JP2001072589A - 制癌剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 新規な制癌剤の提供。 【解決手段】 抗ＶＥＧＦ／ＶＰＦモノクローナル抗体
とタキサン系化合物を有効成分とする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、血管透過性因子(V
PF)[血管内皮細胞増殖因子(VEGF)とも呼称されており、
本明細書では「ＶＥＧＦ／ＶＰＦ」と総称する] アンタ
ゴニストとタキサン系化合物とを併用した制癌剤、特
に、癌細胞の増殖を抑える副作用の少ない制癌剤に関す
るものであり、医療、製薬技術に属するものである。

【０００２】

【従来の技術】本発明者等は、先に、ＶＥＧＦ／ＶＰＦ
の機能阻害剤からなる腫瘍抑制剤についての提案を行い
（特開平６−１１６１６３号）、さらに、腫瘍血管の新
生を抑制することによって間接的に腫瘍の増殖を阻害す
るという作用機作と従来の腫瘍細胞そのものをターゲッ
トとする抗癌剤との併用により、癌の化学療法がより効
果的に行えることを見出し、ＶＥＧＦ／ＶＰＦアンタゴ
ニストとシクロホスファミド、ビンクリスチンまたはミ
ノサイクリンを併用した薬剤がより効果的に腫瘍の増殖
を抑えることが出来ることを見いだし併用薬剤の提案を
おこなった（特開平１０−１１４６８０、特願平１０−
１２９６４６）。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、先の提
案を行うと共に、ビンクリスチンはチューブリンの微小
管形成を阻害するビンカアルカロイド系抗癌剤であり、
広い概念では、有糸分裂阻害作用を有するものであると
されているため、それらに属する化合物、例えば、スル
ホンアミド系化合物(E7010)、コルヒチン類、ステガナ
シン類、コンプレスタチン類、ストレプトピロン、マク
ベシン類、ポドフィロトキシン類、ベンズイミダゾール
類(Carbendazim)、メイタンシン類、リゾキシン類、ド
ラスタチン類、ホモプシン(Phomopsin)、ウスチロキシ
ン(Ustiloxin)、更には、ミノサイクリンはテトラサイ
クリン系抗菌抗生物質であるが、その作用として、血管
新生阻害活性を有することが報告されていることから、
ＴＮＰ-４７０のようなフマギリン誘導体やＭＭＰ阻害
剤等の血管新生阻害剤、血管新生阻害活性を有するステ
ロイド剤、サリドマイド、抗インテグリン抗体等の血管
新生阻害活性を有する化合物等とＶＥＧＦ／ＶＰＦの機
能阻害剤との併用について検討を行い、併用により優れ
た抗癌剤が提供できないか研究を行ったのである。

【０００４】

【課題を解決する手段】本発明者らは上記の様な各種の
化合物とＶＥＧＦ／ＶＰＦの機能阻害剤との併用につい
て検討し、特定の化合物との併用において、格別に優れ
た効果が奏されることを見出し、本発明を完成したので
ある。すなわち、本発明はＶＥＧＦ／ＶＰＦアンタゴニ
ストとタキサン系化合物を有効成分とすることを特徴と
する制癌剤、該ＶＥＧＦ／ＶＰＦアンタゴニストが抗Ｖ
ＥＧＦ／ＶＰＦモノクローナル抗体であることを特徴と
する制癌剤および該抗ＶＥＧＦ／ＶＰＦモノクローナル
抗体がＶＥＧＦ／ＶＰＦのアミノ酸配列の一部である下
記配列１〜３の少なくとも１つと反応する抗体であるこ
とを特徴とする制癌剤に関するものである。 １．ＫＰＳＣＶＰＬＭＲ ２．ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣＲＰ ３．ＫＣＥＣＲＰＫＫＤＲＡＲ

【０００５】

【発明の実施の形態】ＶＥＧＦ／ＶＰＦ(vascular endo
thelial growth factor / vascular permeability fact
or)は、直接的に血管内皮細胞に作用し、血管新生すな
わち毛細血管内皮細胞の増殖、移動および組織への浸潤
という現象は胎児の生長、創傷治癒、癌細胞の増殖など
の生理的または病理的現象において重要な役割を果たし
ているものである。

