JP2001506576A

JP2001506576A - 慢性肺炎の治療

Info

Publication number: JP2001506576A
Application number: JP53727797A
Authority: JP
Inventors: アンドリュージェイギーオ; トーマスピーケネディ
Original assignee: シャーロットメクレンブルクホスピタルオーソリティードゥーイングビジスネアズカロライナスメディカルセンター
Priority date: 1996-04-15
Filing date: 1997-04-14
Publication date: 2001-05-22
Also published as: AU2728997A; US5840277A; EP0906112A2; US6024940A; WO1997038699A3; WO1997038699A2; CA2251384A1

Abstract

(57)【要約】有効量の式（Ｉ）（式中で、Ｒはエチレンであり、Ｒ’はＣ₄〜Ｃ₁₄の直鎖状アリキル基または枝分かれのあるアルキル基であり、xは１よりも大きく、ｙは８〜１８である）で表される有効量の化合物を投与することを含む、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法および薬を提供する。この薬を、哺乳類の呼吸系に、エーロゾル化により投与するのが好ましい。また、この薬を、哺乳類の皮膚に適用することもできる。好ましくは、この薬は、緩衝生理食塩水、等張生理食塩水、通常の生理食塩水、石油を基剤とする軟膏およびＵ．Ｐ．コールドクリームから成る群から選択できる、生理的に受け入れられる担体を含む。さらに、前述の薬が抗炎症ステロイドを含む方法を提供する。さらにプロ炎症サイトカインであるＴＮＦ，ＩＬ−１，ＩＬ−６，ＩＬ−８および成長因子であるＧＭ−ＣＳＦの分泌を阻害する、皮膚の炎症疾患を治療する方法および薬を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】慢性肺炎の治療関連出願の相互参照本出願は、１９９５年３月３０日出願の米国特許出願第０８／４１３，６９９号の一部継続出願であり；この出願は１９９５年１２月１２日刊行の米国特許第５，４７４，７６０号の一部継続出願であり；この出願は、１９９４年８月３１日に出願され、現在では許可された米国特許出願第２９９，３１６号の一部継続出願であり；この出願は、１９９３年３月３０日に出願され、現在では放棄された米国特許出願第０８／０３９，７３２号の一部継続出願である。発明の背景発明の分野本発明は、アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーを、慢性の炎症に用いることに関するものである。さらに特に、本発明は、アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーを用いて、核因子カッパＢ（ＮＦ−κＢ）の活性化を低下させ、プロ炎症(pro-inflammatory)サイトカインであるＴＮＦ−アルファ（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１ベータ（ＩＬ−１β）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）および成長因子である顆粒球大食細胞コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）の分泌を阻害することに関するものである。従来技術酸化体により媒介される損傷についての論考酸素は、好気性植物および酸素にエネルギー代謝を依存している動物に生命を与える。また、酸素は、これがその安定なジオキシジェン（Ｏ₂）の状態から次の３種の部分的に還元された種：ａ）１つの電子が還元された形態である過酸化物アニオン（^・Ｏ₂ ^-）；２つの電子が還元された形態である過酸化水素（Ｈ₂Ｏ₂ ）；または致命的な３つの電子が還元された形態であるヒドロキシルラジカル（^・ＯＨ）のいずれか１つに変化すると、同一の生体に対して致命的となりうる。生物系において、Ｏ₂-およびＨ₂Ｏ₂は、酸素を補助因子として用いる酵素（オキシゲナーゼ）のホストの代謝副産物である。Ｈ₂Ｏ₂はまた、^・Ｏ₂-から、スーパーオキシドジスムターゼの酵素作用により生成する。しかし、^・ＯＨは、一般的には、^・Ｏ₂-およびＨ₂Ｏ₂が金属、例えば鉄、銅、ニッケルまたはバナジウムの遷移金属イオンと、危険な循環的酸化還元反応：において相互作用する際にのみ生成する。前述の反応は、生物系に共通の、過酸化物により駆動されるフェントン反応と呼ばれる。また、フェントン反応は、アスコルビン酸塩等の他の還元物質により、第二鉄およびＨ₂Ｏ₂の存在下で開始しうる。 ^・Ｏ₂-およびＨ₂Ｏ₂がそれぞれ生物系に有毒である一方、^・ＯＨ（およびフェリル(ferryl)中間体ＦｅＯ²⁺の交互の仮定の形態）は、不飽和膜脂質を酸化することができる高度に反応性の種であり、細胞タンパク質を損傷し、ＤＮＡにおいて突然変異鎖破壊を生じる。通常の条件下で部分的に還元されたＯ₂種による損傷を防止するために、細胞には、抗酸化剤酵素（スーパーオキシドジスムターゼ、カタラーゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ）および抗酸化剤分子（グルタチオン、α−トコフェロール、β−カロテン）の精巧なシステムが伴っている。しかし、部分的に還元されたＯ₂種の生成が、抗酸化剤防御の該Ｏ₂種を含む能力を超えると、酸化体損傷が生じる。ますます多数の哺乳類の病気の本質が、現在では、部分的に還元されたＯ₂種の過剰な生成に関連すると考えられ、これには、リパーフュージョン(reperfusi on)損傷症候群である心筋梗塞および発作、成人呼吸窮迫症候群、肺の酸素毒性、アスベストによる肺の損傷、パーキンソン病、皮膚の熱性熱傷および日焼け、非ステロイド系抗炎症薬剤による胃腸管に対する損傷および気道の病気、例えば慢性気管支炎、喘息およびのう胞性線維症が含まれる（B．HalliwellおよびJ.M. C．Gutteridge．Methods in Enzymology（1990）186：第１〜85頁の第60頁の表 IV参照）。これらの容態の治療は、部分的に還元されたＯ₂種の酵素生成を防止する計画および生物系および化学系における酸化剤−抗酸化剤のバランスを回復する外来性抗酸化剤化合物の導入にますます関連深くなっている。さらに最近では、以下に概説するように、これらの容態の多くにおける炎症の治療は、これらの容態の病原論において重要であるプロ炎症サイトカインの遺伝子発現を媒介する転写因子の活性化を中断することを目的としている。転写因子およびサイトカインについての論考転写因子は、遺伝子の調節配列に結合し、遺伝子転写の速度を上昇させるかまたは低下させる、細胞タンパク質である。遺伝子転写の速度に影響を与えることにより、転写因子は、健康および病気の間の細胞の機能の調節において、臨界的に重要な作用を奏する。病気における最も重要な転写因子の中には、プロ炎症サイトカインのための遺伝子の発現を調節するものがある。これらのサイトカインは、他の細胞の挙動に大きく影響する、分泌された細胞タンパク質である。例えば、サイトカインＴＮＦ−αは、腫瘍または慢性炎症を有する患者において体重の損失を生じさせ、細胞死を生じさせ、これは、敗血症性ショックの重要なメディエイタであると考えられている。サイトカインＩＬ−１βは、熱を媒介し、ＴＮＦの特性の多くを共有する。サイトカインＩＬ−８（およびこれに密接に関連するもの、例えばＲＡＮＴＥＳ）は、炎症細胞、例えば好中球の補充を助ける有力な走化性信号(chemotactic signal)である。サイトカインＧＭ−ＣＳＦは、骨髄の信号となって、一層多くの炎症細胞を生じさせ、一旦生成した炎症細胞を活性化させ、炎症細胞の生存を延長させる。これらのサイトカインは、他のサイトカインの中でも、のう胞性線維症、慢性気管支炎、喘息およびウイルス感染症等の炎症病気の病理発生を媒介するのに重要な作用を奏する（T.L．Bonfield等、“Inflammatory cytokines in cystic fi brosis lungs”.American Journal of Respiratory and Critical Care Medicin e （1996）In Press;N.G．McElvaney等、“Modulation of airway inflammation in cystic fibrosis．In vivo suppression of interleukin-8 levels on the r espiratory epithelial surface by aetosolization of recombinant secretory leukoprotease inhibitor”．Journal of Clinical Investigation(1992)90:第 1296〜1301頁；K.D．Pfeffer等、”Expression and regulation of tumor necro s is factor in macrophages from cystic fibrosis patients”．American Jou rnal of Respiratory ，Cell and Molecular Biology （1993）9:第511〜519頁；G ．WilliamsおよびB.P．Giroir．”Regulation of cytokine gene expression:Tu mor necrosis factor，interleukin-1，and the emerging biology of cytokine receptors”．