JP2001059840A - 液体試料中のイオン強度測定用試薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 リン酸ジエステルといった陽イオン交換抽出
剤の陽イオン交換能力を利用して、液体試料のイオン強
度を測定する際に、高比重な試料はもちろん、極端な低
比重の試料に対しても高い検出感度を得る。 【解決手段】 陽イオン交換抽出剤、ｐＨ緩衝剤、ｐＨ
指示薬に加えて、中性抽出剤を含有させる。陽イオン交
換抽出剤が酸性有機リン酸化合物であり、中性抽出剤が
中性有機リン酸かアルコールであり、中性有機リン酸と
してはホスファートが好ましく使用できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、液体試料のイオン
強度を簡易に測定するための試薬組成物、及び該試薬組
成物を含浸、コーティング又は印刷してなる試験片に関
するものである。特に生物学的液体、その中でも特にイ
オン強度と比重が良好な相関関係を有する尿の比重測定
用試薬組成物および試験用具に有用である。

【０００２】

【従来の技術】液体試料の比重測定は、広範囲な技術分
野で行われているが、特に尿の比重を測定することは、
臨床検査の分野において臨床的意義の高い重要な項目の
一つであり、腎臓病の診断等に利用されている。尿の比
重を直接測定する方法として現在一般に行われている方
法には、尿比重計（浮秤法）、ピクノメーター、屈折計
などを利用する方法がある。

【０００３】これらの方法は、大部分は必要な精度が得
られるものであるが、それらの装置は、精度を保持する
ため、目盛りの校正、器具の洗浄管理の維持などのメン
テナンスが必要であり、時間も手間もかかり、数多くの
不便さがある。また、尿比重計においては、測定時に一
定以上の量の尿サンプルが必要であり、尿の量が不足し
て測定に困難が生じる場合もある。更に、液面の気泡や
毛細管現象により目盛りの読み取りが困難となる欠点も
ある。

【０００４】これらの問題を解決するものとして、試験
紙タイプの尿比重試験片を用いる方法が開発され、汎用
されつつある。この方法によれば、試験片を尿中に浸漬
し、発色した色を比色表と比較する「ディップ アンド
リード」（ｄｉｐ ａｎｄｒｅａｄ）法によって手軽
に測定できる上に、他の尿検査項目、例えばグルコー
ス、ケトン体、蛋白質、ヘモグロビン、白血球、ビリル
ビン、ウロビリノーゲン、ｐＨ、アスコルビン酸等の試
験片と組み合わせて一度に測定することもできるので、
非常に便利である。

【０００５】そして、かかる試験片を用いた比色分析に
より液体試料の比重を求める方法として、近年、液体試
料のイオン強度を測定することにより間接的に比重を測
定する方法が、種々提案されている。液体試料のイオン
強度と比重との関係は、特公昭６２−１２８５８号公報
（特開昭５５−１０１０４７号公報）に詳しいので省略
するが、特に尿においてはイオン強度と比重は良好に相
関し、比例関係にあることが知られている。

