JP2002525277A

JP2002525277A - Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｔｙｐｈｉワクチン組成物

Info

Publication number: JP2002525277A
Application number: JP2000571026A
Authority: JP
Inventors: デミル，パスカル; ドント，エリック; オーク，クリスチャンバン
Original assignee: スミスクラインビーチャムバイオロジカルズソシエテアノニム
Priority date: 1998-08-28
Filing date: 1999-08-24
Publication date: 2002-08-13
Also published as: ES2193742T3; WO2000012129A2; EP1285666A1; PT1107787E; AR023643A1; EP1107787A2; DE69907921D1; CA2341703A1; DE69907921T2; WO2000012129A3; EP1107787B1; DK1107787T3; ATE240118T1; AU5739999A

Abstract

(57)【要約】提供される新規ワクチン組成物は、(a)Salmonella typhi の精製されたVi多糖、及び(b)少なくとも1種の他の抗原を含有し、ここでこれらのワクチン成分は安定しておりかつ互いに干渉しない。従ってこのワクチン組成物は、単回の予防接種で、旅行者が罹りやすい、腸チフス並びにA型肝炎のような他の疾患を防御することが可能である。更にVi多糖の抽出及び精製が、フェノールの非存在下で行われる、S. typhiのVi多糖の生成法が説明されている。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は、新規ワクチン製剤、その調製法及びそれらの治療における使用に関
する。特に本発明は、旅行者に投与するための複合体ワクチンに関する。

【０００２】腸チフス熱は、ヒトのみが保菌者である微生物サルモネラ・チフィ（Salmonel
la typhi）が起因菌となる急性の全身感染症である。本疾患は、細網内皮系、腸
リンパ系組織及び胆嚢に作用する。重症の腸チフス熱に罹患した未治療の患者の
症例致死率は、9〜32％である。旅行者の腸チフス熱のリスクは、訪問する国の
発生率に関連して変動する。アメリカ人旅行者について、目的地がインド亜大陸
である場合、腸チフス感染のリスクは100,000例につき10例より多い。ニューヨ
ーク市の研究は、報告された腸チフス熱症例479例のうち、67％は旅行に関係し
ており、死亡率は1.5％であることを示した。

【０００３】ワクチンTypherix（商標）は、Vi多糖腸チフスワクチンであるが、これは腸チ
フスを防御するために使用することができる。Typherix（商標）は、予め充填さ
れた注射器において提供され、かつ用量0.5ml当たりVi抗原25μgを含有している
。通常のVi多糖腸チフスワクチンの調製法には、多糖を安定化するためのフェノ
ールが関与している。Vi多糖腸チフスワクチンにより調製された複合体ワクチン
はいずれも、現在まで、フェノールの存在の結果不安定となるこの複合体中の他
の抗原の存在を示している。

【０００４】驚くべきことに、A型肝炎、B型肝炎、デング熱及びE型肝炎の抗原のような他
の抗原と複合されているTypherixを含有するワクチンは、ワクチンを特定の方法
で製剤すると安定化することがわかっている。特定のパーティは、腸チフス、A型肝炎又はB型肝炎に感染するリスクが増大し
ている。できる限り迅速にかつ簡単な方法、最も好ましくは単回投与量で、効果
的に防御されることが重要である。このようなパーティの例は以下を含む；熱帯
性及び感染性疾患の臨床部門；免疫低下した患者を治癒する医療ユニット；臨床
検査室；開発援助の志願者およびその家族；風土病流行地域で活動する平和団体
又は軍人又は個人。

【０００５】増進された予防接種が重要であるような別の重要なヒト集団は、旅行者である
。非風土病流行地域からやってきた殆どの旅行者は、感染症から防御されていな
い。例えば独国において、40歳以下人口の20％未満がA型肝炎に対して血清反応
陰性である。算出された年間50,000件の感染症の2/3が、旅行者により持ち込ま
れている。アフリカや東南アジアの熱帯地方のような好ましい旅行目的地は、B
型肝炎の流行地でもある。乳幼児のB型肝炎に対する世界規模の予防接種キャン
ペーンがWHO基金により支援されており、増加する旅行者には潜在的リスクを承
知し、かつB型肝炎に対する予防接種を受けることが求められている。しかし、
ほとんどの場合において決定的な問題点は、通常出発前4週間未満という限られ
た時間枠である。

【０００６】従ってこのようなヒト集団には、旅行者が罹患しやすい腸チフス及び他の疾患
に対して防御する単回の予防接種が必要である。本発明は、下記を含有するワクチン組成物を提供する： (a)Salmonella typhiの精製されたVi多糖、及び (b)他の抗原、ここでこれらのワクチン成分は安定しておりかつ互いに干渉しない。

【０００７】本発明組成物は、更にアジュバント、より好ましくはTH1細胞反応の優先的刺
激剤を含有することができる。驚くべきことに本発明のワクチン組成物は干渉を示さないこと、すなわち本発
明の組成物中の各抗原に対する免疫応答が、アジュバントとの結合において個別
に投与された各抗原により得られたものと本質的に同じであることがわかってい
る。Vi多糖の精製は、フェノールを含有しないが、代わりにこの多糖は、フェノ
ールを含有しない緩衝液による脱水により安定化される。

【０００８】驚くべきことに、Vi多糖が、溶液中において別の抗原、好ましくは市販のワク
チンHAVRIX（商標）のようなHepatitis Aと複合された場合、Viは安定性を保持
し、かつ他方の抗原(複数)は、可能性のあるフェノールの有害作用により影響を
受けない。更なる態様において、本発明は、下記を含有するワクチン組成物を提供する： (a)Salmonella typhiの精製されたVi多糖、及び (b)A型肝炎(HAV)抗原、ここでこれらのワクチン成分は安定しておりかつ互いに干渉しない。

【０００９】 A型肝炎ウイルスにより起因されるA型肝炎は、糞便−経口経路で伝播し、かつ
悪い衛生状態及び過密状況に関連している。感染症は、発熱, 食欲不振、疲労及
び吐気から黄疸までの範囲の症状を呈する。世界中で毎年約140万例が発症して
いるが、しかし致死症例は少なく、かつ小児よりも成人に死亡例が多いという年
齢特異性がある。本疾患は、限定された経過を辿りかつ衰弱性であり、有効な治
療法はわかっていない。1990年代初頭に最初に安全かつ免疫原性のある不活化し
たA型肝炎ワクチン(Havrvix（商標）)が認可されるまでは、短期間(4〜6ヶ月間)
の受動防御のみが、免疫グロブリンの使用により利用可能であった。

