JP2002128690A - アポトーシス誘導剤 - Google Patents
アポトーシス誘導剤Info
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- JP2002128690A JP2002128690A JP2000316464A JP2000316464A JP2002128690A JP 2002128690 A JP2002128690 A JP 2002128690A JP 2000316464 A JP2000316464 A JP 2000316464A JP 2000316464 A JP2000316464 A JP 2000316464A JP 2002128690 A JP2002128690 A JP 2002128690A
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【解決手段】 ＴＮＦ−α及びＩＬ−４を有効成分とす
るアポトーシス誘導剤。 【効果】 本発明アポトーシス誘導剤は、ＴＮＦ−α又
はＩＬ−４を単独で用いた場合に比べ、アポトーシス誘
導効果が相乗的に増強され、副作用の少ない制癌剤、慢
性関節リウマチ治療剤、自己免疫疾患治療剤、肝炎、肝
硬変等の肝疾患治療剤等として使用できる。
るアポトーシス誘導剤。 【効果】 本発明アポトーシス誘導剤は、ＴＮＦ−α又
はＩＬ−４を単独で用いた場合に比べ、アポトーシス誘
導効果が相乗的に増強され、副作用の少ない制癌剤、慢
性関節リウマチ治療剤、自己免疫疾患治療剤、肝炎、肝
硬変等の肝疾患治療剤等として使用できる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明はアポトーシス誘導剤
に関するものである。
に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】アポトーシスはプログラムされた細胞死
の一形態であり、古典的細胞死（ネクローシス）と対比
されるものである。アポトーシスは生理学上の種々の条
件下に起こり、その形態学的特徴として、周囲の細胞と
の接触の欠乏、細胞質の濃縮化、エンドヌクレアーゼの
活性に関連したクロマチンの凝縮及び核凝縮、核の分節
化、細胞表面の微絨毛の消失、細胞表面の平滑化（細胞
表面の水疱形成：membrance blebbing）及びエンドヌヌ
クレアーゼによるＤＮＡの断片化が観察され、アポティ
ック体細胞の最終断片が隣接する細胞により貧食される
機構として論じられている（Duvall,E．and Wyllie,A.
H.，Immunology Today，7（4），115-119（1986）：Sci
ence，245，301-305（1989））。
の一形態であり、古典的細胞死（ネクローシス）と対比
されるものである。アポトーシスは生理学上の種々の条
件下に起こり、その形態学的特徴として、周囲の細胞と
の接触の欠乏、細胞質の濃縮化、エンドヌクレアーゼの
活性に関連したクロマチンの凝縮及び核凝縮、核の分節
化、細胞表面の微絨毛の消失、細胞表面の平滑化（細胞
表面の水疱形成：membrance blebbing）及びエンドヌヌ
クレアーゼによるＤＮＡの断片化が観察され、アポティ
ック体細胞の最終断片が隣接する細胞により貧食される
機構として論じられている（Duvall,E．and Wyllie,A.
H.，Immunology Today，7（4），115-119（1986）：Sci
ence，245，301-305（1989））。
【０００３】アポトーシスは正常な発生・分化に不可欠
な生理的細胞死であり、正常な生体組織の細胞回転など
において個々の細胞に起こっているが、悪性腫瘍、白血
病、増殖性皮膚疾患、慢性関節リウマチ、自己免疫疾患
等の疾患においては、アポトーシスが過剰に抑制され、
その結果、細胞に機能障害が生じるものと考えられてい
る。例えば、ワタナベ−フクナガらはＭＲＬｌｐｒ／ｌ
ｐｒマウスにおいては、アポトーシスに関与するＦａｓ
分子に異常があり、胸腺における自己反応性Ｔ細胞のネ
ガティブセレクション（アポトーシス）機構がうまく作
動せず、その結果自己免疫疾患が発症すると示唆してい
る（Watanabe-Fukunaga,R.，et al.，Nature，356，314
-317（1992））。また、慢性肝炎が肝硬変、肝癌に移行
していく過程では、アポトーシスは抑制状態にあり、こ
れがサイトトキシックＴ細胞による肝細胞の炎症に続く
線維化、肝硬変へと進展するものと考えられている。従
って、斯かる疾患に関与する細胞のアポトーシスを誘導
する物質は、当該疾患の予防・治療薬として有用であ
る。
な生理的細胞死であり、正常な生体組織の細胞回転など
において個々の細胞に起こっているが、悪性腫瘍、白血
病、増殖性皮膚疾患、慢性関節リウマチ、自己免疫疾患
等の疾患においては、アポトーシスが過剰に抑制され、
