JP2002519020A - 腫瘍抗原ｕｋ１１４に対するヒトモノクローナル抗体並びにそれらの産生のためのリンパ性細胞及びハイブリドーマ - Google Patents
腫瘍抗原ｕｋ１１４に対するヒトモノクローナル抗体並びにそれらの産生のためのリンパ性細胞及びハイブリドーマInfo
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Abstract
(57)【要約】
腫瘍抗原ＵＫ１１４に対するヒトモノクローナル抗体及び診断及び治療用途におけるそれらの使用。
Description
【０００１】 本発明は、腫瘍抗原ＵＫ１１４に対するヒトモノクローナル抗体、不死化リン
パ球及び該抗体を分泌するハイブリドーマに関する。
パ球及び該抗体を分泌するハイブリドーマに関する。
【０００２】 １４kDaの新規抗原が、ヤギ肝臓の過塩素酸可溶画分から最近精製された（Bar
torelli, A. et al., J. Tumor Marker Oncology, 9: 37, 1994）。ＵＫ１１４
タンパク質の１次構造（Ceciliani, F., et al., FEBS, 1996）は、ＹＥＲ０５
７ｃ／ＹＪＧＦとして定義されるタンパク質ファミリー（Schmiederknecht, G.,
et al., Eur. J. Biochem. 242: 339, 1996）と高い配列類似性を示す。ＵＫ１
１４タンパク質は、正常細胞の細胞質に局在するが、新生物形質転換後の細胞膜
上に発現し、腫瘍関連抗原の特性を獲得すると思われる（Bartorelli, A. et al
., Int. J. Oncol. 8:543, 1996）。ＵＫ１１４タンパク質特異的抗体は、がん
患者の血清から単離されており、そして、ＵＫ１０１、すなわち活性成分として
非相同ＵＫ１１４タンパク質を含有する薬剤で処置した患者の特異的抗体力価は
、殆どの場合有意に増加していることが判明した（Bartrelli, A., et al., J.
Tumor Marker Oncoloty 9: 57, 1994）。該抗体は、膜腫瘍抗原と反応し、そし
てインビトロ及びモデルマウスで補体依存性細胞溶解を誘発する。
torelli, A. et al., J. Tumor Marker Oncology, 9: 37, 1994）。ＵＫ１１４
タンパク質の１次構造（Ceciliani, F., et al., FEBS, 1996）は、ＹＥＲ０５
７ｃ／ＹＪＧＦとして定義されるタンパク質ファミリー（Schmiederknecht, G.,
et al., Eur. J. Biochem. 242: 339, 1996）と高い配列類似性を示す。ＵＫ１
１４タンパク質は、正常細胞の細胞質に局在するが、新生物形質転換後の細胞膜
上に発現し、腫瘍関連抗原の特性を獲得すると思われる（Bartorelli, A. et al
., Int. J. Oncol. 8:543, 1996）。ＵＫ１１４タンパク質特異的抗体は、がん
患者の血清から単離されており、そして、ＵＫ１０１、すなわち活性成分として
非相同ＵＫ１１４タンパク質を含有する薬剤で処置した患者の特異的抗体力価は
、殆どの場合有意に増加していることが判明した（Bartrelli, A., et al., J.
