JP2000143695A - 新規ペプチド、血圧降下剤および生理活性物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 安全かつ有効な血圧降下物質を得る。 【解決手段】 Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒ
ｏ−Ｐｈｅからなる、降圧作用を有する新規ペプチドを
提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、アンジオテンシン
２レセプターに対して親和性を持ち、血圧降下剤として
有用な新規ペプチドおよびその製造方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】わが国における高血圧患者は数は３００
０万人を超えると言われており、経口投与で有効な安全
な血圧降下物質が求められている。既知の血圧降下物質
としては交感神経遮断剤、アドレナリンアルファおよび
ベータブロッカー、カルシウム拮抗剤、利尿剤、アンジ
オテンシン変換酵素阻害剤およびアンジオテンシンＡＴ
１レセプターアンタゴニスト等がある。

【発明が解決しようとする課題】

【０００３】アンジオテンシンレセプターにはサブタイ
プがあり、アンジオテンシン１レセプターが血圧上昇に
関与することは古くから知られていたが、ノックアウト
マウスを用いた実験からアンジオテンシン２レセプター
は血圧降下に関与することが最近解明された。しかし、
アンジオテンシン２レセプターを介して作用する血圧降
下物質は未だ見出されていない。

【課題を解決するための手段】

【０００４】発明者は、食品中に含まれる生理活性物質
の探索研究を行う中で、卵白を酵素で加水分解した組成
物中に、動脈弛緩作用を持ち、血圧降下作用を有する物
質が含まれることをつきとめ、その物質がＡｒｇ−Ａｌ
ａ−Ａｓｐ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（ｏｖｏｋｉｎｉ
ｎＩＩＩ）であることを示した（特開平１０−３６３９
４号）。その知見より、上記ペプチドと類似するペプチ
ドにつき、その生理活性を検討してきたところ、Ａｒｇ
−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅという配列
を有するペプチドが、アンジオテンシン２レセプターに
対してのみ親和性を有し、血圧降下作用を有することを
見出した。

【０００５】アンジオテンシン２レセプターに親和性を
もつペプチドとしてはアンジオテンシンＩＩおよびＩＩ
Ｉが従来から知られているが、これらは血圧上昇に関与
するアンジオテンシン１レセプターに対しても強力に結
合するため血圧降下作用を示し得ない。そこで、アンジ
オテンシン１レセプターに対しては親和性を持たずにア
ンジオテンシン２レセプターに対してのみ親和性をもつ
物質は、本発明のペプチドが初めてであり、このような
作用機序による血圧降下物質は従来存在しない。また、
その作用機序より、本発明ペプチドは高血圧者に対して
は作用を示すが、正常血圧には影響を及ぼさない安全な
降圧物質である。

【０００６】本発明のペプチドは、Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐ
ｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅからなる配列をもつ直鎖
状のペプチドであり、ペプチド合成の常套手段を適用し
て合成することによって製造することができる。上記で
いうＡｒｇはアルギニン、Ｐｒｏハプロリン、Ｐｈｅは
フェニルアラニン、Ｈｉｓはヒスチジンを示す。かかる
アミノ酸はいずれもＬ−体である。

【０００７】

【実施例】本発明のペプチドは、ペプチド合成法で取得
でき、ペプチド合成に通常用いられる方法、即ち液相法
または固相法でペプチド結合の任意の位置で二分される
２種のフラグメントの一方に相当する反応性カルボキシ
ル基を有する原料と、他方のフラグメントに相当する反
応性アミノ基を有する原料と、他方のフラグメントに相
当する反応性アミノ基を有する原料とを２-(1H-Benzotr
iazole-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluoro
phosphate(ＨＢＴＵ）等の活性エステルを用いた方法、
カルボジイミドを用いた方法等を用いて縮合させ、生成
する縮合物が保護基を有する場合、その保護基を除去す
ることによっても製造し得る。

【０００８】この反応工程において反応に関与すべきで
ない官能基は、保護基により保護される。アミノ基の保
護基としては、例えばベンジルオキシカルボニル（Ｂ
ｚ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ），ｐ−ビ
フェニルイソプロピロオキシカルボニル、９ーフルオレ
ニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）等が挙げられ
る。カルボキシル基の保護剤としては例えばアルキルエ
ステル、ベンジルエステル等を形成し得る基が挙げられ
るが、固相法の場合は、Ｃ末端のカルボキシル基はクロ
ロトリチル樹脂、クロルメチル樹脂、オキシメチル樹
脂、Ｐ−アルコキシベンジルアルコール樹脂等の担体に
結合している。縮合反応は、カルボジイミド等の縮合剤
の存在下にあるいはＮ−保護アミノ酸活性エステルまた
はペプチド活性エステルを用いて実施する。

【０００９】縮合反応終了後、保護基は除去されるが、
固相法の場合はさらにペプチドのＣ末端と樹脂との結合
を切断する。更に、本発明のペプチドは通常の方法に従
い精製される。例えばイオン交換クロマトグラフィー、
逆相液体クロマトグラフィー、アフィニティークロマト
グラフィー等が挙げられる。合成したペプチドの合成は
エドマン分解法でＣ−末端からアミノ酸配列を読み取る
プロティンシークエンサー、ＧＣ−ＭＳ等で分析され
る。

【００１０】次に医薬品として用いる場合について説明
する。本発明で使用するペプチドの投与経路としては、
経口投与、非経口投与、直腸内投与のいずれでもよい
が、経口投与が好ましい。本発明のペプチドの投与量は
化合物の種類、投与方法、患者の症状、年齢等により異
なるが、通常１回０．００１〜１０００ｍｇ，好ましく
は０．０１〜１０ｍｇを一日当たり１〜３回である。本
発明のペプチドは通常、製剤用担体と混合して調製した
製剤の形で投与される。製剤用担体としては、製剤分野
において常用され、かつ本発明のペプチドと反応しない
物質が用いられる。