【０００６】このようなイオン強度の測定により比重を
求める方法としては、例えば、以下のような手法が提案
されている。 ｉ）担体マトリックスに着色剤を包合したマイクロカプ
セルを保有させ、低浸透圧溶液と接すると該マイクロカ
プセル内の圧力が上昇してマイクロカプセルが膨潤、破
裂し、着色剤が溶出してマトリックスを変色させるとい
う現象を利用する方法（色の濃さが溶液の比重に比例す
る）（特公昭６０−４６３７４号公報） ｉｉ）ポリアクリル酸もしくはポリビニルアミンなどの
少なくとも約５０％中和されている高分子電解質とｐＨ
指示薬とを含有する組成物からなる試験片を用いてイオ
ン強度又は比重を測定する方法（特開昭５５−１０１０
４７号公報） ｉｉｉ）強酸性あるいは強塩基性の高分子電解質ポリマ
ーと少なくとも約５．５のｐＨ値を維持できる緩衝剤物
質及びｐＨ指示薬手段とからなる組成物で、高分子電解
質ポリマーとして、ポリスチレンスルホン酸、ポリビニ
ル硫酸あるいはポリビニルアンモニウムクロリドを用い
る方法（特開昭５６−２１０６４号公報） ｉｖ）強有機酸によって中和された弱塩基性の高分子電
解質重合体及び指示薬を含む試薬で、高分子電解質重合
体としてポリエチレンイミン、ポリビニルアミン、ポリ
アミノスチレン又はそれらを構成する単量体同士の共重
合体を用いる方法（特開昭５９−１３３２０７号公報） ｖ）少なくとも１個のカルボキシル基がアンモニウム塩
の形で存在する弱塩基性高分子電解質重合体及び指示薬
を含む組成物を用いる方法（特開昭５９−１３３２０８
号公報） ｖｉ）少なくとも１種のｐＨ緩衝剤を含むが高分子電解
質ポリマーを含まないか又は少なくとも１種のｐＨ緩衝
剤及び／又は少なくとも１種の錯体形成剤を含有し、さ
らに１種のｐＨ指示薬を含む組成物を用いる方法（特開
平２−６６４５１号公報） ｖｉｉ）少なくとも１つの洗浄剤及び１つのｐＨ指示薬
を含む組成物を用いる方法（特開平５−１７２８２２号
公報） ｖｉｉｉ）１種以上のｐＨ緩衝剤、１種以上のｐＨ指示
薬及び増感剤としての１種以上の界面活性剤を含む組成
物を用いる方法（特開平５−１９６６１６号公報）

【０００７】前記公報に開示された従来の液体試料のイ
オン強度測定による比重の比色分析的測定方法では、電
解質ポリマー、錯体形成剤、ｐＨ緩衝剤、ｐＨ指示薬、
マイクロカプセル等を用いた試験片を使用している。し
かしながら、これらの方法は、例えば液体試料のｐＨや
温度、測定時間等の影響を受け易く、正確な測定が困難
である。また、従来の比色分析的測定方法に使用する試
験片は、一般に製造が難しいものが多く、実用的なもの
ではなかった。

【０００８】そこで、特開平９−１１３５０２号公報に
は、液体試料の比重の大きさと相関関係を有するイオン
強度を測定し、これによって比重を求めるための試薬組
成物及び試験用具であって、従来と比べてより簡便で液
体試料のｐＨや温度、測定時間等の影響の少ない試験用
具が開示されている。これは、有機リン酸であるリン酸
ジエステルの陽イオン交換能力を利用し、リン酸ジエス
テル、ｐＨ緩衝剤、およびｐＨ指示薬を含有する液体試
料のイオン強度測定用試薬組成物と、該試薬組成物を含
む試験用具である。換言すれば、金属精製等の分野にお
いて金属イオンの溶媒抽出に有効な陽イオン交換抽出剤
であるリン酸ジエステルを、尿といった液体試料のイオ
ン強度測定法に応用したものである。

【０００９】上記のリン酸ジエステルは、一般に液状イ
オン交換体と言われており、イオン交換基を持つ。同時
に大きな非極性部分をもつこと、すなわち水相に不溶な
ことが特徴である。従って、交換平衡に達するのが速
く、また水相に不溶であるため抽出効率が高いとされて
いる。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、リン酸
ジエステルといった陽イオン交換抽出剤の陽イオン交換
能力を利用する手法は、イオン強度が高い高比重試料で
は有用だが、極端な低比重の試料に対しては、ほとんど
反応せず、指示薬も色変化を示さないことが判明した。

【００１１】というのも、リン酸ジエステルといった陽
イオン交換抽出剤は水性試料に不溶であるために親水性
に乏しく、水性試料を測定しようとした際に、試料中の
イオン強度がある程度以上無い場合に陽イオン交換を起
こしにくいのである。これはつまり、極端な低比重の試
料に対しては、陽イオン交換能力が低いということを意
味する。そこで本発明の目的は、イオン強度の高低に関
わらず、従来技術では得られなかった検出感度を得るこ
とにある。

