JP2001518523A

JP2001518523A - インターベンショナル療法をモニタリングするためのコントラスト増強型診断的画像化方法

Info

Publication number: JP2001518523A
Application number: JP2000514677A
Authority: JP
Inventors: ランドールビー．ラファー，; ステファンオー．ダナム，
Original assignee: エピックスメディカル，インコーポレイテッド
Priority date: 1997-10-02
Filing date: 1998-09-24
Publication date: 2001-10-16
Also published as: EP1019094B1; CA2303426A1; IS5399A; JP2006077020A; KR20010030854A; NO20001707D0; IL134985A0; PT1019094E; ES2206996T3; US6861045B1; US7175829B2; AU742438B2; US20050118103A1; DE69819925D1; DE69819925T2; WO1999017809A3; CA2303426C; NO20001707L; NO321966B1; HK1030744A1

Abstract

(57)【要約】本発明は、インターベンショナル療法の有効性をモニタリングするための、コントラスト増強型診断的画像化方法に関する。本方法に有用な画像化剤は、画像増強化部分（ＩＥＭ）および状態依存性組織結合部分（ＳＤＴＢＭ）を含む。これらの造影剤は、標的化された組織または組織成分の１つ以上の成分に対して状態依存性な結合を示し、そして一旦標的化された組織に結合した薬剤のシグナル特性の検出可能な変化を提供する。結果として、これらの薬剤は標的化された組織に対して結合親和性を示し、それゆえ標的組織のコントラストを画像化する。これは、治療の間の組織状態が変化するに従って、変化する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（本発明の技術分野）本発明は、コントラスト増強型診断的画像化のための方法に関する。詳細には
、本発明は、特定の組織または組織成分を標的化し、そしてインターベンショナ
ル療法の間または後に生じる、標的化された組織における状態の変化（例えば、
変性、壊死、組織凝固、アポトーシス）のモニタリングを可能にする造影剤を使
用する、ＭＲＩおよび光学的画像化の方法に関する。本発明に使用される造影剤
は、標的化された組織の１つ以上の成分に対する状態依存性結合を示し、そして
組織結合型造影剤のシグナル特異性において検出可能な変化を提供する。

【０００２】（発明の背景）診断的画像化技術（例えば、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、Ｘ線、核放射性薬学
的画像法、光学的（紫外線、可視光および／または赤外光）画像法、および超音
波画像法）は、長年、医療診断に使用されてきた。いくつかの場合において、画
像の質を改善するため、または特定の情報を提供するための造影媒体の使用は、
長年進歩してきた。光学的または超音波画像法のような、他の場合において、造
影剤の導入は、差し迫っている（すなわち、近年のものである）。

【０００３】ＭＲＩおよび光学的画像化方法は、標的化された組織の化学的環境および状態
に感受性の複雑なシグナルを生じるという点で、画像化様式のなかでも独特のも
のである。Ｘ線または放射性核種薬剤からのシグナルは、この薬剤が血漿中に遊
離していようと、タンパク質に結合していようと、または骨の中に補足されてい
ようと同じままであるが、ＭＲＩまたは光学的画像化のための特定の薬剤は、異
なる生理的環境および病理学的状態において異なるシグナル特性を有する。例え
ば、組織成分への結合によって、ＭＲＩ造影剤は、核の近傍または核に付随する
誘導された緩和速度または化学シフトの変化を示し得る。同様に、光学色素は、
結合の際に、その吸光度、反射率、蛍光、燐光、化学ルミネセンス、散乱、また
は他のスペクトル特性における変化を示し得る。

【０００４】一般に、診断データを提供するために、この造影剤は画像化技術で使用される
電磁放射の波長を干渉するか、組織の物理学的特性を改変して改変型シグナルを
生じるか、または放射性薬品の場合のように、それ自体、放射線源を提供しなけ
ればならない。一般に使用される物質には、有機分子、金属イオン、塩あるいは
キレート剤が挙げられ、これには金属キレート剤、粒子（特に、鉄粒子）、また
は標識ペプチド、抗体、タンパク質、ポリマーもしくはリポソームが含まれる。

【０００５】投与後、代謝および／または排泄される前に、身体コンパートメント中に非特
異的に拡散する薬剤もある；一般にこれらの薬剤は、非特異的薬剤として公知で
ある。あるいは、他の薬剤は特定の身体コンパートメント、細胞、細胞性コンパ
ートメント、器官または組織に対して特異的な親和性を有する；これらの薬剤は
標的化薬剤と称され得る。

【０００６】診断的画像化技術の適応の１つは、インターベンショナル療法モニタリングに
おけるものであった。一般のインターベンショナル療法は、以下を用いる高熱エ
ネルギーによる所望されない組織または組織成分の標的化工程を包含する：集束
超音波（例えば、Ｃｌｉｎｅら、「ＭＲＴｅｍｐｅｒａｔｕｒｅＭａｐｐｉ
ｎｇｏｆＦｏｃｕｓｅｄＵｌｔｒａｓｏｕｎｄＳｕｒｇｅｒｙ」Ｍａｇ
．Ｒｅｓｎ．Ｍｅｄ．，３１：６２８−６３６（１９９４））、無線周波発生器
（例えば、Ｒｏｓｓｉら、「ＰｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓＲＦＩｎｔｅｒｓｔ
ｉｔｉａｌＴｈｅｒｍａｌＡｂｌａｔｉｏｎｉｎｔｈｅＴｒｅａｔｍ
ｅｎｔｏｆＨｅｐａｔｉｃＣａｎｃｅｒ」ＡＪＲ，１６７：７５９−７６
８（１９９６））、マイクロ波アンテナ（例えば、Ｓｃｈｗａｒｚｍａｉｅｒら
、「ＭａｇｎｅｔｉｃＲｅｓｏｎａｎｃｅＩｍａｇｉｎｇｏｆＭｉｃｒ
ｏｗａｖｅＩｎｄｕｃｅｄＴｉｓｓｕｅＨｅａｔｉｎｇ」Ｍａｇ．Ｒｅｓ
ｎ．Ｍｅｄ．，３３：７２９−７３１（１９９５））、およびレーザー（例えば
、Ｖｏｇｌら、「ＲｅｃｕｒｒｅｎｔＮａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌＴｕｍ
ｏｒｓ：ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙＣｌｉｎｉｃａｌＲｅｓｕｌｔｗｉｔｈ
ＩｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎａｌＭＲＩｍａｇｉｎｇ−Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅ
ｄＬａｓｅｒ−ＩｎｄｕｃｅｄＴｈｅｒｍｏｔｈｅｒａｐｙ」Ｒａｄｉｏｌ
ｏｇｙ，１９６：７２５−７３３（１９９５））；寒冷切除の使用（すなわち、
液体窒素）および変性液（例えば、エタノール、熱生理食塩水）の所望される組
織への直接的な注入（例えば、Ｎｅｇａｌら、「Ｃｏｎｔｒａｓｔ−Ｅｎｈａｎ
ｃｅｄＭＲＩｍａｇｉｎｇｏｆＨｅｐａｔｉｃＬｅｓｓｉｏｎｓＴ
ｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＰｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓＥｔｈａｎｏｌＡｂｌ
ａｔｉｏｎＴｈｅｒａｐｙ」Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ、１８９：２６５−２７０（
１９９３）およびＨｏｎｄａら、「ＰｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓＨｏｔＳａｌ
ｉｎｅＩｎｊｅｃｔｉｏｎＴｈｅｒａｐｙｆｏｒＨｅｐａｔｉｃＴｕ
ｍｏｒｓ：ＡｎＡｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｔｏＰｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ
ＥｔｈａｎｏｌＩｎｊｅｃｔｉｏｎＴｈｅｒａｐｙ」Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ、
１９０：５３−５７（１９９４））；化学療法剤および／またはカオトロピック
剤の組織への注入（例えば、Ｐａｕｓｅｒら、「ＥｖａｌｕｔｉｏｎｏｆＥ
ｆｆｉｃｉｅｎｔＣｈｅｍｏｅｍｂｐｌｉｚａｔｉｏｎＭｉｘｔｕｒｅｂ
ｙＭａｇｎｅｔｉｃＲｅｓｏｎａｎｃｅＩｍａｇｉｎｇｏｆＴｈｅｒ
ａｐｙＭｏｎｉｔｏｒｉｎｇ：ＡｎＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＳｔｕｄｙ
ｏｎｔｈｅＶＸ２ＴｕｍｏｒｉｎｔｈｅＲａｂｂｉｔＬｉｖｅ
ｒ」ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．、５６：１８６３−６７（１９９６））；および光
力学的療法、ここで細胞傷害性薬剤は光の照射によってインビボで活性化される
（例えば、Ｄｏｄｄら、「ＭＲＩＭｏｎｉｔｏｒｉｎｇｏｆｔｈｅＥｆ
ｆｅｃｔｓｏｆＰｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃＴｈｅｒａｐｙｏｎＰｒｏ
ｓｔａｔｅＴｕｍｏｒ」Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ’ｙＭａｇ．Ｒｅｓｎ．，３：１
３６８、ＩＳＳＮ１０６５−９８８９（８月号１９−２５，１９９５））。全
てのこのようなインターベンショナル療法に共通の目標は、所望されない組織ま
たは組織成分（すなわち、ガン性、腫瘍性、新形成性組織または組織成分）の壊
死、切除（ａｂｌａｔｉｏｎ）、凝固、あるいは変性による、このような組織の
処置である。

【０００７】このようなインターベンショナル方法から最大の利益を得るために、そして副
作用（例えば、隣接組織の損傷）を最小にするために、インビボでこの療法の効
率をモニターすることが必要である。事実、本当に有効であるために、このイン
ターベンショナル療法は、所望されない組織または組織成分の完全な「死」（除
去または治療の終結後に生育可能ではない）まで継続しなければならない。それ
ゆえ、過剰な処置および隣接組織への起こり得る損傷を回避するために治療の進
行を正確にモニターしなければならないだけではなく、真に壊死性の組織と一定
の程度まで損傷されているがそれにも関わらず生存し得る細胞とを正確に区別し
得なければならない。

【０００８】インターベンショナル療法の効率をモニターするための１つの方法は、このよ
うな療法の間または後に、所望されない組織または組織成分を画像化することで
ある。しかし、任意のこのような診断的画像化方法は、このような方法で異なる
病理学的状態（ネイティブ対変性、生存対壊死）の組織間のコントラストを増加
して２つの基本的なクラスの情報を提供し得なければならない：１）検出データ．これには、画像化された組織の病理学的状態を決定するため
に必要な分光学的情報が挙げられる。このクラスの情報を提供するための能力は
、この薬剤の「特異性」および「感度」に関する。

【０００９】２）フィードバックおよび解像度．これらのクラスの情報は、組織または組織
成分を破壊または分解するインターベンショナル療法的手順のモニタリングを提
供する。いくつかのインターベンショナル方法を用いる、治療の進行の「リアル
タイム」フィードバック（約１〜１０秒）が好ましく、一方、他の方法を用いて
の治療後評価が適切であることが想定される。全てのインターベンショナル療法
で、処置された組織および処置の間の周辺組織に対する任意の影響の正確な空間
的解像度が（約１〜５ｍｍ）が望ましい。

【００１０】インターベンショナル療法の効率をモニタリングするための現在のＭＲＩ−ベ
ースの方法は、一般に、２つのクラスのうちの１つである：（１）外因性造影剤
は使用しないがいくつかの他の観察可能なＭＲパラメーターに頼るもの（以下を
参照のこと）；および（２）非特異的細胞外造影剤を使用するもの。しかしなが
ら、これらの方法は、インターベンショナル療法を受けている組織または組織成
分の病理学的状態に関する直接的な情報を、実質的には全く提供しない（例えば
、ネイティブであるかまたは変性されているか、壊死であるかまたは生存してい
るか）。さらに、このような方法は、熱切除療法のモニタリングに対して非常に
制限されており、そして熱誘導型組織温度変化に対して制限された感度を提供す
る。

【００１１】熱切除療法をモニタリングするためのこれらのＭＲＩ−ベースの方法のいくつ
かは、温度依存性ＮＭＲパラメーター（例えば、緩和時間（Ｔ₁および／またはＴ₂）、水のプロトン共鳴振動数（ＰＲＦ）、位相のずれ、および拡散係数）に依存する。しかしながら、これらの方法は多数の制限を受けている。

【００１２】例えば、このような方法の１つは、組織のＴ₁緩和時間に対する温度の影響をモニタリングすることに関する。例えば、Ｃｌｉｎｅら、「ＭＲＴｅｍｐｅｒ
ａｔｕｒｅＭａｐｐｉｎｇｏｆＦｏｃｕｓｅｄＵｌｔｒａｓｏｕｎｄ
Ｓｕｒｇｅｒｙ」Ｍａｇ．Ｒｅｓｎ．Ｍｅｄ．，３１：６２８〜６３６（１９９
４）を参照のこと。しかし、このアプローチは、各組織が独特のＴ₁対温度プロフィールを有し、それゆえこの方法が各組織型についてＴ₁較正を必要とするので、不適切である。このＴ₁方法はまた、１℃あたりほんの０．０１％〜１．５％のＴ₁の組織依存的変化での感度の点で制限される。

【００１３】温度測定を使用する別の方法は、水のプロトン磁気共鳴（または化学シフト）
に対する温度の影響をモニタリングすることに関する。この方法は、温度変化に
より誘導される水分子の水素結合および分子運動における変化を検出する。例え
ば、Ｊ．Ｄ．Ｐｏｏｒｔｅｒら、「ＮｏｎｉｎｖａｓｉｖｅＭＲＩＴｈｅｒ
ｍｏｍｅｔｒｙｗｉｔｈｔｈｅＰｒｏｔｏｎＲｅｓｏｎａｎｃｅＦｒ
ｅｑｕｅｎｃｙ（ＰＲＦ）Ｍｅｔｈｏｄ：ＩｎＶｉｖｏＲｅｓｕｌｔｓ
ｉｎＨｕｍａｎＭｕｓｃｌｅｓ」Ｍａｇ．Ｒｅｓｎ．Ｍｅｄ．，３３：７４
−８１（１９９５）を参照のこと。しかし、低感度（０．０１ｐｐｍ／℃）のこ
の方法は、強い磁界強度（すなわち、＞４．７Ｔ）の使用を必要とし、これは臨
床的に望ましくない。さらに、この水の化学シフトの測定は、磁界の完全な安定
性を必要とし、そしてまた、異なる組織型間で劇的に変化する組織の磁化率に非
常に依存する。それゆえ、Ｔ₁方法のような、この方法はまた、各組織型に対して広範な較正を必要とする。最終的に、この方法は熱誘導型の組織の壊死または
変性に関する情報を提供しない。

