JP2001508429A - 選択プロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２の阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 ［構造式Ｉ］ 本発明は構造式（Ｉ）を有し、ＲはＣＨ₃，ＣＨ₂ＣＨ₃，(ＣＨ₂)₂ＣＨ₃，(ＣＨ₂）₃ＣＨ₃，(ＣＨ₂)₄ＣＨ₃，(ＣＨ₂)₅ＣＨ₃，(ＣＨ₂)₆ＣＨ₃，(ＣＨ₂)₂Ｏ(ＣＨ₂)₃ＣＨ₃，ＣＨ₂ＨＣ＝ＣＨ(ＣＨ₂)₃ＣＨ₃，ＣＨ₂Ｃ≡Ｃ(ＣＨ₂)₃ＣＨ₃，ＣＣＨ₂Ｃ≡Ｃ(ＣＨ₂)₂ＣＨ₃，ＣＨ₂Ｃ≡Ｃ−ＣＣＨ₂ＣＨ₃，ＣＨ₂Ｃ≡Ｃ−ＣＨ₃及びＣＨ₂Ｃ≡ＣＨからなる群から選択され、Ｒ’はＣＨ₃，ＣＦ₃，ＣＨ₂Ｃｌ及びＣＨ₂Ｂｒ又はそれらについての薬理的に許容される塩又は水和物からなる群から選択される、化合物を提供する。また、哺乳類においてプロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２（ＰＧＨＳ−２）合成の阻害の方法も提供する。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の名称 選択プロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２の阻 害剤 発明の背景 発明の分野 本発明は一般に炎症の分子薬理学及び生化学の分野に関する。さらに詳しくは 、本発明はプロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２の選択２−ア シルオキシフェニルアルキル及び２−アシルオキシフェニルアリルスルフィド阻 害剤に関する。関連技術の説明 プロスタグランジン、特にプロスタグランジンＥ₂（ＰＧＥ₂）は多くの異なっ た生理的及び病態生理的機能を持っている。これらのエイコサノイド（eicosano id）はアラキドン酸へのプロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ（Ｐ ＧＨＳ，ＥＣ 1.14.99.1）の作用によって生産される。プロスタグランジンエ ンドペルオキシドシンターゼ活性は、プロスタグランジンエンドペルオキシドシ ンターゼ−１及びプロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２と命名 され２個の異なった遺伝子にコードされた、２つの別個であり独立して調節され た異性体から生じている（１，２）。 プロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−１は本質的な発現をし、 生理的役割、特に凝集反応、胃での細胞保護及び一般的な腎臓機能の調節におい て役割を果たしてい ると考えられている（図１）。プロスタグランジンエンドペルオキシドシンター ゼ−２は誘導アイソザイムでプロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ −２の発現は内毒素、サイトカイン及びマイトジェンを含む様々な試薬により誘 導される（２，３）。重要なこととして、プロスタグランジンエンドペルオキシ ドシンターゼ−２は試験管内において有意な高水準の前炎症性刺激を誘導する（ ４）。 これらの発見はプロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−１及びプ ロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２が異なった生理的及び病態 生理的機能に役立つという考え方を導く。例えば、現在使用されているすべての 無ステロイド抗炎症剤（ＮＳＡＩＤｓ）による有益なプロスタグランジン産物の 混乱は、特に消化器官及び腎臓における反応機構に基づいた毒性を生じさせ、長 期の治療が含まれるときに特にそれらの治療状の有用さを制限する（５−７）。 この臨床上の発見の結果として、製薬産業において主要な発見のための努力が選 択性及び経口活性プロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２阻害剤 の同定について行われてきており、なぜならそれらが求められる抗炎性及び鎮痛 性特徴を既存の無ステロイド抗炎症剤通常持っている有害性、時には生命の危険 を招く副作用無しに持つ可能性があるからである。 以前技術では、選択性及び経口性活性プロスタグランジンエンドペルオキシド シンターゼ−２阻害剤が欠如していた。 本発明は、この技術分野のこの長期に渡る必要性及び要望を満たすものである。発明の要約 本発明の具体例では、次の構造式を有する化合物を提供する。 ［構造式Ｉ］ ここでＲはＣＨ₃，ＣＨ₂ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₂ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃，（ＣＨ₂ ）₄ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₅ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₆ＣＨ₃，（ＣＨ₂）。Ｏ（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃ ，ＣＨ₂ＨＣ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃，ＣＨ₂Ｃ≡Ｃ（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃，ＣＣＨ₂Ｃ ≡Ｃ（ＣＨ₂）₂ＣＨ₃，ＣＨ₂Ｃ≡Ｃ−ＣＣＨ₂ＣＨ₃，ＣＨ₂Ｃ≡Ｃ−ＣＨ₃及びＣ Ｈ₂Ｃ≡ＣＨからなる群から選択され、Ｒ’はＣＨ₃，ＣＦ₃，ＣＨ₂Ｃｌ及びＣＨ₂ Ｂｒ若しくはそれらについての薬理的に許容される塩又は水和物からなる群か ら選択される。 本発明の別の具体例では、本発明の新化合物及び薬剤学的に許容される運搬体 を含む薬剤化合物の提供である。 本発明のさらに別の具体例は、このような治療を必要とする哺乳類に効果的な 量の構造式（Ｉ）化合物を前記哺乳類に投与する手段を含むプロスタグランジン エンドペルオキシドシンターゼ−２（ＰＧＨＳ−２）の合成を阻害する方法の提 供である。 本発明のさらに別の観点、特徴、利点は開示の目的で与えられた発明の現在で の好ましい具体例の以下の記述から明白にされるだろう。 図面の簡単な説明 本発明の上記に列挙された特徴、利点及び目的が含まれる事が、明らかになる 他の事と同様に、達成され及び詳細に理解するために、発明を簡単に要約したよ り特殊な記述が掲載された図面で示されたある具体例を参照する事により、でき るようにした。これらの図面は明細書の一部である。しかしながら、掲載された 図面は発明の好ましい具体例を示し、それらの分野を制限すると考えるべきでは ないことに注意しなければならない。 図１は炎症を起こさせる生理的刺激の概略図を示す。 図２Ａはフロスリド（flosulide）、ＮＳ−398，ＳＣ8076,アスピリン及びＤ ｕＰ697の構造を示す。図２Ｂは化合物２，３，４及び６〜14の合成のための合 成概略図を示す。図２Ｃは化合物15，16，17，18及び19の合成のための合成概略 図を示す。図２Ｄは化合物21，22，23及び24の合成のための合成概略図を示す。 図２Ｅは化合物26，27，28，29，30及び31の合成のための合成概略図を示す。図 ２Ｆは化合物33〜48及び49〜63の合成のための合成概略図を示す。図２Ｇは化合 物65，66，67，69，70及び71の合成のための合成概略図を示す。図２Ｈは化合物 73，74及び75の合成のための合成概略図を示す。 図２Ｉは化合物79〜91の合成のための合成概略図を示す。図２Ｊは化合物36，92 及び93の合成のための合成概略図を示す。図２Ｋは化合物95，96及び97の合成の ための合成概略図を示す。 図３は２−アセトキシチオアニソール（２）による、ヒトＰＧＨＳ−２及びヒ ツジＰＧＨＳ−１の時間及び濃度依存阻害を示す。ホロＰＧＨＳ−１（22nM）又 はホロＰＧＨＳ−２（88nM）は指示された濃度の２と、室温で３時間インキュベ ートされた。シクロオキシゲナーゼ反応は50μM［１−¹⁴Ｃ］−アラキドン酸を3 7℃で30秒間加えることで開始された。黒丸、ＰＧＨＳ−２＋２；白丸、ＰＧＨ Ｓ−１＋２。２−アセトキシチオアニソール（mM）％残存酵素活性。 図４は２−アセトキシチオアニソール（２）による、アポ及びホロＰＧＨＳ− ２のシクロオキシゲナーゼ活性の時間依存阻害を示す。アポＰＧＨＳ−２（５μ M）又はホロＰＧＨＳ−２（５μM）は1000倍過剰の２とインキュベートされた。 過ヨウ素0.16μM酵素アリコート（最終阻害剤濃度は160μM以下）は上記記載の ように残存シクロオキシゲナーゼ及びペルオキシダーゼ活性を測定した。黒四角 、ホロＰＧＨＳ−２のシクロオキシゲナーゼ活性；白四角、アポＰＧＨＳ−２の シクロオキシゲナーゼ活性；黒丸、ホロＰＧＨＳ−２のペルオキシダーゼ活性； 白丸、アポＰＧＨＳ−２のペルオキシダーゼ活性。 図５はアスピリンによる、ヒトＰＧＨＳ−２及びヒツジＰ ＧＨＳ−１の時間及び濃度依存阻害を示す。ホロＰＧＨＳ−１（22nM）又はホロ ＰＧＨＳ−２（88nM）は指示された濃度の２と、室温で１時間インキュベートさ れた。シクロオキシゲナーゼ反応は［１−¹⁴Ｃ］−アラキドン酸（50μM）を37 ℃で30秒間加えることで開始された。白丸、ＰＧＨＳ−１＋アスピリン；黒丸、 ＰＧＨＳ−２＋アスピリン。 図６は２−アセトキシチオアニソール（２）による、ホロ及びアポＰＧＨＳ− ２のシクロオキシゲナーゼ活性の阻害を示す。アポ又はホロＰＧＨＳ−２（５mM ）は1000倍過剰の２−アセトキシチオアニソール（２）と500mMフェノールを含 む100mMトリスＨＣｌバッファー、pH８中で22.5℃で指示された時間インキュベ ートされ、その後100mMトリスＨＣｌバッファー、pH7.5に含まれた500mMヒドロ キシルアミンが（矢印で）示された時点で加えられた。ホロＰＧＨＳ−２の過ヨ ウ素0.16μMアリコート（白丸）、ホロＰＧＨＳ−２＋２−アセトキシチオアニ ソール（白四角）、アポＰＧＨＳ−２（黒丸）、アポＰＧＨＳ−２＋２−アセト キシチオアニソール（黒四角）はシクロオキシゲナーゼ活性を測定された。 