JP2002003403A - 癌の治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】新しい免疫学的癌治療の手段を提供すること。 【構成】癌免疫を担うＮＫＴ細胞の活性化に係わるＮＫ
Ｔ細胞の有する２つの異なる抗原受容体、すなわちＮＫ
Ｒ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）とＶα２４Ｖβ１１
の作用が全く異なるものであることことを見出して本発
明を完成し、ＮＫＴ細胞の活性化能におけるＮＫＲ−Ｐ
１（ナチュラルキラーＰ１）に対する作用を指標として
用いられる癌の治療剤を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ＮＫＴ細胞の活性化に
着目した癌の治療剤、またはＮＫＴ細胞の活性化に着目
して抗癌効果を期待し摂取する経口摂取用健康補助食品
製剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】癌の予防または治療のために有用な物質
の選別は、従来、癌細胞へのその直接的作用が重要視さ
れていた。免疫賦活剤が癌治療に有用であることは認め
られていたが、免疫賦活剤として得られた化合物はいず
れもその抗癌効果が微弱であり、免疫療法単独または化
学療法との併用治療によっても癌の十分な治療効果は達
成されていない。

【０００３】本発明者の医学博士、八木田は、先に癌治
療における画期的な手法として、インターロイキン１２
（ＩＬ−１２）を生体内で誘発する物質の有用性に着目
し、椎茸菌糸体加工物であるＡＨＣＣがその機能を有す
ることを発見し、新免疫療法ともいうべき癌治療法を確
立した。従来ＩＬ−１２自体は、抗癌効果があるものの
生体内にＩＬ−１２自体を直接投与した場合には副作用
を生じ患者が治療に耐えられないという事実があり、Ｉ
Ｌ−１２自体を抗癌剤として使用できなかった。しか
し、八木田が報告したＡＨＣＣを含む製剤は、癌の治療
において著しい治癒・延命効果を達成した。つまり八木
田は、ＩＬ−１２を生体内で誘発できる有効量のＡＨＣ
Ｃを投与することにより、癌の治療目的を達成した（特
開平１０−１３９６７０号公報）。

【０００４】ＩＬ−１２は、インターフェロンγ（ＩＦ
Ｎγ）の産生増強作用、生体における細胞性免疫を担う
ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞・ＬＡＫ細胞（Ｌｙｍｐ
ｈｏｋｉｎｅ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｋｉｌｌｅｒ ｃ
ｅｌｌ）・キラーＴ細胞の活性化効果と増強効果をも
つ。ＩＦＮγは、生体の免疫応答をＴヘルパー１細胞
（Ｔｈ１）が作用する状態（ＮＫＴ細胞やキラーＴ細胞
が効果を発揮しやすい状態、すなわちインターロイキン
２（ＩＬ−２）、ＩＬ−１２が大量に産生されている状
態）に誘発するサイトカインである。キラーＴ細胞およ
びＬＡＫ細胞は、癌免疫に係わる細胞として知られてい
る。ＮＫ細胞についても生体の抗癌作用に係わるという
報告がなされているが、ＮＫ細胞は臨床的な抗癌効果と
その活性が相関せずむしろＩＬ−１２の産生誘発量とＮ
Ｋ活性とが完全な逆相関を示すことが八木田により証明
されており、ヒトにおける抗癌作用にはＮＫ細胞は関与
していないものと結論付けられる。

【０００５】現在では、八木田により、ＩＬ−１２の産
生誘発能をもつ物質が、有望な制癌物質になる可能性あ
ることが確立された。

【０００６】しかしながら、一部の癌患者においては、
ＡＨＣＣ投与によってもＩＬ−１２の産生が十分に誘発
されず、治療効果が得られないこと、またＩＬ−１２の
産生が誘発されても治療効果が得られないことがある。
そのため、ＡＨＣＣの有する抗癌効果とは別な機序で作
用する新たな癌治療剤の開発が更に望まれていた。

【０００７】癌免疫の作用機序において、生体内で産生
または誘発されるサイトカインの量が重要な要素である
ことは公知であり、抗癌効果を有するとされるサイトカ
インを投与する、または誘発もしくは産生させて癌を治
療する方法も、試みられ実施されている。しかし、癌と
免疫、癌とサイトカインの関係が明らかになってきたも
のの、癌の治癒・延命効果は、５０％以下の患者でしか
認められなかった。更に近年、癌免疫に関与する細胞と
して、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞（Ｃｕｉ
Ｊ． ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７８，１６
２３，１９９７）が見出された。ＮＫＴ細胞は、免疫系
に関与する細胞の一つであり、強力なサイトカイン産生
能、とくにＩＦＮγ産生能、およびＦａｓやパーフォリ
ンを介した細胞傷害性等の機能を持つ。従ってこの細胞
を活性化することにより、癌患者の治癒・延命効果が更
に高くなることが期待される。

【０００８】谷口等は、ＮＫＴ細胞が有するＶα２４Ｖ
β１１という特異的なＴ細胞抗原受容体（ＴＣＲ）が認
識する特異的な糖脂質抗原を発見し、この抗原が、αガ
ラクトシルセラミドであることを報告している。更に、
αガラクトシルセラミドを投与した担癌マウスでは、Ｎ
ＫＴ細胞が活性化され、癌の消失はみられないものの転
移が抑制されることを証明した。

