JP2000502410A - キシログルカンエンドトランスグリコシラーゼ（ｘｅｔ）の利用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明はセルロース材料、例えば布帛又は紙及びパルプ製品に改善された強度及び／又は形状保持力及び／又は防しわ特性を供与するための方法であって、水性媒体の中でこのセルロース材料をキシログルカン エンドトランスグリコシラーゼ(XET)と接触させることを含んで成る方法に関する。

Description

【発明の詳細な説明】 キシログルカン エンドトランスグリコシラーゼ(XET)の利用 発明の分野 本発明は改善された強度及び／又は形状保持力及び／又は防しわ特性を有する セルロース材料の提供のための方法に関連する。 背景技術 今日、紙、カードボード等は事実上全てグレード水性パルプスラリーから製造 されている。典型的には、パルプを水の中に懸濁し、様々な添加剤と混合し、次 いで紙、カードボード等を成形、加圧及び乾燥する設備に通す。機械式製造パル プ、半化学式製造パルプ、非漂白化学パルプ又はリサイクル繊維から作ったパル プ（即ち、リサイクル紙、ぼろきれ等から調製したパルプ）を使用しようと関係 なく、往々にして適度な強度特性を有する最終製品を得るためにパルプに様々な 強化剤を添加する必要がある。包装等において利用するための紙及びボードの場 合、ドライ及びウェット条件下での引張強さ及び引裂強さが最も重要である。更 に、特に所定のグレードのカードボード（例えば包装、輸送等のためのダンボー ル箱の製造のためのいわゆる非漂白ボード）の場合、往々にして材料の圧縮強さ も重要な因子である。 今日利用されている強化剤のうち、より環境的に許容される材料により代替さ れることの所望される数多くの環境的に所望されない物質がある。その例として エピクロロヒドリン、尿素−ホルムアルデヒド及びメラミン−ホルムアルデヒド が挙げられうる。 当該産業では綿繊維の強度及び／又は形状保持力及び／又は防し わ特性を高めるための環境に優しい方法も提案されている。今日様々な架橋技術 が利用されている： ^* DMU技術。これはジメチル尿素及び触媒を利用する。この技術はホルムアル デヒドが放出されるという欠点を有する； ^* DMDHEU技術。これはジメチロールジヒドロキシエチレン尿素及び触媒を使用 する。この技術はホルムアルデヒドを放出すること及びセルロース材料が剛性と なるという欠点を有する； ^* BTCA技術。これはブタンテトラカルボン酸及び触媒を使用する。この技術は 生成エステルが弱い耐久性を有し、また工程が高価であるという欠点を有する。 従って、様々なセルロース材料の強度及び／又は形状保持力及び／又は防しわ 特性を改善するためのより環境に優しい工程を見い出すことのニ−ズが当該産業 にある。この工程は同時に高い耐久性を有する製品を供することが好ましいであ ろう。 発明の概要 驚くべきことに、セルロース材料の強度特性を改善するための酵素的方法を作 り上げることが可能であることが見い出された。かくして、本発明は改善された 強度及び／又は形状保持力及び／又は防しわ特性を有するセルロース材料を提供 するための方法であって、い水性媒体の中で、セルロース材料をキシログルカン エンドトランスグリコシラーゼ(XET)と接触させることを含んで成る方法に関 する。 発明の詳細な説明セルロース材料 本発明に従うと、セルロース材料は全体的に又は部分的にセルロ ース製である任意の材料である。 かかる材料の例は紙及びパルプ製品並びにセルロース布帛である。 本発明の背景において、セルロース布帛は当業界公知の任意のセルロース含有 布帛、例えば綿、ビスコース、レーヨン、ラミー、リンネル、テンセルもしくは それらの混合物、又は任意のこれらの繊維の混合物、又は任意のこれらの繊維と 合成繊維もしくはウールとの混合物、又は綿とスパンデックス（伸長デニム）、 テンセルとウール、ビスコースとポリエステル、綿とポリエステル、及び綿とウ ールとの混合物である。 本発明の背景において、紙又はパルプ製品は任意のリグニン含有材料、特に任 意のリグニン改質製品、例えば粒状ボード、ファイバーボード又は紙であってよ い。