JP2002506855A - 細胞毒性金属キレート剤とその製法及びその使用方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 一群のヘキサデンテートＦｅ（II）鉄錯体キレート剤は、腫瘍細胞に対する抗増殖活性を示した。金属キレート剤は、tachpyr や他の既知のキレート剤の構想について、顕著な利点と革新をもたらすものである。細胞毒性の結果は、化学療法剤としての本発明の金属キレート剤の適用可能性をさらに実証している。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【関連特許発明】

本願は、March 18,1998に出願されたU.S. provisional application Serial N
o.60/078,448と、6/25/98に出願されたU.S. Provisional Application Serial N
o.60/090,618の利益を請求するものである。

【０００２】

【連邦後援研究に関する陳述】

本発明は、National Institute of Health DK42412とDK42412-0951による補助
資金によるU.S.政府の援助によってなされたものである。U.S.政府は、本発明に
関する権利を有するものと考えられる。

【０００３】

【発明の背景】

この発明は、キレート剤とそれらの治療薬としての使用に関するものであり、
特に、金属キレート剤と、癌治療における化学療法剤としての金属キレート剤の
使用に関する。

【０００４】 酸素伝達や電子伝達、酸化、還元、その他多様な機能を担っている生体分子は
、それらの活性部位に鉄（”Fe”）を含んでいる。鉄は、呼吸鎖酵素やリボヌク
レオチドレダクターゼを含む多数の重要な酵素の触媒活性にも必要なものである
。リボヌクレオチドレダクターゼは、DNA合成の速度制限段階であるリボヌクレ オチドからデオキシリボヌクレオチドへの還元を触媒する。細胞レベルでの鉄の
役割、特に、DNA 合成における鉄の役割においては、細胞レベルでの鉄代謝の調
節は、様々な病理学上の条件での治療、例えば、組織の鉄過剰状態や酸化ストレ
スにおいて重要な役割を持つものと考えられる。

【０００５】 鉄削減ストラテジーは確かに、癌や、細胞分裂の不制御によって分類される病
気の治療に有効であると考えられる。実際に、いくつかのストラテジーが、癌治
療のための鉄剥奪処方への適用のために研究されてきている。例えば、鉄循環の
細胞での吸収を担っているトランスフェリン受容体に対する抗体は、造血性と非
造血性の腫瘍の両方の治療に使用されてきている。トランスフェリン受容体に結
合する硝酸ガリウムは、リンパ腫や膀胱癌での使用のための研究がされてきてい
る（参考文献：Miller,R.,Cancer Chemotherapy and Pharmacology 30 Suppl.S9
9(1992);Chitambar,C.,Amer.J.Clin.Oncol.20:173(1997)）。膀胱癌は、鉄剥奪 処方の臨床学上の標的として研究されてきている（参考文献：Seymour,G.,Urol.
Res.15:341(1987);and Seligman,P.,Amer.J.Hematol.41:232(1992)）。

【０００６】 鉄キレート剤は、診察や様々な病気の治療における薬剤として使用されてきて
いる。鉄キレート剤は、金属イオンと結合する分子であり、金属イオンを化学的
に不活性にする。キレート剤と金属との間に形成される化学結合は、金属の電子
軌道に対するキレート剤の分子軌道における電子の支配を含んでいる。一般的に
、キレート剤は、供与原子の番号や一致性及びその結合幾何学構造によって分類
される。金属の電子軌道が飽和しているのと同等にキレート剤の密度が満たされ
ているときに、最も安定なキレート−金属錯体またはキレートが形成される。鉄
は、配位数が６の２価または３価のカチオンとして存在する。したがって、安定
な鉄のキレート剤は、有効なヘキサデンテートである。

【０００７】 鉄キレート剤は通常、遺伝病や輸血依存の貧血症に関連する過鉄症の利用に使
用されている（参考：U.S. Patent No.5,430,058）。また、鉄キレート剤は、X 線や超音波、放射線治療、重金属の解毒を含む、症候イメージングのためのコン
トラスト剤としても使用されている（参考：U.S.Patent No.5,446,145）。しか しながら、鉄キレート剤は、最初には過鉄症の治療のための薬剤として開発され
ており、鉄キレート剤の開発のための理論と同様にそれらの有効性についても、
そのような薬剤への適用を基になされてきている。それらの適用のために、鉄キ
レート剤の望ましい特徴として、高い安定性を持ったFe（III）のキレート化や 、排出のために鉄を移動させる能力や、経口での有効性、低い慢性毒性が挙げら
れる。

【０００８】 過鉄症の治療のための代表的な鉄キレート剤は、次の５つ、ヒドロオキサメー
ト、アミンカルボン酸塩、カテコール、ハイドロキシピリジノン、ピリドキサー
ルイソニコチノイルヒドラゾンに分類される。デスフェリオキサミン（DFO）は 、鉄のキレート剤のヒドロオキサメートに属するものであり、過鉄症の治療のた
めの現在の臨床学上の基準となっている。DFOは、上述の過鉄症の治療のための 基準の全てではないがいくらかを満たしている。特に、DFOは、Fe（III）に対し
て、高く、選択的な親和性を示す。DFOはヘキサデンテートであるから、鉄との 結合における有効性はDFO濃度に依存している（参考文献：Nathan,D.,N.Eng.J.M
ed.332(14)(1995)）。DFOは、排出のために鉄を移動させることもできる。しか しながら、DFOは重大な制限をもっている。ほとんどのヒドロオキサメートのよ うに、DFOは不安定な酸であり、いくらかの慢性毒性を示し、そして経口で用い ることができない。非経口的な投与が必要とされることから、適応の問題や過鉄
症が通常となっている第三世界での薬の利用の制限の両方が生じており、そして
、非経口的な投与のための設備や道具が不足している。さらに、Strepromyces培
養株から単離しなければならないDFOの高いコストが原因となって、薬の利用が さらに制限されている（参考文献：Hoffbrand,A.,J.,Lab.Clin.Med.123:492(199
4)）。

【０００９】 キレート剤のハイドロキシピリジノン類は、最近開発されたものであり、過鉄
症の治療のための臨床試験として現在使用されている。Deferiproneは, LI（1,2 dimeth-3-hydroxypyrid-4,1 compound）として知られており、ハイドロ
キシピリジノンとして研究対象とされてきたものの１つである。Deferiproneは 経口用の活性化された鉄キレート剤であり、鉄を移動させる（参考文献：Olivei
eri,N.,N.Engl.J.Med.14:918-922(1995)）。しかしながら、deferiproneのFe（I
II）に対する親和性は緩やかであり、deferiprone の濃度に強く依存している（
参考文献：Loebstein,R.,Clin.Drug.Invest,3(6):345-349(1997)）。Deferipron
e も、制限をもっている。一般的に、deferiproneはDFOよりも非常に低い治療可
能比率である。Deferiproneは相当の毒性を持っており、無顆粒球症を含む副作 用を伴うことも知られている。

【００１０】 その他の鉄のキレート剤として、ピリドキサールイソニコチノイルヒドラゾン
（PIH)とその誘導体も同様に研究されている。PIH誘導体やそれらの鉄錯体は、 良好な細胞内可動性を示しているが、Fe（III）への親和性は緩やかである（PCT
WO 95/08519,July 10,1995 ）。

【００１１】 鉄削減機構を解明した化学療法剤は、比較的未開発な研究領域である。これら
の薬剤は、DNA合成によって阻害されるので代謝拮抗物質として考えらている。 いくつかの、Fe（III）キレート剤も同様に化学療法剤としての使用のために研 究されている。デスフェリオキサミン（DFO）は現在、神経芽細胞腫や前立腺癌 の治療のための併用化学療法剤として臨床実験中である（参考文献：Donfranesc
o,A.,Acta,Haematol.95:66(1996);and Frantz,C.,Proc.Acad.Soc.Clin.Oncol.:4
16(abstr)(1994)）。ピリドキサールイソニコチノイルヒドラゾン（PIH)類のキ レート剤は同様に、抗増殖剤としても研究されている。PIH類は、酸素と窒素の 供与体原子の両方を持つ三座配位子である。PIH類の中のいくつかは、デスフェ リオキサミン(70μM）よりも低いIC_５０（1-7μM）と、疎水性と細胞毒性との間
の相関によって特定されている（参考文献：Richardson,D.,Blood 86:4295(1995
)）。

【００１２】 ほとんどのキレート剤の選択性はFe（III）に対するものであるが、これは、F
e（II）よりもFe（III）の結合力が強く、毒性が低いことに起因する。上述のキ
レート剤の全てがFe（III）に結合する一方で、Fe（II）のキレート剤は、それ らの金属特性が比較的少ないことと、Fe（II）の潜在的な毒性が原因で、あまり
研究されていない。Fe（II）は、H₂O₂を還元し、結果として高い反応性を持ち、
細胞に障害を与えるヒドロキシルラジカルの形成を引き起こす。しかしながら、
ヒドロキシルラジカルの形成の機構中で邪魔をすると考えられる立体化学的作用
のようなキレート剤の構造的特徴が原因となり、すべてのキレート剤が毒性のFe
（II）を形成するものではない。フェナントロリンのようなキレート剤は、Fe（
II）に酸化還元電位を与えるが（＋1.15V/NHE）、塩基性が強すぎてH₂O₂の還元 ができない。

【００１３】 酸化還元活性のあるFe（II）キレート剤は、Fe（III）がFe（II）へ還元され るならば、Fe（III）との結合も引き起こすと考えられる。したがって、いくつ かの理由で、酸化還元の特性は、Fe（II）キレート剤とFe（III）キレート剤と の関連において利点を与えるものである。まず第１に、細胞内での鉄の貯蔵はFe
（II）キレート剤に近づきやすく、第２に、Fe（II）の還元によって接近される
と考えられる、Fe（III）の細胞内での貯蔵部位がある。それゆえ、臨床使用の ために、Fe（III）とFe（II）との両方に接近する非常に大きいキレート剤の可 転性が必要とされる。

【００１４】 物質、bipy は、血管痙攣の治療における細胞内でのFe（II）キレートとして 発見された（参考文献：Horky et al.,PCT WO 97/49401,December 31,1997）。 開かれた配位部位が一酸化窒素の血管壁への送達を促進させるようにするFe（II
）の弱い錯体形成で、このキレートが機能するものと信じられている。このFe（
II）の弱い錯体形成は、鉄欠乏症剤としての機能には適さない。さらに、bipyは
、腫瘍細胞で弱い毒性作用のみを示すものである。

【００１５】 その他の、Fe（II）キレートと酸化還元性を持つ物質として、tachpyrがある 。共同発明者によって最初に発見され、合成されたtachpyrは、Fe（II）と反応 し、細胞内で鉄欠乏状態を引き起こす。Tachpyrは、ヘキサデンテートキレート 剤であるから、バイデンテート（bidentate)なbipyよりも効果的である。したが
って、Fe（II）キレート剤としてのtachpyrの有効性は、その濃度とは無関係で ある。Tachpyrは、酸化還元性を示し、Fe（II）の還元を通してFe（III）と結合
する。Tachpyrは、過酸化水素からヒドロキシルラジカルを化学量論的に形成す る。Fe（III）の還元は、Fe（III）から複合型Fe（II）への還元に付随する、ta
chpyrから新たなイミンリガンドである、”tachpyr-nH₂”（n=1,2,3）への酸化 を通して起こるものと信じられている。

【００１６】 最近、３つの酸素供与体の類がtachに加えられた。結果としてのキレート剤は
、Al（III）、Ga（III）、Fe（III）と結合するが、Fe（II）との結合はみられ なかった（参考文献：Bollinger,Je.et al Inorg Chem 33,1241 (1994)）。1,3,
5-トリアミノ-1,3,5-トリデオキシ-cis-イノシトールは、tachと類似のトリデン
テート（tridentate）キレート剤である。この物質のヘキサデンテート誘導体は
ほとんど調製されていない（参考文献：Hegetschweiler,et al.,Inorg Chem 31,
4027(1992)）。

【００１７】 tachpryの他の化合物の中の１つは、cis-cis-1,3,5-トリアミノシクロヘキサ ン、または、”tach”である。Tachは、トリデンテート（tridentate）のリガン
ドであり、これまでにも知られているものである。tachに対する３つの供与体の
類の追加によって、ヘキサデンテートのリガンドが形成される。非常に少ない数
のそのようなヘキサデンテート 誘導体が、この発明以前に知られている。Tachi
mpyrとFe［tachimpyr］^2＋は、調製されているが、あまり研究されていない（参
考文献：Lions et al.,J.Am.Chem.Coc.79,1572(1957)）。

【００１８】 Fe［tachpyr-nH₂］^2＋については、化学作用上いくつかの問題があり、それは
、その鉄の剥奪効果が制限されていることにあり、それゆえ、細胞毒性があるこ
とである。Fe［tachpyr-nH₂］^2＋と他のイミン複合体は求核体によって攻撃され
、Feが遊離される。この問題は、イミノ類の加水分解の感受性に関係している。
それゆえ、フリーなキレート剤であるtachpyr-3H₂は細胞毒性を持っておらず、 水溶媒質中で不安定である。その他のFe［tachpyr-nH₂］^2＋の重大な問題は、＋
２の電荷にある。正電荷は、一般的に、生体膜の透過を制限する。したがって、
Fe［tachpyr-nH₂］^2＋は生体膜と交わることができないため、tachpyrは、細胞 内の鉄を移動しそうにない。正電荷は、また、塩化物や水酸化物のような生物学
的に有用な陰イオンとともに反応性を促進する。それ故、＋２の電荷と化学構造
（イミノ基）が原因で、tachpyr-nH₂は、鉄削減剤としての活性において内因性 の制限がある。

【００１９】 化学療法剤は５０年以上されている間、新たな抗癌剤の探索が進行している。
代替剤、特に、新規な細胞毒性機構の鉄削減化学療法剤の一般的な要求が残って
いる。そのため、最小の毒性による最大の腫瘍への効果を達成するための組み合
わせにおいて、異なった細胞病理の機構を解明する新たな抗癌剤が使用されてい
る。

【００２０】

【発明の概要】

この発明は、新規な金属キレート類とそれらの金属錯体に関するものである。
金属キレートはさらに、ヘキサデンテート、比較的濃度に影響されることなく鉄
と結合し、細胞内鉄貯蔵をキレートするために生体膜と交わる化学化合物に分類
される。金属キレート剤は、結合鎖を攻撃する様々なキレート部分を含んでいる
。キレート部分は、供与原子の１またはそれ以上の炭素を置換する線状または環
状の炭化水素であり、供与原子によって１またはそれ以上の位置が置換される結
合鎖である。この発明の金属キレート剤は、次の一般式で表される。

【００２１】

【化１７】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、および／また
はＹ、Ｙ’およびＹ’’はＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ，Ｐ（Ｏ）（
ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物である。
そしてＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であ
り、Ｙ、Ｙ’およびＹ’’で同一かもしくは異なる； Ｓ、Ｓ’、Ｓ’’は０から約２そして ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２である。

【００２２】 この発明は、また、上の一般式で表される金属キレートの活性剤と同様に後に
示す具体例から成る化学療法剤を含む医薬品に関するものでもある。この化合物
によって現れる抗増殖活性は、化学療法剤としての有効性と一致する。医薬品と
しての金属キレートのために様々な形式の投与が考察されたが、経口投与が、投
与のルートとして好適である。組成物を、希釈剤または固体担体と共に併せて経
口投与することも可能である。医薬品として、本発明の組成物は、還元が必要な
細胞内で鉄のレベルを減少させることに使用することができる。１つの具体例と
して、本発明の組成物は、腫瘍細胞の増殖を阻害することに使用されている。本
発明の組成物が、治療的に鉄の還元として使用されている一方で、この組成物は
、還元が必要な量が存在する他の金属を除去することにも用いることができると
考えられる。

【００２３】 本発明の金属キレートは、DFOやPIHのような既知の細胞毒性の鉄のキレート剤
から、化学構造や物理的特性の両方においていくつかの方法によって区別するこ
とができる。本発明の金属キレート剤は、結合基中の供与体原子と同様に、結合
するキレート部分によって分類される。金属キレート剤は、腫瘍細胞に対する潜
在性の細胞毒性を伴うヘキサデンテートのリガンドである。経口投与がこれらの
化合物にとって好適ではあるが、他の形式の投与も使用できる可能性を考慮する
必要がある。この組成物の細胞毒性の機構は、細胞内での鉄のキレート化を含ん
でいると考えられている。さらに、この組成物の化学的特性は、結合と同様に、
それらの生体活性に潜在的に影響を及ぼす鉄を減少させるようにしている。

【００２４】 本発明の金属キレート剤は、tachpyr や上述した多数のキレート剤の構想につ
いて、顕著な利点と革新をもたらすものである。例えば、図２に示すキレート剤
、tach-C(Me)-pyr(R=Me)は、Fe（III）を減少的に捕獲する能力において、tahcp
yr に対する強い酸化還元活性を与えるものである。したがって、Fe［tach-C(Me
)-pyr-nH₂］^2＋は、Fe［tachpyr-nH₂］^2＋を非常に速く形成する。これは、また
、イミノ基の加水分解を阻害するために立体的な構造障害を与え、Feの損失を引
き起こす。図３に示すS,S,S-tachen-2-BnとS,S,S-tachen-2-Meは、Fe（II）やFe
（III）に対する優れた供与体である第１アミノ基のキレート剤である。強い塩 基性は、tachpyrのピリジン基に対するFe（II）の強い親和性を引き起こすもの と考えられる。Fe錯体の強力な可動性が予想されるキレート剤は、図４に示すta
chcarbox,R=Me またはEtを含む。このリガンドは、鉄とともに中性または陰イ オン性の錯体を形成し、鉄の可動性を促進するものと考えられる。

