JP2002512191A

JP2002512191A - Ｌ−カルニチンまたはアルカノイルｌ−カルニチンおよびｎａｄｈおよび／またはｈａｄｐｈを含む組成物。

Info

Publication number: JP2002512191A
Application number: JP2000544325A
Authority: JP
Inventors: クラウディオ・カヴァッツァ
Original assignee: Sigma Tau HealthScience SpA
Current assignee: Sigma Tau HealthScience SpA
Priority date: 1998-04-17
Filing date: 1999-04-14
Publication date: 2002-04-23
Also published as: AU750645B2; TR200002894T2; IS5663A; CN1299283A; HUP0101914A3; SK15442000A3; CA2328331A1; PL343482A1; AU3442899A; ITRM980238A0; KR20010042765A; NO20005128L; NO20005128D0; HUP0101914A2; WO1999053921A1; IT1299161B1; EP1071424A1; BR9909712A; EE200000601A; IL139014A0

Abstract

(57)【要約】激しい肉体運動に従事している個人または無力症の患者のための食餌補助としておよび、慢性疲労症候群およびパーキンソン病を治療するための薬剤として有用なＬ-カルニチンまたはアルカノイルＬ-カルニチンまたは薬理学上許容されるそれらの塩およびＮＡＤＨおよび/またはＮＡＤＰＨを含む組成物を開示する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 (技術分野) 本発明は、末梢筋肉および中枢神経系レベルの両方における作用を強化するこ
とにより、骨格筋の代謝とエネルギー効率および、中枢レベルでの筋肉運動の調
節と共調の両方に作用を発揮する組成物に関する。しかるべく該組成物は、該組
成物が投与されるべき特定の個人に関して該組成物が発揮することを指向される
補充若しくは予防作用または、厳密には治療的作用いかんにより、栄養補助食品
または実際薬剤の形をとり、その作用を発揮してもよい。

【０００２】本発明の組成物は特に栄養補助食品または予防薬として、強度の長期肉体活動
に従事している個人において骨格筋の適応を促進することおよび、多少強度な肉
体的活動をいかなる形においても全くしていない場合にも無力症の患者により体
験される筋肉疲労感および消耗感へ対抗することの両方に特に適している。プロであろうとアマチュアであろうとスポーツ活動に従事している人は、骨格
筋が強い肉体的活動を長期間維持できる最大程度の適応を短期間に達成し、でき
る限り長くそれを維持することを望む。適応のこの最適状態を追及するあまり、
薬物、詳細にはステロイドの不適当な使用を招く可能性がある。そのような薬物
が蛋白の合成を高め、その結果としてトレーニングや食餌療法で達成することが
できる以上の程度まで筋肉集団を成長させることを可能にし得ることは周知であ
る。しかし、これらの薬物の使用がプロのスポーツでなされると不法であり、か
つ確実に有害である。ゆえに明らかに、前記の目的を適切に達成するための唯一の方法は、適当なト
レーニングプログラムを、適当な栄養補助食品を追加することにより強化される
適当な食餌療法と組み合わせて行うことにある。

【０００３】ここで「無力症」の語が意味するものは、特に大都市や建て込んだ地域に一般
的なストレスの多い生活事情に典型的であり、かつ、たいてい年齢や社会的地位
に関連する要因に関わらず幅広い階層が関わっている、簡単に疲れることや刺激
に対して不適当に反応することと共に、筋肉強度の欠乏や損失により特徴付けら
れる、広汎な一連の特定症状である。全くの治療薬として用いる場合、本発明の組成物の一つの特定の適用は、慢性
疲労症候群およびパーキンソン病の治療および、不法薬物の投与により引き起こ
される突発性パーキンソン症候群に類似する症候群の治療におけるものである。 Annals of Internal Medicineに１９８８年に初めて公式に記録された慢性疲
労症候群(ＣＦＳ)は、いずれの公知の原因によっても説明されず、しばしば、癌
やエイズのような非常に重い病気で直面するよりもっと強烈であり、かつ、労働
活動および通常の社会関係の５０％以上の低下を６ヶ月以上続けて引き起こす程
度まで衰弱する程度の疲労により特徴付けられる疾患である。 Annals of Internal Medicine(1994年12月)に概説される、ＣＦＳの診断に関
する基準によると、患者は次の８つの症状のうちの少なくとも４つを６ヶ月間以
上続けて示さなければならない。１.記憶喪失、過剰過敏症(excessive irritability)、精神錯乱、思考および集
中困難のような神経心理学的疾患；２.咽頭炎；３.触診可能な、触ると痛い子宮頚あるいは腋窩リンパ腺；４.筋肉痛；５.いずれの関節の膨化も伴わない移動性関節痛; ６.タイプ、特性および重篤度が、疾患の前に患者が経験したいずれの頭痛とも
異なる広汎性頭痛；７.不眠症または睡眠過剰あるいは眠気により特徴付けられる睡眠障害；８.以前は容易に耐えることができたレベルの肉体活動をした後、２４時間また
はそれ以上も続く全身疲労感および倦怠感。