【００１１】具体的には、例えば乳糖、ブドウ糖、マン
ニット、デキストリン、シクロデキストリン、デンプ
ン、蔗糖、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、合成ケ
イ酸アルミニウム、カルボキシメチルセルロースナトリ
ウム、ヒドロキシプロピルデンプン、カルボキシメチル
セルロースカルシウム、イオン交換樹脂、メチルセルロ
ース、ゼラチン、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルセ
ルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリ
ビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、軽質無水ケ
イ酸、ステアリン酸マグネシウム、タルク、トラガン
ト、ベントナイト、ビーガム、酸化チタン、ソルビタン
脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリ
ン、脂肪酸グリセリンエステル、精製ラノリン、グリセ
ロゼラチン、ポリソルベート、マクロゴール、植物油、
ロウ、流動パラフィン、白色ワセリン、フルオロカーボ
ン、非イオン性界面活性剤、プロピレングルコール、水
等が挙げられる。

【００１２】剤型としては、錠剤、カプセル剤、顆粒
剤、散剤、シロップ剤、懸濁剤、座剤、軟膏、クリーム
剤、ゲル剤、貼付剤、吸入剤、注射剤等が挙げられる。
これらの製剤は常法に従って調製される。尚、液体製剤
にあっては、用時、水又は他の適当な溶媒に溶解または
懸濁する形であってもよい。また錠剤、顆粒剤は周知の
方法でコーティングしてもよい。注射剤の場合には、本
発明のペプチドを水に溶解させて調製されるが、必要に
応じて生理食塩水あるいはブドウ糖溶液に溶解させても
よく、また緩衝剤や保存剤を添加してもよい。

【００１３】これらの製剤は、本発明のペプチドを０．
０１％以上、好ましくは０．５〜７０％の割合で含有す
ることができる。これらの製剤はまた、治療上価値のあ
る他の成分を含有していてもよい。

【００１４】

【実施例】次に実例を挙げて本発明を更に具体的に説明
する。 （ペプチドの合成）市販のＦｍｏｃ−Ｐｈｅｎｙｌａｌ
ａｎｉｎｅ−Ｗａｎｇ樹脂（置換率０．５０ｍｅｑ／
ｇ）０．６０ｇをＰＳ３型ペプチド合成機（Ｐｒｏｔｅ
ｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）の反応槽に分取
し、以下のように合成を行った。まず、上記の樹脂を反
応容器に入れて、１ｍｍｏｌのＦｍｏｃ−Ｐｒｏと、活
性化剤として、１ｍｍｏｌのＨＢＴＵを１０ｍｌの０．
４Ｍ Ｎ−メチルモルフォリンを含むジメチルフォルム
アミドに溶解したものを反応槽に加え、室温にて２０分
攪拌反応させた。

【００１５】得られた樹脂を２０重量％ピペリジンを含
むジメチルフォルムアミド２０ｍｌ中で、Ｆｍｏｃ基を
除去し、ついで上記のＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）をカ
ップリングさせた方法と同様にＣ末端から順次Ｆｍｏｃ
−アミノ酸をカップルさせて、Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｐｒ
ｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−樹脂
を得た。該樹脂を１０ｍｌの脱保護液（８２容量％トリ
フルオロ酢酸、５容量％チオアニソール、３容量％エタ
ンジオール、２容量％エチルメチルスルフィド、３容量
％フェノール、５容量％水）中で室温にて４時間攪拌
し、ペプチドを樹脂から遊離させた。

【００１６】ここに４０ｍｌの冷エーテルを添加し、ペ
プチドを沈殿させ、さらに冷エーテルにて３回洗浄し粗
ペプチドを得た。これをＯＤＳカラム（Ｃｏｓｍｏｓｉ
ｌ５Ｃ₁₈−ＡＲ，２０×２５０ｍｍ）による逆相クロマ
トグラフィーにより０．１重量％トリフルオロ酢酸を含
むアセトニトリルの直線的濃度勾配にて展開、精製し、
Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅを得
た。本品をプロテインシーケンサー（アプライド バイ
オシステムズ社製４７７Ａ型）により分析した結果、上
記の組成であることが判明した。

【００１７】（アンジオテンシン２レセプター結合アッ
セイ）アンジオテンシン２レセプターに対する結合アッ
セイは、副腎膜画分と放射標識した［¹²⁵I］ＣＧＰ４２
１１２Ａを用いて行った。まず５０ｍＭトリス−塩酸緩
衝液（ｐＨ７．４）、１２５ｍＭ ＮａＣｌ、６．５ｍ
Ｍ ＭｇＣｌ₂ 、１ｍＭ ＥＤＴＡ、０．２％ウシ血清
アルブミン中にて、５０ｐＭ［¹²⁵I］ＣＧＰ４２１１２
Ａと試料およびラット脳膜画分を１２℃にて１２０分間
インキュベートし、氷冷することにより反応を停止し
た。Ｗｈａｔｍａｎ ＧＦ／Ｆガラスフィルター上にて
０℃の同緩衝液にて洗浄後の放射活性をガンマ−カウン
ターにて計測した。なおフィルターは、予め２ｍｇ／ｍ
ｌのポリエチレンイミンに２時間浸してラベルリガンド
の非特異的吸着を防いだ。

