JP2002515757A

JP2002515757A - 水媒介による、安定なビタミンｃ誘導体の強化によって、水生生物の成長及び生存率を高める方法

Info

Publication number: JP2002515757A
Application number: JP53478298A
Authority: JP
Inventors: モーグル，ポール，デビッド
Original assignee: KI Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: KI Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 1997-02-07
Filing date: 1998-01-30
Publication date: 2002-05-28
Also published as: EP0959675A1; NO993802L; NO993802D0; WO1998034474A1; AU6046098A

Abstract

(57)【要約】本発明は、小エビ及び他の水生生物の成長率及び生存率、並びに魚卵の孵化率を増大させる方法を開示する。水生生物が幼生段階を経て発育する水性媒体に、安定形のビタミンＣを直接添加し、そこで水生生物は、そのビタミンＣ誘導体を吸収する。この方法によって処理した水生生物は、成育池において成熟するまで生存するチャンスが大きくなり、生産量増大をもたらす。

Description

【発明の詳細な説明】水媒介による、安定なビタミンＣ誘導体の強化によって、水生生物の成長及び生存率を高める方法発明の背景発明の分野本発明は、水生生物が育てられる水性媒体への安定なビタミンＣの添加による、魚、小エビ、その他の形態の水生生物の成長及び生存率の高度化に関する。関連技術の説明食品としての魚、小エビ、その他の形態の水生生物の養殖は、多くの国でふつうのことになってきた。そのような水生生物を育てる方法は、通常、幾つかの段階を含む。例えば、小エビの卵は、受精後養殖タンク中に入れ、その受精卵は、２日の後期幼生段階（Post Larvae stage）までそのタンク中で成長させる。２日の後期幼生段階に達したら、その幼生を、小エビがさらに成長する場所である水路に移す。その水路で１０日の後期幼生段階に達した後、その後期幼生を、小エビが十分に成熟する場所である成育池（grow-out pond）に移す。魚の養殖及び孵化のためには、数匹の雌の卵及び数匹の雄の精子をとるか又は産生させ、次いで別々の容器にプールする。精子部分を、卵と、均一な濃度になるように水のない状態で混合する。次いで、受精卵に水性媒体を添加し、そしてその卵を、肥沃化混合物中に１時間浸漬しながら堅くする。その卵を、受精成功の徴候である、眼の出現まで、トレー中で孵化させる。受精が成功した生物を、成長させるためにタンク又は池に移す。水性環境で水生生物を養殖するときに直面する問題の一つは、水性養殖液の変化が水生生物にもたらす有害な影響である。小エビは、環境の偏りに特に敏感である。小エビ幼生養殖サイクル中の水性環境の温度、塩分、及び栄養分の小さな変化がストレスにつながり、そして小エビ幼生の生存率減少の原因となる。小エビの養殖において特にストレスの大きい期間は、変態、養殖タンク及び水路から成育池への移送、並びに池放流への順応期間を包含する。水性環境で魚、小エビ及び他の水生生物を養殖する技術分野において、ビタミンＣ栄養剤強化飼料のような栄養強化飼料の使用が、生産される水生生物の数を増加させることは知られている。これらの栄養剤は、通常、アスコルビン酸２− サルフェートのような安定形のビタミンＣを含有し、そしてまた、他の添加剤も含有する。安定形のビタミンＣは、飼料に添加し、そしてその強化飼料を、水生生物を養殖する媒体に添加する。安定形のビタミンＣは、アスコルビン酸が、水性環境に通常存在する銅、鉄及びカルシウムイオンの存在下で、迅速に分解するので、使用される。ビタミンＣ強化飼料が水生生物の成長を高めることは、先行技術として知られているが、先行技術は、成育池に水生生物を入れる前に、水生生物の生育過程の幼生、稚エビ段階の間に、水性環境媒体に、安定化ビタミンＣを直接添加することを開示していない。