JP2002510667A - 新規レチノイドおよびその使用法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、新規レチノイド化合物および皮膚および／または肺癌の化学予防のため、および白血病の治療のためのヒトおよび動物でのその化合物の使用を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 （発明の背景）関連出願の説明 本発明では、現在放棄されている１９９８年４月６日に提出された米国の仮特
許出願番号６０／０８０，８６８号の特恵が主張される。

【０００２】連邦基金交付 本発明は、アメリカ合衆国連邦政府により、交付番号ＰＯ１ ＣＡ３４９６８
で、供給される基金を部分的に使用してなされた。したがって、アメリカ合衆国
連邦政府は、本発明の明確な権利を有する。

【０００３】発明の分野 本発明は、一般に、化学および癌治療の分野に関する。さらに詳細には、本発
明は、新規レチノイド、および化学的予防および癌治療でのそれらの使用に関す
る。

【０００４】関連技術の説明 続く化学的説明では、Ｅは、トランスと同義に相互交換でき、そしてＺは、シ
スと同義に相互交換できる。レチノイドレセプターおよび核内レセプターのこの
スーパーファミリーの他の構成員（ステロイド、チロイドおよびビタミンＤホル
モンレセプター、および既知リガントなしの他の「希少」レセプターを含む）は
、医薬品開発のための新たな標的である（１）。レチノール酸（ＲＡ）および合
成レチノイドは、細胞増殖、分化、発生および細胞死を引起す遺伝子転写を制御
する様々な構成員の核内レチノイドレセプターを有する、リガンド依存性の転写
因子として作用することが考えられる（２）。２つのクラスの核内レチノイドレ
セプター（ＲＡＲおよびＲＸＲ）は、これまでは同定されているし、各々は、数
種の異なったサブタイプ（α、β、γ）を示す。（全Ｅ）−および（９Ｚ）−Ｒ
Ａの両方は、ＲＡＲに結合し、そしてＲＡＲ／ＲＸＲ異質二量体によって指示さ
れた転写を活性化させるが、（９Ｚ）−ＲＡは、同質二量体または異質二量体を
形成することによって転写を指示するＲＸＲ用の唯一の既知の天然のリガンドで
ある。

【０００５】 化学的予防での最近の進歩は、数種の固形臓器腫瘍でのレチノイドの使用にお
ける興味を高め、そして主要な治療的成功が、ある種の白血病でのレチノイドに
示された（３）。急性前骨髄球白血病（ＡＰＬ）を有する患者の（全Ｅ）−ＲＡ
治療は、好中球にＡＰＬ骨髄芽球の正常な成熟およびアポトーシスを誘導するこ
とによってこれらの患者で９０％完全な寛解速度に至るが、この分化療法は、一
過性であり、そしておそらくレチノール酸に対する耐性の発生により、共通して
３−１５ヶ月以内に病気をぶり返す（４）。（１３Ｚ）−ＲＡは、幼若骨髄単球
性白血病（ＪＭＭＬ）に罹った５０％までの子供で過剰な骨髄芽球増殖を有効に
制御する（５）。しかし、この治療は、病気にきかず、そして最善には、疾病の
長期化した安定化の時期に至るが、しかし結局、患者は、異質遺伝子型の骨髄移
植を行う必要がある（４、６）。

【０００６】 全トランス−レチノール酸（ＡＴＲＡ）は、ＡＰＬに罹った患者の分化療法（
標準内毒性癌化学療法よりむしろ）のために使用されるＦＤＡが認可した薬剤の
最初の例である。ＡＰＬ治療に非常に有効であることが示されているが、臨床上
の耐性が、ＡＴＲＡの薬学上の用量で頻繁に起こり、そしてＡＰＬ患者はしばし
ば再発する（Ｄｅｇｏｓら、Ｂｌｏｏｄ、８５巻、２６４３頁（１９９５年））
。さらに有効な治療法を提供するために、新たに非常に活性のあるレチノイドが
、これらの剤の低い容量が、ＡＴＲＡと同じくらい迅速に再発を誘導しないとい
う予測と一致する必要がある。

【０００７】 ＡＴＲＡ療法にかけているＡＰＬ患者から単離されるＮＢ４セルラインは、Ａ
ＰＬの優れた生体外モデルを供する。ＡＰＬの特徴であるｔ（１５：１７）転座
は、ＮＢ４細胞で安定に行われ、そしてＰＭＬ／ＲＡＲ−ａ融合タンパク質は、
この形質転換セルラインで発現される（Ｌａｎｏｔｔｅら、Ｂｌｏｏｄ、７７巻
、１０８０頁（１９９１年））。ＮＢ４細胞のＡＴＲＡ治療が、分化に対するＰ
ＭＬ／ＲＡＲ−ａ遮断を取除き、そして前骨髄球を正常に成熟させ、そして死滅
させる。ＡＴＲＡが、分化遮断を取除く機構は、よく理解されていない。最近の
証拠では、ＡＴＲＡが、ＰＭＬ／ＲＡＲ−ａの発現を下方制御し、そして正常な
ミレオイド（ｍｙｌｅｏｉｄ）分化を回復することが示唆される（Ｒａｅｌｓｏ
ｎら、Ｂｌｏｏｄ、８８巻、２８２６頁（１９９６年））。

【０００８】 先行技術は、レチノール酸の有益な効果を示すが、副作用を減少された効果的
な治療剤では不十分である。本発明は、当業界での長年の必要性および望みを果
たす。

【０００９】発明の概要 本発明は、ＵＡＢ８異性体が、天然のレチノール酸の異性体と比較して、等し
いか、またはより大きな効力を示す。さらに、提供されるのは、その全Ｅ異性体
が、（全Ｅ）−ＵＡＢ８より異なる核内レセプター選択性（ＲＡＲβおよびＲＡ
Ｒγサブタイプ選択性レチノイドおよびＲＡＲαアンタゴニスト）を示す、新た
なレチノイドであるＵＡＢ３０である。

【００１０】 本発明は、ＮＢ４細胞分化アッセイで、ＵＡＢレチノイドと称される、新たに
配座的に強制されたレチノイド、およびＡＴＲＡより大きな力価を示す同定され
た全トランスＵＡＢ８も評価する（Ｍｕｃｃｉｏら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、
４１巻、１６７９頁（１９９８年））。さらに、ＡＰＬ療法でその力価を評価す
るために、ＮＢ４細胞分化を誘導するその能力は、ＲＸＲ選択性レチノイドの存
在下で研究され、ＡＴＲＡ有効性を増大させることが示された（Ｃｈｅｎら、Ｎ
ａｔｕｒｅ、３８２巻、８１９頁（１９９６年）。さらに、ＡＴＲＡのＲＡＲ−
α交差作用および交差発現作用を分離するＵＡＢレチノイドを同定し、そしてＮ
Ｂ４細胞分化における全トランスＵＡＢ８のＲＡＲ依存性機構を理解するために
使用した。

【００１１】 本発明の１つの具体例で、新たな構造クラスのレチノイドについて提供される
化合物がある。これらの化合物は、一般構造ＩおよびIIによって示されるＵＡＢ
８の類縁体である。代表的例は、（９Ｚ）−ＵＡＢ２０、（全Ｅ）−ＵＡＢ２０
、（９Ｚ）−ＵＡＢ２１および（全Ｅ）−ＵＡＢ２１である。

【００１２】 本発明の別の具体例では、化合物がＵＡＢ３０および類縁体である別の新たな
構造クラスのレチノイドについて提供される化合物がある。代表的例は、（９Ｚ
）−ＵＡＢ３０、（９Ｚ）−ＵＡＢ３１、（９Ｚ）−ＵＡＢ３２、（９Ｚ）−Ｕ
ＡＢ３３、（全Ｅ）−ＵＡＢ３３、（９Ｚ）−ＵＡＢ３４、（９Ｚ）−ＵＡＢ３
５、（９Ｚ）−ＵＡＢ６０、（９Ｚ）−ＵＡＢ６１、（９Ｚ）−ＵＡＢ６２、（
９Ｚ）−ＵＡＢ４０および（９Ｚ）−ＵＡＢ７０である。

【００１３】 本発明のさらに別の具体例では、個体（個人）に、有効用量の新たなレチノイ
ド化合物を投与することによって提供されるような治療の必要な個体を治療する
、提供された方法がある。好ましくは、個体は、白血病のための治療が必要であ
るか、または癌化学的予防が必要である。レチノイド化合物は、その治療用に互
いに作用して使用できる。

【００１４】 本発明の他のおよび別の態様および利点は、開示の目的のために示される本発
明の現に好まれる具体例の以下の説明から明らかである。

【００１５】 （図面の簡単な説明） 明らかになる他のものと同様に、本発明の、上に引用される特性、利点および
目的は、維持され、そして詳細に理解できることのため、上で簡単に要約された
本発明のさらに特定の説明は、付随の図面に例示されるそれらの特定の具体例に
参照してなされうる。これらの図面は、明細書の一部を形成する。しかし、付随
の図面は、本発明の好ましい具体例を例示することに注目すべきであり、したが
って、それらの範囲内に限定すると考えられるべきではない。

【００１６】 図１は、ＵＡＢ８および類縁体（ＵＡＢ８は、構造ＩでＲ_１＝エチルおよびＲ _２ ＝ｉ−プロピルと定義される）を記述する一般構造ＩおよびIIを示す。ここで
、Ｒ_１は、Ｈ、エチル、メチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｔ−ブチル、フ
ェニル、ベンジル、環状アルキル（Ｃ３−Ｃ８から）、アリール、およびアリー
ルアルキルから構成される群から選択され、そしてＲ_２は、２−メチルプロピル
、ｎ−ブチル、シクロヘキシル、３−シクロヘキセニル、ベンジル、環状アルキ
ル（Ｃ３−Ｃ８から）、およびアリールアルキルから構成される群から選択され
る。そして、ここで、Ｒ_１は、フェニル、ベンジル、環状アルキル（Ｃ３−Ｃ８
から）、アリール、およびアリールアルキルから構成される群から選択され、そ
してＲ_２は、Ｈ、エチル、メチル、ｎ−プロピルおよびｉ−プロピルから構成さ
れる群から選択される。

【００１７】 図２は、ＵＡＢ３０および類縁体を記述する一般構造IIIおよびIVを示す。こ こで、Ｒ_１は、アリール環上の１つまたは２つの置換基を表し、そしてＨ、エチ
ル、メチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｔ−ブチル、フェニル、ベンジル、
クロロ、フルオロ、メトキシ、エトキシ、ベンジルオキシ、環状アルキル（Ｃ１
−Ｃ８から）、アリール、アリールアルキル、アルキルオキシ、アリールオキシ
、アリールアルキルオキシおよびハロゲンから構成される群から選択される。そ
してＲ_２は、Ｈ、エチル、メチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、２−メチルプ
ロピル、ｎ−ブチル、シクロヘキシル、３−シクロヘキセニル、ベンジル、メト
キシ、エトキシ、ベンジルオキシ、環状アルキル（Ｃ１−Ｃ８から）、アリール
、アリールアルキル、アルキルオキシ、アリールオキシおよびアリールアルキル
オキシから構成される群から選択され、そしてここでｎ＝０−３である。

【００１８】 図３から５は、ＵＡＢ３０を製造する略図を示す。

【００１９】 図６および７は、ＵＡＢ８およびＵＡＢ３０レチノイドの全トランス−および
９−シス異性体に比較した全トランス−レチノール酸（ＡＴＲＡ）の構造を示す
。

【００２０】 図８は、ＲＡＲ−αアンタゴニスト、全トランス−ＵＡＢ３０およびＲｏ−４
１−５２５３によってＣＶ−１細胞中で全トランス−レチノール酸を誘導したＲ
ＡＲ−α転写活性の阻害を示す。全トランス−レチノール酸用量は、５０ｎＭで
あり、そして全トランスＵＡＢ３０およびＲｏ−４１−５２５３の用量は、１０ ^−９ から１０^−６Ｍまで変化した。

【００２１】 図９は、２つの用量（１０^−７から１０^−６Ｍ）で全トランス−レチノール酸
（ＡＴＲＡ）、およびＵＡＢ８およびＵＡＢ３０異性体によって、ＨｅＬａ細胞
中のＴＰＡ誘導ＲＡＲ−α転写活性の阻害を示す。

【００２２】 図１０は、ＡＴＲＡ（塗りつぶした円形）、全トランス−ＵＡＢ８（塗りつぶ
した三角形）、９−シス−ＵＡＢ８（塗りつぶした四角形）、全トランス−ＵＡ
Ｂ３０（逆さまの塗りつぶした三角形）、および９−シスＵＡＢ３０（塗りつぶ
したダイアモンド型）によってＮＢ４細胞分化を示す。細胞を、３日間、１０％
ＦＢＳおよび指示濃度の各レチノイドで補足した培地で育成した。分化は、ＮＢ
Ｔ陽性細胞の含有率で評価された。

【００２３】 図１１は、ＮＢ４細菌（塗りつぶした円形）のみ、または９−シス−ＵＡＢ８
（１：２．５）（塗りつぶした三角形）、９−シス−ＵＡＢ３０（１：１０）（
塗りつぶした四角形）、または全トランスＵＡＢ３０（１：１０）（塗りつぶし
たダイアモンド型）と組合わせて分化させる全トランス−レチノール酸（ＡＴＲ
Ａ）の許容量を示す。図１２は、ＮＢ４細胞（塗りつぶした円形）のみ、または
９−シス−ＵＡＢ８（１：２．５）（塗りつぶした三角形）、９−シス−ＵＡＢ
３０（１：１０）（塗りつぶした四角形）、または全トランス−ＵＡＢ３０（１
：１０）（塗りつぶしたダイアモンド型）と組合わせて分化させる全トランス−
ＵＡＢ８の許容量を示す。

【００２４】 図１３は、ＮＢ４細胞（塗りつぶした円形）のみ、または１μＭ（塗りつぶし
た三角形）および４μＭ（塗りつぶされた四角形）で４−ヒトロキシフェニルレ
チナミドと組合わせて分化させる全トランス−ＵＡＢ８の許容量を示す。

