JP2000351733A

JP2000351733A - 神経栄養因子様低分子化合物

Info

Publication number: JP2000351733A
Application number: JP28411099A
Authority: JP
Inventors: Takumi Sato; 託実佐藤; Yukifumi Furuta; 享史古田; Yasuyoshi Watanabe; 恭良渡辺; Masaaki Suzuki; 正昭鈴木; Naotake Namura; 尚武名村
Original assignee: Osaka Bioscience Institute
Current assignee: Osaka Bioscience Institute
Priority date: 1999-04-09
Filing date: 1999-10-05
Publication date: 2000-12-19

Abstract

(57)【要約】【課題】神経栄養因子様の活性を有する低分子有機化
合物を有効成分として含む医薬組成物を提供する。【解決手段】該課題はジエノン構造を有する低分子有
機化合物により解決される。本発明の医薬組成物は、神
経栄養因子様の活性、すなわち神経突起の再生／伸長促
進作用及び／又は神経細胞生存維持作用を有する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、神経栄養因子様低
分子化合物を含む医薬組成物に関する。更に詳しくは、
神経突起の再生／伸展作用及び／又は神経細胞の生存維
持作用を有する低分子化合物を有効成分として含む医薬
組成物に関する。

【０００２】

【従来の技術】神経栄養因子は、中枢神経系（ＣＮＳ）
の神経膠細胞及び神経細胞で恒常的に発現され、神経系
の発達（分化）と生存維持に重要な役割を果たす。神経
栄養因子には神経成長因子（ＮＧＦ）、脳由来神経成長
因子（ＢＤＮＦ）、Neurotrophin 3（ＮＴ３）などが含
まれ、ＴｒｋＡ，ＴｒｋＢ，ＴｒｋＣと呼ばれる特異的
な受容体型チロシンキナーゼに結合して、これを活性化
させる。遺伝子欠損を用いた最近の研究によれば神経細
胞のサブセットの生存維持にはそれぞれ異なる神経栄養
因子を必要とすることが分かった。神経栄養因子は、神
経細胞の生存維持又は分化、及び成熟神経細胞のシナプ
ス可塑性の調節を含む様々な生物作用を有する。成体の
脳においても、神経栄養因子及び塩基性線維芽細胞増殖
因子（ｂＦＧＦ）等の神経栄養因子様因子は脳虚血等の
非常事態に神経細胞死を抑制すると考えられている。例
えば、ｂＦＧＦは閉塞の前に注入された場合、局所脳虚
血損傷から中枢の神経細胞を保護するが、閉塞の２４時
間後に注入すると保護しない。しかしながら、ｂＦＧＦ
は２４時間後に注入した場合、虚血反対側の大脳皮質に
おける神経細胞の神経突起の伸展／再生の促進を介して
行動レベルの回復を高める。このことはｂＦＧＦは神経
細胞死を抑制するのみならず、神経突起の伸展／再生の
促進を介して脳の高次機能を保護ないしは機能回復する
作用があることを示唆する。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】上記のように、神経細
胞の分化と生存維持作用を有するいくつかの神経栄養因
子は見出されている。しかしながらそれらは分子量の大
きなタンパク質であるため、それらを投与した場合、血
液脳関門を透過し難く、中枢神経組織への到達性に難点
がある。この意味で神経栄養因子と同様の作用を有する
低分子化合物は中枢神経系の神経変性疾患の治療剤とし
て理想的な低分子化合物である。本発明は、神経栄養因
子様の活性、即ち神経突起の再生／伸展促進作用、及び
／又は神経細胞生存維持作用を有する、神経変性疾患の
治療薬として利用可能であり、低毒性の低分子化合物を
有効成分として含む医薬組成物を提供することを目的と
する。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、種々のＰ
Ｇ類を試験し、神経突起再生／伸展促進活性及び／又は
神経細胞生存維持作用を示す一群のＰＧ類を見出し、
式：

【化１４】で示されるジエノン構造がその活性にとって必須である
ことを発見した。

【０００５】そこで、本発明は先ず、ジエノン構造を有
する有機化合物を有効成分として含有する、神経突起再
生／伸展促進作用、及び／又は神経細胞生存維持作用を
有する医薬組成物に関する。

【０００６】好ましくは、該有機化合物が式Ｉ：

【化１５】［式中、Ｒ¹およびＲ²はそれぞれ独立して水素、アルキ
ル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル
基、シクロアルケニル基、アリール基、ヘテロアリール
基、アラルキル基、ヒドロキシ基、カルボキシ基または
アミノ基であり、これらの基は各々置換されていてもよ
く、波線はそれぞれ、本化合物がその部分においていず
れかの立体異性体またはその混合物であることを意味す
る］で示される化合物またはそれらの製薬的に許容され
る塩である本発明の医薬組成物であり、より好ましくは
該有機化合物がプロスタグランジンＡ誘導体またはＪ誘
導体の化合物、さらに好ましくは該有機化合物がΔ⁷プ
ロスタグランジンＡ₁誘導体である本発明の医薬組成物
である。

【０００７】また、該有機化合物が、式ＩＩ−１：

【化１６】又は、式ＩＩ−２：

【化１７】［Ｒ³は前記のＲ¹と同意義であり、Ｒ⁴は水素、アルキ
ル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル
基、シクロアルケニル基、アリール基、ヘテロアリール
基、またはアラルキル基であり、これらの基は各々置換
されていてもよく、波線はそれぞれ、本化合物がその部
分においていずれかの立体異性体またはその混合物であ
ることを意味する］で示される化合物またはその製薬的
に許容される塩である医薬組成物も好ましい。

【０００８】また、式ＩＩ−１又は式ＩＩ−２におい
て、Ｒ⁴が式：

【化１８】［式中、Ｚ¹およびＺ²はそれぞれ独立して水素、アルキ
ル基、アリール基、ハロゲン、置換されていてもよいヒ
ドロキシ基、置換されていてもよいカルボキシル基、置
換されていてもよいアミノ基、シアノ基、またはトリア
ルキルスズであり、ｎは０−１０である］で示される基
である医薬組成物も好ましい。

【０００９】また、該有機化合物が式ＩＩＩ−１：

【化１９】または、式ＩＩＩ−２：

【化２０】［式中、Ｘは置換されていてもよいヒドロキシ基または
置換されていてもよいアミノ基であり、Ｒ⁴は上記に定
義した通りであり、波線はそれぞれ、本化合物がその部
分においていずれかの立体異性体またはその混合物であ
ることを意味する］で示される化合物またはその製薬的
に許容される塩である医薬組成物も好ましい。

【００１０】より好ましくは、式ＩＩＩ−１またはＩＩ
Ｉ−２において、Ｘがヒドロキシ基またはアルコキシ
基、好ましくはＣ₁−Ｃ₅アルコキシ基であり、Ｒ⁴がア
ルキル基、好ましくはＣ₁−Ｃ₁₀アルキル、さらに好ま
しくはＣ₁−Ｃ₅アルキルである医薬組成物である。

【００１１】該有機化合物が、式Ｉで示され、Ｒ¹が先
に定義した通りであり、Ｒ²がアルキル基である化合物
またはその製薬的に許容される塩である医薬組成物も好
ましい。この場合、Ｒ¹が、（ＣＨ₂）₅ＣＯＸ（式中、
Ｘは置換されていてもよいヒドロキシ基または置換され
ていてもよいアミノ基である）であることが更に好まし
い。

【００１２】該有機化合物が、式Ｉで示され、Ｒ¹が先
に定義した通りであり、Ｒ²が式：

【化２１】［式中、Ｙ¹およびＹ²はそれぞれ独立して水素、アルキ
ル基、アリール基、ハロゲン、置換されていてもよいヒ
ドロキシ基、置換されていてもよいカルボキシル基、置
換されていてもよいアミノ基、シアノ基、またはトリア
ルキルスズであり、ｍは０−１０である］で示される基
である有機化合物またはその製薬的に許容される塩であ
る医薬組成物も好ましい。

【００１３】この場合、Ｙ¹が水素であり、Ｙ²がメチル
基であることが好ましく、メチル基がパラ位にあること
が更に好ましい。また、Ｒ¹は、（ＣＨ₂）₅ＣＯＸ（式
中、Ｘは置換されていてもよいヒドロキシ基または置換
されていてもよいアミノ基である）であることが好まし
い

【００１４】本発明は、新規なプロスタグランジン誘導
体にも関する。一態様として、本発明は式ＩＩ’−１：

【化２２】［Ｒ^3'は水素、低級アルキル基、低級アルケニル基、低
級アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル
基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル基、低
級アルキルオキシカルボニル基、アルカノイル基、また
はアロイル基であり、これらの基は各々置換されていて
もよく、Ｒ^4'は水素、低級アルキル基、低級アルケニル
基、低級アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアル
ケニル基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル
基、低級アルキルオキシカルボニル基、アルカノイル
基、またはアロイル基であり、これらの基は各々置換さ
れていてもよく、波線は本化合物がその部分においてい
ずれかの立体異性体（幾何異性体）またはその混合物で
あることを意味する］で示される化合物またはその製薬
的に許容される塩に関する。

【００１５】好ましくは、式ＩＩＩ’−１：

【化２３】［式中、Ｘはヒドロキシ基、低級アルコキシ基または置
換されていてもよいアミノ基であり、Ｒ^4'は上に定義し
た通りであり、波線は本化合物がその部分においていず
れかの立体異性体（幾何異性体）またはその混合物であ
ることを意味する］で示される化合物またはその製薬的
に許容される塩である。より好ましくは、式ＩＩＩ’
中、Ｘはヒドロキシ基または低級アルコキシ基であり、
Ｒ⁴が低級アルキル基である化合物である。

【００１６】本発明は別の態様として、式ＩＩ''−１：

【化２４】［Ｒ^3'は水素、低級アルキル基、低級アルケニル基、低
級アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル
基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル基、低
級アルキルオキシカルボニル基、アルカノイル基、また
はアロイル基であり、これらの基は各々置換されていて
もよく、Ｒ^4'は水素、低級アルキル基、低級アルケニル
基、低級アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアル
ケニル基、アリール基、ヘテロアリール基、またはアラ
ルキル基であり、これらの基は各々置換されていてもよ
く、波線はそれぞれ、本化合物がその部分においていず
れかの立体異性体またはその混合物であることを意味す
る］で示される化合物またはその製薬的に許容される塩
に関する。

【００１７】好ましくは、式ＩＩＩ’’−１：

【化２５】［式中、Ｘはヒドロキシ基、低級アルコキシ基または置
換されていてもよいアミノ基であり、Ｒ^4'は上に定義し
た通りであり、波線はそれぞれ、本化合物がその部分に
おいていずれかの立体異性体またはその混合物であるこ
とを意味する］で示される化合物またはその製薬的に許
容される塩である。さらに好ましくは、式ＩＩＩ''−１
中、Ｘがヒドロキシ基または低級アルコキシ基であり、
Ｒ⁴が低級アルキル基である化合物またはその製薬的に
許容される塩である。

【００１８】さらなる態様として、本発明は、式ＩＶ：

【化２６】 [式中、Ｒ^3'は水素、低級アルキル基、低級アルケニル
基、低級アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアル
ケニル基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル
基、低級アルキルオキシカルボニル基、アルカノイル基
またはアロイル基であり、これらの基は各々置換されて
いてもよく、Ｙ¹およびＹ²はそれぞれ独立して水素、ア
ルキル基、アルケン基、アリール基、ハロゲン、置換さ
れていてもよいヒドロキシ基、置換されていてもよいカ
ルボキシル基、置換されていてもよいアミノ基、シアノ
基、またはトリアルキルスズであり、ｍは０−１０であ
る]で示される化合物またはその製薬的に許容される塩
に関する。

【００１９】Ｒ^3'は、（ＣＨ₂）₅ＣＯＸ（式中、Ｘは置
換されていてもよいヒドロキシ基または置換されていて
もよいアミノ基である）であることが好ましい。Ｙ¹は
水素であり、Ｙ²はメチル基であることが好ましく、メ
チル基がパラ位にあることがさらに好ましい。

【００２０】さらなる態様として、本発明は、式Ｖ：

【化２７】 [式中、Ｒ^3'は水素、低級アルキル基、低級アルケニル
基、低級アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアル
ケニル基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル
基、低級アルキルオキシカルボニル基、アルカノイル
基、またはアロイル基であり、これらの基は各々置換さ
れていてもよく、ｍは０−１０である]で示される化合
物またはその製薬的に許容される塩に関する。

【００２１】Ｒ^3'は、（ＣＨ₂）₅ＣＯＸ（式中、Ｘは置
換されていてもよいヒドロキシ基または置換されていて
もよいアミノ基である）であることが好ましい。Ｙ¹は
水素であり、Ｙ²はメチル基であることが好ましく、メ
チル基がパラ位にあることがさらに好ましい。

