JP2001120091A - 薬用人参培養苗の製造方法 - Google Patents

薬用人参培養苗の製造方法

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JP2001120091A
JP2001120091A JP30334499A JP30334499A JP2001120091A JP 2001120091 A JP2001120091 A JP 2001120091A JP 30334499 A JP30334499 A JP 30334499A JP 30334499 A JP30334499 A JP 30334499A JP 2001120091 A JP2001120091 A JP 2001120091A
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ginseng
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JP30334499A
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Kazuo Ii
一夫 伊井
Isao Asaka
勲 淺香
Yukiko Tokin
由紀子 東近
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NIPPON NINJIN HANBAI NOGYO KYODO KUMIAI RENGOKAI
Bio Oriented Technology Research Advancement Institution
Sasaki Co Ltd
AGC Techno Glass Co Ltd
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NIPPON NINJIN HANBAI NOGYO KYODO KUMIAI RENGOKAI
Bio Oriented Technology Research Advancement Institution
Asahi Techno Glass Corp
Sasaki Co Ltd
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Abstract

(57)【要約】 【課題】 薬用人参から誘導した無菌培養苗の製造方法
において、根の伸長方向をコントロールすると共に、一
定方向への伸長をさらに延長すること、および短い細根
の多発を防げ、乾燥に強く吸水力のある根を育成するこ
とを含む無菌培養苗の製造方法を提供すること。 【構成】本発明は、薬用人参培養苗の育苗に斜面培地を
利用すること、成長段階に応じて急勾配の培地に移植す
ることで、課題を達成した。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は組織培養によって、薬用
人参の苗を大量に得るための方法に関するものである。
さらに詳しくは、本発明は、薬用人参の無菌培養苗の馴
化・育苗法を含む薬用人参無菌培養苗の製造方法に関す
るものである。
【0002】
【従来の技術】薬用人参(オタネニンジン:Panax
ginseng C.A.Meyer)は、重要な薬
用植物として栽培され、通常は種子により繁殖されてい
る。古くから漢方薬、民間薬として広く用いられてきた
生薬の一種で、最近では健康食品にも利用されるように
なり、需要はますます伸びる一方である。しかし、生薬
原料として用いられる薬用人参は、通常収穫までに4年
〜7年を要し、天候によっても生育が左右されやすく、
また病害(ネグサレ病、タチガレ病、ハンテン病など)
や害虫(ウドコブゾウムシ、ズイムシなど)による被害
も多いため栽培には多大な労力を要している。従って、
優良な品種の安定な保存と供給が望まれていたが、薬用
人参は自殖性であり種子の採取までに最低3年を要する
ため、優良品種の苗を大量に得ることは困難なものとさ
れていた。
【0003】そこで上記の問題を解決するために、薬用
人参の根、茎、葉などの組織からオーキシン類およびサ
イトカイニン類を含有するカルス誘導培地を用いてカル
スを誘導し、該カルスを増殖し、次いで該カルスを光照
射下で再分化させる方法(特開昭61−216619号
公報)が提案されたが、地上部を誘導した後に根を誘導
する過程が必要であるため手間がかかり、また発根の効
率や幼苗の圃場での活着にも問題がある。さらに、再分
