JP2001253896A - 糖脂質アナログメチルアミド化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【課題】細胞培養やレクチン等のスクリーニング等に使
用可能な、新規な構造を持つ糖脂質アナログ化合物、及
び、その合成中間体を提供する。 【解決手段】安価な原料から短工程、高効率で得られ
る、次に示す式（１）〜式（６）の糖脂質アナログ化合
物、及び、その合成中間体。 （ただし、式中で、Ｒはグルコース残基またはガラクト
ース残基を表す。）

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新規な構造を持つ
糖脂質アナログ化合物に関するものである。

【０００２】より詳細には、本発明は、細胞培養、ある
いは糖鎖の関わる細胞間認識の実体であるレクチン等の
糖鎖認識物質のスクリーニング等に使用可能な、安価な
原料から短工程、高効率で得られる、新規な構造を持つ
糖脂質アナログ化合物、及び、その合成中間体に関する
ものである。

【０００３】

【従来の技術】細胞表層に、糖脂質、糖蛋白質等の複合
糖質の構成要素として存在する糖鎖が、細胞間のコミュ
ニケーション、細菌の感染等、多くの生命現象に重要な
役割を果たすことから、糖鎖を結合した様々な化合物
が、細胞培養、あるいは糖鎖の関わる細胞間認識の実体
であるレクチン等の糖鎖認識物質のスクリーニング等に
用いられて来た。

【０００４】細胞表層に存在する糖鎖を模した人工系の
研究は、主に糖鎖を結合した高分子を材料として行われ
て来た（例えば、赤池敏宏ら、１１４−１２９ページ、
別冊日経サイエンス１１１「糖鎖と細胞」、入村達郎
編、日経サイエンス社、東京、１９９４年）。しかし、
高分子を用いる場合、糖鎖の密度、糖鎖の提示様式等を
制御することが難しく、また、様々な構造を持った糖鎖
を結合させたモノマーの合成も難しいことから、糖鎖密
度、提示様式、そして何より、糖鎖構造の多様性に関す
る検討が充分に行われて来なかった。

【０００５】より細胞表層に類似した系として、糖脂質
をプラスチックディッシュにコートするという研究も１
９８０年代から行われて来た（Ｒ．Ｌ．Ｓｃｈｎａａｒ
ら、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．、第１７９巻、
５４２−５５８ページ、１９８９年）。この手法は簡便
で、糖鎖の密度はコートする糖脂質の全脂質中の濃度と
して制御することが可能であり、糖鎖の提示様式は細胞
膜表面に類似していると考えられる。しかし、糖脂質の
サンプルを自然界から得るには、精製に手間が掛かり、
また、大量のサンプルを調製することも困難である。さ
らに、糖鎖の構造も極めて限定されたものになる。

【０００６】その為、合成した糖脂質アナログを用い
て、同様の実験を行う試みもなされて来た（Ｃ．Ｃ．Ｂ
ｌａｃｋｂｕｒｎとＲ．Ｌ．Ｓｃｈｎａａｒ、Ｊ．Ｂｉ
ｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２５３巻、１１８０−１１８８ペ
ージ、１９８３年）が、天然の糖脂質に類似した化学構
造を用いる限り、合成収率が低い、工程数が長い等の問
題があり、糖鎖構造の多様性に関しては、充分な検討が
行われていない。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、細胞
培養、あるいは糖鎖の関わる細胞間認識の実体であるレ
クチン等の糖鎖認識物質のスクリーニング等に使用可能
な、安価な原料から短工程、高効率で得られる、新規な
構造を持つ糖脂質アナログ化合物、及び、その合成中間
体を提供することにある。

【０００８】

【課題を解決するための手段】細胞表層に存在する糖鎖
が、細胞間コミュニケーションに関わり、多くの生命現
象に関わっていることから、これまでに、糖鎖を含有す
る高分子や糖脂質を用いて、細胞培養、あるいは糖鎖の
関わる細胞間認識の実体であるレクチン等の糖鎖認識物
質のスクリーニング等の研究、応用が行われて来た。

【０００９】しかし、先に述べた様に、糖鎖を結合した
高分子には、糖鎖密度や提示様式の制御に大きな問題が
あり、糖脂質あるいは糖脂質アナログ化合物はそれらの
点は解決できるものの、依然として、サンプルの調製に
は難点があった。

【００１０】糖鎖密度、糖鎖提示様式の制御が可能なこ
とは既に報告されているので、糖脂質アナログ化合物の
利点を生かす為の最大の問題は、その合成の難しさにあ
ると考えられる。

【００１１】本発明者らは、天然の脂質構造を離れ、式
（１）、（３）、あるいは（５）で示される化学構造を
基本構造とすれば、安価な原料から短工程、高効率で得
られる糖脂質アナログ化合物を提供できるのではないか
と考え、単糖であるグルコースとガラクトースをモデル
として用いて、式（１）、（３）、あるいは（５）で示
される糖脂質アナログ化合物を、それぞれ、式（２）、
（４）、あるいは（６）で示される化合物を中間体とし
て合成し、レクチンにより糖鎖構造が認識されることを
確認して、本発明を完成するに至った。

