，４．２３；Ｎ，１１．７６測定値：Ｃ，７０．６２；Ｈ，４．３２；Ｎ
，１１．６４。
【０１４１】 Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ１−（３−ニトロフェニル）アセトアミド（Ｈ）の合成 ヒドラジン水和物（３．５６ｇ、７１．１１mmol）を、１５℃未満に温度を維
持したテトラヒドロフラン（３０mL）中の１，３−ジニトロベンゼン（６．０ｇ
、３５．６９mmol）及び湿潤５％ロジウム炭素（１２０mg）の懸濁液に滴下して
加えた。室温で一晩、撹拌した後、その混合物をろ過し、その触媒を少量のテト
ラヒドロフランで洗った。重炭酸ナトリウムのスラリー（５mLの水中６ｇ）をそ
の溶液に加えた。その混合物を０℃に冷やし、アセチルクロライド（６．１７ｇ
、７８．６０mmol）を滴下して加えた。撹拌を一晩、続け、次に水酸化ナトリウ
ムの溶液（１００mL中５ｇ）を加えた。その水性相を分離し、ペトロレウムエー
テルを加え、そしてそのテトラヒドロフラン相を再び分離した。その組み合わせ
有機相を１０％水酸化ナトリウム水溶液で抽出した。その組み合わせた水性相を
ＣＨ2 Ｃｌ2 で洗い、次に塩酸で中和した。その混合物をＣＨ2 Ｃｌ2 で抽出し
、その抽出物を組み合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、そして減圧
下で濃縮した。ペトロレウムエーテルを加えた後、明るいオレンジの結晶が形成
され、４．５９ｇの純粋な（ｈ）を供した（６６％）：ｍｐ ９２−９４℃． 1 Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ）ｄ ９．４１（１Ｈ），８．３６（１
Ｈ），７．９６（１Ｈ），７．９１（１Ｈ），７．４６（１Ｈ），２．２８（３
Ｈ）．13Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）ｄ １４９．０１，１３０．
５２，１２７．４２，１２１．２５，１１６．４３，２３．４５．計算値（Ｃ8
Ｈ8 Ｎ2 Ｏ4 ）：Ｃ，４８．９８；Ｈ，４．１１；Ｎ，１４．２８測定値：Ｃ，
４９．５５；Ｈ，４．１６；Ｎ，１４．２１。
持したテトラヒドロフラン（３０mL）中の１，３−ジニトロベンゼン（６．０ｇ
、３５．６９mmol）及び湿潤５％ロジウム炭素（１２０mg）の懸濁液に滴下して
加えた。室温で一晩、撹拌した後、その混合物をろ過し、その触媒を少量のテト
ラヒドロフランで洗った。重炭酸ナトリウムのスラリー（５mLの水中６ｇ）をそ
の溶液に加えた。その混合物を０℃に冷やし、アセチルクロライド（６．１７ｇ
、７８．６０mmol）を滴下して加えた。撹拌を一晩、続け、次に水酸化ナトリウ
ムの溶液（１００mL中５ｇ）を加えた。その水性相を分離し、ペトロレウムエー
テルを加え、そしてそのテトラヒドロフラン相を再び分離した。その組み合わせ
有機相を１０％水酸化ナトリウム水溶液で抽出した。その組み合わせた水性相を
ＣＨ2 Ｃｌ2 で洗い、次に塩酸で中和した。その混合物をＣＨ2 Ｃｌ2 で抽出し
、その抽出物を組み合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、そして減圧
下で濃縮した。ペトロレウムエーテルを加えた後、明るいオレンジの結晶が形成
され、４．５９ｇの純粋な（ｈ）を供した（６６％）：ｍｐ ９２−９４℃． 1 Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ）ｄ ９．４１（１Ｈ），８．３６（１
Ｈ），７．９６（１Ｈ），７．９１（１Ｈ），７．４６（１Ｈ），２．２８（３
Ｈ）．13Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）ｄ １４９．０１，１３０．
５２，１２７．４２，１２１．２５，１１６．４３，２３．４５．計算値（Ｃ8
Ｈ8 Ｎ2 Ｏ4 ）：Ｃ，４８．９８；Ｈ，４．１１；Ｎ，１４．２８測定値：Ｃ，
４９．５５；Ｈ，４．１６；Ｎ，１４．２１。
【０１４２】 Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−（４−シアノフェニル）−カルバミン酸メチルエステル （Ｑ）の合成 ＴＨＦ（３０mL）中のＮ−４−（シアノフェニル）ヒドロキシルアミン（３．
１３ｇ、２１．１mmol）の溶液を、Ｎ−４−フェニルヒドロキシルアミンの調製
についてＯｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．１９８９，６７，１８７〜１９２に記載される手
順に従って合成した。重炭酸ナトリウムのスラリー（７mLの水中４．６ｇ）をそ
の溶液に加えた。その混合物を−０℃に冷却し、メチルクロロホルメート（１．
４３mL、２１．１mmol）を滴下して加えた。撹拌を一晩、続けた後、ＮａＯＨ（
８％、３０mL）を４５分にわたって加えた。その水相を分離した。ペトロレウム
エーテル（６０mL）をＴＨＦ相に加え、その水相を再び分離した。その有機相を
８％ＮａＯＨ（４０mL）で２回、抽出した。その組み合わせた水相をＣＨ2 Ｃｌ 2 で洗い、ＨＣｌで中和した（冷却！）。その酸性化した水相をＣＨ2 Ｃｌ2 （
６０mL）で３回、抽出した。その組み合わせた有機相をＭｇＳＯ4 で乾燥させ、
ろ過し、そしてその溶媒を真空下で除去して粗（ｇ）を供した。その化合物をト
ルエン／ヘプタンから再結晶化して２．６９ｇの白色結晶（６６％）を供した：
ｍｐ：１１８−１２１℃． 1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ）ｄ ７．
７１（ｄ，２Ｈ），７．６３（ｄ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ）．13Ｃ ＮＭ
Ｒ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ）ｄ １５４．１６，１４３．８９，１３２．５
２，１１９．０１，１１８．５４，１０７．１７，５４．２２．分析、計算値（
Ｃ9 Ｈ8 Ｎ2 Ｏ3 ）：Ｃ，５６．２５；Ｈ，４．２０；Ｎ，１４．５８．測定値
：Ｃ，５５．５１；Ｈ，４．２４；Ｎ，１４．７３。
１３ｇ、２１．１mmol）の溶液を、Ｎ−４−フェニルヒドロキシルアミンの調製
についてＯｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．１９８９，６７，１８７〜１９２に記載される手
順に従って合成した。重炭酸ナトリウムのスラリー（７mLの水中４．６ｇ）をそ
の溶液に加えた。その混合物を−０℃に冷却し、メチルクロロホルメート（１．
４３mL、２１．１mmol）を滴下して加えた。撹拌を一晩、続けた後、ＮａＯＨ（
８％、３０mL）を４５分にわたって加えた。その水相を分離した。ペトロレウム
エーテル（６０mL）をＴＨＦ相に加え、その水相を再び分離した。その有機相を
８％ＮａＯＨ（４０mL）で２回、抽出した。その組み合わせた水相をＣＨ2 Ｃｌ 2 で洗い、ＨＣｌで中和した（冷却！）。その酸性化した水相をＣＨ2 Ｃｌ2 （
６０mL）で３回、抽出した。その組み合わせた有機相をＭｇＳＯ4 で乾燥させ、
ろ過し、そしてその溶媒を真空下で除去して粗（ｇ）を供した。その化合物をト
ルエン／ヘプタンから再結晶化して２．６９ｇの白色結晶（６６％）を供した：
ｍｐ：１１８−１２１℃． 1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ）ｄ ７．
７１（ｄ，２Ｈ），７．６３（ｄ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ）．13Ｃ ＮＭ
Ｒ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ）ｄ １５４．１６，１４３．８９，１３２．５
２，１１９．０１，１１８．５４，１０７．１７，５４．２２．分析、計算値（
Ｃ9 Ｈ8 Ｎ2 Ｏ3 ）：Ｃ，５６．２５；Ｈ，４．２０；Ｎ，１４．５８．測定値
：Ｃ，５５．５１；Ｈ，４．２４；Ｎ，１４．７３。
【図面の簡単な説明】 本発明は、添付図面を引用することにより更に詳述される。
【図１】 Ｐ．フルオレセンス（Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）に対するＣ．シネレウス
（Ｃ．ｃｉｎｅｒｅｕｓ）ペルオキシダーゼの抗微生物活性を示す（ペルオキシ
ダーゼ：３POXU／mL、増強剤：２００μＭ Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド；実
施例１を参照のこと）。中黒四角＝pH８；中白四角＝pH６；…＝全体の死殺。
（Ｃ．ｃｉｎｅｒｅｕｓ）ペルオキシダーゼの抗微生物活性を示す（ペルオキシ