発明の要約本発明は、小エビ、魚、及び他の形態の水生生物を養殖する媒体に直接に、安定形のビタミンＣを添加することからなる方法を開示する。幼生発育中に、小エビ幼生を入れた養殖水に、安定化ビタミンＣ誘導体を添加すると、生存率がよくなり、脂質蓄積（lipid deposition）が増大し、環境ストレスに対する抵抗力が高められ、そして幼生及び小エビの生産量が増加する。魚卵を堅固化するときに、魚卵を入れた養殖水に、安定化ビタミンＣを添加すると、卵の孵化率が改良され、稚魚の生産量が多くなる。後記の実施例に示すように、化学的に安定化したビタミンＣを、水性養殖媒体に直接添加すると、つまり、水媒介による強化を行うと、小エビの生存率及び成長率、並びに魚卵の孵化率が増大する。本発明の方法で使用できる安定形のビタミンＣは、アスコルビン酸二カリウム２−サルフェート、アスコルビル２−サルフェート、アスコルビル２−モノホスフェート、アスコルビル２−ポリホスフェート、アスコルビルパルミテート、アスコルビルアセテート、アスコルビン酸２−グルコシド、及びカプセル化することで安定化しているカプセル型ビタミンＣを包含する。小エビ及び他の甲殻類においては、成長は、脱皮、つまり体を大きくするための殼の脱落の間だけに起こる。殼が脱落した後、幼生は浸透により海水を摂取する。この海水の浸透摂取により、小エビはビタミンＣ等の、海水に存在する栄養を吸収する。ビタミンＣは、小エビ及び他の水生生物における、コラーゲン形成及びイオンの交換調整に関与している。幼生段階の間の、小エビによるビタミンＣの摂取は、小エビのビタミンＣレベルを増大させ、高い生存率と成長をもたらす。本発明の方法は、二段階孵化所で利用できる。第一段階は、小エビの卵の受精、そして、ノープリウス（Nauplii）、ゾエア（Zoea）及びマイシスの段階並びに２日までの後期幼生までの生まれた小エビ幼生の幼生飼育タンク中での生育期間である。第二段階は、２日の後期幼生を水路に移すことではじまり、そこで約１０日の後期幼生になるまで飼育する。安定化ビタミンＣは、受精後約２〜３日してから、幼生がゾエア幼生段階に達した後に水路に添加し、そして好適な例では５または６日の後期幼生になるまで毎日添加する。第二段階の間、水路の海水は、毎日取り替え、そして海水の容積は毎日の水取り替えごとに増大させることもある。もし海水の容積を増大させるなら、安定化ビタミンＣの量も相応して増大させ、所要の濃度を保持する。約１０日の後期幼生に達した後、幼生を水路から成育池に移す。もしもこの移動に輸送トラックを使用するときは、輸送トラックにビタミンＣを通常どおり添加する。小エビは成育池で成熟させるが、それには通常約１００〜１５０日かかる。成育池で使用する飼料はビタミンＣ補強剤を含有するので、成育池にはビタミンＣ誘導体を添加しない。したがって、本発明の１つの目的は、水生養殖媒体に安定化ビタミンＣ誘導体を直接に添加することにより、小エビ及び他の水生生物の生存率及び成長率、並びに魚卵の孵化率を増大させることである。好適な態様の記述本発明は、水媒介の安定化ビタミンＣ誘導体による小エビ幼生の処理に関し、通常、受精卵を、海水を満たしたタンク中に入れそしてその受精卵をそのタンク中で、ゾエア及びマイシスの段階を経て２日の後期幼生にまで成長させる、第一段階を含む。第二段階は、２日の後期幼生段階に達したときに始まる。幼生を水路に移し、そしてゾエア段階に始まって毎日、ある濃度の安定化ビタミンＣ誘導体で処理する。２日の後期幼生を、ふつうに工業的に実施されているよりも低い密度で水路に移すと、その幼生を成育池に移す前に水路に保持しなければならない期間約２０日を約１０日に短縮できる。ゾエア段階に始まる、アスコルビン酸二カリウム２−サルフェートによる処理を、約１０日の後期幼生まで継続する。約１０日の後期幼生に達したなら、幼生を成育池に移す。もしも幼生をトラックによって成育池に移すときは、トラック中の養殖水にビタミンＣ誘導体を添加する。本発明で使用する好適なビタミンＣ誘導体は、アスコルビン酸二カリウム２− サルフェート（「ASTOS」という商品名で供給されている。）