JP2000319189A - Elastase inhibitor, and senility-preventing skin lotion containing the same - Google Patents
Elastase inhibitor, and senility-preventing skin lotion containing the sameInfo
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、ヒト線維芽細胞の
産生するエラスターゼに対し、特異的且つ高い活性阻害
作用を有するエラスターゼ阻害剤、及びこれを含有して
成る、皮膚の老化症状の防止及び改善に有効な皮膚外用
剤に関する。さらに詳しくは、ワレモコウ，イタドリ，
ハチジョウイタドリ，オオイタドリ，メリッサ，マンネ
ンロウ，ベニバナ，ショウガの各抽出物の１種又は２種
以上、或いはワレモコウ抽出物の分画物を含有して成る
エラスターゼ阻害剤、及びこれを含有する老化防止用皮
膚外用剤に関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to an elastase inhibitor having a specific and high activity inhibitory effect on elastase produced by human fibroblasts, and a method for preventing aging symptoms of skin comprising the same. It relates to an external preparation for skin which is effective for improvement. For more information,
An elastase inhibitor comprising one or more extracts of each of the extracts of a bee housebird, a giant knotweed, a melissa, a manner wax, a safflower, and a ginger; It relates to a skin external preparation.
【０００２】[0002]
【従来の技術】エラスチンは、動脈，腱，皮膚などの伸
展性に富んだ組織に見られる構成タンパク質であり、エ
ラスターゼにより分解可溶化される。エラスターゼはセ
リンプロテアーゼに類別され、膵臓，白血球，線維芽細
胞等に由来するものが知られている。かかるエラスター
ゼの過剰発現或いは活性化によるエラスチンの過度の分
解は、肺気腫，肺線維症，気管支炎，気管支拡張症，肺
炎，リウマチ関節炎，心筋梗塞等の虚血性疾患，動脈硬
化，膵炎，腎炎，歯周炎，皮膚疾患などの原因となると
考えられている。そこで、過剰に亢進されたエラスター
ゼ活性を抑制するべく、種々のエラスターゼ阻害剤の検
索がなされている。2. Description of the Related Art Elastin is a constituent protein found in highly extensible tissues such as arteries, tendons and skin, and is degraded and solubilized by elastase. Elastase is classified as a serine protease and is known to be derived from pancreas, leukocyte, fibroblast and the like. Excessive degradation of elastin due to the overexpression or activation of elastase may cause ischemic diseases such as emphysema, pulmonary fibrosis, bronchitis, bronchiectasis, pneumonia, rheumatoid arthritis, myocardial infarction, arteriosclerosis, pancreatitis, nephritis, teeth It is thought to cause periodontitis and skin diseases. Therefore, various elastase inhibitors have been searched for in order to suppress the excessively enhanced elastase activity.
【０００３】たとえば、ヒト好中球由来のエラスターゼ
に対しては、イミノ誘導体（特開平７−４１４５９），
p-グアニジノ安息香酸フェニルエステル誘導体（特開平
７−１７３０６２），アゼチジノン誘導体（特開平７−
２４２６２４）等が、ヒト白血球由来エラスターゼに対
しては、β-ケト酸誘導体（特開平７−１７３０６
１），ヒドロキサム酸誘導体（特開平７−１７３１２
７），4H-3,1-ベンズオキサジン-4-オン（特開平７−３
１６０５６，同８−１３４０５０）等が開示されてい
る。For example, for elastase derived from human neutrophils, imino derivatives (JP-A-7-41459),
p-guanidinobenzoic acid phenyl ester derivative (JP-A-7-173062), azetidinone derivative (JP-A-7-173)
242624), etc., against β-keto acid derivatives against human leukocyte-derived elastase (JP-A-7-17306).
1), hydroxamic acid derivative (JP-A-7-17312)
7), 4H-3,1-benzoxazin-4-one (JP-A-7-3
16056, and 8-134050).
【０００４】また、特に皮膚組織に由来するエラスター
ゼの活性を阻害するものとしては、トウダイグサ科植物
（特開平９−８７１３６），セプリク（特開平９−８７
１３７），ツバキ科スチマ属植物（特開平９−９５４２
０），フトモモ科ベッケア属植物（特開平９−９５４３
６），クララ（特開平１０−１７４６０），カユアンギ
ン，ムリコ・ボロン（特開平１０−２９９２５），ジャ
ケツイバラ属植物（特開平１０−２９９２６），ミソハ
ギ科ウドフォルディア属植物（特開平１０−３６２８
１），シソ科スファケレ属植物（特開平１１−９２３５
４）等の抽出物や、ニワトコ抽出物由来のポリペプチド
等、植物由来のものが多く提案されている。[0004] Particularly, those inhibiting the activity of elastase derived from skin tissue include spurges (JP-A-9-87136) and seprik (JP-A-9-87).
137), Camellia stima plant (Japanese Unexamined Patent Publication No. 99542/1997)
0), a plant belonging to the genus Becka in the family Myrtaceae (Japanese Unexamined Patent Publication No. 9-9543)
6), Clara (Japanese Patent Application Laid-Open No. 10-17460), Kayuangin, Muriko Boron (Japanese Patent Application Laid-Open No. 10-29925), Plant of the Genus Jaketibara (Japanese Patent Application Laid-Open No. 10-29926), Plant of the Genus Udophordia (Japanese Patent Application Laid-Open No. 10-3628)
1), Labiatae plant of the genus Lamiaceae (JP-A-11-9235)
Many extracts derived from plants, such as extract 4) and polypeptides derived from elder extract, have been proposed.
【０００５】しかしながら、上記したようなエラスター
ゼ阻害剤には、好中球や白血球に由来するエラスターゼ
に対して特異性を示すものの、線維芽細胞由来のエラス
ターゼに対する特異性の低いものもあり、その他、特殊
な植物を原料とするため、一定品質のものを入手するの
が困難であるといった問題があった。[0005] However, some of the elastase inhibitors as described above have specificity for elastase derived from neutrophils and leukocytes, but have low specificity for elastase derived from fibroblasts. Since special plants are used as raw materials, there is a problem that it is difficult to obtain products of a certain quality.
【０００６】[0006]
【発明が解決しようとする課題】そこで本発明において
は、一定品質のものを容易に入手することができ、さら
にヒト線維芽細胞に由来するエラスターゼに対して高い
特異性及び阻害作用を示し、エラスターゼ活性の過剰亢
進に起因する真皮マトリックスの弾性低下を有効に防止
することのできるエラスターゼ阻害剤を得ることを目的
とした。またさらに、真皮エラスチンの分解促進に基づ
く皮膚の老化症状の防止及び改善に有効な皮膚外用剤を
提供することを目的とした。Therefore, in the present invention, a product of a certain quality can be easily obtained, and furthermore, it shows high specificity and inhibitory activity against elastase derived from human fibroblasts, An object of the present invention is to obtain an elastase inhibitor capable of effectively preventing a decrease in elasticity of the dermal matrix due to excessively increased activity. Still another object of the present invention is to provide an external preparation for skin that is effective for preventing and improving the aging symptoms of the skin based on the promotion of the decomposition of dermal elastin.
【０００７】[0007]
【課題を解決するための手段】上記の課題を解決するべ
く種々検討した結果、本発明者らは、ワレモコウ，イタ
ドリ，ハチジョウイタドリ，オオイタドリ，メリッサ，
マンネンロウ，ベニバナ，ショウガの各抽出物に高いエ
ラスターゼ阻害活性が存することを見いだし、本発明を
完成するに至った。As a result of various studies to solve the above-mentioned problems, the present inventors have found that the present invention provides:
The inventors have found that the extracts of Mannenrou, safflower and ginger have high elastase inhibitory activity, and have completed the present invention.