New Horizons（1995）3:第276〜287頁;C.A．Dinarello．”Role of interleukin-1 and tumor necrosis factor in systemic responses to in f ection and inflammation”．In Inflammation:Basic Principles and Clinical Correlates ，第２編、J.I．Gallin、I.M．GoldsteinおよびR.Snyderman編、Rav en Press，Ltd.，米国ニューヨーク(1992)第211〜232頁;W.C．Greene、“The in terleukins”．In Inflammation:Basic Principles and Clinical Correlates ，第２編、J.I．Gallin、I.M．GoldsteinおよびR.Snyderman編、Raven Press，Ltd .，米国ニューヨーク(1992)第233〜245頁;M．Baggiolini等、”interleukin-8 a nd related chemotactic cytokines”．In Inflammation:Basic Principles and Clinical Correlates ，第２編、J.I．Gallin、I.M．Goldste inおよびR.Snyder man編、Raven Press，Ltd.，米国ニューヨーク(1992)第247〜263頁;D.W．Golde およびG.C．Baldwin．”Myeloid growth factors”．In Inflammation:Basic Pr inciples and Clinical Correlates ，第２編、J.I．Gallin、I.M．GoldsteinおよびR.Snyderman編、RavenPress，Ltd.，米国ニューヨーク(1992)第291〜301頁; R.J．HorwitzおよびW.W．Busse．”Inflammation anc asthma”．Clinics in Ch est Medicine （1995）16:第583〜602頁）。これらのサイトカインは、これらの発現を、転写因子である核因子カッパ−Ｂ（ＮＦ−κＢ）、即ち炎症事象を媒介する特に重要な転写因子により、共有する（U．Siebenlist、G．GranzusoおよびR．Brown．”Structure，regulation and function of NF-κB”．Annual Review of Cell Biology(1994)10:第405〜455頁）。ＮＦ−κＢはまた、ケモカイン（chemokines）例えばＲＡＮＴＥＳ（U．Sie benlist、G．GranzusoおよびR．Brown．”Structure，regulation and function of NF-κB”．Annual Review of Cell Biology（1994）10:第405〜455頁）、および誘導可能な酸化窒素シンターゼ（ｉＮＯＳ）（P.J．Nelson等、“Genomic organisation and transcriptional regulation of the RANTES chemokine gene ”．Journal of Immunology（1993）151:第2601〜2612頁）の重要な転写レギュレータであり、この酵素は、酸化窒素（ＮＯ^・）、即ち敗血症性ショックの発生病理の一部として生成する臨界的に重要な酸化体化学物質を生成する。ＮＦ−κ Ｂは：阻害タンパク質ＩκＢと複合した不活性形態で細胞質中に存在する。未だ完全には特徴づけされていない多数の事象は、ＩκＢを、ＮＦ−κＢから細胞質中に解離させる。次に、遊離のＮＦ−κＢは、核中に局在し、ここでこれは、標的遺伝子のプロモーター領域中の特異的なκＢ認識部位に結合する。ＮＦ−κＢは、サイトカイン自体が含まれる多数の刺激により、およびリポ多糖（ＬＰＳ）により：活性化される（U．Siebenlist、G．GranzusoおよびR．Brown．“Struct ure，regulation and function of NF-κB”．Annual Review of Cell Biology （1994）10：第405〜455頁）。ＮＦ−κＢはまた、過酸化水素等の酸化体により活性化され（M．Meyer、R．SchreckおよびP.A．Baeverie．“H₂O₂ and antioxid ants hav eopposite effects on the activation of NF-κB and AP-1 in intac t cells:AP-1 as secondary antioxidant response factor”．EMBO Journal（1 993）12:第2005〜2015頁）、このことは、ＮＦ−κＢが、酸化体ストレスに応答性の転写因子でありうることを示唆している。逆に、ＮＦ−κＢ活性化の最も有力な阻害剤のうちのいくつかは、抗酸化剤として作用しうる化合物である。いくつかであるが、ほとんどではない抗酸化剤は、ＮＦ−κＢの活性化を、ＬＰＳにより防止し、炎症サイトカインに対応する伝令ＲＮＡの増加を防止し、ＬＰＳ注入に続く循環におけるＴＮＦおよびＩＬ−１のレベルを低下させる（E.M．Eugui 等、”Some antioxidants inhibit，in a coordinate fashion，the production of tumor necrosis factor α，IL-1β and IL-6 by human peripheral blood mononuclear cells”．International Journal of Immunology（1993）6:第409 〜422頁;Ｒ．Schreck等、”Dithiocarbamates as potent inhibitors of nuclea r factorκB activation in intact cells”．Journal of Experimental Medici ne （1992）175:第1181〜1194頁）。しかし、ＮＦ−κＢ活性化を阻害すると知られている少数の抗酸化剤は、これらを、ＮＦ−κＢの活性化を防止しないこれらの抗酸化剤と区別する共通の構造的類似性を共有しておらず（Eugui、上記参照）、当業者が、いずれの抗酸化剤化合物が、ＮＦ−κＢの活性化を、病気における炎症事象を緩和する計画として好ましく低下させ、および低下させないかを予測するのを妨げている。ＮＦ−κＢの活性化を阻害することが知られている他の群の化合物は、抗炎症ステロイドである。ステロイドは、細胞質中で、グリココルチコイドレセプター（ＧＲ）と呼ばれる細胞内タンパク質と混合することにより、作用する。前に：ステロイドの抗炎症作用は、専ら、ＧＲ−ステロイド複合体の核への通過の結果として生じ、ここでこの複合体は、グリココルチコイド応答性要素（ＧＲＥｓ）と呼ばれる調節遺伝子領域に結合し、これに影響する、と考えられている。しかし、最近、抗炎症性ステロイド活性の主要な機構は、ＮＦ−κＢの阻害であることが示されている(I.M．Adcock等、”Effects of glucocorticoids on transc ription factor activation in human peripheral blood mononuclear cells”.American Journal of Physiology (1995)268(Cell Physiology 37):C331-C338)。Ｇ−ステロイド複合体は、ＮＦ−κＢの活性化を、細胞質中の遊離のＮＦ−κＢにＲ直接相互作用して、ＮＦ−κＢが核に転位するのを防止することにより、防止する（A．RayおよびK.E．Prefontaine．”Physical association and functio nal antagonism between the p65 subunit of transcription factor NF−κB and the glucocorticoid receptor”．Proceedings of the National Academy o f Sciences ，USA （1994）91:第752〜756頁）。しかし、ＧＲ−ステロイド複合体は：ＮＦ−κＢの阻害を、相互の抑制により達成する。細胞質中の遊離のＮＦ− κＢと結合することにより、これはまた、核への転位を防止されて、他の抗炎症事象をアップレギュレート(up-regulate)する。実際、相互の抑制は、重症の喘息患者におけるステロイド耐性の現象の一部を説明すると考えられている。喘息発作中に気道中に分泌されるＩＬ−１，ＩＬ−６，ＴＮＦおよび他のプロ炎症サイトカインは、ＮＦ−κＢの細胞の活性化を高め、ＧＲ−ステロイド複合体に結合する一層多くのＮＦ−ｋＢサブユニットを提供し、核に転位するのに有用なＧＲ−ステロイド複合体の量を低下させる（P.J．Barnes、A.P．GreeningおよびG. K．Crompton．”Glucocorticoid resistance in asthma”．American Journal o f Respiratory and Critical Care Medicine （1995）152:S125-S142）。チロキサポールを含むアルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーについての論考抗酸化剤は、安定な化学形態に容易に酸化されうる化合物である。