JP2000319189A - Elastase inhibitor, and senility-preventing skin lotion containing the same - Google Patents

Elastase inhibitor, and senility-preventing skin lotion containing the same

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JP2000319189A
JP2000319189A JP13267499A JP13267499A JP2000319189A JP 2000319189 A JP2000319189 A JP 2000319189A JP 13267499 A JP13267499 A JP 13267499A JP 13267499 A JP13267499 A JP 13267499A JP 2000319189 A JP2000319189 A JP 2000319189A
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Hirotake Kiyoutani
Megumi Obayashi
大毅 京谷
恵 大林
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Noevir Co Ltd
株式会社ノエビア
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain an elastase inhibitor having constant and stable quality and exhibiting high specificity to and inhibitory action against an elastase derived from human fibroblast, and also to provide a skin lotion effective in preventing and improving the symptom of skin aging due to the accelerated degradation of corium elastin with excess sthenia of elastase activity. SOLUTION: This elastase inhibitor is obtained by including an eluted fraction with 30 vol% ethanol aqueous solution when fractioning the following extract by an adsorption gel chromatography using a styrene-based polymer in a ethanol-water mixed solvent as an effective ingredient: at least one kind of extracts extracted from the group consisting of Sanguisorba officinalis L., Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc., Polygonum cuspidatum Sisb. et Zucc. var. hachidyoense Ohwi, Polygonum sachalinense Fr. Schm., Melissa officinalis L., Rosmarinus officinalis L., Carthamus tinctorius L. and Zingiber officinale Roscoe, or the extract of Sanguisorba officinalis L. with 50 vol% ethanol aqueous solution. This senility-preventing skin lotion is prepared by including at least one kind of above elastase inhibitors in an external preparation basis.

Description

【発明の詳細な説明】 DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】 [0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、ヒト線維芽細胞の産生するエラスターゼに対し、特異的且つ高い活性阻害作用を有するエラスターゼ阻害剤、及びこれを含有して成る、皮膚の老化症状の防止及び改善に有効な皮膚外用剤に関する。 BACKGROUND OF THE INVENTION The present invention is, with respect to elastase produced by human fibroblasts, elastase inhibitors with specific and high activity inhibitory action, and comprising the same, prevention and aging symptoms of the skin It relates to an effective external preparation for skin to improve. さらに詳しくは、ワレモコウ,イタドリ, More particularly, burnet, Japanese knotweed,
ハチジョウイタドリ,オオイタドリ,メリッサ,マンネンロウ,ベニバナ,ショウガの各抽出物の1種又は2種以上、或いはワレモコウ抽出物の分画物を含有して成るエラスターゼ阻害剤、及びこれを含有する老化防止用皮膚外用剤に関する。 Bee Zhou knotweed, Ooitadori, Melissa, rosemary, safflower, one or more of the extracts of ginger, or fractions elastase inhibitor comprising a burnet extract, and for anti-aging, containing the same on the external preparation for skin.

【0002】 [0002]

【従来の技術】エラスチンは、動脈,腱,皮膚などの伸展性に富んだ組織に見られる構成タンパク質であり、エラスターゼにより分解可溶化される。 BACKGROUND OF THE INVENTION Elastin, arteries, tendons, a tissue found constituent protein rich extensibility such as the skin, are decomposed solubilized by elastase. エラスターゼはセリンプロテアーゼに類別され、膵臓,白血球,線維芽細胞等に由来するものが知られている。 Elastase is classified as a serine protease, pancreas, leukocytes, there has been known one derived from fibroblast cells. かかるエラスターゼの過剰発現或いは活性化によるエラスチンの過度の分解は、肺気腫,肺線維症,気管支炎,気管支拡張症,肺炎,リウマチ関節炎,心筋梗塞等の虚血性疾患,動脈硬化,膵炎,腎炎,歯周炎,皮膚疾患などの原因となると考えられている。 Overexpression or excessive degradation of elastin by activation of such elastase, emphysema, pulmonary fibrosis, bronchitis, bronchiectasis, pneumonia, rheumatoid arthritis, ischemic diseases such as myocardial infarction, arteriosclerosis, pancreatitis, nephritis, teeth periodontitis, is believed to be responsible for, such as skin diseases. そこで、過剰に亢進されたエラスターゼ活性を抑制するべく、種々のエラスターゼ阻害剤の検索がなされている。 Therefore, in order to suppress the excessive enhanced elastase activity, it has been made research various elastase inhibitors.

【0003】たとえば、ヒト好中球由来のエラスターゼに対しては、イミノ誘導体(特開平7−41459), For example, for the elastase from human neutrophils, imino derivatives (JP-A-7-41459),
p-グアニジノ安息香酸フェニルエステル誘導体(特開平7−173062),アゼチジノン誘導体(特開平7− p- guanidino benzoic acid phenyl ester derivatives (JP-A-7-173062), azetidinone derivative (JP-A-7-
242624)等が、ヒト白血球由来エラスターゼに対しては、β-ケト酸誘導体(特開平7−17306 242624), etc., for the human leukocyte-derived elastase, beta-keto acid derivatives (JP-A-7-17306
1),ヒドロキサム酸誘導体(特開平7−17312 1), the hydroxamic acid derivatives (JP-A-7-17312
7),4H-3,1-ベンズオキサジン-4-オン(特開平7−3 7), 4H-3,1- benzoxazin-4-one (JP-7-3
16056,同8−134050)等が開示されている。 16056, the same 8-134050) and the like have been disclosed.

【0004】また、特に皮膚組織に由来するエラスターゼの活性を阻害するものとしては、トウダイグサ科植物(特開平9−87136),セプリク(特開平9−87 Further, those that inhibit the activity of elastase derived from particular skin tissue, Euphorbiaceae plants (JP-A 9-87136), Sepuriku (JP-9-87
137),ツバキ科スチマ属植物(特開平9−9542 137), theaceous Suchima a plant belonging to the genus (JP-A-9-9542
0),フトモモ科ベッケア属植物(特開平9−9543 0), the myrtle family Bekkea a plant belonging to the genus (JP-A-9-9543
6),クララ(特開平10−17460),カユアンギン,ムリコ・ボロン(特開平10−29925),ジャケツイバラ属植物(特開平10−29926),ミソハギ科ウドフォルディア属植物(特開平10−3628 6), Clara (JP 10-17460), Kayuangin, Muriko Boron (JP-10-29925), caesalpinia decapetala genus plants (JP-A 10-29926), Lythraceae Udo fault Deer genus plants (JP-A 10-3628
1),シソ科スファケレ属植物(特開平11−9235 1), Shisoka Sufakere genus plants (JP-A 11-9235
4)等の抽出物や、ニワトコ抽出物由来のポリペプチド等、植物由来のものが多く提案されている。 4) extracts and the like, such as polypeptides derived from the elder extract, have been proposed many those derived from plants.