キシログルカン エンドトランスグリコシラーゼ(XET) キシログルカン エンドトランスグリコシラーゼ(XET)は植物由来の公知の酵 素である。Stephen C．FryらはBiochem．J（1992）282 ， p.821−828 におい て、XETが微小フィブリル間キシログルカン鎖の切断及び再連結を担い、それ故X ETが植物細胞膨張のために必要な壁軟化（wall-loosening）を引き起こすものと 提唱している。 XETは植物の形態を調節するうえで利用されることが提唱されている。EP 562 ,836 p2,ｌ27−28参照のこと。 XETは全ての植物、特に全ての土壌植物に存在しているものと提唱されている 。XETは双子葉植物、単子葉植物、特にイネ科（graminaceous）の単子葉植物及 びユリ科（liliaceous）の単子葉植物、そして更にはこけ（moss）及びぜにごけ （livewort）から抽出されている。参考のため、Biochem ．J（1992）282，p.823 を参照され たい。 XETは実施例１（カリフラワー）及び実施例５（グリーントマト）に記載の通 りにして植物から得るか、又はBiochem ．J（1992）282 ， p.821−828 に記載の 通りにして得られうる。 他方、 XETは、例えば注目の植物由来の適当な遺伝情報を含む形質転換宿主生 物、例えばアスペルギルス(Aspergillus)、特にＡ．オリザ(A．oryzae)又はＡ． ニガー（A．niger）の好気培養により生産されうる。かかる形質転換体は当業界 公知の方法により調製及び培養でき、例えばXET遺伝子は開示内容を本明細書に 組入れるEP562,836号に開示の通りに得られ、そしてXET DNA構築体を含んで成る 宿主細胞は下記の通りにして得られうる： 宿主細胞は好ましくは真核系細胞、特に真菌細胞、例えば酵母もしくは糸状菌 細胞又は細菌細胞である。特にこの細胞はトリコデルマ(Trichoderma)の種、好 ましくはトリコデルマ・ハージアヌム（T．harzianum）もしくはトリコデルマ・ リーシイ(T．reesei)、又はアスペルギルスの種、最も好ましくはアスペルギル ス・オリザもしくはアスペルギルス・ニガーである。真菌細胞はプロトプラスト の形成及びプロトプラストの形質転換、それに次ぐ公知の手段での細胞壁の再生 を包括する工程により形質転換されうる。宿主微生物としてのアスペルギルスの 利用はEP 238,023（Novo Nordisk A/S）に記載されている。この内容は引用する ことで本明細書に組入れる。宿主細胞は酵母細胞、例えばサッカロマイセス(Sac charomyces)の株、特にサッカロマイセス・セレビジエ(S．cerevisiae)、サッカ ロマイセス・クルイベリ(S．Kluyveri)又はサッカロマイセス・ウバルム(S．uva rum)、シゾサッカロマイセス(Schizosaccharomyces)種の株、例えばシゾサッカ ロマイセス・ポンベ（S．pombe）、ハンセヌラ(Hansenula)種、ピチア（Pichia ）種、ヤロウィア（Ya rrowia）種の株、例えばヤロウィア・リポリチカ(Y．lipolytica)又はクルイベ ロマイセス(Kluyveromyces)の種、例えばクルイベロマイセス・ラクチス(K．lac tis)でもあってよい。 適当な宿主細菌の例はグラム陽性細菌、例えばバチルス・スブチリス(Bacillu s subtilis)、バチルス・リシェニホルミス（B．licheniformis）、バチルス・ レンタス(B．lentus)、バチルス・ブレビス(B．brevis)、バチルス・ステアロサ ーモフィルス(B．stearothermophilus)、バチルス・アルカロフィルス(B．alkal ophilus)、バチルス・アミロリケファシエンス（B．amyloliquefaciens）、バチ ルス・コアギュランス（B．coagulans）、バチルス・サーキュランス（B．circu lans）、バチルス・ロータス(B．