JP2001074722A - 分取液体クロマトグラフ - Google Patents
分取液体クロマトグラフInfo
- Publication number
- JP2001074722A JP2001074722A JP25254599A JP25254599A JP2001074722A JP 2001074722 A JP2001074722 A JP 2001074722A JP 25254599 A JP25254599 A JP 25254599A JP 25254599 A JP25254599 A JP 25254599A JP 2001074722 A JP2001074722 A JP 2001074722A
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- Japan
- Prior art keywords
- sample
- detector
- separation column
- absorbance
- fraction collector
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
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- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 試料成分を高感度に検出し、確実に分取でき
る分取液体クロマトグラフを提供する。 【解決手段】 予備的に試料を分離して、図３（Ａ）に
示すように、２１０ｎｍ、２３０ｎｍ、２８０ｎｍの吸
光波長における吸光度データを取得し、その吸光度デー
タに基づいて、各試料成分が検出器９に到達する時間に
その試料成分を検出するのに適した吸光波長の吸光度信
号を選択するように波長選択プログラムを作成する。試
料を分取すべく、試料を分離カラムに導入して分離した
とき、ＰＣ１３は、図３（Ｂ）に示すように、試料注入
から経過した時間が０〜５分のときは２３０ｎｍ、５〜
１０分のときは２８０ｎｍ、１０〜２０分のときは２１
０ｎｍにおける吸光度信号に応じてフランクションコレ
クタ１１を制御する。
る分取液体クロマトグラフを提供する。 【解決手段】 予備的に試料を分離して、図３（Ａ）に
示すように、２１０ｎｍ、２３０ｎｍ、２８０ｎｍの吸
光波長における吸光度データを取得し、その吸光度デー
タに基づいて、各試料成分が検出器９に到達する時間に
その試料成分を検出するのに適した吸光波長の吸光度信
号を選択するように波長選択プログラムを作成する。試
料を分取すべく、試料を分離カラムに導入して分離した
とき、ＰＣ１３は、図３（Ｂ）に示すように、試料注入
から経過した時間が０〜５分のときは２３０ｎｍ、５〜
１０分のときは２８０ｎｍ、１０〜２０分のときは２１
０ｎｍにおける吸光度信号に応じてフランクションコレ
クタ１１を制御する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は液体クロマトグラフ
に関し、特に検出器の出力に基づいて試料成分を採取す
るフラクションコレクタを備えた分取液体クロマトグラ
フに関するものである。
に関し、特に検出器の出力に基づいて試料成分を採取す
るフラクションコレクタを備えた分取液体クロマトグラ
フに関するものである。
【０００２】
【従来の技術】分取液体クロマトグラフは、図１に示さ
れるように、分離カラム７、移動相容器１に収容された
移動相を分離カラム７へ送液する送液ポンプ３、試料を
分離カラム７への移動相流路に注入するインジェクタ
５、分離カラム７からの試料成分を検出する検出器９、
及び検出器９の出力に基づいて溶出液から試料成分を採
取するフラクションコレクタ１１を備えている。フラン
クションコレクタ１１には切替えバルブと分取容器が配
置されている。１３は検出器９の検出信号に基づいてフ
ラクションコレクタ１１の動作を制御するパーソナルコ
ンピュータ（ＰＣ）である。
れるように、分離カラム７、移動相容器１に収容された
移動相を分離カラム７へ送液する送液ポンプ３、試料を
分離カラム７への移動相流路に注入するインジェクタ
５、分離カラム７からの試料成分を検出する検出器９、
及び検出器９の出力に基づいて溶出液から試料成分を採
取するフラクションコレクタ１１を備えている。フラン
クションコレクタ１１には切替えバルブと分取容器が配
置されている。１３は検出器９の検出信号に基づいてフ
ラクションコレクタ１１の動作を制御するパーソナルコ
ンピュータ（ＰＣ）である。
【０００３】試料はインジェクタ５から流路に注入さ
れ、移動相により分離カラム７に送られ、分離されて溶
出する。検出器９により特定波長の吸光度や蛍光による
クロマトグラムをモニタしておき、ＰＣ１３は、その特
定波長における検出器９の検出信号に基づいてフランク
ションコレクタ１１のバルブ切替え制御を行なう。
れ、移動相により分離カラム７に送られ、分離されて溶
出する。検出器９により特定波長の吸光度や蛍光による
クロマトグラムをモニタしておき、ＰＣ１３は、その特
定波長における検出器９の検出信号に基づいてフランク
