JP2001017195A - 微生物触媒を用いた物質生産方法 - Google Patents
微生物触媒を用いた物質生産方法Info
- Publication number
- JP2001017195A JP2001017195A JP18906499A JP18906499A JP2001017195A JP 2001017195 A JP2001017195 A JP 2001017195A JP 18906499 A JP18906499 A JP 18906499A JP 18906499 A JP18906499 A JP 18906499A JP 2001017195 A JP2001017195 A JP 2001017195A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- reaction
- microbial catalyst
- substance
- microbial
- substituent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 微生物触媒を用いた反応において、反応生成
物の生産速度を長期間一定にできる、工業的に有利な物
質生産方法を提供すること。 【解決手段】 α−ヒドロキシニトリル類を相当するα
−ヒドロキシ酸アミド類やα−ヒドロキシ酸アンモニウ
ム塩に変換しうるアースロバクター属等の休止菌体など
の微生物触媒を用いた反応において、一定速度で基質を
添加し、微生物の触媒の反応液中濃度を一定とし、反応
中に微生物触媒の酵素活性が低下した時点で反応温度を
上昇させ反応速度を一定に保持するという昇温コントロ
ールを実施することにより、一定速度で物質生産を行
う。
物の生産速度を長期間一定にできる、工業的に有利な物
質生産方法を提供すること。 【解決手段】 α−ヒドロキシニトリル類を相当するα
−ヒドロキシ酸アミド類やα−ヒドロキシ酸アンモニウ
ム塩に変換しうるアースロバクター属等の休止菌体など
の微生物触媒を用いた反応において、一定速度で基質を
添加し、微生物の触媒の反応液中濃度を一定とし、反応
中に微生物触媒の酵素活性が低下した時点で反応温度を
上昇させ反応速度を一定に保持するという昇温コントロ
ールを実施することにより、一定速度で物質生産を行
う。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、微生物触媒を用い
たα−ヒドロキシ酸アンモニウム塩等の有用な化学物質
を一定速度で生産する方法に関する。
たα−ヒドロキシ酸アンモニウム塩等の有用な化学物質
を一定速度で生産する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、微生物触媒を用いた物質生産にお
いて、生産速度を一定に維持する方法として、新鮮な微
生物触媒を追加する方法が知られている（Enzyme Catal
ysis in Organic Synthesis, VCH, 1995, p148）。
いて、生産速度を一定に維持する方法として、新鮮な微
生物触媒を追加する方法が知られている（Enzyme Catal
ysis in Organic Synthesis, VCH, 1995, p148）。
【０００３】他方、α−ヒドロキシニトリル類から微生
物によってα−ヒドロキシ酸アンモニウム塩又はα−ヒ
ドロキシ酸を製造する方法も知られている（特公昭５８
−１５１２０号公報、特開昭６３−２２２６９６号公
報、特開昭６４−１０９９６号公報、特開平４−４０８
９７号公報、特開平４−４０８９８号公報、特表平１０
−５０７６３１号公報等）。
物によってα−ヒドロキシ酸アンモニウム塩又はα−ヒ
ドロキシ酸を製造する方法も知られている（特公昭５８
−１５１２０号公報、特開昭６３−２２２６９６号公
報、特開昭６４−１０９９６号公報、特開平４−４０８
９７号公報、特開平４−４０８９８号公報、特表平１０
−５０７６３１号公報等）。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】工業的に物質生産を行
う上で、反応槽あたりの生産量を一定に維持すること
は、製品の安定出荷、反応コントロールの簡便さという
点で、きわめて有利である。一方、微生物触媒を用いた
連続反応においては、反応槽と分離機を組み合わせた反
応装置が用いられ、微生物触媒を連続的に回収して再使
用すると同時に、生成物を分離ろ液として連続排出する
方式が採用されている。微生物触媒は連続使用すると一
般にその活性が徐々に低下するため、生産速度を一定に
維持するためには、従来、新鮮な微生物触媒を追加する
方法が採用されていた。しかし、微生物触媒の製造コス
トは一般に高価であり、新たな微生物触媒の追加使用は
好ましくない。また、微生物触媒の追加により反応槽の
微生物触媒濃度が上昇すると、分離機の負担が増加し、
反応をコントロールする上で問題がある。
う上で、反応槽あたりの生産量を一定に維持すること
は、製品の安定出荷、反応コントロールの簡便さという
点で、きわめて有利である。一方、微生物触媒を用いた
連続反応においては、反応槽と分離機を組み合わせた反
応装置が用いられ、微生物触媒を連続的に回収して再使
用すると同時に、生成物を分離ろ液として連続排出する
方式が採用されている。微生物触媒は連続使用すると一
般にその活性が徐々に低下するため、生産速度を一定に
維持するためには、従来、新鮮な微生物触媒を追加する
方法が採用されていた。しかし、微生物触媒の製造コス
トは一般に高価であり、新たな微生物触媒の追加使用は
好ましくない。また、微生物触媒の追加により反応槽の
微生物触媒濃度が上昇すると、分離機の負担が増加し、
反応をコントロールする上で問題がある。
【０００５】本発明の課題は、微生物触媒を用いた反応
において、反応生成物の生産速度を長期間一定にでき
る、工業的に有利な物質生産方法を提供することにあ
る。
において、反応生成物の生産速度を長期間一定にでき
る、工業的に有利な物質生産方法を提供することにあ
る。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するため鋭意研究し、微生物触媒の温度に対する
活性変化を詳しく解析した結果、微生物触媒を初期添加
量のみの所定濃度としたまま、基質を一定速度で連続的