抗酸化剤は、化学系および生物系を、これら自体の酸化を犠牲にして、臨界的に重要な化学分子および生体分子の酸化を優先させることにより、保護することができる。すべての酸化可能な化合物が、抗酸化機能を発揮することができるとは限らない。化学系および生物系を酸化体から好都合に保護するために、抗酸化剤は、保護しようとする化学分子または生体分子よりも高い、酸化体に対する反応性を有する必要がある。所望の化学系および生物系を酸化から保護するために、抗酸化剤が、それ自体を、保護されるべき分子に隣接して分割することも必要である。例えば：血漿、エンドソーム膜または核膜の脂質二重層内に保護されるべき分子は、少なくとも部分的に親油性構造を有する抗酸化剤により最良に保護され、従ってこれを、酸化から保護することが必要である分子に隣接する、膜の脂質部分または該部分付近に分割する。本発明者等は、最近、従来知られている群の薬物であるアルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーが、哺乳類の病気の治療において有用な効力のある抗酸化剤であることを示した（共にGhio ，KennedyおよびPiantadosiによる、１９９５年１２月１２日刊行の米国特許第５，４７４，７６０号明細書および１９９３年３月３０日出願の米国特許出願第０８／０３９，７３２号明細書）。アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーは、界面活性洗浄剤および湿潤剤として、市場で用いられている（Bock およびRaineyによる米国特許第２，４５４，５４１号明細書）。この群で最良に知られているのは、チロキサポール、即ちホルムアルデヒドおよびオキシランを含む４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）フェノールのポリマーである。しかし、この群中の、チロキサポールの特性を共有する他の化合物が、業界においてよく知られている（J.W．Cornforth 等、”Antituberculous effect of certain surface-active polyoxyethylene e thers in mice”．Nature（1951）168:第150〜153頁）。チロキサポールは、比較的毒性が低く、他の洗浄剤が溶血させる濃度の１０００倍の濃度において、赤血球を溶血させない（H.N．Glassman.”Hemolytic acti v ity of some nonionic surface-active agents”．Science （1950）111:第688〜 689頁）。チロキサポールは、３０年を超える期間にわたり、ヒトの薬理配合物において用いられている（M.L．Tainter等、”Alevaire as a mucolytic agent ”．New England Journal of Medicine（1955）253:第764〜767頁）。例えば、２％の重炭酸ナトリウムおよび５％のグリセリンと共に、０．１２５％のSUPERI NONE（商標）（チロキサポールの銘柄）を含む、Winthrop Laboratories(Sterli ng Drug社の事業部）およびBreon Laboratories(Sterling Drug社の補助的機関）により、ALEVAIRE（商標）の商品名で販売されている組成物が、約３０年間、病気および疾患、例えば慢性気管支炎、クループ、百日咳およびポリオを患っている患者における粘液の分泌を治療するために、販売されている。（例えば、Br eo Inhalation”（１９６１年１１月）の製品小冊子参照。）しかし、１９８１年１２月に、ALEVAIRE（商標）は、Food and Drug Administ rationにより、病気および疾患、例えば慢性気管支炎、クループ、百日咳およびポリオを患っている患者における粘液の分泌を治療する効力に欠けるとして、回収された。その理由は、ALEVAIRE（商標）中のチロキサポールが、単なる希釈による分泌物の希釈における水の効果以外の、病気、例えば慢性気管支炎からの肺中の分泌物に対して何らかの効果があるとの根拠がないこと、および製造者の参考文献中の解説が、臨床的印象に基づいており、適切な制御を反映していない、ことが見いだされたからである。（１９９４年５月２７日付の、本出願の共同発明者の１人であるThomas Kennedy博士への、Carolann W．Hooton女史、Chief ，Freedom of Information Office，Center for Drug Evaluation and Research ，Department of Health & Human Services，Public Health Service，Food and Drug Administration，米国メリーランド州ロックビルからの手紙を参照）。驚異的なことに、本発明者等は、チロキサポールに代表される群のアルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーが、ＮＦ−κＢの活性化に対する有力な阻害剤であり、これにより、プロ炎症サイトカインの細胞での生成を防止する、ことを見いだした。背景の論考の概要多数の病気における炎症は、転写因子であるＮＦ−κＢの活性化により媒介され、これが次にプロ炎症サイトカイン、例えばＴＮＦ，ＩＬ−１，ＩＬ−６，ＩＬ−８および成長因子であるＧＭ−ＣＳＦの細胞での生成を増加させ、臨界的に重要な細胞酵素、例えば誘導可能な酸化窒素シンターゼ（ｉＮＯＳ）の増加を生じる。ＮＦ−κＢの活性化およびその後のサイトカインの分泌を防止するのに有用な現在の治療は、抗炎症グルココルチコイドである。最近、いくつかであるが、ほとんどではない抗酸化剤もまた、ＮＦ−κＢを阻害することが見いだされた。抗酸化剤特性を有する多数の化合物を合成することは、理論的に可能である。しかし、ＮＦ−κＢの活性化を防止することが示されている少数の薬剤の中で、予測可能な構造的類似性はない。従って、ある化合物が抗酸化剤活性を示すという例証によっては、自発的に、同一の化合物もまた、プロ炎症サイトカインのＮＦ−κＢの活性化および分泌を阻害することは予測されない。また、抗酸化剤を生物系における治療薬として用いることを制限する因子は、多くの抗酸化剤化合物自体の固有の毒性である。同様に、抗炎症コルトステロイドは、ＮＦ−κＢの有力な阻害剤であるが、これらのこのような使用は、コルチコステロイドのよく知られている副作用により、厳しく限定され、この副作用には、グルコース不耐性、高血圧、骨吸収、重量増加および白内障が含まれる。従って、主要な利点は、医療用薬理学的調製物において共通して用いられ、かつ無毒性である成分の群が、有力な抗酸化剤であるのみならず、ＮＦ−κＢの活性化に対する有力な阻害剤であることを見いだすことである。このような化合物を、抗酸化剤が価値があると予測されうる病気用の治療薬として用いることができるのみならず、これらの化合物を、これらの化合物自体が生物系に対して毒性を生じずに、ＮＦ−κＢにより媒介された炎症の容態用の治療薬として用いることができる。発明の要約本発明の目的は、部分的に還元されたＯ₂種により生じる酸化体化学反応を阻害する方法を提供することにある。本発明の他の目的は、部分的に還元されたＯ₂種による損傷に対して哺乳類組織を保護する方法を提供することにある。本発明の他の目的は、ＨＯＣｌ／ＯＣｌ（本明細書中では利便のためにＨＯＣｌとも記載する）による気道損傷からの保護のための方法および薬を提供することにある。本発明の他の目的は、部分的に還元されたＯ₂種により生じる酸化体化学反応を、治療用薬剤を用いたエーロゾル治療により阻害する方法を提供することにある。本発明の他の目的は、部分的に還元されたＯ₂種により生じる酸化体化学反応を、治療用薬剤を皮膚に局所的に適用することにより阻害する方法を提供することにある。本発明の他の目的は、転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する（従ってこの調節細胞タンパク質により制御される遺伝子を活性化することによりひき起こされるプロ炎症細胞の事象を緩和する）ための方法および薬を提供することにある。本発明の他の目的は、サイトカインであるＴＮＦ、ＩＬ−１、ＩＬ−６およびＩＬ−８並びに成長因子であるＧＭ−ＣＳＦを阻害するための方法および薬を提供することにある。本発明の他の目的は、喘息および他の病気におけるステロイド耐性を、転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を遮断し、これによりグルココルチコイドと受容体との複合体の結合および相互の抑制を、細胞質中に存在する活性ＮＦ−κＢにより防止することにより防止する方法および薬を提供することにある。本発明の利点は、治療用薬剤が、生物系に対して低い毒物学的効力を有する毒物学的に特徴づけられた群の化合物から生成する、という点である。本発明のこれらの目的および原理に従って、次のことが見いだされている；アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマー、例えばチロキサポールは、転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害するための治療用薬剤として、およびサイトカインであるＴＮＦ、ＩＬ−１、ＩＬ−６およびＩＬ−８並びに成長因子であるＧＭ−ＣＳＦの細胞での分泌の阻害剤として、有用である。薬剤の投与は、米国特許第５，４７４，７６０号明細書に記載したのと同一とすることができる。