【０００８】すなわち本発明においては、ワレモコウ
（Sanguisorba officinalis L.），イタドリ（Polygonu
m cuspidatum Sieb. et Zucc.），ハチジョウイタドリ
（Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. var. hachidy
oense Ohwi），オオイタドリ（Polygonum sachalinense
Fr. Schm.），メリッサ（Melissa officinalis L.），
マンネンロウ（Rosmarinus officinalis L.），ベニバ
ナ（Carthamus tinctorius L.），ショウガ（Zingiber
officinale Roscoe）の各植物抽出物の１種又は２種以
上、或いはワレモコウ（Sanguisorba officinalis L.）
の５０容量％エタノール水溶液による抽出物を、スチレ
ンポリマー製の吸着ゲルクロマトグラフィーにてエタノ
ール−水混合溶媒で分画した際、３０容量％エタノール
水溶液により溶出される画分を有効成分として、担体又
は基剤に含有させてエラスターゼ阻害剤とする。さら
に、前記エラスターゼ阻害剤より１種又は２種以上を選
択して外用剤基剤に含有させ、老化防止用皮膚外用剤を
得る。[0008] That is, in the present invention, Warm Mole ( Sanguisorba officinalis L.), Knotweed ( Polygonu )
m cuspidatum Sieb. et Zucc.) , bees Zhou Japanese knotweed (Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. var. hachidy
oense Ohwi), Knotweed ( Polygonum sachalinense )
Fr. Schm.), Melissa ( Melissa officinalis L.),
Mannenrou ( Rosmarinus officinalis L.), Safflower ( Carthamus tinctorius L.), Ginger ( Zingiber
officinale Roscoe), or one or more of each plant extract, or Warm grub ( Sanguisorba officinalis L.)
When the extract of 50% by volume of an aqueous ethanol solution is fractionated with an ethanol-water mixed solvent by adsorption gel chromatography made of a styrene polymer, the fraction eluted with a 30% by volume aqueous ethanol solution is used as an active ingredient, An elastase inhibitor is contained in the base. Further, one or two or more of the elastase inhibitors are selected and contained in an external preparation base to obtain a skin external preparation for aging prevention.
【０００９】[0009]
【発明の実施の形態】本発明において用いるワレモコウ
（Sanguisorba officinalis L.）は、日本各地に自生す
るバラ科に属する多年草で、根部を採取し乾燥したもの
が生薬「チユ」として用いられる。BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION The scallop ( Sanguisorba officinalis L.) used in the present invention is a perennial herb belonging to the Rosaceae native to various parts of Japan, and its roots collected and dried are used as crude drugs "Chiyu".
【００１０】次いで、本発明において用いるイタドリ
（Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.）は、日本各
地の山野に自生するタデ科に属する多年草で、根は生薬
「虎杖根」として用いられる。近縁植物であるハチジョ
ウイタドリ（Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. va
r. hachidyoense Ohwi）及びオオイタドリ（Polygonums
achalinense Fr. Schm.）をも用いることができる。Next, the knotweed ( Polygonum cuspidatum Sieb. Et Zucc.) Used in the present invention is a perennial herb belonging to the Polygonaceae family which grows naturally in the mountains in various parts of Japan, and its root is used as a crude drug "Tiger root". A closely related plant, Polygonum cuspidatum Sieb. Et Zucc. Va
r. hachidyoense Ohwi and Knotweed ( Polygonums )
achalinense Fr. Schm.) can also be used.
【００１１】次に、本発明において用いるメリッサ（Me
lissa officinalis L.）は、シソ科に属し、ヨーロッパ
南部地中海，黒海，小アジアに自生又は栽培される多年
草である。Next, Melissa ( Me) used in the present invention is used.
lissa officinalis L.) belongs to the Labiatae family and is a perennial plant native to or cultivated in the Mediterranean Sea, the Black Sea, and Asia Minor in Europe.
【００１２】続いて、本発明において用いるマンネンロ
ウ（Rosmarinus officinalis L.）は、シソ科に属する
常緑低木で、ヨーロッパ南部において多く栽培されてい
る。[0012] Subsequently, the bean wax ( Rosmarinus officinalis L.) used in the present invention is an evergreen shrub belonging to the Labiatae family and is cultivated frequently in southern Europe.
【００１３】また、本発明において用いるベニバナ（Ca
rthamus tinctorius L.）は、日本でも栽培されるキク
科に属する２年草で、花は生薬「コウカ」として用いら
れる。The safflower ( Ca) used in the present invention is
(rthamus tinctorius L.) is a two-year plant belonging to the Asteraceae family, which is also cultivated in Japan, and its flowers are used as herbal medicine "Koka".
【００１４】最後に、本発明において用いるショウガ
（Zingiber officinale Roscoe）は、ショウガ科に属す
る多年草で、世界各国で栽培されている。根茎を乾燥し
たものは、生薬「ショウキョウ」として用いられる。Finally, ginger ( Zingiber officinale Roscoe) used in the present invention is a perennial plant belonging to the family Ginger, and is cultivated all over the world. The dried rhizome is used as a crude drug "Shokyo".
【００１５】本発明においては、上記各植物の溶媒によ
る抽出物を用いる。抽出には、上記各植物の花，葉，
茎，果実，根茎，根等の各部位を用いることができ、ま
た全草又は全木を用いてもよいが、それぞれ生薬として
用いられる部位、すなわちワレモコウについては根及び
根茎、イタドリ，ハチジョウイタドリ及びオオイタドリ
については根、メリッサ及びマンネンロウについては
葉、ベニバナについては花、ショウガについては根茎を
用いることが好ましい。In the present invention, an extract of each of the above plants with a solvent is used. For extraction, flowers, leaves,
Each part such as stem, fruit, rhizome, root and the like can be used, and whole plant or whole tree may be used. However, for each part used as a crude drug, that is, for root-knotting, root and rhizome, knotweed, hummingbird, etc. It is preferable to use roots for Giant Knotweed, leaves for Melissa and Mannenwa, flowers for safflower, and rhizomes for ginger.
【００１６】上記植物は生のまま抽出操作に供してもよ
いが、抽出効率を考えると、細切，乾燥，粉砕等の処理
を行った後抽出を行うことが好ましい。抽出は、抽出溶
媒に浸漬して行う。抽出効率を上げるため撹拌を行った
り、抽出溶媒中でホモジナイズすることもできる。抽出
温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度
とするのが適切である。抽出時間は、４時間〜１４日間
程度とするのが適切である。The above plant may be subjected to an extraction operation as it is, but in consideration of the extraction efficiency, it is preferable to perform the extraction after performing processing such as shredding, drying, and pulverization. The extraction is performed by immersion in an extraction solvent. Stirring can be performed to increase the extraction efficiency, or homogenization can be performed in an extraction solvent. It is appropriate that the extraction temperature is set to a temperature of about 5 ° C. to the boiling point of the extraction solvent or lower. It is appropriate that the extraction time is about 4 hours to 14 days.
【００１７】抽出溶媒としては、水の他、メタノール，
エタノール，プロパノール，イソプロパノール，ブタノ
ール等の低級アルコール、1,3-ブチレングリコール，プ
ロピレングリコール，ジプロピレングリコール，1,2-ペ
ンタンジオール，グリセリン等の多価アルコール、エチ
ルエーテル，プロピルエーテル等のエーテル類、酢酸エ
チル，酢酸ブチル等のエステル類、アセトン，エチルメ
チルケトン等のケトン類などの極性有機溶媒、及びこれ
らの２種以上による混合溶媒が好ましく用いられ、５０
容量％のエタノール水溶液が特に好ましい。また、生理
食塩水，リン酸緩衝液，リン酸緩衝生理食塩水等を用い
てもよい。As an extraction solvent, in addition to water, methanol,
Lower alcohols such as ethanol, propanol, isopropanol and butanol; polyhydric alcohols such as 1,3-butylene glycol, propylene glycol, dipropylene glycol, 1,2-pentanediol and glycerin; ethers such as ethyl ether and propyl ether; Polar organic solvents such as esters such as ethyl acetate and butyl acetate, ketones such as acetone and ethyl methyl ketone, and mixed solvents of two or more thereof are preferably used.