に添加し、生成物を一定速度で生産する昇温コントロー
ル法を見い出し、本発明を完成するに至った。
を解決するため鋭意研究し、微生物触媒の温度に対する
活性変化を詳しく解析した結果、微生物触媒を初期添加
量のみの所定濃度としたまま、基質を一定速度で連続的
に添加し、生成物を一定速度で生産する昇温コントロー
ル法を見い出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】すなわち本発明は、微生物触媒を用いた反
応において、反応温度を昇温コントロールすることによ
り、一定速度で物質生産を行うことを特徴とする微生物
触媒を用いた物質生産方法や、微生物触媒を用いた反応
において、微生物触媒の基質を一定速度で添加し、反応
温度を昇温コントロールすることにより、一定速度で物
質生産を行うことを特徴とする微生物触媒を用いた物質
生産方法に関する。
応において、反応温度を昇温コントロールすることによ
り、一定速度で物質生産を行うことを特徴とする微生物
触媒を用いた物質生産方法や、微生物触媒を用いた反応
において、微生物触媒の基質を一定速度で添加し、反応
温度を昇温コントロールすることにより、一定速度で物
質生産を行うことを特徴とする微生物触媒を用いた物質
生産方法に関する。
【０００８】また本発明は、微生物触媒の反応液中の濃
度が一定であることを特徴とする上記微生物触媒を用い
た物質生産方法や、微生物触媒の反応液中の濃度を一定
とするために、反応槽から排出した反応液中の微生物触
媒を分離回収し、再度反応槽に戻すことを特徴とする上
記微生物触媒を用いた物質生産方法や、昇温が５〜２５
℃から選択される温度範囲であることを特徴とする上記
微生物触媒を用いた物質生産方法や、微生物触媒がニト
リラーゼ発現微生物触媒であることを特徴とする上記微
生物触媒を用いた物質生産方法や、ニトリラーゼ発現微
生物がアースロバクター（Arthrobacter）属に属する微
生物であることを特徴とする上記微生物触媒を用いた物
質生産方法に関する。
度が一定であることを特徴とする上記微生物触媒を用い
た物質生産方法や、微生物触媒の反応液中の濃度を一定
とするために、反応槽から排出した反応液中の微生物触
媒を分離回収し、再度反応槽に戻すことを特徴とする上
記微生物触媒を用いた物質生産方法や、昇温が５〜２５
℃から選択される温度範囲であることを特徴とする上記
微生物触媒を用いた物質生産方法や、微生物触媒がニト
リラーゼ発現微生物触媒であることを特徴とする上記微
生物触媒を用いた物質生産方法や、ニトリラーゼ発現微
生物がアースロバクター（Arthrobacter）属に属する微
生物であることを特徴とする上記微生物触媒を用いた物
質生産方法に関する。
【０００９】さらに本発明は、微生物触媒を用いた反応
が、一般式 ＲＣＮ（式中、Ｒは、水素原子、置換基を
有してもよいＣ1〜Ｃ6のアルキル基、置換基を有しても
よいＣ2〜Ｃ6のアルケニル基、置換基を有してもよいＣ
1〜Ｃ6のアルコキシ基、置換基を有してもよいアリール
基、置換基を有してもよいアリールオキシ基又は置換基
を有してもよい複素環基を示す。）で表されるニトリル
化合物を、微生物の触媒作用により水性溶媒中で加水分
解して、一般式 ＲＣＯＮＨ2（式中、Ｒは前記と同一
の意味を示す。）で表されるアミド化合物、又は一般式
ＲＣＯＯ-ＮＨ4 +（式中、Ｒは前記と同一の意味を示
す。）で表されるカルボン酸アンモニウム塩化合物に変
換する反応であることを特徴とする上記の微生物触媒を
用いた物質生産方法や、微生物触媒を用いた反応が、一
般式 Ｒ′ＣＨ（ＯＨ）ＣＮ（式中、Ｒ′は、水素原
子、置換基を有してもよいＣ1〜Ｃ6のアルキル基、置換
基を有してもよいＣ2〜Ｃ6のアルケニル基、置換基を有
してもよいＣ1〜Ｃ6のアルコキシ基、置換基を有しても
よいアリール基、置換基を有してもよいアリールオキシ
基又は置換基を有してもよい複素環基を示す。）で表さ
れるα−ヒドロキシニトリル化合物を微生物の触媒作用
により水性溶媒中で加水分解して、一般式 Ｒ′ＣＨ
（ＯＨ）ＣＯＮＨ2（式中、Ｒ′は前記と同一の意味を
示す。）で表されるα−ヒドロキシ酸アミド化合物、又
は一般式 Ｒ′ＣＨ（ＯＨ）ＣＯＯ-ＮＨ4 +（式中、
Ｒ′は前記と同一の意味を示す。）で表されるα−ヒド
ロキシ酸アンモニウム塩化合物に変換する反応であるこ
とを特徴とする上記の微生物触媒を用いた物質生産方法
に関する。
が、一般式 ＲＣＮ（式中、Ｒは、水素原子、置換基を
有してもよいＣ1〜Ｃ6のアルキル基、置換基を有しても
よいＣ2〜Ｃ6のアルケニル基、置換基を有してもよいＣ
1〜Ｃ6のアルコキシ基、置換基を有してもよいアリール
基、置換基を有してもよいアリールオキシ基又は置換基
を有してもよい複素環基を示す。）で表されるニトリル
化合物を、微生物の触媒作用により水性溶媒中で加水分
解して、一般式 ＲＣＯＮＨ2（式中、Ｒは前記と同一
の意味を示す。）で表されるアミド化合物、又は一般式
ＲＣＯＯ-ＮＨ4 +（式中、Ｒは前記と同一の意味を示
す。）で表されるカルボン酸アンモニウム塩化合物に変
換する反応であることを特徴とする上記の微生物触媒を
用いた物質生産方法や、微生物触媒を用いた反応が、一
般式 Ｒ′ＣＨ（ＯＨ）ＣＮ（式中、Ｒ′は、水素原
子、置換基を有してもよいＣ1〜Ｃ6のアルキル基、置換
基を有してもよいＣ2〜Ｃ6のアルケニル基、置換基を有
してもよいＣ1〜Ｃ6のアルコキシ基、置換基を有しても
よいアリール基、置換基を有してもよいアリールオキシ
基又は置換基を有してもよい複素環基を示す。）で表さ
れるα−ヒドロキシニトリル化合物を微生物の触媒作用
により水性溶媒中で加水分解して、一般式 Ｒ′ＣＨ
（ＯＨ）ＣＯＮＨ2（式中、Ｒ′は前記と同一の意味を
示す。）で表されるα−ヒドロキシ酸アミド化合物、又
は一般式 Ｒ′ＣＨ（ＯＨ）ＣＯＯ-ＮＨ4 +（式中、
Ｒ′は前記と同一の意味を示す。）で表されるα−ヒド
ロキシ酸アンモニウム塩化合物に変換する反応であるこ
とを特徴とする上記の微生物触媒を用いた物質生産方法
に関する。
【００１０】
【発明の実施の形態】本発明の微生物触媒を用いた物質
生産方法は、微生物触媒を用いた反応において、反応温
度を昇温コントロールすることにより、好ましくは、微
生物触媒の基質を一定速度で添加し、微生物触媒の反応
液中の濃度を一定とし、反応温度を昇温コントロールす
ることにより、一定速度で物質生産を行うことを特徴と