本発明は、部分的に還元されたＯ₂の化学系および生物系における損傷の影響を阻害するための、治療薬として有効量の次式：（式中で、Ｒはエチレンであり、Ｒ’はＣ₄〜Ｃ₁₄の直鎖状アルキル基または枝分れのあるアルキル基であり、ｘは１より大きく、ｙは２〜１８である）で表されるアルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーを含み、哺乳類において酸化体種により生じる酸化体化学反応を阻害し、これにより哺乳類の病気の本質を治療するのに有効な薬を提供する。また、アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーは、これを脂質膜中に配置する構造の疎水性部分、およびこれが細胞の外部の環境またはサイトゾルの区画と相互作用することを可能にする構造の親水性部分を有するために、有効であると考えられている。また、本発明は、哺乳類にチロキサポールおよび関連するアルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーの中の治療効果を施与することを含む方法および薬を提供する。本発明の１つの実施態様において、薬を呼吸系に直接点滴注入し、エーロゾル化により投与する。この実施態様において、薬は、生理的に緩衝された生理食塩水、等張性生理食塩水、および通常の生理食塩水並びに追加の治療に有効な量のセチルアルコールから成る群から選択することができる、生理学的に受け入れられる担体を含むのが好ましい。アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーと担体との混合物のｐＨは、６．５より大きいのが好ましいが、７．４に等しいかまたは７．４より小さい。本発明の他の実施態様において、この薬を皮膚に局所的に適用する。この実施態様において、薬は、市場で入手できるワセリンを基剤とする軟膏またはＵ．Ｓ．Ｐ．コールドクリームから成る群から選択された生理的担体を含むのが好ましい。図面の簡単な説明以下の詳細な説明の参照は、図面と共に、本発明を一層十分に理解する助けとなる。図面において：図１は、サリチル酸塩の水酸化として測定したフェントン反応による^・ＯＨの発生に対するチロキサポールの阻害効果を示すグラフであり；図２は、糖である２−デオキシリボースの酸化により測定したフェントン反応による^・ＯＨの発生に対するチロキサポールの阻害効果を示すグラフであり；図３は、１００％酸素に曝し、通常の生理食塩水、チロキサポール、およびチロキサポールとセチルアルコールとの混合物で処理したラットにおける肺の湿潤／乾燥重量比を示すものであり；図４は、１００％酸素に曝し、通常の生理食塩水、チロキサポール、およびチロキサポールとセチルアルコールとの混合物で処理したラットにおける胸膜の流体の蓄積を示すものであり；図５Ａは、タンパク質濃度の上昇により示すラットにおけるＨＯＣｌにより媒介された肺の損傷に対するチロキサポールの効果を示すものであり；図５Ｂは、好中球の百分率の増加により示すラットにおけるＨＯＣｌにより媒介され肺の損傷に対するチロキサポールの効果を示すものであり；図６は、転写因子であるＮＦ−κＢのＩＬ−１およびＨ₂Ｏ₂による活性化並びにこの活性化のチロキサポールによる阻害を示すものであり；図７は、チロキサポールで処理した、および処理していない、刺激していないヒトの単球によるＩＬ−８の基線量分泌を示すものであり；図８Ａは、チロキサポールで処理した、および処理していないＴＮＦ−αのヒト単球分泌を示すものであり；図８Ｂは、チロキサポールで処理した、および処理していないＩＬ−１βのヒト単球分泌を示すものであり；図８Ｃは、チロキサポールで処理した、および処理していないＩＬ−６のヒト単球分泌を示すものであり；図８Ｄは、チロキサポールで処理した、および処理していないＩＬ−８のヒト単球分泌を示すものであり；図８Ｆは、チロキサポールで処理した、および処理していないＧＭ−ＣＳＦのヒト単球分泌を示すものである。発明の詳細な説明アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーは、一般的に、米国特許第２，４５４，５４１号明細書に記載されたように、アルキルアリールアルコールをホルムアルデヒドと縮合させることにより、合成することができる。同出願の開示の内容を参考のために本明細書中に加入する。本発明は、部分的に還元されたＯ₂の化学系および生物系における損傷の影響を阻害するための、治療薬として有効量の次式：（式中で、Ｒはエチレンであり、Ｒ’はＣ₄〜Ｃ₁₄の直鎖状アルキル基または枝分かれのあるアルキル基であり、ｘは１より大きく、ｙは2〜18である）で表されるアルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーを含み、哺乳類において酸化体種により生じる酸化体化学反応を阻害し、これにより哺乳類の病気の本質を治療するのに有効な薬を提供する。この特許明細書中に開示されたアルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーは、本発明において作用する必要がある。若干の特定のアルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーを、前記したようにして合成することができる（J.W.Cornforth等、“Antituberculous effec t of certain surface-active polyoxyethylene ethers in mice”．Nature（19 51）168:第１５０〜１５３頁）。この群の基本型の化合物であるチロキサポールは、米国ニューヨーク州１２１４４レンセレアー３３リバーサイドアヴェニュー所在のＮｙｃｏｍｅｄＩｎｃ．から、薬として受け入れられる純度で好都合に購入することができる。転写因子であるＮＦ−κＢの活性化およびサイトカインであるＴＮＦ−α，ＩＬ−１β，ＩＬ−６，ＩＬ−８および成長因子であるＧＭ−ＣＳＦの生産を、アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマー、特にチロキサポールを用いて阻害するための、患者の治療は、本質的に米国特許第５，４７４，７６０号明細書および米国特許出願第０８／０３９，７３２号明細書に記載されている施与と同一である。さらに特に、部分的に還元されたＯ₂種の過剰生成に関連する哺乳類の呼吸器の容態を治療するため、および転写因子であるＮＦ−κＢの活性化およびサイトカインであるＴＮＦ−α，ＩＬ−１β，ＩＬ−６，ＩＬ−８および成長因子であるＧＭ−ＣＳＦの生成を阻害するために、アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーを、注射用に無菌の０．９％ＮａＣｌ溶液に溶解し、ＮａＯＨまたはＨＣｌを加えることにより、ｐＨを約７．０に調整する。非重合アルキルアルコールまたは非重合アリールアルコール、例えばセチルアルコール（ヘキサデカノール）を、チロキサポールの重量の１倍〜１．５倍に相当する量で加えて、酸化体損傷に対する保護における混合物の効果を高めることができる。次にこの混合物を肺に、呼吸系に直接点滴注入することにより投与する。また、この混合物を、５ミクロン未満の質量中央径を有する呼吸可能な粒子を生成する、臨床的に有用である正圧により駆動される噴霧器を用いるエーロゾル化により投与することができる。例えば、チロキサポールの０．１２５％〜０．５％溶液を、無菌の０．９％ＮａＣｌ溶液およびダブルガラス蒸留（double glass distilled）脱イオン水中に調製して、この溶液を呼吸性の分泌に対して等張とする。ｐＨを約７．０に調整して、極端な酸性またはアルカリ性による気管支痙攣を防止する。この混合物を：０．２２ミクロンのミリポア(Millipore)フィルターを通して真空濾過することにより減菌し、各々３．３ｍｌを、アルミニウムクリンプオン（crimp-on）「フリップテア(flip-tear)」シールを用いて固定したゴム栓を有する５ｍｌの単位用量ガラスビン中に封入する。製品をさらに減菌するために、単位用量ビンを、最後に１２〜１４分間１２５℃で加圧減菌する。０．５％の濃度のグリセロールを、随意に前述の混合物に加えて、エーロゾル化中の液体粒子の大きさを安定にすることができる。療法の有効性を高めるために、治療有効量の普通に入手できる抗炎症ステロイド、例えばメチルプレドニゾロン（１〜５ｍｇ）、トリアムシノロン（１〜５ｍｇ）、ジプロピオン酸ベクロメタゾン（１〜４ｍｇ）、フルニソリド（２００〜４００μｇ）またはデキサメタゾン（２００〜４００μｇ、デキサメタゾンまたはその水溶性同族体であるデキサメタゾンリン酸ナトリウム）を、配合物に加えることができる。チロキサポールの有効であるべきステロイドに対する量は、いずれのステロイドを用いるかによって変わる。例えば、５ｍｇのチロキサポール対２５ｍｇのメチルプレドニゾロンの比率、５ｍｇのチロキサポール対２５ｍｇのトリアムシノロンの比率、６ｍｇのチロキサポール対２５ｍｇのジプロピオン酸ベクロメタゾンの比率、１２５ｍｇのチロキサポール対２５０ｍｇのフルニソリドの比率、または１２５ｍｇのチロキサポール対２５０ｍｇのデキサメタゾンの比率が好ましい。アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーと抗炎症ステロイドとを混合すると、喘息または他の病気におけるステロイド耐性を低下させる手段が得られ、これにより、ステロイドの有効性が高まる。このことを達成するには、アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーの添加に加えて、転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を遮断し、これによりステロイドと受容体との複合体の、細胞質中に存在する活性ＮＦ−κＢによる結合およびこれによる相互の抑制を防止する。