【００１２】本発明の糖脂質アナログ化合物合成中間体
に類似した、３，４，５−長鎖アルキロキシベンジルア
ルコール、３，４，５−長鎖アルキロキシ安息香酸の合
成については既に報告した（Ｈ．Ｔａｍｉａｋｉら、１
２５−１２８、Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ １９
９８、Ｍ．Ｋｏｎｄｏ編、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓｅａ
ｒｃｈ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ、大阪、１９９９年）。
それらの長鎖アルキロキシ部分の長さの異なる誘導体の
合成は、全て同じエーテル合成法で行えることが知られ
ている。

【００１３】糖部分のアクセプターとなる式（２）、
（４）あるいは（６）の合成中間体を得るには、長鎖ア
ルキロキシ安息香酸エステル誘導体の２−（メチルアミ
ノ）エタノールによる加溶媒分解反応を用いれば好い。

【００１４】グルコースやガラクトースの導入には、ト
リクロロアセトイミデート法を用いたが、原料となるト
リクロロアセトイミデート体の合成法は文献公知である
（Ｒ．Ｒ．ＳｃｈｍｉｄｔとＷ．Ｋｉｎｚｙ、Ａｄｖ．
Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、第
５０巻、２１−１２３、１９９４年）。参考例に示す通
り、ガラクトースが導入できれば、グルコースも同様の
手法で導入できることが知られており、また、長鎖アル
キロキシ部分の長さの異なる誘導体でも、同じ反応が使
用できることが判っている。

【００１５】糖鎖導入方法には、トリクロロアセトイミ
デートを用いる方法以外にも、糖ハライドやチオグリコ
シドを用いる方法等が知られており（Ｓ．Ｈ．Ｋｈａｎ
とＲ．Ａ．Ｏ’Ｎｅｉｌｌ編、Ｍｏｄｅｒｎ Ｍｅｔｈ
ｏｄｓ ｉｎ Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｓｙｎｔｈ
ｅｓｉｓ、Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂ
ｌｉｓｈｅｒｓ、Ａｍｓｔｅｒｄａｍ、１９９６年）、
本発明の糖脂質アナログ化合物の合成には、そうした文
献公知の糖鎖導入法を用いることもできる。

【００１６】また、グルコースとガラクトース以外の単
糖、あるいは、糖質オリゴマーを糖鎖構造とする糖脂質
アナログ化合物の合成も同様の方法で行える。さらに、
本研究の合成中間体を用いれば、その上で、糖鎖伸長反
応を行うことも可能である。

【００１７】既に報告した様に（Ｈ．Ｔａｍｉａｋｉ
ら、１２５−１２８、ＰｅｐｔｉｄｅＳｃｉｅｎｃｅ
１９９８、Ｍ．Ｋｏｎｄｏ編、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓ
ｅａｒｃｈ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ、大阪、１９９９
年）、本発明の構造を応用して、糖脂質アナログ化合物
ライブラリーを作成することも可能である。

【００１８】

【発明の実施の形態】以下に、本発明を更に具体的に説
明するが、本発明はこれに限定されるものではない。

【００１９】

【実施例１】（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチ
ル）−（３、４、５−トリス（１−オクタデシロキシ）
−ベンズアミドの合成）

【００２０】窒素雰囲気下、３、４、５−トリス（１−
オクタデシロキシ）安息香酸メチル（1.84g、1.95mmo
l）を、２−（メチルアミノ）エタノール（78.0ml、971
mmol）に加え、１１０℃で１２時間加熱後、室温で一晩
放置し、沈澱物をろ取し、メタノールで洗浄した。アル
ミナカラムクロマトグラフィー（クロロホルム）を用い
て精製を行い、エタノールから再結晶して、目的物（1.
19g、62%）を得た。

【００２１】¹H-NMR (CDCl₃, 300MHz)δ6.63(2H, s)、
3.96(6H, t, J = 6.4Hz)、3.89(2H,m)、3.70(2H, bt)、
3.44(1H, bt)、3.07(3H, s)、1.76(6H, m)、1.45(6H,
m)、1.25(84H, m)、0.88(9H, t, J = 6.5Hz)、MALDI-TO
FMS (m/z, [M+H]⁺) 983。

【００２２】

【実施例２】（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ガラクトキシエ
チル）−（３、４、５−トリス（１−オクタデシロキ
シ）−ベンズアミドの合成）