【００２２】本明細書中、以下の用語は次の意味を有す
る。「神経突起の再生／伸展促進作用」とはニューロン
（神経細胞）に作用し、軸索、樹状突起の別を問わず、
神経突起の再生または伸展あるいはその両者を促進させ
る作用を意味する。本明細書中、かかる作用を神経突起
再生／伸展促進作用と表記する場合がある。「神経細胞
の生存維持作用」とはニューロンに作用し、ニューロン
を細胞死から保護する作用を意味する。

【００２３】本発明の化合物は神経突起の再生／伸展促
進作用については単独では作用を示さず、神経成長因子
（ＮＧＦ）などの神経栄養因子における神経突起の再生
／伸展作用を促進させる。本発明の化合物は神経細胞の
生存維持作用については単独で作用を示す。神経突起再
生／伸展促進作用により、切断されたまたは変性した神
経繊維を再構築することができ、それにより、脊髄など
の末梢神経系のネットワークを保護することが可能とな
る。しかしながら、中枢ニューロンでは、神経繊維が切
断した場合、影響はその神経繊維にとどまらず細胞体全
体に及び、細胞死に到ることが多い。ここで、中枢ニュ
ーロンにおいて、神経突起再生／伸展促進作用が充分に
発揮されるためには、細胞死の抑制も同時に行われる必
要がある。従って本発明の医薬組成物は中枢神経系の神
経変性疾患の処置に使用することができる。具体的な適
応症としては、神経軸索変性または神経細胞死を伴う神
経疾患、例えば脳虚血、アルツハイマー病、パーキンソ
ン病、ハンチントン舞踏病、虚血性脳梗塞、筋萎縮性側
索硬化症等が挙げられる。

【００２４】「プロスタグランジンＡ誘導体」とは、炭
素１０−１１位に二重結合を持つ通常のエノン型プロス
タグランジンの他に、そのエステル体、アミド体もしく
は塩；あるいはそれらの個々の立体異性体、即ち光学異
性体、幾何異性体のいずれか、またはそれらの混合物；
あるいは上記プロスタグランジン骨格にアルキル基、好
ましくはメチル基、またはアルコキシ基が置換している
化合物、好ましくは１６位にメチル基が置換している化
合物を包含する意味である。「プロスタグランジンＪ誘
導体」とは、炭素９−１０位に二重結合を持つ通常のエ
ノン型プロスタグランジンの他に、そのエステル体、ア
ミド体もしくは塩；あるいはそれらの個々の立体異性
体、即ち光学異性体、幾何異性体のいずれか、またはそ
れらの混合物；あるいは上記プロスタグランジン骨格に
アルキル基、好ましくはメチル基、またはアルコキシ基
が置換している化合物、好ましくは１６位にメチル基が
置換している化合物を包含する意味である。

【００２５】本明細書中、「アルキル基」とは炭素原子
１−１５個を有する直鎖状または分枝鎖状アルキル基で
あり、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロ
ピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチ
ル、ｎ−ペンチル、ｉ−ペンチル、ネオペンチル、ｓ−
ペンチル、ｔ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ネオヘキシ
ル、ｉ−ヘキシル、ｓ−ヘキシル、およびｔ−ヘキシル
が挙げられる。「低級アルキル基」とは、アルキル基の
中で炭素原子１−１０個、好ましくは１−６個を有する
直鎖状または分枝鎖状アルキル基、例えばメチル、エチ
ル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブ
チル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｉ−ペ
ンチルである。

【００２６】本明細書中、「アルケニル基」とは炭素原
子２−１５個を有する直鎖状または分枝鎖状アルケニル
基であり、例えばビニル、アリル、２−プロペニル、１
−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、１−ペンテ
ニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニ
ル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニ
ル、４−ヘキセニル、５−ヘキセニル、１−ヘプテニ
ル、２−ヘプテニル、３−ヘプテニル、４−ヘプテニ
ル、５−ヘプテニル、６−ヘプテニル、１−オクテニ
ル、２−オクテニル、３−オクテニル、４−オクテニ
ル、５−オクテニル、６−オクテニル、または７−オク
テニルが挙げられる。「低級アルケニル基」とは、アル
ケニル基の中で炭素原子２−１０個、好ましくは２−６
個を有する直鎖状または分枝鎖状アルケニル基、例えば
ビニル、アリル、１−プロペニル、イソプロペニル、１
−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、１−ｉ−ブ
テニル、２−ｉ−ブテニル、ペンテニル、およびヘキセ
ニルである。

【００２７】本明細書中、「アルキニル基」とは炭素原
子２−１５個を有する直鎖状または分枝鎖状アルキニル
基であり、例えばエチニル、１−プロピニル、２−プロ
ピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、３−ブチニル、
１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４
−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、３−
ヘキシニル、４−ヘキシニル、５−ヘキシニル、１−ヘ
プチニル、２−ヘプチニル、３−ヘプチニル、１−オク
チニル、２−オクチニル、または７−オクチニルが挙げ
られる。「低級アルキニル基」とは上記アルキニル基
中、炭素原子２−１０個、好ましくは２−６個を有する
直鎖状または分枝鎖状アルキニル基である。

【００２８】本明細書中、「シクロアルキル基」とは炭
素原子３−１０個を有するシクロアルキル基であり、例
えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、
シクロヘキシル、シクロヘプチル、またはシクロオクチ
ルが挙げられる。

【００２９】本明細書中、「シクロアルケニル基」と
は、炭素原子３−１０個を有するシクロアルケニル基で
あり、例えば１−シクロブテニル、１−シクロペンテニ
ル、３−シクロペンテニル、１−シクロヘキセニル、２
−シクロヘキセニル、１−ヘプテニル、２−ヘプテニ
ル、３−ヘプテニル、４−ヘプテニル、または１−オク
テニルが挙げられる。

【００３０】本明細書中、「アリール基」とは、炭素原
子６−１４個を有する単環状または縮合環状芳香族炭化
水素であり、例えばフェニル、α−ナフチル、β−ナフ
チル、アントラセニル、インデニルが挙げられる。

【００３１】本明細書中、「ヘテロアリール基」とは、
Ｎ、ＯまたはＳ原子を環内に１個以上含む５〜７員環で
あり炭素環もしくは他の複素環と縮合していてもよいヘ
テロ芳香族であり、例えば２−ピリジル、３−ピリジ
ル、２−チエニル、２−フリル、イミダゾリル、トリア
ゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、ピロリル、２−チ
アゾリル、３−イソチアゾリル、２−オキサゾリル、３
−イソオキサゾリル、２−ベンゾフリル、２−キノリ
ル、２−インドリニル、３−（１Ｈ）−インダゾリル、
２−キナゾリニルなどが挙げられる。

【００３２】本明細書中、「アラルキル基」とは前記ア
ルキルに前記アリールが置換したものであり、例えばベ
ンジル、フェネチル、フェニルプロピル、およびナフチ
ルメチル、２−（２−ナフチル）−プロピルなどが挙げ
られる。

【００３３】本明細書中、「置換されていてもよい」等
により置換基の存在を示唆する場合、その置換基には同
一または異なって、それぞれハロゲン原子、ヒドロキシ
基、カルボキシ基、アミノ基、アミド基、ニトロ基、シ
アノ基、低級アルキル基、低級アルケニル基、低級アル
キニル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル
基、シクロアルケニル基、シクロアルケニルアルキル
基、アリール基、アラルキル基、ヘテロアリールアルキ
ル基の中から選ばれる１つまたはそれ以上の基を意味す
る。例えば、置換されているアルキル基にはハロゲン化
アルキル、ヒドロキシアルキル等があるまた、置換され
ているヒドロキシ基には低級アルキルオキシ（アルコキ
シ）、低級アルケニルオキシ基、アリールオキシ基およ
びアラルキルオキシ基、シクロアルキルオキシ等が含ま
れる。置換されているカルボキシ基には、アルキルオキ
シカルボニル、アリールオキシカルボニル等のエステ
ル、あるいはアミドが含まれる。置換されているアミノ
基とは式：ＮＲ¹⁰Ｒ¹¹で示される基（ここに、Ｒ¹⁰およ
びＲ¹¹は独立して水素、アルキル基またはアラルキル基
であるが、同時に水素となることはない）、例えばジメ
チルアルキル等を意味する。

【００３４】本明細書中、「低級アルキルオキシ基」と
は、酸素原子に前記低級アルキルが置換しているもので
あり、例えばメチルオキシ、エチルオキシ、ｎ−プロピ
ルオキシ、ｉ−プロピルオキシ、ｎ−ブチルオキシ、ｔ
−ブチルオキシ、ｎ−ペンチルオキシ、ｉ−ペンチルオ
キシ、ネオペンチルオキシ、ｓ−ペンチルオキシ、ｔ−
ペンチルオキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、ｓ−ヘキシルオ
キシ、シクロプロピルオキシ、シクロペンチルオキシな
どが挙げられる。

【００３５】本明細書中、「低級アルケニルオキシ
基」、「アリールオキシ基」、および「アラルキルオキ
シ基」とは、酸素原子にそれぞれ前記低級アルケニル、
アリールおよびアラルキルが置換しているものである。

【００３６】本明細書中、「低級アルキルオキシカルボ
ニル基」とは、例えばメトキシカルボニル、エトキシカ
ルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシ
カルボニル、ｎ−ブトキシカルボニル、イソブトキシカ
ルボニルなどである。

【００３７】本明細書中、「アルカノイル基」とはカル
ボニル基に前記アルキル基またはシクロアルキル基が結
合したものであり、例えばアセチル、ｎ−プロパノイ
ル、イソプロパノイル、ｎ一ブチロイル、ｔ−ブチロイ
ルが挙げられる。

【００３８】本明細書中、「アルカノイルオキシ基」と
は酸素原子に直接前記アルカノイル基が結合したもので
ある。本明細書中、「アロイル基」とはカルボニル基に
前記のアリール基が結合したものである。本明細書中、
「アロイルオキシ基」とは酸素原子に前記アロイル基が
結合したものである。

【００３９】本明細書中、立体異性体とは、化合物の構
造に二重結合が存在する場合にはいずれかの幾何異性
体、あるいは不斉炭素が存在する場合にはいずれかの光
学異性体を包含する意味であり、当業者ならば、その意
味するところは明らかである。

【００４０】

【発明の実施の形態】Δ⁷プロスタグランジンＡ₁誘導体
が以下の系において顕著な神経突起再生（または伸展）
促進活性及び／又は神経細胞生存維持作用を有すること
を確認した：１）ＰＣ１２細胞におけるＮＧＦによる神経突起伸展の
促進作用２）ニワトリ胎仔脊髄神経節の器官培養におけるＮＧＦ
による神経突起伸展または再生の促進作用３）ＨＴ２２細胞におけるグルタミン酸により誘発され
るアポトーシスに対する神経細胞生存維持作用４）大脳皮質ニューロンにおけるグルタミン酸により誘
発されるアポトーシスに対する神経細胞生存維持作用５）大脳皮質ニューロンにおけるＮＯにより誘発される
アポトーシスに対する神経細胞生存維持作用６）ラットにおける局所脳虚血により誘発される脳の神
経細胞死抑制作用（個体レベルでの神経細胞死の抑制）

【００４１】ＰＣ１２細胞とは副腎褐色細胞腫由来の細
胞株であり、ニューロン前駆体細胞からニューロン様の
細胞への分化の実験モデルとして周知の細胞である。こ
れはＡＴＣＣＣＲＬ１７２１にて入手可能である。Ｈ
Ｔ２２細胞とは、マウス海馬の神経芽細胞腫由来の細胞
株であり、高濃度のグルタミン酸による細胞死は、神経
細胞死のモデルシステムとして周知の細胞である（Pro
c. Natl. Acad. Sci. USA, 89, 8264-8267(1992)）。

【００４２】ここに新たに見出された本発明化合物は神
経突起再生／伸展促進プロスタグランジン(Neurite out
growth-/regeneration-Promoting Prostaglandin)よ
り、ＮＥＰＰと命名し、その後ろに化合物番号を付与し
て各化合物を区別する。本発明の新規な化合物は、当業
者に周知である一般のプロスタグランジンを製造する手
法、例えば下記スキーム１および２に示すように三成分
連結プロスタグランジン合成法によって容易に合成でき
る［M.Suzuki et al., Bull.Chem.Soc.Jpn., 61 1299
(1988); M.Suzuki et al., Tetrahedron, 46 4809 (199
0);Suzukiet al., J. Med. Chem. 41 3084(1998); 特開
昭59-65068号公報］。

