JP2002515043A

JP2002515043A - Ｖｌａ―４インヒビターのための分子モデル

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Publication number: JP2002515043A
Application number: JP50898698A
Authority: JP
Inventors: シン，ジャスウィンダー; ゼン，ゾングリ; スプラグエ，ピーター; ブリジメン，ハーマンダブリュー．ティー．バン; シー．カストロ，アルフレド; ピー．アダムス，スティーブン
Original assignee: バイオジェン，インコーポレイテッド
Priority date: 1996-07-25
Filing date: 1997-07-24
Publication date: 2002-05-21
Also published as: HK1020211A1; ES2285735T3; EP0914605B1; DE69737769D1; US6552216B1; DK0914605T3; DE69737769T2; ATE363658T1; EP0914605A1; CA2261974A1

Abstract

(57)【要約】 VLA-4インヒビターのファルマコフォアモデル、新規インヒビターの同定方法およびこれらの方法によって同定される新規インヒビター。

Description

【発明の詳細な説明】 VLA-4インヒビターのための分子モデル本発明は、インテグリン(integrin)VLA-4とそのリガンドとの結合の阻害、変更または防止のために有用な化合物の同定のための新規なファルマコフォアモデルに関する。本発明はまた、VLA-4のそのリガンドへの結合を阻害し得る分子を発見する方法、ならびに本発明のモデルにマップする特徴を有する新規分子に関する。発明の背景近年、合理的な薬剤設計は、製薬工業において新規薬剤を同定するための一般的なアプローチとなっている。このアプローチは、生理学的に関連する生物学的経路において重大な役割を果たすタンパク質標的分子を選択することを必要とする。化学者は、典型的には天然リガンドを手がかりとして開始し、そしてそれを改変して所望の特性を有する化合物を生成する。このタンパク質の天然のリガンドまたは基質を操作して、同定される治療的必要性に応じ、タンパク質−リガンド複合体の作用の機構に関して公知の知識を主に利用して、酵素インヒビター、またはレセプターに対してのアゴニストまたはアンタゴニストを生成する。大部分の細胞レセプターについては、アゴニストまたはアンタゴニストとして作用する薬剤の薬理学が発展している。しかし、広範囲な薬理学的研究ならびに多くの新規方法論ならびに実験室的技術の発展にも関わらず、ある種のレセプターおよび／またはその作用はいまだに分かりにくく、そしてその活性を阻害または調節するための所望のアンタゴニストはいまだに発見されていない。さらに、しばしば特定の細胞レセプターのある種のアゴニストまたはアンタゴニストは公知であるが、しかし、新規インヒビターの同定方法、新規分子種、および特定の化合物が所望の薬理学的活性を有するかどうかを迅速かつ有効に決定する方法の必要性は残っている。細胞接着は多くの生物学的現象の根底となる基礎的な機構の1つである。例えば、造血細胞が内皮細胞へ接着し、そして次にこれらの造血細胞が血管から外に出て損傷の部位に移動するなどである。従って、細胞接着は、炎症および免疫反応のような多くの病理において役割を果たすことが公知である。 α4β1インテグリンはまた非常に遅い抗原-4(very late antigen -4(「VLA-4 」))としても知られている白血球表面レセプターであり、これは多様な細胞−細胞および細胞−マトリックスの接着相互作用の両方に関与する。これは、サイトカイン誘導性内皮細胞表面タンパク質、血管細胞接着分子-1(「VCAM-1」)、ならびに細胞外マトリックスタンパク質フィブロネクチンのためのレセプターとして働く。いくつかのインビボでの実験の結果は、VLA-4に依存する細胞接着の阻害が、いくつかの炎症および自己免疫病理を防止し、阻害し、または変化させ得ることを示唆する。 VLA-4に結合するために必要な最少の活性アミノ酸配列を同定するために、Kom oriyaらは、特定のフィブロネクチンの種のCS-1領域(VLA-4結合ドメイン)のアミノ酸配列に基づく、種々の重複するペプチドを合成した。(「フィブロネクチンの択一的に接合されたIII型連結セグメントドメイン内の主要な細胞型特異的接着部位(CS1)のための最少必須配列はロイシン−アスパラギン酸−バリンである」、 J.Biol.Chem.,266(23)、15075-79頁(1991))。彼らは、8-アミノ酸ペプチドGlu-I le-Leu-Asp-Val-Pro-Ser-Thr、ならびに2つのより小さな重複するペンタペプチドGlu-Ile-Leu-Asp-ValおよびLeu-Asp-Val-Pro-Serを同定した。これらはFN-依存性細胞接着に対する阻害活性を有する。これらの結果は、トリペプチドLeu-As p-Valが細胞接着活性のための最少配列であることを示唆した。Leu-Asp-ValがVL A-4の活性化形態を発現するリンパ球にのみ結合することが後に示され、それゆえこのようなペプチドのインビボでの有用性に疑念を抱かせる。(E.A.Waynerら、「フィブロネクチンのV領域中のLDV配列の造血細胞による活性化依存性認識」、J.Cell.Biol.,116(2)、489-497(1992))。しかし、LDV配列を含む、ある種のより大きなペプチドがインビボで活性であることが次に示された(T.A.Fergusonら、「2つのインテグリン結合ペプチドはインビボでT細胞媒介免疫反応を抑止する」、Proc.Natl.Acad.Sci.USA、88、8072-76頁(1991)；およびS.M.Wahlら、「合成フィブロネクチンペプチドは白血球の接着および漸増を妨害することによってラットの関節炎を抑制する」、J.Clin.Invest.、94、655-62頁(1994))。 VLA-4およびVLA-5の両方のＦＮへの接着を阻害し得る環状ペンタペプチドArg- Cys-Asp-TPro-Cys(ここでTProは4-チオプロリンを表す)もまた記載されている。 (例えば、D.M.Nowlinら「新規環状ペンタペプチドはα4β1およびα5β1インテグリン媒介細胞接着を阻害する」、J.Biol.Chem.、268(27)、20352-59頁(1993) ；およびPCT公報PCT/US91/04862参照)。このペンタペプチドは、いくつかの細胞外マトリックスタンパク質についての認識部位の共通モチーフとして知られていたFNからのトリペプチド配列Arg-Gly-Aspに基づいていた。他のVLA-4インヒビターの例が、例えば同時係属中の米国特許出願S.N.08/376, 372に報告されており、これは具体的に本明細書中に参考として援用される。USS N376,372は、細胞接着阻害活性を有するβ-アミノ酸を含む直鎖ペプチジル化合物を記載する。国際特許出願WO94/15958およびWO92/00995(具体的に本明細書中に参考として援用される)は、細胞接着調節活性を有する環式ペプチドおよびペプチド擬態（peptidomimetic）化合物を記載する。国際特許出願WO93/08823およびWO92/08464(具体的に本明細書中に参考として援用される)は、グアニジニル− 、ウレア−およびチオウレア含有細胞接着調節化合物を記載する。米国特許第5, 260,277号は、グアニジニル細胞接着調節化合物を記載し、そしてこれは具体的に本明細書中に参考として援用される。上で論述したように、ランダムな方法とは対照的な合理的な方法で新規薬物を発見することに対するアプローチが、いくつかの理由により所望される。それゆえ、化合物のランダムな改変を行うよりもむしろ合理的に化合物を至適化し得る。理想的には、インヒビターのレセプターへの結合モードの三次元モデルは、化合物の構造と生物学的活性に対するその効果との間の相関が誘導できるように探求される。化合物とそのレセプターまたはリガンドとの三次元の定量的な構造活性関係を決定するためのいくつかの一般的なアプローチが存在する。これには、 CATALYST^TM(Greeneら、1994，「三次元データベースサーチのための化学的機能照会(query)」、J.Chem.Inf.Comp.Sci.,34,1297-1308)、DISCO(Martin Y.C.ら、 1993、「ファルマコフォアマッピングへの速い新たなアプローチおよびドピネルジック(dopinergic)およびベンゾジアゼピンアゴニストへのその適用」、J.Comp.A ided Mol.Design,7,83-102)、C0MFA(Cramer R.D.,1988，「比較分子場分析［CoM FA］1.ステロイドのキャリアタンパク質への結合に対する形状の影響」、J.Am.C hem.Soc.,110,5959-5967)、Apex3D(Golender,V.E.およびVorpagel,E.R.,1993，「コンピュータ補助ファルマコフォア同定」、Three dimensional-QSAR in Drug Design:Theory,Methods and Application,ESCOM Science Publ.,Netherlands) が包含されるが、これらに限定されない。三次元モデルが一旦確立されると、それは新規化合物の同定に有用であり得る。例えば、Kiyamaらは既知のAIIインヒビターの三次元モデルに基づいて新規AIIアンタゴニストを同定することができた。(1995、「新規AIIレセプターアンタゴニスト。ジベンゾ[a,d]シクロヘプタンおよびジベンゾ[b,f]オキセピン誘導体の設計、合成、およびインビトロ評価。三次元サーチ技術を用いるビフェニルテトラゾールの生物等電子体(bioisoter e)のサーチ」、J.Med.Chem,38,2728-2741) 一般に、薬物とそのレセプターとの間の分子認識を支配する基礎的な力がいくつか存在する。この力としては、例えば、水素結合力、静電的相互作用および疎水性相互作用が挙げられる。近年まで、ほとんどのインヒビターの記述は、化学構造(例えば、インドール環、カルボニル酸素)を説明する二次元原子トポロジーダイアグラムに基づいていた。これらのダイアグラムも有用であり得るが、化合物の生物学的活性の詳細に関してこれらのダイアグラムが提供する情報にはいくぶん限界がある。さらなる情報が入手可能であれば、化学者が特定の生物学的活性を有する新規な化合物を、比較的迅速、安価に、そして比較的高い成功率で同定する助けとなるであろう。二次元原子トポロジーの代わりに、アプローチ(Greeneら、1994,「三次元データベースサーチのための化学的機能照会(query)」、J.Chem.Inf.Comp.Sci.,34,12 97-1308)は、化学的サブ構造の結合相互作用のタイプを考慮に入れた化学的特徴に基づく化合物を記載する。