JP2001172193A - 抗酸化性組成物およびその製法 - Google Patents
抗酸化性組成物およびその製法Info
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Abstract
(57)【要約】
【解決手段】 抗酸化活性を有する成分を含有するハラ
タケ属（Agaricus）に属する担子菌、特にそれらの子実
体をエタノール、クロロホルム、クロロホルム・メタノ
ール混液などで抽出して、下記の特性を有する抗酸化性
組成物を得る。 ｉ）溶解性：冷水には難溶であるが、３０重量％以上の
エタノール、３０重量％以上のメタノール、クロロホル
ム、クロロホルム・メタノール混液、酢酸エチルに溶解
する。 ii）紫外部での吸収特性：２６５ｎｍ付近に極大吸収が
存在する。 iii ）シリカゲルの薄層クロマトグラフィーのＲｆ値が
０．８５〜０．９２である。 iv）抗酸化活性を有する。 【効果】 抗酸化機能によって食品の保存、あるいは有
毒な活性酸素の生成を抑制して免疫機能の強化などを促
進し、ヒトの健康を保持する機能性食品としての利用に
供する。
タケ属（Agaricus）に属する担子菌、特にそれらの子実
体をエタノール、クロロホルム、クロロホルム・メタノ
ール混液などで抽出して、下記の特性を有する抗酸化性
組成物を得る。 ｉ）溶解性：冷水には難溶であるが、３０重量％以上の
エタノール、３０重量％以上のメタノール、クロロホル
ム、クロロホルム・メタノール混液、酢酸エチルに溶解
する。 ii）紫外部での吸収特性：２６５ｎｍ付近に極大吸収が
存在する。 iii ）シリカゲルの薄層クロマトグラフィーのＲｆ値が
０．８５〜０．９２である。 iv）抗酸化活性を有する。 【効果】 抗酸化機能によって食品の保存、あるいは有
毒な活性酸素の生成を抑制して免疫機能の強化などを促
進し、ヒトの健康を保持する機能性食品としての利用に
供する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、抗酸化活性を有す
る成分を含有するハラタケ属（Agaricus）に属する担子
菌から得られる抗酸化活性を有する抗酸化性組成物およ
びその製法に関する。
る成分を含有するハラタケ属（Agaricus）に属する担子
菌から得られる抗酸化活性を有する抗酸化性組成物およ
びその製法に関する。
【０００２】
【従来の技術】多くの植物食品に含まれるビタミンＣ、
α−トコフェロール、カロチノイドなどのビタミンおよ
びその前駆体の抗酸化作用はよく知られている。最近で
は緑茶のカテキン、赤ワインのクエルセチンや大豆のイ
ソフラボンなど、多様なポリフェノール系化合物の強い
抗酸化作用が、生体細胞の老化、動脈硬化や癌化をイニ
シエートする活性酸素の消去または抑制に効果的である
ことがわかり注目されている。
α−トコフェロール、カロチノイドなどのビタミンおよ
びその前駆体の抗酸化作用はよく知られている。最近で
は緑茶のカテキン、赤ワインのクエルセチンや大豆のイ
ソフラボンなど、多様なポリフェノール系化合物の強い
抗酸化作用が、生体細胞の老化、動脈硬化や癌化をイニ
シエートする活性酸素の消去または抑制に効果的である
ことがわかり注目されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、高等植
物以外の食品素材、特に生体の免疫機能を促進するとい
われている食用茸類のもつ潜在的な生理機能に着目して
種々研究を行い、抗酸化活性を有する抗酸化性組成物お
よびその製法を開発すべく鋭意研究をした。
物以外の食品素材、特に生体の免疫機能を促進するとい
われている食用茸類のもつ潜在的な生理機能に着目して
種々研究を行い、抗酸化活性を有する抗酸化性組成物お
よびその製法を開発すべく鋭意研究をした。
【０００４】
【課題を解決するための手段】その結果、アガリクス茸
として知られるアガリクス（Agaricus blazei ）、特に
その子実体から抽出した画分が強い抗酸化活性を有する
ことを発見し、この知見に基づいてさらに鋭意研究の結
果、本発明を完成するに至ったものである。
として知られるアガリクス（Agaricus blazei ）、特に
その子実体から抽出した画分が強い抗酸化活性を有する
ことを発見し、この知見に基づいてさらに鋭意研究の結
果、本発明を完成するに至ったものである。
【０００５】すなわち、本発明は、抗酸化活性を有する
成分を含有するハラタケ属（Agaricus）に属する担子
菌、特にそれらの子実体から得られる下記の特性を有す
る抗酸化性組成物である。 ｉ）溶解性：冷水には難溶であるが、３０重量％以上の
エタノール、３０重量％以上のメタノール、クロロホル
ム、クロロホルム・メタノール混液、酢酸エチルに溶解
する。 ii）紫外部での吸収特性：２６５ｎｍ付近に極大吸収が
存在する。 iii ）シリカゲルの薄層クロマトグラフィーのＲｆ値が
０．８５〜０．９２である。 iv）抗酸化活性を有する。
成分を含有するハラタケ属（Agaricus）に属する担子
菌、特にそれらの子実体から得られる下記の特性を有す
る抗酸化性組成物である。 ｉ）溶解性：冷水には難溶であるが、３０重量％以上の
エタノール、３０重量％以上のメタノール、クロロホル
