JP2001041930A

JP2001041930A - 試料溶液のイオン化方法

Info

Publication number: JP2001041930A
Application number: JP2000211981A
Authority: JP
Inventors: Tsudoi Hirabayashi; 集平林; Minoru Sakairi; 実坂入; Yasuaki Takada; 安章高田; Hideaki Koizumi; 英明小泉; Kaoru Umemura; 馨梅村
Original assignee: Hitachi Ltd
Current assignee: Hitachi Ltd
Priority date: 1994-03-15
Filing date: 2000-07-07
Publication date: 2001-02-16

Abstract

(57)【要約】【課題】溶液試料は試料溶液供給部１からイオン源２
の中のキャピラリーに導入される。ガス供給部３から供
給されるガスは流量計４により流量が調節され、キャピ
ラリーの外周部に沿って流され、キャピラリー先端で噴
出するように構成されたガスガイド管に導入される。試
料溶液はキャピラリー先端部で噴出ガスの作用効果によ
りイオン化され、質量分析計１１で分析される。【効果】従来のイオン化法の１０倍以上のイオン強度
が得られ、操作が安全にできる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、イオン源およびこ
れを用いる質量分析装置に関し、特に液体中に存在する
試料をイオン化する方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】キャピラリー電気泳動（ＣＥ）あるいは
液体クロマトグラフ（ＬＣ）は、溶液中に存在する試料
の分離ができるが、分離された試料の種類の同定が困難
である。一方、質量分析計（ＭＳ）は試料を高感度で同
定することができるが、溶液中の試料の分離ができな
い。このため、水等の溶媒に溶解した複数の生体関連物
質を分離分析する場合、質量分析計にキャピラリー電気
泳動あるいは液体クロマトグラフを結合させたキャピラ
リ−電気泳動／質量分析計（ＣＥ／ＭＳ）または液体ク
ロマトグラフ／質量分析計（ＬＣ／ＭＳ）が一般には使
用される。

【０００３】キャピラリー電気泳動あるいは液体クロマ
トグラフにより分離された試料を質量分析計で分析する
ためには、溶液中の試料分子を気体状のイオンに変換す
ることが必要である。このようなイオンを得る従来技術
として、イオンスプレー法（アナリティカル・ケミスト
リー（ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ）、
第５９巻（１９８７年）第２６４２項から第２６４６
項）等が知られている。

【０００４】このイオンスプレー法では、キャピラリの
外周部に沿ってガスが流され、試料溶液が導入されるキ
ャピラリーと、質量分析計にイオン取り込むための細孔
（サンプリングオリフィス）との間に、高電圧（３〜６
ｋＶ）が印加され、キャピラリー先端では強電界が発生
している。このような構成のもとで生成する静電噴霧現
象により、小さな帯電液滴が生じ、上記のガスにより帯
電液滴の中の溶液が気化し、気体状のイオンが生成され
る。このように生成したイオンはサンプリングオリフィ
スを介し質量分析計に導入され、質量分析される。上記
のガスは、帯電液滴の気化を促進させる他に、キャピラ
リーの先端で放電が起こるのを抑圧する。

【０００５】キャピラリーに供給される溶液の流量が１
０μＬ（マイクロリットル）／分以下で、ガスを流さず
にイオン化する方法である、エレクトロスプレー法（ジ
ャーナル・オブ・フィジカル・ケミストリー（Ｊｏｕｎ
ａｌｏｆＰｈｙｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第８
８巻（１９８４年）第４４５１頁から第４４５９頁）
は、イオンスプレー法と区別されているが、イオン生成
の原理はイオンスプレー法と同じである。また、大気圧
化学イオン化法（アナリティカル・ケミストリー（Ａｎ
ａｌｙｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第５４巻
（１９８２年）第１４３頁から第１４６頁）では、キャ
ピラリーの先端の近くに放電を行なう電極を設け、大気
圧下に噴霧された液滴を放電によりイオンさせる方式が
取られている。これら従来の各種のスプレーイオン化法
では、高いイオン生成効率を得るためには、直径が約１
０ｎｍ以下の微細な帯電液滴の生成が必要と考えられて
いる。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】上記従来技術では、キ
ャピラリーとサンプリングオリフィスの間には高電圧が
印加される。そのため、感電防止策が必要であり、装置
の構造は複雑になるという問題がある。キャピラリー電
気泳動／質量分析計では、キャピラリー先端に高電圧が
印加されるため、キャピラリー電気泳動装置で試料を泳
動させるためにさらに高電圧を印加する必要がある。

【０００７】また、静電噴霧現象はキャピラリーの先端
やサンプリングオリフィスの表面の汚れに大きく影響さ
れ、エレクトロスプレー法やイオンスプレー法では、試
料溶液の噴霧を一旦停止すると、同一条件で噴霧を再開
しても検出されるイオン強度は異なり、再現性が低い。
そのため、検出されるイオン強度が最大となるように、
キャピラリー位置を微調整したり、キャピラリー先端や
サンプリングオリフィス表面をクリーニングする等の煩
雑な作業が、噴霧を再開する毎に必要である。

【０００８】そのため、感電防止のために装置の構造が
複雑になり、操作上の障害となる。

【０００９】また、上記従来技術では、試料溶液に、溶
媒としてアルコ−ルやアンモニア等の揮発性物質を混合
する必要がある。電気伝導度が低い溶媒を用いた場合に
は、静電噴霧現象が起こらず、静電噴霧現象を生じさせ
るためには、試料溶液の電気伝導度が１０^-13〜１０^-5
Ω^-1ｃｍ^-1の範囲とする必要があることが経験的に知ら
れている。これらの条件が満たされない限り、静電噴霧
現象が安定に起こらず、溶媒の選択が制限される点で問
題がある。

【００１０】また、キャピラリーとサンプリングオリフ
ィスの間に高電圧が印加されるため、イオン源の周辺で
放電が起こる可能性があり、引火性溶媒の使用は困難で
ある。このように使用できる溶媒の種類が制限される
と、キャピラリー電気泳動あるいは液体クロマトグラフ
により、測定対象物質の分離ができない場合が生じる。