【００１８】（アンジオテンシン１レセプター結合アッ
セイ）アンジオテンシン１レセプターに対する結合アッ
セイは、ラット肝臓アンジオテンシン１レセプターと放
射標識した［¹²⁵I］［Ｓａｒ¹ ，Ｉｌｅ⁸ ］アンジオテ
ンシンＩＩを用いて行った。まず２０ｍＭトリス−塩酸
緩衝液（ｐＨ７．５）、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１０ｍ
Ｍ ＭｇＣｌ₂ 、０．２％ウシ血清アルブミン中にて、
５０ｐＭ［¹²⁵I］［Ｓａｒ¹ ，Ｉｌｅ⁸ ］アンジオテン
シンＩＩと試料およびラット肝臓アンジオテンシン１レ
セプターを１２℃にて１２０分間インキュベートし、氷
冷することにより反応を停止した。Ｗｈａｔｍａｎ Ｇ
Ｆ／Ａガラスフィルター上にて０℃の同緩衝液にて洗浄
後の放射活性をガンマ−カウンターにて計測した。なお
フィルターは、予め２ｍｇ／ｍｌのポリエチレンイミン
に２時間浸してラベルリガンドの非特異的吸着を防い
だ。

【００１９】上記アッセイにより、ペプチドのアンジオ
テンシン１（ＡＴ１）レセプターおよびアンジオテンシ
ン２（ＡＴ２）レセプターに対する親和性の評価を行っ
た。その結果を表１に示す。

【００２０】

【表１】

【００２１】当該ペプチド（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−
Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）は、Ｋｉ＝２ｎＭで結合抑制
を示したことから、アンジオテンシン２レセプターに結
合活性を有し、アンジオテンシン１レセプターに対する
親和性は１００倍弱かった。よって当該ペプチドはアン
ジオテンシン２レセプターに対して特異的に結合すると
いえる。一方、アンジオテンシンレセプターを介さずに
降圧作用を示すｏｖｏｋｉｎｉｎＩＩＩをコントロール
として用いて、レセプター親和性を測定したところ、ア
ンジオテンシン２レセプターに対する親和性は当該ペプ
チドと比較して３０倍以上弱かった。

【００２２】（血圧変動の測定）１５〜２０週令の自然
高血圧ラットに、卵黄でエマルジョン化したサンプルを
ゾンデ針を使用して強制経口投与した。そして尾静脈部
の血圧をｔａｉｌ−ｃｕｆｆ法により経時的に測定し
た。その結果、当該ペプチド（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ
−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）は、自然発症高血圧ラット
（ＳＨＲ）に対して０．３〜１０ｍｇ／ｋｇの用量で経
口投与を行うことにより、１１〜１５ｍｍＨｇの血圧降
下作用をもたらした。図１に高血圧ラットに１ｍｇ／ｋ
ｇの当該ペプチドを経口投与した際の血圧降下作用の時
間依存性を、図２に当該ペプチドを投与して６時間後の
血圧降下作用の容量依存性を示す。

【００２３】

【発明の効果】当該ペプチド（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ
−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）は経口投与により自然発症
高血圧ラット（ＳＨＲ）の血圧を降下させるが、これは
アンジオテンシン２レセプターを介して作用するという
新しい機構によるものであり、正常血圧ラットの血圧は
変化させないことから安全な血圧降下物質である。

【図面の簡単な説明】

【図１】自然発症高血圧ラットに当該ペプチドを経口投
与した際の血圧降下作用の時間依存性を示す図である。

【図２】自然発症高血圧ラットに当該ペプチドを経口投
与した際の血圧降下作用の容量依存性を示す図である。

─────────────────────────────────────────────────────

【手続補正書】

【提出日】平成１０年１２月３日（１９９８．１２．
３）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正内容】

【書類名】 明細書

【発明の名称】 新規ペプチド、血圧降下剤および生
理活性物質

【特許請求の範囲】

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、アンジオテンシン
ＡＴ２レセプターに対して親和性を持ち、血圧降下剤と
して有用な新規ペプチドおよびその製造方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】わが国における高血圧患者数は３０００
万人を超えると言われており、経口投与で有効な安全な
血圧降下物質が求められている。既知の血圧降下物質と
しては交感神経遮断剤、アドレナリンアルファおよびベ
ータブロッカー、カルシウム拮抗剤、利尿剤、アンジオ
テンシン変換酵素阻害剤およびアンジオテンシンＡＴ１
レセプターアンタゴニスト等がある。

【発明が解決しようとする課題】

【０００３】アンジオテンシンレセプターにはサブタイ
プがあり、アンジオテンシンＡＴ１レセプターが血圧上
昇に関与することは古くから知られていたが、ノックア
ウトマウスを用いた実験からアンジオテンシンＡＴ２レ
セプターは血圧降下に関与することが最近解明された。
しかし、アンジオテンシンＡＴ２レセプターを介して作
用する血圧降下物質は未だ見出されていない。

【課題を解決するための手段】

【０００４】発明者は、食品中に含まれる生理活性物質
の探索研究を行う中で、卵白を酵素で加水分解した組成
物中に、動脈弛緩作用を持ち、血圧降下作用を有する物
質が含まれることをつきとめ、その物質がＡｒｇ−Ａｌ
ａ−Ａｓｐ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（ｏｖｏｋｉｎｉ
ｎＩＩＩ）であることを示した（特開平１０−３６３９
４号）。その知見より、上記ペプチドと類似するペプチ
ドにつき、その生理活性を検討してきたところ、Ａｒｇ
−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅという配列
を有するペプチドが、アンジオテンシンＡＴ２レセプタ
ーに対してのみ親和性を有し、血圧降下作用を有するこ
とを見出した。