ム、クロロホルム・メタノール混液、酢酸エチルに溶解
する。 ii）紫外部での吸収特性：２６５ｎｍ付近に極大吸収が
存在する。 iii ）シリカゲルの薄層クロマトグラフィーのＲｆ値が
０．８５〜０．９２である。 iv）抗酸化活性を有する。
【０００６】また、本発明は、抗酸化活性を有する成分
を含有するハラタケ属（Agaricus）に属する担子菌、特
にそれらの子実体の終濃度３０〜９０重量％のエタノー
ル抽出画分を濃縮した後、この濃縮物から終濃度７５重
量％以上のエタノールの不溶物を除去する工程を有する
抗酸化性組成物の製法である。
を含有するハラタケ属（Agaricus）に属する担子菌、特
にそれらの子実体の終濃度３０〜９０重量％のエタノー
ル抽出画分を濃縮した後、この濃縮物から終濃度７５重
量％以上のエタノールの不溶物を除去する工程を有する
抗酸化性組成物の製法である。
【０００７】さらにまた、本発明は、抗酸化活性を有す
る成分を含有するハラタケ属（Agaricus）に属する担子
菌、特にその子実体をクロロホルムまたはクロロホルム
・メタノール混液で抽出する工程を有する抗酸化性組成
物の製法である。
る成分を含有するハラタケ属（Agaricus）に属する担子
菌、特にその子実体をクロロホルムまたはクロロホルム
・メタノール混液で抽出する工程を有する抗酸化性組成
物の製法である。
【０００８】
【発明の実施の形態】本発明において「ハラタケ属（Ag
aricus）に属する担子菌」とは、担子菌門（Basidiomyc
ota ）菌蕈類（Hymenomycetes ）ハラタケ目（Agarical
es）ハラタケ科（Agaricaceae ）ハラタケ属（Agaricu
s）に属する担子菌をいい、抗酸化活性を有する成分を
含有するものであれば特に制限はない。特にアガリクス
（Agaricus blazei ）が好適に使用される。また、アガ
リクス（Agaricus blazei ）の類縁体も好適に使用さ
れ、類縁体としては、例えばAgaricus bioporus （マッ
シュルーム）、Agaricus arvensis （シロハラタケ）、
Agaricus augustus など毒性のない、または毒性の少な
い食用のアガリクス茸等が好ましいものとして挙げられ
る。以下、本発明で使用される、抗酸化活性を有する成
分を含有するハラタケ属（Agaricus）に属する担子菌
を、単に「本ハラタケ属担子菌」と呼ぶこともある。
aricus）に属する担子菌」とは、担子菌門（Basidiomyc
ota ）菌蕈類（Hymenomycetes ）ハラタケ目（Agarical
es）ハラタケ科（Agaricaceae ）ハラタケ属（Agaricu
s）に属する担子菌をいい、抗酸化活性を有する成分を
含有するものであれば特に制限はない。特にアガリクス
（Agaricus blazei ）が好適に使用される。また、アガ
リクス（Agaricus blazei ）の類縁体も好適に使用さ
れ、類縁体としては、例えばAgaricus bioporus （マッ
シュルーム）、Agaricus arvensis （シロハラタケ）、
Agaricus augustus など毒性のない、または毒性の少な
い食用のアガリクス茸等が好ましいものとして挙げられ
る。以下、本発明で使用される、抗酸化活性を有する成
分を含有するハラタケ属（Agaricus）に属する担子菌
を、単に「本ハラタケ属担子菌」と呼ぶこともある。
【０００９】本発明の組成物の原料となる「本ハラタケ
属担子菌」は、抗酸化活性を有する成分を含有している
限りはその状態は特に限定されず、生、凍結状態はもと
より、乾燥させ粉砕または粉末化したものも用いること
ができ、好適には凍結乾燥させた子実体を粉砕または粉
末化したものが使用される。
属担子菌」は、抗酸化活性を有する成分を含有している
限りはその状態は特に限定されず、生、凍結状態はもと
より、乾燥させ粉砕または粉末化したものも用いること
ができ、好適には凍結乾燥させた子実体を粉砕または粉
末化したものが使用される。
【００１０】本発明の抗酸化性組成物は、エタノー
ル、メタノール等のアルコールを使用する方法、他の
有機溶媒を用いる方法によって、本ハラタケ属担子菌、
特にそれらの子実体から抽出される。
ル、メタノール等のアルコールを使用する方法、他の
有機溶媒を用いる方法によって、本ハラタケ属担子菌、
特にそれらの子実体から抽出される。
【００１１】エタノール、メタノール等のアルコール
を使用する方法：本ハラタケ属担子菌、特にそれらの子
実体に終濃度３０〜９０重量％のエタノール、メタノー
ル等のアルコールを加え攪拌抽出した後、沈澱物を除去
し、上清画分を得ることによって、本発明の組成物を含
有するアルコール抽出画分を得る。
を使用する方法：本ハラタケ属担子菌、特にそれらの子
実体に終濃度３０〜９０重量％のエタノール、メタノー
ル等のアルコールを加え攪拌抽出した後、沈澱物を除去
し、上清画分を得ることによって、本発明の組成物を含
有するアルコール抽出画分を得る。
【００１２】上記アルコール抽出を行う場合、終濃度３
０〜９０重量％、好ましくは６０〜７０重量％のエタノ
ール、メタノール等のアルコールを用いて、通常１５〜
９０℃、好ましくは５０〜６０℃程度にて数時間〜約１
０日間程度抽出を行う。
