SU789063A1 - Способ повышени жизнестойкости оплодотворенной икры рыб - Google Patents

Description

I

Данное изобретение относитс  к рыб (фазведению, в частности к способу пог вышени  жизнестойкости оплодотворенной икры рыб.

Известен способ, заключающийс  в выдерживании оплодотворенной икры в водном pacTBqae биологически активных соединений. Б качестве соединени  используют молоко fl.

Недостатки известного способа заключаютс  в невысоком выходе личинок из икры и высокой смертности выклюнувшихс  личинок в Постнатальный период.

Цель изобретени  - повьпиение выхода личинок путем снижени  смертности последних в Постнатальный период.

Дл  достижени  этой цели в качестве биологически активньк веществ, используют смесь Р) -каротина, oL -токоферола, убихинонай , пирогаллола, пропилгаллата и аскорбиновой кислоты соответственно при конце1гграции их в растворе 10 10 мол  и в соотношении (0,2-2): :(0,4-5):(0,5-2,5):(0,8-3):(0,6-1.5):

:(0,7 5-5,5), при г этом вьщерживанив икры осуществл ют в течение 10-6О мин. Способ основан на том, что антиокс - данты и их синергисты предотвращают последующей развитие в лишодах шфы и эмбриона свободно радикальных реакций , 1ФИВОДЯЩИХ к накоплению плазматических  дов (липидных перекисей и щюдуктов их распада), например у вьюновых и осетровых рыб в период эмбрионально10 го развити  при недостаточном запасе в  йцеклетке биоантиоксидантов возникает и развиваетс  свободно-радикальна  патологи , дл  кoтqзoй характерно несвойственное нормальным физиологическим гфо15 цессам повышение концентрации продуктов свободно-радикальных реакций. Эти гфодукты обладают активностью плазмати- четких  дов, в повышенных концентраци х нарушают активную и пассивную 1фо20 ницаемость клеточных мембран и оболочек икры, угнетают энергетический и .пластический обмен в клетках эмбрионал ных тканей, ивдуцируют уродства и ы 1зывают гибель эмбрионов. При обогащении воды антиоксидантами и синергистами ан тиоксвдантного действи  икра сорбирует эти вещества и таким образом оптимизируетс  эмбриогенез. Способ осуществл ют следующим образом . Икру вьюновых либо осетровых рыб непосредственно после оплодотворени  и обесклеивани  вьщерживают в течение 1О-6О мин в смеси водных растворов антиоксндангов и синергистов антиоксиг дангного действи , например р, -карот1 на, оС -токоферола, убихинона Q , пирогал; лопа, пропилгаллата, аскорбиновой кислоты в соотношении 0,2:0,4: О,5:О,8; :О,6:О,75 - 2:5:2,5:3:1,5:5,5. Действующие агенты берут а виде двухкомпонентных либо трехкомпонентных смесей , тогда преимущественным соотношением дл  тех и других смесей  вл етс  соотношение соответственно 1:1 и 1:1:1 Концентрацию дл  отдельных компоненто -U берут Ю - 1О мол /литр, что составл ет в г/л дл  всех веществ 1О умноженное, соответственно, на р) -каротин - 468, L - токоферол - 416, убихиHoaOL Q- 754, пирогаллол - 126, пропи галлат - 196, аскорбинова  кислота 176 . После этого икру перенос т в инкуба ционный аппарат и инкубируют обычным образом. Пример 1. Готов т смесь антиоксидантов oL -токоферола и убихинона GLjjB соотношении 1:1 при концентрации каждого 1О мол  (соответственно 416 7 54 Х- ), после чег . смешивают ее с Твином 8О в соотношении 1:1О. Затем к 10О мл полученной смеси добавл ют 9ОО мл отстойной вод проводной воды, получив таким образом раствор, содержащий 1О антиоксидантов СХшодотворенную и обесклеенную икр вьюна помещают на ЗО. мин в эксикатор с полученным водным раствором антиок оадакгов, после чего икру перенос т в эксикатор с отстойной водопроводной водой, где инкубируют икру при температуре 18 С. Каждые 8 часов воду мен ют к удал ют погибшие личишси. На 2-3 сутки получают выклев личинок. П р и м е р 2. Берут производителей вьюна одинакового размера и состо  ни  и инициируют созревание половых продуктов общеприн тым методом путем внутримышечной инъекции хориогонина. При температуре 2lC получают через 124 часа текучую самку. Самку аавор ивают в марлю и выдавливают икру в ухую чашку Петри. Забивают самца, звлекают семенники, помещают их в ту е чашку Петри, не привод  в соприкосовение с икрой и мелко измельчают ожницами. В чашку с половыми продуками приливают немного воды и осто эожыми покачивани ми чашки привод т икру и сперму в контакт. Такое покачивание провод т 3-5 мин дл  того, чтобы икра, котора  в первый момент осеменени  (активации) становитс  клейкой, не прилипала ко дну чашки и не склеивалась в комки. Активированную икру дел т на 2 равные части и одну помещают на 30 мин в эксикатор с водным раствором антиоксидантов и из синергистов одной из указанных ниже концентраций. Обработанную таким образом икру парти ми по 500 штук помещают в 3 эксикатора, в которых находитс  по 1 литру отсто нной водопроводной воды, в контрольные эксикаторы , идентичные экспериментальным, помещают по 500 активированных икринок из части, необработанной водными растворами антиоксидантов. Через каждые 8 часов во всех эксикаторах мен ют воду и удал ют погибшие икринки. Температура воды в эксикаторах комнатна  (15-20с). Смесь антиксидантов ( -токоферола и убихинона готов т в соотношении 1:1 при концентрации каждого 10 мол . Берут навеску dl-токоферола и убихинона в любой последовательности смешивают с полиоксиэтиленсорбитан моноолеатом (Твином 8О) в соотношении 1:1О. Берут 1ОО мл полученной смеси и добавл ют 90О мл отстойной водо1ФОВОДНОЙ &ОДЫ. Полученный раствор содержит 1() мол  антиоксидантов. Аналогичным приемом получают растворы с концентраци ми антиоксидантов 1О , 10 lO-f . В результате на 2 - 3-й сутки получают выклев личинок и на 3-и сутки имеют в контроле в 1 - 3-ем эксикаторах соответственно мертвых (к моменту выклева) 178, 231, 287 икринок и вышедших из оболочки личинок 50, 33, 2О штук. На 6-е сутки от нач;ала инкубации имеют уродливых личинок 160, 138, 1О2 щтук и нормально развивающихс  162, 131, 111 штук. В партии обработанной антиоксидантами, например концентраци ми 1(5 м/литр, на 3-й сутки имеют в1 - 3-ем эксикаторах соответственно мертвых (к моменту выклева)