【０００９】ＮＫＴ細胞には、もう一つの受容体として
ＮＫ細胞抗原受容体（ＮＫＲ−Ｐ１；ナチュラルキラー
Ｐ１）があることは報告されている（特集 ＮＫＴ細胞
の基礎と臨床：最新医学５５巻４号２０００年８１８〜
８２３ページ）。ＮＫＲ−Ｐ１もＮＫＴ細胞の活性化に
関与する。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】本発明が解決しようと
する課題は、ＮＫＴ細胞の活性化機構を解明し、新規で
有用なＮＫＴ細胞の活性化能を有する癌の治療剤を提供
することである。

【００１１】

【課題を解決するための手段】上述の課題を解決するた
めに、本発明者は癌の予防または治療における癌免疫カ
スケードについて検討を重ね、癌免疫を担う活性化され
たＮＫＴ細胞が関与するカスケードにおいて、ＮＫＴ細
胞の活性化に係わる２つの異なる抗原受容体、すなわち
ＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）とＶα２４Ｖβ
１１の作用が全く異なるものであることことを見出し本
発明を完成した。

【００１２】すなわち本発明は、ＮＫＴ細胞の活性化能
におけるＮＫＴ細胞が有するＮＫ細胞抗原受容体である
ＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に対する作用を
指標として用いられる癌の治療剤、ＮＫＴ細胞の活性化
能におけるＮＫＴ細胞が有するＮＫ細胞抗原受容体であ
るＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に対して選択
的に作用することを特徴とする上記の癌の治療剤、ＮＫ
Ｒ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に対する選択的作用
の結果として、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）の大量
生産を誘導し、かつＴｈ１／Ｔｈ２比をＴｈ１が主に作
用する免疫系が働く方向に誘導する上記のいずれか１の
癌の治療剤、細胞表面マーカーであるＣＤ３およびＣＤ
１６１を測定することによってＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラ
ルキラーＰ１）の測定を行いＮＫＴ細胞の活性化能を検
定する上記のいずれか１の癌の治療剤、経口摂取用健康
補助食品製剤である上記のいずれか１の癌の治療剤、上
記のいずれか１の癌の治療剤についての情報を担持した
商業媒体および当該情報を利用した商業方法、並びにＮ
ＫＴ細胞の活性化能におけるＮＫＴ細胞が有するＮＫ細
胞抗原受容体であるＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ
１）に対する作用を指標としてスクリーニングすること
を特徴とする癌治療剤のスクリーニング方法を対象とす
る。

【００１３】

【発明の実施の形態】以下に本発明を詳述する。本発明
は、臨床における効果とサイトカインの相関性を検討す
ることによりおこなった。本発明者は、３７例の癌疾患
患者に茸菌糸体由来物を投与し、各種サイトカインを測
定した（表１）。そして、その結果を図２〜８に示す相
関性を示すデータとして得、図１に示すようなサイトカ
イン相関図を得た。

【００１４】図１に示すとおり、Ｔｈ１／Ｔｈ２比とＩ
Ｌ−１２、Ｔｈ１／Ｔｈ２比とＩＦＮγ、ＩＦＮγとＩ
Ｌ−１２、ＩＬ−１２とＣＤ３×ＣＤ１６１（ＮＫＲ−
Ｐ１）陽性細胞（ＣＤ３＋／ＣＤ１６１＋）の割合、Ｉ
ＦＮγとＣＤ３×ＣＤ１６１（ＮＫＲ−Ｐ１）陽性細胞
の割合には強い正の相関、ＩＬ−１２とＶα２４Ｖβ１
１陽性細胞（ＴＣＲ Ｖα２４＋／ＴＣＲ Ｖβ１１
＋）の割合には強い逆相関のあることが判明した。

【００１５】かくして、本発明では、Ｖα２４Ｖβ１１
Ｔ細胞抗原受容体が刺激を受けたＮＫＴ細胞は、ＩＬ−
１２と強い逆相関を示し、ＩＦＮ‐γ産生量、Ｔｈ１／
Ｔｈ２比とも弱い逆相関を示すことを証明し、Ｖα２４
Ｖβ１１への刺激が免疫機能の抑制に働くことを立証し
た。おそらく、Ｖα２４Ｖβ１１への刺激は、インター
ロイキン４（ＩＬ−４）の大量生産を導き免疫抑制に作
用するものと推定された。一方、ＮＫＴ細胞のＮＫ細胞
抗原受容体ＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）が刺
激を受けた場合はＩＬ−１２およびＩＦＮ‐γと強い正
の相関を示し、Ｔｈ１／Ｔｈ２比とも弱い正の相関を示
すことを証明し、ＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ
１）への刺激は免疫機能の活性化に働くことを立証し
た。

【００１６】この結果、ＮＫＴ細胞の活性化能を有する
物質をスクリーニングするに際しては、少なくともＮＫ
Ｒ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に対する作用を指標
として選別することが必要であり、しかもその作用がＮ
ＫＴ細胞の活性化においてＮＫ細胞抗原受容体であるＮ
ＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に対して選択的で
あることを指標として選別される。加えるに、その作用
は、Ｖα２４Ｖβ１１には影響しないものであることが
重要である。この様にして選別される物質の選択的作用
の結果として、ＩＦＮγの大量生産が誘導され、かつ免
疫応答において免疫系がＴｈ１の働く方向に誘導される
ことを可能とし、該選別された物質を用いることにより
極めて有用な癌免疫療法のための治療剤を提供すること
ができる。この有用な物質の選別は、例えば当該物質を
生体内に投与したとき、ＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラ
ーＰ１）を保持する細胞、すなわち細胞表面マーカーで
あるＣＤ３×ＣＤ１６１を有する細胞を刺激するかどう
かでその活性化能を検定することが出来る。この選別さ
れた治療剤は、例えば茸菌糸体由来成分からなる経口摂
取用健康補助食品製剤であってもよい。