【化２８】（式中、Ｒ^3'およびＲ^4'は上に定義した通りである）で
示される化合物は、例えば以下のスキーム１によって合
成することができる。

【００４３】スキーム１：

【化２９】

【００４４】スキーム１において、ＴＢＤＭＳはtert-
ブチルジメチルシロキシ（＊これでよいですか）を表
し、Ｒ^3'およびＲ^4'は上に定義した通りである。（ａ）
および／または（ｂ）の化合物の光学異性体を適宜組み
合わせることにより、本発明の式II'−１または式II”
−１で表される立体異性体を得ることができる。

【００４５】本発明の式IV：

【化３０】または式Ｖ：

【化３１】（式中、Ｒ^3'、Ｙ¹、Ｙ²およびｍは上に定義した通りで
ある）で表される化合物は例えば次のスキーム２によっ
て製造することができる。

【００４６】スキーム２：

【化３２】

【００４７】スキーム２において、ＴＢＤＭＳおよびＲ
³ ^’は上に定義した通りであり、Ｒ⁵は、

【化３３】または

【化３４】（式中、Ｙ¹、Ｙ²およびｍは上に定義した通りである）
である。Ｒ⁵が式VIで表される基である場合には場合に
は式IVで表される化合物を得ることができ、Ｒ⁵が式VII
で表される基である場合には式Ｖで表される化合物を得
ることができる。

【００４８】PG誘導体で１位がカルボン酸の化合物は、
対応するエステル体を豚肝臓エステラーゼなどで加水分
解することで、また１位が一級アミンのアミド体である
化合物はカルボン酸体を相当するアミンと縮合させるこ
とで（例えばジクロロメタン中、EDCなどを縮合剤とし
て用いて）合成することができる。

【００４９】本発明の化合物は製薬的に許容される塩を
形成できる。例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カル
シウム塩、アンモニウム塩などである。

【００５０】本発明の医薬製剤および化合物は、経口的
にあるいは直腸内、皮下、筋肉内、腹腔内、静脈内等へ
非経口的にあるいは疾患部位へ局所的に投与することが
できる。

【００５１】経口投与のためには、固形製剤あるいは液
体製剤にすることができる。固形製剤としては、例えば
錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤などがある。このような固形
剤では本発明の化合物は、例えば重炭酸ナトリウム、炭
酸カルシウム、バレイショデンプン、ショ糖、マンニト
ール、カルボキシメチルセルロースなどと混合する。製
剤操作は常法に従って行われる。また固形製剤には、例
えばステアリン酸カルシウム、ステリン酸マグネシウ
ム、グリセリンなどの潤滑剤、甘味剤、安定剤、防腐剤
などを含有させてもよい。経口投与のための液体製剤と
しては、例えば乳濁剤、懸濁剤、シロップ剤などが挙げ
られる。また、湿潤剤、懸濁補助剤、甘味剤、風味剤、
芳香剤、安定剤などを含有させることができる。液体製
剤は、ゼラチンのような吸収される物質でつくられたカ
プセルに入れて用いることもできる。

【００５２】直腸内投与のためには、ゼラチンソフトカ
プセルなどの通常の坐剤が用いられる。直腸内投与以外
の非経口投与の製剤としては、例えば、無菌の水性ある
いは非水性溶液剤、懸濁剤、乳濁剤などにした皮下、筋
肉内、静脈内注射用製剤が挙げられる。非水性溶液、懸
濁剤には、例えばプロピレングリコール、ポリエチレン
グリコール、オリーブ油、あるいはオレイン酸エチルの
ような注射しうる有機エステルなどが用いられる。ま
た、このような製剤には、防腐剤、乳化剤、分散剤、安
定剤などを含有させることができる。これらの注射用製
剤は、バクテリア保留フィルターを通す濾過、殺菌剤の
配合、あるいは照射等の処理を適宜行うことによって無
菌化できる。さらに、本発明の化合物は、いわゆるリピ
ッドマイクロスフィアー（ＬＭ剤）とよばれる脂肪乳剤
として用いることもできる。

【００５３】本発明の医薬組成物は通常は、注射により
投与する。脳疾患の処置には、血液脳関門を通って脳内
に移行できるようリポ化など、製剤上の工夫を施す。あ
るいは、化合物をエチルエステルまたはプロピルエステ
ルまたはアミド体にする等、誘導体を製造してもよい。
投与量は患者の年齢、体重、性別、症状の重篤度等によ
り左右されるが、一般には１ｍｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体
重／日の量で投与することができる。かかる投与量は、
１日に１回あるいは数回、例えば２〜６回に分けて投与
することもできる。本発明化合物は、神経細胞の生存維
持のために使用する場合、単独で効力を発揮する。しか
し神経突起再生／伸展促進活性を示すにはＮＧＦなどの
神経栄養因子が存在しなければならない。本発明組成物
または化合物を脳内に投与する場合、ＮＧＦはグリア細
胞などから産生され脳内に存在しているため、必ずしも
同時にＮＧＦを投与する必要はない。しかし、本発明組
成物または化合物とともにＮＧＦなどの神経栄養因子を
同時に投与するのは任意である。同時に投与できる神経
栄養因子にはＮＧＦのほか、脳由来神経成長因子（ＢＤ
ＮＦ）およびNeurotrophin 3（ＮＴ３）、ＮＴ４／５、
毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）、塩基性線維芽細胞増
殖因子（ｂＦＧＦ）などがある。

【００５４】

【実施例】以下に実施例および試験例を挙げて本発明を
さらに詳細に説明するが、これらは本発明の範囲の限定
を意図するものでない。

【００５５】実施例１ 13,14-ジヒドロ-15-epi-Δ⁷ -ＰＧＡ₁ メチルエステル
（ＮＥＰＰ１０）の合成工程１：

【化３５】 (R,E)-3-(tert-ブチルジメチルシリル)-1-ヨード-1-オ
クテン (3.89 g, 10.6mmol)のTHF (50 mL) 溶液を-98℃
に冷却し、tert-ブチルリチウム (1.82 M ペンタン溶
液, 11.6 mL, 21.1 mmol) を加え15分間撹拌した。この
溶液にZn(CH₃)₂（1.0 M ヘキサン溶液, 10.6 mL, 10.6
mmol）を加え、0℃に昇温して15分間撹拌した後、反応
混合物を再び-98℃に冷却した。次に、(R)-4-(tert-ブ
チルジメチルシロキシル)-2-シクロペンテン-1-オン
(2.26 g, 10.6 mmol) のTHF (50 mL)溶液を反応液に2時
間かけてゆっくり滴下し、さらに20分間撹拌した。これ
に6-ホルミルヘキサン酸メチル (1.69 g, 10.6 mmol)
のTHF (50 mL) 溶液を15分かけて滴下し、さらに30分間
撹拌を続けた。反応混合物を飽和NH₄Cl水溶液に注ぎ、
生成物をヘキサンで抽出した。抽出液を無水Na₂SO₄で乾
燥後、ろ過、濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカ
ラムクロマトグラフィ（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エ
チル＝ 6：1）で精製し、付加体として化合物1 (5.30
g, 82%) を得た。

【００５６】化合物1：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ -
0.03 (s, 3H), -0.01 (s, 6H), 0.02 (s, 3H), 0.80-0.
86 (21H), 1.18-1.65 (16H), 2.04 (dd, J = 5.4, 8.6
Hz, 1H), 2.21 (dd, J = 6.6, 18.2 Hz, 1H), 2.25 (t,
J = 7.4 Hz, 2H), 2.52-2.65 (m, 2H), 3.15 (d, J =
4.0 Hz, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.69 (m, 1H), 3.99 (q,
J= 6.7 Hz, 1H), 4.06 (q, J = 5.7 Hz, 1H), 5.44 (d
d, J = 7.9, 15.5 Hz, 1H), 5.55 (dd, J = 5.5, 15.5
Hz, 1H).

【００５７】工程２：

【化３６】工程１にて得た化合物1 (146 mg, 0.238 mmol) のエタ
ノール (3 mL) 溶液にPtO₂ (17.6 mg) を加え、水素雰
囲気下室温で20時間撹拌した。続いて反応混合物をセラ
イトろ過し、濃縮後残査をシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル＝ 6：
1）で精製することによりジヒドロ体2 (114mg, 78%) を
得た。化合物2：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ -0.04 (s, 3H),
-0.03 (s, 3H), 0.00 (s, 3H), 0.02 (s, 3H), 0.75-
0.85 (21H), 1.14-1.62 (20H), 1.83-1.98 (2H),2.16
(d, J = 18.0 Hz, 1H), 2.23 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.
47 (dd, J = 5.4,18.2 Hz, 1H), 3.50-3.60 (m, 1H),
3.59 (s, 3H), 3.69 (m, 1H), 3.81 (s, 1H), 4.20-4.4
0 (m, 1H).

【００５８】工程３：

【化３７】化合物2 (413 mg, 0.672 mmol) のジクロロメタン (10
mL) 溶液に室温でメタンスルホニルクロライド (210 μ
L, 1.18 mmol) と4-(ジメチルアミノ)ピリジン(650 mg,
5.33 mmol) を加え撹拌した。反応の終了を薄層クロマ
トグラフィーで確認した後、反応混合物に5% HCl水溶液
を加え、生成物を酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水
Na₂SO₄で乾燥後、ろ過、濃縮し、粗生成物をシリカゲル
クロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチ
ル＝ 9：1）で精製してエノン体3 (267 mg, 67%) を得
た。化合物3：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ -0.04 (s, 3H),
-0.02 (s, 3H), 0.00 (s, 3H), 0.01 (s, 3H), 0.77-
0.86 (21H), 1.14-1.65 (18H), 2.11 (q, J = 7.6Hz, 2
H), 2.19 (d, J = 18.0 Hz, 1H), 2.25 (t, J = 7.0 H
z, 2H), 2.55 (dd,J = 5.2, 18.2 Hz, 1H), 2.64-2.72
(br, 1H), 3.52-3.61 (m, 1H), 3.62 (s,3H), 4.17 (d,
J = 4.4 Hz, 1H), 6.54 (dt, J = 1.6, 7.7 Hz, 1H).

【００５９】工程４：

【化３８】エノン体3 (80.0 mg, 0.134 mmol) のアセトニトリル
(6 mL) 溶液に0℃でHF水溶液（47%）とアセトニトリル
の混合溶液（1:9, 8 mL）を加え撹拌した。反応の終了
を薄層クロマトグラフィーで確認した後、反応混合物に
飽和NaHCO₃水溶液を加え、生成物を酢酸エチルで抽出し
た。抽出液を無水Na₂SO₄で乾燥後、ろ過、濃縮し、粗生
成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘ
キサン：酢酸エチル＝ 1：2）で精製し、脱保護体4 (4
1.4 mg, 84%) を得た。化合物4：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.90 (t, J =
6.8 Hz, 3H), 1.20-1.72(18H), 1.90 (d, J = 2.8 Hz,
1H), 2.22 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 2.25-2.38 (3H), 2.6
5 (dd, J = 5.2, 18.4 Hz, 1H), 2.87-2.95 (br, 1H),
3.56-3.65 (br, 1H), 3.66 (s, 3H), 4.33-4.37 (m, 1
H), 6.65 (dt, J = 1.5, 7.7 Hz, 1H).

【００６０】工程５：

【化３９】化合物4 (38.0 mg, 0.103 mmol) と4-(ジメチルアミノ)
ピリジン (160 mg, 1.31 mmol) のCH₂Cl₂ (4 mL) 溶液
に0℃で無水トリフルオロ酢酸 (73.0 μL, 0.517 mmol)
を加え、20分間撹拌した。この反応混合物に飽和NaHCO
₃水溶液を加え、生成物を酢酸エチルで抽出した。抽出
液を無水Na₂SO₄で乾燥後、ろ過、濃縮し、得られた粗生
成物をTHF (5 mL) に溶解し、飽和NaHCO₃水溶液 (5 mL)
を加えて室温で1時間撹拌した。続いて反応液を飽和食
塩水で希釈し、生成物を酢酸エチルで抽出した。抽出液
を無水Na₂SO₄で乾燥後、ろ過、濃縮し、残査をシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：
酢酸エチル＝ 2：1）で精製して目的とする13,14-ジヒ
ドロ-15-epi-Δ⁷-PGA₁ メチルエステル (5) (24.1mg, 6
7%) を得た。 13,14-ジヒドロ-15-epi-Δ⁷-PGA₁ メチルエステル
(5)：¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 0.89 (t, J = 7.0 H
z, 3H), 1.20-1.70 (17H), 2.00-2.12 (m, 1H), 2.18-
2.35 (m, 2H), 2.31 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.50-3.58
(m, 2H), 3.67 (s, 3H), 6.35 (dd, J = 2.0, 6.0 Hz,
1H), 6.55 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.53 (ddd, J= 0.9,
2.7, 6.0 Hz, 1H).