【０００４】パーキンソン病は一般に突発性疾患状態とみなされるが、パーキンソン症候群
の症状はフェノチアジン、ブチロフェノンおよびレセルピンのような薬物の濫用
から生じる可能性があることは周知である。ごく最近、その不正合成(abusive s
ynthesis)がＭＰＴＰおよびＭＰＰＰを生み出したメペリジンと類似の化合物を
注射した薬物濫用者において、パーキンソン症候群が研究された。実際に１-メチル-４-フェニル-１，２，３，６-テトラヒドロピリジン(ＭＰＴ
ＰまたはＮＭＰＴＰ)および１-メチル-４-フェニル-プロポキシ-ピペリジン(Ｍ
ＰＰＰ)は、中脳の黒質においてドーパミン作用性の神経細胞を選択的に破壊し
、ヒトおよびヒト以外の霊長類において、その臨床的、病理学的および生化学的
側面およびその薬理学的応答に関して突発性パーキンソン病と完全に類似する症
候群を引き起こす。突発性パーキンソン病とＭＰＴＰ-誘導性パーキンソン病の間の同一性は大変
大きいので、この誘導性パーキンソン症候群はモデル以上のものであり得ると仮
定されてきた(Burns ら、:サルおよびヒトにおける１-メチル-４-フェニル-１，
２，３，６-テトラヒドロピリジンの神経毒性。Can. J. Neur. Sci., 11, n. 1(
付録)、166-168、1984年 2月)。ＭＰＴＰ-誘導性パーキンソン病は、パーキンソ
ン病に関して推定される毒性原因を示唆する。

【０００５】パーキンソン病治療に一般に好まれる治療法は、現在のところ、それ自体は血
液-脳関門を通過することができないドーパミンの代謝プレカーサーである左旋
性ドーパ(Ｌ-ドーパ)の投与に基づくものである。左旋性ドーパは脳内の作用部位に到達し得る前に大部分が代謝されるため、非
常に高投与量で投与されなければならない。従ってＬ-ドーパは、ドーパデカル
ボキシラーゼのインヒビターであるカルビドーパと組み合わせて投与し、これに
よって脳に到達する前に左旋性-ドーパが全身代謝されることが妨げられる。左旋性-ドーパを単独で投与する場合、食欲不振、吐き気と嘔吐、および起立
性低血圧のような副作用が生じる可能性があるが、これはカルビドーパを投与す
ると実質上軽減する。しかし、Ｌ-ドーパを用いた治療の数ヶ月後、デカルボキシラーゼインヒビタ
ーと組み合わせた場合でさえ、他の大変わずらわしい副作用:顔面、胴体および
手足の運動障害;が生じる可能性があり、それが頻発する。そのような障害の発
生はほとんどの場合、薬物の投与量が越えてはいけない危篤域に達したことを示
す。

【０００６】それゆえ、適当な食餌補助を単に必要とする場合および前記の病理学的疾患の
症状の初期発生時の両方において、その効果、実質上無毒であること、および副
作用がないことの結果としてそのような幅広い範囲の使用者に安全に使用するこ
とができる補助／予防／治療薬の必要性が強く認識される。これらの多くの目的−補助、予防および全くの治療用の薬剤を製造すること−
は、以下に詳細に記載するように、その基本成分としてＬ-カルニチンまたは低
級Ｃ２-Ｃ６アルカノイル-Ｌ-カルニチンまたはその薬理学上許容される塩およ
びニコチンアミドアデニンジヌクレオチド(ＮＡＤＨ)またはＮＡＤＨプレカー
サーおよび／またはニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート、
還元型(ＮＡＤＰＨ)を含む新規な組み合わせの中に存在する本発明の組成物によ
り達成される。