【００１２】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記リン
酸ジエステルといった陽イオン交換抽出剤使用時の水性
試料測定時の陽イオン交換を促進させるすべく、鋭意研
究の結果、金属精錬等で用いられる中性抽出剤を添加す
ると、高比重の試料は当然として、低比重の試料に対し
ても絶大な増感効果が得られることを見出した。

【００１３】すなわち本発明は、陽イオン交換抽出剤、
ｐＨ緩衝剤、ｐＨ指示薬、および中性抽出剤を含有す
る、液体試料のイオン強度測定用の試薬組成物に関す
る。また、本発明は、特開平９−１１３５０２号と同様
に、前記試薬組成物を含有する試験用具に加工すること
もでき、特に前記試薬組成物を吸収性担体に含浸させる
か、またはフィルム上にコーティングもしくは印刷し
て、液体試料のイオン強度又は比重測定用の試験片とす
ることができる。

【００１４】

【発明の実施の形態】以下に、本発明の実施の形態を説
明する。

【００１５】本発明で用いられる陽イオン交換抽出剤と
しては、酸性有機リン酸化合物が好ましく用いられ、特
に、下記一般式（１）で表される酸性リン酸化合物が好
ましく使用できる。

【００１６】

【化３】 ここで、式（１）中、Ｘ_１およびＸ_２は相互に同一また
は異なっていてもよく、Ｘ_１およびＸ_２は共に−Ｒ又は
−ＯＲで示され、Ｒはａ）炭素数４〜２０の直鎖又は分
岐型のアルキル基、（ｂ）フェニル基、（ｃ）直鎖又は
分岐型のアルキル基又はアルコキシル基で置換されたフ
ェニル基、（ｄ）ベンジル基、（ｅ）直鎖又は分岐型の
アルキル基又はアルコキシル基で置換されたベンジル基
からなる群から選ばれる有機基を表す。また、前記フェ
ニル基またはベンジル基に導入される置換基である直鎖
又は分岐型のアルキル基又はアルコキシル基は、好まし
くは炭素数１〜２０程度のものである。また、Ｙ_１およ
びＹ_２はＯかＳを示し、相互に同一または異なっていて
もよい。

【００１７】上記に示す酸性リン酸化合物として、Ｙ_１
およびＹ_２が共にＯのとき、Ｘ_１およびＸ_２が共に−Ｏ
Ｒで示されるリン酸ジエステル、Ｘ_１およびＸ_２のどち
らか一方が−Ｒで他方が−ＯＲであるリン酸モノエステ
ル、Ｘ_１およびＸ_２が共に−Ｒで示されるリン酸化合物
が挙げられる。また、Ｙ_１＝Ｏ，Ｙ_２＝Ｓのとき、Ｘ_１
およびＸ_２が共に−ＯＲで示されるモノチオリン酸ジエ
ステル、Ｘ_１およびＸ_２のどちらか一方が−Ｒで他方が
−ＯＲであるモノチオリン酸モノエステル、Ｘ_１および
Ｘ_２が共に−Ｒで示されるモノチオリン酸化合物が挙げ
られる。Ｙ_１およびＹ_２が共にＳのとき、Ｘ_１およびＸ
_２が共に−ＯＲで示されるジチオリン酸ジエステル、Ｘ
_１およびＸ_２のどちらか一方が−Ｒで他方が−ＯＲであ
るジチオリン酸モノエステル、Ｘ_１およびＸ_２が共に−
Ｒで示されるジチオリン酸化合物が挙げられる。

【００１８】溶媒抽出法を常用している金属精錬等の分
野では、抽出剤を単独で用いた場合よりも、二種類の抽
出剤を同時に用いた場合に抽出効果が高いとき、「協同
効果」と呼称している。例えば、本発明でも使用される
陽イオン交換抽出剤であるリン酸ジエステルは、酸性抽
出剤に分類され、さらに非キレート系の酸性抽出剤とし
て分類されている。つまり、本発明は、一つの抽出剤で
あるリン酸ジエステルと同時に第二の抽出剤を同時に適
用したものであり、液体試料中のイオン強度測定方法に
対しては意外としか表現できない協同効果の概念を応用
したものである。