０〜９０重量％、好ましくは６０〜７０重量％のエタノ
ール、メタノール等のアルコールを用いて、通常１５〜
９０℃、好ましくは５０〜６０℃程度にて数時間〜約１
０日間程度抽出を行う。
【００１３】また、上記の方法で抽出後に、約９０重量
％のエタノール等のアルコールを加えるなどして、アル
コールの終濃度を３５〜５０重量％とし、さらに５０〜
６０℃にて２０分間程度加熱しても良く、これにより本
発明の抗酸化性組成物が効果的に抽出され得る。
％のエタノール等のアルコールを加えるなどして、アル
コールの終濃度を３５〜５０重量％とし、さらに５０〜
６０℃にて２０分間程度加熱しても良く、これにより本
発明の抗酸化性組成物が効果的に抽出され得る。
【００１４】食用または飲用としての観点から、上記の
アルコール抽出の後に、さらに１５〜３０℃、好ましく
は常温（１５〜２５℃）で、数時間〜１０日間程度、終
濃度３０〜９０重量％のアルコールで抽出を行う。抽出
は静置または攪拌のいずれの状態でも行い得るが、適度
に攪拌しながら抽出するのが好ましい。
アルコール抽出の後に、さらに１５〜３０℃、好ましく
は常温（１５〜２５℃）で、数時間〜１０日間程度、終
濃度３０〜９０重量％のアルコールで抽出を行う。抽出
は静置または攪拌のいずれの状態でも行い得るが、適度
に攪拌しながら抽出するのが好ましい。
【００１５】得られた抽出懸濁液をチーズ・クロス、濾
紙またはフィルタープレス濾過機等により濾過して不溶
物を取り除いて粗製物を含む上清画分を得、この上清画
分を濃縮し、必要に応じて遠心分離（3,000 〜8,000 回
転、１０〜２０分間）を行って濃縮物を得る。濃縮は固
形分含量が８５〜９８重量％となるように行う。好まし
くは凍結乾燥させて、凍結乾燥物を得る。なお、本発明
においては、本凍結乾燥物を濃縮物の概念に含めるもの
とする。
紙またはフィルタープレス濾過機等により濾過して不溶
物を取り除いて粗製物を含む上清画分を得、この上清画
分を濃縮し、必要に応じて遠心分離（3,000 〜8,000 回
転、１０〜２０分間）を行って濃縮物を得る。濃縮は固
形分含量が８５〜９８重量％となるように行う。好まし
くは凍結乾燥させて、凍結乾燥物を得る。なお、本発明
においては、本凍結乾燥物を濃縮物の概念に含めるもの
とする。
【００１６】次に、濃縮物（凍結乾燥物を含む。）を再
び終濃度７５重量％以上、好ましくは終濃度８５重量％
以上のエタノール等のアルコール（１５〜２５℃）に溶
解し、不溶物を濾紙または遠心分離などにより除去す
る。このようにして精製された画分は、シロップ様の粘
稠物として得られる。なお、アルコールとしては無水ア
ルコール、含水アルコールの両者を包含する概念であ
る。
び終濃度７５重量％以上、好ましくは終濃度８５重量％
以上のエタノール等のアルコール（１５〜２５℃）に溶
解し、不溶物を濾紙または遠心分離などにより除去す
る。このようにして精製された画分は、シロップ様の粘
稠物として得られる。なお、アルコールとしては無水ア
ルコール、含水アルコールの両者を包含する概念であ
る。
【００１７】他の有機溶媒を用いる方法：本発明の組
成物は、上記のアルコールを使用する方法に代えて、
他の有機溶媒を用いても調製することができる。アルコ
ール以外の他の有機溶媒としては、クロロホルム、クロ
ロホルム・メタノール混液（例えば容量比２：１）、酢
酸エチルなどが挙げられる。
成物は、上記のアルコールを使用する方法に代えて、
他の有機溶媒を用いても調製することができる。アルコ
ール以外の他の有機溶媒としては、クロロホルム、クロ
ロホルム・メタノール混液（例えば容量比２：１）、酢
酸エチルなどが挙げられる。
【００１８】本ハラタケ属担子菌、特にそれらの乾燥子
実体１０ｇに対して、他の有機溶媒３００〜６００ｍｌ
を用い、使用する有機溶媒の沸点以下の温度にて、好ま
しくは常温（１５〜２５℃）にて抽出を行う。
実体１０ｇに対して、他の有機溶媒３００〜６００ｍｌ
を用い、使用する有機溶媒の沸点以下の温度にて、好ま
しくは常温（１５〜２５℃）にて抽出を行う。
【００１９】さらに、得られた抽出物を水で洗って水溶
性の不純物を除いた後、適当な脱水剤、例えば無水炭酸
ナトリウム、無水硫酸ナトリウムなどを加えて脱水し、
脱水物から溶媒を減圧下に除去することにより精製する
ことができる。
性の不純物を除いた後、適当な脱水剤、例えば無水炭酸
ナトリウム、無水硫酸ナトリウムなどを加えて脱水し、
脱水物から溶媒を減圧下に除去することにより精製する
ことができる。
【００２０】さらに必要ならば、この精製物中に少量存
在する、有機溶媒に可溶な不純物をシリカゲルカラムま
たは薄層クロマトグラフィーにより可及的に除去するこ
とができる。
在する、有機溶媒に可溶な不純物をシリカゲルカラムま
たは薄層クロマトグラフィーにより可及的に除去するこ
とができる。
【００２１】この他の有機溶媒を用いる方法は、上記
のアルコールを使用する方法と組み合わせてもよく、ア
ルコール抽出により得られたシロップ様の粘稠物をさら
に、この他の有機溶媒を用いる方法によって精製する
ことができる。望ましい方法を例示すると、のアルコ
ールを使用する方法により得られた粘稠物に対して１０
〜２０倍容量のクロロホルム・メタノール混液（例えば