【００１４】別の公知の方法は、水プロトン拡散係数に対する温度の影響をモニタリングす
ることを必要とする。例えば、Ｈ．ＳａｉｎｔＪａｌｍｅｓ，「Ｐｒｅｃｉｓ
ｉｏｎｉｎＴｅｍｐｅｒａｔｕｒｅＭｅｓｕｒｅｍｅｎｔｖｉａＴ₁ ｏｒＤｉｆｆｕｓｉｏｎＩｍａｇｉｎｇ」Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ’ｙＭａｇ
．Ｒｅｓｎ．、２：１０７２、ＩＳＳＮ１０６５〜９８８９（８月号１９−２
５，１９９５）を参照のこと。しかし、この方法はまた、拡散係数が組織運動お
よび還流に対して感度が高いので制限される。

【００１５】上記の方法の全てにおいて、増加した血流、組織代謝、または誘導された浮腫
に起因する生理学的な組織変化は、予測不可能なシグナルバリエーションを生じ
得る（すなわち、磁化率の変化）。これらの影響は、熱切除療法の正確なモニタ
リングに対して標準熱較正曲線をほとんど価値がないかまたは全く価値が無いも
のにする。さらに、温度のみの測定は、組織切除の有効性または周辺組織に対す
る副作用を正確に決定するために不充分なものであり得る。

【００１６】他の方法はまた、他の磁気核の化学シフトに対する温度の影響をモニターする
ことが報告されている。例えば、コバルトＮＭＲ化学シフトは、温度の非常に感
度の高いプローブである。しかし、⁵⁹Ｃｏの低受容性（ｒｅｃｅｐｔｉｖｉｔｙ
）は、強い磁界（ｆｉｅｌｄ）強度（≧４．７Ｔ）、高濃度、および過度の測定
時間を必要とする。Ａ．Ｇ．Ｗｅｂｂら、「ＭｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｏｆＭ
ｉｃｒｏｗａｖｅＩｎｄｕｃｅｄＨｅａｔｉｎｇｏｆＢｒｅａｓｔＴ
ｕｍｏｒｓｉｎＡｎｉｍａｌＭｏｄｅｌｓＵｓｉｎｇＣｏｂａｌｔ
ＢａｃｅｄＮＭＲ」Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ’ｙＭａｇ．Ｒｅｓｎ．、１：７２、
ＩＳＳＮ１０６５〜９８８９（８月号１９−２５，１９９５）を参照のこと。
さらに、コバルト薬剤の毒性は、インビボでの使用に対して重大な制限が存在す
る。

【００１７】フッ素（¹⁹Ｆ）ＮＭＲもまた、リポソームカプセル化フッ化炭素およびフッ素
化ポリマーの温度依存的相転移をモニターするために使用されてきた。例えば、
Ｗｅｂｂら、「ＭｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎｏｆＦｌｕｏｒｉｎ
ｅ−ＣｏｎｔａｉｎｉｎｇＰｈａｓｅＴｒａｎｓｉｔｉｏｎＡｇｅｎｔｓ
ｆｏｒＭｏｎｉｔｏｒｉｎｇＴｅｍｐｅｒａｔｕｒｅＣｈａｎｇｅｉｎ
ｖｉｖｏ」Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ’ｙＭａｇ．Ｒｅｓｎ．、３：１５７４、ＩＳ
ＳＮ１０６５〜９８８９（８月号６−１２，１９９４）を参照のこと。しかし
、臨床的に、ポリマー性フッ素化化合物の限定された生体分布（ｂｉｏｄｉｓｔ
ｒｉｂｕｔｉｏｎ）、ｐＨおよび組織型に対するフッ素化薬剤の化学シフト依存
性、ならびに大きな磁界の必要性のために、¹⁹Ｆ方法は有用ではない。これらの
薬剤はまた、熱誘導型組織壊死については報告していない。

【００１８】常磁性金属錯体を含有する特定の造影剤もまた、インターベンショナル療法の
効率をモニターすることが示唆されてきた。このような薬剤は、水共鳴振動数の
正常範囲からの、キレート化リガンドのプロトン化学シフト（２０〜４０ｐｐｍ
）における大きな変化を誘導し得る。インビボにおける大量の水共鳴からの共鳴
の常磁性シフトにより、これらの共鳴が観察され得る。例えば、Ａｉｍｅら、「
Ｙｂ（ＩＩＩ）ＤＯＴＭＡａｓＣｏｎｔｒａｓｔＡｇｅｎｔｉｎＣＳ
ＩａｎｄＴｅｍｐｅｒａｔｕｒｅＰｒｏｂｅｉｎＭＲＳ」Ｐｒｏｃ．
Ｓｏｃ’ｙＭａｇ．Ｒｅｓｎ．、２：１１０９、ＩＳＳＮ１０６５〜９８８
９（８月号１９−２５，１９９５）を参照のこと。これらの超微細シフト化共鳴
は温度依存性であるけれども、これらは温度変化を検出するために高濃度の常磁
性錯体および臨床的に非現実的な、強い磁界の使用を必要とする。これらの錯体
はまた、熱誘導型組織壊死を報告し得ない。

【００１９】さらに近年、正常肝組織と壊死肝組織とを区別するための方法が記載された。
Ｄｕｐａｓら、「ＤｅｌｉｎｅａｔｉｏｎｏｆＬｉｖｅｒＮｅｃｒｏｓｉ
ｓＵｓｉｎｇＤｏｕｂｌｅＣｏｎｔｒａｓｔ−ＥｎｈａｎｃｅｄＭＲＩ
」Ｊ．ＭＲＩ、第７巻、第３号、４７２〜７７頁（１９９７）。しかし、この方
法は非特異的な造影剤の使用に関し、このことは、特に、所望されない組織また
は組織成分の状態の変化をモニターする能力を制限する。また、この方法は複数
の造影剤の投与を必要とする。

【００２０】それゆえ、公知の診断的画像化方法は、それらがインターベンショナル療法を
受けている特定の組織または組織成分の状態に対する正確な情報を提供し得ない
という点で制限される（すなわち、その組織がネイティブな状態であるかまたは
変性状態であるか、壊死であるかまたは生存しているか）。従って、非侵襲的か
つ正確に特定の組織または組織成分の状態をモニターし得る診断的画像化方法に
ついての必要性が存在し、これは必要に応じて、インターベンショナル療法の間
の誘導型組織壊死の迅速なフィードバックを提供し得る。

【００２１】（発明の要旨）本発明は、インターベンショナル療法を受けているかまたは受けた特定の組織
または組織成分の、コントラスト増強型診断用画像化、特にＭＲＩおよび光学的
画像化のための方法を提供する。本方法は以下の工程を包含する：（ａ）インターベンショナル療法を受けているかまたは受けた、標的化された
組織または組織成分に結合し得る造影剤を、患者に投与する工程；（ｂ）ＭＲＩ画像化、紫外光画像化、可視光画像化または赤外光画像化の１つ
に、該患者を供する工程；ならびに（ｃ）該造影剤の特徴的な画像化シグナルをモニターしてインターベンショナ
ル療法が完了したかどうかを決定する工程。

【００２２】本発明に使用される造影剤は、画像増強（すなわちシグナル生成）部分（「Ｉ
ＥＭ」）および状態依存性組織結合部分（「ＳＤＴＢＭ」）を含む。これらの造
影剤は、標的化された組織または組織成分に対する状態依存性結合を実証し得る
。このような結合は造影剤のシグナル特性における検出可能な変化を導き、それ
ゆえ、インターベンショナル療法を受けているかまたは受けた標的化された組織
内での状態の変化（例えば、切除、分解または変性）の決定を可能にする。

【００２３】本発明の１つの局面において、造影剤の使用は、熱誘導型壊死の熱的インター
ベンショナル療法の間の「リアルタイム」モニタリングを可能にする。これらの
造影剤は、異なる状態の組織間の増加したコントラストを示す。

【００２４】（発明の詳細な説明）本明細書中に記載される発明がより十分に理解され得るために、以下に詳細な
説明を記載する。

【００２５】本発明は、インターベンショナル療法の有効性を正確にモニタリングするため
の非侵襲的な方法を提供する（すなわち、望ましくない組織または組織成分の状
態のモニタリング）。特に、本発明は診断的画像化方法を提供し、この方法は標
的化された組織または組織成分への状態依存性結合を示す造影剤の使用に関し、
そしてこれらのシグナル特性は標的化された組織に結合した場合に変化する。本
発明の方法に有用な画像化方法は、ＭＲＩ（これは、磁気共鳴分光技術を含む）
および光学的画像化である。

【００２６】本明細書中で使用される場合、用語「インターベンショナル療法」とは、任意
の多数の治療方法を称し、ここでの目的は、所望されない（ガン性、腫瘍性、ま
たは新形成性）組織または組織成分の壊死、切除、あるいは凝固を誘導するかま
たは引き起こすことである。

【００２７】また、本明細書中で使用されるように、用語「病理学的状態」または「状態」
は、インターベンショナル療法を受けている組織または組織成分の２つの生理学
的状態を広範に記載するために本明細書中で使用される。１つの状態は、生存、
ネイティブまたは生存可能とみなされる。この「最初（初期）」の状態は、通常
、任意のインターベンショナル療法を受ける前の組織を記載し、そしてここでの
組織および／または細胞性機構（例えば、代謝および呼吸）は機能的である。「
第２」の状態（これは首尾良い治療を受けている間かまたは受けた後の組織を記
載する）は、非生存、変性、壊死、またはアポトーシスと見なされ得、そしてこ
こでこのような組織および／または細胞性機構は異常であるか、非機能的である
か、または停止している。

【００２８】本明細書中に記載される本発明の方法は、以下の工程を包含する：（ａ）インターベンショナル療法を受けているかまたは受けた、標的化された
組織または組織成分に結合し得る造影剤を、患者に投与する工程；（ｂ）ＭＲＩ画像化、紫外光画像化、可視光画像化または赤外光画像化の１つ
に、該患者を供する工程；ならびに（ｃ）該造影剤の特徴的な画像化シグナルをモニターしてインターベンショナ
ル療法が完了したかどうかを決定する工程。

【００２９】本発明に使用される造影剤は、画像増強（すなわちシグナル生成）部分（「Ｉ
ＥＭ」）および状態依存性組織結合部分（「ＳＤＴＢＭ」）を含む。以下により
詳細に規定される、これらの部分の組み合わせのために、これらの造影剤は標的
化された組織または組織成分に対する状態依存性結合を実証し得、そして標的へ
と結合した場合に変化されるシグナル特性を実証し得る。

【００３０】状態依存性結合とは、標的化された組織の状態に依存する、標的化された組織
または組織成分について造影剤が示す相対的な親和性をいう。従って、本発明に
使用される薬剤は、ネイティブまたは生存組織についてのこの薬剤の結合親和性
と比較して、それらの変性または壊死状態における１つ以上の組織成分に対する
より高いかまたはより低い結合親和性を有する。

【００３１】結合におけるこの状態依存性変化は、ある状態の組織を超える他の状態の組織
への薬剤の局在化を生じると同時に、生じている状態変化の検出を増強する薬剤
のシグナル特性を変更する。例えば、この薬剤が生存組織またはネイティブな組
織に対してより高い結合親和性を示す場合（ここで増加した結合親和性はより強
いシグナルを生じる）、生存組織は「ホットスポット」として画像化される（ま
たは検出される）。インターベンショナル療法の経過の間、生存組織が壊死にな
ってしまうにつれてこのホットスポットは「クール」になる。なぜならば、この
壊死組織に対するこの薬剤の結合親和性が減少するためである。逆に、壊死また
は非生存組織に対してこの薬剤がより高い結合親和性を示す場合、この組織はこ
の療法の経過の間にホットスポットとして進展する。

【００３２】この薬剤の状態依存性結合親和性が生理学的な状態の変化に非常に高い感受性
を示すことが好ましい。好ましい薬剤は、結合親和性および対応するシグナル変
化（これは組織または組織成分が受けている状態変化に対応して調節された感受
性である）を有するものである。本発明の１つの局面において、インターベンシ
ョナル療法手順の経過の間におけるシグナルの変化をモニタリングすることによ
って、組織切除の効率および範囲の高感度リアルタイムモニタリングが増強され
る。

【００３３】（造影剤の構造）本発明に使用される造影剤は、最小限、画像増強剤（すなわちシグナル生成）
部分（「ＩＥＭ」）および状態依存性組織結合部分（「ＳＤＴＢＭ」）を含まな
ければならない。生理学的に適合性の連結基（「Ｌ」）が、必要に応じてＩＥＭ
をＳＤＴＢＭへと結合するために使用され得る。適切な連結基の例には、直鎖、
分岐もしくは環状アルキル、アルキル、アリール、エーテル、ポリヒドロキシル
、ポリエーテル、ポリアミン、ヘテロ環式、ペプチド、ペプトイド、ホスフェー
ト、スルフェート、または他の生理学的に適合性の共有結合が挙げられる。この
連結基は、血液または他の生物学的液体およびコンパートメントにおける半減期
を増強することにより、重要な物理化学的な安定性をこの錯体へと提供し得る。
この連結基はまた、この薬剤の生体分解および続いての排泄のための手段を提供
し得る。

【００３４】（１．画像増強部分（ＩＥＭ））本発明に使用される造影剤の第一のドメインは、ＩＥＭであり、これは画像化
におけるシグナルまたはコントラストを提供するために使用される任意の化学物
質または物質であり得る。ＩＥＭは、薬剤のないシグナルと比べて、この薬剤が
組織または組織成分へと結合される場合に特徴的な異なるシグナルを生成し得な
ければならない。光学的画像化法については、これは吸光度、反射度、蛍光、散
乱、燐光、化学ルミネセンスにおける変化、吸光ピークの数における増加もしく
は減少またはそれらの最大波長における任意の変化であり得るか、あるいは任意
の他の変化であり得る。この外部検出による変化は、結合型ＩＥＭに対応する。
ＭＲＩについては、このことは水プロトンの誘導された緩和速度（１／Ｔ₁または１／Ｔ₂）または任意の他の近傍の核の誘導された緩和速度における変化であり得るか、あるいはＩＥＭまたはピークのいずれかのＮＭＲスペクトルにおける
１つ以上のピークのシフト（これはＳＤＴＢＭのための結合部位中の核由来であ
るようである）であり得る。

【００３５】従って、このＩＥＭは有機分子、金属イオン、塩またはキレート（金属キレー
トを含む）；金属クラスターまたは粒子（特に鉄粒子）；あるいは標識ペプチド
、タンパク質、ポリマーまたはリポソームであり得る。光学的画像化法（これは
紫外線、可視光および／または赤外光を使用する）のために、ＩＥＭはまた、任
意の有機色素または無機色素であり得る。有用な有機色素の例にはインドシアニ
ングリーンおよびフルオレセイン（ｆｌｕｏｒｏｓｃｅｉｎ）が挙げられる。無
機色素の例には、発光性金属錯体(例えば、Ｅｕ（ＩＩＩ）、Ｔｂ（ＩＩＩ）およ
び他のランタニドイオン（原子番号５７〜７１）の錯体）が挙げられる。Ｗ．
Ｄｅｗ．ＨｏｒｒｏｃｋｓおよびＭ．Ａｌｂｉｎ、Ｐｒｏｇｒ．Ｉｎ
ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８４、３１、１−１０４頁を参照のこと。