【００１１】本発明の目的は、安全で操作性の高いイオ
ン源を提供し、このイオン源を使用して、安定にイオン
を生成し高感度に再現性よく試料の分析ができる質量分
析装置を提供することにある。

【００１２】本発明の他の目的は、キャピラリー電気泳
動あるいは液体クロマトグラフ等で使用される広範囲の
溶媒が使用できるイオン源およびこれを使用した質量分
析装置を提供することにある。

【００１３】

【課題を解決するための手段】本発明は、試料溶液が導
入される細管の端部の外周部にガス流を形成するガスガ
イド管を有し、細管の端部の外周部にガスをの流速を２
７５ｍ／ｓ〜４００ｍ／ｓの範囲で前記ガスが噴出し、
細管からの試料溶液を霧化してイオン化することにあ
る。また、ガスガイド管に加熱することによりイオン化
を促進することが出来、ガスガイド管と細管の電位を接
地することにより安全に動作させることが可能となる。

【００１４】以下、より詳細に本発明の特徴を説明する
と、試料溶液を大気中に噴霧させるキャピラリーと、キ
ャピラリーの先端近傍部位が、挿入されて設置されるガ
スガイド管であり、ガス導入口から導入されたガスがキ
ャピラリーの外周壁面に沿って、キャピラリー先端まで
流されるように構成したガスガイド管とを具備するイオ
ン源であって、キャピラリー先端近傍におけるガスの流
速が、ガス中での音速をＣ（ｍ／ｓ）とするとき、（Ｃ
−８５）ｍ／ｓ〜（Ｃ＋７５）ｍ／ｓの範囲で試料をイ
オン化することを特徴とする。試料を効率良くイオン化
するためには、キャピラリー先端におけるガスの流速
が、（Ｃ−６０）ｍ／ｓ〜（Ｃ＋６０）ｍ／ｓの範囲で
あればさらによく、（Ｃ−３０）ｍ／ｓ〜（Ｃ＋３０）
ｍ／ｓの範囲であれば最もよい効果が得られる。

【００１５】キャピラリーの先端を、ガスガイド管の先
端にある内径が最小である開口部のに配置して、キャピ
ラリーの中心軸と開口部の中心軸とを一致させ、開口部
の内周面とキャピラリーの外周面により、形成された微
小空間から上記のガスが噴出される。ガスガイド管先端
（上記の開口部の大気圧側の面）とキャピラリー先端と
の距離をキャピラリーの中心軸に沿って変化させる手段
を有し、試料のイオン化効率を調整する。ガスガイド管
の一部に加熱手段を設けて、ガスを加熱して試料のイオ
ン化効率を高めることも可能である。

【００１６】イオン源で生成されたイオンをサンプリン
グオリフィスを介して質量分析計に導入する場合には、
上記のイオン源とサンプリングオリフィスとの間に、イ
オンが通過する穴のあいたカバーを設ける。このカバー
により、ガスガイド管から吹き出されたガス、試料溶液
の液滴が、サンプリングオリフィスに当たるのを防ぎ、
サンプリングオリフィスの温度の低下を防止する。

【００１７】イオンを効率良く質量分析計に導入するた
めに、キャピラリー先端とサンプリングオリフィスとの
距離を調節する。また、キャピラリー先端部の中心軸位
置とサンプリングオリフィスの中心軸位置との相対関係
を調整して、双方の中心軸を一致させるようにする。さ
らに、キャピラリーとサンプリングオリフィスとの間に
電圧を印加してもよい。

【００１８】キャピラリー先端において生成される液滴
の大きさにはガス流速により決まり、キャピラリー先端
のまわりで外側に向かって圧力勾配がなければ、帯電液
滴は生成されない。かかる圧力勾配が生じるためには、
ガスガイド管の内径が最小の部位の先端から、キャピラ
リーの先端が露出する距離を−０．２５ｍｍ〜１．０ｍ
ｍであるようにキャピラリーを設ける。また、帯電液滴
の生成効率を高めるために、キャピラリーの肉厚は１０
μｍ〜１５０μｍの範囲の薄いものを使用する。さら
に、キャピラリーに供給される試料溶液の流量が６０μ
Ｌ（マイクロリットル）／分以下とする。また、キャピ
ラリー先端部におけるガスの流速が不均一になる場合に
は、帯電液滴を含んだガスの流れは軸対称に形成され
ず、イオンの生成の再現性も低下するので、キャピラリ
ーの中心軸とガスガイド管のそれとは一致させる。

【００１９】試料溶液を、キャピラリ−電気泳動装置ま
たは液体クロマトグラフィー装置からキャピラリ−に供
給する。キャピラリ−電気泳動装置または液体クロマト
グラフィー装置を用いることにより、複数の試料成分が
含まれた試料溶液を分離してから、イオン源内のキャピ
ラリ−に供給して、時間的に連続して複数の試料成分の
質量分析を行ない、試料成分の同定を行なう。

【００２０】ガスとして水蒸気の含有の少ない乾燥窒素
を用い、キャピラリー先端近傍（上記の微小空間）にお
けるガスの流速を（２５０〜４００）ｍ／ｓ（０℃にお
けるマッハ数は、０．７５〜１．２）の範囲に設定し
て、試料を効率良くイオン化する。さらに、キャピラリ
ー先端（上記の微小空間）におけるガスの流速を、（２
７５〜４００）ｍ／ｓ（０℃におけるマッハ数は、０．
８〜１．２）の範囲として、試料をさらに効率良くイオ
ン化する。

【００２１】キャピラリー先端部での微小空間から噴出
されたガスにより、キャピラリー先端において試料溶液
の細かな帯電液滴が生成される。ガスの流速が音速に近
づくと、より小さな帯電液滴ができる。噴出されたガス
により、生成した帯電液滴から溶媒が気化して、気体状
のイオンが生成される。生成したイオンを質量分析計に
導入して分析することができる。

【００２２】キャピラリー先端部での噴霧ガスの流速が
ある程度以上になると、キャピラリー先端において、キ
ャピラリーに導入された試料溶液が細分化され、様々な
大きさの帯電液滴が生成される。そして極めて細かな帯
電液滴は容易に、脱溶媒（乾燥）される。溶液中では、
中性の試料分子も極めて細かな液滴中ではプロトンやナ
トリウムイオンなどと結合することにより、擬似分子イ
オン化が実現することがあり、質量分析装置で分析可能
なイオンが得られると考えられる。

