JP2000193661A - 痴呆症の検査方法 - Google Patents
痴呆症の検査方法Info
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- JP2000193661A JP2000193661A JP36860798A JP36860798A JP2000193661A JP 2000193661 A JP2000193661 A JP 2000193661A JP 36860798 A JP36860798 A JP 36860798A JP 36860798 A JP36860798 A JP 36860798A JP 2000193661 A JP2000193661 A JP 2000193661A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 患者の少量の体液中に含まれるタンパク質を
測定することにより、痴呆症の検査を行なうことができ
る、痴呆症の検査方法を提供すること。 【解決手段】 患者の血液、血清又は血漿である検体を
採取し、該検体中に含まれる、痴呆症患者に特異的なポ
リペプチドと、該ポリペプチドに対する抗体との抗原抗
体反応を利用した免疫測定により、検体中に含まれる痴
呆症患者に特異的なポリペプチドを測定することから成
る、痴呆症の検査方法を提供した。
測定することにより、痴呆症の検査を行なうことができ
る、痴呆症の検査方法を提供すること。 【解決手段】 患者の血液、血清又は血漿である検体を
採取し、該検体中に含まれる、痴呆症患者に特異的なポ
リペプチドと、該ポリペプチドに対する抗体との抗原抗
体反応を利用した免疫測定により、検体中に含まれる痴
呆症患者に特異的なポリペプチドを測定することから成
る、痴呆症の検査方法を提供した。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、アルツハイマー病
のような痴呆症の検査方法に関する。
のような痴呆症の検査方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来より、アルツハイマー病のような痴
呆症の検査は、知能テストと、ＣＴテスト等の脳の形態
学的変化を判断基準として行なわれている。しかしなが
ら、これらの検査は、間接的なものであり、必ずしも痴
呆症を正確に診断することができない。
呆症の検査は、知能テストと、ＣＴテスト等の脳の形態
学的変化を判断基準として行なわれている。しかしなが
ら、これらの検査は、間接的なものであり、必ずしも痴
呆症を正確に診断することができない。
【０００３】一方、アミロイドのような、アルツハイマ
ー病患者に特異的に現れるタンパク質が存在することも
知られている。しかしながら、これらのタンパク質は患
者の脳細胞から得られるものであり、検査のために患者
から脳細胞を採取することは困難であるから、これらの
タンパク質を検出することによりアルツハイマー病の検
査を行なうことは従来行なわれていない。
ー病患者に特異的に現れるタンパク質が存在することも
知られている。しかしながら、これらのタンパク質は患
者の脳細胞から得られるものであり、検査のために患者
から脳細胞を採取することは困難であるから、これらの
タンパク質を検出することによりアルツハイマー病の検
査を行なうことは従来行なわれていない。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、患者
の少量の体液中に含まれるタンパク質を測定することに
より、痴呆症の検査を行なうことができる、痴呆症の検
査方法を提供することである。
の少量の体液中に含まれるタンパク質を測定することに
より、痴呆症の検査を行なうことができる、痴呆症の検
査方法を提供することである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本願発明者は、鋭意研究
の結果、痴呆症患者に特異的なタンパク質が血液中に含
まれ、かつ、採取可能な少量の血液中に含まれる該タン
パク質を免疫測定により測定することができることを見
出し、本発明を完成した。
の結果、痴呆症患者に特異的なタンパク質が血液中に含
まれ、かつ、採取可能な少量の血液中に含まれる該タン
パク質を免疫測定により測定することができることを見
出し、本発明を完成した。
【０００６】すなわち、本発明は、患者の血液、血清又