【００２３】テトラアセチルガラクトシルトリクロロア
セトイミデート(0.10g, 0.20mmol)と（Ｎ−メチル−Ｎ
−（２−ヒドロキシエチル）−（３、４、５−トリス
（１−オクタデシロキシ）−ベンズアミド(0.10g, 0.10
mmol)を乾燥ジクロロメタン(7ml)に溶かし、モレキュラ
ーシーブスAW-300(0.10g, 粉末)を加え、アルゴン雰囲
気下で１時間撹拌した。０℃に冷却して、三フッ化ホウ
素ジエチルエーテル錯体(3.2μl, 26.1μmol)をジクロ
ロメタン(1.0ml)で希釈して滴下後、徐々に室温に戻し
１．５時間撹拌した。反応終了後、トリエチルアミンを
加えて中和し、セライトろ過後、溶媒を留去した。残さ
をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (トルエン：酢
酸エチル＝３：１) により精製し、目的物のテトラアセ
チル体(60.0mg, 45%) を得た。

【００２４】¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz)δ6.63(s)、5.44
(d, J = 2.6Hz)、5.27(bd, J = 8.1Hz)、5.06(dd, J =
10.1Hz, 2.6Hz)、4.56(d, J = 6.8Hz, 幾何異性体の一
方)、4.48(m, 幾何異性体の一方)、4.19(m)、3.84-4.03
(m)、3.45-3.66(m)、3.08(s)、2.20(s)、2.10(s)、1.80
(m)、1.50(m)、1.29(m)、0.93(t, J = 6.8Hz)、MALDI-T
OFMS(m/z, [M+H]⁺) 1315。

【００２５】テトラアセチル体(96.3mg, 73.2μmol)を
乾燥メタノール(5ml)に熱を加えながら溶かし、ナトリ
ウムメトキシド(2.1mg, 36.6μmol)を加え、１時間加熱
還流した。反応終了後、アンバーライトＩＲ−１２０を
加えて中和し、ろ過後、溶媒を留去した。残さをシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノ
ール：水＝２４０：２０：１）により精製し、目的物(7
2.1mg, 86%)を得た。

【００２６】¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz)δ6.65(s, 幾何異
性体の一方)、6.59(s, 幾何異性体の一方)、4.35(d, J
= 6.6Hz, 幾何異性体の一方)、4.21(d, J = 6.6Hz,幾何
異性体の一方)、3.83-4.07(m)、3.32-3.66(m)、3.09(s,
幾何異性体の一方)、3.03(s, 幾何異性体の一方)、1.7
6(m)、1.45(m)、1.26(m)、0.88(t, J = 6.8Hz)、MALDI-
TOFMS (m/z, [M+H]⁺) 1147。

【００２７】

【実施例３】（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチ
ル）−３、５−ビス（１−オクタデシロキシ）−４−メ
トキシベンズアミドの合成）

【００２８】３、４、５−トリヒドロキシ安息香酸メチ
ル（178mg, 968μmol）をメタノール（90ml）に溶解
し、ジアゾメタンのエーテル溶液を滴下して、メチル化
を行った。アルミナカラムクロマトグラフィー（メタノ
ール）で精製を行い、得られた３、５−ジヒドロキシ−
４−メトキシ安息香酸メチルは、そのまま次の反応に用
いた。

【００２９】¹H-NMR (CDCl₃+CD₃OD, 300MHz)δ6.82(2H,
s)、3.64(3H, s)、3.60(3H, s)、MALDI-TOFMS (m/z,
[M+H]⁺) 198。

【００３０】窒素雰囲気下、この３、５−ジヒドロキシ
−４−メトキシ安息香酸メチルと１−オクタデシルブロ
マイド（206mg, 618μmol）をジメチルホルムアミド（5
ml）に溶解し、６５℃に加熱して、炭酸カリウム（415m
g, 3.00mmol）を加え、８．５時間反応を行った。１Ｍ
塩酸を加え、室温に戻した後、沈澱物をろ取し、水とメ
タノールで洗浄して、３、５−ビス（１−オクタデシロ
キシ）−４−メトキシ安息香酸メチル（65.4mg, ２ステ
ップで10%）を得た。

【００３１】¹H-NMR (CDCl₃, 300MHz)δ7.26(2H, s)、
4.03(4H, t, J = 7.0Hz)、3.89(6H,s)、1.81(4H, m)、
1.45(4H, m)、1.26(56H, m)、0.88(6H, t, J = 6.6H
z)。

【００３２】窒素雰囲気下、３、５−ビス（１−オクタ
デシロキシ）−４−メトキシ安息香酸メチル（21.4mg,
30.4μmol）に２−（メチルアミノ）エタノール（3.7m
l, 45.6mmol）を加え、１００℃で７時間反応させた。
１Ｍ塩酸を加え、室温に戻した後、沈澱物をろ取し、水
とメタノールで洗浄した。アルミナカラムクロマトグラ
フィーで精製し、メタノールから再結晶して、目的物
（1.5mg, 6.6%）を得た。

【００３３】¹H-NMR (CDCl₃, 300MHz)δ6.64(2H, s)、
3.99(4H, t, J = 7.0Hz)、3.89(2H,bt)、3.84(3H, s)、
3.71(2H, bt)、3.07(3H, s)、1.81(4H, m)、1.44(4H,
m)、1.25(56H, m)、0.88(6H, t, J = 6.5Hz)。