容量比２：１）またはクロロホルムで抽出（１０〜２５
℃）する。この抽出物を水洗し脱水し（例えば、無水炭
酸ナトリウム、硫酸ナトリウム等を使用）、脱水物から
溶媒を減圧下に除去することにより精製することができ
る。
のアルコールを使用する方法と組み合わせてもよく、ア
ルコール抽出により得られたシロップ様の粘稠物をさら
に、この他の有機溶媒を用いる方法によって精製する
ことができる。望ましい方法を例示すると、のアルコ
ールを使用する方法により得られた粘稠物に対して１０
〜２０倍容量のクロロホルム・メタノール混液（例えば
容量比２：１）またはクロロホルムで抽出（１０〜２５
℃）する。この抽出物を水洗し脱水し（例えば、無水炭
酸ナトリウム、硫酸ナトリウム等を使用）、脱水物から
溶媒を減圧下に除去することにより精製することができ
る。
【００２２】さらに必要ならば、この精製物中に少量存
在する、クロロホルム可溶不純物（リノール酸など）を
シリカゲルカラム（ワコーゲルＣ−１００など）または
薄層クロマトグラフィー（Kieselgel 60 F254 、メルク
社製など）により可及的に除去することができる。
在する、クロロホルム可溶不純物（リノール酸など）を
シリカゲルカラム（ワコーゲルＣ−１００など）または
薄層クロマトグラフィー（Kieselgel 60 F254 、メルク
社製など）により可及的に除去することができる。
【００２３】以上の通り、本発明の抗酸化性組成物は、
メタノール、クロロホルム、クロロホルム・メタノール
混液などのエタノール以外の有機溶媒により抽出され得
るが、本発明の抗酸化性組成物を食用に供し、または食
品加工もしくは薬用材料として供するなどの用途を考慮
すれば、抽出に用いる有機溶媒としてはエタノールが望
ましい。
メタノール、クロロホルム、クロロホルム・メタノール
混液などのエタノール以外の有機溶媒により抽出され得
るが、本発明の抗酸化性組成物を食用に供し、または食
品加工もしくは薬用材料として供するなどの用途を考慮
すれば、抽出に用いる有機溶媒としてはエタノールが望
ましい。
【００２４】かくして得られた本発明の抗酸化性組成物
は、下記の特性を有する。 ｉ）溶解性：冷水には難溶であるが、３０重量％以上の
エタノール、３０重量％以上のメタノール、クロロホル
ム、クロロホルム・メタノール混液（例えば容量比２：
１）、酢酸エチルに溶解する。
は、下記の特性を有する。 ｉ）溶解性：冷水には難溶であるが、３０重量％以上の
エタノール、３０重量％以上のメタノール、クロロホル
ム、クロロホルム・メタノール混液（例えば容量比２：
１）、酢酸エチルに溶解する。
【００２５】ここで、「溶解性」とは、抗酸化性組成物
を溶媒中に入れ、２０±５℃（但し、冷水は下記の温度
のものをいう）で５分毎に強く３０秒間振り混ぜると
き、３０分以内に溶ける度合いをいう。抗酸化性組成物
１ｇを溶かすのに要する溶媒の量が１０００ｍｌ以上を
「難溶」、１００ｍｌ未満を「溶解する」と定めた。
「冷水」は１５℃以下の水をいう。
を溶媒中に入れ、２０±５℃（但し、冷水は下記の温度
のものをいう）で５分毎に強く３０秒間振り混ぜると
き、３０分以内に溶ける度合いをいう。抗酸化性組成物
１ｇを溶かすのに要する溶媒の量が１０００ｍｌ以上を
「難溶」、１００ｍｌ未満を「溶解する」と定めた。
「冷水」は１５℃以下の水をいう。
【００２６】ii）紫外部での吸収特性（抗酸化性組成物
の０．０１w/v ％メタノール溶液を比色計で測定）：２
６５ｎｍ付近に極大吸収が存在する。紫外部での吸収特
性は通常使用される比色計を用いて測定することが可能
である。
の０．０１w/v ％メタノール溶液を比色計で測定）：２
６５ｎｍ付近に極大吸収が存在する。紫外部での吸収特
性は通常使用される比色計を用いて測定することが可能
である。
【００２７】iii ）シリカゲルの薄層クロマトグラフィ
ーのＲｆ値が０．８５〜０．９２である。展開剤にはク
ロロホルム：メタノール：水＝６５：２５：４を用い
る。発色剤には２０w/v ％モリブドリン酸エタノール溶
液を用い、これを噴霧して１２０℃、５分間加熱して発
色させる。シリカゲルの薄層クロマトグラフィーのＲｆ
値は、日本薬局方に規定される薄層クロマトグラフ法に
準じて求められる。
ーのＲｆ値が０．８５〜０．９２である。展開剤にはク
ロロホルム：メタノール：水＝６５：２５：４を用い
る。発色剤には２０w/v ％モリブドリン酸エタノール溶
液を用い、これを噴霧して１２０℃、５分間加熱して発
色させる。シリカゲルの薄層クロマトグラフィーのＲｆ
値は、日本薬局方に規定される薄層クロマトグラフ法に
準じて求められる。
【００２８】iv）抗酸化活性を有する。
【００２９】
【実施例】以下、本発明を実施例および試験例によって
さらに詳しく説明するが、本発明はこれらに限定される
ものではない。
さらに詳しく説明するが、本発明はこれらに限定される
ものではない。
【００３０】実施例１ 国内産のアガリクス茸の凍結乾燥標品２６．６ｇ（生茸
３２０ｇに相当）をブレンダーで粉砕して、これに７５
重量％エタノール７００ｍｌを加え１５℃〜２５℃で一
晩攪拌した。得られたアルコール抽出液を濾過して、多
糖類およびタンパク質等を含む不純物を除き、透明なア
ルコール溶液を減圧濃縮して褐色のシロップ状の無水濃