【００２５】 図４に示す新規なキレート剤であるtachen-OHとtachcarbox,R=MeまたはEtのそ
の他の特性は、鉄の酸化状態での結合における融通性である。Fe（II）とFe（II
I）のそれぞれに対する親和性がある窒素と酸素の供与体原子の両方の取り込み を通して、tachen-OHとtachcarbox,R=MeまたはEtは、鉄の生物的な形に近づくも
のと考えられる。フリーなキレート剤の細胞内の通過能力は、しばしばそれらの
疎水性に関連している。図２に示すtachquinの供与体原子はtachpyrと類似して いるが、キノリン基の付加された芳香環は疎水性を増加させる。図２に示すTach
-6-Mepyrは、tachpyrと関連して強い疎水性を与える6-メチル基を持つ他のキレ ート剤である。

【００２６】 有害なヒドロキシルラジカルを生成する鉄錯体の有効性も、tachpyr と関連し
て高められていると考えられる。したがって、Fe-tachcarbox錯体は、Fe(tachpy
r-nH₂)と比べて、より負の酸化還元電位を持っており、Fe（III）とFe（II）の 循環がヒドロキシルラジカルをさらに効果的に生成するようにしていると考えら
れる。

【００２７】 図４に示す、(N-R)₃tachpyr,R=MeまたはEtのキレート剤は、Fe（II）の効果的
なキレート剤でなく、細胞内毒性または抗増殖性剤でもない、この化合物類の中
で低い毒性を示しており、さらに、それらは、構造上、同じ部位を共有している
。

【００２８】 本発明による金属キレート剤の好ましい実施の形態は以下の化学式で表される
：

【化１８】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団はシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に位置する、シス型配列； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基、またはこれらの
化合物であり、ＸＹ間の原子団の数は約２から約４； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基或
いはこれらの化合物、またはＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ，Ｐ（Ｏ）
（ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ， ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物のい ずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、そしてＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族
、アリル基またはこれらの化合物であり、それらはＹ、Ｙ’およびＹ’’におい
て同一かあるいは異なる； ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であり；そして ｎは０から約３の間である。

【００２９】 別の好ましい実施の形態として、本発明の金属キレート剤は次の化学式で表さ
れる：

【化１９】 式中： Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子団
はシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に位置する、シス型配列；そして
Ｓ、Ｓ’、Ｓ’’は０から約２である；］

【化２０】 式中： ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族、アリル基またはこれらの化合物でありＺ、Ｚ’
、Ｚ’’で同一かあるいは異なる； ＹはＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ，Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）
ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物である。またＲはＨ、脂肪族、
枝分れ脂肪族、アリル基またはこれらの化合物であり、またＹは脂肪族、枝分れ
脂肪族、アリル、ヘテロキシル基またはこれらの化合物のいずれかに由来するＮ
、ＯまたはＳ原子を含み、いずれにせよＹとＲはＺ、Ｚ’、Ｚ’’において同一
かもしくは異なる； ｔは０から約２； ｎは０から約３の間である。

【００３０】 哺乳類における医療が必要な状態を処方、予防するための、公表された医薬品
上の組成物のその他の好適な具体例は、活性化された成分としての次の式の組成
物を含んでいる。

【００３１】

【化２１】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、および／また
はＹ、Ｙ’およびＹ’’はＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ，Ｐ（Ｏ）（
ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物である。
そしてＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であ
り、Ｙ、Ｙ’およびＹ’’で同一かもしくは異なる； Ｓ、Ｓ’、Ｓ’’は０から約２そして ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２である。

【００３２】 医薬品上の組成物は、tach-C(Me)pyr，tach-6-Mepyr,tachquin,sss-tachem-2B
n,sss-tachen-2Me,(N-R)₃tachpyr,tachpyr-2H₂とtach-N-Me-Im-imineからなる金
属キレート剤から選択された有効成分の組成物を含んでいる。医薬組成物は、治
療用法(therapeutic dosage)により単独で、少なくとも他の一の医薬品と結合し
て、又は少なくとも他の一の医薬品と化学的に結合して、処方(formulated)され
る。医薬組成物は、薬学基準に合う担体(carriers)、希釈液(diluents)、安定剤
(stabilizers)、可溶性剤(solubilizers)、潤滑剤(lubricants)、結合剤(binder
s)など又はそれらの補形薬(excipients thereof)とそれぞれ配合される。さらに
、医薬組成物は、有効成分化合物（active ingredient compound)の哺乳類代謝 共役体(mammalian metabolic conjugate)を備えている。

【００３３】 医薬組成物は、以下のような医学的症状の処方と予防に使用されうるものと考
えられるが、これに限られるものではない。それらは、癌(cancer)、炎症および
感染症(inflammatory and infectious conditions)、血管過敏症(vasoreactive)
および血管閉塞症(vasoocclusive conditions), 冠動脈および末梢血管のアテ ローマ性動脈硬化症(athlerosclerosis), 寄生虫症(parasitic diseases)、神経
および神経筋症状(neurologic and neuromuscular conditions)、およびエイズ(
AIDS)を含むウイルス性症(viral conditions)を含んでいる さらなる症状として、血管痙攣(vasospasm)、パーキンソン病(Parkinson's di
sease)、アルツハイマー病（Alzeihmer's disease)、マラリア(malaria)、結核 （tuberculosis)、関節炎（arthritis）、アレルギー(allergic)および喘息症(a
sthmatic conditions)肝炎(hepatitis)、冠動脈および末梢血管の血管性再潅流 障害(coronary and peripheral vascular ischemia-reperfusion injury of blo
od vessel)を含む。

【００３４】 その他の具体例として、医薬組成物は、液体の希釈液(liquid diluent)又は固
体の担体(solid carrier)と結合して経口用に処方(orally formulated)される。

【００３５】 また、その他の具体例として、医薬組成物は、治療に有効な量投与することに
より腫瘍細胞(tumor cells)の発生を防止し、増殖速度を低減させ、又は大きさ を縮小させ、又はこれらを組み合わせて行われる。

【００３６】 前述及び後述する本発明の目的は、本発明の詳細な説明及び本発明の単なる例
示にすぎない後述の発明の実施例を読むことにより、当技術分野の当業者によっ
て理解される。

【００３７】

【詳細な説明】

腫瘍細胞に対して抗増殖作用を示すシス型、シス−１，３，５−トリアミノシ
クロヘキサンを基とする新規な一群のヘキサデンテートＦｅ（II）鉄錯体および
キレート剤を合成した。本発明による金属キレート剤および錯体の一般的な化学
式は以下のように表される：

【化２２】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、および／また
はＹ、Ｙ’およびＹ’’はＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ，Ｐ（Ｏ）（
ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物である。
そしてＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であ
り、Ｙ、Ｙ’およびＹ’’で同一かもしくは異なる； s、s’、s’’は０から約２そして ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２である。

【００３８】 本発明によるキレート剤は、これらに限定されないがｔａｃｈｑｕｉｎ、ｔａ
ｃｈ−Ｃ（Ｍｅ）−ｐｙｒ、ｔａｃｈ−６−Ｍｅｐｙｒ、Ｓ，Ｓ，Ｓ−ｔａｃｈ
ｅｎ−２−Ｂｎ（ｔａｃｈｂｎとも呼ばれる）、Ｓ，Ｓ，Ｓ−ｔａｃｈｅｎ−２
−Ｍｅ（ｔａｃｈｐｎとも呼ばれる）、ｔａｃｈｅｎ−ＯＨ、ｔａｃｈｃａｒｂ
ｏｘ，（Ｎ−Ｒ）_３ｔａｃｈｐｙｒを含み、その時のＲはＭｅ Ｅｔ、ｔａｃｈ ｅｎ−Ｒ、ｔａｃｈ−Ｎ−Ｍｅ−Ｉｍ−ｉｍｉｎｅ、ｔａｃｈｉｍｐｙｒ，ｔａ
ｃｈｐｙｒ−Ｈ_２およびｔａｃｈｐｙｒ−２Ｈ_２である。これらのキレート剤の
例を図２〜５に示す。本キレート剤はＧａ、Ｉｎ、ＣｄやＨｇと同様に、生物学
的に重要な金属であるＦｅ、Ｃｕ、Ｎｉ、Ｚｎ、Ｍｎ、ＣａそしてＭｇをもキレ
ート化すると考えられる。

【００３９】 本発明による金属キレート剤の一連の化学的特徴は、細胞毒性が確かめられて
いる既存のキレート剤と区別される。それらの特徴として、ａ）シクロヘキシル
基構造；ｂ）Ｆｅ（III）よりもＦｅ（II）へ化学的結合優先性；ｃ）Ｆｅ（III
）、特に生物学的に重要な分子となるＦｅ（III）を還元的に捕らえる能力；ｄ ）Ｆｅ（III）を有する分子との反応を介してＦｅ（II）と強い親和性を持つ変 形キレート剤構造を形成する能力；そしてｅ）過酸化水素からヒドロキシル基を
形成する能力などがある。

【００４０】 培養した膀胱癌細胞ＭＢＴ２またはＴ２４にｔａｃｈｐｙｒを加えると、濃度
約８μＭ以下においてｔａｃｈｐｙｒは培養膀胱癌細胞に対し強い細胞毒性を示
した。事実、４回の個別の実験においてＭＢＴ２細胞に対してのＩＣ_５０価は、
デスフェリオキサミンの場合が７０μＭであるのに対し４．６±２．０μＭであ
った。このキレートの幾つかの鉄錯体が無毒であったことから、ｔａｃｈｐｙｒ
は金属錯体化を通じて細胞毒性効力を発揮すると思われる。金属錯体から立体的
に阻害されるｔａｃｈｐｙｒのメチル、エチル誘導体が細胞毒性を示さなかった
ことから、この理論は尚一層支持できる。さらに脂肪親和性計算によってｔａｃ
ｈｐｙｒは分配係数（ｌｏｇＰ_ＯＣＴ）―０．１０が得られた。このことからｔ
ａｃｈｐｙｒは細胞内キレート剤としての機能を潜在的に有すると思われる。

【００４１】 膀胱癌細胞に対してのｔａｃｈｐｙｒの細胞毒性は細胞内鉄の配位と目標化に
関連すると考えられる。これらのキレート剤の毒性は、例えば以前はｔａｃｈｐ
ｎと呼ばれるｔａｃｈｅｎ−Ｍｅなどが、還元によってＦｅ（III）をＦｅ（II ）へ配位結合させる能力と一致していた。実験によってこれらのキレート剤は生
物学的に重要な形態であるＦｅ（III）（ＡＴＰ）_３からＦｅ（III）を除去する
ことが分かる。ｔａｃｈｐｙｒとＦｅ（II）塩の嫌気性下で反応させるとＦｅ（
II）−ｔａｃｈｐｙｒ^２＋錯体を得たが、酸素の存在下ではＨ_２の形式的損失と
共にリガンドのアミノメチレン基が１個または２個、酸化的脱水素化された；Ｒ
−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｈ）_２−（２−ｐｙ）→Ｒ−Ｎ＝Ｃ（Ｈ）−（２−ｐｙ）＋Ｈ _２ 。結果として得られたモノ−およびジ−イミノＦｅ（II）錯体（［Ｆｅ（ｔａ
ｃｈｐｈｒ−Ｈ_２）］^２＋や［Ｆｅ（ｔａｃｈｐｙｒ−２Ｈ_２）］^２＋によって
示される）は，分割不可能な混合物であるが、それらはＨ_２Ｏ_２によって完全に
酸化されて既知のトリスイミノ錯体Ｆｅ（II）［シス型，シス−１，３，５−ト
リ（ピリジン−２−ｃａｒｂｏｘａlｄｉｍｉｎｏ）シクロヘキサン］^２＋（ま たは［Ｆｅ（ｔａｃｈｐｙｒ−３Ｈ_２）^２＋］となる可能性がある。

【００４２】 イミノ錯体混合物の環状ボルタメトリは標準水素電極に対し＋０．７８Ｖで不
可逆性アノード波を示す。Ｆｅ−ｔａｃｈｐｙｒ錯体はＨ_２Ｏ_２に対して還元剤
として働き細胞毒性物質であるヒドロキシル基を生成する。

【００４３】 ＴａｃｈｐｙｒはＦｅ（III）塩に対して還元剤として働き２個の同じＦｅ（I
I）イミノ錯体を生成する。またＴａｃｈｐｙｒはＦｅ（III）（ＡＴＰ）_３錯体
（これが細胞内鉄の形態と類推される）からＦｅ（III）を還元的に除去し２個 の同じＦｅ（II）イミノ錯体を生成する。Ｎ−アルキレート化がｔａｃｈｐｙｒ
に対し二つの効力を与える新規のＮ−アルキレート化を経たｔａｃｈｐｙｒの誘
導体を合成した。つまり立体障害力を増加させることにより金属親和性を低下さ
せ、また窒素の酸素的脱水素化が妨害されるためＦｅ（III）の還元を妨害する 。Ｎ−メチルｔａｃｈｐｙｒ誘導体は高スピン錯体なのでＦｅ（II）との結合が
弱く、Ｆｅ（III）の錯体化や還元は認められない。Ｎ−アルキレート化された キレート剤は鉄と結合する力がないため、培養された膀胱癌細胞には毒性を示さ
ない。Ｎ−プロピレンアミノの3本の手を持つｔａｃｈベースのキレート剤もま た合成された。このキレート剤の化学的、生化学的特性の研究は、細胞内鉄キレ
ート化、鉄還元、細胞毒性間の関連性をより深く支持する。従ってこのキレート
剤はｔａｃｈｐｙｒと比較して酸素的脱水素化が行われる能力の軽減と細胞毒性
の双方を示す。

【００４４】 当データは、キレート剤誘導体が医薬製剤として癌治療に、さらに血管痙攣、
パーキンソン病、マラリアなどに限らず鉄過剰状態のため鉄代謝への作用が好ま
しいと思われる疾患に対して潜在的な有用性があることを強く示唆している。

【００４５】 金属キレート剤は、リンクする基によって様々なキレート部からなる化合物が
存在し多様な形態をとるであろう。その各々のキレート部は窒素、酸素、硫黄か
ら構成される基から選択された供与原子により一つまたはそれ以上の部位で置換
された直鎖または環状炭化水素であり、リンクする基は窒素、酸素、硫黄からな
る基の供与原子により一個またはそれ以上の置換が起きた炭化水素を基礎として
いる。

【００４６】 本発明がリンクする基は様々である。好ましくはリンクする基は、−Ｎ−、−
Ｏ−、そして−Ｓ−からなる基から選択された供与原子によって一つまたはそれ
以上の炭素が置換された炭化水素分子である。本発明の一つの実施の形態では、
リンクする基は３個の窒素により置換される。特に重要なのはシス型、シス−１
，３，５−トリアミノシクロヘキサンである。

【００４７】 化合物のキレート部の数も様々であり、同一または異なる場合もあるだろう。
本発明の一つの実施の形態では、化合物が三つの同一な環を持つ。キレート部は
−Ｎ−、−Ｏ−および−Ｓ−からなる基より選択された供与原子によって、一つ
またはそれ以上の部位で置換される。好ましくはキレート部は窒素で置換された
炭素環である。本発明の一つの実施の形態では化合物は様々な数の２−ピリジル
メチル分枝とリンクする基からなる。環はリンクする基のリンク部以外ならどの
場所においても供与原子によって置換される可能性がある。もし置換が金属イオ
ンの結合を立体的に阻害しなければ環はさらに置換される可能性がある。

【００４８】 化合物中の供与原子が金属イオンの結合に適切な位置に収まるような方法でキ
レート部はリンクする基と接合する。本発明の一つの実施の形態では、環はリン
クする基の供与原子を介してリンクする基に接合する。さらに本発明の実施の形
態の一つに、化合物がＣＨ_３ＣＨ（Ｒ）ＮＨ_２の分枝の各々に窒素を有するシス
−１，３，５−トリアミノシクロヘキサンでそのＲが芳香族または脂肪族基であ
るものがある。

【００４９】 本発明による金属キレート剤の好ましい実施の形態は以下の化学式で表される
：

【化２３】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団はシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に位置する、シス型配列； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基、またはこれらの
化合物であり、ＸＹ間の原子団の数は約２から約４； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基或
いはこれらの化合物、またはＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ，Ｐ（Ｏ）
（ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ， ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物のい ずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、そしてＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族
、アリル基またはこれらの化合物であり、それらはＹ、Ｙ’およびＹ’’におい
て同一かあるいは異なる； ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であり；そして ｎは０から約３の間である。

【００５０】 別の好ましい実施の形態として、本発明の金属キレート剤は次の化学式で表さ
れる：

【化２４】 式中： Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子団
はシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に位置する、シス型配列；そして
Ｓ、Ｓ’、Ｓ’’は０から約２である；

【化２５】 式中： ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族、アリル基またはこれらの化合物でありＺ、Ｚ’
、Ｚ’’で同一かあるいは異なる； ＹはＮＨ_２かＮＨＲ'、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ，Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，Ｒ'Ｐ（Ｏ
）ＯＨ，Ｒ'ＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物である。またＲはＨ、脂肪 族、枝分れ脂肪族、アリル基またはこれらの化合物であり、またＹは脂肪族、枝
分れ脂肪族、アリル、ヘテロキシル基またはこれらの化合物のいずれかに由来す
るＮ、ＯまたはＳ原子を含み、いずれにせよＹとＲ'はＺ、Ｚ’、Ｚ’’におい て同一かもしくは異なる； ｔは０から約２； ｎは０から約３の間である。