【００３４】

【実施例４】（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチ
ル）−３、５−ジメトキシ−４−（１−オクタデシロキ
シ）ベンズアミドの合成）

【００３５】窒素雰囲気下、３、５−ジメトキシ−４−
ヒドロキシ安息香酸（40.2mg, 203μmol）と１−オクタ
デシルブロマイド（137mg, 411μmol）をジメチルホル
ムアミド（4ml）に溶解し、６５℃に加熱し、炭酸カリ
ウム（280mg, 2.03mmol）を加え、９．５時間反応の
後、反応液を１Ｍ塩酸（20ml）に注ぎ、沈澱物をろ取
し、水とメタノールで洗浄して３、５−ジメトキシ−４
−（１−オクタデシロキシ）安息香酸オクタデシル（10
3mg, 72%）を得た。

【００３６】¹H-NMR (CDCl₃, 300MHz)δ7.29(2H, s)、
4.30(2H, t, J = 6.7Hz)、4.02(2H,t, J = 6.8Hz)、3.8
9(6H, s)、1.75(4H, m)、1.43(4H, m)、1.25(56H, m)、
0.88(6H, t, J = 6.5Hz)。

【００３７】窒素雰囲気下、３、５−ジメトキシ−４−
（１−オクタデシロキシ）安息香酸オクタデシル（83.1
mg, 118μmol）に２−（メチルアミノ）エタノール（2.
9ml,36.1mmol）を加え、１００℃で３０時間反応させ
た。２Ｍ塩酸とジクロロメタンを加え、有機層を分離し
た。溶媒を留去し、メタノールから再結晶して、目的物
（13.0mg, 22%）を得た。

【００３８】¹H-NMR (CDCl₃, 300MHz)δ6.68(2H, s)、
3.97(2H, t, J = 6.9Hz)、3.90(2H,bt)、3.85(6H, s)、
3.73(2H, s)、3.09(3H, s)、1.75(2H, m)、1.43(2H,
m)、1.25(28H, m)、0.88(6H, t, J = 6.5Hz)。

【００３９】

【実施例５】（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチ
ル）−（３、５−ビス（１−オクタデシロキシ）−ベン
ズアミドの合成）

【００４０】窒素雰囲気下、１−オクタデシルブロマイ
ド（10.0g, 30.0mmol）を、炭酸カリウム（21.1g, 153m
mol）を懸濁したジメチルホルムアミド（150ml）に加
え、６５℃に加熱し、３、５−ジヒドロキシ安息香酸
（1.54g, 9.99mmol）を加え、２６時間加熱撹拌し、食
塩を加えた氷水（1l)に注ぎ込んだ。得られた沈殿物を
ろ取し、水とメタノールで洗浄した後、ジクロロメタン
（1.25l）に溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー（ジクロロメタン）で精製し、最後にエタノールか
ら再結晶して、３、５−ビス（１−オクタデシロキシ）
安息香酸オクタデシル(7.63g,84%)を得た。

【００４１】¹H-NMR (CDCl₃, 300MHz)δ7.15(2H, d, J
= 2.0Hz)、6.63(1H, t, J = 2.0Hz)、4.28(2H, t, J =
6.7Hz)、3.96(4H, t, J = 6.5Hz)、1.76(6H, m)、1.43
(6H,m)、1.25(84H, m)、0.88(9H, t, J = 6.5Hz)、MALD
I-TOFMS(m/z, [M+H]⁺) 910。

【００４２】窒素雰囲気下、３、５−ビス（１−オクタ
デシロキシ）安息香酸オクタデシル（1.51g, 1.65mmo
l）に、２−（メチルアミノ）エタノール（66ml, 822mm
ol）を加え、１１０℃で１９時間加熱の後、室温で一晩
放置し、生成するゲルをろ別し、水とメタノールで洗浄
した。メタノールから再結晶して、目的物（1.10g, 93
%）を得た。

【００４３】¹H-NMR (CDCl₃, 300MHz)δ6.52(s)、6.48
(s)、3.93(t, J = 6.4Hz)、3.90(m)、3.71(m, 幾何異性
体の一方)、3.47(m, 幾何異性体の一方)、3.32(bt)、3.
11(s, 幾何異性体の一方)、3.04(s, 幾何異性体の一
方)、1.76(m)、1.43(m)、1.26(m)、0.88(t, J = 6.5Hz)
、MALDI-TOFMS(m/z, [M+H]⁺) 714。

【００４４】

【実施例６】（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ガラクトキシエ
チル）−（３、５−ビス（１−オクタデシロキシ）−ベ
ンズアミドの合成）