【０００６】ＶＥＧＦ／ＶＰＦに関しては、マウス、ラ
ット、モルモット、ウシ及びヒトの正常又は腫瘍細胞株
で分泌されており、また組織別では脳、下垂体、腎臓、
卵巣に存在することが明らかにされている[(Ferrara,
N., et.al. Endocrine Reviews13:18(1992)]。ヒトＶＥ
ＧＦ／ＶＰＦ遺伝子についてはそのcＤＮＡがすでに単
離されて塩基配列が決定され、アミノ酸配列も推定され
ている。この遺伝子からアミノ酸残基数の異なる４種類
の蛋白（アミノ酸残基数が１２１個、１６５個、１８９
個、２０６個の４種類）が作られ、それらの中で１２１
個のアミノ酸残基数のもの（ＶＥＧＦ／ＶＰＦ121)と１
６５個のアミノ酸残基数のもの（ＶＥＧＦ／ＶＰＦ165)
が成熟蛋白であると言われている[(Ferrara N., et. a
l. Endocrine Reviews 13:18(1992)]。ＶＥＧＦ／ＶＰ
Ｆ121はＶＥＧＦ／ＶＰＦ165のカルボキシル末端側の４
４個のアミノ酸が欠損したものであるが、 ＶＥＧＦ／
ＶＰＦ121とＶＥＧＦ／ＶＰＦ165の間に、血管内皮細胞
に対する作用の違いがあるかどうかについては明らかに
されてはいない。

【０００７】本発明において、ＶＥＧＦ／ＶＰＦアンタ
ゴニストとは、上記のＶＥＧＦ／ＶＰＦの作用を阻害す
る機能を有するものをさし、その機能を有するものであ
れば如何なる形態のものでもよく、従来、血管内皮細胞
培養系を用いたin vitro培養系およびin vivo血管新生
モデルを用いて、血管新生を選択的に阻害する物質がス
クリーニングされており、これまでに、例えば、プロタ
ミン（Taylor, S. etal., Nature, 297, 307, 1982)、
ヘパリンとコーチゾンの併用剤（Folkman, J.et al., S
cience, 221, 71, 1983)、プレドニゾロン・アセテート
（Robin, J. B., Arch. Opthalmol., 103, 284, 198
5）、硫酸化多糖（特開昭63-119500号公報）、ハービマ
イシンＡ（特開平63-295509号公報）、フマギリン（特
開平1-279828号公報）、インターフェロンβ（国際公開
第WO/29092号公報）等が知られている。

【０００８】本発明におけるＶＥＧＦ／ＶＰＦアンタゴ
ニストとして好ましいものとしては、ＶＥＧＦ／ＶＰＦ
に作用する抗体、またはその一部分が挙げられるが、そ
れらに限定されることなく、例えば、ＶＥＧＦ／ＶＰＦ
の作用を阻害する不活性なＶＥＧＦ／ＶＰＦ、またはそ
の一部分、ＶＥＧＦ／ＶＰＦの受容体の機能を損なう、
例えば、血管透過性因子受容体に対する抗体、またはそ
の一部分等を挙げることができる。ＶＥＧＦ／ＶＰＦに
作用する抗体は、アミノ酸残基数１２１個、１６５個、
１８９個又は２０６個の４種類のＶＥＧＦ／ＶＰＦサブ
タイプの何れに対する抗体であってもよく、好ましくは
抗ＶＥＧＦ／ＶＰＦモノクローナル抗体が挙げられ、特
に、該抗ＶＥＧＦ／ＶＰＦモノクローナル抗体が、ＶＥ
ＧＦ／ＶＰＦのアミノ酸配列の一部である下記配列１〜
３： １．ＫＰＳＣＶＰＬＭＲ ２．ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣＲＰ ３．ＫＣＥＣＲＰＫＫＤＲＡＲ の少なくとも１つと反応する抗体がであることが好まし
い。