【０００７】細胞内のミトコンドリアの膜から脂肪酸の酸化部位であるミトコンドリアのマ
トリックスへと横断する長鎖脂肪酸のベクターとして重要な生理学的役割を果た
すことに関してＬ-カルニチンが無比のものであるという基礎発見以来(Fritz I.
B.: 長鎖脂肪酸酸化におけるカルニチンの効果の代謝的重要性。F.C.Granにより
編集, New York, Academic Press, 1968, pp. 39-63)および、Ｌ-カルニチンの
一次欠損がまれではあるが重大な、時に致命的な筋疾患形態(脂肪貯蔵性筋疾患)
の原因として最初に認識されて以来(EngelとAngelini, Science, 1973, 179: 89
9-902)数十年を経過して、Ｌ-カルニチンの一次および二次欠損およびこれらと
は逆の、Ｌ-カルニチンの外からの供給の治療的および栄養的価値の病理学的重
要性に関する我々の知識は大幅に進歩した。

【０００８】カルニチンは、遊離カルニチンとして比較的高濃度で、およびアシルカルニ
チンの形態で比較的低濃度で全生物細胞中に存在している。アシルカルニチン
は３グループの酵素、すなわち、試薬基質に対するその特異性により主として区
別されるトランスフェラーゼ:基質が短鎖アシル基(例えばアセチルおよびプロピ
オニル)であるカルニチンアセチルトランスフェラーゼ(ＣＡＴ)グループ;基質
が中鎖アシル基を含むカルニチンオクタノイルトランスフェラーゼ(ＣＯＴ)グ
ループ;基質が長鎖アシル基を含むカルニチンパルミトイルトランスフェラー
ゼを含むカルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ(ＣＰＴ)グループ:によ
り触媒される可逆反応:

【化１】の代謝産物である。中間代謝におけるカルニチンの重要な役割はその制限された生合成に特に関連
して、異なる器官および組織に関わる様々な病理学的作用に関する二次的な事態
として、どのようにカルニチンの欠損が生じ得るのかを説明するのに役立つ。臨
床スペクトルの拡張は、この天然化合物の効力に関連する治療機会数の増加に反
映している。Ｌ-カルニチンの置き換え治療により脂質貯蔵性筋疾患を患ってい
る患者の臨床病像が劇的に転換することが認められ、この効果の全領域および範
囲が明らかになった。食品医薬品庁(ＦＤＡ)は、Ｌ-カルニチンに「オーファン
ドラッグ」の地位を与えただけでなく、それを食品医薬品庁(ＦＤＡ)の「救命薬
」リストにも含めた。

【０００９】カルニチンの一次および二次欠損の病理学的な掛かり合いに関する我々の知識
の進歩に伴って、Ｌ-カルニチンおよび、それより比較的少ない程度であるがい
くつかのアシルカルニチンに主として焦点を当てている科学および特許刊行物
が実質上大いに急増した。患者の状況の部分的な調査に限って言えばＬ-カルニチンの使用は、心血管分
野では心不整脈および鬱血性心不全(US 4,656,191)、心筋虚血および心筋無酸素
症(US 4,649,159)の治療のために；脂質代謝疾患の分野では高脂血症および高リ
ポタンパク血症(US 4,315,944)の治療および、異常ＨＤＬ:ＬＤＬ-ＶＬＤＬ比の
正常化(US 4,255,449)のために；総合非経口栄養の分野において(US 4,254,147
およびUS 4,320,145); 腎臓学の分野では筋無力症および、規則的な血液透析治
療を行っている慢性尿毒症患者の透析分泌液中のカルニチンの減損により引き起
こされる筋肉痙攣の発生に対抗するために(US 4,272,549)；アドリアマイシンの
ような抗癌剤により(US 4,400,371およびUS 4,713,370)および、ハロセインのよ
うなハロゲン化麻酔薬により(US 4,780,308)誘導される毒性効果に対抗するため
に；静脈鬱血の治療において(US 4,415,589)；年配の患者において、多くの生化
学および行動パラメータの低下に対抗するために(US 4,474,812)；エイズ患者や
無症候性ＨＩＶ-陽性患者のトリグリセリドおよび腫瘍壊死因子(ＴＮＦ-α)レベ
ルを正常化するために(US 5,631,288)提案されている。Ｌ-カルニチンの使用はまた、広いスペクトルの代謝的/抗アテローム性動脈硬
化症作用を有するＬ-カルニチンと補酵素Ｑ１０の組み合わせのような、他の活
性成分との組み合わせにおいても提案されている(US 4,599,232)。プロピオニルＬ-カルニチンが末梢脈管障害(US 4,343,816)および鬱血性心機
能不全(US 4,194,006)の治療のために提案されてきたのに対し、アルカノイル
Ｌ-カルニチンに関しては、中枢神経系疾患、特にアルツハイマー病の治療のた
めの(US 4,346,107)および、糖尿病性神経障害の治療のための(US 4,751,242)ア
セチルＬ-カルニチンの使用が知られている。