その結果、細胞に機能障害が生じるものと考えられてい
る。例えば、ワタナベ−フクナガらはＭＲＬｌｐｒ／ｌ
ｐｒマウスにおいては、アポトーシスに関与するＦａｓ
分子に異常があり、胸腺における自己反応性Ｔ細胞のネ
ガティブセレクション（アポトーシス）機構がうまく作
動せず、その結果自己免疫疾患が発症すると示唆してい
る（Watanabe-Fukunaga,R.，et al.，Nature，356，314
-317（1992））。また、慢性肝炎が肝硬変、肝癌に移行
していく過程では、アポトーシスは抑制状態にあり、こ
れがサイトトキシックＴ細胞による肝細胞の炎症に続く
線維化、肝硬変へと進展するものと考えられている。従
って、斯かる疾患に関与する細胞のアポトーシスを誘導
する物質は、当該疾患の予防・治療薬として有用であ
る。
【０００４】従来、蛋白合成阻害剤であるシクロヘキシ
ミドやＲＮＡ合成阻害剤であるアクチノマイシンＤ、腫
瘍壊死因子（以下、「ＴＮＦ−α」という）やリンホト
キシン（ＬＴ）等のサイトカイン類にアポトーシスの誘
導作用があることが報告され（Martin,S.J.，et al.，
J.Immunol.，145,1859-1867（1990）、Strelow, A., et
al., J. Exp. Med., 192, 601-611(2000)）、また最近
ではインターロイキン４（以下、「ＩＬ−４」という）
に、ヒト単球や好酸球に対してアポトーシス誘導作用が
あることが報告されている（J.Immunol.,148(6),1812-1
816(1992)、J.Allergy Clin.Immunol.,102(6 Pt 1）,10
13-1020(1998))。
ミドやＲＮＡ合成阻害剤であるアクチノマイシンＤ、腫
瘍壊死因子（以下、「ＴＮＦ−α」という）やリンホト
キシン（ＬＴ）等のサイトカイン類にアポトーシスの誘
導作用があることが報告され（Martin,S.J.，et al.，
J.Immunol.，145,1859-1867（1990）、Strelow, A., et
al., J. Exp. Med., 192, 601-611(2000)）、また最近
ではインターロイキン４（以下、「ＩＬ−４」という）
に、ヒト単球や好酸球に対してアポトーシス誘導作用が
あることが報告されている（J.Immunol.,148(6),1812-1
816(1992)、J.Allergy Clin.Immunol.,102(6 Pt 1）,10
13-1020(1998))。
【０００５】しかし、これまでに知られている物質は、
アポトーシス誘導活性や副作用の点から充分なものでは
なく、アポトーシス誘導活性が高く且つ安全性の高いア
ポトーシス誘導剤が求められていた。
アポトーシス誘導活性や副作用の点から充分なものでは
なく、アポトーシス誘導活性が高く且つ安全性の高いア
ポトーシス誘導剤が求められていた。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、有効性が高
く且つ安全性の高いアポトーシス誘導剤を提供すること
を目的とする。
く且つ安全性の高いアポトーシス誘導剤を提供すること
を目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明らは、斯かる実情
に鑑み、アポトーシス誘導活性を有する物質について鋭
意研究した結果、ＴＮＦ−αとＩＬ−４を併用した場合
に、未分化細胞や前駆体細胞に対してそれぞれが有する
アポトーシス誘導効果が相乗的に増強され、アポトーシ
スの過剰抑制に伴う疾患の予防・治療薬として有用であ
ることを見出し、本発明を完成した。
に鑑み、アポトーシス誘導活性を有する物質について鋭
意研究した結果、ＴＮＦ−αとＩＬ−４を併用した場合
に、未分化細胞や前駆体細胞に対してそれぞれが有する
アポトーシス誘導効果が相乗的に増強され、アポトーシ
スの過剰抑制に伴う疾患の予防・治療薬として有用であ
ることを見出し、本発明を完成した。
【０００８】すなわち、本発明は、ＴＮＦ−α及びＩＬ
−４を有効成分とするアポトーシス誘導剤を提供するも
のである。
−４を有効成分とするアポトーシス誘導剤を提供するも
のである。
【０００９】
【発明の実施の形態】本発明のアポトーシス誘導剤は、
ＴＮＦ−αとＩＬ−４を有効成分とするものであるが、
ここで、ＴＮＦ−αとは、炎症を通した生体防御機構を
中心に、抗腫瘍作用、破骨作用、細胞への脂質の取り込
み阻害作用、インターロイキン−１やコロニー刺激因子
の生産誘導作用等、多様な生物活性を示す分子量１７ｋ
Ｄａのポリペプチドであり、ＩＬ−４とは、広い範囲の
免疫細胞刺激作用（Ｂ細胞の形質細胞への分化、Ｔ細胞
の分化増殖）を中心に、抗腫瘍作用、Ｉ型アレルギー誘
導作用、抗炎症作用等を有するサイトカインの一種であ
る。これらＴＮＦ−α及びＩＬ−４には前述したように