【００１７】本発明の癌の治療剤は、ＮＫＴ細胞のＮＫ
Ｒ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択的に作用して
ＮＫＴ細胞を活性化する能力を有する物質を有効量含
み、好ましくは経口で投与される。

【００１８】また、本発明の癌の治療剤は、抗癌効果を
期待して摂取する経口摂取用健康補助食品製剤である。

【００１９】本発明の治療剤は、肺癌、肺腺腫、胸腺
腫、甲状腺癌、膀胱癌、結腸癌、直腸癌、盲腸癌、尿管
癌、乳癌、子宮頸癌、脳腫瘍、舌癌、咽頭癌、鼻腔癌、
喉頭癌、胃癌、肝癌、胆管癌、精巣癌、卵巣癌、子宮体
癌、悪性黒色腫、脂肪肉腫、食道癌、膵臓癌、前立腺
癌、腎癌、食道癌、形質細胞腫、悪性リンハ゜腫等の治療に
有効であるが、これらの癌に限定されない。

【００２０】本発明のＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチ
ュラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞の活
性化能を有する癌の治療剤は、茸菌糸体加工物から選ば
れる少なくとも一を活性成分とする。その具体例の一と
しては、ＳＰＧ（ｓｉｚｏｆｉｒａｎ：科研製薬）（ス
エヒロ茸菌糸体培養ロ液からえられる多糖体）、ＳＣＰ
（スエヒロ茸菌糸体加工物の経口製剤）（有限会社 東
西医薬研究所）等のスエヒロ茸（学名：Schizophyllum
Commune Fries）菌糸体由来物、ＰＳＫ（クレスチン）
等のカワラ茸菌子体加工物、ＡＨＣＣやＬＥＭ（野田食
菌工業株式会社）等の椎茸菌子体加工物が有効である。
スエヒロ茸菌糸体培養ロ液由来多糖体のＳＰＧ（ｓｉｚ
ｏｆｉｒａｎ：科研製薬）は、一部限定された癌に対し
て制癌剤として使用されている（台糖株式会社、科研製
薬株式会社）。ＰＳＫ（クレスチン）も同様である。

【００２１】本発明では、生体におけるＩＬ−１２産生
誘発能およびＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキ
ラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞を活性化する
能力を指標にして、このスエヒロ茸菌糸体加工物、スエ
ヒロ茸菌糸体培養ロ液由来多糖体、ＰＳＫ（クレスチ
ン）等のカワラ茸菌子体加工物、ＡＨＣＣやＬＥＭ等の
椎茸菌子体加工物の有用性を再発見し、本発明を完成し
た。すなわち、本発明はＳＰＧ等のスエヒロ茸菌糸体培
養ロ液由来多糖体、ＳＣＰ等のスエヒロ茸菌糸体加工
物、ＰＳＫ（クレスチン）等のカワラ茸菌子体加工物、
ＡＨＣＣやＬＥＭ等の椎茸菌子体加工物から選ばれる少
なくとも一を活性成分として含む組成物であって、ＮＫ
Ｔ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択
的に作用してＮＫＴ細胞を活性化せしめる癌の治療剤を
提供した。

【００２２】更に本発明者は、ＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ
１（ナチュラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ
細胞を活性化する能力を有する茸菌糸体由来物は、α−
１，３および／またはα−１，４グルコシド結合構造、
特に好ましくは少なくともα−１，３グルコシド結合構
造をもつ糖成分であることを見出した。そしてＮＫＴ細
胞の活性化能を有する物質は、この構造をもった多糖類
および／または２〜１０個のオリゴ糖を含む茸菌糸体由
来物の組成物であってもよいことを見出した。本発明者
は、各種茸菌糸体由来物とＮＫＴ活性化能の検討および
その成分との関係を検討し、上記糖構造の存在が茸菌糸
体由来物のＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラ
ーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞を活性化する能
力の本質であることを見出した。なお、菌糸体のβ−
１，３およびβ−１，６グルコシド結合構造も、ＮＫＴ
細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択的
に作用してＮＫＴ細胞の活性化能を有することの確認を
得た。

【００２３】これら茸菌糸体由来物を含む組成物ＮＫＴ
細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択的
に作用してＮＫＴ細胞を活性化せしめる癌の治療剤の投
与量は、１日あたり、１〜２０００ｍｇ／Ｋｇ体重程度
であり、１０日〜１２ヶ月、１〜３１回／月で、好適に
は経口摂取される。無論、投与量を減少させ、癌の治療
剤を非経口にたえうる品質に調製することで、非経口摂
取も可能である。

【００２４】本発明のＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチ
ュラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞を活
性化せしめる癌の治療剤には、上記ＮＫＴ細胞のＮＫＲ
−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮ
ＫＴ細胞を活性化する能力を有する茸菌糸体加工物また
は茸菌糸体由来物をそれぞれ単独で用いてもよいし、同
時に組合わせて用いてもよい。

