JP2000228984A - 新規ｈＰｅｒ３遺伝子及びそれにコードされる蛋白質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】ｐｅｒ遺伝子ファミリーに関する新たな遺伝子
を同定することによって、哺乳動物の概日リズムの分子
機構の解明を行うこと。 【解決手段】 以下の（ａ）又は（ｂ）の蛋白質をコー
ドする塩基配列を有するＤＮＡ： （ａ）配列番号：１で示されるアミノ酸配列と同一又は
実質的に同一のアミノ酸配列から成る蛋白質、（ｂ）配
列番号：１で示されるアミノ酸配列において、一部のア
ミノ酸が欠失、置換又は付加されたアミノ酸配列から成
り、マウスＰｅｒ３蛋白質と実質的に同質の生物学的活
性を有する蛋白質；以下の（ａ）又は（ｂ）のＤＮＡ： （ａ）配列番号：２で示される塩基配列において、配列
番号：１で示されるアミノ酸配列をコードするＤＮＡ、
(ｂ）（ａ）のＤＮＡとストリンジェントな条件下でハ
イブリダイズし、マウスＰｅｒ３蛋白質と実質的に同質
の生物学的活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ；及
び上記蛋白質。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、概日リズムに関与
するヒト由来の新規な蛋白質であるｈＰｅｒ３、及びそ
れをコードするＤＮＡに関する。

【０００２】

【従来の技術】地球上の生命の営みは、自然界の環境サ
イクルを真似た、一定の周期で起こるリズム状態をとる
ことが知られており、これは一般に「生体リズム（biol
ogicalrhythm）」と呼ばれている。この生体リズムの中
でも、睡眠・覚醒等に関わる日単位の概日リズムは、細
菌からヒトに至るまで広く認められる生体機構である。
概日リズムは、生体の内部で自律的にリズムを刻む発振
体（oscillator）、外部からの明暗リズム等の刺激を発
振体に伝え同調させる同調機構、及び発振体のリズムを
出力して体温調節やホルモン分泌等のリズムを規定する
出力機構の三つから成り立っていると考えられている。
このような概日リズムを司る発振体ないしペースメーカ
ーである「体内時計」は、哺乳動物においては視床下部
の前下方の視交叉直上に位置する視交叉上核（ＳＣＮ）
に存在することがわかっている。

【０００３】概日リズムに関する分子遺伝学的研究の結
果、先ず最初に、ショウジョウバエからｐｅｒｉｏｄ
（ｐｅｒ）遺伝子（Konopka, R.J.& Benzer,S. Proc.Na
tl.Acad.Sci.USA 68,2112-2116 （1971））が発見さ
れ、同じくショウジョウバエからｔｉｍｅｌｅｓｓ（ｔ
ｉｍ）遺伝子（Sehgal,A.,Price,J.L.,Man,B.& Young,
M.W.Science 263，1603-1606 （1994））が発見され
た。最近になって、哺乳動物であるマウスから、ｃｌｏ
ｃｋ遺伝子が単離された（King,D.P.et al Cell 89,641
-653（1997））。更に、マウスからは、ｍｐｅｒ１，ｍ
ｐｅｒ２，及びｍｐｅｒ３の三つの遺伝子が発見され、
これらの塩基配列はショウジョウバエから発見されたｐ
ｅｒ遺伝子とはっきりとした相同性を有することも示さ
れた（Tei,H.et al.Nature, 389,512-516（1997）; Alb
recht,U.，Sun,Z.S.,Eichele,G.& Lee,C.C.Cell, 91 10
55-1064（1997）； Zylka,M.J.,Shearman,L.P.,Weaver,
D.R.& Reppert,S. M.Neuron, 20,1103-1110（199
8））。又、これらに対応するヒトｐｅｒ遺伝子ファミ
リーとして、ｈｐｅｒ１及びｈｐｅｒ２遺伝子の配列も
決定されている（Tei, H. et al Nature, 389, 512-516
(1997); Sun, Z.S. et al Cell, 90, 1003-1011 (199
7); Nagase, T. et al DNA Res., 4 141-150 (199
7)）。

【０００４】これらの概日リズムに関する遺伝子相互間
の関連・機能等に関しては、現在、未だ十分に解明され
ていない点も多いが、最近、提案された機構としては以
下のようなものがある（U. Schibler, Nature, 393 620
-621 （1998））。まず、塩基性領域ヘリックス−ルー
プ−ヘリックス-ＰＡＳ（ｂＨＬＨ-ＰＡＳ）型転写因子
であるＣｌｏｃｋ蛋白質（King,D.P. et al Cell 89,64
1−653（1997））は、ＢＭＡＬ１蛋白質と複合体を形成
し、これがｐｅｒ及びｔｉｍ遺伝子のＥ−ボックスに結
合しその転写を活性化する。このように活性化したｐｅ
ｒ及びｔｉｍ遺伝子はＰｅｒｉｏｄ蛋白質とＴｉｍｅｌ
ｅｓｓ蛋白質を産生していくが、ある濃度を超えると以
下のような負のフィードバック制御が働き始める。即
ち、この二つの蛋白質は互いに結合してヘテロダイマー
を形成し、これが核内に移行してＣｌｏｃｋ−ＢＭＡＬ
１蛋白質複合体の機能を抑制する。このことによって、
ｐｅｒ及びｔｉｍ遺伝子の転写が抑制されるのである
が、この活性化と抑制という状態が約２４時間の周期で
繰り返されることにより、概日リズムが規定されている
と考えられる。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】さて、ＳＣＮにおい
て、ｍＰｅｒ１ＲＮＡ及びｍＰｅｒ２ＲＮＡは光刺激に
よって増大し、Ｐｅｒ１及びＰｅｒ２蛋白質が光によっ
て誘導される。一方、Ｐｅｒ３蛋白質は光に対して非誘
導性であることが確認されている（ Zylka,M.J.,Shearm
an,L.P.,Weaver,D.R.& Reppert,S.M.Neuron Vol.20,110
3-1110（1998）; Toru,T. et al.The EMBO Journal Vo
l.17,No.16 pp.4753−4759,1998）。このように同じｐ
ｅｒ遺伝子ファミリーの中でも、ｐｅｒ３遺伝子はｐｅ
ｒ１及びｐｅｒ２遺伝子とはその機能に大きな違いが見
られる。従って、ｐｅｒ遺伝子ファミリーに関する一層
の研究が求められており、これらの遺伝子を同定するこ
とによって、哺乳動物の概日リズムの分子機構の解明が
より進み、このような基礎的な研究は、非２４時間睡眠
覚醒症候群、睡眠相後退症候群、躁鬱病等の感情障害の
原因究明やそれらの治療方法の確立に多いに貢献するこ
とが期待される。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者は、ヒト脳由来
のｃＤＮＡライブラリーから、新規な蛋白質であるｈＰ
ｅｒ３をコードする新規な塩基配列を有する遺伝子をク
ローニングすることに成功し、本発明を完成させた。即
ち、本発明は第一の態様として、以下の（ａ）又は
（ｂ）の蛋白質（以下、「本発明の蛋白質」ともい
う。）をコードする塩基配列を有するＤＮＡ： （ａ）配列番号：１で示されるアミノ酸配列と同一又は
実質的に同一のアミノ酸配列から成る蛋白質、（ｂ）配
列番号：１で示されるアミノ酸配列において、一部のア
ミノ酸が欠失、置換又は付加されたアミノ酸配列から成
り、マウスＰｅｒ３蛋白質と実質的に同質の生物学的活
性を有する蛋白質、を提供する。本発明の第二の態様と
して、以下の（ａ）又は（ｂ）のＤＮＡ： （ａ）配列番号：２で示される塩基配列において、配列
番号：１で示されるアミノ酸配列をコードするＤＮＡ、
（ｂ）（ａ）のＤＮＡとストリンジェントな条件下でハ
イブリダイズし、マウスＰｅｒ３蛋白質と実質的に同質
の生物学的活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡを提
供する。以上の本発明の第一及び第二の態様であるＤＮ
Ａをまとめて、以下、「発明のＤＮＡ」ともいう。更
に、本発明の第三の態様として、上記ＤＮＡにコードさ
れる蛋白質を提供する。

【０００７】本発明のｈＰｅｒ３をコードする新規な塩
基配列を有する遺伝子は、市販されている（クロンテッ
ク社）ヒト脳由来のｍＲＮＡを出発材料として、本発明
者が調製したｃＤＮＡライブラリーから、ｃＤＮＡ断片
として単離した後に、塩基配列を決定し同定したもので
ある。即ち、具体的には、小原他の方法（DNA Research
Vol.4,53−59（1997））に従って調製したヒト脳由来
のｃＤＮＡライブラリーから、約２５，０００個の組換
え体を選択し、この内の１５，０００個のクローンのｃ
ＤＮＡにつき、その５’末端及び３’末端側の塩基配列
を決定した。次に、こうして得られた５’末端塩基配列
を、既に報告されているｈＰｅｒ１及びｈＰｅｒ２の塩
基配列とＤＮＡ解析プログラム（Fasta & Blast）を用
いて比較することによって、それらと有意な相同性を示
す塩基配列を有する本発明のＤＮＡを含むクローンを見
つけることができる。また、小原他の方法（同上）で調
製したヒト脳由来のｃＤＮＡライブラリーに対し、ｈＰ
ｅｒ１又はｈＰｅｒ２のＤＮＡをプローブとして行うハ
イブリダイゼーションで単離することも出来る。

【０００８】尚、塩基配列中の蛋白質をコードする領域
（ＯＲＦ：Open Reading Frame）の存在は、コンピュー
タープログラムを用いる汎用解析方法によって確認する
ことが出来る。このようにして本発明者によって新たに
確認・同定された、ｈＰｅｒ３は、全１，２１０個のア
ミノ酸から成る蛋白質である。