【００６１】実施例２ 13,14-ジヒドロ-12-iso-Δ⁷ -PGA₁ メチルエステル（Ｎ
ＥＰＰ９）の合成 (S,E)-3-(tert-ブチルジメチルシリル)-1-ヨード-1-オ
クテンと(S)-4-(tert-ブチルジメチルシロキシ)-2-シク
ロペンテン-1-オンとを出発物質として用いる以外は実
施例１と同様に処理し、標題化合物を合成する。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 3
H), 1.22-1.70 (17H), 2.02-2.13 (m, 1H), 2.19-2.36
(m, 2H), 2.31 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.50-3.59(m, 2
H), 3.67 (s, 3H), 6.35 (dd, J = 1.6, 6.0 Hz, 1H),
6.55 (t, J = 7.8Hz, 1H), 7.53 (ddd, J = 0.9, 2.7,
6.0 Hz, 1H).

【００６２】実施例３ 13,14-ジヒドロ-ent-Δ⁷ -PGA₁ メチルエステル（ＮＥＰ
Ｐ８）の合成 (R,E)-3-(tert-ブチルジメチルシリル)-1-ヨード-1-オ
クテンと(S)-4-(tert-ブチルジメチルシロキシ)-2-シク
ロペンテン-1-オンとを出発物質として用いる以外は実
施例１と同様に処理し、標題化合物を合成する。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 3
H), 1.22-1.69 (16H), 1.70-1.82 (m, 1H), 1.83-1.95
(m, 1H), 2.20-2.37 (m, 2H), 2.31 (t, J = 7.6Hz, 2
H), 3.51-3.63 (2H), 3.67 (s, 3H), 6.35 (dd, J = 2.
0, 6.0 Hz, 1H),6.55 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.52 (dd
d, J = 0.9, 2.5, 6.2 Hz, 1H).

【００６３】参考例１ 13,14-ジヒドロ-Δ⁷ -PGA₁ メチルエステル（ＮＥＰＰ
７）の合成 (S,E)-3-(tert-ブチルジメチルシリル)-1-ヨード-1-オ
クテンと(R)-4-(tert-ブチルジメチルシロキシ)-2-シク
ロペンテン-1-オンとを出発物質として用いる以外は実
施例１と同様に処理し、標題化合物を合成する。 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3
H), 1.2-1.7 (16H), 1.7-1.8 (m, 1H), 1.8-1.9 (m, 1
H), 2.1-2.4 (m, 2H), 2.30 (t, J = 7.3 Hz, 2H),3.53
(dd, J = 2.4, 4.4 Hz, 1H), 3.56 (tt, J = 5.4, 7.3
Hz, 1H), 3.66 (s, 3H), 6.34 (dd, J = 2.0 Hz, 1H),
6.54 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.52 (dd, J= 2.4, 5.9 H
z, 1H).

【００６４】実施例にて合成したＮＥＰＰ類を含め、以
下の試験例で使用するＮＥＰＰ１−１０の構造式を以下
に示す：

【化４０】

【００６５】ＮＥＰＰ１１（ＧＩＦ０１７３）：

【化４１】ＮＥＰＰ１２（ＧＩＦ０１８８）：

【化４２】ＮＥＰＰ１３（ＧＩＦ０１８７）：

【化４３】ＮＥＰＰ１４（ＧＩＦ０１９１）：

【化４４】ＮＥＰＰ１５（ＧＩＦ０１８６）：

【化４５】ＮＥＰＰ１６（ＧＩＦ０１７２）：

【化４６】ＮＥＰＰ１７（ＧＩＦ０１７４）：

【化４７】ＮＥＰＰ１８（ＧＩＦ０１８０）：

【化４８】ＮＥＰＰ１９（ＧＩＦ０１９０）：

【化４９】ＧＩＦ０１７５：(4R,5E)-5-(6-カルボメトキシヘキシ
リデン)-4-(7-ヒドロキシオクチル)-2-シクロペンテノ
ン

【化５０】

【００６６】実施例４ 13,14-ジヒドロ-15-epi-Δ⁷ -PGA₁ ベンジルアミドの合
成実施例１にて製造した13,14-ジヒドロ-15-epi-Δ⁷-PGA₁
メチルエステルを豚肝臓エステラーゼで加水分解して得
られた13,14-ジヒドロ-15-epi-Δ⁷-PGA₁（１１．４ｍ
ｇ、３３．９μｍｏｌ）とベンジルアミン（３．６ｍ
ｇ、３４μｍｏｌ）のジクロロメタン（０．５ｍＬ）溶
液を氷浴で冷却した。この反応液に１−エチル−３−
（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩
（１２．４ｍｇ、６４．６μｍｏｌ）を加え、室温に昇
温し、１３時間撹拌した。続いて反応液に飽和食塩水を
加え、生成物を酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水Ｎ
ａ₂ＳＯ₄で乾燥後、ろ過、濃縮し、得られた粗生成物を
シリカゲルカラムクロマトグラフィ（シリカゲル、ヘキ
サン：酢酸エチル＝１：２）で精製し、13,14-ジヒドロ
-15-epi-Δ⁷-PGA₁ベンジルアミド（６．２ｍｇ、４３
％）を得た。¹ H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3
H), 1.20-2.00 (19H), 2.15-2.40 (m, 2H), 2.21 (t, J
= 7.4 Hz, 2H), 3.51-3.63 (m, 2H), 4.43 (d, J= 5.6
Hz, 2H), 5.80-5.93 (br, 1H), 6.34 (dd, J = 2.0,
6.0 Hz, 1H), 6.55(t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.24-7.37 (5
H), 7.52 (ddd, J = 0.9, 2.7, 6.0 Hz, 1H).

【００６７】参考例２ 15-epi-Δ⁷ -PGA₁ ベンジルアミド Suzuki et al., J.Med.Chem., 41, 3084-3090 (1989)に
記載のようにして15-epi-Δ⁷-PGA₁メチルエステル（Ｎ
ＥＰＰ４）を製造し、次いでこのメチルエステル体を用
い、実施例４と同様に処理して標題化合物を合成する。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 3
H), 1.20-1.75 (14H), 2.13-2.26 (m, 1H), 2.19 (t, J
= 7.4 Hz, 2H), 2.28-2.41 (m, 1H), 2.54-2.65(br, 1
H), 3.98-4.10 (m, 2H), 4.43 (d, J = 6.0 Hz, 2H),
5.37 (dd, J = 8.6, 15.4 Hz, 1H), 5.73 (dd, J = 6.
6, 15.4 Hz, 1H), 5.76-5.90 (br, 1H), 6.34 (dd, J =
2.0, 5.6 Hz, 1H), 6.61 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.22-
7.37 (6H).

【００６８】実施例５１５−デオキシ−１３，１４−ジヒドロ−１２−iso−
Δ⁷ −ＰＡＧ₁ メチルエステル（ＮＥＰＰ６）の合成工程１：

【化５１】１-ブロモオクタン(345 μl, 2.0 mmol)のTHF (10 mL)
溶液を―98℃に冷却し、tert-ブチルリチウム(1.82 Mペ
ンタン溶液, 2.2 mL, 4.0 mmol) を加え15分間撹拌し
た。この溶液にZn(CH₃)₂（1.0 Mヘキサン溶液, 2.0 mL,
2.0 mmol）を加え、0℃に昇温して20分間撹拌した後、
反応混合物を再び―98℃に冷却した。次に、(S)-4-(ter
t-ブチルジメチルシロキシ)-2-シクロペンテン-1-オン
(424 mg,2.0 mmol) のTHF (10 mL) 溶液を反応液に1時
間かけてゆっくり滴下し、さらに40分間撹拌した。これ
にメチル 6-ホルミルヘキサノエート (314 mg, 1.99 mm
ol)のTHF (10 mL) 溶液を15分かけて滴下し、さらに20
分間撹拌を続けた。反応混合物を飽和NH₄Cl水溶液に注
ぎ、生成物をヘキサンで抽出した。抽出液を無水Na₂SO₄
で乾燥後、ろ過、濃縮し、得られた粗生成物をカラムク
ロマトグラフィ（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル＝
8：1）で精製し、付加体1 (229 mg, 24%)を得た。化合物1：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ―0.02 (s, 3
H), 0.00 (s, 3H), 0.75―0.85 (12H), 1.13―1.60 (22
H), 1.85 (br, 1H), 1.95 (br, 1H), 2.14 (br d,J = 1
8.3 Hz, 1H), 2.21 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.45 (dd, J
= 5.4, 18.3 Hz,1H), 3.57 (s, 3H), 3.67 (m, 1H),
3.81 (d, J = 2 Hz, 1H), 4.06 (m, 1H)

【００６９】工程２：

【化５２】化合物１(225 mg, 0.464 mmol) のジクロロメタン (5 m
L) 溶液に室温でメタンスルホニルクロライド(95 μL,
1.20 mmol) と4-(ジメチルアミノ)ピリジン(230 mg, 1.
89 mmol) を加え室温で20時間撹拌した。反応混合物に
0.1 M HCl水溶液を加え、生成物をエーテルで抽出し
た。抽出液を無水Na₂SO₄で乾燥後、ろ過、濃縮し、粗生
成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサ
ン：酢酸エチル＝ 8：1）で精製してエノン体2 (98.4 m
g, 45%) を得た。化合物2：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.00 (s, 3H),
0.01 (s, 3H), 0.01 (s,3H), 0.79 (s, 9H), 0.84 (t,
J = 6.8 Hz, 3H), 1.15―1.65 (20H), 2.11 (dt, J =
6.8, 7.6 Hz, 2H), 2.18 (dd, J = 1.2, 18 Hz, 1H),
2.25 (t, J = 7.6Hz, 2H), 2.51 (dd, J = 4.8, 18 Hz,
1H), 2.72 (br, 1H), 3.62 (s, 3H), 4.19 (br d, J =
4.8 Hz, 1H), 6.53 (dt, J = 1.6, 7.6 Hz, 1H).

【００７０】工程３：

【化５３】エノン体2 (96 mg, 0.2 mmol) のTHF―水―酢酸 (1:1:
2、12 mL) 溶液を70℃で12時間撹拌した。反応液を室温
まで放冷した後、飽和NaHCO₃水溶液を加えて中和し、生
成物を酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水Na₂SO₄で乾
燥後、ろ過、濃縮し、粗生成物をカラムクロマトグラフ
ィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル＝ 4：1）で
精製し、目的の3 (58 mg, 87%) を得た。 NEPP6 (3)：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.88 (t, J =
6.8 Hz, 3H), 1.20―1.32 (12H), 1.37 (m, 2H), 1.48
―1.6 (3H), 1.65 (m, 2H), 1.76―1.86 (br, 1H), 2.2
6 (m, 2H), 2.32 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.47 (m, 1H),
3.67 (s, 3H), 6.33 (dd, J = 1.8, 6.1 Hz, 1H), 6.5
3 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.54 (ddd, J =1.0, 2.6, 6.1
Hz, 1H).

【００７１】実施例６ (4R,5E)-5-(6-カルボメトキシヘキシリデン)-4-[6-(4-
メチルフェニル)ヘキシル]-2-シクロペンテノン（ＮＥ
ＰＰ１１）の合成工程１：

【化５４】１-ブロモ-6-(4-メチルフェニル)ヘキサン(465 mg, 1.8
2 mmol)のTHF (10 mL)溶液を―98℃に冷却し、tert-ブ
チルリチウム (1.82 M ペンタン溶液, 2.0 mL,3.64 mmo
l) を加え15分間撹拌した。この溶液にZn(CH₃)₂（1.0 M
ヘキサン溶液, 1.82 mL, 1.82 mmol）を加え、0℃に昇
温して20分間撹拌した後、反応混合物を再び―98℃に冷
却した。次に、(S)-4-(tert-ブチルジメチルシロキシ)-
2-シクロペンテン-1-オン(385 mg, 1.82 mmol) のTHF
(10 mL) 溶液を反応液に1時間かけてゆっくり滴下し、
さらに30分間撹拌した。これにメチル 6-ホルミルヘキ
サノエート(280 mg, 1.77 mmol) のTHF (10 mL) 溶液を
15分かけて滴下し、さらに20分間撹拌を続けた。反応混
合物を飽和NH₄Cl水溶液に注ぎ、生成物をヘキサンで抽
出した。抽出液を無水Na₂SO₄で乾燥後、ろ過、濃縮し、
得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲ
ル、ヘキサン：酢酸エチル＝ 6：1）で精製し、付加体4
(533 mg, 55%) を得た。化合物4：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ―0.02 (s, 3
H), 0.00 (s, 3H), 0.79 (9H), 1.15―1.60 (16H), 1.8
5 (br, 1H), 1.94 (br, 1H), 2.14 (br d, J = 18Hz, 1
H), 2.22 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.23 (s, 3H), 2.38―
2.45 (1H), 2.47 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.57 (s, 3H),
3.67 (m, 1H), 3.81 (br d, J = 2 Hz, 1H), 4.06 (m,
1H), 6.97 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.00 (d, J = 8.2 H
z, 2H).