【００５１】 本発明の化合物は、本発明のキレート部の総数と同数かまたはそれ以下の配位
数を持つ金属イオンと結合またはキレートする。この化合物が配位数６を越える
金属イオンを収容するように意図することも可能であるが、好ましくは本発明の
化合物は６の配位数をまたはヘキサデンテートイオンを持つ金属イオンと結合す
る。一つの実施の形態で本発明の化合物はＦｅ（III）と結合する。別の実施の 形態では本発明の化合物はＦｅ（II）と結合する。

【００５２】 本発明の化合物が細胞膜を貫通する可能性は本発明の有用な特徴である。細胞
膜を転位させる化合物は細胞内の鉄層をキレート化するのに役立つ。好ましい化
合物は従って脂肪親和性を持つ。実施の形態の一つとして、化合物は分配係数が
−０．１０ｌｏｇ_ＯＣＴである。

【００５３】 本発明の化合物は医薬製剤を含む製剤用として調合できる。金属キレート剤が
本発明と調和して利用されたならば、例えばカプセル、錠剤、粉末、懸濁液、乳
化剤、水薬、シロップ、エアゾール、軟質および硬質ゼラチンカプセル、坐薬、
注射用薬など好ましい投与形で調合できる。金属キレート剤はそれ自体または薬
学的基準に合う担体、希釈液、安定剤、可溶性剤、潤滑剤、結合剤など、または
それらの補形薬などと配合して処方できる。

【００５４】 これら多様な処方様式の全てが期待されるが、経口投与が好ましい投与方法で
ある。この化合物は希釈溶液または固体の担体と混合させて経口投与することが
可能である。製剤として本発明による化合物は、還元を介して細胞内の鉄のレベ
ルを減少させるのに利用できる。実施の形態として本発明による化合物は腫瘍細
胞の生長を阻害するのに利用できる。本発明による化合物は鉄の治療的削減に利
用されるが、同時に還元を介して他の金属の量も削減させることができる。

【００５５】 以下の本発明の詳細な説明において、実施例１は本発明による金属キレート 剤を合成するのに使用される材料を示す。

【００５６】 実施例２は、典型的キレート剤とそのアルキル化誘導体の合成を示す。より具
体的には、実施例２は、トリアミノリンク基の各第二アミンに２−ピリジルメチ
ル分枝を付加した特徴を持つｔａｃｈｐｙｒとして知られる６座キレート剤の合
成を示す。また実施例２はｔａｃｈｐｙｒのアルキル化誘導体を示すが、それは
第二アミンがメチルまたはエチル基によってさらに置換されている。

【００５７】 実施例３は、ｔａｃｈｐｙｒの金属錯体の調製を示す。調製された金属錯体は
Ｍ［ｔａｃｈｐｙｒ］［Ｘ］２^IIを含む。その場合、ＭはＦｅ（II）、Ｃａ（II
）、Ｍｇ（II）またはＣｕ（II）、そしてＸはＣｌ−であり、またＭはＭｎ（II
）またはＺｎ（II）そしてＸはＣ１０_４−；Ｍ＝Ｇａ^３−、Ｘ＝ＮＯ_３。

【００５８】 実施例４は、Ｆｅ（II）およびＦｅ（III）が、Ｆｅ（II）キレート剤、ｔａ ｃｈｐｙｒおよびｔａｃｈ−Ｃ（Ｍｅ）ｐｙｒと及ぼす相互作用、特に二つのキ
レート剤の性質の相違から生成される６座低スピンのカチオン金属錯体の調製を
示す。

【００５９】 実施例５はリガンドの調製を示す。

【００６０】 実施例６は、金属錯体に働いた電気化学的検証とＦｅ−ｔａｃｈｐｙｒがヒド
ロキシル基を生成する能力を示す。

【００６１】 実施例７は、Ｆｅ（III）−ＡＴＰ（１：３）錯体の反応を示す。

【００６２】 実施例８は、様々な腫瘍細胞および正常細胞の生育能力に影響するｔａｃｈｐ
ｙｒの効果を示す。

【００６３】 実施例９および１０は、ｔａｃｈｐｙｒが細胞内鉄をキレート化する能力を調
査する。実施例９は、フェリチンの合成に与えるｔａｃｈｐｙｒの効果を検証す
る。この物質は細胞内鉄のレベルによって調節されている。実施例１０は、キレ
ート剤が細胞膜を貫通し細胞内の鉄層へ到達する能力の証拠としてｔａｃｈｐｙ
ｒの分配係数を検証する。

【００６４】 実施例１１、１２および１３は、ｔａｃｈｐｙｒのイオン特異性を検証する。
より具体的には、実施例１１は、Ｆｅ（II）、Ｍｇ（II）、Ｍｎ（II）、Ｃｕ（
II）、Ｚｎ（II）そしてＧａ（III）などの多様なキレート化に関与するキレー ト剤の細胞毒性を示す。実施例１２は、アルキル化がｔａｃｈｐｙｒの金属イオ
ンの結合能力与える効果を示す。実施例１３は、アルキル化、非アルキル化され
たｔａｃｈｐｙｒの単結晶Ｘ線構造を検証して、アルキル化が結合距離に及ぼす
効果を示す。

【００６５】 実施例１４は、ｔａｃｈｐｙｒのアポトーシスを示す。

【００６６】 本発明によるキレート剤は以下の方法に従って調製された。

【００６７】 立体障害を強めＮ−Ｈ活性化をブロックするためにｔａｃｈｐｙｒを変化させ
ること、つまり（Ｎ−Ｒ）_３ｔａｃｈｐｙｒ（Ｒ＝Ｍｅ，Ｅｔ）の合成は、図６
（スキーム３）に示される方法によって達成されるだろう。窒素のｐ−トルエン
スルホンアミド保護を利用するｔａｃｈのＮ−アルキル化は、文献［Ｐａｕｌ−
Ｒｏｔｈ．Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｏｒｇ，Ｃｈｅｍ．３４：１４０８〜１４１ ２（１９９５）］に適合する。Ｔａｃｈ（５）のＮ，Ｎ^I，Ｎ^II−トリトシラミ ド誘導体はｔａｃｈとＴｓＣｌから得られる。このトシラミド５は、６または７
を得るためのメチル、エチル基のソースとしてその陰イオンをジアルキル硫酸塩
で消しながらＮａＨへ陽子を提供する。このトシレートは目的の生成物であるト
リアミン８または９を良好な収量で得るため、その後、酢酸無水物中、臭化水素
で効率的に除去された。このｔａｃｈのＮ，Ｎ^I，Ｎ^II−トリアルキル−Ｎ，Ｎ^I ，Ｎ^II−トリス（２−ピリジルメチル）誘導体は過剰塩基のもと乾燥ＤＭＦの中
で２−クロロメチルピリジン塩酸塩を用いてトリアミン８または９を適切にアル
キル化して調製する。純粋物はシリカゲルのカラムクロマトグラフィによって精
製する。

【００６８】 本発明のキレート剤による金属錯体は図７に示される。図７に示すように、摂
氏０度において酸素を除去したＭｅＯＨ中でＦｅ（II）とｔａｃｈｐｙｒを反応
させると、酸化に先立ちＦｅ（II）とｔａｃｈｐｙｒ間の初期錯体の生成が認め
られる。鉄（II）塩化物または過塩素酸塩はｔａｃｈｐｙｒと酸素下で反応し、
分離不可能な生成物２と３の混合物を生成する。そこではｔａｃｈｐｙｒは酸素
的脱水化されている。２と３ではｔａｃｈｐｙｒの3つある第二アミン供与原子 の１つか２つがイミン供与体によって置換される。これは図７Ａ［Ｃｈｕｍ，Ｈ
．Ｌ．ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２１：１１４６（１９８２）ａｎ ｄ Ｈｏｌａｎｄａ，ＭＩＤ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１５：８９ ０−９３（１９７６）］に示されるように、最初に対応するイミン錯体を生成す
ると考えられる鉄と２−アミノメチルピリジンの反応があってから加水分解と縮
合（スキーム２ａ）が起こることに類似する。

【００６９】 生成物が何であるかは、続いて起きる化学反応と共に、元素分析、紫外線可視
分光計測、そして水素ＮＭＲスペクトルの部分指定に基づく。（以下参照）混合
物２および３の紫外線可視スペクトルは電荷移動ピークとして表われるが６０２
ｎｍ（ｅ＝１７１０）と４１２ｎｍ（ｅ＝５００）での吸光度を示す。［Ｇｏｅ
ｄｋｅｎ，Ｖ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．９４：７３５ ５（１９７２）］。混合物２および３の水素ＮＭＲスペクトルはどちらの分子で
もミラー対称を欠くことからして錯体である。それは、先にＧａ（ｔａｃｈｐｙ
ｒ）（ＮＯ_３）_３のＸ線構造で認めたようなｔａｃｈキレート剤錯体のねじれた
分枝に由来すると推測する。［Ｈｉｌｆｉｋｅｒ，Ｋ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｉｎ ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．３６：４６００−０３（１９９７）］。しかしながら、イミ
ン領域は２のイミンＣ−Ｈに当たる単一ピーク（ＤＭＳＯ−ｄ_６の９．５１ｄ）
と３の２個のイミンＣ−Ｈに当たる２個のピーク（ＤＭＳＯ−ｄ_６８．３２と８
．２１ｄ）を明らかに示す。ＧｏｅｄｋｅｎとＢｕｓｃｈ［Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓ
ｏｃ，９４；７３５５（１９７２）］は、Ｆｅ（II）とジアミン−ジイミンリガ
ンドＭｅ_６の反応から、本発明者が得た１に類似する錯体［Ｆｅ（［１４］ジエ
ンＮ_４）−（ＣＨ_３ＣＮ）_２］［ＣｌＯ_４］_２（図７Ａのスキーム２ｂ参照）を
得た。彼らは［Ｆｅ（［１４］ジエンＮ_４）−（ＣＨ_３ＣＮ）_２］［ＣｌＯ_４］ _２ が順次対応するＦｅ（III）錯体へ酸化し、続いてモノアミン−トリイミノ錯 体そして最終的にＦｅ（II）のテトライミノ錯体へ酸素的脱水素化される（全て
酸素による）ことを確認した。

【００７０】 Ｈ_２Ｏ_２による２ａと３ａの酸化と、それに続く固形物を沈殿させるための陰
イオン交換が終了すると同時に、トリイミノ錯体［Ｆｅ（ｔａｃｈｉｍｐｙ）］
［ＢＰｈ_４］_２（４ａ）は分離できる。ピリジン−２−カルボキシルアルデヒド
，ｔａｃｈｐｙｒ，ＦｅＳＯ_４そしてＨＣｌＯ_４から［Ｆｅ（ｔａｃｈｉｍｐｙ
）］［ＣｌＯ_４］_２（４ａ）錯体がＬｉｏｎｓとＭａｒｔｉｎによって初めて直
接生成されたが、この錯体はこれにとても良く似た陽子ＮＭＲデータを示す。［
Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．７９；１５７２−７５（１９５７）］。

【００７１】 回転環ディスク電極サイクリックボルタメトリを使った２ａと３ａの混合物の
酸化還元作用の予備研究からＮＨＥに対してｃａ．０．７８Ｖでアノード波が認
めたが、それは２および／または３（図７）の酸化によって４が生成されたから
だと考える。それは、このプロセスが実行中の電極の回転スピードの変化によっ
て拡散律速を受けることから証明される。逆プロセスに対応する陰極流は認めら
れなかった。可能な逆プロセスの速度論および中間生成物を調査するため、環は
還元電位（ＮＨＥに対し０．４４Ｖ）に維持され、ディスク電極は陽極電位に覆
われていた。電流は認められなかった。

【００７２】 本発明による金属キレート剤の細胞毒性は以下の通りである。Ｆｅ（II）およ
びＦｅ（III）がｔａｃｈｐｙｒと相互に強く影響し合う結果に一致して、この キレート剤はヒトとマウスの膀胱腫瘍細胞の培養組織に極めて毒性があることが
分った。（Ｎ−Ｒ）_３ｔａｃｈｐｙｒ（Ｒ＝Ｍｅ，Ｅｔ）キレート剤は本質的に
は無毒であった。さらにｔａｃｈｐｙｒによる治療が細胞の鉄の排除につながる
強力な証拠もある。

【００７３】 錯体の全ての研究から（Ｎ−Ｍｅ）_３ｔａｃｈｐｙｒはｔａｃｈｐｙｒより効
果の低い鉄のキレート剤であることが判明した。乾燥ＭｅＯＨ中での（Ｎ−Ｍｅ
）_３ｔａｃｈｐｙｒとＦｅ（ＣｌＯ_４）_２・６Ｈ_２Ｏの相互作用により常磁性の
薄緑色の粉末（１０）が得られる。元素分析と質量スペクトルによって、この化
合物は暫定的に高スピンＦｅ（II）錯体Ｆｅ［（Ｎ−Ｍｅ）_３ｔａｃｈｐｙｒ］
［ＣｌＯ_４］₂とする。１−４は低スピン錯体であるが、１０のスピン状態は金 属配位結合の相互作用が弱いことを示し、これはＮ―アルキル基の立体影響によ
るものと考える。ｔａｃｈｐｙｒのＮ−アルキル化が金属錯体のＸ線構造パラメ
ーターに与える立体影響は金属−窒素結合の延長を含む。

【００７４】 Ｆｅ（ＣｌＯ_４）₃・６Ｈ_２Ｏと（Ｎ−Ｍｅ）_３ｔａｃｈｐｙｒの相互作用は 、陽子ＮＭＲ信号が僅かに広く、自由配位子の信号に関連して移動する油性物質
（１１）を導く。配位子信号の摂動は高スピンＦｅ（III）と配位子の弱い相互 作用によるのだが、その配位子は（Ｎ−Ｍｅ）_３ｔａｃｈｐｙｒの水素ＮＭＲス
ペクトル中の接触転位［参照：Ｄｒａｇｏ，Ｒ．Ｓ．，Ｐｈｙｃａｌ Ｍｅｔｈ ｏｄｓ ｆｏｒＣｈｅｍｉｓｔｓ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，ｐｐ５１９（１９９２） ］を誘発する。Ｆｅ（III）の場合、（Ｎ−Ｍｅ）_３ｔａｃｈｐｙｒがＦｅ（III
）を強くキレート化することが不可能な理由は、立体影響（それはＦｅ（III） の方がサイズが小さいことからＦｅ（II）よりもＦｅ（III）の方が強い）と（ Ｎ−Ｍｅ）_３ｔａｃｈｐｙｒがイミンを生成し、よってＦｅ（III）を還元する ことが不可能なためである。

【００７５】 Ｆｅ（III）はｔａｃｈｐｙｒおよびｔａｃｈ−Ｃ（Ｍｅ）ｐｙｒによって還 元されるが、そのプロセスはｔａｃｈｐｙｒの生物学的作用に適切であろう。な
ぜならＦｅ（III）の形で細胞鉄が大量に存在するからだ。（以下参照）Ｆｅ（I
II）（Ｃｌ⁻またはＣｌＯ_４ ⁻塩）をｔａｃｈｐｙｒと反応させると２および３
の混合物ができるが、それはＢＰｈ４塩として単離される。Ｆｅ（III）とｔａ ｃｈｐｙｒの中間錯体が存在するかどうかは不明である。単離されたＦｅ（II）
錯体との類似性から、ｔａｃｈ−Ｃ（Ｍｅ）ｐｙｒは鉄と還元物を生成する傾向
がｔａｃｈｐｙｒよりも強い。

【００７６】 ｔａｃｈｐｙｒは１：３Ｆｅ（III）錯体とＡＴＰを反応させ［Ｍａｎｓｏｕ ｒ，Ａ．Ｎ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０：７９７５：７９
（１９８５）］２および３を供給する。細胞膜貫通キレート剤は、細胞内の不安
定な鉄層として知られ十分に特徴づけられていない状態で存在する細胞内鉄を、
Ｆｅ（II）或いはＦｅ（III）−配位子錯体が産出されると考えられる方法でキ レート化すると思われる。［Ｂｒｅｕｅｒ，Ｗ．他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．
２７０：２４２０９−１５（１９９５）］。Ｆｅ（III）はｔａｃｈｐｙｒと反 応してＦｅ（II）へ還元されるので、鉄キレート剤の新型の毒性としてＦｅ（II
I）−ＡＴＰのように、細胞膜の源と仮定されるものからＦｅ（III）が錯体化さ
れ還元される可能性を提案する。

【００７７】 酸素的脱水素化が立体的に阻害されているらしい弱毒性のｔａｃｈキレート剤
は（Ｎ−Ｒ）_３−ｔａｃｈｐｙｒによって代表される。酸素的脱水素化の仕組み
は率決定方法において意見が分れ今日まで複数の研究課題である。［Ｇｏｔｏ，
Ｍ．他，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．２０１５−２０１６
（１９９４）とＫｅｅｎｅ，Ｆ．Ｒ．，他，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１０
５：７０７５−８（１９８３）］。その結果にかかわらず、Ｈ^aにかかる立体的 電気的影響が工程上重要なことは明白である。

