JP2002515878A

JP2002515878A - 脳虚血性損傷およびその他の神経の病気を治療する方法

Info

Publication number: JP2002515878A
Application number: JP50997298A
Authority: JP
Inventors: ホエーレイ，エリック，テイ．; レルトン，ジェーン，ケイ．
Original assignee: コーテックインコーポレーテッド
Priority date: 1996-08-16
Filing date: 1997-08-15
Publication date: 2002-05-28
Also published as: WO1998006417A1; CA2261130A1

Abstract

(57)【要約】この発明は一般的にいうと、ブラディキニン２受容体（Ｂ₂）に選択的に影響を及ぼすアンタゴニストまたはブラディキニン１受容体（Ｂ₁）に選択的に影響を及ぼすアゴニストを使用して脳虚血性損傷を治療することに関し、この損傷は脳卒中もしくは他の原因により生ずるもので、特に線状体（ｓｔｒｉａｔａｌ）脳虚血性損傷および皮質脳虚血性損傷によるものである。本発明はまたパーキンソン病やハンチントン病を治療のためにＢ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストを使用することに関するものである。この選択されたＢ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストは単独もしくは一緒に組合わせて該治療剤として用いることができ、またこれら単独もしくは他の治療剤との組合わせで用いることができるのである。

Description

【発明の詳細な説明】脳虚血性損傷およびその他の神経の病気を治療する方法次のような特許または特許出願公開公報がＢ₂アンタゴニストおよびその合成に関係するものとして挙げられる：ＵＳ４，６９３，９９３；ＷＯ９４／０６４５３；ＷＯ９１／０９０５５；ＥＰ５５２，１０６；ＥＰ３７０，４５３−Ａ２；ＥＰ４１３，２７７−Ｂ１；ＷＯ９３／１１７８９；ＥＰ５６４，９７２；ＷＯ９４／０８６０７；ＥＰ５７８，５２１；ＷＯ９４／１９３７２；ＷＯ９４／１１０２１；ＵＳ５，２２８，７２５；ＥＰ５９６，４０６−Ａ１；ＷＯ９５／０７２９４及びＥＰ６２２，３６１−Ａ１．発明の背景発明の分野この発明は一般的にブラディキニン２受容体（Ｂ₂）に選択的に影響を及ぼすアンタゴニストまたはブラディキニン１受容体（Ｂ₁）に選択的に影響を及ぼすアゴニストを使用して脳虚血性損傷を治療することに関し、この損傷は脳卒中もしくは他の原因により、特に線状体（ｓｔｒｉａｔａｌ）脳虚血性損傷および皮質脳虚血性損傷によるものである。本発明はまたパーキンソン病やハンチントン病または線状体（ｓｔｒｉａｔｕｍ）または微細運動調節（ｆｉｎｅｍｏｔｏｒｃｏｎｔｒｏｌ）が影響を受ける他の神経の病気の治療にＢ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストを使用することに関するものである。この選択されたＢ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストは単独もしくは一緒に組合わせて該治療剤として用いることができ、またこれらは単独もしくは他の治療剤との組合わせで用いることができるのである。背景に関する記載脳卒中（発作、ｓｔｒｏｋｅ）は世界中で１年につき１５０万人の人々に影響を及ぼしている。その患者が生き残った場合に脳卒中と合併して起こる傷病としては意志の伝達、歩行、調整もしくは思考の能力の喪失が挙げられる。脳の皮質領域への損傷は通常、喋れなくなったり、手足の調節ができなくなったりする。脳卒中の従来の治療法、あるいは脳卒中の症状が出る前のもしくは脳卒中のために臨床的に開発されたものは主に皮質を保護するかあるいは浮腫を軽減することを目的としている（脳の空隙に血漿腋が異常に蓄積する）。線状体への損傷は微細運動能力の損傷もしくは喪失という結果となり、治療が難しいことが証明されている。現在のところ線状体および皮質の両者に有効な治療法はない。本方法はこのような治療法を提供するものである。脳卒中による脳虚血性損傷はグルタミン酸塩受容体機能の損傷を生じさせるエネルギー損失によるニューロンの脱極化により生じ、ミトコンドリア損傷、酵素活性化／不活化、細胞膨潤および毒性刺激（ｅｘｃｉｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ）という結果となるおそれがある。したがって、脳卒中のための薬理学的戦略としては次のようなものがある．チャンネルブロッカー、即ちＮＭＤＡもしくはＡＭＰＡ受容体アンタゴニストを使用するグルタミン酸塩受容体機能の遮断、；再潅流損傷を改善する遊離ラジカル清掃（ｓｃａｖｅｎｇｅｒ）；ソジウムおよびカルシウムチャンネルブロッカーもしくはカルシウムチャンネルモジュレーターを用いる電圧ゲートチャンネルブロッカー；白血球粘着ブロッカーのような抗脳炎症剤；抗凝集および血栓溶解剤；ニューロトロフィン；抑制的な神経伝達の強化および種々の他の戦略。これらについての考察は全てＫｏｒｏｓｈｅｔｚおよびＭｏｓｋｏｗｉｔｚ，１７ＴＩＰＳ２２７（１９９６）による評論記事に記載されている。本発明を充分理解するために、神経損傷および脳浮腫の病原学および病理生理学におけるブラディキニンの役割について考察を加える。ブラディキニンは神経損傷および神経外傷を起こす（Ｆｒａｃｅｌ，９Ｊ．ＮｅｕｒｏｔｒａｕｍａＳ２７（１９９２）．Ｅｌｌｉｓ，４ＮｅｗＴｒｅｎｄｓＬｉｐｉｄＭｅｄｉａｔｏｒｓＲｅｓ．１２９（１９９０）が、これが血管原性脳浮腫の仲介役となっており（Ｕｎｔｅｒｂｅｒｇｅｔａｌ．，ＲｅｃｅｎｔＰｒｏｇｒｅｓｓｉｎｔｈｅＳｔｕｄｙａｎｄＴｈｅｒａｐｙｏｆＢｒａｉｎＥｄｅｍａ１７５（１９８４））、ＵｎｔｅｒｂｅｒｇおよびＢａｅｔｈｍａｎｎの６１Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．