JP2001272374A - 免疫分析方法ならびに装置 - Google Patents
免疫分析方法ならびに装置Info
- Publication number
- JP2001272374A JP2001272374A JP2000131833A JP2000131833A JP2001272374A JP 2001272374 A JP2001272374 A JP 2001272374A JP 2000131833 A JP2000131833 A JP 2000131833A JP 2000131833 A JP2000131833 A JP 2000131833A JP 2001272374 A JP2001272374 A JP 2001272374A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antigen
- antibody
- electrophoresis
- mixing
- holding
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】蛋白質、病原体、細胞などの免疫分析を高速か
つ簡便に行える方法とその方法を利用する装置を提供す
る。 【構成】生体に由来する抗原と抗体を保持する手段と、
抗原と抗体を混合し反応させる手段と、抗原を電気泳動
させる流路と、当該保持手段、当該混合手段、当該電気
泳動手段を接続する流路手段と、当該保持手段、当該混
合手段、当該電気泳動手段、当該流路手段内に存在する
抗原あるいは抗体を移動させる手段を表面上に有する基
板と、当該基板上に液体を含む物質を保持するための蓋
と、移動手段、混合手段、電気泳動手段の動作の制御手
段と、当該基板中あるいは外部に設けられた当該基板内
での抗原の電気泳動速度に関する情報を出力する手段を
用いて抗原と抗体との反応を検出することを特徴とする
免疫分析装置を提供し、被測定対象の抗原を抗体と混合
し、抗原の電気泳動速度の情報を得ることで免疫分析を
行う。
つ簡便に行える方法とその方法を利用する装置を提供す
る。 【構成】生体に由来する抗原と抗体を保持する手段と、
抗原と抗体を混合し反応させる手段と、抗原を電気泳動
させる流路と、当該保持手段、当該混合手段、当該電気
泳動手段を接続する流路手段と、当該保持手段、当該混
合手段、当該電気泳動手段、当該流路手段内に存在する
抗原あるいは抗体を移動させる手段を表面上に有する基
板と、当該基板上に液体を含む物質を保持するための蓋
と、移動手段、混合手段、電気泳動手段の動作の制御手
段と、当該基板中あるいは外部に設けられた当該基板内
での抗原の電気泳動速度に関する情報を出力する手段を
用いて抗原と抗体との反応を検出することを特徴とする
免疫分析装置を提供し、被測定対象の抗原を抗体と混合
し、抗原の電気泳動速度の情報を得ることで免疫分析を
行う。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は血液中の赤血球、白
血球、リンパ球、病原体、蛋白質などの抗原を抗体試薬
と反応させ、反応量あるいは反応の有無により抗原の分
離・分析、同定を行う免疫分析方法およびその装置に関
する。
血球、リンパ球、病原体、蛋白質などの抗原を抗体試薬
と反応させ、反応量あるいは反応の有無により抗原の分
離・分析、同定を行う免疫分析方法およびその装置に関
する。
【０００２】
【従来の技術】従来より、免疫分析は生化学や免疫学の
研究において細胞の分離・分析や物質の精製・同定、更
に臨床の場における診断・治療など広い分野で応用され
ている。免疫反応とは抗原と呼ばれる病原菌や毒素が体
内に侵入した際に、血清中に抗体と呼ばれる蛋白質が多
量に生じ、特異的に抗原と化学的に結合する反応であ
り、病原体に体する防御反応として発見された。しか
し、病原菌だけでなく、分子量が５０００以上の分子の
多くは抗原になりえることから免疫反応を利用して免疫
原生をもつ分子全般の同定、分離、測定が行われてい
る。また、体内に腫瘍細胞などの異常があると抗体が生
じることや臓器移植の際にも移植者間の蛋白質などに適
合性が無い場合には免疫反応を起こすため医学的検査や
治療において重要である。以下に免疫反応を利用した分
析方法を示す。
研究において細胞の分離・分析や物質の精製・同定、更
に臨床の場における診断・治療など広い分野で応用され
ている。免疫反応とは抗原と呼ばれる病原菌や毒素が体
内に侵入した際に、血清中に抗体と呼ばれる蛋白質が多
量に生じ、特異的に抗原と化学的に結合する反応であ
り、病原体に体する防御反応として発見された。しか
し、病原菌だけでなく、分子量が５０００以上の分子の
