JP2002515555A

JP2002515555A - 羊毛の酵素処理法

Info

Publication number: JP2002515555A
Application number: JP2000549797A
Authority: JP
Inventors: パトリックマクデビット，ジェイソン; ビンクレル，ヤコブ
Original assignee: ノボザイムスノースアメリカ，インコーポレイティド
Priority date: 1998-05-20
Filing date: 1999-05-12
Publication date: 2002-05-28
Also published as: EP1088128A1; WO1999060200A8; AU757109B2; TR200003419T2; AU3986199A; WO1999060200A1

Abstract

(57)【要約】羊毛、羊毛繊維、又は動物の毛を、タンパク質分解酵素及びトランスグルタミナーゼで処理する方法。記載した方法は、向上した防縮性、感触、外観、湿潤性、低下したフェルト化傾向、増大した白色度、低下したピリング、向上した柔軟性、引張強さの残率、向上した伸張性、向上した破裂強度、並びに向上した染色特性、例えば染料の吸収性及び染料の洗濯堅牢度をもたらす。更に、タンパク質分解酵素単独での処理（トランスグルタミナーゼ無し）と比較して、上記方法は重量の減少の低下、繊維損傷の低下、及び強度の向上をもたらす。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】発明の分野本発明は羊毛、羊毛繊維又は動物の毛を、トランスグルタミナーゼ及びタンパ
ク質分解酵素で処理する方法に関する。

【０００２】発明の背景羊毛に関する２つの主要な問題は、その手ざわりの悪さ（むずがゆさ）及び縮
みやすさである。羊毛の柔軟性及び感触の向上は、様々な化学的薬剤、例えばシ
リコン乳化剤の添加又はタンパク質分解酵素の添加によって達成することができ
る。これらの向上の費用は達成される中程度な恩恵以上のことがある。羊毛の一
方の特性の変化は、他方の特性に時々不都合に作用することがある。例えば、プ
ロテアーゼ処理は通常、羊毛材料の強度及び重量に対して不都合な作用を有する
。

【０００３】防縮性の羊毛を製造する方法は知られている。最も一般的に使用される方法は
ＩＷＳ／ＣＳＩＲＯＣｈｌｏｒｉｎｅＨｅｒｃｏｓｅｔｔ法であり、これは
羊毛の酸塩素化、続く重合体適用を含んで成る。この方法は高度な防縮性を羊毛
に与えるが、羊毛の感触に不都合に作用し、そして環境を傷つける廃棄物を生み
出す。

【０００４】環境への汚染物質の放出をもたらさない、羊毛の収縮を減少させる方法が示さ
れてきており、これは酵素的方法及び穏やかな化学的方法、例えば低温プラズマ
処理を含む。プラズマ処理は、羊毛繊維材料を電気的な気体の放電（いわゆるプ
ラズマ）で処理することを含む乾燥方法である。現在、プラズマ処理方法の大規
模な商業化に対する障害（費用、設備能力、適合性）が存在する。

【０００５】様々な酵素的方法が、羊毛を処理するために使用されてきた。ＪＰ−Ａ５１０
９９１９６号は、アルカリ性プロテアーゼによる羊毛繊維の処理方法を記載して
いる。ＪＰ−Ａ３２１３５７４号は、トランスグルタミナーゼ（羊由来の羊毛の
小胞において天然に見出される酵素）又はトランスグルタミナーゼを含む溶液を
用いる、羊毛を処理するための方法を記載している。国際公開第９２／１８６８
３号は、ペルオキシダーゼ活性又はオキシダーゼ活性を示す酵素による処理を含
んで成る染め織物の漂白方法を記載している。国際公開第９８／２７２６４号は
、オキシダーゼ又はペルオキシダーゼ溶液との羊毛の接触を、前記酵素と羊毛を
反応させるのに適した条件下行うことを含んで成る、羊毛の収縮を減少させる方
法を記載している。米国特許第５，５２９，９２８号は、柔かい羊毛の感触及び
防縮特性を有する羊毛を得るための、初期の化学的酸化段階又は酵素処理（例え
ばペルオキシダーゼ、カタラーゼ、又はリパーゼ）、続くプロテアーゼ処理、続
く熱処理を用いる方法を記載している。欧州特許公開第３５８３８６Ａ２号は、
タンパク質分解処理並びに酸化処理（例えばＮａＯＣｌ）及び重合体処理のうち
の１つ又はその両方を含んで成る、羊毛の処理方法を記載している。欧州特許第
１３４２６７号は、酸化剤、続く塩含有組成物中のタンパク質分解酵素による動
物性繊維の処理方法を記載している。

【０００６】羊毛処理のための現在の工業方法と関連する、環境的及び能力的な欠如は、防
縮性又は柔軟性に関する更なる向上を提供する新規の方法の必要性を実証してい
る。単独で又は酸化的な化学的段階との組合わせで使用される、羊毛を処理する
ための酵素的方法が、商業的価値をほとんど持っていないのは、それらの比較的
高い費用並びに重量及び強度の低下を引き起こすことにより、羊毛を損傷させる
それらの傾向に寄与するためである。羊毛、羊毛繊維、又は動物の毛の材料を処
理するための向上した酵素的方法は、柔軟性、防縮性、外観、白色度、染料の吸
収性、及びピリングに対する耐性における向上を与えるが、知られている酵素処
理よりも繊維の損傷を引き起こさないことが必要である。発明の要約本発明の目的は羊毛、羊毛繊維又は動物の毛を処理するための向上した、酵素
を基にした方法、特に向上した防縮性、並びに／あるいは消費者に高度に望まれ
る柔軟性及び感触の向上に関する利点を提供し、同時に羊毛及び他の動物の毛の
材料の現行の分解処理と比較して繊維損傷を最小化する方法を提供することであ
る。

【０００７】本発明は羊毛、羊毛繊維又は動物の毛を処理する方法であって、羊毛、羊毛繊
維又は動物の毛を水溶液中で、トランスグルタミナーゼによる処理の前に又は、
好ましくはそれと同時に、タンパク質分解酵素と接触させることを含んで成る方
法に関する。羊毛のスカラー構造は、多くのその特性、利点及び欠点のその両方にとっての
大きな原因であり、そして主に羊毛の縮みやすさの原因である。防縮性を達成す
るための１つの方法は、羊毛の表面からスケールを除去することである。この方
法は、多くの理由、特に極限強度及び重量の損失が起こるので、工業的に実際的
ではない。防縮性を付与するための理想的な商業的方法は必然的に、繊維表面の
物理的構造を、繊維を大きく弱めることなしに変化させるであろう。残念ながら
、スケール構造を変化させる多くの方法（常用のタンパク質分解処理を含む）が
また、破壊的手段を介する。分子レベルで、化学結合が破断され、前記タンパク
質の分子量の減成が生じる。この分子量の減少は、羊毛又は動物の毛の織物の、
巨視的に観察される強度及び重量の低下の原因である。