A volume% aqueous ethanol solution is particularly preferred. Further, physiological saline, phosphate buffer, phosphate buffered saline, or the like may be used.
【００１８】上記植物の抽出物は、そのままでもエラス
ターゼ阻害剤に添加できるが、濃縮，乾固したものを水
や極性有機溶媒に再度溶解したり、或いはエラスターゼ
阻害作用を損なわない範囲で脱色，脱臭等の精製処理を
行った後に添加してもよい。また保存のためには、精製
処理の後凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いること
が好ましい。The above plant extract can be added to the elastase inhibitor as it is, but the concentrated and dried extract can be redissolved in water or a polar organic solvent, or decolorized or deodorized within a range that does not impair the elastase inhibitory action. May be added after performing purification treatments such as For storage, it is preferable to freeze-dry after purification treatment and to dissolve in a solvent before use.
【００１９】さらに本発明においては、ワレモコウ根部
の５０容量％エタノール水溶液による抽出物を、スチレ
ンポリマー製の吸着ゲルクロマトグラフィーにてエタノ
ール−水混合溶媒で分画した際、３０容量％エタノール
水溶液により溶出される画分を用いることができる。ス
チレンポリマー製の吸着ゲルとしては、ＭＣＩ ＧＥＬ
（三菱化学株式会社製）等が好ましく使用できる。Furthermore, in the present invention, when the extract of the root of the sprouts was extracted with a 50% by volume aqueous ethanol solution by a styrene polymer adsorption gel chromatography with an ethanol / water mixed solvent, the extract was eluted with a 30% by volume aqueous ethanol solution. Fractions can be used. As the adsorption gel made of styrene polymer, MCI GEL
(Manufactured by Mitsubishi Chemical Corporation) and the like can be preferably used.
【００２０】本発明に係るエラスターゼ阻害剤は、上記
各植物の抽出物の１種又は２種以上、或いはワレモコウ
抽出物の分画物をそのまま用い、又は担体に添加して得
る。担体としては、水、エタノール，プロパノール，ブ
タノール等低級アルコールなどの極性有機溶媒、これら
の混合液といった液状担体、各種乳濁液、各種クリーム
基剤、軟膏基剤、ゲル、粉体などが用いられる。従っ
て、本発明に係るエラスターゼ阻害剤は、ローション
剤，懸濁剤，乳剤，クリーム剤，軟膏剤，ゲル剤，粉末
剤等の形態で提供することができる。また、リポソーム
やマイクロカプセルに内包させた状態とすることもでき
る。なお、本発明に係るエラスターゼ阻害剤には、本発
明の特徴を損なわない範囲で、抗酸化剤，防菌防黴剤，
紫外線吸収剤等の安定化剤や、吸収促進剤等を添加する
こともできる。The elastase inhibitor according to the present invention can be obtained by using one or more of the above plant extracts, or a fraction of Warmoko extract, as such, or by adding it to a carrier. Examples of the carrier include water, polar organic solvents such as lower alcohols such as ethanol, propanol and butanol, liquid carriers such as a mixture thereof, various emulsions, various cream bases, ointment bases, gels and powders. . Therefore, the elastase inhibitor according to the present invention can be provided in the form of a lotion, suspension, emulsion, cream, ointment, gel, powder, and the like. Alternatively, the liposome or microcapsule may be contained. The elastase inhibitor according to the present invention includes an antioxidant, a fungicide and a fungicide, as long as the characteristics of the present invention are not impaired.
Stabilizers such as ultraviolet absorbers and absorption promoters can also be added.
【００２１】さらに本発明においては、上記に記載した
エラスターゼ阻害剤の１種又は２種以上を外用剤基剤に
含有させて、皮膚の老化防止及び改善に有効な皮膚外用
剤を提供する。かかる皮膚外用剤は、ローション剤，懸
濁剤，乳剤，クリーム剤，軟膏剤，ゲル剤等の形状で提
供することができる。また、化粧水，乳液，クリーム，
パック剤等皮膚用の化粧料や、化粧下地用ローション又
はクリーム、乳液状，クリーム状，軟膏状，固形状の各
種ファンデーション等のメイクアップ化粧料、日焼け止
めローション又はクリーム等の日焼け止め化粧料、ハン
ドローション又はクリーム，レッグローション又はクリ
ーム，ボディローション又はクリーム等のボディ化粧料
などとしても提供することができる。Further, in the present invention, an external preparation for skin which is effective in preventing and improving skin aging is provided by incorporating one or more of the above-mentioned elastase inhibitors into an external preparation base. Such skin external preparations can be provided in the form of lotions, suspensions, emulsions, creams, ointments, gels and the like. Also, lotion, emulsion, cream,
Skin cosmetics such as packs, makeup foundations such as lotions or creams for makeup bases, emulsions, creams, ointments, solid foundations, etc., sunscreen cosmetics such as sunscreen lotions or creams, It can also be provided as a body cosmetic such as hand lotion or cream, leg lotion or cream, body lotion or cream.
【００２２】本発明に係る老化防止用皮膚外用剤におい
ても、上記エラスターゼ阻害剤の他に、本発明の特徴を
損なわない範囲で、各種油分，界面活性剤，低級一価ア
ルコール，保湿剤，多価アルコール，細胞賦活剤，抗酸
化剤，美白剤，紫外線吸収剤，防菌防黴剤，顔料，色素
類，香料等、一般的な皮膚外用剤添加成分を加えること
ができる。In the skin external preparation for preventing aging according to the present invention, various oils, surfactants, lower monohydric alcohols, moisturizers, polyhydric alcohols, etc. may be used in addition to the elastase inhibitor as long as the characteristics of the present invention are not impaired. Common skin external preparation additives such as polyhydric alcohols, cell activators, antioxidants, whitening agents, ultraviolet absorbers, antibacterial and fungicides, pigments, pigments, and fragrances can be added.
【００２３】[0023]
【実施例】さらに実施例により、本発明の特徴について
詳細に説明する。EXAMPLES Further, the features of the present invention will be described in detail with reference to examples.
【００２４】［実施例１〜実施例６］ ワレモコウ根
部，イタドリ根部，メリッサ葉，マンネンロウ葉，ベニ
バナ花及びショウガ根茎をそれぞれ乾燥したもの各１０
０ｇを粉砕し、５０容量％エタノール水溶液９００ｍｌ
中に加えて、２５℃にて７日間撹拌抽出を行った。抽出
液をろ過してろ液を回収し、それぞれ実施例１〜実施例
６とした。[Examples 1 to 6] Each of dried Warmoko roots, knotweed roots, Melissa leaves, Mannenwa leaves, safflower flowers and ginger rhizomes was dried 10 each.
0 g is crushed, and 900 ml of 50% by volume ethanol aqueous solution
The mixture was stirred and extracted at 25 ° C. for 7 days. The extract was filtered to collect the filtrate, which was referred to as Example 1 to Example 6, respectively.
【００２５】［実施例７］ 上記実施例１に係るワレモ
コウ根部の５０容量％エタノール水溶液による抽出物
を、ＭＣＩ ＧＥＬ（三菱化学株式会社製）を用いたカ
ラムクロマトグラフィーにかけ、エタノール−水混合溶
媒により分画した。そして、３０容量％エタノール水溶
液により溶出される画分を回収して、実施例７とした。[Example 7] The extract of the root of the sprouts according to the above-mentioned Example 1 with a 50% by volume aqueous ethanol solution was subjected to column chromatography using MCI GEL (manufactured by Mitsubishi Chemical Corporation), and mixed with an ethanol-water mixed solvent. Fractionated. Then, a fraction eluted with a 30% by volume aqueous ethanol solution was collected to obtain Example 7.