Tumor Marker Oncoloty 9: 57, 1994）。該抗体は、膜腫瘍抗原と反応し、そし
てインビトロ及びモデルマウスで補体依存性細胞溶解を誘発する。
【０００３】 本発明のモノクローナル抗体を分泌する特異的免疫適格細胞の調製のために、
ＵＫ１０１で処置され、該処置に反応性であるがん患者の末梢血のサンプルを用
いた。
ＵＫ１０１で処置され、該処置に反応性であるがん患者の末梢血のサンプルを用
いた。
【０００４】 このようにして、下記に詳述するように、効率的に所望のモノクローナル抗体
を分泌する細胞を単離することができる。
を分泌する細胞を単離することができる。
【０００５】 該抗体の調製のために用いる方法を、以下に述べる。すなわち、血液サンプル
を化学療法に非応答性のがんに冒された患者から得、そしてイタリア保険省に認
可された治験という状況において、ＵＫ１０１を用いる反復処置に付した。患者
のＢ細胞数に富む末梢血リンパ球を、ＥＢＶを用いて不死化させた。８種の細胞
系を精製されたＵＫ１１４タンパク質との反応性でもって多くのポリクローナル
系統から選び、次いでクローニングした。陽性クローンを展開し、そして繰り返
しアッセイし、全てのＥＢＶ形質転換系に記載されているよくある分泌活性の減
少を回避した。腫瘍関連抗原の選択的認識を評価するために、目的の抗体を、異
なる起源の腫瘍細胞系及び正常細胞のパネルについて分析した。ヒト抗体は全て
、精製天然タンパク質に加えて、胃がん（ＨＴ−２９、ＫａｔｏIII）、大腸が
ん（Ｃｏｌｏ６８４、ＬｏＶｏ）、乳がん（ＭＣＦ−７、ＭＤＡ）、及びいくつ
かの神経芽細胞腫（ＬＡＮ−１、ＳＹ５Ｙ）、同じく手術に付された患者の乳が
ん及び肺がんで発現している膜抗原を認識した。対照的に、それらは造血性起源
の細胞（Ｍｏｌｔ−４、ＨＰＢ−ＡＩＩ、ＨＩ−６０、Ｋ５６２）、正常細胞（
末梢リンパ球、繊維芽細胞、チャング細胞）及び細胞蛍光測定法によって示され
るような新形成の周囲にある正常細胞とは、一貫して全く反応性を示さなかった
。
を化学療法に非応答性のがんに冒された患者から得、そしてイタリア保険省に認
可された治験という状況において、ＵＫ１０１を用いる反復処置に付した。患者
のＢ細胞数に富む末梢血リンパ球を、ＥＢＶを用いて不死化させた。８種の細胞
系を精製されたＵＫ１１４タンパク質との反応性でもって多くのポリクローナル
系統から選び、次いでクローニングした。陽性クローンを展開し、そして繰り返
しアッセイし、全てのＥＢＶ形質転換系に記載されているよくある分泌活性の減
少を回避した。腫瘍関連抗原の選択的認識を評価するために、目的の抗体を、異
なる起源の腫瘍細胞系及び正常細胞のパネルについて分析した。ヒト抗体は全て
、精製天然タンパク質に加えて、胃がん（ＨＴ−２９、ＫａｔｏIII）、大腸が
ん（Ｃｏｌｏ６８４、ＬｏＶｏ）、乳がん（ＭＣＦ−７、ＭＤＡ）、及びいくつ
かの神経芽細胞腫（ＬＡＮ−１、ＳＹ５Ｙ）、同じく手術に付された患者の乳が
ん及び肺がんで発現している膜抗原を認識した。対照的に、それらは造血性起源
の細胞（Ｍｏｌｔ−４、ＨＰＢ−ＡＩＩ、ＨＩ−６０、Ｋ５６２）、正常細胞（
末梢リンパ球、繊維芽細胞、チャング細胞）及び細胞蛍光測定法によって示され
るような新形成の周囲にある正常細胞とは、一貫して全く反応性を示さなかった
。
【０００６】 したがって、本発明の第１の実施態様は、ＵＫ１１４タンパク質に対するヒト
モノクローナル抗体に関する。
モノクローナル抗体に関する。
【０００７】 本発明の第２の実施態様は、ＵＫ１１４に対するモノクローナル抗体を分泌す
る不死化リンパ球に関する。
る不死化リンパ球に関する。
【０００８】 不安定性及び産生される抗体の低収量という欠点を有する、不死化細胞、特に
ＥＢＶ不死化細胞に加えて、ヒトハイブリドーマが得られた。この意味に、最高
の成長及び分泌能力を有する３種のＥＢＶ系統を選択した。
ＥＢＶ不死化細胞に加えて、ヒトハイブリドーマが得られた。この意味に、最高
の成長及び分泌能力を有する３種のＥＢＶ系統を選択した。
