JP2002522380A

JP2002522380A - タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼの阻害

Info

Publication number: JP2002522380A
Application number: JP2000563261A
Authority: JP
Inventors: フェルナンド・ラブリー; イブ・メラン; シルバン・ゴーティエ; ルイ・プロバンシェ; バン・ルー−テ
Original assignee: Endorecherche Inc
Current assignee: Endorecherche Inc
Priority date: 1998-08-07
Filing date: 1999-08-06
Publication date: 2002-07-23
Also published as: ID28791A; NO20010651L; CA2339368A1; WO2000007576A2; CN1322130A; WO2000007576A3; AR021757A1; EP1102582A2; NO20010651D0; AU5144999A

Abstract

(57)【要約】前立腺癌、良性前立腺過形成、前立腺炎、ざ瘡（にきび）、皮脂漏、粗毛症またはアンドロゲン性脱毛症の発症を処置および／または阻害する新規方法は、タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤を単独でまたはタイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤などの他の活性医薬品と組み合わせて使用する。新規阻害剤および医薬製品もまた開示される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（発明の分野）本発明は、天然先駆物質からの性ステロイドの生合成に含まれる酵素の阻害剤
の使用に基づく、性ステロイド依存性疾病の処置方法に関する。特に、テストス
テロン及びジヒドロテストステロンのようなアンドロゲン類の天然生産を低下さ
せる阻害剤が開示される。

【０００２】（関連技術の背景）多くのアンドロゲン−感受性疾病、すなわちその始まり又は進捗がアンドロゲ
ン活性によって助長される疾病が知られている。それらの疾病には、前立腺癌、
良性前立腺過形成、にきび、皮脂漏、粗毛症、アンドロゲン性脱毛症、思春期早
発症、副腎皮質過形成及び多曩胞性卵巣症候群が含まれるが、これらに限定され
るものではない。エストロゲン感受性疾病、すなわちその始まり又は進捗がエス
トロゲン活性によって助長される疾病もまた、知られている。それらの疾病には
、肺癌、子宮内膜癌、子宮内膜症、平滑筋腫及び思春期早発症が含まれるが、こ
れらに限定されるものではない。

【０００３】アンドロゲン活性やエステロゲン活性は、それぞれアンドロゲン受容体アンタ
ゴニスト（”アンチアンドロゲン”）やエステロゲン受容体アンタゴニスト（”
アンチエステロゲン”）の投与によって、抑制され得る。WO９４／２６７６７及
びWO９６／２６２０１参照。アンドロゲン活性やエステロゲン活性は、また、公
知の方法により、アンドロゲン又はエステロゲンの生合成又は分泌を抑制するこ
とによって、低下させ得る。WO９０／１０４６２、ＷＯ９１／００７３１、ＷＯ
９１／００７３３及びWO８６／０１１０５参照。タイプ５１７β−ヒドロキシ
ステロイドデヒドロゲナーゼは、WO９７／１１１６２に記載されている。

【０００４】ヒト前立腺ｃＤＮＡライブラリーからのヒトタイプ３ 3α−ヒドロキシステロ
イドデヒドロゲナーゼの分子クローニング及び特性化は、Dufort et al., Bioch
emical and Biophysical Research Communications, 228, 474-479 (1996)に記
載されている。

【０００５】ヒトタイプ5 17−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ酵素の阻害は、１９
９８年３月１１日に出願された米国仮特許出願６０／０７７５１０に記載されて
いる。

【０００６】ヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ酵素の効果的阻
害剤又はヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ及びヒト
タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ両酵素の効果的阻害
剤は、アンドロゲン形成がそれによって抑制されると言う発見と共に、本発明に
よって提供される。タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼの
阻害が標的組織において利用され得るテストステロン及びジヒドロテストステロ
ンの量を低下させる点で有利な役割を演ずると言うことは、従来技術に記載又は
示唆されたとは考えられない。

【０００７】（発明の要約）従って、本発明の目的は、ヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒド
ロゲナーゼの阻害剤を使用し、タイプ２又は４１７β−ヒドロキシステロイド
デヒドロゲナーゼ、タイプ１３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ又
はその他のアンドロゲン分解酵素の阻害を回避しながら、４−アンドロステン−
３，１７−ジオンのテストステロンヘの及び５α−３，１７−ジオンのジヒドロ
テストステロンヘの変換を、より選択的かつ効果的に阻害することにある。

【０００８】本発明の他の目的は、ヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲ
ナーゼとタイプ５１７α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼの両者の阻
害剤を使用し、タイプ２又は４１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナー
ゼ、タイプ１３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ又はその他のアン
ドロゲン分解酵素の阻害を回避しながら、４−アンドロステン−３，１７−ジオ
ンのテストステロンヘの及び５α−３，１７−ジオンのジヒドロテストステロン
ヘの変換を、より選択的かつ効果的に阻害することにある。

【０００９】他の目的は、前立腺癌、良性前立腺過形成及び前立腺炎に対する処置及び予防
の方法を提供することにある。

【００１０】他の目的は、アンドロゲン感受性皮膚疾病、特にざ瘡（にきび）、皮脂漏、粗
毛症及びアンドロゲン性脱毛症の処置及び予防の方法を提供することにある。

【００１１】１つの態様において、本発明は、４−アンドロステン−３，１７−ジオンのテ
ストステロンヘの又は５α−アンドロスタン−３，１７−ジオンのジヒドロテス
トステロンヘの変換を阻害することを必要とする患者に対し、１７−ラクトン誘
導体化合物以外のヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ
阻害剤の治療的有効量を投与することにより、当該患者において、当該変換を阻
害する方法を提供する。

【００１２】他の１つの態様において、本発明は、ヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロ
イドデヒドロゲナーゼの活性の阻害を必要とする患者に対し、次式の構造を有す
るヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼの阻害剤の治療
的有効量を投与することにより、当該患者において、当該阻害を行う方法を提供
する：

【００１３】

【化１３】（式中、点線は任意のπ結合である； R³はＣ_１−Ｃ_２０アルキルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_１０アシルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_２ _０アルコキシカルボニルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキルオキシアルキルオキシ
、ヒドロキシル、（Ｎ−アルキル又は−Ｈ）カルバメート及びイン・ビボでヒド
ロキシルに変換される基から成る群から選択された基である；Ｒ^２及びＲ^４は独立して水素、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ及びニトロ
から成る群から選択された基（Ｒ^２及びＲ^４は同時に水素ではない。）である；Ｒ^１７αは水素又はＣ_２−Ｃ_１４炭素基（ただし、水素、ハロゲン、カルボキ
シル、アミド、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ及びＣ_１−Ｃ_５アルキルから成る群から選
択された残基によって置換されている。）若しくはＲ^１７αとＲ^１７βは一緒に
なってＣ_５−Ｃ_７ラクトン環又はケトン性酸素を形成する；Ｒ^１７βはヒドロキシル、アシルオキシ、アルコキシ、アルケニルオキシ又は
（Ｎ−アルキル又はＨ）アミド若しくはＲ^１７αとＲ^１７βは一緒になってＣ_５ −Ｃ_７ラクトン環又はケトン性酸素を形成する；Ｒ^１６αおよびＲ^１６βはそれぞれ独立して水素、低級アルキル又はベンジル
若しくはＲ^１６αとＲ^１６βが一緒になってＣ_５−Ｃ_６シクロアルケンを形成す
る。）。

【００１４】他の1つの態様において、本発明は、ヒトタイプ3 3α-ヒドロキシステロイド
デヒドロゲナーゼ活性の阻害を必要とする患者に対して、次式で示される化合物
から成る群から選択されたヒトタイプ3 3α-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナ
ーゼ阻害剤の治療有効量を投与することを特徴とする、ヒトタイプ3 3α-ヒドロ
キシステロイドデヒドロゲナーゼ活性阻害方法を提供する：

【００１５】

【化１４】

【化１５】

【化１６】

【００１６】他の1つの態様において、本発明は、４−アンドロステン−３,１７−ジオンの
テストステロンへの及び５α−アンドロスタン−３,１７−ジオンのジヒドロテ
ストステロンへの変換の推定的阻害剤の効果を評価する方法を提供するものであ
り、当該方法は推定的阻害剤の存在下、タイプ3 3α-ヒドロキシステロイドデヒ
ドロゲナーゼの活性を測定し、当該活性の低下に対する効果を、当該推定的阻害
剤の不存在下、当該デヒドロゲナーゼの活性と関連付けることを特徴とする。

【００１７】他の1つの態様において、本発明は、医薬的に許容し得る希釈剤又は担体と、
次式の分子構造を有するヒトタイプ3 3α-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナー
ゼ阻害剤の治療有効量を含む医薬組成物を提供するものである：

【００１８】

【化１７】（式中、R³は、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_１０アシルオキシ、Ｃ_１ −Ｃ_２０アルコキシカルボニルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキルオキシアルキ
ルオキシ、ヒドロキシル、（Ｎ−アルキルまたは−Ｈ）カルバメート及びイン・
ビボでヒドロキシルに変換される基から成る群から選択された基である；Ｒ^２及びＲ^４は独立して水素、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ及びニトロ
から成る群から選択された基（Ｒ^２およびＲ^４は同時に水素ではない。）である
；点線は任意のπ結合である；Ｒ^１７αは水素又はＣ_２−Ｃ_１４炭素基（ただし、水素、ハロゲン、カルボキ
シル、アミド、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ及びＣ_１−Ｃ_５アルキルから成る群から選
択された残基によって置換されている。）若しくはＲ^１７αとＲ^１７βは一緒に
なってＣ_５−Ｃ_７ラクトン環又はケトン性酸素を形成する；Ｒ^１７βはヒドロキシ、アシルオキシ、アルコキシ、アルケニルオキシ又は（
Ｎ−アルキルまたはＨ）アミド若しくはＲ^１７αとＲ^１７βは一緒になってＣ_５ −Ｃ_７ラクトン環又はケトン性酸素を形成する。）。

【００１９】他の1つの態様において、本発明は、医薬的に許容し得る希釈剤又は担体と、
次式の分子構造を有するヒトタイプ3 3α-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナー
ゼ阻害剤の治療有効量を含む医薬組成物を提供するものである：

【００２０】

【化１８】（式中、R¹⁰⁰は水素、カルボキシル、アミド、Ｃ_１−Ｃ_５アルキル、ハロ、ニト
ロ、ヒドロキシ及びＣ_１−Ｃ_３アルコキシから成る群から選択されたものである
。）。

【００２１】他の1つの態様において、本発明は、次式の分子構造を有するヒトタイプ3 3α
-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤を提供するものである：

【００２２】

【化１９】（式中、R³は、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_１０アシルオキシ、Ｃ_１ −Ｃ_２０アルコキシカルボニルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキルオキシアルキ
ルオキシ、ヒドロキシル、（Ｎ−アルキルまたは−Ｈ）カルバメート及びイン・
ビボでヒドロキシルに変換される基から成る群から選択された基である；Ｒ^２及びＲ^４は独立して水素、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ及びニトロ
から成る群から選択された基（Ｒ^２およびＲ^４は同時に水素ではない。）である
；点線は任意のπ結合である；Ｒ^１７αは水素又はＣ_２−Ｃ_１４炭素基（ただし、水素、ハロゲン、カルボキ
シル、アミド、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ及びＣ_１−Ｃ_５アルキルから成る群から選
択された残基によって置換されている。）若しくはＲ^１７αとＲ^１７βは一緒に
なってＣ_５−Ｃ_７ラクトン環又はケトン性酸素を形成する；Ｒ^１７βはヒドロキシル、アシルオキシ、アルキルオキシ、アルケニルオキシ
又は（Ｎ−アルキルまたはＨ）アミド若しくはＲ^１７αとＲ^１７βは一緒になっ
てＣ_５−Ｃ_７ラクトン環又はケトン性酸素を形成する；Ｒ^１６αおよびＲ^１６βはそれぞれ独立して水素、低級アルキル又はベンジル
若しくはＲ^１６αとＲ^１６βが一緒になってＣ_５−Ｃ_６シクロアルケンを形成す
る。）。

【００２３】他の1つの態様において、本発明は、次式の分子構造を有するヒトタイプ3 3α
-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤を提供するものである：

【００２４】

【化２０】（式中、R¹⁰⁰は水素、カルボキシル、アミド、Ｃ_１−Ｃ_５アルキル、ハロ、ニト
ロ、ヒドロキシ及びＣ_１−Ｃ_３アルコキシから成る群から選択されたものである
。）。

【００２５】他の１つの態様において、本発明は、前立腺癌の発達の危険を処置又は低下さ
せることを必要とする患者に対し、１７−ラクトン誘導体化合物以外のヒトタイ
プ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤の治療的有効量を投
与することによる、当該処置又は低下方法を提供する。

【００２６】他の１つの態様において、本発明は、良性前立腺過形成の発達の危険を処置又
は低下させることを必要とする患者に対し、１７−ラクトン誘導体化合物以外の
ヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤の治療的有
効量を投与することによる、当該処置又は低下方法を提供する。

【００２７】他の１つの態様において、本発明は、前立腺炎の発達の危険を処置又は低下さ
せることを必要とする患者に対し、１７−ラクトン誘導体化合物以外のヒトタイ
プ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤の治療的有効量を投
与することによる、当該処置又は低下方法を提供する。

【００２８】他の１つの態様において、本発明は、ざ瘡、皮脂漏、粗毛症及びアンドロゲン
性脱毛症の発達の危険を処置又は低下させることを必要とする患者に対し、１７
−ラクトン誘導体化合物を投与することを除き、ヒトタイプ3 3α-ヒドロキシス
テロイドデヒドロゲナーゼのヒトタイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒ
ドロゲナーゼ活性阻害剤の治療的有効量を投与することによる、当該処置又は低
下方法を提供する。

【００２９】本発明の阻害剤は、その始まり又は進捗がアンドロゲン活性によって刺激され
る、ここに記載のある種の疾病の予防及び／又は処置のために使用される。本発
明者らの研究の驚くべき結果の1つは、ステロイド類の3位に影響を与える反応に
おける触媒的活性が知られている、タイプ３３α−ＨＳＤが、１７位に影響を
与える反応を触媒することを発見したことである。タイプ３３α−ＨＳＤがア
ンドロステンジオンとアンドロスタンジオンからのテストステロンとＤＨＴの形
成に参与すると言うこの発見は、本発明者らが発見したこの新しい生合成経路を
抑制することによって、これら二つの重要なアンドロゲンの生合成の高度の抑制
を可能にするものである。タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナ
ーゼは、１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼの活性（４−アンドロ
ステンジオン−３，１７−ジオンのテストステロンへの及び５α−アンドロスタ
ン−３，１７−ジオンのジヒドロテストステロンヘの変換を触媒する。）に類似
の活性を発揮すること及びタイプ５ 15β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナ
ーゼ阻害剤及び／又は５α−リダクターゼ阻害剤と結合して又は結合することな
く、タイプ3 3α-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼの１７β−ヒドロキシ
ステロイドデヒドロゲナーゼ活性を抑制する阻害剤は、これらの酵素によって触
媒されたアンドロゲン類の産生を減ずることが見出された。

【００３０】これらの酵素によって触媒される反応によって形成されたアンドロゲン類は、
エストロゲン類に対する前駆物質であるから、本発明は、その始まりや進捗がエ
ストロゲン活性によって助長される疾病に対してもまた、適用性を有するもので
ある。

【００３１】本明細書で推奨する用量のすべてについて、臨床家は個々の患者の応答を監視
し、用量を調整すべきである。

【００３２】所定の疾病の発症の危険性の処置又は低減の必要性が認められる患者は、その
ような疾病にかかっていると診断されたもの又はそのような疾病にかかっている
ことが疑われるものである。

【００３３】特記しない限り、本発明の活性化合物の好ましい用量は、治療目的でも、予防
目的でも同一である。ここに記載する各活性分に対する用量は、処置されるべき
（又は予防されるべき）特定の疾病に関係なく同じである。

【００３４】ここに記載した、疾病の発症の危険性を低減させる医療的処置方法に使用され
る、「タイプ3 3α-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤」とは、当該
酵素に対する阻害のＩＣ５０値（本明細書の第１表に関して記載されたと同じ方
法で算出）が２００ｎＭよりも高くない化合物を意味する。このような阻害剤の
ＩＣ５０値は、５０ｎＭよりも高くないことが好ましく、更に１０ｎＭよりも高
くないことがもっと好ましい。また、３α−ＨＳＤタイプ１及び１７β−ＨＳＤ
タイプ２の好ましくない阻害は、３．１０^−７Ｍにおいて９０％以下であり、好
ましくは８０％以下であり、更に好ましくは７０％以下である。ある態様におい
て、アンドロゲン性は１０^−７Ｍの濃度においてシオノギ細胞の刺激の１００％
以下であり、好ましくは５０％以下であり、更に好ましくは２０％以下である。

【００３５】２種又はそれ以上の異なった活性剤（例えば酵素阻害剤及び抗アンドロゲン）
が本明細書で結合療法の１部として論じられる場合、複数の活性を持った単一化
合物よりも、複数の異なった化合物が投与される。

【００３６】特記する場合又は字義から明白な場合を除き、ここに記載する用量は、医薬的
賦形剤、希釈剤、担体又は他の成分によって影響されない、活性化合物の重量に
関するものである。但し、そのような付加的な成分は本明細書の実施例に示され
ているように、含有されることが好ましい。医薬産業において通常使用されるい
かなる用量形（カプセル、錠剤、注射など）も使用することができ、「賦形剤」
、「希釈剤」又は「担体」成る用語は、当該産業においてこのような用量形に活
性分と共に典型的に含まれる非活性成分を含む。例えば典型的なカプセル剤、丸
剤、腸溶皮膜、固体又は液体希釈剤又は賦形剤、香味剤、保存剤などが含まれ得
る。

【００３７】ここに記載したように、「炭化水素基（又は部分）」なる用語は直鎖又は分枝
鎖アルキル、直鎖又は分枝鎖アルケニル、直鎖又は分枝鎖アルキニル、フェニル
、フェニルアルキル、フェニルアルケニル、フェニルアルキニルなどを含むが、
これらに限定されるものではない。

【００３８】（好ましい実施態様の詳細な説明）前立腺癌は前立腺上皮の疾病であるのに対し、良性前立腺過形成（ＢＰＨ）は
主として前立腺の間質コンパートメント（stromal compartment）を含む。前立
腺炎は、前立腺上皮においてより普通であるが、前立腺の両領域に見出すことが
出来る。