アポトーシス誘導作用があることが報告されているが、
ＴＮＦ−αとＩＬ−４を併用した場合に、該アポトーシ
ス誘導効果が相乗的に増強されることは全く予測するこ
とができなったことである。
ＴＮＦ−αとＩＬ−４を有効成分とするものであるが、
ここで、ＴＮＦ−αとは、炎症を通した生体防御機構を
中心に、抗腫瘍作用、破骨作用、細胞への脂質の取り込
み阻害作用、インターロイキン−１やコロニー刺激因子
の生産誘導作用等、多様な生物活性を示す分子量１７ｋ
Ｄａのポリペプチドであり、ＩＬ−４とは、広い範囲の
免疫細胞刺激作用（Ｂ細胞の形質細胞への分化、Ｔ細胞
の分化増殖）を中心に、抗腫瘍作用、Ｉ型アレルギー誘
導作用、抗炎症作用等を有するサイトカインの一種であ
る。これらＴＮＦ−α及びＩＬ−４には前述したように
アポトーシス誘導作用があることが報告されているが、
ＴＮＦ−αとＩＬ−４を併用した場合に、該アポトーシ
ス誘導効果が相乗的に増強されることは全く予測するこ
とができなったことである。
【００１０】本発明のアポトーシス誘導剤に用いられる
ＴＮＦ−α及びＩＬ−４としては、それぞれＴＮＦ−α
及びＩＬ−４としての活性を有する、天然型或いは遺伝
子組換えにより産生された組換え体の何れもが包含され
る。
ＴＮＦ−α及びＩＬ−４としては、それぞれＴＮＦ−α
及びＩＬ−４としての活性を有する、天然型或いは遺伝
子組換えにより産生された組換え体の何れもが包含され
る。
【００１１】天然型のＴＮＦ−αは、例えば、センダイ
ウイルス（Sendai Virus）刺激ヒトＢリンパ芽球株ＢＡ
ＬＬ−１などの既存の細胞株の培養上清より、アフィニ
ティークロマトグラフィーやＨＰＬＣなどの既知方法に
従い精製することにより得ることができ、遺伝子の組換
えによって得られるＴＮＦ−αは、既知の遺伝子を組み
込んだプラスミド或いはベクターを導入した大腸菌や既
存細胞株の産生蛋白を同様に精製することにより得るこ
とが可能である。
ウイルス（Sendai Virus）刺激ヒトＢリンパ芽球株ＢＡ
ＬＬ−１などの既存の細胞株の培養上清より、アフィニ
ティークロマトグラフィーやＨＰＬＣなどの既知方法に
従い精製することにより得ることができ、遺伝子の組換
えによって得られるＴＮＦ−αは、既知の遺伝子を組み
込んだプラスミド或いはベクターを導入した大腸菌や既
存細胞株の産生蛋白を同様に精製することにより得るこ
とが可能である。
【００１２】また、天然のＩＬ−４は、ヒトＴ細胞クロ
ーンや末梢血Ｔ細胞或いは任意の既存細胞株をマイトジ
ェン等で非刺激或いは刺激した培養上清から同様に精製
して収得でき、組換えＩＬ−４も既存遺伝子の利用によ
って前記と同様にして得ることが可能である。
ーンや末梢血Ｔ細胞或いは任意の既存細胞株をマイトジ
ェン等で非刺激或いは刺激した培養上清から同様に精製
して収得でき、組換えＩＬ−４も既存遺伝子の利用によ
って前記と同様にして得ることが可能である。
【００１３】本発明のアポトーシス誘導剤は、ＴＮＦ−
αとＩＬ−４とが単一の製剤中に含まれるように調製さ
れてもよく、或いは、ＴＮＦ−αとＩＬ−４のそれぞれ
を別個の製剤として調製し、これら２つの製剤を併用す
るものでもよい。また、ＴＮＦ−αとＩＬ−４の配合比
率は、アポトーシス誘導作用の相乗効果が発揮できれば
特に限定されずそれぞれ１〜９９％の範囲で混合される
ことができ、特にＴＮＦ−αを３０〜７０％、ＩＬ−４
を７０〜３０％で配合することが好ましい。
αとＩＬ−４とが単一の製剤中に含まれるように調製さ
れてもよく、或いは、ＴＮＦ−αとＩＬ−４のそれぞれ
を別個の製剤として調製し、これら２つの製剤を併用す
るものでもよい。また、ＴＮＦ−αとＩＬ−４の配合比
率は、アポトーシス誘導作用の相乗効果が発揮できれば
特に限定されずそれぞれ１〜９９％の範囲で混合される
ことができ、特にＴＮＦ−αを３０〜７０％、ＩＬ−４
を７０〜３０％で配合することが好ましい。
【００１４】このようにして調製された本発明のアポト
ーシス誘導剤は、後記実施例に示すようにＴＮＦ−α又
はＩＬ−４を単独で用いた場合に比べ、アポトーシス誘
導効果が著しく増強されるという相乗作用を発揮する。
従って、ＴＮＦ−α又はＩＬ−４を単独で投与する場合
に比べて両者の投与量を大幅に減少させることができ、
副作用の軽減が可能となる。
ーシス誘導剤は、後記実施例に示すようにＴＮＦ−α又
はＩＬ−４を単独で用いた場合に比べ、アポトーシス誘
導効果が著しく増強されるという相乗作用を発揮する。
従って、ＴＮＦ−α又はＩＬ−４を単独で投与する場合
に比べて両者の投与量を大幅に減少させることができ、
副作用の軽減が可能となる。
【００１５】本発明のアポトーシス誘導剤の成人に対す
る一日当たりの投与量は、広範囲に適宜選択されるが、
ＴＮＦ−αについては、通常一日当たり５０μg/body〜
５０mg/body程度であり、ＩＬ−４については、一日当