縮物８．２５ｇを得た。
３２０ｇに相当）をブレンダーで粉砕して、これに７５
重量％エタノール７００ｍｌを加え１５℃〜２５℃で一
晩攪拌した。得られたアルコール抽出液を濾過して、多
糖類およびタンパク質等を含む不純物を除き、透明なア
ルコール溶液を減圧濃縮して褐色のシロップ状の無水濃
縮物８．２５ｇを得た。
【００３１】これに９５重量％メタノール３００ｍｌを
加え一晩２０〜２５℃で攪拌した。そのときにできる結
晶状沈澱を濾過によって除去し、その濾液を再度濃縮し
て、抗酸化性組成物４．９５ｇを得た。
加え一晩２０〜２５℃で攪拌した。そのときにできる結
晶状沈澱を濾過によって除去し、その濾液を再度濃縮し
て、抗酸化性組成物４．９５ｇを得た。
【００３２】実施例２ 生のアガリクス茸５本（５００ｇ、水分８５重量％）を
蒸留酒（エタノール濃度３５〜４５重量％）１リットル
に浸して、２０〜２５℃で２ヶ月間保存した後、これよ
り１００ｍｌ採取しシロップ状に濃縮して、７５重量％
エタノールに溶解した。これを濾紙にて濾過して、得ら
れた濾液を再度濃縮することにより、約１００ｍｇの抗
酸化性組成物が得られた。
蒸留酒（エタノール濃度３５〜４５重量％）１リットル
に浸して、２０〜２５℃で２ヶ月間保存した後、これよ
り１００ｍｌ採取しシロップ状に濃縮して、７５重量％
エタノールに溶解した。これを濾紙にて濾過して、得ら
れた濾液を再度濃縮することにより、約１００ｍｇの抗
酸化性組成物が得られた。
【００３３】実施例３ 実施例１で得たアルコール画分（抗酸化性組成物）に２
００ｍｌのクロロホルムを２０〜２５℃で加え超音波方
法で短時間（５分間）処理し、可及的に溶解させた。こ
のクロロホルム抽出液に１／３容量の水を加えて、よく
振盪した後クロロホルム層に無水炭酸ナトリウムを加え
て脱水し、クロロホルム溶液を減圧下に２０〜２５℃で
濃縮することによって可及的に精製された抗酸化性組成
物を得た（約２５０ｍｇ）。この抗酸化性組成物は、元
素分析によれば、炭素、水素および酸素からなることが
分かった（炭素５７．６５％、水素１０．６５％、酸素
３１．７％）。
００ｍｌのクロロホルムを２０〜２５℃で加え超音波方
法で短時間（５分間）処理し、可及的に溶解させた。こ
のクロロホルム抽出液に１／３容量の水を加えて、よく
振盪した後クロロホルム層に無水炭酸ナトリウムを加え
て脱水し、クロロホルム溶液を減圧下に２０〜２５℃で
濃縮することによって可及的に精製された抗酸化性組成
物を得た（約２５０ｍｇ）。この抗酸化性組成物は、元
素分析によれば、炭素、水素および酸素からなることが
分かった（炭素５７．６５％、水素１０．６５％、酸素
３１．７％）。
【００３４】実施例４ アガリクス茸の凍結乾燥物（９．８ｇ）を粉末化し、こ
れに２００ｍｌのクロロホルム・メタノール混液（２：
１の容量比）を加え、２０〜２５℃で１時間振盪下に抽
出した。抽出液に無水炭酸ナトリウムを加えて脱水し
た。脱水液を減圧下に２０〜２５℃で濃縮することによ
って可及的に精製された抗酸化性組成物を得た（約６０
ｍｇ）。
れに２００ｍｌのクロロホルム・メタノール混液（２：
１の容量比）を加え、２０〜２５℃で１時間振盪下に抽
出した。抽出液に無水炭酸ナトリウムを加えて脱水し
た。脱水液を減圧下に２０〜２５℃で濃縮することによ
って可及的に精製された抗酸化性組成物を得た（約６０
ｍｇ）。
【００３５】実施例５ 実施例４のクロロホルム・メタノール混液（２：１の容
量比）の抽出で得られた抗酸化性組成物を水洗によって
精製して、水溶性不純物を除いた。
量比）の抽出で得られた抗酸化性組成物を水洗によって
精製して、水溶性不純物を除いた。
【００３６】実施例１〜５で得られた抗酸化性組成物に
ついて以下の特性を確認した。
ついて以下の特性を確認した。
【００３７】試験例１（抗酸化性組成物の溶解性） ｉ）冷水に対する溶解性：抗酸化性組成物１００ｍｇに
対して１００ｍｌの水（１０℃）には溶解せず、難溶で
あった。
対して１００ｍｌの水（１０℃）には溶解せず、難溶で
あった。
【００３８】ii）７０重量％のエタノールに対する溶解
性：抗酸化性組成物１００ｍｇに対して２０ｍｌの７０
重量％エタノール水溶液（２０℃）で溶解した。
性：抗酸化性組成物１００ｍｇに対して２０ｍｌの７０
重量％エタノール水溶液（２０℃）で溶解した。
【００３９】iii ）７０重量％のメタノールに対する溶
解性：抗酸化性組成物１００ｍｇに対して１５ｍｌの７
０重量％メタノール水溶液（２０℃）で溶解した。
解性：抗酸化性組成物１００ｍｇに対して１５ｍｌの７
０重量％メタノール水溶液（２０℃）で溶解した。
【００４０】iv）クロロホルムに対する溶解性：抗酸化
性組成物１００ｍｇに対して２５ｍｌのクロロホルム
（２０℃）で溶解した。
性組成物１００ｍｇに対して２５ｍｌのクロロホルム
（２０℃）で溶解した。
【００４１】ｖ）クロロホルム・メタノール混液（２：
１の容量比）に対する溶解性：抗酸化性組成物１００ｍ
ｇに対して２５ｍｌのクロロホルム・メタノール混液
（２０℃）で溶解した。
１の容量比）に対する溶解性：抗酸化性組成物１００ｍ
ｇに対して２５ｍｌのクロロホルム・メタノール混液
（２０℃）で溶解した。
【００４２】vi）酢酸エチルに対する溶解性：抗酸化性
組成物１００ｍｇに対して２５ｍｌの酢酸エチル（２０