は血漿である検体を採取し、該検体中に含まれる、痴呆
症患者に特異的なポリペプチドと、該ポリペプチドに対
する抗体との抗原抗体反応を利用した免疫測定により、
検体中に含まれる痴呆症患者に特異的なポリペプチドを
測定することから成る、痴呆症の検査方法を提供する。
は血漿である検体を採取し、該検体中に含まれる、痴呆
症患者に特異的なポリペプチドと、該ポリペプチドに対
する抗体との抗原抗体反応を利用した免疫測定により、
検体中に含まれる痴呆症患者に特異的なポリペプチドを
測定することから成る、痴呆症の検査方法を提供する。
【０００７】
【発明の実施の形態】本発明の方法により検査すること
ができる痴呆症は、該痴呆症の患者に特有なポリペプチ
ドが、少量の血液中に測定可能な量存在するものであれ
ば特に限定されるものではなく、アルツハイマー病、ダ
ウン症等を挙げることができる。なお、本発明におい
て、「ポリペプチド」とは、糖タンパク質のように、糖
鎖等により修飾されたポリペプチドをも包含する。
ができる痴呆症は、該痴呆症の患者に特有なポリペプチ
ドが、少量の血液中に測定可能な量存在するものであれ
ば特に限定されるものではなく、アルツハイマー病、ダ
ウン症等を挙げることができる。なお、本発明におい
て、「ポリペプチド」とは、糖タンパク質のように、糖
鎖等により修飾されたポリペプチドをも包含する。
【０００８】本発明の方法では、患者の血液、血清又は
血漿(以下、「血液等」)中に含まれる、痴呆症患者に特異
的なポリペプチドを測定する。ここで、「痴呆症患者に
特異的なポリペプチド」には、痴呆症患者にのみ存在
し、健常人には存在しないポリペプチド、痴呆症患者及
び健常人の両者に存在するが、その存在量が両者におい
て有意に異なるもの、並びに痴呆症患者及び健常人の両
者に存在するが、その構造が両者において異なるもの、
が包含される。検査対象がアルツハイマー病の場合、こ
のようなポリペプチドの例としてアミロイドＡ１、アミ
ロイドＡ２−β、アポリポプロテインＥ４(D.J. Selko
e, Alzheimer's Disease: Genotypes, phenotype and t
reatments, Science 275, 630 (1997))、アポリポプロ
テインＪβ鎖(The cerebrospinal-fluid soluble form
of Alzhimer's amylo beta is complexed to SP-40, 40
(apolipoprotein J), an inhibior of the compleent m
embrane-attack complex, J. Ghiso et al., Biochem.
J. 293, 27-30 (1993))並びにプレセニリン１及び２(D.
J. Selkoe, Alzheimer's Disease: Genotypes, phenoty
pe and treatments, Science 275, 630 (1997))等を挙
げることができるがこれらに限定されるものではない。
これらのポリペプチドは、その全領域のアミノ酸配列が
公知である。
血漿(以下、「血液等」)中に含まれる、痴呆症患者に特異
的なポリペプチドを測定する。ここで、「痴呆症患者に
特異的なポリペプチド」には、痴呆症患者にのみ存在
し、健常人には存在しないポリペプチド、痴呆症患者及
び健常人の両者に存在するが、その存在量が両者におい
て有意に異なるもの、並びに痴呆症患者及び健常人の両
者に存在するが、その構造が両者において異なるもの、
が包含される。検査対象がアルツハイマー病の場合、こ
のようなポリペプチドの例としてアミロイドＡ１、アミ
ロイドＡ２−β、アポリポプロテインＥ４(D.J. Selko
e, Alzheimer's Disease: Genotypes, phenotype and t
reatments, Science 275, 630 (1997))、アポリポプロ
テインＪβ鎖(The cerebrospinal-fluid soluble form
of Alzhimer's amylo beta is complexed to SP-40, 40
(apolipoprotein J), an inhibior of the compleent m
embrane-attack complex, J. Ghiso et al., Biochem.