【0005】しかしながら、上記したようなエラスターゼ阻害剤には、好中球や白血球に由来するエラスターゼに対して特異性を示すものの、線維芽細胞由来のエラスターゼに対する特異性の低いものもあり、その他、特殊な植物を原料とするため、一定品質のものを入手するのが困難であるといった問題があった。 However, the elastase inhibitor, as described above, while indicating specificity for elastase derived from neutrophils and leukocytes, while others less specificity to elastase-derived fibroblasts, other, in order to a special plant as a raw material, there has been a problem that it is difficult to obtain those of a certain quality.

【0006】 [0006]

【発明が解決しようとする課題】そこで本発明においては、一定品質のものを容易に入手することができ、さらにヒト線維芽細胞に由来するエラスターゼに対して高い特異性及び阻害作用を示し、エラスターゼ活性の過剰亢進に起因する真皮マトリックスの弾性低下を有効に防止することのできるエラスターゼ阻害剤を得ることを目的とした。 In THE INVENTION try problem solving] The present invention can be easily obtained those constant quality further show high specificity and inhibitory activity against elastase from human fibroblasts, elastase obtaining a elastase inhibitor that can effectively prevent the elastic reduction in the dermal matrix due to excessive enhancement of activity aimed. またさらに、真皮エラスチンの分解促進に基づく皮膚の老化症状の防止及び改善に有効な皮膚外用剤を提供することを目的とした。 Furthermore, it aimed to provide an effective external preparation for skin for the prevention and amelioration of aging symptoms of skin based on the accelerated degradation of the dermis elastin.

【0007】 [0007]

【課題を解決するための手段】上記の課題を解決するべく種々検討した結果、本発明者らは、ワレモコウ,イタドリ,ハチジョウイタドリ,オオイタドリ,メリッサ, [Summary of the results of various studies to solve the above problems, the present inventors have burnet, knotweed, bee jaw knotweed, Ooitadori, Melissa,
マンネンロウ,ベニバナ,ショウガの各抽出物に高いエラスターゼ阻害活性が存することを見いだし、本発明を完成するに至った。 Found rosemary, safflower, that exists a high elastase inhibitory activity to each extract ginger, and have completed the present invention.

【0008】すなわち本発明においては、ワレモコウ( Sanguisorba officinalis L.),イタドリ( Polygonu [0008] That is, in the present invention, burnet (Sanguisorba officinalis L.), Japanese knotweed (Polygonu
m cuspidatum Sieb. et Zucc.),ハチジョウイタドリ( Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. var. hachidy m cuspidatum Sieb. et Zucc.) , bees Zhou Japanese knotweed (Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. var. hachidy
oense Ohwi),オオイタドリ( Polygonum sachalinense oense Ohwi), Ooitadori (Polygonum sachalinense
Fr. Schm.),メリッサ( Melissa officinalis L.), Fr. Schm.), Melissa (Melissa officinalis L.),
マンネンロウ( Rosmarinus officinalis L.),ベニバナ( Carthamus tinctorius L.),ショウガ( Zingiber Rosemary (Rosmarinus officinalis L.), safflower (Carthamus tinctorius L.), ginger (Zingiber
officinale Roscoe)の各植物抽出物の1種又は2種以上、或いはワレモコウ( Sanguisorba officinalis L.) officinale Roscoe) 1, two or more of the plant extracts, or burnet (Sanguisorba officinalis L.)
の50容量%エタノール水溶液による抽出物を、スチレンポリマー製の吸着ゲルクロマトグラフィーにてエタノール−水混合溶媒で分画した際、30容量%エタノール水溶液により溶出される画分を有効成分として、担体又は基剤に含有させてエラスターゼ阻害剤とする。 Of the extract according to 50 volume% aqueous ethanol solution, ethanol in the adsorption gel chromatography manufactured styrene polymer - when fractionated with water mixed solvent, as an active ingredient the fractions eluted with 30% by volume aqueous ethanol, carrier or It is contained in a base and elastase inhibitor. さらに、前記エラスターゼ阻害剤より1種又は2種以上を選択して外用剤基剤に含有させ、老化防止用皮膚外用剤を得る。 Further, the select one or more than elastase inhibitor is contained in external preparation base, to obtain the anti-aging external preparation for skin.

【0009】 [0009]

【発明の実施の形態】本発明において用いるワレモコウ( Sanguisorba officinalis L.)は、日本各地に自生するバラ科に属する多年草で、根部を採取し乾燥したものが生薬「チユ」として用いられる。 Burnet used in the DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The present invention (Sanguisorba officinalis L.) is a perennial plant that belongs to the rose family native to parts of Japan, which were taken to dry the root is used as a herbal medicine "healing".

【0010】次いで、本発明において用いるイタドリ( Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.)は、日本各地の山野に自生するタデ科に属する多年草で、根は生薬「虎杖根」として用いられる。 [0010] Subsequently, Japanese knotweed used in the present invention (Polygonum cuspidatum Sieb. Et Zucc. ) Is a perennial plant belonging to the polygonaceae native to Japan around the Yamano, root is used as a herbal medicine "Japanese knotweed root". 近縁植物であるハチジョウイタドリ( Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. va Bee Zhou Japanese knotweed is a closely related plant (Polygonum cuspidatum Sieb. Et Zucc. Va
r. hachidyoense Ohwi)及びオオイタドリ( Polygonums r. hachidyoense Ohwi) and Ooitadori (Polygonums
achalinense Fr. Schm.)をも用いることができる。 achalinense Fr. Schm.) can also be used.

【0011】次に、本発明において用いるメリッサ( Me [0011] Next, Melissa used in the present invention (Me
lissa officinalis L.)は、シソ科に属し、ヨーロッパ南部地中海,黒海,小アジアに自生又は栽培される多年草である。 lissa officinalis L.) belongs to the mint family, southern Europe Mediterranean, Black Sea, is a perennial plant that is native or cultivated in Asia Minor.

【0012】続いて、本発明において用いるマンネンロウ( Rosmarinus officinalis L.)は、シソ科に属する常緑低木で、ヨーロッパ南部において多く栽培されている。 [0012] Subsequently, rosemary used in the present invention (Rosmarinus officinalis L.) is an evergreen shrub belonging to the mint family, it has been cultivated many in southern Europe.

【0013】また、本発明において用いるベニバナ( Ca Further, safflower used in the present invention (Ca
rthamus tinctorius L.)は、日本でも栽培されるキク科に属する2年草で、花は生薬「コウカ」として用いられる。 rthamus tinctorius L.) is a two-year grass belonging to the chrysanthemum family that is cultivated in Japan, flower is used as a herbal "cure".

【0014】最後に、本発明において用いるショウガ( Zingiber officinale Roscoe)は、ショウガ科に属する多年草で、世界各国で栽培されている。 [0014] Finally, ginger used in the present invention (Zingiber officinale Roscoe) is a perennial plant belonging to the ginger family, it is grown in countries around the world. 根茎を乾燥したものは、生薬「ショウキョウ」として用いられる。 Which was dried rhizome is used as a crude drug "ginger root".