する。
生産方法は、微生物触媒を用いた反応において、反応温
度を昇温コントロールすることにより、好ましくは、微
生物触媒の基質を一定速度で添加し、微生物触媒の反応
液中の濃度を一定とし、反応温度を昇温コントロールす
ることにより、一定速度で物質生産を行うことを特徴と
する。
【００１１】本発明において微生物触媒とは、ニトリラ
ーゼ活性をはじめとする加水分解酵素活性、酸化還元酵
素活性、転移酵素活性、異性化酵素活性、分裂酵素活
性、結合酵素活性等の酵素活性を有する微生物由来のも
のであればどのようなものでもよく、微生物菌体や、固
定化微生物、粗酵素、固定化酵素等の微生物処理物を例
示することができる。また、微生物触媒が微生物菌体や
固定化微生物などの場合、生菌体であっても死菌体であ
っても特に限定されるものではない。
ーゼ活性をはじめとする加水分解酵素活性、酸化還元酵
素活性、転移酵素活性、異性化酵素活性、分裂酵素活
性、結合酵素活性等の酵素活性を有する微生物由来のも
のであればどのようなものでもよく、微生物菌体や、固
定化微生物、粗酵素、固定化酵素等の微生物処理物を例
示することができる。また、微生物触媒が微生物菌体や
固定化微生物などの場合、生菌体であっても死菌体であ
っても特に限定されるものではない。
【００１２】かかる微生物触媒としては、微生物触媒の
酵素活性低下率と反応速度の温度依存率との関係におい
て、昇温による反応速度の上昇率が活性低下率を上回る
微生物触媒が好ましく、その具体例としては、α−ヒド
ロキシニトリル類を相当するα−ヒドロキシ酸アンモニ
ウム塩に変換しうるアースロバクター(Arthrobacter)s
p. NSSC104（FERM P-15424）の休止菌体を挙げることが
できる。
酵素活性低下率と反応速度の温度依存率との関係におい
て、昇温による反応速度の上昇率が活性低下率を上回る
微生物触媒が好ましく、その具体例としては、α−ヒド
ロキシニトリル類を相当するα−ヒドロキシ酸アンモニ
ウム塩に変換しうるアースロバクター(Arthrobacter)s
p. NSSC104（FERM P-15424）の休止菌体を挙げることが
できる。
【００１３】また、微生物触媒における微生物として
は、上記アースロバクターsp. NSSC104以外のアースロ
バクター属に属する微生物や、カゼオバクター（Caseob
acter）属、シュードモナス(Pseudomonas)属、アルカリ
ゲネス(Alcaligenes)属、コリネバクテリウム(Coryneba
cterium)属、ブレビバクテリウム(Brevibacterium)属、
ノカルジア(Nocardia)属、ロドコッカス(Rhodococcus)
属、ゴルドナ(Gordona)属、バチルス(Bacillius)属、バ
クテリジウム(Bacteridium)属、ミクロコッカス(Microc
occus)属、アシネトバクター(Acinetobacter)属に属す
る微生物を例示することができる。
は、上記アースロバクターsp. NSSC104以外のアースロ
バクター属に属する微生物や、カゼオバクター（Caseob
acter）属、シュードモナス(Pseudomonas)属、アルカリ
ゲネス(Alcaligenes)属、コリネバクテリウム(Coryneba
cterium)属、ブレビバクテリウム(Brevibacterium)属、
ノカルジア(Nocardia)属、ロドコッカス(Rhodococcus)
属、ゴルドナ(Gordona)属、バチルス(Bacillius)属、バ
クテリジウム(Bacteridium)属、ミクロコッカス(Microc
occus)属、アシネトバクター(Acinetobacter)属に属す
る微生物を例示することができる。
【００１４】本発明における微生物触媒を用いた反応
は、水性溶媒下で休止菌体反応として実施することが好
ましい。また、休止菌体反応の場合、微生物触媒の反応
液中濃度は、生産物の種類、微生物触媒の特性により、
任意に選択することができ、通常乾燥菌体として、０．
１〜１０．０重量％の範囲から選択されるが、微生物触
媒の反応液中の濃度が一定であることが、物質生産コス
トや生産操作上好ましい。例えば、反応槽から排出した
反応液中の微生物触媒を分離回収し、この回収された微
生物触媒を再度反応槽に戻すことにより、微生物触媒の
反応液中の濃度を一定とすることができる。微生物触媒
の製造コストは一般に高価であり、また、微生物触媒の
追加により反応槽の微生物触媒濃度が上昇すると、分離
機の負担が増加し、微生物触媒反応のコントロールが複
雑となる。
は、水性溶媒下で休止菌体反応として実施することが好
ましい。また、休止菌体反応の場合、微生物触媒の反応
液中濃度は、生産物の種類、微生物触媒の特性により、
任意に選択することができ、通常乾燥菌体として、０．
１〜１０．０重量％の範囲から選択されるが、微生物触
媒の反応液中の濃度が一定であることが、物質生産コス
トや生産操作上好ましい。例えば、反応槽から排出した
反応液中の微生物触媒を分離回収し、この回収された微
生物触媒を再度反応槽に戻すことにより、微生物触媒の
反応液中の濃度を一定とすることができる。微生物触媒
の製造コストは一般に高価であり、また、微生物触媒の
追加により反応槽の微生物触媒濃度が上昇すると、分離
機の負担が増加し、微生物触媒反応のコントロールが複
雑となる。
【００１５】微生物触媒反応のｐＨは、微生物触媒の種
類により異なるが、通常ｐＨ５〜１０の範囲から選択さ
れ、反応液に酸やアルカリを添加することにより、反応
液のｐＨは所定の一定値に保たれるが、微生物触媒によ
っては反応中のｐＨを必ずしも一定に保たなくてもよい
場合がある。
類により異なるが、通常ｐＨ５〜１０の範囲から選択さ
れ、反応液に酸やアルカリを添加することにより、反応
液のｐＨは所定の一定値に保たれるが、微生物触媒によ
っては反応中のｐＨを必ずしも一定に保たなくてもよい
場合がある。
【００１６】本発明において反応温度の昇温コントロー
ルとは、反応温度を昇温することで、微生物触媒の酵素
活性を一定にコントロールすることをいい、反応温度を
昇温コントロールすることにより、一定速度で物質生産
を行うことが可能となる。また、昇温コントロール条件
は、酵素活性低下率と反応速度の温度依存率を解析する
ことにより決定することができるが、反応液中の基質濃
度や生成物濃度を測定することにより具体的に求めるこ