J. 293, 27-30 (1993))並びにプレセニリン１及び２(D.
J. Selkoe, Alzheimer's Disease: Genotypes, phenoty
pe and treatments, Science 275, 630 (1997))等を挙
げることができるがこれらに限定されるものではない。
これらのポリペプチドは、その全領域のアミノ酸配列が
公知である。
【０００９】本発明の方法では、痴呆症患者に特異的な
ポリペプチドと、該ポリペプチドに対する抗体との抗原
抗体反応を利用した免疫測定により、検体中に含まれる
痴呆症患者に特異的なポリペプチドを測定する。ここで
用いられる抗体としては、ポリクローナル抗体でもモノ
クローナル抗体でもよく、これらは周知の方法により調
製することができる。なお、「痴呆症患者に特異的なポ
リペプチド」が、痴呆症患者及び健常人の両者に存在す
るがその構造が異なるものである場合には、痴呆症患者
に存在するポリペプチドと反応するが健常人に存在する
当該ポリペプチドとは反応しない抗体を用いる必要があ
ることは言うまでもない。また、免疫測定法自体もこの
分野において周知であり、血液等の中に含まれる上記特
異的ポリペプチドを測定できる感度を有する限り、いか
なる公知の免疫測定法をも採用することができる。すな
わち、測定原理に従って分類すれば、サンドイッチ法、
競合法、凝集法等があり、標識に従って分類すれば、酵
素法、蛍光法、放射法、ビオチン法等があるが、これら
のいずれをも採用することができる。なお、本発明にお
いて、「測定する」とは、定量及び検出の両者を包含す
る。
ポリペプチドと、該ポリペプチドに対する抗体との抗原
抗体反応を利用した免疫測定により、検体中に含まれる
痴呆症患者に特異的なポリペプチドを測定する。ここで
用いられる抗体としては、ポリクローナル抗体でもモノ
クローナル抗体でもよく、これらは周知の方法により調
製することができる。なお、「痴呆症患者に特異的なポ
リペプチド」が、痴呆症患者及び健常人の両者に存在す
るがその構造が異なるものである場合には、痴呆症患者
に存在するポリペプチドと反応するが健常人に存在する
当該ポリペプチドとは反応しない抗体を用いる必要があ
ることは言うまでもない。また、免疫測定法自体もこの
分野において周知であり、血液等の中に含まれる上記特
異的ポリペプチドを測定できる感度を有する限り、いか
なる公知の免疫測定法をも採用することができる。すな
わち、測定原理に従って分類すれば、サンドイッチ法、
競合法、凝集法等があり、標識に従って分類すれば、酵
素法、蛍光法、放射法、ビオチン法等があるが、これら
のいずれをも採用することができる。なお、本発明にお
いて、「測定する」とは、定量及び検出の両者を包含す
る。
【００１０】特に正確で高感度な、好ましい方法とし
て、抗原抗体反応に先立ち、検体を第１軸方向には等電
点、第２軸方向には分子量に基づき分離する二次元電気
泳動にかけ、電気泳動パターンを維持したままイムノブ
ロッティングを行なう方法を挙げることができる。この
方法を用いる場合には、検体は血球成分を含まない血清
又は血漿を用いることが好ましい。なお、等電点電気泳
動、分子量に基づいて分離する電気泳動及びイムノブロ
ッティングの手法自体は、この分野において周知であ
り、下記実施例にも具体例が詳細に記載されている。
て、抗原抗体反応に先立ち、検体を第１軸方向には等電
点、第２軸方向には分子量に基づき分離する二次元電気
泳動にかけ、電気泳動パターンを維持したままイムノブ
ロッティングを行なう方法を挙げることができる。この
方法を用いる場合には、検体は血球成分を含まない血清
又は血漿を用いることが好ましい。なお、等電点電気泳
動、分子量に基づいて分離する電気泳動及びイムノブロ
ッティングの手法自体は、この分野において周知であ
り、下記実施例にも具体例が詳細に記載されている。
【００１１】
【実施例】以下、実施例に基づき本発明を具体的に説明
する。もっとも、本発明は下記実施例に限定されるもの
ではない。
する。もっとも、本発明は下記実施例に限定されるもの
ではない。
【００１２】実施例１ ６０〜７０歳代のアルツハイマー患者、同年代の同疾病
以外の患者及び健常なボランティアからクエン酸ナトリ
ウム存在下に採取した血液各２００μｌから血漿を分離
し、−２０℃のフリーザー中に凍結保存したものを実験
材料とした。
以外の患者及び健常なボランティアからクエン酸ナトリ
ウム存在下に採取した血液各２００μｌから血漿を分離
し、−２０℃のフリーザー中に凍結保存したものを実験
