JP2000506494A

JP2000506494A - 良性前立腺過形成の治療に有用な複合体

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Publication number: JP2000506494A
Application number: JP9515930A
Authority: JP
Inventors: デフエオ−ジヨーンズ，デボラ; ジヨーンズ，レイモンド・イー; オリフ，アレン・アイ; スコルニツク，エドワード・エム; ガルスキイ，ビクター・エム
Original assignee: メルクエンドカンパニーインコーポレーテッド
Priority date: 1995-10-18
Filing date: 1996-10-15
Publication date: 2000-05-30
Also published as: EP0855910A1; AU708475B2; WO1997014416A1; AU7432196A; EP0855910A4

Abstract

(57)【要約】酵素活性ＰＳＡにより選択的に切断される新規なオリコペプチドと、該ペプチドに結合した細胞毒性物質とを含む、良性前立腺過形成の治療に有用な新規な医薬組成物を記載する。良性前立腺過形成の治療方法も開示する。

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称良性前立腺過形成の治療に有用な複合体発明の背景良性前立腺過形成（又は「前立腺症」）は、８０才を超える全ての男性のほぼ１００％に認められ、また前立腺の変化は、６０才までの男性の約５０％に発見し得る。良性前立腺過形成（ＢＰＨ）を有している多くの男性は無症状状態に留まっているが、症状がゆっくり進行している人や、症状が安定している人もいる。しかし、手術を要する程の重度の症状を示す男性が１年に約４００，０００人もいる。最も一般的な手術である経尿道的切除術はＢＰＨ症状の緩和に有効であるが、限定数の患者に、手術自体に由来する罹患状態、中程度から重度の尿失禁及び軽度の勃起又は射精機能不全を含む副作用が報告されている。通常、前立腺は、４５才過ぎごろまでは安定な状態を保つが、以後、組織が変化し始め、増殖し、前立腺が腫大する。腫大した前立腺は尿道を圧迫し、ＢＰＨを特徴とする症状を発生させる。該症状には、排尿（開始）困難（躊躇）、弱尿流、排尿後の尿滴下及び睡眠中の頻尿及び尿意頻数の増加が含まれる。排尿痛を伴う場合もあり得る。一般的なＢＰＨ合併症の１つである尿路感染症が発生すると、しばしば尿道の閉塞症状がさらにひどくなり得る。前立腺特異抗原（ＰＳＡ：prostate specific antigen）は、殆どヒト前立腺上皮によってのみ生成され、ヒト精液中０．５〜２．０ｍｇ／ｍｌのレベルで産生される一本鎖の３３ｋＤａ糖タンパク質である〔Ｍ．Ｎａｄｊｉ，Ｓ．Ｚ．Ｔａｂｅｒ，Ａ．Ｃａｓｔｒｏら（１９８１）Ｃａｎｃｅｒ４８：１２２９；Ｌ．Ｐａｐｓｉｄｅｒｏ，Ｍ．Ｋｕｒｉｙａｍａ，Ｍ．Ｗａｎｇら（１９８１）ＪＮＣＩ６６：３７；Ｓ．Ｄ．Ｑｕｉ，Ｃ．Ｙ．Ｆ．Ｙｏｕｎｇ，Ｄ．Ｌ．Ｂｉｈａｒｔｚら（１９９０），Ｊ．Ｕｒｏｌ．１４４：１５５０；Ｍ．Ｃ．Ｗａｎｇ，Ｌ．Ａ．Ｖａｌｅｎｚｕｅｌａ，Ｇ．Ｐ．Ｍｕｒｐｈｙら（１９７９），Ｉｎｖｅｓｔ．Ｕｒｏｌ．１７：１５９〕。単一の炭水化物単位が第４５アスパラギン残基に結合しており、該単位は総分子量の２〜３ｋＤａを構成する。ＰＳＡはキモトリプシン様特異性を有するプロテアーゼである〔Ａ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｓｏｎ，Ｃ．Ｂ．Ｌａｕｒｅｌｌ，Ｈ．Ｌｉｌｊａ（１９９０），Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９４，７５５−７６３〕。ＰＳＡは主として、精子を取り込むゲル中の主要タンパク質、セメノケリン（semenogelin）Ｉ及びセメノケリンII及びフィブロネクチンのタンパタ質加水分解による、射精時に形成されるゲル構造の溶解に関与することが証明されている〔Ｈ．Ｌｉｌｊａ（１９８５），Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．７６：１８９９；Ｈ．Ｌｉｌｊａ，Ｊ．Ｏｌｄｂｒｉｎｇ，Ｇ．Ｒａｎｎｅｖｉｋら（１９８７），Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．８０：２８１；Ｒ．Ｓ．ＭｃＧｅｅ，Ｊ．Ｃ．Ｈｅｒｒ（１９８８），Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．３９：４９９〕。ＰＳＡが媒介するケル形成タンパク質のタンパク質加水分解により、数種の可溶性セメノゲリンＩ及びセメノゲリンII断片並びに可溶性フィブロネクチン断片が生成されて、１回射精液が融解し、自発運動性の精子が放出される〔Ｈ．Ｌｉｌｊａ，Ｃ．Ｂ．Ｌａｕｒｅｌｌ（１９８７），Ｓｃａｄ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．４４：４４７；Ｒ．Ｓ．ＭｃＧｅｅ，Ｊ．Ｃ．Ｈｅｒｒ（１９８７），Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．３７：４３１〕。さらに、ＰＳＡは、タンパク質を加水分解してＩＧＦＢＰ−３（インスリン様成長因子結合タンパタ質３）を分解し、ＩＧＦがＰＳＡ分泌細胞を特異的に刺激することを可能にする〔Ｃｏｈｅｎら，（１９９２），Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏ．＆Ｍｅｔａ．７５：１０４６−１０５３〕。ＰＳＡとα₁−抗キモトリプシンとの複合体は、血清ＰＳＡの主要な分子形態であり、検出される血清ＰＳＡの最大９５％を構成し得る〔Ａ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｓｏｎ，Ｔ．Ｂｊｏｒｋ，Ｏ．Ｎｉｌｓｓｏｎら（１９９３），Ｊ．Ｕｒｏｌ．１５０：１００−１０５；Ｈ．Ｌｉｌｊａ，Ａ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｓｏｎ，Ｕ．Ｄａｈｌｅｎ（１９９１），Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．３７：１６１８−１６２５；Ｕ．Ｈ．Ｓｔｅｎｍａｎ，Ｊ．Ｌｅｉｎｏｖｅｎ，Ｈ．Ａｌｆｔｈａｎら（１９９１），ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．５１：２２２−２２６〕。前立腺組織（正常組織、良性過形成組織又は悪性組織）は、成熟した酵素活性形態のＰＳＡがα₁−抗キモトリプシンとの複合体の形成に必要とされるときに、該ＰＳＡを優勢に放出させることに関与している〔Ａ．Ｅ．Ｍａｓｔ，Ｊ．Ｊ．Ｅｎｇｈｉｌｄ，Ｓ．Ｖ．Ｐｉｚｚｏら（１９９１），Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ３０：１７２３−１７３０；Ｄ．Ｈ．Ｐｅｒｌｍｕｔｔｅｒ，Ｇ．Ｉ．Ｇｌｏｖｅｒ，Ｍ．Ｒｉｖｅｔｎａら（１９９０），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８７：３７５３−３７５７〕。従って、前立腺のＰＳＡ分泌細胞という微環境において、ＰＳＡはどの阻害性分子とも複合体を形成しないその成熟した酵素活性形態でプロセス且つ分泌されると考えられる。ＰＳＡはα₂−マクログロブリンとも安定な複合体を形成するが、それによってＰＳＡの封入及びＰＳＡエピトープの完全な損失が生ずるので、ｉｎｖｉｖｏでのこの複合体形成の重要性は解明されていない。複合体を形成しいない遊離形態のＰＳＡは血清ＰＳＡ中の微量画分を構成する〔Ａ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｓｏｎ，Ｔ．Ｂｊｏｒｋ，Ｏ．Ｎｉｌｓｓｏｎら（１９９３），Ｊ．Ｕｒｏｌ．１５０：１００−１０５；Ｈ．Ｌｉｌｊａ，Ａ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｓｏｎ，Ｕ．Ｄａｈｌｅｎ（１９９１），Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．３７：１６１８−１６２５〕。この形態の血清ＰＳＡの大きさは精液中のＰＳＡの大きさに近い〔Ｈ．Ｌｉｌｊａ，Ａ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｓｏｎ，Ｕ．Ｄａｈｌｅｎ（１９９１），Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．３７：１６１８−１６２５〕が、遊離形態の血清ＰＳＡが、チモーケンか、内部切断された不活性形態の成熟ＰＳＡか、又は酵素活性を示すＰＳＡであるかどうかはまだ解明されていない。しかし、遊離形態の血清ＰＳＡが酵素活性を示すとは考えられない。というのは、検出された遊離３３ｋＤａ形態のＰＳＡの血清レベルに比べ、血清中には、かなりの（１００〜１，０００倍）モル過剰の未反応α₁−抗キモトリプシンとα₂−マタログロブリンとが存在するからである〔Ａ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｓｏｎ，Ｔ．Ｂｊｏｒｋ，Ｏ．Ｎｉｌｓｓｏｎら（１９９３），Ｊ．Ｕｒｏｌ．１５０：１００−１０５；Ｈ．Ｌｉｌｊａ，Ａ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｓｏｎ，Ｕ．Ｄａｈｌｅｎ（１９９１），Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．３７：１６１８−１６２５〕。ＰＳＡの血清測定は、前立腺ガンの治療のモニターに有用である〔Ｍ．Ｓ．Ｄｕｆｆｙ（１９８９），Ａｎｎ．Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２６：３７９−３８７；Ｍ．Ｋ．Ｂｒａｗｅｒ及びＰ．Ｈ．Ｌａｎｇｅ（１９８９），Ｕｒｏｌ．Ｓｕｐｐｌ．５：１１−１６；Ｍ．Ｈａｒａ及びＨ．Ｋｉｍｕｒａ（１９８９），Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１１３：５４１−５４８〕。良性前立腺過形成や術後外傷を有する前立腺に、王常な血清濃度を超えるＰＳＡが報告された〔Ｈ．Ｌｉｌｊａ，Ａ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｓｏｎ，Ｕ．Ｄａｈｌｅｎ（１９９１），Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．３７：１６１８−１６２５〕。従って、ＰＳＡのタンパク質分解活性により活性化され得る細胞毒性化合物は、前立腺細胞特異的であると共にＰＳＡ分泌前立腺転位部特異的でなければならない。そのような特異的物質は、他の療法に付随する副作用を引き起こすこともなく、ＢＰＨに対して有効であり得る。従って、本発明の目的は、良性前立腺過形成の治療に有用な新規な医薬組成物を提供することであり、該組成物は、酵素活性ＰＳＡによって選択的に切断される新規なオリゴペプチドと、該オリゴペプチドに結合した細胞毒性物質とを含む。本発明の別の目的は、該新規医薬組成物を投与することを含む、良性前立腺過形成の治療法を提供することである。発明の要旨前立腺の有害症状、特に良性前立腺過形成の治療に有用な、酵素活性ＰＳＡにより選択的に切断される新規なオリゴペプチドと該オリゴペプチドに結合した薬剤とを含む新規な医薬組成物を記載する。そのような前立腺症状の治療法も開示する。図面の簡単な説明図１及び図１Ａ：セメノゲリンＩの一次アミノ酸配列：セメノゲリンＩの一次アミノ酸配列（配列番号１）を示す。（ＰＳＡ加水分解に対する部位の相対親和性の順に番号を付した）ＰＳＡタンパク質分解活性による切断部位（「ＣＳ」）が示されており、該タンパク質断片にはアミノ末端から出発して順次番号が付されている。図２：合成オリゴペプチドの切断親和性：合成オリゴペプチドの繰り込みセットを調製し、該オリゴペプチドを酵素活性遊離ＰＳＡで種々の時間消化した。結果を表２に示す。全てのオリゴペプチドはトリフルオロ酢酸塩としてテストした。図３、図３Ａ及び図３Ｂ：合成オリゴペプチドの切断親和性：合成オリゴペプチドを調製し、該オリゴペプチドを酵素活性遊離ＰＳＡで４時問消化した。この時間で切断されるオリゴペプチドの百分率をリストする。結果を表４に示す。表４ａは、酵素活性遊離ＰＳＡにより上記オリゴペプチドの５０％を切断するのに要する時間量（分）を示す。オリゴペプチドに関して塩が示されていない場合には、その遊離塩基をテストした。図４：切断不能なオリゴペプチド−ドキソルビシン複合体の細胞毒性データ：該図のデータは、ドキソルビシンと、遊離ＰＳＡによるタンパク質分解的切断部位を含まないオリゴペプチドに共有結合したドキソルビシン複合体（化合物１２ｄ）との比較細胞毒性を示す。ドキソルビシンのＥＣ₅₀は０．３μＭであり、アセチル化オリゴペプチド修飾ドキソルビシンのＥＣ₅₀は３００分の１以下に減少している。この複合体は、ＨＰＬＣで検出し得るような非修飾ドキソルビシンによる汚染を有していなかった。該オリゴペプチド単独では検出可能な細胞死滅化活性を有していなかった。