ションコレクタ１１のバルブ切替え制御を行なう。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかし、検出器９にお
いて特定波長のみにより吸光度や蛍光をモニタする場
合、その特定波長における試料成分の感度の違いによ
り、効果的なクロマトグラムのモニタができず、正確な
フランクションコレクタ１１の制御を行なえないという
問題があった。そこで本発明は、分離カラムから溶出す
る試料成分を高感度に検出し、その試料成分のすべてを
正確に分取できる分取液体クロマトグラフを提供するこ
とを目的とするものである。
いて特定波長のみにより吸光度や蛍光をモニタする場
合、その特定波長における試料成分の感度の違いによ
り、効果的なクロマトグラムのモニタができず、正確な
フランクションコレクタ１１の制御を行なえないという
問題があった。そこで本発明は、分離カラムから溶出す
る試料成分を高感度に検出し、その試料成分のすべてを
正確に分取できる分取液体クロマトグラフを提供するこ
とを目的とするものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明は、分離カラム、
移動相を分離カラムへ送る送液手段、分離カラムへの移
動相流路に試料を注入するインジェクタ、分離カラムか
ら溶出する試料成分を検出する光学的検出器、及び検出
器の出力に基づいて試料成分を採取するフラクションコ
レクタを備えた分取液体クロマトグラフであって、その
検出器は複数波長を同時に検出できるものであり、分離
カラムから溶出する試料成分に応じて、その試料成分を
検出するのに適した波長の検出器からの検出信号を選択
し、その検出信号に基づいてフランクションコレクタを
制御する分取制御部を備えるものである。
移動相を分離カラムへ送る送液手段、分離カラムへの移
動相流路に試料を注入するインジェクタ、分離カラムか
ら溶出する試料成分を検出する光学的検出器、及び検出
器の出力に基づいて試料成分を採取するフラクションコ
レクタを備えた分取液体クロマトグラフであって、その
検出器は複数波長を同時に検出できるものであり、分離
カラムから溶出する試料成分に応じて、その試料成分を
検出するのに適した波長の検出器からの検出信号を選択
し、その検出信号に基づいてフランクションコレクタを
制御する分取制御部を備えるものである。
【０００６】動作の一例を吸光光度計検出器を用いた場
合について図２に示す。検出器により複数波長の吸光度
を同時に測定しつつ、試料を予備的に分離する。そのと
きの吸光度データに基づいて、分取制御部は、各試料成
分を検出するのに適した吸光波長を選択し、それらの選
択された波長での吸光度信号に基づいてフランクション
コレクタを制御するように波長選択プログラムを作成す
る。他の方法として、分離する試料について、試料成分
が検出器に到達する時間及び試料成分を検出する適当な
吸光波長が経験的に既知の場合は、それらのデータに基
づいて波長選択プログラムを作成してもよい。試料を分
取する時には、作成した波長選択プログラムに基づい
て、選択された波長の検出信号でフランクションコレク
タを制御する。
合について図２に示す。検出器により複数波長の吸光度
を同時に測定しつつ、試料を予備的に分離する。そのと
きの吸光度データに基づいて、分取制御部は、各試料成
分を検出するのに適した吸光波長を選択し、それらの選
択された波長での吸光度信号に基づいてフランクション
コレクタを制御するように波長選択プログラムを作成す
る。他の方法として、分離する試料について、試料成分
が検出器に到達する時間及び試料成分を検出する適当な
吸光波長が経験的に既知の場合は、それらのデータに基
づいて波長選択プログラムを作成してもよい。試料を分
取する時には、作成した波長選択プログラムに基づい
て、選択された波長の検出信号でフランクションコレク
タを制御する。
【０００７】
【実施例】装置の構成は図１に示されたものと同じであ
る。ただし、検出器９は複数波長の吸光度や蛍光を同時
に検出できる多波長検出器やフォトダイオードアレイ検
出器などである。本発明の分取制御部はＰＣ１３により
実現される。図３は、予備的に試料を分離したときの２
１０ｎｍ、２３０ｎｍ、２８０ｎｍにおける時間と吸光
度との関係を示す波形図（Ａ）及びフランクションコレ
クタの動作を示す波形図（Ｂ）である。図２のフローチ
ャートに沿って、３種類の試料成分を分離分取する例を
図１から図３を用いて説明する。
る。ただし、検出器９は複数波長の吸光度や蛍光を同時
に検出できる多波長検出器やフォトダイオードアレイ検
出器などである。本発明の分取制御部はＰＣ１３により
実現される。図３は、予備的に試料を分離したときの２
１０ｎｍ、２３０ｎｍ、２８０ｎｍにおける時間と吸光
度との関係を示す波形図（Ａ）及びフランクションコレ
クタの動作を示す波形図（Ｂ）である。図２のフローチ
ャートに沿って、３種類の試料成分を分離分取する例を
図１から図３を用いて説明する。
【０００８】予備的に試料を分離すべく、試料をインジ
ェクタ５から流路に注入する。試料は移動相により分離
カラム７に送られ、分離されて溶出する。図３（Ａ）に
示すように、分離されて溶出する３種類の試料成分は、
２１０ｎｍ（チャンネルｃｈ１）、２３０ｎｍ（チャン
ネルｃｈ２）、２８０ｎｍ（チャンネルｃｈ３）の吸光