【００７２】工程２および３：

【化５５】化合物4 (533 mg, 0.974 mmol) のジクロロメタン (10
mL) 溶液に室温でメタンスルホニルクロライド (225 μ
L, 2.85 mmol) と4-(ジメチルアミノ)ピリジン (700 m
g, 5.74 mmol) を加え室温で20時間撹拌した。反応混合
物に0.1 M HCl水溶液を加え、生成物をエーテルで抽出
した。抽出液を無水Na₂SO₄で乾燥後、ろ過、濃縮し、粗
生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキ
サン：酢酸エチル＝ 10：1）にかけ、少量の不純物を含
むエノン体5を得た。続いて、このエノン体5 (223 mg)
のTHF―水―酢酸 (1:1:2、16 mL) 溶液を70℃で17時間
撹拌した。反応液を室温まで放冷した後、飽和NaHCO₃水
溶液を加えて中和し、生成物を酢酸エチルで抽出した。
抽出液を無水Na₂SO₄で乾燥後、ろ過、濃縮し、粗生成物
をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：
酢酸エチル＝ 6：1）で精製し、目的の6 (58 mg, 25%)
を得た。 NEPP11 (6)：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.18―1.70
(15H), 1.80 (m, 1H), 2.24 (m, 2H), 2.31 (t, J = 7.
4 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.55 (t, J = 7.8 Hz, 2H),
3.46 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 6.32 (dd, J = 2.0, 6.
2 Hz, 1H), 6.52(t, J = 6.8 Hz, 1H), 7.05 (d, J =
8.2 Hz, 2H), 7.08 (d, J = 8.2 Hz, 2H),7.52 (ddd, J
= 0.8, 2.5, 6.2 Hz, 1H).

【００７３】実施例７ (4R,5E)-5-(6-カルボメトキシヘキシリデン)-4-[4-(4-
メチルフェニル)ブチル]-2-シクロペンテノン（ＮＥＰ
Ｐ１２）の合成実施例６において出発物質として１ブロモ−６−（４−
メチルフェニル）ヘキサンの代わりに、1-ブロモ-4-(4-
メチルフェニル)ブタンを用いた外は実施例６と同様に
して、標記化号物を得た。 NEPP12：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.25―1.42 (4
H), 1.46―1.69 (7H), 1.84 (m, 1H), 2.24 (m, 2H),
2.31 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.55 (dt,
J = 3.2, 7.8 Hz, 2H), 3.46 (m, 1H), 3.66 (s, 3H),
6.32 (dd, J = 1.8,6.2 Hz, 1H), 6.52 (t, J = 7.8 H
z, 1H), 7.03 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.08 (d, J = 8.0
Hz, 2H), 7.51 (ddd, J = 0.9, 2.5, 6.2 Hz, 1H).

【００７４】実施例８ (4R,5E)-5-(6-カルボメトキシヘキシリデン)-4-[2-(4-
メチルフェニル)エチル]-2-シクロペンテノン（ＮＥＰ
Ｐ１３）の合成実施例６において出発物質として１ブロモ−６−（４−
メチルフェニル）ヘキサンの代わりに、4-(2-ブロモエ
チル)トルエンを用いた外は実施例６と同様にして、標
記化号物を得た。 NEPP13：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.30―1.44 (m,
2H), 1.50 (q, J = 7.6Hz, 2H), 1.63 (q, J = 7.6 Hz,
2H), 1.83 (m, 1H), 2.08―2.35 (3H), 2.30 (t, J =
7.6 Hz, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.45―2.65 (m, 2H), 3.5
2 (m, 1H), 3.67(s, 3H), 6.36 (dd, J = 1.6, 6.0 Hz,
1H), 6.55 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.04(d, J = 7.8 H
z, 2H), 7.10 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.57 (dd, J = 2.
4, 6.0 Hz, 1H).

【００７５】実施例９ (4R,5E)-5-(6-カルボメトキシヘキシリデン)-4-[8-(4-
メチルフェニル)オクチル]-2-シクロペンテノン（ＮＥ
Ｐ１４）の合成実施例６において出発物質として１ブロモ−６−（４−
メチルフェニル）ヘキサンの代わりに、1-ヨード-8-(4-
メチルフェニル)-1-オクテンを用い、工程２の前に実施
例１の工程２の処理を行った外は実施例６と同様にし
て、標記化号物を得た。 NEPP14：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.18―1.43 (12
H), 1.45―1.70 (7H), 1.80 (m, 1H), 2.25 (m, 2H),
2.31 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.55 (t, J
= 7.8 Hz, 2H), 3.46 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 6.32
(dd, J = 1.6, 6.0 Hz, 1H), 6.52 (t, J = 7.8 Hz, 1
H), 7.05 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.08 (d, J =8.0 Hz,
2H), 7.52 (ddd, J = 0.8, 2.4, 6.0 Hz, 1H).

【００７６】実施例１０ (4R,5E)-5-(6-カルボメトキシヘキシリデン)-4-[6-(3-
メチルフェニル)ヘキシル]-2-シクロペンテノン（ＮＥ
ＰＰ１５）の合成実施例６において出発物質として１ブロモ−６−（４−
メチルフェニル）ヘキサンの代わりに、1-ブロモ-4-(3-
メチルフェニル)ブタンを用いた外は実施例６と同様に
して、標記化号物を得た。 NEPP15：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.18―1.42 (8
H), 1.44―1.70 (7H), 1.80 (m, 1H), 2.24 (m, 2H),
2.31 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.55 (t, J
= 7.6 Hz, 2H), 3.46 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 6.32
(dd, J = 1.8, 6.2 Hz, 1H), 6.52 (t, J = 7.6 Hz, 1
H), 6.95―7.02 (3H), 7.16 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.5
2 (ddd, J = 1.0, 2.4, 6.2 Hz, 1H).

【００７７】実施例１１ (4R,5E)-5-(6-カルボメトキシヘキシリデン)-4-[4-(3-
メチルフェニル)ブチル]-2-シクロペンテノン（ＮＥＰ
Ｐ１６）の合成実施例６において出発物質として１ブロモ−６−（４−
メチルフェニル）ヘキサンの代わりに、1-ブロモ-4-(3-
メチルフェニル)ブタンを用いた外は実施例６と同様に
して、標記化号物を得た。 NEPP16：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.25―1.42 (4
H), 1.45―1.70 (7H), 1.85 (m, 1H), 2.24 (m, 2H),
2.31 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.55 (m, 2
H), 3.46 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 6.32 (dd, J = 1.8,
5.8 Hz, 1H), 6.52(t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.92―7.04
(3H), 7.16 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.52 (ddd, J = 1.
1, 2.4, 5.8 Hz, 1H).

【００７８】実施例１２ (4R,5E)-5-(6-カルボメトキシヘキシリデン)-4-[2-(3-
メチルフェニル)エチル]-2-シクロペンテノン（ＮＥＰ
Ｐ１７）の合成実施例６において出発物質として１ブロモ−６−（４−
メチルフェニル）ヘキサンの代わりに、3-(2-ブロモエ
チル)トルエンを用いた外は実施例６と同様にして、標
記化号物を得た。 NEPP17：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.31―1.42 (m,
2H), 1.51 (q, J = 7.6Hz, 2H), 1.63 (q, J = 7.6 Hz,
2H), 1.84 (m, 1H), 2.10―2.30 (3H), 2.30 (t, J =
7.4 Hz, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.45―2.65 (m, 2H), 3.5
2 (m, 1H), 3.66(s, 3H), 6.36 (dd, J = 1.8, 6.2 Hz,
1H), 6.55 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.95(d, J = 7.6 H
z, 1H), 6.96 (s, 1H), 7.01 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.
18 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.57 (ddd, J = 1.1, 2.7, 6.
2 Hz, 1H).

【００７９】実施例１３ (4R,5E)-5-(6-カルボメトキシヘキシリデン)-4-(5-フェ
ニルペンチル)-2-シクロペンテノン（ＮＥＰＰ１８）の
合成実施例６において出発物質として１ブロモ−６−（４−
メチルフェニル）ヘキサンの代わりに、1-ブロモ-5-フ
ェニルペンタンを用いた外は実施例６と同様にして、標
記化号物を得た。 NEPP18：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.20―1.42 (6
H), 1.45―1.70 (7H), 1.80 (m, 1H), 2.24 (m, 2H),
2.30 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.59 (t, J = 7.8 Hz,2H),
3.46 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 6.32 (dd, J = 2.0, 6.
0 Hz, 1H), 6.52 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.13―7.20 (3
H), 7.24―7.30 (2H), 7.52 (ddd, J = 0.9,2.5, 6.0 H
z, 1H).

【００８０】実施例１４ (4R,5E)-5-(6-カルボメトキシヘキシリデン)-4-(7-フェ
ニルヘプチル)-2-シクロペンテノン（ＮＥＰＰ１９）の
合成実施例６において出発物質として１ブロモ−６−（４−
メチルフェニル）ヘキサンの代わりに、1-ブロモ-7-フ
ェニルヘプタンを用いた外は実施例６と同様にして、標
記化号物を得た。 NEPP19：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.17―1.42 (10
H), 1.45―1.70 (7H), 1.80 (m, 1H), 2.25 (m, 2H),
2.31 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.59 (t, J = 7.6 Hz,2H),
3.46 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 6.33 (dd, J = 2.0, 6.
0 Hz, 1H), 6.52 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.13―7.20 (3
H), 7.23―7.30 (2H), 7.52 (ddd, J = 0.9, 2.5, 6.0
Hz, 1H).

【００８１】試験例１ＰＣ１２細胞に対するＰＧＪ誘導体の神経突起伸展促進
活性ここで使用する被検化合物の構造式をそれらの代謝経路
とともに以下に示す：

【化５６】ダルベッコ改変イーグル培地および、５％（ｖ／ｖ）非
働化（５６℃、３０分）したウマ血清（ＧＩＢＣＯ）お
よび５％（ｖ／ｖ）牛胎仔血清（三菱化学）を含有する
Ｆ１２培地１：１（以下、５／５ＤＦと称する）を含む
７５ｃｍ²フラスコ（FALCON）中にて、ＰＣ１２細胞
（ＡＴＣＣＣＲＬ１７２１）の亜株であるＰＣ１２ｈ
細胞（Dev.Brain Res., 6, 143-250(1983)）を維持させ
た。

【００８２】神経突起伸展の評価のため、細胞をコラー
ゲン被覆２４ウエル平板（住友ベークライト）に密度１
ｘ１０⁴細胞／ｃｍ²で移し、５／５ＤＦ中にて３時間イ
ンキュベートした。培地を、５／５ＤＦから血清を除い
た培地（以下、ＤＦと称する）に換え、１時間インキュ
ベートした後、ＰＧＡ₁、ＰＧＡ₂、ＰＧＤ₂、ＰＧＪ₂、
Δ¹²−ＰＧＪ₂または１５−デオキシ−Δ^12,14−ＰＧＪ
₂（Cayman Chemical）のエタノール０．１％溶液を加え
た。その３０分後にＮＧＦ（２．５Ｓ）（Chemicon Int
ernational）（５０ｎｇ／ｍｌ）を加えた。次いで、細
胞を２４時間インキュベートし、全細胞（約７０−１０
０）当たり神経突起（＞１０μｍ）を担持する細胞を同
領域内にてカウントした。同時にペルオキシソーム増殖
剤応答性レセプターγ（ＰＰＡＲγ）の活性化因子であ
るトログリタゾン（Sankyo Co.）を用いて同様に処理
し、神経突起伸展に対するＰＰＡＲγ活性化の関与を評
価した。

【００８３】得られた結果を図１に示す。ＰＰＡＲγ活
性化因子であるトログリタゾン、ＰＧＡ₁、ＰＧＡ₂およ
びＰＧＤ₂は濃度０．１−５．０μＭでは神経突起の伸
展を促進させないが、ＰＧＪ₂、Δ¹²−ＰＧＪ₂および１
５−デオキシ−Δ^12,14−ＰＧＪ₂は同濃度にて神経突起
伸展を促進した。促進効果の強度は１５−デオキシ−Δ
^12,14−ＰＧＪ₂＞Δ¹²−ＰＧＪ₂＞ＰＧＪ₂であった。Ｐ
ＧＪ₂はΔ¹²−ＰＧＪ₂へと容易に変換されるので、ＰＧ
Ｊ₂における促進活性はこのΔ¹²−ＰＧＪ₂に由来すると
考えられる。これを前提にすれば、本試験において促進
活性を示した化合物の共通項はジエノン構造であり、こ
のことは神経突起伸展促進活性にこのジエノン構造が重
要な役割を果たしていることを示唆している。