図５及び図５Ａ：遊離ＰＳＡによるオリゴペプチド−ドキソルビシン複合体のｉｎＶｉｔｒｏ切断親和性：オリゴペプチドードキソルビシン複合体を調製し、該複合体を酵素活性遊離ＰＳＡで４時間消化した。この時間でオリゴペプチド中で酵素活性により切断される複合体の百分率をリストする。結果を表５に示す。表５ａは、酵素活性遊離ＰＳＡによる上記オリゴペプチド−細胞毒性物質複合体の５０％切断に要する時間量（分）を示す。該複合体に関して塩が示されていない場合には、その遊離複合体をテストした。図６：細胞ならし培地におけるオリゴペプチド−ドキソルビシン複合体の切断親和性：オリゴペプチド−ドキソルビシン複合体を、（遊離ＰＳＡを分泌することが知られている）ＬＮＣａＰ細胞又は（遊離ＰＳＡを分泌しない）ＤｕＰＲＯ細胞に暴露して条件付けした細胞培地と４時間反応させた。この時間でオリゴペプチド中で酵素活性により切断される複合体の百分率をリストする。結果を表６に示す。図７：切断可能なオリゴペプチド−ドキソルビシン複合体の細胞毒性データ：表７のデータは、遊離ＰＳＡによるタンパタ質分解的切断部位を含むオリゴペプチドと該オリゴペプチドに共有結合したドキソルビシンの複合体の、遊離ＰＳＡを分泌することが知られているガン細胞系に対する（ＥＣ₅₀としての）細胞毒性を示す。さらに、遊離ＰＳＡを分泌しない細胞系（ＤｕＰＲＯ）に対する選択された複合体の細胞街性も示す。該複合体に関して塩が示されていない場合には、その遊離複合体をテストした。発明の詳細な説明本発明は、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）により特異的に認識され且つ該遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドと、直接又はリンカー単位を介して該オリゴペプチドに共有結合した薬剤とを含む複合体又はその医薬上許容し得る塩を含む医薬組成物に関する。特に、本発明は、該薬剤が細胞毒性物質であるそのような複合体に関する。本発明はさらに、該組成物を用いる、前立腺の有害症状、特に良性前立腺過形成の新規な治療法に関する。そのようなオリゴペプチドには、以下から選択されるアミノ酸配列を含むオリゴマーが含まれる（但し、本明細書を通して使用される、「ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．」、「ａｍｉｄｅ」及び「ａｃｉｄ」は、それそれ「配列番号」、「アミド」及び「酸」を意味する）：（ここで、ｈＡｒ−ｇはホモアルギニンであり、Ｃｈａはシタロヘキシルアラニンであり、Ｘａａは任意の天然アミノ酸である）。本発明の１つの実施態様において、オリゴペプチドとしては、以下から選択されるアミノ酸配列を含むオリゴマー又はその医薬上許容し得る塩が挙げられる：本発明のより好ましい実施態様において、オリゴペプチドとしては、以下から選択されるアミノ酸配列を含むオリゴマー又はその医薬上許容し得る塩が挙げられる：本発明の別の実施態様において、オリゴペプチドとしては、以下から選択されるアミノ酸配列を含むオリゴマーが含まれる：上記及び発明の詳細な説明の他の部分に用いられている用語「アミノ酸配列を含むオリゴマー」とは、アミノ酸配列中に上記の特定のアミノ酸配列を含み、従って遊離ＰＳＡにより上記アミノ酸配列内でタンパク質分解的に切断される約６〜約１００個のアミノ酸残基からなるオリゴマーを意味する。従って、例えば、以下のオリゴマー：ＧｌｎＬｅｕＡｓｐＡｓｎＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＧｌｎ|ＳｅｒＳｅｒＳｅｒＴｈｒＨｉｓＧｌｎＳｅｒＳｅｒ（配列番号２０）は、アミノ酸配列：ＡｓｎＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＧｌｎ|ＳｅｒＳｅｒＳｅｒＴｈｒ（配列番号１０）を含み、従って、本発明の範囲内に包含される。そのようなオリゴマーはセメノケリンＩ及びセメノケリンIIを含まないものと理解されたい。さらに本発明は、Ｎ末端アミノ酸か、Ｃ末端アミノ酸、又はＮ末端アミノ酸とＣ末端アミノ酸の両方が修飾されているオリゴマーをも包含するものと理解されたい。そのような修飾には、Ｎ末端アミン基のアシル化及びＣ末端カルボン酸の置換によるアミドの形成が含まれるがそれらには限定されない。そのような部分の付加はオリゴマーの固相合成中に実施し得る。従って、Ｃ末端アミノ酸をアミンを介して固相樹脂に結合すると、樹脂からオリゴマーが酸切断されてアミド部分が得られる。従って、以下の化合物又はその医薬上許容し得る塩は、上記で用いられている「アミノ酸配列を含むオリゴマー」であると考えられる（但し、これらの化合物は例示に過ぎず、限定的なものではない）：ペプチド化学業界の当業者には、生物学的に活性なオリゴペプチド中の特定のアミノ酸を、元のオリゴペプチドの生物学的活性が修飾オリゴペプチド中に保存されている他の同族、等配及び／又は等電子的アミノ酸で置換し得ることは容易に理解されよう。特定の非天然及び修飾天然アミノ酸を用いて本発明のオリゴペプチド中の対応天然アミノ酸を置換することもできる。従って、例えばチロシンは、３−ヨードチロシン、２−メチルチロシン、３−フルオロチロシン、３−メチルチロシンなどで置換し得る。さらに、例えばリシンは、Ｎ’−（２−イミダゾリル）リシンなどで置換し得る。以下のアミノ酸置換リストは例示に過ぎず、限定的なものではない：元のアミノ酸置換アミノ酸ＡｌａＧｌｙＡｒｇＬｙｓ，オルニチンＡｓｎＧｌｎＡｓｐＧｌｕＧｌｕＡｓｐＧｌｎＡｓｎＧｌｙＡｌａＩｌｅＶａｌ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、ＮｌｅＬｅｕＩｌｅ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、ＮｌｅＬｙｓＡｒｇ、オルニチンＭｅｔＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｎｌｅ、ＶａｌオルニチンＬｙｓ、ＡｒｇＰｈｅＴｙｒ、ＴｒｐＳｅｒＴｈｒＴｈｒＳｅｒＴｒｐＰｈｅ、ＴｙｒＴｙｒＰｈｅ、ＴｒｐＶａｌＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、Ｎｌｅ。従って、例えば、以下のオリゴペプチド又はその医薬上許容し得る塩は当業者には周知の方法に従って合成し得、遊離ＰＳＡによりタンパタ質分解的に切断されると考えられる：同様に以下のオリゴペプチドなどは、当業者には周知の方法に従って合成し得、遊離ＰＳＡによりタンパク質分解的に切断されると考えられる：アミノ酸配列中に記号「｜」が含まれている場合、該記号は、該配列中でオリゴペプチドが遊離ＰＳＡによりタンパク質分解的に切断される箇所を示している。本発明の化合物は不斉中心を有しており、ラセミ体、ラセミ混合物及び個々のジアステレオマーとして生成し得る。光学異性体を含む全ての可能な異性体は本発明に包含される。特に断りのない限り、名前が挙げられているアミノ酸は天然「Ｌ」立体配置を有するものと理解されたい。本明細書及び図面に用いられている以下の略号は、示されているアミノ酸及びその部分を表す：ｈＲ又はｈＡｒｇ：ホモアルギニンｈＹ又はｈＴｙｒ：ホモチロシンＣｈａ：シクロヘキシルアラニンＡｍｆ：４−アミノメチルフェニルアラニンＤＰＬ：２−（４，６−ジメチルピリミジニル）リシン（イミダゾリル）Ｋ：Ｎ’−（２−イミダゾリル）リシンＭｅ₂ＰＯ₃−Ｙ：Ｏ−ジメチルホスホチロシンＯ−Ｍｅ−Ｙ：Ｏ−メチルチロシンＴＩＣ：テトラヒドロ−３−イソキノリンカルボン酸ＭｅＬ：２−ケト−３−アミノ−５−メチルヘキサンＤＡＰ：１，３−ジアミノプロパンＴＦＡ：トリフルオロ酢酸ＡＡ：酢酸本発明の治療法は、医薬活性が酵素活性ＰＳＡを分泌する細胞に対して特異的である医薬組成物を用いる。そのような組成物は、上述のオリゴペプチドと、該オリゴペプチドに直接又はリンカー単位を介して結台した薬剤とを含む。オリゴペプチドと薬剤とのそのような組み合わせ体は複合体（conjugate）と称し得る。該複合体の薬剤成分は、その生物学的に活性な部位又は生物学的に活性な所望の標的が前立腺内にあるか又は前立腺に近接して存在する前立腺の症状の治療に有用な公知化合物から選択し得る。そのような薬剤には、細胞毒性物質が含まれるがそれには限定されない。好ましい実施態様において、本発明の治療法は、その細胞毒性が酵素活性ＰＳＡを分泌する細胞に対して特異的である細胞毒性組成物を用いる。そのような組成物は、上記オリゴペプチドと、直接又はリンカー単位を介して該オリゴペプチドに共有結合した細胞毒性物質とを含む。ＰＳＡによるタンパク質分解的切断部位を含むオリゴペプチドが直接又は化学リンカーを介して細胞毒性物質に結合しており且つ無傷である場合、細胞毒性物質の細胞毒活性が著しく低減するか又は全く存在しなくなるのが理想的である。また、細胞毒性物質の細胞毒活性は、結合しているオリゴペプチドをタンパタ質分解的切断部位で切断すると著しく増大するか又は非修飾細胞毒性物質の活性に戻るのが理想的である。本発明のこの側面の実施には必要ではないが、本発明の該側面の好ましい実施態様は、オリゴペプチド及びリンカー単位（存在する場合）が遊離ＰＳＡ及び該組織の近隣に存在する任意の他の天然タンパク質分解酵素のタンパク質分解活性により細胞毒性物質から切り離され、それによって、非修飾細胞毒性物質をタンパク質分解的切断が生起した場所の生理的環境中に放出する複合体である。該複合体の医薬上許容し得る塩も包含される。直接共有結合により又はリンカー単位を介して細胞毒性物質に結合している本発明のオリゴペプチドは、遊離ＰＳＡにより最も高度に認識され且つ遊離ＰＳＡにより最も容易にタンパク質分解的に切断されるオリゴペプチドである必要はない。従って、そのような抗ＢＰＨ組成物に組み込むために選択されるオリゴペプチドは、遊離ＰＳＡによるその選択的タンパク質分解的切断に対しても、そのような切断から生成する細胞毒性物質−タンパク質分解残基複合体（又は理想的な状況であると考えられる場合には、非修飾細胞毒性物質）に対しても選択されるであろう。本発明に用いられる複合体は所与の生物学的応答の調節にも用い得るので、細胞毒性物質は古典的な化学治療剤に限定するように解釈すべきではない。例えば、細胞毒性物質は、所望の生物学的活性を有するタンパク質又はポリペプチドであってよい。そのようなタンパク質には、例えば、アブリン、リシンＡ、シュードモナスエキソトキシン若しくはジフテリア毒素のような毒素、腫瘍ネクローシス因子、α−インターフェロン、β−インターフェロン、神経成長因子、血小板誘導成長因子、組織プラスミノーゲンアクチベーターのようなタンパク質；又は、生物学的応答調節剤、例えば、リンホカイン、インターロイキン−１（「ＩＬ−１」）、インターロイキン−２（「ＩＬ−２」）、インターロイキン−６（「ＩＬ−６」）、顆粒球マタロファージコロニー刺激因子（「ＧＭ−ＣＳＦ」）、顆粒球コロニー刺激因子（「Ｇ−ＣＳＦ」）若しくは他の成長因子が含まれ得る。好ましい細胞毒性物質としては、一般に、アルキル化剤、抗増殖剤、チューブリン結合剤などが挙げられる。好ましい細胞毒性剤群には、例えば、アンスラサイクリン系薬剤、ビンカ薬剤群、マイトマイシン群、ブレオマイシン群、細胞毒性ヌクレオシド群、プテリジン系薬剤、ジイネン（diyenes）群、タキサン（tax anes）群及びポドフィロトキシン群が含まれる。これらの群の特に有用なメンバーとしては、例えば、ドキソルビシン、カルミノマイシン、ダウノルビシン、アミノプテリン、メトトレキサート、メトプテリン、ジクロロ−メトトレキサート、マイトマイシンＣ、ポルフィロマイシン、５−フルオロウラシル、６−メルカプトプリン、シトシンアラビノシド、ポドフィロトキシン、又はエトポサイド若しくはエトポサイドホスフェートのようなポドフィロトキシン誘導体、メルファラン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ロイロシジン、ビンデシン、ロイロシン、タキソール（taxol）などが挙げられる。他の有用な細胞毒性物質には、エストラムスチン、シスプラチン及びシクロホスファミドが含まれる。当業者は、所望の細胞毒性物質を化学修飾して、該化合物の反応を本発明の複合体の製造により都合がよいようにすることができる。