【００１０】現在、A型肝炎の予防のためのワクチンは余り良くわかっていない。SmithKlin
e Beecham Biologicais社のワクチンHavrix（商標）は、A型肝炎感染症の防止に
使用することができ、これはアジュバントとしての水酸化アルミニウムと共に製
剤されている。このワクチンは、フォルモール(ホルムアルデヒド)で不活化され
た弱毒化されたHM-175A型肝炎ウイルスを含有している；Andreらの論文(Prog Me
d. Virol.、37:72-95 (1990))を参照のこと。

【００１１】成人用のホルマリンで不活化したA型肝炎単価ワクチンであるHavrix（商標）1
440は、用量1ml中に少なくとも1440 EL.UのA型肝炎抗原を含有している。臨床試
験および市販後調査におけるこのワクチンの集中的使用は、その安全性、臨床的
に優れた忍容性、及び高い免疫原性プロフィールを確証した。 A型肝炎抗原として好ましいのは、市販品Havrix (SmithKline Beecham Biolog
icals社)において使用されるHM-175菌株である。

【００１２】本発明のワクチン製剤中のA型肝炎抗原濃度は、約720-2880 EUユニット／mlが
好ましい。EUユニットの定義については、上記Andreらの論文(1990)を参照のこ
と。本発明のHAVを含有する組成物は、更に水酸化アルミニウムを含有し、水酸化
アルミニウムの総量は通常0.05〜0.10mg/mlである。

【００１３】用量0.5又は1 ml当たりのアルミニウム塩の総量は、通常0.4〜1.0mgの範囲で
ある。本発明のワクチン組成物において、フォルモール濃度約10〜200μg/mlとなる
ようにするフォルモール(ホルムアルデヒド)の添加は利点である。好ましいフォルモール濃度は、約20〜160μg/mlである。

【００１４】 A型肝炎及び腸チフス熱が流行しているような国を対象とし、これら2疾患に対
して1回の注射で予防接種できる機会は、このような地域への出張者及び旅行者
にとって魅力的であろう。両疾患に対するひとつの複合体ワクチンの利便性は、
服薬遵守を向上するであろう。従って本発明のワクチン組成物は、特に腸チフス
及び／又はA型肝炎感染のリスクのある旅行者への投与に関して大きい利点とな
る。

【００１５】場合により本発明のワクチン組成物は更に、例えばB型肝炎、デング熱又はE型
肝炎などの多くの他の抗原を1種以上含むことがある。好ましいデング熱抗原は、エンベロープ(E)糖タンパク質のタンパク質、とり
わけ切断型(カルボキシル末端での)Eタンパク質(例えば60％E、80％E又はアミノ
酸301-395のBドメイン、もしくはそれらの他の融合体／一部)を含む。国際公開
公報第96/37221号を参照のこと。他の好ましいデング熱抗原は、ウイルスのカル
ボキシル末端が欠失し、かつ次に例えばヒスチジン尾に融合したデング熱ウイル
スタンパク質(E)を含む(国際公開公報第97/18311号)。

【００１６】好ましいE型肝炎抗原は、DynCorpから入手可能でバキュロウイルスにおいて発
現されるSar 55である。 1種以上のB型肝炎抗原を含有するB型肝炎感染の予防のためのワクチンも周知
である。例えばSmithKline Beecham Biologicals社のワクチンEngerix-B（商標
）は、B型肝炎を予防するために使用される。このワクチンは、B型肝炎表面抗原
(特にHarfordらが明らかにした（Postgraduate Medical Journal、63 (補遺2):6
5-70 (1987)）、226個のアミノ酸のS-抗原)を含有し、かつアジュバントとして
水酸化アルミニウムを用いて製剤されている。

【００１７】通常B型肝炎抗原は、B型肝炎表面抗原(HBsAg)である。B型肝炎表面抗原(HBsAg
)の調製は良く文献に記されている。例えば、HarfordらのDevelop. Biol. Stand
ard、54:125 (1983)、GreggらのBiotechnology、5:479 (1987)、欧州特許出願第
EP-A-0226 846号、第EP-A-0 299 108号及びそれらの参考文献を参照のこと。本願明細書において使用される、「B型肝炎表面抗原」又は「HBsAg」という表
現は、HBsAg抗原又はHBV表面抗原の抗原性を発揮するそれらの断片のいずれかで
ある。HBsAg S 抗原の226個のアミノ酸(Tiollaisら、Nature、317:489 (1985)及
びその参考文献)に加え、本願明細書において記したHBsAgが、望ましいならば、
前述の参考文献及び欧州特許出願第EP-A-0 278 940号に開示されたプレ-S配列の
全て又は一部を含むことができることは理解されるであろう。本願明細書に記し
たHBsAgは更に、変種、例えば国際公開公報第91/14703号に開示された「エスケ
ープ変異体(escape mutant)」と称することもできる。更なる態様において、HBs
Agは、欧州特許出願第0 414 374号にSL* として記されたタンパク質を含有する
こともでき、これはいわゆるタンパク質であり、B型肝炎ウイルスのラージ(L)タ
ンパク質(ad又はayサブタイプ)のアミノ酸配列の一部を構成するアミノ酸配列で
、該タンパク質のアミノ酸配列が下記のいずれかからなることを特徴とするもの
である： (a) 該Lタンパク質の残基12-52、それに続く残基133-145、それに続く残基175
-400；又は (b) 該Lタンパク質の残基12、それに続く残基14-52、それに続く残基133-145
、それに続く残基175-400。

【００１８】 HBsAgは更に、欧州特許第EP 0 198 474号又は第EP 0 304 578号に開示された
ように、ポリペプチドと称される。通常HBsAgは粒子形である。これはSタンパク質のみを含むか、又は例えば(L*,
S)のような複合粒子（ここでL*は先に定義されたものであり、かつSはB型肝炎表
面抗原のS-タンパク質を意味する。）であることができる。

【００１９】本発明のワクチン製剤中の B型肝炎抗原の濃度は、1用量につき約5〜30μgが
好ましい。好ましくは、HBsAgは、国際公開公報第93/24148号に開示されたように、リン
酸アルミニウム上に吸着される。好ましくはB型肝炎抗原は、市販品Engerix-B（商標）において使用されるよう
なHBsAg S-抗原である。

【００２０】本発明のワクチン製剤は、これらの抗原の免疫防御的量を含み、かつ常法に従
い調製され得る。ワクチン調製法は、一般に「New Trends and Developments in
Vaccines」、Vollerら編集、University Park Press、ボルチモア、メリーラン
ド州、USA、1978年に記されている。リポソームによる被包については、例えばF
ullertonにより米国特許第4,235,877号に開示されている。巨大分子へのタンパ
ク質の結合は、例えばLikhiteの米国特許第4,372,945号、及びArmorらの米国特
許第4,474,757号に開示されている。