【００２５】 図１４は、時間後期メチルニトロソウレア（ＭＮＵ）誘導の時期をかけた平均
哺乳類腫瘍重量／ラット（グラム）を示す。グループ１７のラットを、ベヒクル
（テクラド食餌）（円形）で処置した一方で、グループ２９を、ＵＡＢ−３０（
２００ｍｇ／ｋｇ食餌）（塗りつぶされた四角形）で処置した。

【００２６】 図１５は、様々な日齢をかけた平均体重／ラット（グラム）を示す。グループ
１７のラットを、ベヒクル（テクラド食餌）（円形）で処置した一方で、グルー
プ２９を、ＵＡＢ−３０（２００ｍｇ／ｋｇ食餌）（塗りつぶされた四角形）で
処置した。

【００２７】 （発明の詳細な説明） 本発明は、新たなレチノイド化合物およびそれらの使用に向けられる。全トラ
ンス−レチノール酸（ＡＴＲＡ）は、最終的に顆粒球に分化する急性前骨髄性白
血病（ＡＰＬ）セルライン、ＮＢ４を誘導する。臨床的には、ＡＴＲＡは、正常
な細胞毒性の化学療法に屈折性のあるＡＰＬ患者のための代替療法として使用さ
れる。しかし、ほとんどのＡＰＬ患者は、長期化したＡＴＲＡ療法を示す臨床的
耐性を発生する。前トランスＵＡＢ８は、ＮＢ４細胞が分化するのを誘導する上
でＡＴＲＡより有効な剤として確認される。本発明は、９−シス−ＵＡＢ８また
は９−シス−ＵＡＢ３０の２つのＲＸＲ選択性レチノイドと組合わせて使用され
る場合、ＮＢ４細胞分化での前トランス−ＵＡＢ８、ＲＡＲ選択性レチノイドの
影響も調査する。前トランス−ＵＡＢ８および９−シス−ＵＡＢ３０の組合わせ
た使用は、ＮＢ４細胞分化で相互に作用した一方で、９−シス−ＵＡＢ３０は、
単独でほとんど効果を示さなかった。さらに、全トランス−ＵＡＢ８および４−
ヒドロキシフェニルレチナミドは、ＮＢ４細胞に分化を誘導させるのに相互に作
用した。

【００２８】 このセルライン中でレチノイドで誘導される分化の作用の強力な核内レセプタ
ー基本の機構が、次に探られる。全トランス−ＵＡＢ８は、遺伝子のＲＡＲ依存
性の相互作用およびＡＰ−１複合体のＲＡＲ依存性相互発現（ｃ−Ｊｕｎ／ｃ−
Ｆｏｓ）の両方に非常に有効であることが示される。これらの２つのレセプター
基本機構の間を区別するために、全トランス−ＵＡＢ３０を評価し、そして、Ａ
Ｐ−１複合体の相互発現について、しかしＲＡＲ−αアンタゴニストとして活性
であった。単独で使用するとき、全トランス−ＵＡＢ３０は、ＮＢ４細胞の分化
を誘導せず、そして混合使用するとき、それは、全トランスＵＡＢ８またはＡＴ
ＲＡのいずれかの有効性を減少させる。これらのデータは、ＮＢ４細胞の全トラ
ンス−ＵＡＢ８誘導分化のＲＡＲ−α−基本機構を支持する。最終的に、全トラ
ンス−ＵＡＢ８は、ＡＴＲＡと同じ速度で代謝されるが、９−シスＵＡＢ３０は
、５日間代謝的に安定であることが分かった。これらを一緒にすると、本発明で
は、全トランスＵＡＢ８の有効性が、代謝的に安定なＲＸＲ選択性リガンドと組
合わせて使用される場合、さらに増大されうることが開示され、それによりＡＰ
Ｌの臨床的治療のための新たな混合療法が提供される。

【００２９】 本発明の１つの具体例では、構造Ｉおよび構造II：

【化９】 （式中、 Ｒ_１は、Ｈ、エチル、メチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｔ−ブチル、フェ
ニル、ベンジル、環状アルキル（Ｃ_３−Ｃ_８から）、アリールおよびアリールア
ルキルから構成される群から選択され、そしてＲ_２は、２−メチルプロピル、ｎ
−ブチル、シクロヘキシル、３−シクロヘキセニル、ベンジル、環状アルキル（
Ｃ３−Ｃ８から）、およびアリールアルキルから構成される群から選択される。
そしてここで、Ｒ_１は、フェニル、ベンジル、環状アルキル（Ｃ３−Ｃ８から）
、アリールおよびアリールアルキルから構成される群から選択され、そしてＲ_２ は、Ｈ、エチル、メチル、ｎ−プロピルおよびｉ−プロピルから構成される群か
ら選択される。） から構成される群から選択される構造を示すＵＡＢ８（ＵＡＢ８は、構造Ｉ中で
Ｒ_１＝エチルおよびＲ_１＝ｉ−イソプロピルとして定義される）の類縁体である
提供のレチノイド化合物がある。

【００３０】 好ましくは、ＵＡＢ８の類縁体であるレチノイド化合物が、（９Ｚ）−ＵＡＢ
２０、（全９Ｅ）−ＵＡＢ２０、（９Ｚ）−ＵＡＢ２１および（全９Ｅ）−ＵＡ
Ｂ２１から構成される群から選択され、ここで、（９Ｚ）−ＵＡＢ２０、（全９
Ｅ）−ＵＡＢ２０、（９Ｚ）−ＵＡＢ２１および（全９Ｅ）−ＵＡＢ２１は、式
：

【化１０】 （式中、 （９Ｚ）−ＵＡＢ２０および（全９Ｅ）−ＵＡＢ２０は、Ｒ_１としてＰｈ基を、
Ｒ_２としてｉ−プロピル基を有する。ここで、（９Ｚ）−ＵＡＢ２１および（全
Ｅ）−ＵＡＢ２１は、Ｒ_１としてＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２を、Ｒ_２としてｉ−プ
ロピル基を有する。） を示す。

【００３１】 本発明の別の具体例では、構造IIIおよび構造IV：

【化１１】 （式中、 Ｒ_１が、アリール環に１つまたは２つの置換基を表し、そしてＨ、エチル、メチ
ル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｔ−ブチル、フェニル、ベンジル、クロロ、
フルオロ、メトキシ、エトキシ、ベンジルオキシ、環状アルキル（Ｃ３−Ｃ８か
ら）、アリール、アリールアルキル、アルキルオキシ、アリールアルキルオキシ
およびハロゲンから構成される群から選択される。Ｒ_２は、Ｈ、エチル、メチル
、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、２−メチルプロピル、ｎ−ブチル、シクロヘキ
シル、３−シクロヘキセニル、ベンジル、メトキシ、エトキシ、ベンジルオキシ
、環状アルキル（Ｃ３−Ｃ８から）、アリール、アリールアルキル、アルキルオ
キシおよびアリールアルキルオキシから構成される群から選択される。そしてこ
こで、ｎ＝０−３である。） から構成される群から選択される構造を示す提供されたレチノイド化合物、すな
わちＵＡＢ３０および類縁体がある。

【００３２】 好ましくは、レチノイド化合物ＵＡＢ３０および類縁体は、（９Ｚ）−ＵＡＢ
３０、（９Ｚ）−ＵＡＢ３１、（９Ｚ）−ＵＡＢ３２、（９Ｚ）−ＵＡＢ３３、
（全９Ｅ）−ＵＡＢ３３、（９Ｚ）−ＵＡＢ３４、（９Ｚ）−ＵＡＢ３５、（９
Ｚ）−ＵＡＢ６０、（９Ｚ）−ＵＡＢ６１および（９Ｚ）−ＵＡＢ６２から構成
される群から選択され、ここで、（９Ｚ）−ＵＡＢ３０、（９Ｚ）−ＵＡＢ３１
、（９Ｚ）−ＵＡＢ３２、（９Ｚ）−ＵＡＢ３３、（全９Ｅ）−ＵＡＢ３３、（
９Ｚ）−ＵＡＢ３４および（９Ｚ）−ＵＡＢ３５は、式：

【化１２】 を示す。

【００３３】 ここで、（９Ｚ）−ＵＡＢ３０は、アリール環上に置換基Ｈを有し、（９Ｚ） −ＵＡＢ３１は、アリール環上に置換基５’−メトキシを有し、（９Ｚ）−ＵＡ
Ｂ３２は、アリール環上に置換基６’−メトキシを有し、（９Ｚ）−ＵＡＢ３３
は、アリール環上に置換基７’−メトキシを有し、（全９Ｅ）−ＵＡＢ３３は、
アリール環上に置換基７’−メトキシを有し、（９Ｚ）−ＵＡＢ３４は、シクロ
アルキル環上に置換基４’−メチルを有し、および（９Ｚ）−ＵＡＢ３５は、ア
リール環上に２つの置換基５’，７’−ジメチルを有する。

【００３４】 ここで、（９Ｚ）−ＵＡＢ６０、（９Ｚ）−ＵＡＢ６１および（９Ｚ）−ＵＡ
Ｂ６２は、構造：

【化１３】 を示す。

【００３５】 ここで、（９Ｚ）−ＵＡＢ６０は、アリール環上に置換基Ｈを有し、（９Ｚ）
−ＵＡＢ６１は、アリール環上に置換基５’−メトキシを有し、そして（９Ｚ）
−ＵＡＢ６２は、アリール環上に置換基７’−メトキシを有する。

【００３６】 さらに好ましくは、式：

【化１４】 を示す（９Ｚ）−ＵＡＢ４０、そして式：

【化１５】 を示す（９Ｚ）−ＵＡＢ７０は、ＵＡＢ３０および類縁体の代表的例である。

【００３７】 さらに別の具体例では、本発明は、その個体に、ここに開示されるレチノイド
化合物の有効用量を投与する段階により、新生物形成症状を示すか、または新生
物形成または新生物形成様症状を示すことが疑われる個人（個体）を処置する方
法に向けられる。好ましくは、レチノイド化合物は、さらに、治療のために４−
ヒドロキシフェニルレチナミドと混合する。さらに好ましくは、個人は、白血病
の治療の必要があるか、皮膚または胸部癌のような癌の化学的予防の必要がある
。さらに好ましくは、その化合物を、約１０ｍｇ／ｋｇから約３００ｍｇ／ｋｇ
までの用量範囲で投与する。

【００３８】 本発明のさらに別の具体例では、個体に、ここに開示される２つまたはそれ以
上のレチノイド化合物を組合わせて投与することによって、新生物形成症状を有
する個体を治療する提供された方法がある。その混合は、さらに４−ヒドロキシ
フェニルレチナミドを含みうる。さらに好ましくは、個体は、白血病につての治
療の必要があるか、または癌化学的予防の必要がある。

【００３９】 したがって、以下の請求項に示されるとおりここに開示されるＵＡＢ８および
他の化合物の有効量を個体に投与する段階を含むことを特徴とする、前記新生物
形成症状を示す個体を処置する提供された方法がある。さらに、この化合物は、
４−ヒドロキシフェニルレチナミドを含みうる。そのように処置されうる代表的
新生物形成症状としては、皮膚癌、胸部癌、膀胱癌、前立腺癌、肺癌、結腸癌お
よび白血病が挙げられる。好ましくは、化合物は、約１０ｍｇ／ｋｇから約３０
０ｍｇ／ｋｇまでの用量で投与される。

【００４０】 本発明は、ＵＡＢ８／類縁体およびＵＡＢ３０／類縁体から構成される群から
選択される２つまたは２つ以上のレチノイド化合物を混合してその個体に投与す
る段階を含むことを特徴とする、新生物形成症状を有する個体を処置する方法に
も向けられる。その混合は、さらに４−ヒドロキシフェニルレチナミドを含みう
る。さらに好ましくは、その個体は、白血病についての治療の必要があるか、ま
たは癌化学的予防の必要がある。そのように処置されうる代表的新生物形成症状
としては、皮膚癌、胸部癌、膀胱癌、前立腺癌、肺癌、結腸癌および白血病が挙
げられる。好ましくは、化合物は、約１０ｍｇ／ｋｇから約３００ｍｇ／ｋｇま
での用量で投与される。

【００４１】 以下の実施例は、本発明の種々の具体例を例示する目的で示され、そしていか
なる形態で本発明を制限することも意図されない。

【００４２】 （実施例１） （レチノール酸類縁体の化学的性質） ^１Ｈ ＮＭＲを、ＣＤＣｌ_３中で４００．１ＭＨｚ（ブルッカーＤＲＸ分光計
）で得た。様々な混合時間（２５０および２０００ｍｓの間）で、２Ｄ相の感受
性ＮＯＥＳＹ実験を使用する脱気サンプルでＮＯＥ実験を行った。特に、１秒の
混合時間は、相サイクリングのために１６パルスおよび２回のダミースキャンで
使用された。データは、各次元で０．３Ｈｚのライン拡張で処理され、そしてゼ
ロ補充して、５１２×４０９６の２Ｄ計数計プロットを得た。陰性交差ピークの
集約的強度は、標準ブルッカーＮＭＲソフトウエア特性を使用して測定された。

【００４３】 ＵＶ／ビス（可視光）・スペクトルは、シクロヘキサンまたはメタノール溶液
（フィシャー（Ｆｉｓｈｅｒ）、光学グレード）中のＡＶＩＶ１４ＤＳ分光光度
計で記録させた。ＩＲスペクトルは、薄層フィルム上のニコレットのＦＴ ＩＲ
分光光度計を用いて記録された。ＨＰＬＣ分離は、２５ｍｌのポンプヘッドおよ
びＩＳＣＯ Ｖ^４可変波長検出器を用いて、ギルソンＨＰＬＣ勾配システムで行
われた。使用されたカラムは、５ｍｌ／分の流速で、そして３４０ｎｍでＵＶ／
可視光検出によって監視するワットマンのパーティシル１０Ｍ２０／５０（５０
０−×２２ｍｍ直径（ｉ．ｄ．））であった。予め被覆した２５０μｍのシリカ
ゲルＧＦガラス板（アナルテック・インク．（Ａｎａｌｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）；
５×１０ｃｍ）上でＴＬＣクロマトグラフィーを行った。溶媒および液体出発材
料は、使用前に蒸留された。脱酸素した溶媒、不活性ガス（Ｎ_２）下、そして抑
えた照明で、反応および精製を行った。図３に示される略図の中間体および生成
物についての選択データは、表１に含まれる。