【０００５】アンジオテンシンＡＴ２レセプターに親和
性をもつペプチドとしてはアンジオテンシンＩＩおよび
ＩＩＩが従来から知られているが、これらは血圧上昇に
関与するアンジオテンシンＡＴ１レセプターに対しても
強力に結合するため血圧降下作用を示し得ない。そこ
で、アンジオテンシンＡＴ１レセプターに対しては親和
性を持たずにアンジオテンシンＡＴ２レセプターに対し
てのみ親和性をもつ物質は、本発明のペプチドが初めて
であり、このような作用機序による血圧降下物質は従来
存在しない。また、その作用機序より、本発明ペプチド
は高血圧者に対しては作用を示すが、正常血圧には影響
を及ぼさない安全な降圧物質である。

【０００６】本発明のペプチドは、Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐ
ｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅからなる配列をもつ直鎖
状のペプチドであり、ペプチド合成の常套手段を適用し
て合成することによって製造することができる。上記で
いうＡｒｇはアルギニン、Ｐｒｏはプロリン、Ｐｈｅは
フェニルアラニン、Ｈｉｓはヒスチジンを示す。かかる
アミノ酸はいずれもＬ−体である。

【０００７】

【実施例】本発明のペプチドは、ペプチド合成法で取得
でき、ペプチド合成に通常用いられる方法、即ち液相法
または固相法でペプチド結合の任意の位置で二分される
２種のフラグメントの一方に相当する反応性カルボキシ
ル基を有する原料と、他方のフラグメントに相当する反
応性アミノ基を有する原料と、他方のフラグメントに相
当する反応性アミノ基を有する原料とを２-(1H-Benzotr
iazole-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluoro
phosphate(ＨＢＴＵ）等の活性エステルを用いた方法、
カルボジイミドを用いた方法等を用いて縮合させ、生成
する縮合物が保護基を有する場合、その保護基を除去す
ることによっても製造し得る。

【０００８】この反応工程において反応に関与すべきで
ない官能基は、保護基により保護される。アミノ基の保
護基としては、例えばベンジルオキシカルボニル（Ｂ
ｚ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ），ｐ−ビ
フェニルイソプロピロオキシカルボニル、９ーフルオレ
ニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）等が挙げられ
る。カルボキシル基の保護剤としては例えばアルキルエ
ステル、ベンジルエステル等を形成し得る基が挙げられ
るが、固相法の場合は、Ｃ末端のカルボキシル基はクロ
ロトリチル樹脂、クロルメチル樹脂、オキシメチル樹
脂、Ｐ−アルコキシベンジルアルコール樹脂等の担体に
結合している。縮合反応は、カルボジイミド等の縮合剤
の存在下にあるいはＮ−保護アミノ酸活性エステルまた
はペプチド活性エステルを用いて実施する。

【０００９】縮合反応終了後、保護基は除去されるが、
固相法の場合はさらにペプチドのＣ末端と樹脂との結合
を切断する。更に、本発明のペプチドは通常の方法に従
い精製される。例えばイオン交換クロマトグラフィー、
逆相液体クロマトグラフィー、アフィニティークロマト
グラフィー等が挙げられる。合成したペプチドの合成は
エドマン分解法でＣ−末端からアミノ酸配列を読み取る
プロティンシークエンサー、ＧＣ−ＭＳ等で分析され
る。

【００１０】次に医薬品として用いる場合について説明
する。本発明で使用するペプチドの投与経路としては、
経口投与、非経口投与、直腸内投与のいずれでもよい
が、経口投与が好ましい。本発明のペプチドの投与量は
化合物の種類、投与方法、患者の症状、年齢等により異
なるが、通常１回０．００１〜１０００ｍｇ，好ましく
は０．０１〜１０ｍｇを一日当たり１〜３回である。本
発明のペプチドは通常、製剤用担体と混合して調製した
製剤の形で投与される。製剤用担体としては、製剤分野
において常用され、かつ本発明のペプチドと反応しない
物質が用いられる。

【００１１】具体的には、例えば乳糖、ブドウ糖、マン
ニット、デキストリン、シクロデキストリン、デンプ
ン、蔗糖、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、合成ケ
イ酸アルミニウム、カルボキシメチルセルロースナトリ
ウム、ヒドロキシプロピルデンプン、カルボキシメチル
セルロースカルシウム、イオン交換樹脂、メチルセルロ
ース、ゼラチン、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルセ
ルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリ
ビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、軽質無水ケ
イ酸、ステアリン酸マグネシウム、タルク、トラガン
ト、ベントナイト、ビーガム、酸化チタン、ソルビタン
脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリ
ン、脂肪酸グリセリンエステル、精製ラノリン、グリセ
ロゼラチン、ポリソルベート、マクロゴール、植物油、
ロウ、流動パラフィン、白色ワセリン、フルオロカーボ
ン、非イオン性界面活性剤、プロピレングルコール、水
等が挙げられる。

【００１２】剤型としては、錠剤、カプセル剤、顆粒
剤、散剤、シロップ剤、懸濁剤、座剤、軟膏、クリーム
剤、ゲル剤、貼付剤、吸入剤、注射剤等が挙げられる。
これらの製剤は常法に従って調製される。尚、液体製剤
にあっては、用時、水又は他の適当な溶媒に溶解または
懸濁する形であってもよい。また錠剤、顆粒剤は周知の
方法でコーティングしてもよい。注射剤の場合には、本
発明のペプチドを水に溶解させて調製されるが、必要に
応じて生理食塩水あるいはブドウ糖溶液に溶解させても
よく、また緩衝剤や保存剤を添加してもよい。

【００１３】これらの製剤は、本発明のペプチドを０．
０１％以上、好ましくは０．５〜７０％の割合で含有す
ることができる。これらの製剤はまた、治療上価値のあ
る他の成分を含有していてもよい。