【０００９】更に、本発明は、第１又は２項記載のＤＮ
Ａを含有する組換えベクター、該組換えベクターを保持
する形質転換体、該形質転換体を培養し、第３項記載の
蛋白質を生成、蓄積せしめ、これを採取することを特徴
とする第３項記載の蛋白質又はその塩の製造方法、及
び、第３項記載の蛋白質の部分ペプチドまたはその塩、
を提供する。又、本発明は、第１又は２項記載のＤＮＡ
を含有してなる医薬、第３項記載の蛋白質又はその部分
ペプチドをコードするＤＮＡに実質的に相補的な塩基配
列を有するアンチセンスヌクレオチド又はそれらを含有
してなる医薬、第３項記載の蛋白質又はその部分ペプチ
ドを含有してなる医薬、第３項記載の蛋白質又はその部
分ペプチド又はそれらの塩に対する抗体、第３項記載の
蛋白質若しくはその部分ペプチド又はそれらの塩を用い
ることを特徴とする第３項記載の蛋白質若しくはその部
分ペプチド又はそれらの塩と特異的に結合する物質のス
クリーニング方法、並びにスクリーニング用キット等も
提供する。

【００１０】

【発明の実施の形態】本発明の蛋白質をコードするＤＮ
Ａとしては、前述した本発明の蛋白質をコードする塩基
配列を含有するものであればいかなるものであってもよ
い。また、ヒトの脳、又は、それ以外の組織、例えば、
心臓、肺、肝臓、脾臓、腎臓、精巣、等の細胞・組織に
由来するｃＤＮＡライブラリー等から同定・単離された
ｃＤＮＡ、又は、合成ＤＮＡのいずれでもよい。ライブ
ラリーに使用するベクターは、バクテリオファージ、プ
ラスミド、コスミド、ファージミドなどいずれであって
もよい。また、前記した細胞・組織よりtotalＲＮＡ画
分またはｍＲＮＡ画分を調製したものを用いて、直接Re
verse Transcriptase Polymerase Chain Reaction（以
下、「ＲＴ-ＰＣＲ法」と略称する）によって増幅する
こともできる。

【００１１】配列番号：１で示されるアミノ酸配列と実
質的に同一のアミノ酸配列とは、配列番号：１で示され
る全アミノ酸配列との相同性の程度が、全体の平均で約
８０％以上、好ましくは約９０％以上であるアミノ酸配
列を意味する。従って、本発明の配列番号：１で示され
るアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有す
る蛋白質としては、例えば、前記の配列番号：１で示さ
れるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有
し、配列番号：１で示されるアミノ酸配列を含有する蛋
白質と実質的に同質の生物学的活性を有する蛋白質を挙
げることが出来る。又、実質的に同質の生物学的活性と
しては、マウスＰｅｒ３の特性、例えば、視交叉上核等
での光非誘導性の概日リズムのような特性を例示するこ
とが出来る。ここで、実質的に同質とは、それらの活性
が性質的に同質であることを示す。

【００１２】又、本発明の蛋白質には、例えば、配列番
号：１で示されるアミノ酸配列中の一部（好ましくは、
１〜２０個程度、より好ましくは１〜１０個程度、さら
に好ましくは数個）のアミノ酸が欠失、置換又は付加し
たアミノ酸配列、或いはそれらを組み合わせたアミノ酸
配列を含有する蛋白質も含まれる。

【００１３】更に、本発明のＤＮＡは、例えば、配列番
号：２で示される塩基配列において、配列番号：１で示
されるアミノ酸配列をコードするＤＮＡ、又は、該ＤＮ
Ａとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、配
列番号：１で示されるアミノ酸配列を有する蛋白質、又
は上記のようなマウスＰｅｒ３蛋白質と同質の生物学的
活性、を有する蛋白質をコードするＤＮＡであればいず
れのものでもよい。かかる条件下で、配列番号：２で示
される塩基配列において、配列番号：１で示されるアミ
ノ酸配列をコードするＤＮＡとハイブリダイズできるＤ
ＮＡとしては、例えば、該ＤＮＡの全塩基配列との相同
性の程度が、全体の平均で約８０％以上、好ましくは約
９０％以上である塩基配列を含有するＤＮＡ等を挙げる
ことが出来る。ハイブリダイゼーションは、モレキュラ
ー・クローニング（Molecular Cloning）２nd（J. Samb
rook etal., Cold Spring Harbor Lab. Press, 1989）
に記載の方法等、当業界で公知の方法あるいはそれに準
じる方法に従って行なうことができる。また、市販のラ
イブラリーを使用する場合、添付の使用説明書に記載の
方法に従って行なうことができる。ここで、「ストリン
ジェントな条件」とは、例えば、DIG DNA Labeling (ベ
ーリンガー・マンハイム社製 Cat No. 1175033）でプ
ローブをラベルした場合に、３２℃のDIG Easy Hyb 溶
液(ベーリンガー・マンハイム社製 Cat No. 1603558）
中でハイブリダイズさせ、４０℃の0.1xSSC 溶液(0.1%
[w/v]SDSを含む)中でメンブレンを洗浄する条件（1xSSC
は0.15Ｍ NaCl，0.015M クエン酸ナトリウムである）で
のサザンブロットハイブリダイゼーションでｈＰｅｒ３
プローブにハイブリダイズする程度の条件である。

【００１４】本発明のＤＮＡのクローニングの手段とし
ては、本発明の蛋白質の部分等の適当な塩基配列を有す
る合成ＤＮＡプライマーを用いてＰＣＲ法によって増幅
するか、または適当なベクターに組み込んだＤＮＡを本
発明の蛋白質の一部あるいは全領域をコードするＤＮＡ
断片もしくは合成ＤＮＡを用いて標識したものとのハイ
ブリダイゼーションによって選別することができる。ハ
イブリダイゼーションの方法は、例えば、Molecular Cl
oning ２nd（J. Sambrook et al., Cold Spring Harbor
Lab. Press, 1989）に記載の方法などに従って行なう
ことができる。また、市販のライブラリーを使用する場
合、添付の使用説明書に記載の方法に従って行なうこと
ができる。ＤＮＡの塩基配列の変換は、公知のキット、
例えば、SuperScript II 逆転写酵素キット（ギブコＢ
ＲＬ社）等を用いて、Gapped duplex法やKunkel法など
の公知の方法あるいはそれらに準じる方法に従って行な
うことができる。クローン化された蛋白質をコードする
ＤＮＡは目的によりそのまま、または所望により制限酵
素で消化したり、リンカーを付加したりして使用するこ
とができる。該ＤＮＡはその５’末端側に翻訳開始コド
ンとしてのＡＴＧを有し、また３’末端側には翻訳終止
コドンとしてのＴＡＡ、ＴＧＡまたはＴＡＧを有してい
てもよい。これらの翻訳開始コドンや翻訳終止コドン
は、適当な合成ＤＮＡアダプターを用いて付加すること
もできる。

【００１５】本発明の蛋白質の発現ベクターは、当該技
術分野で公知の方法に従って作成することが出来る。例
えば、（１）本発明のＤＮＡを含有するＤＮＡ断片を切
り出し、（２）該ＤＮＡ断片を適当な発現ベクター中の
プロモーターの下流に連結することにより製造すること
ができる。ベクターとしては、大腸菌由来のプラスミド
（例、ｐＢＲ３２２，ｐＢＲ３２５，ｐＵＣ１８，ｐＵ
Ｃ１１８）、枯草菌由来のプラスミド（例、ｐＵＢ１１
０，ｐＴＰ５，ｐＣ１９４）、酵母由来プラスミド
（例、ｐＳＨ１９，ｐＳＨ１５）、λファージなどのバ
クテリオファージ、レトロウイルス，ワクシニアウイル
ス，バキュロウイルスなどの動物ウイルス等を利用する
ことが出来る。本発明で用いられるプロモーターとして
は、遺伝子の発現に用いる宿主に対応した適切なプロモ
ーターであればいかなるものでもよい。例えば、宿主が
大腸菌である場合は、ｔｒｐプロモーター、ｌａｃプロ
モーター、ｒｅｃＡプロモーター、λＰLプロモータ
ー、ｌｐｐプロモーターなどが、宿主が枯草菌である場
合は、ＳＰＯ１プロモーター、ＳＰＯ２プロモーター、
ｐｅｎＰプロモーターなど、宿主が酵母である場合は、
ＰＨＯ５プロモーター、ＰＧＫプロモーター、ＧＡＰプ
ロモーター、ＡＤＨプロモーターなどが好ましい。動物
細胞を宿主として用いる場合は、ＳＲαプロモーター、
ＳＶ４０プロモーター、ＬＴＲプロモーター、ＣＭＶプ
ロモーター、ＨＳＶ-ＴＫプロモーターなどが挙げられ
る

【００１６】発現ベクターには、以上の他に、所望によ
り当該技術分野で公知の、エンハンサー、スプライシン
グシグナル、ポリＡ付加シグナル、選択マーカー、ＳＶ
４０複製オリジン（以下、ＳＶ４０ｏｒｉと略称する場
合がある）等を付加することができる。また、必要に応
じて、本発明のＤＮＡにコードされた蛋白質を他の蛋白
質（例えば、グルタチオンＳトランスフェラーゼ及びプ
ロテインＡ）との融合蛋白質として発現させることも可
能である。このような融合蛋白質は、適用名プロテアー
ゼを使用して切断し、それぞれの蛋白質に分離すること
が出来る。