【０００９】 しかし、モデルマウスにおける体細胞融合技術が周知であるとはいえ、ごくわ
ずかの数の安定化ヒトプラズマ細胞腫だけが現在入手可能であり、ヒト−ヒトハ
イブリドーマ産生のための体細胞融合の良きパートナーであるものは１つもない
。より有益な結果は、ヒト細胞とマウスミエローマとの融合に由来するヘテロミ
エローマの使用によって得られた。
ずかの数の安定化ヒトプラズマ細胞腫だけが現在入手可能であり、ヒト−ヒトハ
イブリドーマ産生のための体細胞融合の良きパートナーであるものは１つもない
。より有益な結果は、ヒト細胞とマウスミエローマとの融合に由来するヘテロミ
エローマの使用によって得られた。
【００１０】 該系統は、一般に、より安定なハイブリドーマを産生し、腹水腫瘍の形態でヌ
ードマウス中でより優れた成長をすることができる。
ードマウス中でより優れた成長をすることができる。
【００１１】 それらの成長特性に基づいて選ばれた３種のＥＢＶ系統を、ＡＴＣＣから入手
可能なヘテロミエローマＫ６Ｈ６（Carrol, W.L. et al., J. Immunol. Meth. 8
9: 61-69, 1986）と融合させ、次いで得られたクローンをＥＬＩＳＡ法によって
ＵＫ１１４抗原に対する反応性について分析した。融合システムは、とても効率
的であり、そして得られたクローンの７０％より多くが反応性であった。選ばれ
たハイブリドーマをインビトロで展開し、次いで限界希釈によってクローニング
した。最終結果は、３種のハイブリドーマ、すなわち、ＵＫ＃１／２Ｇ３ｈｙ、
ＵＫ＃１／１Ａ１１ｈｙ及びＵＫ＃１／３Ｄ８ｈｙの選択であった。最初の２種
のハイブリドーマは、ＩｇＭ−ｋイソタイプであり、そして第３のハイブリドー
マは、ＩｇＭ−λイソタイプであった。このハイブリドーマは、下記表に示すよ
うな、親系統の腫瘍特異的特性を維持した。
可能なヘテロミエローマＫ６Ｈ６（Carrol, W.L. et al., J. Immunol. Meth. 8
9: 61-69, 1986）と融合させ、次いで得られたクローンをＥＬＩＳＡ法によって
ＵＫ１１４抗原に対する反応性について分析した。融合システムは、とても効率
的であり、そして得られたクローンの７０％より多くが反応性であった。選ばれ
たハイブリドーマをインビトロで展開し、次いで限界希釈によってクローニング
した。最終結果は、３種のハイブリドーマ、すなわち、ＵＫ＃１／２Ｇ３ｈｙ、
ＵＫ＃１／１Ａ１１ｈｙ及びＵＫ＃１／３Ｄ８ｈｙの選択であった。最初の２種
のハイブリドーマは、ＩｇＭ−ｋイソタイプであり、そして第３のハイブリドー
マは、ＩｇＭ−λイソタイプであった。このハイブリドーマは、下記表に示すよ
うな、親系統の腫瘍特異的特性を維持した。
【００１２】
【表１】
【００１３】 図に示すように、異なる腫瘍系統におけるヒトモノクローナル抗体の反応性も
、陽性細胞数及びそれによる蛍光安定性に関して大きな差を示し、それによって
３種の試薬によって認識される異なるエピトープが、膜上に発現される標的抗原
に存在することを示唆する。この３種のハイブリドーマは、ｎｕ／ｎｕマウス内
のインビボでの成長に適合し、それで腹水腫瘍として成長することができ、そし
てこれはあるオーダーの規模の特異的イムノグロブリン濃度を増加させることを
可能にする。次に、このハイブリドーマを合成無血清培地中での成長に適合させ
た：最終的臨床的に使用することになっている抗体を精製するための主要段階。
、陽性細胞数及びそれによる蛍光安定性に関して大きな差を示し、それによって
３種の試薬によって認識される異なるエピトープが、膜上に発現される標的抗原
に存在することを示唆する。この３種のハイブリドーマは、ｎｕ／ｎｕマウス内
のインビボでの成長に適合し、それで腹水腫瘍として成長することができ、そし
てこれはあるオーダーの規模の特異的イムノグロブリン濃度を増加させることを
可能にする。次に、このハイブリドーマを合成無血清培地中での成長に適合させ
た：最終的臨床的に使用することになっている抗体を精製するための主要段階。