(図１、例えば、H-結合供与体、疎水性)。このアプローチの1つの利点は、化合物のより全般的な記述を可能にし、そしてそのレセプターとの可能な相互作用を説明することである。別の化学構造が同じ化学的特徴を提示し得るという認識は、薬物の発見の中心を成す。化学的構造は異なるがそれらが提示する化学的特徴は同じである強力なアンタゴニストを記述するために、化合物の特徴に基づく記述を使用する例が存在する。これらの例としては例えば、アンギオテンシン変換酵素アンタゴニスト(Spraq ue、1994、「Building a hypothesis for Angiotensin Converting Enzyme Inhi bition」、MSI Inc.,16 New England Executive Park,Burlington,MA 01803)およびA₂アンタゴニスト(Spmgue、1994、「Building a hypothesis for AII Angio tensin」、MSI Inc.,16 New England Executive Park,Burlington,MA 01803)が挙げられる。これらの利点にも関わらず、細胞接着の新規な特異的インヒビターを同定するために使用され得るVLA-4インヒビターのモデル、特にVLA-4細胞接着の新規な特異的インヒビターを同定するための方法に対する必要性が残っている。さらなる情報が入手可能であれば、当業者が、特定の生物学的活性を有する化合物を、迅速、安価に、そして比較的高い成功率で同定する助けとなるであろう。理想的には、そのような方法は、当業者が、細胞接着またはVLA-4結合によって媒介される種々の病理を処置、変化、防止または抑制するために有用な薬剤を提供する新規化合物の阻害活性を予測することを可能とする。発明の要旨従って、本発明はVLA-4インヒビターのモデル、新規インヒビターの同定方法、およびVLA-4活性を阻害する、上記モデルにマップする新規化合物に関し、これは関連技術の限界および不利な点による1つ以上の問題を実質的に除去する。本発明の特徴および利点を達成するために、本明細書に例示されそして広範囲に記載されるように、本発明は、VLA-4阻害活性を有する化合物の三次元ファルマコフォアモデルに関連する。本発明のモデル1は以下の公差および三次元座標x 、yおよびzで定義される特定の特性を含む。詳細には、このモデルはNEG(「N」)およびからなる群から選択される少なくとも3つの特徴を含む。本発明のモデルの座標は特徴間の相対関係を定義し、従って、具体的な座標は使用される個々の座標系に依存し、それゆえこれらの座標の回転または並進(tra nslation)は座標の具体的な値を変化させ得るけれども、これらの座標は実際、本発明のモデルを定義することを当業者は容易に認識する。当業者は、本発明のモデルが標準誤差を排除しないことを認識すべきである。それゆえ、本発明のモデルは、同定された特徴を含み、そして等価な特徴の根二乗平均が約2Å未満である任意のモデルを包含することが意図される。より詳細には、本発明のモデル1は、負に電離し得るという特徴「NEG]と、特徴1〜7からなる群から選択される少なくとも4つの特徴を含む。他の実施態様において、モデルはMEGに加えて、この特徴の5〜7つを含み得る。他の実施態様において、本出願人は、本発明のモデルに「マップ」する化合物に関する。本明細書において用語「マップ」および「フィット」は、「catalyst」(「Hy pothesis in Catalyst」、MSI Inc.,New England Executive Park,Burlington,MA 0 1803;Greene,I.,1994,J.Chem.Inf.Sci.,「三次元データベースサーチのための化学的機能照会(query)」、34,1297-1308)で計算されるように、ある仮説(仮定)における特徴のいくつかまたはすべてと、これらの特徴を満たす化合物の特定のコンホーマーの化学サブ構造との間の対応を表すために、互換的に使用される。さらなる実施態様において、VLA-4直接結合アッセイにおけるIC₅₀値が約100μmから約1μmの範囲であり、そしてNEG、およびモデルのさらなる3〜7つの特徴にマップする化合物が包含される。さらに他の実施態様において、本出願人は、VLA-4直接結合アッセイにおけるI C₅₀値が約100μMから約1μMの範囲である化合物を同定するための新規な方法を発見した。本発明の方法は全般として、VLA-4阻害活性について評価されるべき実験化合物構造を選択する工程を包含する。次に上記化合物の三次元構造を得、そして次にこの実験化合物の構造を本発明のVLA-4モデルに重ね合わせ、そしてこの実験化合物がモデルに「フィット」するかを決定して評価する。実験化合物がモデルにフィットするならば、次にこれを直接結合アッセイで試験して、この実験化合物が所望の阻害活性を有するか否かを決定する。本発明の化合物は好ましくは、約100μMから約0.5nMの範囲、好ましくは約50μm未満、より好ましくは約500nM未満、そして最も好ましくは約50nM未満の阻害活性を有する。さらに他の実施態様において、本発明は、VLA-4阻害活性を有する化合物の三次元ファルマコフォアモデルであるモデル2に関する。モデル2は以下に定義されるNeg(「N」)と、そして特徴1から8の少なくとも4つを含む。好ましくは、モデルは、モデル2の特徴1〜8のうち少なくと5つから8つを含む。さらに、本発明は、モデル2にフィットし、かつモデル2の特徴のうち4つから8 つの間にマップする特徴を有する化合物に関する。本発明の化合物は好ましくは、約100μMから約50nMの範囲、好ましくは約50μm未満、より好ましくは約500nM 未満、そして最も好ましくは約50nM未満の阻害活性を有する。他の実施態様において、本発明は、モデル1に関して上述したやり方と同様のやり方でモデル2を用いてVLA-4阻害活性を有する化合物を同定する方法、ならびに本発明の方法によって得られる化合物に関する。さらに他の実施態様において、本発明は、VLA-4阻害活性を有する化合物の第三の三次元ファルマコフォアモデルに関する。モデル3は以下の特徴を含む：モデル1および2に関連して上記で論述したように、本発明はまた、モデル3を用いて所望の化合物を同定する方法、ならびにモデル3にマップする新規化合物を包含する。好ましくは、本発明で包含されるこの新規化合物は、上述の好ましいIC₅₀値を有する。上記の一般的な記述および以下の詳細な説明は両者とも例示および説明のためであり、本発明のさらなる説明を提供することを意図していることを理解すべきである。添付の図面は本発明のさらなる理解を与えるために添付され、そして本明細書に含まれ、かつその一部を構成し、本発明のいくつかの実施態様を図示し、そして説明と共に、本発明の原理を説明するために役立つ。図面の簡単な説明図１。化合物14の原子および特徴に基づく記述である。原子に基づく記述は、 M14の原子および結合の三次元的配置を示す。図２。Catalystによって計算されたM14と本発明のVLA-4モデル1との間の重なり。モデルの特徴を表示している。図３(a)〜(x)。VLA-4モデル1にマップする化合物の化学構造。図４。Catalystで計算されたM2と本発明のVLA-4モデル2との重なりである。図５。モデル3とVCAM構造(Berrstein,F.,1977,「タンパク質データバンク：巨大分子構造のコンピュータに基づく記録（archival）」J.Mol.Biol,112,535-542 ；Brookhaven Code 1VCA)のGln-Ile-Asp-Ser-Pro領域(38〜42残基)との対応。図６。ジフェニルウレア含有化合物の重なり、ケンブリッジ結晶学データベース(Cambridge Crystallographic Database)(コードネームPPESIR、KUHWHIT、SIL VOY、GIMROJ10、GIMRUP10、GIMSAW10、SALTOW、SILTUC01)。(Cambridge Crystal lographic Database Center,12 Union Road,Cambride,CB21EZ,U.K.)。重ね合わされた化合物の上面図、およびエンドオン図(end-on-view)を示す。図７。ジフェニルウレア擬態(mimetics)を同定するための本発明者らのサーチ手順の模式例。これは、ケンブリッジ結晶学データベースから化合物DPUREAを定義および抽出し、そしてプログラムcatShapeを用いてその形状を定義することを伴う。これは、分子の3つの主軸およびその容積を表すマスクに関して定義される。このマスクを次に用いて、Catalystデータベース中の類似の形状および容積を有する他の分子についてサーチする。図８。ACDから抽出されたキャップ(cap)を含むアミンのマルチコンホメーションのデータベースから抽出されたジフェニルウレア擬態の例。図９。VCAMのX線構造のGln-Ile-Asp-Ser-Pro部分(残基番号38-41)とVLA-4モデル1の短縮バージョンとの重なり。図１０。Catalystで計算されるM2とVLA-4モデル1との重なり。図１１。化合物M5からVLA-4インヒビターであるM6への転化。M6とVLA-4モデル 1との重なりを示す。図１２。ロイシンアミノペプチダーゼ(Brookhavenコード1BPM)およびVCAM(Bro okhavenコード1VCA)のX線構造の比較。図１３。2つの強力なVLA-4(M13およびM17)とモデル3。図１４。2つの新規化合物のモデル3へのフィット。これらは、Catalystを用いて、骨格の市販のデータベースによりサーチすることにより、同定された。図１５(a)、１５(b)、１５(c)。本発明の好ましい化合物のリスト。詳細な説明本発明の現在の好ましい実施態様についてこれから詳細に言及する。これらの例は、添付の図面に例示される。出願人は、化合物がVLA-4レセプターへのリガンドの結合を阻害するために必要とされる化学的特徴から構成される三次元モデルを発明した。このモデルは構造活性データから作成され、そしてある分子のクラス内の生物学的活性のために重要な化学的サブ構造または特徴の記述である。化学的特徴のうちのいくつかをこのモデルによって記述されるような相対的な三次元配向で提示し得る化合物は、VLA-4直接結合アッセイ(DBA)で測定されるようなVLA-4阻害活性を有し、それゆえ治療的可能性を有し得ると予測される。このモデルは特徴に基づくものであり、化学的サブ構造の結合相互作用のタイプを考慮に入れた化学的特徴に基づく化合物を記述する(Greeneら、1994,「三次元データベースサーチのための化学的機能照会(query)」、J.Chem.Inf.Comp.Sci.,34,1297-1308)。(図１；例えばH-結合供与体、疎水性)。このアプローチの1つの利点は、化合物のより全般的な記述を可能にし、そしてレセプターとの可能な相互作用を説明することである。