【００３６】特に有用なＩＥＭには、１以上の金属イオンで錯体化される１以上の環式また
は非環式の有機キレート化剤からなる生理学的に適合性の金属キレート化合物が
ある。光学画像化法のために、好ましい金属イオンには、原子番号１３、２１〜
３１、３９〜４２、４４〜５０または５７〜８３を有する金属イオンが挙げられ
る。ＭＲＩのために、好ましい金属イオンには、原子番号２１〜２９、４２、４
４または５７〜８３を有する金属イオンが挙げられ、そしてより好ましくは原子
番号２１〜２９、４２、４４または５７〜８３を有する金属イオンの常磁性形態
が挙げられる。ＩＥＭが常磁性金属キレートを含む場合、好ましい常磁性金属は
、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩおよびＩＩＩ）、Ｃｒ（ＩＩＩ
）、Ｃｕ（ＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｔｂ（ＩＩＩおよびＩＶ）、Ｈｏ（ＩＩＩ
）、Ｅｒ（ＩＩＩ）、Ｐｒ（ＩＩＩ）ならびにＥｕ（ＩＩおよびＩＩＩ）からな
る群から選択される。最も好ましいのはＧｄ（ＩＩＩ）である。

【００３７】ＩＥＭが金属キレートである場合、この金属キレートは、この薬剤が標的化さ
れた組織を含む体内を通過する間、任意の有意な程度には解離されてはならない
。遊離金属イオン、特に遊離の常磁性金属イオンの著しい放出は毒性を生じ得、
これは、病理学的組織に受容可能なだけにすぎない。

【００３８】一般に、金属キレートの毒性の程度は、排出前のインビボでのその解離の程度
に関係する。一般に、毒性は、遊離の金属イオン量と共に増加する。動力学的不
安定性が高い錯体について、高い熱力学的安定性（少なくとも１０¹⁵Ｍ^-1および
より好ましくは少なくとも１０²⁰Ｍ^-1の生成定数）が、解離およびその付随する
毒性を最小にするために望ましい。動力学不安定性が比較的低い錯体について、
解離はより低い生成定数（すなわち、１０¹⁰Ｍ^-1以上）で最小にされ得る。

【００３９】毒性はまた、錯体における開かれた配位部位の数との関数である。一般に、水
の配位部位が少なければ少ないほど、キレート剤が常磁性金属を放出する傾向が
少なくなる。従って、好ましくは、この錯体は、２つ、１つまたは０の開かれた
配位部位を含む。一般に、２つ以上の開かれた部位の存在は、インビボでの金属
イオンの放出により毒性を受容不可能に増加させる。

【００４０】ＭＲＩ画像を有効に増強するために、錯体は、水プロトンあるいは他の画像化
または分光核（ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃｎｕｌｅｉ）（ＩＥＭ、他の生体
分子または注入された生体マーカー上のプロトンまたはＰ−３１、Ｃ−１３、Ｎ
ａ−２３、またはＦ−１９を含む）の緩和速度１／Ｔ₁（縦、またはスピン−格子）、および／または１／Ｔ₂（横、またはスピン−スピン）を増強し得なければならない。緩和率（ｒｅｌａｘｉｖｉｔｙ）Ｒ₁およびＲ₂は、それぞれ、金属
イオンのｍＭあたりの１／Ｔ₁または１／Ｔ₂、（すなわち、ｍＭ^-1ｓ^-1）を増大
する能力として定義される。臨床ＭＲＩの最も一般的な形態である水プロトンＭ
ＲＩについて、キレート配位子に結合する常磁性イオンがなお、水交換のための
１つ以上の開かれた（ｏｐｅｎ）配位部位を有する場合、緩和性は最適である（
Ｒ．Ｂ．Ｌａｕｆｆｅｒ，ＣｈｅｍｉｃａｌＲｅｖｉｅｗｓ，８７，９０１〜
９２７頁（１９８７））。しかし、これは、一般に、開かれた配位部位の増加数
と共に減少する金属キレート（以下を参照のこと）の安定性と平衡に保たなけれ
ばならない。従って、より好ましくは、錯体は１つまたは２つのみの開かれた配
位部位を含む。

【００４１】キレート配位子の型は、ＭＲＩ薬剤についての水交換速度に非常に影響を与え
得る。特に、この水交換速度は、熱切除療法で生成される組織コントラストに重
要な役割を果たし得る。一般に、より高い水交換速度は、常磁性中心と相互作用
するより多数の水分子のために、より高いＲ₁を与える；逆に、より低い交換速度は、より低いＲ₁を与える。従って、遅い水交換速度（ｋｅｘ−２９８Ｋ＝５００〜１０，０００ｎｓ）を有する金属キレート錯体は、一般に、温度が増加す
るに従って１／Ｔ₁（Ｒ₁）における増加を示し、これは水分子の増加した熱運動
および常磁性中心近傍の増加した水交換の明らかな影響を反映する；次いで、通
常、Ｒ₁は生理学的よりも高い温度で最大コントラスト値に達する。次いで、いくつかの温度では、増加した水交換の有益な影響が、各水分子が常磁中心の近傍
で消費する不充分な量の時間により差し引きされるので、このコントラストは最
小値に低下する。

【００４２】中程度に速い水交換速度（ｋｅｘ−２９８Ｋ１０〜１００ｎｓ）を有する金
属キレートは、１／Ｔ₁（Ｒ₁）の温度に対する比較的均一な依存性を実証し、次
いで、これは、再度、各水分子がこのような状態における常磁性金属近傍で消費
する不充分な時間のために、いくらかより高い温度で低下する。

【００４３】生理学的およびそれより高い温度で非常に早い水交換速度（ｋｅｘ−２９８Ｋ
０．１〜１０ｎｓ）を有する金属キレートは、水分子の増加した熱運動が、各
水分子が常磁性中心の近傍で消費する時間をさらに制限するので、減少する１／
Ｔ₁を実証する。しかし、このようなキレートは各水分子が常磁性金属の近傍で消費する増加した時間に起因して、より低い温度（すなわち、極低温）で１／Ｔ ₁ の増加を実証する。

【００４４】本発明の方法が熱切除療法をモニターするために使用される場合、最初のネイ
ティブな（すなわち生存可能な）組織状態（Ｒ₁初期）と変性した（すなわち壊死した）組織状態（Ｒ₁第２）との間のコントラストを最大にするために、中程度に早い水交換のキレートがＩＥＭとして使用されることが好ましい。極低温（
ｃｒｙｏｇｅｎｉｃ）技術を使用するこれらの療法のために、温度が低下するに
つれての１／Ｔ₁（Ｒ₁）における増加の選択的な利点を採用するために、非常に
早い水交換速度のキレートを使用することが好ましくあり得る。インターベンシ
ョナル療法の全ての方法において、組織状態に関するＲ₁プロフィールの感度が、目的の組織または組織成分の変性プロフィールと正確に一致することが好まし
い。

【００４５】双極子−双極子相互作用を介して組織核（ｔｉｓｓｕｅｎｕｃｌｅｉ）の１
／Ｔ₁または１／Ｔ₂を高めることに加えて、ＭＲＩ剤は、２つの他の磁気特性に
影響し得るので、臨床的に使用し得る。

【００４６】１）高い磁化率の鉄粒子または金属キレート（特に、Ｄｙ、ＧｄまたはＨｏの
キレート）は、微視的な磁化率勾配を作り出すことにより、組織のＭＲＩシグナ
ル強度を変化し得る（Ａ．Ｖｉｌｌｒｉｎｇｅｒら、Ｍａｇｎ．Ｒｅｓｏｎ．Ｍ
ｅｄ．６、１６４〜１７４頁（１９８８））。この用途には、キレート上におけ
る空の配位部位は必要ではない。

【００４７】２）鉄粒子または金属キレートはまた、水プロトンの共鳴周波数、あるいは注
入剤またはそれが結合する組織成分上の他の画像化核または分光核（プロトン、
Ｐ−３１、Ｃ−１３、Ｎａ−２３またはＦ−１９を含む）の共鳴周波数をシフト
するために使用され得る。ここで、使用される核およびストラテジーに依存して
、０〜３個の空の配位部位が使用され得る。

【００４８】この有機キレート配位子は、生理学的に適合可能であるべきである。このキレ
ート配位子の分子サイズは、この常磁性金属のサイズに適合しなければならない
。従って、Ｇｄ（ＩＩＩ）（これは０．９３８Ａの結晶イオン半径を有する）は
、鉄（ＩＩＩ）（これは０．６４Ａの結晶イオン半径を有する）よりも大きいキ
レート配位子を必要とする。

【００４９】ＭＲＩ剤に適した多くのキレート配位子が当該技術分野で公知である。これら
はまた、他の形態の生物学的画像化のための金属キレートに使用され得る。好ま
しいＩＥＭには、以下が挙げられる：

【００５０】

【化８】特定の用途において、他の金属がＧｄ³⁺を置換し得ることは、当該技術分野で公
知である。

【００５１】（２．状態依存性組織結合部分（ＳＤＴＢＭ））本発明に使用される造影剤の第２のドメインは、状態依存性組織結合部分（Ｓ
ＤＴＢＭ）であり、これはこの薬剤に対して標的化機能を提供する。このＳＤＴ
ＢＭは非常に可変性であり得、これは目的の適用に依存する。それゆえ、ＳＤＴ
ＢＭの特定の構造は、結合されるべき特定の組織または組織成分に依存する。し
かし、一般に、ＳＤＴＢＭは、標的化された組織または組織成分に対する結合親
和性における状態依存性変化を有する造影剤を提供しなければならない。結合親
和性におけるこの状態依存性変化もまた、造影剤のシグナル特性における検出可
能な変化を生じなければならない。結合親和性における変化は十分感度が高くな
ければならず、そして結合部位の数は、組織の状態が変化した場合にコントラス
トが生じるように十分多くなければならない。

【００５２】このＳＤＴＢＭは、低分子、あるいは生体分子を含み得る。生体分子は分子量
およびサイズが変化し得るが、これらが天然に存在するサブユニット（すなわち
、アミノ酸またはヌクレオチド）から生物学的に誘導されるかまたは合成される
という点で、すべて同一の基本的な特徴を共有する。生体分子の例には、レセプ
ターリガンド、サッカリド、脂質、ホルモン、ペプチド、タンパク質、ヌクレオ
チドおよび核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）、ならびに抗体（そのフラグメントおよびモ
ノクローナルおよび遺伝子操作されたバージョンを含む）が挙げられる。

【００５３】一方、低分子は、周知の合成的に誘導された比較的低分子量の有機分子であり
、これは生体分子とほとんどまたは全く化学的な類似性を有さない。典型的には
、低分子には生体分子サブユニットおよび連結（ｌｉｎｋａｇｅ）（例えば、ア
ミド結合によって連結された天然のアミノ酸）は挙げられない。低分子の例には
、合成薬剤、親油性または両親媒性有機分子、およびポルフィリンが挙げられる
。

【００５４】より好ましいＳＤＴＢＭは、血漿、間質空間（細胞間液）または細胞内空間に
て、タンパク質と可逆的に結合するものである。タンパク質に結合する任意の生
体分子または低分子が使用され得るが、最も有用なものは高濃度で存在するかま
たは特定のリガンドに対して多数の結合部位を有するかのいずれかのタンパク質
に結合するものである。通常、組織、血漿、または間質空間もしくは細胞内空間
中のネイティブな状態の多数のタンパク質は、変性または折たたまれていない状
態のものよりも構造的および化学的に非常に明確であるので、このようなネイテ
ィブな状態のものにその対応する変性状態のものよりも高い親和性で結合するＳ
ＤＴＢＭを設計することは本発明の好ましい局面である。ネイティブな状態と変
性状態との間の結合親和性におけるこの差異は、この薬剤のシグナル特性に検出
可能な変化を導く。

【００５５】造影剤が、水のプロトンを緩和して、結果的にＭＲＩ画像に影響を及ぼす能力
の定量的な測定は、その緩和率により提供される。先に記載したように、緩和率
とは、溶液中の常磁性金属イオンの濃度に対する水のプロトンシグナル強度の依
存性である。緩和率は、造影剤について観察された単位時間あたりの誘起Ｔ₁またはＴ₂緩和として定義され（ｍＭ^-1秒^-1の単位のＲ₁またはＲ₂）、ここで、造影剤の濃度はミリモル（ｍＭ）で表わされる。

【００５６】ガドリニウム錯体の物理的特性は、造影剤の緩和率に影響を及ぼす。ガドリニ
ウム錯体に結合した水分子の数、水分子とバルク溶液との交換速度、７個の不対
電子の緩和時間、および溶液中での造影剤の回転タンブリング時間（これは、回
転相関時間として知られる）は全て、全体として観察される緩和率に寄与する。
これらの物理的特性の変化は、この緩和率を劇的に変化させ得る。水交換速度の
緩和率に対する影響は上に記載した。さらに、小さい、比較的低分子量のガドリ
ニウムキレートの大きな高分子への結合により、回転タンブリング時間が遅延し
、３〜１０のファクターで緩和増強が増大する。造影剤のタンパク質への結合に
より、ラーモア振動数と同じタイムスケールで生じる常磁性イオンと水のプロト
ンとの間で磁気的揺動（ｍａｇｎｅｔｉｃｆｌｕｃｔｕａｔｉｏｎ）が引き起
こされ、これは最も効率的な縦（Ｔ₁）緩和の可能性および最も高い可能性の緩和率を生じる。従って、タンパク質のような大きな高分子へのＭＲＩ造影剤の状
態依存性結合は、他の状態を超えるある状態で、ＭＲＩシグナル（およびコント
ラスト）を高める効率的な方法である。造影剤への異なるレベルの結合を有する
領域間に、画像コントラストが生じる。本発明の好ましい局面において、高い結
合親和性の領域（ネイティブな状態）と低い結合親和性の領域（変性状態）との
間で、画像コントラストが生じる。

【００５７】異なる状態の組織または組織成分との間にコントラストを生じるために、この
組織が状態を変化した場合、少なくとも２０％以上、造影剤の結合親和性の変化
を有することが所望される。例えば、この薬剤が生存状態の標的化された組織ま
たは組織成分（すなわち、ＨＳＡ）に９０％結合（すなわち１０％遊離）するの
ならば、この薬剤は同一条件下で非生存（すなわち、変性）状態に７２％以下で
結合するべきである。結合親和性における差異が大きければ大きいほど、より多
きいコントラストが生じる。第２の組織状態（これはインターベンショナル療法
に起因してまたはその間に生じる）に対する造影剤の結合親和性は、第２の状態
における結合親和性と比較して第１の組織状態に対する結合親和性の８０％以下
、好ましくは５０％以下、より好ましくは３０％以下、さらにより好ましくは２
０％以下、そして最も好ましくは、１０％以下であるべきである。