多くは抗原になりえることから免疫反応を利用して免疫
原生をもつ分子全般の同定、分離、測定が行われてい
る。また、体内に腫瘍細胞などの異常があると抗体が生
じることや臓器移植の際にも移植者間の蛋白質などに適
合性が無い場合には免疫反応を起こすため医学的検査や
治療において重要である。以下に免疫反応を利用した分
析方法を示す。
【０００３】細菌、酵母、白血球、赤血球などの微小粒
子抗原はその表面に特定の抗体が結合すると凝集を起こ
すことが知られており、抗体試薬との混合により凝集が
生じたかどうかを凝集物の沈降により確認することで抗
原の同定が可能である。これはＡＢＯ式血液型の検査な
どに用いられている。
子抗原はその表面に特定の抗体が結合すると凝集を起こ
すことが知られており、抗体試薬との混合により凝集が
生じたかどうかを凝集物の沈降により確認することで抗
原の同定が可能である。これはＡＢＯ式血液型の検査な
どに用いられている。
【０００４】可溶性抗原の免疫反応の検出法としてはゲ
ル内で抗原と抗体を反応させて、不溶化した抗原の沈降
反応を観察するゲル内免疫拡散法やその変形であるゲル
中での免疫電気泳動法がある。
ル内で抗原と抗体を反応させて、不溶化した抗原の沈降
反応を観察するゲル内免疫拡散法やその変形であるゲル
中での免疫電気泳動法がある。
【０００５】また、自動化した高速細胞分析装置とし
て、あらかじめ蛍光物質で標識しておいた抗体を用い、
細胞と抗体との免疫反応を行わせ、反応後の細胞に励起
光を当て、蛍光の強度を測定し免疫反応の有無、量を測
定するフローサイトメトリーがある。
て、あらかじめ蛍光物質で標識しておいた抗体を用い、
細胞と抗体との免疫反応を行わせ、反応後の細胞に励起
光を当て、蛍光の強度を測定し免疫反応の有無、量を測
定するフローサイトメトリーがある。
【０００６】また、微量の液体あるいは微粒子の反応検
出方法に関する技術としてマイクロキャピラリチップを
用いた分析装置の開発が行われている。これは数ｃｍ角
の石英板や樹脂板に数１０μｍから１００μｍ程度の細
い溝（キャピラリ）を形成し、蓋をして、細い流路のネ
ットワークをチップ中に形成したものであり、この流路
網中の液体を機械的ポンプあるいは電気浸透流によるポ
ンプ作用により輸送し、混合させ反応を起こさせる。更
にキャピラリ中での物質による移動速度の違いを利用し
て反応生成物を分離し、光や電気的信号などにより反応
生成物質を検出する。このような装置はマイクロ全分析
システム（μ−ＴＡＳ：ｔｏｔａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ
ｓｙｓｔｅｍ）と総称されている。
出方法に関する技術としてマイクロキャピラリチップを
用いた分析装置の開発が行われている。これは数ｃｍ角
の石英板や樹脂板に数１０μｍから１００μｍ程度の細
い溝（キャピラリ）を形成し、蓋をして、細い流路のネ
ットワークをチップ中に形成したものであり、この流路
網中の液体を機械的ポンプあるいは電気浸透流によるポ
ンプ作用により輸送し、混合させ反応を起こさせる。更
にキャピラリ中での物質による移動速度の違いを利用し
て反応生成物を分離し、光や電気的信号などにより反応
生成物質を検出する。このような装置はマイクロ全分析
システム（μ−ＴＡＳ：ｔｏｔａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ
ｓｙｓｔｅｍ）と総称されている。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】前述の沈降反応を利用
した免疫分析法は、液体あるいはゲル中での抗原の沈降
を待つ必要があり、数時間の長い時間を要する。また、
自動化した装置ではなく、専門の知識を持った者しか行
うことができない。
した免疫分析法は、液体あるいはゲル中での抗原の沈降
を待つ必要があり、数時間の長い時間を要する。また、
自動化した装置ではなく、専門の知識を持った者しか行
うことができない。
【０００８】また、フローサイトメトリーは高速かつ自
動化された装置であるが、蛍光標識した抗体試薬を用い
なければならず、抗体試薬の種類が限定され、また抗体
試薬が高額である。臨床の場における診断・治療などで
は多種の抗体を用いた免疫検査を行う必要があり、蛍光
標識していない抗体を用いた免疫分析方法あるいは抗体
の使用量がごく微量である免疫分析方法が必要とされて
いた。
動化された装置であるが、蛍光標識した抗体試薬を用い
なければならず、抗体試薬の種類が限定され、また抗体
試薬が高額である。臨床の場における診断・治療などで
は多種の抗体を用いた免疫検査を行う必要があり、蛍光
標識していない抗体を用いた免疫分析方法あるいは抗体