別の化学構造が同じ化学的特徴を提示し得るという認識は、薬物の発見の中心を成す。化学的構造は異なるが、それらが提示する化学的特徴は同じ強力なアンタゴニストを記述するために、化合物の特徴に基づく記述を使用する例が存在する。これらの例としては例えば、アンギオテンシン変換酵素アンタゴニストおよびAII アンタゴニストが挙げられる。(Sprague、1994、「Building a hypothesis for AII Antagonism」、MSI Inc.,16 New England Executive Park,Burlington,MA 0 1803)。本発明のモデルは、新規VLA-4インヒビターを発見するためのツールを当業者に提供し、それゆえ、化合物を合成する前にリガンドのVLA-4レセプターへの結合を阻害するその化合物の能力について評価するために、あるいは新規化合物を設計するために使用され得る。評価される化合物は本明細書において「実験化合物」と呼ばれる。より詳細には、当業者は、本発明のモデルを例えばCstalyst^TM のようなコンピュータ計算プログラムと組み合わせて使用して、モデルのすべてまたは一部にフィットするかもしれない「実験化合物」の化学的サブ構造について化学データベースによりサーチし得ること、およびそのようにして集められた情報を用いて実験化合物がVLA-4阻害活性を有する見込みがあるかどうかを決定し得ること見いだす。さらに、本発明は、当業者に、種々の実験化合物を本発明のモデルと比較するのみではなく、他の実験化合物と比較するツールを提供し得る。他の実施態様において、当業者は、本発明を他のソフトウェアプログラム、例えばDcnovo設計ソフトウェアプログラム(例えば、Leapfrog「Ligand-Based desi gn Manual」、Tripos Inc.,1699 S.Hanley Road,St.Louis.Missouri 63144-1913 )のようなプログラムと組み合わせて使用して、モデルの全部または一部にフィットするテンプレートまたは化学的サブ構造を同定し得、そしてそれによって「フィット」の質を決定し得る。「フィット」は本明細書において、実験化合物の特徴のいくつかまたは全部と参照モデルとの間の対応を表すのに使用される。さらに他の実施態様において、本発明は、新規VLA-4インヒビターの直感的設計の根拠として当業者によって使用され得る。本発明は、新規VLA-4インヒビターを同定するために使用し得る、特徴に基づく三次元VLA-4モデルに関する。図２は、本発明のVLA-4モデル1を示す。図示されるように、モデル1は三次元空間に配置された特徴のセットから構成される。各特徴は分子上の官能基の化学的特性の定義である。それゆえ、図２に示されるように、化学構造と特徴との関係が与えられる。これらの特徴の完全な定義は刊行されており、そして当業者には容易に理解され得る。例えば、Greene,J.,Kahn ,S.,Saboj,H.,Sprague,P.,およびTeig,S.、1994，「三次元データベースサーチのための化学的機能照会(query)」、J.Chem.Inf.and Comp.Sci.,34,1297-1308( 本明細書中に参考として具体的に援用される)参照。本発明のモデルのデカルト座標はx軸、y軸およびz軸ならびに関連する公差の値で数学的に定義され得る。他に断りのない限り、本明細書において与えられるすべてのデカルト座標はオングストローム(Å)で測定される。Ａ．ファルマコフォアモデルｉ)モデル1 本発明のモデル1は以下の公差と三次元座標x、yおよびzで定義される。詳細にはモデル1は以下のように定義されるNEG(「N」)およびからなる群から選択される少なくとも3つの特徴を含む。本発明のモデルは特定の広範囲な実施態様において「Neg」(すなわち負に電離可能な特徴)と呼ばれる特徴を含み、そして異なる実施熊様において、上記の7つの特徴のうちの3つから7つを含む。本明細書において、水素結合受容体という特徴HBAである特徴番号1は、HBA-1およびHBA-2の両方を包含するけれども、単独の特徴と見なされることに留意すべきである。同様に、HBDあるいは水素結合供与体という特徴である特徴番号2は、HBD-1およびHBD-2の両方を包含するけれども、本明細書において単独の特徴として議論される。「Hyd」は本明細書において疎水性の特徴をいう。モデル1および他の本発明のモデルの座標は、本明細書において、特徴間の相対的関係を定義する。さらに、座標は使用される特定の座標系に依存し、そしてこれらの座標の回転または並進は座標の具体的な値を変化させ得るけれども、これらの座標は本発明のモデルを実際定義することを当業者は認識する。本発明のモデルは、モデルの最適な重ね合わせの後、同定された特徴を含み、そして等価な特徴の根二乗平均が約2Å未満である任意のモデルを包含することを意図する。より好ましくは、本発明のモデルは、同定された特徴を含みそして等価な特徴の根二乗平均が約1.5Å未満、そして最も好ましくは約1.0Åである任意のモデルを包含する。 VLA-4モデルは、VLA-4のそのレセプターへの結合を阻害する化合物の能力を評価するために使用され得る。化合物は阻害活性について評価され、「実験化合物」は本発明のモデルを用いて設計され得される新規構造であり得、あるいは当該分野で公知の構造であり得る。本発明のモデルおよび方法、ならびに本明細書での教示を用いて、当業者は、モデルに「フィット」または「マップ」する実験化合物がVLA-4阻害活性を有するであろうことを予測し得る。実施において、本発明のモデルは種々のやり方で使用され得る。例えば、本発明のモデルは、新規VLA-4インヒビターを同定するために、本発明の方法に従って使用され得る。まず、VLA-4活性について評価されるべき実験化合物を同定する。これは例えば、化学データベースのサーチにより、あるいは存在する化合物の修飾により行われ得る。あるいは新規な実験化合物を作成し得る。当業者は、化合物のサーチ、ならびにコンピュータ的作成および／または修飾のためのコンピュータデータベースをルーチンに用いる。 VLA-4阻害活性について評価されるべき実験化合物を同定した後、この実験化合物の三次元構造を決定する。例えばCatalyst^TMソフトウェアのようなコンピュータプログラムを使用し得るが、このソフトウェアに限定されることはない。例として、化合物をCatalyst^TM中のドローイングツールを用いて描き、そして次に例えばBestコンホーマー生成プロセスを用いて、エネルギーを10kcal/molssにセットし、そして生成されるコンホメーションの最大数を250にセットして、三次元コンホメーションを生成し得る。次にモデルを、2つの構造を比較し得るツール、例えばViewHypothesisワークベンチ内のCompareを用いて実験化合物にフィットさせる。「フィット」は、例えば化合物がモデル中の化学的特徴にマップし得るかを決定することによって自動的に計算され得る。これは化合物が必要または所望される官能基を有しているかどうかに依存する。そしてまた化合物が必要な三次元配置を受け入れてモデルにフィットし得るかどうかにも依存する。プログラムは自動的にモデル中のどの特徴が化合物によってマップされるかを報告し得る。「フィット」は本明細書において、実験化合物が負に電離する特徴を含まなければならず、そしてモデルの7つの特徴のうち少なくとも3つの他の特徴がマップされることを意味する。実験化合物がモデルにフィットまたはマップする場合、次に直接結合アッセイ (DBA)を行うことによって、その化合物が所望のVLA-4阻害活性を有するかどうかが実験的に決定され得る。当業者はルーチンにこのようなアッセイを行い。そして実験化合物の活性を容易に決定し得る。好ましい実施態様において、本発明は商業的に有用な選択性および特異性を有するVLA-4インヒビターを包含する。これらの値は広範囲に変化し得るが、インヒビターの所望の用途に基づいて当業者によって容易に決定され得る。一般に、本発明のインヒビターはVLA-4直接結合アッセイにおけるIC₅₀値が約100μm未満である。より好ましくは、この値は約50μｍ未満であり、より好ましくは約1μm である。さらにより好ましくい実施態様において、VLA-4インヒビターは約500nM 未満、約100nM、そして最も好ましくは約50nMのIC₅₀を有する。出願人が本発明の方法および化合物により、当業者は当該分野で入手可能なものよりもさらに所望される活性を有するVLA-4インヒビターを予測しかつ得ることが可能となる。出願人は本発明のVLA-4モデルを以下のように生成した。M16-01、M14、M18、M 19(各々図３p、q、Rおよびs)からなるトレーニングセットは、活性な既知のVL A-4インヒビターの異なるファミリーの代表として選択された。このトレーニングセットをCatalyst^TM3.1(Catalyst Tutorial Manuarl,MSI Inc.,16 New Englan d Executive Park,Burlington,MA 01803)で、Bestコンホーマー生成プロセスを用いて、エネルギーを10kcal/molssにセットし、そして生成されるコンホメーション(confs)の最大数を250にセットして、マルチコンホーマーモデルに変換した。これらをCatalyst^TMで実施されるモデル生成プログラムHIPHOP^TM(HIPHOP Manu arl、MSI Inc.,New England Executive Park,Burlington,MA 01803)に対するインプットとして用いた。出願人らは、以下を除いて、全てのパラメーターについて、省略した議論を用いる一般的な特徴モードを定めた。全ての化合物は、主として、主なカラムをそれぞれ２に定めることによって言及された。最大省略（ＭａｘＯｍｉｔ）の特徴は、０に定められた。スペーシングパラメーターは、２５０ピコメーターにし、最大および最小パラメーターは、９に定め、そして、応答（ｒｅｔｕｒｎｅｄ）モデルの数は、１０に定められた。出願人らは、モデル１がＶＬＡ−４インヒビターを表すことを決定した。本発明の方法およびモデルをさらに確認するために、出願人らは、公知のＶＬＡ−４インヒビターが請求のモデルに適合するかどうかを決定した。高分子の生物学的コンフォメーションへの構造的洞察を与えるタンパク質Ｘ線結晶学（強力な、そして一般に用いられる実験ツール）は、血管細胞接着分子１（ＶＣＡＭ；Ｂｒｏｏｋｈａｖｅｎコードｌｖｃａ）の結晶学的構造を決定するのに用いられた。これは、公知のＶＬＡ−４レセプターの生理学的リガンドであり、これは、配列Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒを含む。Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ配列は、本発明のモデルに用いられるペプチド擬態物がベースとするＣＳ１由来のＬｅｕ−Ａｓｐ−Ｖａｌ配列と相同である。Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｖａｌ領域をベースとするペプチドは、ＶＬＡ−４−ＶＣＡＭ相互作用を阻害することが示されている（Ｗａｎｇら，１９９５）。従って、出願人らは、ＶＬＡ−４アンタゴニストは、それらがＶＬＡ−４に結合する場合、ＶＣＡＭ構造のＩｌｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ領域の構造を模倣し得ると仮定した。モデルとＶＣＡＭのＩｌｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ部分の間の重なりを、図２に示す。図２でわかるように、該Ｉｌｅは、疎水性の特徴のＨＹＤ３を「マップ(ｍａｐ )」し、そしてＡｓｐのカルボキシル基は、負のイオン化の特徴のＮＥＧを「マップ」する。さらに、Ｉｌｅ残基のカルボニルは、水素結合受容体の特徴をマッピングする。従って、出願人らは、それらの本発明のモデルを公知のＶＬＡ−４のリガンドの結合エピトープのモデルへのマップによって確認できた。ｉｉ）モデル２本発明のモデル２（図４に示す）は、以下の公差（ｔｏｌｅｒａｎｃｅ）および３次元座標によって定義された特徴を含む。特に、モデル２は、特徴ＮＥＧ（「Ｎ」）、および残りの８つの特徴の群から選択される少なくとも４つの他の特徴を含む。モデル２の記述モデル２は、以下のように生成された。Ｍ２１，Ｍ２６、Ｍ２３、Ｍ２２、およびＭ２４からなるトレーニングセットが選択され、そしてモデル２を作るのに使用される。トレーニングセットは、Ｃａｔａｌｙｓｔ（登録商標）２．３．１（ＣａｔａｌｙｓｔＴｕｔｏｒｉａｌＭａｎｕａｌ，Ｒｅｌｅａｓｅ２．３，ＭＳＩＩｎｃ．，１６ＮｅｗＥｎｇｌａｎｄＥｘｅｃｕｔｉｖｅｐａｒｋ，Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ０１８０３）を用いたマルチコンフォーマーモデル（エネルギーを１５ｋｃａｌ／ｍｏｌに、および最大コンフ（ｃｏｎｆｓ）を２５５に定めて、最良のコンフォーマー生成プロセスを用いる）に変えられた。これらは、Ｃａｔａｌｙｓｔ（登録商標）２．３．１で提供されるような仮定生成プログラムＨＩＰＨＯＰ（登録商標）（ＣａｔａｌｙｓｔＴｕｔｏｒｉａｌＭａｎｕａｌ，Ｒｅｌｅａｓｅ２．３，ＭＳＩＩｎｃ．，１６ＮｅｗＥｎｇｌａｎｄＥｘｅｃｕｔｉｖｅｐａｒｋ，Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ０１８０３）への入力として用いられた。仮定生成は、以下を除いて、全てのパラメーターについて、省略した議論を用いるよう定められた一般的な特徴モードを用いて実行された。全ての化合物は、主として、主なカラムをそれぞれ２に定めることによって言及された。Ｍ２１は、任意の特徴を抜かすことが許容されなく、Ｍ２０は、２つの特徴まで抜かすことが許容され、そして他の全ての化合物は、最大省略特徴カラムを０、２および１にそれぞれ定めることによる任意の生成された仮定の１つの特徴まで抜かすことが許容された。スペーシングパラメーターは、２５０ピコメーターにし、最大および最小パラメーターは、９に定め、そして、応答仮定の数は、２０に定められた。従って、出願人らは、１２個の９−特徴モデルを生成し、それらの中から、観察された構造−活性データを最も相関させるように、上位４つの高いものが決定された。ｉｉｉ）モデル３出願人らは、モデル３は、特定のＶＬＡ−４インヒビターは、ＶＬＡ−４リガンド中の金属への配位に含まれ得るという発見をベースとすることをクレームした。従って、出願人らは、金属に配位し得る足場（ｓｃａｆｆｏｌｄ）は、公知のＶＬＡ−４インヒビターの足場を変換するのに有用であり得ると仮定した。用語「足場（ｓｃａｆｆｏｌｄ）」は、公知のＶＬＡ−４インヒビターのＬｅｕ− Ａｓｐ−Ｖａｌ部分に関連したＶＬＡ−４インヒビターの化学構造の一部を説明するのに本明細書で用いられる。出願人らは、公知のインヒビターの足場は、新しいか、または異なる化学構造で変換され得、それによって新規のＶＬＡ−４インヒビターを生成することを発見した。出願人らは、請求モデル３を、金属に配位し得る足場を探すのに用いられるＶＣＡＭ（公知のＶＬＡ−４リガンド）に基づいた。以下に定められたモデル３の要素は、特定の原子タイプに対応し、一方、モデル１および２は、化学特徴を示す。モデル３は、以下の５つの特徴を含む：出願人らは、金属と相互作用するＶＣＡＭ（公知のＶＬＡ−４リガンド）の鍵部分を第１に決定することによってモデル３を生成した。Ｇｌｎ３８残基の背骨カルボニル基とＡｓｐ４０のカルボキシル基は、識別された。出願人らは、ＶＣＡＭ構造（ＢｒｏｏｋｈａｖｅｎＣｏｄｅ１ＶＣＡ）由来の２つの部分に含まれる原子の３次元座標を抽出し、次いで、２つの部分をＣａｔａｌｙｓｔプログラムを用いる探索可能モデルに並進（ｔｒａｎｓｌａｔｅ）した。Ｂ．本発明のモデルを用いる方法本発明のモデルは、当業者に、新規のＶＬＡ−４インヒビターを発見するためのツールを提供し、従って、合成の前に、リガンドのＶＬＡ−４レセプターへの結合を阻害する化合物の性能に関して、化合物を評価するか、または新規の化合物を設計するのに用いられ得る。ＶＬＡ−４阻害活性に関して評価される化合物は、本明細書中で、「実験化合物」と呼ばれる。ＶＬＡ−４モデルは、化合物の、ＶＬＡ−４を阻害する能力を評価するために用いられ得る。阻害活性を評価される化合物である「実験化合物」は、本発明のモデルを用いて設計された新規な構造、または当該分野で公知の構造であり得る。本発明のモデルおよび方法並びに本明細書に記載する教示を用いた場合、当業者は、モデルに「フィットする」または「マップする」実験化合物がＶＬＡ−４阻害活性を有すると予測し得る。実際には、本発明のモデルは、様々な様式で用いられ得る。例えば、本発明のモデルは、新規のＶＬＡ−４インヒビターを同定するために、本発明の方法に従って用いられ得る。まず、ＶＬＡ−４活性を評価すべき実験化合物を同定する。これは、例えば、化学データベースを検索すること、または存在する化合物を改変することによって行われ得る。あるいは、新規の実験化合物を作成し得る。当業者は、通常、検索のためにコンピュータデータベースを用い、演算的に化合物を作成および／または改変し新たに化合物を構築する（例えば、ＬｅａｐＦｒｏｇ”Ｌｉｇａｎｄ−ＢａｓｅｄＤｅｓｉｇｎＭａｎｕａｌ”、ＴｒｉｐｏｓＩｎｃ．、１６９９Ｓ．ＨａｎｌｅｙＲｏａｄ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｉｓｓｏｕｒｉ６３１４４−２９１３）。ＶＬＡ−４阻害活性を評価すべき実験化合物を同定した後、実験化合物の３次元構造が決定される。例えば、Ｃａｔａｌｙｓｔ^TMソフトウェアなどのコンピュータプログラムを用い得るが、このソフトウェアに限定されない。例として、化合物は、Ｃａｔａｌｙｓｔ^TM内のドローイングツール（ｄｒａｗｉｎｇｔｏｏｌ）を用いて描画され得る。その後３次元コンホメーションが、例えば、１０ｋｃａｌ／ｍｏｌに設定されたエネルギーと２５０に設定された生成されるコンホメーションの最大数とを有するベストコンホーマー（ｂｅｓｔｃｏｎｆｏｒｍｅｒ）生成プロセスを用いて生成され得る。その後、実験化合物は、例えば、ＶｉｅｗＨｙｐｏｔｈｅｓｉｓワークベンチ内のＣｏｍｐａｒｅなどの２つの構造を比較し得るツールを用いてモデルにフィットする。「フィット」は、例えば、化合物がモデル内において化学的特性にマップし得るか否かを決定することにより、自動的に演算され得る。これは、化合物が必要な又は所望の官能基を有するか否か、さらにそれらがモデルにフィットするために必要な３次元配列を採用するか否かに依存する。プログラムは、自動的に、モデル内のいずれの特徴に化合物によってマップされるかを報告する。実験化合物がモデルのうちのいずれかにフィットまたはマップする場合、その化合物が所望のＶＬＡ−４阻害活性を有するか否かを、直接結合アッセイ（ＤＢＡ）を行うことにより、実験により決定し得る。当業者は、通常、このようなアッセイを行っており、実験化合物の活性を容易に決定し得る。好適な実施態様において、本発明は、商品として有用な選択性および効力を有するＶＬＡ−４インヒビターを同定する方法を含む。これらの値は大幅に変更し得るが、インヒビターの所望の適応に基づいて当業者により容易に決定される。概して、本発明のインヒビターは、ＶＬＡ−４ＤＢＡ内において、約１００μ ｍ未満のＩＣ₅₀値を有する。より好適には、本発明の方法は、約５０μｍ未満の値、より好適には約１μｍ未満の値のＩＣ₅₀を有する化合物を同定するために用いられ得る。さらに別の好適な実施態様において、ＶＬＡ−４インヒビターは、約５００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満、最も好適には約５０ｎＭ未満のＩＣ₅₀を有する。出願人の本発明の方法および化合物は、当業者が、当該分野で入手可能な活性よりも望ましい活性を有するＶＬＡ−４インヒビターを予測し獲得することを可能にする。本発明のVLA4インヒビターにおけるジフェニルウレア置換の発見のための方法以前に報告された（すなわちUSSN 08/376,372）一連のVLA-4インヒビターは、上述のようなジフェニルウレア「キャップ」および「骨格」を含む。本明細書において、「キャップ」を、VLA-4インヒビターの化学的構造の一部を記述するために用いている。一般に、公知のインヒビター上のキャップは、新しいあるいは異なる化学的サブ構造で置換され得、これにより、新規なVLA-4インヒビターを作成し得る。本明細書において、用語キャップは、Ｎ−末端キャップ、すなわち2'-トリルウレイドフェニルアセチル（M1；図３ａ）の他の化学的構造との置換を記述するために用いられる。出願人は、新規のVLA-4インヒビターを同定するために用いることができる、公知のVLA-4インヒビターのジフェニルウレアキャップの擬態物(mimetics)を同定するための方法を発明した。本発明の方法は、当業者に、別のキャップ構造、すなわちジフェニルウレアのジフェニルアナログ以外を同定するための、効果的かつ価値あるツールを当業者に提供し、これによって新規なインヒビターの同定に有用であり得る。 catShapeプログラム（Catalyst 3.1 Installation Guides and Release Notes 、San Diego、Molecular Simulations Inc.、1996）は、化合物の形状および体積を互いに比較することが可能である。出願人は、本発明の方法を用いてこのプログラムを利用し、ジフェニルウレアと同様でありかつ組み合わせ化学に適切である化合物（すなわち特定の公知のVLA-4インヒビター上の「キャップ」）を、同定した。ジフェニルウレア（コードネームDPUREA）のＸ線結晶構造を、Cambridge Crys tallographic Database（1991年10月発行；Cambridge Crystallographic Data C enter、12 Union Road、Cambridge CB21EZ、U.K.）