【００２１】本発明のワクチン組成物は好ましくは単回投与量で投与される。本発明のワクチン組成物は、特に成人に適しており、かつ青年への投与にも適
している。 TH1細胞反応の優先的刺激が可能なアジュバントについては、国際公開公報第9
4/00153号及び第95/17209号に開示されている。

【００２２】 3脱-O-アシル化された(3 de-O-acylated)モノホスホリル脂質A(3D-MPL)は、こ
のようなアジュバントのひとつである。これは英国特許第GB 2220211号(Ribi)に
おいて開示されている。これは化学的には、3脱-O-アシル化されたモノホスホリ
ル脂質Aの4,5又は6アシル化された鎖との混合物であり、かつRibi Immunochem社
（モンタナ）から製造されている。好ましい3脱-O-アシル化されたモノホスホリ
ル脂質Aの形は、SmithKline Beecham Biologicals SAの名称で、欧州特許第EP06
89454B1号に開示されている。

【００２３】好ましくは3D-MPLの粒度は12Onmを越えず、通常は60〜l2Onmであり、好ましく
は約100nm又はそれ未満である(欧州特許第0689454号に開示されている)。 3D-MPLは、1用量当たり1Oμg〜100μg、好ましくは25〜50μgの範囲で存在し
、この場合抗原は典型的には1用量当たり2〜50μgの範囲で存在している。別の好ましいアジュバントは、南アメリカ産樹木であるQuillaja Saponaria M
olina. mの樹皮にから得たサポニンのHPLC精製された無毒の画分である、QS21を
含む。任意にこれは3脱-O-アシル化されたモノホスホリル脂質A (3D-MPL)と共に
、任意に担体に混合される。

【００２４】 QS21の製造法は、米国特許第5,057,540号に(QS21として)開示されている。 QS21を含有する非反応原性(non-reactogenic)アジュバント製剤がこれまでに
説明されている(国際公開公報第96/33739号)。このようなQS21及びコレステロー
ルを含有する製剤は、抗原と共に製剤した場合に、良好なTH1刺激性アジュバン
トであることが示されている。従って、本発明の一部を形成するワクチン組成物
は、QS21及びコレステロールの混合物を含有することができる。

【００２５】例えば前述のもののような様々なTH1刺激性アジュバントとの組合せも、TH1細
胞反応を優先的に刺激するアジュバントを提供すると考えられている。例えば、
QS21は、3D-MPLと共に製剤することができる。QS21：3D-MPLの比は、典型的には
1:10〜10 1の桁であり、好ましくは1:5〜5:1であり、かつ実質的には1:1である
ことが多い。最適な相乗効果の好ましい範囲は、3D-MPL:QS21が2.5:1から1:1で
ある。

【００２６】担体が、本発明のワクチン組成物中に存在することが好ましい。この担体は、
水中油型乳剤、又はアルミニウム塩であることができる。好ましい水中油型乳剤は、代謝可能な油分、例えばスクアレン、α-トコフェ
エロール、及びTween 80（商標）を含む。別の水中油型乳剤は、Span 85及び／
又はレシチンを含む。

【００２７】好ましい態様において、水酸化アルミニウム(ミョウバンalum)又はリン酸アル
ミニウムが、免疫原性を増強するために、本発明の組成物に添加される。別の好ましい態様において、本発明のワクチン組成物中の抗原は、3D-MPL及び
ミョウバンと組合せられる。典型的にはヒトへの投与について、QS21及び3D-MPLは、ワクチン中に、1用量
につき1μg〜200μg、例えば10〜100μgで、好ましくは10μg〜50μgで存在する
。典型的には水中油型は、スクアレン2〜10％、α-トコフェロール2〜10％、及
びTween 80（商標）を0.3〜3％含有している。スクアレン：α-トコフェロール
の好ましい比は、より安定した乳液を提供するものと同じ又はそれ未満である。
Span 85も1％のレベルで存在することができる。一部の場合においては、本発明
のワクチンは、更に安定化剤を含有することが利点となり得る。

【００２８】無毒の水中油型乳液は、水性担体の中に、好ましくは無毒の油分、例えばスク
アラン又はスクアレン、乳化剤、例えばTween 80（商標）を含有する。水性担体
は例えばリン酸緩衝生理食塩水であることができる。水中油型乳液中のQS21、3D-MPL及びトコフェロールに関連した特に強力なアジ
ュバント製剤が、国際公開公報第95/17210号に開示されている。

【００２９】これらは、一次感染に対して優れた防御を提供し、かつ有利なことに特異的体
液性免疫応答(中和抗体)及びエフェクター細胞媒介(DTH)免疫応答の両方を刺激
する。本発明の別の態様において、本願明細書に記された製造法が提供されており、
この方法は、複合体ワクチンの製造を安定化しかつ最適化するフェノール非存在
下でのVi多糖の調製を含んでいる。

【００３０】各ワクチン投与量中のタンパク質量は、典型的ワクチンにおいて有意な有害副
作用を伴うことなく免疫防御的反応が惹起される量が選択される。このような量
は、具体的な免疫原としてどれが用いられるかに応じて変動するであろう。一般
に、各用量は、タンパク質1〜1000μg、好ましくは2〜100μg、最も好ましくは4
〜40μgを含有すると予想される。特定のワクチンの最適量は、対象における抗
体力価及び他の反応の観察に関連した標準の試験により確定することができる。

【００３１】本発明の医薬組成物は、腸チフス熱又はHAV感染に罹患しやすいヒトの予防接
種に加えて、これらの感染症に罹患した患者の免疫療法的治療に使用することが
できる。下記の実施例は、本発明を例証するものである。実施例実施例１：Vi多糖の生成 Vi多糖の製造本質的に、Vi多糖の生成法は、下記の工程に関連している： Salmonella typhi菌の発酵多糖の抽出／精製。

【００３２】発酵はシードロット原理を基にした。各生成の作業は、Salmonella typhi製造
用種株ロット1バイアルから開始した。製造用種株の生成とそれに続くVi多糖生成の様々な工程の説明を以下に示す。製造用種株の生成製造工程及び品質管理(QC)試験の要約を、下記スキーム1に示した。各工程の
説明は後に記す。

【００３３】

【表１】

【００３４】 1.固形培地における増殖「マスター種」(ATCCから得たSaty 19430Ty2株)の1本のバイアルの中身を、室
温で解凍し、かつ細菌懸濁液0.2mlを、Polyvitex 1％(v/v)を補充した固形ミュ
ーラー−ヒルトン培地15〜20mlを含有する4個のペトリ皿の各々に接種した。こ
れは第一の固形予備培養物を構成する。「マスター種」の残りの懸濁液は同定試
験に使用した。