の使用量がごく微量である免疫分析方法が必要とされて
いた。
【０００９】
【課題を解決するための手段】基板表面の凹形状部から
なる生体に由来する抗原と抗体を保持する手段と、基板
表面の溝形状部からなる抗原と抗体を混合し反応させる
手段と、基板表面の溝形状部からなる抗原を電気泳動さ
せる流路と、当該保持手段、当該混合手段、当該電気泳
動手段を接続する基板表面の溝形状部からなる流路手段
と、当該保持手段、当該混合手段、当該電気泳動手段、
当該流路手段内に存在する抗原あるいは抗体を移動させ
る手段を備えた基板と、当該混合手段、当該電気泳動手
段、当該流路手段内に液体を含む物質を保持するための
蓋と、移動手段、混合手段、電気泳動手段の動作を制御
するための制御手段と、当該基板中あるいは外部に設け
られた当該基板内での抗原の電気泳動速度に関する情報
を出力する手段を用いて抗原と抗体との免疫反応を検出
することを特徴とする免疫分析装置を提供し、被測定対
象となる抗原を抗体と混合し、抗原の電気泳動速度の情
報を得ることにより免疫分析を行う。
なる生体に由来する抗原と抗体を保持する手段と、基板
表面の溝形状部からなる抗原と抗体を混合し反応させる
手段と、基板表面の溝形状部からなる抗原を電気泳動さ
せる流路と、当該保持手段、当該混合手段、当該電気泳
動手段を接続する基板表面の溝形状部からなる流路手段
と、当該保持手段、当該混合手段、当該電気泳動手段、
当該流路手段内に存在する抗原あるいは抗体を移動させ
る手段を備えた基板と、当該混合手段、当該電気泳動手
段、当該流路手段内に液体を含む物質を保持するための
蓋と、移動手段、混合手段、電気泳動手段の動作を制御
するための制御手段と、当該基板中あるいは外部に設け
られた当該基板内での抗原の電気泳動速度に関する情報
を出力する手段を用いて抗原と抗体との免疫反応を検出
することを特徴とする免疫分析装置を提供し、被測定対
象となる抗原を抗体と混合し、抗原の電気泳動速度の情
報を得ることにより免疫分析を行う。
【００１０】
【作用】抗体が細胞に結合すると細胞表面の帯電の量が
変化するために、抗体との結合の有無あるいは結合量の
違いにより抗原の泳動速度が変化したことから免疫反応
を短時間で検出することができた。本発明では微小なキ
ャピラリ内で反応を行うため、抗体試薬と被測定対象物
は微量で済み、また０．２μｍ以上の大きさの光学的に
検出できる抗原を分析する場合には、あらかじめ蛍光標
識した高価な抗体試薬を用いる必要がなかった。また、
移動手段、混合手段、電気泳動手段の動作は電気的に制
御することができるため、自動化が容易である。このよ
うに本発明により前述した高速化、自動化、抗体試薬の
使用量、蛍光標識抗体試薬の使用などに関する課題が解
決された。
変化するために、抗体との結合の有無あるいは結合量の
違いにより抗原の泳動速度が変化したことから免疫反応
を短時間で検出することができた。本発明では微小なキ
ャピラリ内で反応を行うため、抗体試薬と被測定対象物
は微量で済み、また０．２μｍ以上の大きさの光学的に
検出できる抗原を分析する場合には、あらかじめ蛍光標
識した高価な抗体試薬を用いる必要がなかった。また、
移動手段、混合手段、電気泳動手段の動作は電気的に制
御することができるため、自動化が容易である。このよ
うに本発明により前述した高速化、自動化、抗体試薬の
使用量、蛍光標識抗体試薬の使用などに関する課題が解
決された。
【００１１】
【実施例】本実施例で用いた装置の概略を図１に示す。
１０１は石英であり、本基板上にはエッチングにより形
成した１０２の抗体保持手段、１０３の抗体廃液保持手
段、１０４の抗原保持手段、１０５の抗原廃液保持手
段、１０６の混合手段、１０７の電気泳動手段、１０８
の流路手段が配置される。分析に先立ち、保持手段、混
合手段、電気泳動手段、流路手段内にはゼラチンベロナ
ール緩衝液が満たされている。ゼラチンベロナール緩衝
液を用いて抗体および抗原を希釈して、それぞれ１０２
と１０４に導入する。１０２、１０３、１０４、１０５
のそれぞれに差し入れた電極Ａ（１０９）、電極Ｂ（１
１０）、電極Ｃ（１１１）、電極Ｄ（１１２）の電圧を
１１３の制御手段により制御し、１１４の抗原および１
１５の抗体を移動させる。１０９に正の高電圧を与え、
１１０を接地することにより１０２から１０３に向かう
１１６の抗体の移動方向が得られ、１１２に正の高電圧
を与え、１１１を接地することにより１０４から１０５
に向かう１１７の抗原の移動方向が得られる。この抗原
の移動方向は１１８の電気浸透流の移動方向とは逆向き
である。１０９あるいは１１２の電位を変化させるか、
あるいは１１０の電位を浮遊状態にすることで１０６の
混合手段において抗原の移動方向を１１２から１０２へ
