JP2002233246A - 植物生育促進能及び植物病害防除能を有する微生物 - Google Patents
植物生育促進能及び植物病害防除能を有する微生物Info
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- JP2002233246A JP2002233246A JP2001032812A JP2001032812A JP2002233246A JP 2002233246 A JP2002233246 A JP 2002233246A JP 2001032812 A JP2001032812 A JP 2001032812A JP 2001032812 A JP2001032812 A JP 2001032812A JP 2002233246 A JP2002233246 A JP 2002233246A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 ナス科植物に対し生育促進能を有し、かつシ
ュードモナス・ソラナセアラムを病原菌とする青枯病に
対して高い防除能を有する細菌を提供する。 【解決手段】 ＡＣＣ（１−アミノ−１−シクロプロパ
ンカルボン酸）資化能またはインドール酢酸生産能を有
するシュードモナス属アルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍ
ｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）細菌、およびそれ
をナス科植物に接種すること。
ュードモナス・ソラナセアラムを病原菌とする青枯病に
対して高い防除能を有する細菌を提供する。 【解決手段】 ＡＣＣ（１−アミノ−１−シクロプロパ
ンカルボン酸）資化能またはインドール酢酸生産能を有
するシュードモナス属アルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍ
ｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）細菌、およびそれ
をナス科植物に接種すること。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、植物生育能を有
し、ナス科植物青枯病に対する拮抗能を有する学名シュ
ードモナス・アルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ａｌｋａｌｉｇｅｎｅｓ）細菌に関し、より詳しくは
該細菌に属する新菌株、およびこの菌株を生きたままナ
ス科植物に接種してシュードモナス・ソラナセアラムに
よるナス科植物の青枯病を防除する方法に関するもので
ある。
し、ナス科植物青枯病に対する拮抗能を有する学名シュ
ードモナス・アルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ａｌｋａｌｉｇｅｎｅｓ）細菌に関し、より詳しくは
該細菌に属する新菌株、およびこの菌株を生きたままナ
ス科植物に接種してシュードモナス・ソラナセアラムに
よるナス科植物の青枯病を防除する方法に関するもので
ある。
【０００２】
【従来技術】従来よりシュードモナス・ソラナセアラム
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕ
ｍ）に属する細菌は、トマトやナス、ピーマンなどのナ
ス科作物に甚大な病害を生じることが知られている。
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕ
ｍ）に属する細菌は、トマトやナス、ピーマンなどのナ
ス科作物に甚大な病害を生じることが知られている。
【０００３】シュードモナス・ソラナセアラムによるナ
ス科植物青枯病は、細菌性土壌病害として知られてお
り、ナス科作物に多大な損害を与えているにもかかわら
ず、有効かつ安全な防除方法があまりないのが現状であ
る。従来の青枯病など土壌病害に対する防除方法として
は、例えば、クロルピクリンや臭化メチルなどによる土
壌消毒方法があるが、この方法には、土壌中の有用な微
生物や昆虫をも殺してしまうなどの環境上の問題や、臭
気があること、それゆえ、人家の近くでは使用が制限さ
れるなどの問題がある。また、一旦滅菌した後に病原菌
が侵入した場合、かえって病気が進行してしまうという
懸念をも抱えている。臭化メチルは環境上の理由から、
使用が禁止もしくは制限される方向にある。
ス科植物青枯病は、細菌性土壌病害として知られてお
り、ナス科作物に多大な損害を与えているにもかかわら
ず、有効かつ安全な防除方法があまりないのが現状であ
る。従来の青枯病など土壌病害に対する防除方法として
は、例えば、クロルピクリンや臭化メチルなどによる土
壌消毒方法があるが、この方法には、土壌中の有用な微
生物や昆虫をも殺してしまうなどの環境上の問題や、臭
気があること、それゆえ、人家の近くでは使用が制限さ
れるなどの問題がある。また、一旦滅菌した後に病原菌
が侵入した場合、かえって病気が進行してしまうという
懸念をも抱えている。臭化メチルは環境上の理由から、
使用が禁止もしくは制限される方向にある。
【０００４】また、細菌病全般に対する防除方法として
は、例えば、硫酸銅剤、塩基性塩化銅など銅剤やストレ
プトマイシン等の抗生物質があるが、効果が充分でない
上に、使用条件によっては薬害や葉の汚れの恐れがあ