【0015】本発明においては、上記各植物の溶媒による抽出物を用いる。 In the present invention, use of the extract with a solvent for the respective plant. 抽出には、上記各植物の花,葉, Extraction, said each plant flowers, leaves,
茎,果実,根茎,根等の各部位を用いることができ、また全草又は全木を用いてもよいが、それぞれ生薬として用いられる部位、すなわちワレモコウについては根及び根茎、イタドリ,ハチジョウイタドリ及びオオイタドリについては根、メリッサ及びマンネンロウについては葉、ベニバナについては花、ショウガについては根茎を用いることが好ましい。 Stems, fruit, rhizome, can be used each part of the root or the like or may be used whole plant or the entire tree, but site used as a crude drug, respectively, i.e. the roots for burnet and rhizomes, Japanese knotweed, bees jaw Polygonum cuspidatum and root for Ooitadori, leaves the Melissa and rosemary, for safflower flower, it is preferable to use a rhizome for ginger.

【0016】上記植物は生のまま抽出操作に供してもよいが、抽出効率を考えると、細切,乾燥,粉砕等の処理を行った後抽出を行うことが好ましい。 [0016] The plant may be subjected to extraction raw but, considering the extraction efficiency, minced, dried, it is preferable to carry out the extraction after the treatment such as pulverization. 抽出は、抽出溶媒に浸漬して行う。 Extraction is carried out by immersing the extraction solvent. 抽出効率を上げるため撹拌を行ったり、抽出溶媒中でホモジナイズすることもできる。 Or followed by stirring to raise the extraction efficiency, it can be homogenized in the extraction solvent. 抽出温度としては、5℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とするのが適切である。 As the extraction temperature, it is appropriate to the temperature below the boiling point of the extraction solvent from about 5 ° C.. 抽出時間は、4時間〜14日間程度とするのが適切である。 Extraction time, it is appropriate to about 4 hours to 14 days.

【0017】抽出溶媒としては、水の他、メタノール, [0017] As extraction solvent include water, methanol,
エタノール,プロパノール,イソプロパノール,ブタノール等の低級アルコール、1,3-ブチレングリコール,プロピレングリコール,ジプロピレングリコール,1,2-ペンタンジオール,グリセリン等の多価アルコール、エチルエーテル,プロピルエーテル等のエーテル類、酢酸エチル,酢酸ブチル等のエステル類、アセトン,エチルメチルケトン等のケトン類などの極性有機溶媒、及びこれらの2種以上による混合溶媒が好ましく用いられ、50 Ethanol, propanol, isopropanol, a lower alcohol, 1,3-butylene glycol, such as butanol, propylene glycol, dipropylene glycol, 1,2-pentanediol, ethers such as polyhydric alcohols, ethyl ether, propyl ether of glycerin or the like, an ester such as ethyl acetate or butyl acetate, acetone, polar organic solvents such as ketones such as ethyl methyl ketone, and mixed solvents by two or more of them are preferably used, 50
容量%のエタノール水溶液が特に好ましい。 Volume% ethanol aqueous solution being particularly preferred. また、生理食塩水,リン酸緩衝液,リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。 Moreover, saline, phosphate buffer, or with phosphate buffered saline and the like.

【0018】上記植物の抽出物は、そのままでもエラスターゼ阻害剤に添加できるが、濃縮,乾固したものを水や極性有機溶媒に再度溶解したり、或いはエラスターゼ阻害作用を損なわない範囲で脱色,脱臭等の精製処理を行った後に添加してもよい。 The extract of the plant, can be added to the left even elastase inhibitor, concentrated, those dryness and redissolved in water or a polar organic solvent or, alternatively decolorized within a range that does not impair the elastase inhibitory activity, deodorizing the purification treatment etc. may be added after. また保存のためには、精製処理の後凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いることが好ましい。 Also for storage, after purification and freeze-drying, it is preferred to dissolve in a solvent upon use.

【0019】さらに本発明においては、ワレモコウ根部の50容量%エタノール水溶液による抽出物を、スチレンポリマー製の吸着ゲルクロマトグラフィーにてエタノール−水混合溶媒で分画した際、30容量%エタノール水溶液により溶出される画分を用いることができる。 [0019] Furthermore, in the present invention, the extract according to 50 volume% ethanol aqueous solution of burnet root, ethanol at adsorption gel chromatography manufactured styrene polymer - when fractionated with water mixed solvent, eluting with 30 volume% ethanol aqueous solution it can be used and fractions. スチレンポリマー製の吸着ゲルとしては、MCI GEL The styrene polymeric adsorption gel, MCI GEL
(三菱化学株式会社製)等が好ましく使用できる。 (Mitsubishi Chemical Co., Ltd.) and the like may be preferably used.

【0020】本発明に係るエラスターゼ阻害剤は、上記各植物の抽出物の1種又は2種以上、或いはワレモコウ抽出物の分画物をそのまま用い、又は担体に添加して得る。 [0020] According to the present invention elastase inhibitors, one or more of the above respective plant extract, or fractions was used as the burnet extract, or added to the carrier. 担体としては、水、エタノール,プロパノール,ブタノール等低級アルコールなどの極性有機溶媒、これらの混合液といった液状担体、各種乳濁液、各種クリーム基剤、軟膏基剤、ゲル、粉体などが用いられる。 The carriers include water, ethanol, propanol, a polar organic solvent such as butanol lower alcohols, liquid carrier such as a mixture solution of these various emulsions, various cream base, ointment base, gel, powder and the like are used . 従って、本発明に係るエラスターゼ阻害剤は、ローション剤,懸濁剤,乳剤,クリーム剤,軟膏剤,ゲル剤,粉末剤等の形態で提供することができる。 Therefore, an elastase inhibitor according to the present invention can provide lotions, suspensions, emulsions, creams, ointments, gels, in the form of powders, and the like. また、リポソームやマイクロカプセルに内包させた状態とすることもできる。 It is also possible to state that the encapsulated in liposomes or microcapsules. なお、本発明に係るエラスターゼ阻害剤には、本発明の特徴を損なわない範囲で、抗酸化剤,防菌防黴剤, Note that the elastase inhibitor according to the present invention, within a range not to impair the characteristics of the present invention, an antioxidant, Antibacterial and Antifungal Agents,
紫外線吸収剤等の安定化剤や、吸収促進剤等を添加することもできる。 And stabilizers ultraviolet absorbers, may be added absorption enhancing agent.