から抽出した。データベース中には、非常に同様な構造（図６）を有する化合物を含む他のジフェニルウレアが、存在する（コード：PPESIR、KUHWHIT、SILVOY、GIMROJ10、GIMRUP10、GIMSA W10、SALTOW、SILTUC01）。ファイルのフォーマットをCambridge DatabaseフォーマットからMDL SDフォーマット（MDL Information Systems、14600 Catalina Street、San Leandro、CA94577）に変換した後のDPUREAを、catShapeプログラムの入力として用いた。この化合物を用いて、分子データベース（例えばAvailabl e Chemical Directory；MDL Information Systems、14600 Catalina Street、Sa n Leandro、CA 94577）において同様な形状および体積（図７）を有する化合物を検索した。これらの化学データベースを、Catalyst3.1に読み込み、エネルギーを10kcal/molに設定し最大リトライ(retry)数を100に設定しかつ最大コンホメーション数を250に設定した状態でファストコンホーマー(fast conformer)生成プロセスを用いて各化合物についてのコンホメーションモデルを構築することにより、Catalystデータベースに変換した。catShape法は、データベース中の各分子の３つの主要な直交軸のサイズを化合物の体積とともに計算し、これらのそれぞれをジフェニルウレアのそれと比較することを包含する。パラメータは、Catalyst 3.1 Installation Guid e and Release Notes(Molecular Simulations Inc.、1996、9685 Scranton Road 、SanDiego)のRN-10頁に記載された通りのデフォルト設定に設定した。発明者らは、サーチ手順の間、主軸に対してデフォルトの許容度２０％を用いた。このように、本発明の特定の実施態様は、ジフェニルウレアの擬態物を同定するための方法、特に、非関連の擬態物を同定する方法を包含する。発明の方法は従って、ジフェニルウレア擬態物をサブ構造として有するVLA-4インヒビターを同定する方法を包含する。上述のように、本発明の方法は、第１の工程として、ＶＬＡ−４阻害活性の評価のための実験化合物を選択し、この実験化合物が、当該分野（すなわち、ｃａｔＳｈａｐｅまたは他のプログラム）で規定されるジフェニルウレアと類似の形状および体積を有する化学的サブ構造を含むかどうかを判定する工程を包含する。いくつかの実施態様では、方法は、上記の代わりに、この実験化合物の三次元サブ構造が、ＶＬＡ−４モデル-１の特徴２、３、５および６にマップするかどうかを判定することを包含する。次に実験化合物全体の三次元構造が、実験によりまたはコンピュータ上で得られ、これが次にＶＬＡ−４モデル−１Ｎｅｇおよび特徴１にマップされる。実験化合物が、特徴２、３、５または６のいずれかのうちの、約０．５から約３Åの範囲、より好ましくは約１から約２Åの範囲、最も好ましくは約２Åの原子を含むサブ構造を有する場合は、実験化合物はＶＬＡ −４阻害活性を有すると予測される。ウレア擬態物を含む実験化合物（図８）は次に、上述のように、ＤＢＡを用いて試験され得る。本発明の三次元モデルを用いれば、当業者は、モデルにフィットし、ＶＬＡ− ４阻害活性を有する両方の新規の化学的物質(entity)を固定することができ、またＶＬＡ−４インヒビターであることが以前に知られていなかった所望の活性を有する既知の化合物を固定することができる。以下の実施例は本発明の様々な実施態様をさらに示し、当業者による本発明の実施をさらに可能にする。Ｃ．新規のＶＬＡ−４インヒビター（ｉ）モデル−１にマップするインヒビターいくつかの広い実施態様では、本発明は、ＶＬＡ−４阻害活性を有する新規の化合物を包含する。本発明の化合物は上記のモデルにフィットし、極めて良好な阻害活性を有し、従って、例えば、ＶＬＡ−４経路に関連する疾患および症状の処置のための製薬製剤で使用され得る。以下のセクションで述べるファルマコフォアのモデルおよび方法を用いて、出願人は、これらのモデルにフィットする新規のＶＬＡ−４インヒビターを発見した。例えば、好適な実施態様は、ＧＢ−１によって表されるＶＬＡ−４阻害性化合物を包含する。 Aは以下からなる群から選択される：アルキル；必要に応じてN-アルキル-または N-アリールアミドで置換された脂肪族アシル；アロイル；ヘテロシクロイル；アルキル-またはアリールスルホニル;必要に応じてアリールで置換されたアラルキルカルボニル；ヘテロシクロアルキルカルボニル；アルコキシカルボニル；アラルキルオキシカルボニル；必要に応じてアリールと縮合したシクロアルキルカルボニル；ヘテロシクロアルコキシカルボニル；アルキルアミノカルボニル；必要に応じてビス（アルキルスルホニル）アミノ、アルコキシカルボニルアミノまたはアルケニルで置換されたアリールアミノカルボニルおよびアラルキルアミノカルボニル;アルキルスルホニル;アラルキルスルホニル;アリールスルホニル；必要に応じてアリールと縮合したシクロアルキルスルホニル；ヘテロシクリルスルホニル；ヘテロシクリルアルキルスルホニル；アラルコキシカルボニル；アリールオキシカルボニル；シクロアルキルオキシカルボニル；ヘテロシクリルオキシカルボニル；ヘテロシクリルアルコキシカルボニル；必要に応じてアリールで置換されたモノ-またはジ-アルキルアミノカルボニル；（アルキル）（アラルキル）アミノカルボニル；モノ-またはジ-アラルキルアミノカルボニル；モノ-またはジ-アリールアミノカルボニル；（アリール）（アルキル）アミノカルボニル；モノ-またはジ-シクロアルキルアミノカルボニル；ヘテロシクリルアミノカルボニル；ヘテロシクリルアルキルアミノカルボニル；（アルキル）（ヘテロシクリル）アミノカルボニル；（アルキル）（ヘテロシクリルアルキル）アミノカルボニル；（アラルキル）（ヘテロシクリル）アミノカルボニル；（アラルキル）（ヘテロシクリルアルキル）アミノカルボニル；必要に応じてアリールで置換されたアルケノイル；必要に応じてアリールで置換されたアルケニルスルホニル；必要に応じてアリールで置換されたアルキノイル；必要に応じてアリールで置換されたアルキニルスルホニル；シクロアルケニルカルボニル；シクロアルケニルスルホニル：シクロアルキルアルカノイル；シクロアルキルアルキルスルホニル；アリールアロイル；ビアリールスルホニル；アルコキシスルホニル；アラルコキシスルホニル；アルキルアミノスルホニル；アリールオキシスルホニル；アリールアミノスルホニル；N-アリールウレア-置換アルカノイル；N-アリールウレア-置換アルキルスルホニル；シクロアルケニル-置換カルボニル；シクロアルケニル-置換スルホニル；必要に応じてアリールで置換されたアルケノキシカルボニル；必要に応じてアリールで置換されたアルケノキシスルホニル；必要に応じてアリールで置換されたアルキノキシカルボニル；必要に応じてアリールで置換されたアルキノキシスルホニル;必要に応じてアリールで置換されたアルケニル-またはアルキニル-アミノカルボニル；必要に応じてアリールで置換されたアルケニル-またはアルキニル-アミノスルホニル；アシルアミノ-置換アルカノイル；アシルアミノ-置換アルキルスルホニル；アミノカルボニル-置換アルカノイル；カルバモイル-置換アルカノイル；カルバモイル-置換アルキルスルホニル；ヘテロシクリルアルカノイル；ヘテロシクリルアミノスルホニル；カルボキシアルキル-置換アラルコイル；カルボキシアルキル-置換アラルキルスルホニル；オキソカルボシクリル-縮合アロイル；オキソカルボシクリル-縮合アリールスルホニル；ヘテロシクリルアルカノイル；N',N'-アルキル、アリールヒドラジノカルボニル；アリールオキシ-置換アルカノイルおよびヘテロシクリルアルキルスルホニル;アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール-縮合シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、アリール-置換アルキル（「アラルキル」）、アリール-置換アルケニルまたはアルキニル、シクロアルキル-置換アルキル、シクロアルケニル-置換シクロアルキル、ビアリール、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、アリール-置換アルコキシ（「アラルコキシ」）、アリール-置換アルケノキシまたはアルキノキシ、アルキルアミノ、アルケニルアミノまたはアルキニルアミノ、アリール-置換アルキルアミノ、アリール-置換アルケニルアミノまたはアルキニルアミノ、アリールオキシ、アリールアミノ、N-アルキルウレア- 置換アルキル、N-アリールウレア-置換アルキル、アルキルカルボニルアミノ-置換アルキル、アミノカルボニル-置換アルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリル-置換アルキル、ヘテロシクリル-置換アミノ、カルボキシアルキル置換アラルキル、オキソカルボシクリル-縮合アリールおよびヘテロシクリルアルキル；ｎ＝１〜４；Ｒ³が水素の場合、ｎ＝２〜４；またはｎ＝１の場合、Ｒ³またはＲ⁵だけが水素；Ｒ¹およびＲ⁴は独立して以下からなる群から選択される：水素、アルキル、アリール、アラルキル；必要に応じてシクロアルキルで置換されるアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、アラルコキシ、チオアルコキシ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、カルボキサアミド、アミン、アルキルスルホン、およびアルキルスルホキシド；Ｒ²は以下からなる群から選択される：水素、アルキル：必要に応じてアミンで置換されるアルキル、シクロアルキル、アルキルスルホン、およびアルキルスルホキシド；Ｒ³は、Ｈ、アルキルよりなる群から選択され、アルキルは、必要に応じて、アラルコキシ、ヒドロキシに置換され；Ｘは、−ＣＨ₂−、Ｓ、Ｏ、ＮＲ⁴、ＮＣＯＲ⁷、およびＮＳＯ₂Ｒ⁷よりなる群から選択され；ｍは３または４であり；ｐは３または４であり；ｑおよびｒは独立して１または２であり；Ｒ¹およびＲ²は一緒になって、−（ＣＲ¹Ｒ²）_p−または−（ＣＲ¹Ｒ²）_qＸ（ＣＲ¹Ｒ²）_r−を形成し得；Ｒ³およびＲ⁴は一緒になって、−（ＣＲ¹Ｒ²）_m−または−（ＣＲ¹Ｒ²）_qＸ（ＣＲ¹Ｒ²）_r−を形成し得；Ｒ³およびＲ⁵は一緒になって、−（ＣＲ¹Ｒ²）_m−を形成し得；Ｒ⁵は、Ｈ、ヒドロキシ、アルキル、ＮＨ₂、ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷、ＮＨＣＯＲ⁷、およびＮＨＣＯ₂Ｒ⁷よりなる群から選択され；Ｒ⁷は、アルキル、アリル、アラルキルよりなる群から選択され、アルキルは、必要に応じて、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環、アルケニル、アルキニル、アルコキシル、ヒドロキシル、ハロゲン、アラルコキシ、チオアルコキシ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、およびカルボキサミドに置換される。