る。また、有用な微生物をも殺してしまうなどの環境上
の問題がある。さらに土壌への散布は効果的ではない。
次いで、微生物を防除に用いる方法が近年、研究されて
いる。シュードモナス属細菌を用いて植物病害を防除す
る方法は、いくつか見出され、特許出願されている。例
えば、ナス科植物の青枯病（特開平６−９３２５号公
報、特開平６−８６６６８号公報、特公平６−１７２９
１号公報、特開平７−１６５５２３号公報、特公平８−
１５４２８号公報）、イネ苗立枯病（特開平４−１０４
７８３号公報）、ポトリチス属およびペニシリウム属の
植物病原菌に起因する植物病害（特開平４−７７４０５
号公報）、グラム陽性細菌起因の植物病害（特開平５−
３１０５２１号公報）、フザリウム属菌に起因する植物
病害（特公平６−６５２３号公報）などをシュードモナ
ス属細菌により防除することができることが報告されて
いる。しかし、その防除効果は、未だ満足すべきもので
はない。
は、例えば、硫酸銅剤、塩基性塩化銅など銅剤やストレ
プトマイシン等の抗生物質があるが、効果が充分でない
上に、使用条件によっては薬害や葉の汚れの恐れがあ
る。また、有用な微生物をも殺してしまうなどの環境上
の問題がある。さらに土壌への散布は効果的ではない。
次いで、微生物を防除に用いる方法が近年、研究されて
いる。シュードモナス属細菌を用いて植物病害を防除す
る方法は、いくつか見出され、特許出願されている。例
えば、ナス科植物の青枯病（特開平６−９３２５号公
報、特開平６−８６６６８号公報、特公平６−１７２９
１号公報、特開平７−１６５５２３号公報、特公平８−
１５４２８号公報）、イネ苗立枯病（特開平４−１０４
７８３号公報）、ポトリチス属およびペニシリウム属の
植物病原菌に起因する植物病害（特開平４−７７４０５
号公報）、グラム陽性細菌起因の植物病害（特開平５−
３１０５２１号公報）、フザリウム属菌に起因する植物
病害（特公平６−６５２３号公報）などをシュードモナ
ス属細菌により防除することができることが報告されて
いる。しかし、その防除効果は、未だ満足すべきもので
はない。
【０００５】微生物によるナス科植物の青枯病（特開平
６−９３２５号公報、特開平６−８６６６８号公報、特
公平６−１７２９１号公報、特開平７−１６５５２３号
公報、特公平８−１５４２８号公報）防除方法に関し
て、その有効成分菌としては、シュードモナス・フルオ
レスセンス、シュードモナス・グラディオリ、シュード
モナス・フルオレスセンスとカニ殻の混合物、弱病原性
のシュードモナス・ソラナセアラム、弱病原性シュード
モナス・ソラナシアラムとファージの混合物等が提案さ
れており、本発明のシュードモナス属アルカリゲネスの
適用は従来知られていない。
６−９３２５号公報、特開平６−８６６６８号公報、特
公平６−１７２９１号公報、特開平７−１６５５２３号
公報、特公平８−１５４２８号公報）防除方法に関し
て、その有効成分菌としては、シュードモナス・フルオ
レスセンス、シュードモナス・グラディオリ、シュード
モナス・フルオレスセンスとカニ殻の混合物、弱病原性
のシュードモナス・ソラナセアラム、弱病原性シュード
モナス・ソラナシアラムとファージの混合物等が提案さ
れており、本発明のシュードモナス属アルカリゲネスの
適用は従来知られていない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、ナス科植物
に対し生育促進能を有し、かつシュードモナス・ソラナ
セアラムを病原菌とする青枯病に対して高い防除能を有
する細菌およびその細菌を有効成分とする微生物農薬を
提供し、さらに、その細菌により土壌および／または植
物を処理してナス科植物の生長を促進し、かつ植物細菌
病を防除する栽培方法を提供するものである。
に対し生育促進能を有し、かつシュードモナス・ソラナ
セアラムを病原菌とする青枯病に対して高い防除能を有
する細菌およびその細菌を有効成分とする微生物農薬を
提供し、さらに、その細菌により土壌および／または植
物を処理してナス科植物の生長を促進し、かつ植物細菌
病を防除する栽培方法を提供するものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、シュード
モナス属細菌に属するシュードモナス・アルカリゲネシ
ス Ｋ５Ａ菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌ
ｉｇｅｎｅｓ Ｋ５Ａ）がナス科植物の生育促進能を有
し、かつナス科植物の主要な細菌病である青枯病を効果
的に防除することを見出し、本発明に至った。
モナス属細菌に属するシュードモナス・アルカリゲネシ
ス Ｋ５Ａ菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌ
ｉｇｅｎｅｓ Ｋ５Ａ）がナス科植物の生育促進能を有
し、かつナス科植物の主要な細菌病である青枯病を効果
的に防除することを見出し、本発明に至った。
【０００８】すなわち、本発明は、ＡＣＣ（１−アミノ
−１−シクロプロパンカルボン酸）資化能またはインド
ール酢酸生産能を有するシュードモナス属アルカリゲネ
ス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅ
ｓ）細菌、特にシュードモナス属アルカリゲネス（Ｐｓ
ｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）細菌Ｋ