８７（１９８４）、また虚血性脳浮腫の進行の増大の役割も果たしている（Ｋａｍｉｙａｅｔａｌ．，２４Ｓｔｒｏｋｅ５７１（１９９３）。キニノゲン（Ｋｉｎｉｎｏｇｅｎ）、このものはブラディキニンの前駆体であるが、狭窄性（ｓｔｅｎｏｔｉｃ）および閉塞性（ｏｃｃｌｕｓｉｖｅ）頚動脈損傷のための神経外科治療を受けているラットおよびヒトにおける脳の虚血および再潅流の間に消費される（Ｍａｋｅｖｎｉｎａｅｔａ１．，２７（８）ＢｒａｚｉｌｉａｎＪ．Ｍｅｄ．＆Ｂｉｏ．Ｒｅｓ．１９５５（１９９４）。しかしながら、虚血におけるブラディキニンアンタゴニストの役割は組織が違うと予測し難い。ブラディキニンアンタゴニストはラビットにおける脳損傷に続く過度呼吸に対する血管反応性を弱めることが示され（Ｅｉｌｉｓ，４ＮｅｗＴｒｅｎｄｓＬｉｐｉｄＭｅｄｉａｔｏｒｓＲｅｓ．１２９（１９９０））、また低温外傷（ｃｏｌｄｌｅｓｉｏｎ）トラウマに続くラットにおける脳浮腫を減少させ、トラウマ性脳損傷に続くヒトにおける脳浮腫を減少させる（Ｒｏｄｅｌｌ，３０Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ２７９（１９９６））。これとは対照的に、心筋梗塞および心臓虚血−再潅流損傷モデルにおいてはブラディキニンＢ₂およびＢ₁受容体アンタゴニストの両者は状態を悪化させ、一方Ｂ₂アゴニストブラディキニンおよびＢ₁アゴニスト、ｄｅｓ−Ａｒｇ⁹−ＢＫは保護的である。Ｃｈａｈｉｎｅｅｔａｌ．，１０８Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３１８（１９９３）；Ｌｉｎｚｅｔａｌ．，４７Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｖ．２５（１９９５）；Ｐａｒｒａｒｔｅｔａｌ．，７３Ｃａｎ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．８３７（１９９５）。ＥＰＯ特許公開公報ＷＯ９５／０７２９４はブラディキニンＢ₁およびＢ₂受容体アンタゴニストを開示している。この出願ではこの化合物を脳卒中のために用いることが記載されているがデータは示されていない。同様に米国特許出願においてもブラディキニンアンタゴニストが脳卒中との関連で記載されている。両開示とも単に推測の域を出ずデータを提供していない。Ｂ₁アンタゴニストはブタの内部毒性ショックにおける生存のためのＢ₂アンタゴニストの保護効果を逆行させることもまた今までに示されている。Ｓｉｅｂａｃｋｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ。しかしながら正常な生理学におけるＢ₁の役割については明確な理解が得られるまでに至っていない。発明の要旨本発明の目的はＢ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストを用いて脳虚血性損傷を治療する方法を提供することであり、Ｂ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストは治療剤として各々単独でもしくは両者一緒に用いるか、また他の治療剤とは別個にもしくは他の治療剤と組合わせて用いるものである。Ｂ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストを用いて脳卒中を治療する方法を提供することももう一つの目的であり、その際この方法はこれらを単独でもしくは他の治療法と組合わせて用いられる。したがって、Ｂ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストを用いて線状体虚血性損傷を治療する方法を提供することが本発明の目的であり、その際この方法は単独でもしくは他の治療と組合わせて用いられる。またＢ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストを用いて皮質虚血性損傷を治療する方法を提供することも本発明の目的であり、その際この方法は単独でもしくは他の治療と組合わせて用いられる。更にＢ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストを用いて神経の疾患を治療する方法を提供することを目的とするものである。またＢ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストを用いてハンチントン病もしくはパーキンソン病を治療する方法を提供するものであり、その際この方法は単独でもしくは他の治療と組合わせて用いられる。またＢ₂アンタゴニストを単独であるいは他の治療と組合わせて再潅流損傷を治療する方法を提供するものである。本発明の他の目的および概要は以下の詳細な説明から明らかになるであろう。図面の簡単な説明第１〜８図において、全て化合物は中大脳動脈（ｍｉｄｄｌｅｃｅｒｅｂｒａｌａｒｔｅｒｙ）を永久に閉塞する３０〜４５分前に、ミニ浸透圧ポンプで皮下的に実験の間中（２４時間）与えられた。第１図：中大脳動脈の永久閉塞後２４時間のラットにおける総梗塞容積に対するブラディキニンＢ₂受容体アンタゴニストＣＰ−０５９７の効果である。この図は治療を受けていない対照ラットと比べ、ＣＰ−０５９７を与えたものではその投与量に比例した保護効果があることを示している。ＣＰ−０５９７を３０ｎｇ／ｋｇ／分の投与量で、対照のラットの別の１グループに投与された（ｂ）。第２図：中大脳動脈の永久閉塞後２４時間の、ラットにおける線状体梗塞容積に対するブラディキニンＢ₂受容体アンタゴニストＣＰ−０５９７の効果である。この図は生理食塩水で処理した対照ラットと比べた場合の、ＣＰ−０５９７の投与量に比例した保護効果を示している。