より好適な化合物は、図１５のＭ１０１〜Ｍ１１２、Ｍ１１６、Ｍ１１７、Ｍ１２４、Ｍ１２５、Ｍ１２７〜Ｍ１２９、Ｍ１３９、Ｍ１４０、Ｍ１４１〜Ｍ１５０である。別の実施形態において、好適な化合物はＧＢ−２で表される。Ａは、ＧＢ−１で定義したものと同じであり、Ｑは、−ＣＨ₂−、−ＣＨ＝ＣＨ−、または−ＣＨ₂ＣＨ₂−であり、Ｚは、−ＣＨＲ⁴−、−ＣＯ−、Ｏ、Ｓ、−ＳＯ−、−ＳＯ₂−、ＮＲ⁴、ＮＣＯＲ⁷、ＮＳＯ₂Ｒ⁷、−ＮＣＯ₂Ｒ⁷−、および−ＣＯＮＲ⁷−からなる群より選択され、Ｒ⁴は、Ｈ、アルキル、アリール、アラルキルからなる群より選択され、アルキルは、任意に、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環、アルケニル、アルキニル、アルコキシル、ヒドロキシル、ハロゲン、アラルコキシ、チオアルコキシ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、カルボキサミド、アミン、アルキルスルホン、またはアルキルスルホキシドで置換され、Ｒ⁵は、Ｈ、ヒドロキシ、アルキル、ＮＨ₂、ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷、およびＮＨＣＯＲ⁷ からなる群より選択され、Ｒ⁷は、アルキル、アリール、アラルキルからなる群より選択され、アルキルは、任意に、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環、アルケニル、アルキニル、アルコキシル、ヒドロキシル、ハロゲン、アラルコキシ、チオアルコキシ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、またはカルボキサミドで置換され、Ｘは、−ＣＨ₂−、Ｓ、Ｏ、ＮＲ⁴、ＮＣＯＲ⁷、およびＮＳＯ₂Ｒ⁷からなる群より選択され、ｎ＝０〜５であり、ｑおよびｒは、互いに独立して、１および２から選択される。より好適な化合物を、図１５において最も好適な化合物Ｍ１１５、Ｍ１１８〜Ｍ１２３、Ｍ１２６、Ｍ１３０〜Ｍ１３５とともに図１５に示す。本発明の新規なＶＬＡ−４インヒビターは、モデル１の「Ｎｅｇ」特徴、および特徴１〜７のうちの３〜７にマップする。好適には、本発明の化合物は、約１００μｍ〜約０．５ｎＭの範囲内、好ましくは約５０μｍ未満、より好ましくは約５００ｎＭ未満、そして最も好ましくは約５０ｎＭ未満の阻害活性を有する。好ましいインヒビターは、モデル１の特徴１〜７のうちの少なくとも３にマップし、約５０ｎＭ未満のＩＣ₅₀値を有する。より好ましいインヒビターは、特徴１〜７のうちの少なくとも５にマップする。ｉｉ）モデル２にマップするインヒビター別の実施形態において、請求項に記載のＶＬＡ−４インヒビターは、モデル２の「Ｎｅｇ」特徴、およびモデル２の特徴１〜８から選択される少なくとも他の４つの特徴にマップする。より好ましくは、これらのインヒビターは、「Ｎｅｇ」に加えて、少なくとも６つの特徴にマップし、より好ましくは少なくとも７つの特徴にマップする。最も好ましい実施形態において、モデル２の「Ｎｅｇ」、および特徴１〜８のうちの４〜８にマップする請求項に記載のインヒビターは、約５０μｍ〜約０．５ｎＭのＩＣ₅₀値を有する。好適には、本発明の化合物は、約１００μｍ〜約０．５ｎＭの範囲内、好ましくは約５０μｍ未満、より好ましくは約５００ｎＭ未満、そして最も好ましくは約５０ｎＭ未満の阻害活性を有する。最も好ましいインヒビターは、モデル２の特徴のうちの少なくとも６にマップし、約５０ｎＭ未満のＩＣ₅₀値を有する。ｉｉｉ）モデル３にマップするインヒビターさらに別の実施形態において、請求項に記載の化合物はモデル３にマップする骨格(scaffold)を含む。本出願人らは、それらの骨格を含む化合物が約５００μ ｍ〜約０．５ｎＭの範囲の優れた阻害活性を有することを見出した。好適には、本発明の化合物は、約１００μＭ〜約０．５ｎＭの範囲内、好ましくは約５０μ ｍ未満、より好ましくは約５００ｎＭ未満、そして最も好ましくは約５０ｎＭ未満の阻害活性を有する。当業者であれば、本発明のインヒビターが請求項に記載のモデルの複数にマップし得ることを認識するであろう。実施例実施例１：請求の範囲に記載のモデルの公知のＶＬＡ−４リガンドの実験構造へのフィット請求の範囲に記載の方法およびモデルをさらに実証するために、出願人は、公知のＶＬＡ−４インヒビターが請求の範囲に記載のモデル１にフィットするかどうかを決定した。タンパク質Ｘ線結晶学は、構造的洞察を巨大分子の生物学的コンホメーションに提供するための強力かつ一般に用いられている実験ツールであり、これを、導管細胞癒着分子１（ＶＣＡＭ；ＢｒｏｏｋｈａｖｅｎＣｏｄａｌｖｃａ）の結晶学的構造を決定するために用いた。これは、配列Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒを含むＶＬＡ−４レセプターの公知の生理学的リガンドである。Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ配列は、ＣＳＩからのＬｅｕ−Ａｓｐ−Ｖａｌ配列と相同であり、請求の範囲に記載のモデルにおいて用いられるペプチド擬態物（peptidom imetics）はこの配列に基づいている。Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｖａｌ領域に基づくペプチドは、ＶＬＡ−４−ＶＣＡＭ相互作用を示すことが示されている。従って、出願人は、ＶＬＡ−４アンタゴニストがＶＬＡ−４に結合すると、ＶＣＡＭ構造のＩｌｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ領域の構造を模倣し得ると仮定した。モデルと、ＶＣＡＭのＩｌｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ部分との重なりを図９に示す。図９より理解され得るように、Ｉｌｅは、疎水性特徴（feature）ＨＹＤ３に「マップ」し、Ａｓｐのカルボキシル基は、負にイオン化され得る特徴ＮＥＧに「マップ」する。さらに、Ｉｌｅ残基のカルボニルは、水素結合アクセプター特徴ＨＢＡにマップする。（ＨＢＡは、特徴ＨＢＡ−１およびＨＢＡ−２を表すことに留意されたい）。従って、出願人は、ＶＬＡ−４の公知のリガンドのモデル− １への結合エピトープにマップすることによって請求の範囲に記載のモデルを確認することができる。実施例２：モデルが異なる化学テンプレートにどのようにフィットするか請求の範囲のモデル１をさらに実証するために、出願人は、モデルの構築に用いられず、モデルに関するすべての知識を用いても合成されなかった公知のＶＬＡ−４インヒビターにモデル１がフィットする能力を調べた。モデル１がＭ２、Ｍ３およびＭ２（図３ｂ、ｃおよびｄにそれぞれ示す）にマップする能力を決定した。これらの３つの分子の骨格は、構造的に全く異なるものの、それぞれ請求の範囲に記載のモデル１にマップする。従って、出願人は、請求の範囲に記載のモデル１が、実際には、ＶＬＡ−４インヒビターを同定し、他の化学テンプレートを同定するのに用いられ得ることを確認した（図１０：フィットを定義方法１ｃを参照）。実施例３：公知のＶＬＡ−４インヒビターの一部と他の骨格との置換出願人は、請求の範囲に記載のモデルおよび方法を用いて、公知のＶＬＡ−４インヒビターの−ＬＤＶ−部分を置換して他の骨格を設計した。このような一例は、モデルにフィットするＭ６によって示される。この新規の化合物を、８００ｎＭのＩＣ₅₀を用いた直接結合アッセイにおいて、有効なＶＬＡ４インヒビターであると決定した。実施例４：公知のＶＬＡ−４インヒビターのジフェニルウレア部分の置換出願人は、請求の範囲に記載のモデル１を用いて、公知のＶＬＡ−４インヒビターのジフェニルウレア部分の模倣を同定した。請求の範囲に記載のモデルは、２つの疎水性特徴（ＨＹＤ２およびＨＹＤ５）を有し、これらは、ジフェニル尿素の２つのフェニル基にマップする。請求の範囲に記載のモデルに基づくと、これらの特徴、ならびにＨＹＤ４およびＨＢＤが面内に配置されることは公知であった。ジフェニルウレアのＸ線構造解析によると、Ｘ線構造は、２つのフェニル環（図６）の間に平面配置を採用していることが示される。請求の範囲のモデルの有効性をさらに支持するために、フェニルを非平面シクロヘキシル基（Ｍ７；図３ｇ）（Ｍ８；図３ｈ）で置換すると結合性が減少する（Ｍ７ＩＣ₅₀ １０ μＭ、Ｍ８ＩＣ₅₀ ５０ｎＭ）ことを示すデータを得て、平面性の重要性を確認した。さらに、出願人は、より短い分子が、より弱いバインダーであることを示している。従って、例えば、フェニルアセチル-Leu-Asp-Val-Pro（図3i）は、2μMの IC₅₀を有し、oMePUPA-Leu-Asp-Val-Pro（図3j）は、8nMのIC₅₀を有するため、ジフェニルウレアが、分子の長さおよび形状が高いアフィニティー結合性につながるキャビティを占有していることを確認している。出願人は、プログラムcatShape(Catalyst 3.1 Installation Guides and Rele ase Notes、San Diego、Molecular Simulations Inc.、1996)を用いて、ジフェニルウレアモデル（図７）と類似した形状および体積の分子を検索した。図８は、検索でヒットしたものの例を示す。 M11（図3k）およびM12（図31）を合成し、ジフェニルウレアを、検索から戻されたサブ構造(substructure returned from the search)と置き換えた。M11およびM12はそれぞれ、34nMおよび383nMのIC₅₀を有していた。従って、請求の範囲に記載される発明は、VLA-4の強力なインヒビターを予測する代替のキャップを提供する。実施例５：公知のアンタゴニストのLeu-Asp-Val部分の、金属に配位し得る骨格との置き換え請求の範囲に記載される発明は、VLA-4レセプターの金属に配位する際に、所望のVLA-4インヒビターがしばしば必要とされることを教示している。従って、請求の範囲に記載されるモデル３によれば、金属に配位し得る骨格は、VLA-4アンタゴニストのLeu-asp-Val部分を置き換えるために有用であり得る。VLA-4アンタゴニストの金属配位の証拠としては、構造のデータおよび生物学的データがある。 