【００２６】上記実施例１〜実施例７について、エラス
ターゼ阻害率を測定した。まず、ヒト線維芽細胞を５(w
/v)％の牛胎仔血清を含有するダルベッコ基礎培地（Ｄ
ＭＥＭ）に播種し、３７℃で２４時間培養してコンフル
エントとした後、０．５(w/v)％トリトンＸ-100水溶液
にて細胞を溶解し、酵素液とした。前記酵素液に、合成
基質であるサクシニル-アラニル-アラニル-アラニル-p-
ニトロアニリド（最終濃度１．２ｍＭ）及び試料（実施
例１〜実施例７）を添加し、３７℃で２時間インキュベ
ートして、生成するp-ニトロアニリドの量を４０５ｎｍ
における吸光度を測定して求めた。この際試料の濃度と
しては、実施例１〜実施例６については最終濃度にして
１００μｇ／ｍｌ、実施例７については最終濃度にして
５０μｇ／ｍｌとした。エラスターゼ阻害率（％）は、
試料を添加した場合の前記吸光度（Ａs）を、試料を添
加しない対照について同様に測定した吸光度（Ａc）で
除した値（Ａs／Ａc）を求め、（１−Ａs／Ａc）×１０
０により算出した。結果は表１に示した。In Examples 1 to 7, the elastase inhibition rate was measured. First, 5 (w
/ v) Dulbecco's basal medium (D
MEM) and cultured at 37 ° C. for 24 hours to reach confluence, and then the cells were dissolved in a 0.5 (w / v)% aqueous solution of Triton X-100 to obtain an enzyme solution. In the enzyme solution, a synthetic substrate succinyl-alanyl-alanyl-alanyl-p-
Nitroanilide (final concentration 1.2 mM) and sample (Examples 1 to 7) were added and incubated at 37 ° C. for 2 hours to reduce the amount of p-nitroanilide generated to 405 nm.
Was determined by measuring the absorbance. At this time, the concentration of the sample was 100 μg / ml as the final concentration for Examples 1 to 6, and 50 μg / ml as the final concentration for Example 7. The elastase inhibition rate (%)
The absorbance in the case of addition of sample (A s), calculated similarly measured absorbance for the control without addition of the sample divided by the (A c) (A s / A c), (1-A s / A c ) x 10
0 was calculated. The results are shown in Table 1.
【００２７】[0027]
【表１】 [Table 1]
【００２８】表１より明らかなように、本発明の実施例
１〜実施例６は、それぞれ１００μｇ／ｍｌの低濃度で
２０％以上の有意なエラスターゼ阻害率を示していた。
特に実施例１は、６８．７％と高い阻害率を示してい
た。また実施例７については、５０μｇ／ｍｌの濃度
で、７４．０％と非常に高い阻害率が認められていた。
なお、今回エラスターゼ阻害率の評価に用いたヒト線維
芽細胞由来のエラスターゼは、紫外線曝露により放出さ
れるサイトカインであるインターロイキン-1αにより活
性化されることから、この酵素活性に対し阻害作用を有
する本発明の実施例１〜実施例７は、紫外線による皮膚
の光老化の防止，改善に有効であることが示唆される。As is clear from Table 1, Examples 1 to 6 of the present invention each showed a significant elastase inhibition rate of 20% or more at a low concentration of 100 μg / ml.
In particular, Example 1 showed a high inhibition rate of 68.7%. In Example 7, a very high inhibition rate of 74.0% was observed at a concentration of 50 μg / ml.
Elastase derived from human fibroblasts used in the evaluation of elastase inhibition rate was activated by interleukin-1α, a cytokine released by exposure to ultraviolet light, and has an inhibitory effect on this enzyme activity. It is suggested that Examples 1 to 7 of the present invention are effective in preventing and improving photoaging of skin due to ultraviolet rays.
【００２９】続いて、本発明に係る老化防止用皮膚外用
剤についての実施例の処方を示す。Subsequently, the formulations of the examples of the external preparation for preventing aging according to the present invention will be described.
【００３０】 ［実施例８］ 皮膚老化防止用ローション剤 （１）エタノール １０．００（重量％） （２）ヒドロキシエチルセルロース １．００ （３）エラスターゼ阻害剤（実施例１） ０．０２ （４）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （５）精製水 ８８．８８ 製法：(1)〜(4)を順次(5)に添加し、均一に溶解する。Example 8 Lotion for Preventing Skin Aging (1) Ethanol 10.00 (% by weight) (2) Hydroxyethylcellulose 1.00 (3) Elastase inhibitor (Example 1) 0.02 (4) Methyl paraoxybenzoate 0.10 (5) Purified water 88.88 Production method: (1) to (4) are sequentially added to (5) and uniformly dissolved.
【００３１】 ［実施例９］ 皮膚老化防止用乳剤 （１）ステアリン酸 ０．２０（重量％） （２）セタノール １．５０ （３）ワセリン ３．００ （４）流動パラフィン ７．００ （５）ポリオキシエチレン(10E.O.)モノオレイン酸 １．５０ エステル （６）酢酸トコフェロール ０．２５ （７）グリセリン ５．００ （８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （９）トリエタノールアミン １．００ （10）精製水 ８０．４０ （11）エラスターゼ阻害剤（実施例２） ０．０５ 製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７０℃に保つ。一方、(7)〜(10)の水相成分を混
合，加熱して均一とし、７０℃とする。この水相成分に
前記油相成分を撹拌しながら徐々に添加して乳化し、冷
却した後４０℃にて(11)を添加，混合する。Example 9 Skin Aging Prevention Emulsion (1) Stearic acid 0.20 (% by weight) (2) Cetanol 1.50 (3) Vaseline 3.00 (4) Liquid paraffin 7.00 (5) Polyoxyethylene (10E.O.) monooleic acid 1.50 ester (6) Tocopherol acetate 0.25 (7) Glycerin 5.00 (8) Methyl paraoxybenzoate 0.10 (9) Triethanolamine 1.00 (10) Purified water 80.40 (11) Elastase inhibitor (Example 2) 0.05 Production method: The oil phase components (1) to (6) are mixed, heated and uniformly dissolved, and kept at 70 ° C. . On the other hand, the aqueous phase components (7) to (10) are mixed and heated to be uniform, and the temperature is set to 70 ° C. The oil phase component is gradually added to this aqueous phase component while stirring to emulsify, and after cooling, (11) is added and mixed at 40 ° C.
【００３２】 ［実施例１０］ 皮膚老化防止用ゲル剤 （１）ジプロピレングリコール １０．００（重量％） （２）カルボキシビニルポリマー ０．５０ （３）水酸化カリウム ０．１０ （４）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （５）精製水 ８９．２５ （６）エラスターゼ阻害剤（実施例３） ０．０５ 製法：(5)に(2)を均一に溶解した後、(1)に(4)を溶解し
て添加し、次いで(3)を加えて増粘させ、(6)を添加，混
合する。Example 10 Gel for Preventing Skin Aging (1) Dipropylene glycol 10.00 (% by weight) (2) Carboxyvinyl polymer 0.50 (3) Potassium hydroxide 0.10 (4) Paraoxybenzoate Methyl acid 0.10 (5) Purified water 89.25 (6) Elastase inhibitor (Example 3) 0.05 Production method: After uniformly dissolving (2) in (5), (4) in (1) Is dissolved and added, then (3) is added to increase the viscosity, and (6) is added and mixed.