第３図：中大脳動脈の永久閉塞後２４時間の、ラットにおける総梗塞容積に対するＢ₂／Ｂ₁受容体アンタゴニストの組合わせのＢ９４３０の効果である。この図は、Ｂ₂およびＢ₁受容体の両者をブロックすることによっては何ら保護がなされず、生理食塩水処理の対照ラットに比べて損傷を悪化させている場合もあることを示している。第４図：ラットにおける中大脳動脈の永久閉塞に続く２４時間の、ラットにおける総梗塞容積に対するＢ₁アンタゴニスト（Ｂ−９８５８）単独およびＢ₂アンタゴニストＣＰ−０５９７との組合わせの効果である。この図はＢ₁アンタゴニスト単独では梗塞容積に何ら効果がなくＣＰ−０５９７と組合わせて投与されたときにＣＰ−０５９７単独の際の保護効果を逆行させ（第１図参照）、生理食塩水処理対照に比べて損傷を悪化させた可能性があることを示している。第５図：ラットにおける中大脳動脈の永久閉塞後２４時間の、ラットにおける総梗塞容積に対するＢ₂アンタゴニストＨＯＥ１４０およびＮＰＣ１７７３１の効果である。これらのＢ₂受容体アンタゴニストは対照に比べて損傷に対し保護を与えた。第６図：ラットにおける中大脳動脈の永久閉塞後２４時間の、ラットにおける線状体梗塞容積に対するブラディキニンＢ₂アンタゴニストＨＯＥ１４０およびＮＰＣ１７７３１の効果である。これらのＢ₂受容体アンタゴニストは両者共、対照に比べ線状体損傷に対し有意の保護を与えた。第７図：ラットにおける中大脳動脈の永久閉塞後２４時間の、ラットにおける総梗塞容積に対するＮＭＤＡアンタゴニストＭＫ８０１の効果である。ＭＫ８０１は対照ラットに比べて損傷からの有意の保護を与えていた。第８図：ラットにおける中大脳動脈の永久閉塞後２４時間の、ラットにおける線状体梗塞容積に対するＮＭＤＡアンタゴニストＭＫ８０１の効果である。ＭＫ８０１は食塩水処理対照に比べ線状体損傷に対し保護を与えなかった。第９図：中大脳動脈の永久閉塞後２４時間の、ａ）総、ｂ）皮質およびｃ）線状体梗塞容積に対するブラディキニンＢ₂アンタゴニストＣＰ−０５９７の効果である。この実験ではこの化合物は該動脈閉塞後３０〜４０分で与えられもので後処理を表わす。ＣＰ−０５９７は線状体損傷に有意の保護を与えるが皮質損傷は保護しない。第10図：ＣＰ−０５９７、ＨＯＥ１４０およびＮＰＣ１７７３１の構造。第11図：ラットにおける可逆的なＭＣＡＯの前後における行動評価に対するＢ₂ アンタゴニストＣＰ−０５９７の効果である。ＣＰ−０５９７で治療することによって、可逆的なＭＣＡＯの後２４時間での測定により、担体（ｖｅｈｉｃｌｅ）処理対照に比べ平均行動評価点数を有意に増加させた（Ｐ＜０．０１）。第12図：ラットにおける可逆的ＭＣＡＯ後２４時間の体重の変化に対するＣＰ− ０５９７の効果である。この実験期間にわたっての体重の平均減少は担体対照に比べＣＰ−０５９７で治療したラットでは有意に少なかった（Ｐ＜０．０１）。第13図：脳卒中のｒＭＣＡＯモデルに用いた断面を示すラット脳の背部形態。脳の損傷の組織学的分析のために取り出された部位を示すラット脳の背部形態を示す。第14図：ｒＭＣＡＯ後２４時間のラット脳の冠状切片を示す。担体（溶剤）もしくはＣＰ−０５９７で処理したラットからのＨ＆Ｅ染色脳切片（Ａ−Ｅ）に対する脳損傷の分布。第15図：浮腫に対するＣＰ−０５９７の効果である：半球サイズの増加パーセント。可逆的ＭＣＡＯ後に観察される半球サイズにおけるこの増加パーセントは、担体処理対照に比べてＣＰ−０５９７で処理したラットからの全脳切片（Ａ−Ｅ）において有意に減少した（Ｐ＜０．０５）。第16図：ｒＭＣＡＯ後２４時間後の、絶対的梗塞域に対するＣＰ−０５９７の効果を示す。絶対的脳梗塞域は担体処理対照に比べてＣＰ−０５９７で処理したラットからの全脳切片（Ａ−Ｅ）において有意に減少した。第17図：ｒＭＣＡＯ後２４時間の絶対梗塞容積に対するＣＰ−０５９７の効果を示す。総絶対梗塞容積を、各々の定位座標に対してプロットされた連続した脳切片上の梗塞域の曲線の下の領域として計算した。平均絶対梗塞容積は、担体で処理した対照に比べてＣＰ−０５９７で処理したラットにおいて６０％（Ｐ＜０．００１）有意に減少した。皮質および皮質下領域が各々６３％および４３％保護された。第18図：ｒＭＣＡＯ後２４時間の絶対梗塞容積に対するＣＰ−０５９７の効果を示す。各脳切片についての蒼白域（ｐａｌｌｏｒ）を定位マップ上にスケッチし、半球状の膨潤に対し調整し、このマップから梗塞のひろがりを数量化した。このようにして計算された梗塞域は担体処理対照に比べてＣＰ−０５９７で処理したラットからの全脳切片（Ａ−Ｅ）において有意に減少した。第19図：ｒＭＣＡＯ後２４時間の絶対梗塞容積に対するＣＰ−０５９７の効果を示す。調節された梗塞容積の総量を上記のようにして計算した。梗塞容積は、ＣＰ−０５９７で処置したラットにおいて担体処理の対照に比べ有意に５７％減少した（Ｐ＜０．００１）。皮質および皮質下領域が各々６０％および４９％保護された。第20図：神経損傷のサンプルとされたラット脳の領域。神経細胞計数のための脳サンプルの特定の領域を図示する。壊死神経細胞の数は、担体およびＣＰ−０５９７で処理した動物からのＨ＆Ｅで染色された脳切片の内の切片Ｃ上の同一部位でカウントした。第21図：神経計数、切片Ｃ、領域II。ａ）擬似手術対照、ｂ）ｒＭＣＡＯ後２４時間の担体処理したラットおよびｃ）ｒＭＣＡＯ後２４時間のＣＰ−０５９７処理ラットからのＨ＆Ｅ染色Ｃ切片（領域II、体壁皮質）の顕微鏡写真（２０×倍率）を示す。第22図：８０Ｘ領域につき死んだ神経数に対するＣＰ−０５９７の効果を示す。領域Ｉ−IVにおける壊死神経数は担体処理対照に比しＣＰ−０５９７処理ラットでは有意に減少した。第23図：ａ）１時間の虚血およびｂ）２４時間の再潅流が為された後のラット脳中のブラディキニンＢ₁受容体の同定。特定の神経細胞と結合しているｂ）中のＢ₁受容体（黒染色）に注意されたい。発明の詳細な説明脳におけるＢ₂受容体に対する拮抗作用および／又はＢ₁受容体に対する作動作用（アゴニズム）によって、天然のペプチドブラディキニンの過剰生産による損傷から脳が保護されることを、本発明者等はこの度初めて発見したものである。