である。アスコルビン酸二カリウム２−サルフェートは、2つのユニークな特性をもっている。それは、水溶性であり、かつ水中安定性であることである。特にそれは、アスコルビン酸に似た溶解特性（すなわち、５０％よりも大きな水溶解性）を示し、この誘導体にすることで、銅、カルシウム及び鉄のイオンのような、水性養殖媒体中に存在するカチオンによる、分子の崩壊が防止される。使用できる他のビタミンＣ誘導体は、アスコルビル２−サルフェート、アスコルビル２−モノホスフェート、アスコルビル２−ポリホスフェート、アスコルビルパルミテート、アスコルビルアセテート、アスコルビン酸２−グルコシド、及びカプセル形のビタミンＣを包含する。アスコルビン酸二カリウム２−サルフェートは、孵化所の水路に、３０〜１５０ｐｐｍの濃度（水１トン当たり３０〜１５０グラム）で添加する。多くの場合、養殖中に毎日、タンクの水を半分入れ替え、それにより入れ替えごとに、アスコルビン酸二カリウム２−サルフェートの濃度を、好適な濃度（３０〜１５０ｐｐｍ）に戻す。典型的には、最大１５トンの海水を入れた２０トンの養殖タンクに、ゾエアをリットル当たり８０個の濃度で入れ、そうすると、１２０万匹の後期幼生小エビが得られる。１０日の後期幼生に達すると、処理水路から小エビを、輸送のためにプールする。輸送の間、トン当たり３０〜１５０グラムのアスコルビン酸二カリウム２− サルフェートを輸送タンクに添加し、３０〜１５０ｐｐｍのアスコルビン酸二カリウム２−サルフェートの一定濃度を保持する。後期幼生は、池のコンディションに順応した後、養殖池ないし成育池（nursery or grow-out ponds）に入れる。水媒介アスコルビン酸二カリウム２−サルフェートで強化した小エビは、成育池で成熟する前に、アスコルビン酸（ビタミンＣ）の組織レベルが増大する。小エビは、成育池で１００〜１５０日間成熟させる。成育池では、小エビに、ビタミンＣ強化飼料を与えてもよい。小エビ養殖の際のビタミンＣの使用に加えて、魚卵の堅固化のときに、安定化ビタミンＣを２５〜１５０ｐｐｍの量で添加すると、卵の孵化率及び生存率が改良され、稚魚の生産量増大をもたらす。以下の実施例は、例示のためのものであって、全く制限を意図するものではないが、本発明の方法のステップを例示し、処理した小エビや他の水生生物の生存率、成長率及び全体的成長における本発明の方法の効果を例示し、さらにビタミンＣの水媒介添加の利点をビタミンＣによる飼料の強化と比較して例示する。特に、それらの実施例は、ビタミンＣ誘導体による水媒介処理が、ペナユースバンナメイ（Penaeus vannamei）の孵化所養殖、輸送、順応及び引き続く成育の間の、後期幼生小エビの生存率を高めることを例示する。実施例Ｉペナエイド(Penaeid)小エビを使用した水媒介添加量の応答評価一匹の妊娠した雌からのペナユースバンナメイノープリウスを、リットル当たり１００個のノープリウスの濃度で、２８０リットルの円錐形タンクに入れた。ゾエア生物段階の２日目に、アスコルビン酸二カリウム２−サルフェート又はアスコルビル２−ポリホスフェートの第一処理を加え、そして、マイシス段階の３日目まで毎日添加を継続した。ビタミンＣ誘導体の正確な添加量は、表Ｉに要約してある。各々の添加量は、それぞれ４つのタンクで反復し、そして対照は、３つのタンクで繰り返した。アスコルビン酸二カリウム２−サルフェートを海水に溶解し、そして養殖タンクに直接添加した。アスコルビル２−ポリホスフェートは、アスコルビン酸二カリウム２−サルフェートほど可溶性ではなくて、それゆえにブレンダー中で５分間海水と混合して、さらに希釈しそれから小エビ養殖タンクに添加しなければならなかった。マイシス段階の間、タンク中の水を９０％減らして（幼生を残りの１０％の水中に保持しながら）、次いで新しい海水を添加することにより、毎日水を交換した。幼生は、この短い時間、細い網目の網体で、タンク中に保持した。毎回の水交換後に、必要な量の適切なアスコルビン酸誘導体を添加することにより、正しいビタミン濃度を保持した。タンク中の幼生は、９日間養殖し、そして各タンクの生存幼生のパーセンテージを計算した。これらの結果を表Ｉにまとめてある。