【００４４】（２Ｚ，４Ｅ）−４−（３’，４’−ジヒドロ−１’（２’Ｈ）−ナフタレン− １’−イリデン）−３−メチル−２−ブテン酸（（９Ｚ）−２） 亜鉛粉（１．７５ｇ、２６．８ミリモル）を、２分間、室温で５％ＨＣｌ（５
ｍｌ）と攪拌させた。混合液を静置させ、そしてその液体を、ピペットで注意深
く除去した。類似の方法で、窒素下、水（３×５ｍｌ）、アセトン（３×５ｍｌ
）、およびエーテル（２×８ｍｌ）でそのＺｎを洗浄した。残りのエーテルを窒
素の蒸気下で除去させた後、そのＺｎ粉を含有するフラスコを、ブンゼンバーナ
ーの炎で３０秒間強力に加熱した。冷却Ｚｎ粉を、無水ジオキサン（３ｍｌ）で
懸濁させ、そして攪拌懸濁液を還流するまで加熱した。新たに蒸留したα−テト
ラロン（０．５２０ｇ、３．５６ミリモル）、エチル・ブロモセネシオエート（
１．４７ｇ、７．１２ミリモル）、および無水ジオキサン（２．５ｍｌ）の溶液
を、窒素下で製造し、そしてこの溶液の一部（０．５ｍｌ）を、加熱Ｚｎ懸濁液
に加えた。これは、発熱反応を生じ、そしてその後、α−テトラロンを含有する
溶液の残りを、１０分間、還流を制御するのに十分な速度で添加した。最終反応
混合液を、８時間、還流で攪拌し、そしてその後、室温まで冷却させた。水（５
ｍｌ）を添加し、混合液を２０分間攪拌し、そしてエーテル（２０ｍｌ）を添加
した。懸濁液をセライトの床を通して濾過し、そして濾過物を、エーテル（４０
ｍｌ）で十分に洗浄した。濾液を、１５％ＨＣｌ（４０ｍｌ）、水（４０ｍｌ）
、１ＮのＮａＯＨ（４０ｍｌ）および追加量の水（３０ｍｌ）で抽出させた。塩
基洗浄液および最終水洗浄液を合わせて、ｐＨ１−２に、１５％ＨＣｌで調整し
、そしてエーテル（２×１００ｍｌ）で抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ_２Ｓ
Ｏ_４）、そして真空下で濃縮させて（９Ｚ）−２を黄色結晶（０．７０ｇ、８６
％収率）として得た。融点１５３−１５４℃（１：１ヘキサン−酢酸エチル）。

【００４５】（２Ｚ，４Ｅ）−および（２Ｅ，４Ｅ）−４−（３’，４’−ジヒドロ−１’（ ２’Ｈ）−ナフタレン−１’−イリデン）−３−メチル−２−ブテン−１−オー ル（（９Ｚ）−および（全Ｅ）−３） 無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）中に酸（９Ｚ）−２（０．１１ｇ、０．４８ミリモル
）を含む溶液を、−７８℃まで冷却させ、そして１ＭのＬｉＡｌＨ_４／エーテル
（０．５０ｍｌ、０．５０ミリモル）を、窒素下、攪拌しながら滴加した。乾燥
氷冷アセトン浴を取除き、そして反応混合液を、室温にさせ、そして３時間攪拌
させた。反応混合液を、０℃に冷却し、そしてメタノール（０．２ｍｌ）、続い
て１０％ＨＣｌ（１０ｍｌ）を滴加した。これを、室温まで加温させ、そして混
合液を、エーテル（２×２０ｍｌ）で抽出させた。エーテル層を、ブライン（１
×２０ｍｌ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして真空下で濃縮させて
油状残渣（０．１１３ｇ）を得た。これを、フラッシュシリカゲルカラム（１×
３０ｃｍ）に載せ、そして３０％のＥｔ_２Ｏ−ヘキサンで溶出させて、１：１混
合物の（９Ｅ）−および（全Ｅ）−３（０．０６８ｇ、６７％収率）を得た。ア
ルコール混合液を、さらに精製することなしに、この形態で行った。

【００４６】（２Ｚ，４Ｅ）−および（２Ｅ，４Ｅ）−４−（３’，４’−ジヒドロ−１’（ ２’Ｈ）−ナフタレン−１’−イリデン）−３−メチル−２−ブテナール（（９ Ｚ）−および（全Ｅ）−４） 窒素下、０℃で、乾燥Ｃｈ_２Ｃｌ_２（１０ｍｌ）で、アルコール３（０．０６
５ｇ、０．３０ミリモル）の攪拌溶液に、４Ａモレキュラーシーブ（１．５ｇ）
を加え、続いて活性化ＭｎＯ_２（０．５３ｇ、６．１ミリモル）を加え、そして
混合物を、３時間、０℃で攪拌した。反応混合液を、フラッシュシリカゲルの床
を通して濾過し、そして濾過物を、冷５０％ＣＨ_２Ｃｌ_２／エーテル（１００ｍ
ｌ）で洗浄した。濾液を、真空下で、乾固するまで濃縮して、残渣油状物を得た
（０．０５）。これを、フラッシュシリカゲルカラム（１×１５ｃｍ）に載せ、
そして１０％Ｅｔ_２Ｏ−ヘキサンで溶出させて、（９Ｚ）−４（０．０１８ｇ）
、（全Ｅ）−４（０．０１６ｇ）および出発アルコール３（０．００７ｇ）を得
た。４の総収量は、０．０３４ｇであった（未回収の出発アルコールに基づいて
５９％収率）。

【００４７】アルデヒド４の個々の異性体のオレフィン化のための一般的手段 ＮａＨ（１．２当量）を、乾燥ＴＨＦで、三回洗浄させて、鉱物油を排出させ
た。Ｎ_２下、０℃で、ＴＨＦ中の新たに蒸留したトリエチル・ホスホノセネシオ
エート（１．１当量）を添加した。混合液を、３０分間攪拌させた後、ＨＭＰＡ
（０．２当量）、続いてエーテル（９Ｚ）−または（全Ｅ）−４（１当量、最終
濃度０．８Ｍ）を添加した。混合液を、１２０分間、室温で反応させた後、水を
添加し、そして反応混合液を、エーテルと水との間に分配した。エーテル層を、
一回ブラインで洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、そして真空下で濃縮させて
、主に２つの配座の異性体の混合物としてエステルを得た。この方法によって、
以下のものを製造した。

【００４８】（２Ｅ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）−および（２Ｚ，４Ｅ，６Ｚ，８Ｅ）エチル・８− （３’，４’−ジヒドロ−１’（２’Ｈ）−ナフタレン−１’−イリデン）−３ ，７−ジメチル−２，４，６−オクタトリエノエート（（９Ｚ）−および（９Ｚ ，１３Ｚ）−５） この製造には、乾燥ＴＨＦ（１ｍｌ）中のＮａＨ（０．０６０ｇ、２．５ミリ
モル）の懸濁液、乾燥ＴＨＦ（１ｍｌ）中のトリエチル・ホスホノセネシオエー
ト（０．１４ｇ、０．５３ミリモル）の溶液、ＨＭＰＡ（０．０４１ｇ、０．２
１ミリモル）、および乾燥ＴＨＦ（１ｍｌ）中の（９Ｚ）−４（０．０８９ｇ、
０４２ミリモル）の溶液が使用されて、エステル（９Ｚ）−および（９Ｚ，１３
Ｚ）−５の２：１混合物（０．１２ｇ、７８％収率）を得た。この混合液を、０
．５％Ｅｔ_２Ｏ、ヘキサン中の．０１％ＴＨＦを用いたシリカゲル上のＨＰＬＣ
によって製造した。

【００４９】（２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ，８Ｅ）−および（２Ｚ，４Ｅ，６Ｅ，８Ｅ）エチル・８− （３’，４’−ジヒドロ−１’（２’Ｈ）−ナフタレン−１’−イリデン）−３ ，７−ジメチル−２，４，６−オクタトリエノエート（（全Ｅ）−および（１３ Ｚ）−５） この製造には、乾燥ＴＨＦ（１ｍｌ）中のＮａＨ（０．０５０ｇ、２．１ミリ
モル）の懸濁液、乾燥ＴＨＦ（１ｍｌ）中のトリエチル・ホスホノセネシオエー
ト（０．１１ｇ、０．４０ミリモル）の溶液、ＨＭＰＡ（０．０４８ｇ、０．２
２ミリモル）、および乾燥ＴＨＦ（１ｍｌ）中の（全Ｅ）−４（０．０６５ｇ、
０．３１ミリモル）の溶液が使用されて、エステル（全Ｅ）−および（１３）−
５の２：１混合物（０．１２ｇ、７８％収率）を得た。この混合液を、１％Ｅｔ _２ Ｏ、ヘキサン中の０．５％ＴＨＦを用いたシリカゲル上のＨＰＬＣによって分
離させた。

【００５０】エステル５の個々の異性体の加水分解のための手段 メタノール（最終濃度０．０６１Ｍ）中のエステル５（１当量）の溶液に、２
ＭのＫＯＨ（１０当量）の水溶液を添加した。この溶液を、還流下で加熱し、そ
してＴＬＣによって反応進行を監視した。９０分後、熱溶液を、氷（４０ｇ）の
ビーカーに注ぎ、そしてｐＨ２まで、１０％ＨＣｌで酸性化させた。その後、混
合物を、Ｅｔ_２Ｏで抽出させ、そしてそれをブラインで洗浄し、乾燥（Ｎａ_２Ｓ
Ｏ_４）させ、そして減圧下で濃縮させて、生成物を得た。ＮＭＲは、加水分解が
異性化なしに起こることを示した。以下の酸を、この方法によって合成した。

【００５１】（２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ，８Ｅ）−８−（３’，４’−ジヒドロ−１’（２’Ｈ）− ナフタレン−１’−イリデン）−３，７−ジメチル−２，４，６−オクタトリエ ン酸（（全Ｅ）−ＵＡＢ３０） この製造には、水（２ｍｌ）中のＫＯＨ（０．２５８ｇ、４．６１ミリモル）
の溶液、およびメタノール（１０ｍｌ）中のエステル（全Ｅ）−５（０．１２２
ｇ、０．３７８ミリモル）の温溶液が利用されて、黄色固形物として酸（全Ｅ）
ＵＡＢ３０（０．１０４ｇ、９３％収率）を供した。融点１９２−１９７℃（シ
クロヘキサン）。

【００５２】（２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ，８Ｅ）−８−（３’，４’−ジヒドロ−１’（２’Ｈ）− ナフタレン−１’−イリデン）−３，７−ジメチル−２，４，６−オクタトリエ ン酸（（９Ｚ）−ＵＡＢ３０） この製造には、水（１ｍｌ）中のＫＯＨ（０．１５ｇ、２．８ミリモル）の溶
液、およびメタノール（３ｍｌ）中のエステル（９Ｚ）−５（０．０７３ｇ、０
．２３ミリモル）の温溶液が利用されて、黄色固形物として酸（９Ｚ）ＵＡＢ３
０（０．０６５ｇ、９８％収率）を供した。融点１８２−１８５℃（シクロヘキ
サン）。

【００５３】（２Ｅ，４Ｅ，６Ｅ，８Ｅ）−８−（３’，４’−ジヒドロ−１’（２’Ｈ）− ナフタレン−１’−イリデン）−３，７−ジメチル−２，４，６−オクタトリエ ン酸（（１３Ｚ）−ＵＡＢ３０） この製造には、水（１ｍｌ）中のＫＯＨ（０．０８５ｇ、１．５０ミリモル）
の溶液、およびメタノール（４ｍｌ）中のエステル（１３Ｚ）−５（０．０４０
ｇ、０．１２ミリモル）の温溶液が利用されて、黄色固形物として酸（１３Ｚ）
ＵＡＢ３０（０．０３４ｇ、９３％収率）を供した。融点１８０−１８５℃（シ
クロヘキサン）。

【００５４】 （実施例２）レチノール酸類縁体の生物学 若鶏の皮膚のＣＲＡＢＰ結合アッセイで、放射性標識競合アッセイ（８−１０
）を用いてＣＲＡＢＰ−ＩＩに結合するレチノール酸についてのＩＣ_５０値を測
定した。ＲＡＲおよびＲＸＲを用いたレチノイドについてのＩＣ_５０値を、放射
性標識競合アッセイ（８−１０）で測定した。ＣＶ−１細胞を使用して、核内レ
セプター転写活性アッセイを行った。基本的にＡｌａｍ（９）らによって記述さ
れるとおり、ＤＮＡプラスミドを用いたこれらの細胞の一過性形質移入を行った
。マウスの皮膚の抗乳頭腫アッセイでは、マウスの腹部皮膚でのレチノイド腫瘍
阻害についてのＥＤ_５０値を測定した。先にＭｕｃｃｉｏら（８）によって報告
されたとおり、ＶｅｒｍａおよびＢｏｕｔｗｅｌｌ（１４）によって開発された
手段の修正法にしたがって、レチノイドによるマウスの皮膚乳頭腫の阻害を行っ
た。