【００１０】エネルギーレベルでのその役割が周知である補酵素ニコチンアミドアデニン
ジヌクレオチド(ＮＡＤＨ)が発揮する活性は同様に複雑である。呼吸鎖におけるその機能は、ミトコンドリア組織における電子の輸送およびＡ
ＴＰの形成に欠くことができない。２つのＮＡＤＨデヒドロゲナーゼがミトコン
ドリア内部マトリックスから単離されている。おそらく大きいほうの錯体(分子
量３０００００以上)のサブユニットである、低分子量(分子量７８０００)を有
する一つが、該組織に属する天然に存在する機能形態であるとみなされている。ミトコンドリア内膜に位置する様々な錯体は、シトクロムと補酵素Ｑ１０鎖の
名称の元に進行し、電子が酸素の使用とＡＴＰの形成を伴って低ポテンシャル系
から高ポテンシャル系へ輸送されることを可能にする酸化系の鎖を構成する。実
際に、ＮＡＤＨからＡＴＰの産生を導く酸化的リン酸化は、呼吸鎖に由来する。

【００１１】シトクロムと補酵素Ｑ１０の複合体とともに、ＮＡＤＨはＡＴＰへのエネルギ
ーの変換に必要な要素であり、この鎖の開始時点で見出されるＮＡＤＨは、この
過程の主たる条件付け的要素である。ＮＡＤＨの酵素的機能は、単にＡＴＰの形成のためのエネルギー型反応におい
て認められるだけでなく、キノジヒドロキシ-プテリジンレダクターゼ(ＤＨＰ
Ｒ)がＨ４-ビオプテリンの生合成を進行するのに必要な補酵素としてＮＡＤＨが
作用することも近年示された。パーキンソン症候群のような疾患で欠損を示すＬ-ドーパ、そしてドーパミン
を増加させる方法として、Ｈ４-ビオプテリンの生合成を刺激し、脳内でのその
濃度を増加させる可能性が近年提案された(Ｌ-ドーパの欠損はパーキンソン症候
群の神経障害の根元とみなされている)。Ｌ-ドーパがドーパミンのプレカーサー
として作用し、つまりそれ自体がドーパミンに代謝的に変換され得るのに対して
、同じことはチロシンの場合にはチロシンヒドロキシラーゼの存在なしでは起こ
らない(チロシンもまた、Ｌ-ドーパの形成を導くことができるプレカーサーとみ
なすことができる)。実際に、この酵素の減少が、パーキンソン症候群の患者の
黒質レベルで見出されている。ヒドロキシチロシンの減少はそのうえ、ヒドロキ
シチロシンの合成に必要な補酵素であるＨ４-ビオプテリンの大きな減少を伴う
。Ｈ４-ビオプテリンは血液-脳関門を通過せず、それゆえＨ４-ビオプテリンの
直接投与は全く役に立たないので、ＮＡＤＨにより行われることが知られている
機能である、Ｈ４-ビオプテリンの形成のためのキノジヒドロキシ-プテリジン
レダクターゼ(ＤＨＰＲ)の活性に必要な補酵素を投与することによりＨ４-ビオ
プテリンの形成を刺激することに頼る方が有効であるように思われる。ＮＡＤＨ
の投与はその結果ＤＨＰＲを活性化し、次に、ドーパの新合成を達成するために
チロシンヒドロキシラーゼを活性化するのに必要なＨ４-ビオプテリンの形成を
導く。パーキンソン病を煩っている患者へのＮＡＤＨの静脈内注射に基く臨床試験に
より、そのように治療された患者においてパーキンソン症状が有意に改善される
ことが示され、これより前に概説した理論上の仮説の妥当性が確認された。ＮＡＤＨレベルの急速な低下を招く胃の酸性環境を避けるために遅延放出性胃
腸カプセルを用いて投与することを取り計らったＮＡＤＨの経口投与を用いて、
かなり類似した結果が得られた。アルツハイマー病および慢性疲労症候群(ＣＦＳ)の臨床的改善が、ＮＡＤＨの
投与について報告されている(Birkmayer J.G., Annals Clin. Lb. Sci., 26, 1
1996)。