図７は２−アセトキシチオアニソール（２）による、ヒトＰＧＨＳ−２のシクロ オキシゲナーゼ活性の阻害に対するpHの影響を示す。pH６，７，８及び９の100m Mナトリウムリン酸バファー中のアポＰＧＨＳ−２（５μM，1.62μg/μL）は２ 当量のヘマチンと再構成された。ＤＭＳＯ中の化合物２（1000倍過剰）を反応混 合液に添加した。定期的に、過ヨウ 素0.16μM酵素アリコート（最終阻害剤濃度は178μM以下）は残存シクロオキシ ゲナーゼ活性を測定した。白丸、pH６で２と処理されたホロＰＧＨＳ−２のシク ロオキシゲナーゼ活性；黒丸、pH７でのホロＰＧＨＳ−２＋２のシクロオキシゲ ナーゼ活性；白四角、pH８でのホロＰＧＨＳ−２＋２のシクロオキシゲナーゼ活 性；黒四角、pH９でのホロＰＧＨＳ−２＋２のシクロオキシゲナーゼ活性。阻害 剤を含まないコントロールの実験では測定の期間を通じて直線状態が保たれた。 図８は２−（トリフルオロメチルアセチル）チオアニソール（６）による、ヒ トＰＧＨＳ−２及びヒツジＰＧＨＳ−１の時間及び濃度依存阻害を示す。ホロＰ ＧＨＳ−１（22nM）又はホロＰＧＨＳ−２（88nM）は指示された濃度の６と、室 温で３時間インキュベートされた。シクロオキシゲナーゼ反応は［１−¹⁴Ｃ］− アラキドン酸（50μM）を37℃で30秒間加えることで開始された。白丸、ＰＧＨ Ｓ−１＋６；黒丸、ＰＧＨＳ−２＋６。 図９は２−アセトキシフェニルヘプチルスルフィド（54）及び比較の２−ヒド ロキシルフェニルヘプチルスルフィド（38）による、ヒトＰＧＨＳ−２及びヒツ ジＰＧＨＳ−１の時間及び濃度依存阻害を示す。ホロＰＧＨＳ−１（22nM）又は ホロＰＧＨＳ−２（88nM）は指示された濃度の54および38と、室温で３時間イン キュベートされた。シクロオキシゲナーゼ反応は［１−¹⁴Ｃ］−アラキドン酸（ 50μM）を37℃で30秒間加えることで開始された。黒四角、54で処理されたホ ロＰＧＨＳ−２のシクロオキシゲナーゼ活性；白四角、54で処理されたホロＰＧ ＨＳ−１のシクロオキシゲナーゼ活性；黒丸、38で処理されたホロＰＧＨＳ−２ のシクロオキシゲナーゼ活性；白丸、38で処理されたホロＰＧＨＳ−１のシクロ オキシゲナーゼ活性。 図10は２−アセトキシフェニルヘプチルスルフィド（54）による、ヒトＰＧＨ Ｓ−２のシクロオキシゲナーゼ活性の阻害に対するpHの影響を示す。pH６，７， ８及び９の100mMナトリウムリン酸バファー中のアポＰＧＨＳ−２（５μM，1.62 μg/μL）は２当量のヘマチンと再構成された。ＤＭＳＯ中の化合物54（181μM ）を反応混合液に添加した。定期的に、過ヨウ素0.16μM酵素アリコート（最終 阻害剤濃度は６μM以下）は残存シクロオキシゲナーゼ活性を測定した。白丸、p H６で54と処理されたホロＰＧＨＳ−２のシクロオキシゲナーゼ活性；黒丸、pH ７でのホロＰＧＨＳ−２＋54のシクロオキシゲナーゼ活性；白四角、pH８でのホ ロＰＧＨＳ−２＋54のシクロオキシゲナーゼ活性；黒四角、pH９でのホロＰＧＨ Ｓ−２＋54のシクロオキシゲナーゼ活性。阻害剤を含まないコントロールの実験 では測定の期間を通じて直線状態が保たれた。 図11は２−アセトキシフェニル−２−ブトキシエチルスルフィド（67）及び２ −アセトキシフェニル−３−プロピオノキシプロピルスルフィド（71）による、 ヒトＰＧＨＳ−２及びヒツジＰＧＨＳ−１の時間依存性及び濃度依存阻害を示す 。 ホロＰＧＨＳ−１（22nM）又はホロＰＧＨＳ−２（88nM）は指示された濃度の67 及び71と、室温で３時間インキュベートされた。シクロオキシゲナーゼ反応は［ １−¹⁴Ｃ］−アラキドン酸（50μM）を37℃で30秒間加えることで開始された。 黒四角、67で処理されたホロＰＧＨＳ−２のシクロオキシゲナーセ活性；白四角 、67で処理されたホロＰＧＨＳ−１のシクロオキシゲナーゼ活性；白丸、71で処 理されたホロＰＧＨＳ−１のシクロオキシゲナーゼ活性；黒丸、71で処理された ホロＰＧＨＳ−１のシクロオキシゲナーゼ活性。 図12は２−アセトキシフェニル−２−ブチルプロパギルスルフィド（79）によ る、ヒトＰＧＨＳ−２及びヒツジＰＧＨＳ−１の時間及び濃度依存阻害を示す。 ホロＰＧＨＳ−１（22nM）又はホロＰＧＨＳ−２（88nM）は指示された濃度の79 と、室温で３時間インキュベートされた。シクロオキシゲナーゼ反応は［１−¹⁴ Ｃ］−アラキドン酸（50μM）を37℃で30秒間加えることで開始された。黒四角 、ホロＰＧＨＳ−２のシクロオキシゲナーゼ活性；黒丸、ホロＰＧＨＳ−１のシ クロオキシゲナーゼ活性；黒三角、相当する２−ヒドロオキシフェニルヘプト− ２−ニルスルフィド（78）で処理されたホロＰＧＨＳ−２のシロオキシゲナーゼ 活性。 図13は２−アセトキシフェニルヘキシ−２−ニルスルフィド（88）による、ヒ トＰＧＨＳ−２及びヒツジＰＧＨＳ−１の時間及び濃度依存阻害を示す。ホロＰ ＧＨＳ−１（22nM）又はホロＰＧＨＳ−２（88nM）は指示された濃度の88と、室 温で３時間インキュベートされた。シクロオキシゲナーゼ反応は［１−¹⁴Ｃ］− アラキドン酸（50μM）を37℃で30秒間加えることで開始された。黒四角、ホロ ＰＧＨＳ−２のシクロオキシゲナーゼ活性；黒丸、ホロＰＧＨＳ−１のシグロオ キシゲナーゼ活性。図14はアスピリンと比較した２−アセトキシチオアニソール （２）による、活性化マクロファージでのＰＧＨＳ−２の阻害を示す。図15は、 ２−（アセトキシフェニル）ヘプト−２−ニルスルフィド（87）及び２−（アセ トキシフェニル）ヘプチルスルフィド（54）による、活性化マクロファージでの ＰＧＨＳ−２の阻害を示す。 発明の詳細な説明 プロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２選択性阻害剤の２つの 一般的な構造種は文献で普通に報告される。試験管内での選択プロスタグランジ ンエンドペルオキシドシンターゼ−２阻害に加え、これらの多くの化合物が、既 存の抗炎症剤に比較して、ラットアジュバント誘導関節炎モデルにおいて例外的 な安全なプロフィールに従って潜在的抗炎症活性を所有する。構造種にはトリサ イクル非酸性アリルメチルスルフォン（８〜11）（ＤｕＰ697及びＳＣ8092で例 示される）及び酸性スルフォンアミド（12〜15）（フロスリド及びＮＳ−398で 例示される）が含まれる（図２）。ＳＣ8092のようなトリサイクル非酸性化合物 におけるアリルメチルスルフォニル部分は、これらの化合物による選択性プロス タグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２阻害において、 ＳＣ8092のスルフォン基からプロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ −１選択性阻害剤のＳＣ8076（11）を発生させる対応のスルフィド官能性に還元 することで重要な役割を担っていると考えられる（図２参照）。 本発明では多くの置換アシルベンゼン誘導体が合成され、選択プロスタグラン ジンエンドペルオキシドシンターゼ−２阻害剤であるかを検査された。２−メチ ルチオ官能性の誘導はプロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２の シクロオキシゲナーゼ活性の選択的阻害を示す、対応する２−アセトキシチオア ニソール２誘導体を発生させる（ＩＣ₅₀（ＰＧＨＳ−２）264μM以下；ＩＣ₅₀（ ＰＧＨＳ−１）５mM以上）。 プロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２選択阻害剤としての２ の効力を改良する試みは、いくつかは２と比較して300倍までの効力を持つ新た な２−アセトキシフェニルアルキル及びアリルスルフィドの発見を、本発明が選 択プロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ阻害剤の新構造種の発見を 提供したように導いてきた。¹⁴Ｃ放射性標識阻害剤による一連の研究で選択プロ スタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２阻害剤が活性部位アミノ酸残 基のアセチル化から生じることを確立した。本発明は選択プロスタグランジンエ ンドペルオキシドシンターゼ−２阻害剤によってプロスタグランジンエンドペル オキシドシンターゼ−２の選択的共有結合修飾についての最初の文書である。精 製したヒトプロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２及びヒツジプ ロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−１を使用した試験管内での阻 害研究に加えて、ネズミマクロファージでのこれら新化合物のプロスタグランジ ンエンドペルオキシドシンターゼ−２活性の阻害の能力もまた調査した。ほとん どの阻害剤は、ＬＰＳ及びＩＦＮ−γで活性化されたネズミマクロファージで、 プロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２活性の阻害の能力を示し 、これらの化合物が生体内でも同様に有効であることを示す。 本発明の具体例では、次の構造式を有する化合物を提供する。 ［構造式Ｉ］ ここでＲはＣＨ₃，ＣＨ₂ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₂ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃，（ＣＨ₂ ）₄ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₅ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₆ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₂Ｏ（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃ ，ＣＨ₂ＨＣ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃，ＣＨ₂Ｃ≡Ｃ（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃，ＣＣＨ₂Ｃ ≡Ｃ（ＣＨ₂）₂ＣＨ₃，ＣＨ₂Ｃ≡Ｃ−ＣＣＨ₂ＣＨ₃，ＣＨ₂Ｃ≡Ｃ−ＣＨ₃及びＣ Ｈ₂Ｃ≡ＣＨからなる群から選択され、Ｒ’はＣＨ₃，ＣＦ₃，ＣＨ₂Ｃｌ及びＣＨ₂ Ｂｒ若しくはそれらについての薬理的に許容される塩又は水和物からなる群か ら選択される。