とができる。そして、反応温度の昇温の程度は、微生物
触媒の種類や特性及び生産速度維持期間により適宜選択
することができるが、通常５〜２５℃であり、その中で
も１０〜２０℃が好ましい。また、微生物触媒反応は、
０〜５０℃、好ましくは２０〜４０℃から選択される温
度範囲内の所定の範囲で行われる。
ルとは、反応温度を昇温することで、微生物触媒の酵素
活性を一定にコントロールすることをいい、反応温度を
昇温コントロールすることにより、一定速度で物質生産
を行うことが可能となる。また、昇温コントロール条件
は、酵素活性低下率と反応速度の温度依存率を解析する
ことにより決定することができるが、反応液中の基質濃
度や生成物濃度を測定することにより具体的に求めるこ
とができる。そして、反応温度の昇温の程度は、微生物
触媒の種類や特性及び生産速度維持期間により適宜選択
することができるが、通常５〜２５℃であり、その中で
も１０〜２０℃が好ましい。また、微生物触媒反応は、
０〜５０℃、好ましくは２０〜４０℃から選択される温
度範囲内の所定の範囲で行われる。
【００１７】本発明において、一定速度で物質生産を行
うとは、反応速度を実質的に一定とし、反応液単位体積
当たりの生成物の生産速度を実質的に一定に保持して物
質生産を行うことをいい、一定速度で物質生産を行うこ
とにより、工業的に物質生産を行う上で、反応槽あたり
の生産量を一定に維持することが可能となり、製品の安
定出荷、反応コントロールの簡便さという点できわめて
有利である。そして、酵素反応における反応速度は原料
（基質）濃度が高い程最大反応速度に近くなるが、原料
（基質）が高い程反応液中の残存率も高くなることか
ら、生成物の収率等の生産性の点から原料（基質）濃度
を決定することが好ましい。
うとは、反応速度を実質的に一定とし、反応液単位体積
当たりの生成物の生産速度を実質的に一定に保持して物
質生産を行うことをいい、一定速度で物質生産を行うこ
とにより、工業的に物質生産を行う上で、反応槽あたり
の生産量を一定に維持することが可能となり、製品の安
定出荷、反応コントロールの簡便さという点できわめて
有利である。そして、酵素反応における反応速度は原料
（基質）濃度が高い程最大反応速度に近くなるが、原料
（基質）が高い程反応液中の残存率も高くなることか
ら、生成物の収率等の生産性の点から原料（基質）濃度
を決定することが好ましい。
【００１８】次に、攪拌型反応槽と分離機を組み合わせ
た反応装置を用いる場合を例にとって、本発明の微生物
触媒を用いた物質生産方法について説明する。反応槽中
の水性溶媒に微生物触媒を所定濃度となるように投入
し、次いで一定速度で原料基質の添加を開始する。原料
基質の添加と同時に反応が始まり、生成物が所望の濃度
まで反応液中に蓄積したところで、分離機の運転を開始
し、微生物触媒と生成物の分離処理が行われる。分離処
理により、回収された微生物触媒は、連続的に反応槽へ
全量戻され、一方反応液中の生成物は、一定速度で連続
的に系外に排出されていく。この分離処理の開始時に
は、一定速度での基質の添加を継続すると同時に、生成
物蓄積濃度を一定に維持するための濃度調整用に、水又
は有機溶媒含有水溶液からなる水性溶媒を一定速度で添
加することが好ましい。
た反応装置を用いる場合を例にとって、本発明の微生物
触媒を用いた物質生産方法について説明する。反応槽中
の水性溶媒に微生物触媒を所定濃度となるように投入
し、次いで一定速度で原料基質の添加を開始する。原料
基質の添加と同時に反応が始まり、生成物が所望の濃度
まで反応液中に蓄積したところで、分離機の運転を開始
し、微生物触媒と生成物の分離処理が行われる。分離処
理により、回収された微生物触媒は、連続的に反応槽へ
全量戻され、一方反応液中の生成物は、一定速度で連続
的に系外に排出されていく。この分離処理の開始時に
は、一定速度での基質の添加を継続すると同時に、生成
物蓄積濃度を一定に維持するための濃度調整用に、水又
は有機溶媒含有水溶液からなる水性溶媒を一定速度で添
加することが好ましい。
【００１９】微生物触媒反応を継続する過程で、反応液
中の微生物触媒は反応条件に依存したある速度で活性が
低下するので、この活性低下分を反応温度を上昇させる
ことで補い、反応温度を昇温コントロールすることが一
定速度で物質生産を行う上で必要である。反応温度の昇
温コントロールは、分離処理後の生成物含有溶液中の残
存基質濃度及び生成物蓄積濃度を、高速液体クロマトグ
ラフィー等により連続的又は間欠的に検知し、この値が
一定になるように反応槽の温調システムをプログラムす
ることにより行われる。反応速度が一定に保てる期間
は、微生物触媒の活性低下分が反応温度上昇による反応
速度増加で相殺しうる期間継続可能であり、微生物触媒
それぞれの特性により異なるが、通常１０日〜３ヵ月程
度である。
中の微生物触媒は反応条件に依存したある速度で活性が
低下するので、この活性低下分を反応温度を上昇させる
ことで補い、反応温度を昇温コントロールすることが一
定速度で物質生産を行う上で必要である。反応温度の昇
温コントロールは、分離処理後の生成物含有溶液中の残
存基質濃度及び生成物蓄積濃度を、高速液体クロマトグ
ラフィー等により連続的又は間欠的に検知し、この値が
一定になるように反応槽の温調システムをプログラムす
ることにより行われる。反応速度が一定に保てる期間
は、微生物触媒の活性低下分が反応温度上昇による反応
速度増加で相殺しうる期間継続可能であり、微生物触媒
それぞれの特性により異なるが、通常１０日〜３ヵ月程
度である。
【００２０】また、生成物と微生物触媒の分離に用いら
れる前記分離機としては、膜分離機や遠心分離機等を用
いることができる。生成物と微生物触媒の分離におい
て、生成物が水性溶媒中に溶解している場合は、遠心分
離機又は精密ろ過膜や限外ろ過膜等の膜分離機で容易に
分離することができる。生成物が水性溶媒中に溶解して
いない場合は、微生物触媒の粒径と生成物の粒径の中間
の孔径を有するろ過膜を使用することにより両者を分離
することができる。なお、反応装置としては、上記攪拌
型反応槽と分離機を組み合わせたものの他に、攪拌型反
応槽と分離機が一体化された膜型リアクター等のプラグ
フローリアクターも採用することができる。
れる前記分離機としては、膜分離機や遠心分離機等を用
いることができる。生成物と微生物触媒の分離におい