【００１４】 このＵＫ＃１／２Ｇ３ｈｙ及びＵＫ＃１／１Ａ１１ｈｙがヒト補体の存在下で
腫瘍標的上に影響を及ぼすことができる細胞溶解能力（同封した図）は、可能な
臨床的使用のための極めて有望な特性である。
腫瘍標的上に影響を及ぼすことができる細胞溶解能力（同封した図）は、可能な
臨床的使用のための極めて有望な特性である。
【００１５】 したがって、本発明の更なる対象は、抗ＵＫ１１４ヒトモノクローナル抗体を
分泌することができるヒトハイブリドーマに関する。そのようなハイブリドーマ
の１つ（ＵＫ＃１／３Ｄ８）は、１９９７年６月２４日に番号９７０６２４０９
のもとにＥＣＡＣＣ（European Collection of Cell Cultures）に寄託された。
分泌することができるヒトハイブリドーマに関する。そのようなハイブリドーマ
の１つ（ＵＫ＃１／３Ｄ８）は、１９９７年６月２４日に番号９７０６２４０９
のもとにＥＣＡＣＣ（European Collection of Cell Cultures）に寄託された。
【００１６】 ここに記載されているヒト抗体は、最良の臨床／診断用具である：現在の第１
の側面は、これらは、現在知られておらず、そしてモデル動物で再現可能なもの
とは異なり、ＵＫ１０１処置に対するヒト抗体応答をテストすることを可能にす
る；第２に、産生される試薬は、放射性誘導手術において有用な放射性同位元素
のベクターとして診断において、又は毒素もしくは薬剤ベクターとして治療にお
いて用いることができる。
の側面は、これらは、現在知られておらず、そしてモデル動物で再現可能なもの
とは異なり、ＵＫ１０１処置に対するヒト抗体応答をテストすることを可能にす
る；第２に、産生される試薬は、放射性誘導手術において有用な放射性同位元素
のベクターとして診断において、又は毒素もしくは薬剤ベクターとして治療にお
いて用いることができる。
【００１７】 上記の全ての用途について、本発明の抗体は、これらはヒトが自然に有してい
るものであるから、マウス試薬に典型的な所望しない副作用の原因とならない。
るものであるから、マウス試薬に典型的な所望しない副作用の原因とならない。
【００１８】
下記の実施例は、不死化細胞、ハイブリドーマ及び腹水調製のための工程、同
じく細胞溶解力に属する機能的特徴をより詳細に示す。
じく細胞溶解力に属する機能的特徴をより詳細に示す。
【００１９】 ｉ）Ｂ細胞不死化 ＵＫ１０１を用いて奏効に処置された肺がん患者がん腫の末梢血から精製され
たヒトＢ細胞を、通常の密度勾配によって濃縮した。ヒツジ赤血球でロゼット形
成させることによって、得られたリンパ球細胞からＴリンパ球を除去した。この
精製Ｂ細胞（１０7／mL）を、Ｂ９５−８細胞系から得られたエプスタインバー
ウイルス（ＥＢＶ）と一緒のインキュベーションによって感染させた（培地中に
１０％）。３７℃で１晩インキュベーションした後、この細胞を遠心し、培地で
２回洗浄し、次いで１０％ＦＣＳを含有するイスコフ培地に５０００／ウェルの
密度で（２０００ラド照射アロジェニックリンパ球と並んで）プレートした。
たヒトＢ細胞を、通常の密度勾配によって濃縮した。ヒツジ赤血球でロゼット形
成させることによって、得られたリンパ球細胞からＴリンパ球を除去した。この
精製Ｂ細胞（１０7／mL）を、Ｂ９５−８細胞系から得られたエプスタインバー
ウイルス（ＥＢＶ）と一緒のインキュベーションによって感染させた（培地中に
１０％）。３７℃で１晩インキュベーションした後、この細胞を遠心し、培地で
２回洗浄し、次いで１０％ＦＣＳを含有するイスコフ培地に５０００／ウェルの
密度で（２０００ラド照射アロジェニックリンパ球と並んで）プレートした。
【００２０】 ii）ＵＫ１０１に対する特異的クローンの選択 得られたクローンを２０日間培養した後、精製タンパク質でプリコートしたプ
レートでの酵素的テストによって、それらのタンパク質ＵＫ１１４に対する特異
的免疫グロブリンを産生する能力についてテストした（Bartorelli, A., et al.