５Ａをナス科植物に接種することを含んでなるナス科植
物の栽培方法であり、さらに該細菌、該菌株並びにこれ
らを有効成分として含んでなる微生物農薬である。該栽
培方法は、ナス科植物の生育を促進させる栽培方法であ
り、または青枯病を防除する栽培方法である。本発明で
使用する細菌は、また、植物病害、特に青枯病の病原細
菌シュードモナス・ソラナセアラムに対して抗菌性を有
し防除能を有する微生物であり、植物、特にナス科植物
の生育促進能を有する微生物である。
−１−シクロプロパンカルボン酸）資化能またはインド
ール酢酸生産能を有するシュードモナス属アルカリゲネ
ス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅ
ｓ）細菌、特にシュードモナス属アルカリゲネス（Ｐｓ
ｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）細菌Ｋ
５Ａをナス科植物に接種することを含んでなるナス科植
物の栽培方法であり、さらに該細菌、該菌株並びにこれ
らを有効成分として含んでなる微生物農薬である。該栽
培方法は、ナス科植物の生育を促進させる栽培方法であ
り、または青枯病を防除する栽培方法である。本発明で
使用する細菌は、また、植物病害、特に青枯病の病原細
菌シュードモナス・ソラナセアラムに対して抗菌性を有
し防除能を有する微生物であり、植物、特にナス科植物
の生育促進能を有する微生物である。
【０００９】本発明のシュードモナス属アルカリゲネス
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）
細菌およびシュードモナス属アルカリゲネス（Ｐｓｅｕ
ｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）細菌Ｋ５Ａ
菌株はＡＣＣ（１アミノ−１−シクロペンタンカルボン
酸）資化能またはインドール酢酸（ＩＡＡ）生産能を有
し、かつ植物病原細菌シュードモナス・ソラナセアラム
に対して抗菌性を有する。そして、これらの細菌を植物
に接種することでナス科植物の生育を促進させ、青枯病
を防除することができる。
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）
細菌およびシュードモナス属アルカリゲネス（Ｐｓｅｕ
ｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）細菌Ｋ５Ａ
菌株はＡＣＣ（１アミノ−１−シクロペンタンカルボン
酸）資化能またはインドール酢酸（ＩＡＡ）生産能を有
し、かつ植物病原細菌シュードモナス・ソラナセアラム
に対して抗菌性を有する。そして、これらの細菌を植物
に接種することでナス科植物の生育を促進させ、青枯病
を防除することができる。
【００１０】ＡＣＣ分解酵素を有する微生物は、植物の
エチレン生合成の中間体であるＡＣＣを分解し、植物に
よって生産されるエチレン濃度を下げることによって、
植物の老化を遅らせることができる。また、インドール
酢酸は植物ホルモンとして考えられ、この物質の生産能
をもつ微生物は植物生長を促すことが知られている。こ
れらの性質を有する菌株を接種することにより植物を健
全に育苗することができる。さらに、ＡＣＣ分解酵素生
産能を有する微生物は、植物に対する優位性のために、
植物根への長期の定着が期待できる。
エチレン生合成の中間体であるＡＣＣを分解し、植物に
よって生産されるエチレン濃度を下げることによって、
植物の老化を遅らせることができる。また、インドール
酢酸は植物ホルモンとして考えられ、この物質の生産能
をもつ微生物は植物生長を促すことが知られている。こ
れらの性質を有する菌株を接種することにより植物を健
全に育苗することができる。さらに、ＡＣＣ分解酵素生
産能を有する微生物は、植物に対する優位性のために、
植物根への長期の定着が期待できる。
【００１１】以下、本発明を詳細に説明する。
【００１２】まず、以下に本発明の菌株の採取方法につ
いて述べる。
いて述べる。
【００１３】種々の植物体の中からＡＣＣ（１アミノ−
１−シクロプロパンカルボン酸）資化能を有する微生物
を採取するために、ＡＣＣを唯一の窒素源とする栄養寒
天培地（ＡＣＣ培地と略す。組成：ＡＣＣ；２５０ｍ
ｇ、ＫＨ２ＰＯ４；４ｇ、Ｎａ ２ＨＰＯ４；６ｇ，Ｍｇ
ＳＯ4・Ｈ２Ｏ；０．２ｇ、グルコース；２ｇ、グルコ
ン酸２ｇ、クエン酸２ｇ、ＦｅＳＯ４；１ｍｇ、Ｈ３Ｂ
Ｏ３；１０μｇ，ＺｎＳＯ４；７０μｇ、ＣｕＳＯ４；
２０μｇ、ＭｏＯ３；１０μｇ、ｐＨ７．０、水１Ｌ）
に植物根の破砕液を塗布し、本培地に生育する菌を選抜
し、ＡＣＣ分解酵素活性及びインドール酢酸生産能を測
定した。ＡＣＣ分解酵素活性とインドール酢酸生産能を
併せ持つ細菌並びにどちらかの能力を有する菌株をナス
及びトマトに処理したところ、生育促進能を有する複数
の菌株が得られた。次にこれらの菌株をナス及びトマト
の青枯病のポット試験に供し、青枯病防除能を調べた。
また、これらの菌株のうちナス科植物への生育促進能を
有する菌株の中で、著しく青枯病を防除する菌株が得ら
れた。本菌株は、青枯病の病原細菌であるシュードモナ
ス・ソラナセアラムに対し、寒天培地上で抗菌活性を有
していた。
１−シクロプロパンカルボン酸）資化能を有する微生物
を採取するために、ＡＣＣを唯一の窒素源とする栄養寒
天培地（ＡＣＣ培地と略す。組成：ＡＣＣ；２５０ｍ
ｇ、ＫＨ２ＰＯ４；４ｇ、Ｎａ ２ＨＰＯ４；６ｇ，Ｍｇ