【００１４】

【実施例】次に実例を挙げて本発明を更に具体的に説明
する。 （ペプチドの合成）市販のＦｍｏｃ−Ｐｈｅｎｙｌａｌ
ａｎｉｎｅ−Ｗａｎｇ樹脂（置換率０．５０ｍｅｑ／
ｇ）０．６０ｇをＰＳ３型ペプチド合成機（Ｐｒｏｔｅ
ｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）の反応槽に分取
し、以下のように合成を行った。まず、上記の樹脂を反
応容器に入れて、１ｍｍｏｌのＦｍｏｃ−Ｐｒｏと、活
性化剤として、１ｍｍｏｌのＨＢＴＵを１０ｍｌの０．
４Ｍ Ｎ−メチルモルフォリンを含むジメチルフォルム
アミドに溶解したものを反応槽に加え、室温にて２０分
攪拌反応させた。

【００１５】得られた樹脂を２０重量％ピペリジンを含
むジメチルフォルムアミド２０ｍｌ中で、Ｆｍｏｃ基を
除去し、ついで上記のＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）をカ
ップリングさせた方法と同様にＣ末端から順次Ｆｍｏｃ
−アミノ酸をカップルさせて、Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｐｒ
ｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−樹脂
を得た。該樹脂を１０ｍｌの脱保護液（８２容量％トリ
フルオロ酢酸、５容量％チオアニソール、３容量％エタ
ンジオール、２容量％エチルメチルスルフィド、３容量
％フェノール、５容量％水）中で室温にて４時間攪拌
し、ペプチドを樹脂から遊離させた。

【００１６】ここに４０ｍｌの冷エーテルを添加し、ペ
プチドを沈殿させ、さらに冷エーテルにて３回洗浄し粗
ペプチドを得た。これをＯＤＳカラム（Ｃｏｓｍｏｓｉ
ｌ５Ｃ₁₈−ＡＲ，２０×２５０ｍｍ）による逆相クロマ
トグラフィーにより０．１重量％トリフルオロ酢酸を含
むアセトニトリルの直線的濃度勾配にて展開、精製し、
Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅを得
た。本品をプロテインシーケンサー（アプライド バイ
オシステムズ社製４７７Ａ型）により分析した結果、上
記の組成であることが判明した。

【００１７】（アンジオテンシンＡＴ２レセプター結合
アッセイ）アンジオテンシンＡＴ２レセプターに対する
結合アッセイは、副腎膜画分と放射標識した［¹²⁵I］Ｃ
ＧＰ４２１１２Ａを用いて行った。まず５０ｍＭトリス
−塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）、１２５ｍＭ ＮａＣｌ、
６．５ｍＭ ＭｇＣｌ₂ 、１ｍＭ ＥＤＴＡ、０．２％
ウシ血清アルブミン中にて、５０ｐＭ［¹²⁵I］ＣＧＰ４
２１１２Ａと試料およびラット脳膜画分を１２℃にて１
２０分間インキュベートし、氷冷することにより反応を
停止した。Ｗｈａｔｍａｎ ＧＦ／Ｆガラスフィルター
上にて０℃の同緩衝液にて洗浄後の放射活性をガンマ−
カウンターにて計測した。なおフィルターは、予め２ｍ
ｇ／ｍｌのポリエチレンイミンに２時間浸してラベルリ
ガンドの非特異的吸着を防いだ。

【００１８】（アンジオテンシンＡＴ１レセプター結合
アッセイ）アンジオテンシンＡＴ１レセプターに対する
結合アッセイは、ラット肝臓アンジオテンシンＡＴ１レ
セプターと放射標識した［¹²⁵I］［Ｓａｒ¹ ，Ｉｌ
ｅ⁸ ］アンジオテンシンＩＩを用いて行った。まず２０
ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）、１００ｍＭ
ＮａＣｌ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ₂ 、０．２％ウシ血清ア
ルブミン中にて、５０ｐＭ［¹²⁵I］［Ｓａｒ¹ ，Ｉｌｅ
⁸ ］アンジオテンシンＩＩと試料およびラット肝臓アン
ジオテンシンＡＴ１レセプターを１２℃にて１２０分間
インキュベートし、氷冷することにより反応を停止し
た。ＷｈａｔｍａｎＧＦ／Ａガラスフィルター上にて０
℃の同緩衝液にて洗浄後の放射活性をガンマ−カウンタ
ーにて計測した。なおフィルターは、予め２ｍｇ／ｍｌ
のポリエチレンイミンに２時間浸してラベルリガンドの
非特異的吸着を防いだ。

【００１９】上記アッセイにより、ペプチドのアンジオ
テンシンＡＴ１レセプターおよびアンジオテンシンＡＴ
２レセプターに対する親和性の評価を行った。その結果
を表１に示す。

【００２０】

【表１】

【００２１】当該ペプチド（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−
Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）は、Ｋｉ＝２ｎＭで結合抑制
を示したことから、アンジオテンシンＡＴ２レセプター
に結合活性を有し、アンジオテンシンＡＴ１レセプター
に対する親和性は１００倍弱かった。よって当該ペプチ
ドはアンジオテンシンＡＴ２レセプターに対して特異的
に結合するといえる。一方、アンジオテンシンレセプタ
ーを介さずに降圧作用を示すｏｖｏｋｉｎｉｎＩＩＩを
コントロールとして用いて、レセプター親和性を測定し
たところ、アンジオテンシンＡＴ２レセプターに対する
親和性は当該ペプチドと比較して３０倍以上弱かった。