材料とした。
【００１３】ヒト血漿タンパク質をトリフロロ酢酸（Ｔ
ＣＡ)で沈殿させ、沈殿したタンパク質に混在する脂
肪、塩類等をエーテルで洗浄除去した。これらの操作は
具体的には次のように行なった。
ＣＡ)で沈殿させ、沈殿したタンパク質に混在する脂
肪、塩類等をエーテルで洗浄除去した。これらの操作は
具体的には次のように行なった。
【００１４】室温で融解したヒト血漿検体各１００μｌ
を小型チューブに取り分けて氷水中で冷やし、氷冷した
５．５％ＴＣＡ溶液１ｍｌを加えて混和した。この混和
液を１時間氷冷した後、４℃に冷却した小型の高速遠心
分離機で16000 rpm、１５分間遠心分離した。上清を捨
てた後、沈殿に氷冷した水１５０μｌを加えて懸濁液と
した。これを１ｍｌずつのエーテルで５回洗浄した。エ
ーテルを除去した後、残留した水層を減圧下で除去した
後にタンパク質に３５０μｌの緩衝液(2% Nonidet-P40
(商品名）、9.8 M尿素、2% Pharmalyte(商品名）、1.5%
ディチオスライトール(DTT))を加えて溶解した。溶液
には、Bio Rad社製の低分子量マーカーと微量のブロム
フェノールブルーを加えた。
を小型チューブに取り分けて氷水中で冷やし、氷冷した
５．５％ＴＣＡ溶液１ｍｌを加えて混和した。この混和
液を１時間氷冷した後、４℃に冷却した小型の高速遠心
分離機で16000 rpm、１５分間遠心分離した。上清を捨
てた後、沈殿に氷冷した水１５０μｌを加えて懸濁液と
した。これを１ｍｌずつのエーテルで５回洗浄した。エ
ーテルを除去した後、残留した水層を減圧下で除去した
後にタンパク質に３５０μｌの緩衝液(2% Nonidet-P40
(商品名）、9.8 M尿素、2% Pharmalyte(商品名）、1.5%
ディチオスライトール(DTT))を加えて溶解した。溶液
には、Bio Rad社製の低分子量マーカーと微量のブロム
フェノールブルーを加えた。
【００１５】上記の方法で調製したタンパク質溶液をフ
ァルマシア社製のゲル膨潤容器中に入れ、これにファル
マシア社製等電点電気泳動用乾燥ゲルストリップ(Immob
ilone dry strip pH 3-10, (18 cm又は11 cm))を浸し、
１６時間ゲルを膨潤させ、同時にタンパク質溶液を吸収
させた。
ァルマシア社製のゲル膨潤容器中に入れ、これにファル
マシア社製等電点電気泳動用乾燥ゲルストリップ(Immob
ilone dry strip pH 3-10, (18 cm又は11 cm))を浸し、
１６時間ゲルを膨潤させ、同時にタンパク質溶液を吸収
させた。
【００１６】膨潤させたゲルストリップを初めは３時間
500V、続いて500V−3500V ５時間、最後に3500V １５時
間の全体で64 kVhをかけ等電点電気泳動した。泳動後、
ゲルストリップは、平衡バッファー(6M尿素、3% SDS、5
0 mM Tris-HCl (pH6.8))中で平衡化した後、12.5%ポリ
アクリルアミド平板ゲル(20 cm×20 cm×1 cm)上に密着
させ、16W/gelの電力でTris-グリシンバッファー(Catho
de 25 mM Tris, Anode50 mM Tris, 1% SDS, pH8.6)中で
二次元目の電気泳動を行なった。
500V、続いて500V−3500V ５時間、最後に3500V １５時
間の全体で64 kVhをかけ等電点電気泳動した。泳動後、
ゲルストリップは、平衡バッファー(6M尿素、3% SDS、5
0 mM Tris-HCl (pH6.8))中で平衡化した後、12.5%ポリ
アクリルアミド平板ゲル(20 cm×20 cm×1 cm)上に密着
させ、16W/gelの電力でTris-グリシンバッファー(Catho
de 25 mM Tris, Anode50 mM Tris, 1% SDS, pH8.6)中で
二次元目の電気泳動を行なった。
【００１７】泳動終了後のゲルは、Matsudairaの方法
（P. Matsudaira, Sequence from Picomole Quantities
of Proteins Electroblotted onto Polyvinylidene Di
fluoride Membranes, J. Biol. Chem., 262, 10035-100
38 (1987))に従って、10 mM CHAPSバッファー(pH 11)中
で３時間タンパク質をPVDF(ポリビニリデンフルオライ
ド）膜にelectro blotting (1 mA/cm)した。PVDF膜はそ