波長でそれぞれ検出される。ＰＣ１３は、その吸光度デ
ータに基づいて、試料成分が検出器９に到達する時間に
その試料成分を検出するのに適した吸光波長の吸光度信
号を選択するように波長選択プログラムを作成する。表
１にその波長選択プログラムの一例を示す。
ェクタ５から流路に注入する。試料は移動相により分離
カラム７に送られ、分離されて溶出する。図３（Ａ）に
示すように、分離されて溶出する３種類の試料成分は、
２１０ｎｍ（チャンネルｃｈ１）、２３０ｎｍ（チャン
ネルｃｈ２）、２８０ｎｍ（チャンネルｃｈ３）の吸光
波長でそれぞれ検出される。ＰＣ１３は、その吸光度デ
ータに基づいて、試料成分が検出器９に到達する時間に
その試料成分を検出するのに適した吸光波長の吸光度信
号を選択するように波長選択プログラムを作成する。表
１にその波長選択プログラムの一例を示す。
【０００９】
【表１】
【００１０】Ｔｉｍｅは試料注入から経過した時間
（分）を示し、ｃｈａｎｎｅｌはその時間に選択される
吸光波長を示す。ＰＣ１３は、この波長選択プログラム
に基づき、０〜５分ではチャンネルｃｈ２における吸光
度信号、５〜１０分ではチャンネルｃｈ３における吸光
度信号、１０〜２０分ではチャンネルｃｈ１における吸
光度信号に基づいて、フランクションコレクタ１１を制
御することになる。
（分）を示し、ｃｈａｎｎｅｌはその時間に選択される
吸光波長を示す。ＰＣ１３は、この波長選択プログラム
に基づき、０〜５分ではチャンネルｃｈ２における吸光
度信号、５〜１０分ではチャンネルｃｈ３における吸光
度信号、１０〜２０分ではチャンネルｃｈ１における吸
光度信号に基づいて、フランクションコレクタ１１を制
御することになる。
【００１１】試料を分取すべく、試料をインジェクタ５
から流路に注入すると、予備的な分離時と同様に、図３
（Ａ）に示すように、分離されて溶出する３種類の試料
は、チャンネルｃｈ１、チャンネルｃｈ２、チャンネル
ｃｈ３の吸光波長でそれぞれ検出される。このときＰＣ
１３は、図３（Ｂ）に示すように、波長選択プログラム
に基づいて、試料注入から経過した時間が０〜５分のと
きはチャンネルｃｈ２、５〜１０分のときはチャンネル
ｃｈ３、１０〜２０分のときはチャンネルｃｈ３におけ
る吸光度信号に応じてフランクションコレクタ１１を制
御する（斜線部参照）。
から流路に注入すると、予備的な分離時と同様に、図３
（Ａ）に示すように、分離されて溶出する３種類の試料
は、チャンネルｃｈ１、チャンネルｃｈ２、チャンネル
ｃｈ３の吸光波長でそれぞれ検出される。このときＰＣ
１３は、図３（Ｂ）に示すように、波長選択プログラム
に基づいて、試料注入から経過した時間が０〜５分のと
きはチャンネルｃｈ２、５〜１０分のときはチャンネル
ｃｈ３、１０〜２０分のときはチャンネルｃｈ３におけ
る吸光度信号に応じてフランクションコレクタ１１を制
御する（斜線部参照）。
【００１２】このように、各試料成分に適したチャンネ
ル選択により溶出する試料成分を高感度で検出でき、そ
の吸光度信号に基づいて効果的なフランクションコレク
タの制御ができ、試料成分の分取を正確に行なうことが
できる。この動作では、試料成分が検出器に到達する時
間及び試料成分を高感度で検出できる吸光波長を調べる
べく予備的に試料の分離を行なっているが、それらのデ
ータが既知の試料については、予備的な試料分離を行な
わずに、それらのデータに基づいて波長選択プログラム
を作成してもよい。
ル選択により溶出する試料成分を高感度で検出でき、そ
の吸光度信号に基づいて効果的なフランクションコレク
タの制御ができ、試料成分の分取を正確に行なうことが
できる。この動作では、試料成分が検出器に到達する時
間及び試料成分を高感度で検出できる吸光波長を調べる
べく予備的に試料の分離を行なっているが、それらのデ
ータが既知の試料については、予備的な試料分離を行な
わずに、それらのデータに基づいて波長選択プログラム
を作成してもよい。
【００１３】
【発明の効果】本発明の分取液体クロマトグラフでは、
複数波長の吸光度や蛍光を同時に測定できる光学的検出
器を用い、分取制御部によって、分離カラムから溶出す
る試料成分に応じて、その試料成分を検出するのに適し
た波長での検出器からの検出信号を選択し、その検出信
号に基づいてフランクションコレクタを制御するように
したので、分離カラムから溶出する試料成分を高感度に
検出し、正確に分取を行なうことができる。
複数波長の吸光度や蛍光を同時に測定できる光学的検出
器を用い、分取制御部によって、分離カラムから溶出す
る試料成分に応じて、その試料成分を検出するのに適し
た波長での検出器からの検出信号を選択し、その検出信
号に基づいてフランクションコレクタを制御するように
したので、分離カラムから溶出する試料成分を高感度に
検出し、正確に分取を行なうことができる。
【図１】 従来及び一実施例の分取液体クロマトグラフ
を示す流路図である。
を示す流路図である。
【図２】 一実施例の動作を示すフローチャートであ
る。
る。
【図３】 予備的に試料を分離したときの２１０ｎｍ、
２３０ｎｍ、２８０ｎｍにおける時間と吸光度との関係
を示す波形図（Ａ）及びフランクションコレクタの動作
を示す波形図（Ｂ）である。
２３０ｎｍ、２８０ｎｍにおける時間と吸光度との関係