【００２２】（血圧変動の測定）１５〜２０週令の自然
高血圧ラットに、卵黄でエマルジョン化したサンプルを
ゾンデ針を使用して強制経口投与した。そして尾静脈部
の血圧をｔａｉｌ−ｃｕｆｆ法により経時的に測定し
た。その結果、当該ペプチド（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ
−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）は、自然発症高血圧ラット
（ＳＨＲ）に対して０．３〜１０ｍｇ／ｋｇの用量で経
口投与を行うことにより、１１〜１５ｍｍＨｇの血圧降
下作用をもたらした。図１に高血圧ラットに１ｍｇ／ｋ
ｇの当該ペプチドを経口投与した際の血圧降下作用の時
間依存性を、図２に当該ペプチドを投与して６時間後の
血圧降下作用の容量依存性を示す。

【００２３】

【発明の効果】当該ペプチド（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ
−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）は経口投与により自然発症
高血圧ラット（ＳＨＲ）の血圧を降下させるが、これは
アンジオテンシンＡＴ２レセプターを介して作用すると
いう新しい機構によるものであり、正常血圧ラットの血
圧は変化させないことから安全な血圧降下物質である。

【図面の簡単な説明】

【図１】自然発症高血圧ラットに当該ペプチドを経口投
与した際の血圧降下作用の時間依存性を示す図である。

【図２】自然発症高血圧ラットに当該ペプチドを経口投
与した際の血圧降下作用の容量依存性を示す図である。 ─────────────────────────────────────────────────────

【手続補正書】

【提出日】平成１１年１０月８日（１９９９．１０．
８）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正内容】

【書類名】 明細書

【発明の名称】 新規ペプチド、血圧降下剤および生
理活性物質

【特許請求の範囲】

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、アンジオテンシン
２（ＡＴ２）レセプターに対して親和性を持ち、血圧降
下剤として有用な新規ペプチドおよびその製造方法に関
する。

【０００２】

【従来の技術】わが国における高血圧患者数は３０００
万人を超えると言われており、経口投与で有効な安全な
血圧降下物質が求められている。既知の血圧降下物質と
しては交感神経遮断剤、アドレナリンアルファおよびベ
ータブロッカー、カルシウム拮抗剤、利尿剤、アンジオ
テンシン変換酵素阻害剤およびアンジオテンシン１（Ａ
Ｔ１）レセプターアンタゴニスト等がある。

【発明が解決しようとする課題】

【０００３】アンジオテンシンレセプターにはサブタイ
プがあり、アンジオテンシン１（ＡＴ１）レセプターが
血圧上昇に関与することは古くから知られていたが、ノ
ックアウトマウスを用いた実験からアンジオテンシン２
（ＡＴ２）レセプターは血圧降下に関与することが最近
解明された。しかし、アンジオテンシン２（ＡＴ２）レ
セプターを介して作用する血圧降下物質は未だ見出され
ていない。

【課題を解決するための手段】

【０００４】発明者は、食品中に含まれる生理活性物質
の探索研究を行う中で、卵白を酵素で加水分解した組成
物中に、動脈弛緩作用を持ち、血圧降下作用を有する物
質が含まれることをつきとめ、その物質がＡｒｇ−Ａｌ
ａ−Ａｓｐ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（ｏｖｏｋｉｎｉ
ｎＩＩＩ）であることを示した（特開平１０−３６３９
４号）。その知見より、上記ペプチドと類似するペプチ
ドにつき、その生理活性を検討してきたところ、Ａｒｇ
−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅという配列
を有するペプチドが、アンジオテンシン２（ＡＴ２）レ
セプターに対してのみ親和性を有し、血圧降下作用を有
することを見出した。

【０００５】アンジオテンシン２（ＡＴ２）レセプター
に親和性をもつペプチドとしてはアンジオテンシンＩＩ
およびＩＩＩが従来から知られているが、これらは血圧
上昇に関与するアンジオテンシン１（ＡＴ１）レセプタ
ーに対しても強力に結合するため血圧降下作用を示し得
ない。そこで、アンジオテンシン１（ＡＴ１）レセプタ
ーに対しては親和性を持たずにアンジオテンシン２（Ａ
Ｔ２）レセプターに対してのみ親和性をもつ物質は、本
発明のペプチドが初めてであり、このような作用機序に
よる血圧降下物質は従来存在しない。また、その作用機
序より、本発明ペプチドは高血圧者に対しては作用を示
すが、正常血圧には影響を及ぼさない安全な降圧物質で
ある。

【０００６】本発明のペプチドは、Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐ
ｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅで表される配列をもつ直
鎖状のペプチドであり、ペプチド合成の常套手段を適用
して合成することによって製造することができる。上記
でいうＡｒｇはアルギニン、Ｐｒｏはプロリン、Ｐｈｅ
はフェニルアラニン、Ｈｉｓはヒスチジンを示す。かか
るアミノ酸はいずれもＬ−体である。

【０００７】

【実施例】本発明のペプチドは、ペプチド合成法で取得
でき、ペプチド合成に通常用いられる方法、即ち液相法
または固相法でペプチド結合の任意の位置で二分される
２種のフラグメントの一方に相当する反応性カルボキシ
ル基を有する原料と、他方のフラグメントに相当する反
応性アミノ基を有する原料と、他方のフラグメントに相
当する反応性アミノ基を有する原料とを２-(1H-Benzotr
iazole-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluoro
phosphate(ＨＢＴＵ）等の活性エステルを用いた方法、
カルボジイミドを用いた方法等を用いて縮合させ、生成
する縮合物が保護基を有する場合、その保護基を除去す
ることによっても製造し得る。