【００３９】本発明者らの最近の研究結果によれば、タイプ５１７β−ヒドロキシステロ
イドデヒドロゲナーゼ（タイプ５１７β−ＨＳＤ）及びタイプ３３α−ヒド
ロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（タイプ３３α−ＨＳＤ）は、前立腺上皮
、主に基底細胞に存在し、従って、第１図に示された経路によってアンドロステ
ンジオンはテストステロンに転換されることが示される。次いでテストステロン
は、アンドロゲン依存性であり、前立腺癌が成長するルミナール上皮細胞中に拡
散する。間質コンパートメントに関し、タイプ３３α−ＨＳＤ及びタイプ５
１７β−ＨＳＤは、主に筋肉細胞の間に分散している繊維芽細胞中に見出される
。繊維芽細胞によって分泌された成長因子は周囲の細胞を刺激し、ＢＰＨに導く
ものと信じられる。間質におけるこれらの繊維芽細胞中のエストロゲン受容体の
存在は、恐らくＢＰＨにおけるエストロゲン類及びアンドロゲン類の役割に対す
る基礎を提供するものである。しかしながら、前立腺癌は本質的にはアンドロゲ
ン感受性疾病である。

【００４０】従来技術において、タイプ３３α−ＨＳＤはＤＨＴを不活性なメタボライト
であるアンドロスタン−３α，１７β−ジオールに変換することが知られている
。本発明者らは、最近アンドロステンジオン及びアンドロスタンジオンからそれ
ぞれテストステロン及びＤＨＡへの形成（第１図参照）を触媒する３α−ＨＳＤ
の驚くべき役割を発見した。タイプ３３α−ＨＳＤを阻害してテストステロン
とＤＨＴの形成を抑制することの利益は、タイプ３３α−ＨＳＤが阻害される
とき、結果として生ずるかもしれないアンドロゲン異化作用における低下を本質
的により重要なものとすると信じられている。

【００４１】前立腺組織におけるアンドロゲン類の形成に対し必須である多くの他の酵素の
存在は、ここに記載する結合療法（例えば酵素活性の他の阻害剤、アンドロゲン
類及び／又はカストレーション（castration）の使用）は、ただ１種の活性剤の
使用に比較して、相対的に優れた結果を与えるであろう。これは特に２種又はそ
れ以上の別のメカニズム（例えば２種又はそれ以上の異なった合成経路を阻害す
ること、アンドロゲン受容体に接近するブロックと結合してアンドロゲン形成を
阻害することなど）によって疾病に影響を与えるそれらの結合について真実であ
ると信じられる。

【００４２】第１図は、前立腺癌とＢＰＨの間では細胞の型が異なるとは言え、前立腺癌、
良性前立腺過形成及び前立腺炎の各々に適用される。前立腺癌において、タイプ
５１７β−ＨＳＤ及びタイプ３３α−ＨＳＤは主に１つの細胞型（基底細胞
）中に存在するが、５α−リダクターゼは基底細胞の直ぐ上に位置するルミナー
ル細胞中に存在しており、従ってテストステロンは基底細胞からルミナール細胞
へ拡散され、より有力なアンドロゲンＤＨＴに変換される。間質コンパートメン
ト中に位置する繊維芽細胞に対し、アンドロステンジオンのテストステロンへの
、そして次ぎにＤＨＴへの転換は同じ細胞中で起こる。

【００４３】タイプ１３α−ＨＳＤは、前立腺中において有意な量では存在せず、主とし
て肝臓酵素である。本発明で使用する阻害剤（例えばタイプ３３α−ＨＳＤ阻
害剤、タイプ５１７β−ＨＳＤ阻害剤、５α−リダクターゼ阻害剤など）は、
好ましくはアンドロゲン類を不活性化するために好適に作用するタイプ１３α
−ＨＳＤに対し、殆ど又は全く阻害効果を有していない。すなわち、本発明者ら
は、本発明の実施に際し、タイプ１３α−ＨＳＤの阻害を回避し、肝組織によ
るアンドロゲン類の不活化を遅延させないことを好むものである。

【００４４】本発明者らは、５α−アンドロスタン−３，１７−ジオン及びジヒドロテスト
ステロンをそれぞれアンドロステロン及びアンドロスタン−３α，１７−ジオー
ルに変換させるヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼが
、また、４−アンドロステン−３，１７−ジオンをテスタステロンへ、５α−ア
ンドロスタン−３，１７−ジオンをジヒドロテストステロンへ変換させることを
見出した。前立腺組織において、ヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデ
ヒドロゲナーゼの発現は、ヒトタイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒド
ロゲナーゼ酵素の発現よりも遥かに高く、従って前立腺中におけるアンドロゲン
類の有意な割合がこの経路（第１図参照）によって形成されるものと推定される
。

【００４５】好ましい態様の１つにおいて、第１図に説明したように、アンドロゲン形成の
阻害は、５α−リダクターゼ及びヒトタイプ５１７β−ヒドロキシステロイド
デヒドロゲナーゼ活性の両者の効果的阻害によるジヒドロテストステロン（ＤＨ
Ｔ）産生の効果的ブロックによって達成される。

【００４６】５α−リダクターゼの二つのタイプが存在する。いずれも前立腺中で発現され
るが、タイプ２５α−リダクターゼの方がより高いレベルで発現される。メル
クの製品プロスカール（Proscar）(フィナステライド、ＭＫ−９０６）は、概ね
タイプ２５α−リダクターゼを阻害する。

【００４７】グラクソ・ウエルカムの製品である化合物ＧＩ１９８７４５（１７β−｛Ｎ−
２，５−ビス（トリフロオロメチル）フェニル｝カルバモイル−４−アザ―５α
−アンドロスト−１−エン−３−オン）及びエンドルシェルシェの化合物である
ＥＭ−５０３（１７β−（Ｎ，ベンゾイル，Ｎ−フェニル）アミノ−４−メチル
−４−アザ−アンドロステン−３−オン）は、ヒトタイプ１及び２５α−リダ
クターゼの両者を効率良く阻害し、従ってＤＨＴ形成のより有効なブロックの可
能性を与える。

【００４８】しかしながら、５α−リダクターゼ活性の阻害はテストステロン（Ｔ）レベル
を増加させる。ＤＨＴよりは弱いが、Ｔはまた前立腺を種々の程度に成長させる
アンドロゲン性効果を所有する。

【００４９】アンドロゲン形成のより効率のよいブロックを達成するため、４−ジオンをＴ
に、又はＡ−ジオンをＤＨＴに変換させる１７β−ヒドロキシステロイドデヒド
ロゲナーゼ活性を阻害することもまた、有用である。この活性はタイプ5 17β
−ＨＳＤ及び驚くべきことにタイプ3 3α−ＨＳＤにより、前立腺中で触媒され
る。本発明者らは、その分子構造及び合成を以下に示す、タイプ５ 17β−ＨＳ
Ｄに対する極めて有効な阻害剤を開発した：

【００５０】

【化２１】

【００５１】３−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−１,３,５（１０）−エストラトリ
エン−１７（Ｒ）−スピロ−２'−（５',５'−ジメチル−６'−オキソ）テトラ
ヒドロピラン（ｂ）。アルゴン雰囲気下で、化合物ａ（５００mg，１.３５mmol
）、２，６−ルチジン（０.３５５ml，３.０５ mmol）及び４−ジメチルアミノ
ピリジン（３３mg，０.２７ mmol）を無水ジクロロメタン（２５mL）に溶解した
溶液を０ ℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物で処理し、４５分
間撹拌した。反応混合物を水で急冷し、ジクロロメタンで抽出した。有機相（or
ganic phase）を２％塩酸、飽和重炭酸ナトリウム及び水で洗浄し、硫酸マグネ
シウム上で乾燥し、濾過し、次いで蒸発乾燥させた。粗油をフラッシュ・クロマ
トグラフィ（ヘキサン−エチルアセテート４９−１〜ヘキサン−エチルアセテ
ート４−１）で精製し、トリフルオロメタンスルフォン酸塩ｂＥＭ−１３９９
（５４０mg，８０％）を得た。

【００５２】

【化２２】

【００５３】３−カルボキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１７（Ｒ）−スピ
ロ−２'−（５',５'−ジメチル−６'−オキソ）テトラヒドロピラン（ＥＭ−１
４０１）方法Ａ：ジメチル・スルホキシド（２０mL）中、化合物ｂ（５６
０mg，１.１２ mmol）、酢酸カリウム（４４０mg，４.４８ mmol）、酢酸パラジ
ウム（１２.６mg，０.０５６ mmol）及び１，１'−ビス（ジフェニルホスフィノ
）フェロセン（１２５mg，０.２５５mmol）の混合物を一酸化炭素で２０分パー
ジし、一酸化炭素バルーンの環境下、８０ ℃で３時間撹拌した。反応混合物を
０.５Ｎ塩酸で希釈し、ジクロロメタンで抽出した。有機相を水洗し、硫酸マグ
ネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発乾燥させた。反応混合物をフラッシュ・クロ
マトグラフィ（ジクロロメタン−メタノール１９−１〜ジクロロメタン−メタ
ノール４−１）で精製し、カルボン酸ＥＭ−１４０１（３００mg，６８％）
を得た。

【００５４】

【化２３】

【００５５】３−アルコキシカルボキニル−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１７
（Ｒ）−スピロ−２'−（５',５'−ジメチル−６'−オキソ）テトラヒドロピラ
ン（ｃ）ＤＭＦ（１０％Ｗ／Ｖ）中、化合物ｂ、トリエチルアミン（３.２５
当量）、酢酸パラジウム（０.０７当量）、１，３−ビス（ジフェニルホスフィ
ノ）プロパン（０.０６当量）、及びアルコール（１.５当量〜大過剰）の混合物
を一酸化炭素で２０分パージし、一酸化炭素バルーンの環境下、９０ ℃で１６
時間撹拌した。反応混合物を室温で冷却し、水で希釈し、ジクロロメタンで抽出
した。有機相を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発乾燥
させた。反応混合物を３回のフラッシュ・クロマトグラフィ（ベンゼン−アセト
ン４−１で２回、ヘキサンーエチルアセテート７−３）で精製し、化合物ｃ
（例えば、ＥＭ１３９８，Ｒ＝ベンジル、７０％）を得た。

【００５６】

【化２４】

【００５７】３−カルボキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１７（Ｒ）−スピ
ロ−２'−（５',５'−ジメチル−６'−オキソ）テトラヒドロピラン（ＥＭ−１
４０１）方法Ｂ：酢酸エチル（４０mL）中、化合物ｃ（３５０mg，０.７２
mmol）及び１０％パラジウム担持活性炭（５０mg）の混合物を水素バルーン環境
下で３時間撹拌した。反応混合物をセリート（celite）に載せて濾過し、蒸発乾
燥させた。粗製混合物をフラッシュ・クロマトグラフィ（ジクロロメタン−ＴＨ
Ｆ１９−１〜ジクロロメタン−ＴＨＦ３−１）で精製し、カルボン酸ＥＭ
−１４０１（２４０mg，８４％）を得た。試料をメタノール−ＨＴＦ中で再結晶
化させた（特性は該述の通り）。

【００５８】３−カルボキサミド−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１７（Ｒ）−
スピロ−２'−（５',５'−ジメチル−６'−オキソ）テトラヒドロピラン（d）
アルゴン雰囲気中、ＥＭ−１４０１及びピリジン（１５当量）の無水ジクロロメ
タン（１.６％Ｗ／Ｖ）溶液を０℃に冷却し、シュウ酸クロライド（６当量）で
処理し、０.５時間攪拌した。反応混合物を蒸発させ、無水ＴＨＦ（１.６％Ｗ／
Ｖ）に溶解し、０℃に冷却し、１０当量のアミンで処理し、１５分間処理した。
反応混合物を水で急冷し、ジクロロメタンで抽出し、硫酸マグネシウム上で乾燥
させ、濾過し、蒸発乾燥させた。粗製混合物をフラッシュ・クロマトグラフィ
（ヘキサン−アセトン１９−１〜ヘキサン−アセトン３−２）で精製し、
化合物ｄ（例えば、ＥＭ１４０４，Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、６５％）を得た。

【００５９】

【化２５】

【００６０】タイプ５１７β−ＨＳＤとタイプ３３α−ＨＳＤは、８５.５％のアミノ
酸の同一性を有する。タイプ５１７β−ＨＳＤとタイプ３３α−ＨＳＤ間の
高い一次構造の相同性によりタイプ３３α−ＨＳＤ活性に見られる微少な１７
β−ＨＳＤ活性を説明できる。しかしながら、タイプ３３α−ＨＳＤはタイプ
５１７β−ＨＳＤよりもさらに高いレベルで発現するから、タイプ３３α−
ＨＳＤが寄与する予期せぬ１７β−ＨＳＤ活性は前立腺に重要な役割を果たす。
従って、タイプ３３α−ＨＳＤ活性の抑制は、アンドロゲン形成の効率的阻止
を行うために必要である（Ｆｉｇ.１）。

【００６１】タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤は、本発明に
基づいて、単独で利用しても良く、また、それとは異なる機構でアンドロゲン感
応疾病に有益な効果を有する下記の他の療法と共に併用療法の一部としてし、併
用し得る。これらの併用療法には、タイプ３の３α−ヒドロキシステロイドデヒ
ドロゲナーゼ阻害剤（ある実施例においては、タイプ５の１７β−ヒドロキシス
テロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤と組み合わせて）に加えて、次の１以上の療法
が含まれる。

【００６２】療法１：化学的若しくは外科的去勢による卵巣若しくは精巣ホルモン分泌の
抑制。この手法は、エストロゲン又はアンドロゲンに逆反応する疾病の治療に有
用である。化学的若しくは外科的去勢を利用する場合、ＬＨＲＨ−アゴニスト、
ＬＨＲＨ−アンタゴニストのいずれか一方及び／又はタイプ３の１７β−ヒドロ
キシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤（本明細書に記載の如く、これは多少の
精巣アンドロゲン形成に触媒作用を及ぼす）を用いる化学的去勢が好ましい。適
当なＬＨＲＨ−アゴニストが米国特許第４，６５９，６９５号明細書に報告され
ているが、化学的去勢を誘発する能力を示すＬＨＲＨ−アゴニストは、全て最初
に記載された（ラブリー他、ジャーナルオブアンドロロジィＪ.Androl.１
：２０９−２２８、１９８０）のと同じ機構で作用するので、任意のＬＨＲＨ−
アゴニストを使用することができる。用量は当業界で周知である。適当なＬＨＲ
Ｈ−アンタゴニストが米国特許第４，６６６，８８５号明細書に若干報告されて
いるが、製造業者のアドバイスに従って使用すれば、任意のＬＨＲＨ−アンタゴ
ニストの使用を容認できる。

【００６３】療法２：アンドロゲン又はエストロゲンによるアンドロゲン又はエストロゲ
ン・レセプタの活性化防止のためのアンドロゲン又はエストロゲン・レセプタア
ンタゴニスト（抗アンドロゲン剤又は抗エストロゲン剤）の利用。療法２はアン
ドロゲン又はエストロゲン活性にそれぞれ逆反応する疾病に対して有用である。
抗アンドロゲン剤、及びその用量は、当業界で周知である（例えば、フルートア
ミド（Flutamide）（Ｎ−[４−ニトロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル）
]−２−メチルプロパンアミド）１回２５０mg、一日２〜３回、ニルトアミド
（Nilutamide）の用量は１５０mg/日、カソデクス(Casodex)の用量は７５０mg/
日）。

【００６４】本発明に従って、抗エストロゲン剤を単独で又は本明細書に記載の併用療法の
一部として使用する場合、担当臨床医は、少なくとも初期には、製造業者の推奨
する用量を使用すべきである。しかしながら、担当臨床医は、個々の患者の反応
及び代射を監視し、それに応じて患者の用量を調節すべきである。実際に、ここ
で述べた全ての療法及び本発明の併用療法のいずれかにおいて使用される全ての
活性成分は本当のことである。好ましい抗エストロゲン剤の一例は、ＰＣＴ／Ｃ
Ａ９６／０００９７（ＷＯ９６／２６２０１）号明細書に記載されたＥＭ−８
００である。

【００６５】

【化２６】

【００６６】本発明における他の好ましい抗エストロゲン剤はＥＭ−０１５３８である。

【化２７】

【００６７】本発明の他の好ましいＳＥＲＭには、タモキシフェン（Ｚ）−２−[４-（１，
２−ジフェニル−１−ブテニル)]-Ｎ，Ｎ−ジメチルエタンアミン）（英国のツ
ェニカ社製）、トレミフェン（Toremifene、フインランドのオリオンファーモス
・ファマキューティカル社製又はシェリング・プラウ社製）、ドロロキシフェン
（Droloxifene）及びＣＰ−３３６，１５６（シス−１Ｒ−[４'−ピロリジノ−
エトキシフェニル]−２Ｓ−フェニル−６−ヒロドキシ−１，２，３，４−テト
ラヒドロナフタリン）Ｄ-(-酒石酸塩）（米国、ファイザー社製）、ラロキシフ
ェン（Raloxifene、米国、イーライリリー社）、ＬＹ３３５５６３及びＬＹ３５
３３８１（米国、イーライリリー社）、アイオドキシフェン（Iodoxifen、米国
、スミスクライン・ビーチャム社）、レヴォルメロキシフェン（Levormeloxifen
e, ３，４−トランス−２，２−ジメチル−３−フェニル−４−[４−（２−（
２−（ピロリジン−１−イル)エトキィ）フェニル]−７−メトキシクロマン（デ
ンマーク、Ａ／Ｓ、ノボ・ノルヂスク社））（シャルミ他のＷＯ９７／２５０３
４、ＷＯ９７／２５０３５、ＷＯ９７／２５０３７、ＷＯ９７／２５０３８；
及びコルスガード他のＷＯ９７／２５０３６に記載されている）、ＧＷ５６３８
（ウイルソン他により、エンドクリノロジ、１３８（９）、３９０１−３９１１
，１９９７に記載されている）、インドール誘導体（ミラー他によりＥＰ０８０
２１８３Ａ１に記載されている）、ワイエス（米国）により開発されＪＰ１００
３６３４７号（アメリカン・ホーム・プロダクツ）に記載されたＴＳＥ４２４、
及びＷＯ９７／３２８３７に記載された非ステロイド性エストロゲン誘導体が含
まれる。

【００６８】２タイプの５α−リダクターゼがあり、両タイプとも前立腺で発現するが、タ
イプ２の５α−リダクターゼがより高いレベルで発現する。メルク社製品、プロ
スカー（フィンアステリド（finasteride）、ＭＫ−９０６）は、主にタイプ２
の５α−リダクターゼを抑制する。

【００６９】グラクソウェルカム社製化合物ＧＩ１９８７４５（１７β−{Ｎ−２，５−ビ
ス(トリフルオロメチル)フェニル}カルバモイル−４−アザ−５α−アンドロス
ト−１−エン−３−オン）、及びエンドレチェルチェの化合物、ＥＭ−５０３(
１７β(Ｎ，ベンゾイル，Ｎ−フェニル)アミノ−４−メチル−４−アザーアンド
ロスタン−３−オン)は、ヒトタイプ１、２の５α−リダクターゼの双方を効果
的に抑制し、効果的なＤＨＴ形成の遮断可能性をもたらす。