【００３５】 36℃±2℃で20〜28時間インキュベーションした後、各ペトリ皿から1個のコロ
ニーを採取し、次にこれを15〜20mlの固形のミューラー−ヒルトン培地を含有す
る4個のペトリ皿の各々に接種した。これは、第二の固形予備培養物を構成する
。この細菌培養物について同定試験を行った。 36℃±2℃で20〜28時間インキュベーションした後、各ペトリ皿の細菌増殖物
を、滅菌した生理食塩水3ml中に再懸濁した。その後これらを、ミューラー−ヒ
ルトン培地100mlを含有する4本のRouxボトルに各々移した。これは第三の固形予
備培養物を構成する。この細胞懸濁液の試料を、同定試験のために各ペトリ皿か
ら採取した。4本のRouxボトルを、36℃±2℃で6〜10時間インキュベーションし
た。各Rouxボトルの細菌増殖物を、生理食塩水6ml中に再懸濁した。

【００３６】 2.液体予備培養物懸濁液6mlを、液体培地0.9Lを含有する3Lフラスコ4個に各々移した。これらは
液体予備培養物を構成する。インキュベーション前には、液体培養物の光学密度
(O.D.650 nm)は0.1より大きくなければならない。同定試験のために各Rouxボトルから試料を採取した。フラスコを振盪テーブル
(200 RPM)上に置き、かつ36℃±2℃で12〜20時間インキュベーションし、その後
O.D.650nmは0.2以上でなければならない(1／10希釈物について)。微生物の純度
を試験するために、試料を各フラスコから採取した。

【００３７】 3.遠心分離液体予備培養物400mlを、無菌条件下で、9000 RPMで25分間遠心分離した。上
清を破棄し、各遠心分離管のペレットを、10％グリセロールを補充したTSB培地1
00mlに再懸濁した。その後異なる懸濁液を、滅菌レシピエント(sterile recipie
nt)においてプールした。

【００３８】 4.分配懸濁液を、無菌条件下で自動シリンジを用いて、ポリプロピレン管に分配した
(0.8ml／管)。各管にラベルをつけ、-70℃で貯蔵した。合計726個のバイアルを1
994年1月17日に調製し、製造用種株を構成した(19430 Ty2 17/01/94)。 5.対照試験製造用種株の様々な工程で行った対照試験を、スキーム1にまとめた。

【００３９】 Vi多糖の生成製造工程及び品質管理試験の要約を、下記スキーム2に示す。

【００４０】

【表２】

【００４１】各工程の説明を以下に記す。 1.発酵 1.1. 固形培地上での増殖製造用種株管の内容物を室温で解凍し、かつ細菌懸濁液0.3mlを、固形ミュー
ラー−ヒルトン培地15〜20mlを含有する3個のペトリ皿の各々に接種した。管に
残る製造用種株を、同定試験及び微生物純度試験に使用した。

【００４２】 36℃±2℃で20〜28時間インキュベーションした後、各ペトリ皿の表面増殖物
を、生理食塩水4ml中に再懸濁し、かつ2mlを、ミューラー−ヒルトン培地100ml
を含有する6本のRouxボトルの1本に移した。これは第二固形予備培養物を構成し
ている。微生物純度試験及び同定試験のために、各ペトリ皿から試料を採取した
。6本のRouxボトルを、36℃±2℃で6〜10時間インキュベーションした。

【００４３】 1.2.液体予備培養物各Rouxボトルの表面培養物を、生理食塩水10ml中に懸濁し、かつ液体培地0.9L
を含有する6個の3Lフラスコの各々に移した。これは液体予備培養物を構成して
いる。光学密度(O.D.650nm)は開始時ほぼ0.1であった。純度及び同定試験のために、
細菌懸濁液の試料を、各Rouxボトルから採取した。6個のフラスコを、振盪テー
ブル(200 rpm)上に置き、かつ36℃±2℃で12〜20時間インキュベーションした。
各フラスコの液体試料を、純度及び同定試験のために採取し、5個のフラスコの
中身(5 x 0.9 L)をプールした。この容量は、200L発酵槽のための接種材料を構
成している。このO.D.は0.1以上でなければならない(1:10希釈物について)。

【００４４】 1.3.バッチ発酵培地導入の前に、発酵槽を蒸気滅菌した。培地を分離タンクにおいて調製し、
かつ滅菌のための二重ろ過システムを通して発酵槽に移した。接種材料を、液体培地120〜140Lを含有する200L(総容量)の発酵槽に導入した
。そのpHを、滅菌NaOH(10％ w/v)又はH₃PO₄(10％ w/v)を添加することにより、7
.2に自動的に調節しかつこれに維持した。pH補正のために添加された容量は、酸
については2Lを及び苛性液については10Lを越えない。温度は、36℃±1℃に調節
しこれに維持した。溶存酸素は、曝気速度及び攪拌速度を調節することにより、
30％〜50％飽和に維持した。発酵期間は、酸素移動を促進しかつ発泡を最小化す
るために、0.1 bar過剰圧力に維持した。非常に多くの泡が存在する場合には、
滅菌した消泡剤(SAG 471)を培養物に添加した。添加した消泡剤の容量は100mlを
越えない。

【００４５】無菌流加培地(50％グルコース)の制御された添加により、流加バッチ培養を行
った。細菌増殖の速度論を追跡するために、指数関数的な増殖相には、ブロスの
アリコートを定期的に採取した。発酵の総時間は8〜14時間であり、酸素取込み量が減少した時点で終了した。
これは、発酵ブロスの1:100希釈物について測定した、最小光学密度(650nm)の0.
1に相当している。

【００４６】発酵終了時に、微生物の同定／純度試験のために、試料を採取した。 2.抽出／精製 2.1. 熱による不活化発酵終了時に、微生物懸濁液を、即座に発酵槽を一定で攪拌しながら60℃±1
℃に30分以上加熱することによって、不活化した。不活化の効験を証明するため
に、アリコート(約30mlの2試料)を採取した(適当な培養培地上で増殖せず)。発
酵槽の内容物を、無菌条件下で滅菌した200Lのタンクに移し、かつ遠心するまで
温度20℃以下に維持した。

【００４７】 2.2.遠心分離不活化工程の終了時に、細菌懸濁液を、細胞破片を除去するために、半連続(s
emi-continuous)滅菌遠心分離機において遠心した。上清を中間のガラスレシピ
エントに収集し、その透明度を肉眼で確かめ、その後滅菌した200Lのステンレス
スチール製タンクに移した。遠心分離の収集速度は、33〜55L／時であった。