【００１９】この協同効果は、先述のように金属精錬業
界では増感手法として公知ではあるものの、イオン強度
測定方法へ応用して、はたして効果があるか甚だ疑問で
あった。しかし、本発明者による研究の結果、予想以上
の値を示す絶大なる増感作用が認められ、本発明の完成
に至ったのである。

【００２０】溶媒抽出は、通常、水相／有機溶媒相間の
接触を促進させるために、撹拌作業や振とう作業を行う
が、イオン強度測定、特にドライ試験片へ加工された場
合には、その両界間の接触が完全では無いと言える。し
かし本発明は、従来のイオン強度測定法に対して絶大な
増感を引き起こすために、そのような両界間の接触が困
難なドライ試験片へ特に有効である。

【００２１】本発明において測定対象となる液体試料
は、水溶性の液体、例えば尿、血液、汗等の生物学的液
体を挙げることができる。特に、本発明の試薬組成物又
は試験用具は、イオン強度と比重が良好な相関関係を有
する尿の比重の簡易測定に有用である。

【００２２】本発明の試薬組成物を用いた試験用具は、
このような液体試料のイオン強度又は比重の測定におい
て、反応速度が速く、また均一な発色が得られることに
加えて、極端な低比重の試料に対しても格別に感度が高
い。

【００２３】本発明の陽イオン交換抽出剤は、酸性有機
リン酸化合物が好ましい。入手し易い酸性有機リン酸化
合物の例として、リン酸ジエステル、リン酸モノエステ
ル、チオリン酸ジエステル、チオリン酸モノエステル、
ジチオリン酸ジエステル、ジチオオン酸モノエステルと
いったエステル系化合物から、非エステル化合物である
酸性有機リン酸化合物が挙げられるが、イオン交換能力
を有する酸性有機リン酸化合物ならば特に支障はない。
金属精錬業界で汎用の試薬ならば、全て使用することが
できる。敢えて言うならば、酸性有機リン酸の中でも、
入手のし易さ、価格面、加工のし易さ、安全性の高さと
いった面から、リン酸ジエステルが好ましく使用でき
る。

【００２４】そのリン酸ジエステルも、具体的にはリン
酸ジ（−２−エチルヘキシル）エステル、リン酸ジ（ヘ
キサデシル）エステル、リン酸ジ（ポリエチレングリコ
ール−４−ノニルフェニル）エステル、リン酸ジベンジ
ルエステル、リン酸ジ−ｎ−ブチルエステル、リン酸ジ
フェニルエステル等が挙げられるが、これらのうち、特
に好ましくは、リン酸ジ（エチルヘキシル）エステルが
用いられる。リン酸ジエステルとしての陽イオン交換抽
出剤の試薬組成物中の濃度は、０．０１〜１．０Ｍ程度
が好ましい。

【００２５】本発明におけるｐＨ緩衝剤は、有機塩基又
は有機塩基と酸との組合せによるものが好適であり、好
ましくはｐＨ３．０〜１０．０の範囲で使用される緩衝
剤が用いられる。具体的には、２−アミノ−２−メチル
プロパン−１，３−ジオール、トリス、種々のグッド緩
衝剤、又はこれらの緩衝剤と塩酸との組合せによる緩衝
液などが挙げられる。ｐＨ緩衝剤の試薬組成物中の濃度
は０．０１〜２Ｍ程度が好ましい。

【００２６】本発明におけるｐＨ指示薬は、前記ｐＨ緩
衝剤のｐＨ変動幅内に変色域がある指示薬であればいず
れも使用可能であるが、特にイオン強度の増強で解離が
促進されるトリフェニルメタン系のｐＨ指示薬が好まし
いものとして挙げられ、具体的にはブロモチモールブル
ー、ブロモクレゾールパープル、チモールブルー、フェ
ノールレッド、ブロモクレゾールグリーン等が挙げられ
る。これらの指示薬は単独で使用しても、併用してもよ
い。ｐＨ指示薬の試薬組成物中の濃度は０．００１〜
１．０ｗ／ｖ％が好ましい。