【００７０】療法３：テストステロン５α−リダクターゼの活性の抑制による（例えば
、メルク・シャープ・アンド・ドーメ・カナダ社が市販しているプロスカー（Pr
oscar）の推奨用量による投与による）アンドロゲン・テストステロンのより強
力なアンドロゲン・ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）への変換の抑制。任意の
他の強力な５α−リダクターゼ阻害剤を使用できる。使用し得る用量は経口投与
で１日に２〜２０mgである。用量は、製造業者の推奨するものにすべきである。
療法３はアンドロゲン活性に逆反応する疾病に対して有用である。

【００７１】療法４：エストロゲン産生を減少させるためのアロマターゼ阻害剤の利用。療法４は、
エストロゲン活性に逆反応する疾病、又はエストロゲン感応疾病（例えば、良性
前立腺過形成）でもあるアンドロゲン感応疾病タイプのエストロゲン・レセプタ
媒介病勢昂進に対して有用である。また、アンドロゲン依存性疾病の治療中に生
じるエストロゲンレベル高進に起因する望ましくないエストロゲン効果を減少さ
せるため、アロマターゼ阻害剤（及び抗エストロゲン剤）を使用しても良い。本
発明に基づいて、アロマターゼ阻害剤を単独で或いは本明細書に記載した併用療
法の一部として使用する場合、担当臨床医は、初期には製造業者の推薦する用量
を使用すべきである。経口投与する場合、通常、所望の血清レベルをもたらすの
に有効な用量は、体重５０ｋｇにつき活性成分１.０〜２０mg／日である。例え
ば、ツェネカ（Zeneca）社製アリミデックス（Arimidex）は経口投与で１日に１
mg服用される。しかしながら、担当臨床医は、個々の患者の反応及び代射を監視
し、それに応じて特定患者の用量を調節すべきである。ある種のアロマターゼ阻
害剤は、例えば、米国特許５２２７３７５号明細書に記載された分子構造を含む
。また、アロマターゼ抑制は、例えば、英国ツェネカ社のアリミデックス（２，
２'−[５−(１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イルメチル)−１，３−フェ
ニレン・ビス(２−メチルプロピオノニトリル)）を１mg/日の用量で投与するこ
とにより実現しても良い。任意の他のアロマターゼ阻害剤を製造業者の推奨法に
従って使用しても良い。

【００７２】一般に、アンドロゲン感応疾病及びエストロゲン感応疾病に対しては、性ステ
ロイド生合成阻害剤（エストロゲン又はアンドロゲン生合成又はエストロゲン又
はアンドロゲン前駆体の生合成の１工程以上に触媒作用を及ぼす酵素の阻害剤）
と、エストロゲン・レセプタアンタゴニスト及び／又はアンドロゲン・レセプタ
アンタゴニストとによる同時治療は、これらが異なる機構により効果的に働くた
め、重複効果よりも相加的効果を持つと思われる。同様に、二つの異なる酵素阻
害剤（性ステロイド生合成の異なる１工程以上に触媒作用を及ぼす酵素）の活性
は、特に阻害剤が１以上の合成経路に影響を及ぼす場合、相加的効果をもたらす
と思われる。このような手法は、より完全な効果を達成すると思われる。

【００７３】本発明に係るタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤
及びタイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤は、（ア
ンドロゲン又はエストロゲン活性を増加又は減少させる）効果が問題の疾病に対
し望ましい効果と一致する任意の前記療法１−４と任意に組み合わせて使用して
も良い。

【００７４】そのことを考慮に入れて、本発明に従って治療し得る又はリスクを減少させ得
る代表的な疾病のリストを次に示す。各疾病の下に、特定の疾病の治療若しくは
リスク軽減のための若干の好ましい療法又は併用療法を示してある。しかしなが
ら、特定の疾病がエストロゲン活性及び／又はアンドロゲン活性に対して有利に
又は逆に反応するか否かによってのみ制限されるが、これらの組合せは、前述の
４療法のうちの１以上を用いて補完しても良い。

【００７５】Ａ）前立腺癌（アンドロゲン活性に逆反応する）１.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤２.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤３.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋ＬＨＲＨアゴニスト(
又はアンタゴニスト) ４.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ３１７β−ヒ
ドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤５.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ３１７β−ヒ
ドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋ＬＨＲＨアゴニスト(又はアンタ
ゴニスト) ６.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋ＬＨＲＨアゴニスト(
又はアンタゴニスト)＋抗アンドロゲン剤７.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ３１７β−ヒ
ドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンドロゲン剤８.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ３１７β−ヒ
ドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋ＬＨＲＨアゴニスト(又はアンタ
ゴニスト)＋抗アンドロゲン剤９.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンドロゲン剤＋
５α−リダクターゼ阻害剤＋ＬＨＲＨアゴニスト(又はアンタゴニスト) １０.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ
５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋５α−リダクター
ゼ阻害剤１１.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ
５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ３１７β−
ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋５α−リダクターゼ阻害剤１２.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ
５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ３１７β−
ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンドロゲン剤＋５α−リダ
クターゼ阻害剤１３.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ
５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ３１７β−
ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋ＬＨＲＨアゴニスト(又はアン
タゴニスト)＋抗アンドロゲン剤＋５α−リダクターゼ阻害剤

【００７６】Ｂ）良性前立腺過形成（アンドロゲン活性及びエストロゲン活性の双方に逆反
応する）１.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤２.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗エスト
ロゲン剤又はアロマターゼ阻害剤３.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンド
ロゲン剤４.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンド
ロゲン剤＋５α−リダクターゼ阻害剤＋抗エストロゲン剤又はアロマターゼ阻害
剤５.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋５α−リ
ダクターゼ阻害剤６.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンド
ロゲン剤＋５α−リダクターゼ阻害剤７.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋５α−リ
ダクターゼ阻害剤＋抗エストロゲン剤又はアロマターゼ阻害剤８.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤９.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗エストロゲン剤又
はアロマターゼ阻害剤１０.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ
５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンドロゲン剤１１.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ
５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンドロゲン剤
＋５α−リダクターゼ阻害剤＋抗エストロゲン剤又はアロマターゼ阻害剤１２.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ
５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋５α−リダクター
ゼ阻害剤１３.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ
５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンドロゲン剤
＋５α−リダクターゼ阻害剤１１.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ
５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋５α−リダクター
ゼ阻害剤＋抗エストロゲン剤又はアロマターゼ阻害剤

【００７７】Ｃ）前立腺炎（アンドロゲン活性に逆反応する）１.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンド
ロゲン剤２.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋５α−リ
ダクターゼ阻害剤３.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンド
ロゲン剤＋５α−リダクターゼ阻害剤４.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤５.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンドロゲン剤６.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋５α−リダクターゼ
阻害剤７.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンドロゲン剤＋
５α−リダクターゼ阻害剤

【００７８】Ｄ）座瘡、脂漏症、多毛症及び男性ホルモン性脱毛症（アンドロゲン活性にの
み逆反応する）１.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤２.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤３.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンド
ロゲン剤４.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンドロゲン剤５.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋５α−リ
ダクターゼ阻害剤６.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋５α−リダクターゼ
阻害剤７.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンド
ロゲン剤＋５α−リダクターゼ阻害剤８.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋１７β−
ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤＋抗アンドロゲン剤＋５α−リダ
クターゼ阻害剤

【００７９】タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤を本発明に従
って単独で或いはここに述べた併用療法のうちの一療法の一部として使用する場
合、担当臨床医は、タイプ３の阻害剤の患者血清濃度を０.５ng/ml〜１００ng/m
l、好ましくは１ng/ml〜２０ng/ml、最も好ましくは１ng/ml〜１０ng/mlを目標
とするのが望ましい。血清濃度はＬＣ／ＭＳで測定し得る。経口投与する場合、
所望の血清レベルを与える通常有効な用量は、体重５０ｋｇにつき１日当たり活
性成分１.０mg〜１０００mgであり、好ましくは、１０mg〜５００mg、最も好ま
しくは、１０mg〜１００mgである。しかしながら、用量は、選択された阻害剤の
バイオアベイラビリティ及び個々の患者の反応に伴って変えるべきである。例え
ば、ＥＭ−０１６４５若しくはＥＭ−０１６６７−Ｃを選択した場合、経口量は
、好ましくは、体重５０ｋｇにつき１日当たり活性成分５mg〜５００mg、より好
ましくは、１０mg/日〜３００mg/日、例えば、２０mg/日〜１００mg/日である。
担当臨床医は、個々の患者の反応（適当と判断された場合には）更に血清濃度を
監視し、それに応じて患者の用量を調節すべきである。注射により投与する場合
、通常、より少ない用量、例えば、体重５０ｋｇにつき１日当たり活性成分１０
mg〜１００mgが適当である。

【００８０】タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤を本発明に
従って本明細書に記載の併用療法のうちの一療法の一部として使用する場合、担
当臨床医は、タイプ５の阻害剤の患者の血清濃度を０.５ng/ml〜１００ng/ml、
好ましくは１ng/ml〜２０ng/ml、最も好ましくは１ng/ml〜１０ng/mlを目標とす
るのが望ましい。血清濃度はＬＣ／ＭＳで測定し得る。経口投与する場合、所望
の血清レベルを与える通常有効な用量は、体重５０ｋｇにつき１日当たり活性成
分１.０mg〜１０００mgであり、好ましくは、１０mg〜５００mg、最も好ましく
は、１０mg〜１００mgである。しかしながら、用量は、選択された阻害剤のバイ
オアベイラビリティ及び個々の患者の反応に伴って変えるべきである。例えば、
ＥＭ−１４０４を選択した場合、経口量は、好ましくは、体重５０ｋｇにつき１
日当たり５mg〜５００mgであり、より好ましくは、１０mg/日〜３００mg/日、例
えば、２０mg/日〜１００mg/日である。担当臨床医は、個々の患者の反応及び代
射（適当と判断される場合、血清濃度）を監視し、それに応じて患者の用量を調
節すべきである。注射により投与する場合、通常、より少ない用量、例えば、体
重５０ｋｇにつき１日当たり１０mg〜１００mgが適当である。

【００８１】タイプ３１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤を本発明に
従って本明細書に記載の併用療法のうちの一療法の一部として使用する場合、担
当臨床医は、タイプ３の阻害剤の患者の血清濃度を０.５ng/ml〜１００ng/ml、
好ましくは１ng/ml〜２０ng/ml、最も好ましくは１ng/ml〜１０ng/mlを目標とす
るのが望ましい。経口投与する場合、用量は、体重５０ｋｇにつき１日当たり活
性成分１.０mg〜１０００mgであり、好ましくは、５mg〜５００mg、最も好まし
くは、１０mg〜１００mgである。しかしながら、担当臨床医は、個々の患者の反
応及び代射を監視し、それに応じて患者の用量を調節すべきである。以下、この
ような阻害剤の合成について説明する。

【００８２】

【化２８】

【００８３】ＴＢＤＭＳによる１７β−アルコールの保護。ＤＭＦに溶解したジヒドロテス
トステロン（ＤＨＴ，ｅ）（５ｇ，１７.２mmol）の溶液にイミダゾール（６当
量）とＴＢＤＭＳ（５当量）を加えた。反応は、室温で朝まで撹拌して行った。
混合物を氷の上に注ぎ、次いで濾過した。得られた白色沈殿物を水洗し、減圧下
で２４時間、五酸化燐上で乾燥させた。収率８５〜９５％を得た。１７β−[(タ
ーシャリ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−５α−アンドロスタン−３−オン(
ｆ)。白色固体；ＩＲ（ＫＢｒ）ｖ１７１９(Ｃ＝Ｏ，ケトン)；

【００８４】

【化２９】

【００８５】３位置のカルボニルのアルキル化。０℃で化合物ｆ(５００mg，１.２３mmol)
の無水ＴＨＦ（１００mL）溶液に、無水ＴＨＦに溶解した３当量の市販のグリニ
ャール試薬を滴下した。混合物を０℃で３時間反応させ、室温で朝まで放置した
。飽和塩化アンモニウム溶液を加え、粗製品をＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を
ＮＨ_４Ｃｌ飽和溶液で洗浄し、ＭgＳＯ_４上で乾燥させ、減圧下で蒸発乾燥させ
た。３β−アルキル化立体異性体は、ヘキサンと酢酸エチルの混合物を溶離剤と
して用いて、シリカゲル上フラッシュ・クロマトグラフィで３α−アルキル化立
体異性体から容易に分離された。エチルフェニル臭化マグネシウムの場合のよう
に現場でグリニャール試薬を生成すると、対応する臭化物、活性化マグネシウム
及びヨウ化物を用いて、周知方法で５当量が得られた。次に、ステロイドを無水
ジエチルエーテルに溶解し、これを試薬溶液に滴下した。収率は二つの立体異性
体につき約６０％であった。３β−ベンジル−１７β[ターシャリ−ブチルジメ
チルシリル)オキシ]−３α−ヒドロキシ−５α−アンドロスタン（ｇ）。白色固
体（２４％）；ＩＲ（ＫＢｒ）ｖ３５８５及び３４６０（ＯＨ，アルコール）；

【００８６】

【化３０】

【００８７】３α−ヒドロキシ−３β−(フェニルエチル)−１７β[ターシャリ−ブチルジ
メチルシリル)オキシ]−５α−アンドロスタン（ｇｂ）。白色固体（３８％）；
ＩＲ（フィルム）ｖ３４４７（ＯＨ，アルコール）；

【００８８】

【化３１】

【００８９】ＴＢＤＭＳグループの加水分解及び生成するアルコールの酸化方法。シリル化エーテルを塩化水素（２％，v/v）のメタノール溶液に溶解し、得ら
れた混合物を室温で３時間撹拌した。次いで、水を加え、メタノールを真空蒸発
させた。生じる白色沈殿物を精製することなくジョーンズ酸化に供した。０℃の
アセトンに入れた原料アルコールの撹拌溶液に、ジョーンズ試薬（２.７Ｍク
ロム酸溶液）を滴下した。３０〜４５分後、反応が終了した。イソプロパノール
と水を加え、アセトンを減圧して除去した。残りの水層をＥｔＯＡｃで抽出した
。複合有機相を塩水で洗浄し、ＭgＳＯ_４上で乾燥し、減圧下で蒸発乾燥させた
。溶離液としてＨＰＬＣ級溶媒、ＥｔＯＡｃ及びヘキサンを用いて、シリカゲル
上で精製を行った。

【００９０】３β−ベンジル−３α−ヒドロキシ−−５α−アンドロスタン−１７−オン（
ＣＳ−２１３）。白色固体（２工程について８８％）；ＩＲ（ＫＢｒ）ｖ３４０
８（ＯＨ，アルコール），１７３２(Ｃ＝Ｏ，ケトン)；

【００９１】

【化３２】

【００９２】３α−ヒドロキシ−３β−フェニルエチル−５α−アンドロスタン−１７−オ
ン（ＥＭ−１３２４−ＣＳ）。白色固体（２工程について８２％）；ＩＲ（フィ
ルム）ｖ３４８６（ＯＨ，アルコール），１７３７(Ｃ＝Ｏ，ケトン)；

【化３３】

【００９３】ここに述べたいずれかの療法で使用する全ての活性成分は、一種以上の他の活
性成分を含む医薬品組成物を形成し得る。もう一つの方法として、前記活性成分
をそれぞれ単独ではあるが、患者が最終的に高血中濃度を持つか、さもなければ
各活性物質（療法）の恩恵を同時に受けられるように、十分に時期を合わせて投
与しても良い。本発明のある好ましい実施例においては、少なくとも二つの個別
の容器（その一方の少なくとも一つの容器の中身は、他の少なくとも一つの容器
の中身とその中に含まれる活性物質が全部または一部異なる）を含むキットが提
供される。本発明の併用療法においては２以上の異なる容器が使用される。また
、ここに述べた併用療法は、問題の疾病の治療若しくは予防が併用療法の他の活
性成分若しくは療法を含む場合には、その治療（若しくは防止）用薬剤の製品の
一活性成分の使用を含む。ここに述べた疾病の治療若しくは予防する方法のある
実施例においては、ここに述べた特定の（即ち、ここに述べた分子構造の）タイ
プ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤及び／又はタイプ
３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤を利用する。

【００９４】ＬＨＲＨアゴニスト及びＬＨＲＨアンタゴニストは、何らかの選択が指定して
ない限り、公知技術で精巣ホルモン又は卵巣ホルモン分泌を抑制するため、取り
替えて使用し得る。本発明に係る活性成分を投与する場合、グルココルチコイド
・レセプタの活性化を最小限に抑えるのが望ましい。ＬＨＲＨアゴニスト又はＬ
ＨＲＨアンタゴニストで与えられるのと同様な効果を与えるため、タイプ３１
７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤を使用しても良い。

【００９５】好ましいタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤として有用で
あると考えられる化合物のリストを下表に示す。また、表には、アンドロゲン及
び抗アンドロゲン活性などの他の重要なパラメータに関する特定化合物の検定、
アンドロゲン・レセプタに及ぼす化合物の効果、アンドロゲン感応細胞の増殖、
下に詳述する他の効果も含めてある。下表において、表番号に「プライム」(')
を含まないものは、好ましい阻害剤（若しくは比較化合物）の分子構造の詳細を
示してある。表番号に「プライム」(')を含む対応する表は、各試験済み化合物
の機能の有効性についての情報を示す。欄見出しの数字は、各欄に何の情報が記
録されているか、また、如何にして決定されたかについて全ての表の末尾の記載
に対応する。

【００９６】

【表１】

【表２】

【００９７】

【表３】

【表４】

【００９８】

【表５】

【表６】

【００９９】

【表７】

【表８】

【０１００】表の凡例１欄に、好ましいタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻
害剤の経口バイオアベイラビリティ（ng/mLで表す）は、後述するように、「ヒ
ト型タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤のバイオア
ベイラビリティのインビボアッセイ」で測定した。高い数字が望ましい。ＮＤは
測定が行われなかったことを意味する。

【０１０１】２欄に、酵素活性の５０％阻害（ＩＣ５０ｎＭ）を生じる濃度で表されるヒ
ト型タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ活性の阻害を示す
。ＩＣ５０を測定する方法は、下の「II−タイプ１，２，３及び５１７β−Ｈ
ＳＤ及びタイプ１、３３α−ＨＳＤの酵素的分析」に記載してある。空白は測
定が行われなかったことを意味する。３.１０^−７及び３.１０^−６Ｍでの阻害剤
による酵素活性の阻害率を括弧内に示す。

【０１０２】３欄において、酵素活性の５０％阻害（ＩＣ５０ in ｎＭ）を生じる濃度で
表される、ヒト型タイプ１１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ活
性の阻害を示す。ＩＣ５０を測定する方法は、下の「II−タイプ１，２，３及び
５１７β−ＨＳＤ及びタイプ１、３３α−ＨＳＤの酵素的分析」に記載して
ある。高い数字のＩＣ５０が望ましい。空白は測定が行われなかったことを意味
する。３.１０^−７及び３.１０^−６Ｍでの阻害剤による酵素活性の阻害率を括弧
内に示す。