【００４５】テトラアセチルガラクトシルトリクロロア
セトイミデート(0.21g, 0.42mmol)と（Ｎ−メチル−Ｎ
−（２−ヒドロキシエチル）−（３、５−ビス（１−オ
クタデシロキシ）−ベンズアミド(0.15g, 0.21mmol)を
乾燥ジクロロメタン(10ml)に溶かし、モレキュラーシー
ブスAW-300(0.15g, 粉末)を加え、アルゴン雰囲気下で
１時間撹拌した。０℃に冷却して、三フッ化ホウ素ジエ
チルエーテル錯体(5.4μl, 41.9μmol)をジクロロメタ
ン(1.0ml)で希釈して滴下後、徐々に室温に戻し０．５
時間撹拌した。反応終了後、トリエチルアミンを加えて
中和し、セライトろ過後、溶媒を留去した。残さをシリ
カゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン：酢酸エチ
ル＝２：１) により精製し、目的物のテトラアセチル体
(69.9mg, 32%) を得た。

【００４６】¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz)δ6.47(m)、5.40
(bs)、5.22(m)、5.01(m)、4.52(d, J= 8.1Hz, 幾何異性
体の一方)、4.43(d, J = 8.1Hz, 幾何異性体の一方)、
4.15(m)、3.89(m)、3.46-3.57(m)、3.06(s, 幾何異性体
の一方)、3.00(s, 幾何異性体の一方)、2.16(s)、2.05
(s)、2.04(s)、1.98(s)、1.75(m)、1.42(m)、1.24(m)、
0.87(m)、MALDI-TOFMS(m/z, [M+H]⁺) 1047。

【００４７】テトラアセチル体(52.3mg, 49.9μmol)を
乾燥メタノール(5ml)に熱を加えながら溶かし、ナトリ
ウムメトキシド(1.4mg, 25.0μmol)を加え、室温で１．
５時間撹拌した。反応終了後、アンバーライトＩＲ−１
２０を加えて中和し、ろ過後溶媒を留去した。残さをシ
リカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メ
タノール：水＝２４０：２０：１）により精製し、目的
物(33.2mg, 76%)を得た。

【００４８】¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz)δ6.51(m)、4.34
(d, J = 7.3Hz, 幾何異性体の一方)、4.22(d, J = 7.8H
z, 幾何異性体の一方)、3.75-4.05(m)、3.33-3.64(m)、
3.10(s, 幾何異性体の一方)、3.01(s, 幾何異性体の一
方)、1.76(m)、1.42(m)、1.25(m)、0.88(t, J = 6.8H
z)、MALDI-TOFMS (m/z, [M+H]⁺) 879。

【００４９】

【実施例７】（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチ
ル）−４−（１−オクタデシロキシ）−ベンズアミドの
合成）

【００５０】窒素雰囲気下、１−オクタデシルブロマイ
ド（10.0g, 30.0mmol）を、炭酸カリウム（20.7g, 150m
mol)を懸濁したジメチルホルムアミド（200ml）に加
え、６５℃に加熱し、ｐ−ヒドロキシ安息香酸（2.07g,
15.0mmol）を加え、３０時間加熱撹拌し、食塩を加え
た氷水（1.25l）に注ぎ込んだ。沈澱物をろ取し、水と
メタノールで洗浄してから、クロロホルムに溶解し、不
溶物をろ別して、クロロホルムを留去し、エタノールか
ら再結晶して、４−（１−オクタデシロキシ）安息香酸
オクタデシル（8.44g, 87.5%）を得た。

【００５１】¹H-NMR (CDCl₃, 300MHz)δ7.98(2H, d, J
= 8.8Hz)、6.90(2H, d, J = 8.8Hz)、4.27(2H, t, J =
6.6Hz)、4.00(2H, t, J = 6.5Hz)、1.77(4H, m)、1.43
(4H,m)、1.25(56H, m)、0.88(6H, t, J = 6.5Hz) 、MAL
DI-TOFMS(m/z, [M+H]⁺) 642。

【００５２】窒素雰囲気下、４−（１−オクタデシロキ
シ）安息香酸オクタデシル（1.86g,2.89mmol）に、２−
（メチルアミノ）エタノール（58.0ml, 724mmol）を加
え、１１５℃で５８時間加熱した。濃塩酸で中和し、ジ
クロロメタンで抽出して、溶媒を留去した残さをシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール−ジクロロ
メタン）で精製した。得られた固体を、２．５％水−メ
タノールに溶解し、不溶物をろ別した後、溶媒を留去
し、アセトンから再結晶して、目的物（833mg, 66.2%）
を得た。

【００５３】¹H-NMR (CDCl₃, 300MHz)δ7.43(2H, d, J
= 8.5Hz)、6.89(2H, d, J = 8.5Hz)、3.97(2H, t, J =
6.5Hz)、3.87(2H, bt)、3.68(2H, bt)、3.09(3H, s)、
1.79(2H, m)、1.45(2H, m)、1.25(28H, m)、0.88(3H,
t, J = 6.5Hz) 、MALDI-TOFMS(m/z, [M+H]⁺) 446。

【００５４】

【実施例８】（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ガラクトキシエ
チル）−４−（１−オクタデシロキシ）−ベンズアミド
の合成）