混合された配合物の追加の利点は、界面活性剤としてのアルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーが、水不溶性抗炎症ステロイド、例えばトリアムシノロン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、フルニソリドまたはデキサメタゾンの可溶化を助け、これにより、気道へのこれらの有効な分布を促進する、ことである肺および気管支気道への有効用量の治療薬の投与のために、３ｍｌの無菌のチロキサポール溶液を、エーロゾルとして、４〜１２時間おきに、臨床的に有用な正圧駆動噴霧器（アコーン(Acorn)またはデビルビス(deVilbiss)を用いて吸入させる。あるいはまた、この混合物を、機械的通気の呼吸デリバリー回路(respira tory delivery circuit)中に噴霧することができる。ベータ交感神経性アゴニスト気管支拡張薬（例えば１．２５〜２．５ｍｇのアルブテロール）をチロキサポール溶液と混合し、一緒に噴霧して、チロキサポールまたはチロキサポール−ステロイド溶液自体により生じうるすべての一過性の気管支痙攣を防止することができる。アトロピンの第四アンモニウム誘導体、例えばイプラトロピウム（５００μｇ）またはグリコピロレート（２００〜１０００μｇ）もまた、チロキサポール溶液に、同一の目的のための気管支拡張薬として加えることができる。鼻の気道への有効用量の治療薬の投与のために、無菌のチロキサポール溶液または前述の抗炎症ステロイドを含むチロキサポール溶液を、市場で入手できる１０ｍｌのスクイズボトル(squeeze bottle)または微細なミストを発生することができる同様の装置中に入れる。鼻炎、副鼻腔炎または他の炎症を緩和するために、この調剤からの１〜４回のスプレーを、各外鼻腔中に、１日２〜４回吸入させる。日焼け、乾癖または他の皮膚症等の皮膚の炎症疾患を治療するために、チロキサポール等のアルキルアリールポリエーテルアルコール、またはチロキサポールおよびヒドロコルチゾン、トリアムシノロンまたはフルニソリド等の抗炎症ステロイドを用いて、アクアホア(Aquaphor)（Beiersdord Inc，米国コネクティカット州ノーウォーク所在）等の市場で入手できるワセリンを基剤とする軟膏中に、ベースビヒクルとして白色ワセリンまたはＵ．Ｓ．Ｐ．コールドクリームを用いて、０．５〜５％の混合物（ｗ／ｗ）を製造する。この混合物を、冒された皮膚の領域に、毎日３〜４回軽くすり込む。本発明をさらに理解するのを容易にするために、次の実施例で、主に本発明のいくつかの一層特定的な詳細を例示する。実施例Ｉは、化学系における^・ＯＨスカベンジャーとしてのアルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーの有効な活性を論証する。実施例IIは、アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーを用いて、１００％酸素に曝したことによる哺乳類の肺の損傷を防止する治療的利点を論証する。実施例IIIは、アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーの、化学系におけるＨＯＣｌのスカベンジャーとしての有効な活性を論証する。実施例IVは、転写因子であるＮＦ−κＢの活性化の阻害を論証する。実施例Ｖは、サイトカインおよびＧＭ−ＣＳＦの生成の抑制を論証する。実施例Ｉフェントン反応により生成した酸化体の阻害第１の化学系を用いて、酸化体の標的分子としてサリチル酸塩を用いて、アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーの抗酸化剤活性を試験した。ヒドロキシルラジカルは、サリチル酸（２−ヒドロキシ安息香酸）と反応して、２種のジヒドロキシ安息香酸生成物、即ち２，３−ジヒドロキシ安息香酸および２，５−ジヒドロキシ安息香酸を生成する。これらのヒドロキシル化された生成物は、^・ＯＨの生成の証拠を提供する（R.A．Floyd等、Journal of Biochemical and Biophysical Methods (1984)10：第221〜235頁；R.A．floyd等、Journal of Free Radicals in Biology & Medicine (1986)2：第13〜18頁）。２，３−ジヒドロキシ安息香酸および２，５−ジヒドロキシ安息香酸の検出は：高速液体クロマトグラフィーを用いて、電気化学的検出により実施した。１０ μＭのＦｅＣｌ₃、１ｍＭのＨ₂Ｏ₂、１．０μＭのアスコルビン酸塩および１０．０μＭのサリチル酸の懸濁液を用いて、^・ＯＨを発生させ、検出した。１．０ｍｌの通常の生理食塩水またはチロキサポールのいずれか（最終濃度は０．０〜１０ｍｇ／ｍｌ）を加えた。反応混合物を４５℃で３０分間温置し、１２００ｇで１０分間遠心分離した。上清液を、０．２２μＭのマイクロフュージ管フィルター(microfuge tubefilter)（ＰＧＣサイエンティフィックＮｏ．３５２−１１８）により、１５０００ｇで遠心分離した（ベックマン・マイクロフュージ(Bec kman Microfuge)Ｅ）。溶出液の１００μＬの試料を、Ｃ１８ＲＰＨＰＬＣカラム（２５０ｍｍ×４．７ｍｍ、ベックマンＮｏ．２３５３２９）上に注入した。サリチル酸の水酸化生成物を、−０．４０ＶＤＣの還元電位に設定した検出装置を備えたクーロケム（Coulochem）電気化学検出装置（ＥＳＡモデル５１００Ａ）を用いて定量した。ガードセル(guard cell)（スクリーンとして用いる）を、＋０．４０ＶＤＣの酸化電位に設定した。測定を２つ１組で実施した。図１に、チロキサポールを反応混合物に加えると、^・ＯＨの生成が、濃度に依存する様式で阻害された、ことを示す。第２の化学系を用いて、酸化体の標的分子として２−デオキシリボースを用いて、アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーの抗酸化剤活性を試験した。このペントース糖は、酸化体と反応して、生成物の混合物を生成する。チオバルビツール酸（ＴＢＡ）と共に低いｐＨで加熱する際に、これらの生成物は、５３２ｎｍにおけるその吸光度により測定できるピンク色の発色団を形成する（ B．HalliwellおよびJ.M.C．Gutteridge．Methods in Enzymology(1990)186：第1 〜85頁）。酸化体を発生するのに用いられる化学系は、ハンクスの平衡塩類溶液中に10.0 μＭのＦｅＣｌ₃，１．０ｍＭのアスコルビン酸塩、１．０ｍＭのＨ₂Ｏ₂および１．０ｍＭのデオキシリボースを含む反応混合物であった。この系は、部位特異的な^・ＯＨの生体分子上での発生を測定するのに有用である。このことは、すぐ前に記載した文献中にHalliwellおよびGutteridgeにより記載された通りである。０．１ｍｌの通常の生理食塩水またはチロキサポール（最終濃度は０．０〜１０．０ｍｇ／ｍｇ）のいずれかを加えた。この反応混合物を４５℃で３０分間温置し、1200ｇで１０分間遠心分離した。１．０％（ｗ／ｖ）のＴＢＡおよび２．８％（ｗ／ｖ）のトリクロロ酢酸を共に１．０ｍｌ、１．０ｍｌの上清液に加え、１００℃で１０分間加熱し、氷中で冷却し、発色団をその５３２ｎｍにおける吸光度により３つ１組で測定した。図２に、１０ｍｇ／ｍｌのチロキサポールを反応混合物に加えると、酸化体反応の５３２ｎｍにおいて発生した吸光度により測定されたように、デオキシリボースの酸化の顕著な阻害が生じる、ことを示す。第３の系を用いて、酸化体を発生するための鉄の源としてアスベストを用い、酸化体の標的分子として２−デオキシリボースを用いて、アルキルアリールポリエーテルアルコールポリマーの抗酸化剤活性を試験した。アスベストによる酸化体の発生は、以前に記載されている(A.J．Ghio等、American Journal of Physio logy （Lung Cellular and Molecular Physiology7）（1992）263：L511〜L518）。２．０ｍｌの合計容積のリン酸緩衝塩類溶液（ＰＢＳ）中の反応混合物は、次の成分を含んでいた：１．０ｍＭのデオキシリボース、１．０ｍＭのＨ₂Ｏ₂、１．０ｍＭのアスコルビン酸塩および１１０ｍｇ／ｍｌのクロシドライトアスベスト。この混合物を３７℃で１時間かきまぜながら温置し、次に１２００ｇで１０間遠心分離した。酸化体の発生を、前のパラグラフに詳細に記載したように、デオキシリボースのＴＢＡ反応性生成物を測定することにより、評価した。測定を、３つ１組で実施した。以下の表Ｉに、チロキサポールを加えると、酸化体反応生成物の５３２ｎｍにおける吸光度により測定されたように、アスベストによる酸化体の発生が、濃度に依存する様式で阻害された、ことを示す。実施例II 100 ％酸素による哺乳動物の肺の損傷の保護アルキルアリール・ポリエーテル・アルコール・ポリマーが完全な生物系に対する酸素損傷に抗し得るか否かを決定すべく、この処理は好適に確立された肺に対する酸素毒性のモデル（J.F．Turrens等、臨床研究ジャーナル（1984年）、第 73巻、第87−95頁）で研究された。生後60日の雄のSprague-Dawleyラット（チャールス・リバー社、マサチューセッツ州、ウィルミングトン）に、気管から0.5m lの通常の生理食塩水、チロキサポール(6.0mg)、または、チロキサポール(6.0mg )およびセチルアルコール（ヘキサデカノール，11.0mg）を点滴注入した。これらのラット（各処理グループにおいてｎ＝１０）を次に、プレキシグラスチャンバ内で１０リットル／分の流速の空気もしくは１００％酸素に曝した。酸素の百分率を、ポーラログラフ電極により監視し、継続的に９８％以上に維持した。