【００１７】宿主細胞としては、例えば、エシェリヒア
属菌、バチルス属菌、酵母、昆虫細胞、昆虫、動物細胞
などが用いられる。エシェリヒア属菌の具体例として
は、エシェリヒア・コリ（Escherichia coli）Ｋ１２・
ＤＨ１（Proc. Natl. Acad. Sci. ＵＳＡ，６０巻，１
６０(１９６８)），ＪＭ１０３（Nucleic Acids Resear
ch，９巻，３０９(１９８１)），ＪＡ２２１（Journal
of Molecular Biology，１２０巻，５１７(１９７
８)），及びＨＢ１０１（Journal of Molecular Biolog
y，４１巻，４５９(１９６９)）等が用いられる。バチ
ルス属菌としては、例えば、バチルス・サチルス（Baci
llus subtilis）ＭＩ１１４（Gene，２４巻，２５５(１
９８３)），２０７−２１〔Journal of Biochemistry，
９５巻，８７(１９８４)〕等が用いられる。酵母として
は、例えば、サッカロマイセス セレビシエ（Saccaromy
ces cerevisiae）ＡＨ２２，ＡＨ２２Ｒ-，ＮＡ８７−
１１Ａ，ＤＫＤ−５Ｄ，２０Ｂ−１２、シゾサッカロマ
イセス ポンベ（Schizosaccaromyces pombe）ＮＣＹＣ
１９１３，ＮＣＹＣ２０３６、サッカロマイセス ピキ
ア パストリス（Saccaromycespicjia pastoris）等が用
いられる。動物細胞としては、例えば、サル細胞ＣＯＳ
−７，Ｖero，チャイニーズハムスター細胞ＣＨＯ（以
下、ＣＨＯ細胞と略記），ｄｈｆｒ遺伝子欠損チャイニ
ーズハムスター細胞ＣＨＯ（以下、ＣＨＯ（ｄｈｆｒ
-）細胞と略記），マウスＬ細胞，マウスＡｔＴ−２
０，マウスミエローマ細胞，ラットＧＨ３，ヒトＦＬ細
胞などが用いられる。

【００１８】これら宿主細胞の形質転換は、当該技術分
野で公知の方法に従って行うことが出来る。例えば、以
下に記載の文献を参照することが出来る。Proc. Natl.
Acad. Sci. ＵＳＡ，６９巻，２１１０(１９７２)； Ge
ne，１７巻，１０７(１９８２)；Molecular ＆ General
Genetics，１６８巻，１１１(１９７９)；Methods in
Enzymology，１９４巻，１８２−１８７（１９９１）；
Proc. Natl. Acad. Sci. ＵＳＡ），７５巻，１９２９
(１９７８)；細胞工学別冊８ 新 細胞工学実験プロトコ
ール．２６３−２６７（１９９５）（秀潤社発行）；及
び Virology，５２巻，４５６(１９７３)。

【００１９】このようにして得られた、本発明のＤＮＡ
を含有する発現ベクターで形質転換された形質転換体
は、当該技術分野で公知の方法に従って培養することが
出来る。例えば、以下に記載の文献を参照することが出
来る。例えば、宿主がエシェリヒア属菌の場合、培養は
通常約１５〜４３℃で約３〜２４時間行ない、必要によ
り、通気や撹拌を加えることもできる。宿主がバチルス
属菌の場合、培養は通常、約３０〜４０℃で約６〜２４
時間行ない、必要により通気や撹拌を加えることもでき
る。宿主が酵母である形質転換体を培養する際、培養は
通常、ｐＨ約５〜８に調整された培地を用いて約２０℃
〜３５℃で約２４〜７２時間行ない、必要に応じて通気
や撹拌を加えることもできる。宿主が動物細胞である形
質転換体を培養する際、ｐＨは約６〜８に調整された培
地を用いて、通常約３０℃〜４０℃で約１５〜６０時間
行ない、必要に応じて通気や撹拌を加えることもでき
る。

【００２０】上記培養物から本発明の蛋白質を分離精製
するには、例えば、培養後、公知の方法で菌体あるいは
細胞を集め、これを適当な緩衝液に懸濁し、超音波、リ
ゾチームおよび／または凍結融解などによって菌体ある
いは細胞を破壊したのち、遠心分離やろ過により蛋白質
の粗抽出液を得る。緩衝液の中に尿素や塩酸グアニジン
などの蛋白質変性剤や、トリトンＸ−１００TMなどの界
面活性剤が含まれていてもよい。培養液中に蛋白質が分
泌される場合には、培養終了後、公知の方法で菌体ある
いは細胞と上清とを分離し、上清を集める。このように
して得られた培養上清、あるいは抽出液中に含まれる蛋
白質の精製は、公知の分離・精製法を適切に組み合わせ
て行なうことができる。こうして得られた本発明の蛋白
質は、公知の方法あるいはそれに準じる方法によって塩
に変換することができ、逆に塩で得られた場合には公知
の方法あるいはそれに準じる方法により、遊離体または
他の塩に変換することができる。更に、、組換え体が産
生する蛋白質を、精製前または精製後に、トリプシン及
びキモトリプシンのような適当な蛋白修飾酵素を作用さ
せることにより、任意に修飾を加えたり、ポリペプチド
を部分的に除去することもできる。本発明の蛋白質また
はその塩の存在は、様々な結合アッセイ及び特異抗体を
用いたエンザイムイムノアッセイ等により測定すること
ができる。

【００２１】本発明の蛋白質は、Ｃ末端が通常カルボキ
シル基（−ＣＯＯＨ）またはカルボキシレート(−ＣＯ
Ｏ-）であるが、Ｃ末端がアミド（−ＣＯＮＨ₂）または
エステル（−ＣＯＯＲ）であってもよい。ここでエステ
ルにおけるＲとしては、例えば、メチル、エチル、ｎ−
プロピル、イソプロピルもしくはｎ−ブチルなどのＣ1-
6アルキル基、例えば、シクロペンチル、シクロヘキシ
ルなどのＣ3-8シクロアルキル基、例えば、フェニル、
α−ナフチルなどのＣ6-12アリール基、例えば、ベンジ
ル、フェネチルなどのフェニル−Ｃ1-2アルキル基もし
くはα−ナフチルメチルなどのα−ナフチル−Ｃ1-2ア
ルキル基などのＣ7-14アラルキル基のほか、経口用エス
テルとして汎用されるピバロイルオキシメチルエステル
などが用いられる。

【００２２】本発明の蛋白質がＣ末端以外にカルボキシ
ル基（またはカルボキシレート）を有している場合、カ
ルボキシル基がアミド化またはエステル化されているも
のも本発明の蛋白質に含まれる。この場合のエステルと
しては、例えば上記したＣ末端のエステルなどが用いら
れる。さらに、本発明の蛋白質には、Ｎ末端のメチオニ
ン残基のアミノ基が保護基（例えば、ホルミル基、アセ
チル基などのＣ1-6アシル基など）で保護されているも
の、生体内で切断されて生成するＮ末端のグルタミン酸
残基がピログルタミン化したもの、分子内のアミノ酸の
側鎖上にある、例えばＯＨ、ＣＯＯＨ、ＮＨ₂、ＳＨな
どが適当な保護基（例えば、ホルミル基、アセチル基な
どのＣ1-6アシル基など）で保護されているもの、ある
いは糖鎖が結合したいわゆる糖蛋白質などの複合蛋白質
なども含まれる。

【００２３】本発明の蛋白質の部分ペプチドとしては、
前記した本発明の蛋白質の部分ペプチドであって、実質
的に同質の活性を有するものであればいずれのものでも
よい。例えば、本発明の蛋白質の構成アミノ酸配列のう
ち少なくとも２０個以上、好ましくは５０個以上、さら
に好ましくは７０個以上、より好ましくは１００個以
上、最も好ましくは２００個以上のアミノ酸配列を有
し、例えば、マウスＰｅｒ３蛋白質と実質的に同質の生
物学的活性を有するするペプチドなどが用いられる。
又、本発明の部分ペプチドはＣ末端が通常カルボキシル
基（−ＣＯＯＨ）またはカルボキシレート（−ＣＯＯ
-）であるが、前記した本発明の蛋白質のごとく、Ｃ末
端がアミド（−ＣＯＮＨ₂ ）またはエステル（−ＣＯＯ
Ｒ）であってもよい。さらに、本発明の部分ペプチドに
は、前記した本発明の蛋白質と同様に、Ｎ末端のメチオ
ニン残基のアミノ基が保護基で保護されているもの、Ｎ
端側が生体内で切断され生成したグルタミル基がピログ
ルタミン酸化したもの、分子内のアミノ酸の側鎖上の置
換基が適当な保護基で保護されているもの、あるいは糖
鎖が結合したいわゆる糖ペプチドなどの複合ペプチドな
ども含まれる。

【００２４】本発明の蛋白質またはその部分ペプチドの
塩としては、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が
好ましい。この様な塩としては、例えば、無機酸（例え
ば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸）との塩、あるい
は有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル
酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ
酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスル
ホン酸）との塩などが用いられる。

【００２５】本発明の蛋白質、その部分ペプチドもしく
はそれらの塩またはそれらのアミド体は、当該技術分野
で公知の化学合成方法を用いて調製することも出来る。
例えば、通常市販されている蛋白質合成用樹脂を用い、
α−アミノ基と側鎖官能基を適当に保護したアミノ酸
を、目的とする蛋白質の配列通りに、当業界において自
体公知の各種縮合方法に従い、樹脂上で縮合させる。反
応の最後に樹脂から蛋白質を切り出すと同時に各種保護
基を除去し、さらに高希釈溶液中で分子内ジスルフィド
結合形成反応を実施し、目的の蛋白質、その部分ペプチ
ドまたはそれらのアミド体を取得する。上記した保護ア
ミノ酸の縮合に関しては、例えば、DCC、N,N'-ジイソプ
ロピルカルボジイミド、及びN-エチル-N'-(3-ジメチル
アミノプロリル）カルボジイミドのようなカルボジイミ
ド類に代表される蛋白質合成に使用できる各種活性化試
薬を用いることができる。これらによる活性化にはラセ
ミ化抑制添加剤（例えば、HOBt, HOOBt)とともに保護ア
ミノ酸を直接樹脂に添加するかまたは、対称酸無水物ま
たはHOBtエステルあるいはHOOBtエステルとしてあらか
じめ保護アミノ酸の活性化を行なった後に樹脂に添加す
ることができる。