, M. J. Tumor Marker Oncology 11: 67, 1996）。この反応性クローンをインビ
トロで展開し、そして上清をイソタイプを決定するために、そして免疫蛍光の分
布を調べるために用いた。
レートでの酵素的テストによって、それらのタンパク質ＵＫ１１４に対する特異
的免疫グロブリンを産生する能力についてテストした（Bartorelli, A., et al.
, M. J. Tumor Marker Oncology 11: 67, 1996）。この反応性クローンをインビ
トロで展開し、そして上清をイソタイプを決定するために、そして免疫蛍光の分
布を調べるために用いた。
【００２１】 iii）ヒトハイブリドーマ産生 最良の成長及び分泌特性に基づき、得られたリンパ芽球系の中から３つを選択
し、ミエローマとの体細胞融合におけるパートナーとして用いた。細胞融合にお
ける腫瘍パートナーとして適切なヒトミエローマの入手可能性は極めて低く、そ
して得られた産物もまた極めて不安定であるため、高率に融合することができ、
より優れた産物安定性を有するＡＴＣＣから供給されるヘテロミエローマ細胞系
（ヒト−マウス）を選んだ。用いた細胞系は、マウスミエローマと正常ヒトＢリ
ンパ球との融合から得られ、そして非分泌性及びアミノプテリン感受性であるも
のを選んだ。ＥＢＶ細胞系とＫ６Ｈ６／Ｂ５とを２：１の割合で、通常の技術に
よってプロモーター剤としてポリエチレングリコール（pH７）を用いて融合させ
た。融合後、細胞を照射アロジェニックリンパ球上にプレートし、支持細胞を構
成した。２４時間後、選択剤を下記の割合：ヒポキサンチン１００μM、アミノ
プテリン８００nM、チミジン１５μM、ウワバイン０．１μMで加えた。得られた
クローンの特異性を記載されるように酵素的アッセイで評価した（Bartorelli,
A., Biancardi, C., Cavalca, V., Clemente, C., Ferrara, R., Arzani, C., B
ailo, M., M. J. Tumor Marker Oncology 11: 67, 1996）。
し、ミエローマとの体細胞融合におけるパートナーとして用いた。細胞融合にお
ける腫瘍パートナーとして適切なヒトミエローマの入手可能性は極めて低く、そ
して得られた産物もまた極めて不安定であるため、高率に融合することができ、
より優れた産物安定性を有するＡＴＣＣから供給されるヘテロミエローマ細胞系
（ヒト−マウス）を選んだ。用いた細胞系は、マウスミエローマと正常ヒトＢリ
ンパ球との融合から得られ、そして非分泌性及びアミノプテリン感受性であるも
のを選んだ。ＥＢＶ細胞系とＫ６Ｈ６／Ｂ５とを２：１の割合で、通常の技術に
よってプロモーター剤としてポリエチレングリコール（pH７）を用いて融合させ
た。融合後、細胞を照射アロジェニックリンパ球上にプレートし、支持細胞を構
成した。２４時間後、選択剤を下記の割合：ヒポキサンチン１００μM、アミノ
プテリン８００nM、チミジン１５μM、ウワバイン０．１μMで加えた。得られた
クローンの特異性を記載されるように酵素的アッセイで評価した（Bartorelli,
A., Biancardi, C., Cavalca, V., Clemente, C., Ferrara, R., Arzani, C., B
ailo, M., M. J. Tumor Marker Oncology 11: 67, 1996）。
【００２２】 iv）細胞蛍光測定分析 分析された異なる細胞系の細胞（２×１０5）をリン酸緩衝生理食塩液に再懸
濁し、次いで被検抗体と一緒に４℃で１時間インキュベートした。２回洗浄後、
細胞を蛍光ラベルした抗ヒトＩｇと一緒に４℃で３０分間インキュベートした。
蛍光を（ソフトウェアLysis IIを用いる）ＦＡＣＳｏｒｔを用いて分析した。選
択した実験を手術サンプルから得られた新しい腫瘍からの細胞について類似方法
を用いて行った。
濁し、次いで被検抗体と一緒に４℃で１時間インキュベートした。２回洗浄後、
細胞を蛍光ラベルした抗ヒトＩｇと一緒に４℃で３０分間インキュベートした。
蛍光を（ソフトウェアLysis IIを用いる）ＦＡＣＳｏｒｔを用いて分析した。選
択した実験を手術サンプルから得られた新しい腫瘍からの細胞について類似方法
を用いて行った。