と変えることができる。また、電気泳動手段あるいは流
路手段内での電気浸透流、抗原、抗体の移動速度や向き
は１１９の電極の電圧を変化させることでも制御でき
る。抗体の含まれた緩衝液中に混合された抗原の１０７
の電気泳動手段内での泳動速度情報は１２０の画像撮影
装置により撮影され、１２１の画像処理装置により取り
出される。
１０１は石英であり、本基板上にはエッチングにより形
成した１０２の抗体保持手段、１０３の抗体廃液保持手
段、１０４の抗原保持手段、１０５の抗原廃液保持手
段、１０６の混合手段、１０７の電気泳動手段、１０８
の流路手段が配置される。分析に先立ち、保持手段、混
合手段、電気泳動手段、流路手段内にはゼラチンベロナ
ール緩衝液が満たされている。ゼラチンベロナール緩衝
液を用いて抗体および抗原を希釈して、それぞれ１０２
と１０４に導入する。１０２、１０３、１０４、１０５
のそれぞれに差し入れた電極Ａ（１０９）、電極Ｂ（１
１０）、電極Ｃ（１１１）、電極Ｄ（１１２）の電圧を
１１３の制御手段により制御し、１１４の抗原および１
１５の抗体を移動させる。１０９に正の高電圧を与え、
１１０を接地することにより１０２から１０３に向かう
１１６の抗体の移動方向が得られ、１１２に正の高電圧
を与え、１１１を接地することにより１０４から１０５
に向かう１１７の抗原の移動方向が得られる。この抗原
の移動方向は１１８の電気浸透流の移動方向とは逆向き
である。１０９あるいは１１２の電位を変化させるか、
あるいは１１０の電位を浮遊状態にすることで１０６の
混合手段において抗原の移動方向を１１２から１０２へ
と変えることができる。また、電気泳動手段あるいは流
路手段内での電気浸透流、抗原、抗体の移動速度や向き
は１１９の電極の電圧を変化させることでも制御でき
る。抗体の含まれた緩衝液中に混合された抗原の１０７
の電気泳動手段内での泳動速度情報は１２０の画像撮影
装置により撮影され、１２１の画像処理装置により取り
出される。
【００１２】本実施例では、抗原に羊の赤血球を、抗体
にはウサギ抗羊赤血球抗体を用いた。まず、図２は緩衝
液によるマイクロキャピラリ内での抗原の移動特性の違
いを示す。実験に先立ち保持手段、混合手段、電気泳動
手段、流路手段内に緩衝液で希釈した抗原を注入し、１
０９と１１０の電極間に電位差を与え、この電位差を５
０、１００、１５０、２００Ｖに変化させて抗原の泳動
方向と速度を画像撮影装置により計測した。（ａ）代表
的な生体細胞用緩衝液であるリン酸希釈生理食塩水を緩
衝液に用いたときには抗原は正極から負極側に移動し、
また、マイクロキャピラリの側壁に引き寄せられやすい
ために移動速度はマイクロキャピラリの中央と端で大き
くことなり、分布形状に歪みが見られた。一方、（ｂ）
ゼラチンベロナール緩衝液では負極側から正極側に移動
し、マイクロキャピラリ内での速度は中央でも端でも差
が無いため正規分布的であった。正極から負極に向かっ
て移動する抗体に対向させて抗原を混合するために、ま
た抗原の電気泳動速度の情報から免疫反応を検出するた
めにはゼラチンベロナール緩衝液を用いることが有効で
あることが分かる。
にはウサギ抗羊赤血球抗体を用いた。まず、図２は緩衝
液によるマイクロキャピラリ内での抗原の移動特性の違
いを示す。実験に先立ち保持手段、混合手段、電気泳動
手段、流路手段内に緩衝液で希釈した抗原を注入し、１
０９と１１０の電極間に電位差を与え、この電位差を５
０、１００、１５０、２００Ｖに変化させて抗原の泳動
方向と速度を画像撮影装置により計測した。（ａ）代表
的な生体細胞用緩衝液であるリン酸希釈生理食塩水を緩
衝液に用いたときには抗原は正極から負極側に移動し、
また、マイクロキャピラリの側壁に引き寄せられやすい
ために移動速度はマイクロキャピラリの中央と端で大き
くことなり、分布形状に歪みが見られた。一方、（ｂ）
ゼラチンベロナール緩衝液では負極側から正極側に移動
し、マイクロキャピラリ内での速度は中央でも端でも差
が無いため正規分布的であった。正極から負極に向かっ
て移動する抗体に対向させて抗原を混合するために、ま
た抗原の電気泳動速度の情報から免疫反応を検出するた
めにはゼラチンベロナール緩衝液を用いることが有効で
あることが分かる。
【００１３】図３に混合手段の動作例を説明するため、
図１の１０６の混合手段を拡大した写真を示す。前述の
１０９と１１２の電圧をそれぞれ３００Ｖと１４０Ｖに
し、１１０と１１１を接地すると抗体は１０２から１０
３に赤血球は１０４から１０５に向かって流れる（写真
上段）。その後、１１０の電位をしばらくの間浮遊状態
にすると、その間、赤血球は抗体の含まれる流路に流れ
込み、混合される（写真中段）。１１０を再び接地する