【００７８】 酸素的脱水素化がキレート剤の毒性に関与するという仮説をさらに研究するた
め、３本のＮ−プロピレンアミノの手を持つｔａｃｈベースのキレート剤（名称
ｔａｃｈｐｎ、図３の方法４）。Ｔａｃｈｐｎとｔａｃｈｐｙｒの違いはピリジ
ン環の代わりに−Ｃ（Ｈ）（ＣＨ_３）（ＮＨ_２）部分を持っていることである。
ｔａｃｈｐｙｒに比べｔａｃｈｐｎのα−水素はそのβ位置にあるメチル基によ
って立体障害を受けるため、ｔａｃｈｐｎのα−水素抽出は低い傾向があるかも
しれない。さらに、ｔａｃｈｐｙｒの擬−ベンジルＨ^aはｔａｃｈｐｎに比べ潜 在的に電子場において抽出される傾向が強いであろう。［参照 Ｍａｒｃｈ，Ｊ ．，Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．ＭｃＧｒａｗ−Ｈ
ｉｌｌ，ｐｐ９１４ｆｆ］。これらの考察からｔａｃｈｐｎはｔａｃｈｐｙｒよ
り酸素的脱水素化を行いＦｅ（III）を還元する能力が低いと類推される。予備 的な細胞培養実験でｔａｃｈｐｙｒとｔａｃｈｐｎの毒性の比較が行われた（図
３）。この実験によりｔａｃｈｐｎのＩＣ_５０価は約８０μＭであり、毒性にお
いてｔａｃｈｐｙｒの１７分の１倍であることが分った。

【００７９】 本発明をさらに説明するため以下に実施例を示す。

【００８０】 −−−実施例１−材料 無水等級ＭｅＯＨはフィッシャーから得た。Ｅｔ_２ＯはＮａ／Ｋから蒸留した
。無水等級ＤＭＳＯとＤＭＦはオルドリッチから得た。他の化学薬品はオルドリ
ッチ、シグマまたはフルカから購入し一般的な方法で使用した。

【００８１】 陽子と^１３Ｃ ＮＭＲをジェミニ３００ＸＬ装置を使用して３００ＭＨｚで、 またはブルカーＡＭ３６０装置を用いて３６０ＭＨｚで得た。化学的移行はＴＭ
Ｓ（ＤＭＳＯまたはＣＤＣｌ_３溶液）またはＴＳＰ（Ｄ_２Ｏ溶液）に比較しｄ等
級でｐｐｍ単位で認められた。陽子の化学的移行を以下に説明する。ｐｐｍ（多
重またはスピン系、完全にその生成量が測定できるとしてカップリング定数）。
化学的イオン化質量スペクトル（ＣＩ−ＭＳ）はフィネガン３０００装置を用い
て得た。陽イオン検出モードでの高速原子衝撃（ＦＡＢ−ＭＳ）質量スペクトル
はエクストレル４００装置を用いて得た。元素分析は、ニューハンプシャー大学
（The University of NH）Instrumentation Center, Atlantic Microlabs（ジョ
ージア州アトランタ）またはGalbraith Laboratories（テネシー州ノックスヴィ
ル）において行った。紫外線可視スペクトルはＨＰ８４５３二極配列分光計を用
いて計測した。ＨＰＬＣ分析はウォーターズ６００Ｅ／４８６／７４６二元ポン
プシステムを用いて紫外線検出２５４ｎｍで行った。ベックマン超球体４．６ｘ
２５ｃｍＲＰ−１８カラムが１００％ＭｅＯＨ２４分間に対し１００％勾配０．
０５Ｍ Ｅｔ_３ＮＨＯＡｃで得られた。サイクリックボルタメトリではコンピュ ーターインターフェース・スキャニング・バイポテンシオスタット（Pine Instr
ument Co. の model AFCBP1）が使用された。使用電極は毎分１６００回転（Pin
e Instrument Co.）の白金回転リングディスク電極（ＲＲＤＥ）でＳＣＥ基準電
極およびガラス状炭素逆電極と共に用いられた。

【００８２】 −−−実施例２−ｔａｃｈｐｙｒとそのアルキル化誘導体 ６座キレート剤（ｔａｃｈｐｙｒ）は、Ｂｏｗｅｎ，Ｔ．他,.Ｂｉｏｏｒｇ．
Ｍｅｄ.Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．６:８０７(１９９６)に明記されている手順により
トリアミン シス−１，３，５−トリアミノシクロヘキサン（ｔａｃｈ）のそれ ぞれの窒素に２−ピリジルメチル分枝を付加させて合成した。図１はｔａｃｈｐ
ｙｒの開裂型と閉鎖型の双方の配座構造を示す。合成されたｔａｃｈｐｙｒのア
ルキル化誘導体には（Ｎ−Ｍｅ）_３ｔａｃｈｐｙｒおよび（Ｎ−Ｅｔ）_３ｔａｃ
ｈｐｙｒそしてＮ−アルキル化誘導体がある。図４はｔａｃｈｐｙｒのアルキル
化誘導体の構造を示す。（参照（Ｎ−Ｒ）_３ｔａｃｈｐｙｒ，Ｒ＝ＭｅまたはＥ
ｔ）。

【００８３】 キレート剤の精製そして取扱いを容易にするために、キレート剤をエタノール
中の過剰の硝酸で処理して硝酸塩基を調製した。典型的な実施例では、８モル等
量の濃硝酸を無水エタノール１ｍｌ中で５ｘ１０^−３モルのｔａｃｈｐｙｒ溶液
に加えた。薄緑色の沈殿物を無水ジエチルエーテル８ｍｌで二度洗浄し、減圧下
（５ｘ１０−２Ｔｏｒｒ）で乾燥した。この硝酸塩は元素分析によってｔａｃｈ
ｐｙｒ、（ＨＮＯ_３）_５、（Ｎ−Ｍｅ）_３ｔａｃｈｐｙｒ（ＨＮＯ_３）_６そして
（Ｎ−Ｅｔ）_３ｔａｃｈｐｙｒ（ＨＮＯ_３）_６であると判明した。

【００８４】 −−−実施例３−ｔａｃｈｐｙｒの金属錯体の調製 適切な金属塩とキレート剤をメタノール溶液中で反応させ、続いてその溶液に
ジエチルエーテルを静かに注いでｔａｃｈｐｙｒの金属錯体を生成した。そして
酸化分析によって決定された十分な純度を得るために再結晶化を行った。化合物
をりん酸バッファーの塩水に溶かし、そして細胞毒性の分析に用いた。以下の物
質が生成された金属錯体に含まれる。“Ｍ［ｔａｃｈｐｙｒ］［Ｘ］２”ここで
、ＭがＦｅ（II）、Ｃａ（II）、Ｍｇ（II）、Ｃｕ（II）でありＸがＣｌ⁻；ま
たＭがＭｎ（II）、Ｚｎ（II）でありＸがＣｌＯ_４−；ＭがＧａ^３＋でありＸが
ＮＯ_３−である。図１はｔａｃｈｐｙｒの金属錯体の構造を示す。

【００８５】 −−−実施例４−ｔａｃｈｐｙｒとＴａｃｈ−Ｃ（Ｍｅ）ｐｙｒの鉄錯体の調製 Ａ．［Ｆｅ（ｔａｃｈｐｙｒ）］Ｃｌ_２（１）の調製 薄緑色のＦｅＣｌ_２・４Ｈ_２Ｏ（０．０２２９ｇ，１．１５ｘ１０^−４モル）
メタノール（２ｍｌ）溶液を、シュレンクフラスコ内で５分間窒素パージガスを
与えて脱気し、同様に脱気した黄色のｔａｃｈｐｙｒ（０．０４６４ｇ，１．１
５ｘ１０^−４モル）メタノール溶液（２ｍｌ）を加えた。混合液を窒素下で摂氏
０度で３０分攪拌すると茶色に変化した。Ｅｔ_２Ｏと層にすると褐色の沈殿物が
生成されたので、それを窒素ガス中でろ過し減圧乾燥し、窒素下においてシュレ
ンクフラスコに保存した。Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，３６０ＭＨｚ，２５℃ ）；ｄ７．８０，７．５８，７．２６，６．９８（ｔ，ｄ，ｔ，ｄ，４Ｈ，Ｃ₅ Ｈ_４Ｎ）；５．５５（ｔ，１Ｈ，ＮＨ）；４．４３，４．１０（ＡＢＸ，２Ｈ，
ｐｙ−ＣＨ_２）；３．０７（ｓ，１Ｈ，シクロヘキシルメチンＨ）；２．０９，
１．８６（ＡＢ，Ｊ＝１４．８Ｈｚ，２Ｈ，シクロヘキシルメチレンＨ^＋ｓ，ジ
アスター）。生成物の空気感応性は、更なる性質決定に干渉した。

【００８６】 Ｂ．１の２ａおよび３ａの混合物への転化 錯体１（固体）を摂氏２５度で１時間空気に晒すと、色が褐色から緑褐色に変
化した。生成物はＨ ＮＭＲ分光計で２ａおよび３ａの混合物と判明した。

【００８７】 Ｃ．ＦｅＣｌ_２・４Ｈ_２Ｏおよびｔａｃｈｐｙｒからの［Ｆｅ（ｔａｃｈｐｙ
ｒ−Ｈ_２）］Ｃｌ_２（２ａ）および［Ｆｅ（ｔａｃｈｐｙｒ−２Ｈ_２）］Ｃｌ_２ （３ａ）の混合物の調製 つまりＦｅ（ｔａｃｈ−Ｃ（Ｍｅ）ｐｙｒ−ｎＨ_２）^２＋（ｎ＝１，２）の調製 薄緑色のＦｅＣｌ_２（０．０１７９ｇ，９．０１ｘ１０^−５モル）メタノール
（２ｍｌ）溶液を、黄色のｔａｃｈｐｙｒ（０．０３６ｇ，９．０１ｘ１０^−５ モル）メタノール溶液（２ｍｌ）を加えると、暗緑褐色溶液に変わった。これを
０．５時間放置し、エーテル（１２ｍｌ）をこの混合物に層状に重ねると暗緑色
の沈殿物と緑色の溶液が得られた。上清を静かに注ぎ流して沈殿物を分離し減圧
乾燥すると収量６９．３％（０．０１４９ｇ，２．８２ｘ１０^−５モル）で暗緑
褐色の固形物が得られた。Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，３６０ＭＨｚ，２５℃ ）；ｄ９．４０，９．３８，９．３０（ｓ，３イミンＨ，ＲＮ＝Ｃ（Ｈ）Ｒ’）
；８．５ｄから７．３ｄの多数のピークはピリジン水素、６．３ｄから５．５ｄ
の４個のピークは（ＮＨ）；５．０ｄから４．３ｄの６個のピークは（ｐｙ−Ｃ
Ｈ_２）；２．９ｄから４．３ｄの多数のピークは（シクロヘキシルメチンＨ）と
（シクロヘキシルメチレンＨ^＋ｓ）。

【００８８】 Ｄ．［Ｆｅ（ｔａｃｈｉｍｐｙ）］［ＢＰｈ_４］_２（４ａ）の調製 薄緑色のＦｅＣｌ_２・４Ｈ_２Ｏ（０．０２１９ｇ，１．１０ｘ１０^−４モル）
メタノール（２ｍｌ）溶液を、黄色のｔａｃｈｐｙｒ（０．０４４ｇ，１．１０
ｘ１０^−４モル）メタノール溶液（２ｍｌ）に加えると暗緑褐色溶液に変わった
。Ｈ_２Ｏ_２（３０％）を４滴落とし、１時間放置した後Ｅｔ_２Ｏ（１０ｍｌ）と
層にすると直ぐに紫色の沈殿物でき青紫色溶液に変化した。上清を静かに注ぎ流
し固形物をアセトン（５ｍｌ）で抽出し、ろ過後減圧乾燥し、その後アセトン抽
出を繰り返し乾燥すると精製された紫色の固形物が得られた。この固形物をメタ
ノール（２ｍｌ）に溶かし、［ＮaＢＰｈ_４］_２（メタノール２ｍｌ中０．０５ ｇ）で処理し減圧下で分離乾燥すると紫色の沈殿物が得られた。この沈殿物をア
セトン（５ｍｌ）へ抽出後、ろ過して減圧乾燥した。その固形物をＣＨ_２Ｃｌ_２ （５ｍｌ）で洗浄し減圧乾燥すると収量３５．５％（０．０３０１ｇ，４．７９
ｘ１０^−５モル）で紫色の固形物が得られた。Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，３ ６０ＭＨｚ，２５℃）；ｄ９．１８（ｓ，１Ｈ，Ｎ＝ＣＨ−ｐｙ）８．３８，８
．２２，７．５９，６．６９（ｄ，ｔ，ｔ，ｄ，４Ｈ，Ｃ_３Ｈ_４Ｎ）；７．５９
，６．９０，６．７７（ｓ，ｔ，ｔ，Ｂ（Ｃ_６Ｈ_６）_４）；４．７９（ｓ，１Ｈ
，シクロヘキシルメチンＨ；２．５７，１．７９（ＡＢ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，２
Ｈ，シクロヘキシルメチレンＨ'ｓ，ジアスタエコトピック）。ＵＶ（ＭｅＯＨ ）５８２ｎｍ（ｅ＝５２２０），３２８ｎｍ（ｅ＝２９５０）．ｔａｃｈ−Ｃ（
Ｍｅ）ｐｙｒはｔａｃｈｐｙｒよりも容易にＦｅ［ｔａｃｈ−Ｃ（Ｍｅ）ｐｙｒ
−３Ｈ_２］^２＋の錯体を作る。それゆえ上記手順でＨ_２Ｏ_２でなくＯ_２を用いて
ＦｅＣｌ_２とｔａｃｈ−Ｃ（Ｍｅ）ｐｙｒの反応からＦｅ［ｔａｃｈ−Ｃ（Ｍｅ
）ｐｙｒ−３Ｈ_２］^２＋を得ることができる。

【００８９】 Ｅ．Ｆｅ［（Ｎ−Ｍｅ）_３ｔａｃｈｐｙｒ］［ＣｌＯ_４］₂（１０）の生成 薄黄色のＦｅ（Ｃｌ_４）_２・６Ｈ_２Ｏ（０．０３７４ｇ，１．０３ｘ１０^−１ モル）メタノール（２ｍｌ）溶液を、薄黄色の（Ｎ−Ｍｅ_３）ｔａｃｈｐｙｒ（
０．０４５８ｇ，１．０３ｘ１０^−４モル）メタノール溶液（２ｍｌ）に加える
と緑褐色溶液に変わった。３時間放置すると灰緑色の微結晶物質が沈殿した。上
清を静かに注ぎ流しＥｔ_２Ｏで洗浄し減圧乾燥すると収量７７．７％（０．０６
４７ｇ，９．２７ｘ１０^−５モル）で緑色の固形物が得られた。分析，Ｃａｌｃ
ｄはＣ_２７Ｈ_３８Ｎ_６Ｃｌ_２Ｏ_９（Ｆｅ［（Ｎ−Ｍｅ）_３ｔａｃｈｐｙｒ］［Ｃ
ｌＯ_４］₂・Ｈ_２Ｏ）；Ｃ，４５．２１；Ｈ，５．３４；Ｎ，１１．７１．結果 ：Ｃ，４４．９０；Ｈ，５．０８；Ｎ，１１．８８， ＭＳ（ＦＡＢ／ＤＭＳＯ ／グリセロール）：５００（Ｍ−２ＣｌＯ_４）。