【００２３】 ｖ）ヌードマウスにおけるハイブリドーマ成長 各ハイブリドーマの２×１０7細胞を生理的溶液２００μLに再懸濁し、次いで
予めプリスタン０．５mLを接種したヌードマウスの腹腔内に接種した。１５〜１
８日後、腹水２〜４mLを各マウスから採取した。
予めプリスタン０．５mLを接種したヌードマウスの腹腔内に接種した。１５〜１
８日後、腹水２〜４mLを各マウスから採取した。
【００２４】 vi）補体依存性細胞毒性 腫瘍標的として選ばれたＫＡＴＯIII（胃がん）、ＭＯＧ−Ｇ−ＵＶＷ（星状
細胞腫）及びＨＴ−２９（大腸がん）を３７℃で１時間３．７MBqのＮａ2〔51Ｃ R 〕Ｏ4でラベルした。繰り返し洗浄した後、ヒト抗ＵＫ１１４抗体（１：１０希
釈した腹水）及びヒト血清１０μLの存在下、細胞を３７℃で１．５時間インキ
ュベートした。補体による細胞溶解性活性の依存性のコントロールとして、Ｃ８
、Ｃ９因子欠乏ヒト血清を用いた。
細胞腫）及びＨＴ−２９（大腸がん）を３７℃で１時間３．７MBqのＮａ2〔51Ｃ R 〕Ｏ4でラベルした。繰り返し洗浄した後、ヒト抗ＵＫ１１４抗体（１：１０希
釈した腹水）及びヒト血清１０μLの存在下、細胞を３７℃で１．５時間インキ
ュベートした。補体による細胞溶解性活性の依存性のコントロールとして、Ｃ８
、Ｃ９因子欠乏ヒト血清を用いた。
【図１】 異なる腫瘍系統におけるヒトモノクローナル抗体の反応性を示す。
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書
【提出日】平成１２年１０月９日（２０００．１０．９）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正内容】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ， ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，Ｇ Ｅ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ， ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，Ｍ Ｎ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ， ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，Ｚ Ａ，ＺＷ (72)発明者 フナロ，アダ イタリア国、イ−20122 ミラノ、ガッレ リア・デル・コルソ、２ Ｆターム(参考） 4B024 AA01 BA45 DA02 GA05 HA15 4B064 AG27 CA10 CA20 CC24 DA05 DA14 4B065 AA92X AA93Y AB05 BA06 BA08 CA25 CA44 CA46 4H045 AA11 CA41 DA76 EA28 EA51 FA72
Claims (7)
- 【請求項１】 ＵＫ１１４腫瘍抗原に対するヒトモノクローナル抗体。
- 【請求項２】 請求項１記載の該抗体を産生することができる不死化リンパ
性細胞。 - 【請求項３】 ＥＢＶウイルスを用いて不死化した、請求項２記載の細胞。
- 【請求項４】 モノクローナル抗体を分泌する、請求項１記載のハイブリド
ーマ。 - 【請求項５】 １９９７年６月２４日に番号９７０６２４０９のもとに寄託
された、請求項４記載のハイブリドーマ。 - 【請求項６】 請求項１記載の抗体の調製方法であって、 − ＵＫ１０１を用いる処置に応答性の患者からのリンパ性細胞サンプルの調製
； − 該細胞の不死化、そして抗体を産生する系統の選択； − マウスミエローマを用いるヒト細胞の融合からのヘテロミエローマを用いる
該細胞の融合； − 活性クローンの選択 を含む方法。 - 【請求項７】 試薬、診断剤又は治療剤の調製のための、請求項１記載の抗
体（ここで、該抗体は、場合により放射性同位元素、毒素又は薬剤と結合してい
るか又は組合わせられている）の使用。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT98A001467 | 1998-06-26 | ||
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