【０００９】上記の抗ＶＥＧＦ／ＶＰＦ抗体としては、
マウス抗体等もあげられるが、ヒトへの投与において副
作用を軽減するための処理を行ったものも使用すること
ができる。例えば、マウスモノクローナル抗体をポリエ
チレングリコールのような物質で化学修飾を行い、抗原
性を軽減させたもの、また、マウスモノクローナル抗体
の可変領域を残して他の部分をヒトの抗体に変換させた
マウス・ヒトキメラ抗体や、マウスモノクローナル抗体
の抗原との結合領域であるＣＤＲ領域を残して他の領域
をヒト抗体に抗原との結合力を保持させたまま置き換え
たヒト化抗体も使用することができる。さらに、これら
を酵素的に切断して低分子化した抗体も使用することが
できる。該キメラ抗体またはヒト化抗体としては、Ｉｇ
Ｇタイプ又はＩｇＡタイプ等があげられ、該ＩｇＧのイ
ソタイプとしては、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又は
ＩｇＧ４があげられる。

【００１０】ポリクローナル抗体はヒト前骨髄性白血病
細胞ＨＬ−６０等より単離しＶＥＧＦ／ＶＰＦのcＤＮ
Ａを大腸菌の中でグルタチオンＳ−トランスフェラーゼ
との融合蛋白として発現させ、得られた蛋白質を抗原と
して得ることができる。抗体は、常法に従い、該抗原に
よりウサギを免疫し、抗体価の上昇した血清からクロマ
トグラフィーで分画することにより得られる。また、モ
ノクローナル抗体は動物をＶＥＧＦ／ＶＰＦで免疫し脾
細胞を取り出しこれをミエローマ細胞とを融合して得た
ハイブリドーマ細胞を培養することにより製造すること
ができる。このハイブリドーマの製造は例えばKohlerと
Milsteinの方法[Nature,256:495(1975)]等により行うこ
とができる。

【００１１】タキサン系化合物 タキサン系化合物とは、太平洋イチイや欧州イチイから
抽出される、タキソール(Taxol)およびその誘導体を示
し、下記構造式で示されるものであり、すでにその一種
ドセタキセル(Docetaxel)が制癌剤として市販されてい
るものである。

【００１２】

【化１】

【００１３】上記式においてＲがアセチル基、Ｒ’がフ
ェニル基のときがタキソールであり、Ｒが水素原子、
Ｒ’がt-ブトキシ基のときがドセタキセルである。

【００１４】本発明の制癌剤を投与する場合、投与する
対象は特に限定されない。例えば、個々の血管形成性疾
患の予防或いは治療を特異目的として局所又は全身投与
することができる。投与する方法は経口又は非経口でも
よく、経口投与には舌下投与を包含する。非経口投与に
は注射例えば皮下、筋肉、血管内、腹腔内又は胸腔内な
どへの注射、点滴、座剤等を含む。又、その投与量およ
び有効成分の割合は動物か人間かによって、又年齢、投
与経路、投与回数により異なり、広範囲に変えることが
できる。この場合ＶＥＧＦ／ＶＰＦアンタゴニスト及び
タキサン系化合物の有効量と適切な希釈剤および薬学的
に使用し得る担体の組成物として投与される有効量は
０.１〜１００mg/kg体重/日であり１日１回から数回に
分けて毎日又は数日に１回又は１〜２週間に１回投与さ
れる。ＶＥＧＦ／ＶＰＦアンタゴニストとタキサン系化
合物は、任意の割合で併用することができ、両者は混合
した状態で、又は、別々の状態で併用することも可能で
ある。