【００２３】キャピラリー先端において生成される液滴
の大きさを決める条件は、噴霧されるガスのガス流速が
本質的な役割を果たすが、極めて細かな液滴の生成効率
においては、考慮すべき他の要素も存在する。即ち、キ
ャピラリー先端において溶液表面と周囲との圧力差があ
る程度以上大きくなければ、極めて細かな液滴は生成さ
れない。そのため、キャピラリーの肉厚は１００μｍ以
下の薄いものを使用することが極めて細かな液滴の生成
効率を高める。さらに、キャピラリーの中心軸とガスガ
イド管の中心軸とは一致することが望ましい。そうでな
い場合には、キャピラリー先端部におけるガスの流速が
不均一になるため、生成される溶液を含んだ噴霧ガスは
軸対称に形成されず、再現性も低下するからである。

【００２４】溶液の細分化にはガス流量はほとんど関係
しない。経験的には、ガス流量は０．５リットル／分以
上であれば充分である。キャピラリーの材質や、キャピ
ラリーに印加する電位も溶液の細分化にはほとんど影響
しない。

【００２５】

【発明の実施の形態】以下、図を参照して本発明を詳細
に説明する。

【００２６】図１は、本発明の装置構成を示すブロック
図である。試料溶液供給部１に溶液試料が供給され、溶
液試料は、イオン源２の内部に設けたキャピラリー（細
管）（図示せず）に導入される。ガス供給部３から供給
されるガスは流量調節計４によりガス流量が調節され、
イオン源２に導入されキャピラリーの外周部に沿って流
され、キャピラリーの先端部で大気中に、約２００ｍ／
ｓ（０℃におけるマッハ数は約０．６）以上のガス速度
で噴出する。キャピラリーに導入された試料溶液は、キ
ャピラリーの先端部に噴出されたガスにより、微小液滴
の他に試料分子の気体状の擬似分子イオンが試料溶液か
ら生成する（以下、このイオン化方法を、新しいスプレ
ーイオン化法である、ソニックスプレー（Ｓｏｎｉｃ
Ｓｐｒａｙ）法と呼ぶ）。生成したイオンは、キャピラ
リーの先端部から質量分析計１１に上記のガスにより導
入され、質量分析計１１で分析される。以下、本発明に
よるイオン源の構成、およびこのイオン源を使用した分
析例をもとにして、本発明によるイオン源の特徴に関し
て説明する。

【００２７】〔第１の実施例〕本実施例では、イオン源
は、液体クロマトグラフに結合され、液体クロマトグラ
フ／質量分析計（ＬＣ／ＭＳ）を構成する。液体クロマ
トグラフにより分離された試料溶液は、図１において、
連結管を経て試料溶液供給部１に供給されるか、あるい
は液体クロマトグラフの分離管が試料溶液供給部１に直
結されている。

【００２８】図２は、本実施例で使用するイオン源を示
す断面図である。試料溶液は１００μＬ（マイクロリッ
トル）／分の流量で、キャピラリー５（ステンレス製、
内径１００μｍ、外径３００μｍ）に、図２の左方に配
置された試料溶液供給部１から導入される。キャピラリ
ー５はその肉厚が薄い場合、強度的に弱く、湾曲しやす
いので、キャピラリー５はキャピラリー保持管（ステン
レス製）６により保持固定する。キャピラリー５の先端
部の約４ｍｍに部分が、キャピラリー保持管６から露出
する。キャピラリー５の外周部に沿ってガスが流され、
キャピラリーの先端部で大気中に所定のガス流速をもつ
ガスを噴出させるためのガスガイド管は、ガスガイド管
先端部７と、ガスガイド管先端部保持部１０とから構成
される。

【００２９】キャピラリー５の先端のおけるキャピラリ
ーの中心軸と、ガスガイド管先端部７に形成され、ガス
が噴出する出口を形成するための開口部（ガスガイド管
の内径の中で最小の内径を有する部分であり、内径は４
００μｍである）の中心軸とが一致するように、キャピ
ラリー５はキャピラリー保持管６を介してガスガイド管
先端部保持部１０に固定され、ガスガイド管先端部７は
直接ガスガイド管先端部保持部１０に固定される。ガス
ガイド管の外側は大気である。キャピラリー５の先端
は、図２に示すように寸法Ｌだけ、上記の開口部の大気
側の面へ突出している。

【００３０】ガスガイド管には、ガスボンベあるいはコ
ンプレッサーから窒素ガスあるいは空気が、流量調節計
４（図１）とガス導入管８を介して導入され、ガスガイ
ド管先端部７の先端において、上記の開口部内周面とキ
ャピラリー５の外周面で形成される微小空間を通って、
ガスは噴出する。この微小空間のキャピラリー５もしく
は開口部の中心軸に直交する面での断面積Ｓとガスガイ
ド管内を流れる流量Ｆより、上記の微小空間でのガスの
流速ｖはｖ＝Ｆ／Ｓで求められる。上記の開口部の形が
円（内径Ｄ）、およびキャピラリー５の長手方向に直交
する面での断面の外形が円（外径ｄ）である場合、ガス
ガイド管内を流れる流量Ｆから、ガスガイド管先端部７
先端の最も内径の小さい部位の内径Ｄと前記キャピラリ
ー５の外径ｄ、および測定されたガスの流量Ｆ（誤差約
３％で測定した）より、上記の微小空間の出口でのガス
の流速ｖは（数１）で求められる。

【００３１】

【数１】ｖ＝４Ｆ／（π（Ｄ²−ｄ²）） …（数１）ガスの流速ｖは、流量計を用いなくても、直接あるは間
接的に流速を測定する手段により決定してもよい。例え
ば、熱線流速計、レーザ・ドップラ流速計または追跡法
もしくは火花追跡法による流速計を用いて、流速を測定
してもよい。