好ましく は、本発明の化合物の典型例は、２−アセトキシチオアニソール、２−（トリフ ルオロメチルアセトキシ）チオアニソール、２−（α−クロロアセトキシ）チオ アニソール、２−（α−ブロモアセトキシ）チオアニソール、２−アセトキシフ ェニルベンジルスルフィド、２−アセトキシフェニル−２−フェニルエチルスル フィド、２−アセトキシフェニルエチルスルフィド、２−アセトキシフェニルプ ロピルスルフィド、２−アセトキシフェニルブチルスルフィド、２−アセトキシ フェニルペンチルスルフィド、２−アセトキシフェニルヘキシルスルフィド、２ −アセトキシフェニルヘプチルスルフィド、２−アセトキシフェニル−２−ブト キシエチルスルフィド、２−アセトキシフェニル−２−トランス−ヘプテニルス ルフィド、２−アセトキシフェニルヘプト−２−ニルスルフィド、２−アセトキ シフェニルヘキシ−２−ニルスルフィド、２−アセトキシフェニルペント−２− ニルスルフィド、２−アセトキシフェニルブト−２−ニルスルフィド及び２−ア セトキシフェニルプロプ−２−ニルスルフィド又はそれらについての薬理的に許 容される塩又は水和物からなる群から選択される。 構造式（Ｉ）の化合物はシクロオキシゲナーゼ−２のような誘導前炎症タンパ グ質を阻害することができ、その結果治療において有効である。シクロオキシゲ ナーゼ（ＣＯ）経路のこれら前炎症性脂質媒体は誘導シクロオキシゲナーゼ−２ 酵素により生産される。その結果、プロスタグランジンのよ うなアラキドンから誘導されたこれらの生産物に対して反応性のあるシクロオキ シゲナーゼ−２の調節は、非常に多くの細胞及び組織状態及び条件に影響する。 シクロオキシゲナーゼ−１の発現は構造式（Ｉ）の化合物には影響されない。こ のシクロオキシゲナーゼ−２に対する選択的な阻害は、プロスタグランジン本来 の細胞保護効果に対し阻害するシクロオキシゲナーゼ−１の阻害に関係した潰瘍 遺伝的負担を軽減又は分離する。したがって、前炎症性媒体の阻害は多くのこれ らの病気の状態を制御、減少及び軽減において有効である。もっとも著しいのは 、プロスタグランジンは痛み（痛み受容体におけるような）又は浮腫を増幅させ てきた。この観点の痛みの処置には神経筋痛、頭痛、ガンの痛み及び関節炎痛の 治療が含まれる。 構造式（Ｉ）の化合物又はそれらの薬理的に許容される塩は、シクロオキシゲ ナーゼ−２酵素の合成を阻害することによりヒト又は他の哺乳類での予防又は治 療において有効である。 それ故、本発明はまた、そのような治療が必要な哺乳類に効果的な量の構造式 （Ｉ）の化合物の投与の手段を含む、前記哺乳類におけるプロスタグランジンエ ンドペルオキシドシンターゼ−２（ＰＧＨＳ−２）の阻害によるプロスタグラン ジン合成の阻害の方法を指示する。一般に、この方法は浮腫、発熱、アレルギー 、神経筋痛、頭痛、ガンの痛み及び関節炎痛の予防又は治療において有効である 。この方法で有用な典 型的な化合物には２−アセトキシチオアニソール、２−（トリフルオロメチルア セトキシ）チオアニソール、２−（α−クロロアセトキシ）チオアニソール、２ −（α−ブロモアセトキシ）チオアニソール、２−アセトキシフェニルベンジル スルフィド、２−アセトキシフェニル−２−フェニルエチルスルフィド、２−ア セトキシフェニルエチルスルフィド、２−アセトキシフェニルプロピルスルフィ ド、２−アセトキシフェニルブチルスルフィド、２−アセトキシフェニルペンチ ルスルフィド、２−アセトキシフェニルヘキシルスルフィド、２−アセトキシフ ェニルヘプチルスルフィド、２−アセトキシフェニル−２−ブトキシエチルスル フィド、２−アセトキシフェニル−２−トランス−ヘプテニルスルフィド、２− アセトキシフェニルヘプト−２−ニルスルフィド、２−アセトキシフェニルヘキ シ−２−ニルスルフィド、２−アセトキシフェニルペント−２−ニルスルフィド 、２−アセトキシフェニルブト−２−ニルスルフィド及び２−アセトキシフェニ ルプロプ−２−ニルスルフィド又はそれらについての薬理的に許容される塩又は 水和物からなる群から選択される。 本発明はまた構造式（Ｉ）の化合物及び薬理的に許容される運搬体又は希釈剤 を含んだ薬剤複合物を指示する。治療において構造式（Ｉ）の化合物又はそれら の薬理的に許容される塩を使用ためには、標準的な製薬の慣例に従ってそれらは 薬剤複合物に形を変えられる。したがって、本発明はまた構造式（Ｉ）の化合物 及び薬理的に許容される運搬体又は希釈 剤を、効果的で毒性の無い量を含んだ薬剤複合物に関する。 構造式（Ｉ）の化合物、それらについての薬理的に許容される塩及びそれらが 取り込まれた薬剤複合物は、薬剤投与において通常行われている、例えば、経口 、局部、注射又は吸入などによるいかなるやり方によって都合のよい形式で投与 できる。構造式（Ｉ）の化合物は通常の手順に従って標準的な薬剤運搬体との結 合により調製された都合のよい投薬形式で投与する事ができる。本発明の化合物 は既知の第２治療的活性化合物と結合による、都合のよい投薬形式で投与する事 もできる。これらの手順には、要望される調製にふさわしい成分の混合、粒化及 び圧縮又は溶解を含む事ができる。薬理的に許容される運搬体又は希釈剤は結合 されるべき有効成分の量によって指示され、投与のやり方及びその他は可変的で あると広く知られることは認識されている。運搬体は定式化した他の成分と適合 的で、それらについての受容体に対して有害ではないという意味で「許容」され なければならない。 使用される薬剤運搬体は、例えば、固体又は液体のいずれであってもよい。代 表的な固体運搬体は、ラクトース、テラアルバ、サッカロース、タルク、ゼラチ ン、寒天、ペクチン、アカシア、マグネシウムステレート、ステアリン酸及び同 類なものである。液体運搬体にはシロップ、ピーナッツオイル、オリーブオイル 、水及び同類なものが含まれる。同様に、運搬体はこの技術分野でよく知られて いる単独の又はワックスとともにあるグリセリルモノステレート又はグリセリル ジス テレートのような時間遅延物質を含むことができる。 非常に多くの種類の薬剤形式を使用することができる。従って、固体の運搬体 を使用する場合は、調製は錠剤にする、粉又は粒状で固いゼラチンのカプセルに 入れる、又はトローチ又はドロップの形にすることができる。固体運搬体の量は 非常に広い範囲ではあるが、好ましくは約１グラムあたり約25mgの形である。液 体運搬体を使用する場合は、シロップ、乳濁液、柔らかいゼラチンカプセル、ア ンプルのような無菌注入可能な液体、又は無水液体懸濁液の形で行われるだろう 。 構造式（Ｉ）の化合物は局部的（非組織的）に投与できる。このことには、化 合物が有意に血流へ入ることがないような化合物の外部からの表皮又は口腔への 利用、及び耳、目、鼻への滴下が含まれる。局部投与に適した定式化物には皮膚 から炎症部位への浸透通過に適した塗布薬、水薬、クリーム、軟膏、ペースト及 び耳、目及び鼻へ投与に適した滴薬のような液体及び半液体の調製物が含まれる 。有効成分が、定式化物の重量に対して、局部投与では0.001％から10％ｗ/ｗ、 例としては１％から２％を含んでいる。それは定式化物の10％ｗ/ｗを含むこと ができるが、好ましくは５％ｗ/ｗ以下、さらに好ましくは0.1％から１％ｗ/ｗ が含まれる。 本発明に従う水薬には皮膚及び目への利用に適したものが含まれる。点眼薬に は任意に殺菌剤を含んだ無菌水溶液を含み、滴薬の調製に対するものと同様な方 法で調製することができる。皮膚への利用での水薬及び塗布薬にアルコール及び アセトンのような乾燥を早め、皮膚を冷却する試薬、及び／又はグリセリン若し くはヒマシ油又はナンキンマメ油のような油のようなモイスターライザーを含む ことができる。 本発明に従うクリーム、軟膏、又はペーストは外部性の利用のために有効成分 を半固体の定式化形式である。それらは有効成分を混合をする事で、単独で又は 溶液又は水性又は無水流動性懸濁液で、安定的な機構の助けと、脂又は無脂基剤 を伴い細かく分離又は粉末状にすることができる。基剤には、硬質、軟質又は脂 質パラフィンのような炭水化物、グリセリン、みつろう、金属セッケン、粘質物 、アーモンド、コーン、ナンキンマメ、ヒマシ又はオリーブ油のような天然油、 羊毛脂又はその誘導体又はステリックのような脂肪酸又はプロピレングリコール のようなアルコールと結合したオレイン酸又はマクロゲルを含むことができる。 定式化形式には、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤、ソルビンタンエス テルおよびそれについてのポリオキシエチレン誘導体のような非イオン性界面活 性剤のような、いかなる適する界面活性剤を取り入れることができる。天然ゴム 、セルロース誘導体またはシリカを含む無水シリカのような無機物質のような懸 濁試薬、及びラノリンのような他の成分も含むことができる。 本発明に従う滴薬は無菌水又は油性溶液又は懸濁液を含むことができ、また有 効成分を殺菌剤、及び／又は殺菌の試薬、及び／又は他の適した保存剤、及び好 ましくは界面活性剤を含んだ適した水性溶液に溶解することで調製することがで き る。調製された溶液は濾過により不純物を取り除くことができ、その後密閉され る適した容器に移され、オートクレーブにより殺菌された。代わりに、濾過によ り滅菌され、無菌技術により容器に移すことができる。滴薬の含有に適した殺菌 剤、及び殺菌の試薬の例はフェニメルクル硝酸塩又は酢酸塩（0.002％以下）、 塩化ベンザルコニウム（0.01％以下）、酢酸クロルヘキシジン（0.01％以下）で ある。油性溶液の調製に適した溶媒はグリセリン、希釈アルコール、プロピレン グリコールが含まれる。 構造式（Ｉ）の化合物は注射による投与、すなわち、静脈、筋肉、皮下、鼻内 、直腸内、膣内、又は腹膜内注射により、投与できる。注射による投与には皮下 注射及び筋肉注射が一般的に好まれる。このような投与にふさわしい投薬形式は 通常行われる技術で調製することができる。化合物はまた吸入、例えば鼻及び口 からの吸入により投与することができる。エアロゾル定式化形式又は計量投薬吸 入器のような、このような投与のためのふさわしい投薬形式は、この技術分野の 通常の技能を持つ人によく知られている通常行われる技術で調製することができ る。 