【００１２】前に記載した化合物の性質に基づき、これらの間の相互作用の可能性をＬ-カ
ルニチンまたはそのアルカノイル誘導体およびＮＡＤＨおよび／またはＮＡＤＰ
Ｈの組み合わせに関して行った一連の試験を用いて評価した。これらの新規組み
合わせに関して行った試験において、Ｌ-カルニチンまたはそのアルカノイル誘
導型およびＮＡＤＨおよびＮＡＤＰＨに関する我々の薬理学的知識によっては全
く予想できなかった、驚くべき、意外な共同性相互作用が、該組み合わせの成分
間で認められた。本発明の組成物は以下の成分を組み合わせて含む: (ａ)Ｌ-カルニチンまたは、直鎖または分枝鎖アルカノイル基が２-８、好ましく
は２-６の炭素原子を有するアルカノイルＬ-カルニチン、または薬理学上許容さ
れるそれらの塩の一つ; (ｂ)ＮＡＤＨまたはＮＡＤＨプレカーサーおよび/またはＮＡＤＰＨ;および、 (ｃ)薬理学上許容される賦形剤。好ましくは、ＮＡＤＨプレカーサーはニコチンアミドである。 (ａ)対(ｂ)の重量対重量比は一般に、１:０.０１〜１:１の範囲にあり、好ま
しくは１:０.０５〜１:０.５の範囲にあるべきであり、例えば重量:重量比は１:
０.１であってもよい。アルカノイルＬ-カルニチンは、好ましくはアセチルＬ-カルニチン、プロピオ
ニルＬ-カルニチン、ブチリルＬ-カルニチン、バレリルＬ-カルニチンおよびイ
ソバレリルＬ-カルニチンからなる群から選択されるべきである。アセチルＬ-カ
ルニチンおよびプロピオニルＬ-カルニチンが特に好ましい。本発明の目的に関して、Ｌ-カルニチン、アセチルＬ-カルニチン、プロピオニ
ルＬ-カルニチンおよびイソバレリルＬ-カルニチンが意味するものは、分子内塩
の形態にあるこれらの化合物である。Ｌ-カルニチンまたはアルカノイルＬ-カルニチンの薬理学上許容される塩が意
味するものは、好ましくない毒性または副作用を生じない、酸とのこれらの塩の
いずれかである。これらの酸は薬理学者や製薬における専門家に周知である。そのような塩の無制限の例は、クロライド;ブロマイド；イオダイド；アスパ
ルテート；酸アスパルテート；シトレート；酸シトレート；タートレート；ホス
フェート；酸ホスフェート；フマレート；酸フマレート；グリセロホスフェート
；グルコースホスフェート；ラクテート；マレエート；酸マレエート；オロテー
ト；オキサレート；酸オキサレート；スルフェート；酸スルフェート；トリクロ
ロアセテート；トリフルオロアセテートおよびメタンスフホネートである。

【００１３】ＦＤＡが認可した薬理学上許容できる塩のリストは、Int. J. Pharm. 33, (19
86), 201-217に見ることができ、本明細書中に引用により組み込まれている。本発明の組成物はさらに、ビタミン、補酵素、ミネラル物質および抗酸化剤を
含んでもよい。単位投与製剤においては、本発明の組成物は例えば、１００-５００ｍｇの(ａ
)Ｌ-カルニチンまたはアルカノイルＬ-カルニチンまたは、等量の薬理学上許容
できるそれらの塩の一つ;および、重量対重量比(ａ):(ｂ)が１:０.０１〜１:１
に、および好ましくは１:０.０２〜１:０.２の範囲となるような重量の(ｂ)ＮＡ
ＤＨまたはＮＡＤＰＨ;を含む。単純化のためにこれ以下ではＬ-カルニチンとＮＡＤＨの組み合わせのみに限
って言及するが、Ｌ-カルニチンとＮＡＤＰＨの、または前記のアルカノイルＬ-
カルニチンとＮＡＤＨおよび／またはＮＡＤＰＨの組み合わせも等しく有効であ
り、本発明の目的を完全に達成することが理解されるべきである。