【００３２】ガスガイド管先端部７のガス出口ではガス
の断熱膨張がおこり、ガスガイド管先端部７とキャピラ
リー５が冷却される。従って、噴出ガスの温度を室温以
上に保ち、生成される液滴の気化を促進するために、ガ
スガイド管先端部７にヒーター９を設置し、導入される
ガスを、５０℃から約９０℃の間の温度で加熱するのが
望ましい。

【００３３】キャピラリー５の先端がガスガイド管先端
部７から露出する長さ（露出長Ｌ）が２ｍｍ以上である
場合には、キャピラリー５の先端におけるガスの流速が
低下するためイオン生成効率は低い。このため、キャピ
ラリー５の先端とガスガイド管先端部７の先端との距離
を調節するために、ガスガイド管先端部７はガスガイド
管先端部保持部１０にネジ込まれて固定される。ガスガ
イド管先端部７のねじ込み位置を調節することにより、
イオン、あるいは極めて細かな帯電液滴の生成効率を最
大にすることができる。

【００３４】以上の説明では、ガスガイド管先端部７か
ら、窒素ガスまたは空気を噴出させた場合を説明した
が、アルゴン等の希ガスあるいは二酸化炭素を噴出させ
てもよい。また、ガスを購入するコスト面から、窒素、
空気または二酸化炭素を使用するのが好ましい。さらに
好ましくは、水蒸気の含有が少ない乾燥窒素を使用する
のがよい。

【００３５】本実施例では、ガスガイド管先端部７の先
端の最も内径の小さい部位の軸方向の厚さを、２ｍｍと
した。この厚さは、薄い方がガスガイド管先端部７とキ
ャピラリー５との軸合わせが容易になり、厚さ０．５ｍ
ｍ程度が実際の作業操作から好ましい。

【００３６】〔第２の実施例〕本実施例では、イオン源
は、キャピラリー電気泳動装置に連結され、キャピラリ
ー電気泳動／質量分析計結合装置（ＣＥ／ＭＳ）を構成
する。キャピラリー電気泳動装置により分離された試料
溶液は、図１において、連結管を経て試料溶液供給部１
に供給されるか、あるいはキャピラリー電気泳動装置の
分離管であるキャピラリーが試料溶液供給部１に直結さ
れている。

【００３７】図３は、本実施例で使用するイオン源を示
す断面図である。第１の実施例に示すイオン源と同様
に、図３に示すようにガスガイド管は、ガスガイド管先
端部７と、ガスガイド管先端部保持部１０とから構成さ
れる。キャピラリー電気泳動装置では、試料溶液の流量
が少なく０．１μＬ（マイクロリットル）／分以下であ
り、電気泳動キャピラリーの末端に泳動してくる分離さ
れた試料溶液を希釈する。この試料溶液を希釈により、
連続的にキャピラリー５に希釈された試料溶液を連続的
に流すことができる。希釈用溶媒を加える時に、試料溶
液のイオン濃度やｐＨ等を最適化して、測定試料のイオ
ン化の効率を増大させることができる。

【００３８】キャピラリー電気泳動装置により、分離さ
れた溶液試料は電気泳動用キャピラリー１２から混合ジ
ョイント１４に導入され、配管１３から２０μＬ（マイ
クロリットル）／分の流量で導入される希釈用溶媒と混
合され、キャピラリー５に導入される。次に、試料はキ
ャピラリー５の先端部でガス導入管８から導入されたガ
スにより、第１の実施例と同様に、液滴の他に、気体状
の試料分子の擬似分子イオンに変換される。

【００３９】キャピラリー５は金属のキャピラリー保持
管６を介して混合ジョイント１４とガスガイド管先端部
保持部１０に固定される。キャピラリー電気泳動装置の
電気泳動用の電極としてキャピラリー保持管６又は混合
ジョイント１４が使用される。ガスガイド管先端部７を
固定する位置調節用治具１５は、ガスガイド管先端部保
持部１０にネジ１６を用いて固定される。位置調節用治
具１５に設けられたネジ１６が貫通する穴は、ネジ外形
より大きめに開けられている。このため、位置調節用治
具１５に固定されたガスガイド管先端部７の位置を、キ
ャピラリー５の中心軸に垂直な平面内で調節して、キャ
ピラリー５とガスガイド管先端部７の中心軸を一致させ
ることができる。作業中に、キャピラリー５の破損を防
止するため、ガスガイド管先端部７の先端部分に円周を
形成する突起部が設けてある。第１の実施例と同様にし
て、ガスガイド管先端部７にヒーターを設け噴出ガスを
加熱してもよい。

【００４０】質量分析計のサンプリングオリフィス１７
は、例えば内径を０．３ｍｍ、オリフィスの奥行き長さ
を１５ｍｍとする。さらに、サンプリングオリフィス１
７は、セラミックヒーター１８により１００℃〜１５０
℃に加熱される。サンプリングオリフィス１７の外側
（大気圧側）にはカバー１９が設置され、サンプリング
オリフィス１７が噴出ガス及び試料溶液の液滴により冷
却されるのを防止している。ｘｙｚステ−ジ２０により
キャピラリー５の中心軸とサンプリングオリフィス１７
の中心軸の位置を微調整して一致させ、キャピラリー５
の先端部で生成したイオンが効率良く質量分析計に導入
される。本実施例のキャピラリー電気泳動／質量分析計
結合装置を用いて、溶液試料を効率良く高精度、高感度
で分析することができる。

【００４１】質量分析計として四重極型質量分析計を用
い、サンプリングオリフィス１７に最大数百Ｖの電圧が
印加される場合でも、キャピラリー５、キャピラリー保
持管６またはそれらの周囲部の全て、すなわちイオン源
全体の電位を接地状態にできる。キャピラリー電気泳動
装置で泳動電位は、この電位を接地電位を基準にして与
えられる。質量分析計として、イオンを磁場内において
質量分離するための加速電圧が４ｋＶ程度の磁場型質量
分析計を使用する場合、サンプリングオリフィス１７に
加速電圧と同程度の電圧が印加されるため、キャピラリ
ー５の先端とサンプリングオリフィス１７との間で、放
電が発生する可能性がある。しかし、カバー１９に、接
地電位と加速電位の中間的な電圧（例えば、１〜２ｋ
Ｖ）を印加し、キャピラリー５とサンプリングオリフィ
ス１７との間の距離を１ｃｍ程度にし、さらに噴出ガス
にＯ₂やＳＦ₆等の電子親和力の高いガスを用いて、その
結果放電を回避して、キャピラリー５の先端周辺部の電
位を接地させることができる。