ダーゼ：３POXU／mL、増強剤：２００μＭ Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド；実
施例１を参照のこと）。中黒四角＝pH８；中白四角＝pH６；…＝全体の死殺。
【図２】 pH６、２０分及び４０℃でポリポルス（Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ）ラッカーゼ（ｒ
ＰｐＬ）と組み合わせたＮ−ヒドロキシアセトアニリドについての投与量応答曲
線を示す。−□−＝エンテロコッカス・ファエカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕ ｓ ｆａｅｃａｌｉｓ ）；−−○−−＝シュードモナス・アエルギノサ（Ｐｓｅ ｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ）；…△…＝エンテロバクター・アエ
ロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）。
ＰｐＬ）と組み合わせたＮ−ヒドロキシアセトアニリドについての投与量応答曲
線を示す。−□−＝エンテロコッカス・ファエカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕ ｓ ｆａｅｃａｌｉｓ ）；−−○−−＝シュードモナス・アエルギノサ（Ｐｓｅ ｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ）；…△…＝エンテロバクター・アエ
ロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）。
【図３】 pH６、２０分及び４０℃でのコプリヌス（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ）ラッカーゼ（ｒ
ＣｃＬ）と組み合わせたＮ−ヒドロキシアセトアニリドについての投与量応答曲
線を示す（実施例２を参照のこと）。−□−＝エンテロコッカス・ファエカリス
；−−○−−＝シュードモナス・アエルギノサ；…△…＝エンテロバクター・ア
エロゲネス。
ＣｃＬ）と組み合わせたＮ−ヒドロキシアセトアニリドについての投与量応答曲
線を示す（実施例２を参照のこと）。−□−＝エンテロコッカス・ファエカリス
；−−○−−＝シュードモナス・アエルギノサ；…△…＝エンテロバクター・ア
エロゲネス。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ０１Ｎ 47/20 Ａ０１Ｎ 47/20 Ｚ ４Ｈ００３ 47/22 47/22 Ｂ ４Ｈ０１１ 63/02 63/02 Ｐ ４Ｌ０５５ Ａ６１Ｋ 7/00 Ａ６１Ｋ 7/00 Ｃ Ｊ Ｍ Ｎ Ｒ 7/20 7/20 7/32 7/32 7/40 7/40 7/50 7/50 9/06 9/06 9/10 9/10 31/167 31/167 38/44 Ａ６１Ｐ 31/02 Ａ６１Ｐ 31/02 Ｃ０２Ｆ 1/50 ５１０Ｃ Ｃ０２Ｆ 1/50 ５１０ ５２０Ｂ ５２０ ５２０Ｐ ５３２Ｃ ５３２ ５３２Ｄ ５３２Ｈ ５３２Ｊ ５４０Ｄ ５４０ Ｃ１１Ｄ 3/32 Ｃ１１Ｄ 3/32 3/386 3/386 3/48 3/48 Ｄ２１Ｈ 21/02 Ｄ２１Ｈ 21/02 Ａ６１Ｌ 2/16 Ｚ // Ａ６１Ｌ 2/16 Ａ６１Ｋ 37/50 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｕ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ， ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，Ｌ Ｋ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ， ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，Ｔ Ｊ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ Ｆターム(参考） 4C058 AA02 AA06 AA07 AA09 AA13 BB07 CC02 DD07 JJ03 JJ04 JJ23 