【００５５】テトラアセチルガラクトシルトリクロロア
セトイミデート(0.22g, 0.45mmol)と（Ｎ−メチル−Ｎ
−（２−ヒドロキシエチル）−４−（１−オクタデシロ
キシ）−ベンズアミド (0.10g, 0.22mmol)を乾燥ジクロ
ロメタン(10ml)に溶かし、モレキュラーシーブスAW-300
(0.10g, 粉末)を加えアルゴン雰囲気下で１時間撹拌し
た。０℃に冷却して、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル
錯体(5.7μl, 44.7μmol)をジクロロメタン(1.0ml)で希
釈して滴下後、徐々に室温に戻し１．５時間撹拌した。
反応終了後、トリエチルアミンを加えて中和し、セライ
トろ過後、溶媒を留去した。残さをシリカゲルカラムク
ロマトグラフィー (ヘキサン：酢酸エチル＝３：２) に
より精製し、目的物のテトラアセチル体(43.1mg, 25%)
を得た。

【００５６】¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz)δ7.37(2H, d, J
= 8.1Hz)、6.89(2H, d, J = 8.8Hz)、5.40(1H, d, J =
3.2Hz)、5.23(1H, dd, J = 10.4Hz, 8.0Hz)、5.02(1H,
d, J= 10.4Hz, 3.2Hz)、4.51(1H, bs)、4.16(2H, m)、
3.97(2H, t, J = 6.6Hz)、3.92(2H, m)、3.59(2H, m)、
3.06(3H, s)、2.17(3H, s)、2.05(3H, s)、2.02(3H,
s)、1.99(3H, s) 、1.78(2H, m)、1.43(2H, m)、1.26(2
8H, m)、0.88(3H, t, J= 6.8Hz)、MALDI-TOFMS(m/z, [M
+H]⁺) 778。

【００５７】テトラアセチル体(40.9mg, 52.9μmol)を
乾燥メタノール(5ml)に熱を加えながら溶かし、ナトリ
ウムメトキシド(1.5mg, 26.5μmol)を加え、室温で２時
間撹拌した。反応終了後、アンバーライトＩＲ−１２０
を加えて中和し、ろ過後溶媒を留去した。残さをシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノ
ール：水＝２００：２０：１）により精製し、目的物(2
5.8mg, 80%)を得た。

【００５８】¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz)δ7.38(2H, d, J
= 8.5Hz)、6.88(2H, d, J = 8.5Hz)、4.30(1H, bs)、3.
96(2H, t, J = 6.6Hz)、3.85(5H, m)、3.54-3.65(5H,
m)、3.06(3H, bs)、1.77(2H, m)、1.44(2H, m)、1.29(2
8H, m)、0.88(3H, t, J = 6.8Hz)、MALDI-TOFMS (m/z,
[M+H]⁺) 610。

【００５９】

【参考例１】（３，４，５−トリス（１−オクタデシロ
キシ）−ベンジルガラクトシドの合成） テトラアセチルガラクトシルトリクロロアセトイミデー
ト(0.44g, 0.88mmol) と３，４，５−トリス（１−オク
タデシロキシ）−ベンジルアルコール(0.40g, 0.44mmo
l)を乾燥ジクロロメタン(24 ml)に溶かし、モレキュラ
ーシーブス４Ａ(0.40g, 粉末)を加えアルゴン雰囲気下
で１時間撹拌した。０℃に冷却した後、ジクロロメタン
(0.2ml)で希釈したトリメチルシリルトリフルオロメタ
ンスルホナート(0.8μl, 4.4μmol)を滴下後、徐々に室
温に戻し１．５時間撹拌した。反応終了後、トリエチル
アミンを加えて中和し、セライトろ過後溶媒を留去し
た。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキ
サン：酢酸エチル＝７：１) により精製し、目的物のテ
トラアセチル体(0.19g, 34%) を得た。

【００６０】¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz)δ6.47(2H, s)、
5.39(1H, dd, J = 3.4Hz, 2.7Hz)、5.27(1H, dd, J = 1
0.5Hz, 7.8Hz)、5.00(1H, dd, J = 10.5Hz, 3.4Hz)、4.
81(1H, d, J = 11.6Hz)、4.53(1H, d, J = 7.8Hz)、4.5
1(1H, d, J = 11.6Hz)、 4.22(1H, dd, J = 11.1Hz, 6.
6Hz)、4.14(1H, dd, J = 11.1Hz, 7.0Hz)、3.94(5H,
m)、3.89(2H, t, J = 6.2Hz)、2.15(3H, s)、2.06(3H,
s)、1.99(3H, s)、1.97(3H, s)、1.76(6H, m)、1.46(6
H, m)、1.25(84H, m)、0.88(9H, t, J = 7.1Hz)、MALDI
-TOFMS (m/z, [M+H]⁺) 1244。