【００２５】また本発明は、少なくともＩＬ−１２産生
誘発能を有する物質とＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチ
ュラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞を活
性化する能力を有する物質とを配合した癌の治療剤また
は抗癌効果を期待して摂取する経口摂取用健康補助食品
製剤でありうる。

【００２６】この配合組成物の例示としては、ＳＣＰ等
のスエヒロ茸菌糸体加工物またはＳＰＧ等のスエヒロ茸
菌糸体培養ロ液由来多糖体、ＡＨＣＣやＬＥＭ等の椎茸
菌糸体加工物、ＭＡＫ（野田食菌工業株式会社）やＳＭ
等の万年茸菌糸体加工物から選ばれる少なくとも２種を
配合する。これらのほとんどはこれまでにも免疫賦活剤
として抗癌効果を目的として使用されたことは広く知ら
れている。しかし、本発明はこれらの組合せとＩＬ−１
２産生誘発能およびＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュ
ラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞を活性
化する能力との関係を見出し、これらを組合せることで
これまでの一般的な制癌剤の抗癌効果（２０％有効率）
とは比較の出来ない程の優位性を確立することで本発明
を完成した。

【００２７】最適の組合せは、スエヒロ茸菌糸体加工物
またはスエヒロ茸菌糸体培養ロ液由来多糖体と、椎茸菌
糸体加工物と、万年茸菌糸体加工物の３種を配合した組
成物であり、詳しくはスエヒロ茸菌糸体加工物またはス
エヒロ茸菌糸体培養ロ液由来多糖体の２０〜６０好まし
くは３０〜５０重量％、椎茸菌糸体加工物の２０〜６０
好ましくは３０〜５０重量％、万年茸菌糸体加工物５〜
４０好ましくは１０〜３０重量％の配合組成物である。
この配合組成物は、癌の治療剤または抗癌効果を期待し
て摂取する経口摂取用健康補助食品製剤として有効であ
る。

【００２８】本発明の配合組成物の経口摂取量は、通常
成人に対して、１日あたり、１〜２０００ｍｇ／Ｋｇ体
重程度である。用法用量は、ＩＬ−１２の産生誘発量お
よび／またはＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキ
ラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞の活性化度に
より調整されうる。投与期間は、１０日〜１２ヶ月、投
与頻度は１〜３１回／月である。

【００２９】スエヒロ茸の菌糸体培養ロ液から得られる
多糖体は、既にＳＰＧ（ｓｉｚｏｆｉｒａｎ）として科
研製薬および台糖株式会社が商業化している。その製法
としては、特公昭５２−４６３４号公報、特公昭５２−
４４６３４号公報等に記載の方法が例示される。

【００３０】ＬＥＭ等の椎茸菌糸体加工物とＭＡＫ等の
霊芝（万年茸）菌糸体加工物は、既に野田食菌工業株式
会社が商業化している。これらの製法の一例は、バガス
（砂糖黍の搾汁残査）に米糠を加え、良く配合し、水分
調整した後、一定の容器につめて個体培養基を作り、高
圧蒸気滅菌を行う。予め培養した、各菌の菌糸を培養基
に接種し、２３℃の培養室で四ヶ月間菌糸を培養する。
菌糸の蔓延した培養基を破砕し、自己消化処理をおこな
った後、椎茸菌糸体加工物と万年茸菌糸体加工物の場合
は温水で１５時間抽出する。抽出液をメンブランフィル
ターで除菌後、濾液を濃縮し、乾燥して粉末を得る（特
公平７−１４３５号公報、特開平１−３１２９８０号公
報、特公昭５１−１９０１３号公報、特公昭５３−１８
５９１号公報）。

【００３１】スエヒロ茸菌糸体加工物は菌糸体成分であ
り、油溶性である。そのため適当な有機溶媒例えばアセ
トン抽出処理等により抽出し、フィルターで除菌後、濾
液を濃縮し、乾燥して粉末を得る。本発明では、この経
口製剤（ＳＣＰ（有限会社東西医薬研究所））を使用し
た。その他の茸菌子体加工物もそれらの溶解性の特性
（水溶性・油溶性）に応じて同様の処理で調製できる。

【００３２】経口製剤は、錠剤、散剤、カプセル剤、シ
ロップ剤等に調製される。製剤は、無論既知の賦形剤、
崩壊剤、結合剤、滑沢剤等必要な添加物を配合し、常套
手段を使用することでも製剤化できる。更に必要に応じ
て、矯味剤、着色料、香料、安定剤、殺菌剤、防腐剤等
の添加も可能である。

【００３３】本発明の癌の治療剤は、ＮＫＴ細胞のＮＫ
Ｒ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択的に作用して
ＮＫＴ細胞を活性化せしめる組成物、または該組成物に
加えてＩＬ−１２産生誘発組成物を有効量含み、経口ま
たは静脈内または筋肉内投与、好ましくは患者の継続的
な自己管理を可能とする経口で投与される。

【００３４】また、ＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュ
ラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞を活性
化せしめる組成物、または該組成物に加えてＩＬ−１２
産生誘発組成物を含んでなる本発明の経口摂取用健康補
助食品製剤は、摂取した結果として抗癌効果が期待でき
る経口摂取用健康補助食品製剤である。