【００２６】保護アミノ酸の活性化や樹脂との縮合に用
いられる溶媒としては、酸アミド類、ハロゲン化炭化水
素類、アルコール類、スルオキシド類、及びエーテル類
等、当業界において蛋白質縮合反応に使用しうることが
知られている溶媒から適宜選択されうる。反応温度は蛋
白質結合形成反応に使用され得ることが知られている範
囲から適宜選択され、通常約−２０℃〜５０℃の範囲か
ら適宜選択される。活性化されたアミノ酸誘導体は通常
１.５〜４倍過剰で用いられる。ニンヒドリン反応を用
いたテストの結果、縮合が不十分な場合には保護基の脱
離を行うことなく縮合反応を繰り返すことにより十分な
縮合を行なうことができる。反応を繰り返しても十分な
縮合が得られないときには、無水酢酸またはアセチルイ
ミダゾールを用いて未反応アミノ酸をアセチル化して、
後の反応に影響を及ぼさないようにすることができる。
原料の各アミノ基、カルボキシル基、及びセリン水酸基
等の保護基としても、当該技術分野において、通常使用
される基を使用することができる。原料の反応に関与す
べきでない官能基の保護ならびに保護基、およびその保
護基の脱離、反応に関与する官能基の活性化などは公知
の基または公知の手段から適宜選択しうる。

【００２７】本発明の部分ペプチドまたはそれらの塩
は、当該技術分野において自体公知のペプチドの合成法
に従って、あるいは本発明の蛋白質を適当なペプチダー
ゼで切断することによって製造することができる。ペプ
チドの合成法としては、例えば、固相合成法、液相合成
法のいずれによっても良い。公知の縮合方法や保護基の
脱離としては、例えば、以下の（１）〜（３）に記載さ
れた方法が挙げられる。 （１）泉屋信夫他、ペプチド合成の基礎と実験、 丸善
(株) （1975年） （２）矢島治明 および榊原俊平、生化学実験講座 1、
蛋白質の化学IV、 205、(1977年) （３）矢島治明監修、続医薬品の開発 第14巻 ペプチド
合成 広川書店 反応後の精製も自体公知の方法、例えば、溶媒抽出・蒸
留・カラムクロマトグラフィー・液体クロマトグラフィ
ー・再結晶などを組み合わせて本発明の部分ペプチドを
精製単離することができる。上記方法で得られる部分ペ
プチドが遊離体である場合は、公知の方法によって適当
な塩に変換することができるし、逆に塩で得られた場合
は、公知の方法によって遊離体に変換することができ
る。

【００２８】本発明の蛋白質、その部分ペプチドまたは
それらの塩に対する抗体は、本発明の蛋白質、その部分
ペプチドまたはそれらの塩を認識し得る抗体であれば、
ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体の何れであっ
てもよい。本発明の蛋白質、その部分ペプチドまたはそ
れらの塩に対する抗体は、本発明の蛋白質を抗原として
用い、公知の抗体または抗血清の製造法に従って製造す
ることができる。本発明の抗体は、体液や組織などの被
検体中に存在する本発明の蛋白質等を検出するために使
用することができる。また、本発明の蛋白質等を精製す
るために使用する抗体カラムの作製、精製時の各分画中
の本発明の蛋白質等の検出、被検細胞内における本発明
の蛋白質の挙動の分析などのために使用することができ
る。

【００２９】更に、本発明の抗体は、公知の方法による
被検液中の本発明の蛋白質等の定量、特に、モノクロー
ナル抗体を使用したサンドイッチ免疫測定法による定
量、及び組織染色等による検出などに使用することがで
きる。それによって、例えば、本発明の蛋白質等が関与
する疾病の診断を行なうことができる。これらの目的に
は、抗体分子そのものを用いてもよく、また、抗体分子
のＦ(ａｂ')2 、Ｆａｂ'、あるいはＦａｂ画分を用いて
もよい。本発明の抗体を用いる本発明の蛋白質等の定量
法は、特に制限されるべきものではなく、被測定液中の
抗原量（例えば、蛋白質量）に対応した抗体、抗原もし
くは抗体−抗原複合体の量を化学的または物理的手段に
より検出し、これを既知量の抗原を含む標準液を用いて
作製した標準曲線より算出する測定法であれば、いずれ
の測定法を用いてもよい。例えば、ネフロメトリー、競
合法、イムノメトリック法およびサンドイッチ法が好適
に用いられるが、感度、特異性の点で、後述するサンド
イッチ法を用いるのが好ましい。標識物質を用いる測定
法に用いられる標識剤としては、当該技術分野で公知
の、例えば、放射性同位元素、酵素、蛍光物質、発光物
質などを用いることが出来る。

【００３０】これらの測定・検出方法に関する一般的な
技術手段の詳細については、総説、成書などを参照する
ことができる。例えば、入江 寛編「続ラジオイムノア
ッセイ〕（講談社、昭和５４年発行）、石川栄治ら編
「酵素免疫測定法」（第３版）（医学書院、昭和６２年
発行）、「Methods in ENZYMOLOGY」Vol. 70(Immunoche
mical Techniques(Part A))、 同書 Vol. 73(Immunoche
mical Techniques(PartB))、 同書 Vol. 74(Immunochem
ical Techniques(Part C))、 同書 Vol. 84(Immunochem
ical Techniques(Part D:Selected Immunoassays))、
同書 Vol. 92(Immunochemical Techniques(Part E:Mono
clonal Antibodies and General Immunoassay Method
s))、 同書 Vol. 121(Immunochemical Techniques(Part
I:HybridomaTechnology and Monoclonal Antibodies))
(以上、アカデミックプレス社発行)などを参照すること
ができる。

【００３１】本発明の蛋白質及びその部分ペプチドをコ
ードするＤＮＡに実質的に相補的な塩基配列を有するア
ンチセンスＤＮＡとしては、当該ＤＮＡの塩基配列に実
質的に相補的な塩基配列を有し、該ＤＮＡの発現を抑制
し得る作用を有するものであれば、いずれのアンチセン
スＤＮＡであってもよい。実質的に相補的な塩基配列と
は、例えば、本発明のＤＮＡに相補的な塩基配列の全塩
基配列または部分塩基配列と約９５％以上、最も好まし
くは１００％の相同性を有する塩基配列などが挙げられ
る。又、これらアンチセンスＤＮＡと同様の作用を有す
る核酸配列（ＲＮＡまたはＤＮＡの修飾体）も本発明で
いうアンチセンスＤＮＡに含まれる。これらのアンチセ
ンスＤＮＡは、公知のＤＮＡ合成装置などを用いて製造
することができる。

【００３２】既に記載したように、本発明のＤＮＡがコ
ードする蛋白質は、哺乳動物の概日リズムの分子機構に
おいて重要な役割を担っている。従って、これまでに記
載した、本発明のＤＮＡ、それがコードする蛋白質、該
蛋白質に対する抗体、アンチセンスＤＮＡ等は、非２４
時間睡眠覚醒症候群、睡眠相後退症候群、及び躁鬱病等
の感情障害等を治療する為の各種治療・予防方法に医薬
として使用することが考えられる。例えば、本発明の蛋
白質等またはＤＮＡに異常があったり、欠損している場
合あるいは発現量が減少している場合、生体内において
正常な機能を発揮できない患者に対しては、公知手段に
従って（１）レトロウイルスベクター、アデノウイルス
ベクター、アデノウイルスアソシエーテッドウイルスベ
クターなどの適当なベクターをベヒクルとして使用する
遺伝子治療によって、本発明のＤＮＡを該患者体内に導
入し、発現させるか、又は（２）本発明の蛋白質等を該
患者に注入すること等によって、該患者において本発明
の蛋白質等の機能を発揮させることができるものと考え
られる。本発明のＤＮＡを、該ＤＮＡを単独、又は、摂
取促進のための補助剤とともに、遺伝子銃やハイドロゲ
ルカテーテルのようなカテーテルによって投与すること
も可能である。

【００３３】更に、本発明の蛋白質等は、本発明の蛋白
質等の活性を阻害する化合物またはその塩のスクリーニ
ングのための試薬として有用である。すなわち、本発明
は、本発明の蛋白質、その部分ペプチドまたはそれらの
塩を用いることを特徴とする本発明の蛋白質、その部分
ペプチドまたはそれらの塩の活性を阻害する化合物（以
下、「阻害剤」ともいう）のスクリーニング方法、及び
その為のスクリーニング用キットを提供する。本発明の
スクリーニング方法またはスクリーニング用キットを用
いて得られる化合物またはその塩は、上記した試験化合
物から選ばれた化合物であり、本発明の蛋白質等の生物
学的活性を阻害する化合物である。該化合物またはその
塩は、本発明の蛋白質等の活性を直接阻害するものであ
ってもよいし、本発明の蛋白質等の発現を阻害すること
によって間接的に本発明の蛋白質等の活性を阻害するも
のであってもよい。該化合物の塩としては、例えば、薬
学的に許容可能な塩などが用いられる。例えば、無機塩
基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との
塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩などがあげられ
る。本発明の蛋白質等の生物学的活性を阻害する化合物
も上記各種疾病に対する治療・予防剤などの医薬として
使用できる可能性がある。

【００３４】本発明のＤＮＡをプローブとして使用する
ことにより、ヒトにおける本発明の蛋白質またはその部
分ペプチドをコードするＤＮＡまたはｍＲＮＡの異常
（遺伝子異常）を検出することができるので、例えば、
該ＤＮＡまたはｍＲＮＡの損傷、突然変異あるいは発現
低下や、該ＤＮＡまたはｍＲＮＡの増加あるいは発現過
多などの遺伝子診断剤として有用である。本発明のＤＮ
Ａを用いる上記の遺伝子診断は、例えば、公知のノーザ
ンハイブリダイゼーションやＰＣＲ−ＳＳＣＰ法（Geno
mics，第５巻，８７４〜８７９頁（１９８９年）、Proc
eedings of the Natinal Academy of Sciences of the
United States of America，第８６巻，２７６６〜２７
７０頁（１９８９年））などにより実施することができ
る。