【００４２】静電噴霧現象を用いずに全イオン量や多価
イオンの生成効率を増加させることができる。静電噴霧
現象により多価イオンの生成するには、２．５ｋＶ以上
の電圧をキャピラリ−の先端に印加する必要があるが、
本発明では、２．５ｋＶ以下の低い電圧を利用して、全
イオン量や多価イオンの生成効率を増大できる。

【００４３】本装置においてキャピラリー５とサンプリ
ングオリフィス１７との間に１ｋＶ程度の電圧を印加し
て、キャピラリー５の先端部からでてくる試料溶液の表
面に近い部分で、正と負のイオンの分離を起こさせ、試
料溶液の表面に近い部分で、正または負のイオンのいず
れかが多い状態とすることができる。従って、本発明の
ソニックスプレー化法において、ガスの噴出により生成
される帯電液滴の電荷密度は高くなり、静電噴霧現象を
用いずに全イオン量や多価イオンの生成効率を増大させ
ることができる。

【００４４】〔第３の実施例〕以上説明した第１、第２
の実施例において、液体クロマトグラフ、キャピラリー
電気泳動装置、その他の分析装置で分離された試料溶液
をシリンジ、またはシリンジポンプにより、図１に示す
試料溶液供給部１に供給して、試料溶液をイオン源２で
イオン化させて、質量分析できることは言うまでもな
い。

【００４５】〔第４の実施例〕本発明によるイオン源を
使用した測定例をもとにして、本イオン源の特徴に関し
て以下説明する。本実施例では、以下に記載する全ての
質量分析は、特に明記する以外は、以下に示す装置構
成、および測定条件で行なった。

【００４６】装置構成として、図２に示したイオン源を
用い、サンプリングオリフィスのキャピラリー側に、図
３に示したカバー１９を設置した。カバー１９は直径２
ｍｍの穴の開いた厚さ１ｍｍのステンレス製のものを用
い、サンプリングオリフィスは内径０．３ｍｍのものを
用た。キャピラリー５として石英製のキャピラリー（内
径０．１ｍｍ、外径０．２ｍｍ）を用いた。ガスガイド
管の先端部の開口部の内径は、４００μｍとした。キャ
ピラリー５の先端位置は、ガスガイド管の先端部の開口
部（４００μｍ）の大気圧側の面から０．６５ｍｍだけ
突出させた。質量分析計として、二重収束型質量分析計
（日立、Ｍ−８０）を使用した。開口部（４００μ
ｍ）、キャピラリー５、サンプリングオリフィスのそれ
ぞれの中心軸を、検出されるイオン強度が最大となるよ
うに同軸に調整してセットした。

【００４７】測定条件として、キャピラリー先端部、サ
ンプリングオリフィス、カバー１９のそれぞれの電位を
同電位に設定した。噴出ガスとしてＮ₂ガスを用い、噴
出ガスの流速を３３７ｍ／ｓ（Ｎ₂ガス中での０℃にお
ける音速に対応）とした。試料溶液（Ｇｒａｍｉｃｉｄ
ｉｎ（グラミジン）−Ｓ）の流量を４０μＬ（マイクロ
リットル）／分とした。ガスガイド管は室温に保持さ
れ、ヒーター９によりガスガイド管先端部７を加熱せず
にイオン強度の測定を行った。

【００４８】（１）本イオン源を使用して得られる質量
スペクトル（図４）。

【００４９】図４に、ペプチドの一種であるＧｒａｍｉ
ｃｉｄｉｎ−Ｓの溶液（濃度１μＭ、溶媒は５０％メタ
ノール水溶液）を試料溶液として得られた質量スペクト
ルを示す。ｍ／ｚ＝１４０のイオンは、試料溶液中また
は大気から混入した不純物に由来するものと考えられ
る。メタノール由来のＣＨ₃ＯＨ₂のプラスイオン（ｍ／
ｚ＝３３）はわずかに観測されるが、Ｈ₃Ｏのプラスイ
オンあるいはＨ₃Ｏのプラスイオンに水分子が付加して
形成されるクラスターは観測されず、単純なスペクトル
が得られ、スペクトルの解析が容易になる。エレクトロ
スプレー法、イオンスプレー法等の従来の方法では、希
薄な試料溶液を用いて質量スペクトルを測定する場合に
は、溶媒に由来するイオンが強く観測される。本発明で
は、溶媒に由来するＣＨ₃ＯＨ₂のプラスイオン強度は、
試料溶液濃度を１０倍変化させても殆ど変化せず、試料
溶液濃度に影響されずに測定対象の試料の質量スペクト
ルを測定することができる。

【００５０】（２）試料溶液の流量とイオン強度の関係
（図５）。

【００５１】図５に、試料溶液流量を変化させたとき
に、検出されたＧｒａｍｉｃｉｄｉｎ−Ｓの２価イオン
の強度を示す。４０μＬ（マイクロリットル）／分以下
の流量では、流量が増大するに従いイオン強度は直線的
に増加する。しかし、流量が増加するにつれて、微細な
帯電液滴（直径が１０ｎｍ程度）よりも直径が大きい液
滴が優先的に生成され、サンプリングオリフィスの温度
が低下するため、４０μＬ（マイクロリットル）／分以
上の流量では、流量が増大してもイオン強度の増加は少
なくなる。試料溶液流量が１０〜６０μＬ（マイクロリ
ットル）／分の範囲にあれば試料を効率良くイオン化す
ることができる。

【００５２】なお、試料溶液流量がゼロの場合において
も、ガスガイド管先端部から噴出するガスによって生じ
る大気圧よりも圧力が低い減圧空間が生じるため、スプ
レーイオン化法では、試料がイオン化されてゼロでない
イオン強度（図５では、図示せず）が得られる。