【００３５】以上説示したように本発明は、新規なＮＫ
Ｔ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択
的に作用してＮＫＴ細胞を活性化せしめる組成物を提供
し、更にＩＬ−１２産生誘発能とＮＫＴ細胞のＮＫＲ−
Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮＫ
Ｔ細胞の活性化する能力との関係を明らかにしたもので
あるから、これらのことを商業的媒体に担持させれば、
当該製品の価値について差別化手段となる。従って、こ
れら情報を商業的媒体に担持させた物は、極めて有用性
の高いものである。そのうえ、これら情報を商業的に利
用すれば、当該製品の価値について差別化手段となるか
ら、これら情報を利用した商業方法は、極めて有用性の
高いものである。

【００３６】

【実施例】本発明の実施例を示し、更に具体的に説明す
るが、本発明はこれらに限定されるものではなく、本発
明の技術的思想を逸脱しない範囲内で種々の応用が可能
である。

【実施例１】

【００３７】スエヒロ茸菌糸体加工物（ＳＣＰ：有限会
社 東西医薬研究所）を４０％重量部、椎茸菌糸体加工
物（ＬＥＭ（登録商標）：野田食菌工業株式会社）を４
０％重量部、霊芝（万年茸）菌糸体加工物（ＭＡＫ：野
田食菌工業株式会社）を２０％重量部からなる配合組成
物（ＩＬ−Ｘ）の１Ｋｇを均一に配合し、スプレードラ
イ方式による流動造粒法により、３種配合粒剤を得た。
この粒剤を６ｇ／日／体を経口摂取させた。摂取期間
は、３ヶ月である。処置開始前、開始１ヶ月後、３ヶ月
後でＮＫＴ細胞およびＩＬ−１２を測定し、効果の確認
を行った。ＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラ
ーＰ１）に選択的に作用したＮＫＴ細胞活性化とＩＬ−
１２の産生誘発が確認された患者の約８５％で、有意の
癌退縮効果がみられ、約２０％が完全癌退縮という結果
を得た。

【００３８】

【実施例２】スエヒロ茸菌糸体加工物（ＳＣＰ）を４０
％重量部、椎茸菌糸体加工物（ＬＥＭ：野田食菌工業株
式会社）を４０％重量部、霊芝（万年茸）菌糸体加工物
（ＭＡＫ：野田食菌工業株式会社）を２０％重量部から
なる配合組成物（ＩＬ−Ｘ）の１Ｋｇを、均一に配合
し、配合粉末を湿式造粒法により細粒化し、ハードゼラ
チンカプセルに３ｇずつ充填して、カプセル剤を作成し
た。このカプセル剤を、２個／日／体を経口摂取させ
た。摂取期間は、３ヶ月である。結果は、実施例１と同
等の有用性が確認された。

【００３９】

【臨床例１】本発明者は、癌患者（３７症例）の各種サ
イトカインの動態に着目し、ＩＦＮγ、ＣＤ３×ＣＤ１
６１、Ｖα２４Ｖβ１１、ＩＬ−１２、Ｔｈ１／Ｔｈ２
比等を測定し、各サイトカインの相関を分析した。患者
にはいずれも、茸菌糸体成分（多糖体）、またはこれに
加えてＯＫ４３２（ピシバニール：中外製薬株式会社）
を投与した。投与した茸菌糸体成分（多糖体）は、いず
れもＩＬ−１２の産生誘発能およびＮＫＴ細胞活性化能
を保持する茸菌糸体成分である。表１は、各種癌疾患の
患者に各種茸由来物質を投与した後の、各サイトカイン
値を示す。表２は、表１の各患者に投与した薬剤を示す
ものであり、表１の患者例と相関するものである。投与
量は、一日あたり３〜６グラムを経口投与し、投与期間
は表中に期間として示した。３７症例中６例が完全治癒
（ＣＲ）、１４例が部分治癒（ＰＲ）、１４例が無反応
（癌の進展なし：ＮＣ）、３例が無効（ＰＤ）であっ
た。

【００４０】

【表１】

【００４１】

【表２】

【００４２】Ｖα２４＋／Ｖβ１１＋とはＶα２４Ｖβ
１１陽性細胞、すなわち細胞表面上に細胞表面マーカー
であるＶα２４およびＶβ１１を有している細胞を意味
する。ＣＤ３＋／ＣＤ１６１＋はＣＤ３×ＣＤ１６１陽
性細胞、すなわち細胞表面上に細胞表面マーカーである
ＣＤ３およびＣＤ１６１を有している細胞を意味する。
表中、ＣＲは完全治癒（癌が消失して４週間以上経過す
るもの）、ＰＲは部分治癒（癌が５０％以上縮小したも
の）、ＮＣは無反応（癌の増殖が５０％以下に抑制され
ているか、２５％以内の増殖で抑えられているもの）、
ＰＤは無効（癌の増殖が２５％以上みられるもの）を示
す。