【０００８】本発明は、繊維の表面構造を実質的に修飾し、同時に減成を最小化する、２つ
の相補的な酵素を使用する方法を記載する。タンパク質分解酵素はアミド結合を
開裂し、一方トランスグルタミナーゼは異なるものであるが、アミド結合を形成
する。本発明の文脈において、タンパク質分解酵素は主に表面構造を分解するの
に重要であり、一方トランスグルタミナーゼはその方法において保護を行い、そ
して更にタンパク質分解酵素処理に関連する過剰な分子量の減少を予防する。従
って、常用のタンパク質分解処理と比較して、本発明に記載の処理は優れた防縮
性を、繊維の損傷の低下と共に提供する。他の利益もまた、未処理の羊毛、タン
パク質分解酵素で処理した羊毛、又はトランスグルタミナーゼで処理した羊毛の
いずれかと比較して達成される。

【０００９】本発明に従う処理にかけられる羊毛の特定の特性に依存して、この処理がもた
らす利益は防縮性の向上、感触の向上、外観の向上、湿潤性の向上、フェルト化
傾向の減少、白色度の増大、ピリングの減少、柔軟性の向上、引張強さの維持、
伸張性の向上、破裂強度の向上、並びに染色特性、例えば染料の吸収性及び染料
の洗濯堅牢度の向上であってもよい。更に、この組合わせが繊維の損傷を減少さ
せることは、プロテアーゼのみの処理と比較して、繊維重量の減少及び破裂強度
が低下することから明らかである。

【００１０】更なる態様において、羊毛、羊毛繊維又は動物の毛は、上述した酵素処理のい
ずれかの前に、酸化的前処理を経験してもよい。酸化的前処理の例は、酸塩素化
、ＤＣＡＡ、次亜塩素酸ナトリウム、カロー酸塩及び過マンガン酸塩、並びに酸
化還元酵素、例えばペルオキシダーゼ又はハロペルオキシダーゼを用いる酵素処
理を含む。発明の詳細な説明本発明の方法を記述する前に、この発明は記述される特定の方法に限定されな
いことが理解されるべきである。本明細書で使用する学術語が、特定の態様を記
述することのみが目的であり、そして限定されることを意図しないのは、本発明
の範囲が添付した特許請求の範囲によってのみ限定されるからである。

【００１１】この明細書及び添付した特許請求の範囲において使用する場合、単数形は本文
脈が別の方法で明らかに指示していないかぎり複数の言及を含む。従って、例え
ば“タンパク質分解酵素”又はタンパク質分解調製物”の言及はその様なタンパ
ク質分解酵素の混合物を含み、“方法”の言及は１又は複数の方法、並びに／あ
るいは本明細書に記載の型の段階及び／又はこの開示などを読むことで当業者に
明らかとなる段階を含む。

【００１２】特に断らないかぎり、本明細書で使用する全ての技術的及び科学的用語は、本
発明に属する業界の者によって一般に理解される同一の意味を有する。本明細書
に記載したものに類似又は等しい、あらゆる方法及び材料を、本発明の実施又は
試験において使用することができるが、好ましい方法及び材料を今回記載する。
本明細書で述べる全ての刊行物は、例示した引用に関する材料を開示及び記載す
るための引用によって、本明細書に組入れられる。定義 “収縮”の用語は、ＩＷＳＴＭ３１において定義される様な繊維のフェルト
化収縮を意味し、すなわち、フェルト化収縮は水溶液中での洗浄によって誘導さ
れる、羊毛繊維の漸進的なからみ合いによって起こる不可逆な収縮であり、そし
て洗浄によって誘導される長さ及び／又は幅の縮小として定義される。収縮はＩ
ＷＳＴＭ３１に従い測定することができ、あるいはそれを以下の改良を用いて
測定することができる。羊毛の試料（２４cm×２４cm）は縁の周囲を縫い込まれ
、そして方形を内接させる。試料を処理し、風乾し、続いて外部のバラスト、例
えばタオル及び衣料品と一緒に、５サイクルの機械洗浄及び乾燥（温水洗浄、高
熱乾燥）にかけた。方形の寸法を、５サイクルの後に測定し、そして収縮を初期
の緩和収縮の計算後の、方形の寸法の変化として定義する。

【００１３】収縮の低下はフェルト化における低下を暗示し、そしてその結果、向上した防
縮性を提供する全ての方法が、“抗フェルト化”特性も提供する。 “感触”の用語は、生地のさわった感覚又は手ざわりを意味する主観的な用語
である。“柔軟性”の用語は、生地の手ざわりに関する主観的な用語であり、そ
して感触の構成要素である。

【００１４】 “ピリング”の用語は繊維の、毛玉（ピル）へのからみ合いを意味し、これは
織物の表面上で見られる。ピルは影を落とすのに十分な密度のものである。ピリ
ングに対する耐性を、ＩＷＳ試験法１９６に従い測定することができ、あるいは
視覚的に検査することができる。ピリングは織物の外観の主要な構成要素である
（他の特性、例えば白色度と並ぶ）。ピリングの低下はより良い外観を与え、そ
してピリングに対しての向上した耐性は、本明細書で“優れた外観”の用語が使
用される場合にはいつでも暗示される。

【００１５】 “伸張性”の用語は、固定荷重が適用されるときの、繊維材料の長さにおける
増大を意味する。一般に、伸張性のより高い値が、より低い値と比較して好まし
い。本文脈において、“伸び率”の用語は、固定荷重の適用及び除去の後の、繊
維材料の長さにおける永久の増大（回復不可能な伸張）を意味する。一般に伸び
率のより低い値が、より高い値と比較して好ましい。伸張性及び伸び率は、ＩＷ
ＳＴＭ１７９の以下の改良に従い測定されてきた。織物の試験片（横方向にお
いてより長い寸法を有する、１００mm×５５mmの方形）を適当な引張強さ測定機
、例えばＩｎｓｔｒｏｎ（商標）５５６４のジョーに据えた。ジョーの間の距離
は６０mmで固定し、そして荷重を１０Ｎまで、１００mm／分の伸長速度で増大し
た。一旦所望の荷重に達すると、移動方向はすぐに反転し、そして収縮速度は伸
長速度に等しかった。５サイクル行った。５サイクル後の伸長を、織物の“収縮
性”として定義し、そして“伸び率”は１回目のサイクル後の収縮と比較した、
５回目のサイクル後の収縮、すなわちＥ＝Ｓ₅ ／Ｓ₁ として定義した。