【００３３】 ［実施例１１］ 皮膚老化防止用クリーム（水中油型） （１）ミツロウ ６．０（重量％） （２）セタノール ５．０ （３）還元ラノリン ８．０ （４）スクワラン ２７．５ （５）グリセリル脂肪酸エステル ４．０ （６）親油型グリセリルモノステアリン酸エステル ２．０ （７）ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン ５．０ モノラウリン酸エステル （８）プロピレングリコール ５．０ （９）パラオキシ安息香酸メチル ０．１ （10）精製水 ３７．３ （11）エラスターゼ阻害剤（実施例４） ０．１ 製法：(1)〜(7)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(8)〜(10)の水相成分を混
合，加熱して均一とし、７５℃とする。この水相成分に
前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサー
にて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(11)を添加，混合
する。[Example 11] Cream for preventing skin aging (oil-in-water type) (1) Beeswax 6.0 (% by weight) (2) Cetanol 5.0 (3) Reduced lanolin 8.0 (4) Squalane 27. 5 (5) Glyceryl fatty acid ester 4.0 (6) Lipophilic glyceryl monostearate 2.0 (7) Polyoxyethylene (20E.O.) sorbitan 5.0 Monolaurate (8) Propylene glycol 0 (9) Methyl parahydroxybenzoate 0.1 (10) Purified water 37.3 (11) Elastase inhibitor (Example 4) 0.1 Production method: Mix and heat oil phase components (1) to (7) Dissolve uniformly and keep at 75 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (8) to (10) are mixed and heated to be uniform, and the temperature is set to 75 ° C. After adding the oil phase component to the aqueous phase component and pre-emulsifying the mixture, the mixture is uniformly emulsified by a homomixer. After cooling, (11) is added and mixed at 40 ° C.
【００３４】 ［実施例１２］ 皮膚老化防止用水中油型乳剤性軟膏 （１）白色ワセリン ２５．００（重量％） （２）ステアリルアルコール ２５．００ （３）グリセリン １２．００ （４）ラウリル硫酸ナトリウム １．００ （５）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （６）精製水 ３６．８９ （７）エラスターゼ阻害剤（実施例７） ０．０１ 製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，溶解して均一とし、
７５℃に加熱する。一方、(5)を(6)に溶解して７５℃に
加熱し、これに前記油相成分を添加して乳化し、冷却後
４０℃にて(7)を添加，混合する。Example 12 Oil-in-water emulsion ointment for preventing skin aging (1) White petrolatum 25.00 (% by weight) (2) Stearyl alcohol 25.00 (3) Glycerin 12.00 (4) Sodium lauryl sulfate 1.00 (5) Methyl paraoxybenzoate 0.10 (6) Purified water 36.89 (7) Elastase inhibitor (Example 7) 0.01 Production method: mixing oil phase components (1) to (4) ， Dissolve and uniform
Heat to 75 ° C. On the other hand, (5) is dissolved in (6) and heated to 75 ° C., the oil phase component is added thereto to emulsify, and after cooling, (7) is added and mixed at 40 ° C.
【００３５】 ［実施例１３］ 日焼け止め用油中水型クリーム （１）スクワラン ３８．００（重量％） （２）グリセリルジイソステアリン酸エステル ３．００ （３）パラメトキシ桂皮酸2-エチルヘキシル ３．００ （４）オキシベンゾン １．５０ （５）有機変性ベントナイト １．５０ （６）シリコーン処理酸化チタン ３．００ （７）1,3-ブチレングリコール ５．００ （８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （９）エラスターゼ阻害剤（実施例５） ０．０５ （10）エラスターゼ阻害剤（実施例６） ０．０５ （11）精製水 ４４．７０ （12）香料 ０．１０ 製法：(1)〜(5)を混合，加熱して溶解し、(6)を分散し
て７０℃とし、油相とする。一方、(8)を(7)に溶解して
(9)，(10)とともに(11)に加えて混合し、７０℃に加熱
する。前記油相に水相を添加し、ホモジナイザー処理し
て乳化後冷却し、４０℃にて(12)を添加，混合する。[Example 13] Water-in-oil cream for sunscreen (1) Squalane 38.00 (wt%) (2) Glyceryl diisostearate 3.00 (3) 2-Ethylhexyl paramethoxycinnamate 3.00 ( 4) Oxybenzone 1.50 (5) Organically modified bentonite 1.50 (6) Silicone treated titanium oxide 3.00 (7) 1,3-butylene glycol 5.00 (8) Methyl paraoxybenzoate 0.10 (9) Elastase inhibitor (Example 5) 0.05 (10) Elastase inhibitor (Example 6) 0.05 (11) Purified water 44.70 (12) Fragrance 0.10 Production method: (1) to (5) Mix, dissolve by heating, disperse (6) to 70 ° C, and make oil phase. On the other hand, dissolve (8) in (7)
Add to (11) together with (9) and (10), mix and heat to 70 ° C. The aqueous phase is added to the oil phase, homogenized, emulsified and cooled, and (12) is added and mixed at 40 ° C.
【００３６】 ［実施例１４］ メイクアップベースクリーム （１）ステアリン酸 １２．００（重量％） （２）セタノール ２．００ （３）グリセリルトリ2-エチルヘキサン酸エステル ２．５０ （４）自己乳化型グリセリルモノステアリン酸 ２．００ エステル （５）プロピレングリコール １０．００ （６）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （７）水酸化カリウム ０．３０ （８）精製水 ６９．４７ （９）酸化チタン １．００ （10）ベンガラ ０．１０ （11）黄酸化鉄 ０．４０ （12）エラスターゼ阻害剤（実施例２） ０．０３ （13）香料 ０．１０ 製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(5)〜(8)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、これに(9)〜(11)を添加してホモミ
キサーにて均一に分散した後、７５℃とする。この水相
成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミ
キサーにて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(12)，(13)
を添加，混合する。Example 14 Makeup Base Cream (1) Stearic acid 12.00 (% by weight) (2) Cetanol 2.00 (3) Glyceryl tri-2-ethylhexanoate 2.50 (4) Self-emulsification Type glyceryl monostearic acid 2.00 ester (5) Propylene glycol 10.00 (6) Methyl parahydroxybenzoate 0.10 (7) Potassium hydroxide 0.30 (8) Purified water 69.47 (9) Titanium oxide 1 0.00 (10) Bengala 0.10 (11) Yellow iron oxide 0.40 (12) Elastase inhibitor (Example 2) 0.03 (13) Fragrance 0.10 Production method: Oil of (1) to (4) The phase components are mixed and heated to dissolve uniformly and kept at 75 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (5) to (8) are mixed,
The mixture is heated to be uniform, and (9) to (11) are added thereto and uniformly dispersed by a homomixer. The oil phase component was added to the water phase component and pre-emulsified, then uniformly emulsified by a homomixer, cooled and then cooled to 40 ° C. at (12) and (13).
Add and mix.
【００３７】 ［実施例１５］ 乳液状ファンデーション （１）ステアリン酸 ２．００（重量％） （２）スクワラン ５．００ （３）ミリスチン酸オクチルドデシル ５．００ （４）セタノール １．００ （５）デカグリセリルモノイソパルミチン酸エステル ９．００ （６）1,3-ブチレングリコール ６．００ （７）水酸化カリウム ０．１０ （８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （９）精製水 ５３．５９ （10）酸化チタン ９．００ （11）タルク ７．４０ （12）ベンガラ ０．５０ （13）黄酸化鉄 １．１０ （14）黒酸化鉄 ０．１０ （15）エラスターゼ阻害剤（実施例１） ０．０１ （16）香料 ０．１０ 製法：(1)〜(5)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(6)〜(9)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、これに(10)〜(14)を添加してホモミ
キサーにて均一に分散した後、７５℃とする。この水相
成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミ
キサーにて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(15)，(16)
を添加，混合する。Example 15 Emulsion Foundation (1) Stearic acid 2.00 (% by weight) (2) Squalane 5.00 (3) Octyldodecyl myristate 5.00 (4) Cetanol 1.00 (5) Decaglyceryl monoisopalmitate 9.00 (6) 1,3-butylene glycol 6.00 (7) Potassium hydroxide 0.10 (8) Methyl parahydroxybenzoate 0.10 (9) Purified water 53.59 ( 10) Titanium oxide 9.00 (11) Talc 7.40 (12) Bengala 0.50 (13) Yellow iron oxide 1.10 (14) Black iron oxide 0.10 (15) Elastase inhibitor (Example 1) 0.01 (16) Fragrance 0.10 Production method: Mix and heat the oil phase components of (1) to (5) to uniformly dissolve and keep at 75 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (6) to (9) are mixed,
The mixture is heated to be uniform, and (10) to (14) are added thereto and uniformly dispersed by a homomixer. The oil phase component was added to the water phase component and preliminarily emulsified, and then uniformly emulsified by a homomixer. After cooling, the mixture was cooled at 40 ° C. (15), (16)
Add and mix.