【００１５】本発明の血管新生阻害剤を非経口投与する
場合には、安定剤・緩衝剤・保存剤・膨張化剤等の添加
剤を含有し通常単位投与量アンプル若しくは多投与量容
器又はチューブの状態で提供される。たとえば、注射用
製剤は、精製されたＶＥＧＦ／ＶＰＦアンタゴニスト及
び／又はタキサン系化合物を溶剤、たとえば、生理食塩
水、緩衝液などに溶解し、それに、吸着防止剤、たとえ
ば、Tween８０、ゼラチン、ヒト血清アルブミン（ＨＳ
Ａ）などを加えたものであり、または、使用前に溶解再
構成するために凍結乾燥したものであってもよい。凍結
乾燥のための賦形剤としては例えばマンニトール、ブド
ウ糖などの糖アルコールや糖類を使用することができ
る。同様に、点眼液、点眼軟膏、乳化剤等の形態とした
り、滞留を延長させるためにリポソームやマイクロスフ
ェアーにして使用することも出来る。

【００１６】また経口投与する場合はそれに適用される
錠剤・顆粒剤・細粒剤・散剤・カプセル剤等は通常それ
らの組成物中に製剤上一般に使用される結合剤・包含剤
・賦形剤・滑沢剤・崩壊剤・湿潤剤のような添加剤を含
有する。又、経口用液体製剤としては内用水剤・懸濁剤
・乳剤・シロップ剤等いずれでの状態であってもよく、
又、使用する際に再溶解させる乾燥生成物であっても良
い。更にその組成物は添加剤・保存剤の何れを含有して
も良い。

【００１７】

【実施例】以下実施例により本発明をさらに具体的に説
明する。但し本発明はこれら実施例に限定されるもので
はない。 （１）ＶＥＧＦ／ＶＰＦモノクローナル抗体を産生する
ハイブリドーマの作製単離したヒトＶＥＧＦ／ＶＰＦ c
ＤＮＡにて形質転換した酵母の培養液よりヒトＶＥＧＦ
／ＶＰＦを精製し(ＹＶＰＦ；特開平７−３１４９６号
参照)、キーホールリンペットヘモシアニン(ＫＬＨ)と
グルタルアルデヒドを用いて複合体を作製し、得られた
蛋白を抗原として常法に従ってマウスモノクローナル抗
体を作製した。即ち、ＫＬＨ-ＹＶＰＦで免疫したマウ
スの脾細胞とマウスミエローマ細胞(Ｓp2/0-Ａg14)をポ
リエチレングリコール存在下で細胞融合させた。得られ
たハイブリドーマは限界希釈法によりクローニングし
た。ＹＶＰＦとクローン化したハイブリドーマの培養上
清の反応性を酵素免疫測定法により調べ、ＹＶＰＦと反
応するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマを
選択した。又、このハイブリドーマが産生するモノクロ
ーナル抗体をＭＶ833と命名した。なお得られたモノク
ローナル抗体を産生するハイブリドーマは通商産業省工
業技術院生命工学工業技術研究所にＦＥＲＭ ＢＰ−５
６６９として寄託されている。