温度を20℃と22℃との間に維持した。４時間毎に実験動物をチェックすることにより生存時間を決定した。同様に処理したラットの別体の各グループ（各処理グループにおいてｎ＝１０）を１００％酸素に６１時間だけ曝し、次に、 100mg/kgの腹腔内ペントバルビツールにより安楽死させた。胸膜液の体積を、胸膜を小さく切開して胸室から胸膜液を吸引することにより測定した。肺の湿潤／乾燥重量比を、60℃にて96時間にわたり組織を乾燥した後に残された肺から計算した。生存データを以下の表IIに示す。気管内チロキサポールを受けたラットは、生理食塩水を点滴注入したプラシーボ対照実験動物と比較して生存が顕著に改善された。チロキサポールの保護効果は、チロキサポールをセチルアルコールと組合せることにより更に増大された。肺の湿潤／乾燥重量比は、チロキサポールもしくはチロキサポールおよびセチルアルコールて処理したラットにおいては相当に低く（図３）、チロキサポールまたはチロキサポールとセチルアルコールとの組合せは酸化体損傷による水腫形成に対する防護性を例証した。チロキサポールまたはチロキサポールとセチルアルコールとの組合せで処理したラットもまた、生理食塩水により処理した対照物よりも少ない胸膜液蓄積を有していた（図４）。これらの結果は、酸化体による組織の損傷に対してチロキサポールの如きアルキルアリール・ポリエーテル・アルコール・ポリマーが防護性を有することを例証している。生存研究（表II）は更に、上記薬の防護性効果は、この薬をセチルアルコールなどのアルコールと組合せることにより強化されることを例証している。実施例III ＨＯＣｌの捕捉ＯＣｌ^-1を捕捉するチロキサポールの作用を、ＯＣｌ^-1により媒介されたジエタノールアミンから対応する安定なクロルアミンへの酸化体転化を防止する能力を研究することにより試験した（“ミエロペロキシダーゼによるHOClの生成”、 Robert A．Greenwald編、酸素ラジカル研究方法便覧、CRCプレス、フロリダ州、ボカレートン(1987)、第300頁）。反応混合物は、pH4.5の0.1N酢酸ナトリウム緩衝液中の10.0mMのジエタノールアミンを0.9ml含んでいた。これに対し、0.1MのNaClを100μLまたは0.1MのNaCl 中のチロキサポールのいずれかを加え、且つ、基準吸光度を280nmで読取った。N aOClを、10mMの最終濃度まで添加した。上記反応混合物を15分間だけ温置し、280nmで吸光度を測定した。NaOClの添加の前後におけるＡ₂₈₀の差異を、安定クロルアミンの濃度測定として用いた。実験を３つ１組で行った。結果を以下の表IIIに示す：チロキサポールが生体内でもHOClの効果的なスカベンジャーであることを例証すべく、HOClに対する肺損傷を防護するチロキサポールの能力を、250乃至300ｇ重量の生後60日の雄のSprague-Dawleyラット（チャールス・リバー社、マサチューセッツ州、ウィルミングトン）(各処理グループにおいてn=6)で考察した。ハロタン(2〜5%)で麻酔した後、ラットには、（pH6.0に緩衝された）通常の生理食塩水中の2.0mMのNaOClの0.3ml、または、通常の生理食塩水のみ、を気管内注入した。ラットを回復させ、且つ、１時間後に、通常の生理食塩水中の6.0mgのチロキサポール、または、通常の生理食塩水を気管内投与した。NaOClの点滴注入の24時間後、全てのラットをペントバルビツールナトリウムにより安楽死させた。気管にカニューレ挿入すると共に、肺を通常の生理食塩水(35ml/kg体重)）により洗浄した。洗浄流体を変更Wright着色剤（イリノイ州、マクグローパーク、ASP、Diff-Quick着色剤）により着色した後、細胞の差異を500細胞／サンプルで決定した。値を、回復した細胞の合計の百分率として表示した。洗浄蛋白質を、遠心分析器での使用の為に改変された合計蛋白質決定用のBio-Rad法を用いて測定した。 NaOClの気管内点滴注入は急性の肺損傷を引き起こしたが、これは、肺洗浄流体中における蛋白質濃度（図５Ａ）および％好中球(％PMNs)(図５Ｂ)の顕著な増大により例証される。チロキサポールによる後露出処理により、洗浄蛋白質濃度 (p＜0.001)および％PMNs(p＜0.01)が相当に減少し、生体内におけるHOClにより媒介される細胞毒性に対してもチロキサポールは防護を行うことが例証された。従って、チロキサポールはHOClの酸化体作用の有力な阻害剤であり、且つ、HO Clにより媒介される気道の酸化体損傷を防止する上で有用である必要がある。嚢胞性線維症および慢性気管支炎などの、好中球により媒介される気道の病気を持つ患者に対する気管への点滴注入によりチロキサポールを施せば、これらの患者内で生じたHOClを抑制し、従って患者を酸化体損傷から防護する必要がある。もしチロキサポールに対して幾分かセチルアルコールを混合すればこの結果は更に望ましくなるはずであり；好適には、セチルアルコールをチロキサポールの１乃至1.5倍の重量で付加する。患者に対して施すべき試薬の調製は上述と同様のものとし、最も好適には、４乃至１２時間毎に噴霧によりチロキサポールの0.125乃至0.5％溶液を3mlだけ吸入するものとする必要がある。実施例IV チロキサポールによる転写因子ＮＦ−κＢの活性化の抑制細胞蛋白質の遺伝子発現の対照物が転写因子と称される蛋白質により制御されるが、この転写因子は調節ＤＮＡ配列に結合し、調節された遺伝子の蛋白質生成物の生成に影響を与える。炎症に対する重要な転写因子はＮＦ−κＢであり、これはプロ炎症サイトカインに対する伝令RNAと、成長因子と、の転写を促進する。転写因子ＮＦ−κＢの作用をチロキサポールが阻害するか否かを決定すべく、培養されたA549ヒト肺上皮細胞に対して行われた電気泳動ゲル移動分析試験でチロキサポールを試験した。A549ヒト肺の上皮細胞に、10％の加熱非活性化された胎児子牛の血清、Ｌ−グルタミン(2mM)、ペニシリン(100U/ml)、ストレプトマイシン(100μg/ml)およびアンホテリシンＢ(250μg/ml)を補ったHamのF-12培養媒体内で培養した。融合性細胞を10U/mlのIL-1βまたは100μＭのH₂O₂により刺激した。幾つかの培養物においては、100μg/mlのチロキサポールを刺激剤と同時に付加した。２時間の温置の後、核抽出物を、Dignam等（核酸研究(1983)第11巻、第1,475〜1,489頁のJ.D.Dignam R.M．LebovitaおよびR.G.Roederによる“分離された哺乳動物の核からの可溶性抽出物におけるRNA重合酵素IIによる正確な転写開始”）により記載された如く分離したが、僅かな改変を行った（分子および細胞生物学 (1994)第14巻、第7,569〜7,580頁のC.V.GuntherおよびB.J.Gravesによる“Moloneyのネズミ白血病ウィルス・エンハンサーと相互作用するネズミＴリンパ球におけるETSドメイン蛋白質の検証）。簡単に述べると、上清の除去の後、1mMのフェニルメチルスルフォン弗化物(PMSF)と1mMのジチオトレイトール(D TT)を含む20〜30mlのPBS内で細胞を掻き落とした。細胞懸濁液を遠心分離し、ペレットを再懸濁すると共に、10mMのHEPES、1.5mMのMgCl₂、1OmMのKCl、1mMのPMS F、1mMのDTT、10mMのβ−グリセロールリン酸、2.5mMのベンズアミジン、1mMのN aF、1mMのNaVO₄、1mg/mlのロイペプチン、および、1mg/mlのペプスタチンＡを含む1mlの緩衝液Ａ内で15分間温置し、次に、25Gニードルを介した懸濁液の５回の通過により剪断した。遠心分離の後、ペレットを懸濁すると共に、25％体積／体積のグリセロールと、0.25MのNaClと、1.5mMのMgCl₂と、0.2mMのエチレンジアミン四酢酸(EDTA)、1mMのPMSF、1mMのDTT、10mMのβ−グリセロールリン酸、2.5mM のベンズアミジン、1mMのNaF、1mMのNaVO₄、1mg/mlのロイペプチン、および、1m g/mlのペプスタチンＡを含む緩衝液Ｃ内で30分間懸濁し、かきまぜた。遠心分離の後、20mMのHEPES、20％体積／体積グリセロール、100mMのKCl、0.2mMのEDTA、1mMのPMSFおよび1mMのDTTを含む緩衝液Ｄ内での上清の透析により核抽出物が得られた。AP-1（細胞(1987)第49巻、第742〜752頁のW.Lee,P.MitchellおよびR.Tijanの“精製された転写因子AP-1はT PA誘導可能なエンハンサー要素と相互作用を行う”）およびNF−κＢ（細胞(198 6)第46巻、第705〜716頁のR.SenおよびD.Baltimoreの“複数の核因子は免疫グロブリン・エンハンサー配列と相互作用する”）の座に対する野性型共通配列を利用し、次のオリゴヌクレオチドを合成した（結合部位は下線が付されている）：オリゴヌクレオチドを、ポリアクリルアミドゲルの電気泳動により精製した後、 Sep-PakC 18カラムを通過せしめた。各相補鎖を、［Υ³²Ｐ］−ATPおよびT4ポリヌクレオチドキナーゼによるリン酸化により端部標識した。二重鎖DNAプローブは、相補端部標識オリゴヌクレオチド鎖を徐冷し、３分間ボイルし、且つ、水浴内で室温にて緩冷することにより生成した。組み込まれなかった放射性ヌクレオチドをSephadex G-25カラムクロマトグラフィにより除去した。結合反応を、300 ngの牛の血清アルブミン(BSA)、１〜２μｇのポリ(dI-dC)、50mMのDTT、0.5mMの PMSFおよび１〜２×10⁴c.p.m.の³²Ｐ標識プローブを含む20μＬ体積内の５〜10 μｇの合計蛋白質により氷上で20分間行った。これに加え、所定濃度の６mMのMg Cl₂をAP-1結合反応に使用した。