【0021】さらに本発明においては、上記に記載したエラスターゼ阻害剤の1種又は2種以上を外用剤基剤に含有させて、皮膚の老化防止及び改善に有効な皮膚外用剤を提供する。 [0021] Furthermore, in the present invention, one or more elastase inhibitors described above be contained in an external preparation base, provides an effective external preparation for skin anti-aging and skin improvement. かかる皮膚外用剤は、ローション剤,懸濁剤,乳剤,クリーム剤,軟膏剤,ゲル剤等の形状で提供することができる。 Such skin external agent may provide lotions, suspensions, emulsions, creams, ointments, in the form of such gels. また、化粧水,乳液,クリーム, In addition, lotion, milky lotion, cream,
パック剤等皮膚用の化粧料や、化粧下地用ローション又はクリーム、乳液状,クリーム状,軟膏状,固形状の各種ファンデーション等のメイクアップ化粧料、日焼け止めローション又はクリーム等の日焼け止め化粧料、ハンドローション又はクリーム,レッグローション又はクリーム,ボディローション又はクリーム等のボディ化粧料などとしても提供することができる。 Cosmetics and pack agents, and the like for the skin, makeup base lotion or cream, lotion, cream, ointment, makeup cosmetics such as solid of various foundation, sunscreen lotion or sunscreen cosmetics such as cream, hand lotion or cream, leg lotion or cream, can be provided as and body cosmetics such as body lotion or cream.

【0022】本発明に係る老化防止用皮膚外用剤においても、上記エラスターゼ阻害剤の他に、本発明の特徴を損なわない範囲で、各種油分,界面活性剤,低級一価アルコール,保湿剤,多価アルコール,細胞賦活剤,抗酸化剤,美白剤,紫外線吸収剤,防菌防黴剤,顔料,色素類,香料等、一般的な皮膚外用剤添加成分を加えることができる。 [0022] Also in the anti-aging external preparation for skin according to the present invention, in addition to the elastase inhibitor, within a range that does not impair the features of the present invention, various oils, surfactants, lower monohydric alcohols, humectants, multi polyhydric alcohols, cell activators, antioxidants, whitening agents, UV absorbers, antibacterial and antifungal agents, pigments, dyes, can be added perfumes, general skin external additive component.

【0023】 [0023]

【実施例】さらに実施例により、本発明の特徴について詳細に説明する。 The EXAMPLES Further embodiments will be described in detail the features of the present invention.

【0024】[実施例1〜実施例6] ワレモコウ根部,イタドリ根部,メリッサ葉,マンネンロウ葉,ベニバナ花及びショウガ根茎をそれぞれ乾燥したもの各10 [0024] [Examples 1 to 6] burnet root, Japanese knotweed root, Melissa leaf, each 10 that dried rosemary leaves, safflower flower and ginger rhizome, respectively
0gを粉砕し、50容量%エタノール水溶液900ml Was ground 0 g, 50% by volume aqueous ethanol solution 900ml
中に加えて、25℃にて7日間撹拌抽出を行った。 In addition to the in it was carried out for 7 days stirring extraction at 25 ° C.. 抽出液をろ過してろ液を回収し、それぞれ実施例1〜実施例6とした。 The extract was filtered and the filtrate was collected, and respectively first to sixth embodiments.

【0025】[実施例7] 上記実施例1に係るワレモコウ根部の50容量%エタノール水溶液による抽出物を、MCI GEL(三菱化学株式会社製)を用いたカラムクロマトグラフィーにかけ、エタノール−水混合溶媒により分画した。 [0025] [Example 7] extract according 50 volume% aqueous ethanol burnet root portion according to the first embodiment, subjected to column chromatography using MCI GEL (manufactured by Mitsubishi Chemical Corporation), ethanol - the water mixed solvent fractionated. そして、30容量%エタノール水溶液により溶出される画分を回収して、実施例7とした。 Then, to recover the fractions eluted with 30 vol% ethanol aqueous solution was as in Example 7.

【0026】上記実施例1〜実施例7について、エラスターゼ阻害率を測定した。 [0026] For the Examples 1 to 7 was measured elastase inhibition rate. まず、ヒト線維芽細胞を5(w First, the human fibroblasts 5 (w
/v)%の牛胎仔血清を含有するダルベッコ基礎培地(D / V)% of Dulbecco's basal medium containing fetal calf serum (D
MEM)に播種し、37℃で24時間培養してコンフルエントとした後、0.5(w/v)%トリトンX-100水溶液にて細胞を溶解し、酵素液とした。 It was seeded in MEM), after the confluence cultured for 24 hours at 37 ° C., the cells were lysed in 0.5 (w / v)% Triton X-100 solution and the enzyme solution. 前記酵素液に、合成基質であるサクシニル-アラニル-アラニル-アラニル-p- The enzyme solution, a synthetic substrate succinyl - alanyl - alanyl - alanyl -p-
ニトロアニリド(最終濃度1.2mM)及び試料(実施例1〜実施例7)を添加し、37℃で2時間インキュベートして、生成するp-ニトロアニリドの量を405nm Nitroanilide (final concentration 1.2 mM) and added sample (Example 1 to Example 7), incubated for 2 hours at 37 ° C., 405 nm the amount of the produced p- nitroanilide
における吸光度を測定して求めた。 It was determined by measuring the absorbance at. この際試料の濃度としては、実施例1〜実施例6については最終濃度にして100μg/ml、実施例7については最終濃度にして50μg/mlとした。 The concentration of this time the sample, 100 [mu] g / ml in the final concentration for Example 1 to Example 6, was 50 [mu] g / ml in the final concentration for Example 7. エラスターゼ阻害率(%)は、 Elastase inhibition rate (%) is,
試料を添加した場合の前記吸光度(A s )を、試料を添加しない対照について同様に測定した吸光度(A c )で除した値(A s /A c )を求め、(1−A s /A c )×10 The absorbance in the case of addition of sample (A s), calculated similarly measured absorbance for the control without addition of the sample divided by the (A c) (A s / A c), (1-A s / A c) × 10
0により算出した。 It was calculated by 0. 結果は表1に示した。 The results are shown in Table 1.

【0027】 [0027]

【表1】 [Table 1]

【0028】表1より明らかなように、本発明の実施例1〜実施例6は、それぞれ100μg/mlの低濃度で20%以上の有意なエラスターゼ阻害率を示していた。 [0028] As is apparent from Table 1, Examples 1 to 6 of the present invention showed a significant elastase inhibition rate of over 20% at low concentrations of 100 [mu] g / ml.
特に実施例1は、68.7%と高い阻害率を示していた。 Especially Example 1, showed 68.7% of high inhibition rate. また実施例7については、50μg/mlの濃度で、74.0%と非常に高い阻害率が認められていた。 Also for Example 7, at a concentration of 50 [mu] g / ml, 74.0% and very high inhibition rate were observed.
なお、今回エラスターゼ阻害率の評価に用いたヒト線維芽細胞由来のエラスターゼは、紫外線曝露により放出されるサイトカインであるインターロイキン-1αにより活性化されることから、この酵素活性に対し阻害作用を有する本発明の実施例1〜実施例7は、紫外線による皮膚の光老化の防止,改善に有効であることが示唆される。 Incidentally, human fibroblast-derived elastase used in the evaluation of the current elastase inhibition rate, from being activated by interleukin -1α a cytokine released by exposure to UV radiation, has an inhibitory effect on the enzyme activity examples 1 to 7 of the present invention, the prevention of photoaging of the skin due to ultraviolet rays, it is suggested that effective to improve.