lautus)、バチルス・メガテリウム(B．megater ium)、バチルス・スリンジエンシス(B．thuringiensis)、又はストレプトマイセ ス・リビダンス(Streptomyces lividans)もしくはストレプトマイセス・ミュリ ナス（S．murinus）、又はグラム陰性菌、例えばＥ．コリ(E．coli)である。細 菌の形質転換は例えばプロトプラスト形質転換により、又はコンピテント細胞を 用いることにより、周知の方法で行ってよい゜ 本発明によると、双子葉植物又は単子葉植物、特にカリフラワー、ダイズ、ト マト、ポテト、レープ、ヒマワリ、綿及びタバコより成る群から選ばれる双子葉 植物、又はコムギ、コメ、コーン及びサトウキビより成る群から選ばれる単子葉 植物より得られるXET酵素が好ましい。 本発明では我々はキシログルカンが綿繊維の中に存在するという事実（Carboh ydrate Research 181 ，1988， p.273-277 を参照のこと）及びキシログルカン がセルロースに対して強力な水素結合を構築できるという事実（The Plant Jour nal ３，1993，p.1− 30を参照のこと）を利用しており、これによりXET酵素をセルロース材料に添加 することにより、我々はセルロース繊維間でのキシログルカン媒介相互連結の程 度を高めることができた。かくして、我々は前述の化学的工程に代わる様々なセ ルロース材料の強度及び／又は形状保持力及び／又は防しわ特性を改善するため の環境に優しい酵素的方法を構築できた。 XET 活性の決定 XET活性は FryらBiochem．J（1992）282 ， p.821−828 に従って測定する。 20μｌの酵素溶液を50mMの酢酸ナトリウムバッファー、pH６中の20μｌの0.25 ％のキシログルカン（Megazyme，オーストラリア）に加える。 ８μｌのトリチウム化キシログルカンオリゴマー（〔³H〕XG9；C．Fryより入 手）を加え、そして反応を30℃で１ｈ進行させる。酵素溶液をバッファーで置き 換えたブランクを作る。反応を50μｌの40％の酢酸の添加により停止させる。反 応混合物を濾紙に載せ（Whatman No 3MM）、そして60℃で30分乾燥させる。この ろ紙を脱イオン流水で１ｈ洗い、そして60℃で30分乾燥させる。このろ紙をシン チレーションバイアルに移し、５mlのシンチラント（OptiPhase HiSafe，Wallao ）を加え、そしてシンチレーション計測により ³Ｈについてアッセイする。産業上の利用 性 本発明に従うと、セルロース材料は XET酵素による処理を経て改善された強度 特性及び／又は改善された形状保持力及び／又は改善され防しわ特性を獲得し得 る。XET酵素はセルロース繊維に水素結合したキシログルカン分子を転移及び結 合させる能力を有し、これにより上記の特徴は達成され得る。 強度特性は例えば実施例３及び４に示す通り、当業界の任意の方法により測定 し得る。 形状保持特性は当業界公知の任意の方法、例えばATCC試験方法８8C−1992に開 示の「反復家庭洗濯後の布帛の折り目の保持力」により測定し得、この試験は反 復家庭洗濯後の布帛のプレスド・イン折り目保持力の評価のためにデザインされ ている。 防しわ特性は当業界公知の方法、例えばATCC試験方法 128−1994「布帛のしわ 回復：外観法」により測定し得、この方法は誘導式しわ付け後の繊維布帛の外観 を決定するための試験である。 本特許出願の実施例２において我々は綿布帛がキシログルカンを含むことを実 証し、そして実施例３において我々は綿布帛の相対強さを強めることが可能であ ることを示している。 本特許出願の実施例６において、我々は XET処理がセルロース材料に耐久性プ レスを供与するのに利用できうることを示している。 残念ながら、防しわ特性を示す実施例はないが、耐久性プレスと防しわ特性は多 かれ少なかれ同じである。 XET酵素の効果を高めるため、ある場合においてはキシログルカンをセルロー ス材料に添加することが好都合であり得、これにより酵素はより多くのセルロー ス材料を結合させ合うことができうる。