化して得られる幼苗の数がカルスの量に依存し、またカ
ルスは継代を繰り返すとかなりの割合で変異するので、
1個体の植物から得られる正常なクローン苗の量に限界
があるという欠点がある。
【0004】一方、これまでに食用人参など多くの植物
において、種子と同様の形態変化の過程をとって成長す
る不定胚を誘導して幼苗を得る技術が多数報告されてい
るが、薬用人参においては既に根や子葉などからカルス
を誘導し、さらに不定胚を誘導してこれを再分化させ幼
苗を得る方法(W.C.Chang,Y.I.Hsin
g;THEORITICAL AND APPLIED
GENENNTICS,57,133,(198
0)、特開昭62−151117号公報、特開昭63−
248321号公報)が提案されている。しかしこの方
法では不定胚の誘導効率に問題があり、また培養開始か
ら幼苗を得るまでに長期間を要するという欠点がある。
【0005】そこでこれらの問題点を解決するために、
花芽を材料に不定胚を誘導する方法(特公平2−515
73号公報)、および不定胚からシュートを誘導し、こ
れをマルチプルシュート化して増殖させる方法(特公平
3−44725号公報)などが提案されている。しか
し、これらの方法も前述のカルスから光照射で再分化さ
せる方法と同様カルスを経由するために、継代培養を繰
り返すうちに不定胚形成能や再分化能が失われ、加えて
変異が発生する可能性がある。
【0006】そこで、不定胚形成能や再分化能が安定に
保持し継代培養できる、再分化組織より高温処理により
直接的に不定胚を誘導する方法が提案された(特開平4
−370047号公報)。
【0007】ところで、通常不定胚は雑多な組織中にお
いて徐々に分化してくるため、他の組織から成熟不定胚
だけを分離しなければ効率よく苗を生産することはでき
ない。従って、不定胚からの苗の大量生産を行うために
は、1培養周期内でできる限り大量に、且つ同調的に成
熟胚を得ることが必要である。既に食用人参においては
細胞塊の大きさをメッシュによって揃える方法(鎌田
博,原田 宏,「植物細胞組織培養」,理工学社,p.
94,(1979))や、細胞塊の培地中の密度を調整
する方法(第12回植物組織培養学会 講演要旨集,p
p53,(1991))などが同調的に不定胚を誘導す
る方法として提案されているが、薬用人参に関してはそ
の様な同調化の方法はまだ確立されていない。
【0008】また食用人参などでは、芽生えの茎頂を高
濃度のサッカロースやマンニトールを含む培地で一時的
に高浸透圧処理することにより、不定胚が誘導できると
の報告があるが(Kamada H.,Kobayas
hi K.,KiyosueT., and Hara
da H., In Vitro Cell.Dev.
Biol.,Vol.25,pp.1163,(198
9))、薬用人参においてはそのような方法、および条
件は知られていなかった。
【0009】そこで、不定胚形成組織を炭素源濃度を4
〜20g/lに調整された培地で培養することにより不
定胚を連続的に大量に増殖させる方法が提案され(特開
平5−168359号公報)、これらの方法によって質
の高い不定胚が量産できるようになり無菌培養苗が大量
に得られるようになった。
【0010】しかし、オタネニンジンは乾燥した環境で
生育するため、容器内の湿度が非常に高い環境下で育成
した無菌培養苗を圃場に活着させるためには、移植前の
馴化工程に長時間を要していた。また、移植の成功は、
育苗時に根の毛根が発達し、且つ主根が長く伸長する必
要があるが、この点を効率よくコントロールする育苗方
法は知られていない。
【0011】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、前述
の問題点を解決しようとするものであり、無菌培養苗を
圃場へ移植する際の、活着が高い効率となる薬用人参培
養苗の育苗方法を含む薬用人参培養苗の製造方法を提供
することを課題とするものである。
【0012】
【課題を解決するための手段】本発明は、オタネニンジ
ン(Panax ginseng C.A.Meye
r)のような薬用人参から誘導した無菌培養苗の育苗に
際し、培地を支持材により容器内に斜面状に成形させ、
当該斜面培地に培養苗を置床して育成することを特徴と
する新規な薬用人参培養苗の育苗方法を提供するもので
ある。
【0013】本発明は、無菌環境下にある薬用人参の植
物種子および/または再分化組織を原料として用いる。
この原料を、培地中において、発芽および/または発根