【０００８】この反応工程において反応に関与すべきで
ない官能基は、保護基により保護される。アミノ基の保
護基としては、例えばベンジルオキシカルボニル（Ｂ
ｚ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ），ｐ−ビ
フェニルイソプロピロオキシカルボニル、９ーフルオレ
ニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）等が挙げられ
る。カルボキシル基の保護剤としては例えばアルキルエ
ステル、ベンジルエステル等を形成し得る基が挙げられ
るが、固相法の場合は、Ｃ末端のカルボキシル基はクロ
ロトリチル樹脂、クロルメチル樹脂、オキシメチル樹
脂、Ｐ−アルコキシベンジルアルコール樹脂等の担体に
結合している。縮合反応は、カルボジイミド等の縮合剤
の存在下にあるいはＮ−保護アミノ酸活性エステルまた
はペプチド活性エステルを用いて実施する。

【０００９】縮合反応終了後、保護基は除去されるが、
固相法の場合はさらにペプチドのＣ末端と樹脂との結合
を切断する。更に、本発明のペプチドは通常の方法に従
い精製される。例えばイオン交換クロマトグラフィー、
逆相液体クロマトグラフィー、アフィニティークロマト
グラフィー等が挙げられる。合成したペプチドの合成は
エドマン分解法でＣ−末端からアミノ酸配列を読み取る
プロティンシークエンサー、ＧＣ−ＭＳ等で分析され
る。

【００１０】次に医薬品として用いる場合について説明
する。本発明で使用するペプチドの投与経路としては、
経口投与、非経口投与、直腸内投与のいずれでもよい
が、経口投与が好ましい。本発明のペプチドの投与量は
化合物の種類、投与方法、患者の症状、年齢等により異
なるが、通常１回０．００１〜１０００ｍｇ，好ましく
は０．０１〜１０ｍｇを一日当たり１〜３回である。本
発明のペプチドは通常、製剤用担体と混合して調製した
製剤の形で投与される。製剤用担体としては、製剤分野
において常用され、かつ本発明のペプチドと反応しない
物質が用いられる。

【００１１】具体的には、例えば乳糖、ブドウ糖、マン
ニット、デキストリン、シクロデキストリン、デンプ
ン、蔗糖、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、合成ケ
イ酸アルミニウム、カルボキシメチルセルロースナトリ
ウム、ヒドロキシプロピルデンプン、カルボキシメチル
セルロースカルシウム、イオン交換樹脂、メチルセルロ
ース、ゼラチン、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルセ
ルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリ
ビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、軽質無水ケ
イ酸、ステアリン酸マグネシウム、タルク、トラガン
ト、ベントナイト、ビーガム、酸化チタン、ソルビタン
脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリ
ン、脂肪酸グリセリンエステル、精製ラノリン、グリセ
ロゼラチン、ポリソルベート、マクロゴール、植物油、
ロウ、流動パラフィン、白色ワセリン、フルオロカーボ
ン、非イオン性界面活性剤、プロピレングルコール、水
等が挙げられる。

【００１２】剤型としては、錠剤、カプセル剤、顆粒
剤、散剤、シロップ剤、懸濁剤、座剤、軟膏、クリーム
剤、ゲル剤、貼付剤、吸入剤、注射剤等が挙げられる。
これらの製剤は常法に従って調製される。尚、液体製剤
にあっては、用時、水又は他の適当な溶媒に溶解または
懸濁する形であってもよい。また錠剤、顆粒剤は周知の
方法でコーティングしてもよい。注射剤の場合には、本
発明のペプチドを水に溶解させて調製されるが、必要に
応じて生理食塩水あるいはブドウ糖溶液に溶解させても
よく、また緩衝剤や保存剤を添加してもよい。

【００１３】これらの製剤は、本発明のペプチドを０．
０１％以上、好ましくは０．５〜７０％の割合で含有す
ることができる。これらの製剤はまた、治療上価値のあ
る他の成分を含有していてもよい。

【００１４】

【実施例】次に実例を挙げて本発明を更に具体的に説明
する。 （ペプチドの合成）市販のＦｍｏｃ−Ｐｈｅｎｙｌａｌ
ａｎｉｎｅ−Ｗａｎｇ樹脂（置換率０．５０ｍｅｑ／
ｇ）０．６０ｇをＰＳ３型ペプチド合成機（Ｐｒｏｔｅ
ｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）の反応槽に分取
し、以下のように合成を行った。まず、上記の樹脂を反
応容器に入れて、１ｍｍｏｌのＦｍｏｃ−Ｐｒｏと、活
性化剤として、１ｍｍｏｌのＨＢＴＵを１０ｍｌの０．
４Ｍ Ｎ−メチルモルフォリンを含むジメチルフォルム
アミドに溶解したものを反応槽に加え、室温にて２０分
攪拌反応させた。

【００１５】得られた樹脂を２０重量％ピペリジンを含
むジメチルフォルムアミド２０ｍｌ中で、Ｆｍｏｃ基を
除去し、ついで上記のＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）をカ
ップリングさせた方法と同様にＣ末端から順次Ｆｍｏｃ
−アミノ酸をカップルさせて、Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｐｒ
ｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−樹脂
を得た。該樹脂を１０ｍｌの脱保護液（８２容量％トリ
フルオロ酢酸、５容量％チオアニソール、３容量％エタ
ンジオール、２容量％エチルメチルスルフィド、３容量
％フェノール、５容量％水）中で室温にて４時間攪拌
し、ペプチドを樹脂から遊離させた。

【００１６】ここに４０ｍｌの冷エーテルを添加し、ペ
プチドを沈殿させ、さらに冷エーテルにて３回洗浄し粗
ペプチドを得た。これをＯＤＳカラム（Ｃｏｓｍｏｓｉ
ｌ５Ｃ₁₈−ＡＲ，２０×２５０ｍｍ）による逆相クロマ
トグラフィーにより０．１重量％トリフルオロ酢酸を含
むアセトニトリルの直線的濃度勾配にて展開、精製し、
Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅを得
た。本品をプロテインシーケンサー（アプライド バイ
オシステムズ社製４７７Ａ型）により分析した結果、上
記の組成であることが判明した。