i）すべてのインテグリンは、リガンド結合のためにMg²⁺を必要とする（Sprin ger、TA、Nature、346、425-433）。これは、フィブロネクチン（Leu-Asp-Val）およびVCAM（Ile-Asp-Ser）の公知のVLA-4レセプター結合領域中にAsp残基が存在することとともに、リガンドが金属に配位することを示唆している。 ii）出願人は、出願人のモデルにおける水素結合受容体（HBA）およびNEGの特徴のジオメトリは、金属に配位する分子のカルボキシル基および水素結合受容体のジオメトリと一致していることを発見した。例えば、図12には、ロイシンアミノペプチダーゼのMg²⁺結合部位が示される。この部位では、残基ｉのカルボニル酸素および残基i+2のカルボキシル側鎖は、Mg²⁺に配位されている。モデル１にフィットすると、カルボニルおよびカルボキシル基のこのジオメトリは、M2（図 3b）における残基ｉのLeuのカルボニル基およびi+2のAspカルボキシルのジオメトリと非常に類似している。さらに、VLA-4の公知のリガンドであるVCAMのIle-A sp-Ser部分の結晶構造は、位置ｉのIleのカルボニル酸素およびi+2のAspのカルボキシルのジオメトリが、公知の金属結合タンパク質のジオメトリ（図12参照）に類似しており、また、モデル１にも類似していることを示している。出願人は、モデル３を用いて、金属に配位し得る骨格を検索した。図13では、これらの骨格が、M13（図3m）およびM14（図3n）がどのようにモデル３にフィットするかを示している。出願人はまた、モデル３にフィットする他の分子についての化学的データベースを検索した。図14は、市販の骨格であって、モデル３にマップする骨格を含む２つの化合物を示す。請求の範囲に記載される発明には、本発明の精神または範囲から逸脱することなく、様々な改変および変更がなされ得ることが、当業者に明らかである。従って、本発明は、添付の請求の範囲およびその等価物の範囲内であれば、本発明の改変および変更を包含することが意図される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/426 Ａ６１Ｋ 31/426 31/443 31/443 31/445 31/445 31/454 31/454 31/496 31/496 31/505 31/505 31/54 31/54 31/55 31/55 Ａ６１Ｐ 43/00 １０５Ａ６１Ｐ 43/00 １０５Ｃ０７Ｂ 61/00 Ｃ０７Ｂ 61/00 ＺＣ０７Ｄ 207/335 Ｃ０７Ｄ 207/335 211/20 211/20 211/28 211/28 211/34 211/34 211/60 211/60 401/06 401/06 403/06 403/06 405/12 405/12 Ｇ０１Ｎ 33/15 Ｇ０１Ｎ 33/15 Ｚ 33/50 33/50 Ｚ (31)優先権主張番号６０／０５７，００２ (32)優先日平成９年６月30日(1997．6．30) (33)優先権主張国米国（ＵＳ） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者スプラグエ，ピーターアメリカ合衆国ニュージャージー 08534，ペニントン，ハーバートンリッジドライブ 13 (72)発明者バンブリジメン，ハーマンダブリュー．ティー. アメリカ合衆国マサチューセッツ 02143，ソマービル，クレイギーストリート 56 (72)発明者カストロ，アルフレドシー. アメリカ合衆国マサチューセッツ 01801，ウォバーン，グレンウッドアベニュー 31 (72)発明者アダムス，スティーブンピー. アメリカ合衆国マサチューセッツ 01810，アンドバー，バークレーレーン 12

Claims

【特許請求の範囲】１．VLA-4阻害活性を有する化合物の三次元ファルマコフォアモデルであって、N EG(「N」) およびからなる群から選択される少なくとも3つの特徴を含む、モデル。２．特徴1、特徴2、特徴3、特徴4、特徴5、特徴6および特徴7からなる群から選択される少なくとも5つの特徴を含む、請求項１に記載のモデル。３．特徴1、特徴2、特徴3、特徴4、特徴5、特徴6および特徴7からなる群から選択される少なくとも7つの特徴を含む、請求項２に記載のモデル。４．請求項１のモデルにフィットする化合物であって、VLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有する、化合物。５．約50μM未満のIC₅₀値を有する、請求項４に記載の化合物。６．約1μM未満のIC₅₀値を有する、請求項５に記載の化合物。７．約500nM未満のIC₅₀値を有する、請求項６に記載の化合物。８．約100nM未満のIC₅₀値を有する、請求項７に記載の化合物。９．約50nM未満のIC₅₀値を有する、請求項８に記載の化合物。１０．請求項２のモデルにフィットする化合物であって、VLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有する、化合物。１１．約50μM未満のIC₅₀値を有する、請求項１０に記載の化合物。１２．約1μM未満のIC₅₀値を有する、請求項１１に記載の化合物。１３．約500nM未満のIC₅₀値を有する、請求項１２に記載の化合物。１４．約100nM未満のIC₅₀値を有する、請求項１３に記載の化合物。１５．約50nM未満のIC₅₀値を有する、請求項１４に記載の化合物。１６．請求項３のモデルにフィットする化合物であって、VLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有する、化合物。１７．約50μM未満のIC₅₀値を有する、請求項１６に記載の化合物。１８．約1μM未満のIC₅₀値を有する、請求項１７に記載の化合物。１９．約500nM未満のIC₅₀値を有する、請求項１８に記載の化合物。２０．約100nM未満のIC₅₀値を有する、請求項１９に記載の化合物。２１．約50nM未満のIC₅₀値を有する、請求項２０に記載の化合物。２２．VLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有する化合物の同定のための方法であって：ａ）VLA-4活性について評価される実験化合物構造を選択する工程；ｂ）該実験化合物の三次元構造をコンピュータ的または実験的に得る工程；ｃ）該実験化合物の三次元構造が請求項１のファルマコフォアモデルにフィットするかどうかを評価する工程；およびｄ）該実験化合物がVLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有するかどうかを決定する工程を包含する、方法。２３．請求項２２に記載の方法によって同定される、約50μM未満のIC₅₀を有する化合物。２４．約1μM未満のIC₅₀を有する、請求項２３に記載の化合物。２５．約500nM未満のIC₅₀を有する、請求項２４に記載の化合物。２６．約100nM未満のIC₅₀を有する、請求項２５に記載の化合物。２７．約50nM未満のIC₅₀を有する、請求項２６に記載の化合物。２８．VLA-4阻害活性を有する化合物の三次元ファルマコフォアモデルであって、NEG(「N」)および特徴1から8 からなる群から選択される少なくとも4つの特徴を含む、モデル。２９．特徴1、特徴2、特徴3、特徴4、特徴5、特徴6、特徴7および特徴8からなる群から選択される少なくとも5つの特徴を含む、請求項２８に記載のモデル。３０．特徴1、特徴2、特徴3、特徴4、特徴5、特徴6、特徴7および特徴8からなる群から選択される少なくとも7つの特徴を含む、請求項２９に記載のモデル。３１．請求項２８のモデルにフィットする化合物であって、VLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有する、化合物。３２．約50μM未満のIC₅₀値を有する、請求項３１に記載の化合物。３３．約1μM未満のIC₅₀値を有する、請求項３２に記載の化合物。３４．約500nM未満のIC₅₀値を有する、請求項３３に記載の化合物。３５．約100nM未満のIC₅₀値を有する、請求項３４に記載の化合物。３６．約50nM未満のIC₅₀値を有する、請求項３５に記載の化合物。３７．請求項２９のモデルにフィットする化合物であって、VLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有する、化合物。３８．約50μM未満のIC₅₀値を有する、請求項３７に記載の化合物。３９．約1μM未満のIC₅₀値を有する、請求項３８に記載の化合物。４０．約500nM未満のIC₅₀値を有する、請求項３９に記載の化合物。４１．約100nM未満のIC₅₀値を有する、請求項４０に記載の化合物。４２．約50nM未満のIC₅₀値を有する、請求項４１に記載の化合物。４３．請求項３０のモデルにフィットする化合物であって、VLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有する、化合物。４４．約50μM未満のIC₅₀値を有する、請求項４３に記載の化合物。４５．約1μM未満のIC₅₀値を有する、請求項４４に記載の化合物。４６．約500nM未満のIC₅₀値を有する、請求項４５に記載の化合物。４７．約100nM未満のIC₅₀値を有する、請求項４６に記載の化合物。４８．約50nM未満のIC₅₀値を有する、請求項４７に記載の化合物。４９．VLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有する化合物の同定のための方法であって：ａ）VLA-4活性について評価される実験化合物を選択する工程；ｂ）該実験化合物の三次元構造を得る工程；ｃ）該実験化合物の三次元構造が請求項２８のモデルにフィットするかどうかを評価する工程；およびｄ）該実験化合物がVLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有するかどうかを決定する工程を包含する、方法。５０．請求項４９に記載の方法によって同定される、約50μM未満のIC₅₀を有する化合物。５１．約1μM未満のIC₅₀を有する、請求項５０に記載の化合物。５２．約500nM未満のIC₅₀を有する、請求項５１に記載の化合物。５３．約100nM未満のIC₅₀を有する、請求項５２に記載の化合物。５４．約50nM未満のIC₅₀を有する、請求項５３に記載の化合物。５５．VLA-4阻害活性を有する化合物の三次元ファルマコフォアモデルであって、を含む、モデル。５６．VLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有する化合物の同定のための方法であって：ａ）VLA-4活性について評価される実験化合物構造を選択する工程；ｂ）該実験化合物の三次元構造をコンピュータ的または実験的に得る工程；ｃ）該実験化合物の三次元構造が請求項５５のモデルにフィットするかどうかを評価する工程；およびｄ）該実験化合物がVLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有するかどうかを決定する工程を包含する、方法。