ここで説明された本発明の化合物のすべての使用方法について、１日の経口投 薬レジメントは全体重の約0.1から約100mg/kgまでが好まれる。１日の注射投薬 レジメントは全体重の約0.1から約100mg/kgまでが好まれる。１日の局部投薬レ ジメは全体重の約0.1から約15mgまでが好まれ、１日あたり １から４回、好ましくは２から３回投与させる。この技術分野の１つの技能によ り、本発明の化合物、又はそれらの薬理的に許容される塩の個々の最適の投与量 及び投与間隔は、治療される病気の性質及び程度に決定され、これらの最適条件 も通常の方法により決定できることもまた認識される。 ふさわしい薬理的に許容される塩はこの技術分野の技能を持つ人によく知られ ていて、それには、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルスルホン酸、 エタンスルホン酸、酔酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、乳酸、シュウ酸、コハ ク酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸、サリチル酸、フェニル酢酸及びマンデ リン酸のような無機及び有機酸の塩基性塩を含む。さらに、構造式（Ｉ）の化合 物の薬理的に許容される塩はまた、例えばカルボキシの一部分を含む置換基のよ うな薬理的に許容される陽イオンと構造物を形成できる。薬理的に許容されるふ さわしい陽イオンはこの技術分野の技能を持つ人によく知られていて、それには 、アルカリ性、アルカリ土類アンモニウムイオン及び第４アンモニウム陽イオン が含まれる。 以下の実施例は発明の様々な具体化例を示す目的で与えられており、いかなる 方式でも本発明を制限する意味ではない。 実施例１ 化学 融点はGallenkamp融点測定機を使用し補正は行わずに決定た。テトラヒドロフ ラン（ＴＨＦ）はベンゾフェノンケチル を蒸留して生産される。アセトニトリルはカルシウム水素を通じて蒸留した。他 に記載のない場合、合成反応はアルゴン雰囲気下で行った。すべての化学品（Al drich，Milwaukee，WI又はLancaster，PA）は試薬グレード又はそれ以上であっ た。¹ Ｈ ＮＭＲスペクトラムはBruker ＷＰ−360又はＡＭ400分光計で記録した； 化学シフトは内部テトラメチルシラン（ＴＭＳ）標準に対しｐｐｍ（parts per million）で示されて、スピン多様性はｓ（シングレット）、ｂｓ（広いダブレ ット）、ｄ（ダブレット）、ｄｄ（ダブレットのダブレット）、ｔ（トリブレッ ト）、ｑ（クオートレット）、ｍ（マルチプレット）で示される。ファストアト ムボンバードメント質量分析（ＦＡＢ−ＭＳ）はKratos Concept IIＨＨ ４セ クター質量分析計で記録した。カラムクロマトグラフィーはフィシャーからのシ リカゲル（60〜100メッシュ）を使用して行った。 実施例２ ２−ヒドロキシ−１−メチルフェニルスルフォン（３）の合成 20mLの氷酢酸中に２−ヒドロキシ−１−メチルフェニルメルカプトン（１，１ ｇ，7.13mmol）を含んだ反応混合液に０℃の30％Ｈ₂Ｏ₂（14mL）が滴下法で加え られた。添加が完了後、100℃に温められ、一晩撹拌された。混合物は減圧下で 濃縮されて残留物はシリカゲル（ＥｔＯＡｃ：petエーテル； 90：10）のクロマトグラフィーにより精製され、その後ＥｔＯＨ/Ｈ₂Ｏから再結 晶され、３を以下の性質を持つ白結晶固体として与えた、収率が52％： ２−ヒドロキシフェニルヘプチルスルフォン（92）は無色オイル（137mg，62 ％）として同様な方法で調製された。 実施例３ フェノール誘導体のアセチル化：方法Ａ ５mLの酢酸ハイドレイト中にふさわしいアレノール(14.26mmol)を含んだ反応 混合液及び５滴のＨ₃ＰＯ₄は水浴により15分間熱した。水（10mL）が滴下法で熱 した混合液に加えられ、氷浴により冷却された。水溶液はＣＨＣｌ₂（３×30mL ）で抽出された。結合した有機抽出物は水での洗浄、乾燥（ＭｇＳＯ₄）、ろ過 され、真空下での溶媒の除去の結果、粗生産物が生じ、それは近い収率で目的の 生産物を与えるために ＥｔＯＡｃ：石油エーテル（10：90）を伴ったシリカゲルにより精製された。 ２−アセトキシ−１−メチルフェニルスルフォン（４）。 収率91％： ２−アセトキシアニソール（５）。収率78％の無色オイル。 実施例４ フェノール誘導体のアセチル化：方法Ｂ ５mLのＣＨ₂Ｃｌ₂中の２−メルカプトメチルフェノール（１，0.3ｇ，2.14mmo l）を含んだ反応混合液はドライピリジン（0.169ｇ，2.2mmol）及び酸性無水物 （2.14mmol）で処理した。反応混合液は一晩撹拌され、及びその後水で希釈され た。水溶液はＥｔ₂Ｏ（３×10mL）で抽出された。結合した有機抽出物は水での 洗浄、乾燥（ＭｇＳＯ₄）、ろ過され、真空下での溶媒が除去された。粗生産物 は、目的の生産物を与えるためにシリカゲルによりクロマトグラフィーが行われ 、 ＥｔＯＡｃ：石油エーテル（２：98）で溶出された。この方法により、２−アシ ルオキシアニソール類似体６−14が合成された。（図２Ｂ，図２Ｃのそれぞれの 化合物の化学及び物理学的特質を参照）。 ２−アセトキシフェニルヘプチルスルフォン（93）。収率56％の無色オイル。 実施例５ ２−（メトキシメチレンオキシ）チオアニソール（15）の合成（方法Ａ） ドライピリジン（0.3ｇ，3.9mmol）中に２−ヒドロキシチオアニソール（１， １ｇ，7.14mmol）を含んだ反応混合液に対し、粉末状ＫＯＨ（0.4ｇ，7.09mmol ）が添加された（図２Ｄ）。添加完了溶液は、メトキシメチルクロライド（0.72 ｇ，9.0mmol）で処理、還流のために3.5時間の加熱、冷却して、１Ｍ ＮａＯＨ 及びジエチルエーテルの間に分画される。有機溶液は１Ｍ ＨＣｌ（２×30mL） 、塩水で洗浄の後乾燥（ＭｇＳＯ₄）された。溶媒は真空下で除去され、及び、 粗生産物がシリカゲルによりクロマトグラフィーにかけられ、 石油エーテル：ＥｔＯＡｃ（95：５）で溶出されて目的の生産物を無色オイル（ １ｇ，83％）として与えた。 実施例６ ２−（メタキシオキシメチレンオキシ）チオアニソール（15）の合成（方法Ｂ） ドライアセトニトリル（30mL）中に２−ヒドロキシチオアニソール（１，１ｇ ，7.14mmol）を含んだ反応混合液に対し、粉末状フッ化カリウム活性化アルミナ （８ｇ）及びメトキシメチルクロライド（0.72g，9.0mmol）が添加された。混合 液は室温で一晩撹拌された。反応混合液はセライトによるクロマトグラフィーに かけられ、真空下での溶媒が除去された。残留物は水及びジエチルエーテルの間 に分画される。有機溶液は水で洗浄し、その後乾燥（ＭｇＳＯ₄）された。溶媒 は真空下で除去され、及び、粗生産物がシリカゲルよるクロマトグラフィーにか けられ、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ（95：５）で溶出されて目的の生産物を無色 オイル（1.1ｇ，85％）として与えた。実施例７ ３−メチルメルカプト−２−（メトキシ）メチレンオキシ−１−メチル安息香酸 （16） 氷浴中で冷却された30mL新鮮な希釈されたＴＨＦ中の２−（メトキシ）メチレ ンオキシ−１−チオアニソール（15,1.06ｇ，5.7mmol）に対しｎ−ＢｕＬｉ（2. 6mLのヘキサン中の2.5Ｍ溶液、6.27mmol）を添加し、室温で14時間撹拌された（ 図２Ｄ）。明るい黄色溶液は−78℃に冷却され、及びメチルクロロギ酸（1.1ｇ ，11.7mmol，0.92mL）がすべてに同じに添加された。反応混合液は飽和ＮＨ₄Ｃ ｌの添加により抑制され、溶液は真空下で濃縮された。残留物は水（50mL）で希 釈され、ＣＨ₂Ｃｌ₂（３×30mL）で抽出された。結合有機溶液は、塩水、水で洗 浄の後乾燥（ＭｇＳＯ₄）された。溶媒は減圧下で除去され、及び、残留物はシ リカゲルによりクロマトグラフィーにかけられ、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ 96 ：４（開始物質がこの極性で回収される）及びその後で90：10溶出されて目的の 生産物16をオイル（0.61ｇ，44％）として与えた。 実施例８ ３−（メチルメルカプト）メチルサリチル酸塩（17）の合成 ＴＨＦ（0.23mL）中の16（0.6ｇ，2.47mmol）、水（２mL）及び６Ｍ ＨＣｌ （５mL）は60℃で６時間加熱された（図２Ｄ）。反応混合物は当量の飽和ＮａＣ ｌに注がれ、水性溶液は（３×20mL）で抽出された。結合有機溶液は、乾燥（Ｍ ｇＳＯ₄）、ろ過して、溶媒を真空下で除去した。粗抽出物はシリカゲルにより クロマトグラフィーにかけられ、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ（95：５）で溶出さ れて17を結晶化白色固体（0.3ｇ，61％）として与えられた。 実施例９ ３−（メチルメルカプト）メチルサリチル酸（18）の合成 ＥｔＯＨ：Ｈ₂Ｏ（3.64mL：0.36mL）中にメチルサリチル酸誘導体17（50mg，0 .25mmol）、粉末ＫＯＨ（56mg，１mmol）を含む反応混合物は還流下で3.5時間加 熱された（図２Ｄ）。結果として生じた溶液は冷却され、１Ｍ ＨＣｌで酸性化 された。水性溶液はＥｔＯＡｃ（３×10mL）で抽出された。結合有機溶液は水、 塩水で洗浄後、乾燥（ＭｇＳＯ₄）された。溶媒は減圧下で除去して本質的に純 粋なサリチル酸誘導体18 を白色固体（38mg，82％）として与えた。 実施例10 ３−（メチルメルカプト）アセチルサリチル酸（19）の合成 １mL ＣＨ₂Ｃｌ₂中の18（46mg，0.25mmol）の溶液に０℃でドライピリジン（ 20mg，50μL，0.3mmol）を添加した。溶液は０℃で10分間撹拌の後、アセチルク ロライド（30μL以下、0.4mmol）が添加された。反応混合液は０℃で一晩撹拌の 後、溶媒は真空下で除去された。有機溶液は１Ｍ ＨＣｌ（10mL）、水（50mL） で洗浄後、乾燥（ＭｇＳＯ₄）された。溶媒は蒸発により、シリカゲルによりク ロマトグラフィーにかけられ、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（初期70：30、後に50：50 ）で溶出されて目的の生産物を白色固体（11mg、収率20％）として与えた。 