【００１８】（２）ＶＥＧＦ／ＶＰＦモノクローナル抗
体の調製 選択したハイブリドーマをヌードマウスの腹腔内に移植
し、モノクローナル抗体を大量に含む腹水を採取した。
この腹水中からプロテインＧアフィニティーカラム(Ｍ
ＡbＴrapＧII、ファルマシア社製）を用いてモノクロー
ナル抗体を精製した。又、抗体のクラスを抗マウス免疫
グロブリンサブクラス特異的抗体を用いた酵素免疫測定
法により調べた結果、ＭＶ833抗体のクラスはＩgＧ1で
あった。又、下記の方法で測定したＶＥＧＦ／ＶＰＦ12
1及びＶＥＧＦ／ＶＰＦ165に対する解離定数は以下の通
りであり本発明のモノクローナル抗体はＶＥＧＦ／ＶＰ
Ｆに対して強い親和性を有することがわかる。 ○ ５.７×１０^-11Ｍ±０.３５×１０^-11Ｍ（ＶＥＧＦ
／ＶＰＦ121) ○ １.１０×１０^-10Ｍ±０.１１×１０^-10Ｍ（ＶＥＧ
Ｆ／ＶＰＦ165) 解離定数の測定方法 モノクローナル抗体を０.１Ｍ塩化ナトリウムを含む２
５mＭ炭酸緩衝液(pＨ=９.０)で２μg/mlに調製し取り外
し可能な有穴プレートに１００μlずつ添加し４℃で一
晩放置する。次に穴から溶液を除き１％ＢＳＡ-ＰＢＳ
を３０μlずつ添加し３７℃で４時間放置する。１％Ｂ
ＳＡ-ＰＢＳを取り除いた後０.１％ＢＳＡ-ＰＢＳで調
製したＶＰＦと¹²⁵Ｉ標識ＶＰＦ(¹²⁵Ｉ標識ＶＰＦ121は
ＹＶＰＦをクロラミンＴ法により標識、¹²⁵Ｉ標識ＶＰ
Ｆ165はアマシャム社より購入)反応混液を穴あたり２０
０μl添加して一晩放置する。この反応混液中のＶＰＦ
濃度はＶＰＦ121が０〜１ng/穴，ＶＰＦ165が０〜１０n
g/穴、125Ｉ標識ＶＰＦが１×１０４cpm/穴(125Ｉ標識
ＶＰＦ121 ; ６６.７pg/穴、125Ｉ標識ＶＰＦ165 ；１
１６pg/穴)とする。穴から反応混液を取り除き０.１％
ＢＳＡ-ＰＢＳで６回洗浄した後、穴を１個ずつ切り離
して分析用チューブに入れガンマーカウンターにてカウ
ントしその結果から作成した散布図から解離定数を求め
る。又、下記の方法で測定した本発明のモノクローナル
抗体の等電点はpＩ＝５.２〜５.５であった。現時点で
報告のある他のＩgＧ1タイプの抗ＶＰＦモノクローナル
抗体の等電点は我々の報告しているＭＶ101が pＩ＝７.
０〜７.５でありジェネンテック社のＡ４.６.１が pＩ
＝４.２〜５.２[Kim,K.J. et.al. Growth Factors,7:53
(1992)]であり本発明の物質はいずれの物質とも異なる
物質である。 等電点の測定方法 モノクローナル抗体の等電点電気泳動は市販の等電点電
気泳動用アガロースゲル(和科盛社)を使用し同社の等電
点電気泳動層にて泳動した。泳動は等電力出力可能なパ
ワーサプライ(バイオラド社)により３Ｗで３０分間泳動
した。泳動後ゲルは銀染色キット(バイオラド社)にて蛋
白染色した。モノクローナル抗体の等電点は同時に泳動
した等電点マーカー蛋白の泳動度より抗体の等電点を求
めた。

【００１９】（５）ＶＥＧＦ／ＶＰＦ中のモノクローナ
ル抗体の反応部位の同定 （ａ）ＶＥＧＦ／ＶＰＦのアミノ酸配列の一部分に相当
するペプチドの作製ヒトＶＥＧＦ／ＶＰＦ121のアミノ
配列の連続した１２個のアミノ酸を１つのペプチドとし
て全配列を網羅する６７種のペプチドを考案し、各ペプ
チドをマルチピンペプチド合成法[Maeji,N,J, et.al.
J.Immunol.method,134:23(1990)]により合成した。まず
９６穴アッセイプレート用ピンブロックのピンの先端に
導入された9-フルオレニルメトキシカルボニル(Ｆmoc)-
β-アラニンからピペリジンによりＦmoc基を除去した
後、ジシクロヘキシカルボジイミドとヒドロキシベンゾ
トリアゾール存在下でＦmoc-アミノ酸を縮合させた。N,
N-ジメチルホルムアミドで洗浄後、再びジシクロヘキシ
カルボジイミドとヒドロキシベンゾトリアゾール存在下
でＦmoc-アミノ酸を縮合させ、この操作を繰り返すこと
により目的のペプチドを合成した。縮合反応終了後、無
水酢酸でアセチル化を行い、さらにトリフルオロ酢酸で
側鎖保護基を除去した。ピン上で合成したペプチドはピ
ンを中性溶液中に浸すことにより切り出した。合成した
ペプチドの定量はオルトフタルアルデヒドを用いてアミ
ノ基を定量することにより行った。合成した６７種のペ
プチドのアミノ酸配列を表１に示した。数字はペプチド
識別番号を示す。