本発明の極めて好ましい細胞毒性物質群には、以下の式の薬剤が含まれる：式（１）のメトトレキサート群：（式中、Ｒ¹²はアミノ又はヒドロキシであり；Ｒ⁷は水素又はメチルであり；Ｒ⁸は、水素、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードであり；Ｒ⁹は、ヒドロキシ又はカルボン酸の塩を完結する部分である）；式（２）のマイトマイシン群：（式中、Ｒ¹⁰は水素又はメチルである）；式（３）のブレオマイシン群：〔式中、Ｒ¹¹は、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ₁−Ｃ₃アルキルアミノ、ジ（Ｃ₁−Ｃ₃アルキル）アミノ、Ｃ₄−Ｃ₆ポ式（４）のメルファラン：式（５）の６−メルカプトプリン：式（６）のシトシンアラビノシド：式（７）のポドフィロトキシン群：（式中、Ｒ¹³は水素又はメチルであり；Ｒ¹⁴はメチル又はチエニルである）又はそのリン酸塩；式（８）のビンカアルカロイド薬剤群：〔式中、Ｒ¹⁵は、Ｈ、ＣＨ₃又はＣＨＯであり；Ｒ¹⁷及びＲ¹⁸が独立している場合は、Ｒ¹⁸はＨであり、Ｒ¹⁶とＲ¹⁷の一方はエチルであり、他方はＨ又はＯＨであり；Ｒ¹⁷とＲ¹⁸が結合している炭素と一緒になってオキシラン環を形成するときは、Ｒ¹⁶はエチルであり；Ｒ¹⁹は、水素、（Ｃ₁−Ｃ₃アルキル）−ＣＯ又はクロロ置換された（Ｃ₁−Ｃ₃ アルキル）−ＣＯである〕；式（９）のジフルオロヌクレオシド群：〔式中、Ｒ²¹は、次式：（式中、Ｒ²²は、水素、メチル、ブロモ、フルオロ、クロロ又はヨードであり；Ｒ²³は、−ＯＨ又は−ＮＨ₂であり；Ｒ²⁴は、水素、ブロモ、クロロ又はヨードである）のうちの１つの塩基である〕；又は式（１０）のアンスラサイクリン系抗生物質：〔式中、Ｒ¹は、−ＣＨ₃、−ＣＨ₂ＯＨ、−ＣＨ₂ＯＣＯ（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃、又は −ＣＨ₂ＯＣＯＣＨ（ＯＣ₂Ｈ₅）₂であり；Ｒ³は、−ＯＣＨ₃、−ＯＨ又は−Ｈであり；Ｒ⁴は、−ＮＨ₂、−ＮＨＣＯＣＦ₃、４−モルホリニル、３−シアノ−４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−メトキシ−１−ピペリジニル、ベンジルアミン、ジベンジルアミン、シアノメチルアミン、又は１−シアノ−２−メトキシエチルアミンであり；Ｒ⁵は、−ＯＨ、−ＯＴＨＰ又は−Ｈであり；Ｒ⁶は、−ＯＨ又はＨであり、但し、Ｒ⁵が−ＯＨ又は−ＯＴＨＰのとき、Ｒ⁶は−ＯＨでない〕；エストラムスチン（１１）：シクロホスファミド（１２）：最も好ましい薬剤は、上記式（１０）のアンスラサイクリン系抗生物質剤である。当業者には、この構造式には、当業界では異なる一般名又は慣用名が与えられている薬剤又は薬剤誘導体である化合物が含まれることが理解されよう。以下の表１は、多くのアンスラサイクリン系薬剤とそれらの一般名及び慣用名を表しており、本発明には、該アンスラサイクリン系薬剤を用いるのが特に好ましい。表１に示されている化合物のうち、最も好ましい細胞毒性物質は、ドキソルビシン、ビンブラスチン及びデスアセチルビンブラスチンである。ドキソルビシン（本明細書では、「ＤＯＸ」とも称される）は、式（１０）（式中、Ｒ¹は−ＣＨ₂ＯＨであり、Ｒ³は−ＯＣＨ₃であり、Ｒ⁴は−ＮＨ₂であり、Ｒ⁵は−ＯＨであり、Ｒ⁶は−Ｈである）のアンスラサイクリンである。本発明の治療法に用いられる複合体に組み込まれるオリゴペプチド、ペプチドサブユニット及びペプチド誘導体（「ペプチド」とも称される）は、・慣用のペプチド合成法、好ましくは固相法によってそれらの構成アミノ酸から合成し得る。次いで、該ペプチドを逆相高性能液体タロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にかけて精製する。標準的なペプチド合成法が、例えば以下の文献に開示されている：Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒら，“ＴｈｅＰｅｐｔｉｄｅｓ”,第Ｉ巻、ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ１９６５；Ｂｏｄａｎｓｋｙら，“ＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ”，ＩｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅＰｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９６６；ＭｃＯｍｉｅ（編）“ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ”，ＰｌｅｎｕｍＰｒｅｓｓ，１９７３；Ｂａｒａｎｙら，“ＴｈｅＰｅｐｔｉｄｅｓ：Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｂｉｏｌｏｇy”，２，第１章，ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，１９８０，及びＳｔｅｗａｒｔら，“ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉs”,第２版，ＰｉｅｒｃｅＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｐａｎｙ，１９８４。これらの文献の教示は本明細書に参照として組み込むものとする。本発明の治療法に用いられる複合体に組み込まれる化合物の医薬上許容し得る塩には、例えば、無毒性の無機又は有機酸から形成される本発明の化合物の慣用の無毒性塩が含まれる。例えば、そのような慣用の無毒性塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミド酸、リン酸、硝酸などのような無機酸から誘導される塩；及び酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、酪酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ− 安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、トリフルオロ酢酸などのような有機酸から製造される塩が含まれる。同様に、本発明の治療法に用いられる、ＰＳＡ切断部位を含むオリゴペプチドと細胞毒性物質とを含む複合体も、医化学業界で周知の方法に従って合成し得る。例えば、細胞毒性物質の遊離アミン部分をオリゴペプチドのカルボキシル末端と共有結合させてアミド結合を形成し得る。同様に、オリゴペプチドのアミン部分と細胞毒性物質のカルボキシル部分を共有結合させてアミド結合を形成し得る。これらの目的には、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾル−１−イル）−１，３，３ −テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵとして公知）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢＴとして公知）、ジシクロヘキシル−カルボジイミド（ＤＣＣ）、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（ＥＤＣ）、ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）、ベンゾトリアゾル−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）などのような試薬を単独又は組み合わせて用い得る。さらに、本発明の複合体は、ＰＳＡ切断部位と細胞毒性物質とを非ペプチジル結合して形成し得る。例えば、細胞毒性物質をそのヒドロキシル部分を介してオリゴペプチドのカルボキシル末端と共有結合させてエステル結合を形成し得る。このためには、ＨＢＴＵとＨＯＢＴの組み合わせ、ＢＯＰとイミダゾールの組み台わせ、ＤＣＣとＤＭＡＰの組み合わせなどのような試薬を用い得る。カルボン酸をニトロフェニルエステルなどを形成することにより活性化し、ＤＢＵ（１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク −７−エンの存在下に反応させてもよい。リンカー単位を介してオリゴペプチドを細胞毒性物質に結合させて本発明の複合体を形成することもできる。そのようなリンカー単位には、例えば、細胞毒性物質のアミン部分をリンカー単位と結合させてアミド結合を形成し、オリゴペプチドのアミノ末端をリンカー単位の他方の末端と結合させてアミド結合を形成するビスカルボニルアルキルジラジカルが含まれる。あるいは、細胞毒性物質のカルボニル部分をリンカー単位のアミンの一方に共有結合させ、リンカー単位の他方のアミンをオリゴペプチドのＣ末端に共有結合させるジアミノアルキルジラジカルリンカー単位も有用であり得る。遊離ＰＳＡの不在下には生理的環境に対して安定であるが、ＰＳＡタンパク質分解的切断部位を切断すると切断可能になる他のそのようなリンカー単位も考えられる。さらに、ＰＳＡタンパク質分解的切断部位を切断すると、細胞毒性物質に結合したままであるが、非修飾細胞毒性物質に比べてそのような切断後の細胞毒性物質誘導体の細胞毒活性を有意に低下させないリンカー単位を用いることもできる。当業者には、本発明の治療法に用いられる複合体の合成において、出発化合物及び中間体で所望の反応を実施している間、該分子の他の部分の種々の反応性基を保護又はブロックする必要があり得ることが理解されよう。通常、そのような保護基は、所望の反応が完結した後又は任意の所望の時に、例えば加水分解又は加水素分解手段により除去する。そのような保護ステップ及び脱保護ステップは有機化学では慣用的である。当業者は、本発明の化合物の製造に有用であり得る保護基の教示については、ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＭｃＯｍｉｅ編，ＰｌｅｎｕｍＰｒｅｓｓ，ＮＹ，ＮＹ（１９７３）；及びＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅ GｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｇｒｅｅｎｅ編，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ，ＮＹ（１９８１）を参照されたい。有用なアミノ保護基の（非限定的な）例には、例えば、Ｃ₁−Ｃ₁₀アルカノイル基〔例えば、ホルミル、アセチル、ジクロロアセチル、プロピオニル、ヘキサノイル、３，３−ジエチルヘキサノイル、γ−タロロブチル（γ−chlorobutryl ）など〕；Ｃ₁−Ｃ₁₀−アルコキシカルボニル及びＣ₅−Ｃ₁₅アリールオキシカルボニル基（例えば、ｔ−ブトキシカルホニル、ベンジルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、４−ニトロベンジルオキシカルボニル、フルオレニルメチルオキシカルボニル及びシンナモイルオキシカルボニル）；ハロ−（Ｃ₁−Ｃ₁₀ ）−アルコキシカルボニル（例えば、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル）；並びにＣ₁−Ｃ₁₅アリールアルキル及びアルケニル基（例えば、ベンジル、フェネチル、アリル、トリチルなど）がある。一般的に用いられている他のアミノ保護基は、メチル又はエチルアセトアセテートのようなβ−ケト−エステルを用いて製造されたエナミン形態のものである。有用なカルボキシ保護基としては、例えば、Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル基（例えば、メチル、ｔ−ブチル、デシル）；ハロ−Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル（例えば、２，２，２−トリクロロエチル及び２−ヨードエチル）；Ｃ₅−Ｃ₁₅アリールアルキル（例えば、ベンジル、４−メトキシベンジル、４−ニトロベンジル、トリフェニルメチル、ジフェニルメチル）；Ｃ₁−Ｃ₁₀アルカノイルオキシメチル（例えば、アセトキシメチル、プロピオンオキシメチルなど）；並びにフェナシル、４−ハロフエナシル、アリル、ジメチルアリル、トリ−（Ｃ₁−Ｃ₃アルキル）シリル（例えば、トリメチルシリル）、β−ｐ−トルエンスルホニルエチル、β−ｐ−ニトロフェニル−チオエチル、２，４，６−トリメチルベンジル、β−メチルチオエチル、フタルイミドメチル、２，４−ジニトロフェニルスルフェニル、２−ニトロベンズヒドリル及び関連基が含まれ得る。同様に、有用なヒドロキシ保護基には、例えば、ホルミル基、クロロアセチル基、ベンジル基、ベンズヒドリル基、トリチル基、４−ニトロベンジル基、トリメチルシリル基、フェナシル基、ｔ−ブチル基、メトキシメチル基、テトラヒドロピラニル基などが含まれ得る。オリゴペプチドをアンスラサイクリン系抗生物質であるドキソルビシンと結合させる本発明の治療法の好ましい実施態様に関して、以下の反応図式は本発明の複合体の合成法を示している。反応図式Ｉ反応図式II 反応図式III 反応図式IV 反応図式Ｖ反応図式VIは、本発明の治療法に用いる複合体の製造法を示しており、該複合体は、オリゴペプチドをビンカアルカロイド細胞毒性物質ビンブラスチンと結合させる。オリゴペプチドのＮ末端とビンブラスチンとの結合を示す〔Ｓ．Ｐ．Ｋａｎｄｕｋｕｒｉら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２８：１０７９−１０８８（１９８５）〕。反応図式VIIは、本発明の治療法に用いる複合体の製造法を示しており、該複合体は、オリゴペプチドをそのＣ末端でビンカアルカロイド細胞毒性物質ビンブラスチンと結合させる。１，３−ジアミノプロパンリンカーの使用は例示に過ぎない。ビンブラスチンのカルボニルとオリゴペプチドのＣ末端との間に他のスペーサー単位を用いることも考えられる。さらに、図式VIIは、リンカー単位を付加した後で、Ｃ−４位のヒドロキシ部分を再アセチル化する複合体の合成法を示している。本発明者は、デスアセチルビンブラスチン複合体も有用であり、該複合体は、反応図式VIIに示されている、リンカーの第１級アミンを保護するステップ及び中間体と無水酢酸とを反応させるステップ、その後のアミンの脱保護ステップを排除することにより製造し得ることを発見した。オリゴペプチドの他の位置でのビンブラスチン官能性基との結合は、当業者が容易に実施し得るものであり、該複合体も良性前立腺過形成の治療に有用な化合物を提供すると考えられる。