℃）で溶解した。
組成物１００ｍｇに対して２５ｍｌの酢酸エチル（２０
℃）で溶解した。
【００４３】試験例２（抗酸化性組成物の紫外部での吸
収特性） 紫外部での吸収特性（抗酸化性組成物の０．０１w/v ％
メタノール溶液を比色計で測定）：いずれも２６５ｎｍ
付近に極大吸収が存在した。
収特性） 紫外部での吸収特性（抗酸化性組成物の０．０１w/v ％
メタノール溶液を比色計で測定）：いずれも２６５ｎｍ
付近に極大吸収が存在した。
【００４４】試験例３（抗酸化性組成物の薄層クロマト
グラフィー） シリカゲルの薄層クロマトグラフィーのＲｆ値は０．８
５〜０．９２であった。展開剤にはクロロホルム：メタ
ノール：水＝６５：２５：４を用いた。発色剤には２０
w/v ％モリブドリン酸エタノール溶液を用い、これを噴
霧して１２０℃、５分間加熱して発色させた。薄層プレ
ートとしては、Kieselgel 60 F254 （メルク社製）を使
用した。蛍光発色のスポットの位置からカテキン、クエ
ルセチン、コーヒー酸など、既知の植物性ポリフェノー
ル類とは異なっていた。
グラフィー） シリカゲルの薄層クロマトグラフィーのＲｆ値は０．８
５〜０．９２であった。展開剤にはクロロホルム：メタ
ノール：水＝６５：２５：４を用いた。発色剤には２０
w/v ％モリブドリン酸エタノール溶液を用い、これを噴
霧して１２０℃、５分間加熱して発色させた。薄層プレ
ートとしては、Kieselgel 60 F254 （メルク社製）を使
用した。蛍光発色のスポットの位置からカテキン、クエ
ルセチン、コーヒー酸など、既知の植物性ポリフェノー
ル類とは異なっていた。
【００４５】試験例４（抗酸化活性） 実施例１、３、４および５で得られた各抗酸化性組成
物、ＢＨＴ（tert-butyl-4-hydroxytoluene ）、α−ト
コフェロール、カテキンおよびクエルセチンについて、
リノール酸の酸化（暗所、３７℃、４０日間）抑制効果
を比較するために、下記のロダン鉄アンモン法およびチ
オバルビツル酸（thiobarbituric acid 、ＴＢＡ）法で
測定した。
物、ＢＨＴ（tert-butyl-4-hydroxytoluene ）、α−ト
コフェロール、カテキンおよびクエルセチンについて、
リノール酸の酸化（暗所、３７℃、４０日間）抑制効果
を比較するために、下記のロダン鉄アンモン法およびチ
オバルビツル酸（thiobarbituric acid 、ＴＢＡ）法で
測定した。
【００４６】ｉ）ロダン鉄アンモン法 〔試薬〕 ０．０５Ｍのリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）：０．１Ｍ
第一リン酸ナトリウムと０．１Ｍ第二リン酸ナトリウム
とを適正に混合（例えば１９．５ｍｌと３０．５ｍ
ｌ）、蒸留水で１００ｍｌとする。 ０．２Ｍの塩化鉄(II)（ferrous chloride）（例えば
メルク社の FeCl2・4H2O）の３．５w/v ％塩酸溶液 ３０w/v ％のチオシアン酸アンモニウム（ammonium t
hiocyanate、ＮＨ4 ＳＣＮ）水溶液 高純度のリノール酸（linoleic acid ） 以上の〜の試薬は冷所に保存した。 ２．５w/v ％リノール酸エタノール溶液〔高純度のリ
ノール酸を９９．５v/v％（無水）エタノールで溶解し
たもの〕
第一リン酸ナトリウムと０．１Ｍ第二リン酸ナトリウム
とを適正に混合（例えば１９．５ｍｌと３０．５ｍ
ｌ）、蒸留水で１００ｍｌとする。 ０．２Ｍの塩化鉄(II)（ferrous chloride）（例えば
メルク社の FeCl2・4H2O）の３．５w/v ％塩酸溶液 ３０w/v ％のチオシアン酸アンモニウム（ammonium t
hiocyanate、ＮＨ4 ＳＣＮ）水溶液 高純度のリノール酸（linoleic acid ） 以上の〜の試薬は冷所に保存した。 ２．５w/v ％リノール酸エタノール溶液〔高純度のリ
ノール酸を９９．５v/v％（無水）エタノールで溶解し
たもの〕
【００４７】〔操作〕スクリューキャップ付のバイアル
（４０ｍｍ径×７５ｍｍ）に測定用の各サンプル４ｍｇ
を精秤して入れ、これに２ｍｌの無水エタノールを加え
て溶解した。別に調製したリノール酸の２．５w/v ％エ
タノール溶液２ｍｌを加え、さらに４ｍｌの０．０５Ｍ
リン酸緩衝液、次いで２ｍｌの水を加えて全容を１０ｍ
ｌにした。コントロールとしてはサンプルのかわりに２
ｍｌの無水エタノールを加えたものを、またブランクと
してはサンプルおよびリノール酸を共に含まないものを
調製した。これらのバイアルにスクリューキャップをし
て、４０℃で暗所に３６〜５０日間静置した。
（４０ｍｍ径×７５ｍｍ）に測定用の各サンプル４ｍｇ
を精秤して入れ、これに２ｍｌの無水エタノールを加え
て溶解した。別に調製したリノール酸の２．５w/v ％エ
タノール溶液２ｍｌを加え、さらに４ｍｌの０．０５Ｍ
リン酸緩衝液、次いで２ｍｌの水を加えて全容を１０ｍ
ｌにした。コントロールとしてはサンプルのかわりに２
ｍｌの無水エタノールを加えたものを、またブランクと
してはサンプルおよびリノール酸を共に含まないものを
調製した。これらのバイアルにスクリューキャップをし
て、４０℃で暗所に３６〜５０日間静置した。