今回の明細書で開示するまでブラディキニンと関連している病理状態におけるＢ₂ もしくはＢ₁受容体の役割が何であるかは不明であった。これは第１に実験が全く行なわれていないので結果が出せないことによるが、他にも虚血におけるブラディキニンの役割の相対立する証拠が存在するという理由のためである。神経病理学におけるＢ₂アンタゴニストおよびＢ₁アゴニストの役割を本発明者等は明確にし、本発明では、治療剤としてＢ₂アンタゴニストおよびＢ₁アゴニストを用い神経の病気を治療することについても記載している。線状体および皮質の両者における虚血性損傷を治療するためのＢ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストの能力がこのたび新しく発見されたもので、これは臨床的に重要な発見である。脳卒中の病理において皮質と線状体の両者が影響を受けるとき、前述の治療では、主に皮質を守るという結果を生じるのであった。このようにこれまでの方法では、線状体の治療が為されず損傷を完全に広げてしまい好ましくないのである。したがって線状体損傷同様皮質損傷をも治療できるある種の化合物を見出したことは驚くべきことでありまた予測し難いことであった。本発明は脳卒中の治療法を提供するものであり、これは従来使用されてきた方法に比べ非常にすぐれているものである。Ｂ₂アンタゴニストＢ₂アンタゴニストは一般に２つのカテゴリーに分けられている：即ちペプチドに類するものと非ペプチドに類するものである。この分野では、利用し得るＢ₂ アンタゴニストがいくつか知られており、また既知のＢ₂アンタゴニストをわずかに改変することによって活性化合物になることもまた知られている。更に多くのペプチドおよび非ペプチドＢ₂アンタゴニストが将来必ず発明されると考えられる。本開示の目的のためには、Ｂ₂受容体において選択的な活性を示す化合物はいずれも本発明方法に有用である。「Ｂ₂受容体に対して選択的」という語はＢ₂／Ｂ₁Ｋｉ比が１００より大であるような化合物を指すものである。しかしながら５００〜１０００の範囲の比率のものが好ましいものである。最も好ましい化合物はＢ₂／Ｂ₁比が１０００より大のものである。ペプチドに基くＢ₂アンタゴニスト化合物は例えば次のような文献に挙げられている：Ｃｈｅｒｏｎｉｓｅｔ．ａｌ．，３５Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１５６３（１９９２）；Ｋｙｌｅ＆Ｂｕｒｃｈ，２Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ５（１９９３）；Ｈｏｃｋｅｔａｌ．，１０２Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．７６９（１９９１）；Ｈｏｃｋｅｔａｌ．，１０２Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．７７４（１９９１）；Ｂｕｒｋｅｅｔ．ａｌ．，５（４）Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ３３１（１９９５）他。これらの化合物は全て本明細書に開示されている方法に有用である。非ペプチドおよびペプトイドＢ₂アンタゴニスト化合物は次に示されているものを含んでいる。：Ｓａｗｕｔｚｅｔ．ａｌ．，９１Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌＡｃａｄ．Ｓｃｉ．４６９３（１９９３）；Ｌａｍｅｔ．ａｌ．，５２Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ４８１（１９９６）；Ｉｎａｍｕｒａｅｔａｌ．，ＣｈａｒｓｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＦＲ１７３６５７，ａｎｏｖｅｌｎｏｎ −ｐｅｐｔｉｄｅＢＫ₂ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ，ｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｉｎｖｉｖｏｓｔｕｄｉｅｓ，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ−ＰｅｐｔｉｄｅＲｅｃｅｐｔｏｒｓＳｙｍｐｏｓｉｕｍ，Ｍｏｎｔｒｅａｌ（１９９６）；Ｋｙｌｅｅｔａｌ．ＷＯ９５／０７２９４（１９９５）他。これらの化合物は全て本明細書に開示されている方法に有用である。更に、神経の病気のための多くの治療法が既に知られている。Ｂ₂アンタゴニストとこれらの治療法との組合わせが本発明の範囲内のものである。最近の２つの考察が、本発明にしたがってＢ₂アンタゴニストと組み合わせることのできる種類の治療法の実例を提供している。Koroshetz & Moskowitz，17 TIPS 227(199 6);Barinaga，272 Science 664(1996)。本開示の目的のためにこのような治療法を「アジュバント（ａｄｊｕｖａｎｔ（ｓ））」と定義する。上記の剤の殆どが脳卒中の動物モデルで有効であり、それらの作用は主に皮質の損傷を保護するかまたは炎症／浮腫を減少させることを介して生じている。上記の剤で線状体の損傷に対し有効な効果をもつものは皆無である。本発明に開示されているように、ブラディキニンＢ₂アンタゴニストは、皮質よりは線状体の損傷を保護するという主たる効果で総梗塞容積を減少させる。ブラディキニンアンタゴニストは又ヒトの脳浮腫を減少させるものである。即ち、ブラディキニンＢ₂アンタゴニストとアジュバントの組合わせは相乗的で皮質および線状体損傷の両者を保護するものである。最後に、ある化合物がＢ₂受容体アンタゴニストであるかどうかを決めるアッセイ法は知られている。