ＳＯ4・Ｈ２Ｏ；０．２ｇ、グルコース；２ｇ、グルコ
ン酸２ｇ、クエン酸２ｇ、ＦｅＳＯ４；１ｍｇ、Ｈ３Ｂ
Ｏ３；１０μｇ，ＺｎＳＯ４；７０μｇ、ＣｕＳＯ４；
２０μｇ、ＭｏＯ３；１０μｇ、ｐＨ７．０、水１Ｌ）
に植物根の破砕液を塗布し、本培地に生育する菌を選抜
し、ＡＣＣ分解酵素活性及びインドール酢酸生産能を測
定した。ＡＣＣ分解酵素活性とインドール酢酸生産能を
併せ持つ細菌並びにどちらかの能力を有する菌株をナス
及びトマトに処理したところ、生育促進能を有する複数
の菌株が得られた。次にこれらの菌株をナス及びトマト
の青枯病のポット試験に供し、青枯病防除能を調べた。
また、これらの菌株のうちナス科植物への生育促進能を
有する菌株の中で、著しく青枯病を防除する菌株が得ら
れた。本菌株は、青枯病の病原細菌であるシュードモナ
ス・ソラナセアラムに対し、寒天培地上で抗菌活性を有
していた。
【００１４】得られた細菌の菌学的性質は、以下の通り
である。 （１）形態学的性質 形状 ：桿状 グラム染色 ：陰性 運動性 ：＋ 胞子形成 ：− （２）コロニー形状 肉汁寒天平板培養において平滑円形コロニー （３）生理学的性質 細胞内黄色色素産生 ：＋ カタラーゼ分解 ：＋ オキシダーゼ ：＋ ＯＦテスト ：Ｏ 酸素に対する態度 ：通性嫌気的 糖、有機酸の資化性 Ｄ−グルコース ：＋ Ｄ−マルトース ：− Ｄ−アラビノース：＋ Ｌ−ラムノース ：− Ｄ−マンノース ：＋ Ｄ−マンニト−ル：− セロビオース ：− アドニトール ：− Ｄ−ガラクトース：− Ｄ−ラフィノース：− Ｄ−メリビオース：− シュークロース ：− ソルビトール ：− トレハロース ：− Ｌ−ヒスチジン ：＋ Ｄ−アラニン ：− Ｌ−セリン ：＋ γ−アミノ酪酸 ：＋ メチルピルビン酸：＋ Ｄ−グルコン酸 ：＋ β-ヒドロキシブチル酸 ：＋ クエン酸の利用 ：＋
である。 （１）形態学的性質 形状 ：桿状 グラム染色 ：陰性 運動性 ：＋ 胞子形成 ：− （２）コロニー形状 肉汁寒天平板培養において平滑円形コロニー （３）生理学的性質 細胞内黄色色素産生 ：＋ カタラーゼ分解 ：＋ オキシダーゼ ：＋ ＯＦテスト ：Ｏ 酸素に対する態度 ：通性嫌気的 糖、有機酸の資化性 Ｄ−グルコース ：＋ Ｄ−マルトース ：− Ｄ−アラビノース：＋ Ｌ−ラムノース ：− Ｄ−マンノース ：＋ Ｄ−マンニト−ル：− セロビオース ：− アドニトール ：− Ｄ−ガラクトース：− Ｄ−ラフィノース：− Ｄ−メリビオース：− シュークロース ：− ソルビトール ：− トレハロース ：− Ｌ−ヒスチジン ：＋ Ｄ−アラニン ：− Ｌ−セリン ：＋ γ−アミノ酪酸 ：＋ メチルピルビン酸：＋ Ｄ−グルコン酸 ：＋ β-ヒドロキシブチル酸 ：＋ クエン酸の利用 ：＋
【００１５】なお、得られた菌株について１６ｓ−ｒＲ
ＮＡ遺伝子塩基配列分析を行ったところ、最も近縁とさ
れる種は、シュードモナス・アルカリゲネス（Ｐｓｅｕ
ｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）であった。
ＮＡ遺伝子塩基配列分析を行ったところ、最も近縁とさ
れる種は、シュードモナス・アルカリゲネス（Ｐｓｅｕ
ｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）であった。
【００１６】なお、上記の菌学的性質を有する菌株を、
「バージェイズ・マニュアル・オブ・システマティツク
・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ
ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏ
ｇｙ），第１巻、１９８４年」に基づき検索すると、グ
ラム陰性桿菌であること、好気的に生育すること、オキ
シダーゼ活性が陽性であることなどの性質より、本菌株
は、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属に属
するものであり、さらに１６ｓ−ｒＲＮＡで同定された
シュードモナス・アルカリゲネスと矛盾がない。
「バージェイズ・マニュアル・オブ・システマティツク
・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ
ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏ
ｇｙ），第１巻、１９８４年」に基づき検索すると、グ
ラム陰性桿菌であること、好気的に生育すること、オキ
シダーゼ活性が陽性であることなどの性質より、本菌株
は、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属に属
するものであり、さらに１６ｓ−ｒＲＮＡで同定された
シュードモナス・アルカリゲネスと矛盾がない。
【００１７】したがって、得られた菌株はシュードモナ
ス・アルカリゲネス Ｋ５Ａ菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎ
ａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ Ｋ５Ａ）と命名し、平
成１３年１月２４日に経済産業省産業技術総合研究所生
命工学工業技術研究所に寄託し、ＦＥＲＭ Ｐ−１８１
８０（生技研菌寄Ｐ−１８１８０）として受託されてい
る。