【００１６】 “白色度”の用語は、羊毛上の色の範囲の光学的測定値を意味することが予期
される。白色度を、Ｓｔｅｎｓｂｙ単位（Ｗ＝Ｌ＋３ａ−３ｂ）において、適当
な分光光度計、例えばＭａｃｂｅｔｈＣｏｌｏｒ−Ｅｙｅ（商標）７０００で
測定することができる。 “破裂強度”の用語は、円形の試料を破断させるために引っ張るときの、試料
にかけた圧力を意味する。破裂強度をＩＷＳＴＭ２９に従い測定することがで
き（適当な装置、例えばＢ．Ｆ．ＰｅｒｋｉｎｓのＭｕｌｌｅｎ（商標）を用い
る）、そして湿潤又は乾燥のいずれかの織物で行うことができる。

【００１７】 “染色特性”の用語は、羊毛又は動物の毛の材料の染色に関する特性を意味し
、これは染料の吸収性及び染料の湿潤アルカリ性接触に対する色彩の堅牢度（Ｉ
ＷＳＴＭ１７４において定義されたもの）を含んでいる。染料の吸収性は、利
用可能な色素を吸収させるために、染色溶液中に浸される羊毛又は動物の毛の材
料の能力の測定値である。この特性を以下の試験によって測定することができる
。適当な反応容器において、羊毛又は動物の毛の材料をａｃｉｄｂｌａｃｋ
１７２の緩衝化溶液（３００mlの０．０５ＭＮａＯＡｃ緩衝液、pH４．５と７
．５mlのａｃｉｄｂｌａｃｋ１７２／水の１．０％ｗ／ｗ溶液を足したもの
）に加えた。前記容器を振盪水槽中で、５０℃で１５分間穏やかな振盪でインキ
ュベートした。溶液から材料を取り出した後、それを風乾し、次にＣＩＥＬＡＢ
値を決定するために適当な分光光度計で測定した。染料の吸収性をＬ^* リーディ
ングによって決定し、そして染料の吸収性における変化を、未処理材料と比較し
たｄＬ^* を決定することによって見出す。

【００１８】 “羊毛”の用語によって、“羊毛繊維”、“動物の毛”などは、いずれかの商
業上有用な動物の毛の生成物、例えばヒツジ、ラクダ、ウサギ、ヤギ、ラマのウ
ール、及びメリノウール、シェトランドウール、カシミアウール、アルパカウー
ル、モヘアなどとしても知られるものを意味する。本発明の方法は、羊毛又は動物の毛の材料を、トップ、繊維、糸、あるいは織
物又はメリヤス生地の形態で使用することができる。前記の酵素処理はまた、羊
毛又は動物の毛の材料から作製したルーズフロック又は被服で行うことができる
。前記処理は染色の前又は後のいずれかを含む、多くの異なる処理段階で行うこ
とができる。範囲の異なる化学添加剤を、湿潤剤及び柔軟剤を含めて、酵素と一
緒に加えることができる。

【００１９】羊毛及び他の動物の毛の材料が生物学的起源の生成物であることは強調される
べきである。前記の材料は、例えば前記動物の生育条件及び健康に依存する化学
的な組成及び形態学的構造において、大きく変化することがある。従って、羊毛
又は他の動物の毛の生成物を本発明の方法にかけることによって得られる効果は
、出発材料の特性に従って変化することがある。本発明の方法酵素処理を、独立型の段階あるいは他の処理、例えば羊毛又は動物の毛の材料
の精練又は染色との組合わせとして、そのいずれかで行うことができることが考
えられる。羊毛又は動物の毛の材料は、トランスグルタミナーゼによる処理にか
けられ、これはタンパク質分解酵素の後、又は好ましくはそれと同時に、そのい
ずれかに行われる。更に、化学添加剤、例えば界面活性剤及び柔軟剤は酵素処理
段階、又は分離段階において含めてもよい。その様な処理は、物理学的特性、例
えば向上した感触、防縮性、及び外観の新規の組合わせを有する羊毛織物を製造
することができ、同時に羊毛の分解処理で一般に観察される、強度の損失及び繊
維の損傷を低下させる。

【００２０】処理条件．前記の酵素処理段階は、好ましくは少なくとも１分及び１５０分以
下の期間；好ましくは約１５℃〜約９０℃、更に好ましくは約２０℃〜約７０℃
、特に約３０℃〜約６５℃の温度で行われる。あるいは、羊毛を水性の処理溶液
に浸すか、又は詰め込み、そして次に常用の温度及び圧力での蒸煮にかけること
ができる。前記の酵素処理段階の反応速度を、前記の処理の間、酵素槽の温度を
増大させることによって増大させることができ、すなわち合計の処理時間を減少
することができることが考えられる。

【００２１】前記の酵素処理を、酸性、中性又はアルカリ性溶媒中で、問題の特定酵素に依
存して行うことができる。前記の溶媒は緩衝液を含んでもよい。前記の酵素処理
段階を、１又は複数の常用の陰イオン性、非イオン性又は陽イオン性の界面活性
剤の存在下で行うことは有利であるかもしれない。有用な非イオン性界面活性剤
の例は、Ｄｏｂａｎｏｌ（ＨｅｎｋｅｌＡＧ）である。タンパク質分解酵素本発明の方法にとって有用なタンパク質分解酵素は、タンパク質分解活性を実
際の処理条件で有するいずれかの酵素であり、これは２又はそれ以上のその様な
酵素を含んでいる。従って、前記の酵素は植物起源の、例えばパパイン、ブロメ
ライン、フィチン、又は動物起源の、例えばトリプシン及びキモトリプシン、又
は微生物起源の、すなわち細菌若しくは菌起源若しくは酵母由来のタンパク質分
解酵素であってもよい。様々なタンパク質分解酵素のいずれかの混合物が、本発
明の方法に適用可能であろうことが理解される。

【００２２】また、いずれかのタンパク質分解酵素変異体を本発明の方法において使用する
ことができ、ここで“変異体”の用語はタンパク質分解酵素をコードする遺伝子
を発現する生物によって産生する酵素を意味し、そしてここで、前記遺伝子は天
然のタンパク質分解酵素の遺伝子の変異によって得られ、前記変異はランダム又
は位置指定のいずれかの天然のものであり、これは遺伝子シャッフルを通じての
変異遺伝子の発生を含む。