【００５８】ＩＥＭが光学的画像化での使用に適切な発色団である場合において、本発明は
、非組織結合型薬剤の光学特性と組織結合型造影剤の光学特性との間に、測定可
能な相違が存在する必要がある。例えば、インドシアニングリーンの最大吸光度
は、血漿または血液中での結合の際に、７７０〜７８０ｎｍから７９０〜８０５
ｎｍへとシフトする。この状態依存性結合は、組織が変性され、そしてこのタン
パク質がもはや結合しない場合の色素の吸光度におけるシフトをモニタリングす
ることにより、組織変性を検出するために使用され得る。一般的に、本発明に有
用な光学的薬剤は組織状態に対してより高い感受性を提供する傾向を有すること
が、当業者に理解される。それゆえ、十分なコントラストを生じるために、この
光学的薬剤は、２つの組織状態の間で、本発明のＭＲ薬剤と同じぐらい大きい結
合親和性の差異、または同じくらい大きいシグナルの差異を必要としなくてもよ
い。

【００５９】状態依存性結合はまた、造影剤の特徴的なシグナル変化を生じなければならな
い。ＭＲＩでは、この状態依存性シグナル変化は、水プロトンの誘起緩和速度（
１／Ｔ₁または１／Ｔ₂）の変化、または緩和率Ｒ₁およびＲ₂として表わされ得る
。本発明の好ましい局面においては、第２の組織状態におけるこの薬剤の緩和率
（Ｒ₁第２）は、望ましくは、最初の組織状態における薬剤の緩和率（Ｒ₁初期）
の８０％以下である。好ましくは、緩和率Ｒ₁第２は、緩和率Ｒ₁初期の５０％以
下、さらに好ましくは、２０％以下、さらにより好ましくは、１０％以下である
。

【００６０】インターベンショナル療法が完了し、そして標的化された組織が生理学的状態
に戻った後（例えば、熱変性の場合、温度が生理学的温度に戻った後）、この薬
剤のＲ₁緩和率が最初の組織状態における薬剤の緩和率（Ｒ₁初期）よりもさらに
低く、好ましくはＲ₁初期の８０％以下、より好ましくはＲ₁初期の５０％以下、
さらにより好ましくはＲ₁初期の２０％以下、そして最も好ましくは１０％以下であることもまた、好ましい。インターベンショナル療法が完了し、そして標的
化された組織が生理学的状態に戻った後、この造影剤のＲ₁緩和率が、このインターベンショナル療法が完了した直後に測定されたこの薬剤の緩和率に維持され
ることもまた、好ましい。

【００６１】先に記載したように、このＳＤＴＢＭの特異的な構造は結合されるべき特定の
組織または組織成分に依存する。従って、標的化される組織または組織成分を最
初に決定することが必須である。

【００６２】多数の可能な結合部位が意図される。このような結合部位には、核酸、グリコ
サミノグリカン（以前には酸ムコ多糖類として公知）、石灰化組織、骨、脂肪、
滑液、細胞膜、タンパク質、リポタンパク質、酵素、プロテオグリカン、アミロ
イドおよびセロイドが挙げられる。好ましい結合部位はタンパク質であり、血清
および構造的／結合タンパク質がより好ましい。

【００６３】標的がタンパク質の場合、適切なタンパク質には、以下が挙げられる：ヒト血
清アルブミン（ＨＳＡ、血漿中では０．７ｍＭ；間質空間では、それより低い濃
度）；脂肪酸結合タンパク質（ＦＡＢＰ、Ｚ−タンパク質またはプロテインＡと
しても公知、肝臓、腎臓、心臓および他の組織の主要細胞中に、およそ０．１ｍ
Ｍ）；グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ；これは、リガンジンと
しても公知；肝臓、腎臓、心臓および他の組織の主要細胞中に、およそ０．１ｍ
Ｍ）；α１−酸性糖タンパク質（ＡＡＧ、分子量４１，０００、０．５５〜１．
４ｇ／Ｌ）およびリポタンパク質（例えばアテローム硬化性プラーク中に集中す
る）。他の例には、細胞外マトリックスの構造タンパク質（コラーゲン、ラミニ
ン、エラスチン、フィブロネクチン、エンタクチン、ビトロネクチン）、アミロ
イド（アルツハイマー病のβ−２アミロイドタンパク質（Ａ４）を含む）、セロ
イド（またはリポフスチン）、および糖タンパク質（例えば、オステオネクチン
、テネイシンおよびトロンボスポンジン）が挙げられる。

【００６４】正に荷電した造影剤または塩基性ＳＤＴＢＭ含有造影剤に好ましいタンパク質
標的は、α１−酸性糖タンパク質（ＡＡＧ）である。この正の急性期タンパク質
の血漿レベルは、疾患状態に伴い著しく変わる。例えば、ＡＡＧの濃度は、炎症
性刺激の後に２〜４倍高くなり、ＡＡＧの血漿レベルは、神経膠腫、転移性の乳
ガンおよび他のガン、新生児感染、ならびに慢性疼痛のための予後判定の補助と
して示唆されている。アテローム硬化症、クローン病、心筋梗塞、腎炎、および
細菌感染、ウイルス感染および術後感染において、高いレベルが認められている
。高い可溶性のＡＡＧは、１８３アミノ酸の単一のポリペプチド鎖を有し、そし
て高い炭水化物含量およびシアリン酸含量（それぞれ、４５％および１２％）な
らびにｐＨ２．７の低い等電点を含む、いくつかの珍しい特性によって特徴づけ
られる。α１−酸性糖タンパク質は、多くの塩基性薬物（プロプラノロール（Ｋ
ａ＝１１．３×１０⁵）、イミプラミン（Ｋａ＝２．４×１０⁵）およびクロルプ
ロマジン（Ｋａ＝３５．４×１０⁵））の結合に関連してきた。遊離のリグノカイン（ｌｉｇｎｏｃａｉｎｅ）の割合は、患者におけるＡＡＧの濃度（０．４〜
３ｇｌ^-1）に相関し、このことは、血漿中における他のタンパク質（例えば、Ｈ
ＳＡ）を超えるＡＡＧに対する選択的結合が理論的な薬剤設計法を使用して達成
され得ることを意味する。

【００６５】ＨＳＡ、ＦＡＢＰおよびＧＳＴに対する配位子は、負に荷電した分子であり、
そして部分的に負に荷電した基（例えば、エステル、アミドまたはケトンカルボ
ニル酸素）により中性となる傾向にあるので、より好ましいＳＤＴＢＭである；
このような化合物は、一般に、正に荷電した分子よりも毒性が低いと考えられる
。これらの３種のタンパク質のうち、いくつかの場合において、ＨＳＡは最も好
ましくあり得る。なぜなら、ＦＡＢＰおよびＧＳＴに対する配位子は、結合前に
いくつかの細胞内への取り込みを必要とするからである。一般に、細胞内への取
り込みは、毒性を最小限にするために造影剤については回避される（肝臓内を除
く）。ＨＳＡは、多くの細胞外液環境（血漿、正常組織およびガン組織の間質空
間、滑液、脳脊髄液および炎症性液（ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｆｌｕｉｄ）
または膿瘍液（ａｂｓｃｅｓｓｆｌｕｉｄ）を含む）でかなりの量で存在して
いる。多くの病理学的組織（例えば、腫瘍、炎症、アテローム硬化性プラークま
たはアテローム硬化性動脈壁）では、毛細管が漏れやすくなり、その結果、さら
により高いＨＳＡレベルが生じる。このことによって、本発明の薬剤の有用性が
増強され得る。なぜならば、多数のインターベンショナル療法が疾患組織を標的
化するからである。

【００６６】ＨＳＡはまた、通常、多数の結合部位で、良好な親和性、および広範な種々の
構造的に類似していない分子に結合する高い能力を有することが公知であるので
好ましい。それゆえ、造影剤の設計において、より高い順応性が存在する。

【００６７】ネイティブな状態のＨＳＡに対する結合について、広範な疎水性および両親媒
性基質がＳＤＴＢＭとして有用であり得る（Ｕ．Ｋｒａｇｈ−Ｈａｎｓｅｎ、Ｐ
ｈａｒｍ．Ｒｅｖ．、３３、１７〜５３頁（１９８１）；Ｘ．Ｍ．Ｈｅら、Ｎａ
ｔｕｒｅ、３５８、２０９〜２１５頁（１９９２）；Ｄ．Ｃ．Ｃａｒｔｅｒ、Ａ
ｄｖ．ＰｒｏｔｅｉｎＣｈｅｍ．、４５、１５３〜２０３頁（１９９４））。
これらには、１個〜６０個の炭素を有する、少なくとも１つの脂肪族基、アルコ
キシ基、アルキルチオ基、アルキルカルボニル基、アルキルカルボニルオキシ基
、アリール基または複素環式基、および、必要に応じて１個以上の窒素置換基、
酸素置換基、イオウ置換基、ハロゲン置換基、脂肪族アミド置換基、エステルス
ルホンアミド置換基、アシル置換基、スルホネート置換基、ホスフェート置換基
、ヒドロキシル置換基または有機金属置換基を含む低分子が挙げられるが、これ
らに限定されない。あるいは、あまり好ましくはないが、ＳＤＴＢＭは、疎水性
または親水性の末端基を有するかまたは有さない、疎水性アミノ酸残基および／
または置換基を含むペプチドのような生体分子であり得る。

【００６８】上記のように、ＨＳＡへの結合については、広範な疎水性基質がＳＤＴＢＭと
して有用であり得る。一般に、ＨＳＡおよびおそらく他のタンパク質に対する結
合親和性は、ＳＤＴＢＭの疎水性と共に増加する。置換基（例えば、ＳＤＰＢＭ
）の疎水性の理論上の評価は、置換基についてＨａｎｓｃｈ１定数を用いて、Ｔ
ＢＭ自体に対するオクタノール−水（またはオクタノール−緩衝液）分配係数の
対数（ｌｏｇＰ）への寄与を計算することにより得られ得る。Ａ．Ｌｅｏおよ
びＣ．Ｈａｎｓｃｈ，「ＰａｒｔｉｔｉｏｎＣｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓａｎ
ｄｔｈｅｉｒＵｓｅｓ」，ＣｈｅｍｉｃａｌＲｅｖｉｅｗｓ，７１，Ｅ５
２５〜６１６頁（１９７１）；Ｋ．Ｃ．Ｃｈｕ，「ＴｈｅＱｕａｎｔｉｔａｔ
ｉｖｅＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＳｔｒｕｃｔｕｒｅ−ＡｃｔｉｖｉｔｙＲ
ｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ」，Ｂｕｒｇｅｒ’ｓＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅ
ｍｉｓｔｒｙ，Ｐａｒｔ１，３９３〜４１８頁（第４版、１９８０）を参照
のこと。結合親和性は、ｌｏｇＰ寄与の増加と共に増加する。例えば、脂肪族
基の置換基について、以下の１定数が使用され得る：

【００６９】

【表１】アリール基上の置換基について、以下の定数が使用され得る：

【００７０】

【表２】従って、ＩＥＭに取り付いたｐ−メチルベンジル基に対するｌｏｇＰ寄与（ｃ
ｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ）は、（−ＣＨ₂−基に対する評価のようにＣＨ₃に対す
る１−脂肪族の値を用いて）以下のように計算される：ｌｏｇＰ寄与＝０．５０＋２．１５＋０．５６＝３．２。

【００７１】ＨＳＡへの結合において、２の最小のｌｏｇＰ寄与（４つのＣＨ₃基または１つのフェニル環に等しい）は、著しい結合を達成するために必要とされる。３
のｌｏｇＰ寄与は、より好ましい。４のｌｏｇＰ寄与は、さらにより好まし
い。

【００７２】ＨＳＡ結合は、ｐＨ７．４緩衝液中の４．５％重量／体積ＨＳＡを用いる平衡
透析または限外濾過により評価され得る。好ましくは少なくとも１０％、および
より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも８０％、および最
も好ましくは少なくとも９５％の造影剤が、生理学的に適切な濃度（ＭＲＩおよ
び光学的画像化について血漿中に０．０１〜１０ｍＭ）でネイティブな状態のＨ
ＳＡに結合する。この適用において、ＨＳＡへの造影剤の結合パーセントの測定
は、約＋／−５％の誤差を有する。他のタンパク質または血清へのタンパク質結
合は、同様の様式で評価され得る。

【００７３】造影剤への親油性基の付加は、薬剤の可溶性を減少させるようである。臨床的
に効果的な投与量レベルまたはより高い投与量レベルでの、造影剤の効率的な溶
解性を保持するために、１つ以上の水素結合基（酸素、窒素等）をＳＤＴＢＭに
組み込むことは、好ましくあり得る。

【００７４】純粋に脂肪族基がＳＤＴＢＭとして使用され得る一方で、これらは混合脂肪ア
リール基または純粋にアリール基ほど好ましくなくてもよい。特に、負の電荷が
純粋に脂肪基、特に長く、かつ可変性のものに接着される場合、造影剤は、内因
性分子（例えば、脂肪酸）の代謝あるいは膜タンパク質と脂質との間の相互作用
を妨げ得る。これは、薬剤の毒性を増加し得る。従って、ＳＤＴＢＭは少なくと
も１つのアリール環を含むことが好ましい。

【００７５】腫瘍または組織増強に対するネイティブな状態のＨＳＡ結合型ＭＲＩ剤の場合
において、造影剤が、タンパク質に結合する場合、薬剤を十分に固定する２つ以
上の異なる親油性基を含有することは特に好ましい。これらの基は、１つのＳＤ
ＴＢＭ上であり得るか、または造影剤に取り付いた２つ以上の別個の化学基上で
あり得る。それらのかさ高い（ｂｕｌｋｙ）性質および剛性（ｒｉｇｉｄｉｔｙ
）のために、２つ以上の基それぞれが芳香族環からなることは好ましく、全分子
内の２つ以上の環は、固定された非平面方向に配置される。

【００７６】一般に、ＭＲＩ剤の磁気効力または緩和は、薬剤がＨＳＡにほぼ等しい回転相
関時間を有する場合最も高い（Ｒ．Ｂ．Ｌａｕｆｆｅｒ，ＣｈｅｍｉｃａｌＲ
ｅｖｉｅｗｓ，８７，９０１〜９２７頁（１９８７））。Ｇｄ−ＤＴＰＡのよう
な低分子は、約０．１ナノ秒（ｎｓｅｃ）の回転相関時間を有するが、ＨＳＡは
５〜１０ｎｓｅｃより大きな相関時間を有する；キレートがこのより長い相関時
間を有する場合、常磁性イオンと水プロトンとの間の磁気変動は、ラーモア振動
数と同じ時間スケールで起こり、これは最も効率的な縦（Ｔ₁）緩和の可能性、従って最も高い可能性のある緩和率を生じる。タンパク質に結合する場合、キレ
ートの屈曲性はいずれも、有効な回転相関時間を減少させ、従って緩和率を減少
させると予想される。タンパク質に取り付く１つの部位は、いくつかの方向にお
ける屈曲性を生じ得るため、さらなる取り付け部位が好ましくあり得る。