ス・アルカリゲネス Ｋ５Ａ菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎ
ａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ Ｋ５Ａ）と命名し、平
成１３年１月２４日に経済産業省産業技術総合研究所生
命工学工業技術研究所に寄託し、ＦＥＲＭ Ｐ−１８１
８０（生技研菌寄Ｐ−１８１８０）として受託されてい
る。
【００１８】次に、本発明の内容について述べる。
【００１９】まず、上記の本発明のシュードモナス・ア
ルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉ
ｇｅｎｅｓ）細菌を適当な培地で培養する。ここで使用
する培地は、菌株が増殖するものであれば特に限定され
るものではなく、通常使用されている培地を使用すれば
よい。培養して菌株を増殖させた後、遠心分離もしくは
膜濃縮により集菌を行い、保護剤と混合し、凍結乾燥し
た後、本菌株を含む粉状もしくは粒状の微生物農薬とし
て作成することができる。保護剤としては、グルコー
ス、フルクトース、シュークロースおよびトレハロース
などの糖類の１つもしくは複数の混合物を用いることが
できる。
ルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉ
ｇｅｎｅｓ）細菌を適当な培地で培養する。ここで使用
する培地は、菌株が増殖するものであれば特に限定され
るものではなく、通常使用されている培地を使用すれば
よい。培養して菌株を増殖させた後、遠心分離もしくは
膜濃縮により集菌を行い、保護剤と混合し、凍結乾燥し
た後、本菌株を含む粉状もしくは粒状の微生物農薬とし
て作成することができる。保護剤としては、グルコー
ス、フルクトース、シュークロースおよびトレハロース
などの糖類の１つもしくは複数の混合物を用いることが
できる。
【００２０】一方、本発明のシュードモナス・アルカリ
ゲネシス細菌を同様に培養後、しかるべき担体と混合
し、粉剤もしくは粒剤とすることもできる。この場合の
担体には、タルク、クレー、炭酸カルシウム、ケイソウ
土などの鉱物性粉末や、ピートモス、さらには、ポリビ
ニルアルコールなどの高分子化合物、ザンサンゴムやア
ルギン酸などの天然高分子化合物などがある。菌体の濃
度は、液剤の場合は、１０６ｃｆｕ／ｍｌ以上、好まし
くは１０７ｃｆｕ／ｍｌ以上とする。固体（水和剤、粉
剤）の場合は、１０５ｃｆｕ／ｇ以上、好ましくは１０
７ｃｆｕ／ｇ以上とする。
ゲネシス細菌を同様に培養後、しかるべき担体と混合
し、粉剤もしくは粒剤とすることもできる。この場合の
担体には、タルク、クレー、炭酸カルシウム、ケイソウ
土などの鉱物性粉末や、ピートモス、さらには、ポリビ
ニルアルコールなどの高分子化合物、ザンサンゴムやア
ルギン酸などの天然高分子化合物などがある。菌体の濃
度は、液剤の場合は、１０６ｃｆｕ／ｍｌ以上、好まし
くは１０７ｃｆｕ／ｍｌ以上とする。固体（水和剤、粉
剤）の場合は、１０５ｃｆｕ／ｇ以上、好ましくは１０
７ｃｆｕ／ｇ以上とする。
【００２１】次に本発明のシュードモナス・アルカリゲ
ネス細菌を有効成分とする微生物農薬の使用方法を述べ
る。
ネス細菌を有効成分とする微生物農薬の使用方法を述べ
る。
【００２２】本発明のシュードモナス・アルカリゲネシ
ス細菌は、トマトやナスなどのナス科作物の根に存在す
ることにより、植物生育促進効果を示す。したがって、
水に懸濁させ、種子または苗の根部を本菌液に浸漬する
ことにより植物体に定着させることが可能となり、生育
促進効果を発揮するとともに、シュードモナス・ソラナ
セアラムによるナス科植物青枯病を防除することができ
る。また、育苗期間中に根部へ灌注することによっても
目的を達成する事ができる。本発明の細菌を上記方法で
使用する場合、浸漬処理または土壌かん注処理の場合
は、浸漬液中の菌濃度が１０５ｃｆｕ／ｍｌ以上、好ま
しくは１０６ｃｆｕ／ｍｌ以上になるように調整する。
用土あるいは覆土に土壌混和する場合は、培養土１Ｌに
対して本防除剤を１ｇ以上混合し、均一になるように撹
拌する。また、浸種時に本防除剤希釈液に種を浸漬処理
する場合の希釈液の温度は、１５℃〜３５℃、好ましく
は２０℃〜３０℃であり、瞬時〜４８時間、より好まし
くは１時間〜２４時間処理をする。苗の根を浸漬処理す
る場合の希釈液の温度は、１５℃〜３５℃、好ましくは
２０℃〜３０℃であり、処理時間は瞬時〜２４時間、よ
り好ましくは１時間〜２４時間処理をする。
ス細菌は、トマトやナスなどのナス科作物の根に存在す
ることにより、植物生育促進効果を示す。したがって、
水に懸濁させ、種子または苗の根部を本菌液に浸漬する
ことにより植物体に定着させることが可能となり、生育
促進効果を発揮するとともに、シュードモナス・ソラナ
セアラムによるナス科植物青枯病を防除することができ
る。また、育苗期間中に根部へ灌注することによっても
目的を達成する事ができる。本発明の細菌を上記方法で
使用する場合、浸漬処理または土壌かん注処理の場合
は、浸漬液中の菌濃度が１０５ｃｆｕ／ｍｌ以上、好ま
しくは１０６ｃｆｕ／ｍｌ以上になるように調整する。
用土あるいは覆土に土壌混和する場合は、培養土１Ｌに
対して本防除剤を１ｇ以上混合し、均一になるように撹
拌する。また、浸種時に本防除剤希釈液に種を浸漬処理
する場合の希釈液の温度は、１５℃〜３５℃、好ましく
は２０℃〜３０℃であり、瞬時〜４８時間、より好まし