と赤血球は抗体と衝突しながら、１０２と１０３の間の
電界により電気泳動される（写真下段）。
図１の１０６の混合手段を拡大した写真を示す。前述の
１０９と１１２の電圧をそれぞれ３００Ｖと１４０Ｖに
し、１１０と１１１を接地すると抗体は１０２から１０
３に赤血球は１０４から１０５に向かって流れる（写真
上段）。その後、１１０の電位をしばらくの間浮遊状態
にすると、その間、赤血球は抗体の含まれる流路に流れ
込み、混合される（写真中段）。１１０を再び接地する
と赤血球は抗体と衝突しながら、１０２と１０３の間の
電界により電気泳動される（写真下段）。
【００１４】図４に免疫反応の有無による抗原の電気泳
動速度の違いを示す。免疫実験の手順は以下の通りであ
る。実験に先立ち保持手段、混合手段、電気泳動手段、
流路手段内にゼラチンベロナール緩衝液を満たし、１０
９に３００Ｖ、１１２に１４０Ｖの電圧を与え、１１０
と１１１を接地した。１０２にウサギ抗羊赤血球抗体を
１０４に羊赤血球を注入すると、ウサギ抗羊赤血球抗体
は１０２から１０３に移動し、羊赤血球は１０４から１
０５に移動する。前述の１０６の混合手段の動作の説明
と同様に１１０の電圧を変化させることにより羊赤血球
を１０７の電気泳動手段に混合し、画像撮影手段１２０
により羊赤血球の泳動速度を測定した。比較として測定
した１０２にウサギ抗羊赤血球抗体を注入せず、ゼラチ
ンベロナール緩衝液だけが１０２から１０３に流れる条
件で抗原の羊赤血球を電気泳動させたときの速度分布
（上図）に対し、抗体のウサギ抗羊赤血球抗体を含むゼ
ラチンベロナール緩衝液に混合させた羊赤血球を電気泳
動させたときの速度分布（下図）は大きくばらついた。
この変化から羊赤血球とウサギ抗羊赤血球抗体との間の
免疫反応が起きていることが検出できた。この変化は負
に帯電した抗原表面への抗体の結合により抗原の表面電
荷が変化したためであり、羊赤血球以外の抗原にも起こ
ることから、本発明に基づき白血球、リンパ球、細菌な
どの種々の抗原の免疫分析も可能になることが分かる。
また、抗原の泳動速度の変化は本実施例ではＣＣＤカメ
ラによる実時間画像を観察しているだけでも１分以内で
はっきりと確認できたことから、高速分析法であること
も示された。
動速度の違いを示す。免疫実験の手順は以下の通りであ
る。実験に先立ち保持手段、混合手段、電気泳動手段、
流路手段内にゼラチンベロナール緩衝液を満たし、１０
９に３００Ｖ、１１２に１４０Ｖの電圧を与え、１１０
と１１１を接地した。１０２にウサギ抗羊赤血球抗体を
１０４に羊赤血球を注入すると、ウサギ抗羊赤血球抗体
は１０２から１０３に移動し、羊赤血球は１０４から１
０５に移動する。前述の１０６の混合手段の動作の説明
と同様に１１０の電圧を変化させることにより羊赤血球
を１０７の電気泳動手段に混合し、画像撮影手段１２０
により羊赤血球の泳動速度を測定した。比較として測定
した１０２にウサギ抗羊赤血球抗体を注入せず、ゼラチ
ンベロナール緩衝液だけが１０２から１０３に流れる条
件で抗原の羊赤血球を電気泳動させたときの速度分布
（上図）に対し、抗体のウサギ抗羊赤血球抗体を含むゼ
ラチンベロナール緩衝液に混合させた羊赤血球を電気泳
動させたときの速度分布（下図）は大きくばらついた。
この変化から羊赤血球とウサギ抗羊赤血球抗体との間の
免疫反応が起きていることが検出できた。この変化は負
に帯電した抗原表面への抗体の結合により抗原の表面電
荷が変化したためであり、羊赤血球以外の抗原にも起こ
ることから、本発明に基づき白血球、リンパ球、細菌な
どの種々の抗原の免疫分析も可能になることが分かる。
また、抗原の泳動速度の変化は本実施例ではＣＣＤカメ
ラによる実時間画像を観察しているだけでも１分以内で
はっきりと確認できたことから、高速分析法であること
も示された。
【００１５】
【発明の効果】以上に述べたとおり、本発明による免疫
分析方法では微量の被測定試料と抗体試薬しか必要とせ
ず、簡単な装置で高速で免疫反応を検出することがで
き、生化学、免疫学、細胞生物学などの生命化学で広く
用いられる免疫分析の簡易化・高速化に貢献する。また
蛍光化した抗体を必ずしも用いる必要がないため多種の
抗原抗体反応に利用でき、特に臨床の場における診断・
治療に応用すれば病理あるいは生体適合性などの検査時
間の大幅な短縮ができる。
分析方法では微量の被測定試料と抗体試薬しか必要とせ
ず、簡単な装置で高速で免疫反応を検出することがで
き、生化学、免疫学、細胞生物学などの生命化学で広く
用いられる免疫分析の簡易化・高速化に貢献する。また
蛍光化した抗体を必ずしも用いる必要がないため多種の
抗原抗体反応に利用でき、特に臨床の場における診断・
治療に応用すれば病理あるいは生体適合性などの検査時