たり５０μg/body〜５０mg/body程度とするのが望まし
い。
る一日当たりの投与量は、広範囲に適宜選択されるが、
ＴＮＦ−αについては、通常一日当たり５０μg/body〜
５０mg/body程度であり、ＩＬ−４については、一日当
たり５０μg/body〜５０mg/body程度とするのが望まし
い。
【００１６】本発明のアポトーシス誘導剤は、その使用
目的に応じ、医薬製剤としてこの分野で慣用されている
各種の投与形態で使用される。斯かる製剤は、通常使用
される充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面
活性剤、滑沢剤等の希釈剤或いは賦形剤を無毒性薬理担
体として用いて調製される。剤形は、治療目的に応じて
各種の形態が選択でき、この代表的なものとして錠剤、
丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル
剤、坐剤、注射剤（液剤、懸濁剤等）、点眼剤等が挙げ
られる。
目的に応じ、医薬製剤としてこの分野で慣用されている
各種の投与形態で使用される。斯かる製剤は、通常使用
される充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面
活性剤、滑沢剤等の希釈剤或いは賦形剤を無毒性薬理担
体として用いて調製される。剤形は、治療目的に応じて
各種の形態が選択でき、この代表的なものとして錠剤、
丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル
剤、坐剤、注射剤（液剤、懸濁剤等）、点眼剤等が挙げ
られる。
【００１７】錠剤の形態に成形するに際しては、担体と
してこの分野で従来公知のものを広く使用でき、例えば
乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプ
ン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ
酸等の賦形剤、水、エタノール、プロパノール、単シロ
ップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボ
キシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、
リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン糖の結合剤、乾
燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミ
ナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリ
オキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル
硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプ
ン、乳糖等の崩壊剤、白糖、ステアリン、カカオバタ
ー、水素添加油等の崩壊抑制剤、第４級アンモニウム塩
基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤、グリセリ
ン、デンプン等の保湿剤、デンプン、乳糖、カオリン、
ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤、精製タル
ク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコー
ル等の滑沢剤等が例示できる。更に錠剤は必要に応じ通
常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包
錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重
錠、多層錠とすることができる。
してこの分野で従来公知のものを広く使用でき、例えば
乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプ
ン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ
酸等の賦形剤、水、エタノール、プロパノール、単シロ
ップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボ
キシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、
リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン糖の結合剤、乾
燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミ
ナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリ
オキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル
硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプ
ン、乳糖等の崩壊剤、白糖、ステアリン、カカオバタ
ー、水素添加油等の崩壊抑制剤、第４級アンモニウム塩
基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤、グリセリ
ン、デンプン等の保湿剤、デンプン、乳糖、カオリン、
ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤、精製タル
ク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコー
ル等の滑沢剤等が例示できる。更に錠剤は必要に応じ通
常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包
錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重
錠、多層錠とすることができる。
【００１８】丸剤の形態に成形するに際しては、担体と
してこの分野で従来公知なるものを広く使用でき、例え
ばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、
カオリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガ
ント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤、ラミナラン
カンテン等の崩壊剤等が例示できる。
してこの分野で従来公知なるものを広く使用でき、例え
ばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、
カオリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガ
ント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤、ラミナラン
カンテン等の崩壊剤等が例示できる。
【００１９】坐剤の形態に成形するに際しては、担体と
して従来公知のものを広く使用でき、例えばポリエチレ
ングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコ
ールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド等を
挙げることができる。
して従来公知のものを広く使用でき、例えばポリエチレ
ングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコ
ールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド等を
挙げることができる。
【００２０】注射剤として調製される場合には、液剤及
び懸濁剤は殺菌され、且つ血液と等張であるのが好まし
く、これら液剤、乳剤及び懸濁剤の形態に成形するに際
しては、希釈剤としてこの分野において慣用されている
ものを全て使用でき、例えば水、エチルアルコール、プ
ロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコ
ール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオ
キシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を挙げるこ
とができる。尚、この場合等張性の溶液を調製するに充
分な量の食塩、ブドウ糖あるいはグリセリンを医薬製剤
中に含有せしめてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝
剤、無痛化剤等を添加してもよい。
び懸濁剤は殺菌され、且つ血液と等張であるのが好まし
く、これら液剤、乳剤及び懸濁剤の形態に成形するに際
しては、希釈剤としてこの分野において慣用されている
ものを全て使用でき、例えば水、エチルアルコール、プ
ロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコ
ール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオ
キシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を挙げるこ
とができる。尚、この場合等張性の溶液を調製するに充
分な量の食塩、ブドウ糖あるいはグリセリンを医薬製剤
中に含有せしめてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝
剤、無痛化剤等を添加してもよい。
【００２１】更に本発明アポトーシス誘導剤中には必要
に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等や他
の医薬品を含有せしめてもよい。
に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等や他
の医薬品を含有せしめてもよい。
【００２２】かくして得られる本発明のアポトーシス誘
導剤は、アポトーシス誘導作用に基づいて、アポトーシ
スの過剰抑制に起因する各種疾患に適用でき、所望の薬
理効果を期待できる。該適用疾患としては、例えば癌、
ＡＩＤＳ、ＡＲＣ（ＡＩＤＳ関連疾患）、ＡＴＬ（成人
Ｔ細胞白血病：Adult T-cellleukemia）、毛様細胞性白
血病（Hairy cell leukemia）、脊髄症（HAM/TSP）、呼
吸器障害（HAB/HABA）、関節症（HAAP）、ブドウ膜炎
（HAU）等のＨＴＬＶ−Ｉ関連疾患、自己免疫疾患、例
えばＳＬＥ（全身性エリテマトーデス）、慢性関節リウ
マチ（ＲＡ）等の膠原病、潰瘍性大腸炎、シェーグレン
症候群、原発性胆汁性肝硬変、突発性血小板減少性紫斑
病（Idiopathic Thrombocytopenic Purapura：ITP）、
自己免疫性溶血性貧血、重症筋無力症、橋本病、インス
リン依存型（Ｉ型）糖尿病等を例示できる。また、本発
明のアポトーシス誘導剤は、骨髄異形成症候群、周期性
血小板減少症、再生不良性貧血、突発性血小板減少症、
汎発性血管内凝固症等の血小板減少を伴う各種の疾患、
Ｃ型、Ａ型、Ｂ型、Ｆ型等の各種の肝炎、アルツハイマ
ー病、アルツハイマー型老年痴呆症、心筋炎、ＡＲＤＳ
（成人呼吸急迫症候群）、感染症、肝硬変、前立腺肥大
症、子宮筋腫、気管支喘息、動脈硬化症、各種先天性奇
形症、腎炎、老人性白内障、慢性疲労症候群（Chronic
Faligiu Syndrome）、筋ジストロフィー（Myolonic dys
lrophy）等の各種疾患にも適応可能である。
導剤は、アポトーシス誘導作用に基づいて、アポトーシ
スの過剰抑制に起因する各種疾患に適用でき、所望の薬
理効果を期待できる。該適用疾患としては、例えば癌、
ＡＩＤＳ、ＡＲＣ（ＡＩＤＳ関連疾患）、ＡＴＬ（成人
Ｔ細胞白血病：Adult T-cellleukemia）、毛様細胞性白
血病（Hairy cell leukemia）、脊髄症（HAM/TSP）、呼
吸器障害（HAB/HABA）、関節症（HAAP）、ブドウ膜炎
（HAU）等のＨＴＬＶ−Ｉ関連疾患、自己免疫疾患、例
えばＳＬＥ（全身性エリテマトーデス）、慢性関節リウ
マチ（ＲＡ）等の膠原病、潰瘍性大腸炎、シェーグレン
症候群、原発性胆汁性肝硬変、突発性血小板減少性紫斑
病（Idiopathic Thrombocytopenic Purapura：ITP）、
自己免疫性溶血性貧血、重症筋無力症、橋本病、インス
リン依存型（Ｉ型）糖尿病等を例示できる。また、本発
明のアポトーシス誘導剤は、骨髄異形成症候群、周期性
血小板減少症、再生不良性貧血、突発性血小板減少症、
汎発性血管内凝固症等の血小板減少を伴う各種の疾患、
Ｃ型、Ａ型、Ｂ型、Ｆ型等の各種の肝炎、アルツハイマ
ー病、アルツハイマー型老年痴呆症、心筋炎、ＡＲＤＳ
（成人呼吸急迫症候群）、感染症、肝硬変、前立腺肥大
症、子宮筋腫、気管支喘息、動脈硬化症、各種先天性奇
形症、腎炎、老人性白内障、慢性疲労症候群（Chronic
Faligiu Syndrome）、筋ジストロフィー（Myolonic dys
lrophy）等の各種疾患にも適応可能である。
【００２３】特に、本発明アポトーシス誘導剤を制癌剤
として用いる場合、その投与により癌細胞に対してアポ
トーシスを誘導でき、制癌作用を発揮するが、これを癌
の化学療法剤として知られている各種の制癌剤や放射線
療法と併用すれば、制癌効果を一層助長することがで
き、副作用の軽減を図ることもできる。斯かる化学療法
剤としては、例えば５−フルオロウラシル（５−ＦＵ、
協和発酵工業株式会社製）、マイトマイシン（Mitomyci
n-C、同上社製）、フトラフール（ＦＴ−２０７、大鵬
薬品工業株式会社製）、エンドキサン（Endoxan、塩野
義製薬株式会社製）、トヨマイシン（Toyomicin、武田
薬品工業株式会社製）等が挙げられる。
として用いる場合、その投与により癌細胞に対してアポ
トーシスを誘導でき、制癌作用を発揮するが、これを癌
の化学療法剤として知られている各種の制癌剤や放射線
療法と併用すれば、制癌効果を一層助長することがで
き、副作用の軽減を図ることもできる。斯かる化学療法
剤としては、例えば５−フルオロウラシル（５−ＦＵ、
協和発酵工業株式会社製）、マイトマイシン（Mitomyci
n-C、同上社製）、フトラフール（ＦＴ−２０７、大鵬