くは１時間〜２４時間処理をする。苗の根を浸漬処理す
る場合の希釈液の温度は、１５℃〜３５℃、好ましくは
２０℃〜３０℃であり、処理時間は瞬時〜２４時間、よ
り好ましくは１時間〜２４時間処理をする。
【００２３】このように本菌株を有効成分とする微生物
農薬による簡単な処理方法により、シュードモナス・ソ
ラナセアラムによる青枯病を防除することが可能となっ
た。
農薬による簡単な処理方法により、シュードモナス・ソ
ラナセアラムによる青枯病を防除することが可能となっ
た。
【００２４】以下、本発明の実施の形態を実施例により
具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定され
るものではない。
具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定され
るものではない。
【００２５】
【実施例】［実施例１］シュードモナス・アルカリゲネ
ス Ｋ５Ａ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｒｉｇ
ｅｎｅｓ Ｋ５Ａ）のシュードモナス・ソラナセアラム
に対する抗菌性を測定した。ＤＦ寒天培地上での対峙培
養法で抗菌性を調べた。結果を表１に示す。
ス Ｋ５Ａ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｒｉｇ
ｅｎｅｓ Ｋ５Ａ）のシュードモナス・ソラナセアラム
に対する抗菌性を測定した。ＤＦ寒天培地上での対峙培
養法で抗菌性を調べた。結果を表１に示す。
【００２６】
【表１】
【００２７】［実施例２］ＡＣＣ分解酵素活性は以下の
ように測定した。まず、シュードモナス・アルカリゲネ
ス Ｋ５Ａ菌株を３ｍＭのＡＣＣを含むＭ９寒天培地
（ｐＨ７．２）２ｍｌに植菌し３０℃で培養した。菌体
培養液を超音波破砕を行った後、遠心分離した上澄みの
タンパク質量を測定した。０．０２ｍｌのサンプルに
０．１Ｍトリスアミノメタン緩衝液（ｐＨ８．５）を
０．１８ｍｌ加え、さらに最終ＡＣＣ濃度を５０ｍＭに
して３０℃、２．５時間振とうした。その後、０．５６
Ｎ塩酸を１．８ｍｌ加えて反応を止めた後、０．１％
２，４−Ｄを０．３ｍｌ加えて３０℃で１５分間振とう
した。さらに２Ｎ水酸化ナトリウムを２ｍｌ加えた後に
５４０ｎｍの吸光度を測定した。これらの条件下で１分
間に１μｍｏｌのα−ケト酪酸を形成する活性を１Ｕと
した。インドール酢酸生産活性測定は、通常行われる比
色定量法を用いた。シュードモナス・アルカリゲネス
Ｋ５Ａ菌株のＡＣＣ分解酵素活性は、１．６７Ｕ／ｍｇ
であり、インドール酢酸生産能は４０μｇ／ｍｌであっ
た。
ように測定した。まず、シュードモナス・アルカリゲネ
ス Ｋ５Ａ菌株を３ｍＭのＡＣＣを含むＭ９寒天培地
（ｐＨ７．２）２ｍｌに植菌し３０℃で培養した。菌体
培養液を超音波破砕を行った後、遠心分離した上澄みの
タンパク質量を測定した。０．０２ｍｌのサンプルに
０．１Ｍトリスアミノメタン緩衝液（ｐＨ８．５）を
０．１８ｍｌ加え、さらに最終ＡＣＣ濃度を５０ｍＭに
して３０℃、２．５時間振とうした。その後、０．５６
Ｎ塩酸を１．８ｍｌ加えて反応を止めた後、０．１％
２，４−Ｄを０．３ｍｌ加えて３０℃で１５分間振とう
した。さらに２Ｎ水酸化ナトリウムを２ｍｌ加えた後に
５４０ｎｍの吸光度を測定した。これらの条件下で１分
間に１μｍｏｌのα−ケト酪酸を形成する活性を１Ｕと
した。インドール酢酸生産活性測定は、通常行われる比
色定量法を用いた。シュードモナス・アルカリゲネス
Ｋ５Ａ菌株のＡＣＣ分解酵素活性は、１．６７Ｕ／ｍｇ
であり、インドール酢酸生産能は４０μｇ／ｍｌであっ
た。
【００２８】［実施例３］ナス（品種黒陽）種子を、シ
ュードモナス・アルカリゲネス Ｋ５Ａ（Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ Ｋ５Ａ）の１×
１０８ｃｆｕ／ｍｌ希釈液に２５℃にて２４時間浸漬し
て、育苗箱に播種した。３週間後に生育調査を行った。
無処理区と比較した。表２に結果を示す。平均葉径が生
育促進能の目安である１０％を超える増大を示してお
り、生育促進効果の大きいことがわかった。
ュードモナス・アルカリゲネス Ｋ５Ａ（Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ Ｋ５Ａ）の１×
１０８ｃｆｕ／ｍｌ希釈液に２５℃にて２４時間浸漬し
て、育苗箱に播種した。３週間後に生育調査を行った。
無処理区と比較した。表２に結果を示す。平均葉径が生
育促進能の目安である１０％を超える増大を示してお
り、生育促進効果の大きいことがわかった。
【００２９】
【表２】
【００３０】［実施例４］トマト（品種桃太郎）種子
を、シュードモナス・アルカリゲネス Ｋ５Ａ（Ｐｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｉｓ Ｋ５
Ａ）の１×１０８ｃｆｕ／ｍｌ希釈液に２５℃にて２４
時間浸漬して、育苗箱に播種した。３週間後に生育調査
を行った。無処理区と比較した。表３に結果を示す。平
均茎高が生育促進能の目安である１０％を超える増大を
示しており、生育促進効果の大きいことがわかった。
を、シュードモナス・アルカリゲネス Ｋ５Ａ（Ｐｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｉｓ Ｋ５