【００４３】細胞および各サイトカインの測定方法を以
下に示す。 （ＮＫＴ細胞の測定）ＮＫＴ細胞の活性化のうち、ＮＫ
Ｒ−Ｐ１への作用による活性化の測定は、ＮＫＴ細胞の
細胞表面に特異的に存在する細胞表面抗原（ＣＤ３およ
びＣＤ１６１）の測定により、ＮＫＴ細胞数の増加を調
べることで行うことができる。具体的には、末梢血中の
リンパ球について、ＣＤ３陽性細胞でかつＣＤ１６１陽
性細胞の細胞を検定する。つまり、ＮＫＴ細胞の細胞表
面抗原であるＣＤ３およびＣＤ１６１を、モノクローナ
ル抗体を用いてフローサイトメトリーを使用するＴｗｏ
Ｃｏｌｏｒ検査により測定する。ＮＫＴ細胞が活性化さ
れているとは、リンパ球の中でＮＫＴ細胞の割合が１０
％以上であることをいう。ＮＫＴ細胞活性化能とは、Ｎ
ＫＴ細胞の割合を１０％以上に増加せしめる機能、また
はある物質を投与する前のＮＫＴ細胞の割合より更に増
強せしめる機能を意味する。

【００４４】癌患者の血液を用いて、血中細胞につい
て、細胞表面抗原であるＣＤ３およびＣＤ１６１が陽性
である細胞の割合をフローサイトメトリーを用いたＴｗ
ｏ Ｃｏｌｏｒ検査により常法通り測定した。ＣＤ３お
よびＣＤ１６１に対するモノクローナル抗体は、それぞ
れコールター社製のＣＤ３−ＰＣ５並びにベクトンディ
ッキンソン社製のＣＤ１６１を使用した。

【００４５】ＮＫＴ細胞の活性化のうち、Ｖα２４Ｖβ
１１への作用による活性化の測定は、ＮＫＴ細胞の細胞
表面に特異的に存在する細胞表面抗原（Ｖα２４および
Ｖβ１１）の測定により、ＮＫＴ細胞数の増加を調べる
ことで行うことができる。具体的には、末梢血中のリン
パ球について、Ｖα２４陽性細胞でかつＶβ１１陽性細
胞の細胞を検定する。つまり、ＮＫＴ細胞の細胞表面抗
原であるＶα２４およびＶβ１１を、モノクローナル抗
体（ＴＣＲ−Ｖα２４ＰＥ、ＴＣＲ−Ｖβ１１ＦＩＴ
Ｃ；Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ社）を用いてフロ
ーサイトメトリーを使用するＴｗｏ Ｃｏｌｏｒ検査に
より測定した。

【００４６】（サイトカインを測定するための試料の調
製）まず、癌患者血液より単核球画分を分離調製する。
癌患者から得たヘパリン加末梢血をリン酸緩衝生理食塩
水（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｂｕｆｆｅｒｅｄ Ｓａｌｉ
ｎｅ；ＰＢＳ）で２倍に希釈して混和した後、Ｆｉｃｏ
ｌｌ−Ｃｏｎｒａｙ液（比重１．０７７）上に重層し、
４００Ｇで２０分遠沈後、単核球画分を採取した。洗浄
後、１０％牛胎児血清（ＦＢＳ）を加えたＲＰＭＩ−１
６４０培地を加え、細胞数を１×１０^６個となるように
調製した。得られた細胞浮遊液２００μｌにフィトヘマ
グルチニン（Ｐｈｙｔｏｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ；
以下、ＰＨＡと略称する）（ＤＩＦＣＯ製）を２０μｇ
／ｍｌの濃度となるように加え、９６穴マイクロプレー
トにて５％ＣＯ_２存在下、３７℃で２４時間培養し、該
培養した細胞溶液中のサイトカインを測定する試料とし
た。

【００４７】（ＩＬ−１２の測定）ＩＬ−１２は、Ｒ＆
Ｄ ＳＹＳＴＥＭＳ製のキットを用いたＥＬＩＳＡ法に
て測定した。実際には９６穴マイクロプレートの各穴に
測定用希釈液ＡｓｓａｙＤｉｌｕｅｎｔ ＲＤ１Ｆを５
０μｌ、標準液（ｓｔａｎｄａｒｄ）または実施例１で
調製した試料を２００μｌずつ分注した後、室温にて静
置して２時間反応させた。その後、ｈｏｒｓｅ ｒａｄ
ｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（以下、ＨＲＰと略称す
る）標識抗ＩＬ−１２抗体を２００μｌずつ分注し２時
間室温で静置した。各穴の反応液を除去し３回洗浄後、
発色基質溶液を２００μｌずつ分注し、２０分室温静置
後、酵素反応停止溶液を５０μｌずつ分注した。５５０
ｎｍを対照として４５０ｎｍにおける各穴の吸光度をＥ
ｍａｘ（和光純薬株式会社）にて測定した。ＩＬ−１２
量は、ｐｇ／ｍｌとして表される。ＩＬ−１２産生誘発
能とは、末梢血単核球が刺激により産生するＩＬ−１２
量を、７．８ｐｇ／ｍｌ以上（７．８は測定限界値）に
増強せしめる機能、またはある物質を投与する前のＩＬ
−１２産生量より増強せしめる機能を意味する。