実施例４は XET酵素を添加する前にキシ ログルカンを綿布帛に添加したときの結果を示す。 自然界においては XET酵素は植物の中で働き、従って酵素は水性環境の中で働 くことができる。 本発明の方法は水の中で実施してよく、又は水の中で所定の成分、例えばバッ ファー及び／又は湿潤剤及び／又は安定化剤及び／又はポリマー及び／又は水活 性を弱める有機成分、例えばDMSOの存在下で実施してよい。 バッファーは適切にはリン酸塩、硼酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、アジピン酸塩 、トリエタノールアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、炭酸塩 （特にアルカリ金属又はアルカリ土類金属、特に炭酸ナトリウムもしくはカリウ ム、又はアンモニウム及びHCl塩）、ジアミン、特にジアミノエタン、イミダゾ ール、トリス又はアミノ酸バッファーでありうる。 湿潤剤はセルロース材料の湿潤性を高めるのを担う。湿潤剤は好ましくは非イ オン性界面活性型である。 安定化剤は XET酵素を安定化する試薬であってよい。 本発明に従うと、水性媒体中の XETの濃度は１ｇのセルロース材料当り0.01〜 1000μｇの酵素タンパク質、好ましくは１ｇのセルロース材料当り 0.1〜100 μ ｇの酵素タンパク質であってよい。 反応媒体（セルロース材料と XET酵素とを含む）を少なくとも数分インキュベ ーションするのが一般に適当であろう。１分〜20時間のインキュベーション時間 が一般に適当であり、特に30分〜10時間のインキュベーション時間が往々にして 好ましいであろう。 本発明の方法における反応媒体の温度は注目の XET酵素により、適切には10〜 50℃の範囲でありうる。洗 剤 セルロース布帛の強度及び／又は形状保持力及び／又は防しわ特性を改善する ため、 XET酵素は洗浄組成物中の成分であってよく、又はすすぎ助剤中の成分も しくは柔軟剤中の成分であってよい。 洗剤は任意の好適な形態、例えば粉末、顆粒又は液体であってよい。 洗剤は通常界面活性剤を含み、それはアニオン、非イオン、カチオン、両性又 はこれらのタイプの混合物であってよい。洗剤は通常５〜30％のアニオン性界面 活性剤、例えば線形アルキルベンゼンス ルホネート(LAS)、アルファーオレフィンスルホネート(AOS)、アルコールエトキ シスルフェート(AES)又は石けんを含むであろう。これは更に３〜20％の非イオ ン性界面活性剤、例えばノニルフェノールエトキシレート又はアルコールエトキ シレートを含みうる。 洗剤は１〜40％の洗剤ビルダー、例えばゼオライト、リン酸塩、ホスホネート 、クエン酸塩、NTA，EDTAもしくはDTPAを含んでよく、又はそれはビルダー抜き （即ち、本質的に洗剤ビルダーを含まない）であってよい。これは更にその他の 慣用の洗剤成分、例えば布帛コンディショナー、発泡促進剤、殺菌剤、蛍光増白 剤及び香料を含んでよい。 液体洗剤は水性であってよく、典型的には20〜70％の水及び０〜20％の有機溶 媒を含む。 pHは通常中性又はアルカリ性、例えば７〜10であろう（水性洗剤溶液中で測定 ）。 洗浄組成物は通常洗浄性能及び／又は布帛ケア利点を高めるために XET酵素以 外の酵素を含んで成るであろう。かかる酵素にはプロテアーゼ、リパーゼ、クチ ナーゼ、アミラーゼ、セルラーゼ、キシログルカナーゼ、ペルオキシダーゼ及び オキシダーゼ（例えばラッカーゼ）が含まれる。 本発明を下記の限定でない実施例により更に説明する。 実施例１カリフラワーからの XETの抽出 250ｇのカリフラワーを 750mlの50mMの MES、400mMのNaCl、pH6.2バッファ ーの中でホモジナイズする。18.75ｇのPVPP（ポリビニルピロリドン）を加え、 そして撹拌を10分続ける。スラリーを濾過し、そして10,000×ｇで30分遠心する 。80％の(NH₄)₂SO₄（516ｇ／ｌ）を上清液に加え、そしてこの混合物を(NH₄)₂SO₄ が溶解する まで撹拌する。撹拌を更に20分続ける。