ラットおよびヒトＢ₂受容体がクローン化され、蛙卵母細胞内に注入されたＲＮＡに基づくアッセイが特徴的なものである。Ｂｕｒｋｅら、ＭｏｌｅｃｕｌａＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙｏｆＢｒａｄｙｋｉｎｉｎＲｅｃｅｐｔｏｒｓ１９（１９９３）を参照されたい。更にＢ₂活性を測定する古典的アッセイ、即ちモルモット腸骨アッセイもまた適用可能である。Ｂ₁活性の古典的アッセイ、即ちラビット大動脈平滑筋アッセイがＢｕｒｋｅｅｔ．ａｌ．，ＭｏｌｅｃｕｌａＢｉｏｉｏｇｙａｎｄＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙｏｆＢｒａｄｙｋｉｎｉｎＲｅｃｅｐｔｏｒｓ６（１９９３）において検討され他のアッセイと比較されている。Ｂ₁アゴニストペプチドを基体とするＢ₁アゴニストの例は次の文献に見出すことができる。ＲｅｇｏｌｉａｎｄＢａｓａｂｅ，ＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＲｅｖｉｅｗ，１９８０，３２，１−４６；Ｍａｒｃｅａｕ，Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９５，３０，１−２６；Ａｕｄｅｔ，ｅｔａｌ．Ｐｈａｒｍ．ａｎｄＴｈｅｒ．，１９９７，２８０，６−１５；Ｒｅｇｏｌｉ，ｅｔａｌ．，Ｃａｎ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．，１９７７，５５，８５５ −８６７；Ｄｒａｐｅａｕ，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，１９９３，２６６，１９２−１９９；Ｌｅｖｅｓｑｕｅ，ｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９５，２９，１４１−１４７；Ｄｒａｐｅａｕ，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，１９９１，２５９，９９７−１００３；ＤｒａｐｅａｕａｎｄＲｅｇｏｌｉ，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１９８８，１６３，２６３−２７２．ペプチドおよびペプチドを基体とするブラディキニンＢ₁アゴニストは上記文献中に記載されているようにして製造し、同定し、アッセイすることができる。ブラデイキニンＢ₁アゴニストはＰｈｏｅｎｉｘＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．（ＭｏｕｎｔａｉｎＶｉｅｗ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ），ＳｉｇｍａＣｈｅｍ．Ｃｏ．（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｉｓｓｏｕｒｉ），Ｂａｃｈｅｍ（Ｔｏｒｒｅｎｃｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）およびＰｅｎｉｎｓｕｌａＬａｂｓ（Ｂｅｌｍｏｎｔ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）のような種々の販売会社から購入することもできる。脳卒中の動物モデルに関することについてはＨｕｎｔｅｒｅｔａｌ．，６ＴＩＰＳ１２３（１９９６）により考察されている。中大脳動脈永久閉塞のラットモデルはヒトの脳卒中の症状の擬態であり、この障害の治療のために治療的に有効であると考えられる化合物の評価に用いられる標準モデルである。Ｔａｍｕｒａｅｔａｌ．，１（１）Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．ＢｌｏｏｄＦｌｏｗＭｅｔａｂｏｌ．５３（１９８１）；Ｇａｒｃｉａｅｔａｌ．，２６（４）Ｓｔｒｏｋｅ６２７（１９９５）．保護されたアミノ酸残基の誘導体形成、活性化およびカップリングを含む本発明に有用なペプチドの合成法、およびその精製、および同定し、純度を測定するための分析法は次のようなペプチド化学の一般的な文献に記載されている：液相合についてはＨｏｕｂｅｎＷｅｙｌＭｅｔｈｏｄｅｎｄｅｒＯｒｇａｎｉｓｃｈｅｎＣｈｅｍｉｅ（１９７４）Ｖｏｌ．１６，ｐａｒｔｓＩ＆IIに、そしてメリフィールドの固相合成についてはＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，（１９８４），ｂｙＳｔｅｗａｒｔａｎｄＹｏｕｎｇに記載されている。ペプチド合成の分野の化学者であれば誰でも標準的な溶液法またはマニュアルもしくは自動化された固相法により本発明で有用なペプチドを合成することができる。本発明による治療法は有効量の活性化合物を経口的にもしくは局所的に対象に投与することを含む。本発明方法における活性化合物の投与量は有効かつ非毒性の量で０．０１〜５００ｍｇ／ｋｇ；好ましくは０．１〜５０ｍｇ／ｋｇの活性化合物の範囲である。通常の臨床テストを使用するこの分野の当業者であれば、治療されている特定の患者に対する好適な投与量を決めることができるであろう。好適な剤を対象に対し１日に１〜６回もしくはそれ以上、静脈内、経口的に、直腸内に、非経口的に、局所的にもしくは吸入によって投与される。好適な剤を継続的な静脈内輸注によって投与することもでき、これは本投与の好ましい形態である。本発明においては、Ｂ₂アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストの非経口投与においては、該化合物は抗酸化剤、緩衝液、静菌剤等を含有してもよい水性注射液の形に製剤することができる。無菌のピル、顆粒もしくは錠剤から即時調合の注射液を調製することもでき、これには希釈剤、分散および表面活性剤、結合剤および潤滑剤を含有させることができ、これらの剤は全て当業者によく知られているものである。