【００２３】本発明の好ましい態様において、タンパク質分解酵素はセリンプロテアーゼ、
メタロプロテアーゼ、又はアスパラギン酸プロテアーゼである。セリンプロテア
ーゼはペプチド結合の加水分解を触媒する酵素であり、そして活性部位に必須の
セリン残基を含む（White, Handler and Smith, 1973“Principles of Biochemi
stry”，Fifth Edition, McGraw-Hill Book Company, NY, pp. 271-272）。それ
らはジイソプロピルフルオロリン酸によって阻害されるが、メタロプロテアーゼ
と対照的に、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）に対して耐性である（しかし
、それらはカルシウムイオンによって高温で安定化される）。セリンプロテアー
ゼは、単純な末端エステルを加水分解し、そして活性において真核生物のキモト
リプシン、更にはセリンプロテアーゼに類似している。狭義の、サブグループを
覆うアルカリ性プロテアーゼは、いくつかの前記セリンプロテアーゼの高い至適
pH、pH９．０〜１１．０を表わす。前記セリンプロテアーゼは通常、最大のタン
パク質分解活性をアルカリ性のpH領域において示すが、前記メタロプロテアーゼ
及び前記アスパラギン酸プロテアーゼは通常、最大のタンパク質分解活性を、そ
れぞれ中性及び酸性のpH領域で示す。

【００２４】前記セリンプロテアーゼのサブグループは、一般にサブチラーゼ（ｓｕｂｔｉ
ｌａｓｅ）と称する（Siezen et al., Protein Engng. 4 (1991) 719-737）。そ
れらは既にズブチリシン様プロテアーゼとして言及されてきたセリンプロテアー
ゼの４０以上のアミノ酸配列の相同性解析によって定義される。ズブチリシンは
グラム陽性細菌の菌類によって産生されるセリンプロテアーゼとして既に定義さ
れ、そしてSiezen等に従い、現在はサブチラーゼのサブグループである。いくつ
かのサブチラーゼのアミノ酸配列が決定され、これはバチルス菌株由来の少なく
とも６つのサブチラーゼ、すなわちズブチリシン１６８、ズブチリシンＢＰＮ′
、ズブチリシンＣａｒｌｓｂｅｒｇ、ズブチリシンＤＹ、ズブチリシンａｍｙｌ
ｏｓａｃｃａｒｉｔｉｃｕｓ、及びｍｅｓｅｎｔｅｒｉｃｏｐｅｐｔｉｄａｓｅ
、アクチノマイセターレス由来のズブチリシンの１つ、サーモアクチノマイセス
・ブルガリス（Ｔｈｅｒｍｏａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓｖｕｌｇａｒｉｓ）由来
のＴｈｅｒｍｉｔａｓｅ、並びに菌類のズブチリシンの１つ、トリチラチウム・
アルバム（Ｔｒｉｔｉｒａｃｈｉｕｍａｌｂｕｍ）由来のプロテイナーゼＫを
含んでいる。セリンプロテアーゼ、ズブチリシンの長い間認識されていた群は、
この最近の分類に従い、２つのサブグループに分けられてきた。サブグループの
１つ、Ｉ−Ｓ１は“古典的”なズブチリシン、例えばズブチリシン１６８、ズブ
チリシンＢＰＮ′、ズブチリシンＣａｒｌｓｂｅｒｇ（ＡＬＣＡＬＡＳＥ（商標
）、Novo Nordisk A/S）、及びズブチリシンＤＹを含んで成る。残りのサブグル
ープ、Ｉ−Ｓ２は、高度にアルカリ性のズブチリシンとして記述され、そして例
えばズブチリシンＰＢ９２（ＭＡＸＡＣＡＬ（商標）、Genencor International
, Inc.）、ズブチリシン３０９（ＳＡＶＩＮＡＳＥ（商標）、Novo Nordisk A/S
）、ズブチリシン１４７（ＥＳＰＥＲＡＳＥ（商標）、Novo Nordisk A/S）、及
びアルカリ性エラスターゼＹａＢの様な酵素を含んで成る。

【００２５】群Ｉ−Ｓ２のこれらのズブチリシン及びその変異体は、本発明の方法において
有用な、好ましいクラスのプロテアーゼを構成する。有用なズブチリシン変異体
の例は、ズブチリシン３０９（ＳＡＶＩＮＡＳＥ（商標））の変異体であり、こ
こで１９５位において、グリシンがフェニルアラニンによって置換されている（
Ｇ１９５Ｆ又は ¹⁹⁵Ｇｌｙから ¹⁹⁵Ｐｈｅへ）。

【００２６】簡便的に、常用の発酵した商業用プロテアーゼが有用である。その様な商業用
プロテアーゼの例はＡｌｃａｌａｓｅ（商標）（バチルス・リチェニホルミス（
ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）の菌株の液内発酵によって産生）、Ｅｓｐｅｒａ
ｓｅ（商標）（バチルスの好アルカリ性スピーシスの液内発酵によって産生）、
Ｒｅｎｎｉｌａｓｅ（商標）（ムコール・ミエーイ（Ｍｕｃｏｒｍｉｅｈｅｉ
）の非病原菌株の液内発酵によって産生）、Ｓａｖｉｎａｓｅ（商標）（バチル
スの遺伝学的に修飾した菌株の液内発酵によって産生）であり、例えば国際公開
第９２／１９７２９号として公開された国際特許出願において開示された変異体
、及びＤｕｒａｚｙｍ（商標）（Ｓａｖｉｎａｓｅ（商標）のタンパク質工学的
に処理した変異体）である。全ての、言及した商業用プロテアーゼはNovo Nordi
sk A/S, DK-2880 Bagsvaerd, Denmarkによって製造され、そして販売されている
。他の好ましいセリンプロテアーゼは、ノカルジオプシス（Ｎｏｃａｒｄｉｏｐ
ｓｉｓ）、アスペルギルス、リゾプス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）、バチルス・アルカ
ロフィラス（ａｌｃａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．セレウス（ｃｅｒｅｕｓ）、Ｎ
．ナットー（ｎａｔｔｏ）、Ｂ．ブルガタス（ｖｕｌｇａｔｕｓ）、Ｂ．ミコイ
ド（ｍｙｃｏｉｄｅ）由来のプロテアーゼ、並びにバチルス由来のズブチリシン
であり、特にノカルジオプシスｓｐ．及びノカルジオプシス・ダソンビレイ（ｄ
ａｓｓｏｎｖｉｌｌｅｉ）由来のプロテアーゼ、例えば国際公開第８８／０３９
４７号として公開された国際特許出願に開示されているもの、特にノカルジオプ
シスｓｐ．由来のプロテアーゼ、ＮＲＲＬ１８２６２、及びノカルジオプシス
・ダソンビレイの、ＮＲＲＬ１８１３３である。更に他の好ましいプロテアー
ゼは、バチルスのズブチリシンの変異体由来のセリンプロテアーゼであって、国
際特許出願番号ＰＣＴ／ＤＫ８９／００００２及びＰＣＴ／ＤＫ９７／００５０
０、並びに国際公開第９１／００３４５号として公開された国際特許出願におい
て開示されているものであり、そして欧州特許公開第４１５２９６Ａ２号に
開示されているプロテアーゼである。