【００４８】 2.3. セトリミドとの複合及びセライト上への固定セライト545の懸濁液(蒸留水10L中にセライト2.4kg)及び5％セトリミド溶液を
、連続して200Lのステンレススチール製タンク中の遠心分離した上清(130L)に加
えた。セライト上に吸着した多糖−セトリミド複合体を形成するために、この混
合物をプロペラで少なくとも20分間攪拌した。その後少なくとも20分間懸濁液を
静置しデカントした。上清を吸引除去した。セライト上に吸着した複合体を、タ
ンクの底のバルブをあけて収集し、パイロジェン非含有(apyrogenic)のクロマト
グラフィーカラムに移した。このカラムを、防爆領域(explosion proof area)に
移した。

【００４９】 2.4. カラムの洗浄吸着した不純物を除去するために、セライトを、連続して下記の溶液を、室温
で、下向きに流して洗浄した： −0.05％セトリミド30L −20％エタノール-50mMリン酸緩衝液、pH 6.0、30L −45％エタノール40L。

【００５０】流れは、これら3工程の間、0.75〜1.25 L/分で維持した。全ての溶液は、0.22
μmフィルターでろ過した。 2.5.溶離最後に多糖を、50％エタノール／0.4M NaClの0.22μmフィルターでろ過した溶
液により、室温で溶離した。溶離液を、パイロジェン非含有のガラスフラスコに
収集した。溶離は、最早多糖が溶離液中に含まれなくなるまで続けた(80％エタ
ノール＋CaCl₂中の沈殿試験による)。溶離液の最終容量は、3〜5Lであった。

【００５１】 3. フロキュレーション溶離液を10又は20Lのパイロジェン非含有のガラスビーカーに移した。エタノ
ールを添加し、多糖をフロキュレートした(添加した容量＝溶離液容量 x 1.5)。
懸濁液を最低20分間攪拌し、その後少なくとも20分間静置しデカントした。上清
を吸引除去した。懸濁液を、過剰量のエタノール存在下で遠心した。この操作は
2回繰り返した。多糖を、パイロジェン非含有のフリット(frit)したガラスフィ
ルター上に収集し、かつアセトン1Lで洗浄した。

【００５２】 4.乾燥多糖を、室温、真空下で少なくとも24時間乾燥した。秤量後、多糖を放射線照
射したフラスコ中で貯蔵した。試料を、保管(archiving)及びQC試験のために取
り出した。この多糖ロットにラベルをつけかつ-20℃で貯蔵した。実施例２：A型肝炎ワクチン及び腸チフス熱ワクチンの併用投与腸チフス熱及びA型肝炎の両方のリスクの大きいグループは、非流行国から流
行国へ移動する旅行者及び労働者であり、かつ予防接種が、臨床疾患に対する長
期防御をもたらす唯一の方法であることが認められている。両疾患は類似した疫
学及びリスクグループを共有しているので、前向きの論理的段階としてこれらの
疾患に対するワクチンの同時投与が挙げられる。本実施例は、安全性、反応原性
及び免疫原性プロフィールを評価することによる、A型肝炎ワクチン及びVi多糖
腸チフスワクチンの同時投与の実現可能性を評価するために行われたふたつの試
験を説明している。

【００５３】材料及び方法試験集団ふたつの独立した試験を、2種の異なる試験施設において、年齢18〜50歳の、A
型肝炎及び／又は腸チフス熱の既往歴がなく、かつ過去5年間にS. typhi又はA型
肝炎のいずれの予防接種も受けたことのない、健常志願者について行った。各試
験施設の施設内倫理委員会の承認及び各被験者に関する書面によるインフォーム
ドコンセントを得た。妊娠適齢期の女性は、本試験期間中は適当な避妊具を使用
することに同意した。

【００５４】除外基準は、試験登録時の急性疾患の臨床徴候、コルチコステロイドを含む免
疫抑制剤による長期治療、ワクチン成分に対する過敏症の既往歴、他の臨床試験
への同時参加、妊娠、他のワクチン(複数)の同時投与、登録前3週間以内又は予
防接種後2ヶ月間の免疫グロブリンの投与を含んだ。更に、スクリーニング時にA
型肝炎、B型肝炎表面抗原、C型肝炎及び／又は抗-HIV抗体について血清反応陽性
であることが分かった被験者も除外した。

【００５５】ワクチンワクチンは全て、SmithKline Beecham Biologicals (リキセンサルト、ベルギ
ー)において調製された。バイアル又は予め充填された注射器中の、A型肝炎ワク
チン(Havrix-1440（商標）)の各投与量1mlは、アルミニウム(AlOH₃として)0.5mg
上に吸着され不活化された抗原を少なくとも1440ELISAユニット(EL.U)含有して
いた。予め充填された注射器中で提供された腸チフスワクチン各投与量0.5mlは
、Vi莢膜多糖を25μg含有していた。複合体ワクチンの1mlの単回投与バイアルは
、Vi莢膜多糖25μg及びアルミニウム(AlOH₃)0.5mg上に吸着され不活化されたA型
肝炎抗原少なくとも1440 EL.Uを含有していた。

【００５６】試験デザイン試験は両方共、ワクチンは、第0日目に単回注射(単価、混合及び複合体)又は
個別のアームにおいて2回注射(併用)のいずれかで投与される、オープン無作為
化試験であった。被験者は、愁訴した又は愁訴しない徴候及び症状を、記録日誌
に4日目まで記録し、被験者は28日目まで経過観察した。血液検体を、0日目及び
28日目に採取し、抗-HAV及び抗-Vi抗体力価を決定した。

【００５７】 Clinique Notre Dame de Grace（ゴッセリックス、ベルギー）において実施さ
れた試験1において、各々50名の被験者の2群が、個別のアームで両ワクチンの併
用予防接種か、又は1本の注射器中で用時混合した2種のワクチンの単回注射(容
量1.5ml)のいずれかを受取った。これらの群間に、男女分布について群間の有意
差はなく(p＝0.69)、又は平均年齢については男女間(p＝0.48)、群間(p = 0.17)
又は群／性別相互作用(p＝0.08)について有意差はなかった。

【００５８】 University Hospital of Hradec Kralov(チェコ共和国)において実施された第
二の試験において、各々100名の3群が、A型肝炎又は腸チフスワクチンの単独の
単回注射、又は複合体ワクチンのいずれかを受取り、かつ被験者101名の1群は、
両方のワクチンを同時に個別のアームで受取った。男女比に関して、群間で有意
差はなかった(p＝0.798)。平均年齢に関して、男女間で(p＝0.003) 差があった
が、これは臨床的に関連があるとはみなされず、かつ群間(p＝0.803)も群／性別
相互作用(p＝0.770)も差はなかった。本試験の目的に関して、これらの群は同等
であるとみなされた。