表Ｉからわかるように、アスコルビン酸二カリウム２−サルフェートで処理したタンクは、アスコルビル２ −ポリホスフェートで処理したタンクや対照に比べて、生存幼生のパーセンテージが著しく高い結果をもたらした。５０ｐｐｍのアスコルビン酸二カリウム２− サルフェートで処理したタンクは、第三段階のマイシスまでに７０％の生存率を有した。これは、対照の生存率の約３倍であり、またアスコルビル２−ポリホスフェートで処理したタンクの生存率の２倍を超えるものである。表Ｉには記載していないが、５０〜１５０ｐｐｍの範囲のどの濃度であっても、アスコルビン酸二カリウム２−サルフェートで強化した幼生は、対照タンクやアスコルビル２− ポリホスフェートで処理したタンクよりも、第三段階マイシスへの発育をより早く完了した。５０ｐｐｍのアスコルビン酸二カリウム２−サルフェートで処理したタンクは、最も高い生存率を示すとともに、第三段階マイシスへの最も早い発育を示した。表Ｉ９日目における第三段階マイシスにまで発育した幼生のパーセンテージ ^*A2S=アスコルビン酸二カリウム２−サルフェート A2PP=アスコルビル２−ポリホスフェート実施例 II ペナエイド小エビを使用した水媒介添加量の応答評価一匹の妊娠した雌からのペナユースバンナメイノープリウスを、リットル当たり８０個のノープリウスの密度で海水中に貯蔵し、そして、１２個の５００リットル円錐形タンク中で養殖した。日数基準で、ゾエア生物段階の第一日目から始まって、後期幼生段階の第五日目まで、養殖水は表IIに記載した添加量のアスコルビン酸誘導体で強化した。これらの添加濃度は、テストの間中保持した。各濃度及び未処理対照は、３つのタンクで繰り返した。各添加量のアスコルビン酸誘導体は、２００リットルの海水を含有するタンクに直接添加した。アスコルビン酸二カリウム２−サルフェートは、すばやく溶解したが、アスコルビル２− ポリホスフェートは、完全には溶解しなかった。タンク中の海水の容量は、２日目に３００リットルにそして３日目に４００リットルに増加させた。４日目から、すなわち、幼生の大半がゾエア段階２に達したときから、５０％の水を毎日取り替えた。３００及び４００リットルへの水容量増加の間、並びに水取替えの間、適量のビタミンＣ誘導体を添加して、各タンクを適正な濃度に保持した。表IIからわかるように、７５ｐｐｍのアスコルビン酸二カリウム２−サルフェートによる処理は、７９％という最高の生存率とともに最大の後期幼生サイズをもたらした。５０ｐｐｍのアスコルビン酸二カリウム２−サルフェートによる処理は、生存率及び後期幼生サイズについては、７５ｐｐｍ処理ほどは高くなかったが、後期幼生が７５ｐｐｍ処理より幾分早く発育した。表IIはさらに、アスコルビル２−ポリホスフェートでは、生存率が６％に減少し、かつ対照に比べて発育が遅くなったことを示す。表II 処理の効果 a A2S=アスコルビン酸二カリウム２−サルフェート A2PP=アスコルビル２−ポリホスフェート b PL=後期幼生実施例 III ペナエイド小エビを使用した水媒介添加量の応答評価一匹の妊娠した雌からのペナユースバンナメイノープリウスを、最終希釈時のノープリウスの密度がリットル当たり８０個になるように、海水中に貯蔵した。幼生を１２個の５００リットル円錐形タンク中で養殖した。ゾエア生物段階の第一日目から始まって、後期幼生段階の第五日目まで養殖を継続した。養殖水は、毎日、表IIIに記載した添加量のアスコルビン酸誘導体で強化した。各々のビタミン添加量レベル及び未処理対照は、３つのタンクで反復した。この実施例は、各タンクに２００リットルの海水を入れて開始した。２日目に、幼生は、発育段階がノープリウス５からゾエア１に変化し、そして各タンクの水量を３００リットルに増加させた。４日目大半の幼生がゾエア２に達した後、水量を４００リットルに増加させた。また、４日目から９日目まで、５０％の水を毎日取り替えた。毎回の水取替えの後、所要量のアスコルビン酸二カリウム２−サルフェートを添加して、一定のビタミン濃度を保持した。表IIIの結果は、５０ｐｐｍの添加量が９日目における高い生存率及び成長率をもたらし、一方７５及び１００ｐｐｍの濃度では、少しだけ進んだ発育をした幼生（２日の後期幼生）をもたらした。