のままＣＢＢ染色を行なうか、又は固定液(50%メタノー
ル−10%酢酸−水）中に５分間浸してタンパク質を固定
した後、メタノール、ＴＢＳ溶液(0.154 M NaCl, 20 mM
Tris-HCl, pH7.5)中で洗浄してからＣＢＢ染色を行な
った。
（P. Matsudaira, Sequence from Picomole Quantities
of Proteins Electroblotted onto Polyvinylidene Di
fluoride Membranes, J. Biol. Chem., 262, 10035-100
38 (1987))に従って、10 mM CHAPSバッファー(pH 11)中
で３時間タンパク質をPVDF(ポリビニリデンフルオライ
ド）膜にelectro blotting (1 mA/cm)した。PVDF膜はそ
のままＣＢＢ染色を行なうか、又は固定液(50%メタノー
ル−10%酢酸−水）中に５分間浸してタンパク質を固定
した後、メタノール、ＴＢＳ溶液(0.154 M NaCl, 20 mM
Tris-HCl, pH7.5)中で洗浄してからＣＢＢ染色を行な
った。
【００１８】ＣＢＢ染色は次のようにして行なった。す
なわち、タンパク質を転写したＰＶＤＦ膜を直ちに０．
１％ ＣＢＢ−５０％メタノール染色液中で５分間染色
した後、脱色液(５０％メタノール−１０％酢酸−水）
中で脱色、さらに、水洗した後減圧下で乾燥した。膜
は、乾燥した状態で−２０℃のフリーザー中に保存し
た。
なわち、タンパク質を転写したＰＶＤＦ膜を直ちに０．
１％ ＣＢＢ−５０％メタノール染色液中で５分間染色
した後、脱色液(５０％メタノール−１０％酢酸−水）
中で脱色、さらに、水洗した後減圧下で乾燥した。膜
は、乾燥した状態で−２０℃のフリーザー中に保存し
た。
【００１９】また、免疫染色は、次のようにして行なっ
た。すなわち、泳動終了後のゲルは、ブロッティングバ
ッファー(0.1% SDS, 20%メタノール、0.05M Tris-グリ
シン)中で９０分間ニトロセルロース膜にエレクトロブ
ロッティング(1 mA/cm)した。転写した膜は１％酢酸液
に浸した後、0.1%ポンソーＳ液に浸し、タンパク質を染
色した。吸着した色素は１％酢酸液で除去した後、タン
パク質が染色された膜をカラープリントした。次にＴＢ
Ｓ中で膜を振盪してタンパク質を脱色した後、４％脱脂
粉乳入りＴＢＳで膜を処理し、更に一次抗体を加えた同
上液に膜を浸して抗原抗体反応を行なわせた。膜はTwee
n-20(商品名）含有ＴＢＳ液(ＴＢＳＴ)で洗浄後、４％
脱脂粉乳入りＴＢＳに溶解した酵素標識二次抗体液で処
理した。膜はＴＢＳＴで洗浄後、発色液に浸し、目的と
するタンパク質のスポットを発色させた。
た。すなわち、泳動終了後のゲルは、ブロッティングバ
ッファー(0.1% SDS, 20%メタノール、0.05M Tris-グリ
シン)中で９０分間ニトロセルロース膜にエレクトロブ
ロッティング(1 mA/cm)した。転写した膜は１％酢酸液
に浸した後、0.1%ポンソーＳ液に浸し、タンパク質を染
色した。吸着した色素は１％酢酸液で除去した後、タン
パク質が染色された膜をカラープリントした。次にＴＢ
Ｓ中で膜を振盪してタンパク質を脱色した後、４％脱脂
粉乳入りＴＢＳで膜を処理し、更に一次抗体を加えた同
上液に膜を浸して抗原抗体反応を行なわせた。膜はTwee
n-20(商品名）含有ＴＢＳ液(ＴＢＳＴ)で洗浄後、４％
脱脂粉乳入りＴＢＳに溶解した酵素標識二次抗体液で処
理した。膜はＴＢＳＴで洗浄後、発色液に浸し、目的と
するタンパク質のスポットを発色させた。
【００２０】なお、免疫染色に用いた一次抗体は、抗ア
ミロイドＡ１抗体、抗アミロイドＡ２−β抗体及び抗ア
ポリポプロテインＥ抗体である。また、二次抗体は、一
次抗体を作製した動物種に応じて、パーオキシデースで
標識した抗羊、抗山羊、抗マウス、抗兎抗体を用いた。
発色液としては、ジアミノベンチジン（ＤＡＢ)を用い
た。
ミロイドＡ１抗体、抗アミロイドＡ２−β抗体及び抗ア
ポリポプロテインＥ抗体である。また、二次抗体は、一
次抗体を作製した動物種に応じて、パーオキシデースで
標識した抗羊、抗山羊、抗マウス、抗兎抗体を用いた。
発色液としては、ジアミノベンチジン（ＤＡＢ)を用い
た。
【００２１】一方、ＣＢＢ染色したPVDF膜上のタンパク
質のスポットを切り取り、80%メタノール水溶液中で洗
浄した後、プロテインシーケンサーにかけ、タンパク質
のＮ末端領域のアミノ酸配列を決定した(Hewick, R.M.