本発明の治療法に用いられるオリゴペプチドのＮ末端を細胞毒性物質の１種、例えばビンブラスチンと結合させ、同時に該オリゴペプチドのＣ末端をビンブラスチンかそれとは異なる細胞毒性物質（例えばドキソルビシン）であるもう１つの細胞毒性物質と結合させる複合体を製造し得ることも理解されたい。反応図式 VIIIは、そのような複数細胞毒性物質複合体の合成法を示している。該複数細胞毒性物質複合体は、細胞毒性物質を１種しか含んでいない複合体より有利であり得る。反応図式VI 反応図式VI（続き）反応図式VII 反応図式VII（続き）反応図式VIII 反応図式VIII（続き）本発明の治療法に用いられるオリゴペプチド−細胞毒性物質複合体（ここで、細胞毒性物質は好ましい細胞毒性物質ドキソルビシンである）は、以下の一般式Ｉ：〔式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）により特異的に認識され且つ遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドであり；Ｘ_Lは不在か、又は（ａ）フェニルアラニン、（ｂ）ロイシン、（ｃ）バリン、（ｄ）イソロイシン、（ｅ）（２−ナフチル）アラニン、（ｆ）シクロヘキシルアラニン、（ｇ）ジフェニルアラニン、（ｈ）ノルバリン、（ｉ）ノルロイシン、及び（ｊ）１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸から選択されるアミノ酸であり；Ｒは、水素又は−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ¹であり；Ｒ¹は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル又はアリールである〕によって表される化合物又はその医薬上許容し得る塩であり得る。本発明のＢＰＨ治療法の好ましい実施態様において、オリゴペプチドは、以下：〔ここで、Ｘａａは任意の天然アミノ酸であり；Ｘ_Lは不在であるか、又は、（ａ）ロイシン、（ｂ）イソロイシン、（ｃ）ノルロイシン、及び（ｄ）バリンから選択されるアミノ酸であり；Ｒは、アセチル、ピバロイル又はベンゾイルである〕から選択されるアミノ酸を含むオリゴマー又はその医薬上許容し得る塩である。以下の化合物は、本発明の治療法に用いられるオリゴペプチド−細胞毒性物質複合体の特定の例である：〔式中、Ｘは：又はその医薬上許容し得る塩である〕。オリゴペプチドのＮ末端をアシル化し、該オリゴペプチドのＣ末端をドキソルビシンの３’−アミンと結合させるオリゴペプチド−ドキソルビシン複合体の他の例は以下の複合体又はその医薬上許容し得る塩である：本発明の治療法に用いられるオリゴペプチド−細胞毒性物質複合体（ここで、細胞毒性物質は好ましい細胞毒性物質ビンブラスチン又はデスアセチルビンブラスチンである）は、以下の一般式Ｉ：〔式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）によって特異的に認識され且つ遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドであり；Ｘ_Lは、不在であるか、若しくは、（ａ）フェニルアラニン、（ｂ）ロイシン、（ｃ）バリン、（ｄ）イソロイシン、（ｅ）（２−ナフチル）アラニン、（ｆ）シクロヘキシルアラニン、（ｇ）ジフェニルアラニン、（ｈ）ノルバリン、（ｉ）ノルロイシン、及び（ｊ）１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３ −カルホン酸から選択されるアミノ酸であるか、又はＸ_Lは、−ＮＨ−（ＣＨ₂）_n−ＮＨ−であり；Ｒは、水素又は−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ¹であり；Ｒ¹は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル又はアリールであり；Ｒ¹⁹は、水素又はアセチルであり；ｎは、１、２、３、４又は５である〕によって表される化合物又はその医薬上許容し得る塩であり得る。本発明の治療法に用いられるオリゴペプチド−デスアセチルビンブラスチン複合体の特定の例は以下の化合物又はその医薬上許容し得る塩である：本発明の治療法に用いられる多細胞毒性物質複合体の特定の例は以下の化合物又はその医薬上許容し得る塩である：オリゴペプチド−細胞毒性物質複合体のようなペプチジル治療剤は、アセチル、ベンゾイル、ピバロイルなどのような適当な保護基で保護された任意のオリゴペプチド置換基の末端アミノ部分を有するのが好ましいことは当業界では周知であり且つ本発明において理解されよう。そのような末端アミノ基の保護により、温血動物の血漿中に存在する外来アミノペプチダーゼの作用による前記ペプチジル治療剤の酵素による分解が低減又は排除される。本発明の治療法に用いられるオリゴペプチド−細胞毒性物質複合体は、医薬組成物の形態で患者に投与される。該組成物は、式（Ｉ）の複合体及び該複合体用の医薬上許容し得る担体、賦形剤又は稀釈剤を含む。用いられている「医薬上許容し得る」とは、例えば、ヒト、ウマ、ブタ、ウシ、ネズミ、イヌ、ネコ又は他の哺乳動物を含む温血動物、並びに鳥類又は他の温血動物の治療又は診断に有用な物質を指す。好ましい投与形態は、特に、静脈内、筋肉内、皮下、経直脳又はリンパ管内経路による非経口投与である。そのような組成物は、当業者が熟知している担体、稀釈剤又は賦形剤を用いて製造し得る。この点に関しては、例えば、Ｏｓｏｌらによって編纂された、Ｒｅｍｉｎｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅＳ，第１６版，１９８０，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙを参照されたい。そのような組成物は、血清タンパク質、例えばヒト血清アルブミンのようなタンパク質と、ホスフェート、他の塩又は電解質などのような緩衝剤又は緩衝性物質を含み得る。適当な稀釈剤としては、例えば、滅菌水、等張サリン、水性希デキストロース、多価アルコール又はそのようなアルコールの混合物、例えば、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどが含まれ得る。該組成物は、フェネチルアルコール、メチル及びプロピルパラベン、チメロサールなどのような保存剤を含み得る。所望なら、該組成物は、約０．０５〜約０．２０重量％の酸化防止剤（例えば、メタ重亜硫酸ナトリウム又は重亜硫酸ナトリウム）を含み得る。静脈内投与の場合、該組成物は、患者に対する投与量が約０．０１〜約１ｇの複合体となるように製造するのが好ましい。投与量は、約０．２〜約１ｇの複合体の範囲が好ましい。本発明の複合体は、治療すべき病態又は修飾すべき生物学的作用、複合体の投与法、患者の年令、体重及び状態のような要素、並びに治療担当医により決定されるべき他の要素に応じた広範な投薬量範囲にわたって有効である。従って、いずれの所定の患者に対する投与量も、個人ベースで決定しなければならない。以下の実施例では特定の試薬及び反応条件を概説するが、本発明の精神及び範囲に包含される変更を行い得ることが当業者には理解されよう。従って、以下の製造法及び実施例は、本発明をさらに例示すべく提供されており、制限的なものではない。実施例実施例１セメグリンのＰＳＡ媒介切断部位の同定：精液ゲルの融解はセメノゲリンＩのタンパク質分解による切断と並行する〔Ｈ．Ｌｉｌｊａ，Ｃ．Ｂ．Ｌａｕｒｅｌｌ（１９８４）Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓ．４４，４４７−４５２〕。タンパク質分解によるセメノゲリンの切断は主として前立腺特異抗原のタンパク質分解活性によると考えられる〔Ｈ．Ｌｉｌｊａ（１９８５）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．７６，１８９９−１９０３〕。セメノゲリンＩの公表配列〔Ｈ．Ｌｉｌｊａ，Ｐ．Ａ．Ａｂｒａｈａｍｓｓｏｎ，Ａ．Ｌｕｎｄｗａｌｌ（１９８９）Ｊ．ｏｆＢｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４，１８９４−１９００〕（図１）を用い、市販の前立腺ｃＤＮＡライブラリーからセメノケリンｃＤＮＡをクローン化するためのポリメラーゼ連鎖反応プライマーを設計した（Ｃｌｏｎｅｔｅｃｈ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）。精製したセメノゲリンｃＤＮＡを細菌発現ベクターｐＴＡＣ〔Ｄ．Ｌ．Ｌｉｎｅｍｅｙｅｒ，Ｌ．Ｊ．Ｋｅｌｌｙ，Ｊ．Ｇ．Ｍｉｎｋｅ，Ｇ．Ｇｉｍｅｎｅｚ−Ｇａｌｌｅｇｏ，Ｊ．ＤｅＳａｌｖｏ及びＫ．Ａ．Ｔｈｏｍａｓ（１９８７）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ５，９６０−９６５〕中に挿入した。セメノゲリンｃＤＮＡは、チューブリンエピトープがセメノゲンタンパタ質のカルボキシル末端に位置するように設計した。細菌で発現させたセメノゲリンタンパク質を抗チューブリン抗体カラム上で精製した。精製されたセメノケリンＩタンパク質を、１２ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ８．０）、２５ｍＭのＮａＣｌ、０．５ｍＭのＣａＣｌ₂中の市販の前立腺特異抗原（ＰＳＡ）（ＹｏｒｋＢｉｏｌｏｇｉｃａｌｓＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，ＳｔｏｎｙＢｒｏｏｋ，ＮＹ）と１００：１のモル比（セメノゲリンＩ／ＰＳＡ）で混合し、種々の時間インキュベートした。ポリアクリルアミドゲル電気泳動にかけてこの消化物を切断し、電気泳動にかけて、ＣＡＰＳ緩衝液〔Ｐ．Ｍａｔｓｕｄａｉｒａ（１９８７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２，１００３５−１００３８〕中のＰｒｏＢｌｏｔｔフィルターペーパー（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，ＦｏｓｔｅｒＣｉｔｙ，ＣＡ）に移した。ｐｒｏＢｌｏｔｔフィルターペーパーをクーマシーブルーで染色して、新規にＰＳＡにより生成されたセメノゲリンＩタンパタ質断片を同定した。フィルターから小刀で新規断片を切り離し、配列決定にかけた。タンパク質分解断片を可変時間消化により同定した後、１０分間の消化反応を実施した。セメノゲリンＩの５つの潜在的切断部位に対するＰＳＡの親和性を定量すると以下の通りであった：部位３４９／３５０＞部位３７５／３７６＞部位２８９／２９０＝部位３１５／３１６＞部位１５９／１６０。ＰＳＡにより生成された各ペプチド断片のクーマシーブルー染色強度から相対親和性を推論した。これらの強度はおおよそ３：１：０．６：０．３の比率を有していた。実施例２ＰＳＡ媒介切断部位を含むオリゴペプチドの調製：ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓモデル４３０Ａ自動化ペプチドシンセサイザーへのアミノ酸の導入に二重結合プロトコルを用いる固相合成法によりオリゴペプチドを調製した。脱保護及び樹脂担体からのオリゴペプチドの切り離しは、液体フッ化水素酸で処理して行った。水性０．１％トリフルオロ酢酸／アセトニトリル勾配を用いる逆相Ｃ−１８シリカカラム上の分取高性能液体クロマトグラフィーにかけてオリゴペプチドを精製した。アミノ酸の組成の分析、高性能液体クロマトグラフィー及び高速原子衝撃質量スペクトル分析により、オリゴペプチドの同一性及び均質性を確認した。この方法で調製したオリゴペプチドを図２に示す。実施例３遊離ＰＳＡにによるオリゴペプチドの認識の評価：実施例２に記載の方法で調製したオリゴペプチドを個別にＰＳＡ消化緩衝液〔１２ｍＭのトリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン（ｐＨ８．０）、２５ｍＭのＮａＣｌ、０．５ｍＭのＣａＣｌ₂〕に溶解し、該溶液を１００：１のモル比でＰＳＡに加えた。あるいは、用いるＰＳＡ消化緩衝液は、５０ｍＭのトリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン（ｐＨ７．４）、１４０ｍＭのＮａＣｌである。種々の反応時間後にトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を最終１％（容量／容量）まで加えて反応混合物をクエンチする。あるいは、１０ｍＭのＺｎＣｌ₂を加えて反応混合物をクエンチする。クエンチした反応混合物を、水性０．１％ＴＦＡ／アセトニトリル勾配を用いる逆相Ｃ−１８カラム上のＨＰＬＣにかけて分析した。評価の結果を図２に示す。実施例２に記載の方法で調製した他のオリゴペプチドを同アッセイ（４時間後にクエンチ）でテストした。評価の結果を図３に示す。オリゴペプチドのアミノ末端からアスパラギン残基を除去すると、ＰＳＡ媒介ペプチド加水分解産物の有意な損失が生じるが、該ペプチドのカルボキシル末端のグルタミン酸残基の存在はＰＳＡによる認識には必須ではないようである。実施例４切断不能オリゴペプチデ−ドキソルビシン複合体の調製：以下の一般反応を用い、表３に示されているドキソルビシン誘導体を調製した：ＤＭＳＯ中のドキソルビシン（Ｓｉｇｍａ）と〔固相合成法で調製したものか又は市販（Ｓｉｇｍａ）〕の対応ペプチドとの混合物に、ＨＢＴＵ及びＨＯＢＴと共にジイソプロピルエチルアミンを加え、反応混合物を一晩攪拌した。