【００３５】本明細書および図面において、塩基やアミ
ノ酸などを略号で表示する場合、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ C
ommision on Biochemical Nomenclature による略号あ
るいは当該分野における慣用略号に基づくものであり、
またアミノ酸に関し光学異性体があり得る場合は、特に
明示しなければＬ体を示すものとする。

【００３６】本願明細書の配列表の配列番号は、以下の
配列を示す。 〔配列番号：１〕本発明のヒト脳由来Ｐｅｒ３蛋白質の
アミノ酸配列を示す。 〔配列番号：２〕配列番号：１で示されるアミノ酸配列
を有する本発明の蛋白質をコードするＤＮＡの塩基配列
を含む、クローンＨＧ０４２２９の全塩基配列を示す。 該クローンＨＧ０４２２９で形質転換されたエシェリヒ
ア コリ（Escherichiacoli)Ｋ１２株（ＸＬ１-Ｂｌｕｅ
ＭＲＦ’）は、平成１１年１月２７日付けで通商産業
省工業技術院生命工学工業技術研究所（ＮＩＢＨ）に寄
託番号ＦＥＲＭＰ−１７１６９として寄託されている。

【００３７】

【実施例】以下に、実施例により本発明をさらに具体的
に説明するが、本発明はそれに限定されるものではな
い。なお、実施例における各種遺伝子操作は、Molecula
r cloning 2nd.ed.（Cold Spring Harbor Lab.Press，1
989 に記載されている方法に従った。

【００３８】

【実施例１】（１）ヒト脳由来ｃＤＮＡライブラリーの
構築 ＮｏｔＩ部位を有するオリゴヌクレオチド（ＧＡＣＴＡ
ＧＴＴＣＴＡＧＡＴＣＧＣＧＡＧＣＧＧＣＣＧＣＣＣ
（Ｔ）_１５）（ギブコＢＲＬ社）をプライマーとして、
ヒト脳由来ｍＲＮＡ（クローンテック社）を鋳型にSupe
rScriptII逆転写酵素キット（ギブコＢＲＬ社）で２本
鎖ｃＤＮＡを合成した。ＳａｌＩ部位を有するアダプタ
ー（ギブコＢＲＬ社）をｃＤＮＡとライゲーションし
た。その後、ＮｏｔＩ消化し、１％濃度の低融解アガロ
ース電気泳動により、３ｋｂ以上のＤＮＡ断片を精製し
た。精製ｃＤＮＡ断片を、ＳａｌＩ−ＮｏｔＩ制限酵素
処理したpBluescript IISK＋ プラスミドとライゲーシ
ョンした。大腸菌 ElectroMax DH10B 株（ギブコＢＲＬ
社）にエレクトロポレーション法によりこの組換えプラ
スミドを導入した。次いで、こうして構築したｃＤＮＡ
ライブラリーから、無作為に２５，０００個の組換え体
を選択し、組換えＤＮＡを抽出し、１５，０００クロー
ンのｃＤＮＡ部分の５’側及び３’側）の塩基配列を決
定した。配列決定には、ＰＥアプライドバイオシステム
社製のＤＮＡシークエンサー（ABI PRISM377）と同社製
反応キットを使用した。

【００３９】（２）ｈｐｅｒ３を含むクローンの決定 ＤＮＡ解析プログラム（BLAST 及び FastA）を用いて、
（１）で決定した全クローンの５’側の配列と報告され
ているマウスｐｅｒ３とを比較したところ、クローンＨ
Ｇ０４２２９が有意な相同性（１２１塩基領域で７４.
４％）を示した。そこで、上記ＤＮＡシークエンサーを
用いて、クローンＨＧ０４２２９の両鎖の全塩基配列を
決定した。大部分の配列はショットガンクローンをダイ
プライマー法を用いて決定した。一部の塩基配列につい
ては、決定した塩基配列を元にしてオリゴヌクレオチド
を合成し、プライマーウォーキング法で決定した。当該
クローンの全塩基配列（６，２７８塩基対）を配列番号
２に示す。ヒトｐｅｒ３遺伝子とマウスｐｅｒ３遺伝子
のＤＮＡ塩基配列の相同性をＤＮＡ解析プログラム(Gen
etic Computer Group 社のＧＡＰプログラム)で解析し
たところ、６９．７％（ヒトｐｅｒ３遺伝子の塩基配列
の第１〜５１１４番までの領域とマウスｐｅｒ３遺伝子
の塩基配列の第１５１〜４８６３番までの領域の比較結
果）の相同性を示した。このｃＣＤＮＡは、１，２１０
アミノ酸残基より成る蛋白質（ｈＰｅｒ３）をコードす
る読み取り枠（ＯＲＦ）を含んでおり、該蛋白質の開始
コドンであるメチオニン残基の上流域に同じ読み取り枠
で終止コドンが出現したことから、当該ｃＤＮＡ断片が
コードする蛋白質のアミノ酸配列は、配列番号１にしめ
したものが唯一であることを確認した。ヒトｐｅｒ３遺
伝子とマウスｐｅｒ３遺伝子のアミノ酸配列の相同性を
ＤＮＡ解析プログラム(Genetic Computer Group 社のＧ
ＡＰプログラム)で解析したところ、６５．７％（ヒト
Ｐｅｒ３アミノ酸配列の第１〜１２１０番までの領域と
マウスＰｅｒ３アミノ酸配列の第１〜１１１３番までの
領域の比較結果）の相同性を示した。