【００９０】 −−−実施例５−リガンドの調製 Ａ．１，３，５−シス，シス−トリアミノシクロヘキサン−Ｎ，Ｎ^I，Ｎ^II− トリ−ｐ-トルエンスルフォニルアミド（５）の調製 塩ｔａｃｈ−３ＨＢｒ（７．６ｇ，２０．４モル）をＨ_２Ｏ（２５ｍｌ）にＮ
ａＯＨ（４．９ｇ，１２０モル）と共に溶解させると澄んだ溶液が得られた。こ
れにジオクサン（１５０ｍｌ）を加え氷槽に入れて冷やした。ジオクサン（７５
ｍｌ）にｐ−トルエンスルフォニル塩化物（１１．６９ｇ，６１．３モル）を滴
下した。この反応は室温にて行い、次に１８時間攪拌した。次に反応液はＥｔＯ
Ａｃ（２５０ｍｌ）へ抽出され層状に分離後、塩水（１００ｍｌ）で洗浄した。
次にこの溶液を硫酸ナトリウムで乾燥しろ過する。その後溶剤を回転蒸発させて
除去すると白色固体が残った。溶剤を除去するためにＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３（５
／９５％）でシリカのカラムクロマトグラフィにかけると、この生成物は精製さ
れて白色固体（１１．０ｇ，８９％）になる。分析，ＣａｌｃｄはＣ_２７Ｈ_３３ Ｎ_３Ｏ_６Ｓ_３；Ｃ，５４．７８；Ｈ，５．６３；Ｎ，７．１０．結果：Ｃ，５４
．７４；Ｈ，５．５９；Ｎ，７．０２，^IＨ ＮＭＲ（d₆-ＤＭＳＯ）ｄ７．６０ −７．５０（ｍ，３Ｈ），７．３４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．８），２．９５（ｍ，
１Ｈ），２．４０（ｓ，３Ｈ），１．５０（ｂｒ．ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．７），
０．８７（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝１２．０）；^１３Ｃ ＮＭＲ（ｄ_６−ＤＭＳＯ）ｄ１ ４２．５，１３９．４，１２９．７，１２６．３，４８．３，３９．４，２１．
０：ＭＳ（Ｃｌ／ＮＨ_３）６０９（Ｍ^＋＋１８）． Ｂ．Ｎ，Ｎ^I，Ｎ^II−トリメチル−１，３，５−シス，シス−トリアミノシク ロヘキサン−Ｎ，Ｎ^I，Ｎ^II−トリ−ｐ−トルエンスルフォニルアミド（６）の 調製 氷槽で冷却されたトシレート５（５．７３ｇ，９．７モルが乾燥ＤＭＦ（１５
０ｍｌ）中に溶解している）とＮａＨ（４５．２モル）を混合し、水素の放出が
止まった時点でジメチル硫酸塩（１２．６ｇ，９６．９モル）を加えた。この反
応混合液を摂氏９０度で１８時間熱し、冷却した後濃縮ＮＨ_４ＯＨ／Ｈ_２Ｏ（１
：１）（１５０ｍｌ）を加えて１時間攪拌した。溶媒を高真空ロータリーエバポ
レーターを用いて除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（５００ｍｌ）で集め、塩水（１
００ｍｌ）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥、ろ過、濃縮を経て粗固形物を
得た。精製はＣＨＣｌ_３（１００％）で抽出しながらシリカのカラムクロマトグ
ラフィによって行われた。溶媒除去後白色固形物（５．９ｇ、９６％）が精製さ
れた。分析．ＣａｌｃｄはＣ_３０Ｈ_３９Ｎ_３Ｏ_６Ｓ_３；Ｃ，５６．８２；Ｈ，６
．６１；Ｎ，６．６３，結果：Ｃ，５６．５８；Ｈ，６．５７；Ｎ，６．６４， ^I Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）ｄ７．６５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．４）７．３２（ｄ，
２Ｈ，Ｊ＝８．１），３．９０（ｍ，１Ｈ），２．６２（ｓ，３Ｈ），２．４５
（ｓ，３Ｈ），１．４０（ｍ，１Ｈ），１．３０（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝１１．７）； ^１３ Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）ｄ１４３．０９，１３６．６５，１２９．９８， １２６．８８，５１．９６，３１．８６，２８．５２，２０．９９；ＭＳ（Ｃｌ
／ＮＨ_３）６３４（Ｍ^＋＋１）． Ｃ．Ｎ，Ｎ^I，Ｎ^II−トリエチル−１，３，５−シス，シス−トリアミノシク ロ ヘキサン−Ｎ，Ｎ^I，Ｎ^II−トリ−ｐ−トルエンスルフォニルアミド（７） の調製 調製は６に類似し５（５．０ｇ，８．４６モル）、ＮａＨ（３９．４モル）そ
してジエチル硫酸塩（１３．０ｇ，８４．４モル）を使った。粗固形物を得るた
めに同様の作業を行い、精製はＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３（３／９７％）で抽出しな
がらシリカゲルのカラムクロマトグラフィによって行った。溶媒除去後白色固形
物（５．２９ｇ、９３％）が精製された。分析，ＣａｌｃｄはＣ_３３Ｈ_４５Ｎ_３ Ｏ_６Ｓ_３；Ｃ，５８．６２；Ｈ，６．７２；Ｎ，６．２２，結果：Ｃ，５８．３
３；Ｈ，６．７５；Ｎ，５．９６．^IＨ ＮＭＲ（ｄ_６−ＤＭＳＯ）ｄ７．６６（
ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．８）７．３３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．８），３．８２（ｂｒ．
ｔ，１Ｈ），３．１１（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝６．９）２．３９（ｓ，３Ｈ），１．５
８（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝１２．９），１．１５（ｂｒ．ｔ，１Ｈ），０．９９（ｔ，
３Ｈ，Ｊ＝６．６）；^１３Ｃ ＮＭＲ（ｄ_６−ＤＭＳＯ）ｄ１４３．４６，１３ ８．２６，１２９．８２，１２６．７９，５４．６０，３９．４８，３５．７１
，２１．３３，１６．７１：ＭＳ（Ｃｌ／ＮＨ_３）６０３（Ｍ^＋＋１８）． Ｄ．Ｎ，Ｎ^I，Ｎ^II−トリメチル−１，３，５−シス，シス−トリアミノシク ロヘキサントリ水素臭化物（８）の調製 フラスコに酢酸無水物（７．５ｍｌ）を満たし氷槽で冷却し濃臭化水素（１８
．５ｍｌ）を静かに加えた後、溶液を室温で１８時間攪拌した。トシレート６（
２．０ｇ，３．１６モル）を加え、この懸濁液を２４時間還流していると暗赤褐
色ができた。この溶液をロータリーエバポレータにかけると暗色の固形物を得た
ので、これをＨ_２Ｏ（２５ｍｌ）で集めてＥｔ_２Ｏ(2×50ml)で抽出した。水性 層をろ過後ｃａ．１０ｍｌまで濃縮する。この残留物を１００％ＥｔＯＨ（ｃａ
．５０ｍｌ）で集めた後、この残留物を沈殿させるため同量のＥｔ_２Ｏ加えた。
白い懸濁液を摂氏４度で１８時間冷却した後、固形物を回収、Ｅｔ_２Ｏで洗浄し
、真空乾燥する（１．１５ｇ，８８％）．分析，ＣａｌｃｄはＣ_９Ｈ_２１Ｎ_３（
ＨＢｒ）_３；Ｃ，２６．０９；Ｈ，５．８５；Ｎ，１０．１４，結果：Ｃ，２６
．０６；Ｈ，５．８１；Ｎ，１０．０６．^IＨ ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ）ｄ３．４１（ｔ
ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１２．０，３．６），２．７９（ｓ，３Ｈ），２．６３（ｂｒ．
ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．４），１．６６（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝１２．３）；^１３Ｃ Ｎ ＭＲ（Ｄ_２Ｏ）ｄ５５．７５，３３．２６，３２．５１；ＭＳ（Ｃｌ／ＮＨ_３）
１７２（Ｍ^＋＋１）． Ｅ．Ｎ，Ｎ^I，Ｎ^II−トリエチル−−シス，シス−１，３，５−トリアミノシ クロヘキサントリ水素臭化物（９）の調製 調製は８に類似し酢酸無水物（１６．８ｍｌ）、濃臭化水素（３０．５ｍｌ）
そして７（５．０ｇ、７．４モル）から、Ｈ_２Ｏ（５０ｍｌ）使用した同様の手
順とＥｔ_２Ｏ抽出（３ｘ１００ｍｌ）を行った。水性層をろ過後ほぼ無水になる
まで濃縮した。８を得るためＥｔＯＨ溶液にＥｔ_２Ｏを加えて沈殿を起こさせた
後、その白い懸濁液を摂氏４度で１８時間冷却、それから固形物を回収し、Ｅｔ _２ Ｏで洗浄し真空乾燥した（２．７３ｇ，８１％）。分析，ＣａｌｃｄはＣ_１２ Ｈ_２７Ｎ_３（ＨＢｒ）_３；Ｃ，３１．５７；Ｈ，６．６４；Ｎ，９．２１，結果
：Ｃ，３１．４９；Ｈ，６．６５；Ｎ，９．１２．^IＨ ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ）ｄ３．
４７（ｔｔ，１Ｈ，Ｊ＝１１．７，３．９），３．２０（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝６．９
），２．６２（ｂｒ．ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．８），１．６５（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝１
２．６）１．３１（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．９）；^１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ）ｄ５４ ．４０，４３．５９，３３．０３，１３．６０；ＭＳ（Ｃｌ／ＮＨ_３）１７２（
Ｍ^＋＋１）． Ｆ．Ｎ，Ｎ^I，Ｎ^II−トリメチル−Ｎ，Ｎ^I，Ｎ^II−トリス（２−ピリジルメチ
ル）−シス，シス−１，３，５−トリアミノシクロヘキサン（（Ｎ−Ｍｅ）_３ta
chpyr）の調製 トリアミン８（２．０ｇ，４．８３mmol）とＮａ₂ＣＯ_３（４．６０ｇ，４３ ．４mmol）をＤＭＦ（５０ｍｌ）で懸濁化させｃａ．摂氏８０度まで熱した。２
−クロロメチルピリジンＨＣｌ（２．３８ｇ，１４．５１mmol）を入れたＤＭＦ
（１０ｍｌ）を一度に加え、その反応に１８時間加熱を続けた。溶媒は真空ロー
タリーエバポレータで除去した。残留物をＣＨＣｌ_３（２００ｍｌ）で回収し、
Ｈ_２Ｏ（３ｘ１００ｍｌ）で洗浄、さらにもう一度飽和塩水で洗浄した。硫酸ナ
トリウムで乾燥後、乾燥剤をろ過、溶媒を除去して粗生成物である黒ずんだター
ル状油を得た。精製はＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３（５／９５％）で抽出しながらシリ
カゲルのカラムクロマトグラフィによって行われ、褐色の油を得た（０．７８ｇ
，３６％）。分析．ＣａｌｃｄはＣ_２７Ｈ_３９Ｎ_６；Ｃ，７２．４３；Ｈ，８．
８０；Ｎ，１８．７８，結果：Ｃ，７２．２２；Ｈ，８．６２；Ｎ，１８．４７
，^IＨ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）ｄ８．４８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８），７．５９（
ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８，１．８），１．３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８），７．
０８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．７），３．７０（ｓ，３Ｈ），２．５２（ｔ，１Ｈ，
Ｊ＝１２．０），２．２２（ｓ，２Ｈ），２．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．８）
，１．３２（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝１１．７）；^１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）ｄ１６ ０．４８，１４９．１３，１３６．５０，１２２．７２，１２１．８１，６０．
４３，５９．８２，３７．９６，３０．２５；ＭＳ（ＦＡＢ／グリセロール）４
４８（Ｍ^＋＋１）． Ｇ．Ｎ，Ｎ^I，Ｎ^II−トリエチル−Ｎ，Ｎ^I，Ｎ^II−トリス（２−メチルピリジ
ル）−シス，シス−１，３，５−トリアミノシクロヘキサン（（Ｎ−Ｅｔ）_３ta
chpyr）の調製 調製は（Ｎ−Ｍｅ）_３に類似し、９（２．７３ｇ，５．９７mmol）、Ｎａ₂CO _３ （５．９ｇ，５５．７mmol）と２−クロロメチルピリジンＨＣｌ（２．９５ｇ
，１８mmol）からＣＨＣｌ_３（１５０ｍｌ）、Ｈ_２Ｏ（３ｘ２００ｍｌ）、塩水
（１００ｍｌ）を使用し、同様の手順で行った。純粋物は黒ずんだ油をＭｅＯＨ
／ＣＨＣｌ_３（１０／９０％）で抽出しながらシリカのカラムクロマトグラフィ
によって精製され、溶媒を除去すると明るい黄褐色の油が残った（０．９３ｇ，
３２％）。分析．ＣａｌｃｄはＣ_３０Ｈ_４２Ｎ_６；Ｃ，７４．０２；Ｈ，８．７
１；Ｎ，１７．２７，結果：Ｃ，７４．２１；Ｈ，８．９２；Ｎ，１６．９７， ^I Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）ｄ８．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．９），７．６３（ｄ
ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８，２．１），７．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８），７．１
２（ｂｒ，ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．９），３．７７（ｓ，２Ｈ），２．６０（ｑ，３
Ｈ，Ｊ＝７．８，全体として陽子１個が不明瞭），１．９７（ｂｒ，ｄ，１Ｈ，
Ｊ＝８．７），１．２８（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝１２．０），０．９８（ｔ，３Ｈ，Ｊ
＝６．９）；^１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）ｄ１６２．１２，１４８．７６，１ ３６．３８，１２２．４１，１２１．５６，５７．６３，５６．１８，４５．０
６，３０．９８，１４．０４；ＭＳ（Ｃｌ／ＮＨ_３）４８７（Ｍ^＋＋１）． −−−実施例６−電子化学的研究−Ｆｅ−ｔａｃｈｐｙｒとＨ_２Ｏ_２からヒドロ
キシル基の検出 ０．５ｍＭ２ａ／３ａ水溶液と支持電解質としてのＫＣｌ（０．５Ｍ）をサイ
クリックボルタメトリーを利用して研究した。支持電解質のみの計測によって、
実質電位域はＮＨＥに対し０．１１Ｖから１．２９Ｖということが証明されたが
、それはＯ_２の還元とＣｌ⁻の酸化と関与している（図６）。２ａ／３ａ錯体の
酸化波は、電極回転スピードの違いと環電流の調査から０．５４Ｖ／ＳＣＥだと
判明した。よってＦｅ−ｔａｃｈｐｙｒ錯体は酸化還元反応を行う。

【００９１】 イミノ錯体混合物２／３がＨ_２Ｏ_２のＨＯ構成に触媒作用を持つか否かを調査
するために、デオキシリボース分析が行われた。２ａ／３ａの緩衝液（HBSS)（ １００ｍｌ）にデオキシリボース（５ｍＭ）とＨ_２Ｏ_２（２００ｍＭ）を混合し
、決められた最終濃度１ｍｌ溶液になるようにする。この混合溶液を摂氏３７度
で３０分間保温し、その後１．０ｍｌのトリクロロ酢酸（６％ｗ／ｖ）および０
．５ｍLのチオバルビツール酸（０．５ＭのＮａＯＨで１％ｗ／ｖ）で反応を抑 え、それから混合物を摂氏９７度で１５分煮沸した。溶液の紫外線スペクトルが
５３２ｎｍだったことから、吸光度（０．１０８）はデオキシリボースの酸化低
下を示している。２ａ／３ａの代わりにＦｅ（ＮＨ_４）_２（ＳＯ_４）_２を使用す
ると吸光度０．２０５を得た。つまりｔａｃｈｐｙｒの毒性は、イミノ錯体の細
胞内構成が細胞の酸化ダメージを強めることと関係があるのであろう。

【００９２】 −−−実施例７−TachpyrとFe（III）−ATP(1:3)錯体との反応 1M HCl（pale yellow)−6.14mL FeCl₃(0.179M)溶液に対して、0.1M HEPES/Na
バッファ（pH 7.0,20mL)−ATPジナトリウム塩（1.82g,3.30×10^-3 mol)が加えら
れ、その間1.0N NaOHを使用してpH7.0に保った。深い黄色の溶液が得られた。総
量は、100mLになるようにした。10mLの蒸留水ーtachpyr(3 eq based on Fe,0.01
33g,3.3×10-5mol)に、このFe-ATP錯体溶液（1mL）が加えられ、５分後に黄色か
ら緑色に変化した。UV-Vis分光法により判断して４８時間の反応は終了したが、
その生成物は、2aと3aとして特定された。

【００９３】 −−−実施例８−Tachpyrを用いた細胞毒性のアッセイ A. MTT アッセイ マウス(MBT2)とヒト(T24)の膀胱癌細胞におけるtachpyrの細胞毒性効果を、in
vitroで実験を行い、通常のヒト線維芽細胞(MRC-5)と比較した。MBT2細胞は、D
r.L.Lattime(Thomas Jefferson University,Philadelphia,PA)によって提供され
、一方、MRC-5細部は、H.Blau(Standford University,Standford,CA)から贈与さ
れた。T24細胞は、ATTC(Rockville,MD)から取得した。細胞は、5％CO₂を含んだ 加湿されたチェンバー中で、RPMI(MBTa2)または、10％のウシ胎児血清を含むDME
培地(T24とMRC-5)において増殖させた。９６穴の組織培養皿に、5×10³の細胞を
プレートして、一晩貼り付けた。その後、それぞれの実験点 の６つの重複した 培養皿について、試料化合物を加えた。

【００９４】 ７２時間後、細胞生存率がMTT dye reduction アッセイによって評価された（
参考文献：Mosman,T,J.Immunol.Meth.65:55(1983)）。MTTアッセイは、細胞生存
率における薬効を測定するために広く使用されている（参考文献：Richardson,D
.,Blood 86:4295(1995); Bruggerman,S.,Cancer Res,57:2676(1997);and Silver
,R., Blood 84:3440(1994)）。特に、(3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-yl)-2,5- ジフェニル tetraxolium ブロミドを培地に加え、減少した生成物の形成を、３ 時間後の560/650nmでの光学密度を測定することによってアッセイした。色彩形 成は、生存細胞数に比例するものと考えられる。IC₅₀は、50％の増殖を阻害する
のに必要な濃度として定義され、Multiple Drug-Effect Analysis Program (Bio
soft)を使用して計算された。

【００９５】 結果は、tachpyrとデスフェリオキサミンの両方が、MBT２細胞での細胞毒性を
示していた。４つの独立の実験では、tachpyrの平均IC₅₀は、70μMのデスフェリ
オキサミンと比べて、4.6±2.0μM（標準誤差）であった。

【００９６】 図８は、tachpyrと、培養されたMBT２細胞のデスフェリオキサミンとの 比較細胞毒性を示している。この図から、細胞増殖は、tachpyr（このデータか らの、計算された3.6μMのIC50を含む）とデスフェリオキサミン（70μM）の両 方によって阻害され、tachpyrはデスフェリオキサミンよりも効能があることが 明らかである。tachpyrの細胞毒性の効果は、細胞に特異ではなく、T24膀胱癌細
胞も、以下の表１に示すように、tachpyrに対して感受性がある。Tachpyrは、乳
癌に対しても細胞毒性を持つ。MRC-5 normalヒト線維芽細胞は、tachpyrに対し て感受性があるが、IC₅₀は実質的に高かった（30.6μM)。このことは、腫瘍細胞
は、非腫瘍細胞よりも、tachpyrに対してさらに感受性があることを示唆してお り、そして、このことは、抗腫瘍療法における適用と一致している。T24膀胱癌 細胞とMRC-5 normalヒト線維芽細胞 の両方は、正確には、それぞれ4.3μtMと30
.5μtMのIC₅₀の値のtachpyrに感受性があった。

【００９７】

【表１】 概して、tachpyrは、8μM以上の濃度での培養された膀胱癌細胞に対して、潜 在的に細胞毒性であった。

【００９８】 B．Clonogenic アッセイ 細胞生存率も、細胞が分裂する能力や可視の約50またはそれ以上の細胞のコロ
ニーの形成を測定することによるクローン原性測定法（Clonogenicアッセイ）を
使用して評価した。重複したプレートが、増殖培地に対して様々な濃度のtachpy
rを加えたものにさらされた。コントロール細胞は、tachpyrが加えられていない
。培養期間の最後において、生き残っている細胞は、トリプシンで処理（tripsi
nized)し、希釈し、tachpyrの無い増殖細胞に再びプレートした。コロニーは、 ７日間生成させた。それから、増殖培地は取り除かれ、プレートは、0.5％glute
raldehydeに固定し、1%のクリスタル・ヴァイオレットで染色して、その後にカ ウントした。