【００５３】（３）ガスガイド管先端でのガスが噴出す
る開口部の大きさと、キャピラリーの寸法と、イオン強
度との関係。

【００５４】ガス流速とキャピラリーの外径を一定にし
て、ガスガイド管先端部７の先端部のガス出口の断面積
が最も小さい部位での内径を０.４ｍｍから０.５ｍｍに
変更しても検出されるイオン強度は変化しなかった。一
方、ガス流量を一定にして、ガスガイド管先端部７先端
のガス出口である、開口部の内径が０.５ｍｍの場合に
は、開口部の内径が０.４ｍｍの場合より著しくイオン
強度は低く、実質的にイオンは検出されなかった。従っ
て、イオンの生成はガスの流量ではなくガスの流速に依
存する。

【００５５】ガスガイド管先端部７先端部の上記の開口
部の内径を０.５ｍｍに固定し、肉厚５０μｍの石英キ
ャピラリー（内径０.１ｍｍ、外径０.２ｍｍ）と肉厚が
約３倍大きい肉厚１３７．５μｍの石英キャピラリー
（内径０.１ｍｍ、外径０.３７５ｍｍ）とを比較した。
ガス流速を同一にしても検出されるイオン強度は肉厚５
０μｍの石英キャピラリーの方が約１桁高く、キャピラ
リーの肉厚が薄いほどイオン生成効率が高く好ましい。
このことはキャピラリーの肉厚が厚くなるとキャピラリ
ーから流れ出る試料溶液に対して、キャピラリー外周部
を流れるガスが効果的に作用しなくなるため、イオン化
の効率が悪くなるためである。

【００５６】キャピラリーとして石英キャピラリーを使
用したが、ステンレスのキャピラリーでもよく、キャピ
ラリーの肉厚が１０〜１５０μｍの範囲にあれば、強度
的に余裕があり、試料を効率良くイオン化することがで
きる。

【００５７】（４）噴出ガス速度、溶媒濃度とイオン強
度の関係（図６）。

【００５８】図６に、Ｇｒａｍｉｃｉｄｉｎ−Ｓを試料
とし、溶媒としてメタノール濃度が、２０％、５０％、
および８０％であるメタノール水溶液を用いて、試料の
三種類の溶液（試料濃度はともに１μＭ）を調整した。
次に、三種類の試料溶液を個別に４０μＬ（マイクロリ
ットル）／分の流量でキャピラリー５に導入した。Ｇｒ
ａｍｉｃｉｄｉｎ−Ｓは、二つのプロトンが付加した２
価のプラスイオン（ｍ／ｚ＝５７１）として検出され
た。

【００５９】図６の測定図は、（数１）によりガスの流
量から計算されるキャピラリー先端部でのガスの流速
（誤差約±３％）に対して、上記のＧｒａｍｉｃｉｄｉ
ｎ−Ｓの２価イオン（ｍ／ｚ＝５７１）のイオン強度を
プロットしたのもである。図６中、□は２０％、○は５
０％、および●は８０％のメタノール水溶液を溶媒とし
た試料溶液に対して観測されたそれぞれの相対イオン強
度を示す。キャピラリー５の先端での試料溶液の表面張
力が、帯電液滴の大きさや生成効率を支配する。

【００６０】水とメタノールの表面張力はそれぞれ０.
０７３、０.０２２５Ｎ／ｍと大きく異なり、溶媒とし
て用いた３種類の濃度のメタノール水溶液の表面張力も
異なる。

【００６１】図６から明らかなように、噴出ガスの流速
が約２２０ｍ／ｓ（０℃におけるマッハ数は約０．６
５）以上になるとイオンが検出され、ガス流速が増加す
るにつれイオン強度の増加する。イオン強度はガス流速
が３３７ｍ／ｓ（Ｎ₂ガス中での０℃における音速に対
応）付近で最大に達して、流速が超音速領域ではガス流
速の増加とともにイオン強度がいくぶん低下する傾向が
ある。しかし、５０％のメタノール水溶液では、ガス流
速がＮ₂ガス中での音速（３３７ｍ／ｓ）を越えても、
約４００ｍ／ｓ（０℃におけるマッハ数は約１．２）ま
でほぼ一定のイオン強度が検出されている。同様に、２
０％のメタノール水溶液では、ガス流速がＮ₂ガス中で
の音速を越えても、約３７０ｍ／ｓ（０℃におけるマッ
ハ数は約１．１）まではほぼ一定のイオン強度が検出さ
れている。

【００６２】図６において、点線で示した外挿線から明
らかなように、イオンが検出されるガス流速の下限は約
２２０ｍ／ｓ（０℃におけるマッハ数は約０．６５）で
ある。

【００６３】噴出ガスの流速が超音速の場合には、キャ
ピラリー先端付近で衝撃波が発生し、キャピラリー先端
近傍での圧力が変動する。このため、大きい液滴が生成
され易くなり、イオンの生成に必要な細かな帯電液滴は
生成されにくくなり、観測されるイオン強度が低下す
る。さらに、超音速領域では噴出ガスは断熱膨張により
著しく冷却されるため、冷却防止のためガスガイド管が
加熱が十分でないときには、帯電液滴の気化が抑制され
ることになる。

【００６４】図６に示した測定結果を得たさいの測定、
装置条件は、キャピラリー先端とサンプリングオリフィ
スの電位を同電位に設定し、ガスガイド管、キャピラリ
ーの温度は、加熱せず、室温である。また、噴出ガスの
流速が約３３０ｍ／ｓ（０℃におけるマッハ数は約１．
０）の場合に検出されるイオン強度は、キャピラリー先
端とサンプリングオリフィス間に３ｋＶの高電圧を印加
しても変化しない。従って、図６に示されるイオン強度
は、キャピラリーの加熱、キャピラリーに印加され電圧
により生成したイオンに基づくものではなく、観測され
たイオンの生成は、噴出ガスのみの作用効果によるもの
であって、本発明のスプレーイオン化法では、キャピラ
リー先端に印加された電圧、加熱の作用効果は必要とし
ていない。さらに、図６の結果のように、キャピラリー
を加熱しない場合でも、以下に説明するように、従来法
に比較して十分なイオン強度が得られている。即ち、従
来のイオン化法では、直径が１０ｎｍ以下の帯電液滴の
生成は、強電場や加熱を利用する以外に手段がないと考
えられていたが、本発明のソニックスプレー法では、ガ
スを用いた試料溶液の噴霧だけで、直径が１０ｎｍ以下
の帯電液滴の生成を実現している。