および/または馴化および/または育苗する過程におい
て、培地を支持材により容器内に斜面状に成形させ、当
該斜面培地に無菌の培養苗を置床して育成する。
【0014】斜面培地の斜面の勾配は、15゜〜80゜
となるように成形され、より好ましくは、育成中に根の
伸長に応じて、15゜〜80゜の範囲において、勾配を
上げる。斜面培地を形成する支持材としては、アルギン
酸塩、ゲラン・ガム、アガロース、寒天、またはゼラチ
ンを用いることができる。また、苗の育成中に5℃〜1
8℃で1〜2週間以上低温処理する工程を設定すること
も好ましい結果をうる。
【0015】このような製造方法によって得られた薬用
人参培養苗は、一定方向への根の伸長があり、短い細根
の発生が防止され、乾燥に強く吸水力ある根を保有する
薬用人参培養苗であり、極めて有用性の高い薬用人参培
養苗を提供するものである。
【0016】
【発明の実施の形態】以下、本発明をさらに詳細に説明
する。本発明における斜面培地を、成形する際に用いる
支持材は、無期繊維性の支持材と、一般に植物および/
または微生物の培養に利用される全てのゲル性培地支持
材のいずれにおいても可能であるが、斜面を成形する容
易さの点でゲル性の培地支持材を用いることが好まし
い。
【0017】本発明における斜面培地を成形するための
ゲル性支持材としては、一般に植物および/または微生
物の培養に利用される全てのゲル性培地支持材が利用可
能であるが、成形後の保湿性と物理的安定性および機械
的強度の面からアルギン酸塩、ゲラン・ガム、アガロー
ス、寒天、またはゼラチンを用いることが好ましく、特
に成形性および根の成長の面から、アルギン酸塩、ゲラ
ン・ガム、または寒天を用いることが好ましい。
【0018】本発明における斜面培地の斜面勾配は、1
5゜〜80゜の範囲において可能であるが、斜面の勾配
に応じて培地水分の含量が変化するため、根の成長段階
に応じて、無菌培養苗を急勾配の斜面培地に移植してゆ
くことが好ましい。すなわち、無菌培養苗の成長初期で
あって、根長が1cm以下である場合においては、勾配
が15゜〜60゜の斜面培地を用い、また、根長が5c
m以上で圃場に移植する直前の時期には、前記15゜〜
60゜の勾配を有する斜面培地からさらに10〜40゜
の範囲で傾斜を増大した30゜〜80゜の勾配を有する
斜面培地を用いることが好ましい。
【0019】本発明における斜面培地を成形する方法
は、支持材として無機繊維性の支持材を用いる場合と、
ゲル性培地支持材を用いる場合とで斜面を成形する方法
が異なり、以下にそれぞれの方法について説明する。
【0020】まず、支持材として、無機繊維性の支持材
を用いる場合について説明する。グラスファイバーや、
ロックウール、セラミックファイバー等の無機繊維性の
培地支持材を、底面から所定の勾配に斜面が形成される
ように斜めに切断し、切断した支持材を容器内に収容
し、植物培養用液体培地を添加した後オートクレーブに
よって滅菌して成形する。
【0021】次に、支持材として、ゲル性支持材を用い
る場合について説明する。ゲル性支持材は、一旦高温状
態にした後冷却することによりゲル化することが知られ
ている。ここでは寒天を用いた場合の製造方法について
詳細に解説するが、他のゲル性支持材を用いた場合も同
様の工程で製造されるものである。
【0022】寒天を用いた斜面培地の成形方法は、植物
培養用液体培地に寒天を0.8〜2%の濃度になるよう
に加え、加熱して一旦寒天を溶解し、培養容器に分注し
た後オートクレーブにより滅菌を行う。滅菌終了後、容
器を取り出して斜面の勾配が所定の角度となるよう斜め
に容器を設置してそのまま放冷する。ゲルが固化した段
階で容器を起こす。
【0023】前述の方法により、斜面培地を成形した
後、無菌環境下に置いて薬用人参の無菌胚、または不定
胚および/または無菌苗を移植し、人工照明下において
培養する。
【0024】(作用機作)本発明のプロセスが、薬用人
参苗の生産性向上に対して及ぼす詳細な作用は明らかで
はないが、根は本来水分が多い方向に伸長する傾向があ
り、斜面を形成させることにより、培地の水分に偏りを
構成することができるため、根が水分含量の多い下方へ
伸長する頻度が高くなり主根を長く育成することができ
る。一方、通常の平面培地の状態では、水分含量はどの
部分においても一定であるため、根はランダムに伸長
し、細根が多くなりその長さも短くなる。従って圃場に
移植した際には、後者の活着率は前者に対して著しく低
い結果となる。また、根の伸長に応じて、急勾配の斜面