【００４８】２４時間ごとに対照（ブランク）、コント
ロールおよびサンプル０．１ｍｌを採取し、これに７５
重量％エタノール（９．７ｍｌ）と３０w/v ％チオシア
ン酸アンモニウム水溶液（０．１ｍｌ）を加えた。次い
で０．２Ｍ塩化鉄(II)（３．５w/v ％塩酸溶液中）を加
え、正確に３分間置いた後、５００ｎｍにおける各溶液
の吸光度を測定し、コントロールとサンプルとの吸光度
の差から抗酸化活性を求めた。
ロールおよびサンプル０．１ｍｌを採取し、これに７５
重量％エタノール（９．７ｍｌ）と３０w/v ％チオシア
ン酸アンモニウム水溶液（０．１ｍｌ）を加えた。次い
で０．２Ｍ塩化鉄(II)（３．５w/v ％塩酸溶液中）を加
え、正確に３分間置いた後、５００ｎｍにおける各溶液
の吸光度を測定し、コントロールとサンプルとの吸光度
の差から抗酸化活性を求めた。
【００４９】ii）ＴＢＡ法 〔試薬〕 ２０w/v ％トリクロール酢酸水溶液 ０．６７w/v ％２−チオバルビツル酸（ＴＢＡ）水溶
液
液
【００５０】〔操作〕上記の「ロダン鉄アンモン法」で
述べた抗酸化測定において反応の最終（４０日後）に各
サンプル溶液２．０ｍｌを試験管（１０ｍｌ）に採取
し、周知の方法に従って、２０w/v ％トリクロール酢酸
水溶液１．０ｍｌと０．６７w/v ％ＴＢＡ水溶液２．０
ｍｌを加えた。ブランクにはＴＢＡ水溶液の代わりに蒸
留水を加えた。各試験管を１０分間煮沸し、冷却後3,00
0 回転、２０分間遠心分離した。上清液の５３２ｎｍに
おける吸光度の測定値から０時間における測定値を引い
た値をサンプルのＴＢＡ値とした。
述べた抗酸化測定において反応の最終（４０日後）に各
サンプル溶液２．０ｍｌを試験管（１０ｍｌ）に採取
し、周知の方法に従って、２０w/v ％トリクロール酢酸
水溶液１．０ｍｌと０．６７w/v ％ＴＢＡ水溶液２．０
ｍｌを加えた。ブランクにはＴＢＡ水溶液の代わりに蒸
留水を加えた。各試験管を１０分間煮沸し、冷却後3,00
0 回転、２０分間遠心分離した。上清液の５３２ｎｍに
おける吸光度の測定値から０時間における測定値を引い
た値をサンプルのＴＢＡ値とした。
【００５１】本発明によるアガリクスの抗酸化性組成物
のリノール酸に対する酸化抑制作用を既知の抗酸化物質
であるＢＨＴ、α−トコフェロール、カテキンおよびク
エルセチンと比較した結果を図１および図２（ロダン鉄
アンモン法）ならびに図３（ＴＢＡ法）に示す。
のリノール酸に対する酸化抑制作用を既知の抗酸化物質
であるＢＨＴ、α−トコフェロール、カテキンおよびク
エルセチンと比較した結果を図１および図２（ロダン鉄
アンモン法）ならびに図３（ＴＢＡ法）に示す。
【００５２】実施例１のサンプルは７５重量％エタノー
ル抽出画分で、実施例３のサンプルは実施例１で得られ
た抗酸化性組成物をクロロホルムで再抽出することによ
ってさらに濃縮精製したものである。いずれのサンプル
も、α−トコフェロール、カテキンより強く、ＢＨＴや
クエルセチンに匹敵した高活性を発現するが、実施例１
のサンプルをさらに精製した実施例３のサンプルの方が
優っていることが分かる（図１および図３参照）。
ル抽出画分で、実施例３のサンプルは実施例１で得られ
た抗酸化性組成物をクロロホルムで再抽出することによ
ってさらに濃縮精製したものである。いずれのサンプル
も、α−トコフェロール、カテキンより強く、ＢＨＴや
クエルセチンに匹敵した高活性を発現するが、実施例１
のサンプルをさらに精製した実施例３のサンプルの方が
優っていることが分かる（図１および図３参照）。
【００５３】実施例４のクロロホルム・メタノール混液
（２：１の容量比）の抽出で得られた抗酸化性組成物
と、これを水洗によって精製した実施例５の組成物とを
比較すると、実施例５の組成物では水洗により水溶性不
純物が除かれて、抗酸化活性が高くなっていることが分
かる（図２参照）。
（２：１の容量比）の抽出で得られた抗酸化性組成物
と、これを水洗によって精製した実施例５の組成物とを
比較すると、実施例５の組成物では水洗により水溶性不
純物が除かれて、抗酸化活性が高くなっていることが分
かる（図２参照）。
【００５４】本発明の抗酸化性組成物は、実施例３〜５
に示すように、クロロホルム、クロロホルム・メタノー
ル混液などのエタノール以外の有機溶媒による直接的ま
たは副次的な抽出に付すことも可能である。しかし、本
発明の抗酸化性組成物の食品工業上の用途または機能性
食品（飲料など）としての用途を考慮すれば、抽出溶媒
としては安全なエタノールが望ましい。但し、クロロホ
ルムなどエタノール以外の有機溶剤で抽出した場合であ
っても、十分な乾燥を施せば、食用に供することができ
る。
に示すように、クロロホルム、クロロホルム・メタノー
ル混液などのエタノール以外の有機溶媒による直接的ま
たは副次的な抽出に付すことも可能である。しかし、本
発明の抗酸化性組成物の食品工業上の用途または機能性
食品（飲料など）としての用途を考慮すれば、抽出溶媒
としては安全なエタノールが望ましい。但し、クロロホ
ルムなどエタノール以外の有機溶剤で抽出した場合であ
っても、十分な乾燥を施せば、食用に供することができ
る。
【００５５】
【発明の効果】本発明によれば、ハラタケ属（Agaricu
s）に属する担子菌、特にそれらの子実体から強力な抗