【００１７】（アンジオテンシン２（ＡＴ２）レセプタ
ー結合アッセイ）アンジオテンシン２（ＡＴ２）レセプ
ターに対する結合アッセイは、副腎膜画分と放射標識し
た［¹²⁵I］ＣＧＰ４２１１２Ａを用いて行った。まず５
０ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）、１２５ｍＭ
ＮａＣｌ、６．５ｍＭ ＭｇＣｌ₂ 、１ｍＭ ＥＤＴ
Ａ、０．２％ウシ血清アルブミン中にて、５０ｐＭ［
¹²⁵I］ＣＧＰ４２１１２Ａと試料およびラット脳膜画分
を１２℃にて１２０分間インキュベートし、氷冷するこ
とにより反応を停止した。Ｗｈａｔｍａｎ ＧＦ／Ｆガ
ラスフィルター上にて０℃の同緩衝液にて洗浄後の放射
活性をガンマ−カウンターにて計測した。なおフィルタ
ーは、予め２ｍｇ／ｍｌのポリエチレンイミンに２時間
浸してラベルリガンドの非特異的吸着を防いだ。

【００１８】（アンジオテンシン１（ＡＴ１）レセプタ
ー結合アッセイ）アンジオテンシン１（ＡＴ１）レセプ
ターに対する結合アッセイは、ラット肝臓アンジオテン
シン１（ＡＴ１）レセプターと放射標識した［¹²⁵I］
［Ｓａｒ¹，Ｉｌｅ⁸ ］アンジオテンシンＩＩを用いて
行った。まず２０ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．
５）、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ₂ 、
０．２％ウシ血清アルブミン中にて、５０ｐＭ［¹²⁵I］
［Ｓａｒ¹ ，Ｉｌｅ⁸ ］アンジオテンシンＩＩと試料お
よびラット肝臓アンジオテンシン１（ＡＴ１）レセプタ
ーを１２℃にて１２０分間インキュベートし、氷冷する
ことにより反応を停止した。Ｗｈａｔｍａｎ ＧＦ／Ａ
ガラスフィルター上にて０℃の同緩衝液にて洗浄後の放
射活性をガンマ−カウンターにて計測した。なおフィル
ターは、予め２ｍｇ／ｍｌのポリエチレンイミンに２時
間浸してラベルリガンドの非特異的吸着を防いだ。

【００１９】上記アッセイにより、ペプチドのアンジオ
テンシン１（ＡＴ１）レセプターおよびアンジオテンシ
ン２（ＡＴ２）レセプターに対する親和性の評価を行っ
た。その結果を表１に示す。

【００２０】

【表１】

【００２１】当該ペプチド（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−
Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）は、Ｋｉ＝２ｎＭで結合抑制
を示したことから、アンジオテンシン２（ＡＴ２）レセ
プターに結合活性を有し、アンジオテンシン１（ＡＴ
１）レセプターに対する親和性は１００倍弱かった。よ
って当該ペプチドはアンジオテンシン２（ＡＴ２）レセ
プターに対して特異的に結合するといえる。一方、アン
ジオテンシンレセプターを介さずに降圧作用を示すｏｖ
ｏｋｉｎｉｎＩＩＩをコントロールとして用いて、レセ
プター親和性を測定したところ、アンジオテンシン２
（ＡＴ２）レセプターに対する親和性は当該ペプチドと
比較して３０倍以上弱かった。

【００２２】（血圧変動の測定）１５〜２０週令の自然
高血圧ラットに、卵黄でエマルジョン化したサンプルを
ゾンデ針を使用して強制経口投与した。そして尾静脈部
の血圧をｔａｉｌ−ｃｕｆｆ法により経時的に測定し
た。その結果、当該ペプチド（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ
−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）は、自然発症高血圧ラット
（ＳＨＲ）に対して０．３〜１０ｍｇ／ｋｇの用量で経
口投与を行うことにより、１１〜１５ｍｍＨｇの血圧降
下作用をもたらした。図１に高血圧ラットに１ｍｇ／ｋ
ｇの当該ペプチドを経口投与した際の血圧降下作用の時
間依存性を、図２に当該ペプチドを投与して６時間後の
血圧降下作用の容量依存性を示す。

【００２３】

【発明の効果】当該ペプチド（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ
−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）は経口投与により自然発症
高血圧ラット（ＳＨＲ）の血圧を降下させるが、これは
アンジオテンシン２（ＡＴ２）レセプターを介して作用
するという新しい機構によるものであり、正常血圧ラッ
トの血圧は変化させないことから安全な血圧降下物質で
ある。

【図面の簡単な説明】

【図１】 自然発症高血圧ラットに当該ペプチドを経口
投与した際の血圧降下作用の時間依存性を示す図であ
る。

【図２】 自然発症高血圧ラットに当該ペプチドを経口
投与した際の血圧降下作用の容量依存性を示す図であ
る。

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒ
   ｏ−Ｐｈｅからなる新規ペプチド。
2. 【請求項２】 血圧降下作用を有する、請求項１記載の
   新規ペプチド。
3. 【請求項３】 アンジオテンシン２レセプターに対して
   親和性を持ち、アンジオテンシン１レセプターに対して
   親和性を持たない、請求項１記載の新規ペプチド。
4. 【請求項４】 Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒ
   ｏ−Ｐｈｅからなるペプチドを活性成分として、血圧降
   下剤として有効量含有することを特徴とする血圧降下
   剤。
5. 【請求項５】 Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒ
   ｏ−Ｐｈｅからなるペプチドであり、アンジオテンシン
   ２レセプターに作用する生理活性物質。