培地に移植することにより、水分含量の偏りを大きくし
て、さらに根の伸長を促進することができる。
【0025】
【実施例】以下に本発明の実施例を示すが、本発明はこ
の実施例に限定されるものではない。 (実施例1)薬用人参の種子を次亜塩素酸により10分
間滅菌し、クリーンベンチ内において胚を無菌的に摘出
し、サッカロースを30g/l添加した、ムラシゲ・ス
クーグの基本培地に、寒天15g/lを支持材として添
加し斜面の勾配が60゜となるようオートクレーブ後固
化させて成形した斜面培地に移植した。この無菌胚を5
℃〜18℃で、5,000lux14時間の光照射下で
6週間培養し、薬用人参の無菌培養苗を約40本得た
(図1)。この苗をオートクレーブで滅菌した園芸用培
養土が入ったポットに移植し、4週間蓋をのせて乾燥を
防止し圃場に移植したところ、圃場に活着し、2ヶ月以
上生育することが確認された。
【0026】
【発明の効果】本発明は、薬用人参培養苗の育苗に斜面
培地を利用することにより、根の伸長方向をコントロー
ルすると共に、成長段階に応じて急勾配の培地に移植す
ることで、一定方向への伸長を、さらに延長することが
可能である。また、従来の方法に対し、短い細根の多発
を防げ、乾燥に強く吸水力のある根を育成できることか
ら、圃場に移植した際の活着率は、著しく向上される。
また、薬用人参は細根が少なく、主根が太く長いものが
良品とされ、苗の段階で主根の長さを長くできれば、良
品の収穫率も向上せしめることが可能である。
【図面の簡単な説明】
【図1】薬用人参の無菌培養苗を15゜〜80゜の勾配
を有するよう成形した斜面培地で、5,000lux1
4時間の光照射下で培養する方法を説明する図面であ
る。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 伊井 一夫 千葉県船橋市行田一丁目50番1号 旭テク ノグラス株式会社内 (72)発明者 淺香 勲 千葉県船橋市行田一丁目50番1号 旭テク ノグラス株式会社内 (72)発明者 東近 由紀子 千葉県船橋市行田一丁目50番1号 旭テク ノグラス株式会社内 Fターム(参考) 2B030 AA02 AB03 CB02 CD03 CD07 CD10 CD13 CD14 CD21 4B065 AA89X BC39 BC46 BC47 BD50 CA53

Claims (5)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 無菌環境下にある植物種子および/また
    は再分化組織を、発芽および/または発根および/また
    は馴化および/または育苗する過程において、培地を支
    持材により容器内に斜面状に成形させ、当該斜面培地に
    無菌の培養苗を置床して育成することを特徴とする薬用
    人参培養苗の製造方法。
  2. 【請求項2】 斜面培地の斜面の勾配が、15゜〜80
    ゜となるように成形した、請求項1の薬用人参培養苗の
    製造方法。
  3. 【請求項3】 育成中に根の伸長に応じて、15゜〜8
    0゜の範囲において、勾配を上げることを特徴とする請
    求項2の薬用人参培養苗の製造方法。
  4. 【請求項4】 斜面培地を形成する支持材として、アル
    ギン酸塩、ゲラン・ガム、アガロース、寒天、またはゼ
    ラチンを用いた、請求項1〜3のいずれか1項に記載の
    薬用人参培養苗の製造方法。
  5. 【請求項5】 育成中に5℃〜18℃で低温処理する工
    程を設定することを特徴とする、請求項1〜4のいずれ
    か1項に記載の薬用人参培養苗の製造方法。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005270003A (ja) * 2004-03-25 2005-10-06 Akita Prefecture 変異株選抜培地および該培地の調製方法
CN116762701A (zh) * 2023-07-31 2023-09-19 扬州大学 用于在近自然状态下检测植物根向水性的装置及方法

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JP2005270003A (ja) * 2004-03-25 2005-10-06 Akita Prefecture 変異株選抜培地および該培地の調製方法
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