【００６１】テトラアセチル体(0.11g, 0.09mmol)を乾
燥メタノール(15ml)に熱を加えながら溶かし、ナトリウ
ムメトキシド(2.7mg, 0.04mmol)を加え、３時間加熱還
流した。反応終了後、アンバーライトＩＲ−１２０を加
えて中和し、ろ過後溶媒を留去した。残さをシリカゲル
カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノー
ル＝１０：１）により精製し、目的物(0.08 g, 88 %)を
得た。

【００６２】¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz)δ6.53(2H, s)、
4.82(1H, d, J = 11.5Hz)、4.47(1H,d, J = 11.5Hz)、
4.43(1H, d, J = 7.8Hz,)、3.97(1H, dd, J = 3.4Hz)、
3.90(6H, m)、3.84(2H, dd, J = 11.9Hz, 4.6Hz)、3.66
(1H, dd, J = 9.5Hz, 7.8Hz)、3.54(1H, dd, J = 9.5H
z, 3.4Hz)、3.52(1H, m)、1.72(6H, m)、1.42(6H, m)、
1.24(84H, m)、0.84(9H, t, J = 6.8Hz)、MALDI-TOFMS
(m/z, [M+Na]⁺) 1098。

【００６３】

【参考例２】（３，４，５−トリス（１−オクタデシロ
キシ）−ベンジルグルコシドの合成）テトラアセチルグ
ルコシルトリクロロアセトイミデート(0.44g, 0.88mmo
l)と３，４，５−トリス（１−オクタデシロキシ）−ベ
ンジルアルコール(0.41g, 0.44mmol)を乾燥ジクロロメ
タン(24ml)に溶かし、モレキュラーシーブス４Ａ(0.4g,
粉末)を加えアルゴン雰囲気下で、１時間撹拌した。０
℃に冷却した後、ジクロロメタン(24ml)で希釈した三フ
ッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体(16.8μl, 0.13mmol)
を滴下後、徐々に室温に戻し0．５時間撹拌した。反応
終了後、トリエチルアミンを加えて中和し、セライトろ
過後溶媒を留去した。残さをシリカゲルカラムクロマト
グラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）により
精製し、目的物のテトラアセチル体(0.15g, 27%) を得
た。

【００６４】¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz)δ6.47(2H, s)、
5.20(1H, dd, J = 9.5Hz, 9.3Hz)、5.11(1H, dd, J =
9.8Hz, 9.5Hz)、5.06(1H, dd, J = 9.3Hz, 7.8Hz)、4.8
0(1H,d, J = 11.5Hz)、4.58(1H, d, J = 7.8Hz)、4.50
(1H, d, J = 11.5Hz)、4.28(1H, dd, J = 12.3Hz, 4.6H
z)、4.17(1H, dd, J = 12.3Hz, 2.4Hz)、3.92-4.06(6H,
m)、3.70(1H, ddd, J = 9.8Hz, 4.6Hz, 2.4Hz)、2.10(3
H, s)、2.03(3H, s)、2.00(3H, s)、1.99(3H, s)、1.76
(6H, m)、1.46(6H, m)、1.25(84H, m)、0.88(9H, t, J
= 7.1Hz)。

【００６５】テトラアセチル体(0.06g, 0.05mmol)を乾
燥メタノール(10ml)に熱を加えながら溶かし、ナトリウ
ムメトキシド(2.0mg, 0.02mmol)を加え、１時間加熱還
流した。反応終了後、アンバーライトＩＲ−１２０を加
えて中和し、ろ過後溶媒を留去した。残さをシリカゲル
カラムクロマトグラフィー (クロロホルム：メタノール
＝１０：１) により精製し、目的物(0.05g, 89%)を得
た。

【００６６】¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz)δ6.53(2H, s)、
4.81(1H, d, J = 11.5Hz)、4.47(1H,d, J = 11.5Hz)、
4.42(1H, d, J = 7.6Hz)、3.93(6H, m)、3.86 (2H,
m)、3.56-3.67(2H, m)、3.40-3.44(2H, m)、2.95(1H, b
r)、2.90(1H, d, J = 2.9Hz)、2.70(1H, d, J = 2.4H
z)、2.15(1H, m)、1.74(6H, m)、1.44(6H, m)、1.24(84
H, m)、0.86(9H, t, J = 6.8Hz)、MALDI-TOFMS(m/z, [M
+Na]⁺) 1098。

【００６７】

【参考例３】（３，４，５−トリス（１−ドデシロキ
シ）−ベンジルガラクトシドの合成）テトラアセチルガ
ラクトシルトリクロロアセトイミデート(0.30g, 0.61mm
ol)と３，４，５−トリス（１−ドデシロキシ）−ベン
ジルアルコール(0.20g, 0.30mmol) を乾燥ジクロロメタ
ン(12ml)に溶かし、モレキュラーシーブス４Ａ(0.2g,粉
末)を加えアルゴン雰囲気下で１時間撹拌した。０℃に
冷却した後、ジクロロメタン(0.2ml) で希釈したトリメ
チルシリルトリフルオロメタンスルホナート(0.6μl,
3.0μmol)を滴下後、徐々に室温に戻し４０分間撹拌し
た。反応終了後、トリエチルアミンを加えて中和し、セ
ライトろ過後溶媒を留去した。残さをシリカゲルカラム
クロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝５：１）
により精製し、目的物のテトラアセチル体(0.17g, 56%)
を得た。