【００７７】上記のように、状態依存性結合はまた、造影剤の特徴的なシグナル変化を生じ
なければならない。ＭＲＩでは、この状態依存性シグナル変化は、水プロトンの
誘起緩和速度（１／Ｔ₁または１／Ｔ₂）の変化、または緩和率Ｒ₁およびＲ₂とし
て表わされ得る。それゆえ、ＨＳＡが標的である場合、薬剤が最大緩和率へと調
整される程度は、ＨＳＡの存在下におけるその２つの生理学的な状態（ネイティ
ブおよび変性）の状態依存性緩和率結合（Ｒ₁結合型）を測定することによって、評価され得る。本発明の好ましい局面において、第２の組織状態におけるこの
薬剤の緩和率（Ｒ₁第２）は、望ましくは、最初の組織状態における薬剤の緩和率（Ｒ₁開始時）の８０％以下である。好ましくは、Ｒ₁第２は、Ｒ₁開始時の５０％以下、さらに好ましくは、２０％以下、そして最も好ましくは、１０％以下
である。

【００７８】これは、その２つの生理学的状態で、遊離のキレートの緩和率（Ｒ₁−遊離）、ならびに緩和率（Ｒ₁−観察）、および４．５％ＨＳＡ中の薬剤の結合パーセントの測定を必要とする。本発明の好ましい局面において、変性状態におけるＲ ₁ −遊離は、Ｒ₁観察に対応する。Ｒ₁観察は、Ｒ₁−遊離およびＲ₁−結合のモル分率加重平均である：

【００７９】

【数１】（ＨＳＡに対する状態依存性結合）上記のように、本発明に使用されるべき造影剤について好ましい標的化タンパ
ク質は、ＨＳＡである。このような適用のために、造影剤は、この薬剤が血液中
に残存する（すなわち、ＨＳＡに結合する）程度を増加させるために、増強され
た血液半減期を示し、それゆえ、インターベンショナル療法の経過にわたってず
っと利用可能であることが望ましい。延長された血液半減期は、造影剤の肝細胞
取り込みの速度を減少させるために、血液半減期延長部分（「ＢＨＥＭ」）とし
て機能する連結基（Ｌ）を含むことにより達成され得る。米国特許出願第０８／
３８２，３１７号（１９９５年２月１日に出願され、その内容は、参考として援
用される）を参照のこと。ＢＨＥＭは非常に親水性の基であり、これは水と水素
結合し得る。造影剤上における親水性ＢＨＥＭの存在は、この薬剤の肝細胞取り
込みを減少する。

【００８０】ＢＨＥＭとして働く化学基の例として、２つ以上の孤立電子対（すなわち、完
全なまたは部分的な負の電荷）を有するかもしくは水との水素結合のための正に
荷電した水素原子（すなわち、プロトン化アミン）を有する荷電したまたは中性
ヘテロ原子（例えば、酸素、窒素、硫黄、またはハロゲン（特にフッ素））を結
合した炭素、リン（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ）、タングステン、モリブデン、ま
たは硫黄原子が挙げられる。これらは、スルホン、エーテル、ウレア、チオ−ウ
レア、アミンスルホンアミド、カルバメート、ペプチド、エステル、カーボネー
ト、およびアセタールのような基を含む。好ましい基として、生理学的ｐＨの水
溶液において、１つ以上の部分的または完全に負の電荷を有する基が挙げられ、
ここで負に荷電した原子は、ＩＥＭへの共有結合、または配位共有結合により部
分的または完全に中和され得ない。これらの好ましいＢＨＥＭの例として、リン
酸モノエステル、リン酸ジエステル、カルボキシレート、およびスルホネートの
ような負に荷電した基が挙げられる。リン酸基またはその任意のエステル形態を
有する基は、さらに好ましい。リン酸ジエステルはなおさらに好ましい。なぜな
ら：ａ）それらは４つの水素結合する酸素により非常に親水性である；ｂ）それ
らは以下に示す技術を用いて比較的容易に合成される；ｃ）それらはＩＥＭとＳ
ＤＴＢＭとの間の優秀なリンカーとして作用する；そしてｄ）リン酸化合物は体
内において自然に存在し、そして代謝されるので、リン酸ジエステル含有造影剤
は非毒性であることが予想される、からである。

【００８１】ＢＨＥＭの本発明の造影剤への組み込みは、薬剤の延長された血液保持をもた
らす。好ましくは、血液保持は、ラット血漿薬物動態学実験である、特定の長さ
の時間（例えば、０〜１０分、０〜３０分、０〜６０分、０〜１２０分または０
〜無限大）に対する血漿濃度対時間曲線下の面積（「曲線下の面積」または「Ａ
ＵＣ−濃度」）の計算により測定される。（ＡＵＣ−濃度により測定されるよう
に）血液保持は、ラット、ウサギ、または高等哺乳動物に対する造影剤の投与に
より実験的に評価され得る。血液半減期延長は、ラットにおいてよりウサギおよ
び高等哺乳動物においてより高いことが観察された。この適用において、ＡＵＣ
−濃度により測定されるように、血液半減期データは、ラットにおける実験を表
す。このデータに関する誤差は、約＋／−１０％である。

【００８２】半減期測定自体が使用されない理由は、この量の数学的な定義がしばしば明確
でなく、そして得られた評価は、使用した薬物動態学モデルおよび血液サンプル
が得られた時間の長さに依存して変化し得るからである。

【００８３】例えば、２匹のラットにおける０．１ｍｍｏｌ／ｋｇのＧｄ¹⁵³標識Ｇｄ−ＤＴＰＡを尾静脈注射した後に観察された平均血漿濃度を、以下に示す。Ｍａｃｉ
ｎｔｏｓｈプログラムＫａｌｅｉｄａＧｒａｐｈを用いて、０〜１０分のこのＡ
ＵＣ−濃度を、３．５ｍＭ分として計算した。

【００８４】

【表３】血清タンパク質（例えば、ＨＳＡ）の標的化に有用な本発明の造影剤は、ＢＨ
ＥＭがＩＥＭおよびＳＤＴＢＭに添加された場合、少なくとも２０％のＡＵＣ−
濃度の増加を示す。それらは、好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは少
なくとも７０％、およびさらにより好ましくは少なくとも１００％のＡＵＣ−濃
度の増加を示す。一般に、ＢＨＥＭにより引き起こされたＡＵＣ−濃度の増加は
、血漿における結合が著しい場合、より高い（例えば、２０％〜５０％、または
それ以上）。ＡＵＣ−濃度の計算されたパーセントの増加は、異なる時間にわた
って測定されたＡＵＣ−濃度のパーセントの増加とは異なり得る。一般に、ＢＨ
ＥＭにより引き起こされたＡＵＣ−濃度のパーセントの増加は、より長い期間（
例えば、０〜３０分）にわたって得たＡＵＣ−濃度の方が０〜１０分の場合より
高い。

【００８５】造影剤分子全体の構造的および物理的特性は血漿中におけるその結合を支配す
るので、所望の結合に適合するＩＥＭおよびＢＨＥＭを選択することは重要であ
る。例えば、ＨＳＡ上の正に荷電した結合部位への結合を達成するために、正味
の中性電荷または正味の負電荷のＩＥＭおよびＢＨＥＭを有し、斥力の可能性を
低下させ、そしておそらく結合親和力をさらに増加させることが好ましい。α酸
性糖タンパク質へ結合するためには、造影剤の少なくともいくつかの部分は正に
荷電するべきである。グロブリンへ結合するためには、造影剤の少なくともいく
つかの部分はその性質においてステロイド性であるべきである。リポタンパク質
に結合するためには、造影剤の少なくともいくつかの部分は、親油性または脂肪
酸様であるべきである。

【００８６】ＢＨＥＭは、ＩＥＭおよびＳＤＴＢＭに関して種々の位置で配置され得ること
が意図される。しかし、これらの部分の位置は、１つの部分が、他の部分の意図
された機能を妨害するような位置でないかもしれない。例えば、ＨＳＡ結合造影
剤の場合、ＢＨＥＭの配置は、ＳＴＤＢＭの造影剤をＨＳＡに結合する能力を妨
げるべきではない。ＨＳＡにおける主な結合部位が、疎水性の内部（特に、「つ
ま先（ｔｏｅ）」領域付近）および正電荷を帯びた「足首（ａｎｋｌｅ）」領域
を有する靴下様（ｓｏｃｋ−ｌｉｋｅ）（Ｘ．Ｍ．Ｈｅら，Ｎａｔｕｒｅ，３５
８，２０９〜２１５頁（１９９２）；Ｄ．Ｃ．Ｃａｒｔｅｒ，Ａｄｖ．Ｐｒｏｔ
ｅｉｎＣｈｅｍ．，４５，１５３〜２０３頁（１９９４））であるので、ＳＴ
ＤＢＭの遠位部分が極めて親水性になされた場合、ＳＴＤＢＭの結合親和性は減
少する。例示的な例として、ＳＴＤＢＭがフェニル環である場合、環上の最も好
ましいＢＨＥＭの位置はオルト、続いてメタである。パラ位の親水基は、ＨＳＡ
に対するＳＴＤＢＭの結合親和性を低減させる。

【００８７】金属キレートからなるＩＥＭに対して、金属イオンとキレート配位子との間の
結合の強度が顕著に低下するように、ＢＨＥＭおよびＳＤＴＢＭはＩＥＭに結合
されないのが好ましい。例えば、キレート化アーム（ｃｈｅｌａｔｉｎｇａｒ
ｍ）がアセテートである場合、好ましくは、ＢＨＥＭまたはＳＤＴＢＭをアセテ
ートの酸素に結合されない。

【００８８】別の位置的な必要条件は、ＢＨＥＭの負に荷電した原子が、ＩＥＭとの共有結
合または配位共有結合によって部分的または完全に中和され得ないことである；
このことは、水性系において、ＢＨＥＭの非常に親水性の原子がかなり溶媒和さ
れることを確実にする。例えば、ＩＥＭが金属キレートである場合、ＢＨＥＭの
負に荷電した原子が、最も安定な環サイズである５−または６−員キレート環の
形成を経て、配位共有結合を通じてＩＥＭの正に荷電した金属イオン（Ｍⁿ⁺）に
よって中和され得ないような位置に置くことが重要である。５−員キレート環は
ＩＥＭについての目的の金属イオン（例えば、ガドリニウム）に対して最も安定
であるので、これらの形成を妨げるために最も重要である。従って、以下の図に
示すように、ホスフィネート（−ＰＯ₂−）またはホスホネート（−ＰＯ₃−）Ｂ
ＨＥＭは、−ＣＨ₂−リンカーを介してアミノカルボキシレートキレート剤の窒素原子に結合し得ない。なぜなら、これは非常に安定な５−員キレート環を形成
するためである。同様に、ホスホジエステル（−ＯＰＯ₃−）ＢＨＥＭは、−ＣＨ₂−リンカーを介してアミノカルボキシレートキレート剤の窒素原子に結合されるべきでない。なぜなら、これは６−員キレート環を形成し得るためである。
しかし、これらのＢＨＥＭの両方は他の位置（例えば、リガンドのエチレン骨格
）に結合され得る。いくつかの場合において、示されるように、リンカー基の長
さを増加させて、５−または６−員環を確実に形成できなくすることが好ましく
あり得る。

【００８９】

【化９】本発明の部分が、造影剤において、以下の構造式であり得るように配置され得
ることが意図される：

【００９０】

【数２】ここで、ｍは、０から４に等しくあり得、ｓ、ｏおよびｐは同一であるかまたは異なり、そして１〜４に等しくあり得
、そしてｒおよびｑは少なくとも１である。

【００９１】本発明の部分が上記の構造（１）におけるように造影剤に配置される場合、Ｂ
ＨＥＭは好ましくはスルホン、ウレア、チオウレア、アミン、スルホンアミド、
カルバメート、ペプチド、エステル、カーボネート、アセタールであり、そして
より好ましくは、

【００９２】

【化１０】またはエステル形態であり、ここで、ＺはＰ、Ｗ、ＭｏまたはＳであり、Ｙ¹、Ｙ²はＯまたはＳであり、Ｙ³、Ｙ⁴は、Ｏ、Ｓであるか、または存在せず、Ｒ₂は、Ｈ、Ｃ_1-6アルキルであるか、または存在しない。最も好ましくは、ＢＨＥＭはホスフェート基である。

【００９３】本発明の部分が上記の構造（２）のように造影剤に配置される場合、ＢＨＥＭ
は好ましくはスルホン、ウレア、チオウレア、アミン、スルホンアミド、カルバ
メート、ペプチド、エステル、カーボネート、アセタールであり、そしてより好
ましくは、ＢＨＥＭは以下の式を有する：

【００９４】

【化１１】またはエステル形態であり、ここで、ＺはＰ、ＷまたはＭｏであり、Ｙ¹、Ｙ²はＯまたはＳであり、Ｙ³、Ｙ⁴は、Ｏ、Ｓであるか、または存在せず、Ｒ₂は、Ｈ、Ｃ_1-6アルキルであるか、または存在しない。最も好ましくは、ＢＨＥＭはホスフェート基である。

【００９５】本発明のこの部分が上記の構造（３）のように造影剤に配置される場合、ＢＨ
ＥＭは好ましくはＳＯ₃ ^-またはエステル形態、スルホン、ウレア、チオウレア、
アミン、スルホンアミド、カルバメート、ペプチド、エステル、カーボネート、
アセタールであり、そしてより好ましくは、

【００９６】

【化１２】またはエステル形態であり、ここで、ＺはＰ、Ｗ、ＭｏまたはＳであり、Ｙ¹、Ｙ²はＯまたはＳであり、Ｙ³、Ｙ⁴は、Ｏ、Ｓであるか、または存在せず、Ｒ₂は、Ｈ、Ｃ_1-6アルキルであるか、または存在しない。最も好ましくは、ＢＨＥＭはホスフェート基である。