実施例11 ２−フルオロ−１−メトキシメチルフェノール（21）の合成 30mLドライピリジン中に２−フルオロフェノール（20，２ｇ，17.84mmol）の 溶液に粉末状ＫＯＨ（１ｇ，17.71mmol）及びメトオキシメチルクロライド（1.8 ｇ，22.49mmol）が添加され、この反応混合物は還流下で3.5時間加熱した。反応 物は冷却され、１Ｍ ＮａＯＨ及びエチルエーテル（２×30mL）の間に分画され た。有機溶液は１Ｍ ＨＣｌ（２×20mL）、水で洗浄後、乾燥（ＭｇＳＯ₄）、 ろ過し、溶媒は真空下で除去し油性残留物を与えた。粗生産物はカラムクロマト グラフィー（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；５：95）で精製され目的の生産物を収率62 ％の青白い黄色のオイルとして与えた。 実施例12 ２−フルオロ−１−メトキシメチレンオキシメチルスルフィド（22）の合成 炎乾燥３首フラスコはアルゴン下で30mLの新鮮な希釈ＴＨＦ中の２−フルオロ −１−メトオキシメチルフェノール（21,1.07ｇ，6.4mmol）で満たされて、この 混合物は−78℃に冷却された（図２Ｅ）。ｎＢｕＬｉ（ヘキサン中の2.5Ｍ溶液 、３mL，7.25mmol）がアルゴン下で−78℃、2.5時間撹拌されたこの反応混合液 に添加された。メチルジスルフィド（0.68ｇ，7.25mmol）がその後−78℃で混合 物に添加され、その後 アセトン／ドライアイスバスが取り除かれ、反応は室温で20時間続けられた。飽 和ＮＨ₄Ｃｌ（20mL以下）が混合液に加えれれ、さらに10分間撹拌され、その後 エチルエーテルで抽出された。結合有機溶液は、塩水、水で洗浄後、乾燥（Ｍｇ ＳＯ₄）及びろ過された。溶媒は真空下で除去され、シリカゲルのフラシュクロ マトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；５：95）による精製で、黄色オイル（ 0.8ｇ，79％）を生じる粗生産物を与えた。 実施例13 ２−フルオロ−１−ヒドロキシフェニルメチルスルフィド（23）の合成 10％ＴＨＦ−Ｈ₂Ｏ（２mL）中のＭＯＭ−保護フェノール（22，0.57ｇ，2.8mm ol）及び６Ｍ ＨＣｌ（５mL以下）を含む反応混合液は60℃で５時間加熱された （図２Ｅ）。飽和ＮａＣｌが混合液に加えられ、水溶液はエチルエーテル（３× 10mL）で抽出された。結合有機溶液は、水での洗浄、乾燥（ＭｇＳＯ₄）、ろ過 され、及び溶媒は真空下で除去され黄色オイル状残留物を与えた。その生産物は シリカゲルのクロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）により精製され 、青白い黄色オイル（190mg，46％）を生じた。 実施例14 ２−アセキシ−１−フルオロフェニルメチルスルフィド（24）の合成 ＣＨ₂Ｃｌ₂（２mL）中にフェノール誘導体(23，140mg，0.9mmol)を含む溶液に ドライピリジン（74mg，0.92mmol）及び無水酢酸（74mg，0.92mmol）が添加され 、反応混合物は室温で一晩撹拌された（図２Ｅ）。溶媒は減圧下で除去され、水 で希釈された。水溶液はエチルエーテル（２×10mL）で抽出され、及びエーテル 抽出物は乾燥（ＭｇＳＯ₄）、ろ過されて、溶媒を蒸発濃縮させた。粗生産物は カラムクロマトグラフィー（10％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）により無色オイル（10 4mg，60％）として精製アセトキシ誘導体を生産した。 実施例15 ２，４−ジフルオ−１−メトオキシフェノール（26）の合成 30mLのドライピリジン２，４−ジフルオロフェノール（25，２ｇ，15.37mmol ）を含む反応混合物に、粉末ＫＯＨ（0.854ｇ，15.25mmol）及びメトオキシメチ ルクロライド（1.6ｇ，19.37mmol）が添加されて、反応混合物は還流下で3.5時 間加 熱された（図２Ｆ）。反応物は冷却され１Ｍ ＮａＯＨ及びエチルエーテル（２ ×30mL）の間に分画された。有機溶液は１Ｍ ＨＣｌ（２×20mL）、水で洗浄、 乾燥（ＭｇＳＯ₄）、ろ過されて、溶媒は真空下で除去されて油状残留物を与え た。粗生産物はカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；５：95）に より精製され、収率71％の青白い黄色オイルとして精製アセトキシ誘導体を生産 した。 実施例16 ２，４−ジフルオロ−３−トリメチルシリル−１−メトオキシメチルフェノール （27）の合成 炎乾燥３首フラスコはアルゴン下で30mLの新鮮な希釈ＴＨＦ中の２，４−ジフ ルオロ−１−メトオキシメチルフェノール（26，0.84ｇ，4.8mmol）で満たされ て、この混合物は−78℃に冷却された（図２Ｆ）。ｎＢｕＬｉ（ヘキサン中の2. 5Ｍ溶液、2.2mL，5.43mmol）がアルゴン下で−78℃、2.5時間撹拌されたこの反 応混合液に添加された。クロロトリメチルシラン（ＴＨＦ中の1.0Ｍ溶液、5.43m L，5.43mmol）がその後−78℃で深いピンク色の混合物に添加され、その後アセ トン／ドライアイスバスが取り除かれ、反応は室温で14時間続けられた。飽和Ｎ Ｈ₄Ｃｌ（20mL以下）が混合液に加えられ、さらに10分間撹拌され、その後エチ ルエーテル（３×10mL） で抽出された。結合有機溶液は、塩水、水で洗浄後、乾燥（ＭｇＳＯ₄）及びろ 過された。溶媒は真空下で除去され、シリカゲルのフラシュクロマトグラフィー （ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；５：95）による精製で、黄色オイル（0.8g，79％）を 生じる粗生産物を与えた。 実施例17 ２，４−ジフルオロ−６−メチルメルカプト−３−トリメチルシリル−１−メト オキシメチルフェノール（28）の合成 炎乾燥３首フラスコはアルゴン下で15mLの新鮮な希釈ＴＨＦ中の２，４−ジフ ルオロ−３−トリメチルシリル−１−メトオキシメチルフェノール（27，0.63ｇ ，2.56mmol）で満たされて、この混合物は−78℃に冷却された（図２Ｆ）。ｎＢ ｕＬｉ（ヘキサン中の2.5M溶液、1.16mL，2.9mmol）がアルゴン下で−78℃、2.5 時間撹拌されたこの反応混合液に添加された。メチルスルフィド（0.27ｇ，2.9m mol）がその後−78℃で混合物に添加され、その後アセトン／ドライアイスバス が取り除かれ、反応は室温で14時間続けられた。飽和ＮＨ₄Ｃｌ（10mL以下）が 混合液に加えられ、さらに10分間撹拌され、その後エチルエーテル（３×10mL） で抽出された。結合 有機溶液は、塩水、水で洗浄後、乾燥（ＭｇＳＯ₄）及びろ過された。溶媒は真 空下で除去され、シリカゲルのフラシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ヘキ サン；５：95）による精製で、黄色オイル（0.51ｇ，68％）を生じる粗生産物を 与えた。 実施例18 ２，４−ジフルオロ−６−メチルメルカプト−１−メトオキシメチルフェノール （29）の合成 10mLの新鮮な希釈ＴＨＦ中のトリメチルシリル誘導体（28，0.51ｇ，1.74mmol ）を含む反応混合液はトリフルオロエタノール（0.18ｇ，1.82mmol）及びテトラ ブチルアンモニウムフロライド（ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、1.74mL，1.74mmol）によ りアルゴン下で−78℃で処理された（図２Ｆ）。反応混合物は−78℃で20分間、 室温で30分間撹拌された。反応は水の添加により抑制され、その後ジエチルエー テル（２×15mL）で抽出された。結合有機抽出物は、水で洗浄後、乾燥（ＭｇＳ Ｏ₄）及びろ過され、溶媒は真空下で除去された。シリカゲルクロマトグラフィ ー（５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で、無色オイル（270mg，71％）として精製産 物を生じさせた。 実施例19 ２，４−ジフルオロ−２−ヒドロキシフェニルメチルスルフィド（30）の合成 10％ＴＨＦ−Ｈ₂Ｏ中にＭＯＭ−保護フェノール（29，270mg，1.22mmol）及び ６Ｍ ＨＣｌ（１mL以下）を含む反応混合液は60℃で４時間加熱された（図２Ｆ ）。反応混合物に飽和ＮａＣｌに添加され、水性溶液はジエチルエーテル（２× 15mL）で抽出された。結合有機抽出物は、水で洗浄後、乾燥（ＭｇＳＯ₄）及び ろ過され、溶媒が真空下で除去され油状残留物を与えた。生産物はフラッシュク ロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で精製され、青白い黄色オイル （110mg，53％）を生産した。 実施例20 ２−アセトキシ−３，５−ジフルオロフェニルメチルスルフィド（31）の合成 ＣＨ₂Ｃｌ₂（２mL）中のフェノール誘導体（30，110mg，O.62mmol）、ドライ ピリジン（58mg，0.64mmol）及び無水酢酸からなる反応混合物は、室温で一晩撹 拌された（図２Ｆ）。溶媒は減圧下で除去され、水で希釈された。水溶液はジエ チルエーテル（２×10mL）で抽出され、エーテル抽出物は乾燥 （ＭｇＳＯ₄）、ろ過後、溶媒を蒸発させた。粗生産物のカラムクロマトグラフ ィー（５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で精製アセトキシ誘導体を無色オイル（75mg ，56％）として与えた。 実施例21 ２−ヒドロキシフェニルアルキルスルフィドの合成 ４mLのドライＤＭＦ中に２−ヒロキシチオフェノール（32，3.96mmol）を含ん だ反応混合物をＫＨＣＯ₃（4.52mmol）及びアルキルハリド（3.96mmol）で処理 し、室温で一晩撹拌した（図２Ｇ）。反応混合物は水で希釈されて、ジエチルエ ーテル（３×20mL）で抽出された。結合有機抽出物は水（２×50mL）による洗浄 、乾燥（ＭｇＳＯ₄）、ろ過後、溶媒が真空で除去された。残留物はシリカゲル のクロマトグラフィーを行い、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン（３：97）で溶出して目的 の生産物を与えた。 ２−ヒドロキシフェニルエチルスルフィド(33)：無色オイル、収率60％ ２−ヒドロキシフェニルプロピルスルフィド(34)：無色オイル、収率77％ ２−ヒドロキシフェニル−２−メチルプロピルスルフィド(35)：無色オイル、 収率78％ ２−ヒドロキシフェニルスルフィド(36)：無色オイル、収率89％、 ２−ヒドロキシフェニルヘキシルスルフィド(37)：無色オイル、収率84％ ２−ヒドロキシフェニルヘプチルスルフィド(38)：無色オイル、収率67％ ２−ヒドロキシフェニルオクチルスルフィド(39)：無色オイル、収率77％ ２−ヒドロキシフェニルノニルスルフィド(40)：無色オイル、収率69％ ２−ヒドロキシフェニルシクロヘキシルスルフィド(41)：無色オイル、収率66 ％ ２−ヒドロキシフェニルシクロヘプチルスルフィド(42)：無色オイル、収率66 ％ ２−ヒドロキシフェニルベンジルスルフィド(43)：白色固体、収率66％ ２−ヒドロキシフェニル−２−フェネチルスルフィド(44)：無色オイル、収率 78％ ２−ヒドロキシフェニル−３−フェニルプロピルスルフィド(45)：無色オイル 、収率79％ ２−ヒドロキシフェニル−３−フェノキシプロピルスルフィド(46)：無色オイ ル、収率72％ ２−ヒドロキシフェニル−８−（メトキシカルボニル）ヘプチルスルフィド(4 7) ：無色オイル、収率53％ 実施例23 ２−ヒドロキシフェニル−８−（カルボキシ）ヘプチルスルフィド（48）の合成 ＥｔＯＡｃ：Ｈ₂Ｏ（36mL：４mL）混合物中に（47，0.5Ｇ，1.77mmol）を含ん だ反応フラスコに粉末ＫＯＨ（0.4ｇ，7.08mmol）が加えられ、この反応物は還 流下で3.5時間加熱された。溶媒を真空で除去され、残留物は１Ｍ ＨＣｌ（pH ２以下）で希釈された。水性混合物はＥｔＯＡｃ（３×20mL）抽出された。結合 有機抽出物は塩水、水による洗浄の後、乾燥（ＭｇＳＯ₄）された。溶媒は減圧 下で除去され、オイル（89％）として本質的に精製されたカルボキシル酸が与え ら れた。 実施例24 ２−ヒドロキシフェニル−２−ブトキシエチルスルフィド（66）の合成 10mLのドライＴＨＦ中に２−ブトキシエタノール（64，0.5ｇ，4.23mmol）を 含んだ炎乾燥フラスコにトリフェニルホスフィン（2.66ｇ，10.15mmol）、ドラ イピリジン（0.39ｇ，4.9mmol）及び四臭化炭素（1.4ｇ，4.23mmol）が添加され た（図２Ｈ）。室温で１時間の撹拌後、反応混合液はヘキサンで処理され、沈殿 はろ過された。ろ過液は減圧下で濃縮され、残留物は１Ｍ ＨＣｌで処理された 。水溶液はヘキサンで（３×10mL）抽出された。結合有機溶液は水による洗浄の 後、乾燥（ＭｇＳＯ₄）、ろ過され、溶媒は真空下で蒸発されオイルを与えた。¹ Ｈ ＮＭＲ分析結果はオイルが初期アルコール64及び目的の２−ブロキシエチル ブロマイド（65）の混合物であることを示し、それ以上の精製無しで次に続く反 応に使用された。１mLのドライＤＭＦ中に２−ヒドロキシチオフェノール（32， 100mg，0.8mmol）を含む反応混合液にＫＨＣＯ₃（95mg，0.95mmol）及び粗ブト キシブロマイドを添加 し、この反応混合物は室温で一晩撹拌された。反応物は水で希釈されて、エチル エーテルで（２×10mL）抽出された。結合有機溶液は水による洗浄の後、乾燥（ ＭｇＳＯ₄）、ろ過され、溶媒は真空下で蒸発されオイルを与えた。粗フェノー ルはシリカゲルのクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；２：98）で目的 のフェノール66（初期２−ヒドロキシチオフェノールに対し収率34％）を与えた 。 ２−ヒドロキシフェニル−３−エトキシプロピルスルフィド(70)：は上記と同 様な方法で収率67％で調製された（図２Ｈ）。 ２−ヒドロキシフェニル−トランス−ヘプト−２−ニルスルフィド(74)：は上 記と同様な方法で収率54％で調製された （図２Ｉ）。 ２−ヒドロキシフェニル−ヘプト−２−ニルスルフィド(82)：は上記と同様な 方法で収率92％で調製された(図２Ｉ)。 ２−ヒドロキシフェニルヘグス−２−ニルスルフィド(83)：は上記と同様な方 法で収率51％で調製された。 ２−ヒドロキシフェニルペント−２−ニルスルフィド(84)：は上記と同様な方 法で収率59％で調製された。 ２−ヒドロキシフェニルブト−２−ニルスルフィド(85)：は上記と同様な方法 で収率61％で調製された。 ２−ヒドロキシフェニルプロプ−２−ニルスルフィド(86)：は上記と同様な方 法で収率58％で調製された（図２Ｇ）。 ２−ヒドロキシチオフェノキシメチルプロピネート(95)：無色オイル、収率67 ％（図２Ｋ）。 ２−（２−ヒドロキシチオフェノキシ）プロピオン酸(96)：同様な方法で無色 オイルが収率77％で得られた（図２Ｋ）。 実施例25 ２−ヒドロキシフェニルアルキルスルフィドアセチル化の手順 １mLのＣＨ₂Ｃｌ₂中のふさわしいアレノール（2.8mmol）を含んだ反応混合液 はドライピリジン（2.85mmol）及び無水酢酸（2.85mmol）で処理され、この反応 混合物は、室温で一晩撹拌された。溶媒は減圧下で除去され、水で希釈された。 水溶液はジエチルエーテル（２×10mL）で抽出され、結合エーテル抽出物は乾燥 （ＭｇＳＯ₄）、ろ過後、溶媒は減圧下で除去された。粗生産物のシリカゲルカ ラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；５：95）で精製された。２−アセトキシフェニルエチルスルフィド(49)：は収率58％で得られた（図２ Ｇ）。 ２−アセトキシフェニルプロピルスルフィド(50)：は収率68％で得られた（図 ２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニル−２−メチルプロピルスルフィド(51)：は収率77％で 得られた（図２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニルペンチルスルフィド(52)：は収率92％で得られた（図 ２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニルヘキシルスルフィド(53)：は収率82％で得られた（図 ２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニルヘプチルスルフィド(54)：は収率67％で得られた。 ２−アセトキシフェニルオクチルスルフィド(55)：は収率66％で得られた（図 ２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニルノンニルスルフィド(56)：は収率85％で得られた（図 ２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニルシクロエキシルスルフィド(57)：は収率78％で得られ た（図２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニルシクロヘプチルスルフィド(58)：は収率64％で得られ た（図２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニルベンジルスルフィド(59)：は収率75％で得られた（図 ２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニル−２−フェニルエチルスルフィド(60)：は収率96％で 得られた。 ２−アセトキシフェニル−３−フェニルプロピルスルフィド(61)：は収率66％ で得られた（図２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニル−３−フェノキシプロピルスルフィド(62)：は収率83 ％で得られた（図２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニル−８−カルボキシヘプチルスルフィド(63)：は収率47 ％で得られた（図２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニル−２−ブトキシエチルスルフィド(67)：は収率72％で 得られた。 ２−アセトキシフェニル−３−エトキシプロピルスルフィド(71)：は収率70％ で得られた。 ２−アセトキシフェニル−トランス−ヘプト−２−ニルスルフィド(75)：は収 率62％で得られた（図２Ｇ）。 ２−アセトキシフェニル−ヘプト−２−ニルスルフィド(87)：は収率56％で得 られた。 ２−アセトキシフェニル−ヘキシ−２−ニルスルフィド(88)：は収率56％で得 られた。 ２−アセトキシフェニル−ペント−２−ニルスルフィド(89)：は収率63％で得 られた。 ２−アセトキシフェニル−ブト−２−ニルスルフィド(90)：は収率78％で得ら れた。 ２−アセトキシフェニル−プロプ−２−ニルスルフィド(91)：は収率58％で得 られた。 実施例26 化合物97 クロマトグラフィーの後に得られるオイルの¹Ｎ ＮＭＲ スペクトラム及びＦＡＢ−ＭＳはそこでアセチル化が起こらず、代わりに結晶化 が起こり収率81％で化合物85が得られたことを示した。 実施例27 酵素学 ヒツジ精嚢はOxford Biomedical Research,Inc（Oxford，MI）から購入した。 アルキドン酸はNu Chek Prep（Elysian，MN）から購入した。ヘマチン、過酸化 水素、及びグアイアコールはSigma Chemical Co．(St．Louis，MO)から購入した 。ＰＧＨＳ−１は前の記載に従って精製した。タンパク質の特異的活性は20.9（ μＭＯ２/min）/mg、及びホロ酵素の比率は13.5％であった。アポＰＧＨＳ前の 記載に従って調製した。アポ酵素は混合物の検査のためにヘマチンの付加により 再構成された。ヒトＰＧＨＳ−２（1.62μg/μｌ）はJ．Glerse，Monsanto（St ．Louis，MO）。 実施例28 シクロオキシゲナーゼ活性 酸素消費量は37℃でクラーク電極及びサーモスタットキュベットを備えたGils onモデル５／６オキシグラフ（Gilson Medical Electronics，Inc.，Middleton ，WI）を使用して測 定した。酵素アリコート（0.16μM）は500μMフェノール及び１μMヘマチンを含 んだ100mMトリス−ＨＣｌ，pH8.0に、最終容積が1.3mLになるように加えられた 。