【０１０３】４欄に、酵素活性の５０％阻害（ＩＣ５０ in ｎＭ）を生じる濃度で表され
る、ヒト型タイプ２１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ活性の阻
害を示す。ＩＣ５０を測定する方法は、下の「II−タイプ１，２，３及び５１
７β−ＨＳＤ及びタイプ１、３３α−ＨＳＤの酵素的分析」に記載してある。
高い数字のＩＣ５０が望ましい。空白は測定が行われなかったことを意味する。
３.１０^−７及び３.１０^−６Ｍでの阻害剤による酵素活性の阻害率を括弧内に示
す。

【０１０４】５欄に、酵素活性の５０％阻害（ＩＣ５０ in ｎＭ）を生じる濃度で表され
る、ヒト型タイプ３１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ活性の阻
害を示す。ＩＣ５０を測定する方法は、下の「II−タイプ１，２，３及び５１
７β−ＨＳＤ及びタイプ１、３３α−ＨＳＤの酵素的分析」に記載してある。
低い数字のＩＣ５０が望ましい。空白は測定が行われなかったことを意味する。
３.１０^−７及び３.１０^−６Ｍでの阻害剤による酵素活性の阻害率を括弧内に示
す。

【０１０５】６欄に、酵素活性の５０％阻害（ＩＣ５０ in ｎＭ）を生じる濃度で表され
る、ヒト型タイプ１３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ活性の阻害
を示す。ＩＣ５０を測定する方法は、下の「II−タイプ１，２，３及び５１７
β−ＨＳＤ及びタイプ１、３３α−ＨＳＤの酵素的分析」に記載してある。高
い数字のＩＣ５０が望ましい。空白は測定が行われなかったことを意味する。３
.１０^−７及び３.１０^−６Ｍでの阻害剤による酵素活性の阻害率を括弧内に示す
。

【０１０６】７欄に、酵素活性の５０％阻害（ＩＣ５０ in ｎＭ）を生じる濃度で表され
る、ヒト型タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ活性の阻
害を示す（中心値）。ＩＣ５０を測定する方法は、下の「II−タイプ１，２，３
及び５１７β−ＨＳＤ及びタイプ１、３３α−ＨＳＤの酵素的分析」に記載
してある。低い数字のＩＣ５０が望ましい。ＩＣ５０が測定されなかった場合、
３.１０^−７Ｍ（左の数値）及び３.１０^−６Ｍ（右の数値）での阻害率を括弧内
に示す。３.１０^−７及び３.１０^−６Ｍでの阻害剤による酵素活性の阻害率を括
弧内に示す。

【０１０７】８欄に、阻害剤の３.１０^−７Ｍ（左の数値）及び３.１０^−６Ｍ（右の数値）
の濃度でのシオノギ細胞の増殖の刺激率として示される、好ましいタイプ３３
α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤のアンドロゲン活性を示す。
刺激を測定する方法を「III−アンドロゲン／抗アンドロゲン活性」に記す。低
い数字が望ましい。ＮＤは測定が行われなかったことを意味する。

【０１０８】９欄に、シオノギ細胞のＤＨＴ誘導増殖の５０％阻害（ＩＣ５０ in ｎＭ）
を生じる濃度で表されるタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナー
ゼ阻害剤の抗アンドロゲン活性を示す（ブラケット付中心値）。また、３.１０
^−７Ｍ（左の数値）及び３.１０^−６Ｍ（右の数値）の濃度でのシオノギ細胞の
ＤＨＴ誘導増殖の阻害率も示す。阻害率を測定する方法を「III−アンドロゲン
／抗アンドロゲン活性」に記す。低い数値が望ましい。ＮＤは測定が行われなか
ったことを意味する。

【０１０９】１０欄に、阻害剤の３.１０^−７Ｍ（左の数値）及び３.１０^−６Ｍ（右の数値
）の濃度でのＺＲ−７５−１細胞の増殖の刺激率として示される、好ましいタイ
プ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤のエストロゲン活性
を示す。刺激を測定する方法を「IＶ−エストロゲン／抗エストロゲン活性」に
記す。低い数字が望ましい。ＮＤは測定が行われなかったことを意味する。

【０１１０】１１欄に、阻害剤の３.１０^−７Ｍ（左の数値）及び３.１０^−６Ｍ（右の数値
）の濃度でのＺＲ−７５−１細胞のＥ２誘導増殖の阻害率として表されるタイプ
３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤の抗エストロゲン活性
を示す。刺激を測定する方法を「IＶ−エストロゲン／抗エストロゲン活性」に
記す。低い数字が望ましい。ＮＤは測定が行われなかったことを意味する。

【０１１１】１２欄に、阻害剤の１０^−８Ｍ（１０^−７Ｍでの凝視値)(左の数値）及び１０^−６Ｍ（１０^−５Ｍでの凝視値)（右の数値）の濃度での[3H]Ｒ１８８１の結合
の阻害率として表されるアンドロゲン・レセプタへの結合を示す。阻害率を測定
する方法を「Ｖ−アンドロゲン・レセプタ（ＡＲ）アッセイ」に記す。低い数字
が望ましい。

【０１１２】１３欄に、阻害剤の１０^−８Ｍ（１０^−７Ｍでの凝視値)(左の数値）及び１０^−６Ｍ（１０^−５Ｍでの凝視値)（右の数値）の濃度での[3H]Ｒ５０２０の結合
の阻害率として表されるプロゲステロン・レセプタへの結合を示す。阻害率を測
定する方法を「ＶＩ−プロゲステロン・レセプタアッセイ」に記す。低い数字が
望ましい。

【０１１３】１４欄に、阻害剤の１０^−８Ｍ（１０^−７Ｍでの凝視値)(左の数値）及び１０^−６Ｍ（１０^−５Ｍでの凝視値)（右の数値）の濃度での[６，７−3H＊(Ｎ)]−
デキサメタゾンの結合の阻害率として表されるグルココルチコイド・レセプタへ
の結合を示す。阻害率を測定する方法を「ＶII−グルココルチコイド・レセプタ
アッセイ」に記す。

【０１１４】１５欄に、阻害剤の１０^−８Ｍ（１０^−７Ｍでの凝視値)(左の数値）及び１０^−６Ｍ（１０^−５Ｍでの凝視値)（右の数値）の濃度での[3H]Ｅ２の結合の阻害
率として表されるエストロゲン・レセプタへの結合を示す。阻害率を測定する方
法を「ＶIIＩ−エストロゲン・レセプタ（ＥＲ）アッセイ」に記す。

【０１１５】好ましい阻害剤の有効性Ｉ−ヒト型タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤のバ
イオアベイラビリティのインビボ・アッセイ１.雄のスプレーグ・ドーリー・ラットに化合物の単一経口投与後、化合物の
血漿濃度を測定して、タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ
阻害剤のバイオアベイラビリティのアッセイを行った。多様な時間間隔での測定
を１.０ ng/mL以上５０ ng/mL以下の値について行った。

【０１１６】ａ) 動物及び取扱い重さ２７５−３５０gの雄のスプレーグ・ドーリー・ラット[Crl:CD(SD)Br]を
チャールス・リバー・カナダ社から入手し、環境順応期間中は１ケージに２匹、
研究期間中は個別に入れた。動物は、１２時間を明るく１２時間を暗くする（午
前８時に点灯）規制下で飼育した。動物には認定ローデント飼料（ラボ・ダイエ
ット＃５００２，ペレット）及び水道水を任意に与えた。ラットは投薬前に夕方
から絶食（水だけに接近可能）させた。各被試験化合物を０.４％メチルセルロース懸濁液としてチューブによる経口
補給により３匹の動物に１回分０.５mg/rat（１.０ mg/rat）投与した。毎日４
〜８種の新規化合物を試験し、比較対照として動物の一群には投与日毎に同条件
で酢酸メゲストロール（ＭＧＡ）を与えた。補給１，２，３，４及び７時間後に
イソフルレン誘導麻酔下でラットの頚静脈から０.７ mlまでの血液サンプルを採
取した。血液サンプルは、直ちにＥＤＴＡを含む０.７５ml冷凍微小容器に移し
、氷ー水浴に保持し、その後３０００rpmで１０分間の遠心分離した。血漿分離
は、血液採取後、迅速に(５０分未満)行った。分取した血漿０.２５ mlをホウケ
イ酸ガラス管（１３×１００）に移し、ドライ・アイス上で急速冷凍した。血漿
サンプルは、ＬＣＭＳ／ＭＳによる阻害剤の血漿濃度の測定まで−８０℃に維持
した。

【０１１７】２.ＬＣＭＳ測定ａ）装置１.真空マニホールド２.ターボ・バップ・ＬＶ蒸発器３.マススペクトロメータＡＰＩ III又はＡＰＩ−３００（PE/Sciex）付
帯機器付４.自動噴射機５.ＨＰＬＣポンプ６.注入ポンプ７.目盛り付ピペットｂ）試薬及び溶液１.メタノール、ＨＰＬＣ級２.水、超純水（スーパーＱ）３.エタノール、試薬級４.塩化ブチル(Ｎ−)、ＨＰＬＣ級５.アセトン、ＨＰＬＣ級６.雄ラット血漿（ＥＤＴＡ）７.タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤、参照標
準エタノール溶液中薬１００μg/mL ８.ＥＭ２４８国際基準参照標準（５０ ng/mL溶液）９.質量キャリブレータ溶液ポリプロピレン・グリコール(PE/Sciex) ｃ）マススペクトロメータ条件検出器：マススペクトロメータAPI-300(PE/Sciex) 界面：ターボ・イオン・スプレー・インレット（スプリット1/5）補助流量：４.５Ｌ／分（窒素）ネブライザー流量：１１カーテンガス流量：１１プローブ温度：４６０℃ 圧力：約３×１０^−５ Torr ＣＡＤガス厚さ：３計数制御：１溶離液：１ mm 蟻酸アンモニウムを含むメタノールと１ mm 蟻酸アンモ
ニウムを含む水との濃度勾配流量：１mL/分ｄ）ＥＭ−１１１８のマススペクトロメータ分析パラメータ保圧時間：１５０ msec 休止時間：３０ msec 持続期間：４分ＭＲＭモードＥＭ−１１１８分析：４４４.２及び３９８.３インジェクｓジョン：１０ μＬ

【０１１８】ｅ）標準液の調製各タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤の貯蔵液
をメタノールで調製し、非使用時、メタノール液を−２０℃で保存した。各化合物についての校正曲線基準液を、表１に示すように雄ラット血漿で調製
した。ＥＭ−２４８を５０ ng/mL含むメタノールの内部標準液を、−２０℃で保存し
たＥＭ−２４８の貯蔵標準液から調製した。

【０１１９】

【表９】

【０１２０】ｆ）ラット血漿からのタイプ３阻害剤の抽出法ラット血漿の一定分量（０.２５０mL）をホウケイ酸ガラス管（１３×１００m
m）に移し、水（１.０ mL）と内部標準液（０.１ mL）を各サンプルに加えて２
分間旋回させた。塩化Ｎ−ブチルとアセトン（ｖ：ｖ，７：３）の混合物（３mL）を各サンプル
に加え、２分間旋回させた。この工程を繰り返し、複合有機相をターボ・バップ
蒸発器中、窒素雰囲気下、３５℃で蒸発乾燥させた。残留物を１mＬのメタノー
ルで再生し、ターボ・バップ蒸発器で乾燥させた。最終抽出物を０.１mLのメタ
ノール／水（ｖ：ｖ，７５：２５）で再生し、マススペクトロメータへの注入の
ため円錐バイアルに移した。

【０１２１】ｇ）アッセイアッセイ処理は、６種の異なるタイプ５阻害剤濃度（１，２，５，１０，２０，５０ μg/mL）で
投薬したラット血漿サンプルを繰り返し分析して行った。定量化の下限（ＬＯＱ
）は１.０ ng/mLに固定した。

【０１２２】ｈ）直線性ＥＭ−１１１８のアッセイ処理は、１.０〜５０ ng/mLの範囲で線形であるこ
とを見出した。加重（1/X）直線回帰分析により０.９９１の相関(ｒ2)が得られ
た。

【０１２３】ｉ）ＡＵＣ値の計算対象の全化合物につき、薬物投与後０〜７時間の範囲の血漿濃度−時間曲線（
ＡＵＣ）を測定した。線形トラペゾイド法（モデル非依存性）により各ラットに
ついてＡＵＣ_0-7値を計算した。データを平均ＡＵＣ_0-7±ＳＥＭ（ｎ＝３）とし
て示す。

【０１２４】 II タイプ１、２、３及び５１７β−ＨＳＤ並びに１及びタイプ３３α−Ｈ
ＳＤの酵素分析酵素ソースリン酸カルシウム法(Kingston et al., In: Current Protocols in
Molecular Biology. E.M. Ausbel, R. Brent, R.E. Kingston, D.D. Moore, J.
G. Seidman, J.A. Smith, K. Struhl. John Wiley & Sons編, New York, pp. 9.
1.1-9.1.9, 1991; Luu-The et al., J. Invest. Dermatol., 102: 221-226, 199
4)を用いて、タイプ１、２、及び３１７β−ＨＳＤ(Luu−The et al.、 J. St
eroid Biochem. Molec. Biol., 55: 581-587, 1995),タイプ５１７β−ＨＳＤ
(ＷＯ９７／１１１６２記載)、並びにタイプ１及び３３α−ＨＳＤ(Dufort
et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. 228: 474-479, 1996)をコードする発
現ベクターを、一過性的に形質移入された２９３個の細胞。細胞細画分を用いる
分析のため、細胞を、２０％グリセリン及び１ｍＡＥＤＴＡを含む５０ｍＡ
リン酸ナトリウム緩衝液(pH7.4)中で、超音波処理し、１００００ｘｇで３
０分間遠心分離し、そして１０００００ｘｇで１時間遠心分離し、ミトコン
ドリア及びミクロソームの画分を分離した。サイトゾル画分(100000 x ｇ上
清)を用いてタイプ１活性を測定する一方ミクロソーム画分(100000 ｘｇで
のペレット)を用いてタイプ２及び３１７β−ＨＳＤ活性を測定した。

【０１２５】培養酵素反応を３７℃で、１ｍｌの５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液(pH7.4
、２０％グリセリン、１ｍＭＥＤＴＡ、及び２ｍＭ補因子(NADPH 又は NAD⁺ )含有)中で０．１μＭ ^１４Ｃ標識基質の存在下で１時間行った。タイプ１
１７β−ＨＳＤ、ＤＨＥＡ及び４−アンドロステン−３,−１７−ジオン(△4)用
エストロン、タイプ３及び５１７β−ＨＳＤ用エストロン、タイプ２１７β
−ＨＳＤ用テストステロン、並びに本発明の好ましい阻害剤の増加する濃度の存
在又は不存在下でのタイプ１及び３３α−ＨＳＤ活性用アンドロスタンジオン
及びＤＨＴを、６ウェル培養プレート中の新たに換えた培地に加えた。

【０１２６】１時間培養後、ステロイドを２ｍｌのエーテルで２度抽出した。有機層を乾燥
するまでプールし蒸発させた。ステロイドを、５０μｌのジクロロメタン中で可
溶化し、シリカゲル６０薄層クロマトグラフィー(TLC)プレート(Merck, Darmsta
d, Germany)にかけ、トルエン−アセトン(４：１)溶媒系で泳動分子した。基質
及び代謝産物を基準ステロイドとの比較により同定し、オートラジオグラフィー
により示し、ＰｈｏｓｐｈｏｉｍａｇｅｒＳｙｓｔｅｍ(Molecular Dynamics,
Sunnyval, CA)を用い定量化した。形質移入はＨｅｌａ，ＳＷ−１３，２９３，
ＣＯＳ−１細胞を用いても行うことが出来る、好ましい細胞株は２９３細胞であ
る。

【０１２７】 III- シオノギ(Shionogi)活性好ましい化合物のなかには、そのアンドロゲン／抗アンドロゲン活性を、シオ
ノギマウス乳癌細胞を用いて測定されたものもある。

【０１２８】材料最小基本培地(MEM)、非必須アミノ酸、及びウシ胎児血清をＦｌｏｗＬａ
ｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。内因性ステロイドを除去するために、血清
を一晩４℃で１％活性炭(Norit A, Fisher)及び０．１％ Dextran T-70 (ファル
マシア)を用いて培養した。２−ｈ補充吸着を２５℃で行い、さらに蛋白質結合
ステロイドを除去した。血清をまた、５６℃での２０分間の培養により不活性化
した。５α−ジヒドロテストステロン(DHT)をＳｔｅｒａｌｏｉｄｓから入手し
た。抗アンドロゲンヒドロキシフルタミド(OH-FLU)は、Ｔ．Ｌ．Ｎａｇａｂｕ
ｓｃｈａｎとＲ．Ｎｅｒｉ博士(Schering Corporation, Kenilworth, U.S.A.)か
ら快く提供された。

【０１２９】細胞分散、培養及びクローニングアンドロゲン感受性乳腺腫瘍を有するシオノ
ギオスマウスをＫｅｉｓｈｉＭａｔｓｕｍｏｔｏ博士(Osaka, Japan)とＹｖｏ
ｎｎｅＬｅｆｅｂｖｒｅ博士(Ottawa, Canada)から入手した。初代培養のため
、腫瘍を切除し、氷冷無菌２５ｍＭヘペス(Hepes)緩衝液(137 mM NaCl; 5 mM
KCl; 0.7 mM Na₂HPO₄; 10mM グルコース, pH7.2)中で洗浄した。ハサミでみじん
切りにした後、腫瘍のみじん切りを、3.8 ｍｇ／ｍｌのコラゲナーゼ(Clostridi
um, Boehringer)、 1.5ｍｇ／ｍｌのヒアルノニダーゼＩＩ(Sigma)、及び３％ウ
シ血清アルブミン画分Ｖ(Schwartz-Mann)を含有するヘペス(Hepes)緩衝液中で２
時間３７℃で温浸した。分散した細胞を、遠心分離で集め(１０分間、５００ x
ｇ)、５％デクストランコートの木炭処理ウシ胎児血清(DCC-FCS)、１％非必須
アミノ酸、１０ＩＵ／ｍｌのペニシリン、５０μｇ／ｍｌストレプトマイシン、
及び１００ｎＭジヒドロテストステロン(DHT)(Steraloids)含有最小基本培地(
MEM)中の懸濁液で２度洗浄した。

【０１３０】細胞を、７５ｃｍ_２フラスコ中で、７５０００ｃｅｌｌｓ／ｍｌの密度で同
じ培地に、空気中５％二酸化炭素雰囲気下３７℃で、蒔いた。培地は毎週交換す
る。ステロイド及び抗ステロイドを、エタノールに溶かし、培地中０．０１％以
下の最終エタノール濃度になるよう選ばれた保存液に保管した。エタノールの該
濃度は、細胞の成長に影響しない。