【００５５】 （実施例３）細胞 Ｗａｘｍａｎ博士がＭ．Ｌａｎｏｔｔｅ博士からＮＢ４細胞を受取った後、そ
れをＷａｘｍａｎ博士から得た。ＮＢ４細胞を、１０％（ｖ／ｖ）ＦＢＳ（胎仔
ウシ血清）（ジブコ）および１０ｍＭ４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペ
ラジンエタン・スルホン酸（ｐＨ７．３）で補足したＲＰＭＩ１６４０（ジブコ
、ニューヨーク州グランド・アイランド）中の培地で維持させた。その細胞を、
空気中の５％ＣＯ_２の湿潤雰囲気下、３７℃で育成させた。細胞密度は、電気的
粒子計測器（コールター・エレクトロニック（Ｃｏｕｌｔｅｒ ｅｌｅｃｔｒｏ
ｎｉｃ）、フロリダ州ハイアリーア（Ｈｉａｌｅａｈ、ＦＬ））で、そして細胞
生存性を、トリパン青染料排除を用いて概算した。ＮＢ４細胞は、ホエスト３３
２５８蛍光染料および寒天培養検出法（Ｄｅｌ Ｇｉｕｄｉｃｅら、モノグラフ
番号５（１９８４））を用いて、マイコプラズマの実験室、すなわち、ＰＲＩ／
ＤｙｎＣｏｒｐ，ＮＣＩ−フレデリック癌研究および開発センター（メリーラン
ト州フレデリック（Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ，ＭＤ））によって評価されるとおり、
マイコプラズマなしであった。

【００５６】 （実施例４）ＣＶ−１細胞中の（全Ｅ）−ＲＡ 誘導ＲＡＲα転写活性の阻害 ＲＡＲαの転写におけるＵＡＢ３０レチノイドのアンタゴニストとしての影響
を、ＣＶ−１細胞で測定した。その方法は、転写アッセイを行うのに使用される
ものとほぼ一致する。これらの研究では、Ｖａｅｚｉら（１１）によって記述さ
れるとおりチミジンキナーゼプロモーターと一緒にＴＲＥｐａｌを含むＣＡＴレ
ポーター遺伝子［（ＴＲＥｐａｌ）_２−ｔｋ−ＣＡＴ］が利用された。形質移入
の２４時間後、細胞を、（全Ｅ）−ＲＡ（１−１０００ｎＭ）のみで、または指
示ＵＡＢレチノイド（１００または１０００ｎＭ）と一緒で処理した。２４時間
後、細胞を収穫し、そして形質移入の有効性についてのβ―ｇａｌ活性で修正し
た後、転写の影響を、相対的ＣＡＴ活性を測定した。類似の研究を、既知ＲＡＲ
αアンタゴニストＲｏ−４１−５２５３で行った。全ての実験を三重に行い、そ
してデータを平均化させた。アンタゴニストは、レチノイドを含まない陽性対照
と比較するように、レチノイドの存在下で（全Ｅ）−ＲＡによって誘導される転
写の相対的ＣＡＴ活性を低下させるとして定義された。（全Ｅ）−ＵＢＡ３０お
よびＲｏ−４１−５２５３の両方が、転写を誘導するのに使用される（全Ｅ）−
ＲＡの各濃度でアンタゴニストを示したが、しかしその影響は、（全Ｅ）−ＲＡ
が５０ｎＭであるときに最も注目された。

【００５７】 （実施例５）ＨＬ−６０およびＮＢ４細胞の分化のレチノイド誘導 ヒト白血病セルラインＨＬ−６０およびＮＢ４を、末端分化を誘導するレチノ
イドの能力を測定するのに使用した。両方のセルラインは、優先的に前骨髄球性
であり、そして成熟顆粒球の多くの特徴を示す細胞に成熟させるレチノール酸に
よって誘導される。この分化の誘導は、レチノール酸類縁体の生物学的活性の内
の１つを分析するため基本原理である。分化アッセイについては、ＨＬ−６０ま
たはＮＢ４細胞を、Ｂｒｅｉｔｍａｎ（１５）によって詳説されるとおり胎仔ウ
シ血清を伴う栄養培地で育成させた。

【００５８】 全トランスレチノール酸およびニトロブルーテトラゾリウム（ＮＢＴ）をシグ
マ・ケミカル・カンパニ−．（ミズーリー州セントルイス（Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ、
ＭＯ））から購入した。ＵＡＢ８およびＵＡＢ３０の全トランスおよび９−シス
異性体を、先に記述された方法（Ａｌａｍら、１９９５年：Ｍｕｃｃｉｏら、１
９９８年）によって合成した。ＡＴＲＡおよびＵＡＢレチノイドを、０．１から
１０ｍＭまでの濃度で、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解させ、そして
その後細胞処理のために１０００倍に希釈した。先に記述された方法（Ｂｒｅｉ
ｔｍａｎ、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．、１９０巻、１１８頁（１９９０
年）；ＴａｉｍｉおよびＢｒｅｉｔｍａｎ、Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｃｅｌ
ｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２３０巻、６９頁（１９９７年））によって、ＮＢ４細
胞育成および分化を行った。インキュベーションの３日後、細胞分化を、ＮＢＴ
を還元させることから生じる細胞結合ニトロブルージホルマザン沈殿を示す細胞
の含有率としてＮＢＴを還元する能力によって評価した（Ｂｒｅｉｔｍａｎ、Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．、１９０巻、１１８頁（１９９０年））。この
マーカを得る細胞の含有率を、顕微鏡で測定した。その後、陽性細胞の含有率を
、イソボルの形成に使用されるＥＤ_５０およびＥＤ_３０値を決定するレチノイド
濃度の係数としてプロットさせた。

【００５９】 （実施例６）ＲＡＲアゴニストおよびアンタゴニストのための一過性形質移入アッセイ ＲＡＲαまたはＲＸＲαのいずれかによって指向される転写のＡＴＲＡまたは
ＵＡＢレチノイド誘導についての一過性形質移入アッセイを、先に報告された方
法（Ａｌａｍら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、３８巻、２３０２頁（１９９５年）
）を用いて測定した。これらのアッセイを、ＲＡＲまたはＲＸＲ遺伝子、および
チミジンキナーゼプロモーターと共にＴＲＥｐａｌを含むクロラムフェニコール
アセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）レポーター遺伝子［（ＴＲＥｐａｌ）_２ −ｔｋ−ＣＡＴ］を用いてＣＶ−１細胞で行った。形質移入の２４時間後、細胞
を、レチノイドの単回投与で処理し、そして細胞抽出物を、ｂ−ガラクトシダー
ゼおよびＣＡＴ活性について分析した。ＲＡＲαの転写におけるＵＡＢ３０レチ
ノイドのアンタゴニストの効果も、ＣＶ−１細胞で測定した。その方法は、転写
アッセイを行うのに使用したものとほぼ一致する。これらの研究では、ＣＡＴレ
ポーター遺伝子［（ＴＲＥｐａｌ）_２−ｔｋ−ＣＡＴ］が利用された。形質移入
の２４時間後、細胞を、ＡＴＲＡ（１から１０００ｎＭまで）のみで、または指
示ＵＡＢレチノイド（１００または１０００ｎＭ）と一緒で処理した。２４時間
後、細胞を収穫し、そして形質移入の有効性についてβ―ガラクトシダーゼ活性
で修正した後、転写の影響を、相対的ＣＡＴ活性で測定した。類似の研究を、既
知ＲＡＲαアンタゴニストＲｏ−４１−５２５３で行った。実験を三重に行い、
そしてデータを平均化させた。アンタゴニストは、レチノイドを含まない陽性対
照と比較するとおり、レチノイドの存在下でＡＴＲＡによって誘導される転写の
相対的ＣＡＴ活性を低下させるとして定義された。

【００６０】 （実施例７）抗−ＡＰ−１活性のための一過性形質移入アッセイ ＡＰ−１結合部位を含むコラゲナーゼプロモーターが、指示レチノイドレセプ
ター発現ベクターと一緒にＣＡＴ遺伝子と結合される−７３Ｃｏｌ−ＣＡＴで、
ＨｅＬａ細胞を、形質移入させた。形質移入の２４時間後、細胞を、０．５％胎
仔ウシ血清で維持させ、そして２４時間、ＴＰＡ（１００ｍｇ／ｍＬ）と共に、
またはなしで指示レチノイド濃度で処理した。細胞を、収穫し、そしてＣＡＴ活
性を測定し、そして形質移入の有効性について対応のβ−ガラクトシダーゼ活性
で補正した。

【００６１】 （実施例８）ＪＭＭＬ自発的ＣＦＵ−ＧＭコロニー形成の阻害 （全Ｅ）−および（９Ｚ）−ＲＡ、ＵＡＢ８、およびＵＡＢ３０レチノイドを
、Ｅｍａｎｕｅｌら（５，１６）によって記述されるとおり３つのＪＭＭＬ患者
サンプルでの自発的ＣＦＵ−ＧＭコロニー成長を阻害するそれらの能力について
試験した。簡潔に、親の同意を得て、そして研究所の検討委員会の認可を得た後
、ＪＭＭＬ末梢血および骨髄サンプルを、患者から採取し、そしてバーミンガム
にあるアラバマ大学（ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｌａｂａｍａ）
に一夜配送によって送られた。単核細胞を、密度勾配遠心分離によって分離し、
洗浄し、そして適量にして凍結させた。適量のＪＭＭＬ患者サンプルを、後に融
解させ、洗浄し、そして１５％胎仔ウシ血清と同様に、栄養を補足したマッコイ
の５Ａ培地での０．３％軟質寒天クローナルアッセイで設定した。その培養基に
は、なんら成長因子または他の内在性刺激物は加えられなかった。ＵＡＢレチノ
イドおよびレチノール酸異性体は、１００％エタノールまたはＤＭＳＯのいずれ
かに溶解させた。適切な希釈を行い、そして予測エタノールまたはＤＭＳＯ濃度
を使用した対照を、平行して立ち上げた。軟質寒天アッセイの開始の２４時間後
、軟質寒天の頂部にレチノイド溶液をピペットで取り、そしてその溶液を寒天に
入れさせ、そして拡散により細胞と相互作用させることによって、可変用量のレ
チノイドを一回のみ添加した。５％ＣＯ_２での湿潤雰囲気下、１４日間、３７℃
で培養物をインキュベートした。ＣＦＵ−ＧＭコロニー（１コロニーは、＞４０
細胞を示す）を、等級分けし、そして自発的ＣＦＵ−ＧＭコロニー成長の阻害の
生成量を、（１３Ｚ）−ＲＡに比較した。

【００６２】 （実施例９）ＭＮＵ−誘導した哺乳類癌でのＵＡＢ−３０の効力 ハーラン・スプラーグ−ダウレイ，インク．（Ｈａｒｌａｎ Ｓｐｒａｇｕｅ
−Ｄａｗｌｅｙ，Ｉｎｃ．）から、雌スプラーグ−ダウレイ・ラット（ウイルス
不含コロニー番号２１８）を得た。ラットは、２８日齢で到着し、そして到着の
日にテクラッド（４％）食餌にかけた。５０日齢で、ラットは、頚静脈を介して
メチルニトロソウレア（ＭＮＵ）（５０ｍｇ／ｋｇ体重）の単回の静脈注射を受
けた。ＭＮＵを、アッシュ−スティーブンス，インク（Ａｓｈ−Ｓｔｅｖｅｎｓ
，Ｉｎｃ．）から購入した。５３日齢で始めて、ラットに、食餌（２００ｍｇ／
ｋｇ供給）で（９Ｚ）−ＵＡＢ３０を投与した。ラットを、週に一度秤量し、週
に二回哺乳類腫瘍について触診し、そして毒性の兆候について毎日調べた。ラッ
トの体重を、（９Ｚ）−ＵＡＢ３０の投与開始後、５週、１０週および１５週で
統計的に分析した。ＭＮＵ誘導の１４０日後に、研究を終了させた。全哺乳類腫
瘍を、解剖で取除いたときに秤量し、そして組織学的に分類した。

【００６３】 （実施例１０）分子モデル化 レチノイド構造は、シリコンのグラフィック・インディゴ２端末でシビル（Ｓ
ｙｂｙｌ）版６．２（トリップス・インク．（Ｔｒｉｐｓ Ｉｎｃ．）、ミズー
リー州セントルイス）で作成された。（９Ｚ）−２の構造は、最近報告されてい
るＸ線結晶構造（１７）を使用して構築させた。この構造は、８−ｓ−トランス
−コンフォメーションで結晶化された。８−ｓ−シス−コンフォメーションを生
じるために、この構造は、Ｃ_８−Ｃ_９結合の周囲を回転させ、続いて、アリンガ
ーのＭＭ３（９４）場を用いたエネルギー最小化を行った。最終のＵＡＢ３０酸
の構造は、２のこの８−ｓ−シス−および８−ｓ−トランス−構造から作成され
た。熱力学的パラメーターを、先に記述される方法（８）にしたがって計算した
。

【００６４】 （実施例１１）新たな化合物の生成 図３〜５では、ＵＡＢ３０を製造するのに使用される方法が要約される。その
アプローチ法は、α−テトラロンが、出発エノン（図１で１）として使用される
以外は、アルキル置換ＵＡＢレチノイド（例えば、ＵＡＢ８）（９，１０）の合
成について先に報告されたものと類似であった。適切なケトンで始めることによ
って、一般構造ＩおよびIIIに属する全レチノイドを作成するために類似の方法 を使用した（図１および２）。一般構造IIおよびIV（図１および２）については
、化合物２（図３〜５）に関連したカルボン酸中間体を、ヘキサクロロアセトン
の存在下で、４−アミノ安息香酸メチルと反応させて、アミドを得、そしてメチ
ルエステルを、続いて鹸化させて、構造IIおよびIVを示す最終産物を得た。