【００９７】本発明の部分が上記の構造（３）のように造影剤に配置される場合、好ましい
造影剤は以下の式を有することが意図される：

【００９８】

【化１３】ここで、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁およびＲ₁₆は、同じであっても異なってもよく、そしてＨ、ＳＤＴＢＭ、ＢＨＥＭおよ
びＣ_1-6アルキルからなる群より選択され得る。ただし、これらのＲ_sの少なくと
も一方がＳＤＴＢＭであり、そして少なくとも他方がＢＨＥＭであり、Ｒ₁₂、Ｒ₁₃およびＲ₁₄は、同じであっても異なってもよく、そしてＯ^-およびＮ（Ｈ）Ｒ₁₇からなる群から選択され、Ｒ₁₅はＨ、ＣＨ₂ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ₃、ヒドロキシアルキルまたはＣＨ（Ｒ₁₆）
ＣＯＲ₁₂であり、そしてＲ₁₇はＨまたはＣ_1-6アルキルである。上記に示した式を有する造影剤の場合、ＢＨＥＭは、好ましくはスルホン、エー
テル、ウレア、チオウレア、アミン、アミド、スルホンアミド、カルバメート、
ペプチド、エステル、カーボネート、アセタールであり、そしてより好ましくは
ＣＯＯ^-またはエステル形態、ＳＯ₃ ^-またはエステル形態、および

【００９９】

【化１４】またはエステル形態であり、ここで、ＺはＰ、Ｗ、ＭｏまたはＳであり、Ｙ¹、Ｙ²はＯまたはＳであり、Ｙ³、Ｙ⁴は、Ｏ、Ｓであるか、または存在せず、Ｒ₂は、Ｈ、Ｃ_1-6アルキルであるか、または存在しない。

【０１００】ＨＳＡ結合造影剤の場合、構造（１）において上に示されるようにＩＥＭとＳ
ＤＴＢＭとの間か、または構造（３）において上に示されるようにＳＤＴＢＭか
ら離れたＩＥＭ上に、ＢＨＥＭは配置され得る。この様式において、疎水性ＳＤ
ＴＢＭ基の完全な結合能は、親水性ＢＨＥＭ基によって妨害されることなく発現
され得る。

【０１０１】ＨＳＡに対して状態依存性結合を示す、本発明に有用な造影剤は、米国特許出
願第０８／３８２，３１７号（１９９５年２月１日出願）に記載される。例えば
、以下の薬剤が有用である：

【０１０２】

【化１５】

【０１０３】

【化１６】

【０１０４】

【化１７】ここで、Ｒは、脂肪族基および／または少なくとも１個のアリール環を包含す
るか、あるいは疎水性アミノ酸残基および／または疎水性または親水性の末端基
を有するかもしくは有さない置換基を含むペプチドを包含する。

【０１０５】本発明に好ましい有用な造影剤は、以下の通りである：

【０１０６】

【化１８】ＨＳＡに対して状態依存性結合を有するより好ましい造影剤は、ＭＳ−３１７
、ＭＳ−３２２、ＭＳ−３２５およびＭＳ−３２８である。最も好ましくはＭＳ
−３２５である。

【０１０７】（造影剤の使用）本発明に使用される薬剤は、その薬学的に受容可能な誘導体を含むことが定義
される。薬学的に受容可能な誘導体とは、任意の薬学的に受容可能な塩、エステ
ル、エステルの塩、または本発明の化合物の他の誘導体を意味し、これはレシピ
エントへの投与の際に、本発明の化合物、または阻害性の活性な代謝物もしくは
それらの残留物を、（直接的にかまたは間接的に）提供し得る。特に好ましい誘
導体は、本発明の化合物が哺乳動物に投与される際にこのような化合物のバイオ
アベイラビリティを増加させる（例えば、経口的に投与された化合物を血液中に
より容易に吸収させることによって）ものか、または親化合物の生物学的コンパ
ートメント（例えば、脳またはリンパ系）への送達を増強するものである。

【０１０８】本発明に使用される薬剤が、薬学的に受容可能な塩を包含し得ることもまた考
慮される。本発明の薬学的に受容可能な塩は、無機または有機の酸および塩基か
ら誘導されるものを含む。以下がこのような酸性塩に包含される：酢酸塩、アジ
ピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸
塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩
、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンス
ルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩
、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−
ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、
２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パモエート（ｐａｍ
ｏａｔｅ）、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン
酸塩、ピバル酸塩（ｐｉｖａｌａｔｅ）、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸
塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩およびウンデカン酸塩。塩基性塩は、アンモニ
ウム塩、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土
類金属塩（例えば、カルシウム、マグネシウムおよび亜鉛塩）、有機塩基を有す
る塩（例えば、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン）、お
よびアミノ酸（例えば、アルギニン、リジン）を有する塩などを包含する。また
、塩基性窒素含有基は、低級アルキルハライド（例えば、メチル、エチル、プロ
ピルおよびブチルクロリド、ブロミドおよびヨージド）；ジアルキル硫酸（例え
ば、ジメチル、ジエチル、ジブチルおよびジアミル硫酸）、長鎖ハライド（例え
ば、デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルクロリド、ブロミドおよび
ヨージド）、アラルキルハライド（例えば、ベンジルおよびフェネチルブロミド
）、ならびにその他のような薬剤で４級化され得る。それによって、水溶性また
は油溶性あるいは水分散性または油分散性の生成物が得られる。本発明の好まし
い塩は、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、カルシウムおよびナトリウム塩である。

【０１０９】本発明の薬学的組成物は、任意の薬学的に受容可能なキャリア、アジュバント
もしくはビヒクルと共に、本発明の任意の複合物、または薬学的に受容可能なそ
の塩を含有する。本発明の薬学的組成物中に使用され得る薬学的に受容可能なキ
ャリア、アジュバントおよびビヒクルは、イオン交換物質、アルミナ、ステアリ
ン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）
、緩衝物質（例えば、ホスフェート）、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリ
ウム、ＴＲＩＳ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）、植物性飽和脂肪
酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質（例えば、硫酸プロタミン、リ
ン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩）、コロ
イド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベー
スの物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、
ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロック
ポリマー、ポリエチレングリコールおよびラノリンを包含するが、これらに限定
されない。

【０１１０】本発明によれば、薬学的組成物は、無菌注射用調製物（例えば、注射可能な無
菌の水性または油性の懸濁液）の形態であり得る。この懸濁液は、当該分野で公
知の技術に従い、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を用いて製剤され得る
。無菌注射用調製物はまた、非毒性の非経口で受容可能な希釈剤または溶媒中に
おいて、無菌の注射可能な溶液または懸濁液（例えば、１，３−ブタンジオール
中の溶液として）であり得る。用いられ得る受容可能なビヒクルおよび溶媒は、
水、リンガー溶液および等張食塩水である。さらに、従来では、無菌、固定油が
溶媒または懸濁媒体として使用される。この目的のために、合成のモノ−または
ジ−グリセリドを含む任意の刺激のない固定油が使用され得る。脂肪酸（例えば
、オレイン酸およびそのグリセリド誘導体）は、天然の薬学的に受容可能なオイ
ル（例えば、オリーブオイルまたはヒマシ油）と同様に、注射可能物の調製、特
にこれらのポリオキシエチル化した変形物において有用である。これらのオイル
溶液または懸濁液はまた、長鎖アルコールの希釈剤または分散剤（例えば、Ｐｈ
．Ｈｅｌｖまたは類似のアルコール）を含み得る。

【０１１１】本発明の造影剤は血漿タンパク質に結合し得るので、用量および注入速度に依
存するいくつかの場合において、血漿タンパク質の結合部位が飽和になり得る。
これは、この薬剤の結合の減少を導き、そして半減期および耐用性を損ない得る
。それゆえ、無菌アルブミンまたは血漿置換溶液へとあらかじめ結合させた薬剤
を注入することが望ましくあり得る。あるいは、器具/シリンジ（これは造影剤を含み、そして造影剤をシリンジ中に引き上げられた血液と混合する）が使用さ
れ得る；次いでこれは患者に再び注射される。

【０１１２】本発明の化合物および薬学的組成物は、経口投与、非経口投与、吸入スプレー
による投与、局所投与、直腸投与、鼻腔投与、頬投与、膣投与または従来の無毒
性の薬学的に受容可能なキャリア、アジュバントおよびビヒクルを含有する投薬
製剤中に埋め込まれたリザーバを介して投与され得る。本明細書に使用されるよ
うに用語「非経口」は、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液包内、胸骨内、く
も膜下、肝臓内、病変内および頭蓋内注射または点滴技術を含む。

【０１１３】経口投与される場合、本発明の薬学的組成物は任意の経口的に受容可能な投薬
形態（カプセル、錠剤、水性の懸濁液または溶液が挙げられるがこれらに限定さ
れない）で投与され得る。錠剤を経口使用する場合、一般的に使用されるキャリ
アには、ラクトースおよびコーンスターチが挙げられる。代表的には、ステアリ
ン酸マグネシウムのような潤滑剤もまた添加される。カプセル形態の経口投与に
対して、有用な希釈剤としては、ラクトースおよび乾燥コーンスターチが挙げら
れる。経口使用に水性懸濁液を必要とする場合、活性成分は乳化剤および懸濁剤
と配合される。所望の場合、特定の甘味料、香味料または着色料もまた添加して
もよい。

【０１１４】あるいは、直腸投与のために座薬形態で投与される場合には、本発明の薬学的
組成物は、この薬剤と室温で固体であるが直腸温で液体である適切な非刺激性の
賦形剤とを混合して調製され得、その結果直腸内で溶け薬剤を放出する。このよ
うな物質として、ココアバター、ビーズワックスおよびポリエチレングリコール
が挙げられる。

【０１１５】また、前述のように、特に、処置標的が局所施用によって容易に接近可能な領
域または器官（目、皮膚または下部腸道（ｌｏｗｅｒｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ
ｔｒａｃｔ）を含む）を含む場合に、本発明の薬学的組成物は局所投与され得る
。適切な局所製剤は、これらの各領域または器官用に容易に調製される。

【０１１６】下部腸道に対する局所施用は、直腸用座薬製剤（上記を参照のこと）または適
切な浣腸製剤でなされ得る。局所−経皮性パッチもまた使用され得る。

【０１１７】局所施用に対して、薬学的組成物は、１つ以上のキャリア中に懸濁または溶解
される活性成分を含有する、適切な軟膏に製剤され得る。本発明の化合物の局所
投与のためのキャリアには、鉱油、液体ペトロラタム、白色ペトロラタム、プロ
ピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワ
ックスおよび水が挙げられるが、それらに限定されない。あるいは、薬学的組成
物は、１つ以上の薬学的に受容可能なキャリア中に懸濁または溶解された活性成
分を含有する、適切なローションまたはクリームに処方されてもよい。適切なキ
ャリアには、鉱油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルべート６０、セチル
エステルワックス、セテアリールアルコール、２−オクチルドデカノール、ベン
ジルアルコールおよび水が挙げられるが、それらに限定されない。

【０１１８】眼科用途に対して、薬学的組成物は、防腐剤（例えば、ベンジルアルコニウム
クロリド）を含有してもしなくてもどちらでもよい、ｐＨ調節された等張の無菌
生理食塩水中に微小化された懸濁液として、または好ましくは、ｐＨ調節された
等張の無菌生理食塩水中の溶液として、製剤され得る。あるいは、眼科使用のた
めに、薬学的組成物は、ペトロラタムのような軟膏に製剤され得る。

【０１１９】鼻腔エーロゾルまたは吸入による投与に対して、本発明の薬学的組成物は、薬
学的処方の分野で周知の技術に従って調製され、そしてベンジルアルコールもし
くは他の適切な防腐剤、バイオアベイラビリティを増大させる吸収促進剤、フル
オロカーボン、および／または他の従来の可溶化剤もしくは分散剤を使用し、生
理食塩水中の溶液として調製され得る。

【０１２０】投薬は、診断用画像化機器の感度、ならびに造影剤の組成に依存する。例えば
、ＭＲＩ画像化に対して、高常磁性の物質（例えば、ガドリニウム（ＩＩＩ））
を含有する造影剤は、一般的に、より低い磁気モーメントを有する常磁性物質（
例えば、鉄（ＩＩＩ））を含有する造影剤より、より低い投薬を必要とする。好
ましくは、投薬は、１日当たり約０．００１〜１ｍｍｏｌ／ｋｇ体重の活性金属
−配位子錯体の範囲である。より好ましくは、投薬は、１日当たり約０．００５
ｍｍｏｌ／ｋｇ体重〜約０．０５ｍｍｏｌ／ｋｇ体重の範囲である。

【０１２１】インターベンショナル療法をモニタリングするために使用される光学的画像化
の場合、この薬剤の用量は、およそ、ＭＲＩの場合に等しい（０．００１〜１０
ｍｍｏｌ／ｋｇ）。また、ＭＲＩ造影剤を用いる場合のように、この光学的薬剤
の投与は、当該分野において周知である。

【０１２２】しかしながら、任意の特定の患者に対する特定の用量レジメもまた、種々の因
子（年齢、体重、全体的な健康状態、性別、食事、投与時間、排泄速度、薬剤の
組み合わせ、および処置する医者の判断を含む）に依存することが理解されるべ
きである。

【０１２３】適切な用量の本発明の造影剤の投与に続いて、次いで、患者はＭＲＩまたは光
学的画像化（紫外光、可視光または赤外光画像化）のいずれかに供される。これ
らの画像化技術、ならびにデータ回収および分析（すなわち、この薬剤のシグナ
ル特性のモニタリング）を行うために適切なセッティングおよび画像化パラメー
ターは、周知であるか、または一般的に受け入れられている方式に関する。

【０１２４】本発明の方法の最終工程は、投与された造影剤の画像化シグナル特性をモニタ
リングすることである。光学的画像のために、このようなシグナル特性には、吸
光度、反射率、蛍光またはりん光および／またはそれらの寿命、化学発光、散乱
、または他のスペクトル特性が挙げられる。ＭＲＩ画像化のために、このような
シグナル特性には、Ｒ₁およびＲ₂緩和率（それぞれ、１／Ｔ₁および１／Ｔ₂）が
挙げられる。

【０１２５】本発明のより好ましい局面において、インターベンショナル療法の経過にわた
って画像が生成され、それゆえシグナル特性が定期的にモニタリングされる場合
、「リアルタイム」モニタリングが可能である。画像が生成され、そしてモニタ
リングされる頻度は、治療の型および期間に依存する。

【０１２６】本発明がより完全に理解され得るために、以下の実施例を示す。これらの実施
例は、例示のみの目的のためであり、いかなる観点においても、本発明の範囲を
制限するようには解釈されない。

【０１２７】（実施例）以下は、本発明の方法に有用な好ましい造影剤の合成スキームであり、そして
特に、ＭＳ−３２５についてのものである。米国特許出願第０８／８３３，７４
５号（１９９７年４月１１日出願そしてこれは本明細書中において参考として援
用される）を参照のこと。好ましいものではないが、別の有用な、これらの造影
剤についての合成スキームは、米国特許出願第０８／３８２，３１７号（１９９
５年２月１日に出願、そしてこれは本明細書中参考として援用される）に記載さ
れる。