【０１３１】細胞を、３ｍＭエチレンジアミン四酢酸(EDTA)(pH7.2)含有ヘペス緩衝液中
の０．１％のパンクレアチン(Flow Laboratories)の溶液中にやさしく温浸する
ことによりほぼ秘密裏に継代培養した。細胞を、遠心分離によりペレットにし、
培地に再懸濁し、Ｃｏｕｌｔｅｒｃｏｕｎｔｅｒ中で数を数え、上記のように
再び蒔いた。ソウトアジャークローニング(Soft agar cloning)を、１００ｎＭ
ＤＨＴ存在下で記載通り行った(Stanley et al., Cell 10: 35-44, 1977)。

【０１３２】細胞成長並びにステロイド及び抗ステロイド感受性の測定細胞を、２４ウェルプレートに２００００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの密度で蒔
いた。指示濃度が増加するを試薬を三つぞろいの皿に加え、細胞を、３−４日毎
に培地を交換しながら１０−１２日間成長させた。細胞数を、Ｃｏｕｌｔｅｒ
ｃｏｕｎｔｅｒ中で直接数えることにより測定した。

【０１３３】計算及び統計的分析ＤＨＴ及びグルココルチコイド作用のＥＤ_５０値を、記載
の最小２乗回帰により計算した(Rodbard, Endocrinology 94: 1427-1431, 1974)
。統計的有意性を、マルチプルレンジテスト(Multiple-range test)により計
算した(Kramer, Biometrics 12: 307-310, 1956)。

【０１３４】ＩＶ−エストロゲン／抗エストロゲン活性好ましい化合物のなかには、そのエストロゲン／抗エストロゲン活性を、下記
により詳細に記載の通りＺＲ−７１−１ヒト乳癌細胞株を用いて測定されたもの
もある。

【０１３５】保存培養の維持ＺＲ−７５−１細胞(８３継代目)を、アメリカンタイプカ
ルチャーコレクション(Rockville, MD)から入手し、日常的に１ｎＭエスト
ラジオール (E₂)、２ｍＭＬグルタミン、１ｍＭピルビン酸ナトリウム(s
odium pyruvate)、１５ｍＭＮ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−
２−エタンスルホン酸、１００ＩＵペニシリン／ｍｌ、１００μｇストレ
プトマイシン／ｍｌ、及び１０％(v/v) ウシ胎児血清(Hyclone, Logan, UT)を
補充したフェノールレッドを含まないＰＲＭＩ１６４０中で９５％空気、５％
二酸化炭素の加湿雰囲気下３７℃で培養した。全ての培地及び培地補充物をシグ
マから購入した。細胞を、ＥＤＴＡ(0.2g/l)含有脾臓液で処理して毎週継代培養
した。本明細書記載の実験に用いられた細胞培養は、８９と９４継代の間であっ
た。

【０１３６】細胞増殖の測定対数増殖期の細胞を、収集し、暫時遠心分離し、ＲＰＭＩ１
６４０に再び懸濁した。細胞をその後、ＬＩＭＢＲＯ２４-ウェルプラスチ
ック培養プレート(２ｃｍ^２/ｗｅｌｌ)に３通りに蒔いた。蒔く密度は、ＺＲ−
７５−１細胞成長へのホルモンの効果に影響するので、細胞を、１ｘ１０４
ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの密度で蒔いた。７２時間後、培地を０．１Ｍエスト
ラジオル(E₂)の存在下又は不存在下で３．１０^−７及び１０^−６の濃度での阻害
剤を含有する新しい培地と取り替えた。対照培養物には、エタノール溶媒のみを
与えた。細胞をその後、２日毎に(同一組成の)培地を変えながら、３７℃で１０
日間成長させた。阻害剤の不存在下、０．１Ｍエストラジオル(E₂)含有培地で
は、ＺＲ−７５−１細胞の倍加時間は、約４８時間である。

【０１３７】Ｅ_２及び/又は抗エストロゲン処理後、０．５ｍｌのパンクレアチン液(シグマ
)を５−１０分間３７℃で加え、０．５ｍｌの５％デクストランコートの木炭を
含まないウシ血清含有ＲＰＭＩ１６４０を加えて、細胞を採取し、酵素作用を
妨害した。細胞数(0.10 ml アリコート)を、以前に記載のＤＮＡ含有量の測定に
より測定した(Simard et al., Endocrinology 126: 3223-3231, 1990)。

【０１３８】Ｖ− アンドロゲン受容体(AR)分析組織調製体重２００−３００ｇのオススプレーグ−ドーリーラット(M
ale Sprague-Dawley rats)(Crl:CD(SD)Br)をＣｈａｒｌｅｓ−ＲｉｖｅｒＩｎ
ｃ．(St-Constant, Quebec, Canada)から入手した。ラットを、全身麻酔下(Isof
lurane)去勢し、２４時間後頚部脱臼により殺した。腹側前立腺を速やかに取り
除き、付着する組織から切り裂き、ドライアイス上で凍らせた。前立腺を分析ま
で−８０℃で保存した。

【０１３９】その後の全ての段階は、０−４℃で行った。前立腺を、５本１組１０秒の３期
で、冷却のため１０秒間隔でＰｏｌｙｔｒｏｎＰＴ−１０ｈｏｍｏｇｅｎｉ
ｚｅｒ(Brinkman Instruments, Canada)を用いて、５ｖｏｌ(wt/vol)の緩衝液Ａ
(25 mM Tris-HCl, 1.5 mM EDTA 二ナトリウム塩 10 mM α-モノシオグリセリン,
10％グリセリン、及び１０ｍＭモリブデン酸ナトリウム、ｐＨ７．４)中で
、均質化した。ホモジェネートをその後、ＢｅｃｋｍａｎＬ５−６５ｕｎｔ
ｒａｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ(Fullerton, CA)中６０分間１０５．０００ｘｇ
で遠心分離した。サイトゾル画分の蛋白質濃度を、ウシ血清アルブミンを基準と
して用い、ブラッドフォード法により測定した(Anal. Biochem. 72: 248-254, 1
976)。

【０１４０】アンドロゲン受容体分析アンドロゲン結合を、ｈｙｄｒｏｘｙｌａｐａｔｉｔ
ｅａｓｓａｙ(HAP)を用いて測定した。要するに、エタノールに可溶化した放
射性ステロイド[³H]Ｒ１８８１を緩衝液Ａに希釈した。前立腺サイトゾル調製物
(0.1 ml)のアリコートをその後、指示濃度の非標識化合物(0.1 ml, 10% エタノ
ール含有緩衝液Ａで調製)の存在下又は不存在下、８ｎＭ [³Ｈ]Ｒ１８８１(0.1
ml, -200,000 cpm)で１６−１８時間０−４℃で培養した。トリアムシノロン
アセトナイド(Triamcinolone acetonide)(150 nM)を、プロゲステロン受容体を
遮蔽するために加えた。非結合ステロイドを、以下のように緩衝液Ｐ(50mM, Tri
s-HCL, 10mM KH₂PO₄, pH7.4)で調製した０．３ｍｌＨＡＰで０−４℃での４０
分間の培養で分離した。１０ｇのＨＡＰを緩衝液Ｐで上清がｐＨ７．４になるま
で洗浄し、その後、上清の遠心分離及びデカンテーションを行い、３７．５ｍｌ
の緩衝液Ｐを加えた。ＨＡＰでの培養及び１０分間の１、０００ｘｇでの遠
心分離後、ペレットを１ｍｌの緩衝液Ｐで３回洗浄した。その後、放射能を、１
ｍｌのＥｔＯＨで６０分間の室温での培養によりペレットから抽出した。遠心分
離後、上清を、閃光放射バイアルにデカントし、ペレットを、エタノールで再抽
出した。その後、１０ｍｌのフォーミュラ−９８９放射閃光液を、プールされた
上清に加え、放射能をＢｅｃｋｍａｎｃｏｕｎｔｅｒで測定した。

【０１４１】計算結果を、阻害剤の１０^−８及び１０^−６Ｍの濃度での[^３Ｈ]Ｒ１８８１の
結合阻害の割合として報告した。

【０１４２】ＶＩ−プロゲステロン受容体分析化学品 [17α-メチル-^３Ｈ]−プロゲステロン(R5020)(84 Ci/mmol)及び対応非
標識化合物を、ニューイングランドニュークリアー(Lachine, Quebec, Canada)
から購入した。全ての化学品は、分析グレードのものである。

【０１４３】非標識ステロイドの保存液を、エタノール中に４℃で保存した。目的のステロ
イド液をその後、３０％エタノール含有緩衝液Ｂ(10mM Tris-HCl, 1.5 mM EDT
A, 10 mM α−モノチオグリセリン, pH7.4)中での適切な希釈により調製した。

【０１４４】組織標本：体重200〜300ｇの雌のSprague-DawleyラットをCharles−River Inc
.(St−Constant, Quebec, Canada)より入手した。一般的な麻酔（イソフルラ
ン）下に生殖腺摘出がされ、24時間後に頚部脱臼により殺された。直ちに子宮が
摘出され、付着する組織が切り離され、ドライアイス上で凍結された。組織は使
用時まで-80℃で保存された。

【０１４５】サイトゾル作成：全ての操作は4℃で実行された。組織はThermovac粉砕機を用
いて、ドライアイスによる凍結下に粉末化された。試料は10倍量(w/v)の緩衝液
Ａ（トリス塩酸塩 25mM、EDTA 1.5mM、α-モノチオグリセロール 10mM、10％
グリセロール、モリブデン酸ナトリウム 10mM、ｐH 7.4）中でPolytron PT-10
ホモジナイザ(Brinkmann Instruments, Canada)を使用して、10秒間の冷却期間
を挿んだ10秒間ずつの2回の操作を5回セットして均質化された。ホモジネートは
105,000 x ｇで90分遠心分離された。上澄液を直ちに分析に使用した。

【０１４６】結合分析：プロゲステロン結合は、デキストラン被覆活性炭への吸着法で測定
された。サイトゾル100μｌ、［³Ｈ］-Ｒ5020（最終５nM、グルココルチコイド
受容体をマスクするための1000ｎMのデキサメタゾンを含む）100μｌ、及び指示
された濃度のラベルされていない化合物100μｌのインキュベーションが0-4℃で
16-18時間行われた。それぞれの濃度について3回ずつ実施された。分析は300μ
ｌのDCC（緩衝液Ｂ中のNorit A 1％、デキストランT-70 0.1％）で終了させ
た。10分間インキュベーションした後、試験管は2000 x gで10分間遠心分離にか
けられた。上澄液は6mlのBCSシンチレーション液（New England Nucleaer, Dupo
nt）を入れたバイアル中に傾写された。放射活性はBeckman計数器を用いて計数
効率35％で測定された。

【０１４７】計算：結果は、１０^-8および１０^-6Mの阻害剤濃度における[³Ｈ]Ｒ5020の結合
阻害パーセントとして報告された。

【０１４８】ＶＩＩ-グルココルチコイド受容体分析試薬： [6,7-³Ｈ(Ｎ)]-デキサメタゾン（39 Ci/mmol）はNew England Nuclea
r (Lachine, Quebec, Canada)より購入した。ラベルされていないデキサメタゾ
ンはSteraloids (Wilton, NH)から入手した。そのたの全ての試薬は試薬品質で
ある。

【０１４９】ラベルされていないステロイドの溶液は、エタノール中で４℃で保存された。
希望するステロイド溶液は、30％エタノールを含む緩衝液Ｂ（トリス塩酸塩 10
mM、ＥＤＴＡ 1.5mM、α−モノチオグリセロール 10mM、ｐH 7.4）で適当に
希釈することによって作られた。

【０１５０】組織標本：体重200〜300ｇの雄のSprague-DawleyラットをCharles−River Inc
.(St−Constant, Quebec, Canada)より入手した。ラットは頚部脱臼により殺
され、直ちに肝臓が摘出され、付着する組織が切り離され、ドライアイス上で凍
結された。組織は使用時まで-80℃で保存された。

【０１５１】サイトゾル作成：全ての操作は4℃で実行された。組織は粉砕され、10倍量(w/
v)の緩衝液Ａ（トリス塩酸塩 25mM、EDTA 1.5mM、α-モノチオグリセロール
10mM、10％グリセロール、モリブデン酸ナトリウム 10mM、ｐH 7.4）中でPoly
tron PT-10ホモジナイザ（Brinkmann Instruments, Canada）を使用して、10秒
間の冷却期間を挿んだ10秒間ずつの2回の操作を5回セットして均質化された。ホ
モジネートは105,000 x ｇで90分遠心分離された。上澄液を直ちに分析に使用し
た。

【０１５２】結合分析：グルココルチコイド結合は、デキストラン被覆活性炭への吸着法で
測定された。サイトゾル100μｌ、［³Ｈ］-デキサメタゾン（最終５nM）100μｌ
、及び指示された濃度のラベルされていない化合物100μｌのインキュベーショ
ンが0-4℃で16-18時間行われた。それぞれの濃度について3回ずつ実施された。
分析は300μｌのDCC（緩衝液Ｂ中のNorit A 1％、デキストランT-70 0.1％）
で終了させた。10分間インキュベーションした後、試験管は2000 x gで10分間遠
心分離にかけられた。上澄液は6mlのBCSシンチレーション液（New England Nucl
eaer, Dupont）を入れたバイアル中に傾写された。放射活性はBeckman計数器を
用いて計数効率35％で測定された。

【０１５３】計算：結果は、１０^-8および１０^-6Mの阻害剤濃度における[³Ｈ]-デキサメタ
ゾンの結合阻害パーセントとして報告された。

【０１５４】ＶＩＩＩ-エストロゲン受容体（ＥＲ）分析組織標本：体重200〜300ｇの雌のSprague-Dawleyラット（Crl: CD(SD)Br）をC
harles−River Inc.(St−Constant, Quebec, Canada)より入手した。一般的な
麻酔（イソフルラン）下に生殖腺摘出がされ、24時間後に頚部脱臼により殺され
た。直ちに子宮が摘出され、付着する組織が切り離され、ドライアイス上で凍結
された。子宮は使用時まで-80℃で保存された。

【０１５５】全ての継続するステップは0-4℃で実行された。子宮は均質化され、10倍量(w/
v)の緩衝液Ａ（トリス塩酸塩 25mM、EDTAジナトリウム塩 1.5mM、α-モノチオ
グリセロール 10mM、10％グリセロール、モリブデン酸ナトリウム 10mM、ｐH 7.4）中でPolytron PT-10ホモジナイザ（Brinkmann Instruments, Canada）を
使用して、10秒間の冷却期間を挿んだ10秒間ずつの3回の操作を5回セットして均
質化された。ホモジネートはBeckman L5-65超遠心機（Fullerton, CA）により10
5,000 x ｇで60分遠心分離された。サイトゾルフラクションの蛋白質濃度は、
Bradfordの方法（Anal. Biochem. 72: 248-254, 1976）に従って、牛血清アルブ
ミンを標準として測定された。

【０１５６】エストロゲン結合は、デキストラン被覆活性炭への吸着法（Asselin et al.,
Endocrinology, 101: 666-671, 1977; Asselin and Labrie, J. Steroid Bioche
m., 9: 1079-1082, 1978）で測定された。手短に言えば、[³Ｈ]Ｅ2をエタノール
に溶解し、緩衝液Ａで希釈する。子宮サイトゾル試料の一定量（0.1ml）が、［³ Ｈ］Ｅ2（〜200,000 cpm, 0.1ml）５nMとともに、指示された濃度のラベルされ
ていない化合物（0.1ml, 10％エタノール含有緩衝液Ａにより作成）の存在下又
は非存在下で、室温３時間インキュベーションされた。非結合のステロイドは、
緩衝液Ｂ（トリス塩酸塩 10mM、ＥＤＴＡジナトリウム塩 1.5mM、モノチオグ
リセロール 10mM、ｐH 7.4）中の0.5％ Norit A、0.05％デキストランT-70の
0.3mlとともに0-4℃で15分間インキュベーションして分離され、3000 x gで15分
間遠心分離にかけられた。上澄液の一定量（0.3ml）が放射活性の測定のために
分離された。10mlのFormula-989シンチレーション液（New England Nucleaer, D
upont）を加えた後、放射活性がBeckman計数器を用いて計数効率62％で測定され
た。

【０１５７】計算：結果は、１０^-8および１０^-6Mの阻害剤濃度におけるＥ2の結合阻害パー
セントとして報告された。

【０１５８】好ましい阻害剤を選択する第一の基準としては、バイオアベイラビリティ、タ
イプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ及びタイプ５ 17β−
ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼに対する望ましい阻害、タイプ２ 17
β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼに対する望ましくない阻害の程度
、及びアンドロゲン活性がある。ＥＭ 01645、ＥＭ 01667及び類似化合物におけ
る５’位のメチル基は、（望ましくないタイプ２阻害に対して）タイプ５ 17β
-ＨＳＤ阻害を選択的に促進すると信じられている。３位の遊離ヒドロキシ基は
、２位の置換基と同様に有利な効果を有するとも信じられている。

【０１５９】出願人は、広範囲の化合物のタイプ３３α-ＨＳＤ阻害剤としての有効性に
ついて試験した。この実験に基づいて、ここで論じられている分子構造のある種
の特徴が、この発明のステロイド化合物に好ましい性質を付与すると信じられる
。たとえば、芳香性のＡ環及びヒドロキシ又はin vivoでヒドロキシ基に変わり
うる一般的プロドラッグ基である３位の部分は、２位又は４位の適当な置換基と
一緒になってタイプ３３α-ＨＳＤの阻害に貢献する好ましい特徴であると信
じられる。２位及び／又は４位の置換基は好ましくはそれぞれ独立に、水素、シ
アノ、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びニトロ基から選ばれる（ただし、２位お
よび４位の基が同時に水素であってはならない）。２位において有効な基は４位
においても有効である傾向があり、逆の場合も同様である。２位と４位に同一の
基を置くことは、製造法としての意味からは容易であろう。このようなタイプの
化合物は試験した限りにおいてタイプ３３α-ＨＳＤの良い阻害剤である傾向
が見られた。

【０１６０】３α-ＨＳＤのタイプ３阻害剤は、ステロイド骨格の１６位又は17位について
記載されているような基がＤ環に付与されると、より優れた選択性を有すること
を出願人は発見した。「選択性」という言葉は次のことを意味している。これら
の好ましいＤ環置換基、特に１７位におかれる基は、この発明の阻害剤と、たと
えば、阻害されることが望ましくない酵素及び活性化されることが望ましくない
受容体との間の望ましくない相互作用を低下させる傾向がある。試験されたある
種のパラメーター（望ましいもの及び望ましくないものの両方）は表の番号の後
ろにプライム（’）を付与することによって示されている。（表の後の詳細な説
明を参照すること）。これらの表から判るように、この発明の好ましい化合物は
、３α-ＨＳＤのタイプ３活性を効果的に阻害し、一方出願人が同一化合物につ
いて試験した多くの望ましくない活性を実質的に無効にする。たとえば、Ｄ環の
適当な置換基は望ましくないアンドロゲン又はエストロゲン活性を減少させる傾
向がある。１７−スピロ−ラクトン及び１７α-ベンジル基は、３α-ＨＳＤのタ
イプ３に対してよい選択性を与えることが発見された。ここで論じられたタイプ
３３α-ＨＳＤ化合物の全てが特許請求されているわけではない。その理由は
、これらの化合物のうちあるものはタイプ５１７β-ＨＳＤに対しても良い活
性を有し、出願人は別の特許出願においてこの別の活性について特許請求してい
るからである。