et al., J. Biol. Chem. 1981, 256, 7990-7997)。
質のスポットを切り取り、80%メタノール水溶液中で洗
浄した後、プロテインシーケンサーにかけ、タンパク質
のＮ末端領域のアミノ酸配列を決定した(Hewick, R.M.
et al., J. Biol. Chem. 1981, 256, 7990-7997)。
【００２２】その結果、アルツハイマー病患者由来検体
についてのみ染色され、他の疾病の患者及び健常人由来
の検体については染色されなかったスポットが５個見出
された。これらのスポットの二次元電気泳動後の位置を
図１に模式的に示す。また、これらのスポットを構成し
ているタンパク質のＮ末端領域のアミノ酸配列、等電点
及び分子量をタンパク質の名称と共に下記表１に示す。
についてのみ染色され、他の疾病の患者及び健常人由来
の検体については染色されなかったスポットが５個見出
された。これらのスポットの二次元電気泳動後の位置を
図１に模式的に示す。また、これらのスポットを構成し
ているタンパク質のＮ末端領域のアミノ酸配列、等電点
及び分子量をタンパク質の名称と共に下記表１に示す。
【００２３】
【表１】
【００２４】なお、表１中、例えば、「70/A(V)」なる表
示は、７０番目のバリンがアラニンに変異していること
を意味する。
示は、７０番目のバリンがアラニンに変異していること
を意味する。
【００２５】上記のように、本発明の方法により、アル
ツハイマー病患者の血漿中にのみ含まれる特異的なタン
パク質を、わずか２００μｌの血液から検出することが
できた。
ツハイマー病患者の血漿中にのみ含まれる特異的なタン
パク質を、わずか２００μｌの血液から検出することが
できた。
【００２６】
【発明の効果】本発明により、わずか１０〜２００μｌ
程度の少量の血液等の検体を用いて免疫学的手法により
アルツハイマー病等の痴呆症の検査を行なうことができ
る方法が初めて提供された。本発明の方法によれば、痴
呆症を正確にかつ高感度に検査することができる。
程度の少量の血液等の検体を用いて免疫学的手法により
アルツハイマー病等の痴呆症の検査を行なうことができ
る方法が初めて提供された。本発明の方法によれば、痴
呆症を正確にかつ高感度に検査することができる。
【００２７】
SEQUENCE LISTING <110> <120> Method for Diagnosing Dementia <130> <160> 5
【００２８】 <210> 1 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Gly Ser Phe Phe Ser Phe Leu Gly Glu Ala Phe Asp Gly Ala Arg 1 5 10 15
【００２９】 <210> 2 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Ser Phe Phe Ser Phe Leu Gly Glu Ala Phe Asp Gly Ala Arg Asp 1 5 10 15
【００３０】
【００３１】
【００３２】
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の実施例において、二次元電気泳動及び
その後の免疫染色により現れた、アルツハイマー病患者
に特異的なタンパク質のスポットを模式的に示す図であ
る。
その後の免疫染色により現れた、アルツハイマー病患者
に特異的なタンパク質のスポットを模式的に示す図であ
る。
Claims (4)
- 【請求項１】 患者の血液、血清又は血漿である検体を
採取し、該検体中に含まれる、痴呆症患者に特異的なポ
リペプチドと、該ポリペプチドに対する抗体との抗原抗
体反応を利用した免疫測定により、検体中に含まれる痴
呆症患者に特異的なポリペプチドを測定することから成
る、痴呆症の検査方法。 - 【請求項２】 前記痴呆症はアルツハイマー病である請
求項１記載の方法。 - 【請求項３】 前記免疫測定は、検体を第１軸方向には
等電点、第２軸方向には分子量に基づき分離する二次元
電気泳動にかけ、電気泳動パターンを維持したままスポ
ットのアミノ酸配列の確認を行なう請求項１又は２記載
の方法。 - 【請求項４】 前記ポリペプチドは、アミロイドＡ１、
アミロイドＡ２−β、アポリポプロテインＥ４及びアポ
リポプロテインＪβ鎖から成る群より選ばれる少なくと
も１種である請求項１ないし３のいずれか１項に記載の
方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP36860798A JP2000193661A (ja) | 1998-12-25 | 1998-12-25 | 痴呆症の検査方法 |
Applications Claiming Priority (1)
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