間の大幅な短縮ができる。
【図１】本発明による装置の概略図
【図２】緩衝液によるキャピラリ内での抗原の移動特性
の違いを示す図
の違いを示す図
【図３】混合手段の動作例を示す図
【図４】免疫反応の有無による抗原の電気泳動速度の違
いを示す図
いを示す図
１０１ 石英 １０２ 抗体保持手段 １０３ 抗体廃液保持手段 １０４ 抗原保持手段 １０５ 抗原廃液保持手段 １０６ 混合手段 １０７ 電気泳動手段 １０８ 流路手段 １０９ 電極Ａ １１０ 電極Ｂ １１１ 電極Ｃ １１２ 電極Ｄ １１３ 制御手段 １１４ 抗原 １１５ 抗体 １１６ 抗体の移動方向 １１７ 抗原の移動方向 １１８ 電気浸透流の移動方向 １１９ 電極 １２０ 画像撮影装置 １２１ 画像処理装置
フロントページの続き (72)発明者 氏家 建和 埼玉県鶴ヶ島市上広谷１−１リーリエ岩本 305 (72)発明者 奥田 智子 東京都練馬区旭丘２−41−２江古田パーク マンション418 (72)発明者 堀池 靖浩 東京都保谷市東伏見３丁目２番地12号 Ｆターム(参考） 4B029 AA07 FA05 FA10
Claims (9)
- 【請求項１】基板表面の凹形状部からなる生体に由来す
る抗原と抗体を保持する手段と、基板表面の溝形状部か
らなる抗原と抗体を混合し反応させる手段と、基板表面
の溝形状部からなる抗原を電気泳動させる流路と、当該
保持手段、当該混合手段、当該電気泳動手段を接続する
基板表面の溝形状部からなる流路手段と、当該保持手
段、当該混合手段、当該電気泳動手段、当該流路手段内
に存在する抗原あるいは抗体を移動させる手段を備えた
基板と、当該混合手段、当該電気泳動手段、当該流路手
段内に液体を含む物質を保持するための蓋と、移動手
段、混合手段、電気泳動手段の動作を制御するための制
御手段と、当該基板中あるいは外部に設けられた当該基
板内での抗原の電気泳動速度に関する情報を出力する手
段を用いて抗原と抗体との免疫反応を検出する方法。 - 【請求項２】基板表面の凹形状部からなる生体に由来す
る抗原と抗体を保持する手段と、基板表面の溝形状部か
らなる抗原と抗体を混合し反応させる手段と、基板表面
の溝形状部からなる抗原を電気泳動させる流路と、当該
保持手段、当該混合手段、当該電気泳動手段を接続する
基板表面の溝形状部からなる流路手段と、当該保持手
段、当該混合手段、当該電気泳動手段、当該流路手段内
に存在する抗原あるいは抗体を移動させる手段を備えた
基板と、当該混合手段、当該電気泳動手段、当該流路手
段内に液体を含む物質を保持するための蓋と、移動手
段、混合手段、電気泳動手段の動作を制御するための制
御手段と、当該基板中あるいは外部に設けられた当該基
板内での抗原の電気泳動速度に関する情報を出力する手
段を用いて抗原と抗体との免疫反応を検出することを特
徴とする免疫分析装置。 - 【請求項３】請求項２記載の保持手段、混合手段、電気
泳動手段、流路手段のいずれかが、除去加工、接合加
工、添加加工、モールド加工で製作されていることを特
徴とする免疫分析装置。 - 【請求項４】請求項１記載の免疫分析方法において抗原
と抗体が対向方向に電気泳動するような緩衝液で抗原と
抗体を希釈して用いることを特徴とする免疫分析方法。 - 【請求項５】請求項３記載の緩衝液においてゼラチンを
含む緩衝液を用いることを特徴とする免疫分析方法。 - 【請求項６】請求項２記載の基板において当該基板内の
流路、電気泳動手段の少なくとも一つから１０μｍ以上
２００μｍ以下の距離に電極を設け、その電位を変化さ
せることにより、当該流路、当該電気泳動手段内部での
流体、抗原、抗体の移動の速度及び方向あるいは流体中
の抗原、抗体の壁への付着を制御することを特徴とする
免疫分析装置。 - 【請求項７】請求項２記載の基板において当該基板内の
流路、電気泳動手段の断面形状が矩型であることを特徴
とする免疫分析装置。 - 【請求項８】請求項２記載の基板において抗原が混合手
段を通過した後に電気泳動手段に移動することを特徴と
する免疫分析装置。 - 【請求項９】請求項１記載の免疫分折方法において抗原
と抗体の間の免疫反応の有無の判定を抗原の電気泳動速
度の変化の有無により行うことを特徴とする免疫分析方
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000131833A JP2001272374A (ja) | 2000-03-27 | 2000-03-27 | 免疫分析方法ならびに装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000131833A JP2001272374A (ja) | 2000-03-27 | 2000-03-27 | 免疫分析方法ならびに装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2001272374A true JP2001272374A (ja) | 2001-10-05 |