【0029】続いて、本発明に係る老化防止用皮膚外用剤についての実施例の処方を示す。 [0029] Subsequently, showing the formulation examples for anti-aging external preparation for skin according to the present invention.

【0030】 [実施例8] 皮膚老化防止用ローション剤 (1)エタノール 10.00(重量%) (2)ヒドロキシエチルセルロース 1.00 (3)エラスターゼ阻害剤(実施例1) 0.02 (4)パラオキシ安息香酸メチル 0.10 (5)精製水 88.88 製法:(1)〜(4)を順次(5)に添加し、均一に溶解する。 [0030] [Example 8] skin aging prevention lotion (1) Ethanol 10.00 (wt%) (2) Hydroxyethyl cellulose 1.00 (3) elastase inhibitors (Example 1) 0.02 (4) methyl parahydroxybenzoate 0.10 (5) purified water 88.88 preparation: (1) was added to (4) successively (5), is uniformly dissolved.

【0031】 [実施例9] 皮膚老化防止用乳剤 (1)ステアリン酸 0.20(重量%) (2)セタノール 1.50 (3)ワセリン 3.00 (4)流動パラフィン 7.00 (5)ポリオキシエチレン(10E.O.)モノオレイン酸 1.50 エステル (6)酢酸トコフェロール 0.25 (7)グリセリン 5.00 (8)パラオキシ安息香酸メチル 0.10 (9)トリエタノールアミン 1.00 (10)精製水 80.40 (11)エラスターゼ阻害剤(実施例2) 0.05 製法:(1)〜(6)の油相成分を混合,加熱して均一に溶解し、70℃に保つ。 [0031] [Example 9] Emulsion for preventing skin aging (1) Stearic acid 0.20 (wt%) (2) cetanol 1.50 (3) Vaseline 3.00 (4) Liquid paraffin 7.00 (5) polyoxyethylene (10E.O.) monooleate 1.50 ester (6) tocopherol acetate 0.25 (7) glycerol 5.00 (8) methyl parahydroxybenzoate 0.10 (9) triethanolamine 1.00 (10) purified water 80.40 (11) elastase inhibitor (example 2) 0.05 preparation: (1) mixing the oil phase component to (6), and uniformly dissolved by heating and kept at 70 ° C. . 一方、(7)〜(10)の水相成分を混合,加熱して均一とし、70℃とする。 On the other hand, (7) mixing the aqueous phase component to (10), the uniform heating, and 70 ° C.. この水相成分に前記油相成分を撹拌しながら徐々に添加して乳化し、冷却した後40℃にて(11)を添加,混合する。 The stirring of the oil phase components in the aqueous phase component were emulsified gradually added, adding (11) at 40 ° C. After cooling, mixed.

【0032】 [実施例10] 皮膚老化防止用ゲル剤 (1)ジプロピレングリコール 10.00(重量%) (2)カルボキシビニルポリマー 0.50 (3)水酸化カリウム 0.10 (4)パラオキシ安息香酸メチル 0.10 (5)精製水 89.25 (6)エラスターゼ阻害剤(実施例3) 0.05 製法:(5)に(2)を均一に溶解した後、(1)に(4)を溶解して添加し、次いで(3)を加えて増粘させ、(6)を添加,混合する。 [0032] [Example 10] Skin antiaging gels (1) Dipropylene glycol 10.00 (wt%) (2) carboxyvinyl polymer 0.50 (3) Potassium hydroxide 0.10 (4) parahydroxybenzoate methyl 0.10 (5) purified water 89.25 (6) elastase inhibitor (example 3) 0.05 preparation: (5) were uniformly dissolved (2), (1) (4) It was added to dissolve and then (3) the increase is viscosity by adding, adding (6) and mix.

【0033】 [実施例11] 皮膚老化防止用クリーム(水中油型) (1)ミツロウ 6.0(重量%) (2)セタノール 5.0 (3)還元ラノリン 8.0 (4)スクワラン 27.5 (5)グリセリル脂肪酸エステル 4.0 (6)親油型グリセリルモノステアリン酸エステル 2.0 (7)ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン 5.0 モノラウリン酸エステル (8)プロピレングリコール 5.0 (9)パラオキシ安息香酸メチル 0.1 (10)精製水 37.3 (11)エラスターゼ阻害剤(実施例4) 0.1 製法:(1)〜(7)の油相成分を混合,加熱して均一に溶解し、75℃に保つ。 [0033] [Example 11] Skin anti-aging cream (oil-in-water) (1) Beeswax 6.0 (wt%) (2) Cetanol 5.0 (3) reduced lanolin 8.0 (4) Squalane 27. 5 (5) glyceryl fatty ester 4.0 (6) lipophilic glyceryl monostearate 2.0 (7) polyoxyethylene (20E.O.) sorbitan 5.0 monolaurate ester (8) propylene glycol 5. 0 (9) methyl parahydroxybenzoate 0.1 (10) purified water 37.3 (11) elastase inhibitors (example 4) 0.1 preparation: (1) mixing the oil phase component to (7), heating and homogeneously dissolved, kept at 75 ° C.. 一方、(8)〜(10)の水相成分を混合,加熱して均一とし、75℃とする。 On the other hand, (8) mixing the aqueous phase component to (10), the uniform heating, and 75 ° C.. この水相成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサーにて均一に乳化し、冷却後40℃にて(11)を添加,混合する。 After preliminary emulsification by adding the oil phase components in the aqueous phase component, uniformly emulsified using a homomixer, adding (11) at 40 ° C. After cooling, the mixture.

【0034】 [実施例12] 皮膚老化防止用水中油型乳剤性軟膏 (1)白色ワセリン 25.00(重量%) (2)ステアリルアルコール 25.00 (3)グリセリン 12.00 (4)ラウリル硫酸ナトリウム 1.00 (5)パラオキシ安息香酸メチル 0.10 (6)精製水 36.89 (7)エラスターゼ阻害剤(実施例7) 0.01 製法:(1)〜(4)の油相成分を混合,溶解して均一とし、 [0034] [Example 12] Skin aging prevention oil-in-water emulsion ointment (1) white petrolatum 25.00 (wt%) (2) Stearyl alcohol 25.00 (3) Glycerin 12.00 (4) Sodium lauryl sulfate 1.00 (5) methyl parahydroxybenzoate 0.10 (6) purified water 36.89 (7) elastase inhibitor (example 7) 0.01 preparation: (1) mixing the oil phase component to (4) , and uniform dissolving,
75℃に加熱する。 Heated to 75 ℃. 一方、(5)を(6)に溶解して75℃に加熱し、これに前記油相成分を添加して乳化し、冷却後40℃にて(7)を添加,混合する。 On the other hand, (5) was dissolved in (6) was heated to 75 ° C., this was emulsified by adding the oil phase component, it added (7) at the cooling after the 40 ° C., and mixed.