【００６５】 図３〜５にある原子の番号づけは、レチノール酸との十分な比較を可能にする ために系統だっていない。前に記したとおり（９）、δ−ラクトン中間体は、こ
れらの条件下では検出されなかったが、しかし（９Ｚ）−２の生成での中間体で
あると推定された。関連化合物についての初期の報告（８−１０）とは異なり、
酸（９Ｚ）−２のアルコール３への還元は、異性化によって達成されて、全Ｅ−
および９Ｚ−異性体の１：１混合物を得た。この混合物を、ＭｎＯ_２で酸化させ
て、アルデヒド（４）の比較可能な混合物を得た。そしてそれを、シリカゲル上
でフラッシュクロマトグラフィーを用いて生産的に分離させた。４の各純粋な異
性体を、示されるとおりオレフィン化させて、（９Ｚ）−および（９Ｚ，１３Ｚ
）−５または（全Ｅ）−および（１３Ｚ）−５のいずれかの混合物を得た。記述
されたもの（８−１１）に類似の方法を用いて、各混合物を、シリカゲル（前者
については０．５％Ｅｔ_２Ｏ、ヘキサン中の０．１％ＴＨＦ、そして後者につい
ては１％Ｅｔ_２Ｏ、ヘキサン中の０．５％ＴＨＦ）上でＨＰＬＣによって生産的
に分離させた。その後、エステル５の個々の異性体を、Ｅ／Ｚ−異性化（１２）
なしにＫＯＨ中の対応の酸に加水分解させた。最終酸についての異性純度（＞９
７％）は、ＮＭＲおよび逆相ＨＰＬＣ（８−１１）によって確認された。図１中
の中間体および生成物についての実験の収量および選択データは、表１に要約さ
れる。精製異性体のＵＶ／可視光スペクトルのデータは、表１に示され、そして
完全な^１Ｈ ＮＭＲレポートは、表２に含まれる。

【００６６】

【表１】 ^ａ値は、溶出剤としてエーテル／ヘキサンを用いたシリカゲル上である：３０％
Ｅｔ_２Ｏ、３および４；２０％Ｅｔ_２Ｏ、２；１０％Ｅｔ_２Ｏ、５およびＵＡＢ
３０。^ｂ最大波長（ｎｍ）および吸光係数（Ｍ^−１ｃｍ^−１）を、室温で、シク
ロヘキサン（５）またはメタノール（ＵＡＢ３０、４）中で得た。ＮＤ：測定さ
れず。^ｃＩＲ収縮頻度（ｃｍ^−１）を、ＮａＣｌディスク上の薄層フィルムとし
て得た。化合物３ＯＨ収縮頻度は、括弧に入れて報告される。^ｄＥ／Ｚ異性体の
混合物についての収率。^ｅエステル５は、５ｍｌ／分の流速（９）で、１．０％
Ｅｔ_２Ｏおよびヘキサン中の０．５％ＴＨＦを用いて、ワットマンのパーチシル
１０Ｍ２０／５０正常相カラム上で生産的に分離させた。滞留時間は、１３８．
６分（１３Ｚ）、１４０．２分（９Ｚ）、および１４２．６分（全Ｅ）であった
。再注入画分は、３００または３４０ｎｍのいずれかで監視するとき１つの異性
体を示した。^ｆＵＡＢ３０異性体を、アセトニトリル（３：７）中の１％酢酸を
用い、１．０ｍｌ／分の流速で、セフェリソーブＯＤＳ Ｃ−１８カラムを用い
た逆相クロマトグラフィーによって異性純度について分析した。３４０ｎｍ検出
（ここで、各異性体は、非常に類似の吸光係数を示した）を用いて、異性比は、
統合ピーク領域から測定した。異性比は、各異性体について９５％より大きかっ
た。

【００６７】

【表２】 （実施例１２）構造研究 （９Ｚ）−２のＸ線結晶構造は、最近報告され（１７）、そしてそれは、８−
ｓ−トランス−立体配座で結晶化した。分子機関によって作成されるものと、（
９Ｚ）−２のＸ線構造を比較するために、アリンガーのＭＭ３（９４）計算を、
ＵＡＢ１−ＵＡＢ８レチノイド（８）の構造を計算するために記述されたとおり
行った。この中間体の計算した構造は、固形状態の構造に非常に類似した。Ψ_{５ ，６，７，８} 捩り角は、アルキル置換基（８）を有する他のＵＡＢレチノイドの
ように、各構造でほぼ平面状（−１６０°）であった。Ψ_{７，８、９，１０}捩り
角は、分子機構の構造については、−１３３°であり、そして結晶構造では１３
４．３°であった。この角度は、Ｃ２’メチレンおよびＣ１９メチル基の間の立
体の相互作用のため、平面でない。（９Ｚ）−および（全Ｅ）−ＵＡＢ３０レチ
ノイドの分子機構の構造も作成された。ＵＡＢ８異性体（８）のものと比較する
と、予測される低エネルギーのコンフォーマーは、非常に類似する。ＵＡＢ３０
レチノイドの芳香族環は、ＵＡＢ８のアルキル基（Ｒ_１＝Ｅｔ、Ｒ_２＝Ｐｒ）の
ものと非常に類似する空間を占める。

【００６８】 ８−ｓ−シス−コンフォーマーが、様々なＵＡＢレチノイド（８）についての
８−ｓ−トランス−コンフォーマーと同じくらい安定であったことが先に注目さ
れた。ＵＡＢ３０異性体の８−ｓ−シス−コンフォーマーの低エネルギー構造も
計算された。Ψ_{５，６，７，８}捩り角は、８−ｓ−トランス−コンフォーマーの
ものとほぼ一致し、そしてΨ_{７，８、９，１０}捩り角は、−７０°であった。さ
らに、８−ｓ−シス−コンフォーマーは、対応の８−ｓ−トランス−コンフォー
マーよりわずかにいっそう安定であった（ΔＧ＝１ｋｃａｌ／モル）。

【００６９】 核内オーバーハウザー実験（ＮＯＥＳＹ）（２Ｄ）は、ＣＤＣｌ_３中で（９Ｚ
）−２で行われた。明らかなＮＯＥは、Ｈ−１９とＨ−２’の間（８−ｓ−トラ
ンスーコンフォーマーと一致する）およびＨ−１９とＨ−８の間（８−ｓ−シス
ーコンフォーマーと一致する）で観察された。Ｈ−１９メチルプロトンとＨ−１
０との間（９Ｚ−形状を示す）で見られる非常に強力な交差ピーク強度と比較し
て、Ｈ−１９／Ｈ−２’とＨ−１９／Ｈ−８の間で観察される負の交差ピークの
強度は、この統合強度の約半分であった。類似の結果が、ＵＡＢ３０の全Ｅ−お
よび９Ｚ−異性体でのＮＯＥＳＹ実験から得られた。ＮＯＥ結果は、これらのレ
チノイドのポリエン鎖のＣ８−Ｃ９結合の周りの２つの低エネルギーコンフォー
マーを確認したＭＭ３計算の支持の状態にある。

【００７０】 （実施例１３）ＣＲＡＢＰ結合アフィニティー ＩＣ_５０値は、放射性リガンドとして［^３Ｈ］−（全Ｅ）−ＲＡを用いたヒナ
ドリの皮膚のＣＲＡＢＰ放射性リガント結合アッセイ（１８）で評価された。１
００倍過剰の未標識ＵＡＢレチノイドで、（全Ｅ）−ＵＡＢ３０が、わずか７５
％まで［^３Ｈ］ＲＡの結合を阻害した。（１３Ｚ）−ＵＡＢ３０（２８％阻害）
および（９Ｚ）−ＵＡＢ３０（５％阻害）は、ＣＲＡＢＰについてアフィニティ
ーが更に低いことを示した。ＲＡ（ＩＣ_５０＝６００ｎＭ）の全Ｅ異性体と比べ
て低いアフィニティーのＵＡＢ３０異性体（ＩＣ_５０＞２０００ｎＭ）は、ＵＡ
Ｂ７およびＵＡＢ８レチノイドが、ＲＡのものと比較できる結合アフィニティー
を示したので、特に驚くべきである。明らかに、これらの基が、溶液内の空間の
類似の領域に配置される場合でさえ、ＵＡＢ３０の芳香族環残渣は、ＣＲＡＢＰ
のＲＡ結合部位にあるＵＡＢ８の塊状のアルキル基と同様に相互作用しない。

【００７１】 （実施例１４）核内レセプター結合アフィニティーおよび転写活性 ＵＡＢ３０の全Ｅ−、９Ｚ−および１３Ｚ−異性体を、ＲＡＲへの［^３Ｈ］−
（全Ｅ）−ＲＡの結合を阻害するそれらの能力について評価した。阻害工程を調
査するために、核内レセプター（ＲＡＲα、ＲＡＲβ、ＲＡＲγおよびＲＸＲα
）を、１０００ｍＭのＵＡＢレチノイドおよび５ｎＭ［^３Ｈ］−（全Ｅ）−ＲＡ
に最初に露出させた。これは、１０００ｎＭ未標識（全Ｅ）ＲＡを使用する陽性
対照と、レチノイドを使用しない対照とを比較した。活性レチノイドについては
、ＩＣ_５０値は、ＵＡＢレチノイドの可変濃度で滴定することによって測定した
。

【００７２】 （全Ｅ）−ＵＡＢ３０は、ＲＡＲに有効に結合する唯一のＵＡＢ３０異性体で
あった。ＲＡＲについてのＩＣ_５０値（３０−５０ｎＭ）は、（全Ｅ）−ＲＡま
たは（全Ｅ）−ＵＡＢ８（表３）についてのものよりわずか約５倍大きく、そし
て（９Ｚ）−ＲＡについてのものと比較できる。（９Ｚ）−ＵＡＢ３０について
のＩＣ_５０値は、＞１０００ｎＭであり、それにより、それは、ＲＡＲレセプタ
ーに結合しないことが示された（表３）。そしてそれは、（９Ｚ）−ＵＡＢ８で
のデータと一致する。ＲＡＲについての低いアフィニティーは、これらのレセプ
ターに、（全Ｅ）−ＲＡとほぼ同様に結合する（９Ｚ）−ＲＡに共有されない。
さらに、（１３Ｚ）−ＵＡＢ３０は、ＲＡＲサブタイプに対する有効性のないバ
インダーであったが、それは、これらの核内レセプター（９）に対する（１３Ｚ
）−ＵＡＢ８の結合特性と異なる。

【００７３】

【表３】 ^ａＩＣ_５０およびＥＣ_５０値は、１および１０００ｎＭの間の濃度を用いて用量
応答曲線のプロビット分析によって計算された。報告されたＩＣ_５０値での標準
誤差は、±２．０ｎＭまたはそれ未満であった。（９Ｚ）−ＲＡによるＲＡＲγ
の活性化について報告されるＥＣ_５０値が±４ｎＭである以外は、報告されたＥ
Ｃ_５０値での標準誤差は、±２．５ｎＭまたはそれ未満であった。^ｂＩＣ_５０値
は、Ａｌａｍら（９）から取られた。

【００７４】 ＵＡＢ３０異性体を、ＲＡＲα−、ＲＡＲβ−およびＲＡＲγ依存性転写活性
を誘導する細胞内のそれらの機能的活性を測定するアッセイで評価した。ＣＶ−
１細胞は、適切なＲＡＲサブタイプおよび（ＴＲＥｐａｌ）_２−ｔｋ−ＣＡＴ（
９，１９）から得られるＤＮＡプラスミドで一過的に形質移入させた。用量応答
曲線を使用して、ＵＡＢ３０異性体のレチノイド誘導転写についてのＥＤ_５０値
を測定し、そしてその後、（全Ｅ）−および（９Ｚ）−ＲＡについて、そして（
全Ｅ）−および（９Ｚ）−ＵＡＢ８について見られるものと比較した（表３）。
（全Ｅ）−ＵＡＢ３０は、ＲＡＲβ依存性レセプターで活性化される転写を誘導
した。しかし、５倍高い濃度は、（９Ｚ）−ＲＡまたは（全Ｅ）−ＵＡＢ８につ
いて観察されるものに類似の活性化を達成するのに必要とされる。（全Ｅ）−Ｕ
ＡＢ３０は、ＲＡＲγ−依存性転写を誘導する上で中程度の活性を表し、そして
ＲＡＲα転写を誘導する活性がなかった。そういうものだから、このＵＡＢ３０
異性体が、ＲＡＲβおよびＲＡＲγサブタイプ選択性およびＲＡＲαアンタゴニ
スト特性を示し、それは、非常に十分なｐａｎ−ＲＡＲアゴニストである（全Ｅ
）−ＵＡＢ８に対比する形態にある。（１３Ｚ）−ＵＡＢ３０は、そのＵＡＢ８
類縁体よりいっそう異なる核内レセプター転写特性を示した。ＲＡＲ依存性遺伝
子発現を誘導する上で活性がなかったのに対して、（１３Ｚ）−ＵＡＢ８は、Ｒ
ＡＲによって指向される遺伝子転写の十分なアクチベーターであった。（９Ｚ）
−ＵＡＢ３０は、ＲＡＲによって指向されるレセプター遺伝子のいっそう乏しい
アクチベーターであった。（９Ｚ）−ＵＡＢ８よりこれらのアッセイでの活性が
いっそう低かった。

【００７５】 ＲＸＲαへのＵＡＢ３０異性体の結合アフィニティーを次に試験した。唯一（
９Ｚ）−ＵＡＢ３０が、ＲＸＲαへの２０ｎＭ［^３Ｈ］−（９Ｚ）−ＲＡの結合
を阻害した（表３）。１００倍過剰の未標識ＵＡＢレチノイドで、（９Ｚ）−Ｕ
ＡＢ３０は、（９Ｚ）−ＲＡに比べて活性の７０％を阻害した。この異性体につ
いてのＩＣ_５０値は、（９Ｚ）−ＵＡＢ８についてのものより良く、そして（９
Ｚ）−ＲＡのものよりただ４倍高かった。他の異性体は、有効性がいっそう低か
った（ＩＣ_５０＞２０００ｎＭ）。（９Ｚ）−ＵＡＢ３０によるＲＸＲα同質二
量体依存性転写活性における影響が、（９Ｚ）−ＲＡによるものより約４倍低か
ったが、（９Ｚ）−ＵＡＢ８によるものより２倍良かった。（９Ｚ）−ＵＡＢ異
性体の内、ＵＡＢ３０は、ＲＸＲを活性化させるための最も強力で、そして選択
性のあるリガンドである。