【００３８】 ［実施例１６］ ハンドクリーム （１）セタノール ４．００（重量％） （２）ワセリン ２．００ （３）流動パラフィン １０．００ （４）グリセリルモノステアリン酸エステル １．５０ （５）ポリオキシエチレン(60E.O.)グリセリル ２．５０ イソステアリン酸エステル （６）酢酸トコフェロール ０．５０ （７）グリセリン ２０．００ （８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （９）精製水 ５９．３７ （10）エラスターゼ阻害剤（実施例４） ０．０２ （11）エラスターゼ阻害剤（実施例７） ０．０１ 製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(7)〜(9)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、７５℃とする。この水相成分に前記
油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサーにて
均一に乳化し、冷却後４０℃にて(10)，(11)を添加，混
合する。Example 16 Hand Cream (1) Cetanol 4.00 (% by weight) (2) Vaseline 2.00 (3) Liquid paraffin 10.00 (4) Glyceryl monostearate 1.50 (5) Polyoxyethylene (60E.O.) glyceryl 2.50 isostearate (6) tocopherol acetate 0.50 (7) glycerin 20.00 (8) methyl paraoxybenzoate 0.10 (9) purified water 59.37 ( 10) Elastase inhibitor (Example 4) 0.02 (11) Elastase inhibitor (Example 7) 0.01 Production method: The oil phase components (1) to (6) are mixed, heated and uniformly dissolved. , Maintained at 75 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (7) to (9) are mixed,
Heat to uniformity and bring to 75 ° C. After the oil phase component is added to the water phase component and pre-emulsified, the mixture is uniformly emulsified by a homomixer. After cooling, (10) and (11) are added and mixed at 40 ° C.
【００３９】上記本発明に係る老化防止用皮膚外用剤に
ついての実施例のうち、実施例８〜実施例１２につい
て、紫外線によるしわの発生に対する防止効果を評価し
た。なお各実施例において、配合した実施例１〜実施例
４及び実施例７のエラスターゼ阻害剤を、それぞれこれ
らにおいて溶媒として用いた５０容量％エタノール水溶
液及び３０容量％エタノール水溶液に代替したものをそ
れぞれ比較例１〜比較例５とし、同時に評価を行った。
しわの発生防止効果は、ヘアレスマウス５匹を１群と
し、各群について実施例及び比較例各０．２ｇをそれぞ
れ１日１回背部に塗布し、１Ｊ／ｃｍ2／週の長波長紫
外線（ＵＶＡ）を５０週間照射し、ヘアレスマウスにお
けるしわの発生状況を観察し、表２に示す判定基準に従
って点数化して行った。この際、精製水のみを塗布した
群を対照とした。結果は各群の平均値を算出し、ＵＶＡ
照射日数との関係により表３に示した。Of the examples of the skin external preparation for aging according to the present invention, Examples 8 to 12 were evaluated for the effect of preventing wrinkles caused by ultraviolet rays. In each of the examples, the elastase inhibitors of Examples 1 to 4 and Example 7 were replaced with a 50% by volume aqueous ethanol solution and a 30% by volume aqueous ethanol solution used as a solvent in these examples, respectively. Example 1 to Comparative Example 5 were evaluated at the same time.
The effect of preventing wrinkles was determined by applying five hairless mice to one group, applying 0.2 g of each of Examples and Comparative Examples to the back once a day for each group, and applying 1 J / cm 2 / week long-wavelength ultraviolet light ( UVA) was irradiated for 50 weeks, the occurrence of wrinkles in hairless mice was observed, and scored according to the criteria shown in Table 2. At this time, a group to which only purified water was applied was used as a control. As a result, the average value of each group was calculated, and UVA
Table 3 shows the relationship with the number of irradiation days.
【００４０】[0040]
【表２】 [Table 2]
【００４１】[0041]
【表３】 [Table 3]
【００４２】表３に示されるように、対照群において
は、ＵＶＡ照射日数が４０週を超える頃には形成された
しわの深さは中程度にまで達し、５０週後には深いしわ
の発生が認められていた。これに対し本発明の実施例塗
布群では、いずれにおいても有意なしわの発生の抑制が
認められ、５０週後において微小ないし軽微なしわが認
められた程度であった。特に、実施例１又は実施例７を
含有する実施例８及び実施例１２塗布群においては、顕
著なしわの発生抑制が認められていた。一方比較例塗布
群では、酢酸トコフェロールを含有する比較例２塗布群
で発生したしわの程度の軽減が若干認められた他は、有
意なしわの発生抑制或いは軽減は認められなかった。As shown in Table 3, in the control group, when the number of days of UVA irradiation exceeded 40 weeks, the depth of wrinkles formed reached a medium level, and after 50 weeks, deep wrinkles occurred. It was allowed. On the other hand, in the group to which the examples of the present invention were applied, the suppression of the occurrence of significant wrinkles was observed in all cases, and the degree of slight or slight wrinkles was observed after 50 weeks. In particular, in Examples 8 and 12 applied groups containing Example 1 or Example 7, significant suppression of wrinkles was observed. On the other hand, in the group to which the comparative example was applied, the degree of wrinkles generated in the group to which the comparative example 2 containing tocopherol acetate was applied was slightly reduced, but no significant suppression or reduction of wrinkles was observed.
【００４３】次に、女性パネラーによる使用試験を行っ
た。この際にも、各実施例において配合した実施例１〜
実施例７のエラスターゼ阻害剤を、５０容量％エタノー
ル水溶液又は３０容量％エタノール水溶液に代替したも
のを比較例１〜比較例９とした。使用試験は、２０才代
〜５０才代の通常戸外で作業する女性２０名を１群と
し、５月中旬〜６月中旬の１カ月間、各群に実施例及び
比較例のそれぞれをブラインドにて１日２回使用させ、
使用前後の皮膚のしわ及び皮膚弾性の変化を観察して行
った。皮膚のしわについては写真撮影後の目視評価及び
レプリカ法により評価し、皮膚弾性についてはキュート
メーターによる測定により評価した。結果は、各パネラ
ーについて使用後の皮膚のしわ及び皮膚弾性を使用前と
比べて、「改善」，「やや改善」，「変化なし」，「や
や悪化」，「悪化」の５段階にて評価し、各評価を得た
パネラー数にて表４に示した。Next, a use test was conducted by a female panelist. Also in this case, Examples 1 to 9 blended in each example.
Comparative Examples 1 to 9 were obtained by replacing the elastase inhibitor of Example 7 with a 50% by volume aqueous ethanol solution or a 30% by volume aqueous solution of ethanol. In the use test, a group of 20 women in their 20s and 50s who normally work outdoors was one group from mid-May to mid-June and each of the examples and comparative examples was blind. Use it twice a day,
The evaluation was performed by observing skin wrinkles and changes in skin elasticity before and after use. The wrinkles of the skin were evaluated by visual evaluation after photographing and the replica method, and the skin elasticity was evaluated by measurement with a cute meter. The results were evaluated for wrinkles and skin elasticity of skin after use for each panel in five stages: "improved", "slightly improved", "no change", "slightly worse", and "worse". Table 4 shows the number of panelists who obtained each evaluation.