【０１６１】タイプ３３α-ＨＳＤによる４−アンドロステンジオン（４−ジオン）のテス
トステロン（Ｔ）への変換の”in vitro”阻害タイプ３３α-ＨＳＤの阻害は、上述の”ＩＩ１、２、３及びタイプ５
１７β−ＨＳＤ及び１及びタイプ３３α-ＨＳＤに対する酵素的分析”で記載
したように、また表１及び２の欄２に報告されているように、ＤＨＴのアンドロ
スタン-３α，１７β-ジオールへの変換の阻害により予備的に決定された。このデータを完全にするために、表３及び４において、タイプ３３α-ＨＳＤ
による４−アンドロステンジオン（４−ジオン）のテストステロン（Ｔ）への変
換の、いくつかの好ましい阻害剤による阻害が報告されている。

【０１６２】タイプ３３α-ＨＳＤによる４−アンドロステンジオン（４−ジオン）のテス
トステロン（Ｔ）への変換の酵素的分析

【０１６３】酵素の起源：Ｅ．coliによって発現された、精製されたヒトタイプ３３α-ＨＳＤヒトタイプ３３α-ＨＳＤのコード領域がＰＣＲ法により増幅され、グルタチ
オン-Ｓ-トランスフェラーゼとの融合蛋白質を製造するために、ｐＧＥＸ-1λＴ
ベクター（Amersham Pharmacia Biotech, Inc., Quebec, Canada）に挿入された
。Ｅ．coliによるヒトタイプ３３α-ＨＳＤの発現、グルタチオン-Sepharose
4B 親和性カラム（Amersham Pharmacia Biotech）上での蛋白質の精製、及びト
ロンビンによる融合蛋白質の開裂が生産者により記載された方法で実行された。

【０１６４】インキュベーション：リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ 7.5） 50mM、20％グリセロール、ＥＤＴＡ 1mM、[¹⁴Ｃ]-ラベル化ステロイド 0.1μM、及びＮＡＤＰＨ 1mMからなる最
終容量１mlの溶液中で精製酵素がインキュベートされた。２時間のインキュベー
ションの後、ステロイドがエーテル１mlで２回抽出された。有機層がプールされ
、蒸発乾固された。このステロイドをジクロルメタン50μlに溶解し、分離の前
にトルエン−アセトン（4：1）溶媒系中の移動により、シリカゲル60 ＴＬＣプ
レート（Merck, Darmstad, Germany）の上に適用された。基質および代謝物はそ
れらの標準ステロイドとの比較により同定され、オートラジオグラフィーで現像
され、Phosphoimager System （Molecular Dynamics, Sunnyval, CA）を用いて
定量された。

【０１６５】

【表１０】

【０１６６】

【表１１】

【表１２】

【０１６７】上記表の化合物のうち、最も好ましいもの及びその分子構造が以下に示される
。

【０１６８】

【化３４】

【化３５】

【０１６９】好ましい阻害剤の合成例ＩＲスペクトルは、Perkin-Elmer 1600シリーズ FT-IR分光機によって得られ
た。プロトンＮＭＲスペクトルは、Brucker AC-F 300測定機により記録された。
次のような省略記号が用いられる：ｓ、シングレット；ｄ、ダブレット；
ｄｄ、ダブレットのダブレット、ｔ、トリプレット；ｑ、クアドルプレット；
及びｍ、マルチプレット。ケミカルシフト（δ）はクロロフォルム（¹Ｈに
ついては7.26ppm、¹³Ｃについては77.00ppm）を標準とし、ppmで表示した。旋光
度は、Jasco DIP 360分光計により室温で測定した。マススペクトル（ＭＳ）は
、V. G. Micromass 16F装置により得られた。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ
）は、0.25mm Kieselgel 60F254プレート（E. Merck, Darmstad, FRG）を用い
て実行された。フラッシュクロマトグラフィーには、Merck-Kieselgel 60 (230-
400メッシュ A.S.T.M.)が用いられた。特に記載されている場合を除いて、原料
及び試剤は市販品を用い、そのまま使用するか、常法により精製して使用した。
全ての溶媒と反応試剤は精製、乾燥し、アルゴンの存在下に貯蔵された。無水反
応は、不活性な雰囲気の下で実行され、装置の組み立てと冷却はアルゴンの存在
下に行われた。有機溶液は、硫酸マグネシウムの上で乾燥され、ロータリーエバ
ポレーターを用いて、減圧下に蒸発濃縮された。原料と反応試剤は、Aldrich Ch
emical Company, Inc. (Milwaukee, Wisconsin)から得られる。

【０１７０】省略記号のリストＤＨＰ３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピランＥＤＴＡエチレンジアミンテトラ酢酸ＨＰＬＣ高圧液体クロマトグラフィーＰＴＳＡｐ-トルエンスルホン酸ＴＨＦテトラヒドロフランＴＨＰテトラヒドロピラニルＴＭＳテトラメチルシリル

【０１７１】実施例１２−ニトロ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１７−スピロ−δ−ラク
トン誘導体の合成これらの合成は工程図 1 に示される。

【０１７２】

【化３６】

【０１７３】実施例１Ａ３−ヒドロキシ−２−ニトロ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１７−
オン（２ａ）表題の化合物は、Stubenrauch及びKnuppenにより記載された、下記のような方
法で製造される。エストロン（１、18.004ｇ、66.6mmol）が沸騰する酢酸(540ml)に溶解され、5
0℃まで冷却される。70％硝酸(4.5mL、70mmol)、水（10ｍL）及び少量の亜硝酸
ナトリウムの結晶のニトロ化混合物が作られ、50℃まで加温され、攪拌下にエス
トロン溶液に一滴ずつ加えられる。一夜室温で攪拌した後、黄色沈殿が吸引濾過
される。この沈殿が92%水性酢酸から再結晶される。４−ニトロ誘導体（6.800ｇ
、32％）が淡黄色固体として得られる。

【０１７４】

【化３７】

【０１７５】上記反応濾液は減圧下に蒸発濃縮され、残渣がＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ 8.5：1.5か
ら再結晶される。褐色固体（7.854ｇ）が得られ、ＳｉＯ₂カラム上のフラッシュ
クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、グラジエント8-20％）により更に
精製されて化合物２ａ（6.284ｇ、30％）が黄色固体として得られる。

【０１７６】

【化３８】

【０１７７】実施例１Ｂ３−（ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシリロキシ）−２−ニトロ−１，３，５（１０
）−エストラトリエン−１７−オン（２ｂ）２−ニトロ−エストロン（２ａ、1.118ｇ、3.55mmol）、イミダゾール（0.670
ｇ、9.84mmol）およびＴＢＤＭＳＣｌ（0.781ｇ、5.18mmol）の乾燥ＤＭＦ(50ml
)溶液をＡｒ（ｇ）存在下に一夜攪拌した。混合物を氷／水(80mL)の上に注いだ
。白色沈殿物を濾過し、水洗し、真空下に乾燥して（２ｂ）を黄色っぽい粉末と
して得た。(1.447g、95%)

【０１７８】

【化３９】

【０１７９】実施例１Ｃ３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリロキシ）−１７β−ヒドロキシ−２−ニト
ロ−１７α−（４’-（２”-テトラヒドロ−２”Ｈ−ピラニルオキシ）−ブチニ
ル）−１，３，５（１０）−エストラトリエン（３）テトラヒドロ−２−（ブチニルオキシ）−２Ｈ−ピラン(1.71mL、10.91mmole)
の乾燥ＤＭＦ(75mL)溶液をＡｒ（ｇ）存在下に−３５℃で攪拌しながら、この溶
液に（エーテル7.80mL中ＭｅＬｉ 1.4Ｍ、10.92mmole）を一滴ずつ加える。こ
の溶液を45分攪拌した後、−３５℃でケトン２ｂ（1.294ｇ、3.01mmole）の乾燥
ＴＨＦ(20mL)溶液を加える。75分後に、この反応混合液に氷（20ｇ）及び飽和水
性ＮａＨＣＯ₃(70mL)を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。集めた有機層を塩
水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮する。粗製黄色油を
ＳｉＯ₂（40ｇ、２：８ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して黄色泡状物質として
化合物３を得た。(1.617g、92%)

【０１８０】

【化４０】

【０１８１】実施例１Ｄ３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１７β−ヒドロキシ−２−ニ
トロ−１７α−（４’−（２”−テトラヒドロ−２”Ｈ−ピラニルオキシ）−ブ
チル）−１，３，５（１０）−エストラトリエン（４）化合物３（2.00ｇ、3.42mmol）及び5％Ｐｄ／ＣａＣＯ₃（400ｍｇ）の乾燥Ｍ
ｅＯＨ(400mL)溶液をＨ_２（ｇ）雰囲気（バルーン）下に１時間攪拌する。混合
物をセライトを通して濾過し、濾液をロータリーエバポレーターで蒸発濃縮する
。残渣をシリカゲル（２：８ＥｔＯＡｃ/ヘキサン）上で精製すると化合物４
を白色泡状固体（1.483ｇ、74％）として得る。

【０１８２】

【化４１】

【０１８３】実施例１Ｅ１７α−（４’−ヒドロキシブチル）−３，１７β−ジヒドロキシ−２−ニトロ
−１，３，５（１０）−エストラトリエン（５）化合物４（300ｍｇ、0.510mmol）の5％ＨＣｌ含有ＭｅＯＨ(10mL)溶液をアル
ゴン雰囲気下で１２時間、室温で攪拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ_３／氷の中
に注ぎ、ＭｅＯＨを減圧下に蒸発させた。水層をＥｔＯＡｃで抽出し、集めた有
機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄上で乾燥し、濾過し、蒸発乾固する。粗製の黄
色泡状物質（198ｍｇ、100％）が得られる。フラッシュクロマトグラフィー(カ
ラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を充填し、ＥｔＯＡｃ/ＣＨ₂Ｃｌ₂ ２：８；４：６；１
：１；６：４；９：１で溶出)による精製で化合物８２が黄色固体（127.0ｍ
ｇ、64％）として得られる。

【０１８４】

【化４２】

【０１８５】実施例１Ｆ２−ニトロ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−３−オール−１７（Ｒ）
−スピロ−２’−（６’−オキソ）テトラヒドロピラン（ＥＭ−１１２４）化合物５（128ｍｇ、0.33mmole）の乾燥アセトン(25mL)溶液を０℃で攪拌しな
がら、Jones’試薬（1.25M、0.29mL、0.80mmol）の最初の1：1当量を徐々に加え
る。オレンジ色の溶液を0.5時間攪拌し、２番目の当量を加える。暗色溶液を更
に0.5時間攪拌し、イソプロパノールで反応を停止する（緑色沈殿形成）。混合
物を１０分間攪拌する。セライトを通して濾過し、濾液をロータリーエバポレー
ターで蒸発濃縮する。残渣をＥｔＯＡｃに移し、水性飽和ＮａＨＣＯ₃、水、塩
水の順に洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）する。濾過し、ロータリーエバポレーター
で蒸発濃縮する。粗製の固体をＳｉＯ₂（３：７ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）上の
フラッシュクロマトグラフィーで精製してＥＭ−１１２４（108ｍｇ、85％）が
黄色固体として得られる。

【０１８６】

【化４３】

【０１８７】実施例１Ｇ２−ニトロ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−３−オール−１７（Ｒ）
−スピロ−２’−（５’−メチル−６’−オキソ）テトラヒドロフラン（ＥＭ
−１１２６、ＥＭ−１１３１）ＬＤＡが次のようにして作られる：ジイソプロピルアミン（92μL、71ｍｇ、0.70mmol）の乾燥ＴＨＦ（5ｍL）溶
液を−７８℃でＡｒ（ｇ）の存在下で攪拌し、この溶液にｎ−ＢｕＬｉ（１．２
Ｍ／ヘキサン、580μL、0.68mmol）を加える。溶液は０℃で２５分攪拌する。次
いで−７８℃に冷却する。ＥＭ−１１２４（66ｍｇ、0.17mmol）の乾燥ＴＨＦ（
5ｍL）溶液を加え、得られる暗オレンジ色溶液を30分攪拌する。乾燥ＨＭＰＡ（
2ｍL）を加え、15分後にＭｅＩ（107μL、243ｍｇ、1.71mmol）を加える。溶液
を更に4時間攪拌する。水性飽和ＮＨ_４Ｃｌで反応を停止させ、ＥｔＯＡｃで抽
出する。有機層を1Ｍ水性ＣｕＳＯ₄（4Ｘ）、水、水性1ＭＮａ₂ＳＯ₃、塩水で
洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、ロータリーエバポレーターで蒸発濃縮
すると粗製固体（103ｍｇ）を得る。ＳｉＯ₂（１：９ −＞２：８ＥｔＯＡ
ｃ/ヘキサン）上のフラッシュクロマトグラフィーで精製すると最初にＥＭ−１
１２６（11ｍｇ、１６％）が、続いてＥＭ−１１３１（34ｍｇ、34％）が両方と
も黄色固体として得られる。

【０１８８】

【化４４】

【０１８９】

【化４５】

【０１９０】実施例１Ｈ２−ニトロ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−３−オール−１７（Ｒ）
−スピロ−２’−（５’，５’−ジメチル−６’−オキソ）テトラヒドロピラン
（ＥＭ−１１２５）ＬＤＡが次のようにして作られる：ジイソプロピルアミン（206μL、159ｍｇ、1.57mmol）の乾燥ＴＨＦ（12ｍL）
溶液を−７８℃でＡｒ（ｇ）の存在下で攪拌し、この溶液にｎ−ＢｕＬｉ（１．
２Ｍ／ヘキサン、1.28ｍL、1.53mmol）を加える。溶液は０℃で２０分攪拌する
。次いで−７８℃に冷却する。ＥＭ−１１２６とＥＭ−１１３１の混合物（153
ｍｇ、0.38mmol）の乾燥ＴＨＦ（10ｍL）溶液を加え、得られる暗オレンジ色溶
液を20分攪拌する。乾燥ＨＭＰＡ（4.7ｍL）を加え、15分後にＭｅＩ（238μL、
544ｍｇ、3.83mmol）を加える。溶液を更に5分攪拌し、−３０℃まで加温し、更
に1時間攪拌する。水性飽和ＮＨ_４Ｃｌで反応を停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出す
る。有機層を塩水（6Ｘ）、水性1ＭＮａ₂ＳＯ₃、塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳ
Ｏ_４）し、濾過し、ロータリーエバポレーターで蒸発濃縮すると粗製液体を得る
。ＳｉＯ₂（１：９ −＞２：８ＥｔＯＡｃ/ヘキサン）上のフラッシュクロ
マトグラフィーで精製するとＥＭ−１１２５（82ｍｇ、52％）が黄色固体として
得られる。

【０１９１】

【化４６】

【０１９２】実施例２２−シアノ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−３０’−１７（Ｒ）−ス
ピロ−２’−（５’，５’−ジメチル−６’−オキソ）テトラヒドロピラン（
１３）

【０１９３】

【化４７】

【０１９４】３−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン
−１７−オン（７）このエーテルは、エストロン（６）からPelletier et al.,(Steroids 59: 536-5
47, 1994)の記載方法に従って製造される。

【０１９５】３−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−１７β−ヒドロキシ−１７α−｛４’−
（２”−テトラヒドロ−２”Ｈ−ピラニル）ブチン−１’−イル｝−１，３，５
（１０）−エストラトリエン（８）３−ブチニルオキシテトラヒドロピラン(18.3mL、117mmol)の乾燥ＴＨＦ(600mL)
溶液に０℃で、ｎ−ブチルリチウム（43.7mL、109mmmol）を一滴ずつ加える。混
合物を90分攪拌する。混合物を−７８℃に冷却し、ＴＢＤＭＳ−エストロン７
（15ｇ、39mmol）のＴＨＦ(500mL)溶液を一滴ずつ加える。次いで、反応混合物
を室温に戻し、１５時間攪拌を続ける。半量になるまで溶媒を蒸発し、水200ｍ
Ｌを加える。混合物をＥｔＯＡｃ(3x200mL)で抽出し、有機層を塩水で洗浄し、
乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、蒸発乾固する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィーでヘキサン／ＥｔＯＡｃ（９／１）を展開相として精製し、生成物15.1ｇ（
72％）を得る。

【０１９６】

【化４８】

【０１９７】３−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−１７β−ヒドロキシ−１７α-｛４’−
（２”−テトラヒドロ−２”Ｈ−ピラニル）ブタン−１’−イル｝−１，３，５
（１０）−エストラトリエン（９）活性炭上の5％パラジウム（1.5ｇ、10％ｗｔ）をアルキン８（15.1ｇ、28mmol）
のＥｔＯＡｃ(500ml)溶液に室温で加えた。フラスコにＨ₂を3回パージする（真
空にした後Ｈ₂を導入）、続いて１気圧のＨ₂の存在下で攪拌を続ける。反応はＴ
ＬＣで確認する。３時間後に、混合物をセライトのプラグの上で濾過し、溶媒を
減圧下に除去する。粗製の生成物を精製せずにそのまま次の工程に使用する。

【０１９８】

【化４９】

【０１９９】３−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−１７β−ヒドロキシ−１７α−（４’−
ヒドロキシブタン−１’−イル）−１，３，５（１０）−エストラトリエン（
１０）ＴＨＰエーテル９（１５．１ｇ、28mmol）のＭｅＯＨ(400mL)溶液に、ｐ−ト
ルエンスルホン酸一水和物(150mg、0.8mmol)を加え、５時間攪拌する。ＮａＨＣ
Ｏ_３飽和溶液(100mL)を加え、溶媒量をロータリーエバポレーターを用いて半分
まで減少させる。混合物をＣＨ₂Ｃｌ₂で抽出する。有機層を塩水で洗浄し、乾燥
（ＭｇＳＯ_４）し、蒸発乾固する。粗製生成物は精製せずに次の工程で使用する
。

【０２００】

【化５０】

【０２０１】３−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン
−１７（Ｒ）−スピロ−２’−（６’−オキソ）テトラヒドロピラン（１１）
ジオール１０(12.5g、27mmol)のアセトン(500mL)に０℃で、Jones’試薬の2.7M
溶液(15.1mL、41mmol)を一滴ずつ加える。反応溶液を３０分攪拌する。２−プロ
パノール(100mL)を加え、ついでＮａＨＣＯ_３の飽和溶液(200mL)を加える。溶媒
の容量は蒸発により半分まで減少させる。混合物はＥｔＯＡｃで抽出する。有機
層は塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧下に濃縮する。残渣をシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィーでヘキサン／アセトン（６／１）で精製し、ラクト
ン体８．６ｇ（３工程の収率６８％）を得た。