【００５９】安全性及び反応原性の評価愁訴された局所的有害事象(紅斑及び腫脹)は、最大直径の測定値により説明し
た。注射部位のただれ及び愁訴された全身の有害事象、発熱、倦怠感、悪心、疼
痛、全身の疼痛、及び痒みは、被験者により等級化された。正常な日常活動を妨
げ救済療法を必要とするような何らかの有害事象は、重症と定義した。

【００６０】血清学予防接種前及び後の血清を、SmithKline Beecham Biologicals (リキセンサル
ト、ベルギー)において盲検法で分析した。抗-HAV抗体を、市販のELISAキット(E
nzymun, Boehringer)を用いて行い、カットオフ値を33mIU/mlとした。抗-HAV力
価が＜33mIU/ml(血清反応陰性)から≧33mIU/ml(血清反応陽性)に上昇した被験者
は、血清転換(seroconvert)とみなした。抗-Vi多糖力価は、社内でELISAを用い
て測定し、アッセイのカットオフ値を150 EL.U/mlとしたが、これはアッセイ定
量下限のおよそ3倍に相当していた。予防接種前の力価が＜150 EL.U/mlの被験者
で、予防接種後の力価が≧150 EL.U./mlであった場合、血清転換とみなした。

【００６１】統計学的方法：二元ANOVA(分散分析)を用いて、群間及び性別間の平均年齢を比較し；フィッ
シャーの直接法を用いて、男性の分布を女性に対し比較した。抗-HAV及び抗-Vi
多糖抗体の抗体力価の相乗平均(GMT)及び血清転換率(SC)を計算した。アッセイ
のカットオフ値(抗-HAV抗体力価＜33mIU/ml及び抗-Vi抗体力価＜150 EL.U/ml)以
下のGMT力価は、カットオフ値の半分の任意値(arbitrary value)とした。一元AN
OVAを用いて、群間でGMTを比較した。

【００６２】結果反応原性両試験で報告された有害事象の大半は(表1及び2)、局所的で、強さは軽度から
中等度であり、かつ一過性であった。重篤な有害事象はいずれの試験においても
報告されず、かつ全ての有害事象は後遺症を伴うことなく寛解した。

【００６３】被験者が報告する症状の発生率を表1に示した。試験1において、A型肝炎ワク
チン及びVi多糖ワクチンの両方を併用(64％)又は混合後(56％)注射された被験者
において、局所症状及び全身症状を報告した被験者の数の差に臨床的相関関係は
なかった。試験2において、両ワクチンの併用又は複合体ワクチンの予防接種後
に同様の症状発生率が報告されたが(各々、66％対67％)、他方個別に注射された
A型肝炎又は腸チフスの単価ワクチンについては、より少ない報告が関連してい
た(各々、56％及び36％)。全身症状は、頻発せず、強さは主に軽度であり、各試
験の全ての群で同様の頻度が報告された(試験1では24％及び試験2では24〜30％)
。A型肝炎ワクチン単独又は腸チフスワクチンとの同時投与のいずれかを受けた
被験者は、単価の腸チフスワクチンを受取った被験者よりもより多くの局所症状
を報告した(44〜59％対10〜22％)。

【００６４】軽度から中等度の注射部位のただれが、最も頻繁に報告された局所症状であっ
た(表2)。試験1において、各群1名の被験者(混合及び併用／個別−Viアーム)が
、＞30mmの紅斑及び重度のただれを報告した。試験2において、単価のA型肝炎ワ
クチンによる1症例のみが、＞30mmの腫脹を報告した。全て強さが軽度から中等
度の頭痛が、最も頻繁に報告された全身症状であった。試験責任医師により正常
な日常活動を妨げたので重度であると分類された唯一の全身症状は、全身の疼痛
の1症例であり、これは試験2の両ワクチンの併用投与に続く予防接種に関連して
いるとみなされた。しかしこれは救済療法は不要であった。

【００６５】免疫原性ほとんど全ての被験者は、HAV抗体及びVi抗体の両方に関して予防接種後1ヶ月
で血清転換した(94.4〜100％)(表3)。試験1において、両抗原に対して同様の免疫応答が惹起され、投与の態様に起
因した影響はなかった(混合対併用投与、抗-Viについて各々、GMT＝1159 EL.U/m
l及び1331 EL.U/ml、並びに抗-HAVについて各々、GMT＝302 EL.U/ml及び367 EL.
U/ml)。血清転換率は、全ての症例について＞95.6％であった。

【００６６】試験2において、いずれかのワクチン単独、両ワクチンの併用投与、又は結合
ワクチンとして予防接種後のGMT(抗-Viについて各々：1307、1247及び942 EL.U/
ml；抗-HAVについて各々：462、517及び432)は、有意差を示さなかった(抗-HAV
についてp＝0.45、抗-Viについてp＝0.18)。血清転換率は、全ての症例について
＞94.4％であった。

【００６７】

【表３】

【００６８】全体＝被験者が少なくとも1種の症状を報告する割合。被験者の一部は2種以上の
症状を報告することがある。全身＝被験者が少なくとも1種の全身症状を報告する割合。局所＝被験者が少なくとも1種の局所症状を報告する割合。 HAV＝A型肝炎ワクチン部位 Vi＝腸チフスワクチン部位 N＝被験者の数

【００６９】

【表４】

【００７０】 HAV＝A型肝炎ワクチン部位 Vi＝腸チフスワクチン部位 N＝被験者の数 NB 被験者の一部は2種以上の症状を報告することがある。

【００７１】

【表５】

【００７２】抗-Vi＝Vi多糖腸チフス抗原に対する抗体抗-HAV＝A型肝炎抗原に対する抗体 SC(％)＝血清転換率；抗-Vi力価≧150 EL.U/ml又は抗-HAV力価≧33 EL.U/mlであ
る被験者の割合（％） N＝被験者の数 GMT＝括弧内の95％信頼区間を示す力価の相乗平均(ELU/ml) 考察これらの結果は、健常成人に対して、Havrix-1440（商標）は、SmithKline Be
echam Biologicalsの候補のVi多糖腸チフスワクチンと新規製剤の複合体ワクチ
ンとして、うまく同時投与することができることを示している。このワクチンは
、高度に免疫原性であり、両成分について血清転換率が＞94％であり、かつ免疫
プロフィールにおいて交差−妨害はなく、被験者は単価ワクチンと同程度に両抗
原に対して血清転換する。