【００４４】[0044]
【表４】 [Table 4]
【００４５】表４より明らかなように、本発明の実施例
使用群ではいずれにおいても、皮膚のしわ及び皮膚弾性
の悪化傾向を認めたパネラーはおらず、皮膚のしわにつ
いては６５％以上、皮膚弾性については９０％以上のパ
ネラーにおいて、改善又はやや改善されたと評価されて
いた。特に、実施例１又は実施例７のエラスターゼ阻害
剤を含有する実施例８，実施例１２，実施例１５及び実
施例１６、紫外線吸収剤を併用する実施例１３の各使用
群で、高い改善傾向が認められた。これに対し比較例使
用群では、皮膚のしわ及び皮膚弾性について明確に改善
されたと評価されたパネラーは存在せず、皮膚のしわに
ついては８５％以上、皮膚弾性については７０％以上の
パネラーで症状の改善が見られなかった。また、皮膚の
しわについては１０〜４０％、皮膚弾性については１５
〜５５％のパネラーにおいて、各症状の悪化傾向を認め
ていた。As is evident from Table 4, none of the panelists in the group using the examples of the present invention showed any tendency of skin wrinkles and deterioration of skin elasticity. Was evaluated as improved or slightly improved by 90% or more of panelists. In particular, the use groups of Examples 8, 12, 12, and 16 containing the elastase inhibitor of Example 1 or 7 and the use group of Example 13 using an ultraviolet absorber in combination show a high improvement tendency. Was observed. On the other hand, in the group using the comparative example, none of the panelists evaluated that the skin wrinkle and skin elasticity were clearly improved, and the symptom was observed in the panel wrinkles of skin 85% or more and the skin elasticity 70% or more. No improvement was seen. The wrinkle of the skin is 10 to 40%, and the elasticity of the skin is 15%.
~ 55% of panelists tended to worsen each symptom.
【００４６】なお、本発明の実施例８〜実施例１６につ
いては、上記の使用期間中に含有成分の析出，分離，凝
集，変色，変臭といった状態変化は全く見られなかっ
た。また各実施例使用群において、皮膚刺激性反応や皮
膚感作性反応を示したパネラーも存在しなかった。In Examples 8 to 16 of the present invention, no change in state such as precipitation, separation, agglomeration, discoloration, and odor of the contained components was observed at all during the above use period. In addition, in each group used in Examples, there was no paneler showing a skin irritating reaction or a skin sensitizing reaction.
【００４７】[0047]
【発明の効果】以上詳述したように、本発明により、ヒ
ト線維芽細胞に由来するエラスターゼに対して高い特異
性及び阻害作用を示し、紫外線曝露等により惹起される
エラスターゼ活性の過剰亢進に起因する真皮マトリック
スの弾性低下を有効に防止し得るエラスターゼ阻害剤を
得ることができた。なお、本発明に係るエラスターゼ阻
害剤の原料とする植物は容易に入手することができるた
め、一定の品質のものを安定供給することが可能であ
る。また本発明により、紫外線曝露等による真皮エラス
チンの分解促進に基づく皮膚の老化症状の防止及び改善
において、有効な皮膚外用剤を提供することができた。As described in detail above, the present invention exhibits high specificity and an inhibitory effect on elastase derived from human fibroblasts, and is caused by an excessive increase in elastase activity caused by exposure to ultraviolet rays. An elastase inhibitor capable of effectively preventing the decrease in the elasticity of the dermis matrix was obtained. In addition, since the plant used as the raw material of the elastase inhibitor according to the present invention can be easily obtained, it is possible to stably supply a plant having a certain quality. Further, according to the present invention, it was possible to provide an effective external preparation for skin in preventing and improving aging symptoms of skin based on promotion of decomposition of dermal elastin due to exposure to ultraviolet rays or the like.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 7/00 Ａ６１Ｋ 7/00 Ｋ 7/42 7/42 7/48 7/48 Ａ６１Ｐ 17/00 31/00 ６１７ Ｆターム(参考） 4C083 AA111 AA112 AB032 AB232 AB242 AB442 AC012 AC022 AC072 AC102 AC122 AC242 AC342 AC402 AC422 AC472 AC482 AC542 AC782 AD092 AD282 AD512 AD662 BB51 CC03 CC04 CC05 CC11 CC12 DD22 DD23 DD27 DD31 DD33 DD41 EE11 EE12 EE17 4C088 AB26 AB38 AB43 AB51 AB81 AC01 AC03 AC04 AC05 AC11 AC13 BA08 BA09 BA10 CA04 CA14 MA07 MA63 NA14 ZA36 ZA40 ZA45 ZA59 ZA66 ZA67 ZA81 ZA89 ZB15 ZC20 ──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. 7 Identification symbol FI Theme coat ゛ (Reference) A61K 7/00 A61K 7/00 K 7/42 7/42 7/48 7/48 A61P 17/00 31 / 00 617 F-term (reference) 4C083 AA111 AA112 AB032 AB232 AB242 AB442 AC012 AC022 AC072 AC102 AC122 AC242 AC342 AC402 AC422 AC472 AC482 AC542 AC782 AD092 AD282 AD512 AD662 BB51 CC03 CC04 CC05 CC11 CC12 DD22 DD23 DD27 DD31 DD33 DD41 EE11 AB1238 AB51 AB81 AC01 AC03 AC04 AC05 AC11 AC13 BA08 BA09 BA10 CA04 CA14 MA07 MA63 NA14 ZA36 ZA40 ZA45 ZA59 ZA66 ZA67 ZA81 ZA89 ZB15 ZC20
Claims (3)
L.），イタドリ（Polygonum cuspidatum Sieb. et Zuc
c.），ハチジョウイタドリ（Polygonum cuspidatum Sie
b. et Zucc. var. hachidyoense Ohwi），オオイタドリ
（Polygonum sachalinense Fr. Schm.），メリッサ（Me
lissa officinalis L.），マンネンロウ（Rosmarinus o
fficinalis L.），ベニバナ（Carthamus tinctorius
L.），ショウガ（Zingiber officinale Roscoe）の各植
物抽出物の１種又は２種以上を含有して成る、エラスタ
ーゼ阻害剤。[Claim 1] Waremoko ( Sanguisorba officinalis)
L.), Knotweed ( Polygonum cuspidatum Sieb. Et Zuc
c.), Honey beebird ( Polygonum cuspidatum Sie
b. et Zucc. var. hachidyoense Ohwi), Giant Knotweed ( Polygonum sachalinense Fr. Schm.), Melissa ( Me )
lissa officinalis L.), Mannenrou ( Rosmarinus o )
fficinalis L.), safflower ( Carthamus tinctorius )
L.), ginger ( Zingiber officinale Roscoe), an elastase inhibitor comprising one or more plant extracts.
L.）の５０容量％エタノール水溶液による抽出物を、ス
チレンポリマー製の吸着ゲルクロマトグラフィーにてエ
タノール−水混合溶媒で分画した際、３０容量％エタノ
ール水溶液により溶出される画分を含有して成るエラス
ターゼ阻害剤。(2) Warm moth ( Sanguisorba officinalis)
L.) containing a fraction eluted with a 30% by volume aqueous ethanol solution when the extract with a 50% by volume aqueous ethanol solution was fractionated with an ethanol-water mixed solvent by adsorption gel chromatography made of a styrene polymer. An elastase inhibitor.
ーゼ阻害剤より選択した１種又は２種以上を含有して成
る、老化防止用皮膚外用剤。3. An external preparation for preventing aging, comprising one or more selected from the elastase inhibitors according to claim 1 and 2.