【００８４】図２は、本試験において最も良好な成績を
示した１５−デオキシ−Δ^12,14−ＰＧＪ₂の促進活性を
示す写真である。血清不含のＤＦ培地にて２４時間イン
キュベートしてもＰＣ１２ｈ細胞は神経突起を伸展せず
（図２ａ）、１５−デオキシ−Δ^12,14−ＰＧＪ₂は単独
では伸展の促進効果を示していない（図２ｂ）。他方、
ＰＣ１２ｈ細胞をＮＧＦ（５０ｎｇ／ｍｌ）とともに２
４時間インキュベートすると、若干の神経突起の伸展が
認められる（図２ｃ）。１５−デオキシ−Δ ^12,14−Ｐ
ＧＪ₂をＮＧＦとともに存在させると、神経突起の伸展
が顕著に促進されている（図２ｄ）。

【００８５】試験例２ＮＥＰＰ類の神経突起伸展促進活性実施例および参考例にて製造したＮＥＰＰ６−１９およ
びSuzuki et al., J.Med.Chem., 41, 3084-3090 (1989)
に記載した方法に従い製造したＮＥＰＰ１−５、ＧＩＦ
０１７５を被検化合物として使用する以外は、試験例１
と同様に処理し、神経突起の伸展促進活性を調べた。

【００８６】得られた結果を図３−７に示す。図３は、
ＮＥＰＰ４およびＮＥＰＰ１０によって誘導されるＰＣ
１２ｈ細胞における神経突起伸展活性を証明する写真で
ある。ＰＣ１２ｈ細胞は血清不含のＤＦ培地では２４時
間で全く神経突起を伸展していない（図３Ａ）が、ＮＧ
Ｆ（５０ｎｇ／ｍｌ）とともに２４時間インキュベート
すると若干神経突起が伸展された（図３Ｂ）。他方、Ｎ
ＥＰＰ４またはＮＥＰＰ１０は単独では効果がないが、
それをＮＧＦと存在させると神経突起伸展が顕著に促進
された（ＮＥＰＰ４、６６.０±３.２％；ＮＥＰＰ１
０、６６.７±８.４％）（図３Ｃおよび図３Ｄ）。

【００８７】図４は、ＮＥＰＰ１−６によって誘導され
るＰＣ１２ｈ細胞における神経突起伸展の濃度依存性の
促進活性を示している。図４より、ＮＥＰＰ１−６は
０.１−０.５μＭにおいてＮＥＰＰ４と同様の活性を有
することが分かる。

【００８８】図５は、ＮＥＰＰ７−１０によって誘導さ
れるＰＣ１２ｈ細胞における神経突起伸展の濃度依存性
の促進活性を示している。ＮＥＰＰ７−９もこの活性を
保持していたが、その効力はＮＥＰＰ１−６と比較して
低かった。ＮＥＰＰ１０はＮＥＰＰ１−６と同等のレベ
ルの神経突起伸展の促進活性を有していた。

【００８９】図６は、ＮＥＰＰ１１−１９による、ＰＣ
１２ｈ細胞における神経突起伸展の促進活性を示してい
る。ＮＧＦの濃度は（５０ng／ml）であり、ＮＥＰＰ１
１−１９の濃度は０.５μMである。図７は、ＮＥＰＰ１
１の場合の神経突起伸展促進活性の濃度依存性を示す。

【００９０】試験例３毒性試験（Ｉ) ＮＥＰＰ類は元来、抗ガン剤として開発されたものであ
るため、ＰＣ１２細胞に対する細胞毒性活性を有してい
る可能性がある。細胞毒性を評価するため、ＭＴＴ活性
の測定を元の方法（Masmann, J. Immunol. Methods, 6
5, 55-63 (1983))）の改変法（Kuboなど、Dev, Brain R
es 85 249-258(1994)）に従って行なった。１ｘ１０⁵細
胞／ｃｍ²でポリエチレンイミン被覆２４ウエル平板（F
ALCON）にＰＣ１２細胞を移し、試験例１に記載の５／
５ＤＦ中で２４時間インキュベートした。培地を血清不
含ＤＦと交換し、１時間インキュベートし、種々の濃度
のＰＧ類を加えた。細胞を４８時間インキュベートし、
ＭＴＴテトラゾリウム塩（３−（４，５−デメチル−２
−チアゾリル９−２，５ジフェニル−２Ｈ−テトラゾ
リウムブロミド）を最終濃度１ｍｇ／ｍｌで培養培地に
加えた。３７℃で２時間インキュベートした後，２０％
（ｗ／ｖ）ＳＤＳおよび５０％（ｖ／ｖ）Ｎ，Ｎ−ジメ
チルホルムアミドｐＨ４．７を含有する細胞溶解緩衝液
を等容積加えて検定を終了した。３７℃で一晩インキュ
ベートした後、５４０ｎｍにおける吸光度を測定した。
コントロールのＭＴＴ活性に対する比を細胞の生存率と
した。

【００９１】

【表１】表１はＰＣ１２細胞についてのＮＥＰＰ１−１０の毒性
試験の結果を示す。ＮＥＰＰ１−６は比較的毒性が強
く、これに対してＮＥＰＰ７−１０は比較的低毒性であ
った。

【００９２】試験例４背根神経節ニューロンに対する神経突起再生／伸展促進
活性ＰＣ１２ｈ細胞のような細胞株ではなく、初代培養ニュ
ーロンを用いてＮＥＰＰ類における神経突起再生／伸展
の促進活性を確かめた。ここでは、ニワトリ胎仔（受精
後７日齢）背根神経節（ＤＲＧ）ニューロンにＮＥＰＰ
１０を適用した。得られた結果を図８に示す。ＤＲＧニ
ューロンをＮＧＦ（５０ｎｇ／ｍｌ）の不存在下（図８
Ａおよび図８Ｂ）または存在下（図８Ｃおよび図８Ｄ）
に２４時間培養した。ＢおよびＤでは、ＮＥＰＰ１０
（１．０μＭ）をＮＧＦを加える３０分前に加えた。対
照ＤＲＧニューロンおよびＮＥＰＰ１０のみで処理した
ニューロンは低レベルでしか神経突起を再生／伸展させ
ないが（図８Ａおよび図８Ｂ）、ＮＧＦを存在させると
再生／伸展活性が促進された（図８Ｃ）。ＮＧＦの他さ
らにＮＥＰＰ１０を存在させると再生／伸展活性は顕著
に促進された（図８Ｄ）。これらの結果はＮＥＰＰ類に
よる神経突起の伸展の促進はＰＣ１２ｈ細胞に限られた
ものではなく、神経細胞一般に及ぶ現象であることを示
している。

【００９３】試験例５１位カルボン酸の化学修飾による神経突起伸展促進活性
への影響１位のカルボン酸のエステルの影響を調べるため、実施
例１記載の手法に従い、ＮＥＰＰ４並びにそのベンジル
アミド体およびフリーのカルボン酸のＰＣ１２ｈ細胞に
対する各種化合物の神経突起伸展促進活性を調べた。Ｎ
ＥＰＰ４、そのベンジルアミド体およびカルボン体は参
考例２記載のようにして製造した。得られた結果を図９
に示す。これにより、１位のカルボン酸がエステル化さ
れていることは神経突起伸展促進活性に影響を与えない
ことが明らかとなった。

【００９４】試験例６ＨＴ２２細胞におけるグルタミン酸誘発アポトーシスに
対するＮＥＰＰ類の神経細胞生存維持作用（１）マウスの海馬の神経芽細胞腫由来であるＨＴ２２細胞
は、高濃度（５ｍＭ）のＬ−グルタミン酸を添加すると
グルタチオン枯渇によりアポトーシスを受けることが知
られている（Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89,8264-826
7(1992)）。ＮＥＰＰ類の神経細胞の生存維持効果を調
べるため、ＨＴ２２細胞を用い、これにグルタミン酸を
添加してアポトーシスを起させ、さらにＮＥＰＰ類を添
加してＮＥＰＰ類が細胞死を抑制するか否かを調べた。
ＨＴ２２細胞（David Schubert lab. in Salk Instより
入手）を、５％（ｖ／ｖ）の非働化した（５６℃、３０
分）ウマ血清（ＧＩＢＣＯ）及び５％（ｖ／ｖ）の牛胎
仔血清（Mithubishi Kasei）を補った Dulbecco Modifi
ed Eagle （ＤＭＥ）培地（５／５ＤＭＥ）を用いて
７５ｃｍ²フラスコ（ＦＡＬＣＯＮ）中に保持した。

【００９５】細胞生存率を評価するため、ＭＴＴ活性の
測定を元の方法（Masmann, J. Immunol. Methods, 65,
55-63 (1983))）の改変法（Kuboなど、Dev, Brain Res
85 249-258(1994)）に従って行なった。細胞を、６×１
０⁴細胞／ｃｍ²の密度で２４ウエルのプレート（ＦＡＬ
ＣＯＮ）上に移し、５／５ＤＭＥ中１２時間インキュベ
ートした後、ＮＥＥＰを加えた。グルタミン酸はこの３
０分後に添加した。グルタミン酸（５ｍＭ）は以下のよ
うにして添加した。滅菌水で２００ｍＭの液をつくり、
１／４０（ｖ／ｖ）の２００ｍＭグルタミン酸溶液を添
加した。細胞を２４時間インキュベートし、テトラゾリ
ウム塩ＭＴＴを培養物に最終濃度１ｍｇ／ｍｌで加え
た。３７℃で２時間インキュベートした後、２０％（ｗ
／ｖ）ＳＤＳ及び５０％（ｖ／ｖ）Ｎ，Ｎ−ジメチルホ
ルムアミドを含む溶解緩衝液、ｐＨ４.７を等容積加え
ることによりそのアッセイを中止させた。３７℃で一晩
インキュベートした後、５４０ｎｍでの吸光度を測定し
た。

【００９６】結果を図１０〜１２に示す。図１０は、グ
ルタミン酸塩で誘発されるＨＴ２２細胞のアポトーシス
に及ぼすＮＥＥＰ６又はシクロヘキシミドの添加の効果
を示す顕微鏡写真である。図１０Ａは、もとのＨＴ２２
細胞の位相差写真であり、図１０Ｂは、該細胞にＬ−グ
ルタミン酸（濃度５ｍＭ）を添加した場合である。この
グルタミン酸による細胞死はＮＭＤＡ受容体を介した興
奮毒性ではなく、グルタチオン凅渇により誘導される細
胞死である。グルタミン酸を添加すると８時間後には、
細胞質が断片化し、核が凝集した像が認められる。これ
はアポトーシスの形態的な特徴である。その過程は２４
時間までに完全にプラトー（大部分の細胞がＬ−グルタ
ミン酸に反応して死ぬ）に達した。グルタミン酸の添加
によりＨＴ２２細胞がアポトーシスを起しているのが観
察される（特に矢印部分）。

【００９７】図１０Ｃは、グルタミン酸に加えてＮＥＰ
Ｐ６（１μＭ）をさらに添加した場合である。図１０Ｃ
を図１０Ａ及びＢと比較すると、グルタミン酸添加によ
り誘発されるアポトーシスがＮＥＰＰ６の添加により抑
制されることがわかる。図１１Ｄは、ＮＥＰＰ６に代え
てシクロヘキシミド（１μＭ）を添加した場合である。
翻訳阻害剤であるシクロヘキシミドを存在させるとアポ
トーシスは完全に抑制され、蛋白質への翻訳が必要であ
ることがわかる。これはアポトーシスの典型的な特徴で
ある。

【００９８】図１０Ｅ−Ｈは、図１０Ａ−Ｄにそれぞれ
対応する、ＨＴ２２細胞の核をヘキスト染色したものの
蛍光写真である。グルタミン酸の添加により核が凝集を
起し（図１０Ｆ）、ＮＥＰＰ６を添加するとこれが抑制
されることがわかる（図１０Ｇ）。ＮＥＰＰ６はグルタ
ミン酸で誘発されるＨＴ２２細胞のアポトーシスを抑制
する効果、即ち細胞保護効果を有することが示される。

【００９９】図１１は、グルタミン酸で誘発されるＨＴ
２２細胞のアポトーシスに対するＮＥＰＰ１−１０の神
経細胞死抑制効果を定量的に示したものである。ＮＥＰ
Ｐ１−２及びＮＥＰＰ７−１０はＮＥＰＰ３−４及び５
−６より保護効果が小さい。ＮＥＰＰ１−６に匹敵する
レベルで神経突起伸展促進作用を有するＮＥＰＰ１０
（図５を参照）が神経細胞死抑制効果が小さいことは指
摘する価値があり、神経細胞死抑制作用が神経突起伸展
促進作用とは細胞内メカニズムが異なっていることを示
唆する。ＮＥＰＰ３−４及び５−６は死を７５％以上抑
制するが、ＮＥＰＰ１−１０の中ではＮＥＰＰ６が最も
広い濃度（０.２−２.０μＭ）で細胞死を抑制する。