【００６５】一方、ガス流速を、ガスの噴出により生成
されるイオンの量が無視される５ｍ／ｓに設定し、キャ
ピラリーとサンプリングオリフィスとの間に３ｋＶ程度
の高電圧を印加し、静電噴霧現象によりイオンを生成す
るイオンスプレー法の場合に検出されるイオン強度は、
図６に示す５０％のメタノール水溶液において検出され
るイオン強度の１／１０以下の低い値であり、図６に示
す８０％のメタノール水溶液において検出されるイオン
強度にほぼ等しい。

【００６６】噴出ガスの流速を２５０〜４１０ｍ／ｓ
（０℃におけるマッハ数は０．７５〜１．２）の範囲に
設定して、従来のイオンスプレー法によるイオン強度の
約３倍以上のイオン強度が得ることができる。噴出ガス
の流速を２７５〜４００ｍ／ｓ（０℃におけるマッハ数
は０．８〜１．２）の範囲に設定することが好ましく、
従来のイオンスプレー法によるイオン強度の約６倍以上
のイオン強度が得られる。さらに、噴出ガスの流速を３
２０〜４００ｍ／ｓ（０℃におけるマッハ数は０．９５
〜１．２）の範囲に設定すれば、従来のイオンスプレー
法の１０倍以上のイオン強度を得ることができ、最も好
ましい結果を得ることができる。

【００６７】図６に示すように、溶媒に２０％または５
０％のメタノール水溶液を用いた場合に得られるイオン
強度は、８０％のメタノール水溶液を用いた場合に得ら
れるイオン強度の約１０以上である。従って、本発明
は、水を高濃度に含む試料溶液を分析するに適した液体
クロマトグラフにより分離された試料溶液の高感度分析
に非常に有効となる。

【００６８】（５）キャピラリー先端位置に対するサン
プリングオリフイス位置ずれと、イオン強度の関係（図
７）。

【００６９】キャピラリー５とサンプリングオリフィス
１７との間の距離を５ｍｍに保持して、第４の実施例に
おいて説明したように、イオン源の、ガスガイド管の開
口部、キャピラリー５、サンプリングオリフィス１７の
それぞれの中心軸を、検出されるイオン強度が最大とな
るように同軸に調整してセットして（この位置を以下の
移動変化の基準の位置（＝０）とする）、試料溶液から
のイオン強度を測定する。次いで、イオン源全体の位置
を水平方向に移動変化させて、それぞれの移動位置にお
いて、Ｇｒａｍｉｃｉｄｉｎ−Ｓの２価イオンのイオン
強度（試料溶液は、溶媒が５０％メタノール水溶液のＧ
ｒａｍｉｃｉｄｉｎ−Ｓ溶液（濃度１０μＭ）である）
を検出した結果を図７に示す。図７の中央部の相対イオ
ン強度約２．８の鋭いピークは、ガス流速を音速３３７
ｍ／ｓ（Ｎ₂ガス中での０℃における音速に対応）か
ら、さらに大きくした超音速の４００ｍ／ｓの場合には
消失してしまい、かわりに相対イオン強度が約１．６で
ある、幅の広い鈍ったピークとなってしまう。イオン源
の移動距離が、−１ｍｍおよび０.５ｍｍ付近に小さい
ピークが出現するが、これらのピークは、サンプリング
オリフィス１７の前のカバー１９の穴（直径２ｍｍ）に
よる、噴霧ガス流の乱れにより生じたものと考えられ
る。図７に示す結果は、イオン源全体の位置を垂直方向
に移動変化させても同様である。

【００７０】上記の移動距離、１ｍｍの位置は、キャピ
ラリー５の先端部の中心を頂点とし、キャピラリーの中
心軸を軸とする、頂角、約２２．５度を有する直円錐の
底面の円周上にある。即ち、サンプリングオリフィス１
７の中心位置（１ｍｍ）は、この円周上にある。同様に
して、移動距離、０．２ｍｍの位置は、キャピラリー５
の先端部の中心を頂点とし、キャピラリーの中心軸を軸
とする、頂角、約４．５度を有する直円錐の底面の円周
上にある。即ち、サンプリングオリフィス１７の中心位
置（０．２ｍｍ）は、この円周上にある。好ましくは上
記の頂角４．５度を有する、直円錐の底面の円周内部に
サンプリングオリフィスの中心位置を配置することによ
り、従来のイオンスプレー法により得られるイオン強度
の約２．５倍以上のイオン強度が得られる。さらに好ま
しくは上記の頂角２２．５度を有する、直円錐の底面の
円周内部にサンプリングオリフィスの中心位置を配置す
ることにより、従来のイオンスプレー法により得られる
イオン強度の約６倍以上のイオン強度が得られる。

【００７１】さらに、ガス流速を音速３３７ｍ／ｓ（Ｎ
₂ガス中での０℃における音速に対応）から、さらに大
きくした超音速の場合でも、従来のイオンスプレー法に
より得られるイオン強度の約６倍以上のイオン強度が得
られる。

【００７２】（６）ガスガイド管の先端からキャピラリ
ーの先端が露出する長さとイオン強度の関係（図８）。

【００７３】図８に、ガスガイド管先端部７の先端の最
小内径を有する開口部の大気圧面から、キャピラリー５
の最先端が露出する露出長（図２及び図３に示すＬ）を
変化させたときに検出されるイオン強度を示す。露出長
Ｌが１．２ｍｍ以上では、イオン強度は低下している。
露出長Ｌが大きくなると、キャピラリーの先端における
ガス流速が実質的に低下して、検出されるイオン強度は
低下する。従って、上記の露出長Ｌは、−０．２５〜
１．０ｍｍに設定することが好ましい。