【００７３】投与様式は、個々のワクチンの安全性、反応原性又は免疫原性には影響を及ぼ
さなかった。両ワクチンの同時投与は、症状の頻度及び強さに有意に影響しなか
った。同様の症状発生率が、A型肝炎ワクチンの予防接種、腸チフスワクチンの
単独又は同時投与のいずれかを受取った被験者により報告され、腸チフスワクチ
ン単独についての報告はより少なかった。軽度から中等度の注射部位のただれは
、最も頻繁に報告された症状であり、これはHavrix（商標）について発表された
文献と一致していた。2種のワクチンを1本の注射器で混合した場合のより大きい
容量(1.5ml)は、A型肝炎ワクチンと比べて局所症状の報告の増加を示さなかった
。実際に、用時混合したワクチンの投与後のほうがA型肝炎ワクチン単独よりも
、少ない局所症状が報告された(44％対50％)。全身症状は、余り頻繁ではなく、
強さは主に軽度であり、全ての群で同様の頻度が報告された。

【００７４】実施例３：複合体Vi多糖腸チフス及び不活化したA型肝炎ワクチンの免疫原性
実験方法多施設試験で、複合体Vi多糖腸チフス及びA型肝炎ワクチンの3ロットの一貫性
試験の長期にわたる経過観察について評価した。一貫性試験については、年齢15
〜50歳の462名の健常被験者が予防接種を受けた。ワクチンの単回投与量は、腸
チフスVi多糖を25μg及び不活化されたA型肝炎を≧1440 ELISAユニット(投与量1
ml)を含有していた。一貫性試験の間に、3種のワクチンロットの安全性及び生体
等価性を明らかにした。6ヶ月目に、このワクチンは、 SB BioのA型肝炎ワクチ
ンのブースター投与量を受け、無作為化されたサブセットの免疫原性についての
観察を続けた。

【００７５】

【表６】

【００７６】 GMT(力価の相乗平均)は、mIU/ml(HAV)及びEL.U/ml (Vi)である。 SP＝血清転換(力価≧33mIU/ml(HAV)及び≧150 EL.U/mI(Vi)) 結論腸チフス熱及びA型肝炎に対する結合ワクチンは、急速な早期血清転換と共に
、良好な免疫応答を惹起し、かつSP％を最大6ヶ月まで82.0％(Vi)及び95.0％(HA
V)の間に維持する。A型肝炎ワクチンのブースター投与量の1ヶ月後、予防接種を
受けた者は全員A型肝炎について免疫成立しており、かつ初回予防接種後7ヶ月で
も依然腸チフス熱に対して＞80％免疫成立していた。この結合ワクチンは、健常
な成人及び青年(年齢15〜18歳)において、安全かつ忍容性が良好であった。

【００７７】実施例４：複合体A型肝炎及び腸チフス熱ワクチンの実行可能性の更なる確認第II相オープン無作為化試験を、年齢18〜50歳の健常な成人4O1名について行
った。1群につきおよそ100名の被験者が、候補の複合体Vi多糖及びA型肝炎ワク
チン、又はVi多糖腸チフスワクチン(Typherix（商標）)単独、又はA型肝炎ワク
チン(Havrix-1440（商標）)単独もしくは両方の単価のワクチンの同時のいずれ
かの単回投与を0ヶ月目に受取った。複合体ワクチンの反応原性及び免疫原性の
プロフィールを評価し、かつ単独又は同時に投与された単価のワクチンの場合と
比較した。

【００７８】 12ヶ月目に、2回目のブースター投与量の複合体ワクチンを、Havrix単独(1群)
で先に予防接種した被験者に投与した。Havrixの2回目の投与量を、複合体ワク
チン又はHavrix及びViを同時に受取った被験者に投与した。安全性及び反応原性予防接種後5日間の経過観察期間に報告された症状の発生率は、以下のようで
あった。A型肝炎ワクチンを単独又はVi多糖腸チフスワクチンとの併用のいずれ
かで受取った被験者は、Viワクチンのレシピエントよりもより多くの症状を報告
した。最も多く報告された症状は事実上局所的であった。A型肝炎及びViワクチ
ンを異なるアームで併用投与又は複合体ワクチンとして投与した場合には、同様
の症状発生率が認められた。

【００７９】いずれのワクチンの組合せを受取ったかに関りなく、ブースター後は、初回接
種と比べて、症状の報告は少なかった。初回及びブースター接種後の局所及び全身の症状の発生率は、以下のようであ
った：注射部位のただれが、最も頻繁に報告された局所症状であり(初回及びブース
ター接種後)、及びこの発生率は、Havrixを、Viワクチンを伴う又は伴わずにに
受取ったレシピエントにおいて最も高かった。腫脹の1症例が、グレード「3」と
報告された(＞30mmで24時間以上持続)。他の症例は全て強さが、軽度から中等度
であった。全身症状は、頻発せず、強さは軽度であり、かつ初回接種と比べてブ
ースター接種後により低い頻度が報告された。初回接種後に最も一般的に報告さ
れた症状は頭痛であり、ブースター予防接種後は倦怠感及び頭痛であった。全身
の疼痛に関する1報告(投与量1後)のみが、予防接種と関係があるのではないかと
疑われ、グレード「3」とされた。報告された全ての全身症状のおよそ75％は、
予防接種とおそらく関連しているか又は関連が疑わしいとみなされた。

【００８０】有害事象の発生率は、予防接種の順番には無関係であった(すなわち、HAの後H
A-Vi、又はその逆)。全ての愁訴された症状は自然寛解した。免疫原性予防接種後の免疫応答を表5に示した。全ての被験者は最初は抗-Vi及び抗-HAy
抗体力価に対し血清反応陰性であった。

【００８１】ワクチンの1回投与量後の抗-Vi-反応 2、3及び4群の被験者において、抗Viに対する同様の血清転換率が認められた
。Vi多糖ワクチンを、不活化したA型肝炎ワクチンと同時又は複合して受取った
か、もしくは単独で受取った群間で、GMTの有意差は認められなかった(スチュー
デントt検定では、2群対3群についてp＝0.13、3群対4群についてp＝0.08である)
。

【００８２】抗-Vi-抗体の持続性抗-Vi-抗体の持続性を、2、3及び4群において測定した。ワクチンの1回投与量
の12ヶ月後、わずかに低い免疫の結果が3群において得られたが、信頼区間は、
大きくかつ重なっていた。血清転換率は、1ヶ月目のレベルから1.2〜1.6分の1ま
で減少し、かつGMTは3〜4分の1に低下した。まとめると、全被験者の60％〜76％
が血清反応陽性であり、GMTが240〜394 EL.U/mlの間であり続けた。