131, 138, 167 икринок, вышедших из оболочки 108, 130, 139 личинок. На .6-е сутки от начала инкубации имеют уродливых личинок 66, 35, 28 штук и нормально развиваюишхс  303, 327, 305 штук.

При обработке после оплодотворени  икры осетровых рыб согласно предлагаемому способу двухкомпонентной смесь антиокидантов oL -токоферол и убихинон

равных соотношени х при концентрашш каждого 1СГм, например севрюги, и дальнейшем выдерживании икры в экспериментальных услови х выход личинок на 4-е сутки больше, чем в контроле, а, начина  с 9-х суток, процент выживших личинок значительно превышает контрольный , где на 12-е сутки не остаетс  живых особей, в то врем  как при использовании предлагаемого сопсоба со;фан етс  около 7О% личинок севрюги.

Таблица 1

j Антиоксид анты (равные соотношени  при концентрации ) В-кароти Н.-токоферол- -убихинонй + пирогаллол+пропилгаллат аскорбинова  кислота Пропилгаллат+А-токоферол+убихинон Контроль Из таблицы 2 видно, что обработке после оплодотворени  икры в течение 30 мин водным : растворами антиоксидантов и,их синергистов всех компонентов выживаемость личинок на ЗО-й день равна 80-85% при контроле равном 9%. Длина личинок на ЗО-й ден колебалась в контроле от 3 до 1О мм, прн обработке икры антиоксидантами и их синергистами была 8-12 мм при большей однородности особей. П р и м е р 3. Берут смесь антиокс дангов (пирогаллола, dL-токоферола и убюишона Q ) в соотнсшени х 1:1:1 ор концентрации каждого 1СГ мол . ДальТаблица Нор ес Минимальный и максимальразвивающиный размер личинок (мм) ки на ЗО-й (%) O нейшие операции провод т согласно способу . В результате получают в течение 2-3 сутоквыклевличинсж и на 3-й сутки имеют в контроле в 1 - 3-ем эксикаторах соответственно мертвых (к моменту выклева) 180, 2ОО, 296 икринок и вышедших иа оболочки личинок 54, 38, 18. На б-е сутки от начала инкубации имеют уродливых личинок 164, 121, 94 штуки и нормально развиваюшихс  156, 179, НО штук. Выклев личинок в контроле наблюдают от 6О до 75 часа эмбриогенеза, при основной массе выклюнувшихс  осо бей на 72-75 час.

В партии, обработанной ангиоксидан- , таМи, например концентраци ми 1Ь мол , на 3-й сутки имеют в 1 - эксикаторах соответственно мертвых (к моменту выкле)а} 44, 23, 6 икринок и вышедших из оболочки 456, 477, 494 личинок. На сутки от начала инкубации имеют уродливых личинок 21, 31, 42 штуки .и нормально развивающихс  435, 446, 452. Выклев в партии, обработанной антиоксидантами, наблюдают от 46 до 52 часов инкубации при основ№сЛ массе выклюнувшихс  особей на 4852 час.

ТехниЕо-економический эффект способа заключаетс  в том, что способ позвол ет : увеличить выход личинок из икры в 3 раза, Jrмeньшить их смертность в постнатальный период в 8 раз и получать QQHqppaHbie попул ции разбивающихс  личинок по скорости роста и приросту биомассы и размерам.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ повьпиени  жизнестойкости оплодотворенной икры рыб, закпючаюишйс  в выдерживании оплодотворенной икры в водном растворе биологически активных соединений, отличающийс   тем, что, с целью повышени  выхода личинок путем снижени  смертности последних в постнатальный период, в качестве биологически активных веществ . используют смесь -каротина,с(, -токофе- рола, убихинона СЦр пирогаллола, пропилгаллата и аскорбиновой кислоты соответственно при концентрации их в растворе Ю мол  и в соотношении (О,2-2 ): (0,4-5): (0,5-2.5): (0,8-3): (0,6-1 ,5): (0,75-5,5), при этом выдерживание икры осуществл ют в течение 106О минут. Источники информации,

   прин тые во внимание при экспертизе 1. Авторское свидетельство СССР №554848, кл. А 01 К 61/ОО, 1976.