【００１４】毒物学的試験カルニチンおよびＮＡＤＨの両方が、ごく限られた毒性と良好な耐容性を有す
ることは公知である。これらの好ましい特性を、ラットとマウスの両方に１００
ｍｇ/ｋｇまでのＬ-カルニチンと５ｍｇ／ｋｇまでのＮＡＤＨの組み合わせを静
脈投与することにより確認した。長期(３０日)毒性試験では、２５０ｍｇ／ｋｇ
のＬ-カルニチンと１０ｍｇのＮＡＤＨの組み合わせの経口投与が良好な耐容性
を示し、処置動物において死亡または、毒性あるいは不耐性のいずれの形跡も示
さなかった。治療の終わりに様々な器官で行った血液化学的および組織学的調査
はコントロール動物と比較して異常性を全く示さず、従って研究された該組み合
わせの良好な耐容性が確認された。

【００１５】長期運動後の筋肉酵素の増加に関する試験筋肉運動に関与するミトコンドリア酵素の濃度へのカルニチンとＮＡＤＨの効
果ならびに２つの組み合わせの効果を評価するために、長期筋肉運動を行ってい
るラットの腓腹筋中のこれらのミトコンドリア酵素の活性を、コントロール動物
と比較して、長期の筋肉運動により必要とされるより大きなエネルギー需要に応
じて増大させることができるかどうかを確証するための試験を行った。この目的
のために、ウィスターラットの一群を２０ｍ／分の速度のロータロイド装置(Bas
ile, Como, Italy)上に１２０分間毎日乗せ、筋肉トレーニングを行わせた(Benz
i G., J. Appl. Physiol., 38, 565, 1975)。７日または３０日のトレーニング
の後、各ラットの腓腹筋を単離および均質化し、筋肉酵素活性を評価した(Oscai
L.B., J. Biol. Med., 245, 6968, 1971)。評価した酵素は、シトレートシン
セターゼ、イソシトレートデヒドロゲナーゼおよびスクシネートデヒドロゲナ
ーゼであった。この試験で得られた結果により、わずか７日間のトレーニングの後、カルニチ
ンとＮＡＤＨの組み合わせは酵素活性の大変有意な増加を誘導することができた
のに対し、この観察期間では、カルニチンまたはＮＡＤＨのいずれか単独により
誘導される変化は、コントロールと比較して全く認められないことが実証された
。これら２つの生成物の強い共同性効果は、３０日間のトレーニングの後ではよ
り懸著であった。

【００１６】

【表１】

【００１７】低酸素症後のウサギ乳頭筋ＡＴＰ濃度の増加に関する試験これらの試験を用いて、Ｌ-カルニチンおよびＮＡＤＨまたはその２つの組み
合わせにより、ＡＴＰの欠乏に至ることが知られている低酸素症に罹患させた後
のウサギの心臓乳頭筋のＡＴＰ濃度を保つことができるかどうかを評価した。こ
の試験は、Ｌ-カルニチン(１００ｍｇ／ｋｇ)およびＮＡＤＨ(１０ｍｇ／ｋｇ)
両者単独の静脈注射、ならびに２つの物質の組み合わせの静脈注射を３日間毎日
連続して与えたニュージーランドウサギに関して行った。ウサギの別の群を処置を与えないコントロール群とした。処置の３日目の終わ
りに、全動物を屠殺し、その心臓を抽出し、直径１ｍｍで厚さ４.５ｍｍの乳頭
筋のセクションを単離した。こうして単離した組織を恒温浴中で１００％の飽和
Ｏ₂溶液を用いて還流した。次いで試験的な低酸素症を浴中、Ｏ₂の代わりに１０
０％のＮ₂を導入することにより生じさせた。乳頭筋のＡＴＰ含量をStrehler B.
L.により記載される方法(Strehler B.L., 酵素学における方法 III。New York.
Acad. Press, 871, 1957)を用いて分析した。分析は９０分間通常の還流下に維
持した組織標本に関して、および、さらに９０分続く低酸素症期間の後に行った
。