【００２７】別の好ましいクラスのプロテアーゼは、微生物起源のメタロプロテアーゼであ
る。簡便的に、常用の発酵した商業用プロテアーゼが有用である。その様な商業
用プロテアーゼの例は、Ｎｅｕｔｒａｓｅ（商標）（Ｚｎ）（バチルス・ズブチ
リスの菌株の液内発酵によって産生）であり、これはNovo Nordisk A/S, DK-288
0 Bagsvaerd, Denmarkによって製造され、そして販売されている。

【００２８】他の有用な商業用プロテアーゼの酵素調製物はＢａｃｔｏｓｏｌ（商標）ＷＯ
及びＢａｃｔｏｓｏｌ（商標）ＳＩ（Sandoz AG, Basle, Switzerland から入手
可能）；Ｔｏｙｏｚｙｍｅ（商標）（Toyo Boseki Co. Ltd., Japan から入手可
能）；並びにプロテイナーゼＫ（商標）（バチルスｓｐ．の菌株、ＫＳＭ−Ｋ１
６の液内発酵によって産生）（Kao Corporation Ltd., Japan から入手可能）で
ある。使用するタンパク質分解酵素の量は、羊毛、繊維、又は毛のkg当たり、好
ましくは０．００１ｇ〜２０ｇ、好ましくは０．０１ｇ〜１０ｇ、更に好ましく
は０．０５ｇ〜５ｇの範囲内である。トランスグルタミナーゼ本発明に従い使用される“トランスグルタミナーゼ”は、カルシウム依存及び
カルシウム非依存、その両方のトランスグルタミナーゼあるいは２又はそれ以上
のトランスグルタミナーゼの混合物を含む、いずれかのトランスグルタミナーゼ
であってよい。トランスグルタミナーゼは、タンパク質−グルタミンγ−グルタ
ミルトランスフェラーゼであり、そしてAcademic Press, Inc., 1992の酵素命名
法に従い、ＥＣ２．３．２．１３の番号を有する酵素として分類されてきた。
トランスグルタミナーゼはアシル転移反応を触媒することができる酵素であり、
ここで、ペプチドが結合したグルタミン残基のγ−カルボキシアミド基はアシル
ドナーである。多くの化合物における主なアミノ基は、ペプチドが結合したグル
タミン酸の一置換ガンマアミドの続く形成でのアシル受容体として機能しうる。
ペプチド鎖のリジン残査のε−アミノ基がアシル受容体として働くとき、前記ト
ランスグルタミナーゼは分子内又は分子間のε−（γ−グルタミル）リジン架橋
を形成する。

【００２９】幅広い一群のトランスグルタミナーゼが多くの動物及びいくつかの植物種から
同定され、そして単離されてきた。最も広く使用される動物由来のトランスグル
タミナーゼ、ＸIIIa因子は複数のサブユニット酵素である。本発明に従い、トランスグルタミナーゼは哺乳類起源のもの、例えばヒト若し
くはウシ起源のもの、海洋生物起源のもの、例えばホヤ（Ｈａｌｏｃｙｎｔｈｉ
ａｒｏｒｅｔｚｉ）に由来するもの、又は微生物起源のもの、例えば細菌、糸
状菌起源の酵母、あるいはこれらの変異体であってもよい。

【００３０】本発明の態様において、前記のトランスグルタミナーゼはヒト起源のＸIIIa因
子である。別の態様において、前記のトランスグルタミナーゼはストレプトマイ
セス・リジカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｌｙｄｉｃｕｓ）（先のストレプ
トマイセス・リバニ）由来の、微生物のトランスグルタミナーゼ、あるいはその
変異体である。他の適当な微生物のトランスグルタミナーゼが記述されてきてお
り、これらはフィサラム・ポリセファラム（ＰｈｙｓａｒｕｍＰｏｌｙｃｅｐ
ｈａｌｕｍ）由来のトランスグルタミナーゼ（Klein et al., Journal of Bacte
riology, Vol.174, p2599-2605）、そしてストレプトバーチシラム、特にストレ
プトバーチシラム・モバラエンス（ｍｏｂａｒａｅｎｓｅ）、ストレプトバーチ
シラム・シンナモネウム（Ｃｉｎｎａｍｏｎｅｕｍ）、及びストレプトバーチシ
ラム・グリセオカルネウム（ｇｒｉｅｓｅｏｃａｒｎｅｕｍ）由来のトランスグ
ルタミナーゼ（Motoki et al., U.S. 5,156,956 ）、並びにストレプトマイセス
・ラべンジュラエ（ｌａｖｅｎｄｕｌａｅ）由来のトランスグルタミナーゼ（An
dou et al., U.S. 5,252,469）を含んでいる。引用によって本明細書に組入れら
れる欧州特許公開第４８１５０４−Ａ1号（Amano Pharmaceutical Co. Ltd ）
及び国際公開第９６／０６９３１号（Novo Nordisk A/S）に記載のトランスグル
タミナーゼもまた、使用することができる。更に、菌様の生物、卵菌類の網由来
、好ましくはフィトフソラ属由来のトランスグルタミナーゼも使用することがで
きる。他の関連した卵菌類のトランスグルタミナーゼは、ＰＣＴ／ＤＫ９６／０
００３１（Novo Nordisk A/S）に記載されており、これは引用によって本明細書
に組入れられる。好ましいトランスグルタミナーゼは、フィトフソラ・カクトラ
ム（Ｃａｃｔｏｒｕｍ）及びストレプトバーチシラム・モバラエンス（ｍｏｂａ
ｒａｅｎｓｅ）（Ａｊｉｎｏｍｏｔｏより入手可能）である。