薬品工業株式会社製）、エンドキサン（Endoxan、塩野
義製薬株式会社製）、トヨマイシン（Toyomicin、武田
薬品工業株式会社製）等が挙げられる。
【００２４】
【実施例】以下に実施例を挙げて、本発明を更に詳細に
説明する。 実施例１ （１）活動型慢性関節リウマチ患者の骨髄検体から、市
販キット（Histopaque;Sigma社製）を用いて、濃度勾配
法により単核球を分離した。分離した単核球から磁気ビ
ーズ（Dynal CD34 progenitor cells selection syste
m; Dynal社製）を用いてＣＤ３４陽性細胞（ＣＤ３４
＋）を得た。分離回収した細胞は、ＣＤ３４＋細胞が約
９５％でＣＤ１９＋Ｂ細胞は０．５％以下であった。
説明する。 実施例１ （１）活動型慢性関節リウマチ患者の骨髄検体から、市
販キット（Histopaque;Sigma社製）を用いて、濃度勾配
法により単核球を分離した。分離した単核球から磁気ビ
ーズ（Dynal CD34 progenitor cells selection syste
m; Dynal社製）を用いてＣＤ３４陽性細胞（ＣＤ３４
＋）を得た。分離回収した細胞は、ＣＤ３４＋細胞が約
９５％でＣＤ１９＋Ｂ細胞は０．５％以下であった。
【００２５】（２）ＣＤ３４＋細胞を２４ウエル平底マ
イクロプレート（No.3596;Costar）に１．０×１０5／
ウエルになるようにＳＣＦ（10ng／ml）とＧＭ−ＣＳＦ
（１ng／ml）を添加した培地で調製し、ＴＮＦ−α（10
ng／ml）添加、ＩＬ−４（10ng／ml）添加、その両者
（10ng／ml＋10ng／ml）を添加又は非添加（対照群）に
て２週間培養した。培養後、ＰＢＳにて細胞を洗浄し、
細胞を０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００及び０．１％ク
エン酸ナトリウムを含むＰＢＳ２００μｌに浮遊し、Ｐ
Ｉ染色（10μg／ml Propidium Iodideの10μlを添加し
４℃で１０分）後フローサイトメーター（EPICS XL;Cou
lter）にて染色陽性細胞（アポトーシス死細胞）を測定
した。結果を表１に示す。尚、培地は、ＲＰＭＩ−１６
４０培地（Life Technologies社製）にペニシリンＧ（1
00 unit／ml）、ストレプトマイシン（100μg／ml）、
Ｌ−グルタミン（0.3mg／ml）及びＦＢＳ（10％ fetalb
ovine serum; Life Technologies社製）を添加して用い
た。また、ＳＣＦ（stem cell factor）、ＧＭ−ＣＳＦ
(granulocyte-macrophage colonystimulating facto
r)、ＴＮＦ−α及びＩＬ−４は、いずれも市販品（Pepr
o Tech EC社製）を用いた。
イクロプレート（No.3596;Costar）に１．０×１０5／
ウエルになるようにＳＣＦ（10ng／ml）とＧＭ−ＣＳＦ
（１ng／ml）を添加した培地で調製し、ＴＮＦ−α（10
ng／ml）添加、ＩＬ−４（10ng／ml）添加、その両者
（10ng／ml＋10ng／ml）を添加又は非添加（対照群）に
て２週間培養した。培養後、ＰＢＳにて細胞を洗浄し、
細胞を０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００及び０．１％ク
エン酸ナトリウムを含むＰＢＳ２００μｌに浮遊し、Ｐ
Ｉ染色（10μg／ml Propidium Iodideの10μlを添加し
４℃で１０分）後フローサイトメーター（EPICS XL;Cou
lter）にて染色陽性細胞（アポトーシス死細胞）を測定
した。結果を表１に示す。尚、培地は、ＲＰＭＩ−１６
４０培地（Life Technologies社製）にペニシリンＧ（1
00 unit／ml）、ストレプトマイシン（100μg／ml）、
Ｌ−グルタミン（0.3mg／ml）及びＦＢＳ（10％ fetalb
ovine serum; Life Technologies社製）を添加して用い
た。また、ＳＣＦ（stem cell factor）、ＧＭ−ＣＳＦ
(granulocyte-macrophage colonystimulating facto
r)、ＴＮＦ−α及びＩＬ−４は、いずれも市販品（Pepr
o Tech EC社製）を用いた。
【００２６】
【表１】
【００２７】表１より、ＴＮＦ−α及びＩＬ−４を併用
した本発明のアポトーシス誘導剤は、ＴＮＦ−α又はＩ
Ｌ−４を単独で用いた場合に比べ、死細胞率が相乗的に
増強することが示された。
した本発明のアポトーシス誘導剤は、ＴＮＦ−α又はＩ
Ｌ−４を単独で用いた場合に比べ、死細胞率が相乗的に
増強することが示された。
【００２８】実施例２ Ｈｅｌａ細胞（子宮頸部扁平上皮癌由来ヒト培養細胞）
を用い、実施例１（２）と同様にして、ＴＮＦ−α及び