【００４８】（ＩＦＮγの測定）ＩＦＮγの測定は、Ｂ
ｉｏＳｏｕｒｃｅ Ｅｕｒｏｐｅ Ｓ．社のＩＦＮγＥ
ＡＳＩＡキットを用いて、酵素免疫測定法（ＥＩＡ法）
で測定した。実際には９６穴マイクロプレートの各穴に
標準液（ｓｔａｎｄａｒｄ）または上記調製した試料を
２倍希釈したものを５０μｌずつ分注し、ＨＲＰ標識抗
ＩＦＮ−γ抗体を５０μｌずつ分注し更に振盪しながら
２時間室温で反応させた。各穴の反応液を除去し３回洗
浄後、発色基質溶液を２００μｌずつ分注し、振盪しな
がら１５分室温で反応させ、酵素反応停止溶液を５０μ
ｌずつ分注した。６３０ｎｍを対照として４５０ｎｍお
よび４９０ｎｍにおける各穴の吸光度をＥｍａｘ（和光
純薬）にて測定した。ＩＦＮγ量は、ＩＵ／ｍｌとして
表される。

【００４９】（ＩＬ−１０の測定）ＩＬ−１０の測定
は、ＢｉｏＳｏｕｒｃｅ Ｅｕｒｏｐｅ Ｓ．社のＩＬ
−１０ ＥＡＳＩＡキットを用いて、固相酵素免疫測定
法（ＥＬＩＳＡ法）で測定した。方法は、抗ＩＬ−１０
抗体を用いる以外は、ＩＦＮγの測定方法に準じて行っ
た。。ＩＬ−１０量は、ｐｇ／ｍｌとして表される。

【００５０】（Ｔｈ１／Ｔｈ２細胞比の測定）Ｔｈ１／
Ｔｈ２細胞比は、フローサイトメトリーによるヘルパー
Ｔ（Ｔｈ）細胞系統Ｔｈｒｅｅ ｃｏｌｏｒ解析検査に
よって常法により検定した。Ｔｈ１／Ｔｈ２とは、細胞
表面抗原ＣＤ４を有するヘルパーＴ細胞のなかでＩＦＮ
γを産生する細胞（Ｔｈ１）とＩＬ−４を産生する細胞
（Ｔｈ２）の比率を表すもので、ＣＤ４×ＩＦＮγ／Ｉ
Ｌ−４と記す。まず癌患者血液を、ホルボール１２−ミ
リステート−１３−アセテート（ｐｈｏｒｂｏｌ １２
−Ｍｙｒｉｓｔａｔｅ １３ Ａｃｅｅｔａｔｅ）とイ
オノマイシン（Ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ）により３７℃で４
時間処理し、血液中の細胞を刺激してサイトカインを産
生させた。次いでブレフェルジンＡ（Ｂｒｅｆｅｒｄｉ
ｎ Ａ）を加えて産生反応を停止させ、抗ＣＤ４抗体で
あるＣＤ４−ＰＣ５（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ
社）を用いて細胞表面マーカーであるＣＤ４を染色し、
細胞を固定後、ＦＡＣＳ Ｌｙｓｉｎｇ Ｓｏｌｕｔｉ
ｏｎ（日本ベクトンディッキンソン社）を用いて溶血処
理した。その後ＦＡＣＳ Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚｉｎ
ｇ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（日本ベクトンディッキンソン
社）により細胞膜透過処理を行い、更に抗ＩＦＮγ抗体
／抗ＩＬ−４抗体（ＦＡＳＴＩＭＭＵＮＥ ＩＦＮγ
ＦＩＴＣ／ＩＬ−４ ＰＥ，日本ベクトンディッキンソ
ン社）で細胞内のサイトカインを染色して、フローサイ
トメーター（ＦＡＣＳ Ｃａｌｉｂｕｒ、Ｂｅｃｔｏｎ
Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社）で測定および解析を行った。

【００５１】以上の測定結果データをもとに以下に各サ
イトカインの相関性を分析した。図１は、各種サイトカ
インの相関性を説明する全体図である。図１は、Ｔｈ１
／Ｔｈ２比とＩＬ−１２、Ｔｈ１／Ｔｈ２比とＩＦＮ
γ、ＩＦＮγとＩＬ−１２、ＩＬ−１２とＣＤ３×ＣＤ
１６１（ＮＫＲ−Ｐ１）、ＩＦＮγとＣＤ３×ＣＤ１６
１（ＮＫＲ−Ｐ１）には強い正の相関、ＩＬ−１２とＶ
α２４Ｖβ１１（ＴＣＲ Ｖα２４＋／ＴＣＲ Ｖβ１
１＋）には強い逆相関のあること示し、各抗原受容体と
サイトカインの関係を示している。

【００５２】図２は、ＩＦＮγ量（ＩＵ／ｍｌ）に対す
るＣＤ３×ＣＤ１６１とＶα２４Ｖβ１１との相関を示
すものであり、前者（図２Ａ）には強い正の相関が存在
するが、後者（図２Ｂ）には弱い逆相関のあることが判
明した。このことはＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュ
ラルキラーＰ１）への刺激はＩＮＦ−γの誘発と強い正
の相関があることを示唆する。

【００５３】図３は、ＩＬ−１２（ｐｇ／ｍｌ）とＣＤ
３×ＣＤ１６１の相関を示すものであり、ＮＫＴ細胞の
ＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）への刺激はＩＬ
−１２の誘発と強い正の相関のあることが明らかとなっ
た。

【００５４】図４は、ＩＬ−１２とＶα２４Ｖβ１１の
相関を示すものであり、ＮＫＴ細胞のＶα２４Ｖβ１１
への刺激はＩＬ−１２の誘発とは強い逆相関のあること
がわかった。