酸素の取り込みは100μMのアラキドン酸ナトリウムを添加することで開始され 、開始反応速度は酸素取り込み曲線の直線部分から決定した。 実施例29 ペルオキシダーゼ活性 分析は25℃でShimadzu UV 160Ｕを使用し、436nmでグアイアコールの酸化初期 速度を測定することで行った。酵素アリコート（0.16μM）は１mLのディスポー ザブルキュベット中の１μMヘムを含んだ100mMトリス−ＨＣｌ（pH8.0）に加え られた。反応は400μMの過酸化水素を添加することで開始された。 実施例30 酸素取り込み分析を使用したアポ及びホロＰＧＨＳ−１及びＰＧＨＳ−２のシク ロオキシゲナーゼ及びペルオキシダーゼ活性の時間依存阻害 500μMフェノールを含んだ100mMトリス−ＨＣｌバッファー、pH8.0中のアポＰ ＧＨＳ−１（2.48μｇ/μｌ）（５μM）及びアポＰＧＨＳ−２（1.62μg/μｌ） （５μM）は阻害剤により処理され、及び室温でインキュベートされた（図４） 。定期的に0.16μMのアポＰＧＨＳ−１又はアポＰＧＨＳ−２アリコートは記載 のように残存シクロオキシゲナーゼ活性又 はペルオキシダーゼ活性を測定された。同様な方法で、500μMフェノールを含ん だ100mMトリス−ＨＣｌバッファー、pH8.0中のアポＰＧＨＳ−１又はアポＰＧＨ Ｓ−２（５μM）は２当量のヘマチン（ＤＭＳＯ中の500μM貯蔵溶液）で処理さ れ、及び室温でインキュベートされた。定期的に0.16μMのアポＰＧＨＳ−１又 はアポＰＧＨＳ−２アリコートは残存シグロオキシゲナーゼ活性又はペルオキシ ダーゼ活性を測定された（図４）。 実施例31 酸素取り込み分析を使用した２−アセトキシチオアニソール（２）及び２−アセ トキシフェニルヘプチルスルフィド（54）によるホロＰＧＨＳ−２のシクロオキ シゲナーゼ活性の時間依存阻害のpHの依存：アスピリンとの比較 500μMフェノールを含んだ100mMナトリウムリン酸バッファー、pH６，７，８ 及び９中のアポＰＧＨＳ−２（1.62μｇ/μｌ）（５μM）は阻害剤（２−アセト キシチオアニソール、10μM；２−アセトキシフェニルヘプチルスルフィド、181 μM又はアスピリン、32μM）により処理され、及び室温でインキュベートされた 。定期的に0.16μMのアポＰＧＨＳ−１又はアポＰＧＨＳ−２アリコートは記載 のように残存シクロオキシゲナーゼ活性又はペルオキシダーゼ活性を測定された 。図５はアスピリンがＰＧＨＳ−２よりＰＧＨＳ−１に大きな阻害効果を与える ことを示す。図７は２−アセトキシチオアニソールがpH９でホロＰＧＨＳ−２の シグロオキシゲナーゼ 活性を大ききく阻害することを示す。 実施例32 薄層クロマトグラフィー分析を使用したヒツジＰＧＨＳ−１及びヒトＰＧＨＳ− ２の時間及び濃度依存阻害 ヒツジＰＧＨＳ−１（22nM）及びヒトＰＧＨＳ−２（88nM）のシクロオキシゲ ナーゼ活性はＴＬＣにより分析された。200μLの反応混合液は100mMトリス−Ｈ Ｃｌバッファー、pH8.0中のヘマチン再構成タンパク質、500μMフェノール、及 び［１−¹⁴Ｃ］アラキドン酸（50μM、57mCi/mmol）で構成された。時間依存阻 害分析のため、ヘマチン再構成ＰＧＨＳ−１（22nM）又はＰＧＨＳ−２（88nM） 室温で２時間、次に、０℃で１時間、ＤＭＳＯ中の様々は濃度の阻害剤とプレイ ンキュベートされ、続いて［１−¹⁴Ｃ］アラキドン酸（50μM）を37℃で30秒間 添加した。反応はジエチルエーテル／メタノール／ｌ Ｍクエン酸、pH4.0（30 ：４：１）での溶媒抽出により終了された。有機相はＴＬＣプレート（Amersham Crop．）状にスポットされた。プレートは４℃で、酢酸エチル／塩化メチレン ／氷酢酸（75：25：１）により展開された。放射能標識産物は放射活性スキャナ ー（Bioscan，Inc.，Washington，D．C．）により定量した。生産物に対するア ラキドン酸の転換はタンパク質含有量及びインクベーション時間の両方それぞれ に対して直線的であった。異なる阻害剤濃度で観察される総生産物に対するパー センテージは、ＤＭＳＯで同時間プレインキュベートされたタンパク質サンプル で 観察された総生産物のパーセンテージで割った。図８は0.1mMの化合物６がヒト ＰＧＨＳ−２を約35％阻害した。 実施例33 アポ及びホロＰＧＨＳ−２のシクロオキシゲナーゼ活性の２−アセトキシ−１− チオアニソールによる不活性化及びヒドロキシルアミンによる再活性化 500μMフェノールを含んだ100μMトリス−ＨＣｌバッファー、pH8.0、37℃中 の、アポＰＧＨＳ−２（５μM）又は２当量のヘマチンで再構成されたアポＰＧ ＨＳ−２（５μM）は２−アセトキシ−１−チオアニソール（10mM）により処理 された。定期的に0.16μMの酵素アリコートは前に記載のように残存シクロオキ シゲナーゼ活性を測定された。シグロオキシゲナーゼ活性は2.5時間で70％以上 阻害された。100mMトリス−ＨＣｌ、pH7.5中のヒドロキシルアミンヒドロクロラ イド（80mM）がインキュベーション混合液に添加され、その後0.16μMの酵素ア リコートは阻害シクロオキシゲナーゼ−２の再活性化を測定した。同様な再活性 化実験はアポＰＧＨＳ−１のシクロオキシゲナーゼ活性を阻害するＮ−アセチル イミダゾールにっいて行われ、ヒドロキシルアミンの添加の後で酵素が再生され た（図６）。 実施例34 ２−［１−¹⁴Ｃ］−アセトキシチオアニソール（¹⁴Ｃ−２）の合成 300μLのＣＨ₂Ｃｌ₂中の２−ヒドロキシチオアニソール （１，３mg，21μmol）を含んだ反応混合液はドライピリジン（2.85μL，36μmo l）で処理され、室温で５分間撹拌された。ＣＨ₂Ｃｌ₂（それぞれ200μL）が［ １−¹⁴Ｃ］−無水酢酸を含む薬ビン（２つの薬ビンに３μLの全放射能標識物質 ）（３μL，31μmol，55mCi/mmol）が加えられ、この混合物がシリンジにより反 応混合物に移された。放射能標識物質を含む薬ビンは新たな200μLのＣH₂Ｃｌ₂ により洗浄され、これらの洗浄物も同様に反応混合物に移された。反応混合物は 一晩室温で撹拌された。反応混合物はシリカゲルカラムに載せられＥｔＯＡｃ： ヘキサン（１：99）で溶出された。溶媒の極性はその後増加され（ＥｔＯＡｃ： ヘキサン；３：97）、より極性の放射能標識２−アセトチオアニソールが溶出さ れた（１mg、初期ヒドロキシアニソール基準で収率35％）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ ：ヘキサン；10：90）単一スポット（Ｒ_f＝0.625）；特異的活性55mCi/mmol。 実施例35 ２−［１−¹⁴Ｃ］−アセトキフェニルヘプト−２−ニルスルフィド（¹⁴Ｃ−79） の合成 300μLのＣH₂Ｃｌ₂中の２−ヒドロキシフェニルヘプト−２−ニルスルフィド （78，４mg，18μmol）を含んだ反応混合液は、ドライピリジン（2.4μL，30μm ol）で処理され、室温で５分間撹拌された。ＣＨ₂Ｃｌ₂（200μL×２）が［１−¹⁴ Ｃ］−無水酢酸を含む薬ビン（３μL，31μmol，55mCi/mmol）が加えられ、こ の混合物がシリンジにより反応混合物 に移された。放射能標識物質を含む薬ビンは新たな200μLのＣＨ₂Ｃｌ₂により洗 浄され、これらの洗浄物も同様に反応混合物に移された。反応混合物は一晩室温 で撹拌された。反応混合物はシリカゲルカラムに載せられＥｔＯＡｃ：ヘキサン （２：98）で溶出されて、¹⁴Ｃ−79が与えられた（１mg、初期フェノール基準で 収率10％）。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；10：90）単一スポット（Ｒ_f＝0.6 ）；特異的活性55mCi/mmol。 実施例36 ２−アセトキシ−１−チオアニソール、２−アセトキシフェニルヘプチルスルフ ィド及びアスピリンによる活性化ＲＡＷ264.7細胞の阻害 ネズミマクロファージ細胞系が翌朝30％集合になるために、一晩培養された。 一晩たったＤＭＥＭ及びウシ胎児血清は除去され、1.5％ＦＢＳ±500ng/mL Ｌ ＰＳ及び10ユニット/mLインターフェロン−γを含む２mL ＳＦ−ＤＭＥＭが37 ℃で7.5時間添加された。活性化培地は除去され、2.0mL ＳＦ−ＤＭＥＭ及び／ 又はアスピリン又は２−アセトキシフェニルヘプチルスルフィド（54）が様々な 濃度で添加された。アラキドン酸代謝は20μM ¹⁴Ｃ−ＡＡを室温で15分間加え ることにより測定した。アリコート（200μL）は最終溶液に移され、ＴＬＣプレ ートで展開した。２−アセトオキシチオアニソール（２）の場合は、８時間の活 性化の後、500μMの２が続く3.5時間加えられた。11.5時間の活性化後、20μMの ［１ −¹⁴Ｃ］アラキドン酸が細胞と20分間インキュベートされ、総生産物はＴＬＣに より決定された。 図９は化合物54がヒトホロＰＧＨＳ−２のシグロオキシゲナーゼ活性を強く阻 害し、一方、化合物38は非常にわずかな効果しか持たないことを示す。図10はヒ トホロＰＧＨＳ−２のシクロオキシゲナーゼ活性に対する化合物54の効果のpH依 存性を、pH９で最も強い阻害を見せる状態で示す。図11は８μMの化合物67がヒ トホロＰＧＨＳ−２のシクロオキシゲナーゼ活性を強く阻害し、一方、化合物71 は非常にわずかな効果しか持たないことを示す。図12は１〜16μMの化合物79が ヒトホロＰＧＨＳ−２のシクロオキシゲナーゼ活性を強く阻害し、一方、化合物 78は非常にわずかな効果しか持たないことを示す。図13は化合物２が活性化マク ロファージでヒトホロＰＧＨＳ−２のシクロオキシゲナーゼ活性を強く阻害する ことを示す。図14は化合物54が活性化マクロファージでアスピリンに比較してヒ トホロＰＧＨＳ−２のシクロオキシゲナーゼ活性を強く阻害することを示す。図 15は化合物54及び79の両方が活性化マタロファージでヒトホロＰＧＨＳ−２のシ グロオキシゲナーゼ活性を強く阻害したことを示す。 表１は化合物６，７，８，59，60，61，62，63及び93を含む２−アシルオキシ フェニルアルリル及びアリルスルフィドのＰＧＨＳ−１及びＰＧＨＳ−２に対す る時間及び濃度依存阻害を示す。表２は化合物２，49，50，51，52，53，54，55 ，56，57，58，67，71，75，79，83及び87を含む２−アシルオ キシフェニルアルリル及びアリルスルフィドのＰＧＨＳ−１及びＰＧＨＳ−２に 対する時間及び濃度依存阻害を示す。 