【００４０】

【発明の効果】概日リズムに関与するヒト由来の新規な
蛋白質であるｈＰｅｒ３、及びそれをコードするＤＮＡ
を提供した。

【００４１】

【配列表】 SEQUENCE LISTING <110> Kazusa DNA Research Institute <120> Novel hPer3 gene and the protein encoded by the hPer3 gene <160> 2 <210> 1 <211> 1210 <212> PRT <213> Homo Sapiens <400> Met Pro Arg Gly Glu Ala Pro Gly Pro Gly Arg Arg Gly Ala Lys 15 5 10 15 Asp Glu Ala Leu Gly Glu Glu Ser Gly Glu Arg Trp Ser Pro Glu 30 20 25 30 Phe His Leu Gln Arg Lys Leu Ala Asp Ser Ser His Ser Glu Gln 45 35 40 45 Gln Asp Arg Asn Arg Val Ser Glu Glu Leu Ile Met Val Val Gln 60 50 55 60 Glu Met Lys Lys Tyr Phe Pro Ser Glu Arg Arg Asn Lys Pro Ser 75 65 70 75 Thr Leu Asp Ala Leu Asn Tyr Ala Leu Arg Cys Val His Ser Val 90 80 85 90 Gln Ala Asn Ser Glu Phe Phe Gln Ile Leu Ser Gln Asn Gly Ala 105 95 100 105 Pro Gln Ala Asp Val Ser Met Tyr Ser Leu Glu Glu Leu Ala Thr 120 110 115 120 Ile Ala Ser Glu His Thr Ser Lys Asn Thr Asp Thr Phe Val Ala 135 125 130 135 Val Phe Ser Phe Leu Ser Gly Arg Leu Val His Ile Ser Glu Gln 150 140 145 150 Ala Ala Leu Ile Leu Asn Arg Lys Lys Asp Val Leu Ala Ser Ser 165 155 160 165 His Phe Val Asp Leu Leu Ala Pro Gln Asp Met Arg Val Phe Tyr 180 170 175 180 Ala His Thr Ala Arg Ala Gln Leu Pro Phe Trp Asn Asn Trp Thr 195 185 190 195 Gln Arg Ala Ala Ala Arg Tyr Glu Cys Ala Pro Val Lys Pro Phe 210 200 205 210 Phe Cys Arg Ile Arg Gly Gly Glu Asp Arg Lys Gln Glu Lys Cys 225 215 220 225 His Ser Pro Phe Arg Ile Ile Pro Tyr Leu Ile His Val His His 240 230 235 240 Pro Ala Gln Pro Glu Leu Glu Ser Glu Pro Cys Cys Leu Thr Val 255 245 250 255 Val Glu Lys Ile His Ser Gly Tyr Glu Ala Pro Arg Ile Pro Val 270 260 265 270 Asn Lys Arg Ile Phe Thr Thr Thr His Thr Pro Gly Cys Val Phe 285 275 280 285 Leu Glu Val Asp Glu Lys Ala Val Pro Leu Leu Gly Tyr Leu Pro 300 290 295 300 Gln Asp Leu Ile Gly Thr Ser Ile Leu Ser Tyr Leu His Pro Glu 315 305 310 315 Asp Arg Ser Leu Met Val Ala Ile His Gln Lys Val Leu Lys Tyr 330 320 325 330 Ala Gly His Pro Pro Phe Glu His Ser Pro Ile Arg Phe Cys Thr 345 335 340 345 Gln Asn Gly Asp Tyr Ile Ile Leu Asp Ser Ser Trp Ser Ser Phe 360 350 355 360 Val Asn Pro Trp Ser Arg Lys Ile Ser Phe Ile Ile Gly Arg His 375 365 370 375 Lys Val Arg Thr Ser Pro Leu Asn Glu Asp Val Phe Ala Thr Lys 390 380 385 390 Ile Lys Lys Met Asn Asp Asn Asp Lys Asp Ile Thr Glu Leu Gln 405 395 400 405 Glu Gln Ile Tyr Lys Leu Leu Leu Gln Pro Val His Val Ser Val 420 410 415 420 Ser Ser Gly Tyr Gly Ser Leu Gly Ser Ser Gly Ser Gln Glu Gln 435 425 430 435 Leu Val Ser Ile Ala Ser Ser Ser Glu Ala Ser Gly His Arg Val 450 440 445 450 Glu Glu Thr Lys Ala Glu Gln Met Thr Leu Gln Gln Val Tyr Ala 465 455 460 465 Ser Val Asn Lys Ile Lys Asn Leu Gly Gln Gln Leu Tyr Ile Glu 480 470 475 480 Ser Met Thr Lys Ser Ser Phe Lys Pro Val Thr Gly Thr Arg Thr 495 485 490 495 Glu Pro Asn Gly Gly Gly Glu Ser Ala Asn Gly Gly Gly Glu Cys 510 500 505 510 Lys Thr Phe Thr Ser Phe His Gln Thr Leu Lys Asn Asn Ser Val 525 515 520 525 Tyr Thr Glu Pro Cys Glu Asp Leu Arg Asn Asp Glu His Ser Pro 540 530 535 540 Ser Tyr Gln Gln Ile Asn Cys Ile Asp Ser Val Ile Arg Tyr Leu 555 545 550 555 Lys Ser Tyr Asn Ile Pro Ala Leu Lys Arg Lys Cys Ile Ser Cys 570 560 565 570 Thr Asn Thr Thr Ser Ser Ser Ser Glu Glu Asp Lys Gln Asn His 585 575 580 585 Lys Ala Asp Asp Val Gln Ala Leu Gln Ala Gly Leu Gln Ile Pro 600 590 595 600 Ala Ile Pro Lys Ser Glu Met Pro Thr Asn Gly Arg Ser Ile Asp 615 605 610 615 Thr Gly Gly Gly Ala Pro Gln Ile Leu Ser Thr Ala Met Leu Ser 630 620 625 630 Leu Gly Ser Gly Ile Ser Gln Cys Gly Tyr Ser Ser Thr Ile Val 645 635 640 645 His Val Pro Pro Pro Glu Thr Ala Arg Asp Ala Thr Leu Phe Cys 660 650 655 660 Glu Pro Trp Thr Leu Asn Met Gln Pro Ala Pro Leu Thr Ser Glu 675 665 670 675 Glu Phe Lys His Val Gly Leu Thr Ala Ala Val Leu Ser Ala His 690 680 685 690 Thr Gln Lys Glu Glu Gln Asn Tyr Val Asp Lys Phe Arg Glu Lys 705 695 700 705 Ile Leu Ser Ser Pro Tyr Ser Ser Tyr Leu Gln Gln Glu Ser Arg 720 710 715 720 Ser Lys Ala Lys Tyr Ser Tyr Phe Gln Gly Asp Ser Thr Ser Lys 735 725 730 735 Gln Thr Arg Ser Ala Gly Cys Arg Lys Gly Lys His Lys Arg Lys 750 740 745 750 Lys Leu Pro Glu Pro Pro Asp Ser Ser Ser Ser Asn Thr Gly Ser 765 755 760 765 Gly Pro Arg Arg Gly Ala His Gln Asn Ala Gln Pro Cys Cys Pro 780 770 775 780 Ser Ala Ala Ser Ser Pro His Thr Ser Ser Pro Thr Phe Pro Pro 795 785 790 795 Ala Ala Met Val Pro Ser Gln Ala Pro Tyr Leu Val Pro Ala Phe 810 800 805 810 Pro Leu Pro Ala Ala Thr Ser Pro Gly Arg Glu Tyr Ala Ala Pro 825 815 820 825 Gly Thr Ala Pro Glu Gly Leu His Gly Pro Pro Leu Ser Glu Gly 840 830 835 840 Leu Gln Pro Tyr Pro Ala Phe Pro Phe Pro Tyr Leu Asp Thr Phe 855 845 850 855 Met Thr Val Phe Leu Pro Asp Pro Pro Val Cys Pro Leu Leu Ser 870 860 865 870 Pro Ser Phe Leu Pro Cys Pro Phe Leu Gly Ala Thr Ala Ser Ser 885 875 880 885 Ala Ile Ser Pro Ser Met Ser Ser Ala Met Ser Pro Thr Leu Asp 900 890 895 900 Pro Pro Pro Ser Val Thr Ser Gln Arg Arg Glu Glu Glu Lys Trp 915 905 910 915 Glu Ala Gln Ser Glu Gly His Pro Phe Ile Thr Ser Arg Ser Ser 930 920 925 930 Ser Pro Leu Gln Leu Asn Leu Leu Gln Glu Glu Met Pro Arg Pro 945 935 940 945 Ser Glu Ser Pro Asp Arg Met Arg Arg Asn Thr Cys Pro Gln Thr 960 950 955 960 Glu Tyr Gln Cys Val Thr Gly Asn Asn Gly Ser Glu Ser Ser Pro 975 965 970 975 Ala Thr Thr Gly Ala Leu Ser Thr Gly Ser Pro Pro Arg Glu Asn 990 980 985 990 Pro Ser His Pro Thr Ala Ser Ala Leu Ser Thr Gly Ser Pro Pro 1005 995 1000 1005 Met Lys Asn Pro Ser His Pro Thr Ala Ser Ala Leu Ser Thr Gly 1020 1010 1015 1020 Ser Pro Pro Met Lys Asn Pro Ser His Pro Thr Ala Ser Thr Leu 1035 1025 1030 1035 Ser Met Gly Leu Pro Pro Ser Arg Thr Pro Ser His Pro Thr Ala 1050 1040 1045 1050 Thr Val Leu Ser Thr Gly Ser Pro Pro Ser Glu Ser Pro Ser Arg 1065 1055 1060 1065 Thr Gly Ser Ala Ala Ser Gly Ser Ser Asp Ser Ser Ile Tyr Leu 1080 1070 1075 1080 Thr Ser Ser Val Tyr Ser Ser Lys Ile Ser Gln Asn Gly Gln Gln 1095 1085 1090 1095 Ser Gln Asp Val Gln Lys Lys Glu Thr Phe Pro Asn Val Ala Glu 1110 1100 1105 1110 Glu Pro Ile Trp Arg Met Ile Arg Gln Thr Pro Glu Arg Ile Leu 1125 1115 1120 1125 Met Thr Tyr Gln Val Pro Glu Arg Val Lys Glu Val Val Leu Lys 1140 1130 1135 1140 Glu Asp Leu Glu Lys Leu Glu Ser Met Arg Gln Gln Gln Pro Gln 1155 1145 1150 1155 Phe Ser His Gly Gln Lys Glu Glu Leu Ala Lys Val Tyr Asn Trp 1170 1160 1165 1170 Ile Gln Ser Gln Thr Val Thr Gln Glu Ile Asp Ile Gln Ala Cys 1185 1175 1180 1185 Val Thr Cys Glu Asn Glu Asp Ser Ala Asp Gly Ala Ala Thr Ser 1200 1190 1195 1200 Cys Gly Gln Val Leu Val Glu Asp Ser Cys 1210 1205 1210 <210> 2 <211> 6278 <212> DNA <213> Homo Sapiens <400> gccggagtcc tgaaagtcga gcgagctccg ggttttgaaa atgttggagg gaaaagctcc 60 tcggagatga gcgtgacccc ctggctcgtg gtggccgcct gttctcacta acgccatggc 120 ggggaccgga gtgagaaacc ggtgtctgtc actgactgca aagtgagcga gaagcaggct 180 gcgggccgtc ccagcacgac gtggagcccc gcggagacct cgag atg ccc cgc ggg 236 Met Pro Arg Gly gaa gct cct ggc ccc ggg aga cgg ggg gct aag gac gag gcc ctg 281 Glu Ala Pro Gly Pro Gly Arg Arg Gly Ala Lys Asp Glu Ala Leu ggc gaa gaa tcg ggg gag cgg tgg agc ccc gag ttc cat ctg cag 326 Gly Glu Glu Ser Gly Glu Arg Trp Ser Pro Glu Phe His Leu Gln agg aaa ttg gcg gac agc agc cac agt gaa cag caa gat cga aac 371 Arg Lys Leu Ala Asp Ser Ser His Ser Glu Gln Gln Asp Arg Asn aga gtt tct gaa gaa ctt atc atg gtt gtc caa gaa atg aaa aaa 416 Arg Val Ser Glu Glu Leu Ile Met Val Val Gln Glu Met Lys Lys tac ttc ccc tcg gag aga cgc aat aaa cca agc act cta gat gcc 461 Tyr Phe Pro Ser Glu Arg Arg Asn Lys Pro Ser Thr Leu Asp Ala ctc aac tat gct ctc cgc tgt gtc cac agc gtt caa gca aac agt 506 Leu Asn Tyr Ala Leu Arg Cys Val His Ser Val Gln Ala Asn Ser gag ttt ttc cag att ctc agt cag aat gga gca cct cag gca gat 551 Glu Phe Phe Gln Ile Leu Ser Gln Asn Gly Ala Pro Gln Ala Asp gtg agc atg tac agt ctt gag gag ctg gcc act atc gct tca gaa 596 Val Ser Met Tyr Ser Leu Glu Glu Leu Ala Thr Ile Ala Ser Glu cac act tcc aaa aac aca gat acc ttt gtg gca gta ttt tca ttt 641 His Thr Ser Lys Asn Thr Asp Thr Phe Val Ala Val Phe Ser Phe ctg tct gga agg tta gtg cac att tct gaa cag gct gct ttg atc 686 Leu Ser Gly Arg Leu Val His Ile Ser Glu Gln Ala Ala Leu Ile ctg aat cgt aag aaa gat gtc ctg gcg tct tct cac ttt gtt gac 731 Leu Asn Arg Lys Lys Asp Val Leu Ala Ser Ser His Phe Val Asp ctg ctt gca cct caa gac atg agg gta ttc tac gcg cac act gcc 776 Leu Leu Ala Pro Gln Asp Met Arg Val Phe Tyr Ala His Thr Ala aga gct cag ctt cct ttc tgg aac aac tgg acc caa aga gca gct 821 Arg Ala Gln Leu Pro Phe Trp Asn Asn Trp Thr Gln Arg Ala Ala gca cgg tat gaa tgt gct ccg gtg aaa cct ttt ttc tgc agg atc 866 Ala Arg Tyr Glu Cys Ala Pro Val Lys Pro Phe Phe Cys Arg Ile cgt gga ggt gaa gac aga aag caa gag aag tgt cac tcc cca ttc 911 Arg Gly Gly Glu Asp Arg Lys Gln Glu Lys Cys His Ser Pro Phe cgg atc atc ccc tat ctg att cat gta cat cac cct gcc cag cca 956 Arg Ile Ile Pro Tyr Leu Ile His Val His His Pro Ala Gln Pro gaa ttg gaa tcg gaa cct tgc tgt ctc act gtg gtt gaa aag att 1001 Glu Leu Glu Ser Glu Pro Cys Cys Leu Thr Val Val Glu Lys Ile cac tct ggt tat gaa gct cct cgg atc cca gtg aat aaa aga atc 1046 His Ser Gly Tyr Glu Ala Pro Arg Ile Pro Val Asn Lys Arg Ile ttc acc acc aca cac acc cca ggg tgt gtt ttt ctt gaa gta gat 1091 Phe Thr Thr Thr His Thr Pro Gly Cys Val Phe Leu Glu Val Asp gaa aaa gca gtg cct ttg ctg ggt tac cta cct cag gac ctg att 1136 Glu Lys Ala Val Pro Leu Leu Gly Tyr Leu Pro Gln Asp Leu Ile gga aca tcg atc cta agc tac ctg cac cct gaa gat cgt tct ctg 1181 Gly Thr Ser Ile Leu Ser Tyr Leu His Pro Glu Asp Arg Ser Leu atg gtt gcc ata cac caa aaa gtt ttg aag tat gca ggg cat cct 1226 Met Val Ala Ile His Gln Lys Val Leu Lys Tyr Ala Gly His Pro ccc ttt gaa cat tct ccc att cga ttt tgt act caa aac gga gac 1271 Pro Phe Glu His Ser Pro Ile Arg Phe Cys Thr Gln Asn Gly Asp tac atc ata ctg gat tcc agt tgg tcc agc ttt gtg aat ccc tgg 1316 Tyr Ile Ile Leu Asp Ser Ser Trp Ser Ser Phe Val Asn Pro Trp agc cgg aag att tct ttc atc att ggt cgg cat aaa gtt cga acg 1361 Ser Arg Lys Ile Ser