【０２０２】

【化５１】

【０２０３】３−ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン
−１７（Ｒ）−スピロ−２’−（５’，５’−ジメチル−６’−オキソ）テトラ
ヒドロピラン（１２）乾燥した１Ｌのフラスコの中に、アルゴンの存在下に、ラクトン１１(8.6g、1
9mmol)を乾燥ＴＨＦ(300mL)に溶解し、０℃に冷却した。ＬｉＨＭＤＳの１Ｍ溶
液(47.3mL、47.3mmol)を一滴ずつ加えた。混合物は０℃で１５分攪拌し、―７８
℃まで冷却した。そしてメチルヨーダイド(5.9mL、79mmol)が加えられた。反応
液はこの温度で１時間攪拌し、室温まで２時間かけて暖めた。ＮＨ_４Ｃｌ飽和溶
液(200mL)を加え、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層はＮａ_２Ｓ_２Ｏ_３の
飽和溶液、塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、減圧濃縮した。残渣はヘキサ
ン／アセトン（５／１）によりカラムクロマトグラフィーで精製し、溶出液から
ジメチル化合物７．４ｇ（８１％）が得られる。

【０２０４】

【化５２】

【０２０５】１，３，５（１０）−エストラトリエン−３−オール−１７（Ｒ）−スピロ−２
’−（５’，５’−ジメチル−６’−オキソ）テトラヒドロピラン（１３）シリルエーテル１２（７．１ｇ、14.7mmol）のＴＨＦ(300mL)溶液に０℃で、
ＴＢＡＦの１Ｍ溶液(17.6mL、17.6mmol)を一滴ずつ加える。反応液は１５分攪拌
する。氷水(200mL)を加えると化合物が沈殿する。フラスコをロータリーエバポ
レーターにセットし、ＴＨＦの量を減少させる。ついで、氷浴の上に置く。沈殿
を濾過により集め、冷水で洗浄し、３０℃のオーブンで２４時間乾燥する。３−
ＯＨ化合物５．４ｇ(100%)得られる。

【０２０６】

【化５３】

【０２０７】実施例３ＥＭ−０１６６７の合成

【０２０８】

【化５４】

【０２０９】３−ヒドロキシ−２−フェニルセレニル−エストラ−１，３，５（１０）−トリ
エン−１７（Ｒ）−スピロ−２’−（５’，５’−ジメチル−６’−オキソ）テ
トラヒドロピラン（１４）３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７（Ｒ）−ス
ピロ−２’−（５’，５’−ジメチル−６’−オキソ）テトラヒドロピラン（13
）(406mg、1.10mmol)とフェニルセレニルクロライド(253mg、1.32mmol)の乾燥Ｃ
ＨＣｌ_３(24mL)溶液をＡｒ（ｇ）存在下で、０℃で１時間攪拌し、ついで室温で
一夜攪拌する。得られた黄色溶液を氷／Ｈ_２Ｏの上に注ぎ、ＣＨ₂Ｃｌ₂（３ｘ）
で抽出する。集められた有機層を乾燥（綿プラグ）し、ロータリーエバポレータ
ーで濃縮し、粗製泡状固体を得る。１：９ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを溶出液とし
たフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂）で精製して、化合物７(353mg、61%
)及びその４−異性体(86mg、15%)を得た。

【０２１０】

【化５５】

【０２１１】２−クロロ−３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７
（Ｒ）−スピロ−２’−（５’，５’−ジメチル−６’−オキソ）テトラヒドロ
ピラン（ＥＭ−０１６６７）化合物１４(116mg、0.22mmol)とＮ−クロロサクシンイミド(44mg、0.33mmol)
の乾燥ＣＨＣｌ_３(15mL)溶液をＡｒ（ｇ）存在下０℃で３０分攪拌する。溶液を
氷／Ｈ_２Ｏの上に注ぎ、ＣＨ₂Ｃｌ₂（３ｘ）で抽出する。集めた有機層を乾燥（
綿プラグ）し、ロータリーエバポレーターで濃縮して粗製固体を得る。１：２９ −＞１：１９ＥｔＯＡｃ／トルエンを溶出液とするフラッシュクロマトグ
ラフィー（ＳｉＯ₂）で精製してＥＭ−０１６６７(51mg、57%)を白色固体として
得る。

【０２１２】

【化５６】

【０２１３】実施例４ＥＭ−０１７２８の合成

【０２１４】

【化５７】

【０２１５】１７−ベンジル−１，３，５（１０）−エストラトリエン−３，１７β−ジオー
ル（１５）エストロン(5.0g、18.5mmol)の乾燥ＴＨＦ(200mL)溶液に０℃で、Ａｒ（ｇ）
存在下にベンジルマグネシウムクロライド（ＴＨＦ中２Ｍ溶液、65mL）を加え、
溶液を一夜攪拌する。ＮＨ_４Ｃｌ水性飽和溶液を０℃で加え、溶液をＣＨ₂Ｃｌ₂ （３回）で抽出する。塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。
フラッシュクロマトグラフィー（ＲＰ−Ｃ１８、３０：３０：４０−１０：３０
：６０Ｈ_２Ｏ／ＭｅＯＨ／ＣＨ_３ＣＮ）で生成物を精製し、化合物１を白色固
体(4.0g、60%)としておよびエストロン（1.5g、回収率30%）を得た。

【０２１６】

【化５８】

【０２１７】１７−ベンジル−２−フェニルセレニル−１，３，５（１０）−エストラトリエ
ン−３，１７β−ジオール（１６）化合物１(508mg、1.40mmol)のＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３（１：１０，33mL）を０
℃で攪拌し、ＰｈＳｅＣｌ(322mg、1.68mmol)を０度で加える。２時間後、溶液
の色はオレンジ色から黄色に変化する、これを氷／Ｈ_２Ｏに注ぎ、ＣＨ₂Ｃｌ₂で
抽出し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、濃縮する。粗製生成物はフラッシュク
ロマトグラフィー(ＳｉＯ₂、１：２９ＥｔＯＡｃ／トルエン)で精製して化合
物２がベージュ色の固体(456mg、63%)として、また４−フェニルセレニル異性体
(71mg、10%)が得られる。

【０２１８】

【化５９】

【０２１９】１７−ベンジル−２−クロロ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−３，１
７β−ジオール（ＥＭ−０１７２８）化合物２(155mg、0.30mmol)のＣＨＣｌ_３(15mL)溶液を０℃でＡｒ（ｇ）存在
下に攪拌し、Ｎ−クロロサクシンイミド(48mg、0.36mmol)を加える。１時間後、
反応液は化合物２の場合と同様に処理し、フラッシュクロマトグラフィー（Ｓｉ
Ｏ₂、１：２９−＞１：１９ＥｔＯＡｃ／トルエン）で精製し、ＥＭ−０１７
２８を白色固体(74mg、62%)として得る。

【０２２０】

【化６０】

【０２２１】実施例５ＥＭ−０１８３１及びＥＭ−０１８３２の合成

【０２２２】

【化６１】

【０２２３】１６，１６−ジメチル−３−メトキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン
−１７−オン（１７）３−メトキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オン(10.00
g、35mmol)の無水ＴＨＦ(500mL)溶液にＡｒ（ｇ）存在下、室温でＮａＨ(油中60
%、2.55g、105mmol)及びヨードメタン(22mL、350mmol)を加える。溶液を一夜還
流させる。ＮａＨ(2.55g、105mmol)及びヨードメタン(22ml、350mmol)を追加し
、溶液を更に２４時間還流する。得られた溶液にエタノール(100mL)を加えて反
応を停止させる。ついで氷水(300mL)を加え、酢酸エチル（２ｘ300mL）で抽出す
る。塩水（２ｘ300mL）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥する。減圧下に濃縮すると
黄色固体を得る。シリカゲル上で酢酸エチル／ヘキサン（１：１９）を溶出液と
して、フラッシュクロマトグラフィーで精製し、化合物３(10.19g、93%)が白色
結晶として得られる。

【０２２４】

【化６２】

【０２２５】１６，１６−ジメチル−１，３，５（１０）−エストラトリエン−３−オール−
１７−オン（１８）３−メトキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オン−１６
−ジメチル、１７(6.00g、19mmol)とヨードトリメチルシラン(27mL、190mmol)の
無水ＣＨ₂Ｃｌ₂ (1000mL)溶液をＡｒ（ｇ）存在下に一夜還流する。得られた溶
液を氷／Ｈ_２Ｏ(600mL)の上に注ぎ、ＣＨ₂Ｃｌ₂（3x600mL）で抽出し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮する。粗製の褐色固体はシリカゲル上酢酸エ
チル／トルエン（１：９）を溶出液として精製し、化合物４を白色固体(3.50g、
62%)として得る。

【０２２６】

【化６３】

【０２２７】１６，１６−ジメチル−２−フェニルセレニル−１，３，５（１０）−エストラ
トリエン−３−オール−１７−オン（１９）化合物１８(2.00g、6.70mmol)のＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３（１：１０、550mL）溶
液を０℃で攪拌し、ＰｈＳｅＣｌ(1.56g、8.15mmol)を加える。反応混合物を一
夜室温で攪拌する。得られた黄色溶液を氷／Ｈ_２Ｏ(500mL)の上に注ぐ。ＣＨ₂Ｃ
ｌ₂ (2x500mL)で抽出し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮する。生成物
をシリカゲル上、酢酸エチル／トルエン（0.3：9.7）を用いたフラッシュクロマ
トグラフィーで精製し、化合物５を白色泡状物(2.44g、80％)及びその２−クロ
ロ異性体(100mg、5％)を得る。

【０２２８】

【化６４】

【０２２９】２−クロロ−１６，１６−ジメチル−１，３，５（１０）−エストラトリエン−
３−オール−１７−オン（ＥＭ−０１８３１）化合物５(680mg、1.84mmol)の無水ＣＨＣｌ_３(200mL)溶液をＡｒ（ｇ）存在下
で室温で攪拌しながら、Ｎ−クロロサクシンイミド(246mg、1.84mmol)を加える
。混合物を−３０℃で１時間攪拌する。水性飽和ＮＨ_４Ｃｌ(300mL)で反応を停
止し、ＣＨ₂Ｃｌ₂ (2x300mL)で抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧濃
縮する。粗製の生成物をメタノール／酢酸エチル／ヘキサン（0.5：1：9）を溶
出液としたフラッシュクロマトグラフィーで精製し、ＥＭ−０１８３１を黄色固
体(178mg、33%)として得る。

【０２３０】

【化６５】

【０２３１】２−クロロ−１６，１６−ジメチル−１，３，５（１０）−エストラトリエン−
３，１７β−ジオール（ＥＭ−０１８３２）ＥＭ−０１８３１(200mg、0.60mmol)の無水ＴＨＦ(20mL)溶液をＡｒ（ｇ）存
在下−７８℃で攪拌しながら、ＬｉＡｌＨ_４(33mg、0.86mmol)を加える。反応温
度を２４時間かけてゆっくりと室温に戻す。反応液を０℃まで冷却し、さらにＬ
ｉＡｌＨ_４(23mg、0.60mmol)を加え、混合物を更に２時間攪拌する。反応混合物
に１Ｍ水性Rochelle塩(50mL)を加えて反応停止し、酢酸エチル(3x50mL)で抽出す
る。有機層を塩水(50mL)で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮する
。生成物をシリカゲル上、酢酸エチル／トルエン（1：19）を溶出えきとしてた
フラッシュクロマトグラフィーで精製し、ＥＭ−０１８３２を白色固体(145mg、
72%)として得る。

【０２３２】

【化６６】

【０２３３】実施例５２−シアノ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１７−スピロ−（ジメチ
ル−δ−ラクトン）の３−ヒドロキシ誘導体

【０２３４】

【化６７】

【０２３５】実施例５Ａ２−フォルミル−１，３，５（１０）−エストラトリエン−３−オ−ル−１７（
Ｒ）−スピロ−２’−（５’，５’−ジメチル−６’−オキソ）テトラヒドロピ
ラン（２０）ラクトン１３(1.0g、2.72mmol)を１，２−ジクロロエタン(9mL)にアルゴン雰
囲気で溶かした。続いてＳｎＣｌ_４(0.16mL、1.37mmol)及びＢｕ_３Ｎ(0.52mL、2
.18mmol)を加えた。混合物を室温で２０分攪拌した。フォルムアルデヒド（0.23
ｇ、7.84mmol）を加え、混合物を６時間還流しながら攪拌した。反応混合物を水
性酸（ｐＨ＝２）に注ぎ、ＣＨ₂Ｃｌ₂で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、乾燥
（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、濾過し、減圧濃縮した。粗製生成物をシリカゲル上、ヘキ
サン−アセトン（95：5から80：20）で溶出するフラッシュクロマトグラフィー
で精製し、目的物０．７４ｇ(69%)を得た。

【０２３６】

【化６８】

【０２３７】実施例５Ｂ２−オキシイミノ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−３−オール−１７
（Ｒ）−スピロ−２’−（５’，５’−ジメチル−６’−オキソ）テトラヒドロ
ピラン（２１）アルゴン雰囲気下に、化合物２０(215mg、0.54mmol)の無水エタノール−ピリ
ジン１−１(4mL)溶液を、塩酸ヒドロキシルアミン(56.6mg、0.814mmol)で処理
し、室温で２５分攪拌した。反応混合物を濃縮し、水で希釈し、ジクロメタンで
３回抽出した。集めた有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し
、濃縮してオキシム１１３(217mg、98%)を得た。

【０２３８】

【化６９】

【０２３９】実施例５Ｃ３−アセトキシ−２−シアノ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１７（
Ｒ）−スピロ−２’−（５’，５’−ジメチル−６’−オキソ）テトラヒドロピ
ラン（２２ａ）化合物２１(180mg、0.44mmol)と無水酢酸(125μL、1.32mmol)のピリジン(3.5m
L)溶液を１時間還流した。反応混合物を濃縮し、ジクロロメタンで希釈し、水で
３回洗浄し、飽和炭酸水素ナトリウムで１回、塩水で１回洗浄した。有機層を硫
酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗製混合物をフラッシュクロマ
トグラフィー（ジクロロメタンからジクロロメタン−酢酸エチル１９−１）で
精製して酢酸エステル２２ａ(145mg、76%)を得た。

【０２４０】

【化７０】

【０２４１】実施例５Ｄ２−シアノ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−３−オール−１７（Ｒ）
−スピロ−２’−（５’，５’−ジメチル−６’−オキソ）テトラヒドロピラン
（２２ｂ）化合物２２ａ(60mg、0.14mmol)のメタノール(5mL)溶液を１０％炭酸カリウム(
0.5mL)で処理し、３０分攪拌した。反応混合物を１Ｎ塩酸でｐＨ２の酸性にし、
ジクロロメタンで３回抽出した。集めた有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム、
塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗製混合物を水
性エタノールから再結晶してフェノール２２ｂ(28mg、52%)を得た。

【０２４２】

【化７１】

【０２４３】実施例５Ｅ３−アルコキシ−２−シアノ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１７（
Ｒ）−スピロ−２’−（５’，５’−ジメチル−６’−オキソ）テトラヒドロピ
ラン（２２ｃ）アルゴン雰囲気で、化合物２２ｂ、ヨー化アルキル（５当量）及び炭酸セシウ
ム（１．５当量）の無水アセトニトリル中懸濁液（１％Ｗ／Ｖ）を、必要なら
ば還流条件で、１６時間攪拌する。反応混合物を塩水で反応停止し、ジクロロメ
タンで３回抽出する。集めた有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥
し、濾過し、濃縮した。粗製混合物をフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロ
メタンからジクロロメタン−酢酸エチル１０−１）による精製、及び再結晶（
メタノール）をし、化合物２２ｃ（例、ＥＭ−１３９６、Ｒ＝（ＣＨ₂）₂ＯＣＨ₃ 、75%）を得る。

【０２４４】

【化７２】

【０２４５】実施例６

【化７３】

【０２４６】医薬組成物の実施例下記に、限定ではなく例として、好ましい活性化合物ＥＭ−２３３０（タイプ
３３α−ＨＳＤの阻害剤）を利用するいくつかの医薬組成物を示す。本発明の
他の化合物またはその組み合わせをＥＭ−０２３１８およびＥＭ−０２２００の
代わりに（またはさらに）使用してもよい。活性成分の濃度は、本明細書に記載
の好ましい用量に適合し得る広い範囲にわたって変化し得、好ましい投与回数に
依存する。含まれ得る他の成分の量およびタイプは、当分野において既知である
。

【０２４７】実施例Ａ注射に適切な組成物

【表１３】

【０２４８】実施例Ｂ局所ローションとしての使用に適切な組成物

【表１４】

【０２４９】実施例Ｃ局所ゲルとしての使用に適切な組成物

【表１５】

【０２５０】実施例Ｄ錠剤

【表１６】

【０２５１】実施例Ｅゼラチンカプセル

【表１７】

【０２５２】実施例Ｆ局所ゲルとしての使用に適切な組成物

【表１８】

【０２５３】タイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼの他の阻害剤を、上
記製剤においてＥＭ−２３３０の代わりに使用し得る。いくつかの実施態様にお
いて、２以上のタイプ３３α−ヒドロキシステロイド阻害剤が共に含まれてい
ることもあり（または、１つのタイプ３３α−ＨＳＤ阻害剤と１つのタイプ５
１７β−ＨＳＤの阻害剤）、その場合２つの合わせた重量％は、ＥＭ−２３３
０単独について上記実施例に示したものの好ましくは２倍であり、最も一般的な
賦形剤（例えば、水、ラクトース、エタノールなど）の重量％が対応して減少す
る。本明細書の好ましい組み合わせの他の活性成分を同様の方法で添加し得る。

【０２５４】本発明は好ましい実施態様および実施例によって記載されているが、それによ
って限定されるものではない。当業者は、本明細書に記載の請求の範囲によって
のみ限定される本発明の広範な適用可能性および範囲を容易に認識するであろう
。

【図面の簡単な説明】

【図１】第１図は、ヒト前立腺における活性アンドロゲン類の模式的生合
成経路を示す。

【図２】第２図は、培養においてタイプ３ 3α−ＨＳＤで安定にトランス
フェクトされたインタクト２９３細胞（ＡＴＣＣＣＲＬ１５７３）中の１７β
−ＨＳＤ及び３α−ＨＳＤ活性を示す。タイプ３ 3α−ＨＳＤで安定にトランス
フェクトされた細胞を、１０^５細胞／ウエルの密度で２４ウエルのプレート中に
、種付けした。[^１４Ｃ]標識４−ジオン及び[^１４Ｃ]標識ＤＨＴの０．１ｕＭを
新たに変化させた培養培地に添加し、タイプ３ 3α−ＨＳＤ酵素の１７β−ＨＳ
Ｄ活性（４−ジオンのテストステロンへの転換（□））及びタイプ３３α−Ｈ
ＳＤ酵素の３α−ＨＳＤ活性（ＤＨＴの３α−ジオールへの転換（○））をそれ
ぞれ評価した。トランスフェクトされなかった細胞を対照として使用した。所定
の時間培養した後、培地を集め、抽出し、ここに記載する「タイプ１、２、３及
び５１７β−ＨＳＤ及びタイプ１及び３３α−ＨＳＤに対する酵素的検定」
により、検定した。