【０１２８】最初に、アルコール（ＲＯＨ）をＰＣｌ₃と、好ましくは１：１のモル比で反応させてジクロロホスフィン反応生成物（Ｉ）を形成する：

【０１２９】

【化１９】このＲ基は、直鎖、分岐、または環式脂肪族、アリール、ヘテロ環式、ペプチド
性、ペプトイド、デオキシリボ−もしくはリボ−ヌクレオチド、またはヌクレオ
シド、または環式もしくは非環式有機キレート剤基であり得、これは、必要に応
じて１つ以上の窒素、酸素、硫黄、ハロゲン、脂肪族、アミド、エステル、スル
ホンアミド、アリール、アシル、スルホネート、ホスフェート、ヒドロキシル、
または有機金属置換基で置換され得る。

【０１３０】この反応は、エーテル性溶媒または炭化水素溶媒の存在下で生じ、そして約−
５０℃〜約１５℃、好ましくは約−１０℃〜約−５℃の温度で、約３０分〜約３
時間、好ましくは約１〜約１．５時間の時間で、行う。この溶媒は、任意のエー
テル性溶媒または炭化水素溶媒であり得、そして好ましくは、ヘプタン、メチル
−ｔ−ブチルエーテル、ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、
およびエチレングリコールジアルキルエーテルからなる群から選択され得る。よ
り好ましくは、この溶媒はテトラヒドロフランである。

【０１３１】次いで、ジクロロホスフィン（Ｉ）を、約５〜約６当量のアミン塩基と反応さ
せてビス（アミノ）ホスフィノ反応生成物（ＩＩ）を形成する：

【０１３２】

【化２０】この反応もまた、上記のように、エーテル性溶媒または炭化水素溶媒の存在下で
生じ、そして約−５０℃〜約１５℃、好ましくは約−１０℃〜約−５℃の温度で
、約３０分〜約３時間、好ましくは約１５分〜約３０分の時間、行う。反応生成
物（ＩＩ）を形成するために使用される塩基は、任意のアミン塩基であり得、好
ましくは、約５〜約１１のｐＫａ値を有する塩基であり得、そしてより好ましく
は、イミダゾール、２，４−ジメチルイミダゾール、１Ｈ−テトラゾール、ジア
ルキルアミン（メチル、エチル、ブチル）、ピリジン、ピペラジン、ピペリジン
、ピロール、１Ｈ−１、２，３−トリアゾール、および１，２，４，−トリアゾ
ールからなる群から選択される。より好ましい実施例において、この塩基はイミ
ダゾールである。

【０１３３】次いで、ビス（アミノ）ホスフィノ化合物（ＩＩ）を、約０．７５〜約１．０
当量の第２のアルコール（Ｒ¹ＯＨ）（ここで、Ｒ¹は、Ｒ基について上に規定さ
れた任意の置換基であり得る）と反応させて、（アミノ）ホスフィノ反応生成物
（ＩＩＩ）を形成する：

【０１３４】

【化２１】この反応は、エーテル性溶媒または炭化水素溶媒の存在下で生じ、そして約−５
０℃〜約１５℃、好ましくは約−１０℃〜約−５℃の温度で、約３０分〜約３時
間、好ましくは約１．０時間〜約１．５時間の時間、行う。この溶媒は任意のエ
ーテル性溶媒または炭化水素溶媒であり得、そして好ましくは、ヘプタン、メチ
ル−ｔ−ブチルエーテル、ジオキサン、テトラヒドロフラン、１，３−ジオキソ
ラン、ジグリム、ジエチルエーテル、ジアルキルエーテル、およびエチレングリ
コールジアルキルエーテルからなる群から選択され得る。より好ましくは、この
溶媒はテトラヒドロフランである。

【０１３５】最終的に、（アミノ）ホスフィノ化合物（ＩＩＩ）を、約１当量の酸性の水、
好ましくは、約２．５〜約５のｐＨを有する酸性の水、および約１当量以上の酸
化剤と反応させて、所望のホスホジエステル化合物（ＩＶ）を形成する：

【０１３６】

【化２２】この酸化剤は任意の過酸化型酸化剤であり得、そして好ましくは、過ヨウ素酸塩
からなる群から選択される。より好ましくは、この酸化剤は過ヨウ素酸ナトリウ
ムである。

【０１３７】上記の加水分解および酸化は、約−１５℃〜約２５℃の温度で、好ましくは、
約０℃〜約２℃、約１０時間〜約２４時間、好ましくは約１０〜約１５時間の間
、溶媒混合物中で行われる。この溶媒混合物は、エーテル性溶媒または炭化水素
溶媒からなる群から選択される溶媒の任意の組み合わせを含む。好ましくは、こ
の溶媒混合物は、テトラヒドロフラン、ヘプタンおよびトルエンを、１０：１０
：１の容量比で含む。

【０１３８】この合成スキームに従って、このＭＳ−３２５錯体におけるキレート配位子は
以下のように調製される。

【０１３９】（［（４，４−ジフェニルシクロヘキシル）ホスホオキシメチル］ジエチレ
ントリアミンペンタ−酢酸の調製）ＭＳ−３２５錯体に使用されるキレート配位子の調製を以下のスキームＩに示
す：

【０１４０】

【化２３】三塩化リン（１３．２ｍＬ，０．１５１ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０
２ｍｌ）溶液を含む単一の反応容器に、４，４−ジフェニル−シクロヘキサノー
ル（１）（３８．３４ｇ，０．１５２ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２４
３ｍｌ）を添加し、この間、撹拌し、かつ内部の温度を−６．２℃〜−５．３℃
に１．５時間維持した。次いで、この混合物をさらに３４分間撹拌して、ジクロ
ロホスフィン反応生成物（２）を得た。これは１７４．２８ｐｐｍの³¹ＰＮＭ
Ｒ化学シフトを有した。

【０１４１】この溶液に、イミダゾール（５１．３４ｇ，０．７５３ｍｏｌ）のテトラヒド
ロフラン（２４３ｍｌ）溶液を添加し、この間、撹拌し、かつ内部の温度を−７
．８℃〜−３．６℃に３７分間維持した。次いで、得られた混合物をさらに２０
分間撹拌して、ビス（アミノ）ホスフィノ反応生成物（３）の溶液を得た。これ
は１０６．３６ｐｐｍの³¹ＰＮＭＲ化学シフトを有した。

【０１４２】この混合物に、ヘプタン（１１４ｍｌ）中２−（Ｒ）−ヒドロキシルメチルジ
エチレントリアミン五酢酸，ペンタ−ｔ−ブチルエステル（４）（１６０．０ｇ
，０．１２８ｍｏｌ、純度：５６．３２重量％）からなる溶液を添加し、この間
、撹拌し、かつ内部の温度を−６．８℃〜−４．８℃に１時間６分の間、維持し
た。次いで、この混合物をさらに２３分間撹拌して、１２３．８ｐｐｍの³¹Ｐ
ＮＭＲ化学シフトを有する溶液（５）を得た。

【０１４３】最後に、約１分かけて水（２０２ｍｌ）を添加し、この間、内部の温度を−６
．５℃〜６．５℃に維持した。この混合物を５分間撹拌し、続いてヘプタン（６
２０ｍｌ）、トルエン（７０ｍｌ）および５Ｎ水性塩酸（２０２ｍｌ）を５分か
けて添加し、この間、内部の温度を１．０℃〜１２．１℃に維持した。次いで、
過ヨウ素酸ナトリウム（２２．６ｇ，０．１０６ｍｏｌ）を３分かけて添加し、
この間、内部温度を１０．５℃に維持した。この反応混合物を３５分かけて室温
まで加温し、そしてさらに２．５時間撹拌して４．２７ｐｐｍの³¹ＰＮＭＲ化
学シフトを有する溶液（６）を得た。この層を分離し、そしてこの有機層を１０
％水性チオ硫酸ナトリウムで洗浄した（２×８０９ｍＬ）。

【０１４４】上記の有機層にテトラオクチルアンモニウムブロミド（８．２１ｇ，０．０１
５ｍｏｌ）を添加した。次いで、２２分かけて濃塩酸（１１．５１Ｍ，４０５ｍ
Ｌ）を添加し、この間、２２．８℃〜２５．０℃の内部の温度を維持した。この
混合物を１６．０時間撹拌して、７．７８ｐｐｍの³¹ＰＮＭＲ化学シフトを有
する化合物（７）を得た。この層を分離し、そしてこの有機層を捨てた。

【０１４５】上記の水層に、６．５６のｐＨを記録するまで８Ｍの水性水酸化ナトリウム（
６３０ｍＬ）を添加した。４００ｍＬの溶媒が回収されるまで、この溶液を減圧
下（５０℃〜５５℃，真空８５ｍｍＨｇ）で濃縮した（約１時間）。この溶液を
室温まで冷却し、そしてアンバーライトＸＡＤ−４樹脂（９２．０ｇ）を添加し
た。この懸濁液を５０分間室温で撹拌し、そしてろ過して明るい黄色の水溶液を
得た（１．１Ｌ）。

【０１４６】上記の溶液をＣ−１８逆相シリカゲル（２７１ｇ，メタノールで湿らせてパッ
クし、次いで８００ｍＬのメタノール、８００ｍＬのメタノール／水（１：１）
および８００ｍＬの水で洗浄した）にロードし、そして水で溶出した。回収した
最初の１．０Ｌの溶出物を捨て、そして次の１．３Ｌの回収物を保持した。この
保持した溶液に、６Ｎの水性塩酸（ｐＨ＝２．１５まで、６０ｍＬ）および３Ｎ
の水性塩酸（ｐＨ＝１．６３まで、３０ｍＬ）を添加した。このスラリーを１．
２５時間撹拌し、そしてろ過した。この固体をｐＨ１．６７の水溶液（５００ｍ
Ｌ）で洗浄し、そして一定重量まで乾燥して（４８〜５０℃、４〜６ｍｍＨｇ）
（１８時間）、オフホワイトの固体の、以下の式の化合物を得た：

【０１４７】

【化２４】（６５．５ｇ、収率：６８．８９％、純度：９９．４５重量％、９８．９５面積
％、３．０２％の水および９７．８１％のキレート可能物（ｃｈｅｌａｔａｂｌ
ｅｓ））。

【０１４８】（実験）３つの型のサンプルを調製し、そして評価した。第１は、造影剤を有さずにヒ
ト血清アルブミン（ＨＳＡ）を含むコントロールサンプルであった。他の２つの
サンプルは、それぞれ、ＨＳＡと、非特異的な薬剤Ｇｄ−ＤＴＰＡおよびＨＳＡ
−特異的薬剤ＭＳ−３２５を含有した。

【０１４９】これらの実施例において、２０ＭＨｚで、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ，
１５０ｍＭＮａＣｌ，１０ｍＭリン酸塩，ｐＨ＝７．４）、４．５ｗｔ％ＨＳ
Ａを含有するＰＢＳ溶液、または４．５ｗｔ％ＨＳＡおよび１％寒天を含有する
ゲルにおける水プロトンの緩和速度（１／Ｔ₁）を決定することにより、縦緩和率（Ｒ₁、ｍＭ^-1秒^-1）をモニターし、そして得た。緩和率（Ｒ₁）の温度への依
存を、循環水浴を用いてサンプルの温度を変化させ、そして熱電対を用いたサン
プル温度のモニタリングにより観察した。

【０１５０】（実施例１：４．５％ＨＳＡの熱壊死のモニタリング）以下の３つのサンプルを、４．５％ＨＳＡ溶液中で調製した：（１）造影剤を
含有しないコントロールサンプル；（２）Ｇｄ−ＤＴＰＡを含有する比較サンプ
ル；および（３）ＭＳ−３２５を含有するサンプル。Ｇｄ−ＤＴＰＡおよびＭＳ
−３２５を含有するサンプルを、Ｇｄ−ＤＴＰＡまたはＭＳ−３２５のいずれか
を有する水性処方物（ｐＨ＝７）を４．５％ＨＳＡ溶液に添加することによって
調製した。得られた混合物は、それぞれ、０．３ｍＭＧｄ−ＤＴＰＡおよび０
．１ｍＭＭＳ−３２５の濃度を有した。

【０１５１】次いで、３つのサンプルを使用して、４．５％ＨＳＡ溶液の熱変性をモニター
した。このことを行うために、各サンプルについてのＴ₁データ（従ってＲ₁デー
タ（＝１／Ｔ₁））を、２０℃〜６０℃の温度範囲にわたって２０ＭＨｚで集めた。次いで、各サンプルをＮＭＲから取り出し、そして８５℃で１５分間加熱し
てＨＳＡの熱変性を誘導した。続いて、このサンプルをＮＭＲに戻し、そしてＴ ₁ デ−タをこのより高い温度で集めた。以下の表１および図１を参照のこと。

【０１５２】

【表４】表１および図１に示すように、３つのＨＳＡ含有溶液の熱変性後、ＨＳＡ特異
的造影剤ＭＳ−３２５をも含有するサンプルは、変性直前（５６．２℃）〜変性
直後（８５℃）で測定したＨＳＡの変性の間の観察されたＲ₁に、顕著な減少（２６．７ｍＭ^-1秒^-1の損失）を実証した。しかし、非特異的な造影剤であるＧｄ
−ＤＴＰＡを含有するサンプルは、ＭＳ−３２５サンプルについて使用されたも
のの３倍の濃度でさえ、変性の間、Ｒ₁にほとんど変化を示さなかった（ほんの０．１ｍＭ^-1秒^-1の損失）。このことは、Ｇｄ−ＤＴＰＡがネイティブなＨＳＡ
または変性したＨＳＡのいずれにも結合しないことを示す。

【０１５３】上記のデータが得られた後、この変性したサンプルを生理学的な温度（３７℃
）まで冷却させ、そして再度Ｔ₁データを回収した。ＭＳ−３２５を含有するサンプルはＲ₁における顕著な減少を維持した（２５ｍＭ^-1秒^-1の正味の損失）が、一方、Ｇｄ−ＤＴＰＡを含有するサンプルはＲ₁においてわずかな変化のみを示した（０．５ｍＭ^-1秒^-1の正味の損失）。

【０１５４】（実施例２：１．０テスラでのＨＳＡの熱変性のＭＲＩ画像化）以下のサンプルを、４．５％ＨＳＡを含有する１％寒天ゲル中で調製した：（
１）造影剤を含有しないコントロールサンプル；（２）Ｇｄ−ＤＴＰＡを含有す
る比較サンプル；および（３）ＭＳ−３２５を含有するサンプル。Ｇｄ−ＤＴＰ
ＡおよびＭＳ−３２５の濃度が、それぞれ、０．３ｍＭＧｄ−ＤＴＰＡおよび
０．１ｍＭＭＳ−３２５であるように、十分な量で造影剤を添加する。４．５
％ＨＳＡを含有するような寒天ゲルを、「ファントム（ｐｈａｎｔｏｍ）」と称
する。