て、生成物が水性溶媒中に溶解している場合は、遠心分
離機又は精密ろ過膜や限外ろ過膜等の膜分離機で容易に
分離することができる。生成物が水性溶媒中に溶解して
いない場合は、微生物触媒の粒径と生成物の粒径の中間
の孔径を有するろ過膜を使用することにより両者を分離
することができる。なお、反応装置としては、上記攪拌
型反応槽と分離機を組み合わせたものの他に、攪拌型反
応槽と分離機が一体化された膜型リアクター等のプラグ
フローリアクターも採用することができる。
【００２１】生成物含有溶液からの生成物の分離は、生
成物が水性溶媒に溶解している場合は、例えば水性溶媒
を蒸発濃縮することにより、また、生成物が水性溶媒に
溶解していない場合は、固液分離機等を用いて行うこと
ができる。さらに、精製が必要な場合は、有機溶媒抽
出、蒸留、再結晶等、通常の精製手段を用いて行うこと
ができる。
成物が水性溶媒に溶解している場合は、例えば水性溶媒
を蒸発濃縮することにより、また、生成物が水性溶媒に
溶解していない場合は、固液分離機等を用いて行うこと
ができる。さらに、精製が必要な場合は、有機溶媒抽
出、蒸留、再結晶等、通常の精製手段を用いて行うこと
ができる。
【００２２】次に、本発明の微生物触媒を用いた物質生
産方法を実生産に適用する場合の物質生産プラントの一
例を図１として示す。この物質生産プラントは反応槽１
と反応槽１に具備さられた温調システム２と膜分離機３
とろ液貯槽４と洗浄槽５と廃菌体貯槽６と遠心分離機７
と複数個のポンプ８と三方弁９とそれらを連結する配管
１０とから構成されており、前述のように、温調システ
ム２によって昇温コントロールができる反応槽１と膜分
離機３で連続反応を行い、膜分離機３によりろ液と分離
された微生物触媒は回収されて反応槽１に戻され、他方
ろ液はろ液貯槽４に回収される。反応が終了すると、反
応液はすべて洗浄槽５に移送され、反応液中の微生物触
媒は膜分離機３によりろ液と分離され、洗浄槽５におい
て水洗浄され、洗浄水は上記ろ液と同様にろ液貯槽４に
回収される。洗浄後の廃菌体は遠心分離機７で脱水さ
れ、廃菌体貯槽６に送られる。
産方法を実生産に適用する場合の物質生産プラントの一
例を図１として示す。この物質生産プラントは反応槽１
と反応槽１に具備さられた温調システム２と膜分離機３
とろ液貯槽４と洗浄槽５と廃菌体貯槽６と遠心分離機７
と複数個のポンプ８と三方弁９とそれらを連結する配管
１０とから構成されており、前述のように、温調システ
ム２によって昇温コントロールができる反応槽１と膜分
離機３で連続反応を行い、膜分離機３によりろ液と分離
された微生物触媒は回収されて反応槽１に戻され、他方
ろ液はろ液貯槽４に回収される。反応が終了すると、反
応液はすべて洗浄槽５に移送され、反応液中の微生物触
媒は膜分離機３によりろ液と分離され、洗浄槽５におい
て水洗浄され、洗浄水は上記ろ液と同様にろ液貯槽４に
回収される。洗浄後の廃菌体は遠心分離機７で脱水さ
れ、廃菌体貯槽６に送られる。
【００２３】
【実施例】以下、実施例により詳細に説明するが、本発
明はこれらの実施例により限定されるものではない。な
お、生成物の収量は、得られた生成物重量又は生成物を
含有する水性溶媒溶液容量を測定し、更に高速液体クロ
マトグラフィー又はガスクロマトグラフィー等で、残存
基質濃度と生成物濃度を測定することにより求めた。ア
ンモニア分はNADH〜グルタミン酸脱水素酵素を用いる紫
外部吸光度測定法（Methods of Enzymatic Analysis, B
ergmeyer H. U. ed., 3rd ed., vol.8, pp.454-461）に
より定量した。
明はこれらの実施例により限定されるものではない。な
お、生成物の収量は、得られた生成物重量又は生成物を
含有する水性溶媒溶液容量を測定し、更に高速液体クロ
マトグラフィー又はガスクロマトグラフィー等で、残存
基質濃度と生成物濃度を測定することにより求めた。ア
ンモニア分はNADH〜グルタミン酸脱水素酵素を用いる紫
外部吸光度測定法（Methods of Enzymatic Analysis, B
ergmeyer H. U. ed., 3rd ed., vol.8, pp.454-461）に
より定量した。
【００２４】［実施例１］限外ろ過（ＵＦ）膜分離機、
自動希釈装置、オートインジェクター付きのオンライン
高速液体クロマトグラフィー装置、ｐＨコントローラー
を備えた３００ｍｌ容攪拌型反応槽に、微生物触媒とし
てあらかじめ培養しておいたArthrobactersp. NSSC104
の３５％湿菌体２４５．４ｇ（乾燥重量として１７．２
ｇ）を添加し、さらに水２９．８ｍｌで希釈した。この
反応槽に基質として２−ヒドロキシ−４−メチルチオブ
チロニトリルを０．２２７ｇ／ｍｉｎの速度で連続的に
添加し、反応温度２１℃で反応を開始し、合計で５１．
８ｇ加え終わった時点から、水を０．９４５ｇ／ｍｉｎ
の速度で連続的添加を開始した。
自動希釈装置、オートインジェクター付きのオンライン
高速液体クロマトグラフィー装置、ｐＨコントローラー
を備えた３００ｍｌ容攪拌型反応槽に、微生物触媒とし
てあらかじめ培養しておいたArthrobactersp. NSSC104
の３５％湿菌体２４５．４ｇ（乾燥重量として１７．２
ｇ）を添加し、さらに水２９．８ｍｌで希釈した。この
反応槽に基質として２−ヒドロキシ−４−メチルチオブ
チロニトリルを０．２２７ｇ／ｍｉｎの速度で連続的に
添加し、反応温度２１℃で反応を開始し、合計で５１．
８ｇ加え終わった時点から、水を０．９４５ｇ／ｍｉｎ
の速度で連続的添加を開始した。
【００２５】２−ヒドロキシ−４−メチルチオブチロニ
トリルの０．２２７ｇ／ｍｉｎによる連続添加を継続し
ながら、反応槽から反応液を膜分離機に導き、反応液中
の微生物触媒を膜分離機で分離回収して反応槽に戻すと
同時に、膜分離機からの透過ろ液を１．１７３ｇ／ｍｉ
ｎの速度で排出した。また反応中を通して、ｐＨを７．
０に保つように、２８％アンモニア水を添加した。この
連続反応の間、生成物である２−ヒドロキシ−４−メチ
ルチオブタン酸アンモニウム塩の生成速度が一定となる
ように、２−ヒドロキシ−４−メチルチオブチロニトリ
ルの反応液中濃度をオンライン高速液体クロマトグラフ
ィーにより検知し、約０．２重量％を越えるとその都度
反応温度を上昇させ、約０．２重量％になるように昇温