粗反応混合物をそのまま、アセトニトリル０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）／水中０．１％ＴＦＡ中を用いる逆相Ｃ−１８カラム上の分取ＨＰＬＣにかけて精製した。実施例５ドソルビシンのペプチジル誘導体のｉｎＶｉｔｒｏ細胞毒性アッセイ：ＡｌａｍａｒＢｌｕｅアッセイを用い、実施例４に記載の方法で調製した切断不能なオリゴペプチド−ドキソルビシン複合体と、非修飾ドキソルビシンによって死滅化することが知られている細胞系との相対細胞毒性を評価した。具体的に言えば、９６ウエルプレート中のリンパ節の針生検から単離されたヒト転移前立腺ガンであるＬＮＣａＰ前立腺腫瘍細胞（ＬＮＣａＰ．ＦＧＣ：ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，ＡＴＣＣＣＲＬ１７４０）又はＤｕＰＲＯ細胞の細胞培養物を、種々の濃度の所与の複合体を含む培地で稀釈した（最終プレートウエル容量は２００μｌ）。細胞を３７℃で３日間インキュベートし、次いで、アッセイウエルに２０μｌのＡｌａｍａｒＢｌｕｅを加えた。細胞をさらにインキュベートし、ＡｌａｍａｒＢｌｕｅを加えてから４時間後及び７時間後に、５７０ｎｍ及び６００ｎｍの二重波長のＥＬ−３１０ＥＬＩＳＡ読み取り装置でアッセイプレートの読み取りを行った。次いで、テストした種々の濃度の複合体と、（複合体を含まない）対照培養物との相対生存％を計算した。非修飾ドキソルビシンと非修飾オリゴペプチドの細胞毒性も評価した。図３は、代表的な化合物（化合物１２ｄ）の細胞毒性データを示す。実施例６ＬＮＣａＰ細胞由来の酵素活性ＰＳＡの評価：ＬＮＣａＰ血清フリー培地（約２００分の１に濃厚）を組換えセメノゲリンＩタンパク質と共にインキュベートして酵素活性を証明した。濃縮ならし培地中約０．５μｇの免疫反応性ＰＳＡＣＨＹＢＲＩＤＴＥＣＨ（ＴａｎｄｅｍＥ）エリザで測定して〕を、約３μｇの組換えセメノゲリンＩと混合し、３７℃で４時間インキュベートした。インキュベーション後、消化物混合物をウエスターンブロット法で分析した。その結果は、精液由来の精製ＰＳＡと、ＬＮＣａＰならし培地由来のＰＳＡは組換えセメノゲリンタンパク質について同一のタンパク質分解マップを生成することを示している。従って、ＬＮＣａＰ細胞は酵素活性ＰＳＡを生成する。ＬＮＣａＰは、ヌードマウスでは腫瘍化しており、検出可能なレベルの循環性ＰＳＡを生成する。実施例７切断可能オリゴペプチド−ドキソルビシン複合体の調製：以下の一般反応を用い、遊離ＰＳＡによりタンパク質分解的に切断されるオリゴペプチドがドキソルビシンの糖部分のアミンに共有結合したドキソルビシン誘導体を調製した：ＤＭＳＯ中のドキソルビシン（Ｓｉｇｍａ）と（実施例２に記載のように固相合成法に従って調製した）対応ペプチドとの混合物に、ＨＢＴＵ及びＨＯＢＴと共にジイソプロピルエチルアミンを加え、反応混合物を一晩攪拌した。粗反応混合物をそのまま、アセトニトリル中の０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）／水中０．１％ＴＦＡ勾配を用いる逆相Ｃ−１８カラム上の分取ＨＰＬＣにかけて精製した。ペプチド上に反応性アミン部分が存在する場合には、そのような基を典型的にはフルオレニルメチルオキシカルボニル付加物として保護し、ピペリジンなどのような第２級アミンで処理して除去してからドキソルビシンと結合させた。上記の複合体は、一般式：の構造を有し、用語「Ａｃ−ペプチド−ＤＯＸ（３’）」によって表し得る。上記一般法によるか又は実施例８に記載の合成経路に従い、但し、市販物から又は当業界では周知の合成法により容易に得られる適切な出発アミノ酸残基を用いて調製した複合体を、図５、図５Ａ及び図７の表５、表５ａ及び表７にリストする。実施例８Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｄｏｘ・アセテートステップＡ：Ａｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−ＰＡＭ樹脂（１）０．５ｍｍｏｌ（０．６７ｇ）のＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＰＡＭ樹脂で出発し、４３０ＡＡＢ］ペプチドシンセサイザーで保護ペプチドを合成した。該プロトコルでは、それぞれ以下の保護アミノ酸：Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（ＯＢｚｌ）、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（ＢｒＺ）、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）の４倍過剰量（２ｍｍｏｌ）を用いた。メチル−２−ピロリジノン中でＤＣＣ及びＨＯＢＴを活性化してカップリングを行った。Ｎ末端アセチル基の導入には酢酸を用いた。Ｂｏｃ基の除去は、塩化メチレン中５０％のＴＦＡを用いて行い、ＴＦＡ塩はジイソプロピルエチルアミンで中和した。合成完結後、ペプチド樹脂を乾燥して１．３ｇの（１）を得た。ステップＢ：Ａｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−ＯＨ（２）１．３ｇの保護ペプチド樹脂（１）を、アニソール（２ｍｌ）の存在下に０℃ で２時間、ＨＦ（２０ｍｌ）で処理した。ＨＦを蒸発させた後、残留物をエーテルで洗浄、濾過し、ＤＭＦで抽出した。ＤＭＦ濾液（７５ｍｌ）を濃縮乾固して、Ｈ₂Ｏですり砕いた。不溶性生成物（２）を濾過、乾燥した（０．４６ｇ）。ステップＣ：Ａｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｄｏｘ（３）先行ステップの中間体（２）（０．４６ｇ，０．４３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５ｍｌ）に溶解し、ドキソルビシンヒドロクロリド（１２５ｍｇ，０．２１５ｍｍｏｌ）次いでトリエチルアミン（６０μｌ，０．４３０ｍｍｏｌ）を加えた。攪拌溶液を冷却（０℃）し、ジフェニルホスホリルアジド（９２μｌ，０．４３ｍｍｏｌ）を加えた。５分後、追加の９２μｌのＤＰＰＡを加え、ＴＥＡでｐＨを〜７．５（ｐＨペーパー）に調整した。１時間後、追加の９２μｌのＤＰＰＡを加え、ｐＨを〜７．５に調整し、反応混合物を０〜５℃で一晩攪拌した。１８時間後、（分析ＨＰＬＣにより反応の完結が確認された）反応混合物を濃縮して、油状物（３）を得た。ステップＤ：Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｄｏｘ（４）上記生成物（３）をＤＭＦ（２０ｍｌ）に溶解し、冷却（０℃）、１０ｍｌのピペリジンを加えた。溶液を濃縮乾固し、分取ＨＰＬＣにかけて精製した。緩衝液Ａ＝１５％酢酸−Ｈ₂Ｏ；Ｂ＝１５％酢酸−メタノール。粗生成物を３００ｍｌの１０％Ｂ／９０％Ａ緩衝液に溶解し、濾過、Ｃ−１８逆相ＨＰＬＣラジアル圧縮カラム（Ｗａｔｅｒｓ，Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ１５μｍ，３００Å）で精製した。１０％Ｂ→６０％Ｂのステップ勾配を７５ｍｌ／分の流速で用いた（ｕｖ＝２６０ｎｍ）。均一生成物画分をプールし、濃縮、Ｈ₂Ｏから凍結乾燥して、１２５ｍｇの精製生成物（４）を得た。実施例９デアセチルビンブラスチニル−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｔｒｙ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−ＮＨ₂・アセテート（５）（配列番号１８４）ステップＡ：ＮＨ₂−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ− Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−アミド（６）０．５ｍｍｏｌのｐ−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（ＭＢＨＡ）、保護ペプチド、ＮＨ₂−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ａｌａ−Ｓｅｒ（ＯＢｚＬ）−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ（ＯＢｚＬ）−Ｓｅｒ（ＯＢｚＬ）−Ｓｅｒ（ＯＢｚＬ）−Ｌｅｕ−ＭＢＨＡで出発し、４３０ＡＡＢＩペプチドシンセサイザーで中間体を合成した。該プロトコルでは、４倍過剰量（２ｍｍｏｌ）の以下の各保護アミノ酸：Ｂｏｃ−Ｌｅｕ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）、Ｂｏｃ−Ａｌａ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（ＯＢｚｌ）、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（ＢｒＺ）、Ｂｏｃ−Ｇｌｎを用いた。カップリングは、Ｎ−メチル−２− ピロリジノン（ＮＭＰ）中でＤＣＣ及びＨＯＢＴを活性化して行った。Ｂｏｃ基の除去は、塩化メチレン中５０％ＴＦＡを用いて行い、ＴＦＡ塩はジイソプロピルエチルアミンで中和した。乾燥した保護ペプチド樹脂（１．８０ｇ）を、アニソール（２ｍｌ）の存在下に０℃で２時間ＨＦ（２０ｍｌ）で処理した。蒸発させた後、残留物をＤＭＦで抽出した。ＤＭＦ濾液（７５ｍｌ）を濃縮乾固して、アセトニトリル−Ｈ₂Ｏの１：１混合物に溶解し、凍結乾燥して、粗生成物７５０ｍｇを得た。一部（２００ｍｇ）を、Ｃ−１８逆相担体（Ｗａｔｅｒｓ，μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ）上の分取ＨＰＬＣにかけて精製した。緩衝液Ａ＝１５％酢酸− Ｈ₂Ｏ；Ｂ＝１５％酢酸−メタノール。精製するために、粗生成物を４００ｍｌの１０％Ｂ／９０％Ａ緩衝液に懸濁、濾過し、濾液をカラム上に装入した。１０％Ｂ→５５％Ｂのステップ勾配を７５ｍｌ／分の流速で用いた。均一生成物画分をプールし、濃縮、Ｈ₂Ｏから凍結乾燥して、（６）を得た。ステップＢ：デアセチルビンブラスチンモノヒドラジド（７）１ｇのビンブラスチンスルフェートを、塩化メチレン及び飽和重炭酸ナトリウム中で抽出してアミン形態に変換した。塩化メチレン層をＨ₂Ｏで洗浄し、無水ＭｇＳＯ₄で脱水、濃縮乾固した。次いで、ビンブラスチンを無水エタノール（２０ｍｌ）に溶解し、無水ヒドラジン（２０ｍｌ）を加えた。溶液をＮ₂ 雰囲気下に１７時間加熱（６０℃）した。反応混合物を濃縮して油状物を得、該油状物を塩化メチレンに溶解し、Ｈ₂Ｏで抽出、ＭｇＳＯ₄で脱水した。蒸発させた後、化合物（７）を単離した。〔Ｋ．Ｓ．Ｐ．ＢｈｕｓｈａｎａＲａｏら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（１９８５），２８：１０７９参照〕。ステップＣ：デアセチルビンブラスチン酸アジド（８）デアセチルビンブラスチンモノヒドラジド（７）（４８ｍｇ，０．０６２４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍｌ）に溶解、冷却（−１５℃）し、ＨＣｌ／ジオキサンを加えてｐＨを〜２．５（ｐＨペーパー）に酸性化した。亜硝酸イソアミル（１０μｌ）を加え、次いで１０分後にさらに１０μｌを加えた。ＨＰＬＣ分析にかけると、５分後にヒドラジドが完全にアジ化物に変換されたことが示された。該アジ化物を、使用するまで溶液中−１５℃で維持した。ステップＤ：デアセチルビンブラスチニル−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｔｒｙ− Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−ＮＨ₂・アセテート（５）ステップＡで調製したオリゴペプチド生成物（６）（３２ｍｇ，０．０２２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍｌ）に溶解し、冷却（−１５℃）した。この溶液に、デスアセチルビンブラスチン酸アジド（８）のＤＭＦ溶液（１．５ｍｌ，０．０３１ｍｍｏｌ）を加えた。トリエチルアミンを加えてｐＨを〜７．５（ｐＨペーパー）に調整し、反応混合物を−５で℃２時時間、０℃で１８時間攪拌した。該反応混合物に、Ｈ₂Ｏ（２ｍｌ）を加え、溶液を蒸発乾固した。該中間体をＤＭＦ（４ｍｌ）に溶解、冷却（０℃）し、２ｍｌのピペリジンを加えた。溶液を濃縮乾固し、ステップＡに記載のように分取ＨＰＬＣにかけて精製した。均一画分をプール、濃縮し、Ｈ₂Ｏから凍結乾燥して、（５）を得た。実施例１０デアセチルビンブラスチニル−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｔｒｙ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｄｏｘ・アセテート（１０）ステップＡ：デアセチルビンブラスチニル−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｔｒｙ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｄｏｘ・アセテート（９）実施例９のステップＡに記載の方法で調製したオリゴペプチド生成物（６）（１６６ｍｇ，０．