【００７６】 （全Ｅ）−ＵＡＢ３０は、ＲＡＲα（ＩＣ_５０＝３５ｎＭ）とよく結合したが
、このレセプターを十分に活性化させなかった（ＥＣ_５０＞１０００ｎＭ）ので
、ＲＡＲαアンタゴニストとして作用するその可能性を、次に評価した。１と１
０００ｎＭの間の範囲にある固定された（全Ｅ）−ＲＡ濃度を、２つの濃度の（
全Ｅ）−ＵＡＢ３０（１０または１００ｎＭ）を用いてＲＡＲα同質二量体によ
って指向される転写アッセイで評価した。これらを、（全Ｅ）−ＲＡ単独の陰性
対照およびＲｏ−４１−５２５３を使用する陽性対照である既知ＲＡＲαアンタ
ゴニストと、１０および１００ｎＭで比較した。５０および１００ｎＭ（全Ｅ）
−ＲＡ濃度については、１００ｎＭ（全Ｅ）−ＵＡＢ３０で処置した細胞の相対
的ＣＡＴ活性は、唯一（全Ｅ）−ＲＡを含むものと比較して減少した。ＣＡＴ活
性でのこの減少は、（全Ｅ）―ＵＡＢ３０によるレチノール酸拮抗作用で一定で
あが、これらの影響の規模は、Ｒｏ−４１−５２５３によって示されるものより
２倍低かった。

【００７７】 （実施例１５）マウスの皮膚乳頭腫の化学的予防 ＵＡＢ３０レチノイドを、次に、マウス皮膚（１４）上の乳頭腫の化学的誘導
を予防する上でその活性について評価した。（全Ｅ）−ＲＡおよび（全Ｅ）−Ｕ
ＡＢ８の両方は、この化学的予防アッセイで非常に有効であった。４５．９ナノ
モルの用量で、それらは、腫瘍形成を完全に予防した（レチノール酸については
９５％；ＵＡＢ８については９９％）。これらのレチノイドについてのＥＤ_５０ 値は、３．０（ＲＡ）および２．５（ＵＡＢ８）ナノモルであった（８）。（全
Ｅ）−ＵＡＢ３０は、皮膚抗乳頭腫アッセイでのこのレチノール酸またはＵＡＢ
８異性体より有効性が低かった。それは、４５．９ナノモルで乳頭腫の５９％を
減少させた。容量応答曲線を使用して、ＥＤ_５０は、このレチノイドについて正
確に測定できず、他の周縁で活性なＵＡＢレチノイド（８）の活性を定量する努
力と密着している。先に、高い活性の（全Ｅ）−ＵＡＢ８（Ｒ１およびＲ２で大
型のアルキル基を含む）を、ＲＡＲαのその十分な結合および／または活性化に
対して修正（構造−活性の関係で）した。これらの流れを用いて、（全Ｅ）−Ｕ
ＡＢ３０の活性が減少されるのは、特に、優れたＲＡＲγ活性を示す（全Ｅ）−
ＵＡＢ８との比較の上で、ＲＡＲγを活性化する能力が乏しいこと、および／ま
たはＲＡＲαを活性化する能力の欠如（表３）のためである可能性がある。（９
Ｚ）−ＵＡＢ８異性体は、このアッセイで（９Ｚ）−ＲＡより有効性が低かった
。４５．９ナノモルで腫瘍形成のただ５４％を防止し、（９Ｚ）−ＲＡでの用量
は、非常に活性であった（９５％）（８）。しかし、この低い活性は、このアッ
セイ（８）での（９Ｚ）−ＵＡＢ８のものと比較しうる。（９Ｚ）−ＵＡＢ８お
よび（９Ｚ）−ＵＡＢ３０の両方は、ＲＸＲ選択性レチノイドであるので、それ
らは、ＲＡＲ依存性経路の、特に、ＲＡＲβおよびＲＡＲγ核内レセプターによ
って指向されるものの有効なアクチベーターではない。Ｃｈａｎｄｒａｒａｔｎ
ａら（２０）は、ＲＡＲβおよびＲＡＲγ選択性レチノイドが、皮膚でのＴＰＡ
誘導オルニチンデカルボキシラーゼ（ＯＤＣ）活性の優れた阻害剤であること、
そのアッセイが、皮膚抗乳頭腫アッセイ（１４）と十分に互いに関係づけること
を示した。それらは、これらのＲＡＲβおよびＲＡＲγ選択性レチノイドが、Ｒ
ＡＲα結合を介してＡＰ−１依存性遺伝子発現を拮抗させることによって、生体
内でのＯＤＣ活性の強力な阻害剤であることを示唆した。これがその場合である
と、それにより（全Ｅ）−ＵＡＢ３０（弱いＲＡＲαアンタゴニスト）は、有効
なＡＰ−１アンタゴニストでないが、しかし（全Ｅ）−ＵＡＢ８は、ＲＡＲ同質
二量体（表３）のその例示の強力な転写活性を加える上でＡＰ−１遺伝子転写を
抑制させる活性を示す。

【００７８】 （実施例１６）核内レセプターの形質移入および形質抑制 先に、ＵＡＢ８およびＵＡＢ３０レチノイドは、ＲＡＲおよびＲＸＲ核内レセ
プター結合および転写アッセイ（Ｍｕｃｃｉｏら、１９９８年）で評価した。全
−トランス−ＵＡＢ８は、ＡＴＲＡと類似の特性を示す優れたｐａｎ−ＲＡＲア
ゴニストであることが分かった。９−シス−ＵＡＢ３０は、ＲＡＲ転写を誘導す
る活性をほとんど示さない基本的にＲＸＲ選択性アゴニストであった。９−シス
−ＵＡＢ８は、ＲＡＲ−αおよびＲＡＲγを弱く活性化することを除いて、９−
シス−ＵＡＢ３０に類似した。全−トランス−ＵＡＢ３０は、各ＲＡＲレセプタ
ー（ＩＣ_５０値３０−５５ｎＭ）によく結合したが、しかしＲＡＲ−βおよびＲ
ＡＲ−γによって指向される転写のみを活性化させた。全−トランス−ＵＡＢ３
０は、ＲＡＲ−αアンタゴニストとして作用できるかどうかを理解するために、
このレチノイドの影響を、ＡＴＲＡによって誘導されるＲＡＲ−α指向性転写に
ついて調べた。図８に示されるとおり、全−トランス−ＵＡＢ３０（１０から１
０００ｎＭ）の用量が増加すると、固定用量でＡＴＲＡによって誘導されるＲＡ
Ｒ−α指向性転写を弱めた。既知ＲＡＲ−αアンタゴニスト（Ａｐｆｅｌら、Ｐ
ＮＡＳ、８９巻、７１２９頁（１９９２年））であるＲｏ−４１−５２５３は、
全−トランス−ＵＡＢ３０によって観察されるものと類似の流れを生じるが、し
かし、それは、２倍多く活性である。

【００７９】 ＡＴＲＡは、用量依存的手段でＡＰ−１（ｃ−Ｊｕｎ／ｃ−Ｆｏｓ）遺伝子転
写を抑制する。ＵＡＢレチノイドを研究するために、ＣＡＴ遺伝子と結合される
ＡＰ−１結合部位を含むコラゲナーゼプロモーターを使用した。ＲＡＲ−αレチ
ノイドレセプター発現ベクターと一緒に、ＴＰＡ−誘導遺伝子発現の抑制を、Ａ
ＴＲＡと比べて様々なＵＡＢレチノイドについて測定した。図９に示されるとお
り、ＵＡＢ８およびＵＡＢ３０の全−トランス−異性体は両方とも、ＴＰＡ誘導
遺伝子発現を減少させる上でＡＴＲＡと同じくらい有効であった。ＵＡＢ８およ
びＵＡＢ３０レチノイドの９−シス−異性体は、高い用量でのみ有効であった。
したがって、全−トランス−ＵＡＢ８は、ＡＴＲＡの特性を共有する。それは、
優れたｐａｎ−ＲＡＲアゴニストであり、そしてＡＰ−１形質抑制で非常に活性
である。興味深くは、全−トランス−ＵＡＢ３０は、開示される他のレチノイド
（Ｆａｎｊｕｌら、Ｎａｔｕｒｅ、３７２巻、１０７頁、１９９４年；Ｎａｇｐ
ａｌら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７０巻、９２３頁、１９９５年）のよう
にＡＰ−１転写を抑制するのみである。

【００８０】 （実施例１７）ＨＬ−６０およびＮＢ４細胞のレチノイド誘導分化 ＡＰＬの処置のためにＵＡＢレチノイドの可能性を探るために、ＵＡＢ８およ
びＵＡＢ３０異性体を、２つのＡＰＬ白血病セルラインＨＬ−６０およびＮＢ４
細胞の分化を誘導するそれらの能力を測定する生体外アッセイで評価した。ＨＬ
−６０細胞を、ＡＰＬ患者から単離した場合でさえ、ＮＢ４セルラインのみが、
ＲＡＲαに関与して、ＲＡＲα／ＰＭＬ融合タンパク質を形成するｔ（１５：１
７）転位を含む。この特徴的な突然変異は、ＮＢ４細胞で安定に行われるので、
それは、この疾病についてのレチノイドの効力を判定するのによいモデルである
。ＡＴＲＡおよび他のＵＡＢレチノイドが、３日後ＮＢ４細胞の分化を誘導する
という効率の比較は、図１０に表される。全−トランス−ＵＡＢ８は、用量の範
囲のＡＴＲＡより約１０倍いっそう活性である（ＥＤ_３０１１０対８１０ｎＭ）
。９−シス−レチノール酸活性は、ＡＴＲＡのものと比較できる（データは示さ
れず）。しかし、高度にＲＸＲ選択性のリガンドである９−シス−ＵＡＢ３０の
活性は、１ｎＭより大きな用量でさえ低い活性を示す（ＥＤ_３０＞１０ｍＭ）。
全トランス−ＵＡＢ８と対照的に、全トランス−ＵＡＢ３０は、ＲＡＲ−α核内
レセプターの拮抗作用と一致する４０ｎＭまで活性でない。９−シス−ＵＡＢ８
の活性は、ＡＴＲＡと同様の活性のただ５０％である（ＥＤ_３０＞３ｍＭ）。こ
の活性は、高用量でＲＡＲ−α依存性転写を活性化するその能力のためでありう
る（Ｍｕｃｃｉｏら、１９９８年）。

【００８１】 （実施例１８）レチノイドを組合わせて使用するＮＢ４細胞分化 可能な相互作用的効果が、ＮＢ４細胞分化で、組み合わせてＲＡＲ−およびＲ ＸＲ−アゴニストを使用することが次に調べられた。図１１に表されるとおり、
ＮＢ４細胞は、ＡＴＲＡ単独の用量を、そしてＵＡＢ８およびＵＡＢ３０異性体
と組合わせて、用量を変化させて処置した。ＵＡＢ８およびＵＡＢ３０レチノイ
ドの用量は、ＡＴＲＡ（Ｂｅｒｅｎｂａｕｍ、Ｐａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．４１
巻、９３頁（１９８９年））に対して各レチノイドの活性にほぼ等しいことを可
能にするために選択された。ＮＢ４細胞は、ＡＴＲＡおよび９−シス−ＵＡＢ３
０で処置されたとき、ＮＢ４細胞の分化についてのＥＤ_３０値（３日目）で１０
倍の減少が起こった。９−シス−ＵＡＢ３０単独は、ＮＢ４細胞分化で効果を示
さなかった（図１０）ので、これは、これら２つのレチノイドの間の相互作用の
明確な兆候である。９−シス−ＵＡＢ３０は、ＡＴＲＡの効果を強化し、そして
ＥＤ_３０を８１０から５０ｎＭへ移行させた（ＡＴＲＡ：９−シス−ＵＡＢ３０
＝１：１０）。全−トランス−ＵＡＢ８を、９−シス−ＵＡＢ８と組合わせて使
用して、ＮＢ４細胞分化についての類似の効果も観察された（図１２）。ＥＤ_{３ ０} での移行は、１１０から２５ｎＭであった。相互作用的効果は、見掛け上９−
シス−ＵＡＢ８を使用することと同様ではない。しかし、イソボルが作成される
とき、相互作用も観察される（Ｂｒｅｉｔｍａｎ）。ＲＡＲ−およびＲＸＲ−選
択性アゴニストの間の相互作用は、他のレチノイド類縁体を用いて、ＮＢ４細胞
で観察された（Ｃｈｅｎら、Ｎａｔｕｒｅ、３８２巻、８１９頁（１９９６年）
）。ここで観察される効果は、ＲＸＲ選択性リガンドＢＭＳ６４９（ＳＲ１１２
３７）および他のＲＡＲ選択性アゴニストを用いて生成されるものと比較できる
。

【００８２】 組合せの効果は、ＡＴＲＡおよび全トランス−ＵＡＢ３０の間で評価して、Ｎ
Ｂ４細胞の分化でのＲＡＲ−ａアンタゴニストの効果を評価した。組合せの効果
は、高いＡＴＲＡ用量で最も明らかであり（図１１）、８１０から２８００ｎＭ
までＥＤ_３０は増加した。全トランス−ＵＡＢ８と類似の研究（図１２）で、全
トランス−ＵＡＢ３０は、約５倍（６６０から３０００ｎＭまで）までＥＤ_３０ を増大させた。全トランス−ＵＡＢ３０は、ＡＰ−１転写を制御する能力がある
が、ＮＢ４細胞の分化で不活性であるので、作用のこの態様は、ＮＢ４細胞の分
化において重要な役割を果たすようにない。その代わり、全トランス−ＵＡＢ３
０によるＡＴＲＡ誘導または全トランス−ＵＡＢ８で誘導されたＮＢ４細胞の分
化の両方の拮抗作用は、ＲＡＲ−αに関与する作用の機構と最も一致する。