【００７４】（７）試料溶液濃度とイオン強度の関係
（図９）。

【００７５】図９に、Ｇｒａｍｉｃｉｄｉｎ−Ｓの濃度
を変化させたときに検出されるイオン強度を示す。約１
μＭ以下の低濃度領域では、イオン強度は試料濃度に対
して直線的に変化して増大する。本発明のイオン化法で
は、特に約１μＭ以下の試料溶液の濃度に対して好適で
ある。約２μＭ以上の試料濃度では、検出されるイオン
強度は、約１μＭ以下の低濃度領域における直線変化と
は異なる直線変化を示している。約２μＭ以上の高濃度
領域では試料濃度を変化させてもイオン強度の増加はあ
まり変化しない理由は、溶液のｐＨは５程度であり、高
濃度領域では試料溶液中のほとんどのプロトンが、Ｇｒ
ａｍｉｃｉｄｉｎ−Ｓに結合しており、試料溶液中のプ
ロトンの枯渇によると考えられる。

【００７６】〔第５の実施例〕次に、ガスガイド管の簡
単な製作方法を図１０に基づいて説明する。図３に示す
ガスガイド管先端部保持部の変形例を図１０に断面図に
より示す。

【００７７】図１０では、図３に示す７、１５、１６の
各部の詳細は図３と同じであり省略した。図１０の断面
図から明らかなように、円柱材料を使用して単なる孔開
け加工のみによる簡単な製作方法でガスガイド管先端部
保持部を得ることができる。

【００７８】なお、ガスガイド管を構成する各部の材質
は、以上の各実施例において説明した材質以外であって
もよく、各種の金属材料、ガラス材料、セラミックス材
料、さらには、フイラー充填の高分子樹脂材料を使用し
て作成してもよい。

【００７９】本発明の明細書の記載において、ガスの流
速に関して付して記載した（）内のマッハ数は、ガス
ガイド管の先端近傍での温度が０℃±約１０℃と想定さ
れたので、Ｎ₂ガス中での０℃における音速３３７ｍ／
ｓ（「理科年表」、国立天文台編（１９９３）、丸善株
式会社（東京））に基づいて求めた。

【００８０】

【発明の効果】本発明によれば、イオン源を構成するキ
ャピラリー等の各部の電位を接地させたまま、噴出ガス
により試料溶液から、効率よくイオンを生成できる。こ
の結果、従来のイオン化法に比較して、イオン源の構造
が単純化され、操作性、安全性が高くなる。また、本発
明のイオン源をキャピラリー電気泳動装置に適用し、キ
ャピラリー電気泳動／質量分析計を構成するさい、上記
のようにキャピラリーの先端を接地電位にできるため、
キャピラリー電気泳動装置では独自に電位を印加でき、
装置全体の構成が単純になり、装置の操作が単純とな
り、操作の安全性も格段に向上する。

【００８１】さらに、従来のイオン化法では、イオンの
生成はキャピラリーやサンプリングオリフィスの周囲の
汚れの影響を大きく受けるが、本発明の、噴出ガスによ
リ試料溶液からイオンを生成する、本発明のソニックス
プレー法では、従来方法とは異なり、キャピラリーやサ
ンプリングオリフィスの周囲の汚れの影響を受けない。

【００８２】また、従来のイオン化法では、検出される
イオン強度はサンプリングオリフィスの周囲やキャピラ
リーでの汚れの影響を大きく受けるが、本発明の、ソニ
ックスプレー法では、従来方法とは異なり、検出される
イオン強度はキャピラリー周囲の汚れの影響を受けるこ
となく、サンプリングオリフィスの周囲の汚れにあまり
影響されず、試料の高感度検出が可能であり、再現性が
よい。即ち、キャピラリー先端やガスガイド管を最適な
位置に設定することにより、再現性よく試料溶液からイ
オンを高効率で生成し、検出できる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の装置の構成を示すブロック図。

【図２】本発明のイオン源の第１の実施例を示す断面
図。

【図３】本発明のイオン源の第２の実施例、およびサン
プリングオリフィスを示す断面図。

【図４】本発明のイオン源を使用して得られた質量スペ
クトル例を示す図。

【図５】試料溶液流量と検出されるイオン強度の関係を
示す図。

【図６】噴出ガス速度、および溶媒濃度とイオン強度の
関係を示す図。

【図７】キャピラリー先端位置とサンプリングオリフイ
位置との位置ずれと、イオン強度の関係を示す図。

【図８】キャピラリー先端位置の露出長とイオン強度の
関係を示す図。

【図９】試料溶液濃度とイオン強度の関係を示す図。

【図１０】ガスガイド管の簡単な製作方法を説明するた
めの断面図。

【符号の説明】

１…試料溶液供給部、２…イオン源、３…ガス供給部、
４…流量調節計、５…キャピラリー、６…管、７…ガス
ガイド管先端部、８…ガス導入管、９…ヒーター、１０
…ガスガイド管先端部保持部、１１…質量分析計、１２
…電気泳動用キャピラリー、１３…配管、１４…混合ジ
ョイント、１５…位置調節用治具、１６…ネジ、１７…
サンプリングオリフィス、１８…セラミックヒーター、
１９…カバー、２０…ｘｙｚステージ。

フロントページの続き (72)発明者高田安章東京都国分寺市東恋ケ窪１丁目280番地株式会社日立製作所中央研究所内 (72)発明者小泉英明東京都国分寺市東恋ケ窪１丁目280番地株式会社日立製作所中央研究所内 (72)発明者梅村馨東京都国分寺市東恋ケ窪１丁目280番地株式会社日立製作所中央研究所内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】試料溶液をキャピラリーに供給する工程
と、ガスを前記キャピラリーの先端位置近傍にガスガイ
ド管により導く工程と、前記先端近傍で前記ガスの流速
を２７５ｍ／ｓ〜４００ｍ／ｓの範囲で前記ガスが噴出
する工程と、前記噴出する工程により試料溶液を霧化し
てイオン化する工程と、を有することを特徴とする試料
溶液のイオン化方法。
【請求項２】前記ガスガイド管に加熱する工程を付加し
たことを特徴とする請求項１記載の試料溶液のイオン化
方法。
【請求項３】前記ガスガイド管と前記キャピラリーの電
位を接地する工程を付加したことを特徴とする請求項１
又は２のいずれかに記載の試料溶液のイオン化方法。