【００２０】

【表１】

【００２１】（ｂ）ＭＶ833抗体と反応するペプチドの
同定 以上のようにして合成した６７種のペプチドはヒトＶＥ
ＧＦ／ＶＰＦ121の全領域に対応するものである。した
がって６７種のペプチドとＭＶ833抗体との反応性を調
べることによりＭＶ833抗体がＶＥＧＦ／ＶＰＦのどの
部位に反応しているかを明らかにすることができる。そ
こで酵素免疫測定法により６７種のペプチドとＭＶ833
抗体との反応性を調べた。９６穴ＮＯＳプレート(コー
スター社製)に６７種の２０μＭペプチド溶液を入れ室
温で２時間放置した。０.１％ＢＳＡ-ＰＢＳでプレート
の穴を３回洗浄した後、２％ＢＳＡ-ＰＢＳを入れ室温
で１時間放置した。２％ＢＳＡ-ＰＢＳを除いた後、Ｍ
Ｖ833(１％ＢＳＡ-ＰＢＳ溶液)を入れ室温で１時間放置
した。０.１％ＢＳＡ-ＰＢＳで６回洗浄後ペルオキシダ
ーゼ標識したヒツジ抗マウスＩgＧ(アマシャム社)(０.
１％ＢＳＡ-ＰＢＳ溶液)を入れ室温で１時間放置した。
０.１％ＢＳＡ-ＰＢＳで６回洗浄後８.３mg/mlオルトフ
ェニレンジアミン２塩酸塩および０.０１％過酸化水素
を含む０.２Ｍトリス−クエン酸緩衝液(pＨ=５.２)を入
れて発色させた。反応は２規定硫酸を加えて停止させた
後、吸光度(ＯＤ４９０／６５０)を測定した。なお、反
応性の測定には、上記のような酵素免疫測定法の他、オ
クタロニー法、ウエスタンブロッティング法等を用いて
もよい。

【００２２】ＭＶ833抗体は６７種類のペプチドの中で
ペプチド識別番号３１、３２、３３、６０、６３の５つ
のペプチドに強く反応した。ペプチド識別番号３１〜３
３のペプチドにはＫＰＳＣＶＰＬＭＲという配列が共通
に含まれていることより、この領域ではＭＶ833抗体は
ＫＰＳＣＶＰＬＭＲというアミノ酸配列部分と反応して
いると考えられる。したがって、ＭＶ833抗体はＶＥＧ
Ｆ／ＶＰＦのＫＰＳＣＶＰＬＭＲ配列とＳＦＬＱＨＮＫ
ＣＥＣＲＰ配列とＫＣＥＣＲＰＫＫＤＲＡＲ配列とに反
応していることが予想される。抗体はタンパク質の表面
に露出している部分を認識すると考えられるため、この
２種類のアミノ酸配列部分はＶＥＧＦ／ＶＰＦの表面に
露出している部分であると言える。又、モノクローナル
抗体は抗原決定基が単一であると言われているが、高次
構造をとっている蛋白質などの高分子物質が抗原の場合
は抗体が立体的に抗原を認識し、蛋白質の一次構造レベ
ルで抗体の反応性を調べた時に二箇所以上の不連続なア
ミノ酸配列に反応することがある。ＭＶ833抗体がＶＰ
Ｆ中の二箇所のアミノ酸配列部分に反応したことより、
本抗体は二箇所のアミノ酸配列部分を立体的に同時に認
識していると考えられる。