コントロールを実施した。かくして、２−ヒドロキシ−
４−メチルチオブタン酸アンモニウム塩を約２２重量％
含有する膜透過ろ液が、上記一定速度で排出され、２７
日間の連続反応を通じて、全量で４７．３ｋｇの膜透過
ろ液を回収した。また、反応温度は最終日までに１４℃
昇温して３５℃となっていた。生産速度と反応温度の経
時変化を表１に示す。
トリルの０．２２７ｇ／ｍｉｎによる連続添加を継続し
ながら、反応槽から反応液を膜分離機に導き、反応液中
の微生物触媒を膜分離機で分離回収して反応槽に戻すと
同時に、膜分離機からの透過ろ液を１．１７３ｇ／ｍｉ
ｎの速度で排出した。また反応中を通して、ｐＨを７．
０に保つように、２８％アンモニア水を添加した。この
連続反応の間、生成物である２−ヒドロキシ−４−メチ
ルチオブタン酸アンモニウム塩の生成速度が一定となる
ように、２−ヒドロキシ−４−メチルチオブチロニトリ
ルの反応液中濃度をオンライン高速液体クロマトグラフ
ィーにより検知し、約０．２重量％を越えるとその都度
反応温度を上昇させ、約０．２重量％になるように昇温
コントロールを実施した。かくして、２−ヒドロキシ−
４−メチルチオブタン酸アンモニウム塩を約２２重量％
含有する膜透過ろ液が、上記一定速度で排出され、２７
日間の連続反応を通じて、全量で４７．３ｋｇの膜透過
ろ液を回収した。また、反応温度は最終日までに１４℃
昇温して３５℃となっていた。生産速度と反応温度の経
時変化を表１に示す。
【００２６】
【表１】
【００２７】この２７日間の連続反応終了後、反応槽及
び反応配管系に存在する滞留液を膜濃縮洗浄し、５３
４．５ｇの洗浄膜透過ろ液を別途回収した。高速液体ク
ロマトグラフィーにより、連続反応中に得られた膜透過
ろ液及び別途回収した洗浄膜透過ろ液中の、基質である
２−ヒドロキシ−４−メチルチオブチロニトリルの濃度
を分析したところ、それぞれ０．２５重量％及び０．１
２重量％残存し、同様に生成物である２−ヒドロキシ−
４−メチルチオブタン酸の濃度を分析したところ、それ
ぞれ２０．００重量％及び９．３５重量％存在し、また
同様に副生物である２−ヒドロキシ−４−メチルチオブ
タン酸アミドの濃度を分析したところ、それぞれ０．０
７重量％及び０．０３重量％存在していた。用いた基質
２−ヒドロキシ−４−メチルチオブチロニトリルの純度
が９５．０重量％であったころから、生成物のモル収率
及び基質の残存率を計算すると、それぞれ９５．０％及
び１．３５％であった。なお、膜透過ろ液及び洗浄膜透
過ろ液中のアンモニア分を酵素法で測定したところ、そ
れぞれ２．２８重量％及び１．０７重量％であった。
び反応配管系に存在する滞留液を膜濃縮洗浄し、５３
４．５ｇの洗浄膜透過ろ液を別途回収した。高速液体ク
ロマトグラフィーにより、連続反応中に得られた膜透過
ろ液及び別途回収した洗浄膜透過ろ液中の、基質である
２−ヒドロキシ−４−メチルチオブチロニトリルの濃度
を分析したところ、それぞれ０．２５重量％及び０．１
２重量％残存し、同様に生成物である２−ヒドロキシ−
４−メチルチオブタン酸の濃度を分析したところ、それ
ぞれ２０．００重量％及び９．３５重量％存在し、また
同様に副生物である２−ヒドロキシ−４−メチルチオブ
タン酸アミドの濃度を分析したところ、それぞれ０．０
７重量％及び０．０３重量％存在していた。用いた基質
２−ヒドロキシ−４−メチルチオブチロニトリルの純度
が９５．０重量％であったころから、生成物のモル収率
及び基質の残存率を計算すると、それぞれ９５．０％及
び１．３５％であった。なお、膜透過ろ液及び洗浄膜透
過ろ液中のアンモニア分を酵素法で測定したところ、そ
れぞれ２．２８重量％及び１．０７重量％であった。
【００２８】上記で得られた膜透過ろ液及び洗浄膜透過
ろ液を合体し、１０分の１量のトルエンで洗浄した後、
水層部分をロータリーエバポレーターを用いて、５０〜
７０ｍｍＨｇ、バス温５０℃で、１３．５ｋｇまで濃縮
した。この濃縮液を高速液体クロマトグラフィーで分析
したところ、基質である２−ヒドロキシ−４−メチルチ
オブチロニトリルが０．０６重量％残存し、生成物であ
る２−ヒドロキシ−４−メチルチオブタン酸が７０．４
４重量％存在し、副生物として２−ヒドロキシ−４−メ
チルチオブタン酸アミドが０．２３重量％、２−ヒドロ
キシ−４−メチルチオブタン酸の２分子縮合エステル体
である鎖状ダイマーが０．１５重量％存在した。この濃
縮後における、生成物のモル収率及び基質の残存率を計
算すると、９５．０％及び０．０９％であった。なお、
アンモニア分は酵素法で測定したところ、７．１８重量
％であった。この値から、基質の２−ヒドロキシ−４−
メチルチオブチロニトリルは濃縮操作で分解留去するこ
とが確認された。
ろ液を合体し、１０分の１量のトルエンで洗浄した後、
水層部分をロータリーエバポレーターを用いて、５０〜
７０ｍｍＨｇ、バス温５０℃で、１３．５ｋｇまで濃縮
した。この濃縮液を高速液体クロマトグラフィーで分析
したところ、基質である２−ヒドロキシ−４−メチルチ
オブチロニトリルが０．０６重量％残存し、生成物であ
る２−ヒドロキシ−４−メチルチオブタン酸が７０．４
４重量％存在し、副生物として２−ヒドロキシ−４−メ
チルチオブタン酸アミドが０．２３重量％、２−ヒドロ
キシ−４−メチルチオブタン酸の２分子縮合エステル体
である鎖状ダイマーが０．１５重量％存在した。この濃
縮後における、生成物のモル収率及び基質の残存率を計
算すると、９５．０％及び０．０９％であった。なお、
アンモニア分は酵素法で測定したところ、７．１８重量
％であった。この値から、基質の２−ヒドロキシ−４−
メチルチオブチロニトリルは濃縮操作で分解留去するこ
とが確認された。
【００２９】
【発明の効果】本発明によると、高価な微生物触媒を新
たに追加することなく、反応開始時に添加した微生物触
媒を全量回収し、反応温度の昇温コントロールにより、
反応槽あたりの生成物生産速度を長期間一定に維持する
ことができ、高価な微生物触媒を有効に利用し、有用物
質を高収率で生産することができるばかりでなく、工業
的に有利な安定生産を実現することができる。
たに追加することなく、反応開始時に添加した微生物触
媒を全量回収し、反応温度の昇温コントロールにより、
反応槽あたりの生成物生産速度を長期間一定に維持する
ことができ、高価な微生物触媒を有効に利用し、有用物
質を高収率で生産することができるばかりでなく、工業