18000×ｇで30分遠心後、沈渣を25mMのM ES pH 5.8の中に懸濁し、そして飽和(NH₄)₂SO₄を１：１で添加する。20分後、懸 濁物を18000×ｇで30分遠心し、そして沈渣を50mlの25mMのMES pH 5.8の中に溶 かし、そして５ｌの25mMのMES pH 5.8に対して一夜透析する。バッファーを交換 し、そして透析を１ｈ続ける。透析サンプルを２ml／min において、25mMのMES pH 5.8で較正した５mlのHiTrp SP陽イオン交換カラム(Pharmacia)の上に２ml／m in で適用し、そしてそのカラムを２カラム容量の同バッファーで洗う。結合タ ンパク質を２容量の25mMの MES、 500mMのNaCl pH 5.8で溶出させる。XET活性を 含む画分をプールし、そして25mMの MES、35％の(NH₄)₂SO₄、pH 5.8で較正した ４mlのオクチルセファロース(Pharmacia)カラムに 0.5ml／min で載せる。この カラムを２容量の同バッファー及び２容量の25mMの MES、２％の(NH₄)₂SO₄、pH 5.8で洗う。結合タンパク質を３容量の25mMの MES、40％のエチレングリコールp H 5.8で溶出させる。XET活性を含む画分を10mlの総容量でプールし、上記の方法 により測定して約１μｇ／mlの XET濃度が得られる。 プールした画分はセルラーゼ活性を有さず（Megazyme由来のAZCL−HE−セルロ ースで測定）、キシログルカナーゼ活性を有さず（Megazyme由来のAZCL−キシロ グルカンで測定）、そしてセロビオヒドロラーゼ活性を有さない（酸膨潤Avicel からの還元糖の形成として測定）。 実施例２綿布帛に対する〔³HXG9 〕の XET媒介組込み 0.05ｇの綿布帛を600μｌの50mMの酢酸ナトリウムpH 6.0、16μｌの〔³HXG9 〕及び実施例１記載の通りにして得た40μｌのカリフラワー XET溶液に加える。 インキュベーションを30℃で一夜行う。綿布帛を流水で１時間洗い、そして65 ℃で30分乾燥させる。布帛片をシンチレーションバイアルに移し、そして前述の 通りに³Ｈについてアッセイする。２本のブランクを調製し、一方は XET溶液を バッファーに置き換えたもの、そして他方は XET溶液を20分沸騰させることによ り失活させたものとする。１分当りのカウント数(CPM)を表１に示す。 表１：綿布帛に対するキシログルカンオリゴマーの組込み 表１の結果は綿布帛がキシログルカンを含み、それに対してその他のキシログ ルカン分子が XETの作用により付加され得ることを示す。 実施例３布帛の強度の測定 下記の実施例はセルロース布帛に改善された強度特性を供与するキシログルカ ン エンドトランスグリコシラーゼ(XET)の能力を例示する。試験はカリフラワ ー由来の XETにより実施例１記載の通りに行った。 綿 100％の布帛の見本(1.5cm×4.0cm ４片)を約50ngの XETと３時間40mlの50m MのトリスバッファーpH 5.8の中で25℃でインキュベーションした。比較のため 、ブランク試験を XETの添加抜きで行った。 インキュベーション後、見本を脱イオン水で静かにすすぎ、そして部分的によ じれていない糸端の測定を避けるために1.0×3.0cm のサイズへと切った。 すすぎの後、見本を脱イオン水の中に15分保ち、そして湿潤引張強さ測定にか けた。 見本の引張強さは INSTRONモデル5564により 2.5cmのクランプ間距離で測定し た（縦方向）。 結果を下記の表２に示す。 実施例４セルロース布帛とキシログルカンとのインキュベーション 下記の実施例はセルロース布帛とキシログルカンとのインキュベーション、そ れに続くキシログルカン エンドトランスグリコシラーゼ(XET)による処理がセ ルロース布帛への改善された強度特性の供与の代替ルートを担いうることを例示 する。 試験は実施例１記載の通りにカリフラワー由来の XETで行った。 綿 100％の織布見本(1.5cm×4.0cm ８片)をタマリンド種子より得られる0.50 ｇ／ｌのキシログルカン（キシログルカン(Amyloid)、Lot TXG90901； Megazyme オーストラリアより入手）を含む100mlの脱イオン水の中に25℃で15分浸漬した 。