【０１５５】次いで、１．０テスラで、寒天ファントムの初期Ｔ₁−加重ＭＲＩスキャン（ＦＩＳＰ−３Ｄ、ＴＲ＝１５、ＴＥ＝４、α＝３０）を、約２５℃の温度で得た
。この初期スキャンは、ＭＳ−３２５含有ファントムがＧｄ−ＤＴＰＡ含有ファ
ントム（比較サンプル）または４．５％ＨＳＡのみを含有するファントム（コン
トロールサンプル）よりも明るいことを示した；この結果は、予想通り、ＭＳ−
３２５のＨＳＡに対する特異的な結合に起因した。

【０１５６】次いで、ファントムを循環水浴中で加熱し、この時間にわたって、さらなる初
期Ｔ₁−加重ＭＲＩスキャンを得た。温度が増加するにつれて、ＭＳ−３２５含有ファントムは、Ｇｄ−ＤＴＰＡのみ、または４．５％ＨＳＡのみを含有するフ
ァントムよりもずっと明るいままであった（％ＲＯＩ減少において測定されるよ
り少ないシグナル強度の減少（目的の領域））。以下の表２および図２を参照の
こと。

【０１５７】

【表５】ファントムを５０℃〜６０℃より上で加熱するにつれて、これらは、ＨＳＡの
熱変性に対応して色が不透明になった。同時に、表２および図２に示すように、
ＭＳ−３２５を含有するファントムについてシグナル強度の劇的な減少が観察さ
れた（７６％の強度の減少）。しかし、Ｇｄ−ＤＴＰＡのみ、またはＨＳＡのみ
を含有するファントムは、シグナル強度において穏やかな変化のみを生じた。こ
のＧｄ−ＤＴＰＡファントムは、ＭＳ−３２５ファントムについて使用された濃
度の３倍のＧｄ−ＤＴＰＡ濃度でさえ、熱変性の後のＭＲＩスキャンの間、コン
トラストの暗い画像として残存した。

【０１５８】上記のデータを回収した後、次いで、この変性したサンプルを正常な生理学的
温度（３７℃）まで冷却させた。ＭＳ−３２５を含有するファントムはシグナル
強度におけるその減少を維持した（３２％の損失）。コントロールファントムお
よびＧｄ−ＤＴＰＡを含有するファントムは、さらに、変性後に、それぞれ、５
％および１０％のみのシグナル強度の減少を示した。

【０１５９】これらの結果に従って、本発明の方法に有用な造影剤は、ＨＳＡの熱変性の非
常に感度の高い指標を提供し得る。事実、３倍の濃度の別の造影剤を使用した場
合でさえ、このより高い濃度はＨＳＡの熱変性をモニターするために必要とされ
る感度を提供し得なかった。

【０１６０】（実施例３：ＨＳＡのエタノール変性）以下の３つのサンプルを、４．５％ＨＳＡ溶液中で調製した：（１）造影剤を
含有しないコントロールサンプル；（２）Ｇｄ−ＤＴＰＡを含有する比較サンプ
ル；および（３）ＭＳ−３２５を含有するサンプル。Ｇｄ−ＤＴＰＡおよびＭＳ
−３２５を含有するサンプルを、Ｇｄ−ＤＴＰＡまたはＭＳ−３２５のいずれか
を有する水性処方物（ｐＨ＝７）を４．５％ＨＳＡ溶液に添加することによって
調製した。得られた混合物は、それぞれ、０．３１ｍＭＧｄ−ＤＴＰＡおよび
０．０８ｍＭＭＳ−３２５の濃度を有した。

【０１６１】次いで、無水エタノールを各々のサンプルに対して滴定した。Ｔ₁データ（従って、Ｒ₁データ（＝１／Ｔ₁））を、エタノールの各々の添加後、２０ＭＨｚお
よび３７℃で集めた。以下の表３および図３を参照のこと。

【０１６２】

【表６】表３および図３に示されるように、４．５％ＨＳＡ溶液のエタノールアブレー
ションの間、このＭＳ−３２５含有サンプルが観察された緩和率（ｒｅｌａｔｉ
ｖｉｔｙ）に顕著な減少（３３ｍＭ^-1秒^-1）を示し、それゆえエタノール誘導性
壊死の検出を可能にすることを実証した。しかし、Ｇｄ−ＤＴＰＡ含有サンプル
は（ＭＳ−３２５の約４倍の濃度においてさえ）、観察された緩和率に少量の変
化のみを示した（０．３ｍＭ^-1秒^-1）。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、造影剤の使用を伴うかまたは伴わない、ＨＳＡ溶液の観察された緩和
率（Ｒ₁）に対する温度における変化の効果の実験データの図示である。

【図２】図２は、造影剤を含むかまたは含まないＨＳＡ溶液を使用して生成されたＭＲ
Ｉ画像に対する、時間にわたってのＲＯＩシグナル強度の損失の実験データの図
示である。

【図３】図３は、造影剤を含むかまたは含まないＨＳＡ溶液に対して観察された緩和率
（Ｒ₁）に対するエタノール濃度における変化の効果の実験データの図示である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷＦターム(参考） 4C085 HH01 HH07 JJ05 KA26 KB01 KB07 KB08 KB12 KB37 KB59 KB67 KB82 LL01 LL07 LL13 4C096 AA11 AA20 AB50

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】インターベンショナル療法を受けているまたは受けた特異的
な組織または組織成分のコントラスト増強型診断的画像化のための方法であって
、該方法は以下：（ａ）標的化された組織または組織成分に結合し得、かつ該組織または組織成
分に特異的な親和性を有し得る造影剤を、患者に投与する工程であって、ここで
該造影剤は画像増強部分（ＩＥＭ）および状態依存性の組織結合部分（ＳＤＴＢ
Ｍ）を包含する；（ｂ）ＭＲＩ画像化、紫外光画像化、可視光画像化または赤外光画像化のうち
の１つに、該患者を供する工程；ならびに（ｃ）該造影剤の特徴的な画像化シグナルをモニターして該インターベンショ
ナル療法が完了したかどうかを決定する工程、を包含する方法。
【請求項２】前記ＩＥＭが有機分子、金属イオン、金属塩および金属キレ
ート剤、粒子、クラスター、鉄粒子、標識ペプチド、タンパク質、ポリマー、リ
ポソーム、有機染料および無機染料からなる群から選択される、請求項１に記載
される方法。
【請求項３】前記ＩＥＭが、原子番号１３、２１〜３４、３９〜４２、４
４〜５０または５７〜８３を有する１つ以上の金属イオンと錯体化した少なくと
も１つの環式または非環式有機キレート剤を含む、生理学的に適合性のキレート
剤を含有する、請求項１に記載される方法。
【請求項４】前記金属イオンが、原子番号２１〜２９、４２、４４または
５７〜８３を有する常磁性金属イオンである、請求項３に記載される方法。
【請求項５】前記常磁性金属イオンが、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）
、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩＩ）、Ｃｒ（ＩＩＩ）、Ｃｕ（ＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩ
Ｉ）、Ｔｂ（ＩＩＩ）、Ｈｏ（ＩＩＩ）、Ｅｒ（ＩＩＩ）およびＥｕ（ＩＩＩ）
からなる群から選択される、請求項４に記載される方法。
【請求項６】前記金属イオンがＧｄ（ＩＩＩ）である、請求項５に記載さ
れる方法。
【請求項７】前記キレート剤が、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＴＰＡ−ＢＭＡ
およびＨＰ−ＤＯ３Ａからなる群から選択される、請求項５に記載される方法。
【請求項８】前記ＩＥＭが、ルミネッセンス金属錯体を含む、請求項１に
記載される方法。
【請求項９】前記ＩＥＭが、鉄粒子またはＤｙ、ＧｄまたはＨｏの金属キ
レートを含む、請求項１に記載される方法。
【請求項１０】前記ＳＤＴＢＭが低分子および生体分子からなる群から選
択される、請求項１に記載される方法。
【請求項１１】前記ＳＤＴＢＭが、１〜６０の炭素原子、および必要に応
じて１つ以上の窒素、酸素、イオウ、ハロゲン、脂肪族アミド、エステルスルホ
ンアミド、アシル、スルホネート、ホスフェート、ヒドロキシルまたは有機金属
置換基を有する少なくとも１つの脂肪族、アルコキシ、アルキルチオ、アルキル
カルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アリールまたは複素環式基を含む低分
子を包含する、請求項１０に記載される方法。
【請求項１２】前記ＳＤＴＢＭが少なくとも１つのアリール環を包含する
、請求項１１に記載される方法。
【請求項１３】前記ＳＤＴＢＭが少なくとも２つのアリール環を包含する
、請求項１１に記載される方法。
【請求項１４】前記ＳＤＴＢＭが、疎水性または親水性末端基を有するか
または有さない、疎水性アミノ酸残基および／または疎水性置換基を含むペプチ
ドを包含する生体分子を有する、請求項１０に記載される方法。
【請求項１５】前記造影剤が、血漿中の組織または組織成分、間質性の空
間、滑液、大脳脊髄液、炎症液（ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｆｌｕｉｄ）、ア
ブセス液（ａｂｃｅｓｓｆｌｕｉｄ）、または細胞間空間に状態依存性の結合
親和性を示す、請求項１に記載される方法。
【請求項１６】前記造影剤が、ヒト血清アルブミン、脂肪酸結合タンパク
質、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼおよびリポタンパク質からなる群か
ら選択されるタンパク質に対して状態依存性結合親和性を示す、請求項１に記載
される方法。
【請求項１７】前記造影剤が、生理学的ｐＨの水溶液中で１つ以上の完全
または部分的に負の電荷を有する血液半減期延長部分（ＢＨＥＭ）をさらに含み
、ここで該負の電荷は前記ＩＥＭに対する共有結合または配位共有結合によって
部分的または完全に中和され得ない、請求項１に記載される方法。
【請求項１８】前記造影剤が、ヒト血清アルブミンに対して状態依存性な
結合親和性を示す、請求項１７に記載される方法。
【請求項１９】そのネイティブな状態において、少なくとも１０％の薬剤
がヒト血清アルブミンに対して結合する、請求項１８に記載される方法。
【請求項２０】少なくとも５０％の薬剤が、ネイティブな状態でのヒト血
清アルブミンに対して結合する、請求項１８に記載される方法。
【請求項２１】少なくとも８０％の薬剤が、ネイティブな状態でのヒト血
清アルブミンに対して結合する、請求項１８に記載される方法。
【請求項２２】少なくとも９５％の薬剤が、ネイティブな状態でのヒト血
清アルブミンに対して結合する、請求項１８に記載される方法。
【請求項２３】前記造影剤が変性状態でのヒト血清アルブミンに結合親和
性を示し、これはネイティブな状態のヒト血清アルブミンに対する該造影剤の結
合親和性の約８０％未満である、請求項１８に記載される方法。
【請求項２４】前記造影剤が変性状態でのヒト血清アルブミンに結合親和
性を示し、これはネイティブな状態のヒト血清アルブミンに対する該造影剤の結
合親和性の約５０％未満である、請求項１８に記載される方法。
【請求項２５】前記造影剤が、変性状態でのヒト血清アルブミンに結合親
和性を示し、これはネイティブな状態のヒト血清アルブミンに対する該造影剤の
結合親和性の約２０％未満である、請求項１８に記載される方法。
【請求項２６】前記造影剤が、変性状態でのヒト血清アルブミンに結合親
和性を示し、これはネイティブな状態のヒト血清アルブミンに対する該造影剤の
結合親和性の約１０％未満である、請求項１８に記載される方法。
【請求項２７】前記造影剤が、変性状態で前記組織または組織成分へと結
合した場合にＲ₁緩和率を示し、これはネイティブな状態で該組織または組織成分へと結合した場合の該造影剤のＲ₁緩和率の約８０％未満である、請求項１または１８に記載される方法。
【請求項２８】前記造影剤が、変性状態で前記組織または組織成分へと結
合した場合にＲ₁緩和率を示し、これはネイティブな状態で該組織または組織成分へと結合した場合の該造影剤のＲ₁緩和率の約５０％未満である、請求項１または１８に記載される方法。
【請求項２９】前記造影剤が、変性状態で前記組織または組織成分へと結
合した場合にＲ₁緩和率を示し、これはネイティブな状態で該組織または組織成分へと結合した場合の該造影剤のＲ₁緩和率の約２０％未満である、請求項１または１８に記載される方法。
【請求項３０】前記造影剤が、変性状態で前記組織または組織成分へと結
合した場合にＲ₁緩和率を示し、これはネイティブな状態で該組織または組織成分へと結合した場合の該造影剤のＲ₁緩和率の約１０％未満である、請求項１または１８に記載される方法。
【請求項３１】前記インターベンショナル療法が完了し、そして前記標的
化された組織または組織成分が生理学的状態に戻される場合に、前記造影剤がＲ ₁ 緩和率を示し、該緩和率がネイティブな状態での該組織または組織成分へと結合した場合の該造影剤のＲ₁緩和率の約８０％未満である、請求項１または１８に記載される方法。
【請求項３２】前記インターベンショナル療法が完了し、そして前記標的
化された組織または組織成分が生理学的状態に戻される場合に、前記造影剤がＲ ₁ 緩和率を示し、該緩和率がネイティブな状態での該組織または組織成分へと結合した場合の該造影剤のＲ₁緩和率の約５０％未満である、請求項１または１８に記載される方法。
【請求項３３】前記インターベンショナル療法が完了し、そして前記標的
化された組織または組織成分が生理学的状態に戻される場合に、前記造影剤がＲ ₁ 緩和率を示し、該緩和率がネイティブな状態での該組織または組織成分へと結合した場合の該造影剤のＲ₁緩和率の約２０％未満である、請求項１または１８に記載される方法。
【請求項３４】前記インターベンショナル療法が完了し、そして前記標的
化された組織または組織成分が生理学的状態に戻される場合に、前記造影剤がＲ ₁ 緩和率を示し、該緩和率がネイティブな状態での該組織または組織成分へと結合した場合の該造影剤のＲ₁緩和率の約１０％未満である、請求項１または１８に記載される方法。
【請求項３５】インターベンショナル療法を受けているまたは受けた特異
的な組織または組織成分のコントラスト増強型診断的画像化のための方法であっ
て、該方法は以下：（ａ）以下の式の１つを有する造影剤を、患者に投与する工程であって、ここ
でｎは１〜４であり得、そしてＲは脂肪族の基および／または少なくとも１つの
アリール環を包含する；【化１】【化２】【化３】【化４】【化５】【化６】【化７】（ｂ）ＭＲＩ画像化、紫外光画像化、可視光画像化または赤外光画像化のうち
の１つに、該患者を供する工程；ならびに（ｃ）該造影剤の特徴的な画像化シグナルをモニターしてインターベンショナ
ル療法が完了したかどうかを決定する工程、を包含する方法。