4C076 AA06 AA09 AA12 AA16 AA25 BB24 BB25 CC10 CC31 FF11 4C083 AC641 AC732 AD471 BB48 CC17 CC25 CC41 DD22 DD23 DD27 DD41 EE18 EE31 EE41 FF01 4C084 AA02 BA44 DC23 DC24 MA02 MA13 MA17 MA28 NA05 ZA331 ZA341 ZB351 ZC192 ZC751 ZC752 4C206 AA01 AA02 HA16 KA01 MA02 MA04 MA11 MA33 MA37 MA48 MA77 MA78 MA79 NA05 ZA33 ZA34 ZB35 ZC19 ZC75 4H003 DA01 DA02 DA05 DA12 DA13 DA16 DA17 DA19 EB17 EC03 FA34 FA43 4H011 AA02 BA01 BA02 BB06 BB13 BB21 BC18 DA13 4L055 AG33 AG42 AH21 AH22 AH40 AH50 BD20 BG10 FA20
Claims (32)
- 【請求項１】 フェノール酸化酵素系及び次式： 【化１】 〔式中、Ａ及びＢは互いに独立して、 【化２】 であるか、又はＢはＨもしくはＣ1-16−アルキル（ここで該アルキルは、ヒドロ
キシ、エステル又はエーテル基を含んでよい）であり、ここでＲ２，Ｒ３，Ｒ４
，Ｒ５及びＲ６は、互いに独立して、Ｈ，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，
Ｃ1-12−アルキル、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＦ3 ，ＮＯＨ−
ＣＯ−フェニル、ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、Ｃ1-6 −ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ，ＣＯ−
ＮＯＨ−Ａ，ＣＯＲ１２、フェニル−ＣＯ−ＮＯＨ−Ａ，ＯＲ７，ＮＲ８Ｒ９，
ＣＯＯＲ１０、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１１であり、ここでＲ７，Ｒ８，Ｒ９，Ｒ
１０，Ｒ１１及びＲ１２はＣ1-12−アルキル又はアシルである〕 の増強剤を含む酵素的抗微生物組成物。 - 【請求項２】 前記増強剤のＡ及びＢが、互いに独立して、 【化３】 であるか、又はＢがＨもしくはＣ1-3 −アルキル（ここで、該アルキルは、ヒド
ロキシ、エステル又はエーテル基を含んでよい）であり、ここでＲ２，Ｒ３，Ｒ
４，Ｒ５及びＲ６は互いに独立して、Ｈ，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，
Ｃ1-3 −アルキル、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＦ3 ，ＮＯＨ−
ＣＯ−フェニル、ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＣＯＲ１２，ＯＲ７，ＮＲ８Ｒ９，
ＣＯＯＲ１０、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１１であり、ここでＲ７，Ｒ８及びＲ９は
Ｃ1-3 −アルキル又はアシルであり、Ｒ１０，Ｒ１１及びＲ１２はＣ1-3 −アル
キルである請求項１に記載の酵素的抗微生物組成物。 - 【請求項３】 前記増強剤のＡ及びＢが、互いに独立して、 【化４】 であるか、又はＢがＨもしくはＣ1-3 −アルキル（ここで、該アルキルは、ヒド
ロキシ又はエーテル基を含んでよい）であり、ここで、Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５
及びＲ６は、互いに独立して、Ｈ，ＯＨ，ＮＨ2 ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3
、アシル、ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＦ3 ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、
ＣＯＣＨ3 ，ＯＲ７，ＮＲ８Ｒ９、又はＣＯＯＣＨ3 であり、ここでＲ７，Ｒ８