Phe Ile Ile Gly Arg His Lys Val Arg Thr agc cca cta aat gag gat gtt ttt gct acc aaa att aaa aag atg 1406 Ser Pro Leu Asn Glu Asp Val Phe Ala Thr Lys Ile Lys Lys Met aac gat aat gac aaa gac ata aca gaa tta caa gaa caa att tac 1451 Asn Asp Asn Asp Lys Asp Ile Thr Glu Leu Gln Glu Gln Ile Tyr aaa ctt ctc tta cag cca gtt cac gtg agc gtg tcc agc ggc tac 1496 Lys Leu Leu Leu Gln Pro Val His Val Ser Val Ser Ser Gly Tyr ggg agc ctg ggg agc agc ggg tcg cag gag cag ctt gtc agc atc 1541 Gly Ser Leu Gly Ser Ser Gly Ser Gln Glu Gln Leu Val Ser Ile gcc tcc tcc agt gag gcc agc ggg cac cgt gtg gag gag acg aag 1586 Ala Ser Ser Ser Glu Ala Ser Gly His Arg Val Glu Glu Thr Lys gcg gag cag atg acc ttg cag cag gtc tat gcc agt gtg aac aaa 1631 Ala Glu Gln Met Thr Leu Gln Gln Val Tyr Ala Ser Val Asn Lys att aaa aat ctg ggt cag cag ctc tac att gag tca atg acc aaa 1676 Ile Lys Asn Leu Gly Gln Gln Leu Tyr Ile Glu Ser Met Thr Lys tca tca ttc aag cca gtg acg ggg aca cgc aca gaa ccg aat ggt 1721 Ser Ser Phe Lys Pro Val Thr Gly Thr Arg Thr Glu Pro Asn Gly ggt ggt gag tca gcg aat ggt ggt ggt gaa tgt aag acc ttt act 1766 Gly Gly Glu Ser Ala Asn Gly Gly Gly Glu Cys Lys Thr Phe Thr tcc ttc cac caa aca ctg aaa aac aat agt gtg tac act gag ccc 1811 Ser Phe His Gln Thr Leu Lys Asn Asn Ser Val Tyr Thr Glu Pro tgt gag gat ttg agg aac gat gag cac agc cca tcc tat caa cag 1856 Cys Glu Asp Leu Arg Asn Asp Glu His Ser Pro Ser Tyr Gln Gln atc aac tgt atc gac agt gtc atc aga tac ctg aag agc tac aac 1901 Ile Asn Cys Ile Asp Ser Val Ile Arg Tyr Leu Lys Ser Tyr Asn att cca gct ttg aaa aga aag tgt atc tcc tgt aca aat aca act 1946 Ile Pro Ala Leu Lys Arg Lys Cys Ile Ser Cys Thr Asn Thr Thr tct tcc tcc tca gaa gaa gac aaa cag aac cac aag gca gat gat 1991 Ser Ser Ser Ser Glu Glu Asp Lys Gln Asn His Lys Ala Asp Asp gtc caa gcc tta caa gct ggt ttg caa atc cca gcc ata cct aaa 2036 Val Gln Ala Leu Gln Ala Gly Leu Gln Ile Pro Ala Ile Pro Lys tca gaa atg cca aca aat gga cgg tcc ata gac aca gga gga gga 2081 Ser Glu Met Pro Thr Asn Gly Arg Ser Ile Asp Thr Gly Gly Gly gct cca cag atc ctg tcc acg gcg atg ctg agc ttg ggg tcg ggc 2126 Ala Pro Gln Ile Leu Ser Thr Ala Met Leu Ser Leu Gly Ser Gly ata agc caa tgc ggt tac agc agc acc att gtc cat gtc cca ccc 2171 Ile Ser Gln Cys Gly Tyr Ser Ser Thr Ile Val His Val Pro Pro cca gag aca gcc agg gat gct acc ctc ttc tgt gag ccc tgg acc 2216 Pro Glu Thr Ala Arg Asp Ala Thr Leu Phe Cys Glu Pro Trp Thr ctg aac atg cag cca gcc cct ttg acc tcg gaa gaa ttt aaa cac 2261 Leu Asn Met Gln Pro Ala Pro Leu Thr Ser Glu Glu Phe Lys His gtg ggg ctc aca gcg gct gtt ctg tca gcg cac acc cag aag gaa 2306 Val Gly Leu Thr Ala Ala Val Leu Ser Ala His Thr Gln Lys Glu gag cag aat tat gtt gat aaa ttc cga gaa aag atc ctg tca tca 2351 Glu Gln Asn Tyr Val Asp Lys Phe Arg Glu Lys Ile Leu Ser Ser ccc tac agc tcc tat ctt cag caa gaa agc agg agc aaa gct aaa 2396 Pro Tyr Ser Ser Tyr Leu Gln Gln Glu Ser Arg Ser Lys Ala Lys tat tca tat ttt caa gga gat tct act tcc aag cag acg cgg tcg 2441 Tyr Ser Tyr Phe Gln Gly Asp Ser Thr Ser Lys Gln Thr Arg Ser gcc ggc tgc agg aaa ggg aag cac aag cgg aag aag ctg ccg gag 2486 Ala Gly Cys Arg Lys Gly Lys His Lys Arg Lys Lys Leu Pro Glu ccg cca gac agc agc agc tcg aac acc ggc tct ggt ccc cgc agg 2531 Pro Pro Asp Ser Ser Ser Ser Asn Thr Gly Ser Gly Pro Arg Arg gga gcg cat cag aac gca cag ccc tgc tgc ccc tcc gcg gcc tcc 2576 Gly Ala His Gln Asn Ala Gln Pro Cys Cys Pro Ser Ala Ala Ser tct ccg cac acc tcg agc ccg acc ttc cca cct gcc gcc atg gtg 2621 Ser Pro His Thr Ser Ser Pro Thr Phe Pro Pro Ala Ala Met Val ccc agc cag gcc cct tac ctc gtc cca gct ttt ccc ctc cca gcc 2666 Pro Ser Gln Ala Pro Tyr Leu Val Pro Ala Phe Pro Leu Pro Ala gcg acc tca ccc gga aga gaa tac gca gcc ccc gga act gca ccg 2711 Ala Thr Ser Pro Gly Arg Glu Tyr Ala Ala Pro Gly Thr Ala Pro gaa ggc ctg cat ggg ccg ccc ttg tcc gag ggc ttg cag cct tac 2756 Glu Gly Leu His Gly Pro Pro Leu Ser Glu Gly Leu Gln Pro Tyr cca gct ttc cct ttt cct tac ttg gat act ttt atg acc gtt ttc 2801 Pro Ala Phe Pro Phe Pro Tyr Leu Asp Thr Phe Met Thr Val Phe ctg cct gac ccc cct gtc tgt cct ctg ttg tcg cca tcg ttt ttg 2846 Leu Pro Asp Pro Pro Val Cys Pro Leu Leu Ser Pro Ser Phe Leu cca tgt cca ttc ctg ggg gcg aca gcc tct tct gcg ata tca ccc 2891 Pro Cys Pro Phe Leu Gly Ala Thr Ala Ser Ser Ala Ile Ser Pro tca atg tcg tca gca atg agt cca act ctg gac cca ccc cct tca 2936 Ser Met Ser Ser Ala Met Ser Pro Thr Leu Asp Pro Pro Pro Ser gtc acc agc caa agg aga gag gag gaa aag tgg gag gca caa agc 2981 Val Thr Ser Gln Arg Arg Glu Glu Glu Lys Trp Glu Ala Gln Ser gag ggg cac ccg ttc att act tcg aga agc agc tca ccc ttg cag 3026 Glu Gly His Pro Phe Ile Thr Ser Arg Ser Ser Ser Pro Leu Gln tta aac tta ctt cag gaa gag atg ccc aga ccc tct gaa tct cca 3071 Leu Asn Leu Leu Gln Glu Glu Met Pro Arg Pro Ser Glu Ser Pro gat cgg atg aga agg aac acg tgc cca caa act gag tat cag tgt 3116 Asp Arg Met Arg Arg Asn Thr Cys Pro Gln Thr Glu Tyr Gln Cys gtt aca ggc aac aat ggc agt gag agc agt cct gct act acc ggt 3161 Val Thr Gly Asn Asn Gly Ser Glu Ser Ser Pro Ala Thr Thr Gly gca ctg tcc acg ggg tca cct ccc agg gag aat cca tcc cat cct 3206 Ala Leu Ser Thr Gly Ser Pro Pro Arg Glu Asn Pro Ser His Pro act gcc agc gct ctg tcc aca gga tcg cct ccc atg aag aat cca 3251 Thr Ala Ser Ala Leu Ser Thr Gly Ser Pro Pro Met Lys Asn Pro tcc cat cct act gcc agc gct ctg tcc acg gga tcg cct ccc atg 3296 Ser His Pro Thr Ala Ser Ala Leu Ser Thr Gly Ser Pro Pro Met aag aat cca tcc cat cct act gcc agc aca ctg tcc atg gga ttg 3341 Lys Asn Pro Ser His Pro Thr Ala Ser Thr Leu Ser Met Gly Leu cct ccc agc agg act cca tcc cat cct act gcc act gtt ctg tcc 3386 Pro Pro Ser Arg Thr Pro Ser His Pro Thr Ala Thr Val Leu Ser acg ggg tca cct ccc agc gaa tcc cca tcc aga act ggt tca gca 3431 Thr Gly Ser Pro Pro Ser Glu Ser Pro Ser Arg Thr Gly Ser Ala gca tca gga agc agc gac agc agt ata tac ctt act agt agt gtt 3476 Ala Ser Gly Ser Ser Asp Ser Ser Ile Tyr Leu Thr Ser Ser Val tat tct tct aaa atc tcc caa aat ggg cag caa tct cag gac gta 3521 Tyr Ser Ser Lys Ile Ser Gln Asn Gly Gln Gln Ser Gln Asp Val cag aaa aaa gaa aca ttt cct aat gtc gcc gaa gag ccc atc tgg 3566 Gln Lys Lys Glu Thr Phe Pro Asn Val Ala Glu Glu Pro Ile Trp aga atg ata cgg cag aca cct gag cgc att ctc atg aca tac cag 3611 Arg Met Ile Arg Gln Thr Pro Glu Arg Ile Leu Met Thr Tyr Gln gta cct gag agg gtt aaa gaa gtt gta cta aaa gaa gac ctg gaa 3656 Val Pro Glu Arg Val Lys Glu Val Val Leu Lys Glu Asp Leu Glu aag cta gaa agt atg agg cag cag cag ccc cag ttt tct cat ggg 3701 Lys Leu Glu Ser Met Arg Gln Gln Gln Pro Gln Phe Ser His Gly caa aag gag gag ctg gct aag gtg tat aat tgg att caa agc cag 3746 Gln Lys Glu Glu Leu Ala Lys Val Tyr Asn Trp Ile Gln Ser Gln act gtc act caa gaa atc gac att caa gcc tgt gtc act tgt gaa 3791 Thr Val Thr Gln Glu Ile Asp Ile Gln Ala Cys Val Thr Cys Glu aat gaa gat tca gct gat ggt gcg gcc aca tcc tgt ggt cag gtt 3836 Asn Glu Asp Ser Ala Asp Gly Ala Ala Thr Ser Cys Gly Gln Val ctg gta gaa gac agc tgt 3854 Leu Val Glu Asp Ser Cys tgagtgactg tgaggatgaa ccttcatacc ctttccaaga cgtgttacac agacagacct 3914 ttttaagtcc tggactttta aatgaccatg aagttatcat tgaatgttaa gattttttct 3974 tcttgatttt ttaatacacg taatcttttt gaagcagaca ttgtatacag aatcttactt 4034 ctctttgttc ctgatatatt aaaatggcca gttaggctct ttttgtagtt gaattgtctt 4094 ctaaagagat tggatggcct ctaaagaggt atgtgtatct ttatttcaga tgtcacccag 4154 agtaaattat aattagaagt atagctagaa tgagccccaa accttagcct catttatttt 4214 gttctgttac ataagtcatt ttccccttag agtgcttgaa gaaatgccac ctacaggttg 4274 tgtacttttc ataatggttt ccatgaatgt agtacgttca tacaggcttc attcaacctg 4334 gcgttcccct ccataattaa gatgaaacat tccggttttc tcacaacaca ttagcacata 4394 ctgtccatta gcatatctgg gataaccagg ttttgggggt tgagttttgg ccttcatcct 4454 tgtagatccc tttcctattg atttcccacc ttccagtgaa attctgaaag tcttatctta 4514 aaaatcgatc cgcttaccat gggcctattc ttgtaagttt cagttagcat ttgcatgtgt 4574 aatattaaaa tgaaagagct tcttacccag tgctgttgcc cttttgagta tttttgtttt 4634 taaaataatg attgtaaaat gttttacaag taatgtaaaa gctagtatca ttcttacata 4694 cttctgtgtt taaattttca ttcttaccaa aacagttaac tctttctttc caatcaattt 4754 atacaaaaga ggtcgctcca gccctaccac aggtctgact ggcactgcct tttgtttgcc 4814 cttgaacagg gcagtgttgt ggggactgca aaagagaaaa cgtccaggcg agcccagttg 4874 tcctcgccca cagggtcctg caggctccat cagtcaccgc tttctatggc gtttgtagtt 4934 gtgtctttta agaagtgagt gtgattgttt acttgataaa tcagctcact ctctggtgct 4994 ttttagagaa gtccctgatt ccttcttaaa cttggaatga tagatgaaat tcacacccct 5054 gcagatcaga aaaaacaaat agaagaaaat gagggttaca gtaacctgtt gtctttatat 5114 aacttgcaac aaactaattt attttttttt cctttttttg tttttggttt tttatggttt 5174 tttaaggaaa atacttttct cctttgaagt tttacagctt tttgtaaatg cgtcctgata 5234 atgattagga aaatcgacct tttcatccat gatgaccatc ctcatagctc agatttcctt 5294 tcaaagtagt ggctttctgg atggtaattc catcttaagg tgtcagaact attttcaaat 5354 gctgcctttg acagttcttg gaattttctg atattaagca gttccatgca aatattcgtg 5414 ttttataaat agctctcata gtctgctcca tcttgatagt taagtgattt ctgaagcgtt 5474 tgtgtgtgtg ttgatcaggt tgtgtgatat ttttgcttga taaagaatca aatttgaaac 5534 aattaaccag ccagtagatt gtctgtcagt gaccttctgt agtaataaag tttttgccac 5594 tgtaaataaa aacagtatcc gtagctatca ggatcattgc gcactcatat atgctaagcc 5654 ttctgttctc taatagaagc ctttcttttc cattgtttct ggatatttgt attatccaaa 5714 tgtgcttatt tctttgcctt agcacacgtt ttatggagta cttgttatac taggtttgat 5774 ttgaaactgg tgcttgtcgc agaactgtca gagcatgagg agcgctcctc ctgtgggtgg 5834 acgcattcac gcactcccag gttgcacctg ctgctggcgg tgagcagggg gttcagcagc 5894 ttgaccgatg ccccccgagg gggctctccc cagcttaaac tttgttgttt aaatttgtta 5954 actttttata ttaatgacta ttgaaagtgg taataaaaat ttatattata ggcttcaatg 6014 ttttcatgaa tgttacccaa aaagctgtgt tttctttggt cagaggtcaa aatttatgaa 6074 aaacaaaatg ctgtatgaat ggaaatcatt ttgcaattga gtgacacttc attgtaattc 6134 acagtgtaaa tttaatccaa actgaaattt tgtttcaact gaatttgtaa ttaactctga 6194 atttgttttt aatcattagt aatatttcag ttgggtatct ttttaagtaa aaacaacaaa 6254 taaactctgt acatgtaaaa cgtg 6278