【００１８】これらの試験により、コントロール動物においてもカルニチン単独またはＮＡ
ＤＨ単独のいずれかで処置された動物においても、ＡＴＰ濃度が実質上低下する
ことが示された。他方、カルニチンとＮＡＤＨの組み合わせを用いて処置された
動物においては、低酸素症により誘導されるＡＴＰの低下に対する完全な防御が
見られた。それゆえこれらの試験により、Ｌ-カルニチンとＮＡＤＨの組み合わせが、Ｌ-
カルニチン単独またはＮＡＤＨ単独のいずれかでは達成することができないが、
驚くべきことに組み合わせを用いると達成することができるほどに、乳頭筋中に
存在するＡＴＰを低酸素症により誘導されるその低下から保護することができる
ことが示された。

【００１９】

【表２】

【００２０】Ｌ-カルニチンおよびＮＡＤＨの、ドーパミンの産生を刺激する能力に関する試
験これらの試験を、１５００-３０００〜６０００万の範囲の細胞密度を有する
、２００μｇのＮＡＤＨ/ｍｌまたは２ｍｇ／ｍＬのＬ-カルニチンまたはその２
つの成分を組み合わせたものと共に培養した神経芽腫培養細胞に関して行った。ＮＡＤＨおよびＬ-カルニチンにより誘導されるドーパミンの産生は、Jonsson
およびKellerにより改変された(Jonsson G., Holman H., Adams R.N., 中枢アド
レナリン神経。Ed. De Fuxe-Pergamon Press, 59, 1980; Keller R., Oke A., M
efford I., Life Science, 19, 995, 1976)メイヤー法(Mayer method)(Mayer G.
S., Strong R. F., Current separation 4, 44, 1982)に従い、ＨＰＬＣにより
分析した。これらの試験の結果により、培養細胞へＮＡＤＨを添加することによ
り、存在する細胞の数に対するドーパミン産生の増加が効果的に誘導されること
が立証された。しかし、単独では非常に小さな効果しか生み出さないＬ-カルニチンをＮＡＤ
Ｈ溶液に添加した場合には、有意により大きな増加が達成された。それゆえ、該
共同性効果がこれらの試験に関しても示される。

【００２１】

【表３】

【００２２】ＭＰＴＰ(１-メチル-４-フェニル-１，２，３，６-テトラヒドロピリジン)試
験神経骨格筋系(neuroskeletal system)のレベルで主に活性な神経毒としてのＭ
ＰＴＰの使用は、パーキンソン症候群およびその生化学的および臨床的病原論の
研究のための有用な実験モデルとなり得る。サルおよびマウスの両方にＭＰＴＰを高投与量(４０ｍｇ／ｋｇ)で投与するこ
とにより、ドーパおよびその代謝産物のかなりの低下を伴う、パーキンソン病に
典型的な運動低下症状および動作緩慢症状が誘導される。これらの試験では、マ
ウスにおいてＭＰＴＰにより誘導された行動および運動障害ならびにドーパミン
濃度を、ＮＡＤＨまたはＬ-カルニチンの単独投与若しくは両物質を組み合わせ
た投与により緩和および修正することができるかどうかを研究した。これらの試験のために、２０ｇの体重のＣ５７ＢＥ/６系統の黒マウスを用い
た。これらのマウスの１グループをコントロールとし、他のグループには皮下に
２４時間間隔で２回、４０ｍｇ／ｋｇのＭＰＴＰを注射した。ＭＰＴＰの注射の
３週間後、全処置動物およびコントロール動物の運動性を評価した。ドーパアッ
セイもＭＰＴＰ処置の３週間後に行った。ＮＡＤＨとカルニチンの両方を用いた
処置は、運動性試験の開始の直前に行った。運動性はArcher(Archer T., Fredri
kson A., 精神薬理学, 88, 141, 1986)により開示される方法に従い、２つの赤
外線光線を異なる高さで通過させたプレクシグラスカメラを用いて評価した。