【0035】 [実施例13] 日焼け止め用油中水型クリーム (1)スクワラン 38.00(重量%) (2)グリセリルジイソステアリン酸エステル 3.00 (3)パラメトキシ桂皮酸2-エチルヘキシル 3.00 (4)オキシベンゾン 1.50 (5)有機変性ベントナイト 1.50 (6)シリコーン処理酸化チタン 3.00 (7)1,3-ブチレングリコール 5.00 (8)パラオキシ安息香酸メチル 0.10 (9)エラスターゼ阻害剤(実施例5) 0.05 (10)エラスターゼ阻害剤(実施例6) 0.05 (11)精製水 44.70 (12)香料 0.10 製法:(1)〜(5)を混合,加熱して溶解し、(6)を分散して70℃とし、油相とする。 [0035] [Example 13] sunscreen water-in-oil cream (1) Squalane 38.00 (wt%) (2) glyceryl diisostearate ester 3.00 (3) paramethoxy 2-ethylhexyl 3.00 ( 4) oxybenzone 1.50 (5) organic-modified bentonite 1.50 (6) silicone-treated titanium oxide 3.00 (7) 1,3-butylene glycol 5.00 (8) methyl parahydroxybenzoate 0.10 (9) (1) to (5): elastase inhibitor (example 5) 0.05 (10) elastase inhibitor (example 6) 0.05 (11) purified water 44.70 (12) perfume 0.10 preparation mixed, heated to dissolve, and 70 ° C. and dispersed (6), and the oil phase. 一方、(8)を(7)に溶解して On the other hand, by dissolving (8) (7)
(9),(10)とともに(11)に加えて混合し、70℃に加熱する。 (9), and added to and mixed with a with (11) (10), heated to 70 ° C.. 前記油相に水相を添加し、ホモジナイザー処理して乳化後冷却し、40℃にて(12)を添加,混合する。 It was added to the aqueous phase to the oil phase, and homogenizer processing cooling after emulsification, adding (12) at 40 ° C., and mixed.

【0036】 [実施例14] メイクアップベースクリーム (1)ステアリン酸 12.00(重量%) (2)セタノール 2.00 (3)グリセリルトリ2-エチルヘキサン酸エステル 2.50 (4)自己乳化型グリセリルモノステアリン酸 2.00 エステル (5)プロピレングリコール 10.00 (6)パラオキシ安息香酸メチル 0.10 (7)水酸化カリウム 0.30 (8)精製水 69.47 (9)酸化チタン 1.00 (10)ベンガラ 0.10 (11)黄酸化鉄 0.40 (12)エラスターゼ阻害剤(実施例2) 0.03 (13)香料 0.10 製法:(1)〜(4)の油相成分を混合,加熱して均一に溶解し、75℃に保つ。 [0036] [Example 14] Makeup Base Cream (1) Stearic acid 12.00 (wt%) (2) cetanol 2.00 (3) glyceryl 2-ethylhexanoate 2.50 (4) self-emulsifying type glyceryl monostearate 2.00 ester (5) propylene glycol 10.00 (6) methyl parahydroxybenzoate 0.10 (7) potassium hydroxide 0.30 (8) purified water 69.47 (9) titanium oxide 1 .00 (10) red iron oxide 0.10 (11) yellow iron oxide 0.40 (12) elastase inhibitor (example 2) 0.03 (13) perfume 0.10 preparation: (1) oil - (4) Combine phase ingredients, are heated uniformly dissolved, kept at 75 ° C.. 一方、(5)〜(8)の水相成分を混合, On the other hand, the aqueous phase component of (5) to (8) mixing,
加熱して均一とし、これに(9)〜(11)を添加してホモミキサーにて均一に分散した後、75℃とする。 Heated to a uniform, was added thereto (9) to (11) were uniformly dispersed in a homomixer, and 75 ° C.. この水相成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサーにて均一に乳化し、冷却後40℃にて(12),(13) After preliminary emulsification by adding the oil phase components in the aqueous phase component, uniformly emulsified using a homomixer at cooling after 40 ℃ (12), (13)
を添加,混合する。 Added and mixed.

【0037】 [実施例15] 乳液状ファンデーション (1)ステアリン酸 2.00(重量%) (2)スクワラン 5.00 (3)ミリスチン酸オクチルドデシル 5.00 (4)セタノール 1.00 (5)デカグリセリルモノイソパルミチン酸エステル 9.00 (6)1,3-ブチレングリコール 6.00 (7)水酸化カリウム 0.10 (8)パラオキシ安息香酸メチル 0.10 (9)精製水 53.59 (10)酸化チタン 9.00 (11)タルク 7.40 (12)ベンガラ 0.50 (13)黄酸化鉄 1.10 (14)黒酸化鉄 0.10 (15)エラスターゼ阻害剤(実施例1) 0.01 (16)香料 0.10 製法:(1)〜(5)の油相成分を混合,加熱して均一に溶解し、75℃に保つ。 [0037] [Example 15] milky foundation (1) Stearic acid 2.00 (wt%) (2) Squalane 5.00 (3) octyldodecyl myristate 5.00 (4) cetanol 1.00 (5) decaglyceryl monoisostearate palmitic acid ester 9.00 (6) 1,3-butylene glycol 6.00 (7) potassium hydroxide 0.10 (8) methyl parahydroxybenzoate 0.10 (9) purified water 53.59 ( 10) titanium oxide 9.00 (11) talc 7.40 (12) red iron oxide 0.50 (13) yellow iron oxide 1.10 (14) black iron oxide 0.10 (15) elastase inhibitors (example 1) 0.01 (16) perfume 0.10 preparation: (1) to the oil phase components (5) mixture was homogeneously dissolved by heating and kept at 75 ° C.. 一方、(6)〜(9)の水相成分を混合, On the other hand, the aqueous phase component of (6) to (9) mixture,
加熱して均一とし、これに(10)〜(14)を添加してホモミキサーにて均一に分散した後、75℃とする。 Heated to a uniform, was added thereto (10) to (14) were uniformly dispersed in a homomixer, and 75 ° C.. この水相成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサーにて均一に乳化し、冷却後40℃にて(15),(16) After preliminary emulsification by adding the oil phase components in the aqueous phase component, uniformly emulsified using a homomixer at cooling after 40 ℃ (15), (16)
を添加,混合する。 Added and mixed.