【００５５】図５は、Ｔｈ１／Ｔｈ２比とＩＬ−１２の
相関を示すものであり、強い正の相関性を示すことか
ら、ＩＬ−１２がＮＫＴ細胞に直接作用して、ＩＮＦ−
γの産生増強し免疫応答をＴｈ１が作用する方向に傾け
ることを示唆した。

【００５６】図６は、Ｖα２４Ｖβ１１とＣＤ３×ＣＤ
１６１の相関を示すものであり、両者には相関性がない
ことが判明した。

【００５７】図７は、Ｖα２４Ｖβ１１とＴｈ１／Ｔｈ
２比の相関を示すものであり、弱い逆相関を示した。

【００５８】図８は、ＣＤ３×ＣＤ１６１とＴｈ１／Ｔ
ｈ２比の相関を示すものであり、弱い正の相関性を示し
た。

【００５９】以上から、Ｖα２４Ｖβ１１のＴ細胞抗原
受容体が刺激を受けたＮＫＴ細胞は、ＩＬ−１２と強い
逆相関、ＩＦＮ‐γ、Ｔｈ１／Ｔｈ２とも弱い逆相関を
示すことを証明した。このことから、Ｖα２４Ｖβ１１
への刺激は免疫機能の抑制に働くことが立証された。一
方、ＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ
１）が刺激を受けた場合はＩＬ−１２およびＩＦＮ‐γ
と強い正の相関を示し、Ｔｈ１／Ｔｈ２とも弱い正の相
関を示すことを証明し、ＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラ
ーＰ１）への刺激は免疫機能の活性化に働くことを立証
した。

【００６０】

【発明の効果】本発明では、本発明者は癌の予防または
治療における癌免疫カスケードについて検討を重ね、癌
免疫を担う活性化されたＮＫＴ細胞が関与するカスケー
ドにおいて、ＮＫＴ細胞の抗原受容体への作用効果がＮ
ＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）とＶα２４Ｖβ１
１では全く異なるものであることを見出し、ＮＫＲ−Ｐ
１に選択的に作用する物質およびＶα２４Ｖβ１１に選
択的に作用する物質の有用性を見出し、癌免疫治療にお
ける革命的な効果を達成したものである。

【図面の簡単な説明】

【図１】 各種サイトカインの相関性を示す全体図であ
る。

【図２】 ＩＦＮγ量（ＩＵ／ｍｌ）に対するＣＤ３×
ＣＤ１６１とＶα２４Ｖβ１１との相関性を示す図であ
る。

【図３】 ＩＬ−１２（ｐｇ／ｍｌ）とＣＤ３×ＣＤ１
６１の相関性を示す図である。

【図４】 ＩＬ−１２（ｐｇ／ｍｌ）とＶα２４Ｖβ１
１の相関性を示す図である。

【図５】 Ｔｈ１／Ｔｈ２比とＩＬ‐１２の相関性を示
す図である。

【図６】 Ｖα２４Ｖβ１１とＣＤ３×ＣＤ１６１の相
関性を示す図である。

【図７】 Ｖα２４Ｖβ１１とＴｈ１／Ｔｈ２比の相関
性を示す図である。

【図８】 ＣＤ３×ＣＤ１６１とＴｈ１／Ｔｈ２比の相
関性を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 43/00 １１７ Ａ６１Ｐ 43/00 １１７ Ｃ１２Ｑ 1/02 Ｃ１２Ｑ 1/02

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞の活
   性化能におけるＮＫＴ細胞が有するナチュラルキラー
   （ＮＫ）細胞抗原受容体であるＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラ
   ルキラーＰ１）に対する作用を指標として用いられる癌
   の治療剤。
2. 【請求項２】 ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞の活
   性化能におけるＮＫＴ細胞が有するナチュラルキラー
   （ＮＫ）細胞抗原受容体であるＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラ
   ルキラーＰ１）に対する作用を指標としてスクリーニン
   グすることを特徴とする癌治療剤のスクリーニング方
   法。
3. 【請求項３】 ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞の活
   性化能におけるＮＫＴ細胞が有するナチュラルキラー
   （ＮＫ）細胞抗原受容体であるＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラ
   ルキラーＰ１）に選択的に作用することを特徴とする請
   求項１の癌の治療剤。
4. 【請求項４】 ＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）
   に対する選択的作用の結果として、インターフェロンγ
   （ＩＦＮγ）の大量生産を誘導し、かつＴヘルパー１細
   胞／Ｔヘルパー２細胞（Ｔｈ１／Ｔｈ２）比をＴｈ１が
   主に作用する免疫系が働く方向に誘導する請求項３の癌
   の治療剤。
5. 【請求項５】 細胞表面マーカーであるＣＤ３およびＣ
   Ｄ１６１を測定することによってＮＫＲ−Ｐ１（ナチュ
   ラルキラーＰ１）の測定を行いナチュラルキラーＴ（Ｎ
   ＫＴ）細胞の活性化能を検定する請求項１または３また
   は４に記載の癌の治療剤。
6. 【請求項６】 経口摂取用健康補助食品製剤である請求
   項１および３〜５のいずれか１項に記載の癌の治療剤。
7. 【請求項７】 請求項１および３〜６のいずれか１項に
   記載の情報を担持した商業的媒体。
8. 【請求項８】 請求項１および３〜６のいずれか１項に
   記載の情報を利用した商業方法。