【００２３】ＭＰＴＰにより誘導される運動性の低下はコントロールマウスにおいて８０％
以上であることが証明され、運動性はＮＡＤＨおよびＬ-カルニチン単独ではそ
れぞれ６０％および７０％低下する一方で、２つの物質の組み合わせを用いると
、運動性は事実上通常のレベル(２０％減)まで回復した。さらに興味深いのは、
横紋筋中のドーパ濃度に関する結果であり、これはＭＰＴＰを投与したコントロ
ールマウスでは９０％低下したが、処置マウスではほとんど通常のレベルを呈し
た。これらの試験において、また、Ｌ-カルニチン単独の効果はほとんどとるに
足らないものであるが、ＮＡＤＨの効果は４０％に等しく、その組み合わせはド
ーパをこの組織中で通常に存在する濃度に非常に近いレベルまで回復させた。本発明による組成物のいくらかの例を以下に報告する。:

【００２４】

【表４】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 25/16 Ａ６１Ｐ 25/16 43/00 １２１ 43/00 １２１ //(Ａ６１Ｋ 31/205 (Ａ６１Ｋ 31/205 31:7084） 31:7084） (Ａ６１Ｋ 31/205 (Ａ６１Ｋ 31/205 31:455） 31:455） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷＦターム(参考） 4C086 AA01 AA02 BC19 EA18 MA03 MA05 MA52 MA55 NA14 ZA02 ZA94 4C206 AA01 AA02 FA59 MA03 MA05 MA72 MA75 NA14 ZA02 ZA94

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】 (ａ)Ｌ-カルニチンまたは、直鎖または分枝鎖アルカノイル
基が２-８の、好ましくは２-６の炭素原子を有するアルカノイルＬ-カルニチン
または、薬理学上許容されるそれらの塩; (ｂ)ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド、還元型(ＮＡＤＨ)またはそのプ
レカーサー、および/またはニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェ
ート、還元型(ＮＡＤＰＨ);および、 (ｃ)薬理学上許容される賦形剤: を含む組成物。
【請求項２】ＮＡＤＨプレカーサーがニコチンアミドである請求項１記載
の組成物。
【請求項３】重量比(ａ):(ｂ)が１:０.０１〜１:１である請求項１または
２記載の組成物。
【請求項４】重量比(ａ):(ｂ)が１:０.０２〜１:０.２である請求項３記
載の組成物。
【請求項５】重量比(ａ):(ｂ)が１:０.１である請求項４記載の組成物。
【請求項６】アルカノイルＬ-カルニチンが、アセチルＬ-カルニチン、プ
ロピオニルＬ-カルニチン、ブチリルＬ-カルニチン、バレリルＬ-カルニチンお
よびイソバレリルＬ-カルニチンから成る群から選択される請求項１-５記載の組
成物。
【請求項７】薬理学上許容される塩が、クロライド;ブロマイド；イオダ
イド；アスパルテート；酸アスパルテート；シトレート；酸シトレート；タート
レート；ホスフェート；酸ホスフェート；フマレート；酸フマレート；グリセロ
ホスフェート；グルコースホスフェート；ラクテート；マレエート；酸マレエー
ト；オロテート；オキサレート；酸オキサレート；スルフェート；酸スルフェー
ト；トリクロロアセテート；トリフルオロアセテートおよびメタンスルホネート
から成る群から選択される前記請求項いずれかに記載の組成物。
【請求項８】ビタミン、補酵素、ミネラル物質および抗酸化剤をさらに含
む前記請求項いずれかに記載の組成物。
【請求項９】１００-５００ｍｇの(ａ)Ｌ-カルニチンまたはアルカノイル
Ｌ-カルニチンまたは等量の薬理学上許容できるそれらの塩;および、重量比(ａ)
:(ｂ)が１:０.０１〜１:１となるような量の(ｂ)ＮＡＤＨ、ＮＡＤＨプレカーサ
ーまたはＮＡＤＰＨ;を含む単位投与製剤である請求項１または２記載の組成物
。
【請求項１０】１００-５００ｍｇの(ａ)Ｌ-カルニチンまたはアルカノイ
ルＬ-カルニチンまたは等量の薬理学上許容できるそれらの塩;および、重量比(
ａ):(ｂ)が１:０.０２〜１:０.２となるような量の(ｂ)ＮＡＤＨ、ＮＡＤＨプレ
カーサーまたはＮＡＤＰＨ;を含む単位投与製剤である請求項４記載の組成物。
【請求項１１】経口投与可能な、食餌補助品の形態の前記請求項いずれか
に記載の組成物。
【請求項１２】経口または非経口投与可能な、薬剤の形態の前記請求項い
ずれかに記載の組成物。