表１ ２−アシルオキシフェニルアルキル、シクロアルキル、 オキソアルキル及びアルキルスルフィドによる ＰＧＨＳ−２及びＰＧＨＳ−１の時間及び濃度依存阻害 ^aＰＧＨＳ−２（88nM）又はＰＧＨＳ−１（22nM）を阻害剤とともに室温で ３時間インキュベーションした。シクロオキシゲナーゼ反応は¹⁴Ｃ−アラキドン 酸（50μM）をインキュベーション混合物に37℃で30秒間、加えることで開始さ れた。 ^b研究濃度範囲（１μM〜33mM）では、認識できる有意な阻害はない。 ^c対象濃度で25〜30％以下のＰＧＨＳ−１の阻害。 ^*相当するフェノール38はＰＧＨＳ−１又はＰＧＨＳ−２を阻害しない。 スルフォン93は、いずれの異性体もごくわずかに阻害するが、いかなる選択性も 示さなかった。 ^d16.5μMで75によるＰＧＨＳ−１の25％以下の阻害。 表２２−アセトオキシフェニルアルキル及びアリルスルフィドによるＰＧＨＳ−２及 びＰＧＨＳ−１の時間及び濃度依存阻害 ^aＰＧＨＳ−２（88nM）又はＰＧＨＳ−１（22nM）を阻害剤とともに室温で ３時間インキュベーションした。シクロオキシゲナーゼ反応はインキュベーショ ン混合物に¹⁴Ｃ−アルキドン酸（50μM）をインキュベーション混合物に37℃で3 0秒間加えることで開始された。 ^b相当するフェノール82はＰＧＨＳ−１又はＰＧＨＳ−２を阻害しない。 表３２−アセトオキシフェニルアルキル及びアリルスルフィドによるＰＧＨＳ−２及 びＰＧＨＳ−１の時間及び濃度依存阻害 ^aＰＧＨＳ−２（88nM）又はＰＧＨＳ−２（22nM）を阻害剤とともに室温で ３時間インキュベーションした。シクロオキシゲナーゼ反応は¹⁴Ｃ−アルキドン 酸（50μM）をインキュベーション混合物に37℃で30秒間加えることで開始され た。 ^b対象濃度でＰＧＨＳ−１は25〜30％以下の阻害。 ^c研究濃度範囲（66μM〜１mM）で認識される阻害はない。 ^*１mMで30％以下のＰＧＨＳ−１の阻害。フルオロアセトオキシチオアニソ ールアナローグ24及び31はアスピリンアナローグ19と同様にいずれの異性体にも 有意な阻害はみられない。アルリル基（化合物９−14）の長さの増加は不活性な 化合物を導いた。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 1. 次の構造式有する化合物。 ［構造式Ｉ］ ここでＲはＣＨ₃，ＣＨ₂ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₂ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃，（Ｃ Ｈ₂）₄ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₅ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₆ＣＨ₃，（ＣＨ₂）₂Ｏ（ＣＨ₂）₃Ｃ Ｈ₃，ＣＨ₂ＨＣ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃，ＣＨ₂Ｃ≡Ｃ（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃，ＣＣＨ₂ Ｃ≡Ｃ（ＣＨ₂）₂ＣＨ₃，ＣＨ₂Ｃ≡Ｃ−ＣＣＨ₂ＣＨ₃，ＣＨ₂Ｃ≡Ｃ−ＣＨ₃及び ＣＨ₂Ｃ≡ＣＨからなる群から選択される。 Ｒ’はＣＨ₃，ＣＦ₃，ＣＨ₂Ｃｌ及びＣＨ₂Ｂｒ又はそれらについての薬理的 に許容される塩又は水和物からなる群から選択される。 2. 化合物が２−アセトキシチオアニソール又はそれについての薬理的に許容さ れる塩又は水和物である請求項１の化合物。 3. 化合物が２−（トリフルオロメチルアセトキシ）チオアニソール又はそれに ついての薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 4. 化合物が２−（α−クロロアセトキシ）チオアニソー ル又はそれについての薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物 。 5. 化合物が２−（α−ブロモアセトキシ）チオアニソール又はそれについての 薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 6. 化合物が２−アセトキシフェニルベンジルスルフィド又はそれについての薬 理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 7. 化合物が２−アセトキシフェニル−２−フェニルエチルスルフィド又はそれ についての薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 8. 化合物が２−アセトキシフェニルエチルスルフィド又はそれについての薬理 的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 9. 化合物が２−アセトキシフェニルプロピルスルフィド又はそれについての薬 理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 10. 化合物が２−アセトキシフェニルブチルスルフィド又はそれについての薬 理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 11. 化合物が２−アセトキシフェニルペンチルスルフィド又はそれについての 薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 12. 化合物が２−アセトキシフェニルヘキシルスルフィド 又はそれについての薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 13. 化合物が２−アセトキシフェニルヘプチルスルフィド又はそれについての 薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 14. 化合物が２−アセトキシフェニル−２−ブトキシエチルスルフィド又はそ れについての薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 15. 化合物が２−アセトキシフェニル−２−トランス−ヘプテニルスルフィド 又はそれについての薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 16. 化合物が２−２−アセトキシフェニルヘプト−２−ニルスルフィド又はそ れについての薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 17. 化合物が２−アセトキシフェニルヘキシ−２−ニルスルフィド又はそれに ついての薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 18. 化合物が２−アセトキシフェニルペント−２−ニルスルフィド又はそれに ついての薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 19. 化合物が２−アセトキシフェニルブト−２−ニルスルフィド又はそれにつ いての薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の化合物。 20. 化合物が２−アセトキシフェニルプロプ−２−ニルス ルフィド又はそれについての薬理的に許容される塩又は水和物である請求項１の 化合物。 21. 効果的な量の請求項１の構造式（Ｉ）の化合物の哺乳類に対しての投与の 手段を含む、このような治療が必要な前記哺乳類におけるプロスタグランジンエ ンドペルオキシドシンターゼ−２（ＰＧＨＳ−２）合成の阻害の方法。 22. プロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２の阻害が浮腫、発 熱、アレルギー、神経筋痛、頭痛、ガンの痛み及び関節炎痛の予防又は治療にお いて有効である請求項21の方法。 23. 化合物が２−アセトキシチオアニソール、２−（トリフルオロメチルアセ トキシ）チオアニソール、２−（α−クロロアセトキシ）チオアニソール、２− （α−ブロモアセトキシ）チオアニソール、２−アセトキシフェニルベンジルス ルフィド、２−アセトキシフェニル−２−フェニルエチルスルフィド、２−アセ トキシフェニルエチルスルフィド、２−アセトキシフェニルプロピルスルフィド 、２−アセトキシフェニルブチルスルフィド、２−アセトキシフェニルペンチル スルフィド、２−アセトキシフェニルヘキシルスルフィド、２−アセトキシフェ ニルヘプチルスルフィド、２−アセトキシフェニル−２−ブトキシエチルスルフ ィド、２−アセトキシフェニル−２−トランス−ヘプテニルスルフィド、２−ア セトキ シフェニルヘプト−２−ニルスルフィド、２−アセトキシフェニルヘキシ−２− ニルスルフィド、２−アセトキシフェニルペント−２−ニルスルフィド、２−ア セトキシフェニルブト−２−ニルスルフィド及び２−アセトキシフェニルプロプ −２−ニルスルフィド又はそれらについての薬理的に許容される塩又は水和物か らなる群から選択される請求項11の方法。 24. 構造式（Ｉ）の化合物及び薬理的に許容される運搬体又は希釈剤を含んだ 薬剤複合物。 25. 化合物が２−アセトキシチオアニソール、２−（トリフルオロメチルアセ トキシ）チオアニソール、２−（α−クロロアセトキシ）チオアニソール、２− （α−ブロモアセトキシ）チオアニソール、２−アセトキシフェニルベンジルス ルフィド、２−アセトキシフェニル−２−フェニルエチルスルフィド、２−アセ トキシフェニルエチルスルフィド、２−アセトキシフェニルプロピルスルフィド 、２−アセトキシフェニルブチルスルフィド、２−アセトキシフェニルペンチル スルフィド、２−アセトキシフェニルヘキシルスルフィド、２−アセトキシフェ ニルヘプチルスルフィド、２−アセトキシフェニル−２−ブトキシエチルスルフ ィド、２−アセトキシフェニル−２−トランス−ヘプテニルスルフィド、２−ア セトキシフェニルヘプト−２−ニルスルフィド、２−アセトキシフェニルヘキシ −２−ニルスルフィド、２−アセトキ シフェニルペント−２−ニルスルフィド、２−アセトキシフェニルブト−２−ニ ルスルフィド及び２−アセトキシフェニルプロプ−２−ニルスルフィド又はそれ らについての薬理的に許容される塩又は水和物からなる群から選択される請求項 24の薬剤複合物。