【0038】 [実施例16] ハンドクリーム (1)セタノール 4.00(重量%) (2)ワセリン 2.00 (3)流動パラフィン 10.00 (4)グリセリルモノステアリン酸エステル 1.50 (5)ポリオキシエチレン(60E.O.)グリセリル 2.50 イソステアリン酸エステル (6)酢酸トコフェロール 0.50 (7)グリセリン 20.00 (8)パラオキシ安息香酸メチル 0.10 (9)精製水 59.37 (10)エラスターゼ阻害剤(実施例4) 0.02 (11)エラスターゼ阻害剤(実施例7) 0.01 製法:(1)〜(6)の油相成分を混合,加熱して均一に溶解し、75℃に保つ。 [0038] Example 16 Hand cream (1) Cetyl alcohol 4.00 (wt%) (2) Vaseline 2.00 (3) Liquid paraffin 10.00 (4) glyceryl monostearate 1.50 (5) polyoxyethylene (60E.O.) glyceryl 2.50 isostearate (6) tocopherol acetate 0.50 (7) glycerin 20.00 (8) methyl parahydroxybenzoate 0.10 (9) purified water 59.37 ( 10) elastase inhibitor (example 4) 0.02 (11) elastase inhibitor (example 7) 0.01 preparation: (1) to the oil phase components (6) mixed and homogeneously dissolved by heating , kept at 75 ℃. 一方、(7)〜(9)の水相成分を混合, On the other hand, the aqueous phase components (7) to (9) mixture,
加熱して均一とし、75℃とする。 Heated to a uniform, and 75 ° C.. この水相成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサーにて均一に乳化し、冷却後40℃にて(10),(11)を添加,混合する。 After preliminary emulsification by adding the oil phase components in the aqueous phase component, uniformly emulsified using a homomixer at 40 ° C. After cooling (10), adding (11), and mixed.

【0039】上記本発明に係る老化防止用皮膚外用剤についての実施例のうち、実施例8〜実施例12について、紫外線によるしわの発生に対する防止効果を評価した。 [0039] Among the examples of anti-aging external preparation for skin according to the present invention, for Example 8 to Example 12, it was evaluated effect of preventing occurrence of wrinkles due to ultraviolet rays. なお各実施例において、配合した実施例1〜実施例4及び実施例7のエラスターゼ阻害剤を、それぞれこれらにおいて溶媒として用いた50容量%エタノール水溶液及び30容量%エタノール水溶液に代替したものをそれぞれ比較例1〜比較例5とし、同時に評価を行った。 Note In each example, compare the elastase inhibitors of Examples 1 to 4 and Example 7 was blended, what was replaced by 50% by volume aqueous ethanol solution and 30% by volume aqueous ethanol solution was used as a solvent in their respective respectively and example 1 to Comparative example 5 were evaluated at the same time.
しわの発生防止効果は、ヘアレスマウス5匹を1群とし、各群について実施例及び比較例各0.2gをそれぞれ1日1回背部に塗布し、1J/cm 2 /週の長波長紫外線(UVA)を50週間照射し、ヘアレスマウスにおけるしわの発生状況を観察し、表2に示す判定基準に従って点数化して行った。 Effect of preventing wrinkles, and the five hairless mice with one group, examples and comparative examples each 0.2g was applied once back each day for each group, 1 J / cm 2 / week UVA ( the UVA) irradiation 50 weeks, to observe a wrinkle occurrence of the hairless mice was carried out by scoring according to the criteria shown in Table 2. この際、精製水のみを塗布した群を対照とした。 In this case, it served as controls group was applied only purified water. 結果は各群の平均値を算出し、UVA It results an average value of each group, UVA
照射日数との関係により表3に示した。 Table 3 shows the relationship between the irradiation days.

【0040】 [0040]

【表2】 [Table 2]

【0041】 [0041]

【表3】 [Table 3]

【0042】表3に示されるように、対照群においては、UVA照射日数が40週を超える頃には形成されたしわの深さは中程度にまで達し、50週後には深いしわの発生が認められていた。 [0042] As shown in Table 3, in the control group, reached a moderate depth of wrinkles which are formed by the time UVA irradiation days exceeds 40 weeks, the occurrence of deep wrinkles after 50 weeks It was recognized. これに対し本発明の実施例塗布群では、いずれにおいても有意なしわの発生の抑制が認められ、50週後において微小ないし軽微なしわが認められた程度であった。 In an embodiment applied group of the present invention contrast, any significant wrinkles generation suppression was observed even in was the degree to which small or minor wrinkles was observed after 50 weeks. 特に、実施例1又は実施例7を含有する実施例8及び実施例12塗布群においては、顕著なしわの発生抑制が認められていた。 In particular, in Examples 8 and 12 applied group containing Example 1 or Example 7, was observed generation suppression notable wrinkles. 一方比較例塗布群では、酢酸トコフェロールを含有する比較例2塗布群で発生したしわの程度の軽減が若干認められた他は、有意なしわの発生抑制或いは軽減は認められなかった。 In contrast comparative example applied group, in addition to reduction of the degree of wrinkles generated in Comparative Example 2 applied group containing tocopherol acetate was observed slightly, suppressing generation or mitigate significant wrinkle was observed.

【0043】次に、女性パネラーによる使用試験を行った。 Next, we use test by women panelists. この際にも、各実施例において配合した実施例1〜 In this case also, Examples 1 blended in each example
実施例7のエラスターゼ阻害剤を、50容量%エタノール水溶液又は30容量%エタノール水溶液に代替したものを比較例1〜比較例9とした。 The elastase inhibitor of Example 7 was Comparative Example 1 to Comparative Example 9 which was replaced to 50% by volume aqueous ethanol, or 30% by volume aqueous ethanol solution. 使用試験は、20才代〜50才代の通常戸外で作業する女性20名を1群とし、5月中旬〜6月中旬の1カ月間、各群に実施例及び比較例のそれぞれをブラインドにて1日2回使用させ、 Using test twenties and 50 normal women twenty one group to work in outdoor Saitai, 1 month of mid May to mid-June the respective Examples and Comparative Examples each group blind Te is used twice a day,
使用前後の皮膚のしわ及び皮膚弾性の変化を観察して行った。 Use was performed to observe the changes in wrinkles and skin elasticity of the skin before and after. 皮膚のしわについては写真撮影後の目視評価及びレプリカ法により評価し、皮膚弾性についてはキュートメーターによる測定により評価した。 For the wrinkles of the skin was evaluated by visual assessment and the replica method after the photo shoot, it was evaluated by measurement by the cute meter for skin elasticity. 結果は、各パネラーについて使用後の皮膚のしわ及び皮膚弾性を使用前と比べて、「改善」,「やや改善」,「変化なし」,「やや悪化」,「悪化」の5段階にて評価し、各評価を得たパネラー数にて表4に示した。 The results, compared with the previous use wrinkles and skin elasticity of the skin after use for each panelist, "improvement", "slight improvement", "no change", "slightly worse", evaluated at five stages of "worse" and, as shown in Table 4 at a panel number to obtain each evaluation.