【図３】第３ａ〜３ｃ図は、タイプ３３α−ＨＳＤに対する抗体で免疫
汚染させた正常なヒト皮膚のバラフィン断片を示す。タイプ３３α−ヒドロキ
システロイドデヒドロゲナーゼの存在は次ぎの中に認めることができる：ａ）上
皮及び繊維芽細胞、ｂ）毛包、ｃ）発汗腺。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ｃ０７Ｊ 21/00 Ｃ０７Ｊ 21/00 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者イブ・メランカナダ、ジー１ダブリュー・３エイ１、ケベック、サン−フォワ、モントロー3101番 (72)発明者シルバン・ゴーティエカナダ、ジー３エイ・２エル２、ケベック、サン−オーギュスタン−ドゥ−デスモーレ、リュ・ドゥ・ラ・モディスト152番 (72)発明者ルイ・プロバンシェカナダ、ジー６エックス・３アール７、ケベック、シャルニ、ドゥ・ラ・サルセル 7518番 (72)発明者バン・ルー−テカナダ、ジー６エックス・１シー６、ケベック、シャルニ、ドゥ・レスチュエル4460 番Ｆターム(参考） 4C084 AA17 MA01 MA02 NA14 ZA81 ZB26 ZC10 ZC11 ZC20 4C086 AA01 AA02 DA09 MA01 MA02 MA03 MA04 NA14 ZA81 ZB26 ZC10 ZC11 ZC20 4C091 AA01 BB01 CC03 DD03 DD15 EE03 FF01 GG01 HH01 JJ01 KK01 LL01 MM03 NN01 PA09 PB05 QQ06 QQ18

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】４−アンドロステン−３，１７−ジオンのテストステロンヘ
の又は５α−アンドロスタン−３，１７−ジオンのジヒドロテストステロンヘの
変換を阻害することを必要とする患者に対し、ヒトタイプ３３α−ヒドロキシ
ステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤の治療的有効量を投与することを特徴とする
、当該患者において当該変換を阻害する方法。
【請求項２】さらにタイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲ
ナーゼ阻害剤を投与する、請求項1記載の方法。
【請求項３】ヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナー
ゼの活性の阻害を必要とする患者に対し、次式の構造を有するヒトタイプ３３
α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤の治療的有効量を投与するこ
とを特徴とする、当該患者において当該阻害を行う方法：【化１】（式中、点線は任意のπ結合である； R³はＣ_１−Ｃ_２０アルキルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_１０アシルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_２ _０アルコキシカルボニルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキルオキシアルキルオキシ
、ヒドロキシル、（Ｎ−アルキル又は−Ｈ）カルバメート及びイン・ビボでヒド
ロキシルに変換される基から成る群から選択された基である；Ｒ^２及びＲ^４は独立して水素、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ及びニトロ
から成る群から選択された基（Ｒ^２及びＲ^４は同時に水素ではない。）である；Ｒ^１７αは水素又はＣ_２−Ｃ_１４炭素基（ただし、水素、ハロゲン、カルボキ
シル、アミド、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ及びＣ_１−Ｃ_５アルキルから成る群から選
択された残基によって置換されている。）若しくはＲ^１７αとＲ^１７βは一緒に
なってＣ_５−Ｃ_７ラクトン環又はケトン性酸素を形成する；Ｒ^１７βはヒドロキシル、アシルオキシ、アルコキシ、アルケニルオキシ又は
（Ｎ−アルキル又はＨ）アミド若しくはＲ^１７αとＲ^１７βは一緒になってＣ_５ −Ｃ_７ラクトン環又はケトン性酸素を形成する；Ｒ^１６α及びＲ^１６βはそれぞれ独立して水素、低級アルキル又はベンジル若
しくはＲ^１６αとＲ^１６βが一緒になってＣ_５−Ｃ_６シクロアルケンを形成する
。）。
【請求項４】ヒトタイプ3 3α-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ
阻害剤が次の分子構造を有するものである、請求項３記載の方法：【化２】（式中、ｎは１〜２の整数である；点線は独立して任意のπ結合である；Ｘ及びＹは独立してＨ、（Ｃ_１−Ｃ_３）アルキル及び（Ｃ_２−Ｃ_３）アルケニ
ルから成る群から選択されたものである。）。
【請求項５】Ｒ３がヒドロキシルである、請求項４記載の方法。
【請求項６】ＸとＹの少なくとも一方がメチルである、請求項４記載の方
法。
【請求項７】ＸとＹの両方がメチルである、請求項４記載の方法。
【請求項８】Ｒ２が塩素又はシアノである、請求項４記載の方法。
【請求項９】ヒトタイプ3 3α-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ
阻害剤が次の分子構造を有するものである、請求項３記載の方法：【化３】（式中、記号は次ぎの何れかである：ｉ）Ｒ^１７βはヒドロキシル、Ｒ^１７αはＣ_２−Ｃ_１４炭素基（ただし、水素
、ハロゲン、カルボキシル、アミド、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ及びＣ_１−Ｃ_５アル
キルから成る群から選択された残基によって置換されている。）及びＲ^１６αと
Ｒ^１６βはそれぞれ水素である；ｉｉ）Ｒ^１７βはヒドロキシル、Ｒ^１７αは水素及びＲ^１６αとＲ^１６βはそ
れぞれ低級アルキル又はベンジル若しくはＲ^１６αとＲ^１６βが一緒になってＣ_５ −Ｃ_６シクロアルカンを形成する；ｉｉｉ）Ｒ^１７αとＲ^１７βは一緒になってケトン性酸素を形成し、Ｒ^１６α とＲ^１６βはそれぞれ低級アルキル又はベンジル若しくはＲ^１６αとＲ^１６βが
一緒になってＣ_５−Ｃ_６シクロアルカンを形成する。
【請求項１０】Ｒ^１７αがベンジルである、請求項９記載の方法。
【請求項１１】Ｒ^３がヒドロキシである、請求項１０記載の方法。
【請求項１２】Ｒ^２が塩素又はシアノである、請求項１０記載の方法。
【請求項１３】ヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナ
ーゼの活性の阻害を必要とする患者に対し、次式の構造を有するヒトタイプ３
３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤の治療的有効量を投与する
ことを特徴とする、当該患者において当該阻害を行う方法：【化４】【化５】【化６】
【請求項１４】推定的阻害剤の存在下、タイプ3 3α-ヒドロキシステロ
イドデヒドロゲナーゼの活性を測定し、当該活性の低下に対する効果を、当該推
定的阻害剤の不存在下、当該デヒドロゲナーゼの活性と関連付けることを特徴と
する、４−アンドロステン−３,１７−ジオンのテストステロンへの及び５α−
アンドロスタン−３,１７−ジオンのジヒドロテストステロンへの変換の推定的
阻害剤の効果を評価する方法。
【請求項１５】次ぎの工程を含むことを特徴とする、請求項１４記載の方
法：ａ）培養培地に、プロモータ配列とヒトタイプ3 3α-ヒドロキシステロイド
デヒドロゲナーゼをコードするヌクレオチド配列を含む組換えベクターにより形
質転換又はトランスフェクトされた組換え宿主細胞を与える工程；ｂ）上記培養培地に、推定的阻害剤と、阻害剤の不存在下にタイプ3 3α-ヒ
ドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ変換を行う基質を与える工程；ｃ）上記変換を測定する工程。
【請求項１６】医薬的に許容し得る希釈剤又は担体と、次式の分子構造を
有するヒトタイプ3 3α-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤の治療
有効量を含むことを特徴とする、医薬組成物：【化７】（式中、R³は、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_１０アシルオキシ、Ｃ_１ −Ｃ_２０アルコキシカルボニルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキルオキシアルキ
ルオキシ、ヒドロキシル、（Ｎ−アルキルまたは−Ｈ）カルバメート及びイン・
ビボでヒドロキシルに変換される基から成る群から選択された基である；Ｒ^２及びＲ^４は独立して水素、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ及びニトロ
から成る群から選択された基（Ｒ^２およびＲ^４は同時に水素ではない。）である
；点線は任意のπ結合である；Ｒ^１７αは水素又はＣ_２−Ｃ_１４炭素基（ただし、水素、ハロゲン、カルボキ
シル、アミド、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ及びＣ_１−Ｃ_５アルキルから成る群から選
択された残基によって置換されている。）若しくはＲ^１７αとＲ^１７βは一緒に
なってＣ_５−Ｃ_７ラクトン環又はケトン性酸素を形成する；Ｒ^１７βはヒドロキシ、アシルオキシ、アルコキシ、アルケニルオキシ又は（
Ｎ−アルキルまたはＨ）アミド若しくはＲ^１７αとＲ^１７βは一緒になってＣ_５ −Ｃ_７ラクトン環又はケトン性酸素を形成する。）。
【請求項１７】Ｒ^１７αがフェニル又はプロピルである、請求項１６記載
の医薬組成物。
【請求項１８】Ｒ^３がヒドロキシである、請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項１９】Ｒ^２が塩素又はシアノである、請求項１６記載の医薬組成
物。
【請求項２０】医薬的に許容し得る希釈剤又は担体と、次式の分子構造を
有するヒトタイプ3 3α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤の治療
有効量を含むことを特徴とする、医薬組成物：【化８】（式中、R¹⁰⁰は水素、カルボキシル、アミド、Ｃ_１−Ｃ_５アルキル、ハロ、ニト
ロ、ヒドロキシ及びＣ_１−Ｃ_３アルコキシから成る群から選択されたものである
。）。
【請求項２１】医薬的に許容し得る希釈剤又は担体と、次式を有するもの
から選択されたヒトタイプ3 3α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害
剤の治療有効量を含むことを特徴とする、医薬組成物：【化９】【化１０】
【請求項２２】次式の分子構造を有するヒトタイプ3 3α−ヒドロキシス
テロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤：【化１１】（式中、R³は、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_１０アシルオキシ、Ｃ_１ −Ｃ_２０アルコキシカルボニルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキルオキシアルキ
ルオキシ、ヒドロキシル、（Ｎ−アルキルまたは−Ｈ）カルバメート及びイン・
ビボでヒドロキシルに変換される基から成る群から選択された基である；Ｒ^２及びＲ^４は独立して水素、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ及びニトロ
から成る群から選択された基（Ｒ^２およびＲ^４は同時に水素ではない。）である
；点線は任意のπ結合である；Ｒ^１７αは水素又はＣ_２−Ｃ_１４炭素基（ただし、水素、ハロゲン、カルボキ
シル、アミド、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ及びＣ_１−Ｃ_５アルキルから成る群から選
択された残基によって置換されている。）若しくはＲ^１７αとＲ^１７βは一緒に
なってＣ_５−Ｃ_７ラクトン環又はケトン性酸素を形成する；Ｒ^１７βはヒドロキシル、アシルオキシ、アルキルオキシ、アルケニルオキシ
又は（Ｎ−アルキルまたはＨ）アミド若しくはＲ^１７αとＲ^１７βは一緒になっ
てＣ_５−Ｃ_７ラクトン環又はケトン性酸素を形成する；Ｒ^１６αおよびＲ^１６βはそれぞれ独立して水素、低級アルキル又はベンジル
若しくはＲ^１６αとＲ^１６βが一緒になってＣ_５−Ｃ_６シクロアルケンを形成す
る。）。
【請求項２３】Ｒ^１７αがフェニル又はプロピルである、請求項２２記載
の阻害剤。
【請求項２４】Ｒ^３がヒドロキシである、請求項２２記載の阻害剤。
【請求項２５】Ｒ^２が塩素又はシアノである、請求項２２記載の阻害剤。
【請求項２６】次式の分子構造を有するヒトタイプ3 3α−ヒドロキシス
テロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤：【化１２】（式中、R¹⁰⁰は水素、カルボキシル、アミド、Ｃ_１−Ｃ_５アルキル、ハロ、ニト
ロ、ヒドロキシ及びＣ_１−Ｃ_３アルコキシから成る群から選択されたものである
。）。
【請求項２７】前立腺癌の発達の危険を処置又は低下させることを必要と
する患者に対し、１７−ラクトン誘導体化合物以外のヒトタイプ３３α−ヒド
ロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤の治療的有効量を投与することを特徴
とする、当該処置又は低下方法。
【請求項２８】さらにヒトタイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒ
ドロゲナーゼ阻害剤の治療的有効量を投与する、請求項２７記載の方法。
【請求項２９】前立腺癌を処置し、さらに性ステロイドの精巣分泌を低下
させるに有効なＬＨＲＨアゴニスト（又はアンタゴニスト）の治療的有効量を投
与する、請求項２７記載の方法。
【請求項３０】前立腺癌を処置し、さらに阻害剤が性ステロイドの精巣分
泌を低下させるに有効なＬＨＲＨアゴニスト（又はアンタゴニスト）の治療的有
効量を含む、請求項２７記載の方法。
【請求項３１】さらに抗アンドロゲンの治療的有効量を投与する、請求項
２９記載の方法。
【請求項３２】さらに抗アンドロゲンの治療的有効量を投与する、請求項
３０記載の方法。
【請求項３３】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項２７記載の方法。
【請求項３４】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項２８記載の方法。
【請求項３５】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項２９記載の方法。
【請求項３６】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項３０記載の方法。
【請求項３７】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を含む、
請求項３１記載の方法。
【請求項３８】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を含む、
請求項３２記載の方法。
【請求項３９】さらにタイプ３１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロ
ゲナーゼの治療的有効量を含む、請求項２７記載の方法。
【請求項４０】さらにタイプ３１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロ
ゲナーゼの治療的有効量を含む、請求項２８記載の方法。
【請求項４１】さらにタイプ３１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロ
ゲナーゼの治療的有効量を含む、請求項２９記載の方法。
【請求項４２】さらにタイプ３１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロ
ゲナーゼの治療的有効量を含む、請求項３０記載の方法。
【請求項４３】さらにタイプ３１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロ
ゲナーゼの治療的有効量を含む、請求項３１記載の方法。
【請求項４４】さらにタイプ３１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロ
ゲナーゼの治療的有効量を含む、請求項３２記載の方法。
【請求項４５】さらにタイプ３１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロ
ゲナーゼの治療的有効量を含む、請求項３５記載の方法。
【請求項４６】さらにタイプ３１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロ
ゲナーゼの治療的有効量を含む、請求項３６記載の方法。
【請求項４７】さらにタイプ３１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロ
ゲナーゼの治療的有効量を含む、請求項３７記載の方法。
【請求項４８】さらにタイプ３１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロ
ゲナーゼの治療的有効量を含む、請求項３８記載の方法。
【請求項４９】さらに抗アンドロゲンの治療的有効量を含む、請求項２７
記載の方法。
【請求項５０】良性前立腺過形成の発達の危険を処置又は低下させること
を必要とする患者に対し、１７−ラクトン誘導体化合物以外のヒトタイプ３３
α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼの１７β−ヒドロキシステロイドデ
ヒドロゲナーゼ活性阻害剤の治療的有効量を投与することを特徴とする、当該処
置又は低下方法。
【請求項５１】さらにヒトタイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒ
ドロゲナーゼ阻害剤の治療的有効量を投与する、請求項５０記載の方法。
【請求項５２】さらに抗エストロゲン又はアロマターゼ阻害剤から成る群
から選択された剤の治療的有効量を投与する、請求項５０記載の方法。
【請求項５３】さらに抗エストロゲン又はアロマターゼ阻害剤から成る群
から選択された剤の治療的有効量を投与する、請求項５１記載の方法。
【請求項５４】さらに抗アンドロゲンの治療的有効量を投与する、請求項
５２記載の方法。
【請求項５５】さらに抗アンドロゲンの治療的有効量を投与する、請求項
５３記載の方法。
【請求項５６】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項５４記載の方法。
【請求項５７】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項５５記載の方法。
【請求項５８】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項５２記載の方法。
【請求項５９】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項５３記載の方法。
【請求項６０】さらに５α−リダクターゼ阻害剤と抗エストロゲン又はア
ロマターゼ阻害剤の治療的有効量を投与する、請求項５２記載の方法。
【請求項６１】さらに５α−リダクターゼ阻害剤と抗エストロゲン又はア
ロマターゼ阻害剤の治療的有効量を投与する、請求項５３記載の方法。
【請求項６２】さらに５α−リダクターゼ阻害剤、抗アンドロゲン及び抗
エストロゲン又はアロマターゼ阻害剤の治療的有効量を投与する、請求項５２記
載の方法。
【請求項６３】さらに５α−リダクターゼ阻害剤、抗アンドロゲン及び抗
エストロゲン又はアロマターゼ阻害剤の治療的有効量を投与する、請求項５３記
載の方法。
【請求項６４】前立腺炎の発達の危険を処置又は低下させることを必要と
する患者に対し、ヒトタイプ３３α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ
の１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ活性阻害剤の治療的有効量を
投与することを特徴とする、当該処置又は低下方法。
【請求項６５】さらにヒトタイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒ
ドロゲナーゼ阻害剤の治療的有効量を投与する、請求項６４記載の方法。
【請求項６６】さらに抗アンドロゲンの治療的有効量を投与する、請求項
６４記載の方法。
【請求項６７】さらに抗アンドロゲンの治療的有効量を投与する、請求項
６５記載の方法。
【請求項６８】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項６４記載の方法。
【請求項６９】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項６５記載の方法。
【請求項７０】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項６６記載の方法。
【請求項７１】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項６７記載の方法。
【請求項７２】ざ瘡、皮脂漏、粗毛症又はアンドロゲン性脱毛症の発達の
危険を処置又は低下させることを必要とする患者に対し、１７−ラクトン誘導体
化合物以外のヒトタイプ3 3α−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼのヒト
タイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ活性阻害剤の治療的
有効量を投与することを特徴とする、当該処置又は低下方法。
【請求項７３】さらにヒトタイプ５１７β−ヒドロキシステロイドデヒ
ドロゲナーゼ阻害剤の治療的有効量を投与する、請求項７２記載の方法。
【請求項７４】さらに抗アンドロゲンの治療的有効量を投与する、請求項
７２記載の方法。
【請求項７５】さらに抗アンドロゲンの治療的有効量を投与する、請求項
７３記載の方法。
【請求項７６】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項７２記載の方法。
【請求項７７】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項７３記載の方法。
【請求項７８】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項７４記載の方法。
【請求項７９】さらに５α−リダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与す
る、請求項７５記載の方法。