Ａ）の１×１０８ｃｆｕ／ｍｌ希釈液に２５℃にて２４
時間浸漬して、育苗箱に播種した。３週間後に生育調査
を行った。無処理区と比較した。表３に結果を示す。平
均茎高が生育促進能の目安である１０％を超える増大を
示しており、生育促進効果の大きいことがわかった。
【００３１】
【表３】
【００３２】［実施例５］育苗箱で栽培したナス（品種
黒陽）の根を、シュードモナス・アルカリゲネスＫ５Ａ
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ
Ｋ５Ａ）の１×１０８ｃｆｕ／ｍｌ希釈液に２０分間浸
漬して、１５ｃｍのビニールポットに移植した。３日後
に病原菌シュードモナス・ソラナセアラム Ｎｏ．１株
を、菌密度１×１０６ｃｆｕ／ｍｌの濃度でポット当た
り２０ｍｌを灌注した。その後、４週間後に発病調査し
た。病原菌のみの無処理区と比較した。表４に結果を示
す。防除価は、９２．９％であった。
黒陽）の根を、シュードモナス・アルカリゲネスＫ５Ａ
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ
Ｋ５Ａ）の１×１０８ｃｆｕ／ｍｌ希釈液に２０分間浸
漬して、１５ｃｍのビニールポットに移植した。３日後
に病原菌シュードモナス・ソラナセアラム Ｎｏ．１株
を、菌密度１×１０６ｃｆｕ／ｍｌの濃度でポット当た
り２０ｍｌを灌注した。その後、４週間後に発病調査し
た。病原菌のみの無処理区と比較した。表４に結果を示
す。防除価は、９２．９％であった。
【００３３】
【表４】
【００３４】［実施例６］育苗箱で栽培したナス（品種
黒陽）に、シュードモナス・アルカリゲネスＫ５Ａ（Ｐ
ｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ Ｋ５
Ａ）の１×１０８ｃｆｕ／ｍｌ希釈液を苗当たり１０ｍ
ｌずつ灌注し、２４時間後に１５ｃｍのビニールポット
に移植した。３日後に病原菌シュードモナス・ソラナセ
アラムＮｏ．１株を、菌密度１×１０６ｃｆｕ／ｍｌの
濃度でポット当たり２０ｍｌを灌注した。その後、４週
間後に発病調査した。病原菌のみの無処理区と比較し
た。表５に結果を示す。防除価は、７３．７％であっ
た。
黒陽）に、シュードモナス・アルカリゲネスＫ５Ａ（Ｐ
ｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ Ｋ５
Ａ）の１×１０８ｃｆｕ／ｍｌ希釈液を苗当たり１０ｍ
ｌずつ灌注し、２４時間後に１５ｃｍのビニールポット
に移植した。３日後に病原菌シュードモナス・ソラナセ
アラムＮｏ．１株を、菌密度１×１０６ｃｆｕ／ｍｌの
濃度でポット当たり２０ｍｌを灌注した。その後、４週
間後に発病調査した。病原菌のみの無処理区と比較し
た。表５に結果を示す。防除価は、７３．７％であっ
た。
【００３５】
【表５】
【００３６】［実施例７］育苗箱で栽培したトマト（品
種桃太郎）の根を、シュードモナス・アルカリゲネス
Ｋ５Ａ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎ
ｅｓ Ｋ５Ａ）の１×１０８ｃｆｕ／ｍｌ希釈液に２０
分間浸漬して、１５ｃｍのビニールポットに移植した。
３日後に病原菌シュードモナス・ソラナセアラム Ｎ
ｏ．１株を、菌密度１×１０６ｃｆｕ／ｍｌの濃度でポ
ット当たり２０ｍｌを灌注した。その後、４週間後に発
病調査した。病原菌のみの無処理区と比較した。表６に
結果を示す。防除価は、９０．０％であった。
種桃太郎）の根を、シュードモナス・アルカリゲネス
Ｋ５Ａ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎ
ｅｓ Ｋ５Ａ）の１×１０８ｃｆｕ／ｍｌ希釈液に２０
分間浸漬して、１５ｃｍのビニールポットに移植した。
３日後に病原菌シュードモナス・ソラナセアラム Ｎ
ｏ．１株を、菌密度１×１０６ｃｆｕ／ｍｌの濃度でポ
ット当たり２０ｍｌを灌注した。その後、４週間後に発
病調査した。病原菌のみの無処理区と比較した。表６に
結果を示す。防除価は、９０．０％であった。
【００３７】
【表６】
【００３８】
【発明の効果】本発明は、薬害がない安全な所謂生物防
除策であって、植物細菌病であるシュードモナス・ソラ
ナセアラムによる病害を効果的に防除することが可能で
あるという効果を奏する。
除策であって、植物細菌病であるシュードモナス・ソラ
ナセアラムによる病害を効果的に防除することが可能で
あるという効果を奏する。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） //(Ｃ１２Ｎ 1/20 (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ａ Ｃ１２Ｒ 1:38） Ｃ１２Ｒ 1:38） (72)発明者 阪本 雅之 兵庫県西宮市天道町26番20号 (72)発明者 高原 吉幸 埼玉県川越市今福中台2805番地 セントラ ル硝子株 式会社化学研究所内 (72)発明者 渡辺 正弘 埼玉県川越市今福中台2805番地 セントラ ル硝子株 式会社化学研究所内 (72)発明者 坪内 正之 埼玉県川越市今福中台2805番地 セントラ ル硝子株 式会社化学研究所内 (72)発明者 長井 克将 埼玉県川越市今福中台2805番地 セントラ ル硝子株 式会社化学研究所内 Ｆターム(参考） 4B065 AA41X AA89X AC14 AC20 CA47 4H011 AA01 BB21 DA14 DD03 DD04