５７．請求項５６に記載の方法によって同定される、約50μM未満のIC₅₀を有する化合物。５８．約1μM未満のIC₅₀を有する、請求項５７に記載の化合物。５９．約500nM未満のIC₅₀を有する、請求項５８に記載の化合物。６０．約100nM未満のIC₅₀を有する、請求項５９に記載の化合物。６１．約50nM未満のIC₅₀を有する、請求項６０に記載の化合物。６２．VLA-4阻害活性を有する化合物を同定するための方法であって：ａ）VLA-4阻害活性について評価される実験化合物構造を選択する工程；ｂ）該実験化合物がジフェニルウレアとほぼ同じ形状および容積を有するサブ構造を含むかどうかを決定する工程；ｃ）該実験化合物の三次元構造を決定する工程；ｄ）該実験化合物の三次元構造をNegおよび請求項１のモデルの特徴１に対してマップする工程；ｅ）該サブ構造が、請求項１のVLA-4モデルの特徴2、3、5または6のいずれか１つの約0.5Åから約3.0Åの範囲内であるかを決定する工程を包含する、方法。６３．前記実験化合物がVLA-4直接結合アッセイにおいて約100μM未満のIC₅₀値を有するかどうかを決定する工程をさらに包含する、請求項６２に記載の方法。６４．前記実験化合物がVLA-4直接結合アッセイにおいて約50μM未満のIC₅₀値を有するかどうかを決定する工程をさらに包含する、請求項６３に記載の方法。６５．前記実験化合物がVLA-4直接結合アッセイにおいて約1μM未満のIC₅₀値を有するかどうかを決定する工程をさらに包含する、請求項６４に記載の方法。６６．前記実験化合物がVLA-4直接結合アッセイにおいて約500nM未満のIC₅₀値を有するかどうかを決定する工程をさらに包含する、請求項６５に記載の方法。６７．前記実験化合物がVLA-4直接結合アッセイにおいて約100nM未満のIC₅₀値を有するかどうかを決定する工程をさらに包含する、請求項６６に記載の方法。６８．該実験化合物がVLA-4直接結合アッセイにおいて約50nM未満のIC₅₀値を有するかどうかを決定する工程をさらに包含する、請求項６７に記載の方法。６９．式GB-1 を含む細胞接着インヒビターであって、 Aが、アルキル；N-アルキル−またはN-アリールアミドで必要に応じて置換される脂肪族アシル；アロイル；ヘテロシクロイル；アルキル−またはアリールスルホニル；アリールで必要に応じて置換されるアラルキルカルボニル；ヘテロシクロアルキルカルボニル；アルコキシカルボニル；アラルキルオキシカルボニル；必要に応じてアリールと縮合したシクロアルキルカルボニル；ヘテロシクロアルコキシカルボニル；アルキルアミノカルボニル；ビス（アルキルスルホニル）アミノ、アルコキシカルボニルアミノまたはアルケニルで必要に応じて置換されるアリールアミノカルボニルおよびアラルキルアミノカルボニル；アルキルスルホニル；アラルキルスルホニル；アリールスルホニル；必要に応じてアリールと縮合したシクロアルキルスルホニル；ヘテロシクリルスルホニル；ヘテロシクリルアルキルスルホニル；アラルコキシカルボニル；アリールオキシカルボニル；シクロアルキルオキシカルボニル；ヘテロシクリルオキシカルボニル；ヘテロシクリルアルコキシカルボニル；必要に応じてアリールで置換されるモノ−またはジ −アルキルアミノカルボニル；（アルキル）（アラルキル）アミノカルボニル；モノ−またはジ−アラルキルアミノカルボニル；モノ−またはジ−アリールアミノカルボニル；（アリール）（アルキル）アミノカルボニル；モノ−またはジ− シクロアルキルアミノカルボニル；ヘテロシクリルアミノカルボニル；ヘテロシクリルアルキルアミノカルボニル；（アルキル）（ヘテロシクリル）アミノカルボニル；（アルキル）（ヘテロシクリルアルキル）アミノカルボニル；（アラルキル）（ヘテロシクリル）アミノカルボニル；（アラルキル）(ヘテロシクリルアルキル)アミノカルボニル；アリールで必要に応じて置換されるアルケノイル; アリールで必要に応じて置換されるアルケニルスルホニル；アリールで必要に応じて置換されるアルキノイル；アリールで必要に応じて置換されるアルキニルスルホニル；シクロアルケニルカルボニル；シクロアルケニルスルホニル；シクロアルキルアルカノイル；シクロアルキルアルキルスルホニル；アリールアロイル、ビアリールスルホニル；アルコキシスルホニル；アラルコキシスルホニル；アルキルアミノスルホニル;アリールオキシスルホニル;アリールアミノスルホニル；N-アリールウレア置換アルカノイル；N-アリールウレア置換アルキルスルホニル；シクロアルケニル置換カルボニル；シクロアルケニル置換スルホニル；アリールで必要に応じて置換されるアルケノキシカルボニル；アリールで必要に応じて置換されるアルケノキシスルホニル；アリールで必要に応じて置換されるアルキノキシカルボニル；アリールで必要に応じて置換されるアルキノキシスルホニル；アリールで必要に応じて置換されるアルケニル−またはアルキニル−アミノカルボニル；アリールで必要に応じて置換されるアルケニル−またはアルキニル −アミノスルホニル；アシルアミノ置換アルカノイル；アシルアミノ置換アルキルスルホニル；アミノカルボニル置換アルカノイル；カルバモイル置換アルカノイル；カルバモイル置換アルキルスルホニル；ヘテロシクリルアルカノイル；ヘテロシクリルアミノスルホニル；カルボキシアルキル置換アラルコイル；カルボキシアルキル置換アラルキルスルホニル；オキソカルボシクリル縮合アロイル；オキソカルボシクリル縮合アリールスルホニル；ヘテロシクリルアルカノイル； N',N'-アルキル、アリールヒドラジノカルボニル；アリールオキシ置換アルカノイルおよびヘテロシクリルアルキルスルホニル；アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール縮合シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、アリール置換アルキル（「アラルキル」）、アリール置換アルケニルまたはアルキニル、シクロアルキル置換アルキル、シクロアルケニル置換シクロアルキル、ビアリール、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、アリール置換アルコキシ（「アラルコキシ」）、アリール置換アルケノキシまたはアルキノキシ、アルキルアミノ、アルケニルアミノまたはアルキニルアミノ、アリール置換アルキルアミノ、アリール置換アルケニルアミノまたはアルキニルアミノ、アリールオキシ、アリールアミノ、N-アルキルウレア置換アルキル、N-アリールウレア置換アルキル、アルキルカルボニルアミノ置換アルキル、アミノカルボニル置換アルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリル置換アルキル、ヘテロシクリル置換アミノ、カルボキシアルキル置換アラルキル、オキソカルボシクリル縮合アリールおよびヘテロシクリルアルキルからなる群から選択され； n=1〜4であり；ここでR³がHの場合、n=2〜4であり；あるいはn=1の場合、R³またはR⁵だけがHであり；R¹およびR⁴が独立して、H、アルキル、アリール、アラルキル；シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、アルケニル、アルキニル、アルコキシル、ヒドロキシル、ハロゲン、アラルコキシ、チオアルコキシ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、カルボキサミド、アミン、アルキルスルホン、およびアルキルスルホキシドで必要に応じて置換されるアルキルからなる群から選択され； R²が、H、アルキル：アミン、シクロアルキル、アルキルスルホンおよびアルキルスルホキシドで必要に応じて置換されるアルキルからなる群から選択され； R³が、H、アルキル、およびアラルコキシ、ヒドロキシで必要に応じて置換されるアルキルからなる群から選択され； Xが、-CH₂-、S、O、NR⁴、NCOR⁷、およびNSO₂R⁷からなる群から選択され； mが3または4であり； pが3または4であり； qおよびrが独立して1または2であり； R¹およびR²が一緒になって-(CR¹R²)_p-、または-(CR¹R²)_qX(CR¹R²)_r-を形成し得； R³およびR⁴が一緒になって-(CR¹R²)_m-、または-(CR¹R²)_qX(CR¹R²)_r-を形成し得； R³およびR⁵が一緒になって-(CR¹R²)_m-を形成し得； R⁵が、H、ヒドロキシ、アルキル、NH₂、NHSO₂R⁷、NHCOR⁷、およびNHCO₂R⁷からなる群から選択され； R⁷が、アルキル；アリール；アラルキル；およびシクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環(cycle)、アルケニル、アルキニル、アルコキシル、ヒドロキシル、ハロゲン、アラルコキシ、チオアルコキシ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、およびカルボキサミドで必要に応じて置換されるアルキルからなる群から選択される、細胞接着インヒビター。７０．式GB-2 を含む細胞接着インヒビターであって、 AがGB-1で定義されたものと同じであり； Qが-CH₂-、-CH=CH-、または-CH₂CH₂-であり； Zが、-CHR⁴-、-CO-、O、S、-SO-、-SO₂-、NR⁴、NCOR⁷、NSO₂R⁷、-NCO₂R⁷-、および-CONR⁷-からなる群から選択され； R⁴が、H、アルキル、アリール、アラルキル；シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環(cycle)、アルケニル、アルキニル、アルコキシル、ヒドロキシル、ハロゲン、アラルコキシ、チオアルコキシ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、カルボキサミド、アミン、アルキルスルホン、またはアルキルスルホキシドで必要に応じて置換されるアルキルからなる群から選択され； R⁵が、H、ヒドロキシ、アルキル、NH₂、NHSO₂R⁷、およびNHCOR⁷からなる群から選択され； R⁷が、アルキル、アリール、アラルキル；シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環(cycle)、アルケニル、アルキニル、アルコキシル、ヒドロキシル、ハロゲン、アラルコキシ、チオアルコキシ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、またはカルボキサミドで必要に応じて置換されるアルキルからなる群から選択され； Xが、-CH₂-、S、O、NR⁴、NCOR⁷、およびNSO₂R⁷からなる群から選択され； n=0〜5であり； qおよびrが独立して1、2から選択される、細胞接着インヒビター。