Family
ID=18640656
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000131833A Pending JP2001272374A (ja) | 2000-03-27 | 2000-03-27 | 免疫分析方法ならびに装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2001272374A (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004063752A1 (ja) * | 2003-01-10 | 2004-07-29 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | 微粒子表面電荷制御剤を含む組成物、それを利用した微粒子分離方法および微粒子分離装置 |
| WO2005097968A1 (ja) * | 2004-04-06 | 2005-10-20 | Bussan Nanotech Research Institute, Inc. | 細菌検出装置及び細菌検出方法 |
| WO2005098022A1 (ja) * | 2004-04-06 | 2005-10-20 | Bussan Nanotech Research Institute, Inc. | 細菌計数方法及び細菌計数装置 |
| JP2006170646A (ja) * | 2004-12-13 | 2006-06-29 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | 微細管電気泳動による微生物分離用分離促進剤及び分析装置 |
| CN102901539A (zh) * | 2012-11-15 | 2013-01-30 | 重庆市计量质量检测研究院 | 一种微小液体流量检测方法 |
| JP2014126554A (ja) * | 2012-12-27 | 2014-07-07 | Osaka Univ | 物質の移動速度の制御方法および制御装置 |
-
2000
- 2000-03-27 JP JP2000131833A patent/JP2001272374A/ja active Pending
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004063752A1 (ja) * | 2003-01-10 | 2004-07-29 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | 微粒子表面電荷制御剤を含む組成物、それを利用した微粒子分離方法および微粒子分離装置 |
| WO2005097968A1 (ja) * | 2004-04-06 | 2005-10-20 | Bussan Nanotech Research Institute, Inc. | 細菌検出装置及び細菌検出方法 |
| WO2005098022A1 (ja) * | 2004-04-06 | 2005-10-20 | Bussan Nanotech Research Institute, Inc. | 細菌計数方法及び細菌計数装置 |
| JP2006170646A (ja) * | 2004-12-13 | 2006-06-29 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | 微細管電気泳動による微生物分離用分離促進剤及び分析装置 |
| JP4677524B2 (ja) * | 2004-12-13 | 2011-04-27 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 微細管電気泳動による微生物分離用分離促進剤及び分析装置 |
| CN102901539A (zh) * | 2012-11-15 | 2013-01-30 | 重庆市计量质量检测研究院 | 一种微小液体流量检测方法 |
| CN102901539B (zh) * | 2012-11-15 | 2014-06-18 | 重庆市计量质量检测研究院 | 一种微小液体流量检测方法 |