【０１００】図１２はグルタミン酸で誘発されるＨＴ２
２細胞に対するＧＩＦ０１７５の神経細胞抑制効果を定
量的に示す。図１２から明らかなようにＧＩＦ０１７５
は細胞死を部分的に抑制する作用があるが、一方神経突
起伸展促進作用はほとんどない。

【０１０１】試験例７毒性試験（II）実施例６においてアポトーシス誘発剤であるグルタミン
酸を加えなかった外は、実施例６と同様にしてＮＥＰＰ
３−６のＨＴ２２細胞に対する細胞毒性を調べた。図13
に結果を示す。ＮＥＰＰ３および４は比較的毒性が強く
ＮＥＰＰ５および６は比較的毒性が弱い。図１１に示す
ように、細胞死抑制作用はＮＥＰＰ６＞ＮＥＰＰ５であ
るので、ＮＥＰＰ１−１０の中ではＮＥＰＰ６が最良の
候補と考えられる。

【０１０２】比較試験例１ＨＴ２２細胞におけるグルタミン酸誘発アポトーシスに
対するＮＥＰＰの神経細胞生存維持作用に及ぼすジエノ
ン構造の影響ジエノン構造を有するＮＥＰＰ６の神経細胞死抑制効果
を、類似の化学構造を有するがエノン構造を有する以下
の化合物と比較した。

【化５７】

【０１０３】これらの化合物を用いる以外は試験例６と
同様の方法により、ＨＴ２２細胞におけるグルタミン酸
誘発アポトーシスに対するこれら化合物の神経細胞生存
維持作用を調べた。結果を図１４に示す。ジエノン構造
を有するＮＥＰＰ６が優れた神経細胞死抑制効果を有す
るのに対し、モノエノン構造を有するこれらの化合物は
神経細胞死抑制効果を示さない。このことは細胞の抑制
にジエノン構造が必須であることを示す。

【０１０４】試験例８ＨＴ２２細胞におけるグルタミン酸誘発アポトーシスに
対するＮＥＰＰ類の神経細胞生存維持作用（２）ＮＥＰＰ６のいくつかの誘導体（ＮＥＰＰ１１−１９）
について更に神経細胞死抑制効果を調べた。これらの化
合物を用いる以外は試験例６と同様の方法により、ＨＴ
２２細胞におけるグルタミン酸誘発アポトーシスに対す
る神経細胞生存維持作用を調べた。結果をＮＥＰＰ６と
比較して図１５に示す。これらの化合物の中でＮＥＰＰ
１１は、最も優れた神経細胞保護効果を示し、しかもそ
の効果はＮＥＰＰ６より特に低濃度で強力であった。図
６及び図７に示すように、ＮＥＰＰ１１はＰＣ１２細胞
において優れた神経突起伸展促進作用を示す。ＮＥＰＰ
１１は、神経突起伸展促進作用及び神経細胞生存維持作
用を有する神経栄養因子様低分子化合物の最良の候補で
あることを示す。

【０１０５】試験例９皮質ニューロン（妊娠２０日齢）におけるグルタミン酸
誘発アポトーシスに対するＮＥＰＰ１１の神経細胞生存
維持作用ＮＥＰＰの神経細胞死抑制効果が初代培養ニューロンに
対してもあることを示すために、ＨＴ２２細胞に代え
て、大脳皮質ニューロンを使用して、グルタミン酸誘発
アポトーシス(Raten RR, Murphy TH. and Baraban JM,
J. Neurochem 62376-379(1994))に対するＮＥＰＰ１１
の保護効果を確認した。大脳皮質ニューロンは以下のよ
うにして得た。ラット（Ｗｉｓｔａｒ，♀または♂；Ｎ
ｉｐｐｏｎＳＬＣ）の妊娠２０日齢（Ｅ２０）の胎仔
から大脳皮質を取り出した。その分散培養系を以下のよ
うにして得た。組織を、パパイン（９０単位）、ＤＮａ
ｓｅ（２０００単位）、ＤＬ−システイン（２ｍｇ）、
再結晶化ウシ血清アルブミン（２ｍｇ）及びグルコース
（５０ｍｇ）を含むＣａ²⁺，Ｍｇ ²⁺を含まない燐酸緩衝
液（ＰＢＳ（−））１０ｍｌに加え、次に３７℃のイン
キュベーターで２００ｒｐｍの一定の回転速度で３０分
間インキュベートした。パパイン消化の後、その組織を
培地（ウシ胎仔血清：５％；非働化したウマ血清：５
％；Dulbecco Modified Eagle 培地及び１５ｍＭのＨＥ
ＰＥＳ緩衝液、ｐＨ７．４、３０ｎＭのセレニウム、
１．９ｍｇ／ｍｌの重炭酸ナトリウムを含むＨａｍのＦ
−１２培地の１：１混合物（ＤＦ培地）：９０％）に再
懸濁した。その解離した細胞をポリエチレンイミンでコ
ートした４８ウエルのプレート（住友ベークライト）上
に３ｘ１０⁵細胞／ｃｍ²の密度で直接プレートした。そ
の細胞を３７℃で４８時間、ＣＯ₂インキュベーター中
５％ＣＯ₂及び９％Ｏ₂で培養した。２４時間５／５ＤＦ
で培養した後、５／５ＤＭＥに培地を交換した。１時間
５／５ＤＭＥで培養した後、各濃度のＮＥＰＰ１１を添
加し、さらに３０分後、５ｍＭのグルタミン酸を加え
た。２４時間培養した後、ＭＡＰ２で染色し（Enokido
Y. and Hatanaka H., Neurosci., 57, 965-972(199
3)）、ＭＡＰ２陽性細胞をカウントし、コントロールと
のＭＡＰ２陽性細胞の比を神経細胞の生存率とした。

【０１０６】結果を図１６に示す。大脳皮質ニューロン
におけるグルタミン酸により誘発されるグルタチオン凅
渇によるアポトーシスに対してもＮＥＰＰ１１は神経細
胞生存維持作用を有することがわかる。顕微鏡による観
察によってもこのことが確認された。これらの結果は、
ＮＥＰＰによる神経細胞保護作用はＨＴ２２細胞に特異
的なものではなく、神経細胞一般の現象であることを示
している。

【０１０７】試験例１０大脳皮質ニューロン（妊娠２０日齢）における血清除去
誘発アポトーシスに対するＮＥＰＰ１１の神経細胞生存
維持作用試験例６、８および９では、グルタミン酸塩によって誘
発されるアポトーシスに対するＮＥＰＰの保護作用を調
べた。本試験例では血清除去(Satoh T, SakaiN, Enokid
o Y, Uchiyama Y, and Hatanaka H, Brain Res 733, 9
-14(1996))により誘発されるアポトーシスに対するＮＥ
ＰＰの神経細胞保護作用をさらに調べた。試験に使用し
た神経細胞は試験例９と同様に妊娠２０日齢の胎仔から
調整した大脳皮質ニューロンである。アポトーシスを誘
発するために培地中に血清を含ませなかった外は実験例
９と同様の方法により神経細胞の生存率を測定した。

【０１０８】結果を図１６に示す。皮質ニューロン（妊
娠２０日齢）における血清除去誘発アポトーシスに対し
てもＮＥＰＰはニューロン生存維持作用を有することが
わかる。このことはＮＥＰＰの神経細胞死抑制作用が、
グルタミン酸により誘発されるアポトーシスに特異的な
ものではなく、他の刺激による神経細胞死にも及ぶこと
を示唆する。

【０１０９】試験例１１マウスにおける永久閉塞により誘発される虚血性神経細
胞死に及ぼすＮＥＰＰの作用試験例６−１０では細胞レベルでのＮＥＰＰの神経細胞
死抑制効果を示したが、本試験例ではマウスの局所脳虚
血による神経細胞死に対する、ＮＥＰＰの神経細胞死抑
制効果、すなわち個体レベルでの効果を確認した。成体
のＩＣＲマウス（雄性、２５〜３０ｇ、ＳＬＣ、浜松）
を、ベーパライザー（Ｈａｌｏｗｉｃｋ，Ｍｕｒａｃｏ
Ｍｅｄｉｃａｌ，東京）を用いて、誘導のため、７０
％のＮ₂Ｏ及び３０％のＯ₂中の１．５％のハロタンで麻
酔し、１．０％のハロタンで麻酔を維持した。各マウス
において、局所的な大脳の血流（ｒＣＢＦ）をフレキシ
ブルなプローブを用いてＬａｓｅｒ―Ｄｏｐｐｌｅｒフ
ローメトリー（ＦＬＯ−Ｃｌ、Ｏｍｅｇａｗａｖｅ，東
京）によりモニターした。そのプローブの先端をシアノ
アクリレート接着剤（アロンアルファ、ＴＯＡ，東京）
で頭蓋（プレグマの２ｍｍ後方及び６ｍｍ外側）に貼り
つけた。熱伝対で調節する加熱パッド（ＮＳ−ＴＣ，ニ
ューロサイエンス、東京、及びＢＡＴ−１２、Ｐｈｙｓ
ｉｔｅｍｐ，ＮＪ，米国）を用いて、直腸及び側頭筋の
温度を手術の間、約３７℃に維持し、再潅流の後３時間
モニターした。１０％エタノール１０ｍＭに溶解した６
６ｎｇ又は６６０ｎｇのＮＥＥＰ１１を、Ｈａｍｉｌｔ
ｏｎのマイクロシリンジを用いて虚血３０分前に左側の
脳室（ブレグマの−０．９ｍｍ外側、−０．１ｍｍ後
方、−３．０ｍｍ深）中に注入した。シリコン樹脂及び
硬化剤混合物（キサントプレン及びオプトシルアクチベ
ーター、Ｈｅｒａｅｕｓ、Ｄｏｒｍａｇｅｎ，ドイツ）
でコートした８−０ナイロンモノフィラメントで中大脳
動脈(ＭＣＡ）閉塞を誘発した。そのフィラメントを左
の内頚動脈中へ、前大脳動脈まで押し入れた。虚血の誘
発の２４時間後に、過量のペントバルビタールナトリウ
ムでマウスを深く麻酔し、脳をすばやく取り除き、マウ
スの脳マトリックス（ニュウロサイエンス、東京）を用
いて２ｍｍ厚の５つの冠状切片に切断した。その脳スラ
イスを２％の２，３，５−トリフェニルテトラゾリウム
クロライド（ＴＴＣ）（Ｓｉｇｍａ）で処理した後、１
０％ホルマリンで一晩処理した。白色の輪郭を画く梗塞
した面積を、イメージ分析システム（オリンパス、東
京）により各スライスの後表面で測定し、梗塞体積を各
スライスの梗塞面積を合計することにより計算した。動
物実験プロトコールは動物実験の国立循環器センターの
ガイドラインに従った。

【０１１０】結果を図１８に示す。ＮＥＰＰ１１を投与
することにより、梗塞容積が減少したので、ＮＥＰＰが
局所脳虚血により誘発される神経細胞死を抑制したこと
がわかる。即ち。ＮＥＰＰは個体レベルにおいても神経
細胞死抑制効果を有することがわかる。

【０１１１】

【発明の効果】以上の試験例で示したように、本発明の
化合物は、神経突起の再生／伸展促進作用、及び／また
は神経細胞の生存維持作用を有する。即ち本発明により
神経栄養因子様活性を有する低分子化合物を有効成分と
する医薬組成物が提供される。なお、本発明の化合物は
神経疾患などの治療剤としての有用性にとどまらず、本
化合物の示す生理機能解析や生体内動態解析、病態診断
のための分子プローブとしての応用など、多方面での有
用性が期待できる。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＰＧＪ誘導体によって誘導されるＰＣ１２ｈ
細胞における神経突起伸展の濃度依存性の促進活性を示
すグラフである。値は平均±Ｓ.Ｄ.（ｎ＝４）で表して
いる。

【図２】１５−デオキシ−Δ^12,14−ＰＧＪ₂およびＮ
ＧＦによって誘導されるＰＣ１２ｈ細胞における神経突
起伸展活性を証明する、生物の形態を表す図面に代わる
写真である。棒は１０μｍである。 a: 対照, b: 15-デオキシ-△^12,14-PGJ₂(0.5μM),c: N
GF(50ng/ml), d: 15-デオキシ-△^12,14-pGJ₂(0.5μM)
＋NGF(50ng/ml)