ＩＬ−４の併用効果を試験した。尚、Ｈｅｌａ細胞は、
２×１０4／ウエルにて９６ウエルプレートで培養し
た。結果を表２に示す。
を用い、実施例１（２）と同様にして、ＴＮＦ−α及び
ＩＬ−４の併用効果を試験した。尚、Ｈｅｌａ細胞は、
２×１０4／ウエルにて９６ウエルプレートで培養し
た。結果を表２に示す。
【００２９】
【表２】
【００３０】表２より、ＴＮＦ−α及びＩＬ−４を併用
した本発明のアポトーシス誘導剤は、ＴＮＦ−α又はＩ
Ｌ−４を単独で用いた場合に比べ、死細胞率が相乗的に
増強することが示された。
した本発明のアポトーシス誘導剤は、ＴＮＦ−α又はＩ
Ｌ−４を単独で用いた場合に比べ、死細胞率が相乗的に
増強することが示された。
【００３１】
【発明の効果】本発明アポトーシス誘導剤は、ＴＮＦ−
α又はＩＬ−４を単独で用いた場合に比べ、アポトーシ
ス誘導効果が相乗的に増強され、副作用の少ない制癌
剤、慢性関節リウマチ治療剤、自己免疫疾患治療剤、肝
炎、肝硬変等の肝疾患治療剤等として使用できる。
α又はＩＬ−４を単独で用いた場合に比べ、アポトーシ
ス誘導効果が相乗的に増強され、副作用の少ない制癌
剤、慢性関節リウマチ治療剤、自己免疫疾患治療剤、肝
炎、肝硬変等の肝疾患治療剤等として使用できる。
Claims (2)
- 【請求項１】 ＴＮＦ−α及びＩＬ−４を有効成分とす
るアポトーシス誘導剤。 - 【請求項２】 悪性腫瘍又は慢性関節リウマチの予防・
治療薬である請求項１記載のアポトーシス誘導剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000316464A JP2002128690A (ja) | 2000-10-17 | 2000-10-17 | アポトーシス誘導剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000316464A JP2002128690A (ja) | 2000-10-17 | 2000-10-17 | アポトーシス誘導剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002128690A true JP2002128690A (ja) | 2002-05-09 |
Family
ID=18795406
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000316464A Pending JP2002128690A (ja) | 2000-10-17 | 2000-10-17 | アポトーシス誘導剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2002128690A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004072056A1 (ja) * | 2003-02-14 | 2004-08-26 | Keio University | 医薬組成物 |
| WO2007018229A1 (ja) * | 2005-08-11 | 2007-02-15 | Galpharma Co., Ltd. | 成人ｔ細胞白血病治療 |
| JP2013216677A (ja) * | 2006-04-12 | 2013-10-24 | Genzyme Corp | 自己免疫疾患を治療する方法 |
-
2000
- 2000-10-17 JP JP2000316464A patent/JP2002128690A/ja active Pending
Non-Patent Citations (7)
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004072056A1 (ja) * | 2003-02-14 | 2004-08-26 | Keio University | 医薬組成物 |
| JPWO2004072056A1 (ja) * | 2003-02-14 | 2006-06-01 | 学校法人 慶應義塾 | 医薬組成物 |
| WO2007018229A1 (ja) * | 2005-08-11 | 2007-02-15 | Galpharma Co., Ltd. | 成人ｔ細胞白血病治療 |
| JP2013216677A (ja) * | 2006-04-12 | 2013-10-24 | Genzyme Corp | 自己免疫疾患を治療する方法 |
| US9744233B2 (en) | 2006-04-12 | 2017-08-29 | Genzyme Corporation | Methods of treating autoimmune diseases |
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