表III ９日後の収量データ a A2S=アスコルビン酸二カリウム２−サルフェート b PL=後期幼生実施例 IV 孵化所における処理の、小エビ収量に対する効果孵化所において、商業規模の量の小エビを、ゾエアからマイシス段階までの間、３０ｐｐｍのアスコルビン酸二カリウム２−サルフェートで処理し、次いで、後期幼生段階７まで、５０ｐｐｍのアスコルビン酸二カリウム２−サルフェートで処理した。後期幼生小エビを、別個の塩水池に移して、収穫サイズへの成育を完成させる。池養殖期の間、処理グループと対照グループとの両者に、同じ市販飼料を与えた。孵化所及び生育池の両方における成長及び生存のデータを、表IVに要約する。孵化所におけるアスコルビン酸二カリウム２−サルフェート処理により、後期幼生生存率は、平均９３％にまで改善された。因みに、未処理対照の生存率は平均８８％にすぎない。処理した小エビの池における生存率も、未処理小エビより格段に優れ、処理した小エビの平均生存率が３０％であるのに対して、未処理のものの平均生存率は２２．４％にすぎない。平均すると、サイズ、収量、収穫までの日時、及び飼料変換率（小エビ１ポンドを生産するのに要する飼料のポンド数）は、孵化所の段階でアスコルビン酸二カリウム２−サルフェート処理した小エビの方が、未処理対照のものよりも、本質的に優れていた。表IVに記載されていないが、更なる観察の結果から、平均の週当たりの成長率における本質的な改善を示した。アスコルビン酸二カリウム２−サルフェートで処理した小エビの成長率は、週当たり平均約０．８０グラム（収穫時の平均重量／（収穫までの日数／７））であったのに対して、未処理小エビの成長率は、週当たり平均約０．６５グラムであった。表IV 小エビ収量及び飼料変換に及ぼす処理の効果 a A2S=アスコルビン酸二カリウム２−サルフェート実施例Ｖアスコルビル２−サルフェートで強化したブラインシュリンプの、ペナエイド小エビ養殖用フードとしての使用アーテミア（ブラインシュリンプ）ノープリウスを、孵化後２１時間で収穫し、８００リットルのタンクに移し、そして時間ごとに、藻類（algae;Cheatocero s）を添加して飼育した。給飼開始から７時間後、アスコルビン酸二カリウム２ −サルフェートを５００ｐｐｍ（２４０ｐｐｍのアスコルビン酸と当量である）のレベルで添加した。１１時間後と１７時間後とに、乳化したオキアミオイルを添加した。ビタミンＣ強化ブラインシュリンプを、藻類飼育開始後２０〜２４時間に、二齢（instar II）段階で収穫し、そしてマイシス３から後期幼生までの段階のペナエイド小エビ幼生に直接与えた。前記のようにして、２種の種（species）のペナエイド小エビを、３回の商業スケール試行で飼育した。対照の小エビは、ブラインシュリンプをアスコルビン酸二カリウム２−サルフェートで強化しなかった点以外は、同じように飼育した。収穫時の生存データを、表Ｖに要約する。表Ｖ処理したブラインシュリンプで飼育したペナエイド小エビの生存データ実施例 VI 受精鮭卵のアスコルビン酸二カリウム２−サルフェートによる処理数匹の雌鮭から採った卵を、数匹の雄鮭から採った精子と混合する。５０ｐｐｍのアスコルビン酸二カリウム２−サルフェートを含有する水性媒体を添加し、そして、卵を１時間で堅固化させる。受精卵をトレーに移しそして孵化させる。眼の出現によって実証された、受精卵に転化した卵のパーセンテージは、アスコルビン酸二カリウム２−サルフェートで処理しない卵から転化したパーセンテージよりも大である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】 1. 下記の段階を含む、水性環境媒体中で育てられる水生生物の成長及び生存を高める方法：前記水性環境媒体中で前記水生生物の卵を受精させて受精卵とし、前記受精卵をゾエア、マイシス及び幼生の諸段階を経て変態させ；前記水性環境媒体に所要量の安定化ビタミンＣ誘導体を添加し、それによって、前記幼生が浸透によって前記ビタミンＣ誘導体を取り入れるようにし；前記幼生段階の前記水生生物を成育池に移し；そして、前記幼生を貯蔵池に移して前記幼生を成熟させる。