選択されたサンプルに、DNA-蛋白質相互作用の特異性を確認すべく、100倍モル過剰の標識無しDNAプローブを導入した。DNA-蛋白質複合体を、50mMの（ヒドロキシメチル）アミノメタン(Tris)、0.4Ｍのグリシン、2mMのEDTAおよび2.5％体積／体積のグリセロール、pH8.5の高イオン強度条件下において4.5％のポリアクリルアミドゲル上で未結合DNAプローブから分離した。20mAの定電流で４℃で電気泳動を実施した。ゲルを真空下で乾燥すると共に、強化スクリーンにより６〜24時間にわたり−70℃で膜に曝した。図６に示された如く、チロキサポールはIL-1βまたはH₂O₂により誘発されたNF −κＢの結合を防止するが、核抽出物に対するAP-1の結合は防止しない。融合性のA549ヒト肺上皮細胞を、IL-1β無しで（レーン１）または10U/mlのIL-1β（レーン２および３）または100μＭのH₂O₂（レーン４および５）と共に温置した。チロキサポール（100ug／ml、レーン３および５）を刺激剤と同時に加えた。３時間の温置後、核抽出物を調製した。抽出物の一定分量を、³²Ｐ標識NF−κＢ特異オリゴヌクレオチドおよびAP-1特異オリゴヌクレオチドと共に温置すると共に、上記で詳述した如く電気泳動移動度シフト分析試験で分析した。特異DNA-蛋白質複合体の位置を矢頭で示す。競合レーン中に示すサンプルに対する結合反応においては、100倍モル過剰の適切な標識無しDNAプローブを導入した。従って、チロキサポールは転写因子NF−κＢの活性化を阻害する。この作用は特異である、と言うのも、他の重要な転写因子AP-1の活性化は影響を受けないからである。NF−κＢの活性化をブロックすることは、プロ炎症サイトカインおよび成長因子の細胞生成を減少し、これにより、処理された組織内の炎症を改善するという利点をもたらすものである。実施例Ｖチロキサポールによるサイトカイン生成の抑圧転写因子NF−κＢの活性化の阻害は、NF−κＢにより影響を受けたプロ炎症サイトカインの分泌を減少すると予測される。例として、激しい嚢胞性線維症肺疾病を有する患者における悪液質および／または食欲不振は、嚢胞性線維症大食細胞によるTNF遺伝子転写および分泌の割合増大により引き起こされる。（呼吸、細胞および分子生物学に関するアメリカンジャーナル(1993)、第９巻、第511〜5 19頁、におけるK.d.Pfeffer等の“嚢胞性線維症患者からの大食細胞における腫瘍壊死因子の発現および制御”参照。）TNFもまた、喘息の病因論における重要な媒介物である（胸部医療における臨床教育(1995)、第16巻、第585〜602頁、R. J.HorwitzおよびW.W.Busseの“炎症および喘息”）。チロキサポールは、胞性線維症患者もしくは喘息患者に対して施されたときに嚢胞性線維症および喘息病態生理学におけるTNFの悪影響を改善する必要がある、と言うのも、以下に示す如く、それは単核大食細胞の細胞系列によるTNF分泌の有力な抑制物だからである。TNF分泌を阻害することにより、チロキサポールは、このサイトカインにより部分的に引き起こされた喘息におけるコルチコステロイド耐性も減少する必要がある（呼吸および臨界医療医学に関するアメリカンジャーナル(1995)、第15 2巻、第S125〜S142頁におけるP.J.Barnes等の“喘息におけるグルココルチコイド耐性”）。同様に、IL-8は多形核好中球に対する有力な化学誘引物質であり、嚢胞性線維症、慢性気管支炎、成人呼吸窮迫症侯群および乾癖などの種々の疾病の病因論において輝かしい役割を演じている（臨床研究に関するジャーナル(199 2)、第89巻、第1,478〜1,484頁におけるH.Nakamura等の“嚢胞性線維症を有する個体の呼吸上皮内層液中の好中球エラスターゼは人体気管支炎上皮細胞ラインにインターロイキン−８遺伝子発現を誘起する”；臨床研究に関するジャーナル(1 992)、第90巻、第1,296〜1,301頁におけるN.G.McElvaney等の“嚢胞性線維症における気道炎症のモジュレーション”、組換え分泌ロイコプロテアーゼ阻害剤のエーロゾル投与による呼吸上皮表面上におけるインターロイキン-8レベルの生体内抑圧；ニューヨーク、Ravenプレス社のJ.I.Gallin、I.M.GoldsteinおよびR.Sn yderman編、炎症：基礎原理および臨床相関の第２版の第247〜263頁におけるM.B aggiolini等の“インターロイキン−８および関連化学走性サイトカイン”；を参照）。IL−８の分泌を阻害することにより、チロキサポールは、これらの病気において炎症を起こした組織内への好中球の流入を改善するはずである。最後に GM-CSFは、喘息における好酸球を活性化して寿命を延ばす重要な成長因子である（ニューヨーク、Ravenプレス社のJ.I.Gallin、I.M.GoldsteinおよびR.Snyderma n編、炎症：基礎原理および臨床相関の第２版の第291〜301頁におけるD.W.golde およびG.C.Baldwinの“骨髄成長因子”；胸部医療における臨床教育(1995)、第1 6巻、第583〜602頁、R.J.HorwitzおよびW.W.Busseの“炎症および喘息”）。GM- CSF分泌を減少することにより、チロキサポールは好酸球を減少して喘息気道に対する好酸球の影響を減する必要がある。サイトカイン分泌に対するチロキサポールの効果を試験すべく、健康なヒトドナーから得られた白血球(leukopaks)から遠心分離溶出により単核細胞を調製した。精製した単核細胞を、100U/mlのペニシリン、100μg/mlのストレプトマイシン、2mMのＬ−グルタミン、1mMのピルビン酸ナトリウム、１％のMEM可欠アミノ酸、25mMのＮ−２−ヒドロキシエチル−イエラジン−Ｎ’−エタンスルホン酸(HEPES)、および、196Nutridoma(インディアナ州、インディアナポリス、ベーリンガーマンハイム社）、および、５％プールされ、加熱非活性化されたヒトＡＢ血清（ウィスコンシン州、ブラウンディアのPel-freeze）が補われたRPMI-164 0内で２×10⁶細胞で懸濁した。この細胞懸濁液の0.5mlを、48凹所式の平底組織培養プレートの各凹所に加えた。試験材料（所望の最終濃度の４倍で完全培養媒体内に希釈されたもの）を各々250μＬの体積で各凹所に加えた。対照凹所に、完全培地もしくは250μLのIL- 4(所望の最終濃度50μg／mlの４倍に希釈されたもの）のいずれかの250μLを加えた。チロキサポールを100ng/mlのサルモネラチフス・リポ多糖(LPS、所望の最終濃度の４倍の250μLを添加）の存在下でもしくは存在無しで４種類の濃度で３つ１組で試験し、且つ、加湿５％CO₂で37℃で16時間にわたり温置した。このときに培養上清を吸引除去し、且つ、付着しない細胞および細胞片を濾過により除去した。TNF-α、IL-1β、IL-6およびIL-8並びに成長因子GM-CSFの遊離を、ELIS A捕捉分析試験を用いて細胞無し上清内で測定した。全ての緩衝液およびチロキサポールにおける内毒系の濃度は、検出レベル(25pg/ml)より低かった。100μg/ mlに等しいもしくはそれ未満のチロキサポール濃度における単核細胞の温置では上清中のLDH濃度の大きな上昇が見られず、チロキサポールによる細胞毒性の欠乏が証明されると共に、以下に示すサイトカイン分泌の阻害は単核細胞に対する有害な洗浄効果に依るもので無いことを示唆する。チロキサポールは、IL-8に対する以外はいずれのメディエイタの基準遊離に対しても影響を及ぼさないが、非刺激細胞におけるIL−８の分泌を相当に減少した（図７）。しかし乍ら、LPSにより刺激された単核細胞による幾つかのメディエイタの遊離は、低濃度のチロキサポールで相当に減少した。TNF-α、IL-1β、IL -6、IL-8およびGM-CSFの分泌は、50％阻害に対する実効濃度（30〜70μg/ml（下記の表IV）の範囲内のEC₅₀）で、チロキサポールにより投与量に依存して（図8A 乃至図8E）相当に（p<0.01）減少した。但し、チロキサポールはLPSにより刺激された単核細胞からPAFの遊離を変化せしめず、NF−κＢにより影響を受けたサイトカインに関してチロキサポールの効果は選択的であったことの付加的な証拠が与えられた。従って、チロキサポールはプロ炎症サイトカイン分泌の有力な阻止剤であり、転写囚子NF−κＢを抑制する治療剤としての成果が期待される。故に、チロキサポールは、嚢胞性線維症を有する患者などの、TNFによる悪液質および／または食欲不振の改善を助けることが期待される。エーロゾル投与されたチロキサポールはまた、嚢胞性線維症、喘息および慢性気管支炎などの気道の病気による気道損傷を減少し、且つ、成人呼吸窮迫症侯群などにおける肺炎症および損傷を、化学誘引物質IL-8、TNF、IL-1、IL-6およびG M-CSFの局部的生成を阻害することにより緩和させるものと期待される。局所的なチロキサポールは、同所のサイトカインの局所的生成を減少することにより、乾癬および日焼けもしくは熱性熱傷に対する応答などの皮膚の炎症疾病を改善するものと期待される。チロキサポールをグルココルチコイドと共に調製混合する場合には、結果は更に良くなるはずである、と言うのも、グルココルチコイド− GR受容体複合体とは異なるメカニズムによりNF−κＢを阻害することにより、チロキサポールは、上述の如く抗炎症グルココルチコイドに対するサイトカインにより誘発されるNF−κＢ関連耐性を減少するからである。一方、ステロイド抵抗の減少は、グルココルチコイドの全体的な抗炎症作用を強めると共に、処理された体の画分の炎症の改善を高めるものである。チロキサポールはまた、チロキサポールの1〜1.5倍の重量で加えられたセチルアルコールと混合されれば更に良好に作用するはずである。患者に対する投与用のサンプルの調製は上述と同様である必要があるが、最も好適には、４乃至12時間毎に噴霧による抗炎症グルココルチコイドと共にもしくは抗炎症グルココルチコイド無しでチロキサポールの 0.5％溶液を3ml吸入するか、または、患部に対して適切な軟膏において抗炎症グルココルチコイドと共にもしくは抗炎症グルココルチコイド無しでチロキサポールをを０／５乃至５％(w/w)で局所的塗付する。添付の請求の範囲は、本発明の新規かつ有用な種々の特徴を示すものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 29/00 Ａ６１Ｐ 29/00 43/00 １１１ 43/00 １１１ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ケネディトーマスピーアメリカ合衆国ヴァージニア州 23229 リッチモンドグランドドライヴ 213