【００２７】本発明で用いられる中性抽出剤としては、
金属精錬業界で協同効果を生じさせるための一般的な中
性抽出剤を使うことができ、ほぼ中性の性質を示す中性
有機リン酸やアルコールが使用できる。これら中性抽出
剤の沸点は、ドライ試験片に加工する際の熱乾燥時に気
化してしまわないように、例えば９０℃以上が好まし
い。故に、例えばアルコールならばデカノールより炭素
数が大きなアルコールが好ましい。中性抽出剤の試薬組
成物中の濃度は、０．０１〜１．０Ｍ程度が好ましい。

【００２８】中性抽出剤の中でも、中性有機リン酸が好
ましく使用できる。というのも、本発明で用いる陽イオ
ン交換抽出剤は酸性有機リン酸化合物が好ましいため
に、この酸性有機リン酸と構造的に類似している中性有
機リン酸の方が、試薬組成物の調製時に加工しやすく
（混合しやすい）、ムラの少ない組成物が出来上がるた
めである。それら中性有機リン酸は、下記一般式（２）
で示すことができる。

【００２９】

【化４】 ここで、式（２）中、Ｘ_１およびＸ_２およびＸ_３は相互
に同一または異なっていてもよく、Ｘ_１およびＸ_２およ
びＸ_３は共に−Ｒ又は−ＯＲで示され、Ｒは（ａ）炭素
数４〜２０の直鎖又は分岐型のアルキル基、（ｂ）フェ
ニル基、（ｃ）直鎖又は分岐型のアルキル基又はアルコ
キシル基で置換されたフェニル基、（ｄ）ベンジル基、
（ｅ）直鎖又は分岐型のアルキル基又はアルコキシル基
で置換されたベンジル基からなる群から選ばれる有機基
を表す。また、前記フェニル基またはベンジル基に導入
される置換基である直鎖又は分岐型のアルキル基又はア
ルコキシル基は、好ましくは炭素数１〜２０程度のもの
である。

【００３０】上記に示す中性有機リン酸として、三個の
エステル基を有する（Ｘ_１〜Ｘ_３の全てが−ＯＲであ
る）ホスファート、二個のエステル基を有する（Ｘ_１〜
Ｘ_３の任意の二つが−ＯＲで、残り一つが−Ｒである）
ホスホネート、一個のエステル基を有する（Ｘ_１〜Ｘ_３
の任意の一つが−ＯＲで、残り二つが−Ｒである）ホス
フィネート、エステル基を有さない（Ｘ_１〜Ｘ_３の全て
が−Ｒである）ホスフィンオキサイドが挙げられる。こ
れらを単独はもちろん、混合して使用することも可能で
ある。

【００３１】本発明の試薬組成物中、陽イオン交換抽出
剤、中性抽出剤、ｐＨ緩衝剤およびｐＨ指示薬の４成分
の総量を１００％（ｗ／ｖ）としたとき、陽イオン交換
抽出剤の含有量としては２０〜８０％（ｗ／ｖ）、好ま
しくは３０〜６０％（ｗ／ｖ）、中性抽出剤の含有量と
しては２０〜８０％（ｗ／ｖ）、好ましくは３０〜６０
％（ｗ／ｖ）、ｐＨ指示薬の含有量としては０．０１〜
３０％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．０５〜１０％（ｗ／
ｖ）、ｐＨ緩衝剤の量としては３０〜８０％（ｗ／
ｖ）、好ましくは４０〜６０％（ｗ／ｖ）とするのがよ
い。

【００３２】本発明の試薬組成物には、前記成分以外
に、バインダー類、例えばポリビニルピロリドン、ヒド
ロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアルコー
ル等の公知の配合成分を添加することができる。