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 野村 信夫 千葉県木更津市矢那1532番３号 財団法人 かずさディー・エヌ・エー研究所内 Ｆターム(参考） 4B024 AA01 BA80 CA04 DA06 EA04 GA14 HA01 4B064 AG01 CA02 CA19 CC24 DA01 4H045 AA11 CA40 EA20 FA74

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 以下の（ａ）又は（ｂ）の蛋白質をコー
   ドする塩基配列を有するＤＮＡ： （ａ）配列番号：１で示されるアミノ酸配列と同一又は
   実質的に同一のアミノ酸配列から成る蛋白質、 （ｂ）配列番号：１で示されるアミノ酸配列において、
   一部のアミノ酸が欠失、置換又は付加されたアミノ酸配
   列から成り、マウスＰｅｒ３蛋白質と実質的に同質の生
   物学的活性を有する蛋白質。
2. 【請求項２】 以下の（ａ）又は（ｂ）のＤＮＡ： （ａ）配列番号：２で示される塩基配列において、配列
   番号：１で示されるアミノ酸配列をコードするＤＮＡ、 (ｂ）（ａ）のＤＮＡとストリンジェントな条件下でハ
   イブリダイズし、マウスＰｅｒ３蛋白質と実質的に同質
   の生物学的活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ。
3. 【請求項３】 以下の（ａ）又は（ｂ）の蛋白質： （ａ）配列番号：１で示されるアミノ酸配列と同一又は
   実質的に同一のアミノ酸配列から成る蛋白質、 (ｂ）配列番号：１で示されるアミノ酸配列において、
   一部のアミノ酸が欠失、置換又は付加されたアミノ酸配
   列から成り、マウスＰｅｒ３蛋白質と実質的に同質の生
   物学的活性を有する蛋白質。