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Cited By (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2003002820A (en) * | 2001-06-22 | 2003-01-08 | Naris Cosmetics Co Ltd | Skin care composition |
| JP2003104865A (en) * | 2001-07-25 | 2003-04-09 | Noevir Co Ltd | Skin care preparation |
| JP2003183171A (en) * | 2001-12-21 | 2003-07-03 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | Elastase activity inhibitor |
| JP2003212749A (en) * | 2002-01-16 | 2003-07-30 | Noevir Co Ltd | INHIBITOR OF AGEs FORMATION AND SKIN CARE PREPARATION COMPRISING THE SAME |
| JP2003261432A (en) * | 2002-03-07 | 2003-09-16 | Noevir Co Ltd | Skin care preparation |
| JP2005206466A (en) * | 2004-01-20 | 2005-08-04 | Naris Cosmetics Co Ltd | Wrinkle-smoothing skin lotion |
| WO2006106996A1 (en) * | 2005-03-31 | 2006-10-12 | Kobayashi Pharmaceutical Co., Ltd. | Gingival epithelial cell extension inhibitor |
| JP2007001905A (en) * | 2005-06-22 | 2007-01-11 | Kao Corp | Cosmetic |
| JP2007182420A (en) * | 2005-12-30 | 2007-07-19 | Ind Technol Res Inst | Medicinal herb composition having free radical suppressing action and health food containing the medicinal herb composition |
| WO2009084742A2 (en) | 2009-03-30 | 2009-07-09 | Shiseido Company, Ltd. | Fibroblast proliferator |
| JP2011183019A (en) * | 2010-03-10 | 2011-09-22 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | Deodorant |
| JP2012184270A (en) * | 2005-05-27 | 2012-09-27 | Hayashibara Co Ltd | Agent for external application to the skin |
| CN103169794A (en) * | 2013-01-24 | 2013-06-26 | 谢菊荣 | Traditional Chinese medicine paste for treating severe burn and preparation method thereof |
| EP2772245A1 (en) | 2013-02-27 | 2014-09-03 | Symrise AG | Ginger extract for the protection of stem cells |
| US8980336B2 (en) | 2005-12-30 | 2015-03-17 | Industrial Technology Research Institute | Method for inhibiting free radicals |
| KR101574248B1 (en) * | 2014-01-27 | 2015-12-03 | 한국콜마주식회사 | Cosmetic composition comprising Reynoutria sachalinensis extracts for skin anti-wrinkle effect |
| EP3097905A1 (en) | 2015-05-28 | 2016-11-30 | Symrise AG | Cosmetic compositions |
| JP2017100960A (en) * | 2015-11-30 | 2017-06-08 | ポーラ化成工業株式会社 | Melanin uptake inhibitor |
| JP2017128538A (en) * | 2016-01-21 | 2017-07-27 | 丸善製薬株式会社 | Endo180 production promoter |
| WO2017207021A1 (en) | 2016-05-30 | 2017-12-07 | Symrise Ag | Medicament comprising ginger root co2 extract |
| WO2017215729A1 (en) | 2016-05-30 | 2017-12-21 | Symrise Ag | Cosmetic compositions comprising sclareolide |
| WO2018001485A1 (en) | 2016-06-30 | 2018-01-04 | Symrise Ag | Medicament and cosmetic composition comprising resorcinol derivatives |
| US20180008557A1 (en) * | 2008-10-27 | 2018-01-11 | The Regents Of The University Of Michigan | Use of two botanicals with complementary activities for improvement of skin |
-
1999
- 1999-05-13 JP JP13267499A patent/JP3839618B2/en not_active Expired - Lifetime
Cited By (30)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2003002820A (en) * | 2001-06-22 | 2003-01-08 | Naris Cosmetics Co Ltd | Skin care composition |
| JP2003104865A (en) * | 2001-07-25 | 2003-04-09 | Noevir Co Ltd | Skin care preparation |
| JP2003183171A (en) * | 2001-12-21 | 2003-07-03 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | Elastase activity inhibitor |
| JP2003212749A (en) * | 2002-01-16 | 2003-07-30 | Noevir Co Ltd | INHIBITOR OF AGEs FORMATION AND SKIN CARE PREPARATION COMPRISING THE SAME |
| JP2003261432A (en) * | 2002-03-07 | 2003-09-16 | Noevir Co Ltd | Skin care preparation |
| JP2005206466A (en) * | 2004-01-20 | 2005-08-04 | Naris Cosmetics Co Ltd | Wrinkle-smoothing skin lotion |
| WO2006106996A1 (en) * | 2005-03-31 | 2006-10-12 | Kobayashi Pharmaceutical Co., Ltd. | Gingival epithelial cell extension inhibitor |
| JP2012184270A (en) * | 2005-05-27 | 2012-09-27 | Hayashibara Co Ltd | Agent for external application to the skin |
| JP4589823B2 (en) * | 2005-06-22 | 2010-12-01 | 花王株式会社 | Cosmetics |
| JP2007001905A (en) * | 2005-06-22 | 2007-01-11 | Kao Corp | Cosmetic |
| JP2007182420A (en) * | 2005-12-30 | 2007-07-19 | Ind Technol Res Inst | Medicinal herb composition having free radical suppressing action and health food containing the medicinal herb composition |
| US8980336B2 (en) | 2005-12-30 | 2015-03-17 | Industrial Technology Research Institute | Method for inhibiting free radicals |
| US20180008557A1 (en) * | 2008-10-27 | 2018-01-11 | The Regents Of The University Of Michigan | Use of two botanicals with complementary activities for improvement of skin |
| KR20120041090A (en) | 2009-03-30 | 2012-04-30 | 가부시키가이샤 시세이도 | Fibroblast proliferator |
| WO2009084742A2 (en) | 2009-03-30 | 2009-07-09 | Shiseido Company, Ltd. | Fibroblast proliferator |
| US8628783B2 (en) | 2009-03-30 | 2014-01-14 | Shiseido Company, Ltd. | Method for growing fibroblasts |
| JP2011183019A (en) * | 2010-03-10 | 2011-09-22 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | Deodorant |
| CN103169794A (en) * | 2013-01-24 | 2013-06-26 | 谢菊荣 | Traditional Chinese medicine paste for treating severe burn and preparation method thereof |
| EP2772245A1 (en) | 2013-02-27 | 2014-09-03 | Symrise AG | Ginger extract for the protection of stem cells |
| KR101574248B1 (en) * | 2014-01-27 | 2015-12-03 | 한국콜마주식회사 | Cosmetic composition comprising Reynoutria sachalinensis extracts for skin anti-wrinkle effect |
| EP3097905A1 (en) | 2015-05-28 | 2016-11-30 | Symrise AG | Cosmetic compositions |
| WO2016189024A1 (en) | 2015-05-28 | 2016-12-01 | Symrise Ag | Cosmetic compositions comprising sclareolide |
| WO2016189038A1 (en) | 2015-05-28 | 2016-12-01 | Symrise Ag | Cosmetic compositions comprising ginger root extracts |
| WO2016189046A1 (en) | 2015-05-28 | 2016-12-01 | Symrise Ag | Cosmetic compositions comprising purple coneflower pressed juice |
| WO2016188988A1 (en) | 2015-05-28 | 2016-12-01 | Symrise Ag | Cosmetic compositions comprising e/z-2-benzylindene-5,6-dimethoxy-3,3-dimethylindan-1-one |
| JP2017100960A (en) * | 2015-11-30 | 2017-06-08 | ポーラ化成工業株式会社 | Melanin uptake inhibitor |
| JP2017128538A (en) * | 2016-01-21 | 2017-07-27 | 丸善製薬株式会社 | Endo180 production promoter |
| WO2017207021A1 (en) | 2016-05-30 | 2017-12-07 | Symrise Ag | Medicament comprising ginger root co2 extract |
| WO2017215729A1 (en) | 2016-05-30 | 2017-12-21 | Symrise Ag | Cosmetic compositions comprising sclareolide |
| WO2018001485A1 (en) | 2016-06-30 | 2018-01-04 | Symrise Ag | Medicament and cosmetic composition comprising resorcinol derivatives |
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