１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（３ｍｌ）に溶解し、−１５℃に冷却した。この溶液に、実施例９のステップＣに記載の方法で調製したデアセチルビンブラスチン酸アジド（８）のＤＭＦ溶液（０．１２５ｍｍｏｌ）を加えた。トリエチルアミンを加えてｐＨを〜７．５（ｐＨペーパー）に調整し、反応混合物を−１５℃で９０分間攪拌した。０〜５℃で１８時間攪拌した後、反応混合物を濃縮乾固し、粗残留物をＤＭＦ（１０ｍｌ）に溶解、濾過した。濾液に、ドキソルビシンヒドロクリリド（６２ｍｇ，０．１０６ｍｍｏｌ）、次いでトリエチルアミン（３０μｌ）を加えた。攪拌溶液を冷却（０℃）し、２７μｌのジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ，０．１３４ｍｍｏｌ）を加えた。５分後、追加の２７μｌのＤＰＰＡを加え、ＴＥＡでｐＨを〜７．５（ｐＨペーパー）に調整した。１時間後、追加の２７μｌのＤＰＰＡを加え、ｐＨを〜７．５に調整し、反応混合物を０〜５℃で一晩攪拌した。１８時間後、（分析ＨＰＬＣにかけて反応が完結したことが判明した）反応混合物を濃縮して、油状物（９）を得た。ステップＢ：デアセチルビンブラスチニル−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｔｒｙ− Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ −Ｄｏｘ・アセテート（１０）上記中間体生成物（９）をＤＭＦ（２０ｍｌ）に溶解、冷却（０℃）し、１０ｍｌのピペリジンを加えた。溶液を濃縮乾固し、分取ＨＰＬＣにかけて精製した。緩衝液Ａ＝１５％酢酸−Ｈ₂Ｏ；Ｂ＝１５％酢酸−メタノール。粗生成物を３００ｍｌの１０％Ｂ／９０％Ａ緩衝液に溶解、濾過し、Ｃ−１８逆相ＨＰＬＣラジアル圧縮カラム（Ｗａｔｅｒｓ，μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ）上で精製した。１０％Ｂ→６０％Ｂのステップ勾配を７５ｍｌ／分の流速で用いた（ｕｖ＝２６０ｎｍ）。半純生成物を、緩衝液Ａ＝０．１３Ｍのトリエチルアンモニウムホスフェート（ｐＨ３．０）及び緩衝液Ｂ＝アセトニトリルを用いるＣ−１８（Ｗａｔｅｒｓ，ＰｒｅｐＰａｋ）にかけてさらに精製した。１０％Ｂ→４０％Ｂのステップ勾配を７５ｍｌ／分の流速で用いた（ｕｖ＝２１４ｎｍ）。純生成物画分をプール、Ｈ₂Ｏで稀釈し、生成物を同一カラムにかけ、９０％アセトニトリル／１０％Ｈ₂Ｏ（１％酢酸）を用いて生成物を酢酸塩として溶離して脱塩した。生成物画分を濃縮、Ｈ₂Ｏから凍結乾燥して、精製生成物（１０）を得た。実施例１１Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｎｌｅ−ＮＨ−（ＣＨ₂）₃ＮＨ−デアセチルビンブラスチンアミド（１４）ステップＡ：デアセチルビンブラスチン−３−アミノプロピルアミド（１１）（実施例９のステップＣに記載の合成法で合成した）デアセチルビンブラスチン酸アジドの冷却（−１５℃）ＤＭＦ溶液（３ｍｌ，０．０６２４ｍｍｏｌ）に、ＤＭＦ（２ｍｌ）中の１，３−ジアミノプロパン１２０μｌを加えた。反応混合物を−１０℃で１時間攪拌し、濾過、濃縮乾固して（１１）を得た。ステップＢ：デアセチルビンブラスチン−３−アミノプロピルアミド−ノルロイシンアミド（１２）Ｂｏｃ−Ｎｌｅ（２２ｍｇ，０．０９５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１ｍｌ）に、（ＮＭＰ中の）ＨＯＢＴの１Ｍ溶液３１８μｌ、次いで（ＮＭＰ中の）ＤＣＣの１Ｍ溶液２８０μｌを加えた。３０分後、３．５ｍｌのＤＭＦ中の中間体（１１）（０．０６２４ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミンを加えて反応混合物のｐＨを〜７．５に調整した。１８時間攪拌した後、反応混合物を濃縮して油状物を得、該油状物をＴＦＡ：ＣＨ₂Ｃｌ₂の１：１溶液（２０ｍｌ）で処理してＢｏｃ保護基を除去した。５分後、反応混合物を濃縮乾固した。Ｃ−１８逆相担体（Ｗａｔｅｒｓ，ＤｅｌｔａＰａｋ）上の分取ＨＰＬＣにかけて精製した。緩衝液Ａ＝０．１％ＴＦＡ−Ｈ₂Ｏ；Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ₃ＣＮ。粗生成物を１００％Ａ緩衝液（１００ｍｌ）に入れ、１００％Ａ→３０％Ａのステップ勾配を７５ｍｌ／分の流速で用いた。均一生成物画分をプールし、凍結乾燥して、（１２）を得た。ステップＣ：Ａｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｎｌｅ−ＯＨ（１３）Ａｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−ＯＨの製造について実施例９のステップＡに記載の方法で上記中間体を調製した。ステップＤ：Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ− Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｎｌｅ−ＮＨ−（ＣＨ ₂）₃ＮＨ−デアセチルビンブラスチンアミド（１４）ＤＭＦ（１ｍｌ）中のオリゴペプチド生成物（１３）（７０ｍｇ，０．０６５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４ｍｌ）中の（１２）（４１ｍｇ，０．０５ｍｍｏｌ）と合わせた。溶液を冷却（０℃）し、ジフェニルホスホリルアジド（１７μｌ，０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。５分後、追加の１μｌのＤＰＰＡを加え、トリエチルアミンでｐＨを〜７．５（ｐＨペーパー）に調整した。２時間後、ＤＭＦ（０．５ｍｌ）中の追加の（１３）（３５ｍｇ）及び１７μｌのＤＰＰＡを加えた。ＴＥＡを加えてｐＨを〜７．５に維持し、３時間後、ＤＭＦ（０．５ｍｌ）中の追加の３５ｍｇの（１３）を加えた。反応混合物を０〜５℃で攪拌した。１８時間後、反応混合物を濃縮乾固し、ＤＭＦ（９ｍｌ）に再溶解、冷却（０℃）し、３ｍｌのピペリジンを加えた。溶液を濃縮乾固し、分取ＨＰＬＣにかけて精製した。緩衝液Ａ＝０．１％ＴＦＡ−Ｈ₂Ｏ；Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ₃ＣＮ。粗生成物を３０％酢酸−Ｈ₂Ｏ（１００ｍｌ）に溶解し、Ｃ−１８逆相ＨＰＬＣラジアル圧縮カラム（Ｗａｔｅｒｓ，ＤｅｌｔａＰａｋ）上で精製した。１００％Ａ→７０％Ａのステップ勾配を７５ｍｌ／分の流速で用いた。半純生成物画分をプールし、凍結乾燥した。上記のＣ−４担体（Ｗａｔｅｒ−ｓ，ＤｅｌｔａＰａｋ）上で再精製して均質性とした。生成物画分をプールし、凍結乾燥して、純生成物（１４）を得た。実施例１２遊離ＰＳＡによるオリゴペプチド−ドキソルビシン複合体の認識の評価：実施例７〜９に記載の方法で調製した複合体を個別にＰＳＡ消化緩衝液〔１２ｍＭのトリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン（ｐＨ８．０）、２５ｍＭのＮａＣｌ、０．５ｍＭのＣａＣｌ₂〕に溶解し、該溶液を１００：１のモル比でＰＳＡに加えた。あるいは、用いるＰＳＡ消化緩衝液は、５０ｍＭのトリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン（ｐＨ７．４）、１４０ｍＭのＮａＣｌである。種々の反応時間後にトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を最終１％（容量／容量）まで加えて反応混合物をクエンチする。あるいは、１０ｍＭのＺｎＣｌ₂で反応混合物をクエンチする。クエンチした反応混合物を、水性０．１％ＴＦＡ／アセトニトリル勾配を用いる逆相Ｃ−１８カラム上のＨＰＬＣにかけて分析した。評価の結果を図５の表５及び表５ａに示す。実施例１３細胞ならし培地中のオリゴペプチド−ドキソルビシン複合体の切断の評価：細胞ならし血清フリーα−ＭＥＭ培地（フェノールレッドマイナス）を、該培地を〔Ｊ．Ｕｒｏｌｏｇｙ、１４６：９１５−９１９（１９９１）に記載のように調製した〕ＬＮＣａＰ又はＤｕＰＲＯ細胞系に加えてから３日後に回収した。該培地を、１０，０００分子量カットオフをいて２０分の１に濃縮した。ＬＮＣａＰならし培地は、Ｔ離ＰＳＡタンパク質を含んでいた。ＤｕＰＲＯ細胞ならし培地には検出可能な遊離ＰＳＡは存在しなかった。濃縮ならし培地の１００μｌを、実施例７に記載の方法で調製したオリゴペプチド−ドキソルビシン複合体３５μｇと混合し、混合物を３７℃で０時間、４時間及び２４時間インキュベートした。ＺｎＣｌ₂を（０．０１Ｍの最終濃度で）加えて反応を停止し、水性０．１％ＴＦＡ／アセトニトリル勾配を用いる逆相Ｃ −１８カラム上のＨＰＬＣにかけて分析し、消化されたペプチド−細胞毒性物質複合体の百分率を決定した。評価の結果を図６の表６に示す。実施例１４ドキソルビシンのぺプチジル誘導体のｉｎｖｉｔｒｏ細胞毒性アッセイ：実施例５に記載のＡｌａｍａｒＢｌｕｅアッセイを用い、実施例７に記載の方法で調製した切断可能なオリゴペプチド−ドキソルビシン複合体の、非修飾ドキソルビシンにより死滅化することが知られている細胞系に対する細胞毒性を評価した。具体的に言えば、９６ウエルプレート中のＬＮＣａＰ前立腺腫瘍細胞又はＤｕＰＲＯ細胞の細胞培養物を、種々の濃度の所与の複合体を含む培地で稀釈した（最終プレートウエル容量２００μｌ）。細胞を３７℃で３日間インキュベートし、アッセイウエルにＡｌａｍａｒＢｌｕｅ２０μｌを加える。細胞をさらにインキュベートし、Ａ１ａｍａｒＢｌｕｅを加えてから４時間後及び７時間後に、５７０ｎｍ及び６００ｎｍの二重波長のＥＬ−３１ＯＥＬＩＳＡ読み取り装置でアッセイプレートの読み取りを行った。次いで、テストした種々の濃度の複合体と、（複合体を含まない）対照培養物との相対生存％を計算した。さらに、該複合体の細胞毒性と、同じアッセイで評価した非修飾ドキソルビシン及び非修飾オリゴペプチドの細胞毒性とを比較した。このアッセイの結果を図７の表７に示す。実施例１５ペプチジル−細胞毒性物質複合体のｉｎｖｉｖｏ効力：ＬＮＣａＰ．ＦＧＣ又はＤｕＰＲＯ−１細胞をトリプシン処理し、増殖培地に再懸濁して、２００Ｘｇで６分間遠心する。細胞を血清フリーα−ＭＥＭに再懸濁し、計数する。次いで、所望数の細胞を含むこの溶液のうち適切な容量を円錐遠心管に移し、上記のように遠心し、適切な容量の冷α−ＭＥＭ−Ｍａｔｒｉｇｅｌ（１：１）混合物に再懸濁する。該懸濁液は動物に接種するときまで氷上で維持する。雄のヌードマウス（１０〜１２週齢）を麻酔せずに拘束し、２２Ｇの針を用いた皮下注射により左脇腹に細胞懸濁液０．５ｍｌを接種する。マウスには約５× １０⁵ＤｕＰＲＯ細胞又は１．５×１０⁷ＬＮＣａＰ．ＦＧＣ細胞を接種する。腫瘍細胞を接種した後、マウスを以下の２種のプロトコルの１つで処理する：プロトコルＡ：細胞接種後１日目に、動物に０．１〜０．５ｍｌ容量のテスト複合体、ドキソルビシン又はビヒクル対照（滅菌水）を投与する。該複合体及びドキソルビシンの投薬量は初期には最大非致死量であるが、その後で低量を滴加し得る。２４時問間隔で５日間同じ用量を投与する。１０日後、マウスから血液試料を採取し、ＰＳＡの血清レベルを定量する。類似の血清ＰＳＡレベルを５〜１０日間隔で定量する。５．５週間後、マウスを殺し、存在する腫瘍の重量を測定し、再度血清ＰＳＡを定量する。アッセイの開始時と終了時に動物の体重を測定する。プロトコルＢ：細胞を接種してから１０日後に、動物から血液試料を採取し、ＰＳＡの血清レベルを定量する。次いで、動物をそのＰＳＡ血清レベルに従ってグループ分けする。細胞接種後１４〜１５日目に、動物に、０．１〜０．５ｍｌ容量のテスト複合体、ドキソルビシン又はビヒクル対照（滅菌水）を投与する。該複合体及びドキソルビシンの投薬量は初期には最大非致死量であるが、その後で低量を滴加し得る。２４時間間隔で５日間同じ用量を投与する。５〜１０日間隔で血清ＰＳＡレベルを定量する。５．５週間後、マウスを殺し、存在する腫瘍の重量を測定し、再度血清ＰＳＡを定量する。アッセイの開始時と終了時に動物の体重を測定する。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９７年１１月１７日（１９９７．１１．１７）【補正内容】請求の範囲１．前立腺の有害症状の治療を要する哺乳動物に、オリゴペプチドに結合した該症状の治療に有効な薬剤を含む複合体又は医薬上許容し得るその塩を投与することを含む、前立腺の有害症状の治療方法であって、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパク質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記方法。２．良性前立腺過形成の治療を要する哺乳動物に、オリゴペプチドに結合した細胞毒性物質を含む複合体又は医薬上許容し得るその塩を投与することを含む、良性前立腺過形成の治療方法であって、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパク質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記方法。