【００８３】 先に、Ｂｒｅｉｔｍａｎおよび共同研究者は、４−ヒドロキシフェニルレチナ
ミド（４−ＨＰＲ）単独は、ＮＢ４細胞に分化を誘導しないが、しかし全トラン
ス−レチノール酸と組合わせて使用するとき、ＮＢ４細胞の分化は増強されるこ
とを示した。４−ＨＰＲと全トランス−ＵＡＢ８の組合せの使用は、ここで調査
され、類似の効果が誘導されうるかどうかを決定した。ＮＢ４細胞分化（ｉｆｆ
ｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）は、全トランス−ＵＡＢ８の濃度を変化させながら、
細胞が、１および４ｕＭまでの４−ＨＰＲにさらされるときに明らかに増強され
た（図１３）。全トランス−ＵＡＢ８のＥＤ５０値を、４−ＨＰＲを添加しなが
ら、１００倍低く（５０ｎＭ）移行させた。

【００８４】 （実施例１９）ＮＢ４細胞でのレチノイド代謝 ＡＴＲＡ治療に対する医療的耐性を発生するＡＰＬ患者からＮＢ４細胞を単離
した（Ｌａｎｏｔｔｅら、Ｂｌｏｏｄ、７７巻、１０８０頁（１９９１年））。
これらの細胞は、誘導可能なシトクロムＰ４５０ヒドロキシラーゼに急速に関与
するＡＴＲＡを代謝する（Ｗｈｉｔｅら、Ｊ ＢＣ、２７１巻、２９９２２頁（
１９９６年））。この代謝は、ＡＴＲＡの効力を急速に減少させ、そしてこの酵
素の強力な阻害剤は、ＮＢ４細胞分化でのこのホルモンの効率を改善する。

【００８５】 （実施例２０）ＪＭＭＬ・ＣＦＵ−ＧＭコロニー形成の阻害 １９９１年に、Ｅｍａｎｕｅｌら（２１）は、ＪＭＭＬで観察される自発的Ｃ
ＦＵ−ＧＭコロニー形成は、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−Ｃ
ＳＦ）に対するＪＭＭＬ造血性原種細胞の選択性過敏性に関連することを示した
。この最初の報告から、他の者（２２）は、ＪＭＭＬでの病原性機構としてＧＭ
−ＣＳＦ過敏性のこれらの観察を確認した。さらに、１９９１年には、Ｃａｓｔ
ｌｅｂｅｒｒｙ、Ｅｍａｎｕｅｌおよび共同研究者も、ＪＭＭＬでのその可能な
医療的効力についての証拠（２１）と同様に、生体外ＪＭＭＬの自発的ＣＦＵ−
ＧＭ成長を阻害する（１３Ｚ）−ＲＡの能力の予備的証拠を示した。この先駆的
臨床治験では、生体外でのスクリーンでの（１３Ｚ）−ＲＡの効果が、医療機関
でのＪＭＭＬを示す患者を治療する上でのその効力と一致することが示唆された
（５）。この調査では、（全Ｅ）−および（９Ｚ）−ＲＡは、この生体外アッセ
イで最初に評価され、そしてこれらのＲＡ異性体も、ＪＭＭＬを示す３名の患者
から単離された細胞での自発的ＣＦＵ−ＧＭコロニー成長を阻害する優れた可能
性を示すことが示された（表４）。

【００８６】 ヒトＪＭＭＬ細胞の増殖の阻害におけるＵＡＢ８およびＵＡＢ３０異性体の効
果は、次に調査された。ＵＢＡ８異性体は、２名の患者から得た細胞を用いたこ
のアッセイで評価された（表４）。（全Ｅ）−ＵＡＢ８は、これらのＣＦＵ−Ｇ
Ｍコロニーの自発的成長を制御する上で（全Ｅ）−ＲＡと同じ効力があった。し
かし、（９Ｚ）−および（１３Ｚ）−ＵＡＢ８は、成長を制御する上で対応のＲ
Ａ異性体より効力が低かった。特に、患者Ｊ８４細胞については、これらのレチ
ノイドの活性に２倍の減少がある。ＵＡＢ３０異性体については、最も強力な異
性体は、２名の患者で、ＲＡのものよりほんのわずかに低い活性を示す（１３Ｚ
）−ＵＡＢ３０である。ＵＡＢ８異性体と対照的に、このレチノイドの全Ｅ異性
体は、ＲＡおよび（全Ｅ）−ＵＡＢ８より活性が低い。さらに、（９Ｚ）−ＵＡ
Ｂ３０は、（９Ｚ）−ＵＡＢ８のものに類似して、このアッセイで低い活性を示
す。

【００８７】

【表４】 ^ａＥＤ_５０値を、１０^−２から１０μＭまでの範囲にあるレチノイドの４つの濃
度を用いて用量応答曲線から測定した。^ｂ正常化した阻害率を、（レチノイドの
阻害率（％））／（１０^−６Ｍでの（全Ｅ）−ＲＡの阻害率（％））によって計
算した。１０^−６Ｍでの（全Ｅ）−ＲＡの阻害率は、それぞれ、Ｊ４３、Ｊ８３
およびＪ８４の患者の細胞について８５％、７８％および６１％であった。^ｃＮ
Ｔは、試験されなかったことを意味する。

【００８８】 ＪＭＭＬでの固定していない染色体異常性があり、そしてレチノイドレセプタ ーに関与するように見えるものはない。しかし、ＪＭＭＬでのＧＭ−ＣＳＦ過敏
性におけるＲＡの見かけの調節効果（２３）は、転写因子ＡＰ−１（ｃ−ｊｕｎ
／ｃ−ｆｏｓ）におけるＲＡＲαのＲＡ誘導の拮抗作用的効果であると考えられ
る。ＧＭ−ＣＳＦシグナル形質移入は、Ｒａｓを介して流れて、その主要な終了
点の１つとして、ＡＰ−１応答要素の上昇制御または活性化を有するように見え
る。この応答要素は、ｃ−ｊｕｎ／ｃ−ｆｏｓによって活性化され、そして細胞
外シグナル形成（例えば、ＧＭ−ＣＳＦ）によって刺激されたときに、ＡＰ−１
の誘導は、他の方法の中でも、細胞増殖に至る。実際、ＪＭＭＬでの初期応答遺
伝子発現を調べるノーザンブロット実験では、Ｅｍａｎｕｅｌ（２２）は、ｃ−
ｊｕｎおよびｃ−ｆｏｓの両方の、しかしｃ−ｍｙｃではない見掛けの構成する
上昇制御に注目した。Ｐｆａｈｌ（２４）は、上皮細胞（２５）では、ＲＡが、
ＡＰ−１によって指向される遺伝子転写を抑制する機構が、セルライン特異的で
あり、そしてＲＡＲおよびＲＸＲのいずれかによって指向されうることを示した
。

【００８９】 ＪＭＭＬ中のこれらの骨髄性原種細胞の増殖を阻害する上で高い活性の（１３
Ｚ）−ＲＡについての厳密な機構は、調査の範囲を残す。レセプター基本の機構
を推定すると、（１３Ｚ）−ＲＡ異性体は、（全Ｅ）−または（９Ｚ）−ＲＡの
いずれかに異性化でき、そしてＲＡＲ／ＲＸＲレセプターと相互作用する。本発
明では、これらの後者の２つの異性体は、ＪＭＭＬ細胞中の増殖を防止する上で
（１３Ｚ）−ＲＡと同様に活性であることが示され、それによりこの仮定は支持
される。ＲＡＲ／ＲＸＲ依存性経路を釣上げるために、ＪＭＭＬ細胞の増殖を防
止するレセプター選択性レチノイドの能力を調べた。この生体外でのＪＭＭＬア
ッセイで（全Ｅ）−ＵＡＢ８の活性が高く、そして（９Ｚ）−ＵＡＢ８または（
９Ｚ）−ＵＡＢ３０のいずれかの２つのＲＸＲ選択性レチノイドの活性が減少し
たことは、形質抑制のＲＡＲ依存性経路と一致する。（全Ｅ）−ＵＡＢ３０は、
他の天然のＲＡ異性体および（全Ｅ）−ＵＡＢ８より活性が低い。それは、各Ｒ
ＡＲサブタイプに十分結合するが、しかしＲＡＲαアンタゴニストについての転
写を活性化しないので、（全Ｅ）−ＵＡＢ８に比べて生体外ＪＭＭＬアッセイで
のこの低い活性は、そのＲＡＲα拮抗作用の、または言換えると、ＡＰ−１拮抗
作用を欠くためでありうる。リガンド結合は、ＡＰ−１拮抗作用のために必要で
あるが、しかし十分な条件でない。これは、レチノイドが、ＲＡＲαアンタゴニ
ストであるが、ＡＰ−１依存性転写のＲＡＲ依存性形質抑制を誘導しないことが
確認されたので、レチノイドのまれな特性ではない（２６）。

【００９０】 （実施例２１）ＵＡＢレチノイドによる癌の予防 メチルニトロソウレア（ＭＮＵ）誘導哺乳類癌での（９Ｚ）−ＵＡＢ３０の効
力を測定した。表５および図１４は、ＭＮＵ誘導後の時間じゅう平均腫瘍重量／
ラットのラットの２つの群の間の比較を示す。表６および図１５は、様々な日数
で測定された平均体重／ラットのラットの同じ２つの群の間の比較を示す。デー
タは、ＵＡＢ−３０処置は、ＭＮＵ−誘導哺乳類癌の成長を阻害したことを示す
一方で、全体の体の成長に対する明らかな効果は示さなかった。

【００９１】

【表５】

【表６】 （実施例２２）ＵＡＢ８に関連した化合物の例 列記された以下のものは、分析的データを示す、ＵＡＢ８に関連する合成化合
物の例である：

【化１６】

【表７】

【表８】

【表９】

【表１０】 （実施例２３）ＵＡＢ３０に関連した化合物の例 列記された以下のものは、分析的データを示す、ＵＡＢ３０に関連する合成化
合物の例である：

【化１７】

【表１１】

【表１２】

【表１３】

【表１４】

【表１５】

【表１６】

【表１７】

【表１８】

【表１９】

【表２０】

【表２１】 結論として、本発明は、融合ベンジル環を、アルキル基に置換することは、Ｃ
−８とＣ−１５との間のポリエン鎖上の配座でほとんど影響しないが、それは、
立体配座で強制されるＵＡＢレチノイドの生物学上の特性を顕著に変化すること
を示す。特に、全Ｅ−異性体の核内レセプター転写プロフィールは、劇的に修正
される。ＵＡＢ３０については、この異性体は、ＲＡＲβ−およびＲＡＲγ−依
存性転写（ＲＡＲαアンタゴニスト）の活性化について選択的に示すのに対して
、（全Ｅ）−ＵＡＢ８は、強力なｐａｎ−ＲＡＲアゴニストである。９Ｚ−異性
体の形質移入のプロフィールは、非常に類似性がある。ＵＡＢ８およびＵＡＢ３
０の両方の９Ｚ−異性体は、後者が最大の力価および選択性を示しつつ、ＲＸＲ
α−選択性化合物である。これらのレチノイドも、数種の生物学的アッセイで非
常に異なる効力を示し、そしてそれらの活性における変化は、それらの個々の転
写特性と十分に互いに関係がある。例えば、皮膚乳頭腫の予防における、ＩＭＭ
Ｌ細胞の増殖の阻害における、（全Ｅ）−ＵＡＢ３０および（９Ｚ）−ＵＡＢ８
／（９Ｚ）−ＵＡＢ３０を超える（全Ｅ）−ＵＡＢ８の高い活性は、各ＲＡＲサ
ブタイプによって指向される遺伝子発現を活性化するその例示される強力な活性
、および／またはＲＡＲサブタイプを介してＡＰ−１の遺伝子発現を抑制するそ
の推定活性と一致する。本発明の刺激的な態様は、ＮＢ４細胞を分化させるそれ
らの能力で（全Ｅ）−ＲＡより（全Ｅ）−および（１３Ｚ）−ＵＡＢ８が高い効
力である。ＵＡＢ８の全Ｅ−異性体は、ＲＡ９２９）、そしてその延長期間のそ
の血漿のこの異性体より毒性が２倍低い。一緒にして、これら２つのＵＡＢ８異
性体および類縁体は、ＡＰＬ患者の治療で臨床用途の改善された薬剤でありうる
。

【００９２】 さらに、本発明では、ＲＸＲ選択性アゴニスト、９−シス−ＵＡＢ３０と組合
わせた強力なＲＡＲα、全−トランス−ＵＡＢ８の使用は、ＮＢ４細胞の分化を
明らかに増強することが示される。ＡＴＲＡ単独と比較した場合、この組合せは
、ＮＢ４細胞分化で３０倍さらに有効である。全−トランス−ＵＡＢ８での生体
内毒性データは、それが、ＡＴＲＡより毒性が低いことを示し（Ｌｉｎら、Ｔｏ
ｘｉｃｏｌ．Ａｐｐｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏ．１３９巻、３１０頁、１９９６年）
、９−シス−ＵＡＢ３０での予備データは、それが、９−シス−レチノール酸よ
りいっそう毒性が少ないことを示す。ＵＡＢ３０レチノイドの増強された安定性
と一緒にして、これらのデータは、これらの剤が組合わせて使用される場合に、
改善されたＡＰＬ療法が得られることを示唆する。

【００９３】 以下の資料が、ここで引用された。

【００９４】

【表２２】

【表２３】 本明細書で記されたあらゆる特許および出版物は、本発明が関連する当業者の
レベルを示す。これらの特許および出版物は、各々の個別の出版物が、特定に、
そして個別に参照して組込まれることが示された場合と同じ範囲で参照してここ
に組込まれる。

【００９５】 当業者は、本発明が、目的を行い、そしてそこに本来備わっているものと同様
に、記された結果および利点を得るのによく適合していることを容易に予測する
。ここに記述される方法、手段、治療、分子、および特定の化合物に伴う本実施
例は、現在、好ましい具体例の代表であり、そして実例であり、そして本発明の
範囲における制限として意図されない。請求項の範囲によって規定されるとおり
本発明の概念の範囲内に包含される、そこでの、および他の用途での変化は、当
業者で起こる。