【００３３】本発明の試験用具は、前記試薬組成物を含
有するものであれば特に限定されず、たとえば溶媒中に
試薬組成物を溶解させた溶液、適当な支持体の上に試薬
組成物を保持した試験片、試薬組成物を含む粉末状のも
の、試薬組成物を封入した錠剤状のもの等、いずれの形
式であっても良い。

【００３４】本発明の試薬組成物を試験片に使用する場
合には、まず本発明の試薬組成物を、例えば濾紙のよう
な吸収性担体に含浸させるか、またはポリマー等と混合
してフィルム上にコーティングもしくは印刷した後、十
分乾燥させて試験片を得る。このようにして得られる試
験片を、次いで、検出対象となる液体試料に浸漬した後
これを取り出し、一定時間経過後、前記試験用具のｐＨ
の変動及びｐＨ指示薬の解離度の変動を検出する。吸収
性担体としては、濾紙等の紙、ポリスチレン等の合成樹
脂多孔質膜、不織布等が挙げられる。また、コーティン
グもしくは印刷するフィルムとしては、ポリ塩化ビニル
等のプラスチックプレート、ポリエチレンテレフタレー
トフィルム等が挙げられる。

【００３５】ｐＨの変動及びｐＨ指示薬の解離度の変動
は、一定時間後の前記試験用具の呈色を、イオン強度既
知又は比重既知の溶液を用いて同様な操作を行い作成し
た標準色調表の色調と比較することにより求めることが
できる。比較する方法は、肉眼判定を行うか、あるいは
一定時間後（１０秒〜数分後）の試験用具の呈色を、公
知の方法で光学的に反射率を測定することにより行うこ
とができる。

【００３６】本発明の試薬組成物は、試験片として使用
する場合が最も有利であるが、溶液として、または粉末
もしくは錠剤の形で使用することもできる。また試験片
や錠剤を使用する他の方法として、試験片や錠剤上に液
体試料を滴下して、試験片の呈色を肉眼で、又は光学的
に反射率を測定することにより検出する方法もある。

【００３７】

【実施例】以下に、実施例により本発明を具体的に説明
する。

【００３８】（実施例１） ［試験片含浸液の調製］以下の試薬類をエタノール２０
ｍｌに溶解し、１液目を得た。 陽イオン交換抽出剤として下記式で示されるリン酸ジ
（−２−エチルヘキシル）エステル（Ｃ_１６Ｈ_３５Ｏ_４
Ｐ）：１．０ｇ 中性抽出剤として、トリブチルホスファート又はトリオ
クチルホスファート又はトリブチルホスフィンオキサイ
ド又はデカノール：全て１．０ｇ ｐＨ指示薬として０．０８ｇのブロムチモールブルー
と、０．００７ｇのブロムフェノールレッドの混合物 一方、ｐＨ緩衝剤としてトリス（ヒドロキシメチル）ア
ミノメタン：１．２ｇを精製水８０ｍｌに溶解し、塩酸
を用いてｐＨを８．６に調製し、２液目を得た。上記二
液を混合し、試験片へ加工するための含浸液とした。

【００３９】

【化５】

【００４０】［試験片への加工］得られた含浸液を、１
５ｃｍ×１５ｃｍの濾紙（ワットマン社製の３ＭＭＣｈ
ｒ）に含浸させ、８０℃にて１０分間送風乾燥させた。
乾燥後の濾紙を５ｍｍ×５ｍｍに裁断し、５ｍｍ×６０
ｍｍの白色ポリエチレンテレフタレート板（０．５ｍｍ
厚）の先端へ両面テープを用いて貼り付け、試験片とし
た。

【００４１】［試験］屈折計（アタゴ社製：屈折比重計
ＵＧ−Ｄ）で確認した適当な比重値を示す人尿および精
製水を試料検体液とし、液中へ先に作製した試験片を２
秒間浸漬し、引き上げた６０秒後の試験片の呈色を、色
差計（日本電色工業社製のΣ−９０）にて主波長６３０
ｎｍ／副波長７５０ｎｍで反射率を測定した。各尿検体
での反射率と精製水での反射率との差をΔＲ％とした。
特開平９−１１３５０２号での実施例では差ΔＲ％をと
っていないので、注意する。