【００６８】¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz)δ6.48(2H, s)、
5.40(1H, bd, J = 3.4Hz)、5.28(1H,dd, J = 10.5Hz,
8.1Hz)、5.01(1H, dd, J = 10.5Hz, 3.4Hz)、4.82(1H,
d, J= 11.5Hz)、4,54(1H, d, J = 8.1Hz)、4.52(1H, d,
J = 11.5Hz)、4.22(1H, dd,J = 11.2Hz, 6.4Hz,)、4.1
5(1H, dd, J = 11.2Hz, 7.0Hz,)、3.95(5H, m)、3.91(2
H, t, J = 4.9Hz)、2.16(3H, s)、2.07(3H, s)、2.00(3
H, s)、1.99(3H, s)、1.77(6H, m)、1.47(6H, m)、1.27
(48H, m)、0.88(9H, m, J = 6.8Hz)、MALDI-TOFMS(m/z,
[M+Na]⁺ )1014。

【００６９】テトラアセチル体(0.33g, 0.33mmol)を乾
燥メタノール(20ml)に溶かし、ナトリウムメトキシド
(9.3mg, 0.17mmol)を加え、アルゴン雰囲気下室温で１
時間撹拌した。反応終了後、アンバーライトＩＲ−１２
０を加えて中和し、ろ過後溶媒を留去した。残さをシリ
カゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタ
ノール＝２０：１）により精製し、目的物(0.12g, 45%)
を得た。

【００７０】¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz)δ6.58(2H, s)、
4.84(1H, d, J = 11.5Hz)、4.50(1H,d, J = 11.5Hz)、
4.33(1H, d, J = 7.8Hz)、3.96(5H, m)、3.92(2H, t)、
3.89(1H, dd, J = 11.7Hz, 6.0Hz)、3.83(1H, dd, J =
11.7Hz, 9.4Hz)、3.66(1H, dd, J = 9.4 Hz, 7.8Hz)、
3.53(1H, dd, J = 9.4Hz, 3.4Hz)、3.50(1H, dd, J =
9.4Hz, 6.0Hz)、1.76(6H, m)、1.44(6H, m)、1.28(48H,
m)、0.88(9H, t, J = 7.0Hz)、MALDI-TOFMS(m/z, [M+N
a]⁺) 846。

【００７１】

【発明の効果】本発明は、細胞培養やレクチン等のスク
リーニング等に使用可能な、安価な原料から短工程、高
効率で得られる、新規な構造を持つ糖脂質アナログ化合
物、及び、その合成中間体を提供するものである。

フロントページの続き Ｆターム(参考） 4C057 BB02 DD01 JJ09 4H006 AA03 AB84 BJ50 BN10 BP30 BV72

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】下記、式（１）で示される糖脂質アナログ
   化合物。 【化１】 （ただし、式中で、Ｒはグルコース残基またはガラクト
   ース残基を表し、ｌとｍとｎは、ｌ＝ｍ＝ｎでｌとｍと
   ｎが１１から１７の整数、あるいは、ｍ＝０かつｌ＝ｎ
   でｌとｎが１１から１７の整数、あるいは、ｌ＝ｎ＝０
   かつｍが１１から１７の整数、のいずれかを表す。）
2. 【請求項２】下記、式（２）で示される糖脂質アナログ
   化合物合成中間体。 【化２】 （ただし、式中で、lとｍとｎは、ｌ＝ｍ＝ｎでｌとｍ
   とｎが１１から１７の整数、あるいは、ｍ＝０かつｌ＝
   ｎでｌとｎが１１から１７の整数、あるいは、ｌ＝ｎ＝
   ０かつｍが１１から１７の整数、のいずれかを表す。）
3. 【請求項３】下記、式（３）で示される糖脂質アナログ
   化合物。 【化３】 （ただし、式中で、Ｒはグルコース残基またはガラクト
   ース残基を表し、ｎは１１から１７の整数を表す。）
4. 【請求項４】下記、式（４）で示される糖脂質アナログ
   化合物合成中間体。 【化４】 （ただし、式中で、ｎは１１から１７の整数を表す。）
5. 【請求項５】下記、式（５）で示される糖脂質アナログ
   化合物。 【化５】 （ただし、式中で、Ｒはグルコース残基またはガラクト
   ース残基を表し、ｎは１１から１７の整数を表す。）
6. 【請求項６】下記、式（６）で示される糖脂質アナログ
   化合物合成中間体。 【化６】 （ただし、式中で、ｎは１１から１７の整数を表す。）