経口投与の場合には、該化合物の細かな粉もしくは顆粒を希釈剤および分散剤および表面活性剤を用いて調製することができ、また水剤もしくはシロップ剤とすることもでき、乾燥状態もしくは非−水性懸濁液でのカプセルやカシェ剤とすることもでき、この場合懸濁剤を含有してもよい。該化合物は必要であれば、結合剤や滑剤と共に錠剤の形で投与してもよく、また水やシロップの懸濁液、油状物もしくは水／油エマルジョンの形で投与してもよく、矯味剤、保存剤、懸濁剤、肥厚剤および乳化剤を含有することもできる。経口投与のための顆粒剤もしくは錠剤はコーティングすることもでき、また他の製薬学的に許容し得る剤や製剤を使用することもでき、これは薬学の分野の当業者によく知られているものである。固体もしくは液体の担体もまた用いることができる。固体の担体としてはでん粉、ラクトース、硫酸カルシウム二水化物、テラアルバ（ｔｅｒｒａａｌｂａ）、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸が挙げられる。液体担体としてはシロップ、落花生油、オリーブ油、食塩水および水が挙げられる。軟膏およびクリームが種々のよく知られている親水性および疎水性ベースを用いて調製される。所望の放出特性を与えるように選択された種々のアクリル性ポリマーのような既知の高分子物質を用いて局所レザバー（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓ）が好適に調製される。ポリエチレングリコールおよびココアバターのような標準的なベースから座薬が調製される。実施例実施例１永久閉塞モデルのプロトコル複数群のラットをハロエタンで麻酔し、左中大脳動脈（ＭＣＡ）の永久閉塞を行なうか擬似手術（ｓｈａｍｓｕｒｇｅｒｙ）を行なった。永久閉塞はＭＣＡの電気凝固法により導入された。これらのラットは覚醒させ２４時間後に殺し、その際梗塞容積および他のパラメーターを測定した。梗塞のサイズはテトラゾリウムで染色した５００マイクロメーター冠状（ｃｏｒｏｎａｌ）脳切片から決定した。複数群の動物をブラインド方式でブラディキニンアンタゴニストもしくは担体（ｖｅｈｉｃｌｅ）で前処理をした。ＭＣＡ手術直後に埋め込んだ予備活性化したミニ浸透圧ポンプを経由して薬剤もしくは食塩水を皮下に入れた。担体を与えた対照とＣＰ−０５９７を１０、３０、１００および３００ｍｇ／ｋｇ／分投与したものとを２４時間の間比較した。実施例２永久の閉塞モデルの結果脳卒中のモデルの梗塞のサイズはＣＰ−０５９７の投与量に比例して有意の減少がもたらされた。４ｍｇ／ｋｇ秒の投与量でＮＭＤＡアンタゴニストＭＫ８０１についてもこのモデルでテストした。ＣＰ−０５９７ではわずかに０．４３２ｍｇ／ｋｇの投与量で、ＭＫ８０１を４ｍｇ／ｋｇの投与したときと同等の梗塞サイズの減少が２４時間以上にわたって続いた。ＣＰ−０５９７はこの脳卒中モデルにおける総梗塞サイズを投与量に比例して減少させ（第１図）、これは４ｍｇ／ｋｇのＭＫ８０１でみられるものに匹敵する（第７図）。ＣＰ−０５９７の効果が線状体の損傷に対し最大であり、対照に比べ９０％より大の保護を行ない（第２図）、皮質の損傷に対してはいくらかの保護をしていた。ＭＫ８０１は皮質の損傷に対し保護効果を有するが、線状体域にはほんの少ししか効果がないか、あるいは全く効果がなかった（第８図）。線状体および皮質の損傷に対するＣＰ−０５９７の保護効果と同様の効果が他のＢ₂ アンタゴニストＮＰＣ１７７３１およびＨＯＥ１４０において見られた（第５図および６図）。Ｂ₂／Ｂ₁アンタゴニストの組合わせ、Ｂ９４３０は脳の損傷をわずかに悪化させた（第３図）。Ｂ₁アンタゴニストだけでは全く効果がなく、Ｂ₂アンタゴニストＣＰ−０５９７との組合わせでは損傷をわずかに悪化させた。このことからするとＢ₂受容体は破壊的でありＢ₁受容体は保護的である可能性があるということが示唆されるであろう。最後に、ＣＰ−０５９７は中大脳動脈閉塞後３０〜４５分投与されると線状体損傷に対する保護を与えた（第９図）。これらのデータは、Ｂ₂受容体アンタゴニストおよび／又はＢ₁アゴニストを、それらを単独でもしくは皮質損傷に対する追加の保護を提供する剤との組合わせで、脳卒中／虚血に対して使用することを支持している。実施例３可逆的閉塞モデルのプロトコル可逆的なＭＣＡＯはラット縫合モデルのＺｅａＬｏｎｇａ，Ｅ．ら（１９８９）Ｓｔｒｏｋｅ２０：８４−９１を用いて行なわれた。簡単に言うと、雄のウィスターラット（２７０−３００ｇ）をハロエタンを用いて麻酔し、次いで４ −０ナイロンモノフィラメントを右外部頚動脈に入れることによってＭＣＡＯを行ない、この内部頚動脈を通じてＭＣＡのｏｒｉｇｉｎへと通じさせた。１時間後、このフィラメントを除き（ｒｅｔｒａｃｔ）この虚血域の再潅流を可能とした。担体もしくはＣＰ−０５９７を含有する感作されたミニ浸透圧ポンプをＭＣＡＯ直後に皮下部分に植え付けた。これらのポンプは続く２４時間以上の間、３００ｎｇ／ｋｇ／分の割合でＣＰ−０５９７を、もしくは８μｌ／ｈの割合で担体（溶剤）を放出した。ＭＣＡＯ後２４時間でラットは０．９％食塩水続いてＢｏｕｉｎ溶液で心臓潅流を受ける。固定脳を１ｍｍの順次並んだブロック（Ａ− Ｅ）で４μｍの切片に切断しヘマトキシリンおよびエオシン（Ｈ＆Ｅ）で染色した。ラットの臨床的評価を前足の屈曲動作の対称性および後足の伸び方（ｏｕｔｓｔｒｅｃｈｉｎｇ）（正常＝１０）および体重の変化をこの実験期間の間、神経学的に点数をつけることによって行なった。順に並んだ脳切片（Ａ−Ｅ）をその虚血性半球の半球サイズの変化のパーセンテージを対側性の損傷を受けていない半球と比べ組織病理学的に評価して脳浮腫を測定した。Ｈ＆Ｅ染色脳切片について蒼白の領域として梗塞のサイズを測定し、絶対的な梗塞サイズおよび浮腫に対して調整された梗塞サイズとして定量化した。前交連(anterior commissure )のレベルに相当する組織ブロックＣの規定された皮質および線状体領域において壊死性神経の神経細胞の測定を行なった。