的に有利な安定生産を実現することができる。
【図１】 本発明の微生物触媒を用いた物質生産方法を
実生産に適用する場合の物質生産プラントを示す模式図
である。
実生産に適用する場合の物質生産プラントを示す模式図
である。
１ 反応槽 ２ 温調システム ３ 膜分離機 ４ ろ液貯槽 ５ 洗浄槽 ６ 廃菌体貯槽 ７ 遠心分離機 ８ ポンプ ９ 三方弁 １０ 配管
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 横山 雅裕 神奈川県小田原市高田345 日本曹達株式 会社小田原研究所内 Ｆターム(参考） 4B064 AE02 AE61 CA02 CA21 CC03 CC06 CC08 CC10 CD12 DA16
Claims (9)
- 【請求項１】 微生物触媒を用いた反応において、反応
温度を昇温コントロールすることにより、一定速度で物
質生産を行うことを特徴とする微生物触媒を用いた物質
生産方法。 - 【請求項２】 微生物触媒を用いた反応において、微生
物触媒の基質を一定速度で添加し、反応温度を昇温コン
トロールすることにより、一定速度で物質生産を行うこ
とを特徴とする微生物触媒を用いた物質生産方法。 - 【請求項３】 微生物触媒の反応液中の濃度が一定であ
ることを特徴とする請求項１又は２記載の微生物触媒を
用いた物質生産方法。 - 【請求項４】 微生物触媒の反応液中の濃度を一定とす
るために、反応槽から排出した反応液中の微生物触媒を
分離回収し、再度反応槽に戻すことを特徴とする請求項
３記載の微生物触媒を用いた物質生産方法。 - 【請求項５】 昇温が５〜２５℃から選択される温度範
囲であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか記載
の微生物触媒を用いた物質生産方法。 - 【請求項６】 微生物触媒がニトリラーゼ発現微生物触
媒であることを特徴とする請求項１〜５のいずれか記載
の微生物触媒を用いた物質生産方法。 - 【請求項７】 ニトリラーゼ発現微生物がアースロバク
ター（Arthrobacter）属に属する微生物であることを特
徴とする請求項６記載の微生物触媒を用いた物質生産方
法。 - 【請求項８】 微生物触媒を用いた反応が、一般式 Ｒ
ＣＮ（式中、Ｒは、水素原子、置換基を有してもよいＣ
1〜Ｃ6のアルキル基、置換基を有してもよいＣ2〜Ｃ6の
アルケニル基、置換基を有してもよいＣ1〜Ｃ6のアルコ
キシ基、置換基を有してもよいアリール基、置換基を有
してもよいアリールオキシ基又は置換基を有してもよい
複素環基を示す。）で表されるニトリル化合物を、微生
物の触媒作用により水性溶媒中で加水分解して、一般式
ＲＣＯＮＨ2（式中、Ｒは前記と同一の意味を示
す。）で表されるアミド化合物、又は一般式 ＲＣＯＯ
-ＮＨ4 +（式中、Ｒは前記と同一の意味を示す。）で表
されるカルボン酸アンモニウム塩化合物に変換する反応
であることを特徴とする請求項１〜７のいずれか記載の
微生物触媒を用いた物質生産方法。 - 【請求項９】 微生物触媒を用いた反応が、一般式
Ｒ′ＣＨ（ＯＨ）ＣＮ（式中、Ｒ′は、水素原子、置換
基を有してもよいＣ1〜Ｃ6のアルキル基、置換基を有し
てもよいＣ2〜Ｃ6のアルケニル基、置換基を有してもよ
いＣ1〜Ｃ6のアルコキシ基、置換基を有してもよいアリ
ール基、置換基を有してもよいアリールオキシ基又は置
換基を有してもよい複素環基を示す。）で表されるα−
ヒドロキシニトリル化合物を微生物の触媒作用により水
性溶媒中で加水分解して、一般式Ｒ′ＣＨ（ＯＨ）ＣＯ
ＮＨ2（式中、Ｒ′は前記と同一の意味を示す。）で表
されるα−ヒドロキシ酸アミド化合物、又は一般式
Ｒ′ＣＨ（ＯＨ）ＣＯＯ-ＮＨ4 +（式中、Ｒ′は前記と
同一の意味を示す。）で表されるα−ヒドロキシ酸アン
モニウム塩化合物に変換する反応であることを特徴とす
る請求項１〜７のいずれか記載の微生物触媒を用いた物
質生産方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18906499A JP2001017195A (ja) | 1999-07-02 | 1999-07-02 | 微生物触媒を用いた物質生産方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18906499A JP2001017195A (ja) | 1999-07-02 | 1999-07-02 | 微生物触媒を用いた物質生産方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2001017195A true JP2001017195A (ja) | 2001-01-23 |
Family
ID=16234702
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP18906499A Pending JP2001017195A (ja) | 1999-07-02 | 1999-07-02 | 微生物触媒を用いた物質生産方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2001017195A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002052027A1 (fr) * | 2000-12-22 | 2002-07-04 | Nippon Soda Co., Ltd. | Procede de production d'une substance a l'aide d'un catalyseur microbien |
| WO2003000914A1 (fr) * | 2001-06-22 | 2003-01-03 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Procede de fabrication d'un compose avec un biocatalyseur, a l'aide d'une temperature de reaction commandee |
| WO2003062437A1 (fr) * | 2002-01-18 | 2003-07-31 | Nippon Soda Co.,Ltd. | Procede de production de sel d'ammonium d'$g(a)-hydroxyacide |