Claims (6)
- 【請求項１】ＡＣＣ（１−アミノ−１−シクロプロパン
カルボン酸）資化能またはインドール酢酸生産能を有す
るシュードモナス属アルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏ
ｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）細菌をナス科植物に
接種することを含んでなるナス科植物の栽培方法。 - 【請求項２】ＡＣＣ（１−アミノ−１−シクロプロパン
カルボン酸）資化能またはインドール酢酸生産能を有す
るシュードモナス属アルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏ
ｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）細菌がＫ５Ａ菌株で
ある請求項１記載のナス科植物の栽培方法。 - 【請求項３】ＡＣＣ（１−アミノ−１−シクロプロパン
カルボン酸）資化能を有するシュードモナス属アルカリ
ゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎ
ｅｓ）細菌。 - 【請求項４】インドール酢酸生産能を有するシュードモ
ナス属アルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌ
ｃａｌｉｇｅｎｅｓ）細菌。 - 【請求項５】シュードモナス属アルカリゲネス（Ｐｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）Ｋ５Ａ菌
株。 - 【請求項６】請求項１または２に記載のシュードモナス
属アルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａ
ｌｉｇｅｎｅｓ）細菌を有効成分として含んでなる微生
物農薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001032812A JP2002233246A (ja) | 2001-02-08 | 2001-02-08 | 植物生育促進能及び植物病害防除能を有する微生物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001032812A JP2002233246A (ja) | 2001-02-08 | 2001-02-08 | 植物生育促進能及び植物病害防除能を有する微生物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002233246A true JP2002233246A (ja) | 2002-08-20 |
Family
ID=18896677
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2001032812A Pending JP2002233246A (ja) | 2001-02-08 | 2001-02-08 | 植物生育促進能及び植物病害防除能を有する微生物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2002233246A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102250808A (zh) * | 2011-07-15 | 2011-11-23 | 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 | 一株产acc脱氨酶的小麦内生固氮菌及其用途 |
| CN104818231A (zh) * | 2015-05-07 | 2015-08-05 | 安徽农业大学 | 一种产acc脱氨酶的拮抗促生长的假单胞菌及其应用 |
| JP2015166344A (ja) * | 2014-02-17 | 2015-09-24 | 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 | 微生物農薬、並びに植物の虫害抵抗性付与及び品質低下抑制方法 |
-
2001
- 2001-02-08 JP JP2001032812A patent/JP2002233246A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102250808A (zh) * | 2011-07-15 | 2011-11-23 | 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 | 一株产acc脱氨酶的小麦内生固氮菌及其用途 |
| JP2015166344A (ja) * | 2014-02-17 | 2015-09-24 | 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 | 微生物農薬、並びに植物の虫害抵抗性付与及び品質低下抑制方法 |
| CN104818231A (zh) * | 2015-05-07 | 2015-08-05 | 安徽农业大学 | 一种产acc脱氨酶的拮抗促生长的假单胞菌及其应用 |
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