及びＲ９はＣＨ3 又はＣＯＣＨ3 である請求項１に記載の酵素的抗微生物組成物
。 - 【請求項４】 前記増強剤のＡ及びＢが、互いに独立して、 【化５】 であるか、又はＢがＨもしくはＣ1-3 −アルキル（ここで該アルキルは、ヒドロ
キシ又はエーテル基を含んでもよい）であり、ここでＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及
びＲ６は互いに独立して、Ｈ，ＯＨ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 、アシル、Ｎ
Ｏ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，ＣＯ−ＮＯＨ−フェニル、ＯＣＨ3 ，ＣＯＣＨ3
、又はＣＯＯＣＨ3 である請求項１に記載の酵素的抗微生物組成物。 - 【請求項５】 前記増強剤のＡ及びＢが、互いに独立して、 【化６】 であるか、又はＢがＣ1-3 −アルキル（ここで、該アルキルは、エーテル基を含
んでもよい）であり、ここでＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は互いに独立して
、Ｈ，ＯＨ，ＣＯＯＨ，ＳＯ3 Ｈ，ＣＨ3 ，ＮＯ2 ，ＣＮ，Ｃｌ，Ｂｒ，ＣＯ−
ＮＯＨ−フェニル、又はＯＣＨ3 である請求項１に記載の酵素的抗微生物組成物
。 - 【請求項６】 前記増強剤が、 ４−ニトロ安息香酸−Ｎ−ヒドロキシアニリド； ４−メトキシ安息香酸−Ｎ−ヒドロキシアニリド； Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジフェニルテレフタルアミド； デカン酸−Ｎ−ヒドロキシアニリド； Ｎ−ヒドロキシ−４−シアノアセトアニリド； Ｎ−ヒドロキシ−４−アセチルアセトアニリド； Ｎ−ヒドロキシ−４−ヒドロキシアセトアニリド； Ｎ−ヒドロキシ−３−（Ｎ′−ヒドロキシアセトアミド）アセトアニリド； ４−シアノ安息香酸−Ｎ−ヒドロキシアニリド； Ｎ−ヒドロキシ−４−ニトロアセトアニリド； Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド； Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−フェニル−カルバミン酸イソプロピルエステル； Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−フェニル−カルバミン酸メチルエステル； Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−フェニル−カルバミン酸フェニルエステル； Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−フェニル−カルバミン酸エチルエステル；及び Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−（４−シアノフェニル）−カルバミン酸メチルエステル
からなる群から選択される請求項１に記載の組成物。 - 【請求項７】 前記フェノール酸化酵素系がペルオキシダーゼ及び過酸化水
素源である請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。 - 【請求項８】 前記ペルオキシダーゼが、セイヨウワサビペルオキシダーゼ
、ダイズペルオキシダーゼ又はコプリヌス（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ）、バチルス（Ｂ ａｃｉｌｌｕｓ ）、もしくはマイキソコッカス（Ｍｙｘｏｃｏｃｃｕｓ）由来の
ペルオキシダーゼである請求項７に記載の組成物。 - 【請求項９】 前記ペルオキシダーゼが、コプリヌス・シネレウス（Ｃｏｐ ｒｉｎｕｓ ｃｉｎｅｒｅｕｓ ）又はコプリヌス・マクロリズス（Ｃｏｐｒｉｎ ｕｓ ｍａｃｒｏｒｈｉｚｕｓ ）由来である請求項８に記載の組成物。
- 【請求項１０】 前記過酸化水素源が過酸化水素又は過酸化水素前駆体であ
る請求項７に記載の組成物。 - 【請求項１１】 前記フェノール酸化酵素系が、酸素を伴うラッカーゼ又は
ラッカーゼ関連酵素である請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。 - 【請求項１２】 前記ラッカーゼが微生物ラッカーゼである請求項１１に記