【００９９】 図９に示すように、tachpyrはMBT2細胞中でコロニーの形成を阻害していた。 これらの結果は、MTTアッセイによって示されたものと同様に、生存率は、tachp
yrによって激しく減少されることを確証した。

【０１００】 C．細胞毒性の時間経過 その後、MBT2細胞を、150μM(dfo)または25μM tachpyrとともに様々な時間の
長さで培養し、次に、上記したMTTアッセイを使用して測定した。

【０１０１】 時間０における生存率は、100％と定義した。図１０に示すように、tachpyrは、
細胞に対して、すぐに細胞毒性とはなっていなかった。正確には、約２４時間後
に遅れて細胞毒性を示し、その細胞毒性は、デスフェリオキサミンの時間経過と
並行していた。

【０１０２】 −−−実施例９−フェリチン合成 フェリチンは、その合成が細胞内の鉄の濃度に依存する、主要な鉄貯蔵蛋白で
ある。細胞内の鉄のキレート化におけるtachpyrの役割を調べるために、フェリ チン合成におけるtachpyrの影響を調べた。不添加または、20μM tachpyr、150 μM デスフェリオキサミン、あるいは200μＭ ferric nitrolotriacetateのいず
れかを含む培地に、細胞を、７または１６時間のいずれかの間放置した。培養の
最後の２時間は、細胞を、代謝的に［３５］S-translabel(ICN)とフェリチンで ラベルし、免疫沈降法やSDS PAGEによって視覚化した（参考文献：Torti,S.et a
l.,J.Biol.Chem.263:12638(1988)）。

【０１０３】 図１１で示すように、、tachpyrで１６時間処理された細胞において、フェリ チン合成は抑制された。これらの条件下では、tachpyrは、デスフェリオキサミ ンと同じくらい効果的にフェリチン合成を抑制した。フェリチンのＨとＬサブユ
ニットが示されている（それぞれ、下と上のバンド）。一致したTCA沈殿性の数 にによって確立されたものとして、フェリチン合成は、tachpyrによって特に阻 害される。フェリチン合成の同様の阻害が、７時間後の、tachpyrのすべての細 胞毒性の前の時間点においても見られた。したがって、細胞内の鉄消耗は、tach
pyrによって阻害される、初期に近い段階での減少であるものと考えられる。

【０１０４】 −−−実施例１０−分配係数 疎水性は、n-オクタノールと水の間の分配で得られる分配係数の値によって測
られる。疎水性計算で、-0.10の分配係数（logP_oct/H20）が算出され、これによ
り、tachpyrは、：k生体膜を貫通して細胞内イオンをキレートする可能性がある
ことを示している。この観測は、実施例９で示したtachpyrのフェリチン合成阻 害と一致する。

【０１０５】 特定の理論に縛られなければ、結果は、デスフェリオキサミンに関するtachpy
rの潜在性の毒性が、一部、デスフェリオキサミンに関するtachpyrの透過性を高
めることに寄与しているものと考えられる。二者択一的にか、あるいは追加的に
、tachpyrは、重要な細胞内イオン貯蔵への大きな通路を持っているものと考え られる。

【０１０６】 −−−実施例１１−細胞生存率におけるTachpyrの金属錯体の影響 tachpyrの金属錯体が、実施例３に開示されているものとして調製され、実施 例８で参照されたMTTアッセイを使用して、７２時間後の、MBT2細胞におけるそ れらの影響と、MBT2細胞におけるtachpyrの影響を比較した。

【０１０７】 図１２は、tachpyr（黒棒）の細胞毒性と、Fe［tachpyr］Cl₂（斜線棒）の細 胞毒性の比較を示している。図１３は、tachpyrと、［Mg］tachpyr、［Mn］tach
pyr、［Mn］tachpyr、［Cu］tachpyr、［Zn］tachpyr、そして、［Ca］tachpyr の細胞毒性の比較を示している。

【０１０８】 概して、Ca（II）、Mn（II）、そしてMg（II）のtachpyr錯体は、毒性であり 、一方、Zn（II）、Fe（II）、そしてCu（II）の錯体は、非毒性であった。

【０１０９】 −−−実施例１２−細胞生存率におけるSterically Hindered Tachpyrの誘導体 の影響 アルキル化されたtachpyrの誘導体を、アミノ基窒素N１、Ｎ２、そして、Ｎ３
の水素を置換したメチル基またはエチル基とともに、実施例２で示されたものと
して調製した。これらの誘導体は、Fe（III）またはFe（II）に強く結合するこ とができなかったが、Zn（II）とCu（II）に結合することができた。

【０１１０】 図１４では、これらのアルキル化された誘導体の細胞毒性と、MBT2細胞におけ
るtachpyrの細胞毒性の比較をしている。この結果から、steritically hindered
tachpyr誘導体は非毒性であることが明らかであり、tachpyrは鉄キレート剤で あることを示唆している。

【０１１１】 −−−実施例１３−結合距離と金属半径の関係 錯体形成特性におけるアルキル化の、化学的構造的効果を調べるために、Ni(I
I)錯体Ni［tachpyr］Cl₂とNi［(N-Me)₃tachpyr］［C10₄］²の単結晶Ｘ線構造を 比較した。金属と、それぞれのtachpyrキレート剤のアミン窒素との間の結合の 長さは、tachpyrのメチル化において、2.102(4)から2.168Åであった。

【０１１２】 この長さは、アルキル化されたtachpyrと金属イオンとの会合を弱めるメチル基 の窒素への立体効果と、Haへの立体電気的効果が重要であること、及び、プロセ
スにおけるHaへの立体電気的効果が重要であること、そして、特に鉄に対して顕
著であることを実証している。

【０１１３】 以下に示すように、表２は、tachpyrの様々な金属に対する結合距離と金属半 径の関係を示している。

【０１１４】 表３は、金属半径と、配位tachpyrのねじれと反転角度との間の関係を示して いる。

【０１１５】

【表２】

【０１１６】

【表３】 −−−実施例１４−アポトーシス アポトーシスまたは”プログラムされた細胞死”は、多数の抗癌剤によって開
始されるプロセスである。アポトーシスの経路は、細胞内プロテアーゼ（caspas
es)の挙動や、チトクロームCの解離、ミトコンドリアの変形、核凝縮や核断片化
、そして究極的には、細胞死、を含む複雑な細胞内の変化を含んでいる。アポト
ーシス細胞死の顕著な特色は、”DNA ladder”によって表れる。一連のDNA断片 を作り出すための細胞内ヌクレオソーム領域でのDNA切断部位は、アガロースゲ ル電気泳動を使用して視覚化することができる。tachpyrがアポトーシス経路の 引き金となっているか否かを決定するために、RAW264.7細胞から単離されたDNA を、25μMのtachpyrによって、０、６、１２そして２０時間の間処理した。細胞
から単離されたDNAは、50μMのcisplatin または500μMのエトポシド(VP16)によ
って、７時間の間でも処理した。Cisplatin とエトポシドは、現在癌治療として
使用されており、アポトーシスを引き起こすことで知られているDNA損傷剤であ る。それらは、ポジティブコントロールとして用いた。我々は、アガロースゲル
電気泳動を使用して、DNA断片化におけるtachpyr、VP16、そして、cisplatinの 影響を比較した。図１６で示すように、tachpyrは明らかに、アポトーシス細胞 死と一致するDNA断片化を引き起こした。その効果の大きさは、VP16やcisplatin
とほぼ一致する。したがって、tachpyrによる細胞毒性経路は、典型的な抗癌剤 によって引き起こされるものと類似しており、その医薬製剤としての使用の考慮
と一致している。

【０１１７】 本願明細書において参照されたすべての参考文献は、その内容が全体として本
願明細書に取り込まれる。

【０１１８】 本願明細書で述べた現時点での好適な実施例に対する様々な変形や修正例が、
当該技術分野の当業者にとって明白であろうことについて理解されるであろう。

【０１１９】 本発明の精神や範囲に反することなく、そして、本発明に付随する効果を減少
させることなく、このような変形や修正例はなされる。したがって、そのような
変形や修正例は、本願請求の範囲に含まれることが意図されるものである。

【図面の簡単な説明】

本発明は、図面を考慮しつつ、以下に示した発明の詳細な説明を読むとよりよ
く理解されるであろう。

【図１】 図１は、tachpyrのような既知の鉄キレート剤（オープンおよびクローズドコ ンフォメーションで示した）、デスフェリオキサミン(desferrioxamine)(DFO)、
およびPIHの構造を示し；

【図２】 図２は、本発明における金属キレート剤の例を示し；

【図３】 図３は、本発明における金属キレート剤の例を示し；

【図４】 図４は、本発明における金属キレート剤の例を示し；

【図５】 図５は、本発明における金属キレート剤の例を示し；

【図６】 図６は、立体障害力(steric hindrance)を増加させ、N-H間の活性化：(N-R)₃ t
achpyr(R-Me,ET)の合成を阻止するtachpyrの修飾(modificatin)方法を示し；

【図７】 図７は、本発明のキレート剤による金属複合体の生成を示し；

【図８】 図８は、tacpyrの変化する投与量の比較細胞傷害(comparative cytotoxicity) および培養されたMTB2膀胱癌細胞(cultured MTB2 bladder cancer cells)のデス
フェリオキサミン(desferrioxamine)を示し、細胞は、７２時間デスフェリオキ サミンメシレートの投与量を変化させて培養されたものであり；

【図９】 図９は、MBT2細胞における細菌コロニーの形成に関するtacpyrの効果を示し、 細胞は、tachpyrを用いて７２時間培養されたものであり、生存可能性は、クロ ーン原性測定法(clonogenic assay)を用いて評価され；

【図１０】 図１０は、tachpyrに関する細胞傷害の時間進路(time course)を示し、細胞は 、１５０μMのデスフェリオキサミン(dfo)又は１５０μMのtacpyrを用いて様々 な時間培養されたものであり、生存率は、MTT検査法を用いて評価され；

【図１１】 図１１は、フェリチン合成(ferritin synthesis)おけるtachpyrの効果を示し、
細胞は、２０μMのtachpyr(tach)、又は１５０μMのデスフェリオキサミン(def)
、ないしは２００μMのニトリロトリアセテート第2鉄(ferric nitrilotriacetat
e)(iron)を用いて培養地内で１６時間処理されたものであり、細胞は、処理中の
最後の２時間[35]Sアミノ酸と標識付けられ、第2鉄は免疫沈降(immunoprecipita
tion)により隔離され、SDS PAGEによって分析され、第2鉄のHおよびLサブユニッ
トは、（上方および下方にそれぞれ帯状で）示されており；

【図１２】 図１２は、MBT2細胞におけるtachpyrおよびFe[tachpyr]Cl₂の効果を示し、細胞
は、生存率は、MTT検査法を用いて評価される前にtacpyr（黒塗りの棒）又はFe[
tachpyr]Cl₂（斜線の棒）のいずれかを用いて７２時間処理されたものであり；

【図１３】 図１３は、MBT2細胞におけるtachpyrの効果およびその金属誘導体を示し、生存
率は、示された化合物に７２時間さらした後に評価され；

【図１４】 図１４は、MBT2細胞におけるtachpyrのN-アルキル化された誘導体の効果を示し
、生存率は、示された化合物に７２時間さらした後に評価され；

【図１５】 図１５Aは、tachpyrシクロヘキシル環(cyclohexyl)の偏平変形(flatterning di
stortion)および対応する調整されたtachの配位子(coordinated tach ligand)の
ねじれ角度を示し； 図１５Bは、配位されたtachの配位子（coordinated tach ligand)のねじれの代
表値(as a measure of)としてのねじれ角度を示しており、ねじれ角度は、M(tac
hpyr)n+の配位圏 [(coordination sphere)として定義され；

【図１６】 図１６は、tachpyr、エトポシド (etoposide)(vp)およびシスプラチン(cisplat
in) (cis)によって０、６、１２および２０時間処理された細胞のDNAについての
アポトーシス効果を示すものである。

【手続補正書】

【提出日】平成１３年４月２６日（２００１．４．２６）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

【化１】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、および／また
はＹ、Ｙ’およびＹ’’はＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（
ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、
ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ
、Ｙ’およびＹ’’内で同一かもしくは異なり； s、s'、s’’は０から約２であり；そして ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であり；

【化２】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、またはＮＨ_２ かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ)_２，Ｒ'Ｐ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯ
Ｐ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族ま
たはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ、Ｙ’およびＹ’’内で同一かも
しくは異なり； ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であり；そして nは０から約３であり；

【化３】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
り；かつ s、s'、s''は０から約２であり；

【化４】 式中； ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Z 、Z’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； ＹはＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，Ｒ'Ｐ（Ｏ ）ＯＨ，Ｒ'ＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、Ｒ’はＨ、脂肪族 、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、又は、Ｙは脂肪族
、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基またはそれらの化合物のいずれか
に由来するＮ、ＯまたはＳ原子団を含む属であり、いずれにせよとＹとＲ'はZ、
Z’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； tは０から約２であり；そして nは０から約３であること、 を特徴とするもの。

【化５】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、および／また
はＹ、Ｙ’およびＹ’’はＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（
ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、
ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ
、Ｙ’およびＹ’’内で同一かもしくは異なり； s、s’、s’’は０から約２であり；そして ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であること、 を特徴とするもの。

【化６】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、またはＮＨ_２ かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯ
Ｐ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族ま
たはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ、Ｙ’およびＹ’’内で同一かも
しくは異なり； ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であり；そして nは０から約３であること、 を特徴とするもの。

【化７】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
り；かつ s、s'、s''は０から約２であり；

【化８】 式中； ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Z 、Z’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； ＹはＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，Ｒ'Ｐ（Ｏ ）ＯＨ，Ｒ'ＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、Ｒ’はＨ、脂肪族 、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、又は、Ｙは脂肪族
、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基またはそれらの化合物のいずれか
に由来するＮ、ＯまたはＳ原子団を含む属であり、いずれにせよＹとＲ''はZ、Z
’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； tは０から約２であり；そして nは０から約３であること、 を特徴とするもの。

【化９】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、および／また
はＹ、Ｙ’およびＹ’’はＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（
ＯＨ）_２、ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、
ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ
、Ｙ’およびＹ’’内で同一かもしくは異なり； s、s'、ｓ’’は０から約２であり；そして ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であること、 を特徴とするもの。

【化１０】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、またはＮＨ_２ かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ)_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯ Ｐ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族ま
たはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ、Ｙ’およびＹ’’内で同一かも
しくは異なり； ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であり；そして nは０から約３であること、 を特徴とするもの。

【化１１】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
り；かつ s、s'、s''は０から約２であり；

【化１２】 式中； ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Z 、Z’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； ＹはＮＨ_２かＮＨＲ’、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，Ｒ’Ｐ（
Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、Ｒ’はＨ、脂肪族
、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、又は、Ｙは脂肪族
、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基またはそれらの化合物のいずれか
に由来するＮ、ＯまたはＳ原子団を含む属であり、いずれにせよＹとＲ’はZ、Z
’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； tは０から約２であり；および nは０から約３であること、 を特徴とするもの。

【化１３】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、および／また
はＹ、Ｙ’およびＹ’’はＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（
ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、
ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ
、Ｙ’およびＹ’’内で同一かもしくは異なり； ｓ、ｓ’、ｓ’’は０から約２であり；そして ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であること、 を特徴とするもの。

【化１４】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、またはＮＨ_２ かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯ
Ｐ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族ま
たはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ、Ｙ’およびＹ’’内で同一かも
しくは異なり； ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であり；そして nは０から約３であること、 を特徴とするもの。

【化１５】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
り；かつ s、s'、s''は０から約２であり；

【化１６】 式中； ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Z 、Z’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； ＹはＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，Ｒ’Ｐ（Ｏ
）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、Ｒ’はＨ、脂肪族、
枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、又は、Ｙは脂肪族、
枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基またはそれらの化合物のいずれかに
由来するＮ、ＯまたはＳ原子団を含む属であり、いずれにせよとＹとＲ’はZ、Z
’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； tは０から約２であり；そして nは０から約３であること、 を特徴とするもの。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 31/47 Ａ６１Ｋ 31/47 Ａ６１Ｐ 35/00 Ａ６１Ｐ 35/00 Ｃ０７Ｄ 215/12 Ｃ０７Ｄ 215/12 233/54 233/54 // Ｃ０７Ｄ 213/69 213/69 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ， ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，Ｇ Ｈ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ， ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，Ｍ Ｘ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ， ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (71)出願人 アメリカ合衆国 ＴＨＥ ＵＮＩＴＥＤ ＳＴＡＴＥＳ Ｇ ＯＶＥＲＮＭＥＮＴ アメリカ合衆国、ワシントン、デー・シー 20546 （番地なし) (72)発明者 スージー・ブイ．・トーチ アメリカ合衆国，ノース カロナイナ州 27106，ウィンストン−セイレム，ヒルト ップ コート 2334 (72)発明者 フランク・エム．・トーチ アメリカ合衆国，ノース カロナイナ州 27106，ウィンストン−セイレム，ヒルト ップ コート 2334 (72)発明者 ロイ・ピー．・プラナルプ アメリカ合衆国，ニュー ハンプシャー州 03801，ポ−ツマス，カボット ストリ ート 202 (72)発明者 マーティン・ダヴリュー．ブレッチビール アメリカ合衆国，ヴァージニア州 22003 −1155，アナンデール，モナク レーン 3404 Ｆターム(参考） 4C031 BA02 4C055 AA01 BA02 BA03 BA06 BA27 BB10 CA01 DA01 4C086 AA01 AA02 AA03 BC17 BC28 GA07 GA08 HA28 MA03 MA05 MA13 MA23 MA35 MA37 MA52 MA56 MA59 MA60 MA63 MA66 ZA02 ZA36 ZA45 ZA59 ZA75 ZB11 ZB26 ZB33 ZB35 ZB37 ZC55 4C206 AA01 AA02 AA03 FA01 GA11 MA03 MA05 MA33 MA43 MA55 MA57 MA72 MA76 MA79 MA80 MA83 MA86 ZA02 ZA36 ZA45 ZA59 ZA75 ZB11 ZB26 ZB33 ZB35 ZB37 ZC55