| JP2014126554A (ja) * | 2012-12-27 | 2014-07-07 | Osaka Univ | 物質の移動速度の制御方法および制御装置 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sato et al. | Microchip‐based immunoassay system with branching multichannels for simultaneous determination of interferon‐γ | |
| US6887362B2 (en) | Dielectrophoretic separation and immunoassay methods on active electronic matrix devices | |
| Jung et al. | Point-of-care testing (POCT) diagnostic systems using microfluidic lab-on-a-chip technologies | |
| US7138269B2 (en) | Microflow system for particle separation and analysis | |
| KR100507454B1 (ko) | 유전영동력을 이용한 물질의 분리방법 | |
| US5788819A (en) | Method for driving liquid, and method and apparatus for mixing and agitation employing the method | |
| JP4569711B2 (ja) | 複数溶液導入構造、該構造を有する微小流体装置及び溶液導入法 | |
| US7754150B2 (en) | Microfluidic analytic detection assays, devices, and integrated systems | |
| US8263022B2 (en) | Microfluidic detection of analytes | |
| JP4470310B2 (ja) | 誘電泳動力を用いた物質の分離方法 | |
| US20090215158A1 (en) | Micro Flow Channel Chip | |
| US6699669B2 (en) | Multistage electromagnetic separator for purifying cells, chemicals and protein structures | |
| US20060292558A1 (en) | Methods and apparatus for protein assay diagnostics | |
| EP3909686A1 (en) | Analyte detection methods and apparatus using dielectrophoresis and electroosmosis | |
| KR20050044559A (ko) | 자성 콜로이드 입자를 이용한 분석물의 검출 방법 | |
| US20060292649A1 (en) | Methods and apparatus for reference lab diagnostics | |
| JP2007510935A (ja) | 多次元電気泳動装置 | |
| EP4012410A1 (en) | Magnetic particle luminescence micro-fluidic chip for multi-marker detection, and detection device | |
| CN101526520A (zh) | 一种生物样品的检测方法及装置 | |
| US20060046305A1 (en) | Method and apparatus for detecting analyte with filter | |
| WO2008036083A1 (en) | Microfluidic flow cytometer and applications of same | |
| Sista | Development of a digital microfluidic lab-on-a-chip for automated immunoassay with magnetically responsive beads | |
| JP2001272374A (ja) | 免疫分析方法ならびに装置 | |
| CN102047102A (zh) | 等电聚焦生物芯片 | |
| EP1637884A1 (en) | Method for measuring substance having affinity |