実施例４可逆的閉塞モデルの結果ＭＣＡＯを受けた担体処理対照ラットはその脳の皮質および皮質下領域全部にわたって広く外傷を持っており、その虚血性半球は著しく膨れ有意の行動障害が観察された。Ｂ₂受容体アンタゴニストＣＰ−０５９７で処理したものは担体処理ラットに比べ行動結果、体重変化を改善し、虚血導入後２４時間で測定した梗塞および脳浮腫のひろがりを減少させた。結果は平均値±ｓｅｍ（１グループにつきｎ＝１２）として表わしている。Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ−テスト（^***はｐ＜０．００１を外挿、^**＝ｐ＜０．０１、^*＝ｐ＜０．０５）を用いて統計的分析を行なった。再潅流（虚血導入後１時間）の際には処理および非処理動物の両者において神経学的スコアは類似のものであったが、ＭＣＡＯ後２４時間で測定した際には、ＣＰ−０５９７で処理したラットは有意に改善されていた（担体：２．５８±０．３７対ＣＰ−０５９７：６．９±０．８９、ｐ＜０．００１、第１図）。実験期間中に観察された体重の減少は、担体処理対照（−２８．３±２．３ｇ、ｐ＜０．０１、第１２図）に比べてＣＰ−０５９７処理ラット（−１７．７± ３ｇ）において有意に減少した。第１４図は手術後２４時間で測定された食塩水処理対照脳に観察される広い脳梗塞および浮腫と、ＣＰ−０５９７で処理した後に観察される損傷の劇的な減少を図示している。脳損傷を定量したところ、担体処理ラットでは脳切片Ａ−Ｅにわたって２５〜４０％の深い同側脳半球拡大を示した。この半球サイズのパーセンテージ増大は、ＣＰ−０５９７処理動物では８〜２０％に有意に減少した（第１５図）。梗塞サイズについては、脳浮腫に対して調整された容積と絶対的容積の両者を測った。Ｈ＆Ｅで染色した各脳切片の蒼白域を固定切片から直接定量化し（絶対域）、そしてＡ−Ｅの切片に対して定位マップ上につくられたスケッチ（調整域）から定量した。絶対梗塞域および調整梗塞域の両方が、担体処理対照に比べてＣＰ−０５９７処理動物において分析された全ての切片において減少していた（第１６および１８図）。総梗塞容積は、系列脳切片の各々の定位座標に対してプロットされた系列脳切片上の梗塞域の曲線の下の領域として計算した。平均絶対総梗塞容積は担体処理対照（２８４．９ ±１７．４ｍｍ³）に比べてＣＰ−０５９７処理ラット（１１４．１±３０．１ｍｍ³）において６０％（ｐ＜０．００１）有意に減少した。皮質および皮質下保護について更に分析したところ各々６３％および４３％であった（第１７図）。平均調整梗塞容積は担体処理対照（２０４．５±８．６ｍｍ³）に比べてＣＰ −０５９７処理ラット（８８．８±２１．１ｍｍ³）において５７％（ｐ＜０．００１）有意に減少し、皮質および皮質下保護については各々６０％および４９％であった（第１９図）。Ｈ＆Ｅで染色された脳切片Ｃから取られた組織サンプルは神経細胞のカウントのため高倍率（２０×）で試験された。４つの特定の分野（第２０図）の各々において壊死神経細胞の数が測定された。ＣＰ−０５９７で処理することにより体壁および視索前方皮質および線状体における壊死神経の数を担体処理対照動物に比べて減少させた（第２１および２２図）。虚血の導入後で組織再潅流の時間より前に、ブラディキニンＢ₂受容体アンタゴニストＣＰ−０５９７で処理することにより、ラットにおける可逆的局限的脳虚血のモデルにおける虚血性傷に対し有意に脳が保護された。このモデルの症状はヒトの脳卒中の状態を臨床的に代表しており、現在のデータはＣＰ−０５９７がこの卒中および他の虚血関連障害の処理において有意の効果を与えることを示唆している。実施例５Ｂ₁アゴニズムの証拠組合わせられたＢ₁／Ｂ₂アンタゴニストＢ９４３０は３００ｎｇ／ｋｇ／分ｓ．ｃ．で梗塞容積に何の効果も無かった。Ｂ₁アンタゴニストＢ９８５８は３００ｎｇ／ｋｇ／分ｓ．ｃ．単独で梗塞容積に何の効果もなく、ＣＰ−０５９７と共に投与されるとＣＰ−０５９７の保護的効果を逆転させた。Ｌｙｓ０−ｄｅｓ −Ａｒｇ９−Ｌｅｕ８−ＢＫ（ＣＰ−０２９８）はＣＰ−０５９７と共に投与するとやはりＣＰ−０５９７の保護的効果を逆転させた。Ｂ₁受容体は正常な脳には正常には存在しない。１時間の虚血（可逆的中大脳動脈閉塞）後再潅流した後２４時間において、Ｂ₁受容体を脳の卒中を起こしている側の皮質および線状体に認めることができる。卒中を起こしていない対側性半球にはＢ₁受容体は全く認められない。このことは、虚血−再潅流に続いて時間経過と共に脳内にＢ₁受容体の上昇調整があることを示唆している。したがって、このことはＢ₁アンタゴニストがＢ₂アンタゴニスト（ＣＰ−０５９７）の保護的効果を逆転させるというデータを支持し、この効果はおそらく特定のＢ₁受容体を介して仲介されていることを示唆し、Ｂ₁受容体のいくつかは損傷を受けた脳における神経細胞に存在しているのである。このことは、虚血および再潅流に応答して神経細胞を保護しようとＢ₁受容体が上昇調整されていることを示唆するものである。したがってブラディキニンＢ₁アゴニストは脳の虚血再潅流（脳卒中）に続いて投与されることが有効であろうし、その受容体は時間と共に上昇調整されるので、治療の機会が広くあることを示しているのである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 25/00 Ａ６１Ｐ 25/14 25/14 25/16 25/16 Ａ６１Ｋ 37/02 (31)優先権主張番号６０／０３７，９８１ (32)優先日平成９年２月13日(1997．2．13) (33)優先権主張国米国（ＵＳ） (31)優先権主張番号０８／９１０，４５３ (32)優先日平成９年８月５日(1997．8．5) (33)優先権主張国米国（ＵＳ） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ

Claims