３．細胞毒性物質が、以下の群：（ａ）アンスラサイクリン系薬剤、（ｂ）ビンカアルカロイド薬剤群、（ｃ）マイトマイシン群、（ｄ）ブレオマイシン群、（ｅ）細胞毒性ヌクレオシド群、（ｆ）プテリジン系薬剤、（ｇ）ジイネン群、（ｈ）エストラムスチン（ｉ）シタロホスファミド（ｊ）ポドフィロトキシン群、及び（ｋ）タキサン群から選択される細胞毒性物質群の一頁又はその医薬上許容し得る塩である、請求項２に記載の治療方法。４．細胞毒性物質が、以下の細胞毒性物質：（ａ）ドキソルビシン、（ｂ）カルミノマイシン、（ｃ）ダウノルビシン、（ｄ）アミノプテリン、（ｅ）メトトレキサート、（ｆ）メトプテリン、（ｇ）ジクロロ−メトトレキサート、（ｈ）マイトマイシンＣ、（ｉ）ポルフィロマイシン、（ｊ）５−フルオロウラシル、（ｋ）６−メルカプトプリン、（ｌ）シトシンアラビノシド、（ｍ）ポドフィロトキシン、（ｎ）エトポサイド（ｏ）エトポサイドホスフェート、（ｐ）メルファラン、（ｑ）ビンブラスチン、（ｒ）ビンクリスチン、（ｓ）ロイロシジン、（ｔ）ビンデシン、（ｕ）エストラムスチン、（ｖ）シスプラチン、（ｗ）シクロホスファミド、（ｘ）ロイロシン、及び（ｙ）タキソール又はその医薬上許容し得る塩から選択される、請求項２に記載の治療方法。５．細胞毒性物質が、ドキソルビシン、ビンブラスチン及びデスアセチルビンブラスチン又はその細胞毒性誘導体から選択される、請求項２に記載の治療方法。６．細胞毒性物質が、ビンブラスチン及びデスアセチルビンブラスチン又はその細胞毒性誘導体から選択される、請求項２に記載の治療方法。７．複合体が、式Ｉ：〔式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）により特異的に認識され且つ該遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドであり；Ｘ_Lは不在であるか、又は（ａ）フェニルアラニン、（ｂ）ロイシン、（ｃ）バリン、（ｄ）イソロイシン、（ｅ）（２−ナフチル）アラニン、（ｆ）シクロヘキシルアラニン、（ｇ）ジフェニルアラニン、（ｈ）ノルバリン、（ｉ）ノルロイシン、及び（ｊ）１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸から選択されるアミノ酸であり；Ｒは、水素又は−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ¹であり；Ｒ¹は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル又はアリールである〕を有する化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項５に記載の治療方法。８．複合体が、式Ｉにおいて、オリゴペプチドが、（ここで、ｈＡｒｇはホモアルギニンであり、Ｘａａは任意の天然アミノ酸である）から選択されるアミノ酸配列を含むオリゴマーであり；Ｘ_Lは不在であるか、又は、（ａ）ロイシン、（ｂ）イソロイシン、（ｃ）ノルロイシン、及び（ｄ）バリンから選択されるアミノ酸であり；Ｒは、アセチル、ピバロイル又はベンゾイルである化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項７に記載の治療方法。９．複合体が、〔式中、Ｘは：である〕又はその医薬上許容し得る塩から選択される、請求項７に記載の治療方法。１０．複合体が、又はその医薬上許容し得る塩から選択される、請求項７に記載の治療方法。１１．複合体が、式II：〔式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）により特異的に認識され且つ該遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドであり；Ｘ_Lは、不在であるか、若しくは、（ａ）フェニルアラニン、（ｂ）ロイシン、（ｃ）バリン、（ｄ）イソロイシン、（ｅ）（２−ナフチル）アラニン、（ｆ）シクロヘキシルアラニン、（ｇ）ジフェニルアラニン、（ｈ）ノルバリン、（ｉ）ノルロイシン、及び（ｊ）１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸から選択されるアミノ酸であるか、又はＸ_Lは、−ＮＨ−（ＣＨ₂）_n−ＮＨ−であり；Ｒは、水素又は−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ¹であり；Ｒ¹は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル又はアリールであり；Ｒ¹⁹は、水素又はアセチルであり；ｎは、１、２、３、４又は５である〕を有する化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項６に記載の治療方法。１２．複合体が、式II：（式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）により特異的に認識され且つ該遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドである）を有する化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項６に記載の治療方法。１３．複合体が、及び又はその医薬上許容し得る塩から選択される、請求項１１に記載の治療方法。１４．前立腺の有害症状の治療を要する哺乳動物に、オリゴペプチドに結合した２種の薬剤を含む複合体又はその医薬上許容し得る塩を投与することを含む、前立腺の有害症状の治療方法であって、該薬剤の少なくとも１種が前記症状に対して有効であり、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパタ質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記方法。１５．良性前立腺過形成の治療を要する哺乳動物に、オリゴペプチドに結合した２種の細胞毒性物質を含む複合体又はその医薬上許容し得る塩を投与することを含む、良性前立腺過形成の治療方法であって、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパタ質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記方法。１６．複合体が、又はその医薬上許容し得る塩である、請求項１５に記載の治療方法。１７．医薬担体と、該担体中に分散された治療上有効量の複合体又はその医薬上許容し得る塩とを含む、前立腺の有害症状の治療に有用な医薬組成物であって、前記複合体はオリゴペプチドに結合した前記症状の治療に有効な薬剤を含み、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパク質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記医薬組成物。１８．医薬担体と、該担体中に分散された治療上有効量の複合体又はその医薬上許容し得る塩とを含む、良性前立腺過形成の治療に有用な医薬組成物であって、前記複合体はオリゴペプチドに結合した細胞毒性物質を含み、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパク質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記医薬組成物。１９．複合体が、式Ｉ：〔式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）により特異的に認識され且つ該遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパタ質分解的に切断され得るオリゴペプチドであり；Ｘ_Lは不在であるか、又は（ａ）フェニルアラニン、（ｂ）ロイシン、（ｃ）バリン、（ｄ）イソロイシン、（ｅ）（２−ナフチル）アラニン、（ｆ）シクロヘキシルアラニン、（ｇ）ジフェニルアラニン、（ｈ）ノルバリン、（ｉ）ノルロイシン、及び（ｊ）１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルホン酸から選択されるアミノ酸であり；Ｒは、水素又は−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ¹であり；Ｒ¹は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル又はアリールである〕を有する化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項１８に記載の組成物。２０．複合体が、〔式中、Ｘは：である〕又はその医薬上許容し得る塩から選択される、請求項１８に記載の組成物。２１．複合体が、又はその医薬上許容し得る塩から選択される、請求項１８に記載の組成物。２２．複合体が、式II：〔式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）により特異的に認識され且つ該遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドであり；Ｘ_Lは、不在であるか、若しくは、（ａ）フェニルアラニン、（ｂ）ロイシン、（ｃ）バリン、（ｄ）イソロイシン、（ｅ）（２−ナフチル）アラニン、（ｆ）シクロヘキシルアラニン、（ｇ）ジフェニルアラニン、（ｈ）ノルバリン、（ｉ）ノルロイシン、及び（ｊ）１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸から選択されるアミノ酸であるか、又はＸ_Lは、−ＮＨ−（ＣＨ₂）_n−ＮＨ−であり；Ｒは、水素又は−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ¹であり；Ｒ¹は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル又はアリールであり；Ｒ¹⁹は、水素又はアセチルであり；ｎは、１、２、３、４又は５である〕を有する化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項１８に記載の組成物。２３．複合体が、又はその医薬上許容し得る塩である、請求項２２に記載の組成物。２４．複合体が、式II：（式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）により特異的に認識され且つ該遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドである）を有する化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項１８に記載の組成物。２５．複合体が、又はその医薬上許容し得る塩である、請求項１８に記載の組成物。２６．医薬担体と、該担体中に分散された治療上有効量の複合体又はその医薬上許容し得る塩とを含む、前立腺の有害症状の治療に有用な医薬組成物であって、前記複合体はオリゴペプチドに結合した２種の薬剤を含み、該薬剤の少なくとも１種が前記症状に対して有効であり、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパク質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記組成物。２７．医薬担体と、該担体中に分散された治療上有効量の複合体又はその医薬上許容し得る塩を含む、良性前立腺過形成の治療に有用な医薬組成物であって、前記複合体はオリゴペプチドに結合した２種の細胞毒性物質を含み、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパク質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が共有結合によるか又は化学的リンカーによることを特徴とする前記組成物。２８．複合体が、又はその医薬上許容し得る塩である、請求項２７に記載の組成物。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/475 Ａ６１Ｋ 31/475 31/513 31/505 ６０２ 31/517 ６０５ 31/675 31/675 31/704 31/70 ６１１ 31/7048 ６１３ 45/00 45/00 47/42 47/42 ＺＣ０７Ｋ 7/06 Ｃ０７Ｋ 7/06 7/08 7/08 // Ｃ０７Ｈ 15/252 Ｃ０７Ｈ 15/252 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ジヨーンズ，レイモンド・イーアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカーン・アベニユー・126 (72)発明者オリフ，アレン・アイアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカーン・アベニユー・126 (72)発明者スコルニツク，エドワード・エムアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカーン・アベニユー・126 (72)発明者ガルスキイ，ビクター・エムアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカーン・アベニユー・126