【００３１】使用するトランスグルタミナーゼの量は、羊毛、繊維、又は毛のkg当たり０．
００１ｇ〜１０ｇ、好ましくは０．０１ｇ〜５ｇ、更に好ましくは０．０２ｇ〜
２kgの範囲内である。別の態様において、前記トランスグルタミナーゼはポリアミノ含有化合物Ｒ₁
ＮＨＲ₂ ＮＨＲ₃ （ここで、Ｒ₁ ，Ｒ₂ 、及びＲ₃ は独立して水素、ヒドロカル
ビル、又は置換ヒドロカルビルであってもよく、そしてＲ₁ ，Ｒ₂ 、及びＲ₃ の
いずれかの組合わせが１又は複数の還を形成するために結合していてもよく、あ
るいは結合していなくてもよく、ここで“ヒドロカルビル”の用語は炭素及び水
素原子のみを含む直鎖、分枝鎖、又は環状の基を意味し；“ヘテロ原子”の用語
は炭素又は水素以外の原子を意味し；そして“置換ヒドロカルビル”の用語は、
１又は複数のヘテロ原子で置換されたヒドロカルビルを意味する）と一緒に加え
られる。ポリアミノ含有化合物の例は、１，１２−ジアミノドデカン及びポリエ
チレンイミンである。柔軟剤羊毛又は動物の毛の材料を柔軟剤で、酵素処理と同時又はその後のいずれかに
処理することが望ましいことがある。羊毛上で常用に使用される柔軟剤は、通常
陽イオン性柔軟剤であって、有機性の陽イオン性柔軟剤又はシリコンを基にした
生成物のいずれかであるが、陰イオン性又は非イオン性の柔軟剤もまた有用であ
る。有用な柔軟剤の例は、ポリエチレンの柔軟剤及びシリコンの柔軟剤であり、
すなわちジメチルポリシロキサン（シリコン油）、Ｈ−ポリシロキサン、シリコ
ンエラストマー、アミノ官能基ジメチルポリシロキサン、アミノ官能基シリコン
エラストマー、及びエポキシ官能基ジメチルポリシロキサンであり、そして有機
性の陽イオン性柔軟剤、例えばアルキル第４級アンモニウム誘導体である。

【００３２】本発明は更に、以下の限定しない例において例示される。例例１．トランスグルタミナーゼ及びプロテアーゼによる処理ジャージーニットウール（ＴｅｓｔＦａｂｒｉｃｓＴＦ５３２）の布きれ（
２４cm×２４cmの、１８cm×１８cm² の方形を両側に内接している、それぞれ約
９ｇの布きれ）を、縁の周りに沿って縫い込んだ。試料を、２５℃で２５０mlの
pH８．２５、０．０４ＭＴｒｉｓ緩衝液を含み、５mM塩化カルシウムを含む分
離ラウンダーオーメータービーカーに据えた。ＥＳＰＥＲＡＳＥ（商標）の８．
０Ｌ（２００μｌ）溶液を容器に加え、続けて直ちにフィトフソラ・カクトラム
のトランスグルタミナーゼ溶液（４mgのトランスグルタミナーゼを含む）を加え
た。前記容器をラウンダーオーメーターに据え、そして４４℃で４０分間反応さ
せ、続けて１０分間かけて漸進的に８０℃まで加熱し、次にその温度を１０分間
保ち、前記の酵素を不活性化した。前記試料を前記溶液から取り出し、すすぎ、
乾燥させ、そして測定し、次に、更なる特性試験にかける前に、５サイクルの機
械洗浄及び乾燥にかけた。例２．ハロペルオキシダーゼ、Ｓａｖｉｎａｓｅ、及びトランスグルタミナーゼ
による処理ジャージーニットウール（ＴｅｓｔＦａｂｒｉｃｓＴＦ５３２）の２つの布
きれ（２４cm×２４cmの、１８cm×１８cm² の方形を両側に内接している、それ
ぞれ約９ｇの布きれ）を、縁の周りに沿って縫い込んだ。前記の布きれを、１０
mM ＮａＣｌ及び１０mM過酸化水素を含む、５００mlの２５mM酢酸ナトリウム緩
衝液、pH５に浸し、そしてカルブラリア・ベルクロサのハロペルオキシダーゼ（
３．３mgの精製酵素）で、４０℃で５０分間、インキュベート用振盪槽中で処理
した。３０分後、十分な過酸化水素を、涸渇した過酸化物を高めるために、５mM
の濃度になるまで加えた。試料をすすぎ、そして風乾させ、次に２５℃で２５０
mlの、pH８．２５の０．０４ＭＴｒｉｓ緩衝液を含み、５mM塩化カルシウムを
含む、分離ラウンダーオーメータービーカーに据えた。ＳＡＶＩＮＡＳＥ（商標
）の１６．０Ｌ（２００μｌ）溶液を容器に加え、続けて直ちにフィトフソラ・
カクトラムのトランスグルタミナーゼ溶液（６mgのトランスグルタミナーゼを含
む）を加えた。前記容器をラウンダーオーメーターに据え、そして４０分間、４
４℃で反応させ、続けて１０分間かけて漸進的に８０℃まで加熱し、その後その
温度を１０分間保ち、前記酵素を不活性化した。前記試料を前記溶液から取り出
し、すすぎ、乾燥させ、そして測定し、次に更なる特性試験にかける前に、５サ
イクルの機械洗浄及び乾燥にかけた。例３．ハロペルオキシダーゼ、Ｅｓｐｅｒａｓｅ、及びトランスグルタミナーゼ
による処理ジャージーニットウール（ＴｅｓｔＦａｂｒｉｃｓＴＦ５３２）の２つの布
きれ（２４cm×２４cmの、１８cm×１８cm² の方形を両側に内接している、それ
ぞれ約９ｇの布きれ）を、縁の周りに沿って縫い込んだ。前記の布きれを、１０
mM ＮａＣｌ及び１０mM過酸化水素を含む、５００mlの２５mM酢酸ナトリウム緩
衝液、pH５に浸し、そしてカルブラリア・ベルクロサのハロペルオキシダーゼ（
３．３mgの精製酵素）で、４０℃で５０分間、インキュベート用振盪槽中で処理
した。３０分後、十分な過酸化水素を、涸渇した過酸化物を高めるために、５mM
の濃度になるまで加えた。試料をすすぎ、そして風乾させ、次に２５℃で２５０
mlの、pH８．２５の０．０４ＭＴｒｉｓ緩衝液を含み、５mM塩化カルシウムを
含む、分離ラウンダーオーメータービーカーに据えた。ＥＳＰＥＲＡＳＥ（商標
）の８．０Ｌ（２００μｌ）溶液を容器に加え、続けて直ちにフィトフソラ・カ
クトラムのトランスグルタミナーゼ溶液（６mgのトランスグルタミナーゼを含む
）を加えた。前記容器をラウンダーオーメーターに据え、そして４０分間、４４
℃で反応させ、続けて１０分間かけて漸進的に８０℃まで加熱し、その後その温
度を１０分間保ち、前記酵素を不活性化した。前記試料を前記溶液から取り出し
、すすぎ、乾燥させ、そして測定し、次に更なる特性試験にかける前に、５サイ
クルの機械洗浄及び乾燥にかけた。例４．ハロペルオキシダーゼ、Ｅｓｐｅｒａｓｅ、及びトランスグルタミナーゼ
による処理ジャージーニットウール（ＴｅｓｔＦａｂｒｉｃｓＴＦ５３２）の２つの布
きれ（２４cm×２４cmの、１８cm×１８cm² の方形を両側に内接している、それ
ぞれ約９ｇの布きれ）を、縁の周りに沿って縫い込んだ。前記の布きれを、１０
mM ＮａＣｌ及び１０mM過酸化水素を含む、５００mlの２５mM酢酸ナトリウム緩
衝液、pH５に浸し、そしてカルブラリア・ベルクロサのハロペルオキシダーゼ（
３．３mgの精製酵素）で、４０℃で５０分間、インキュベート用振盪槽中で処理
した。３０分後、十分な過酸化水素を、涸渇した過酸化物を高めるために、５mM
の濃度になるまで加えた。試料をすすぎ、そして風乾させ、次に２５℃で２５０
mlの、pH８．２５の０．０４ＭＴｒｉｓ緩衝液を含み、５mM塩化カルシウムを
含む、分離ラウンダーオーメータービーカーに据えた。ＥＳＰＥＲＡＳＥ（商標
）の８．０Ｌ（２００μｌ）溶液を容器に加え、続けて直ちにストレプトベルチ
シラム・モバラエンスのトランスグルタミナーゼ（Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ）溶液（
０．９mgのトランスグルタミナーゼを含む）を加えた。前記容器をラウンダーオ
ーメーターに据え、そして４０分間、４４℃で反応させ、続けて１０分間かけて
漸進的に８０℃まで加熱し、その後その温度を１０分間保ち、前記酵素を不活性
化した。前記試料を前記溶液から取り出し、すすぎ、乾燥させ、そして測定し、
次に更なる特性試験にかける前に、５サイクルの機械洗浄及び乾燥にかけた。