を示す波形図（Ａ）及びフランクションコレクタの動作
を示す波形図（Ｂ）である。
１ 移動相容器 ３ 送液ポンプ ５ インジェクタ ７ 分離カラム ９ 検出器 １１ フラクションコレクタ １３ パーソナルコンピュータ（ＰＣ）
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｇ０１Ｎ 30/74 Ｇ０１Ｎ 30/74 Ｆ 30/78 30/78
Claims (1)
- 【請求項１】 分離カラム、移動相を分離カラムへ送る
送液手段、分離カラムへの移動相流路に試料を注入する
インジェクタ、分離カラムから溶出する試料成分を検出
する光学的検出器、及び検出器の出力に基づいて試料成
分を採取するフラクションコレクタを備えた分取液体ク
ロマトグラフにおいて、 前記検出器は複数波長を同時に検出できるものであり、 前記分離カラムから溶出する試料成分に応じて、その試
料成分を検出するのに適した波長の前記検出器からの検
出信号を選択し、その検出信号に基づいて前記フランク
ションコレクタを制御する分取制御部を備えたことを特
徴とする分取液体クロマトグラフ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP25254599A JP2001074722A (ja) | 1999-09-07 | 1999-09-07 | 分取液体クロマトグラフ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP25254599A JP2001074722A (ja) | 1999-09-07 | 1999-09-07 | 分取液体クロマトグラフ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2001074722A true JP2001074722A (ja) | 2001-03-23 |
Family
ID=17238874
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP25254599A Pending JP2001074722A (ja) | 1999-09-07 | 1999-09-07 | 分取液体クロマトグラフ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2001074722A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013011616A (ja) * | 2007-12-05 | 2013-01-17 | Alltech Associates Inc | サンプルの画分を収集しサンプルを分析するための方法および装置 |
| JP2013525815A (ja) * | 2010-05-07 | 2013-06-20 | オールテック・アソシエイツ・インコーポレーテッド | サンプルを分析し、サンプル画分を収集する方法および装置 |
-
1999
- 1999-09-07 JP JP25254599A patent/JP2001074722A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013011616A (ja) * | 2007-12-05 | 2013-01-17 | Alltech Associates Inc | サンプルの画分を収集しサンプルを分析するための方法および装置 |
| JP2013011615A (ja) * | 2007-12-05 | 2013-01-17 | Alltech Associates Inc | サンプルの画分を収集しサンプルを分析するための方法および装置 |
| JP2015135346A (ja) * | 2007-12-05 | 2015-07-27 | オールテック・アソシエイツ・インコーポレーテッド | サンプルの画分を収集しサンプルを分析するための方法および装置 |
| JP2013525815A (ja) * | 2010-05-07 | 2013-06-20 | オールテック・アソシエイツ・インコーポレーテッド | サンプルを分析し、サンプル画分を収集する方法および装置 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060111 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20071005 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20071016 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20071213 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20080115 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20080314 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20080415 |