【図面の簡単な説明】

【図１】 図１は、ＵＡＢ８および類縁体（ＵＡＢ８は、構造ＩでＲ_１＝エチルおよびＲ _２ ＝ｉ−プロピルと定義される）を記述する一般構造ＩおよびIIを示す。

【図２】 図２は、ＵＡＢ３０および類縁体を記述する一般構造IIIおよびIVを示す。

【図３】 図３は、ＵＡＢ３０を製造する略図を示す。

【図４】 図４は、図３の続きを示す。

【図５】 図５は、図４の続きを示す。

【図６】 図６は、ＵＡＢ８およびＵＡＢ３０レチノイドの全トランス−および９−シス
異性体に比較した全トランス−レチノール酸（ＡＴＲＡ）の構造を示す。

【図７】 図７は、ＵＡＢ８およびＵＡＢ３０レチノイドの全トランス−および９−シス
異性体に比較した全トランス−レチノール酸（ＡＴＲＡ）の構造を示す。

【図８】 図８は、ＲＡＲ−αアンタゴニスト、全トランス−ＵＡＢ３０およびＲｏ−４
１−５２５３によってＣＶ−１細胞中で全トランス−レチノール酸を誘導したＲ
ＡＲ−α転写活性の阻害を示す。

【図９】 図９は、２つの用量（１０^−７から１０^−６Ｍ）で全トランス−レチノール酸
（ＡＴＲＡ）、およびＵＡＢ８およびＵＡＢ３０異性体によって、ＨｅＬａ細胞
中のＴＰＡ誘導ＲＡＲ−α転写活性の阻害を示す。

【図１０】 図１０は、ＡＴＲＡ（塗りつぶした円形）、全トランス−ＵＡＢ８（塗りつぶ
した三角形）、９−シス−ＵＡＢ８（塗りつぶした四角形）、全トランス−ＵＡ
Ｂ３０（逆さまの塗りつぶした三角形）、および９−シスＵＡＢ３０（塗りつぶ
したダイアモンド型）によってＮＢ４細胞分化を示す。

【図１１】 図１１は、ＮＢ４細菌（塗りつぶした円形）のみ、または９−シス−ＵＡＢ８
（１：２．５）（塗りつぶした三角形）、９−シス−ＵＡＢ３０（１：１０）（
塗りつぶした四角形）、または全トランスＵＡＢ３０（１：１０）（塗りつぶし
たダイアモンド型）と組合わせて分化させる全トランス−レチノール酸（ＡＴＲ
Ａ）の許容量を示す。

【図１２】 図１２は、ＮＢ４細胞（塗りつぶした円形）のみ、または９−シス−ＵＡＢ８
（１：２．５）（塗りつぶした三角形）、９−シス−ＵＡＢ３０（１：１０）（
塗りつぶした四角形）、または全トランス−ＵＡＢ３０（１：１０）（塗りつぶ
したダイアモンド型）と組合わせて分化させる全トランス−ＵＡＢ８の許容量を
示す。

【図１３】 図１３は、ＮＢ４細胞（塗りつぶした円形）のみ、または１μＭ（塗りつぶし
た三角形）および４μＭ（塗りつぶされた四角形）で４−ヒトロキシフェニルレ
チナミドと組合わせて分化させる全トランス−ＵＡＢ８の許容量を示す。

【図１４】 図１４は、時間後期メチルニトロソウレア（ＭＮＵ）誘導の時期をかけた平均
哺乳類腫瘍重量／ラット（グラム）を示す。

【図１５】 図１５は、様々な日齢をかけた平均体重／ラット（グラム）を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｃ 59/72 Ｃ０７Ｃ 59/72 233/55 233/55 (72)発明者 マシオ，ドナルド ディー アメリカ合衆国 アラバマ州 35226 ヒ ューヴァー アットドゥーアン ドライヴ 3531 Ｆターム(参考） 4C206 AA01 AA03 DA12 FA32 GA07 KA01 MA02 MA04 ZB26 ZB27 4H006 AA01 AA03 AB28 BJ20 BJ50 BS30 BV55 UC12

Claims (27)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 【化１】 （式中、 Ｒ_１は、Ｈ、エチル、メチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｔ−ブチル、フェ
   ニル、ベンジル、環状アルキル（Ｃ３−Ｃ８から）、アリールおよびアリールア
   ルキルから構成される群から選択され、そしてＲ_２は、２−メチルプロピル、ｎ
   −ブチル、シクロヘキシル、３−シクロヘキセニル、ベンジル、環状アルキル（
   Ｃ３−Ｃ８から）、およびアリールアルキルから構成される群から選択される）
   から構成される群から選択される構造を有するレチノイド化合物。
2. 【請求項２】 【化２】 （式中、 Ｒ_１は、フェニル、ベンジル、環状アルキル（Ｃ３−Ｃ８から）、アリールおよ
   びアリールアルキルから構成される群から選択され、そしてＲ_２は、Ｈ、エチル
   、メチル、ｎ−プロピルおよびｉ−プロピルから構成される群から選択される）
   から構成される群から選択される構造を有するレチノイド化合物。
3. 【請求項３】 【化３】 （式中、 前記Ｒ_１は、アリール環上で１つまたは２つの置換基を表し、そしてＨ、エチル
   、メチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｔ−ブチル、フェニル、ベンジル、ク
   ロロ、フルオロ、メトキシ、エトキシ、ベンジルオキシ、環状アルキル（Ｃ１−
   Ｃ８から）、アリール、アリールアルキル、アルキルオキシ、アリールオキシ、
   アリールアルキルオキシ、およびハロゲンから構成される群から選択され、そし
   てＲ_２は、Ｈ、エチル、メチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、２−メチルプロ
   ピル、ｎ−ブチル、シクロヘキシル、３−シクロヘキセニル、ベンジル、メトキ
   シ、エトキシ、ベンジルオキシ、環状アルキル（Ｃ_１−Ｃ_８から）、アリール、
   アリールアルキル、アルキルオキシ、アリールオキシおよびアリールアルキルオ
   キシから構成される群から選択され、そしてｎ＝０−３である） から構成される群から選択される構造を有するレチノイド化合物。
4. 【請求項４】 前記化合物が、（９Ｚ）−ＵＡＢ２０、（全Ｅ）−ＵＡＢ２
   ０、（９Ｚ）−ＵＡＢ２１および（全Ｅ）−ＵＡＢ２１から構成される群から選
   択され、その（９Ｚ）−ＵＡＢ２０、（全Ｅ）−ＵＡＢ２０、（９Ｚ）−ＵＡＢ
   ２１および（全Ｅ）−ＵＡＢ２１が、構造： 【化４】 （式中、 前記（９Ｚ）−ＵＡＢ２０および（全Ｅ）−ＵＡＢ２０は、Ｒ_１としてＰｈ基を
   、そしてＲ_２としてｉ−プロピル基を示し、そして（９Ｚ）−ＵＡＢ２１および
   （全Ｅ）−ＵＡＢ２１は、前記Ｒ_１としてＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２を、そしてＲ _２ としてｉ−プロピル基を示す） を示すことを特徴とする請求項１記載のレチノイド化合物。
5. 【請求項５】 前記化合物が、（９Ｚ）−ＵＡＢ３０、（９Ｚ）−ＵＡＢ３
   １、（９Ｚ）−ＵＡＢ３２、（９Ｚ）−ＵＡＢ３３、（全Ｅ）−ＵＡＢ３３、（
   ９Ｚ）−ＵＡＢ３４、（９Ｚ）−ＵＡＢ３５、（９Ｚ）−ＵＡＢ６０、（９Ｚ）
   −ＵＡＢ６１、および（９Ｚ）−ＵＡＢ６２から構成される群から選択され、そ
   の（９Ｚ）−ＵＡＢ３０、（９Ｚ）−ＵＡＢ３１、（９Ｚ）−ＵＡＢ３２、（９
   Ｚ）−ＵＡＢ３３、（全Ｅ）−ＵＡＢ３３、（９Ｚ）−ＵＡＢ３４、および（９
   Ｚ）−ＵＡＢ３５が、構造： 【化５】 （式中、 前記（９Ｚ）−ＵＡＢ３０が、アリール環上に置換基Ｈを有し、（９Ｚ）−ＵＡ
   Ｂ３１が、アリール環上に置換基５’−メトキシを有し、（９Ｚ）−ＵＡＢ３２
   が、アリール環上に置換基６’−メトキシを有し、（９Ｚ）−ＵＡＢ３３が、ア
   リール環上に置換基７’−メトキシを有し、（全９Ｅ）−ＵＡＢ３３が、アリー
   ル環上に置換基７’−メトキシを有し、（９Ｚ）−ＵＡＢ３４が、シクロアルキ
   ル環上に置換基４’−メチルを有し、（９Ｚ）−ＵＡＢ３５が、アリール環上に
   ２つの置換基５’，７’−ジメチルを有し、ここで、前記（９Ｚ）−ＵＡＢ６０
   、（９Ｚ）−ＵＡＢ６１および（９Ｚ）−ＵＡＢ６２は、構造： 【化６】 （式中、前記（９Ｚ）−ＵＡＢ６０が、アリール環上に置換基Ｈを有し、（９Ｚ
   ）−ＵＡＢ６１が、アリール環上に置換基５’−メトキシを有し、そして（９Ｚ
   ）−ＵＡＢ６２が、アリール環上に置換基７’−メトキシを有する） を示すことを特徴とする請求項３記載のレチノイド化合物。
6. 【請求項６】 前記化合物が、（９Ｚ）−ＵＡＢ４０であり、式： 【化７】 （９Ｚ）−ＵＡＢ４０ を示すことを特徴とする請求項３記載のレチノイド化合物。
7. 【請求項７】 前記化合物が、（９Ｚ）−ＵＡＢ７０であり、式： 【化８】 （９Ｚ）−ＵＡＢ７０ を示すことを特徴とする請求項３記載のレチノイド化合物。
8. 【請求項８】 その個体に有効用量のＵＡＢ８を投与する段階を含むことを
   特徴とする、新生物形成症状を示す個体を処置する方法。
9. 【請求項９】 前記化合物を、４−ヒドロキシフェニルレチナミドと混合す
   ることを特徴とする請求項８記載の方法。
10. 【請求項１０】 前記新生物形成症状が、皮膚癌、胸部癌、膀胱癌、前立腺
    癌、肺癌、結腸癌および白血病から構成される群から選択されることを特徴とす
    る請求項８記載の方法。
11. 【請求項１１】 前記化合物を、約１０ｍｇ／ｋｇから約３００ｍｇ／ｋｇ
    までの用量で投与することを特徴とする請求項８記載の方法。
12. 【請求項１２】 前記個体に有効用量の請求項１記載の化合物を投与する段
    階を含むことを特徴とする、新生物形成症状を示す個体を処置する方法。
13. 【請求項１３】 前記化合物を、４−ヒドロキシフェニルレチナミドと混合
    することを特徴とする請求項１２記載の方法。
14. 【請求項１４】 前記新生物形成症状が、皮膚癌、胸部癌、膀胱癌、前立腺
    癌、肺癌、結腸癌および白血病から構成される群から選択されることを特徴とす
    る請求項１２記載の方法。
15. 【請求項１５】 その個体に有効用量の請求項１記載の化合物を投与する段
    階を含むことを特徴とする、個体での新生物形成症状の発生を軽減または予防す
    る方法。
16. 【請求項１６】 前記新生物形成症状が、皮膚癌、胸部癌、膀胱癌、前立腺
    癌、肺癌、結腸癌および白血病から構成される群から選択されることを特徴とす
    る請求項１５記載の方法。
17. 【請求項１７】 前記化合物を、約１０ｍｇ／ｋｇから約３００ｍｇ／ｋｇ
    までの用量範囲で投与することを特徴とする請求項１５記載の方法。
18. 【請求項１８】 前記個体に有効用量の請求項２記載の化合物を投与する段
    階を含むことを特徴とする、新生物形成症状を示す個体を処置する方法。
19. 【請求項１９】 前記化合物を、４−ヒドロキシフェニルレチナミドと混合
    することを特徴とする請求項１８記載の方法。
20. 【請求項２０】 前記新生物形成症状が、皮膚癌、胸部癌、膀胱癌、前立腺
    癌、肺癌、結腸癌および白血病から構成される群から選択されることを特徴とす
    る請求項１８記載の方法。
21. 【請求項２１】 前記化合物を、約１０ｍｇ／ｋｇから約３００ｍｇ／ｋｇ
    までの用量範囲で投与することを特徴とする請求項１８記載の方法。
22. 【請求項２２】 その個体に有効用量の請求項２記載の化合物を投与する段
    階を含むことを特徴とする、個体での新生物形成症状の発生を軽減または予防す
    る方法。
23. 【請求項２３】 前記新生物形成症状が、皮膚癌、胸部癌、膀胱癌、前立腺
    癌、肺癌、結腸癌および白血病から構成される群から選択されることを特徴とす
    る請求項２２記載の方法。
24. 【請求項２４】 前記化合物を、約１０ｍｇ／ｋｇから約３００ｍｇ／ｋｇ
    までの用量範囲で投与することを特徴とする請求項２２記載の方法。
25. 【請求項２５】 ＵＡＢ８／類縁体およびＵＡＢ３０／類縁体から構成され
    る群から選択される２または２以上のレチノイド化合物を混合して前記個体に投
    与する段階を含むことを特徴とする、新生物形成症状を示す個体を処置する方法
    。
26. 【請求項２６】 前記新生物形成症状が、皮膚癌、胸部癌、膀胱癌、前立腺
    癌、肺癌、結腸癌および白血病から構成される群から選択されることを特徴とす
    る請求項２５記載の方法。
27. 【請求項２７】 前記混合が、さらに４−ヒドロキシフェニルレチナミドを
    含むことを特徴とする請求項２５記載の方法。