| WO2005095626A1 (ja) * | 2004-03-31 | 2005-10-13 | Nippon Soda Co., Ltd. | 固定化生体触媒およびそれを用いた有機酸塩の製造方法 |
-
1999
- 1999-07-02 JP JP18906499A patent/JP2001017195A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002052027A1 (fr) * | 2000-12-22 | 2002-07-04 | Nippon Soda Co., Ltd. | Procede de production d'une substance a l'aide d'un catalyseur microbien |
| WO2003000914A1 (fr) * | 2001-06-22 | 2003-01-03 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Procede de fabrication d'un compose avec un biocatalyseur, a l'aide d'une temperature de reaction commandee |
| US7078199B2 (en) | 2001-06-22 | 2006-07-18 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Method of manufacturing compound with biocatalyst by using controlled reaction temperature |
| AU2002315819B2 (en) * | 2001-06-22 | 2007-03-29 | Mitsubishi Chemical Corporation | Method of manufacturing compound with biocatalyst by using controlled reaction temperature |
| KR100884676B1 (ko) | 2001-06-22 | 2009-02-18 | 미쯔비시 레이온 가부시끼가이샤 | 반응 온도를 제어하는 생체 촉매를 사용한 화합물의 제조방법 |
| WO2003062437A1 (fr) * | 2002-01-18 | 2003-07-31 | Nippon Soda Co.,Ltd. | Procede de production de sel d'ammonium d'$g(a)-hydroxyacide |
| WO2005095626A1 (ja) * | 2004-03-31 | 2005-10-13 | Nippon Soda Co., Ltd. | 固定化生体触媒およびそれを用いた有機酸塩の製造方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pal et al. | Manufacture of gluconic acid: A review towards process intensification for green production | |
| JP4235450B2 (ja) | ニトリラーゼを用いて対応するアルファーヒドロキシニトリルからアルファーヒドロキシ酸、グリコール酸、２−ヒドロキシイソ酪酸の製造法 | |
| EP0773297B2 (en) | Process for producing alpha-hydroxy acid or alpha-hydroxyamide by microorganism | |
| Obón et al. | High-density Escherichia coli cultures for continuous L (−)-carnitine production | |
| JP2003199595A (ja) | 光学活性マンデル酸誘導体の製造方法 | |
| EP0603321A1 (en) | Fermentation process for producing lactic acid | |
| JP2001017195A (ja) | 微生物触媒を用いた物質生産方法 | |
| CN1108304A (zh) | 发酵制造乳酸的方法 | |
| WO2007026860A1 (ja) | 光学活性α－ヒドロキシカルボン酸の製造方法 | |
| JPH0928390A (ja) | グリコール酸の微生物学的製造法 | |
| JPH1175885A (ja) | ２−ヒドロキシ−４−メチルチオブタン酸カルシウム塩の製造方法 | |
| JPWO2002052027A1 (ja) | 微生物触媒を用いた物質生産方法 | |
| DK144277B (da) | Femgangsmaade til fremstilling af 6-aminopenicillansyre | |
| JPH09154589A (ja) | エリスリトールの製造方法 | |
| JP2005176639A (ja) | ニコチン酸類の製造方法 | |
| JP2005533497A (ja) | ２相のアルコールデヒドロゲナーゼをベースとする共役酵素反応系 | |
| JPH09131194A (ja) | 微生物によるα−ヒドロキシ酸またはα−ヒドロキシアミドの製造法 | |
| JPH04218385A (ja) | Ｒ（−）−マンデル酸の製造法 | |
| JP2002034584A (ja) | α−ヒドロキシ酸アンモニウム塩の製造法 | |
| WO2004009829A1 (ja) | メチオニンの製造法 | |
| JP4756620B2 (ja) | β−ヒドロキシ−γ−ブチロラクトン類の製造方法 | |
| JP2005117905A (ja) | 光学活性１−ベンジル−３−ピロリジノールの製造方法 | |
| JP4647059B2 (ja) | グリシンの着色を防止した微生物学的な製造方法 | |
| JPWO2003062437A1 (ja) | α−ヒドロキシ酸アンモニウム塩の製造法 | |
| JP3107244B2 (ja) | 光学活性ジオールの製造方法 |