【００４２】［結果］測定の結果を表１に示した。表か
ら判るように、陽イオン交換抽出剤を主成分とする試薬
組成物に関して、中性抽出剤の添加により、低比重領域
でも高感度が得られている。

【００４３】

【表１】

【００４４】

【発明の効果】以上詳細に説明したように、本発明の試
薬組成物は高感度で反応速度が速く、高比重試料はもち
ろんのこと、極端な低比重値でも鋭敏に反応するため、
良好な測定結果を示す新しい比重測定用試験用具が得ら
れる。

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 陽イオン交換抽出剤、ｐＨ緩衝剤、ｐＨ
   指示薬、および中性抽出剤を含有する、液体試料のイオ
   ン強度測定用の試薬組成物。
2. 【請求項２】 陽イオン交換抽出剤が酸性有機リン酸化
   合物である、特許請求の範囲第１項に記載の試薬組成
   物。
3. 【請求項３】 酸性有機リン酸化合物が下記一般式
   （１）で示される酸性リン酸化合物である、特許請求の
   範囲第２項に記載の試薬組成物。 【化１】 （式（１）中、Ｘ_１およびＸ_２は、相互に同一または異
   なっていてもよく、Ｘ_１およびＸ_２は共に−Ｒ又は−Ｏ
   Ｒで示され、Ｒはａ）炭素数４〜２０の直鎖又は分岐型
   のアルキル基、（ｂ）フェニル基、（ｃ）直鎖又は分岐
   型のアルキル基又はアルコキシル基で置換されたフェニ
   ル基、（ｄ）ベンジル基、（ｅ）直鎖又は分岐型のアル
   キル基又はアルコキシル基で置換されたベンジル基から
   なる群から選ばれる有機基を表す。また、Ｙ_１およびＹ
   _２はＯかＳを示し、相互に同一または異なっていてもよ
   い。）
4. 【請求項４】 酸性リン酸化合物がリン酸ジエステルで
   ある、特許請求の範囲第３項に記載の試薬組成物。
5. 【請求項５】 酸性リン酸化合物がリン酸モノエステル
   である、特許請求の範囲第３項に記載の試薬組成物。
6. 【請求項６】 ｐＨ緩衝剤が有機塩基を含み、且つｐＨ
   ３．０〜１０．０の範囲で使用されるものである、特許
   請求の範囲第１項に記載の試薬組成物。
7. 【請求項７】 中性抽出剤が中性有機リン酸である、特
   許請求の範囲第１項に記載の試薬組成物。
8. 【請求項８】 中性抽出剤がアルコールである、特許請
   求の範囲第１項に記載の試薬組成物。
9. 【請求項９】 中性有機リン酸が下記一般式（２）で示
   される中性リン酸化合物である、特許請求の範囲第７項
   に記載の試薬組成物。 【化２】 （式（２）中、Ｘ_１およびＸ_２およびＸ_３は、相互に同
   一または異なっていてもよく、Ｘ_１およびＸ_２およびＸ
   _３は共に−Ｒ又は−ＯＲで示され、Ｒは（ａ）炭素数４
   〜２０の直鎖又は分岐型のアルキル基、（ｂ）フェニル
   基、（ｃ）直鎖又は分岐型のアルキル基又はアルコキシ
   ル基で置換されたフェニル基、（ｄ）ベンジル基、
   （ｅ）直鎖又は分岐型のアルキル基又はアルコキシル基
   で置換されたベンジル基からなる群から選ばれる有機基
   を表す。）
10. 【請求項１０】 特許請求の範囲第１項に記載の試薬組
    成物を含有する、液体試料のイオン強度測定用試験用
    具。
11. 【請求項１１】 試験用具が、前記試薬組成物を吸収性
    担体に含浸させるか、またはフィルム上にコーティング
    もしくは印刷してなる試験片である、特許請求の範囲第
    １０項に記載の試験用具。
12. 【請求項１２】 尿の比重測定に用いる特許請求の範囲
    第１項に記載の試薬組成物。