【特許請求の範囲】１．Ｂ₂アンタゴニストを投与することを包含する、治療を要している脳卒中（ｓｔｒｏｋｅ）の患者を治療する方法。２．更にアジュバントを投与することを包含する請求項１の方法。３．アジュバントが血栓崩壊剤である請求項２の方法。４．血栓崩壊剤が組織プラスミノーゲンアクチベーターである請求項３の方法。５．アジュバントが、ＮＭＤＡ、ＡＭＰＡ、グリシン、カルシウムチャネルおよびナトリウムチャネルからなる群から選択される受容体のアンタゴニストである請求項２の方法。６．Ｂ₂アンタゴニストが、ＣＰ−０５９７、ＨＯＥ１４０およびＮＰＣ１７７３１からなる群から選択されたものである請求項１の方法。７．更にアジュバントを投与することを包含する請求項６の方法。８．Ｂ₂アンタゴニストを投与することを包含する、治療を要している脳虚血性障害患者を治療する方法。９．更にアジュバントを投与することを包含する請求項８の方法。 10．アジュバントが血栓崩壊剤である請求項９の方法。 11．血栓崩壊剤が組織プラスミノーゲンアクチベーターである請求項10の方法。 12．アジュバントが、ＮＭＤＡ、ＡＭＰＡ、グリシン、カルシウムチャネルおよびナトリウムチャネルからなる群から選択される受容体のアンタゴニストである請求項９の方法。 13．Ｂ₂アンタゴニストが、ＣＰ−０５９７、ＨＯＥ１４０およびＮＰＣ１７７３１からなる群から選択されたものである請求項８の方法。 14．更にアジュバントを投与することを包含する請求項13の方法。 15．脳虚血性傷害が線状体虚血傷害である請求項８の方法。 16．更にアジュバントを投与することを包含する請求項15の方法。 17．アジュバントが血栓崩壊剤である請求項16の方法。 18．血栓崩壊剤が組織プラスミノーゲンアクチベーターである請求項17の方法。 19．アジュバントが、ＮＭＤＡ、ＡＭＰＡ、グリシン、カルシウムチャネルおよびナトリウムチャネルからなる群から選択される受容体のアンタゴニストである請求項16の方法。 20．Ｂ₂アンタゴニストが、ＣＰ−０５９７、ＨＯＥ１４０およびＮＰＣ１７７３１からなる群から選択されたものである請求項15の方法。 21．更にアジュバントを投与することを包含する請求項20の方法。 22．脳虚血性傷害が皮質虚血傷害である請求項８の方法。 23．Ｂ₂アンタゴニストが、ＣＰ−０５９７、ＨＯＥ１４０およびＮＰＣ１７７３１からなる群から選択されたものである請求項22の方法。 24．更にアジュバントを投与することを包含する請求項23の方法。 25．Ｂ₂アンタゴニストを投与することを包含する、治療を要している神経系の病気により細かな運動を実行する能力の減少した患者を治療する方法。 26．Ｂ₂アンタゴニストが、ＣＰ−０５９７、ＨＯＥ１４０およびＮＰＣ１７７３１からなる群から選択されたものである請求項25の方法。 27．更にアジュバントを投与することを包含する請求項26の方法。 28．神経系の病気がパーキンソン病である請求項25の方法。 29．神経系の病気がハンチントン病である請求項25の方法。 30．Ｂ₂アンタゴニストを投与することを包含する、治療を要している再潅流傷害の患者を治療する方法。 31．Ｂ₁アゴニストを投与することを包含する、治療を要している脳卒中（ｓｔｒｏｋｅ）の患者を治療する方法。 32．更にアジュバントを投与することを包含する請求項31の方法。 33．アジュバントが血栓崩壊剤である請求項32の方法。 34．血栓崩壊剤が組織プラスミノーゲンアクチベーターである請求項33の方法。 35．アジュバントが、ＮＭＤＡ、ＡＭＰＡ、グリシン、カルシウムチャネルおよびナトリウムチャネルからなる群から選択される受容体のアンタゴニストである請求項32の方法。 36．Ｂ₁アゴニストが次の文献に記載されているものから選ばれるものである請求項31の方法。37．更にアジュバントを投与することを包含する請求項36の方法。 38．Ｂ₁アゴニストを投与することを包含する、治療を要している脳虚血性障害患者を治療する方法。 39．更にアジュバントを投与することを包含する請求項38の方法。 40．アジュバントが血栓崩壊剤である請求項39の方法。 41．血栓崩壊剤が組織プラスミノーゲンアクチベーターである請求項40の方法。 42．アジュバントが、ＮＭＤＡ、ＡＭＰＡ、グリシン、カルシウムチャネルおよびナトリウムチャネルからなる群から選択される受容体のアンタゴニストである請求項39の方法。 43．Ｂ₁アゴニストが次の文献に記載されているものから選ばれるものである請求項38の方法。 44．更にアジュバントを投与することを包含する請求項43の方法。 45．脳虚血性傷害が線状体虚血傷害である請求項38の方法。 46．更にアジュバントを投与することを包含する請求項45の方法。 47．アジュバントが血栓崩壊剤である請求項46の方法。 48．血栓崩壊剤が組織プラスミノーゲンアクチベーターである請求項47の方法。 49．アジュバントが、ＮＭＤＡ、ＡＭＰＡ、グリシン、カルシウムチャネルおよびナトリウムチャネルからなる群から選択される受容体のアンタゴニストである請求項46の方法。 50．Ｂ₁アゴニストが次の文献に記載されているものから選ばれるものである請求項45の方法。 51．更にアジュバントを投与することを包含する請求項50の方法。 52．脳虚血性傷害が皮質虚血傷害である請求項38の方法。 53．Ｂ₁アゴニストが次の文献に記載されているものから選ばれるものである請求項52の方法。54．更にアジュバントを投与することを包含する請求項53の方法。 55．Ｂ₁アゴニストを投与することを包含する、治療を要している神経系の病気による細かな運動を実行する能力の減少した患者を治療する方法。 56．Ｂ₁アゴニストが次の文献に記載されているものから選ばれるものである請求項55の方法。 57．更にアジュバントを投与することを包含する請求項56の方法。 58．神経系の病気がパーキンソン病である請求項55の方法。 59．神経系の病気がハンチントン病である請求項55の方法。 60．Ｂ₁アゴニストを投与することを包含する、治療を要している再潅流傷害の患者を治療する方法。