【００２３】（６）抗腫瘍試験 抗腫瘍試験ヌードマウス皮下にて継代したヒト線維
肉腫（ＨＴ−１０８０）を２mm角に切り出し、別の１群
６匹のヌードマウス皮下にトロアカールを用いて移植し
た。移植翌日よりおよび５日後にタキソールを１０mg／
kg尾静脈より２回投与した。抗体は移植翌日から１２.
５μg／マウスを４日毎に尾静脈投与した。経時的に腫
瘍径を測定することで腫瘍体積を算出した。その結果を
図１に示す。 ヌードマウス皮下にて継代したヒト乳癌（ＭＸ−
１）を２mm角に切り出し、別の一群６匹のヌードマウス
皮下にトロアカールを用いて移植した。移植２０日後お
よび２４日後にタキソールを２０mg／kg尾静脈より２回
投与した。抗体は、移植２０，２４，２８，３２，３６
日後に１００μｇ／マウスを５回尾静脈投与した。経時
的に腫瘍径を測定することで腫瘍体積を算出した。その
結果を図２に示す。図１中、□はコントロール（非投
与）、●はタキソール単独、○は抗体単独、▲は抗体と
タキソールを併用したものを示し、横軸は移植後の日
数、縦軸は腫瘍体積（mm³）を示す。図２中、□はコン
トロール（非投与）、●は抗体単独、○はタキソール単
独、▲は、抗体とタキソールを併用したものを示し、横
軸は移植後の日数、縦軸は腫瘍体積（mm³）を示す。図
から明らかなようにタキソールと抗体を併用した群では
それぞれ単独で投与した群より抗腫瘍活性が強く、特に
ヒト乳癌（ＭＸ−１）の系においては、抗体最終投与か
ら３０日を経過した時点で６例中５例の腫瘍が消失し治
癒と判断された。タキソール単独投与でも腫瘍の退縮は
観察されたが全例再増殖していた。

【００２４】

【発明の効果】本発明は、ＶＥＧＦ／ＶＰＦの機能阻害
剤からなる腫瘍抑制剤の奏する効果をさらに向上するも
のであり、優れた制癌剤を提供できるものである。

【００２５】

【配列表】

配列番号：１ 配列の長さ：９ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直線状 配列の種類：タンパク質 起源： セルライン： 配列： 配列番号：２ 配列の長さ：１２ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直線状 配列の種類：タンパク質 起源： セルライン： 配列： Ser Phe Leu Gln His Asn Lys Cys Glu Cys Arg Pro 1 5 10 配列番号：３ 配列の長さ：１２ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直線状 配列の種類：タンパク質 起源： セルライン： 配列：

【図面の簡単な説明】

【図１】ＶＥＧＦ／ＶＰＦモノクローナル抗体とタキソ
ールの併用によるヒト線維肉腫系における腫瘍体積の変
化を示す図である。

【図２】ＶＥＧＦ／ＶＰＦモノクローナル抗体とタキソ
ールの併用によるヒト乳癌系における腫瘍体積の変化を
示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き Ｆターム(参考） 4B024 AA01 BA31 4C084 AA02 BA01 BA08 BA17 BA18 BA23 MA02 NA14 ZB261 ZB262 ZC411 ZC412 ZC752 4C085 AA14 CC17 DD33 EE03 GG02 GG03 GG04 GG06 GG08 4C086 AA01 AA02 BA02 MA02 MA04 NA14 ZB26 ZC41 ZC75

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ＶＥＧＦ／ＶＰＦアンタゴニストとタキ
   サン系化合物を有効成分とすることを特徴とする制癌
   剤。
2. 【請求項２】 ＶＥＧＦ／ＶＰＦアンタゴニストが抗Ｖ
   ＥＧＦ／ＶＰＦモノクローナル抗体であることを特徴と
   する請求項１の制癌剤。
3. 【請求項３】 抗ＶＥＧＦ／ＶＰＦモノクローナル抗体
   がＶＥＧＦ／ＶＰＦのアミノ酸配列の一部である下記配
   列１〜３の少なくとも１つと反応する抗体であることを
   特徴とする請求項２の制癌剤。 １．ＫＰＳＣＶＰＬＭＲ ２．ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣＲＰ ３．ＫＣＥＣＲＰＫＫＤＲＡＲ