Claims (93)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一群のヘキサデンテートＦｅ（II）鉄錯体キレート剤であって、一般的な化 学式が以下のように表されるもの： 【化１】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
   団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
   り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
   化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
   たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、および／また
   はＹ、Ｙ’およびＹ’’はＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（
   ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、
   ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ
   、Ｙ’およびＹ’’内で同一かもしくは異なり； s、s'、s’’は０から約２であり；そして ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であり； 【化２】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
   団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
   り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
   化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
   たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、またはＮＨ_２ かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ)_２，Ｒ'Ｐ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯ
   Ｐ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族ま
   たはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ、Ｙ’およびＹ’’内で同一かも
   しくは異なり； ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であり；そして nは０から約３であり； 【化３】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
   団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
   り；かつ s、s'、s''は０から約２であり； 【化４】 式中； ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Z 、Z’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； ＹはＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，Ｒ'Ｐ（Ｏ ）ＯＨ，Ｒ'ＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、Ｒ’はＨ、脂肪族 、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、又は、Ｙは脂肪族
   、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基またはそれらの化合物のいずれか
   に由来するＮ、ＯまたはＳ原子団を含む属であり、いずれにせよとＹとＲ'はZ、
   Z’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； tは０から約２であり；そして nは０から約３であること、 を特徴とするもの。
2. 【請求項２】 請求項１に係る一群のヘキサデンテートＦｅ（II）キレート剤において、前記
   Ｆｅ（II）キレート剤は、tach-C(Me)pyr, tach-6-Mepyr, tachquin, s,s,s-tac
   hem-2Bn, s,s,s-tachen-2Me, (N-R)₃ tachpyr, tachpyr-2H₂ および tach-N-Me-
   Im-imineからなる金属キレート剤群から選択されたこと、 を特徴とするもの。
3. 【請求項３】 請求項１に係る一群のヘキサデンテートＦｅ（II）キレート剤において、前記 キレート剤は、医薬品(pharmaceuticals)であること、 を特徴とするもの。
4. 【請求項４】 請求項３に係る一群のヘキサデンテートＦｅ（II）キレート剤において、前記 医薬品は、化学療法剤(chemotherapeutic agent)であること、 を特徴とするもの。
5. 【請求項５】 請求項１に係る一群のヘキサデンテートＦｅ（II）キレート剤において、前記 各キレート剤は、治療用法(therapeutic dosage)により単独で、少なくとも他の
   一の医薬品と結合して、又は少なくとも他の一の医薬品と化学的に結合して、処
   方(formulated)されること、 を特徴とするもの。
6. 【請求項６】 請求項１に係る一群のヘキサデンテートＦｅ（II）キレート剤において、前記 キレート剤は、薬学基準に合う担体(carriers)、希釈液(diluents)、安定剤(sta
   bilizers)、可溶性剤(solubilizers)、潤滑剤(lubricants)、結合剤(binders)な
   ど又はそれらの補形薬(excipients thereof)とそれぞれ配合されること、 を特徴とするもの。
7. 【請求項７】 請求項１に係る一群のヘキサデンテートＦｅ（II）キレート剤において、前記 キレート剤は、腫瘍細胞(tumor cells)に対し抗増殖作用(antiproliferative ac
   tivity)を示すこと、 を特徴とするもの。
8. 【請求項８】 請求項１に係る一群のヘキサデンテートＦｅ（II）キレート剤において、キレ ート剤は、癌(cancer)、炎症および感染症(inflammatory and infectious condi
   tions)、血管過敏症(vasoreactive) および血管閉塞症(vasoocclusive conditio
   ns), 冠動脈および末梢血管のアテローマ性動脈硬化症(athlerosclerosis), 寄 生虫症(parasitic diseases)、神経および神経筋症状(neurologic and neuromus
   cular conditions)、およびエイズ(AIDS)を含むウイルス性症(viral conditions
   )を含んだ医学的症状（medical condition)の治療に用いられるが、これらに限 定されないこと、 を特徴とするもの。
9. 【請求項９】 請求項８に係る一群のヘキサデンテートＦｅ（II）キレート剤において、キレ ート剤は、さらに、血管痙攣(vasospasm)、パーキンソン病(Parkinson's diseas
   e)、アルツハイマー病（Alzeihmer's disease)、マラリア(malaria)、結核（tub
   erculosis)、関節炎（arthritis）、アレルギー(allergic)および喘息症(asthma
   tic conditions)、肝炎(hepatitis)、冠動脈および末梢血管の血管性再潅流障害
   (coronary and peripheral cascular ischemia-reperfusion injury of blood v
   essel)を含んだ医学的症状（medical condition)の治療に用いられること、 を特徴とするもの。
10. 【請求項１０】 哺乳類の医学的症状の治療および予防用の医薬組成物であって、有効成分とし
    て以下の化学式の化合物を備えているもの： 【化５】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
    団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
    り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
    化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
    たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、および／また
    はＹ、Ｙ’およびＹ’’はＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（
    ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、
    ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ
    、Ｙ’およびＹ’’内で同一かもしくは異なり； s、s’、s’’は０から約２であり；そして ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であること、 を特徴とするもの。
11. 【請求項１１】 請求項１０に係る医薬組成物において、前記有効成分化合物(active ingredie
    nts compound)は、tach-C(Me)pyr, tach-6-Mepyr, tachquin, sss-tachem-2Bn,
    sss-tachen-2Me, (N-R)₃ tachpyr, tachpyr-2H₂ および tach-N-Me-Im-imineか らなる金属キレート剤群から選択されたこと、 を特徴とするもの。
12. 【請求項１２】 請求項１０に係る医薬組成物において、前記組成物は、化学療法剤(chemother
    apeutic agent)であること、 を特徴とするもの。
13. 【請求項１３】 請求項１０に係る医薬組成物において、前記組成物は、治療用法(therapeutic
    dosage)により単独で、少なくとも他の一の医薬品と結合して、又は少なくとも 他の一の医薬品と化学的に結合して、処方(formulated)されること、 を特徴とするもの。
14. 【請求項１４】 請求項１０に係る医薬組成物において、前記組成物は、薬学基準に合う担体(ca
    rriers)、希釈液(diluents)、安定剤(stabilizers)、可溶性剤(solubilizers)、
    潤滑剤(lubricants)、結合剤(binders)など又はそれらの補形薬(excipients the
    reof)と配合されること、 を特徴とするもの。
15. 【請求項１５】 請求項１０に係る医薬組成物において、前記組成物は、有効成分化合物（activ
    e ingredient compound)の哺乳類代謝共役体(mammalian metabolic conjugate) を備えていること、 を特徴とするもの。
16. 【請求項１６】 請求項１０に係る医薬組成物 において、前記医学的症状（medical condition)
    は, 癌(cancer)、炎症および感染症(inflammatory and infectious conditions)
    、血管過敏症(vasoreactive) および血管閉塞症(vasoocclusive conditions), 冠動脈および末梢血管のアテローマ性動脈硬化症(athlerosclerosis), 寄生虫症
    (parasitic diseases)、神経および神経筋症状(neurologic and neuromuscular
    conditions)、およびエイズ(AIDS)を含むウイルス性症(viral conditions)を含 んでいるが、これらに限定されないこと、 を特徴とするもの。
17. 【請求項１７】 請求項１６に係る医薬組成物 において、前記医学的症状（medical condition)
    は、さらに、血管痙攣(vasospasm)、パーキンソン病(Parkinson's disease)、ア
    ルツハイマー病（Alzeihmer's disease)、マラリア(malaria)、結核（tuberculo
    sis)、関節炎（arthritis）、アレルギー(allergic)および喘息症(asthmatic co
    nditions)、肝炎(hepatitis)、冠動脈および末梢血管の血管性再潅流障害(coron
    ary and peripheral cascular ischemia-reperfusion injury of blood vessel)
    を含むこと、 を特徴とするもの。
18. 【請求項１８】 請求項１０に係る医薬組成物において、前記組成物は、液体の希釈液(liquid d
    iluent)又は固体の担体(solid carrier)と結合して経口用に処方(orally formul
    ated)されること、 を特徴とするもの。
19. 【請求項１９】 請求項１０に係る医薬組成物において、前記組成物を、治療に有効な量投与す ることにより腫瘍細胞(tumor cells)の発生を防止し、増殖速度を低減させ、又 は大きさを縮小させ、又はこれらを組み合わせて行うこと、 を特徴とするもの。
20. 【請求項２０】 哺乳類の医学的症状の治療および予防用の医薬組成物であって、有効成分とし て以下の化学式の化合物を備えているもの： 【化６】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
    団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
    り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
    化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
    たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、またはＮＨ_２ かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯ
    Ｐ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族ま
    たはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ、Ｙ’およびＹ’’内で同一かも
    しくは異なり； ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であり；そして nは０から約３であること、 を特徴とするもの。
21. 【請求項２１】 請求項２０に係る医薬組成物において、前記有効成分化合物(active ingredien
    ts compound)は、sss-tachem-2Bn, sss-tachen-2Meからなる金属キレート剤群か
    ら選択されたこと、 を特徴とするもの。
22. 【請求項２２】 請求項２０に係る医薬組成物において、前記有効成分化合物(active ingredien
    ts compound)は、化学療法剤(chemotherapeutic agent)であること、 を特徴とするもの。
23. 【請求項２３】 請求項２０に係る医薬組成物において、前記組成物は、治療用法(therapeutic
    dosage)により単独で、少なくとも他の一の医薬品と結合して、又は少なくとも 他の一の医薬品と化学的に結合して、処方(formulated)されること、 を特徴とするもの。
24. 【請求項２４】 請求項２０に係る医薬組成物において、前記組成物は、薬学基準に合う担体(ca
    rriers)、希釈液(diluents)、安定剤(stabilizers)、可溶性剤(solubilizers)、
    潤滑剤(lubricants)、結合剤(binders)など又はそれらの補形薬(excipients the
    reof)と配合されること、 を特徴とするもの。
25. 【請求項２５】 請求項２０に係る医薬組成物において、前記組成物は、有効成分化合物（activ
    e ingredient compound)の哺乳類代謝共役体(mammalian metabolic conjugate) を備えていること、 を特徴とするもの。
26. 【請求項２６】 請求項２０に係る医薬組成物において、前記医学的症状（medical condition) は,癌(cancer)、炎症および感染症(inflammatory and infectious conditions) 、血管過敏症(vasoreactive) および血管閉塞症(vasoocclusive conditions), 冠動脈および末梢血管のアテローマ性動脈硬化症(athlerosclerosis), 寄生虫症
    (parasitic diseases)、神経および神経筋症状(neurologic and neuromuscular
    conditions)、およびエイズ(AIDS)を含むウイルス性症(viral conditions)を含 んでいるが、これらに限定されないこと、 を特徴とするもの。
27. 【請求項２７】 請求項２６に係る医薬組成物 において、前記医学的症状（medical condition)
    は、さらに、血管痙攣(vasospasm)、パーキンソン病(Parkinson's disease)、ア
    ルツハイマー病（Alzeihmer's disease)、マラリア(malaria)、結核（tuberculo
    sis)、関節炎（arthritis）、アレルギー(allergic)および喘息症(asthmatic co
    nditions)、肝炎(hepatitis)、冠動脈および末梢血管の血管性再潅流障害(coron
    ary and peripheral cascular ischemia-reperfusion injury of blood vessel)
    を含むこと、 を特徴とするもの。
28. 【請求項２８】 請求項２０に係る医薬組成物において、前記組成物は、液体の希釈液(liquid d
    iluent)又は固体の担体(solid carrier)と結合して経口用に処方(orally formul
    ated)されること、 を特徴とするもの。
29. 【請求項２９】 請求項２０に係る医薬組成物において、前記組成物を、治療に有効な量投与す ることにより腫瘍細胞(tumor cells)の発生を防止し、増殖速度を低減させ、又 は大きさを縮小させ、又はこれらを組み合わせて行うこと、 を特徴とするもの。
30. 【請求項３０】 哺乳類における医学的症状の治療および予防用の医薬組成物であって、有効成
    分として以下の化学式の化合物を備えているもの： 【化７】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
    団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
    り；かつ s、s'、s''は０から約２であり； 【化８】 式中； ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Z 、Z’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； ＹはＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，Ｒ'Ｐ（Ｏ ）ＯＨ，Ｒ'ＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、Ｒ’はＨ、脂肪族 、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、又は、Ｙは脂肪族
    、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基またはそれらの化合物のいずれか
    に由来するＮ、ＯまたはＳ原子団を含む属であり、いずれにせよＹとＲ''はZ、Z
    ’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； tは０から約２であり；そして nは０から約３であること、 を特徴とするもの。
31. 【請求項３１】 請求項３０に係る医薬組成物において、前記有効成分化合物(active ingredien
    ts compound)は、tach-C(Me)pyr, tach-6-Mepyr, tachquin, (N-R)₃ tachpyr, t
    achpyr-H₂、tachpyr-2H₂ および tach-N-Me-Im-imineからなる金属キレート剤群
    から選択されたこと、 を特徴とするもの。
32. 【請求項３２】 請求項３０に係る医薬組成物において、前記組成物は、化学療法剤(chemothera
    peutic agent)であること、 を特徴とするもの。
33. 【請求項３３】 請求項３０に係る医薬組成物において、前記組成物は、治療用法(therapeutic
    dosage)により単独で、少なくとも他の一の医薬品と結合して、又は少なくとも 他の一の医薬品と化学的に結合して、処方(formulated)されること、 を特徴とするもの。
34. 【請求項３４】 請求項３０に係る、医薬組成物において、前記組成物は、薬学基準に合う担体
    (carriers)、希釈液(diluents)、安定剤(stabilizers)、可溶性剤(solubilizers
    )、潤滑剤(lubricants)、結合剤(binders)など又はそれらの補形薬(excipients
    thereof)と配合されること、 を特徴とするもの。
35. 【請求項３５】 請求項３０に係る医薬組成物において、前記組成物は、有効成分化合物（activ
    e ingredient compound)の哺乳類代謝共役体(mammalian metabolic conjugate) を備えていること、 を特徴とするもの。
36. 【請求項３６】 請求項３０に係る医薬組成物において、前記医学的症状（medical condition) は,癌(cancer)、炎症および感染症(inflammatory and infectious conditions) 、血管過敏症(vasoreactive) および血管閉塞症(vasoocclusive conditions), 冠動脈および末梢血管のアテローマ性動脈硬化症(athlerosclerosis), 寄生虫症
    (parasitic diseases)、神経および神経筋症状(neurologic and neuromuscular
    conditions)、およびエイズ(AIDS)を含むウイルス性症(viral conditions)を含 んでいるが、これらに限定されないこと、 を特徴とするもの。
37. 【請求項３７】 請求項３６に係る医薬組成物において、前記医学的症状（medical condition) は、さらに、血管痙攣(vasospasm)、パーキンソン病(Parkinson's disease)、ア
    ルツハイマー病（Alzeihmer's disease)、マラリア(malaria)、結核（tuberculo
    sis)、関節炎（arthritis）、アレルギー(allergic)および喘息症(asthmatic co
    nditions)、肝炎(hepatitis)、冠動脈および末梢血管の血管性再潅流障害(coron
    ary and peripheral vascular ischemia-reperfusion injury of blood vessel)
    を含むこと、 を特徴とするもの。
38. 【請求項３８】 請求項３０に係る医薬組成物において、前記組成物は、液体の希釈液(liquid d
    iluent)又は固体の担体(solid carrier)と結合して経口用に処方(orally formul
    ated)されること、 を特徴とするもの。
39. 【請求項３９】 請求項３０に係る医薬組成物において、前記組成物を、治療に有効な量投与す ることにより腫瘍細胞(tumor cells)の発生を防止し、増殖速度を低減させ、又 は大きさを縮小させ、又はこれらを組み合わせて行うこと、 を特徴とするもの。
40. 【請求項４０】 哺乳類における癌治療および予防をするために鉄分を削減する治療法であって
    、前記治療を必要とする哺乳類に対して治療的に有効な分量の合成物を投与する
    ステップを備えており、該合成物は有効成分として以下の化学式の化合物を備え
    ているもの： 【化９】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
    団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
    り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
    化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
    たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、および／また
    はＹ、Ｙ’およびＹ’’はＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（
    ＯＨ）_２、ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、
    ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ
    、Ｙ’およびＹ’’内で同一かもしくは異なり； s、s'、ｓ’’は０から約２であり；そして ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であること、 を特徴とするもの。
41. 【請求項４１】 請求項４０に係る鉄分を削減する治療法において、投与された有効成分化合物
    (active ingredients compound)は、tach-C(Me)pyr, tach-6-Mepyr, tachquin,
    s,s,s-tachem-2Bn、 s,s,s-tachen-2Me, (N-R)₃ tachpyr, tachpyr-H₂, tachpyr