【００３３】前記試料は非常に柔らかい感触、増白の結果としての満足できる外観及び減少
したピリング、並びに６４％の防縮性に相当する、５回の洗浄−乾燥サイクル後
の、わずかに１２％の収縮領域を有していた。例５．次亜塩素酸ナトリウム、Ｓａｖｉｎａｓｅ、及びトランスグルタミナーゼ
による処理ジャージーニットウール（ＴｅｓｔＦａｂｒｉｃｓＴＦ５３２）の布きれ（
２４cm×２４cmの、１８cm×１８cm² の方形で内接している、約９ｇの布きれ
）を縁の周りに沿って縫い込んだ。前記の布きれを１０mM ＮａＣｌを含む、２
５０mlの２５mM酢酸ナトリウム緩衝液、pH５に浸し、１．５mlの次亜塩素酸の工
業用溶液（Ａｕｓｔｉｎ’ｓ（商標）の漂白剤、５．２５％次亜塩素酸ナトリウ
ム）で処理した。反応を４０℃で、ラウンダーオーメーター中で５０分間進め、
この時点で前記の織物を溶液から取り出し、そして水ですすぎ、次に２５℃、pH
８．３５の、２５０mlの０．０４ＭＴｒｉｓ緩衝液、５mM塩化カルシウムを含
むラウンダーオーメータービーカーに据えた。ＳＡＶＩＮＡＳＥ（商標）の１６
．０Ｌ（２００μｌ）溶液を容器に加え、続けて直ちにフィトフソラ・カクトラ
ムのトランスグルタミナーゼ溶液（６mgのトランスグルタミナーゼを含む）を加
えた。前記容器をラウンダーオーメーターに据え、そして４０分間、４４℃で反
応させ、続けて１０分間かけて漸進的に８０℃まで加熱し、その後その温度を１
０分間保ち、前記酵素を不活性化した。前記試料を前記溶液から取り出し、すす
ぎ、乾燥させ、そして測定し、次に更なる特性試験にかける前に、５サイクルの
機械洗浄及び乾燥にかけた。例６．プロテアーゼ及びトランスグルタミナーゼで処理した羊毛の、重量の減少
、破裂強度、及び収縮羊毛の布きれを、プロテアーゼ及びトランスグルタミナーゼを複合した処理に
かけた。試料を入念にすすぎ、絞って脱水し、続いて６回の機械洗浄／乾燥サイ
クル（冷水による洗浄及び熱乾燥を２回、温水による洗浄及び高熱乾燥を４回）
にかけ、一定の温度及び温度の部屋で平衡化し、その後試験した。

【００３４】実験条件：材料：２４cm×２４cmの、１８cm×１８cm² の方形を両側に内接
している、それぞれ約９ｇの、縁に沿って縫い込んだ羊毛の布きれ（ジャージー
ニットウール−ＴｅｓｔＦａｂｒｉｃｓＴＦ５３２）。処理条件：羊毛の布きれを、ラウンダーオーメーターの容器中の、Ｅｓｐｅｒ
ａｓｅ８．０Ｌ及びフィトフソラ・カクトラムのトランスグルタミナーゼ溶液
（溶液中で、重量当たり約４％のタンパク質）を記載した量含む２５０mlの緩衝
液（２５℃、４０mM Ｔｒｉｓ、pH８．２５）でそれぞれ４０分間、４４℃でイ
ンキュベートし、１０分かけて８０℃まで上昇させ、続いて８０℃を１０分間保
った。

【００３５】

【表１】

【００３６】注意：重量の減少は６回の洗浄−乾燥サイクル後に測定した。収縮は６回の機械
洗浄／乾燥サイクル後に測定した。“強度”は、羊毛織物の乾燥破裂強度の測定
を、布きれ当たり複数回試験したものである。上記のデータ表から明らかである様に、トランスグルタミナーゼの至適濃度を
用いる複合処理は、プロテアーゼのみで処理した羊毛と比較して、減少した繊維
の損傷（重量の減少の低下及び破裂強度の増大において明らかである）及び増大
した防縮性を有する羊毛をもたらす。更に、前記のデータはトランスグルタミナ
ーゼ単独での処理が有意な利益を提供しないことを示している。