Claims

【特許請求の範囲】１．哺乳類における核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法であって、次式：（式中で、Ｒはエチレンであり、Ｒ’はＣ₄〜Ｃ₁₄の直鎖状アルキル基または枝分れのあるアルキル基であり、ｘは１よりも大きく、ｙは８〜１８である）で表され、哺乳類において酸化体種により生じる酸化体化学反応を阻害するのに有効な、有効量の化合物を、哺乳類に投与し、これにより、哺乳類の病気の本質を治療して、ＮＦ−κＢの生成を防止することを特徴とする、核転写因子ＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。２．前記化合物が、チロキサポールであることを特徴とする、請求の範囲第１項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。３．前記投与が、哺乳類の気道に直接投与することを含むことを特徴とする、請求の範囲第１項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。４．前記投与が、前記化合物をエーロゾル化により投与することを含むことを特徴とする、請求の範囲第１項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。５．前記化合物の前記投与が、生理的に受け入れられる担体中で投与することを含むことを特徴とする、請求の範囲第１項記載の、核転写因子であるＮＦ−κ Ｂの活性化を阻害する方法。６．前記投与がさらに、非重合アルキルアルコールまたは非重合アリールアルコールの投与を含むことを特徴とする、請求の範囲第１項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。７．前記アルコールがセチルアルコールであり、前記セチルアルコールを、前記化合物の重量の１〜１．５倍に相当する量で加えることを特徴とする、請求の範囲第６項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。８．哺乳類における皮膚の炎症疾患を治療する方法であって、次式：（式中で、Ｒはエチレンであり、Ｒ’はＣ₄〜Ｃ₁₄の直鎖状アルキル基または枝分れのあるアルキル基であり、ｘは１よりも大きく、ｙは８〜１８である）で表され、哺乳類において酸化体種により生じる酸化体化学反応を阻害するのに有効な、有効量の化合物を、哺乳類に投与し、これにより、冒された皮膚の領域に対する哺乳類の病気の本質を治療することを特徴とする、皮膚の炎症疾患を治療する方法。９．前記化合物が、チロキサポールであることを特徴とする、請求の範囲第８項記載の、皮膚の炎症疾患を治療する方法。 10．前記化合物の前記投与が、生理的に受け入れられる担体中で投与することを含むことを特徴とする、請求の範囲第８項記載の、皮膚の炎症疾患を治療する方法。 11．前記担体が、ワセリンを基剤とする軟膏であることを特徴とする、請求の範囲第１０項記載の、皮膚の炎症疾患を治療する方法。 12．プロ炎症サイトカインであるＴＮＦ，ＩＬ−１，ＩＬ−６，ＩＬ−８および成長因子であるＧＭ−ＣＳＦの分泌を阻害する方法であって、前記方法が、次式：（式中で、Ｒはエチレンであり、Ｒ’はＣ₄〜Ｃ₁₄の直鎖状アルキル基または枝分れのあるアルキル基であり、ｘは１よりも大きく、ｙは８〜１８である）で表され、哺乳類において酸化体種により生じる酸化体化学反応を阻害するのに有効な、有効量の化合物を、哺乳類に投与し、これにより、哺乳類の病気の本質を治療して、前記プロ炎症サイトカインの分泌を阻害することを特徴とする、プロ炎症サイトカインの分泌を阻害する方法。 13．前記化合物が、チロキサポールであることを特徴とする、請求の範囲第１２項記載の、プロ炎症サイトカインの分泌を阻害する方法。 14．前記投与が、哺乳類の気道に直接投与することを含むことを特徴とする、請求の範囲第１２項記載の、プロ炎症サイトカインの分泌を阻害する方法。 15．前記化合物の前記投与が、エーロゾル化によるものであることを特徴とする、請求の範囲第１２項記載の、プロ炎症サイトカインの分泌を阻害する方法。 16．前記化合物の前記投与が、生理的に受け入れられる担体中で投与することを含むことを特徴とする、請求の範囲第１２項記載の、プロ炎症サイトカインの分泌を阻害する方法。 17．前記投与がさらに、非重合アルキルアルコールまたは非重合アリールアルコールの投与を含むことを特徴とする、請求の範囲第１２項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。 18．前記アルコールがセチルアルコールであり、前記セチルアルコールを、前記化合物の重量の１〜１．５倍に相当する量で加えることを特徴とする、請求の範囲第１７項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。 19．核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法であって、前記方法が、次式：（式中で、Ｒはエチレンであり、Ｒ’はＣ₄〜Ｃ₁₄の直鎖状アルキル基または枝分れのあるアルキル基であり、ｘは１よりも大きく、ｙは８〜１８である）で表され、哺乳類において酸化体種により生じる酸化体化学反応を阻害するのに有効な、有効量の化合物と、ステロイド耐性を阻害する有効量の抗炎症ステロイドを、哺乳類に投与し、これにより、哺乳類の病気の本質を治療して、ＮＦ−κＢの生成を防止することを特徴とする、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。 20．前記ステロイドを、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、フルニソリドまたはデキサメタゾンから成る群から選択することを特徴とする、請求の範囲第１９項記載の、核転写因子であるＮＦ− κＢの活性化を阻害する方法。 21．前記化合物が、チロキサポールであることを特徴とする、請求の範囲第１９項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。 22．前記投与が、エーロゾル化による投与を含むことを特徴とする、請求の範囲第１９項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。 23．前記化合物および前記ステロイドを、生理的に受け入れられる担体中で投与することを特徴とする、請求の範囲第１９項記載の、核転写因子であるＮＦ− κＢの活性化を阻害する方法。 24．前記化合物がチロキサポールであり、前記抗炎症ステロイドがメチルプレドニゾロンであり、前記チロキサポール対前記メチルプレドニゾロンの比率が５ｍｇ対２５ｍｇであることを特徴とする、請求の範囲第１９項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。 25．前記化合物がチロキサポールであり、前記抗炎症ステロイドがトリアムシロノンであり、前記チロキサポール対前記トリアムシノロンの比率が５ｍｇ対２５ｍｇであることを特徴とする、請求の範囲第１９項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。 26．前記化合物がチロキサポールであり、前記抗炎症ステロイドがジプロピオン酸ベクロメタゾンであり、前記チロキサポール対前記ジプロピオン酸ベクロメタゾンの比率が６ｍｇ対２５ｍｇであることを特徴とする、請求の範囲第１９項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。 27．前記化合物がチロキサポールであり、前記抗炎症ステロイドがフルニソリドであり、前記チロキサポール対前記フルニソリドの比率が１２５ｍｇ対２５０ｍｇであることを特徴とする、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。 28．前記化合物がチロキサポールであり、前記抗炎症ステロイドがデキサメタゾンであり、前記チロキサポール対前記デキサメタゾンの比率が１２５ｍｇ対２５０ｍｇであることを特徴とする、請求の範囲第１９項記載の、核転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を阻害する方法。 29．ルコトレインを阻害する方法であって、前記方法が、次式：（式中で、Ｒはエチレンであり、Ｒ’はＣ₄〜Ｃ₁₄の直鎖状アルキル基または枝分かれのあるアルキル基であり、xは１よりも大きく、yは８〜１８である）で表され、哺乳類中で酸化体種により生じる酸化体化学反応を阻害するのに有効な、有効量の化合物を哺乳類に投与し、これにより哺乳類の病気の本質を治療して、ルコトリエンの生成を阻害することを特徴とする、ルコトリエンを阻害する方法。