この見本をキシログルカン溶液から取り出した。濡れたまま、４枚の見本を約 50ngのXETと40mlの50mMのトリスバッファーpH 5.8の中で25℃で３時間インキュ ベーションし、残り４枚の見本は XET抜きで4Omlのトリスバッファ−pH 5.8の中 でインキュベーションした（ブランク）。 インキュベーションの後、これらの見本を脱イオン水の中で静かにすすぎ、そ して部分的によじれていない糸端の測定を回避するた めに1.0cm×3.0cmのサイズに切った。すすいだ後、これらの見本を脱イオン水の 中に15分保ち、次いで湿潤引張強さを測定した。これらの見本の湿潤引張強さは INSTRONモデル5564により 2.5cmのクランプ間距離で測定した（縦方向）。 結果を下記の表３に示す。 実施例５グリーントマトからの XETの抽出 10kgのグリーントマトを半分に切り、そして仁を取り除き、直ちに液体窒素の 中で凍結した。得られる7.2kgの凍結トマトを１％のポリビニルポリピロリドン を含む10.8kgの 0.1Ｍのリン酸ナトリウムバッファーpH 7.2の中に懸濁した。こ の懸濁物をミルの中で冷却しながら０℃でホモジナイズした。ペーストを０℃で １ｈ撹拌し、次いで濾過し、13.7kgの濾液が得られた。温度を３℃以下に保った 。8.3kgの硫酸アンモニウムを加え、そしてその溶液を０℃で45分撹拌した。沈 殿材料を遠心分離により回収した。沈殿物を２ｌの 0.2Ｍの酢酸ナトリウムpH 5 .7の中に溶かし、 7.4ｌの総量とした。次いで 1.2ｌの飽和硫酸アンモニウム溶 液を添加した。３℃で15分撹拌後、沈殿物質を遠心分離により回収した。その沈 殿物を500mlの0.2Ｍの酢酸ナトリウムバッファーpH 5.7の中に溶かし、そして同 バッファーに対して３℃で一夜透析した。透析チューブは Sigma由来の DO655と し、 12000Daのカットオフ値を有する。透析チューブの中身を遠心分離し、それ は 600mlの XET溶液を供した。 XET活性は XETアッセイにより確認し、そしてセルラーゼ及びキ シログルカナーゼ活性の不存在は Megazyme オーストラリア由来のAZCL−HE−セ ルロース及びAZCL−キシログルカンに対してpH 6.0で試験することにより確認し た。 トマトの XET溶液を、綿布帛に対する耐久性プレス仕上げ効果の試験（実施例 ６）及び紙の強化の試験のために用いた（実施例７）。 実施例６ XET による耐久性プレス ４枚の白色織布(６cm×140cm)をTermamyl 300 L（Novo Nordisk製）の0.05％ の溶液で60℃で10分かけて脱サイジングにかけた。この布帛を水の中で10分すす いだ。この布帛を蒸留水の入った４枚のトレーに移し、そしてその２枚に更に0. 1％のキシログルカン（タマリンドゴム、Lot TXG90901； Megazyme オーストラ リア由来）を添加した。１時間浸漬後、見本を溶液から取り出し、そして水の中 で10分すすいだ。 各見本を６回折りたたみ、そして 0.2Ｍの酢酸ナトリウムバッファ−pH 5.5の 入ったトレーに入れた。２枚のトレーの中に我々はグリーントマト由来の XET含 有溶液10ml（実施例５参照）を加えた。容量を同バッファーで 150mlの総量に調 整した。重いおもし(2.5kg)を折りたたんだ見本それぞれの上に、この折りたた まれた布帛に対して均一な圧力がかかるように載せた。暗室で室温（約25℃）に おいて24時間インキュベーション後、布帛を洗濯機の中で40℃の短サイクルプロ グラムで水によりすすいだ。見本を翌日まで平らにして乾かした。布帛を折り目 について評価した。 XET処理は耐久性プレスを供与するのに用いることができる のが非常に明確であり、なぜなら XET処理した見本のみがプレス折りを保持して いたからである。 