【図３】ＮＥＰＰ４およびＮＥＰＰ１０によって誘導
されるＰＣ１２ｈ細胞における神経突起伸展活性を証明
する、生物の形態を表す図面に代わる写真である。棒は
１０μｍである。 A: 対照, B: NGF(50ng/ml), C: NGF(50ng/ml)＋NEPP4 (0.5μM), D: NGF(50ng/ml)＋NEPP10 (0.5μM)

【図４】ＮＥＰＰ１−６によって誘導されるＰＣ１２
ｈ細胞における神経突起伸展の濃度依存性の促進活性を
示すグラフである。値は平均±Ｓ.Ｄ.（ｎ＝４）で表し
ている。

【図５】ＮＥＰＰ７−１０によって誘導されるＰＣ１
２ｈ細胞における神経突起伸展の濃度依存性の促進活性
を示すグラフである。値は平均±Ｓ.Ｄ.（ｎ＝４）で表
している。

【図６】ＮＥＰＰ１１−１９によって誘導されるＰＣ
１２ｈ細胞における神経突起伸展促進活性を示すグラフ
である。値は平均±Ｓ.Ｄ.（ｎ＝４）で表している。

【図７】ＮＥＰＰ１１によって誘導されるＰＣ１２ｈ
細胞における神経突起伸展の濃度依存性の促進活性を示
すグラフである。値は平均±Ｓ.Ｄ.（ｎ＝４）で表して
いる。

【図８】ＤＲＧニューロンに対するＮＥＰＰ１０の神
経突起再生／伸展の促進活性を証明する、生物の形態を
表す図面に代わる写真である。棒は１０μｍである。 A: 対照, B: NEPP10(1μM), C: NGF(50ng/ml),D: NEP
P10(1μM)＋NGF(50ng/ml)

【図９】ＮＥＰＰ４およびそのニコチンアミド体、カ
ルボン酸体によって誘導されるＰＣ１２ｈ細胞における
神経突起伸展活性を示すグラフである。値は平均±Ｓ.
Ｄ.（ｎ＝４）で表している。

【図１０】グルタミン酸で誘発されるＨＴ２２細胞の
アポトーシスに対するＮＥＰＰ６の生存維持作用を示す
図面に代わる写真である。 A,E: 対照, B,F: ＋L-グルタミン酸(5mM),C,G: ＋L-グ
ルタミン酸(5mM)＋NEPP6(1.0μM),D,H: ＋L-グルタミン
酸(5mM)＋シクロヘキシイミド(1.0μM)

【図１１】グルタミン酸で誘発されるＨＴ２２細胞の
アポトーシスに対するＮＥＰＰ１−１０の生存維持作用
の濃度依存性を示すグラフである。値は平均±Ｓ.Ｄ.
（ｎ＝４）で表している。

【図１２】グルタミン酸で誘発されるＨＴ２２細胞の
アポトーシスに対するＮＥＰＰ２０の生存維持作用の濃
度依存性を示すグラフである。値は平均±Ｓ.Ｄ.（ｎ＝
４）で表している。

【図１３】ＨＴ２２細胞に対するＮＥＰＰ３−６の細
胞毒性を示すグラフである。値は平均±Ｓ.Ｄ.（ｎ＝
４）である。

【図１４】グルタミン酸で誘発されるＨＴ２２細胞の
アポトーシスに対するＮＥＰＰの生存維持作用に及ぼす
ジエノン構造の影響を示すグラフである。値は平均±
Ｓ.Ｄ.（ｎ＝４）で表している。

【図１５】グルタミン酸で誘発されるＨＴ２２細胞の
アポトーシスに対するＮＥＰＰ１１−１９の生存維持作
用の濃度依存性を示すグラフである。値は平均±Ｓ.Ｄ.
（ｎ＝４）で表している。

【図１６】グルタミン酸または血清除去により誘発さ
れる大脳皮質ニューロンのアポトーシスに対するＮＥＰ
Ｐ１１の生存維持作用の濃度依存性を示すグラフであ
る。値は平均±Ｓ.Ｄ.（ｎ＝４）で表している。

【図１７】マウスにおいて恒久的な閉塞により誘発さ
れる脳の梗塞に対するＮＥＰＰ１１の作用を示す棒グラ
フである。値は平均±Ｓ.Ｄ.（ｎ＝４）で表している。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者鈴木正昭愛知県名古屋市東区徳川町1010−1202 (72)発明者名村尚武大阪府吹田市青山台３−50 Ｄ−11 205 Ｆターム(参考） 4C086 AA01 AA02 DA03 MA01 MA04 NA14 ZA02 4H006 AA03 AB20 AB21 UE14 UE38 UE52 UE54 UE55

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ジエノン構造を有する有機化合物を有効
成分として含有する、（ｉ）神経突起の再生／伸展作
用、及び／又は（ｉｉ）神経細胞の生存維持作用を有す
る医薬組成物。
【請求項２】該有機化合物が式Ｉ：【化１】［式中、Ｒ¹およびＲ²はそれぞれ独立して水素、アルキ
ル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル
基、シクロアルケニル基、アリール基、ヘテロアリール
基、アラルキル基、ヒドロキシ基、カルボキシ基または
アミノ基であり、これらの基は各々置換されていてもよ
く、波線はそれぞれ、本化合物がその部分においていずれか
の立体異性体またはその混合物であることを意味する］
で示される化合物またはそれらの製薬的に許容される塩
である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】該有機化合物がプロスタグランジンＡ誘
導体またはＪ誘導体の化合物である請求項２に記載の医
薬組成物。
【請求項４】該有機化合物がΔ⁷プロスタグランジン
Ａ₁誘導体である請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】該有機化合物が、式ＩＩ−１：【化２】又は、式ＩＩ−２：【化３】［Ｒ³は前記のＲ¹と同意義であり、Ｒ⁴は水素、アルキル基、アルケニル基、アルキニル
基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、アリール
基、ヘテロアリール基、またはアラルキル基であり、こ
れらの基は各々置換されていてもよく、波線はそれぞれ、本化合物がその部分においていずれか
の立体異性体またはその混合物であることを意味する］
で示される化合物またはその製薬的に許容される塩であ
る請求項２又は３に記載の医薬組成物。
【請求項６】Ｒ⁴が式：【化４】［式中、Ｚ¹およびＺ²はそれぞれ独立して水素、アルキ
ル基、アリール基、ハロゲン、置換されていてもよいヒ
ドロキシ基、置換されていてもよいカルボキシル基、置
換されていてもよいアミノ基、シアノ基、またはトリア
ルキルスズであり、ｎは０−１０である］で示される基である請求項５に記
載の医薬組成物。
【請求項７】該有機化合物が式ＩＩＩ−１：【化５】または、式ＩＩＩ−２：【化６】［式中、Ｘは置換されていてもよいヒドロキシ基または
置換されていてもよいアミノ基であり、Ｒ⁴は上に定義した通りであり、波線はそれぞれ、本化合物がその部分においていずれか
の立体異性体またはその混合物であることを意味する］
で示される化合物またはその製薬的に許容される塩であ
る請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項８】Ｘがヒドロキシ基またはアルコキシ基で
あり、Ｒ⁴がアルキル基である請求項７に記載の医薬組
成物。
【請求項９】式Ｉで示される有機化合物において、Ｒ
²がアルキル基である請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項１０】Ｒ¹が、（ＣＨ₂）₅ＣＯＸ（式中、Ｘ
は置換されていてもよいヒドロキシ基または置換されて
いてもよいアミノ基である）である請求項９に記載の医
薬組成物。
【請求項１１】式Ｉで示される有機化合物において、
Ｒ²が式：【化７】［式中、Ｙ¹およびＹ²はそれぞれ独立して水素、アルキ
ル基、アルケン基、アリール基、ハロゲン、置換されて
いてもよいヒドロキシ基、置換されていてもよいカルボ
キシル基、置換されていてもよいアミノ基、シアノ基、
またはトリアルキルスズであり、ｍは０−１０である］で示される基である請求項２に記
載の医薬組成物。
【請求項１２】Ｙ¹が水素であり、Ｙ²がメチル基であ
る請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】メチル基がパラ位にある請求項１２に
記載の医薬組成物。
【請求項１４】Ｒ¹が、（ＣＨ₂）₅ＣＯＸ（式中、Ｘ
は置換されていてもよいヒドロキシ基または置換されて
いてもよいアミノ基である）である請求項１１−１３の
いずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１５】式ＩＩ’−１：【化８】［Ｒ³'は水素、低級アルキル基、低級アルケニル基、低
級アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル
基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル基、低
級アルキルオキシカルボニル基、アルカノイル基、また
はアロイル基であり、これらの基は各々置換されていて
もよく、Ｒ^4'水素、低級アルキル基、低級アルケニル基、低級ア
ルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、
アリール基、ヘテロアリール基、またはアラルキル基で
あり、これらの基は各々置換されていてもよく、波線は本化合物がその部分においていずれかの立体異性
体またはその混合物であることを意味する］で示される
化合物またはその製薬的に許容される塩。
【請求項１６】式ＩＩＩ’−１：【化９】［式中、Ｘはヒドロキシ基、低級アルコキシ基または置
換されていてもよいアミノ基であり、Ｒ^4'上に定義した通りであり、波線は本化合物がその部分においていずれかの立体異性
体またはその混合物であることを意味する］で示される
請求項１５に記載の化合物またはその製薬的に許容され
る塩。
【請求項１７】Ｘがヒドロキシ基または低級アルコキ
シ基であり、Ｒ⁴が低級アルキル基である請求項１６に
記載の化合物またはその製薬的に許容される塩。
【請求項１８】式ＩＩ''−１：【化１０】［Ｒ^3'は水素、低級アルキル基、低級アルケニル基、低
級アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル
基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル基、低
級アルキルオキシカルボニル基、アルカノイル基、また
はアロイル基であり、これらの基は各々置換されていて
もよく、Ｒ⁴ ^’は水素、低級アルキル基、低級アルケニル基、低
級アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル
基、アリール基、ヘテロアリール基、またはアラルキル
基であり、これらの基は各々置換されていてもよく、波線はそれぞれ、本化合物がその部分においていずれか
の立体異性体またはその混合物であることを意味する］
で示される化合物またはその製薬的に許容される塩。
【請求項１９】式ＩＩＩ’’−１：【化１１】［式中、Ｘはヒドロキシ基、低級アルコキシ基または置
換されていてもよいアミノ基であり、Ｒ^4'は上に定義した通りであり、波線はそれぞれ、本化合物がその部分においていずれか
の立体異性体またはその混合物であることを意味する］
で示される請求項１８に記載の化合物またはその製薬的
に許容される塩。
【請求項２０】Ｘがヒドロキシ基または低級アルコキ
シ基であり、Ｒ⁵が低級アルキル基である請求項１９に
記載の化合物またはその製薬的に許容される塩。
【請求項２１】式ＩＶ：【化１２】 [式中、Ｒ³'は水素、低級アルキル基、低級アルケニル
基、低級アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアル
ケニル基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル
基、低級アルキルオキシカルボニル基、アルカノイル
基、またはアロイル基であり、これらの基は各々置換さ
れていてもよく、Ｙ¹およびＹ²はそれぞれ独立して水素、アルキル基、ア
ルケン基、アリール基、ハロゲン、置換されていてもよ
いヒドロキシ基、置換されていてもよいカルボキシル
基、置換されていてもよいアミノ基、シアノ基、または
トリアルキルスズであり、ｍは０−１０である]で示される化合物またはその製薬
的に許容される塩。
【請求項２２】Ｒ^3'が（ＣＨ₂）₅ＣＯＸ（式中、Ｘは
置換されていてもよいヒドロキシ基または置換されてい
てもよいアミノ基である）である請求項２１に記載の化
合物またはその製薬的に許容される塩。
【請求項２３】Ｙ¹が水素であり、Ｙ²がメチル基であ
る請求項２１または２２に記載の化合物またはその製薬
的に許容される塩。
【請求項２４】メチル基がパラ位にある請求項２３に
記載の化合物またはその製薬的に許容される塩。
【請求項２５】式Ｖ：【化１３】 [式中、Ｒ^3'は水素、低級アルキル基、低級アルケニル
基、低級アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアル
ケニル基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル
基、低級アルキルオキシカルボニル基、アルカノイル
基、またはアロイル基であり、これらの基は各々置換さ
れていてもよく、ｍは０−１０である]で示される化合物またはその製薬
的に許容される塩。
【請求項２６】Ｒ^3'が、（ＣＨ₂）₅ＣＯＸ（式中、Ｘ
は置換されていてもよいヒドロキシ基または置換されて
いてもよいアミノ基である）である請求項２５に記載の
化合物またはその製薬的に許容される塩。