載の組成物。 - 【請求項１３】 前記ラッカーゼが、コプリヌス（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ）、マ
イセリオフトラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ）、ポリポルス（Ｐｏｌｙｐｏ ｒｕｓ ）、ピクノポルス（Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓ）、シタリジウム（Ｓｃｙｔａ ｌｉｄｉｕｍ ）又はリゾクトニア（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）から得られる請求
項１２に記載の組成物。 - 【請求項１４】 前記ラッカーゼが、コプリヌス・シネレウス（Ｃｏｐｒｉ ｎｕｓ ｃｉｎｅｒｅｕｓ ）、マイセリオフトラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉ ｏｐｈｔｈｏｒａ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ ）、ポリポルス・ピンシトウス（Ｐ ｏｌｙｐｏｒｕｓ ｐｉｎｓｉｔｕｓ ）、ピクノポルス・シンナバリヌス（Ｐｙ ｃｎｏｐｏｒｕｓ ｃｉｎｎａｂａｒｉｎｕｓ ）、シタリジウム・サーモフィル
ム（Ｓｃｙｔａｌｉｄｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ）又はリゾクトニア・
ソラニ（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ）から得られる請求項１３に記
載の組成物。 - 【請求項１５】 前記組成物が水性組成物である請求項１〜６のいずれかに
記載の組成物。 - 【請求項１６】 前記フェノール酸化酵素の濃度がリッター当り０．００１
〜１０mgの酵素タンパク質の範囲内にある請求項１５に記載の組成物。 - 【請求項１７】 前記増強剤の濃度が１〜１０００μＭに相当する請求項１
５に記載の組成物。 - 【請求項１８】 前記組成物が粒状である請求項１〜６のいずれかに記載の
組成物。 - 【請求項１９】 微生物細胞を殺し又は阻害するための方法であって、前記
微生物を請求項１〜１８のいずれかに記載の組成物で処理することを含む方法。 - 【請求項２０】 界面活性剤と、請求項１〜６のいずれかに記載の組成物と
、を含む洗剤組成物。 - 【請求項２１】 洗濯場に存在する微生物を阻害する方法であって、該洗濯
場を、請求項１〜６のいずれかに記載の組成物を含む浸漬、洗浄又はゆすぎ液で
処理することを含む方法。 - 【請求項２２】 化粧用品を保護する方法であって、有効量の請求項１〜６
のいずれかに記載の組成物を化粧用品に組み込むことを特徴とする方法。 - 【請求項２３】 前記化粧用品が、口内洗浄組成物、化粧用液、ゲルもしく
はペースト、点眼液、制汗剤、脱臭剤、鼻噴霧剤、眼軟膏、軟膏もしくはクリー
ム、又は足浴塩である請求項２２に記載の方法。 - 【請求項２４】 コンタクトレンズの洗浄又は消毒のための請求項１〜６の
いずれかに記載の組成物の使用。 - 【請求項２５】 硬質表面上の微生物増殖を洗浄、消毒又は阻害する方法で
あって、該表面を請求項１〜６のいずれかに記載の組成物に接触させることを特
徴とする方法。 - 【請求項２６】 前記硬質表面が、プロセス設備、例えば冷却塔の構成要素
、水処理施設、乳製品施設、食品処理プラント、化学又は医薬プロセスプラント
である請求項２５に記載の方法。 - 【請求項２７】 前記硬質表面が、水衛生装置の表面である請求項２５に記
載の方法。 - 【請求項２８】 前記硬質表面が、製紙用パルププロセッシングのための装
置の表面である請求項２５に記載の方法。 - 【請求項２９】 クリーニング・イン・プレイスシステムにおける請求項１
〜６のいずれかに記載の組成物の使用。 - 【請求項３０】 水システムの消毒のための請求項１〜６のいずれかに記載
の組成物の使用。 - 【請求項３１】 製紙用パルププロセッシングにおける水システムの消毒の
ための請求項３０に記載の使用。 - 【請求項３２】 保護用ペイントのための請求項１〜６のいずれかに記載の
組成物の使用。
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