【００３７】トランスグルタミナーゼが架橋酵素であることは、指摘されるべきである。架
橋の程度を、異なる反応条件の組み合わせごとに最適化することは、過剰な架橋
がもろく、弱い繊維をもたらすので重要である。従って、この例において定義し
たトランスグルタミナーゼの至適濃度は、与えたトランスグルタミナーゼのため
の、Ｅｓｐｅｒａｓｅ（商標）の記載した量による、記載した温度及び時間での
、記載した羊毛を用いる使用のためである。反応条件における変更が、トランス
グルタミナーゼの至適な量における変更を必要としていることは明らかである（
そして、全てのトランスグルタミナーゼが同じようにふるまわないことも明らか
である）。従って、我々はプロテアーゼとトランスグルタミナーゼの全ての組合
わせのための、全ての可能な反応条件下での、統一の好ましい濃度比を同定する
ことはできない。例７．穏やかな酸化処理後に、プロテアーゼ及びトランスグルタミナーゼで処理
した羊毛の重量の減少、破裂強度、白色度及び収縮羊毛の布きれを、次亜塩素ナトリウムの酸化溶液を用いて穏やかな酸化的塩素
化段階にかけ、続いてすすぎ、絞って脱水し、そして、プロテアーゼ及びトラン
スグルタミナーゼの複合処理にかけた。試料を入念にすすぎ、絞って脱水し、５
回の機械洗浄／乾燥サイクル（温水洗浄、高熱乾燥）にかけ、一定の温度及び湿
度の部屋で平衡化し、その後試験した。

【００３８】実験条件：材料：２４cm×２４cmの、１８cm×１８cm² の方形を両側に内接
している、それぞれ約９ｇの、縁の周囲を縫い込んだ羊毛の布きれ（ジャージー
ニットウール−ＴｅｓｔＦａｂｒｉｃｓＴＦ５３２）。前処理条件：羊毛の布きれを対で、１mlの市販の家庭用漂白溶液（重量当たり
５．２５％の次亜塩素酸ナトリウム）を含む５００mlの緩衝液（２５％の、pH５
．０の２５mM酢酸ナトリウム）を有するラウンダーオーメーター容器中で、４０
℃で４５分間インキュベートした。

【００３９】処理条件：羊毛の布きれを、ラウンダーオーメーターの容器中の、Ｓａｖｉｎ
ａｓｅ１６．０Ｌ及びフィトフソラ・カクトラムのトランスグルタミナーゼ溶
液（溶液中で、重量当たり約４％のタンパク質）を記載した量含む５００mlの緩
衝液（２５℃、４０mM Ｔｒｉｓ、pH８．３０）でそれぞれ４０分間、５４℃で
インキュベートし、１０分かけて８０℃まで上昇させ、続いて８０℃を１０分間
保った。

【００４０】

【表２】

【００４１】注意：全ての値は２つの試験の平均を表わす。反応液の濃度は、羊毛の布きれ当
たりのものである。重量の減少は、６回の洗浄−乾燥サイクル後に測定した。収
縮は、５回の機械洗浄／乾燥サイクル後に測定した。“強度”は羊毛織物の湿潤
破裂強度の測定を、布きれ当たり複数回試験したものである。白色度（Ｓｔｅｎ
ｓｂｙ単位）は、５回の洗浄−乾燥サイクル後に測定した。

【００４２】穏やかな酸化的塩素化の前処理後の、プロテアーゼ及びトランスグルタミナー
ゼの選択した組合わせによる羊毛の処理は、未処理又はプロテアーゼ処理の羊毛
と比較して、優れた防縮性及び白色度、同時にプロテアーゼ単独による処理と比
較して重量及び強度低下の維持を与えた。

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１２年３月２２日（２０００．３．２２）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＵ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＤ，ＧＥ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡＦターム(参考） 4L031 AA03 AB01 AB31 BA34 BA39 DA05 DA11

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】羊毛、羊毛繊維又は動物の毛の処理方法であって、羊毛、繊
維又は毛を、水溶液中で有効量の（ｉ）タンパク質分解酵素、及び（ii）トラン
スグルタミナーゼと接触させることを含んで成る方法。
【請求項２】羊毛、羊毛繊維、又は動物の毛を、タンパク質分解酵素及び
トランスグルタミナーゼで同時に処理する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】羊毛、羊毛繊維、又は動物の毛をタンパク質分解酵素による
処理後に、トランスグルタミナーゼで処理する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】前記のタンパク質分解酵素が、植物、動物、細菌、又は菌類
起源である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】前記のタンパク質分解酵素が、パパイン、ブロメライン、フ
ィチン、及びトリプシンから成る群から選択される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】前記のタンパク質分解酵素がセリンプロテアーゼである、請
求項４に記載の方法。
【請求項７】前記のセリンプロテアーゼが、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
）又はトリチラチウム（Ｔｒｉｔｉｒａｃｈｉｕｍ）由来のズブチリシンである
、請求項６に記載の方法。
【請求項８】羊毛、繊維、又は毛のkg当たりの使用されるプロテアーゼの
量が、０．００１ｇ〜１０ｇの範囲内である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】前記のトランスグルタミナーゼがストレプトバーチシラム（
Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｍ）由来である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】前記のトランスグルタミナーゼが、フィトフソラ（Ｐｈｙ
ｔｏｐｈｔｈｏｒａ）由来である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】ヒトのトランスグルタミナーゼがＸIIIa因子である、請求
項１に記載の方法。
【請求項１２】前記トランスグルタミナーゼが、ポリアミノ含有化合物Ｒ ₁ ＮＨＲ₂ ＮＨＲ₃ （ここで、Ｒ₁ ，Ｒ₂ 、及びＲ₃ は独立して水素、ヒドロカ
ルビル、又は置換ヒドロカルビルであってもよく、そしてＲ₁ ，Ｒ₂ 、及びＲ₃
のいずれかの組合わせは、１又は複数の環を形成するために共に結合してもよい
）と一緒に加えられる、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】前記のポリアミノ含有化合物がポリエチレンイミンである
、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】羊毛、繊維、又は毛のkg当たり使用されるトランスグルタ
ミナーゼの量が、０．００１ｇ〜１０ｇの範囲内である、請求項１に記載の方法
。
【請求項１５】前記の水溶液が、更に柔軟剤を含んで成る、請求項１に記
載の方法。
【請求項１６】羊毛、羊毛繊維又は動物の毛が、前記のプロテアーゼ及び
トランスグルタミナーゼの処理後に、柔軟剤で処理される、請求項１に記載の方
法。
【請求項１７】羊毛、羊毛繊維、又は動物の毛が、プロテアーゼ及びトラ
ンスグルタミナーゼによる前記処理の前に、酸化的処理にかけられる、請求項１
に記載の方法。
【請求項１８】前記の酸化的処理が、酸化的塩素化である、請求項１７に
記載の方法。
【請求項１９】前記の酸化的処理が、酸化還元酵素による酵素処理を含ん
で成る、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】前記の酸化還元酵素がハロペルオキシダーゼである、請求
項１９に記載の方法。