Claims

【特許請求の範囲】１．前立腺の有害症状の治療を要する哺乳動物に、オリゴペプチドに結合した前記症状の治療に有効な薬剤を含む複合体又は医薬上許容し得るその塩を投与することを含む、前立腺の有害症状の治療方法であって、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパク質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記方法。２．良性前立腺過形成の治療を要する哺乳動物に、オリゴペプチドに結合した細胞毒性物質を含む複合体又は医薬上許容し得るその塩を投与することを含む、良性前立腺過形成の治療方法であって、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパク質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記方法。３．細胞毒性物質が、以下の群：（ａ）アンスラサイクリン系薬剤、（ｂ）ビンカアルカロイド薬剤群、（ｃ）マイトマイシン群、（ｄ）ブレオマイシン群、（ｅ）細胞毒性ヌクレオシド群、（ｆ）プテリジン系薬剤、（ｇ）ジイネン群、（ｈ）エストラムスチン（ｉ）シクロホスファミド（ｊ）ポドフィロトキシン群、及び（ｋ）タキサン群から選択される細胞毒性物質群の一員又はその医薬上許容し得る塩である、請求項２に記載の治療方法。４．細胞毒性物質が、以下の細胞毒性物質：（ａ）ドキソルビシン、（ｂ）カルミノマイシン、（ｃ）ダウノルビシン、（ｄ）アミノプテリン、（ｅ）メトトレキサート、（ｆ）メトプテリン、（ｇ）ジクロロ−メトトレキサート、（ｈ）マイトマイシンＣ、（ｉ）ポルフィロマイシン、（ｊ）５−フルオロウラシル、（ｋ）６−メルカプトプリン、（ｌ）シトシンアラビノシド、（ｍ）ポドフィロトキシン、（ｎ）エトポサイド（ｏ）エトポサイドホスフェート、（ｐ）メルファラン、（ｑ）ビンブラスチン、（ｒ）ビンクリスチン、（ｓ）ロイロシジン、（ｔ）ビンデシン、（ｕ）エストラムスチン、（ｖ）シスプラチン、（ｗ）シクロホスファミド、（ｘ）ロイロシン、及び（ｙ）タキソール又はその医薬上許容し得る塩から選択される、請求項２に記載の治療方法。５．細胞毒性物質が、ドキソルビシン、ビンブラスチン及びデスアセチルビンブラスチン又はその細胞毒性誘導体から選択される、請求項２に記載の治療方法。６．細胞毒性物質が、ビンブラスチン及びデスアセチルビンブラスチン又はその細胞毒性誘導体から選択される、請求項２に記載の治療方法。７．複合体が、式Ｉ：〔式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）により特異的に認識され且つ該遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドであり；Ｘ_Lは不在か、又は（ａ）フェニルアラニン、（ｂ）ロイシン、（ｃ）バリン、（ｄ）イソロイシン、（ｅ）（２−ナフチル）アラニン、（ｆ）シクロヘキシルアラニン、（ｇ）ジフェニルアラニン、（ｈ）ノルバリン、（ｉ）ノルロイシン、及び（ｊ）１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸から選択されるアミノ酸であり；Ｒは、水素又は−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ¹であり；Ｒ¹は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル又はアリールである〕を有する化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項５に記載の治療方法。８．複合体が、式Ｉにおいて、オリゴペプチドが、（ここで、ｈＡｒｇはホモアルギニンであり、Ｘａａは任意の天然アミノ酸である）から選択されるアミノ酸配列を含むオリゴマーであり；Ｘ_Lは不在であるか、又は、（ａ）ロイシン、（ｂ）イソロイシン、（ｃ）ノルロイシン、及び（ｄ）バリンから選択されるアミノ酸であり；Ｒは、アセチル、ピバロイル又はベンゾイルである化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項７に記載の治療方法。９．複合体が、〔式中、Ｘは：である〕又はその医薬上許容し得る塩から選択される、請求項７に記載の治療方法。１０．複合体が、又はその医薬上許容し得る塩から選択される、請求項７に記載の治療方法。１１．複合体が、式II：〔式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）によって特異的に認識され且つ該遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパタ質分解的に切断され得るオリゴペプチドであり；Ｘ_Lは、不在であるか、若しくは、（ａ）フェニルアラニン、（ｂ）ロイシン、（ｃ）バリン、（ｄ）イソロイシン、（ｅ）（２−ナフチル）アラニン、（ｆ）シクロヘキシルアラニン、（ｇ）ジフェニルアラニン、（ｈ）ノルバリン、（ｉ）ノルロイシン、及び（ｊ）１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３ −カルボン酸から選択されるアミノ酸であるか、又はＸ_Lは、−ＮＨ−（ＣＨ₂）_n−ＮＨ−であり；Ｒは、水素又は−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ¹であり；Ｒ¹は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル又はアリールであり；Ｒ¹⁹は、水素又はアセチルであり；ｎは、１、２、３、４又は５である〕を有する化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項６に記載の治療方法。１２．複合体が、式II：（式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）によって特異的に認識され且つ該遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドである）を有する化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項１１に記載の治療方法。１３．複合体が、及び又はその医薬上許容し得る塩から選択される、請求項１１に記載の治療方法。１４．前立腺の有害症状の治療を要する哺乳動物に、オリゴペプチドに結合した２種の薬剤を含む複合体又はその医薬上許容し得る塩を投与することを含む、前立腺の有害症状の治療方法であって、該薬剤の少なくとも１種が前記症状に対して有効であり、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパタ質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記方法。１５．良性前立腺過形成の治療を要する哺乳動物に、オリゴペプチドに結合した２種の細胞毒性物質を含む複合体又はその医薬上許容し得る塩を投与することを含む、良性前立腺過形成の治療方法であって、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパク質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記方法。１６．複合体が、又はその医薬上許容し得る塩である、請求項１５に記載の治療方法。１７．医薬担体と、該担体中に分散された治療上有効量の複合体又はその医薬上許容し得る塩とを含む、前立腺の有害症状の治療に有用な医薬組成物であって、前記複合体はオリゴペプチドに結合した前記症状の治療に有効な薬剤を含み、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパク質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記医薬組成物。１８．医薬担体と、該担体中に分散された治療上有効量の複合体又はその医薬上許容し得る塩とを含む、良性前立腺過形成の治療に有用な医薬組成物であって、前記複合体はオリゴペプチドに結合した細胞毒性物質を含み、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパタ質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記医薬組成物。１９．複合体が、式Ｉ：〔式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）により特異的に認識され且つ遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドであり；Ｘ_Lは不在か、又は（ａ）フェニルアラニン、（ｂ）ロイシン、（ｃ）バリン、（ｄ）イソロイシン、（ｅ）（２−ナフチル）アラニン、（ｆ）シクロヘキシルアラニン、（ｇ）ジフェニルアラニン、（ｈ）ノルバリン、（ｉ）ノルロイシン、及び（ｊ）１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸から選択されるアミノ酸であり；Ｒは、水素又は−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ¹あり；Ｒ¹は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル又はアリールである〕を有する化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項１８に記載の組成物。２０．複合体が、〔式中、Ｘは：である〕又はその医薬上許容し得る塩から選択される、請求項１８に記載の組成物。２１．複合体が、又はその医薬上許容し得る塩から選択される、請求項１８に記載の組成物。２２．複合体が、式II：〔式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）によって特異的に認識され且つ遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドであり；Ｘ_Lは、不在であるか、若しくは、（ａ）フェニルアラニン、（ｂ）ロイシン、（ｃ）バリン、（ｄ）イソロイシン、（ｅ）（２−ナフチル）アラニン、（ｆ）シクロヘキシルアラニン、（ｇ）ジフェニルアラニン、（ｈ）ノルバリン、（ｉ）ノルロイシン、及び（ｊ）１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３ −カルボン酸から選択されるアミノ酸であるか、又はＸ_Lは、−ＮＨ−（ＣＨ₂）_n−ＮＨ−であり；Ｒは、水素又は−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ¹であり；Ｒ¹は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル又はアリールであり；Ｒ¹⁹は、水素又はアセチルであり；ｎは、１、２、３、４又は５である〕を有する化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項１８に記載の組成物。２３．複合体が、又はその医薬上許容し得る塩である、請求項２２に記載の組成物。２４．複合体が、式II：（式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異抗原（ＰＳＡ）によって特異的に認識され且つ遊離前立腺特異抗原の酵素活性によりタンパク質分解的に切断され得るオリゴペプチドである）を有する化合物又はその医薬上許容し得る塩である、請求項１８に記載の組成物。２５．複合体が、又はその医薬上許容し得る塩である、請求項２４に記載の組成物。２６．前立腺の有害症状の治療を要する哺乳動物に、オリゴペプチドに結合した２種の薬剤を含む複合体又はその医薬上許容し得る塩を投与することを含む、前立腺の有害症状の治療に有用な医薬組成物であって、該薬剤の少なくとも１種が前記症状に対して有効であり、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパク質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結合によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記組成物。２７．医薬担体と、該担体中に分散された治療上有効量の複合体又はその医薬上許容し得る塩を含む、良性前立腺過形成の治療に有用な医薬組成物であって、前記複合体はオリゴペプチドに結合した２種の細胞毒性物質を含み、該オリゴペプチドが、遊離前立腺特異抗原により認識され且つ選択的にタンパク質分解的に切断されるアミノ酸配列を含み、上記結合の様式が直接共有結台によるか又はリンカー単位を介することを特徴とする前記組成物。２８．複合体が、又はその医薬上許容し得る塩である、請求項２７に記載の組成物。