【0044】 [0044]

【表4】 [Table 4]

【0045】表4より明らかなように、本発明の実施例使用群ではいずれにおいても、皮膚のしわ及び皮膚弾性の悪化傾向を認めたパネラーはおらず、皮膚のしわについては65%以上、皮膚弾性については90%以上のパネラーにおいて、改善又はやや改善されたと評価されていた。 [0045] Table 4 As is clear, in any in the embodiment used groups of the present invention, panelists acknowledged wrinkles and deteriorating the skin elasticity of the skin Orazu, 65% or more for the skin wrinkles, skin elasticity in a panel of more than 90% for improved or had been evaluated to have been slightly improved. 特に、実施例1又は実施例7のエラスターゼ阻害剤を含有する実施例8,実施例12,実施例15及び実施例16、紫外線吸収剤を併用する実施例13の各使用群で、高い改善傾向が認められた。 In particular, in the group using the Example 1 or Example 8 containing elastase inhibitor of Example 7, Example 12, Example 15 and Example 16, Example 13 to use a UV absorber, a high improvement trends It was observed. これに対し比較例使用群では、皮膚のしわ及び皮膚弾性について明確に改善されたと評価されたパネラーは存在せず、皮膚のしわについては85%以上、皮膚弾性については70%以上のパネラーで症状の改善が見られなかった。 In the comparative example using groups contrast, panelists evaluated that clearly improves the wrinkle and skin elasticity of the skin is not present, more than 85% for the skin wrinkles, symptoms panelist than 70% for skin elasticity improvement of was not observed. また、皮膚のしわについては10〜40%、皮膚弾性については15 Moreover, 10-40% for the skin wrinkles, 15 for skin elasticity
〜55%のパネラーにおいて、各症状の悪化傾向を認めていた。 In 55% of the panelists, it had acknowledged the worsening trend of each symptom.

【0046】なお、本発明の実施例8〜実施例16については、上記の使用期間中に含有成分の析出,分離,凝集,変色,変臭といった状態変化は全く見られなかった。 [0046] Incidentally, Examples 8 16 of the present invention, precipitation of containing components in the above period of use, separation, aggregation, discoloration, state changes such as smell change was observed at all. また各実施例使用群において、皮膚刺激性反応や皮膚感作性反応を示したパネラーも存在しなかった。 In each embodiment using group, panelists there was no showing skin irritation reactions and skin sensitization reactions.

【0047】 [0047]

【発明の効果】以上詳述したように、本発明により、ヒト線維芽細胞に由来するエラスターゼに対して高い特異性及び阻害作用を示し、紫外線曝露等により惹起されるエラスターゼ活性の過剰亢進に起因する真皮マトリックスの弾性低下を有効に防止し得るエラスターゼ阻害剤を得ることができた。 As described above in detail, the present invention show a high specificity and inhibitory activity against elastase from human fibroblasts, due to excessive enhancement of elastase activity elicited by exposure to ultraviolet radiation, etc. We were obtained elastase inhibitors which can effectively prevent the elastic reduction in the dermal matrix. なお、本発明に係るエラスターゼ阻害剤の原料とする植物は容易に入手することができるため、一定の品質のものを安定供給することが可能である。 Incidentally, the plant as a raw material of elastase inhibitor according to the present invention because it is readily available, it is possible to stably supply those constant quality. また本発明により、紫外線曝露等による真皮エラスチンの分解促進に基づく皮膚の老化症状の防止及び改善において、有効な皮膚外用剤を提供することができた。 Also the present invention, in the prevention and amelioration of aging symptoms of skin based on the accelerated degradation of the dermis elastin by exposure to UV radiation or the like, it was possible to provide an effective external preparation for skin.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl. 7識別記号 FI テーマコート゛(参考) A61K 7/00 A61K 7/00 K 7/42 7/42 7/48 7/48 A61P 17/00 31/00 617 Fターム(参考) 4C083 AA111 AA112 AB032 AB232 AB242 AB442 AC012 AC022 AC072 AC102 AC122 AC242 AC342 AC402 AC422 AC472 AC482 AC542 AC782 AD092 AD282 AD512 AD662 BB51 CC03 CC04 CC05 CC11 CC12 DD22 DD23 DD27 DD31 DD33 DD41 EE11 EE12 EE17 4C088 AB26 AB38 AB43 AB51 AB81 AC01 AC03 AC04 AC05 AC11 AC13 BA08 BA09 BA10 CA04 CA14 MA07 MA63 NA14 ZA36 ZA40 ZA45 ZA59 ZA66 ZA67 ZA81 ZA89 ZB15 ZC20 ────────────────────────────────────────────────── ─── of the front page continued (51) Int.Cl. 7 identification mark FI theme Court Bu (reference) A61K 7/00 A61K 7/00 K 7/42 7/42 7/48 7/48 A61P 17/00 31 / 00 617 F-term (reference) 4C083 AA111 AA112 AB032 AB232 AB242 AB442 AC012 AC022 AC072 AC102 AC122 AC242 AC342 AC402 AC422 AC472 AC482 AC542 AC782 AD092 AD282 AD512 AD662 BB51 CC03 CC04 CC05 CC11 CC12 DD22 DD23 DD27 DD31 DD33 DD41 EE11 EE12 EE17 4C088 AB26 AB38 AB43 AB51 AB81 AC01 AC03 AC04 AC05 AC11 AC13 BA08 BA09 BA10 CA04 CA14 MA07 MA63 NA14 ZA36 ZA40 ZA45 ZA59 ZA66 ZA67 ZA81 ZA89 ZB15 ZC20

Claims (3)

    【特許請求の範囲】 [The claims]
  1. 【請求項1】 ワレモコウ( Sanguisorba officinalis [Claim 1] burnet (Sanguisorba officinalis
    L.),イタドリ( Polygonum cuspidatum Sieb. et Zuc L.), Japanese knotweed (Polygonum cuspidatum Sieb. Et Zuc
    c.),ハチジョウイタドリ( Polygonum cuspidatum Sie c.), bees Zhou Japanese knotweed (Polygonum cuspidatum Sie
    b. et Zucc. var. hachidyoense Ohwi),オオイタドリ( Polygonum sachalinense Fr. Schm.),メリッサ( Me b. et Zucc. var. hachidyoense Ohwi), Ooitadori (Polygonum sachalinense Fr. Schm.), Melissa (Me
    lissa officinalis L.),マンネンロウ( Rosmarinus o lissa officinalis L.), rosemary (Rosmarinus o
    fficinalis L.),ベニバナ( Carthamus tinctorius fficinalis L.), safflower (Carthamus tinctorius
    L.),ショウガ( Zingiber officinale Roscoe)の各植物抽出物の1種又は2種以上を含有して成る、エラスターゼ阻害剤。 L.), ginger (one or comprising two or more, elastase inhibitors of each plant extract of Zingiber officinale Roscoe).
  2. 【請求項2】 ワレモコウ( Sanguisorba officinalis 2. The method of claim 1] burnet (Sanguisorba officinalis
    L.)の50容量%エタノール水溶液による抽出物を、スチレンポリマー製の吸着ゲルクロマトグラフィーにてエタノール−水混合溶媒で分画した際、30容量%エタノール水溶液により溶出される画分を含有して成るエラスターゼ阻害剤。 The extract according to 50 volume% ethanol aqueous L.), ethanol at adsorption gel chromatography manufactured styrene polymer - when fractionated with water mixed solvent, containing the fraction eluted with 30 vol% aqueous ethanol solution elastase inhibitor made.
  3. 【請求項3】 請求項1及び請求項2に記載のエラスターゼ阻害剤より選択した1種又は2種以上を含有して成る、老化防止用皮膚外用剤。 3. One or comprising two or more anti-aging skin external agent selected from elastase inhibitor according to claim 1 and claim 2.
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