XET キシログルカン 目視観察 な し な し 折り目なし あ り な し 折ったところで明確な折り目 な し あ り 折ったところで多少の折り目らしきものあ り あ り 折ったところで明確な折り目 結 論 ： XET処理した布帛は簡単に目視できうる折り目を有した。キシログルカ ンの添加は折り目のために必要でなく、しかしキシログルカン自体の添加は折り 目を供する傾向にあった。 実施例７紙の強化のための XETの利用 パイン TMPパルプのハンドシート(130ｇ／ｍ²)を PFIシートモルドの中に作っ た。これらのシートをシートプレスの中で400kPaの圧力において５分間プレスし た。プレス後、湿潤シートをネットの上に載せ、そして様々な溶液の中に浸した 。全ケースにおいて、シートを30分浸漬し、そして温度は25℃とした。 様々な溶液は下記の通りである。コントロール ：水の中に浸漬キシログルカン エンドトランスグリコシラーゼ ： XET溶液に浸漬 （実施例５由来の酵素ストック溶液の6.67％の溶液。各シートに約1.8ｇの酵素 溶液を吸収させた。これはドライ繊維１ｇ当り0.45ｇの酵素溶液に相当する）。 浸漬後、シートをシートプレスの中で15分400kPaの圧力でプレスした。シート をプレスした後、室温で一夜乾かした。 シートについての厚み及び引張指数をSCAN標準SCAN−P7及びSCAN−P16 に従っ て測定した。 この実験より XETの添加がシートの引張強さを高めることがわか る。 処 理 引張強さ(kNm／kg) コントロール 4.12−4.57 XET 8.95−8.40

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） //(Ｃ１２Ｎ 9/10 Ｃ１２Ｒ 1:92） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，Ｓ Ｚ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ， ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，Ｇ Ｅ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ， ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，Ｐ Ｌ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ， ＶＮ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．改善された強度及び／又は形状保持力及び／又は防しわ特性を有するセル ロース材料を提供するための方法であって、水性媒体の中で、セルロース材料を キシログルカン エンドトランスグリコシラーゼ(XET)と接触させることを含ん で成る方法。 ２．前記セルロース材料がセルロース布帛又は紙及びパルプ製品である、請求 項１記載の方法。 ３．前記 XET酵素が植物より得られる、請求項１記載の方法。 ４．前記植物が双子葉植物及び単子葉植物より成る群から選ばれる、請求項３ 記載の方法。 ５．前記双子葉植物がカリフラワー、ダイズ、トマト、ポテト、レープ、ヒマ ワリ、綿及びタバコより成る群から選ばれる、請求項４記載の方法。 ６．前記単子葉植物がコムギ、コメ、コーン、及びサトウキビより成る群から 選ばれる、請求項４記載の方法。 ７．前記 XET酵素が植物由来の適当な遺伝情報を含む形質転換宿主生物の好気 的培養により生産されたものである、請求項１記載の方法。 ８． XETの濃度が１ｇのセルロース材料当り0.01〜1000μｇの酵素タンパク質 、特に１ｇのセルロース材料当り 0.1〜100 μｇの酵素タンパク質に相当する、 請求項１記載の方法。 ９．前記水性媒体がキシログルカンを更に含む、請求項１記載の方法。 10．請求項１〜９のいづれか１項記載の方法により得られるセルロース材料。 11．セルロース材料の強度特性を改善するためのキシログルカン エンドトランスグリコシラーゼの利用。 12．キシログルカン エンドトランスグリコシラーゼ(XET)酵素及び界面活性 剤を含んで成る洗浄組成物。