    -2H₂ およびtach-N-Me-Im-imineからなる金属キレート剤群から選択されたこと 、 を特徴とするもの。
42. 【請求項４２】 請求項４０に係る鉄分を削減する治療法において、前記組成物は、医薬品(pha
    rmaceuticals)であること、 を特徴とするもの。
43. 【請求項４３】 請求項４０に係る鉄分を削減する治療法において、前記医薬品は、化学療法剤
    (chemotherapeutic agent)であること、 を特徴とするもの。
44. 【請求項４４】 請求項４０に係る鉄分を削減する治療法において、前記組成物は、単独で、 少なくとも一の医薬品と結合し、又は少なくとも一の医薬品と化学的に結合して
    投与されること、 を特徴とするもの。
45. 【請求項４５】 請求項４０に係る鉄分を削減する治療法において、前記組成物は、単独で、 又は薬学基準に合う担体(carriers)、希釈液(diluents)、安定剤(stabilizers) 、可溶性剤(solubilizers)、潤滑剤(lubricants)、結合剤(binders)など又はそ れらの補形薬(excipients thereof)と配合して投与されること、 を特徴とするもの。
46. 【請求項４６】 請求項４０に係る鉄分を削減する治療法において、前記投与される前記組成 物は、有効成分化合物（active ingredient compound)の哺乳類代謝共役体(mamm
    alian metabolic conjugate)を備えていること、 を特徴とするもの。
47. 【請求項４７】 請求項４０に係る鉄分を削減する治療法において、前記治療が必要な哺乳類 は、癌を発病(developing)し又は癌にかかっている(suffering)おそれがあるこ と、 を特徴とするもの。
48. 【請求項４８】 請求項４０に係る鉄分を削減する治療法において、前記投与経路は、経口(or
    al)、静脈注射(intravenous)、非経口(parental)、直腸(rectal)、経皮(transde
    rmal)、膣内(intravaginal)、鼻腔内(intranasal)および気管支内（intrabronch
    ial)の投与のからなるグループから選択されること、 を特徴とするもの。
49. 【請求項４９】 請求項４０に係る鉄分を削減する治療法において、前記組成物は、カプセル(c
    apsules)、錠剤(tablets)、粉末(powder)、懸濁液(suspension)、乳濁液(emulsi
    ons)、水薬(solutions)、シロップ(syrups)、エアゾール(aerosols)、軟質およ び硬質のゼラチンカプセル(soft and hard gelatin capsules)、坐薬(supposito
    ries）、注射用薬(injectable solutions）からなるグループから選択された投 与形態(dosage form)によって投与されること, を特徴とするもの。
50. 【請求項５０】 請求項４０に係る鉄分を削減する治療法において、前記組成物は、液体の希 釈液(liquid diluent)又は固体の担体(solid carrier)と結合して経口用に処方(
    orally formulated)されること、 を特徴とするもの。
51. 【請求項５１】 哺乳類における癌治療および予防をするために鉄分を削減する治療法であって
    、前記治療を必要とする哺乳類に対して治療的に有効な分量の合成物を投与する
    ステップを備えており、該合成物は有効成分として以下の化学式の化合物を備え
    ているもの： 【化１０】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
    団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
    り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
    化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
    たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、またはＮＨ_２ かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ)_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯ Ｐ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族ま
    たはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ、Ｙ’およびＹ’’内で同一かも
    しくは異なり； ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であり；そして nは０から約３であること、 を特徴とするもの。
52. 【請求項５２】 請求項５１に係る鉄分を削減する治療法において、前記投与される有効成分 化合物(active ingredient compound)は、tach-C(Me)pyr, tach-6-Mepyr, tachq
    uin, s,s,s-tachem-2Bn, s,s,s-tachen-2Me, (N-R)₃ tachpyr、tachpyr-2H₂およ
    びtach-N-Me-Im-imineからなる金属キレート剤群から選択されたこと、 を特徴とするもの。
53. 【請求項５３】 請求項５１に係る鉄分を削減する治療法において、前記組成物は、医薬品(ph
    armaceuticals)であること、 を特徴とするもの。
54. 【請求項５４】 請求項５３に係る鉄分を削減する治療法において、前記医薬品は、化学療法 剤(chemotherapeutic agent)であること、 を特徴とするもの。
55. 【請求項５５】 請求項５１に係る鉄分を削減する治療法において、前記組成物は、単独で、 少なくとも一の医薬品と結合し、又は少なくとも一の医薬品と化学的に結合して
    投与されること、 を特徴とするもの。
56. 【請求項５６】 請求項５１に係る鉄分を削減する治療法において、前記組成物は、単独で、又
    は薬学基準に合う担体(carriers)、希釈液(diluents)、安定剤(stabilizers)、 可溶性剤(solubilizers)、潤滑剤(lubricants)、結合剤(binders)など又はそれ らの補形薬(excipients thereof)と配合して投与されること、 を特徴とするもの。
57. 【請求項５７】 請求項５１に係る鉄分を削減する治療法において、前記投与される組成物は、
    有効成分化合物（active ingredient compound)の哺乳類代謝共役体(mammalian
    metabolic conjugate) を備えていること、 を特徴とするもの。
58. 【請求項５８】 請求項５１に係る鉄分を削減する治療法において、前記治療が必要な哺乳類は
    、癌を発病(developing)し又は癌にかかっている(suffering)おそれがあること 、 を特徴とするもの。
59. 【請求項５９】 哺乳類における癌治療および予防をするために鉄分を削減する治療法であって
    、前記治療を必要とする哺乳類に対して治療的に有効な分量の合成物を投与する
    ステップを備えており、該合成物は有効成分として以下の化学式の化合物を備え
    ているもの： 【化１１】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
    団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
    り；かつ s、s'、s''は０から約２であり； 【化１２】 式中； ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Z 、Z’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； ＹはＮＨ_２かＮＨＲ’、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，Ｒ’Ｐ（
    Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、Ｒ’はＨ、脂肪族
    、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、又は、Ｙは脂肪族
    、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基またはそれらの化合物のいずれか
    に由来するＮ、ＯまたはＳ原子団を含む属であり、いずれにせよＹとＲ’はZ、Z
    ’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； tは０から約２であり；および nは０から約３であること、 を特徴とするもの。
60. 【請求項６０】 請求項５９に係る鉄分を削減する治療法において、前記投与される有効成分化
    合物(active ingredient compound)は、tach-C(Me)pyr, tach-6-Mepyr, tachqui
    n, 2Me、(N-R)₃ tachpyr、tachpyr-H₂ tachpyr-2H₂およびtach-N-Me-Im-imineか
    らなる金属キレート剤群から選択されたこと、 を特徴とするもの。
61. 【請求項６１】 請求項５９に係る鉄分を削減する治療法において、前記組成物は、医薬品(pha
    rmaceuticals)であること、 を特徴とするもの。
62. 【請求項６２】 請求項５９に係る鉄分を削減する治療法において、前記医薬品は、化学療法剤
    (chemotherapeutic agent)であること、 を特徴とするもの。
63. 【請求項６３】 請求項５９に係る鉄分を削減する治療法において、前記組成物は、単独で、少
    なくとも一の医薬品と結合して、又は少なくとも一の医薬品と化学的に結合して
    投与されること、 を特徴とするもの。
64. 【請求項６４】 請求項５９に係る鉄分を削減する治療法において、前記組成物は、単独で、又
    は薬学基準に合う担体(carriers)、希釈液(diluents)、安定剤(stabilizers)、 可溶性剤(solubilizers)、潤滑剤(lubricants)、結合剤(binders)など又はそれ らの補形薬(excipients thereof)と配合して投与されること、 を特徴とするもの。
65. 【請求項６５】 請求項５９に係る鉄分を削減する治療法において、前記投与される組成物は、
    有効成分化合物（active ingredient compound)の哺乳類代謝共役体(mammalian
    metabolic conjugate) を備えていること、 を特徴とするもの。
66. 【請求項６６】 請求項５９に係る鉄分を削減する治療法において、前記治療が必要な哺乳類は
    、癌を発病(developing)し又は癌にかかっている(suffering)おそれがあること 、 を特徴とするもの。
67. 【請求項６７】 哺乳類における第一期、第二期の双方、および急性鉄中毒症(acute iron toxi
    city)に対する慢性過鉄症(chronic iron overload)の治療方法であって、前記治
    療を必要とする哺乳類に対して治療的に有効な分量の合成物を投与するステップ
    を備えており、該合成物は有効成分として以下の化学式の化合物を備えているも
    の： 【化１３】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
    団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
    り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
    化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
    たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、および／また
    はＹ、Ｙ’およびＹ’’はＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（
    ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、
    ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ
    、Ｙ’およびＹ’’内で同一かもしくは異なり； ｓ、ｓ’、ｓ’’は０から約２であり；そして ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であること、 を特徴とするもの。
68. 【請求項６８】 請求項６７に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記投与される有効成分化 合物(active ingredient compound)は、tach-C(Me)pyr, tach-6-Mepyr, tachqui
    n, s,s,s-tachem-2Bn, s,s,s-tachen-2Me, (N-R)₃ tachpyr、tachpyr-H_2、tachp
    yr-2H₂およびtach-N-Me-Im-imineからなる金属キレート剤群から選択されたこと
    、 を特徴とするもの。
69. 【請求項６９】 請求項６７に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記組成物は、医薬品(phar
    maceuticals)であること、 を特徴とするもの。
70. 【請求項７０】 請求項６７に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記医薬品は、化学療法剤
    (chemotherapeutic agent)であること、 を特徴とするもの。
71. 【請求項７１】 請求項６７に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記組成物は、単独で、少
    なくとも一の医薬品と結合して、又は少なくとも一の医薬品と化学的に結合して
    投与されること、 を特徴とするもの。
72. 【請求項７２】 請求項６７に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記組成物は、単独で、又
    は薬学基準に合う担体(carriers)、希釈液(diluents)、安定剤(stabilizers)、 可溶性剤(solubilizers)、潤滑剤(lubricants)、結合剤(binders)など又はそれ らの補形薬(excipients thereof)と配合して投与されること、 を特徴とするもの。
73. 【請求項７３】 請求項６７に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記投与される組成物は、
    有効成分化合物（active ingredient compound)の哺乳類代謝共役体(mammalian
    metabolic conjugate) を備えていること、 を特徴とするもの。
74. 【請求項７４】 請求項６７に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記治療が必要な哺乳類は
    、癌を発病(developing)し又は癌にかかっている(suffering)おそれがあること 、 を特徴とするもの。
75. 【請求項７５】 請求項６７に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記投与経路は、経口(ora
    l)、静脈注射(intravenous)、非経口(parental)、直腸(rectal)、経皮(transder
    mal)、膣内(intravaginal)、鼻腔内(intranasal)および気管支内（intrabronchi
    al)の投与のからなるグループから選択されること、 を特徴とするもの。
76. 【請求項７６】 請求項６７に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記組成物は、カプセル(c
    apsules)、錠剤(tablets)、粉末(powder)、懸濁液(suspension)、乳濁液(emulsi
    ons)、水薬(solutions)、シロップ(syrups)、エアゾール(aerosols)、軟質およ び硬質のゼラチンカプセル(soft and hard gelatin capsules)、坐薬(supposito
    ries）、注射用薬(injectable solutions）からなるグループから選択された投 与形態(dosage form)によって投与されること, を特徴とするもの。
77. 【請求項７７】 請求項６７に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記組成物は、液体の希釈
    液(liquid diluent)又は固体の担体(solid carrier)と結合して経口用に処方(or
    ally formulated)されること、 を特徴とするもの。
78. 【請求項７８】 哺乳類における第一期、第二期の双方、および急性鉄中毒症(acute iron toxic
    ity)に対する慢性過鉄症(chronic iron overload)の治療方法であって、前記治 療を必要とする哺乳類に対して治療的に有効な分量の合成物を投与するステップ
    を備えており、該合成物は有効成分として以下の化学式の化合物を備えているも
    の： 【化１４】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
    団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
    り； Ｂ、Ｂ’およびＢ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、またはアリル基またはそれらの
    化合物である。ＸＹ間の原子団の数は約２から約４であり； Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は脂肪族、枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基ま
    たはそれらの化合物のいずれかに由来するＮ、ＯまたはＳを含み、またはＮＨ_２ かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，ＲＰ（Ｏ）ＯＨ，ＲＯ
    Ｐ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族ま
    たはアリル基或いはそれらの化合物であり、Ｙ、Ｙ’およびＹ’’内で同一かも
    しくは異なり； ｔ、ｔ’、ｔ’’は０から約２であり；そして nは０から約３であること、 を特徴とするもの。
79. 【請求項７９】 請求項７８に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記投与される有効成分化
    合物(active ingredient compound)は、tach-C(Me)pyr, tach-6-Mepyr, tachqui
    n, s,s,s-tachem-2Bn, s,s,s-tachen-2Me, (N-R)₃ tachpyr、tachpyr-H_2、tachp
    yr-2H₂およびtach-N-Me-Im-imineからなる金属キレート剤群から選択されたこと
    、 を特徴とするもの。
80. 【請求項８０】 請求項７８に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記組成物は、医薬品(pha
    rmaceuticals)であること、 を特徴とするもの。
81. 【請求項８１】 請求項７８に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記医薬品は、化学療法剤
    (chemotherapeutic agent)であること、 を特徴とするもの。
82. 【請求項８２】 請求項７８に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記組成物は、単独で、少
    なくとも一の医薬品と結合して、又は少なくとも一の医薬品と化学的に結合して
    投与されること、 を特徴とするもの。
83. 【請求項８３】 請求項７８に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記組成物は、単独で、又
    は薬学基準に合う担体(carriers)、希釈液(diluents)、安定剤(stabilizers)、 可溶性剤(solubilizers)、潤滑剤(lubricants)、結合剤(binders)など又はそれ らの補形薬(excipients thereof)と配合して投与されること、 を特徴とするもの。
84. 【請求項８４】 請求項７８に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記投与される組成物は、
    有効成分化合物（active ingredient compound)の哺乳類代謝共役体(mammalian
    metabolic conjugate)を備えていること、 を特徴とするもの。 有効成分化合物（active ingredient compound)の哺乳類代謝共役体(mammalian
    metabolic conjugate) を備えていること、 を特徴とするもの。
85. 【請求項８５】 請求項７８に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記治療が必要な哺乳類は
    、癌を発病(developing)し又は癌にかかっている(suffering)おそれがあること 、 を特徴とするもの。
86. 【請求項８６】 哺乳類における第一期、第二期の双方、および急性鉄中毒症(acute iron toxi
    city)に対する慢性過鉄症(chronic iron overload)の治療方法であって、前記治
    療を必要とする哺乳類に対して治療的に有効な分量の合成物を投与するステップ
    を備えており、該合成物は有効成分として以下の化学式の化合物を備えているも
    の： 【化１５】 式中； Ｘ^１、Ｘ^３、およびＸ^５はＮ、ＯまたはＳであり、Ｘ^１、Ｘ^３およびＸ^５の原子
    団がシクロヘキシル基の１、３および５にシス型に配置される、シス型配列であ
    り；かつ s、s'、s''は０から約２であり； 【化１６】 式中； ＲはＨ、脂肪族、枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、Z 、Z’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； ＹはＮＨ_２かＮＨＲ、ＯＨかＳＨ，ＣＯ_２Ｈ、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２，Ｒ’Ｐ（Ｏ
    ）ＯＨ，ＲＯＰ（Ｏ）ＯＨ基またはそれらの化合物であり、Ｒ’はＨ、脂肪族、
    枝分れ脂肪族またはアリル基或いはそれらの化合物であり、又は、Ｙは脂肪族、
    枝分れ脂肪族、アリルまたはヘテロキシル基またはそれらの化合物のいずれかに
    由来するＮ、ＯまたはＳ原子団を含む属であり、いずれにせよとＹとＲ’はZ、Z
    ’およびZ’’内で同一かもしくは異なり； tは０から約２であり；そして nは０から約３であること、 を特徴とするもの。
87. 【請求項８７】 請求項８６に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記投与される有効成分化
    合物(active ingredient compound)は、tach-C(Me)pyr, tach-6-Mepyr, tachqui
    n, s,s,s-tachem-2Bn, s,s,s-tachen-2Me, (N-R)₃ tachpyr、tachpyr-H_2、tachp
    yr-2H₂およびtach-N-Me-Im-imineからなる金属キレート剤群から選択されたこと
    、 を特徴とするもの。
88. 【請求項８８】 請求項８６に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記組成物は、医薬品(pha
    rmaceuticals)であること、 を特徴とするもの。
89. 【請求項８９】 請求項８６に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記医薬品は、化学療法剤
    (chemotherapeutic agent)であること、 を特徴とするもの。
90. 【請求項９０】 請求項８６に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記組成物は、単独で、少
    なくとも一の医薬品と結合して、又は少なくとも一の医薬品と化学的に結合して
    投与されること、 を特徴とするもの。
91. 【請求項９１】 請求項８６に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記組成物は、単独で、又
    は薬学基準に合う担体(carriers)、希釈液(diluents)、安定剤(stabilizers)、 可溶性剤(solubilizers)、潤滑剤(lubricants)、結合剤(binders)など又はそれ らの補形薬(excipients thereof)と配合して投与されること、 を特徴とするもの。
92. 【請求項９２】 請求項８６に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記投与される組成物は、
    哺乳類の代謝性共役(mammalian metabolic conjugate)tach-C(Me)pyr, tach-6-M
    epyr, tachquin, s,s,s-tachem-2Bn, s,s,s-tachen-2Me, (N-R)₃ tachpyr、tach
    pyr-2H₂およびtach-N-Me-Im-imineを備えていること、 を特徴とするもの。
93. 【請求項９３】 請求項８６に係る慢性過鉄症の治療方法において、前記治療が必要な哺乳類は
    、癌を発病(developing)し又は癌にかかっている(suffering)おそれがあること 、 を特徴とするもの。