【００８３】予防接種に対する抗-HAV反応 1群の被験者はA型肝炎ワクチンに続けて複合体HA-Viワクチンを受取り、2群は
Viワクチンと同時にA型肝炎ワクチンを、その後A型肝炎ワクチンを受取り、3群
は複合体HA-Viワクチンの後A型肝炎ワクチンを受取った。1回投与量後に抗HAVに
対して同様の血清反応陽性率が認められた(98％〜l00％)。A型肝炎ワクチンを、
Vi多糖ワクチンと同時又は複合してもしくは単独で受取った群間で、GMTの有意
差は示されなかった(スチューデントt検定では、1群対3群についてp＝0.61であ
り、2群対3群についてp＝0.19であった)。

【００８４】抗-HAV-抗体の持続性及びブースターの作用 12ヶ月目のブースター投与量の直前に、1、2及び3群において、各々、抗-HAV
抗体は被験者の88.3％、92.5％及び91.5％において持続しており、かつGMTは79.
6、85.2及び81.8 mIU/mlであった。GMTは、1ヶ月目のレベルのおよそ80％まで低
下した。ブースター投与量の1ヵ月後に試験した被験者全員は、血清反応陽性で
あり、同様のGMTレベルであった。GMTは、ブースター前のレベルと比べて29〜33
倍増加した。

【００８５】

【表７】

【００８６】抗-HAV GMTの1ヶ月(m1)での比較：G1対G3：p＝0.61；及びG2対G3：p＝0.19、ス
チューデントt検定注：N＝記録された投与量の総数 n＝予防接種後症状が少なくとも1回記録された投与量 PB/SU＝予防接種と恐らく関連している又は関連が疑わしい 1群：HAの後HA-Vi、2群：HA + Viの後HA、3群：HA-Viの後HA。抗-HAVは4群では
調べなかった(Viのみのレシピエント)。

【００８７】この試験の結果は、候補の複合されたA型肝炎及びVi多糖腸チフスワクチンが
、健常な成人において安全でありかつ忍容性が良好であることを確認した。複合
体Vi多糖腸チフス及びA型肝炎ワクチン並びにTypherix（商標）又はHavrix（商
標）の間で、GMTの有意差はなかった。予防接種後の同様の血清反応陽性、及び
予防接種後最大12ヶ月目までのわずかに低下する抗体の持続も認められた。

【００８８】抗-HAV抗体についてのブースター作用(血清反応陽性及びGMT)は、Havrix（商
標）のブーストのために複合体ワクチンが使用されたか、又はその逆の場合に、
かつHavrix（商標）がHavrix（商標）及びTypherix（商標）の併用投与後の力価
のブーストのために使用された場合に認められた。結論これらの知見は、候補の複合体A型肝炎及びVi多糖腸チフスワクチンが、評価
した全ての集団において、安全であり、忍容性が良好でありかつ免疫原性である
ことを示している。これは、現在市販されている単価のワクチン(Typherix（商
標）及びHavrix（商標）1440)と、その反応原性プロフィール、免疫原性及び抗
体持続の点で同等である。このワクチンは、A型肝炎の予防接種スケジュールに
組入れた場合に安全であることができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考） //(Ｃ１２Ｐ 19/04 (Ｃ１２Ｐ 19/04 ＣＣ１２Ｒ 1:42）Ｃ１２Ｒ 1:42） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者ドント，エリックベルギー国，ベ−1330 リクサンサール，リュドゥランスティテュ 89，スミスクラインビーチャムバイオロジカルズソシエテアノニム (72)発明者バンオーク，クリスチャンベルギー国，ベ−1330 リクサンサール，リュドゥランスティテュ 89，スミスクラインビーチャムバイオロジカルズソシエテアノニムＦターム(参考） 4B064 AF11 CA02 CE02 CE09 CE10 CE16 DA01 4C085 AA04 AA38 BA24 BA88 BA89 BB12 DD86 EE03 FF01 FF02 FF11 GG01

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記を含有する、ワクチン組成物： (a)Salmonella typhi の精製されたVi多糖、及び (b)少なくとも1種の他の抗原、ここでこれらのワクチン成分は安定しておりかつ互いに干渉しない。
【請求項２】前記他の抗原がA型肝炎抗原である、請求項１記載のワクチ
ン組成物。
【請求項３】更にアジュバントを含有する、請求項１又は請求項２記載の
ワクチン組成物。
【請求項４】前記アジュバントがTH1-細胞応答の優先的刺激剤である、請
求項３記載のワクチン組成物。
【請求項５】更に担体を含有する、請求項１〜４のいずれか１項記載のワ
クチン組成物。
【請求項６】 TH1-細胞応答の優先的刺激剤が下記を含むアジュバントの群
より選択される、請求項４記載のワクチン組成物： 3D-MPL、3D-MPL（ここで3D-MPLの粒度は約100nm又はそれ未満が好ましい。）、Q
S21、 QS21とコレステロールの混合物、又は前記アジュバントの2種以上の組合
せ。
【請求項７】 TH-細胞応答の優先的刺激剤が3D-MPLである、請求項６記載
のワクチン組成物。
【請求項８】 A型肝炎抗原がHM-175株に由来する、請求項１〜７のいずれ
か１項記載のワクチン組成物。
【請求項９】 B型肝炎抗原が更に存在する、請求項１〜８のいずれか１項
記載のワクチン組成物。
【請求項１０】 B型肝炎抗原が肝炎表面抗原である、請求項９項記載のワ
クチン組成物。
【請求項１１】前記担体が、水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム及
び油／水エマルジョンからなる群から選択される、請求項５記載のワクチン組成
物。
【請求項１２】前記担体が水酸化アルミニウムである、請求項11記載のワ
クチン組成物。
【請求項１３】更にデング熱抗原を含有する、請求項１〜12のいずれか１
項記載のワクチン組成物。
【請求項１４】前記デング熱抗原が、エンベロープ(E)糖タンパク質のタ
ンパク質、切断型エンベロープ糖タンパク質のタンパク質、及びデング熱ウイル
スタンパク質からなる群より選択される、請求項13記載のワクチン組成物。
【請求項１５】更にE型肝炎抗原を含有する、請求項１〜14のいずれか１
項記載のワクチン組成物。
【請求項１６】前記E型肝炎抗原がSAR 55である、請求項15記載のワクチ
ン組成物。
【請求項１７】下記の工程を含む、Vi多糖の製法： a. S. typhiの予備培養物の発酵； b. フェノール非存在下でのVi多糖の抽出及び精製；及び c. 真空乾燥及び貯蔵。
【請求項１８】請求項17記載の方法で製造された、S. typhiのVi多糖。