酸化活性を有する組成物が提供される。その抗酸化機能
によって食品の保存、あるいは有毒な活性酸素の生成を
抑制して免疫機能の強化などを促進し、ヒトの健康を保
持する機能性食品としての利用に供することができる。
s）に属する担子菌、特にそれらの子実体から強力な抗
酸化活性を有する組成物が提供される。その抗酸化機能
によって食品の保存、あるいは有毒な活性酸素の生成を
抑制して免疫機能の強化などを促進し、ヒトの健康を保
持する機能性食品としての利用に供することができる。
【図１】試験例２におけるロダン鉄アンモン法の試験結
果（実施例１および３）を示すグラフである。
果（実施例１および３）を示すグラフである。
【図２】試験例２におけるロダン鉄アンモン法の試験結
果（実施例４および５）を示すグラフである。
果（実施例４および５）を示すグラフである。
【図３】試験例２におけるＴＢＡ法の試験結果を示すグ
ラフである。
ラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き Ｆターム(参考） 4B021 MC03 MK02 MK06 4C088 AA07 AC17 BA04 BA10 CA06 CA09 NA14 ZC02
Claims (5)
- 【請求項１】 抗酸化活性を有する成分を含有するハラ
タケ属（Agaricus）に属する担子菌から得られる下記の
特性を有する抗酸化性組成物。 ｉ）溶解性：冷水には難溶であるが、３０重量％以上の
エタノール、３０重量％以上のメタノール、クロロホル
ム、クロロホルム・メタノール混液、酢酸エチルに溶解
する。 ii）紫外部での吸収特性：２６５ｎｍ付近に極大吸収が
存在する。 iii ）シリカゲルの薄層クロマトグラフィーのＲｆ値が
０．８５〜０．９２である。 iv）抗酸化活性を有する。 - 【請求項２】 担子菌の子実体から得られる請求項１記
載の抗酸化性組成物。 - 【請求項３】 抗酸化活性を有する成分を含有するハラ
タケ属（Agaricus）に属する担子菌の終濃度３０〜９０
重量％のエタノール抽出画分を濃縮した後、この濃縮物
から終濃度７５重量％以上のエタノールの不溶物を除去
する工程を有する抗酸化性組成物の製法。 - 【請求項４】 抗酸化活性を有する成分を含有するハラ
タケ属（Agaricus）に属する担子菌をクロロホルムまた
はクロロホルム・メタノール混液で抽出する工程を有す
る抗酸化性組成物の製法。 - 【請求項５】 担子菌の子実体を使用する請求項３また
は４記載の抗酸化性組成物の製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35518499A JP2001172193A (ja) | 1999-12-14 | 1999-12-14 | 抗酸化性組成物およびその製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35518499A JP2001172193A (ja) | 1999-12-14 | 1999-12-14 | 抗酸化性組成物およびその製法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2001172193A true JP2001172193A (ja) | 2001-06-26 |
Family
ID=18442446
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP35518499A Pending JP2001172193A (ja) | 1999-12-14 | 1999-12-14 | 抗酸化性組成物およびその製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2001172193A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004307453A (ja) * | 2003-04-07 | 2004-11-04 | Bhn Kk | 血管新生阻害剤及びその利用 |
| JP2008266177A (ja) * | 2007-04-19 | 2008-11-06 | Noda Shokukin Kogyo Kk | 脳保護剤 |
-
1999
- 1999-12-14 JP JP35518499A patent/JP2001172193A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004307453A (ja) * | 2003-04-07 | 2004-11-04 | Bhn Kk | 血管新生阻害剤及びその利用 |
| JP2008266177A (ja) * | 2007-04-19 | 2008-11-06 | Noda Shokukin Kogyo Kk | 脳保護剤 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060627 |
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| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20061024 |